(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
セルロース含有原料からエタノールを製造する方法であって、
セルロース含有原料に、糖含有液由来発酵液を添加した後、糖化する糖化工程と、
前記糖化工程において得られた糖液をエタノール発酵する発酵工程と、を有し、
前記糖含有液由来発酵液は、水溶性糖類を含有する農作物の搾汁液、モラセス、及び穀類の酵素処理物からなる群より選択される１種以上の糖含有液を、エタノール発酵して得られるものであることを特徴とするエタノール製造方法。
【請求項２】
前記セルロース含有原料の糖化工程の糖化槽における不溶性固形分濃度が、２５質量％以下であることを特徴とする請求項１に記載のエタノール製造方法。
【請求項３】
前記セルロース含有原料のエタノール発酵後に得られるエタノール濃度が、１２質量％以下であることを特徴とする請求項１又は２に記載のエタノール製造方法。
【請求項４】
前記セルロース含有原料の糖化工程と発酵工程とが、同一の反応槽中で行われることを特徴とする請求項１〜３のいずれか記載のエタノール製造方法。
【請求項５】
前記セルロース含有原料が、バガス、稲わら、麦わら、籾殻、麦殻、キャッサバ残渣及びコーンストーバーからなる群より選択される１種以上であり、
前記穀類の酵素処理物が、米、麦、キャッサバ及びトウモロコシからなる群より選択される１種以上を糖化して得られる澱粉糖化液であることを特徴とする請求項１〜４のいずれか記載のエタノール製造方法。
【請求項６】
前記セルロース含有原料がバガスであり、前記糖含有液が水溶性糖類を含有する農作物の搾汁液又はモラセスであることを特徴とする請求項１〜５のいずれか記載のエタノール製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、セルロース含有原料から、効率よく、高濃度のエタノールを製造する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、地球温暖化防止策として、植物性バイオマスからエタノールを効率よく製造し、エネルギーや化学原料として利用する試みが国内外で進められている。植物性バイオマスとしては、食糧供給と競合しないセルロース系バイオマスを用いてエタノールを製造する方法が注目されている。
セルロース系バイオマスからエタノールを製造するための方法としては、まず、セルロース系バイオマスを前処理した後に、酵素による糖化処理を行って糖を得、得られた糖をエタノール発酵してエタノールを製造する方法が一般的に用いられている（特許文献１、２参照）。
一方、糖含有液を原料として用いたエタノール生産は古くから行われており、例えば、砂糖工場におけるモラセス（廃糖蜜）を原料としたエタノール生産が挙げられる。
【０００３】
近年では、上記のようなセルロース系バイオマスからのエタノール生産技術の向上に伴い、セルロース系バイオマスと、糖含有液とからのエタノール生産を組み合わせるシステムが提案されている。例えば、非特許文献１、２には、図１に示すような糖含有液であるモラセスを用いて製造したエタノールと、セルロース系バイオマスであるバガス（サトウキビ搾汁後残渣）とを用いて製造したエタノールとを併せて蒸留するエタノール製造方法が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００５−１６８３３５号公報
【特許文献２】特開２００９−０２２１６５号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】「平成１６年度調査報告  製糖工場におけるモラセス・バガスエタノール  製造モデル事業実施可能性調査」独立行政法人  新エネルギー・産業技術総合開発機構編
【非特許文献２】「Ｏｐｅｒａｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｐｏｒｔ  ｆｒｏｍ  Ｔｈａｉ  ＲｏｏｎｇＲｕａｎｇＥｎｅｒｇｙ  Ｃｏ．，ｌｔｄ．，  Ｕｇｒｉｔ  Ａｓａｄａｔｏｒｎ」タイ国砂糖工業局ホームページ、ｈｔｔｐ：／／ｏｌｄｗｅｂ．ｏｃｓｂ．ｇｏ．ｔｈ／ｕｐｌｏａｄｓ％５Ｃｃｏｎｔｅｎｔｓ％５Ｃ４％５Ｃａｔｔａｃｈｆｉｌｅｓ％５ＣＴＲＥ％２０Ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ％２０４−０６−０９−１．ｐｄｆ
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上記のようなセルロース系バイオマスを原料として酵素糖化する際に、糖化槽内の不溶性固形分濃度が高すぎる場合には、糖化効率が低くなり、糖化後の糖収率が低下する。そのため、糖化処理前に希釈液を投入して糖化槽内の不溶性固形分濃度を調整することが一般に行われているが、その場合、大量の希釈液が必要になるという問題があった。
一方で、糖含有液を原料としてエタノール発酵をする際に、仕込み糖濃度が高すぎる場合、発酵処理中の発酵槽内エタノール濃度が高くなりすぎ、該高濃度のエタノールが発酵槽内の酵母によるエタノール発酵自体を阻害し、発酵後のエタノール収率が低下する。例えば、糖含有液が一般に５０質量％程度の糖を有するモラセスである場合、糖濃度５０質量％では発酵処理中の発酵槽内エタノール濃度が高くなりすぎる。そのため、糖含有液の種類によっては発酵処理前に希釈液を投入して発酵槽内の糖濃度を調整することが一般に行われているが、その場合、大量の希釈液が必要になるという問題があった。
【０００７】
さらに、上記のように糖化処理前や発酵処理前に希釈液を投入する場合、得られる発酵液中のエタノール濃度が低下し、該発酵液を蒸留して高濃度エタノール液を製造する際に必要なエネルギー量が増大するという問題もある。さらに、エタノール製造から排出される排水量が多くなるという問題もある。
【０００８】
また、上記非特許文献１〜２に記載されたエタノール製造方法では、モラセス由来の発酵液とバガス由来の発酵液とを混合し、蒸留工程を一度に行うが、セルロース系バイオマスからの糖化及び発酵と、糖含有液からの発酵とは、それぞれ個別の槽内で行われる。そのため、それぞれの槽に対して希釈液を添加する必要があり、大量の希釈液を必要とするという問題は解決されていない。
糖含有液の発酵は、発酵に用いる微生物のエタノール耐性濃度を越えないように希釈液を添加することにより行われるが、セルロースの糖化発酵の場合、先述のように固形物濃度を調整して糖化を効率よく行う目的のためにも希釈液を添加する。よって、セルロースの糖化発酵液中のエタノールは発酵に用いる微生物のエタノール耐性濃度よりも低く、かつ通常行われる糖含有液発酵液のエタノール濃度よりも低くなってしまう。
蒸留工程には両発酵液を混合したものを供給するが、結果としてこの混合液中のエタノール濃度は微生物の耐性濃度より大幅に低い値となるのが現状である。
【０００９】
本発明は上記事情に鑑みてなされたものであって、セルロース含有原料から、効率よく、高濃度のエタノールを製造することが可能なエタノール製造方法の提供を目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究した結果、モラセス、及び穀類の酵素処理物からなる群より選択される１種以上の糖含有液をエタノール発酵して得られる糖含有液由来発酵液を、セルロース含有原料の糖化工程において用いることにより、セルロース含有原料から効率よく、高濃度のエタノールを製造することができることを見出し、本発明を完成させた。
【００１１】
すなわち、本発明は、
（１）セルロース含有原料からエタノールを製造する方法であって、セルロース含有原料に、糖含有液由来発酵液を添加した後、糖化する糖化工程と、前記糖化工程において得られた糖液をエタノール発酵する発酵工程と、を有し、前記糖含有液由来発酵液は、水溶性糖類を含有する農作物の搾汁液、モラセス、及び穀類の酵素処理物からなる群より選択される１種以上の糖含有液を、エタノール発酵して得られるものであることを特徴とするエタノール製造方法、
（２）前記セルロース含有原料の糖化工程の糖化槽における不溶性固形分濃度が、２５質量％以下であることを特徴とする（１）のエタノール製造方法、
（３）前記セルロース含有原料のエタノール発酵後に得られるエタノール濃度が、１２質量％以下であることを特徴とする（１）又は（２）のエタノール製造方法、
（４）前記セルロース含有原料の糖化工程と発酵工程とが、同一の反応槽中で行われることを特徴とする（１）〜（３）いずれかのエタノール製造方法、
（５）前記セルロース含有原料が、バガス、稲わら、麦わら、籾殻、麦殻、キャッサバ残渣、及びコーンストーバーからなる群より選択される１種以上であり、前記穀類の酵素処理物が、米、麦、キャッサバ、及びトウモロコシからなる群より選択される１種以上を糖化して得られる澱粉糖化液であることを特徴とする（１）〜（４）いずれかのエタノール製造方法、
（６）前記セルロース含有原料がバガスであり、前記糖含有液が水溶性糖類を含有する農作物の搾汁液又はモラセスであることを特徴とする（１）〜（５）いずれかのエタノール製造方法、
を提供するものである。
【発明の効果】
【００１２】
本発明のエタノール製造方法では、セルロース含有原料を糖化する際の希釈液の一部として、従来の水等に替えて、糖含有液由来発酵液を用いることにより、セルロース含有原料を糖化する際の希釈液の使用量を低減することができるため、コスト低減及び効率向上を達成でき、且つ、発酵後に高濃度のエタノールを得ることができる。
また、本発明のエタノール製造方法によれば、得られる発酵液中のエタノールが高濃度であるため、該エタノール発酵液を蒸留する際のエネルギーを低減することができる。
さらに、希釈水として水の代わりにエタノールを含有した発酵液を用いることにより、セルロース含有原料の糖化、発酵の際の雑菌繁殖のリスクを低減させることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】バガス及びモラセスを用いた従来のエタノール製造方法を示すフローチャートである。
【図２】発酵後エタノール目標濃度（微生物エタノール耐性上限濃度）が１２％の場合の、前処理物、糖含有液由来発酵液、及び希釈液量を決定するための算出方法を示す図である。
【図３】発酵後エタノール目標濃度（微生物エタノール耐性上限濃度）が１２％の場合の、前処理物、糖含有液由来発酵液、及び希釈液量を決定するための制御概念を示すフローチャートである。
【図４】発酵後エタノール目標濃度（微生物エタノール耐性上限濃度）が１０％の場合の、バガス及びモラセスを用いた本発明のエタノール製造方法を示すフローチャートである。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明のエタノール製造方法は、セルロース含有原料からエタノールを製造する方法であって、セルロース含有原料に、糖含有液由来発酵液を添加した後、糖化する糖化工程と、前記糖化工程において得られた糖液をエタノール発酵する発酵工程と、を有する。
【００１５】
本発明において用いられるセルロース含有原料は、セルロースを含有するものであれば特に限定されるものではなく、草本系バイオマスであってもよく、木質系バイオマスであってもよく、その他のセルロースを含有するバイオマスであってもよい。セルロース含有原料としては、稲、麦、トウモロコシ、サトウキビ、テンサイ、麻、綿花、ソルガム、エリアンサス、キャッサバ等の栽培作物等であってもよいが、廃棄の対象とされ得るものであって、セルロース含有量が比較的多いものであることが好ましい。具体的には、稲わら、麦わら、籾殻、麦殻、コーンストーバー、バガス、ヤシガラ、キャッサバ残渣（デンプン回収後のキャッサバの残渣）等の農業残渣、竹、木材チップ、間伐材等の林業残渣、古紙、古着等が挙げられる。中でも、草本系バイオマス等のソフトセルロース系バイオマスであることが好ましく、安価で大量に入手可能であることから、バガス、稲わら、麦わら、籾殻、麦殻、キャッサバ残渣、コーンストーバー等の穀物残渣であることがより好ましい。本発明においては、これらのセルロース含有原料のうち、１種類のみを用いてもよく、２種類以上を用いてもよい。
【００１６】
また、本発明において、セルロース含有原料は、前処理工程により前処理されたものであることが好ましい。
セルロース含有原料を前処理する方法は、セルロース含有原料に対して施すことにより後段の糖化工程における糖化効率を改善し得るものであれば、特に限定されるものではないが、例えば、細断処理、及び水熱処理からなる処理方法から選択される１種又は２種以上を組み合わせて用いることが好ましい。
【００１７】
細断処理の方法は特に限定されるものではなく、公知の装置等を用いて行うことができるが、例えば、１〜２０ｍｍのサイズ、より好ましくは１〜５ｍｍのサイズに細断することができる。
【００１８】
水熱処理の方法は特に限定されるものではなく、公知の装置等を用いて行うことができる。
水熱処理の条件は特に限定されるものではないが好ましくは１６０〜２５０℃の飽和水蒸気下、より好ましくは１７０〜２２０℃の飽和水蒸気下で、圧力として具体的には６．３〜２８．５ＭＰａで水熱処理を行うことが好ましい。また、水熱処理は、好ましくは３〜１２０分、より好ましくは５〜３０分で行うことが好ましい。上記のような好ましい条件において水熱処理を行うことにより、セルロース含有原料の過分解を低減することができる。
【００１９】
また、上記細断処理、水熱処理に代えて、又は、これらと組み合わせて、粗粉砕処理、微粉砕処理、アルカリ処理、微生物処理、硫酸処理、熱軟化処理、ソルボリシス処理等の公知の前処理を行うこともできる。
【００２０】
さらに、上記処理に替えて、または上記処理と併せて、解繊処理を行うことも好ましい。解繊処理の方法は特に限定されるものではなく、例えば、通常製紙産業において用いられるパルプ離解機、具体的には、低濃度（固形分濃度６質量％未満）パルパー、中濃度（固形分濃度６〜１０質量％）パルパー、高濃度（固形分濃度１０〜３０質量％）パルパー等を用いて行うことができる。解繊処理は、前記水熱処理の後に併せて行うことがより好ましい。
【００２１】
また、上記のように処理されたセルロース含有原料は、必要に応じて、遠心脱水式、ベルト濃縮式等の公知の濃縮機を用いて、液体成分の割合を調整してもよい。
【００２２】
本発明における糖化工程では、セルロース含有原料、又は、上記のような前処理を行った前処理済セルロース含有原料（以下、「前処理物」ということがある。）に、糖含有液由来発酵液（必要に応じてさらに、糖化酵素等）を添加した後、糖化し、糖液を得る。
【００２３】
本発明において、糖含有液由来発酵液は、グルコース、ガラクトース、マンノース、フルクトース、ソルボース、アロース、タロース、グロース、アルトロース、イドース、キシロース、アラビノース、リボース、リキソースなどの単糖、または、これら単糖を最小単位とするスクロース、トレハロース、ラクトース、マルトース、セロビオース、ラフィノース、セロトリオースなどの多糖類等の水溶性糖類を含有する農作物の搾汁液、モラセス、及び穀類の酵素処理物からなる群より選択される１種以上の糖含有液を、エタノール発酵して得られるものである。
水溶性糖類を含有する農作物としては、例えば、ケーンジュース、ビートジュース、ソルガムジュース等が挙げられる。
穀類としては、米、麦、キャッサバ、とうもろこし、キビ、アワ、ヒエ等が挙げられる。
穀類を酵素処理する方法は、特に限定されるものではなく、例えば、アミラーゼ等の酵素と穀類とを接触させることにより行うことができる。本発明においては、澱粉含有量が高く、且つ生産量が多いことから、米、麦、キャッサバ及びトウモロコシからなる群より選択される１種以上を糖化して得られる澱粉糖化液であることが好ましい。
水溶性糖類を含有する農作物の搾汁液、モラセス、又は穀物の酵素処理物は、そのまま用いてもよく、脱塩処理や、殺菌処理をした後に用いてもよい。ここで脱塩処理、殺菌処理の方法は特に限定されるものではなく、公知の方法により行うことができる。
【００２４】
本発明において、糖含有液は、糖を５質量％以上含有する液体であることが好ましく、糖を１０質量％以上含有する液体であることがより好ましく、糖を１５質量％以上含有する液体であることがさらに好ましく、糖を２０質量％以上含有する液体であることが特に好ましい。
【００２５】
本発明における糖含有液としては、特に、用いられるセルロース含有原料と同一の産業分野で得られる糖液、水溶性糖類を含有する搾汁液、若しくはそれらを酵素糖化処理して得られる液、又は、セルロース含有原料と同一の産業分野で得られる穀類を酵素処理して得られる液であることが好ましく、上記セルロース含有原料と同一の食物工場等から得られるものであることがさらに好ましい。セルロース含有原料と糖含有液とを、同じ工場や農地等から調達可能である場合には、本発明のエタノール製造方法を、当該工場等の近隣に建設されたプラントにおいて実施することにより、セルロース含有原料や糖含有液を運搬するコストを削減することができる。
【００２６】
具体的には、製糖工場において得られる、バガスをセルロース含有原料とし、モラセスを糖含有液とする場合；稲又は米加工工場分野において得られる、稲わら又は籾殻をセルロース含有原料とし、何らかの理由で廃棄される米の酵素処理物を糖含有液とする場合；麦加工工場において得られる、麦わら又は麦殻をセルロース含有原料とし、何らかの理由で廃棄される麦の酵素処理物を糖含有液とする場合；キャッサバ澱粉工場で得られる澱粉製造残渣（キャッサバ残渣）をセルロース原料含量とし、何らかの理由で廃棄されるキャッサバの酵素処理物を糖含有液とする場合；トウモロコシ加工工場において得られる、コーンストーバーをセルロース含有原料とし、何らかの理由で廃棄されるトウモロコシの酵素処理物を糖含有液とする場合；製糖工場において得られる、バガスをセルロース含有原料とし、何らかの理由で廃棄されるサトウキビを搾った搾汁液（ケーンジュース）を糖含有液とする場合；製糖工場において得られる、甜菜残渣をセルロース含有原料とし、何らかの理由で廃棄される甜菜（砂糖大根）を搾った搾汁液（ビートジュース）を糖含有液とする場合；製糖工場において得られる、ソルガム残渣をセルロース含有原料とし、何らかの理由で廃棄されるソルガムを搾った搾汁液（ソルガムジュース）を糖含有液とする場合、が好ましいものとして挙げられる。
なかでも、バガスと、農作物の搾汁液又はモラセスとを用いた場合、穀類を酵素処理する工程が不要であるため、特に好ましい。
【００２７】
糖含有液をエタノール発酵する方法は、特に限定されるものではなく、糖液のエタノール発酵に通常用いられる方法により行うことができる。例えば、エタノール発酵槽中の糖含有液に、エタノール発酵能を有する公知の微生物を添加することにより、糖含有液由来発酵液が得られる。
エタノール発酵能を有する微生物としては、例えば、サッカロミセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属の酵母、具体的には、サッカロミセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）等が挙げられる。
糖含有液をエタノール発酵する際に、エタノール発酵槽中の糖濃度が高すぎる場合、前述したように発酵処理中の発酵槽内エタノール濃度が高くなりすぎ、該エタノールが発酵槽内の酵母によるエタノール発酵を阻害し、単位糖量あたりのエタノール収量が低下してしまう。そのため、エタノール発酵槽中の糖濃度は、２５質量％以下であることが好ましく、２２質量％以下であることがより好ましく、２０質量％以下であることが最も好ましい。
エタノール発酵槽中の糖濃度を上記範囲とする方法は特に限定されるものではなく、希釈液を添加する等の方法により行うことができる。希釈液としては、水が好ましい。なお、本発明における糖含有液由来発酵液には、未発酵の糖が微量（３％程度以下）含有されていてもよい。
【００２８】
糖化工程において、セルロース含有原料又は前処理物に添加する糖含有液由来発酵液の量は、特に限定されるものではないが、糖化工程の糖化槽における不溶性固形分濃度が、２５質量％以下となり、且つ、セルロース含有原料のエタノール発酵後に得られる発酵液中のエタノール濃度が、１２質量％以下となるように添加量を決定することが好ましく、エタノール濃度が１０質量％以下となるように添加量を決定することがより好ましい。また、糖含有液由来発酵液のみを添加した場合に、上記不溶性固形分濃度及びエタノール濃度が満たされない場合には、さらに希釈液を添加することができる。
【００２９】
具体的には、発酵液中のエタノール濃度が１２質量％以下となる前処理物と糖含有液由来発酵液と希釈液との量は、例えば図２に示す算出方法、並びに、図３のフローチャートで示す制御概念により決定することができる。
図２〜３中、Ｂは糖含有液由来発酵液量を、Ｄは糖化槽内の全量を、ｘｂは糖含有液由来発酵液中の糖濃度を、ｙｂは糖含有液由来発酵液中のエタノール濃度を、ｚａは前処理物中の水分割合を、Ｑは前処理物中の固形物のエタノールへの変換係数を、Ｃは添加すべき希釈液量を示す。なお、図２〜３中、糖含有液由来発酵液中の糖からエタノールへの変換係数（割合）は、５１質量％とした。また、Ｑで示される前処理物中の固形物のエタノールへの変換係数（割合）は、バガスを水熱処理した前処理物の場合、一般に１４〜２５質量％となる。
【００３０】
本発明において、糖化工程において糖化を行う方法は特に限定されるものではなく、公知慣用の方法により行うことができる。例えば、上記のようにして得られたセルロース含有原料又は前処理物と、糖含有液由来発酵液と、場合によっては希釈液とを含む液に、セルラーゼ等の糖化酵素を添加して酵素処理を行うことにより、セルロースやヘミセルロースを糖化した糖液を得ることができる。糖化酵素については公知慣用のものでよく、トリコデルマ・リーゼイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉ）由来のものであっても、アクレモニウム・セルロリティカス（Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ  ｃｅｌｌｕｌｏｌｙｔｉｃｕｓ）由来のものであっても構わない。なお、糖含有液由来発酵液にはエタノールが含まれるため、糖化工程において雑菌繁殖を抑制する効果がある。
【００３１】
次に、本発明における発酵工程では、前記糖化工程において得られた糖液をエタノール発酵する。
エタノール発酵の方法は特に限定されるものではなく、糖液のエタノール発酵に通常用いられる方法により行うことができる。例えば、糖液に、エタノール発酵能を有する公知の微生物を添加し、糖液をエタノール発酵することにより、エタノールを含む発酵液が得られる。エタノール発酵能を有する微生物としては、上記同様のものが挙げられる。
【００３２】
近年、製造プロセスを単純化し効率を向上させる観点から、糖化工程と発酵工程とを同時に行う方法も用いられている。本発明においても、糖化処理とエタノール発酵とは、別個の槽内で独立に行ってもよく、同一の槽内で、同時に行ってもよい。
本発明のエタノール製造方法を用いた場合、糖化工程と発酵工程とを同一の槽内で、同時に行う場合にも、槽内の攪拌性と、糖濃度との両者を最適化することができる。
【００３３】
発酵工程により得られたエタノールを含む発酵液は、通常、蒸留、精製等の工程を経て、実用に供されるが、本発明のエタノール製造方法によって得られた発酵液はエタノール濃度が高いため、蒸留の工程におけるエネルギーを低減することが可能となり、より効率よく純度の高いエタノールを得ることができる。
【００３４】
図４に、本発明のエタノール製造方法の具体例を示す。図４において用いられているモラセス及びバガスの量は、図１の従来のエタノール製造方法と同じであり、図１及び図４における発酵後エタノール目標濃度（微生物エタノール耐性上限濃度）は１０％である。
図４と図１とを比較すると、従来法（図１）では、用いる希釈液の量が合計で１９５万トン／年であるのに対し、本発明（図４）では１１０万トン／年である。
また、従来法では、得られた発酵液中のエタノール濃度が７．３質量％であるのに対し、本発明では１０質量％と向上している。そのため、本発明では製品エタノール（約１００％純度のエタノール）を得る際の蒸留に必要なエネルギーを低減することができる。
このように、本発明のエタノール製造方法によれば、添加する希釈液量を低減し、且つ、得られる発酵液中のエタノール濃度を高めることができる。
なお、本発明のエタノール製造方法では、図４中に示すような、「糖、エタノール濃度測定手段」、「スラリー濃度（水分）測定手段」を用いて、それぞれ、糖含有液由来発酵液中の糖及びエタノール濃度の測定、前処理物中の水分割合の測定を行い、得られた測定値等を用いて、図２〜３に示す制御概念や式により、用いる糖含有液由来発酵液の量や希釈液の量を決定することが好ましい。
【実施例】
【００３５】
次に実施例を示して本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００３６】
≪実施例１、比較例１〜２≫
セルロース含有原料としてバガスを、糖含有液としてモラセスを用いてエタノールを製造した場合の、発酵後の発酵液中のエタノール濃度について検討した。
【００３７】
［実験例１・酵母培養液の調整］
酵母エキス１０ｇ／Ｌ、ペプトン２０ｇ／Ｌ、グルコース２０ｇ／Ｌからなる培地を定法により滅菌後、本菌株を接種し、３５℃で１日間好気的に培養した。培養液はそのままモラセス発酵およびバガス発酵に使用した。
【００３８】
［実験例２・酵素液の調整］
結晶性セルロース５０ｇ／Ｌ、コーンステイープリカー１０ｇ／Ｌ、硫酸アンモニウム５ｇ／Ｌ、尿素３ｇ／Ｌ、硫酸マグネシウム１．２ｇ／Ｌ、リン酸２水素カリウム１２ｇ／Ｌ、硫酸亜鉛１０ｍｇ／Ｌ、硫酸マンガン１０ｍｇ／Ｌ、硫酸銅１０ｍｇ／Ｌからなる培地（ｐＨ４．０）を定法により滅菌後、本菌株を接種し、３０℃で７日間好気的に培養した。得られた培養液をそのままバガス糖化に使用した。
【００３９】
［実施例１］
（モラセス発酵）
モラセス（糖濃度５０質量％）１８ｇを滅菌した三角フラスコに入れ、実験例１の酵母培養液２．５ｇ硫酸アンモニウム０．５ｇを含む滅菌水２９．５ｇを添加して全量５０ｇとした。この三角フラスコを３５℃恒温培養器に設置された振とう培養器（（株）日伸理化製ＮＸ−２５Ｄ；以下、振とう機は全て同型を使用）にて５０ｒｐｍで４８時間振とうし、発酵を行った。発酵後の発酵液の全量は４５．５ｇであり、発酵液のエタノール濃度は１０質量％であった。
【００４０】
（バガス同時糖化発酵）
酵素糖化前処理として、セルロース含有原料であるバガスの水熱処理を行った。水熱処理には、バイオマス投入口、反応物排出口、水蒸気供給口を有する小型圧力容器（スチームガン）を用いた。バガス１００ｇ（水分２０％）をスチームガンに投入して密閉し、水蒸気を供給して２２０℃まで加熱した。この状態を１０分保持した後、排出口を開放し、バガスを取り出した。排出物の総量は１４０ｇであり、水分は６０質量％であった。これをそのまま酵素糖化または同時糖化発酵に使用した。
水熱処理をしたバガス２５ｇ（湿ベース、水分６０質量％）を滅菌した２５０ｍＬの三角フラスコに入れ、実験例１の酵母培養液４．４ｇ、実験例２の酵素液６．７ｇ、上記モラセス発酵液４５．５ｇ、及び滅菌水９．６ｇを添加し、全量を５０ｇとした（スラリー濃度１１．９質量％）。
この三角フラスコを３５℃恒温培養器に設置された振とう培養器にて５０ｒｐｍで９６時間振とうし、同時糖化発酵を行った。同時糖化発酵後の発酵液の全量は８０．７ｇであり、発酵液のエタノール濃度は１０．０質量％であった。
【００４１】
［比較例１］
（モラセス発酵）
モラセス（糖濃度５０質量％）１８ｇを滅菌した三角フラスコに入れ、実験例１の酵母培養液２．５ｇ及び硫酸アンモニウム０．５ｇを含む滅菌水２９．５ｇを添加して全量を５０ｇとした。この三角フラスコを３５℃恒温培養器に設置された振とう培養器にて５０ｒｐｍで４８時間振とうし、発酵を行った。発酵後の発酵液の全量は４５．５ｇであり、発酵液のエタノール濃度は１０質量％であった。
【００４２】
（バガス同時糖化発酵）
上記実施例１と同様に水熱処理を行ったバガス２５ｇ（湿ベース、水分６０質量％）を滅菌した２５０ｍＬの三角フラスコに入れ、実験例１の酵母培養液２．５ｇ、実験例２の酵素液６．７ｇ、及び滅菌水１５．８ｇを添加し、水熱処理バガス２０質量％スラリーを調整した（全量５０ｇ）。この三角フラスコを３５℃恒温培養器に設置された振とう培養器にて５０ｒｐｍで９６時間振とうし、同時糖化発酵を行った。同時糖化発酵後の発酵液の全量は４６．４ｇであり、発酵液のエタノール濃度は７．７質量％であった。
両発酵液を合わせたエタノール量、濃度を表１に示す。
【００４３】
［比較例２］
（モラセス発酵）
モラセス（糖濃度５０質量％）１８ｇを滅菌した三角フラスコに入れ、実験例１の酵母培養液２．２ｇ及び硫酸アンモニウム０．５ｇを含む滅菌水２４．５ｇを添加して全量４４．７ｇとした。この三角フラスコを３５℃恒温培養器に設置された振とう培養器にて５０ｒｐｍで４８時間振とうし、発酵を行った。発酵後の全量は４０．７ｇであり、そのエタノール濃度は１０質量％であった。
【００４４】
（バガス同時糖化発酵）
上記実施例１と同様に水熱処理をしたバガス２５ｇ（湿ベース、水分６０質量％）を滅菌した２５０ｍＬの三角フラスコに入れ、実験例１の酵母培養液２．２ｇ、実験例２の酵素液６．７ｇ、及び滅菌水１０．８ｇを添加し、水熱バガス２２．４質量％スラリーを調整した（全量４４．７ｇ）。この三角フラスコを３５℃恒温培養器に設置された振とう培養器にて５０ｒｐｍで９６時間振とうし、同時糖化発酵を行った。同時糖化発酵後の全量は４１．７ｇであり、このエタノール濃度は７．３質量％であった。
両発酵液を合わせたエタノール量、濃度を表１に示す。
【００４５】
【表１】
0005581244.tif 000002
【００４６】
まず、比較例１は、バガス、モラセスを別々に発酵した例であり、両発酵液は各々発酵が良好に進む条件（バガス糖化発酵：スラリー濃度２０質量％以下、発酵後エタノール濃度１０質量％以下、及びモラセス糖化発酵：発酵後エタノール濃度１０質量％以下）を採用している。よって仕込モラセス、バガス量からすると最大エタノール収量が得られていると考えられる。
次に、比較例２は比較例１同様、バガス、モラセスを別個に発酵するプロセスで、エタノール濃度向上を目的として、希釈水量を両工程から５ｇずつ減量した例である。この場合、両系統ともエタノール収量が減少し、結果として収量が少ないばかりか、エタノール濃度も低くなってしまった。
一方、本発明に係る実施例１は、上述の発酵が良好に進む条件を確保しつつ、希釈液として、滅菌水の替わりに糖含有液由来発酵液を用いた例である。その結果、比較例２よりも得られたエタノール収量が多く、且つ、比較例１よりも得られた発酵液中のエタノール濃度が高いものとなった。
上記の結果から、本発明のエタノール製造方法によれば、同量のモラセス及びバガスを用いた場合にも、セルロース含有原料から、効率よく、高濃度のエタノールを製造することができることがわかった。
【００４７】
≪参考例１≫
発酵液中のエタノール濃度と、該発酵液中のエタノールの蒸留に必要な熱量との関係をシミュレーションにより調べた。
発酵液を蒸留する際のエネルギー量と、発酵液中のエタノール濃度とは反比例の関係にあるため、約５質量％のエタノールを９９．５質量％に濃縮脱水する場合のエネルギー量は約１３９０ｋｃａｌ／Ｌ−エタノールとなり、約８質量％のエタノールを９９．５質量％に濃縮脱水する場合のエネルギー量は約９３０ｋｃａｌ／Ｌ−エタノールとなる。
上記シミュレーションの結果から、発酵工程によって得られる発酵液中のエタノール濃度が高いほど、発酵工程後の蒸留にかかる熱量を低減できることが分かる。
【産業上の利用可能性】
【００４８】
本発明のエタノール製造方法を用いることにより、セルロース含有原料から、効率よく、高濃度のエタノールを製造することができるため、バイオマスからのエタノール産生の分野で好適に利用可能である。
【図１】
0005581244.tif 000003
【図２】
0005581244.tif 000004
【図３】
0005581244.tif 000005
【図４】
0005581244.tif 000006