(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式(III)の化合物、その塩、その溶媒和物、その互変異性体、またはそのＮ‐オキシド：
【化１】
0005507049.tif 000130
（上記式中、Ｅが結合であり、Ｒ２がＨであり、Ｒ１が３〜５環員のシクロアルキル基、シクロヘキシル、または基ＣＲ６Ｒ７Ｒ８（ここで、Ｒ６およびＲ７は各々メチルであり、Ｒ８は水素およびメチルから選択される）である）。
【請求項２】
Ｒ１が３〜５環員のシクロアルキル基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１がシクロプロピル基であり、前記化合物が１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素、その塩、その溶媒和物、またはその互変異性体である、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
乳酸およびクエン酸塩と、それらの混合物とから選択される塩の形態をとる、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
乳酸塩の形態をとる、請求項３に記載の化合物。
【請求項６】
乳酸塩がＬ−乳酸塩である、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
請求項４〜６のいずれか一項に記載の化合物が遊離塩基または塩の形態をとり、前記遊離塩基および塩が結晶性である、請求項３に記載の化合物。
【請求項８】
前記化合物が結晶性であり、下記パラメーターのいずれか１以上またはすべてにより特徴付けられる、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩であり、すなわち前記塩が：
（ａ）下記の熱的楕円プロットを示す図４：
【化２】
0005507049.tif 000131
および、下記のパッキング図を示す図５： 
【化３】
0005507049.tif 000132
により示されている結晶構造を有し、および／または
（ｂ）下記表４：
【表１】
0005507049.tif 000133
0005507049.tif 000134
0005507049.tif 000135
に示された座標により規定される結晶構造を有し、および／または
（ｃ）９７（２）Ｋにおいてａ＝９．９４（１０）、ｂ＝１５．０３（１０）、ｃ＝１６．１８（１０）Å、α＝β＝γ＝９０°の結晶格子パラメーターを有し、および／または
（ｄ）室温においてａ＝１０．０８（１０）、ｂ＝１５．２２（１０）、ｃ＝１６．２２（１０）Å、α＝β＝γ＝９０°の結晶格子パラメーターを有し、および／または
（ｅ）斜方晶空間群Ｐ２１２１２１（＃１９）に属する結晶構造を有し、および／または
（ｆ）１７．５０、１８．３０、１９．３０、１９．６０、および２１．８５°の回折角（２θ）、および／または５．０６、４．８５、４．６０、４．５３、および４．０７Åの面間隔（ｄ）において主ピークの存在により特徴付けられるＸ線粉末回折パターンを有し、および／または
（ｇ）下記表５： 
【表２】
0005507049.tif 000136
により示された回折角でのピークを示し、および／または
（ｈ）無水であり、ＤＳＣに付された場合に１９０℃において吸熱ピークを示し、および／または
（ｉ）ＫＢｒディスク法を用いて分析された場合に、３２２９、２９７２、および１６６０ｃｍ−１において特徴的ピークを含む赤外スペクトルを示す、
請求項４に記載の化合物。
【請求項９】
１２．４０、１５．２０、１５．６０、１７．５０、１８．３０、１８．５０、１９．３０、１９．６０、２１．８５、および２７．３０°の回折角（２θ）において主ピークの存在により特徴付けられるＸ線粉末回折パターンを有する、請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
７．１３、５．８３、５．６８、５．０６、４．８５、４．７９、４．６０、４．５３、４．０７、および３．２６Åの面間隔（ｄ）により特徴付けられるＸ線粉末回折パターンを有する、請求項８に記載の化合物。
【請求項１１】
哺乳動物における異常細胞成長である疾患または症状の治療用の場合により緩衝化された水溶液であって、前記水溶液が１ｍｇ／ｍＬ以上の濃度により、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩またはクエン酸塩またはそれらの混合物を含有し、前記水溶液が２〜６の範囲のｐＨを有する、水溶液。
【請求項１２】
哺乳動物における異常細胞成長である疾患または症状の治療用の水溶液であって、該水溶液が、Ｌ‐乳酸およびクエン酸とそれらの混合物とから選択される１種以上の対イオンと一緒でプロトン化形の１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素、および場合により（ｉ）１種以上の別な対イオンおよび／または（ii）１種以上の賦形剤を含んでなる、水溶液。
【請求項１３】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物、その塩、その溶媒和物、その互変異性体、またはそのＮ‐オキシドと、薬学上許容される担体とを含んでなる、医薬組成物。
【請求項１４】
凍結乾燥処方剤であり、該凍結乾燥処方剤が、Ｌ‐乳酸およびクエン酸とそれらの混合物から選択される１種以上の対イオンと一緒でプロトン化形の１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素、および場合により（ｉ）１種以上の別の対イオンおよび／または（ii）１種以上の賦形剤を含んでなる、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
哺乳動物における異常細胞成長である疾患または症状の治療用の請求項１３または１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記疾患または症状が癌である、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記疾患または症状が、膀胱、乳房、結腸、腎臓、表皮、肝臓、肺臓、食道、胆嚢、卵巣、膵臓、胃、子宮頸部、甲状腺、前立腺、もしくは皮膚から選択される癌腫、白血病、急性リンパ性白血病、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、毛様細胞リンパ腫、もしくはバーキットリンパ腫から選択されるリンパ様系統の造血腫瘍、急性および慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、もしくは前骨髄性白血病から選択される骨髄様系統の造血腫瘍、甲状腺小胞癌、線維肉腫もしくは横紋筋肉腫から選択される間葉源の腫瘍、星状膠細胞腫、神経芽細胞腫、神経膠腫、もしくは神経線維腫から選択される中枢もしくは末梢神経系の腫瘍、黒色腫、セミノーマ、奇形癌、骨癌、色素性乾皮症、角膜棘細胞腫、甲状腺小胞癌、またはカポジ肉腫である、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記疾患または症状が白血病である、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記白血病は、再発性または難治性急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ芽球性白血病、および慢性骨髄性白血病から選択されるものである、請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記疾患または症状が、（Ａ）乳癌、卵巣癌、結腸癌、前立腺癌、食道癌、扁平上皮癌、および非小細胞肺癌腫から選択される癌、または（Ｂ）Ｂ細胞リンパ腫、拡散性大Ｂ細胞リンパ腫、もしくは慢性リンパ性白血病から選択される癌である、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
下記式（Ｘ）の化合物と：
【化４】
0005507049.tif 000137
（i）尿素形成条件下において式Ｒ１‐Ｅ‐Ｎ＝Ｃ＝Ｏのイソシアネート、または(ii)カルボニル含有尿素形成試薬の存在下において式Ｒ１‐Ｅ‐ＮＲ２Ｈのアミンとの反応からなり、Ｒ１、Ｅ、およびＲ２は、いずれも請求項１で記載されたものと同じ意味を有する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物の製造方法。
【請求項２２】
カルボニル含有尿素形成試薬が、１，１′‐カルボニルジイミダゾール、ホスゲン、またはトリホスゲンである、請求項２１に記載の製造方法。
【請求項２３】
下記式(XXVII)もしくは(XXVIII)の化合物またはそれらの塩の製造方法であって：
【化５】
0005507049.tif 000138
有機溶媒中、カップリング剤の存在下において、下記式(XXIX)の化合物：
【化６】
0005507049.tif 000139
（式中、ＰＧはアミン保護基である）と、下記式(XXXI)の化合物：
【化７】
0005507049.tif 000140
との反応からなる方法。
【請求項２４】
カップリング剤が１‐エチル‐３‐（３′‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドおよび１‐ヒドロキシベンゾトリアゾールである、請求項２３に記載の製造方法。
【請求項２５】
式(XXIX)の化合物が下記式(XXXII)の化合物である：
【化８】
0005507049.tif 000141
請求項２３または２４に記載の方法。
【請求項２６】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素、その塩、その溶媒和物、もしくはその互変異性体の製造方法であって、
（ｉ）下記式(XXVIIａ)または(XXVIIIａ)の化合物：
【化９】
0005507049.tif 000142
を、場合により加熱しながら、溶媒中酸により処理し、ここで、ＡＰＧはtert‐ブチルオキシカルボニルであり、および
（ii）反応液を中和する、
(iii)工程（ii）の生成物をカルボニル化試薬と反応させ、そして
（iv）工程(iii)の生成物をシクロプロピルアミンと反応させ、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素、その塩、その溶媒和物、もしくはその互変異性体を得ることからなる方法。
【請求項２７】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素、その溶媒和物、またはその互変異性体の製造方法であって、
下記式(XXXIII)または(XXXIIIa)の化合物：
【化１０】
0005507049.tif 000143
をシクロプロピルアミンと反応させ、次いで場合により酸付加塩を形成させることからなる方法。
【請求項２８】
下記式(XXXII)、(XXVII)、(XXVIII)、(XXVIIa)、(XXVIIIa)、(XXXIII)、または(XXXIIIa)の化合物から選択される、新規化学中間体自体：
【化１１】
0005507049.tif 000144
（ここで、ＰＧはアミン保護基であり、ＡＰＧはtert‐ブチルオキシカルボニルである）。
【発明の詳細な説明】
【発明の背景】
【０００１】
本発明は、サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）、グリコーゲンシンターゼキナーゼ（ＧＳＫ）、およびオーロラキナーゼの活性を阻害または調節するピラゾール化合物、前記キナーゼにより媒介される病状または症状の治療または予防における前記化合物の使用、並びにキナーゼ阻害または調節活性を有する新規化合物に関する。前記化合物および新規化学中間体を含有した医薬組成物も提供される。
【０００２】
背景技術
プロテインキナーゼは、細胞内において様々なシグナル伝達過程の制御に関与する構造関連酵素の大ファミリーを形成している（Hardie,G.and Hanks,S.(1995)The Protein Kinase Facts Book,I and II,Academic Press,San Diego,CA）。前記キナーゼは、それらがリン酸化する基質により、各ファミリーに分類される（例えば、タンパク質‐チロシン、タンパク質‐セリン／トレオニン、脂質など）。これらキナーゼファミリーの各々に通常対応する配列モチーフが特定されてきた（例えば、Hanks,S.K.,Hunter,T.,FASEB J.,9:576-596(1995)、Knighton et al.,Science,253:407-414(1991)、Hiles et al.,Cell,70:419-429(1992)、Kunz et al.,Cell,73:585-596(1993)、Garcia-Bustos et al.,EMBO J.,13:2352-2361(1994)）。
【０００３】
プロテインキナーゼはそれらの調節メカニズムにより特徴付けられる。これらのメカニズムには、例えば自己リン酸化、他のキナーゼによるリン酸基転移、タンパク質‐タンパク質相互作用、タンパク質‐脂質相互作用、およびタンパク質‐ポリヌクレオチド相互作用がある。個々のプロテインキナーゼは２以上のメカニズムにより調節されることもある。
【０００４】
キナーゼは、リン酸基を標的タンパク質へ付加させることにより、増殖、分化、アポトーシス、運動、転写、翻訳、および他のシグナル化過程に限定されないが、それらを含めた多くの異なる細胞過程を調節している。これらのリン酸化現象は、標的タンパク質の生物学的機能を調整または調節しうる分子オン／オフスイッチとして作用する。標的タンパク質のリン酸化は、様々な細胞外シグナル（ホルモン、神経伝達物質、成長および分化因子など）、細胞周期現象、環境または栄養ストレスなどに応答して生じる。適切なプロテインキナーゼが、例えば代謝酵素、調節タンパク質、レセプター、細胞骨格タンパク質、イオンチャンネル、またはポンプ、または転写因子を（直接的または間接的に）活性化または不活性化するために、シグナル経路において機能している。タンパク質リン酸化の欠陥制御による未制御シグナル伝達は、例えば炎症、癌、アレルギー／喘息、免疫系の疾患および症状、中枢神経系の疾患および症状、および血管形成を含めて、多くの疾患に関与していた。
【０００５】
サイクリン依存性キナーゼ
真核細胞分裂の過程は、Ｇ１、Ｓ、Ｇ２、およびＭと称される一連の連続期に広く分けられる。細胞周期の様々な期への正しい進行は、サイクリン依存性キナーゼ（ｃｄｋ）として知られるタンパク質のファミリー、およびサイクリンと称されるそれらの同族タンパク質パートナーの多様な群の空間的および時間的調節に極めて依存することが示された。ｃｄｋおよびｃｄｃ２（ｃｄｋ１としても知られる）は、配列依存的に多様なポリペプチドのリン酸化により基質としてＡＴＰを利用しうる、相同性セリン‐トリオニンキナーゼタンパク質である。サイクリンは、特定のｃｄｋパートナータンパク質と結合してその選択性を画定する“サイクリンボックス”と称される、約１００アミノ酸を含有した、ホモロジー領域で特徴付けられるタンパク質のファミリーである。
【０００６】
細胞周期を通じた様々なｃｄｋおよびサイクリンの発現水準、分解速度、および活性化水準の調節は、ｃｄｋが酵素的に活性であり、一連のｃｄｋ／サイクリン複合体の周期的形成につながる。これら複合体の形成は個別の細胞周期チェックポイント(checkpoints)の通過を制御し、こうして細胞分裂の過程を継続させている。所定の細胞周期チェックポイントにおいて前もって必要な生化学基準を満たすことに失敗すると、すなわち必要なｃｄｋ／サイクリン複合体を形成することに失敗すると、細胞周期停止および／または細胞アポトーシスに至ることがある。癌において現れるような異常な細胞増殖は、正しい細胞周期制御の損失に起因することが多い。したがって、ｃｄｋ酵素活性の阻害は、異常分裂細胞がそれらの分裂を止めるおよび／または自らを殺す手段をもたらすのである。ｃｄｋおよびｃｄｋ複合体の多様性と、細胞周期を媒介するそれらの重要な役割は、規定された生化学的根拠に基づき選択される、広域スペクトルの可能な治療標的をもたらしている。
【０００７】
細胞周期のＧ１期からＳ期への進行は、ＤおよびＥ型サイクリンのメンバーと関連して、ｃｄｋ２、ｃｄｋ３、ｃｄｋ４、およびｃｄｋ６により主に調節される。Ｄ型サイクリンはＧ１制限地点を通り過ぎる上で役立つようであり、一方ｃｄｋ２／サイクリンＥ複合体はＧ１からＳ期への移行に重要である。次いでＳ期の進行とＧ２への移行には、ｃｄｋ２／サイクリンＡ複合体を必要とすると考えられている。双方の有糸分裂と、それを誘発するＧ２からＭ期への移行は、ｃｄｋ１とＡおよびＢ型サイクリンとの複合体により調節される。
【０００８】
Ｇ１期においては、網膜芽腫タンパク質（Ｒｂ）と関連ポケットタンパク質、例えばｐ１３０が、ｃｄｋ（２、４＆６）／サイクリン複合体用の基質である。Ｇ１の進行は、ｃｄｋ（４／６）／サイクリンＤ複合体によるＲｂおよびｐ１３０の過リン酸化、ひいては不活性化により、一部が促進されている。Ｒｂおよびｐ１３０の過リン酸化は、Ｅ２Ｆのような転写因子の放出、ひいてはＧ１の進行とＳ期への移行に必要な遺伝子、例えばサイクリンＥの遺伝子の発現を引き起こす。サイクリンＥの発現は、Ｒｂの更なるリン酸化によりＥ２Ｆ水準を増幅または維持する、ｃｄｋ２／サイクリンＥ複合体の形成を促す。ｃｄｋ２／サイクリンＥ複合体は、ヒストン生合成に関与する、ＮＰＡＴのような、ＤＮＡ複製に必要な他のタンパク質もリン酸化する。Ｇ１進行とＧ１／Ｓ移行とは、ｃｄｋ２／サイクリンＥ経路へ入るマイトジェン刺激Ｍｙｃ経路によっても調節される。ｃｄｋ２は、ｐ２１段階のｐ５３調節により、ｐ５３媒介ＤＮＡ損傷応答経路へも接続されている。ｐ２１はｃｄｋ２／サイクリンＥのタンパク質阻害剤であり、そのためＧ１／Ｓ移行を阻止または遅延しうる。そのためｃｄｋ２／サイクリンＥ複合体は、Ｒｂ、Ｍｙｃ、およびｐ５３経路からの生化学的刺激がある程度組み込まれた地点を表わしているのかもしれない。したがって、ｃｄｋ２および／またはｃｄｋ２／サイクリンＥ複合体は、異常分裂細胞において細胞周期の停止または回復制御に考えられる治療向けの良い標的を表わしている。
【０００９】
細胞周期におけるｃｄｋ３の正確な役割は明らかでない。今のところ同族サイクリンパートナーは特定されていないが、ｃｄｋ３の優性ネガティブ形はＧ１において細胞を遅らせ、こうしてｃｄｋ３がＧ１／Ｓ移行を調節する上で役割を有することを示唆している。
【００１０】
ほとんどのｃｄｋは細胞周期の調節に関与しているが、ｃｄｋファミリーのあるメンバーは他の生化学的過程に関係している証拠がある。これは、Ｔａｕ、ＮＵＤＥ‐１、シナプシン１、ＤＡＲＰＰ３２、およびＭｕｎｃ１８／Syntaxin１Ａ複合体のようないくつかの神経タンパク質のリン酸化にも関与している、正しい神経発達に必要であるｃｄｋ５により例示される。神経ｃｄｋ５はｐ３５／ｐ３９タンパク質と結合することで通常活性化される。しかしながら、ｃｄｋ５活性は、ｐ３５の端部切欠体、ｐ２５の結合により脱調節されうる。ｐ３５からｐ２５への変換と、それに続くｃｄｋ５活性の脱調節は、虚血、興奮毒性、およびβ‐アミロイドペプチドにより誘導される。結果的にｐ２５はアルツハイマー病のような神経変性疾患の病因に関与しており、そのためこれら疾患に対する治療の標的として関心が持たれている。
【００１１】
ｃｄｋ７は、ｃｄｃ２  ＣＡＫ活性を有してサイクリンＨと結合する、核タンパク質である。ｃｄｋ７は、ＲＮＡポリメラーゼII  Ｃ末端ドメイン（ＣＴＤ）活性を有する、ＴＦIIＨ転写複合体の成分として同定された。これは、Ｔａｔ媒介生化学経路によるＨＩＶ‐１転写の調節と関連していた。ｃｄｋ８はサイクリンＣと結合し、ＲＮＡポリメラーゼIIのＣＴＤのリン酸化に関与していた。同様に、ｃｄｋ９／サイクリン‐Ｔ１複合体（Ｐ‐ＴＥＦｂ複合体）はＲＮＡポリメラーゼIIの延長制御に関与していた。ＰＴＥＦ‐ｂは、サイクリンＴ１との相互作用を介する、ウイルストランスアクチベーターＴａｔによるＨＩＶ‐１ゲノムの転写の活性化にも要求される。したがって、ｃｄｋ７、ｃｄｋ８、ｃｄｋ９、およびＰ‐ＴＥＦｂ複合体は抗ウイルス治療に可能性のある標的である。
【００１２】
分子レベルにおいて、ｃｄｋ／サイクリン複合体活性の媒介には一連の刺激的および阻害的リン酸化または脱リン酸化現象を要する。ｃｄｋリン酸化は、ｃｄｋ活性化キナーゼ（ＣＡＫ）および／またはｗｅｅ１、Ｍｙｔ１、およびＭｉｋ１のようなキナーゼの群により行われる。脱リン酸化は、ｃｄｃ２５（ａ＆ｃ）、ｐｐ２ａ、またはＫＡＰのようなホスファターゼにより行われる。
【００１３】
ｃｄｋ／サイクリン複合体活性は、更に、内在性細胞タンパク質阻害剤の二つのファミリー：Ｋｉｐ／ＣｉｐファミリーまたはＩＮＫファミリーにより調節される。ＩＮＫタンパク質はｃｄｋ４およびｃｄｋ６と特異的に結合する。ｐ１６ｉｎｋ４（ＭＴＳ１としても知られる）は、多数の原発癌において変異または欠損している、潜在的な腫瘍抑制遺伝子である。Ｋｉｐ／Ｃｉｐファミリーにはｐ２１Ｃｉｐ１，Ｗａｆ１、ｐ２７Ｋｉｐ１、およびｐ５７Ｋｉｐ２のようなタンパク質を含む。前記のように、ｐ２１はｐ５３により誘導され、ｃｄｋ２／サイクリン（Ｅ／Ａ）およびｃｄｋ４／サイクリン（Ｄ１／Ｄ２／Ｄ３）複合体を不活性化しうる。変則的に、低水準のｐ２７発現が乳、結腸および前立腺癌において観察された。逆に、固形腫瘍においてサイクリンＥの過剰発現が悪い患者予後と相関していることが示された。サイクリンＤ１の過剰発現は、食道、乳、扁平上皮、および非小細胞肺癌腫と関連していた。
【００１４】
増殖細胞において、細胞周期を調和および運行させるのに際して、ｃｄｋおよびそれらの関連タンパク質の中枢的役割が、略述されてきた。ｃｄｋが主要な役割を果たす生化学経路の一部も記載された。このように、ｃｄｋまたは特定ｃｄｋにおいて一般的に標的化される療法を用いる、癌のような増殖障害の治療のための単独療法の開発が、潜在的に高度に望まれている。ｃｄｋ阻害剤は、特にウイルス感染、自己免疫疾患、および神経変性疾患の他の症状を治療するためにもおそらく用いられる。ｃｄｋ標的療法は、現存または新規治療剤との組合せ療法において用いられた場合にも、既に記載された疾患の治療において臨床効果を発揮しうる。ｃｄｋ標的抗癌療法は多くの現行抗腫瘍剤よりも潜在的に利点を有しているが、その理由はそれらがＤＮＡと直接的に相互作用せず、そのため二次的腫瘍発生の危険を減らすからである。
【００１５】
拡散性大Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）
細胞周期進行は、サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）、およびネガティブな細胞周期調節因子であるＣＤＫ阻害剤（ＣＤＫｉ）の組合せ作用により調節される。ｐ２７ＫＩＰ１は細胞周期調節において重要なＣＤＫｉであり、その分解がＧ１／Ｓ移行に必要である。増殖リンパ球におけるｐ２７ＫＩＰ１発現の不在の代わりに、一部の悪性Ｂ細胞リンパ腫は異常ｐ２７ＫＩＰ１染色を示すことが報告された。ｐ２７ＫＩＰ１の異常に高い発現がこの種のリンパ腫において見られた。これら発見の臨床的関連性の分析によると、この種の腫瘍における高水準のｐ２７ＫＩＰ１発現は、単および多変量解析の双方において、悪い予後マーカーであることを示した。これらの結果は、拡散性大Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）において悪い臨床的意義を有する異常ｐ２７ＫＩＰ１発現があることを示し、この異常ｐ２７ＫＩＰ１タンパク質が他の細胞周期調節タンパク質との相互作用において非機能化されることを示唆している（Br.J.Cancer,1999 Jul,80(9):1427-34.p27KIP1 is abnormally expressed in Diffuse Large B-cell Lymphomas and is associated with an adverse clinical outcome.Saez A,Sanchez E,Sanchez-Beato M,Cruz MA,Chacon I,Munoz E,Camacho FI,Martinez-Montero JC,Mollejo M,Garcia JF,Piris MA.Department of Pathology,Virgen de la Salud Hospital,Toledo,Spain）。
【００１６】
慢性リンパ性白血病
Ｂ細胞慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）は西半球において最も多い白血病であり、約１０，０００の新例が毎年診断されている（Parker SL,Tong T,Bolden S,Wingo PA:Cancer statistics,1997,Ca.Cancer.J.Clin.,47:5(1997)）。他型の白血病と比較して、ＣＬＬの全体予後は良く、最も進行した段階の患者においても３年の半生存期間を有している。
【００１７】
症候性ＣＬＬ患者において初期療法としてフルダラビンの付加は、以前用いられたアルキル化剤ベース療法と比較して、高い完全応答率（２７％ vs.３％）および無進行生存期間（３３ vs.１７月間）に至った。療法後における完全臨床応答の到達はＣＬＬにおいて生存期間を改善する初期工程であるが、患者の大半は完全緩解に到達せず、またはフルダラビンに応答しない。更に、フルダラビンにおいて治療されたＣＬＬの全患者は最終的に逆戻りして、単剤としてのその役割を完全に一時逃れの手段にしている（Rai KR,Peterson B,Elias L,Shepherd L,Hines J,Nelson D,Cheson B,Kolitz J,Schiffer CA:A randomized comparison of fludarabine and chlorambucil for patients with previously untreated chronic lymphocytic leukemia.A CALGB SWOG,CTG/NCI-C and ECOG Inter-Group Study.Blood 88:141a,1996(abstr.552,suppl.1)）。したがって、フルダラビンの細胞毒性を補い、固有ＣＬＬ薬物耐性因子により誘導される耐性を止める、作用の新規メカニズムを有した新剤を特定することが、この疾患の療法において更なる進歩が実現されるべきであれば必要であろう。
【００１８】
ＣＬＬ患者において乏しい治療応答性および劣った生存期間について最も広範に研究された、一様に予想される要因は、点変異または染色体１７ｐ１３欠損により特徴付けられるような、異常ｐ５３機能である。実際には、アルキル化剤またはプリンアナログ療法に対する応答は、異常ｐ５３機能を有したＣＬＬ患者に関する多数の個別実施ケースシリーズにおいて、事実上文書化されていなかった。ＣＬＬにおいてｐ５３変異に伴う薬物耐性を克服しうる能力を有した治療剤の導入は、前記疾患の治療においておそらく大きな進歩となるであろう。
【００１９】
サイクリン依存性キナーゼの阻害剤、フラボピリドール、およびＣＹＣ２０２は、Ｂ細胞慢性リンパ性白血病（Ｂ‐ＣＬＬ）からの悪性細胞のアポトーシスをインビトロにおいて誘導する。
【００２０】
フラボピリドール暴露は、カスパーゼ３活性の刺激と、Ｂ‐ＣＬＬで過剰発現される、細胞周期のネガティブ調節因子、ｐ２７（ｋｉｐ１）のカスパーゼ依存性開裂をもたらす（Blood,1998 Nov 15,92(10):3804-16.Flavopiridol induces apoptosis in chronic lymphocytic leukemia cells via activation of caspase-3 without evidence of bcl-2 modulation or dependence on functional p53.Byrd JC,Shinn C,Waselenko JK,Fuchs EL,Lehman TA,Nguyen PL,Flinn IW,Diehl LF,Sausville E,Grever MR）。
【００２１】
オーロラキナーゼ
比較的最近、細胞周期のＧ２およびＭ期に関与し、有糸分裂の重要な調節因子である、オーロラキナーゼとして知られるセリン／トレオニンキナーゼの新ファミリーが発見された。
【００２２】
オーロラキナーゼの正確な役割はこれから解明されねばならないが、それらは有糸分裂チェックポイント制御、染色体動力学および細胞質分裂において役割を果たしている（Adams et al.,Trends Cell Biol.,11:49-54(2001)）。オーロラキナーゼは、間期細胞の中心体、双極性紡錘体の極および分裂装置の中央体に位置している。
【００２３】
オーロラキナーゼファミリーの三つのメンバーが、これまでに哺乳動物において発見された（E.A.Nigg,Nat.Rev.Mol.Cell Biol.,2:21-32(2001)）。これらは：
オーロラＡ（文献ではオーロラ２とも称されている）、
オーロラＢ（文献ではオーロラ１とも称されている）、および
オーロラＣ（文献ではオーロラ３とも称されている）である。
【００２４】
オーロラキナーゼは高度に相同的な触媒ドメインを有しているが、Ｎ末端部分において著しく異なる（Katayama H,Brinkley WR,Sen S.、The Aurora kinases:role in cell transformation and tumorigenesis、Cancer Metastasis Rev.,2003 Dec,22(4):451-64）。
【００２５】
オーロラキナーゼＡおよびＢの基質は、キネシン様運動タンパク質、紡錘体装置タンパク質、ヒストンＨ３タンパク質、動原体タンパク質、および腫瘍抑制タンパク質ｐ５３を含めて、同定されてきた。
【００２６】
オーロラＡキナーゼは、紡錘体形成に関与し、初期Ｇ２期において中心体に配置されるようになり、そこでそれらは紡錘体関連タンパク質をリン酸化する、と考えられている（Prigent et al.,Cell,114:531-535(2003)）。Hirota et al.,Cell,114:585-598(2003)は、オーロラＡタンパク質キナーゼを枯渇した細胞が有糸分裂へ入れないことを発見した。更に、様々な種におけるオーロラＡ遺伝子の変異または破壊が、中心体分離および成熟欠陥、紡錘体異常と染色体分離欠陥とを含めて、有糸分裂異常に至ることが発見された（Adams,2001）。
【００２７】
オーロラキナーゼは大半の正常組織において低水準で通常発現されるが、例外は高割合の分裂細胞を有する組織、例えば胸腺および精巣である。しかしながら、高水準のオーロラキナーゼが多くのヒト癌において発見されてきた（Giet et al.,J.Cell.Sci.,112:3591-361(1999)およびKatayama(2003)）。更に、オーロラＡキナーゼは、多くのヒト癌においてしばしば増幅されることがわかった、染色体２０ｑ１３領域に位置している。
【００２８】
例えば、有意なオーロラＡ過剰発現がヒト乳、卵巣、および膵臓癌において検出された（Zhou et al.,Nat.Genet.,20:189-193(1998)、Tanaka et al.,Cancer Res.,59:2041-2044(1999)、Han et al.,Cancer Res.,62:2890-2896(2002)参照）。
【００２９】
更にIsola,American Journal of Pathology,147,905-911(1995)は、オーロラＡ座（２０ｑ１３）の増幅がリンパ節転移陰性乳癌の患者において悪い予後と相関していることを報告した。
【００３０】
オーロラＡの増幅および／または過剰発現がヒト膀胱癌において観察され、オーロラＡの増幅は異数性および悪性臨床挙動と関連している（Sen et al.,J.Natl.Cancer Inst.,94:1320-1329(2002)参照）。
【００３１】
オーロラＡの高発現が、５０％以上の結腸直腸癌（Bischoff et al.,EMBO J.,17:3052-3065(1998)およびTakahashi et al.,Jpn.J.Cancer Res.,91:1007-1014(2000)参照）、卵巣癌（Gritsko et al.,Clin.Cancer Res.,9:1420-1426(2003)参照）および胃腫瘍（Sakakura et al.,British Journal of Cancer,84:824-831(2001)）において検出された。
【００３２】
Tanaka et al.,Cancer Research,59:2041-2044(1999)は、乳房の侵襲性管腺癌の９４％においてオーロラＡの過剰発現の証拠を見つけた。
【００３３】
高水準のオーロラＡキナーゼは、腎臓、子宮頸部、神経芽細胞腫、黒色腫(melanoma)、リンパ腫、膵臓、および前立腺腫瘍細胞系でも見られた（Bischoff et al. (1998),EMBO J.,17:3052-3065(1998)、Kimura et al.,J.Biol.Chem.,274:7334-7340(1999)：Zhou et al.,Nature Genetics,20:189-193(1998)、Li et al.,Clin.Cancer Res.,9(3):991-7(2003)）。
【００３４】
オーロラＢは、白血球を含めた多くのヒト腫瘍細胞系において高度に発現される（Katayama et al.,Gene,244:1-7）。この酵素の水準は原発結腸直腸癌において、Duke段階の関数として増加する（Katayama et al.,J.Natl.Cancer Inst.,91:1160-1162(1999)）。
【００３５】
高水準のオーロラ３（オーロラＣ）が数種の腫瘍細胞系において検出されたが、このキナーゼは正常組織において生殖細胞に限定されやすいのである（Kimura et al.,Journal of Biological Chemistry,274:7334-7340(1999)）。結腸直腸癌の約５０％におけるオーロラ３の過剰発現もTakahashi et ai.,Jpn.J.Cancer Res.,91:1007-1014(2001)の論文において報告された。
【００３６】
増殖障害におけるオーロラキナーゼの役割の他の報告がBischoff et al.,Trends in Cell Biology,9:454-459(1999)、Giet et al.,Journal of Cell Science,112:3591-3601(1999)、Dutertre et al.,Oncogene,21:6175-6183(2002)において見られる。
【００３７】
Royceらは、（ＳＴＫ１５またはＢＴＡＫとして知られる）オーロラ２遺伝子の発現が原発乳腫瘍の約１／４において見られることを報告している（Royce ME,Xia W,Sahin AA,Katayama H,Johnston DA,Hortobagyi G,Sen S,Hung MC、STK15/Aurora-A expression in primary breast tumours is correlated with nuclear grade but not with prognosis、Cancer,2004 Jan 1,100(1):12-9）。
【００３８】
子宮内膜癌腫（ＥＣ）は少なくとも２種類の癌からなる：類内膜癌腫（ＥＣＣ）はエストロゲン関連腫瘍であって、多くが正倍数性であり、良い予後を有する。非類内膜癌腫（ＮＥＥＣ、漿液性で、透明な細胞形）はエストロゲン関連でなく、多くが異数性であり、臨床的に悪性である。オーロラはＮＥＥＣの５５．５％において増幅されるが、ＥＥＣにおいてはそうでない（Ｐ＜または＝０．００１）こともわかった（Moreno-Bueno G,Sanchez-Estevez C,Cassia R,Rodriguez-Perales S,Diaz-Uriarte R,Dominguez O,Hardisson D,Andujar M,Prat J,Matias-Guiu X,Cigudosa JC,Palacios J.,Cancer Res.,2003 Sep 15,63(18):5697-702）。
【００３９】
Reichardtら（Oncol.Rep.,2003 Sep-Oct,10(5):1275-9）は、神経膠腫におけるオーロラ増幅について調べるＰＣＲによる定量的ＤＮＡ分析によると、異なるＷＨＯグレードの１６腫瘍のうち５例（３１％）（１×グレードII、１×グレードIII、３×グレードIV）がオーロラ２遺伝子のＤＮＡ増幅を示した、と報告した。オーロラ２遺伝子の増幅が、腫瘍形成の遺伝子経路において役割を果たす、ヒト神経膠腫における非ランダム遺伝子変化かもしれない、と仮説が立てられた。
【００４０】
Hamada et al.（Br.J.Haematol.,2003 May.121(3):439-47）による結果も、オーロラ２が疾患活性のみならず非ホジキンリンパ腫の腫瘍形成も指示する有効な候補であることを示唆している。この遺伝子機能の制限から生じる腫瘍細胞成長の遅延化が、非ホジキンリンパ腫の治療アプローチになるかもしれない。
【００４１】
Gritsko et al.（Clin.Cancer Res.,2003 Apr,9(4):1420-6）による研究においては、オーロラＡのキナーゼ活性およびタンパク質レベルが原発卵巣腫瘍の患者９２例により試験された。インビトロキナーゼ分析においては、４４ケース（４８％）において高いオーロラＡキナーゼ活性を現した。高いオーロラＡタンパク質レベルが５２例（５７％）において検出された。オーロラＡの高タンパク質レベルは高キナーゼ活性とよく相関していた。
【００４２】
Li et al.（Clin.Cancer Res.,2003 Mar,9(3):991-7）により得られた結果は、オーロラＡ遺伝子が膵臓腫瘍および癌腫細胞系において過剰発現されていることを示し、オーロラＡの過剰発現が膵臓癌形成において役割を果たしていることを示唆している。
【００４３】
同様に、オーロラＡ遺伝子増幅とそれがコードする有糸分裂キナーゼの関連増加発現は、ヒト膀胱癌において異数性の悪性臨床挙動と関連していることが示された（J.Natl.Cancer Inst.,2002 Sep 4,94(17):1320-9）。
【００４４】
数グループによる研究（Dutertre S,Prigent C.,Aurora-A overexpression leads to override of the microtubule-kinetochore attachment checkpoint、Mol.Interv.,2003 May,3(3):127-30およびAnand S,Penrhyn-Lowe S,Venkitaraman AR.,Aurora-A amplification overrides the mitotic spindle assembly checkpoint,inducing resistance to Taxol,Cancer Cell.,2003 Jan,3(1):51-62）においては、オーロラキナーゼ活性の過剰発現が一部の現行癌療法に対する耐性と関連していることを示唆している。例えば、マウス胚線維芽細胞におけるオーロラＡの過剰発現は、タキサン誘導体の細胞毒性効果に対するこれら細胞の感受性を減少させられる。したがって、オーロラキナーゼ阻害剤は現行療法に耐性を獲得した患者において特に用いうるかもしれない。
【００４５】
今までに行われた研究に基づくと、オーロラキナーゼ、特にオーロラキナーゼＡおよびオーロラキナーゼＢの阻害は腫瘍発育を阻止する有効な手段になると考えられる。
【００４６】
Harringtonら（Nat.Med.,2004 Mar,10(3):262-7）は、オーロラキナーゼの阻害剤が腫瘍成長を抑制し、インビボにおいて腫瘍退行を誘導することを証明した。研究においては、オーロラキナーゼ阻害剤は癌細胞増殖を妨げ、白血病、結腸直腸、および乳房細胞系を含めたある範囲の癌細胞系において細胞死も誘発した。加えて、それは白血病細胞においてアポトーシスを誘導することにより、白血病の治療において可能性を示した。ＶＸ‐６８０は患者からの難治性原発急性骨髄性白血病(treatment-refractory primary Acute Myelogenous Leukemia)（ＡＭＬ）細胞を効果的に殺した（Andrews,Oncogene,2005,24,5005-5015）。
【００４７】
オーロラ阻害剤に特に応答しやすい癌には、乳房、膀胱、結腸直腸、膵臓、卵巣、非ホジキンリンパ腫、神経膠腫、および非類内膜性子宮内膜癌腫がある。オーロラ阻害剤に特に応答しやすい白血病には、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、Ｂ細胞白血病（マントル細胞）、および急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）がある。
【００４８】
グリコーゲンシンターゼキナーゼ
グリコーゲンシンターゼキナーゼ‐３（ＧＳＫ３）は、ヒトにおいて２種の遍在発現イソ型として存在するセリン‐トレオニンキナーゼである（ＧＳＫ３α＆ベータＧＳＫ３β）。ＧＳＫ３は、胚発育、タンパク質合成、細胞増殖、細胞分化、微小管動力学、細胞運動、および細胞アポトーシスにおいて役割を有するように、関与していた。ＧＳＫ３そのものは、糖尿病、癌、アルツハイマー病、発作、癲癇、運動神経疾患、および／または頭部トラウマの病状の進行に関与していた。系統発生学的には、ＧＳＫ３がサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫ）と最も密接に関連している。
【００４９】
ＧＳＫ３により認識される共通ペプチド基質配列は（Ｓｅｒ／Ｔｈｒ）‐Ｘ‐Ｘ‐Ｘ‐（ｐＳｅｒ／ｐＴｈｒ）であり、ここでＸは（（ｎ＋１）、（ｎ＋２）、（ｎ＋３）位で）いかなるアミノ酸でもよく、ｐＳｅｒおよびｐＴｈｒは各々ホスホ‐セリンおよびホスホ‐トレオニンである（ｎ＋４）。ＧＳＫ３は（ｎ）位において第一セリンまたはトレオニンをリン酸化する。（ｎ＋４）位のホスホ‐セリンまたはホスホ‐トレオニンは、プライミングＧＳＫ３が最大基質代謝回転を行う上で必要らしい。Ｓｅｒ２１におけるＧＳＫ３αまたはＳｅｒ９におけるＧＳＫ３βのリン酸化は、ＧＳＫ３の阻害に至る。変異誘発およびペプチド競合研究から、ＧＳＫ３のリン酸化Ｎ末端が自己阻害メカニズムによりホスホ‐ペプチド基質（Ｓ／ＴＸＸＸｐＳ／ｐＴ）と競合しうるモデルに至った。ＧＳＫ３αおよびＧＳＫβが各々チロシン２７９および２１６のリン酸化において巧妙に調節されることを示唆するデータもある。これら残基においてＰｈｅへの変異はインビボにおいてキナーゼ活性の減少を生じた。ＧＳＫ３βのＸ線結晶構造は、ＧＳＫ３活性化および調節の全側面を解明する上で役立った。
【００５０】
ＧＳＫ３は哺乳動物インスリン応答経路の一部を形成し、グリコーゲンシンターゼをリン酸化することにより不活性化させられる。そのため、ＧＳＫ３の阻害によるグリコーゲンシンターゼ活性、ひいてはグリコーゲン合成の上方調節は、抵抗型II、すなわち非インスリン依存性真性糖尿病（ＮＩＤＤＭ）：体組織がインスリン刺激に耐性となる症状において可能な手段と考えられた。肝臓、脂肪、または筋肉組織における細胞インスリン応答は、細胞外インスリンレセプターへのインスリン結合により誘発される。これはインスリンレセプター基質（ＩＲＳ）タンパク質のリン酸化、次いで原形質膜への動員(recruitment)を引き起こす。ＩＲＳタンパク質の更なるリン酸化は原形質膜へのホスホイノシチド‐３キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）の動員を開始させ、そこでは第二メッセンジャーのホスファチジルイノシチル３，４，５‐三リン酸（ＰＩＰ３）を遊離させられる。これは膜への３‐ホスホイノシチド脱依存性タンパク質キナーゼ１（ＰＤＫ１）およびプロテインキナーゼＢ（ＰＫＢまたはＡｋｔ）の同時局在化を促し、そこではＰＤＫ１がＰＫＢを活性化させる。ＰＫＢは、各々Ｓｅｒ９またはＳｅｒ２１のリン酸化により、ＧＳＫ３αおよび／またはＧＳＫβをリン酸化して阻害しうる。次いでＧＳＫ３の阻害はグリコーゲンシンターゼ活性の上方調節を誘発する。そのため、ＧＳＫ３を阻害しうる治療剤は、インスリン刺激において見られるものと類似した細胞応答を誘導しうるのである。ＧＳＫ３の別なインビボ基質は真核細胞タンパク質合成開始因子２Ｂ（ｅＩＦ２Ｂ）である。ｅＩＦ２Ｂはリン酸化により不活性化され、こうしてタンパク質生合成を抑制させられる。例えば“ラパマイシンの哺乳動物標的”タンパク質（ｍＴＯＲ）の不活性化による、ＧＳＫ３の阻害は、タンパク質生合成を上方調節しうる。最後に、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ活性化プロテインキナーゼ１（ＭＡＰＫＡＰ‐Ｋ１またはＲＳＫ）のようなキナーゼでのＧＳＫ３のリン酸化によるマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）経路を介した、ＧＳＫ３活性の調節に関する証拠が一部存在している。これらのデータは、ＧＳＫ３活性がマイトジェン、インスリン、および／またはアミノ酸刺激により調節されることを示唆している。
【００５１】
ＧＳＫ３βが脊椎動物Ｗｎｔシグナリング経路の主要成分であることも示された。この生合成経路は正常胚発育に重要であることが示され、正常組織において細胞増殖を調節している。ＧＳＫ３はＷｎｔ刺激に応答して阻害されるようになる。これは、Ａｘｉｎ、腺腫様結腸ポリープ（ＡＰＣ）遺伝子産物およびβ‐カテニンのようなＧＳＫ３基質の脱リン酸化に至ることがある。Ｗｎｔ経路の異常調節は多くの癌と関連していた。ＡＰＣおよび／またはβ‐カテニンの変異は結腸直腸癌および他の腫瘍に共通している。β‐カテニンは細胞付着に重要であることも示された。そのためＧＳＫ３は細胞付着過程もある程度調節しうる。既に記載された生化学的経路とは別に、サイクリン‐Ｄ１のリン酸化による細胞分裂の調節、転写因子、例えばｃ‐Ｊｕｎ、ＣＣＡＡＴ／エンハンサー結合タンパク質α（Ｃ／ＥＢＰα）、ｃ‐Ｍｙｃおよび／または他の基質、例えば活性化Ｔ細胞の核因子（ＮＦＡＴｃ）、熱ショック因子‐１（ＨＳＦ‐１）、およびｃ‐ＡＭＰ応答要素結合タンパク質（ＣＲＥＢ）のリン酸化における、ＧＳＫ３の関与を示すデータもある。ＧＳＫ３は細胞アポトーシスを調節する上でも役割を果たすらしいが、組織特異的である。前アポトーシスメカニズムにより細胞アポトーシスを調節する上でＧＳＫ３の役割は、神経アポトーシスが生じうる病状と特に関連している。これらの例は、頭部トラウマ、発作、癲癇、アルツハイマー、および運動神経疾患、進行性核上性麻痺、皮質基底変性、およびピック病である。インビトロにおいて、ＧＳＫ３は微小管関連タンパク質Ｔａｕを過リン酸化しうることが示された。Ｔａｕの過リン酸化は微小管へのその正常結合を壊し、細胞内Ｔａｕフィラメントの形成に至ることもある。これらフィラメントの進行性蓄積は、最終的に神経機能不全および変性に至ると考えられる。そのため、ＧＳＫ３の阻害によるＴａｕリン酸化の阻害は神経変性作用を制限および／または防止する手段を提供するかもしれない。
【００５２】
従来技術
Du PontのＷＯ０２／３４７２１号は、サイクリン依存性キナーゼの阻害剤としてインデノ〔１，２‐ｃ〕ピラゾール‐４‐オン類の種類について開示している。
【００５３】
Bristol Myers SquibbのＷＯ０１／８１３４８号は、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤として５‐チオ‐、スルフィニル‐およびスルホニルピラゾロ〔３，４‐ｂ〕ピリジン類の使用について記載している。
【００５４】
Bristol Myers SquibbのＷＯ００／６２７７８号も、プロテインチロシンキナーゼ阻害剤の種類について開示している。
【００５５】
CyclacelのＷＯ０１／７２７４５Ａ１号は、２‐置換４‐ヘテロアリールピリミジン類およびそれらの製造、それらを含有した医薬組成物、サイクリン依存性キナーゼ（ｃｄｋ）の阻害剤としてのそれらの使用、ひいては癌、白血病、乾癬などのような増殖障害の治療におけるそれらの使用について記載している。
【００５６】
AgouronのＷＯ９９／２１８４５号は、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、およびＣＤＫ６のようなサイクリン依存性キナーゼ（ｃｄｋ）を阻害するための４‐アミノチアゾール誘導体について記載している。本発明は、このような化合物を含有した医薬組成物の治療または予防使用と、このような化合物の有効量とを投与することにより悪性疾患および他の障害を治療する方法にも関する。
【００５７】
AgouronのＷＯ０１／５３２７４号は、ＣＤＫキナーゼ阻害剤として、アミド置換ベンゼン環をＮ含有ヘテロ環式基へ結合させうる化合物の種類について開示している。
【００５８】
ＷＯ０１／９８２９０号（Pharmacia & Upjohn）は、プロテインキナーゼ阻害剤として、３‐アミノカルボニル‐２‐カルボキサミドチオフェン誘導体の種類について開示している。前記化合物は多数のプロテインキナーゼ活性を有すると述べられている。
【００５９】
AgouronのＷＯ０１／５３２６８号およびＷＯ０１／０２３６９号は、サイクリン依存性キナーゼまたはチロシンキナーゼのようなプロテインキナーゼの阻害により細胞増殖を媒介または阻害する化合物について開示している。
【００６０】
ＷＯ００／３９１０８号およびＷＯ０２／００６５１号（双方ともDu Pont Pharmaceuticals）は、トリプシン様セリンプロテアーゼ酵素、特にＸａ因子およびトロンビンの阻害剤である、広域種のヘテロ環式化合物について記載している。前記化合物は、抗凝血剤としてまたは血栓塞栓障害の予防に有用であると述べられている。
【００６１】
米国特許第２００２／００９１１１６号（Zhuら）、ＷＯ０１／１９７８号、およびＷＯ０１／６４６４２号は各々、Ｘａ因子に対する活性を有したヘテロ環式化合物の多様なグループについて開示している。
【００６２】
ＷＯ０３／０３５０６５号（Aventis）は、プロテインキナーゼ阻害剤として広域種のベンゾイミダゾール誘導体について開示しているが、ＣＤＫキナーゼまたはＧＳＫキナーゼに対する活性は開示していない。
【００６３】
ＷＯ９７／３６５８５号および米国特許第５，８７４，４５２号（双方ともMerck）は、ファルネシルトランスフェラーゼの阻害剤である、ビヘテロアリール化合物について開示している。
【００６４】
ＷＯ０３／０６６６２９号（Vertex）は、ＧＳＫ‐３阻害剤としてベンゾイミダゾリルピラゾールアミン類について開示している。
【００６５】
ＷＯ９７／１２６１５号（Warner Lambert）は、１５‐リポキシゲナーゼ阻害剤としてベンゾイミダゾール類について開示している。
【００６６】
ＷＯ２００４／５４５１５号（SmithKline Beecham Corporation）は、トロンボポエチン擬似体としてベンゾイミダゾール類の種類について開示している。
【００６７】
ＷＯ２００４／４１２７７号（Merck）は、アンドロゲンレセプターモジュレーターとしてアミノベンゾイミダゾール類の種類について開示している。
【００６８】
ＷＯ２００５／０２８６２４号（Plexxikon）は、プロテインキナーゼに対する活性を有した化合物用の分子の足場(scaffolds)について開示している。
【００６９】
我々の先の国際特許出願ＰＣＴ／ＧＢ２００４／００２８２４号（ＷＯ２００５／００２５５２号）は、ＣＤＫ、オーロラキナーゼおよびＧＳＫキナーゼ阻害剤として、置換１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の種類について開示している。ＷＯ２００５／００２５５２号において特に命名および例示された化合物の一つは、１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素である。ＷＯ２００５／００２５５２号の実験セクションでは、遊離塩基形で１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の製造が記載されている。
【発明の概要】
【００７０】
本発明は、サイクリン依存性キナーゼ阻害または調節活性およびグリコーゲンシンターゼキナーゼ‐３（ＧＳＫ３）阻害または調節活性および／またはオーロラキナーゼ阻害または調節活性を有し、前記キナーゼにより媒介される病状または症状を予防または治療する上で有用と考えられる化合物を提供する。
【００７１】
そのため、例えば、本発明の化合物は癌を軽減するかまたはその発生頻度を減らす上で有効であろうと考えられる。
【００７２】
第一の態様において、本発明は下記式（Ｉ）の化合物、その塩、その溶媒和物、その互変異性体、またはそのＮ‐オキシドを提供する：
【化１】
0005507049.tif 000002
上記式中、Ｍは下記基Ｄ１および基Ｄ２から選択され：
【化２】
0005507049.tif 000003
上記式中：
（Ａ）Ｍが基Ｄ１である場合：
Ｘは、Ｏ、ＮＨ、およびＮＣＨ３から選択され、
Ａは、結合および基ＮＲ２から選択され、ここでＲ２は水素またはメチルであり、
Ｅは、結合、ＣＨ２、ＣＨ（ＣＮ）、およびＣ（ＣＨ３）２から選択され、
Ｒ１は、以下から選択され：
（ｉ）ヒドロキシ、フッ素、アミノ、メチルアミノ、メチル、またはエチルで場合により置換された３〜５環員のシクロアルキル基、
（ii）Ｏ、Ｎ、Ｓ、およびＳＯ２から選択される一または二つのヘテロ原子環員を含有する４〜６環員の飽和へテロ環式基、ここでへテロ環式基は場合によりＣ１‐４アルキル、アミノまたはヒドロキシで置換され、但し非置換４‐モルホリニル、非置換テトラヒドロピラン‐４‐イル、非置換２‐ピロリジニルと非置換および１‐置換ピペリジン‐４‐イルは除かれ、
(iii)下記式の２，５‐置換フェニル基：
【化３】
0005507049.tif 000004
上記式中、（ａ）ＸがＮＨまたはＮ‐ＣＨ３である場合、Ｒ３は塩素およびシアノから選択され、および（ｂ）ＸがＯである場合、Ｒ３はＣＮであり、
（iv）基ＣＲ６Ｒ７Ｒ８、ここでＲ６およびＲ７は各々水素およびメチルから選択され、Ｒ８は水素、メチル、Ｃ１‐４アルキルスルホニルメチル、ヒドロキシメチル、およびシアノから選択され、
（ｖ）メチル、エチル、メトキシ、およびエトキシから選択される一または二つの置換基で場合により置換されたピリダジン‐４‐イル基、
（vi）置換イミダゾチアゾール基、ここで前記置換基はメチル、エチル、アミノ、フッ素、塩素、アミノ、およびメチルアミノから選択され、および
(vii)場合により置換された１，３‐ジヒドロイソインドール‐２‐イルまたは場合により置換された２，３‐ジヒドロインドール‐１‐イル基、ここで前記任意の置換基は、各場合において、ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１‐４モノおよびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨ‐Ｃ１‐４アルキル、Ｃ１‐４アルキル、およびＣ１‐４アルコキシから選択され、ここで前記Ｃ１‐４アルキルおよびＣ１‐４アルコキシ基は場合によりヒドロキシ、メトキシ、またはアミノで置換され、
(viii)ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１‐４モノおよびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨ‐Ｃ１‐４アルキル、Ｃ１‐４アルキル、およびＣ１‐４アルコキシから選択される一または二つの置換基によって場合により置換された３‐ピリジル、ここで前記Ｃ１‐４アルキルおよびＣ１‐４アルコキシ基は場合によりヒドロキシ、メトキシ、またはアミノにより置換され、但し化合物２‐オキソ‐１，２‐ジヒドロピリジン‐３‐カルボン酸〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕アミドおよび２，６‐ジメトキシ‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕ニコチンアミドは除かれ、
（ix）ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１‐４モノおよびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨ‐Ｃ１‐４アルキル、Ｃ１‐４アルキル、およびＣ１‐４アルコキシから選択される一または二つの置換基によって場合により置換されたチオモルホリンまたはそのＳ‐オキシドもしくはＳ，Ｓ‐ジオキシド、ここで前記Ｃ１‐４アルキルおよびＣ１‐４アルコキシ基は場合によりヒドロキシ、メトキシ、またはアミノにより置換され、および
Ｅ‐ＡがＮＲ２である場合、Ｒ１は追加的に以下から選択され：
（ｘ）２‐フルオロフェニル、３‐フルオロフェニル、４‐フルオロフェニル、２，４‐ジフルオロフェニル、３，４‐ジフルオロフェニル、２，５‐ジフルオロフェニル、３，５‐ジフルオロフェニル、２，４，６‐トリフルオロフェニル、２‐メトキシフェニル、５‐クロロ‐２‐メトキシフェニル、シクロヘキシル、非置換４‐テトラヒドロピラニル、およびtert‐ブチル、
（xi）基ＮＲ１０Ｒ１１、ここでＲ１０およびＲ１１は各々Ｃ１‐４アルキルであるか、またはＲ１０およびＲ１１は、ＮＲ１０Ｒ１１がＯ、Ｎ、Ｓ、およびＳＯ２から選択される第二のヘテロ原子環員を場合により含有する４〜６環員の飽和へテロ環式基を形成するように結合され、へテロ環式基は場合によりＣ１‐４アルキル、アミノ、またはヒドロキシにより置換され、
(xii)ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１‐４モノおよびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨ‐Ｃ１‐４アルキル、Ｃ１‐４アルキル、およびＣ１‐４アルコキシから選択される一または二つの置換基によって場合により置換されたピリドン、ここで前記Ｃ１‐４アルキルおよびＣ１‐４アルコキシ基は場合によりヒドロキシ、メトキシ、またはアミノにより置換され、
Ｅ‐Ａが、Ｃ（ＣＨ３）２ＮＲ２またはＣＨ２‐ＮＲ２である場合、Ｒ１は、追加的に以下から選択され：
(xiii)非置換２‐フリルおよび２，６‐ジフルオロフェニル、および
Ｅ‐Ａが、Ｃ（ＣＨ３）２ＮＲ２である場合、Ｒ１は追加的に以下から選択され：
(xiv)非置換フェニル、および
ＥがＣＨ２である場合、Ｒ１は追加的に以下から選択され：
（xv）非置換テトラヒドロピラン‐４‐イル、および
（Ｂ）Ｍが基Ｄ２である場合：
Ａは結合および基ＮＲ２から選択され、ここでＲ２は水素またはメチルであり、
Ｅは結合、ＣＨ２、ＣＨ（ＣＮ）、およびＣ（ＣＨ３）２から選択され、
Ｒ１は以下から選択され：
(xvi)下記式の２‐置換３‐フリル基：
【化４】
0005507049.tif 000005
上記式中、Ｒ４およびＲ５は同一であるかまたは異なり、水素およびＣ１‐４アルキルから選択されるか、またはＲ４およびＲ５は、ＮＲ４Ｒ５がＯ、ＮＨ、ＮＭｅ、Ｓ、またはＳＯ２から選択される第二のヘテロ原子または基を場合により含有する５または６員飽和へテロ環式基を形成するように結合され、前記５または６員飽和環は場合によりヒドロキシ、フッ素、アミノ、メチルアミノ、メチル、またはエチルにより置換され、
(xvii)下記式の５‐置換２‐フリル基：
【化５】
0005507049.tif 000006
上記式中、Ｒ４およびＲ５は同一であるかまたは異なり、水素およびＣ１‐４アルキルから選択されるか、またはＲ４およびＲ５は、ＮＲ４Ｒ５がＯ、ＮＨ、ＮＭｅ、Ｓ、またはＳＯ２から選択される第二のヘテロ原子または基を場合により含有する５または６員飽和へテロ環式基を形成するように結合され、前記５または６員飽和へテロ環式環は場合によりヒドロキシ、フッ素、アミノ、メチルアミノ、メチル、またはエチルにより置換され、但し化合物は５‐ピペリジン‐１‐イルメチルフラン‐２‐カルボン酸〔３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕アミドではなく、
(xviii)下記式の基：
【化６】
0005507049.tif 000007
上記式中、Ｒ９は水素、メチル、エチル、またはイソプロピルであり、ＧはＣＨ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、またはＮＨであり、前記基はＣ１‐４ヒドロカルビル、ヒドロキシ、Ｃ１‐４ヒドロカルビルオキシ、フッ素、アミノ、モノおよびジＣ１‐４アルキルアミノから選択される一、二、または三つの置換基によって場合により置換され、前記Ｃ１‐４ヒドロカルビルおよびＣ１‐４ヒドロカルビルオキシ基は各々ヒドロキシ、フッ素、アミノ、モノまたはジＣ１‐４アルキルアミノによって場合により置換され、および
(xix)下記式の３，５‐二置換フェニル基：
【化７】
0005507049.tif 000008
上記式中、ＸはＯ、ＮＨ、およびＮＣＨ３から選択され、
（Ｃ）Ｍが基Ｄ１である場合：
ＸがＯであり、Ａが基ＮＲ２（Ｒ２は水素である）であり、Ｅが結合であり、Ｒ１が２，６‐ジフルオロフェニルである場合、式（Ｉ）の化合物は、酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸（例えば、Ｌ‐アスコルビン酸）、アスパラギン酸（例えば、Ｌ‐アスパラギン酸）、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、ショウノウ酸（例えば、（＋）ショウノウ酸）、カプリン酸、カプリル酸、炭酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデカン酸、ドデシル硫酸、エタン‐１，２‐ジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、グルコヘプトン酸、Ｄ‐グルコン酸、グルクロン酸（例えば、Ｄ‐グルクロン酸）、グルタミン酸（例えば、Ｌ‐グルタミン酸）、α‐オキソグルタル酸、グリコール酸、馬尿酸、塩酸、イセチオン酸、イソ酪酸、乳酸（例えば、（＋）‐Ｌ‐乳酸および（±）‐ＤＬ‐乳酸）、ラクトビオン酸、ラウリルスルホン酸、マレイン酸、リンゴ酸、（−）‐Ｌ‐リンゴ酸、マロン酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、ナフタレンスルホン酸（例えば、ナフタレン‐２‐スルホン酸）、ナフタレン‐１，５‐ジスルホン酸、ニコチン酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、リン酸、プロピオン酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸（例えば、（＋）‐Ｌ‐酒石酸）、チオシアン酸、トルエンスルホン酸（例えば、ｐ‐トルエンスルホン酸）、吉草酸、およびシナホ酸（xinafoic acid）からなる群より選択される酸と形成される塩から選択される酸付加塩である。
【００７３】
一つの態様において、基Ｍは前記式（Ｉ）のサブグループ（Ａ）および（Ｂ）において定義されている基Ｄ１またはＤ２である。
【００７４】
他の態様において、基Ｍは基Ｄ１であり、式（Ｉ）の化合物は前記式（Ｉ）のサブグループ（Ｃ）において定義されているような１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の酸付加塩である。
【００７５】
具体的態様において、本発明は１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の塩または遊離塩基、特にその乳酸塩を提供する。
【００７６】
本発明は、更に、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素、その塩（例えば、酸付加塩）、その溶媒和物、その互変異性体、またはそのＮ‐オキシドの新規使用を提供する。
【００７７】
本発明は特に以下も提供する：
・サイクリン依存性キナーゼまたはグリコーゲンシンターゼキナーゼ‐３により媒介される病状または症状の予防または治療用の薬剤の製造のための、ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物の使用、
・ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物を必要な対象者に投与することからなる、サイクリン依存性キナーゼまたはグリコーゲンシンターゼキナーゼ‐３により媒介される病状または症状の予防または治療方法、
・ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物を必要な対象者に投与することからなる、サイクリン依存性キナーゼまたはグリコーゲンシンターゼキナーゼ‐３により媒介される病状または症状を軽減するか、またはその発生頻度を減らすための方法、
・異常細胞成長を阻害するために有効な量の、ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物を哺乳動物に投与することからなる、哺乳動物において異常細胞成長を含む疾患または症状、またはそれから生じる疾患または症状の治療方法、
・異常細胞成長を阻害するために有効な量の、ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物を哺乳動物に投与することからなる、哺乳動物において異常細胞成長を含む疾患または症状、またはそれから生じる疾患または症状を軽減するか、またはその発生頻度を減らすための方法、
・ｃｄｋキナーゼ（例えば、ｃｄｋ１またはｃｄｋ２）またはグリコーゲンシンターゼキナーゼ‐３活性を阻害するために有効な量の、ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物を哺乳動物に投与することからなる、哺乳動物において異常細胞成長を含む疾患または症状、またはそれから生じる疾患または症状の治療方法、
・ｃｄｋキナーゼ（例えば、ｃｄｋ１またはｃｄｋ２）またはグリコーゲンシンターゼキナーゼ‐３活性を阻害するために有効な量の、ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物を哺乳動物に投与することからなる、哺乳動物において異常細胞成長を含む疾患または症状、またはそれから生じる疾患または症状を軽減するか、またはその発生頻度を減らすための方法、
・ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例のキナーゼ阻害化合物と、キナーゼとを接触させることからなる、サイクリン依存性キナーゼまたはグリコーゲンシンターゼキナーゼ‐３を阻害する方法、
・ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物を用いてサイクリン依存性キナーゼまたはグリコーゲンシンターゼキナーゼ‐３の活性を阻害することにより細胞過程(cellular process)（例えば、細胞分裂）を調節する方法、
・オーロラキナーゼ（例えば、オーロラＡキナーゼおよび／またはオーロラＢキナーゼ）の上方調節により特徴付けられる疾患または症状の予防または治療用の薬剤の製造のための、ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物の使用、
・癌の予防または治療用の薬剤の製造のための、ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物の使用（前記癌はオーロラキナーゼ（例えば、オーロラＡキナーゼおよび／またはオーロラＢキナーゼ）の上方調節により特徴付けられるものである）、
・オーロラＡ遺伝子のＩｌｅ３１変種を有するサブ群から選択される患者における癌の予防または治療用の薬剤の製造のための、ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物の使用、
・オーロラＡ遺伝子のＩｌｅ３１変種を有するサブ群の一部を形成していると診断された患者における癌の予防または治療用の薬剤の製造のための、ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物の使用、
・ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物を投与することからなる、オーロラキナーゼ（例えば、オーロラＡキナーゼおよび／またはオーロラＢキナーゼ）の上方調節により特徴付けられる疾患または症状の予防または治療方法、
・ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物を投与することからなる、オーロラキナーゼ（例えば、オーロラＡキナーゼおよび／またはオーロラＢキナーゼ）の上方調節により特徴付けられる疾患または症状を軽減するか、またはその発生頻度を減らすための方法、
・癌に罹患した、または罹患した疑いがある患者における癌の予防または治療の（またはそれを軽減するか、またはその発生頻度を減らす）ための方法、前記方法は(ｉ)患者がオーロラＡ遺伝子のＩｌｅ３１変種を有するか否かを調べるために、患者を診断検査に付し、および(ii)患者が前記変種を有する場合は、その後でオーロラキナーゼ阻害活性を有したここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物を患者に投与することからなり、
・オーロラキナーゼ（例えば、オーロラＡキナーゼおよび／またはオーロラＢキナーゼ）の上方調節により特徴付けられる病状または症状の予防または治療の（またはそれを軽減するか、またはその発生頻度を減らす）ための方法、前記方法は(ｉ)オーロラキナーゼの上方調節に特有のマーカーを検出する診断検査に患者を付し、および(ii)診断検査がオーロラキナーゼの上方調節を示す場合は、その後でオーロラキナーゼ阻害活性を有したここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物を患者に投与することからなる、
・（ａ）ＣＤＫキナーゼの過剰活性化、および／または（ｂ）正常ＣＤＫ活性に対する経路の増感、および／または（ｃ）サイクリンＥの上方調節により特徴付けられる病状または症状の予防または治療の（またはそれを軽減するか、またはその発生頻度を減らす）ための方法、前記方法は(ｉ)（ａ）および／または（ｂ）および／または（ｃ）に特有のマーカーを検出する診断検査に患者を付し、および(ii)診断検査が（ａ）および／または（ｂ）および／または（ｃ）を示す場合は、その後でＣＤＫキナーゼ阻害活性を有したここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物を患者に投与することからなる、
・ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物が、前記化合物で治療されやすい疾患または症状を有すると本明細書において記載された診断検査のいずれか１以上により特定された患者のサブ群へ（例えば、治療有効量により）投与される、治療方法、医学的使用、または前記使用向け化合物、
・本明細書において記載されている病状の予防または治療用の薬剤の製造のための、ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物の使用、
・本明細書において記載されている病状の予防または治療に有用な、ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物、
・ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物の治療有効量を哺乳動物に投与することからなる、本明細書において記載されている病状または症状の予防または治療の（またはそれを軽減するか、またはその発生頻度を減らす）ための方法、
・ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物と薬学上許容される担体を含んでなる医薬組成物、
・水中において１ｍｇ／ｍＬ以上、典型的には５ｍｇ／ｍＬ以上、更に典型的には１５ｍｇ／ｍＬ以上、更に典型的には２０ｍｇ／ｍＬ以上、好ましくは２５ｍｇ／ｍＬ以上の溶解度を有する塩の形態によりここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物を含んでなる、水溶液形で投与用の医薬組成物、
・薬剤として使用される、ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物、
・前記されたおよびその他で記載されている使用および方法のための、ここで定義されているような化合物、
・Ｂ細胞リンパ腫の治療に有用な、ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物、その塩（例えば、酸付加塩）、その溶媒和物、その互変異性体、またはそのＮ‐オキシド、
・慢性リンパ性白血病の治療に有用な、ここで定義される式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物、その塩（例えば、酸付加塩）、その溶媒和物、その互変異性体、またはそのＮ‐オキシド、
・拡散性大Ｂ細胞リンパ腫の治療に有用な、ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物、その塩（例えば、酸付加塩）、その溶媒和物、その互変異性体、またはそのＮ‐オキシド、
・ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物、その塩（例えば、酸付加塩）、その溶媒和物、その互変異性体、またはそのＮ‐オキシドを治療の必要な患者へ投与することによる、Ｂ細胞リンパ腫、拡散性大Ｂ細胞リンパ腫、または慢性リンパ性白血病の治療方法、
・白血病、特に再発性または難治性急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、急性リンパ性白血病および慢性骨髄性白血病の治療に有用な、ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、もしくは(XXX)またはそれらのサブグループまたは例の化合物、その塩（例えば、酸付加塩）、その溶媒和物、その互変異性体、またはそのＮ‐オキシド、
・前記されたおよびその他において記載の使用および方法のための、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の酸付加塩または遊離塩基、特に乳酸塩、
【００７８】
一般的優先度および定義
以下の一般的優先度および定義は、内容がそれ以外を示していない限り、部分Ｄ１、Ｄ２、Ａ、Ｅ、Ｘ、Ｘａ、およびＲ１〜Ｒ９とそれらの様々なサブグループ、サブ定義、例および態様の各々に該当する。
【００７９】
ここで式（Ｉ）への言及は、内容がそれ以外を要求していない限り、式(II)〜(VIII)と式（Ｉ）とに属するいずれか他のサブグループの化合物にも言及していると解釈される。
【００８０】
ここで用いられているオーロラキナーゼの上方調節という用語は、遺伝子増幅（すなわち、マルチ遺伝子コピー）および転写効果による発現増加を含めたオーロラキナーゼの高発現または過剰発現と、変異による活性化とを含めたオーロラキナーゼの機能亢進および活性化を含めて定義される。
【００８１】
ここで用いられている“飽和”という用語は、環原子間に多重結合が存在しない環に関する。
【００８２】
ここで用いられている“ヒドロカルビル”という用語は、単独であろうと、または“ヒドロカルビルオキシ”のような複合語の一部であろうと、全炭素主鎖を有する脂肪族および脂環式基を包含した一般用語である。ヒドロカルビル基の例としては、アルキル、シクロアルキル、シクロアルケニル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキルアルキル、シクロアルケニルアルキルがある。具体的なヒドロカルビル基はアルキルおよびシクロアルキル基のような飽和基である。
【００８３】
ヒドロカルビルオキシ基の例としては、アルコキシ、シクロアルコキシ、シクロアルケノキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、シクロアルキルアルキルオキシ、シクロアルケニルアルキルオキシがある。具体的なヒドロカルビルオキシ基はアルコキシのような飽和基である。
【００８４】
ここで用いられている接頭語“Ｃ１‐ｎ”（ｎは、整数である）は、所定基における炭素原子の数に関する。そのため、Ｃ１‐４ヒドロカルビル基は１〜４の炭素原子を含有し、一方Ｃ１‐３ヒドロカルビルオキシ基は１〜３の炭素原子を含有する、などである。
【００８５】
Ｃ１‐４ヒドロカルビル基の例としてはＣ１‐３ヒドロカルビル基またはＣ１‐２ヒドロカルビル基があり、具体例はＣ１、Ｃ２、Ｃ３、およびＣ４ヒドロカルビル基から選択されるいずれかの個別値または値の組合せである。
【００８６】
“アルキル”という用語は直鎖および分岐鎖双方のアルキル基に及ぶ。アルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ‐ブチル、イソブチルおよびtert‐ブチルである。
【００８７】
シクロアルキル基の例は、シクロプロパン、シクロブタン、およびシクロペンタンから誘導されるものである。
【００８８】
アルケニル基の例は、エテニル（ビニル）、１‐プロペニル、２‐プロペニル（アリル）、イソプロペニル、ブテニル、およびブタ‐１，４‐ジエニルである。
【００８９】
シクロアルケニル基の例は、シクロプロペニルおよびシクロブテニルである。
【００９０】
アルキニル基の例は、エチニルおよび２‐プロピニル（プロパルギル）基である。
【００９１】
シクロアルキルアルキルおよびシクロアルケニルアルキルの例としては、シクロプロピルメチルがある。
【００９２】
アルコキシ基の例は、メトキシ、エトキシ、ｎ‐プロピルオキシ、ｉ‐プロピルオキシ、ｎ‐ブトキシ、イソブトキシ、およびtert‐ブトキシである。
【００９３】
アルキル基がモノアルキルアミノまたはジアルキルアミノ基の一部を形成している場合、アルキル基は前記アルキル基の例のいずれでもよい。具体的なアルキルアミノまたはジアルキルアミノ基はメチルアミノ、ジメチルアミノ、エチルアミノ、ジエチルアミノ、ｎ‐プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ブチルアミノ、イソブチルアミノ、およびｉ‐ブチルアミノである。具体的なアルキル‐およびジアルキルアミノ基は、メチルアミノおよびジメチルアミノである。
【００９４】
ここで用いられている“飽和ヘテロ環式基”という用語は、隣接環員間に多重結合を含有しないヘテロ環式基に関する。飽和ヘテロ環式基は、Ｏ、Ｓ、およびＮから選択される１または２のヘテロ原子環員を含有しうる。
【００９５】
内容に応じて、ヘテロ環式基は、例えば、環式エーテル部分（例えば、テトラヒドロフランおよびジオキサンの場合）、環式チオエーテル部分（例えば、テトラヒドロチオフェンおよびジチアンの場合）、環式アミン部分（例えば、ピロリジンの場合）、環式アミド部分（例えば、ピロリドンの場合）、環式チオアミド、環式チオエステル、環式尿素（例えば、イミダゾリジン‐２‐オンの場合）、環式エステル部分（例えば、ブチロラクトンの場合）、環式スルホン（例えば、スルホランおよびスルホレンの場合）、環式スルホキシド、環式スルホンアミド、およびそれらの組合せ（例えば、チオモルホリン）を含有しうる。
【００９６】
飽和ヘテロ環式基は、典型的には単環式であり、他で言及されていない限り、通常４、５、または６環員を含有している。
【００９７】
４環員を含有する飽和ヘテロ環式基の具体例はアゼチジン基である。
【００９８】
５環員を含有する飽和ヘテロ環式基の例としては、ピロリジン（例えば、１‐ピロリジニル、２‐ピロリジニルおよび３‐ピロリジニル）、ピロリドン、テトラヒドロフラン、およびテトラヒドロチオフェンがある。
【００９９】
６環員を含有する飽和ヘテロ環式基の例としては、モルホリン、チオモルホリン、チオモルホリンＳ‐オキシド、チオモルホリンＳ，Ｓ‐ジオキシド、ピペリジン（例えば、１‐ピペリジニル、２‐ピペリジニル、３‐ピペリジニルおよび４‐ピペリジニル）、ピペリドン、ジオキサン、テトラヒドロピラン（例えば、４‐テトラヒドロピラニル）、ピペラゾン、ピペラジン、およびＮ‐アルキルピペラジン、例えばＮ‐メチルピペラジンがある。
【０１００】
式（Ｉ）のサブグループ（Ａ）および（Ｂ）においてＤ１、Ｄ２、Ａ、Ｅ、Ｒ１〜Ｒ９、およびＸに関する具体的態様および優先度
一つの一般的な態様において、Ｍは基Ｄ１である。
【０１０１】
他の一般的な態様において、Ｍは基Ｄ２である。
【０１０２】
ＸはＯ、ＮＨ、およびＮＣＨ３から選択される。一つの具体的態様において、ＸはＯである。
【０１０３】
Ａは、結合および基ＮＲ２から選択され、ここでＲ２は水素またはメチルである。
【０１０４】
一つの態様において、Ａは結合である。
【０１０５】
他の態様において、Ａは基ＮＲ２であり、ここでＲ２は水素またはメチルである。
【０１０６】
Ｅは、結合、ＣＨ２、ＣＨ（ＣＮ）、およびＣ（ＣＨ３）２から選択される。
【０１０７】
化合物の１サブグループにおいて、Ｅは結合である。
【０１０８】
化合物の他のサブグループにおいて、ＥはＣＨ２である。
【０１０９】
化合物の別なサブグループにおいて、ＥはＣＨ（ＣＮ）である。
【０１１０】
化合物の他のサブグループにおいて、ＥはＣ（ＣＨ３）２である。
【０１１１】
Ｍが基Ｄ１である場合、Ｒ１は基（ｉ）、（ii）、(iii)、（iv）、（ｖ）、（vi）、(vii)、(viii)、（ix）、（ｘ）、（xi）、および(xii)から選択される。
【０１１２】
Ｍが基Ｄ１であり、Ｅ‐ＡがＣ（ＣＨ３）２ＮＲ２またはＣＨ２‐ＮＲ２である場合、Ｒ１は追加的に：
(xiii)非置換２‐フリルおよび２，６‐ジフルオロフェニル
から選択しうる。
【０１１３】
Ｍが基Ｄ１であり、Ｅ‐ＡがＣ（ＣＨ３）２ＮＲ２である場合、Ｒ１は追加的に：
(xiv)非置換フェニル
から選択しうる。
【０１１４】
Ｍが基Ｄ１であり、ＥがＣＨ２である場合、Ｒ１は追加的に：
（xv）非置換テトラヒドロピラン‐４‐イル
から選択しうる。
【０１１５】
基（ｉ）〜（xv）のリストにおける各個別基は本発明の別々な態様を表わしている。
【０１１６】
態様（ｉ）において、Ｒ１はヒドロキシ、フッ素、アミノ、メチルアミノ、メチル、またはエチルによって場合により置換された３〜５環員のシクロアルキル基である。
【０１１７】
具体的なシクロアルキル基は場合により置換されたシクロプロピルおよびシクロブチル基、更に典型的には場合により置換されたシクロプロピル基である。好ましい態様において、Ｒ１は非置換シクロプロピル基である。
【０１１８】
態様（ii）において、Ｒ１はＯ、Ｎ、Ｓ、およびＳＯ２から選択される一または二つのヘテロ原子環員を含有する４〜６環員の飽和へテロ環式基であり、へテロ環式基は場合によりＣ１‐４アルキル、アミノ、またはヒドロキシで置換され、但し非置換４‐モルホリニル、非置換テトラヒドロピラン‐４‐イル、非置換２‐ピロリジニルと非置換および１‐置換ピペリジン‐４‐イルとを除く。
【０１１９】
飽和へテロ環式基の例は、前記の一般的優先度および定義で示されている通りである。
【０１２０】
飽和へテロ環式基の具体例には：
・Ｏ、Ｎ、およびＳから選択される単一ヘテロ原子環員を含有する５員環（非置換２‐ピロリジニル以外）、
・Ｏ、Ｎ、およびＳから選択される二つのヘテロ原子環員を含有する６員環（非置換４‐モルホリニル以外）がある。
【０１２１】
飽和へテロ環式基は置換されているか、または非置換である。一つの態様において、それらは非置換である。他の態様において、それらは１または２のＣ１‐４アルキル基、例えば一または二つのメチル基により置換される。
【０１２２】
一つの具体的な飽和へテロ環式基は、場合により置換されたテトラヒドロフラン基（例えば、テトラヒドロフラン‐２‐イルおよびテトラヒドロフラン‐３‐イル）、更に好ましくは非置換テトラヒドロフラン基である。
【０１２３】
態様(iii)において、Ｒ１は下記式の２，５‐置換フェニル基である：
【化８】
0005507049.tif 000009
上記式中、（ａ）ＸがＮＨまたはＮ‐ＣＨ３である場合、Ｒ３は塩素およびシアノから選択され、および（ｂ）ＸがＯである場合、Ｒ３はＣＮである。
【０１２４】
態様(iii)に属する化合物の１サブグループにおいて、ＸはＮ‐ＣＨ３であり、Ｒ３は塩素およびシアノから選択される。
【０１２５】
態様(iii)に属する化合物の他のサブグループにおいて、ＸはＯであり、Ｒ３はＣＮである。
【０１２６】
態様（iv）において、Ｒ１は基ＣＲ６Ｒ７Ｒ８であり、ここでＲ６およびＲ７は各々水素およびメチルから選択され、Ｒ８は水素、メチル、Ｃ１‐４アルキルスルホニルメチル、ヒドロキシメチル、およびシアノから選択される。
【０１２７】
態様（iv）において、Ｒ１の具体例はメチル、シアノメチル、ＨＯＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２‐、および２‐メチルスルホニルエチルである。
【０１２８】
態様（iv）において、Ｒ１の別の具体例はメチルおよびイソプロピルである。
【０１２９】
態様（ｖ）において、Ｒ１はメチル、エチル、メトキシ、およびエトキシから選択される一または二つの置換基によって場合により置換されたピリダジン‐４‐イル基である。ピリダジニル基はピリダジン‐３‐イルまたはピリダジン‐４‐イル基であるが、典型的にはピリダジン‐４‐イルである。具体的な置換基はメトキシ基であり、例えばピリダジニル基は二つのメトキシ置換基を有してもよい。
【０１３０】
態様（vi）において、Ｒ１は置換イミダゾチアゾール基であり、ここで置換基はメチル、エチル、アミノ、フッ素、塩素、アミノ、およびメチルアミノから選択される。具体的な置換基はメチルである。
【０１３１】
態様(vii)において、Ｒ１は場合により置換された１，３‐ジヒドロイソインドール‐２‐イルまたは場合により置換された２，３‐ジヒドロインドール‐１‐イル基であり、任意の置換基は、各場合において、ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１‐４モノおよびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨ‐Ｃ１‐４アルキル、Ｃ１‐４アルキル、およびＣ１‐４アルコキシから選択され、ここでＣ１‐４アルキルおよびＣ１‐４アルコキシ基は場合によりヒドロキシ、メトキシ、またはアミノで置換される。
【０１３２】
具体的な置換基は、メチル、エチル、フッ素、塩素（好ましくは、ジヒドロインドールまたはジヒドロイソインドールのアリール環上のみ）、ＣＯＮＨ２、アミノ、メチルアミノ、ジメチルアミノ、およびメトキシから選択される。
【０１３３】
態様(vii)に属する化合物の１サブグループにおいて、ジヒドロインドールまたはジヒドロインドールは各々非置換である。
【０１３４】
態様(viii)において、Ｒ１はヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１‐４モノおよびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨ‐Ｃ１‐４アルキル、Ｃ１‐４アルキル、およびＣ１‐４アルコキシから選択される一または二つの置換基によって場合により置換された３‐ピリジルであり、ここでＣ１‐４アルキルおよびＣ１‐４アルコキシ基は場合によりヒドロキシ、メトキシ、またはアミノにより置換され、但しそれは化合物２，６‐ジメトキシ‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕ニコチンアミドまたは化合物２‐オキソ‐１，２‐ジヒドロピリジン‐３‐カルボン酸〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕アミドを形成しない。
【０１３５】
一つの態様において、Ｒ１はヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１‐４モノおよびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨ‐Ｃ１‐４アルキル、Ｃ１‐４アルキル、およびＣ１‐４アルコキシから選択される一または二つの置換基によって場合により置換された３‐ピリジルであり、ここでＣ１‐４アルキルおよびＣ１‐４アルコキシ基は場合によりヒドロキシ、メトキシ、またはアミノにより置換されるが、Ｒ１が３‐ピリジルであり、ＸがＯであり、Ａが結合およびＥが結合である場合、ピリジルはハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１‐４モノおよびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨ‐Ｃ１‐４アルキル、Ｃ１‐４アルキル、およびＣ２‐４アルコキシから選択される一または二つの置換基を有し、ここでＣ１‐４アルキルおよびＣ１‐４アルコキシ基は場合によりヒドロキシ、メトキシ、またはアミノにより置換される。
【０１３６】
具体的な置換基は、メチル、エチル、フッ素、塩素、ＣＯＮＨ２、アミノ、メチルアミノ、ジメチルアミノ、およびメトキシから選択される。別な具体的な置換基は、メチル、エチル、フッ素、塩素、ＣＯＮＨ２、アミノ、メチルアミノ、およびジメチルアミノから選択される。
【０１３７】
化合物の１サブグループにおいて、３‐ピリジル基は非置換である。
【０１３８】
態様（ix）において、Ｒ１はハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１‐４モノおよびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨ‐Ｃ１‐４アルキル、Ｃ１‐４アルキル、およびＣ１‐４アルコキシから選択される一または二つの置換基によって場合により置換されたチオモルホリンまたはそのＳ‐オキシドもしくはＳ，Ｓ‐ジオキシドであり、ここでＣ１‐４アルキルおよびＣ１‐４アルコキシ基は場合によりヒドロキシ、メトキシ、またはアミノにより置換される。
【０１３９】
化合物の１サブグループにおいて、チオモルホリンまたはそのＳ‐オキシドもしくはＳ，Ｓ‐ジオキシドは非置換である。
【０１４０】
態様（ｘ）において、Ｅ‐ＡはＮＲ２であり、Ｒ１は２‐フルオロフェニル、３‐フルオロフェニル、４‐フルオロフェニル、２，４‐ジフルオロフェニル、３，４‐ジフルオロフェニル、２，５‐ジフルオロフェニル、３，５‐ジフルオロフェニル、２，４，６‐トリフルオロフェニル、２‐メトキシフェニル、５‐クロロ‐２‐メトキシフェニル、シクロヘキシル、非置換４‐テトラヒドロピラニル、およびtert‐ブチルから選択される。
【０１４１】
態様（xi）において、Ｅ‐ＡはＮＲ２であり、Ｒ１は基ＮＲ１０Ｒ１１であり、ここでＲ１０およびＲ１１は各々Ｃ１‐４アルキルであるか、またはＲ１０およびＲ１１は、ＮＲ１０Ｒ１１がＯ、Ｎ、Ｓ、およびＳＯ２から選択される第二のヘテロ原子環員を場合により含有する４〜６環員の飽和へテロ環式基を形成するように結合され、へテロ環式基は場合によりＣ１‐４アルキル、アミノ、またはヒドロキシにより置換される。
【０１４２】
この態様において、化合物の１サブグループは、Ｒ１０およびＲ１１が各々Ｃ１‐４アルキル、特にメチルである化合物のグループである。
【０１４３】
化合物の他のサブグループは、ＮＲ１０Ｒ１１がＯ、Ｎ、Ｓ、およびＳＯ２から選択される第二のヘテロ原子環員を場合により含有する４〜６環員の飽和へテロ環式基を形成するようにＲ１０およびＲ１１が結合されている化合物のグループであり、へテロ環式基は場合によりＣ１‐４アルキル、アミノ、またはヒドロキシにより置換される。飽和へテロ環式基は一般的優先度および定義セクションにおいて掲載された窒素含有飽和へテロ環式基のいずれでもよいが、具体的な飽和へテロ環式基にはピロリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、およびＮ‐Ｃ１‐４アルキル‐ピペラジニル基がある。このような基は典型的には非置換であるかまたは一もしくは二つのメチル基により置換され、一つの具体的態様では非置換である。
【０１４４】
態様(xii)において、Ｅ‐ＡはＮＲ２であり、Ｒ１はヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、アミノ、Ｃ１‐４モノおよびジアルキルアミノ、ＣＯＮＨ２またはＣＯＮＨ‐Ｃ１‐４アルキル、Ｃ１‐４アルキル、およびＣ１‐４アルコキシから選択される一または二つの置換基によって場合により置換されたピリドン基であり、ここでＣ１‐４アルキルおよびＣ１‐４アルコキシ基は場合によりヒドロキシ、メトキシ、またはアミノにより置換される。
【０１４５】
ピリドン基は、例えばメチルのようなアルキル基によりＮ‐置換され、そうでなければ非置換でもよい。
【０１４６】
態様(xiii)において、Ｅ‐ＡはＣ（ＣＨ３）２ＮＲ２またはＣＨ２‐ＮＲ２であり、Ｒ１は非置換２‐フリルおよび２，６‐ジフルオロフェニルから選択される。
【０１４７】
態様(xiv)において、Ｅ‐ＡはＣ（ＣＨ３）２ＮＲ２であり、Ｒ１は非置換フェニルである。
【０１４８】
態様（xv）において、ＥはＣＨ２であり、Ｒ１は非置換テトラヒドロピラン‐４‐イルである。
【０１４９】
Ｍが基Ｄ２である場合、Ｒ１は基(xvi)、(xvii)、(xviii)、および(xix)から選択される。
【０１５０】
基(xvi)〜(xix)のリストにおける各個別基は本発明の別々の態様を表わしている。
【０１５１】
態様(xvi)において、Ｒ１は下記式の２‐置換３‐フリル基であり：
【化９】
0005507049.tif 000010
上記式中、Ｒ４およびＲ５は同一であるかまたは異なり、水素およびＣ１‐４アルキルから選択されるか、またはＲ４およびＲ５は、ＮＲ４Ｒ５がＯ、ＮＨ、ＮＭｅ、Ｓ、またはＳＯ２から選択される第二のヘテロ原子または基を場合により含有する５または６員飽和へテロ環式基を形成するように結合され、５または６員飽和環は場合によりヒドロキシ、フッ素、アミノ、メチルアミノ、メチル、またはエチルにより置換される。一つの態様において、Ｒ１は下記式の２‐置換３‐フリル基であり：
【化１０】
0005507049.tif 000011
上記式中、Ｒ４およびＲ５は同一であるかまたは異なり、水素およびＣ１‐４アルキルから選択されるか、またはＲ４およびＲ５は、ＮＲ４Ｒ５がＯ、ＮＨ、ＮＭｅ、Ｓ、またはＳＯ２から選択される第二のヘテロ原子または基を場合により含有する５または６員飽和へテロ環式基を形成するように結合され、５または６員飽和環は場合によりヒドロキシ、フッ素、アミノ、メチルアミノ、メチル、またはエチルにより置換されるが、Ａが結合およびＥが結合である場合、Ｒ４およびＲ５は、ＮＲ４Ｒ５が非置換ピペリジンを形成するようには結合されない。
【０１５２】
具体的な飽和へテロ環式基は一般的優先度および定義セクションで前記されている通りであるが、具体的な飽和へテロ環式基にはピロリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、およびＮ‐Ｃ１‐４アルキル‐ピペラジニル基がある。このような基は典型的には非置換であるかまたは一もしくは二つのメチル基により置換され、一つの具体的態様では非置換である。
【０１５３】
Ｒ４およびＲ５が水素およびＣ１‐４アルキルから選択される化合物の具体例は、メチルアミノおよびジメチルアミノ基、更に典型的にはジメチルアミノ基である。
【０１５４】
態様(xvii)において、Ｒ１は下記式の５‐置換２‐フリル基であり：
【化１１】
0005507049.tif 000012
上記式中、Ｒ４およびＲ５は同一であるかまたは異なり、水素およびＣ１‐４アルキルから選択されるか、またはＲ４およびＲ５は、ＮＲ４Ｒ５がＯ、ＮＨ、ＮＭｅ、Ｓ、またはＳＯ２から選択される第二のヘテロ原子または基を場合により含有する５または６員飽和へテロ環式基を形成するように結合され、５または６員飽和へテロ環式環は場合によりヒドロキシ、フッ素、アミノ、メチルアミノ、メチル、またはエチルにより置換され、但し化合物は５‐ピペリジン‐１‐イルメチルフラン‐２‐カルボン酸〔３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕アミドを形成しない。
【０１５５】
具体的な飽和へテロ環式基は一般的優先度および定義セクションで前記されている通りであるが、具体的な飽和へテロ環式基にはピロリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、およびＮ‐Ｃ１‐４アルキル‐ピペラジニル基がある。このような基は典型的には非置換であるか、または一もしくは二つのメチル基により置換され、一つの具体的態様では非置換である。
【０１５６】
態様(xviii)において、Ｒ１は下記式の基であり：
【化１２】
0005507049.tif 000013
上記式中、Ｒ９は水素、メチル、エチル、またはイソプロピルであり、ＧはＣＨ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、またはＮＨであり、前記基はＣ１‐４ヒドロカルビル、ヒドロキシ、Ｃ１‐４ヒドロカルビルオキシ、フッ素、アミノ、モノおよびジＣ１‐４アルキルアミノから選択される一、二、または三つの置換基によって場合により置換され、Ｃ１‐４ヒドロカルビルおよびＣ１‐４ヒドロカルビルオキシ基は各々ヒドロキシ、フッ素、アミノ、モノまたはジＣ１‐４アルキルアミノによって場合により置換される。
【０１５７】
態様(xix)に属する化合物の１サブグループにおいて、ＧはＯおよびＣＨから選択される。
【０１５８】
態様(xviii)において、基Ｒ１は典型的には非置換であるかまたは一もしくは二つのメチル基により置換され、更に典型的には非置換である。
【０１５９】
態様(xix)において、Ｒ１は下記式の３，５‐二置換フェニル基であり：
【化１３】
0005507049.tif 000014
上記式中、ＸａはＸがＯ、ＮＨ、およびＮＣＨ３から選択される通りである。
【０１６０】
好ましくは、ＸａはＮ‐ＣＨ３である。
【０１６１】
部分Ｒ１‐Ａ‐の具体例が表１において示され、星印が基Ｒ１‐Ｅ‐Ａ‐Ｃ（＝Ｏ）‐ＮＨ‐におけるカルボニル基Ｃ＝Ｏとの結合点を示している。
【表１】
0005507049.tif 000015
0005507049.tif 000016
0005507049.tif 000017
【０１６２】
表１において、好ましい基Ｒ１‐Ｅ‐Ａ‐にはＡ１、Ａ４、Ａ１０、Ａ１１、Ａ１３、Ａ２０、Ａ２２、Ａ２３、Ａ２４、Ａ２９、Ａ３０、Ａ３１、Ａ３２、Ａ３８、Ａ４２、Ａ４３、Ａ４４、Ａ４６、Ａ４７、Ａ４９、Ａ５４、およびＡ５６がある。
【０１６３】
他の態様において、基Ｒ１‐Ｅ‐Ａ‐はＡ５７、Ａ５８、またはＡ５９である。
【０１６４】
基Ｒ１‐Ｅ‐Ａ‐の好ましいサブ群にはＡ１、Ａ４、Ａ２０、Ａ２４、Ａ３０、Ａ４４、Ａ４６、およびＡ５４がある。このサブ群において、一つの具体的な基Ｒ１‐Ａ‐は基Ａ２４である。
【０１６５】
本発明の化合物の１サブ群は下記式（II）で表わされ：
【化１４】
0005507049.tif 000018
上記式中、Ｒ１、Ｅ、Ａ、およびＸは前記において定義したものと同義である。
【０１６６】
式（II）において、化合物の１サブグループはＸがＯであるサブグループである。
【０１６７】
式（II）の化合物の１サブグループは下記式(III)の化合物、その塩、特に乳酸塩で表わされる：
【化１５】
0005507049.tif 000019
【０１６８】
式(III)において、化合物の１サブ群はＥが結合であるサブ群である。
【０１６９】
式(III)に属する化合物の他のサブ群は、ＥがＣＨ２またはＣ（ＣＨ３）２であるサブ群である。
【０１７０】
式(III)に属する一つの特に好ましい態様において、Ｅは結合であり、Ｒ２はＨであり、Ｒ１は前記と同義のシクロアルキル基（ｉ）である。一つの態様において、シクロアルキル基はシクロプロピルまたはシクロブチルである。更に好ましくは、Ｒ１はシクロプロピル基である。
【０１７１】
疑問の解消のため、基Ｒ１の各一般的および具体的優先度、態様および例が、別記されない限り、ここで定義されている基Ｒ２および／またはＲ３および／またはＲ４および／またはＲ５および／またはＲ６および／またはＲ７および／またはＲ８および／またはＲ９および／またはＲ１０および／またはＲ１１および／またはＤ１および／またはＤ２および／またはＡおよび／またはＥおよび／またはＸおよび／またはＸａとそれらのサブグループの各一般的および具体的優先度、態様、および例と組み合わせられ、すべてのこのような組合せがこの出願に包含されている、と理解すべきである。
【０１７２】
式（Ｉ）の化合物を構成する様々な官能基および置換基は、典型的には式（Ｉ）の化合物の分子量が１０００を超えないように選択される。更に一般的には、化合物の分子量は７５０以下、例えば７００以下、６５０以下、６００以下、または５５０以下である。更に好ましくは、分子量は５２５以下、例えば５００以下である。
【０１７３】
本発明の具体的化合物は、下記例において示されている通りである。
【０１７４】
本発明の一つの好ましい化合物は、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素とその塩、その溶媒和物、およびその互変異性体である。
【０１７５】
式（Ｉ）のサブグループ（Ａ）および（Ｂ）とそのサブグループおよび態様の化合物の塩、溶媒和物、互変異性体、異性体、Ｎ‐オキシド、エステル、プロドラッグおよび同位元素
それ以外で示されない限り、具体的化合物への言及は、例えば、以下で記載されているそのイオン、その塩、その溶媒和物、およびその保護形も含んでいる。
【０１７６】
式（Ｉ）の多くの化合物は、塩の形態で、例えば酸付加塩、またはある場合にはカルボン酸、スルホン酸、およびリン酸塩のような有機および無機塩基の塩により存在しうる。すべてのこのような塩が本発明の範囲内に属し、式（Ｉ）の化合物への言及には前記化合物の塩の形態を含む。本出願の先のセクションのように、式（Ｉ）へのすべての言及は、内容がそれ以外を示していない限り、ここで定義されているような式(II)、(III)とそれらのサブグループにも言及していると解釈するべきである。
【０１７７】
本発明の塩は、Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use,P.Heinrich Stahl(Editor),Camille G.Wermuth(Editor),ISBN:3-90639-026-8,Hardcover,388 pages,August 2002において記載された方法のような一般的化学法により、塩基性または酸性部分を含有する親化合物から合成される。通常、このような塩は、水または有機溶媒中、または２種の混合液中で、これら化合物の遊離酸または塩基形を適切な塩基または酸と反応させることにより製造される、通常エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノールまたはアセトニトリルのような非水性媒体が用いられる。
【０１７８】
酸付加塩は、無機および有機双方の様々な酸と形成される。酸付加塩の例には、酢酸、２，２‐ジクロロ酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸（例えば、Ｌ‐アスコルビン酸）、Ｌ‐アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、４‐アセトアミド安息香酸、ブタン酸、（＋）ショウノウ酸、ショウノウスルホン酸、（＋）‐（１Ｓ）‐ショウノウ‐１０‐スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、ケイ皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデシル硫酸、エタン‐１，２‐ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２‐ヒドロキシエタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、グルコヘプトン酸、Ｄ‐グルコン酸、グルクロン酸（例えば、Ｄ‐グルクロン酸）、グルタミン酸（例えば、Ｌ‐グルタミン酸）、α‐オキソグルタル酸、グリコール酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、ヨウ化水素酸、イセチオン酸、（＋）‐Ｌ‐乳酸および（±）‐ＤＬ‐乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、リンゴ酸、（−）‐Ｌ‐リンゴ酸、マロン酸、（±）‐ＤＬ‐マンデル酸、メタンスルホン酸、ナフタレン‐２‐スルホン酸、ナフタレン‐１，５‐ジスルホン酸、１‐ヒドロキシ‐２‐ナフトエ酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、リン酸、プロピオン酸、Ｌ‐ピログルタミン酸、サリチル酸、４‐アミノサリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、タンニン酸、（＋）‐Ｌ‐酒石酸、チオシアン酸、ｐ‐トルエンスルホン酸、ウンデシレン酸および吉草酸と、アシル化アミノ酸、およびカチオン交換樹脂からなる群より選択される酸と形成された塩がある。
【０１７９】
酸付加塩は、アスパラギン酸（例えば、Ｄ‐アスパラギン酸）、炭酸、ドデカン酸、イソ酪酸、ラウリルスルホン酸、ムチン酸、ナフタレンスルホン酸（例えば、ナフタレン‐２‐スルホン酸）、トルエンスルホン酸（例えば、ｐ‐トルエンスルホン酸）、およびシナホ酸から選択してもよい。
【０１８０】
塩の一つの具体的グループは、塩酸、ヨウ化水素酸、リン酸、硝酸、硫酸、クエン酸、乳酸、コハク酸、マレイン酸、リンゴ酸、イセチオン酸、フマル酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、吉草酸、酢酸、プロパン酸、ブタン酸、マロン酸、グルクロン酸、およびラクトビオン酸から形成される塩からなる。
【０１８１】
塩の１サブグループは、塩酸、酢酸、アジピン酸、Ｌ‐アスパラギン酸、およびＤＬ‐乳酸から形成される塩からなる。
【０１８２】
塩の他のサブグループは、酢酸、メシル酸、エタンスルホン酸、ＤＬ‐乳酸、アジピン酸、Ｄ‐グルクロン酸、Ｄ‐グルコン酸、および塩酸塩からなる。
【０１８３】
酸付加塩のような塩は対応遊離塩基よりもいくつかの利点を有している。例えば、塩は遊離塩基より下記利点のうち１以上を呈し、それらは：
・より可溶性であり、そのためｉ．ｖ．投与（例えば注入による）の場合に良く、改善された薬物動態を有し、
・良い安定性（例えば、改善された貯蔵寿命）を有し、
・良い熱安定性を有し、
・塩基性が低く、そのためｉ．ｖ．投与の場合に良く、
・生産で利点を有し、
・改善された代謝性を有し、および
・患者間で少ない臨床差を示す。
【０１８４】
ここで記載されている式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)とそれらのサブグループおよび例の化合物の液体（例えば、水性）組成物の製造用に好ましい塩は、所定液体担体（例えば水）中において２５ｍｇ／ｍＬ液体担体（例えば水）以上、更に典型的には５０ｍｇ／ｍＬ以上、好ましくは１００ｍｇ／ｍＬ以上の溶解度を有した塩である。
【０１８５】
他の態様において、ここで記載されている式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)とそれらのサブグループおよび例の化合物の液体（例えば、水性）組成物の製造用に好ましい塩は、所定液体担体（例えば、水または緩衝系）中で１ｍｇ／ｍＬ以上、典型的には５ｍｇ／ｍＬ液体担体（例えば水）以上、更に典型的には１５ｍｇ／ｍＬ以上、更に典型的には２０ｍｇ／ｍＬ以上、好ましくは２５ｍｇ／ｍＬ以上の溶解度を有した塩である。
【０１８６】
他の態様において、好ましい酸付加塩はメシル酸、エタンスルホン酸、Ｄ‐またはＬ‐乳酸、および塩酸塩である。一つの具体的態様において、酸付加塩は乳酸塩、特にＬ‐乳酸またはＤ‐乳酸塩、好ましくはＬ‐乳酸塩である。
【０１８７】
本発明の一つの態様において、２５ｍｇ／ｍＬ以上、典型的には５０ｍｇ／ｍＬ以上、好ましくは１００ｍｇ／ｍＬ以上の濃度で、塩の形態において、ここで記載されている式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)とそれらのサブグループおよび例の化合物を含有した水溶液を含んでなる医薬組成物が提供される。
【０１８８】
本発明の他の態様において、１ｍｇ／ｍＬ以上、典型的には５ｍｇ／ｍＬ液体担体（例えば、水）以上、更に典型的には１５ｍｇ／ｍＬ以上、更に典型的には２０ｍｇ／ｍＬ以上、好ましくは２５ｍｇ／ｍＬ以上の濃度で、塩の形態において、ここで記載されている式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)とそれらのサブグループおよび例の化合物を含有した水溶液を含んでなる医薬組成物が提供される。
【０１８９】
化合物がアニオン性であるか、またはアニオン性となりうる官能基（例えば、‐ＣＯＯＨは‐ＣＯＯ−となりうる）を有していれば、塩は適切なカチオンと形成される。適切な無機カチオンの例には、Ｎａ＋およびＫ＋のようなアルカリ金属イオン、Ｃａ２＋およびＭｇ２＋のようなアルカリ土類金属カチオンと、Ａｌ３＋のような他のカチオンがあるが、それらに限定されない。適切な有機カチオンの例には、アンモニウムイオン（すなわち、ＮＨ４＋）および置換アンモニウムイオン（例えば、ＮＨ３Ｒ＋、ＮＨ２Ｒ２＋、ＮＨＲ３＋、ＮＲ４＋）があるが、それらに限定されない。一部の適切な置換アンモニウムイオンの例は、エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミン、およびトロメタミンと、アミノ酸、例えばリジンおよびアルギニンから誘導されるものである。一般的、四級アンモニウムイオンの例はＮ（ＣＨ３）４＋である。
【０１９０】
式（Ｉ）の化合物がアミン官能基を含有している場合、例えば当業者に周知の方法に従いアルキル化剤との反応により、これらは四級アンモニウム塩を形成しうる。このような四級アンモニウム化合物も式（Ｉ）の範囲内に属する。
【０１９１】
本発明の化合物の塩形は典型的には薬学上許容される塩であり、薬学上許容される塩の例はBerge et al.,1977,”Pharmaceutically Acceptable Salts”,J.Pharm.Sci.,Vol.66,pp.1-19において記載されている。しかしながら、薬学上許容されない塩も中間体として製造してから、薬学上許容される塩へ変換してよい。このような薬学上許容されない塩も、例えば本発明の化合物の精製または分離に際して有用なことがあり、本発明の一部を形成している。
【０１９２】
アミン官能基を含有した式（Ｉ）の化合物はＮ‐オキシドを形成することもある。アミン官能基を含有した式（Ｉ）の化合物へのここでの言及は、Ｎ‐オキシドも含む。
【０１９３】
化合物がいくつかのアミン官能基を含有している場合、１または２以上の窒素原子が酸化されてＮ‐オキシドを形成することもある。Ｎ‐オキシドの具体例は、窒素含有ヘテロサイクルの三級アミンまたは窒素原子のＮ‐オキシドである。
【０１９４】
Ｎ‐オキシドは過酸化水素または過酸（例えば、ペルオキシカルボン酸）のような酸化剤での対応アミンの処理により形成される、例えばAdvanced Organic Chemistry,By Jerry March,4th Edition,Wiley Interscience,pages参照。更に具体的には、Ｎ‐オキシドはL.W.Deady（Syn.Comm.,1977,7,509-514）の操作により製造され、アミン化合物が、例えばジクロロメタンのような不活性溶媒中で、ｍ‐クロロペルオキシ安息香酸（ＭＣＰＢＡ）と反応させられる。
【０１９５】
式（Ｉ）の化合物はいくつかの異なる幾何異性体および互変異性体で存在することがあり、式（Ｉ）の化合物への言及はすべてのこのような形を含む。疑問の解消のため、化合物がいくつかの幾何異性体または互変異性体のうち一つで存在し、一つのみが特に記載または示されていたとしても、他のすべてが式（Ｉ）に含まれる。
【０１９６】
例えば、式（Ｉ）の化合物において、ベンゾイミダゾール基は下記２種の互変異性体Ａ、Ａ′、Ｂ、およびＢ′のいずれもとれる。簡素化のために、一般式（Ｉ）はＡおよびＡ′形を示しているが、前記式は全４種の互変異性体に及ぶと解釈すべきである。
【化１６】
0005507049.tif 000020
【０１９７】
ピラゾール環も互変異性を示すことがあり、下記２種の互変異性体ＣおよびＤで存在しうる。
【化１７】
0005507049.tif 000021
【０１９８】
互変異性体の他の例には、例えば下記互変異性対：ケト／エノール（下記）、イミン／エナミン、アミド／イミノアルコール、アミジン／アミジン、ニトロソ／オキシム、チオケトン／エンチオール、およびニトロ／ａｃｉ‐ニトロのような、例えばケト‐、エノール‐、およびエノラート形がある。
【化１８】
0005507049.tif 000022
【０１９９】
式（Ｉ）の化合物が１以上のキラル中心を含有して、２以上の光学異性体の形で存在しうる場合、式（Ｉ）の化合物への言及は、内容がそれ以外を要求していない限り、個別の光学異性体または２種以上の光学異性体の混合物（例えば、ラセミ混合物）として、そのすべての光学異性体（例えば、エナンチオマー、エピマー、およびジアステレオマー）を含む。
【０２００】
例えば、基Ａは１以上のキラル中心を含有しうる。そのため、ＥおよびＲ１が双方ともリンカー基Ａで同一炭素原子に結合されている場合、前記炭素原子は典型的にはキラルであり、そのため式（Ｉ）の化合物はエナンチオマーの対（２以上のキラル中心が化合物に存在している場合は、エナンチオマーの２以上の対）として存在する。
【０２０１】
光学異性体はそれらの光学活性により（すなわち、＋および−異性体、またはｄおよびｌ異性体として）特徴付けおよび同定されるか、あるいはそれらはCahn,Ingold and Prelogにより作成された“Ｒ”および“Ｓ”命名法を用いて絶対立体化学に基づき特徴付けられる、Advanced Organic Chemistry,by Jerry March,4th Edition,John Wiley & Sons,New York,1992,pages 109-114参照、および更にCahn,Ingold & Prelog,Angew.Chem.Int.Ed.Engl.,1966,5,385-415参照。
【０２０２】
光学異性体はキラルクロマトグラフィー（キラル担体でのクロマトグラフィー）を含めたいくつかの技術により分離され、このような技術は当業者に周知である。
【０２０３】
キラルクロマトグラフィーの代わりに、光学異性体は、（＋）‐酒石酸、（−）‐ピログルタミン酸、（−）‐ジトルロイル‐Ｌ‐酒石酸、（＋）‐マンデル酸、（−）‐リンゴ酸、および（−）‐ショウノウスルホン酸のようなキラル酸とジアステレオマー塩を形成させ、優先的結晶化によりジアステレオマーを分離し、次いで遊離塩基の個別エナンチオマーを得るために塩を解離させることにより分離できる。
【０２０４】
式（Ｉ）の化合物が２種以上の光学異性体として存在している場合、一対のエナンチオマーのうち一方のエナンチオマーは、例えば生物活性に関して、他のエナンチオマーより利点を示すことがある。そのため、ある状況下では、一対のエナンチオマーのうち一方のみ、または複数のジアステレオマーのうち１種のみを治療剤として用いることが望ましい。したがって、本発明は、式（Ｉ）の化合物の少なくとも５５％（例えば、少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、または９５％）が単一の光学異性体（例えば、エナンチオマーまたはジアステレオマー）として存在している、１以上のキラル中心を有する式（Ｉ）の化合物を含有した組成物を提供する。一つの一般的な態様において、式（Ｉ）の化合物の総量の９９％以上（例えば、実質的にすべて）が、単一の光学異性体（例えば、エナンチオマーまたはジアステレオマー）として存在しうる。
【０２０５】
本発明の化合物には１以上の同位元素置換を有する化合物を含み、具体的元素への言及はその範囲内に前記元素の全同位体を含む。例えば、水素への言及はその範囲内に１Ｈ、２Ｈ（Ｄ）、および３Ｈ（Ｔ）を含む。同様に、炭素および酸素への言及はそれらの範囲内に１２Ｃ、１３Ｃ、および１４Ｃと１６Ｏおよび１８Ｏを各々含む。
【０２０６】
同位元素は放射性でもまたは非放射性でもよい。本発明の一つの態様において、化合物は非放射性同位元素を含有している。この化合物は治療用に好ましい。しかしながら、他の態様では、化合物が１種以上の放射性同位元素を含有してもよい。このような放射性同位元素を含有した化合物は診断の場面で有用かもしれない。
【０２０７】
カルボン酸基またはヒドロキシル基を有する式（Ｉ）の化合物のカルボン酸エステルおよびアシルオキシエステルのようなエステルも、式（Ｉ）に含まれる。エステルの例は基‐Ｃ（＝Ｏ）ＯＲを含有する化合物であり、ここでＲはエステル置換基、例えばＣ１‐７アルキル基、Ｃ３‐２０ヘテロシクリル基、またはＣ５‐２０アリール基、好ましくはＣ１‐７アルキル基である。エステル基の具体例としては‐Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ３、‐Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ２ＣＨ３、‐Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ（ＣＨ３）３、および‐Ｃ（＝Ｏ）ＯＰｈがあるが、それらに限定されない。アシルオキシ（逆エステル）基の例は‐ＯＣ（＝Ｏ）Ｒで表わされ、ここでＲはアシルオキシ置換基、例えばＣ１‐７アルキル基、Ｃ３‐２０ヘテロシクリル基、またはＣ５‐２０アリール基、好ましくはＣ１‐７アルキル基である。アシルオキシ基の具体例としては‐ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ３（アセトキシ）、‐ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２ＣＨ３、‐ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３、‐ＯＣ（＝Ｏ）Ｐｈ、および‐ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ２Ｐｈがあるが、それらに限定されない。
【０２０８】
式（Ｉ）には、化合物の多形体、化合物の溶媒和物（例えば、水和物）、複合体（例えば、シクロデキストリンのような化合物との包接複合体またはクラスレート、または金属との錯体）、および化合物のプロドラッグも含まれる。“プロドラッグ”とは、例えば式（Ｉ）の生物活性化合物へインビボにおいて変換される化合物を意味する。
【０２０９】
例えば、一部のプロドラッグは活性化合物のエステル（例えば、生理学上許容される易代謝性エステル）である。代謝に際して、エステル基（‐Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ）は開裂されて活性薬を生じる。このようなエステルは、例えば親化合物でカルボン酸基（‐Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ）のエステル化により形成されるが、適宜に、親化合物に存在する他の反応基を予め保護しておき、次いで必要であれば脱保護する。
【０２１０】
このような易代謝性エステルの例には、Ｒが以下である式‐Ｃ（＝Ｏ）ＯＲのものがある：
Ｃ１‐７アルキル（例えば、‐Ｍｅ、‐Ｅｔ、‐ｎＰｒ、‐ｉＰｒ、‐ｎＢｕ、‐ｓＢｕ、‐ｉＢｕ、‐ｔＢｕ）、
Ｃ１‐７アミノアルキル（例えば、アミノエチル、２‐（Ｎ，Ｎ‐ジエチルアミノ）エチル、２‐（４‐モルホリノ）エチル）、および
アシルオキシ‐Ｃ１‐７アルキル（例えば、アシルオキシメチル、アシルオキシエチル、ピバロイルオキシメチル、アセトキシメチル、１‐アセトキシエチル、１‐（１‐メトキシ‐１‐メチル）エチル‐カルボニルオキシエチル、１‐（ベンゾイルオキシ）エチル、イソプロポキシ‐カルボニルオキシメチル、１‐イソプロポキシ‐カルボニルオキシエチル、シクロヘキシル‐カルボニルオキシメチル、１‐シクロヘキシル‐カルボニルオキシエチル、シクロヘキシルオキシ‐カルボニルオキシメチル、１‐シクロヘキシルオキシ‐カルボニルオキシエチル、（４‐テトラヒドロピラニルオキシ）カルボニルオキシメチル、１‐（４‐テトラヒドロピラニルオキシ）カルボニルオキシエチル、（４‐テトラヒドロピラニル）カルボニルオキシメチル、および１‐（４‐テトラヒドロピラニル）カルボニルオキシエチル）
【０２１１】
しかも、一部のプロドラッグは酵素的に活性化されて活性化合物を生じるか、または更なる化学反応で活性化合物を生じる化合物である（例えば、ＡＤＥＰＴ、ＧＤＥＰＴ、ＬＩＤＥＰＴなどの場合）。例えば、プロドラッグは糖誘導体または他のグリコシド複合体でもよく、またはアミノ酸エステル誘導体でもよい。
【０２１２】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素およびその塩
式（Ｉ）、サブグループ（Ａ）の一つの具体的化合物は、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素である。
【０２１３】
したがって、一つの好ましい態様において、本発明は１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基または酸付加塩を提供する。
【０２１４】
塩が誘導される１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基は、下記式(XXX)を有し：
【化１９】
0005507049.tif 000023
【０２１５】
式(XXX)の化合物は、この出願において、その化学名で１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素、あるいは便宜上“化合物XXX”、“式(XXX)の化合物”または例２４の化合物と称される。これら同義語の各々は、上記式(XXX)において示された、化学名１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素を有する化合物に関する。
【０２１６】
化合物１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基およびその酸付加塩への言及は、それらの範囲内に、そのすべての溶媒和物、互変異性体、および同位体と、状況が許せば、Ｎ‐オキシド、他のイオン形およびプロドラッグを含む。したがって、式(XXX)の別な互変異性体、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（６‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素への言及も、化合物(XXX)に関すると理解すべきである。
【０２１７】
式(XXX)の酸付加塩は、無機および有機双方の様々な酸と形成される塩から選択される。酸付加塩の例には、酢酸、２，２‐ジクロロ酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸（例えば、Ｌ‐アスコルビン酸）、アスパラギン酸（例えば、Ｌ‐アスパラギン酸）、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、４‐アセトアミド安息香酸、ブタン酸、（＋）ショウノウ酸（例えば、（＋）ショウノウ酸）、ショウノウスルホン酸、（＋）‐（１Ｓ）‐ショウノウ‐１０‐スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、炭酸、ケイ皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデカン酸、ドデシル硫酸、エタン‐１，２‐ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２‐ヒドロキシエタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、グルコヘプトン酸、Ｄ‐グルコン酸、グルクロン酸（例えば、Ｄ‐グルクロン酸）、グルタミン酸（例えば、Ｌ‐グルタミン酸）、α‐オキソグルタル酸、グリコール酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、ヨウ化水素酸、イセチオン酸、イソ酪酸、乳酸（例えば、（＋）‐Ｌ‐乳酸、（−）‐Ｄ‐乳酸）、ラクトビオン酸、ラウリルスルホン酸、マレイン酸、リンゴ酸、（−）‐Ｌ‐リンゴ酸、マロン酸、（±）‐ＤＬ‐マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、ナフタレンスルホン酸（例えば、ナフタレン‐２‐スルホン酸）、ナフタレン‐１，５‐ジスルホン酸、１‐ヒドロキシ‐２‐ナフトエ酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、リン酸、プロピオン酸、Ｌ‐ピログルタミン酸、サリチル酸、４‐アミノサリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、タンニン酸、酒石酸（例えば、（＋）‐Ｌ‐酒石酸）、チオシアン酸、トルエンスルホン酸（例えば、ｐ‐トルエンスルホン酸）、ウンデシレン酸、吉草酸およびシナホ酸と、アシル化アミノ酸、およびカチオン交換樹脂からなる群より選択される酸と形成された塩がある。
【０２１８】
塩の一つの具体的グループは、塩酸、ヨウ化水素酸、リン酸、硝酸、硫酸、クエン酸、乳酸、コハク酸、マレイン酸、リンゴ酸、イセチオン酸、フマル酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、吉草酸、酢酸、プロパン酸、ブタン酸、マロン酸、グルクロン酸、およびラクトビオン酸から形成される塩からなる。
【０２１９】
塩の１サブグループは、塩酸、酢酸、アジピン酸、Ｌ‐アスパラギン酸、およびＤ‐またはＬ‐乳酸から形成される塩からなる。
【０２２０】
塩の他のサブグループは、酢酸、メシル酸、エタンスルホン酸、Ｄ‐またはＬ‐乳酸、アジピン酸、Ｄ‐グルクロン酸、Ｄ‐グルコン酸、および塩酸塩からなる。他の態様において、好ましい酸付加塩はメシル酸、エタンスルホン酸、Ｄ‐またはＬ‐乳酸、および塩酸塩である。
【０２２１】
一つの具体的態様において、酸付加塩はＤＬ‐乳酸塩、特にＬ‐乳酸またはＤ‐乳酸塩、好ましくはＬ‐乳酸塩である。
【０２２２】
他の態様において、式(XXX)の化合物の遊離塩基または塩はＬ‐乳酸塩、遊離塩基脱水物、エシル酸塩、遊離塩基、および塩酸塩から選択される。
【０２２３】
別の好ましい態様において、式(XXX)の化合物の塩は乳酸塩およびクエン酸塩とそれらの混合物から選択され、更に好ましくはＬ‐乳酸およびクエン酸塩とそれらの混合物から選択され、Ｌ‐乳酸塩が特に好ましい。１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸およびクエン酸塩に関する本発明の具体的な好ましい態様が、以下で更に詳細に掲載および記載されている。
【０２２４】
他の態様において、式(XXX)の化合物は遊離塩基である。
【０２２５】
本発明の塩、例えば乳酸（例えばＬ‐乳酸）およびクエン酸塩は、Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use,P.Heinrich Stahl(Editor),Camille G.Wermuth(Editor),ISBN:3-90639-026-8,Hardcover,388 pages,August 2002において記載された方法のような一般的化学法により、親化合物１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素から合成される。通常、このような塩は、水または有機溶媒中、または２種の混合液中で、親化合物１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素を適切な酸と反応させることにより製造される、通常、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルのような非水性媒体が用いられる。
【０２２６】
他の態様において、本発明は１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の酸付加塩、例えば乳酸（例えば、Ｌ‐乳酸）およびクエン酸塩の製造方法を提供し、前記方法は溶媒（典型的には有機溶媒）または溶媒の混合液で１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基の溶液を形成し、前記溶液を酸により処理して、酸付加塩の沈殿物を形成させることからなる。
【０２２７】
酸は、遊離塩基が溶解される溶媒と混和性である溶媒中の溶液として加えられる。遊離塩基が最初に溶解される溶媒は、その酸付加塩が不溶性であるものである。一方、遊離塩基が最初に溶解される溶媒は、酸付加塩が少なくとも一部可溶性であるものでもよく、次いで酸付加塩がさほど可溶性でない異なる溶媒が、塩が溶液から沈殿するように加えられる。
【０２２８】
乳酸（例えばＬ‐乳酸）およびクエン酸塩のような酸付加塩を形成する別の方法では、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素が、揮発性酸を含んでなる溶媒と場合により補助溶媒に溶解されて、揮発性酸との酸付加塩の溶液を形成し、次いで得られた溶液が塩を単離するために濃縮または蒸発される。こうして得られる酸付加塩の別の例は酢酸塩である。
【０２２９】
別の態様において、本発明は、ここで定義されているような１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の酸付加塩、例えば乳酸（例えば、Ｌ‐乳酸）およびクエン酸塩の形成方法を提供し、前記方法は下記式(XXX)の化合物：
【化２０】
0005507049.tif 000024
を有機溶媒中においてここで定義されている有機または無機酸で処理して、有機または無機酸との１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の酸付加塩を得、場合によりこうして形成された酸付加塩を単離することからなる。
【０２３０】
塩は典型的にはそれが形成されると有機溶媒から沈殿し、例えば濾過により、溶液から固体物の分離により単離される。
【０２３１】
本発明のある塩の形態は、当業者に周知の方法で、遊離塩基に、場合により他の塩の形態に変換してもよい。例えば、遊離塩基はアミン固定相を含有したカラム（例えば、Strata‐ＮＨ２カラム）に塩溶液を通すことにより形成される。一方、水中における塩の溶液が、塩を分解して遊離塩基を沈殿させるために、重炭酸ナトリウムで処理されてもよい。遊離塩基は、上記されたまたは他で記載された方法の一つにより、他の酸と混合してもよい。
【０２３２】
酸付加塩、例えば乳酸（例えばＬ‐乳酸）およびクエン酸塩のような好ましい塩は、いくつかの利点を有している。例えば、塩は下記利点のうち１以上を呈し、それらは：
・より可溶性であり、特にそれらは水溶液中で改善された溶解性を有し、そのためｉ．ｖ．投与（例えば注入による）の場合に良い、
・溶液ｐＨを制御でき、そのためｉ．ｖ．投与の場合に良い、
・改善された抗癌活性を有する、および
・改善された治療係数を有する。
【０２３３】
塩の別な利点は、それらが：
・良い安定性、例えば熱安定性（例えば、改善された貯蔵寿命）を有し、
・生産で利点を有し、および
・良い物理化学的性質を有することである。
【０２３４】
本発明の乳酸（例えばＬ‐乳酸）塩が、それが水に良い溶解性を有し、緩衝系で良い溶解性を示すことから、特に有利である。
【０２３５】
液体（例えば、水性）医薬組成物の製造用に好ましい塩は、所定液体担体（例えば、水）中において１ｍｇ／ｍＬ以上、典型的には５ｍｇ／ｍＬ液体担体（例えば水）以上、更に典型的には１５ｍｇ／ｍＬ以上、更に典型的には２０ｍｇ／ｍＬ以上、好ましくは２５ｍｇ／ｍＬ以上の溶解度を有した酸付加塩（例えば乳酸塩）である。
【０２３６】
塩の水溶液（例えば、医薬組成物の形態）は本発明の別の態様を表わす。このような溶液は緩衝化しても、または緩衝化しなくてもよい。溶液中で、塩は典型的には解離して、１種以上の対イオンと一緒にプロトン化形で１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素を形成する。したがって、他の態様において、本発明は、１種以上の対イオンおよび場合により１種以上の別な対イオン（例えば、塩化ナトリウムまたは緩衝剤のような他の塩から誘導される対イオン）と一緒にプロトン化形で、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の水溶液も提供する。
【０２３７】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の塩は、典型的には薬学上許容される塩であり、薬学上許容される塩の例はBerge et al.,1977,”Pharmaceutically Acceptable Salts”,J.Pharm.Sci.,Vol.66,pp.1-19において記載されている。しかしながら、薬学上許容されない塩も中間体として製造してから、薬学上許容される塩へ変換してよい。そのため、このような薬学上許容されない塩も本発明の一部を形成している。
【０２３８】
化合物１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素はＮ‐オキシドを形成してもよい。Ｎ‐オキシドは前記方法により形成される。
【０２３９】
本発明の他の化合物の場合のように、化合物１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素およびその酸付加塩はいくつかの異なる互変異性体で存在することがあり、この出願で前記化合物への言及はすべてのこのような形態を含む。
【０２４０】
更に詳しくは、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素およびその塩において、ベンゾイミダゾール基は下記２種の互変異性体Ａ″およびＢ″のいずれもとれる。簡素化のために、一般式（Ｉ）はＡ″形を示しているが、前記式は全部の互変異性体に及ぶと解釈すべきである。
【化２１】
0005507049.tif 000025
【０２４１】
したがって、別な互変異性体、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（６‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素への言及は、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素と同様の化合物へも明らかに言及している。
【０２４２】
ピラゾール環も互変異性を示すことがあり、下記２種の互変異性体Ｃ″およびＤ″で存在しうる。
【化２２】
0005507049.tif 000026
【０２４３】
加えて、前記尿素のシスおよびトランス立体配座が下記のように可能である。
【化２３】
0005507049.tif 000027
【０２４４】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素およびその塩への言及は、１以上の同位元素置換を有する別種も含み、具体的元素への言及はその範囲内に前記元素の全同位体を含む。例えば、水素への言及はその範囲内に１Ｈ、２Ｈ（Ｄ）、および３Ｈ（Ｔ）を含む。同様に、炭素および酸素への言及はそれらの範囲内に１２Ｃ、１３Ｃ、および１４Ｃと１６Ｏおよび１８Ｏとを各々含む。
【０２４５】
同位元素は放射性でもまたは非放射性でもよい。本発明の一つの態様において、化合物は非放射性同位元素を含有している。このような化合物は治療用に好ましい。しかしながら、他の態様では、化合物が１種以上の放射性同位元素を含有してもよい。このような放射性同位元素を含有した化合物は診断の場面において有用かもしれない。
【０２４６】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素およびその塩への言及には、その多形体、その溶媒和物（例えば、水和物）、その複合体（例えば、シクロデキストリンのような化合物との包接複合体またはクラスレート、または金属との錯体）も含まれる。
【０２４７】
乳酸およびクエン酸塩、その混合物および結晶
この出願の前記セクションから明らかなように、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の好ましい塩は、乳酸（更に好ましくは、Ｌ‐乳酸）、クエン酸またはその混合物と形成された酸付加塩である。
【０２４８】
便宜上、乳酸、Ｌ‐乳酸およびクエン酸から形成された塩は、ここでは各々乳酸塩、Ｌ‐乳酸塩、およびクエン酸塩と称される。
【０２４９】
一つの具体的態様において、塩はＬ‐乳酸塩またはＤ‐乳酸塩、好ましくはＬ‐乳酸塩である。
【０２５０】
他の態様において、塩はクエン酸と形成される塩である。
【０２５１】
更に具体的には、塩はＬ‐乳酸塩およびクエン酸塩の混合物である。
【０２５２】
固体状態で、本発明の乳酸（特に、Ｌ‐乳酸）またはクエン酸塩は結晶、非晶質、またはその混合物である。
【０２５３】
一つの態様において、乳酸（特にＬ‐乳酸）またはクエン酸塩は非晶質である。
【０２５４】
非晶質固体の場合、通常結晶形で存在する三次元構造は存在せず、非晶質形で互いの分子位置は本質的にランダムである（例えば、Hancock et al.,J.Pharm.Sci.,(1997),86,1）。
【０２５５】
他の態様において、乳酸（特に、Ｌ‐乳酸）またはクエン酸塩は実質的に結晶であり、すなわちそれらは５０％〜１００％結晶であり、更に具体的にはそれらは少なくとも５０％結晶、少なくとも６０％結晶、少なくとも７０％結晶、少なくとも８０％結晶、少なくとも９０％結晶、少なくとも９５％結晶、少なくとも９８％結晶、少なくとも９９％結晶、少なくとも９９．５％結晶、または少なくとも９９．９％結晶、例えば１００％結晶である。
【０２５６】
別の態様において、乳酸（特にＬ‐乳酸）またはクエン酸塩は、５０％〜１００％結晶、例えば少なくとも５０％結晶、少なくとも６０％結晶、少なくとも７０％結晶、少なくとも８０％結晶、少なくとも９０％結晶、少なくとも９５％結晶、少なくとも９８％結晶、少なくとも９９％結晶、少なくとも９９．５％結晶、および少なくとも９９．９％結晶、例えば１００％結晶である乳酸（特に、Ｌ‐乳酸）またはクエン酸塩からなる群より選択される。
【０２５７】
更に好ましくは、乳酸（特に、Ｌ‐乳酸）またはクエン酸塩は、９５％〜１００％結晶、例えば少なくとも９８％結晶、少なくとも９９％結晶、少なくとも９９．５％結晶、少なくとも９９．６％結晶、少なくとも９９．７％結晶、少なくとも９９．８％結晶、または少なくとも９９．９％結晶、例えば１００％結晶であるものである（またはそれらのものからなる群より選択される）。
【０２５８】
実質的結晶塩の一例は、Ｌ‐乳酸と形成される結晶塩である。
【０２５９】
実質的結晶塩の他の例は、クエン酸と形成される結晶塩である。
【０２６０】
本発明の塩は、固体状態で、溶媒和（例えば、水和）しているか、または非溶媒和（例えば、無水）である。
【０２６１】
一つの態様において、塩は非溶媒和（例えば、無水）である。
【０２６２】
非溶媒和塩の別の例は、ここで定義されているような乳酸（特に、Ｌ‐乳酸）と形成される結晶塩である。
【０２６３】
ここで用いられる“無水”という用語は、塩（例えば、塩の結晶）上または中におけるわずかな水の存在の可能性を排除しない。例えば、塩（例えば、塩結晶）の表面上にわずかまたは塩（例えば、結晶）の本体内に少量で水が存在してもよい。典型的には、無水形は化合物の分子当たり０．４分子未満の水を含有し、更に好ましくは化合物の分子当たり０．１分子未満の水、例えば０分子の水を含有する。
【０２６４】
他の態様において、乳酸（特にＬ‐乳酸）またはクエン酸塩は溶媒和している。塩が水和している場合、それらは、例えば３分子以下の結晶化水、更に一般的には２分子以下の水、例えば１分子の水または２分子の水を含有しうる。存在する水の分子数が１未満または非整数である非化学両論水和物も形成されうる。例えば、１分子未満の水が存在する場合、例えば化合物の分子当たり０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、または０．９分子の水が存在しうる。
【０２６５】
他の溶媒和物には、エタノレートおよびイソプロパノレートのようなアルコレートがある。
【０２６６】
一つの態様において、乳酸塩（特に、Ｌ‐乳酸塩）は例えば水および／またはエタノールで溶媒和される。
【０２６７】
Ｌ‐乳酸塩およびクエン酸塩は、この出願の前記セクションおよびその他において記載された方法に従い製造される。
【０２６８】
Ｌ‐乳酸およびクエン酸塩の利点には、本出願の前記セクションで記載された一般的利点がある。しかしながら、本発明の結晶乳酸塩が特に有利であり、それは：
・非吸湿性であり、
・無水であり、水和物を形成せず、
・単結晶形で存在し、多形性を示さないと考えられ、
・結晶であり、
・貯蔵安定性であり、
・鋭い融点を有し、ＤＳＣで分析された場合に形態変化を示さず、
・水中で良い溶解性を有し、および
・緩衝系で良い溶解性を呈する。
【０２６９】
このように、Ｌ‐乳酸塩は安定な結晶形で存在し、水和物を形成せず、典型的取扱い、処理、および貯蔵条件下で形態に変化を受けない。
【０２７０】
ここで用いられている‘安定’または‘安定性’という用語には、化学的安定性および固体状態（物理的）安定性を含む。‘化学的安定性’という用語は、化合物が、通常の貯蔵条件下で、化学崩壊または分解がほとんどまたは全くなく、単離形で、あるいは例えばここで記載されている薬学上許容される担体、希釈物、またはアジュバントと混合して提供される処方剤の形態で貯蔵されうることを意味する。‘固体状態安定性’とは、化合物が、通常の貯蔵条件下で、固体状態変換（例えば、水和、脱水、溶媒和、脱溶媒和、結晶化、再結晶化、または固体状態相転移）がほとんどまたは全くなく、単離形で、あるいは例えばここで記載されているような薬学上許容される担体、希釈物、またはアジュバントと混合して提供される固体処方剤の形で貯蔵されうることを意味する。
【０２７１】
Ｌ‐乳酸塩、クエン酸塩およびそれらの混合物は良い水溶解性を有し、そのため比較的高濃度の塩を含有した水溶液を調製するために用いられる。したがって、他の態様において、１ｍｇ／ｍＬ以上、典型的には５ｍｇ／ｍＬ液体担体（例えば、水または緩衝系）以上、更に典型的には１５ｍｇ／ｍＬ以上、更に典型的には２０ｍｇ／ｍＬ以上、好ましくは２５ｍｇ／ｍＬ以上の濃度で１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩、クエン酸塩、またはそれらの混合物を含有した水溶液が（例えば、医薬組成物の形態で）提供される。この態様では、（ｉ）Ｌ‐乳酸塩または（ii）Ｌ‐乳酸塩およびクエン酸塩の混合物を含有した水溶液（例えば、医薬組成物の形態）が特に好ましい。
【０２７２】
Ｌ‐乳酸塩、クエン酸塩、またはそれらの混合物の水溶液は、２〜６、例えば２〜５、更に具体的には４〜６、例えば４〜５範囲のｐＨを有する水溶液として提供される。
【０２７３】
Ｌ‐乳酸塩、クエン酸塩、またはそれらの混合物の水溶液は緩衝化してもまたは緩衝化しなくてもよいが、一つの態様において、例えば上記のような範囲内のｐＨに緩衝化される。
【０２７４】
好ましい緩衝液は、約４．５のｐＨに溶液を緩衝化できて、溶液を凍結乾燥するために用いられる条件下で揮発性でないものである。
【０２７５】
Ｌ‐乳酸で形成される塩の関係において、好ましい緩衝液は、クエン酸から形成されて、正しいｐＨ、例えば約４．５の溶液ｐＨにＮａＯＨまたはＨＣｌにより調整される緩衝液である。このｐＨで、クエン酸緩衝液中、前記遊離塩基は約８０ｍｇ／ｍＬの溶解度を有する。
【０２７６】
Ｌ‐乳酸塩、クエン酸塩、またはそれらの混合物の水溶液は、Ｌ‐乳酸および／またはクエン酸対イオンと一緒にプロトン化形で１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素を含有する。他の対イオンも存在してよく、これらは、例えば、塩水のような張度調整剤（すなわち、塩化物対イオン）および／またはクエン酸緩衝剤のような緩衝剤から誘導される。例えば、Ｌ‐乳酸塩が水溶液中でクエン酸緩衝剤と混合される場合には、Ｌ‐乳酸およびクエン酸対イオンが双方とも存在し、クエン酸対イオンの性質は溶液のｐＨに依存する。加えて、Ｌ‐乳酸塩、クエン酸塩、またはそれらの混合物の水溶液は、Ｉ．Ｖ．処方剤で典型的に見られる１種以上の他の賦形剤、例えば張度調整剤を含有してもよく、その例はthe United States Pharmacopeia and the National Formularyにおいて詳述され、グルコースのようなヘキソース糖、例えばデキストロース（Ｄ‐グルコース）がある。
【０２７７】
したがって、別の態様において、本発明はＬ‐乳酸、クエン酸、およびそれらの混合物から選択される１種以上の対イオンと一緒でプロトン化形の１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素、および場合により（ｉ）１種以上の別な対イオン、例えば塩化物対イオンおよび／または（ii）１種以上のＩ．Ｖ．賦形剤、例えば張度調整剤（例えば、グルコースのようなヘキソース糖、好ましくはＤ‐グルコース）の水溶液を提供する。
【０２７８】
水溶液は、特に、クエン酸イオンの溶液（例えば、クエン酸緩衝液）に乳酸塩を溶解するか、または乳酸イオンの溶液にクエン酸塩を溶解することにより形成される。乳酸およびクエン酸イオンは、１０：１またはそれ以下、例えば１０：１〜１：１０、更に好ましくは８：１以下、７：１以下、６：１以下、５：１以下、４：１以下、３：１以下、２：１以下、または１：１以下、更に具体的には１：１〜１：１０の乳酸：クエン酸比で溶液中に存在する。一つの態様において、乳酸およびクエン酸イオンは、１：１〜１：１０、例えば１：１〜１：８、１：１〜１：７、１：１〜１：６、または１：１〜１：５、例えば約１：４．４の乳酸：クエン酸比で溶液中に存在する。
【０２７９】
本出願のこのセクションおよびその他で記載された水溶液の各々は、塩水および／またはデキストロースのようなＩ．Ｖ．賦形剤を含有する水（好ましくは、無菌水）または水性媒体の添加で所要時に容易に再調製されて水溶液（好ましくは、無菌溶液）を形成する固体処方剤を提供するために、凍結乾燥に付してもよい。
【０２８０】
したがって、本発明はここで定義されているようなＬ‐乳酸塩、クエン酸塩、またはそれらの混合物を含んでなる凍結乾燥処方剤も（例えば、医薬組成物の形態で）提供し、例えば前記処方剤は、水に溶解された場合、２〜６、例えば２〜５、更に具体的には４〜６、例えば４〜５のｐＨを有する。
【０２８１】
他の態様において、本発明はＬ‐乳酸、クエン酸、およびそれらの混合物から選択される１種以上の対イオンと一緒でプロトン化形の１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素、および場合により（ｉ）１種以上の別の対イオン、例えば塩化物イオンおよび／または（ii）１種以上のＩ．Ｖ．賦形剤、例えば張度調整剤（例えば、グルコースのようなヘキソース糖、好ましくはＤ‐グルコース）を含んでなる凍結乾燥処方剤を（例えば、医薬組成物の形態で）提供する。
【０２８２】
凍結乾燥処方剤の各々におけるＬ‐乳酸対クエン酸イオンの比率は、水溶液に関して前記された通りでよい。
【０２８３】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素およびその塩の結晶構造
上記のように、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の乳酸（特にＬ‐乳酸）またはクエン酸塩は非晶質でもまたは実質的に結晶でもよい。一つの具体的態様において、乳酸（特にＬ‐乳酸）またはクエン酸塩は実質的に結晶であり、“実質的に結晶”という用語は前記の意味を有する。特に、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の乳酸塩（特に、Ｌ‐乳酸塩）は実質的に結晶である。
【０２８４】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基も非晶質または実質的に結晶である。一つの具体的態様において、遊離塩基は実質的に結晶であり、“実質的に結晶”という用語は前記の意味を有する。一つの態様において、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基は二水和結晶形で存在する。
【０２８５】
ここで記載されている結晶およびその結晶構造は、本発明の別の形態を形成している。
【０２８６】
上記のように、本発明の乳酸塩は、ここで示された特徴を有する単結晶形で存在すると考えられる。この結晶形が本発明の好ましい態様を表わす。しかしながら、他の結晶形が存在する場合でも、これらは本発明の範囲から除外されない。
【０２８７】
そのため、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の乳酸塩（特にＬ‐乳酸塩）が実質的に結晶である場合、ある単結晶形（例えば、ここで定義および特徴付けされている結晶形）が優位であるが、他の結晶形も少量で、好ましくは微量で存在しうる。
【０２８８】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素（またはその塩）の結晶形（例えば、ここで定義および特徴付けされている結晶形）は、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素（またはその塩）の他の結晶形を約５重量％以下で含有し、特に他の結晶形（または他の塩）を約１重量％以下で含有する。
【０２８９】
好ましい態様において、本発明は、塩の単結晶形（例えば、ここで定義および特徴付けされている結晶形）および約５重量％以下で塩の他の結晶形を含有する、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の実質的結晶塩（例えば、ここで定義されているＬ‐乳酸塩のような乳酸塩）を提供する。
【０２９０】
好ましくは、単結晶形（例えば、ここで定義および特徴付けされている結晶形）は、４％以下、３％以下、または２％以下で他の結晶形を伴い、特に約１重量％以下で他の結晶形を含有している。更に好ましくは、単結晶形（例えば、ここで定義および特徴付けされている結晶形）は、０．９重量％以下、０．８％以下、０．７％以下、０．６％以下、０．５％以下、０．４％以下、０．３％以下、０．２％以下、０．１％以下、０．０５％以下、または０．０１％以下で他の結晶形、例えば０重量％で他の結晶形を伴う。
【０２９１】
結晶およびそれらの結晶構造は、単結晶Ｘ線結晶法、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）、示差走査熱量法（ＤＳＣ）、および赤外分光法、例えばフーリエ変換赤外分光法（ＦＴＩＲ）を含めたいくつかの技術を用いて特徴付けされる。様々な湿度条件下における結晶の挙動は重量蒸気吸着検査により、およびＸＲＰＤでも分析される。
【０２９２】
化合物の結晶構造の決定は、ここで記載されかつFundamentals of Crystallography,C.Giacovazzo,H.L.Monaco,D.Viterbo,F.Scordari,G.Gilli,G.Zanotti and M.Catti,（International Union of Crystallography/Oxford University Press,1992 ISBN 0-19-855578-4(p/b),0-19-855579-2(h/b)）において記載されているような常法に従い行える、Ｘ線結晶法により行われる。この技術は単結晶のＸ線回折の分析および解析を伴う。
【０２９３】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基二水和物およびＬ‐乳酸塩の結晶構造がＸ線結晶法により決定された‐各々下記例６９および７１参照。
【０２９４】
例６９および７１における表２および４は、各々、Crystallographic Information File（ＣＩＦ）Format（Hall,Allen and Brown,Acta Cryst.(1991),A47,655-685、http://www.iucr.ac.uk/iucr-top/cif/home.html参照）で１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素およびそのＬ‐乳酸塩の結晶に関する座標データを示している。ＰＤＢファイルフォーマット（例えば、ＥＢＩ Macromolecular Structure Database（Hinxton,ＵＫ）の場合と合致するフォーマット）のような別のファイルフォーマットも用いてよく、または当業者により好まれる。しかしながら、表の座標を示すまたは操作する異なるファイルフォーマットの使用も本発明の範囲内に属することは明らかであろう。表中で括弧内の数は偏差（ｓ．ｕ．，標準不確かさ）を表わしている。乳酸塩の結晶構造が図４および５で示されている。
【０２９５】
一つの態様において、本発明は、結晶性であり、（ｉ)表２の座標で規定されるような結晶構造を有し、および／または（ii）結晶が結晶格子パラメーターａ＝７．６６（１０）、ｂ＝１５．１８（１０）、ｃ＝１７．７１（１０）Å、β＝９８．５３（２）°、α＝γ＝９０°の単斜晶空間群Ｐ２１／ｎ（＃１４）に属する、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の二水和遊離塩基を提供する。
【０２９６】
他の態様において、本発明は結晶性であり、表４の座標で規定されるような結晶構造を有する、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩を提供する。
【０２９７】
他の態様において、本発明は結晶性であり、表４および５で示されているような結晶構造を有する、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩を提供する。
【０２９８】
他の態様において、本発明は結晶性であり、斜方晶空間群Ｐ２１２１２１（＃１９）に属する結晶構造を有し、９７（２）Ｋでａ＝９．９４（１０）、ｂ＝１５．０３（１０）、ｃ＝１６．１８（１０）Å、α＝β＝γ＝９０°の結晶格子パラメーターを有する、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩を提供する。
【０２９９】
他の態様において、本発明は結晶性であり、室温でａ＝１０．０８（１０）、ｂ＝１５．２２（１０）、ｃ＝１６．２２（１０）Å、α＝β＝γ＝９０°の結晶格子パラメーターを有する、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩を提供する。
【０３００】
したがって、他の態様において、本発明は結晶性であり：
（ａ）表４および５で示されているような結晶構造を有する、および／または
（ｂ）表４の座標で規定されるような結晶構造を有する、および／または
（ｃ）９７（２）Ｋでａ＝９．９４（１０）、ｂ＝１５．０３（１０）、ｃ＝１６．１８（１０）Å、α＝β＝γ＝９０°の結晶格子パラメーターを有する、および／または
（ｄ）室温でａ＝１０．０８（１０）、ｂ＝１５．２２（１０）、ｃ＝１６．２２（１０）Å、α＝β＝γ＝９０°の結晶格子パラメーターを有する、および／または
（ｅ）斜方晶空間群Ｐ２１２１２１（＃１９）に属する結晶構造を有する、
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩を提供する。
【０３０１】
一方、化合物の結晶構造はＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）の固体状態技術でも分析される。ＸＲＰＤは、ここ（例７０および７２参照）と、Introduction to X-ray Powder Diffraction ,Ron Jenkins and Robert L.Snyder（John Wiley & Sons,New York,1996）において記載されているような常法に従い行われる。ＸＲＰＤ回折図で（ランダムバックグラウンドノイズと対照的に）示されるピークの存在は、化合物がある程度の結晶度を有することを示している。
【０３０２】
化合物のＸ線粉末パターンは、Ｘ線回折スペクトルの回折角（２θ）および面間隔（ｄ）パラメーターにより特徴付けられる。これらはBragg式：ｎλ＝２ｄ  Ｓｉｎθ（ｎ＝１、λ＝用いられるカソードの波長、ｄ＝面間隔、およびθ＝回折角）で結びつけられる。そこでは、面間隔、回折角、および全体パターンが、データの特徴のおかげで、Ｘ線粉末回折で結晶の同定に重要である。比強度は厳密に解釈すべきでなく、その理由はそれが結晶成長の方向、粒径、および測定条件に応じて変わるからである。加えて、回折角は２θ±０．２°の範囲内で一致するものを通常意味する。ピークは主ピークを意味し、上記のもの以外の回折角で中間より大きくないピークも含む。
【０３０３】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩および遊離塩基形の双方がＸＲＰＤにより特徴付けられた。各場合において、粉末Ｘ線回折パターンは回折角（２θ）、面間隔（ｄ）、および／または比強度で表現される。例７０および７２の表３、５、および６は、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基、Ｌ‐乳酸塩および二水和遊離塩基形の回折角値に対応するＸ線回折スペクトルの面間隔（ｄ）値を示している。
【０３０４】
このように、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素およびその塩は、本質的に図３、６、７、または８および／または例７０および７２の表３、５、または６で示されているようなＸ線粉末回折パターンを有している。
【０３０５】
したがって、一つの態様において、本発明は、図３、６、７、または８および／または表３および／または表５および／または表６で示されたＸ線粉末回折パターンのものと同様の回折角でピークを有するＸ線粉末回折パターンを示し、ピークが場合により同様の比強度を有する、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基またはそのＬ‐乳酸塩の結晶を提供する。更に具体的には、塩の結晶は実質的に図３、６、７、または８で示されているようなＸ線粉末回折パターンを有するものである。
【０３０６】
好ましい態様において、本発明は、本質的に図６で示されているようなＸ線粉末回折パターンを有する、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素Ｌ‐乳酸塩の結晶を提供する。
【０３０７】
他の態様において、本発明は、図６で示されたＸ線粉末回折パターンのものと同様の回折角でピークを示す、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の実質的に結晶性のＬ‐乳酸塩を提供する。好ましくは、前記ピークは図６におけるピークと同様の比強度を有している。
【０３０８】
本発明は、実質的に図６で示されているＸ線粉末回折パターンを有する、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の実質的に結晶性のＬ‐乳酸塩も提供する。
【０３０９】
Ｌ‐乳酸塩のＸ線粉末回折パターンは、例７２において表５で示された回折角（２θ）および面間隔（ｄ）と、好ましくは比強度におけるピークの存在により特徴付けられる。
【０３１０】
このように、本発明は、例７２における表５の回折角（２θ±１．０°、例えば±０．２°、特に±０．１°）で特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを示す、シクロプロピル‐３‐〔３‐（６‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素Ｌ‐乳酸塩の結晶を提供する。
【０３１１】
本発明は、１７．５０、１８．３０、１９．３０、１９．６０、および２１．８５±１．０°、例えば±０．２°、特に±０．１°の回折角２θの主ピークを示すＸ線粉末回折パターンを有し、シクロプロピル‐３‐〔３‐（６‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素Ｌ‐乳酸塩の結晶も提供する。前記結晶は、Ｘ線回折パターンで１２．４０、１５．２０、１５．６０、１７．５０、１８．３０、１８．５０、１９．３０、１９．６０、２１．８５、および２７．３０±１．０°２θのピークにより更に特徴付けられる。
【０３１２】
シクロプロピル‐３‐〔３‐（６‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素Ｌ‐乳酸塩の結晶は、特徴的なＸ線粉末回折パターンが例７２で表５の格子面間隔ｄ（Å）により表わされることでも特徴付けられる。
【０３１３】
別の態様において、本発明は、５．０６、４．８５、４．６０、４．５３、および４．０７で粉末Ｘ線回折の格子間隔（ｄ）として出現する特徴的ピークを含み、更に具体的には７．１３、５．８３、５．６８、５．０６、４．８５、４．７９、４．６０、４．５３、４．０７、および３．２６Åで粉末Ｘ線回折の格子間隔（ｄ）として出現する別な特徴的ピークを含んでなるＸ線粉末回折パターンを有する、シクロプロピル‐３‐〔３‐（６‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素乳酸塩の結晶を提供する。
【０３１４】
他の態様において、本発明は、１７．５０、１８．３０、１９．３０、１９．６０、および２１．８５°、更に具体的には１２．４０、１５．２０、１５．６０、１７．５０、１８．３０、１８．５０、１９．３０、１９．６０、２１．８５、および２７．３０°の回折角（２θ）と、５．０６、４．８５、４．６０、４．５３、および４．０７、更に具体的には７．１３、５．８３、５．６８、５．０６、４．８５、４．７９、４．６０、４．５３、４．０７、および３．２６Åの面間隔（ｄ）で主ピークの存在により特徴付けられるＸ線粉末回折パターンを有する、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の実質的に結晶性のＬ‐乳酸塩を提供する。
【０３１５】
別の態様において、本発明は、例７２において表５で示された回折角（２θ）および面間隔（ｄ）と、好ましくは比強度におけるピークの存在により特徴付けられるＸ線粉末回折パターンを有し、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の実質的に結晶性のＬ‐乳酸塩を提供する。
【０３１６】
本発明は、表２の回折角（２θ±１．０°、例えば±０．２°、特に±０．１°）で特徴的ピークを有するＸ線粉末回折パターンを示す、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基の結晶も提供する。
【０３１７】
別の態様において、本発明は、特徴的ピークが表２の格子間隔（ｄ）として出現するＸ線粉末回折パターンを有する、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基の結晶を提供する。
【０３１８】
本発明の結晶塩は示差走査熱量法（ＤＳＣ）でも特徴付けられる。
【０３１９】
Ｌ‐乳酸塩はＤＳＣにより分析され、１９０℃でピーク（融点および分解）を示す。
【０３２０】
したがって、他の態様において、本発明は無水であり、ＤＳＣに付された場合に１９０℃において吸熱ピークを示す、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩を提供する。
【０３２１】
本発明の別の態様は、図６、７、または８で示されたＸ線粉末回折パターンのものと同様の回折角でピークを示し、更に熱分析（ＤＳＣ）によると１９０℃付近で分解を伴う吸熱ピークを示す、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩である。
【０３２２】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基は、図３および／または表２で示されたＸ線粉末回折パターンのものと同様の回折角によりピークを示し、更に熱分析（ＤＳＣ）によると１９３℃付近で分解を伴う吸熱ピークを示す。
【０３２３】
高湿度条件下における本発明の塩の挙動は、例えば例６８のセクションＥで記載されているように、標準重量蒸気吸着（ＧＶＳ）法により分析される。
【０３２４】
Ｌ‐乳酸塩は高い相対湿度の条件下において安定な無水結晶形で存在し、このような条件下で結晶構造に変化を受けない。
【０３２５】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の塩は、赤外分光法、例えばＦＴＩＲで更に特徴付けられる。Ｌ‐乳酸塩の赤外スペクトル（ＫＢｒディスク法）は３２２９、２９７２、および１６６０ｃｍ−１で特徴的ピークを含む。
【０３２６】
したがって、別の態様において、本発明は、ＫＢｒディスク法を用いて分析された場合に、３２２９、２９７２、および１６６０ｃｍ−１で特徴的ピークを含む赤外スペクトルを示す、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の（好ましくは実質的に結晶性の）Ｌ‐乳酸塩を提供する。
【０３２７】
前段落から明らかなように、本発明のＬ‐乳酸塩はいくつかの異なる物理化学的パラメーターで特徴付けられる。したがって、好ましい態様において、本発明は結晶性であり、下記パラメーターの（いずれかの組合せで）いずれか１以上またはすべてで特徴付けられる、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩を提供し、すなわち前記塩は：
（ａ）図４および５で示されている結晶構造を有し、および／または
（ｂ）例７１の表４で座標により規定される結晶構造を有し、および／または
（ｃ）９７（２）Ｋでａ＝９．９４（１０）、ｂ＝１５．０３（１０）、ｃ＝１６．１８（１０）Å、α＝β＝γ＝９０°の結晶格子パラメーターを有し、および／または
（ｄ）室温でａ＝１０．０８（１０）、ｂ＝１５．２２（１０）、ｃ＝１６．２２（１０）Å、α＝β＝γ＝９０°の結晶格子パラメーターを有し、および／または
（ｅ）斜方晶空間群Ｐ２１２１２１（＃１９）に属する結晶構造を有し、および／または
（ｆ）１７．５０、１８．３０、１９．３０、１９．６０、および２１．８５°、更に具体的には追加的に１２．４０、１５．２０、１５．６０、１７．５０、１８．３０、１８．５０、１９．３０、１９．６０、２１．８５、および２７．３０°の回折角（２θ）、および／または５．０６、４．８５、４．６０、４．５３、および４．０７、更に具体的には追加的に７．１３、５．８３、５．６８、５．０６、４．８５、４．７９、４．６０、４．５３、４．０７、および３．２６Åの面間隔（ｄ）で主ピークの存在により特徴付けられるＸ線粉末回折パターンを有する、および／または
（ｇ）図６または例７２の表５で示されたＸ線粉末回折パターンのものと同様の回折角でピークを示し、場合により前記ピークが図６または表５におけるピークと同様の比強度を有する、および／または
（ｈ）実質的に図６で示されているＸ線粉末回折パターンを有し、および／または
（ｉ）無水であり、ＤＳＣに付された場合に１９０℃で吸熱ピークを示し、および／または
（ｊ）ＫＢｒディスク法を用いて分析された場合に、３２２９、２９７２、および１６６０ｃｍ−１で特徴的ピークを含む赤外スペクトルを示す。
【０３２８】
式（Ｉ）のサブグループ（Ｃ）の化合物
式（Ｉ）の化合物の１サブグループ（すなわち、式（Ｉ）のサブグループ（Ｃ））において、Ｍは基Ｄ１であり、ＸはＯであり、Ａは基ＮＲ２であり、ここでＲ２は水素であり、Ｅは結合であり、Ｒ１は２，６‐ジフルオロフェニルであり、および化合物は酸の選択グループから形成される酸付加塩である。
【０３２９】
したがって、一つの態様において、本発明は酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸（例えば、Ｌ‐アスコルビン酸）、アスパラギン酸（例えば、Ｌ‐アスパラギン酸）、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、ショウノウ酸（例えば、（＋）ショウノウ酸）、カプリン酸、カプリル酸、炭酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデカン酸、ドデシル硫酸、エタン‐１，２‐ジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、グルコヘプトン酸、Ｄ‐グルコン酸、グルクロン酸（例えば、Ｄ‐グルクロン酸）、グルタミン酸（例えば、Ｌ‐グルタミン酸）、α‐オキソグルタル酸、グリコール酸、馬尿酸、塩酸、イセチオン酸、イソ酪酸、乳酸（例えば、（＋）‐Ｌ‐乳酸および（±）‐ＤＬ‐乳酸）、ラクトビオン酸、ラウリルスルホン酸、マレイン酸、リンゴ酸、（−）‐Ｌ‐リンゴ酸、マロン酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、ナフタレンスルホン酸（例えば、ナフタレン‐２‐スルホン酸）、ナフタレン‐１，５‐ジスルホン酸、ニコチン酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、リン酸、プロピオン酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸（例えば、（＋）‐Ｌ‐酒石酸）、チオシアン酸、トルエンスルホン酸（例えば、ｐ‐トルエンスルホン酸）、吉草酸、およびシナホ酸からなる群より選択される酸と形成される塩である、１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の酸付加塩を提供する。
【０３３０】
一つの態様において、酸付加塩は、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸（例えば、Ｌ‐アスコルビン酸）、アスパラギン酸（例えば、Ｌ‐アスパラギン酸）、安息香酸、ショウノウ酸（例えば、（＋）ショウノウ酸）、カプリン酸、カプリル酸、炭酸、シクラミン酸、ドデカン酸、ドデシル硫酸、エタン‐１，２‐ジスルホン酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、グルコヘプトン酸、Ｄ‐グルコン酸、グルタミン酸（例えば、Ｌ‐グルタミン酸）、α‐オキソグルタル酸、グリコール酸、馬尿酸、イソ酪酸、ラウリルスルホン酸、ムチン酸、ナフタレン‐１，５‐ジスルホン酸、ニコチン酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、セバシン酸、ステアリン酸、酒石酸（例えば、（＋）‐Ｌ‐酒石酸）、チオシアン酸、およびシナホ酸からなる群より選択される酸から形成される。
【０３３１】
他の態様において、酸付加塩は、酢酸、アジピン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、クエン酸、ＤＬ‐乳酸、フマル酸、グルコン酸、グルクロン酸、馬尿酸、塩酸、グルタミン酸、ＤＬ‐リンゴ酸、ｐ‐トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸（メシル酸）、エタンスルホン酸（エシル酸）、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、および酒石酸からなる群より選択される酸から形成される。
【０３３２】
別の態様において、酸付加塩は、アジピン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、グルコン酸、馬尿酸、グルタミン酸、セバシン酸、ステアリン酸、および酒石酸からなる群より選択される酸から形成される。
【０３３３】
他の具体的態様において、化合物は塩酸と形成される酸付加塩である。
【０３３４】
好ましい塩は、所定液体担体（例えば水）中において２５ｍｇ／ｍＬ液体担体（例えば水）以上、更に典型的には５０ｍｇ／ｍＬ以上、好ましくは１００ｍｇ／ｍＬ以上の溶解度を有した塩である。このような塩は、例えば注射または注入による、液体形での投与で特に有利である。
【０３３５】
本発明の他の態様において、２５ｍｇ／ｍＬ以上、典型的には５０ｍｇ／ｍＬ以上、好ましくは１００ｍｇ／ｍＬ以上の濃度で、ここで記載されているような塩を含有した水溶液を含んでなる組成物（例えば、医薬組成物）が提供される。
【０３３６】
２５ｍｇ／ｍＬ以上の溶解度を有した本発明の塩にはＤ‐グルクロン酸、メシル酸、エシル酸、およびＤＬ‐乳酸があり、そのうち後者の三つは１００ｍｇ／ｍＬを超える溶解度を有している。
【０３３７】
したがって、一つの具体的態様では、１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のメシル酸塩が提供される。
【０３３８】
他の具体的態様では、１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のエシル酸（エタンスルホン酸）塩が提供される。
【０３３９】
別の具体的態様では、１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＤＬ‐乳酸塩が提供される。一つの態様において、乳酸塩はＬ‐乳酸塩である。
【０３４０】
本発明の式（Ｉ）のサブグループ（Ｃ）の化合物（すなわち、酸付加塩）が誘導される遊離塩基または親化合物は、下記式（ＩＡ）を有している：
【化２４】
0005507049.tif 000028
【０３４１】
化合物（ＩＡ）の塩は、非晶質または結晶である。
【０３４２】
一つの態様において、塩は非晶質形である。
【０３４３】
他の態様において、化合物は結晶形である。
【０３４４】
化合物は非溶媒和（例えば、水和）であるか、または溶媒和している。
【０３４５】
一つの態様において、塩は非溶媒和である。
【０３４６】
他の態様において、塩は溶媒和、例えば水和している。
【０３４７】
化合物が水和している場合、それらは、例えば３分子以下の結晶化水、更に一般的には２分子以下の水、例えば１分子の水または２分子の水を含有しうる。
【０３４８】
本発明の塩は、１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基形より利点を有している。
【０３４９】
例えば、塩は水中で大きな溶解度を有し、したがって注射または注入（例えば、ｉ.ｖ．注入）用の非経口処方剤を製造する際に使用上良い。本発明の塩は：
・改善された薬物動態、
・良い安定性、例えば改善された貯蔵寿命、
・それらをｉ．ｖ．使用で良くする低塩基性、
・生産上の利点、
・改善された代謝性、および
・患者間で少ない臨床差
から選択される１以上の他の利点も有している。
【０３５０】
塩は、式（Ｉ）のサブグループ（Ａ）および（Ｂ）の化合物の塩について記載している本出願の前記セクションで示された方法のいずれかにより製造される。
【０３５１】
式（Ｉ）のサブグループ（Ｃ）の化合物は、典型的には薬学上許容される塩である。しかしながら、薬学上許容されない塩も中間体として製造してから、薬学上許容される塩へ変換してよい。このような薬学上許容されない塩も、例えば本発明の化合物の精製または分離に際して有用なことがあり、本発明の一部を形成している。
【０３５２】
式（Ｉ）のサブグループ（Ｃ）の化合物はいくつかの異なる互変異性体で存在することがあり、本発明の化合物への言及はすべてのこのような形態を含む。疑問の解消のため、化合物がいくつかの幾何異性体または互変異性体のうち一つにおいて存在し、一つのみが特に記載または示されていたとしても、他のすべてが本出願に含まれる。
【０３５３】
例えば、本発明の化合物において、ベンゾイミダゾール基は前記された２種の互変異性体Ａ″およびＢ″のいずれもとれる。
【０３５４】
ピラゾール環も互変異性を示すことがあり、下記２種の互変異性体Ｃ'''およびＤ'''で存在しうる。
【化２５】
0005507049.tif 000029
【０３５５】
本発明の化合物には１以上の同位元素置換を有する化合物を含み、具体的元素への言及はその範囲内に前記元素の全同位体を含む。例えば、水素への言及はその範囲内に１Ｈ、２Ｈ（Ｄ）、および３Ｈ（Ｔ）を含む。同様に、炭素および酸素への言及はそれらの範囲内に１２Ｃ、１３Ｃ、および１４Ｃと１６Ｏおよび１８Ｏを各々含む。
【０３５６】
同位元素は放射性でもまたは非放射性でもよい。本発明の一つの態様において、化合物は非放射性同位元素を含有している。このような化合物は治療用に好ましい。しかしながら、他の態様では、化合物が１種以上の放射性同位元素を含有してもよい。このような放射性同位元素を含有した化合物は診断の場面において有用かもしれない。
【０３５７】
本発明には、化合物の多形体、化合物の複合体（例えば、シクロデキストリンのような物質との包接複合体またはクラスレート、または金属との錯体）、および化合物のプロドラッグも含まれる。“プロドラッグ”とは、例えば本発明の生物活性化合物へインビボにおいて変換される化合物を意味する。
【０３５８】
生物活性
本発明の化合物は、サイクリン依存性キナーゼ阻害または調節活性およびグリコーゲンシンターゼキナーゼ‐３（ＧＳＫ３）阻害または調節活性および／またはオーロラキナーゼ阻害または調節活性を有し、前記キナーゼにより媒介される病状または症状を予防または治療する上で有用と考えられる。
【０３５９】
そのため、例えば、本発明の化合物は癌を軽減するか、またはその発生頻度を減らす上で有効であろうと考えられる。
【０３６０】
更に詳しくは、式（Ｉ）およびそのサブグループの化合物はサイクリン依存性キナーゼの阻害剤である。例えば、本発明の化合物はＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ３、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、およびＣＤＫ７キナーゼ、特にＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ３、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、およびＣＤＫ６から選択されるサイクリン依存性キナーゼに対する活性を有している。
【０３６１】
好ましい化合物は、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、およびＣＤＫ５、例えばＣＤＫ１および／またはＣＤＫ２から選択される１種以上のＣＤＫキナーゼを阻害する化合物である。
【０３６２】
加えて、ＣＤＫ４、ＣＤＫ８、および／またはＣＤＫ９に関心がもたれる。
【０３６３】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の乳酸またはクエン酸塩は、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、ＣＤＫ６、およびＣＤＫ９キナーゼ、特にＣＤＫ２に対する活性を有している。
【０３６４】
本発明の化合物は、グリコーゲンシンターゼキナーゼ‐３（ＧＳＫ‐３）に対する活性も有している。
【０３６５】
本発明の化合物はオーロラキナーゼに対する活性も有している。本発明の好ましい化合物は０．１μＭ以下のＩＣ５０値を有するものである。
【０３６６】
特に、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の乳酸またはクエン酸塩はオーロラキナーゼの阻害剤であり、例えばオーロラＡおよび／またはオーロラＢを阻害する。
【０３６７】
本発明の化合物の多くはＣＤＫ１およびＣＤＫ２と比較してオーロラＡキナーゼに選択性を示し、このような化合物は本発明の一つの好ましい態様を表わしている。例えば、本発明の多くの化合物は、ＣＤＫ１およびＣＤＫ２に対するＩＣ５０の１／１０〜１／１００であるＩＣ５０値をオーロラＡに対して有している。
【０３６８】
ＣＤＫ、オーロラキナーゼ、およびグリコーゲンシンターゼキナーゼを調節または阻害するそれらの活性の結果として、それらは異常分裂細胞で細胞周期の停止または回復制御の手段を提供する上で有用であろうと予想される。したがって、前記化合物は癌のような増殖障害を治療または防止する上で有用であろうと期待される。本発明の化合物は、ウイルス感染、II型または非インスリン依存性真性糖尿病、自己免疫疾患、頭部トラウマ、発作、癲癇、神経変性疾患、例えばアルツハイマー、運動神経疾患、進行性核上性麻痺、皮質基底変性、およびピック病、例えば自己免疫疾患および神経変性疾患のような症状を治療する上でも有用であろうと考えられる。
【０３６９】
本発明の化合物が有用であろうと考えられる病状および症状の１サブグループは、ウイルス感染、自己免疫疾患、および神経変性疾患からなる。
【０３７０】
ＣＤＫは、細胞周期、アポトーシス、転写、分化、およびＣＶＳ機能の調節で役割を果たす。したがって、ＣＤＫ阻害剤は、増殖、アポトーシス、または分化に障害がある疾患、例えば癌の治療に有用であろう。特に、ＲＢ＋ｖｅ腫瘍は特にＣＤＫ阻害剤に感受性かもしれない。ＲＢ−ｖｅ腫瘍もＣＤＫ阻害剤に感受性かもしれない。
【０３７１】
阻害されうる癌の例には、癌腫(carcinoma)(例えば、膀胱、乳房、結腸（例えば、結腸腺癌および結腸腺腫のような結腸直腸癌腫）、腎臓、表皮、肝臓、肺臓の癌腫（例えば、腺癌、小細胞肺癌、および非小細胞肺癌腫）、食道、胆嚢、卵巣、膵臓（例えば、外分泌膵臓癌腫）、胃、子宮頸部、甲状腺、前立腺または皮膚、例えば扁平上皮細胞癌腫)、リンパ様系統の造血腫瘍（例えば、白血病、急性リンパ性白血病、Ｂ細胞リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、毛様細胞リンパ腫、またはバーキットリンパ腫）、骨髄様系統の造血腫瘍（例えば、急性および慢性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、または前骨髄性白血病）、甲状腺小胞癌、間葉源の腫瘍（例えば、線維肉腫または横紋筋肉腫）、中枢または末梢神経系の腫瘍（例えば、星状膠細胞腫、神経芽細胞腫、神経膠腫、または神経線維腫）、黒色腫、セミノーマ、奇形癌、骨癌、色素性乾皮症、角膜棘細胞腫、甲状腺小胞癌、またはカポジ肉腫があるが、それらに限定されない。
【０３７２】
癌は、ＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ３、ＣＤＫ４、ＣＤＫ５、およびＣＤＫ６から選択される１種以上のサイクリン依存性キナーゼ、例えばＣＤＫ１、ＣＤＫ２、ＣＤＫ４、およびＣＤＫ５、例えばＣＤＫ１および／またはＣＤＫ２から選択される１種以上のＣＤＫキナーゼの阻害に感受性である癌である。
【０３７３】
具体的な癌がサイクリン依存性キナーゼまたはオーロラキナーゼによる阻害に感受性であるものかどうかは、例７９および８０で示されているような細胞成長アッセイまたは“診断の方法”と題されたセクションで示されている方法により調べられる。
【０３７４】
ＣＤＫはアポトーシス、増殖、分化、および転写で役割を果たすことも知られ、したがってＣＤＫ阻害剤は癌以外の下記疾患、ウイルス感染、例えばヘルペスウイルス、ポックスウイルス、エプスタイン‐バールウイルス、シンドビスウイルス、アデノウイルス、ＨＩＶ、ＨＰＶ、ＨＣＶおよびＨＣＭＶの治療、ＨＩＶ感染個体でエイズ発症の予防、慢性炎症疾患、例えば全身性エリテマトーデス、自己免疫性糸球体腎炎、リウマチ様関節炎、乾癬、炎症性腸疾患および自己免疫性真性糖尿病、心血管系疾患、例えば心肥大、再狭窄、アテローム性動脈硬化症、神経変性障害、例えばアルツハイマー病、エイズ関連痴呆、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症、色素性網膜炎、棘筋萎縮および小脳変性、糸球体腎炎、骨髄異形成症候群、虚血性損傷関連心筋梗塞、発作および再灌流損傷、不整脈、アテローム性動脈硬化症、毒素性またはアルコール関連肝疾患、血液系疾患、例えば慢性貧血および再生不良性貧血、筋骨格系の変性疾患、例えば骨粗鬆症および関節炎、アスピリン感受性副鼻腔炎、嚢胞性線維症、多発性硬化症、腎臓疾患、および癌痛の治療にも有用であろう。
【０３７５】
一部のサイクリン依存性キナーゼ阻害剤は、他の抗癌剤と組み合わせて用いうることもわかった。例えば、サイクリン依存性キナーゼ阻害剤のフラボピリドールは、組合せ療法で他の抗癌剤と併用されていた。
【０３７６】
このように、異常細胞成長を含んでなる疾患または症状を治療するための本発明の医薬組成物、使用または方法において、一つの態様において異常細胞成長を含んでなる疾患または症状は癌である。
【０３７７】
癌の１グループには、ヒト乳癌（例えば、原発乳腫瘍、リンパ節転移陰性乳癌、乳房の侵襲性管腺癌、非類内膜乳癌）、およびマントル細胞リンパ腫がある。加えて、他の癌は結腸直腸および子宮内膜癌である。
【０３７８】
癌の他のサブ群には、乳癌、卵巣癌、結腸癌、前立腺癌、食道癌、扁平上皮癌、および非小細胞肺癌腫がある。
【０３７９】
オーロラキナーゼに対する活性を有した化合物の場合において、本発明のオーロラキナーゼ阻害化合物が有用であろうと考えられる癌の具体例には：
ヒト乳癌（例えば、原発乳癌、リンパ節転移陰性乳癌、乳房の侵襲性管腺癌、非類内膜乳癌）、
卵巣癌（例えば、原発卵巣癌）、
膵臓癌、
ヒト膀胱癌、
結腸直腸癌（例えば、原発結腸直腸癌）、
胃腫瘍、
腎臓癌、
子宮頸癌、
神経芽細胞腫、
黒色腫、
リンパ腫、
前立腺癌、
白血病、
非類内膜性子宮内膜癌腫、
神経膠腫、および
非ホジキンリンパ腫がある。
【０３８０】
オーロラ阻害剤に特に応答しやすい癌には、乳房、膀胱、結腸直腸、膵臓、卵巣、非ホジキンリンパ腫、神経膠腫、および非類内膜性子宮内膜癌腫がある。
【０３８１】
オーロラ阻害剤に特に応答しやすい癌の具体的サブ群は、乳房、卵巣、結腸、肝臓、胃、および前立腺癌からなる。
【０３８２】
オーロラ阻害剤が特に治療しやすい癌の他のサブ群は、血液癌、特に白血病からなる。したがって、別の態様において、式（Ｉ）の化合物は血液癌、特に白血病を治療するために用いられる。具体的な白血病は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、Ｂ細胞リンパ腫（マントル細胞）、および急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）（それとは別に急性リンパ性白血病としても知られている）から選択される。一つの態様において、白血病は再発性または難治性急性骨髄性白血病、骨髄異形成症候群、および慢性骨髄性白血病から選択される。
【０３８３】
癌の１グループには、ヒト乳癌（例えば、原発乳癌、リンパ節転移陰性乳癌、乳房の侵襲性管腺癌、非類内膜乳癌）、およびマントル細胞リンパ腫がある。加えて、他の癌は結腸直腸および子宮内膜癌である。
【０３８４】
癌の他のサブ群には、リンパ系の血液腫瘍、例えば白血病、慢性リンパ性白血病、マントル細胞リンパ腫、およびＢ細胞リンパ腫（例えば、拡散性大Ｂ細胞リンパ腫）がある。
【０３８５】
一つの具体的な癌は慢性リンパ性白血病である。
【０３８６】
他の具体的な癌はマントル細胞リンパ腫である。
【０３８７】
他の具体的な癌は拡散性大Ｂ細胞リンパ腫である。
【０３８８】
本発明の化合物、特にオーロラキナーゼ阻害活性を有する化合物は、高水準のオーロラキナーゼの存在を伴うまたはそれで特徴付けられる種類の癌、例えば本出願の冒頭セクションでこの関係について言及された癌の治療または予防で特に有用であろう、と更に考えられる。
【０３８９】
サイクリン依存性キナーゼ、オーロラキナーゼ、およびグリコーゲンシンターゼキナーゼ‐３の阻害剤として本発明の化合物の活性は、下記例で示されたアッセイを用いて測定され、所定化合物により示される活性の水準はＩＣ５０値で定められる。本発明の好ましい化合物は、１．０μＭ以下、更に好ましくは０．１μＭ以下のＩＣ５０値を有する化合物である。
【０３９０】
本発明の化合物の利点
本発明の化合物（例えば、例２４、６２、６３、および６４の化合物）は従来の化合物よりいくつかの利点を有している。例えば、本発明の化合物（表Ａ参照）は特にオーロラＡおよびＢキナーゼに対して高い選択性と効力を呈する。
【表２】
0005507049.tif 000030
インビトロのキナーゼ活性は例７５および７６で記載されたプロトコールに従い求めた。
【０３９１】
本発明の化合物は、それらがＰ４５０酵素に対して異なる感受性を有するという点でも、従来の化合物より有利である（下記表Ｂおよび例８１参照）。
【表３】
0005507049.tif 000031
【０３９２】
加えて、本発明の化合物は、それらが薬物代謝および薬物動態性に関して改善を示すという点でも、従来の化合物より有利である。特に、本発明の化合物は低い血漿タンパク質結合性を有する。血漿タンパク質に対する例２４、６２、６３、および６４の化合物の結合性は試験されたすべての種で同程度にほどほどであり、ラット血漿で６１％からマウス血漿で８２％にわたる。これは、適切な作用部位に達してその治療効果を発揮する上で、全身循環で多くの遊離薬物を利用可能にしているという利点を呈する。腫瘍で薬理作用を発揮する遊離分の増加は潜在的に改善された効力に至り、そのことで投与量を減らせる。
【０３９３】
本発明の化合物（例えば、例２４、６２、６３、および６４）は、広範囲の固形腫瘍細胞系に対しても、増殖およびクローン原性アッセイ（例えば、例７９および８０で記載されたアッセイ）で改善された細胞活性を呈し、ひいては改善された抗癌活性を示す（表Ｃ）。データは、化合物治療が正常細胞と比較して腫瘍細胞で異なる効果を有することを示している。チェックポイントコンプロマイズド腫瘍細胞において、化合物治療は、有糸分裂の崩壊、細胞質分裂の阻害およびオーロラキナーゼ阻害による紡錘体チェックポイントの迂回により、多核化に至る。細胞死に至るように見えるのが、この多核化である。逆に、化合物で処理された正常チェックポイントコンピテント細胞において、２４時間化合物処理後に多核化または死亡する細胞は少なく、代わりに多くの割合が可逆的Ｇ２／Ｍ停止を受け、化合物が除去されると細胞周期に再び入る。効果に関するこれらの違いは、正確な染色体分離が生じないならば細胞周期を停止させるチェックポイント、例えば分裂後ｐ５３依存性チェックポイントを正常細胞が適所に有している、という事実を反映している。腫瘍細胞には、これらのチェックポイントが存在せず、有糸分裂を進めて、多核化を生じさせてしまう。
【表４】
0005507049.tif 000032
【０３９４】
更に、本発明の化合物の塩形は、水溶液中で改善された溶解性と、良い物理化学的性質、例えば低ｌｏｇＤを示す。
【０３９５】
式（Ｉ）の化合物の製造方法
このセクションでは、本出願の他の全セクションのように、内容がそれ以外を示していない限り、式（Ｉ）への言及は、ここで定義されているような式(II)、(III)、(XXX)とそれらのすべての他のサブグループおよび例も含む。
【０３９６】
式（Ｉ）の化合物は、当業者に周知の合成法に従い製造される。
【０３９７】
例えば、Ａが結合である（すなわち、Ａおよびカルボニル基がアミド結合を形成している）式（Ｉ）の化合物は、標準アミド形成条件下で、下記式（Ｘ）の化合物：
【化２６】
0005507049.tif 000033
とカルボン酸Ｒ１‐Ｅ‐ＣＯ２Ｈまたはその反応誘導体との反応により製造される。
【０３９８】
カルボン酸とアミン（Ｘ）とのカップリング反応は、ペプチド結合の形成で常用される種類の試薬の存在下において行われる。このような試薬の例には、１，３‐ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）（Sheehan et al.,J.Amer.Chem.Soc.,1955,77,1067）、１‐エチル‐３‐（３′‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）（Sheehan et al.,J.Org.Chem.,1961,26,2525）、Ｏ‐（７‐アザベンゾトリアゾール‐１‐イル）‐Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′‐テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）のようなウロニウムベースカップリング剤（L.A.Carpino,J.Amer.Chem.Soc.,1993,115,4397）および１‐ベンゾトリアゾリルオキシトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）のようなホスホニウムベースカップリング剤（Castro et al.,Tetrahedron Letters,1990,31,205）がある。カルボジイミドベースカップリング剤は、有利には１‐ヒドロキシアザベンゾトリアゾール（ＨＯＡｔ）または１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）（Konig et al.,Chem.Ber.,103,708,2024-2034）と組み合わせて用いられる。好ましいカップリング試薬には、ＨＯＡｔまたはＨＯＢｔと組み合わされたＥＤＣおよびＤＣＣがある。
【０３９９】
カップリング反応は、典型的には、アセトニトリル、ジオキサン、ジメチルスルホキシド、ジクロロメタン、ジメチルホルムアミド、またはＮ‐メチルピロリドンのような非水性非プロトン溶媒中で、または場合により１種以上の混和性補助溶媒と一緒に水性溶媒中で行われる。反応は室温で、または反応剤がさほど反応性でない場合（例えば、スルホンアミド基のような電子求引基を有する乏電子アニリン類の場合）には適度に高い温度で行われる。反応は非障害性塩基、例えばトリエチルアミンまたはＮ，Ｎ‐ジイソプロピルエチルアミンのような三級アミンの存在下で行ってもよい。
【０４００】
代わりに、カルボン酸の反応性誘導体、例えば無水物または酸クロリドも用いてよい。無水物のような反応性誘導体との反応は、典型的には、ピリジンのような塩基の存在下、室温でアミンおよび無水物を攪拌することにより行われる。
【０４０１】
式（Ｘ）のアミンは、標準条件下で、式（XI）の対応ニトロ化合物の還元により製造される。還元は、例えば、室温でエタノールまたはジメチルホルムアミドのような極性溶媒中、パラジウム炭素のような触媒の存在下で、接触還元により行われる。
【化２７】
0005507049.tif 000034
【０４０２】
式（XI）のニトロ化合物は、下記式(XII)のニトロ‐ピラゾールカルボン酸：
【化２８】
0005507049.tif 000035
と４‐モルホリン‐４‐イルメチルベンゼン‐１，２‐ジアミン（ＭがＤ１である化合物を形成する場合）または４，５‐ジメトキシベンゼン‐１，２‐ジアミン（ＭがＤ２である化合物を形成する場合）との反応により製造される。
【０４０３】
ジアミンとカルボン酸(XII)との反応は、前記のようなアミドカップリング条件下において、前記のようなＨＯＢｔの存在下、ＤＣＣまたはＥＤＣのような試薬の存在下で行われて、中間体オルト‐アミノフェニルアミド（示さず）を生じ、次いでこれは環化されてベンゾイミダゾール環を形成する。最終環化工程は、典型的には、酢酸の存在下で加熱還流することにより行われる。
【０４０４】
Ｍが基Ｄ１である式（Ｘ）の化合物の製法を示す例示反応スキームが、スキーム１で記載されている。
【化２９】
0005507049.tif 000036
スキーム１における各工程の典型的条件は、下記の例セクションにおいて見られる。
【０４０５】
Ｍが基Ｄ２である化合物も同様に製造されるが、但しスキーム１でジアミン(XVI)の代わりに４，５‐ジメトキシベンゼン‐１，２‐ジアミンを用いる。
【０４０６】
Ａが結合である式（Ｉ）の化合物の別の合成においても、ジアミンの４‐モルホリン‐４‐イルメチルベンゼン‐１，２‐ジアミンおよび４，５‐ジメトキシベンゼン‐１，２‐ジアミンは、Ａが結合である下記式(XVII)のカルボン酸と反応させると、式（Ｉ）の化合物を生じる。
【化３０】
0005507049.tif 000037
【０４０７】
ジアミンとカルボン酸(XVII)との反応は、ニトロ化合物（XI）を製造するために、前記されたものと類似した条件下で行われる。式(XVII)のカルボン酸は、スキーム２で示された反応順序で製造される。
【０４０８】
スキーム２で示されているように、置換または非置換４‐ニトロ‐３‐ピラゾールカルボン酸(XVIII)は、塩化チオニルとの反応で酸クロリド中間体を生じ、次いでエタノールとの反応においてエチルエステル(XIX)を形成することによりエステル化される。一方、エステル化は酸性触媒の存在下でアルコールおよびカルボン酸を反応させることにより行われ、その一例は塩化チオニルである。反応は、典型的には、溶媒としてエステル化アルコール（例えば、エタノール）を用いて、室温において行われる。次いで、ニトロ基が標準法に従いパラジウム炭素を用いて還元され、アミン（XX）を生じる。アミン（XX）は、前記のものと同様のまたは類似したアミド形成条件下で、適切なカルボン酸Ｒ１‐Ｅ‐ＣＯ２Ｈとカップリングされて、アミド(XXI)を生じる。次いで、アミド(XXI)のエステル基は、典型的には室温において、メタノールのような極性水混和性溶媒中で水酸化ナトリウムのような水酸化アルカリ金属を用いて加水分解される。
【化３１】
0005507049.tif 000038
【０４０９】
ＡがＮＲ２である式（Ｉ）の化合物は、尿素類の合成に関する標準法を用いて製造される。例えば、このような化合物は、ＤＭＦのような極性溶媒中で、式（Ｘ）のアミノピラゾール化合物を式Ｒ１‐Ｅ‐Ｎ＝Ｃ＝Ｏの適切な置換イソシアネートと反応させることにより製造される。反応は便宜上室温において行われる。
【０４１０】
一方、式（Ｉ）の尿素は、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）の存在下で、式（Ｘ）のアミンを式Ｒ１‐Ｅ‐ＮＨ２のアミンと反応させることにより製造される。反応は、典型的には、（例えば、マイクロ波ヒーターを用いて）約１５０℃以下の温度に加熱しながら、ＴＨＦのような極性溶媒中で行われる。
【０４１１】
ＣＤＩを用いる代わりに、尿素を形成させる２種アミンのカップリングは、室温またはそれ以下で、ジクロロメタンのような溶媒中、テトラエチルアミンのような非障害性塩基の存在下において、トリホスゲン（ビス（トリクロロメチル）カーボネート）を用いて行える。
【０４１２】
ＣＤＩの別なものとして、ホスゲンがトリホスゲンの代わりに用いうる。
【０４１３】
上記反応の多くにおいて、分子上の望ましくない位置において反応が生じないように、１以上の基を保護しておくことが必要かもしれない。保護基の例と官能基を保護および脱保護する方法は、Protective Groups in Organic Synthesis（T.Green and P.Wuts、3rd Edition、John Wiley and Sons,1999）において見られる。ヒドロキシ基は、例えばエーテル（‐ＯＲ）またはエステル（‐ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ）として、例えばｔ‐ブチルエーテル、ベンジル、ベンズヒドリル（ジフェニルメチル）またはトリチル（トリフェニルメチル）エーテル、トリメチルシリルまたはｔ‐ブチルジメチルシリルエーテル、またはアセチルエステル（‐ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ３、‐ＯＡｃ）として保護される。アルデヒドまたはケトン基は、例えばアセタール（Ｒ‐ＣＨ（ＯＲ）２）またはケタール（Ｒ２Ｃ（ＯＲ）２）として各々保護され、ここでカルボニル基（＞Ｃ＝Ｏ）は例えば一級アルコールとの反応においてジエーテル（＞Ｃ（ＯＲ）２）へ変換される。アルデヒドまたはケトン基は、酸の存在下において大過剰の水を用いて加水分解により容易に再生される。アミン基は、例えばアミド（‐ＮＲＣＯ‐Ｒ）またはウレタン（‐ＮＲＣＯ‐ＯＲ）として、例えばメチルアミド（‐ＮＨＣＯ‐ＣＨ３）、ベンジルオキシアミド（‐ＮＨＣＯ‐ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、‐ＮＨ‐Ｃｂｚ）、ｔ‐ブトキシアミド（‐ＮＨＣＯ‐ＯＣ（ＣＨ３）３、‐ＮＨ‐Ｂｏｃ）、２‐ビフェニル‐２‐プロポキシアミド（‐ＮＨＣＯ‐ＯＣ（ＣＨ３）２Ｃ６Ｈ４Ｃ６Ｈ５、‐ＮＨ‐Ｂｐｏｃ）、９‐フルオレニルメトキシアミド（‐ＮＨ‐Ｆｍｏｃ）、６‐ニトロベラトリルオキシアミド（‐ＮＨ‐Ｎｖｏｃ）、２‐トリメチルシリルエチルオキシアミド（‐ＮＨ‐Ｔｅｏｃ）、２，２，２‐トリクロロエチルオキシアミド（‐ＮＨ‐Ｔｒｏｃ）、アリルオキシアミド（‐ＮＨ‐Ａｌｌｏｃ）、または２‐（フェニルスルホニル）エチルオキシアミド（‐ＮＨ‐Ｐｓｅｃ）として保護される。環式アミンおよびヘテロ環式Ｎ‐Ｈ基のようなアミン用の他の保護基には、トルエンスルホニル（トシル）およびメタンスルホニル（メシル）基とベンジル基、例えばｐ‐メトキシベンジル（ＰＭＢ）基がある。カルボン酸基はエステルとして、例えばＣ１‐７アルキルエステル（例えば、メチルエステル、ｔ‐ブチルエステル）、Ｃ１‐７ハロアルキルエステル（例えば、Ｃ１‐７トリハロアルキルエステル）、トリＣ１‐７アルキルシリル‐Ｃ１‐７アルキルエステル、Ｃ５‐２０アリール‐Ｃ１‐７アルキルエステル（例えば、ベンジルエステル、ニトロベンジルエステル）、またはアミド、例えばメチルアミドとして保護される。チオール基は、例えばチオエーテル（‐ＳＲ）として、例えばベンジルチオエーテル、アセトアミドメチルエーテル（‐Ｓ‐ＣＨ２ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ３）として保護される。
【０４１４】
式（Ｉ）のサブグループ（Ｃ）を構成する酸付加塩は、親化合物１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の合成に際して、または親化合物の遊離塩基から所望の塩への変換により、または親化合物のある塩から親化合物の他の所望塩への変換により形成される。親化合物１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素（式（ＩＡ）の化合物）は、下記スキーム３で示された方法により製造される。
【０４１５】
スキーム３で示されているように、市販化合物の３，４‐ジニトロカルボン酸(XIII)がモルホリド(XXI)へ変換される。アミドの形成は、標準方法を用いて、酸(XIII)を酸クロリドのような活性誘導体へ変換することにより行われる。例えば、酸クロリドは、塩化チオニルの還流温度において過剰の塩化チオニルと加熱し、次いでトルエンとの共沸により過剰の塩化チオニルを除去することにより形成される。
【０４１６】
モルホリド(XXI)は、三フッ化ホウ素と共に水素化ホウ素ナトリウムのような適切な還元剤での処理により、ジニトロベンジルモルホリン(XXIII)へ還元される。還元反応は、典型的には、テトラヒドロフランのような無水溶媒中、低温、例えば０〜５℃の温度において行われる。次いで、ジニトロベンジルモルホリン(XXIII)は、標準条件下において、例えば室温においてエタノールのような極性溶媒中パラジウム炭素のような触媒の存在下において接触水素添加により、ジアミノベンジルモルホリン(XXIV)へ還元される。
【０４１７】
次いで、ジアミノベンジルモルホリン(XXIV)は市販４‐ニトロピラゾール‐３‐カルボン酸と反応させると、ニトロピラゾリルベンゾイミダゾール(XXV)を形成する。ニトロピラゾリルベンゾイミダゾール(XXV)の形成は、芳香族アミン基とのアミド結合形成を促進しうるＯ‐（ベンゾトリアゾール‐１‐イル）‐Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′‐テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）のようなペプチドカップリング試薬を用いて、カルボン酸とジアミノベンジル化合物(XXIV)とのアミド結合を最初に形成させることにより行われる。次いで、中間体アミド（示さず）は、例えば約６５℃の温度において、過剰の氷酢酸中で加熱することにより、ニトロピラゾリルベンゾイミダゾール(XXV)へ環化される。
【０４１８】
ニトロピラゾリルベンゾイミダゾール(XXV)は、標準条件下において対応アミン(XXVI)へ還元される。還元は、例えば、室温においてエタノールまたはジメチルホルムアミドのような極性溶媒中パラジウム炭素のような触媒の存在下において、接触水素添加により行われる。
【０４１９】
次いで、アミン(XXVI)は、尿素類の合成に関する標準方法を用いて、例えば室温またはそれ以下、例えば０〜５℃の温度において、ＴＨＦのような極性溶媒中でアミン(XXVI)を２，６‐ジフルオロフェニルイソシアネートと反応させることにより、尿素（ＩＡ）へ変換される。
【０４２０】
尿素（ＩＡ）の遊離塩基形は本発明の酸付加塩を製造するために用いられる。
【化３２】
0005507049.tif 000039
【０４２１】
本発明の塩は、Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use,P.Heinrich Stahl(Editor),Camille G.Wermuth(Editor),ISBN:3-90639-026-8,Hardcover,388 pages,August 2002において記載された方法のような常法により、遊離塩基から製造される。例えば、塩は水または有機溶媒中、または２種の混合液中で遊離塩基を適切な酸と反応させることにより製造される、通常、エーテル、酢酸エチル、メタノール、エタノール、イソプロパノールまたはアセトニトリルのような非水性媒体が用いられる。
【０４２２】
他の態様において、本発明は１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の酸付加塩の製造方法を提供し、前記方法は溶媒（典型的には、有機溶媒）または溶媒の混合液で１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基の溶液を形成し、溶液を酸で処理して、酸付加塩の沈殿物を形成させることからなる。
【０４２３】
酸は、典型的には、遊離塩基が溶解される溶媒と混和性である溶媒中の溶液として加えられる。
【０４２４】
遊離塩基が最初に溶解される溶媒は、その酸付加塩が不溶性であるものである。一方、遊離塩基が最初に溶解される溶媒は、酸付加塩が少なくとも一部可溶性であるものでもよく、次いで酸付加塩がさほど可溶性でない異なる溶媒が、塩が溶液から沈殿するように加えられる。
【０４２５】
例えば、本発明の塩を製造する一つの方法では、遊離塩基が第一溶媒（酢酸エチルまたは酢酸エチルとメタノールのようなアルコールとの混合液である）に溶解され、次いで第二溶媒（ジエチルエーテルまたはジオキシンのようなエーテルである）中塩酸のような酸の溶液（例えば、濃または飽和溶液）が、酸付加塩の沈殿物が形成されるように加えられ、次いで沈殿物が例えば濾過により集められる。
【０４２６】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の製造方法
我々の先の出願ＷＯ２００５／００２５５２号の例と前記スキーム１および３では、〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕アミドが下記からなる工程の順序により製造されることが開示されている：
（ｉ）Ｎ，Ｎ‐ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中１‐エチル‐３‐（３′‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）および１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）の存在下で４‐モルホリン‐４‐イルメチルベンゼン‐１，２‐ジアミンを４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸と反応させて、５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐２‐（４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐イル）‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾールを得、および
（ii）水素雰囲気下でパラジウム炭素との処理によりニトロ基を還元する、
または
（ｉ）Ｎ，Ｎ‐ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中１‐エチル‐３‐（３′‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）および１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）の存在下で適切なカルボン酸とまたはトリエチルアミンの存在下で適切な酸クロリドと４‐アミノ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸エステルを反応させて、４‐アミド‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸を形成し、および
（ii）ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中１‐エチル‐３‐（３′‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣ）および１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）の存在下で４‐モルホリン‐４‐イルメチルベンゼン‐１，２‐ジアミンを適切な４‐アミド‐１Ｈ‐ピラゾールカルボン酸と反応させて、〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕アミドを得る。
【０４２７】
ニトロピラゾール化合物をジアミンと反応させてからニトロ基をアミンへ還元するか、またはアミドピラゾールをジアミンと反応させる代わりに、アミノピラゾールのアミノ基が適切に保護されていれば、アミノピラゾールがジアミンと反応させうることがわかった。次いで、反応の生成物が環化されてベンゾイミダゾールを形成する。加えて、アミン保護基の除去とベンゾイミダゾールへの環化は一つの工程で行えることがわかった。
【０４２８】
したがって、他の態様において、本発明は下記式(XXVII)または(XXVIII)の化合物またはそれらの塩の製造方法を提供する：
【化３３】
0005507049.tif 000040
前記方法は、有機溶媒中、ＥＤＣおよびＨＯＢｔのようなカップリング剤の存在下で：
（ｉ）下記式(XXIX)の化合物：
【化３４】
0005507049.tif 000041
（式中、ＰＧはアミン保護基である）と、
（ii）下記式(XXXI)の化合物：
【化３５】
0005507049.tif 000042
との反応からなる。
【０４２９】
式(XXVIII)は式(XXVII)の位置異性体である。
【０４３０】
アミン保護基ＰＧは、前記過程で用いられる条件下において、アミン基の保護上有用と知られているいかなる保護基でもよい（例えば、前掲Green et al.参照）。そのため、例えば、窒素は、アミド（ＮＣＯ‐Ｒ）またはウレタン（ＮＣＯ‐ＯＲ）として、例えばメチルアミド（ＮＣＯ‐ＣＨ３）、ベンジルオキシアミド（ＮＣＯ‐ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、‐ＮＨ‐Ｃｂｚ）、tert‐ブトキシアミド（‐ＮＣＯ‐ＯＣ（ＣＨ３）３、Ｎ‐Ｂｏｃ）、２‐ビフェニル‐２‐プロポキシアミド（ＮＣＯ‐ＯＣ（ＣＨ３）２Ｃ６Ｈ４Ｃ６Ｈ５、Ｎ‐Ｂｐｏｃ）、９‐フルオレニルメトキシアミド（Ｎ‐Ｆｍｏｃ）、６‐ニトロベラトリルオキシアミド（Ｎ‐Ｎｖｏｃ）、２‐トリメチルシリルエチルオキシアミド（Ｎ‐Ｔｅｏｃ）、２，２，２‐トリクロロエチルオキシアミド（Ｎ‐Ｔｒｏｃ）、アリルオキシアミド（Ｎ‐Ａｌｌｏｃ）、または２‐（フェニルスルホニル）エチルオキシアミド（‐Ｎ‐Ｐｓｅｃ）として保護される。アミン用の他の保護基には、ｐ‐メトキシベンジル（ＰＭＢ）基のようなベンジル基がある。好ましいアミン保護基はウレタン（ＮＣＯ‐ＯＲ）、例えばベンジルオキシアミド（ＮＣＯ‐ＯＣＨ２Ｃ６Ｈ５、‐ＮＨ‐Ｃｂｚ）またはtert‐ブトキシアミド（‐ＮＣＯ‐ＯＣ（ＣＨ３）３、Ｎ‐Ｂｏｃ）、またはアリルオキシアミド（Ｎ‐Ａｌｌｏｃ）である。一つの態様において、保護基ＰＧは保護基ＡＰＧであり、これは酸性条件下で除去されるアミン保護基である。このような基にはウレタンがある。特に好ましいウレタン保護基は、酸性条件下で除去されるtert‐ブチルオキシカルボニルである。
【０４３１】
一つの態様において、保護基ＰＧは次いで式(XXVII)または(XXVIII)の化合物から除去され、保護基ＡＰＧと置き換えられて、式(XXVIIａ)または(XXVIIIａ)の化合物を形成する。
【０４３２】
式(XXIX)の一つの特に好ましい化合物は下記式(XXXII)の化合物である：
【化３６】
0005507049.tif 000043
本発明は、式(XXXII)の新規化学中間体自体も更に提供する。
【０４３３】
本発明は、式(XXVII)または(XXVIII)の新規化学中間体自体、例えば下記式(XXVIIａ)または(XXVIIIａ)の新規化学中間体も提供する。したがって、本発明は新規化学中間体として４‐アミノ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸（２‐アミノ‐４‐モルホリン‐４‐イルメチルフェニル）アミドまたは４‐アミノ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸（２‐アミノ‐５‐モルホリン‐４‐イルメチルフェニル）アミドとそれらの保護形を提供する。式(XXVII)の一つの特に好ましい新規化学中間体は〔３‐（２‐アミノ‐４‐モルホリン‐４‐イルメチルフェニルカルバモイル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕カルバミン酸tert‐ブチルエステルである。式(XXVIII)の一つの特に好ましい新規化学中間体は〔３‐（２‐アミノ‐５‐モルホリン‐４‐イルメチルフェニルカルバモイル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕カルバミン酸tert‐ブチルエステルである。
【０４３４】
保護基ＰＧがtert‐ブチルオキシカルボニル基である場合、前記過程の全体収率は８５％を超える。更に、前記過程は比較的簡単で安価な試薬および溶媒を利用するという点で有利であり、生成物の精製容易さという点でも有利である。
【０４３５】
他の態様において、本発明は３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミンまたはその塩の製造方法を提供し、前記方法は：
（ｉ）式(XXVIIａ)または(XXVIIIａ)の化合物：
【化３７】
0005507049.tif 000044
を、場合により加熱しながら、溶媒中酸で処理し、および
（ii）反応液を中和することからなる。
【０４３６】
アミン保護基ＡＰＧは、式(XXVII)または(XXVIII)の化合物に関して前記されたようにアミン基の保護に有用と知られた、上記方法で用いられている条件下で除去しうる、いかなる保護基でもよい。
【０４３７】
工程（ｉ）において、酸との反応は、例えば８０〜１００℃範囲の温度に加熱しながら行われる。工程（ｉ）が行われる溶媒はアルコール溶媒であり、それは例えばエタノールである。
【０４３８】
工程（ｉ）において、保護基は、好ましくは、酸との処理で除去されるＢｏｃ基のようなものであり、酸は環化反応のためにカルボニル基を活性化する上で中間体のプロトン化に適するように選択される。適切な酸には硫酸、メタンスルホン酸、または塩酸のような強酸があり、一つの具体的な酸は塩酸である。
【０４３９】
工程（ｉ）で反応の完了後に、例えば出発物質(XIIIａ)の消失で判断されるように、反応液は中和してもよい。
【０４４０】
工程（ii）では、非障害性塩基が用いられる。本関係において“非障害性塩基”という用語は、生成された化合物と反応しない炭酸ナトリウムのような塩基を意味する。工程（ii）は典型的には室温において行われる。
【０４４１】
工程（ii）において、反応液は、例えば反応液が中和剤により飽和されるまで、ｐＨ８．５において中和される。
【０４４２】
工程（ii）後に、化合物は１，１′‐カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）またはホスゲン相当物のようなカルボニル化試薬と反応させ、次いでシクロプロピルアミンにより処理する。ホスゲン相当物にはトリホスゲンまたはホスゲンがある。好ましいカルボニル化試薬は１，１′‐カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）である。
【０４４３】
一方、尿素は、溶媒、例えばＴＨＦ中、ピリジンのような塩基の存在下において、アミノピラゾール、３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミンをフェニルクロロホルメートと反応させて、環式尿素を得、次いでこれをシクロプロピルアミンにより処理するか、または（米国特許第４，３１３，７５５号および米国特許第４，２９９，７７８号において記載されているような）シクロプロパンカルボン酸アジドのCurtius転位から得られるシクロプロピルイソシアネートとアミノピラゾールを反応させることにより製造される。
【０４４４】
このように、本発明の別の態様は、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素またはその塩の製造方法であり、前記方法は：
（ｉ)場合により加熱しながら、溶媒中において式(XXVIIａ)の化合物を酸により処理し、
（ii）反応液を中和し、
(iii)工程（ii）の生成物をカルボニル化試薬と反応させ、
（iv）工程(iii)の生成物をシクロプロピルアミンと反応させることからなる。
【０４４５】
工程(iii)は、典型的には、還流下、例えば約１００℃以下、更に典型的には７０〜７５℃以下の温度において行われる。工程(iii)において、反応はテトラヒドロフランのような極性非プロトン溶媒中において行われる。カルボニル化試薬は１，１′‐カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）またはホスゲン相当物、例えばトリホスゲンまたはホスゲンのような化合物である。好ましいカルボニル化試薬は１，１′‐カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）である。
【０４４６】
工程（iv）は、典型的には、例えば約１００℃以下の温度に加熱しながら行われる。
【０４４７】
工程（iv）後に、生成物は、純度を高めて結晶形を得るために、塩変換または再結晶化（例えば、溶媒として２‐プロパノールまたはエタノールを用いる）に付してもよい。
【０４４８】
前記工程(iii)は式(XXXIII)の中間化合物および／またはその位置異性体(XXXIIIａ)を生じる：
【化３８】
0005507049.tif 000045
【０４４９】
式(XXXIII)および(XXXIIIａ)の中間体は、必要であれば単離され、次いでシクロプロピルアミンと反応させると、式(XXX)の化合物を生じる。
【０４５０】
したがって、他の態様において、本発明はここで定義されているような式(XXX)の化合物の製造方法を提供し、前記方法は式(XXXIII)または(XXXIIIａ)の化合物をシクロプロピルアミンと反応させ、次いで場合により式(XXX)の化合物の酸付加塩を形成させることからなる。反応は、典型的には、好ましくは高温、例えば８０℃を超える、更に典型的には９０℃を超える、例えば９５℃〜１０５℃の温度において、Ｎ‐メチルピロリドンのような極性非プロトン溶媒中において行われる。
【０４５１】
上記方法は、式（Ｉ）における部分（Ａ）が基ＮＨである、ここで定義されているような式（Ｉ）の他の化合物およびそのサブグループを製造するためにも用いられる。
【０４５２】
したがって、別の態様において、本発明は、式（Ｉ）における部分（Ａ）が基ＮＨであり、ここで定義されているような式（Ｉ）の化合物の製造方法を提供し、前記方法は、好ましくは高温、例えば８０℃を超える、更に典型的には９０℃を超える、例えば９５〜１０５℃の温度において、好ましくはＮ‐メチルピロリドンのような極性非プロトン溶媒中、（ｉ）式(XXXIII)の化合物および／またはその位置異性体(XXXIIIａ)、または（ii）式(XXXIV)の化合物および／またはその位置異性体(XXXIVａ)：
【化３９】
0005507049.tif 000046
と式Ｒ１‐Ｅ‐ＮＨ２の化合物との反応、次いで場合により式（Ｉ）の化合物の酸付加塩を形成させることからなる。
【０４５３】
本発明は、式(XXXIII)、(XXXIIIａ)、(XXXIV)、および(XXXIVａ)の新規化学中間体を更に提供する。
【０４５４】
別の態様において、３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミンまたはその塩の製造方法、あるいは１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素またはその塩の製造方法における式(XXVIIａ)の化合物は、有機溶媒中、ＥＤＣおよびＨＯＢｔのようなカップリング剤の存在下において：
（ｉ）ＰＧが酸で除去されるアミン保護基ＡＰＧである、式(XXIX)の化合物と、
（ii）式(XXXI)の化合物
との反応からなる過程により製造される。
【０４５５】
場合により、ここで記載された過程は、塩を再結晶化させて結晶形、例えばここで規定されているような結晶形を得る、別の工程を有している。
【０４５６】
精製の方法
本発明の化合物は当業者に周知のいくつかの方法により単離および精製され、このような方法の例にはカラムクロマトグラフィー（例えば、フラッシュクロマトグラフィー）およびＨＰＬＣのようなクロマトグラフィー技術がある。予備(preparative)ＬＣ‐ＭＳが、ここで記載された化合物のような小有機分子の精製に用いられる、標準的で有効な方法である。液体クロマトグラフィー（ＬＣ）およびマススペクトロメトリー（ＭＳ）の方法は、粗製物質の良い分離とＭＳによる試料の改善された検出を行えるように変えられる。予備勾配ＬＣ法の最適化では、カラム、揮発性溶離液、および調整剤と勾配を変更する。予備ＬＣ‐ＭＳ法を最適化し、次いで化合物を精製するためにそれらを用いる方法は、当業界で周知である。このような方法は、Rosentreter U,Huber U.,Optimal fraction collecting in preparative LC/MS,J.Comb.Chem.,2004,6(2),159-64およびLeister W,Strauss K,Wisnoski D,Zhao Z,Lindsley C.,Development of a custom high-throughput prepararive liquid chromatography/mass spectrometer platform for the prepararive purification and analytical analysis of compound libraries,J.Comb.Chem.,2003,5(3),322-9において記載されている。
【０４５７】
予備ＬＣ‐ＭＳで化合物を精製する一つのこのような系が以下の実験セクションで記載されているが、当業者であれば記載されたものに代わる系および方法も用いうることがわかるであろう。特に、順相予備ＬＣベース法はここで記載された逆相法の代わりに用いられる。ほとんどの予備ＬＣ‐ＭＳ系は逆相ＬＣと揮発性酸性調整剤を利用するが、その理由はアプローチが小分子の精製に非常に有効であり、溶離液が陽イオン電子スプレーマススペクトロメトリーと適合するからである。他のクロマトグラフィー法、例えば順相ＬＣを用いると、前記の分析法で概説されたような別の緩衝移動相、塩基性調整剤なども、化合物を精製するために代わりに用いうる。
【０４５８】
再結晶化
式（Ｉ）の化合物およびその塩、特に１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素およびその塩の再結晶化方法は当業者に周知の方法により行われる‐例えば（P.Heinrich Stahl(Editor),Camille G.Wermuth(Editor),ISBN:3-90639-026-8,Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use,Chapter 8,Publisher Wiley-VCH参照）。有機反応から得られた生成物は、反応混合物から直接単離された場合、ほとんど純粋でない。化合物（または、その塩）が固体物であれば、それは適切な溶媒から再結晶化により精製および／または結晶化される。良い再結晶化溶媒は、高温の場合、精製される物質を適量により、但し低温では少量の物質のみを溶解させるべきである。それは低温の場合、不純物を容易に溶解させるか、または全く溶解させない。最後に、溶媒は精製された生成物から容易に除去されるべきである。これは通常、それが比較的低い沸点を有することを意味し、当業者であれば具体的な物質用の再結晶化溶媒を知ることができるか、その情報が入手できなければ、いくつかの溶媒を試験することになる。精製物質の良い収率を得るために、全部の不純物質を溶解させる最少量の熱溶媒が用いられる。実際には、所要量より３〜５％多い溶媒が、溶液が飽和されないように用いられる。溶媒に不溶性の不純物を不純化合物が含有していれば、それは濾過により除去し、次いで溶液を結晶化させる。加えて、不純化合物が前記化合物に固有でない微量の着色物質を含有していれば、それは少量の脱色炭を熱溶液へ加え、それを濾過し、次いでそれを結晶化させることにより除去される。通常、結晶化は溶液の冷却時に自然に生じる。そうでなければ、結晶化は溶液を室温以下に冷却するか、または単結晶の純粋物質（種結晶）を加えることにより誘導される。再結晶化も行ってよく、および／または収率は反溶媒の使用により最良化される。この場合に、化合物は高温で適切な溶媒に溶解され、濾過され、次いで所要化合物が低い溶解度を有する追加溶媒が結晶化を助けるために加えられる。次いで、結晶が典型
的には真空濾過を用いて単離され、洗浄され、次いで例えばオーブンで、または除湿により乾燥される。
【０４５９】
結晶化のための方法の他の例には、例えば密封管または気流中の蒸発工程を含む蒸気からの結晶化と、溶融物からの結晶化とがある（Cryst allization Technology Handbook 2nd Edition,edited by A.Mersmann,2001）。
【０４６０】
特に、式（Ｉ）の化合物は、純度を高めて結晶形を得るために、再結晶化（例えば、溶媒として２‐プロパノールまたはエタノールを用いる）に付してもよい。
【０４６１】
通常、得られた結晶はＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）またはＸ線結晶回折のようなＸ線回折法により分析される。
【０４６２】
医薬処方剤
活性化合物またはその塩は単独で投与することも可能であるが、１種以上の薬学上許容される担体、アジュバント、賦形剤、希釈剤、フィラー、緩衝剤、安定剤、保存剤、滑沢剤、または当業者に周知の他の物質と、場合により他の治療または予防剤、例えば化学療法に伴う副作用の一部を減少または軽減する剤と一緒に、本発明の少なくとも１種の活性化合物を含んでなる医薬組成物（例えば、処方剤）として、それを提供することが好ましい。このような剤の具体例には、鎮吐剤および化学療法関連好中球減少の継続を防止または減少させて、赤血球または白血球のレベル減少から生じる合併症を防止する剤、例えばエリトロポエチン（ＥＰＯ）、顆粒球マクロファージ‐コロニー刺激因子（ＧＭ‐ＣＳＦ）、および顆粒球‐コロニー刺激因子（Ｇ‐ＣＳＦ）がある。
【０４６３】
このように、本発明は、上記のような医薬組成物と、ここで記載されているような１種以上の薬学上許容される担体、賦形剤、緩衝剤、アジュバント、安定剤、または他の物質とを一緒に、前記の少なくとも１種の活性化合物を混合することからなる、医薬組成物の製造方法を更に提供する。
【０４６４】
ここで用いられている“薬学上許容される”という用語は、過度な毒性、刺激、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症無しに、妥当な利益／危険比で釣り合った、正当な医学的判断の範囲内で、対象者（例えばヒト）の組織との接触使用に適した、化合物、物質、組成物および／または剤形に関する。各担体、賦形剤などは、処方剤の他の成分と適合するという意味でも、“許容され”ねばならない。
【０４６５】
したがって、別の態様において、本発明はここで定義されている式（Ｉ）の化合物とそのサブグループ、例えば式（II）および(III)とそのサブグループを医薬組成物の形態で提供する。
【０４６６】
医薬組成物は、経口、非経口、局所、鼻内、眼、耳、直腸、膣内、または経皮投与に適した形態をとれる。組成物が非経口投与用である場合、それらは静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下投与用あるいは注射、注入または他の送達手段による標的器官または組織への直接送達用に処方される。送達はボーラス注射、短期注入、または長期注入でもよく、受動送達または適切な注入ポンプの利用によってもよい。
【０４６７】
非経口投与向けの医薬処方剤には、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤および所定レシピエントの血液と処方剤を等張にする溶質を含有しうる水性および非水性無菌注射液、懸濁剤、および増粘剤を含有しうる水性および非水性無菌懸濁液がある。これらの例は、R.G.Strickly,Solubilizing Excipients in oral and injectable formulations,Pharmaceutical Research,Vol.21(2),2004,p201-230で記載されている。加えて、それらは補助溶媒、有機溶媒混合液、シクロデキストリン複合化剤、乳化剤（エマルジョン処方剤を形成および安定化させるため）、リポソームを形成させるためのリポソーム成分、ポリマーゲルを形成させるためのゲル化ポリマー、凍結乾燥保護剤と、特に、活性成分を可溶形で安定化させ、処方剤を所定レシピエントの血液と等張にする剤の組合せを含有してもよい。処方剤は単位用量または多数回用量容器、例えば密封アンプルおよびバイアルで供して、使用直前に、無菌液体担体、例えば注射用水の添加のみを要する、フリーズドライ（凍結乾燥）条件下で貯蔵してもよい。
【０４６８】
イオン化しうる薬物分子は、薬物ｐＫａが処方ｐＨ値から十分に離れていれば、ｐＨ調整により望ましい濃度まで溶解される。許容される範囲は静脈内および筋肉内投与の場合においてｐＨ２〜１２であるが、皮下ではその範囲がｐＨ２．７〜９．０である。溶液ｐＨは、薬物の塩の形態、塩酸、または水酸化ナトリウムのような強酸／塩基によるか、またはグリシン、クエン酸、酢酸、マレイン酸、コハク酸、ヒスチジン、リン酸、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン（ＴＲＩＳ）、または炭酸から形成される緩衝液に限定されないが、それらを含めた緩衝剤の溶液により制御される。
【０４６９】
水溶液と水溶性有機溶媒／界面活性剤（すなわち、補助溶媒）の組合せが注射用処方剤でよく用いられる。注射用処方剤で用いられる水溶性有機溶媒および界面活性剤にはプロピレングリコール、エタノール、ポリエチレングリコール３００、ポリエチレングリコール４００、グリセリン、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、Ｎ‐メチル‐２‐ピロリドン（ＮＭＰ、Pharmasolve）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Solutol ＨＳ １５、Cremophor ＥＬ、Cremophor ＲＨ ６０、およびポリソルベート８０があるが、それらに限定されない。このような処方剤は通常注射前に希釈されるが、必ずではない。
【０４７０】
プロピレングリコール、ＰＥＧ３００、エタノール、Cremophor ＥＬ、Cremophor ＲＨ ６０、およびポリソルベート８０は市販注射用処方剤で用いられる完全な有機水混和性溶媒および界面活性剤であり、互いに併用してもよい。得られた有機処方剤はＩＶボーラスまたはＩＶ注入前に少なくとも２倍で通常希釈される。
【０４７１】
一方、水溶解度の増加はシクロデキストリンとの分子複合化でも得られる。
【０４７２】
リポソームは、外側脂質二層膜および内側水性コアから構成されて、＜１００μｍの全径を有する、閉鎖球形小胞である。疎水性のレベルに応じて、中度に疎水性の薬物は、前記薬物がリポソーム内に封入または挿入されるようになれば、リポソームにより溶解される。疎水性薬物は、前記薬物分子が脂質二層膜の一体部分になれば、リポソームでも溶解され、この場合には、疎水性薬物は脂質二層の脂質部分に溶解される。典型的リポソーム処方剤は、リン脂質５〜２０ｍｇ／ｍＬ、等張化剤、ｐＨ５〜８緩衝剤および場合によりコレステロールと共に水を含有している。
【０４７３】
処方剤は単位用量または多数回用量容器、例えば密封アンプルおよびバイアルにより供して、使用直前に無菌液体担体、例えば注射用水の添加のみを要する、フリーズドライ（凍結乾燥）条件下で貯蔵してもよい。
【０４７４】
前記医薬処方剤は、式（Ｉ）の化合物またはその酸付加塩を凍結乾燥することにより製造される。凍結乾燥とは組成物をフリーズドライする操作に関する。したがって、フリーズドライおよび凍結乾燥は同義語としてここでは用いられている。典型的な過程では、化合物を溶解し、得られた処方剤が清澄化され、滅菌濾過され、凍結乾燥に適した容器（例えば、バイアル）へ無菌的に移される。バイアルの場合、それらはリオストッパー（lyo-stopper）で部分的に塞がれる。処方剤は氷点に冷却され、標準条件下で凍結乾燥に付され、次いで栓で密閉されて、安定な凍結乾燥処方剤を形成する。組成物は典型的には低い残留水分、例えば凍結乾燥物の重量ベースで５重量％以下、例えば１％以下の水分を有する。
【０４７５】
凍結乾燥処方剤は、他の賦形剤、例えば増粘剤、分散剤、緩衝剤、酸化防止剤、保存剤、および張度調整剤を含有してもよい。典型的な緩衝剤には、リン酸、酢酸、クエン酸、およびグリシンがある。酸化防止剤の例には、アスコルビン酸、重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、モノチオグリセロール、チオ尿素、ブチル化ヒドロキシトルエン、ブチル化ヒドロキシルアニソール、およびエチレンジアミン四酢酸塩がある。保存剤には、安息香酸およびその塩、ソルビン酸およびその塩、ｐ‐ヒドロキシ安息香酸のアルキルエステル、フェノール、クロロブタノール、ベンジルアルコール、チメロサール、塩化ベンザルコニウム、および塩化セチルピリジニウムがある。前記の緩衝剤と、デキストロースおよび塩化ナトリウムが、必要であれば、張度調整剤に用いられる。
【０４７６】
増量剤が、過程を容易化するおよび／または嵩および／または機械的結着性を凍結乾燥ケークにもたらすために、凍結乾燥技術で通常用いられる。増量剤とは、化合物またはその塩と同時凍結乾燥された場合に、物理的に安定な凍結乾燥ケーク、より適格な凍結乾燥過程および急速で完全な再調製をもたらす、易水溶性の固体微粒子希釈物を意味する。増量剤は溶液を等張にするためにも利用される。水溶性増量剤は、凍結乾燥で典型的に用いられる、薬学上許容される不活性固体物質のいかなるものでもよい。このような増量剤には、例えば、グルコース、マルトース、スクロース、およびラクトースのような糖、ソルビトールまたはマンニトールのようなポリアルコール、グリシンのようなアミノ酸、ポリビニルピロリジンのようなポリマー、およびデキストランのような多糖がある。
【０４７７】
増量剤の重量対活性化合物の重量の比率は、典型的には、約１〜約５、例えば約１〜約３の範囲内、例えば約１〜２の範囲内である。
【０４７８】
一方、それらは、濃縮して適切なバイアル中に密封される、溶液形で提供してもよい。剤形の滅菌は、処方過程の適切な段階で、濾過によるかまたはバイアルおよびそれら内容物のオートクレーブ処理による。供給される処方剤は、適切な無菌注入パック中へ送達、例えば希釈前に、更に希釈または調製を要することもある。
【０４７９】
即時注射用溶液および懸濁液は、無菌粉末、顆粒、および錠剤から製造してもよい。
【０４８０】
本発明の一つの好ましい態様において、医薬組成物はｉ．ｖ．投与、例えば注射または注入に適した形態をとる。
【０４８１】
非経口注射用の本発明の医薬組成物は、薬学上許容される無菌水性または非水性溶液、分散液、懸濁液、または乳濁液と、使用直前における無菌注射用溶液または分散液への再調製用の無菌粉末でもよい。適切な水性および非水性担体、希釈物、溶媒、またはビヒクルの例としては、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、カルボキシメチルセルロースおよびその適切な混合物、植物油（例えば、オリーブ油）およびオレイン酸エチルのような注射用有機エステルがある。適正な流動性は、例えば、レシチンのようなコーティング物質の使用、分散液の場合では所要粒径の維持、および界面活性剤の使用により維持される。
【０４８２】
本発明の組成物は、保存剤、湿潤剤、乳化剤、および分散剤のようなアジュバントも含有してよい。微生物の作用の防止は、様々な抗菌および抗真菌剤、パラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸などの含有により確保される。糖、塩化ナトリウムなどのような等張剤を含有させることも望ましい。注射用製剤の長期吸収は、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンのような、吸収を遅らせる剤の含有により行える。
【０４８３】
化合物が水性媒体中で安定でないか、または水性媒体に低い溶解度を有していれば、それは有機溶媒中で濃縮物として処方される。次いで、濃縮物は水性系で低濃度に希釈され、投薬に際して短期間であれば十分に安定である。したがって、他の態様において、１種以上の有機溶媒から完全に構成される非水溶液を含んでなる医薬組成物が提供され、これはそのままで、またはより一般的には投与前に適切なＩＶ賦形剤（塩水、デキストロース、緩衝化、または非緩衝化）で希釈されて投与される（Solubilizing excipients in oral and injectable formulations,Pharmaceutical Research,21(2),2004,-201-230）。溶媒および界面活性剤の例は、プロピレングリコール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、エタノール、ジメチルアセトアミド(ＤＭＡ)、Ｎ‐メチル‐２‐ピロリドン（ＮＭＰ，Pharmasolve）、グリセリン、Cremophor ＥＬ、Cremophor ＲＨ ６０およびポリソルベートである。具体的な非水溶液は７０〜８０％のプロピレングリコールおよび２０〜３０％のエタノールからなる。一つの具体的な非水溶液は７０％のプロピレングリコールおよび３０％のエタノールからなる。他は８０％のプロピレングリコールおよび２０％のエタノールである。通常、これらの溶媒は組合せで用いられ、ＩＶボーラスまたはＩＶ注入前に通常少なくとも２倍希釈される。ボーラスＩＶ処方剤で典型的な量はグリセリン、プロピレングリコール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００で〜５０％、およびエタノールで〜２０％である。ＩＶ注入処方剤で典型的な量はグリセリンで〜１５％、ＤＭＡで３％、プロピレングリコール、ＰＥＧ３００、ＰＥＧ４００、およびエタノールで〜１０％である。
【０４８４】
本発明の一つの好ましい態様において、医薬組成物はｉ．ｖ．投与、例えば注射または注入に適した形態をとる。静脈内投与の場合、溶液はそのままで投与されるか、または投与前に注入バッグ（０．９％塩水または５％デキストロースのような薬学上許容される賦形剤を含有する）へ注入される。
【０４８５】
他の好ましい態様において、医薬組成物は皮下（ｓ．ｃ．）投与に適した形態をとる。
【０４８６】
経口投与に適した医薬剤形には、錠剤、カプセル、カプレット、ピル、ロゼンジ、シロップ、溶液、粉末、顆粒、エリキシルおよび懸濁液、舌下錠、ウエファーまたはパッチおよび口腔パッチがある。
【０４８７】
式（Ｉ）の化合物を含有する医薬組成物は公知の技術に従い処方できる、例えばRemington’s Pharmaceutical Sciences,Mack Publishing Company,Easton,ＰＡ,米国参照。
【０４８８】
このように、錠剤組成物は、不活性希釈剤または担体、例えば糖または糖アルコール、例えばラクトース、スクロース、ソルビトール、またはマンニトール、および／または非糖誘導希釈剤、例えば炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、またはセルロースまたはその誘導体、例えばメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、およびコーンスターチのようなデンプンと一緒に、単位用量の活性化合物を含有できる。錠剤は、結合および造粒剤、例えばポリビニルピロリドン、崩壊剤（例えば、架橋カルボキシメチルセルロースのような膨潤性架橋ポリマー）、滑沢剤（例えば、ステアレート）、保存剤（例えば、パラベン）、酸化防止剤（例えば、ＢＨＴ）、緩衝剤（例えば、リン酸またはクエン酸緩衝剤）および発泡剤、例えばシトレート／ビカーボネート混合物のような標準成分も含有してよい。このような賦形剤は周知であり、ここで詳細に説明する必要はない。
【０４８９】
カプセル処方剤は硬ゼラチンでもまたは軟ゼラチン種でもよく、固体、半固体、または液体形で活性成分を含有しうる。ゼラチンカプセルは動物ゼラチンまたはその合成もしくは植物誘導相当物から形成される。
【０４９０】
固体剤形（例えば、錠剤、カプセルなど）は被覆してもまたは非被覆でもよいが、典型的にはコーティング、例えば保護膜コーティング（例えば、ワックスまたはニス）または放出制御コーティングを有している。コーティング（例えば、Eudragit型ポリマー）は胃腸管内の望ましい箇所で活性成分を放出するように設計しうる。そのため、コーティングは胃腸管内のあるｐＨ条件下で分解して、胃または回腸もしくは十二指腸で化合物を選択的に放出するように選択される。
【０４９１】
コーティングの代わりに、またはそれに加えて、胃腸管中様々な酸性またはアルカリ性条件下で化合物を選択的に放出するように変えられる放出制御剤、例えば放出遅延剤を含んでなる固体マトリックスに含有させて、薬物は提供しうる。一方、マトリックス物質または放出遅延コーティングは腐食性ポリマー（例えば、無水マレイン酸ポリマー）の形態をとってもよく、これは剤形が胃腸管を通過すると実質上継続的に腐食される。別な代替法として、活性化合物は化合物の放出の浸透制御を行う送達系で処方してもよい。浸透放出および他の遅延放出または徐放処方剤は当業者に周知の方法に従い製造される。
【０４９２】
医薬組成物は、約１％〜約９５％、好ましくは約２０％〜約９０％の活性成分を含んでなる。本発明による医薬組成物は、例えばアンプル、バイアル、坐剤、ドラジェ、錠剤、またはカプセルの形態のような単位剤形をとれる。
【０４９３】
経口投与用の医薬組成物は、活性成分を固体担体と混合し、所望であれば得られた混合物を造粒し、混合物を加工処理することにより、所望または必要であれば、錠剤、ドラジェコア、またはカプセル中へ適切な賦形剤の添加後に得られる。活性成分を拡散させるかまたは計測量で放出させるプラスチック担体中へ配合させることも、それらの場合に可能である。
【０４９４】
局所用の組成物には、軟膏、クリーム、スプレー、パッチ、ゲル、液体滴剤、およびインサート（例えば、眼内インサート）がある。このような組成物は既知方法に従い処方できる。
【０４９５】
非経口投与用の組成物は典型的には無菌水性または油性溶液または微細懸濁液として提供しても、あるいは無菌注射用水で即時に調製しうる微細無菌粉末形態で提供してもよい。
【０４９６】
直腸または膣内投与用の処方剤の例には、例えば活性化合物を含有した成形可能またはロウ状物質から形成される、ペッサリーおよび坐剤がある。
【０４９７】
吸入投与用の組成物は吸入性粉末組成物または液体もしくは粉末スプレーの形をとれ、粉末吸入器またはエアゾル分配器を用いて標準式に投与しうる。このような器具は周知である。吸入による投与の場合、粉末処方剤は典型的にはラクトースのような不活性固体粉末希釈剤と一緒に活性化合物を含んでなる。
【０４９８】
医薬処方剤は、単一パッケージに全治療コースを入れた“患者用パック”、通常ブリスターパックで、患者に提供してもよい。通常患者処方箋に欠けている、患者用パックに入れられた添付文書へ、患者がいつもアクセスできるという点で、薬剤師がバルクサプライから患者分の薬剤を取り分ける伝統的処方箋よりも、患者用パックは利点を有している。添付文書の含有は、医者の指示への患者コンプライアンスを向上させることが示された。
【０４９９】
本発明の化合物は通常単位剤形で提供され、そのため、典型的には所望レベルの生物活性を呈する上で十分な化合物を含有する。例えば、経口投与用の処方剤は０．１ｍｇ〜２ｇの活性成分、例えば１ｎｇ〜２ｍｇの活性成分を含有しうる。この範囲内で、化合物の具体的サブ範囲は、０．１ｍｇ〜２ｇの活性成分、更に一般的には１０ｍｇ〜１ｇ、例えば５０ｍｇ〜５００ｍｇ、または１μｇ〜２０ｍｇ（例えば１μｇ〜１０ｍｇ、例えば０．１ｍｇ〜２ｍｇの活性成分）である。
【０５００】
経口組成物の場合、単位剤形は１ｍｇ〜２ｇ、更に一般的には１０ｍｇ〜１ｇ、例えば５０ｍｇ〜１ｇ、例えば１００ｍｇ〜１ｇの活性化合物を含有しうる。
【０５０１】
活性化合物は、所望の治療効果を発揮するために十分な量の、それを必要とする患者（例えば、ヒトまたは動物患者）に投与される。
【０５０２】
治療の方法
ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)、およびサブグループの化合物は、サイクリン依存性キナーゼ、グリコーゲンシンターゼキナーゼ‐３およびオーロラキナーゼにより媒介されるある範囲の病状または症状の予防または治療に有用であると考えられる。このような病状および症状の例は前記されている。
【０５０３】
本化合物は、このような投与の必要な対象者、例えばヒトまたは動物患者、好ましくはヒトへ通常投与される。
【０５０４】
本化合物は、典型的には、治療上または予防上有用で、通常無毒性な量により投与される。しかしながら、ある状況（例えば、生命脅威疾患の場合）では、式（Ｉ）の化合物を投与する利益が毒性作用または副作用の欠点に勝ることもあり、その場合にはある程度の毒性を伴う量で化合物を投与することが望ましいと考えられる。
【０５０５】
本化合物は有益な治療効果を維持するために長期間にわたり投与しても、または短期間のみで投与してもよい。一方、それらはパルスまたは連続的に投与してもよい。
【０５０６】
化合物の典型的な１日量は１００ｐｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、更に典型的には５ｎｇ〜２５ｍｇ／ｋｇ体重、更に一般的には１０ｎｇ〜１５ｍｇ／ｋｇ体重（例えば、１０ｎｇ〜１０ｍｇ、更に典型的には１μｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇ、例えば１μｇ〜１０ｍｇ）／ｋｇ体重の範囲内であるが、必要時にはそれより高いまたは低い用量により投与してもよい。
【０５０７】
化合物（例えば、化合物１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素またはその塩、例えば乳酸またはクエン酸塩）は、例えば、毎日ベースで、あるいは２、３、４、５、６、７、１０、１４、２１、または２８日毎の反復ベースで投与される。しかしながら、最終的には、投与される化合物の量および用いられる組成物の種類は、治療される疾患または生理状態の程度に応じ、医師の裁量に委ねられる。
【０５０８】
化合物１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素またはその塩、例えば乳酸（特に、Ｌ‐乳酸）またはクエン酸塩に関する毎日投与法の例では、１ｍｇ／ｍ２／日〜１００ｍｇ／ｍ２／日、特に１ｍｇ／ｍ２／日〜１０ｍｇ／ｍ２／日、更に具体的には３〜６ｍｇ／ｍ２／日（２．５〜５ｍｇ遊離塩基／ｍ２／日に相当する）の開始用量で、または２．５ｍｇ／ｍ２／日〜１．５ｇ／ｍ２／日、特に２５ｍｇ／ｍ２／日〜６００ｍｇ／ｍ２／日、更に具体的には２００〜５００ｍｇ／ｍ２／日、例えば２５０ｍｇ／ｍ２／日または４５〜２００ｍｇ／ｍ２／日、例えば４５〜１５０ｍｇ／ｍ２／日または５６〜１８５ｍｇ／ｍ２／日（４５〜１５０ｍｇ遊離塩基／ｍ２／日に相当する）の乳酸塩の有効用量により前記化合物（例えば、Ｌ‐乳酸塩の形態）を投与するが、必要時にはそれより高いまたは低い用量で投与してもよい。
【０５０９】
一つの具体的な投与スケジュールでは、２時間〜１２０時間、例えば２〜９６時間、特に２４〜７２時間にわたり１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素またはその塩、例えば乳酸（特に、Ｌ‐乳酸）またはクエン酸塩の連続ＩＶ注入が患者に施され、治療が１〜３週毎のような望ましい間隔で繰り返される。
【０５１０】
更に具体的には、毎日２４時間で５日間にわたり１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素またはその塩、例えば乳酸（特に、Ｌ‐乳酸）またはクエン酸塩の連続ＩＶ注入が患者に施され、治療が毎週または４８時間繰り返され、治療が２週毎または７２時間繰り返され、治療が３週毎に繰り返される。
【０５１１】
他の具体的な投与スケジュールでは、１、２、または３週毎に週１日１回２時間、または１、２、または３週毎に１回２時間にわたり、ＩＶボーラスとして１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素またはその塩、例えば乳酸（特に、Ｌ‐乳酸）またはクエン酸塩の注入が患者に施される。
【０５１２】
１．５ｇ／ｍ２／日のような高用量でも、１〜２週毎に２４〜４８時間の連続ＩＶ注入のような、無治療期間を数多く組み込んだ投薬法を用いて投与しうる。それより少ない用量であっても、２または３週毎に４８〜７２時間の連続ＩＶ注入のような、より持続的な投薬（但し、なお周期的なオン／オフ）を組み込んだ投薬法を用いて投与しうる。
【０５１３】
特に、式（Ｉ′）の化合物または１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素またはそのすべての塩、例えば乳酸またはクエン酸塩、特に乳酸塩は、３週毎に連続ＩＶ注入で７２時間にわたり２５０ｍｇ／ｍ２／日で患者に投与される。
【０５１４】
他の態様において、式（Ｉ′）の化合物または１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素またはそのすべての塩、例えば乳酸またはクエン酸塩、特に乳酸塩は、５日間の治療周期で患者に投与される。
【０５１５】
最終的に、投与される化合物の量および用いられる組成物の種類は治療される疾患または生理状態の程度に応じ、医師の裁量に委ねられる。
【０５１６】
ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)、およびサブグループの化合物は唯一の治療剤として投与されるか、またはそれらは特定の病状、例えば前記された癌のような腫瘍性疾患(neoplastic disease)の治療に１種以上の他の化合物との組合せ療法で投与される。本発明の化合物と一緒に（同時にまたは異なる時間間隔で）投与または使用される他の治療剤または療法の例には、トポイソメラーゼ阻害剤、アルキル化剤、代謝拮抗物質、ＤＮＡ結合剤、微小管阻害剤（チューブリン標的剤）があるが、それらに限定されず、具体例はシスプラチン、シクロホスファミド、ドキソルビシン、イリノテカン、フルダラビン、５ＦＵ、タキサン類、マイトマイシンＣ、および放射線療法である。
【０５１７】
ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)、およびサブグループの化合物と一緒に（同時にまたは異なる時間間隔で）投与される治療剤の他の例には、モノクローナル抗体およびシグナル伝達阻害剤がある。
【０５１８】
ＣＤＫまたはオーロラ阻害剤が他の療法と組み合わされる場合には、２種以上の治療が個別に変わる用量変更スケジュールで異なる経路により行いうる。
【０５１９】
式（Ｉ）の化合物が１、２、３、４種またはそれ以上の他の治療剤（好ましくは、１または２種、または更に好ましくは１種）との組合せ療法で投与される場合、本化合物は同時に（同一または異なる医薬処方剤で）または連続的に投与される。連続的に投与される場合、それらは近接した間隔で（例えば、５〜１０分間で）または長い間隔で（例えば、１、２、３、４時間またはそれ以上離して、または必要時にはそれより長い間隔で）投与してもよく、正確な投与計画は治療剤の性質に応じる。
【０５２０】
本発明の化合物は、放射線療法、光力学療法、遺伝子療法、手術、および制御されたダイエットのような非化学療法治療と組み合わせて投与してもよい。
【０５２１】
他の化学治療剤との組合せ療法で使用の場合は、式（Ｉ）の化合物と１、２、３、４種またはそれ以上の他の治療剤が、例えば２、３、４種またはそれ以上の治療剤を含有した剤形で、一緒に処方される。代わりに、個別の治療剤は別々に処方して、場合によりそれらの使用説明書を添えた、キットの形態で一緒に提供してもよい。
【０５２２】
当業者であれば、一般常識から、用いる投与計画および組合せ療法についてわかるであろう。
【０５２３】
診断の方法
式（Ｉ）の化合物の投与前に、患者が罹患している、または罹患しているかもしれない疾患または症状が、オーロラおよび／またはサイクリン依存性キナーゼに対する活性を有した化合物による治療への感受性の有無を調べるために、患者が検査される。
【０５２４】
例えば、患者が罹患している、または罹患しているかもしれない癌のような症状または疾患が、ＣＤＫの過剰活性化または正常ＣＤＫ活性に対する経路の増感に至る遺伝子異常または異常タンパク質発現により特徴付けられるものであるかどうかを調べるために、患者から採取された生物試料が分析される。ＣＤＫ２シグナルの活性化または増感に至るこのような異常の例には、サイクリンＥの上方調節（Harwell RM,Mull BB,Porter DC,Keyomarsi K.,J.Biol.Chem.,2004 Mar 26,279(13):12695-705）、ｐ２１もしくはｐ２７の損失、またはＣＤＣ４変種の存在（Rajagopalan H,Jallepalli PV,Rago C,Velculescu VE,Kinzler KW,Vogelstein B,Lengauer C.,Nature,2004 Mar 4,428(6978):77-81）がある。ＣＤＣ４の変異体またはサイクリンＥの上方調節、特に過剰発現、またはｐ２１もしくはｐ２７の損失を有する腫瘍は、ＣＤＫ阻害剤に特に感受性かもしれない。一方または加えて、患者から採取された生物試料は、患者が罹患しているまたは罹患しているかもしれない癌のような症状または疾患が、オーロラキナーゼの上方調節により特徴付けられ、そのため特にオーロラ阻害剤に感受性のものであるかどうかを調べるために分析される。上方調節という用語には、遺伝子増幅（すなわち、多数遺伝子コピー）および転写効果による発現増加を含めた高発現または過剰発現と、変異による活性化を含めた機能亢進および活性化を含む。
【０５２５】
そのため、患者はオーロラキナーゼの過剰発現、上方調節または活性化に特有のマーカーを検出する診断試験に付してもよく、または患者はサイクリンＥの上方調節、ｐ２１もしくはｐ２７の損失、またはＣＤＣ４変種の存在に特有のマーカーを検出する診断試験に付してもよい。診断という用語には検査を含む。マーカーとして、我々は、例えばオーロラまたはＣＤＣ４の変異を特定するＤＮＡ組成の分析を含む、遺伝子マーカーを含めている。マーカーという用語は、酵素活性、酵素レベル、酵素状態（例えば、リン酸化されているまたはされていない）、および前記タンパク質のｍＲＮＡレベルを含めて、オーロラまたはサイクリンＥの上方調節に特有のマーカーも含める。サイクリンＥの上方調節またはｐ２１もしくはｐ２７の損失を有する腫瘍は、ＣＤＫ阻害剤に特に感受性かもしれない。腫瘍は、優先的に、治療前にサイクリンＥの上方調節またはｐ２１もしくはｐ２７の損失に関して検査してもよい。そのため、患者はサイクリンＥの上方調節またはｐ２１もしくはｐ２７の損失に特有のマーカーを検出する診断試験に付される。
【０５２６】
診断試験は、典型的には、腫瘍バイオプシー試料、血液試料（脱落腫瘍細胞の単離および豊富化）、スツールバイオプシー、痰、染色体分析、胸膜液、腹膜液、または尿から選択される生物試料で行われる。
【０５２７】
ＳＴＫ遺伝子（オーロラキナーゼＡの遺伝子）のＩｌｅ３１変種を有するサブ群の一部を形成している個体は、ある形の癌に高い罹患性を有しているらしいことがわかった、Ewart-Tolandら（Nat.Genet.,2003 Aug,34(4):403-12）参照。したがって、癌に罹患したこのような個体は、オーロラキナーゼ阻害活性を有する化合物の投与から効果を得られる、と考えられる。そのため、癌に罹患している、またはそう疑われる患者は、彼または彼女がＩｌｅ３１変種サブ群の一部を形成しているか否かを調べるために検査される。加えて、ヒト結腸直腸癌および子宮内膜癌ではＣＤＣ４（Ｆｂｗ７またはArchipelagoとしても知られる）に変異が存在している（Spruck et al.,Cancer Res.,2002 Aug 15,62(16):4535-9）ことがわかった、Rajagopalanら（Nature,2004 Mar 4,428(6978):77-81）。ＣＤＣ４で変異を有する個体の特定は、患者がＣＤＫ阻害剤による治療に特に適していることを意味する。腫瘍は、優先的に、治療前にＣＤＣ４変種の存在に関して検査してもよい。検査過程では、典型的には、直接配列決定、オリゴヌクレオチドマイクロアレー分析または変異体特異的抗体を用いる。
【０５２８】
イソ型を含めたオーロラの活性化変異体またはオーロラの上方調節を有する腫瘍は、特にオーロラ阻害剤に感受性であるかもしれない。腫瘍は、優先的に、治療前にオーロラの上方調節またはＩｌｅ３１変種を有するオーロラに関して検査してもよい（Ewart-Toland et al.Nat.Genet.,2003 Aug,34(4):403-12）。Ewart-Tolandらは、ヒト結腸腫瘍で優先的に増幅されて異数性の程度と関連している、ＳＴＫ１５の共通遺伝子変種（アミノ酸置換Ｆ３１Ｉを生じる）を特定した。これらの結果は、ヒト癌感受性に及ぼすＳＴＫ１５のＩｌｅ３１変種での重要な役割と一致している。特に、オーロラＡにおけるこの多形性が、乳癌腫を発生させる遺伝子修飾因子であることが示唆された（Sun et al.,Carcinogenesis,2004,25(11),2225-2230）。
【０５２９】
オーロラＡ遺伝子は、多くの癌、例えば乳、膀胱、結腸、卵巣、膵臓癌においてしばしば増幅される染色体２０ｑ１３領域に位置している。この遺伝子増幅を生じた腫瘍を有する患者は、オーロラキナーゼ阻害を標的とする治療に特に感受性であろう。
【０５３０】
タンパク質、例えばオーロライソ型の変異および上方調節と染色体２０ｑ１３増幅の特定および分析方法は、当業者に知られている。検査法には逆転写酵素ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ‐ＰＣＲ）またはin-situハイブリッド形成のような標準法があるが、それらに限定されない。
【０５３１】
ＲＴ‐ＰＣＲによる検査では、腫瘍中におけるｍＲＮＡのレベルが、ｍＲＮＡのｃＤＮＡコピーの作製、次いでＰＣＲによるｃＤＮＡの増幅により評価される。ＰＣＲ増幅の方法、プライマーの選択および増幅条件は当業者に知られている。核酸操作およびＰＣＲは、例えばAusubel,F.M.et al.,eds.,Current Protocols in Molecular Biology,2004,John Wiley & Sons Inc.またはInnis,M.A.et al.,eds.,PCR Protocols:a guide to methods and applications,1990,Academic Press,San Diegoで記載されているように、標準法により行われる。核酸技術を伴う反応および操作も、Sambrook et al.,2001,3rd Ed.,Molecular Cloning:A Laboratory Manual,Cold Spring Harbor Laboratory Pressにおいて記載されている。一方、ＲＴ‐ＰＣＲ用の市販キット（例えばRoche Molecular Biochemicals）、開示することにより本明細書の開示の一部とされる米国特許第４，６６６，８２８号、４，６８３，２０２号、４，８０１，５３１号、５，１９２，６５９号、５，２７２，０５７号、５，８８２，８６４号、および６，２１８，５２９号において示されている方法論も用いてよい。
【０５３２】
ｍＲＮＡ発現を評価するためのin-situハイブリッド形成技術の例として、蛍光in-situハイブリッド形成（ＦＩＳＨ）がある（Angerer,1987,Meth.Enzymol.,152:649参照）。
【０５３３】
通常、in-situハイブリッド形成は下記の主要工程：（１）分析される組織の固定、（２）標的核酸のアクセス性を増して非特異的結合を減らす試料の前ハイブリッド形成処理、（３）核酸の混合物と生体構造または組織中の核酸とのハイブリッド形成、（４）ハイブリッド形成で結合されなかった核酸フラグメントを除去する後ハイブリッド形成洗浄、および（５）ハイブリッド化核酸フラグメントの検出からなる。このような適用に用いられるプローブは、典型的には、例えば放射性同位元素または蛍光リポーターで標識される。好ましいプローブは、ストリンジェント条件下で標的核酸と特異的ハイブリッド形成しうるほど十分に長く、例えば約５０、１００、または２００ヌクレオチド〜約１０００ヌクレオチドまたはそれ以上である。ＦＩＳＨを行う標準方法はAusubel,F.M.et al.,eds.,Current Protocols in Molecular Biology,2004,John Wiley & Sons Inc.およびFluorescence In Situ Hybridization:Technical Overview by John M.S.Bartlett in Molecular Diagnosis of Cancer,Methods and Protocols,2nd ed.、ISBN:1-59259-760-2,March 2004,pps.077-088、Series:Methods in Molecular Medicineにおいて記載されている。
【０５３４】
一方、ｍＲＮＡから発現されたタンパク質産物は、腫瘍試料の免疫組織化学、マイクロタイタープレートでの固相イムノアッセイ、ウエスタンブロッティング、二次元ＳＤＳ‐ポリアクリルアミドゲル電気泳動、ＥＬＩＳＡ、フローサイトメトリー、および特定タンパク質の検出に関して当業界で知られている他の方法によりアッセイしてもよい。検出法では部位特異的抗体の使用を含むこともある。当業者であれば、サイクリンＥの上方調節またはｐ２１もしくはｐ２７の損失の検出、またはＣＤＣ４変種、オーロラ上方調節およびオーロラの変異体の検出に関する、すべてのこのような周知技術が、本ケースで適用しうると認めるであろう。
【０５３５】
したがって、これら技術のすべてが、本発明の化合物での治療に特に適した腫瘍を特定するために用いられる。
【０５３６】
ＣＤＣ４の変異体またはサイクリンＥの上方調節、特に過剰発現、またはｐ２１もしくはｐ２７の損失を有する腫瘍は、ＣＤＫ阻害剤に特に感受性かもしれない。腫瘍は、優先的に、治療前にサイクリンＥの上方調節、特に過剰発現（Harwell RM,Mull BB,Porter DC,Keyomarsi K.,J.Biol.Chem.,2004 Mar 26,279(13):12695-705）、ｐ２１もしくはｐ２７の損失、またはＣＤＣ４変種（Rajagopalan H,Jallepalli PV,Rago C,Velculescu VE,Kinzler KW,Vogelstein B,Lengauer C.,Nature,2004 Mar 4,428(6978):77-81）に関して検査される。
【０５３７】
マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）の患者も、ここで記載された診断検査を用いて、本発明の化合物による治療に選択されうる。ＭＣＬは、ＣＤ５、およびＣＤ２０の同時発現、悪性で不治の臨床経過および頻発ｔ（１１、１４）（ｑ１３、ｑ３２）転座を伴う小〜中の大きさのリンパ球の増殖により特徴付けられる、非ホジキンリンパ腫の別の臨床病理学的存在である。マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）で見られるサイクリンＤ１  ｍＲＮＡの過剰発現は、重要な診断マーカーである。Yatabeら（Blood,2000 Apr 1,95(7):2253-61）は、サイクリンＤ１陽性がＭＣＬで標準的基準の一つとして含まれるべきで、この不治病の革新的療法が新基準に基づき捜し求められるべきだ、と提案した。Jonesら（J.Mol.Diagn.,2004 May,6(2):84-9）は、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）の診断に役立てるため、サイクリンＤ１（ＣＣＮＤ１）発現に関するリアルタイム定量的逆転写ＰＣＲアッセイを開発した。Howe ら（Clin.Chem.,2004 Jan,50(1):80-7）はサイクリンＤ１  ｍＲＮＡ発現を評価するリアルタイム定量的ＲＴ‐ＰＣＲを用いて、ＣＤ１９  ｍＲＮＡに換算されるサイクリンＤ１  ｍＲＮＡに関する定量的ＲＴ‐ＰＣＲが血液、骨髄、および組織でＭＣＬの診断に用いうることを発見した。一方、乳癌の患者も、上記の診断検査を用いて、ＣＤＫ阻害剤による治療に選択されうる。腫瘍細胞は共通してサイクリンＥを過剰発現し、サイクリンＥが乳癌で過剰発現されることが示された（Harwell et al.,Cancer Res.,2000,60,481-489）。したがって、乳癌は前記のようにＣＤＫ阻害剤で特に治療されうる。
【０５３８】
抗真菌使用
別の態様において、本発明は、抗真菌剤として、ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)およびそれらのサブグループの化合物の使用を提供する。
【０５３９】
ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)、およびそれらのサブグループの化合物は、動物医療（例えば、ヒトのような哺乳動物の治療）で、植物の治療（例えば、農業および園芸）で、または一般的抗真菌剤、例えば保存剤および消毒剤として用いてもよい。
【０５４０】
一態様において、本発明は、ヒトのような哺乳動物で、真菌感染症の予防または治療用に、ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)、およびそれらのサブグループの化合物を提供する。
【０５４１】
ヒトのような哺乳動物において真菌感染の予防または治療用の薬剤の製造のための、ここで定義されている式（Ｉ）、(II)、(III)、およびそれらのサブグループの化合物の使用も提供される。
【０５４２】
例えば、本発明の化合物は、特に生物の中でも、Candida、Trichophyton、MicrosporumまたはEpidermophytonの種に起因する局所真菌感染症、またはCandida albicansに起因する粘膜感染症（例えば、鵞口瘡および膣カンジダ症）に罹患している、またはその感染の危険があるヒト患者に投与される。本発明の化合物は、例えばCandida albicans、Cryptococcus neoformans、Aspergillus flavus、Aspergillus fumigatus、Coccidiodies、Paracoccidioides、Histoplasma、またはBlastomycesに起因する全身性真菌感染症の治療または予防にも投与しうる。
【０５４３】
他の態様において、本発明は、農業上許容される希釈物または担体と一緒に、ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)、およびそれらのサブグループの化合物を含んでなる、農業（園芸を含む）使用向けの抗真菌組成物を提供する。
【０５４４】
本発明は、ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)、およびそれらのサブグループの化合物の有効量により、動物、植物、もしくは種子、または植物または種子の前記当箇所を治療することからなる、真菌感染症を有する動物（ヒトのような哺乳動物を含む）、植物または種子の治療方法を更に提供する。
【０５４５】
本発明は、ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)、およびそれらのサブグループの化合物を含有した殺真菌組成物の抗真菌有効量で植物または種子を治療することからなる、植物または種子において真菌感染症の治療方法も提供する。
【０５４６】
鑑別検査アッセイが、非ヒトＣＤＫ酵素に特異的な本発明の化合物について選択するために用いられる。真核細胞病原体のＣＤＫ酵素において特異的に作用する化合物は、抗真菌または抗寄生虫剤として用いうる。Candida ＣＤＫキナーゼの阻害剤、ＣＫＳＩが、カンジダ症の治療に用いられる。抗真菌剤は、前記種類の感染症、あるいは白血病およびリンパ腫の患者のような衰弱および免疫抑制患者、免疫抑制療法を受けている人々、および真性糖尿病またはエイズのような素因症状を有する患者と、更に非免疫抑制患者において一般的に生じる日和見感染症に対して用いられる。
【０５４７】
当業界において記載されているアッセイは、カンジダ症、アスペルギルス症、ムコール症、ブラストミセス症、ゲオトリクム症、クリプトコックス症、クロモブラストミコーシス、コクシジオイデス真菌症、コニジオスポローシス、ヒストプラスマ症、マズラミコーシス、リノスポリジウム症、ノカルジア症、パラアクチノミセス症、ペニシリウム症、モノリアシス、またはスポロトリクス症のような真菌症に関与する少なくとも１種の真菌を阻害するために有用な剤について選別するために用いられる。鑑別検査アッセイは、Aspergillus fumigatus、Aspergillus flavus、Aspergillus niger、Aspergillus nidulans、または Aspergillus terreusのような酵母菌からクローン化されたＣＤＫ遺伝子を利用することによりアスペルギルス症の治療において治療価値を有する、または真菌感染症がムコン‐ナイコーシスである抗真菌剤を特定するために用いられ、ＣＤＫアッセイはRhizopus arrhizus、Rhizopus oryzae、Absidia corymbifera、Absidia ramosa、またはMucorpusillusのような酵母菌から誘導しうる。他のＣＤＫ酵素源には病原体Pneumocystis cariniiがある。
【０５４８】
例として、化合物の抗真菌活性のインビトロ評価は、適切な媒体中において、特定微生物の増殖が生じない試験化合物の濃度である、最小阻止濃度（Ｍ．Ｉ．Ｃ．）を求めることにより行える。実際には、各々が試験化合物を特定濃度で配合させた一連の寒天プレートが、例えばCandida albicansの標準培養物で接種され、次いで各プレートが適切な期間にわたり３７℃でインキュベートされる。次いで、プレートは真菌の増殖の存在または不在について試験され、適切なＭ．Ｉ．Ｃ．値が求められる。一方、液体培養物において濁度アッセイも行え、このアッセイの例を概説したプロトコールが例６４で見られる。
【０５４９】
化合物のインビボアッセイは、真菌、例えばCandida albicansまたはAspergillus flavusの株において接種されたマウスへの、腹腔内もしくは静脈内注射または経口投与により、一連の用量水準により行われる。化合物の活性は、処置および未処置マウスのグループで真菌感染症の進行を（組織検査でまたは感染部位から真菌を採取することで）測定することにより評価される。活性は、化合物が感染症の致死作用に対して５０％防御を呈する用量水準（ＰＤ５０）に関して測定される。
【０５５０】
ヒト抗真菌使用の場合、ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)、およびそれらのサブグループの化合物は、単独でまたは所定の投与経路および標準調剤実務に応じて選択される製薬担体と混合して投与される。そのため、例えば、それらは“医薬処方剤”と題するセクションで前記された処方剤により、経口、非経口、静脈内、筋肉内、または皮下投与される。
【０５５１】
ヒト患者へ経口および非経口投与の場合、本発明の抗真菌化合物の１日投薬水準は、経口または非経口経路で投与される場合、特に化合物の効力に応じて、０．０１〜１０ｍｇ／ｋｇ（分割用量）である。化合物の錠剤またはカプセルは、１回または２回以上の適時投与用に、例えば５ｍｇ〜０．５ｇの活性化合物を含有している。医師はどのような場合でも個別患者に最も適した実際の投与量（有効量）を決定するが、それは具体的患者の年齢、体重、および応答性に応じて変化する。
【０５５２】
一方、抗真菌化合物は坐剤またはペッサリーの形態で投与しても、あるいはそれらはローション、溶液、クリーム、軟膏、または散布粉末の形態で局所適用してもよい。例えば、それらはポリエチレングリコールまたは流動パラフィンの水性エマルジョンからなるクリーム中へ配合される、またはそれらは、必要となるような安定剤および保存剤と一緒に、白ロウまたは白色ワセリン基剤からなる軟膏中に、１〜１０％の濃度で配合される。
【０５５３】
上記の治療使用に加えて、このような鑑別検査アッセイで開発された抗真菌剤は、家畜で体重増を促す食糧、飼料補助物中に、または非生命体の処置用、例えば病院器具および室の汚染除去用の消毒処方剤中に、例えば保存剤として用いられる。同様に、哺乳動物ＣＤＫおよび昆虫ＣＤＫ、例えばDrosophilia ＣＤＫ５遺伝子の阻害の並行比較により（Hellmich et al.(1994)FEBS Lett.,356:317-21）、ヒト／哺乳動物と昆虫との酵素を識別する阻害剤を本化合物の中から選択しうる。したがって、本発明は、例えばミバエのような昆虫の管理用に、殺虫剤として本発明の化合物の使用および処方も明白に考えられる。
【０５５４】
更に他の態様において、対象ＣＤＫ阻害剤のあるものが、哺乳動物酵素と比較した植物ＣＤＫの阻害特異性に基づき選択される。例えば、植物酵素を阻害する上で最大選択性の化合物を選択するために、植物ＣＤＫが１種以上のヒト酵素との鑑別検査に置かれる。このように、本発明は、例えば枯葉剤などの形態で、農業用の対象ＣＤＫ阻害剤の処方剤も特に考えられる。
【０５５５】
農業および園芸目的の場合、本発明の化合物は具体的使用および所定目的に適宜処方された組成物の形態で用いられる。このように、化合物は散布粉末または顆粒、種子ドレッシング、水性溶液、分散液または乳濁液、浸液、スプレー、エアゾル、またはスモークの形態で適用される。組成物は、分散性粉末、顆粒または粒子、または使用前希釈用の濃縮物の形態でも供給される。このような組成物は農業および園芸で認識および許容されているような常用の担体、希釈物、またはアジュバントを含有してもよく、それらは常套操作に従い製造される。本組成物は他の活性成分、例えば除草または殺昆虫活性を有する化合物または別の殺真菌剤も配合してよい。本化合物および組成物はいくつかの手法で適用され、例えばそれらは植物葉、茎、分枝、種子または根、または土壌または他の生育地へ直接適用され、それらは病気を根絶させるのみならず、植物または種子を攻撃から防御する上で予防的にも用いられる。例として、組成物は０．０１〜１ｗｔ％の活性成分を含有する。野外使用の場合、おそらく活性成分の適用割合は５０〜５０００ｇ／ヘクタールであろう。
【０５５６】
本発明は、木材腐朽真菌の制御と、植物が生育する土壌、苗用の水田または灌漑用水の処置に、ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)、およびそれらのサブグループの化合物の使用も考えられる。貯蔵穀物および他の非植物前記当箇所を真菌寄生から防御するために、ここで定義されているような式（Ｉ）、(II)、(III)、(XXX)、およびそれらのサブグループの化合物の使用も、本発明では考えられる。
【実施例】
【０５５７】
本発明は、下記例で記載された具体的態様に限定されないが、それに言及することにより、ここでは説明される。
【０５５８】
例中では、下記略号が用いられている。
ＡｃＯＨ        酢酸
ＢＯＣ          tert‐ブチルオキシカルボニル
ＣＤＩ          １，１‐カルボニルジイミダゾール
ＤＭＡＷ９０    溶媒混合液：ＤＣＭ，ＭｅＯＨ，ＡｃＯＨ，Ｈ２Ｏ(９０：１８：３：２)
ＤＭＡＷ１２０  溶媒混合液：ＤＣＭ，ＭｅＯＨ，ＡｃＯＨ，Ｈ２Ｏ
(１２０：１８：３：２)
ＤＭＡＷ２４０  溶媒混合液：ＤＣＭ，ＭｅＯＨ，ＡｃＯＨ，Ｈ２Ｏ
(２４０：２０：３：２)
ＤＣＭ          ジクロロメタン
ＤＭＦ          ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ        ジメチルスルホキシド
ＥＤＣ          １‐エチル‐３‐（３′‐ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
Ｅｔ３Ｎ        トリエチルアミン
ＥｔＯＡｃ      酢酸エチル
Ｅｔ２Ｏ        ジエチルエーテル
ＨＯＡｔ        １‐ヒドロキシアザベンゾトリアゾール
ＨＯＢｔ        １‐ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＭｅＣＮ        アセトニトリル
ＭｅＯＨ        メタノール
ＳｉＯ２        シリカ
ＴＢＴＵ        Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′‐テトラメチル‐Ｏ‐（ベンゾトリアゾール‐１‐
イル）ウロニウムテトラフルオロボレート
ＴＨＦ          テトラヒドロフラン
【０５５９】
分析ＬＣ‐ＭＳ系および方法記載
例中、製造された化合物は、下記の系および操作条件を用いて、液体クロマトグラフィーおよびマススペクトロスコピーにより特徴付けた。異なる同位元素の原子が存在し、単一の質量が充当される場合、化合物に充当される質量は単同位元素質量（すなわち、３５Ｃｌ、７９Ｂｒなど）である。下記のようないくつかの系が用いられ、これらは密接に類似した操作条件下でランするように装備および設定されている。用いられた操作条件も以下で記載されている。
【０５６０】
WatersプラットホームＬＣ‐ＭＳ系：
ＨＰＬＣ系：          Waters 2795
マススペクトル検出器：Micromass Platform ＬＣ
ＰＤＡ検出器：        Waters 2996 ＰＤＡ
分析酸性条件：
溶離液Ａ：      Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）
溶離液Ｂ：      ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）
勾配：          ５〜９５％溶離液Ｂで３．５分間
フロー：        ０．８ｍＬ／ｍｉｎ
カラム：       Phenomenex Synergi ４μ MAX-RP 80A，２．０×５０ｍｍ
分析塩基性条件：
溶離液Ａ：    Ｈ２Ｏ（ＮＨ４ＯＨでｐＨ＝９．２に調整された
１０ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３緩衝液）
溶離液Ｂ：    ＣＨ３ＣＮ
勾配：        ０５〜９５％溶離液Ｂで３．５分間
流量：        ０．８ｍＬ／ｍｉｎ
カラム：      Phenomenex Luna C18(2)５μｍ ２．０×５０ｍｍ
分析極性条件：
溶離液Ａ：    Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）
溶離液Ｂ：    ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）
勾配：        ００〜５０％溶離液Ｂで３分間
流量：        ０．８ｍＬ／ｍｉｎ
カラム：      Phenomenex Synergi ４μ MAX-RP 80A，２．０×５０ｍｍ
分析親油性条件：
溶離液Ａ：    Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）
溶離液Ｂ：    ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）
勾配：        ５５〜９５％溶離液Ｂで３．５分間
流量：        ０．８ｍＬ／ｍｉｎ
カラム：      Phenomenex Synergi ４μ MAX-RP 80A，２．０×５０ｍｍ
分析長時間酸性条件：
溶離液Ａ：    Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）
溶離液Ｂ：    ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）
勾配：        ０５〜９５％溶離液Ｂで１５分間
流量：        ０．４ｍＬ／ｍｉｎ
カラム：      Phenomenex Synergi ４μ MAX-RP 80A，２．０×１５０ｍｍ
分析長時間塩基性条件：
溶離液Ａ：    Ｈ２Ｏ（ＮＨ４ＯＨでｐＨ＝９．２に調整された
１０ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３緩衝液）
溶離液Ｂ：    ＣＨ３ＣＮ
勾配：        ０５〜９５％溶離液Ｂで１５分間
流量：        ０．８ｍＬ／ｍｉｎ
カラム：      Phenomenex Luna C18(2)５μｍ ２．０×５０ｍｍ
プラットホームＭＳ条件：
キャピラリー電圧：  ３．６ｋＶ（ＥＳ陰極で３．４０ｋＶ）
コーン電圧：        ２５Ｖ
ソース温度：        １２０℃
スキャン範囲：      １００〜８００ａｍｕ
イオン化方式：      ElectroSpray Positive
ElectroSpray Negative、または
ElectroSpray Positive & Negative
【０５６１】
Waters Fractionlynx ＬＣ‐ＭＳ系：
ＨＰＬＣ系：        ２７６７オートサンプラー‐２５２５二元勾配ポンプ
マススペクトル検出器：Waters ＺＱ
ＰＤＡ検出器：        Waters 2996 ＰＤＡ
分析酸性条件：
溶離液Ａ：          Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）
溶離液Ｂ：          ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）
勾配：              ５〜９５％溶離液Ｂで４分間
流量：              ２．０ｍＬ／ｍｉｎ
カラム：            Phenomenex Synergi ４μ MAX-RP 80A，４．６×５０ｍｍ
分析極性条件：
溶離液Ａ：          Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）
溶離液Ｂ：          ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）
勾配：              ００〜５０％溶離液Ｂで４分間
流量：             ２．０ｍＬ／ｍｉｎ
カラム：             Phenomenex Synergi ４μ MAX-RP 80A，４．６×５０ｍｍ
分析親油性条件：
溶離液Ａ：          Ｈ２Ｏ（０．１％ギ酸）
溶離液Ｂ：          ＣＨ３ＣＮ（０．１％ギ酸）
勾配：              ５５〜９５％溶離液Ｂで４分間
流量：              ２．０ｍＬ／ｍｉｎ
カラム：             Phenomenex Synergi ４μ MAX-RP 80A，４．６×５０ｍｍ
Fractionlynx ＭＳ条件：
キャピラリー電圧：  ３．５ｋＶ（ＥＳ陰極で３．２ｋＶ）
コーン電圧：        ２５Ｖ（ＥＳ陰極で３０Ｖ）
ソース温度：        １２０℃
スキャン範囲：      １００〜８００ａｍｕ
イオン化方式：      ElectroSpray Positive、
ElectroSpray Negative、または
ElectroSpray Positive & Negative
【０５６２】
質量向け精製ＬＣ‐ＭＳ系
予備ＬＣ‐ＭＳは、ここで記載された化合物のような小有機分子の精製に用いられる、標準的で有効な方法である。液体クロマトグラフィー（ＬＣ）およびマススペクトロメトリー（ＭＳ）の方法は、粗製物質の良い分離とＭＳによる試料の改善された検出を行えるように変えられる。予備勾配ＬＣ法の最適化では、カラム、揮発性溶離液、および調整剤と勾配とを変更する。予備ＬＣ‐ＭＳ法を最適化し、次いで化合物を精製するためにそれらを用いる方法は、当業界において周知である。このような方法は、Rosentreter U,Huber U.,Optimal fraction collecting in preparative LC/MS,J.Comb.Chem.,2004,6(2),159-64およびLeister W,Strauss K,Wisnoski D,Zhao Z,Lindsley C.,Development of a custom high-throughput prepararive liquid chromatography/mass spectrometer platform for the prepararive purification and analytical analysis of compound libraries,J.Comb.Chem.,2003,5(3),322-9において記載されている。
【０５６３】
予備ＬＣ‐ＭＳで化合物を精製する一つのこのような系が以下で記載されているが、当業者であれば記載されたものに代わる系および方法も用いうるとわかるであろう。特に、順相予備ＬＣベース法はここで記載された逆相法の代わりに用いうる。ほとんどの予備ＬＣ‐ＭＳ系は逆相ＬＣおよび揮発性酸性調整剤を利用するが、その理由はアプローチが小分子の精製に非常に有効であり、溶離液が陽イオン電子スプレーマススペクトロメトリーと適合するからである。他のクロマトグラフィー法、例えば順相ＬＣを用いると、前記の分析法で概説されたような別の緩衝移動相、塩基性調整剤なども、化合物を精製するために代わりに用いうる。
【０５６４】
予備ＬＣ‐ＭＳ系：
Waters Fractionlynx系：
・ハードウェア：
２７６７二重ループオートサンプラー／フラクションコレクター
２５２５予備ポンプ
カラム選択用のＣＦＯ（カラム流体オーガナイザー）
メーキャップポンプとしてのＲＭＡ（Waters試薬マネージャー）
Waters ＺＱマススペクトロメーター
Waters 2996 Photo Diode Array検出器
Waters ＺＱマススペクトロメーター
・ソフトウェア：
Masslynx ４．０
・Waters ＭＳランニング条件：
キャピラリー電圧：  ３．５ｋＶ（ＥＳ陰極で３．２ｋＶ）
コーン電圧：        ２５Ｖ
ソース温度：        １２０℃
倍増管：            ５００Ｖ
スキャン範囲：      １２５〜８００ａｍｕ
イオン化方式：      ElectroSpray Positiveまたは
ElectroSpray Negative
【０５６５】
Agilent 1100 ＬＣ‐ＭＳ予備系：
・ハードウェア：
オートサンプラー：１１００シリーズ“prepALS”
ポンプ：予備フロー勾配の場合１１００シリーズ“PrepPump”およびプレプフローで調整剤を導入する場合１１００シリーズ“QuatPump”
ＵＶ検出器：１１００シリーズ“ＭＷＤ”Multi Wavelength Detector
ＭＳ検出器：１１００シリーズ“ＬＣ‐ＭＳＤ  ＶＬ”
フラクションコレクター：２×“Prep‐ＦＣ”
メーキャップポンプ：“Waters ＲＭＡ”
Agilentアクティブスプリッター
・ソフトウェア：
Chemstation：Chem３２
・Agilent ＭＳランニング条件：
キャピラリー電圧：      ４０００Ｖ（ＥＳ陰極で３５００Ｖ）
フラグメンター／ゲイン：１５０／１
乾燥ガスフロー：        １３．０Ｌ／ｍｉｎ
ガス温度：              ３５０℃
ネブライザー圧力：      ５０ｐｓｉｇ
スキャン範囲：          １２５〜８００ａｍｕ
イオン化方式：          ElectroSpray Positiveまたは
ElectroSpray Negative
【０５６６】
クロマトグラフィー条件：
・カラム：
１．低ｐＨクロマトグラフィー：
Phenomenex Synergy MAX-RP，１０μ，１００×２１．２ｍｍ
（より高極性の化合物には、Thermo Hypersil-Keystone HyPurity Aquastar，５μ，１００×２１．２ｍｍが代用される）
２．高ｐＨクロマトグラフィー：
Phenomenex Luna C18(2)，１０μ，１００×２１．２ｍｍ
（Phenomenex Gemini，５μ，１００×２１．２ｍｍが代用される）
・溶離液：
１．低ｐＨクロマトグラフィー：
溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ＋０．１％ギ酸，ｐＨ〜１．５
溶媒Ｂ：ＣＨ３ＣＮ＋０．１％ギ酸
２．高ｐＨクロマトグラフィー：
溶媒Ａ：Ｈ２Ｏ＋１０ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３＋ＮＨ４ＯＨ，ｐＨ＝９．２
溶媒Ｂ：ＣＨ３ＣＮ
３．メーキャップ溶媒：
ＭｅＯＨ＋０．２％ギ酸（両クロマトグラフィータイプ用）
・方法：
分析トレースに従い、最も適切な予備クロマトグラフィー型を選択した。典型的ルーチンは、化合物構造に最も適したクロマトグラフィーの型（低または高ｐＨ）を用いて分析ＬＣ‐ＭＳをランすることであった。分析トレースが良いクロマトグラフィーを示せば、同じ種類の適切な予備法を選択した。低および高ｐＨ双方のクロマトグラフィー法に関する典型的ランニング条件は以下であった：
流速：２４ｍＬ／ｍｉｎ
勾配：通常、全勾配は９５％Ａ＋５％Ｂの初期０．４分間工程を有した。次いで、分析トレースに従い、良い分離を行うために３．６分間勾配を選択した（例えば、初期保持化合物の場合５％〜５０％Ｂ、中期保持化合物の場合３５％〜８０％Ｂなど）。
洗浄：１．２分間洗浄工程を勾配の最後に行った。
再平衡化：次のラン用に系を調製するため２．１分間再平衡化工程をランした。
メーキャップ流速：１ｍＬ／ｍｉｎ
・溶媒：
全化合物を通常１００％ＭｅＯＨまたは１００％ＤＭＳＯに溶解した。
得られた情報から、当業者であればここで記載された化合物を予備ＬＣ‐ＭＳにより精製しうるであろう。
例の各々に関する出発物質は、別記されていない限り市販されている。
【０５６７】
例１
５‐シアノ‐２‐メトキシ‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕ベンズアミドの合成
１Ａ．（３，４‐ジニトロフェニル）モルホリン‐４‐イルメタノンの合成
【化４０】
0005507049.tif 000047
３，４‐ジニトロ安息香酸（１０．０ｇ）および塩化チオニル（３０ｍＬ）の混合液を２時間加熱還流し、室温(ambient temperature)まで冷却し、過剰の塩化チオニルをトルエンとの共沸により除去した。残渣をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶解し、モルホリン（４．１ｍＬ）およびＥｔ３Ｎ（７．２ｍＬ）を０℃で混合液へ同時に加えた。混合液を３時間攪拌し、水（１００ｍＬ）を加え、次いでＥｔＯＡｃで抽出した。有機部分を塩水で洗浄し、（ＭｇＳＯ４）乾燥し、真空下で減少させた。ＭｅＯＨから残渣の再結晶化により、黄色固体物として（３，４‐ジニトロフェニル）モルホリン‐４‐イルメタノン（８．２３ｇ）を得た。（１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）δ８．３（ｄ，１Ｈ），８．３（ｓ，１Ｈ），８．０（ｄ，１Ｈ），３．７‐３．５（ｍ，８Ｈ））
【０５６８】
１Ｂ．（３，４‐ジアミノフェニル）モルホリン‐４‐イルメタノンの合成
【化４１】
0005507049.tif 000048
ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）中、（３，４‐ジニトロフェニル）モルホリン‐４‐イルメタノン（１．０ｇ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（１５０ｍｇ）の混合液を水素雰囲気下、室温において１０時間振盪し、次いでCeliteのプラグで濾過し、真空下で減少させ、（３，４‐ジアミノフェニル）モルホリン‐４‐イルメタノン（９００ｍｇ）を得た。（１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）δ６．６（ｓ，１Ｈ），６．５（ｓ，２Ｈ），４．８（ｓ，１．５Ｈ），４．６（ｓ，１．５Ｈ），４．１（ｓ，１Ｈ），３．６（ｍ，４Ｈ），３．４（ｍ，４Ｈ））
【０５６９】
１Ｃ．４‐モルホリン‐４‐イルメチルベンゼン‐１，２‐ジアミンの合成
【化４２】
0005507049.tif 000049
乾燥ＴＨＦ（５０ｍＬ）中、（３，４‐ジニトロフェニル）モルホリン‐４‐イルメタノン（２．８４ｇ）の混合液にＮａＢＨ４（９５４ｍｇ）を加え、次いでＢＦ３・Ｅｔ２Ｏ（３．２ｍＬ）を滴下した。混合液を室温において３時間攪拌し、次いでＭｅＯＨの添加により反応停止させた。混合液を真空下において減少させ、ＥｔＯＡｃと水に分配し、有機部分を塩水により洗浄し、（ＭｇＳＯ４）乾燥し、真空下において減少させた。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーによりＥｔＯＡｃで溶出させて精製し、４‐（３，４‐ジニトロベンジル）モルホリン（１．０８ｇ）を得た。
ＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中、４‐（３，４‐ジニトロベンジル）モルホリン（５５０ｍｇ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（７５ｍｇ）の混合物を水素雰囲気下、室温において４時間振盪し、次いでCeliteのプラグにより濾過し、真空下において減少させ、混合物の主成分として４‐モルホリン‐４‐イルメチルベンゼン‐１，２‐ジアミン（４８３ｍｇ）を得た。
【０５７０】
１Ｄ．５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐２‐（４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐イル）‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾールの合成
【化４３】
0005507049.tif 000050
乾燥ＤＭＦ（２５ｍＬ）中、４‐モルホリン‐４‐イルメチルベンゼン‐１，２‐ジアミン（２．３０ｇ，１１．１ｍｍｏｌ）、４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸（１．５７ｇ，１０．０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（２．１３ｇ，１１．１ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１．５０ｇ，１１．１ｍｍｏｌ）の混合液を室温において２４時間攪拌した。混合液を真空下において減少させ、粗製残渣をＡｃＯＨ（４０ｍＬ）に溶解し、３時間加熱還流した。溶媒を真空下において除去し、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーによりＥｔＯＡｃ中０〜２０％ＭｅＯＨにより溶出させて精製し、黄色固体物として５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐２‐（４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐イル）‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール（１．０ｇ，６１％）を得た（ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ１．８３，〔Ｍ＋Ｈ〕＋３２９）。
【０５７１】
１Ｅ．３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミンの合成
【化４４】
0005507049.tif 000051
パラジウム炭素（１０％，０．０８ｇ）を窒素雰囲気下でＤＭＦ（３０ｍＬ）中、５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐２‐（４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐イル）‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール（０．８２ｇ，２．５ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。混合液を水素雰囲気下において４時間振盪し、次いでCeliteで濾過し、ＭｅＯＨで洗浄した。濾液を真空下で濃縮し、褐色固体物として３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（５３０ｍｇ，７１％）を得た（ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ１．９４，〔Ｍ＋Ｈ〕＋２９９）。
【０５７２】
１Ｆ．５‐シアノ‐２‐メトキシ安息香酸の合成
【化４５】
0005507049.tif 000052
アセトン（５０ｍＬ）中、２‐ヒドロキシ‐５‐シアノ安息香酸メチル（２ｇ，５．６ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（４．６８ｇ，１６．８ｍｍｏｌ）の混合液にヨウ化メチル（０．７ｍＬ，５．６ｍｍｏｌ）を加えた。次いで反応液を６５℃で一晩加熱して、固体物の形成を得、これを熱時濾取し、アセトンにより洗浄して、５‐シアノ‐２‐メトキシ安息香酸メチルエステル（０．４５ｇ）を得た。粗生成物をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解し、次いで水（５ｍＬ）中ＬｉＯＨ（０．１０８ｇ，０．２６ｍｍｏｌ）により処理し、室温において一晩攪拌した。反応液を２Ｍ  ＨＣｌにより酸性化し、ＥｔＯＡｃ（×２）により抽出した。有機部分を（ＭｇＳＯ４）乾燥し、真空下で減少させて、５‐シアノ‐２‐メトキシ安息香酸（０．２７７ｇ）を得た。（ＬＣ／ＭＳ酸性：Ｒｔ２．９２，〔Ｍ＋Ｈ〕＋１７８）
【０５７３】
１Ｇ．５‐シアノ‐２‐メトキシ‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕ベンズアミドの合成（酸クロリド法）
【化４６】
0005507049.tif 000053
５‐シアノ‐２‐メトキシ安息香酸（例１Ｆ）（４０ｍｇ，０．２２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解し、次いで塩化オキサリル（３４．４ｍｇ，０．２６４ｍｍｏｌ）の次にＤＭＦ（１滴）を滴下した。反応混合液を室温において１時間攪拌し、真空下において減少させ、次いでトルエン(×２)を用いて再蒸発させた。ＴＨＦ（５ｍＬ）中、３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（１００ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）、５‐シアノ‐２‐メトキシベンゾイルクロリドおよびジイソプロピルエチルアミン（１．８３μＬ，０．９ｍｍｏｌ）の混合液を０℃で攪拌し、次いで２時間かけて室温まで加温した。次いで反応混合液を真空下において濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、５〜７％ＭｅＯＨ‐ＤＣＭ）により精製し、５‐シアノ‐２‐メトキシ‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕ベンズアミド（１２ｍｇ）を得た（ＬＣ／ＭＳ酸性：Ｒｔ２．０２ｍｉｎ〔Ｍ‐Ｈ〕＋４５８）。
【０５７４】
例２
６‐メチルイミダゾ〔２．１‐ｂ〕チアゾール‐５‐カルボン酸〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕アミドの合成
【化４７】
0005507049.tif 000054
６‐メチルイミダゾ〔２．１‐ｂ〕チアゾール‐５‐カルボン酸（Bionet）（６１ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）、３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（１００ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（７７ｍｇ，０．３９ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（５４ｍｇ，０．３９ｍｍｏｌ）の混合液をＤＭＦ（３ｍＬ）中、８０℃において１時間、次いで室温において２０時間攪拌した。混合液を真空下において減少させ、残渣をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯに分配した。有機部分を塩水により洗浄し、（ＭｇＳＯ４）乾燥し、真空下において減少させた。残渣を予備ＬＣ／ＭＳにより精製して、６‐メチルイミダゾ〔２．１‐ｂ〕チアゾール‐５‐カルボン酸〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕アミド（２９ｍｇ）を得た（ＬＣ／ＭＳ塩基性：Ｒｔ２．５６，〔Ｍ＋Ｈ〕＋４６３）。
【０５７５】
例３
２‐シアノ‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕アセトアミドの合成
【化４８】
0005507049.tif 000055
シアノ酢酸（２３ｍｇ，０．２８ｍｍｏｌ）、３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（７０％，１００ｍｇ，０．２３ｍｍｏｌ）、ＴＢＴＵ（８９ｍｇ，０．２８ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（２ｍＬ）の混合液を２５℃において一晩攪拌した。次いで混合液を真空下において蒸発させた。フラッシュクロマトグラフィーによりＤＣＭ‐６％ＭｅＯＨ／ＤＣＭにより溶出させて、黄色固体物として２‐シアノ‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕アセトアミド（６５ｍｇ，７７％）を得た（ＬＣ／ＭＳ（酸性法／最終化合物）：Ｒｔ４．６１，〔Ｍ＋Ｈ〕＋３６６）。
【０５７６】
例４
２‐シアノ‐２‐シクロプロピル‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕アセトアミド
４Ａ．シアノシクロプロピル酢酸の合成
【化４９】
0005507049.tif 000056
１Ｎ  ＮａＯＨ（３．２６ｍＬ，３．２６ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１５ｍＬ）中、シアノシクロプロピル酢酸エチルエステル（０．５ｇ，３．２６ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。２５℃において４時間攪拌後、反応混合液を真空下において蒸発させ、水（２０ｍＬ）に再溶解し、１Ｎ  ＨＣｌ溶液（３．２６ｍＬ）の添加により中和した。次いでこの混合液をＥｔＯＡｃ（３×２０ｍＬ）により抽出し、合わせ、（Ｎａ２ＳＯ４）乾燥し、有機相を真空下において蒸発させて、透明油状物として不純なシアノシクロプロピル酢酸を得た。この物質を例４Ｂの製造で更に精製せず用いた。
【０５７７】
４Ｂ．２‐シアノ‐２‐シクロプロピル‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕アセトアミド
【化５０】
0005507049.tif 000057
例４Ａの生成物を例３において記載された方法に従い３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミンと反応させたが、但し粗生成物をＤＣＭと飽和水性ＮａＨＣＯ３とに分配し、次いでＥｔ２Ｏでの摩砕により精製した。ＬＣ／ＭＳ（酸性法）Ｒｔ１．７９，〔Ｍ＋Ｈ〕＋４０６
【０５７８】
例５〜１４
例１、２および３の方法に従い、下記表で示された箇所を変更して、例５〜１４の化合物を製造した。
【表５】
0005507049.tif 000058
0005507049.tif 000059
【０５７９】
例１５
Ｎ‐〔３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕‐ｒａｃ‐２‐モルホリンカルボキサミド‐トリフルオロ酢酸塩の合成
１５Ａ．５，６‐ジメトキシ‐２‐（４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐イル）‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾールの合成
【化５１】
0005507049.tif 000060
ＤＭＦ（１００ｍＬ）中、ＥＤＣ（４．８１ｇ，２５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３．４０ｇ，２５ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４．６７ｇ，４６ｍｍｏｌ）の溶液に４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸（３．６３ｇ，２３．０９ｍｍｏｌ）および４，５‐ジメトキシベンゼン‐１，２‐ジアミン二塩酸塩（５．０６ｇ，２０．９９ｍｍｏｌ）を加え、混合液を室温において一晩攪拌した。溶媒を真空下において除去し、得られた固体物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）と飽和水性ＮａＨＣＯ３（５０ｍＬ）とに分配した。沈殿物が形成され、これを濾去した。濾液を水の次にジエチルエーテルにより洗浄し、次いでＭｅＯＨおよびトルエンと共沸して、４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸（２‐アミノ‐４，５‐ジメトキシフェニル）アミド（２．３５ｇ，３６％）を得た。４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸（２‐アミノ‐４，５‐ジメトキシフェニル）アミド（２．３５ｇ，７．６５ｍｍｏｌ）を酢酸（１５０ｍＬ）に溶解し、１４０℃により５時間還流した。溶液を冷却させ、溶媒を真空下において除去した。得られた固体物をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）と塩水（２５ｍＬ）とに分配した。有機層を分離し、（ＭｇＳＯ４）乾燥し、濾過し、溶媒を真空下において除去して、５，６‐ジメトキシ‐２‐（４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐イル）‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール（２．０８ｇ，９４％）を得た。
【０５８０】
１５Ｂ．３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミンの合成
【化５２】
0005507049.tif 000061
エタノール（１５０ｍＬ）およびＤＭＦ（５０ｍＬ）中、５，６‐ジメトキシ‐２‐（４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐イル）‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール（２．０８ｇ，７．２ｍｍｏｌ）および１０％パラジウム炭素（２００ｍｇ）の混合液に室温および加圧下において一晩水素添加した。反応混合液をCeliteで濾過し、溶媒を真空下において除去した。得られた固体物をメタノールおよびトルエンと共沸させ、溶媒を真空下において除去した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィーによりＤＣＭ：ＭｅＯＨ：酢酸：水（１２０：１８：３：２）〔ＤＭＡＷ１２０〕、次いでＤＣＭ：ＭｅＯＨ：酢酸：水（９０：１８：３：２）〔ＤＭＡＷ９０〕により溶出させて精製した。生成物フラクションを合わせ、溶媒を真空下において除去して、３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（〜１ｇ，５３％）を得た。
【０５８１】
１５Ｃ．Ｎ‐〔３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕‐ｒａｃ‐４‐ＢＯＣ‐２‐モルホリンカルボキサミドの合成
【化５３】
0005507049.tif 000062
ＤＭＦ（２ｍＬ）中、ＥＤＣ（１２５ｍｇ，０．５４ｍｍｏｌ）およびＨＯＡｔ（７４ｍｇ，０．５４ｍｍｏｌ）の溶液に３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（１１７ｍｇ，０．４５ｍｍｏｌ）（例１５Ｂ）および（ｒａｃ）‐ＢＯＣ‐２‐カルボキシモルホリン（１２５ｍｇ，０．５４ｍｍｏｌ）を加え、混合液を室温において一晩攪拌した。次いで混合液をＥｔＯＡｃと水に分配した。次いで有機層を飽和水性重炭酸ナトリウム、塩水で連続的に洗浄し、次いで（ＭｇＳＯ４）乾燥した。溶液を真空下において蒸発乾固させ、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー〔ＳｉＯ２，勾配溶出：ＥｔＯＡｃ‐ヘキサン（１：１）〜ＥｔＯＡｃ‐ＭｅＯＨ（８０：２０）〕により精製して、無色固体物としてＮ‐〔３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕‐ｒａｃ‐４‐ＢＯＣ‐２‐モルホリンカルボキサミド（６５ｍｇ）を得た（ＬＣ／ＭＳ（酸性法）：Ｒｔ２．６５ｍｉｎ，〔Ｍ＋Ｈ〕＋４７３）。
【０５８２】
１５Ｄ．Ｎ‐〔３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕‐ｒａｃ‐２‐モルホリンカルボキサミド‐トリフルオロ酢酸塩の合成
【化５４】
0005507049.tif 000063
Ｎ‐〔３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕‐ｒａｃ‐４‐ＢＯＣ‐２‐モルホリンカルボキサミド（６５ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）およびアニソール（６０μＬ，０．５６ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸およびジクロロメタンの混合液（１：１，２ｍＬ）に溶解した。室温において３時間後、混合液を蒸発乾固させ、無色固体物としてＮ‐〔３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕‐ｒａｃ‐２‐モルホリンカルボキサミド‐トリフルオロ酢酸塩（７３ｍｇ）を得た（ＬＣ／ＭＳ（酸性法）：Ｒｔ１．４２ｍｉｎ，〔Ｍ‐Ｈ＋〕−３７１）。
【０５８３】
例１６
Ｎ‐〔３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕‐ｒａｃ‐４‐イソプロピル‐２‐モルホリンカルボキサミドの合成
【化５５】
0005507049.tif 000064
ＭｅＣＮ（１ｍＬ）中、Ｎ‐〔３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕‐ｒａｃ‐２‐モルホリンカルボキサミド‐トリフルオロ酢酸塩（例１５Ｄ）（３４ｍｇ，０．０７ｍｍｏｌ）およびＫ２ＣＯ３（２０ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）に２‐ヨードプロパン（１７μＬ，０．１５ｍｍｏｌ）を加えた。混合液を８０℃で約４８時間攪拌した後、混合液を濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィー〔ＳｉＯ２勾配溶出：ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（９８：２）〜ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：濃水性ＮＨ３（９０：１０：１）〕により精製して、無色ゴム状物としてＮ‐〔３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕‐ｒａｃ‐４‐イソプロピル‐２‐モルホリンカルボキサミド（１２ｍｇ）を得た（ＬＣ／ＭＳ（塩基性法）：Ｒｔ２．５２ｍｉｎ，〔Ｍ＋Ｈ〕＋４１５）。
【０５８４】
例１７
Ｎ‐〔３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕‐ｒａｃ‐１‐メチルピペリジン‐３‐カルボキサミドの合成
【化５６】
0005507049.tif 000065
ＤＭＦ（１ｍＬ）中、３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（６５ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ）（例１５Ｂ）、（ｒａｃ）‐１‐メチルピペリジン‐３‐カルボン酸塩酸塩（５０ｍｇ，０．２７ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（５０μＬ，０．２７ｍｍｏｌ）の溶液にＴＢＴＵ（９７ｍｇ，０．３０ｍｍｏｌ）を加えた。混合液を室温において約１６時間攪拌した後、１Ｎ水性ＮａＯＨ（１ｍＬ）を加え、混合液を更に１時間攪拌した。次いで混合液を真空下において蒸発乾固させ、残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー〔ＳｉＯ２，ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（９８：２）〜ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：濃水性ＮＨ３（７０：３０：３）の勾配で溶出〕により精製して、無色ゴム状物としてＮ‐〔３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕‐ｒａｃ‐１‐メチルピペリジン‐３‐カルボキサミド（２０ｍｇ）を得た（ＬＣ／ＭＳ（塩基性法）：Ｒｔ２．３５ｍｉｎ，〔Ｍ＋Ｈ〕＋３８５）。
【０５８５】
例１８
３‐クロロ‐Ｎ‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル‐５‐（４‐メチルピペラジン‐１‐イル）ベンズアミドの合成
１８Ａ．３‐クロロ‐５‐（４‐メチルピペラジン‐１‐イル）ベンゾニトリルの合成
【化５７】
0005507049.tif 000066
５‐フルオロ‐３‐クロロベンゾニトリル（１ｇ，６．４ｍｍｏｌ）をＤＭＳＯ（２０ｍＬ）に溶解し、次いでＫ２ＣＯ３（１．３ｇ，９．６ｍｍｏｌ）および１‐メチルピペラジン（１．４ｍＬ，１２．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合液を８０℃において２０時間加熱した。ジエチルエーテル（１０ｍＬ）を粗製物質に加え、次いで１Ｎ  ＨＣｌで酸性化した。沈殿物を粗製反応混合液から濾取して、白色固体物として３‐クロロ‐５‐（４‐メチルピペラジン‐１‐イル）ベンゾニトリル（１．４ｇ，９３％収率）を得た（ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ１．８３，〔Ｍ＋Ｈ〕＋２３６，酸性法）。
【０５８６】
１８Ｂ．３‐クロロ‐５‐（４‐メチルピペラジン‐１‐イル）安息香酸の合成
【化５８】
0005507049.tif 000067
エタノール（１０ｍＬ）に溶解された３‐クロロ‐５‐（４‐メチルピペラジン‐１‐イル）ベンゾニトリル（１．４ｇ，５．９ｍｍｏｌ）に２Ｍ  ＮａＯＨ（２０ｍＬ）を加え、反応混合液を２０時間加熱還流した。混合液を真空下で減少させ、粗生成物を１Ｎ ＨＣｌにおいてｐＨ６に酸性化し、ＥｔＯＡｃとＨ２Ｏとに分配した。有機層を真空下において蒸発乾固させ、白色固体物として標題化合物０．７ｇを得た（ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ１．６７，〔Ｍ＋Ｈ〕＋２５６，酸性法）。
【０５８７】
１８Ｃ．３‐クロロ‐Ｎ‐〔３‐（５，６‐ジメトキシ‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕‐５‐（４‐メチルピペラジン‐１‐イル）ベンズアミドの合成
【化５９】
0005507049.tif 000068
化合物を例１５Ｃと同様に製造したが、但し（ｒａｃ）‐ＢＯＣ‐２‐カルボキシモルホリンの代わりに１５Ｃで試薬として３‐クロロ‐５‐（４‐メチルピペラジン‐１‐イル）安息香酸（２００ｍｇ，０．７８ｍｍｏｌ）を用いた。粗生成物をフラッシュカラムクロマトグラフィー〔ＤＭＡＷ２４０‐９０によりＳｉＯ２溶出〕により精製して、淡褐色固体物として標題化合物９２ｍｇ（２５％収率）を得た（ＬＣ／ＭＳ：Ｒｔ２．０７，〔Ｍ＋Ｈ〕＋４９６）。
【０５８８】
例１９〜２１
例１５で示された操作に従い、下記箇所を変更して、例１９〜２１の化合物を製造した。
【表６】
0005507049.tif 000069
【０５８９】
例２２
５‐クロロ‐２‐メトキシ‐Ｎ‐〔３‐〔５‐（４‐メチルピペラジン‐１‐イルメチル）‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル〕‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕ベンズアミドの合成
２２Ａ．（３，４‐ジニトロフェニル）‐（４‐メチルピペラジン‐１‐イル）メタノンの合成
【化６０】
0005507049.tif 000070
３，４‐ジニトロ安息香酸（５０ｇ，０．２４ｍｏｌ）をＳＯＣｌ２（１６０ｍＬ）中において６時間加熱還流した。次いで混合液を真空下において蒸発乾固させた。生成物をＴＨＦに溶解し、５℃に冷却した。この溶液にＮ‐メチルピペラジン（２６．２ｍＬ，０．２４ｍｏｌ）およびＥｔ３Ｎ（４２ｍＬ）をＴＨＦ（５０ｍＬ）中の溶液として滴下した。室温において一晩攪拌後、溶液を水（１．５Ｌ）中へ注ぎ、約５℃で０．５時間攪拌した。生成した固体沈殿物を集め、乾燥させて、黄色固体物として（３，４‐ジニトロフェニル）‐（４‐メチルピペラジン‐１‐イル）メタノン（４０ｇ）を得た。
【０５９０】
２２Ｂ．１‐（３，４‐ジアミノベンジル）‐４‐メチルピペラジンの合成
【化６１】
0005507049.tif 000071
ＴＨＦ中、（３，４‐ジニトロフェニル）‐（４‐メチルピペラジン‐１‐イル）メタノン（１２．２ｇ，０．０４１ｍｏｌ）の冷却溶液（５℃）に、温度を５℃以下に保ちながら、粉末ＮａＢＨ４を加え、次いでＢＦ３・ＯＥｔ２を滴下した。混合液を２時間かけて室温まで戻し、次いで室温で更に２時間攪拌した。次いでＭｅＯＨを混合液へ慎重に加え（発泡を生じる）、攪拌を１０分間続け、次いで混合液を濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃと飽和水性ＮａＨＣＯ３とに分配した。有機層を水、塩水により洗浄し、次いで（ＭｇＳＯ４）乾燥した。溶液を真空下において蒸発させ、残渣をＳｉＯ２でフラッシュクロマトグラフィーにより勾配ＤＣＭ：ＭｅＯＨ（９８：２）〜ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：濃水性ＮＨ３（９０：１０：１）により溶出させて精製し、橙色結晶固体物（３．７ｇ）を得た。ＭｅＯＨから再結晶化により、橙色結晶固体物として１‐（３，４‐ジニトロベンジル）‐４‐メチルピペラジン（１ｇ）を得た。
【０５９１】
２２Ｃ．１‐（３，４‐ジアミノベンジル）‐４‐メチルピペラジンの合成
【化６２】
0005507049.tif 000072
１‐（３，４‐ジニトロベンジル）‐４‐メチルピペラジン（１ｇ）をＤＭＦ：ＭｅＯＨ（１：１，２０ｍＬ）に溶解し、Ｈ２雰囲気下において１０％Ｐｄ／Ｃ（５０ｍｇ）と共に６時間攪拌した。次いで混合液を濾過し、蒸発させて、暗色固体物を得、これを更に精製せず直ちに用いた。
【０５９２】
２２Ｄ．５‐クロロ‐２‐メトキシ‐Ｎ‐〔３‐〔５‐（４‐メチルピペラジン‐１‐イルメチル）‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル〕‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕ベンズアミドの合成
【化６３】
0005507049.tif 000073
４‐（５‐クロロ‐２‐メトキシベンゾイルアミノ）‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸（１．１７ｇ）、粗製ジアミン、１‐（３，４‐ジアミノベンジル）‐４‐メチルピペラジン（０．８７ｇ）およびＴＢＴＵ（１．５２ｇ）をＤＭＦ（１５ｍＬ）に溶解し、約１６時間攪拌した。次いで混合液を蒸発乾固させて、暗色固体物を得た。暗色固体物（１００ｍｇ）をＡｃＯＨ（４ｍＬ）に溶解し、混合液を８０℃で３時間加熱した。反応混合液を真空下において蒸発させ、残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２，ＤＭＡＷ１２０で溶出）により精製し、二酢酸塩として５‐クロロ‐２‐メトキシ‐Ｎ‐〔３‐〔５‐（４‐メチルピペラジン‐１‐イルメチル）‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル〕‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕ベンズアミド（３５ｍｇ）を得た（ＬＣ／ＭＳ（酸性法／最終化合物）：Ｒｔ６．６３，〔Ｍ＋Ｈ〕＋４８０）。
【０５９３】
例２３
１‐（２，６‐ジフルオロベンジル）‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の合成
【化６４】
0005507049.tif 000074
ＴＨＦ（２ｍＬ）中３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（例１Ｅ）（１００ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）およびＣＤＩ（２１７ｍｇ，１．３４ｍｍｏｌ）の混合物をマイクロ波照射（１５０℃，１５０Ｗ）に１５分間付した。次いで２，６‐ジフルオロベンジルアミン（３８４ｍｇ，２．６８ｍｍｏｌ）を加え、反応混合液を同一条件下で再び更に１５分間照射した。冷却後、不均質混合液を濾過し、濾液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー（勾配‐ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ：Ｈ２Ｏ（２４０：２０：３：２）（ＤＭＡＷ２４０）〜（１２０：１８：３：２）（ＤＭＡＷ１２０）でＳｉＯ２溶出）により精製し、１‐（２，６‐ジフルオロベンジル）‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素（３０ｍｇ，１９％）を得た（ＬＣ／ＭＳ酸性：Ｒｔ１．８４，〔Ｍ＋Ｈ〕＋４６８）。
【０５９４】
例２４〜３４
例２３で示された一般的方法に従い、下記表で示された箇所を変更して、例２４〜３４の化合物を製造した。
【表７】
0005507049.tif 000075
0005507049.tif 000076
【０５９５】
例３５
１‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕‐３‐ピリジン‐３‐イル尿素の合成
【化６５】
0005507049.tif 000077
ＤＣＭ（３ｍＬ）中、３‐アミノピリジン（３１．５ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（０．１９５ｍＬ，１．３２ｍｍｏｌ）の混合液を０℃に冷却し、次いでトリホスゲン（８５ｍｇ，０．２８ｍｍｏｌ）で処理した。反応液を室温で１時間攪拌し、次いで３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（１００ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）を加え、反応が完了するまで室温で攪拌した。混合液をＭｅＯＨ中２Ｍ  ＮａＯＨで３０分間処理し、次いで真空下で減少させた。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２，２〜２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）により精製し、ＤＣＭの次にジエチルエーテルで摩砕して、１‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕‐３‐ピリジン‐３‐イル尿素（２０ｍｇ）を得た（ＬＣ／ＭＳ塩基性：Ｒｔ２．２９，〔Ｍ＋Ｈ〕＋４１９）。
【０５９６】
例３６
チオモルホリン‐４‐カルボン酸〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕アミドの合成
【化６６】
0005507049.tif 000078
ホスゲン（トルエン中、２０％）（０．３ｍＬ）を０℃でトルエン／ＤＣＭ（１：１）の混合液中３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（１００ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。反応液を室温で１時間攪拌し、次いで過剰のホスゲンを窒素流で吹き飛ばした。チオモルホリン（３５ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）を加え、反応液を室温で１時間、次いで６０℃で１時間攪拌した。次いで混合液を真空下で濃縮し、残渣を予備ＬＣ／ＭＳにより精製して、チオモルホリン‐４‐カルボン酸〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕アミドを得た（ＬＣ／ＭＳ極性：Ｒｔ２．５８，〔Ｍ＋Ｈ〕＋４２８）。
【０５９７】
例３７
１‐（４‐フルオロフェニル）‐１‐メチル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の合成
【化６７】
0005507049.tif 000079
標題化合物を製造するために用いられた操作は例３５で記載されたものと類似していたが、但し３‐アミノピリジンの代わりに４‐フルオロ‐Ｎ‐メチルアニリンを用い、５０℃で２時間反応を行った。粗生成物を冷却反応混合液から沈殿物として単離し、次いでフラッシュカラムクロマトグラフィー〔ＤＣＭ：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ：水（２４０：２０：３：２）でＳｉＯ２溶出〕により精製した。得られた生成物をジエチルエーテルで摩砕して、無色固体物として１‐（４‐フルオロフェニル）‐１‐メチル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素（３ｍｇ）を得た（ＬＣ／ＭＳ酸性：Ｒｔ２．１２，〔Ｍ＋Ｈ〕＋４５０）。
【０５９８】
例３８〜４３
例３５および３７で記載された方法に従い、下記表で示された箇所を変更して、例３８〜４３の化合物を製造した。
【表８】
0005507049.tif 000080
【０５９９】
例４４
１‐（４‐フルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の合成
【化６８】
0005507049.tif 000081
ＴＨＦ（２ｍＬ）中、３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（例１Ｅ）（１００ｍｇ，０．３３ｍｍｏｌ）に４‐フルオロフェニルイソシアネートを加え、混合液を室温で約１６時間攪拌した。樹脂担持トリスアミン（８００ｍｇ，４ｍｍｏｌ／ｇ）を加え、混合液を更に４時間攪拌した。樹脂を濾去し、濾液を１Ｎ  ＫＯＨ（２ｍＬ，ＭｅＯＨ：ＴＨＦ、１：３）で処理し、溶液を約１６時間攪拌した。次いで混合液をＥｔＯＡｃとＨ２Ｏに分配した。水層を更にＥｔＯＡｃで抽出し、次いで合わせた有機フラクションを塩水で洗浄し、（ＭｇＳＯ４）乾燥し、蒸発乾固させた。粗製固体物をＤＣＭに溶解し、ヘキサンで摩砕して固体物を得、これを濾取した。固体物をフラッシュカラムクロマトグラフィー〔ＳｉＯ２，ＥｔＯＡｃ‐ＭｅＯＨ（９０：１０）〕により精製し、黄色固体物として１‐（４‐フルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素（３０ｍｇ，２０％）を得た（ＬＣ／ＭＳ（酸性法）：Ｒｔ２．０１ｍｉｎ，〔Ｍ‐Ｈ＋〕−４３４）。
【０６００】
例４５〜５６
例４４で記載された方法に従い、下記表で示された条件を変更して、例４５〜５６の化合物を製造した。
【表９】
0005507049.tif 000082
0005507049.tif 000083
【０６０１】
例５７〜５９
例２３で示された一般的方法に従い、下記表で示された箇所を変更して、例５７〜５９の化合物を製造した。
【表１０】
0005507049.tif 000084
【０６０２】
例６０
１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素塩酸塩の合成
６０Ａ．（３，４‐ジニトロフェニル）モルホリン‐４‐イルメタノンの合成
【化６９】
0005507049.tif 000085
３，４‐ジニトロ安息香酸（１ｍｏｌ当量）および塩化チオニル（９．２ｍｏｌ当量）の混合液を６時間加熱還流し、室温まで冷却し、過剰の塩化チオニルをトルエンとの共沸により除去した。残渣をＴＨＦ（８倍容量）に溶解し、次いでモルホリン（１．０ｍｏｌ当量）およびＥｔ３Ｎ（１．１ｍｏｌ当量）を０〜５℃で混合液へ同時に加えた。混合液を室温で１時間攪拌してから、水（２５倍容量）に注いだ。混合液を３７℃に冷却し、０．５時間放置したところ、生成物が沈殿物として出現した。沈殿物を濾取し、水洗し、乾燥させて、黄色固体物として（３，４‐ジニトロフェニル）モルホリン‐４‐イルメタノン（７５％）を得た。（１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ‐ｄ６）δ８．３（ｄ，１Ｈ），８．３（ｓ，１Ｈ），８．０（ｄ，１Ｈ），３．７‐３．５（ｍ，８Ｈ））
【０６０３】
６０Ｂ．４‐（３，４‐ジニトロベンジル）モルホリンの合成
【化７０】
0005507049.tif 000086
乾燥テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（２５倍容量）中（３，４‐ジニトロフェニル）モルホリン‐４‐イルメタノン（１ｍｏｌ当量）の混合液に０〜５℃でＮａＢＨ４（２ｍｏｌ当量）を加え、次いで温度を０〜５℃で維持しながらＢＦ３・Ｅｔ２Ｏ（１．０１ｍｏｌ当量）を滴下した。次いで混合液を室温で３時間攪拌し、次いでメタノールの添加で反応停止させた。次いで混合液を真空下で減少させ、酢酸エチルと飽和水性ＮａＨＣＯ３に分配した。混合液を３０分間急速に攪拌してから、各層を分離した。有機層を水および塩水で連続的に洗浄してから、真空下で減少させた。生成物をメタノールから結晶化させて、４‐（３，４‐ジニトロベンジル）モルホリン（８５％）を得た（ＬＣ／ＭＳ（塩基性法）：Ｒｔ２．８０，〔Ｍ＋Ｈ〕＋２６８）。
【０６０４】
６０Ｃ．４‐モルホリン‐４‐イルメチルベンゼン‐１，２‐ジアミンの合成
【化７１】
0005507049.tif 000087
ＩＭＳ（３３倍容量）中４‐（３，４‐ジニトロベンジル）モルホリン（１ｍｏｌ当量）および５％Ｐｄ／Ｃ（０．０５ｗｔ当量）の混合液を０〜５℃で攪拌しながら、容器に水素を充填した。反応が完了するまで（＜２４時間）、混合液を攪拌しながら１５〜２０℃へ慎重に加温した。混合液を濾過し、濾液を蒸発乾固させて、４‐モルホリン‐４‐イルメチルベンゼン‐１，２‐ジアミン（９０％）を得た。物質を次の工程で直ちに用いた（ＬＣ／ＭＳ（塩基性法）：Ｒｔ１．６４，〔Ｍ‐Ｎ（ＣＨ２ＣＨ２）２Ｏ−〕＋１２１）。
【０６０５】
６０Ｄ．５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐２‐（４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐イル）‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾールの合成
【化７２】
0005507049.tif 000088
４‐モルホリン‐４‐イルメチルベンゼン‐１，２‐ジアミン（１ｍｏｌ当量）および４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸（１ｍｏｌ当量）をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（１０倍容量）に溶解した。Ｏ‐（ベンゾトリアゾール‐１‐イル）‐Ｎ，Ｎ，Ｎ′，Ｎ′‐テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）（１．２ｍｏｌ当量）を加え、混合液を室温で２４時間攪拌した。溶媒の蒸留がもはやみられなくなるまで、混合液を真空下で濃縮した。次いで残渣を氷酢酸（１０倍容量）に溶解し、６５℃で〜１２時間加熱した。混合液を真空下で濃縮し、次いで７５℃で水（６倍容量）に溶解した。黒色溶液を２時間かけて０〜５℃に冷却したところ、固体物が形成された。固体物を濾去し、水性濾液を酢酸エチル（４倍容量）およびテトラヒドロフラン（２倍容量）で希釈した。発泡がもはや観察されず、６．８のｐＨに達するまで、固体ＮａＨＣＯ３を攪拌混合液にゆっくり加えた。次いで沈殿物が観察されるまで混合液を攪拌した。混合液を０〜５℃で２時間放置した後、固体物を濾取し、水（２倍容量）および酢酸エチル（２倍容量）で洗浄し、乾燥させて、褐色固体物として５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐２‐（４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐イル）‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール（４０％）を得た（ＬＣ／ＭＳ（塩基性法）：Ｒｔ１．９３，〔Ｍ‐Ｈ＋〕−３２７）。
【０６０６】
６０Ｅ．３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミンの合成
【化７３】
0005507049.tif 000089
ＤＭＦ（３６倍容量）中５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐２‐（４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐イル）‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール（１ｍｏｌ当量）に窒素雰囲気下で５％Ｐｄ／Ｃ（０．１ｗｔ当量）を加えた。反応容器に水素を充填し、室温で２４時間攪拌した。次いで混合液をセライトで濾過し、メタノールで洗浄した。濾液を真空下で濃縮して、褐色固体物として３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（９０％）を得た（ＬＣ／ＭＳ（塩基性法）：Ｒｔ１．９４，〔Ｍ‐Ｈ＋〕−２９７）。生成物を更に精製せず用いた。
【０６０７】
６０Ｆ．１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素塩酸塩の合成
【化７４】
0005507049.tif 000090
ＴＨＦ（１０倍容量）中３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（１ｍｏｌ当量）の混合液に０〜５℃で攪拌しながら２，６‐ジフルオロフェニルイソシアネート（１．３ｍｏｌ当量）を加えた。次いで混合液を室温で１６時間攪拌してから、混合液を１Ｍ水性ＫＯＨ（４倍容量）で処理した。更に２時間攪拌後、混合液を真空下で濃縮し、酢酸エチルと飽和水性ＮａＨＣＯ３に分配した。有機層を飽和塩水で洗浄し、（ＭｇＳＯ４）乾燥し、蒸発乾固させ、次いで残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー〔ＳｉＯ２，勾配ＣＨ２Ｃｌ２‐ＭｅＯＨ（９８：２）〜（９０：１０）で溶出〕により精製して、１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素を得た。
【０６０８】
６０Ｇ．遊離塩基の再結晶化および特徴化
例６０Ｅで記載されたようにシリカでクロマトグラフィー後、生成物を最少量の熱酢酸エチルに溶解し、濾過し、冷却させた。こうして遊離塩基を微結晶固体物として得た。
化合物１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素は、下記の物理化学パラメーターを有している。
ｐＫａ値‐３．４２，６．９２＆１０．９７
ｌｏｇＰ‐３．２４
ｌｏｇＰイオン‐０．３６
ｌｏｇＤ（ｐＨ＝６）２．２７
（ｐＨ＝６．５）２．６８
（ｐＨ＝７．４）３．１１
【０６０９】
６０Ｈ．塩酸塩の形成
生成物を酢酸エチルに溶解し、ジエチルエーテル中過剰飽和ＨＣｌで処理した。得られた沈殿物を濾取し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥させて、無色固体物として１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素塩酸塩（５９％）を得た（ＬＣ／ＭＳ（酸性法）：Ｒｔ１．８０，〔Ｍ＋Ｈ〕＋４５４）。
塩酸を他の酸（例えば、ＤＬ‐乳酸、エタンスルホン酸およびメタンスルホン酸）に代え、必要とされる溶媒の組成を変えることにより、１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の他の塩が製造される。
【０６１０】
６０ｊ．遊離塩基および塩酸塩の溶解度の比較
遊離塩基および塩酸塩の溶解度を測定および比較した。遊離塩基の溶解度はｐＨ７．４（緩衝水溶液）で＜０．００１ｍｇ／ｍＬであることがわかり、一方塩酸塩の溶解度はｐＨ７．１（緩衝水溶液中）で０．０９３ｍｇ／ｍＬであることがわかった。このように、塩酸塩は遊離塩基と比較して溶解度の面で有意な利点を有している。
【０６１１】
例６１
１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の酸付加塩の溶解度の測定
１‐（２，６‐ジフルオロフェニル）‐Ｎ‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基形を、得られる酸付加塩の溶解度を評価するために、下記の操作により様々な酸と一緒にした。
【０６１２】
操作
８ｍＬバイアル中に遊離塩基（５９ｍｇ，０．１３ｍｍｏｌ）および水（０．５９ｍＬ）を加えた。バイアルに適切な酸（１当量，０．１３ｍｍｏｌ）を加え、バイアルを室温で１６時間振盪した。その後でバイアルを視覚検査した。均質溶液が観察されたら、実験を終え、こうして形成された塩が１００ｍｇ／ｍＬより大きな溶解度を有していると結論付けられた。
固体物が残存していれば、更に０．５９ｍＬの水を加え、バイアルを４時間振盪した。均質溶液がこの段階で形成されたら、塩が５０ｍｇ／ｍＬより大きな溶解度を有していると結論付けられた。
固体物がこの時点で残存していれば、更に１．１８ｍＬの水を加え、バイアルを室温で振盪した。これで均質溶液を得たら、溶解度は２５ｍｇ／ｍＬより大きいと結論付けられた。固体物がなお残存していれば、塩の溶解度は２５ｍｇ／ｍＬ以下であると結論付けられた。
【０６１３】
遊離塩基は、塩溶液をStrata‐ＮＨ２カラムへ通すことにより再生された。
【０６１４】
実験の結果が下記表で示されている。
【表１１】
0005507049.tif 000091
【０６１５】
表で示された結果に基づき、メシル酸塩、エタンスルホン酸塩およびＤＬ‐乳酸塩は、例えば非経口投与用の、水性液体組成物を製造する上で、特に有用であるとわかるはずである、と結論付けられる。
【０６１６】
例６２
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基および塩
例２４の化合物、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素は、下記の方法またはそれと類似した方法により、遊離塩基または酸付加塩で単離しうる。
【０６１７】
遊離塩基
シリカでクロマトグラフィー後（例２４参照）、例２４の生成物を最少量の熱ＭｅＯＨに溶解し、濾過し、冷却させた。〜１６時間後、生成物を無色結晶固体物として集めた。
【０６１８】
塩酸塩（一般操作）
シリカでクロマトグラフィー後、生成物（２．０５ｇ）をＭｅＯＨ：ＥｔＯＡｃ（１：１０、１００ｍＬ）に溶解し、ジオキサン中４Ｎ  ＨＣｌ（１．１ｍｏｌ当量）で処理した。得られた沈殿物を濾取し、乾燥させて、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素塩酸塩（１．５ｇ）を得た。生成物を最少量のＭｅＯＨに溶解し、次いで濁りが数秒間持続するまでＥｔ２Ｏで摩砕した。一晩冷却後、生成物を無色結晶固体物として集めた。
【０６１９】
メシル酸塩
前記一般操作を用い、但し塩酸の代わりにメタンスルホン酸を用いて、生成物を無色結晶固体物として集めた。
【０６２０】
他の塩
対象の他の塩も前記の一般操作を用いて製造しうると予想される。
【０６２１】
例６３
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基および塩の溶解度の測定
例２４の化合物、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素を、得られる酸付加塩の溶解度を評価するために、下記の操作により様々な酸と一緒にした。
【０６２２】
操作
８ｍＬバイアル中に例２４の化合物の遊離塩基（５０ｍｇ，０．１３１ｍｍｏｌ）および水（０．５ｍＬ）を加えた。バイアルに適切な酸（１当量，０．１３１ｍｍｏｌ）を加え、バイアルを室温で１４〜１６時間振盪した。その後でバイアルを視覚検査した。均質溶液が観察されたら、実験を終え、こうして形成された塩が１００ｍｇ／ｍＬより大きな溶解度を有していると結論付けられた。
固体物が残存していれば、更に０．５ｍＬの水を加え、バイアルを６時間振盪した。均質溶液がこの段階で形成されたら、塩が５０ｍｇ／ｍＬより大きな溶解度を有していると結論付けられた。
固体物がこの時点で残存していれば、更に１ｍＬの水を加え、バイアルを室温で振盪した。これで均質溶液を得たら、溶解度は２５ｍｇ／ｍＬより大きいと結論付けられた。固体物がなお残存していれば、塩の溶解度は２５ｍｇ／ｍＬ以下であると結論付けられた。
【０６２３】
遊離塩基は、塩溶液をStrata‐ＮＨ２カラムへ通すことにより再生された。
【０６２４】
実験の結果が下記表で示されている。
【表１２】
0005507049.tif 000092
【０６２５】
表で示された結果に基づき、酢酸塩、メシル酸塩、エタンスルホン酸塩、ＤＬ‐乳酸塩、アジピン酸塩、Ｄ‐グルクロン酸塩、Ｄ‐グルコン酸塩および塩酸塩は、例えば非経口投与用の、水性液体組成物を製造する上で、特に有用であるとわかるはずである、と結論付けられる。
【０６２６】
今までに集められたデータから、本発明の化合物、特に１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基および塩（特にＬ‐乳酸塩）は従来の化合物よりいくつかの利点を有すると考えられる。特に、このような利点には以下のうち１以上がある：
・水溶液中で改善された溶解度、
・良い物理化学的性質、特に低いｌｏｇＤ、
・Ｐ４５０酵素に対する感受性の違い、
・薬物代謝および薬物動態性の改善、
・改善された安定性、例えば改善された貯蔵寿命および／または改善された熱安定性、
・投与量要求の減少、
・治療標的、特にオーロラＡおよびＢに対して改善された効力、
・増殖およびクローン原性アッセイで改善された細胞活性、
・改善された抗癌活性、および
・改善された治療係数
【０６２７】
例６４
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素乳酸塩の製造
ＥｔＯＡｃ‐ＭｅＯＨ中１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素（０．７ｇ，１．８３ｍｍｏｌ）の溶液にＬ‐乳酸（１６６ｍｇ，１．８５ｍｍｏｌ）を加えた。混合液を室温で攪拌し、次いで真空下で減少させた。この固体物を沸騰ＥｔＯＨ（２０ｍＬ）から再結晶化により精製し、乾燥させた後で、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素Ｌ‐乳酸塩（０．４８ｇ）を得た。
【０６２８】
例６５
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩の合成
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩は、下記スキームで示された合成経路により製造される。
【化７５】
0005507049.tif 000093
段階１：（３，４‐ジニトロフェニル）モルホリン‐４‐イルメタノンの合成
【化７６】
0005507049.tif 000094
ＴＨＦ（１００ｍＬ）中３，４‐ジニトロ安息香酸（１０ｇ，４７ｍｍｏｌ，１当量）およびＤＭＦ（０．１ｍＬ）の溶液を塩化チオニル（４．５ｍＬ，６２ｍｍｏｌ，１．３当量）で処理し、次いで２．５時間加熱還流した。混合液を氷冷し、次いでトリエチルアミン（１０ｍＬ，７１ｍｍｏｌ，１．１当量）を内部温度＜５℃に保ちながら２０分間かけて加えた。モルホリン（６．２ｍＬ，７１ｍｍｏｌ，１．５当量）を得られた濃黄色懸濁液へ内部温度＜１０℃に保ちながら１５分間かけて加えた。氷浴を取り除き、混合液をｒ．ｔ．に加温した。１５分間後、モルホリン（１ｍＬ，１１ｍｍｏｌ，０．２４当量）を追加し、混合液を一晩攪拌した。混合液を水（２５０ｍＬ）で希釈し、氷冷した。ベージュ色固体物を吸引下で濾取し、更に冷水（２５ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、標題化合物（１２．７ｇ，９６％）を得た。
【０６２９】
段階２：４‐（３，４‐ジニトロベンジル）モルホリンの合成
【化７７】
0005507049.tif 000095
水素化ホウ素ナトリウム（３．３６ｇ，８９ｍｍｏｌ，２．１当量）を粉砕し、窒素フラッシュされたフラスコへ入れ、ＴＨＦ（１２０ｍＬ）に懸濁した。〜０℃に冷却後、三フッ化ホウ素エーテレート（１１．３ｍＬ，８９ｍｍｏｌ，２．１当量）をシリンジで加えた。この反応は軽い発熱性であり、少量の水素発生がみられた。４‐（３，４‐ジニトロベンゾイル）モルホリン（１１．９１ｇ，４２ｍｍｏｌ，１．０当量）を固体物として一度に加え、容器を追加のＴＨＦ（２０ｍＬ）ですすいだ。氷浴を取り除き、懸濁液をｒ．ｔ．で３時間攪拌してから、氷で再び冷却した。メタノール（１００ｍＬ）を慎重に加え（水素発生）、次いで混合液を１時間還流させた。混合液を真空下で濃縮し、次いで残渣を酢酸エチル（１００ｍＬ）と１：１飽和重炭酸ナトリウム溶液／水（１００ｍＬ）に分配した。有機相を分離し、水（５０ｍＬ）、次いで塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、（ＭｇＳＯ４）乾燥した。初回の重炭酸塩洗液を２回目として酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出し、次いでこの抽出液を初回抽出液に用いられたものと同様の水性洗液で洗浄してから、（ＭｇＳＯ４）乾燥し、合わせ、濃縮して、１０．９７ｇの粗製物質を得た。メタノール（４５ｍＬ，１０ｍＬ洗浄）から再結晶化で標題化合物（９．３４ｇ，８３％）を得た。
【０６３０】
段階３：４‐モルホリン‐４‐イルメチルベンゼン‐１，２‐ジアミンの合成
【化７８】
0005507049.tif 000096
４‐（３，４‐ジニトロベンジル）モルホリン（２１ｇ，１０１ｍｍｏｌ）をエタノール（０．９Ｌ）に懸濁し、容器を窒素でパージした。１０％パラジウム炭（１．０５ｇ）をエタノール（２５ｍＬ）に懸濁し、基液に加えた。混合液を氷で冷却し、次いで雰囲気を水素に交換した。混合液を１５〜２０℃に加温し、水素添加を環境圧で２日間続けた。容器を窒素でパージし、次いで混合液をCeliteで濾過し、エタノール（０．３Ｌ）で少しずつすすいだ。濃縮により標題化合物（１５．８ｇ，９７％）を得た。
【０６３１】
段階４：４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸メチルエステルの合成
【化７９】
0005507049.tif 000097
デジタル温度計およびスターラーを備えた２０Ｌ反応器に４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸（１．１１７Ｋｇ，７．１１ｍｏｌ，１ｗｔ）およびメタノール（８．９５０Ｌ，８倍容量）を入れた。反応混合液を窒素下で攪拌し、０〜５℃に冷却し、塩化チオニル（０．５８１Ｌ，８．０ｍｏｌ，０．５２倍容量）を１８０分間かけて加え、得られた混合液を１８〜２２℃に加温して一晩攪拌したところ、１Ｈ  ＮＭＲ分析（ｄ６‐ＤＭＳＯ）は反応完了を示した。反応混合液を減圧下４０〜４５℃で濃縮し、残渣をトルエンで処理し、減圧下４０〜４５℃で再濃縮（３×２．２５０Ｌ，３×２倍容量）し、灰白色固体物として４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸メチルエステル（１．２１０Ｋｇ，９９．５％ｔｈ）を得た。
【０６３２】
段階５：４‐アミノ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸メチルエステルの合成
【化８０】
0005507049.tif 000098
デジタル温度計およびスターラーを備えた２０Ｌ反応器に窒素下でパラジウム炭素（１０％湿潤ペースト，０．１７０Ｋｇ，０．１４ｗｔ）を入れた。別の容器で、エタノール（１２．１０Ｌ，１０倍容量）中４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸メチルエステル（１．２１０Ｋｇ，７．０７ｍｏｌ，１ｗｔ）のスラリーを３０〜３５℃に加温して溶解させ、溶液を窒素下で触媒に加えた。窒素‐水素パージ順序の後で水素雰囲気を導入し、反応完了（５〜１０時間）が１Ｈ  ＮＭＲ分析（ｄ６‐ＤＭＳＯ）で見られるまで、反応混合液を２８〜３０℃で維持した。パージサイクル後、反応混合液を窒素下で濾過し、液体を減圧下で濃縮して、４‐アミノ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸メチルエステル（０．９８７Ｋｇ，９８．９％ｔｈ）を得た。
【０６３３】
段階６：４‐tert‐ブトキシカルボニルアミノ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸の合成
【化８１】
0005507049.tif 000099
ジオキサン（５００ｍＬ）中４‐アミノ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸メチルエステル（５０．０ｇ，３５５ｍｍｏｌ）の混合液に２Ｍ  ＮａＯＨ水溶液（２１３ｍＬ，４２６ｍｍｏｌ）を加え、混合液を５０℃に加熱し、５時間攪拌した。次いでこの混合液にジオキサンリンス（１００ｍＬ）を用いて（ＢＯＣ）２Ｏ（８１．４ｇ，３７３ｍｍｏｌ）を加え、混合液を５０℃で更に５時間加熱し、次いで環境下で１４時間攪拌した。ジオキサンを真空下で除去し、水（１Ｌ）を加えた。濃ＨＣｌ水溶液を用いて混合液をｐＨ〜２とし、形成された固体物を濾取し、フィルター上で乾燥させた。固体物をトルエン（×３）との共沸により真空オーブン中で更に乾燥させ、紫色固体物として４‐tert‐ブトキシカルボニルアミノ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸（７０．０ｇ，８７％）を得た。
【０６３４】
段階７：〔３‐（２‐アミノ‐４‐モルホリン‐４‐イルメチルフェニルカルバモイル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕カルバミン酸tert‐ブチルエステルの合成
【化８２】
0005507049.tif 000100
ＤＭＦ（１５０ｍＬ）中４‐tert‐ブトキシカルボニルアミノ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸（１０．０ｇ，４４．１ｍｍｏｌ）、４‐モルホリン‐４‐イルメチルベンゼン‐１，２‐ジアミン（１０．０ｇ，４８．５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（１０．１４ｇ，５２．９ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（７．１５ｇ，５２．９ｍｍｏｌ）の混合液を室温で２０時間攪拌し、次いで溶媒の大部分を真空下で除去した。残渣をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）と飽和水性ＮａＨＣＯ３（１５０ｍＬ）に分配し、各層を分離し、有機部分を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下で減少させて、褐色固体物として〔３‐（２‐アミノ‐４‐モルホリン‐４‐イルメチルフェニルカルバモイル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕カルバミン酸tert‐ブチルエステル（１７．６ｇ，９６％）を得た。ＬＣ／ＭＳ分析では生成物が〜１５％のジアミドを含有することを示している。これは１Ｈ  ＮＭＲで約５％レベルを示す。ジアミドは次の工程で開裂される。
【０６３５】
段階８：３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミンの合成
【化８３】
0005507049.tif 000101
〔３‐（２‐アミノ‐４‐モルホリン‐４‐イルメチルフェニルカルバモイル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕カルバミン酸tert‐ブチルエステル（１２．０ｇ，２８．８ｍｍｏｌ）および２Ｍ  ＨＣｌ溶液（５０ｍＬ）の混合液を８５℃で１４時間加熱し、次いで室温まで冷却させた。混合液がｐＨ〜８．５になるまで固体Ｎａ２ＣＯ３を慎重に加え、溶液を飽和させた。暗色ゴム状液体が形成された。混合液を静置し、溶媒をデカントした。残渣にＥｔＯＨ（６０ｍＬ）を加え、混合液を１時間加熱還流し、次いで熱時濾過し、ＥｔＯＨ（２×２０ｍＬ）で洗浄して、無機残渣を除去した。濾液を真空下で減少させてガラス状固体物を得、次いでこれをＥｔ２Ｏ（６０ｍＬ）中で１時間攪拌し、得られた紫色粉末を濾取し、真空下で乾燥させて、３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（６．８ｇ，８０％，〜９０％純度）を得た。
【０６３６】
段階９：７‐モルホリン‐４‐イルメチル‐２，４‐ジヒドロ‐１，２，４，５ａ，１０‐ペンタアザシクロペンタ〔ａ〕フルオレン‐５‐オンの合成
【化８４】
0005507049.tif 000102
無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）中３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（３．２ｇ，１０．７ｍｍｏｌ）の混合液に室温で攪拌しながら１，１′‐カルボニルジイミダゾール（１．７８ｇ，１１ｍｍｏｌ）を加えた。混合液を１４時間加熱還流し、次いで環境まで冷却させた。形成された固体物を濾取し、ＴＨＦ（２０ｍＬ）で洗浄し、真空下で乾燥させて、桃色固体物として７‐モルホリン‐４‐イルメチル‐２，４‐ジヒドロ‐１，２，４，５ａ，１０‐ペンタアザシクロペンタ〔ａ〕フルオレン‐５‐オン（２．３４ｇ，６７％）を得た。
【０６３７】
段階１０：１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の合成
【化８５】
0005507049.tif 000103
ＮＭＰ（６５ｍＬ）中７‐モルホリン‐４‐イルメチル‐２，４‐ジヒドロ‐１，２，４，５ａ，１０‐ペンタアザシクロペンタ〔ａ〕フルオレン‐５‐オン（１０．７ｇ，３２．９ｍｍｏｌ）の混合液にシクロプロピルアミン（６．９ｍＬ，９９ｍｍｏｌ）を加えた。混合液を１００℃で５時間加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析では生成物への〜７５％変換を示し、そのため更にシクロプロピルアミン（２．３ｍＬ，３３ｍｍｏｌ）を追加し、混合液を１００℃で４時間加熱し、次いで環境まで冷却させた。混合液を水（１００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で抽出した。有機部分を飽和水性ＮＨ４Ｃｌ（２×５０ｍＬ）および塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで水性部分をＥｔＯＡｃ（３×１００ｍＬ）で再抽出した。合わせた有機部分をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下で減少させて、橙色ガラス状固体物として１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素（９．１０ｇ）を得た。
【０６３８】
段階１１：１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素Ｌ‐乳酸塩の合成
【化８６】
0005507049.tif 000104
ＥｔＯＡｃ‐ｉＰｒＯＨ（１：１，９０ｍＬ）中１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素（９．１０ｇ，２４ｍｍｏｌ）の溶液にＬ‐乳酸（２．２５ｇ，２５ｍｍｏｌ）を加えた。混合液を室温で２４時間攪拌し、次いで真空下で減少させた。トルエン（１００ｍＬ）およびＥｔ２Ｏ（１００ｍＬ）を用いて残渣を連続スラリー化し、得られた固体物を集め、乾燥させた（８．０４ｇ）。
この固体物を沸騰ｉＰｒＯＨ（２００ｍＬ）から再結晶化により精製し、乾燥後に、ベージュ色固体物として１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素Ｌ‐乳酸塩（５．７ｇ）を得た。
【０６３９】
例６６
段階１：（３，４‐ジニトロフェニル）モルホリン‐４‐イルメタノンの製造
【化８７】
0005507049.tif 000105
３，４‐ジニトロ安息香酸（１．０００Ｋｇ，４．７１ｍｏｌ，１．０ｗｔ）、テトラヒドロフラン（１０.００Ｌ，１０．０倍容量）およびジメチルホルムアミド（０．０１０Ｌ，０．０１倍容量）を窒素下でフラスコへ入れた。塩化チオニル（０．４５０Ｌ，６．１６ｍｏｌ，０．４５倍容量）を２０〜３０℃で加え、反応混合液を６５〜７０℃に加熱した。反応完了は１Ｈ  ＮＭＲ分析（ｄ６‐ＤＭＳＯ）により調べたところ、典型的には３時間後であった。反応混合液を０〜５℃に冷却し、トリエチルアミン（１．２５Ｌ，８．９７ｍｏｌ，１．２５倍容量）を０〜１０℃で加えた。モルホリン（０．６２Ｌ，７．０７ｍｏｌ，０．６２倍容量）を０〜１０℃で反応混合液へ入れ、スラリーを０〜１０℃で３０分間攪拌した。反応完了を１Ｈ  ＮＭＲ分析（ｄ６‐ＤＭＳＯ）により調べた。反応混合液を１５〜２０℃に加温し、水（４．００Ｌ，４．０倍容量）を加えた。次いで水（２１．００Ｌ，２１．０倍容量）を含有した４０Ｌフランジフラスコに１５〜２５℃でこの混合液を入れて、生成物を沈殿させた。フラスコ内容物を０〜５℃に冷却して１時間ねかせ、固体物を濾取した。フィルターケークを水（４×５．００Ｌ，４×５．０倍容量）で洗浄したところ、最終洗液のｐＨはｐＨ７であることがわかった。湿潤フィルターケークを１Ｈ  ＮＭＲによりトリエチルアミン塩酸塩の存在について分析した。フィルターケークを真空下４０〜４５℃で水分ＫＦ＜０．２％ｗ／ｗまで乾燥させ、黄色固体物として（３，４‐ジニトロフェニル）モルホリン‐４‐イルメタノン（１．２８６Ｋｇ，９７．０％，ＫＦ０．０６９％ｗ／ｗ）を得た。
【０６４０】
段階２：４‐（３，４‐ジニトロベンジル）モルホリンの製造
【化８８】
0005507049.tif 000106
（３，４‐ジニトロフェニル）モルホリン‐４‐イルメタノン（０．７５０Ｋｇ，２．６７ｍｏｌ，１．０ｗｔ）およびテトラヒドロフラン（７．５０Ｌ，１０．０倍容量）を窒素下でフラスコへ入れ、０〜５℃に冷却した。三フッ化ホウ素エーテレート（０．７１３Ｌ，５．６３ｍｏｌ，０．９５倍容量）を０〜５℃で加え、懸濁液をこの温度で１５〜３０分間攪拌した。水素化ホウ素ナトリウム（０．２１２Ｋｇ，５．６０ｍｏｌ，０．２８２ｗｔ）を９０〜１２０分間かけて６等分して加えた（遅い発熱が初回分の添加後１０〜１５分間でみられた。これが始まり、反応混合液が再冷却された後、１０〜１５分間隔で追加し、反応液を添加と添加との間に冷却させた。）。反応混合液を０〜５℃で３０分間攪拌した。反応完了を１Ｈ  ＮＭＲ分析（ｄ６‐ＤＭＳＯ）により調べた。メタノール（６．３０Ｌ，８．４倍容量）を０〜１０℃で滴下して、反応混合液を反応停止させた（急激なガス発生、少し発泡）。反応停止された反応混合液を０〜１０℃で２５〜３５分間攪拌し、次いでガス発生が遅くなるまで２０〜３０℃に加温して攪拌した（固体物の溶解で発熱、ガス／エーテル発生）。混合液を加熱し、６５〜７０℃で１時間攪拌した。混合液を３０〜４０℃に冷却し、真空下４０〜４５℃で濃縮して、黄色／橙色固体物として粗製４‐（３，４‐ジニトロベンジル）モルホリン（０．７０２Ｋｇ，９８．４％）を得た。
４‐（３，４‐ジニトロベンジル）モルホリン（２．８１５Ｋｇ，１０．５３ｍｏｌ，１．０ｗｔ）およびメタノール（１２．００Ｌ，４．３倍容量）を窒素下でフラスコへ入れ、６５〜７０℃に加熱した。完全溶解まで温度を維持した。次いで混合液を０〜５℃に冷却して１時間ねかせた。固体物を濾取した。フィルターケークをメタノール（２×１．５０Ｌ，２×０．５倍容量）で洗浄し、真空下３５〜４５℃で乾燥させて、黄色固体物として４‐（３，４‐ジニトロベンジル）モルホリン（２．３５３Ｋｇ，投入段階２ベースで８３．５％，全投入段階１物質ベースで全収率８２．５％）を得た。
【０６４１】
段階３：４‐モルホリン‐４‐イルメチルベンゼン‐１，２‐ジアミンの製造
【化８９】
0005507049.tif 000107
４‐（３，４‐ジニトロベンジル）モルホリン（０．８００Ｋｇ，２．９９ｍｏｌ，１．０ｗｔ）およびエタノール（１１．２０Ｌ，１４．０倍容量）を適切なフラスコへ入れ、１５〜２５℃で攪拌し、真空／窒素パージサイクルを３回行った。１０％パラジウム炭素（１０％Ｐｄ／Ｃ，５０％湿潤ペースト，０．０４０Ｋｇ，０．０５ｗｔ湿潤重量）をエタノール（０．８０Ｌ，１．０倍容量）でスラリー化し、反応液に加えた。混合液を１０〜２０℃に冷却し、真空／窒素パージサイクルを３回行った。真空／水素パージサイクルを３回行い、反応液を水素雰囲気下１０〜２０℃で攪拌した。反応完了は１Ｈ  ＮＭＲ分析（ｄ６‐ＤＭＳＯ）により調べたところ、典型的には１４〜２０時間後であった。真空／窒素パージサイクルを３回行い、反応混合液を窒素下ガラスミクロ繊維紙で濾過した。フィルターケークをエタノール（３×０．８０Ｌ，３×１．０倍容量）で洗浄し、合わせた濾液および洗液を真空下３５〜４５℃で濃縮乾固させ、褐色固体物として４‐モルホリン‐４‐イルメチルベンゼン‐１，２‐ジアミン（０．６１１Ｋｇ，９８．６％）を得た。
【０６４２】
段階４：４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸メチルエステルの製造
【化９０】
0005507049.tif 000108
４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸（１．００Ｋｇ，６．３７ｍｏｌ，１．０ｗｔ）およびメタノール（８．００Ｌ，８．０倍容量）をメカニカルスターラー、コンデンサーおよび温度計装備のフランジフラスコへ入れた。懸濁液を窒素下で０〜５℃に冷却し、塩化チオニル（０．５２Ｌ，７．１２ｍｏｌ，０．５２倍容量）をこの温度で加えた。混合液を１６〜２４時間にわたり１５〜２５℃に加温した。反応完了を１Ｈ  ＮＭＲ分析（ｄ６‐ＤＭＳＯ）で調べた。混合液を真空下３５〜４５℃で濃縮した。トルエン（２．００Ｌ，２．０倍容量）を残渣へ入れ、真空下３５〜４５℃で除去した。トルエン（２．００Ｌ，２．０倍容量）を用いて共沸を２回繰り返し、灰白色固体物として４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸メチルエステル（１．０７１Ｋｇ，９８．３％）を得た。
【０６４３】
段階５：４‐アミノ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸メチルエステルの製造
【化９１】
0005507049.tif 000109
４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸メチルエステル（１．０８４Ｋｇ，６．３３ｍｏｌ，１．０ｗｔ）およびエタノール（１０．８４Ｌ，１０．０倍容量）の懸濁液を３０〜３５℃に加熱して、完全溶解が生じるまで維持した。１０％パラジウム炭素（１０％Ｐｄ／Ｃ％湿潤ペースト，０．１５２Ｋｇ，０．１４ｗｔ）を窒素下で別のフラスコへ入れ、真空／窒素パージサイクルを３回行った。エタノール中４‐ニトロ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸メチルエステルの溶液を触媒へ入れ、真空／窒素パージサイクルを３回行った。真空／水素パージサイクルを３回行い、反応液を水素雰囲気下に置いた。１Ｈ  ＮＭＲ分析（ｄ６‐ＤＭＳＯ）で完了と思われるまで、反応混合液を２８〜３０℃で攪拌した。混合液を窒素下で濾過し、真空下３５〜４５℃で濃縮して、紫色固体物として４‐アミノ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸メチルエステル（０．８８３Ｋｇ，９８．９％）を得た。
【０６４４】
段階６：４‐tert‐ブトキシカルボニルアミノ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸の製造
【化９２】
0005507049.tif 000110
４‐アミノ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸メチルエステル（１．０２４Ｋｇ，７．１６ｍｏｌ，１．０ｗｔ）およびジオキサン（１０．２４Ｌ，１０．０倍容量）をメカニカルスターラー、コンデンサーおよび温度計装備のフランジフラスコへ入れた。２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（４．３６Ｌ，８．７２ｍｏｌ，４．２６倍容量）を１５〜２５℃で入れ、混合液を４５〜５５℃に加熱した。１Ｈ  ＮＭＲ分析（ｄ６‐ＤＭＳＯ）で調べて反応完了まで温度を４５〜５５℃で維持した。ジ-tert-ブチルジカーボネート（Ｂｏｃ無水物，１．６６７Ｋｇ，７．６４ｍｏｌ，１．６２８ｗｔ）を４５〜５５℃で加え、混合液を５５〜６５分間攪拌した。１Ｈ  ＮＭＲ  ＩＰＣ分析（ｄ６‐ＤＭＳＯ）では９％未反応中間体の存在を示した。追加のジ-tert-ブチルジカーボネート（Ｂｏｃ無水物，０．１４１Ｋｇ，０．６４ｍｏｌ，０．１４ｗｔ）を５５℃で加え、混合液を５５〜６５分間攪拌した。反応完了を１Ｈ  ＮＭＲ分析（ｄ６‐ＤＭＳＯ）で調べた。ジオキサンを真空下３５〜４５℃で除去し、水（１７．６０Ｌ，２０．０倍容量）を残渣に加えた。ｐＨを２Ｍ水性塩酸（４．３０Ｌ，４．２０倍容量）でｐＨ２に調整し、混合液を濾過した。フィルターケークを水（１０．００Ｌ，９．７倍容量）で２０〜３０分間スラリー化させ、混合液を濾過した。フィルターケークをヘプタン（４．１０Ｌ，４．０倍容量）で洗浄し、パッド上で１６〜２０時間乾燥させた。固体物をトルエン（５×４．００Ｌ，５×４．６倍容量）と共沸し、次いで真空下３５〜４５℃で乾燥させ、紫色固体物として４‐tert‐ブトキシカルボニルアミノ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸（１．３８９Ｋｇ，８５．４％）を得た。
【０６４５】
段階７：〔３‐（２‐アミノ‐４‐モルホリン‐４‐イルメチルフェニルカルバモイル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕カルバミン酸tert‐ブチルエステルの製造
【化９３】
0005507049.tif 000111
４‐tert‐ブトキシカルボニルアミノ‐１Ｈ‐ピラゾール‐３‐カルボン酸（０．７５０Ｋｇ，３．３０ｍｏｌ，１．０ｗｔ）、４‐モルホリン‐４‐イルメチルベンゼン‐１，２‐ジアミン（０．７５２Ｋｇ，３．６３ｍｏｌ，１．０ｗｔ）およびＮ，Ｎ′‐ジメチルホルムアミド（１１．２５Ｌ，１５．０倍容量）をメカニカルスターラーおよび温度計装備のフランジフラスコへ窒素下で入れた。１‐ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ，０．５４０Ｋｇ，３．９６ｍｏｌ，０．７２ｗｔ）を１５〜２５℃で加えた。Ｎ‐（３‐ジメチルアミノプロピル）‐Ｎ′‐エチルカルボジイミド（ＥＤＣ，０．７５９Ｋｇ，３．９６ｍｏｌ，１．０１ｗｔ）を１５〜２５℃で加え、混合液をこの温度で１６〜２４時間攪拌した。反応完了を１Ｈ  ＮＭＲ分析で調べた。反応混合液を真空下３５〜４５℃で濃縮した。残渣を酢酸エチル（７．５０Ｌ，１０．０倍容量）と飽和水性炭酸水素ナトリウム水溶液（８．０３Ｌ，１０．７倍容量）に分配し、各層を分離した。有機相を塩水（３．７５Ｌ，５．０倍容量）で洗浄し、硫酸マグネシウム（１．００Ｋｇ，１．３３ｗｔ）で乾燥させ、濾過した。フィルターケークを酢酸エチル（１．５０Ｌ，２．０倍容量）で洗浄した。合わせた濾液および洗液を真空下３５〜４５℃で濃縮し、暗褐色固体物として〔３‐（２‐アミノ‐４‐モルホリン‐４‐イルメチルフェニルカルバモイル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕カルバミン酸tert‐ブチルエステル（１．２１７Ｋｇ，８８．６％）を得た。
【０６４６】
段階８：３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミンの製造
【化９４】
0005507049.tif 000112
〔３‐（２‐アミノ‐４‐モルホリン‐４‐イルメチルフェニルカルバモイル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕カルバミン酸tert‐ブチルエステル（１．３５０Ｋｇ，３．２４ｍｏｌ，１．０ｗｔ）およびエタノール（６．７５Ｌ，５．０倍容量）をメカニカルスターラー、コンデンサーおよび温度計装備のフランジフラスコへ入れた。濃水性塩酸（１．１０Ｌ，１３．２ｍｏｌ，０．８０倍容量）を窒素下１５〜３０℃で加え、次いで内容物を７０〜８０℃に加熱し、この温度で１６〜２４時間維持した。２回目の塩酸（０．１１Ｌ，１．３２ｍｏｌ，０．０８０倍容量）を７０〜８０℃で加え、反応液を更に４時間加熱した。反応完了をＨＰＬＣ分析で調べた。反応混合液を１０〜２０℃に冷却し、炭酸カリウム（１．３５５Ｋｇ，９．０８ｍｏｌ，１．０ｗｔ）をこの温度で少しずつ入れた。ガス発生が止むまで懸濁液を攪拌し、次いで濾過した。フィルターケークをエタノール（１．３５Ｌ，１．０倍容量）で洗浄し、濾液を保留した。フィルターケークを１５〜２５℃で２０〜４０分間エタノール（４．００Ｌ，３．０倍容量）とスラリー化させ、混合液を濾過した。フィルターケークをエタノール（１．３５Ｌ，１．０倍容量）で洗浄し、全部の合わせた濾液を真空下３５〜４５℃で濃縮した。エタノール（４．００Ｌ，３．０倍容量）を残渣へ入れ、真空下３５〜４５℃で除去した。テトラヒドロフラン（５．９０Ｌ，４．４倍容量）を残渣に加え、１５〜２５℃で１０〜２０分間攪拌した。得られた溶液を濾過し、フィルターケークをテトラヒドロフラン（１．３５Ｌ，１．０倍容量）で洗浄し、合わせた濾液を真空下３５〜４５℃で濃縮した。テトラヒドロフラン（５．４０Ｌ，４．０倍容量）を濃縮物へ入れ、真空下３５〜４５℃で除去した。テトラヒドロフラン（５．４０Ｌ，４．０倍容量）を濃縮物へ入れ、真空下３５〜４５℃で除去して、紫色泡状物として所望の生成物３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（０．９２４Ｋｇ，９５．５％，ＨＰＬＣ面積で８２．８４％）を得た。
【０６４７】
段階９：７‐モルホリン‐４‐イルメチル‐２，４‐ジヒドロ‐１，２，４，５ａ，１０‐ペンタアザシクロペンタ〔ａ〕フルオレン‐５‐オンの製造
【化９５】
0005507049.tif 000113
３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イルアミン（０．９９３Ｋｇ，３．３３ｍｏｌ，１．０ｗｔ）およびテトラヒドロフラン（１４．０Ｌ，１５．０倍容量）をメカニカルスターラー、コンデンサーおよび温度計装備のフランジフラスコへ入れた。内容物を窒素下１５〜２５℃で攪拌し、１，１′‐カルボニルジイミダゾール（０．５９６Ｋｇ，３．６７ｍｏｌ，０．６０ｗｔ）を加えた。次いで、内容物を６０〜７０℃に加熱し、この温度で１６〜２４時間攪拌した。反応完了をＴＬＣ分析で調べた。混合液を１５〜２０℃に冷却し、濾過した。フィルターケークをテトラヒドロフラン（４．００Ｌ，４．０倍容量）で洗浄し、１５〜３０分間乾燥させた。固体物を真空下３５〜４５℃で乾燥させ、紫色固体物として７‐モルホリン‐４‐イルメチル‐２，４‐ジヒドロ‐１，２，４，５ａ，１０‐ペンタアザシクロペンタ〔ａ〕フルオレン‐５‐オン（０．８１０Ｋｇ，７５．０％ｔｈ，ＨＰＬＣ面積で９２．１９％）を得た。
【０６４８】
段階１０：１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の製造
【化９６】
0005507049.tif 000114
７‐モルホリン‐４‐イルメチル‐２，４‐ジヒドロ‐１，２，４，５ａ，１０‐ペンタアザシクロペンタ〔ａ〕フルオレン‐５‐オン（０．７９７Ｋｇ，２．４６ｍｏｌ，１．０ｗｔ）および１‐メチル‐２‐ピロリジノン（２．４０Ｌ，３．０倍容量）をメカニカルスターラー、コンデンサーおよび温度計装備のフランジフラスコへ入れた。シクロプロピルアミン（０．２７９Ｋｇ，４．８８ｍｏｌ，０．３５１ｗｔ）を窒素下１５〜３０℃で加えた。内容物を９５〜１０５℃に加熱し、この温度で１６〜２４時間攪拌した。反応完了を１Ｈ  ＮＭＲ分析で調べた。反応混合液を１０〜２０℃に冷却し、酢酸エチル（８．００Ｌ，１０．０倍容量）および飽和水性塩化ナトリウム（２．５０Ｌ，３．０倍容量）を入れ、混合液を２〜５分間攪拌し、各層を分離した。有機相を飽和水性塩化ナトリウム（５．００Ｌ，６．０倍容量）と２５〜３５分間攪拌し、混合液を濾過し、フィルターケークを酢酸エチル（０．４０Ｌ，０．５倍容量）で洗浄した。フィルターケークを保留し、濾液を分液漏斗へ移し、各層を分離した。操作を更に３回繰り返し、保留固体物を有機相と合わせ、混合液を真空下３５〜４５℃で濃縮乾固させた。濃縮物を４５〜５５℃でプロパン‐２‐オール（８．００Ｌ，１０．０倍容量）に溶解し、活性炭（０．０８０Ｋｇ，０．１ｗｔ）を入れた。混合液を４５〜５５℃で３０〜４０分間攪拌し、次いで４５〜５５℃で熱時濾過した。フィルターケークをプロパン‐２‐オール（０．４０Ｌ，０．５倍容量）で洗浄した。活性炭（０．０８０Ｌ，０．１ｗｔ）を合わせた濾液および洗液へ入れ、混合液を４５〜５５℃で３０〜４０分間攪拌した。混合液を４５〜５５℃で熱時濾過し、フィルターケークをプロパン‐２‐オール（０．４０Ｌ，０．５倍容量）で洗浄した。濾液および洗液を真空下３５〜４５℃で濃縮した。酢酸エチル（８．００Ｌ，１０．０倍容量）および水（２．２０Ｌ，３．０倍容量）を２５〜３５℃で濃縮物へ入れ、混合液を１〜２分間攪拌した。各層を分離し、有機相を真空下３５〜４５℃で濃縮した。酢酸エチル（４．００Ｌ，５．０倍容量）を残渣へ入れ、真空下３５〜４５℃で濃縮した。酢酸エチル（４．００Ｌ，５．０倍容量）を残渣へ入れ、混合液を１５〜２５℃で２〜２０時間攪拌した。混合液を０〜５℃に冷却して９０〜１２０分間ねかせ、次いで濾過した。フィルターケークを酢酸エチル（０．８０Ｌ，１．０倍容量）で洗浄し、１５〜３０分間乾燥させた。固体物を真空下３５〜４５℃で乾燥させ、褐色固体物として１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素（０．５３３Ｋｇ，５６．８％，ＨＰＬＣ面積で９３．２０％）を得た。
【０６４９】
数バッチの段階９生成物をこうして処理したが、各バッチにおける出発物質および生成物の量の詳細は表１Ａで示されている。
【表１３】
0005507049.tif 000115
【０６５０】
段階１１：１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素Ｌ‐乳酸塩の製造
【化９７】
0005507049.tif 000116
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素（１．８５９Ｋｇ，４．８７２ｍｏｌ，１．０ｗｔ）、プロパン‐２‐オール（９．００Ｌ，５．０倍容量）および酢酸エチル（８．００Ｌ，４．５倍容量）をメカニカルスターラーおよび温度計装備のフランジフラスコへ入れた。内容物を窒素下で攪拌し、Ｌ‐乳酸（０．５０４Ｋｇ，５．５９ｍｏｌ，０．２６９ｗｔ）を１５〜２５℃で加え、次いで酢酸エチル（０．９０Ｌ，０．５倍容量）でラインリンスした。混合液を１５〜２５℃で１２０〜１４０分間攪拌した。固体物を濾取し、フィルターケークを酢酸エチル（２×２．００Ｌ，２×１．０倍容量）で洗浄し、２０〜４０分間乾燥させた。フィルターケークを７５〜８５℃でエタノール（３３．００Ｌ，１７．７倍容量）に溶解し、６５〜７０℃に冷却し、溶液をガラスミクロ繊維紙で清澄化させた。濾液を１５〜２５℃に冷却して２〜３時間ねかせた。結晶化した固体物を濾過により単離し、フィルターケークをエタノール（２×１．００Ｌ，２×０．５倍容量）で洗浄し、少なくとも３０分間乾燥させた。固体物を真空下３５〜４５℃で乾燥させ、暗桃色均一固体物として１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素Ｌ‐乳酸塩（１．３８６Ｋｇ，５８．７％ｔｈ，ＨＰＬＣ面積で９９．４７％）を得た。
【０６５１】
乳酸塩の赤外スペクトル（ＫＢｒディスク法）は３２２９、２９７２および１６６０ｃｍ−１で特徴的ピークを含んでいた。
【０６５２】
いかなる理論にも拘束されることなく、赤外ピークは下記のような塩の構造成分に該当すると考えられる：
ピーク： 対象：
３２２９ｃｍ−１            Ｎ‐Ｈ
２９７２ｃｍ−１          脂肪族Ｃ‐Ｈ
１６６０ｃｍ−１          尿素Ｃ＝Ｏ
【０６５３】
例６７
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の結晶遊離塩基および結晶塩形の合成
Ａ．１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基の製造
粗製１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基の試料を例６０で示されたように製造し、最初にシリカゲルでカラムクロマトグラフィーによりＥｔＯＡｃ‐ＭｅＯＨ（９８：２〜８０：２０）で溶出させて精製した。次いで、得られた遊離塩基の試料を熱メタノールから再結晶化させ、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基の結晶物質を得た。
【０６５４】
Ｂ．１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基二水和物の製造
粗製１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基の試料をＴＨＦに溶解し、次いで真空下で最少容量（〜１／４容量）に濃縮した。溶液が混濁するまで溶液に水（２〜４倍容量）を滴下した。少量のＴＨＦを加えて溶液に清澄性を再びもたらし、混合液を一晩放置して結晶物質を得、これを風乾して、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基二水和物を得た。
【０６５５】
Ｃ．１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素塩酸塩の製造
粗製１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基の試料を最少量のＭｅＯＨに溶解し、次いでＥｔＯＡｃで希釈した。溶液に０℃で１．１当量のＨＣｌ（ジオキサン中４Ｍ溶液）をゆっくり加えた。添加後、固体物が溶液から沈殿し、これを濾取した。固体物にＭｅＯＨを加え、混合液を真空下で減少させた。微量の残留ＭｅＯＨを除去するために残渣を水から蒸発させ、次いで６０℃／０．１ｍｂａｒで乾燥させて、塩酸塩を得た。
【０６５６】
Ｄ．１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素エタンスルホン酸塩の製造
ＭｅＯＨ‐ＥｔＯＡｃ中１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基の溶液に１当量のエタンスルホン酸を加えた。混合液を室温で攪拌し、次いで真空下で減少させた。残渣をＭｅＯＨに溶解し、溶液にＥｔ２Ｏを加えた。混合液を７２時間放置し、形成された固体物を濾取し、乾燥させて、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素エタンスルホン酸塩を得た。
【０６５７】
Ｅ．１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素メタンスルホン酸塩の製造
ＭｅＯＨ‐ＥｔＯＡｃ中１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基（３９４ｍｇ）の溶液に１当量のメタンスルホン酸（６７μＬ）を加えた。固体物が形成され、これを濾取し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。固体物を最少量の熱ＭｅＯＨに溶解し、冷却し、次いでＥｔ２Ｏで摩砕した。固体物を７２時間放置し、次いで濾取し、ＭｅＯＨで洗浄して、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素メタンスルホン酸塩を得た。
【０６５８】
例６８
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基および塩の特徴化
様々な形の１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素を特徴付けた。特徴付けに選択された形は、多形性および塩安定性の程度について主に調べた検査から特定した。更なる特徴付けに選択された塩はＬ‐乳酸塩、遊離塩基二水和物、エシル酸塩、遊離塩基および塩酸塩であった。
【０６５９】
Ａ．示差走査熱量法（ＤＳＣ）：
サーモグラムを５０ポジションオートサンプラー装備のＴＡ Instrument Ｑ１０００で集めた。エネルギーおよび温度較正標準はインジウムであった。試料を１０℃／ｍｉｎの割合で１０℃から２５０℃へ加熱した。３０ｍＬ／ｍｉｎの窒素パージを試料で維持した。２〜１０ｍｇの試料を（別記されないかぎり）用い、蓋にピンホールを付したアルミニウムパンに全試料を入れた。
【表１４】
0005507049.tif 000117
【０６６０】
Ｂ．熱重量分析（ＴＧＡ）：
サーモグラムをＴＡ Instruments Ｑ５００で集めた。試料を１０℃／ｍｉｎの割合で加熱した。１００ｍＬ／ｍｉｎの窒素パージを試料で維持した。典型的には５〜２０ｍｇの試料を風袋計測オープンアルミニウムパンへ入れた。
【表１５】
0005507049.tif 000118
【０６６１】
Ｃ．偏光顕微鏡検査
試料を撮影用デジタルカメラ装備のLeica ＬＭ／ＤＭ顕微鏡で検査した。少量の試料をガラススライド上の浸漬油に載せ、ガラスカバースリップで覆った。個別の粒子をできるだけ離し、λ波プレートへ接続して５０〜５００×倍率および一部極交差下で検査した。
【表１６】
0005507049.tif 000119
【０６６２】
Ｄ．ＸＲＰＤ（Ｘ線粉末回折）
Ｄ５０００
ＣｕＫα線（４０ｋＶ，４０ｍＡ）、θ‐θゴニオメーター、自動発散および受光スリット、グラファイト二次モノクロメーターおよびシンチレーションカウンターを用いるSiemens D5000回折計でＸＲＰＤ検査を行った。０．０２°２θまたは０．００５°２θの工程サイズおよび１秒の工程時間を用いる連続走査方式で２°〜３０°２θの角度範囲にわたりデータを集めた。
試料を環境条件下でランし、粉砕せずに受け取ったままの粉末を用いて平板試料として調製した。研磨されたゼロバックグラウンド（５１０）シリコンウェーハー（The Gem Dugout,1652 Princeton Drive,Pennsylvania State College,ＰＡ 16803,ＵＳＡ）に切断された１２ｍｍ径、０．５ｍｍ深さのくぼみに、約２５〜５０ｍｇの試料を静かに詰めた。
全ＸＲＰＤ分析はDiffrac Plus ＸＲＤ Commanderソフトウェアｖ２．３．１を用いて行った。
【０６６３】
Bruker ＡＸＳ  Ｃ２  ＧＡＤＤＳ回折計（ＧＶＳから回収された試料に用いられる）
Ｃｕ  Ｋα線（４０ｋＶ，４０ｍＡ）、自動ＸＹＺステージ、自動試料ポジショニング用のレーザービデオ顕微鏡およびHiStar二次元エリア検出器を用いたBruker ＡＸＳ  Ｃ２  ＧＡＤＤＳ回折計で、試料のＸ線粉末回折パターンを取得した。Ｘ線光学機器は、０．３ｍｍのピンホールコリメーターと接続された単一Gobel多層ミラーからなる。
試料におけるビーム発散、すなわちＸ線ビームの有効サイズは、約４ｍｍであった。
３．２〜２９．８°の有効２θ角度を呈する２０ｃｍの試料対検出器距離でθ‐θ連続走査方式を用いた。試料の典型的露出時間は１２０秒間である。
粉砕せずに受け取ったままの粉末を用いて平板試料として試料を調製した。平らな表面を得るために、約１〜２ｍｇの試料をガラススライドで軽く圧縮した。
ＸＲＰＤトレースをＬ‐乳酸塩および遊離塩基について記録した。トレースは良いシグナル／ノイズ比を示し、結晶物質を表わしている。
【０６６４】
Ｅ．重量蒸気吸着（ＧＶＳ）：
全試料をHiden IGASorp水分吸着アナライザーランニングCFRSorpソフトウェアでランした。試料サイズは約１０〜２５ｍｇであった。水分吸着／脱着等温処理を下記のように行った。試料を室内湿度および室温（約４０％ＲＨ，２５℃）で載せおよび取り出し、その後で（Bruker ＡＸＳ  Ｃ２  ＧＡＤＤＳシステムを用いる）ＸＲＰＤにより分析した。
標準等温ランは４０％ＲＨで開始させる単一サイクルであった。
湿度は下記のように進めた：
４０、５０、６０、７０、８０、９０
８５、７５、６５、５５、４５、３５、２５、１５、５、０
１０、２０、３０、４０
（ｉ）Ｌ‐乳酸塩
Ｌ‐乳酸塩のＧＶＳ等温処理では、試料が吸湿挙動を示さず、水和物を形成しないことを示している。ＧＶＳ実験後における試料のＸＲＰＤトレースは投入物質のものと一致し、相変化が実験中に生じなかったことを示している。
（ii）遊離塩基
実験に際して、試料重量は０％ＲＨ〜９５％ＲＨで約９％異なる。これは試料が性質上吸湿性であることを示している。
【０６６５】
例６９
Ｘ線回折による１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素二水和物遊離塩基の測定
回折実験に用いられた結晶は無色で、寸法０．２×０．２×０．２ｍｍ３の不規則形状である。それは、液体‐液体拡散実験において、ＴＨＦでエシル酸塩の水溶液の沈殿により得た。このような試料と、（ある範囲の溶媒、例えばエタノールのようなアルコール、メチルエチルケトンのようなケトンとＴＨＦおよびジオキサンのようなエーテルと共に反溶媒として水を用いて）遊離塩基から製造された同様の結晶形との同等性は、両試料のＸ線粉末回折パターンの比較により確認した。結晶学的データは、Rigaku回転対陰極ＲＵ３ＨＲからのＣｕＫα線（λ＝１．５４１８Å）、Osmic blue共焦点光学機器、ＡＦＣ９1/4χゴニオメーターおよびRigaku Jupiter ＣＣＤ検出器を用いて、１０１（２）Ｋで集めた。像は、６７ｍｍの検出器対結晶距離において、４回のオメガ走査、２θ＝３０°で１回および２θ＝９０°で３回の走査で集めた。データ収集をCrystalClearソフトウェアにより制御し、像をDtrekにより処理およびスケール調整した。吸収係数は中度（μ＝０．８２ｍｍ−１）であったが、グルーおよび結晶ホルダー（マイクロマウント）吸収を補うために四次フーリエ吸収補正を用いてデータを補正した。結晶は結晶格子パラメーターａ＝７．６６（１０）、ｂ＝１５．１８（１０）、ｃ＝１７．７１（１０）Å、β＝９８．５３（２）°、α＝γ＝９０°の単斜晶空間群Ｐ２１／ｎ（＃１４）に属することがわかった。括弧内の数は偏差（ｓ．ｕ．，標準不確かさ）を表わしている。
【０６６６】
結晶構造はＳＨＥＬＸＳ‐９７で行われた直接法を用いて解析した。１１．５〜０．８９Å（３．８５＜θ＜６０．０１）の分解範囲で全２８２２独自反射に関する強度データをＳＨＥＬＸＳ‐９７により２７４結晶学的パラメーターの精査に用いた。最終統計パラメーターは：ｗＲ２＝０．２４１６（全データ）、ＲＦ＝０．０８６６（Ｉ＞２σ（Ｉ）のデータ）および適合度Ｓ＝１．１４５であった。
【０６６７】
遊離塩基および２水分子からなる１分子は非対称単位でみられた。非対称単位の元素組成はＣ１９Ｈ２６Ｎ７Ｏ４であったため、結晶の計算密度は１．３６Ｍｇ／ｍ３である。水素原子は幾何学的見地で捉え、一方へテロ原子結合水素原子の位置はＦｏ‐Ｆｃ差マップの検査により確認した。水素原子の位置および熱的パラメーターは対応非水素原子で定まるように限定した。非水素原子の熱運動は異方性熱因子によりモデル化した（図１参照）。
【０６６８】
結晶構造は、一つの分子内（Ｎ２２‐Ｈ…Ｎ１４  ２．８９８Å）と７つの分子間水素結合を含んでいる（図２参照）。１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素分子は、二つのＨ結合：Ｎ７‐Ｈ…Ｏ２４  ２．７６１ÅおよびＮ２５‐Ｈ…Ｎ２  ３．３１０Åで、結晶学的ｂ軸に沿い鎖に一緒に結合されている。２鎖からのベンゾイミダゾール部分は３．５〜３．６Åの距離で一緒に重なっている。１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素分子のネットワークは４水分子で占拠されたポケットを形成し、二つと二つが対称の中心で関連付けられている。３つのＨ結合が１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素分子を水分子と、一つは第一の水分子（Ｏ１Ｗ１‐Ｈ…Ｎ１６  ２．８４５Å）におよび残り二つは第二の水分子（Ｎ１‐Ｈ…Ｏ１Ｗ２  ２．８７５ÅおよびＯ１Ｗ２‐Ｈ…Ｏ１９  ２．７４６Å）に結合させている。水分子は、他の二つのＨ結合：Ｏ１Ｗ１‐Ｈ…Ｏ１Ｗ２  ２．８８４ÅおよびＯ１Ｗ２‐Ｈ…Ｏ１Ｗ１  ２．７７１Åによる相互作用で関連付けられている。
【０６６９】
Ｘ線回折検査で得られた構造の熱的楕円図が図１で示され、パッキング図が図２である。
【０６７０】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基二水和物の構造を作り上げる原子の座標は、表２で示されている通りである。括弧内の数は偏差（ｓ．ｕ．，標準不確かさ）を表わしている。
表２
【表１７】
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0005507049.tif 000121
【０６７１】
例７０
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基のＸＲＰＤパターンの測定
Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）データ収集用の試料を大理石乳鉢で静かに粉砕し、結晶解析用キャピラリー（Hampton Research,QuartzまたはGlass Type １０，０．４または０．７ｍｍ径）中へ入れた。回折パターンは、Rigaku回転対陰極ＲＵ３ＨＲからのＣｕＫα線（λ＝１．５４１８Å）、Osmic blue共焦点光学機器、1/4χゴニオメーターおよびRigaku ＨＴＣイメージプレート検出器を用いて室温で集めた。２５０ｍｍの検出器対結晶距離でψ軸を回転させながら、２Ｄ像を集めた。データ収集をCrystalClearソフトウェアにより制御し、２Ｄ像をDatasqueezeにより１Ｄプロット（２θ vs.強度）に変換した（０．０１°または０．０２°工程で２θ範囲３〜３０°にわたり方位角０＜χ＜３６０°で平均した強度）。自前のプログラムAstex ＸＲＰＤを１Ｄ  ＸＲＰＤパターンの取扱いおよび視覚化に用いた。
【０６７２】
ＸＲＰＤパターンとピークの比強度は異なる結晶化バッチ間で変わらず、１結晶形のみの存在と合致している。
【０６７３】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基のＦＢ１形に関するＸＲＰＤパターンが図３で示され、主ピークの詳細が表３に掲載されている。
表３．主ピークの２θ、ｄ‐間隔および比強度
【表１８】
0005507049.tif 000122
【０６７４】
例７１
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素乳酸塩の結晶構造の測定
単結晶形の１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素Ｌ‐乳酸塩が同定された。回折実験に用いられた結晶は、エタノールから蒸発により得られた寸法０．１×０．１×０．１ｍｍ３の無色プリズムであった。結晶学的データは、Rigaku回転対陰極ＲＵ３ＨＲからのＣｕＫα線（λ＝１．５４１８Å）、Osmic blue共焦点光学機器、ＡＦＣ９1/4χゴニオメーターおよびRigaku Jupiter ＣＣＤ検出器を用いて９７Ｋで集めた。像は、６７ｍｍの検出器対結晶距離において、５回のω走査、２θ＝１５°で１回および２θ＝９０°で４回の走査で集めた。データ収集をCrystalClearソフトウェアにより制御し、像をDtrekにより処理およびスケール調整した。吸収係数は中度（μ＝０．７８ｍｍ−１）であったが、グルーおよび結晶ホルダー（マイクロマウント）吸収を補うために四次元フーリエ吸収補正を用いてデータを補正した。結晶は結晶格子パラメーターａ＝９．９４（１０）、ｂ＝１５．０３（１０）、ｃ＝１６．１８（１０）Å、α＝β＝γ＝９０°の斜方晶空間群Ｐ２１２１２１（＃１９）に属することがわかった。括弧内の数は偏差（ｓ．ｕ．，標準不確かさ）を表わしている。結晶格子パラメーターと対称性をチェックするために、１回の短い室温走査を行った。対称性は９７（２）Ｋの場合と同様であり、結晶格子パラメーターが類似（室温ａ＝１０．０８、ｂ＝１５．２２、ｃ＝１６．２２Å）していることがわかった。
【０６７５】
結晶構造はＳＨＥＬＸＳ‐９７で行われた直接法を用いて解析した。結晶化実験で用いられたＬ‐乳酸塩立体配置と一致する絶対立体配置を選択した。１１〜０．９Å（４．０１＜θ＜５８．９２）の分解範囲で全３４１７独自反射に関する強度データをＳＨＥＬＸＳ‐９７により３０８結晶学的パラメーターの精査に用いた。最終統計パラメーターは：ｗＲ２＝０．２２７５（全データ）、ＲＦ＝０．０８１７（Ｉ＞２σ（Ｉ）のデータ）および適合度Ｓ＝１．０７６であった。
【０６７６】
プロトン化遊離塩基および一つのＬ‐乳酸アニオンからなる１分子は非対称単位でみられた。非対称単位の元素組成はＣ２２Ｈ２９Ｎ７Ｏ５であったため、結晶の計算密度は１．３０Ｍｇ／ｍ３である。水素原子は幾何学的見地で捉え、一方へテロ原子結合水素原子の位置はＦｏ‐Ｆｃ差マップの検査により確認した。水素原子の位置および熱的パラメーターは対応非水素原子で定まるように限定した。非水素原子の熱運動は異方性熱因子によりモデル化した（図４参照）。
【０６７７】
結晶構造は一つの分子内（Ｎ２２‐Ｈ…Ｎ１４  ２．８５２Å）と７つの分子間水素結合を含み、複雑な３Ｄネットワークを形成している（図５参照）。二つの分子間Ｈ結合：Ｎ７‐Ｈ…Ｏ２４  ２．８００ÅおよびＮ２５‐Ｈ…Ｎ２  ３．００４Åが、１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素分子を結晶学的ｃ軸に沿い鎖に結合している。Ｌ‐乳酸アニオンは、Ｈ結合：Ｏ３Ｌ‐Ｈ…Ｏ１Ｌ  ２．６２６Åで結晶学的ａ軸に沿い鎖に結合されている。二つの二又Ｈ結合が１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素カチオンとＬ‐乳酸アニオンを結合させている。プロトン化モルホリン窒素原子は両カルボキシル酸素原子（Ｎ１６‐Ｈ…Ｏ１Ｌ  ３．１２５ÅおよびＮ１６‐Ｈ…Ｏ２Ｌ  ２．６２５Å）と相互作用し、一方ピラゾールＮ１窒素はＯ２ＬおよびＯ３Ｌ（Ｎ１‐Ｈ…Ｏ２Ｌ  ２．８８２Å、Ｎ１‐Ｈ…Ｏ３Ｌ  ２．７４０Å）に対するＨドナーである。
【０６７８】
Ｘ線回折検査で得られた構造の熱的楕円図が図４で示され、パッキング図が図５である。
【０６７９】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素乳酸塩の構造を作り上げる原子の座標は、表４で示されている通りである。括弧内の数は偏差（ｓ．ｕ．，標準不確かさ）を表わしている。
表４
【表１９】
0005507049.tif 000123
0005507049.tif 000124
0005507049.tif 000125
【０６８０】
例７２
４０℃７５％ＲＨにおける１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素塩安定性
安定性試験用の試料約１５ｍｇを大理石乳鉢で静かに粉砕し、ペトリ皿に薄層状態で移した。次いで過剰の未溶解ＮａＣｌと共に飽和ＮａＣｌ溶液を含有した密封容器に試料を入れた。次いで、４０℃および７５％相対湿度（ＲＨ）の環境をもたらすために、これを４０℃に保たれたインキュベーター中へ置いた。試料を規則的間隔でＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）により分析した。
【０６８１】
ＸＲＰＤデータ収集用の試料を結晶解析用キャピラリー（Hampton Research,Quartz製，径＝０．４ｍｍ）中へ入れた。回折パターンは、Rigaku回転対陰極ＲＵ３ＨＲからのＣｕＫα線（λ＝１．５４１８Å）、Osmic blue共焦点光学機器、1/4χゴニオメーターおよびRigaku ＨＴＣイメージプレート検出器を用いて室温で集めた。２５０ｍｍの検出器対結晶距離でψ軸を回転させながら、２Ｄ像を集めた。データ収集をCrystalClearソフトウェアにより制御し、２Ｄ像をDatasqueezeにより１Ｄプロット（２θ vs.強度）に変換した（０．０１°工程で２θ範囲３〜３０°にわたり方位角０＜χ＜３６０°で平均した強度）。自前のプログラムAstex ＸＲＰＤを１Ｄ  ＸＲＰＤパターンの取扱いおよび視覚化に用いた。
【０６８２】
乳酸塩、遊離塩基（ＦＢ１）および二水和物遊離塩基（ＦＢ２）のＸＲＰＤパターンは、４０℃および７５％ＲＨに暴露しても、１〜２月間にわたり変化しない。乳酸塩、遊離塩基（ＦＢ１）および二水和物遊離塩基（ＦＢ２）の出発および安定性試験試料のＸＲＰＤパターンが図６〜８で示されている。
【０６８３】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基のＬ‐乳酸塩に関するＸＲＰＤパターンが図６で示され、主ピークの詳細が表５に掲載されている。
表５
【表２０】
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【０６８４】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素遊離塩基の二水和物遊離塩基ＦＢ２形に関するＸＲＰＤパターンが図８で示され、主ピークの詳細が表６に掲載されている。
表６
【表２１】
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【０６８５】
生物活性
例７３
活性化ＣＤＫ２／サイクリンＡキナーゼ阻害活性アッセイ（ＩＣ５０）の測定
本発明の化合物は下記プロトコールを用いてキナーゼ阻害活性について試験した。
【０６８６】
活性化ＣＤＫ２／サイクリンＡ（Brown et al.,Nat.Cell Biol.,1,pp438-443,1999、Lowe,E.D.et al.,Biochemistry,41,pp15625-15634,2002）を２．５×強度アッセイ用緩衝液（５０ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．２，６２．５ｍＭ  β‐グリセロリン酸，１２．５ｍＭ  ＥＤＴＡ，３７．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２，１１２．５ｍＭ  ＡＴＰ，２．５ｍＭ  ＤＴＴ，２．５ｍＭオルトバナジン酸ナトリウム，０．２５ｍｇ／ｍＬ牛血清アルブミン）で１２５ｐＭに希釈し、１０μＬをヒストン基質ミックス（６０μＬ牛ヒストンＨ１（Upstate Biotechnology,５ｍｇ／ｍＬ），９４０μＬ  Ｈ２Ｏ，３５μＣｉ  γ３３Ｐ‐ＡＴＰ）１０μＬと混合し、ＤＭＳＯ中試験化合物の様々な希釈液（２．５％まで）５μＬと一緒に９６ウェルプレートに加える。反応を２〜４時間進行させてから、過剰のオルトリン酸（２％で５μＬ）で停止させる。ヒストンＨ１へ取り込まれずに残留したγ３３Ｐ‐ＡＴＰをMillipore ＭＡＰＨフィルタープレートでリン酸化ヒストンＨ１から分離する。ＭＡＰＨプレートのウェルを０．５％オルトリン酸で湿潤させ、次いで反応の産物をウェルからMillipore真空ユニットで濾過する。濾過後、残渣を０．５％オルトリン酸２００μＬで２回洗浄する。フィルターが乾燥したら、Microscint２０シンチラント２０μＬを加え、次いでPackard Topcountで３０秒間カウントする。
【０６８７】
ＣＤＫ２活性の５０％を阻害するために必要な試験化合物の濃度（ＩＣ５０）を求めるために、ＣＤＫ２活性の阻害％を計算してプロットする。
【０６８８】
例１、１０、１１、１８、２０、２２、３０、３１、３２、４６、４７および５４の化合物はＣＤＫ２アッセイで１μＭ以下のＩＣ５０値を有し、一方例４４、４５、４８、５１および５３の化合物は１０μＭ以下のＩＣ５０値を有している。
【０６８９】
例７４
活性化ＣＤＫ１／サイクリンＢキナーゼ阻害活性アッセイ（ＩＣ５０）の測定
ＣＤＫ１／サイクリンＢアッセイは上記ＣＤＫ２／サイクリンＡと同一であるが、但しＣＤＫ１／サイクリンＢ（Upstate Discovery）を用い、酵素を６．２５ｎＭに希釈する。
例１、４、６、１０、１１、１３、２２、４２、４７および５４の化合物はＣＤＫ１アッセイで１μＭ以下のＩＣ５０値を有し、一方例３、８、９、１６、１７、２０、２４、２８、２９、３１、３２、３４、３９、４１、４５、４６、４８、４９、５０、５１、５２、５３および５６の化合物は１０μＭ以下のＩＣ５０値を有し、例２、２３、２６、２７、３３、３７および４３の化合物は５０μＭ以下のＩＣ５０値を有している。
ている。
【０６９０】
例７５
オーロラＡキナーゼアッセイ
オーロラＡキナーゼ活性は、ＧＳＫ３誘導ビオチニル化ペプチドと共にDissociative Enhanced Lanthanide Fluoro Immuno Assay（ＤＥＬＦＩＡ）を用いて求められる。生じたリン酸化ペプチドの量は、λｅｘ＝３３７ｎｍ、λｅｍ＝６２０ｎｍで時間分解蛍光を用いて、リン特異的一次抗体およびユーロピウム標識抗ウサギＩｇＧ抗体により測定する。
【０６９１】
キナーゼ反応：
アッセイ反応液は、０．５ｎＭオーロラＡ（Upstate Discovery）、３μＭビオチン‐ＣＧＰＫＧＰＧＲＲＧＲＲＲＴＳＳＦＡＥＧ、１５μＭ  ＡＴＰと、１０ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．１ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡ、０．００１％ Brij-３５、０．５％グリセロール、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．０１％  β‐メルカプトエタノールおよび２．５％ＤＭＳＯ中化合物の様々な希釈液とで、２５μＬの全反応容量で９６ウェルプレートに用意する。反応を室温で６０分間進行させてから、１００ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．０５％Surfact-Amps20（Pierce）およびＴＢＳ中１×BlockerＴＭＢＳＡ（Pierce）を含有するＳＴＯＰ緩衝液１００μＬで停止させる。
【０６９２】
検出工程：
次いで反応混合液を９６ウェルNeutravidin被覆プレート（Pierce）に移し、ビオチニル化ペプチドを捕捉するために３０分間インキュベートする。ウェル当たりＴＢＳＴ緩衝液２００μＬで５回洗浄した後、抗リン（Ｓｅｒ／Ｔｈｒ）‐ＡＫＴ基質抗体（Cell Signalling Technology）およびＥｕ‐Ｎ１抗ウサギＩｇＧ（Perkin Elmer）の混合物を全ウェルに加え、１時間放置する。別な洗浄工程後、ＤＥＬＦＩＡ増強溶液（Perkin Elmer）を全ウェルに加える。５分間のインキュベート後、ウェルをFusionプレートリーダーでカウントする。
例１〜５６の化合物はすべて、上記アッセイで１μＭ以下のＩＣ５０値を有している。例６０Ｈの塩酸塩は０．００２５μＭのＩＣ５０を有している。
【０６９３】
例７６
オーロラＢキナーゼアッセイ
キナーゼ反応：
アッセイ反応液は、５ｎＭオーロラＢ（ProQinase）、３μＭビオチン‐ＣＧＰＫＧＰＧＲＲＧＲＲＲＴＳＳＦＡＥＧ、１５μＭ  ＡＴＰと、２５ｍＭ  ＴＲＩＳ  ｐＨ８．５，０．１ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡ、０．０２５％ Surfact-Amps20、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＤＴＴおよび２．５％ＤＭＳＯ中化合物の様々な希釈液とで、２５μＬの全反応容量で９６ウェルプレートに用意する。反応を室温で９０分間進行させてから、１００ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．０５％Surfact-Amps20（Pierce）およびＴＢＳ中１×BlockerＴＭＢＳＡ（Pierce）を含有するＳＴＯＰ緩衝液１００μＬで停止させる。
検出工程はオーロラＡについて記載されたように行う。
オーロラＢアッセイにおいて、例６０Ｈの塩酸塩は０．００３μＭの濃度で５７％阻害を示す。
【０６９４】
例７７
ＧＳＫ３‐βキナーゼ阻害活性アッセイ
ＧＳＫ３‐β（Upstate Discovery）を２５ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．００、２５ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡ、０．００２５％ Brij-３５、１．２５％グリセロール、０．５ｍＭ  ＥＤＴＡ、２５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．０２５％  β‐メルカプトエタノール、３７．５ｍＭ  ＡＴＰで７．５ｎＭに希釈し、１０μＬを基質ミックス１０μＬと混合する。ＧＳＫ３‐β用の基質ミックスは３５μＣｉ  γ３３Ｐ‐ＡＴＰ含有水１ｍＬ中１２．５μＭリン‐グリコーゲンシンターゼペプチド‐２（Upstate Discovery）である。酵素および基質をＤＭＳＯ中試験化合物の様々な希釈液（２．５％まで）５μＬと一緒に９６ウェルプレートへ加える。反応を３時間（ＧＳＫ３‐β）進行させてから、過剰のオルトリン酸（２％で５μＬ）で停止させる。濾過操作は前記の活性化ＣＤＫ２／サイクリンＡアッセイの通りである。
【０６９５】
例７８
ＣＤＫ選択性アッセイ
７８Ａ．プロトコールＡ
本発明の化合物は、例３で前記された一般プロトコールを用いて、但し下記のように修正して、いくつかの異なるキナーゼに対するキナーゼ阻害活性について試験できる。
【０６９６】
キナーゼを２０ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１％γ‐メルカプトエタノール、０．０１％ Brij-３５、５％グリセロール、１ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡで１０×作業用ストックに希釈する。１単位は、３０℃において、１００μＭの最終ＡＴＰ濃度で、０．１ｍｇ／ｍＬヒストンＨ１またはＣＤＫ７基質ペプチド中への１分間当たり１ｎｍｏｌのリン酸の取込みに相当する。
【０６９７】
全ＣＤＫアッセイ（ＣＤＫ７は除く）用の基質はヒストンＨ１であり、使用前に２０ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．４で１０×作業用ストックに希釈する。ＣＤＫ７用の基質は、脱イオン水中１０×作業用ストックに希釈された特異的ペプチドである。
【０６９８】
ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＤＫ２／サイクリンＡ、ＣＤＫ２／サイクリンＥ、ＣＤＫ３／サイクリンＥ、ＣＤＫ５／ｐ３５、ＣＤＫ６／サイクリンＤ３のアッセイ操作：
２５μＬの最終反応容量で、酵素（５〜１０ｍＵ）を８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１ｍｇ／ｍＬヒストンＨ１、１０ｍＭ  酢酸Ｍｇおよび〔γ３３Ｐ‐ＡＴＰ〕（比活性約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、所要の濃度）とインキュベートする。反応はＭｇ２＋〔γ３３Ｐ‐ＡＴＰ〕の添加により開始させる。室温で４０分間インキュベート後、反応を３％リン酸溶液５μＬの添加により止める。反応液１０ｍＬをＰ３０フィルターマットにスポットし、乾燥およびカウント前に５分間にわたり７５ｍＭリン酸で３回およびメタノールで１回洗浄する。
【０６９９】
ＣＤＫ７／サイクリンＨ／ＭＡＴ１のアッセイ操作
２５μＬの最終反応容量で、酵素（５〜１０ｍＵ）を８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、５００μＭペプチド、１０ｍＭ  酢酸Ｍｇおよび〔γ３３Ｐ‐ＡＴＰ〕（比活性約５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ、所要の濃度）とインキュベートする。反応はＭｇ２＋〔γ３３Ｐ‐ＡＴＰ〕の添加により開始させる。室温で４０分間インキュベート後、反応を３％リン酸溶液５μＬの添加により止める。反応液１０ｍＬをＰ３０フィルターマットにスポットし、乾燥およびカウント前に５分間にわたり７５ｍＭリン酸で３回およびメタノールで１回洗浄する。
【０７００】
７８Ａ．プロトコールＢ
これらの酵素に対する阻害活性をUpstate Discovery Ltd.でアッセイした。酵素は酵素用緩衝液（下記表で記載されている通り）で１０×最終濃度に調製した。次いで酵素を表で記載されているような様々な基質および３３Ｐ‐ＡＴＰ（〜５００ｃｐｍ／ｐｍｏｌ）と共にアッセイ用緩衝液中でインキュベートした。
反応はＭｇ／ＡＴＰの添加により開始させた。反応を室温で４０分間進行させてから、３％リン酸溶液５μＬで止めた。反応液ミックス１０μＬをフィルターマットＡまたはＰ３０フィルターマットに移し、シンチレーションカウント用に乾燥させる前に７５ｍＭリン酸で３回およびメタノールで１回洗浄した。
【０７０１】
試験化合物を全キナーゼに対して二重に下記濃度で試験し、制御と比較した活性％を計算した。阻害が高い場合は、ＩＣ５０を求めた。
【表２２】
0005507049.tif 000128
用いられた酵素用緩衝液は：
Ａ：２０ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、１ｍＭ  ＥＤＴＡ、０．１％β‐メルカプトエタノール、０．０１％ Brij-３５、５％グリセロール、１ｍｇ／ｍＬ  ＢＳＡであった。
用いられたアッセイ用緩衝液は：
Ａ：８ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ７．０、０．２ｍＭ  ＥＤＴＡ、１０ｍＭ  酢酸Ｍｇであった。
【０７０２】
例７９
抗増殖活性
いくつかの細胞系で細胞成長を阻害しうる化合物の能力を測定することにより、本発明の化合物の抗増殖活性を調べられる。細胞成長の阻害はAlamar Blueアッセイ（Nociari,M.M,Shalev,A.,Benias,P.,Russo,C.Journal of Immunological Methodes,1998,213,157-167）を用いて測定する。前記方法はレザズリンをその蛍光産物レゾルフィンへ還元する生細胞の能力に基づいている。各増殖アッセイでは、細胞を９６ウェルプレートに入れ、１６時間リカバーしてから、更に７２時間阻害剤化合物を加える。インキュベーションの終了時に１０％（ｖ／ｖ）Alamar Blueを加え、更に６時間インキュベートしてから、５３５ｎＭ  ｅｘ／５９０ｎＭ  ｅｍで蛍光産物を調べる。非増殖細胞アッセイの場合には、細胞を９６時間集密状態で維持してから、更に７２時間阻害剤化合物を加える。生細胞の数を前記のようにAlamar Blueアッセイで調べる。加えて、いかなる形態学的変化も記録する。細胞系はＥＣＡＣＣ（European Collection of cell Cultures）から得られる。
【０７０３】
ＨＣＴ‐１１６細胞系を用いたアッセイで、例６０Ｈの塩酸塩は０．０７０μＭのＩＣ５０を有している。
【０７０４】
特に、本発明の化合物をヒト結腸癌腫由来のＨＣＴ‐１１６細胞系（ＥＣＡＣＣ Reference：９１０９１００５）に対して試験した。
【０７０５】
本発明の多くの化合物はこのアッセイで２５μＭ以下のＩＣ５０値を有することがわかり、好ましい化合物は１μＭ以下のＩＣ５０値を有している。一方、本発明の多くの化合物は１０μＭ以下で倍数性または多核化が観察される最少濃度を有することがわかり、好ましい化合物は１００ｎＭ以下のＩＣ５０値を有している。
【０７０６】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の化合物は、このアッセイで１μＭ以下のＩＣ５０値を有することがわかった。加えて、１００ｎＭ以下で倍数性または多核化が観察される最少濃度を有することがわかった。
【０７０７】
例８０
Ａ．一般的コロニー形成アッセイプロトコール
付着腫瘍細胞系に対する化合物の様々な治療処理の効果をクローン原性アッセイで評価した。
【０７０８】
細胞を６または２４ウェル組織培養プレートに７５〜１００細胞／ｍＬ関連培地の濃度で接種し、１６時間リカバーした。
【０７０９】
化合物またはビヒクルコントロール（ＤＭＳＯ）を二重ウェルに加えて、０．１％の最終ＤＭＳＯ濃度とした。化合物添加後、最良個別コロニー計数のために１０〜１４日間コロニーを増殖させた。コロニーを２ｍＬ Carnoys固定液（２５％酢酸，７５％メタノール）で固定し、０．４％ｗ／ｖクリスタルバイオレット２ｍＬで染色した。各ウェルのコロニー数をカウントした。Prism Graphpad Softwareを用いてＳ字形用量応答（可変勾配）ＩＣ５０曲線によりＩＣ５０値を計算した。
【０７１０】
Ｂ．１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のコロニー形成アッセイプロトコール
Ａ２７８０、Ａ５４９、ＨＣＴ１１６、ＨＣＴ１１６Ｎ７、ＨＴ‐２９、ＭＣＦ７、ＭＩＡ‐Ｐａ‐Ｃａ‐２、ＳＷ６２０細胞系に対する１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の様々な治療処理の効果をクローン原性アッセイで評価した。
【０７１１】
細胞を６または２４ウェル組織培養プレートに７５〜１００細胞／ｍＬ関連培地の濃度で接種し、１６時間リカバーした。
【表２３】
0005507049.tif 000129
【０７１２】
１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素またはビヒクルコントロール（ＤＭＳＯ）を二重ウェルに加えて、０．１％の最終ＤＭＳＯ濃度とした。化合物添加後、最良個別コロニー計数のために１０〜１４日間コロニーを増殖させた。コロニーを２ｍＬ Carnoys固定液（２５％酢酸，７５％メタノール）で固定し、０．４％ｗ／ｖクリスタルバイオレット２ｍＬで染色した。各ウェルのコロニー数をカウントした。単一細胞から多細胞のコロニーへの増殖（すなわち、成功した細胞質分裂を含む完全細胞周期）を示す約５０細胞以上の多細胞コロニーのみを数えた。単一多核化（倍数体）細胞は数えなかった。Prism Graphpad Softwareを用いてＳ字形用量応答（可変勾配）ＩＣ５０曲線によりＩＣ５０値を計算した。
【０７１３】
アッセイの結果は“本発明の化合物の利点”と題されたセクションで表Ｃに示されている。
【０７１４】
例８１
チトクロムＰ４５０に対する効力の測定
Invitrogen（Paisley,ＵＫ）から入手しうるPan Vera Vivid Cyp450スクリーニングキットを用いて、ＣＹＰ４５０  １Ａ２、２Ｃ９、２Ｃ１９、３Ａ４および２Ｄ６に対する例２４の化合物の効力を測定した。ＣＹＰはＣＹＰ４５０およびＮＡＤＰＨレダクターゼを含有したバキュロソーム（baculosome）の形で供給されている。基質は蛍光Vivid基質である。
最終反応混合液は次の通りであった：
【０７１５】
１Ａ２
１００ｍＭリン酸カリウム，ｐＨ８、１％メタノール、２μＭ  １Ａ２  Blue vivid基質、１００μＭ  ＮＡＤＰ＋、４ｎＭ  ＣＹＰ４５０  １Ａ２、２．６６ｍＭグルコース‐６‐リン酸、０．３２Ｕ／ｍＬグルコース‐６‐リン酸デヒドロゲナーゼ
【０７１６】
２Ｃ９
５０ｍＭリン酸カリウム，ｐＨ８、１％メタノール、２μＭ  Green vivid基質、１００μＭ  ＮＡＤＰ＋、８ｎＭ  ＣＹＰ４５０  ２Ｃ９、２．６６ｍＭグルコース‐６‐リン酸、０．３２Ｕ／ｍＬグルコース‐６‐リン酸デヒドロゲナーゼ
【０７１７】
２Ｃ１９
５０ｍＭリン酸カリウム，ｐＨ８、１％メタノール、８μＭ  Blue vivid基質、１００μＭ  ＮＡＤＰ＋、４ｎＭ  ＣＹＰ４５０  ２Ｃ１９、２．６６ｍＭグルコース‐６‐リン酸、０．３２Ｕ／ｍＬグルコース‐６‐リン酸デヒドロゲナーゼ
【０７１８】
３Ａ４
１００ｍＭリン酸カリウム，ｐＨ８、１％メタノール、１０μＭ  ３Ａ４  Blue vivid基質、１００μＭ  ＮＡＤＰ＋、２．５ｎＭ  ＣＹＰ４５０  ３Ａ４、２．６６ｍＭグルコース‐６‐リン酸、０．３２Ｕ／ｍＬグルコース‐６‐リン酸デヒドロゲナーゼ
【０７１９】
２Ｄ６
１００ｍＭリン酸カリウム，ｐＨ８、１％メタノール、５μＭ  ２Ｄ６  Blue vivid基質、１００μＭ  ＮＡＤＰ＋、５ｎＭ  ＣＹＰ４５０  ２Ｄ６、２．６６ｍＭグルコース‐６‐リン酸、０．３２Ｕ／ｍＬグルコース‐６‐リン酸デヒドロゲナーゼ
【０７２０】
蛍光をMolecular Devices Spectramax Geminiリーダーにおいて３０秒間隔で２０分間モニターした。励起および発光波長は、１Ａ２、２Ｃ１９および３Ａ４の場合３９０ｎｍおよび４６０ｎｍ、２Ｄ６の場合３９０ｎｍおよび４８５ｎｍ、２Ｃ９の場合４８５ｎｍおよび５３０ｎｍであった。初速度をプログレス曲線から求めた。
【０７２１】
試験化合物をメタノールに溶解し、１０μＭの濃度でＣＹＰ４５０に対して試験した。
【０７２２】
医薬処方剤
例８２
（ｉ）錠剤処方剤
式（Ｉ）の化合物を含有した錠剤組成物は、錠剤を公知の手法で形成するために、５０ｍｇの化合物を希釈剤としてラクトース（ＢＰ）１９７ｍｇおよび滑沢剤としてステアリン酸マグネシウム３ｍｇと混和し、圧縮することにより製造する。
【０７２３】
（ii）カプセル処方剤
カプセル処方剤は、式（Ｉ）の化合物１００ｍｇをラクトース１００ｍｇと混和し、得られた混合物を標準不透明硬ゼラチンカプセルへ充填することにより製造する。
【０７２４】
(iii)注射用処方剤Ｉ
注射投与用の非経口組成物は、１．５重量％の活性化合物の濃度を得られるように、１０％プロピレングリコール含有水に式（Ｉ）の化合物（例えば、塩形）を溶解することにより製造できる。次いで、溶液を濾過滅菌し、アンプルに充填して、密封する。
【０７２５】
（iv）注射用処方剤II
注射用の非経口組成物は、式（Ｉ）の化合物（例えば、塩形）（２ｍｇ／ｍＬ）およびマンニトール（５０ｍｇ／ｍＬ）を水に溶解し、溶液を濾過滅菌し、密封可能な１ｍＬバイアルまたはアンプルへ充填することにより製造する。
【０７２６】
（ｖ）注射用処方剤III
注射または注入によるｉ．ｖ．送達用の処方剤は、水に式（Ｉ）の化合物（例えば、塩形）を２０ｍｇ／ｍＬで溶解することにより製造できる。次いで、バイアルを密封し、オートクレーブ処理により滅菌する。
【０７２７】
（vi）注射用処方剤IV
注射または注入によるｉ．ｖ．送達用の処方剤は、緩衝剤を含有した水（例えば、０．２Ｍ酢酸ｐＨ４．６）に式（Ｉ）の化合物（例えば、塩形）を２０ｍｇ／ｍＬで溶解することにより製造できる。次いで、バイアルを密封し、オートクレーブ処理により滅菌する。
【０７２８】
(vii)凍結乾燥処方剤Ｉ
ここで定義されているような式（Ｉ）の処方化合物またはその塩のアリコートを５０ｍＬバイアルへ入れ、凍結乾燥する。凍結乾燥に際しては、−４５℃でワンステップ冷凍プロトコールを用いて組成物を冷凍する。温度をアニーリングのために−１０℃に高め、次いで低下させて−４５℃で冷凍し、次いで約３４００分間かけて＋２５℃で一次乾燥させ、次いで温度５０℃まで漸増工程で二次乾燥させる。一次および二次乾燥時の圧力は８０ミリトルに設定する。
【０７２９】
(viii)凍結乾燥処方剤II
ここで定義されているような式（Ｉ）の処方化合物またはその塩のアリコートを５０ｍＬバイアルへ入れ、凍結乾燥する。凍結乾燥に際しては、−４５℃でワンステップ冷凍プロトコールを用いて組成物を冷凍する。温度をアニーリングのために−１０℃に高め、次いで低下させて−４５℃で冷凍し、次いで約３４００分間かけて＋２５℃で一次乾燥させ、次いで温度５０℃まで漸増工程で二次乾燥させる。一次および二次乾燥時の圧力は８０ミリトルに設定する。
【０７３０】
（ix）ｉ．ｖ．投与用凍結乾燥処方剤III
水酸化ナトリウムまたは塩酸でｐＨ４．５に調整された０．０２Ｍクエン酸緩衝液に１２．８６ｍｇ／ｍＬの濃度で１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素Ｌ‐乳酸塩を溶解することにより、水性緩衝液を調製する。
濾過により微粒子を除去して緩衝液を容器（例えば、クラス１ガラスバイアル）へ充填し、次いでこれを（例えば、Florotecストッパーにより）部分的に密封する。化合物および処方剤が十分に安定であれば、適切な時間にわたり１２１℃でオートクレーブ処理することにより処方剤を滅菌する。処方剤がオートクレーブ処理に不安定であれば、適切なフィルターを用いてそれを滅菌し、無菌条件下で無菌バイアルへ充填しうる。適切なサイクルを用いて溶液をフリーズドライする：例えば：
冷凍‐２時間かけて−４０℃に冷凍し、−４０℃で３時間保ち、
一次乾燥‐８時間かけて−４０℃から−３０℃に上げ、−３０℃で７時間保ち、
二次乾燥‐４時間かけて＋３０℃に上げ、＋３０℃で８〜１０時間保つ。
フリーズドライサイクルの完了時に、バイアルを窒素で大気圧まで逆充填し、栓で塞ぎ、（例えば、アルミニウムクリンプで）締める。静脈内投与の場合、フリーズドライされた固体物は０．９％塩水または５％デキストロースのような薬学上許容される賦形剤で再調製しうる。溶液はそのまま投与しても、または投与前に（０．９％塩水または５％デキストロースのような薬学上許容される賦形剤を含有した）注入バッグへ注入してもよい。
【０７３１】
(vii)皮下注射用処方剤
５ｍｇ／ｍＬの濃度を得られるように式（Ｉ）の化合物を薬用コーンオイルと混和することにより、皮下投与用の組成物を製造する。組成物を滅菌して、適切な容器へ充填する。
【０７３２】
例８３
抗真菌活性の測定
式（Ｉ）の化合物の抗真菌活性は下記プロトコールを用いて測定できる。
【０７３３】
Candida parpsilosis、Candida tropicalis、Candida albicans‐ＡＴＣＣ３６０８２およびCryptococcus neoformansを含む真菌群に対して化合物を試験する。試験生物を４℃でSabourahd Dextrose Agarスラント上で維持する。０．０５Ｍモルホリンプロパンスルホン酸（ＭＯＰＳ）と共にアミノ酸含有の酵母‐窒素ベースブロス（ＹＮＢ）（Difco,Detroit,Mich.）ｐＨ７．０中において回転ドラムにより２７℃で酵母菌を一晩、増殖させることにより、各生物の単一懸濁液を調製した。次いで懸濁液を遠心し、０．８５％ＮａＣｌで２回洗浄してから、洗浄細胞懸濁液を４秒間超音波処理する（Branson Sonifier,モデル３５０,Danbury,Conn.）。単一分芽胞子を血球計でカウントし、０．８５％ＮａＣｌで所望濃度に調整する。
【０７３４】
試験化合物の活性はブロスミクロ希釈技術の修正法を用いて測定する。試験化合物をＤＭＳＯで１．０ｍｇ／ｍＬ比に希釈し、次いでＭＯＰＳ含有ＹＮＢブロス，ｐＨ７．０で６４μｇ／ｍＬに希釈して（フルコナゾールをコントロールとして用いる）、各化合物の作業溶液を用意する。９６ウェルプレートを用いて、ウェル１および３〜１２をＹＮＢブロスで調製し、化合物溶液の１０倍希釈をウェル２〜１１で行う（濃度範囲は６４〜０．１２５μｇ／ｍＬである）。ウェル１は分光光度アッセイ用の無菌コントロールおよびブランクとして働く。ウェル１２は増殖コントロールとして働く。マイクロタイタープレートをウェル２〜１１の各々において１０μＬで接種する（最終接種サイズは１０４生物／ｍＬである）。接種されたプレートを３５℃で４８時間インキュベートする。渦巻式ミキサー（Vorte-Genie 2 Mixer,Scientific Industries,Inc.,Bolemia,N.Y.）で２分間プレートの攪拌後に４２０ｎｍ（Automatic Microplate Reader,DuPont Instruments,Wilmington,Del.）で吸光度を測定することにより、分光光度法でＩＣ５０値を求める。ＩＣ５０終点は、コントロールウェルと比較して、増殖の約５０％（またはそれ以上）減少を示す最少薬物濃度として規定される。濁度アッセイにおいて、これはウェルの濁度がコントロールの＜５０％である最少薬物濃度（ＩＣ５０）として規定される。Sabourahd Dextrose Agar（ＳＤＡ）プレートで９６ウェルプレートの全ウェルを継代培養し、３５℃で１〜２日間インキュベートし、次いで生存力をチェックすることにより、最少細胞溶解濃度（ＭＣＣ）を求める。
【０７３５】
例８４
インビボ全植物真菌感染症のコントロールの生物学的評価のためのプロトコール
式（Ｉ）の化合物をアセトンに溶解し、次いである範囲の所望濃度を得るためにアセトンで連続希釈する。最終処理容量は、病原体に応じて、９倍容量の０．０５％水性Tween‐２０ＴＭまたは０．０１％Triton Ｘ‐１００ＴＭを加えることにより得る。
【０７３６】
次いで、下記プロトコールを用いて、トマト胴枯れ病（Phytophthora infestans）に対する本発明の化合物の活性を試験するために、本組成物を用いる。苗が１０〜２０ｃｍの高さになるまで、トマト（品種Rutgers）を無土壌ピートベース鉢植え用混合物中で種子から成長させる。次いで試験化合物を１００ｐｐｍの割合で流出させるまで植物にスプレーする。２４時間後にPhytophthora infestansの水性胞子嚢懸濁液でスプレーすることにより試験植物に接種し、露室で一晩保つ。次いで病気が未処理コントロール植物で発生するまで植物を温室に移す。
【０７３７】
Brown Rust of Wheat（Puccinia）、Powdery Mildew of Wheat（Ervsiphe vraminis）、Wheat（品種Monon）、Leaf Blotch of Wheat（Septoria tritici）およびGlume Blotch of Wheat（Leptosphaeria nodorum）と戦う上で本発明の化合物の活性を試験するためにも、類似プロトコールが用いられる。
【０７３８】
相当物
前記の例は本発明を説明する目的で示されており、本発明の範囲に制限を加えると解釈されるべきでない。本発明の基礎をなす原理から逸脱することなく、前記と例中で示された本発明の具体的態様に様々な修正および変更が加えうることは、自明であろう。すべてのこのような修正および変更が本出願に含まれるはずである。
【図面の簡単な説明】
【０７３９】
【図１】図１は、下記例６９で記載されているような１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基二水和物の熱的楕円プロットである。
【図２】図２は、下記例６９で記載されているような１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基二水和物のパッキング図を示す。
【図３】図３は、下記例７０で記載されているような１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基のＸＲＰＤパターンを示す。
【図４】図４は、下記例７１で記載されているような１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩の熱的楕円プロットを示す。
【図５】図５は、下記例７１で記載されているような１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩のパッキング図を示す。
【図６】図６は、下記例７２で記載されているような１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素のＬ‐乳酸塩の出発および安定性試験試料のＸＲＰＤパターンを示す。
【図７】図７は、下記例７２で記載されているような１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基（ＦＢ１）の出発および安定性試験試料のＸＲＰＤパターンを示す。
【図８】図８は、下記例７２で記載されているような１‐シクロプロピル‐３‐〔３‐（５‐モルホリン‐４‐イルメチル‐１Ｈ‐ベンゾイミダゾール‐２‐イル）‐１Ｈ‐ピラゾール‐４‐イル〕尿素の遊離塩基二水和物（ＦＢ２）の出発および安定性試験試料のＸＲＰＤパターンを示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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