(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
次式を有する錯体を合成する方法であって、
［Ｌ３ＭＯ３］ｎ
式中、Ｌ３は三座配位子であり、ＭはＴｃ及びＲｅから選択される金属であり、ｎは０から＋１の電荷であり、該方法は、
ａ）過テクネチウム酸塩若しくは過レニウム酸塩と還元剤及びＬ３との反応、又は
ｂ）過テクネチウム酸塩若しくは過レニウム酸塩とルイス酸及びＬ３との反応
を含み、
該ルイス酸とＬ３が、これら２成分の付加体又は複合体の形で同時に提供され；
該還元剤が、ホスフィンまたは水素化物であり；
Ｌ３が、トリアザシクロノナン、トリアミノシクロヘキサン、トリスピラゾリルメタン、ビスピラゾリルアセタート、トリスピラゾリルボラート、トリスイミダゾリルメタン、ビスイミダゾリルアセタート、またはトリスイミダゾリルボラートであり；
該ルイス酸が、ボランであり、
合成（ａ）又は（ｂ）が食塩水中で行われる、方法。
【請求項２】
ａ）ｉ）過テクネチウム酸塩若しくは過レニウム酸塩と還元剤の反応、ｉｉ）Ｌ３と生成したＴｃ若しくはＲｅ種それぞれとの配位、及びｉｉｉ）（ＶＩＩ）酸化状態への該Ｔｃ若しくはＲｅ種の酸化、
又は
ｂ）ｉ）過テクネチウム酸塩若しくは過レニウム酸塩とルイス酸の反応、及びｉｉ）Ｌ３と生成したＴｃ若しくはＲｅ種それぞれとの配位
を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ホスフィンが無機又は有機高分子に結合している、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記ホスフィンがアルキル又はアリール置換されている、請求項１又は３に記載の方法。
【請求項５】
Ｌ３が、標的部分の付加を容易にするのに適切な１個以上の官能基でＮ置換され、又はかかる官能基を有し得る１個以上のリンカー基でＮ置換され、該リンカー基の少なくとも１個が、アルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アラルキル及びアルカリール基から選択され、該リンカー基のいずれも、標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基で更に置換することができ、標的部分の付加を容易にするのに適切な該官能基が、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ、アミド、ハロゲン、スルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルホニルアミド、アリールスルホニルアミド、チオ、アルキルチオ、アリールチオ、ホスホニル、ホスファート及びシアノから選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
Ｌ３と前記還元剤が、これら２成分の付加体又は複合体の形で同時に提供される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
［Ｌ３ＭＯ３］ｎのジオラト誘導体を合成する方法であって、該方法が、
（ｉ）ａ）過テクネチウム酸塩若しくは過レニウム酸塩と還元剤及びＬ３とを反応させて、［Ｌ３ＭＯ３］ｎを生成する工程、又は
ｂ）過テクネチウム酸塩若しくは過レニウム酸塩とルイス酸及びＬ３とを反応させて、［Ｌ３ＭＯ３］ｎを生成する工程であって、
該ルイス酸とＬ３が、これら２成分の付加体又は複合体の形で同時に提供され；
合成（ａ）又は（ｂ）が食塩水中で行われ；
該還元剤が、ホスフィンまたは水素化物であり；
Ｌ３が、トリアザシクロノナン、トリアミノシクロヘキサン、トリスピラゾリルメタン、ビスピラゾリルアセタート、トリスピラゾリルボラート、トリスイミダゾリルメタン、ビスイミダゾリルアセタート、またはトリスイミダゾリルボラートであり；
該ルイス酸が、ボランであり、
ＭはＴｃ及びＲｅから選択される金属であり、ｎは０から＋１の電荷である、工程；ならびに
（ｉｉ）（ｉ）の［Ｌ３ＭＯ３］ｎと、アルケン、アルキン又はアルケニル若しくはアルキニル基含有種とを反応させ、［Ｌ３ＭＯ３］ｎのジオラト誘導体を形成する工程、
を含む、方法。
【請求項８】
前記アルケニル又はアルキニル基が、標的部分の一部を形成している、又は標的部分と結合している、請求項７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、金属錯体に関する。特に、それだけに限らないが、本発明は、［ＴｃＯ３］＋核を含むテクネチウム錯体、及び［ＲｅＯ３］＋核を含むレニウム錯体に関し、特にテクネチウムがＴｃ−９９ｍ同位体の形であり、レニウムがＲｅ−１８６又はＲｅ−１８８同位体の形である、［ＴｃＯ３］＋核を含むテクネチウム錯体、及び［ＲｅＯ３］＋核を含むレニウム錯体に関する。
【背景技術】
【０００２】
［ＴｃＯ３］＋核は、恐らく、テクネチウム化学反応において存在する最も小さい部分であって、共配位子によって安定化され得る部分である。この簡単な核構造を含む錯体への好都合な接近方法を見いだすことは極めて望ましいであろう。
【０００３】
Ｂｒａｂａｎｄ及びＡｂｒａｍ（非特許文献１）は、三座配位子のトリアザシクロノナンを使用した［ＴｃＯ３］＋含有錯体の調製を記述している。対応するグリコラト誘導体もその調製における中間体として開示されている。しかし、基底状態のＴｃ−９９のみが使用され、出発Ｔｃ含有材料は、大規模核医学用途には不適切である。Ｔｈｏｍａｓ及びＤａｖｉｓｏｎ（非特許文献２）は、［ＴｃＯ３］＋核を含むトリス−ピラゾリルボラート錯体の調製を記述している。やはり、基底状態のＴｃ−９９が錯体出発材料の形で使用された。さらに、濃酸の使用を含む厳しい条件が合成に使用される。かかる条件は、核医学用途には不適切である。Ｂａｎｂｅｒｒｙ等（非特許文献３）も、基底状態のＴｃ−９９を有する［ＴｃＯ３］＋核を含む錯体を開示している。やはり、厳しい条件（過酢酸）が使用される。Ｔｏｏｙａｍａ等（非特許文献４）は、配位子ビス（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）アセタート及び１，１，１−メタントリイルトリス（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール）との［ＴｃＯ３］＋及び［ＲｅＯ３］＋錯体の調製を記述している。合成は、強ルイス酸を活性化剤として使用して非水媒質中で行われる。実際、使用される活性化剤は、水と反応するので、水性媒質に不適合である。
【０００４】
対象候補となるＴｃ含有核であるにもかかわらず、［９９ｍＴｃＯ３］＋含有錯体の調製の合成的取り組みは、今まで記述されていない。というのは、［９９ｍＴｃＯ４］−自体は、９９ｍＴｃの核医学用途に最も好都合な形であり、典型的には発生体溶出物中に含まれるが、特に水中で、一般に余りにも非反応性であり、活性化が困難であるとみなされるからである。さらに、上記従来技術の手法は、核／錯体の合成に有機溶媒を使用するが、かかる溶媒は、ヒト又は動物における核医学用途の製造規模合成に不適合である。さらに、上記従来技術の錯体においては、金属三酸化物核の錯体形成に使用される配位子は、標的部分を持たず、かかる標的部分の付加に適切であるスペーサー又はリンカー基を持たない。したがって、従来技術の錯体は、特定の細胞又は組織への金属のターゲッティングが画像化目的で頻繁に要求されるｉｎ  ｖｉｖｏ放射性医薬品用途への使用が限られる。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００６，４５，６５８９−６５９１
【非特許文献２】Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ，１９９１，１９０．２３１−２３５
【非特許文献３】Ｐｏｌｙｈｅｄｒｏｎ，１９９０，９，２５４９−２５５１
【非特許文献４】Ｉｎｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２００８，４７，２５７−２６４
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の第１の態様によれば、次式を有する錯体を合成する方法が提供される。
【０００７】
［Ｌ３ＭＯ３］ｎ
式中、Ｌ３は三座配位子を表し、ＭはＴｃ及びＲｅから選択される金属を表し、ｎは−２から＋１の電荷であり、該方法は、
ａ）過テクネチウム酸塩（ｐｅｒｔｅｃｈｎｅｔａｔｅ）若しくは過レニウム酸塩（ｐｅｒｒｈｅｎａｔｅ）と還元剤及びＬ３との反応、又は
ｂ）過テクネチウム酸塩若しくは過レニウム酸塩とルイス酸及びＬ３との反応
を含み、合成（ａ）又は（ｂ）が水性媒質中で行われる。
【０００８】
ある実施形態においては、本発明の方法は、
ａ）ｉ）過テクネチウム酸塩若しくは過レニウム酸塩と還元剤の反応、ｉｉ）Ｌ３と生成したＴｃ若しくはＲｅ種それぞれとの配位、及びｉｉｉ）（ＶＩＩ）酸化状態への前記Ｔｃ若しくはＲｅ種の酸化、
又は
ｂ）ｉ）過テクネチウム酸塩若しくは過レニウム酸塩とルイス酸の反応、及びｉｉ）Ｌ３と生成したＴｃ若しくはＲｅ種それぞれとの配位を含む。
【０００９】
本発明の合成方法は、［ＴｃＯ３］＋又は［ＲｅＯ３］＋核を含む錯体を水／食塩水から直接調製することができる。これは、核を含む錯体を発生体溶出物から直接調製することができるので、重大な意味がある。生成錯体は、最高酸化状態のＴｃ又はＲｅを含むので、＋Ｖなどのより低酸化状態の放射性医薬品にとって特に関連した問題である後続の酸化を受けにくい。この方法に使用されるＴｃ及びＲｅの好ましい同位体としては、９９ｍＴｃ、１８６Ｒｅ及び１８８Ｒｅが挙げられる。好ましい同位体９９ｍＴｃの比較的短い半減期（約６時間）を考慮すると、複数の時間のかかる処理ステップを必要とせずに、核医学用途に有用である錯体を溶出物から直接調製する能力は、重要な利点を与えることが明白である。錯体の諸性質、例えば酸化安定性は、この点でも極めて重要である。これらの方法は、核医学における使用に不適合である潜在的に有毒な溶媒及び試薬の使用も回避する。
【００１０】
本発明の合成方法は、［ＴｃＯ３］＋又は［ＲｅＯ３］＋核を有する錯体の調製に２つの可能性を示す。第１の可能性（ａ）によれば、過テクネチウム酸塩からＴｃ（Ｖ）への還元は、ルイス塩基であり得る還元剤によって行われ、還元種と配位子Ｌ３が配位し、ＴｃＯ３含有錯体への後続の酸化が続く。酸化ステップは、空気（例えば、反応器中の空気）を使用して行うことができる。同じ手法を過レニウム酸塩でも使用することができる。第２の可能性（ｂ）によれば、過テクネチウム酸塩又は過レニウム酸塩は、配位子置換又は配位が起こる前に、まず、水溶液適合性ルイス酸との反応によって（例えば、エステル、混合無水物又は類似構造単位の形成によって）活性化されるべきである。種々の活性化戦略が当業者には明白であるが、ＩＩＩ、ＩＶ又はＶ族非還元性元素に基づくルイス酸を挙げることができる。これらの戦略はいずれも、従来技術においてこれまで探究されておらず、示唆されてもいない。
【００１１】
本発明の合成方法に使用される還元性ルイス塩基としては、ホスフィンを挙げることができる。反応は、例えばホスフィン酸又は水溶性ホスフィン若しくは置換ホスフィンの溶液を使用して、均一にすることができ、又は例えば無機若しくは有機高分子に結合したホスフィン若しくは置換ホスフィンを使用して、不均一にすることができる。高分子（例えば、樹脂系）還元剤（ホスフィンなど）又は活性化ルイス酸は、例えばろ過によって、反応生成物から容易に分離することができる利点を有する。本発明によって使用される、高分子に結合した還元剤又は活性化ルイス酸の高分子支持体は、無機又は有機高分子に基づくことができ、その各々はビーズの形で提供することができる。高分子還元剤及びルイス酸は、市販されており、例えば、ビーズの形とすることができる、ポリスチレンなどの有機高分子に基づくことができる。適切な無機高分子支持体の例としては、シリカに基づく支持体が挙げられる。高分子支持体は、還元剤又は活性化ルイス酸が付加する（ポリ（アルキレングリコール）鎖などの）スペーサー基を含むことができる。
【００１２】
ある実施形態においては、ホスフィンは、例えばアルキル（好ましくはＣ１〜５）又はアリール基で置換され、アルキル又はアリール基自体も更に置換することができる。特に、ホスフィンをフェニル置換することができる。好ましいホスフィンとしては、ジ及びトリフェニルホスフィンが挙げられる。更なる実施形態としては、３，３’，３”−ホスフィントリプロパン酸に基づくホスフィンを挙げることができる。
【００１３】
別の実施形態においては、合成（ａ）に使用される還元剤は、亜リン酸塩、亜硫酸塩、次亜リン酸塩及び水素化物から選択される。やはり、かかる還元剤の固相又は無機若しくは有機高分子形態が、ある実施形態においては好ましいことがある。
【００１４】
本発明の方法のある実施形態においては、Ｌ３と還元剤、又はＬ３とルイス酸を、これら２成分の付加体又は複合体の形で同時に提供することができる。したがって、ホウ化水素、ボランとトリアザシクロノナンなどの三座配位子との付加体を使用することができる。例えば（トリアザシクロノナン、アミノホスホイリドの例における）ホスホイリドの形の、かかる配位子とホスフィン（例えば、トリフェニルホスフィン）の付加体を使用することもできる。
【００１５】
本発明の合成方法は、食塩水中で実施することができる。特に、この方法は、Ｔｃ又はＲｅ発生体からの食塩水主体の溶出物中で実施することができる。
【００１６】
合成方法のある実施形態においては、Ｌ３は、標的部分の付加を容易にするのに適切な１個以上の官能基を有する、又はかかる官能基を有し得る１個以上のリンカー基を有する、三座配位子を表す。前記官能基は、さらに、又はその代わりに、生成錯体の物理化学的性質を改変するのに、又は諸性質を改変可能な更なる部分の付加を容易にするのに、有用であり得る。かかる更なる部分としては、例えば、ポリ（アルキレングリコール）基又は炭水化物を挙げることができる。本明細書では「標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基」という用語は、生成錯体の物理化学的性質を改変可能な更なる部分の付加を容易にするのに適切な官能基を含む。
【００１７】
官能基を用いてＬ３を改変する能力によって、錯体の物理化学的性質（したがって、薬理学的挙動）を高度に制御することができる。官能基が標的部分上の対応する基との反応に適切であるときには、錯体と標的部分を複合化（ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ）することができる。それによって、特定の生物学的部位に錯体を向かわせることができる。標的部分とＬ３の複合化は、錯体の形成前又は形成後に行うことができるが、好ましくは形成前に行われる。同じことが、生成錯体の物理化学的性質を改変可能な部分の複合化の場合にも当てはまる。
【００１８】
Ｌ３が１個以上のリンカー基を有し、そのいずれも標的部分の付加に適切な官能基を持たないときには、リンカー基は少なくとも３個の炭素原子を含むことができる。
【００１９】
Ｌ３は、通常、ＴｃＯ３／ＲｅＯ３核のＴｃ又はＲｅ原子との配位に利用可能な孤立電子対を有する、少なくとも３個の酸素及び／又は窒素原子を含む。ある実施形態においては、Ｌ３は、孤立電子対を含む２又は３個の窒素原子を含む。特に、Ｌ３の窒素原子は、第一級又は第二級アミノ基の一部を形成することができる。ある配位子Ｌ３においては、第一級又は第二級アミノ基は、介在する基又は原子によって連結された別々の環状部分上に存在することができ、又は該環状部分の一部として存在することができる。その代わりに、又はそれに加えて、第一級又は第二級アミノ基の２個以上は、同じ環状部分上に存在することができ、又は該環状部分の一部として存在することができる。特定の実施形態においては、Ｌ３をトリアザシクロノナン、トリアミノシクロヘキサン、トリスピラゾリルメタン、ビスピラゾリルアセタート、トリスピラゾリルボラート又は対応するイミダゾリル種とすることができる。かかる実施形態においては、又は実際にＬ３が窒素原子を含む別の実施形態においては、Ｌ３は、標的部分の付加を容易にするのに適切であり得る１個以上の官能基でＮ置換することができ、又はかかる官能基を有し得る１個以上のリンカー基でＮ置換することができる。
【００２０】
本発明による使用に適切なリンカー基としては、以下を挙げることができる：アルキル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４又はＣ５アルキル）、アルケニル（例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４又はＣ５アルケニル）、アリール（例えば、５、６、又は７員環などの５から９員の芳香環）、ヘテロアリール（例えば、１、２又は３個のヘテロ原子を含む５から９員環）、シクロアルキル（例えば、５、６、又は７員環などの５から９員の非芳香環）、ヘテロシクロアルキル（例えば、１、２又は３個のヘテロ原子を含む５から９員の非芳香環）、アラルキル（例えば、５、６、又は７員環などの１個以上の５から９員の芳香環を有する、例えば、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４又はＣ５アルキル）、及びアルカリール（例えば、１個以上の例えばＣ１、Ｃ２、Ｃ３、Ｃ４又はＣ５アルキル基を有する、５、６、又は７員環などの１個以上の５から９員の芳香環）基。これらのリンカー基はいずれも、標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基で更に置換することができる。さらに、Ｌ３は、非反応性にもかかわらず錯体の薬理学的挙動を改変可能である１個以上の本質的に非反応性の基で置換することができる。かかる基としては、短い（例えば、Ｃ１又はＣ２）アルキル置換基、又は更なる官能基を含まないアリール置換基が挙げられ、文脈上他の意味が要求されないかぎり、「リンカー基」の定義に含まれるものとする。したがって、ある実施形態においては、かかるリンカー基は、官能基をＬ３に連結するのではなく、単にＬ３上の置換基として作用することができる。
【００２１】
標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基は、ある実施形態においては、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ、アミド、ハロゲン、スルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルホニルアミド、アリールスルホニルアミド、チオ、アルキルチオ、アリールチオ、ホスホニル、ホスファート及びシアノ基から選択することができる。
【００２２】
関連する第２の態様においては、本発明は、次式を有する錯体の水溶液を含む組成物も提供する。
【００２３】
［Ｌ３ＭＯ３］ｎ
式中、Ｌ３は三座配位子を表し、ＭはＴｃ及びＲｅから選択される金属を表し、ｎは−２から＋１の電荷である。この組成物は、上述したように本発明による方法によって得られ、又は得ることができる。
【００２４】
本発明の第３の態様によれば、次式を有する錯体が提供される。
【００２５】
［Ｌ３ＭＯ３］ｎ
式中、Ｌ３は三座配位子を表し、ＭはＴｃ及びＲｅから選択される金属を表し、ｎは−２から＋１の電荷であり、ただしＬ３は、ジ−１Ｈ−ピラゾール−１−イルアセタート、ビス（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）アセタート、１，１，１−メタントリイルトリス（１Ｈ−ピラゾール）、１，１，１−メタントリイルトリス（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール）、１，４，７−トリアザシクロノナン、１，４，７−トリメチルトリアザシクロノナン、１，４，７−トリチアシクロノナン、ヒドロトリス（１−ピラゾリル）ボラート又は［（η５−Ｃ５Ｈ５）Ｃｏ｛Ｐ（ＯＲ）２（＝Ｏ）｝３］−ではなく、Ｒはメチル又はエチルである。
【００２６】
本発明の関連する一態様によれば、次式を有する錯体が提供される。
【００２７】
［Ｌ３ＭＯ３］ｎ
式中、Ｌ３は三座配位子を表し、ＭはＴｃ及びＲｅから選択される金属を表し、ｎは−２から＋１の電荷であり、Ｌ３は、標的部分の付加を容易にするのに適切な１個以上の官能基を有する、又はかかる官能基を有し得る１個以上のリンカー基を有する、三座配位子を表し、ＭはＴｃ及びＲｅから選択される金属を表し、ｎは−２から＋１の電荷であり、ただし、Ｌ３が１個以上のリンカー基を有し、そのいずれも標的部分の付加に適切な官能基を持たないときには、リンカー基の少なくとも１個は少なくとも３個の炭素原子を含む。
【００２８】
ある例示的錯体をスキーム１に示す。
【００２９】
【化１】
0005581226.tif 000002
本発明は、通常の放射性医薬品目的で利用可能な［９９ｍＴｃＯ３］＋又は対応する１８６Ｒｅ若しくは１８８Ｒｅ核を有する錯体を作製する新しい戦略に基づく。しかし、Ｔｃ及びＲｅの別の同位体も必要に応じて使用することができる。Ｔｃの別の同位体としては、９４ｍ、９４、９５ｍ、９６、９７、９７ｍ、９８及び９９（すなわち基底状態）が挙げられる。本発明は、新しい核の方がかなり小さく、親油性もはるかに低いことを除いて、対応する公知のトリカルボニル前駆体［９９ｍＴｃ（ＣＯ）３］＋及び［Ｒｅ（ＣＯ）３］＋の化学的性質の背後にある原理に幾らか関連する。物理化学的性質のこの変化は、新しい核を含む錯体の新しい応用分野を潜在的に切り開くものである。さらに、本発明の錯体は、レドックス活性を発揮することができ、例えば、低酸素検出における、又は標的分子の標識化のための、更なる潜在的使用を可能にし得る。本発明の錯体は、比較的低分子量である。上記従来技術の錯体と比較して、本発明のある種の錯体は、標的部分上の適切な基（又は上で概説したように、錯体の物理化学的性質を改変可能な基）との反応に利用可能である官能基であって、それによって錯体を特定の細胞、組織などにｉｎ  ｖｉｖｏで向かわせることができる官能基を含むという利点も有する。あるいは、又はさらに、本発明のある種の錯体は、錯体へのかかる官能基の組入れを容易にするリンカー基を含む。標的部分の付加を容易にする官能基は、好ましくは、ターゲティング性を妨害するのを避けるために錯体の残りの部分から離れている。したがって、本発明のある種の錯体は、好ましくは、少なくとも３個の炭素原子を有するリンカー基を含む。
【００３０】
［９９ｍＴｃＯ３］＋及び［ＲｅＯ３］＋核を有する錯体を作製するための本明細書に開示する新しい戦略は、これらの核を通常の放射性医薬品目的で利用可能にする。
【００３１】
本発明の錯体の特定の実施形態においては、Ｔｃは９９ｍＴｃである。Ｒｅを使用するときには、Ｒｅは、特定の実施形態においては、１８６Ｒｅ又は１８８Ｒｅとすることができる。
【００３２】
ある実施形態においては、標的部分の付加を容易にするのに適切な１個以上の官能基は、リンカー基によってＬ３に結合している。上述したように、標的部分の付加又は複合化を容易にするのに適切な官能基と、官能基とＬ３の間に介在するリンカー基との組合せは、標的部分のターゲティング性が妨害されるのを回避する。
【００３３】
Ｌ３は、Ｔｃ（ＶＩＩ）又はＲｅ（ＶＩＩ）を有する錯体が水に対して安定であるという条件で、（錯体の全電荷の対応する変化を伴う）多種多様な中性又は陰イオン性配位子を表す。適切な配位子Ｌ３は、本発明の第１の態様に関連して上記されている。水中での錯体の安定性は、当業者が、例えば錯体のＬＣ分析によって、容易に決定することができる。トリアザシクロノナン（ｔａｃｎ）及び幾つかのトリスピラゾリルメタン系システムを含めて、幾つかの配位子に基づく錯体の安定性は、本発明者らによって確認された。対応するイミダゾール系配位子を含む錯体も安定性を示す。本発明によって調製された錯体は、血清タンパク質の存在下で安定性を示すことも確認された。
【００３４】
配位子Ｌ３を介して導入することができる変化のために、多種多様な錯体を生成することができる。例えば、これらは、例えば心筋機能不全又は低酸素検出の診断のための、血流製剤として有用であり得る。その代わりに、又はそれに加えて、配位子Ｌ３は１個以上の標的部分と複合化することができる。
【００３５】
本発明の例示的実施形態においては、Ｌ３は、トリアザシクロノナン、トリアミノシクロヘキサン、トリスピラゾリルメタン、ビスピラゾリルアセタート、トリスピラゾリルボラート又は対応するイミダゾリル種である。ピラゾール又はイミダゾール含有配位子においては、ピラゾール又はイミダゾール基は、配位基を表し、更なる官能基を有することができる。Ｌ３が１個以上の窒素原子を含む実施形態などの実施形態においては、Ｌ３は、標的部分の付加を容易にするのに適切な１個以上の官能基でＮ置換することができ、又はかかる官能基を有し得る１個以上のリンカー基でＮ置換することができる。その代わりに、又はそれに加えて、Ｌ３は、非反応性にもかかわらず錯体の薬理学的挙動を改変可能である１個以上の本質的に非反応性の基で置換、例えばＮ置換することができる。かかる基としては、短い（例えば、Ｃ１又はＣ２）アルキル置換基、又は更なる官能基を含まないアリール置換基が挙げられる。
【００３６】
Ｌ３  Ｎ置換リンカー基などの適切なリンカー基は、アルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アラルキル及びアルカリール基から選択することができ、リンカー基はいずれも、標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基で更に置換することができる。適切なリンカー基は、上でより詳細に記述されている。かかる基は、非反応性にもかかわらず錯体の薬理学的挙動を改変可能である本質的に非反応性の上記基としても適切であることが理解されるであろう。したがって、ある実施形態においては、かかるリンカー基は、官能基をＬ３に連結するのではなく、単にＬ３上の置換基として作用することができる。
【００３７】
標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基（又は錯体の物理化学的性質を変化させるのに適切な部分）は、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ、アミド、ハロゲン、スルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルホニルアミド、アリールスルホニルアミド、チオ、アルキルチオ、アリールチオ、ホスホニル、ホスファート及びシアノから選択することができる。ある実施形態においては、官能基は、標的部分上の求核基との反応に適している。別の実施形態においては、官能基は、標的部分上の求電子基との反応に適している。
【００３８】
本明細書では「標的部分」という用語は、受容体又は酵素などの生物学的標的に選択的に結合可能である任意の基を意味する。多数のかかる部分は、当業者に周知であり、（例えば、ポリペプチド、ペプチド、アミノ酸、糖、多糖、ヌクレオシド、ヌクレオチド、オリゴ及びポリヌクレオチド、成長因子、ホルモン、抗体、抗体断片、内因性神経伝達物質、並びにビタミンから選択することができる）生体分子、及び生物学的標的の配位子である合成又は半合成薬剤が挙げられる。当業者は、さらに、（例えば、バイオセンサー技術又は放射性配位子結合試験によって）所与の化合物が生物学的標的に選択的に結合可能であり、したがって本発明の状況において標的部分として作用し得るかどうか容易に判定することができる。
【００３９】
本発明の合成方法及び錯体の特定の実施形態においては、Ｎ置換基として付加したリンカー基などのＬ３上の少なくとも１個のリンカー基は、ベンジル部分又はフェニル部分を含むことができる。ベンジルリンカー基は、ある実施形態においては好ましいことがある。かかるベンジル又はフェニル部分は、例えば、標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基としてのカルボキシル基で置換することができる。前記官能基は、好ましくは、かかる場合における環置換基として存在する。かかる環置換基は、リンカー基の残部又はＬ３への環の付加位置に対してパラ位に存在することができる。
【００４０】
本発明のある種の錯体においては、配位子Ｌ３は、その付加を容易にするのに適切な官能基（単数又は複数）によって、１個以上の標的部分（又は錯体の物理化学的性質を改変可能な部分）と複合化することによって改変される。
【００４１】
かかる標的部分は、上記のものから選択することができる。
【００４２】
本発明の錯体の好ましい実施形態においては、Ｔｃは９９ｍＴｃである。上述したように、９９ｍＴｃは、核医学分野において最も有用なＴｃの形である。かかる設定においては、９９ｍＴｃは、典型的には、テクネチウム発生体溶出物中の［９９ｍＴｃＯ４］−（過テクネチウム酸イオン）の形で得られる。本発明は、激しい試薬又は厳しい酸化若しくは還元条件を使用せずに、［ＴｃＯ３］＋核を含む錯体を食塩水から直接合成するのに過テクネチウム酸塩を直接使用することができる。したがって、本発明は、この核を核医学用途における通常の使用に利用できるようにする。同じ考察が、［ＲｅＯ３］＋核を含む本発明の錯体にも当てはまる。
【００４３】
本発明の別の一態様によれば、次式を有する錯体が提供される。
【００４４】
［Ｌ３ＭＯ３］ｎ
式中、Ｌ３は三座配位子を表し、ＭはＴｃ及びＲｅから選択される金属を表し、ｎは−２から＋１の電荷であり、ただしＬ３は１，４，７−トリアザシクロノナン、１，４，７−トリメチルトリアザシクロノナン、１，４，７−トリチアシクロノナン、ヒドロトリス（１−ピラゾリル）ボラート又は［（η５−Ｃ５Ｈ５）Ｃｏ｛Ｐ（ＯＲ）２（＝Ｏ）｝３］−ではなく、Ｒはメチル又はエチルである。
【００４５】
本発明の別の一態様によれば、１種類以上の薬学的に許容される賦形剤と一緒に、上述した錯体を含む、薬剤組成物が提供される。
【００４６】
本発明の薬剤組成物は、任意の薬学的に許容される担体、補助剤又はビヒクルと一緒に、本発明の錯体又は薬学的に許容されるその塩及びエステルのいずれかを含む。本発明の薬剤組成物は、種々の剤形をとることができる。しかし、一般に、本発明の薬剤組成物は、例えば、静脈内、動脈内（例えば、冠循環又は肺動脈中）、心臓内、脳室内又は細動脈内注射による、非経口投与に適切な剤形であろう。したがって、この組成物は、錯体水溶液などの錯体溶液の剤形とすることができる。薬剤組成物は、無菌注射製剤、例えば、無毒の非経口的に許容される希釈剤又は溶媒中の無菌注射溶液又は懸濁液の剤形とすることができる。使用可能な許容されるビヒクル及び溶媒としては、マンニトール溶液、水、リンゲル液及び等張性塩化ナトリウム溶液（すなわち等張食塩溶液）が挙げられる。必要に応じて、錯体の溶解性を高める追加の賦形剤、例えば、非イオン界面活性剤（例えば、Ｓｐａｎ又はＴｗｅｅｎ化合物グループから選択される界面活性剤）又はポリアルキレングリコールを添加することができる。
【００４７】
本発明の薬剤組成物は溶液の形であり、溶液のｐＨは約５から約９、特に約６から約８とすることができる。本発明の錯体は、広範囲のｐＨ値にわたって安定であることが判明した。重要なことには、本発明の錯体は、核医学における使用に最も関連したｐＨ範囲（すなわち５から９）で特に安定であることが判明した。かかる安定性の説明については、本明細書の図６を参照することができる。
【００４８】
本発明の別の一態様によれば、次式を有する錯体を精製する方法が提供される。
【００４９】
［Ｌ３ＭＯ３］ｎ
式中、Ｌ３は三座配位子を表し、ＭはＴｃ及びＲｅから選択される金属を表し、ｎは−２から＋１の電荷である。この方法は、錯体の非精製溶液を［Ｌ３ＴｃＯ３］ｎ又は［Ｌ３ＲｅＯ３］ｎと反応可能な官能基を有する無機又は有機高分子基質と接触させ、続いて高分子基質を洗浄して非結合材料を除去することを含む。
【００５０】
本発明による錯体は、適切に官能性を持たせた無機又は有機高分子と反応することができる。高分子基質が有する官能基は、特定の実施形態においては、［Ｌ３ＭＯ３］ｎとの反応において還元剤又はルイス酸として作用する能力を有する。例えば、錯体は、ホスフィン官能基を有する無機又は有機高分子と反応する。かかる反応後、すべての他の材料を、固相に結合した錯体から洗浄除去することができる。錯体は、次いで、曝気水などの穏和な酸化剤を使用して高分子から切断することができる。好ましい同位体９９ｍＴｃを含む錯体の場合には、錯体を無機又は有機高分子に結合させ、次いで、非放射性材料を結合錯体から洗浄除去する。したがって、続いて曝気水又は別の穏和な酸化剤を用いて切断すると、担体無添加の放射性医薬品を生成することができる。
【００５１】
本発明は、更に別の一態様においては、［Ｌ３ＭＯ３］ｎのジオラト誘導体を合成する方法も提供する。この方法は、上述した本発明の第２の態様による組成物、又は上述した第３の態様による錯体と、アルケン、アルキン又はアルケニル若しくはアルキニル基含有種との反応を含む。式中、Ｌ３、Ｍ及びｎは、第１の態様に関して上で定義したのと同じ意味を有する。
【００５２】
基底状態のＴｃ−９９を有する巨視的計量可能な量の錯体［Ｌ３ＭＯ３］＋は、有機溶媒（又は水性媒質）中でアルケンと反応して、対応する水に安定なジオラト誘導体を受け取る。この反応は、「クリック」ケミストリーの一種である（［２＋３］付加環化）。この反応は、内在性アルケン（例えば、不飽和脂肪酸）を有する、又は任意の種類の結合アルケン若しくはアルキンを有する、標的部分及び生体分子の直接標識化の可能性をもたらす。この方法の特定の実施形態においては、アルケニル又はアルキニル基は、標的部分の一部を形成し、又は標的部分に結合する。本発明の他の態様と同様に、Ｔｃの好ましい同位体は９９ｍＴｃであり、Ｒｅの好ましい同位体は１８６Ｒｅ又は１８８Ｒｅである。反応から得られるジオラト誘導体は、水中で極めて安定である。さらに、アルケニル又はアルキニル基が、標的部分に付加する、又は標的部分の一部として存在するときには、生成するジオラト誘導体を、診断及び／又は画像化目的で特定の器官器官又は組織に９９ｍＴｃを向かわせるために使用することができる。例示的反応をスキーム２に示す。
【００５３】
【化２】
0005581226.tif 000003
関連する一態様においては、本発明は、式［Ｌ３ＭＯ（ＯＣ（Ｒ１Ｒ２）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｏ）］ｎ又は［Ｌ３ＭＯ（ＯＣ（Ｒ１）＝Ｃ（Ｒ２）Ｏ）］ｎを有する［Ｌ３ＭＯ３］ｎのジオラト誘導体も提供する。式中、Ｍ、Ｌ３及びｎは本発明の第３の態様に関して上で定義したのと同じ意味を有し、第３の態様の条件が適用され、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４はＨ、標的部分、標的部分に付加した又は標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基、及びかかる官能基を有する又は有し得るリンカー基から独立に選択される。
【００５４】
本発明のこの態様の特定の実施形態においては、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び／又はＲ４は、リンカー基を介して錯体に結合することができる標的部分、標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基、又はその組合せである。したがって、標的部分は、官能基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３若しくはＲ４を介して錯体に結合することができ、又はリンカー基Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３若しくはＲ４の末端に官能基を介して結合できることが理解されるであろう。あるいは、アルケニル基が（内在性生体分子などの）標的部分の一部を形成する場合、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び／又はＲ４は、その標的部分のすべて又は一部を含むことが理解されるであろう。特に９９ｍＴｃに関連して、標的部分を有する錯体の利点は、上で概説されている。
【００５５】
別の関連した一態様においては、本発明は、式［Ｌ３ＭＯ（ＯＣ（Ｒ１Ｒ２）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｏ）］ｎ又は［Ｌ３ＭＯ（ＯＣ（Ｒ１）＝Ｃ（Ｒ２）Ｏ）］ｎを有する［Ｌ３ＭＯ３］ｎのジオラト誘導体の水溶液を含む組成物も提供する。Ｍ、Ｌ３及びｎは、本発明の第１の態様に関して上で定義したのと同じ意味を有し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、Ｈ、標的部分、標的部分に付加した又は標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基、及びかかる官能基を有する又は有し得るリンカー基から独立に選択される。この組成物は、上記ジオラト誘導体を合成する方法によって得られる又は得ることができ、この方法は、水性媒質中で実施される。
【００５６】
ジオラト誘導体の水溶液を含む組成物は、ある実施形態においては、Ｌ３が１，４，７−トリアザシクロノナンではない錯体を含むことができる。
【００５７】
本発明は、療法又は診断に使用される、上述した本発明による錯体又は組成物も提供する。
【００５８】
本発明は、器官血液潅流障害及び／又は低酸素状態の診断及び／又は画像化、又は腫よう血液潅流及び／又は低酸素の測定及び／又は画像化に使用される、上述した本発明による錯体又は組成物も提供する。
【００５９】
類似の一態様においては、本発明は、器官血液潅流障害及び／又は低酸素状態の診断及び／又は画像化、又は腫よう血液潅流及び／又は低酸素の測定及び／又は画像化のための医薬品の調製における、上述した本発明による錯体又は組成物の使用も提供する。
【００６０】
さらに、本発明は、関連する一態様においては、被験体における器官血液潅流障害及び／又は低酸素状態の診断、又は腫よう血液潅流及び／又は低酸素の測定及び／又は画像化の方法も提供する。この方法は、上述した本発明による錯体又は組成物の被験体への投与を含む。
【００６１】
この方法のある実施形態においては、方法は、投与後に被験体内の錯体の位置に関連したデータの取得を更に含む。さらに、この方法は、取得データに基づく画像の作成を更に含むことができる。
【００６２】
更なる関連した一態様においては、本発明は、被験体における器官血液潅流及び／又は低酸素状態、又は腫よう血液潅流及び／又は低酸素を画像化する方法も提供する。この方法は、上述した本発明による錯体又は組成物の被験体への投与、投与後の被験体内の錯体の位置に関連したデータの取得、及び取得データに基づく画像の作成の各ステップを含む。
【００６３】
本明細書に記載の本発明の錯体の診断、画像化及び／又は治療上の使用においては、血液潅流が検討されている器官は、特定の実施形態においては、心臓及び肺から選択することができる。
【００６４】
本発明を単なる例として、添付の図面を参照して、以下により詳細に説明する。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
次式を有する錯体を合成する方法であって、
［Ｌ３ＭＯ３］ｎ
式中、Ｌ３は三座配位子であり、ＭはＴｃ及びＲｅから選択される金属であり、ｎは−２から＋１の電荷であり、前記方法は、
ａ）過テクネチウム酸塩若しくは過レニウム酸塩と還元剤及びＬ３との反応、又は
ｂ）過テクネチウム酸塩若しくは過レニウム酸塩とルイス酸及びＬ３との反応
を含み、合成（ａ）又は（ｂ）が水性媒質中で行われる、方法。
（項目２）
ａ）ｉ）過テクネチウム酸塩若しくは過レニウム酸塩と還元剤の反応、ｉｉ）Ｌ３と生成したＴｃ若しくはＲｅ種それぞれとの配位、及びｉｉｉ）（ＶＩＩ）酸化状態への該Ｔｃ若しくはＲｅ種の酸化、
又は
ｂ）ｉ）過テクネチウム酸塩若しくは過レニウム酸塩とルイス酸の反応、及びｉｉ）Ｌ３と生成したＴｃ若しくはＲｅ種それぞれとの配位
を含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
（ａ）で使用される前記還元剤がルイス塩基である、項目１又は項目２に記載の方法。
（項目４）
（ａ）で使用される前記還元剤がホスフィンである、項目３に記載の方法。
（項目５）
前記ホスフィンが無機又は有機高分子に結合した、項目４に記載の方法。
（項目６）
前記ホスフィンがアルキル又はアリール置換された、項目４又は５に記載の方法。
（項目７）
前記還元剤が、亜リン酸塩、亜硫酸塩、次亜リン酸塩及び水素化物から選択される、項目１から３のいずれかに記載の方法。
（項目８）
前記反応が食塩水中で行われる、いずれかの先行項目に記載の方法。
（項目９）
Ｌ３が、標的部分の付加を容易にするのに適切な１個以上の官能基を有する、又はかかる官能基を有し得る１個以上のリンカー基を有する、三座配位子を表す、いずれかの先行項目に記載の方法。
（項目１０）
Ｌ３が１個以上のリンカー基を有し、そのいずれも標的部分の付加に適切な官能基を持たないときには、該リンカー基は少なくとも２個の炭素原子を含むという前提の、項目９に記載の方法。
（項目１１）
Ｌ３がトリアザシクロノナン、トリアミノシクロヘキサン、トリスピラゾリルメタン、ビスピラゾリルアセタート、トリスピラゾリルボラート又は対応するイミダゾリル種である、いずれかの先行項目に記載の方法。
（項目１２）
Ｌ３が、標的部分の付加を容易にするのに適切な１個以上の官能基でＮ置換され、又はかかる官能基を有し得る１個以上のリンカー基でＮ置換された、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
前記リンカー基の少なくとも１個が、アルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アラルキル及びアルカリール基から選択され、該リンカー基のいずれも、標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基で更に置換することができる、項目９又は項目１２に記載の方法。
（項目１４）
標的部分の付加を容易にするのに適切な前記官能基が、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ、アミド、ハロゲン、スルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルホニルアミド、アリールスルホニルアミド、チオ、アルキルチオ、アリールチオ、ホスホニル、ホスファート及びシアノから選択される、項目９、１２及び１３のいずれかに記載の方法。
（項目１５）
Ｌ３と前記還元剤、又はＬ３と前記ルイス酸が、これら２成分の付加体又は複合体の形で同時に提供される、いずれかの先行項目に記載の方法。
（項目１６）
次式を有する錯体の水溶液を含む組成物であって、
［Ｌ３ＭＯ３］ｎ
式中、Ｌ３は三座配位子を表し、ＭはＴｃ及びＲｅから選択される金属を表し、ｎは−２から＋１の電荷であり、該組成物が、項目１から１５のいずれかに記載の方法によって得られる、又は得ることができる、組成物。
（項目１７）
次式を有する錯体であって、
［Ｌ３ＭＯ３］ｎ
式中、Ｌ３は三座配位子を表し、ＭはＴｃ及びＲｅから選択される金属を表し、ｎは−２から＋１の電荷であり、ただしＬ３は、ジ−１Ｈ−ピラゾール−１−イルアセタート、ビス（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）アセタート、１，１，１−メタントリイルトリス（１Ｈ−ピラゾール）、１，１，１−メタントリイルトリス（３，５−ジメチル−１Ｈ−ピラゾール）、１，４，７−トリアザシクロノナン、１，４，７−トリメチルトリアザシクロノナン、１，４，７−トリチアシクロノナン、ヒドロトリス（１−ピラゾリル）ボラート又は［（η５−Ｃ５Ｈ５）Ｃｏ｛Ｐ（ＯＲ）２（＝Ｏ）｝３］−ではなく、Ｒはメチル又はエチルである、錯体。
（項目１８）
次式を有する錯体であって、
［Ｌ３ＭＯ３］ｎ
式中、Ｌ３は、標的部分の付加を容易にするのに適切な１個以上の官能基を有する、又はかかる官能基を有し得る１個以上のリンカー基を有する、三座配位子を表し、ＭはＴｃ及びＲｅから選択される金属を表し、ｎは−２から＋１の電荷であり、ただし、Ｌ３が１個以上のリンカー基を有し、そのいずれも標的部分の付加に適切な官能基を持たないときには、該リンカー基の少なくとも１個は少なくとも３個の炭素原子を含む、錯体。
（項目１９）
前記Ｔｃが９９ｍＴｃ、９４Ｔｃ又は９４ｍＴｃである、項目１７又は項目１８に記載の錯体。
（項目２０）
前記Ｒｅが１８６Ｒｅ又は１８８Ｒｅである、項目１７又は項目１８に記載の錯体。
（項目２１）
標的部分の付加を容易にするのに適切な１個以上の官能基が、場合によってはリンカー基によって、Ｌ３に結合している、項目１７から２０のいずれかに記載の錯体。
（項目２２）
Ｌ３がトリアザシクロノナン、トリスピラゾリルメタン、ビスピラゾリルアセタート、トリスピラゾリルボラート又は対応するイミダゾリル種である、項目１７から２１のいずれかに記載の錯体。
（項目２３）
Ｌ３が、場合によってはリンカー基によって、標的部分の付加を容易にするのに適切な１個以上の官能基でＮ置換されたか、又はかかる官能基を有し得る１個以上のリンカー基でＮ置換された、項目２２に記載の錯体。
（項目２４）
前記Ｎ置換基の少なくとも１個が、アルキル、アルケニル、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アラルキル及びアルカリール基から選択されるリンカー基であり、該リンカー基のいずれも、標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基で更に置換することができる、項目２３に記載の錯体。
（項目２５）
標的部分の付加を容易にするのに適切な前記官能基が、ヒドロキシル、カルボキシル、アミノ、アミド、ハロゲン、スルホニル、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルスルホニルアミド、アリールスルホニルアミド、チオ、アルキルチオ、アリールチオ、ホスホニル、ホスファート及びシアノから選択される、項目１８及び２１から２４のいずれかに記載の錯体。
（項目２６）
前記リンカー基の少なくとも１個がベンジル又はフェニル部分を含む、項目１８及び２１から２５のいずれかに記載の錯体。
（項目２７）
前記ベンジル部分がカルボキシル基で置換された、項目２６に記載の錯体。
（項目２８）
前記配位子Ｌ３が、標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基によって標的部分と複合化することによって改変された、項目１８及び２１から２７のいずれかに記載の錯体。
（項目２９）
前記標的部分が、ポリペプチド、ペプチド、アミノ酸、糖、多糖、ヌクレオシド、ヌクレオチド、オリゴ及びポリヌクレオチド、成長因子、ホルモン、抗体、抗体断片、内因性神経伝達物質、ビタミン、並びに生物学的標的に対する配位子である合成又は半合成薬剤からなる群から選択される、項目２８に記載の錯体。
（項目３０）
１種類以上の薬学的に許容される賦形剤と一緒に項目１７から２９のいずれかに記載の錯体を含む、薬剤組成物。
（項目３１）
前記錯体の水溶液の形である、項目３０に記載の組成物。
（項目３２）
前記溶液のｐＨが約５から約９である、項目３１に記載の組成物。
（項目３３）
次式を有する錯体を精製する方法であって、
［Ｌ３ＭＯ３］ｎ
式中、Ｌ３は三座配位子を表し、ＭはＴｃ及びＲｅから選択される金属を表し、ｎは−２から＋１の電荷であり、該方法が、錯体の非精製溶液を、［Ｌ３ＴｃＯ３］ｎ又は［Ｌ３ＲｅＯ３］ｎと反応可能な官能基を有する無機又は有機高分子基質と接触させ、続いて該高分子基質を洗浄して非結合材料を除去することを含む、方法。
（項目３４）
前記無機又は有機高分子基質が有する前記官能基が、［Ｌ３ＭＯ３］ｎとの反応において還元剤又はルイス酸として作用する能力を有する、項目３３に記載の方法。
（項目３５）
酸化条件下で前記無機又は有機高分子基質からの前記錯体のその後の切断を更に含む、項目３４に記載の方法。
（項目３６）
切断が曝気水を使用して行われる、項目３５に記載の方法。
（項目３７）
［Ｌ３ＭＯ３］ｎのジオラト誘導体を合成する方法であって、該方法が、項目１４に記載の組成物又は項目１７に記載の錯体と、アルケン、アルキン又はアルケニル若しくはアルキニル基含有種との反応を含み、Ｌ３、Ｍ及びｎが項目１と同じ意味を有する、方法。
（項目３８）
前記アルケニル又はアルキニル基が、標的部分の一部を形成する、又は標的部分と結合した、項目３７に記載の方法。
（項目３９）
式［Ｌ３ＭＯ（ＯＣ（Ｒ１Ｒ２）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｏ）］ｎ又は［Ｌ３ＭＯ（ＯＣ（Ｒ１）＝Ｃ（Ｒ２）Ｏ）］ｎを有する［Ｌ３ＭＯ３］ｎのジオラト誘導体の水溶液を含む組成物であって、Ｍ、Ｌ３及びｎは項目１で定義されたのと同じ意味を有し、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は、Ｈ、標的部分、標的部分に付加した又は標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基、及びかかる官能基を有する又は有し得るリンカー基から独立に選択され、該組成物が項目３７に記載の方法によって得られる又は得ることができ、該方法が水性媒質中で実施される、組成物。
（項目４０）
式［Ｌ３ＭＯ（ＯＣ（Ｒ１Ｒ２）Ｃ（Ｒ３Ｒ４）Ｏ）］ｎ又は［Ｌ３ＭＯ（ＯＣ（Ｒ１）＝Ｃ（Ｒ２）Ｏ）］ｎを有する［Ｌ３ＭＯ３］ｎのジオラト誘導体であって、Ｍ、Ｌ３及びｎは項目１７と同じ意味を有し、項目１７の条件が適用され、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４はＨ、標的部分、標的部分に付加した又は標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基、及びかかる官能基を有する又は有し得るリンカー基から独立に選択される、ジオラト誘導体。
（項目４１）
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及び／又はＲ４が、リンカー基を介して前記錯体に結合することができる標的部分、該標的部分の付加を容易にするのに適切な官能基、又はその組合せである、それぞれ項目３９又は項目４０に記載のジオラト誘導体又は組成物。
（項目４２）
療法又は診断に使用される、項目１７から２９、４０及び４１のいずれかに記載の錯体、又は項目１６若しくは項目３９に記載の組成物。
（項目４３）
器官血液潅流障害及び／又は低酸素状態の診断及び／又は画像化、又は腫よう血液潅流及び／又は低酸素の測定及び／又は画像化に使用される、項目１７から２９、４０及び４１のいずれかに記載の錯体、又は項目１６若しくは項目３９に記載の組成物。
（項目４４）
器官血液潅流障害及び／又は低酸素状態の診断及び／又は画像化、又は腫よう血液潅流及び／又は低酸素の測定及び／又は画像化のための医薬品の調製における、項目１７から２９、４０及び４１のいずれかに記載の錯体又は項目１６若しくは項目３９に記載の組成物の使用。
（項目４５）
被験体における器官血液潅流障害及び／又は低酸素状態の診断、又は腫よう血液潅流及び／又は低酸素の測定及び／又は画像化の方法であって、項目１７から２９、４０及び４１のいずれかに記載の錯体又は項目１６若しくは項目３９に記載の組成物の該被験体への投与を含む、方法。
（項目４６）
前記方法は、投与後に前記被験体内の前記錯体の位置に関連したデータの取得を更に含む、項目４５に記載の方法。
（項目４７）
前記方法は、前記取得データに基づく画像の作成を更に含む、項目４６に記載の方法。
（項目４８）
被験体における器官血液潅流及び／又は低酸素状態、又は腫よう血液潅流及び／又は低酸素を画像化する方法であって、項目１７から２９、４０及び４１のいずれかに記載の錯体又は項目１６若しくは項目３９に記載の組成物の該被験体への投与、投与後の該被験体内の該錯体の位置に関連したデータの取得、及び該取得データに基づく画像の作成のステップを含む、方法。
（項目４９）
前記器官が心臓及び肺から選択される、項目４３に記載の錯体、項目４４に記載の使用、又は項目４５から４８のいずれかに記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【００６５】
【図１ａ】図１（ａ）及び図１（ｂ）は、γ放射能（９９ｍＴｃを含む化合物１）及びＵＶ吸収（基底状態９９Ｔｃを含む対応する錯体）によって検出して、過テクネチウム酸塩と本発明の錯体を識別するために、２つの移動相条件下で、本発明の方法（［ＴｃＯ４］−＋トリアザシクロノナン．３ＨＣｌ＋ＰＰｈ３（担持高分子）の反応）によって生成された錯体（化合物１）の分析（ＨＰＬＣ）結果を示す。図１（ａ）は、移動相ＴＥＡＰ／ＭｅＣＮの使用に関する（実験設定のために、γ信号はｕｖ信号よりも０．５６分遅い。）。
【図１ｂ】図１（ａ）及び図１（ｂ）は、γ放射能（９９ｍＴｃを含む化合物１）及びＵＶ吸収（基底状態９９Ｔｃを含む対応する錯体）によって検出して、過テクネチウム酸塩と本発明の錯体を識別するために、２つの移動相条件下で、本発明の方法（［ＴｃＯ４］−＋トリアザシクロノナン．３ＨＣｌ＋ＰＰｈ３（担持高分子）の反応）によって生成された錯体（化合物１）の分析（ＨＰＬＣ）結果を示す。図１（ｂ）は、移動相ＴＦＡ／ＭｅＣＮの使用に関する（γ信号は、ｕｖ信号よりも０．５４分遅い。）。
【図２】図２（ａ）および図２（ｂ）は、ＴＦＡ／ＭｅＣＮ移動相を使用して、γ放射能（９９ｍＴｃを含む化合物２）及びＵＶ（基底状態９９Ｔｃを含む対応する錯体）によって検出された、本発明の更なる錯体（化合物２）（［ＴｃＯ４］−＋Ｎ−ベンジル−トリアザシクロノナン＋ＰＰｈ３（担持高分子）の反応）のＨＰＬＣ結果を示す。実験設定のために、γ信号はｕｖ信号よりも０．５７分遅い。
【図３】図３は、ＴＥＡＰ／ＭｅＣＮ移動相を使用して、（ａ）γ放射能（９９ｍＴｃを含む化合物３）及び（ｂ）β放射能（基底状態９９Ｔｃを含む対応する錯体）によって検出された、本発明の第３の錯体（化合物３）（［ＴｃＯ４］−＋Ｎ−（４−カルボキシ）ベンジル−トリアザシクロノナン．３ＨＣｌ＋ＰＰｈ３（担持高分子）の反応）のＨＰＬＣ結果を示すグラフである。異なる検出器システムのために、β信号はγ信号よりも約１．５分遅れて検出される。
【図４】図４は、［ＴｃＯ４］−＋トリアザシクロノナン．３ＨＣｌ＋Ｈ３ＰＯ２の均一反応によって調製された化合物１（ＴＥＡＰ／ＭｅＣＮ）のγトレースを示す。
【図５】図５は、［ＴｃＯ４］−＋トリアザシクロノナン．３ＨＣｌ＋Ｐ（ＥｔＯＯＨ）３（担持高分子）の反応によって調製された化合物１（ＴＥＡＰ／ＭｅＣＮ）のγトレースを示す。
【図６】図６は、ｐＨ＝７における化合物１の安定性試験を示した一連のトレースを示す（γトレース、ＴＥＡＰ／ＭｅＣＮ）。
【図７】図７は、（ａ）［ＴｃＯ３（ｔａｃｎ）］＋＋スチレンＳＯ３Ｎａ、９５℃で１．５ｈの反応によって調製されたジオラト誘導体化合物４（ＴＥＡＰ／ＭｅＣＮ）のγトレース、及び（ｂ）そのβトレースを示す。
【図８】図８は、アルブミン存在下での化合物４の安定性試験を示す（ＴＥＡＰ／ＭｅＣＮ）。
【図９】図９は、血しょう存在下での化合物４の安定性試験を示す（ＴＥＡＰ／ＭｅＣＮ）。
【図１０】図１０は、［ＴｃＯ４］−及びトリアザシクロノナンとボランの付加体の均一反応によって調製された化合物１のγトレースを示す。
【図１１】図１１は、［ＴｃＯ４］−及びトリアザシクロノナンとトリフェニルホスフィンの付加体の均一反応によって調製された化合物１のγトレースを示す。
【図１２】図１２は、［ＴｃＯ４］−、トリアザシクロノナン及び水素化ホウ素ナトリウムの均一反応によって調製された化合物１のγトレースを示す。
【発明を実施するための形態】
【００６６】
本発明者らは、一般組成［Ｌ３ＴｃＯ３］＋の錯体を水（食塩水）から直接調製する合成方法を開発した（式中、Ｌ３は上で定義したとおりである（Ｌ３の例示的実施形態についてはスキーム１を参照されたい。）。）。幾つかのＴｃ（ＶＩＩ）錯体が従来技術において基底状態９９Ｔｃについて記述されたが、これらのいずれも９９ｍＴｃを用いて、又は水性媒質から、調製されていない。従来技術の基底状態９９Ｔｃ錯体の反応条件は、極めて粗く、濃硝酸、濃硫酸又は３０％過酸化物溶液を含み、核医学用途に由来する通常の要件に適合させるのに不適切な条件である。
【００６７】
化合物１は、基底状態９９Ｔｃについて公知であり、化合物２及び３は以前に記述されておらず、特に３は、生体分子などの標的部分と容易に複合化することができるカルボキシラート官能基を有する。これらの化合物はいずれも、９９ｍＴｃについては従来技術から公知ではない。化合物１〜３（スキーム１）は、今回、以下に概説する方法によって、発生体溶出物から直接合成された。
【００６８】
合成手法
本発明の錯体の調製に使用された２つの異なる経路は、以下のとおりである：ｉ）配位子置換が起こる前に、ルイス酸（通常、強ルイス酸、すなわち、過テクネチウム酸塩がルイス塩基として作用し、反応が過テクネチウム酸塩の酸素原子で起こるような）を用いたエステル又は類似構造単位の形成によって、過テクネチウム酸塩を活性化する、又はｉｉ）Ｔｃ（Ｖ）への還元及び配位子の配位、それに続く空気酸化。配位は還元と本質的に同時に起こると考えられるが、本発明者らはこの考えに拘泥するつもりはない。同じ手順（ｉ）及び（ｉｉ）を過レニウム酸塩でも使用することができる。
【００６９】
有機又は無機高分子に結合したホスフィンは、場合によっては、両方の経路に使用することができる（下記スキーム２参照）。ホスフィンとテクネチウム含有種の説明のための反応、及び還元剤としてのその使用は、それぞれ米国特許出願公開第２００４００４２９６３号並びにＧｒｅｅｎｌａｎｄ及びＢｌｏｗｅｒ（Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍ．，２００５，１６，９３９−４８）に記載されている。
【００７０】
手短に述べると、発生体溶出物を配位子Ｌ３の存在下で無機又は有機高分子と混合する。加熱すると［９９ｍＴｃＯ３］＋核を有する所望の錯体１〜３が生成する。化合物は、良好な放射化学的純度で受け取られる。この合成手法の利点は、［９９ｍＴｃＯ４］−及び配位子Ｌ３を除いて、他の物質が不要なことである。したがって、従来技術と異なり、追加の還元剤、溶媒及び補助的配位子が不要である。本発明者らは、正確な機構的詳細に関して任意の特定の理論に拘泥するつもりはないが、結果は、［９９ｍＴｃＯ４］−が無機又は有機高分子と反応し得るが、配位子Ｌ３の非存在下では無機又は有機高分子に持続的に結合しないことを意味している。
【００７１】
【化３】
0005581226.tif 000004
本発明の合成は、均一反応によって、すなわち還元剤又は活性化ルイス酸を用いて水溶液中で、等しく実施できることが当業者によって理解されるであろう（図４）。
【実施例】
【００７２】
（実施例１）
例として過テクネチウム酸塩を使用した、均一合成と不均一合成の両方の説明のための詳細は以下のとおりである。
【００７３】
１．１  高分子に結合したホスフィン
キット１：
−  高分子に結合したトリフェニルホスピン（ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｐｈｏｓｐｉｎｅ）（２００〜４００メッシュ、標識化度：約３．０ｍｍｏｌ／ｇ添加、ジビニルベンゼンによる２％架橋、Ａｌｄｒｉｃｈ）１０ｍｇ
−  １，４，７−トリアザシクロノナン三塩酸塩２３．５ｍｇ（１０−４ｍｏｌ）
−  Ｈ２ＳＯ４  ２．８１μｌ
プロトコル１：
調製したキット１にＮ２を１０分間流した。溶出された［ＴｃＯ４］−溶液１ｍｌを添加し、反応混合物を９５℃で４時間加熱した。反応溶液をろ過し、ＮａＯＨ（０．１Ｍ）を添加して中和した。
【００７４】
収率：４８％
キット２：
−  高分子に結合したトリス（２−カルボキシ−エチル）ホスフィン塩酸塩（ＮｏｖａＳｙｎ（登録商標）アミノ樹脂（９０μｍ）、標識化度：約０．３ｍｍｏｌ／ｇ、標準ＳＰＰＳ技術によって添加、樹脂はポリエチレングリコールと低架橋ポリスチレンゲルタイプ樹脂の複合体、水中で良好な膨潤性、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）１０ｍｇ
−  １，４，７−トリアザシクロノナン三塩酸塩２３．５ｍｇ（１０−４ｍｏｌ）
プロトコル２：
調製したキット２にＮ２を１０分間流した。溶出された［ＴｃＯ４］−溶液１ｍｌを添加し、反応混合物を９５℃で１時間加熱した。反応溶液をろ過し、ＮａＯＨ（０．１Ｍ）を添加して中和した。
【００７５】
収率：７０％
１．２  ホスフィン酸（すなわち均一合成）
キット：
−  ５０％（５．７  １０−５ｍｏｌ）ホスフィン酸（Ｆｌｕｋａ）０．６２μｌ
−  １，４，７−トリアザシクロノナン三塩酸塩２３．５ｍｇ（１０−４ｍｏｌ）
−  Ｈ２ＳＯ４  ２．８１μｌ
プロトコル
調製したキットにＮ２を１０分間流した。溶出された［ＴｃＯ４］−溶液１ｍｌを添加し、反応混合物を９５℃で４時間加熱した。２時間後、バイアルを開け、反応器に空気を入れた。反応溶液にＮａＯＨ（０．１Ｍ）を添加して中和した。
【００７６】
収率：６４％
配位ステップ後に不均一反応器に追加の空気を入れる必要はないことが判明した。最終酸化／切断ステップに備えるのに既に十分な空気がバイアル中に存在したと考えられる。
【００７７】
不均一反応は、発生体溶出物及びＬ３が溶液状態で導入された、無機又は有機高分子ホスフィン（又は別の還元剤／活性化ルイス酸）を充填したカラムの形のキット中で実施できることを当業者は理解するであろう。
【００７８】
１．３  アミンのボラン付加体（すなわち均一合成）
キット：以下の構造を有するＨ３Ｂ（ｔａｃｎ）（１０−４ｍｏｌ）１４．３ｍｇ
【００７９】
【化４】
0005581226.tif 000005
プロトコル：Ｈ３Ｂ（ｔａｃｎ）を含むキットにＮ２を１０分間流した。溶出された［ＴｃＯ４］−溶液１ｍｌを添加し、反応混合物を９５℃で１５分間加熱した。
【００８０】
収率：９６％。生成物のＨＰＬＣトレースを図１０に示す。
【００８１】
１．４  過テクネチウム酸塩とｔａｃｎのアミノ−ホスホイリドとの反応
キット：以下の構造を有する（Ｐｈ３Ｐ（ｔａｃｎ））Ｂｒ（２・１０−５ｍｏｌ）１０ｍｇ
【００８２】
【化５】
0005581226.tif 000006
プロトコル：（Ｐｈ３Ｐ（ｔａｃｎ））Ｂｒを含むキットにＮ２を１０分間流した。溶出された［ＴｃＯ４］−溶液１ｍｌを添加し、反応混合物を９５℃で６時間加熱した。
【００８３】
収率：９５％。生成物のＨＰＬＣトレースを図１１に示す。
【００８４】
１．５  還元剤としてのＮａ［ＢＨ４］の使用
キット：
−  １，４，７−トリアザシクロノナン三塩酸塩（１０−５ｍｏｌ）２．４ｍｇ
−  ＮａＢＨ４（６．９・１０−５ｍｏｌ）２．６ｍｇ
−  ＮａＯＨ（１．４・１０−４ｍｏｌ）５．６ｍｇ
プロトコル：調製したキットにＮ２を１０分間流した。溶出された［ＴｃＯ４］−溶液１ｍｌを添加し、室温で１５分間撹拌した。反応混合物にＨＣｌ（０．１Ｍ）を添加して中和した。
【００８５】
収率：９７％。生成物のＨＰＬＣトレースを図１２に示す。
【００８６】
（実施例２）
本発明のジオラト誘導体を以下のように調製することができる。
【００８７】
化合物４（化合物１と４−ビニルベンゼンスルホン酸ナトリウム塩の反応）：
不均一方法に従って、高分子に結合したトリス（２−カルボキシ−エチル）ホスフィン塩酸塩を還元試薬として使用して、化合物１を調製した。４−ビニルベンゼンスルホン酸ナトリウム塩水和物３．２ｍｇ（１．５５×１０−５ｍｏｌ）を、ろ過され中和された溶液（０．８ｍｌ）に添加した。反応混合物を９５℃に１．５時間加熱した。
【００８８】
収率：７８％
（実施例３）
安定性
アルブミンを用いた安定性試験：
ウシ血清由来のアルブミン（溶解性：４０ｍｇ／ｍｌ）３８ｍｇを化合物４の溶液（１ｍｌ）に添加した。化合物４の分解は３７℃で３時間認められなかった（図８）。
【００８９】
血しょうを用いた安定性試験：
（ウシ）血しょう０．１ｍｌを化合物４の溶液に添加した。化合物４の分解は２５℃で２４時間認められなかった（図９）。
【００９０】
錯体の特性分析
ＨＰＬＣ条件の詳細
Ｕｖ／ｖｉｓ検出よりも約０．５分遅延させるテフロン（登録商標）管によって分離された、Ｍｅｒｃｋ  Ｈｉｔａｃｈｉ  ＬａＣｈｒｏｍ  Ｌ７２００同調可能ＵＶ検出器と放射線検出器（ｒａｄｉｏｄｅｔｅｃｔｏｒ）に連結されたＭｅｒｃｋ  Ｈｉｔａｃｈｉ  ＬａＣｈｒｏｍ  Ｌ７１００ポンプ上でＨＰＬＣ分析を行った。Ｕｖ／ｖｉｓ検出を２５０ｎｍで行った。放射性９９ｍＴｃ錯体の検出は、ＮａＩ（Ｔｌ）シンチレーション検出器を備えたＢｅｒｔｈｏｌｄ  ＬＢ５０６放射線検出器を用いて行われた。検出器設定のために、９９ｍＴｃ信号は、対応する９９Ｔｃ錯体のＵＶ信号よりも一般に０．４〜０．７分遅れて出現する。分離はＭａｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅｌ  Ｃ１８逆相カラム（Ｎｕｃｌｅｏｓｉｌ  １０ｌｍ、２５０  ４ｍｍ）によってＭｅＣＮ／０．１％ＣＦ３ＣＯＯＨ又はＭｅＣＮ／５０ｍＭ  ＴＥＡＰ勾配を溶離剤として用いて、流量０．５ｍＬ／分で行われた。方法１（化合物１及び２）：ｔ＝０〜３分：０％ＭｅＣＮ；３〜３．１分：０〜２５％ＭｅＣＮ；３．１〜９分：２５％ＭｅＣＮ；９〜９．１分：２５〜３４％ＭｅＣＮ；９．１〜１８分：３４〜１００％ＭｅＣＮ；１８〜２５分：１００％ＭｅＣＮ、２５〜２５．１分：１００〜０％ＭｅＣＮ；２５．１〜３０分：０％ＭｅＣＮ。方法２（化合物３及び４）：ｔ＝０〜３分：０％ＭｅＣＮ；３〜３．１分：０〜２５％ＭｅＣＮ；３．１〜９分：２５％ＭｅＣＮ；９〜９．１分：２５〜３４％ＭｅＣＮ；９．１〜１２分：３４％ＭｅＣＮ；１２．〜１２．１分：３４〜１００％ＭｅＣＮ、１２．１〜１５分：１００％ＭｅＣＮ；１５〜１５．１分：１００〜０％ＭｅＣＮ；１５．１〜１８分：１００％ＭｅＣＮ。
【００９１】
９９ｍＴｃ化合物と対応する９９Ｔｃ化合物とのＨＰＬＣ保持時間を比較して、同一性を確認する（図１から３）。１は移動相の前部で極めて早く、過テクネチウム酸塩の近くで実際に溶出するので、１の比較（図１）はやや困難である。しかし、１でも、異なるＨＰＬＣ勾配及び溶媒を適用することによって形成が見られる。すなわち、（トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）／ＭｅＣＮ移動相ではなく）過塩素酸テトラエチルアンモニウム／アセトニトリル（ＴＥＡＰ／ＭｅＣＮ）移動相を使用することによって、錯体と過テクネチウム酸塩の分離が改善された。９９ｍＴｃと９９Ｔｃ錯体（化合物１の場合には図１ａ及び１ｂ）の保持時間差は、一般に約０．４から０．７分であったことに留意されたい。
【００９２】
続いて、ＴＥＡＰ／ＭｅＣＮ移動相を化合物２及び３に使用した。化合物２及び３の確認は明白である（図２及び３。図２における１５．３８のピークは、カラムの人工産物であることに留意されたい。）。特に化合物３に関して、ＨＰＬＣデータ（図３（ａ）は、化合物１の形成も意味している（３．１２分のピーク）。
【００９３】
化合物１から３は、ｐＨ６から８の食塩水中で数時間安定であり、過テクネチウム酸塩に加水分解しないことが見いだされた（例えば、化合物１については図６を参照されたい。）。さらに、化合物１を使用し９９Ｔｃを使用しないモデル実験によれば、錯体は、ｐＨ１で数日間さほど加水分解せずに維持することができた。
【００９４】
結論として、本明細書に開示する調製経路は、従来技術によって示唆されておらず、基底状態９９Ｔｃに対して以前に記述された手法よりもはるかに好都合な手法を公知と新規の両方の所望の錯体の調製にもたらす。本発明は、潜在的に、放射性医薬品用途に潜在的に有用な多種多様な新しい容易に調製される化合物を製造することができる。本発明は、本発明の錯体とアルケン、アルキン及びアルケニル又はアルキニル基との反応によって標識化する方法、並びに担体無添加放射性医薬品の直接の調製ももたらす。
【図１ａ】
0005581226.tif 000007
【図１ｂ】
0005581226.tif 000008
【図２】
0005581226.tif 000009
【図３】
0005581226.tif 000010
【図４】
0005581226.tif 000011
【図５】
0005581226.tif 000012
【図６】
0005581226.tif 000013
【図７】
0005581226.tif 000014
【図８】
0005581226.tif 000015
【図９】
0005581226.tif 000016
【図１０】
0005581226.tif 000017
【図１１】
0005581226.tif 000018
【図１２】
0005581226.tif 000019