(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
磁性粒子に結合した対象成分を溶液から分離する方法であって、次の工程：
（ａ）１つ以上の平らな室であって、各室が、内部容積と、前記室の外側部（２５）に上る傾斜底と、流体をトラップするトラップ手段（１０）とを備え、前記トラップ手段が、コンテナー（１１）の前記室の外側部（２５）の内側に置かれていることを特徴とする室と、磁性粒子（２１）と前記磁性粒子（２１）に結合された前記対象成分とを捕獲するための、前記コンテナーの前記室の内側部（４）の外側に置かれた磁石（１２）とを有するコンテナー装置を提供する工程と、
（ｂ）前記コンテナーの前記内側部（４）の外側でかつ前記磁石（１２）に隣接して置かれている軸（１９）の周りに前記コンテナーが回転する前に、前記対象成分を含む前記溶液の少なくとも一部を前記室の前記内部容積中に配置する工程と、
（ｃ）前記対象成分を含む前記溶液に、前記対象成分を固定する反応成分で被覆された多数の磁性粒子（２１）を添加する工程と、
（ｄ）前記多数の被覆された磁性粒子と前記溶液とを混合し、それにより前記磁性粒子と上澄み液体とを備える混合物を生成する工程と、その後、
（ｅ）前記液体の少なくとも一部が前記コンテナーの前記外側部（２５）に追い出されるように、前記コンテナーを回転させることにより、前記コンテナー内の磁性粒子と液体の混合物を回転させることによって、前記磁性粒子と前記液体を分離する工程であって、前記液体が遠心力によって前記トラップ手段（１０）中に押しやられ、かつ磁性粒子が前記内部容積の前記内側部（４）の内側に固定されるように磁場が付与される間に、前記液体の一部または全部が、前記コンテナーの前記外側部（２５）において前記内部容積中に組み込まれた前記トラップ手段（１０）によってトラップされることを特徴とする、前記磁性粒子と前記液体を分離する工程と、を備えることを特徴とする方法。
【請求項２】
回転運動の速度は、前記磁性粒子に作用する生成した遠心力が、前記混合物中の前記磁性粒子に作用する磁力と同等かそれより低く、かつ前記混合物の非磁性液体部分を前記トラップ手段に移送するのに充分であるようにすることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項３】
付与される遠心力が、１ｇ〜１００ｇであることを特徴とする請求項１または２記載の方法。
【請求項４】
流体をトラップする前記トラップ手段（１０）が、前記室の前記内部容積中の前記室の上端に到達しない物理的壁であることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項５】
流体をトラップする前記トラップ手段（１０）が、化学吸収材または超吸収材料に基づくものであることを特徴とする請求項１または４記載の方法。
【請求項６】
前記対象成分が、核酸、オリゴヌクレオチドもしくはポリヌクレオチド、タンパク質、抗体、抗原もしくはハプテン、または磁性粒子に直接的にもしくは間接的に結合できる他の成分であることを特徴とする請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記平らな室には、以後の反応を行うための追加のチューブ（１５）が設けられ、前記追加のチューブが前記室の底を経由して接続されていることを特徴とする請求項１記載の方法。
【請求項８】
前記平らな室の底と前記内側部（４）との間の角度は、１゜〜８５゜であることを特徴とする請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
磁性粒子に結合した対象成分を溶液から分離するコンテナー装置であって、前記コンテナー装置は、
（１）１つ以上の室を有するコンテナー（１１）であって、各室が、内部容積と、前記室の外側部（２５）に上がっていく傾斜底と、流体をトラップするトラップ手段（１０）とを有し、前記トラップ手段が、前記コンテナーの前記室の前記外側部（２５）の内側に置かれていることを特徴とするコンテナーと、
（２）前記磁性粒子（２１）と前記磁性粒子に結合された前記対象成分とを捕獲するための、前記コンテナーの前記室の内側部（４）の外側に置かれた磁石（１２）と、
（３）前記コンテナーの前記室の前記内側部（４）の外側でかつ前記磁石（１２）に隣接して置かれた回転軸（１９）と、
（４）磁場を付与するための手段と前記コンテナーを回転するためのエンジンと、を備えることを特徴とするコンテナー装置。
【請求項１０】
前記コンテナーが、１つ以上の室を備え、各室が１ｍｌ〜５０ｍｌの範囲の容積を持っていることを特徴とする請求項９記載のコンテナー装置。
【請求項１１】
１つまたは２つの追加の単一カセットに接続されたまたは接続可能な第１の単一カセット内で結合された多数の室を備え、各カセットは２〜１００室を備えることを特徴とする請求項９または１０記載のコンテナー装置。
【請求項１２】
線形またはリング状配列を形成する単一カセット中に配置された多数の室を備え、各単一カセットは、４〜９６の単一の相互接続可能なコンテナーを備えることを特徴とする請求項９〜１１のいずれか１項に記載のコンテナー装置。
【請求項１３】
１つ以上の個別化したカセットが、前記回転軸（１９）の周りのリング上に置かれていることを特徴とする請求項１１または１２記載のコンテナー装置。
【請求項１４】
１つ以上の室は、少なくとも１つの入口ポートおよび出口ポート（１，２）を備えていることを特徴とする請求項９〜１３のいずれか１項に記載のコンテナー装置。
【請求項１５】
前記少なくとも１つの入口ポートおよび出口ポート（１，２）が、柔軟なシートまたは膜材料で覆われていることを特徴とする請求項１４記載のコンテナー装置。
【請求項１６】
各室には、排出開口部（３）が設けられていることを特徴とする請求項９〜１５のいずれか１項に記載のコンテナー装置。
【請求項１７】
請求項９〜１６のいずれか１項に記載のコンテナー装置を備える、磁性粒子に結合した対象成分を溶液から分離する装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明の目的は、磁力および遠心力を付与することにより、磁性粒子に結合した対象成分を液体サンプルから分離する方法であって、該遠心力は、磁場により磁性粒子に有効な力の方向とは正反対に有効であり、また磁力は磁性粒子に対して有効な遠心力よりも高く、それにより液体から磁性粒子を分離することを特徴とする方法である。分離された液体はトラップにより拘束され、トラップされた液体は、さらに吸着材量に結合されることが好ましい。本発明のさらなる目的は、該方法を実行するための装置である。
【背景技術】
【０００２】
磁性粒子の助けを用いて、生物材料、特に核酸をその自然の環境から単離する方法は、何年も前から公知である（たとえば欧州特許第０８３７８７１号明細書を参照）。公知の方法によれば、分離される対象成分を含むサンプル混合物は、対象化合物が磁性粒子に結合するという条件下で、結合が起きる充分な時間の間、磁性粒子との接触がもたらされ、混合され、培養される。培養後、磁性粒子に結合した生物材料は、通常磁場を用いて流体から分離される。たとえば、培養が行われた容器またはピペットの壁に磁性粒子を引き付けることができる。続いて、磁性粒子に結合していないサンプル内容物を含む流体は、たとえば、吸引によりピペットを経由して除去される。
【０００３】
しかしこれらの手順は、特定量の磁性粒子が反応容器および／またはピペットチップに付着するという不利な点を持っている。
【０００４】
ピペット採取または吸引によりサンプル流体を除去する他の不利な点は、多数の組み立て部品、たとえばロボット機械が必要とされるか、または手動操作の欠陥を享受しなければならないということのいずれかである。さらに、磁力を付与して液体または懸濁液から磁性粒子を引き出すためには、また引き続いてそれらを充分に洗浄する（通常、３〜４回）ためには、長時間が必要である。他の不利な点は、塊または凝集物を集めた磁性粒子は、過剰の流体を保持する傾向にあり、凝集した塊は溶液中には再懸濁させるのが困難であるということである。
【０００５】
米国特許第５０９８８４５号明細書（Babson）中には、特定の検体、たとえば抗体が付着されるかなり大きな球体（固体支持）を含む円形の容器が記述されている。縦軸の周りにカップを回転させることにより洗浄分離が行われ、そこでは、固体材料を容器中に残したままで、液体内容物を除去するために遠心力が働く。しかし該方法は、結合のために利用可能な表面積が球体の寸法に限定されるという、被覆された容器と類似の不利な点を持っている。さらに不利な点は、被覆された容器が、マイクロ球体には使用できないし、また特に、磁性マイクロ球体用には使用できないことである。
【０００６】
米国特許第６１５０１８２号明細書（Cassaday）中には、洗浄効率を向上させかつ磁性システムまたは遠心システム単独の不利を減少させる方法で、磁気抽出技術および遠心抽出技術を組み合わせる方法が記述されている。しかしながら、該方法の不利な点は、たとえ可能であっても、該方法を自動化することが困難であるということである。さらに、Cassadayにより記述された方法は、ピペット採取または吸引によりサンプル流体を除去する方法と関連した不利な点を凌駕していない。
【０００７】
公知の装置および方法は、ロボット手段を必要とすることなく、またはサンプルの手動取り扱いに含まれるリスク無しに、容易で充分な方法で、磁性粒子に結合した対象成分を溶液から分離することができないという不利な点を持っている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は叙上の先行技術の欠点を取り除くことである。
【０００９】
本発明は、磁性粒子に結合した対象成分、たとえば血漿、血液または尿から由来する成分を溶液から分離する方法であって、磁力と遠心力の適用を組み合わせ、それにより後者が互いに正反対の方向を向くという方法に向けられている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
第１の実施形態において、本発明は、溶液から磁性粒子に結合した対象成分を分離する方法であって、特に次の工程：
（ａ）１つ以上の平らな室であって、各室は、内部容積と、区画の外側部に上る傾斜底（８）と、流体をトラップする手段（１０）とを備え、該傾斜底は、１゜〜８５゜の角度を有することが好ましく、該手段は、コンテナーの区画の外側部の内側に置かれていることを特徴とする室（Ｉ）と、磁性粒子と該磁性粒子に結合された対象成分とを捕獲するための、コンテナーの区画の内側部（４）の外側に置かれた磁石（ＩＩ）とを有するコンテナー装置を提供する工程と、
（ｂ）該コンテナーの内側部の外側でかつ磁石に隣接して置かれている軸の周りに該コンテナーが回転する前に、対象成分を含む該溶液の一部と、必要で可能なら、追加の試薬とを、該室の内部容積中に配置する工程と、
（ｃ）該コンテナーの内側部の外側に置かれている軸の周りに該コンテナーが回転する前に、対象成分を含む溶液に、該対象成分を固定する反応成分で被覆された多数の磁性粒子を添加する工程と、
（ｄ）多数の被覆された磁性粒子と該溶液を混合し、それにより該磁性粒子と上澄み液体とを備える混合物を生成する工程と、その後、
（ｅ）該液体の少なくとも一部が該コンテナーの外側部に追い出されるように、該コンテナーを回転させることにより、該コンテナー内の磁性粒子と液体の混合物を回転させることによって、該磁性粒子と該液体を分離する工程であって、該液体が、遠心力（１３）によってトラップ手段中に押しやられ、かつ磁性粒子が、該内部容積の内側部の内側に固定されるように磁場が付与される間に、該液体の一部または全部が、コンテナーの外側部において内部容積中に組み込まれた手段によってトラップされることを特徴とする、該磁性粒子と該液体を分離する工程と、を備えることを特徴とする方法に向けられている。
【００１１】
他の実施形態において、本発明は、磁性粒子に結合した対象成分を溶液から分離するコンテナー装置であって、
該コンテナー装置は、
（１）１つ以上の室を有するコンテナーであって、各室が、内部容積と、室の外側部に上がっていく傾斜底と、流体をトラップする手段とを有し、該手段が、該コンテナーの室の外側部の内側に置かれていることを特徴とするコンテナーと、
（２）磁性粒子と該磁性粒子に結合された該対象成分とを捕獲するための、コンテナーの室の内側壁の外側に置かれた磁石と、
（３）該磁石に隣接した該コンテナーの中央に置かれた回転軸と、
（４）磁性粒子に対して、磁場、たとえば磁力（１４）を付与するための手段と、該コンテナーを回転するためのエンジンと、を備えることを特徴とするコンテナー装置に向けられている。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】本発明による単一室（カートリッジ）と磁石の位置を示している。
【図２】本発明による中心に移動可能な磁石を有するリング形状で配置されているカートリッジの断面を示している。
【図３】回転軸と除去可能な磁石を含む２つのカートリッジの断面を詳細に示している。
【図４】１６の個々の室を持ったカートリッジのリングの平面図を示している。
【図５】室の下側部（５）に取り付けられた反応チューブ（１５）を有する、本発明による単一室（カートリッジ）と磁石の位置を示している。
【図６】８個の分離室を有するコンパクトカートリッジの平面図を示している。
【図７】１つの単一相互接続可能なカートリッジの上部の詳細を示している。
【図８】ピペット採取装置によりピペット採取されるように用意された線形配列の相互接続可能なカセットを示している。
【図９】第１および第３の１２個接続された室が、ピペット採取位置に配置され、また第２および第４の１２個接続された室が、回転位置に配置されていることを特徴とする本発明による回転子装置を示している。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
対象成分を分離する方法に適するコンテナー装置は、平らな室である１つ以上の区画を備え、各室は、内部容積と、傾斜底と、区画の外側部に上がっていく、室の下側部の上り部（８）と、流体をトラップする手段（１０）とを備えている。各平らな室は、内部バリア（６）に隣接して置かれた第１ピペット採取開口部（１）と第２内部ピペット採取開口部（２）とを有するカバー（２３）を備えており、両者は、膜材料または熱可塑性プラスチック高分子弾性体で作られた材料で任意に覆われている。本発明による装置のいくつかにおいて、各室の上り傾斜底の最下部には、さらにピペット採取出口（１７）がある。
【００１４】
反応室として使用するのに適した内部容積は、区画の内側部または壁（４）に隣接して置かれ、それに対して、流体をトラップする手段（１０）が、室の区画の外側壁（２５）の内側に置かれる。サンプルサイズまたは特定の応用に応じて、室の寸法および室の下側部（５）を変更することができる。本発明の方法に適した装置中に含まれる典型的な室は、３〜１３ｃｍの高さと５〜２５ｍｍの厚さを有する内側壁（４）と、２〜１２ｍｍの高さと５〜８０ｍｍの厚さを有する、内側壁（４）と反対で平行に置かれた外側壁（２５）とを備えている。室の内側壁（４）に隣接して、内部バリア（６）が、ピペット採取開口部（１）および（２）を分離するために取り付けられている。内側壁（４）および外側壁（２５）は、ほぼ平行に形成された側壁によって接続され、その結果、内側壁から外側壁までの表面距離は、２〜１２ｃｍである。
【００１５】
本発明による区画の外側部に遠心力により動かされる液体または流体の流体をトラップする手段（１０）は、カットオフ溝（７）の上側部にギャップ（９）を有する物理的壁であり、該室の内部容積中の室の上端には到達しないことが好ましい。該流体をトラップする手段（１０）の材料は、磁性粒子に結合しない物質を含む化学吸着材料または不可逆的に結合したサンプル流体に適する超吸着材料に基づくものが好ましく、後者は、磁石（１２）に隣接する区画の内側部に押しやられる。遠心分離後、他の全ての液体および非磁性成分を含めたサンプル液体が、該吸着材料中に封じ込まれ、対象材料が磁性粒子に結合される。続いて、磁性粒子に結合された対象成分は、洗浄し、さらなる処理をすることができる。
【００１６】
分離プロセスの間、コンテナーの区画の内側壁（４）の外側に置かれた磁石（１２）は、たとえば、磁石を下方に移動させることによりスイッチオフできる。従って、磁石を移動させる前に、区画の内側壁（４）の内側における室の下側部（５）の中に濃縮されかつ捕獲された磁性粒子（２１）は、室の下側部（５）の中において、内部容積の流体中に放出される。たとえば、磁石を上下に移動させることにより、付与される磁場を容易にスイッチオンおよびスイッチオフ出来るという事実は、磁性粒子に結合した対象成分を有する磁性粒子を洗浄し、または混合するために特に重要である。
【００１７】
対象成分を含む溶液の少なくとも一部が、１つ以上の室の内部容積中で処理されるとき、コンテナーの区画の内側壁の外側に置かれた磁石（１２）はスイッチオンされ、一方、コンテナー装置は、該コンテナーの内側部の外側に置かれた軸（１９）の周りに回転する。好ましくは、サンプル液体の少なくとも一部がコンテナーの外側壁に追い出されるようにコンテナー装置が回転するときには、磁石は同時に同じ軸の周りに回転して、その結果、各室中に均一な磁場をもたらす。
【００１８】
サンプル液体または反応溶液（２２）のみならず磁性粒子（２１）を含む混合物に付与される回転運動は、生成した遠心力が、該混合物の内側の磁性粒子に有効である磁力と同等かまたはそれより小さく、かつ該混合物の非磁性液体部分を該トラップ手段（１０）に移送するのに充分であるようにするのが好ましい。遠心力は、回転運動の速度を変化させることにより、通常変更される。好ましくは、１ｇ〜１００ｇの遠心力、より好ましくは、６ｇ〜８０ｇの遠心力が付与される。
【００１９】
対象成分を固定する反応成分を用いて被覆された多数の磁性粒子は、対象成分を含む溶液に対して添加される。磁性粒子の添加の間、磁石が好ましくはスイッチオフされ、かつ装置の回転運動はニュートラルになる。
【００２０】
対象成分が、たとえば、核酸、オリゴヌクレオチドもしくはポリヌクレオチド、タンパク質、抗体、抗原もしくはハプテン、または磁性粒子に直接的にまたは間接的に結合できる他の成分など、定量に値するいかなる検体であってもよい。
【００２１】
ある応用については、平らな室には、室の底において、以後の反応、たとえばＰＣＲ反応を行うための追加のチューブ（１５）が設けられている。室の下側部（４）の底は、反応混合物を容易に反応チューブ（１５）中に移送できる開口部（１６）を有している。磁性粒子に結合した対象成分は通常、室の上り傾斜底の最下部にある出口を経由して、該追加のチューブに移送される。
【００２２】
本発明のさらなる目的は、磁性粒子に結合した対象成分を溶液から分離する円形コンテナー装置であって、該コンテナー装置は、
（１）１つ以上の室を有するコンテナーであって、各室は、内部容積と、区画の外側部に上がっていく傾斜底と、流体をトラップする手段（１０）とを有し、該手段は、該コンテナーの区画の外側壁（２５）の内側に置かれていることを特徴とするコンテナーと、
（２）磁性粒子（２１）と該磁性粒子に結合された対象成分とを捕獲するための、コンテナーの区画の内側壁（４）の外側に置かれた磁石（１２）と、
（３）該磁石（１２）に隣接して、該円形コンテナーの中央に置かれた回転軸（１９）と、
（４）磁性粒子に対して磁場、たとえば磁力を付与するための手段と、該コンテナーを回転するためのエンジンとを備えることを特徴とする円形コンテナー装置である。
【００２３】
本発明による該コンテナー装置が、１つ以上の室を含み、各室が、１ｍｌ〜５０ｍｌの範囲、より好ましくは、５ｍｌ〜２５ｍｌの範囲の容積を有している。
【００２４】
好ましくは、該コンテナー装置は、１つ以上の単一カセットまたはカートリッジに接続された多数の室を備え、各カセットまたはカートリッジは、１つまたは２つの他のカセットに接続され、または接続可能である。該カセットは、好ましくは、２〜１００室を備えている。好ましくは、該カセットは、８、１２、２４、４８、７２または９６室を備えており、線形または環状配列で配置可能である。
【００２５】
本発明による特に好ましい実施形態は、接続可能な単一カセットを含む多数の室は、４、８、１２、１６、３２、６４または９６までの単一の相互接続可能なコンテナーのリングを形成することである。これらのカセットまたはカートリッジは、それぞれ隣のカートリッジに柔軟に接続されることが好ましく、また平行に形成されているか、または好ましくは、回転軸（１９）の周りのリング上に置かれ、各カセットが、個別化されている。単一コンテナー間の接続は、蝶番（２８）を形成する、他のコンテナーの鼻状の細長い一片（２６）を用いて、コンテナーの一方側上にチャンネル（２７）を組み立てることにより、達成されることが好ましい。
【００２６】
本発明装置に使用される室は、通常平坦であり、また区画の外側部に上がっていく傾斜底を備えている。該傾斜底と該室の内側壁（４）の間の角度は、１゜〜８５゜が好ましく、１゜〜６０゜がより好ましい。本発明装置中に含まれる典型的な室は、３〜１３ｃｍの高さと５〜２５ｍｍの厚さを有する内側壁（４）と、２〜１２ｃｍの高さと５〜２５ｍｍの厚さを有する、内側壁（４）に対して反対で平行に置かれた外側壁（２５）とを備えている。内側壁（４）および外側壁（２５）は、ほぼ平行に形成された側壁によって接続され、その結果、内側壁から外側壁までの表面距離は、ほぼ２〜１２ｃｍである。
【００２７】
他の好ましい実施形態において、１つ以上の室は、少なくとも１つの入口および１つの出口または入口ポート（１，２，１７）を備えており、１つ以上のポートは、柔軟なシートまたは膜材料を用いて覆われていてもよい。
【００２８】
コンテナー装置にはさらに、コンテナーが大量の液体で満たされたとき、ならびに、入口ポートおよび出口ポート（１，２，１７）が使用後に閉じられるときに、特に役立つ換気用の排出開口部（３）が設けられている。ウイルス性のサンプルを、コンテナー中に分離してかつ充満させることを意図するときには、後者は特に推奨される。排出開口部（３）は、多孔質のプラスチック、フリース、繊維材料または多孔質金属を備えることが好ましい。
【００２９】
遠心分離中に室の下側部（５）の内側壁（４）に、磁性粒子（２１）を結合させるために使用される磁石は、コンテナーの区画の内側壁（４）の外側に置かれる。さらに、該磁石（１２）は、回転軸（１９）とコンテナー装置の内側部との間に置かれることが好ましい。他の実施形態においては、回転軸（１９）および磁石（１２）はともに、該コンテナーの内側部の外側で、中心に置かれる。
【００３０】
リング形状の実施形態の１つにおいて、カセットまたはカートリッジのリングは２より多い室を備え、該装置はライトサイクラー（LightCycler）装置（図４）のサンプル調製に特に適している。他の線形実施形態において、たとえば、室の２、４、６または８の線形配列が、直角のローター上で回転するときには、装置は高収率装置に適合し、そこでは１つの線形ピペット採取ヘッド上で、たとえば、２、４、６またはそれ以上のピペットを有する線形ピペット採取ヘッドによって、続いて処理されて、増幅は、マイクロタイタープレート・フォーマット・サーモサイクラー装置上で続いて行われる。さらにマイクロタイタープレート・フォーマット装置に適している他の実施形態では、プロセスのピペット採取段階の間でも必要とされる線形配列は、蝶番で曲げられ、全カセット（およびカセット中に組み入れられた室）が回転軸から同じ距離を持ち、その結果、全反応が同じ遠心力で行われ、かつ全区画が同じ磁場に管理されるプロセスになるように、リングの一部を形成する。そのような実施形態を部分的に図９中に示す。
【００３１】
本発明の特定の実施形態は、１２室と、該室の各室中にある流体を吸収またはトラップするフリース材料（１０）（たとえば、スーパー吸収材料）と、該室の上部カバー（２３）における第１および第２入口ポートならびに／または出口ポート（１，２）をカバーする２枚の柔軟なシートとを備える円形装置である（図７）。図１および図８中に示すように、該円形装置の１２室の各室は、区画の外側部に向けて上がっていく傾斜底と、溝（７）の上側部分にギャップ（９）を有するカットオフ溝（７）によって室の下側部（５）から分離されたコンテナーの区画の外側壁（２５）の内側に置かれた、流体をトラップする手段（１０）とを備えている。該装置のコンテナーの内側部の外側には、上下に移動可能な磁石が置かれている。磁性粒子（２１）を含む対象成分および試薬を備えるサンプル溶液は、室の外側部に近く置かれた第１入口ポート（１）を経由して該室に添加される。対象成分を含む溶液と、磁性粒子（２１）および他の必要な試薬とを組み合わせかつ混合したのち、回転磁石（１２）が据え付けられたまま該装置がわずかに回転する。該装置の中心に磁石（１２）が存在するために、対象成分を含む磁性粒子（２１）は、区画の内側壁（４）の内側に結合される。該装置のわずかなまたは適度の回転運動により、残留溶液または流体は、区画の外側壁（２５）の内側に置かれた吸着材料（１０）に移送される。磁力および遠心力付与による分離プロセスは、数秒程度、通常は約３秒〜３０秒しか時間がかからない。コンテナーの内側壁（４）の内側に結合した乾燥した磁性粒子（２１）は、磁石（１２）が取り除かれたのち、溶出緩衝液を用いて懸濁されることが好ましい。さらなる混合および培養工程の後に、懸濁液中の磁性粒子（２１）とともに、またはもし磁石（１２）がその場所に再び置かれる場合は、磁性粒子無しに、たとえばピペット採取チップを用いて溶出液を取り除くことができる。柔軟なシートまたは膜材料によってカバーされた第２ポート（２）を経由して、生成された溶出液は採取される。
【００３２】
本発明の他の実施形態は、リング構造上に配置された多数の室を備える装置である。該室の構造およびサイズは、柔軟なシートまたはフィルム材料によって覆われている他の出口ポート（１７）が、各室の底側に置かれていること以外は、上記したものに対応している。従って、精製された溶出液は、本発明装置の底側にあるポートに接続され、分離された対象成分をさらに処理できる（たとえば、精製された核酸を増幅できる）容器またはコンテナー中に直接移送される。
【００３３】
本発明による装置の室は、通常射出成型部品（たとえば、“Handbuch Spritzgiessen”, Hanser Publ. 2004, 77ff頁；“Werkstoff-Fuehrer Kunststoffe”Hanser Publ. 2001. 8. Ed., 83-89頁）によって製造されており、またこのようにして大変コスト的に有効である。
【００３４】
本発明の他の目的は、磁性粒子に結合した対象成分を溶液から分離するのに適したコンテナー装置を備える装置である。対象成分を含む多数のサンプルを処理するための装置には、多数のピペット採取チップを有するピペット採取装置が設けられている。これらの自動化されたピペットが、線形に配置されている。カセットを回転させるターンテーブルには、カセットを回転させるための４×１２の位置が設けられている。１２個の相互接続されたカセットは、同時にピペット採取装置によって処理される。ピペット採取手順については、１２個のピペット採取装置を有するピペット採取ヘッドが同時に１２個のカセットを処理できるように、相互接続されたカセットが線形に配置されている。１２個のカセットの４ブロック全部を処理したのち、線形配置されたカセットがターンテーブル上に曲げられ、さらに良好な処理を可能にする。該カセットは、ターンテーブルの部分上に置かれる。ここで、実際の分離プロセスを実行することができ、カセットは全て、回転軸に対して同一の距離を有し、磁石はカセットの内側壁の外側に置かれる。従って、４８個のカセットは同時に処理され、望ましくない液体が室の外側部にある吸収材料に移送され、そこで該液体は、液体吸収材料に結合される。分離後、カセットは線形配列に曲げ戻され、この位置において、洗浄緩衝液の添加および混合などのさらなる工程を実行できる。該１２個のピペット採取装置は、いくつかの部分で要求される場合には、最初の１２個のカセットに対して、洗浄緩衝液および／または溶出緩衝液を添加する働きをする。４８個の全てのカセットについて磁性粒子を再度懸濁させたのち、前に記述したように次の分離を実行できる。
【００３５】
該プロセスの終わりには、４８サンプル（または必要な場合には、それより少なく）が実行され、また全ての対象化合物は分離され、また禁止材料から精製され、また溶出溶液中で濃縮される。
【００３６】
次の実施例は、さらに本発明方法および装置を記述する：
COBAS AmpliPrep／COBAS TaqManテストを用いたウイルスＤＮＡの単離と精製
製造業者の処方にしたがって試薬を使用した。
使用した試薬：
溶解緩衝液：１．６ｍｌ
クエン酸ナトリウム・２水和物  ｐＨ＝４．８
４２．５％グアニジン  チオシアン酸エステル
＜１４％ポリドカノール
０．９％ジチオスレイトール
プロテイナーゼ溶液：１００μｌ
トリス緩衝液  ｐＨ＝５．２
＜０．０５％ＥＤＴＡ
塩化カルシウム
酢酸カルシウム
７．８％プロテイナーゼ
グリセロール
結合緩衝液：８２０μｌ
クエン酸ナトリウム・２水和物  ｐＨ＝４．８
４２．５％グアニジン  チオシアン酸エステル
＜１４％ポリドカノール
０．９％ジチオスレイトール
磁性粒子の懸濁液：１２０μｌ
磁性ガラス粒子
９３％イソプロパノール
洗浄緩衝液：１×２．０ｍｌおよび１×５００μｌ
トリスベース緩衝液  ｐＨ＝６．８
０．２％メチルパラベン
溶出緩衝液：６５μｌ
トリスベース緩衝液  ｐＨ＝７．６
０．２％メチルパラベン
吸着性材料：２．７ｇ  ＨｙＳｏｒｂTM  ＢＡＳＦ，Ｌｕｄｗｉｇｓｈａｆｅｎ，ドイツ
対象化合物：ＨＢＶウイルスＤＮＡ
生体サンプル：８６０μｌ血漿
【００３７】
体積８６０μｌの生体サンプルを、本発明による装置の外側部に隣接する上面に置かれた第１入口ポートを経由して、１つ以上の温度制御された室に添加する。使用した装置は、全部で８室を備えている。プロテアーゼ、たとえばプロテイナーゼを含む溶解緩衝液を用いて、また可能であれば、結合緩衝液（またはアルコール）を用いて、該サンプルを予備処理する。磁性粒子の懸濁液の約１２０μｌの一部を、該予備処理されたサンプルに添加する。８室を有する装置を含むローターを前後に数度だけわずかにうごかすことにより、室中での該溶液の混合および培養を行う。
【００３８】
通常は５分以内の時間を要する培養後、対象成分を磁性粒子に結合させる。磁石を上方へ移動させる。そのことは装置の中心に磁石を導入することにより、磁石のスイッチが入れられることを意味している。従って、該室の内側壁の内側に、磁性粒子を集める。適度な遠心力（たとえば、６ｘｇ）を付与することにより、非磁性成分を含むサンプル流体は該室の外側壁に押しやられ、そこでは、吸着材料、たとえば衛生品に非常に幅広く使用されている材料、すなわちＨｙＳｏｒｂTM  ＢＡＳＦ，Ｌｕｄｗｉｇｓｈａｆｅｎ，ドイツまたは繊維マトリックス中で軽く架橋されたポリアクリル酸の部分カリウム塩（シグマーアルドリッチ社、米国ミズーリー州セントルイス６３１０３）が置かれている。
【００３９】
遠心分離後、装置の回転運動がニュートラルになったとき、磁石を下に動かすことにより磁石を該装置から引き抜き、その結果、結合された対象成分を含む磁性粒子が該（反応）室の底に解放される。少量の洗浄緩衝液を多数回添加すること（通常室毎に、１×２ｍｌおよび２回目には、より少ない体積、たとえば５００μｌ以下で十分である）と、ローター装置の妥当な移動（たとえば、６ｘｇを用いて１回かまたは２回）とにより、得られた磁性粒子の懸濁液をさらに精製する。従って、サンプルの望ましくない成分は洗浄溶液中に溶解されるが、対象成分、核酸は磁性粒子に結合される。
【００４０】
洗浄手順が完了し、妥当な遠心分離運動（たとえば、６ｘｇ）により、洗浄緩衝液の最後の部分が除去されたときに、そのときに装置の中央にある元の位置に磁石を戻した。従って、残留する洗浄緩衝液は、装置の上り傾斜底を経由して、装置の外側壁の内側にある吸着材料中に移送され、対象成分を有する磁性粒子は該室の内側壁に隣接した底に固定される。
【００４１】
次の工程では、対象成分が結合される乾燥された磁性粒子の精製された部分を含んだ各室に対して６５μｌの溶出緩衝液が添加される。装置から磁石を取り除き、前後に適度に回転させることによって、それぞれの溶液は磁性粒子と混合される。従って対象成分は、溶出緩衝液中に再び懸濁される。溶出後、装置内のその元の位置に磁石を再び挿入すると、対象成分を含まない磁性粒子が該室のそれぞれの位置に集められる。たとえば、上面上で、該室の内側部寄りに置かれた、柔軟なシートでカバーされた第２ポートを経由して挿入されるピペット採取チップを用いて、該対象成分を含む溶出緩衝液は、取り除き、集めることができる。
【００４２】
求められれば、選択的に、ＨＢＶマスター混合物（６５μｌ）と共に、精製された溶出液を容器、反応チューブ（１５）または装置の各室の底側のポートに接続されたコンテナー中に、直接移送することができ、そこでは対象成分は、たとえば増幅され、および／またはさらに分析され得る。
【００４３】
本発明の方法および装置は、先行技術、たとえば「免疫学的検定ハンドブック」デイビッド・ワイルド著、ネイチャー出版グループ、２００１年、３１６〜３４６頁と組み合わせて、以上提供した報告に対すると同様な方法で免疫学的検定に対して応用できる。
【符号の説明】
【００４４】
１  ピペット採取開口部
２  内側ピペット採取開口部
３  排出口
４  室の内側壁
５  室の下側部
６  内部バリア
７  カットオフ溝
８  室の下側部の上り部
９  ギャップ
１０  流体をトラップする手段、たとえば、超吸着材料
１１  室のハウジング
１２  磁石
１３  遠心力の方向
１４  磁力の方向
１５  反応チューブ
１６  反応チューブの開口部
１７  ピペット採取出口
１８  磁石の矢印運動
１９  回転軸
２０  室の下側上り部
２１  磁性粒子
２２  反応溶液／反応室
２３  カバー
２４  仕切り壁
２５  室の外側壁
２６  鼻状の細長い一片
２７  チャンネル
２８  蝶番
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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