(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（１）で示されるステロイド化合物。
0005412622.tif 000008
［式中、Ｒ１はＨ、ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５、Ｃ３Ｈ７及びＣＨ（ＣＨ３）２から選ばれた基であり、Ｒ２はＮＨ２、ＮＨＡｃ及びＯＣＯＲ１から選ばれた基であり、Ｒ３はＣＨ３、ＣＯＯＣＨ３及びＣＨ２ＯＣＯＲ１から選ばれた基である。］
【請求項２】
Ｒ２がＯＣＯＲ１であり、Ｒ３がＣＨ２ＯＣＯＲ１である請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１がＣＨ３である請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
前記Ｒ１がＨである請求項１または２に記載の化合物。
【請求項５】
前記Ｒ１がＣ２Ｈ５である請求項１または２に記載の化合物。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を有効成分とする抗炎症剤。
【請求項７】
外用投与剤である請求項６に記載の抗炎症剤。
【請求項８】
吸入投与を行う喘息治療剤、点鼻投与を行うアレルギー性鼻炎治療剤、塗布投与を行う関節炎治療剤または皮膚炎治療剤、点眼投与を行う外眼部炎症性疾患治療剤である請求項７項に記載の抗炎症剤。
【請求項９】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を有効成分とする関節炎治療剤。
【請求項１０】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物を有効成分とする潰瘍性大腸炎治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はステロイド化合物に関する。更に詳しくは、本発明は、デスシクレソニドの２１位をアシル化単糖で置換してなる優れた薬理効果をもつ新規ステロイド化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
それ自身ステロイド様活性は有さずに、炎症部位で活性体へと変換されるプロドラッグステロイド化合物に関する報告がある（非特許文献１、特許文献１）。しかし、非特許文献１及び特許文献１に記載されている化合物は、ステロイド化合物の副作用が低減されてはいるものの、それは未だ不十分であった。そこで、糖−ステロイド化合物における単純糖の水酸基を嵩高い保護基で修飾した化合物を合成し、炎症部位以外でのステロイドの遊離が抑えられ、副作用の低減が図られた（技術文献２）。その後、ステロイドを容易代謝ステロイドにすることで、主作用と副作用がより分離した化合物が見出されている（特許文献３、特許文献４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】ＧＢ１０１５３９６
【特許文献２】ＷＯ９５／０９１７７
【特許文献３】ＷＯ９９／４７５４１
【特許文献４】ＷＯ９９／４７５４２
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１９６４，８６，３９０３〜４、ＦＲ３６２７（１９６５）
【発明の概要】
【０００５】
発明の目的
上記先行技術により作用と副作用の分離した化合物が見出されたが、ステロイドの薬理効果が既存のステロイド薬よりも弱い。実際に本発明者もブデソニドに嵩高い官能基に置換した糖を付加した化合物について皮膚炎モデルを用いて外用投与での薬理効果を評価したところ既存ステロイド薬（ブデソニド）よりも弱いことを確認した。医療の場ではより強い活性を持ちながら、副作用が少ないステロイド薬の開発が望まれる。
本発明の目的は、より抗炎症作用が強く、かつその副作用が極めて少ないステロイド化合物を提供することにある。
【０００６】
発明の要約
本発明の第１は、式（１）で示されるステロイド化合物である。
【０００７】
0005412622.tif 000002
【０００８】
［式中、Ｒ１はＨ、ＣＨ３、Ｃ２Ｈ５、Ｃ３Ｈ７及びＣＨ（ＣＨ３）２から選ばれた基であり、Ｒ２はＮＨ２、ＮＨＡｃ及びＯＣＯＲ１から選ばれた基であり、Ｒ３はＣＨ３、ＣＯＯＣＨ３及びＣＨ２ＯＣＯＲ１から選ばれた基である。］
【０００９】
本発明の第２は、式（１）で示されるステロイド化合物を有効成分とする抗炎症剤である。
本発明の第３は、式（１）で示される化合物を有効成分とする皮膚炎治療剤である。
本発明の第４は、式（１）で示される化合物を有効成分とする喘息治療剤である。
本発明の第５は、式（１）で示される化合物を有効成分とする鼻炎治療剤である。
本発明の第６は、式（１）で示される化合物を有効成分とする関節炎治療剤である。
本発明の第７は、式（１）で示される化合物を有効成分とする潰瘍性大腸炎治療剤である。
【００１０】
発明の効果
本発明のステロイド化合物は、ステロイドをデスシクレソニドにしたことにより、意外にも嵩高くない官能基に置換した糖を付加した化合物において、外用投与で既存ステロイド薬よりも強い抗炎症効果を有し、なおかつ全身性副作用が極めて少ないという特長を有する。
また、本発明の化合物は炎症部位の皮膚ではグルコシダーゼ活性が上昇しており、炎症部位ではより糖離脱量が増え、活性本体のステロイド量が増えるのに対し、正常皮膚ではグルコシダーゼ活性が低く、活性体の産生量が少ないために、副作用が出にくいとう特長を有している。すなわち、本発明の化合物は全身性副作用だけでなく局所副作用も低減する特長も有する。
【００１１】
一般に軟膏剤は炎症皮膚に塗布するが、炎症皮膚と正常皮膚が混在していることから、炎症皮膚だけでなく正常皮膚にも塗布することになる。既存のステロイド軟膏剤は当然、正常皮膚でもステロイド活性をもち、そのことが局所副作用につながるおそれがある。これに対し、本発明の化合物は炎症皮膚では活性体に移行して抗炎症効果を示し、正常皮膚では活性体への移行量が少ないために強い作用を発現しないことで副作用の軽減ができるものと思われる。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
図１はＤ−グルコース化合物１を合成する反応工程図である。（実施例１）
図２は化合物１から化合物２を合成する反応工程図である。（実施例２）
図３はＤ−グルコースから化合物３を合成する反応工程図である。（実施例３）
図４は化合物２から化合物３及び化合物４を合成する反応工程図である。（実施例４及び実施例５）
図５は化合物２から化合物５及び化合物６を合成する反応工程図説明図である。（実施例６及び実施例７）
図６は化合物２から化合物７及び化合物８を合成する反応工程図説明図である。（実施例８）
図７はＤ−フコースから化合物９を合成する反応工程図である。（実施例９）
図８はＬ−フコースから化合物１０を合成する反応工程図である。（実施例１０）
図９はＮ−アセチルグルコサミンから化合物１１及び化合物１２を合成する反応工程図である。（実施例１１）
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本明細書において「デスシクレソニド」とは、喘息治療薬で用いられているシクレソニドの活性代謝物（図１の化合物Ｃ）である。
本発明は、デスシクレソニドの２１位に糖が結合し、その糖の水酸基が保護基で保護された構造をもつ。デスシクレソニドの２１位に結合する糖の例として、グルコース、ガラクトース、マンノース、アロース、アルトロース、グロース、イドース、タロース、グルコサミン、ガラクトサミン、マンノサミン、Ｎ−アセチルグルコサミン、Ｎ−アセチルガラクトサミン、Ｎ−アセチルマンノサミンなどがあげられる。また、この配糖体はα体でもβ体でもよい。
【００１４】
本発明の化合物は、上記したような糖を出発原料として容易に合成可能であり、その反応工程図の典型例を図１〜９に示す。その一例を説明すれば、出発物質である糖の水酸基を、トルオイル基やアセチル基で保護した後、このアノメリック位をハロゲン置換し、モレキュラーシーブと炭酸銀、銀トリフレート、過塩素酸銀若しくは四塩化スズ等のルイス酸の存在下、デスシクレソニドと反応させることにより本発明の化合物を得ることができる。特に、トルオイル基を保護基として採用した場合には、オルソエステル体の副生を防止でき、目的とする化合物を収率よく得ることができる。また、上記化合物の脱保護は、ＭｅＯＮａ／ＭｅＯＨ、水酸化ナトリウム水溶液等を用いる脱保護により容易に行うことができる。この脱保護体にアシル化することでも得ることができる。
特に、図１から図２の反応を経て図４の上段の反応に至る５工程を用いる方が、図３の３工程を用いるよりも、精製に要する費用や収率面で好ましい。
【００１５】
本発明の化合物を有効成分として含む医薬、特に抗炎症剤は、単独または組み合わせて様々な製剤を作製することができる。
湿疹、皮膚炎群（進行性指掌角皮症、女子顔面黒皮症、ビダール苔癬、放射性皮膚炎、日光皮膚炎を含む）、皮膚そう痒、痒疹群（じんま疹様苔癬、ストロフルス、固定じんま疹を含む）、虫刺され、乾癬、掌蹠膿疱症、偏平苔癬、光沢苔癬、毛孔性紅色粃糠疹、ジベルバラ色粃糠疹、紅斑症（悪性リンパ腫による紅皮症を含む）、慢性円板状エリテマトーデス、薬疹・中毒疹、円形脱毛症、熱傷（瘢痕、ケロイドを含む）、凍瘡、ジューリング疱疹状皮膚炎（類天疱瘡を含む）、痔核等に対しては軟膏剤、クリーム剤、ローション剤、テープ剤、エアーゾル剤、固形軟膏剤として外皮等に用いることができる。また、アレルギー性鼻炎、外耳炎、中耳炎、鼓室形成手術・内耳開窓手術・内耳根治手術の術創等の耳鼻科疾患に対しては鼻腔内吸入剤、点鼻剤、点耳剤等にすることができる。更に、結膜炎、眼瞼炎、角膜炎等の外眼部の炎症性疾患に対し、点眼剤または眼軟膏剤として使用できる。本発明の化合物は全身性副作用が出にくい化合物であるため、製剤中の薬物濃度を高くすることができ、０．００１％〜１０．０％製剤を使用することができるが、望ましくは０．０１％〜１．０％製剤、特には０．０５％〜０．５％製剤が好ましい。更に、気管支喘息、ＣＯＰＤ等の呼吸器疾患治療のために粉末吸入剤やエアゾル吸入剤として用いることができる。本発明の化合物は全身性副作用が出にくい化合物であるため、製剤中の薬物濃度を高くすることができ、１回の噴霧・吸入量として１μｇ〜１ｍｇ適用する製剤を使用することができるが、望ましくは５０μｇ〜５００μｇ製剤、特に７５μｇ〜３００μｇ製剤が好ましい。この製剤は外用以外にも関節腔内投与を行う関節炎治療剤または経口投与を行う潰瘍性大腸炎治療薬としても使用することができる。
次に実施例によって本発明を説明する。
【実施例１】
【００１６】
化合物１の合成（図１）
化合物Ａの合成：Ｄ−（＋）−グルコース１．２ｇをクロロホルム４０ｍＬに溶解し、０〜５℃でｐ−トルオイルクロライド１４．５ｍＬ及びピリジン８．９ｍＬを滴下した。徐々に温度を室温まで戻しながら６時間攪拌した。反応液を氷水中にあけ、クロロホルムで抽出した後、有機層を飽和硫酸銅水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、溶媒を減圧留去した。得られた残渣の内、５．３３ｇをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（トルエン：酢酸エチル＝５０：１）にて分離精製し、化合物Ａを白色粉末として４．５ｇ得た。【００１７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：２．３０９（３Ｈ，ｓ），２．３１５（３Ｈ，ｓ），２．３６２（３Ｈ，ｓ），２．４０８（３Ｈ，ｓ），２．４７４（３Ｈ，ｓ），７．１０１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６），７．１０６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６），７．１５６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６），７．２０７（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６），７．３４１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６），７．７７５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６），７．７８０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６），７．８３４（２Ｈ，ｄ，＝８．０６），７．９１０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６），８．０６２（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６）ＭＷ＝７７０．８３１【００１８】
化合物Ｂの合成：４．５ｇの化合物Ａをクロロホルム２０ｍＬに溶解し、０〜５℃で臭化水素・酢酸溶液８．８ｍＬを加え、徐々に温度を室温まで戻しながら、一昼夜攪拌した。未反応の臭素をアルゴンガスで除去した後、溶媒を減圧留去した。残渣をクロロホルムに溶解し、冷した飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、溶媒を減圧留去し、化合物Ｂを淡黄色粉末として２．５ｇ（５９．２％）得た。【００１９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：２．２９９（３Ｈ，ｓ），２．３５７（３Ｈ，ｓ），２．３６５（３Ｈ，ｓ），２．４１４（３Ｈ，ｓ），６．８４９（１Ｈ，ｄ，Ｊ１＝Ｊ２＝４．０３），７．０９４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６），７．１６０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６），７．１９１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６），７．２３６（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６），７．７６１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６），７．８３０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６），７．８８１（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６），７．９４４（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０６）ＭＷ＝７１５．５９３【００２０】
化合物Ｃの合成：シクレソニド（３．００ｇ）にメタノール（５１．６ｍＬ）とテトラヒドロフラン（２５．８ｍＬ）を加えて溶解した。攪拌しながら、１Ｎ  ＮａＯＨを５．５５ｍＬ加えた。３０分間攪拌を続け、アンバーリスト１５を加えて、中和した。アンバーリストをろ過した後、減圧化濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製し、化合物Ｃ（２．６１ｇ、１００％）を得た。【００２１】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：０．９２（３Ｈ，ｓ），１．００−１．３０（８Ｈ，ｍ），１．４５（３Ｈ，ｓ），１．５０−１．８０（１０Ｈ，ｍ），２．０２−２．２１（３Ｈ，ｍ），２．３０−２．４０（１Ｈ，ｍ），２．５２−２．６２（１Ｈ，ｍ），２．９５−３．０３（１Ｈ，ｍ），４．２０−４．３０（２Ｈ，ｍ），４．４２−４．５３（２Ｈ，ｍ），４．８８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．７Ｈｚ），６．０４（１Ｈ，ｂｓ），６．２５−６．３１（１Ｈ，ｍ），７．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ）【００２２】
化合物１の合成：化合物Ｂ（１．４６２ｇ）と化合物Ｃ（６００ｍｇ）を無水ジクロロメタン（２１ｍＬ）に溶解し、モレキュラーシブス４Ａ（４．３８ｇ）を加え、アルゴン雰囲気下、室温で３０分間撹拌後、ｉｃｅ−ｓａｌｔ  ｂａｔｈ中トリフルオロメタンスルホン酸銀（４９２ｍｇ）を加え、徐々に室温に戻しながら１６時間撹拌して反応を行った。反応液に飽和重曹水（３０ｍＬ）を加えて撹拌後、クロロホルム（２０ｍＬ）にて２回抽出した。クロロホルム層は飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、減圧下留去した。残渣はシリカゲルカラムクロマト（ｎ−ヘキサン―酢酸エチル＝３：１、２：１、１：１で順次溶出）にて分離精製し、化合物１を白色粉末として８３０ｍｇ（５８．９％）得た。また、同時に化合物Ｂを２４９ｍｇ（４１．５％）回収した。
Ｒｆ＝０．２８（ｎ−ヘキサン―酢酸エチル＝２：１）【００２３】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，５００ＭＨｚ）δ：０．９６０（３Ｈ，ｓ，１８−ＣＨ３），１．４９４（３Ｈ，ｓ，１９−ＣＨ３），６．０４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，Ｈ４），６．３１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．０，１０．０Ｈｚ，Ｈ２），７．２８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，Ｈ１）．グルコース残基：２．２９，２．３５，２．３６，２．４１（ｅａｃｈ  ３Ｈ，ｓ，ＣＨ３Ｃ６Ｈ５ＣＯＯ×４），４．００（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝３．４，４．１，９．７Ｈｚ，Ｈ５），４．５１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．４，１２．０Ｈｚ，Ｈ６ａ），４．７９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．１，１２．０Ｈｚ，Ｈ６ｂ），５．１８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，Ｈ１），５．４９（１Ｈ，ｔ，９．７Ｈｚ，Ｈ２），５．７０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，Ｈ３），５．８７（１Ｈ，ｔ，９．７Ｈｚ，Ｈ４）．
ＦＡＢ−ＭＳ  １１０５（Ｍ＋Ｈ）＋．
【実施例２】
【００２４】
化合物２の合成（図２）
化合物１（８８７ｍｇ）を無水メタノール（１０ｍＬ）及び無水クロロホルム（５ｍＬ）に溶解し、アルゴン雰囲気下、室温にて２８％ナトリウムメトキシド（１ｍＬ）を滴下して加え、さらに１時間撹拌して反応を行った。反応液は撹拌しながら強酸性陽イオン交換樹脂のＤｏｗｅｘ５０Ｗ（Ｈ＋）を加えて中和し、吸引濾過、メタノール洗浄後、ろ液を減圧下留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマト（クロロホルム：メタノール＝１０：１）で精製し、化合物２を白色粉末として４３３ｍｇ（８５．３％）得た。
Ｒｆ＝０．３６（クロロホルム：メタノール＝５：１）【００２５】
１ＨＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：０．９４（３Ｈ，ｓ），０．９６−１．３２（８Ｈ，ｍ），１．４９（３Ｈ，ｓ），１．５０−１．８０（９Ｈ，ｍ），１．８０−２．００（２Ｈ，ｍ），２．０７−２．３０（２Ｈ，ｍ），２．３２−２．４３（１Ｈ，ｍ），２．５７−２．７２（１Ｈ，ｍ），３．２１−３．４０（４Ｈ，ｍ），３．６２−３．７１（１Ｈ，ｍ），３．８４−３．９２（１Ｈ，ｍ），４．３２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ），４．３６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４、２Ｈｚ），４．５４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１８．９Ｈｚ），４．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１８．９Ｈｚ），４．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．５Ｈｚ），６．０１（１Ｈ，ｂｒ），６．２５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．０，７．４５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ）ＦＡＢ−ＭＳ  ６３３（Ｍ＋Ｈ）＋．
【実施例３】
【００２６】
化合物３の合成（図３）
化合物Ｄの合成：Ｄ−（＋）−グルコース（２．０２ｇ）、無水酢酸（１０ｍＬ）、３３ｗｔ％臭化水素／酢酸（２ｍＬ）を室温、遮光下で一夜撹拌し、更に３３ｗｔ％臭化水素／酢酸（１０ｍＬ）を加え７時間撹拌した。反応液にジクロロメタン（５０ｍＬ）を加え、氷水（５０ｍＬ）に注ぎ分液した。水層をジクロロメタン（５０ｍＬ×２）で抽出し、ジクロロメタン層を合わせ、重曹水で中和、水洗、ブライン洗浄、乾燥（ＭｇＳＯ４）、そして減圧濃縮した。濃縮残渣（４．７４ｇ）にジイソプロピルエーテル（６．５ｇ）を加え、別途合成した化合物Ｄを接種した。固化した塊を砕き、ろ取、ジイソプロピルエーテル洗浄、減圧乾燥（室温）し、化合物Ｄ（３．８３ｇ，８３．１％）を得た。
Ｒｆ＝０．４５（ヘキサン：酢酸エチル＝３：２）【００２７】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：２．０４（３Ｈ，ｓ），２．０５（３Ｈ，ｓ），２．０９８（３Ｈ，ｓ），２．１０３（３Ｈ，ｓ），４．０９−４．１７（１Ｈ，ｍ），４．２６−４．３７（２Ｈ，ｍ），４．８４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．２，９．９Ｈｚ），５．１０−５．２１（１Ｈ，ｍ），５．５６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．６，９．６Ｈｚ），６．６１（ＩＨ，ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ）【００２８】
化合物３の合成：アルゴン雰囲気中、遮光下で化合物Ｂ（１．５０ｇ）、トリフルオロメタンスルホン酸銀（０．９０８ｇ）、モレキュラーシブス４Ａ（３．６０ｇ）、ジクロロメタン（２５ｍＬ）を室温で３時間撹拌した。反応液を氷水冷却し、約５℃で化合物１（１．３１ｇ）のジクロロメタン（１５ｍＬ）溶液を滴下した。そのまま約１時間撹拌した後、氷水浴を外し室温で更に一夜撹拌した。反応液をろ過し、飽和重曹水（３０ｍＬ）を加え２．５時間激しく撹拌した。分液しジクロロメタン層をブライン洗浄、乾燥（ＭｇＳＯ４）、減圧濃縮した。濃縮残渣（２．４７ｇ）をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、化合物３を白色粉末として１．３７ｇ（５３．７％）得た。
Ｒｆ＝０．１１（ヘキサン：酢酸エチル＝３：２）【００２９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：０．９０（３Ｈ，ｓ），０．９５−１．３０（７Ｈ，ｍ），１．４７（３Ｈ，ｓ），１．４８−１．８３（９Ｈ，ｍ），１．９６−２．２１（４Ｈ，ｍ），２．０２（３Ｈ，ｓ），２．０４（３Ｈ，ｓ），２．１０（３Ｈ，ｓ），２．１２（３Ｈ，ｓ），２．２９−２．３９（１Ｈ，ｍ），２．５０−２．６５（１Ｈ，ｍ），２．７８（１Ｈ，ｂｒ），３．６４（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝９．９，３．６，３．６Ｈｚ），４．２２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．２，３．６Ｈｚ），４．２６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），４．３７  ４．５１（１Ｈ，ｂｒ），４．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１８．９Ｈｚ），４．８４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），４．８７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．３，８．０Ｈｚ），５．０２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．３，８．０Ｈｚ），５．１１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．３，９．３Ｈｚ），５．２４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝９．３，９．３Ｈｚ），６．０３（１Ｈ，ｂｒ），６．２９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．２，２．０Ｈｚ），７．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ）
ＭＳ  ＥＳＩ（＋）８２３（Ｍ＋Ｎａ）＋．
【実施例４】
【００３０】
化合物３の合成（図４）
化合物２（０．１００ｇ）を乾燥ピリジン（１０ｍＬ）に溶かし、氷水冷却下、無水酢酸（１ｍＬ）を滴下した。５℃で１８時間撹拌した後、反応液にメタノールを注ぎ、３０分間攪拌した。減圧濃縮後、濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、化合物３を白色粉末として０．１２０ｇ（９５％）得た。
Ｒｆ＝０．１１（ヘキサン：酢酸エチル＝３：２）
【実施例５】
【００３１】
化合物４の合成（図４）
化合物２（０．４２２ｇ）を乾燥ピリジン（２１ｍＬ）に溶かし、氷水冷却下、プロピオニルクロリド（０．５５０ｍＬ）を滴下した。氷水浴を外し室温で４時間撹拌した後、反応液を氷水（６０ｇ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル層を水洗、硫酸銅水溶液洗浄、水洗、飽和重曹水洗浄、ブライン洗浄、乾燥（ＭｇＳＯ４）、そして減圧濃縮した。濃縮残渣（０．５５６ｇ）をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、化合物４を微黄色粉末として０．２９０ｇ（５０．７％）得た。
Ｒｆ＝０．８７（クロロホルム：メタノール＝１０：１）【００３２】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：０．９０（３Ｅ，ｓ），０．９９−１．３２（２０Ｈ，ｍ），１．４７（３Ｈ，ｓ），１．５０−１．７８（８Ｈ，ｍ），１．９５−２．２２（３Ｈ，ｍ），２．２２−２．４４（９Ｈ，ｍ），２．５２−２．６２（１Ｈ，ｍ），２．８３−２．８８（１Ｈ，ｍ），３．５８−３．６５（１Ｈ，ｍ），４．２１−４．２８（３Ｈ，ｍ），４．３６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝１２．１Ｈｚ，Ｊ２＝３．６Ｈｚ），４．４７−４．６３（３Ｈ，ｍ），４．８２−４．８８（２Ｈ，ｍ），５．０４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝９．５Ｈｚ，Ｊ２＝８・０Ｈｚ），５．１３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝Ｊ２＝９．８Ｈｚ），５．２７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝Ｊ２＝９．５Ｈｚ），６．０３（１Ｈ，ｂｔ），６．２９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝１０．１Ｈｚ，Ｊ２＝１．８Ｈｚ），７．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ）
ＭＳ  ＥＳＩ（＋）８７９（Ｍ＋Ｎａ）＋．
【実施例６】
【００３３】
化合物５の合成（図５）
化合物２（０．４５０ｇ）を乾燥ピリジン（２０ｍＬ）に溶かし、氷水冷却下、ｎ−ブチリルクロリド（０．６３０ｍＬ）を滴下した。氷水浴を外し室温で４時間撹拌した後、反応液を氷水（６０ｇ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル層を水洗、硫酸銅水溶液洗浄、水洗、飽和重曹水洗浄、ブライン洗浄、乾燥（ＭｇＳＯ４）、そして減圧濃縮した。濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、化合物５を白色粉末として０．３２０ｇ（４９．３％）を得た。【００３４】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：０．８０−１．３０（２３Ｈ，ｍ），１．４７（３Ｈ，ｓ），１．４８−１．８０（１６Ｈ，ｍ），１．９４−２．１８（３Ｈ，ｍ），２．１８−２．４２（９Ｈ，ｍ），２．５２−２．６２（１Ｈ，ｍ），２．８８−２．３３（１Ｈ，ｍ），３．５５−３．６５（１Ｈ，ｍ），４．１９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝１２．１Ｈｚ，Ｊ２＝３．４Ｈｚ），４．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．５Ｈｚ），４．３９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝１２．１Ｈｚ，Ｊ２＝３．５Ｈｚ），４．４７−４．６３（３Ｈ，ｍ），４．８２−４．８８（２Ｈ，ｍ），５．０３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝９．５Ｈｚ，Ｊ２＝８．０Ｈｚ），５．１４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝Ｊ２＝９．８Ｈｚ），５．２７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝Ｊ２＝９．５Ｈｚ），６．０３（１Ｈ，ｂｔ），６．２９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝１０．１Ｈｚ，Ｊ２＝１．８Ｈｚ），７．３０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ）
ＭＳ  ＥＳＩ（＋）９３５（Ｍ＋Ｎａ）＋．
【実施例７】
【００３５】
化合物６の合成（図５）
化合物２（０．３５０ｇ）を乾燥ピリジン（１６ｍＬ）に溶かし、氷水冷却下、イソブチリルクロリド（０．５００ｍＬ）を滴下した。氷水浴を外し室温で４時間撹拌した後、反応液を氷水（６０ｇ）に注ぎ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル層を水洗、硫酸銅水溶液洗浄、水洗、飽和重曹水洗浄、ブライン洗浄、乾燥（ＭｇＳＯ４）、そして減圧濃縮した。濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、化合物６を白色固体として０．４２０ｇ（８３．２％）を得た。【００３６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：０．９０（３Ｈ，ｓ），１．００−１．２７（３２Ｈ，ｍ），１．４７（３Ｈ，ｓ），１．４９−１．８２（８Ｈ，ｍ），１．９５−２・２２（３Ｈ，ｍ），２．３１−２．３７（１Ｈ，ｍ），２．４４−２・６６（５Ｈ，ｍ），２．９２−２．９５（１Ｈ，ｍ），３．５５−３．６２（１Ｈ，ｍ），４．１７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝１２．２Ｈｚ，Ｊ２＝３．０Ｈｚ），４．２５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ），４．４０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝１２．２Ｈｚ，Ｊ２＝３．６Ｈｚ），４．４５−４．６２（３Ｈ，ｍ），４．８４−４．９０（２Ｈ，ｍ），５．０３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝８・０Ｈｚ，Ｊ２＝９．５Ｈｚ），５．１２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝Ｊ２＝９．７Ｈｚ），５．３１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝Ｊ２＝９．５Ｈｚ），６．０３（１Ｈ，ｂｓ），６．２７−６．３１（１Ｈ，ｍ），７．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ）
ＭＳ  ＥＳＩ（＋）９３５（Ｍ＋Ｎａ）＋．
【実施例８】
【００３７】
化合物７の合成（図６）
化合物２（９１ｍｇ）を乾燥ピリジン（４ｍＬ）に溶解し、撹拌しながら５〜１０℃の水浴中、酢酸ギ酸無水物（０．６５ｍＬ）を３回に分けて、少量ずつ滴下した。その後室温にて２０時間撹拌した後、反応液を氷水（２００ｍＬ）に注ぎ、析出した白色固形物を吸引濾過、水洗後、クロロホルムで溶解し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。クロロホルムを減圧下留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマト（ｎ−ヘキサンー酢酸エチル＝１：１）にて精製し、さらに、ＯＤＳカラムを用いてＨＰＬＣ分取（メタノール：水＝７５：２５）することでグルコース水酸基の一部にアセチル基が入った化合物を除き、化合物７を白色粉末として４８ｍｇ（４５％）得た。
Ｒｆ＝０．６６（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：１）
ＨＰＬＣ（ＯＤＳカラム、メタノールー水＝７７：３３，１ｍＬ／ｍｉｎ，ＵＶ２５４ｎｍ）Ｒｔ＝１２．０７ｍｉｎ．【００３８】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：０．９０（３Ｈ，ｓ，１８−ＣＨ３），１．４６（３Ｈ，ｓ，１９−ＣＨ３），６．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，Ｈ４），６．２９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．８，１０．０Ｈｚ，Ｈ２），７．２８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，Ｈ１）．グルコース残基：３．７５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝３．１，４．０，１０．０Ｈｚ，Ｈ５），４．２２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．０，１２．０Ｈｚ，Ｈ６ａ），４．５８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．１，１２．０Ｈｚ，Ｈ６ｂ），４．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｈ１），５．１５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１，９．８Ｈｚ，Ｈ２），５．３０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．８，１０．０Ｈｚ，Ｈ４），５．５０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，Ｈ３），８．０５，８．０７，８．１０，８．１４（ｅａｃｈ１Ｈ，ｓ，ＯＣＨＯ  ｘ  ４）．
ＦＡＢ−ＭＳ  ７４５（Ｍ＋Ｈ）＋．
【実施例９】
【００３９】
化合物８の合成（図６）
化合物２（０．４７３ｇ）を乾燥ピリジン（２１．７ｍＬ）に溶かし、氷水冷却下、２−フロイルクロリド（０．７１８ｍＬ）を滴下した。氷水浴を外し室温で３時間撹拌した後、水を加えて反応を停止した。クロロホルムで抽出し、飽和重曹水洗浄、ブライン洗浄、乾燥（ＭｇＳＯ４）、そして減圧濃縮した。濃縮残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにて精製し、化合物８を白色粉末として０．７０８ｇ（９４．０％）を得た。【００４０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：０．９４（３Ｈ，ｓ），０．９６−１．２７（８Ｈ，ｍ），１．５０（３Ｈ，ｓ）１．５２−１．７８（９Ｈ，ｍ），１．７８−１．８６（１Ｈ，ｍ），１．９４−２．２３（３Ｈ，ｍ），２．３１−２．３８（１Ｈ，ｍ），２．５３−２．６３（１Ｈ，ｍ），３．０３−３．０７（１Ｈ，ｍ），３．９５−４．０１（１Ｈ，ｍ），４．２４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．５Ｈｚ），４．４２−４．５８（３Ｈ，ｍ），４．６９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１８．７Ｈｚ），４．７５−４．８６（２Ｈ，ｍ），５．１５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），５．３９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝８．０Ｈｚ，Ｊ２＝９．５Ｈｚ），５．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝Ｊ２＝９．７Ｈｚ），５．７４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝Ｊ２＝９．７Ｈｚ），６．０４（１Ｈ，ｂｓ），６．２８−６．３３（１Ｈ，ｍ），６．４０−６．４３（１Ｈ，ｍ），６．４５−６．４９（２Ｈ，ｍ），６．５３−６．５６（１Ｈ，ｍ），７．１２−７．１８（２Ｈ，ｍ），７．２２−７．２９（２Ｈ，ｍ），７．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ），７．４８−７．５１（１Ｈ，ｍ），７．５３−７．５７（２Ｈ，ｍ），７．５９−７．６２（１Ｈ，ｍ）
【実施例１０】
【００４１】
化合物９の合成（図７）
化合物Ｅの合成：Ｄ−フコース（０．３６ｇ）を無水酢酸（１．９７ｍＬ）に溶解し、３３ｗｔ％臭化水素酢酸溶液（０．３９ｍＬ）加え、遮光下で、一晩撹拌し、再び、３３ｗｔ％臭化水素酢酸溶液（１．９７ｍＬ）加えた。７時間撹拌した後、ジクロロメタン（９．８５ｍＬ）を加え、この溶液を氷水（９．８５ｍＬ）に加えた。分液後、水層をジクロロメタンで抽出した。飽和炭酸水素ナトリウム溶液で洗浄し、水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過後、減圧濃縮し、化合物Ｅ（８８５ｍｇ）を得た。【００４２】
化合物９の合成：アルゴン雰囲気中、遮光下で化合物Ｃ（１ｇ）、をジクロロメタン（１９．５ｍＬ）に溶解し、トリフルオロメタンスルホン酸銀（７１１ｍｇ）とモレキュラーシーブス４Ａ（２．８２ｇ）を加え、１０分間撹絆した。化合物Ｆ（８８５ｍｇ）のジクロロメタン（１１．７ｍＬ）溶液を加え、撹絆しながら、室温まで昇温し、室温で２時間攪拌した。ろ過後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液を加え、撹拌後、分液した。飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。ろ過後、減圧濃縮し、シリカゲルカラム精製し、化合物９を白色粉末として１１１ｍｇ（２８％）を得た。【００４３】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：０．９１（３Ｈ，ｓ），０．９８−１．３０（８Ｈ，ｍ），１．２４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），１．４５（３Ｈ，ｓ），１．４９−１．８０（１０Ｈ，ｍ），２．００（３Ｈ，ｓ），２．０３−２．１７（３Ｈ，ｍ），２．１３（３Ｈ，ｓ），２．１８（３Ｈ，ｓ），２．３０−２．４０（１Ｈ，ｍ），２．５１−２．６１（１Ｈ，ｍ），３．７６−３．８３（１Ｈ，ｍ），４．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ），４．４２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１８．４Ｈｚ），４．４８−４．５８（１Ｈ，ｍ），４．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ），４．６２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１８．４Ｈｚ），４．８５（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ），５．１２（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ１＝１０．４Ｈｚ，Ｊ２＝３．６Ｈｚ），５．２０−５．２５（２Ｈ，ｍ），６．０４（１Ｈ，ｂｓ），６．２７−６．３１（１Ｈ，ｍ），７．２２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．４Ｈｚ）
【実施例１１】
【００４４】
化合物１０の合成（図８）
化合物Ｆの合成：Ｌ−フコース（１ｇ）をクロロホルム（２０ｍＬ）に溶解し、トルオイルクロライド（７ｍＬ）ピリジン（４．５ｍＬ）を加え、室温にて１２時間撹拌して反応を行った。反応液を氷水（２００ｍＬ）に注ぎ、分液後、水層をクロロホルム（２０ｍＬ）で２回抽出した。クロロホルム抽出液を飽和硫酸銅水溶液（２０ｍＬ）、飽和重曹水（２０ｍＬ）、飽和食塩水（２０ｍＬ）の順で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。次にクロロホルムを減圧下留去し、化合物Ｆを白色結晶として３．９ｇ得た。【００４５】
化合物Ｇの合成：化合物Ｆ（３．９ｇ）を無水クロロホルム（２０ｍＬ）に溶解し、３３％臭化水素−酢酸溶液（９ｍＬ）を氷冷下加えて、１２時間室温にて撹拌した。反応液を氷水（３００ｍＬ）に注ぎ、撹拌後分液し、水層をクロロホルム（４０ｍＬ）で２回抽出した。クロロホムル層を飽和の重層水（３０ｍＬ）で洗浄後、飽和の食塩水で洗浄、無水の硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下留去し、化合物Ｇを白色粉末として３．５ｇ得た。
Ｒｆ＝０．６１（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）【００４６】
化合物Ｈの合成：化合物Ｇ（６３１ｍｇ）と化合物Ｃ（２５５ｍｇ）を無水ジクロロメタン（５ｍＬ）に溶解し、モレキュラーシーブス４Å（１．８ｇ）を加え、アルゴンガス雰囲気下室温にて１５分間撹拌後、０℃でトリフルオロメタンスルホン酸銀（２０９ｍｇ）を加えて徐々に昇温しながら遮光下室温にて１日撹拌して反応を行った。反応液は飽和の重層水（２０ｍＬ）に注ぎ撹拌後、クロロホルム（３０ｍＬ）で２回抽出した。クロロホルム層は飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄後、無水硫酸マグネシウム（５ｇ）で乾燥、減圧下留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトにて分離・精製し、化合物Ｈを白色粉末として６２３ｍｇ（６１％）得た。【００４７】
化合物Ｉの合成：化合物Ｈ（１．１３ｇ）をメタノール―ＴＨＦ溶液（１：１、２ｍＬ）に溶解し、１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液（０．２ｍＬ）を加え、室温にて３時間撹拌し、反応を行った。反応液に強酸性陽イオン交換樹脂のＤｏｗｅｘ５０Ｗｘ８（Ｈ＋）を少量ずつ加えて溶液を中和し、吸引濾過後、減圧下溶液を留去し、残留物をシリカゲルカラムクロマト（ｎ−ヘキサンー酢酸エチル＝１：１）で分離精製し、化合物Ｉを白色粉末として３９０ｍｇ得た。【００４８】
化合物１０の合成：化合物Ｉ（３９０ｍｇ）をピリジン（２０ｍＬ）にて溶解し、０℃から５℃で無水酢酸（２ｍＬ）を少量ずつ滴下した後、さらに、１２時間撹拌して反応を行った。メタノール（１０ｍＬ）を加えて反応を停止し、溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマト（クロロホルムーメタノール＝１０：１，５：１）にて精製し、化合物１０を白色粉末として２５６ｍｇ得た。【００４９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：０．８８（３Ｈ，ｓ，１８−ＣＨ３），１．４５（３Ｈ，ｓ，１９−ＣＨ３），４．４２  ａｎｄ  ４．４９（ｅａｃｈ  １Ｈ，ｄ，Ｊ＝１７．３Ｈｚ，２１−ＣＨ２），６．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，Ｈ４），６．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．７，１０．０Ｈｚ，Ｈ２），７．２７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，Ｈ１）．Ｌ−フコース部分２．００，２．１２，２．１８（ｅａｃｈ  ３Ｈ，ｓ，ＯＡｃ×３），１．２２（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，ＣＨ３），３．８１（１Ｈ，ｄｑ，Ｊ＝６．３，１．０Ｈｚ，Ｈ５），４．５６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，Ｈ１），５．０４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．２，１０．５Ｈｚ，Ｈ３），５．２３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．１，１０．５Ｈｚ，Ｈ２），５．０４（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．４，１．０Ｈｚ，Ｈ４）．
ＦＡＢ−ＭＳ  ７４３（Ｍ＋Ｈ）＋．
【実施例１２】
【００５０】
化合物１１及び化合物１２の合成（図９）
化合物Ｊの合成：Ｎ−アセチルグルコサミン（５．０ｇ）を無水酢酸（５ｍＬ）とピリジン（５ｍＬ）に溶解し、室温にて１６時間撹拌し反応を行った。反応液は氷水（３００ｍＬ）に注ぎ撹拌後、クロロホルム（１５０ｍＬ）にて２回抽出し、飽和食塩水（５０ｍＬ）で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、クロロホルムを減圧下留去。残留物にエーテルを加えて冷蔵庫で一晩放置して結晶化させ、吸引濾過により、白色結晶の化合物Ｊを８．７ｇ得た。【００５１】
化合物Ｋの合成：化合物Ｊ（１ｇ）を無水ジクロロメタン（１ｍＬ）に溶解し、７０％フッ化水素―ピリジン（３ｍＬ）の入ったポリ容器をｉｃｅ−ｂａｔｈで冷却した中に加え、徐々に室温に戻しながら一日撹拌し、反応を行った。反応液は氷―フッ化カリウム水溶液（２００ｍＬ）に注いで１時間撹拌し、クロロホルム（４０ｍＬ）で２回抽出。飽和硫酸銅水溶液、飽和重曹水溶液、飽和食塩水にて順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、クロロホルムを減圧下留去。残留物をシリカゲルカラムクロマト（ｎ−ヘキサン―酢酸エチル＝１：１，１：２）で分離精製し、化合物Ｋを４５８ｍｇ（５１％）、白色粉末として得た。
Ｒｆ＝０．４０（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：２）【００５２】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：２．００１，２．０５１，２．０５３，２．１１１（ｅａｃｈ  ３Ｈ，ｓ，Ａｃ  ×  ４），４．１５（１Ｈ，ｍ，Ｈ５），４．１６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．２，１２．７Ｈｚ，Ｈ６ａ），４．２８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．３，１２．７Ｈｚ，Ｈ６ｂ），４．４０（１Ｈ，ｍ，Ｈ２），５．２２（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．１，９．４Ｈｚ，Ｈ４），５．２５（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．８，９．６Ｈｚ，Ｈ３），５．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．８，５２．６Ｈｚ，Ｈ１），６．０８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，ＮＨ）．
ＦＡＢ−ＭＳ  ３５０（Ｍ＋Ｈ）＋．【００５３】
化合物１１と化合物１２の合成：化合物Ｋ（２４２ｍｇ）と化合物Ｃ（２７１ｍｇ）を無水ジクロロメタン（４ｍＬ）に溶解し、モレキュラーシ−ブス４Å（３００ｍｇ）を加えてアルゴン雰囲気下室温にて３０分間撹拌後、ｉｃｅ−ｂａｔｈで冷却し、三フッ化ホウ素エーテル錯体（２７０ｍＬ）を２回に分けて滴下した。その後室温にて一晩撹拌し反応を行った。飽和重曹水（２０ｍＬ）を注いで反応を終了し、セライト濾過後、ろ液をクロロホルム（１０ｍＬ）にて３回抽出を行った。クロロホルム抽出液を飽和食塩水（１５ｍＬ）で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下留去。残留物をシリカゲルカラムクロマト（ｎ−ヘキサン―酢酸エチル＝１：１、１：２）で分離精製し、化合物１１（１１６ｍｇ、２５．１％）化合物１２（１３９ｍｇ、３０．１％）をそれぞれ白色粉末として得た。【００５４】
化合物１１
Ｒｆ＝０．１５（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：２）
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：０．８９（３Ｈ，ｓ，１８−ＣＨ３），１．４７（３Ｈ，ｓ，１９−ＣＨ３），６．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，Ｈ４），６．２９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．８，８．３Ｈｚ，Ｈ２），７．２８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，Ｈ１）．Ｎ−アセチルグルコサミン部分１．９８８，２．０４５，２．０４６，２．１２３（ｅａｃｈ３Ｈ，ｓ，ＯＡｃ  ×  ３，ＮＨＡｃ），３．６０（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝３．９，４．２，９．５Ｈｚ，Ｈ５），４．０３（１Ｈ，ｍ，Ｈ２），４．２６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．１，４．２Ｈｚ，Ｈ６ａ），４．３１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．１，３．９Ｈｚ，Ｈ６ｂ），４．７６（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，Ｈ１），５．１１（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．５，９．３Ｈｚ，Ｈ４），５．１６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．５，９．３Ｈｚ，Ｈ３），５．７７（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，ＮＨ）．
ＦＡＢ−ＭＳ  ８００（Ｍ＋Ｈ）＋．【００５５】
化合物１２
Ｒｆ＝０．２３（ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１：２）．
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：０．９４（３Ｈ，ｓ，１８−ＣＨ３），１．４７（３Ｈ，ｓ，１９−ＣＨ３），６．０３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，Ｈ４），６．２９（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．０，１０．０Ｈｚ，Ｈ２），７．２８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，Ｈ１）．Ｎ−アセチルグルコサミン部分１．９８８，２．０４５，２．０４６，２．１２３（ｅａｃｈ３Ｈ，ｓ，ＯＡｃ  ×  ３，ＮＨＡｃ），４．０５（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝３．９，４．２，９．５Ｈｚ，Ｈ５），４．３８（１Ｈ，ｍ，Ｈ２），４．１８（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．１，４．２Ｈｚ，Ｈ６ａ），４．２６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１２．１，３．９Ｈｚ，Ｈ６ｂ），４．７７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，Ｈ１），５．１６（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，Ｈ４），５．３０（１Ｈ，ｔ，Ｊ＝９．７Ｈｚ，Ｈ３），６．４４（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ，ＮＨ）．ＦＡＢ−ＭＳ  ８００（Ｍ＋Ｈ）＋．【００５６】
薬理作用の評価
〔クロトン油誘発耳浮腫試験〕
皮膚炎の代表的なモデルであるクロトン油耳浮腫試験を用いて本発明化合物（化合物３〜化合物７、化合物９〜化合物１１）および参考例として化合物２と化合物８等の薬理効果について検討した。なお、化合物２は化合物３〜７の中間体であり、化合物１は、化合物２の前駆体である。
【００５７】
（１）実験方法
５週齢（体重１２８ｇ〜１６９ｇ）のラットを１群５匹ずつ使用した。試験前日、エーテル麻酔下でｄｉａｌ  ｔｈｉｃｋｈｅｓｓ  ｇａｕｇｅを用いて右耳厚を測定し、Ｐｒｅ値とした。試験当日、エーテル麻酔下、白色ワセリンで各濃度に調製した被験軟膏２０ｍｇをラットの右耳介（裏表に）に塗布した後、接触掻擦及び薬剤の除去を予防するために首枷を装着した。２時間後、エーテル麻酔下で脱脂綿を用いて塗布した軟膏をふき取り、５パーセント  クロトン油（クロトン油：エーテル：ピリジン：蒸留水＝１：１４：４：１）溶液０．１ｍＬをドライヤー（送風）で乾かしつつ耳介裏表に滴下塗布して耳浮腫を惹起した。浮腫惹起６及び２４時間後、エーテル麻酔下で右耳介厚を測定し、次式により浮腫率及び浮腫抑制率を算出し、抑制率を表１に示した。【００５８】
【数１】
0005412622.tif 000003
【００５９】
（２）結果
薬理効果（抗炎症効果）が強いほど高い値を示す。本発明化合物は強い抗炎症効果を示し、既存のステロイド薬であるブデソニドやシクレソニドより強い効果を示した。意外にも、活性本体化合物であるシクレソニドよりも強い効果が認められた。一方、２１−置換グリコシルステロイド化合物（国際公開番号：９９／４７５４１、９９／４７５４２）に記載されている化合物（対照化合物１及び２）ではブデソニドより強い効果が認められず、活性本体のブデソニドより強い効果が得られなかったのに対し、本発明化合物では活性本体化合物の効果を超える強い抗炎症効果が認められた。
以上のことより、本発明化合物は皮膚炎モデルにおいて強い抗炎症効果を示す事が判明した。【００６０】
〔クロトン油誘発肉芽腫試験〕
局所抗炎症作用と全身性副作用が同時に評価できる試験方法であるクロトン油肉芽腫試験を用いて本発明化合物の薬理効果及び全身性副作用について検討した。【００６１】
（１）実験方法
体重１８０〜２２５ｇのウイスター系雄性ラットを１群５匹とし、エーテル麻酔下で背部をバリカンで刈毛し、背部の皮下に空気２０ｍＬを注入して空気嚢を作製した。翌日、１％クロトン油含有綿実油１ｍＬを嚢中に投与した。被験薬はクロトン油含有綿実油に懸濁して投与した。７日後にエーテル麻酔下で腹大動脈から採血した後、嚢内の浸出液を採取し液量を測定した。また、胸腺を摘出し重量を測定した。浸出液重量、胸腺重量は対照群に対する抑制率・委縮率（％）として表２に示した。【００６２】
（２）結果
薬理活性（抗炎症効果）の指標として浸出液の抑制効果を測定し、全身性副作用の指標として胸腺の委縮効果を測定した。胸腺の委縮に対しては、既存のステロイド薬であるブデソニドやシクレソニドでは０．１ｍｇ／ｒａｔ投与で２０％以上の委縮が認められ、１ｍｇ／ｒａｔ投与では８０％以上の明らかな委縮が観察された。また、対照化合物では１ｍｇ／ｒａｔ投与で２０％以上の胸腺の委縮が観察された。一方、本発明化合物では２０％以上の胸腺の委縮は観察されなかった。さらに、薬理効果の指標である浸出液抑制効果に対しては、本発明化合物は既存のステロイド薬よりは弱いものの対照化合物よりも同等以上の強い抗炎症作用を示した。医薬品は主作用と全身性副作用のバランスが大切であり、本発明化合物は対照化合物よりは強い抗炎症効果を示し、全身性副作用の指標である胸腺の委縮が観察されなかったことから、全身性副作用の少ない安全な抗炎症ステロイド薬であることが判明した。【００６３】
〔ＤＮＣＢ誘発皮膚炎試験〕
アレルギー性皮膚炎の代表的なモデルであるＤＮＣＢ誘発皮膚炎試験を用いて本発明化合物（化合物３〜化合物７、化合物９〜化合物１１）および参考例として化合物８等の薬理効果について検討した。
【００６４】
（１）実験方法
イソフルラン麻酔下でラット（体重２０５〜２３０ｇ）の腹部被毛を電気バリカン及びシェーバーで毛刈りした後、３ｃｍ×４ｃｍの被験部位を設け、その内側に１％  ＤＮＣＢ／アセトン溶液を０．４ｍＬ塗布して感作を行った。２週間後、同区域内に１％  ＤＮＣＢ／アセトン溶液を１ｍＬ塗布して惹起を行い、その４日後に再惹起を行った。再惹起の２日後に被験区域より皮膚を摘出し、直径１２ｍｍのポンチで所定の５ヵ所を打ち抜いて皮膚厚をｄｉａｌ  ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ  ｇａｕｇｅを用いて測定した。また、副作用の影響を調べるために胸腺を摘出して重量を測定した。被験薬は、最初の皮膚炎惹起４時間後に軟膏０．１ｍＬを被験部位に均一になるように塗布した。その後、１日１回被験薬を塗布し、再惹起の翌日（皮膚摘出の前日）まで計６回塗布した。皮膚厚、胸腺重量は対照群に対する抑制率・委縮率（％）として表３に示した。【００６５】
（２）結果
薬理活性（抗炎症効果）の指標として皮膚厚を測定し、全身性副作用の指標として胸腺の委縮効果を測定した。ＤＮＣＢで感作した動物にＤＮＣＢを塗布することにより皮膚炎が惹起され皮膚厚が増加し、薬理活性（抗炎症効果）が高いほど皮膚厚は減少する。本発明化合物は、皮膚炎治療薬に用いられている吉草酸ベタメタゾン０．１２％軟膏及び酪酸プロピオン酸ベタメタゾン０．０５％軟膏より強い抗炎症作用を示した。また、胸腺の委縮に対しては、吉草酸ベタメタゾン０．１２％軟膏及び酪酸プロピオン酸ベタメタゾン０．０５％軟膏では約５０％の胸腺委縮が観察されたのに対し、本発明化合物では全く胸腺委縮は認められなかった。医薬品は主作用と全身性副作用のバランスが大切であり、本発明化合物は対照化合物よりは強い抗炎症効果を示し、全身性副作用の指標である胸腺の委縮が観察されなかったことから、全身性副作用の少ない安全な抗炎症ステロイド薬であることが判明した。【００６６】
クロトン油誘発耳浮腫試験、クロトン油誘発肉芽腫試験及びＤＮＣＢ誘発皮膚炎試験の結果を総合的に評価すると、本発明化合物は全身性副作用の少ない安全な抗炎症ステロイド薬であり、特に外用投与により強い効果を示すことが明らかとなった。【００６７】
〔炎症皮膚と非炎症皮膚の活性代謝物生成量〕
本発明化合物は炎症部位で活性代謝物（デスシクレソニド）に代謝され薬理効果を示す特長を有する化合物である。本発明化合物を炎症皮膚（ＤＮＣＢにより皮膚炎を惹起した皮膚）又は非炎症皮膚（正常皮膚）に塗布した時の活性代謝物の生成量を比較した。【００６８】
（１）実験方法
９週齢のヘアレスラットの腹部３ｃｍ×４ｃｍを被験部位とし、イソフルラン麻酔下でその内側に１％  ＤＮＣＢ／アセトン溶液を０．４ｍＬ塗布して感作を行った。２週間後、同区域内に１％  ＤＮＣＢ／アセトン溶液を１ｍＬ塗布して惹起を行い、惹起から４８時間後に被験薬（０．１％軟膏）０．１ｍＬを被験部位に均一になるように塗布した。被験薬塗布開始から４８時間後に皮膚を摘出した。一方、感作及び惹起を行っていない正常動物にも、被験薬塗布を行い、４８時間後に皮膚を摘出した。皮膚を直径１２ｍｍのポンチで打ち抜いた後、ハサミで細切し、１ｇ当たり５ｍＬの５０％アセトニトリルを加えてポリトロンでホモジナイズした。遠心（１０，０００ｇ、４℃、５ｍｉｎ）後、遠心上清をＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用い、活性代謝物量（デスシクレソニド）を定量した。皮膚中の活性代謝物量は皮膚１ｇ当たりの薬物量に換算し表４に示した。【００６９】
（２）結果
炎症皮膚又は非炎症皮膚に本発明化合物を単回塗布し、４８時間後の活性代謝物量を測定した結果、炎症皮膚では非炎症皮膚と比較して約１０倍の活性代謝物が認められた。
本発明化合物はそれ自身ステロイド様活性を有さずに、生体内でステロイド様活性を有する活性代謝物へ変換される特徴を有する。通常のステロイド軟膏剤は炎症皮膚と非炎症皮膚で同程度の薬理効果（抗炎症作用、細胞増殖抑制作用、免疫抑制作用等）を示す。しかし、本発明化合物は非炎症皮膚と炎症皮膚では活性代謝物量が異なり、抗炎症効果を期待する炎症皮膚で活性代謝物が多くなり抗炎症効果を示し、抗炎症効果を必要としない非炎症皮膚（正常皮膚）では活性代謝物量が少ないため、局所副作用が少ないことが示された。この事より、本発明化合物は、皮膚の炎症の有無で活性代謝物量を調節することで局所副作用を軽減する特長を有する事が明らかとなった。【００７０】
【表１】
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【００７１】
【表２】
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【００７２】
【表３】
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【００７３】
【表４】
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【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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