(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
血管壁の機械的強度を維持する生分解性ブレンドであって、
PLLA(ポリ(L-乳酸))と、及びホスホリルコリン基を含む共重合体(PPCP)とにより構成されてなり、
前記ホスホリルコリン基を含む共重合体(PPCP)が、ポリ(2-メタクリロイルロキシエチルホスホリルコリン-co-n-ブチルメタアクリルラート(PMB)、又はポリ(MPC-co-BMA-co-p-ニトロペニルオキシカルボニル(ポルリオキシエチレン)メタアクリルラート(MEONP))(PMBN)であることを特徴とする、血管壁の機械的強度を維持する生分解性ブレンド。
【請求項２】
前記ホスホリルコリン基を含む共重合体(PPCP)が、水溶性の両親媒性共重合体であることを特徴とする、請求項１に記載の生分解性ブレンド。
【請求項３】
全てのブレンドに対して、前記ホスホリルコリン基を含む共重合体(PPCP)を0.5〜8重量%で含むことを特徴とする、請求項１又は２に記載の生分解性ブレンド。
【請求項４】
前記ブレンド方法が、溶媒キャスティングである、請求項１〜３の何れか一項に記載の生分解性ブレンド。
【請求項５】
前記溶媒が、ジクロロメタン及びメタノールである、請求項４に記載の生分解性ブレンド。
【請求項６】
請求項１〜５の何れか一項に記載の生分解性ブレンドを備えてなる、血管疾患治療用血管装置。
【請求項７】
前記血管疾患治療用血管装置が、人工血管、血管連結装置、心室補助装置、血液浄化膜、ステント、またはカテーテルであることを特徴とする、請求項６に記載の血管疾患治療用血管装置。
【請求項８】
前記血管疾患治療用血管装置が、ポリマーステントである、請求項６に記載の血管疾患治療用血管装置。
【請求項９】
前記血管疾患が、動脈硬化症(atherosclerosis)、血栓症(thrombosis)、再狭窄症(restenosis)、出血(hemorrhage)、血管剥離または穿孔(vascular  dissection  or  perforation)、血管動脈瘤(vascular  aneurysm)、脆弱性動脈硬化斑(vulnerable  plaque)、慢性全閉鎖症(chronic  total  occlusion)、破行症(claudication)、人工血管移植の時の接合部位の増殖(anastomotic  proliferation  for  vein  and  artificial  grafts)、胆管閉塞症(bileduct  obstruction)、尿管閉塞症(ureter  obstruction)、腫瘍閉塞症(tumor  obstruction)、又はこれらの組合せであることを特徴とする、請求項６〜８の何れか一項に記載の血管疾患治療用血管装置。
【請求項１０】
前記血管疾患治療用血管装置が、ブレンドを用いて管を調製し、その後に、該管を加工して製造されたステントであることを特徴とする、請求項６〜９の何れか一項に記載の血管疾患治療用血管装置。
【請求項１１】
前記血管疾患治療用血管装置が、ブレンドを用いて平板フィルムを調製し、その後に、前記平板フィルムを加工して製造されたステントであることを特徴とする、請求項６〜９の何れか一項に記載の血管疾患治療用血管装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は血管壁の機械的強度を維持しながら、生分解性であるPLLA(ポリ(L-乳酸))及びホスホリルコリン基を含む重合体(PPCP)からなるブレンド、及びそのブレンド（BLEND）を利用した血管の内の挿入装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
産業化と経済成長などで食生活の変化、喫煙及びストレスなどの影響で最近にはアテローム性動脈硬化症による血管疾患が急速に増加する趨勢である。その治療として最近には動脈バルーンとステント(stent)挿入など非手術療法によりこのような疾患の危険から脱しているが、冠状動脈バルーン成形術はその再発率がなかなか高いから、患者らが再発に対する不安感を持っている場合も多い。そのため、ステント挿入術がバルーンカテーテルによる血管拡張術に比べて手術後再発率を著しく低めることができるので、最近ステント挿入術が増加して殆ど標準治療法として認められている。ステントとは、冠状動脈が狭くなっているか、閉塞される場合、心臓をポムピングする心筋に酸素と栄養を供給するため、挿入して血流を回復させる円柱状の金属網である。
【０００３】
しかしながら、ステントも安全性問題が提起されている。もっと深刻な問題の中の一つはステントの内に血栓が生ずるステント血栓症(stent  thrombosis)として、心筋梗塞症または突然心臓死に現われることである。ステント血栓症が、移植以後1年を過ぎる時点で発見されているから、移植部位でステントが生分解されて血栓疾患を減少させることができる、血管壁の一時的骨格（補助材）の必要性が擡頭された。
【０００４】
これと関して、ポリ(L-乳酸)(PLLA)は水性環境で乳酸に加水分解される生分解性ポリマーとして、高分子量のPLLAは血管壁に対する優れる機械的物性と、かなりゆっくり進行される分解特性のため、血管壁の一時的骨格に使うのに非常に好ましいと知られている。
【０００５】
アメリカ特許第2005/0208093号には薬物流出ステントのような移植用装置のコーティングに有用なホスホリルコリンのような燐脂質を含む組成物に関して記載している。また、アメリカ特許第5,712,326号には様々ポリマーの生体適合性が双生イオン性(zwitterion)基を含むポリマーとの混合によって改善されることが記載されている。しかしながら、従来技術はいずれも生分解性ポリマーを金属プラットホォーム(platform)にコーティングすることに関して記載しているし、更に、そのコーティング剤はXPSでホスホリルコリン基が検出されないなどの問題を有している。
【０００６】
そこで、本発明者らは上記の従来発明の問題点を解決するために鋭意研究を行ったところ、低い機械的強度を克服しながら、生分解が可能な本発明を完成するのに至った。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は血管壁の機械的強度を維持しながら、生分解性であるPLLA(ポリ(L-乳酸))及びホスホリルコリン基を含む重合体(PPCP)からなるブレンド、及びそのブレンドを用いたステントのような血管の内の挿入装置を提供することを目的にする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は血管壁の機械的強度を維持しながら、生分解性であるPLLA及びPPCPからなるブレンドを提供するものである。
【０００９】
ポリ(L-乳酸)(PLLA)は水性環境で乳酸に加水分解される完全生分解性ポリマーである。
PLLAが高分子量であることは、血管壁の一時的骨格の用途において非常に特別な特徴である。なぜなら、高分子量であるPLLAは強い機械的特性と倶に、比較的に低い速度の分解能を持ったものだからである。しかしながら、動物実験で実際PLLAの成分が含まれたコーティング剤でコーティングしたステントを移植した実験群の中で一部は深刻な慢性炎症反応が起きたし、他の臨床実験では顔の骨の固定のために移植したPLLAで慢性炎症反応を起こして骨の内に残ったPLLA粒子を含んだ纎維性カプセルの除去のために大部分の患者らが再手術を受けたりした。
【００１０】
そこで、本発明では2-メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン(MPC)重合体とPLLAをブレンドして生体適合的な表面を構築する。本発明において構築された表面は外細胞膜の中で、大部分の構成成分を占める、ホスホリルコリン基が豊かに分布しているので、多様な血管装置で相当な血液適合性を示される。その理由は次のようである。MPC重合体は一般親水性ポリマーと差異がある。一般親水性ポリマーは表面に存在する水と、ポリマーの間に相互作用(バンデルバルス力)があるが、MPCとMPC表面に存在する水の間には相互作用があまりない。それでずっと多い量の水が、ポリマー表面に存在する。上記表面に存在する相当な量の自由水(free  water)は蛋白質の変性及び吸着を防止し、変性された蛋白質によって惹起される血小板吸着、血液凝固形成、それに炎症反応などを抑制する。
【００１１】
人間全血(whole  blood)がMPC重合体と接触される時、原形質内の燐脂質が直ちに表面上から吸収されて血栓形成が抑制される、生体膜のような表面上に安定な吸収層を形成することが報告されている。
【００１２】
ポリ(L-ラックチド-co-グルコリド)(PLGA)/MPC共重合体ブレンドはPLGA上に付着した細胞によって誘発される炎症反応を減少させた。
【００１３】
本発明においては、血管壁に対する機械的強度を強化するためにホスホリルコリン基を含む重合体(PPCP)と生分解性PLLAのブレンドを調製した。
【００１４】
本発明において、ホスホリルコリン基を含む重合体ならこれを制限することはないが、望ましくはメタクリル酸メチル(MMA)、メタクリル酸エチル(EMA)、メタクリル酸ブチル(BMA)、2-エチル-へキシルメタクリルラート、メタクリル酸ラウリル(LMA)、ヒドロキシ-エチルメタクリルレート(HEMA)、メタクリル酸コリン(CMA)、PEGアクリルラート(PEGA)、PEGメタクリルレート、2-メタクリルロキシエチルホスホリルコリン(MFC)、n-ビニールピロ−ルリドン(VP)、メタクリル酸(MA)、アクリル酸(AA)、ヒドロキシプロピルメタクリルレート(HPMA)、ヒドロキシプロピルメタクリルアミド、3-トリメチルシリル-プロピルメタクリルレート(TMSPMA)、p-ニトロペニルオキシカルボニル(ポリオキシエチレン)メタアクリルラート(MEONP)、N-イソプロピルアクリルアミド(NIPAM)及びn-オクチルアクリルアミドからなる群から選ばれたモノマーとMPCユニットとの重合体が挙げられる。もっと望ましくは、ポリ(2-メタクリロイルロキシエチルホスホリルコリン-co-n-ブチルメタアクリルラート(PMB30W)、ポリ(MPC-co-BMA-co-メタアクリル酸(MA);40、40、20)(PMBAc)、ポリ(MPC-co-BMA;80、20)(PMB80)、ポリ(MPC-co-BMA-co-p-ニトロペニルオキシカルボニル(ポリオキシエチレン)メタアクリルラート(MEONP);30、60、10)(PMBN)またはポリ(MPC-co-n-オクチルアクリルアミド-co-NIPAM;40、30、30)(PMON)が挙げられる。水性環境で前記ポリマーは一定濃度(CMC)以上から、ナノ粒子にて自己組み立て(selfassembly)されることができる。
【００１５】
(溶媒)
溶媒蒸溜技術によって、PLLA及びPMB30Wからなる柔らかい膜を作るためには、混合した溶媒らの最適組成の選択が必須である。PMB30Wはメタノールやエチルアルコールで溶解するが、ジクロロメタンでは殆ど溶解されない。溶媒蒸溜過程の中に、ジクロロメタン(沸点：40.2℃)が、メタノール(沸点：64.7℃)またはエチルアルコール(沸点：78.4℃)より早く蒸発される。エチルアルコールがもっと高い沸点を持つから、モールド接触表面に幾多の穴を形成する。
【００１６】
(ブレンド方法)
本発明において、PLLA及びPPCPをブレンドする方法では機械的混合、溶液-鋳型混合、ラテックス混合などがある。
【００１７】
機械的混合は高分子物質を無定形においては、Tgで、結晶形ではTm以上の温度で混合させる方法である。溶液-鋳型混合は高分子物質を溶媒に溶解した後、溶媒をとり除く方法である。最後に、ラテックス混合は液状ゴム(ラテックス)内で微細分散した高分子を混合させる方法であり、混合した高分子はラテックス内で凝集するようになる。
【００１８】
溶液-鋳型混合を選択する場合、PPCPが均質するようにPLLAに分布して凝集結晶部位を連結することによって、PLLAの機械的強度を増進させることができるし、更に、溶媒の蒸発速度の差の効果によりブレンド表面にホスホリルコリン基を豊かにすることができる。
【００１９】
(機械的強度)
本発明の生分解性ブレンドの一種であるPLLA/PMB30W(重量比、95/5)(溶媒、ジクロロメタン/メタノール=12/1、容量比)の平板フィルム(casting  film)がPLLA(溶媒、ジクロロメタン)平板フィルムより強い破壊強度(breaking  strength)を示した理由は下記の2種のためである。
【００２０】
第一に、PLLA平板フィルム(casting  film)は常温で溶媒を蒸溜すれば空気接触表面に亀裂が生じて機械的特性を弱くする可能性もある。然しながら、PLLA/PMB30W(重量比：95/5)の平板フィルムは常温で溶媒を蒸溜する時、亀裂ない滑っこい表面を持つようになって、表面の穴らはサーブミクロン(sub-micron)大きさに制限されるから、PLLA/PMB30W(重量比：95/5)(溶媒：ジクロロメタン/メタノール=12/1、容量比)ポリマーで円筒壁を構築する時、該壁が、もっとぎっしりと構築され血管壁内でポリマーに対する変形圧力を支えられる。
【００２１】
第二で、PMB30Wの疎水性セグメント(BMAユニット)とPLLA鎖間の相互結合架橋が形成される。PLLAの機械的特性は最適濃度の界面活性剤と溶液をブレンドして増加させるという報告がある。よって、PLLA/PMB30W(重量比)のブレンドシステム内で、PMB30Wの同質的な分散はPLLAの非晶質部位を通じてPLLAの結晶質部位の間の空隙を連結することができる(図5a)。
【００２２】
(ホスホリルコリン基が豊かな表面と血管骨格の血液適合性)
ホスホリルコリン基が豊かな表面を作ることは血管骨格の血液適合性を決めるのに重要である。血液細胞の接着と活性は表面にホスホリルコリン基が高い密度にコーティングされている時、抑制される。PLLA/PMB30Wブレンドの機械的性質は、血管壁の骨格としてPLLAの機械的特性と似ていなければならないから、少ない量、約5重量%以下のPMB30WをPLLAとブレンドして従来の溶媒-鋳型方法を用いては、ホスホリルコリン基が高い密度で表面にコーティングされることができない。勿論、PLLA/PMB30Wブレンド内の親水性ホスホリルコリン基が水性環境において、水と接触するために再配列されるが(表2)、あらかじめ浸水させないで、ホスホリルコリン基が豊かな表面を作ることは実際移植手術で重要である。移植手術の前に表面に高い密度でホスホリルコリン基のコーティングを形成するために浸水を行ったら、移植しようとするポリマーに予想しない生物学的汚染が発生することができる。しかしながら、ジクロロメタン/メタノール(12/1：容量比)混合溶媒で繰り返しコーティングすることによって、PLLA/PMB30W管の内側表面にメタノールが豊かになった混合溶媒によって高い密度のPMB30Wが蓄積される。すなわち、高い密度のホスホリルコリン基コーティングが浸水過程なしにPLLA/PMB30W管の内側表面に形成される(図5)。血小板吸着テストはPLLA/PMB30Wブレンドの表面に高い密度のホスホリルコリン基が存在するのかの可否を決めるために遂行した。テスト結果、血小板の吸着数字が激減しながら、表面の血栓形成と接着も防ぐ。
【００２３】
部分的生分解性及び無定形の管支持体は血管骨格部位にかなりの損失を起こす可能性もある。PLLA/PMB30Wブレンド内の親水性ホスホリルコリン基から水の吸入は純粋な水性環境でPLLAのエステル連結を切断させることがある。しかしながら、PLLAの分解は、幾多のカルボックシル末端基が放出されることができなくて、自体触媒分解効果を起こすことができる中央部位で異質的に早く進行されることを見逃してはいけない。反面、高い密度のホスホリルコリン基は血液成分の吸収を妨害するが、一方、血液成分は多層構造で、PLLA上で吸収される。よって、ホスホリルコリン基は表面の血液成分吸収を減少させることによって、PLLA/PMB30W管の内側面からカルボックシル末端基の放出を増加させて、PLLAの全体が自己触媒作用を減少させPLLAより安定した生分解性を構築することができる。
【００２４】
(分解パターン)
血管壁の一時的骨格のための分解パターンはPLLAの分子量、移植装置の形態、移植部位及び骨格目的によって違う。例えば、PLLAステントのための生分解は2~3年が必要である。本願明細書においては、試験管実験の時、短期分解パターンに対してだけで記載しているから、その結果を血管壁の一時的支持のための理想的分解パターンに一般化することができない。PLLAは単純な加水分解を通じるより、むしろ血液成分たちとの相互作用を通じて分解されるから、PLLA/PMB30Wブレンドの長期間分解挙動は生体内で研究されなければならない。
【００２５】
本発明者らはレットの腹部大動脈内の移植されたPLLA/PMB30W管(内部直径：1.6mm;外部直径：2.0mm)の生物学的反応、及び分解パターンを評価した。アメリカで施行された436患者を対象にした無作為的臨床試験(ENDEAVOR  III  試験)は「ホスホリルコリン基-基盤のポリマーがコーティングされた」ゾタロ−ルリムス(zotarolimus)-放出ステント(Endeavor:  Medtronics、U.S.A.)が血管撮影法によって1世代シロ−ルリムス(sirolimus)-放出ステント(Cypher:  Cordis  Johnson  &  Johnson、U.S.A.)より臨床成績が劣等だったことを明らかにした。その理由は、「ホスホリルコリン基-基盤のポリマーコーティングされた」ステントの表面にホスホリルコリン基が存在しなかったからである。
【００２６】
(用途)
前記した本発明のホスホリルコリン基が豊かな表面を持った新規ブレンドは血管疾患治療のために移植される多様な医療器具に適用するのに非常に好ましいことがわかる。具体的に、狭心症、心筋梗塞症または心不全症のような血管疾患の治療に使われることができる。移植装置としては、ステント、血管連結装置、人工血管、心室補助装置、血液浄化膜、またはカテーテルなどが挙げられる。もっと具体的に、PLLA及びPPCPのブレンドで管を加工した後、レーザーカッティングのような工程からなるステント、または平板フィルムで作製されたステントなどを製造することができる。
【発明の効果】
【００２７】
本発明のPLLAとPPCPからなるブレンドは、PLLA重合体に比べて乾燥条件で、ヤング率の大きい変化なしに強い破壊強度を持って、表面内側に高い密度でホスホリルコリン基を持っていて、生体適合性が優秀でステントを含んだ多様な医療器具に適用することができる。さらに、従来の生分解性ポリマーPLLAと比べて、本発明のブレンドは血液成分との相互作用を通じて安定な分解パターンを示す。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】図１は、PMB30Wの化学構造を示したものである。
【図２】図２は、PLLA及びPLLA/PMB30W管の表面内側でC1s及びP2pピークを示したものである。
【図３】図３は、PLLA平板、PLLA/PMB30W平板の各表面状態を示したものである。
【図４】図４は、インキュベーション以前の平板フィルムの機械的特性を示したものである。
【図５】図５は、LLA/PMB30Wブレンド状態及びPLLA/PMB30W管内を示したものである。
【図６】図６は、PLLA/PMB30W管の機械的支持層を示したものである。
【図７】図７は、PBS中のインキュベーション間、PLLA/PMB30W管の内側表面のP/C値(%)の変化を示している。
【図８】図８は、PLLA/PMB30W管の内側表面の高密度のホスホリルコリン基は、PRPとの接触後に血小板吸着を減ることを示している。
【図９】図９は、実施例４の各PLLA/PPCPブレンド平板フィルムの破壊強度を測定したものである。
【図１０】図１０は、実施例６の各PLLA/PMB30Wブレンド平板フィルムの破壊強度を測定したものである。
【発明の実施のための具体的な内容】
【００２９】
以下、本発明を下記実施例によって詳しく説明する。
【００３０】
しかしながら、下記実施例は本発明を例示することであるだけ、本発明の内容がこれら実施例によって限定されるのではない。
【００３１】
実施例１：PLLA/PMB30Wブレンド調製
高分子量のPLLA(分子量=100kDa)及び低分子量のsPLLA(分子量=2kDa)をPolysciences社から購入した。水溶性両親媒性ポリ(MPC-co-BMA)(PMB30W)は、MPCユニットとBMAユニットを3対7の比率で合成した(分子量=50kDa)。PMB30Wの化学構造は図1で示した。ジクロロメタン内の6wt%PLLAポリマー溶液、ジクロロメタン/メタノール(容量比：12/1)内のPLLA/PMB30W(重量比：95/5)ブレンドポリマー溶液、及びジクロロメタン/メタノール(容量比、12/1)内のPLLA/PMB30W(重量比、90/10)の、ブレンドポリマー溶液を透明になるまで充分に撹拌させることによって、製造した。前記溶液を均質化させるために、30分間、氷冷浴槽で超音波処理した。
【００３２】
実施例2：PLLA/PMB30W平板フィルム及び管製造
平板フィルムを作製するため、ポリマー溶液らをテフロンディッシュ上で鋳型化させて、溶媒たちを一晩、室温で乾燥させた。
【００３３】
PLLAポリマー溶液をそれぞれ小さな管と大きいティユブを形成させるために1.6~4.0mmの直径のテフロンロード上に浸漬(dip)コーティングさせた。大きい管はXPS表面分析及び血液接触テストのためだけで加工した。溶媒を室温で、1時間70~80rpmで回転するテフロンロード上で蒸溜させた。この工程を外部直径が2.0mmの小さな管を作るために7~8回繰り返した。
【００３４】
PLLA/PMB30W(重量比：95/5)ブレンドポリマー溶液を1.6~4.0mm直径のテフロンロード上に浸漬(dip)めっきさせた。溶媒を室温で1時間70~80rpmで回転するテフロンロード上で蒸溜させた。この工程をPLLA/PMB30W管の機械的支持層で作用する厚いポリマー膜を生産するために9回繰り返した。連続的に、PLLA/PMB30W(重量比：95/5)管をPLLA/PMB30W(重量比、90/10)ブレンドポリマー溶液で一度浸漬めっきさせてホスホリルコリン基が豊かな表面を作った。溶媒を室温で一晩、70~80rpmで回転するテフロンロード上で蒸溜させた。小さなPLLA/PMB30W管の外部直径は2.0mmであった。すべてのサンプルは一日室温で真空乾燥し、以後二日間60℃で真空乾燥させた。使用の前真空デシケーターに保管した。
【００３５】
実施例3：PLLA/PMB30Wブレンドの特性把握のための方法
(形態)
前記サンプルを金にコーティングし(gold  sputtering)、以後その表面形態をスキャニング電子顕微鏡(SEM;SM-200、Topcon、Japan)で観察した。
【００３６】
(機械的特性)
平板フィルムをバーベル形のフィルム(44.5mm×2.5mm)で切断させた。バーベル形の平板フィルムの破壊強度、及びヤング率(Young's  modulus)を強度測定機(STA;STA-1150、Orientec、Japan)を使って測定した。クロスヘッド速度は10mm/分であった。
【００３７】
(表面分析)
大きいPLLA/PMB30W管を残余溶媒の除去に先立って、ぺこぺこな幕にて切断した。平たい膜を作りため、PLLA/PMB30Wぺこぺこな幕を10分間60℃で、10MPaの圧力で加圧した。前記した方法を使って残余溶媒をとり除いた後、PLLA/PMB30W管の平面膜を80~100rpmの震盪浴槽内で36.7℃で燐酸緩衝食塩水(PBS)でインキュベーションした。PLLA/PMB30W管を数回のインキュベーションを経った後、蒸溜水で充分にあったからだ。PLLA/PMB30W管の平面膜はMgKaソース(1253.6eV)で、X-レイ光電子分光器(XPS;AXIS-HSi、Kratos/Shimadzu、Japan)を使って表面を分析しました。光電子のテーク-オフ(take-off)角は90゜であった。
【００３８】
図2においては、PLLA及びPLLA/PMB30W管の表面内側でC1s及びP2pピークが示した。134eVにての強いP2pピークはホスホリルコリン基の燐の存在のためである。PLLA/PMB30W管のP/C値は燐の量及び炭素の濃度に基礎して計算された。
【００３９】
(血小板吸着テスト)
管カッターで管を0.5cm長さの切れで切断した。新鮮なヒト全血(45mL)を元気なヒトから5mLの酸-枸椽酸-葡萄糖A溶液を含むシリンジ(syringe)内に収集した。血小板が豊かなプラズマ(PRP)を15分間200gで遠心分離して製造した。血小板濃度は細胞個数測定機で測定結果、4.24×105血小板/μLであった。各管をPRPの200μLに浸した。管を十分に浸すために、PRPの上層をテフロンシートで覆った。管を1時間37℃で、5%CO2雰囲気下のインキュベーターに装置させた。各管を取り出して、吸着されない血小板をとり除くために、3分間15mLのPBS中に担持し、吸着された血小板を溶解させるために1時間37℃で1%v/v  Triton-X114溶液を含む200μLのPBS内に装置させた。放出されたラックテイト脱水素酵素(LDH)の量をLDH分析キット(Wako  Chemicals、日本)にて、製造社のマニュアルに従って測定した。対照群は1%v/vTriton-X114溶液を含むPBSであった。
【００４０】
(短期間分解パターン)
1：食塩水内にて実験
平板フィルムを1×1cm2切れで切断した。管カッターで管を0.5cm長さの切れで切断した。各平板フィルム及び各管の初期乾燥重量を測定した。各平板フィルム及び管を36.7℃、80~100rpmで震盪浴槽中、PBSでインキュベーションさせた。サンプルを震盪浴槽からとり、蒸溜水で十分に洗浄した。サンプルを60℃で一日十分に真空乾燥させた。インキュベーションされたサンプルの乾燥重量を重量測定法(gravimetric  method)を使って測定した。總質量変化百分率は下記の方程式によって計算された。
總質量変化百分率＝（初期質量―インキュベーション終末点で再測定した初期質量）/初期質量x１００
【００４１】
2：血清内で実験
PLLA/sPLLA(重量比、4/1)を前記した方法によってPMB30Wとブレンドした。管が製造された後、管カッターで管を1.5cm長さの切れで切断した。管を前記した方法で2mLの牛胎児血清(FBS)内でインキュベーションさせた。ペニシリン-ストレプトマイシン-アンポテリシンB混合物を、バクテリア汚染防止のために、培地に添加した。培地を3日毎に変えてくれた。20日のインキュベーション後、管を取り出して、蒸溜水で濯いだ。吸収された血清成分をとり除くために管を20分間1%硫酸ドデシルナトリウム水溶液中で超音波処理し、蒸溜水で濯いだ後、1日間60℃で真空乾燥させた。總質量変化百分率は前記した方法により測定した。
【００４２】
実験結果
1：PLLA/PMB30W平板フィルムの機械的特性
PLLA/PMB30Wブレンドを製造するのに適当な鋳型溶媒を決めるために、多様に混合した溶媒から多様なPLLA/PMB30W平板フィルムを作製した。ジクロロメタン/メタノール(12/1、容量比)、またはジクロロメタン/エチルアルコール(10/1、容量比)を含む混合した溶媒たちは相対的に良好な表面及び強い機械的特性を持ったPLLA/PMB30Wブレンドを作った。PLLA平板(溶媒、ジクロロメタン)フィルムは空気接触面でいくつの亀裂が現れた(図3a及びd)。PLLA/PMB30W平板(溶媒、ジクロロメタン/メタノール=12/1、容量比)フィルムはきれいで柔らかい表面が示したが(図3b及びe)、一方PLLA/PMB30W平板(溶媒、ジクロロメタン/エチルアルコール=12/1、容量比)フィルムは幾多のマイクロン大きさの穴らが生じたかなり荒い表面を持った(図3c及びf)。混合した溶媒組成物が決まった時、すべてのPLLA/PMB30W(95/5及び90/10)ブレンドは等しい表面モルポルロジを示した。血栓は、特に血液の流れが遅くて抵抗力が高い表面亀裂部位でよく形成される。血管壁に機械的支持を与えるためのポリマー壁を製造するために、ジクロロメタン/メタノール(12/1、容量比)を含む混合した溶媒をPLLA/PMB30Wブレンドをキャスティングするために使った。
【００４３】
図4はインキュベーション以前の平板フィルムの機械的特性を示した。PLLA/PMB30W(95/5、重量比)平板フィルムはPLLA平板フィルムより強い破壊強度を示す一方、PLLA/PMB30W(90/10、重量比)平板フィルムはPLLA平板フィルムより低い破壊強度を現れた。乾燥条件下でPLLA/PMB30W(95/5、重量比)平板フィルムとPLLA/PMB30W(90/10、重量比)平板フィルムのヤング率及びPLLA平板フィルムのそれは特に違わない一方、PLLA/PMB30W(95/5、重量比)フィルムのヤング率はPLLA/PMB30W(90/10、重量比)フィルムのヤング率より高かった。PLLA/PMB30W(90/10)フィルムの總質量変化はPBS内でインキュベーション中、他の平板フィルムのものと比べて非常に増加した(表1)。
【表１】
0005507566.tif 000002
【００４４】
水溶性PMB30WがPLLA/PMB30W(90/10)ブレンドシステム内で凝集されたことと考えられる(図5b、表2)
【表２】
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【００４５】
結論的に、PLLA/PMB30Wの95/5のブレンド比は、PLLA/PMB30W管の機械的支持層を作るためにもっと好ましいことがわかる(図6)。
【００４６】
2：PLLA/PMB30W管の表面内側上のXPS分析
PLLA/PMB30W管の表面上のホスホリルコリン基をXPSにて分析した。図2はC1S及びP2Pが、PLLA及びPLLA/PMB30W管の内側表面でピークを形成したことを示した。134eVでの強いP2Pピークは、ホスホリルコリン基中のホスホロスに起因する。PLLA/PMB30W管のP/C値は、ホスホロスの量及び炭素原子の濃度に基づいて計算した。図7はPBS中のインキュベーション間、PLLA/PMB30W管の内側表面のP/C値(%)の変化を示している。P/C値はインキュベーション初日増加するが、だんだん減少した後、平行を成した。高いP/C値がPBS内のインキュベーション間PLLA/PMB30W管の内側表面で観察された。溶媒の蒸溜によって、混合溶媒中のメタノールの濃度が高くに随伴してスホリルコリンが豊かな表面を持つようになった。
【００４７】
PLLA/PMB30W管の内側表面の高密度のホスホリルコリン基は、PRPとの接触後に血小板吸着を減ることができた(図8)。PLLA管及びPLLA/PMB30W管は、PBS内での100日間のインキュベーション間、總質量変化がゆっくり進行されることが示した(表3)。
【表３】
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【００４８】
異質性の分解を促進するため、sPLLAを管中に挿入した。管の促進された總質量変化率は、PBSまたはFBS内の20日間インキュベーション後の二つの群の間で差が大きくなかった(表4及び5)。表4はPBS内で20日間のインキュベーション以後、sPLLAが挿入された管の促進された總質量変化百分率を示し、表5はFBS内で20日間インキュベーションした結果である。
【表４】
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【表５】
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【００４９】
実施例4：他のPLLA/PPCPブレンド調製
ホスホリルコリン基を含む共重合体として、PMBN:poly(MPC-co-BMA-co-NPMA;6/3/1;Mw=58k)、及びPMB80:poly(MPC-co-BMA;8/2;Mw=40k)を製造して実施例1と同じ方式でPLLA/PPCPブレンドを調製した。
【００５０】
実施例5：実施例4によるPLLA/PPCPブレンド平板フィルムの作製
ジクロロメタン/メタノール(容量比、12/1)内の実施例4の各PLLA/PPCPブレンドポリマー溶液を一晩中撹拌させて調製した。前記溶液を均質化させるために30分間氷冷浴槽で超音波処理した。平板フィルムを作製するため、ポリマー溶液をテフロンディッシュ上で鋳型化し、溶媒を一日間室温で乾燥させた。ついて、一日の間室温で真空乾燥し、二日の間60℃で真空乾燥した。使用の前、真空デシケーターに保管した。
【００５１】
実験結果
実施例4で作製した各PLLA/PPCPブレンド平板フィルムの破壊強度を測定した結果は下記の表6及び図9に示した。PLLA/PMB30W(95/5、重量比)平板フィルム以外にもPLLA/PMBN(95/5、重量比)及びPLLA/PMB80(95/5、重量比)平板フィルムの破壊強度もPLLA平板フィルムまたはPLLA/PPCP(90/10、重量比)平板フィルムより優れていることがわかる。
【表６】
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【００５２】
実施例6：多様なブレンド比のPLLA/PMB30Wブレンド調製
ホスホリルコリン基を含む共重合体としてPMB30W共重合体を0.5重量%、2重量%、5重量%、7重量%、8重量%または10重量%で含むPLLA/PMB30Wブレンドを実施例1と同じ方式で製造した。
【００５３】
実施例7：実施例6のPLLA/PMB30Wブレンドの平板フィルムの製造
実施例5と同じ方式でPLLA/PMB30Wブレンドの平板フィルムを作製した。
【００５４】
実験結果
実施例6で作製した各PLLA/PMB30Wブレンド平板フィルムの破壊強度を測定した結果は下記の表7及び図10に示した。PLLA/PMB30Wブレンド平板フィルムの中で全てのブレンド（総ブレンド）に対してPMB30W共重合体を0.5重量%~8重量%で含むPLLA/PMB30Wブレンドの平板フィルムの破壊強度がPLLA平板フィルム、またはPLLA/PPCP(90/10、重量比)平板フィルムより優れていることがわがる。
【表７】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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