(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
0005548205.tif 000068
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｆ、Ｃｌ、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３、−（Ｃ１−Ｃ３アルキル）ＯＨ、−ＯＣＨ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）ＣＨ３、−ＣＦ３、および−Ｓ（Ｃ１−Ｃ３アルキル）からなる群より選択され、
Ｒ２は、Ｈ、Ｆ、およびＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ２アルキル）、ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２からなる群より選択され、
Ｒ４は、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、−Ｎ（ＣＨ３）２、および−ＣＦ３からなる群より選択され、
Ｒ５は、ＨおよびＣＨ３からなる群より選択される）
の化合物、またはその薬理学的に許容可能な塩。
【請求項２】
式
【化２】
0005548205.tif 000069
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｆ、Ｃｌ、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３、−（Ｃ１−Ｃ３アルキル）ＯＨ、−ＯＣＨ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）ＣＨ３、および−Ｓ（Ｃ１−Ｃ３アルキル）からなる群より選択され、
Ｒ２は、Ｈ、Ｆ、およびＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１−Ｃ２アルキル）、ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２からなる群より選択され、
Ｒ４は、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、−Ｎ（ＣＨ３）２、および−ＣＦ３からなる群より選択され、
Ｒ５は、ＨおよびＣＨ３からなる群より選択される）
の請求項１に記載の化合物、またはその薬理学的に許容可能な塩。
【請求項３】
Ｒ１が、Ｈ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｆ、Ｃｌ、ＣＦ３、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）ＣＨ３、および−ＳＣＨ３からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が、−ＣＨ３である、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
式
【化３】
0005548205.tif 000070
の請求項１に記載の化合物、またはその薬理学的に許容可能な塩。
【請求項６】
前記塩が、塩酸塩である、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
薬理学的に許容可能な担体および請求項１に記載の少なくとも１つの化合物を含む、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は選択的エストロゲン受容体調節因子に関する。
【背景技術】
【０００２】
骨関節炎（「ＯＡ」）を治療するための多くの商業的に利用可能な治療剤は、炎症を減少させ、ＯＡに関連する疼痛を軽減することに狙いを定めている。承認されているＯＡ治療は、侵襲性であり、長期間の使用で効力を失う場合があり、全ての患者を治療するのに適さない場合がある。ＯＡを罹患している患者のために新規の治療の選択が望まれる。
【０００３】
エストロゲンおよび種々の選択的エストロゲン受容体調節因子（ＳＥＲＭ）の前臨床研究が、ＯＡ関節疾患のモデルにおける疾患抑制活性とともに報告されている。多くのＳＥＲＭ調節因子が当業者に公知である。公知のＳＥＲＭの多くは、骨においてエストロゲンアゴニスト活性を有することが見出されているが、ＳＥＲＭは現在、ＯＡを治療するのに承認されていない。種々の組織上のＳＥＲＭ分子の選択的アゴニストまたはアンタゴニスト活性は、ＳＥＲＭの安全性および有効性の特性を変化させる可能性がある。例えば、子宮においてアゴニスト活性を有するＳＥＲＭ分子は、望ましくない膣出血に関連する場合がある。ＳＥＲＭ分子は、例えば骨、乳房、および／または子宮において選択的アゴニストおよび／またはアンタゴニスト活性を有し得る。出願人らは、骨においてＳＥＲＭアゴニスト活性を有するが、子宮において強力なアンタゴニスト活性を与えるＳＥＲＭ化合物が、ＯＡを治療するのに使用するために特に望ましい可能性があると考えている。許容できる安全性の特性を与えるが、ＯＡの兆候または症状に対して有益な効果を有するＳＥＲＭ化合物が、特に有用なさらなる治療選択である。
【０００４】
［２−（２−チエニル）−６−ヒドロキシベンゾチエン−３−イル］［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］メタノン構造を有するＳＥＲＭ化合物は、特許文献１（「７２４特許」）に開示されている。これらの化合物は、骨粗鬆症、閉経後症候群、子宮内膜症、およびＳＥＲＭ活性に関連する種々の他の状態の治療に有用であると開示されている。しかしながら、その特許文献１は、これらのＳＥＲＭ化合物がＯＡを治療するのに有用であると教示していない。さらに、その７２４特許のＳＥＲＭ分子は、本発明の化合物とは構造的に別である。その７２４特許と対照的に、本発明は、ナフタレンベースの骨格に結合されたオキシリンカーを有する化合物を必要とする。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】米国特許第５，７２８，７２４号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は強力な新規のＳＥＲＭ化合物を提供する。さらに、ＳＥＲＭ分子は、子宮において選択的エストロゲン拮抗作用を提供し、特にＯＡの治療に使用するための望ましい薬理学的特性を提供する。さらに、この選択的ＳＥＲＭは、ＯＡの治療に使用するための望ましい安全性の特性を提供することができる。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、式
【化１】
0005548205.tif 000002
の化合物、またはその薬理学的に許容可能な塩に関する。
【０００８】
別の実施形態において、本発明は、式Ｉ
【化２】
0005548205.tif 000003
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｆ、Ｃｌ、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３、−（Ｃ１−Ｃ３アルキル）ＯＨ、−ＯＣＨ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）ＣＨ３、−ＣＦ３、および−Ｓ（Ｃ１−Ｃ３アルキル）からなる群より選択され、
Ｒ２は、Ｈ、Ｆ、およびＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＮＨ（Ｃ０−Ｃ２アルキル）、ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２からなる群より選択され、
Ｒ４は、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、−Ｎ（ＣＨ３）２、および−ＣＦ３からなる群より選択され、
Ｒ５は、ＨおよびＣＨ３からなる群より選択される）
の化合物、またはその薬理学的に許容可能な塩を提供する。
【０００９】
別の実施形態において、本発明は、式Ｉ
【化３】
0005548205.tif 000004
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｆ、Ｃｌ、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３、−（Ｃ１−Ｃ３アルキル）ＯＨ、−ＯＣＨ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）ＣＨ３、および−Ｓ（Ｃ１−Ｃ３アルキル）からなる群より選択され、
Ｒ２は、Ｈ、Ｆ、およびＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＮＨ（Ｃ０−Ｃ２アルキル）、ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２からなる群より選択され、
Ｒ４は、Ｃ１−Ｃ４アルキル、−Ｎ（ＣＨ３）２、およびＣＦ３からなる群より選択され、
Ｒ５は、ＨおよびＣＨ３からなる群より選択される）
の化合物、またはその薬理学的に許容可能な塩を提供する。
【００１０】
別の実施形態において、本発明は、式Ｉ
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｆ、Ｃｌ、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）ＣＨ３、−ＳＣＨ３、および−ＣＦ３からなる群より選択され、
Ｒ２は、ＨおよびＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２および−ＯＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ４は、Ｃ１−Ｃ３アルキルから選択され、
Ｒ５は、ＨおよびＣＨ３からなる群より選択される）
の化合物、またはその薬理学的に許容可能な塩を提供する。
【００１１】
別の実施形態において、本発明は、式Ｉ
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、Ｆ、Ｃｌ、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ３、−Ｓ（Ｏ）２ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２ＣＨ３、−Ｓ（Ｏ）２ＣＨ３、−Ｓ（Ｏ）ＣＨ３、−ＣＦ３、および−ＳＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ２は、ＨおよびＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ５は、Ｈである）
の化合物、またはその薬理学的に許容可能な塩を提供する。
【００１２】
別の実施形態において、本発明は、式Ｉ
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、−ＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、Ｆ、Ｃｌ、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、−Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ３、−Ｓ（Ｏ）２ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｓ（Ｏ）２ＣＨ２ＣＨ３、−Ｓ（Ｏ）２ＣＨ３、−Ｓ（Ｏ）ＣＨ３、−ＣＦ３、および−ＳＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ２は、Ｈであり、
Ｒ５は、Ｈである）
の化合物、またはその薬理学的に許容可能な塩を提供する。
【００１３】
別の実施形態において、本発明は、式Ｉ
（式中、
Ｒ１は、−ＣＨ３であり、
Ｒ２は、−ＣＨ３であり、
Ｒ５は、Ｈである）
の化合物、またはその薬理学的に許容可能な塩を提供する。
【００１４】
別の実施形態において、本発明は、２−チオフェンである式Ｉ
【化４】
0005548205.tif 000005
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｆ、Ｃｌ、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３、−（Ｃ１−Ｃ３アルキル）ＯＨ、−ＯＣＨ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ４、−Ｓ（Ｏ）ＣＨ３、−ＣＦ３、および−Ｓ（Ｃ１−Ｃ３アルキル）からなる群より選択され、
Ｒ２は、Ｈ、Ｆ、およびＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＮＨ（Ｃ０−Ｃ２アルキル）、ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２からなる群より選択され、
Ｒ４は、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、−Ｎ（ＣＨ３）２、および−ＣＦ３からなる群より選択され、
Ｒ５は、ＨおよびＣＨ３からなる群より選択される）
の化合物、またはその薬理学的に許容可能な塩を提供する。
【００１５】
別の実施形態において、本発明は、３−チオフェンである式Ｉ
【化５】
0005548205.tif 000006
（式中、
Ｒ１は、Ｈ、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｆ、Ｃｌ、−ＣＮ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ３、−（Ｃ１−Ｃ３アルキル）ＯＨ、−ＯＣＨ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ４、―Ｓ（Ｏ）ＣＨ３、−ＣＦ３、および−Ｓ（Ｃ１−Ｃ３アルキル）からなる群より選択され、
Ｒ２は、Ｈ、Ｆ、およびＣＨ３からなる群より選択され、
Ｒ３は、ＯＨ、−ＯＣＨ３、−ＮＨ（Ｃ０−Ｃ２アルキル）、ＣＨ３、−Ｎ（ＣＨ３）２からなる群より選択され、
Ｒ４は、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、−Ｎ（ＣＨ３）２、および−ＣＦ３からなる群より選択され、
Ｒ５は、ＨおよびＣＨ３からなる群より選択される）
の化合物、またはその薬理学的に許容可能な塩を提供する。
【００１６】
本発明のさらなる実施形態は、哺乳動物における骨関節炎を治療するための方法を提供し、その方法は、本発明によって特許請求される化合物を哺乳動物に投与する工程を含む。
【００１７】
別の実施形態において、本発明はまた、本発明の化合物、または薬理学的に許容可能な塩、および薬理学的に許容可能な担体を含む医薬組成物に関する。
【００１８】
さらに、本発明は、医薬として使用するための本発明によって特許請求される化合物に関する。さらに、本発明は、骨関節炎の治療に使用するための本発明によって特許請求される化合物、および骨関節炎を治療するための医薬の製造のための本発明によって特許請求される化合物の使用に関する。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
「薬理学的に許容可能な塩」とは、臨床的および／または獣医学的使用に許容可能であるとみなされる本発明の化合物の塩を指す。これらの塩は、当業者に公知の方法によって調製され得る。薬理学的に許容可能な塩およびそれらを調製するための一般的な方法論は、当該分野において周知である。例えば、Ｐ．Ｓｔａｈｌら，ＨＡＮＤＢＯＯＫ  ＯＦ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＡＬＴＳ：ＰＲＯＰＥＲＴＩＥＳ，ＳＥＬＥＣＴＩＯＮ  ＡＮＤ  ＵＳＥ，（ＶＣＨＡ／Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，２００２）；Ｓ．Ｍ．Ｂｅｒｇｅら，「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．６６，Ｎｏ．１，１９９７年１月を参照のこと。本発明の化合物は、好ましくは、種々の経路によって投与される医薬組成物として調製される。用語「薬理学的に許容可能な担体」とは、組成物の他の成分と薬理学的に適合性がある担体、希釈剤、賦形剤および塩を意味する。最も好ましくは、これらの組成物は経口投与用である。薬理学的に許容可能な組成物およびそれらを調製するためのプロセスは当該分野において周知である。例えば、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ：ＴＨＥ  ＳＣＩＥＮＣＥ  ＡＮＤ  ＰＲＡＣＴＩＣＥ  ＯＦ  ＰＨＡＲＭＡＣＹ（Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏら，ｅｄｓ．，１９ｔｈｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，１９９５）を参照のこと。好ましい薬理学的に許容可能な塩としては、塩酸塩、メタンスルホン酸塩、およびメチルベンゼンスルホン酸塩が挙げられる。塩酸塩およびメチルベンゼンスルホン酸塩が特に好ましい薬理学的に許容可能な塩である。
【００２０】
骨関節炎（以下「ＯＡ」）は、関節に影響を及ぼす慢性退行性疾患である。ＯＡの症状は、例えばかなりの疼痛、機能的制限、および影響を受けている関節に関連する身体障害である。
【００２１】
今まで、２つの研究が、ＯＡについての既知のＳＥＲＭである、ラロキシフェンの有用性を調べている。第１の研究は、プロスペクティブ非プラセボ対照観察試験であり、ラロキシフェンの使用が、多数の骨の部位で報告されている疼痛の頻度を顕著に減少させ、鎮痛薬の使用を減少させ、睡眠の質を向上させることを実証した。第２の研究において、ラロキシフェン治療は、治療の１年後の臨床転帰において、低いが有意な改善を生じた（ＷＯＭＡＣスコアにおいて１５％の減少）。両方のラロキシフェンおよび別のＳＥＲＭである、レボルメロキシフェンもまた、軟骨ＩＩ型コラーゲン代謝のマーカーである、ＣＴＸ−ＩＩの尿中レベルを顕著に減少させることを示した。ＯＡの治療に有用であり得る特定の選択的特性を示す新規のＳＥＲＭ化合物が望まれる。
【００２２】
本発明の化合物は、スキームＡに示され、かつ実施例によって記載される方法を用いて調製され得る。調製物および実施例は、ＣｈｅｍＤｒａｗ  Ｕｌｔｒａ  ｖｅｒｓｉｏｎ  １０．０およびＳｙｍｙｘ（登録商標）Ｄｒａｗ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ３．１を用いて命名する。
【００２３】
本明細書中のスキーム、調製物、実施例および手順に使用される用語および略語は、他に指定されない限り、それらの通常の意味を有する。例えば、本明細書中で使用される場合、以下の用語は示される意味を有する：「ＮＢＳ」はＮ−ブロモスクシンイミドであり、「ＢｎＢｒ」は臭化ベンジルであり、「Ｃｓ２ＣＯ３」は炭酸セシウムであり、「ＣｕＯＴｆ」は銅トリフラートであり、「Ｔｆ２Ｏ」はトリフルオロメタンスルホン酸無水物であり、「Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ」は炭素上Ｐｄ（ＯＨ）２であり、「Ｐｄ（ＯＡｃ）２」は酢酸パラジウム（ＩＩ）であり、「ＰＣｙ３」はトリシクロヘキシルホスフィンであり、「ＡＣＮ」はアセトニトリルであり、「ＣｓＦ」はフッ化セシウムであり、「ＢＢｒ３」は三臭化ホウ素であり、「ＤＭＦ」はジメチルホルムアミドであり、「ｎＢｕＬｉ」はｎ−ブチルリチウムであり、「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランであり、「Ｅｔ３ＳｉＨ」はトリエチルシランであり、「ＴＦＡ」はトリフルオロ酢酸であり、「ＰＯＣｌ３」は塩化ホスホリルであり、「ＭｇＳＯ４」は硫酸マグネシウムであり、「ＮＨ４ＯＨ」は水酸化アンモニウムであり、「Ｎａ２ＳＯ４」は硫酸ナトリウムであり、「Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２」は（１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）パラジウム（ＩＩ）クロリドであり、「ｄｐｐｆ」は１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンであり、「ＫＯＡｃ」は酢酸カリウムであり、「ＤＣＭ」はジクロロメタンであり、「ＤＩＰＥＡ」はジイソプロピルエチルアミンであり、「ＴＦＡＡ」は２，２，２−トリフルオロ酢酸無水物であり、「ｎ−ＢｕＬｉ」はｎ−ブチルリチウムであり、「ｍＣＰＢＡ」はメタ−クロロ−過安息香酸であり、「Ｐｄ（ＰＰＨ３）４」はテトラキス（トリフェニルホスフィノ）パラジウムであり、「ＴＥＡ」はトリエチルアミンであり、「ＤＭＡＣ」はＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミドであり、「ＴＢＡＩ」はテトラ−Ｎ−ブチルアンモニウムヨージドであり、「ＤＭＡＰ」は４−ジメチルアミノピリジンであり、「ＮａＣｌＯ２」は亜塩素酸ナトリウムであり、「ＤＤＱ」は２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノベンゾキノンであり、「ＤＭＳＯ」はジメチルスルホンであり、「ＳＣＸ」は強陽イオン交換であり、「ＬＲＭＳ」は低分解能質量分析であり、「ＤＳＣ」は示差走査熱量測定であり、「ＭＰ」は融点である。
【実施例】
【００２４】
【化６】
0005548205.tif 000007
【００２５】
調製物１
６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イルトリフルオロメタンスルホネートの合成
【化７】
0005548205.tif 000008
室温にて、６−メトキシナフタレン−２−オール（２０ｇ，１１４．８ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ，２５０ｍＬ）に加え、続いて、Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ，２１．５ｇ，１２０ｍｍｏｌ）を３０分にわたって加える。４５分後、水（８００ｍＬ）で希釈し、沈殿物を回収し、乾燥させて、２５．５ｇ（８７％）の１−ブロモ−６−メトキシ−ナフタレン−２−オールを得る。
【００２６】
１−ブロモ−６−メトキシ−ナフタレン−２−オール（６６．７ｇ，２６４ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（Ｋ２ＣＯ３，４０．０ｇ，２９０ｍｍｏｌ）および臭化ベンジル（４９．６ｇ，２９０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（８００ｍＬ）に加える。混合物を室温にて１時間攪拌する。水（４００ｍＬ）を加えて、生成物を沈殿させる。沈殿物を回収し、ヘプタン（３×１２５ｍＬ）で濾過ケーキを洗浄し、次いで乾燥させて、２−ベンジルオキシ−１−ブロモ−６−メトキシ−ナフタレン（８３．７ｇ，９８．９ｍｍｏｌ）を得る。
【００２７】
トルエン（２００ｍＬ）、２−ベンジルオキシ−１−ブロモ−６−メトキシ−ナフタレン（３０ｇ，８７．４ｍｍｏｌ）、４−（２−ピペリジン−１−イル−エトキシ）フェノール（２３．２ｇ，１０５ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（３４．４ｇ，１０５ｍｍｏｌ）を混合する。混合物を還流まで加熱する。蒸留によってトルエンの一部（１００ｍＬ）を除去する。酢酸エチル（３９０ｍｇ，４．３７ｍｍｏｌ）および銅トリフラートベンゼン錯体（２．２０ｇ，４．３７ｍｍｏｌ）を反応混合物に加え、５分間攪拌する。蒸留によって溶媒を除去し、得られた残留物を１．５時間、１７４℃まで加熱する。酢酸エチル（２００ｍＬ）とＨＣｌ水溶液（１Ｎ，９０ｍＬ）との混合物に残留物を溶解する。有機溶液を分離し、残留物まで濃縮する。残留物をシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、１−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−６−メトキシ−ナフタレン−１−イルオキシ）−フェノキシ］−エチル｝−ピペリジン（１２．４ｇ，２６．２ｍｍｏｌ）を得る。
【００２８】
１−｛２−［４−（２−ベンジルオキシ−６−メトキシ−ナフタレン−１−イルオキシ）−フェノキシ］−エチル｝−ピペリジン（１２．４ｇ，２５．５ｍｍｏｌ）をメタノール／酢酸エチル混合物（１：１，４９０ｍＬ）に加え、加熱して溶液を形成させる。熱を除去し、ギ酸アンモニウム（４．８３ｇ，７６．６ｍｍｏｌ）および炭素上Ｐｄ（ＯＨ）２（２０％ｗｗ，１．５８ｇ，１／１２ｍｍｏｌ）を加える。５０分間、溶液を還流し、次いで濾過する。濾液を濃縮して、６−メトキシ−１−［４−（２−ピペリジン−１−イル−エトキシ）−フェノキシ］−ナフタレン−２−オール（９．９ｇ，２５．１ｍｍｏｌ）を得る。
【００２９】
ジクロロメタン（２９０ｍＬ）、トリエチルアミン（３．０８ｇ，３０．４ｍｍｏｌ）および６−メトキシ−１−［４−（２−ピペリジン−１−イル−エトキシ）−フェノキシ］−ナフタレン−２−オール（９．２ｇ，２３．４ｇ）を−５０℃まで冷却し、トリフルオロメタンスルホン酸無水物（７．２６ｇ，２５．７ｍｍｏｌ）を加える。得られた混合物を−５０℃で２時間攪拌し、次いで混合物を室温まで加温し、その後、さらに１時間攪拌する。ブライン（１５０ｍＬ）を加え、有機溶液を分離する。有機溶液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、次いで乾燥させ、その後残留物まで濃縮する。残留物をエチルエーテル−ヘキサンで結晶化して、標題化合物（１１．２ｇ，２１．２７ｍｍｏｌ）を得る。ＬＲＭＳ（ｍ／ｚ）：５２６（Ｍ＋１）。
【００３０】
調製物２
１−（２−（４−（６−メトキシ−２−（５−メチルチオフェン−２−イル）ナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン塩酸塩の合成
６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イルトリフルオロメタンスルホネート（３９８．８ｇ，７５８．８ｍｍｏｌ）、５−メチル−２−チオフェンボロン酸（２２４ｇ，１．５８ｍｏｌ）、およびフッ化セシウム（３００ｇ，１．９７ｍｏｌ）をアセトニトリル（１２Ｌ）に懸濁する。得られた懸濁液を、５０℃に加熱しながら、３０分間、ガス注入管を通して脱気する。混合物をトリシクロヘキシルホスフィン（８ｇ，２８．５ｍｍｏｌ）で処理し、１０分間脱気し、次いで酢酸パラジウム（ＩＩ）（４ｇ，１７．８ｍｍｏｌ）で処理し、さらに５分間脱気し、８０℃で一晩攪拌する。トリシクロヘキシルホスフィン（８ｇ，２８．５ｍｍｏｌ）および酢酸パラジウム（ＩＩ）（４ｇ，１７．８ｍｍｏｌ）を加え、さらに８時間、混合物を加熱し、次いで溶液を一晩、ゆっくりと冷却させる。冷却した溶液を大きなガラスフリットを通して濾過し、濾液を濃縮する。水（４Ｌ）および酢酸エチル（８Ｌ）中の残留物および濾過ケーキをスラリーにし、次いで分液漏斗に移し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３００ｇ，３．５７ｍｏｌ）で処理する。１０分間激しく攪拌し、次いで層を分離する。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で一晩乾燥させる。混合物を濾過し、ＨＣｌ（ジオキサン中に４Ｎ、２００ｍＬ、８００ｍｍｏｌ）で濾液を処理する。得られたスラリーを６０分攪拌し、次いで濾過して、標題化合物（３５２ｇ，６９０．０６ｍｍｏｌ）を得る。ＬＲＭＳ（ｍ／ｚ）：４７４（Ｍ＋１−ＨＣｌ）。
【００３１】
実施例１
６−（５−メチルチオフェン−２−イル）−５−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−オール塩酸塩の合成
【化８】
0005548205.tif 000009
１−（２−（４−（６−メトキシ−２−（５−メチルチオフェン−２−イル）ナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン塩酸塩（３４６．９ｇ，６８０．０７ｍｍｏｌ）入りのジクロロメタン溶液（１２Ｌ）を調製し、約３℃まで冷却する。得られた溶液を、２０分にわたってカニューレを通して三臭化ホウ素（ジクロロメタン中に１Ｍ，３０１．４ｍＬ，３．１９ｍｏｌｅ）で処理する。得られた混合物を０℃にて９０分間攪拌する。混合物を砕いた氷に注ぎ、３０分にわたって少量ずつ炭酸水素ナトリウム（１ｋｇ，１１．９０ｍｏｌｅ）で処理する。得られたスラリーを濾過して、暗色の濾過ケーキを得る。濾液を分液漏斗に移す。溶液を分離し、有機溶液を濃縮する。残留物を濾過ケーキと合わせ、クロロホルム（約６Ｌ）中の２０％イソプロパノール中でスラリーにし、２００ｇの炭酸水素ナトリウムを含む水（４Ｌ）とともに３時間攪拌する。層を分離し、有機層をブラインで洗浄し、乾燥（ＭｇＳＯ４）させ、濾過し、蒸発させて、３２４ｇのオフホワイトの固体を得る。シリカゲルクロマトグラフィーによって得られた固体を精製して、２８１ｇの淡黄色の粉末を得る。テトラヒドロフラン（１１Ｌ，１３５．１８ｍｏｌ）中で固体を攪拌し、Ｓ−トリアミン（４４６ｇ，２．０５ｍｏｌ）で処理する。一晩攪拌した後、セライトで濾過し、濾液を白色粉末に濃縮する。テトラヒドロフラン（１１Ｌ，１３５．１８ｍｏｌ）中の粉末を攪拌し、Ｓ−トリアミン（３５７ｇ，１．６４ｍｏｌ）で再度処理する。週末にわたって攪拌した後、セライトで濾過し、濾液を白色粉末に濃縮する。室温にて、得られた白色固体をメタノール（５Ｌ）に懸濁する。別の容器中で、ＨＣｌ（水中に１２Ｎ，８５ｍＬ，１．０４ｍｏｌ）をメタノール（２Ｌ）に一度に加える。この溶液をスラリーに加え、１時間攪拌する。混合物を約２℃まで冷却し、１時間攪拌する。得られた混合物をクリーム色の粉末に濾過する。得られた粉末を８５℃にて真空下で一晩乾燥させて、標題化合物（２５８ｇ，５２０．０ｍｍｏｌ）を得る。ＬＲＭＳ（ｍ／ｚ）：４６０（Ｍ＋１−ＨＣｌ）。ＭＰ（ＤＳＣ）＝２４８．８２℃。
【００３２】
調製物６６
６−（５−メチルチオフェン−２−イル）−５−（４−（２−ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−オールの合成
１−（２−（４−（６−メトキシ−２−（５−メチルチオフェン−２−イル）ナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン塩酸塩（５．１５ｇ，１０．１ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３４０ｍＬ）に溶解する。得られた溶液を０℃まで冷却する。別の容器中で、窒素下で、そのままの三臭化ホウ素（３．９ｍＬ，４０．４ｍｍｏｌ）とジクロロメタン（３６．５ｍｌ）とを合わせる。得られた三臭化ホウ素溶液を冷却した溶液に加える。得られた混合物を０℃にて２．５時間攪拌する。混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でクエンチし、それを室温まで加温する。層を分離し、水層をジクロロメタン中の２０％メタノール（１０ｍＬ×３）で抽出する。合わせた有機溶液を濃縮して、固体を得る。メタノール（２３４ｍＬ）中で固体をスラリーにし、ＨＣｌ（水中に１Ｎ、１０．８ｍＬ）を加える。得られた溶液をＳＣＸ酸性イオン交換カラム上に負荷する。ジクロロメタン中の４０％メタノールでカラムをフラッシュし、次いでジクロロメタン中のメタノール中の４０％の７Ｍアンモニアで所望の物質を溶出する。アンモニア含有溶出液を濃縮して、標題化合物（４．５４ｇ，９．８８ｍｍｏｌ）を得る。ＬＲＭＳ（ｍ／ｚ）：４６０（Ｍ＋１）。
【００３３】
調製物６７
６−（５−メチルチオフェン−２−イル）−５−（４−（２−ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−オールメタンスルホネートの合成
６−（５−メチルチオフェン−２−イル）−５−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−オール（１０５．７ｍｇ，０．２３ｍｍｏｌ）をバイアルに入れる。酢酸エチル（２ｍＬ）およびメタンスルホン酸（１８μＬ）を加える。得られた混合物を、攪拌しながら約６０℃まで加温する。バイアルの底のいくらかの暗褐色のガムを含む得られた橙色の燃焼した溶液に、テトラヒドロフラン（１ｍＬ）を加える。得られた溶液を１５分間、超音波処理する。フラスコで形成するガムから懸濁液を注意深くデカントする。得られた固体を真空濾過によって注意深く回収し、得られたケーキをペンタン（２×２ｍＬ）で洗浄する。得られた固体を４０℃の真空オーブン中で一晩乾燥させて、標題化合物を得る。ＭＰ（ＤＳＣ）＝１６１．９０℃。
【００３４】
調製物６８
６−（５−メチルチオフェン−２−イル）−５−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−オール４−メチルベンゼンスルホネートの合成
６−（５−メチルチオフェン−２−イル）−５−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−オール（１０３．４ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）をバイアルに入れる。酢酸エチル（４ｍＬ）およびｐ−トルエンスルホン酸（５２ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）を加え、約６０℃で攪拌する。テトラヒドロフランを加えて、溶液を透明にし、１５分間、超音波処理する。フラスコで形成するガムから懸濁液を注意深くデカントする。懸濁液を濾過して、非常に明るいピンク色の固体のケーキを得る。ペンタン（２×２ｍＬ）でケーキを洗浄し、４０℃の真空オーブン中で一晩乾燥させて、標題化合物を得る。ＭＰ（ＤＳＣ）＝１３６．２４℃。
【００３５】
【化９】
0005548205.tif 000010
【００３６】
スキームＢにおいて、必要に応じて置換されたチオフェンボロン酸を、式Ｉの化合物に結合して、式２の化合物（式中、Ｒ１ａはＨ、−Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｆ、Ｃｌ、−ＣＮ、および−Ｃ（Ｏ）Ｒ３からなる群より選択され、Ｒ２ａはＨ、ＦおよびＣＨ３からなる群より選択される）を形成させる。好ましくは、Ｒ１ａはＨ、−Ｃｌ、−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３、ＣＨ３、ＣＮであり、Ｒ２ａはＨまたはＣＨ３である。
【００３７】
調製物３
１−（２−（４−（６−メトキシ−２−（チオフェン−２−イル）ナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン
【化１０】
0005548205.tif 000011
窒素下で丸底フラスコに、６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イルトリフルオロメタンスルホネート（６．０ｇ，１１．４ｍｍｏｌ）、チオフェン−２−ボロン酸（４，４ｇ，３４．３ｍｍｏｌ）、トリシクロヘキシルホスフィン（１．１ｇ，４．０ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（０．５１ｇ，２．３ｍｍｏｌ）、フッ化セシウム（１５．６ｇ，１０２．８ｍｍｏｌ）およびアセトニトリル（１５０ｍＬ，３０分間窒素で脱気）を混合する。得られた混合物を８０℃まで加熱し、４０分間攪拌する。固体を濾過し、アセトニトリルで洗浄する。濾液と洗浄液を合わせ、真空中で濃縮する。残留物をメタノールに溶解し、ＳＣＸ酸性イオン交換カラム上に負荷する。カラムをメタノールでフラッシュし、次いでメタノール中の２Ｍアンモニアで溶出する。真空中でアンモニア含有溶出液を濃縮して、淡褐色の固体を得る。固体をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（３．８８ｇ，８．４ｍｍｏｌ）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）δ１．２９（ｄｄ，Ｊ＝５．９，１１．２Ｈｚ，２Ｈ），１．４３−１．３７（ｍ，５Ｈ），２．３２（ｓ，４Ｈ），２．５２（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），３．８７（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，２Ｈ），６．６２−６．６０（ｍ，２Ｈ），６．７６−６．７４（ｍ，２Ｈ），７．０９−７．０３（ｍ，２Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４８−７．４７（ｍ，１Ｈ），７．６２−７．５９（ｍ，２Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．９６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）。
【００３８】
表Ｉの調製物は、チオフェン−２−ボロン酸の代わりに記載される試薬（列３）を用いて調製物３に記載されるように実質的に調製できる。
【００３９】
【表１−１】
0005548205.tif 000012
【表１−２】
0005548205.tif 000013
【表１−３】
0005548205.tif 000014
【００４０】
【化１１】
0005548205.tif 000015
【００４１】
スキームＣにおいて、式３の化合物は、まず有機リチエート（ｏｒｇａｎｏ−ｌｉｔｈｉａｔｅ）に変換され、次いで求電子試薬（［Ｅ＋］）に加えられて、式４の化合物（式中、Ｅは、−Ｆ、−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−Ｓ−ＣＨ３、−Ｓ−ＣＨ（ＣＨ３）２、−Ｓ−ＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＣＨ３、−Ｃ（ＣＨ３）２−ＯＨ、または−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２である）を形成する。
【００４２】
調製物１３
１−（２−（４−（２−（５−フルオロチオフェン−２−イル）−６−メトキシナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン
【化１２】
0005548205.tif 000016
アルゴン下で、１−（２−（４−（６−メトキシ−２−（チオフェン−２−イル）ナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン（１５３ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）およびテトラヒドロフラン（３．３ｍＬ）をスクリューキャップバイアルに加える。得られた溶液を−７８℃まで冷却する。ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中に１．６Ｍ、２３０μＬ、０．４ｍｍｏｌ）を滴下する。得られた溶液を０℃まで加温し、３０分間攪拌する。Ｎ−フルオロベンゼンスルホンイミド（２１０．０ｍｇ，０．６ｍｍｏｌ）入りのテトラヒドロフラン溶液（５００μＬ）を加える。得られた混合物を室温まで加温し、２時間攪拌する。１ＭのＨＣｌを加え、エーテルで希釈し、ＳＣＸ酸性イオン交換カラムに通す。カラムをメタノールでフラッシュし、次いでメタノール中の２Ｍアンモニアで所望の物質を溶出する。アンモニア含有溶出液を濃縮して、黄色の固体を得る。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー上で黄色の固体を精製して、標題化合物（５９．０ｍｇ，０．１ｍｍｏｌ）を得る：マススペクトル（ｍ／ｚ）：４７８（Ｍ＋１）。
【００４３】
表ＩＩの調製物は、Ｎ−フルオロベンゼンスルホンイミドの代わりに記載される試薬（列３）を用いて調製物１３に記載されるように実質的に調製できる。
【００４４】
【表２−１】
0005548205.tif 000017
【表２−２】
0005548205.tif 000018
【００４５】
【化１３】
0005548205.tif 000019
【００４６】
スキームＤにおいて、式５の化合物は、２当量のペルオキシ一硫酸カリウム硫酸塩で酸化されて、式６の化合物（式中、Ｒ４ａは、−ＣＨ３、−ＣＨ２ＣＨ３、または−ＣＨ（ＣＨ３）２である）を形成する。
【００４７】
調製物２２
１−（２−（４−（２−（５−（エチルスルホニル）チオフェン−２−イル）−６−メトキシナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン塩酸塩
【化１４】
0005548205.tif 000020
窒素下で、１−（２−（４−（２−（５−（エチルチオ）チオフェン−２−イル）−６−メトキシナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン（２２６ｍｇ，０．４３ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（８．７ｍＬ）およびメタノール（８．７ｍＬ）を丸底フラスコに加える。得られた溶液を０℃まで冷却し、ペルオキシ一硫酸カリウム硫酸塩（５３５ｍｇ，０．８７ｍｍｏｌ）入りの水溶液（４．５ｍＬ）を加える。得られた混合物を０℃で３０分間攪拌する。混合物を室温まで加温し、１時間攪拌する。混合物をＳＣＸ酸性イオン交換カラム上に負荷する。メタノールとジクロロメタンの１：１混合物でカラムをフラッシュし、次いでメタノール中の２Ｍアンモニアとジクロロメタンの１：１混合物で溶出する。真空中でアンモニア含有溶出液を濃縮して、オフホワイトの泡状物を得る。泡状物をジクロロメタンに溶解し、ＨＣｌ（エーテル中に１Ｍ、９００μＬ）で処理する。真空中で、得られた混合物を濃縮して、標題化合物（１４２ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）を得る：マススペクトル（ｍ／ｚ）：５５２（Ｍ＋１−ＨＣｌ）。
【００４８】
表ＩＩＩの調製物は、１−（２−（４−（２−（５−（エチルチオ）チオフェン−２−イル）−６−メトキシナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジンの代わりに記載される試薬（列３）を用いて調製物２２に記載されるように実質的に調製できる。
【００４９】
【表３】
0005548205.tif 000021
【００５０】
【化１５】
0005548205.tif 000022
【００５１】
スキームＥにおいて、式７の化合物は、１当量のペルオキシ一硫酸カリウム硫酸塩で酸化されて、式８の化合物を形成する。
【００５２】
調製物２５
１−（２−（４−（６−メトキシ−２−（５−（メチルスルフィニル）チオフェン−２−イル）ナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン
【化１６】
0005548205.tif 000023
窒素下で、１−（２−（４−（６−メトキシ−２−（５−（メチルチオ）チオフェン−２−イル）ナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン（８４ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（３．３ｍＬ）およびメタノール（３．３ｍＬ）を丸底フラスコに加える。得られた溶液を０℃まで冷却し、ペルオキシ一硫酸カリウム硫酸塩（１０２ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）入りの水溶液（１．７ｍＬ）に加える。反応混合物を０℃で３０分間攪拌する。混合物をＳＣＸ酸性イオン交換カラム上に負荷する。１：１のメタノール／ジクロロメタンでカラムをフラッシュし、１：１のメタノール中の２Ｍアンモニア／ジクロロメタンで溶出する。真空中で、アンモニア含有溶出液を濃縮して、標題化合物（８７ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）を得る：マススペクトル（ｍ／ｚ）：５２２（Ｍ＋１）。
【００５３】
【化１７】
0005548205.tif 000024
【００５４】
スキームＦにおいて、式９の化合物は式１０の化合物まで還元される。
【００５５】
調製物２６
１−（２−（４−（２−（５−イソプロピルチオフェン−２−イル）−６−メトキシナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン
【化１８】
0005548205.tif 000025
アルゴン下で、２−（５−（６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−２−イル）プロパン−２−オール（８４ｍｇ；０．１６ｍｍｏｌ）、トリエチルシラン（１．７ｍＬ）およびジクロロメタン（０．８５ｍＬ）をフラスコに加える。トリフルオロ酢酸（０．８１ｍＬ）を加え、得られた混合物を４５分間攪拌する。混合物をＳＣＸ酸性イオン交換カラム上に負荷する。１：２のメタノール／ジクロロメタンでカラムをフラッシュし、１：２のメタノール中の２Ｍアンモニア／ジクロロメタンで溶出する。真空中で、アンモニア含有溶出液を濃縮して、標題化合物（７３．１ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）を得る：マススペクトル（ｍ／ｚ）：５０２（Ｍ＋１）。
【００５６】
【化１９】
0005548205.tif 000026
【００５７】
スキームＧにおいて、式１１の化合物は、まず酸塩化物に変換され、次いで水酸化アンモニウムに供され、式１２の化合物のアミドを形成する。次いで式１２の化合物を脱水し、次いで塩酸塩を形成させて、式１３の化合物を得る。
【００５８】
調製物２７
５−（６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−２−カルボキシアミド
【化２０】
0005548205.tif 000027
窒素下で、５−（６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−２−カルボン酸（８６ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（２．４ｍＬ）を丸底フラスコに加える。懸濁液を０℃まで冷却し、塩化オキサリル（２２．２μＬ，０．３ｍｍｏｌ）およびジメチルホルムアミド（３０．０μＬ）を連続して加える。得られた混合物を室温まで加温し、３０分間攪拌する。真空中で濃縮して、黄色の固体を得る。テトラヒドロフラン（２．５ｍＬ）を固体に加える。得られた懸濁液に、アンモニア（水中に１２．１Ｍ、３ｍＬ、３６．４ｍｍｏｌ）入りのテトラヒドロフラン溶液（５．７ｍＬ）を加える。得られた溶液を３０分間攪拌し、次いでエーテルで希釈する。層を分離し、有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮して、黄褐色の固体を得る。得られた固体をメタノールに溶解し、ＳＣＸ酸性イオン交換カラム上に負荷する。メタノールでカラムをフラッシュし、次いでメタノール中の２Ｍアンモニアで所望の物質を溶出する。アンモニア含有溶出液を濃縮して、標題化合物（７９ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）δ１．３２−１．２７（ｍ，２Ｈ），１．４４−１．３８（ｍ，４Ｈ），２．３３（ｓ，４Ｈ），２．５３（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），３．２７（ｓ，２Ｈ），３．８３（ｓ，３Ｈ），３．８９（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），６．６６−６．６１（ｍ，３Ｈ），６．７９−６．７６（ｍ，２Ｈ），７．０９（ｄｄ，Ｊ＝２．６，９．２Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝２．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６５−７．６１（ｍ，３Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）。
【００５９】
調製物２８
５−（６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−２−カルボニトリル塩酸塩
【化２１】
0005548205.tif 000028
窒素下で、５−（６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−２−カルボキシアミド（７９ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）および塩化ホスホリル（１３ｍＬ，１３９．９ｍｍｏｌ）を丸底フラスコに加える。得られた混合物を１００℃まで加熱し、１５分間攪拌する。混合物を室温まで冷却し、真空中で濃縮して、黄色の残留物を得る。メタノールで得られた残留物を注意深くクエンチし、ＳＣＸ酸性イオン交換カラム上に負荷する。メタノールでカラムをフラッシュし、次いでメタノール中の２Ｍアンモニアで所望の物質を溶出する。真空中で、アンモニア含有溶出液を濃縮して、淡い黄色の固体を得る。得られた固体をジクロロメタンに溶解し、ＨＣｌ（エーテル中に１Ｍ、５ｍＬ）で処理する。真空中で濃縮して、標題化合物（８１．５ｍｇ，０．１６ｍｍｏｌ）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（ｄ６−ＤＭＳＯ）δ０．８２−０．７３（ｍ，１Ｈ），１．３３−１．２３（ｍ，４Ｈ），２．８８−２．８０（ｍ，２Ｈ），３．３６−３．３１（ｍ，５Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），４．２３−４．１９（ｍ，２Ｈ），６．７３−６．６３（ｍ，２Ｈ），６．８７−６．７７（ｍ，２Ｈ），７．１５−７．０９（ｍ，１Ｈ），７．４１−７．３６（ｍ，１Ｈ），７．６２−７．５４（ｍ，１Ｈ），７．８７−７．７７（ｍ，３Ｈ），８．０９−８．０５（ｍ，１Ｈ），１０．５８−１０．４５（ｍ，１Ｈ）。
【００６０】
【化２２】
0005548205.tif 000029
【００６１】
式１４の化合物を脱保護して、式Ｉの化合物の塩酸塩を形成する。
【００６２】
実施例５
５−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）−６−（チオフェン−２−イル）ナフタレン−２−オール塩酸塩
【化２３】
0005548205.tif 000030
１−（２−（４−（６−メトキシ−２−（チオフェン−２−イル）ナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン（１００ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）をジクロロメタンに溶解し、ＨＣｌ（エーテル中に１Ｍ、２２０μＬ、０．２２ｍｍｏｌ）で処理する。真空中で濃縮して、黄色の固体を得て、ジクロメタン（７．３ｍＬ）を加える。得られた溶液を０℃まで冷却し、三臭化ホウ素（ジクロロメタン中に１Ｍ、８７０μＬ、０．８７ｍｍｏｌ）を加える。得られた混合物を０℃で２．５時間攪拌する。混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でクエンチし、室温まで加温する。層を分離し、水層をジクロロメタン中の２０％メタノール（１０ｍＬ×３）で抽出する。合わせた有機層を乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濾過し、真空中で濃縮し、黄色の残留物を得る。シリカゲルフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製して、オフホワイトの泡状物を得る。ＡＣＮに泡状物を懸濁し、ＨＣＬ（水中に５Ｍ、１ｍｌ）を加える。得られた溶液を凍結し、凍結乾燥させて、標題化合物（５０．５ｍｇ，０．１２ｍｍｏｌ）を得る：マススペクトル（ｍ／ｚ）：４４６（Ｍ＋１−ＨＣｌ）。
【００６３】
表ＩＶの実施例は、実施例５に記載される脱保護処理によって実質的に調製できる。
【００６４】
【表４−１】
0005548205.tif 000031
【表４−２】
0005548205.tif 000032
【表４−３】
0005548205.tif 000033
【表４−４】
0005548205.tif 000034
【表４−５】
0005548205.tif 000035
【００６５】
【化２４】
0005548205.tif 000036
【００６６】
調製物２９
４，４，５，５−テトラメチル−２−（４−メチルチオフェン−３−イル）−１，３，２−ジオキサボロラン
【化２５】
0005548205.tif 000037
３−ブロモ−４−メチルチオフェン（０．８８５ｇ，５．００ｍｍｏｌ）、（１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）パラジウム（ＩＩ）クロリド（４０８ｍｇ，４９９．８２μｍｏｌ）、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（２７７．０９ｍｇ，４９９．８２μｍｏｌ）、ビス（ピナコラト）ジボロン（２．５４ｇ，１０ｍｍｏｌ）、酢酸カリウム（１．４７ｇ，１４．９９ｍｍｏｌ）および１，４−ジオキサン（５０ｍＬ）を丸底フラスコに加える。アルゴンで反応容器をパージする。混合物を８５℃で１６時間攪拌する。混合物を室温で冷却する。混合物を濾過し、１，４−ジオキサンで固体を洗浄する。濾液を濃縮する。得られた残留物を、シリカ上のフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（０．６２ｇ，２．５ｍｍｏｌ）を得る。
【００６７】
表Ｖの調製物は、３−ブロモ−４−メチルチオフェンの代わりに記載される試薬（列３）を用いて調製物２９に記載されるように実質的に調製できる。
【００６８】
【表５】
0005548205.tif 000038
【００６９】
【化２６】
0005548205.tif 000039
【００７０】
調製物３１
４−（６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−３−カルボニトリル
【化２７】
0005548205.tif 000040
アセトニトリル（１０ｍＬ）、６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）−フェノキシ）ナフタレン−２−イルトリフルオロメタンスルホネート（１５０ｍｇ，２８５．４μｍｏｌ）、４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）チオフェン−３−カルボニトリル（１３４．２ｍｇ，５７０．８μｍｏｌ）、トリシクロヘキシルホスフィン（２４．０ｍｇ，８５．６μｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（１２．８ｍｇ，５７．１μｍｏｌ）およびフッ化セシウム（３９０．２ｍｇ，２．６ｍｍｏｌ）を丸底フラスコに加える。反応容器をアルゴンで３回パージする。混合物を８０℃で１．５時間攪拌する。混合物を濾過し、固体をアセトニトリルで洗浄する。濾液を濃縮する。得られた残留物をＤＯＷＥＸイオン交換樹脂により精製して、標題化合物（８７ｍｇ，１７９．８μｍｏｌ）を得る。
【００７１】
表ＶＩの調製物は、４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）チオフェン−３−カルボニトリルの代わりに記載される試薬（列３）を用いて調製物３１に記載されるように実質的に調製できる。
【００７２】
【表６】
0005548205.tif 000041
【００７３】
調製物３５
４−（６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−３−カルボニトリル塩酸塩
【化２８】
0005548205.tif 000042
塩化水素入りのエーテル溶液（１Ｍ，１８０μＬ，１８０．０μｍｏｌ）を、調製した４−（６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−３−カルボニトリル（８７ｍｇ，１７９．５μｍｏｌ）入りのジクロロメタン溶液（２ｍＬ）に加える。混合物を１０分間攪拌する。混合物を濃縮して、標題化合物（９５ｍｇ，１７９μｍｏｌ）を得る。
【００７４】
表ＶＩＩの調製物は、４−（６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−３−カルボニトリルの代わりに記載される試薬（列３）を用いて調製物３５に記載されるように実質的に調製できる。
【００７５】
【表７】
0005548205.tif 000043
【００７６】
調製物３９
４−（６−ヒドロキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−３−カルボニトリル
【化２９】
0005548205.tif 000044
ジクロロメタン（４Ｍ，１８２μＬ，７２８．０μｍｏｌ）中の三臭化ホウ素を、４−（６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−３−カルボニトリル塩酸塩（９５ｍｇ，１８２．３μｍｏｌ）およびジクロロメタン（４ｍＬ）の溶液に０℃で攪拌しながらゆっくりと加える。混合物を０℃で１．５時間攪拌する。混合物を炭酸水素ナトリウム水溶液でクエンチする。混合物を２０％メタノール／ジクロロメタンで３回抽出する。合わせた有機層を水で洗浄する。得られた溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、乾燥するまで濃縮する。シリカ上のフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製して、標題化合物（５２ｍｇ，１１１．２μｍｏｌ）を得る。
【００７７】
表ＶＩＩＩの調製物は、４−（６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−３−カルボニトリル塩酸塩の代わりに記載される試薬（列３）を用いて調製物３９に記載されるように実質的に調製できる。
【００７８】
【表８】
0005548205.tif 000045
【００７９】
実施例１４の代替合成
４−（６−ヒドロキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−３−カルボニトリル塩酸塩
【化３０】
0005548205.tif 000046
塩化水素入りのエーテル溶液（１Ｍ，１２２μＬ，１２２．０μｍｏｌ）を、４−（６−ヒドロキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−３−カルボニトリル（５２ｍｇ，１１０．５μｍｏｌ）およびジクロロメタン（４ｍＬ）の溶液に加える。混合物を５分、超音波処理し、次いで濃縮して、標題化合物（５７ｍｇ，１１０．５μｍｏｌ）を得る。ＭＳ（ｍ／ｚ）：４７１（Ｍ＋１−ＨＣｌ）。
【００８０】
表ＩＸの実施例は、４−（６−ヒドロキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−３−カルボニトリルの代わりに記載される試薬（列３）を用いて実施例１４の代替合成に記載されるように実質的に調製できる。
【００８１】
【表９】
0005548205.tif 000047
【００８２】
調製物４３
２−ブロモ−４，５−ジメチルチオフェン
【化３１】
0005548205.tif 000048
Ｎ−ブロモスクシンイミド（０．９６ｍｇ，５．３９ｍｍｏｌ）を、２，３−ジメチルチオフェン（０．５５ｇ，４．９０ｍｍｏｌ）入りのジクロロメタン溶液（２０ｍＬ）に加える。反応物を一晩攪拌する。混合物を濃縮する。シリカ上のフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製して、標題化合物（７０４ｍｇ，３．６８ｍｍｏｌ）を得る。
【００８３】
調製物４４
２−ブロモ−３，５−ジメチルチオフェン
調製物４４は、試薬２，４−ジメチルチオフェンを用いて調製物４３に記載されるように実質的に調製できる。
【００８４】
【化３２】
0005548205.tif 000049
【００８５】
調製物４５
２−ブロモチオフェン−３−カルボニルクロリド
【化３３】
0005548205.tif 000050
塩化チオニル（０．３５ｍＬ，４．８０ｍｍｏｌ）を、２−ブロモチオフェン−３−カルボン酸（５００ｍｇ，２．４１ｍｍｏｌ）およびトルエン（２０ｍＬ）の溶液に攪拌しながら加える。反応容器を窒素でパージする。混合物を還流まで加熱し、３時間攪拌する。混合物を濃縮して、標題化合物（５４０ｍｇ，２．４１ｍｍｏｌ）を得る。化合物をさらに精製せずに次の工程に使用する。
【００８６】
調製物４６
５−ブロモチオフェン−３−カルボニルクロリド
調製物４６は、試薬５−ブロモチオフェン−３−カルボン酸を用いて調製物４５に記載されるように実質的に調製できる。
【００８７】
調製物４７
２−ブロモチオフェン−３−カルボキシアミド
【化３４】
0005548205.tif 000051
２−ブロモチオフェン−３−カルボニルクロリド（５４０ｍｇ，２．３９ｍｍｏｌ）を、アンモニア水溶液（２５％，３ｍＬ，１７．４４ｍｍｏｌ）に攪拌しながら加える。混合物を３０分間攪拌する。混合物を濃縮する。得られた沈殿物を濾過により回収し、固体を水で洗浄する。真空下で白色沈殿物を乾燥させて、標題化合物（４５０ｍｇ，２．１７ｍｍｏｌ）を得る。
【００８８】
調製物４８
５−ブロモチオフェン−３−カルボキシアミド
調製物４８は、試薬５−ブロモチオフェン−３−カルボニルクロリドを用いて調製物４７に記載されるように実質的に調製できる。
【００８９】
調製物４９
２−ブロモチオフェン−３−カルボニトリル
【化３５】
0005548205.tif 000052
シリンジにより、２，２，２−トリフルオロ酢酸無水物（０．１７ｍＬ，１．２１ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の２−ブロモチオフェン−３−カルボキシアミド（２００ｍｇ，９７０．５８μｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．３４ｍＬ，２．４４ｍｍｏｌ）の溶液に、５℃にて攪拌しながら加える。冷却槽を取り除き、混合物を室温まで加温し、１６時間攪拌する。混合物を濃縮する。水およびジクロロメタンを加える。混合物をジクロロメタンで３回抽出する。合わせた抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、乾燥するまで濃縮する。シリカ上のフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製して、標題化合物（１１３ｍｇ，６０１．７６μｍｏｌ）を得る。
【００９０】
調製物５０
５−ブロモチオフェン−３−カルボニトリル
調製物５０は、試薬５−ブロモチオフェン−３−カルボキシアミドを用いて調製物４９に記載されるように実質的に調製できる。
【００９１】
【化３６】
0005548205.tif 000053
【００９２】
調製物５１
６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イルトリフルオロメタンスルホネート塩酸塩
塩化水素入りのエーテル溶液（１．０Ｍ，５．５ｍＬ，５．５０ｍｍｏｌ）を、６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イルトリフルオロメタンスルホネート（２．６２ｇ，４．９９ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（２０ｍＬ）の溶液に加える。混合物を１０分間攪拌し、次いで濃縮して、標題化合物（２．８ｇ，４．９９ｍｍｏｌ）を得る。
【００９３】
調製物５２
６−ヒドロキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イルトリフルオロメタンスルホネート
三臭化ホウ素入りのジクロロメタン溶液（４Ｍ，５ｍＬ，２０．００ｍｍｏｌ）を、６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イルトリフルオロメタンスルホネート塩酸塩（２．８ｇ，４．９８ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（１００ｍｌ）の溶液に加える。反応物を２時間攪拌し、次いで炭酸水素ナトリウム水溶液でクエンチする。混合物を３回、ジクロロメタンで抽出する。抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、標題化合物（２．４ｇ，４．６８ｍｍｏｌ）を得る。
【００９４】
調製物５３
５−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチルスルホニルオキシ）ナフタレン−２−イルアセテート
塩化アセチル（０．６７ｍＬ，９．４１ｍｍｏｌ）を、６−ヒドロキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イルトリフルオロメタンスルホネート（２．４ｇ，４．６９ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（２．４５ｍＬ，１４．０５ｍｍｏｌ）の溶液に加える。混合物を１時間攪拌し、次いで炭酸水素ナトリウム水溶液でクエンチする。混合物を３回、ジクロロメタンで抽出する。抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、標題化合物（２．３３ｇ，４．２２ｍｍｏｌ）を得る。
【００９５】
調製物５４
６−ヒドロキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イルボロン酸塩酸塩
【化３７】
0005548205.tif 000054
ビス（ネオペンチルグリコラト）ジボロン（４．２ｇ，１８．５９ｍｍｏｌ）、５−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）−６−（トリフルオロメチルスルホニルオキシ）ナフタレン−２−イルアセテート（２．３３ｇ，４．２１ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（０．１９９ｇ，８８６．３８μｍｏｌ）、フッ化セシウム（５．２１ｇ，３４．３０ｍｍｏｌ）、トリシクロヘキシルホスフィン（０．４１ｇ，１．４０ｍｍｏｌ）およびアセトニトリル（５０ｍＬ）を丸底フラスコに加える。混合物を窒素雰囲気下で１時間攪拌しながら還流する。混合物を冷却し、濾過し、固体をアセトニトリルで洗浄する。合わせた濾液を濃縮し、洗浄する。得られた残留物をジエチルエーテル（４０ｍＬ）に懸濁し、３０分間、超音波処理する。沈殿物を濾過により除去し、濾液を濃縮して、粗中間体を得る。ジエタノールアミン（４０５．２５μＬ，４．２１ｍｍｏｌ）を、粗中間体入りのエーテル溶液（５０ｍＬ）に加える。混合物を１時間攪拌する。有機層をデカントし、残っている残留物をメタノール（２０ｍＬ）および１０ｍＬの水に溶解する。濃ＨＣｌ（２ｍＬ，２４ｍｍｏｌ）を加え、得られた混合物を１６時間攪拌する。混合物を濃縮して、ＭｅＯＨを除去する。水性の残留物をジクロロメタンで３回抽出する。抽出物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、乾燥するまで濃縮する。シリカ上のフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製して、標題化合物（０．６ｇ，１．４７ｍｍｏｌ）を得る。
【００９６】
調製物５５
３−（６−ヒドロキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−２−カルボニトリル
【化３８】
0005548205.tif 000055
３−ブロモチオフェン−２−カルボニトリル（９３ｍｇ，４９４．６μｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（１２ｍｇ，５３．４μｍｏｌ）、トリシクロヘキシルホスフィン（２１ｍｇ，７４．９μｍｏｌ）、フッ化セシウム（３３６ｍｇ，２．２ｍｍｏｌ）を、エタノール（２ｍＬ）およびアセトニトリル（８ｍＬ）中の６−ヒドロキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イルボロン酸塩酸塩（１００ｍｇ，２４５，５μｍｏｌ）の溶液に加える。反応容器を窒素で３回パージする。混合物を８５℃にて２時間攪拌する。混合物を冷却し、濾過する。得られた固体をアセトニトリルで洗浄する。合わせた濾液を濃縮し、洗浄する。ＤＯＷＥＸイオン交換樹脂により残留物を精製して、粗生成物を得る。Ｐｒｅｐ−ＨＰＬＣにより粗生成物を精製して、標題化合物（１２ｍｇ，２４．５５μｍｏｌ）を得る。
【００９７】
表Ｘの調製物は、３−ブロモチオフェン−２−カルボニトリルの代わりに記載される試薬（列３）を用いて調製物５５に記載されるように実質的に調製できる。
【００９８】
【表１０】
0005548205.tif 000056
【００９９】
実施例２６
３−（６−ヒドロキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−２−カルボニトリル塩酸塩
【化３９】
0005548205.tif 000057
塩化水素入りのエーテル溶液（１Ｍ，２８μＬ，２８．０μｍｏｌ）を、３−（６−ヒドロキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−２−カルボニトリル（１２ｍｇ，２４．５μｍｏｌ）およびジクロロメタン（４ｍＬ）の溶液に加える。混合物を５分間、超音波処理し、次いで濃縮して、標題化合物（１３ｍｇ，２４．５μｍｏｌ）を得る。マススペクトル（ｍ／ｚ）：４７１（Ｍ＋１−ＨＣｌ）。
【０１００】
表ＸＩの実施例は、３−（６−ヒドロキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−イル）チオフェン−２−カルボニトリルの代わりに記載される試薬（列３）を用いて実施例２６に記載されるように実質的に調製できる。
【０１０１】
【表１１−１】
0005548205.tif 000058
【表１１−２】
0005548205.tif 000059
【表１１−３】
0005548205.tif 000060
【０１０２】
【化４０】
0005548205.tif 000061
【０１０３】
調製物６４
トリメチル−（５−メチルスルホニル−３−チエニル）スタンナン
−７８℃にて、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中１．６Ｍ，３９ｍＬ，６２ｍｍｏｌ）を、２，４−ジブロモチオフェン（７ｍＬ，６２ｍｍｏｌ）入りのエーテル溶液（２４０ｍＬ）に加える。０．５時間後、ｎ−ブチルリチウム（ヘキサン中１．６Ｍ，１５．６ｍＬ，２５ｍｍｏｌ）を加え、反応物を−７８℃にてさらに１５分間攪拌する。メチルジスルファニルメタン（６ｍＬ，６８ｍｍｏｌ）を加え、室温まで加温しながら反応物を攪拌する。反応物を、氷冷した飽和塩化アンモニウム水溶液の混合物に注ぐ。層を分離し、水層をエーテルで抽出する。有機層を合わせ、飽和塩化アンモニウム水溶液、水およびブラインで洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥させる。得られた溶液を濃縮して、４−ブロモ−２−メチルスルファニル−チオフェン（９．３ｇ，４４．４ｍｍｏｌ）を得る。
【０１０４】
４−ブロモ−２−メチルスルファニル−チオフェン（９．３ｇ，４４．４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２３０ｍＬ）に溶解し、０℃まで冷却する。メタ−クロロ−過安息香酸（２８ｇ，１６２ｍｍｏｌ）を、５分間隔で３回に分けて加える。得られた混合物を、室温まで加温しながら攪拌する。反応物をエーテルで希釈し、５％硫酸ナトリウム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液およびブラインで洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥させる。得られた溶液を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中に１０〜２０％酢酸エチル）により残留物を精製して、４−ブロモ−２−メチルスルホニル−チオフェン（５ｇ，２０．７３ｍｍｏｌ）を得る。
【０１０５】
４−ブロモ−２−メチルスルホニル−チオフェン（０．６ｇ，２．５ｍｍｏｌ）をトルエン（１８ｍＬ）に溶解する。ヘキサメチルジチン（１．８ｍＬ，３．８ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィノ）パラジウム（０）（０．０５ｇ，０．０４ｍｍｏｌ）を加える。得られた混合物を８５℃まで加熱し、４時間攪拌する。混合物を室温まで冷却し、ブラインで分配する。有機溶液を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（ヘキサン中に０〜１０％酢酸エチル）により精製して、トリメチル−（５−メチルスルホニル−３−チエニル）スタンナン（０．５ｇ，１．５３ｍｍｏｌ）を得る。
【０１０６】
調製物６５
１−［２−［４−［［６−メトキシ−２−（５−メチルスルホニル−３−チエニル）−１−ナフチル］オキシ］フェノキシ］エチル］ピペリジン
【化４１】
0005548205.tif 000062
アセトニトリル（１５ｍＬ）中に酢酸パラジウム（ＩＩ）（０．０４３ｇ，０．１９ｍｍｏｌ）およびトリシクロヘキシルホスフィン（０．０８１ｇ，０．２９ｍｍｏｌ）を合わせ、１０分間、超音波処理する。［６−メトキシ−１−［４−［２−（１−ピペリジル）エトキシ］フェノキシ］−２−ナフチル］トリフルオロメタンスルホネート（０．５ｇ，０．９５ｍｍｏｌ）、トリメチル−（５−メチルスルホニル−３−チエニル）スタンナン（０．９４ｇ，２．９ｍｍｏｌ）およびパラジウム混合物を、アセトニトリル（４０ｍＬ）中のフッ化セシウム（０．５ｇ，３．３ｍｍｏｌ）の懸濁液に加える。得られた混合物を９０℃まで加熱し、１８時間攪拌する。混合物を室温まで冷却し、濃縮する。得られた残留物を、酢酸エチルと飽和炭酸水素ナトリウム水溶液との間に分配する。層を分離し、有機層を飽和塩化アンモニウム水溶液およびブラインで洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥させる。得られた溶液を濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン中に０〜５％メタノール）により精製して、標題化合物（０．３ｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を得る。
【０１０７】
実施例３５
６−（５−メチルスルホニル−３−チエニル）−５−［４−［２−（１−ピペリジル）エトキシ］フェノキシ］ナフタレン−２−オールトリフルオロアセテート
【化４２】
0005548205.tif 000063
１−［２−［４−［［６−メトキシ−２−（５−メチルスルホニル−３−チエニル）−１−ナフチル］オキシ］フェノキシ］エチル］ピペリジン（０．３ｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を酢酸エチルに溶解する。エーテル（１０ｍＬ）を加え、０℃まで冷却する。塩酸（エーテル中に２Ｍ，０．４ｍＬ，０．８４ｍｍｏｌ）を加え、得られた沈殿物を濾過により回収する。固体を酢酸エチルに溶解し、濃縮して、１−［２−［４−［［６−メトキシ−２−（５−メチルスルホニル−３−チエニル）−１−ナフチル］オキシ］フェノキシ］エチル］ピペリジン塩酸塩（０．３５ｇ，０．５５ｍｍｏｌ）を得る。
【０１０８】
１−［２−［４−［［６−メトキシ−２−（５−メチルスルホニル−３−チエニル）−１−ナフチル］オキシ］フェノキシ］エチル］ピペリジン塩酸塩（０．３５ｇ，０．５５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１５ｍＬ）に溶解し、０℃まで冷却する。三臭化ホウ素（０．３ｍＬ，３．１ｍｍｏｌ）を得られた冷却溶液に加える。得られた混合物を０℃にて１時間攪拌する。反応物を酢酸エチルと飽和炭酸水素ナトリウム水溶液との間に分配する。層を分離し、水層を酢酸エチル（×２）で抽出する。合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させる。得られた溶液を合わせ、高圧液体クロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（２４ｍｇ，０．０４ｍｍｏｌ）を得る。マススペクトル（ｍ／ｚ）：５２４（ｍ＋１−ＴＦＡ）。
【０１０９】
【化４３】
0005548205.tif 000064
【０１１０】
スキームＮにおいて、トリフルオロメタンスルホネート化合物をボロン酸化合物に変換する。６−ボロン酸−５−［４−（２−ピペリジン−１−イル−エトキシ）−フェノキシ］−ナフタレン−２−オール塩酸塩は、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２００５０７３２０４号の手順に従って調製できる。ＷＯ２００５０７３２０４号に記載されるプロセスを実質的に用いて試薬３−ブロモ−２−クロロ−チオフェンまたは２−ブロモ−５−メチル−チオフェンのいずれかを用いてボロン酸化合物を置換チオフェン化合物に変換する。
【０１１１】
実施例３６
６−（２−クロロ−３−チエニル）−５−［４−［２−（１−ピペリジル）エトキシ］フェノキシ］ナフタレン−２−オールトリフルオロアセテート
【化４４】
0005548205.tif 000065
ＷＯ２００５０７３２０４号における５−［４−（２−ピペリジン−１−イル−エトキシ）−フェノキシ］−６−（２，３，４−トリフルオロ−フェニル）−ナフタレン−２−オールトリフルオロ酢酸塩を調製するための同様の手順によって、かつ、３−ブロモ−２−クロロ−チオフェンを用いて、６−（２−クロロ−３−チエニル）−５−［４−［２−（１−ピペリジル）エトキシ］フェノキシ］ナフタレン−２−オールトリフルオロアセテートを実質的に調製する。マススペクトル（ｍ／ｚ）：４８０（Ｍ＋１−ＴＦＡ）。
【０１１２】
【化４５】
0005548205.tif 000066
【０１１３】
調製物６９
１−クロロ−６−メトキシ−３，４−ジヒドロナフタレン−２−カルバルデヒド
丸底フラスコに、化合物１（スキームＯのもの；６−メトキシテトラリン−１−オン）（６．１１ｇ，３４．７ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（２０ｍＬ，２５９．５ｍｍｏｌ）を加える。反応容器をアルゴンで５回パージする。ＰＯＣｌ３（８ｍＬ，１４８．９ｍｍｏｌ）を反応混合物に滴下する。反応混合物を攪拌しながら１０５℃まで加熱し、４時間、その温度を保持する。反応混合物を氷水でクエンチする。混合物を酢酸エチルで３回抽出し、水相を捨てる。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、乾燥するまで濃縮して、茶色の固体として１−クロロ−６−メトキシ−３，４−ジヒドロナフタレン−２−カルバルデヒド（５．９４ｇ，７０％収率）を得る。
【０１１４】
調製物７０
６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）−３，４−ジヒドロナフタレン−２−カルバルデヒド
三つ口丸底フラスコに、１−クロロ−６−メトキシ−３，４−ジヒドロナフタレン−２−カルバルデヒド（２．２５ｇ，１０．１ｍｍｏｌ）、４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノール（１．８ｇ，８．２４ｍｍｏｌ）、ヨウ化テトラ−Ｎ−ブチルアンモニウム（５０ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（４．１ｇ，２９．８ｍｍｏｌ）、および４−ジメチルアミノピリジン（１２０ｍｇ，０．９９ｍｍｏｌ）を加える。反応容器を窒素でパージする。ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）を反応物にゆっくりと加える。混合物を攪拌しながら１００℃まで加熱し、４時間保持する。反応混合物を室温まで冷却し、氷水でクエンチする。混合物を酢酸エチルで３回抽出する。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）−３，４−ジヒドロナフタレン−２−カルバルデヒド（４．１１ｇ）を得る。
【０１１５】
調製物７１
６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）−３，４−ジヒドロナフタレン−２−カルボン酸
丸底フラスコに、６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）−３，４−ジヒドロナフタレン−２−カルバルデヒド（３．０ｇ，４．３４ｍｍｏｌ）、レゾルシノール（５３１ｍｇ，４．８ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（８ｍＬ）、エタノール（８ｍＬ）および酢酸（０．９ｍＬ）を加える。混合物を２５℃にて５分間攪拌する。水（８ｍＬ）中の塩化ナトリウム（１．３，１１．２ｍｍｏｌ）を反応混合物にゆっくりと加える。混合物を８０℃にて２時間攪拌する。反応混合物を氷水でクエンチする。酢酸エチルを攪拌しながら容器に加える。混合物を希ＮａＯＨで３回洗浄し、有機相を捨てる。水層に水を加えて、ｐＨを５〜６に調整した。水層を酢酸エチルで５回抽出し、水相を捨てた。ＭｇＳＯ４で有機層を乾燥させ、濾過し、乾燥するまで濃縮し、それをさらに精製して、４００ｍｇの６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）−３，４−ジヒドロナフタレン−２−カルボン酸を得た。１ＨＮＭＲ（ｄ−ＤＭＳＯ，３００ＭＨＺ）：９．９７（１Ｈ，ｓ）７．１２（１Ｈ，ｍ），６．８６（５Ｈ，ｍ），６．７１（１Ｈ，ｍ），４．２７（２Ｈ，ｍ），３．７３（３Ｈ，ｓ），４．２６（２Ｈ，ｓ），３．４１（３Ｈ，ｍ），２．８２（２Ｈ，ｍ），２．５９（２Ｈ，ｍ），１．７０（６Ｈ，ｍ）。
【０１１６】
調製物７２
１−（２−（４−（２−ブロモ−６−メトキシ−３，４−ジヒドロナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン
フラスコに、６−メトキシ−１−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）−３，４−ジヒドロナフタレン−２−カルボン酸（０．４ｇ，０．６８ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１０ｍＬ）、およびトリエチルアミン（０．２ｍＬ，１．４３ｍｍｏｌ）を加える。混合物を２５℃にて１０分間攪拌する。Ｎ−ブロモスクシンイミド（０．５ｇ，４．１３当量，２．８１ｍｍｏｌ）を少しずつ加える。反応混合物を室温まで冷却し、氷水でクエンチする。混合物を酢酸エチルで３回抽出し、水相を捨てる。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、乾燥するまで濃縮して、１−（２−（４−（２−ブロモ−６−メトキシ−３，４−ジヒドロナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジンを黄色の油状物（３００ｍｇ）として得る。
【０１１７】
調製物７３
１−（２−（４−（２−ブロモ−６−メトキシナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン
丸底フラスコに、１−（２−（４−（２−ブロモ−６−メトキシ−３，４−ジヒドロナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン（６．７ｇ，６．６ｍｍｏｌ）およびアセトニトリル（５０ｍＬ）を加える。混合物を２５℃にて５分間攪拌する。２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノベンゾキノン（ＤＤＱ）（３，２ｇ，１４．１ｍｍｏｌ）を反応混合物にゆっくりと加える。混合物を８０℃まで加熱し、その温度で１４時間攪拌する。反応混合物を室温まで冷却し、氷水でクエンチする。混合物を酢酸エチルで３回抽出し、水相を捨てる。合わせた有機層を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、乾燥するまで濃縮する。フラッシュクロマトグラフィーにより精製して、１−（２−（４−（２−ブロモ−６−メトキシナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジンを茶色の固体（８１７ｍｇ）として得る。１ＨＮＭＲ（ｄ−ＤＭＳＯ，３００ＭＨＺ）：７．６８（３Ｈ，ｍ），７．４３（１Ｈ，ｓ），７．１５（１Ｈ，ｍ），６．９７（２Ｈ，ｄ），６．７２（２Ｈ，ｄ），４．２６（２Ｈ，ｓ），３．８５（３Ｈ，ｓ），３．４８（４Ｈ，ｍ），２．９６（２Ｈ，ｍ），１．７０（６Ｈ，ｍ）。
【０１１８】
調製物７４
１−（２−（４−（６−メトキシ−２−（５−メチルチオフェン−２−イル）ナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン
三つ口丸底フラスコに、１−（２−（４−（２−ブロモ−６−メトキシナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジン（２５ｍｇ，７５．９μｍｏｌ）、５−メチルチオフェン−２−イルボロン酸（２０ｍｇ，１４０．８６μｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（２０ｍｇ，１７．３μｍｏｌ）、およびジメチルスルホン（ＤＭＳＯ）（２ｍＬ）を加える。反応容器を窒素で５回パージする。混合物を１００℃にて６時間加熱し、続いて、８０℃にて４０時間加熱する。
【０１１９】
調製物７５
６−（５−メチルチオフェン−２−イル）−５−（４−（２−（ピペリジン−１−イル）エトキシ）フェノキシ）ナフタレン−２−オール
【化４６】
0005548205.tif 000067
実施例１に記載される手順を用いて１−（２−（４−（６−メトキシ−２−（５−メチルチオフェン−２−イル）ナフタレン−１−イルオキシ）フェノキシ）エチル）ピペリジンを脱保護する。
【０１２０】
生物学的アッセイ
エストロゲン受容体結合アッセイ
化合物を、両方のエストロゲン受容体型（ＥＲαおよびＥＲβ）に対する結合親和性について、受容体から３Ｈ−エストラジオールを転位させる化合物の能力を測定する競合結合アッセイにより、試験する。両方の受容体型についてのＩＣ５０およびＫｉ値を算出することができる。
【０１２１】
競合結合アッセイを、５０ｍＭのＨＥＰＥＳバッファ試薬、ｐＨ７．５、１．５ｍＭのエチレンジアミン四酢酸（「ＥＤＴＡ」）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１０％のグリセロール、１ｍｇ／ｍＬのオボアルブミンおよび５ｍＭのジチオスレイトール（「ＤＴＴ」）を含有するバッファ中で、ウェルあたり０．０２５μＣｉの３Ｈ−エストラジオール（１１８Ｃｉ／ｍｍｏｌ、１ｍＣｉ／ｍＬにおいて、ＮＥＮ  ＃ＮＥＴ５１７）、１０ｎｇ／ウェルのＥＲαまたはＥＲβ受容体を用いて行う。試験化合物を１０種類の異なる濃度にて加える。非特異的結合を１μＭのエストラジオール（１７β−エストラジオール）の存在下で決定する。結合反応物（１４０μＬ）を４時間室温にてインキュベートし、次いで、７０μＬの冷ＤＣＣバッファを各反応物（５０ｍＬのアッセイバッファ、７５０ｍｇのチャコールおよび２５０ｍｇのデキストランを含有するＤＣＣバッファ）に加える。プレートをオービタルシェーカー上で８分間４°Ｃにて混合する。次いで、プレートを３，０００ｒｐｍで４°Ｃにて１０分間遠心分離する。混合物の１２０μＬのアリコートを別の９６ウェルの白色平底プレートに移動し、１７５μＬのシンチレーション液を各ウェルに加える。プレートを密封し、オービタルシェーカー上で激しく振る。２．５時間のインキュベーションの後、プレートをカウンター上で読み取る。データをＩＣ５０および１０μＭにおける阻害率を算出するために用いる。３Ｈ−エストラジオールについてのＫｄをＥＲαおよびＥＲβ受容体に対する飽和結合により決定する。試験化合物についてのＩＣ５０値を、チェン−プロソフ式および飽和結合アッセイにより決定されたＫｄを用いてＫｉに変換する。本願明細書において開示された全ての実施例は、ＥＲα受容体に対して２０ｎＭ未満の測定Ｋｉ−αと、ＥＲβ受容体に対して２００ｎＭ未満の測定Ｋｉ−βとなる結合アッセイにおける活性を示す。実施例１の化合物については、測定Ｋｉ−αが０．１５±０．２２ｎＭ（幾何平均±標準偏差）となることを見出した。一方、ＥＲβ受容体に対する親和性をＫｉ−β＝０．２０±０．２０ｎＭ（幾何平均±標準偏差）として測定した。したがって、本発明の化合物における両方のＥＲ受容体に対する高い親和性結合が示された。
【０１２２】
石川細胞増殖アッセイ
このアッセイは、単体の試験化合物存在下におけるアゴニストモードと、増殖におけるエストラジオール刺激をブロックする試験化合物の能力を測定するアンタゴニストモードの両方において、細胞増殖を（アルカリホスフォターゼ読み取りを用いて）測定する。
【０１２３】
一晩インキュベーションした後、石川細胞を、Ｃａ＋２およびＭｇ＋２なしのダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（「Ｄ−ＰＢＳ」）を用いてリンスし、０．２５％のトリプシン／ＥＤＴＡ、フェノールレッドフリーを用いて３分間インキュベーションすることによりトリプシン処理する。細胞をアッセイ培地に再懸濁し、２５０，０００細胞／ｍＬに調整する。１００ｕｌ培地中の約２５，０００細胞を平底９６ウェルマイクロ培養プレートに加え、５％ＣＯ２加湿インキュベータ内で３７°Ｃにて２４時間インキュベートする。次の日、アッセイ培地に化合物の連続希釈液（アッセイにおける最終濃度の６倍）を準備する。アッセイをデュアルモード（アゴニストモードおよびアンタゴニストモード）で行う。
【０１２４】
アゴニストモードにおいて、プレートは２５μＬ／ウェルのアッセイ培地を受け取り、その後、２５μＬ／ウェルの希釈試験化合物（最終濃度の６倍）を受け取る。アンタゴニストモードにおいて、プレートは２５μＬ／ウェルの６ｎＭの１７β−エストラジオール（「Ｅ２」）を受け取り、その後、２５μＬ／ウェルの希釈試験化合物（最終濃度の６倍）を受け取る。更に４８時間３７°Ｃにて５％ＣＯ２加湿インキュベータ内でインキュベーションした後、培地をウェルから吸引し、１００μＬの新しいアッセイ培地を各マイクロ培養プレートに加える。化合物の連続希釈液を準備し、上述のように細胞を加える。更に７２時間３７°Ｃにて５％ＣＯ２加湿インキュベータ内でインキュベーションした後、アッセイ物を、培地を除去しＤ−ＰＢＳ内で２回プレートをリンスすることによりクエンチする。プレートを５分間乾燥させ、−７０℃にて少なくとも１時間凍結させる。次いで、プレートをフリーザから外して、室温にて解凍させる。２０分間インキュベーションした後、プレートを分光光度計で４０５ｎｍにて読み取る。
【０１２５】
データを、４パラメータフィットモデルを用いてフィッテングして、ＥＣ５０（アゴニストモードについて）またはＩＣ５０（アンタゴニストモードについて）値を得る。アンタゴニストモードにおいて、各化合物の有効率をＥ２（１ｎＭ）単体に対して算出する。アゴニストモードにおいて、各化合物の有効率をタモキシフェンに対する応答に対して算出する。実施例１の化合物におけるアンタゴニストの有効性を、実質的に上述したように決定したところ、１０２％±８．４％（ｎ＝４）（算術的平均±標準偏差）となり、相対ＩＣ５０が３．７５±１．７１ｎＭ（ｎ＝４）（幾何平均±標準偏差）となった。実施例１の化合物単体における平均アゴニスト活性は、１７．７％±１１．３％（ｎ＝４）（算術的平均±標準偏差）となった。実施例１の化合物の値は、一般的に１００％より大きいアゴニスト活性となる４−ヒドロキシタモキシフェンと比較できる。これらのデータは、この化合物が子宮におけるエストロゲン受容体に対する有効なアンタゴニストとして機能することを示す。
【０１２６】
３日間の未成熟ラット子宮アンタゴニストアッセイ
この子宮の拮抗作用についてのモデルは、未成熟（３週齢）の雌ラットを用いる。この雌ラットの血中エストロゲンレベルが思春期前であることを考えると、子宮のエストロゲン刺激に対する感度は高い。未成熟ラットからの子宮は、外因性エストロゲンに対して完全に応答するが、外因性エストロゲンの非存在下では休止する。外因性エストロゲンを未成熟ラットに対して投与することで、信頼性のある子宮の重量の増加が見られるので、子宮アンタゴニストの有効性の研究に用いることができる。ラットを、エストラジオールと４種類の異なる濃度の試験化合物の両方で３日間処置し、次いで、子宮の湿重量を測定する。
【０１２７】
１９日から２１日齢（または、４５〜５０ｇ）の雌ラットを、１７α−エチニルエストラジオール（ＥＥ２）（０．１ｍｇ／ｋｇの子宮重量を確実に増加させる最大促進エストロゲン刺激）と、１０ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇおよび０．０１ｍｇ／ｋｇの試験化合物で、３日間、１グループにつき６ラットについて、経口処置する。試験化合物を２０％のβ−ヒドロキシシクロデキストリン中に溶解し、１日あたり０．２ｍＬの用量で強制経口投与する（ＥＥ２強制投与の前に１５分間）。賦形剤コントロール、ＥＥ２単体、および、ＥＥ２＋ラロキシフェンもまた、コントロールとして投与する。動物を最終用量の後、一晩絶食させる。次の朝、動物の体重を量り、次いで（二酸化炭素窒息により）安楽死させ、そして、迅速に（腹側正中切開により）子宮を回収して重量を計る。
【０１２８】
子宮重量／体重比（ＵＷＲ）を各動物について算出する。次いで、エストロゲン誘導反応の阻害率を以下の式により計算する。
阻害率＝
１００×（ＵＷＲエストロゲン−ＵＷＲ試験化合物）／（ＵＷＲエストロゲン−ＵＷＲコントロール）
ＥＤ５０値を用量反応曲線の線形についての片対数回帰分析から導く。ＵＷＲデータと阻害率データの両方を、ｐ≦０．０５が示された場合フィッシャーＰＬＳＤによる多重比較とともに一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）により統計解析する。実施例１の化合物を、実質的に上述したアッセイを用いて、０．０５３ｍｇ／ｋｇのＥＤ５０値を有する有力な子宮アンタゴニストとして観察した。
【０１２９】
４日間のＯＶＸラット子宮アゴニストアッセイ
試験化合物が有意な部分的子宮アゴニスト活性を持たないことを保証するために、化合物を成熟卵巣摘出ラットに投与する。
【０１３０】
７５日齢のラットを卵巣切除し、血中エストラジオールレベルが最低レベルに達した場合１４日後に処置を開始する。試験化合物の３用量を用いる処置の４日後（１グループにつき６ラット）、体重、子宮湿重量および子宮好酸球ペルオキシダーゼ（ＥＰＯ）活性を測定する。コレステロールレベルも測定して、他のＳＥＲＭを用いてコレステロールを下げる相対能力と比較する。子宮刺激について疑問がある場合、組織学的検査が上皮細胞の高さを決定する。
【０１３１】
子宮ＥＰＯ活性における有意（１０％より大きい、０．１ｍｇ／ｋｇにてエストラジオールにより誘導された増加）および用量反応性の増加を、潜在的な子宮アゴニスト活性の早期指標として用いる。ＯＶＸグループとの比較において、実施例１の化合物を、１０ｍｇ／ｋｇ以下の用量にて実質的に上述したアッセイを用いたところ、ＥＰＯ活性における有意な用量依存性増加は見られなかった（テューキー・クレーマー；ｐ＜０．０５）。実施例１の化合物を投与したグループのいずれも、ＥＰＯ活性における増加（１０％より大きい、０．１ｍｇ／Ｋｇにてエストラジオールにより誘導された増加）を示さなかった。子宮内膜の厚さにおける有意な用量依存性増加をまた、潜在的なＳＥＲＭ子宮アゴニスト活性の早期指標として用いた。ＯＶＸグループとの比較において、１０ｍｇ／ｋｇ以下の用量における実施例１の化合物は、子宮内膜の厚さにおける有意な用量依存性増加を示さなかった。これらの結果は、実施例１の化合物が望ましい子宮に対する安全性を提供することを示唆するものである。
【０１３２】
ＯＶＸ／半月板断裂モデル
ラットの半月板断裂（ＭＣＴ）モデルは、ＯＡの詳述されたモデルであり、１つの膝関節における外科的介入（内側半月切断）により関節損傷および痛みが誘導されたものである。雄ラットを用いる標準的なＭＣＴモデルにおいて、関節病理学は革新的に発展しており、術後３週間にて関節組織学により測定される。内部の試験的研究により、ＭＣＴ手術後５週間にて、ＯＶＸ／ＭＣＴ動物において痛みおよび関節病理学の両方が、ＭＣＴ手術を経た卵巣未損傷動物と比較して、顕著に現れたことがわかった。
【０１３３】
実質的に上述した断裂モデルを用いて処置したＯＶＸ動物において、実施例１の化合物は、用量依存的に痛みを軽減し、ＯＶＸ／ＭＣＴグループと比較して全ての用量において１．０ｍｇ／ｋｇ以上、統計的に有意な減少を示した。加えて、実施例１の３ｍｇ／ｋｇおよび１０ｍｇ／ｋｇの用量は、１７α−エチニルエストラジオールにより誘導されたものと統計的に同じような関節痛の軽減をもたらした。
【０１３４】
Ｐ−ＣＴＸＩＩ
ｐＣＴＸ−ＩＩは、ＯＡの処置に関連する有効性を反映する有用なバイオマーカーとして考えられている。例えば、Ｇａｒｎｅｒｏ  Ｐ  ら、Ａｎｎ  Ｒｈｅｕｍ  Ｄｉｓ  ２００３；６２：９３９−９４３、および、Ｍａｚｉｅｒｅｓ  Ｂ  ら、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ  ２００３；４８：Ｓ６８３を参照のこと。
【０１３５】
実施例１の化合物は、有意にかつ用量依存的にｐＣＴＸ−ＩＩを減少させた。加えて、全ての用量における実施例１の化合物は、ｐＣＴＸ−ＩＩを、１７α−エチニルエストラジオールを用いる処置により生じるものと統計的に同じレベルまで減少させた。