(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポテトプロテインを酸で加水分解する工程と、得られた加水分解物を含む溶液から難溶性アミノ酸を晶析させる工程と、難溶性アミノ酸を酸で溶解し活性炭で処理する工程と、活性炭処理後の酸溶液のｐＨを調整しチロシンの粗結晶を得る工程と、分離したチロシンの粗結晶を酸で溶解した後、酸溶液のｐＨを調整して、粗チロシンを再結晶して分離する工程とを含む、粗チロシンの分離方法。
【請求項２】
ポテトプロテインを酸で加水分解する工程と、得られた加水分解物を含む溶液を活性炭で処理する工程と、活性炭処理溶液から難溶性アミノ酸を晶析させる工程と、得られた難溶性アミノ酸を酸で溶解した後ｐＨを調整しチロシンの粗結晶を得る工程と、分離したチロシンの粗結晶を酸で溶解した後、酸溶液のｐＨを調整し、粗チロシンを再結晶して分離する工程とを含む、粗チロシンの分離方法。
【請求項３】
前記活性炭が塩化亜鉛賦活炭である、請求項１又は２記載の粗チロシンの分離方法。
【請求項４】
前記粗チロシンの再結晶がｐＨ８〜９．５の範囲で行われる、請求項１〜３のいずれかに記載の粗チロシンの分離方法。
【請求項５】
前記難溶性アミノ酸を晶析させる工程において、前記加水分解物を含む溶液中の不溶成分を除去する操作を含む、請求項１〜４のいずれかに記載の粗チロシンの分離方法。
【請求項６】
ポテトプロテインを酸で加水分解する工程と、得られた加水分解物を含む溶液から難溶性アミノ酸を晶析させる工程と、難溶性アミノ酸を酸で溶解し活性炭で処理する工程と、活性炭処理後の酸溶液のｐＨを調整しチロシンを晶析させて取り除く工程と、分離した溶液の塩化ナトリウム濃度を調整してロイシンの粗結晶を得る工程とを含む、粗ロイシンの分離方法。
【請求項７】
ポテトプロテインを酸で加水分解する工程と、得られた加水分解物を含む溶液を活性炭で処理する工程と、活性炭処理溶液から難溶性アミノ酸を晶析させる工程と、得られた難溶性アミノ酸を酸で溶解した後ｐＨを調整しチロシンを晶析させて取り除く工程と、分離した溶液の塩化ナトリウム濃度を調整してロイシンの粗結晶を得る工程とを含む、粗ロイシンの分離方法。
【請求項８】
前記活性炭が塩化亜鉛賦活炭である、請求項６又は７記載の粗ロイシンの分離方法。
【請求項９】
前記難溶性アミノ酸を晶析させる工程において、前記加水分解物を含む溶液中の不溶成分を除去する操作を含む、請求項６〜８のいずれかに記載の粗ロイシンの分離方法。
【請求項１０】
前記塩化ナトリウム濃度が２３〜２７ｇ／デシリットルの範囲である、請求項６〜９のいずれかに記載の粗ロイシンの分離方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ポテトプロテインから粗チロシン又は粗ロイシンを分離して抽出する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ポテトプロテインは、馬鈴薯由来のタンパク質であり、大豆タンパクと遜色ない構成アミノ酸を有するため、良質な植物性タンパク源として利用が期待されている。しかし、褐変して、見栄えがよくないことと、難消化性であるため、単独で食品として活用されることはほとんどなく、飼料として利用されるのがほとんどである。
【０００３】
ポテトプロテインの活用を広げるため、ポテトプロテインを加水分解し、ペプチド混合物にして利用することが提案されている。例えば、特許文献１には、ポテトプロテインを加水分解して、アンジオテンシン変換酵素阻害活性を有するペプチド混合物を製造することが開示されている。また、特許文献２には、ポテトプロテインの加水分解物の可溶成分にビートアミノ酸を配合して調味料を製造することが開示されている。
【０００４】
また、ポテトプロテイン以外の植物性プロテインでは、タンパク質を加水分解して得られる水難溶性のアミノ酸、例えば、チロシンやロイシンを利用することが行われている。ロイシンは、タンパク質加水分解物からｏ−キシレンスルホン酸塩として分離する方法が一般的である。チロシンに関しては、タンパク質の加水分解物をｐＨ１．５〜４付近の酸性側で再結晶を繰り返すことにより得られることが知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特許第３３７３１５６号公報
【特許文献２】特許第２９６７１２１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
前述したように、ポテトプロテインには様々なアミノ酸が含まれている。しかしながら、これまでポテトプロテインの加水分解物の水可溶性成分のみが利用されているだけで、チロシンやロイシンのような水に難溶性のアミノ酸（以下、難溶性アミノ酸という）は活用されることなく廃棄されていた。この理由は、ポテトプロテイン加水分解物からの粗チロシン抽出率が低いこと、そして、ポテトプロテインには他の植物性タンパク質に比べ褐色の色素成分が多く、この色素成分を粗チロシンから分離することが困難でかつ煩雑であること、ポテトプロテインに含まれる色素以外の成分の除去が困難であることから粗チロシンと粗ロイシンの分離が煩雑なってしまうことにある。
【０００７】
ポテトプロテインは、図５に示すように、馬鈴薯を磨砕して粗デンプンを抽出した残液に含まれるたんぱく質を加熱し、凝固沈殿させて製造されている。
【０００８】
ポテトプロテインに含まれる色素は、馬鈴薯の磨砕時に生成するポリフェノール酸化物や馬鈴薯に含まれるチロシナーゼにより生成するメラニン色素である。これらのポリフェノール酸化物やメラニン色素がタンパク質と結合してポテトプロテイン中に含まれることになる。
【０００９】
これらの色素は、ポテトプロテインの酸加水分解時に加水分解溶液中に遊離するが、難溶性アミノ酸を晶析させるために、中和すると難溶性アミノ酸とともに共沈するため、中和前に分離することが望ましい。色素除去には、通常、活性炭処理やイオン交換処理手段が用いられるが、酸性条件下で活性炭処理をしても色素はほとんど取り除くことができない。
【００１０】
一般に、タンパク質の加水分解物をｐＨ１．５〜４付近の酸性側で繰り返し再結晶することにより、チロシンを抽出できることが知られている。しかし、ポテトプロテインの加水分解物は再結晶を繰り返してもチロシンの収率が低く、ほとんど再結晶しない場合もある。
【００１１】
また、ポテトプロテインの加水分解物には蝋様物質が含まれている。実用化において、一般的に、蝋様物質はパーライト等の濾過助剤による除去操作が行われるが、ポテトプロテイン由来の蝋様物質は濾過助剤に吸着され難いため、濾過助剤以外の吸着物質を用いた新たな分離操作を確立する必要がある。
【００１２】
本発明者は、上記問題点に鑑み、ポテトプロテインの加水分解物の難溶性アミノ酸に含まれるチロシンとロイシンの抽出について研究を進めたところ、蝋様物質がチロシンの晶析に影響を及ぼすことを見出した。この知見に基づき、蝋様物質の効率的な除去方法とチロシン結晶からの色素除去方法について鋭意研究を進め、本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち、本発明の第一の目的は、ポテトプロテインの加水分解物から、効率的に粗ロイシン又は粗チロシンを分離して抽出する方法を提供することにある。
【００１４】
本発明の第二の目的は、ポテトプロテインの加水分解物から分離された粗チロシンに含まれる色素を効率的に分離する方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明の粗チロシンを分離する方法の第一は、ポテトプロテインを酸で加水分解する工程と、得られた加水分解物を含む溶液から難溶性アミノ酸を晶析させる工程と、難溶性アミノ酸を酸で溶解し活性炭で処理する工程と、活性炭処理後の酸溶液のｐＨを調整しチロシンの粗結晶を得る工程と、分離したチロシンの粗結晶を酸で溶解した後、酸溶液のｐＨを調整して、粗チロシンを再結晶して分離する工程とを含む、粗チロシンの分離方法である。
【００１６】
粗チロシンを分離する方法の第二は、ポテトプロテインを酸で加水分解する工程と、得られた加水分解物を含む溶液を活性炭で処理する工程と、活性炭処理溶液から難溶性アミノ酸を晶析させる工程と、得られた難溶性アミノ酸を酸で溶解した後ｐＨを調整しチロシンの粗結晶を得る工程と、分離したチロシンの粗結晶を酸で溶解した後、酸溶液のｐＨを調整し、粗チロシンを再結晶して分離する工程とを含む、粗チロシンの分離方法である。
【００１７】
本発明の粗ロイシンを分離する方法の第一は、ポテトプロテインを塩酸で加水分解する工程と、得られた加水分解物を含む溶液から難溶性アミノ酸を晶析させる工程と、難溶性アミノ酸を酸で溶解し活性炭で処理する工程と、活性炭処理後の酸溶液のｐＨを調整しチロシンを晶析させて取り除く工程と、分離した溶液の塩化ナトリウム濃度を調整してロイシンの粗結晶を得る工程とを含む、粗ロイシンの分離方法である。
【００１８】
粗ロイシンを分離する方法の第二は、ポテトプロテインを酸で加水分解する工程と、得られた加水分解物を含む溶液を活性炭で処理する工程と、活性炭処理溶液から難溶性アミノ酸を晶析させる工程と、得られた難溶性アミノ酸を酸で溶解した後ｐＨを調整しチロシンを晶析させて取り除く工程と、分離した溶液の塩化ナトリウム濃度を調整してロイシンの粗結晶を得る工程とを含む、粗ロイシンの分離方法である。
【発明の効果】
【００１９】
本発明により、ポテトプロテインの加水分解物から粗チロシンと粗ロイシンとを効率的に分離することができる。ポテトプロテインのチロシンやロイシンは、これまで、廃棄物として処分されていた難溶成分に含まれる成分であり、調味料として利用されることのなかったポテトプロテイン成分を有効に活用することが可能となった。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】本発明の粗チロシンの分離抽出方法の一実施形態を示すフロー図である。
【図２】本発明の粗ロイシンの分離抽出方法の一実施形態を示すフロー図である。
【図３】ポテトプロテインの製造方法を示すフロー図である。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
以下、本発明を幾つかの実施形態に基づいて詳細に説明する。
【００２２】
「第一実施形態：粗チロシンの分離方法（１）」
本実施形態の粗チロシンの抽出分離方法を図１に示す。すなわち、ポテトプロテインを酸で加水分解する工程と、得られた加水分解物を含む溶液から難溶性アミノ酸を晶析させる工程と、難溶性アミノ酸を酸で溶解し活性炭で処理する工程と、活性炭処理後の酸溶液のｐＨを調整しチロシンの粗結晶を得る工程と、分離したチロシンの粗結晶を酸で溶解した後、酸溶液のｐＨを調整し、粗チロシンを再結晶して分離する工程とを含む、粗チロシンの分離方法である。なお、晶析とは、溶液中に含まれる単一又は複数の成分が結晶化して溶液中に析出することを意味する。
【００２３】
ポテトプロテインの酸による加水分解工程は、一般的に知られているタンパク質の加水分解条件と同じであり、例えば、ｐＨ４以下の酸溶液を加熱して行うことができる。なお酸は特に限定されるものではないが、鉱酸、好ましくは塩酸である。
【００２４】
次いで、加水分解物中の難溶性アミノ酸を晶析させて、難溶性アミノ酸を分離する。難溶性アミノ酸の晶析は、加水分解物を含む酸溶液を中和する操作を行えばよい。中和剤は特に限定されるものではないが、食品添加物として認められているものであればよく、好ましくは水酸化ナトリウムである。中和は、ｐＨを４．５〜７の範囲に調整する。好ましくは、中性アミノ酸の等電点であるｐＨ５．０〜５．２に調整する。中和後の難溶性アミノ酸晶析のための時間は長いほどよく、特に限定されるものではないが２４時間以上が望ましく、２日以上が好ましい。これは難溶性アミノ酸、特にロイシンの結晶化速度が遅く、緩やかに晶析するためである。
【００２５】
なお、加水分解物を含む酸溶液には繊維質等の不溶物質が含まれているので、難溶性アミノ酸を晶析させる前に溶液中の繊維質等の不溶成分を除去することが望ましい。これは、難溶性アミノ酸の晶析を効果的に行うためである。不溶成分の除去はパーライトやラジオライト等の濾過助剤を用いて濾過操作を行えばよい。
【００２６】
得られた晶析物を濾過して分離した後、晶析物を酸で溶解し、活性炭で処理する。この操作により、酸溶解液中に含まれる蝋様物質が除去される。蝋様物質が酸溶解液から除去されていないと、次工程で粗チロシンの晶析が阻害される。なお、この操作では色素はほとんど除去されない。
【００２７】
晶析物を溶解する酸は、鉱酸であればよく、塩酸や希硫酸を用いることができる。好ましくは塩酸である。晶析物を酸で溶解すると、難溶性アミノ酸と共沈して分離された蝋様の物質が酸溶解液中に遊離してくる。ポテトプロテイン由来の蝋様物質は、濾過助剤に吸着されないので、前工程での濾過助剤を用いた濾過したとしても除去されない。
【００２８】
この活性炭処理工程は、本発明者らの研究において得られた新たな知見である「ポテトプロテイン由来の蝋様物質は濾過助剤に吸着せず、活性炭に吸着すること」に基づき確立されたものである。
【００２９】
実験室レベルのような少量の処理量の場合、濾過等の物理的な分離操作で取り除くことができるが、処理量が多くなると分離効率が悪くなるので、分離操作時あるいは分離操作の前に取り除く必要がある。一般に蝋様の不純物は、濾過助剤を併用することにより取り除くことができるが、前述したように、ポテトプロテイン由来の蝋様物質は濾過助剤に吸着されないので濾過助剤では除去不能である。
【００３０】
本発明者らが蝋様物質の除去を検討したところ、活性炭が蝋様物質を吸着することが判明した。活性炭は、ガス賦活炭、リン酸賦活炭又は塩化亜鉛賦活炭を使用することができる。好ましくは、ニホンエンバイロケミカルズ（株）のカルボラフィン（例えばカルボラフィン５０Ｗ−２０）や二村化学（株）のタイコー（タイコ−Ｓ−Ｗ５０）等の塩化亜鉛賦活炭である。水蒸気活性炭に代表されるガス賦活炭を用いる場合は、塩化亜鉛賦活炭より多い量を必要とする。
【００３１】
活性炭処理は、酸溶解液を加温して行うと処理効率が向上する。しかし、蝋様物質の融点は約６０℃であるため、加温温度は６０℃以下、好ましくは４０〜５０℃の範囲である。活性炭処理は、３０分〜１時間程度攪拌混合して行えばよい。
【００３２】
なお、活性炭処理の前に分離された濾過液は水溶性アミノ酸を含んでいるので、これを調味料の製造に利用することができる。
【００３３】
活性炭処理後、処理液から酸溶液を分離して粗チロシンの晶析を行う。
【００３４】
活性炭処理では色素はほとんど除去されないので、分離された酸溶液は黒褐色を呈している。次いで、得られた溶液のｐＨを中和剤で調整して粗チロシンを晶析させる。中和剤は特に限定されるものではないが、食品添加物として認められているものであればよく、好ましくは水酸化ナトリウムである。中和は、中和剤を添加してｐＨを４．５〜７の範囲に調整する。好ましくは、ロイシンの等電点であるｐＨ５．０〜５．２に調整する。
【００３５】
粗チロシンは温度が高いと結晶が大きく成長し、粗ロイシンとの分離が容易になるので、５０〜７０℃の範囲、好ましくは６０℃に加温して中和し、攪拌を行いながら結晶を成長させる。粗チロシン晶析に要する時間は短いほうがよく、約３時間程度である。長く行うと粗ロイシンが晶析し始めるので好ましくない。
【００３６】
次に、粗チロシン結晶を分離し、酸で溶解した後ｐＨを調整して、粗チロシンを再結晶して分離する。粗チロシンを再結晶することにより、粗チロシン結晶に含まれる色素が除去され、脱色された粗チロシン結晶を得ることができる。
【００３７】
粗チロシン結晶を溶解する酸は、鉱酸であればよく、塩酸や希硫酸を用いることができる。好ましくは塩酸である。ｐＨは水酸化ナトリウム溶液でｐＨ８〜９．５、好ましくはｐＨ８．５〜９．５、さらに好ましくはｐＨ９．０〜９．１の範囲に調整する。
【００３８】
粗チロシン結晶は色素を含んでいるために黒褐色を呈しており、この色素を含んだ酸溶解液は活性炭処理しても脱色されない。粗チロシンを溶解した酸を水酸化ナトリウムで中和すると、色素はｐＨ１．５付近から沈澱し始め、ｐＨ８付近から再び溶解し始める。一方、粗チロシンはｐＨ１．５付近から晶析し始め、ｐＨ９．５付近までは溶解しない。したがって、ｐＨを８〜９．５、好ましくはｐＨ８．５〜９．５、さらに好ましくはｐＨ９．０〜９．１の範囲に調整することにより、溶解した色素を除去することができる。このようにして、脱色された粗チロシン結晶を得ることができる。この操作を繰り返すことにより、さらに色素を取り除くことができる。
【００３９】
得られた粗チロシン結晶を塩酸に溶解し、加熱した後ｐＨを３〜３．５付近に調整して冷却するとＬ−チロシンが針状に結晶析出する。Ｌ−チロシンを分離し、洗浄して乾燥することにより食品添加物規格に適合したＬ−チロシンが得られる。
【００４０】
本実施形態により、ポテトプロテインの加水分解物から粗チロシンを効率的に分離抽出することが可能となった。さらに、これまで困難であった粗チロシンの脱色も可能となったので、これまで廃棄物として処分されていたポテトプロテイン由来のチロシンを有効に活用することができる。
【００４１】
「第二実施形態：粗チロシンの分離方法（２）」
第二実施形態は、難溶性アミノ酸を晶析させる工程と活性炭処理工程の順番が第一実施形態とは異なる。すなわち、第二実施形態の粗チロシンの分離方法は、ポテトプロテインを酸で加水分解する工程と、得られた加水分解物を含む溶液を活性炭で処理する工程と、活性炭処理溶液から難溶性アミノ酸を晶析させる工程と、得られた難溶性アミノ酸を酸で溶解した後ｐＨを調整しチロシンの粗結晶を得る工程と、分離したチロシンの粗結晶を酸で溶解した後、酸溶液のｐＨを調整し、粗チロシンを再結晶して分離する工程とを含む方法で成る。
【００４２】
ポテトプロテインを酸で加水分解する工程は第一実施形態に記載したとおりである。
【００４３】
次に得られた加水分解物を含む溶液を活性炭で処理する。この工程は第一実施形態同様、ポテトプロテインの加水分解物に含まれる蝋様物質を除去するための操作である。活性炭の種類、除去条件は第一実施形態と同じである。
【００４４】
なお、加水分解物を含む酸溶液には繊維質等の不溶物質が含まれているので、第一実施形態と同様に活性炭処理する前に溶液中の繊維質等の不溶成分を除去することが望ましい。これは、活性炭処理を効果的に行うためである。不溶成分の除去はパーライトやラジオライト等の濾過助剤を用いて濾過操作を行えばよい。
【００４５】
活性炭処理溶液から難溶性アミノ酸を晶析させるために使用する中和剤、中和条件は第一実施形態に記載したとおりである。
【００４６】
得られた難溶性アミノ酸を酸で溶解した後、ｐＨを調整しチロシンの粗結晶を得る工程及び、分離したチロシンの粗結晶を酸で溶解した後、酸溶液のｐＨを調整し、粗チロシンを再結晶して分離する工程の操作条件は、第一実施形態と同じである。
【００４７】
第一実施形態同様、ポテトプロテインの加水分解物から粗チロシンを効率的に分離抽出することが可能となった。ポテトプロテイン由来のチロシンは、これまで、廃棄物として処分されていた難溶成分に含まれる成分であり、調味料として利用されることのなかったポテトプロテイン成分を有効に活用することが可能となる。
【００４８】
「第三実施形態：粗ロイシンの分離方法（１）」
本実施形態の粗ロイシンの抽出分離方法を図２に示す。すなわち、第３実施形態の粗ロイシンの分離方法は、ポテトプロテインを塩酸で加水分解する工程と、得られた加水分解物を含む溶液から難溶性アミノ酸を晶析させる工程と、難溶性アミノ酸を酸で溶解し活性炭で処理する工程と、活性炭処理後の酸溶液のｐＨを調整しチロシンを晶析させて取り除く工程と、分離した溶液の塩化ナトリウム濃度を調整してロイシンの粗結晶を得る工程とを含む。
【００４９】
ポテトプロテインを塩酸で加水分解する工程、得られた加水分解物を含む溶液から難溶性アミノ酸を晶析させる工程及び、難溶性アミノ酸を酸で溶解し活性炭で処理する工程は、第一実施形態と同じである。
【００５０】
活性炭処理後、処理液から酸溶液を分離する。そして、酸溶液中に含まれる粗チロシンを晶析させて溶液から分離する。粗ロイシンの晶析に用いる中和剤、晶析条件は、第一実施形態の条件と同じである。
【００５１】
また、第一実施形態に記載したように、粗チロシンは温度が高いと結晶が大きく成長し、粗ロイシンとの分離が容易になるので、５０〜７０℃の範囲、好ましくは６０℃に加温して中和し、攪拌を行いながら結晶を成長させる。粗チロシン晶析に要する時間は短いほうがよく、約３時間程度である。長く行うと粗ロイシンが晶析し始めるので好ましくない。
【００５２】
粗チロシンの結晶を濾過除去して得られた濾液を採取し、溶液中の塩化ナトリウム濃度を調整し、加熱してから放置して、粗ロイシンを晶析させて結晶を分離する。塩化ナトリウムの濃度範囲は２３〜２７ｇ／デシリットルが好ましい。塩化ナトリウムの濃度が２３ｇ／デシリットル以下ではロイシンが晶析され難く収率が低下し、２７ｇ／デシリットル以上では塩化ナトリウムの結晶化が起こり、粗ロイシン結晶と混入するので好ましくない。
【００５３】
得られた粗ロイシンは以下の方法で精製することができる。
【００５４】
粗ロイシンの結晶に水を加えた後、攪拌しながら結晶が溶けきるまで塩酸を加える。塩酸溶液にｏ−キシレン−４−スルホン酸水溶液を加えてｏ−キシレン−４−スルホン酸塩とする。ｏ−キシレン−４−スルホン酸塩を濾過して回収し、水とアンモニア水を加えて溶解する。さらに活性炭を加えて脱色した後、減圧濃縮してアンモニアを除去するとともに、析出した結晶を乾燥する。この操作により食品添加物の規格に適合したＬ−ロイシンを得ることができる。
【００５５】
本実施形態により、ポテトプロテインの加水分解物から粗ロイシンをチロシンと効率的に分離することが可能である。ポテトプロテイン由来のロイシンは、難溶性成分であることから、これまで抽出操作が煩雑でコストの観点からあまり活用されていなかったが、ポテトプロテインから容易に得ることが可能になり、Ｌ−ロイシンを安定的に提供することできる。
【００５６】
「第四実施形態：粗ロイシンの分離方法（２）」
第四実施形態は、難溶性アミノ酸を晶析させる工程と活性炭処理工程の順番が第三実施形態とは異なる。すなわち、第四実施形態の粗ロイシンの分離方法は、ポテトプロテインを酸で加水分解する工程と、得られた加水分解物を含む溶液を活性炭で処理する工程と、活性炭処理溶液から難溶性アミノ酸を晶析させる工程と、得られた難溶性アミノ酸を酸で溶解した後ｐＨを調整しチロシンを晶析させて取り除く工程と、分離した溶液の塩化ナトリウム濃度を調整してロイシンの粗結晶を得る工程とを含む。
【００５７】
ポテトプロテインを酸で加水分解する工程及び、得られた加水分解物を含む溶液を活性炭で処理する工程は、粗チロシンを分離する方法で述べた第二実施形態と同じである。
【００５８】
活性炭処理溶液から難溶性アミノ酸を晶析させる工程、得られた難溶性アミノ酸を酸で溶解した後ｐＨを調整しチロシンを晶析させて取り除く工程、及び分離した溶液の塩化ナトリウム濃度を調整してロイシンの粗結晶を得る工程は、第三実施形態と同じである。
【００５９】
第三実施形態と同様、ポテトプロテインの加水分解物から粗ロイシンをチロシンと効率的に分離することが可能である。ポテトプロテイン由来のロイシンは、難溶性成分であることから、これまで抽出操作が煩雑でコストの観点からあまり活用されていなかったが、ポテトプロテインから容易に得ることが可能になり、Ｌ−ロイシンを安定的に提供することできる。
【００６０】
以下、幾つかの実施例に基づいて本発明をさらに具体的に説明する。
【実施例１】
【００６１】
「粗ロイシンの分離」
濃塩酸約５リットルと水約３．５リットルにポテトプロテイン６Ｋｇを加え、１４時間沸騰させて、ポテトプロテインを加水分解した後、４８％ＮａＯＨ溶液１００ｍリットルを加えた。さらに、パーライト、ラジオライトを各々２００ｇ添加して濾過を行い、濾過液約１３リットルを得た。
【００６２】
得られた濾過液に４８％ＮａＯＨ溶液２．８リットルを加え、ｐＨを５．０〜５．２程度に調整し、室温下に２日間放置して結晶化した。結晶を遠心分離で分離し、約２．４Ｋｇの固形物を得た。この固形物の水分含有率は約４７％であった。
【００６３】
固形物に水３．２リットル及び濃塩酸６５０ｍリットルを加え、約４０〜５０℃に加温して完全に溶解してからカルボラフィン（ニホンエンバイロケミカル社）４００ｇを添加して１時間攪拌した。固形物の溶解液のｐＨは０．５以下であった。さらにブッフナー漏斗を用い、減圧濾過して固形分を取り除いた。得られた溶液は黒褐色をしていた。この溶液を６０℃に加温し、濃度２０％の水酸化ナトリウム溶液でｐＨを５．０〜５．２程度に調整し、室温下で３時間攪拌した後、濾過して、濾液を７リットル得た。
【００６４】
この濾液には、固形分約１．３ｋｇ、そのうち塩化ナトリウムは約９ｇ／デシリットル含まれていた。この段階で、塩化ナトリウム溶液の濃度を確認し、濃度を２３〜２５ｇ／デシリットル程度になるように調整する必要があるため、減圧濃縮した。濃度が２７ｇ／デシリットル以上になると、塩化ナトリウムの結晶化析出しやすいので好ましくない。この溶液を６０〜７０℃程度に加温し攪拌した。一晩室温に放置した後に析出した結晶を濾過して採取し、６０℃で送風乾燥して、粗結晶としてロイシンを約４００ｇ得た。この粗結晶のロイシン含有率は約６０％であった。
【実施例２】
【００６５】
「粗チロシンの分離」
濃塩酸約５リットルと水約３．５リットルにポテトプロテイン６ｋｇを加え、１４時間沸騰させて、ポテトプロテインを加水分解した後、４８％ＮａＯＨ溶液１００ｍリットルを加えた。さらに、パーライト、ラジオライトを各々２００ｇ添加して濾過を行い、濾過液約１３リットルを得た。
【００６６】
得られた濾過液に４８％ＮａＯＨ溶液２．８リットルを加え、ｐＨを５．０〜５．２程度に調整し、室温下に２日間放置して結晶化した。結晶を遠心分離で分離し、約２．４Ｋｇの固形物を得た。この固形物の水分含有率は約４７％であった。
【００６７】
固形物に水３．２リットル及び濃塩酸６５０ｍリットルを加え、約４０〜５０℃に加温して完全に溶解してからカルボラフィン（ニホンエンバイロケミカル社）４００ｇを添加して１時間攪拌した。固形物の溶解液のｐＨは０．５以下であった。さらにブッフナー漏斗を用い、減圧濾過して固形分を取り除いた。得られた溶液は黒褐色をしていた。この溶液を６０℃に加温し、濃度２０％の水酸化ナトリウム溶液でｐＨを５．０〜５．２程度に調整し、室温下で３時間攪拌した後、静置して濾過し、濃黒褐色の固形分約３００ｇを得た。
【００６８】
固形分に水約２リットル及び濃塩酸１７０ｍリットルを加えて溶解し、２０％の水酸化ナトリウム溶液でｐＨを９．０程度に調整し、室温下で１時間攪拌した後、静置した。ｐＨ調整前の溶液は黒褐色を呈していた。静置して得られた沈殿物を約２リットルの水で水洗しながら濾過を行い、６０℃で送風乾燥して、淡灰褐色の粗チロシン約１００ｇを得た。得られた粗チロシン中のチロシン含有量は約９５％であった。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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