(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物：
【化１】
0005581390.tif 000139
［式中、
Ａは
【化２】
0005581390.tif 000140
または
【化３】
0005581390.tif 000141
であり、
Ｒ１は、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３またはＣＦ３であり；
Ｒ２は、Ｈ、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＣＨ＝ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＯＣＨ３またはテトラヒドロピラン−４−イルであり、ここでＣ３−Ｃ６シクロアルキルは１位においてメチルで任意に置換され、テトラヒドロピラン−４−イルは４位においてメチルで任意に置換され、Ｒ３はＨであり；
またはＲ２およびＲ３は両方Ｃｌであり；
Ｒ４はＨであり、Ｒ５はＣＨ３、Ｃ（ＣＨ３）３、ＣＨ（ＣＨ３）２、シクロブチル、シクロペンチル、ＣＨ２−シクロプロピル、Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ３またはテトラヒドロピラン−４−イルであり；
またはＲ４およびＲ５は両方ＣＨ３であり；
またはＲ４およびＲ５は、それらが結合するＮと一緒に３位においてヒドロキシで任意に置換されるピロリジン、またはアゼチジンを形成する］
またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項２】
（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン；
（Ｒ）−４−（４−（４−エチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン；および
（Ｒ）−４−（４−（１−（２−（アゼチジン−１−イル）エチル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
から選択される請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容可能な塩。
【請求項３】
請求項１または２に記載の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩、および医薬的に許容可能な担体、希釈剤または賦形剤を含む、肺癌、乳癌または膠芽細胞腫を治療するための医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はＡＫＴ阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ホスホチジルイノシトール−３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）／ＡＫＴ／ラパマイシンの哺乳動物標的（ｍＴＯＲ）経路は、細胞成長および生存の制御に重要な多くのシグナル伝達ポイントを包含する。プロテインキナーゼＢとしても知られているＡＫＴは、この経路において重要な役割を有するセリン−トレオニンプロテインキナーゼである。ＡＫＴの活性化はＰＩ３Ｋによって媒介される。ＰＩ３ＫはＡＫＴに結合するリン脂質を生成する。結合時に、ＡＫＴは細胞膜に動員され、リン酸化反応を介して活性化される。ＡＫＴ活性化およびシグナル伝達は、細胞生存、成長および増殖を促進する。増加したＡＫＴ活性化は、種々の癌に関与している。
【０００３】
ＡＫＴ阻害活性を有する一連の置換ピペリジン化合物は特許文献１に開示されている。これらの化合物は、癌を含む、異常細胞増殖または異常に停止された細胞死を含む、またはそれらから生じる疾患または病態の治療における使用を開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第２００８／０７５１０９号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
癌などの増殖性疾患の治療に使用され得る代替のＡＫＴ阻害剤を提供する必要性が存在する。本発明は代替のＡＫＴ阻害剤を提供する。本発明の特定の化合物は、当該技術分野において公知のものより有効なＡＫＴ阻害剤である。
【０００６】
本発明の特定の化合物は、当該技術分野において知られている阻害剤と比べて、低いキナーゼ２（ＲＯＣＫ２）活性を有する。本発明の特定の化合物は、当該技術分野において知られているＡＫＴ阻害剤と比べて、改善された経口有効性を有する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は以下の式の化合物：
【化１】
0005581390.tif 000002
［式中、
Ａは、
【化２】
0005581390.tif 000003
であり、
Ｒ１は、ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ３またはＣＦ３であり；
Ｒ２は、Ｈ、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＣＨ＝ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＯＣＨ３またはテトラヒドロピラン−４−イルであり、ここで、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルは１位にてメチルで置換されてもよく、テトラヒドロピラン−４−イルは４位にてメチルで置換されてもよく、Ｒ３はＨであり；またはＲ２およびＲ３は両方Ｃｌであり；およびＲ４はＨであり、Ｒ５はＣＨ３、Ｃ（ＣＨ３）３、ＣＨ（ＣＨ３）２、シクロブチル、シクロペンチル、ＣＨ２−シクロプロピル、Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＣＨ３またはテトラヒドロピラン−４−イルであり；またはＲ４およびＲ５は両方ＣＨ３であり；またはＲ４およびＲ５はそれらが結合するＮと一緒に、３位にてヒドロキシで置換されてもよいピロリジン、またはアゼチジンを形成する］
またはその医薬的に許容可能な塩を提供する。
【０００８】
本発明は、本発明の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩、および医薬的に許容可能な担体、希釈剤、または賦形剤を含む医薬製剤を提供する。
【０００９】
本発明は、治療に使用するための、本発明の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を提供する。
【００１０】
本発明は、肺癌、乳癌または膠芽細胞腫の治療に使用するための、本発明の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を提供する。本発明はさらに、哺乳動物における肺癌、乳癌または膠芽細胞腫を治療する方法であって、そのような治療を必要とする哺乳動物に、有効量の本発明の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を投与することを含む、方法を提供する。加えて、本発明は、肺癌、乳癌または膠芽細胞腫を治療するための医薬を製造するための、本発明の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩の使用を提供する。さらに、本発明は、本発明の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を含む、治療に使用するための医薬組成物を提供し、また、本発明の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を含む、肺癌、乳癌または膠芽細胞腫を治療するための医薬組成物を提供する。
【００１１】
本発明は、医薬的に許容可能な担体および必要に応じて他の治療剤と一緒に本発明の化合物を含む、医薬組成物を提供する。
【００１２】
上記の式に使用される一般的な化学用語はそれらの通常の意味を有する。例えば、用語「Ｃ１−Ｃ４アルキル」とは、１〜４個の炭素原子の直鎖または分枝状の一価飽和脂肪族鎖を指し、限定されないが、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、およびｔ−ブチルが挙げられる。エチル、プロピル、イソプロピル、ブチルおよびイソブチルは好ましいアルキル基である。エチルが特に好ましい。
【００１３】
本発明の化合物は塩基であり、従って、多くの有機酸および無機酸のいずれかと反応して、医薬的に許容可能な塩を形成し、本発明は式Ｉの化合物の医薬的に許容可能な塩を含む。本明細書で用いる、用語「医薬的に許容可能な塩」とは、生物に対して実質的に無毒である式Ｉの化合物の塩を指す。そのような塩は、当業者に公知である、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，６６，２−１９（１９７７）に記載されている医薬的に許容可能な塩を含む。一実施形態において、本発明の化合物は遊離塩基または塩酸塩である。特に、それは遊離塩基である。
【００１４】
本発明の化合物の一部は１つ以上の不斉中心を有し、種々の立体異性体構造で存在し得る。これらの不斉中心の結果として、本発明の化合物は、ラセミ化合物、鏡像異性体の混合物として、ならびに個々の鏡像異性体、およびジアステレオマーおよびジアステレオマーの混合物として存在する。全てのこのようなラセミ化合物、鏡像異性体、およびジアステレオマーは、本発明の範囲内である。式Ｉの化合物の特定の立体異性体および鏡像異性体は、Ｊ．Ｊａｃｑｕｅｓら，「Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ，ａｎｄ  Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ」，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９８１，ならびにＥ．Ｌ．ＥｌｉｅｌおよびＳ．Ｈ．Ｗｉｌｅｎ，「Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」，（Ｗｉｌｅｙ−Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ  １９９４），ならびに１９９８年４月２９日に公開された欧州特許出願公開番号ＥＰ−Ａ−８３８４４８によって開示されているもののような周知技術およびプロセスを使用して当業者により調製され得る。分割の例としては、再結晶技術またはキラルクロマトグラフィーが挙げられる。
【００１５】
用語「Ｒ」および「Ｓ」は、不斉中心の特定の構造を示すために有機化学において一般的に使用されるように本明細書で用いる。用語「Ｒ」（レクタス）とは、優先順位の最も低い基への結合に沿って見る場合に、時計回りの基の優先順位（第１位から第２位への）をもつ不斉中心の立体配置を指す。用語「Ｓ」（シニスター）とは、優先順位の最も低い基への結合に沿って見る場合に、反時計回りの基の優先順位（第１から第２位への）をもつ不斉中心の立体配置を指す。基の優先順位は、それらの原子番号に基づいている（原子番号の減少する順番）。優先順位の部分的リストおよび立体化学の議論は、「Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ」，（Ｊ．Ｈ．Ｆｌｅｔｃｈｅｒら，ｅｄｓ．１９７４），ｐ１０３−１２０に含まれている。
【００１６】
記号
【化３】
0005581390.tif 000004
は、紙面から前へ突き出す結合を指す。記号
【化４】
0005581390.tif 000005
は、紙面から後へ突き出す結合を指す。
【００１７】
用語「鏡像異性体富化」とは、一方の鏡像異性体の量の、他方の鏡像異性体と比較しての増大を指す。達成された鏡像異性体富化を表現する簡便な方法は、鏡像異性体過剰率の概念、または「ｅｅ」の概念であって、以下の式を用いて表される。
％ｅｅ＝Ｅ１−Ｅ２
式中、Ｅ１は第１の鏡像異性体の量の割合であり、Ｅ２は第２の鏡像異性体の量の割合である。鏡像異性体富化は、キラルカラムによるガスクロマトグラフィーまたは高速液体クロマトグラフィーなどの標準的な技術および方法を使用して当業者により容易に決定される。
【００１８】
Ｒ１が結合される炭素はＲ立体配置：
【化５】
0005581390.tif 000006
であることが好ましい。
【００１９】
本明細書で用いる、用語「Ｒ鏡像異性体」とは、９０％より多い、好ましくは９５％より多い、およびより好ましくは９８％より多いＲ鏡像異性体の％ｅｅが存在することを意味する。
【００２０】
当業者はまた、式Ｉの化合物が、互変異性体、例えば：
【化６】
0005581390.tif 000007
として存在することを理解するだろう。
【００２１】
互変異性体は構造的に異なるが、当業者は、それらが平衡状態で存在し、通常の条件下で容易かつ迅速に相互変換することを理解するだろう（Ｍａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９８５），ｐ６６−７０；およびＡｌｌｉｎｇｅｒ，Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｏｒｔｈ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，（１９７６），ｐ１７３を参照のこと）。このように、単一の互変異性型の式Ｉの化合物の表現は、個々の互変異性型およびそれらの混合物の両方を意図する。
【００２２】
例示した化合物は、Ｃｈｅｍ  Ｄｒａｗ  Ｕｌｔｒａバージョンｖ１０またはＣｈｅｍ  Ｂｉｏ  Ｖｉｚ  Ｕｌｔｒａバージョンｖ１１内の命名プログラムを用いて命名した。
【００２３】
一実施形態において、本発明は、Ａが
【化７】
0005581390.tif 000008
である、式Ｉの化合物を含む。
【００２４】
特に、Ａは
【化８】
0005581390.tif 000009
である。
【００２５】
一実施形態において、Ｒ１はＣＨ３またはＣＦ３である。特に、Ｒ１はＣＨ３である。
【００２６】
代替の実施形態において、本発明は、Ａが
【化９】
0005581390.tif 000010
である、式Ｉの化合物を含む。
【００２７】
一実施形態において、本発明は、Ｒ２が、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、ＣＮ、Ｃｌ、Ｂｒ、ＣＨ＝ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＯＣＨ３またはテトラヒドロピラン−４−イルであり、ここで、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルは１位にてメチルにより置換されてもよく、テトラヒドロピラン−４−イルは４位にてメチルで置換されてもよく、Ｒ３はＨであり；またはＲ２およびＲ３は両方Ｃｌである、式Ｉの化合物を含む。特に、Ｒ２は、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ３、（ＣＨ２）２ＣＨ３、（ＣＨ２）３ＣＨ３、ＣＨ（ＣＨ３）２、ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃｌ、Ｂｒ、ＣＨ＝ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＯＣＨ３またはテトラヒドロピラン−４−イルであり、ここで、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルは１位にてメチルにより置換されてもよく、テトラヒドロピラン−４−イルは４位にてメチルで置換されてもよく、Ｒ３はＨであり；またはＲ２およびＲ３は両方Ｃｌである。より特には、Ｒ２はＣＦ３、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ３またはテトラヒドロピラン−４−イルであり、Ｒ３はＨである。さらにより特には、Ｒ２はテトラヒドロピラン−４−イルであり、Ｒ３はＨである。
【００２８】
別の実施形態において、本発明は、Ｒ２が、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ３、（ＣＨ２）２ＣＨ３、シクロプロピル、Ｂｒ、ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、またはテトラヒドロピラン−４−イルであり、Ｒ３がＨである、式Ｉの化合物を含む。特には、Ｒ２は、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３またはＣＨ２ＣＨ３であり、Ｒ３はＨである。
【００２９】
一実施形態において、本発明は、Ｒ４がＨであり、Ｒ５がＣＨ３、Ｃ（ＣＨ３）３、ＣＨ（ＣＨ３）２、シクロブチル、シクロペンチルまたはＣＨ２−シクロプロピルであり；またはＲ４およびＲ５の両方はＣＨ３であり；またはＲ４およびＲ５はそれらが結合するＮと一緒に、３位にてヒドロキシにより置換されてもよい、ピロリジン、またはアゼチジンを形成する、式Ｉの化合物を含む。特に、Ｒ４はＨであり、Ｒ５はＣＨ３、Ｃ（ＣＨ３）３、ＣＨ（ＣＨ３）２、シクロブチル、シクロペンチルまたはＣＨ２−シクロプロピルであり；またはＲ４およびＲ５はそれらが結合するＮと一緒に、ピロリジンまたはアゼチジンを形成する。より特には、Ｒ４およびＲ５はそれらが結合するＮと一緒に、ピロリジンを形成する。
【００３０】
別の実施形態において、本発明は、Ｒ４がＨであり、Ｒ５がＣ（ＣＨ３）３であり；またはＲ４およびＲ５が、それらが結合するＮと一緒にピロリジンまたはアゼチジンを形成する、式Ｉの化合物を含む。特にＲ４およびＲ５は、それらが結合するＮと一緒にピロリジンまたはアゼチジンを形成する。
【００３１】
さらなる実施形態において、本発明は、式Ｉの化合物
［式中、
Ａは
【化１０】
0005581390.tif 000011
であり；
Ｒ１はＣＨ３またはＣＦ３であり；
Ｒ２は、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ３、（ＣＨ２）２ＣＨ３、（ＣＨ２）３ＣＨ３、ＣＨ（ＣＨ３）２、ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）２、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、Ｃｌ、Ｂｒ、ＣＨ＝ＣＨ２、ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３、Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２ＯＣＨ３またはテトラヒドロピラン−４−イルであり、ここで、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキルは１位にてメチルにより置換されてもよく、テトラヒドロピラン−４−イルは４位にてメチルで置換されてもよく、Ｒ３はＨであり；またはＲ２およびＲ３の両方はＣｌであり；
Ｒ４はＨであり、Ｒ５はＣＨ３、Ｃ（ＣＨ３）３、ＣＨ（ＣＨ３）２、シクロブチル、シクロペンチルまたはＣＨ２−シクロプロピルであり；またはＲ４およびＲ５は、それらが結合するＮと一緒にピロリジンまたはアゼチジンを形成する］
またはその医薬的に許容可能な塩を含む。
【００３２】
なおさらなる実施形態において、本発明は、以下の式の化合物：
【化１１】
0005581390.tif 000012
［式中、
Ｒ２は、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ３またはテトラヒドロピラン−４−イルである］
またはその医薬的に許容可能な塩を含む。
【００３３】
別の実施形態において、本発明は、式Ｉの化合物：
［式中、
Ａは、
【化１２】
0005581390.tif 000013
であり、
Ｒ１は、ＣＨ３、ＣＦ３またはＣＨ２ＣＨ３であり；
Ｒ２は、ＣＦ３、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ３、（ＣＨ２）２ＣＨ３、シクロプロピル、Ｂｒ、ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ３またはテトラヒドロピラン−４−イルであり、Ｒ３はＨであり；
Ｒ４はＨであり、Ｒ５はＣ（ＣＨ３）３であり；またはＲ４およびＲ５は、それらが結合するＮと一緒にピロリジンまたはアゼチジンを形成する］
またはその医薬的に許容可能な塩を含む。
【００３４】
さらに別の実施形態において、本発明は、以下の式の化合物：
【化１３】
0005581390.tif 000014
［式中、
Ｒ１は、ＣＨ３またはＣＦ３であり；
Ｒ２は、ＣＨ２ＣＦ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＦ３またはＣＨ２ＣＨ３であり；
Ｒ４およびＲ５は、それらが結合するＮと一緒にピロリジンまたはアゼチジンを形成する］
またはその医薬的に許容可能な塩を含む。
【００３５】
別の実施形態において、以下の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩：
（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピロド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン；
（Ｒ）−４−（４−（４−エチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−メチル−５，６−ジヒドロピロド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン；および
（Ｒ）−４−（４−（１−（２−（アゼチジン−１−イル）エチル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピロド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンが提供される。
【００３６】
一実施形態において、本発明の化合物は、（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン、またはその医薬的に許容可能な塩である。特に、本化合物は、（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンである。より特には、本化合物は、（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン結晶形態ＩＩＩである。（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン結晶形態ＩＩＩは、８．５３（２θ±０．１°）におけるピークならびに任意に１７．０６、７．９７および１４．１７（２θ±０．１°）から選択される１つ以上のピークを含むＸ線粉末回折パターン（ＣｕＫα放射線、λ＝１．５４０５６Å）により特徴付けられる。好ましくは、８．５３、１７．０６、７．９７および１４．１７（２θ±０．１°）におけるピークを含むＸ線粉末回折パターンにより特徴付けられる。
【００３７】
本発明の化合物はＡＫＴの阻害剤であり、従って、癌の治療に有用である。特に、乳癌（Ｃａｒｐｔｅｎら，４４８：４３９−４４４（２００７））、特に、ＨＥＲ２陽性乳癌（Ｙａｋｅｓら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，６２：４１３２−４１４１（２００３））；結腸直腸癌（Ｐａｒｓｏｎｓら，Ｎａｔｕｒｅ，４３６：７９２（２００５）；Ｃａｒｐｔｅｎら，４４８：４３９−４４４（２００７））；卵巣癌（Ｃａｒｐｔｅｎら，４４８：４３９−４４４（２００７））；肺癌、特に、肺扁平上皮癌（Ｍａｌａｎｇａら，Ｃｅｌｌ  Ｃｙｃｌｅ，７：５：６６５−６６９（２００８））；胃癌（Ｂｙｕｎら，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，１０４：３１８−３２７（２００３））；膵癌（Ｒｕｇｇｅｒｉら，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ，２１：８１−８６（１９９８））；頭頸部扁平上皮癌（Ｐｅｄｒｅｒｏら，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，１１４：２４２−２４８（２００５））；黒色腫（Ｓｔａｈｌら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，６４：７００２−７０１０（２００４））；膠芽細胞腫（Ｔｈｅ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ａｔｌａｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｎｅｔｗｏｒｋ，４５５：１０６１−１０６８（２００８））；前立腺癌（Ｓａｓａｋｉら，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．，３９９（１）：７９−８３（２０１０））；膀胱癌（Ｃｈｉｎｇら，Ｌａｂ．Ｉｎｖｅｓｔ．，Ｅｐｕｂ．２６  ２０１０年７月）；中皮腫（Ｍｏｈｉｕｄｄｉｎら，Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｓｕｒ．Ｏｎｃｏｌ．，９（３）：３１０−３１６（２００２））；肉腫、特に軟部組織の肉腫（Ｚｈｕら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，６８（８）：２８９５−２９０３（２００８））；および腎癌（Ｈａｒａら，Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｏｎｃｏｌ．，１６：９２８−９３３（２００５））を含む、ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ／ｍＴＯＲ経路が活性化される癌の治療である。
【００３８】
本発明の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩は、哺乳動物における癌、特に上記の癌を治療する方法であって、そのような治療を必要とする哺乳動物に、有効量の本発明の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を投与することを含む、方法において使用され得る。癌、特に上記の癌の治療に使用するための、本発明の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩がさらに提供される。さらに、本発明の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩は、癌、特に上記の癌を治療するための医薬の製造に使用され得る。本発明の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を含む、癌、特に上記の癌を治療するための医薬組成物もまた、提供される。
【００３９】
本発明の化合物は、他の治療剤および特に、ｍＴＯＲ（ラパマイシンの哺乳動物標的）阻害剤、ＥＧＦＲ（上皮細胞増殖因子受容体）阻害剤、ゲムシタビン（Ｇｅｍｚａｒ（登録商標））、シスプラチン、タシスラム（ナトリウムＮ−［（５−ブロモチオフェン−２−イル）スルホニル］−２，４−ジクロロベンズアミド）、ペメトレキセド（Ａｌｉｍｔａ（登録商標））、ドセタキセル（Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標））、ドキソルビシン（Ｄｏｘｉｌ（登録商標））、イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏ（登録商標）；Ｃａｍｐｔｏｓａｒ（登録商標））、パクリタキセル（Ｔａｘｏｌ（登録商標））またはタモキシフェンと併用して使用されてもよい。好ましいｍＴＯＲ阻害剤としては、ラパマイシン（シロリムスとしても知られている）およびその類似体、例えばエベロリムス（４２−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エチル−ラパマイシン；欧州特許第１４１３５８１号に開示されている）、テムシロリムス（４２−（３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロパノエート）−ラパマイシン；Ｔｏｒｉｓｅｌ（登録商標）；国際公開第９５／２８４０６号パンフレットに開示されている）およびデホロリムス（４２−（ジメチルホスフィナート）ラパマイシン；国際公開第０３／６４３８３号パンフレットに開示されている）が挙げられる。好ましいＥＧＦＲ阻害剤としては、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）；欧州特許第０３５９２８２号に開示されている）、パニツムマブ（Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（登録商標）；欧州特許第０３５９２８２号に開示されている）およびゲフィニチブ（Ｉｒｅｓｓａ（登録商標）；欧州特許第０５６６２２６号に開示されている）が挙げられる。
【００４０】
一実施形態において、本発明は、本発明の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩、および治療における同時、別々または連続使用のための併用製剤として上記のものから選択される治療剤を含有する製剤を提供する。本発明はさらに、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、肺癌、胃癌、膵癌、頭頸部扁平上皮癌、黒色腫、膠芽細胞腫、前立腺癌、膀胱癌、中皮腫、肉腫および腎癌の治療において、上記のものから選択される治療剤と併せて同時、別々および連続して使用するための本発明の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩を提供する。本発明はさらに、乳癌、結腸直腸癌、卵巣癌、肺癌、胃癌、膵癌、頭頸部扁平上皮癌、黒色腫、膠芽細胞腫、前立腺癌、膀胱癌、中皮腫、肉腫および腎癌からなる群より選択される癌を治療する方法であって、そのような治療を必要とする患者に、併用が有効である量で、本発明の化合物、またはその医薬的に許容可能な塩、および上記のものから選択される治療剤を投与することを含む、方法を提供する。
【００４１】
別の実施形態において、本発明は、医薬的に許容可能な担体および任意に他の治療剤と一緒に本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。特に、治療剤は上記のものから選択される。
【００４２】
本発明の化合物の経口投与が好ましい。状況に応じて、他の投与経路、例えば静脈内が使用されてもよいか、またはさらに好適であり得る。経口医薬を摂取することを忘れやすいまたは短気な患者にとって、経皮投与が非常に望ましい場合もある。本発明の化合物はまた、特定の状況において、経皮、筋肉内、鼻腔内または直腸内経路によって投与されてもよい。投与経路は、薬物の物理特性、患者および介護士の利便性、ならびに他の関連状況により制限される、任意の方法で変更されてもよい（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．（１９９０））。
【発明を実施するための形態】
【００４３】
式Ｉの化合物は、当該技術分野において認識されている技術および手順に従って当業者により調製され得る。より具体的には、式Ｉの化合物は、以下に記載されるスキーム、調製例および実施例に記載されるように調製され得る。以下のスキームにおける個々の工程は式Ｉの化合物を得るために変更されてもよいことは当業者により認識されるだろう。試薬および出発物質は当業者に容易に入手可能である。他に特定されない限り、すべての置換基は以前に定義される通りである。
【００４４】
【化１４】
0005581390.tif 000015
スキーム１において、式Ｉの化合物は、化合物（１）のピペリジン環のアミン基と、化合物（２）の離脱基である、クロロ基との間の求核置換反応によって調製できる。化合物（１）および化合物（２）は、ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミンまたは１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エンなどの適切な塩基を含む、Ｎ−メチルピロリジノン、メタノールまたはｎ−プロパノールなどの適切な溶媒中で溶解する。反応物はフラスコまたはマイクロ波チューブ中で加熱できる。式Ｉの化合物は、リン酸水溶液を用いる酸洗浄、続いて、水酸化ナトリウムを用いる塩基水溶液洗浄を含み得る水系後処理（ａｑｕｅｏｕｓ  ｗｏｒｋｕｐ）、およびさらに、シリカゲルクロマトグラフィーまたは高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ−キラルＡＤ）などの精製などの当該技術分野において公知の方法によって単離できる。代替として、水系後処理後、式Ｉの化合物は、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルとヘキサンの７５％混合物などの溶媒から再結晶により単離できる。
【００４５】
式Ｉの化合物の塩は、４Ｍ塩酸などの適切な酸水溶液中に式Ｉの化合物を溶解することによって調製でき、減圧下で濃縮することにより単離できる。代替として、式Ｉの化合物の酸性逆相クロマトグラフィーを使用して、二塩酸塩またはトリフルオロ酢酸塩を得ることができる。
【００４６】
【化１５】
0005581390.tif 000016
スキーム２において、代替経路が式Ｉの化合物（Ａは以前に定義した通りである）の調製について記載されている。この合成経路は、式Ｉの化合物について定義した−ＮＲ４Ｒ５置換基を得るために、化合物（１６）と適切なアミンとの間のアミン置換反応を含む。化合物（１６）は、ジメチルホルムアミドまたはジメチルスルホキシドなどの適切な溶媒中に溶解する。トリエチルアミンなどの適切な塩基を加える。式Ｉの化合物について定義した−ＮＲ４Ｒ５置換基を生じる適切なアミンを加える。反応が完了するまで、反応物を約５０℃にて加熱する。式Ｉの化合物を、水系後処理、濃縮、および有機抽出物のクロマトグラフィーなどの従来の手段によって単離する。
【００４７】
化合物１６を、ジクロロメタンなどの適切な溶媒中に化合物（１７）を溶解し、トリエチルアミンなどの適切な塩基を加え、約０℃に冷却することによって調製する。塩化メタンスルホニルを滴下して加える。その後、反応を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でクエンチし、続いて、当該技術分野で公知の従来の方法により化合物（１６）を単離する。化合物（１６）を精製せずに使用して、式Ｉの化合物を調製することができる。化合物（１７）は、スキーム１に記載した方法によって化合物（１８）（ｎ＝１〜２）および化合物（２）から調製できる。化合物（１７）を精製せずに使用して、化合物（１６）を調製できる。
【００４８】
得られた式Ｉの化合物がラセミ化合物である場合、それは、キラルクロマトグラフィーなどの当該技術分野において公知の方法によって個々の鏡像異性体に分離され得る。
【００４９】
式Ｉの化合物の個々の鏡像異性体のキラル純度は、ＨＰＬＣ（キラルパックＡＤ−Ｈ）および超流動体クロマトグラフィー（キラルＡＤ−Ｈ）により２つの鏡像異性体を比較することによって決定できる。
【００５０】
【化１６】
0005581390.tif 000017
スキーム３において、化合物（２ｂ）および（２ｃ）、化合物（２ａ）のラセミ混合物の鏡像異性体、４−クロロ−５−Ｒ１−６，８−ジヒドロ−５Ｈ−ピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７−オンは、化合物（５）および化合物（６）で開始する一連の反応により調製できる。化合物（２ａ）は、加熱しながら、化合物（３）と、水酸化アンモニウム（２０〜３０％）またはイソプロパノール中のアンモニアガスの溶液とを混合することによって調製する。化合物（２ａ）は、冷却後の濾過およびその後の冷水での洗浄により単離できる。キラルクロマトグラフィーによる化合物（２ａ）のさらなる分割により、化合物（２ｂ）および化合物（２ｃ）を得る。化合物（２ａ）、（２ｂ）または（２ｃ）を、スキーム１またはスキーム２における合成経路に従って使用して、式Ｉの化合物のラセミ体または個々の鏡像異性体を形成できる。
【００５１】
代替として、化合物（２ａ）は、ジクロロメタンなどの溶媒中のｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルｔｅｒｔ−ブチルカルボネートおよび４−（ジメチルアミノ）ピリジンを用いるｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）部分などの窒素保護基により保護できる。キラルクロマトグラフィーによるラセミ化合物の後の分離により、窒素ＢＯＣ−保護化合物（２ｂ）および（２ｃ）を得る。ＢＯＣ−保護化合物（２ｂ、２ｃ）とジオキサン中の塩酸との反応などの当該技術分野における公知の方法による脱保護により、所望の単一の鏡像異性体を得る。
【００５２】
化合物（３）は、化合物（４）のハロゲン置換反応により調製できる。化合物（３）は、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリンなどの塩基および塩化ホスホリルなどの塩素化剤の存在下で、アセトニトリルまたはトルエンなどの適切な溶媒中で溶解する。反応混合物を還流した後、化合物（３）は、３Ｍのリン酸水素二カリウム水溶液での水系後処理、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルなどの適切な溶媒での抽出、水での有機層の洗浄および真空中での濃縮などの従来の手段により単離できる。
【００５３】
代替として、化合物（２ａ）は、２，４−ジメトキシベンジル基などの窒素保護基を含むように合成できる。化合物３はまず、ジメチルホルムアミドなどの適切な溶媒中に溶解する。ジイソプロピルエチルアミンなどの塩基および試薬２，４−ジメトキシベンジルアミンを加える。２，４−ジメトキシベンジル中間体を、水系後処理などの当該技術分野において公知の方法によって単離する。この中間体を、ジイソプロピルエチルアミンなどの塩基の存在下で加熱して、２，４ジメトキシベンジル保護化合物（３）を形成する。この化合物をスキーム１の合成において実施して、式Ｉの２，４−ジメトキシベンジル保護化合物を形成することができる。式Ｉの２，４−ジメトキシベンジル保護化合物を従来の手段によって脱保護して、ラセミ化合物を得、その後、キラルクロマトグラフィーにより個々の鏡像異性体を分離する。
【００５４】
化合物（４）は、マイケル付加反応、続いて、その場（ｉｎ  ｓｉｔｕ）での環形成反応により調製できる。プロパン二酸ジメチルエステル（化合物（５））および化合物（６）を、メタノール溶液および酢酸ホルムアミジン中のナトリウムメトキシドの混合物に加える。化合物（４）は、反応物のｐＨを約３に調節し、濾過し、メタノール／水などの冷却した溶媒混合液で生成物を洗浄することによって従来の手段によって単離できる。
【００５５】
【化１７】
0005581390.tif 000018
スキーム４において、化合物（２ｄ）は、アミン（１０）、２，２，２−トリフルオロエチルアミンなどの市販の出発物質と、市販のアルデヒド、４−アミノ−６−クロロピリミジン−５−カルバルデヒド（７）との間の還元的アミノ化反応で開始する一連の反応により調製して、チタンテトライソプロポキシドの存在下で、テトラヒドロフランおよびメタノールなどの溶媒混合液中のイミン（８）を形成できる。イミンを、ジクロロメタンなどの溶媒中に化合物（８）を溶解し、窒素下で冷却し、メタンスルホン酸およびボランｔｅｒｔ−ブチルアミンなどの適切な還元剤を加えることによって還元する。アミン（９）は、塩基水溶液系後処理および真空中で有機物を乾燥させることによって単離する。化合物（９）はさらに精製せずに次の反応において直接使用できる。化合物（２ｄ）は、窒素下で約０℃に冷却し、その後一晩、約４０℃で反応混合物を加熱しながら、ジクロロメタンなどの適切な溶媒中のトリエチルアミンなどの塩基の存在下で、化合物（９）とトリホスゲンとを反応させることによって調製する。化合物（２ｄ）は、水系後処理、濃縮、および有機抽出物のクロマトグラフィーなどの当該技術分野において公知の方法によって単離する。式Ｉの化合物は、スキーム１および２におけるように化合物（２ｄ）を利用することによって得ることができる。
【００５６】
【化１８】
0005581390.tif 000019
スキーム５において、化合物（１）は、必要に応じてジクロロメタン、メタノールまたはイソプロパノールなどの適切な溶媒中に溶解する、化合物（１５）に、ジオキサン、イソプロパノール、メタノールまたはエタノール中の塩化水素を加えることなどの従来の手段によって、対応するｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル化合物（１５）の脱保護によって調製できる。反応は、約２時間から１８時間、室温から約５０℃までの範囲の温度で実施できる。従来の後処理は、揮発性物質を蒸発させることを含んでもよく、続いて、２Ｍ水酸化ナトリウムなどの塩基を用いる任意選択の塩基性化工程、酢酸エチルなどの溶媒での抽出、および真空中での濃縮により、遊離塩基、ｎＨＣｌまたはｎ酢酸塩として化合物（１）を得ることができる。
【００５７】
化合物（１５）は、化合物（１６）からの式Ｉの化合物の調製に関してスキーム２に記載した同様の反応によって化合物（１４）から調製できる。
【００５８】
化合物（１４）は、化合物（１７）からの化合物（１６）の調製に関してスキーム２に記載した同様の反応によって化合物（１３）から調製できる。
【００５９】
化合物（１３）は合成経路Ａに従って化合物（１２）から酸触媒脱保護反応により調製できる。化合物（１２）はテトラヒドロフランなどの適切な溶媒中に溶解する。１Ｎの塩酸水溶液などの酸触媒を加える。化合物（１３）は水系後処理などの当該技術分野において公知の方法によって単離できる。
【００６０】
化合物（１２）は１つの位置異性体として記載されているが、位置異性体の混合物を表してもよい。位置異性体（１２ａ）および（１２ｂ）の合成および単離をスキーム６に示す。化合物（１２）は、水酸化カリウムまたはカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなどの塩基を含むジメチルスルホキシドなどの適切な溶媒中で化合物（１１）を溶解することによって調製できる。ヨウ化ナトリウムを必要に応じて加えてもよい。２−（２−ハロエトキシ）テトラヒドロピランを反応物に加える。反応を約４時間室温にて維持するか、または約１時間から１２時間、約４５℃から５０℃まで加熱してもよい。化合物（１２）は、水系後処理、真空中での濃縮およびクロマトグラフィーによる精製などの当該技術分野において公知の方法によって単離できる。
【００６１】
代替として、経路Ｂを実施して、Ｒ４およびＲ５が、それらが結合するＮと一緒にピロリジンを形成する、化合物（１）を得ることもできる。化合物（１５ａ）は、化合物（１１）から化合物（１２）の変換に関する上記の反応条件を用いて、化合物（１１）と、１−（２−クロロエチル）−ピロリジン塩酸塩とを反応させることによって調製できる。化合物（１５ａ）は１つの位置異性体として記載されているが、位置異性体の混合物を表してもよい。位置異性体（１５ｂ）および（１５ｃ）の合成および単離をスキーム６に示す。ＢＯＣ保護基は上記の従来の手段によって除去できる。
【００６２】
【化１９】
0005581390.tif 000020
スキーム５におけるようなアルキル化化合物（１１）の場合、化合物（１２）の位置異性体（１２ａ）および（１２ｂ）ならびに化合物（１５ａ）の位置異性体（１５ｂ）および（１５ｃ）のそれぞれは、スキーム６に示すような様々な割合で形成できる。一部の場合、所望の異性体（１２ａ）または（１５ｂ）のみが得られる。他の場合、合成により、所望の化合物（１２ａ）または（１５ｂ）に好ましい割合が得られる。この場合、さらなる精製は任意選択であり、少量の不純物を除去するために後の工程において発生させてもよい。しかしながら、化合物（１２ａ）と化合物（１２ｂ）との間、または化合物（１５ｂ）と化合物（１５ｃ）との間の割合は、所望の異性体について優位でない場合、精製が必要である。所望の異性体（１２ａ）または（１５ｂ）を単離するための精製は、カラムクロマトグラフィーまたはブタン二酸を含むイソプロピルアルコール、または酢酸エチルを含むメタノールもしくはメタノール／エタノール混合物中の１Ｍもしくは３Ｍ塩酸などの適切な溶媒からの再結晶化を含む。
【００６３】
【化２０】
0005581390.tif 000021
スキーム７において、Ｒ２およびＲ３の導入は、化合物（１２ｃ）とＮ−ブロモスクシンイミドなどのハロゲン化剤との間のハロゲン化置換反応によって達成でき、ジハロ（１２ｄ）またはモノハロ（１２ｅ）置換化合物を得ることができる。化合物（１２ｄ）および（１２ｅ）はスキーム５におけるような合成で実施できる。また、Ｒ２およびＲ３がブロモである場合、化合物（１２ｄ）は、低い温度にて、テトラヒドロフランなどの適切な溶媒中で、その化合物と、ｎ−ブチルリチウムとを反応させ、続いて、イソプロピルアルコールを添加することによって化合物（１２ｅ）に変換できる。
【００６４】
化合物（１２ｅ）は、酢酸パラジウム、トリシクロヘキシルホスフィン、リン酸三カリウムＮ水和物および置換ボロン酸などのＳｕｚｕｋｉカップリング反応条件に供することができる。例えば、シクロプロピルボロン酸の場合、臭素がシクロプロピルにより置換される。
【００６５】
【化２１】
0005581390.tif 000022
スキーム８において、Ｒ２およびＲ３がクロロまたはヨードの場合、Ｒ２およびＲ３の導入は、化合物（１１ａ）と、Ｎ−クロロスクシンイミド、Ｎ−ヨードスクシンイミドまたはヨウ素などのハロゲン化剤との間のハロゲン化置換反応によってなされて、一般に文献に見出される反応条件下で、ジハロ（１１ｂまたは１１ｄ）またはモノハロ（１１ｃ）置換化合物を得ることができる。化合物（１１ｂ）および（１１ｃ）は、カラムクロマトグラフィーにより同じ反応混合物から単離できる。化合物（１１ｄ）は、反応混合物を重硫酸ナトリウム水溶液に注いで、黄色懸濁液を形成させ、濾過し、固体を洗浄することによって単離できる。化合物（１５ｄ、１５ｅおよび１５ｆ）は、対応する化合物（１１）からスキーム５に見出される合成に従って調製できる。
【００６６】
化合物（１５ｆ）は、イソプロピルマグネシウムクロリドおよび２−メチルテトラヒドロフランの存在下で、モノ脱ハロゲン化されて、化合物（１５ｇ）を形成することができる。化合物（１５ｇ）は、酢酸パラジウム、炭酸ナトリウムなどの塩基を含むジメチルスルホキシドなどの適切な溶媒中で、トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスホニウムテトラフルオロボラートおよび置換ボロン酸エステル（例えば２−（３，６ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（スキーム１６に従って調製され得る化合物（３８）））などのＳｕｚｕｋｉカップリング反応条件に供することができる。得られた３，６ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル置換化合物は、エタノールなどの適切な溶媒中のパラジウム炭の存在下で、水素の雰囲気下で還元されて、化合物（１５）（式中、Ｒ２＝テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルである）を形成させることができる。
【００６７】
【化２２】
0005581390.tif 000023
スキーム９において、化合物（１５ｈ）は、塩基、典型的には、三塩基性リン酸カリウムＮ水和物、およびパラジウム触媒、典型的には、ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）または酢酸パラジウム、およびジシクロヘキシル−［２−（２，６−ジメトキシフェニル）フェニル］ホスファンの存在下で、ボロン酸エステル４，４，５，５−テトラメチル−２−ビニル−１，３，２−ジオキサボロランと混合することなどのＳｕｚｕｋｉカップリング反応条件に供することができる。得られた化合物（１５ｉ）は、スキーム５におけるように進行させて、化合物（１）を得ることができる。
【００６８】
代替として、この反応は、ピロリジン−エチル置換化合物よりむしろ、ヒドロキシ−エチル置換化合物（１３）で実施してもよい。得られたアルケン化合物は、水素雰囲気下で、エタノールなどの適切な溶媒中の１０％パラジウム炭素を含む水素化条件に供して、アルキル置換化合物を形成することができる。化合物は、セライト（登録商標）で濾過し、続いて、メタノールで洗浄し、真空中で濃縮することにより単離できる。
【００６９】
【化２３】
0005581390.tif 000024
スキーム１０において、化合物（１８）は従来の脱保護方法によって調製できる。化合物（１２）をメタノールなどの適切な溶媒中で溶解し、ジオキサン溶液中の４Ｍ塩酸を加え、一晩攪拌する。化合物（１８）を、真空中で濃縮することなどの当該技術分野において公知の方法によって単離して、ｎＨＣｌ塩として化合物（１８）を得ることができる。化合物（１８）はスキーム２を利用して、式Ｉの化合物を形成できる。
【００７０】
【化２４】
0005581390.tif 000025
スキーム１１において、化合物（１１ｅ）は、ケトン（２２）またはアルデヒド（２６）から化合物（２３）への酸化反応およびアンモニア、化合物（２３）と、化合物（２４）のアルデヒド部分との間の濃縮反応を含む２工程プロセスによって調製できる。二酸化セレンを、酢酸などの酸を含む１，４−ジオキサンおよび水などの適切な溶媒混合物中で混合する。ケトン（２２）またはアルデヒド（２６）を酸化剤に加え、約９０℃で加熱し、２〜１８時間攪拌し、濾過して、化合物（２３）を得る。任意選択の後処理は、セライト（登録商標）での濾過、真空中での濃縮、およびメタノールなどの溶媒中での残留物の溶解を含み得る。化合物（２４）を、水酸化アンモニウムまたは酢酸アンモニウムを含むメタノールに溶解し、必要に応じて約０℃に冷却する。化合物（２３）を滴下して加え、反応物を一晩攪拌する。化合物（１１ｅ）は、濾過、水系後処理およびシリカゲルクロマトグラフィーによる精製などの当該技術分野において公知の方法によって単離できる。任意選択の後処理は、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルおよび水で残留物を希釈すること、リン酸水溶液を加えることによってｐＨを約２に調節すること、水層を分離すること、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで水層を洗浄すること、炭酸ナトリウムでｐＨを約１０に調節すること、および酢酸エチルでの最後の抽出を含み得る。有機層を合わせ、飽和塩化ナトリウムで洗浄し、濾過し、真空中で濃縮して、化合物（１１ｅ）を得る。
【００７１】
化合物（２３）は、市販されていない場合、化合物（２５）または（２６）から開始する一連の酸化反応によって調製できる。３，３，３−トリアセトキシ−３−ヨードフタリドをジクロロメタンなどの適切な溶媒中で溶解する。化合物（２５）を同じ溶媒中に溶解し、酸化剤に滴下して加える。約４時間後、化合物（２６）は、セライト（登録商標）での濾過、チオ硫酸ナトリウムおよび水酸化ナトリウムでの水性洗浄を含む水系後処理、濾過および真空中での濃縮などの当該技術分野において公知の方法によって単離できる。
【００７２】
【化２５】
0005581390.tif 000026
スキーム１２において、化合物（２２）は、ワインレブアミドを形成させることを含むワインレブケトン合成、続いて、有機金属求核試薬との反応および加水分解によって調製して、所望のケトンを形成できる。エステル（２７）をメタノールなどの適切な溶媒中に溶解して、水酸化ナトリウムなどの塩基を加える。酸（２８）は、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルおよび塩酸水溶液を含む酸洗浄液での水系後処理などの従来の手段によって単離できる。固体は精製せずに次の反応に実施できる。ワインレブアミド（２９）を、１，１’−カルボニルジイミダゾールの存在下で、ジクロロメタンなどの適切な溶媒中で酸（２８）を攪拌し、Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩を加えることによって調製する。ワインレブアミドを、塩化アンモニウム水溶液および飽和塩化ナトリウム水溶液での洗浄を含む水系後処理、および真空中での濃縮によって単離する。化合物（２９）は、さらに精製せずに次の工程に使用できる。次の工程は、テトラヒドロフランなどの溶媒中にワインレブアミドを溶解し、約０℃に冷却し、有機金属求核試薬、メチルマグネシウムクロリドを加えることを含む。この複合物を、反応混合物を氷／水混合物または塩化アンモニウム水溶液中に注ぐことによって加水分解する。メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルを含む水系後処理および真空中での濃縮により、化合物（２２）を得る。化合物（２２）は精製せずに次の工程に利用できるか、またはシリカゲルクロマトグラフィーによる精製後に利用できる。
【００７３】
化合物（２２）に対する代替のアプローチは、低温にて、テトラヒドロフランなどの溶媒中で、化合物（２７）と、イソプロピルマグネシウムクロリドおよびＮ，−Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩とを反応させて、ワインレブアミドを形成させることを含む。
【００７４】
【化２６】
0005581390.tif 000027
スキーム１３において、化合物（１１ｅ）はまた、高温にて、化合物（３０）と、酢酸ナトリウム水溶液とを反応させ、次いで、メタノールおよび水酸化アンモニウムなどの適切な溶媒中で、化合物（２４）とを反応させことによって調製できる。化合物（１１ｅ）は、水系後処理などの当該技術分野における公知の方法によって単離でき、さらに精製せずに利用できる。
【００７５】
【化２７】
0005581390.tif 000028
スキーム１４において、化合物（３０）の調製は１，１−ジブロモメタン（３２）のアニオン形成で開始する。アニオンの形成は、一般に文献に見出される方法によってジイソプロピルアミンおよびｎ−ブチルリチウムからリチウムジイソプロピルアミドの調製を含む。リチウムジイソプロピルアミドの形成後、化合物（３１）および化合物（３２）を、低温にてテトラヒドロフランなどの適切な溶媒中で攪拌し、低温を維持しながら、リチウムジイソプロピルアミドを滴下して加える。反応を塩酸水溶液でクエンチし、続いて、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルおよびヘプタンなどの溶媒を用いて水系後処理する。
【００７６】
【化２８】
0005581390.tif 000029
スキーム１５において、化合物（１１ｆ）の合成を、アルデヒド（３３）から開始しているように示す。合成を、Ｎ−メチル−Ｎ−（メチレンアミノ）−メタンアミンと、２，６−ルチジンなどの塩基とを反応させ、低温にてトルフルオロ酢酸無水物を加えることによって、（Ｅ）−（ジメチルヒドラゾノ）−１，１，１−トリフルオロ−プロパン−２−オンを形成させることによって達成する。中間体を、酢酸中の化合物（２４）および酢酸アンモニウムとを反応させて、化合物（１１ｆ）を形成する。化合物（１１ｆ）は、水酸化アンモニア中の化合物（１１ｆ）を加熱し、冷却し、固体を単離するために濾過することによってトリフルオロメチル置換基をシアノ置換基に変換することによって化合物（１１ｇ）にさらに変換できる。
【００７７】
【化２９】
0005581390.tif 000030
スキーム１６において、化合物（３８）は、水素化ナトリウムなどの塩基およびメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルなどの溶媒の存在下で、化合物（３４）と（３５）との間のウィリアムソンエーテル合成で開始する一連の反応を介して調製して、エーテル（３６）を形成できる。化合物（３６）を標準的な反応条件に供して、ボロン酸エステル（３７）を形成する。これらの試薬は、塩化リチウム、一塩化第一銅およびビス（ピナコラト）ジボロンおよびジメチルホルムアミドなどの適切な溶媒を含み得る。化合物（３８）は、ジクロロメタンなどの適切な溶媒中の第２世代グラブス触媒を利用してルテニウム触媒オレフィンメタセシスにより調製できる。化合物（３８）は、スキーム８に記載されるように式Ｉの化合物の合成に利用できる。
【００７８】
当業者は、式Ｉの化合物の置換基の全てが、化合物を合成するのに利用される特定の反応条件を許容するわけではないことを理解するだろう。それらの部分は、合成における簡便な点で導入されてもよく、または保護され次いで必要に応じてもしくは所望の場合に脱保護されてもよい。当業者はまた、保護基は、本発明の化合物の合成における任意の簡便な点で除去されてもよいことを理解するだろう。窒素保護基を導入し、除去するための方法は、当該技術分野において周知である。例えば、ＧｒｅｅｎｅおよびＷｕｔｓ，「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」，第３版，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｃｈａｐｔｅｒ  ７（１９９９）を参照のこと。さらに、当業者は、多くの状況において、導入される部分の順序は重要ではないことを理解するだろう。式Ｉの化合物を生成するために必要な工程の特定の順序は、合成される特定の化合物、開始化合物ならびに置換中間体および生成物の相対的傾向に依存する。
【実施例】
【００７９】
調製例１
（Ｅ，Ｚ）−６−クロロ−５−（（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）メチル）ピリミジン−４−アミン
【化３０】
0005581390.tif 000031
【００８０】
テトラヒドロフラン（４ｍＬ）中の４−アミノ−６−クロロピリミジン−５−カルバルデヒド（０．３１ｇ，１．９４ｍｍｏｌ）の溶液を、チタニウムテトラ（イソプロポキシド）（０．８５ｍＬ、１．５当量）、２，２，２−トリフルオロエチルアミン（０．７６ｍＬ、４．９当量）、およびメタノール（３．８ｍＬ）の混合物に加える。室温で一晩、反応物を攪拌する。２：１の水酸化アンモニウム：水を反応混合物に加え、次いで酢酸エチルで希釈する。層を分離する。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、標題化合物を白色の固体（０．４４ｇ、９６％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２３９［Ｍ］＋。
【００８１】
調製例２
６−クロロ−５−（（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）メチル）ピリミジン−４−アミン
【化３１】
0005581390.tif 000032
【００８２】
（Ｅ，Ｚ）−６−クロロ−５−（（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）メチル）ピリミジン−４−アミン（３．４２ｇ、１４．３５ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（３４．８ｍＬ）を合わせる。窒素下で０℃に冷却する。シリンジによりメタンスルホン酸（２．３０ｍＬ、２．４当量）を滴下して加え、５℃以下に温度を維持する。シリンジによりジクロロメタン（１０ｍＬ）中のボランｔｅｒｔ−ブチルアミン錯体（１．８６ｇ、１．５当量）の溶液を滴下して加え、５℃以下に温度を維持する。反応混合物を１時間、０℃で攪拌する。２：１の水酸化アンモニウム：水を加え、次いでジクロロメタンで希釈する。層を分離する。無水硫酸ナトリウムで有機物を乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮し、標題化合物を黄色の固体（２．３９ｇ、６９％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２４１［Ｍ］＋。
【００８３】
調製例３
５−クロロ−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−３，４−ジヒドロピリミド［４，５−ｄ］ピリミジン−２（１Ｈ）−オン
【化３２】
0005581390.tif 000033
【００８４】
６−クロロ−５−（（２，２，２−トリフルオロエチルアミノ）メチル）ピリミジン−４−アミン（９．５７ｇ、３９．７８ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（５．５０ｍＬ、２．０当量）、およびジクロロメタン（７９５ｍＬ）を合わせる。窒素下で０℃に冷却する。ジクロロメタン（２２８ｍＬ）中のトリホスゲン（１１．８５ｇ、１．０当量）の溶液を加える。０℃で３０分間攪拌し、室温まで加温させる。反応混合物を４０℃まで一晩加熱する。炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出する。無水硫酸ナトリウムで有機物を乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。９：１のジクロロメタン：メタノールで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（４．５０ｇ、４２％）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１０．８３（ｓ，１Ｈ），８．４１（ｓ，１Ｈ），４．２０（ｍ，２Ｈ），３．２５（ｓ，２Ｈ）。
【００８５】
調製例４
メチル３−（４，６−ジヒドロキシピリミジン−５−イル）ブタノエート
【化３３】
0005581390.tif 000034
【００８６】
ナトリウムメトキシド（１４．６９ｇ、０．８５当量）をメタノール（７０ｍＬ）に加える。プロパン二酸ジメチルエステル（３６．６４ｍＬ、３２０．００ｍｍｏｌ）およびクロトン酸メチル（３４．０１ｍＬ、１．０当量）の混合物を加えながら、１５分にわたって加熱還流する。混合物を４０分間還流し、次いでその混合物を室温まで冷却する。ナトリウムメトキシド（１９．０２ｇ、１．１当量）、メタノール（７０ｍＬ）、および酢酸ホルムアミジン（３９．９８ｇ、１．２当量）の混合物を加える。室温で一晩攪拌する。氷槽で混合物を冷却し、５Ｍの塩酸水溶液を加え、ｐＨを３に調整する。濾過して、標題化合物（４１．００ｇ、６０％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２１３［Ｍ］＋。
【００８７】
メチル３−（４，６−ジヒドロキシピリミジン−５−イル）ブタノエートについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する。
【００８８】
【表１】
0005581390.tif 000035
【００８９】
調製例７
メチル３−（４，６−ジクロロピリミジン−５−イル）ブタノエート
【化３４】
0005581390.tif 000036
【００９０】
メチル３−（４，６−ジヒドロキシピリミジン−５−イル）ブタノエート（４１．００ｇ、１９３．２１ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（９５ｍＬ）に加える。塩化ホスホリル（３９．５０ｍＬ、２．２当量）を１０分にわたって滴下して加える（発熱が生じる）。１０分間、混合物を攪拌し、Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン（３４．００ｍＬ、１．１当量）を１０分にわたって滴下して加える（発熱が生じる）。混合物を一晩加熱還流する。氷槽で混合物を冷却する。第二リン酸カリウム水溶液（５００ｍＬの水中に３３６．５２ｇ、１０当量）のあらかじめ冷却した混合物にゆっくりと加える。水層を酢酸エチルで抽出する。飽和塩化ナトリウム水溶液で有機物を洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。ヘキサン中の１０％の酢酸エチルからヘキサン中の４０％の酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物（４４．００ｇ、５５％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２４９［Ｍ］＋。
【００９１】
メチル３−（４，６−ジクロロピリミジン−５−イル）ブタノエートについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する。
【００９２】
【表２】
0005581390.tif 000037
【００９３】
調製例１０
（Ｒ）−４−クロロ−５−エチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
【化３５】
0005581390.tif 000038
【００９４】
水（９５ｍＬ）中の２８％の水酸化アンモニウム中にメチル３−（４，６−ジクロロピリミジン−５−イル）ペンタノエート（１０．００ｇ、３８．０１ｍｍｏｌ）を溶解し、３５０ｍＬのチューブに密閉する。反応混合物を２００℃で２時間加熱する。反応混合物を氷槽中で冷却し、次いで濾過し、冷水で洗浄する。真空下で固体を乾燥させて、ラセミ化合物を得る。キラル分離により（キラルパックＡＳ−Ｈ、１００％のエタノールｗ／０．２％のジメチルエチルアミン）、標題化合物を鏡像異性体２（３．１９ｇ、４０％）（＞９９％ｅｅ）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２１２［Ｍ］＋。
【００９５】
（Ｒ）−４−クロロ−５−エチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する。
【００９６】
【表３】
0005581390.tif 000039
【００９７】
調製例１２および１３
４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンおよび（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
【化３６】
0005581390.tif 000040
【００９８】
密閉したチューブ中で、メチル３−（４，６−ジクロロピリミジン−５−イル）ブタノエート（２４．００ｇ、９６．３５  ｍｍｏｌ）を３０％の水酸化アンモニウム水溶液（１００．００ｍＬ、７．５当量）に加える。混合物を密閉し、６０℃で一晩攪拌する。氷槽中で混合物を冷却する。固体を濾過し、冷水で洗浄して、４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（１１．３５ｇ、６０％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝１９８［Ｍ］＋。
【００９９】
キラル分離（キラルパックＡＳ、０．２％のジメチルエチルアミンを含むエタノール）により、（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンを鏡像異性体２（４．２０ｇ、＞９９％ｅｅ）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝１９８［Ｍ］＋。
【０１００】
調製例１４
４−クロロ−８−（２，４−ジメトキシベンジル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
【化３７】
0005581390.tif 000041
【０１０１】
メチル３−（４，６−ジクロロピリミジン−５−イル）−４，４，４−トリフルオロブタノエート（０．７１ｇ、１．９８ｍｍｏｌ）、ジイソプロピルエチルアミン（０．３８ｍＬ、１．１当量）、２，４−ジメトキシベンジルアミン（０．３２ｍＬ、１．０５当量）、およびジメチルホルムアミド（６ｍＬ）を合わせる。５０℃で一晩加熱する。室温まで冷却させる。水で希釈し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで抽出する。有機層を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、標題化合物およびメチル３−（４−クロロ−６−（２，４−ジメトキシベンジルアミノ）ピリミジン−５−イル）−４，４，４−トリフルオロブタノエートの混合物を油として得る。粗混合物（０．７８ｇ）、ジイソプロピルエチルアミン（０．６３ｍＬ）、およびエタノール（７．８ｍＬ）を合わせる。４時間加熱還流する。室温まで冷却させる。濾過し、エタノールでリンスして、標題化合物を白色の固体（０．４３ｇ、５５％）として得る。
【０１０２】
調製例１５
５，５，５−トリフルオロペンタナール
【化３８】
0005581390.tif 000042
【０１０３】
３，３，３−トリアセトキシ−３−ヨードフタリド（１７．９１ｇ、１．２当量）およびジクロロメタン（９５ｍＬ）を合わせる。ジクロロメタン（２３８ｍＬ）中の５，５，５−トリフルオロ−１−ペンタノール（５．００ｇ、３５．１８ｍｍｏｌ）を窒素下で滴下して加える。４時間後、セライト（登録商標）で反応混合物を濾過する。真空中で濾液を濃縮し、５０ｍＬのジクロロメタンと合わせて、１：１の１０％チオ硫酸ナトリウム：水酸化ナトリウム水溶液（１Ｎ）で洗浄する。無水硫酸ナトリウムで有機物を乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮しで、標題化合物を無色の油（２．１３ｇ、４３％）として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．６１（ｓ，１Ｈ），２．５０（ｍ，２Ｈ），２．２１（ｍ，２Ｈ），１．６６（ｍ，２Ｈ）。
【０１０４】
調製例１６
５，５，５−トリフルオロ−２−オキソペンタナール
【化３９】
0005581390.tif 000043
【０１０５】
５，５，５−トリフルオロペンタナール（２．０１ｇ、１４．３５ｍｍｏｌ）、１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）、二酸化セレン（１．６２ｇ、１．０当量）、水（０．５１ｍＬ）、および酢酸（０．６９ｍＬ）を合わせる。混合物を９０℃で加熱し、一晩攪拌する。反応混合物を室温まで冷却させる。濾過し、ジオキサンで固体を洗浄する。濾液を合わせ、洗浄して、標題化合物（２．２１ｇ、１００％）を得る。ＧＣＭＳ  ｍ／ｚ＝１５４。
【０１０６】
５，５，５−トリフルオロ−２−オキソペンタナールについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する。
【０１０７】
【表４】
0005581390.tif 000044
【０１０８】
調製例２２
１−メチルシクロブタンカルボン酸
【化４０】
0005581390.tif 000045
【０１０９】
ヘキサン（２８１．９１ｍＬ、２．４当量）中の２．５Ｍのｎ−ブチルリチウムを、テトラヒドロフラン（９００ｍＬ）中のジイソプロピルアミン（９９．７０ｍＬ、２．４当量）の溶液に０℃で加える。１５分間攪拌し、次いでテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）中のシクロブタン酸の溶液（２８．６５ｍＬ、２９３．６６ｍｍｏｌ）を滴下して加え、５℃以下に温度を維持する。混合物を５℃で５分間、攪拌する。ヨウ化メチル（１８．４７ｍＬ、１．０当量）を滴下して加える。２日後、０℃まで混合物を冷却し、１０％の塩酸水溶液で酸性にする。エーテルを用いて水相を抽出する。飽和塩化ナトリウム水溶液で有機物を洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、黄色の油を得る。ヘキサン中の５％酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーによって精製して、標題化合物を無色の油（１５．７７ｇ、４７％）として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ１１．８４（ｂｓ，１Ｈ），２．４７（ｍ，２Ｈ），１．８６（ｍ，４Ｈ），１．４２（ｓ，３Ｈ）。
【０１１０】
調製例２３
１−（１−メチルシクロブチル）エタノン
【化４１】
0005581390.tif 000046
【０１１１】
ジエチルエーテル中の１．６Ｍメチルリチウム（１７６．１５ｍＬ、２．０当量）をジエチルエーテル（５００ｍＬ）中の１−メチルシクロブタンカルボン酸（１５．７７ｇ、１３８．１６ｍｍｏｌ）の溶液に０℃で２時間にわたって滴下して加える。混合物を室温まで加温し、５時間攪拌する。混合物を氷冷した３Ｍの塩酸水溶液に注ぐ。飽和炭酸水素ナトリウム、次いで飽和塩化ナトリウムで有機物を洗浄する。無水硫酸ナトリウムで有機物を乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、標題化合物を無色の油（１１．７０ｇ、７６％収率）として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３−ｄ３）：δ２．３８（ｍ，２Ｈ），１．９０（ｍ，２Ｈ），１．７０（ｍ，２Ｈ），１．３８（ｓ，３Ｈ），１．１０（ｓ，３Ｈ）。
【０１１２】
１−（１−メチルシクロブチル）エタノンについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する。
【０１１３】
【表５】
0005581390.tif 000047
【０１１４】
調製例２５
１−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−エタノン
【化４２】
0005581390.tif 000048
【０１１５】
ジメチルホルムアミド（８６１ｍＬ）中のブタン酸、３−オキソ−，メチルエステル（１８．６０ｍＬ、１７２．２０ｍｍｏｌ）、ビス（２−クロロエチル）エーテル（２０．２０ｍＬ、１．０当量）、炭酸カリウム（５２．４２ｇ、２．２当量）、およびヨウ化ナトリウム（２５．８８ｇ、１．０当量）を加える。反応混合物を８０℃で一晩加熱する。室温まで冷却する。炭酸カリウム（２３．７８ｇ）およびヨウ化ナトリウム（２５．８８ｇ）をさらに加える。反応混合物を８０℃で２時間加熱し、次いで混合物を室温まで冷却させる。セライト（登録商標）で濾過し、酢酸エチルで洗浄する。水およびブラインで濾液を洗浄する。無水硫酸ナトリウムで有機物を乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、メチル４−アセチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボキシレート（２３．０６  ｇ）を得る。
【０１１６】
メチル４−アセチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボキシレート（２３．０６ｇ、１２３．８４ｍｍｏｌ）をイソプロピルアルコール（１２４ｍＬ）および水（１２４ｍＬ）と合わせる。硫酸（３３．００ｍＬ、５．０当量）を加える。反応混合物を２晩にわたって１００℃で加熱する。冷却し、反応混合物をゆっくりと、水（１Ｌ）中の炭酸水素ナトリウム（１３６ｇ）の混合物に加える。ジクロロメタンで抽出する。無水硫酸ナトリウムで有機物を乾燥させ、濾過し、真空で濃縮する。ヘキサン〜ヘキサン中の２５％の酢酸エチル〜ヘキサン中の５０％の酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（７．３９ｇ、３４％）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ３．７９（ｍ，２Ｈ），３．２７（ｍ，２Ｈ），２．５４（ｍ，１Ｈ），２．０５（ｓ，３Ｈ），１．６６（ｍ，２Ｈ），１．３８（ｍ，２Ｈ）。
【０１１７】
調製例２６
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化４３】
0005581390.tif 000049
【０１１８】
二酸化セレン（１０．４５ｇ、９４．１５ｍｍｏｌ）、１，４−ジオキサン（６０ｍＬ）、酢酸（５ｍＬ）、および水（５ｍＬ）を合わせる。８０°Ｃまで窒素下で加熱し、次いで４，４，４−トリフルオロブタン−２−オン（９．０１ｍＬ、１．０当量）を滴下してゆっくりと加える。９０°Ｃにて窒素下で１２時間加熱し、次いで室温まで冷却させる。反応混合物を濾過して、橙赤色の濾液を得る。別個のフラスコに、メタノール（１５０ｍＬ）および水酸化アンモニウム（１１７．８４ｍＬ、１０．０当量）中のｔｅｒｔ−ブチル４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシレート（２０．０８ｇ、１．０当量）を加える。０°Ｃまで窒素下で冷却する。添加漏斗を介して濾液を滴下して加える。室温まで加温させ、一晩窒素下で攪拌する。真空中で濃縮乾固する。水を加え、酢酸エチルで抽出する。無水硫酸マグネシウムで有機物を乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。ヘキサン〜４：１のヘキサン：酢酸エチル〜２：１のヘキサン：酢酸エチル〜１：１のヘキサン：酢酸エチル〜１：２のヘキサン：酢酸エチル〜酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を淡褐色の固体（８．０６ｇ、２６％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３３４［Ｍ］＋。
【０１１９】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する。
【０１２０】
【表６】
0005581390.tif 000050
【０１２１】
調製例３５
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化４４】
0005581390.tif 000051
【０１２２】
二酸化セレン（５．７２ｇ、５１．５４ｍｍｏｌ）、１，４−ジオキサン（５２ｍＬ）、酢酸（２．４ｍＬ、０．８１当量）、水（２．４ｍＬ）、および１−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−エタノン（６．２８ｇ、１．０当量）を合わせる。９０℃で一晩攪拌する。冷却し、濾過し、次いで１，４−ジオキサンで洗浄する。この濾液をｔｅｒｔ−ブチル４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシレート（１０．４７ｇ、１．０当量）、メタノール（７８ｍＬ）および３０％の含水水酸化アンモニウム（３０．８ｍＬ）の溶液に０℃で加える。混合物を室温まで加温させ、一晩攪拌する。真空中で濃縮し、酢酸エチルおよび飽和塩化ナトリウム水溶液を加える。層を分離する。９：１のジクロロメタン：イソプロピルアルコールでさらに水層を抽出する。
【０１２３】
二酸化セレン（０．９１ｇ、８．１７ｍｍｏｌ）、１，４−ジオキサン（８．３ｍＬ）、酢酸（０．４ｍＬ、０．８１当量）、水（０．４１ｍＬ）、および１−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−エタノン（１．００ｇ、１．０当量）を合わせる。９０℃にて一晩攪拌する。冷却し、濾過し、次いで１，４−ジオキサンで洗浄する。この濾液を、０℃にて、ｔｅｒｔ−ブチル４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシレート（１．６６ｇ、１．０当量）、メタノール（１２．４ｍＬ）および３０％含水水酸化アンモニウム（４．９ｍＬ）の溶液に加える。混合物を室温にて加温させ、一晩攪拌する。真空中で濃縮し、酢酸エチルおよび飽和塩化ナトリウム水溶液を加える。層を分離する。９：１ジクロロメタン：イソプロピルアルコールで水層をさらに抽出する。
【０１２４】
両方の反応物から合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。ヘキサン〜酢酸エチル〜酢酸エチル中の５％メタノール〜酢酸エチル中の１０％メタノールで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（６．６８ｇ、３５％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３３６［Ｍ］＋。
【０１２５】
調製例３６
Ｎ−メチル−Ｎ−（メチレンアミノ）メタンアミン
【化４５】
0005581390.tif 000052
【０１２６】
ジメチルヒドラジン（１０．６３ｍＬ、１３９．７７ｍｍｏｌ）およびパラホルムアルデヒド（４．２０ｇ、０．３３当量）を合わせる。反応を１時間攪拌する。ヘプタン（２０ｍＬ）および硫酸ナトリウム（２０ｇ）を加える。５分攪拌し、次いで硫酸ナトリウムを濾過する。濾液を短経路蒸留装置で蒸留し、ヘプタン（１０．３ｇ、７７％）を含む７５％ｗ／ｗ溶液として標題化合物を回収する。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．１０（ｍ，２Ｈ），２．８０（ｓ，６Ｈ）。
【０１２７】
調製例３７
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化４６】
0005581390.tif 000053
【０１２８】
Ｎ−メチル−Ｎ−（メチレンアミノ）メタンアミン（１．３０ｇ、１８．０３ｍｍｏｌ）をクロロホルム（１００ｍＬ）に加え、次いで２，６−ルチジン（３．２ｍＬ、１．５当量）を加える。反応混合物を０℃に冷却し、１分にわたって無水トリフルオロ酢酸（３．９ｍＬ，１．５当量）を加える。反応物を０℃にて１０分間攪拌する。０．５ＭのＨＣｌ水溶液、水、および０．１Ｍの炭酸ナトリウム水溶液で連続して洗浄する。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、粗（Ｅ）−３−（ジメチルヒドラゾノ）−１，１，１−トリフルオロ−プロパン−２−オン（１．８０ｇ）を得る。
【０１２９】
酢酸（８ｍＬ）中の中間体（０．２１ｇ、１．２５ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシレート（０．３３ｇ、１．２４当量）ならびに酢酸アンモニウム（３．０ｇ）の一部を加える。８０℃にて１２時間加熱し、次いで混合物を室温まで冷却する。ジクロロメタンおよび飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈する。１０分間攪拌し、次いでジクロロメタンで２回抽出する。有機物を真空中で濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（０．１９ｇ、２８％）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００  ＭＨｚ，  ＣＤ３ＯＤ）  δ  ７．４０  （ｓ，  １Ｈ），    ４．１５  （ｍ，  ２Ｈ），  ２．９０  （ｍ，  ３Ｈ），  １．９０  （ｍ，  ２Ｈ），  １．６５  （ｍ，  ２Ｈ），  １．４０  （ｓ，  ９Ｈ）．
【０１３０】
調製例３７（代替）
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化４７】
0005581390.tif 000054
【０１３１】
３０℃にて酢酸ナトリウム（３６０．８ｇ、２．０当量）を水（３．５４  Ｌ）に加える。１，１−ジブロモ−３，３，３−トリフルオロアセトン（６５３．０１ｇ、１．１０ｍｏｌ）を滴下して加える。窒素下で１時間、混合物を９０℃で加熱する。ｔｅｒｔ−ブチル４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシレート（４７０．００ｇ、２．０当量）を、別のフラスコ中で３０℃にてメタノール（１０Ｌ）に加える。２８％水酸化アンモニウム水溶液（２．５３Ｌ、８．１８当量）をメタノール溶液に加える。最初の混合物を３０℃に冷却し、４５分にわたってメタノール溶液に滴下して加える。窒素下で一晩攪拌する。反応混合物から溶媒を取り除く。水（２Ｌ）およびジクロロメタン（６Ｌ）を加え、２５℃にて１５分間攪拌する。水層をジクロロメタンで３回（１Ｌ×３）抽出する。飽和塩化ナトリウム水溶液で有機物を洗浄する。無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮する。ヘキサン中の２％酢酸エチルの５Ｌの溶液を加え、３０℃で３０分間攪拌する。固体を濾過し、ヘキサンで洗浄し、真空中で濃縮して、標題化合物を白色の固体（６１８．０ｇ、８８％）として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１０．５（ｓ，１Ｈ），７．４（ｓ，１Ｈ），４．１８（ｓ，２Ｈ），２．９８（ｍ，１Ｈ），２．８０（ｍ，２Ｈ），２．０１（ｍ，２Ｈ），１．７１（ｍ，２Ｈ），１．４５（ｓ，９Ｈ）。
【０１３２】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する。
【０１３３】
【表７】
0005581390.tif 000055
【０１３４】
調製例３９
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−シアノ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化４８】
0005581390.tif 000056
【０１３５】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１．５０ｇ、４．７０ｍｍｏｌ）および水酸化アンモニウム（９０ｍＬ）を合わせる。反応混合物を６０℃にて２日間加熱する。室温まで冷却させ、次いでブフナー漏斗により濾過する。固体を水およびヘキサンで洗浄して、標題化合物を白色の固体（１．０８ｇ、８３％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２２１［Ｍ］＋。
【０１３６】
調製例４０
ｔｅｒｔ−ブチル  ４−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化４９】
0005581390.tif 000057
【０１３７】
水酸化アンモニウム（１５０ｍＬ）、ｔｅｒｔ−ブチル４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシレート（２９．８２ｇ、１３９．８１ｍｍｏｌ）、およびメタノール（６００ｍＬ）を合わせる。窒素下でエタンジアール（１６．１０ｍＬ、１．０当量）（水中に４０％）を加える。一晩攪拌する。次いで真空中で濃縮して、メタノールを取り除く。水で希釈し、次いでジクロロメタンで抽出する。飽和塩化ナトリウム水溶液で有機物を洗浄する。有機物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、標題化合物（３３．３０ｇ、９５％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２５２［Ｍ］＋。
【０１３８】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する。
【０１３９】
【表８】
0005581390.tif 000058
【０１４０】
調製例４８および４９
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジクロロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートおよびｔｅｒｔ−ブチル４−（４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化５０】
0005581390.tif 000059
【０１４１】
ジクロロエタン（２００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（６．００ｇ、２３．８７ｍｍｏｌ）を加える。Ｎ−クロロスクシンイミド（３．１９ｇ、１．０当量）を加える。窒素下で１４時間、室温にて攪拌する。反応混合物を真空中で濃縮する。ヘキサン〜９：１ヘキサン：酢酸エチル〜４：１ヘキサン：酢酸エチル〜２：１ヘキサン：酢酸エチル〜１：１ヘキサン：酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、２つの主要なスポットを得る。真空中でより高いＲｆスポットを含有する画分を濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジクロロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２．２５ｇ、２９％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３２１［Ｍ］＋。真空中でより低いスポットを含有する画分を濃縮する。得られた固体をジエチルエーテル／クロロホルム中でスラリーにし、次いで濾過する。濾液を真空中で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１．１６ｇ、１７％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２８６［Ｍ］＋。
【０１４２】
調製例５０
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−イソブチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化５１】
0005581390.tif 000060
【０１４３】
ジメチルスルホキシド（３０ｍＬ）中でｔｅｒｔ−ブチル４−（４−イソブチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１．５０ｇ、４．８８ｍｍｏｌ）および水酸化カリウム（１．６５ｇ、６．０当量）（新たに粉末にした）を合わせる。反応混合物を窒素下で４５℃で加熱する。５分後、１−（２−クロロエチル）ピロリジン塩酸塩（１．０８ｇ、１．３当量）を加える。２時間後、加熱を停止する。水を加え、酢酸エチルで抽出する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、標題化合物を黄色の油（２．１１ｇ、１００％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４０５［Ｍ］＋。
【０１４４】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−イソブチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する（注記１：４−および５−置換アルキル化異性体の混合物が得られ得る。一部の場合、順相クロマトグラフィーによる精製により、所望の異性体を得ることができる。注記２：試薬２−（２−ブロモエトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピランまたは２−（２−クロロエトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピランの使用により、２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル化合物が得られ得る）。
【０１４５】
【表９−１】
0005581390.tif 000061
【表９−２】
0005581390.tif 000062
【０１４６】
調製例７８
ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化５２】
0005581390.tif 000063
【０１４７】
ジメチルスルホキシド（３０ｍＬ）中にｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（５．８４ｇ、１７．４０ｍｍｏｌ）および水酸化カリウム（５．９１ｇ、６．０当量）（新たに粉末にした）を合わせる。反応混合物を窒素下で４５℃で加熱する。１５分後、２−（２−ブロモエトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン（２．９０ｍＬ、１．１当量）を加える。反応物を一晩加熱し続ける。水を加え、酢酸エチルで抽出する。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。ヘキサン〜ヘキサン中の５０％酢酸エチル〜酢酸エチル〜酢酸エチル中の１０％メタノールで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を厚い黄色の油（６．９４ｇ、８６％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４６４［Ｍ］＋。
【０１４８】
調製例７９
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（トリフルオロメチル）−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートコハク酸塩
【化５３】
0005581390.tif 000064
【０１４９】
ジメチルスルホキシド（１．１Ｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１２０．００ｇ、３７５．７９ｍｍｏｌ）および水酸化カリウム（５４．８２ｇ、２．６０当量）の混合物に、１−（２−クロロ−エチル）−ピロリジニウムクロリド（７３．５０ｇ、１．１５当量）を加える。得られた懸濁液を５０℃にて一晩攪拌する。反応混合物を室温まで冷却し、氷／水（１．５０ｌ）を加える。酢酸エチル（３×５００ｍＬ）で抽出する。有機物を水（２×３００ｍＬ）および飽和塩化ナトリウム水溶液（３００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させる。ジクロロメタン中の５％〜１５％イソプロピルアルコールで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（トリフルオロメチル）−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１２２．００ｇ、７８％）およびｔｅｒｔ−ブチル４−（５−（トリフルオロメチル）−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１４．００ｇ、９％）の混合物を得る。イソプロピルアルコール（４７０ｍＬ）を加え、７０℃で加熱する。７５℃で予熱したイソプロピルアルコール（３５０ｍＬ）中のブタン二酸（３５ｇ、１当量）の溶液を加える。加熱を停止し、室温にて一晩攪拌する。固体を濾過し、イソプロピルアルコール（３００ｍＬ）で洗浄する。固体をイソプロピルアルコール（５００ｍＬ）に懸濁し、１５分攪拌する。濾過し、固体をイソプロピルアルコール（５００ｍＬ）中で１５分もう１回攪拌し、次いで濾過して、標題化合物（１２４．００ｇ、８２％）を白色の固体として得る。ｍ／ｚ＝４１７［Ｍ］＋。
【０１５０】
調製例８０
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジブロモ−１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化５４】
0005581390.tif 000065
【０１５１】
ジクロロメタン（１７５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１２１．７０ｇ、３２０．６９ｍｍｏｌ）を加える。Ｎ−ブロモスクシンイミド（１１４．１５ｇ、２．０当量）を加える。窒素下で室温にて攪拌する。９０分後に反応を停止する。反応混合物を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。ヘキサン〜１：１ヘキサン：酢酸エチル〜酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を淡橙色の粘性のある油（１２５．４０ｇ、７３％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝５３８［Ｍ］＋。
【０１５２】
調製例８１
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化５５】
0005581390.tif 000066
【０１５３】
テトラヒドロフラン（１Ｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジブロモ−１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（４６．００ｇ、８５．６１ｍｍｏｌ）を加える。窒素下で−７８℃に冷却する。ヘキサン（９０．９７ｍＬ、１．７当量）中の１．６Ｍのブチルリチウムを１５分にわたって滴下して加える。内部温度を−６５℃以下に維持する。６５分後、イソプロピルアルコール（５０ｍＬ）を加える。２時間にわたって室温まで加温させる。飽和塩化アンモニウム水溶液で希釈し、次いで酢酸エチルで３回抽出する。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、標題化合物（４３．００ｇ、１００％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４６０［Ｍ］＋。
【０１５４】
調製例８２
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−シクロプロピル−１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化５６】
0005581390.tif 000067
【０１５５】
トルエン（１８ｍＬ）および水（０．９ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１．８２ｇ、３．９７ｍｍｏｌ）、シクロプロピルボロン酸（０．４４ｇ、１．３当量）、トリシクロヘキシルホスフィン（０．１１ｇ、０．１当量）、およびリン酸カリウム（２．９５ｇ、３．５当量）を加える。５分間窒素で脱気する。酢酸パラジウム（０．０４５ｇ、０．０５当量）を加え、９０℃にて一晩加熱する。１２時間後、加熱を停止する。水で希釈し、次いで酢酸エチルで３回抽出する。無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮する。０〜２０〜５０％酢酸エチル／ヘキサン、次いで１〜３〜５〜７％メタノール／ジクロロメタンで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（０．６１ｇ、３７％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４２０［Ｍ］＋。
【０１５６】
調製例８３
２−（４−エチル−２−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エタノール二塩酸塩
【化５７】
0005581390.tif 000068
【０１５７】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−エチル−１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（４．７０ｇ、１１．５３ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１００ｍＬ）およびメタノール（５０ｍＬ）を合わせる。塩化水素（２０ｍＬ）（ジオキサン中に４Ｍ）をゆっくりと加える。窒素下で一晩攪拌する。真空中で濃縮して、標題化合物（３．４０ｇ、１００％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２２４［Ｍ］＋。
【０１５８】
２−（４−エチル−２−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エタノール二塩酸塩について記載されるように実質的に以下の化合物を調製する。
【０１５９】
【表１０】
0005581390.tif 000069
【０１６０】
調製例９１
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化５８】
0005581390.tif 000070
【０１６１】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（５．００ｇ、１０．９１ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（１５０ｍＬ）、および１Ｍ塩酸水溶液（５０ｍＬ）を合わせ、室温で一晩攪拌する。酢酸エチルで希釈する。過剰の１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液、続いて飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、標題化合物を黄色の泡状物（３．８４ｇ、９４％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３７６［Ｍ］＋。
【０１６２】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する。
【０１６３】
【表１１】
0005581390.tif 000071
【０１６４】
調製例１０２
ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−ヒドロキシエチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化５９】
0005581390.tif 000072
【０１６５】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（６．８８ｇ、１４．８４ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（１３６ｍＬ）および１Ｎの塩酸水溶液（２５ｍＬ）を合わせる。反応物を室温にて一晩攪拌する。酢酸エチルで希釈し、飽和塩化ナトリウム水溶液および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄する。合わせた水層を９：１ジクロロメタン：イソプロピルアルコールで抽出する。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。ヘキサン〜ヘキサン中の５０％酢酸エチル〜酢酸エチル〜酢酸エチル中の１０％メタノール〜ジクロロメタン中の１０％メタノールで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を白色の固体（４．４８ｇ、７９％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３８０［Ｍ］＋。
【０１６６】
調製例１０３
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ビニル−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化６０】
0005581390.tif 000073
【０１６７】
１，４−ジオキサン（４００ｍＬ）および水（２００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（４２．００ｇ、１１２．２２ｍｍｏｌ）を加える。リン酸カリウム、三塩基性、Ｎ水和物（４７．６４ｇ、２．０当量）およびジシクロヘキシル−［２−（２，６−ジメトキシフェニル）フェニル］ホスファン（５．７６ｇ、０．１２当量）を加える。５分間窒素で脱気する。４，４，５，５−テトラメチル−２−ビニル−１，３，２−ジオキサボロラン（３０．２５ｍＬ、１．５当量）を加え、次いでさらに１０分間脱気する。酢酸パラジウム（１．２６ｇ、０．０５当量）を加え、１２０℃にて一晩還流する。１２時間後、加熱を停止する。セライト（登録商標）で濾過する。ジクロロメタンおよびメタノールで洗浄する。真空中で濃縮乾固する。飽和塩化ナトリウム水溶液で希釈し、次いで酢酸エチルで３回抽出する。無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮する。５０〜９０％酢酸エチル／ヘキサンで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を黄色の泡状物（２０．５０ｇ、５６％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３２２［Ｍ］＋。
【０１６８】
調製例１０４
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−エチル−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化６１】
0005581390.tif 000074
【０１６９】
エタノール（５０ｍＬ）中の１０％パラジウム炭素（２．１０ｇ）を加える。次いでエタノール（２００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−ヒドロキシエチル）−４−ビニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２０．００ｇ、６２．２２ｍｍｏｌ）の溶液を加える。窒素および真空を３回循環させ、次いで水素および真空を３回循環させる。１気圧の水素雰囲気下で室温にて攪拌する。２時間後、セライト（登録商標）で濾過する。メタノールで洗浄する。真空中で濾液を濃縮して、標題化合物（２０．００ｇ、９９％）として淡黄色の固体を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３２４［Ｍ］＋。
【０１７０】
調製例１０５
５−（４−（４−エチル−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−３，４−ジヒドロピリミド［４，５−ｄ］ピリミジン−２（１Ｈ）−オン
【化６２】
0005581390.tif 000075
【０１７１】
２０ｍＬのマイクロ波バイアル中に、５−クロロ−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−３，４−ジヒドロピリミド［４，５−ｄ］ピリミジン−２（１Ｈ）−オン（０．２８ｇ、１．０５ｍｍｏｌ）、２−（４−エチル−２−（ピペリジン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エタノール二塩酸塩（０．３８ｇ、１．３当量）、メタノール（１５ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．９１ｍＬ、５．０当量）を加える。チューブを密閉し、１時間１５０℃でマイクロ反応器中で加熱する。１０％アンモニア−メタノール／ジクロロメタンで溶出する、シリカゲルで濾過する。濾液を真空中で濃縮する。３：１酢酸エチル／メタノールで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を黄色の泡状物（０．６７ｇ、７０％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４５４［Ｍ］＋。
【０１７２】
５−（４−（４−エチル−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−３−（２，２，２−トリフルオロエチル）−３，４−ジヒドロピリミド［４，５−ｄ］ピリミジン−２（１Ｈ）−オンについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する。
【０１７３】
【表１２】
0005581390.tif 000076
【０１７４】
調製例１１６
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−１−（２−（メチルスルホニルオキシ）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化６３】
0005581390.tif 000077
【０１７５】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−１−（２−ヒドロキシエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３．８４ｇ、１０．２６ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（６０ｍＬ）およびトリエチルアミン（４．２９ｍＬ、３．０当量）を合わせる。窒素下に置き、０℃に冷却する。メタンスルホニルクロリド（０．９５ｍＬ、１．２当量）を滴下して加える。１５分後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でクエンチする。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、標題化合物（４．４５ｇ、９６％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４５２［Ｍ］＋。
【０１７６】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−１−（２−（メチルスルホニルオキシ）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する。
【０１７７】
【表１３−１】
0005581390.tif 000078
【表１３−２】
0005581390.tif 000079
【０１７８】
調製例１３９
ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（メチルスルホニルオキシ）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化６４】
0005581390.tif 000080
【０１７９】
ジクロロメタン（７２ｍＬ）中でｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−ヒドロキシエチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（４．４０ｇ、１１．６０ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４．９ｍＬ、３．０当量）を合わせる。０℃に冷却し、メタンスルホニルクロリド（１．１ｍＬ、１．２当量）を加える。１時間後、さらなるジクロロメタンおよび飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈する。層を分離する。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、標題化合物を淡黄色の固体（５．０５ｇ、９５％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４５８［Ｍ］＋。
【０１８０】
調製例１４０
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化６５】
0005581390.tif 000081
【０１８１】
窒素下で、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−１−（２−（メチルスルホニルオキシ）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（４．４５ｇ、９．８４ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（２５ｍＬ）、およびピロリジン（２．４６ｍＬ、３．０当量）を合わせる。反応混合物を５０℃で一晩加熱し、次いで室温まで冷却する。酢酸エチルで希釈する。水、続いて飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、標題化合物（４．１２ｇ、９８％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４２７［Ｍ］＋。
【０１８２】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する。
【表１４−１】
0005581390.tif 000082
【表１４−２】
0005581390.tif 000083
【０１８３】
調製例１６４
ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化６６】
0005581390.tif 000084
【０１８４】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（メチルスルホニルオキシ）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２．０２ｇ、４．４２ｍｍｏｌ）、ピロリジン（１．１ｍＬ、３．０当量）、およびジメチルホルムアミド（１９ｍＬ）を合わせる。反応混合物を５０℃で一晩加熱する。ジクロロメタンおよび飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈する。層を分離する。有機物を水で洗浄する。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。ヘキサン〜酢酸エチル〜ジクロロメタン中の１０％メタノールで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を黄色の油（１．７９ｇ、９３％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４３３［Ｍ］＋。
【０１８５】
調製例１６５
ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−ビニル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート
【化６７】
0005581390.tif 000085
【０１８６】
１，４−ジオキサン（４ｍＬ）および水（１ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（０．２６ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）を加える。リン酸カリウム、三塩基性、Ｎ−水和物（０．２６ｇ、２．０当量）およびジシクロヘキシル−［２−（２，６−ジメトキシフェニル）フェニル］ホスファン（０．０３６ｇ、０．１５当量）を加える。４，４，５，５−テトラメチル−２−ビニル−１，３，２−ジオキサボロラン（０．２２ｍＬ、２．０５当量）を加え、１０分間脱気する。ビス（ジベンジリデンアセトン）パラジウム（０）（０．０３ｇ、０．０６当量）を加え、１５０℃にて１時間還流する。セライト（登録商標）で濾過する。ジクロロメタンで洗浄する。真空中で濾液を濃縮乾固する。２５％メタノール／酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物を黄色の泡状物（０．１４ｇ、３８％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３７５［Ｍ］＋。
【０１８７】
調製例１６６
４−（４−ブロモ−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン三塩酸塩
【化６８】
0005581390.tif 000086
【０１８８】
窒素下で、ジオキサン（９．３６ｍＬ，２０．０当量）中にｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ブロモ−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（０．８０ｇ、１．８７ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（２０ｍＬ）、メタノール（８ｍＬ）、および４Ｍの塩酸を合わせ、室温にて攪拌する。１．５時間後、真空中で濃縮して、標題化合物（０．８２ｇ、１００％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３２７［Ｍ］＋。
【０１８９】
４−（４−ブロモ−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン三塩酸塩について記載されるように実質的に以下の化合物を調製する（一部の場合、塩基性系後処理により遊離塩基を得る）。
【０１９０】
【表１５−１】
0005581390.tif 000087
【表１５−２】
0005581390.tif 000088
【０１９１】
調製例２０１
４−（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン
【化６９】
0005581390.tif 000089
【０１９２】
ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１．７４ｇ、４．０３ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（５３ｍＬ）およびメタノール（２１ｍＬ）を合わせる。１，４−ジオキサン中の４Ｍの塩化水素（１０．４ｍＬ、１０．３当量）を加える。１時間後、真空中で濃縮する。真空下で得られた残留物を乾燥させて、標題の化合物を白色の固体（１．６７ｇ、９４％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３３３［Ｍ］＋。
【０１９３】
調製例２０２
４−（４−トリフルオロメチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン
【化７０】
0005581390.tif 000090
【０１９４】
メタノール（７２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（トリフルオロメチル）−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートコハク酸塩（１２０ｇ、２２４．４８ｍｍｏｌ）を、室温にて、３７％塩化水素水溶液（７６．０８ｍＬ、４当量）に加える。溶液を５０℃にて攪拌する。反応混合物を濃縮する。５００ｍＬの水を加え、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２００ｍＬ）で洗浄する。０℃にて、その水溶液を６Ｍの水酸化ナトリウム水溶液で塩基性にする。酢酸エチル（４×２００ｍＬ）で抽出する。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、標題化合物（６８ｇ、９６％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３１７［Ｍ］＋。
【０１９５】
実施例１
（Ｒ）−４−（４−（１−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
【化７１】
0005581390.tif 000091
【０１９６】
ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の（Ｒ）−２−（２−（１−（５−メチル−７−オキソ−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペリジン−４−イル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エチルメタンスルホネート（０．５０ｇ、０．９９ｍｍｏｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルアミン（０．５２ｍＬ、７．１当量）、およびトリエチルアミン（０．６９ｍＬ、５．０当量）を加える。４８時間、密閉チューブ中で５０℃で加熱する。溶液を飽和塩化ナトリウム水溶液で希釈する。その混合物を酢酸エチル中に加える。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、真空中で濃縮する。２０％エタノール／アセトンで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（０．２７ｇ、５５％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４８０［Ｍ］＋。
【０１９７】
（Ｒ）−４−（４−（１−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する（実施例３についての代替の精製；反応混合物を濃縮し、イソプロパノールから濾過して、所望の生成物をメシル酸塩として得る）。
【０１９８】
【表１６−１】
0005581390.tif 000092
【表１６−２】
0005581390.tif 000093
【表１６−３】
0005581390.tif 000094
【表１６−４】
0005581390.tif 000095
【表１６−５】
0005581390.tif 000096
【表１６−６】
0005581390.tif 000097
【０１９９】
実施例１９
（Ｒ）−４−（４−（４−イソブチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
【化７２】
0005581390.tif 000098
【０２００】
マイクロ波チューブ中に、（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（０．２３ｇ、１．１８ｍｍｏｌ）、４−（４−イソブチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン三塩酸塩（０．６４ｇ、１．３当量）、Ｎ−メチルピロリジノン（１０ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．６５ｍＬ、８．０当量）を加える。クリンプキャップで密封する。２００℃にてマイクロ波反応器中で４０分間加熱する。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。ヘキサン〜酢酸エチル〜５％メタノール／酢酸エチル〜３％〜５％〜７％〜１０％メタノール／ジクロロメタンで溶出する、順相クロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（０．１３ｇ、２３％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４６６［Ｍ］＋。
【０２０１】
（Ｒ）−４−（４−（４−イソブチル１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する（代替の精製：１，−４ジオキサン中の４Ｍ塩酸で遊離塩基を処理し、次いで真空中で濃縮して、二塩酸塩を得る。第２の代替は、酸性逆相クロマトグラフィーで遊離塩基をさらに精製し、真空中で清浄な画分を濃縮して、二塩酸塩または三塩酸塩を得ることである）。
【０２０２】
【表１７−１】
0005581390.tif 000099
【表１７−２】
0005581390.tif 000100
【表１７−３】
0005581390.tif 000101
【表１７−４】
0005581390.tif 000102
【表１７−５】
0005581390.tif 000103
【表１７−６】
0005581390.tif 000104
【表１７−７】
0005581390.tif 000105
【表１７−８】
0005581390.tif 000106
【表１７−９】
0005581390.tif 000107
【表１７−１０】
0005581390.tif 000108
【表１７−１１】
0005581390.tif 000109
【表１７−１２】
0005581390.tif 000110
【表１７−１３】
0005581390.tif 000111
【表１７−１４】
0005581390.tif 000112
【表１７−１５】
0005581390.tif 000113
【０２０３】
実施例７３
（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
【化７３】
0005581390.tif 000114
【０２０４】
１２Ｌの反応フラスコに、４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン三塩酸塩（３００ｇ、１．０当量）、（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（１４６．２ｇ、１．０当量）およびｎ−プロパノール（３．０Ｌ）を入れる。反応混合物を攪拌し、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（３９４．３ｇ、３．５当量）を１０分にわたって加える。反応物を９０℃で８時間加熱し、１２時間にわたって室温まで冷却する。３Ｌの全量で、ｎ−プロパノールの残りの含量が１１％（ｗ／ｗ）になるようにｎ−プロパノールを酢酸ｎ−ブチルに置き換える。有機溶液を５０〜６０℃に加熱し、ブライン（２．２５Ｌ）で洗浄する。酢酸ｎブチル（１．５Ｌ）で水相を逆抽出し、有機層を合わせる。合わせた有機層を水（２×４５０ｍＬ）で５０〜６０℃にて洗浄する。有機層を分離し、活性炭（７５ｇ、０．２５当量）を加え、５０〜６０℃にて３０分間攪拌する。スラリーを濾過し、酢酸ｎブチル（１．５Ｌ）で固体をリンスする。水（１Ｌ）で洗浄し、有機相を分離し、その有機相を共沸乾燥させて水を除去する。５０〜６０℃にて、ヘプタン（３．０Ｌ）を加え、４０℃まで冷却し、種晶を加える。スラリーを約１２時間にわたって室温まで冷却する。０〜５℃まで冷却し、スラリーを濾過し、ヘプタン（２×９００ｍＬ）で洗浄する。真空中で乾燥させ、（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンを白色の固体（３６５．３ｇ、６４％）として単離する。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４９４［Ｍ］＋。
【０２０５】
実施例７４および７５
４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンおよび（Ｒ）−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
【化７４】
0005581390.tif 000115
【０２０６】
密閉容器中に、４−クロロ−８−（２，４−ジメトキシベンジル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（０．６５ｇ、１．６２ｍｍｏｌ）、４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン三塩酸塩（０．７６ｇ、１．１当量）、Ｎ−メチルピロリジノン（２０ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．６９ｍＬ、６．０当量）を合わせる。２２０℃にて３０分間加熱する。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチル抽出する。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。１〜１０％メタノール／ジクロロメタン勾配で溶出する、順相クロマトグラフィーにより精製して、粗８−（２，４−ジメトキシベンジル）−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（粗）を得る。
【０２０７】
マイクロ波チューブ中に、粗保護中間体（１．１０ｇ、理論的）およびトリフルオロ酢酸（５．００ｍＬ、４１当量）を合わせる。チューブを密閉し、マイクロ波反応器中で１００℃にて１０分間加熱する。真空中で濃縮する。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。５〜２０％メタノール／ジクロロメタン勾配で溶出する、順相クロマトグラフィーにより精製して、４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンをラセミ化合物（０．７０ｇ、８２％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝５３２［Ｍ］＋。
【０２０８】
キラル分離（キラルパックＡＤ−Ｈ、３０％エタノール／７０％ＣＯ−２ｗ／０．２％イソプロピルアミン）により、鏡像異性体１（＞９９％ｅｅ）および鏡像異性体２（＞９９％ｅｅ）として（Ｒ）−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンを得る。両方の化合物についてＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝５３２［Ｍ］＋。
【０２０９】
実施例７６および７７
５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンおよび（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン      
【化７５】
0005581390.tif 000116
【０２１０】
マイクロ波チューブ中に、４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（０．２２ｇ、１．１１ｍｍｏｌ）、４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン三塩酸塩（０．５７ｇ、１．２当量）、Ｎ−メチルピロリジノン（１０ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（１．１６ｍＬ、６．０当量）を加える。チューブを密閉し、マイクロ波反応器中で２００℃にて３０分間加熱する。水で反応混合物を希釈し、酢酸エチルで抽出する。飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。無水硫酸ナトリウムで有機物を乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。１〜１０％メタノール／ジクロロメタン勾配で溶出する、順相クロマトグラフィーにより精製して、５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンをラセミ化合物（０．１９ｇ、３６％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４７８［Ｍ］＋。キラル分離（キラルパックＡＤ−Ｈ、３０％エタノール／７０％ＣＯ−２ｗ／０．２％イソプロピルアミン）により、鏡像異性体１（＞９９％ｅｅ）および鏡像異性体２（＞９９％ｅｅ）として（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンを得る。両方の化合物についてＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４７８［Ｍ］＋。
【０２１１】
実施例７８
（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
【化７６】
0005581390.tif 000117
【０２１２】
Ｎ−メチルピロリジノン（８６ｍＬ）中の（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（２８．３０ｇ、１４３．２０ｍｍｏｌ）、４−（４−トリフルオロメチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン（４９．８３ｇ、１．１０当量）およびトリエチルアミン（４３．４７ｇ、３．０当量）を加える。反応混合物を１３０℃で加熱する。２時間後、反応混合物を室温まで冷却する。反応混合物を攪拌しながら氷／水（５００ｍＬ）上に注ぐ。酢酸エチル（４×２００ｍＬ）で抽出する。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮する。固体をヘキサン中に懸濁し、３０分間攪拌する。濾過し、真空下で乾燥させる。ヘキサン中の７５％メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（８００ｍＬ）を加え、加熱還流する。混合物を室温まで冷却する。濾過し、ヘキサン中の７５％メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２００ｍＬ）で洗浄し、４０℃にて真空下で乾燥させて、標題化合物（４８．００ｇ、７０％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４７８［Ｍ］＋。
【０２１３】
実施例７９
（Ｒ）−４−（４−（４−エチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン塩酸塩
【化７７】
0005581390.tif 000118
【０２１４】
ジオキサン中の４Ｍ塩酸（２８．５７μＬ、１．０当量）を、室温にて、ジクロロメタン中の（Ｒ）−４−（４−（４−エチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（５０．００ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）の溶液に加え、１５分間攪拌する。真空中で濃縮して、標題化合物（５４．００ｍｇ、１００％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４３８［Ｍ］＋。
【０２１５】
（Ｒ）−４−（４−（４−エチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン塩酸塩について記載されるように実質的に以下の化合物を調製する。
【０２１６】
【表１８】
0005581390.tif 000119
【０２１７】
実施例８３
（Ｒ）−４−（４−（１−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）エチル）−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
【化７８】
0005581390.tif 000120
【０２１８】
窒素下で、ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）エチル）−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（４４０．００ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（２０ｍＬ）、メタノール（８ｍＬ）、およびジオキサン中の４Ｍ塩酸（３．００ｍＬ、１２．０当量）を合わせ、室温にて一晩攪拌する。真空中で濃縮して、３００ｍｇのＮ−［２−［４−エチル−２−（４−ピペリジル）イミダゾール−１−イル］エチル］−２−メチル−プロパン−２−アミンを得る。このアミンを、Ｎ−メチルピロリジノン（１０ｍＬ）中の（Ｒ）−４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（３００．００ｍｇ、１．０当量）と合わせ、ジイソプロピルエチルアミン（１．６６ｍＬ、８．０当量）を加える。クリンプキャップで密閉する。２００℃にて４０分間マイクロ波反応器中で加熱する。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。ヘキサン〜酢酸エチル〜５％メタノール／酢酸エチル〜３％〜５％〜７％〜１０％メタノール／ジクロロメタンで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、標題化合物（０．０８ｇ、１４％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４９４［Ｍ］＋。
【０２１９】
（Ｒ）−４−（４−（１−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルアミノ）エチル）−４−エチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンについて記載されるように実質的に以下の化合物を調製する。
【０２２０】
【表１９−１】
0005581390.tif 000121
【表１９−２】
0005581390.tif 000122
【０２２１】
実施例９２
（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
【化７９】
0005581390.tif 000123
【０２２２】
ａ．メチル３−（４，６−ジヒドロキシピリミジン−５−イル）ブタノエート：
フラスコに、無水メタノール（５０ｍＬ）、続いてナトリウムメトキシド（５．４ｇ、０．１ｍｏｌ、０．３当量）を入れ、その混合物を６５〜７０℃に加熱する。プロパン二酸ジメチルエステル（４４ｇ、０．３３ｍｏｌ、１．０当量）を滴下して加え、混合物を６５〜７０℃にて１０〜３０分間攪拌する。クロトン酸エチル（３３．４ｇ、０．３３ｍｏｌ、１．０当量）を１〜２時間にわたって滴下して加え、混合物を６５〜７０℃にて１〜１．５時間攪拌する。反応混合物を−２０℃〜−１０℃に冷却する。別のフラスコ中で、無水メタノール（１８０ｍＬ）中のナトリウムメトキシド（５４ｇ、１．０ｍｏｌ、３．０当量）に溶解し、２０〜３０分間混合物を攪拌する。混合物を−２０℃〜−１０℃に冷却し、酢酸ホルムアミジン（４０ｇ、０．４ｍｏｌ、１．２当量）を加える。この溶液を、−２０℃〜−１０℃の温度に維持しながら、１時間にわたって第１の溶液に滴下して加える。１〜２時間攪拌し、次いで混合物を３〜４時間にわたって２０〜２５℃に加温する。混合物を２〜８時間攪拌し、次いで１０℃未満の反応温度を維持しながら、水（３３０ｇ〜３９０ｇ）中の濃ＨＣｌ（１１０〜１３０ｇ）溶液を入れる。懸濁液を１０℃未満にて３０〜６０分間攪拌し、濾過する。濾過ケーキを水（７０ｍＬ）で洗浄し、その濾過ケーキをメタノール（５６ｇ）でスラリーにする。濾過して、メチル３−（４，６−ジヒドロキシピリミジン−５−イル）ブタノエート（５５．６ｇ、７２％）を回収する。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２１３［Ｍ］＋。
【０２２３】
ｂ．メチル３−（４，６−ジクロロピリミジン−５−イル）ブタノエート：
メチル３−（４，６−ジヒドロキシピリミジン−５−イル）ブタノエート（５９．４ｇ、０．２８ｍｏｌ、１．０当量）をトルエン（６００ｍＬ）に溶解し、その溶液を１０〜２０分間攪拌し、次いで５０〜６０℃にて真空下で濃縮して、共沸により水を除去する。混合物を２０〜３０℃に冷却し、４０℃未満に温度を維持しながら、塩化ホスホリル（９１．４ｇ、２．１３当量）およびＮ，Ｎ’−ジエチルアニリン（４５．７ｇ、１．１当量）を連続して加える。反応混合物を１０〜３０分間攪拌し、次いで８０〜８５℃に加温し、１８〜２０時間攪拌する。混合物を２０〜３０℃に冷却し、３０〜４０℃にて水（５００〜６００ｇ）に溶解したＮａ２ＨＰＯ４・１２Ｈ２Ｏ（６０ｇ、０．１７ｍｏｌ）の溶液を加える。溶液を３０〜６０分間攪拌し、層を分離させる。水層をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２２０〜３００ｇ）で抽出し、有機層を合わせる。有機相を水（５００〜６００ｇ）で洗浄し、５０〜６０℃にて真空中で有機相を約２．５〜３溶媒容量まで濃縮する。イソプロパノール（１４０〜１６０ｇ）を加え、溶液を再濃縮する。次の工程においてＩＰＡ溶液をそのまま使用する（メチル３−（４，６−ジクロロピリミジン−５−イル）ブタノエートのその場での収率は８５％である）。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２４９［Ｍ］＋。
【０２２４】
ｃ．４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン：
メチル３−（４，６−ジクロロピリミジン−５−イル）ブタノエート（５００ｇ、２ｍｏｌ）を含有する（ｂ）において調製した溶液を共沸乾燥させ、イソプロパノール（６Ｌ）中のアンモニアガス（４０８ｇ）の溶液に加える。混合物を５８〜６２℃に加熱し、４０〜４５時間攪拌する。混合物を２０〜２５℃に冷却し、その混合物のｐＨが９以下になるまで濃縮する。水（３．７５Ｌ）を加え、懸濁液を０〜１０℃に冷却し、２〜３時間攪拌する。懸濁液を濾過し、冷却したイソプロパノール（３２０ｍＬ）で濾過ケーキを洗浄する。真空中で生成物を乾燥させて、４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（２５５ｇ、６４％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝１９８［Ｍ］＋。
【０２２５】
ｄ．（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−クロロ−５−メチル−７−オキソ−６，７−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８（５Ｈ）−カルボキシレート：
４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（２３３．６ｇ、１．１８ｍｏｌ）、４−（ジメチルアミノ）ピリジン（７．２ｇ、０．０５当量）およびジクロロメタン（８８０ｍＬ）を反応器にいれ、１０〜２０分間攪拌する。ジクロロメタン（２００ｍＬ）に溶解したｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルｔｅｒｔ−ブチルカルボネート（２８４．１ｇ、１．１当量）の溶液を１．５〜２時間にわたって加える。混合物を室温にて１．５〜２時間攪拌し、ヘプタン（１１００ｍＬ）を入れる。混合物を真空中で濃縮して、２ｗｔ％以下までジクロロメタンを除去する。混合物を５〜１０℃に冷却し、この温度で０．５〜１時間攪拌する。懸濁液を濾過し、湿潤ケーキをヘプタン（２００ｍＬ）でスラリーにする。濾過し、真空中で乾燥させて、ラセミ化合物（３４１．８ｇ、９６％）を得る。キラル分離（キラルパックＡＤ、９：１ヘキサン（０．２％ジメチルエチルアミン）：イソプロピルアルコール）により鏡像異性体分割を達成する。回収した画分を合わせ、真空下で混合物を濃縮する。ヘプタン（１０００ｍＬ）を加え、真空中で約２容量まで溶液を濃縮する。残っているイソプロパノールレベルが１％（ｗ／ｗ）未満になるまでこの手順を繰り返す。混合物を０〜５℃に冷却し、２〜３時間攪拌する。得られた懸濁液を濾過し、冷ヘプタン（１８０ｍＬ）で濾過ケーキを洗浄する。真空中で濾過ケーキを乾燥させて、鏡像異性体１（１６５ｇ、９９．８％ｅｅ、９２％収率）として（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−クロロ−５−メチル−７−オキソ−６，７−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８（５Ｈ）−カルボキシレートを得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２９８［Ｍ］＋。
【０２２６】
ｅ．（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン：
（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−クロロ−５−メチル−７−オキソ−６，７−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−８（５Ｈ）−カルボキシレート（３６ｇ、１．０当量）を水（１２０ｍＬ）に加え、攪拌して懸濁液を形成させる。１２ＮのＨＣｌ（１２０ｇ、１０当量）を２０〜３０℃にて滴下して加え、混合物を６〜８時間攪拌する。溶液が徐々に形成する。その溶液を５〜１０℃に冷却し、濃縮水酸化アンモニウム（８６．４ｇ、２．４当量）を加えて、懸濁液を形成させる。懸濁液を２〜３時間攪拌し、濾過する。冷水（３６ｍＬ）で濾過ケーキを洗浄し、次いで冷イソプロパノール（２８ｇ）でスラリーにする。スラリーを濾過し、真空中で濾過ケーキを乾燥させて、（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（２１ｇ、８７％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝１９８［Ｍ］＋。
【０２２７】
ｆ．１−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−エタノン−方法Ａ：
窒素下で−２０℃にて１５分間、テトラヒドロフラン（５２０．２２ｍＬ、３．０当量）中の２Ｍのイソプロピルマグネシウムクロリドを、テトラヒドロフラン（２．４３Ｌ）中のメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボキシレート（４６．３０ｍＬ、３４６．８１ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（５２．４４ｇ、１．６当量）の混合物に加える。３０分後、−２０℃にて飽和塩化アンモニウム水溶液（４００ｍＬ）を反応物に加える。その水溶液をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２５０ｍＬ×３）で抽出する。合わせた有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮する。ジクロロメタン（５００ｍＬ）を加え、セライト（登録商標）で濾過し、真空中で濃縮する。テトラヒドロフラン（７００ｍＬ）を加え、次いで７℃にて１５分にわたってテトラヒドロフラン中の３Ｍメチルマグネシウムクロリド（２３１．２１ｍＬ、２．０当量）を滴下して加える。４０分後、飽和塩化アンモニウム水溶液（２５０ｍＬ）を反応物に加える。その水溶液をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２５０ｍＬ×２）で抽出する。無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮する。２：１ヘキサン：酢酸エチル〜１：１ヘキサン：酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、１−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−エタノン（３３．１８ｇ、７５％）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ３．９８（ｍ，２Ｈ），３．４２（ｍ，２Ｈ），２．５２（ｍ，１Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），１．７４（ｍ，４Ｈ）。
【０２２８】
ｇ．１−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−エタノン−方法Ｂ：
４０％ｗ／ｗの水酸化ナトリウム水溶液（２６４．５ｍＬ、１．１５当量）を、メタノール（２．２６Ｌ）中のメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボキシレート（５００ｇ、３．４７ｍｏｌ）の溶液に加える。５０℃にて７時間攪拌する。溶媒を蒸発させ、残留物を水（２Ｌ）に溶解し、メチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２×１．２Ｌ）で洗浄する。３５％塩酸水溶液を水層（ｐＨを４に調節）に加え、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２×１．２Ｌ）で抽出する。無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮する。物質がまだ水を含む場合、固体をジクロロメタンに溶解し、水層を捨てる。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボン酸（３１２．７６ｇ、６９％）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１１．２１（ｂｒｓ，１Ｈ），３．９７（ｍ，２Ｈ），３．４４（ｍ，２Ｈ），２．５６（ｍ，１Ｈ），１．８１（ｍ，４Ｈ）。
【０２２９】
１，１’−カルボニルジイミダゾール（３３３．４１ｇ、１．２当量）を、１５分にわたって少しずつ、ジクロロメタン（２．２３Ｌ）中のテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボン酸（２２３ｇ、１．７１ｍｏｌ）の溶液に加える。２時間攪拌する。Ｎ，Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミン塩酸塩（１８３．８６ｇ、１．１当量）を少しずつ加え、３時間攪拌する。有機物を飽和塩化アンモニウム水溶液、次いで飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、Ｎ−メトキシ−Ｎ−メチル−テトラヒドロピラン−４−カルボキシアミド（３３９ｇ、１１４％）を粗物質として得て、それをそのまま次の工程に使用する。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ４．０２（ｍ，２Ｈ），３．７１（ｓ，３Ｈ），３．４６（ｍ，２Ｈ），３．１９（ｓ，３Ｈ），２．９１（ｍ，１Ｈ），１．８６（ｍ，２Ｈ），１．６５（ｍ，２Ｈ）。
【０２３０】
０℃にて１時間にわたって、ジエチルエーテル中の３Ｍメチルマグネシウムブロミド（１．１４Ｌ、２．０当量）を、テトラヒドロフラン（２．９６Ｌ）中のＮ−メトキシ−Ｎ−メチル−テトラヒドロピラン−４−カルボキシアミド（２９６ｇ、１．７１ｍｏｌ）の溶液に加える。さらに２時間攪拌し、次いでその内容物を氷／水の混合物中に注ぐ。メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで抽出する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、１−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−エタノン（１０５ｇ、４８％）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ３．９８（ｍ，２Ｈ），３．４２（ｍ，２Ｈ），２．５２（ｍ，１Ｈ），２．１５（ｓ，３Ｈ），１．７４（ｍ，４Ｈ）。
【０２３１】
ｈ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート：
二酸化セレン（１８１．８０ｇ、１．６４ｍｏｌ）、１，４−ジオキサン（６３０ｍＬ）、酢酸（３１．５ｍＬ、０．６７当量）、および水（３１．５ｍＬ）を合わせる。９０℃に加熱し、１−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−エタノン（１０５．０ｇ、１．０当量）を滴下して加える。９０℃にて一晩攪拌する。冷却後、シリカ／セライト（登録商標）のプラグで濾過し、テトラヒドロフラン（２．５Ｌ）で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。粗物質をメタノール（５００ｍＬ）に溶解し、０℃にて、メタノール（１．４５Ｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシレート（１７４．７２ｇ、１．０当量）および酢酸アンモニウム（３１５．７４ｇ、５．０当量）の溶液に加える。一晩攪拌する。シリカ／セライト（登録商標）で濾過し、酢酸エチルおよびメタノールで洗浄する。濾液を真空中で濃縮する。メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（４００ｍＬ）および水（４００ｍＬ）で希釈し、次いで８５％リン酸水溶液を加えることによってｐＨを２に調節する。層を分離し、水相をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２００ｍＬ）で洗浄する。得られた水相を固体の炭酸ナトリウムでｐＨ１０に塩基性にし、酢酸エチル（３×２００ｍＬ）で抽出する。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１０５．１ｇ、３８％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３３６［Ｍ］＋。
【０２３２】
ｉ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート：
ジメチルスルホキシド（５００ｍＬ）中にｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１０１．１０ｇ、３０１．３９ｍｍｏｌ）および新たに粉末にした水酸化カリウム（５０．７３ｇ、３．０当量）を合わせる。１５分間攪拌し、次いでヨウ化ナトリウム（４９．６９ｇ、１．１当量）を加える。ジメチルスルホキシド（１．０１Ｌ）中の１−（２−クロロ−エチル）−ピロリジニウムクロリド（６６．６４ｇ、１．３当量）の溶液を加え、室温にて４時間攪拌する。反応内容物を氷／水混合物（約１Ｌ）に注ぎ、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで抽出する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。ＨＰＬＣ（キラルパックＡＤ塩基性、ヘキサン／エタノール９：１）による精製により、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（８２．０ｇ、６３％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４３３［Ｍ］＋。
【０２３３】
ｊ．４−（１−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−４−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−ピペリジン
イソプロピルアルコール中の５Ｍ塩化水素（１１２．７ｍＬ、５．０当量）を、イソプロピルアルコール（５４９ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１３２．０ｇ、２７４．６１ｍｍｏｌ）の溶液に加える。５０℃にて６時間、反応混合物を攪拌する。真空中で濃縮する。水（１Ｌ）で希釈し、２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液でｐＨを１２に調節する。酢酸エチルおよびジクロロメタンで抽出する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、４−（１−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−４−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−ピペリジン（８１．９ｇ、９０％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３３３［Ｍ］＋。
【０２３４】
ｋ．（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン：
（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（５３．５５ｇ、２７０．９６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（３７．７７ｍＬ、１．１当量）、４−（１−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−４−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）−ピペリジン（８１．９ｇ、１．０当量）およびＮ−メチルピロリジノン（２４６ｍＬ）を合わせる。１１０℃にて一晩攪拌する。反応混合物を室温まで冷却し、酢酸エチル（４００ｍＬ）および水（１２００ｍＬ）で希釈する。２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液でｐＨを１０に調節し、層を分離する。酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で水相を洗浄する。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。水（１Ｌ）を有機物に加え、８５％リン酸水溶液でｐＨを３に調節する。層を分離し、得られた酸性の水相を酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で洗浄する。２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液で水相のｐＨを１０に調節する。酢酸エチル（３×２００ｍＬ）で抽出する。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液（２５０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させて、真空中で濃縮する。残留物をＨＰＬＣ（キラルパックＡＤ、７０／３０ヘキサン／イソプロピルアルコールｗ／０．２％ジメチルエチルアミン）により精製して、最終化合物（５１．０ｇ、４２％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４９４［Ｍ］＋。
【０２３５】
２つの異なる条件：
ＨＰＬＣ：キラルパックＡＤ−Ｈ（４．６×１５０ｍｍ；５ｕｍ）１００％エタノールｗ／０．２％ジメチルエチルアミン
ＳＦＣ：キラルパックＡＤ−Ｈ（４．６×１００ｍｍ；５ｕｍ）６５／３５ＣＯ２／エタノールｗ／０．２％ジメチルエチルアミン
を用いて反対の鏡像異性体との比較により、（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンのキラル純度を決定する。両方の方法において、鏡像異性体の割合は９９％（Ｒ）、１％（Ｓ）ｅｅ＝９８％である。
【０２３６】
実施例９３
（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
【化８０】
0005581390.tif 000124
【０２３７】
ａ．２，２−ジブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エタノン：
リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）を以下のように調製する：ジイソプロピルアミン（３１６．８ｇ、２．５当量）およびメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１．２５Ｌ）を反応器に入れ、反応容器を−１０℃〜０℃に冷却する。−１０℃〜０℃の間に温度を維持しながら、ヘキサン中のｎ−ブチルリチウム（７４８ｇ、２．２当量）を加える。３０〜６０分間、混合物を攪拌する。別の容器に、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１．８Ｌ）、ジブロモメタン（４７１．６ｇ、２．２当量）およびメチルテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−カルボキシレート（１８０ｇ）を加え、−９０℃〜−７０℃に冷却する。−９０℃〜−７０℃の間に温度を維持しながら、ＬＤＡ溶液をゆっくりと加える。３０〜９０分後、反応混合物を、０〜１０℃に維持した１Ｎ  ＨＣＬ溶液（５．５８ｋｇ）に移す。添加の完了時に、混合物を１５℃〜２５℃に加温し、１５〜２０分間この温度で攪拌する。水層を分離し、捨てる。水層が６〜７のｐＨを記録するまで、有機層を水（１．８Ｌ）で洗浄し、真空中、３５℃以下で約２．２〜２．５容量まで有機層を濃縮する。ｎ−ヘプタン（７２０ｍＬ）を加え、−１０℃〜−５℃に冷却し、１〜２時間攪拌する。濾過し、冷ヘプタン（９０ｍＬ）で濾過ケーキをリンスし、真空下で乾燥させて、２，２−ジブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エタノンを淡黄色の固体（２０３．６ｇ、５５％）として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ５．８７（ｓ，１Ｈ），４．０２（ｍ，２Ｈ），３．４８（ｍ，２Ｈ），３．３４（ｍ，１Ｈ），１．８６（ｍ，４Ｈ）。
【０２３８】
ｂ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート：
反応器中に、２，２−ジブロモ−１−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エタノン（１００ｇ、１．０当量）、ｔｅｒｔ−ブチル４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシレート（７５ｇ、１．０当量）、トルエン（８００ｍＬ）を合わせる。２０〜３０℃にて１５分間攪拌し、２５〜２８％水酸化アンモニウム水溶液（８００ｍＬ、８．０当量）を加え、６８℃〜７２℃にて１６〜２０時間加熱する。反応混合物を２０℃〜３０℃に冷却し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（３００ｍＬ）を加える。２０℃〜３０℃にて１５〜２０分間攪拌し、水層を分離する。有機層をｐＨ≦８まで水（５００ｍＬ）で洗浄する。有機層を真空中で２容量まで濃縮し、トルエン（２００ｍＬ）を加える。約２容量まで再濃縮し、カールフィッシャー滴定により含水量を決定する（水のｗｔ％≦０．１％）。温度を２０℃〜３０℃に調節し、イソプロパノール（５０ｍＬ）およびヘプタン（６００ｍＬ）を加える。２０℃〜３０℃にて４〜１６時間攪拌し、０℃〜５℃に冷却し、さらに２〜５時間攪拌する。濾過し、真空下で乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（４０ｇ、３５％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３３６［Ｍ］＋。
【０２３９】
ｃ．４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン三塩酸塩：
２０℃〜３５℃の間の温度を維持しながら、フラスコに、脱気したジメチルスルホキシド（７５０ｍＬ）、続いて、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１５０ｇ、１．０当量）、ヨウ化ナトリウム（８７．２ｇ、１．３当量）、水酸化カリウム（１５ｇ、０．６当量）およびカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（９５．３ｇ、１．９当量）を入れる。混合物を３０〜３５℃に加熱する。別の反応器中で、ジメチルスルホキシド（７５０ｍＬ）中に１−（２−クロロエチル）ピロリジン塩酸塩（８３．７ｇ、１．１当量）を溶解し、３０℃〜３５℃にて第１の反応器に移す。４０℃〜４５℃に温度を調節し、２〜３時間攪拌する。混合物を２０℃〜３０℃に冷却し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（３Ｌ）を加える。有機相を水（１．５Ｌ）で洗浄し、水層をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（３Ｌ）で逆抽出する。有機層を合わせ、水（１．５Ｌ）で洗浄し、有機層を分離し、４０℃〜４５℃にて１〜２時間、活性炭（７．５ｇ、０．０５当量））で処理する。炭を濾過し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１５０ｍＬ）で洗浄する。真空中で３容量まで濃縮し、メタノール（１．０５Ｌ）を加える。再び３〜４容量まで濃縮する。２Ｎの塩酸のメタノール溶液（１．１Ｌ、５．０当量）を加え、５０℃〜６０℃にて２時間加熱する。真空中で３〜４容量まで濃縮し、５０℃〜６０℃の温度で酢酸エチル（１．３５Ｌ）を滴下して加え、その温度で１〜２時間攪拌する。反応混合物を２０℃〜３０℃に冷却し、その温度で１〜２時間攪拌する。濾過し、ケーキを３：１酢酸エチル：ＭｅＯＨ（３００ｍＬ）でリンスして、４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン三塩酸塩を単一の位置異性体（１３０ｇ、５８％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３３３［Ｍ］＋。
【０２４０】
ｄ．（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン：
実施例９２における工程ｋに従って調製する。
【０２４１】
実施例９４
（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
【化８１】
0005581390.tif 000125
【０２４２】
ａ．（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン：
実施例９２の工程ａ〜ｅに従って調製する。
【０２４３】
ａ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート：
２８％の水酸化アンモニウム水溶液（３７２．６６ｍＬ、５．０当量）を、メタノール（５０８ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシレート（１２７ｇ、５９５．４７ｍｍｏｌ）の溶液に加え、１５分間攪拌する。氷／水浴で混合物の温度を２５℃以下に維持しながら、エタンジアール（１０８．７４ｇ、１．０当量）を滴下して加える。１時間攪拌する。水（１．１４Ｌ）を４５分にわたって滴下して加え、得られた懸濁液を室温にて１６時間攪拌する。懸濁液を濾過して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートを白色の固体（１１３ｇ、７６％）として得る。以前の濾液を再濾過して、さらなる物質（１５ｇ、１０％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２５２［Ｍ］＋。
【０２４４】
ｃ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジヨード−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート：
方法１：
ヨウ素（１０４ｇ、２．０５当量）を、１５分にわたって少しずつ、ジメチルスルホキシド（２００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（５０ｇ、１９８．９４ｍｍｏｌ）の溶液に加える（温度は４５℃に上昇する）。溶液を３０分間攪拌し、次いで水酸化カリウム（８５％、１９．７０ｇ、１．５当量）を加え、１６時間攪拌する。混合物を０．１５Ｍの亜硫酸水素ナトリウム水溶液（１．２５Ｌ）にゆっくりと注ぎ、黄色の懸濁液を得る。４５分間攪拌し、濾過し、固体を水で洗浄し、乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジヨード−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートを淡黄色の固体（９８ｇ、９８％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝５０４［Ｍ］＋。
【０２４５】
方法２：
Ｎ−ヨードスクシンイミド（４６．８１ｇ、２．０当量）を、３０℃以下に温度を維持しながら少しずつ、Ｎ−メチルピロリジノン（７５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２５ｇ、９９．４７ｍｍｏｌ）の溶液に加える。１５分間攪拌し、次いで混合物を０．０７Ｍの亜硫酸水素ナトリウム（０．７５Ｌ）にゆっくりと注ぎ、黄色の懸濁液を得る。３０分間攪拌し、濾過し、固体を水で洗浄し、乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジヨード−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートを淡黄色の固体（４９ｇ、９８％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝５０４［Ｍ］＋。
【０２４６】
ｄ．ｔｅｒｔ−ブチル４−［４，５−ジヨード−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）イミダゾール−２−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート：
水酸化カリウム（４５．１３ｇ、４．０当量）を、４０℃以下に温度を維持しながら、２５分にわたって少しずつ、Ｎ−メチルピロリジノン（２５８ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジヨード−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（８６ｇ、１７０．９ｍｍｏｌ）の溶液に加える。混合物を２５分間攪拌し、次いで１−（２−クロロエチル）ピロリジン塩酸塩（４７．５ｇ、１．６当量）を少しずつ加える。得られた混合物を４０℃にて１６時間攪拌し、次いで室温に冷却する。反応物を水（３．１Ｌ）に注ぎ、１５％リン酸水溶液を加えてｐＨを７．５〜８に調節する。得られた懸濁液を０〜５℃にて１時間攪拌する。濾過し、水で洗浄し、５０℃にて真空下で乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル４−［４，５−ジヨード−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）イミダゾール−２−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（１０２ｇ、９９％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝６０１［Ｍ］＋。
【０２４７】
ｅ．ｔｅｒｔ−ブチル４−［４−ヨード−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）イミダゾール−２−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート：
ｔｅｒｔ−ブチル４−［４，５−ジヨード−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）イミダゾール−２−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（３９ｇ、６４．９７ｍｍｏｌ）および２−メチルテトラヒドロフラン（２７３ｍＬ）を合わせ、次いで−１５℃に冷却する。テトラヒドロフラン（３２．４８ｍＬ、１．０当量）中の２Ｍイソプロピルマグネシウムクロリドを、−１０℃以下に温度を維持しながら、４５分にわたって滴下して加える。さらに３０分間攪拌する。酢酸（７．４５ｍＬ）、次いで水（１２０ｍＬ）を滴下して加える。メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２×５０ｍＬ）で水相を洗浄する。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮する。ヘキサン／メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルから得られた油を結晶化して、ｔｅｒｔ−ブチル４−［４−ヨード−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）イミダゾール−２−イル］ピペリジン−１−カルボキシレートを白色の固体（２９ｇ、９５％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４７５［Ｍ］＋。
【０２４８】
ｆ．４−アリルオキシブト−１−イン：
アリルブロミド（１２４．２７ｇ、１．０３ｍｏｌ）およびメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（５０４ｍＬ）を合わせ、次いで−５／０℃に冷却する。水素化ナトリウム（４９．３０ｇ、１．１９当量）を加え、次いで３−ブチン−１−オール（７８ｍＬ、１．０当量）を２０分にわたって滴下して加える。混合物を−５／０℃にて１５分間、次いで室温にて１６時間、攪拌する。硫酸ナトリウム十水和物（３６ｇ、０．１当量）を加え、３０分間攪拌する。超過圧力でセライト（登録商標）により濾過し、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２００ｍＬ）で洗浄して、４−アリルオキシブト−１−インをメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル中の溶液として得る。定量的収率を算出する。
【０２４９】
ｇ．２−（３−アリルオキシ−１−メチレン−プロピル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン：
塩化リチウム（４４．９０ｇ、１．０５当量）を、ジメチルホルムアミド（７７０ｍＬ）中の一塩化第一銅（１０４．８５ｇ、１．０５当量）の懸濁液に加える。その混合物を１時間攪拌し、ビス（ピナコラト）ジボロン（２７１．７０ｇ、１．０５当量）および酢酸カリウム（１０３．９５ｇ、１．０５当量）を加える。得られた黒い懸濁液を０℃に冷却し、４−アリルオキシブト−１−イン（メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル中の溶液、１１０ｇ、９９８．５８ｍｍｏｌ）に滴下して加える。１６時間攪拌し、次いで２Ｍの塩化アンモニウム水溶液（１Ｌ）、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（５００ｍＬ）およびヘキサン（５００ｍＬ）で希釈する。懸濁液を３０分間攪拌し、セライト（登録商標）で濾過し、ヘキサン（１Ｌ）で洗浄する。水相をヘキサン（２×２００ｍＬ）で洗浄する。有機物を水および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。真空中で濃縮して、粗油（２１８ｇ）を得る。ヘキサン〜７０／３０ヘキサン／メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより一部（４５ｇ）を精製して、２−（３−アリルオキシ−１−メチレン−プロピル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（２７ｇ、油の残留物から推定して１３１ｇ、５５％、２工程）を得る。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ５．９３（ｍ，２Ｈ），５．６９（ｍ，１Ｈ），５．２６（ｄｑ，Ｊ＝１７．２，１．７Ｈｚ，１Ｈ），５．１５（ｍ，１Ｈ），３．９７（ｄｔ，Ｊ＝５．８，１．４Ｈｚ，２Ｈ），３．５１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），２．４４（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），１．２６（ｓ，１２Ｈ）。
【０２５０】
ｈ．２−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン：
グラブス触媒、第２世代（ベンジリデン−［１，３−ビス（２，４，６−トリメチルフェニル）イミダゾリジン−２−イリデン］−ジクロロ（トリシクロヘキシルホスフィン）ルテニウム、２．５８ｇ、０．０３当量）を、ジクロロメタン（２８０ｍＬ）中の２−（３−アリルオキシ−１−メチレン−プロピル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（２３．４ｇ、９８．２６ｍｍｏｌ）の溶液を加え、１６時間攪拌する。真空中で濃縮し、ヘキサン（１２０ｍＬ）を残留物に加える。１時間攪拌し、濾過する。濾液を真空中で濃縮して、２−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロランを黄褐色の固体（２０．４ｇ、９９％）として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．５０（ｍ，１Ｈ），４．１７（ｑ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，２Ｈ），３．７３（ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，２Ｈ），２．２０（ｍ，２Ｈ），１．２４（ｓ，１２Ｈ）。
【０２５１】
ｉ．ｔｅｒｔ−ブチル４−［４−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）イミダゾール−２−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート：
２−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン（１９．１ｇ、１．６当量）、ｔｅｒｔ−ブチル４−［４−ヨード−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）イミダゾール−２−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（２７ｇ、５６．９ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（１２０．６ｇ、３．０当量）、およびジメチルスルホキシド（１３５ｍＬ）を合わせる。５分間攪拌する。トリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスホニウムテトラフルオロボレート（１．７ｇ、０．１当量）および酢酸パラジウム（ＩＩ）（６４５．４ｍｇ、０．０５当量）を加える。７５〜８０℃にて窒素下で４５分間、得られた懸濁液を攪拌する。混合物を室温まで冷却し、次いで水（１９０ｍＬ）およびメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（８０ｍＬ）で希釈する。水層をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（３×５４ｍＬ）で洗浄する。有機物を水（６０ｍＬ）および次いで１０％ｗ／ｗのリン酸水溶液（６０ｍＬ、２０ｍＬ）で洗浄する。これらの水層を合わせ、それらをメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（６０ｍＬ）で洗浄する。酸性の水層に炭酸ナトリウムを加え、ｐＨを１２に調節する。塩基性の水層をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（１２０ｍＬ、３０ｍＬ）で洗浄する。合わせた有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル４−［４−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）イミダゾール−２−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（２３．６ｇ、９６％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４３１［Ｍ］＋。
【０２５２】
ｊ．ｔｅｒｔ−ブチル４−［１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）−４−テトラヒドロピラン−４−イル−イミダゾール−２−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート：
パラジウム炭（３．０ｇ、５０％湿潤、０．１ｇ／ｇ限定試薬）を、エタノール（２１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−［４−（３，６−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）イミダゾール−２−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（３０ｇ、６９．６７ｍｍｏｌ）の溶液に加える。Ｐａｒｒシステム（２００ｐｓｉ、６５〜７０℃）において水素雰囲気下で２７時間攪拌する。さらなるパラジウム炭（０．６ｇ、５０％湿潤、０．０２ｇ／ｇ限定試薬）を加え、Ｐａｒｒシステム（２００ｐｓｉ、６５〜７０℃）において水素雰囲気下で５時間攪拌する。セライト（登録商標）で濾過し、エタノールで洗浄する。濾液を真空中で濃縮し、エタノール（１５０ｍＬ）に残留物を溶解する。パラジウム炭（０．６ｇ、５０％湿潤、０．０２ｇ／ｇ限定試薬）を加え、Ｐａｒｒシステム（２５０ｐｓｉ、７０℃）において水素雰囲気下で１６時間攪拌する。セライト（登録商標）で濾過し、エタノールで洗浄する。濾液を真空中で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル４−［１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）−４−テトラヒドロピラン−４−イル−イミダゾール−２−イル］ピペリジン−１−カルボキシレートを茶色の油（２９．５ｇ、９８％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４３３［Ｍ］＋。
【０２５３】
ｋ．４−［１−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−４−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−ピペリジン：
３５％の塩酸水溶液（２３．２０ｍＬ、４．７当量）を、イソプロピルアルコール（１２０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−［１−（２−ピロリジン−１−イルエチル）−４−テトラヒドロピラン−４−イル−イミダゾール−２−イル］ピペリジン−１−カルボキシレート（２９．０ｇ、６０．３３ｍｍｏｌ）の溶液に加える。５０℃にて６時間攪拌する。真空中で濃縮する。水（１Ｌ）および２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液を加えて、ｐＨを１２に調節する。酢酸エチル（３×２００ｍＬ）およびジクロロメタン（３×２００ｍＬ）で抽出する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、４−（４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン（２１．５ｇ、１００％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３３３［Ｍ］＋。
【０２５４】
ｌ．（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン：
（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（１５．６９ｇ、１．２当量）、トリエチルアミン（１０．１４ｍＬ、１．１当量）、４−［１−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−４−（テトラヒドロ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル］−ピペリジン（２２ｇ、６６．１７ｍｍｏｌ）およびＮ−メチルピロリジノン（６６ｍＬ）を合わせる。１１０℃にて１６時間攪拌し、次いで室温まで冷却する。酢酸エチル（１１０ｍＬ）および水（２２０ｍＬ）で希釈する。５Ｍの水酸化ナトリウム水溶液を加えて、ｐＨを１２に調節する。酢酸エチル（２×２００ｍＬ）で抽出する。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物に水（２２０ｍＬ）および８５％のリン酸水溶液を加えてｐＨを３に調節する。得られた酸性の水層を酢酸エチル（２×１００ｍＬ）で洗浄する。５Ｍの水酸化ナトリウム水溶液を加えて、ｐＨを１２に調節する。酢酸エチル（３×７０ｍＬ）で抽出する。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液（５０ｍＬ）で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、真空中で濃縮して、薄茶色の固体（２１．５ｇ、６４％）として最終化合物を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４９４［Ｍ］＋。
【０２５５】
実施例９５
（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン結晶形態ＩＩＩ
約１００ｍｇの非晶質（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンを小さなバイアルに加え、５ｍＬのイソプロピルエーテルおよび１００μＬの酪酸ブチルと混合する。固体のスラリーを得る。種晶を加え、攪拌プレート上で一晩、室温および１０００ｒｐｍにてサンプルをスラリーにする。白色の固体の厚いスラリーを得る。白色の固体を真空濾過により単離し、乾燥するまで６５℃の真空オーブン中に置く。
【０２５６】
Ｘ線粉末回折：結晶のＸＲＤパターンを、５０ｋＶおよび４０ｍＡで作動する、ＣｕＫα源（λ＝１．５４０５６Å）およびＶａｎｔｅｃ検出器を備えた、Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄ８  ＡｄｖａｎｃｅＸ線粉末回折計で得る。各々のサンプルを、２θにおいて０．０２°のステップサイズおよび９．０秒／ステップの走査速度で、ならびに１ｍｍの発散および受信スリットおよび０．１ｍｍの検出スリットで、２θにおいて４から４０°の間で走査する。乾燥粉末を凹型サンプルホルダーの上部に置き、ガラススライドを使用して平滑な表面を得る。結晶形態の回折パターンを室温および相対湿度にて収集する。
【０２５７】
任意の所定の結晶形に関して、回折ピークの相対強度は、結晶形態学および晶癖などの要因から得られる好適な配向に起因して変化し得ることは結晶学の分野において周知である。好適な配向の効果が存在する場合、ピーク強度は変化するが、多形体の特性ピーク位置は不変である。例えば、Ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｐｈａｒｍａｃｏｐｉｅ  ＃２３，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ  ＃１８，１８４３−１８４４ページ，１９９５を参照のこと。さらに、任意の所定の結晶形に関して、結晶学の分野において、角ピーク位置がわずかに変化し得ることも周知である。例えば、ピーク位置は、サンプルが解析される温度もしくは湿度、サンプルの変位の変化、または内部標準の存在または非存在に起因して変化し得る。この場合、２θにおいて±０．１のピーク位置の変化は、示された結晶形の明確な識別を妨げずに、これらの可能性のある変化を考慮に入れる。
【０２５８】
結晶形の確認は、識別ピーク（°２θの単位において）、典型的により突出したピークの任意の固有の組み合わせに基づいてなされ得る。従って、（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン結晶形態ＩＩＩの調製したサンプルを、以下の表１に記載される回折ピーク（２θ値）を有する、特に０．１°の回折角を許容した状態で、１７．０６、７．９７、および１４．１７からなる群より選択されるピークのうちの１つ以上と組み合わせて８．５３におけるピークを有するようなＣｕＫα放射線を用いてＸＲＤパターンにより特徴付ける。
【０２５９】
表１：（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン結晶形ＩＩＩのＸ線粉末回折ピーク
【表２０】
0005581390.tif 000126
【０２６０】
実施例９６
（Ｒ）−４−（４−（１−（２−（アゼチジン−１−イル）エチル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
【化８２】
0005581390.tif 000127
【０２６１】
ａ．メチル３−（４，６−ジヒドロキシピリミジン−５−イル）−４，４，４−トリフルオロブタノエート：
６２℃にて、メタノール（１．４９Ｌ、０．８６当量）中の２５％ナトリウムメトキシドの溶液を加熱する。プロパン二酸ジメチルエステル（１．００ｋｇ、７．５７ｍｏｌ）およびエチル４，４，４−トリフルオロクロトネート（１．２７ｋｇ、１．０当量）の混合物を、２時間にわたって滴下して加える。６２℃にて２時間、混合物を加熱する。その混合物を３０℃に冷却する。メタノール（２．３４Ｌ、１．３５当量）中の２５％ナトリウムメトキシドおよび酢酸ホルムアミジン（８６７．２ｇ、１．１当量）を加える。３０℃にて一晩攪拌する。混合物を０℃に冷却し、５Ｍの塩酸水溶液を加えて、ｐＨを４．５に調節する。濾過し、水（２Ｌ）で洗浄する。湿った固体に、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（５Ｌ）を加える。濾過し、さらなるメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル（２Ｌ）で洗浄し、５０℃にて乾燥させて、メチル３−（４，６−ジヒドロキシピリミジン−５−イル）−４，４，４−トリフルオロブタノエート（１．０５ｋｇ、５２％）を得る。
【０２６２】
ｂ．メチル３−（４，６−ジクロロピリミジン−５−イル）−４，４，４−トリフルオロブタノエート：
塩化ホスホリル（３．１５Ｌ、８．６当量）を０℃に冷却する。メチル３−（４，６−ジヒドロキシピリミジン−５−イル）−４，４，４−トリフルオロブタノエート（１．０５ｋｇ、３．９４ｍｏｌ）を滴下して加える。Ｎ，Ｎ−ジエチルアニリン（０．６９Ｌ、１．１当量）を１時間にわたって滴下して加える。混合物を１００℃にゆっくりと加温し、一晩加熱する。混合物を室温に冷却し、真空中で濃縮する。アセトニトリル（４Ｌ）で希釈し、以前に−２℃に冷却した３Ｍの第二リン酸カリウム水溶液（６．８６ｋｇ、１０当量）の溶液に滴下して加える。濾過し、不要な固体をジクロロメタンで洗浄する。濾液層を分離する。さらなるジクロロメタンで水相を洗浄する。有機物を、２Ｍの塩酸水溶液、水、および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、メチル３−（４，６−ジクロロピリミジン−５−イル）−４，４，４−トリフルオロブタノエート（１．１５ｋｇ、９７％）を得る。
【０２６３】
ｃ．（Ｒ）−４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン：
圧力反応器中で、メチル３−（４，６−ジクロロピリミジン−５−イル）−４，４，４−トリフルオロブタノエート（５０１．０ｇ、１．５７ｍｏｌ）およびイソプロピルアルコール中の２Ｍのアンモニア（１．５７Ｌ、２．０当量）を合わせる。１２０℃にて７時間加熱する。混合物を室温に冷却し、次いで真空中で濃縮する。ヘキサン（１Ｌ）で希釈する。濾過して粗生成物を得る。この固体を水（６００ｍＬ）中の１０％イソプロピルアルコールおよび水（１．３Ｌ）で粉砕する。濾過し、７０℃にて乾燥させて、４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（３２８．９ｇ、８３％）をラセミ化合物として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２５２［Ｍ］＋。
【０２６４】
キラル分離（キラルパックＡＳ、エタノール（０．２％ジメチルエチルアミン））により、（Ｒ）−４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンを鏡像異性体２（＞９９％ｅｅ）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２５２［Ｍ］＋。
【０２６５】
ｄ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート：
二酸化セレン（８．８０ｇ、７９．３２ｍｍｏｌ）、１，４−ジオキサン（５０ｍＬ）、酢酸（２ｍＬ）、および水（２ｍＬ）を合わせる。窒素下で加熱還流し、次いで４，４，４−トリフルオロブタン−２−オン（７．５９ｍＬ、１．０当量）をゆっくりと滴下して加える。窒素下で１５時間加熱還流し、次いで室温に冷却する。反応混合物を濾過して、橙赤色の濾液を得る。別のフラスコに、メタノール（１２５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシレート（１６．９２ｇ、１．０当量）および酢酸アンモニウム（１５．２８ｇ、２．５当量）を加える。濾液を添加漏斗により滴下して加える。窒素下で室温にて一晩攪拌する。真空中で濃縮乾固する。水を加え、２８％の水酸化アンモニウム水溶液で塩基性にする。ジクロロメタンで抽出する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。ヘキサン〜１０％メタノール／ジクロロメタンで溶出する、順相クロマトグラフィーにより精製して、粗生成物を黄色の油として得る。ジクロロメタンおよび飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈する。層を分離する。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートを黄色の固体（１６．３８ｇ、６２％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３３４［Ｍ］＋。
【０２６６】
ｅ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート：
ジメチルスルホキシド（３５ｍＬ）中にｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３．５２ｇ、１０．５６ｍｍｏｌ）、水酸化カリウム（１．９１ｇ、３．２当量）（新たに粉末にした）および２−（２−ブロモエトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン（１．９０ｍＬ、１．２当量）を合わせる。反応混合物を５０℃にて一晩加熱し、次いで室温に冷却する。酢酸エチルで希釈する。水、続いて飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。
【０２６７】
ジメチルスルホキシド（４３ｍＬ）中にｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（４．３４ｇ、１３．０２ｍｍｏｌ）、水酸化カリウム（２．３３ｇ、３．２当量）（新たに粉末にした）および２−（２−ブロモエトキシ）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン（２．４０ｍＬ、１．２当量）を合わせる。反応混合物を５０℃にて一晩加熱し、次いで室温に冷却する。酢酸エチルで希釈する。水、続いて飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮する。
【０２６８】
上記の反応からの２つの固体を合わせる。ヘキサン〜９：１ヘキサン：酢酸エチル〜３：１ヘキサン：酢酸エチル〜１：１ヘキサン：酢酸エチル〜１：３ヘキサン：酢酸エチル〜酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（４．１９ｇ、３０％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４６２［Ｍ］＋。
【０２６９】
ｆ．２−（２−（ピペリジン−４−イル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エタノール二塩酸塩：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルオキシ）エチル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（３．１２ｇ、６．７６ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（８８ｍＬ）、およびメタノール（３５ｍＬ）を合わせる。塩化水素（１７．３ｍＬ、１０．２当量）（ジオキサン中に４Ｍ）をゆっくりと加える。窒素下で一晩攪拌する。真空中で濃縮して、２−（２−（ピペリジン−４−イル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エタノール二塩酸塩（２．３７ｇ、１００％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２７８［Ｍ］＋。
【０２７０】
ｇ．（Ｒ）−４−（４−（１−（２−ヒドロキシエチル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン：
マイクロ波チューブ中に、（Ｒ）−４−クロロ−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（０．７０ｇ、２．７８ｍｍｏｌ）、２−（２−（ピペリジン−４−イル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エタノール二塩酸塩（１．１７ｇ、１．２当量）、Ｎ−メチルピロリジノン（１０ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（２．２０ｍＬ、５．７当量）を加える。クリンプキャップで密閉する。マイクロ波反応器中で１５０℃にて１時間加熱する。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈し、酢酸エチルで抽出する。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。５％メタノール／ジクロロメタン〜１０％メタノール／ジクロロメタン〜メタノール／ジクロロメタン中の１０％の２Ｍアンモニアで溶出する、順相クロマトグラフィーにより精製して、（Ｒ）−４−（４−（１−（２−ヒドロキシエチル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（０．９３ｇ、６８％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４９３［Ｍ］＋。
【０２７１】
ｈ．（Ｒ）−２−（２−（１−（７−オキソ−５−トリフルオロメチル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペリジン−４−イル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エチルメタンスルホネート
（Ｒ）−４−（４−（１−（２−ヒドロキシエチル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（０．９３ｇ、１．８８ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１４ｍＬ）、およびトリエチルアミン（０．７９ｍＬ、３．０当量）を合わせる。窒素下に置き、０℃に冷却する。メタンスルホニルクロリド（０．１７ｍＬ、１．２当量）を滴下して加える。３０分後、ジクロロメタンで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で希釈する。層を分離する。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、（Ｒ）−２−（２−（１−（７−オキソ−５−トリフルオロメチル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペリジン−４−イル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エチルメタンスルホネートを黄色の固体（１．０７ｇ、９６％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝５７１［Ｍ］＋。
【０２７２】
ｉ．（Ｒ）−４−（４−（１−（２−（アゼチジン−１−イル）エチル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン：
窒素下で、（Ｒ）−２−（２−（１−（７−オキソ−５−トリフルオロメチル−５，６，７，８−テトラヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペリジン−４−イル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エチルメタンスルホネート（１．０４ｇ、１．８２ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（９．３ｍＬ）、およびアゼチジン（１．１１ｍＬ、９．０当量）を合わせる。反応混合物を５０℃にて一晩加熱し、次いで室温に冷却する。酢酸エチルで希釈する。有機層を水で洗浄する。無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。１０％メタノール／ジクロロメタン〜メタノール／ジクロロメタン中の１０％の２Ｍアンモニアで溶出する、順相クロマトグラフィーにより精製して、標題化合物である、（Ｒ）−４−（４−（１−（２−（アゼチジン−１−イル）エチル）−４−（２，２，２−トリフルオロエチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−（トリフルオロメチル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンを白色の固体（０．４９ｇ、５１％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝５３２［Ｍ］＋。
【０２７３】
実施例９７
（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
【化８３】
0005581390.tif 000128
【０２７４】
ａ．（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン：
実施例９２の工程ａ〜ｅに従って調製する。
【０２７５】
ｂ．５，５，５−トリフルオロペンタナール：
３，３，３−トリアセトキシ−３−ヨードフタリド（１７．９１ｇ、１．２当量）およびジクロロメタン（９５ｍＬ）を合わせる。窒素下で、ジクロロメタン（２３８ｍＬ）中の５，５，５−トリフルオロ−１−ペンタノール（５．００ｇ、３５．１８ｍｍｏｌ）を滴下して加える。４時間後、セライト（登録商標）で反応混合物を濾過する。濾液を真空中で濃縮し、５０ｍＬのジクロロメタンと合わせ、１：１の１０％チオ硫酸ナトリウム：水酸化ナトリウム水溶液（１Ｎ）で洗浄する。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、５，５，５−トリフルオロペンタナールを無色の油（２．１３ｇ、４３％）として得る。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ９．６１（ｓ，１Ｈ），２．５０（ｍ，２Ｈ），２．２１（ｍ，２Ｈ），１．６６（ｍ，２Ｈ）。
【０２７６】
ｃ．５，５，５−トリフルオロ−２−オキソペンタナール：
５，５，５−トリフルオロペンタナール（２．０１ｇ、１４．３５ｍｍｏｌ）、１，４−ジオキサン（１０ｍＬ）、二酸化セレン（１．６２ｇ、１．０当量）、水（０．５１ｍＬ）、および酢酸（０．６９ｍＬ）を合わせる。混合物を９０℃にて加熱し、一晩攪拌する。反応混合物を室温に冷却する。濾過し、固体をジオキサンで洗浄する。濾液を合わせ、洗浄して、５，５，５−トリフルオロ−２−オキソペンタナール（２．２１ｇ、１００％）を得る。ＧＣＭＳｍ／ｚ＝１５４。
【０２７７】
ｄ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート：
２８％の水酸化アンモニウム水溶液（１８．６ｍＬ）、ｔｅｒｔ−ブチル４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシレート（３．０４ｇ、１４．２５ｍｍｏｌ）、およびメタノール（２２．６ｍＬ）を合わせる。窒素下に置き、０℃に冷却する。窒素下で、５，５，５−トリフルオロ−２−オキソペンタナール（ジオキサン中の溶液として、２．２１ｇ、１．０当量）を加える。室温に加温する。２日間攪拌する。真空中で濃縮して、酢酸エチルおよび飽和塩化ナトリウム水溶液を加える。層を分離する。水層をさらに９：１ジクロロメタン：イソプロピルアルコールで抽出する。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウム乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。ヘキサン〜１：１ヘキサン：酢酸エチル〜酢酸エチルで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートを厚い琥珀色の油（２．３２ｇ、４７％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３４８［Ｍ］＋。
ｅ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート：
ジメチルスルホキシド（１００ｍＬ）中に、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（２．２７ｇ、６．５３ｍｍｏｌ）、水酸化カリウム（１．２０ｇ、３．３当量）（新たに粉末にした）、および１−（２−クロロエチル）ピロリジン塩酸塩（１．３４ｇ、１．２当量）を合わせる。反応混合物を５０℃にて一晩加熱し、次いで室温に冷却する。酢酸エチルで希釈する。水、続いて飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。４：１ジクロロメタン：イソプロピルアルコールで溶出する、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートを厚い黄色の油（０．７３ｇ、２５％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４４５［Ｍ］＋。
【０２７８】
ｆ．４−（４−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジントリス（２，２，２−トリフルオロアセテート）：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（０．７３ｇ、１．６４ｍｍｏｌ）およびジクロロメタン（１６．２ｍＬ）を合わせる。窒素下に置き、０℃に冷却する。トリフルオロ酢酸（１６．２ｍＬ）を加える。１時間後、真空中で濃縮して、４−（４−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジントリス（２，２，２−トリフルオロアセテート）（１．１２ｇ、１００％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３４５［Ｍ］＋。
【０２７９】
ｇ．（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン：
マイクロ波中に、（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（０．３３ｇ、１．６６ｍｍｏｌ）、４−（４−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジトリス（２，２，２−トリフルオロアセテート）（１．１２ｇ、１．０当量）、Ｎ−メチルピロリジノン（１０ｍＬ）およびジイソプロピルエチルアミン（２．３０ｍＬ、８．０当量）を加える。クリンプキャップで密閉する。マイクロ波反応器中で２００℃にて１０分間加熱する。反応混合物を水で希釈し、酢酸エチルで抽出する。飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。ヘキサン〜１０％メタノール／ジクロロメタンで溶出する、順相クロマトグラフィーにより精製して、標題化合物である、（Ｒ）−５−メチル−４−（４−（１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−４−（３，３，３−トリフルオロプロピル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オンを琥珀色の固体（０．２３ｇ、２７％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝５０６［Ｍ］＋。
【０２８０】
実施例９８
（Ｒ）−４−（４−（４−エチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン
【化８４】
0005581390.tif 000129
【０２８１】
ａ．（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン；
実施例９２の工程ａ〜ｅに従って調製する。
【０２８２】
ｂ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート：
２８％の水酸化アンモニウム水溶液（３７３ｍＬ）、ｔｅｒｔ−ブチル４−ホルミルピペリジン−１−カルボキシレート（１２７．００ｇ、５９５．４７ｍｍｏｌ）、およびメタノール（５０８ｍＬ）を合わせる。室温にて攪拌する。１５分後、窒素下でエタンジアール（８６．３０ｍＬ、１．０当量）（水中に６．９Ｍ）を加える。１時間後、水（１．１４Ｌ）を４５分にわたって滴下して加える。得られた懸濁液を室温にて一晩攪拌する。濾過し、得られた白色の固体を真空下で乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル４−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１２８．００ｇ、８６％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２５２［Ｍ］＋。
【０２８３】
ｃ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジヨード−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（５０．００ｇ、１９８．９４ｍｍｏｌ）およびジメチルスルホキシド（２００ｍＬ）を合わせる。ヨウ素（１０４．０３ｇ、２．１当量）を１５分にわたって少しずつ加える。反応混合物を窒素下で４５℃に加熱する。３０分後、水酸化カリウム（１９．７０ｇ、１．５当量）を加える。室温に冷却し、一晩攪拌する。反応混合物を重硫酸ナトリウム水溶液（１．２５Ｌ、１．６５ｗｔ％）にゆっくりと加える。得られた懸濁液を４５分間攪拌する。濾過し、水で洗浄し、得られた固体を乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジヨード−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（９８．００ｇ、９８％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝５０４［Ｍ］＋。
【０２８４】
ｄ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジヨード−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート：
４０℃以下に温度を維持しながら、Ｎ−メチルピロリジノン（２５８ｍＬ）中にｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジヨード−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（８６．００ｇ、１７０．９３ｍｍｏｌ）および水酸化カリウム（４５．１３ｇ、４．０当量）を合わせる。室温にて２５分間攪拌し、次いで１−（２−クロロエチル）ピロリジン塩酸塩（４７．４７ｇ、１．６当量）を加える。反応混合物を４０℃にて一晩加熱し、次いで室温に冷却する。
【０２８５】
Ｎ−メチルピロリジノン（３０ｍＬ）中にｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジヨード−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１０．００ｇ、１９．８８ｍｍｏｌ）および水酸化カリウム（５．２５ｇ、４．０当量）を合わせる。４０℃にて３０分間攪拌し、次いで１−（２−クロロエチル）ピロリジン塩酸塩（５．５２ｇ、１．６当量）を加える。反応混合物を４０℃にて一晩加熱し、次いで室温に冷却する。
【０２８６】
上記の２つの反応混合物を合わせる。水（３．３６Ｌ）に加え、得られた混合物のｐＨを１５％のリン酸水溶液で７．５〜８．０に調節する。０〜５℃にて１時間、懸濁液を攪拌する。濾過し、水で洗浄し、得られた固体を真空下で乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジヨード−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（１０２．００ｇ、８９％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝６０１［Ｍ］＋。
【０２８７】
ｅ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ヨード−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４，５−ジヨード−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（５１．００ｇ、８４．９６ｍｍｏｌ）および２−メチルテトラヒドロフラン（３５７ｍＬ）を合わせる。反応混合物を０℃に冷却する。５℃以下に温度を維持しながら、テトラヒドロフラン中の２Ｍのイソプロピルマグネシウムクロリド（５５．２２ｍＬ、１．３当量）を４５分にわたって滴下して加える。飽和塩化アンモニウム水溶液を加える。層を分離する。水相をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで洗浄する。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、炭で脱色し、濾過し、真空中で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ヨード−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレートを黄色の固体（３９．５０ｇ、９８％）として得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４７５［Ｍ］＋。
【０２８８】
ｆ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（１−ヒドロキシエチル）−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；リン酸：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−ヨード−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート（４０．００ｇ、８２．６３ｍｍｏｌ）およびテトラヒドロフラン（６００ｍＬ）を合わせる。窒素下で−７０℃に冷却する。ヘキサン中の２．５Ｍのｎ−ブチルリチウム（６７．７６ｍＬ、２．１当量）を滴下して加える。アセトアルデヒド（２３．２２ｍＬ、５．０当量）を加え、１５分間攪拌する。飽和塩化アンモニウム水溶液（７５ｍＬ）でクエンチする。層を分離する。水相をメチルｔｅｒｔ−ブチルエーテルで洗浄する。有機物を水および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮する。エタノールに溶解する。８５％のリン酸水溶液を滴下して加えて、懸濁液を得る。室温にて混合物を一晩攪拌する。濾過し、得られたオフホワイトの固体を真空下で乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（１−ヒドロキシエチル）−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；リン酸（２８．００ｇ、６９％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３９３［Ｍ］＋。
【０２８９】
ｇ．ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−エチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；リン酸：
水酸化パラジウム炭素（４．２０ｇ、６０％湿潤、０．１５ｇ／ｇ限定試薬）を、メタノール（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（４−（１−ヒドロキシエチル）−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；リン酸（２８．００ｇ、５７．０８ｍｍｏｌ）の溶液に加える。Ｐａｒｒシステム（１５０ｐｓｉ、６０℃）において水素雰囲気下で６日間攪拌する。Ｐａｒｒシステム（３００ｐｓｉ、８０℃）において水素雰囲気下で７日間さらに攪拌する。セライト（登録商標）で濾過する。濾液を真空中で濃縮して、アセトン（２８０ｍＬ）で希釈する。室温にて一晩攪拌する。濾過し、得られた白色の固体を真空下で乾燥させて、ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−エチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；リン酸（２３．００ｇ、８５％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝３７７［Ｍ］＋。
【０２９０】
ｈ．４−（４−エチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン：
ｔｅｒｔ−ブチル４−（４−エチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−カルボキシレート；リン酸（１８．２７ｇ、３８．５０ｍｍｏｌ）および水（９．１ｍＬ）を合わせる。１２Ｍの塩酸水溶液（９．６３ｍＬ、３．０当量）を滴下して加え、室温にて攪拌する。１時間後、反応混合物のｐＨを２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液で１０に調節する。ジクロロメタンで希釈する。層を分離する。水相をジクロロメタンで洗浄する。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、４−（４−エチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン（７．７０ｇ、７２％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝２７７［Ｍ］＋。
【０２９１】
ｉ．（Ｒ）−４−（４−（４−エチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン：
４−（４−エチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン（７．７０ｇ、２７．８６ｍｍｏｌ）、（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（６．０６ｇ、１．１当量）、Ｎ−メチルピロリジノン（２５．４ｍＬ）およびトリエチルアミン（４．２７ｍＬ、１．１当量）を合わせる。１１０℃にて窒素下で一晩攪拌し、次いで室温に冷却する。酢酸エチルおよび水で希釈する。２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液でｐＨを１０に調節する。層を分離する。水相を酢酸エチルで洗浄する。有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。真空中で濃縮する。酢酸エチルおよび水で希釈する。ｐＨを５に調節する。層を分離し、有機層を捨てる。水相のｐＨを２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液で１１に調節する。水相を酢酸エチルで洗浄する。有機物を水および飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機物を真空中で濃縮する。２−メチルテトラヒドロフラン：ヘキサン（１５：８５、７７ｍＬ）で希釈する。室温にて一晩攪拌する。濾過し、得られた白色の固体を真空下で乾燥させて、標題化合物である、（Ｒ）−４−（４−（４−エチル−１−（２−（ピロリジン−１−イル）エチル）−１Ｈ−イミダゾール−２−イル）ピペリジン−１−イル）−５−メチル−５，６−ジヒドロピリド［２，３−ｄ］ピリミジン−７（８Ｈ）−オン（７．９０ｇ、６５％）を得る。ＭＳ（ＥＳ）ｍ／ｚ＝４３８［Ｍ］＋。
【０２９２】
製剤実施例
マンニトール製剤
実施例７３（５００ｍｇ）およびマンニトール（５００ｍｇ）の化合物を合わせ、２時間または均一な混合物が形成されるまで乾燥混合する。規定量の混合物（１８４．５４ｍｇ；９２．２９ｇの実施例７３の化合物に相当する）を、硬ゼラチンカプセルシェルの底部内で手動により秤量し、混合物を封入するために上部のカプセルシェルを合わせる。代替として、本発明の化合物とマンニトールの混合物を、Ｘｃｅｌｏｄｏｓｅ（登録商標）Ｓ精密微量粉末充填システムおよび密封装置などの機器を用いて硬ゼラチンカプセル内に移してもよい。
【０２９３】
ＰＥＧ４００製剤
実施例７３（１２６ｍｇ）およびＰＥＧ４００（６２１．５ｍｇ）の化合物を容器中で合わせ、２時間または実施例７３の化合物が完全に溶解するまで、２５０ｒｐｍにて攪拌器を用いて７０℃で加熱する。規定量の混合物を、軟ゼラチンカプセルシェルの底部内で手動または自動システムにより秤量し、カプセルを封入するために上部のカプセルを合わせる。
【０２９４】
ＡＫＴ１インビトロ酵素アッセイ
ＡＫＴ１標的物に対する化合物ＩＣ５０値を、ＡＫＴ１  Ｔｒａｎｓｃｒｅｅｎｅｒ（商標）キナーゼＡＤＰ−ＦＰアッセイを用いて測定する。このアッセイは、キナーゼ反応において生成されるアデノシン二リン酸（ＡＤＰ）の濃度を測定することによって化合物阻害剤の存在下でのＡＫＴ１の活性を評価する。キナーゼ反応（２５μＬの反応体積）を、９６ウェルの半分の領域のブラックポリスチレンプレート中で実施する。アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）を加えて、反応を開始する。最終反応条件は、５６ミリモル濃度のＮ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）ｐＨ７．４、０．００８％ＴＲＩＴＯＮ（商標）Ｘ−１００、５ミリモル濃度の塩化マグネシウム、３０マイクロモル濃度のＣｒｏｓｓｔｉｄｅペプチド、２０マイクロモル濃度のＡＴＰ、ｈＡＫＴ１ヒト組換え体、Ｖ−ＡＫＴマウス胸腺腫ウイルス癌遺伝子ホモログ１、ヒスチジン標識、昆虫細胞で発現、４％ジメチルスルホキシドおよび化合物の連続希釈（２０，０００から１ナノモル濃度で１：３希釈）。ＡＴＰ添加後、反応物を室温で６０分間インキュベートし、次いで５２ミリモル濃度のＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．５、２０ミリモル濃度のエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、０．４モル濃度の塩化ナトリウム、０．０２％のＢＲＩＪ−３５（商標）、１０マイクログラム／ミリリットルの抗ＡＤＰ抗体、および４ナノモル濃度のＡＤＰ  Ｆａｒ  Ｒｅｄ  Ｔｒａｃｅｒを含有する２５μＬのクエンチ検出試薬の添加によりクエンチする。クエンチした反応物を４〜１６時間インキュベートし、次いでＥｘ６１２ｎｍおよびＥｍ６３３ｎｍ波長の偏光フィルタを用いて蛍光偏光モードにおいてＴｅｃａｎ  Ｕｌｔｒａ  Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎプレートリーダーで読み取る。ミリ偏光（ｍＰ）生データを、調製したＡＤＰ／ＡＴＰ標準曲線を用いてマイクロモル濃度のＡＤＰに変換する（Ｈｕｓｓら，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａ  Ｔｒａｎｓｃｒｅｅｎｅｒ（商標）Ｋｉｎａｓｅ  Ａｓｓａｙ  ｆｏｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａ  ａｎｄ  Ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｏｎｃｏｒｄａｎｃｅ  ｏｆ  Ｄａｔａ  ｗｉｔｈ  ａ  Ｆｉｌｔｅｒ−Ｂｉｎｄｉｎｇ  Ａｓｓａｙ  Ｆｏｒｍａｔ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ，１２（４）；２００７，５７８−５８４）。各化合物についてのＩＣ５０値を、プレート上のコントロールに対するマイクロモル濃度のＡＤＰ反応データ（１００ミリモル濃度の阻害された酵素コントロールに対する活性酵素）を用いて算出する阻害パーセントのデータを用いて導き出す。次いで阻害パーセントおよび１０点化合物濃度データを、ＡＣＴＩＶＩＴＹＢＡＳＥ４．０（Ａｓｓａｙ  Ｇｕｉｄａｎｃｅ  Ｍａｎｕａｌ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ５．０，２００８，Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ  ａｎｄ  ＮＩＨ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  Ｃｅｎｔｅｒ）を用いて４パラメータロジスティック式にフィットさせる。
【０２９５】
実施例４１を上記のように実質的に試験し、０．０１７μＭのＩＣ５０を有することを見出した。これは、実施例４１がＡＫＴ１阻害剤として活性であることを実証する。
【０２９６】
Ｕ８７ＭＧ細胞におけるＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ  ＳｕｒｅＦｉｒｅ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎリン酸化ＧＳＫ３β（Ｓ９）
内因性リン酸化ＧＳＫ３βセリン９（ｐＧＳＫ３β）の形成に対する化合物の効果を、ｐＧＳＫ３β（ＴＧＲＧＢＳ１０Ｋ）についてＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ  ＳｕｒｅＦｉｒｅ（登録商標）を用いて測定する。これは、リン酸化検体のイムノサンドイッチ捕捉、続いて、増幅シグナルを生成するために抗体でコーティングされたＡｌｐｈａｓｃｒｅｅｎビーズを用いる検出を用いる均一アッセイフォーマットである。
【０２９７】
Ｕ８７ＭＧ細胞を、１０％ウシ胎仔血清、１％非必須アミノ酸および１％ピルビン酸ナトリウムを補足したＤＭＥＭからなるＵ８７ＭＧ増殖培地に維持する。このアッセイのために、細胞を標準的な手順により収集し、次いでＶｉ−Ｃｅｌｌを用いて計数する。細胞（５０，０００／ウェル）を、Ｃｏｓｔａｒ＃３５９６９６ウェルプレート中の１００μＬのＵ８７ＭＧ増殖培地に播種する。プレートを３７℃、５％ＣＯ２にて一晩インキュベートする。
【０２９８】
アッセイの日に、６％ジメチルスルホキシドを含有する培地中で希釈した２０μ／ウェルの化合物で細胞を処理する。３７℃にて１時間後、培地を除去し、５０μＬのＳｕｒｅＦｉｒｅ溶解バッファー（ＴＧＲ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ  ＳｕｒｅＦｉｒｅ（登録商標）キット成分）をウェルごとに加え、インキュベーションを、穏やかに振盪しながら室温にて１０分間継続する。溶解物（６．０μＬ）を３８４ウェルＰｒｏｘｉＰｌａｔｅ（商標）（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＃６００６２８０）に移す。０．９６μＬの活性化バッファー、０．１９μＬの各々のドナービーズおよびアクセプタービーズ、ならびにｐＧＳＫ３βアッセイについての８．７μＬの反応バッファー（ＴＧＲ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，ＴＧＲＧＢＳ１０Ｋ）を各ウェルに加える。プレートをホイルで密封し、穏やかに攪拌しながら室温にて４時間インキュベートし、次いで標準的なＡｌｐｈａＳｃｒｅｅｎ（登録商標）設定（Ｅｘ６８０ｎｍおよびＥｍ５２０−６２０ｎｍ）を用いてＴｕｒｂｏＭｏｄｕｌｅを備えたＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  ＥｎＶｉｓｉｏｎで読み取る。次いで各プレートでのコントロールから測定した阻害パーセントおよび１０点化合物濃度曲線データを、ＡＣＴＩＶＩＴＹＢＡＳＡ４．０（Ａｓｓａｙ  Ｇｕｉｄａｎｃｅ  Ｍａｎｕａｌ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ５．０，２００８，Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ  ａｎｄ  ＮＩＨ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  Ｃｅｎｔｅｒ）を用いて４パラメータロジスティック式にフィットさせる。
【０２９９】
Ａが、
【化８５】
0005581390.tif 000130
または
【化８６】
0005581390.tif 000131
である全ての例示した化合物を上記のように実質的に試験すると、２．８μＭ以下のＩＣ５０を有する。実施例４１を上記のように実質的に試験すると、１．５μＭのＩＣ５０を有することが見出された。
【０３００】
これは、本発明の化合物がＡＫＴ活性を阻害する能力を実証する。
【０３０１】
ＡＫＴのインビボでの標的阻害の測定（ＩＶ）
単一のＩＶ注射によるインビボでの標的阻害：
ヒト膠芽細胞腫由来の対数増殖期のＵ８７ＭＧ細胞を、無胸腺ラットのひ腹に皮下移植する。腫瘍が２００〜２５０ｍｍ３のサイズに到達した場合、用量反応研究または経時変化研究において、単一のＩＶ注射により化合物を動物に投与する。各治療の終わりに、動物をＣＯ２で窒息させる。腫瘍を外科的切除により採取し、液体窒素中で迅速に凍結させ、分析するまで−８０℃に保存する。血清を心穿刺により心臓から採取した血液から調製し、分析するまで−８０℃に保存する。
【０３０２】
サンプル分析
ＡＫＴ阻害剤をアセトニトリル／メタノールを用いて血清から抽出し、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳによる内部標準と一緒に分析する。用量反応研究の場合、化合物血清曝露およびＴＭＥＣ５０（閾値最小有効濃度）の計算。
【０３０３】
腫瘍を、２５ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ７．５）、Ｒｏｃｈｅコンプリートプロテアーゼインヒビター、および１ｍＭのバナジウム酸塩を含有する２容量の溶解バッファー中で、Ｐｏｗｅｒｇｅｎ１２５ホモジナイザーを用いてホモジナイズし、次いで１８ゲージ針および２３ゲージ針を連続して通す。溶解物を２０，０００×ｇにて３０分間遠心分離した後、可溶性細胞質抽出物を上清画分から回収する。細胞質抽出物中のタンパク質濃度を、ＢＣＡキットを用いて測定する。可溶性抽出物中のホスホ−ＧＳＫ３ｂ（ｐＧＳＫ３ｂ）を、ＥＬＩＳＡキットを用いて分析する。各研究に関して、阻害パーセントをビヒクルコントロール群に対して計算し、ＡＮＯＶＡ解析を、統計的有意性の測定のためにＪＭＰソフトウェアパッケージを用いて実施する。
【０３０４】
インビボでの標的阻害アッセイにおいて実施例７８を上記のように実質的に試験すると、以下の活性を有することが見出された。
【０３０５】
【表２１】
0005581390.tif 000132
【０３０６】
これはインビボにおいてＡＫＴを阻害する実施例７８の能力を実証する。
【０３０７】
ＲＯＣＫ２インビボ酵素アッセイ
ＲＯＣＫ２キナーゼに対する化合物ＩＣ５０値を、ＲＯＣＫ２  Ｔｒａｎｓｃｒｅｅｎｅｒ（商標）キナーゼＡＤＰ−ＦＰアッセイを用いて測定する。このアッセイは、キナーゼ反応で形成されるＡＤＰの濃度を測定することによって化合物阻害剤の存在下でのＲＯＣＫ２の活性を評価する。キナーゼ反応（２５μＬ容積）を９６ウェルの半分の領域のブラックポリスチレンプレート中で実施する。酵素を加えて反応を開始する。最終反応条件は、２０ミリモル濃度の３−（Ｎ−モルホリノ）−プロパンスルホン酸  ｐＨ７．４、４ミリモル濃度のベータ−グリセロ−リン酸、０．０１％ＴＲＩＴＯＮ（商標）Ｘ−１００、５ミリモル濃度の塩化マグネシウム、２５マイクロモル濃度のペプチド基質（配列ＲＦＡＲＫＧＳＬＲＱＫＮＶ（配列番号１））、１０マイクロモル濃度のＡＴＰ、ＲＯＣＫ２ヒト組換え酵素（残基１１〜５５２、ヒスチジン標識、昆虫細胞で発現）、４％ジメチルスルホキシドおよび化合物の連続希釈（２０，０００〜１ナノモル濃度で１：３希釈）である。酵素添加後、反応物を室温にて６０分間インキュベートし、次いで５２ミリモル濃度のＨＥＰＥＳ  ｐＨ７．５、２０ミリモル濃度のＥＤＴＡ、０．４モル濃度の塩化ナトリウム、０．０２％のＢＲＩＪ−３５（商標）、１０マイクログラム／ミリリットルの抗ＡＤＰ抗体、および４ナノモル濃度のＡＤＰ  Ｆａｒ  Ｒｅｄ  Ｔｒａｃｅｒを含有する２５μＬのクエンチ検出試薬の添加により停止する。クエンチした反応物を４〜１６時間インキュベートし、次いでＥｘ６１２ｎｍおよびＥｍ６３３ｎｍ波長の偏光フィルタを用いる蛍光偏光モードにおいてＴｅｃａｎ  Ｕｌｔｒａ  Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎプレートリーダーで読み取る。ミリ偏光（ｍＰ）生データを、ＡＤＰ／ＡＴＰ標準曲線を用いてマイクロモル濃度のＡＤＰに変換する（Ｈｕｓｓら，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａ  Ｔｒａｎｓｃｒｅｅｎｅｒ（商標）Ｋｉｎａｓｅ  Ａｓｓａｙ  ｆｏｒ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｋｉｎａｓｅ  Ａ  ａｎｄ  Ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｏｎｃｏｒｄａｎｃｅ  ｏｆ  Ｄａｔａ  ｗｉｔｈ  ａ  Ｆｉｌｔｅｒ−Ｂｉｎｄｉｎｇ  Ａｓｓａｙ  Ｆｏｒｍａｔ，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ，１２（４）；２００７，５７８−５８４）。各化合物についてのＩＣ５０値を、プレート上のコントロールに対するマイクロモル濃度のＡＤＰ反応データ（１００ミリモル濃度のＥＤＴＡにより阻害された酵素コントロールに対する活性酵素）を用いて算出する阻害パーセントのデータを用いて導き出す。次いで阻害パーセントおよび１０点化合物濃度データを、ＡＣＴＩＶＩＴＹＢＡＳＥ４．０（Ａｓｓａｙ  Ｇｕｉｄａｎｃｅ  Ｍａｎｕａｌ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ５．０，２００８，Ｅｌｉ  Ｌｉｌｌｙ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ  ａｎｄ  ＮＩＨ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  Ｃｅｎｔｅｒ）を用いて４パラメータロジスティック式にフィットさせる。
【０３０８】
Ａが、
【化８７】
0005581390.tif 000133
または
【化８８】
0005581390.tif 000134
である全ての例示した化合物を上記のように実質的に試験すると、２０μＭ以上のＩＣ５０を有する。実施例４１を上記のように実質的に試験すると、２０μＭより高いＩＣ５０を有することが見出された。
【０３０９】
本発明の好ましい化合物は低いＲＯＣＫ２活性を有する。
【０３１０】
細胞増殖および併用研究
増殖アッセイは、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ  Ｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ  Ａｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａから市販されている）を使用して、代謝的に活性な細胞の存在を示す、ＡＴＰ存在の定量に基づいて培地中の生存細胞の細胞数を測定する。
【０３１１】
ブランクコントロールとして培地のみを有するカラム１を除いて、細胞を、５０μＬの容積の培地（ＤＭＥＭ、１０％ＦＢＳ、２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１．０ｍＭピルビン酸ナトリウム、および０．１ｍＭ非必須アミノ酸）中で２０００細胞／ウェルにて９６ウェルプレートに播種する。そのプレートを３７℃および５％ＣＯ２にて一晩インキュベートする。次の日に、化合物ストックを、ＤＭＳＯ（５００×）中で４０ｍＭにて調製し、９６ウェル丸底ポリプロピレンプレートにおいてＤＭＳＯ中で連続希釈する。重複（１プレート当たり４つの化合物）して化合物を１０の濃度で評価する。
【０３１２】
４μＬの連続ＤＭＳＯ希釈液を９６ディープウェルプレートに移し、１ｍＬの完全な培地を加えて、投与用の２倍のストックを作製する。５０μＬの各々の２倍の投与ストックを細胞プレートの対応するウェルに穏やかに移し、０．２％のＤＭＳＯ濃度および１００μＬの最終容積を得る。５０ｍＬの培地をコントロールカラム（カラム１２）およびバックグランドカラム（カラム１）に加える。３７℃、５％ＣＯ２にて７２時間、細胞を化合物とインキュベートする。
【０３１３】
インキュベーション後、１００μＬの予め調製したＣｅｌｌＴｉｔｅｒ−Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｃａｔ：Ｇ７５７１）を各ウェルに加え、次いで細胞を、オービタルシェーカーで２分間混合することによってホモジナイズし、室温にて１０分間インキュベートし、発光シグナルの安定化を可能にする。発光生データを、Ｗａｌｌａｃ  Ｖｉｃｔｏｒ  Ｖプレートリーダーで記録し、各化合物についてのＩＣ５０値を、阻害パーセントデータを用いて生成する。４パラメータロジスティック曲線を各々の用量反応にフィットさせる。
【０３１４】
併用研究は、他の治療剤および本発明の化合物が、単一薬剤のＩＣ５０等価物に対応する一定比の濃度で存在する、一定比の方法である。併用研究の読み取りは、Ｃｅｌｌ  Ｔｉｔｅｒ  Ｇｌｏ試薬を用いる、それぞれの細胞株における細胞増殖である。コントロールを、化合物を含まずに同様に処理する。データの解析は、内部で開発されたウェブベースのツールを利用して、Ｚｈａｏら，Ａｌ．（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １０，７９９４−８００４，２００４年，１２月１日）に記載される方法に従って行う。併用指標を以下に式に従って各細胞増殖阻害活性レベルについて算出する。
活性レベルｘにおける併用指標＝［活性レベルｘの併用における他の治療剤の濃度／他の治療剤のＩＣｘ］＋［活性レベルｘの併用における本発明の化合物の濃度／本発明の化合物のＩＣｘ］
【０３１５】
明確さのために、５０％阻害における併用指標値を以下にまとめる。
【０３１６】
【表２２−１】
0005581390.tif 000135
【表２２−２】
0005581390.tif 000136
【表２２−３】
0005581390.tif 000137
【０３１７】
ＡＫＴのインビボでの標的阻害の測定（経口および非経口）
Ｕ８７ＭＧヒト膠芽細胞腫細胞（５×１０６）を、０．２ｍＬのマトリゲル中で無胸腺ヌードマウスのひ腹に皮下移植する。移植の２週間後、時間経過、単一用量／単一時点、またはＴＭＥＤ５０（閾値最小有効量）の測定のための用量反応プロトコルに従ってマウスに経口または非経口投与する。腫瘍を採取時に急速冷凍し、用量反応研究の場合、親化合物血漿曝露の測定およびＴＭＥＣ５０（閾値最小有効濃度）の算出のために血液を収集する。腫瘍または組織を液体Ｎ２で粉砕し、Ｌｙｓｉｎｇ  Ｍａｔｒｉｘ  Ｄチューブ（ＭＰ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｓ，Ｓｏｌｏｎ，ＯＨ，ｃａｔ＃６９１３−５００）およびＢＩＯ１０１  Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓａｖａｎｔ  Ｆａｓｔ  Ｐｒｅｐ  ＦＰ１２を用いて４００μＬのＸＹ溶解バッファー（１０μｇ／ｍＬのロイペプチン、１０μｇ／ｍＬのトリプシン−キモトリプシンインヒビター、１０μｇ／ｍＬのトシルフェニル−アラニルクロロメチルケトン、１０μｇ／ｍＬのアプロチニン、６０ｍＭのベータ−グリセロールリン酸、１％のＴｒｉｔｏｎ  １００、２５ｍＭのＴｒｉｓ  ｐＨ７．５、２．５ｍＭのピロリン酸塩、１５０ｍＭのＮａＣｌ、２ｍＭのｐ−トシル−Ｌ−アルギニンメチルエステル、１５ｍＭのパラ−ニトロフェニルリン酸、５ｍＭのベンズアミジン、１ｍＭのバナジン酸ナトリウム、１０ｍＭのＮａＦ、５０μｇ／ｍＬのフェニル−メタンスルホニルフルオリド、１ｍＭの１，４−ジチオスレイトール（ＤＴＴ）、１５ｍＭのＥＤＴＡ  ｐＨ８．０、５ｍＭのＥＧＴＡ  ｐＨ８．０、１μＭのミクロスチン、１μＭのオカダ酸、および１０ｍＬ当たり１つのＲｏｃｈｅコンプリートプロテアーゼインヒビターミニタブレット）中に溶解する。溶解物をアリコートし、直接評価するか、または後の試験のために−８０℃で保存する。ＡＫＴのインビボでの標的阻害を、Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ）ＥＬＩＳＡ技術を利用して測定し、下流エフェクターＦＯＸＯ、ＰＲＡＳ４０およびＧＳＫ３β（Ｓ９）のリン酸化反応に対する効果を評価する。手短に言えば、２０μｇの溶解物を、適切な捕捉抗体を予めスポットされた９６ウェルプレートを含有する炭素電極に加える。対象のタンパク質を、ルテニウムで標識した検出抗体を用いて調べる。共反応物ＴＰＡを含有するリードバッファーの存在下で電極上を電流が通過する時に、電気化学ルミネセンスにより、ＭＳＤ  Ｓｅｃｔｏｒ  ６０００機器を用いて定量化され、記録される光が生成する。各研究について、阻害パーセントをビヒクルコントロール群に対して算出し、ＡＮＯＶＡ分析を、統計的有意性を決定するためにＪＭＰソフトウェアパッケージを用いて実施する。
【０３１８】
実施例２６を、ＡＫＴのインビボでの標的阻害アッセイにおいて上記のように実質的に試験すると、１２．５ｍｇ／ｋｇにて２時間後に以下の活性を有することが見出された（１群当たり６匹の動物の平均）。
【０３１９】
【表２３】
0005581390.tif 000138
【０３２０】
これは、インビボでＡＫＴを阻害する実施例２６の能力を示す。
【配列表】
0005581390000001.app