(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩもしくはＩＶの化合物または薬学的に許容されるその塩
【化３５】
0005425060.tif 000038
（式中、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキルからなる群から独立に選択され、
Ｒ４は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルおよび−（Ｃ１〜Ｃ４）置換アルキルからなる群から選択され、
Ｒ５は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＣＯＮＨＲ９、−ＣＯＲ１０および−ＳＯ２Ｒ１１からなる群から選択され、
Ｒ９は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキルからなる群から選択され、
Ｒ１０およびＲ１１は、Ｈ、ＮＨＲ１２、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキルからなる群から独立に選択され、
Ｑは、インドリル、置換インドリル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリルおよびアルキルからなる群から独立に選択され、
ＶおよびＺは、Ｏ、Ｓ、Ｈ２からなる群から独立に選択され、但し、ＶとＺのうち少なくとも一方はＨ２であり、
Ｘは、−ＣＨ２−からなる群から選択され、
Ｒ１２は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルおよび−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキルからなる群から選択され、
Ｗは、結合であり、
ｍは０であり、
アリールは、フェニル、ナフチル、ベンゾシクロブタニル、インダニル、テトラヒドロナフチレニル、１，２，３，４−テトラヒドロフェナントレニル、テトラヒドロアントラセニル、１，４−ジヒドロ−１，４−メタノナフタレニル、またはベンゾジオキソリルであり、
ヘテロアリールは、ピリジル、ピリミジニル、トリアゾリル、キノリル、キナゾリニル、チアゾリル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、フラニル、イミダゾリル、またはインドリルであり、そして、
ヘテロシクリルは、ピペリジニル、ピペラジニル、ピラニル、ピロリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、オキソピペリジニル、オキソピロリジニル、オキソアゼピニル、アゼピニル、イソオキソゾリル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、ジオキソリル、ジオキシニル、オキサチオリル、ジチオリル、スルホラニル、ジオキサニル、ジオキソラニル、テトラヒドロフロジヒドロフラニル、テトラヒドロピラノジヒドロ−フラニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロフロフラニル、テトラヒドロピラノフラン、キヌクリジニル（１−アザビシクロ［２．２．２］オクタニル）、またはトロパニル（８−メチル−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタニル）である）。
【請求項２】
Ｑが、インドリル基、あるいは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）フルオロ−置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）フルオロ−置換シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）フルオロ−置換アルキル、−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキルおよび−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）フルオロ−置換シクロアルキル、−アリール、−Ｏ−アリール、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−アリール、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−複素環ならびに−Ｓ（＝Ｏ）２−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から独立に選択される１つまたは複数の置換基で置換されたインドリル基である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
ＶがＯである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
ＺがＯである、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
ＶがＳである、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
ＶがＨ２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
ＺがＨ２である、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ５はＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オン、（３Ｒ，４Ｒ）−４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オン、（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オン、（±）−トランス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オン、（３Ｒ，４Ｒ）−４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−５−チオキソ−ピロリジン−２−オン、（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−５−チオキソ−ピロリジン−２−オン、１−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン、（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−カルボン酸エチルアミド、１−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−（プロパン−２−スルホニル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン、シクロブチル−［（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−イル］−メタノン、１−［（３Ｒ，４Ｒ）−１−ベンゼンスルホニル−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン、および１−［（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−イル］−３，３−ジメチル−ブタン−１−オンからなる群から独立に選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
式（±）−トランス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オン、または（±）−トランス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（３−メトキシ−フェニル）−ピロリジン−２−オンに従う化合物または薬学的に許容されるその塩。
【請求項１１】
請求項９または１０に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩を、１つもしくは複数の薬学的に許容される担体または賦形剤と合わせて含む、医薬組成物。
【請求項１２】
第２の化学療法剤をさらに含む、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記第２の化学療法剤が、タモキシフェン、ラロキシフェン、アナストロゾール、エキセメスタン、レトロゾール、トラスツズマブ、イマチニブ、パクリタキセル、シクロホスファミド、ロバスタチン、ミノシン、ゲムシタビン、ａｒａＣ、５−フルオロウラシル、メトトレキサート、ドセタキセル、ゴセレリン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ノコダゾール、テニポシド、エトポシド、エポチロン、ナベルビン、カンプトテシン、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、ミトキサントロン、アムサクリン、ドキソルビシン、エピルビシンおよびイダルビシンからなる群から選択される、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
細胞増殖性障害を治療するための組成物であって、治療有効量の請求項１３において規定される化合物、あるいは薬学的に許容されるその塩を、薬学的に許容される担体と組み合わせて含む、組成物。
【請求項１５】
前記細胞増殖性障害が前癌状態である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記細胞増殖性障害が癌である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１７】
前記癌が、肺癌、結腸癌、乳癌、膵臓癌、前立腺癌、慢性骨髄性白血病、黒色腫または卵巣癌である、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
前記細胞増殖性障害が乳房の細胞増殖性障害である、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１９】
前記乳房の細胞増殖性障害が乳房の前癌状態である、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記乳房の前癌状態が、乳房の非定型過形成、腺管上皮内癌および上皮内小葉癌からなる群から選択される、請求項１９に記載の組成物。
【請求項２１】
前記乳房の細胞増殖性障害が乳癌である、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２２】
前記乳癌がエストロゲン受容体陰性乳癌である、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
第２の化学療法剤と組み合わせて投与することを特徴とする、請求項１４に記載の組成物。
【請求項２４】
前記第２の化学療法剤が、タモキシフェン、ラロキシフェン、アナストロゾール、エキセメスタン、レトロゾール、トラスツズマブ、イマチニブ、パクリタキセル、シクロホスファミド、ロバスタチン、ミノシン、ゲムシタビン、ａｒａＣ、５−フルオロウラシル、メトトレキサート、ドセタキセル、ゴセレリン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ノコダゾール、テニポシド、エトポシド、エポチロン、ナベルビン、カンプトテシン、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、ミトキサントロン、アムサクリン、ドキソルビシン、エピルビシンまたはイダルビシンからなる群から選択される、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】
前記癌治療が腫瘍サイズの縮小を含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項２６】
前記癌が転移性癌である、請求項１６に記載の組成物。
【請求項２７】
前記癌治療が転移性癌細胞浸潤の阻害を含む、請求項２６に記載の組成物。
【請求項２８】
増殖性障害を有する細胞がｃ−ＭｅｔをコードするＤＮＡを含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項２９】
前記細胞が高められたｃ−Ｍｅｔ活性を有する、請求項２８に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願への相互参照）
本願は、２００７年６月２２日に出願された米国仮特許出願第６０／９４５，８３４号の利益を主張し、この米国仮特許出願の全体の内容は、本明細書中に参考として援用される。
【背景技術】
【０００２】
（発明の背景）
癌は、米国における第２の主要死亡原因であり、これを上回るのは心臓疾患だけである（Ｃａｎｃｅｒ  Ｆａｃｔｓ  ａｎｄ  Ｆｉｇｕｒｅｓ  ２００４年、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｏｃｉｅｔｙ、Ｉｎｃ．）。癌の診断および治療における最近の進歩にもかかわらず、癌が早期に発見された場合、外科処置や放射線治療が治療に有効であるが、転移性疾患のための現在の薬物治療は概して一時的に抑えるに過ぎず、めったに長期的な治癒をもたらすものではない。新規な化学療法が市場に参入してきているが、耐性腫瘍の治療における、第１治療としての、そして、第２および第３治療としての、単剤治療かまたは既存の薬剤との併用治療に有効な新規な薬物が依然として求められている。
【０００３】
癌細胞は本質的に不均一な（ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｏｕｓ）ものである。例えば、単一の組織または細胞タイプ内で、多重変異性の「機序」は癌の発生をもたらす可能性がある。したがって、異なる個体に由来する同じ組織および同じタイプの腫瘍からとった癌細胞間で、不均一性がしばしば存在する。いくつかの癌に付随してしばしば観察される変異性の「機序」は、１つの組織タイプと別の組織タイプでは異なっている可能性がある（例えば、しばしば観察される結腸癌をもたらす変異性の「機序」は、しばしば観察される白血病をもたらす「機序」と異なっている可能性がある）。したがって、特定の癌が、特定の化学療法剤に応答するかどうかを予測することは困難なことが多い（Ｃａｎｃｅｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、第５版、Ｂａｓｔら編、Ｂ．Ｃ．Ｄｅｃｋｅｒ  Ｉｎｃ．、Ｈａｍｉｌｔｏｎ、Ｏｎｔａｒｉｏ）。
【０００４】
乳癌は、女性において最も多く診断される皮膚以外の癌であり、女性における癌による死亡の中で肺癌に次いで第２位にランクされる（Ｃａｎｃｅｒ  Ｆａｃｔｓ  ａｎｄ  Ｆｉｇｕｒｅｓ  ２００４年、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｏｃｉｅｔｙ、Ｉｎｃ．）。乳癌のための最近の治療選択肢には、外科処置、放射線治療、タモキシフェン、アロマターゼ阻害剤、ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）（トラスツズマブ）、ＴＡＸＯＬ（登録商標）（パクリタキセル）、シクロホスファミド、メトトレキサート、ドキソルビシン（アドリアマイシン）および５−フルオロウラシルなどの薬剤を用いる化学療法／ホルモン療法が含まれる。癌の診断法および治療法における進歩にも関わらず、乳癌罹患率は１９８０年以来増加し続けている。２００４年では、女性では約２１５，０００人の乳癌の新たな症例が予測され、男性では約１，４５０人の乳癌の新たな症例が予測されている。したがって、乳癌を治療するための新規な化合物が求められている。
【０００５】
正常細胞の増殖と分化を制御する細胞シグナル伝達経路の構成要素（Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ）は、それが調節不全となった場合、細胞増殖性障害や癌の発生をもたらす可能性がある。細胞シグナル伝達タンパク質における変異は、細胞周期において、そうしたタンパク質が、不適切なレベルでかつ不適切な時に発現するかまたはそれを活性化させる可能性があり、制御されていない細胞増殖、または細胞−細胞結合特性の変化をもたらす可能性がある。例えば、変異、遺伝子再構成、遺伝子増幅、および受容体とリガンドの両方の過剰発現による受容体チロシンキナーゼの異常調節は、ヒト癌の発生と進行に関係している。
【０００６】
ｃ−Ｍｅｔ受容体チロシンキナーゼは、細胞分散因子としても知られている、肝細胞成長因子（ＨＧＦ）に対する唯一の公知の高親和性受容体である。ＨＧＦとｃ−Ｍｅｔ細胞外リガンド結合ドメインの結合は、ｃ−Ｍｅｔの細胞内部における受容体の多量体化および複数チロシン残基のリン酸化反応をもたらす。ｃ−Ｍｅｔの活性化は、Ｇａｂ−１、Ｇｒｂ−２、Ｓｈｃおよびｃ−Ｃｂｌなどのアダプタータンパク質の結合とリン酸化反応をもたらし、続いて、ＰＩ３Ｋ、ＰＬＣ−γ、ＳＴＡＴ、ＥＲＫ１および２ならびにＦＡＫなどのシグナル伝達物質の活性化をもたらす。ｃ−ＭｅｔおよびＨＧＦは多くの組織において発現し、その発現は通常、主として上皮および間葉由来の細胞にそれぞれ限定される。ｃ−ＭｅｔおよびＨＧＦはヒト癌において調節不全となり、細胞増殖の異常調節、腫瘍細胞の転移、ならびに疾患の増悪および転移の際の腫瘍浸潤に影響を及ぼす可能性がある（例えば、非特許文献１および非特許文献２を参照されたい）。ｃ−ＭｅｔおよびＨＧＦは、多くの癌において周囲組織に対して高度に発現され、その発現は患者の不良な予後と相関する（例えば、非特許文献３；非特許文献４；非特許文献５および非特許文献６を参照されたい）。理論に拘泥するわけではないが、ｃ−ＭｅｔおよびＨＧＦは、ＤＮＡ損傷剤によって誘発される細胞死に対して腫瘍を保護し、したがって、腫瘍の化学療法耐性および放射線耐性に影響を及ぼすことができる。いかなる理論にもとらわれるわけではないが、ｃ−Ｍｅｔの阻害剤は、乳癌を含む増殖性障害の治療における治療薬として有用である（例えば、非特許文献７を参照されたい）。
【０００７】
特許文献１は、ピロール−２，５−ジオン化合物およびピロリジン−２，５−ジオン化合物、ならびにこれらの化合物の調製方法を開示している。これらの化合物は、ｃ−Ｍｅｔの活性を選択的に阻害することが可能であり、癌などの細胞増殖性障害の治療に使用することができる。癌の治療のためのさらなるｃ−Ｍｅｔ阻害剤の開発が求められている。
【０００８】
本明細書で引用する文献を、特許請求する本発明の先行技術であると認めるものではない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】国際公開第２００６／０８６４８４号パンフレット
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ、第１０９号：８６３〜８６７頁（２００２年）
【非特許文献２】Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ、５〜６頁、２００４年７月
【非特許文献３】Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第８６号、６６５〜６７７頁（２００２年）
【非特許文献４】Ｉｎｔ．  Ｊ．  Ｃａｎｃｅｒ  （Ｐｒｅｄ．  Ｏｎｃｏｌ．）、第７４号、３０１〜３０９頁（１９９７年）
【非特許文献５】Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第９号、１４８０〜１４８８頁（２００３年）
【非特許文献６】Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第６２号、第５８９〜５９６頁（２００２年）
【非特許文献７】Ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  Ｒｅｖｉｅｗｓ、第２２号、第３０９〜３２５頁（２００３年）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１１】
（発明の要旨）
本発明は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩもしくはＩＶの化合物または薬学的に許容されるその塩を提供する
【００１２】
【化１】
0005425060.tif 000002
（式中、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＲ７Ｒ８、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキルおよび−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルからなる群から独立に選択され、
Ｒ４は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルおよび−（Ｃ１〜Ｃ４）置換アルキルからなる群から選択され、
Ｒ５は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＣＨ２Ｒ６、−ＣＯＮＨＲ９、−ＣＯＲ１０および−ＳＯ２Ｒ１１からなる群から選択され、
Ｒ６は、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＨ）（−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）２、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＨ）（−Ｏ−（ＣＨ２）−フェニル）、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−Ｏ−（ＣＨ２）−フェニル）２、カルボン酸基、アミノカルボン酸基およびペプチドからなる群から独立に選択され、
Ｒ７およびＲ８は、Ｈおよび−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から独立に選択され、
Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は、Ｈ、ＮＨＲ１２、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルからなる群から独立に選択され、
Ｑは、インドリル、置換インドリル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリルおよびアルキルからなる群から独立に選択され、
ＶおよびＺは、Ｏ、Ｓ、Ｈ２からなる群から独立に選択され、ＶとＺがどちらもＯである場合、Ｒ４は、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルまたは−（Ｃ１〜Ｃ４）置換アルキルであり、ＺとＶがどちらもＨ２でない場合、Ｒ５は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルまたは−ＣＨ２Ｒ６であり、
Ｘは、−ＣＨ２−、−ＮＲ１２、Ｓ、Ｏ、および結合からなる群から選択され、
Ｒ１２は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルおよび−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキルからなる群から選択され、
Ｗは、−ＣＨ２−、ＣＯ、および結合からなる群から選択され、
ｍは０、１または２である）。
【００１３】
一実施形態では、Ｑは、インドリル基、あるいは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）フルオロ−置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）フルオロ−置換シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）フルオロ−置換アルキル、−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキルおよび−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）フルオロ−置換シクロアルキル、−アリール、−Ｏ−アリール、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−アリール、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−複素環ならびに−Ｓ（＝Ｏ）２−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から独立に選択される１つまたは複数の置換基で置換されたインドリル基である。
【００１４】
一実施形態では、ＶはＯであり、ＺはＯ、ＳまたはＨ２であり、ＺがＯである場合、Ｒ４は−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルまたは−（Ｃ１〜Ｃ４）置換アルキルである。他の実施形態では、ＶはＳであり、ＺはＯまたはＨ２である。他の実施形態では、ＶはＨ２であり、ＺはＯ、ＳまたはＨ２である。
【００１５】
一実施形態では、Ｗは−ＣＨ２−である。他の実施形態では、ｍは１である。さらに他の実施形態では、Ｘは結合である。
【００１６】
一実施形態では、Ｒ５はＨである。
【００１７】
本発明は、請求項１に記載の式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩもしくはＩＶの化合物、または薬学的に許容されるその塩を、１つもしくは複数の薬学的に許容される担体または賦形剤と合わせて含む医薬組成物も提供する。この医薬組成物は第２の化学療法剤をさらに含むことができる。
【００１８】
本発明はさらに、細胞増殖性障害の治療方法を提供する。その方法は、それを必要とする対象に、治療有効量の請求項１に記載の式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶの化合物、あるいは薬学的に許容されるその塩、またはそのプロドラッグもしくは代謝産物を、薬学的に許容される担体と合わせて投与することを含む方法であって、前記細胞増殖性障害が治療される方法を含む。
【００１９】
一実施形態では、上記細胞増殖性障害は前癌状態または癌である。他の実施形態では、その癌は、肺癌、結腸癌、乳癌、膵臓癌、前立腺癌、慢性骨髄性白血病、黒色腫および卵巣癌からなる群から独立に選択される。
【００２０】
一実施形態では、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶの化合物、あるいは薬学的に許容されるその塩、またはそのプロドラッグもしくは代謝産物を、第２の化学療法剤と合わせて投与する。
【００２１】
一実施形態では、癌の治療は、腫瘍のサイズの縮小もしくは転移性癌細胞浸潤の阻害、またはその両方を含む。
【００２２】
一実施形態では、増殖障害（ｏｒｄｅｒ）を有する細胞はｃ−ＭｅｔをコードするＤＮＡを含む。他の実施形態では、細胞は構成的に高められたｃ−Ｍｅｔ活性を有する。
他の実施形態は以下の特許請求の範囲内にあった。いくつかの実施形態を示し説明してきたが、本発明の趣旨および範囲を逸脱することなく、様々な修正を加えることができる。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩもしくはＩＶの化合物または薬学的に許容されるその塩
【化３５】
0005425060.tif 000003
（式中、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＲ７Ｒ８、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキルおよび−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルからなる群から独立に選択され、
Ｒ４は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルおよび−（Ｃ１〜Ｃ４）置換アルキルからなる群から選択され、
Ｒ５は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＣＨ２Ｒ６、−ＣＯＮＨＲ９、−ＣＯＲ１０および−ＳＯ２Ｒ１１からなる群から選択され、
Ｒ６は、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＨ）（−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）２、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＨ）（−Ｏ−（ＣＨ２）−フェニル）、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−Ｏ−（ＣＨ２）−フェニル）２、カルボン酸基、アミノカルボン酸基およびペプチドからなる群から選択され、
Ｒ７およびＲ８は、Ｈおよび−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から独立に選択され、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は、Ｈ、ＮＨＲ１２、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルからなる群から独立に選択され、
Ｑは、インドリル、置換インドリル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリルおよびアルキルからなる群から独立に選択され、ＶおよびＺは、Ｏ、Ｓ、Ｈ２からなる群から独立に選択され、ＶとＺがどちらもＯである場合、Ｒ４は、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルまたは−（Ｃ１〜Ｃ４）置換アルキルであり、ＺとＶがどちらもＨ２でない場合、Ｒ５は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルまたは−ＣＨ２Ｒ６であり、
Ｘは、−ＣＨ２−、−ＮＲ１２、Ｓ、Ｏ、および結合からなる群から選択され、
Ｒ１２は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルおよび−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキルからなる群から選択され、
Ｗは、−ＣＨ２−、ＣＯ、および結合からなる群から選択され、
ｍは０、１または２である）。
（項目２）
Ｑが、インドリル基、あるいは、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）フルオロ−置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）フルオロ−置換シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）フルオロ−置換アルキル、−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキルおよび−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）フルオロ−置換シクロアルキル、−アリール、−Ｏ−アリール、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−アリール、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−複素環ならびに−Ｓ（＝Ｏ）２−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から独立に選択される１つまたは複数の置換基で置換されたインドリル基である、項目１に記載の化合物。
（項目３）
ＶがＯである、項目１に記載の化合物。
（項目４）
ＺがＯであり、そしてＲ４が−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルまたは−（Ｃ１〜Ｃ４）置換アルキルである、項目３に記載の化合物。
（項目５）
ＺがＳまたはＨ２である、項目３に記載の化合物。
（項目６）
ＶがＳである、項目１に記載の化合物。
（項目７）
ＺがＯまたはＨ２である、項目６に記載の化合物。
（項目８）
ＶがＨ２である、項目１に記載の化合物。
（項目９）
ＺがＯ、ＳまたはＨ２である、項目８に記載の化合物。
（項目１０）
Ｗが−ＣＨ２−である、項目１に記載の化合物。
（項目１１）
ｍが１である、項目１０に記載の化合物。
（項目１２）
Ｘが結合である、項目１１に記載の化合物。
（項目１３）
Ｒ５はＨである、項目１に記載の化合物。
（項目１４）
４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オン、（３Ｒ，４Ｒ）−４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オン、（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オン、（±）−トランス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オン、（３Ｒ，４Ｒ）−４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−５−チオキソ−ピロリジン−２−オン、（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−５−チオキソ−ピロリジン−２−オン、１−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン、（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−カルボン酸エチルアミド、１−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−（プロパン−２−スルホニル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン、およびシクロブチル−［（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−イル］−メタノン、（±）−トランス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オン、（±）−トランス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（３−メトキシ−フェニル）−ピロリジン−２−オン、１−［（３Ｒ，４Ｒ）−１−ベンゼンスルホニル−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン、および１−［（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−イル］−３，３−ジメチル−ブタン−１−オンからなる群から独立に選択される、項目１に記載の化合物。
（項目１５）
項目１に記載の式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩもしくはＩＶの化合物、または薬学的に許容されるその塩を、１つもしくは複数の薬学的に許容される担体または賦形剤と合わせて含む、医薬組成物。
（項目１６）
第２の化学療法剤をさらに含む、項目１５に記載の医薬組成物。
（項目１７）
前記第２の化学療法剤が、タモキシフェン、ラロキシフェン、アナストロゾール、エキセメスタン、レトロゾール、トラスツズマブ、イマチニブ、パクリタキセル、シクロホスファミド、ロバスタチン、ミノシン、ゲムシタビン、ａｒａＣ、５−フルオロウラシル、メトトレキサート、ドセタキセル、ゴセレリン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ノコダゾール、テニポシド、エトポシド、ゲムシタビン、エポチロン、ナベルビン、カンプトテシン、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、ミトキサントロン、アムサクリン、ドキソルビシン、エピルビシンおよびイダルビシンからなる群から選択される、項目１６に記載の医薬組成物。
（項目１８）
細胞増殖性障害を治療する方法であって、該治療を必要とする対象に、治療有効量の項目１に記載の式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶの化合物、あるいは薬学的に許容されるその塩、またはそのプロドラッグもしくは代謝産物を、薬学的に許容される担体と組み合わせて投与することを含み、該細胞増殖性障害が治療される方法。
（項目１９）
前記細胞増殖性障害が前癌状態である、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
前記細胞増殖性障害が癌である、項目１８に記載の方法。
（項目２１）
前記癌が、肺癌、結腸癌、乳癌、膵臓癌、前立腺癌、慢性骨髄性白血病、黒色腫または卵巣癌である、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
前記細胞増殖性障害が乳房の細胞増殖性障害である、項目１８に記載の方法。
（項目２３）
前記乳房の細胞増殖性障害が乳房の前癌状態である、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
前記乳房の前癌状態が、乳房の非定型過形成、腺管上皮内癌および上皮内小葉癌からなる群から選択される、項目２３に記載の方法。
（項目２５）
前記乳房の細胞増殖性障害が乳癌である、項目２２に記載の方法。
（項目２６）
前記乳癌がエストロゲン受容体陰性乳癌である、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
前記式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶの化合物、あるいは薬学的に許容されるその塩、またはそのプロドラッグもしくは代謝産物を、第２の化学療法剤と組み合わせて投与する、項目１８に記載の方法。
（項目２８）
前記第２の化学療法剤が、タモキシフェン、ラロキシフェン、アナストロゾール、エキセメスタン、レトロゾール、トラスツズマブ、イマチニブ、パクリタキセル、シクロホスファミド、ロバスタチン、ミノシン、ゲムシタビン、ａｒａＣ、５−フルオロウラシル、メトトレキサート、ドセタキセル、ゴセレリン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ノコダゾール、テニポシド、エトポシド、ゲムシタビン、エポチロン、ナベルビン、カンプトテシン、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、ミトキサントロン、アムサクリン、ドキソルビシン、エピルビシンまたはイダルビシンからなる群から選択される、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
前記癌治療が腫瘍サイズの縮小を含む、項目１８に記載の方法。
（項目３０）
前記癌が転移性癌である、項目２０に記載の方法。
（項目３１）
前記癌治療が転移性癌細胞浸潤の阻害を含む、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
増殖性障害を有する細胞がｃ−ＭｅｔをコードするＤＮＡを含む、項目１８に記載の方法。
（項目３３）
前記細胞が構成的に高められたｃ−Ｍｅｔ活性を有する、項目３２に記載の方法。
【００２３】
本発明の他の特徴および利点は、様々な実施例を含む本明細書で提供するさらなる説明から明らかである。提供される実施例は、本発明を実施するのに有用な様々な成分および手法を例示するものである。これらの実施例は、請求の範囲に記載されている発明を限定するものではない。本開示をもとにして、当業者は、本発明を実施するのに有用な他の成分および手法を特定しそれを用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】図１Ａは、ＺｖＡＤ−ＦＭＫカスパーゼ阻害を伴うか伴わないで、ｍｅｔ  ｓｉＲＮＡによるｃ−Ｍｅｔ経路の阻害がＨＴ２９細胞に及ぼす影響を示す図である。図１Ｂは、ｍｅｔ  ｓｉＲＮＡが、ＨＴ２９細胞におけるＧＡＰＤＨおよびｃ−Ｍｅｔのノックダウンに及ぼす影響を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
（発明の詳細な説明）
１．ピロリジン−２−オン、ピロリジン−２，５−ジオン、ピロリジンおよびチオスクシンイミド
本発明は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶのピロリジン−２−オン、ピロリジン−２，５−ジオン、ピロリジンおよびチオスクシンイミド化合物、ならびに式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶの化合物の調製方法を提供する。
【００２６】
【化２】
0005425060.tif 000004
（式中、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＮＲ７Ｒ８、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキルおよび−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルからなる群から独立に選択され、
Ｒ４は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルおよび−（Ｃ１〜Ｃ４）置換アルキルからなる群から選択され、
Ｒ５は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＣＨ２Ｒ６、−ＣＯＮＨＲ９、−ＣＯＲ１０および−ＳＯ２Ｒ１１からなる群から選択され、
Ｒ６は、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＨ）（−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル）２、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−ＯＨ）（−Ｏ−（ＣＨ２）−フェニル）、−Ｏ−Ｐ（＝Ｏ）（−Ｏ−（ＣＨ２）−フェニル）２、カルボン酸基、アミノカルボン酸基およびペプチドからなる群から独立に選択され、
Ｒ７およびＲ８は、Ｈおよび−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から独立に選択され、
Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１１は、Ｈ、ＮＨＲ１２、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキル、アリール、ヘテロアリールおよびヘテロシクリルからなる群から独立に選択され、
Ｑは、インドリル、置換インドリル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリルおよびアルキルからなる群から独立に選択され、
ＶおよびＺは、Ｏ、Ｓ、Ｈ２からなる群から独立に選択され、ＶとＺがどちらもＯである場合、Ｒ４は、−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルまたは−（Ｃ１〜Ｃ４）置換アルキルであり、ＺとＶがどちらもＨ２でない場合、Ｒ５は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルまたは−ＣＨ２Ｒ６であり、
Ｘは、−ＣＨ２−、−ＮＲ１２、Ｓ、Ｏ、および結合からなる群から選択され、
Ｒ１２は、Ｈ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルおよび−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキルからなる群から選択され、
Ｗは、−ＣＨ２−、ＣＯ、および結合からなる群から選択され、
ｍは０、１または２である）。
【００２７】
一実施形態では、ＶはＯであり、ＺはＯ、ＳまたはＨ２であり、ＺがＯである場合Ｒ４は−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルまたは−（Ｃ１〜Ｃ４）置換アルキルである。
【００２８】
一実施形態では、ＶはＳであり、ＺはＯまたはＨ２である。
【００２９】
一実施形態では、ＶはＨ２であり、ＺはＯ、ＳまたはＨ２である。
【００３０】
一実施形態では、Ｗは−ＣＨ２−である。他の実施形態では、ｍは１である。さらに他の実施形態では、Ｘは結合である。
【００３１】
一実施形態では、Ｒ５はＨである。
【００３２】
一実施形態では、本発明の化合物は、４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オン、（３Ｒ，４Ｒ）−４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オン、（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オン、（±）−トランス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オン、（３Ｒ，４Ｒ）−４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−５−チオキソ−ピロリジン−２−オン、（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−５−チオキソ−ピロリジン−２−オン、１−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン、（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−カルボン酸エチルアミド、１−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−（プロパン−２−スルホニル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン、およびシクロブチル−［（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−イル］−メタノン、（±）−トランス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オン、（±）−トランス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（３−メトキシ−フェニル）−ピロリジン−２−オン、１−［（３Ｒ，４Ｒ）−１−ベンゼンスルホニル−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン、および１−［（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−イル］−３，３−ジメチル−ブタン−１−オンからなる群から独立に選択される。
【００３３】
「アルキル」という用語は、不飽和を有さない、炭素および水素を含む基を指す。アルキル基は直鎖状であっても分岐状であってもよい。アルキル基の例には、これらに限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ヘキシル、ｔ−ブチル、ｓｅｃ−ブチルなどが含まれる。アルキル基は範囲を用いて表示することができる。すなわち、例えば（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル基は、直鎖状または分岐状のアルキル骨格中に１〜６個の炭素原子を有するアルキル基である。置換および非置換アルキル基は独立に、（Ｃ１〜Ｃ５）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、（Ｃ３〜Ｃ１０）アルキルまたは（Ｃ５〜Ｃ１０）アルキルであってよい。別段の記述のない限り、「アルキル」という用語は、「シクロアルキル」を含まない。
【００３４】
「シクロアルキル」基は、「環部分」に、表示された数の炭素原子を有する環状アルキル基を指す。その「環部分」は、縮合、スピロまたは架橋環構造のような１つもしくは複数の環構造からなってよい。例えば、Ｃ３〜Ｃ６シクロアルキル基（例えば、（Ｃ３〜Ｃ６）シクロアルキル）は環中に３〜６個の炭素原子を有する環構造である。範囲が示されていない場合、シクロアルキルは、環部分に３〜９個の炭素原子（（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル）を有する。シクロアルキル基の例には、これらに限定されないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびアダマンチルが含まれる。好ましいシクロアルキル基は、環構造中に３、４、５、６、７、８、９個または３〜９個の炭素原子を有する。
【００３５】
置換アルキルおよび置換シクロアルキルという用語は、フッ素、アリール、ヘテロアリール、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルおよび−ＮＲ７Ｒ８（Ｒ７およびＲ８は、水素および−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から独立に選択される）からなる群から独立に選択される１つまたは複数の置換基で置換された、上記定義のアルキルおよびシクロアルキル基を指す。
【００３６】
「アリール」という用語は、１、２または３個の芳香族環を有する芳香族炭素環基を指す。アリール基の例には、これらに限定されないが、フェニル、ナフチルなどが含まれる。アリール基は、４〜９員を有する１つもしくは複数の追加の非芳香族炭素環または複素環と縮合した１、２または３個の芳香族環構造を含む。縮合アリール基の例には、ベンゾシクロブタニル、インダニル、テトラヒドロナフチレニル、１，２，３，４−テトラヒドロフェナントレニル、テトラヒドロアントラセニル、１，４−ジヒドロ−１，４−メタノナフタレニル、ベンゾジオキソリルが含まれる。
【００３７】
「ヘテロアリール」という用語は、芳香族環の中に１〜４個のヘテロ原子（窒素、イオウまたは酸素など）を含む１、２または３個の芳香族環を有するヘテロ芳香族（ヘテロアリール）基を指す。ヘテロアリール基は、４〜９員を有する１つもしくは複数の追加の非芳香族環と縮合した１〜４個のヘテロ原子を含む１、２または３個の芳香族環構造を含む。芳香族環の中に単一のタイプのヘテロ原子を含むヘテロアリール基は、そこに含まれるヘテロ原子のタイプによって表され、したがって、窒素含有ヘテロアリール、酸素含有ヘテロアリールおよびイオウ含有ヘテロアリールは、１つもしくは複数の窒素、酸素またはイオウ原子をそれぞれ含むヘテロ芳香族基を表す。ヘテロアリール基の例には、これらに限定されないが、ピリジル、ピリミジニル、トリアゾリル、キノリル、キナゾリニル、チアゾリル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、フラニル、イミダゾリル、インドリルなどが含まれる。
【００３８】
「ヘテロシクリル」または「複素環」という用語は、縮合、スピロまたは架橋により追加の環を形成していてよい、飽和かまたは不飽和の安定な非芳香族環構造を指す。各複素環は、１個または複数の炭素原子と、窒素、酸素およびイオウからなる群から選択される１〜４個のヘテロ原子からなる。「ヘテロシクリル」または「複素環」には、安定な非芳香族３〜７員の単環式複素環環構造および８〜１１員の二環式複素環環構造が含まれる。ヘテロシクリル基は、安定な構造の形成をもたらす、任意の環内炭素または窒素原子で結合していてよい。好ましい複素環には、３〜７員の単環式複素環（より好ましくは５〜７員の単環式複素環）および８〜１０員の二環式複素環が含まれる。そうした基の例には、ピペリジニル、ピペラジニル、ピラニル、ピロリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、オキソピペリジニル、オキソピロリジニル、オキソアゼピニル、アゼピニル、イソオキソゾリル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロフラニル、ジオキソリル、ジオキシニル、オキサチオリル、ジチオリル、スルホラニル、ジオキサニル、ジオキソラニル、テトラヒドロフロジヒドロフラニル、テトラヒドロピラノジヒドロ−フラニル、ジヒドロピラニル、テトラヒドロフロフラニル、テトラヒドロピラノフラン、キヌクリジニル（１−アザビシクロ［２．２．２］オクタニル）およびトロパニル（８−メチル−８−アザビシクロ［３．２．１］オクタニル）が含まれる。
【００３９】
「インドリル」または「置換インドリル」」という用語は、インドリル基、または、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）フルオロ−置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）フルオロ−置換シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）フルオロ−置換アルキル、−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）フルオロ−置換シクロアルキル、−アリール、−Ｏ−アリール、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−アリール、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−複素環および−Ｓ（＝Ｏ）２−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から独立に選択される１つまたは複数の置換基で置換されたインドリル基を指す。
【００４０】
Ｒ６置換基について、「カルボン酸基」という用語は、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アリール、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ヘテロアリール、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−複素環、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−アリール、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ヘテロアリールまたは−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ１−Ｃ６）アルキル−複素環の形態の基を指す。「カルボン酸基」には、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＲ５’Ｒ６’、−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ６）置換アルキル、−Ｓ−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−Ｏ−（Ｃ３〜Ｃ９）置換シクロアルキル、−アリール、−Ｏ−アリール、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、−Ｏ−（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル−複素環、−（Ｓ（＝Ｏ）２）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−ＮＨ−Ｃ（＝ＮＨ）−ＮＨ２（すなわち、グアニド）、−ＣＯＯＨおよび−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ５’Ｒ６’（Ｒ５’およびＲ６’は、水素および−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から独立に選択される）からなる群から独立に選択される１つまたは複数の置換基で置換された−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ３〜Ｃ９）シクロアルキル、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−アリール、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ヘテロアリール、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−複素環、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−アリール、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−ヘテロアリールまたは−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル−複素環の形態の基が含まれる。さらに、Ｒ６置換基について、「アミノカルボン酸基」という用語は、１つまたは複数の独立に選択されるアミノ基の形態の−ＮＲ５’Ｒ６’（Ｒ５’およびＲ６’は水素および（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルからなる群から独立に選択される）を担持する上記置換基の１つまたは複数で置換されたカルボン酸基を含むカルボン酸基を指す。
【００４１】
本発明の一実施形態では、Ｒ６は、これらに限定されないが、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリンまたはその立体異性体もしくはラセミ混合物を含むαアミノ酸またはαイミノ酸である。本発明の他の実施形態では、Ｒ６は、Ｌ−アラニン、Ｌ−アルギニン、Ｌ−アスパラギン、Ｌ−アスパラギン酸、Ｌ−システイン、Ｌ−グルタミン、Ｌ−グルタミン酸、Ｌ−グリシン、Ｌ−ヒスチジン、Ｌ−イソロイシン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−リシン、Ｌ−メチオニン、Ｌ−フェニルアラニン、Ｌ−プロリン、Ｌ−セリン、Ｌ−トレオニン、Ｌ−トリプトファン、Ｌ−チロシン、Ｌ−バリンからなる群から選択されるαアミノ酸またはαミノ酸である。
【００４２】
Ｒ６置換基について、「ペプチド」という用語は、加水分解により２、３、４または５個のアミノ酸またはイミノ酸（例えば、プロリン）をそれぞれ放出するジペプチド、トリペプチド、テトラペプチドまたはペンタペプチドを指す。Ｒ６について、ペプチドは、分子の残りの部分とエステル結合を介して結合している。一実施形態では、Ｒ６のペプチドは、これらに限定されないが、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン、グルタミン酸、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、バリンまたはその立体異性体もしくはラセミ混合物を含むαアミノ酸またはαイミノ酸を含み、本実施形態のより好ましい形態は、エステル結合に関わるカルボキシル基は、側鎖カルボキシルの反対側の、ペプチドのカルボキシル末端ＣＯＯＨ基である。本発明の他の実施形態では、Ｒ６は、Ｌ−アラニン、Ｌ−アルギニン、Ｌ−アスパラギン、Ｌ−アスパラギン酸、Ｌ−システイン、Ｌ−グルタミン、Ｌ−グルタミン酸、Ｌ−グリシン、Ｌ−ヒスチジン、Ｌ−イソロイシン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−リシン、Ｌ−メチオニン、Ｌ−フェニルアラニン、Ｌ−プロリン、Ｌ−セリン、Ｌ−トレオニン、Ｌ−トリプトファン、Ｌ−チロシンおよびＬ−バリンからなる群から選択されるαアミノ酸またはαイミノ酸であり、この好ましい実施形態のより好ましい形態では、エステル結合に関わるカルボキシル基は、側鎖カルボキシルの反対側のペプチドのカルボキシル末端ＣＯＯＨ基である。
【００４３】
本発明の化合物のすべての立体異性体は、ラセミ混合物の結晶形態および個別異性体の結晶形態を含む、混合形態、または純粋かもしくは実質的に純粋な形態であるものとする。本発明による化合物の定義は、可能性のあるすべての立体異性体（例えば、各不斉中心のＲ配置およびＳ配置）およびその混合物を包含する。それは特に、ラセミ体、および特定の活性を有する単離された光学異性体を包含する。ラセミ体は、例えば、分別結晶化、ジアステレオマー誘導体の分離または結晶化、キラルカラムクロマトグラフィーまたは超臨界流体クロマトグラフィーによる分離、などの物理的方法で分割することができる。個々の光学異性体は、光学的に活性な酸との塩の形成、続く結晶化などの従来の方法でラセミ化合物から得ることができる。さらに、二重結合でのＥ配置およびＺ配置などのすべての幾何異性体は、別段の言及のない限り、本発明の範囲内であるものとする。本発明の具体的な化合物は、互変異性型で存在することができる。そうした化合物のすべての互変異性型は、別段の言及のない限り、本発明の範囲内であるものとする。本発明は、類似物または誘導体の１つまたは複数の位置異性体混合物も含む。
【００４４】
本明細書で用いる「塩」という用語は、薬学的に許容される塩であり、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸、硫酸塩、硫酸水素塩、アルキルスルホン酸塩、アリールスルホン酸塩、酢酸塩、安息香酸塩、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、乳酸塩および酒石酸塩を含む酸付加塩；Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｌｉ＋などのアルカリ金属カチオン、ＭｇもしくはＣａなどのアルカリ土類金属塩または有機アミン塩を含むことができる。
【００４５】
本明細書用いる「代謝産物」という用語は、本発明の化合物または薬学的に許容されるその塩、類似体または誘導体の代謝による産物であって、前記本発明の化合物に対してインビボで同様の活性を示す産物を意味する。
【００４６】
本明細書用いる「プロドラッグ」という用語は、アミノ酸部分または他の水溶性部分などの１つまたは複数のプロ部分と共有結合した本発明の化合物を意味する。本発明の化合物は、加水分解的、酸化的および／または酵素的放出機序によってプロ部分から放出させることができる。一実施形態では、本発明のプロドラッグ組成物は、高い水溶解度、改善された安定性および改善された薬物動態プロファイルからなる追加的利益を示す。所望のプロドラッグ特徴が得られるようにプロ部分を選択することができる。例えば、プロ部分、例えばＲ５内のホスフェートなどのアミノ酸部分または他の水溶性部分は、溶解性、安定性、生物学的利用能および／またはインビボでの送達または摂取にもとづいて選択することができる。
【００４７】
２．ピロリジン−２−オン、ピロリジンおよびチオスクシンイミドの合成
有機分子の調製のための標準的な合成方法または手順、ならびに保護基の使用を含む官能基の転換および操作法は、この分野の関連する科学文献または標準的参考書から得ることができる。１つまたは複数のいずれかの情報源に限定するわけではないが、広く認められている有機合成の参考書には、Ｓｍｉｔｈ、Ｍ．Ｂ．；Ｍａｒｃｈ、Ｊ．Ｍａｒｃｈ’ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ、Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ、ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ、第５版；Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、２００１年；およびＧｒｅｅｎｅ、Ｔ．Ｗ．；Ｗｕｔｓ、Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、３ｒｄ；Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ、１９９９年が含まれる。合成方法の以下の記述は、限定するわけではないが、本発明の化合物の調製のための基本手順を示すものである。
【００４８】
本発明は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶのピロリジン−２−オン、ピロリジンおよびチオスクシンイミド化合物を提供する。
【００４９】
２．１  式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶの化合物（ＺとＶの両方がＯまたはＨ２であることはない）の調製のための基本手順
式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶの化合物（ＺとＶの両方がＯまたはＨ２であることはない）の調製は、式ＶまたはＸの化合物の還元、スキーム１および２によって達成することができる。
【００５０】
２．１．１  式Ｖの化合物からの式ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸの化合物の調製
式Ｖの化合物の式ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩおよびＩＸの化合物への還元は、これらに限定されないが、アルコール中の金属（還元手順Ａ）、触媒的水素化（還元手順Ｂ）または触媒的水素化（還元手順Ｂ）を用いた還元、続く、基本スキーム１による異性化などの様々な手順を用いて実施することができる。
【００５１】
スキーム１
【００５２】
【化３】
0005425060.tif 000005
還元手順Ａ
式Ｖの化合物は、これらに限定されないが、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノールおよびイソプロパノールなどの適切な無水溶媒中で、不活性雰囲気下、５０℃〜混合物の沸点の範囲の温度で、これらに限定されないが、ナトリウム、カルシウムまたはマグネシウム等適切な還元性金属と０．５〜１２時間反応させることによって、式ＶＩＩＩおよびＩＸの化合物に還元することができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。特定の実施形態では、反応は、実施例１のステップ１０に記載するように、メタノール中、還流下で約６時間、金属マグネシウムを使用する。
【００５３】
還元手順Ｂ
式Ｖの化合物は、これらに限定されないが、エタノール、メタノール、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）またはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などの適切な溶媒中、２０〜１００℃の温度範囲で、酸化白金、パラジウム炭素、ロジウムまたはルテニウムなどの貴金属触媒を用いて、少なくとも１気圧の水素ガス下で１〜４８時間触媒的水素化することによって、式ＶＩおよびＶＩＩの化合物に還元することができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００５４】
式ＶＩＩＩおよびＩＸの化合物は、式ＶＩおよびＶＩＩの化合物を、これらに限定されないが、ＴＨＦ、ｔｅｒｔ−ブタノールまたはＤＭＦなどの適切な溶媒中で、これらに限定されないが、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、水酸化カリウムまたはナトリウムメトキシドなどの適切な塩基を用いて、周囲温度から混合物の沸点の温度範囲で、１〜４８時間異性化することによっても調製することができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００５５】
２．１．２  式Ｘの化合物からの式ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、ＸＩＶの化合物の調製
式Ｘの化合物からの式ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩおよびＸＩＶの化合物の調製、スキーム２は、節２．１．１に記載の基本手順を用いて実施することができる。
【００５６】
スキーム２
【００５７】
【化４】
0005425060.tif 000006
２．１．３  式ＸＶの化合物からの式Ｖの化合物の調製
式Ｖの化合物は、式ＸＶの化合物から、式ＸＶＩまたはＸＶＩＩの酸または酸クロリドとカップリングし、続く保護、塩基による環化、脱保護するスキーム３（Ｐは保護基である）によって調製することができる。
【００５８】
式ＸＶＩＩＩの化合物を得るための式ＸＶの化合物の式ＸＶＩまたはＸＶＩＩの酸または酸クロリドとのカップリングは、これらに限定されないが、ＴＨＦ、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、１，２−ジクロロエタン（ＤＣＥ）またはＤＭＦなどの適切な任意の無水溶媒中で、これらに限定されないが、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）またはジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）などの酸に対する適切なカップリング試薬を用い、必要に応じて、これらに限定されないが、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）またはピリジンなどの適切な塩基を用いて、０℃〜１００℃の温度範囲で、０．５〜２４時間実施することができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００５９】
スキーム３
【００６０】
【化５】
0005425060.tif 000007
式ＸＩＸの化合物を作製するための式ＸＶＩＩＩの化合物の保護は、これらに限定されないが、ＴＨＦ、ＤＣＭまたはＤＭＦなどの適切な任意の溶媒中、これらに限定されないが、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートなどの適切な保護剤を用い、必要なら、これらに限定されないが、水酸化ナトリウム、重炭酸ナトリウム、４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）などの塩基を用いて、０℃〜６０℃の温度範囲で０．５〜２４時間実施することができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００６１】
式ＸＸの化合物を作製するための式ＸＩＸの化合物の環化は、これらに限定されないが、ＴＨＦ、ＤＭＦまたはＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）などの適切な任意の無水溶媒中、これらに限定されないが、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、水素化ナトリウム、リチウムヘキサメチルジシラザン（ＬｉＨＭＤＳ）またはカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（ｔＢｕＯＫ）などの適切な塩基を用いて、−７８℃〜１３０℃の温度範囲で０．５〜２４時間実施することができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００６２】
式Ｖの化合物を得るための式ＸＸの化合物の脱保護は、これらに限定されないが、ＴＨＦ、１，４−ジオキサン、ＤＣＭ、メタノール、ＤＭＦまたはＤＭＡなどの適切な任意の溶媒中、これらに限定されないが、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、塩酸またはピペリジンなどの適切な脱保護試薬を用いて、０℃〜５０℃の温度範囲で０．５〜２４時間実施することができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００６３】
２．１．４  式ＸＸＩの化合物からの式Ｖの化合物の調製
式Ｖの化合物は、式ＸＸＩの化合物から、式ＸＸＩＩのオキソエステル（Ｒ１３は（Ｃ１〜Ｃ４）アルキル基である）と縮合して式ＸＸＩＩＩの化合物を生成し、続いて、チオカルボニル基を除去することによって得ることもできる（スキーム４）。
【００６４】
式ＸＸＩＩＩの化合物を形成するための式ＸＸＩの化合物の式ＸＸＩＩのオキソエステルとの縮合は、これらに限定されないが、ＴＨＦまたはジエチルエーテルなどの適切な任意の無水溶媒中、これらに限定されないが、水素化ナトリウム、ＬｉＨＭＤＳまたはｔＢｕＯＫなどの適切な塩基の存在下、−７８℃〜２５℃の温度範囲で０．５〜２４時間実施することができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００６５】
スキーム４
【００６６】
【化６】
0005425060.tif 000008
式ＸＸＩＩＩの化合物は、これらに限定されないが、チオカルボニル基を除去することができるラネーニッケルなどの還元剤を用いて、これらに限定されないが、エタノールまたはメタノールなどの適切な溶媒中、２５℃から反応混合物の沸点の温度範囲で０．５〜２４時間反応させることによって、式Ｖの化合物へ転換させることができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００６７】
２．１．５  式ＸＸＶの化合物からの式Ｘの化合物の調製
式Ｘの化合物は、節２．１．３．スキーム５に記載の基本手順によって式ＸＸＶの化合物から調製することができる。
【００６８】
スキーム５
【００６９】
【化７】
0005425060.tif 000009
２．１．６  式ＸＸＸの化合物からの式Ｘの化合物の調製
式Ｘの化合物は、節２．１．４．スキーム６に記載の基本手順によって式ＸＸＸの化合物から調製することができる。
【００７０】
スキーム６
【００７１】
【化８】
0005425060.tif 000010
２．２  式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶ（ＺとＶの両方がＯまたはＳであることはない）および式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶ（ＺとＶの両方がＯまたはＨ２であることはない）の化合物の調製
式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶ（ＺとＶの両方がＯまたはＳであることはない）の化合物は、ＷＯ２００６０８６４８４に記載のようにして、カルボニル基をチオカルボニル基に転換させることができる試薬で処理することによって式ＸＸＸＩＩ〜ＸＸＸＶの化合物から調製することができ、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶ（ＺとＶの両方がＯまたはＨ２であることはない）の化合物は、チオカルボニル基を除去することによって式ＸＸＸＶＩ〜ＸＬＩＩＩの化合物から得ることができる（スキーム７）。
【００７２】
２．２．１  式ＸＸＸＶＩ〜ＸＬＩＩＩの化合物の調製
式ＸＸＸＶＩ〜ＸＬＩＩＩの化合物は、式ＸＸＸＩＩ〜ＸＸＸＶの化合物から、これらに限定されないが、ＴＨＦ、１，４−ジオキサンまたはトルエンなどの適切な溶媒中、２５℃から反応混合物の沸点の温度範囲で０．５〜２４時間、これらに限定されないが、ローソン試薬または五硫化リンなどの、カルボニル基をチオカルボニル基に転換させることができる試薬で処理することによって調製することができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００７３】
２．２．２  式ＸＸＸＶＩ〜ＸＬＩＩＩの化合物からの式ＶＩ〜ＩＸおよびＸＩ〜ＸＩＶの化合物の調製
式ＸＸＸＶＩ〜ＸＬＩＩＩの化合物からの式ＶＩ〜ＩＸおよびＸＩ〜ＸＩＶの化合物の調製は、２５℃から反応混合物の沸点の温度範囲で０．５〜２４時間、これらに限定されないが、エタノールまたはメタノールなどの適切な溶媒中、これらに限定されないが、チオカルボニル基を除去することができるラネーニッケルなどの還元剤と反応させることによって実施することができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００７４】
スキーム７
【００７５】
【化９】
0005425060.tif 000011
２．３  式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶ（ＺとＶはどちらもＨ２である）の化合物の調製
式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶ（ＺとＶはどちらもＨ２である）の化合物は、式ＸＸＸＩＩ、ＸＸＸＩＩＩ、ＸＸＸＩＶまたはＸＸＸＶの化合物から、これを還元し、続いてイソシアネート、酸もしくは酸クロリド、スルホニルクロリドまたはアルキル化試薬と反応させることによって調製することができる（スキーム８）。
【００７６】
２．３．１  式ＸＸＸＩＩ〜ＸＸＸＶの化合物からの式ＸＬＩＶおよびＸＬＶＩの化合物の調製
式ＸＬＩＶの化合物は、式ＸＸＸＩＩ〜ＸＸＸＶの化合物から、これらに限定されないが、ＴＨＦまたは１，４−ジオキサンなどの適切な溶媒中、２５℃から反応混合物の沸点の温度範囲で０．５〜２４時間、これらに限定されないが、水素化アルミニウムリチウムなどの適切な還元剤と反応させることによって調製することができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００７７】
式ＸＬＶＩの化合物は、式ＸＬＩＶの化合物から、最初に、これらに限定されないが、ＴＨＦ、ＤＭＦまたはＤＣＭなどの適切な溶媒中、０℃〜６０℃の温度範囲で０．５〜２４時間、これらに限定されないが、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートなどの適切な保護剤を用い、必要なら、これらに限定されないが、水酸化ナトリウム、重炭酸ナトリウムまたはＤＭＡＰなどの塩基を用いて処理することによって式ＸＬＶの化合物に転換せることができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００７８】
式ＸＬＶの化合物は、これらに限定されないが、ＴＨＦ、１，４−ジオキサン、ＤＣＭ、メタノール、ＤＭＦまたはＤＭＡなどの適切な溶媒中、０℃〜５０℃の温度範囲で０．５〜２４時間、これらに限定されないが、ＴＦＡ、塩酸またはピペリジンなどの適切な脱保護試薬で脱保護することによって、式ＸＬＶＩの化合物に転換させることができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００７９】
２．３．２  式ＸＬＶＩＩ、ＸＬＶＩＩＩ、ＸＬＩＸおよびＬＸの化合物の調製
式ＸＬＶＩＩの化合物は、式ＸＬＶＩの化合物から、これらに限定されないが、ＴＨＦ、１，４−ジオキサン、ＤＣＭ、メタノールまたはＤＭＦなどの適切な溶媒中で、これらに限定されないが、エチルイソシアネート、シクロプロピルイソシアネート、フェニルイソシアネート、ベンゾイルイソシアネートなどの適切なイソシアネートを用い、必要なら、これらに限定されないが、トリエチルアミン、ＤＩＰＥＡまたはピリジン等適切な塩基を用いて、０℃〜６０℃の温度範囲で０．５〜２４時間反応することによって調製することができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００８０】
式ＸＬＶＩＩＩの化合物は、式ＸＬＶＩの化合物を、これらに限定されないが、ＴＨＦ、ＤＣＭ、ＤＭＦまたはＤＭＡなどの適切な無水溶媒中、０℃〜１００℃の温度範囲で０．５〜２４時間、これらに限定されないが、ＣＤＩ、ＨＢＴＵまたはＤＣＣなどの適切なカップリング試薬（酸のためだけ）、必要に応じて、これらに限定されないが、トリエチルアミン、ＤＩＰＥＡまたはピリジンなどの適切な塩基の存在下、安息香酸、ニコチン酸、酢酸などの酸、またはこれらに限定されないが、シクロブチルカルボニルクロリド、ｔｅｒｔ−ブチルアセチルクロリドなどの酸クロリドと縮合させることによって調製することができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００８１】
式ＸＬＩＸの化合物は、式ＸＬＶＩの化合物から、これらに限定されないが、ＴＨＦ、１，４−ジオキサン、ピリジンまたはＤＣＭなどの適切な溶媒中、これらに限定されないが、トリエチルアミン、ＤＩＰＥＡまたはピリジンなどの適切な塩基の存在下、０℃〜１００℃の温度範囲で０．５〜２４時間、これらに限定されないが、イソプロピルスルホニルクロリド、ベンゼンスルホニルクロリド、メタンスルホニルクロリド、ｐ−トルエンスルホニルクロリドなどの適切なスルホニルクロリドと反応させることによって調製することができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００８２】
式ＬＸの化合物は、式ＸＬＶＩの化合物から、これらに限定されないが、ＴＨＦ、１，４−ジオキサン、ＤＣＭ、ＤＭＦまたはＤＭＡ等適切な溶媒中、これらに限定されないが、トリエチルアミン、ＤＩＰＥＡ、ピリジン、水素化ナトリウム、炭酸セシウムまたは炭酸カリウムなどの適切な塩基の存在下、０℃〜１００℃の温度範囲で０．５〜２４時間、これらに限定されないが、臭化ベンジル、クロロアセトアミド、ヨウ化メチル、ヨウ化ブチルなどの適切なアルキルハライドを用いて調製することができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００８３】
スキーム８
【００８４】
【化１０】
0005425060.tif 000012
２．４。式Ａの化合物からの式ＸＶ、ＸＸＩ、ＸＸＩＶおよびＸＸＩＸの化合物の調製
式ＸＶ、ＸＸＩ、ＸＸＩＶおよびＸＸＩＸの化合物は、式Ａの化合物から、市販されているか、またはＷＯ２００６０８６４８４および文献Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒ  １９９７年、第３８巻（３０号）、５３７９〜５３８２頁；Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９８８年、第２５巻（３号）、９３７〜９４２頁；Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒ  ２００４年、第２４巻（１２号）、３２１７〜３２２０頁（スキーム９）に記載されている様々な合成経路によって得ることができる。
【００８５】
２．４．１  式Ａの化合物からの式ＸＸＩＶおよびＸＸＩＸの化合物の調製
式ＸＸＩＸの化合物は、式Ａの化合物から、これらに限定されないが、ＴＨＦ、１，４−ジオキサンまたはＤＣＭなどの適切な無水溶媒中、０℃〜２５℃の温度範囲で０．５〜２４時間塩化オキサリルと反応させ、続いて、これらに限定されないが、エタノール、メタノールまたはイソプロパノールなどの適切なアルコールを加えて０℃〜２５℃の温度範囲で０．５〜２４時間反応させることによって得ることができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００８６】
式Ｂの化合物は、式ＸＸＩＸの化合物から、これらに限定されないが、ＴＨＦ／水または１，４−ジオキサン／水などの適切な水性溶媒混合液中、６０℃から混合物の沸点の温度範囲で０．５〜２４時間、これらに限定されないが、次亜リン酸ナトリウムおよびパラジウム炭素などの還元剤で処理して得ることができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００８７】
式ＸＸＩＶの化合物は、式Ｂの化合物から、これらに限定されないが、ＴＨＦ／水、１，４−ジオキサン／水、エタノール／水またはメタノール／水などの適切な水性溶媒混合液中、２０℃から混合物の沸点の温度範囲で０．５〜２４時間、これらに限定されないが、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムまたは水酸化リチウムなどの塩基で加水分解することによって得ることができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００８８】
２．４．２  式Ａの化合物からの式ＸＸＩの化合物の調製
式ＸＸＩの化合物は、式Ａの化合物から、様々な合成経路、スキーム９によって得ることができる。
【００８９】
式Ｃの化合物は、式Ａの化合物から、これらに限定されないが、ＴＨＦ、１，４−ジオキサンまたはＤＣＭなどの適切な無水溶媒中、０℃〜２５℃の温度範囲で０．５〜２４時間塩化オキサリルと反応させ、続いて、これらに限定されないが、水、エタノール、メタノールまたはイソプロパノールなどの適切な溶媒中でアンモニアを加えて０℃〜２５℃の温度範囲で０．５〜２４時間反応させることによって得ることができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００９０】
式Ｄの化合物は、節２．４．１で説明した式ＸＸＩＸの化合物から式Ｂの化合物を得る手順によって式Ｃの化合物から得るか、あるいは式ＸＸＩＶの化合物から、これらに限定されないが、ＴＨＦ、１，４−ジオキサンまたはＤＣＭなどの適切な無水溶媒中、これらに限定されないが、ＣＤＩ、ＨＢＴＵまたは塩化オキサリルなどの活性化剤で、０℃〜２５℃の温度範囲で０．５〜２４時間処理し、続いて、これらに限定されないが、水、エタノール、メタノールまたはイソプロパノールなどの適切な溶媒中、０℃〜２５℃の温度範囲で０．５〜２４時間アンモニアを加えることによって得ることができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００９１】
式Ｅの化合物は、式Ｄの化合物から、これらに限定されないが、ＴＨＦ、１，４−ジオキサンまたはＤＣＭなどの適切な無水溶媒中、０℃〜２５℃の温度範囲で０．５〜２４時間、これらに限定されないが、バージェス試薬などの適切な脱水試薬で処理することによって得ることができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００９２】
式ＸＸＩの化合物は、式Ｅの化合物から、酢酸中、６０℃〜１２０℃の温度範囲で０．５〜２４時間、チオ酢酸で処理することによって得ることができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００９３】
２．４．３  式Ａの化合物からの式ＸＶの化合物の調製
式ＸＶの化合物は、４段階の一連のスキーム９により式Ａの化合物から得ることができる。
【００９４】
式Ｆの化合物は、式Ａの化合物から、０℃〜１００℃の温度範囲で０．５〜６時間、２−クロロ−Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミドおよびオキシ塩化リンと反応させることによって得ることができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００９５】
式Ｇの化合物は、式Ｆの化合物から、これらに限定されないが、ＤＭＦ、ＤＭＦ／水、ＤＣＭ／水、ＴＨＦ／水などの適切な溶媒中、０℃〜８０℃の温度範囲で０．５〜２４時間、これらに限定されないが、アジ化ナトリウムまたはアジ化リチウムなどの無機アジドと反応させることによって得ることができる。時間と温度はどちらも、使用する化合物の具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００９６】
式Ｊの化合物は、式Ｇの化合物から、これらに限定されないが、ｎ−プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、エタノールまたはメタノールなどの適切な溶媒中でジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネートの存在下、少なくとも１気圧の水素ガス下、２０℃〜８０℃の温度範囲で０．５〜２４時間、これらに限定されないが、酸化白金、パラジウム炭素、酢酸ロジウムまたは塩化ルテニウムなどの貴金属触媒を用いた触媒による還元によって得ることができる。時間と温度はどちらも、化合物上にある具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００９７】
式ＸＶの化合物は、式Ｊの化合物から、これらに限定されないが、ＴＨＦ、１，４−ジオキサン、ＤＣＭまたはメタノールなどの適切な溶媒中、０℃〜１００℃の温度範囲で０．５〜２４時間、これらに限定されないが、塩酸またはトリフルオロ酢酸などの適切な脱保護試薬で処理することによって得ることができる。時間と温度はどちらも、存在する具体的な置換基に応じて変えることができる。
【００９８】
スキーム９
【００９９】
【化１１】
0005425060.tif 000013
２．５  式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶの化合物の分離
式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶの構造を有する個々の生成物の単離が望ましい場合、その生成物は、１つまたは複数のクロマトグラフィー媒体を用いたクロマトグラフィーにより分離することができる。試料中に存在する生成物のアイデンティティおよび純度を判定するために、クロマトグラフィーは、分取スケールまたは分析的スケールで実施することができる。これらに限定されないが、シリカ、Ｃ１８逆相シリカ、イオン交換、キラルクロマトグラフィー媒体またはその組合せを含む適切な任意のクロマトグラフィー媒体を分離に有利に使用することができるが、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶを有する生成物の分離のための具体的なクロマトグラフィー媒体の適合性および条件は、その化合物上に存在する置換基に依存することになる。好ましい実施形態では、クロマトグラフィー分離はＨＰＬＣを用いて実施する。他の好ましい実施形態では、分離は超臨界流体クロマトグラフィーを用いて実施する。超臨界流体クロマトグラフィーを用いる場合、ＣＯ２、またはＣＯ２とアセトニトリル（ＡＣＮ）、メタノール、エタノール、イソプロパノールもしくはヘキサンを含む他の溶媒の混合物が好ましい移動相であり、ＣＯ２とメタノールの混合物が最も好ましい。これらに限定されないが、ＣｈｉｒａｌＣｅｌ  ＯＡ、ＯＢ、ＯＤまたはＯＪ；ＣｈｉｒａｌＰａｋ  ＡＤまたはＡＳ；Ｃｙｃｌｏｂｏｎｄ  Ｉ、ＩＩまたはＩＩＩ；およびＣｈｉｒｏｂｉｏｔｉｃ  Ｔ、ＶおよびＲ媒体を含む様々なクロマトグラフィー媒体（固定相）を、超臨界流体クロマトグラフィーで使用することができる。
【０１００】
より好ましい実施形態では、生成物が式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶの個々の異性体である場合、その異性体の２つ以上を含む混合物を、キラル媒体を用いた超臨界流体クロマトグラフィーにより分離することができる。１つのより好ましい実施形態では、ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ（登録商標）ＡＤカラム（Ｄａｉｃｅｌ（Ｕ．Ｓ．Ａ．）Ｉｎｃ．Ｆｏｒｔ  Ｌｅｅ、ＮＪ）を用いて分離を行う。その実施形態では、生成物を、メタノールとアセトニトリルの混合物、またはアセトニトリル中でＡＤカラムにかけ、続いて、カラムを、ＣＯ２中でメタノールを用いて溶出させる。
【０１０１】
式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶの化合物の個々のラセミ体は、例えば、ジアステレオマー誘導体の分別結晶化または結晶化などの物理的方法によっても分割することができる。さらに、個々の光学異性体は、光学的に活性な酸を用いた塩の生成、必要に応じて、続く結晶化などの従来の方法によって、ラセミ混合物から得ることができる。
【０１０２】
３．治療方法
本明細書で用いるように、「対象」は任意の哺乳動物、例えば、ヒト、霊長類、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ラクダであってよい。好ましい態様では、対象はヒトである。
【０１０３】
本明細書で用いるように、「それを必要とする対象」は、細胞増殖性障害を有する対象、または一般集団と比較して細胞増殖性障害を起こすリスクの高い対象である。一態様では、それを必要とする対象は、前癌状態を有する。好ましい態様では、それを必要とする対象は、癌を有する。
【０１０４】
本明細書で用いるように、用語「細胞増殖性障害」は、細胞の無秩序または異常な増殖、またはその両方が、癌性であっても癌性でなくともよい望ましくない状態または疾患の発生をもたらし得る状態を指す。一態様では、細胞増殖性障害には、非癌性の状態、例えば、関節リウマチ、炎症、自己免疫疾患、リンパ球増殖性状態、先端巨大、リウマチ様脊椎炎、骨関節炎、痛風、他の関節炎状態、敗血症、敗血症性ショック、内毒素ショック、グラム陰性の敗血症、毒素ショック症候群、喘息、成人呼吸窮迫症候群、慢性閉塞性肺疾患、慢性肺炎症、炎症性腸疾患、クローン病、乾癬、湿疹、潰瘍性大腸炎、膵臓線維症、肝臓線維症、急性および慢性の腎疾患、過敏性腸症候群、発熱（ｐｙｒｅｓｉｓ）、再狭窄、大脳マラリア、脳卒中および虚血傷害、神経外傷、アルツハイマー病、ハンチントン病、パーキンソン病、急性および慢性疼痛、アレルギー性鼻炎、アレルギー結膜炎、慢性心不全、急性冠状動脈症候群、悪液質、マラリア、ハンセン病、リーシュマニア症、ライム病、ライター症候群、急性滑膜炎、筋肉変性、滑液包炎、腱炎、滑液鞘炎、ヘルニア性、破裂性または脱出性の椎間板症候群、大理石骨病、血栓症、再狭窄、ケイ肺症、肺筋肉の異常増殖、骨粗鬆症などの骨吸収疾患、移植片対宿主反応、多発硬化症、ループス、線維筋痛、エイズおよび帯状ヘルペス、単純ヘルぺスＩ型またはＩＩ型、インフルエンザウイルスおよびサイトメガロウイルスなどの他のウイルス疾患、ならびに糖尿病が含まれる。別の態様では、細胞増殖性障害には、前癌または前癌状態が含まれる。別の態様では、細胞増殖性障害には、癌が含まれる。治療する様々な癌には、それらに限定されないが、乳癌、肺癌、結腸直腸癌、膵臓癌、卵巣癌、前立腺癌、腎癌、肝癌、脳腫瘍、黒色腫、多発性骨髄腫、慢性骨髄性白血病、血液腫瘍およびリンパ腫が含まれ、それらには、原発腫瘍部位から離れている他の組織または器官の転移病巣も含まれる。治療する癌には、それらに限定されないが、肉腫、癌腫および腺癌が含まれる。一態様では、「前癌細胞」または「前癌性の細胞」は、前癌または前癌状態である細胞増殖性障害を発現している細胞である。別の態様では、「癌細胞」または「癌性の細胞」は、癌である細胞増殖性障害を発現している細胞である。癌細胞または前癌細胞を特定するために、再現性のある任意の測定手段を用いることができる。好ましい態様では、癌細胞または前癌細胞は、組織試料（例えば、生検試料）の組織学的タイピングまたは類別によって特定される。別の態様では、癌細胞または前癌細胞は、適当な分子マーカーを用いることによって特定される。
【０１０５】
「血液系の細胞増殖性障害」は、血液系の細胞に関わる細胞増殖性障害である。一態様では、血管系の細胞増殖性障害には、リンパ腫、白血病、骨髄新生物、肥満細胞新生物、脊髄形成異常、良性単クローン性免疫グロブリン症、リンパ腫様肉芽腫症、リンパ腫様丘疹症、真性赤血球増加症、慢性骨髄性白血病、原因不明骨髄様化生および本態性血小板血症が含まれる。別の態様では、血液系の細胞増殖性障害には、血液系の細胞の過形成、異形成および化生が含まれる。好ましい態様では、本発明の組成物は、本発明の血液癌または本発明の血液細胞増殖性障害からなる群から選択される癌を治療するために用いることができる。一態様では、本発明の血液癌には、多発性骨髄腫、リンパ腫（ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、小児リンパ腫ならびにリンパおよび皮膚起源のリンパ腫を含む）、白血病（小児白血病、毛様細胞性白血病、急性リンパ球性白血病、急性骨髄性白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄球性白血病、慢性骨髄性白血病および肥満細胞性白血病を含む）、骨髄新生物および肥満細胞新生物が含まれる。
【０１０６】
「肺の細胞増殖性障害」は、肺の細胞に関わる細胞増殖性障害である。一態様では、肺の細胞増殖性障害には、肺細胞に影響を及ぼす細胞増殖性障害のすべての形態が含まれる。一態様では、肺の細胞増殖性障害には、肺癌、肺の前癌または前癌状態、肺の良性の増殖または病巣、および肺の悪性の増殖または病巣、および肺以外の体組織および器官の転移病巣が含まれる。好ましい態様では、本発明の組成物を、肺癌または肺の細胞増殖性障害を治療するために用いることができる。一態様では、肺癌には、肺の癌のすべての形態が含まれる。別の態様では、肺癌には、悪性の肺新生物、上皮内癌、定型的カルチノイド腫瘍および非定型カルチノイド腫瘍が含まれる。別の態様では、肺癌には、小細胞肺癌（「ＳＣＬＣ」）、非小細胞肺癌（「ＮＳＣＬＣ」）、扁平上皮癌、腺癌、小細胞癌、大細胞癌、腺扁平上皮癌および中皮腫が含まれる。別の態様では、肺癌には、「瘢痕癌」、気管支肺胞癌、巨細胞癌、紡錘体細胞癌および大細胞神経内分泌癌が含まれる。別の態様では、肺癌には、組織学的および超微細構造的不均一性（例えば、混合した細胞型）を有する肺新生物が含まれる。
【０１０７】
一態様では、肺の細胞増殖性障害には、肺細胞に影響を及ぼす細胞増殖性障害のすべての形態が含まれる。一態様では、肺の細胞増殖性障害には、肺癌、肺の前癌状態が含まれる。一態様では、肺の細胞増殖性障害には、肺の過形成、化生および異形成が含まれる。別の態様では、肺の細胞増殖性障害には、アスベスト誘発過形成、扁平上皮化生および良性反応性中皮化生が含まれる。別の態様では、肺の細胞増殖性障害には、円柱上皮の重層扁平上皮との交換、および粘膜異形成が含まれる。別の態様では、たばこの煙およびアスベストなどの吸入された有害な環境因子に曝露した個体は、肺の細胞増殖性障害を発症するリスクが高いことがある。別の態様では、個体が肺の細胞増殖性障害を発症する素因になり得る先行肺疾患には、慢性間質性肺疾患、壊死性肺疾患、強皮症、リウマチ様疾患、サルコイドーシス、間質性肺炎、結核、反復肺炎、特発性肺線維症、肉芽腫、石綿肺症、線維化性肺胞炎およびホジキン病が含まれる。
【０１０８】
「結腸の細胞増殖性障害」は、結腸の細胞に関わる細胞増殖性障害である。好ましい態様では、結腸の細胞増殖性障害は、結腸癌である。好ましい態様では、本発明の組成物を、結腸癌または結腸の細胞増殖性障害を治療するために用いることができる。一態様では、結腸癌には、結腸の癌のすべての形態が含まれる。別の態様では、結腸癌には、散発性および遺伝性の結腸癌が含まれる。別の態様では、結腸癌には、悪性の結腸新生物、上皮内癌、定型的カルチノイド腫瘍および非定型カルチノイド腫瘍が含まれる。別の態様では、結腸癌には、腺癌、扁平上皮癌および腺扁平上皮癌が含まれる。別の態様では、結腸癌は、遺伝性の非ポリープ性結腸直腸癌、家族性腺腫様ポリープ症、ガードナー症候群、ポイツ−ジェガーズ症候群、ターコット症候群および若年性ポリポーシスからなる群から選択される遺伝性の症候群と関連する。別の態様では、結腸癌は、遺伝性の非ポリープ性結腸直腸癌、家族性腺腫様ポリープ症、ガードナー症候群、ポイツ−ジェガーズ症候群、ターコット症候群および若年性ポリポーシスからなる群から選択される遺伝性の症候群に起因する。
【０１０９】
一態様では、結腸の細胞増殖性障害には、結腸細胞に影響を及ぼす細胞増殖性障害のすべての形態が含まれる。一態様では、結腸の細胞増殖性障害には、結腸癌、結腸の前癌状態、結腸の腺腫性ポリープおよび結腸の異時性病巣が含まれる。一態様では、結腸の細胞増殖性障害には、腺腫が含まれる。一態様では、結腸の細胞増殖性障害は、結腸の過形成、化生および異形成を特徴とする。別の態様では、個体が結腸の細胞増殖性障害を発症する素因になることができる先行結腸疾患には、先行結腸癌が含まれる。別の態様では、個体が結腸の細胞増殖性障害を発症する素因になることができる現在の疾患には、クローン病および潰瘍性大腸炎が含まれる。一態様では、結腸の細胞増殖性障害は、ｐ５３、ｒａｓ、ＦＡＰおよびＤＣＣからなる群から選択される遺伝子の突然変異と関連する。別の態様では、個体は、ｐ５３、ｒａｓ、ＦＡＰおよびＤＣＣからなる群から選択される遺伝子の突然変異の存在のために、結腸の細胞増殖性障害を発症するリスクが高い。
【０１１０】
「前立腺の細胞増殖性障害」は、前立腺の細胞に関わる細胞増殖性障害である。一態様では、前立腺の細胞増殖性障害には、前立腺細胞に影響を及ぼす細胞増殖性障害のすべての形態が含まれる。一態様では、前立腺の細胞増殖性障害には、前立腺癌、前立腺の前癌または前癌状態、前立腺の良性の増殖または病巣、および前立腺の悪性の増殖または病巣、および前立腺以外の体組織および器官の転移病巣が含まれる。別の態様では、前立腺の細胞増殖性障害には、前立腺の過形成、化生および異形成が含まれる。
【０１１１】
「皮膚の細胞増殖性障害」は、皮膚の細胞に関わる細胞増殖性障害である。一態様では、皮膚の細胞増殖性障害には、皮膚細胞に影響を及ぼす細胞増殖性障害のすべての形態が含まれる。一態様では、皮膚の細胞増殖性障害には、皮膚の前癌または前癌状態、皮膚の良性の増殖または病巣、黒色腫、悪性黒色腫、および皮膚の他の悪性の増殖または病巣、および皮膚以外の体組織および器官の転移病巣が含まれる。別の態様では、皮膚の細胞増殖性障害には、皮膚の過形成、化生および異形成が含まれる。
【０１１２】
「卵巣の細胞増殖性障害」は、卵巣の細胞に関わる細胞増殖性障害である。一態様では、卵巣の細胞増殖性障害には、卵巣細胞に影響を及ぼす細胞増殖性障害のすべての形態が含まれる。一態様では、卵巣の細胞増殖性障害には、卵巣の前癌または前癌状態、卵巣の良性の増殖または病巣、卵巣癌、卵巣の悪性の増殖または病巣、および卵巣以外の体組織および器官の転移病巣が含まれる。別の態様では、皮膚の細胞増殖性障害には、卵巣の過形成、化生および異形成が含まれる。
【０１１３】
「乳房の細胞増殖性障害」は、乳房の細胞に関わる細胞増殖性障害である。一態様では、乳房の細胞増殖性障害には、乳房細胞に影響を及ぼす細胞増殖性障害のすべての形態が含まれる。一態様では、乳房の細胞増殖性障害には、乳癌、乳房の前癌または前癌状態、乳房の良性の増殖または病巣、および乳房の悪性の増殖または病巣、および乳房以外の体組織および器官の転移病巣が含まれる。別の態様では、乳房の細胞増殖性障害には、乳房の過形成、化生および異形成が含まれる。
【０１１４】
一態様では、乳房の細胞増殖性障害は、乳房の前癌状態である。一態様では、本発明の組成物を、乳房の前癌状態を治療するために用いることができる。一態様では、乳房の前癌状態には、乳房の非定型過形成、腺管上皮内癌（ＤＣＩＳ）、分泌管内癌、上皮内小葉癌（ＬＣＩＳ）、小葉新生物、および乳房の第０期または段階０の増殖または病巣（例えば、第０期または段階０の乳癌または上皮内癌）が含まれる。別の態様では、乳房の前癌状態は、アメリカ癌合同委員会（ＡＪＣＣ）によって認められているようなＴＮＭ分類スキームによって段階付けされ、そこでは、原発腫瘍（Ｔ）はＴ０期またはＴｉｓ期が割り当てられ、所属リンパ節（Ｎ）はＮ０期が割り当てられ、遠隔転移（Ｍ）はＭ０期が割り当てられている。
【０１１５】
好ましい態様では、乳房の細胞増殖性障害は、乳癌である。好ましい態様では、本発明の組成物を、乳癌を治療するために用いることができる。一態様では、乳癌には、乳房の癌のすべての形態が含まれる。一態様では、乳癌には、原発性上皮乳癌が含まれる。別の態様では、乳癌には、リンパ腫、肉腫または黒色腫などの他の腫瘍が乳房に関わる癌が含まれる。別の態様では、乳癌には、乳房の癌腫、乳房の腺管癌、乳房の小葉癌、乳房の未分化癌腫、乳房の葉状嚢胞肉腫、乳房の血管肉腫および乳房の原発性リンパ腫が含まれる。一態様では、乳癌には、Ｉ期、ＩＩ期、ＩＩＩＡ期、ＩＩＩＢ期、ＩＩＩＣ期およびＩＶ期乳癌が含まれる。一態様では、乳房の腺管癌には、侵襲性の癌腫、管内成分優位の侵襲性の上皮内癌、炎症性乳癌、および、面皰、膠様（コロイド状）、髄様、リンパ浸潤を伴う髄様、乳頭状、硬性および管状からなる群から選択される組織型を有する、乳房の腺管癌が含まれる。一態様では、乳房の小葉癌には、原位置成分優位の侵襲性の小葉癌、侵襲性の小葉癌および浸潤性の小葉癌が含まれる。一態様では、乳癌には、ページェット病、管内癌を伴うページェット病、および侵襲性の腺管癌を伴うページェット病が含まれる。別の態様では、乳癌には、組織学的および超微細構造的不均一性（例えば、混合した細胞型）を有する乳房新生物が含まれる。
【０１１６】
好ましい態様では、本発明の化合物を、乳癌を治療するために用いることができる。一態様では、治療される乳癌には、家族性乳癌が含まれる。別の態様では、治療される乳癌には、散発性の乳癌が含まれる。一態様では、治療される乳癌は、男性対象で生じた。一態様では、治療される乳癌は、女性対象で生じた。一態様では、治療される乳癌は、閉経前の女性対象または閉経後の女性対象で生じた。一態様では、治療される乳癌は、３０才以上の対象、または３０才未満の対象で生じた。一態様では、治療される乳癌は、５０才以上の対象、または５０才未満の対象で生じた。一態様では、治療される乳癌は、７０才以上の対象、または７０才未満の対象で生じた。
【０１１７】
一態様では、治療される乳癌は、ＢＲＣＡ１、ＢＲＣＡ２またはｐ５３の家族性または自然発生の突然変異を特定するために分類されている。一態様では、治療される乳癌は、ＨＥＲ２／ｎｅｕ遺伝子増幅を有する、ＨＥＲ２／ｎｅｕを過剰発現するか、または、低い、中間の、または高いレベルのＨＥＲ２／ｎｅｕ発現を有すると、分類されている。別の態様では、治療される乳癌は、エストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰＲ）、ヒト上皮成長因子受容体−２、Ｋｉ−６７、ＣＡ１５−３、ＣＡ２７−２９およびｃ−Ｍｅｔからなる群から選択されるマーカーについて分類されている。一態様では、治療される乳癌は、未知ＥＲ、富ＥＲまたは貧ＥＲと分類されている。別の態様では、治療される乳癌は、ＥＲ陰性またはＥＲ陽性と分類されている。乳癌のＥＲ分類は、任意の再現性のある手段によって実施することができる。好ましい態様では、乳癌のＥＲ分類は、Ｏｎｋｏｌｏｇｉｅ、第２７号、：１７５〜１７９頁（２００４年）に記載されているように実施することができる。一態様では、治療される乳癌は、未知ＰＲ、富ＰＲまたは貧ＰＲと分類されている。別の態様では、治療される乳癌は、ＰＲ陰性またはＰＲ陽性と分類されている。別の態様では、治療される乳癌は、受容体陽性または受容体陰性と分類されている。一態様では、治療される乳癌は、ＣＡ１５−３またはＣＡ２７−２９、またはその両方の上昇した血液レベルと関連すると分類されている。
【０１１８】
一態様では、治療される乳癌には、乳房の限局性腫瘍が含まれる。一態様では、治療される乳癌には、陰性のセンチネルリンパ節（ＳＬＮ）生検と関連する乳房の腫瘍が含まれる。一態様では、治療される乳癌には、陽性のセンチネルリンパ節（ＳＬＮ）生検と関連する乳房の腫瘍が含まれる。別の態様では、治療される乳癌には、１つまたは複数の陽性の腋窩リンパ節と関連する乳房の腫瘍が含まれ、ここで、腋窩リンパ節は任意の適用できる方法によって段階付けされている。別の態様では、治療される乳癌には、結節陰性の状態（例えば、リンパ節陰性）または結節陽性の状態（例えば、リンパ節陽性）を有すると分類されている乳房の腫瘍が含まれる。別の態様では、治療される乳癌には、体の他の部位へ転移した乳房の腫瘍が含まれる。一態様では、治療される乳癌は、骨、肺、肝臓または脳からなる群から選択される部位に転移したと分類されている。別の態様では、治療される乳癌は、転移性、限局性、領域性、局所領域性、局所進行性、遠隔、多中心性、両側性、同側性、対側性、新規診断、再発性および手術不能からなる群から選択される特徴によって分類される。
【０１１９】
一態様では、本発明の化合物は、一般集団と比較して乳癌発症リスクの高い対象で、乳房の細胞増殖性障害を治療もしくは予防するために、または、乳癌を治療もしくは予防するために用いることができる。一態様では、一般の集団と比較して乳癌発症リスクの高い対象は、乳癌の家族歴または既往のある女性対象である。別の態様では、一般の集団と比較して乳癌発症リスクの高い対象は、ＢＲＣＡ１またはＢＲＣＡ２またはその両方の、生殖細胞系または自然発生の突然変異を有する女性対象である。一態様では、一般の集団と比較して乳癌発症リスクの高い対象は、乳癌の家族歴およびＢＲＣＡ１またはＢＲＣＡ２またはその両方の、生殖細胞系または自然発生の突然変異を有する女性対象である。別の態様では、一般の集団と比較して乳癌の発症リスクの高い対象は、３０才、４０才、５０才、６０才、７０才、８０才または９０才を超える女性である。一態様では、一般の集団と比較して乳癌の発症リスクの高い対象は、乳房の非定型過形成、腺管上皮内癌（ＤＣＩＳ）、分泌管内癌、上皮内小葉癌（ＬＣＩＳ）、小葉新生物または乳房の０期の増殖もしくは病巣（例えば、０期または段階０の乳癌または上皮内癌）を有する対象である。
【０１２０】
別の態様では、治療される乳癌はＳｃａｒｆｆ−Ｂｌｏｏｍ−Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎ系によって組織学的に段階付けされており、そこでは、乳房腫瘍は１、２または３の有糸分裂カウントスコア、１、２または３の核多形スコア、１、２または３の細管形成スコア、および、３〜９の総Ｓｃａｒｆｆ−Ｂｌｏｏｍ−Ｒｉｃｈａｒｄｓｏｎスコアが割り当てられている。別の態様では、治療される乳癌は、段階１、段階１〜２、段階２、段階２〜３または段階３からなる群から選択される、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ  Ｐａｎｅｌ  ｏｎ  ｔｈｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒによる腫瘍段階が割り当てられている。
【０１２１】
一態様では、治療される癌は、アメリカ癌合同委員会（ＡＪＣＣ）ＴＮＭ分類系によって段階付けされており、そこでは、腫瘍（Ｔ）はＴＸ、Ｔ１、Ｔ１ｍｉｃ、Ｔ１ａ、Ｔ１ｂ、Ｔ１ｃ、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ４ａ、Ｔ４ｂ、Ｔ４ｃまたはＴ４ｄの各期が割り当てられ、所属リンパ節（Ｎ）はＮＸ、Ｎ０、Ｎ１、Ｎ２、Ｎ２ａ、Ｎ２ｂ、Ｎ３、Ｎ３ａ、Ｎ３ｂまたはＮ３ｃの各期が割り当てられ、遠隔転移（Ｍ）はＭＸ、Ｍ０またはＭ１の各期が割り当てられている。別の態様では、治療される癌は、アメリカ癌合同委員会（ＡＪＣＣ）分類によってＩ期、ＩＩＡ期、ＩＩＢ期、ＩＩＩＡ期、ＩＩＩＢ期、ＩＩＩＣ期またはＩＶ期と段階付けされている。別の態様では、治療される癌は、ＡＪＣＣ分類によって段階ＧＸ（例えば、段階を評価することができない）、段階１、段階２、段階３または段階４のように、段階が割り当てられている。別の態様では、治療される癌は、ｐＮＸ、ｐＮ０、ＰＮ０（Ｉ−）、ＰＮ０（Ｉ＋）、ＰＮ０（ｍｏｌ−）、ＰＮ０（ｍｏｌ＋）、ＰＮ１、ＰＮ１（ｍｉ）、ＰＮ１ａ、ＰＮ１ｂ、ＰＮ１ｃ、ｐＮ２、ｐＮ２ａ、ｐＮ２ｂ、ｐＮ３、ｐＮ３ａ、ｐＮ３ｂまたはｐＮ３ｃのＡＪＣＣ病理分類（ｐＮ）によって段階付けされている。
【０１２２】
一態様では、治療される癌には、直径約２センチメートル以下であると判定された腫瘍が含まれる。別の態様では、治療される癌には、直径約２〜約５センチメートルであると判定された腫瘍が含まれる。別の態様では、治療される癌には、直径約３センチメートル以上であると判定された腫瘍が含まれる。別の態様では、治療される癌には、直径５センチメートルを超えると判定された腫瘍が含まれる。別の態様では、治療される癌は、顕微鏡的外観によって、よく分化している、適度に分化している、あまり分化していない、または未分化であると分類される。別の態様では、治療される癌は、有糸分裂カウント（例えば、細胞分裂の量）または核多形（例えば、細胞の変化）に関する顕微鏡的外観によって分類される。別の態様では、治療される癌は、顕微鏡的外観によって、壊死領域（例えば、死にかけているか変性している細胞の領域）と関連していると分類される。一態様では、治療される癌は、異常な核型を有する、異常な染色体数を有する、または、外観が異常である１つまたは複数の染色体を有すると分類される。一態様では、治療される癌は、異数体、三倍体、四倍体である、または、変化した倍数性を有すると分類される。一態様では、治療される癌は、染色体転位、またはある染色体全体の欠失もしくは重複、または、ある染色体の欠失領域、ある部分の重複もしくは増幅を有すると分類される。
【０１２３】
一態様では、治療される癌は、ＤＮＡサイトメトリー、フローサイトメトリーまたは画像サイトメトリーによって評価される。一態様では、治療される癌は、細胞分裂の合成期（例えば、細胞分裂のＳ期）の細胞の１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％を有すると分類されている。一態様では、治療される癌は、低いＳ期分画または高いＳ期分画を有すると分類されている。
【０１２４】
本明細書で用いるように、「正常細胞」は、「細胞増殖性障害」の一部として分類することができない細胞である。一態様では、正常な細胞は、望ましくない状態または疾患の発症をもたらすことができる、無秩序または異常な増殖またはその両方が欠如している。好ましくは、正常な細胞は、正常に機能している細胞周期チェックポイント制御機構を有する。
【０１２５】
本明細書で用いるように、「細胞を接触させること」は、物質の化合物または他の組成物が細胞と直接接触しているか、細胞で所望の生物効果を誘導するのに十分近接している状態を指す。
【０１２６】
本明細書で用いるように、「候補化合物」は、その化合物が、研究者または臨床医が調査中の細胞、組織、系、動物またはヒトにおいて、所望の生物学的応答または医学的応答を引き出す可能性があるか否かを判定するために、１つまたは複数のインビトロまたはインビボの生物検定で試験された、または試験される本発明の化合物を指す。一態様では、候補化合物は、式Ｉの化合物である。別の態様では、候補化合物は、式ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶの化合物である。好ましい態様では、生物学的または医学的な応答は、癌の治療である。別の態様では、生物学的または医学的な応答は、細胞増殖性障害の治療または予防である。一態様では、インビトロまたはインビボの生物検定には、それらに限定されないが、酵素活性アッセイ、電気泳動移動度シフトアッセイ、リポーター遺伝子アッセイ、インビトロ細胞生存度アッセイ、および、本明細書の実施例１１〜１３に示すアッセイが含まれる。
【０１２７】
本明細書で用いるように、「単独療法」は、それを必要とする対象への単一の活性化合物または治療的化合物の投与を指す。好ましくは、単独療法は治療有効量の活性化合物の投与を含む。例えば、（±）−シス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１イル）−４（１Ｈ−インドール−３−イル）ピロリジン−２−オンによる癌単独療法は、癌の治療が必要な対象への、治療有効量の（±）−シス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１イル）−４（１Ｈ−インドール−３−イル）ピロリジン−２−オン、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体または誘導体の投与を含む。単独療法は、好ましくはその組合せの各成分が治療有効量で存在する、複数の活性化合物の組合せが投与される併用療法と対比させることができる。一態様では、本発明の化合物による単独療法は、所望の生物効果を誘導することにおいては併用療法よりも有効である。
【０１２８】
本明細書で用いるように、「治療すること」は、疾患、状態または障害と闘うための患者の管理およびケアのことを述べ、それには、症状または合併症の開始を予防すること、症状または合併症を軽減すること、または疾患、状態もしくは障害を除去することのための本発明の化合物の投与が含まれる。
【０１２９】
一態様では、癌を治療することは、腫瘍のサイズの縮小をもたらす。腫瘍のサイズの縮小は、「腫瘍退縮」と呼ぶこともできる。好ましくは、治療の後、腫瘍サイズは、その治療前のサイズと比較して５％以上縮小し、より好ましくは、腫瘍サイズは１０％以上縮小し、より好ましくは、２０％以上縮小し、より好ましくは、３０％以上縮小し、より好ましくは、４０％以上縮小し、さらにより好ましくは、５０％以上縮小し、最も好ましくは、７５％以上を超えて縮小する。腫瘍のサイズは、再現性のある任意の測定手段によって測定することができる。好ましい態様では、腫瘍のサイズは、腫瘍の直径として測定することができる。
【０１３０】
別の態様では、癌を治療することは、腫瘍容積の減少をもたらす。好ましくは、治療の後、腫瘍容積は、その治療前のサイズと比較して５％以上減少し、より好ましくは、腫瘍容積は１０％以上減少し、より好ましくは、２０％以上減少し、より好ましくは、３０％以上減少し、より好ましくは、４０％以上減少し、さらにより好ましくは、５０％以上減少し、最も好ましくは、７５％以上を超えて減少する。腫瘍容積は、再現性のある任意の測定手段によって測定することができる。
【０１３１】
別の態様では、癌を治療することは、腫瘍数の減少をもたらす。好ましくは、治療の後、腫瘍数は、治療前の数と比較して５％以上減少し、より好ましくは、腫瘍数は１０％以上減少し、より好ましくは、２０％以上減少し、より好ましくは、３０％以上減少し、より好ましくは、４０％以上減少し、さらにより好ましくは、５０％以上減少し、最も好ましくは、７５％を超えて減少する。腫瘍の数は、再現性のある任意の測定手段によって測定することができる。好ましい態様では、腫瘍数は、肉眼で、または特定の倍率で見える腫瘍を計数することによって測定することができる。好ましい態様では、特定の倍率は２×、３×、４×、５×、１０×または５０×である。
【０１３２】
別の態様では、癌を治療することは、原発腫瘍部位から離れている他の組織または器官における転移病巣の数の減少をもたらす。好ましくは、治療の後、転移病巣の数は、治療前の数と比較して５％以上減少し、より好ましくは、転移病巣数は１０％以上減少し、より好ましくは、２０％以上減少し、より好ましくは、３０％以上減少し、より好ましくは、４０％以上減少し、さらにより好ましくは、５０％以上減少し、最も好ましくは、７５％を超えて減少する。転移病巣の数は、再現性のある任意の測定手段によって測定することができる。好ましい態様では、転移病巣数は、肉眼で、または特定の倍率で見える転移病巣を計数することによって測定することができる。好ましい態様では、特定の倍率は２×、３×、４×、５×、１０×または５０×である。
【０１３３】
別の態様では、癌を治療することは、担体単独を投与された集団に比較して、治療対象集団の平均生存期間の増加をもたらす。好ましくは、平均生存期間は３０日を超えて、より好ましくは、６０日を超えて、より好ましくは、９０日を超えて、最も好ましくは、１２０日を超えて増加する。集団の平均生存期間の増加は、再現性のある任意の手段によって測定することができる。好ましい態様では、集団の平均生存期間の増加は、例えば、ある集団について活性化合物による治療の開始後の生存期間の平均長さを計算することによって測定することができる。別の好ましい態様では、集団の平均生存期間の増加は、例えば、ある集団について活性化合物による１回目の治療の終了後の生存期間の平均長さを計算することによって測定することもできる。
【０１３４】
別の態様では、癌を治療することは、未処置対象集団に比較して、治療対象集団の平均生存期間の増加をもたらす。好ましくは、平均生存期間は３０日を超えて、より好ましくは、６０日を超えて、より好ましくは、９０日を超えて、最も好ましくは、１２０日を超えて増加する。集団の平均生存期間の増加は、再現性のある任意の手段によって測定することができる。好ましい態様では、集団の平均生存期間の増加は、例えば、ある集団について活性化合物による治療の開始後の生存期間の平均長さを計算することによって測定することができる。別の好ましい態様では、集団の平均生存期間の増加は、例えば、ある集団について活性化合物による１回目の治療の終了後の生存期間の平均長さを計算することによって測定することもできる。
【０１３５】
別の態様では、癌を治療することは、本発明の化合物、および薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体または誘導体でない薬剤を用いる単独療法を投与された集団に比較して、治療対象集団の平均生存期間の増加をもたらす。好ましくは、平均生存期間は３０日を超えて、より好ましくは、６０日を超えて、より好ましくは、９０日を超えて、最も好ましくは、１２０日を超えて増加する。集団の平均生存期間の増加は、再現性のある任意の手段によって測定することができる。好ましい態様では、集団の平均生存期間の増加は、例えば、ある集団について活性化合物による治療の開始後の生存期間の平均長さを計算することによって測定することができる。別の好ましい態様では、集団の平均生存期間の増加は、例えば、ある集団について活性化合物による１回目の治療の終了後の生存期間の平均長さを計算することによって測定することもできる。
【０１３６】
別の態様では、癌を治療することは、担体単独を投与された集団に比較して、治療対象集団の死亡率の低下をもたらす。別の態様では、癌を治療することは、未処置集団に比較して、治療対象集団の死亡率の低下をもたらす。さらなる態様では、癌を治療することは、本発明の化合物、および薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体または誘導体でない薬剤の単独療法を投与された集団に比較して、治療対象集団の死亡率の低下をもたらす。好ましくは、死亡率は、２％を超えて、より好ましくは、５％を超えて、より好ましくは、１０％を超えて、最も好ましくは、２５％を超えて低下する。好ましい態様では、治療対象集団の死亡率の低下は、再現性のある任意の手段によって測定することができる。別の好ましい態様では、集団の死亡率の低下は、例えば、ある集団について活性化合物による治療の開始後の単位時間あたりの疾患関連死の平均数を計算することによって測定することができる。別の好ましい態様では、集団の死亡率の低下は、例えば、ある集団について活性化合物による１回目の治療の終了後の単位時間あたりの疾患関連死の平均数を計算することによって測定することもできる。
【０１３７】
別の態様では、癌を治療することは、腫瘍増殖速度の低下をもたらす。好ましくは、治療の後、腫瘍増殖速度は、治療前の数字と比較して少なくとも５％低下し、より好ましくは、腫瘍増殖速度は少なくとも１０％低下し、より好ましくは、少なくとも２０％低下し、より好ましくは、少なくとも３０％低下し、より好ましくは、少なくとも４０％低下し、より好ましくは、少なくとも５０％低下し、さらにより好ましくは、少なくとも６０％低下し、最も好ましくは、少なくとも７５％低下する。腫瘍増殖速度は、再現性のある任意の測定手段によって測定することができる。好ましい態様では、腫瘍増殖速度は、単位時間あたりの腫瘍直径の変化によって測定される。
【０１３８】
別の態様では、癌を治療することは、腫瘍再成長の減少をもたらす。好ましくは、治療の後、腫瘍再成長は５％未満であり、より好ましくは、腫瘍再成長は１０％未満、より好ましくは、２０％未満、より好ましくは、３０％未満、より好ましくは、４０％未満、より好ましくは、５０％未満、さらにより好ましくは、６０％未満、最も好ましくは、７５％未満である。腫瘍再成長は、再現性のある任意の測定手段によって測定することができる。好ましい態様では、腫瘍再成長は、例えば、治療後の先行する腫瘍縮小の後の腫瘍直径の増加を測定することで測定される。別の好ましい態様では、腫瘍再成長の減少は、治療が停止した後に腫瘍が再発生することができないことによって示される。
【０１３９】
別の態様では、細胞増殖性障害を治療または予防することは、細胞増殖速度の低下をもたらす。好ましくは、治療の後、細胞増殖速度は少なくとも５％、より好ましくは、少なくとも１０％、より好ましくは、少なくとも２０％、より好ましくは、少なくとも３０％、より好ましくは、少なくとも４０％、より好ましくは、少なくとも５０％、さらにより好ましくは、少なくとも６０％、最も好ましくは、少なくとも７５％低下する。細胞増殖速度は、再現性のある任意の測定手段によって測定することができる。好ましい態様では、細胞増殖速度は、例えば、単位時間あたりの組織試料中の分裂細胞数を測定することによって測定される。
【０１４０】
別の態様では、細胞増殖性障害を治療または予防することは、増殖細胞の割合の低下をもたらす。好ましくは、治療の後、増殖細胞の割合は少なくとも５％低下し、より好ましくは、少なくとも１０％、より好ましくは、少なくとも２０％、より好ましくは、少なくとも３０％、より好ましくは、少なくとも４０％、より好ましくは、少なくとも５０％、さらにより好ましくは、少なくとも６０％、最も好ましくは、少なくとも７５％低下する。増殖細胞の割合は、再現性のある任意の測定手段によって測定することができる。好ましい態様では、増殖細胞の割合は、例えば、組織試料中の非分裂細胞数と比較した分裂細胞数を定量化することで測定される。別の好ましい態様では、増殖細胞の割合は、分裂指数と同等である。
【０１４１】
別の態様では、細胞増殖性障害を治療または予防することは、細胞増殖の領域または帯域のサイズの低下をもたらす。好ましくは、治療の後、細胞増殖の領域または帯域のサイズは、治療前のそのサイズと比較して少なくとも５％低下し、より好ましくは、少なくとも１０％低下し、より好ましくは、少なくとも２０％低下し、より好ましくは、少なくとも３０％低下し、より好ましくは、少なくとも４０％低下し、より好ましくは、少なくとも５０％低下し、さらにより好ましくは、少なくとも６０％低下し、最も好ましくは、少なくとも７５％低下する。細胞増殖の領域または帯域のサイズは、再現性のある任意の測定手段によって測定することができる。好ましい態様では、細胞増殖の領域または帯域のサイズは、細胞増殖の領域または帯域の直径または幅として測定することができる。
【０１４２】
別の態様では、細胞増殖性障害を治療または予防することは、異常な外観または形態を有する細胞の数または割合の低下をもたらす。好ましくは、治療の後、異常な形態を有する細胞の数は、治療前のそのサイズと比較して少なくとも５％低下し、より好ましくは、少なくとも１０％低下し、より好ましくは、少なくとも２０％低下し、より好ましくは、少なくとも３０％低下し、より好ましくは、少なくとも４０％低下し、より好ましくは、少なくとも５０％低下し、さらにより好ましくは、少なくとも６０％低下し、最も好ましくは、少なくとも７５％低下する。異常な細胞の外観または形態は、再現性のある任意の測定手段によって測定することができる。一態様では、異常な細胞の形態は、鏡検によって、例えば、倒立組織培養顕微鏡を用いて測定される。一態様では、異常な細胞の形態は、核多形の形態をとる。
【０１４３】
本明細書で用いるように、用語「選択的に」は、１つの集団において別の集団でよりも高い頻度で起こる傾向を意味する。一態様では、比較される集団は細胞集団である。好ましい態様では、本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体は、正常な細胞には作用しないが、癌または前癌細胞に選択的に作用する。別の好ましい態様では、本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体は、選択的に作用して１つの分子標的（例えば、ｃ−Ｍｅｔ）を調節するが、別の分子標的（例えば、プロテインキナーゼＣ）を有意には調節しない。別の好ましい態様では、本発明は、キナーゼなどの酵素の活性を選択的に阻害する方法を提供する。好ましくは、ある事象が集団Ｂと比較して集団Ａで２倍を超えてより頻繁に起こる場合、その事象は集団Ｂと比較して集団Ａで選択的に起こる。より好ましくは、ある事象が集団Ａで５倍を超えてより頻繁に起こる場合、その事象は選択的に起こる。より好ましくは、ある事象が集団Ｂと比較して集団Ａで１０倍を超えて、より好ましくは、５０倍を超えて、さらにより好ましくは、１００倍を超えて、最も好ましくは、集団Ａで１０００倍を超えてより頻繁に起こる場合、その事象は選択的に起こる。例えば、細胞死が正常細胞と比較して癌細胞で２倍を超えてより頻繁に起こるならば、その細胞死は癌細胞で選択的に起こると言われるであろう。
【０１４４】
好ましい態様では、本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体は、分子標的（例えば、ｃ−Ｍｅｔ）の活性を調節する。一態様では、調節することは、分子標的の活性を刺激または阻害することを指す。好ましくは、本発明の化合物が、その化合物の存在を欠くこと以外は同じ条件下での分子標的の活性と比較して、少なくとも２倍分子標的の活性を刺激または阻害する場合、前記化合物は分子標的の活性を調節する。より好ましくは、本発明の化合物が、その化合物の存在を欠くこと以外は同じ条件下での分子標的の活性と比較して、少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも５０倍、少なくとも１００倍、分子標的の活性を刺激または阻害する場合、前記化合物は分子標的の活性を調節する。分子標的の活性は、再現性のある任意の手段によって測定することができる。分子標的の活性は、インビトロまたはインビボで測定することができる。例えば、分子標的の活性は、酵素活性アッセイもしくはＤＮＡ結合アッセイによりインビトロで測定することができ、または、分子標的の活性は、リポーター遺伝子の発現について検査することによってインビボで測定することができる。
【０１４５】
一態様では、本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体は、その化合物の添加が、その化合物の存在を欠くこと以外同じ条件下の分子標的の活性と比較して１０％を超えて分子標的の活性を刺激または阻害しない場合、分子標的の活性を有意には調節しない。
【０１４６】
本明細書で用いるように、用語「アイソザイム選択的」は、酵素の第２のアイソフォームと比較した、酵素の第１のアイソフォームの優先的阻害または刺激（例えば、キナーゼアイソザイムβと比較したキナーゼアイソザイムαの優先的阻害または刺激）を意味する。好ましくは、本発明の化合物は、生物効果を達成するのに必要な投薬量の、最低４倍の差、好ましくは１０倍の差、より好ましくは５０倍の差を示す。好ましくは、本発明の化合物は、阻害の範囲全域にわたってこの差を実証し、差は、目的の分子標的のＩＣ５０、すなわち５０％阻害で例証される。
【０１４７】
好ましい実施形態では、細胞またはそれを必要とする対象へ、本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体を投与することは、ｃ−Ｍｅｔの活性の調節（すなわち、刺激または阻害）をもたらす。本明細書で用いるように、ｃ−Ｍｅｔの活性とは、ｃ−Ｍｅｔによって実行される任意の生物学的機能または活性を指す。例えば、ｃ−Ｍｅｔの機能には、下流の標的タンパク質のリン酸化が含まれる。ｃ−Ｍｅｔの他の機能には、自己リン酸化、Ｇａｂ−１、Ｇｒｂ−２、Ｓｈｃ、ＳＨＰ２およびｃ−Ｃｂｌなどのアダプタータンパク質の結合、ならびに、Ｒａｓ、Ｓｒｃ、ＰＩ３Ｋ、ＰＬＣ−γ、ＳＴＡＴｓ、ＥＲＫ  １および２およびＦＡＫなどのシグナルトランスデューサの活性化が含まれる。
【０１４８】
好ましい実施形態では、細胞またはそれを必要とする対象へ、本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体を投与することは、ＥＲＫ  １またはＥＲＫ  ２またはその両方の活性の調節（すなわち、刺激または阻害）をもたらす。本明細書で用いるように、ＥＲＫ  １またはＥＲＫ  ２の活性とは、ＥＲＫ  １またはＥＲＫ  ２によって実行される任意の生物学的機能または活性を指す。例えば、ＥＲＫ  １またはＥＲＫ  ２の機能には、下流の標的タンパク質のリン酸化が含まれる。
【０１４９】
一態様では、活性化とは、物質の組成物（例えば、タンパク質または核酸）を、所望の生物学的機能を実行するのに適する状態に置くことを指す。一態様では、活性化されることができる物質の組成物は、非活性化状態も有する。一態様では、活性化された物質の組成物は、阻害性または刺激性、またはその両方の生物学的機能を有することができる。
【０１５０】
一態様では、上昇とは、物質の組成物（例えば、タンパク質または核酸）の所望の生物活性の増大を指す。一態様では、上昇は、物質の組成物の濃度の増加を通して起こり得る。
【０１５１】
本明細書で用いるように、「細胞周期チェックポイント経路」は、細胞周期チェックポイントの調節に関与する生化学経路を指す。細胞周期チェックポイント経路は、細胞周期チェックポイントを含む１つまたは複数の機能に対して、刺激性または阻害性の作用またはその両方を有することができる。細胞周期チェックポイント経路は、少なくとも２つの物質の組成物、好ましくはタンパク質を含み、その両方は細胞周期チェックポイントの調節に寄与する。細胞周期チェックポイント経路は、細胞周期チェックポイント経路の１つまたは複数の構成員の活性化を通して活性化することができる。好ましくは、細胞周期チェックポイント経路は、生化学的シグナル伝達経路である。
【０１５２】
本明細書で用いるように、「細胞周期チェックポイント調節因子」は、細胞周期チェックポイントの調節において、少なくとも一部作用することができる物質の組成物を指す。細胞周期チェックポイント調節因子は、細胞周期チェックポイントを含む１つまたは複数の機能に対して、刺激性または阻害性の作用またはその両方を有することができる。一態様では、細胞周期チェックポイント調節因子は、タンパク質である。別の態様では、細胞周期チェックポイント調節因子は、タンパク質でない。
【０１５３】
一態様では、癌または細胞増殖性障害を治療することは細胞死をもたらし、好ましくは、細胞死は集団内の細胞数の少なくとも１０％の減少をもたらす。より好ましくは、細胞死は少なくとも２０％の減少、より好ましくは、少なくとも３０％の減少、より好ましくは、少なくとも４０％の減少、より好ましくは、少なくとも５０％の減少、最も好ましくは、少なくとも７５％の減少を意味する。集団内の細胞数は、再現性のある任意の手段によって測定することができる。一態様では、集団内の細胞数は、蛍光標示式細胞分取（ＦＡＣＳ）によって測定される。別の態様では、集団内の細胞数は、免疫蛍光顕微鏡検査法によって測定される。別の態様では、集団内の細胞数は、光学顕微鏡法によって測定される。別の態様では、細胞死の測定方法は、Ｌｉら、（２００３年）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．第１００巻（５号）：２６７４〜８頁に示されるとおりである。一態様では、細胞死はアポトーシスによって起こる。
【０１５４】
好ましい態様では、本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体の有効量は、正常細胞にあまり細胞傷害性ではない。治療有効量での化合物の投与が正常細胞の１０％を超えて細胞死を誘導しない場合、その化合物の治療有効量は正常細胞にあまり細胞傷害性でない。治療有効量での化合物の投与が正常細胞の１０％を超えて細胞死を誘導しない場合、その化合物の治療有効量は正常細胞の生存度にあまり影響しない。一態様では、細胞死はアポトーシスによって起こる。
【０１５５】
一態様では、細胞を本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体と接触させることは、癌細胞で選択的に細胞死を誘導または活性化する。好ましくは、それを必要とする対象に本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体を投与することは、癌細胞で選択的に細胞死を誘導または活性化する。別の態様では、細胞を本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体と接触させることは、細胞増殖性障害の影響を受ける１つまたは複数の細胞で選択的に細胞死を誘導する。好ましくは、それを必要とする対象に本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体を投与することは、細胞増殖性障害の影響を受ける１つまたは複数の細胞で選択的に細胞死を誘導する。
【０１５６】
好ましい態様では、本発明は、それを必要とする対象に本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体を投与することによって癌を治療または予防する方法に関し、そこで、本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体の投与は、以下のうちの１つをもたらす。細胞周期のＧ１期および／またはＳ期の細胞の蓄積、正常細胞のかなりの量の細胞死を伴わない癌細胞の細胞死による細胞傷害性、動物での少なくとも２の治療指数を有する抗腫瘍活性、および細胞周期チェックポイントの活性化。本明細書で用いるように、「治療指数」は、有効な用量で割った最大耐量である。
【０１５７】
当分野の技術者は、本明細書で述べる既知の技術または同等技術の詳細な説明のために、一般の参考テキストを参照することができる。これらのテキストには、Ａｕｓｕｂｅｌら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，  Ｉｎｃ．（２００５年）、Ｓａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ，  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ（第３版）、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ、Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（２０００年）、Ｃｏｌｉｇａｎら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、Ｎ．Ｙ．、Ｅｎｎａら、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ、Ｎ．Ｙ．、Ｆｉｎｇｌら、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（１９７５年）、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、ＰＡ、第１８版（１９９０年）が含まれる。当然、これらのテキストは、本発明の態様を作製または使用することに参照することもできる。
【０１５８】
さらなる態様では、本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体は、第２の化学療法剤と併用投与することができる。第２の化学療法剤は、タキサン、アロマターゼ阻害剤、アントラサイクリン、微小管標的剤、トポイソメラーゼ毒薬、標的モノクローナルもしくはポリクローナル抗体、分子標的もしくは酵素の阻害剤（例えば、キナーゼ阻害剤）、またはシチジン類似薬であり得る。好ましい態様では、化学療法剤は、それらに限定されないが、タモキシフェン、ラロキシフェン、アナストロゾール、エクセメスタン、レトロゾール、ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）（トラスツズマブ）、ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）（イマチニブ）、タキソール（登録商標）（パクリタキセル）、シクロホスファミド、ロバスタチン、ミノシン、ａｒａＣ、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、メトトレキサート（ＭＴＸ）、タキソテール（登録商標）（ドセタキセル）、ＺＯＬＡＤＥＸ（登録商標）（ゴセレリン）、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ノコダゾール、テニポシド、エトポシド、ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）（ゲムシタビン）、エポチロン、ナベルビン、カンプトテシン、ダウノルビシン、ダクチノマイシン、ミトキサントロン、アムサクリン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、エピルビシンまたはイダルビシン、またはｗｗｗ．ｃａｎｃｅｒ．ｏｒｇ／ｄｏｃｒｏｏｔ／ｃｄｇ／ｃｄｇ＿０．ａｓｐに掲載されている物質であることができる。別の態様では、第２の化学療法剤は、Ｇ−ＣＳＦ（顆粒球コロニー刺激因子）などのサイトカインであることができる。別の態様では、本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体は、放射線療法と併用投与することができる。さらなる別の態様では、本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体は、標準の化学療法併用剤、例えば、それらに限定されないが、ＣＭＦ（シクロホスファミド、メトトレキサートおよび５−フルオロウラシル）、ＣＡＦ（シクロホスファミド、アドリアマイシンおよび５−フルオロウラシル）、ＡＣ（アドリアマイシンおよびシクロホスファミド）、ＦＥＣ（５−フルオロウラシル、エピルビシンおよびシクロホスファミド）、ＡＣＴもしくはＡＴＣ（アドリアマイシン、シクロホスファミドおよびパクリタキセル）、またはＣＭＦＰ（シクロホスファミド、メトトレキサート、５−フルオロウラシルおよびプレドニゾン）と併用投与することができる。
【０１５９】
本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体は、投与に適する医薬組成物に組み込むことができる。そのような組成物は、化合物（すなわち、活性化合物を含む）および薬学的に許容される賦形剤または担体を一般的に含む。本明細書で用いるように、「薬学的に許容される賦形剤」または「薬学的に許容される担体」には、薬剤投与に適合する任意またはすべての溶媒、分散媒、コーティング材、抗細菌剤および抗かび剤、等張剤および吸収遅延剤などが含まれるものとする。適する担体は、当分野で標準の参考テキストであるＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓの最新版に記載されている。そのような担体または希釈剤の好ましい例には、それらに限定されないが、水、生理食塩水、リンガー溶液、デキストロース溶液および５％ヒト血清アルブミンが含まれる。薬学的に許容される担体には、乳糖、白土、ショ糖、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸などの固体担体が含まれる。例示的な液体担体には、シロップ、落花生油、オリーブ油、水などが含まれる。同様に、担体または希釈剤には、単独のもしくはワックスと一緒のモノステアリン酸グリセリンまたはジステアリン酸グリセリン、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メタクリル酸メチルなどの、当技術分野で公知である時間遅延型物質を含めることができる。他の充填剤、賦形剤、矯味矯臭剤、および当技術分野で知られているような他の添加剤も、本発明による医薬組成物に含まれてもよい。リポソーム、および不揮発性油などの非水性媒体を用いることもできる。薬学的に活性な物質のためのそのような媒体および物質の使用は、当技術分野で公知である。従来の任意の媒体または物質が活性化合物と相容れない場合以外は、組成物中でのそれらの使用が企図されている。補助活性化合物を、組成物に組み込むこともできる。
【０１６０】
一態様では、本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体は、有効成分として本発明の化合物、または薬学的に許容されるその塩、プロドラッグ、代謝産物、類似体もしくは誘導体の治療有効量（例えば、腫瘍増殖の阻害、腫瘍細胞の殺滅、細胞増殖性障害の治療もしくは予防その他を通して所望の治療効果を達成するのに十分な効力レベル）を、従来の手順（すなわち、本発明の医薬組成物を生成すること）によって標準の医薬担体または希釈剤と組み合わせることによって調製される、適する剤形で投与される。これらの手順は、成分を混合、造粒、および、所望の調製物を達成するために適宜圧縮または溶解することを含むことができる。
【０１６１】
本発明の医薬組成物は、その意図された投与経路に適合するように製剤化される。投与経路の例には、非経口投与、例えば、静脈内、皮内、皮下、経口（例えば、吸入）、経皮（局所）および経粘膜投与が含まれる。非経口、皮内または皮下適用のために用いられる溶液または懸濁液は、以下の成分を含むことができる。注射用蒸留水、食塩水、不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒などの滅菌希釈剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなどの抗菌剤；アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤；エチレンジアミン四酢酸などのキレート化剤；酢酸、クエン酸またはリン酸などの緩衝剤、および塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの張性調節剤。ｐＨは、塩酸または水酸化ナトリウムなどの酸または塩基で調節することができる。非経口調製物は、ガラス製またはプラスチック製のアンプル、使い捨て注射器または多回用量バイアルに封入することができる。
【０１６２】
本発明の化合物または医薬組成物は、化学療法治療のために現在用いられている公知の方法の多くで、対象に投与することができる。例えば、癌の治療のために、本発明の化合物を腫瘍に直接注入すること、血流もしくは体腔に注入すること、または経口的に投与するか、パッチにより皮膚を通して適用することができる。選択される用量は、有効な治療を構成するのに十分であるべきであるが、受け入れがたい副作用を起こすほど高くてはいけない。好ましくは、病状の状態（例えば、癌、前癌など）および患者の健康状態を、治療中および治療後の相応な期間、密に監視すべきである。
【０１６３】
用語「治療有効量」は、本明細書で用いるように、特定された疾患または状態を治療、改善または予防する薬剤量、あるいは、検出可能な治療効果または阻害効果を示す薬剤量を指す。効果は、当技術分野で公知である任意のアッセイ方法によって検出することができる。対象のための正確な有効量は、対象の体重、サイズおよび健康、状態の性質および程度、ならびに、投与のために選択される治療法または治療法の組合せによって決まる。所与の状況のための治療有効量は、臨床医の技術および判断の範囲内である日常の実験によって判定することができる。好ましい態様では、治療される疾患または状態は、癌である。別の態様では、治療される疾患または状態は、細胞増殖性障害である。
【０１６４】
任意の化合物について、治療有効量は、最初に、例えば新生細胞の細胞培養アッセイで、または、通常ラット、マウス、ウサギ、イヌまたはブタの動物モデルで推定することができる。動物モデルを用いて、適当な濃度範囲および投与経路を決定することもできる。そのような情報を次に用いて、ヒトの有益な用量および投与経路を決定することができる。治療的／予防的効力および毒性は、細胞培養または実験動物における標準の製薬手順によって、例えば、ＥＤ５０（集団の５０％で治療的に有効な用量）およびＬＤ５０（集団の５０％に致死性の用量）で判定することができる。治療効果と毒性効果との間の用量比は治療指数であり、それは、比ＥＤ５０／ＬＤ５０で表すことができる。高い治療指数を示す医薬組成物が、好ましい。投薬量は、使用した剤形、患者の感受性および投与経路によって、この範囲内で異なることができる。
【０１６５】
用法および用量は、活性剤の十分なレベルを提供するか、所望の効果を維持するように調節する。考慮することができる因子には、疾患状態の程度、対象の健康状態、年齢、体重および対象の性別、食事、投与の時間および頻度、薬剤の組合せ、反応感受性、ならびに療法に対する寛容性／応答が含まれる。持続性医薬組成物は、特定の製剤の半減期およびクリアランス速度によって、３〜４日ごと、毎週または２週間に１回投与することができる。
【０１６６】
４．医薬組成物および製剤
本発明の活性化合物を含む医薬組成物は、公知である方法で、例えば、従来の混合、溶解、造粒、糖衣錠化、摩砕、乳状化、封入、混入または凍結乾燥工程によって製造することができる。医薬組成物は、薬学的に用いることができる調製物への活性化合物の加工を促進する、賦形剤および／または補助剤を含む１つまたは複数の薬学的に許容される担体を用いて、従来の方法で製剤化することができる。当然、適当な製剤は、選択される投与経路によって決まる。
【０１６７】
注射用に適する医薬組成物には、滅菌の水溶液（水溶性の場合）または分散液、および、滅菌注射用溶液または分散液の即時使用の調製物のための滅菌粉末が含まれる。静脈内投与のためには、適する担体には、生理的食塩水、静菌水、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ  ＥＬ（商標）（ＢＡＳＦ、Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ、Ｎ．Ｊ．）またはリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）が含まれる。すべての場合に、組成物は滅菌でなければならず、注射針を容易に通過するように流動的であるべきである。この組成物は製造および保存の条件下で安定でなければならず、細菌および真菌などの微生物の汚染作用から保存されなければならない。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコールなど）およびそれらの適する混合物を含む溶媒または分散媒であってよい。適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用によって、分散液の場合には必要とされる粒径の維持によって、および、界面活性剤の使用によって維持することができる。微生物の作用の予防は、様々な抗細菌剤および抗かび剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、アスコルビン酸、チメロサールなどによって達成することができる。多くの場合、等張剤、例えば、糖、マンニトール、ソルビトールなどの多価アルコール、塩化ナトリウムを組成物に含むことが好ましい。注射可能な組成物の長期吸収は、組成物に吸収を遅らせる物質、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを含ませることによってもたらすことができる。
【０１６８】
注射可能な滅菌溶液は、必要に応じて上で列挙した成分の１つまたはそれらの組合せと一緒に、適当な溶媒中に必要とされる量の活性化合物を組み込み、続いてろ過滅菌することによって調製することができる。一般に、分散液は、活性化合物を、基礎分散媒および上で列挙されたものからの必要とされる他の成分を含む滅菌媒体に組み込むことによって調製される。注射可能な滅菌溶液の調製のための滅菌粉末の場合、調製法は、有効成分と、前もってろ過滅菌したその溶液からの任意の追加の所望の成分との粉末を産する、減圧乾燥およびフリーズドライイングである。
【０１６９】
経口組成物は、不活性の希釈剤または食用の薬学的に許容される担体を一般に含む。それらは、ゼラチンカプセルに封入すること、または錠剤に圧縮することができる。経口治療投与のためには、活性化合物を賦形剤と一緒に組み込み、錠剤、トローチまたはカプセルの形で用いることができる。経口組成物は、洗口剤として用いるための流体担体を用いて調製することもでき、その場合、流体担体中の化合物は口に入れられてうがいされ、吐き出されるか飲み込まれる。薬学的に適合する結合剤および／またはアジュバント物質を、組成物の一部として含むことができる。錠剤、ピル、カプセル、トローチなどは、以下の成分または類似した性質の化合物のいずれかを含むことができる。微結晶性セルロース、トラガカントゴムまたはゼラチンなどの結合剤、デンプンまたは乳糖などの賦形剤、アルギン酸、Ｐｒｉｍｏｇｅｌまたはトウモロコシデンプンなどの崩壊剤、ステアリン酸マグネシウムまたはＳｔｅｒｏｔｅｓなどの滑沢剤、コロイド状二酸化ケイ素などの流動促進剤、ショ糖またはサッカリンなどの甘味剤、あるいは、ハッカ、サリチル酸メチルまたはオレンジ着香料などの着香剤。
【０１７０】
吸入による投与のために、化合物は、適する噴射剤、例えば二酸化炭素などのガスを含む加圧容器もしくはディスペンサー、またはネブライザーからのエアゾール噴霧の形で送達される。
【０１７１】
全身投与は、経粘膜または経皮的手段により得る。経粘膜または経皮的投与のために、浸透すべきバリアに適当な浸透剤が、製剤で用いられる。そのような浸透剤は一般に当技術分野で公知であり、例えば、経粘膜投与のためには、界面活性剤、胆汁酸塩およびフシジン酸誘導体がある。経粘膜投与は、鼻内噴霧剤または坐薬を用いることにより達成することができる。経皮投与のためには、一般に当技術分野で公知であるように、活性化合物は、軟膏、膏薬、ゲルまたはクリームに製剤化される。
【０１７２】
一態様では、活性化合物は、インプラントおよびマイクロカプセル送達系を含む制御放出製剤など、体からの速やかな消失から化合物を保護する薬学的に許容される担体を用いて調製される。エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステルおよびポリ乳酸などの、生物分解性、生体適合性のポリマーを用いることができる。そのような製剤の調製方法は、当分野の技術者にとって明らかとなる。このような物質は、Ａｌｚａ  ＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎおよびＮｏｖａ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．から市販されているものから得ることもできる。リポソーム懸濁液（ウイルス抗原に対するモノクローナル抗体を有する感染細胞を標的にしたリポソームを含む）を、薬学的に許容される担体として用いることもできる。これらは、例えば、米国特許第４，５２２，８１１号に記載されているような、当分野の技術者に公知である方法によって調製することができる。
【０１７３】
投与の容易さおよび投薬量の均一性のために、経口または非経口組成物を投薬単位剤形で製剤化することが特に有利である。本明細書で用いる投薬単位剤形は、治療される対象のための単一投薬量として適する物理的に別々の単位を指し、各単位は、必要な医薬担体と組み合わせて所望の治療効果を生じるように計算された、活性化合物の所定量を含有する。本発明の投薬単位剤形の仕様は、活性化合物の特有の特性および達成すべき特定の治療効果によって決定され、およびそれらに直接依存する。
【０１７４】
治療的適用では、本発明に従って用いられる医薬組成物の投薬量は、選択される投薬量に影響を及ぼす他の要素の中でも、薬剤、レシピエント患者の年齢、体重および臨床状態、ならびに、療法を投与する臨床医または開業医の経験および判断によって異なる。一般に、用量は、腫瘍の増殖を遅くし、好ましくは退縮させ、さらに、好ましくは癌の完全な退縮を引き起こすのに十分であるべきである。投薬量は、１日あたり約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約３０００ｍｇ／ｋｇの範囲でよい。好ましい態様では、投薬量は、１日あたり約１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇの範囲でよい。一態様では、用量は、単回の、分割された、または連続的な用量で、約０．１ｍｇ／日〜約５０ｇ／日、約０．１ｍｇ／日〜約２５ｇ／日、約０．１ｍｇ／日〜約１０ｇ／日、約０．１ｍｇ〜約３ｇ／日、または約０．１ｍｇ〜約１ｇ／日の範囲である（用量は、ｋｇで表した患者の体重、ｍ２で表した体表面積および年齢について調整することができる）。医薬用薬剤の有効量は、臨床医または他の資格のある観察者が気づくような、客観的に識別可能な改善を提供する量である。例えば、患者の腫瘍の退縮は、腫瘍の直径について測定することができる。腫瘍の直径の減少は、退縮を示す。退縮は、治療が停止した後に腫瘍が再発生することができないことによっても示される。本明細書で用いるように、用語「投薬が有効な方法」は、対象または細胞で所望の生物効果を生成する活性化合物の量を指す。
【０１７５】
医薬組成物は、投与のための説明書と一緒に、容器、パックまたはディスペンサーに入れることができる。
【０１７６】
本明細書で引用したすべての特許、特許出願および参考文献は、参照により完全に本明細書に組み込まれる。
【実施例】
【０１７７】
本発明の様々な特徴をさらに説明するために以下に実施例を示す。これらの実施例では、本発明を実施するための有用な方法も説明する。これらは、請求の範囲に記載されている発明を限定するものではない。
【０１７８】
（実施例１）
４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オンの調製
ステップ１
【０１７９】
【化１２】
0005425060.tif 000014
２−クロロ−Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（１０ｍＬ、９７．５ミリモル）の氷冷溶液に、ＰＯＣｌ３（１４ｍＬ、１４９．５ミリモル）を加えた。透明な混合液を室温で２０分間撹拌した。５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン（１０．２０ｇ、６５．０ミリモル、調製についてはＷＯ０６０８６４８６Ａ１を参照されたい）を加えた。混合物を８０℃で２時間撹拌した。混合物を氷（２００ｍＬ）およびジクロロメタン（３００ｍＬ）に注加した。水酸化ナトリウム水溶液を加えてｐＨ＞１２に調節した。ジクロロメタン層を分離し、水（３００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し、蒸発させて黒ずんだ固体を得た。固体をＤＣＭに溶解し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ＤＣＭ中に０％〜１％ＥｔＯＡｃ）で精製した。ＥｔＯＡｃで磨砕（ｔｉｔｕｒａｔｉｏｎ）した後、２−クロロ−１−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−エタノンを灰白色固体（１０．８２ｇ、７１％）として得た。融点＝１１８−１１９°Ｃ；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：８．００（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８２（ｓ，１Ｈ），７．２３（ｍ，１Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），４．５１（ｓ，２Ｈ），４．２１（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），３．０１（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．２７（ｍ，２Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｅ２３４．０３［Ｍ＋Ｈ］。
【０１８０】
ステップ２
【０１８１】
【化１３】
0005425060.tif 000015
ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の２−クロロ−１−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−エタノン（５．０４ｇ、２１．６ミリモル）およびアジ化ナトリウム（１．４７ｇ、２２．７ミリモル）の溶液を室温で１６時間振とうした。水（２００ｍＬ）および酢酸エチル（２００ｍＬ）を加えた。酢酸エチル層を分離し、水（２００ｍＬ）で２回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、ろ過し濃縮した。残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、純ＤＣＭ）で精製して２−アジド−１−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−エタノンを灰白色固体（４．７０ｇ、９０％）として得た。融点＝９２−９３°Ｃ；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．９９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７５（ｓ，１Ｈ），７．２３（ｍ，１Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），４．３５（ｓ，２Ｈ），４．２１（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），３．０１（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．２７（ｍ，２Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｅ２４１．０７［Ｍ＋Ｈ］。
【０１８２】
ステップ３
【０１８３】
【化１４】
0005425060.tif 000016
ＴＨＦ（３０ｍＬ）／ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の２−アジド−１−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−エタノン（４．７０ｇ、１９．５８ミリモル）、（ＢＯＣ）２Ｏ（４．４８ｇ、２０．５６ミリモル）、Ｐｄ／Ｃ（１０％）の溶液を、Ｈ２（６０ｐｓｉ）雰囲気下で終夜振とうした。混合物をセライト（Ｃｅｌｉｔｅ）パッドでろ過し、濃縮して残留物を得た。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液、２／１ヘキサン（ｈｅｘ）／ＥｔＯＡｃ）で精製した。［２−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを白色固体（２．８２ｇ、４６％）として得た。融点＝１７５−１７７°Ｃ；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：８．３５（ｓ，１Ｈ），７．８６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．１２（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９９（ｍ，２Ｈ），４．２７（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），４．２３（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．９４（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．１４（ｍ，２Ｈ），１．４１（ｓ，９Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｅ３１５．２１［Ｍ＋Ｈ］，２５９．１７［Ｍ−５６］。
【０１８４】
ステップ４
【０１８５】
【化１５】
0005425060.tif 000017
ＤＣＭ（５０ｍＬ）中の［２−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．３５ｇ、４．３０ミリモル）の溶液に、ＨＣｌ（ジオキサン中に４Ｍ、１１ｍＬ、４４ミリモル）を室温で加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。生成した沈殿物をろ紙でろ過し、ＤＣＭで洗浄し、真空下で乾燥して２−アミノ−１−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−エタノンＨＣｌ塩（１．０６ｇ、９９％）を白色固体として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：８．５０（ｓ，１Ｈ），８．４２（ｂｒｓ，３Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２０（ｍ，１Ｈ），７．０３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．２８（ｍ，４Ｈ），２．９５（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），２．１５（ｍ，２Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｅ２１５．２１［Ｍ＋Ｈ］。
【０１８６】
ステップ６および７
【０１８７】
【化１６】
0005425060.tif 000018
無水ＤＣＭ（４０ｍＬ）中の３−カルボキシメチル−インドール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．３５ｇ、４．９５ミリモル）の溶液に、ＣＤＩ（０．９８ｇ、６．０３ミリモル）を室温で加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、次いで０℃に冷却し、ＮａＨＣＯ３の冷却水溶液で洗浄した。ＤＣＭ層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、ろ過し濃縮した。残留物をＤＣＭ（１０ｍＬ）およびトルエン（１０ｍＬ）に溶解し、蒸発させた。この残留物に無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）／ＤＭＦ（２０ｍＬ）、ＤＩＰＥＡ（２．５ｍＬ、１４．８５ミリモル）を加え、続いて、２−アミノ−１−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−エタノンＨＣｌ塩（１．２６ｇ、５．０４ミリモル）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）と水（１５０ｍＬ）に分配させた。ＥｔＯＡｃ層をＮａＨＣＯ３水溶液、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、次のステップで直接使用した。ＤＣＭ（２０ｍＬ）およびＤＭＦ（１０ｍＬ）の中の残留物の懸濁液に、（Ｂｏｃ）２Ｏ（３．２３ｇ、１４．８５ミリモル）とＤＭＡＰ（触媒）を加えた。反応混合物を室温で終夜撹拌した。反応混合物を濃縮し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：３／１次いで２／１のヘキサン／ＥｔＯＡｃ）で精製した。３−（２−｛ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−［２−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−アミノ｝−２−オキソ−エチル）−インドール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを淡黄色固体（２．１０ｇ、７４％、２段階について）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：８．４４（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．８５（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３０（ｍ，１Ｈ），７．２５（ｍ，１Ｈ），７．１３（ｄｄ，Ｊ１＝Ｊ２＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．０１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），５．０１（ｓ，２Ｈ），４．３７（ｓ，２Ｈ），４．２４（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．９５（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．１５（ｍ，２Ｈ），１．６２（ｓ，９Ｈ），１．３９（ｓ，９Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｅ５７２．２０［Ｍ＋Ｈ］。
【０１８８】
ステップ８
【０１８９】
【化１７】
0005425060.tif 000019
無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の３−（２−｛ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−［２−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−アミノ｝−２−オキソ−エチル）−インドール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１．０４ｇ、１．８２ミリモル）とＤＢＵ（０．２７ｍＬ、１．９１ミリモル）の混合物を１１０℃で２時間撹拌した。混合物を冷却し、蒸発させた。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：４／１次いで３／１のヘキサン／ＥｔＯＡｃ）で精製して３−［１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−２−オキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを黄色泡状固体（０．６４ｇ、６４％）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：８．１３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７２（ｓ，１Ｈ），７．４７（ｓ，１Ｈ），７．３０（ｍ，１Ｈ），７．０５（ｍ，３Ｈ），６．８９（ｍ，２Ｈ），５．００（ｓ，２Ｈ），４．０３（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），２．８８（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），２．０３（ｍ，２Ｈ），１．６５（ｓ，９Ｈ），１．５４（ｓ，９Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｅ５５４．２１［Ｍ＋Ｈ］。
【０１９０】
ステップ９
【０１９１】
【化１８】
0005425060.tif 000020
３−［１−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−２−オキソ−２，５−ジヒドロ−１Ｈ−ピロール−３−イル］−インドール−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（４０８ｍｇ、７３８μｍｏｌ）およびジオキサン（１５ｍＬ）中の４Ｍ  ＨＣｌの混合物を室温で１６時間振とうした。溶媒を除去し、残留物をＥｔＯＡｃと２Ｎ  ＮａＯＨに分配させた。有機物を濃縮し、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ）で精製した。得られた固体をＤＣＭから再結晶化させて４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オンを淡黄色固体（１５９ｍｇ、６１％）として得た。融点＝２６０−２６２°Ｃ；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１１．２２（ｓ，１Ｈ），８．１６（ｓ，１Ｈ），７．４４−７．３９（ｍ，２Ｈ），７．３１（ｓ，１Ｈ），７．０５−６．９５（ｍ，３Ｈ），６．８２−６．７４（ｍ，３Ｈ），４．５１（ｓ，２Ｈ），４．００（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），２．８６（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．０５（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｅ３５４．１２［Ｍ＋Ｈ］。
【０１９２】
ステップ１０（還元手順Ａ）
【０１９３】
【化１９】
0005425060.tif 000021
４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（９５ｍｇ、２７０μｍｏｌ）、削り屑状マグネシウム（１．３ｇ、５４ミリモル）およびメタノール（１５ｍＬ）の混合物を６０℃で３時間加熱した。水を反応混合物に加え、濃ＨＣｌでｐＨを１に調節した。混合物をＥｔＯＡｃに抽出し、飽和炭酸ナトリウム水溶液で洗浄した。有機物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、蒸発させて黄褐色固体を得た。これを熱ＥｔＯＡｃ中で摩砕して４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オンを白色固体（１５ｍｇ、１６％、１Ｈ  ＮＭＲからシス／トランス：１／３．７）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）トランス−δ：７．４２（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．１４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．０６（ｍ，１Ｈ），７．００（ｓ，１Ｈ），６．９５（ｓ，１Ｈ），６．９３（ｍ，１Ｈ），６．８２（ｍ，２Ｈ），４．１４−４．０５（ｍ，４Ｈ），３．８５（ｍ，１Ｈ），３．７１（ｍ，１Ｈ），２．９０（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．１２（ｍ，２Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｅ３５６．１３［Ｍ＋Ｈ］。
【０１９４】
（実施例２）
（３Ｒ，４Ｒ）−４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−５−チオキソ−ピロリジン−２−オンおよび（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−５−チオキソ−ピロリジン−２−オン（１／１混合物）の調製
【０１９５】
【化２０】
0005425060.tif 000022
無水テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中の（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）ピロリジン−２，５−ジオン（１．１ｇ、２．７１ミリモル）の溶液に、ローソン試薬（１．０ｇ、２．７ミリモル）を加えた。反応混合物を１７時間還流加熱し、次いで室温に冷却した。減圧下で溶媒を除去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、酢酸エチル：ヘキサン；４０：６０）で精製して、位置異性体（３Ｒ，４Ｒ）−４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−５−チオキソ−ピロリジン−２−オンと、（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−５−チオキソ−ピロリジン−２−オンの１／１混合物（４７０ｍｇ、４４％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１３．０９（ｓ，１Ｈ），１１．４（ｄ，Ｊ＝１８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３５（ｍ．３Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．０７（ｍ，１Ｈ），６．９５（ｔ，，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），６．８７（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８４（ｍ，１Ｈ），４．６５（ｄｄ，Ｊ＝６．４および１６．４Ｈｚ，１Ｈ），４．５１（ｄｄ，Ｊ＝６．４および１０．０Ｈｚ，１Ｈ），４．０８（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），２．８８（ｔ，Ｊ＝９．６Ｈｚ２Ｈ），２．１０（ｂｒｓ，２Ｈ）．ＬＣＭＳ：３８６［Ｍ＋Ｈ］。
【０１９６】
（実施例３）
（３Ｒ，４Ｒ）−４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オンおよび（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オン（１／１混合物）の調製
【０１９７】
【化２１】
0005425060.tif 000023
メタノール（１５ｍＬ）中の（３Ｒ，４Ｒ）−４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−５−チオキソ−ピロリジン−２−オンおよび（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−５−チオキソ−ピロリジン−２−オン（０．０７０ｇ、０．１８１ミリモル）の溶液を、過剰のラネーニッケルで処理した。混合物を室温で１５分間撹拌した。反応混合物を、Ｎ２雰囲気下、セライトパッドでろ過し、溶媒を減圧下で除去した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチル：メタノール；９８：２）で精製して、位置異性体（３Ｒ，４Ｒ）−４−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オンと、（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オンの混合物（１／１）（２２ｍｇ、３４％）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．８４（ｄ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，１Ｈ），７．９１（ｂｒｓ，１Ｈ），７．４６（ｄｄ，Ｊ＝７．７および１３．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３０−７．１６（ｍ，４Ｈ），７．０２（ｍ，１Ｈ），６．９０（ｍ，１Ｈ），６．８４−６．７８（ｍ，３Ｈ），４．０４（ｂｒｓ，２Ｈ），４．０（ｍ，１Ｈ），３．７２（ｍ，１Ｈ），３．３５（ｂｒｓ，２Ｈ），２．８６（ｂｒｍ，２Ｈ），２．０７（ｂｒｍ，２Ｈ）．ＬＣＭＳ：３５６［Ｍ＋Ｈ］。
【０１９８】
（実施例４）
（±）−トランス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オンの調製
ステップ１
【０１９９】
【化２２】
0005425060.tif 000024
（１Ｈ−インドール−３−イル）−アセトニトリル（５．０ｇ、３２ミリモル）、チオール酢酸（６．８ｍＬ、９６ミリモル）および氷酢酸（２５ｍＬ）の溶液を、１００℃で４時間加熱した。室温に冷却した後、反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水で２回洗浄し、塩水で洗浄した。次いで有機物を真空下で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して２−（１Ｈ−インドール−３−イル）−チオアセトアミドをオレンジ色固体（２．９ｇ、４８％）として得た。
【０２００】
ステップ２
【０２０１】
【化２３】
0005425060.tif 000025
無水ＴＨＦ（３４ｍＬ）中の（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−オキソ−酢酸メチルエステル（３．４ｇ、１４ミリモル）および２−（１Ｈ−インドール−３−イル）−チオアセトアミド（２．９ｇ、１５ミリモル）の溶液に、Ｎ２雰囲気下、−３０℃でＴＨＦ中の１Ｍ  ｔＢｕＯＫ（４２ｍＬ、４２ミリモル）を滴下した。反応混合物を２時間かけて室温に加温した。反応混合物を０℃に冷却し、濃ＨＣｌ（４２ｍＬ）を徐々に加えた。混合物を撹拌しながら１時間かけて室温に加温し、続いて、ＥｔＯＡｃと水で希釈した。有機物を分離し、塩水で洗浄し、蒸発させて黒ずんだ残留物を得た。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製した。３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−５−チオキソ−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オンを黒ずんだ泡状物（４．７ｇ、８７％）として得た。
【０２０２】
ステップ３
【０２０３】
【化２４】
0005425060.tif 000026
Ｎ２雰囲気下で撹拌しながら、ＭｅＯＨ（７５ｍＬ）中の３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−５−チオキソ−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（４．７ｇ、１２ミリモル）の溶液に、ラネーニッケルを加えた。混合物をＮ２雰囲気下でろ過し、ろ液を蒸発させた。得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オンを灰白色固体（２．２ｇ、６ミリモル、５１％）として得た。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ：１１．３３（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｓ，１Ｈ），７．５５（ｓ，１Ｈ），７．３７（ｄｄ，Ｊ＝８．０，６．０Ｈｚ，２Ｈ），７．３０（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），７．０７（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９０（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．７６（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），６．６２（ｍ，２Ｈ），４．５３（ｓ，２Ｈ），４．２０（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），２．９４（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），２．１７（ｍ，１Ｈ），１．１７（ｍ，１Ｈ）；ＬＣＭＳ：３５４［Ｍ＋Ｈ］。
【０２０４】
ステップ４
【０２０５】
【化２５】
0005425060.tif 000027
３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１，５−ジヒドロ−ピロール−２−オン（７００ｍｇ、２ミリモル）、ＭｅＯＨ（２５ｍＬ）および削り屑状マグネシウム（９６３ｍｇ、４０ミリモル）の混合物を６０℃で４時間加熱した。次いで反応混合物を室温に冷却し、蒸発させた。残留物を１Ｍ  ＨＣｌ（７０ｍＬ）中で１５分間撹拌し、ＥｔＯＡｃで２回抽出した。有機物を蒸発させ、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ）を用いて残留物を精製した。熱ＥｔＯＡｃで磨砕して（±）−トランス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２−オンを灰白色粉末（１９０ｍｇ、２７％）として得た。融点＝２４１−２４３°Ｃ；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）d：１０．８６（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），７．９２（ｓ，１Ｈ），７．４４（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３３−７．２３（ｍ，３Ｈ），７．１７（ｓ，１Ｈ），７．０３（ｍ，１Ｈ），６．９０（ｍ，１Ｈ），６．８６−６．７８（ｍ，２Ｈ），４．０３（ｍ，４Ｈ），３．８１（ｍ，１Ｈ），３．３１（ｍ，１Ｈ），２．８７（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），２．０８（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ：３５６［Ｍ＋Ｈ］。
【０２０６】
（実施例５）
（±）−トランス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オンの調製
【０２０７】
【化２６】
0005425060.tif 000028
（１Ｈ−インドール−３−イル）−アセトニトリルの代わりに２−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）アセトニトリルを用いて、実施例４のステップ１〜４に示したようにして調製した。（±）−トランス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−ピロリジン−２−オンを灰白色固体として得た。融点＝８２−８５°Ｃ；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：７．９５（ｓ，１Ｈ），７．７４（ｍ，２Ｈ），７．５３（ｍ，２Ｈ），７．１５（ｍ，２Ｈ），６．８０（ｍ，２Ｈ），４．０５（ｍ，３Ｈ），３．９０（ｍ，１Ｈ），３．６７（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），３．３３（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），２．８７（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），２．０８（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ：３８５［Ｍ＋Ｈ］。
【０２０８】
（実施例６）
（±）−トランス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（３−メトキシ−フェニル）−ピロリジン−２−オンの調製
【０２０９】
【化２７】
0005425060.tif 000029
（１Ｈ−インドール−３−イル）−アセトニトリルの代わりに２−（３−メトキシフェニル）アセトニトリルを用いて、実施例４のステップ１〜４に示したようにして調製した。（±）−トランス−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（３−メトキシ−フェニル）−ピロリジン−２−オンを白色固体として得た。融点＝１９１−１９４°Ｃ；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：７．８６（ｓ，１Ｈ），７．２７（ｍ，２Ｈ），７．１６（ｍ，１Ｈ），７．１１（ｓ，１Ｈ），６．８０（ｍ，４Ｈ），４．０６（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），３．８９（ｍ，１Ｈ），３．７３（ｍ，１Ｈ），３．６８（ｓ，３Ｈ），３．６２（ｍ，１Ｈ），３．２５（ｍ，１Ｈ），２．８７（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），２．０７（ｍ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ：３４７［Ｍ＋Ｈ］。
【０２１０】
（実施例７）
１−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリンの調製
ステップ１
【０２１１】
【化２８】
0005425060.tif 000030
無水ＴＨＦ（４００ｍＬ）中の（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−２，５−ジオン（ＷＯ２００６０８６４８４Ａ１、８．３４ｇ、２２．６ミリモル）の溶液にＮ２をパージし、０℃に冷却した。ＬｉＡｌＨ４（２２６ｍＬ、ＴＨＦ中に１Ｍ、２２６ミリモル）を滴下した。反応混合物を６０℃で終夜撹拌した。混合物を氷水浴で冷却し、Ｎ２雰囲気下で水（４０ｍＬ）を滴下して過剰のＬｉＡｌＨ４をクエンチした。水（５００ｍＬ）を加えた。次いで混合物を４Ｍ  ＨＣｌでｐＨ＜２に酸性化した。２Ｍ  ＮａＯＨを加えてｐＨ＞９に調節した。混合物をＥｔＯＡｃ（２×８００ｍＬ）で抽出した。一緒にしたＥｔＯＡｃ層を飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して１−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリンをオレンジ色／黄色固体として得た。
【０２１２】
１−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリンをＴＨＦ（１５０ｍＬ）に溶解し、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（５．１７ｇ、２３．７ミリモル）およびＤＩＰＥＡ（１１．８ｍＬ、６７．８ミリモル）を加えた。次いで、混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残留物をフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、溶離液：ＤＣＭ中に２％ＥｔＯＡｃ）で精製した。得られた固体をＤＣＭ／ＥｔＯＡｃから再結晶化して、（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルを白色固体（６．０９ｇ、６１％）として得た。融点＝２３９−２４０°Ｃ；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．８１（ｓ，１Ｈ），７．５６（ｄｄ，Ｊ＝８．０および４．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２２−７．１８（ｍ，２Ｈ），７．０２（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．９２（ｍ，１Ｈ），６．８４（ｍ，１Ｈ），６．７７（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），４．０３−３．８８（ｍ，６Ｈ），３．４４−３．２９（ｍ，２Ｈ），２．８４（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．０４（ｍ，２Ｈ），１．４２（ｓ，９Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｅ３８６．１２［Ｍ−５６］。
【０２１３】
ステップ２
【０２１４】
【化２９】
0005425060.tif 000031
ＤＣＭ（１０ｍＬ）中の（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．２０５ｇ、０．４６ミリモル）の溶液に、Ｎ２雰囲気下でジオキサン中のＨＣｌ  ４Ｍ（１．１５ｍＬ、４．６ミリモル）を加えた。混合物を室温で終夜撹拌した。減圧下で溶媒を除去し、残留物をＤＣＭで洗浄した。ＥｔＯＨから再結晶化して１−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリンＨＣｌ塩を白色固体として得た。融点＝＞７０°Ｃで分解；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．９５（ｓ，１Ｈ），９．２４（ｓ，１Ｈ），７．５４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３２−７．２６（ｍ，３Ｈ），７．０５（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．８７（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．８０（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），４．０３（ｍ，４Ｈ），３．８５（ｂｒｓ，１Ｈ），３．５２−３．３５（ｍ，３Ｈ），２．８５（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．０５（ｍ，２Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｅ３４２．１７［Ｍ＋Ｈ］。
【０２１５】
（実施例８）
（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−カルボン酸エチルアミドの調製
【０２１６】
【化３０】
0005425060.tif 000032
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．２０ｇ、０．４５ミリモル）の溶液に、ジオキサン中の４Ｍ  ＨＣｌ（１．７ｍＬ、６．８ミリモル）を加えた。２時間後、反応混合物を濃縮し、残留物をＤＣＭ（５ｍＬ）にとった。ＤＩＰＥＡ（０．３２ｍＬ、１．７０ミリモル）およびエチルイソシアネート（４２μＬ、０．５３μｍｏｌ）を加え、反応混合物を室温で終夜撹拌した。固体をろ別し、ＤＣＭで洗浄して（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−カルボン酸エチルアミドを白色結晶（８８ｍｇ、４７％）として得た。融点＝２７８−２７９°Ｃ；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．８０（ｓ，１Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２０（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１７（ｓ，１Ｈ），７．０２（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．９３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．８５（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．７７（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），６．１４（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），４．０３−３．９４（ｍ，６Ｈ），３．４１−３．３２（ｍ，２Ｈ），３．１１−３．０４（ｍ，２Ｈ），２．８４（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．０４（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ），１．０３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｅ４１３．１６［Ｍ＋Ｈ］。
【０２１７】
（実施例９）
１−［（３Ｒ，４Ｒ）−１−ベンゼンスルホニル−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリンの調製
【０２１８】
【化３１】
0005425060.tif 000033
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２００ｍｇ、４５０μｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下で、ジオキサン中の４Ｍ  ＨＣｌ（１．７ｍＬ、６．８ミリモル）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。次いで溶媒を真空下で除去し、残留物をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（３２０μＬ、１．８ミリモル）およびベンゼンスルホニルクロリド（９５ｍｇ、０．５４μｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を真空下で除去した。残留物をＤＣＭに溶解し、飽和炭酸ナトリウム水溶液および水で洗浄し、蒸発させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して１−［（３Ｒ，４Ｒ）−１−ベンゼンスルホニル−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリンを白色固体（１３５ｍｇ、５７％）として得た。融点＝  １１５−１２５°Ｃ；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．８１（ｓ，１Ｈ），７．９６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．８６（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７５（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０９（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），７．０４（ｓ，１Ｈ），７．００（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９２（ｄｄ，Ｊ＝７．２，２．０Ｈｚ，１Ｈ），６．８６（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．７９−６．７４（ｍ，２Ｈ），４．００−３．９０（ｍ，４Ｈ），３．７８−３．６９（ｍ，２Ｈ），３．３９−３．２９（ｍ，２Ｈ），２．８１（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．０１（ｍ，２Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｅ４８２．０９［Ｍ＋Ｈ］。
【０２１９】
（実施例１０）
１−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−（プロパン−２−スルホニル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリンの調製
【０２２０】
【化３２】
0005425060.tif 000034
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２００ｍｇ、４５０μｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下で、ジオキサン中の４Ｍ  ＨＣｌ（１．７ｍＬ、６．８ミリモル）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、溶媒を真空下で除去し、残留物をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（３２０μＬ、１．８ミリモル）およびイソプロピルスルホニルクロリド（７７ｍｇ、０．５４μｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残留物をＤＣＭに溶解し、飽和炭酸ナトリウム水溶液および水で洗浄し、蒸発させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して１−［（３Ｒ，４Ｒ）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−１−（プロパン−２−スルホニル）−ピロリジン−３−イル］−５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリンを白色固体（１０１ｍｇ、５０％）として得た。融点＝１００−１１５°Ｃ；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．８５（ｓ，１Ｈ），７．５６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２６（ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２３（ｓ，１Ｈ），７．０３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．９４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），６．８６（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．７８（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），４．０７−３．９５（ｍ，６Ｈ），３．５５−３．４６（ｍ，３Ｈ），２．８４（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．０５（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），１．３２（ｍ，６Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｅ４４８．１３［Ｍ＋Ｈ］。
【０２２１】
（実施例１１）
シクロブチル［（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−イル］−メタノンの調製
【０２２２】
【化３３】
0005425060.tif 000035
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２００ｍｇ、４５０μｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下で、ジオキサン中の４Ｍ  ＨＣｌ（１．７ｍＬ、６．８ミリモル）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、溶媒を真空下で除去し、残留物をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（３２０μＬ、１．８ミリモル）およびシクロブチルカルボニルクロリド（６４ｍｇ、０．５４μｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残留物をＤＣＭに溶解し、飽和炭酸ナトリウム水溶液および水で洗浄し、蒸発させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製し、メタノールから再結晶化させてシクロブチル［（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−イル］−メタノンを白色固体８２ｍｇ、４３％）として得た。融点＝２５３−２５５°Ｃ；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．８０（ｄｄ，Ｊ＝８．０および２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５４（ｄｄ，Ｊ＝１７．６および８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３６（ｄｄ，Ｊ＝１８．０，８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．２０−７．１６（ｍ，２Ｈ），７．０１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９３−６．８８（ｍ，１Ｈ），６．８６−６．８１（ｍ，１Ｈ），６．７６（ｍ，１Ｈ），４．１０−３．８７（ｍ，６Ｈ），３．５２−３．２９（ｍ，３Ｈ），２．８２（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．２４−２．００（ｍ，６Ｈ），１．８７（ｍ，１Ｈ），１．７５（ｍ，１Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｅ４２４．１６［Ｍ＋Ｈ］。
【０２２３】
（実施例１２）
１−［（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−イル］−３，３−ジメチルブタン−１−オンの調製
【０２２４】
【化３４】
0005425060.tif 000036
ＤＣＭ（５ｍＬ）中の（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２００ｍｇ、４５０μｍｏｌ）の溶液に、窒素雰囲気下で、ジオキサン中の４Ｍ  ＨＣｌ（１．７ｍＬ、６．８ミリモル）を加えた。混合物を室温で２時間撹拌した。次いで、溶媒を真空下で除去し、残留物をＤＣＭ（５ｍＬ）に溶解した。ＤＩＰＥＡ（３２０μＬ、１．８ミリモル）および３，３−ジメチルブタノイルクロリド（７２ｍｇ、０．５４μｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１６時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残留物をＤＣＭに溶解し、飽和炭酸ナトリウム水溶液および水で洗浄し、蒸発させた。残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製した。得られた固体をメタノールから再結晶化させて１−［（３Ｒ，４Ｒ）−３−（５，６−ジヒドロ−４Ｈ−ピロロ［３，２，１−ｉｊ］キノリン−１−イル）−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロリジン−１−イル］−３，３−ジメチルブタン−１−オンを白色固体（１０６ｍｇ、５３％）として得た。融点＝  ２０２−２０４°Ｃ；１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１０．８２（ｄｄ，Ｊ＝７．２および１．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｄｄ，Ｊ＝１４．０および８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｄｄ，Ｊ＝１３．６および８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３０−７．１８（ｍ，３Ｈ），７．０２（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．９３（ｍ，１Ｈ），６．８６（ｍ，１Ｈ），６．７７（ｍ，１Ｈ），４．２１−３．８９（ｍ，６Ｈ），３．６５−３．３６（ｍ，２Ｈ），２．８３（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，２Ｈ），２．２１（ｓ，２Ｈ），２．０４（ｍ，２Ｈ），１．０４（ｓ，９Ｈ）．ＬＣＭＳ：ｍ／ｅ４４０．２０［Ｍ＋Ｈ］。
【０２２５】
（実施例１３）
指数的に増殖するＨＴ２９細胞を、黒色９６ウェルプレートの１０％ＦＢＳ含有培地に、５，０００細胞数／ウェルで一晩平板培養した。その翌日、ＤｈａｒｍａＦＥＣＴ  ４試薬を用いて、細胞を４つのｍｅｔ特異２１−ヌクレオチドＲＮＡオリゴヌクレオチドのプールで２日間一時的にトランスフェクトし、組み合わされた２−ヌクレオチド３’オーバーハングを有する１９−ｂｐ二重鎖コアを形成した（Ｄｈａｒｍａｃｏｎ，Ｉｎｃ．、Ｌａｆａｙｅｔｔｅ、ＣＯ）。対照として、同じ条件下でのｇａｐｄｈ  ｓｉＲＮＡ（Ｄｈａｒｍａｃｏｎ，Ｉｎｃ．）および非標的ｓｉＲＮＡのトランスフェクションを並行して行った（Ｄｈａｒｍａｃｏｎ，Ｉｎｃ．）。次に、濃度を次第に高めた不可逆的カスパーゼ阻害剤ＺｖＡＤ−ＦＭＫの非存在下または存在下で、細胞をさらに１日インキュベートした。２μｇ／ｍｌ  Ｈｏｅｓｃｈｔ  ３３３４２（青色チャネル、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ／Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐ．、Ｎａｔｉｃｋ、ＭＡ）、５００倍希釈のＡｎｎｅｘｉｎ  Ｖ−Ｆｌｕｏｓ（緑色チャネル、Ｒｏｃｈｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ）および１μｇ／ｍｌヨウ化プロピジウム（赤色チャネル、Ｒｏｃｈｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ）を含む標識化溶液（１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１４０ｍＭ  ＮａＣｌおよび６ｍＭ  ＣａＣｌ２）で、少なくとも１０分間細胞をインキュベートした。高含量画像獲得および分析を、Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ  ＩＣ１００血球計算器を用いて実施した。プログラムは、１ウェルにつき４画像をとるように設定した。曝露時間は、ＤＡＰＩ、ＦＩＴＣおよびローダミンチャネルのために、それぞれ１６．７ｍｓ／１０％増、５００ｍｓ／３５％増および３００ｍｓ／３０％増に設定した。画像を処理し、各チャネルおよび各条件に陽性の細胞数を、Ｃｙｔｏｓｈｏｐ  ２．１ソフトウェア（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｉｎｃ．）を用いて判定した。対照（ｇａｐｄｈおよび非標的ｓｉＲＮＡによってトランスフェクトされた細胞）と比較して、Ａｎｎｅｘｉｎ  Ｖ−Ｆｌｕｏｓによって陽性に染色された細胞の割合によって判定された細胞死の増加量が、ｍｅｔ  ｓｉＲＮＡでトランスフェクトされたＨＴ２９細胞で観察された。さらに、濃度を増加させたＺｖＡＤ−ＦＭＫの存在は細胞死のレベルを低下させ、それは、ｃ−ＭｅｔノックダウンがＨＴ２９細胞でカスパーゼ依存性アポトーシスを誘導することを示す。さらに、これらのデータは、ＨＴ２９細胞が、それらの生存のためにｃ−Ｍｅｔ経路に少なくとも部分的に依存し、したがって、ｃ−Ｍｅｔ阻害化合物について試験するための良好なモデルであることを示す。例えば図１Ａを参照。
【０２２６】
ＨＴ２９細胞でｓｉＲＮＡを用いてＧＡＰＤＨおよびｃ−Ｍｅｔの有効なノックダウンを調べるために、正確に同じ条件を用いて同じ実験を並行して実施した。３日間のトランスフェクションの後、２０ｍＭトリス−ＨＣｌ［ｐＨ７．５］、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、１ｍＭ  Ｎａ２ＥＤＴＡ、１ｍＭ  ＥＧＴＡ、１％トリトン、２．５ｍＭピロリン酸ナトリウム、１ｍＭβ−グリセロリン酸、１ｍＭ  Ｎａ３ＶＯ４、１μｇ／ｍｌロイペプチンおよび１ｍＭ  ＰＭＳＦを含む細胞溶解緩衝液（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）で、全ての細胞抽出物を調製した。製造業者の指示に従ってＢｉｏ−Ｒａｄ試薬（ＢｉｏＲａｄ、Ｈｅｒｃｕｌｅｓ、ＣＡ）を用いて、タンパク質濃度をＢｒａｄｆｏｒｄアッセイによって測定した。還元条件下で試料（５０μｇの総タンパク質）をＳＤＳ−７．５％ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＰＡＧＥ）によって分解し、ポリビニリデン二フッ化膜（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｃｏｒｐ．、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ、ＭＡ）に移した。３％ウシ血清アルブミンを含むＴＢＳ−Ｔ（５０ｍＭトリス−ＨＣｌ［ｐＨ７．６］、２００ｍＭ  ＮａＣｌ、０．１％Ｔｗｅｅｎ  ２０）中で、膜を４℃で一晩インキュベートした。ウサギポリクローナル抗ｃ−Ｍｅｔ抗体（ｓｃ−１０、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ、ＣＡ）、およびＧＡＰＤＨに対するモノクローナル抗体（Ｄｈａｒｍａｃｏｎ，Ｉｎｃ．）およびβ−アクチン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  Ｃｏｒｐ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）と一緒に膜を３％ウシ血清アルブミン含有ＴＢＳ−Ｔ中でインキュベートすることによって、ｃ−Ｍｅｔ、ＧＡＰＤＨおよびβ−アクチンの発現レベルを判定した。ＴＢＳ−Ｔ中での十分な洗浄の後、西洋ワサビペルオキシダーゼ標識二次抗体（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｃｏｒｐ．、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）の１：５，０００希釈溶液を１時間加え、製造業者の説明書に従って強化化学発光検出システム（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ検出システム、Ｗｏｂｕｒｎ、ＭＡ）を用いて、特異的タンパク質バンドを視覚化した。例えば、図１Ｂを参照。
【０２２７】
（実施例１４）
ｃ−Ｍｅｔ  ３３Ｐアッセイ
Ｏｒｉｇｅｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから購入した完全長ｃ−ＭｅｔのｃＤＮＡを、ＰＣＲ増幅のための鋳型として用いた。キナーゼドメイン（１０３８〜１３４６）をコードするＤＮＡ断片を、Ｎｏｖａｇｅｎベクターｐｅｔ２８ａのＮｃｏＩおよびＳａｌＩの部位の間に挿入した。プライマーは、Ｎ末端に６−ヒスチジンタグを含むように設計した。脱リン酸化ｃ−Ｍｅｔキナーゼタンパク質を発現させるために、チロシンホスファターゼＰＴＰ１Ｂ（１−２８３）を、作製した構築物のＳａｌＩおよびＮｏｔＩの部位の間に逐次的に連結した。第２のリボソーム結合部位を、ＳａｌＩ部位の後のＰＴＰ１Ｂプライマーに組み込んだ。Ｎ末端Ｈｉｓ標識タンパク質を、Ｃｉｒｃｌｅｇｒｏｗ培養液（Ｑ−Ｂｉｏｇｅｎ）中に発現させた。形質転換Ｅ．  Ｃｏｌｉ細胞系ＢＬ２１（ＤＥ３）ＲＩＬ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）を、３７℃でＯＤ＝０．８まで培養し、１２℃で一晩、０．３ｍＭのＩＰＴＧで誘導した。同時発現したタンパク質を金属キレート化クロマトグラフィーで、続いてアニオンおよびカチオンカラムで精製した。簡潔には、２０ｍＭ  ＭＯＰＳ  ｐＨ＝６．５、２００ｍＭ  ＮａＣｌ、７．５％グリセロール、０．１％Ｉｇｅｐａｌを含み、１ｍＭ  ＰＭＳＦを補給した１４０ｍｌの緩衝液での超音波処理によって、４リットルの細胞を溶解した。５０，０００ｇで３０分間の遠心分離によって上清を得、それを、４℃で１時間、８ｍＬのＮｉ−ＮＴＡ  Ｈｉｓ結合樹脂（Ｎｏｖａｇｅｎ）とインキュベートした。溶解緩衝液による最初の洗浄の後、第２段階の５０ｍＬ洗浄緩衝液（１００ｍＭ  ＮａＣｌおよび５ｍＭイミダゾールで）を加えた。２００ｍＭイミダゾールｐＨ＝８．５、１００ｍＭ  ＮａＣｌおよび７．５％グリセロールによってタンパク質を溶出させ、１０ｍＬ  ＱＦＦカラムを通させることによって直ちに清澄化した。希釈によってタンパク質フロースルーの塩濃度およびｐＨ値を５０ｍＭおよび７．５に調節し、次に、１ｍＬ  ＳＰ  ＦＦカラムに加えた。２０ｍＭトリスＨＣｌ  ｐＨ＝８．５、１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、７．５％グリセロールおよび２ｍＭ  ＤＴＴの平衡緩衝液で、タンパク質をさらにゲルろ過した。−８０℃での保存のために、単量体非リン酸化ｃ−Ｍｅｔタンパク質を３０ｍｇ／ｍＬまで濃縮した。
【０２２８】
残基１０３８〜１３４６を含む組換え体非リン酸化ｃ−Ｍｅｔ（１２．５ｎｇ）を、濃度を次第に高めた化合物と一緒に、室温で１５分間プレインキュベートした。化合物とのプレインキュベーションに続いて、１００μＭのＩＧＦ−１Ｒｔｉｄｅ基質および、２．５μＣｉ［３３Ｐ−γＡＴＰ］を含む１００μＭ  ＡＴＰを混合液に加えた。反応は、８ｍＭ  ＭＯＰＳ−ＮａＯＨ  ｐＨ＝７．０、２００μＭ  ＥＤＴＡ、５ｍＭ酢酸マグネシウム、２００μＭジチオスレイトール（ＤＴＴ）および１０ｍＭ  Ｎａ３ＶＯ４を含む反応緩衝液中で、３０分間実行した。次に、１０μＬの３％リン酸で反応を終了させた。１０μＬをフィルタープレートに移し、１％リン酸で３回洗浄し、マイクロベータカウンターでカウントを読み取り、各化合物についてｃ−Ｍｅｔ阻害のＩＣ５０を判定した。
【０２２９】
（実施例１５）
ＭＴＳアッセイ
ＨＴ２９細胞を、９６ウェルプレートの１０％ＦＢＳ含有培地に、１，８００細胞数／ウェルで一晩播種した。その翌日、３７℃で２４時間、濃度を次第に高めた化合物で細胞を処理した。処理の後、化合物含有培地を除去し、細胞をＰＢＳで２回洗浄し、１０％ＦＢＳを含有する無薬剤培地でさらなる４８時間インキュベートした。それぞれ２ｍｇ／ｍＬおよび０．９２ｍｇ／ｍＬの濃度のＭＴＳおよびＰＭＳの４時間の添加の後、結果をλ＝４９０ｎｍでの分光測光によって数量化し、各化合物のＩＣ５０値を判定した。
【０２３０】
【表１】
0005425060.tif 000037
他の実施形態は以下の特許請求の範囲内にあった。いくつかの実施形態を示し説明してきたが、本発明の趣旨および範囲を逸脱することなく、様々な修正を加えることができる。
【図１】
0005425060.tif 000039