(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
0005537422.tif 000109
［式中、
ｎは、０、１、２または３の数を表し、
Ｒ１は、塩素、トリフルオロメトキシ、メチル、エチル、ｎ−プロピル、メトキシ、メトキシメチルまたはエトキシメチルを表し、
Ｒ２は、水素またはメチルを表す］
の化合物またはその塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項２】
式中、
ｎが、０、１または２の数を表し、
Ｒ１が、塩素、トリフルオロメトキシ、メチル、ｎ−プロピル、メトキシまたはメトキシメチルを表し、
Ｒ２が、水素またはメチルを表す、
請求項１に記載の化合物またはその塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項３】
式中、
ｎが、０、１または２の数を表し、
Ｒ１が、メチル、メトキシまたはメトキシメチルを表し、
Ｒ２が、水素を表す、
請求項１または請求項２に記載の化合物またはその塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項４】
式中、
ｎが、１または２の数を表し、
Ｒ１が、メチルを表し、
Ｒ２が、水素を表す、
請求項１ないし請求項３のいずれかに記載の化合物またはその塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つ。
【請求項５】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、またはその塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つの製造方法であって、
式
【化２】
0005537422.tif 000110
の化合物を、第１工程で、式
【化３】
0005537422.tif 000111
（式中、ｎ、Ｒ１およびＲ２は、請求項１に記載の意味を有する）
の化合物と反応させ、式
【化４】
0005537422.tif 000112
（式中、ｎ、Ｒ１およびＲ２は、請求項１に記載の意味を有する）
の化合物を得、第２工程で、ホスゲンまたはカルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）の存在下で環化し、式（Ｉ）の化合物を得ることを特徴とする方法。
【請求項６】
請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、またはその塩、その溶媒和物もしくはその塩の溶媒和物の１つの製造方法であって、
式
【化５】
0005537422.tif 000113
（式中、ｎ、Ｒ１およびＲ２は、請求項１に記載の意味を有する）
の化合物を、式
【化６】
0005537422.tif 000114
（式中、Ｘは、ハロゲンまたはヒドロキシルを表す）
の化合物と反応させることを特徴とする方法。
【請求項７】
疾患の処置および／または予防のための、請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の化合物。
【請求項８】
疾患の処置および／または予防用の医薬を製造するための、請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項９】
血栓塞栓性障害の処置および／または予防用の医薬を製造するための、請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１０】
インビトロでの血液凝固を防止するための、請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１１】
請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の化合物を、不活性、非毒性の医薬的に許容し得る補助剤と共に含む、医薬。
【請求項１２】
請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の化合物を、さらなる活性化合物と共に含む、医薬。
【請求項１３】
血栓塞栓性障害の処置および／または予防のための、請求項１１または請求項１２に記載の医薬。
【請求項１４】
抗凝血的に有効な量の請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の化合物を添加することを特徴とする、インビトロでの血液凝固の防止方法。
【請求項１５】
肺高血圧の処置および／または予防用の医薬を製造するための、請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１６】
敗血症、全身性炎症症候群（ＳＩＲＳ）、敗血性臓器機能不全、敗血性臓器不全および多臓器不全、急性呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）、急性肺損傷（ＡＬＩ）、敗血性ショックおよび／またはＤＩＣ（「播種性血管内凝固」）の処置および／または予防用の医薬を製造するための、請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項１７】
血栓塞栓性障害の処置および／または予防方法において使用するための、請求項１ないし請求項４のいずれかに記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規置換オキサゾリジノン類、それらの製造方法、疾患の処置および／または予防のためのそれらの使用、並びに疾患、特に血栓塞栓性障害の処置および／または予防用の医薬を製造するためのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
血液凝固は、血管壁の欠損を迅速かつ確実に「封止」するのを助ける生物の保護メカニズムである。かくして、血液の損失を回避または最小に維持できる。血管損傷後の止血は主に凝血系により実行され、そこでは血漿タンパク質の複雑な反応の酵素的カスケードが誘起される。多数の血液凝固因子がこの過程に関与し、それらの因子の各々は、活性化されると、各々の次の不活性な前駆体をその活性形態に変換する。カスケードの終わりでは、可溶性フィブリノーゲンの不溶性フィブリンへの変換に至り、血餅の形成をもたらす。血液凝固では、伝統的に、共通の反応経路で終わる内因性と外因性のシステムは区別されている。ここで、Ｘａ因子およびＩＩａ因子（トロンビン）は、鍵となる役割を果たす。
【０００３】
Ｘａ因子は、ＶＩＩａ因子／組織因子（外因性経路）およびテナーゼ複合体（内因性経路）の両方を介して、Ｘ因子の変換により形成されるので、２つの凝固経路のシグナルをまとめる。活性化されたセリンプロテアーゼＸａは、プロトロンビンをトロンビンに切断する。
【０００４】
一連の反応を通して、トロンビンは、このカスケードから血液の凝固状態へシグナルを伝達する。トロンビンは、フィブリノーゲンを直接フィブリンに切断する。それは、フィブリン血餅の安定化に必要とされるＸＩＩＩ因子を、ＸＩＩＩａ因子に活性化する。加えて、トロンビンは、これもまた止血にかなり貢献する血小板凝集（ＰＡＲ−１活性化を介する）の強力な引き金である。ＴＡＦＩ（トロンビン活性化線溶阻害因子）をＴＡＦＩａに活性化することにより、トロンボモジュリンとの複合体中のトロンビンは、血餅の溶解を阻害する。ＶおよびＶＩＩＩ因子の活性化は、トロンビン生成を増強し、かくして凝固反応を増幅する；トロンボモジュリンとの複合体において産生される、活性化されたプロテインＣは、このトロンビン生成の増加に対抗し、かくして、過剰な止血（血栓症）を防止する。
【０００５】
血液中の結合していないＸ因子およびトロンビンに加えて、結合形態も知られている。フィブリン血餅の形成中に、トロンビンおよびプロトロンビナーゼ（複合体中のＸａ因子）は、フィブリン骨格に結合する。これらの酵素分子は、依然として活性であり、内在性アンチトロンビンＩＩＩにより阻害され得ない。従って、このようにして、血餅は、依然として全般的な凝固の潜在能力を有する。
【０００６】
多くの心血管および代謝障害の過程で、全身的要因、例えば、高脂血症、糖尿病または喫煙の結果として、うっ滞による血液の変化、例えば、心房細動のために、または、血管壁の病的な変化、例えば内皮細胞機能不全またはアテローム性動脈硬化のために、凝固および血小板活性化の傾向の増加がある。この望まれない過剰な止血は、フィブリンおよび血小板に富む血栓の形成により、生命を脅かす状態を伴う、血栓塞栓性障害および血栓性合併症を引き起こし得る。
【０００７】
止血は、複雑な調節メカニズムに従う。凝固系の無制御の活性化または活性化過程の阻害の欠陥は、血管（動脈、静脈、リンパ管）または心腔における局所的な血栓症または塞栓症の形成を導き得る。これは、深刻な血栓性または血栓塞栓性障害を導き得る。加えて、全身的過凝固状態は、汎発性の血管内凝血に関して、消費性凝固障害を導き得る。血栓塞栓性の合併症は、さらに、微小血管障害性の溶血性貧血、血液透析などの体外循環システム、および、心臓代用弁（prosthetic heart valves）およびステントにおいて起こる。
【０００８】
血栓塞栓性障害は、最も工業化された国々における罹患と死亡の最多の原因である [Heart Disease: A Textbook of Cardiovascular Medicine, Eugene Braunwald, 5th edition, 1997, W.B. Saunders Company, Philadelphia]。
【０００９】
先行技術から知られている抗凝血剤、例えば、血液凝固を阻害または防止する物質は、様々な、しばしば深刻な、欠点を有する。従って、実際のところ、血栓性／血栓塞栓性障害の有効な処置方法または予防は、非常に困難かつ不満足なものであると判明した。
【００１０】
血栓塞栓性障害の治療および予防において、ヘパリンが最初に使用され、非経腸で、または皮下に投与される。より好適な薬物動態学的特性のために、最近は低分子量ヘパリンがますます好まれている；しかしながら、後述するヘパリン治療で起こる既知の欠点は、この方法では回避できない。このように、ヘパリンは、経口で効果がなく、比較的短い半減期しか有さない。加えて、高い出血のリスクがあり、特に、脳出血および胃腸管での出血があり得、血小板減少、薬物性脱毛症または骨粗鬆症があり得る [Pschyrembel, Klinisches Woerterbuch, 257th edition, 1994, Walter de Gruyter Verlag, page 610, キーワード「ヘパリン」; Roempp Lexikon Chemie, version 1.5, 1998, Georg Thieme Verlag Stuttgart, キーワード「ヘパリン」]。低分子量ヘパリンは、ヘパリン起因性血小板減少症の発症を導く可能性は低い；しかしながら、それらも同様に、皮下でしか投与できない。これは、半減期の長い合成選択的Ｘａ因子阻害剤であるフォンダパリナックスにも当てはまる。
【００１１】
第２のクラスの抗凝血剤は、ビタミンＫアンタゴニストである。これらには、例えば、１,３−インダンジオン類、特に、ワーファリン、フェノプロクモン（phenprocoumon）、ジクマロールおよび他のクマリン誘導体などの化合物が含まれ、これらは、肝臓におけるある種のビタミンＫ依存性凝固因子の様々な生成物の合成を非選択的に阻害する。この作用メカニズムのために、作用の開始は非常に遅い（作用開始までの潜時３６ないし４８時間）。この化合物は経口投与できる；しかしながら、出血のリスクが高く治療係数が狭いために、患者の複雑な個別の調整と監視が必要である [J. Hirsch, J. Dalen, D.R. Anderson et al., "Oral anticoagulants: Mechanism of action, clinical effectiveness, and optimal therapeutic range" Chest 2001, 119, 8S 21S; J. Ansell, J. Hirsch, J. Dalen et al., "Managing oral anticoagulant therapy" Chest 2001, 119, 22S 38S; P.S. Wells, A.M. Holbrook, N.R. Crowther et al., "Interactions of warfarin with drugs and food" Ann. Intern. Med. 1994, 121, 676 683]。さらに、胃腸の問題、脱毛および皮膚の壊死などの、他の副作用が記載されている。
【００１２】
加えて、トロンビン阻害剤が、より小規模で用いられている。ヒルジンは、非常に強力にトロンビンを阻害するタンパク質である。組換え形態で、それは、予備的抗凝血剤として静脈内投与される。ビバリルジンは、ヒルジンの２０個のアミノ酸の断片であり、それは、非常に短い半減期を有し、同様に経口で利用できない。これは、直接的非ペプチド性低分子量トロンビン阻害剤のアルガトロバンにも当てはまる［J.H. Sohn, et al. Appl.Microbiol.Biotechnol.2001,57,606-613; T. Galdwell Clin. Ther. 2002, 24, 38-58;G. Escolar, Drugs of Today 2006, 42, 223]。
【００１３】
さらなる治療アプローチは、Ｘａ因子単独の阻害を伴う [J. Hauptmann, J. Steuerzebecher, Thrombosis Research 1999, 93, 203; S.A.V. Raghavan, M. Dikshit, "Recent advances in the status and targets of antithrombotic agents" Drugs Fut. 2002, 27, 669-683; H.A. Wieland, V. Laux, D. Kozian, M. Lorenz, "Approaches in anticoagulation: Rationales for target positioning" Curr. Opin. Investig. Drugs 2003, 4, 264-271; U.J. Ries, W. Wienen, "Serine proteases as targets for antithrombotic therapy" Drugs Fut. 2003, 28, 355-370; L.-A. Linkins, J.I. Weitz, "New anticoagulant therapy" Annu. Rev. Med. 2005, 56, 63-77; A. Casimiro-Garcia et al., "Progress in the discovery of Factor Xa inhibitors" Expert Opin. Ther. Patents 2006, 15, 119-145]。
【００１４】
ここで、様々なペプチド性および非ペプチド性の両方の化合物がＸａ因子阻害剤として有効であることが動物モデルで示された。今日までに、多数の直接的Ｘａ因子阻害剤が知られている [J.M. Walenga, W.P. Jeske, D. Hoppensteadt, J. Fareed, "Factor Xa Inhibitors: Today and beyond" Curr. Opin. Investig. Drugs 2003, 4, 272-281; J. Ruef, H.A. Katus, "New antithrombotic drugs on the horizon" Expert Opin. Investig. Drugs 2003, 12, 781-797; M.L. Quan, J.M. Smallheer, "The race to an orally active Xa因子 inhibitor: Recent advances" Curr. Opin. Drug Discovery & Development 2004, 7, 460-469]。非ペプチド性、低分子量Ｘａ因子阻害剤としてのオキサゾリジノン類は、ＷＯ０１／４７９１９に記載されている。
【００１５】
最近、低分子量のトロンビンおよびＸａ因子の阻害剤を、インビトロおよびインビボで、様々な混合比で試験するアプローチが記載された。ここで、強い相乗的潜在能力が見出された。タノギトラン（tanogitran）は、トロンビンおよびＸａ因子の両方を阻害すると記載されたが、トロンビン阻害への強い優先度を有する低分子量物質である。開発中であるこの物質は、経口で生物が利用可能ではない。
【００１６】
抗血栓性医薬には、治療の幅が非常に重要である：最小のリスクプロフィールで最大の治療活性を達成できるように、凝固阻害のために治療的に活性な用量と、出血が起こり得る用量との隔たりは、できるだけ大きくあるべきである。
【００１７】
低分子量のトロンビンおよびＸａ因子の阻害剤の混合物を用いる実験により示される通り、トロンビンおよびＸａ因子の両方を阻害する化合物は、それらのデュアルの特徴のために、特に強い相乗作用を有し、従って、血栓形成の制御において特に有効である。このようにして、これらの化合物は、個々の酵素を完全に遮断せずに、凝固カスケードの２つの鍵となる酵素を阻害する。残っている部分のＸａ因子およびトロンビンは、損なわれていない止血をもたらし、かくして、特に有利な治療の幅をもたらす。ウサギの動静脈シャントモデルで、抗血栓的に弱い活性しかない投与量の選択的Ｘａ因子阻害剤ＰＤ０３１３０５２および選択的トロンビン阻害剤アルガトロバンの同時投与が、強い超相加的抗血栓効果をもたらすことを立証できた。加えて、最大の相乗効果の個々の用量を組み合わせると、出血の増加は観察されなかった。これらの観察は、トロンビンおよびＸａ因子の同時阻害は、抗血栓作用と出血リスクの隔たりに関して、治療の幅を高めると結論付けることを可能にする（Journal of Thrombosis and Haemostasis, 4: 834-841)。
【００１８】
この相乗作用は、物質濃度の関数としてのプロトロンビン時間を純粋なＸａ因子およびトロンビンの阻害剤との直接比較により研究すると、特に著しい。凝固カスケードの鍵となる２種の酵素に対するこの強い効果は、高い血栓形成のリスクがあるとき、または、血栓形成が致死的な疾患をもたらし得るときに、特に有利であると考えられる。両者は、例えば、急性冠血管症候群のタイプのアテローム血栓性障害の場合に、または、急性心筋梗塞後の状況で、関連がある。
【００１９】
さらに、ヘパリン類、ヒルジンおよびビタミンＫアンタゴニストと対照的に、トロンビンおよびＸａ因子の両方を阻害する化合物は、フィブリン血餅に結合した凝固因子に対しても活性であろう。既存の血餅の血栓性潜在能力の制限は、動脈閉塞の予防において決定的な点である。これは、存在するトロンビン活性および血餅中の新たなトロンビンの形成の両方を阻害することにより、特に効果的に達成される。純粋なトロンビン阻害剤は血餅に結合したＸａ因子を含有するプロトロンビナーゼ複合体による雪崩様のトロンビン生成を防止できず、従って、大量の生成されたトロンビンにより高度に刺激された凝固において、阻害効果が過度に補償され得るのに対し、純粋なＸａ因子阻害剤は、既存のトロンビン活性を阻害する能力がない。阻害は同様に生理的メカニズムによっても可能ではなく、この血餅に結合したトロンビンは、特に大きいリスクをもたらす。対照的に、デュアル（dual）化合物、即ち、トロンビンおよびＸａ因子の両方を阻害する化合物は、血餅上のトロンビン生成およびトロンビン活性の両方を阻害する能力があり、かくして、可能性のある血餅の成長も防止する。
【００２０】
従って、デュアル化合物、即ち、トロンビンおよびＸａ因子の両方を阻害し、血餅上のトロンビン生成およびトロンビン活性を阻害することにより、それらの可能性のある成長を防止し、広い治療の幅を有する、ヒトおよび動物の疾患、特に血栓塞栓性障害を制御するための化合物を提供することが、本発明の目的である。
【００２１】
本発明は、式
【化１】
0005537422.tif 000002
［式中、
ｎは、０、１、２または３の数を表し、
Ｒ１は、塩素、トリフルオロメトキシ、メチル、エチル、ｎ−プロピル、メトキシ、メトキシメチルまたはエトキシメチルを表し、
Ｒ２は、水素またはメチルを表す］
の化合物、並びにそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物を提供する。
【００２２】
本発明による化合物は、式（Ｉ）の化合物およびそれらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物、式（Ｉ）に包含される後述する式の化合物およびそれらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物、並びに、式（Ｉ）に包含される例示的実施態様として後述する化合物およびそれらの塩、溶媒和物および塩の溶媒和物（後述する式（Ｉ）に含まれる化合物が、既に塩、溶媒和物および塩の溶媒和物でない場合に）である。
【００２３】
本発明による化合物は、それらの構造によっては、立体異性体（エナンチオマー、ジアステレオマー）で存在できる。従って、本発明は、エナンチオマーまたはジアステレオマーおよびそれらの各々の混合物を含む。そのようなエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーの混合物から、立体異性的に均一な構成分を既知方法で単離できる。
本発明による化合物が互変異性体で存在できる場合、本発明は、全ての互変異性体を含む。
【００２４】
本発明に関して、好ましい塩は、本発明による化合物の生理的に許容し得る塩である。本発明はまた、それら自体は医薬適用に適さないが、例えば本発明による化合物の単離または精製に使用できる塩も含む。
【００２５】
本発明による化合物の生理的に許容し得る塩には、鉱酸、カルボン酸およびスルホン酸の酸付加塩、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸および安息香酸の塩が含まれる。
【００２６】
本発明による化合物の生理的に許容し得る塩には、また、常套の塩基の塩、例えば、そして好ましくは、アルカリ金属塩（例えばナトリウム塩およびカリウム塩）、アルカリ土類金属塩（例えばカルシウム塩およびマグネシウム塩）、および、アンモニアまたは１個ないし１６個の炭素原子を有する有機アミン（例えば、そして好ましくは、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、アルギニン、リジン、エチレンジアミンおよびＮ−メチルピペリジン）から誘導されるアンモニウム塩が含まれる。
【００２７】
本発明に関して、溶媒和物は、固体または液体状態で溶媒分子との配位により錯体を形成している本発明による化合物の形態である。水和物は、配位が水とのものである、溶媒和物の特別な形態である。本発明に関して、好ましい溶媒和物は水和物である。
【００２８】
さらに、本発明はまた、本発明による化合物のプロドラッグも含む。用語「プロドラッグ」は、それら自体は生物学的に活性であっても不活性であってもよいが、それらが体内に滞在する時間中に、本発明による化合物に（例えば代謝的または加水分解的に）変換される化合物を含む。
【００２９】
好ましいのは、式中、
ｎが、０、１または２の数を表し、
Ｒ１が、塩素、トリフルオロメトキシ、メチル、ｎ−プロピル、メトキシまたはメトキシメチルを表し、
Ｒ２が、水素またはメチルを表す、
式（Ｉ）の化合物、並びにそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物である。
【００３０】
好ましいのは、また、式中、
ｎが、０、１または２の数を表し、
Ｒ１が、メチル、メトキシまたはメトキシメチルを表し、
Ｒ２が、水素を表す、
式（Ｉ）の化合物、並びにそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物である。
【００３１】
好ましいのは、また、式中、
ｎが、０、１または２の数を表し、
Ｒ１が、メチルを表し、
Ｒ２が、水素を表す、
式（Ｉ）の化合物、並びにそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物である。
【００３２】
好ましいのは、また、式中、
ｎが、１または２の数を表し、
Ｒ１が、メチルを表し、
Ｒ２が、水素を表す、
式（Ｉ）の化合物、並びにそれらの塩、それらの溶媒和物およびそれらの塩の溶媒和物である。
【００３３】
好ましいのは、また、式中、ｎが１または２の数を表す、式（Ｉ）の化合物である。
好ましいのは、また、式中、ｎが１の数を表す、式（Ｉ）の化合物である。
好ましいのは、また、式中、Ｒ１がメチルを表す、式（Ｉ）の化合物である。
好ましいのは、また、式中、Ｒ２が水素を表す、式（Ｉ）の化合物である。
好ましいのは、また、式中、Ｒ１がメチルを表し、Ｒ２が水素を表す、式（Ｉ）の化合物である。
【００３４】
特に好ましいのは、式
【化２】
0005537422.tif 000003
の化合物、５−クロロ−Ｎ−［（（５Ｓ）−３−｛４−［３−（ヒドロキシメチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−メチルフェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル）メチル］チオフェン−２−カルボキサミド、並びに、その塩、その溶媒和物およびその塩の溶媒和物である。この化合物は、実施例２に記載されている。
【００３５】
特に好ましいのは、また、式
【化３】
0005537422.tif 000004
の化合物５−クロロ−Ｎ−［（（５Ｓ）−３−｛４−［３−（２−ヒドロキシエチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−メチルフェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル）メチル］チオフェン−２−カルボキサミド、並びに、その塩、その溶媒和物およびその塩の溶媒和物である。この化合物は、実施例６に記載されている。
【００３６】
特に好ましいのは、また、式
【化４】
0005537422.tif 000005
の化合物５−クロロ−Ｎ−｛［（５Ｓ）−３−｛４−［３−（３−ヒドロキシプロピル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−メチルフェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル］メチル｝チオフェン−２−カルボキサミド、並びに、その塩、その溶媒和物およびその塩の溶媒和物である。この化合物は、実施例１０に記載されている。
【００３７】
ラジカルの各々の組合せまたは好ましい組合せで与えられる特定のラジカルの定義は、各々の与えられるラジカルの組合せから独立して、他の組合せのラジカルの定義のいずれによっても置き換えられる。
上述の好ましい範囲の２つまたはそれ以上の組合せがことさら特に好ましい。
【００３８】
本発明は、さらに、式（Ｉ）の化合物、またはそれらの塩、溶媒和物もしくは塩の溶媒和物の製造方法を提供し、その方法では、
［Ａ］式
【化５】
0005537422.tif 000006
の化合物を、第１工程で、式
【化６】
0005537422.tif 000007
（式中、ｎ、Ｒ１およびＲ２は、上記の意味を有する）
の化合物と反応させ、式
【化７】
0005537422.tif 000008
（式中、ｎ、Ｒ１およびＲ２は、上記の意味を有する）
の化合物を得、第２工程で、ホスゲンまたはホスゲン等価物、例えば、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）の存在下で環化し、式（Ｉ）の化合物を得る、
または、
［Ｂ］式
【化８】
0005537422.tif 000009
（式中、ｎ、Ｒ１およびＲ２は、上記の意味を有する）
の化合物を、式
【化９】
0005537422.tif 000010
（式中、Ｘは、ハロゲン、好ましくは臭素もしくは塩素、またはヒドロキシルを表す）
の化合物と反応させる。
【００３９】
ヒドロキシル基が工程中で、例えばシリル保護基により、保護されているならば、方法［Ａ］または［Ｂ］が終わった後に、当業者に知られている方法を使用して、例えば、フッ化テトラブチルアンモニウムと、溶媒、例えば、テトラヒドロフラン中で反応させることにより、または、メタノール中で塩化水素と反応させることにより、これらを除去する。
【００４０】
それらの塩の遊離塩基は、例えば、塩基を添加したアセトニトリル／水グラジエントを使用する逆相カラムのクロマトグラフィーにより、特に、RP18 Phenomenex Luna C18(2) カラムおよび塩基としてのジエチルアミンを使用することにより、または、それらの塩を有機溶媒に溶解し、重炭酸ナトリウムなどの塩基性の塩の水性溶液で抽出することにより、得ることができる。
【００４１】
本発明は、さらに、化合物の塩または化合物の塩の溶媒和物を、塩基を添加してクロマトグラフィーすることによりそれらの化合物に変換する、式（Ｉ）の化合物またはそれらの溶媒和物の製造方法を提供する。
【００４２】
方法［Ａ］による第１工程の反応は、一般的に、不活性溶媒中、ルイス酸の存在下、好ましくは室温から溶媒の還流までの温度範囲で、大気圧で実施する。
不活性溶媒は、例えば、極性非プロトン性溶媒、例えば、アセトニトリル、ブチロニトリル、ジクロロメタンまたはクロロホルムである；好ましいのは、アセトニトリルである。
ルイス酸は、例えば、過塩素酸マグネシウム、イッテルビウム（ＩＩＩ）トリフルオロメタンスルホネート、臭化リチウム、マグネシウムトリフレートまたは、三塩化アルミニウムである；好ましいのは、過塩素酸マグネシウムである。
【００４３】
方法［Ａ］による第２工程の反応は、一般的に、不活性溶媒中、塩基の存在下、好ましくは室温から溶媒の還流までの温度範囲で、大気圧で実施する。
不活性溶媒は、例えば、極性非プロトン性溶媒、例えば、アセトニトリルまたはブチロニトリルである。
塩基は、例えば、強い第三級アミン塩基、例えば、４−Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノピリジンである。
好ましいのは、炭酸等価物としてのＮ,Ｎ'−カルボニルジイミダゾールを用いて、塩基として４−Ｎ,Ｎ−ジメチルアミノピリジンを添加する反応である。
【００４４】
方法［Ｂ］においてＸがハロゲンであるならば、反応は、一般的に、不活性溶媒中、必要に応じて塩基の存在下、好ましくは−３０℃ないし５０℃の温度範囲で、大気圧で実施する。
不活性溶媒は、例えば、テトラヒドロフラン、塩化メチレン、ピリジン、ジオキサンまたはジメチルホルムアミドであり、好ましいのはテトラヒドロフランまたは塩化メチレンである。
塩基は、例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミンまたはＮ−メチルモルホリンである；好ましいのは、ジイソプロピルエチルアミンである。
【００４５】
方法［Ｂ］においてＸがヒドロキシルであるならば、反応は、一般的に、不活性溶媒中、脱水剤の存在下、必要に応じて塩基の存在下、好ましくは−３０℃ないし５０℃の温度範囲で、大気圧で実施する。
【００４６】
不活性溶媒は、例えば、ジクロロメタンまたはトリクロロメタンなどのハロゲン化炭化水素類、ベンゼン、ニトロメタン、ジオキサン、ジメチルホルムアミドまたはアセトニトリルなどの炭化水素類である。これらの溶媒の混合物を使用することも可能である。特に好ましいのは、ジクロロメタンまたはジメチルホルムアミドである。
【００４７】
ここで、適する脱水剤は、例えば、Ｎ,Ｎ'−ジエチル−、Ｎ,Ｎ'−ジプロピル−、Ｎ,Ｎ'−ジイソプロピル−、Ｎ,Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ−（３−ジメチルアミノイソプロピル）−Ｎ'−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）、Ｎ−シクロヘキシルカルボジイミド−Ｎ'−プロピルオキシメチル−ポリスチレン（ＰＳ−カルボジイミド）などのカルボジイミド類、または、カルボニルジイミダゾールなどのカルボニル化合物、または、２−エチル−５−フェニル−１,２−オキサゾリウム−３−サルフェートもしくは２−ｔｅｒｔ−ブチル−５−メチルイソオキサゾリウムパークロレートなどの１,２−オキサゾリウム化合物、または、２−エトキシ−１−エトキシカルボニル−１,２−ジヒドロキノリンなどのアシルアミノ化合物、または、プロパンホスホン酸無水物、または、イソブチルクロロホルメート、または、ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスホリルクロリドまたはベンゾトリアゾリルオキシ−トリ（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート、または、Ｏ−（ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）、２−（２−オキソ−１−（２Ｈ）−ピリジル）−１,１,３,３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＰＴＵ）、または、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ'−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート（ＨＡＴＵ）、または、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、または、ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＢＯＰ）、または、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、またはこれらの塩基との混合物である。
【００４８】
塩基は、例えば、炭酸ナトリウムまたは炭酸カリウムまたは重炭酸ナトリウムまたは重炭酸カリウムなどのアルカリ金属炭酸塩、または、トリアルキルアミン類、例えばトリエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、Ｎ−メチルピペリジン、４−ジメチルアミノピリジンまたはジイソプロピルエチルアミンなどの有機塩基である。
ＨＡＴＵまたはＥＤＣを用いる縮合は、好ましくは、ＨＯＢｔの存在下で実施する。
【００４９】
式（ＩＩ）および（ＶＩ）の化合物は、知られているか、または、対応する出発物質から既知の方法により合成できる。
【００５０】
式（ＩＩＩ）の化合物は、知られているか、または、式
【化１０】
0005537422.tif 000011
（式中、ｎ、Ｒ１およびＲ２は、上記の意味を有する）
の化合物中のニトロ基を還元することにより、製造できる。
【００５１】
この反応は、一般的に、還元剤を使用して、不活性溶媒中で、好ましくは室温ないし溶媒の還流の温度範囲で、大気圧ないし３ｂａｒで実施する。
還元剤は、例えば、パラジウム／炭素、水素、二塩化スズ、三塩化チタン、または、エタノールと酢酸エチルの混合物中のギ酸アンモニウムおよびパラジウム／炭素である；好ましいのは、パラジウム／炭素および水素または二塩化スズである。
不活性溶媒は、例えば、ジエチルエーテル、メチルｔｅｒｔ−ブチルエーテル、１,２−ジメトキシエタン、ジオキサン、テトラヒドロフラン、グリコールジメチルエーテルまたはジエチレングリコールジメチルエーテルなどのエーテル類、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノールまたはｔｅｒｔ−ブタノールなどのアルコール類、ベンゼン、キシレン、トルエン、ヘキサン、シクロヘキサンまたは鉱油留分などの炭化水素類、または、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、アセトニトリルまたはピリジンなどの他の溶媒である；好ましい溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノール、または、二塩化スズの場合、ジメチルホルムアミドである。
【００５２】
式（ＶＩＩ）の化合物は、知られているか、または、対応する出発物質から既知方法により合成できるか、または、実施例の部に記載の方法と同様に製造できる。
【００５３】
式（Ｖ）の化合物は、知られているか、または、式
【化１１】
0005537422.tif 000012
（式中、ｎ、Ｒ１およびＲ２は、上記の意味を有する）
の化合物からフタルイミド保護基を除去することにより製造できる。
【００５４】
この反応は、一般的に、水性メチルアミン溶液またはエタノール中のヒドラジン水和物の溶液を使用して、好ましくは水性メチルアミン溶液を使用して、溶媒の還流で、大気圧下で実施する。
【００５５】
式（ＶＩＩＩ）の化合物は、知られているか、方法［Ａ］に記載の通りに製造できるか、または、適当な出発物質から既知方法により合成できる。
【００５６】
式（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩＩ）および（ＶＩＩＩ）の化合物中、ヒドロキシル基は、例えば、ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリルなどのシリル保護基を有してもよい。
【００５７】
本発明による化合物の製造は、下記の合成スキームにより例示説明できる：
スキーム１：
【化１２】
0005537422.tif 000013
【００５８】
本発明による化合物は、予想し得ない有用な薬理活性スペクトルを有する。
従って、それらは、ヒトおよび動物における疾患の処置および／または予防用の医薬としての使用に適する。
本発明の化合物は、特に、抗凝血剤として作用する、血液凝固因子Ｘａおよびトロンビン（ＩＩａ因子）のデュアル阻害剤である。これらの化合物は、トロンビンおよびＸａ因子の両方を阻害し、血餅上のトロンビン生成および活性を阻害することにより、それらの可能性のある成長を防止し、広い治療の幅を有する。
本発明はさらに、障害、好ましくは血栓塞栓性障害および／または血栓塞栓性合併症の処置および／または予防のための、本発明による化合物の使用を提供する。
【００５９】
本発明の意味における「血栓塞栓性障害」は、特に、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）および非ＳＴ上昇型心筋梗塞（非ＳＴＥＭＩ）、安定狭心症、不安定狭心症、血管形成術または大動脈冠動脈バイパス術などの冠動脈介入後の再閉塞および再狭窄、末梢動脈閉塞疾患、肺栓塞症、深部静脈血栓および腎静脈血栓、一過性虚血発作および血栓性および血栓塞栓性卒中などの障害である。
【００６０】
従って、本発明による化合物は、例えば心房細動などの急性、間欠性または持続性心不整脈を有する患者、および電気的除細動を受けている者、さらに、心臓弁障害を有するか、または人工心臓弁を有する患者における、心原性血栓塞栓症、例えば、脳虚血、卒中および全身性血栓塞栓症および虚血の予防および処置にも適する。
【００６１】
血栓塞栓性合併症は、さらに、微小血管障害性溶血性貧血、血液透析などの体外循環システムおよび人工心臓弁で起こる。
【００６２】
さらに、本発明による化合物は、アテローム硬化性血管障害および炎症障害、例えば運動器のリウマチ性障害の予防および／または処置にも、そして、それに加えて、アルツハイマー病の予防および／または処置にも適する。さらに、本発明による化合物は、腫瘍の成長および転移形成の阻害、微小血管障害、加齢に伴う黄斑変性症、糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症および他の微小血管の障害、並びに、例えば、腫瘍患者、特に大きい外科的介入または化学もしくは放射線治療を受けている患者の、静脈血栓塞栓症などの血栓塞栓性合併症の予防および処置にも使用できる。
【００６３】
さらに、本発明による化合物は、肺高血圧の予防および／または処置にも適する。
用語「肺高血圧」には、例えば世界保健機関（ＷＨＯ）により定められる、ある種の形態の肺高血圧が含まれる（Clinical Classification of Pulmonary Hypertension, Venice 2003）。言及し得る例は、肺動脈高血圧、左心障害に関連する肺高血圧、肺障害および／または低酸素症に関連する肺高血圧、および、慢性血栓塞栓症に起因する肺高血圧（ＣＴＥＰＨ）である。
【００６４】
「肺動脈高血圧」には、特発性肺動脈高血圧（ＩＰＡＨ、以前は原発性肺高血圧とも呼ばれた）、家族性肺動脈高血圧（ＦＰＡＨ）、並びに、膠原線維症（collagenoses）、先天性全身−肺シャント（congenital systemic-pulmonary shunt vitia）、門脈圧亢進症、ＨＩＶ感染、ある種の薬物および医薬の摂取に、他の障害（甲状腺障害、糖原病、ゴーシェ病、遺伝性末梢血管拡張症（teleangiectasy）、異常ヘモグロビン症、骨髄増殖性障害、脾摘出）に、肺静脈閉塞症および肺毛細血管腫症などの重大な静脈／毛細血管の寄与のある障害に関連する、随伴性肺動脈高血圧（ＡＰＡＨ）、並びに、新生児の持続性肺高血圧が含まれる。
【００６５】
左心障害に関連する肺高血圧には、疾患のある左心房または左心室、および、僧帽弁または大動脈弁の欠陥が含まれる。
肺障害および／または低酸素症に関連する肺高血圧には、慢性閉塞性肺障害、間質性肺障害、睡眠時無呼吸症候群、肺胞低換気、慢性高山病および遺伝的欠陥が含まれる。
慢性血栓塞栓症に起因する肺高血圧（ＣＴＥＰＨ）には、近位肺動脈の血栓塞栓性閉塞、遠位肺動脈の血栓塞栓性閉塞および非血栓性肺塞栓症（腫瘍、寄生生物、異物）が含まれる。
【００６６】
本発明は、さらに、サルコイドーシス、組織球症Ｘおよびリンパ管腫（lymphangiomatosis）に関連する肺高血圧の処置および／または予防用の医薬を製造するための、本発明による化合物の使用を提供する。
さらに、本発明による物質は、肺および肝臓の線維症の処置にも好適であり得る。
【００６７】
さらに、本発明による化合物は、敗血症（または敗血症）、全身性炎症症候群（ＳＩＲＳ）、敗血性臓器機能不全、敗血性臓器不全および多臓器不全、急性呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）、急性肺損傷（ＡＬＩ）、敗血性ショック、ＤＩＣ（播種性血管内凝固または消費性凝固障害）および／または敗血性臓器不全の処置および／または予防にも好適であり得る。
【００６８】
「敗血症」は、感染および全身性炎症反応症候群（以後、「ＳＩＲＳ」と称する）の存在と定義される。ＳＩＲＳは感染に関連して起こるが、傷害、火傷、ショック、手術、虚血、膵炎、蘇生または腫瘍などの他の状態に関連しても起こる。１９９２年からの ACCP/SCCM Consensus Conference Committee の定義 (Crit Care Med 1992; 20:864-874) は、「ＳＩＲＳ」の診断に必要とされる診断症状および測定パラメーターを記載している（とりわけ、体温変化、脈拍の増加、呼吸困難および血液像の変化）。後（２００１年）の SCCM/ESICM/ACCP/ATS/SIS International Sepsis Definitions Conference は、本質的にはこの基準を維持したが、詳細を微調整した (Levy et al., Crit Care Med 2003; 31:1250-1256)。
【００６９】
敗血症の過程では、様々な器官の微小血栓および二次的な出血性合併症を伴う全身的な凝血系の活性化があり得る（播種性血管内凝固または消費性凝固障害、以後「ＤＩＣ」と称する）。さらに、血管の透過性の増大並びに流体およびタンパク質の血管外腔へのしみ出しを伴う内皮損傷があり得る。敗血症が進行するにつれて、臓器不全（例えば、腎不全、肝不全、呼吸不全、中枢神経の欠陥および／または心血管系の不全）または多臓器不全があり得る。「敗血性ショック」は、処置を必要とする低血圧の発症を表し、その低血圧は、さらなる臓器の損傷を促進し、予後の悪化と関連する。
【００７０】
病原体は、細菌（グラム陰性およびグラム陽性）、真菌、ウイルスおよび／または真核生物であり得る。侵入点または一次感染は、例えば、肺炎、尿路感染または腹膜炎であり得る。感染は、必ずではないが、菌血症と関連し得る。
【００７１】
ＤＩＣおよび／またはＳＩＲＳは敗血症で起こり得るが、手術、腫瘍疾患、火傷または他の傷害の結果としても起こり得る。ＤＩＣでは、損傷を受けた内皮細胞の表面、異物の表面または傷害された血管外の組織で、凝血系の大きい活性化がある。結果として、様々な臓器の小血管での凝血があり、低酸素および続く臓器の機能不全を伴う。二次的に、凝固因子（例えば、Ｘ因子、プロトロンビンおよびフィブリノーゲン）および血小板の消費があり、それは、血液が凝固する能力を低下させ、深刻な出血をもたらし得る。
【００７２】
敗血症の治療は、第１に、例えば、手術による局所的な再構築および抗生作用による、感染原因の当然の排除からなる。第２に、それは、冒された器官系の一時的な集中的医療支援にある。この疾病の様々な段階の治療は、例えば、以下の刊行物（Dellinger et al., Crit Care Med 2004;32:858-873）に記載されている。ＤＩＣには、証明された有効な治療はない。
【００７３】
本発明は、さらに、特に、上述の障害の処置および／または予防用の、本発明による化合物および１種またはそれ以上のさらなる活性化合物を含む医薬を提供する。例示的かつ好ましい活性化合物の組み合わせは、以下のものである：
・抗菌治療
計画的治療（微生物の診断の存在に先立つ）または敗血症治療として、様々な抗生物質または抗真菌剤の組み合わせが適する。
・流体治療
例えば、晶質またはコロイド状流体
・昇圧剤
例えば、ノルエピネフリン、ドーパミンまたはバソプレシン
・変力性治療
例えばドブタミン
・コルチコステロイド
例えば、ヒドロコルチゾンまたはフルドロコルチゾン
・組換えヒト活性化プロテインＣ
ザイグリス
・血液製剤
例えば、赤血球濃縮物、血小板濃縮物、エリスロポエチンまたは新鮮な凍結血漿
・敗血症に誘導される急性肺傷害（ＡＬＩ）または急性呼吸促迫症候群の場合、人工呼吸
例えば、許容的な高炭酸ガス血症、一回換気量の減少
・鎮静、鎮痛および神経筋遮断
鎮静：例えば、ジアゼパム、ロラゼパム、ミダゾラムまたはプロポフォール。オピオイド：例えば、フェンタニル、ヒドロモルホン、モルヒネ、メペリジンまたはレミフェンタニル。ＮＳＡＩＤ：例えば、ケトロラク、イブプロフェンまたはアセトアミノフェン。神経筋遮断：例えば、パンクロニウム
・グルコース制御
例えば、インシュリン、グルコース
・腎置換方法
例えば、連続的静静脈血液濾過、または、間欠的血液透析。腎臓保護のための低用量ドーパミン。
・抗凝血剤
例えば、血栓症予防または腎置換方法のための、例えば、未分画ヘパリン、低分子量ヘパリン、ヘパリン類似物質、ヒルジン、ビバリルジンまたはアルガトロバン。
・重炭酸塩療法
・ストレス潰瘍予防
例えばＨ２−受容体阻害剤、制酸剤。
【００７４】
加えて、本発明による化合物は、また、エクスビボでの凝血を防止するために、例えば、血液および血漿製品の保存のために、カテーテルおよび他の医療器具および装置の洗浄／予処理のために、インビボまたはエクスビボで使用する医療器具および装置の合成表面の被覆のために、または、Ｘａ因子またはＩＩａ因子を含む生物学的サンプルのために、使用できる。
【００７５】
本発明は、さらに、障害、特に上述の障害の処置および／または予防のための、本発明による化合物の使用を提供する。
本発明は、さらに、障害、特に上述の障害の処置および／または予防用の医薬を製造するための、本発明による化合物の使用を提供する。
本発明は、さらに、抗凝血的に有効な量の本発明による化合物を使用する、障害、特に上述の障害の処置および／または予防方法を提供する。
【００７６】
本発明は、さらに、インビトロでの、特に、保存血液またはＸａ因子および／またはＩＩａ因子を含有する生物学的サンプルにおける、血液凝固の防止方法を提供し、その方法は、抗凝血的に有効な量の本発明による化合物を添加することを特徴とする。
【００７７】
本発明は、さらに、特に、上述の障害の処置および／または予防のための、本発明の化合物および１種またはそれ以上のさらなる活性化合物を含む医薬を提供する。例えば、そして好ましくは、以下の活性化合物または組み合わせに言及し得る：
・脂質低下物質、特に、ＨＭＧ−ＣｏＡ−（３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル−コエンザイムＡ）レダクターゼ阻害剤、例えば、ロバスタチン（メバコル（Mevacor）；ＵＳ４,２３１,９３８）、シンバスタチン（ゾコル（Zocor）；ＵＳ４,４４４,７８４）、プラバスタチン（プラバコール（Pravachol）；ＵＳ４,３４６,２２７）、フルバスタチン（レスコール（Lescol）；ＵＳ５,３５４,７７２）およびアトルバスタチン（リピトール；ＵＳ５,２７３,９９５）；
【００７８】
・冠血管治療剤／血管拡張剤、特に、ＡＣＥ（アンジオテンシン変換酵素）阻害剤、例えば、カプトプリル、リシノプリル、エナラプリル、ラミプリル、シラザプリル、ベナゼプリル、ホシノプリル、キナプリルおよびペリンドプリル、または、ＡＩＩ（アンジオテンシンＩＩ）受容体アンタゴニスト、例えば、エンブサルタン（embusartan）（ＵＳ５,８６３,９３０）、ロサルタン、バルサルタン、イルベサルタン、カンデサルタン、エプロサルタンおよびテミサルタン（temisartan）、または、β−アドレナリン受容体アンタゴニスト、例えば、カルベジロール、アルプレノロール、ビソプロロール、アセブトロール、アテノロール、ベタキソロール、カルテオロール、メトプロロール、ナドロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロパノロール（propanolol）およびチモロール、または、アルファ−１−アドレナリン受容体アンタゴニスト、例えば、プラゾシン、ブナゾシン、ドキサゾシンおよびテラゾシン、または、利尿剤、例えば、ヒドロクロロチアジド、フロセミド、ブメタニド、ピレタニド、トラセミド、アミロライドおよびジヒドララジン、または、カルシウムチャネル遮断薬、例えば、ベラパミルおよびジルチアゼム、または、ジヒドロピリジン誘導体、例えば、ニフェジピン（アダラート）およびニトレンジピン（バイオテンシン（Bayotensin）)、または、ニトロ製剤、例えば、５−一硝酸イソソルビド、二硝酸イソソルビドおよび三硝酸グリセリン、または、環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）の増加を引き起こす物質、例えば、可溶性グアニル酸シクラーゼの刺激剤（ＷＯ９８／１６２２３、ＷＯ９８／１６５０７、ＷＯ９８／２３６１９、ＷＯ００／０６５６７、ＷＯ００／０６５６８、ＷＯ００／０６５６９、ＷＯ００／２１９５４、ＷＯ００／６６５８２、ＷＯ０１／１７９９８、ＷＯ０１／１９７７６、ＷＯ０１／１９３５５、ＷＯ０１／１９７８０、ＷＯ０１／１９７７８、ＷＯ０７／０４５３６６、ＷＯ０７／０４５３６７、ＷＯ０７／０４５３６９、ＷＯ０７／０４５３７０、ＷＯ０７／０４５４３３）；
【００７９】
・プラスミノーゲン活性化因子（血栓溶解剤／線維素溶解剤）および血栓溶解／線維素溶解を促進する化合物、例えば、プラスミノーゲン活性化因子阻害因子の阻害剤（ＰＡＩ阻害剤）またはトロンビン活性化線溶阻害因子の阻害剤（ＴＡＦＩ阻害剤）、例えば組織プラスミノーゲン活性化因子（ｔ−ＰＡ）、ストレプトキナーゼ、レテプラーゼおよびウロキナーゼ；
【００８０】
・抗凝血物質（抗凝血剤）、例えば、ヘパリン（ＵＦＨ）、低分子量ヘパリン（ＮＭＨ）、例えば、チンザパリン、セルトパリン（certoparin）、パルナパリン、ナドロパリン、アルデパリン、エノキサパリン、レビパリン、ダルテパリン、ダナパロイド、
ＡＶＥ５０２６（Sanofi-Aventis, Company Presentation 2008, February 12)、
Ｍ１１８（Momenta Pharmaceuticals Inc., Press Release 2008, February 14)、
ＯＲＧ４２６７５（Organon International Inc., Company World Wide Website 2007, April)、
【００８１】
および、直接的トロンビン阻害剤（ＤＴＩ）、例えば、
エクサンタ（Exanta）（キシメラガトラン）
【化１３】
0005537422.tif 000014
【００８２】
レンディックス（Rendix）(ダビガトラン)
【化１４】
0005537422.tif 000015
【００８３】
ＡＺＤ−０８３７［AstraZeneca Annual Report 2006, 19 March 2007]
【化１５】
0005537422.tif 000016
【００８４】
ＳＳＲ−１８２２８９Ａ［J. Lorrain et al. Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 2003, 304, 567-574; J-M Altenburger et al. Bioorg.Med.Chem. 2004, 12, 1713-1730]
【化１６】
0005537422.tif 000017
【００８５】
ＴＧＮ−１６７［S. Combe et al. Blood 2005, 106, abstract 1863 (ASH 2005)]
Ｎ−［（ベンジルオキシ）カルボニル］−Ｌ−フェニルアラニル−Ｎ−［（１Ｓ）−１−（ジヒドロキシボリル）−４−メトキシブチル］−Ｄ−プロリンアミド［ＷＯ２００５／０８４６８５］
【化１７】
0005537422.tif 000018
【００８６】
ソフィガトラン（Sofigatran）[WHO Drug Information 2007, 21, 77]
【化１８】
0005537422.tif 000019
ＭＣＣ−９７７［Mitsubishi Pharma website pipeline 2006, July 25, 2006]、
ＭＰＣ−０９２０［Press Release: "Myriad Genetics Begins Phase 1 Trial of Anti-Thrombin Drug MPC-0920", Myriad Genetics Inc, 02. Mai 2006] および
【００８７】
ＴＧＮ−２５５（フロバガトラン（flovagatran））
【化１９】
0005537422.tif 000020
【００８８】
および、直接Ｘａ因子阻害剤、例えば、
リバロキサバン（ＢＡＹ５９−７９３９）：５−クロロ−Ｎ−（｛（５Ｓ）−２−オキソ−３−［４−（３−オキソモルホリン−４−イル）フェニル］−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド［ＷＯ２００１／４７９１９］
【化２０】
0005537422.tif 000021
【００８９】
ＡＸ−１８２６［S. Takehana et al. Japanese Journal of Pharmacology 2000, 82 (Suppl. 1), 213P; T. Kayahara et al. Japanese Journal of Pharmacology 2000, 82 (Suppl. 1), 213P]、
タノギトラン（tanogitran）（ＢＩＢＴ−９８６、プロドラッグ：ＢＩＢＴ−１０１１）：Ｎ−［（１Ｒ）−１−｛２−［（｛４−［アミノ（イミノ）−メチル］フェニル｝アミノ）メチル］−１−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−イル｝−１−メチル−２−オキソ−２−ピロリジン−１−イルエチル］グリシン［American Chemical Society - 226th National Meeting, New York City, NY, USA, 2003]
【化２１】
0005537422.tif 000022
【００９０】
ＷＯ２００４／０５６７８４に開示の化合物、
ＹＭ−１５０［Y. Iwatsuki et al. Blood 2006, 108, abstract 911 (ASH 2006)]、
Ｎ−｛４−ブロモ−２−［（５−クロロピリジン−２−イル）カルバモイル］−６−ヒドロキシフェニル｝−１−イソプロピルピペリジン−４−カルボキサミド［ＪＰ２００５／１７９２７２］
【化２２】
0005537422.tif 000023
【００９１】
ＷＯ２０００／２４２２７０に開示の化合物、
ＡＺ１２３００５４７：６−［４−（｛（２Ｓ）−４−［（３−クロロ−１Ｈ−インドール−６−イル）スルホニル］−２−メチル−６−オキソピペラジン−１−イル｝メチル）フェニル］−２−メチルピリダジン−３（２Ｈ）−オン［K.L Granberg et al. American Chemical Society - 232th National Meeting, San Francisco, USA, 2006, MEDI 391]
【化２３】
0005537422.tif 000024
【００９２】
ＷＯ２００７／００８１４２に開示の化合物、
ラザキサバン（razaxaban）（ＤＰＣ−９０６）：１−（３−アミノ−１,２−ベンゾイソオキサゾール−５−イル）−Ｎ−（４−｛２−［（ジメチルアミノ）−メチル］−１Ｈ−イミダゾール−１−イル｝−２−フルオロフェニル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−５−カルボキサミド［J.Med.Chem. 2005, 48, 1729-1744]
【化２４】
0005537422.tif 000025
【００９３】
アピキサバン（ＢＭＳ−５６２２４７）：１−（４−メトキシフェニル）−７−オキソ−６−［４−（２−オキソピペリジン−１−イル）フェニル］−４,５,６,７−テトラヒドロ−１Ｈ−ピラゾロ［３,４−ｃ］ピリジン−３−カルボキサミド［ＷＯ２００３／０２６６５２、ＷＯ２００３／０４９６８１］
【化２５】
0005537422.tif 000026
【００９４】
ＢＭＳ−６９１６４８：３−クロロ−Ｎ−［（３Ｓ,４Ｒ）−１−（メチルスルホニル）−４−｛［４−（２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）ベンゾイル］アミノ｝ピペリジン−３−イル］−１Ｈ−インドール−６−カルボキサミド［T. Guengoer et al. Drugs Fut. 2006, 31(Suppl A): abstract P118；ＷＯ２００４／０８２６８７］
【化２６】
0005537422.tif 000027
【００９５】
ＤＸ−９０６５ａ：（２Ｓ）−３−｛７−［アミノ（イミノ）メチル］−２−ナフチル｝−２−（４−｛［（３Ｓ）−１−エタンイミドイル−ピロリジン−３−イル］オキシ｝フェニル）プロパン酸［T. Nagahara et al. J.Med.Chem. 1994, 37, 1200-1207]
【化２７】
0005537422.tif 000028
【００９６】
ＤＵ−１７６ｂ［Y. Morishima et al. Blood 2004, 104, abstract 1862 (ASH 2004); T. Fukuda et al. Blood 2004, 104, abstract 1852 (ASH 2004); T. Furugohri et al. Blood 2004, 104, abstract 1851 (ASH 2004)]、
Ｎ−（５−クロロピリジン−２−イル）−Ｎ'−［（１Ｓ,２Ｒ,４Ｓ）−４−（ジメチルカルバモイル）−２−｛［（５−メチル−４,５,６,７−テトラヒドロ［１,３］チアゾロ［５,４−ｃ］ピリジン−２−イル）カルボニル］アミノ｝シクロヘキシル］エタンジアミド［ＵＳ２００５／００２０６４５、ＷＯ２００５／４７２９６］
【化２８】
0005537422.tif 000029
【００９７】
ＵＳ２００５／００２０６４５に開示の化合物、
ＬＹ５１７７１７：Ｎ−｛（１Ｒ）−２−［４−（１−メチルピペリジン−４−イル）ピペラジン−１−イル］−２−オキソ−１−フェニルエチル｝−１Ｈ−インドール−６−カルボキサミド［ＷＯ２０００／７６９７１、ＷＯ２００２／１００８４７］
【化２９】
0005537422.tif 000030
【００９８】
８１３８９３［Proteinase Inhibitor Design - Fourth SCI-RSC Symposium, Proteinase 2004: Strategies for New Medicines (Part I), London]、
６−クロロ−Ｎ−｛（３Ｓ）−１−［（１Ｓ）−１−メチル−２−モルホリン−４−イル−２−オキソエチル］−２−オキソピロリジン−３−イル｝ナフタレン−２−スルホンアミド［N.S. Watson et al. Bioorg.Med.Chem.Lett. 2006, 16, 3784；ＷＯ２００２／１００８３０；ＷＯ２００２／１００８８６］
【化３０】
0005537422.tif 000031
【００９９】
ＫＦＡ−１９８２（ＫＦＡ−１８２９のプロドラッグ）［T. Koizumi et al. Journal of Thrombosis and Hemostasis 2003, 1 Suppl 1, P2022]、
ＥＭＤ−５０３９８２［Merck KGaA Annual Report 2006, 48-49]、
ＥＭＤ−４９５２３５：５−クロロ−Ｎ−［（１Ｒ）−１−（メトキシメチル）−２−｛［３−メチル−４−（３−オキソモルホリン−４−イル）−フェニル］アミノ｝−２−オキソエチル］チオフェン−２−カルボキサミド［Bioorg.Med.Chem.Lett. 2004, 14, 5817-5822]
【化３１】
0005537422.tif 000032
【０１００】
Ｍ−５５１１３：４−［（６−クロロ−２−ナフチル）スルホニル］−１−［（１−ピリジン−４−イルピペリジン−４−イル）メチル］ピペラジン−２−オン［H. Nishida et al. Chem.Pharm.Bull. 2001, 49, 1237-1244]
【化３２】
0005537422.tif 000033
【０１０１】
Ｍ−５５５５１／Ｍ−５５５５５：（２Ｒ）−４−［（６−クロロ−２−ナフチル）スルホニル］−６−オキソ−１−［（１−ピリジン−４−イルピペリジン−４−イル）メチル］ピペラジン−２−カルボン酸［H. Nishida et al. Chem.Pharm.Bull. 2002, 50, 1187-1194]
【化３３】
0005537422.tif 000034
【０１０２】
Ｍ−５５１９０：エチル（２Ｒ）−４−［（６−クロロ−２−ナフチル）スルホニル］−６−オキソ−１−［（１−ピリジン−４−イルピペリジン−４−イル）メチル］ピペラジン−２−カルボキシレート[H. Nishida et al. 16th Int Symp Med Chem, Bologna, 18-22 Sept 2000, Abst PA-125]
【化３４】
0005537422.tif 000035
【０１０３】
Ｍ−５５５３２：７−［（６−クロロ−２−ナフチル）スルホニル］−８ａ−（メトキシメチル）−１'−ピリジン−４−イルテトラヒドロ−５Ｈ−スピロ［１,３−オキサゾロ［３,２−ａ］ピラジン−２,４'−ピペリジン］−５−オン［H. Nishida et al. 228th ACS National Meeting, Philadelphia, August 22-26, 2004, MEDI-251; H. Nishida et al. Chem.Pharm.Bull. 2004, 52, 406-412; dito 459-462]
【化３５】
0005537422.tif 000036
【０１０４】
Ｎ−（｛７−［（５−クロロ−１Ｈ−インドール−２−イル）スルホニル］−５−オキソ−１'−プロピオニルテトラヒドロ−８ａＨ−スピロ［１,３−オキサゾロ−［３,２−ａ］ピラジン−２,４'−ピペリジン］−８ａ−イル｝メチル）−Ｎ−メチルグリシン［ＷＯ２００６／１０６８０４］
【化３６】
0005537422.tif 000037
【０１０５】
ＰＲＴ５４０２１［U. Sinha et al. Blood 2006, 108, abstract 907 (ASH 2006); K. Abe et al. Blood 2006, 108, abstract 901 (ASH 2006)]、
ＷＯ２００６／００２０９９に開示の化合物、
オタミキサバン（otamixaban）（ＦＸＶ−６７３、ＲＰＲ−１３０６７３）：メチル（２Ｒ,３Ｒ）−２−｛３−［アミノ（イミノ）メチル］ベンジル｝−３−｛［４−（１−オキシドピリジン−４−イル）ベンゾイル］アミノ｝ブタノエート［V. Chu et al. Thrombosis Research 2001, 103, 309-324; K.R. Guertin et al. Bioorg Med.Chem.Lett. 2002, 12, 1671-1674]
【化３７】
0005537422.tif 000038
【０１０６】
ＡＶＥ３２４７［Sanofi Aventis Company Presentation, Paris  2007, February 13]、
ＳＡＲ３７７１４２（ＳＳＲ−７１４２）［Sanofi Aventis Company Presentation, Paris  2007, February 13]、
ＨＭＲ−２９０６[XVIIth Congress of the International Society for Thrombosis and Haemostasis, Washington D.C., USA, 14-21 Aug 1999; Generating greater value from our products and pipeline. Aventis SA Company Presentation, 05 Feb 2004]、
イドラパリナックス［Harry R. Bueller et al. Blood, 2006, 108, abstract 571 (ASH 2006)] および
フォンダパリナックス；
【０１０７】
・血小板凝集を阻害する物質（血小板凝集阻害剤、栓球凝集阻害剤）、例えば、アセチルサリチル酸（例えばアスピリン）、チクロピジン（チクリド（ticlid））、クロピドグレル（プラビックス）およびプラスグレル；
・フィブリノーゲン受容体アンタゴニスト（糖タンパク質−ＩＩｂ／ＩＩＩａアンタゴニスト）、例えば、アブシキシマブ、エプチフィバチド、チロフィバン、ラミフィバン（lamifiban）、レフラダフィバン（lefradafiban）およびフラダフィバン（fradafiban）；
・並びに、抗不整脈薬。
【０１０８】
本発明は、さらに、少なくとも１種の本発明による化合物を、通常１種またはそれ以上の不活性、非毒性の医薬的に適する補助剤と共に含む医薬、および、上述の目的でのそれらの使用に関する。
【０１０９】
本発明による化合物は、全身的および／または局所的に作用できる。この目的で、それらは、適する方法で、例えば、経口で、非経腸で、肺に、鼻腔に、舌下に、舌に、頬側に、直腸に、皮膚に、経皮で、結膜に、耳経路で、または、インプラントもしくはステントとして、投与できる。
これらの投与経路のために、本発明による化合物を適する投与形で投与できる。
【０１１０】
経口投与に適するのは、先行技術に準じて機能し、本発明による化合物を迅速に、かつ／または、改変された様式で送達し、本発明による化合物を結晶形および／または無定形および／または溶解形で含有する投与形、例えば、錠剤（非被覆または被覆錠剤、例えば、腸溶性被覆、または、不溶であるか、または、遅れて溶解し、本発明による化合物の放出を制御する被覆を有するもの）、口中で迅速に崩壊する錠剤、または、フィルム／オブラート、フィルム／凍結乾燥剤、カプセル剤（例えば、ハードまたはソフトゼラチンカプセル剤）、糖衣錠、顆粒剤、ペレット剤、粉末剤、乳剤、懸濁剤、エアゾル剤または液剤である。
【０１１１】
非経腸投与は、吸収段階を回避して（例えば、静脈内、動脈内、心臓内、脊髄内または腰椎内に）、または、吸収を含めて（例えば、筋肉内、皮下、皮内、経皮または腹腔内）、行うことができる。非経腸投与に適する投与形は、とりわけ、液剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥剤または滅菌粉末剤の形態の注射および点滴用製剤である。
【０１１２】
他の投与経路に適するのは、例えば、吸入用医薬形（とりわけ、粉末吸入器、噴霧器）、点鼻薬、液またはスプレー；舌、舌下または頬側投与用の錠剤、フィルム／オブラートまたはカプセル剤、坐剤、耳または眼用製剤、膣用カプセル剤、水性懸濁剤（ローション、振盪混合物）、親油性懸濁剤、軟膏、クリーム、経皮治療システム（例えば、パッチ）、ミルク、ペースト、フォーム、散布用粉末剤（dusting powder）、インプラントまたはステントである。
【０１１３】
経口または非経腸投与、特に経口投与が好ましい。
【０１１４】
本発明による化合物は、上述の投与形に変換できる。これは、不活性、非毒性、医薬的に適する補助剤と混合することにより、それ自体既知の方法で行うことができる。これらの補助剤には、とりわけ、担体（例えば微結晶セルロース、ラクトース、マンニトール）、溶媒（例えば液体ポリエチレングリコール類）、乳化剤および分散剤または湿潤剤（例えばドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシソルビタンオレエート）、結合剤（例えばポリビニルピロリドン）、合成および天然ポリマー（例えばアルブミン）、安定化剤（例えば抗酸化剤、例えばアスコルビン酸など）、着色料（例えば無機色素、例えば酸化鉄など）および香味および／または臭気のマスキング剤が含まれる。
【０１１５】
一般に、非経腸投与で約０.００１ないし５ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは約０.０１ないし１ｍｇ／体重ｋｇの量を投与するのが、有効な結果を達成するために有利であると明らかになり、経口投与では、投与量は、約０.０１ないし１００ｍｇ／体重ｋｇ、好ましくは約０.０１ないし２０ｍｇ／体重ｋｇ、ことさら特に好ましくは０.１ないし１０ｍｇ／体重ｋｇである。
【０１１６】
それにも拘わらず、必要に応じて、特に、体重、投与経路、有効成分に対する個体の応答、製剤の性質および投与を行う時間または間隔に応じて、上述の量から逸脱することが必要であり得る。従って、上述の最小量より少なくても十分な場合があり得、一方上述の上限を超えなければならない場合もある。大量投与の場合、これらを１日に亘る複数の個別用量に分割するのが望ましいことがある。
【０１１７】
以下の例示的実施態様は、本発明を例示説明する。本発明は、これらの実施例に限定されない。
以下の試験および実施例における百分率のデータは、断りの無い限り、重量パーセントである；部は、重量部である。液体／液体溶液の溶媒比、希釈比および濃度のデータは、各場合で体積に基づく。
【実施例】
【０１１８】
Ａ. 実施例
略号
【表１】
0005537422.tif 000039
【０１１９】
ＬＣ−ＭＳおよびＨＰＬＣの方法
方法１（ＨＰＬＣ）：装置：ＤＡＤ検出を備えた HP 1100；カラム：Kromasil 100 RP-18, 60 mm x 2.1 mm, 3.5 μm；移動相Ａ：過塩素酸（濃度７０％）５ｍｌ／水１ｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０分２％Ｂ→０.５分２％Ｂ→４.５分９０％Ｂ→６.５分９０％Ｂ→６.７分２％Ｂ→７.５分２％Ｂ；流速：０.７５ｍｌ／分；カラム温度：３０℃；検出：ＵＶ２１０ｎｍ。
【０１２０】
方法２（ＨＰＬＣ）：装置：ＤＡＤ検出を備えた HP 1100；カラム：Kromasil 100 RP-18, 60 mm x 2.1 mm, 3.5 μm；移動相Ａ：過塩素酸（濃度７０％）５ｍｌ／水１ｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル；グラジエント：０分２％Ｂ→０.５分２％Ｂ→４.５分９０％Ｂ→９分９０％Ｂ→９.２分２％Ｂ→１０分２％Ｂ；流速：０.７５ｍｌ／分；カラム温度：３０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１２１】
方法３（ＬＣ−ＭＳ）：ＭＳ装置タイプ：Micromass ZQ；ＨＰＬＣ装置タイプ：Waters Alliance 2795; カラム: Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm；移動相Ａ：水１ｌ＋濃度５０％のギ酸０.５ｍｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋濃度５０％のギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２.５分３０％Ａ→３.０分５％Ａ→４.５分５％Ａ；流速：０.０分１ｍｌ／分、２.５分／３.０分／４.５分２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１２２】
方法４（ＬＣ−ＭＳ）：ＭＳ装置タイプ：Micromass ZQ；ＨＰＬＣ装置タイプ：HP 1100 Series; UV DAD；カラム：Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm；移動相Ａ：水１ｌ＋濃度５０％のギ酸０.５ｍｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋濃度５０％のギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２.５分３０％Ａ→３.０分５％Ａ→４.５分５％Ａ；流速：０.０分１ｍｌ／分、２.５分／３.０分／４.５分２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１２３】
方法５（ＬＣ−ＭＳ）：装置：HPLC Agilent series 1100 を備えた Micromass Quattro LCZ；カラム：Phenomenex Synergi 2μ Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm；移動相Ａ：水１ｌ＋濃度５０％のギ酸０.５ｍｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋濃度５０％のギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２.５分３０％Ａ→３.０分５％Ａ→４.５分５％Ａ；流速：０.０分１ｍｌ／分、２.５分／３.０分／４.５分２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２０８−４００ｎｍ。
【０１２４】
方法６（ＬＣ−ＭＳ）：ＭＳ装置タイプ：Micromass ZQ；ＨＰＬＣ装置タイプ：HP 1100 Series; UV DAD；カラム：Phenomenex Gemini 3μ 30 mm x 3.00 mm；移動相Ａ：水１ｌ＋濃度５０％のギ酸０.５ｍｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋濃度５０％のギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２.５分３０％Ａ→３.０分５％Ａ→４.５分５％Ａ；流速：０.０分１ｍｌ／分、２.５分／３.０分／４.５分。２ｍｌ／分；オーブン：５０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１２５】
方法７（ＬＣ−ＭＳ）：装置：HPLC Agilent Serie 1100 を備えた Micromass Platform LCZ; カラム: Thermo Hypersil GOLD 3μ 20 mm x 4 mm；移動相Ａ：水１ｌ＋濃度５０％のギ酸０.５ｍｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋濃度５０％のギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分１００％Ａ→０.２分１００％Ａ→２.９分３０％Ａ→３.１分１０％Ａ→５.５分１０％Ａ；オーブン：５０℃；流速：０.８ｍｌ／分；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１２６】
方法８（ＬＣ−ＭＳ）：ＭＳ装置タイプ：Waters ZQ；ＨＰＬＣ装置タイプ：Waters Alliance 2795；カラム：Phenomenex Onyx Monolithic C18, 100 mm x 3 mm；移動相Ａ：水１ｌ＋濃度５０％のギ酸０.５ｍｌ、移動相Ｂ：アセトニトリル１ｌ＋濃度５０％のギ酸０.５ｍｌ；グラジエント：０.０分９０％Ａ→２分６５％Ａ→４.５分５％Ａ→６分５％Ａ；流速：２ｍｌ／分；オーブン：４０℃；ＵＶ検出：２１０ｎｍ。
【０１２７】
方法９（ＧＣ−ＭＳ）：装置：Micromass GCT, GC6890；カラム：Restek RTX-35MS, 30 m x 250 μm x 0.25 μm；一定のヘリウム流速：０.８８ｍｌ／分；オーブン：６０℃；入口：２５０℃；グラジエント：６０℃（０.３０分間維持）、５０℃／分→１２０℃,１６℃／分→２５０℃,３０℃／分→３００℃（１.７分間維持）。
【０１２８】
方法１０（ＧＣ−ＭＳ）：装置：Micromass GCT, GC6890；カラム：Restek RTX-35, 15 m x 200 μm x 0.33 μm；一定のヘリウム流速：０.８８ｍｌ／分；オーブン：７０℃；入口：２５０℃；グラジエント：７０℃、３０℃／分→３１０℃（３分間維持）。
【０１２９】
出発物質
実施例１Ａ
５−クロロ−Ｎ−［（２Ｓ）−オキシラン−２−イルメチル］チオフェン−２−カルボキサミド
【化３８】
0005537422.tif 000040
実施例１Ａは、ＷＯ０４／１０１５５７（実施例６Ａ）に記載の通りに製造する。
【０１３０】
実施例２Ａ
３−（ヒドロキシメチル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化３９】
0005537422.tif 000041
室温で、ヘキサメチルジシラン２３.２ｇ（１４４ｍｍｏｌ）およびクロロトリメチルシラン０.７８１ｇ（７.１９ｍｍｏｌ）を、トルエン１００ｍｌ中の２−ヒドロキシニコチン酸１０.０ｇ（７１.９ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加し、混合物をＫＰＧスターラーで、１１０℃で３０分間撹拌する。次いで、混合物を−４０℃に冷却し、ジクロロメタン中の１モル濃度ジイソブチルアルミニウムヒドリド溶液２２.５ｇ（１５８ｍｍｏｌ）を、溶液に滴下して添加する。混合物を室温に温め、室温で１８時間撹拌し、最終的に、−１０℃で、希塩酸を用いてｐＨ＝４に調節し、温度が−１０℃を超えないように、メタノール５００ｍｌを添加する。形成される沈殿を濾過し、水１００ｍｌを濾液に添加し、混合物を５０℃で１時間撹拌し、沈殿を濾過する。濾液を濃縮し、所望の化合物８.５５ｇ（理論値の９５％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 11.53 (br. s, 1H), 7.40 (d, 1H), 7.25 (d, 1H), 6.19 (dd, 1H), 5.00 (t, 1H), 4.28 (d, 2H).
HPLC (方法 1): Rt = 0.27 分.
MS (ESIpos, m/z): 148 (M+Na)+.
【０１３１】
実施例３Ａ
３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化４０】
0005537422.tif 000042
室温で、イミダゾール０.６５ｇ（９.５９ｍｍｏｌ）、ｔ−ブチルジフェニルクロロシラン２.４２ｇ（８.７９ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ０.１０ｇ（０.８０ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ１９ｍｌ中の実施例２Ａの化合物１.００ｇ（７.９９ｍｍｏｌ）に添加し、混合物を１８時間撹拌する。次いで、水１８０ｍｌを添加し、混合物を０℃に３時間維持する。濾過後、得られる残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（酢酸エチル／エチルジメチルアミン１０００：１）により精製する。これにより、所望の化合物８０１ｍｇ（理論値の２７％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 11.61 (br. s, 1H), 7.69-7.52 (m, 5H), 7.51-7.38 (m, 6H), 7.30 (d, 1H), 6.29 (dd, 1H), 4.51 (s, 2H), 1.05 (s, 9H).
HPLC (方法 2): Rt = 5.27 分.
MS (DCI, m/z): 364 (M+H)+.
【０１３２】
実施例４Ａ
３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−１−（２−クロロ−４−ニトロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化４１】
0005537422.tif 000043
０℃で、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド０.５００ｇ（４.４６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ２１ｍｌ中の実施例３Ａの化合物１.０８ｇ（２.９７ｍｍｏｌ）に添加し、混合物を室温で３０分間撹拌する。２−クロロ−１−フルオロ−４−ニトロベンゼン０.５７１ｇ（３.２７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で撹拌する。４.５時間後、水２００ｍｌを添加し、次いで、混合物を酢酸エチルで３回抽出する。合わせた有機相を水で洗浄し、次いで硫酸ナトリウムで乾燥させる。濾過後、溶媒を減圧下で除去する。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル９：１）により精製する。これにより、所望の化合物８７２ｍｇ（理論値の５６％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.52 (d, 1H), 8.32 (dd, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.76 (dd, 1H), 7.68-7.63 (m, 4H), 7.59-7.55 (m, 1H), 7.54-7.41 (m, 6H), 6.54 (dd, 1H), 4.56 (br. s, 2H), 1.07 (s, 9H).
HPLC (方法 2): Rt = 6.05 分.
MS (DCI, m/z): 519 (M+H)+.
【０１３３】
実施例５Ａ
１−（４−アミノ−２−クロロフェニル）−３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化４２】
0005537422.tif 000044
実施例４Ａの化合物８００ｍｇ（１.５４ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ４８ｍｌに溶解する。次いで、パラジウム／炭素５０ｍｇ（０.０５ｍｍｏｌ）を添加し、室温で、水素雰囲気中、大気圧下で混合物を水素化する。次いで、混合物を濾過し、濾過ケーキをＴＨＦで洗浄し、濾液から溶媒を除去する。反応生成物（純度：９５％）を、さらに精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 1): Rt = 5.55 分.
MS (ESIpos, m/z): 489 (M+H)+.
【０１３４】
実施例６Ａ
Ｎ−｛［（５Ｓ）−３−｛４−［３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−クロロ−フェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル］メチル｝−５−クロロチオフェン−２−カルボキサミド
【化４３】
0005537422.tif 000045
実施例１Ａの化合物３８６ｍｇ（１.７７ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル２４ｍｌ中の実施例５Ａの化合物７８９ｍｇ（１.６１ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。過塩素酸マグネシウム５４０ｍｇ（２.４２ｍｍｏｌ）を懸濁液に添加する。室温で１９時間後、実施例１Ａの化合物１９３ｍｇ（０.９５２ｍｍｏｌ）を添加し、室温での撹拌をさらに３０時間継続する。次いで、１,１'−カルボニルジイミダゾール５２３ｍｇ（２.４６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ１９ｍｇ（０.０９ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を６０℃で加熱する。２１時間後、混合物を水、飽和塩化ナトリウム水溶液および酢酸エチルで希釈する。水相を酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させる。濾過後、溶媒を除去し、残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル１：１）により精製する。これにより、所望の生成物５３３ｍｇ（理論値の４５％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.97 (t, 1H), 7.85 (dd, 1H), 7.73 (dd, 1H), 7.70-7.63 (m, 5H), 7.58 (dd, 1H), 7.53-7.38 (m, 8H), 7.19 (d, 1H), 6.47 (dd, 1H), 4.91-4.82 (m, 1H), 4.55 (br. s, 2H), 4.24 (dd, 1H), 3.89 (dd, 1H), 3.65-3.58 (m, 2H), 1.07 (s, 9H).
HPLC (方法 2): Rt = 6.07 分.
MS (ESIpos, m/z): 732 (M+H)+.
【０１３５】
実施例７Ａ
３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−１−（２−メチル−４−ニトロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化４４】
0005537422.tif 000046
実施例４Ａと同様に、実施例３Ａの化合物１.５０ｇ（４.１３ｍｍｏｌ）を、２−フルオロ−５−ニトロトルエン７０４ｍｇ（４.５４ｍｍｏｌ）と反応させる。これにより、表題化合物５７０ｍｇ（理論値の２８％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.29 (d, 1H), 8.17 (dd, 1H), 7.76 (dd, 1H), 7.67-7.63 (m, 4H), 7.57 (d, 1H), 7.53 (dd, 1H), 7.51-7.41 (m, 6H), 6.52 (t, 1H), 4.63-4.51 (m, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.07 (s, 9H).
HPLC (方法 4): Rt = 3.39 分.
MS (ESIpos, m/z): 499 (M+H)+.
【０１３６】
実施例８Ａ
１−（４−アミノ−２−メチルフェニル）−３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化４５】
0005537422.tif 000047
実施例７Ａの化合物５５５ｍｇ（１.１１ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ１５ｍｌに溶解し、パラジウム／炭素１５０ｍｇを添加し、水素雰囲気中、大気圧で、理論量の水素が取り込まれるまで混合物を水素化する。触媒を濾過し、減圧下で濃縮した後、表題化合物５２０ｍｇ（理論値の９９％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 7.70-7.63 (m, 5H), 7.51-7.41 (m, 6H), 7.40-7.36 (m, 1H), 6.78 (d, 1H), 6.47-6.41 (m, 2H), 6.38 (t, 1H), 5.22 (s, ブロード, 2H), 4.59-4.48 (m, 2H), 1.81 (s, 3H), 1.06 (s, 9H).
HPLC (方法 5): Rt = 3.20 分.
MS (ESIpos, m/z): 469 (M+H)+.
【０１３７】
実施例９Ａ
Ｎ−［（（５Ｓ）−３−｛４−［３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−メチル−フェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル）メチル］−５−クロロチオフェン−２−カルボキサミド
【化４６】
0005537422.tif 000048
実施例８Ａの化合物５２２ｍｇ（１.１１ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル１０ｍｌに溶解し、実施例１Ａの化合物２６６ｍｇ（１.２２ｍｍｏｌ）を０℃で添加する。過塩素酸マグネシウム３７３ｍｇ（１.６７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で２０時間撹拌する。次いで、１,１'−カルボニルジイミダゾール２７１ｍｇ（１.６７ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ１４ｍｇ（０.１１ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を６０℃で２０時間加熱する。次いで、混合物を減圧下で濃縮し、水およびｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを添加する。混合物を酢酸エチルで２回抽出する。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮する。残渣を分取ＨＰＬＣにより精製する。これにより、所望の生成物５６２ｍｇ（理論値の７１％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.97 (t, 1H), 7.74-7.63 (m, 6H), 7.58-7.41 (m, 9H), 7.23 (d, 1H), 7.19 (d, 1H), 6.45 (t, 1H), 4.89-4.80 (m, 1H), 4.58-4.49 (m, 2H), 4.21 (t, 1H), 3.90-3.83 (m, 1H), 3.63-3.58 (m, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.07 (s, 9H).
HPLC (方法 4): Rt = 3.39 分.
MS (ESIpos, m/z): 712/714 (35Cl/37Cl) (M+H)+.
【０１３８】
実施例１０Ａ
３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−１（２メトキシ−４−ニトロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化４７】
0005537422.tif 000049
実施例４Ａと同様に、実施例３Ａの化合物５.００ｇ（１３.８ｍｍｏｌ）を、１−フルオロ−２−メトキシ−４−ニトロベンゼン２.５９ｇ（１５.１ｍｍｏｌ）と反応させる。生成物をシリカゲルのクロマトグラフィー（移動相ペンタン／酢酸エチル＝５：１）により精製し、表題化合物２.７０ｇ（理論値の３８％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 7.97 (d, 1H), 7.92 (dd, 1H), 7.74-7.70 (m, 1H), 7.68-7.64 (m, 4H), 7.61 (d, 1H), 7.52-7.43 (m, 7H), 6.46 (t, 1H), 4.54 (s, 2H), 3.88 (s, 3H), 1.07 (s, 9H).
HPLC (方法 5): Rt = 3.32 分.
MS (ESIpos, m/z): 515 (M+H)+.
【０１３９】
実施例１１Ａ
１−（４−アミノ−２−メトキシフェニル）−３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化４８】
0005537422.tif 000050
実施例１０Ａの化合物２.６０ｇ（５.０５ｍｍｏｌ）を、実施例８Ａと同様に水素化する。これにより、表題化合物２.４０ｇ（理論値の９５％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 7.70-7.61 (m, 5H), 7.51-7.42 (m, 6H), 7.34-7.31 (m, 1H), 6.79 (d, 1H), 6.35-6.29 (m, 2H), 6.15 (dd, 1H), 5.35 (s, ブロード, 2H), 4.50 (s, 2H), 3.60 (s, 3H), 1.06 (s, 9H).
HPLC (方法 5): Rt = 3.13 分.
MS (ESIpos, m/z): 485 (M+H)+.
【０１４０】
実施例１２Ａ
Ｎ−［（（５Ｓ）−３−｛４−［３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−メトキシフェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル）メチル］−５−クロロチオフェン−２カルボキサミド
【化４９】
0005537422.tif 000051
実施例６Ａと同様に、実施例１１Ａの化合物２.３０ｇ（４.７５ｍｍｏｌ）を、実施例１Ａの化合物と反応させる。生成物をシリカゲルのクロマトグラフィー（移動相：ジクロロメタン／メタノール＝２５：１）により精製する。これにより、所望の生成物３.１０ｇ（理論値の８８％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.98 (t, 1H), 7.71-7.63 (m, 6H), 7.52-7.38 (m, 8H), 7.25 (d, 1H), 7.20 (d, 1H), 7.10 (dd, 1H), 6.40 (t, 1H), 4.90-4.82 (m, 1H), 4.52 (s, 2H), 4.24 (t, 1H), 3.89 (dd, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.64-3.59 (m, 2H), 1.07 (s, 9H).
HPLC (方法 3): Rt = 3.17 分.
MS (ESIpos, m/z): 728/730 (35Cl/37Cl) (M+H)+.
【０１４１】
実施例１３Ａ
３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−１−［４−ニトロ−２−（トリフルオロメチル）フェニル］ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化５０】
0005537422.tif 000052
実施例４Ａと同様に、実施例３Ａの化合物１.５０ｇ（４.１３ｍｍｏｌ）を、１−フルオロ−４−ニトロ−２−（トリフルオロメチル）ベンゼン９４９ｍｇ（４.５４ｍｍｏｌ）と反応させる。生成物をシリカゲルのクロマトグラフィー（移動相ペンタン／酢酸エチル＝５：１）により精製し、表題化合物１.００ｇ（理論値の４４％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.65 (dd, 1H), 8.61 (d, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.78-7.74 (m, 1H), 7.67-7.63 (m, 4H), 7.61-7.58 (m, 1H), 7.62-7.41 (m, 6H), 6.52 (t, 1H), 4.58-4.50 (m, 2H), 1.06 (s, 9H).
HPLC (方法 4): Rt = 3.40 分.
MS (ESIpos, m/z): 553 (M+H)+.
【０１４２】
実施例１４Ａ
１−［４−アミノ−２−（トリフルオロメチル）フェニル］−３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化５１】
0005537422.tif 000053
実施例１３Ａの化合物１.００ｇ（１.８１ｍｍｏｌ）を、実施例８Ａと同様に水素化する。これにより、表題化合物９３０ｍｇ（理論値の９８％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 7.70-7.62 (m, 5H), 7.51-7.37 (m, 7H), 7.04 (d, 1H), 6.95 (d, 1H), 6.82 (dd, 1H), 6.37 (t, 1H), 5.85 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 1.06 (s, 9H).
HPLC (方法 3): Rt = 3.13 分.
MS (ESIpos, m/z): 523 (M+H)+.
【０１４３】
実施例１５Ａ
Ｎ−［（（５Ｓ）−３−｛４−［３−（｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝メチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−（トリフルオロメチル）フェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル）メチル］−５−クロロチオフェン−２−カルボキサミド
【化５２】
0005537422.tif 000054
実施例６Ａと同様に、実施例１４Ａの化合物９３０ｍｇ（１.７８ｍｍｏｌ）を、実施例１Ａの化合物と反応させる。生成物を分取ＨＰＬＣにより精製する。これにより、所望の生成物４０５ｍｇ（理論値の２８％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.97 (t, 1H), 8.11 (dd, 1H), 7.82 (dd, 1H), 7.75-7.71 (m, 1H), 7.68 (d, 1H), 7.67-7.63 (m, 4H), 7.55 (d, 1H), 7.53-7.41 (m, 7H), 7.19 (d, 1H), 6.45 (t, 1H), 4.93-4.85 (m, 1H), 4.57-4.48 (m, 2H), 4.29 (dt, 1H), 3.98-3.92 (m, 1H), 3.66-3.60 (m, 2H), 1.06 (s, 9H).
HPLC (方法 3): Rt = 3.25 分.
MS (ESIpos, m/z): 766/768 (35Cl/37Cl) (M+H)+.
【０１４４】
実施例１６Ａ
３−ブロモ−１−（２−クロロ−４−ニトロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化５３】
0005537422.tif 000055
３−ブロモピリジン−２（１Ｈ）−オン（O. S. Tee, M. Pavent, J. Am. Chem. Soc. 1982, 104, 4142-4146）２.００ｇ（１１.５ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ４０ｍｌに溶解する。混合物を０℃に冷却し、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド２.０４ｇ（１７.２ｍｍｏｌ、９５％濃度）を添加する。約１５分後、氷浴を除去し、さらに３０分後、２−クロロ−１−フルオロ−４−ニトロベンゼン２.２２ｇ（１２.６ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で４時間撹拌する。次いで、混合物を水に添加し、酢酸エチルで３回抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液と振盪し、硫酸ナトリウムで乾燥させる。溶媒を減圧下で除去し、残渣をペンタンに懸濁し、吸引濾過する。得られる固体をシクロヘキサン／酢酸エチル１０：１と共に沸騰させる。生成物を吸引濾過し、シクロヘキサン／酢酸エチル１０：１で洗浄する。これにより、所望の化合物２.５４ｇ（理論値の６７％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.57 (d, 1H), 8.37 (dd, 1H), 8.11 (dd, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.73 (dd, 1H), 6.39 (t, 1H).
HPLC (方法 3): Rt = 1.76 分.
MS (ESIpos, m/z): 329/331 (35Cl/37Cl) (M+H)+.
【０１４５】
実施例１７Ａ
１−（４−アミノ−２−クロロフェニル）−３−ブロモピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化５４】
0005537422.tif 000056
実施例１６Ａの化合物２.００ｇ（６.０７ｍｍｏｌ）を、メタノール８０ｍｌに溶解する。塩化スズ二水和物６.８３ｇ（３０.３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を還流下で２時間加熱する。次いで、溶液を濃縮する。残渣を、シリカゲルでのカラム濾過（移動相ジクロロメタン：メタノール＝２５：１）の後に、酢酸エチルに溶解し、飽和重炭酸ナトリウム溶液と振盪する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮する。これにより、表題化合物１.６０ｍｇ（理論値の８７％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.00 (dd, 1H), 7.56 (dd, 1H), 7.08 (d, 1H), 6.73 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 6.22 (t, 1H), 5.71 (s, 2H).
HPLC (方法 5): Rt = 1.69 分.
MS (ESIpos, m/z): 299/301 (35Cl/37Cl) (M+H)+.
【０１４６】
実施例１８Ａ
Ｎ−（｛（５Ｓ）−３−［４−（３−ブロモ−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）−３クロロフェニル］−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）−５クロロチオフェン−２−カルボキサミド
【化５５】
0005537422.tif 000057
実施例１７Ａの化合物１.６０ｇ（５.３４ｍｍｏｌ）を、先ず、アセトニトリル２５ｍｌに０℃で加え、実施例１Ａの化合物１.２８ｇ（５.８８ｍｍｏｌ）を添加する。過塩素酸マグネシウム１.７９ｇ（８.０１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で２０時間撹拌する。次いで、さらに０.３８ｇ（１.７６ｍｍｏｌ）の実施例１Ａの化合物および０.５４ｇ（２.４ｍｍｏｌ）の過塩素酸マグネシウムを添加し、混合物をさらに２０時間撹拌する。次いで、ＣＤＩ１.３０ｇ（８.０１ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ６５ｍｇ（０.５３ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を６０℃で２０時間加熱し、次いで減圧下で濃縮し、水および酢酸エチルを添加する。有機相を除去し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮する。生成物をメタノールから再結晶する。これにより、表題化合物１.３２ｇ（理論値の４５％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.97 (t, 1H), 8.06 (dd, 1H), 7.88 (dd, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.66-7.56 (m, 3H), 7.20 (d, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.92-4.85 (m, 1H), 4.25 (t, 1H), 3.91 (dd, 1H), 3.65-3.60 (m, 2H).
HPLC (方法 4): Rt = 2.37 分.
【０１４７】
実施例１９Ａ
３−アリル−１−（２−クロロ−４−ニトロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化５６】
0005537422.tif 000058
実施例１６Ａの化合物１.００ｇ（３.０３ｍｍｏｌ）、フッ化セシウム９２２ｍｇ（６.０７ｍｍｏｌ）、および［１,１‘−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］パラジウムジクロリド１２４ｍｇ（１５２ｍｍｏｌ）を、先ず、脱気したＴＨＦ２０ｍｌに加える。２−アリル−４,４,５,５テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン７６５ｍｇ（４.５５ｍｍｏｌ）を滴下して添加し、混合物を還流で終夜加熱する。飽和重炭酸ナトリウム溶液を添加し、混合物を酢酸エチルで３回抽出する。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮する。生成物を分取ＨＰＬＣにより精製し、表題化合物６１６ｍｇ（理論値の７０％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.54 (d, 1H), 8.34 (dd, 1H), 7.86 (d, 1H), 7.50 (dd, 1H), 7.42-7.39 (m, 1H), 6.37 (t, 1H), 6.01-5.90 (m, 1H), 5.15-5.06 (m, 2H), 3.20 (d, 2H).
HPLC (方法 5): Rt = 2.22 分.
MS (ESIpos, m/z): 291/293 (35Cl/37Cl) (M+H)+.
【０１４８】
実施例２０Ａ
３−アリル−１−（４−アミノ−２−クロロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化５７】
0005537422.tif 000059
実施例１７Ａと同様に、実施例１９Ａの化合物８１５ｍｇ（２.８０ｍｍｏｌ）を、塩化スズで還元する。これにより、表題化合物７３７ｍｇ（理論値の９９％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 7.34-7.27 (m, 2H), 7.02 (d, 1H), 6.72 (d, 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.21 (t, 1H), 6.00-5.89 (m, 1H), 5.64 (s, ブロード, 2H), 5.13-5.04 (m, 2H), 3.16 (d, 2H).
HPLC (方法 3): Rt = 1.70 分.
MS (ESIpos, m/z): 261/263 (35Cl/37Cl) (M+H)+.
【０１４９】
実施例２１Ａ
Ｎ−（｛（５Ｓ）−３−［４−（３−アリル−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル）−３クロロフェニル］−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）−５クロロチオフェン−２−カルボキサミド
【化５８】
0005537422.tif 000060
実施例１８Ａと同様に、実施例２０Ａの化合物７３５ｍｇ（２.８２ｍｍｏｌ）を、実施例１Ａの生成物と反応させる。生成物をメタノールからの再結晶により精製する。これにより、所望の生成物８２６ｍｇ（理論値の５８％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.98 (t, 1H), 7.86 (d, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.62-7.57 (m, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.43-7.39 (m, 1H), 7.37-7.34 (m, 1H), 7.20 (d, 1H), 6.30 (t, 1H), 6.01-5.90 (m, 1H), 5.14-5.07 (m, 2H), 4.92-4.85 (m, 1H), 4.25 (t, 1H), 3.90 (dd, 1H), 3.65-3.60 (m, 2H), 3.19 (d, 2H).
HPLC (方法 3): Rt = 2.22 分.
MS (ESIpos, m/z): 504/506/508 (35Cl2/35Cl37Cl/37Cl2) (M+H)+.
【０１５０】
実施例２２Ａ
３−ブロモ−１−（２−メチル−４−ニトロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化５９】
0005537422.tif 000061
３−ブロモピリジン−２（１Ｈ）−オン４４.５ｇ（２８０ｍｍｏｌ）を、無水ジメチルスルホキシド７５０ｍｌに溶解し、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド３３.４ｇ（２９８ｍｍｏｌ）を少しずつ室温で添加する。懸濁液をこの温度で１時間撹拌し、次いで、１−フルオロ−２−メチル−４−ニトロベンゼン３８.５ｇ（２８０ｍｍｏｌ）を添加し、反応溶液を８０℃で２０時間加熱する。溶液を放冷し、注意深く水で希釈する。得られる結晶性沈殿を濾過し、少量の水で洗浄し、減圧下で乾燥させる。これにより、所望の生成物６２ｇ（理論値の８０％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.34 (d, 1H), 8.21 (dd, 1H), 8.10 (dd, 1H), 7.71-7.63 (m, 2H), 6.36 (t, 1H), 2.17 (s, 3H).
LC-MS (方法 3): Rt = 1.72 分 
MS (ESIpos): m/z = 309 (M+H)+
【０１５１】
実施例２３Ａ
１−（２−メチル−４−ニトロフェニル）−３−ビニルピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化６０】
0005537422.tif 000062
実施例２２Ａの化合物５０ｇ（１６２ｍｍｏｌ）を、無水ジオキサン７００ｍｌに溶解し、トリブチルビニルスズ６２ｇ（１９４ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム４.７ｇ（４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を還流で１５時間加熱する。混合物を放冷し、珪藻土で濾過する。濾過ケーキを酢酸エチルで洗浄し、合わせた濾液を減圧下で蒸発乾固する。残渣をシリカゲルにアプライし、シリカゲル８００ｇで、シクロヘキサンと酢酸エチルのグラジエントを使用してクロマトグラフィーする。これにより、所望の生成物２７ｇ（理論値の６２％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.35 (d, 1H), 8.2 (dd, 1H), 7.75 (dd, 1H), 7.60 (d, 1H), 7.55 (dd, 1H), 6.75 (dd, 1H), 6.45 (t, 1H), 6.15 (dd, 1H), 5.3 (dd, 1H), 2.17 (s, 3H).
LC-MS (方法 4): Rt = 1.86 分 
MS (ESIpos): m/z = 257 (M+H)+
【０１５２】
実施例２４Ａ
３−（２−ヒドロキシエチル）−１−（２−メチル−４−ニトロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化６１】
0005537422.tif 000063
氷冷しながら、テトラヒドロフラン６５０ｍｌ中の９−ボラビシクロ［３.３.１］ノナン４０ｇ（３２６ｍｍｏｌ）の溶液を、４５分間かけて、実施例２３Ａの化合物３８ｇ（１４８ｍｍｏｌ）に添加する。混合物をこの温度でさらに１時間撹拌し、次いで、水７４０ｍｌ中の水酸化ナトリウム３０ｇ（７４７ｍｍｏｌ）の溶液を、１５分間かけて添加する。濃度３０％の過酸化水素溶液１５１ｍｌを、温度が３０℃を超えないように添加する。添加終了後、冷却を止め、撹拌をさらに３０分間継続する。混合物を酢酸エチルで繰り返し抽出し、合わせた有機相を二亜硫酸ナトリウム７８０ｇ（１.６３ｍｏｌ）の溶液で洗浄し、有機相を分離し、水相を再度酢酸エチルで抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で蒸発乾固する。残渣をシリカゲルにアプライし、シクロヘキサンと酢酸エチルのグラジエントを使用してクロマトグラフィーする。生成物を含有する画分を合わせ、減圧下で乾燥するまで濃縮する。これにより、所望の生成物３８ｇ（理論値の９３％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.33 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.48-7.40 (m, 2H), 6.33 (t, 1H), 4.58 (t, 1H), 3.62-3.50 (m, 2H), 2.62 (t, 2H), 2.15 (s, 3H).
LC-MS (方法 6): Rt = 1.57 分 
MS (ESIpos): m/z = 275 (M+H)+
【０１５３】
実施例２５Ａ
３−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝エチル）−１−（２−メチル−４−ニトロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化６２】
0005537422.tif 000064
実施例２４Ａの化合物３８ｇ（１３８ｍｍｏｌ）を、無水Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド２００ｍｌに溶解し、イミダゾール１２.２ｇ（１９８ｍｍｏｌ）および、少しずつ、ｔｅｒｔ−ブチル（クロロ）ジフェニルシラン４６ｇ（１３５ｍｍｏｌ）を０℃で添加する。混合物を終夜撹拌し、次いで水で希釈し、酢酸エチルで３回抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で２回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させる。残渣をシリカゲルにアプライし、シクロヘキサンと酢酸エチルのグラジエントを使用してクロマトグラフィーする。生成物を含有する画分を合わせ、減圧下で蒸発乾固する。これにより、所望の生成物６２ｇ（理論値の８８％）を得る。
LC-MS (方法 5): Rt = 3.18 分 
MS (ESIpos): m/z = 483 (M+H)+
【０１５４】
実施例２６Ａ
１−（４−アミノ−２−メチルフェニル）−３−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝エチル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化６３】
0005537422.tif 000065
実施例２５Ａの化合物６２ｇ（１２１ｍｍｏｌ）を、エタノールと酢酸エチルの１：１混合物２ｌに溶解し、ギ酸アンモニウム４６ｇ（７２６ｍｍｏｌ）およびパラジウム／炭素０.６ｇを添加する。混合物を８０℃で加熱する。４５分後、混合物を放冷し、シリカゲルで濾過する。濾過ケーキを酢酸エチルで洗浄し、濾液を減圧下で蒸発乾固する。これにより、所望の生成物３６ｇ（理論値の６１％）を得る。
LC-MS (方法 7): Rt = 1.84 分 
MS (ESIpos): m/z = 221 (M+H)+
【０１５５】
実施例２７Ａ
Ｎ−［（（５Ｓ）−３−｛４−［３−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝エチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−メチル−フェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル）メチル］−５−クロロチオフェン−２−カルボキサミド
【化６４】
0005537422.tif 000066
実施例２６Ａの化合物３５.６ｇ（７４.１ｍｍｏｌ）を、無水アセトニトリル８００ｍｌに溶解し、実施例１Ａの化合物１９ｇ（８９ｍｍｏｌ）を０℃で添加する。過塩素酸マグネシウム２５ｇ（１１０ｍｍｏｌ）を添加し、冷却を止め、混合物を室温で１５時間撹拌する。１,１−カルボニルジイミダゾール２４ｍｇ（１４８ｍｍｏｌ）およびＮ,Ｎ−ジメチルアミノピリジン１８０ｍｇ（１.４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を還流で２時間加熱する。混合物を放冷し、溶媒を減圧下で留去する。次いで、残渣を酢酸エチルに取り、水で、そして、飽和塩化ナトリウム溶液で３回洗浄する。硫酸マグネシウムで乾燥させた後、混合物を濾過し、減圧下で蒸発乾固する。残渣をシリカゲルにアプライし、シクロヘキサンと酢酸エチルのグラジエントを使用してクロマトグラフィーする。生成物を含有する画分を合わせ、減圧下で蒸発乾固する。これにより、所望の生成物４６.４ｇ（理論値の８４％）を得る。
LC-MS (方法 5): Rt = 3.31 分 
MS (ESIpos): m/z = 700 (M+H)+
【０１５６】
実施例２８Ａ
３−ブロモ−１−（２−メトキシ−４−ニトロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化６５】
0005537422.tif 000067
３−ブロモピリジン−２（１Ｈ）−オン７０ｇ（４０３ｍｍｏｌ）を、無水ジメチルスルホキシド１ｌに溶解し、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド５４ｇ（４８４ｍｍｏｌ）を室温で添加する。懸濁液をこの温度で１時間撹拌する。１−フルオロ−２−メトキシ−４−ニトロベンゼン６９ｇ（４０３ｍｍｏｌ）を添加し、反応溶液を８０℃で２０時間加熱する。注意深く、混合物を水５ｌで希釈する。沈殿した固体を濾過し、水で洗浄し、減圧下で乾燥させる。これにより、所望の生成物１０３ｇ（理論値の７２％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.05 (dd, 1H), 8.1 (d, 1H), 7.95 (dd, 1H), 7.7 (d, 1H), 7.6 (dd, 1H), 6.3 (t, 1H), 3.9 (s, 3H).
MS (ESIpos): m/z = 342 (M+NH4)+
【０１５７】
実施例２９Ａ
１−（２−メトキシ−４−ニトロフェニル）−３−ビニルピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化６６】
0005537422.tif 000068
実施例２８Ａの化合物１００ｇ（３０８ｍｍｏｌ）を、無水ジオキサン１.４ｌに溶解し、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム８.９ｇ（７.７ｍｍｏｌ）およびトリブチルビニルスズ１１７ｇ（３７０ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を還流で１６時間加熱する。次いで、反応溶液を放冷し、珪藻土で濾過する。濾液を減圧下で乾燥するまで濃縮する。シクロヘキサンと酢酸エチルのグラジエントを使用して、残渣をシリカゲルでクロマトグラフィーする。生成物を含有する画分を合わせ、減圧下で乾燥するまで濃縮する。結晶化が起こるまで石油エーテルを添加する。結晶を濾過し、減圧下で乾燥させる。これにより、所望の生成物３７ｇ（理論値の４１％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ =  8.0 (m, 2H), 7.7 (m, 2H), 7.5 (dd, 1H), 6.7 (q, 1H), 6.4 (t, 1H), 6.1 (dd, 1H), 5.3 (dd, 1H), 3.9 (s, 3H).
MS (ESIpos): m/z = 273 (M+H)+
【０１５８】
実施例３０Ａ
３−（２−ヒドロキシエチル）−１−（２−メトキシ−４−ニトロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化６７】
0005537422.tif 000069
０℃で、テトラヒドロフラン６００ｍｌ中の９−ボラビシクロ［３.３.１］ノナン３６ｇ（２９９ｍｍｏｌ）の溶液を、４５分間かけて、実施例２９Ａの化合物３７ｇ（１３６ｍｍｏｌ）に添加する。この温度でさらに１時間後、水酸化ナトリウム溶液（１Ｎ、水中）２７ｇ（６８０ｍｍｏｌ）を１５分間かけて添加する。混合物をさらに５分間撹拌し、次いで、濃度３０％の過酸化水素溶液１２５ｍｌを、温度が３０℃を超えないように添加する。冷却を止め、混合物をさらに３０分間撹拌する。混合物を酢酸エチルで繰り返し抽出し、合わせた有機相を、二亜硫酸ナトリウム溶液７３０ｇ（１.５０ｍｏｌ）で洗浄し、有機相を分離し、水相を酢酸エチルで再抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で蒸発乾固する。残渣をシリカゲルに吸収させ、シクロヘキサンと酢酸エチルのグラジエントを使用してクロマトグラフィーする。生成物画分を合わせ、減圧下で蒸発乾固する。結晶化のために、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを添加する。結晶を濾過し、減圧下で乾燥させる。これにより、所望の生成物２４ｇ（理論値の６０％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.0 (d, 1H), 7.95 (dd, 1H), 7.6 (d, 1H), 7.4 (d, 1H), 6.35 (t, 1H), 4.6 (t, 1H), 3.9 (s, 3H), 3.55 (m, 2H), 2.6 (m, 2H).
MS (ESIpos): m/z = 291 (M+H)+
【０１５９】
実施例３１Ａ
３−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝エチル）−１−（２−メトキシ−４−ニトロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化６８】
0005537422.tif 000070
実施例３０Ａの化合物２４ｇ（８１ｍｍｏｌ）を、無水Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド２００ｍｌに溶解し、イミダゾール７.２ｇ（１０６ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル（クロロ）ジフェニルシラン２７ｇ（９８ｍｍｏｌ）を添加する。１６時間後、混合物を水１.２ｌで希釈し、酢酸エチルで３回抽出する。合わせた有機相を水で２回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮する。結晶化のために、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを添加し、得られる結晶を濾過し、減圧下で乾燥させる。これにより、所望の生成物３０ｇ（理論値の６７％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.0 (d, 1H), 7.95 (dd, 1H), 7.6-7.5 (m, 5H), 7.5-7.4 (m, 8H), 6.35 (t, 1H), 3.8 (m, 5H), 2.7 (m, 2H), 1.0 (s, 9H).
【０１６０】
実施例３２Ａ
１−（４−アミノ−２−メトキシフェニル）−３−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝エチル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化６９】
0005537422.tif 000071
実施例３１Ａの化合物２５ｇ（４８ｍｍｏｌ）を、エタノールと酢酸エチルの１：１混合物８００ｍｌに溶解し、ギ酸アンモニウム１８ｇ（２８６ｍｍｏｌ）およびパラジウム／炭素８００ｍｇを添加する。混合物を８０℃で加熱する。６０分後、混合物を放冷し、シリカゲルで濾過する。濾過ケーキを酢酸エチルで洗浄し、濾液を減圧下で乾燥するまで濃縮する。これにより、所望の生成物２７ｇ（理論値の９８％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 7.6 (m, 4H), 7.4 (m, 6H), 7.3 (dd, 1H), 7.25 (dd, 1H), 6.75 (d, 1H), 6.3 (d, 1H), 6.2 (dd, 1H), 6.1 (t, 1H), 5.3 (b, 2H), 3.8 (m, 2H), 3.6 (s, 3H), 2.7 (m, 2H), 1.0 (s, 9H).
MS (ESIpos): m/z = 499 (M+H)+
【０１６１】
実施例３３Ａ
Ｎ−｛［（５Ｓ）−３−｛４−［３−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝エチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−メトキシ−フェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル］メチル｝−５−クロロチオフェン−２−カルボキサミド
【化７０】
0005537422.tif 000072
実施例３２Ａの化合物２９ｇ（５８ｍｍｏｌ）を、無水アセトニトリル６００ｍｌに溶解し、実施例１Ａの化合物１５ｇ（６９ｍｍｏｌ）を０℃で添加する。過塩素酸マグネシウム１９ｇ（８７ｍｍｏｌ）を添加し、冷却を止め、混合物を室温で１５時間撹拌する。次いで、１,１−カルボニルジイミダゾール１９.０ｇ（１１６ｍｍｏｌ）およびＮ,Ｎ−ジメチルアミノピリジン１４１ｍｇ（１.２１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を還流で加熱する。２時間後、混合物を放冷し、溶媒を減圧下で留去する。残渣を酢酸エチルに取り、水で洗浄し、飽和塩化ナトリウム溶液で３回洗浄する。硫酸マグネシウムで乾燥させた後、混合物を濾過し、減圧下で蒸発乾固する。残渣をシリカゲルで、シクロヘキサンと酢酸エチルのグラジエントを使用してクロマトグラフィーする。生成物を含有する画分を合わせ、減圧下で乾燥するまで濃縮する。これにより、所望の生成物３７ｇ（理論値の８５％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ = 9.0 (t, 1H), 7.7 (d, 1H), 7.6 (m, 4H), 7.5-7.3 (m, 9H), 7.2 (m, 2H), 7.1 (m, 1H), 6.2 (t, 1H), 4.8 (m, 1H), 4.4 (t, 1H), 3.9 (m, 1H), 3.8 (b, 2H), 3.7 (s, 3H), 3.65 (m, 2H), 2.7 (m, 2H), 1.0 (s, 9H).
LC-MS (方法 8): Rt = 4.53 分 
MS (ESIpos): m/z = 742 (M+H)+
【０１６２】
実施例３４Ａ
２−（ブロモメチル）−１−フルオロ−４−ニトロベンゼン
【化７１】
0005537422.tif 000073
２−フルオロ−５−ニトロトルエン１８６ｇ（１.２０ｍｏｌ）を、四塩化炭素１.２ｌに溶解し、Ｎ−ブロモスクシンイミド２１４ｇ（１.２０ｍｏｌ）を添加する。アゾジイソブチロニトリル１９.７ｇ（１２０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を還流下で加熱する。１６時間後、混合物を放冷し、濾過し、減圧下で蒸発乾固する。残渣をジクロロメタン３００ｍｌに溶解し、シーサンド（sea sand）３００ｇを添加する。次いで、もう一度、混合物を減圧下で乾燥するまで濃縮し、残渣を１ｋｇのシリカゲルカラムにアプライする。シクロヘキサンと酢酸エチルの２０：１混合物を使用して生成物をクロマトグラフィーし、生成物画分を減圧下で蒸発乾固する。残渣をシクロヘキサンで結晶化し、減圧下で乾燥させる。これにより、所望の生成物９２ｇ（理論値の３２％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.57-8.52 (m, 1H), 8.33-8.27 (m, 1H), 7.56 (t, 1H), 4.62 (s, 2H).
GC-MS (方法 9): Rt = 7.79 分 
MS (ESIpos): m/z = 154 (M-Br)+
【０１６３】
実施例３５Ａ
１−フルオロ−２−（メトキシメチル）−４−ニトロベンゼン
【化７２】
0005537422.tif 000074
実施例３４Ａの化合物３０ｇ（１２８ｍｍｏｌ）を、無水トルエン１.３ｌに溶解し、酸化銀（Ｉ）４５ｇ（１９２ｍｍｏｌ）および無水メタノール２４.６ｇ（７６９ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を６０℃で１６時間加熱する。次いで、混合物を放冷し、シリカゲルで濾過する。シクロヘキサンとシクロヘキサン／酢酸エチル２５：１のグラジエントを使用して、生成物を分画的に溶出する。生成物画分を減圧下で蒸発乾固し、減圧下で乾燥させる。これにより、所望の生成物１７ｇ（理論値の７２％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.41-8.36 (m, 1H), 8.22-8.16 (m, 1H), 7.26 (t, 1H), 4.58 (s, 2H), 3.49 (s, 3H).
GC-MS (方法 9): Rt = 6.52 分 
MS (ESIpos): m/z = 154 (M-OCH3)+
【０１６４】
実施例３６Ａ
３−ブロモ−１−［２−（メトキシメチル）−４−ニトロフェニル］ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化７３】
0005537422.tif 000075
３−ブロモ−２−ヒドロキシピリジン３８ｇ（３９１ｍｍｏｌ）を、無水ジメチルスルホキシド１２５０ｍｌに溶解し、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド５３ｇ（４６９ｍｍｏｌ）を少しずつ添加する。混合物をさらに１時間撹拌し、次いで、実施例３５Ａの化合物７２.４ｇ（３９１ｍｍｏｌ）を添加する。添加終了後、混合物を８０℃で３時間加熱する。次いで、混合物を放冷し、撹拌を室温でさらに１６時間継続する。次いで、反応溶液を１５℃に冷却し、この温度でｐＨを注意深く１Ｎ塩酸でｐＨ＝３に調節する。水４ｌを添加し、混合物を酢酸エチル２ｌで３回抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させる。次いで、溶液を減圧下で蒸発乾固し、ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを結晶化のために添加する。結晶を濾過し、減圧下で乾燥させる。これにより、所望の生成物９４ｇ（理論値の７１％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.37 (d, 1H), 8.33 (dd, 1H), 8.10 (dd, 1H), 7.73-7.67 (m, 2H), 6.35 (t, 1H), 4.3 (q, 2H), 3.3 (s, 3H).
LC-MS (方法 6): Rt = 1.88 分 
MS (ESIpos): m/z = 339 (M+H+)+
【０１６５】
実施例３７Ａ
１−［２−（メトキシメチル）−４−ニトロフェニル］−３−ビニルピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化７４】
0005537422.tif 000076
実施例３６Ａの化合物９４ｇ（２７７ｍｍｏｌ）を、無水ジオキサン１.２ｌに溶解し、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）８ｇ（６.９ｍｍｏｌ）を添加する。室温で、トリブチルビニルスズ１０５ｇ（３３３ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加し、添加終了後、混合物を還流で２１時間加熱する。反応溶液を放冷し、珪藻土で濾過する。濾過ケーキを酢酸エチルで洗浄し、合わせた有機濾液を減圧下で乾燥するまで濃縮する。残っている残渣をジクロロメタンに溶解し、珪藻土にアプライする。生成物を１.２ｋｇのシリカゲルで、シクロヘキサンと酢酸エチルのグラジエントを使用してクロマトグラフィーする。生成物を含有する画分を合わせ、減圧下で乾燥するまで濃縮する。これにより、所望の生成物２３ｇ（理論値の２９％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.36 (d, 1H), 8.31 (dd, 1H), 7.77 (dd, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.56 (dd, 1H), 6.80-6.71 (m, 1H), 6.45 (t, 1H), 6.14 (dd, 1H), 5.33 (dd, 1H), 4.37-4.22 (m, 2H), 3.26 (s, 3H).
LC-MS (方法 6): Rt = 2.07 分 
MS (ESIpos): m/z = 387 (M+H+)+
【０１６６】
実施例３８Ａ
３−（２−ヒドロキシエチル）−１−［２−（メトキシメチル）−４−ニトロフェニル］ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化７５】
0005537422.tif 000077
実施例３７Ａの化合物２３ｇ（８０ｍｍｏｌ）を、無水テトラヒドロフラン８０ｍｌに溶解し、５℃に冷却する。１５分間かけて、９−ボラビシクロ［３.３.１］ノナン（０.５Ｍ溶液、テトラヒドロフラン中）２１ｇ（１７６ｍｍｏｌ）を添加する。冷却を止め、混合物を室温でさらに２時間撹拌する。次いで、混合物を再度５℃に冷却し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液４００ｍｌを添加する。添加終了後、３０％濃度過酸化水素溶液８１ｍｌをこの温度で少しずつ添加する。酢酸エチル５００ｍｌで希釈した後、混合物を４０％濃度重亜硫酸ナトリウム溶液３２ｍｌで洗浄して過酸化物を破壊する。有機相を分離し、水相を酢酸エチルで４回抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過後、減圧下で乾燥するまで濃縮する。残渣をシリカゲルで、シクロヘキサンと酢酸エチルのグラジエントを使用してクロマトグラフィーする。生成物を含有する画分を合わせ、減圧下で乾燥するまで濃縮する。これにより、所望の生成物２０ｇ（理論値の７７％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.36 (d, 1H), 8.30 (dd, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.45 (d, 1H), 6.33 (t, 1H), 4.60 (t, 1H), 4.35-4.20 (m, 2H), 3.62-3.55 (m, 2H), 3.32 (s, 3H), 2.62 (t, 2H).
LC-MS (方法 8): Rt = 1.60 分 
MS (ESIpos): m/z = 305 (M+H+)+
【０１６７】
実施例３９Ａ
３−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝エチル）−１−［２−（メトキシメチル）−４−ニトロフェニル］ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化７６】
0005537422.tif 000078
実施例３８Ａの化合物２０ｇ（６５ｍｍｏｌ）を、無水Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド７５ｍｌに溶解し、冷却しながら、先ずイミダゾール５.３ｇ（７８ｍｍｏｌ）を、次いで、少しずつ、３分間かけて、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルクロロシラン１９ｇ（７２ｍｍｏｌ）を添加する。冷却を止め、混合物を室温でさらに１９時間撹拌する。反応溶液を酢酸エチルで希釈し、水で３回、飽和塩化ナトリウム溶液で２回洗浄する。次いで、混合物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で乾燥するまで濃縮する。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを残渣に添加し、得られる結晶を濾過し、減圧下で乾燥させる。これにより、所望の生成物３９ｇ（理論値の９０％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.35 (d, 1H), 8.31 (dd, 1H), 7.65-7.35 (m, 13H), 6.35 (t, 1H), 4.32-4.14 (m, 2H), 3.92-3.80 (m, 2H), 3.32 (s, 3H), 2.78-2.71 (m, 2H), 0.97 (s, 9H).
LC-MS (方法 8): Rt = 4.59 分 
MS (ESIpos): m/z = 543 (M+H+)+
【０１６８】
実施例４０Ａ
１−［４−アミノ−２−（メトキシメチル）フェニル］−３−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝エチル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化７７】
0005537422.tif 000079
実施例３９Ａの化合物２５ｇ（４８ｍｍｏｌ）を、酢酸エチル５００ｍｌおよびエタノール５００ｍｌに溶解する。ギ酸アンモニウム１８ｇ（２８６ｍｍｏｌ）およびパラジウム／炭素１ｇを添加し、混合物を還流で４５分間加熱する。次いで、反応溶液を放冷し、シリカゲルで濾過する。濾液を減圧下で乾燥するまで濃縮する。これにより、所望の生成物２５ｇ（理論値の１００％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 7.65-7.20 (m, 12H), 6.79 (d, 1H), 6.68 (d, 1H), 6.54 (dd, 1H), 6.20 (t, 1H), 5.46-5.25 (m, 2H), 4.04-3.91 (m, 2H), 3.87-3.77 (m, 2H), 3.07 (s, 3H), 2.75-2.68 (m, 2H), 0.95 (s, 9H).
LC-MS (方法 6): Rt = 3.22 分 
MS (ESIpos): m/z = 513 (M+H+)+
【０１６９】
実施例４１Ａ
Ｎ−｛［（５Ｓ）−３−｛４−［３−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝エチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−（メトキシ−メチル）フェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル］メチル｝−５−クロロチオフェン−２−カルボキサミド
【化７８】
0005537422.tif 000080
実施例４０Ａの化合物２５ｇ（４７ｍｍｏｌ）を、無水アセトニトリル５００ｍｌに溶解し、実施例１Ａの化合物１５ｇ（６１ｍｍｏｌ）および過塩素酸マグネシウム１６ｇ（７１ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で５時間撹拌し、次いで、さらに１ｇ（４.１ｍｍｏｌ）の実施例１Ａの化合物を添加する。２１時間後、カルボニルジイミダゾール１５.３ｇ（９５ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン１１６ｍｇ（０.６５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を還流で３.５時間加熱する。次いで、溶媒を減圧下で除去し、残渣を酢酸エチル８００ｍｌに取る。溶液を水で洗浄し、飽和塩化ナトリウム溶液で２回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、次いで減圧下で濃縮する。残渣をシリカゲルで、シクロヘキサンと酢酸エチルのグラジエントを使用して分離する。生成物を含有する画分を合わせ、減圧下で乾燥するまで濃縮する。これにより、所望の生成物２６.５ｇ（理論値の７２％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 9.00 (t, 1H), 7.73-7.35 (m, 15H), 7.23 (d, 1H), 7.19 (d, 1H), 6.28 (t, 1H), 4.90-4.81 (m, 1H), 4.28-3.80 (m, 6H), 3.62 (t, 2H), 3.11 (s, 3H), 2.79-2.71 (m, 2H), 0.97 (s, 9H).
LC-MS (方法 6): Rt = 3.39 分 
MS (ESIpos): m/z = 756 (M+H+)+
【０１７０】
実施例４２Ａ
（２−フルオロ−５−ニトロベンジル）（トリフェニル）ホスホニウムブロミド
【化７９】
0005537422.tif 000081
実施例３４Ａの化合物２０ｇ（８５.５ｍｍｏｌ）を、無水トルエン２５０ｍｌに溶解し、トリフェニルホスフィン２２.４ｇ（８５.５ｍｍｏｌ）を添加する。溶液を還流下で１６時間加熱し、沈殿の形成をもたらす。混合物を放冷し、沈殿を濾過する。ジエチルエーテルで洗浄した後、沈殿を減圧下で乾燥させる。これにより、所望の生成物３９ｇ（理論値の９２％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.30-8.23 (m, 1H), 7.98-7.88 (m, 4H), 7.81-7.70 (m, 12H), 7.45 (t, 1H), 5.32 (d, 2H).
【０１７１】
実施例４３Ａ
１−フルオロ−４−ニトロ−２−［プロプ−１−エン−１−イル］ベンゼン
【化８０】
0005537422.tif 000082
１０℃で、ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド５.９９ｇ（３２.７ｍｍｏｌ）を、ジオキサン１４５ｍｌ中の実施例４２Ａの化合物１３.５ｇ（２７.３ｍｍｏｌ）の溶液に滴下して添加する。混合物をこの温度で１時間撹拌する。次いで、ジオキサン５ｍｌ中のアセトアルデヒド２.４０ｇ（５４.５ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、反応を室温で１時間撹拌する。次いで、水４００ｍｌを添加し、混合物をジクロロメタンで３回抽出し、合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で２回洗浄する。硫酸ナトリウムで乾燥させ、続いて濾過した後、溶媒を減圧下で除去する。生成物をシリカゲルのクロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル＝４０：１）により精製する。これにより、所望の生成物５.２ｇ（理論値の１００％）を、Ｅ／Ｚ異性体混合物として得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.47-8.05 (m, 2H), 7.58-7.42 (m, 1H), 6.70-6.05 (m, 2H), 1.90-1.78 (m, 3H).
GC-MS (方法 10): Rt = 2.64 および 2.70 分 
MS (ESIpos): m/z = 181 (M+H+)+
【０１７２】
実施例４４Ａ
３−ブロモ−１−｛４−ニトロ−２−［（１Ｅ）−プロプ−１−エン−１−イル］フェニル｝ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化８１】
0005537422.tif 000083
３−ブロモピリジン−２（１Ｈ）−オン０.９６ｇ（５.５２ｍｍｏｌ）を、ＤＭＳＯ１７ｍｌに溶解する。混合物を０℃に冷却し、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド１.００ｇ（５.５２ｍｍｏｌ）を、内部温度が３０℃を超えないように添加する。室温で１時間後、ＤＭＳＯ５ｍｌ中の実施例４３Ａの化合物１.００ｇ（５.５２ｍｍｏｌ）の溶液を添加する。８０℃で３時間後、水２００ｍｌおよび塩化ナトリウム溶液５０ｍｌを添加し、混合物を酢酸エチルで３回抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させる。溶媒を減圧下で除去し、生成物をシリカゲルのクロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル＝４：１）により精製する。これにより、所望の化合物９３５ｍｇ（理論値の４９％）を、Ｅ／Ｚ異性体混合物として得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.52-8.27 (m, 1H), 8.22-8.16 (m, 1H), 8.13-8.04 (m, 1H), 7.76-7.61 (m, 2H), 6.65-5.90 (m, 3H), 1.83-1.69 (m, 3H).
HPLC (方法 1): Rt = 4.20 分.
MS (DCI, m/z): 335 (M+H)+.
【０１７３】
実施例４５Ａ
１−｛４−ニトロ−２−［（１Ｅ）−プロプ−１−エン−１−イル］フェニル｝−３ビニルピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化８２】
0005537422.tif 000084
実施例４４Ａの化合物９２９ｍｇ（２.７７ｍｍｏｌ）を、無水ジオキサン１４ｍｌに溶解し、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）６４ｍｇ（０.０６ｍｍｏｌ）を添加する。室温で、トリブチルビニルスズ１.０６ｇ（３.３３ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加し、添加終了後、混合物を還流で２１時間加熱する。反応溶液を放冷し、珪藻土で濾過する。次いで、濾過ケーキを酢酸エチルで洗浄し、合わせた有機濾液を減圧下で乾燥するまで濃縮する。生成物をシリカゲルのクロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル＝４：１）により精製する。これにより、所望の生成物５６８ｍｇ（理論値の７０％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.52-8.24 (m, 1H), 8.21-8.14 (m, 1H), 7.78-7.58 (m, 2H), 6.79-6.68 (m, 1H), 6.65-6.52 (m, 1H), 6.47-6.38 (m, 1H), 6.20-5.90 (m, 3H), 5.39-5.28 (m, 1H), 1.83-1.70 (m, 3H).
HPLC (方法 1): Rt = 4.33 分 
MS (ESIpos): m/z = 283 (M+H+)+
【０１７４】
実施例４６Ａ
３−（２−ヒドロキシエチル）−１−｛４−ニトロ−２−［（１Ｅ）−プロプ−１−エン−１−イル］フェニル｝ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化８３】
0005537422.tif 000085
実施例４５Ａの化合物４５２ｇ（１.６０ｍｍｏｌ）を、無水テトラヒドロフラン１.７ｍｌに溶解し、０℃に冷却する。９−ボラビシクロ［３.３.１］ノナン（０.５Ｍ溶液、テトラヒドロフラン中）４８８ｍｇ（１７６ｍｍｏｌ）をゆっくりと添加し、混合物を室温で２時間撹拌する。次いで、混合物を再度０℃に冷却し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液８ｍｌをゆっくりと添加する。添加終了後、３０％濃度過酸化水素溶液１.６ｍｌをこの温度で滴下して添加する。混合物を０℃で３０分間撹拌し、次いで４０％濃度重亜硫酸ナトリウム溶液１.３ｍｌで洗浄して過酸化物を破壊し、酢酸エチル５００ｍｌで希釈する。有機相を除去し、水相を酢酸エチルで２回抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過後、減圧下で乾燥するまで濃縮する。生成物をシリカゲルのクロマトグラフィー（移動相：シクロヘキサン／酢酸エチル＝２：１）により精製する。これにより、所望の生成物５１４ｍｇ（理論値の１００％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.51-8.24 (m, 1H), 8.22-8.14 (m, 1H), 7.68-7.55 (m, 1H), 7.48-7.36 (m, 2H), 6.61-6.50 (m, 1H), 6.37-6.26 (m, 1H), 6.09-6.86 (m, 1H), 4.63-4.56 (m, 1H), 3.63-3.54 (m, 2H), 2.65-2.56 (m, 2H), 1.83-1.69 (m, 3H).
HPLC (方法 1): Rt = 3.71 分 
MS (ESIpos): m/z = 301 (M+H+)+
【０１７５】
実施例４７Ａ
１−（４−アミノ−２−プロピルフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化８４】
0005537422.tif 000086
実施例４６Ａの化合物５２０ｍｇ（１.７３ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ１０ｍｌに溶解する。パラジウム／炭素３０ｍｇを添加し、室温で、水素雰囲気中、大気圧下で混合物を水素化する。次いで、混合物を珪藻土で濾過し、濾過ケーキをＴＨＦで３回洗浄し、濾液から溶媒を除去する。反応生成物をさらに精製せずにさらに反応させる。これにより、所望の生成物４７１ｍｇ（理論値の８９％）を得る。
HPLC (方法 1): Rt = 3.00 分 
MS (ESIpos): m/z = 273 (M+H+)+
【０１７６】
実施例４８Ａ
３−アリル−１−（２−メチル−４−ニトロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化８５】
0005537422.tif 000087
加熱乾燥させたフラスコ中、実施例２２Ａの化合物１.５０ｇ（４.８５ｍｍｏｌ）、フッ化セシウム１.４４ｇ（９.４６ｍｍｏｌ）、および、テトラキス−（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）０.５６１ｇ（０.４８ｍｍｏｌ）を、先ず、脱気したＴＨＦに加える。脱気したＴＨＦ５ｍｌ中の２−アリル−４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン２.０４ｇ（１２.１ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して添加し、混合物を還流で終夜加熱する。次いで、混合物をジクロロメタンで希釈し、水を添加する。相分離後、水相をジクロロメタンで３回抽出する。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮する。生成物をシリカゲルのクロマトグラフィーにより精製し、表題化合物１.１８ｇ（理論値の６２％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.31 (d, 1H), 8.18 (dd, 1H), 7.57 (d, 1H), 7.46 (dd, 1H), 7.44-7.38 (m, 1H), 6.35 (t, 1H), 5.96 (dddd, 1H), 5.16-5.06 (m, 2H), 3.20 (d, 2H), 2.15 (s, 3H).
HPLC (方法 2): Rt = 4.05 分.
MS (ESIpos, m/z): 271 (M+H)+.
【０１７７】
実施例４９Ａ
３−（３−ヒドロキシプロピル）−１−（２−メチル−４−ニトロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化８６】
0005537422.tif 000088
０℃で、ＴＨＦ中の０.５モル濃度９−ボラビシクロ［３.３.１］ノナン溶液１８.５ｍｌ（９.２５ｍｍｏｌ）を、ゆっくりと滴下して、ＴＨＦ４ｍｌ中の実施例４８Ａの化合物１.００ｇ（３.７０ｍｍｏｌ）に添加する。室温で１時間後、混合物を再度０℃に冷却し、水中の１モル濃度水酸化ナトリウム溶液１８.５ｍｌ（１８.５ｍｍｏｌ）を滴下して添加する。混合物を０℃でさらに３０分間撹拌し、次いで、３０％濃度過酸化水素溶液３.２４ｍｌを、温度が３０℃を超えないように添加する。混合物を氷冷しながら３０分間撹拌し、次いで、酢酸エチル、続いて重亜硫酸ナトリウム溶液１１ｇ（４０ｍｍｏｌ）を添加する。有機相を分離し、水相を酢酸エチルで２回抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム水溶液で洗浄する。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、次いで、減圧下で蒸発乾固する。残渣をシリカゲルでクロマトグラフィーする（シクロヘキサン／酢酸エチル１：４）。これにより、所望の生成物１.０３ｇ（理論値の８３％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.31 (d, 1H), 8.18 (dd, 1H), 7.66-7.51 (m, 1H), 7.47-7.38 (m, 2H), 6.33 (t, 1H), 4.46 (t, 1H), 3.46-3.38 (q, 2H), 2.52-2.45 (m, 2H), 2.15 (s, 3H), 1.73-1.62 (m, 2H).
HPLC (方法 1): Rt = 3.51 分.
MS (DCI, m/z)  = 289 (M+H)+
【０１７８】
実施例５０Ａ
１−（４−アミノ−２−メチルフェニル）−３−（３−ヒドロキシプロピル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化８７】
0005537422.tif 000089
実施例４９Ａの化合物４７５ｍｇ（１.６５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ４８ｍｌに溶解する。次いで、パラジウム／炭素５０ｍｇ（０.０５ｍｍｏｌ）を添加し、室温で、水素雰囲気中、大気圧下で混合物を水素化する。次いで、混合物を濾過し、濾過ケーキをＴＨＦで３回洗浄し、濾液から溶媒を除去する。反応生成物をさらに精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 1): Rt = 2.82 分.
MS (DCI, m/z): 259 (M+H)+.
【０１７９】
実施例５１Ａ
３−ブロモ−１−（２,６−ジメチル−４−ニトロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化８８】
0005537422.tif 000090
３−ブロモピリジン−２（１Ｈ）−オン（O. S. Tee, M. Pavent, J. Am. Chem. Soc. 1982, 104, 4142-4146.）２.８１ｇ（１６.１ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ１００ｍｌに溶解する。混合物を０℃に冷却し、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド２.７１ｇ（２４.２ｍｍｏｌ）を添加する。氷浴を除去し、混合物を室温で３０分間撹拌する。１−フルオロ−２,５−ジメチル−４−ニトロベンゼン３.００ｇ（１７.７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を８０℃で１８時間、１００℃で３６時間、そして１２０℃で１８時間撹拌する。次いで、混合物を水に添加し、酢酸エチルで３回抽出する。合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させる。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル４：１）により精製する。これにより、所望の化合物２.０４ｇ（理論値の３８％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.19 (s, 2H), 8.14 (dd, 1H), 7.62 (dd, 1H), 6.43 (t, 1H), 2.11 (s, 6H).
HPLC (方法 1): Rt = 4.13 分.
MS (ESIpos, m/z): 323 (M+H)+.
【０１８０】
実施例５２Ａ
１−（２,６−ジメチル−４−ニトロフェニル）−３−ビニルピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化８９】
0005537422.tif 000091
実施例５１Ａの化合物２.００ｇ（６.１９ｍｍｏｌ）を、無水ジオキサン３１ｍｌに溶解し、トリブチルビニルスズ２.３６ｇ（７.４２ｍｍｏｌ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム１４３ｍｇ（０.１２４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で５時間撹拌する。混合物を放冷し、珪藻土で濾過する。濾過ケーキを酢酸エチルで３回洗浄し、合わせた濾液を減圧下で乾燥するまで濃縮する。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル４：１）により精製する。これにより、所望の生成物８４６ｍｇ（理論値の５１％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.17 (s, 2H), 7.78 (dd, 1H), 7.48 (dd, 1H), 6.75 (dd, 1H), 6.48 (dd, 1H), 6.14 (dd, 1H), 5.33 (dd, 1H), 2.10 (s, 6H).
HPLC (方法 1): Rt = 4.25 分 
MS (ESIpos): m/z = 271 (M+H)+
【０１８１】
実施例５３Ａ
１−（２,６−ジメチル−４−ニトロフェニル）−３−（２−ヒドロキシエチル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化９０】
0005537422.tif 000092
氷冷しながら、テトラヒドロフラン１４.８ｍｌ中の９−ボラビシクロ［３.３.１］ノナン９０２ｍｇ（７.４０ｍｍｏｌ）の溶液を、実施例５２Ａの化合物８００ｍｇ（２.９６ｍｍｏｌ）に添加する。混合物を室温で３時間撹拌し、次いで０℃に冷却し、水酸化ナトリウム５９１ｍｇ（１４.８ｍｍｏｌ）の水溶液を１５分間かけて添加する。３０％濃度過酸化水素溶液２.６０ｍｌを、温度が３０℃を超えないように添加する。添加終了後、混合物を０℃で３０分間撹拌する。氷冷しながら、水１２ｍｌ中の重亜硫酸ナトリウム８.７３ｇ（３２.６ｍｏｌ）の溶液を、反応混合物に添加する。混合物を酢酸エチル５０ｍｌで希釈し、有機相を除去し、水相を酢酸エチルで２回抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で蒸発乾固する。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル１：２）により精製する。これにより、所望の生成物７６５ｍｇ（理論値の８９％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.15 (s, 2H), 7.46 (dd, 1H), 7.35 (dd, 1H), 6.37 (dd, 1H), 4.62 (dd, 1H), 4.25 (d, 1H), 2.62 (dd, 2H), 2.08 (s, 6H).
HPLC (方法 1): Rt = 3.59 分 
MS (ESIpos): m/z = 289 (M+H)+
【０１８２】
実施例５４Ａ
３−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝エチル）−１−（２,６−ジメチル−４−ニトロフェニル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化９１】
0005537422.tif 000093
実施例５３Ａの化合物７６０ｍｇ（２.６４ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン０.５５ｍｌ（３.９ｍｍｏｌ）を無水Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド７ｍｌに溶解する。４−ジメチルアミノピリジン１６ｍｇ（０.１３ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチル（クロロ）ジフェニルシラン１.０９ｇ（３.９５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で２時間撹拌する。次いで、混合物を水に添加し、相分離後、酢酸エチルで３回抽出する。合わせた有機相を水で２回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で蒸発させる。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル５：１）により精製する。これにより、所望の生成物９７１ｍｇ（理論値の５８％）を得る。
HPLC (方法 2): Rt = 5.97 分 
MS (ESIpos): m/z = 527 (M+H)+
【０１８３】
実施例５５Ａ
１−（４−アミノ−２,６−ジメチルフェニル）−３−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝エチル）ピリジン−２（１Ｈ）−オン
【化９２】
0005537422.tif 000094
実施例５４Ａの化合物９７０ｍｇ（１.８４ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ２０ｍｌに溶解する。次いで、パラジウム／炭素２００ｍｇを添加し、室温で、水素雰囲気中、大気圧下で混合物を水素化する。次いで、混合物を珪藻土で濾過し、濾過ケーキをＴＨＦで３回洗浄し、濾液から溶媒を除去する。反応生成物（１.００ｇ）を、さらに精製せずにさらに反応させる。
HPLC (方法 2): Rt = 4.99 分 
MS (ESIpos): m/z = 497 (M+H)+
【０１８４】
実施例５６Ａ
Ｎ−［（（５Ｓ）−３−｛４−［３−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝エチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３,５−ジメチル−フェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル）メチル］−５−クロロチオフェン−２−カルボキサミド
【化９３】
0005537422.tif 000095
実施例５５Ａの化合物８００ｍｇ（１.６１ｍｍｏｌ）を、無水アセトニトリル１５ｍｌに溶解し、実施例１Ａの化合物３８５ｇ（１.７７ｍｍｏｌ）および過塩素酸マグネシウム５３９ｍｇ（２.４１ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で５.５時間撹拌する。次いで、１,１−カルボニルジイミダゾール６５２ｍｇ（４.０３ｍｍｏｌ）およびＮ,Ｎ−ジメチルアミノピリジン１９ｍｇ（０.１６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を還流で１８時間加熱する。混合物を放冷し、水１００ｍｌおよび酢酸エチル１００ｍｌに添加する。相分離後、水相を酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させる。濾過後、混合物を減圧下で蒸発乾固する。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（シクロヘキサン／酢酸エチル１：２）により精製する。これにより、所望の生成物６６４ｍｇ（理論値の５５％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.99 (t, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.63-7.45 (m, 4H), 7.48-7.31 (m, 9H), 7.28 (dd, 1H), 7.20 (d, 1H), 6.32 (t, 1H), 4.90-4.81 (m, 1H), 4.22 (dd, 1H), 3.89-3.82 (m, 3H), 3.62 (t, 2H), 2.76 (dd, 2H), 1.94 (s, 6H), 0.95 (s, 9H).
HPLC (方法 2): Rt = 5.92 分 
MS (ESIpos): m/z = 740 (M+H)+
【０１８５】
実施例
実施例１
５−クロロ−Ｎ−｛［（５Ｓ）−３−｛３−クロロ−４−［３−（ヒドロキシメチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］フェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル］メチル｝チオフェン−２−カルボキサミド
【化９４】
0005537422.tif 000096
フッ化テトラブチルアンモニウム３６７ｍｇ（１.４１ｍｍｏｌ；１モル濃度、ＴＨＦ中）を、ＴＨＦ８ｍｌ中の実施例６Ａの化合物５１５ｍｇ（０.７０３ｍｍｏｌ）の溶液に添加する。室温で３時間後、混合物を水、飽和塩化ナトリウム水溶液および酢酸エチルで希釈する。水相を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させる。濾過後、混合物から溶媒を除去し、残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール２０：１）により精製する。これにより、所望の生成物２７８ｍｇ（理論値の７８％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.97 (t, 1H), 7.87 (dd, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.59 (ddd, 1H), 7.56-7.48 (m, 2H), 7.46-7.38 (m, 1H), 7.20 (d, 1H), 6.37 (dd, 1H), 5.15 (dd, 1H), 4.93-4.82 (m, 1H), 4.33 (br. d, 2H), 4.24 (dd, 1H), 3.90 (dd, 1H), 3.62 (dd, 2H).
HPLC (方法 2): Rt = 3.88 分.
MS (DCI, m/z): 494 (M+H)+.
【０１８６】
実施例２
５−クロロ−Ｎ−［（（５Ｓ）−３−｛４−［３−（ヒドロキシメチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−メチルフェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル）メチル］チオフェン−２−カルボキサミド
【化９５】
0005537422.tif 000097
実施例９Ａの化合物５３０ｍｇ（０.７４ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ９ｍｌに溶解する。ＴＨＦ中の１モル濃度フッ化テトラブチルアンモニウム溶液１.５ｍｌを添加し、混合物を室温で３０分間撹拌する。少量の水を添加し、混合物を濃縮し、生成物を分取ＨＰＬＣにより精製する。これにより、所望の生成物３３５ｍｇ（理論値の９３％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 9.00 (t, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.55-7.49 (m, 3H), 7.39 (d, 1H), 7.23 (d, 1H), 7.20 (d, 1H), 6.36 (t, 1H), 5.14 (s, ブロード, 1H), 4.90-4.82 (m, 1H), 4.38-4.29 (m, 2H), 4.22 (t, 1H), 3.91-3.85 (m, 1H), 3.62 (t, 2H), 2.01 (s, 3H).
HPLC (方法 3): Rt = 1.66 分.
MS (ESIpos, m/z): 474/476 (35Cl/37Cl) (M+H)+.
【０１８７】
実施例３
５−クロロ−Ｎ−［（（５Ｓ）−３−｛４−［３−（ヒドロキシメチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−メトキシフェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル）メチル］チオフェン−２−カルボキサミド
【化９６】
0005537422.tif 000098
実施例２と同様に、実施例１２Ａの化合物４９１ｍｇ（０.６７ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ中のフッ化テトラブチルアンモニウムを用いて脱シリル化する。生成物を分取ＨＰＬＣにより精製する。これにより、所望の生成物２８７ｍｇ（理論値の８７％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 9.02 (t, 1H), 7.71 (d, 1H), 7.50-7.46 (m, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.34 (dd, 1H), 7.26 (d, 1H), 7.20 (d, 1H), 7.12 (dd, 1H), 6.29 (t, 1H), 5.11 (s, ブロード, 1H), 4.91-4.83 (m, 1H), 4.30 (s, ブロード, 2H), 4.25 (t, 1H), 3.91 (dd, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.65-3.60 (m, 2H).
HPLC (方法 3): Rt = 1.63 分.
MS (ESIpos, m/z): 490/492 (35Cl/37Cl) (M+H)+.
【０１８８】
実施例４
５−クロロ−Ｎ−（｛（５Ｓ）−３−［４−［３−（ヒドロキシメチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル｝メチル）チオフェン−２−カルボキサミド
【化９７】
0005537422.tif 000099
実施例２と同様に、実施例１５Ａの化合物３７０ｍｇ（０.４８ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ中のフッ化テトラブチルアンモニウムを用いて脱シリル化する。生成物を分取ＨＰＬＣにより精製する。これにより、所望の生成物２００ｍｇ（理論値の７８％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.99 (t, 1H), 8.13 (d, 1H), 7.83 (dt, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.53 (dd, 1H), 7.47-7.42 (m, 1H), 7.20 (d, 1H), 6.35 (t, 1H), 5.17 (t, 1H), 4.94-4.86 (m, 1H), 4.33-4.27 (m, 3H), 3.99-3.93 (m, 1H), 3.67-3.61 (m, 2H).
HPLC (方法 3): Rt = 1.82 分.
MS (ESIpos, m/z): 528/530 (35Cl/37Cl) (M+H)+.
【０１８９】
実施例５
５−クロロ−Ｎ−［（（５Ｓ）−３−｛３−クロロ−４−［３−（２−ヒドロキシエチル）−２オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］フェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル）メチル］チオフェン−２−カルボキサミド
【化９８】
0005537422.tif 000100
実施例２１Ａの化合物４００ｍｇ（０.７９ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ６ｍｌと水４ｍｌの混合物に溶解する。ｔｅｒｔ−ブタノール中の２.５モル濃度四酸化オスミウム溶液１６１ｍｇ（０.０１６ｍｍｏｌ）および過ヨウ素酸ナトリウム５０９ｍｇ（２.３８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を室温で２０時間撹拌する。次いで、混合物を水で希釈し、ジクロロメタンで抽出し、乾燥させ、濃縮する。残渣をＴＨＦ４ｍｌと水４ｍｌの混合物に溶解し、水素化ホウ素ナトリウム３０.０ｍｇ（０.７９ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で１時間撹拌し、次いで水で希釈し、ジクロロメタンで抽出する。有機相を乾燥させ、濃縮し、分取ＨＰＬＣにより精製する。これにより、所望の生成物４７ｍｇ（理論値の１２％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): 8.97 (t, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.62-7.56 (m, 1H), 7.51-7.47 (m, 1H), 7.42-7.36 (m, 2H), 7.20 (d, 1H), 6.27 (t, 1H), 4.92-4.84 (m, 1H), 4.59 (t, 1H), 4.24 (t, 1H), 3.90 (dd, 1H), 3.65-3.55 (m, 4H), 3.18-3.15 (m, 2H).
HPLC (方法 5): Rt = 1.94 分.
MS (ESIpos, m/z): 508/510 (35Cl2/35Cl37Cl) (M+H)+.
【０１９０】
実施例６
５−クロロ−Ｎ−［（（５Ｓ）−３−｛４−［３−（２−ヒドロキシエチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−メチルフェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル）メチル］チオフェン−２−カルボキサミド
【化９９】
0005537422.tif 000101
氷冷しながら、メタノール中の１.２５Ｎ塩酸４００ｍｌを、実施例２７Ａの化合物４３.８ｇ（６０.３ｍｍｏｌ）に添加する。１時間後、混合物をジクロロメタンで希釈し、次いで水相を除去する。有機相を水で２回洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過後、減圧下で乾燥するまで濃縮する。残渣をシリカゲルにアプライし、シクロヘキサンと酢酸エチルのグラジエントを使用してクロマトグラフィーする。生成物を含有する画分を合わせ、減圧下で乾燥するまで濃縮する。これにより、所望の生成物１９.６ｇ（理論値の６６％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.98 (t, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.55-7.47 (m, 2H), 7.40 (dd, 1H), 7.35 (dd, 1H), 7.25-7.17 (m, 2H), 6.26 (t, 1H), 4.90-4.82 (m, 1H), 4.60 (t, 1H), 4.22 (t, 1H), 3.92-3.84 (m, 1H), 3.66-3.54 (m, 4H), 2.60 (t, 2H), 2.01 (s, 3H).
LC-MS (方法 5): Rt = 1.87 分 
MS (ESIpos): m/z = 488 (M+H)+
【０１９１】
実施例７
５−クロロ−Ｎ−｛［（５Ｓ）−３−｛４−［３−（２−ヒドロキシエチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−メトキシフェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル］メチル｝チオフェン−２−カルボキサミド
【化１００】
0005537422.tif 000102
０℃で、実施例３３Ａの化合物３７ｇ（４９ｍｍｏｌ）を、メタノール中の１.２５Ｎ塩酸３１３ｍｌに溶解する。１時間後、溶液を減圧下で蒸発させ、ジクロロメタンで希釈する。有機相を水で２回洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過後、減圧下で蒸発乾固する。残渣をシリカゲルで、ジクロロメタンとメタノールのグラジエントを使用してクロマトグラフィーする。生成物画分を合わせ、減圧下で蒸発乾固する。これにより、所望の生成物１９ｇ（理論値の７８％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 9.00 (t, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.35 (dd, 1H), 7.31 (dd, 1H), 7.25 (d, 1H), 7.20 (d, 1H), 7.15-7.08 (m, 1H), 6.19 (t, 1H), 4.91-4.83 (m, 1H), 4.60 (t, 1H), 4.25 (t, 1H), 3.94-3.87 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.66-3.53 (m, 4H), 2.62-2.55 (m, 2H).
MS (ESIpos): m/z = 504 (M+H)+
【０１９２】
実施例８
Ｎ−｛［（５Ｓ）−３−｛４−［３−（２−｛［ｔｅｒｔ−ブチル（ジフェニル）シリル］オキシ｝エチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−（メトキシメチル）フェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル］メチル｝−５−クロロチオフェン−２カルボキサミド
【化１０１】
0005537422.tif 000103
氷冷しながら、メタノール中の１.２５Ｎ塩酸１３５ｍｌを、実施例４１Ａの化合物２７ｇ（３４ｍｍｏｌ）に添加する。混合物をこの温度でさらに４５分間撹拌する。氷冷しながら、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を使用してｐＨを７に調節し、冷却した溶液をジクロロメタンで繰り返し抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させる。混合物を減圧下で蒸発乾固し、ジクロロメタンとメタノールのグラジエントを使用して、残渣をシリカゲルでクロマトグラフィーする。生成物を含有する画分を合わせ、減圧下で乾燥するまで濃縮する。これにより、所望の生成物１６.４ｇ（理論値の８９％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.98 (t, 1H), 7.72-7.66 (m, 2H), 7.62-7.56 (m, 1H), 7.40 (dd, 1H), 7.36 (dd, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.20 (d, 1H), 6.25 (t, 1H), 4.90-4.82 (m, 1H), 4.60 (t, 1H), 4.27-4.08 (m, 3H), 3.94-3.87 (m, 1H), 3.65-3.55 (m, 4H), 3.18 (s, 3H), 2.60 (t, 2H).
LC-MS (方法 6): Rt = 1.96 分 
MS (ESIpos): m/z = 518 (M+H+)+
【０１９３】
実施例９
５−クロロ−Ｎ−｛［（５Ｓ）−３−｛４−［３−（２−ヒドロキシエチル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−プロピルフェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル］メチル｝チオフェン−２−カルボキサミド
【化１０２】
0005537422.tif 000104
実施例４７Ａの化合物４５０ｍｇ（１.６５ｍｍｏｌ）を、無水アセトニトリル１０ｍｌに溶解し、実施例１Ａの化合物３９５ｍｇ（１.８２ｍｍｏｌ）および過塩素酸マグネシウム５５２ｍｇ（２.４７ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で３.５時間撹拌する。次いで、カルボニルジイミダゾール６６９ｍｇ（４.１３ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン２０ｍｇ（０.１６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を還流で３時間加熱する。室温で１８時間後、４−ジメチルアミノピリジン１０ｍｇ（０.０８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を６０℃で６時間撹拌する。次いで、混合物を水１００ｍｌに添加し、酢酸エチル５０ｍｌで希釈する。相分離後、水相を酢酸エチル５０ｍｌで２回抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、次いで減圧下で濃縮する。残渣を分取ＨＰＬＣにより、アセトニトリル／水混合物を使用して精製する。これにより、所望の生成物２８ｍｇ（理論値の３％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.98 (t, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.54-7.45 (m, 2H), 7.40-7.31 (m, 2H), 7.23-7.17 (m, 2H), 6.25 (t, 1H), 4.90-4.81 (m, 1H), 4.22 (dd, 1H), 3.92-3.85 (m, 1H), 3.65-3.50 (m, 4H), 2.62-2.58 (m, 2H), 2.28 (t, 2H), 1.50-1.32 (m, 2H), 0.77 (t, 3H).
HPLC (方法 2): Rt = 4.11 分 
MS (DCI, m/z) = 516 (M+H)+
【０１９４】
実施例１０
５−クロロ−Ｎ−｛［（５Ｓ）−３−｛４−［３−（３−ヒドロキシプロピル）−２−オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３−メチルフェニル｝−２−オキソ−１,３−オキサゾリジン−５−イル］メチル｝チオフェン−２−カルボキサミド
【化１０３】
0005537422.tif 000105
実施例５０Ａの化合物５８０ｍｇ（２.２４ｍｍｏｌ）を、無水アセトニトリル１２.７ｍｌに溶解し、実施例１Ａの化合物５３８ｍｇ（２.４７ｍｍｏｌ）および過塩素酸マグネシウム７５１ｍｇ（３.３７ｍｍｏｌ）を添加する。混合物を室温で３.５時間撹拌する。次いで、カルボニルジイミダゾール４３７ｍｇ（２.６９ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン２７ｍｇ（０.２３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を還流で１８時間加熱する。次いで、混合物を水１００ｍｌに添加し、酢酸エチル５０ｍｌで３回抽出する。合わせた有機相を飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、次いで、減圧下で濃縮する。残渣を分取ＨＰＬＣにより精製する。これにより、所望の生成物１７５ｍｇ（理論値の１６％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.99 (t, 1H), 7.70 (d, 1H), 7.57-7.47 (m, 2H), 7.40-7.31 (m, 2H), 7.23 (d, 1H), 7.20 (d, 1H), 6.26 (t, 1H), 4.90-4.81 (m, 1H), 4.46 (dd, 1H), 4.22 (t, 1H), 3.91-3.85 (m, 1H), 3.62 (t, 2H), 3.42 (ddd, 2H), 3.31 (s, 1H), 2.48-2.42 (m, 1H), 2.01 (s, 3H), 1.67 (ddd, 2H).
HPLC (方法 2): Rt = 3.92 分 
MS (DCI, m/z) = 502 (M+H)+
【０１９５】
実施例１１
５−クロロ−Ｎ−［（（５Ｓ）−３−｛４−［３−（２−ヒドロキシエチル）−２オキソピリジン−１（２Ｈ）−イル］−３,５−ジメチルフェニル｝−２−オキソ−１,３オキサゾリジン−５−イル）メチル］チオフェン−２−カルボキサミド
【化１０４】
0005537422.tif 000106
実施例５６Ａの化合物６６０ｍｇ（０.８９１ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ２０ｍｌに溶解し、フッ化テトラブチルアンモニウム５１２ｍｇ（１.９６ｍｍｏｌ）を添加する。１時間後、混合物を減圧下で乾燥するまで濃縮する。残渣をシリカゲルのクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール１０：１；１％トリエチルアミン）により精製する。これにより、所望の生成物３９６ｍｇ（理論値の８５％）を得る。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6, δ/ppm): δ = 8.98 (t, 1H), 7.69 (d, 1H), 7.42 (dd, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.25 (dd, 1H), 7.19 (d, 1H), 6.29 (t, 1H), 4.90-4.81 (m, 1H), 4.60 (t, 1H), 4.20 (t, 1H), 3.86 (dd, 1H), 3.64-3.52 (m, 4H), 2.62 (t, 2H), 1.95 (s, 6H).
HPLC (方法 1): Rt = 3.92 分 
MS (ESIpos): m/z = 502 (M+H)+
【０１９６】
Ｂ. 薬理活性の評価
本発明による化合物の血栓塞栓性障害の処置に対する適合性は、以下のアッセイ系を使用して立証できる：
ａ）試験の説明（インビトロ）
ａ.１）バッファー中でのＸａ因子阻害の測定
上記で列挙した物質のＸａ因子阻害を測定するために、Ｘａ因子基質の変換をヒトＸａ因子の酵素活性の測定に使用する生物学的試験系を構築する。ここで、Ｘａ因子は、アミノメチルクマリンをペプチド基質から切り離し、これが蛍光により測定される。測定はマイクロタイタープレートで実施する。
【０１９７】
試験物質を、様々な濃度でジメチルスルホキシドに溶解し、ヒトＸａ因子（５０ｍｍｏｌ／ｌトリスバッファー［Ｃ,Ｃ,Ｃ−トリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン］、１００ｍｍｏｌ／ｌ塩化ナトリウム、５ｍｍｏｌ／ｌ塩化カルシウム、０.１％ＢＳＡ［ウシ血清アルブミン］、ｐＨ７.４に溶解して、１.３ｎｍｏｌ／ｌ）と共に、２２℃で３０分間インキュベートする。次いで、基質（５μｍｏｌ／ｌ Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＡＭＣ、Bachem より）を添加する。３０分間インキュベートした後、サンプルを波長３６０ｎｍで励起し、４６０ｎｍで発光を測定する。測定された試験物質を含む試験バッチの発光を、試験物質を含まない対照バッチ（ジメチルスルホキシド中の試験物質の代わりに、ジメチルスルホキシドのみ）と比較し、濃度／活性関係から、ＩＣ５０値を算出する。
【０１９８】
ａ.２）バッファー中でのトロンビン阻害の測定
上記で列挙した物質のトロンビン阻害を測定するために、トロンビン基質の変換をヒトトロンビンの酵素活性の測定に使用する生物学的試験系を構築する。ここで、トロンビンは、アミノメチルクマリンをペプチド基質から切り離し、これが蛍光により測定される。測定はマイクロタイタープレートで実施する。
【０１９９】
試験物質を、様々な濃度でジメチルスルホキシドに溶解し、ヒトトロンビン（０.０６ｎｍｏｌ／ｌ；５０ｍｍｏｌ／ｌ トリスバッファー［Ｃ,Ｃ,Ｃ−トリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン］、１００ｍｍｏｌ／ｌ塩化ナトリウム、０.１％ＢＳＡ［ウシ血清アルブミン］、ｐＨ７.４に溶解）と共に、２２℃で１５分間インキュベートする。次いで、基質（５μｍｏｌ／ｌ Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ＡＭＣ、Bachem より）を添加する。３０分間インキュベートした後、サンプルを波長３６０ｎｍで励起し、４６０ｎｍで発光を測定する。測定された試験物質を含む試験バッチの発光を、試験物質を含まない対照バッチ（ジメチルスルホキシド中の試験物質の代わりに、ジメチルスルホキシドのみ）と比較し、濃度／活性関係から、ＩＣ５０値を算出する。
【０２００】
ａ.３）選択性の測定
トロンビンおよびＸａ因子の阻害に関して、物質の選択性を立証するために、ＸＩＩａ因子、ＸＩａ因子、トリプシンおよびプラスミンなどの他のヒトセリンプロテアーゼの阻害について、試験物質を調べる。ＸＩＩａ因子（１０ｎｍｏｌ／ｌ、Kordia より）、ＸＩａ因子（０.４ｎｍｏｌ／ｌ、Kordia より）、トリプシン（８３ｍＵ／ｍｌ、Sigma より）およびプラスミン（０.１μｇ／ｍｌ、Kordia より）の酵素活性の測定のために、これらの酵素を溶解し（５０ｍｍｏｌ／ｌ トリスバッファー［Ｃ,Ｃ,Ｃ−トリス（ヒドロキシメチル）−アミノメタン］、１００ｍｍｏｌ／ｌ塩化ナトリウム、０.１％ＢＳＡ［ウシ血清アルブミン］、５ｍｍｏｌ／ｌ塩化カルシウム、ｐＨ７.４）、ジメチルスルホキシド中の様々な濃度の試験物質と、そして、試験物質を含まないジメチルスルホキシドと、１５分間インキュベートする。次いで、適当な基質（ＸＩＩａ因子には、Ｈ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ａｒｇ−ＡＭＣ、Bachem より、トリプシンには、５μｍｏｌ／ｌ Ｂｏｃ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＡＭＣ、Bachem より、ＸＩａ因子には、５μｍｏｌ／ｌ Ｂｏｃ−Ｇｌｕ（ＯＢｚｌ）−Ａｌａ−Ａｒｇ−ＡＭＣ、Bachem より、プラスミンには、５０μｍｏｌ／ｌ ＭｅＯＳｕｃ−Ａｌａ−Ｐｈｅ−Ｌｙｓ−ＡＭＣ、Bachem より）の添加により酵素反応を開始する。２２℃で３０分間のインキュベーション時間の後、蛍光を測定する（励起：３６０ｎｍ、発光：４６０ｎｍ）。測定された試験物質を含む試験バッチの発光を、試験物質を含まない対照バッチ（ジメチルスルホキシド中の試験物質の代わりに、ジメチルスルホキシドのみ）と比較し、濃度／活性関係から、ＩＣ５０値を算出する。
【０２０１】
ａ.４）血漿サンプルにおける可能性のある阻害剤のＸａ因子阻害活性の測定
Ｘａ因子の阻害を血漿サンプルにおいて測定するために、血漿中に存在するＸ因子を、ガラガラヘビ毒素由来のプロテアーゼにより活性化する。次いで、Ｘａ因子活性または可能性のある阻害剤によるその阻害を、発色基質の添加により測定する。
【０２０２】
様々な濃度の試験物質を、ジメチルスルホキシドに溶解し、レフルダン（refludan）水溶液（１０μｇ／ｍｌ）と混合する。透明な平底の９６ウェルのプレート中で、クエン酸血漿（Octapharma）３０μｌを、物質希釈物１０μｌと混合する。次いで、塩化カルシウム水溶液バッファー（塩化カルシウムの最終濃度０.０５Ｍ）中のガラガラヘビ毒素（ラッセルクサリヘビ毒液（ＲＶＶ）；ＲＶＶ試薬：Pentapharm 121-06、最終濃度０.６ｍＵ）の溶液２０μｌまたはＲＶＶ試薬を含まない塩化カルシウム水溶液（塩化カルシウムの最終濃度０.０５Ｍ）２０μｌ（刺激されないサンプルの基準として）を添加する。ChromozymX 基質（最終濃度１.６ｍｍｏｌ／ｌ、Bachem L-1565、水に希釈）２０μｌの添加後、サンプルを SpectraFluor Reader で、４０５ｎｍの測定フィルターを使用して、２０分間にわたり毎分、測定する。最大シグナルの約７０％に達するときに（約１２分）、ＩＣ５０値を測定する。
【０２０３】
この試験の代表的な活性データを、下表１に挙げる：
表１
【表２】
0005537422.tif 000107
【０２０４】
ａ.５）血漿サンプルにおける可能性のある阻害剤のトロンビン阻害活性の測定
様々な濃度の試験物質を、ジメチルスルホキシドに溶解し、水で希釈する。白色、平底の９６ウェルのプレート中で、物質希釈物２０μｌを、Ｃａバッファー（２００ｍＭ Ｈｅｐｅｓ＋５６０ｍＭ塩化ナトリウム＋１０ｍＭ塩化カルシウム＋０.４％ＰＥＧ）中のエカリン（ecarin）溶液（エカリン試薬、Sigma E-0504より、最終濃度２０ｍＵ／バッチ）２０μｌまたはＣａバッファー（刺激されない対照として）２０μｌと混合する。さらに、蛍光発生性トロンビン基質（Bachem I-1120 より、最終濃度５０μｍｏｌ／ｌ）２０μｌおよびクエン酸血漿２０μｌ（Octapharma より）を添加し、徹底的に均質化する。プレートを SpectraFluor Reader で、３６０ｎｍの励起フィルターと４６５ｎｍの発光フィルターを使用して、２０分間にわたり毎分、測定する。最大シグナルの約７０％に達するときに（約１２分）、ＩＣ５０値を測定する。
【０２０５】
この試験の代表的な活性データを、下表２に挙げる：
表２
【表３】
0005537422.tif 000108
【０２０６】
ａ.６）トロンビン生成アッセイ（トロンボグラム（thrombogram））
トロンボグラム（Hemker によるトロンビン生成アッセイ）に対する試験物質の効果を、インビトロで、ヒト血漿で測定する（Octaplas（登録商標）、Octapharma より）。Hemker によるトロンビン生成アッセイでは、凝固している血漿におけるトロンビンの活性を、基質Ｉ−１１４０（Ｚ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ−ＡＭＣ、Bachem）の蛍光切断生成物の測定により決定する。凝固反応を開始するために、Thrombinoscope の試薬（ＰＰＰ試薬：３０ｐＭ組換え組織因子、２４μＭリン脂質、ＨＥＰＥＳ中）を使用する。これらの反応を、変動する濃度の試験物質または対応する溶媒の存在下で実施する。さらに、Thrombinoscope のトロンビン標準物質を使用する。そのアミド分解活性は、血漿サンプル中のトロンビン活性の算出に必要とされる。
【０２０７】
この試験は、製造業者の仕様書（Thrombinoscope BV）に従い実施する：試験物質または溶媒４μｌ、血漿７６μｌおよびＰＰＰ試薬またはトロンビン標準物質２０μｌを、５分間３７℃でインキュベートする。２０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、６０ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡおよび１０２ｍＭ塩化カルシウム中の２.５ｍＭトロンビン基質２０μｌを添加した後、トロンビン生成を１２０分間にわたり、２０秒毎に測定する。測定は、３９０／４６０ｎｍフィルター対およびディスペンサーを備えた Thermo Electron の蛍光光度計 (Fluoroskan Ascent）を使用して実施する。Thrombinoscope のソフトウエアを使用して、トロンボグラムを算出し、図表化する。算出されるのは、以下のパラメーターである：遅延時間、ピークまでの時間、ピーク、ＥＴＰ（内因性トロンビン生成能）およびスタートテール（start tail）。
【０２０８】
ａ.７）抗凝血活性の測定
試験物質の抗凝血活性を、インビトロで、ヒト血漿、ウサギ血漿およびラット血漿で測定する。この目的で、０.１１モル濃度のクエン酸ナトリウム溶液をレシーバーとして使用して、クエン酸ナトリウム／血液の混合比１／９で、血液を採取する。血液を採取した直後に、それを徹底的に混合し、１５分間約４０００ｇで遠心分離する。上清をピペットで取る。
【０２０９】
プロトロンビン時間（ＰＴ、同義語：トロンボプラスチン時間、クイック試験）を、変動する濃度の試験物質または対応する溶媒の存在下で、購入できる試験キット（Neoplastin（登録商標）、Boehringer Mannheim より、または、Hemoliance（登録商標） RecombiPlastin、Instrumentation Laboratory より）を使用して測定する。試験化合物を、血漿と共に、３７℃で、３分間インキュベートする。次いで、トロンボプラスチンの添加により凝固を開始させ、凝固が起こる時間を測定する。プロトロンビン時間を倍増させる試験物質の濃度を決定する。
【０２１０】
トロンビン時間（ＴＴ）を、変動する濃度の試験物質または対応する溶媒の存在下で、購入できる試験キット（Roche のトロンビン試薬）を使用して測定する。試験化合物を、血漿と３７℃で３分間インキュベートする。次いで、トロンビン試薬の添加により凝固を開始させ、凝固が起こる時間を測定する。トロンビン時間を倍増させる試験物質の濃度を決定する。
【０２１１】
活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）を、変動する濃度の試験物質または対応する溶媒の存在下で、購入できる試験キット（Roche のＰＴＴ試薬）を使用して測定する。試験化合物を、血漿およびＰＴＴ試薬（セファリン、カオリン）と、３７℃で３分間インキュベートする。次いで、２５ｍＭ 塩化カルシウムの添加により凝固を開始させ、凝固が起こる時間を測定する。ＡＰＴＴを倍増させる試験物質の濃度を決定する。
【０２１２】
ａ.８）トロンボエラストグラフィー（トロンボエラストグラム（thromboelastogram）)
Pentapharm のトロンボエラストグラフＲＯＴＥＭおよびその付属物、カップおよびピンを利用して、トロンボエラストグラフィーを実施する。測定は、事前に Sarstedt 社のクエン酸ナトリウムモノヴェット（monovettes）に採取した全血で実施する。モノヴェット中の血液を、シェーカーを使用して動かし続け、３７℃で３０分間、予めインキュベートする。塩化カルシウム水溶液の２モル濃度原液を調製する。これを濃度０.９％の塩化ナトリウム水溶液で１：１０に希釈する。測定のために、この２００ｍＭ塩化カルシウム溶液２０μｌを、先ず、カップに加える（塩化カルシウムの最終濃度１２.５ｍＭ）。物質または溶媒３.２μｌを添加する。全血３００μｌの添加により測定を開始する。添加後、ピペットのチップを使用して、気泡を生成させずに、混合物を短時間ピペットに吸い上げ、再度放出する。測定を２.５時間かけて実施するか、または、線維素溶解が起こったら停止する。評価のために、以下のパラメーターを測定する：ＣＴ（凝固時間／［秒］）、ＣＦＴ（凝固形成時間／［秒］）、ＭＣＦ（最大血餅硬度／［ｍｍ］）およびアルファ角［°］。これらの測定事項を３秒毎に測定し、ｙ軸にＭＣＦ［ｍｍ］、ｘ軸に時間［秒］をとって図表化する。
【０２１３】
ａ.９）血栓に結合した凝固因子トロンビンおよびＸａ因子の阻害
血餅は、抗凝血剤による治療の開始前に、治療中断中に、または、治療にも拘わらず血栓形成の促進を利し得る多量の凝固因子を含有するときに、形成される。これらの凝固因子は、血栓に堅固に結合し、洗い流すことができない。ある種の臨床的状況では、これは、患者にとってのリスクをもたらし得る。下記で実施される試験は、生物学的（血栓促進性）活性を有するトロンビンとＸａ因子の両方を、ヒト血栓において実証できる。
【０２１４】
インビトロで形成される血栓
血栓をインビトロでヒト血漿から形成させ、結合した凝固因子トロンビンおよびＸａ因子の活性について調べる。この目的で、血漿３００μｌを、脂質小胞３０μｌおよび塩化カルシウム水溶液３０μｌと、４８ウェルＭＴＰプレート中で混合し、３０分間インキュベートする。この段階および後続の段階を、３７℃で、一定の振動（３００ｒｐｍ）で実施する。形成される血栓を新しい４８ウェルＭＴＰプレートに移し、濃度０.９％の塩化ナトリウム溶液で１０分間にわたり２回洗浄し、洗浄段階中に血栓を濾紙に押し当てる。血栓をバッファーＢ（Owens Veronal Buffer、１％ＢＳＡ）に移し、１５分間インキュベートし、濾紙に押し当て、バッファーＢ中の様々な濃度の試験物質中で３０分間インキュベートする。次いで血餅を上記の通りに２回洗浄する。血栓を押し当て、バッファーＤ：（２４０μｌ Owren's Veronal Buffer、１％ＢＳＡおよび１５.６ｍＭ塩化カルシウム）に移し、０.６μＭプロトロンビンの存在下または非存在下で、４５分間インキュベートする。１％ＥＤＴＡ溶液７５μｌの添加により反応を停止する。トロンビン活性を、血栓中、バッファーＡ（７.５ｍＭ Ｎａ２ＥＤＴＡｘ２Ｈ２Ｏ、１７５ｍＭ塩化ナトリウム、１％ＢＳＡ、ｐＨ８.４）中で、または最終段階の上清中で、別々に測定する。この目的で、基質Ｉ−１１２０を最終濃度５０μＭで使用し、得られる蛍光を蛍光プレートリーダー（３６０／４６５ｎｍ）で測定する。
【０２１５】
この血栓に結合したトロンビンの活性は、治療的に意味のある濃度の選択的Ｘａ因子阻害剤では抑制できない。対照的に、それは、ＩＩａ因子／Ｘａ因子デュアル阻害剤またはＩＩａ因子の参照阻害剤で阻害できる。
【０２１６】
プロトロンビンの添加後、血栓に結合したＸａ因子（プロトロンビナーゼ複合体）が存在するならば、新しいトロンビンが形成され、それは蛍光基質により検出される。この新たなトロンビン形成は、純粋なトロンビン阻害剤により防止され得ない；しかしながら、それは、ＩＩａ因子／Ｘａ因子デュアル阻害剤により、または、選択的なＸａ因子の参照阻害剤により阻害され得る。
【０２１７】
血栓に結合したトロンビン活性の生物学的活性を、蛍光標識されたフィブリノーゲンの添加により試験する。それは、活性トロンビンによりフィブリンに変換され、血栓に結合する。この目的で、血栓を上記の通りに形成させ、Alexa488 で標識されたフィブリノーゲンの溶液（１００μｇ／ｍｌ）２５０μｌおよび１００ｍＭ塩化カルシウム水溶液（様々な濃度の試験物質を含むか、または含まない）３０μｌの中でインキュベートする。上清の蛍光を、蛍光プレートリーダーにおいて、適する波長で測定する。さらに、血栓を４回、各場合で１５分間洗浄し、蛍光顕微鏡で調べる。上清からの蛍光の減少および血栓の蛍光の増加は、ＩＩａ因子／Ｘａ因子デュアル阻害剤により阻害できるが、Ｘａ因子の参照阻害剤では阻害できない。
【０２１８】
インビボ（患者の物質）で形成される心臓内血栓
これらの実験を、心臓外科手術中に患者の左心室から取り出された血栓で繰り返す。この目的で、血栓を解凍し、２片に分けた（湿重量１０−１００ｍｇ）。プロトコールに応じて、血栓を繰り返し洗浄した後に、または、洗浄せずに使用し、上記の方法と同様に、基質Ｉ−１１２０（最終濃度１００μＭ）を使用してトロンビン活性を測定する。
【０２１９】
ａ.１０）エンドトキシン血症（endotoxaemic）のマウスおよびラットにおける凝血と臓器機能の障害の特定診断
トロンビン／アンチトロンビン複合体
トロンビン／アンチトロンビン複合体（以後、「ＴＡＴ」と称する）は、凝血活性化により内因性に形成されるトロンビンの尺度である。ＴＡＴは、ＥＬＩＳＡアッセイを使用して測定される（Enzygnost TAT micro, Dade-Behring）。クエン酸血から遠心分離により血漿を得る。ＴＡＴサンプルバッファー５０μｌを、血漿５０μｌに添加し、サンプルを短時間振盪し、室温で１５分間インキュベートする。サンプルを吸引濾過し、ウェルを洗浄バッファー（３００μｌ／ウェル）で３回洗浄する。洗浄中に、プレートを軽く叩いて液体を除去する。コンジュゲート溶液（１００μｌ）を添加し、プレートを室温で１５分間インキュベートする。サンプルを吸い出し、ウェルを洗浄バッファー（３００μｌ／ウェル）で３回洗浄する。次いで、発色基質（１００μｌ／ウェル）を添加し、プレートを暗所で、室温で、３０分間インキュベートし、停止溶液を添加し（１００μｌ／ウェル）、色の展開を４９２ｎｍで測定する（Saphire プレートリーダー）。
【０２２０】
臓器機能のパラメーター
ＬＰＳの投与による様々な内部臓器の機能の制限に関して結論を得ることを可能にし、そして、試験物質の治療効果の評価を可能にする、様々なパラメーターを測定する。クエン酸血、または、必要に応じて、リチウム／ヘパリン血を遠心分離し、血漿からパラメーターを測定する。典型的には、以下のパラメーターを測定する：クレアチニン、尿素、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）、総ビリルビン、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）、総タンパク質、総アルブミンおよびフィブリノーゲン。これらの値は、腎臓、肝臓、心血管系および血管の機能に関する指標を与える。
【０２２１】
炎症のパラメーター
エンドトキシンにより引き起こされる炎症反応の程度は、血漿中の炎症メディエーター、例えば、インターロイキン（１、６、８および１０）、腫瘍壊死因子アルファまたは単球走化性タンパク質−１の増加により検出できる。この目的で、ＥＬＩＳＡまたはルミネックスシステムを使用し得る。
【０２２２】
ｂ）抗血栓活性（インビボ）の測定
ｂ.１）動静脈シャントおよび出血モデル（組み合わせモデル、ラット）
体重３００−３５０ｇの絶食しているオスのラット（系統：HSD CPB:WU）を、イナクチン（１５０−１８０ｍｇ／ｋｇ）を使用して麻酔する。Christopher N. Berry et al., Br. J. Pharmacol. (1994), 113, 1209-1214 により記載された方法に従い、動静脈シャントにおいて、血栓形成を開始させる。この目的で、左頸静脈および右頸動脈を露出させる。長さ１０ｃｍのポリエチレンチューブ（ＰＥ６０）を使用して、２本の血管を体外シャントにより連結する。中央で、このポリエチレンチューブを、ループを形成するように配列した粗いナイロン糸を含む長さ３ｃｍのさらなるポリエチレンチューブ（ＰＥ１６０）に取り付け、血栓形成性表面を形成させる。体外循環を１５分間維持する。次いでシャントを除去し、血栓を伴うナイロン糸の重さを直ちに測定する。ナイロン糸自体の重量は、実験開始前に測定する。
【０２２３】
出血時間を測定するために、シャント循環を開いた直後に、ラットの尾の先端をカミソリの刃を使用して３ｍｍ切り落とす。次いで、尾を３７℃の温度に維持した生理食塩水中に入れ、傷口からの出血を１５分間にわたり観察する。測定するのは、少なくとも３０秒間の出血停止までの時間（初期出血時間）、１５分間の期間における総出血時間（累積出血時間）、および、回収したヘモグロビンの測光的測定による定量的血液喪失である。
【０２２４】
体外循環を設置し、尾の先端を切り落とす前に、反対側の頸静脈を介して静脈内に、単回ボーラスまたは後続の継続的点滴を伴うボーラスとして、または、咽頭チューブを使用して経口で、試験物質を意識のある動物に投与する。
【０２２５】
ｃ）薬物動態の測定（インビボ）
インビボの薬物動態を測定するために、試験物質を様々な製剤化組成物（例えば、血漿、エタノール、ＤＭＳＯ、ＰＥＧ４００など）またはこれらの可溶化剤の混合物に溶解し、マウス、ラット、イヌまたはサルに静脈内または経口投与する。静脈内投与は、ボーラス注射または点滴として実施する。投与する用量は、０.１ないし５ｍｇ／ｋｇの範囲である。カテーテルを利用して、または、屠殺血漿として、様々な時点で２６時間までの期間にわたり血液サンプルを取る。さらに、いくつかの場合では、臓器、組織および尿のサンプルも取る。試験サンプル中の物質の定量的測定は、問題のマトリックス中で調整した較正サンプルを使用して行う。サンプル中に存在するタンパク質をアセトニトリルまたはメタノールによる沈殿で除去する。次いで、サンプルをＨＰＬＣにより、2300 HTLC システム（Cohesive Technologies, Franklin, MA, USA）で逆相カラムを使用して、分画する。ＨＰＬＣシステムを、ターボイオンスプレーインターフェース（turbo ion spray interface）を介して、API 3000 Triple Quadropole 質量分析計（Applied Biosystems, Darmstadt, Germany）に繋ぐ。血漿濃度の時間経過を、検証済みの動態分析プログラムを使用して分析する。
【０２２６】
輸送タンパク質に対する物質の親和性は、Ｃａｃｏ−２細胞または特定の輸送体を過剰発現させた細胞を使用する流動アッセイで、インビトロで試験することにより調べる（Troutman MD, Thakker DR, Pharm. Res. 20 (8) 1210- 1224 (2003); Schwab D, Fischer H, Tabatabaei A, Poli S, Huwyler J, J. Med. Chem. 46, 1716-1725 (2003); Merino G, Jonker JW, Wagenaar E, Pulido MM, Molina AJ, Alvarez AI, Schinkel AH, Drug Metab. Dispos. 33 (5) 614- 618 (2005)）。この目的で、細胞を２４または９６ウェルのフィルタープレートで４ないし１５日間培養する。浸透を測定するために、ＨＥＰＥＳバッファー中の物質を頂端側（Ａ）または基底側（Ｂ）で細胞に添加し、混合物を２時間インキュベートする。０時間および２時間後、サンプルをシスおよびトランスのコンパートメントから取り、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより分析する。Schwab らにより公表された式を使用して、Ｐａｐｐ値を算出する。Ｐａｐｐ（Ｂ−Ａ）／Ｐａｐｐ（Ａ−Ｂ）の比が＞２または＜０.５であるとき、物質を能動輸送されると分類する。
【０２２７】
ｄ）エンドトキシン血症活性の測定（インビボ）
ラットまたはマウスを使用して調査を実施する。マウスモデル（NMRI, 雄）では、ＬＰＳ（大腸菌血清型０５５：Ｂ５、Sigma-Aldrich）を、５０ｍｇ／ｋｇで腹腔内注射する。尾静脈を介して静脈内に、皮下に、腹腔内に、または、胃管を使用して経口で、ＬＰＳ注射の１時間前までに試験物質を投与する。ＬＰＳ投与の４時間後、動物を麻酔し（Ketavet/Rompun）、腹部を外科手術により開く。クエン酸ナトリウム溶液（３.２％ｗ／ｖ）（式：体重（ｇ）／１３に１００μｌを掛ける）を下部大静脈に注射し、血液サンプル（約１ｍｌ）を３０秒後に取る。様々なパラメーター、例えば、血液細胞成分（特に、赤血球、白血球および血小板）、乳酸塩濃度、凝固活性化（ＴＡＴ）、または、臓器機能不全もしくは臓器不全のパラメーター、および、死亡率を、血液から測定する。
【０２２８】
ｅ）ラットのＤＩＣ試験に使用する方法の説明
ＬＰＳ（大腸菌Ｏ５５ Ｂ５、Sigma により製造、ＰＢＳに溶解）を、雄の Wistar ラットに、２５０μｇ／ｋｇの投与量で、尾静脈に静脈内投与する（投与体積２ｍｌ／ｋｇ）。試験物質をＰＥＧ４００／Ｈ２Ｏ６０％／４０％に溶解し、ＬＰＳ注射の３０分前に経口投与する（投与体積５ｍｌ／ｋｇ）。ＬＰＳ注射の１、５または４時間後に、終末的麻酔（Trapanal（登録商標）１００ｍｇ／ｋｇ ｉ.ｐ.）で心臓の穿刺により動物を失血させ、フィブリノーゲン、ＰＴ、ＴＡＴおよび血小板数の測定のために、クエン酸血漿を得る。場合により、肝臓酵素、腎機能パラメーターおよびサイトカインの測定のために、血清を得る。購入できるＥＬＩＳＡ（R&D Systems）により、ＴＮＦαおよびＩＬ−６を測定する。
【０２２９】
臓器機能の直接的パラメーター、例えば、左室圧および右室圧、動脈圧、尿排出、腎灌流および血液ガスおよび酸／塩基状態を測定することも可能である。
【０２３０】
Ｃ. 医薬組成物の例示的実施態様
本発明による化合物は、以下の方法で医薬製剤に変換できる：
錠剤：
組成：
本発明による化合物１００ｍｇ、ラクトース（一水和物）５０ｍｇ、トウモロコシデンプン（天然）５０ｍｇ、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ２５）(BASF, Ludwigshafen, Germany より）１０ｍｇおよびステアリン酸マグネシウム２ｍｇ。
錠剤重量２１２ｍｇ。直径８ｍｍ、曲率半径１２ｍｍ。
製造：
本発明による化合物、ラクトースおよびデンプンの混合物を、５％濃度ＰＶＰ水溶液（ｍ／ｍ）で造粒する。顆粒を乾燥させ、次いで、ステアリン酸マグネシウムと５分間混合する。この混合物を常套の打錠機を使用して打錠する（錠剤の形状について、上記参照）。ガイドラインとして、打錠力１５ｋＮを打錠に使用する。
【０２３１】
経口懸濁液：
組成：
本発明による化合物１０００ｍｇ、エタノール（９６％）１０００ｍｇ、Rhodigel（登録商標）(FMC, Pennsylvania, USA のキサンタンガム）４００ｍｇおよび水９９ｇ。
経口懸濁液１０ｍｌは、本発明による化合物の単回用量１００ｍｇに相当する。
製造：
Rhodigel をエタノールに懸濁し、本発明による化合物を懸濁液に添加する。撹拌しながら水を添加する。Rhodigel の膨潤が完了するまで、混合物を約６時間撹拌する。
【０２３２】
経口液剤：
組成：
本発明による化合物５００ｍｇ、ポリソルベート２.５ｇおよびポリエチレングリコール４００ ９７ｇ。経口液剤２０ｇは、本発明による化合物の単回用量１００ｍｇに相当する。
製造：
本発明による化合物を、ポリエチレングリコールおよびポリソルベートの混合物に、撹拌しながら懸濁する。本発明による化合物が完全に溶解するまで、撹拌を継続する。
【０２３３】
ｉ.ｖ.液剤：
本発明による化合物を、飽和溶解度より低い濃度で、生理的に許容し得る溶媒（例えば、等張塩化ナトリウム溶液、グルコース溶液５％および／またはＰＥＧ４００溶液３０％）に溶解する。溶液を濾過滅菌し、無菌のパイロジェン不含の注射容器に満たす。