(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
膣に使用される局所潤滑剤組成物であって、
（ａ）メチルパラベンと、グリセロール、アラビノガラクタン、ＰＣＡＧＨ、デキストラン、ポリアクリル酸、カルボマー、ポリエチレンオキシド、エチレンオキシドとプロピレンオキシドのコポリマー、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリエチレングリコール、ヒドロキシプロピルグアール、及び植物油から選択される１又は２以上とを含む潤滑性剤を、水性平衡塩溶液中に含有する水性潤滑剤基剤、及び
（ｂ）カルシウム、ナトリウム、カリウム及びマグネシウムのイオンを含有する生存能維持剤
を含んでなるとともに、
ｐＨが５．０〜９．０であり、重量オスモル濃度が２００〜７００ｍＯｓｍ／ｋｇであり、細胞、精子、卵母細胞、胚又は組織の生存能力に影響を及ぼす特定の防腐剤又はバッファーを全く含まないか、或いは実質的に含まない、組成物。
【請求項２】
前記潤滑性剤がメチルパラベンとヒドロキシプロピルメチルセルロースとを含有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記潤滑性剤がメチルパラベンとグリセロールとを含有する、請求項１に記載の局所潤滑剤組成物。
【請求項４】
前記潤滑性剤がメチルパラベンとヒドロキシプロピルメチルセルロースとグリセロールとからなる、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記生存能維持剤の濃度が０．１ｍＭ〜５．０ｍＭである、請求項１〜４の何れか一項に記載の局所潤滑剤組成物。
【請求項６】
（ａ）リン酸緩衝食塩水と、（ｂ）カルシウム、ナトリウム、カリウム及びマグネシウムのイオンと、（ｃ）ヒドロキシプロピルメチルセルロースと、（ｄ）メチルパラベンと、（ｅ）グリセロールと、（ｆ）抗酸化剤とを含む、膣に使用される組成物であって、細胞、精子、卵母細胞、胚又は組織の生存能力に影響を及ぼす特定の防腐剤又はバッファーを全く含まないか、或いは実質的に含まない、組成物。
【請求項７】
ｐＨが５．０〜９．０である請求項６の組成物。
【請求項８】
ｐＨが７．０〜８．５である請求項１〜７の何れか一項に記載の組成物。
【請求項９】
ＥＤＴＡを含有しない請求項１〜８の何れか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
溶液、ゲル、フォーム又はクリームの形態である請求項１〜９の何れか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
重量オスモル濃度が２５０〜５００ｍＯｓｍ／ｋｇである請求項１〜１０の何れか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
重量オスモル濃度が３００〜４００ｍＯｓｍ／ｋｇである請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
容器に包装されてなる請求項１〜１２の何れか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
卵母細胞の受精を容易にするために使用される請求項１〜１３の何れか一項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は概して、インビボ（in vivo）及び／又はインビトロ（in vitro）における、配偶子の生存；精子、卵母細胞、胚、細胞及び組織の機能改善；及び、精子及び卵母細胞の受精能の増強を促進する組成物、並びに、かかる組成物に関するシステム、物品及び調製方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
性行為の１又は２以上の段階への関与の全体的又は部分的な不能として特徴付けられる性的不全は、受胎を試みる（ＴＴＣ）カップルの障害となる。性的不全の原因の一つとして、膣潤滑の不足が挙げられる。膣性交中に膣内で自然に分泌される潤滑生理液又は粘液が不在だと、膣組織が乾燥して刺激され、不快感、苦痛、及び時には出血が生じる場合がある。かかる状態の原因としては、パートナー関係の質、興奮及び刺激の不足、ホルモンの変化、ある種の薬物の副作用等が挙げられる。避妊用クリーム及びフォームによる刺激も、乾燥を引き起こす場合があり、セックスに対する恐怖及び不安も同様である。
【０００３】
膣乾燥に対処する種々の異なる潤滑剤組成物が当技術分野で公知である。しかしながら、現在入手し得る一般用医薬品（ＯＴＣ）の潤滑剤の大部分は、故意にせよ偶然にせよ、精子の生存能力又は運動性又はその両方を低下させ（１８−２２）、また、精子と卵子の接触も妨害し得る。Ｋ−Ｙゼリー（K-Y Jelly）やワセリン（Vaseline）等の一般に入手可能な潤滑剤は、水溶性が低く、粘稠度が不十分であり、なかんずく、殺精子性であるため、受胎を望むカップルにとっては望ましくない（１８−２２）。かかる潤滑剤は精子及び卵子を害し、精子の運動性を低下させ、精子と卵子との結合を妨げ、結果として受精過程を妨害する可能性がある。
【０００４】
入手可能な膣潤滑剤の一部には、組成物の保管寿命の延長のために、その成分としてエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）が添加されている。しかし、ＥＤＴＡは、細胞機能に必須のイオンをキレートして隔絶してしまうため、細胞の生存能にとって有害である。従来の潤滑剤溶液の一部に含まれる多糖及びオリゴ糖も、精子による卵子の認識を妨害して受精を阻止する。更に、入手可能な潤滑剤組成物は通常、受精過程を容易化し、或いは促進する剤を欠いている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
即ち、既存の潤滑剤組成物の多くは配偶子に敵対的であり、受精にとって好ましくない。従って、受胎を試みるカップルに適した組成物が求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
水系媒質、溶液、保湿剤及び潤滑剤の組成物、調製方法及び種々の応用が提供される。また、本発明は、かかる組成物の物品、システム、及び調製方法及び使用も提供する。
【０００７】
前記水系組成物は、緩衝化されたｐＨ及び重量オスモル濃度を有する、生体液に類似した水溶液を含んでなる。好ましい実施形態によれば、かかる水系組成物は、精子に害を及ぼさず、卵子に害を及ぼさず、及び／又は、受精に有利な非殺精子性膣潤滑剤として有用である。水系組成物は更に、精子及び細胞生存能維持剤、精子及び細胞のためのエネルギー増強剤、抗酸化剤及び酸素スカベンジャー、受精促進剤、及び／又は胚付着促進剤を含んでいてもよい。
【０００８】
更に他の態様によれば、ヒト及び他の動物の自然な生殖又は人為的な生殖を改善するための方法及び組成物が提供される。この組成物は、受精を容易にする物品及びシステムと組み合わせて使用することもできる。
【０００９】
本発明は、細胞、組織、又は器官を害せず、及び／又は、それらの培養、保管、移植及び／又はインビボ及び／又はインビトロでの使用時における、生存能力及び／又は機能を改善する組成物、物品、システム及び組成物の調製方法及び使用を更に提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
添付の図面は、本発明の実施形態の例を示すものである。図中、同一の符号は同様の要素を表す。図示したこれらの実施形態は、本発明の例示として解すべきであり、如何なる意味でも限定的なものと解すべきではない。
【００１１】
受胎を試みるカップルにとって、受精の成功を妨げ得るものとして、不自然な性的補助剤（殺精子性潤滑剤）、並びに、生得的な性器の生物学的及び／又は生理学的状態が挙げられる。精液中の精子は塩基性ｐＨに晒され、その塩基性は時にｐＨ７．８〜８．２にもなるのに対して、膣内のｐＨは通常はより酸性、例えば約４．５であり、かかるｐＨは正常な膣内細菌叢には適しているが、精子には有害である。かかる女性生殖管への進入前には、精子は機能的に不活性な状態で精巣上体尾内に貯蔵されており、運動性ではなく、卵子と相互作用できない（１−１６）。精巣上体尾内に貯蔵された精子は、ｐＨ及び張度が平衡化された溶液中で、イオン、エネルギー基質及び栄養素の存在により生存可能に保たれる。この環境は、高濃度のカリウムイオン、低濃度のナトリウムイオン及び超低濃度の炭酸水素イオンを含んでなる（２４）。
【００１２】
不活性な精子は、生物学的環境の変化により、一連の生化学的段階を経て、卵子を受精させ得る自由遊泳性の機能的な細胞に変換される。精子の受精能獲得には、精子膜からのコレステロール流出、ｃＡＭＰ依存性シグナル伝達（細胞外炭酸水素イオンを要する）、及び、関連するｃＡＭＰ産生の刺激による細胞内ｐＨ及び炭酸水素レベルの上昇（鞭毛運動性の制御と関連する）が関与している。加えて、プロゲステロンも授精能獲得の一部態様を調節する場合があり、カリウムイオンの生理的レベルからの低下も受精能獲得に寄与する（２３）。受精能獲得を誘導する卵管液及び媒質の組成は、高濃度の種々のイオン（ナトリウム、カルシウム及び炭酸水素塩等）及び低濃度の他のイオン（カリウム等（１７））を含んでなる。本発明のある実施形態によれば、組成物は平衡化された塩溶液を含有し、これが女性体内への移動後の精子の生存能力、運動性及び／又は粘液浸透を向上させて、受精の可能性を増加させる。
【００１３】
受精能を獲得した精子は（細胞表面のヒアルロニダーゼの補助により）卵丘に侵入し、透明帯に接触して先体反応を生じる（これはカルシウム依存性である）。透明帯への精子の付着は、細胞表面受容体と細胞上のリガンド（インテグリン等）との間の結合、並びにタンパク質−炭水化物認識過程に基づく。先体反応の完了後、精子は透明帯に侵入し、続いて卵子の形質膜と接触して融合し、受精に至る。更に、この過程中の精子の運動はエネルギー集約的であり、ピルビン酸塩、乳酸塩及びグルコースを含むエネルギー基質によって促進される。本発明のある実施形態によれば、組成物は、精子の生存能力、運動性及び／又は粘液浸透を改善する精子エネルギー増強剤を含んでなる。
【００１４】
最初の精子透明帯結合は、透明帯の構成糖タンパク質であるＺＰ３により媒介され、タンパク質−炭水化物卵子−精子認識及び相互作用を伴う。例えば、精子表面受容体は、透明帯上のタンパク質ＺＰ３由来のＯ結合オリゴ糖と会合する。従って、外部オリゴ糖及び多糖の存在は、この認識に干渉することにより、受精過程に負の影響を与える場合がある。本発明のある実施形態によれば、組成物は、例えば、タンパク質−炭水化物認識過程に干渉する多糖及びオリゴ糖を全く含有せず、或いは実質的に含有しない。
【００１５】
更に、受精の成功に先立つ最終段階の１つは、透明帯に浸透した精子と卵子の細胞膜との結合及び融合である。ＥＤＴＡ等のある種の防腐剤は、有益なイオンを遮蔽することにより、受精過程の成功を妨げる場合がある。本発明のある実施形態によれば、組成物は、精子細胞と卵母細胞との結合を増強する剤を含んでなり、ＥＤＴＡ等のある種の有害な防腐剤を全く含有せず、或いは実質的に含有しない。
【００１６】
加えて、精子と卵子との結合に重要な細胞表面タンパク質の一部、例えばインテグリン等は、常態では不活性な立体配座で細胞上に存在しているため、外界からのシグナルによって活性化されるまではリガンドと結合しない。本発明のある実施形態によれば、組成物は、インテグリン受容体を活性化することにより、精子細胞と卵母細胞との結合を増強する剤を含んでなる。かかる剤を潤滑剤組成物に含めることにより、精子及び卵子の細胞表面受容体を互いに結合するように刺激又は活性化し、ひいては受精能を向上することができる。
【００１７】
現在まで何年もかかって、人工授精及び補助生殖技法（ＡＲＴ）の使用により、個人の不妊の問題を医師が扱うことが可能となった。これらの技法も、細胞、精子、卵母細胞又は胚を、異なる時及び／又は場所で使用するために貯蔵する方法から恩恵を受けてきた。関連する段階及び方法としては（その一部は必須ではないが）、ヒト及び／又は他の動物由来の細胞、精子、卵子又は胚の捕集；捕集した試料の洗浄（例えば、精子濃縮分画を分離するための精液の洗浄、又は卵子の洗浄）；それに続く、機能性生存細胞を得るための処理；細胞の培養；胚を発生させるための体外受精；後の使用のための細胞又は胚の貯蔵（延長培養、冷蔵又は低温貯蔵状態で）；女性体内への移入に先立つ再処理；及び妊娠を確立するための女性体内への移入が含まれる。生存能維持剤又は受精促進剤を含有する、精液及び精子捕集用の改良された組成物は、例えば、精子卵子結合の可能性を増加させることにより、受精の可能性を増進する。同様に、精子洗浄及び精子分離媒質中に生存能維持剤又は受精及び／又は他の機能向上剤を含有する組成物の使用も、精子卵子結合の可能性を増加させることにより、受精の可能性を増進するであろう。同様に、体外受精媒体中に生存能維持剤又は受精及び他の機能の向上剤を含有する組成物の使用も、精子卵子結合の可能性を増加させることにより、受精の可能性を増進するであろう。本発明は更に、細胞、精子、卵母細胞、胚、組織又は器官を害することなく、それらの培養中、貯蔵中、輸送中及びインビボ及びインビトロでの使用中における生存能力及び機能を増進することが可能な組成物を提供する。加えて、ヒト及び動物における種々の人工授精及び補助生殖技法に使用するための組成物が提供される。
【００１８】
加えて、医学的及び／又は物理的条件によっては、膣用及び／又は外科用潤滑剤を使用することが推奨され、或いは必要にさえなる。例えば、本発明の組成物は、骨関節炎の苦痛を軽減するための注射の一部として使用することができる。かかる治療剤の一部は、一連の注射で膝関節内に投与され、関節液の粘度を補完して関節を潤滑し、関節のクッションとなって鎮痛効果を生じ、軟骨細胞の生存能力を改善し得ると考えられる。或いは、本発明の組成物は、眼科手術（例えば、角膜移植、白内障手術、緑内障手術及び網膜剥離を修復するための手術）用に調整することにより、潤滑効果及び／又は細胞生存能力の向上効果を提供することができる。或いは、本発明の組成物を生体材料骨格に組み入れれば、本発明の細胞生存能維持剤の作用で組織増殖を操作することが可能となる。本発明の他の実施形態によれば、種々の医学的用途のための、細胞生存能維持剤を含有する潤滑剤組成物が提供される。
【００１９】
受精過程を促進する潤滑剤の性質の一つは、配偶子の生存能力を低下させないということである。第２の望ましい特性は、精子の運動性、浸透及び／又は受精能、或いは卵母細胞の受精能に、その組成物が負の影響を与えないということである。加えて、その組成物は、卵母細胞又は受精した胚にも害を与えるべきではない。かかる組成物は、卵母細胞及び受精した胚に対しても無毒であることが好ましい。本発明の組成物は、性交前又は性交中に使用するための潤滑剤として特に有用である。
【００２０】
本発明は、精子、卵母細胞、胚、細胞及び組織と適合し、且つ無毒である種々の組成物を提供する。加えて、かかる組成物は更に、精子及び卵母細胞の機能及び生存及び受精成功の可能性も増進し得る。即ち、これら記載の組成物は、（自然受胎か、種々の補助生殖技法のいずれかを用いるかによらず）受胎を試みるカップルにとって有用である。本発明は、水系媒体、溶液、保湿剤及び潤滑剤の、種々の用途のための組成物、物品、システム、調製方法及び使用を提供する。
【００２１】
本明細書で使用する「生存能維持剤」という用語は、特に断らない限り、細胞、精子、卵母細胞、胚、又は組織に対して無毒であり、それらの生存能力を維持又は増進する剤を指す。生存能維持剤の例としては、これらに限定されるものではないが、天然又は合成のイオン及び塩、例えばカルシウム、ナトリウム、カリウム又はマグネシウム等のイオン及び塩が挙げられる。生存能維持剤としては、他のイオン、塩、脂質、低分子、一酸化炭素、二酸化炭素、酸化窒素、ヌクレオシド、ヌクレオチド、糖類、ペプチド、タンパク質、及びそれらの化学的、機能的及び／又は生理的等価体も挙げられる。
【００２２】
本明細書で使用する「水性潤滑基剤」という用語は、特に断らない限り、水性平衡塩溶液中に潤滑性剤を含有する水系組成物を指す。潤滑性剤の例としては、これらに限定されるものではないが、グリセロール、ヒスパゲル（HISPAGEL）（登録商標）（ポリアクリル酸グリセリル）、アラビノガラクタン、ＰＣＡＧＨ（アラビノース、ガラクトース、及び／又はヘクスロン酸を含有する多糖）、デキストラン、ポリアクリル酸、カルボマー（アリルエーテルペンタエリトリトール、スクロースのアリルエーテル、又はプロピレンのアリルエーテルで架橋されたアクリル酸ホモポリマー）、ポリエチレンオキシド、プルロニック（エチレンオキシドとプロピレンオキシドのコポリマー、例えばプルロニック（Pluronic）（登録商標）−１２７）、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、ヒドロキシプロピルグアール（２−ヒドロキシプロピルエーテル）、植物油、メチルパラベン、タンパク質、核酸、石油ゼリー、それらの組合せ又は化学的、機能的、又は生理的に同等又は類似の他の剤又は組合せが挙げられる。
【００２３】
本明細書で使用する「平衡塩溶液」という用語は、特に断らない限り、生物学的に適当なｐＨ及び重量オスモル濃度を有する水溶液を指す。ｐＨ緩衝剤の例としては、これらに限定されるものではないが、リン酸、ホウ酸、クエン酸、アスコルビン酸、炭酸、炭酸水素、ＴＲＩＳ（トリヒドロキシメチルアミノメタン）、ＨＥＰＥＳ（４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸）の塩、又はそれらの混合物が挙げられる。組成物の重量オスモル濃度を平衡化するために有用な浸透圧活性剤の例としては、これらに限定されるものではないが、ナトリウムイオン、カリウムイオン、塩化物イオン、炭酸水素イオン、グルコース、スクロース、ペプチド、タンパク質、それらの組合せ、又は化学的、機能的、又は生理的に同等又は類似の他の剤が挙げられる。
【００２４】
本明細書で使用する「向上した生理機能」という用語は、特に断らない限り、細胞、精子、卵母細胞、胚、又は組織のそれらの本来の機能を果たす能力における改善を指す。向上した生理機能の例としては、これらに限定されるものではないが、精子の受精能の向上、卵母細胞の被受精能の向上、胚の発生能の向上、及び、受精胚の子宮壁への付着能の向上が挙げられる。
【００２５】
本明細書で使用する「精子活性化」という用語は、特に断らない限り、非運動性の機能的に不活性な精子を、受精させる能力のある状態に変換する過程を指す。精子活性化過程の例としては、これらに限定されるものではないが、精子の非運動性を低減させて精子受精能を誘発又は改善することが挙げられる。精子活性化剤の例としては、これらに限定されるものではないが、イオン（炭酸水素塩、ナトリウム、カルシウム、マグネシウム及びマンガン等）、塩類、ヒアルロニダーゼ（PH-20等）、アルブミン、高密度リポタンパク質、プロゲステロン、ペプチド、ヌクレオシド、ヌクレオチド、サイクリックＡＭＰ、低分子、タンパク質、抗体、ケモカイン、サイトカイン、プロスタグランジン、カフェイン、アスピリン、一酸化炭素、二酸化炭素、酸化窒素、それらの組合せ、又は化学的、機能的、又は生理的に同等又は類似の他の剤又は組合せが挙げられる。
【００２６】
本明細書で使用する「エネルギー増強剤」という用語は、特に断らない限り、細胞、精子、卵母細胞、胚又は組織にエネルギー基質を提供する天然又は合成の物質を指す。エネルギー増強剤の例としては、これらに限定されるものではないが、アデノシン三リン酸（ATP）、ピルビン酸塩、グルコース、ラクトース、他の糖類、乳酸塩、グリセロールホスホリルコリン、他の脂質、カルニチン、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、それらの組合せ、又は化学的、機能的、又は生理的に同等又は類似の他の剤又は組合せが挙げられる。
【００２７】
本明細書で使用する「スカベンジャー」という用語は、特に断らない限り、フリーラジカルと反応し、及び／又はフリーラジカルがデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）、リボ核酸（ＲＮＡ）、ペプチド、タンパク質、又は細胞、精子、卵母細胞、胚、及び／又は組織の膜、オルガネラ、構造及び／又は機能に損傷を生じさせることを防止する天然又は合成の物質を指す。スカベンジャーの例としては、これらに限定されるものではないが、ビタミンＥ，ビタミンＣ，ナイアシン、リボフラビン、ナイアシンアミド、グルタチオン、ＮＡＤＨ、他の抗酸化剤、それらの組合せ又は化学的、機能的、又は生理的に同等又は類似の他の剤又は組合せが挙げられる。
【００２８】
本明細書で使用する「受精促進剤」という用語は、特に断らない限り、受精過程を促進し、或いは受精過程を妨害し得る１又は２以上の物質を除去する、天然又は合成の物質を指す。例として、受精促進剤は、精子及び卵子表面の受容体とリガンドとが相互作用する可能性を増大させることにより、その機能を発揮する。受精促進剤の例としては、これらに限定されるものではないが、イオン（マグネシウム、マンガン、炭酸水素塩及び亜鉛）、ヒアルロニダーゼ（PH-20等）、アルブミン、高密度リポタンパク質、プロゲステロン、パンテノール、カフェイン、Ｌ−カルニチン、サイクリックＡＭＰ、アスピリン、ＣＤ９タンパク質活性化剤、表面受容体の活性化剤（インテグリン活性化剤等）、それらの組合せ、又は化学的、機能的、又は生理的に同等又は類似の他の剤又は組合せが挙げられる。
【００２９】
「生殖組織」という用語は、特に断らない限り、生殖過程に関与するヒト又は他の動物の組織を指す。生殖組織の例としては、限定されるものではないが、特に粘膜、膣、子宮、尿道、及び陰茎の組織、及び膣及び陰茎組織の周囲の皮膚が挙げられる。
【００３０】
「器官」という用語は、特に断らない限り、任意のタイプのヒト又は他の動物の器官を指す。器官の例としては、限定されるものではないが、特に生殖器官（膣、陰茎、子宮、卵巣等）、腎臓、心臓、皮膚、肺、及び肝臓が挙げられる。
【００３１】
「細胞」という用語は、特に断らない限り、任意のタイプのヒト又は他の動物の細胞を指す。細胞の例としては、限定されるものではないが、特に精子、卵母細胞、及び胚細胞が挙げられる。
【００３２】
組成物及び物品は、活性成分を適当な量及び濃度で組み合わせる等、任意の方法で調製及び／又は製造することができる。任意により、他の適当な活性又は不活性の剤を加えてもよい。組成物に含まれる所与の剤の絶対重量は広い範囲を取り得る。組成物は無菌であることが好ましい。無菌化の方法としては、０．２ミクロンのフィルターを通過させることが好ましい。
【００３３】
Ｉ．潤滑剤及び保湿剤組成物及び応用
本発明の一部は、生存能維持剤、及び／又は、受精及び他の生理機能の向上剤を潤滑剤及び保湿剤に使用することにより、生体細胞及び組織の生存能力が改善されると共に、それらの機能も改善されるという、本発明者等の予期せぬ発見の結果である。例えば、本発明者等は、精子を種々のバッファー中で３０分間インキュベートした後、ＦＡＣＳアッセイ（実施例３に記載）を用いて生存能力を分析したところ、生存能維持剤として二価イオンを含有する潤滑剤（組成物１、組成物２、及び組成物３）と共にインキュベートした精子の生存能力は、それを含有しない潤滑剤（殺精子性として公知の潤滑剤であるＫ−Ｙゼリー（K-Y Jelly）等（１８−２２））と比べて殆んど低下しないことを見出した（表１）。更に驚くべき結果として、本発明者等は、潤滑剤組成物中に生存能維持剤として二価イオンを加えることにより、市販の非殺精子性潤滑剤（Pre-Seed等）と比較しても精子生存能力が増強されることを見出した。グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等、他の幾つかの潤滑性剤を主とする潤滑剤も、生存能維持剤と組み合わせた場合に、同様の結果が得られた。
【００３４】
【表１】
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【００３５】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、細胞、精子、卵母細胞、胚又は組織の生存能力又は機能に影響を及ぼす特定の防腐剤又はバッファーを全く含まないか、或いは実質的に含まないとともに、非殺精子性であって、且つ、生存能維持剤、水性潤滑剤基剤、精子活性化剤、エネルギー増強剤、スカベンジャー、受精促進剤、細胞の生存能力又は機能に影響しない防腐剤、貯蔵される細胞、組織又は器官の生存能力の低下を低減させる保護剤、他の医薬的に有用な剤及び胚移植促進剤のうち１又は２以上を含んでなる。ある物質を実質的に含まない組成物とは、その物質の含有量が、測定し得る有害作用を生ずる量よりも少ないことを言う。その物質の量は通常、０．１％未満、０．０１％未満、更には０．００１％未満である。
【００３６】
ある実施形態によれば、水性潤滑剤基剤中に１又は２以上の生存能維持剤を含んでなる水系組成物が提供される。その組成物は、精子生存能力及び／又は運動性を維持又は増進するのに適した範囲のｐＨ、重量オスモル濃度及び／又は粘度を有することが好ましい。ある実施形態によれば、本発明の組成物は更に、生理機能を増進する１又は２以上の剤、例えば、精子活性化剤、エネルギー増強剤、スカベンジャー、受精促進剤、胚移植促進剤、又はそれらの任意の組合せを含んでなる。
【００３７】
他の実施形態によれば、本発明は、精子の生理機能を増進する１又は２以上の剤を水性潤滑剤基剤中に含んでなる水系組成物を提供する。その組成物は、精子生存能力及び／又は運動性を維持又は増進するのに適した範囲のｐＨ、重量オスモル濃度及び／又は粘度を有することが好ましい。かかる特定の実施形態によれば、生理機能を増進する剤は、精子活性化剤、エネルギー増強剤、スカベンジャー、受精促進剤、又はそれらの組合せの１又は２以上を含んでなる。ある実施形態によれば、かかる組成物は更に、１又は２以上の生存能維持剤を含んでなる。
【００３８】
ある実施形態によれば、細胞、精子、卵母細胞、胚、又は組織の生存能力及び／又は機能を低下させるある種の防腐剤及び／又はバッファーを含まない又は実質的に含まない組成物が提供される。かかる防腐剤の例としては、限定されるものではないが、ＥＤＴＡ、環状ＲＧＤペプチド、並びに他の特定のタンパク質、糖タンパク質、糖類又はオリゴ及び多糖であって、細胞−細胞及び細胞−細胞間質の相互作用、例えば精子−卵子の認識又は浸透等を阻害するものが挙げられる。即ち、ある実施形態によれば、組成物はＥＤＴＡを全く含有せず、或いは実質的に含有しない。ある実施形態によれば、組成物は、精子−卵子の認識及び浸透等の、細胞−細胞及び細胞−細胞間質の相互作用を阻害する糖タンパク質、糖類又はオリゴ及び／又は多糖を、全く含有せず、或いは実質的に含有しない。本発明の組成物は、精子生存能力及び／又は運動性を維持又は増進するのに適した範囲のｐＨ、重量オスモル濃度及び／又は粘度を有することが好ましい。ある実施形態によれば、組成物は更に、１又は２以上の生存能維持剤及び／又は生理機能を増進する剤（例えば、精子活性化剤、エネルギー増強剤、スカベンジャー、受精促進剤、又はそれらの混合物）を含んでなる。
【００３９】
ある実施形態によれば、水性潤滑剤基剤としては、上記のように、例えばｐＨ及び重量オスモル濃度が平衡化された塩水溶液が挙げられる。中でも、グリセロール、ヒスパゲル（HISPAGEL）（登録商標）、デキストラン、ポリアクリル酸、カルボマー、ポリエチレンオキシド、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、プルロニック（PLURONIC）（登録商標）−１２７、タンパク質、核酸又は石油ゼリーの１又は２以上又はそれらの任意の組合せを含んでなることが好ましい。ある実施形態によれば、水性潤滑剤基剤は、ヒドロキシプロピルメチルセルロースを含んでなる。他の特定の実施形態によれば、水性潤滑剤基剤は、プロピレングリコール、グリセロール、又はそれらの混合物を含んでなる。組成物は、１％から９９．９９９％の水、好ましくは７５％から９９．９９％の水、最も好ましくは９５％から９９．９％の水を含んでなる。ある実施形態によれば、組成物のｐＨは、５．０から９．０、好ましくは７．０から８．５、より好ましくは７．２から８．０、又は７．８から８．２の範囲、例えば約７．３５であり；重量オスモル濃度は、２００ｍＯｓｍ／ｋｇから７００ｍＯｓｍ／ｋｇ、好ましくは２５０ｍＯｓｍ／ｋｇから５００ｍＯｓｍ／ｋｇ、より好ましくは２９０ｍＯｓｍ／ｋｇから３６０ｍＯｓｍ／ｋｇ、又は３００ｍＯｓｍ／ｋｇから４００ｍＯｓｍ／ｋｇ、最も好ましくは約３２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり；粘度は、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）等の平衡塩溶液の粘度に対する比で表した場合に、１．０から５．０、好ましくは１．０から３．５、最も好ましくは１．０から２．５である。適当なｐＨ緩衝剤としては、リン酸塩、ホウ酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、炭酸塩、炭酸水素塩、又はそれらの組合せが挙げられる。ＴＲＩＳ、ＰＩＰＥＳ（ピペラジン−１，４−ビス（２−エタンスルホン酸））、ＨＥＰＥＳ等の他の緩衝剤も、これらの溶液に加えることができる。ある実施形態によれば、ｐＨを調節するために水酸化ナトリウムを加える。ある実施形態によれば、浸透圧調節物質は、ナトリウムイオン、カリウムイオン、イノシトール、ベタイン、ソルビトール、ペプチド又はグルタミンを含んでなる。ある実施形態によれば、カリウムイオンの濃度は低く、例えば０．００１マイクロモル（μＭ）から１２．５ミリモル（ｍＭ）、好ましくは０．１μＭから１０ｍＭ、最も好ましくは１０μＭから５ｍＭである。
【００４０】
ある実施形態によれば、生存能維持剤はイオン性であり、例えばカルシウム又はマグネシウムイオンである。他の実施形態によれば、好ましい生存能維持剤は、一酸化炭素、二酸化炭素、酸化窒素又はそれらの混合物から選択される。ある実施形態によれば、組成物は、１又は２以上の生存能維持剤を、０．００１マイクロモル（μＭ）から１モル（Ｍ）、好ましくは０．０１ミリモル（ｍＭ）から１０ミリモル（ｍＭ）、最も好ましくは０．１ｍＭから５ｍＭの濃度で含んでなる。
【００４１】
他の特定の実施形態によれば、精子活性化剤はイオン性であり、例えばカルシウム、マグネシウム、マンガン又は炭酸水素のイオン又はそれらの組合せである。他の態様によれば、組成物は１又は２以上の精子活性化剤を含んでなり、例えば、０．００１マイクロモル（μＭ）から１モル（Ｍ）、好ましくは０．０１μＭから５０ｍＭ、最も好ましくは１μＭから３０ｍＭの濃度で供される。ある実施形態によれば、精子活性化剤はイオン性カルシウムであり、例えば、１０μＭから１０ｍＭ、好ましくは５００μＭから５ｍＭの濃度で供される。他の特定の実施形態によれば、精子活性化剤はイオン性マグネシウムであり、例えば、１０μＭから１０ｍＭ、好ましくは５００μＭから５ｍＭの濃度で供される。他の特定の実施形態によれば、精子活性化剤は炭酸水素イオンであり、例えば、１００μＭから５０ｍＭ、好ましくは１０ｍＭから３０ｍＭの濃度で供される。他の特定の実施形態によれば、精子活性化剤は、サイクリックＡＭＰ、カフェイン、アセチルサリチル酸（アスピリン）、一酸化炭素又はそれらの混合物である。かかる特定の実施形態によれば、精子活性化剤はカフェインである。更に他の実施形態によれば、精子活性化剤はヒアルロニダーゼ（ＰＨ−２０等）、アルブミン、高密度リポタンパク質、プロゲステロン又はそれらの混合物から選択される。
【００４２】
ある実施形態によれば、エネルギー増強剤は、ピルビン酸塩、乳酸塩又はそれらの混合物であり、例えば、０．０００１μＭから１００ｍＭ、好ましくは０．０１μＭから１０ｍＭ、最も好ましくは１μＭから１ｍＭの濃度で供される。
【００４３】
ある実施形態によれば、スカベンジャーは、ビタミンＥ、ビタミンＣ、ナイアシン、リボフラビン、ナイアシンアミド又はそれらの混合物であり；供される濃度は、０．０００１μＭから１００ｍＭ、好ましくは０．０１μＭから１０ｍＭ、最も好ましくは１μＭから１ｍＭである。
【００４４】
ある実施形態によれば、受精促進剤は、マグネシウムイオン、マンガンイオン、炭酸水素イオン、ヒアルロニダーゼ、プロゲステロン、パンテノール、カフェイン、Ｌ−カルニチン、サイクリックＡＭＰ又はそれらの混合物から選択されることが好ましい。関連する実施形態によれば、受精促進剤の濃度は、０．０００１μＭから１００ｍＭ、好ましくは０．０１μＭから１０ｍＭ、最も好ましくは１μＭから２ｍＭである。
【００４５】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、細胞、精子、卵母細胞、胚又は組織のいずか１つの生存能力又は機能を低下させる防腐剤を全く含有せず、或いは実質的に含有しない。かかる剤の例としては、限定されるものではないが、ＥＤＴＡ、環状ＲＧＤペプチド、並びに、細胞−細胞及び細胞−細胞間質の相互作用を阻害する特定の糖タンパク質、糖類又はオリゴ糖が挙げられる。ある実施形態によれば、組成物はＥＤＴＡを全く含有せず、或いは実質的に含有しない。ある実施形態によれば、望ましくない防腐剤は、細胞−細胞及び細胞−細胞間質の相互作用を阻害する、特定の糖タンパク質、糖類又はオリゴ糖である。
【００４６】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、細胞、精子、卵母細胞、胚又は組織のいずれか１つの生存能力又は機能を低下させない防腐剤を含有する。細胞、精子、卵母細胞、胚又は組織の生存能力又は機能を低下させない防腐剤の例としては、限定されるものではないが、ホウ酸、アスコルビン酸、ホウ酸ナトリウム、メチルパラベン又はそれらの混合物が挙げられる。防腐剤は０．００００１％から１０％、好ましくは０．０００１％から５％、より好ましくは０．００１％から１％の濃度で提供される。
【００４７】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、１又は２以上の他の医薬的に有用な剤を含有する。かかる剤としては、限定されるものではないが、抗掻痒剤、麻酔剤、エストロゲン剤、抗生剤、抗ウイルス剤、抗カビ剤、ステロイド、治療用薬剤、薬剤送達媒体、その他、及びこれらの組合せが挙げられる。好ましい抗生物質として、ペニシリン、ストレプトマイシン、ゲンタマイシン、又はそれらの混合物が挙げられる。
【００４８】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、１又は２以上の他の胚移植能向上剤を含んでなる。胚移植能向上剤としては、限定されるものではないが、ヒアルロナンが挙げられる。
【００４９】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、非汚染性であり、非刺激性であり、透明であり、無臭であり、望ましくない防腐剤を含まず、及び／又は、非殺精子性である。
【００５０】
種々の実施形態によれば、本発明の組成物は、溶液、ゲル、フォーム、クリーム、ゼリー、座剤、潅注液、フィルム、溶解性フィルム等の形態である。加えて、組成物を、例えば、密閉容器及び／又は予充填単回使用アプリケーター、チューブ、アンプル、パッケージ、バイアル、ボトル（例えば、ポンプボトル、スクィーズボトルその他）、ジャー、タブ、袋、又はバッグ等の容器内に包装してもよい。ある実施形態によれば、アプリケーターは、酵母、細菌及びウイルス等の有害な微生物による汚染を制限するべく、皮膚との接触を最小限に抑え得るように設計される。ある実施形態によれば、組成物は、潤滑剤組成物のチューブ及び膣への適用を容易にするデバイスを含んでなるキットとして包装してもよい。他の態様によれば、キットは、１本又は２本以上の潤滑剤組成物のチューブと、他の品目とを有していてもよい。かかる品目としては、限定されるものではないが、使用説明書、ビタミン丸薬、受精モニター、栄養補助食品等が挙げられる。
【００５１】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、ヒト又は他の動物の組織保湿剤及び潤滑剤として使用される。ある実施形態によれば、組成物は、膣潤滑剤及び保湿剤として有用である。ある実施形態によれば、提供される潤滑剤は、非殺精子性、精子適合性（sperm-friendly）、卵母細胞適合性（oocyte-friendly）、及び胚適合性（embryo-friendly）である。ある実施形態によれば、提供される潤滑剤組成物は、精子及び卵母細胞の受精能を増大させる。ある実施形態によれば、提供される潤滑剤組成物は、受精された胚の移植能を増大させる。
【００５２】
ある実施形態によれば、潤滑剤及び保湿剤は、性交中に、ＡＲＴ等の種々の補助生殖技法において、及び／又は、種々の他の医学的及び診断方法において、ヒト及び他の動物に使用される。
【００５３】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、性交前又は性交中に膣に投与又は挿入することができる。組成物は、人工授精の前又は間に、或いは、体外受精処置の前又は間に、膣に投与又は挿入することもできる。ある実施形態によれば、組成物は、性交前又は性交中に、又は体外受精処置の前又は間に、或いは、人工授精の前又は間に、陰茎に適用又は投与することができる。例としては、限定されるものではないが、精液又は精子の捕集時に、捕集容器中への精液又は精子の射精前に、陰茎へ組成物を適用又は投与することや、組成物を含有する捕集容器内に精液又は精子を捕集すること等が挙げられる。ある実施形態によれば、組成物は、精子捕集の前、間、又は後に、精液又は精子捕集容器に加えることができる。
【００５４】
ある実施形態によれば、組成物は、組織の被覆、潤滑及び保湿に使用される。他の実施形態によれば、組成物は、陰茎用の潤滑化シース（sheath）等の表面及び／又は物品の被覆、潤滑及び保湿に使用され、そこで組成物は、シースの内側、外側又は両側の表面の潤滑に使用される。同様に、組成物は、医学的又は生殖処置の前又は間において、医療用デバイス又は手の潤滑剤として使用することもできる。
【００５５】
ある実施形態によれば、本発明の方法及び組成物は、乾燥及び刺激を軽減するための皮膚科用クリーム、ゲル、保湿剤及び潤滑剤の調製に使用される。
【００５６】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、出産で子供を分娩するための潤滑剤として使用するために提供される。
【００５７】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、限定されるものではないが、脳脊髄液、生検細胞、生検組織、嚢胞、腫瘍、唾液、糞便、頬スワブ、組織、細胞、血液、体液又はそれらの混合物等、種々の生体試料の捕集、輸送又は貯蔵に使用される。かかる特定の実施形態によれば、本発明の組成物は、捕集された生体材料の生存能力を維持する。同様に、本発明の組成物は、生体試料を捕集後直ちに培養又は伸展する媒体として使用することができる。同様に、本発明の組成物は、生体試料を制御温度下で、例えば加熱、冷蔵、凍結又はガラス化した状態で貯蔵した後、かかる生体試料を直ちに培養又は伸展する媒体として有用な場合がある。
【００５８】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、限定されるものではないが、脳脊髄液、生検細胞、生検組織、嚢胞、腫瘍、唾液、糞便、頬スワブ、細胞、組織、体液、血液又はそれらの混合物等の生体試料からの微生物叢（限定されないが、細菌、カビ、ウイルスその他等）の捕集、輸送又は貯蔵のために使用される。例えば、本発明の組成物は、捕集された微生物叢の生存能力を維持することができる。同様に、本発明の組成物は、生体試料の捕集後直ちに微生物叢を培養又は伸展する媒体として有用である。更に、本発明の組成物は、冷蔵、凍結又はガラス化された状態での生体試料の貯蔵に続いて、直ちにそれらの生体試料について微生物叢を培養又は伸展する媒体として有用である。例えば、組成物を使用して捕集された微生物叢は、限定されるものではないが、アッセイ、低分子、治療法、高速大量処理スクリーニングその他の開発で使用される。
【００５９】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、限定されるものではないが、膣、陰茎、腎臓、肺、心臓、肝臓、骨、皮膚等種々の生体器官の捕集、輸送又は貯蔵のために使用される。かかる特定の実施形態によれば、本発明の組成物は、捕集された器官の生存能力を維持する。かかる特定の実施形態によれば、本発明の組成物は、捕集された器官の生理機能を維持する。例えば、本発明の組成物は、器官移植後の機能を、拒絶率を低減させることにより、増進することができる。かかる特定の実施形態によれば、本発明の組成物は、器官捕集後直ちに培養又は伸展する媒体として有用である。ある実施形態によれば、本発明の組成物は、制御された温度、室温、加熱された温度、体温、冷蔵、凍結又はガラス化状態における器官貯蔵に続いて、直ちにそれらの器官を培養又は伸展する媒体として有用である。ある実施形態によれば、本発明の組成物は器官の輸送溶液として有用である。例えば、本発明の組成物は、培養中、貯蔵、輸送中及びインビボ及びインビトロでの使用中の器官の生存能力及び／又は生理機能を改善することができる。
【００６０】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、負傷、発疹、熱傷、挫傷、移植、又は他の適当な状態の医療処置時に使用される。
【００６１】
本発明の組成物及び物品は、活性成分を適当な量及び濃度となるよう容器内で組み合わせて混合する等、任意の適当な方法により調製及び／又は製造することができる。必要であれば、成分の溶媒和を促進するために、混合物を加熱又は冷却する。組成物は無菌であることが好ましく、最も好ましい無菌化方法は、０．２ミクロンのフィルターを通過させることである。他の態様によれば、本発明の組成物は高度の透明性も有し、当技術分野で公知の標準的な濁度測定手順で測定した場合に、好ましくは約２未満の濁度を有する。
【００６２】
II．媒体組成物及び応用
本発明は更に、媒体（培地）として使用される組成物、及び関連する使用方法を提供する。
【００６３】
ある実施形態によれば、媒体組成物は、精子、卵母細胞、胚、細胞又は組織のインビトロでの培養又は伸展中に、培養及び／又は伸展媒体（培地）として使用され、１又は２以上の生存能維持剤を平衡塩溶液基剤中に含んでなる。本発明の組成物は、細胞培養に適合するｐＨ、重量オスモル濃度及び／又は粘度を有することが好ましい。ある実施形態によれば、本発明の組成物は更に、生理機能を増進する１又は２以上の剤、例えば、精子活性化剤、エネルギー増強剤、スカベンジャー、受精促進剤、又はそれらの混合物を含んでなる。ある実施形態によれば、本発明の組成物は、細胞、精子、卵母細胞、胚、又は組織の生存能力を低下させるある種の防腐剤及びバッファーを全く含有せず、或いは実質的に含有しない。かかる防腐剤の例としては、限定されるものではないが、ＥＤＴＡ、環状ＲＧＤペプチド、並びに、細胞−細胞及び細胞−細胞間質の相互作用を阻害する、特定の糖タンパク質、糖類又はオリゴ糖が挙げられる。
【００６４】
ある実施形態によれば、本発明の媒体組成物は、精子、卵母細胞、胚、細胞又は組織のインビトロでの培養又は伸展時に、培養及び／又は伸展媒体（培地）として使用され、平衡塩溶液中に生理機能を増進する１又は２以上の剤を含んでなる。本発明の媒体組成物は、細胞及び／又は組織の維持及び増殖に適したｐＨ、重量オスモル濃度及び粘度を有することが好ましい。ある実施形態によれば、生理機能を増進する剤としては、精子活性化剤、エネルギー増強剤、スカベンジャー、受精促進剤、又はそれらの組合せが挙げられる。ある実施形態によれば、本発明の媒体組成物は更に、１又は２以上の生存能維持剤を含んでなる。ある実施形態によれば、本発明の組成物は、細胞、精子、卵母細胞、胚、又は組織の生存能力又は機能を低下させるある種の防腐剤及びバッファーを全く含有せず、或いは実質的に含有しない。かかる防腐剤の例としては、限定されるものではないが、ＥＤＴＡ、環状ＲＧＤペプチド、並びに、細胞−細胞及び細胞−細胞間質の相互作用を阻害する、ある種の糖タンパク質、糖類又はオリゴ糖が挙げられる。
【００６５】
ある実施形態によれば、媒体組成物の平衡塩溶液基剤としては、限定されるものではないが、イスコブ変法ダルベッコ培地（Iscove's Modified Dulbecco's Medium：ＩＭＤＭ）、ダルベッコ改変イーグル培地（Dulbecco's modified Eagle's medium：ＤＭＥＭ）、ロズウェルパーク記念研究所（Roswell Park Memorial Institute：ＰＲＭＩ）培地（PRMI 1640等）、タイロード緩衝塩（Tyrode's buffered salts）、卵母細胞捕集培地、ＴＡＬＰ、ＨＴＦ、ＣＺＢ、Ｔ６、ハムＦ１２（Ham's F12）、アール緩衝塩（Earle'ｓ buffered salts）、ＢＷＷ、アールＭＴＦ（Earle's MTF）、ＫＳＯＭ、ＳＯＦ、ＰＢＳ等が挙げられる。これらの平衡塩溶液や他の平衡塩溶液は当技術分野において周知であり、多数が市販されている（例えばATCC、Fisher Scientific、Invitrogen、VitroLifeその他から）。更に、ＴＲＩＳ、ＰＩＰＥＳ、及びＨＥＰＥＳ等他の緩衝剤を、これらの溶液に加えてもよい。加えて、血清、アルブミン、ゼラチン、ビタミン、ミネラル、アミノ酸、ヌクレオチド、スクロース、トレハロース、エタノール、ＤＭＳＯ、ヒドロキシプロピルメチルセルロース等の他の特定の剤も、緩衝塩溶液に添加することができる。組成物は、５０％から９９．９９９％の平衡塩溶液、好ましくは７５％から９９．９９％の平衡塩溶液、最も好ましくは９５％から９９．９％の平衡塩溶液を含んでなる。ある実施形態によれば、組成物のｐＨは、５．０から９．０、好ましくは７．０から８．５、好ましくは７．８から８．２、好ましくは約７．３５の範囲であり；重量オスモル濃度は、２００ｍＯｓｍ／ｋｇから７００ｍＯｓｍ／ｋｇ、好ましくは２５０ｍＯｓｍ／ｋｇから５００ｍＯｓｍ／ｋｇ、より好ましくは３００ｍＯｓｍ／ｋｇから３５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、最も好ましくは約３２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり；粘度は、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）等の平衡塩溶液の粘度に対する比で表した場合、１．０から５．０、好ましくは１．０から２．５、最も好ましくは１．０から１．２である。ある実施形態によれば、適当なｐＨ緩衝剤には、リン酸塩、ホウ酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、炭酸塩、炭酸水素塩、又はそれらの混合物が含まれる。ｐＨを調節するために水酸化ナトリウムを添加することができる。ある実施形態によれば、浸透圧調節物質には、ナトリウムイオン、カリウムイオン、イノシトール、ベタイン、ソルビトール、ペプチド又はグルタミンが含まれる。ある実施形態によれば、浸透圧調節物質カリウムイオンの濃度は低く、０．００１マイクロモル（μＭ）から１２．５ミリモル（ｍＭ）、好ましくは０．１μＭから１０ｍＭ、最も好ましくは１０μＭから５ｍＭである。
【００６６】
ある実施形態によれば、生存能維持剤はイオン性であり、例えばカルシウム又はマグネシウムイオンである。ある実施形態によれば、媒体組成物は１又は２以上の生存能維持剤を含んでなる。ある実施形態によれば、生存能維持剤は、０．００１マイクロモル（μＭ）から１モル（Ｍ）、好ましくは０．０１ミリモル（ｍＭ）から１０ミリモル（ｍＭ）、最も好ましくは０．１ｍＭから５ｍＭの濃度で提供される。他の実施形態によれば、好ましい生存能維持剤は、一酸化炭素、二酸化炭素、酸化窒素又はそれらの混合物から選択される。
【００６７】
ある実施形態によれば、好ましい精子活性化剤はイオン性であり、好ましいイオンはカルシウム、マグネシウム、マンガン、又は炭酸水素である。関連する態様によれば、媒体組成物は１又は２以上の精子活性化剤を含んでなる。他の態様によれば、精子活性化剤の提供される濃度は、０．００１マイクロモル（μＭ）から１モル（Ｍ）、好ましくは０．０１マイクロモル（μＭ）から５０ミリモル（ｍＭ）、最も好ましくは１μＭから３０ｍＭである。他の態様によれば、好ましい精子活性化剤はイオン性カルシウムであり、カルシウムの提供される濃度は１０μＭから１０ｍＭ、好ましくは５００μＭから５ｍＭである。他の態様によれば、好ましい精子活性化剤はイオン性マグネシウムであり、マグネシウムの提供される濃度は１０μＭから１０ｍＭ、好ましくは５００μＭから５ｍＭである。他の態様によれば、最も好ましい精子活性化剤は炭酸水素イオンであり、炭酸水素イオンの提供される濃度は、１００μＭから５０ｍＭ、好ましくは１０ｍＭから３０ｍＭである。他の実施形態によれば、精子活性化剤は、サイクリックＡＭＰ、カフェイン、アスピリン、一酸化炭素又はそれらの混合物である。関連する実施形態によれば、好ましい精子活性化剤は、カフェインである。他の態様によれば、好ましい精子活性化剤は、ヒアルロニダーゼ（PH-20等）、アルブミン、高密度リポタンパク質、プロゲステロン又はそれらの混合物から選択される。
【００６８】
ある実施形態によれば、好ましいエネルギー増強剤は、ＡＴＰ、フルクトース、グルコース、ピルビン酸塩、ラクトース、乳酸塩又はそれらの混合物である。関連する実施形態によれば、エネルギー増強剤の濃度は、０．０００１μＭから１Ｍ、好ましくは０．０１μＭから１００ｍＭ、最も好ましくは１μＭから２５ｍＭである。
【００６９】
ある実施形態によれば、好ましいスカベンジャーは、ビタミンＥ、ビタミンＣ、ナイアシン、リボフラビン、ナイアシンアミド又はそれらの混合物である。関連する実施形態によれば、スカベンジャーの濃度は、０．０００１μＭから１００ｍＭ、好ましくは０．０１μＭから１０ｍＭ、最も好ましくは１μＭから１ｍＭである。
【００７０】
ある実施形態によれば、受精促進剤は、マグネシウムイオン、マンガンイオン、炭酸水素イオン、ヒアルロニダーゼ、プロゲステロン、パンテノール、カフェイン、Ｌ−カルニチン、サイクリックＡＭＰ又はそれらの混合物から選択される。関連する実施形態によれば、受精促進剤の濃度は、０．０００１μＭから１００ｍＭ、好ましくは０．０１μＭから１０ｍＭ、最も好ましくは１μＭから２ｍＭである。
【００７１】
他の態様によれば、本発明の媒体組成物は、細胞、精子、卵母細胞、胚、又は組織の生存能力に影響する防腐剤を全く含有せず、或いは実質的に含有しない。望ましくない防腐剤の例としては、限定されるものではないが、ＥＤＴＡ、並びに、細胞−細胞及び細胞−細胞間質の相互作用を阻害する、特定の糖タンパク質、糖類又はオリゴ糖が挙げられる。関連する実施形態によれば、望ましくない防腐剤はＥＤＴＡである。他の関連する実施形態によれば、望ましくない防腐剤は、細胞−細胞及び細胞−細胞間質の相互作用を阻害する、特定の糖タンパク質、糖類又はオリゴ糖である。
【００７２】
他の態様によれば、本発明の媒体組成物は、細胞、精子、卵母細胞、胚又は組織の生存能力又は機能に影響しない１又は２以上の防腐剤を含んでなる。細胞、精子、卵母細胞、胚又は組織の生存能力又は機能に影響しない防腐剤の例としては、限定されるものではないが、ホウ酸、アスコルビン酸、ホウ酸ナトリウム、メチルパラベン又はそれらの混合物が挙げられる。ある関連する実施形態によれば、望ましい防腐剤の濃度は、０．００００１％から１０％、好ましくは０．０００１％から５％、最も好ましくは０．００１％から１％である。
【００７３】
他の実施形態によれば、本発明の媒体組成物は、１又は２以上の他の医薬的に有用な剤を含んでなる。かかる剤としては、限定されるものではないが、抗掻痒剤、麻酔剤、エストロゲン剤、抗生剤、ステロイド、治療用薬剤、薬剤送達媒体及びその他、並びにこれらの組合せが挙げられる。好ましい抗生物質としては、ペニシリン、ストレプトマイシン、ゲンタマイシン、又はそれらの混合物が挙げられる。
【００７４】
ある実施形態によれば、本発明の媒体組成物は他の移植能向上剤を含んでいてもよい。例としては、限定されるものではないが、ヒアルロナンが挙げられる。
【００７５】
ある他の態様によれば、本発明の媒体組成物は、溶液、粉末、ゲル、フォーム、クリーム、ゼリー等の形態である。加えて、組成物は、無菌の予充填ボトル、アプリケーター、チューブ及び他の容器内に包装してもよい。ある関連する実施形態によれば、組成物は、ある用途の使用前に水等の１又は２以上の希釈剤で希釈するように、高濃度で提供される。
【００７６】
他の態様によれば、組成物はキットとして包装してもよい。関連する実施形態によれば、キットには、上述のチューブを複数含めてもよい。他の実施形態によれば、キットには、限定されるものではないが、説明書等の他の品目を含めてもよい。
【００７７】
ある好ましい態様によれば、提供される媒体組成物は、非殺精子性、精子適合性、卵母細胞適合性、且つ、胚適合性である。関連する実施形態によれば、提供される媒体組成物は、精子及び卵母細胞の受精能を増進する。関連する実施形態によれば、提供される媒体組成物は、受精胚の移植能を増進する。
【００７８】
他の実施形態によれば、本発明の媒体組成物は、ヒト又は他の動物における人工授精又は補助生殖技法（ＡＲＴ）中の種々の工程や方法において、或いは、ヒト及び他の動物におけるインビトロでの不妊に関する問題を扱う他の処置のための媒体として使用される。かかる処置の例としては、限定されるものではないが、精子捕集、精子洗浄、精子伸展、卵母細胞捕集、卵母細胞洗浄、体外受精等が挙げられる。例えば、本発明の組成物は、精子、卵母細胞、胚、細胞又は組織を洗浄するための媒体として使用される。他のかかる実施形態によれば、組成物は、試料から運動性の精子を分離する際に使用される。他の実施形態によれば、提供される方法及び組成物は、精子−卵子相互作用を向上させ、それにより体内及び体外受精の可能性を増大させるのに有用である。他の同様の実施形態によれば、方法及び組成物は、体外受精、人工授精又は他の受精関連治療の方法を改善するために提供される。
【００７９】
ある実施形態によれば、本発明の媒体組成物は、ヒト又は他の動物における人工授精又は補助生殖技法（ＡＲＴ）中の種々の工程や方法において、或いは、ヒト及び他の動物におけるインビトロでの不妊に関する問題を扱う他の処置のための洗浄媒体として使用される。かかる処置の例としては、限定されるものではないが、精子捕集、精子洗浄、精子伸展、卵母細胞捕集、卵母細胞洗浄、体外受精等が挙げられる。例えば、本発明の組成物は、精子、卵母細胞、胚、細胞又は組織を洗浄するための媒体として使用することができる。他の特定の実施形態によれば、組成物は、試料からの運動性精子の分離のために、或いは分離中に使用される。他の実施形態によれば、提供される方法及び組成物は、精子−卵子相互作用を向上させることにより、体内及び体外受精の可能性を増大させるのに有用である。他の実施形態によれば、方法及び組成物は、体外受精、人工授精又は他の受精関連治療の方法を改善するために提供される。
【００８０】
他の実施形態によれば、本発明の媒体組成物は、精子−卵子結合等の細胞−細胞結合における改善を使用する、胚及び幹細胞等の特殊化された細胞の発生のための培養媒体又は伸展媒体として、インビトロで使用される。
【００８１】
他の実施形態によれば、本方法及び媒体組成物は、精子−卵子結合等の細胞−細胞結合における改善を用いた、胚及び幹細胞等の分化細胞の発生のために提供される。
【００８２】
他の実施形態によれば、精子、卵母細胞、胚、細胞、組織の生存を増大させるべく、それらを本発明の媒体組成物と接触させることを含んでなる方法が提供される。他の特定の実施形態によれば、精子、卵子及び細胞の機能を維持し、精子機能（及び卵子、卵母細胞及び細胞の機能）及び精子、卵子、卵母細胞及び細胞の損傷の低下を低減させるための方法が提供される。他の実施形態によれば、精子及び細胞の機能を改善する方法が提供される。他の実施形態によれば、精子、卵母細胞、胚又は細胞を貯蔵するための媒体が提供される。
【００８３】
ある実施形態によれば、本発明の媒体組成物は、限定されるものではないが、脳脊髄液、生検細胞、生検組織、嚢胞、腫瘍、唾液、糞便、頬スワブ、組織、細胞、体液、血液、又はそれらの混合物等の種々の生体試料の捕集のために使用される。かかる特定の実施形態によれば、本発明の組成物は、捕集された生体材料の生存能力を維持する。他の実施形態によれば、本発明の組成物は、生体試料の捕集後直ちに培養又は伸展する媒体として有用である。他のかかる実施形態によれば、本発明の組成物は、制御温度下、加熱、冷蔵、凍結又はガラス化された状態で生体試料を貯蔵した後、直ちにそれらの生体試料を培養又は伸展する媒体として有用である。
【００８４】
ある実施形態によれば、本発明の媒体組成物は、限定されるものではないが、脳脊髄液、生検細胞、生検組織、嚢胞、腫瘍、唾液、糞便、頬スワブ、細胞、組織、体液、血液、又はそれらの混合物等の生体試料からの種々の微生物叢（限定されないが、細菌、カビ、ウイルスその他等）の捕集に使用される。かかる特定の実施形態によれば、本発明の組成物は、捕集された微生物叢の生存能力を維持する。他の実施形態によれば、本発明の組成物は、生体試料の捕集後直ちに微生物叢を培養又は伸展する媒体として有用である。かかる特定の実施形態によれば、本発明の組成物は、制御された温度、加熱、冷蔵、凍結又はガラス化された状態での生体試料の貯蔵に続いて、直ちにそれらの生体試料について微生物叢を培養又は伸展する媒体として有用である。他の実施形態によれば、本発明の媒体組成物を使用して捕集された微生物叢は、限定されるものではないが、アッセイ、低分子、治療法、高速大量スクリーニングその他の開発に使用される。
【００８５】
ある態様によれば、本発明の組成物及び物品は、活性成分を容器内で、適当な量及び濃度で組み合わせて混合する等、任意の方法により調製及び／又は製造される。必要があれば、成分の溶媒和を促進するために、混合物を加熱又は冷却する。ある実施形態によれば、組成物は無菌であり、好ましい無菌化方法は０．２ミクロンのフィルターを通すことである。ある実施形態によれば、本発明の組成物は高度の透明性も有し、当技術分野で知られている標準的濁度測定手順で測定した場合に、好ましくは約２未満の濁度を有する。
【００８６】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、限定されるものではないが、膣、陰茎、腎臓、肺、心臓、肝臓、骨、皮膚等又はそれらの混合物等の種々の生体器官の捕集に有用である場合がある。かかる特定の実施形態によれば、本発明の組成物は、捕集された器官の生存能力を維持する。他の関連する実施形態によれば、本発明の組成物は、捕集された器官の生理機能を維持する。例えば、本発明の組成物は、拒絶率を低減させることにより、器官移植後の機能を増進することができる。他の実施形態によれば、本発明の組成物は、器官を捕集後直ちに培養又は伸展する媒体として有用である。かかる特定の実施形態によれば、本発明の組成物は、制御された温度、室温、加熱された温度、体温、冷蔵、凍結又はガラス化状態における器官貯蔵に続いて直ちにそれらの器官を培養又は伸展する媒体として有用である。他の関連する実施形態によれば、本発明の組成物は、器官のための輸送溶液として有用である。ある実施形態によれば、本発明の組成物は、培養中、貯蔵中、輸送中及びインビボ及びインビトロでの使用中に器官の生存能力及び／又は生理機能を改善する。ある実施形態によれば、試料は、ヒト、ウシ、イヌ、ウマ、ブタ、ヒツジ、トリ、齧歯類、又は希少又は新奇な種等の動物から取得され、或いは人工的に生成される。
【００８７】
他の実施形態によれば、本発明の組成物は、限定されるものではないが、負傷、発疹、熱傷、挫傷、移植等の医療処置に有用である。
【００８８】
III．貯蔵媒体組成物及び応用
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、制御された温度、加熱、冷蔵、凍結又はガラス化状態における貯蔵中に精子、卵母細胞、胚、細胞又は組織を保存するための貯蔵媒体として使用され、貯蔵溶液基剤中に１又は２以上の生存能維持剤を含んでなる。本発明の組成物は、細胞機能を維持し又は増進するのに適した範囲のｐＨ、重量オスモル濃度及び粘度を有することが好ましい。ある態様によれば、本発明の組成物は、生理機能を増進する剤を含んでなる。かかる特定の実施形態によれば、生理機能を増進する剤は、精子活性化剤、エネルギー増強剤、スカベンジャー、受精促進剤又はそれらの混合物を含んでなる。ある実施形態によれば、本発明の組成物は、細胞、精子、卵母細胞、胚、又は組織の生存能力又は機能に影響するある種の防腐剤及びバッファーを全く含有せず、或いは実質的に含有しない。かかる防腐剤の例としては、これらに限定されるものではないが、ＥＤＴＡ、環状ＲＧＤペプチド及び細胞−細胞及び細胞−細胞間質の相互作用を阻害する、特定の糖タンパク質、糖類又はオリゴ糖が挙げられる。
【００８９】
ある他の態様によれば、本発明の組成物は、制御された温度、加熱、冷蔵、凍結又はガラス化状態における貯蔵中に精子、卵母細胞、胚、細胞又は組織を保存するための貯蔵媒体として使用でき、貯蔵溶液基剤中に生理機能を増進する１又は２以上を含んでなる。本発明の組成物は、細胞又は組織を保存するために適当な範囲のｐＨ，重量オスモル濃度及び粘度を有することが好ましい。他の実施形態によれば、生理機能を増進する剤は、精子活性化剤、エネルギー増強剤、スカベンジャー、受精促進剤、又はそれらの混合物を含んでなる。他の実施形態によれば、本発明の組成物は、生存能維持剤を更に含んでなる。他の実施形態によれば、提供される組成物は、細胞、精子、卵母細胞、胚、又は組織の生存能力又は機能に影響するある種の防腐剤及びバッファーを全く含有せず、或いは実質的に含有しない。かかる防腐剤の例としては、限定されるものではないが、ＥＤＴＡ、環状ＲＧＤペプチド及び細胞−細胞及び細胞−細胞間質の相互作用を阻害する、特定の糖タンパク質、糖類又はオリゴ糖が挙げられる。
【００９０】
ある実施形態によれば、貯蔵溶液基剤は、平衡塩溶液基剤を含んでなる。例としては、限定されるものではないが、ＩＭＤＭ、ＤＭＥＭ、ＰＲＭＩ媒体、タイロード緩衝塩、ＴＡＬＰ、ＨＴＦ、ＣＺＢ、Ｔ６、ハムＦ１２、アール緩衝塩、ＢＷＷ、アールＭＴＦ、ＫＳＯＭ、ＳＯＦ等が挙げられる。これらの平衡塩溶液の各々の組成は、当技術分野において周知であり、多くは市販で入手可能である（例えば、ATCC、Fisher Scientific、Invitrogen、VitroLifeその他から）。他の実施形態によれば、ＴＲＩＳ、ＰＩＰＥＳ、ＨＥＰＥＳ等の緩衝剤がこれらの溶液に更に加えられる。加えて、他の特定の剤を平衡塩溶液に加えてもよい。例としては、トレハロース、ＤＭＳＯ、エタノール、他のアルコール類、グリセロール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、血清、アルブミン、ゼラチン、ビタミン、ミネラル、アミノ酸、ヌクレオチド、スクロース、他の糖類等が挙げられる。組成物は、５０％から９９．９９９％の平衡塩溶液、好ましくは７５％から９９．９９％の平衡塩溶液、最も好ましくは８０％から９３％の平衡塩溶液を含んでなる。ある実施形態によれば、組成物の好ましいｐＨは、５．０から９．０の範囲内、好ましくは７．０から８．５、好ましくは７．８から８．２、好ましくは約７．３５であり；好ましい重量オスモル濃度は、２００ｍＯｓｍ／ｋｇから７００ｍＯｓｍ／ｋｇ、好ましくは２５０ｍＯｓｍ／ｋｇから５００ｍＯｓｍ／ｋｇ、好ましくは３００ｍＯｓｍ／ｋｇから３５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、好ましくは約３２０ｍＯｓｍ／ｋｇであり；且つ、好ましい粘度は、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）等の平衡塩溶液の粘度に対する比で表した場合に、１．０から５．０、好ましくは１．０から４．０、最も好ましくは１．０から３．０である。ある関連する実施形態によれば、ｐＨ緩衝剤は、リン酸塩、ホウ酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、炭酸塩、炭酸水素塩、又はそれらの混合物を含んでなる。
【００９１】
ｐＨを調節するためには、水酸化ナトリウムを添加することが好ましい。ある関連する実施形態によれば、浸透圧調節物質としては、ナトリウムイオン、カリウムイオン、イノシトール、ベタイン、ソルビトール、ペプチド又はグルタミンが挙げられる。かかる特定の実施形態によれば、浸透圧調節物質カリウムイオンの濃度は低く、０．００１マイクロモル（μＭ）から１２．５ミリモル（ｍＭ）、好ましくは０．１μＭから１０ｍＭ、最も好ましくは１０μＭから５ｍＭである。
【００９２】
ある実施形態によれば、好ましい生存能維持剤はイオン性であり、好ましいイオンはカルシウム又はマグネシウムである。ある実施形態によれば、組成物は、１又は２以上の生存能維持剤を含んでなる。かかる特定の実施形態によれば、生存能維持剤の提供される濃度は、０．００１マイクロモル（μＭ）から１モル（Ｍ）、好ましくは０．０１ミリモル（ｍＭ）から１０ｍＭ、最も好ましくは０．１ｍＭから５ｍＭである。他の特定の実施形態によれば、好ましい生存能維持剤は、一酸化炭素、二酸化炭素、酸化窒素又はそれらの混合物から選択される。
【００９３】
ある実施形態によれば、好ましい精子活性化剤は、イオン性であり、好ましいイオンは、カルシウム、マグネシウム、マンガン、又は炭酸水素イオンである。かかる特定の実施形態によれば、組成物は、１又は２以上の精子活性化剤を含んでなる。かかる特定の実施形態によれば、精子活性化剤の提供される濃度は、０．００１マイクロモル（μＭ）から１モル（Ｍ）、好ましくは０．０１μＭから５０ｍＭ、最も好ましくは１μＭから３０ｍＭである。ある実施形態によれば、好ましい精子活性化剤はイオン性カルシウムであり、カルシウムの提供される濃度は、好ましくは１０μＭから１０ｍＭ、好ましくは５００μＭから５ｍＭである。他のかかる実施形態によれば、好ましい精子活性化剤はイオン性マグネシウムであり、カルシウムの提供される濃度は、好ましくは１０μＭから１０ｍＭ、好ましくは５００μＭから５ｍＭである。更に他のそのような実施形態によれば、好ましい精子活性化剤は炭酸水素イオンであり、炭酸水素イオンの提供される濃度は、好ましくは１００μＭから５０ｍＭ、最も好ましくは１０ｍＭから３０ｍＭである。他の実施形態によれば、好ましい精子活性化剤は、サイクリックＡＭＰ、カフェイン、アスピリン、一酸化炭素又はそれらの混合物である。関連する実施形態によれば、好ましい精子活性化剤は、カフェインである。他の実施形態によれば、好ましい精子活性化剤はヒアルロニダーゼ（PH-20等）、アルブミン、高密度リポタンパク質、プロゲステロン又はそれらの混合物から選択される。
【００９４】
ある実施形態によれば、好ましいエネルギー増強剤は、ＡＴＰ、フルクトース、グルコース、ピルビン酸塩、ラクトース、乳酸塩又はそれらの混合物である。ある関連する実施形態によれば、エネルギー増強剤の濃度は、０．０００１μＭから１Ｍ、好ましくは０．０１μＭから１００ｍＭ、最も好ましくは１μＭから２５ｍＭである。
【００９５】
ある実施形態によれば、好ましいスカベンジャーは、ビタミンＥ、ビタミンＣ、ナイアシン、リボフラビン、ナイアシンアミド又はそれらの混合物である。関連する実施形態によれば、スカベンジャーの濃度は、０．０００１μＭから１００ｍＭ、好ましくは０．０１μＭから１０ｍＭ、最も好ましくは１μＭから１ｍＭである。
【００９６】
ある実施形態によれば、好ましい受精促進剤は、マグネシウムイオン、マンガンイオン、炭酸水素イオン、ヒアルロニダーゼ、プロゲステロン、パンテノール、カフェイン、Ｌ−カルニチン、サイクリックＡＭＰ又はそれらの混合物である。関連する実施形態によれば、受精促進剤の濃度は、０．０００１μＭから１００ｍＭ、好ましくは０．０１μＭから１０ｍＭ、最も好ましくは１μＭから２ｍＭである。
【００９７】
他の態様によれば、本発明の組成物は、細胞、精子、卵母細胞、胚、又は組織の生存能力に影響する防腐剤を全く含有せず、或いは実質的に含有しない。かかる望ましくない防腐剤の例としては、限定されるものではないが、ＥＤＴＡ、並びに、細胞−細胞及び細胞−細胞間質の相互作用を阻害する、特定の糖タンパク質、糖類又はオリゴ糖及び多糖が挙げられる。ある関連する実施形態によれば、有害な防腐剤はＥＤＴＡである。ある他の関連する実施形態によれば、有害な防腐剤は、細胞−細胞及び細胞−細胞間質の相互作用を阻害する、特定の糖タンパク質、糖類又はオリゴ糖及び多糖である。
【００９８】
更に他の態様によれば、本発明の組成物は、細胞、精子、卵母細胞、胚又は組織の生存能力又は機能に影響しない防腐剤を含んでいてもよい。細胞、精子、卵母細胞、胚又は組織の生存能力又は機能に影響しない防腐剤の例としては、限定されるものではないが、ホウ酸、アスコルビン酸、ホウ酸ナトリウム、メチルパラベン又はそれらの混合物が挙げられる。関連する実施形態によれば、望ましい防腐剤の濃度は、０．００００１％から１０％、好ましくは０．０００１％から５％、最も好ましくは０．００１％から１％である。
【００９９】
他の態様によれば、本発明の組成物は、制御された温度、加熱、冷蔵、凍結又はガラス化状態における貯蔵中の生存細胞、組織又は器官の損失を低減させるための「保護剤」を含んでいてもよい。好ましい保護剤の例としては、限定されるものではないが、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ＤＭＳＯ、アルブミン、血清、グリセロール、トレハロース、ＰＣＡＧＨ、多糖類、一酸化炭素、二酸化炭素、糖タンパク質、又はそれらの組合せが挙げられる。かかる特定の実施形態によれば、望ましい防腐剤の濃度は、０．０１％から５０％、好ましくは０．１％から２５％、最も好ましくは１％から１０％である。
【０１００】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、低温で貯蔵中の生存細胞、組織又は器官の損失を低減させる。かかる特定の実施形態によれば、保護剤は、低温貯蔵中の細胞構造及び細胞機能の完全性を保存する凍結保護物質である。かかる特定の実施形態によれば、凍結保護物質は、細胞、組織又は器官の冷却又は加温中の細胞構造及び細胞機能の完全性を保存する。ある実施形態によれば、凍結保護物質としては、ＤＭＳＯ、グリセロール、トレハロース、アルブミン、血清、ヒプロメロース、一酸化炭素、二酸化炭素、ＰＣＡＧＨ、多糖類、糖タンパク質、プロピレングリコール、エチレングリコール、ホルムアミド、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、グルコース、スクロース、ラクトース、デキストロース、ラフィノース、ヒドロキシエチルデンプン、グルコン酸塩、ラクトビオン酸塩、硫酸コンドロイチン、抗凍結タンパク質、ポリグリセロール、ポリビニルアルコール、ポリビニルアルコールオリゴマー、ポリグリセロール、ポリビニルピロリドンのいずれか又はそれらの任意の組合せが挙げられる。
【０１０１】
他の実施形態によれば、本発明の組成物は、他の医薬的に有用な物質を含んでいてもよい。例としては、限定されるものではないが、抗掻痒剤、麻酔剤、エストロゲン剤、抗生剤、ステロイド、治療用薬剤、薬剤送達媒体、及びその他、並びにこれらの組合せが挙げられる。好ましい抗生物質としては、ペニシリン、ストレプトマイシン、ゲンタマイシン、又はそれらの混合物が挙げられる。
【０１０２】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、他の移植能向上剤を含んでなる。かかる剤としては、限定されるものではないが、ヒアルロナンが挙げられる。
【０１０３】
ある他の態様によれば、本発明の組成物は、溶液、ゲル、フォーム、クリーム、ゼリー等の形態とすることができる。加えて、組成物は、無菌の予充填アプリケーター、チューブ及び他の容器内に包装することができる。ある実施形態によれば、組成物は、使用前に水等の１又は２以上の希釈剤で希釈するべく、高濃度で提供される。ある態様によれば、組成物は、キット内に包装することができる。ある関連する実施形態によれば、キットには、かかるチューブを複数包装してもよい。関連する実施形態によれば、キットには、限定されるものではないが、説明書等の他の品目を入れてよい。
【０１０４】
他の態様によれば、提供される媒体組成物は、非殺精子性で、精子に無害であり、且つ受精能を増進する。他の特定の実施形態によれば、提供される媒体組成物は、胚の移植能を増進する。
【０１０５】
他の実施形態によれば、本発明の組成物は、ヒト及び他の動物における人工授精又は補助生殖技法（ＡＲＴ）中の又は受精問題を他の方法で治療するための貯蔵媒体として使用される。例としては、限定されるものではないが、精子貯蔵、卵母細胞貯蔵、細胞貯蔵、胚貯蔵、組織貯蔵等が挙げられる。
【０１０６】
ある実施形態によれば、本発明の組成物及び方法は、制御された温度、加熱、冷蔵、凍結又はガラス化された状態で貯蔵中の、生存状態及び／又は機能性の精子、卵母細胞、胚、細胞又は組織の損失を低減させることに有用である。
【０１０７】
ある実施形態によれば、本発明の組成物及び方法は、制御された温度、加熱、冷蔵、凍結又はガラス化された状態で貯蔵中の精子、卵母細胞、胚、細胞又は組織の生存能力を増進するために使用される。
【０１０８】
他の実施形態によれば、本発明の組成物及び方法は、制御された温度、加熱、冷蔵、凍結又はガラス化された状態で貯蔵中の機能性の精子、卵母細胞、胚、細胞又は組織の数を増加させるために使用される。
【０１０９】
他の実施形態によれば、精子、卵母細胞、胚、細胞、組織の生存を増進するべく、それらを本発明の組成物と接触させることを含んでなる方法が提供される。関連する実施形態によれば、精子、卵子及び細胞の機能を維持するための、精子機能（及び卵子、卵母細胞及び細胞の機能）の損失及び精子、卵子、卵母細胞及び細胞の損失を低減させるための方法が提供される。他の実施形態によれば、精子及び細胞の機能を改善する方法が提供される。ある実施形態によれば、精子、卵母細胞、胚又は細胞を貯蔵するための媒体が提供される。ある関連する実施形態によれば、精子バンク、卵母細胞バンク、胚バンク又は細胞バンクを営むための媒体及び方法が提供される。他の実施形態によれば、本発明の組成物は、組織、表面及び陰茎シース等の合成ポリマーを被覆するために使用することもできる。関連する態様によれば、潤滑されたシースのデザインも提供される。
【０１１０】
ある実施形態によれば、本発明の貯蔵媒体組成物は、限定されるものではないが、脳脊髄液、生検細胞、生検組織、嚢胞、腫瘍、唾液、糞便、頬スワブ、組織、細胞、体液、血液又はそれらの混合物等の種々の生体試料の捕集のための組成物として使用される。かかる特定の実施形態によれば、本発明の組成物は、捕集された生体材料の生存能力を維持する。他の実施形態によれば、本発明の組成物は、生体試料の捕集後直ちに培養又は伸展する媒体として有用である。他の関連する実施形態によれば、本発明の組成物は、冷蔵、凍結又はガラス化状態での生体試料の貯蔵に続いて、それらの生体試料を直ちに培養又は伸展する媒体として有用である。他の実施形態によれば、本発明の組成物は、制御された温度、加熱、冷蔵、凍結又はガラス化された状態における生体試料の貯蔵のための貯蔵媒体として有用である。
【０１１１】
ある実施形態によれば、本発明の貯蔵媒体組成物は、限定されるものではないが、脳脊髄液、生検細胞、生検組織、嚢胞、腫瘍、唾液、糞便、頬スワブ、細胞、組織、体液、血液、又はそれらの混合物等の生体試料からの種々の微生物叢（限定されないが、細菌、カビ、ウイルスその他等）の捕集のために使用される。かかる特定の実施形態によれば、本発明の組成物は、捕集された微生物叢の生存能力を維持する。他の関連する実施形態によれば、本発明の組成物は、生体試料の捕集後直ちに微生物叢を培養又は伸展する媒体として有用である。関連する実施形態によれば、本発明の組成物は、冷蔵、凍結又はガラス化された状態でのそれら生体試料の貯蔵に続いて、直ちにそれらの生体試料について微生物叢を培養又は伸展する媒体として有用である。他の実施形態によれば、本発明の組成物は、制御された温度、例えば、加熱、冷蔵、凍結又はガラス化された状態で微生物叢を貯蔵する貯蔵媒体として有用である。他の実施形態によれば、組成物を使用して捕集された微生物叢は、限定されるものではないが、アッセイ、低分子、治療法、高速大量処理スクリーニングその他の開発で使用される。
【０１１２】
他の実施形態によれば、本発明の組成物及び物品は、通常、活性成分を容器内で適当な量及び濃度で組み合わせて混合する等、任意の方法により調製及び／又は製造することができる。必要があれば、成分の溶媒和を促進するために、混合物を加熱又は冷却する。組成物は無菌であることが好ましく、最も好ましい無菌化方法は０．２ミクロンのフィルターを通すことである。ある実施形態によれば、本発明の組成物は高度の透明性も有し、好ましくは、当技術分野で知られている標準的濁度測定手順で測定した場合に、約２未満の濁度を有する。
【０１１３】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、限定されるものではないが、膣、陰茎、腎臓、肺、心臓、肝臓、骨、皮膚等又はそれらの混合物等種々の生体器官の捕集のために使用される。かかる特定の実施形態によれば、本発明の組成物は、捕集された器官の生存能力を維持する。ある関連する実施形態によれば、本発明の組成物は、捕集された器官の生理機能を維持する。例えば、本発明の組成物は、器官移植後の機能を、拒絶率を低減させることにより、増進することができる。ある実施形態によれば、本発明の組成物は、器官を捕集後直ちに培養又は伸展する媒体として有用である。ある関連する実施形態によれば、本発明の組成物は、室温、加熱された温度、体温、冷蔵、凍結又はガラス化状態における器官貯蔵に続いて直ちにそれらの器官を培養又は伸展する媒体として有用である。ある実施形態によれば、本発明の組成物は、器官の輸送溶液として有用である。かかる特定の実施形態によれば、本発明の組成物は、培養中、貯蔵、輸送中及びインビボ及びインビトロでの使用中の器官の生存能力及び／又は生理機能を改善する。ある態様によれば、試料は、ヒト、ウシ、イヌ、ウマ、ブタ、ヒツジ、トリ、齧歯類、又は希少又は新奇な種を含んでなる動物から得られるか、又は人工的に生成される。
【０１１４】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、限定されるものではないが、負傷、発疹、熱傷、挫傷、移植等の医療処置時に使用される。
【０１１５】
ある実施形態によれば、本発明の組成物は、表２に掲載した成分の任意の１又は２以上を含んでいてもよい。ある実施形態によれば、組成物中の上記の成分の比率（％）は、表２に示した値の範囲内に入る。かかる特定の実施形態によれば、表に掲載したいずれの成分も、その（別の）塩及び／又はその成分又はその塩の任意の適当な溶媒和物及び／又は水和物に置き換えることができる。例えば、上記のカリウムイオンの提供源としてのＫＣｌは、組成物中のカリウムイオンの当量濃度を提供する量のＫＯＨ、ＫＨＣＯ3、ＫＢｒその他等の他の適当なカリウム塩又は上記の塩の水和物（例えば、ＫＨＣＯ3セスキ水和物）に置き換えることができる。同様に抗酸化剤は、機能的に当量の、上で論じた任意の他の抗酸化剤その他に置き換えることができる。
【０１１６】
【表２】
0005507852.tif 000003
【０１１７】
IV．シース
コンドームは、米国特許分類マニュアル６０４／３４９に記載のように、通常、陰茎からの精液を捕集するべく構成された容器を指す。コンドームは陰茎に被せることができ、別の設計の物は、膣内に挿入することができる。コンドームは通常は柔軟性を有し、放出された精液を受容するべく、陰茎周囲に密着するように成形及び設計されている。通常は開放端から閉鎖端に伸長するチューブ様構造として成形され、中央に延在部を有する。コンドームは内部及び外部表面を有する。
【０１１８】
ある実施形態によれば、本発明は、その組成及び構造がコンドームに類似するが、性交中又は性交後に放出される精子又は精液の全部又は大部分を捕捉しない物品を目的とする。好ましい態様によれば、本明細書中でシースと命名するデバイスは、妊娠を防止しない。さらなる実施形態によれば、シースは受精過程を補助する潤滑剤で被覆される。
【０１１９】
本発明のある態様によれば、シースは陰茎上に配置され（図１）、或いは膣内に配置されるように設計される（図２）。ある実施形態によれば、本発明のシースは、閉鎖端に存在し、精液又は精子が性交中又は後に流出することを可能にする、１又は２以上の孔を有する（図１−３及び２−６）。他の特定の実施形態によれば、潤滑されたシースは、チューブ様構造の延在部に、性交中又は性交後に精液又は精子の流出を可能にする、１又は２以上の孔を有する。ある他の態様によれば、本発明のシースは、閉鎖端及び延在部の両方に孔を有していてもよい。本発明のある態様によれば、シースは、精子を子宮頚部開口部へ直接送達するように、例えば、精子を開口部に誘導するように、及び／又は、受精を容易にするように構成される（参照：米国特許第５，８５７，９５９号）。
【０１２０】
ある実施形態によれば、本発明のシースのチューブ様部分の延長部分の外面が潤滑剤組成物で被覆される（図１−２及び図２−５）。ある実施形態によれば、本発明のシースのチューブ様部分の内面が潤滑剤組成物で被覆される（図１−１及び図２−４）。かかる特定の実施形態によれば、シース用の潤滑剤は非殺精子性であり、本発明における上記の任意の組成物を用いることができる。
【０１２１】
ある実施形態によれば、本発明の潤滑されたシースは、潤滑コンドーム等のコンドームを作製するための当技術分野で公知の方法と同様にして、調製及び／又は製造される。当技術分野では、コンドームの種々の作製方法が周知である。例えば、限定されるものではないが、浸漬成形等が挙げられる。ある実施形態によれば、シースは巻回された形状で作製及び販売される。ある実施形態によれば、シースは薄く柔軟な天然又は合成弾性材料で作製される。例としては、限定されるものではないが、ラテックス、ポリウレタン、ゴム又はゴム様材料等が挙げられる。ある実施形態によれば、シースは、密閉された袋内に個々に、潤滑剤を付着し、又は付着させずに包装される。ある実施形態によれば、シースの孔は成形工程時に形成される。種々の作製工程の例としては、限定されるものではないが、コンドームの粉付の工程や、コンドームをその開放端の厚膜化リングの周囲に巻回し、通常は閉鎖端をリング円周の中央にカップ状に残す工程が挙げられる。ある実施形態によれば、シースの完成後にシースに孔を形成する。ある実施形態によれば、孔の使用前にシースに孔を形成する。
【実施例】
【０１２２】
ここまで本発明の概要を説明したが、以下の実施例を参照することにより、本発明の理解がより容易となるであろう。かかる実施例は、あくまでも本発明の特定の態様及び実施形態を例示するためのものであり、本発明を限定することを意図したものではない。
【０１２３】
実施例１．本発明に関する組成物の一例を次の手順により調製した。先ず、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）を含んでなる平衡塩溶液を、次のプロトコル及び成分を使用して調製した。
【０１２４】
Ｎａ2ＨＰＯ4（無水）      約１．０９ｇ
ＮａＨ2ＰＯ4（無水）      約０．３２ｇ
ＮａＣｌ                  約９ｇ
蒸留水中で混合して溶解させ、ｐＨを８．０に調節する。
蒸留水を加えて、最終容積を約１０００ｍＬにする。
【０１２５】
二価のカルシウムイオン及びマグネシウムイオンの形態の生存能維持剤をＰＢＳ溶液に加えて、各々約１ｍＭの最終濃度にした。
【０１２６】
基剤の潤滑剤、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ヒプロメロース）を次の量で加えて、生じた混合物を穏やかに混合し、各組成物用の溶液を得た。
【０１２７】
組成物１＝０．５％（ｗ／ｖ）ヒプロメロース
組成物２＝０．７５％（ｗ／ｖ）ヒプロメロース
【０１２８】
実施例２．本発明に関する更なる組成物の例を次の手順により調製した。先ず、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）を含んでなる基剤平衡塩溶液（ＰＢＳ++）を、次のプロトコル及び成分を使用して調製した。
【０１２９】
組成物３
溶液Ａ：
Ｎａ2ＨＰＯ4（無水）        約０．２３４ｇ
ＮａＨ2ＰＯ4（無水）        約０．０４８ｇ
蒸留水を加えた最終容積      約５．０ｍＬ
溶液Ｂ：
ＣａＣｌ2２Ｈ2Ｏ            約０．０１３ｇ
ＫＣｌ                      約０．０２６ｇ
ＭｇＣｌ2６Ｈ2Ｏ            約０．０１８ｇ
ＮａＣｌ                    約０．８０ｇ
蒸留水を加えた最終容積      約５．０ｍＬ
【０１３０】
溶液Ａ及びＢを合わせてｐＨを７．３５に調節し、蒸留水で最終容積を１００ｍＬとした。この溶液に、１．５％（ｗ／ｖ）ヒプロメロース、０．０１％（ｗ／ｖ）メチルパラベン、０．０２％（ｖ／ｖ）ＤＬ−α−トコフェロールアセテート、及び０．５％（ｖ／ｖ）グリセロールを加え、生じた混合物を穏やかに混合して組成物３の溶液を得た。
【０１３１】
実施例３．精子生存率のフローサイトリー（FCM）による分析：発表された文献（２４）のプロトコルに従って、死んだ精子の数を測定した。簡単に述べると、解凍した精子をリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中で１．０×１０6精子／ｍＬの濃度に調節して、遠心分離により洗浄した。洗浄された精子をKY潤滑剤、Pre-Seed Lubricant（Bio-Origyn, LLC）、組成物１、組成物２及び組成物３を含んでなる、３ｍＬの種々の潤滑剤組成物と２０分間インキュベートした。その後、精子を１回洗浄し、ＰＢＳ中に再懸濁して、アネキシンＶ−フルオレセインイソチオシアネート（FITC）溶液（Pharmingen, San Diego, CA）及びヨウ化プロピジウム（PI）（Pharmingen, San Diego, CA）と暗所でインキュベートした。精子を１回洗浄し、精子生存率のレベルをFACSort（Becton Dickinson, Mountain View, CA）を使用して４色ＦＣＭにより分析した。精子集団は、残骸及び凝集物を排除するために、前角光散乱を使用してゲートで制御した。１００細胞／秒未満の流通速度で、各アッセイにおいて最少１０，０００の個々の精子を検査した。励起波長は４８８ｎｍとし、アルゴンレーザーにより２５０ｍＷで提供した。５３０ｎｍフィルターを用いて緑色（ＦＩＴＣ由来）蛍光を、６１０ｎｍフィルターを用いて赤色（ＰＩ）蛍光を測定した。ＰＩ陽性細胞（死んだ精子）の比率（％）を、FACS Caliberプログラム（Becton Dickinson, Mountain View, CA）を使用して計算し、Ｋ−Ｙゼリーを使用して測定された死亡精子の比率（％）を任意に１００％の値と定めて、各潤滑剤組成物について測定された死亡精子の相対数を計算した。結果を表１に示す。
【０１３２】
種々の特許及び参照文献を本明細書に引用する。これらの参照文献の各々は、各々について個別に組み込まれる旨を明示したのと同様に、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【０１３３】
当業者であれば、定型的な実験を超える実験を行うことなく、本明細書に記載した本発明の特定の実施形態と同等の多数の形態を認識し、又は確認し得るであろう。添付の特許請求の範囲は、かかる同等の形態を包含されることを意図するものとする。
【０１３４】
参考文献
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【図面の簡単な説明】
【０１３５】
【図１】図１（Fig.1）は、陰茎を被覆する構成として設計された、受胎を試みるカップル用の潤滑シースの模式図である。
【図２】図２（Fig.2）は、膣内に挿入される構成として設計された、受胎を試みるカップル用の潤滑シースの模式図である。
【図１】
0005507852.tif 000004
【図２】
0005507852.tif 000005