(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
健常な加齢哺乳動物における行動の低下を予防、軽減し、又は遅延させるための医薬組成物であって、
健常な加齢哺乳動物における行動の低下を予防、軽減し、又は遅延させるのに有効な量で中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を含み、
前記ＭＣＴは、グリセロール骨格にエステル結合した、それぞれ独立に５〜１２個の炭素を有する脂肪酸鎖からなり、
前記脂肪酸鎖の９５％超が８炭素長であり、前記脂肪酸鎖の残りが炭素数６又は１０の脂肪酸鎖であり、
前記加齢哺乳動物がイヌであり、
前記加齢哺乳動物は、その平均寿命の少なくとも５０％に到達している、医薬組成物。
【請求項２】
１ヶ月を超える期間にわたって定期ベースで投与される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
乾燥重量ベースで、１５〜５０％のタンパク質、５〜４０％の脂肪、５〜１０％の灰分を更に含み、５〜２０％の水分含量を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
乾燥重量ベースで少なくとも１％から３０％のＭＣＴを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
健常な加齢哺乳動物における行動の低下を予防、軽減し、又は遅延させるための医薬の製造における中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を含む組成物の使用であって、
前記ＭＣＴは、グリセロール骨格にエステル結合した、それぞれ独立に５〜１２個の炭素を有する脂肪酸鎖からなり、
前記脂肪酸鎖の９５％超が８炭素長であり、前記脂肪酸鎖の残りが炭素数６又は１０の脂肪酸鎖であり、
前記加齢哺乳動物がイヌであり、
前記加齢哺乳動物は、その平均寿命の少なくとも５０％に到達している、使用。
【請求項６】
健常な加齢哺乳動物における行動の低下を予防、軽減し、又は遅延させるための方法であって、
行動の低下を有するか、又はそのリスクのある加齢哺乳動物を同定するステップと、
前記哺乳動物における行動の低下を予防、軽減し、又は遅延させるのに有効な量で中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を含む組成物を、長期かつ定期ベースで前記哺乳動物に投与するステップと、
を含み、
前記組成物は、前記哺乳動物における少なくとも１種のケトン体の血中濃度を増加させ、
前記ＭＣＴは、グリセロール骨格にエステル結合した、それぞれ独立に５〜１２個の炭素を有する脂肪酸鎖からなり、
前記脂肪酸鎖の９５％超が８炭素長であり、前記脂肪酸鎖の残りが炭素数６又は１０の脂肪酸鎖であり、
前記哺乳動物がイヌである、方法。
【請求項７】
前記哺乳動物におけるケトン体濃度をモニターするステップを更に含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
β−ヒドロキシ酪酸、アセト酢酸及びアセトンの各々の量が前記哺乳動物の血中で上昇する、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記組成物は、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸又はＶＬＤＬのうちの１つ又は複数の、前記哺乳動物の血中量を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１０】
アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸及びＶＬＤＬの各々の量が前記哺乳動物の血中で低下する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記組成物は、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ又はクエン酸塩のうちの１つ又は複数の、前記哺乳動物の血中量を上昇させるのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１２】
グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ及びクエン酸塩の各々の量が前記哺乳動物の血中で上昇する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記組成物は、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸及びＶＬＤＬの各々の量を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記組成物は、脳への血流を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１５】
前記組成物は、血液脳関門の完全性を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１６】
前記組成物は、ペットフード、又は栄養補助食品である、請求項６に記載の方法。
【請求項１７】
前記組成物は、乾燥重量ベースで少なくとも１％から３０％のＭＣＴを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１８】
前記投与ステップが、少なくとも１日１回を含む定期ベースで行われる、請求項６に記載の方法。
【請求項１９】
前記組成物は、毎日の食餌計画の一部として、少なくとも１週間投与される、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記組成物は、毎日の食餌計画の一部として、少なくとも３カ月間投与される、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記組成物は、血中尿素窒素を低下させるか、又はタンパク質分解を減少させるのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項２２】
前記組成物は、アラニンアミノトランスフェラーゼの量又は活性を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項２３】
前記組成物は、イヌの社会的行動を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項２４】
健常な加齢哺乳動物における行動の低下を予防、軽減し、又は遅延させるための方法であって、
（ａ）加齢性の認知障害疾患を有しない加齢哺乳動物を同定するステップと、
（ｂ）前記哺乳動物における行動の低下を予防、軽減し、又は遅延させるのに有効な量で中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を含む組成物を、長期かつ定期ベースで前記哺乳動物に投与するステップと、
（ｃ）前記投与ステップの期間、少なくとも定期的に、前記哺乳動物における、少なくとも１種のケトン体の濃度、及び行動を測定するステップと、
（ｄ）前記少なくとも１種のケトン体の濃度及び行動の前記測定結果を、前記投与組成物を与えられていない対照動物と比較するステップと、
（ｅ）前記ケトン体の濃度を、行動の測定結果と相関させ、それにより、前記組成物の投与の結果としての、行動の低下の予防、軽減又は遅延を実現させるステップと、
を含み、
前記組成物は、前記哺乳動物における少なくとも１種のケトン体の血中濃度を増加させ、
前記ＭＣＴは、グリセロール骨格にエステル結合した、それぞれ独立に５〜１２個の炭素を有する脂肪酸鎖からなり、
前記脂肪酸鎖の９５％超が８炭素長であり、前記脂肪酸鎖の残りが炭素数６又は１０の脂肪酸鎖であり、
前記哺乳動物がイヌである、方法。
【請求項２５】
β−ヒドロキシ酪酸、アセト酢酸及びアセトンの各々の量が前記哺乳動物の血中で上昇する、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記組成物は、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸又はＶＬＤＬのうちの１つ又は複数の量を前記哺乳動物の血中で低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸及びＶＬＤＬの各々の量が低下する、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記組成物は、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ又はクエン酸塩のうちの１つ又は複数の、前記哺乳動物の血中量を上昇させるのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項２９】
グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ及びクエン酸塩の各々の量が上昇する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記組成物は、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸及びＶＬＤＬの各々の量を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記組成物は、経時的に、又は前記対照動物と比較して脳への血流を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項３２】
前記組成物は、経時的に、又は前記対照動物と比較して血液脳関門の完全性を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項３３】
前記組成物は、ペットフード、又は栄養補助食品である、請求項２４に記載の方法。
【請求項３４】
前記組成物は、乾燥重量ベースで少なくとも１％から３０％のＭＣＴを含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項３５】
前記投与ステップが、少なくとも１日１回を含む定期ベースで行われる、請求項２４に記載の方法。
【請求項３６】
前記組成物は、毎日の食餌計画の一部として、少なくとも１週間から１年間投与される、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記組成物は、血中尿素窒素を低下させるか、又はタンパク質分解を減少させるのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項３８】
前記組成物は、アラニンアミノトランスフェラーゼの量又は活性を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項３９】
前記組成物は、イヌの社会的行動を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項２４に記載の方法。
【請求項４０】
健常な加齢哺乳動物の集団における行動の低下を予防、軽減し、又は遅延させるための方法であって、
（ａ）加齢性の認知障害を有しない健常な加齢哺乳動物の集団を同定するステップと、
（ｂ）前記集団を、少なくとも対照群及び１つ又は複数の試験群に分割するステップと、
（ｃ）哺乳動物個体の血中ケトン体レベルを上昇させ、上昇させたレベルを維持するのに有効な量で中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を含む組成物を送達するための、少なくとも１つの食餌ベース送達系を処方するステップと、
（ｄ）前記対照群及び試験群において、行動を比較するステップと、
（ｅ）ＭＣＴを含む組成物を送達するための前記食餌ベース送達系のうちのいずれが、行動の低下の予防、軽減又は遅延において有効であったかを決定するステップと、
（ｆ）ステップ（ｅ）において決定された前記食餌ベース送達系の１つを加齢哺乳動物の集団に投与し、それにより、行動の低下を予防、軽減し、又は遅延させるステップと、
を含み、
前記ＭＣＴは、グリセロール骨格にエステル結合した、それぞれ独立に５〜１２個の炭素を有する脂肪酸鎖からなり、
前記脂肪酸鎖の９５％超が８炭素長であり、前記脂肪酸鎖の残りが炭素数６又は１０の脂肪酸鎖であり、
前記哺乳動物がイヌであり、
ステップ（ｃ）において、各試験群は、ＭＣＴを含む組成物を送達する処方物を長期かつ定期ベースで投与され、対照群は、ＭＣＴを含む組成物を投与されない方法。
【請求項４１】
前記長期かつ定期ベースの投与が、少なくとも１週間から１年間、少なくとも１日１回の投与を含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記対照群及び試験群の各哺乳動物におけるケトン体濃度をモニターするステップを更に含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】
β−ヒドロキシ酪酸、アセト酢酸及びアセトンの各々の量が上昇する、請求項４０に記載の方法。
【請求項４４】
前記組成物は、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸又はＶＬＤＬのうちの１つ又は複数の血中レベルを低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４５】
アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸及びＶＬＤＬの各々のレベルが低下する、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】
前記組成物は、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ又はクエン酸塩のうちの１つ又は複数の血中レベルを上昇させるのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項４７】
グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ及びクエン酸塩の各々のレベルが上昇する、請求項４６に記載の方法。
【請求項４８】
前記組成物は、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸及びＶＬＤＬの各々のレベルを低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
前記組成物は、脳への血流を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項５０】
前記組成物は、血液脳関門の完全性を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項５１】
前記組成物は、乾燥重量ベースで少なくとも１％から３０％のＭＣＴを含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項５２】
前記組成物は、血中尿素窒素を低下させるか、又はタンパク質分解を減少させるのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項５３】
前記組成物は、アラニンアミノトランスフェラーゼの量又は活性を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項４０に記載の方法。
【請求項５４】
前記組成物は、イヌの社会的行動を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む、請求項４０に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【発明の分野】
【０００１】
本発明は、哺乳動物の栄養、並びに認知機能、行動及び脳生理へのその効果に関する。特に、本発明は、特に加齢動物において、長期食餌計画の一部として投与される中鎖トリグリセリドを利用して、学習、注意力、運動能力、脳血管機能、社会的行動を維持又は改善し、活動レベルを増大させるものである。
【発明の背景】
【０００２】
特許、公開された出願、技術論文及び学術論文を始めとする様々な文献が、明細書全体にわたって引用されている。引用された文献の各々は、その全体が、参照されることにより本明細書に組み込まれる。本明細書内で完全には引用されていない文献の完全な引用は本明細書の最後に挙げられている。
【０００３】
認知障害、認知機能の進行性低下、脳形態の変化、及び脳血管機能の変化は、高齢個体又は加齢個体において一般に観察される。加齢性の、すなわち加齢に伴う認知障害は様々な形で現れるが、徴候としてはとりわけ、短期記憶の喪失、学習能力又は学習速度の減退、注意力の減退、運動能力の減退、及び／又は認知症を挙げることができる。そのような認知機能低下の具体的な原因が未知の場合もあるが、認知障害が、公知の疾患、障害又は症候群（例えば、アルツハイマー病（ＡＤ））の発症又は進行に起因する場合もある。加齢に伴う認知機能低下は、ＡＤとは区別されるものであり、ＡＤとは無関係に起こり得る。
【０００４】
健常な哺乳動物の脳の主要なエネルギー源はグルコースである。加齢性の認知機能低下は、グルコース代謝の障害と相関している（Ｆｉｎｃｈ  ＣＥら、１９９７年）。グルコース代謝の障害は、脳内のエネルギー不足を生じさせ、脳内の神経細胞損失及び形態変化をもたらす可能性がある（Ｈｏｙｅｒ  Ｓ、１９９０年）。
【０００５】
グルコース代謝の障害は、細胞の、酸化的損傷を修復し、これに抵抗する能力を減退させる可能性がある（Ｍｕｎｃｈ  Ｇら、１９９８年）。随伴する神経細胞損失及び形態異常は、高齢者における精神能力の低下の一因となるものと思われる。
【０００６】
アルツハイマー病患者もグルコース代謝の低下を示し、ポジトロン放出断層撮影を用いた研究により、脳のグルコースレベルの低下が示されている（Ｄｒｚｅｚｇａ  Ａら、２００５年；Ｓｍａｌｌ  ＧＷら、２０００年）。グルコースレベル及びグルコース代謝の低下の根底にある正確な機構は完全には理解されていないが、神経病理学的事象、例えば、酸化ストレス、神経細胞死、並びにアセチルコリン、ＡＴＰ及びコレステロールのレベルの低下はすべて、脳内のエネルギー及びグルコース代謝の低下と相関している（Ｓｗａａｂら、１９９８年）。
【０００７】
グルコース代謝の変化の効果に加えて、一仮説によれば、脳への局所血流量の減少が、ヒトにおける認知機能低下及び認知症の一因となっている（Ｗａｒｄｌａｗ  ＪＭら、２００３年）。局所脳血液量は、ヒトの年齢及び認知症の段階によって影響される（Ｓｐｌｉｔ  Ａら、２００５年；Ｐｅｔｒｅｌｌａ  ＪＲら、１９９８年）。
【０００８】
グルコースは、哺乳動物の脳の主要なエネルギー源であると理解されているが、長期の空腹又は炭水化物欠乏の期間においては、ケトン体が脳内の代替エネルギー源として作用し得ることが古くから知られている。アセトン、アセト酢酸、β−ヒドロキシ酪酸を始めとするケトン体は、ＡＴＰ産生のためにミトコンドリアによって容易に用いられ、フリーラジカルによる損傷から神経細胞を保護する効果を発揮し得る（ＶａｎＩｔａｌｌｉｅ  ＴＢら、２００３年）。
【０００９】
ケトン体は、ＡＤ患者への使用が提唱されている（Ｒｅｇｅｒ  ＭＡら、２００４年；ＶａｎＩｔａｌｌｉｅ  ＴＢら、２００３年；米国特許第６３２３２３７号及び第６３１６０３８号）。ケトン体は、認知症及びアルツハイマー病の治療に用いられている。例えば、米国特許第６３２３２３７号及び第６３１６０３８号には、神経変性障害を治療するための、ケトン体及びケトン体の代謝前駆体の使用が記載されている。
【００１０】
中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）は、グリセロール骨格にエステル結合した脂肪酸鎖からなる。ＭＣＴは、ある生理的環境下、肝臓でケトン体へと代謝されるが、ＭＣＴは、ケトン体への変換前に代謝処理を受けなければならない。摂取後、エステル化された脂肪酸は、膵リパーゼ、消化管リパーゼ等のリパーゼによってＭＣＴから切断され、放出された中鎖脂肪酸は、遊離脂肪酸として門脈を経由して肝臓に輸送される。中鎖脂肪酸は、長鎖脂肪酸のようにカイロミクロン中に取り込まれない。肝臓において、中鎖脂肪酸は、酸化されてアセチル−ＣｏＡを形成する。その結果、ＭＣＴから生成されたケトン体は、代替のエネルギー源を提供して、アルツハイマー病患者の神経細胞におけるエネルギー欠乏を補充することができる（Ｒｅｇｅｒ  ＭＡら、２００４年）。しかし、上述の米国特許（米国特許第６３２３２３７号及び第６３１６０３８号）に記載のケトンエステル（これらは、ケトン体に直接変換可能なケトン体の代謝等価物（例えば、β−ヒドロキシ酪酸のポリマー）である。）と異なり、ＭＣＴの摂取は必ずしもケトン体の生成を導くとは限らないため、ＭＣＴを、ケトン体と代謝的に等価と見なすことはできない。更に、ＭＣＴがケトン体に変換される場合、変換は２つのアセチル−ＣｏＡ分子の縮合を通じて行われるが、各分子は様々な供給源に由来し得る。
【００１１】
認知障害の動物モデルは、そのような状態の研究（例えば、生理学、神経学、解剖学、病理学）を大いに促進する。イヌは、認知的作業の関数の変数である学習及び記憶において加齢に伴う認知機能低下のパターンを示すことから、有用なモデルを提供する（Ａｄａｍｓ  Ｂら、２０００ａ；Ｃｈａｎ  ＡＤＦら、２００２年；Ｓｕ  Ｍ−Ｙら、１９９８年；Ｔａｐｐ  ＰＤら、２００３年）。コンパニオンアニマルとしてのイヌにおけるそのような低下の研究はそれ自体で有用であるが、観察される低下が、ヒトにおいて見られる加齢性の認知機能低下を反映しているという事実（Ａｄａｍｓ  Ｂら、２０００ｂ）は、この研究を更に価値のあるものにしている。イヌにおいても、脳の局所的なグルコース代謝率が加齢に伴って低下する（Ｌｏｎｄｏｎ  ＥＤら、１９８３年）。イヌは、認知機能、脳構造及び神経病理の年齢に伴う変化に関連する可能性のある、局所脳血液量及び血液脳関門透過性の年齢依存性の変化を示す（Ｔａｐｐ  ＰＤら、２００５年；Ｓｕ  ＭＹ、１９９８年）。高齢のイヌは、順調に加齢しているヒト及びＡＤを有する患者のいずれにも見られる神経病理（例えば、βアミロイドタンパク質）に関連する神経病理を示す（Ｃｏｔｍａｎ  ＣＷ及びＢｅｒｃｈｔｏｌｄ、２００２年；Ｃｕｍｍｉｎｇｓ  ＢＪら、１９９６年）。しかし、イヌは、ＡＤのあらゆる特徴を示すわけではなく、特に、タウ含有神経原線維変化（Ｄｉｍａｋｏｐｏｕｌｏｓ  ＡＣら、２００２年）は観察されていない。そのため、イヌにおけるそのような状態は区別され、イヌ認知機能不全症候群（Ｃａｎｉｎｅ  Ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ  Ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ  Ｓｙｎｄｒｏｍｅ）（ＣＣＤＳ）と呼ばれる。
【００１２】
健常な加齢若しくは老齢イヌ及びＣＣＤＳと診断されたイヌはいずれも、進行性認知障害及び神経病理学的変化を臨床的に示す場合がある（Ｌｏｎｄｏｎ  ＥＤら、１９８３年）。更に、加齢／老齢イヌ及びＣＣＤＳと診断されたイヌはいずれも様々な行動障害を示す。例えば、これらのイヌは、自分たちの名前や聞き慣れた命令に反応しないことがある。また、慣れ親しんだ場所でも迷子になったり錯乱したりすることがある。飼い主や訪問者にもはや挨拶も反応もしないことがある。また、昼間の活動の減退を示すことがある。また、円を描いて歩くことがある。また、愛情を避けることがある。また、膀胱又は腸の制御を失うことがある。
【００１３】
このような事情から、当技術分野では、特に加齢若しくは老齢動物及びＣＣＤＳ様症状を有する動物における認知障害の治療及び／又は予防のための組成物及び方法を開発する必要がある。コンパニオンアニマルの場合、そのような療法は、生活の全体的な質の改善、飼い主の満足の改善、及び飼い主とコンパニオンアニマルとの間のきずなの改善に有用であろう。
【発明の概要】
【００１４】
本発明の一態様は、加齢哺乳動物、例えば、その平均寿命の少なくとも５０％に到達した哺乳動物、における認知機能、運動能力、脳血管機能又は行動のうちの１つ又は複数の低下を予防、軽減し、又は遅延させるのに有効な量で中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を含む組成物であって、哺乳動物における少なくとも１種のケトン体の血中濃度を増加させる組成物を特徴とする。
【００１５】
ＭＣＴは、典型的には、式：
【化１】
0005537809.tif 000002
［式中、グリセロール骨格にエステル結合したＲ１、Ｒ２及びＲ３は、各々独立に、５〜１２個の炭素を有する脂肪酸である。］
のものである。場合により、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の約９５％超は８炭素長である。残りのＲ１、Ｒ２及びＲ３は、炭素数６又は１０の脂肪酸とすることができる。ある実施形態では、組成物は、乾燥重量ベースで少なくとも約１％から約３０％のＭＣＴを含む。上記組成物は、乾燥重量ベースで、約１５〜５０％のタンパク質、５〜４０％の脂肪、５〜１０％の灰分を更に含み、５〜２０％の水分含量を有する食品組成物とすることができる。組成物は、任意の哺乳動物による摂取のために処方することができる。ある実施形態では、哺乳動物は非ヒトであり、特定の実施形態では、哺乳動物はコンパニオンアニマルである。例示的な実施形態は、イヌ又はネコによる摂取のために処方された組成物を特徴とする。他の実施形態では、哺乳動物はヒトである。
【００１６】
組成物は、健常な加齢哺乳動物に投与するために処方することができる。ある実施形態では、哺乳動物は、加齢性の認知障害に関連する表現型を有する。そのような表現型は、当該表現型を有しない対照哺乳動物と比較して、想起能力の低下、短期記憶の喪失、学習速度の低下、学習能力の低下、問題解決能力の低下、注意持続時間の低下、運動能力の低下、錯乱の増大、又は認知症、のうちの１つ又は複数を含み得る。
【００１７】
本発明の別の態様は、加齢哺乳動物における認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下を予防、軽減し、又は遅延させるための方法であって、（１）認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下を有するか、又はそのリスクのある加齢哺乳動物を同定するステップと、（２）哺乳動物における認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下を予防、軽減し、又は遅延させるのに有効な量で中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を含む前述の組成物を、長期かつ定期ベースで哺乳動物に投与するステップと、を含み、組成物は、哺乳動物における少なくとも１種のケトン体の血中濃度を増加させる方法を特徴とする。場合により、この方法は、哺乳動物におけるケトン体濃度をモニターするステップを更に含む。ある実施形態では、β−ヒドロキシ酪酸、アセト酢酸及びアセトンの各々の量が哺乳動物の血中で上昇する。
【００１８】
別の実施形態では、組成物は、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸又はＶＬＤＬのうちの１つ又は複数の、哺乳動物の血中量を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む。特定の実施形態では、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸及びＶＬＤＬの各々が哺乳動物の血中で低下する。
【００１９】
更に別の実施形態では、組成物は、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ又はクエン酸塩のうちの１つ又は複数の、哺乳動物の血中量を上昇させるのに有効な量でＭＣＴを含む。特定の実施形態では、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ及びクエン酸塩の各々の量が動物の血中で上昇する。
【００２０】
別の実施形態では、組成物は、脳への血流を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む。それに加えて、又はその代わりに、組成物は、血液脳関門の完全性を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む。
【００２１】
別の実施形態では、組成物は、血中尿素窒素を低下させるか、又はタンパク質分解を減少させるのに有効な量でＭＣＴを含む。別の実施形態では、組成物は、アラニンアミノトランスフェラーゼの量又は活性を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む。
【００２２】
本発明のこの態様によれば、哺乳動物に投与される組成物は、ペットフード、栄養補助食品、又はヒトによる摂取のために処方された食品とすることができる。ある実施形態では、哺乳動物は非ヒト動物である。特定の実施形態では、動物は、コンパニオンアニマル、例えばイヌ又はネコである。ある実施形態では、組成物は、コンパニオンアニマルの社会的行動を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む。
【００２３】
一実施形態では、上述の方法は、乾燥重量ベースで約１％〜約３０％のＭＣＴを含む組成物の投与を必要とする。この組成物は定期的に投与され、これは、一実施形態では少なくとも１日１回である。ある実施形態では、組成物は、毎日の食餌計画の一部として、少なくとも約１週間、又は少なくとも約１カ月、又は少なくとも約３カ月以上、最長で哺乳動物の生涯にわたって投与される。
【００２４】
本発明の別の態様は、加齢哺乳動物における認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下を予防、軽減し、又は遅延させるための方法であって、（１）加齢性の認知障害疾患を有しない加齢哺乳動物を同定するステップと、（２）哺乳動物における認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下を予防、軽減し、又は遅延させるのに有効な量で中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を含む前述の組成物を、長期かつ定期ベースで哺乳動物に投与するステップと、（３）投与ステップの間、少なくとも定期的に、哺乳動物における、少なくとも１種のケトン体の濃度、及び認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つ、を測定するステップと、（４）少なくとも１種のケトン体の濃度及び認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動の測定結果を、投与組成物を与えられていない対照動物と比較するステップと、（５）ケトン体の濃度を、認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動の測定結果と相関させ、それにより、上記組成物の投与の結果としての、認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下の予防、軽減又は遅延を実現させるステップと、を含む方法を特徴とする。
【００２５】
ある実施形態では、β−ヒドロキシ酪酸、アセト酢酸及びアセトンの各々の量が哺乳動物の血中で上昇する。
【００２６】
別の実施形態では、組成物は、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸又はＶＬＤＬのうちの１つ又は複数の、哺乳動物の血中量を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む。特定の実施形態では、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸及びＶＬＤＬの各々が哺乳動物の血中で低下する。
【００２７】
更に別の実施形態では、組成物は、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ又はクエン酸塩のうちの１つ又は複数の、哺乳動物の血中量を上昇させるのに有効な量でＭＣＴを含む。特定の実施形態では、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ及びクエン酸塩の各々の量が動物の血中で上昇する。
【００２８】
別の実施形態では、組成物は、脳への血流を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む。それに加えて、又はその代わりに、組成物は、血液脳関門の完全性を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む。
【００２９】
別の実施形態では、組成物は、血中尿素窒素を低下させるか、又はタンパク質分解を減少させるのに有効な量でＭＣＴを含む。別の実施形態では、組成物は、アラニンアミノトランスフェラーゼの量又は活性を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む。
【００３０】
本発明のこの態様によれば、哺乳動物に投与される組成物は、ペットフード、栄養補助食品、又はヒトによる摂取のために処方された食品とすることができる。ある実施形態では、哺乳動物は非ヒト動物である。特定の実施形態では、動物は、コンパニオンアニマル、例えばイヌ又はネコである。ある実施形態では、組成物は、コンパニオンアニマルの社会的行動を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む。
【００３１】
一実施形態では、上述の方法は、乾燥重量ベースで約１％〜約３０％のＭＣＴを含む組成物の投与を必要とする。この組成物は定期的に投与され、これは、一実施形態では少なくとも１日１回である。ある実施形態では、組成物は、毎日の食餌計画の一部として、少なくとも約１週間、又は少なくとも約１カ月、又は少なくとも約３カ月以上、最長で哺乳動物の生涯にわたって投与される。
【００３２】
健常な加齢哺乳動物の集団における認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下を予防、軽減し、又は遅延させるための方法であって、（１）加齢性の認知障害を有しない健常な加齢哺乳動物の集団を同定するステップと、（２）この集団を、少なくとも対照群及び１つ又は複数の試験群に分割するステップと、（３）哺乳動物個体の血中ケトン体レベルを上昇させ、上昇させたレベルを維持するのに有効な量で中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を含む前述の組成物を送達するための、少なくとも１つの食餌ベース送達系（ｄｉｅｔ−ｂａｓｅｄ  ｄｅｌｉｖｅｒｙ  ｓｙｓｔｅｍ）を処方するステップ（ここで、各試験群は、ＭＣＴを含む組成物を送達する処方物を長期かつ定期ベースで投与され、対照群は、ＭＣＴを含む組成物を投与されない。）と、（４）対照群及び試験群において、認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つを比較するステップと、（５）ＭＣＴを含む組成物を送達するための食餌ベース送達系のうちのいずれが、認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下の予防、軽減又は遅延において有効であったかを決定するステップと、（６）ステップ（ｅ）において決定された食餌ベース送達系を加齢哺乳動物の集団に投与し、それにより、認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下を予防、軽減し、又は遅延させるステップと、を含む方法。本明細書でより詳細に説明されるように、長期かつ定期ベースは、少なくとも１週間から、最長１年以上にわたることができる。ある実施形態では、β−ヒドロキシ酪酸、アセト酢酸及びアセトンの各々の量が哺乳動物の血中で上昇する。
【００３３】
別の実施形態では、組成物は、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸又はＶＬＤＬのうちの１つ又は複数の、哺乳動物の血中量を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む。特定の実施形態では、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸及びＶＬＤＬの各々が哺乳動物の血中で低下する。
【００３４】
更に別の実施形態では、組成物は、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ又はクエン酸塩のうちの１つ又は複数の、哺乳動物の血中量を上昇させるのに有効な量でＭＣＴを含む。特定の実施形態では、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ及びクエン酸塩の各々が動物の血中で上昇する。
【００３５】
別の実施形態では、組成物は、脳への血流を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む。それに加えて、又はその代わりに、組成物は、血液脳関門の完全性を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む。
【００３６】
別の実施形態では、組成物は、血中尿素窒素を低下させるか、又はタンパク質分解を減少させるのに有効な量でＭＣＴを含む。別の実施形態では、組成物は、アラニンアミノトランスフェラーゼの量又は活性を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む。
【００３７】
本発明のこの態様によれば、哺乳動物に投与される組成物は、ペットフード、栄養補助食品、又はヒトによる摂取のために処方された食品とすることができる。ある実施形態では、哺乳動物は非ヒト動物である。特定の実施形態では、動物は、コンパニオンアニマル、例えばイヌ又はネコである。ある実施形態では、組成物は、コンパニオンアニマルの社会的行動を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む。
【００３８】
一実施形態では、上述の方法は、乾燥重量ベースで約１％〜約３０％のＭＣＴを含む組成物の投与を必要とする。この組成物は定期的に投与され、これは、一実施形態では少なくとも１日１回である。ある実施形態では、組成物は、毎日の食餌計画の一部として、少なくとも約１週間、又は少なくとも約１カ月、又は少なくとも約３カ月、最長で少なくとも約１年より長く、哺乳動物の生涯にわたって投与される。
【００３９】
本発明の他の特徴及び利点は、以下の図面、詳細な説明及び実施例を参照することによって明らかとなろう。
【例示的な実施形態の詳細な説明】
【００４０】
ヒトにおけるＭＣＴの治療活性は、肝臓内におけるＭＣＴのケトン体への変換によって生じる。ケトン体は、アルツハイマー病に罹っている患者の神経細胞でのエネルギー欠乏を補充するための代替エネルギー源を提供することができる。本発明によって、ＭＣＴでの長期の食餌補充は、既知の疾患に罹っていない加齢動物において、認知機能を改善し、ポジティブな行動変化をもたらすことが見出された。すなわち、本発明の様々な態様は、加齢動物において、定期的な食餌の一部として投与される中鎖トリグリセリドを利用して、学習、注意力、運動能力、脳血管機能、社会的行動のうちの少なくとも１つを改善し、活動レベルを増大させる組成物及び方法に関する。
【００４１】
定義：
本発明の方法及び他の態様に関連する様々な用語が、本明細書及び特許請求の範囲全体にわたって用いられる。そのような用語は、特に断りのない限り、その通常の意味が与えられる。特に定義された用語は、本明細書で付与された定義と整合するように解釈される。
【００４２】
本明細書及び実施例では以下の略語が用いられる。
ＡＤ：アルツハイマー病
ＡＬＴ：アラニンアミノトランスフェラーゼ
ＡＮＣＯＶＡ：共分散分析
ＡＮＯＶＡ：分散分析
ＡＶＧ：平均
ＢＢＢ：血液脳関門
ＢＢＢＩ：血液脳関門指数
ＢＨＢ：β−ヒドロキシ酪酸
ＢＬＩ：血液漏出指数
ＢＶＩ：血液量指数
ＢＵＮ：血中尿素窒素
ＢＷ：体重
ＣＣＤＳ：イヌ認知機能不全症候群
ＤＮＭＰ：遅延非位置合わせ（ｄｅｌａｙｅｄ  ｎｏｎ−ｍａｔｃｈ  ｔｏ  ｐｏｓｉｔｉｏｎ）
Ｆ：メス
ＨＤＬ：高密度リポタンパク質
Ｍ：オス
ＭＣＴ：中鎖トリグリセリド
ＭＲＩ：磁気共鳴イメージング
ｒＣＢＶＩ：局所脳血液量指数
ＳＥＭ：標準誤差
ＶＬＤＬ：超低密度リポタンパク質
【００４３】
「中鎖トリグリセリド」又は「ＭＣＴ」は、３個の脂肪酸分子（各脂肪酸分子は５〜１２個の炭素を有する。）にエステル結合した任意のグリセロール分子を指す。ＭＣＴは、一般式：
【化２】
0005537809.tif 000003
［式中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、グリセロール骨格にエステル結合した炭素骨格に５〜１２個の炭素を有する脂肪酸である。］
によって表すことができる。本発明の構造脂質は、当技術分野で知られている任意の方法、例えば、直接エステル化、転位、分割、エステル交換反応等によって調製することができる。例えば、脂質は、植物油（ヤシ油等）の転位によって調製することができる。鎖長及びその分布は供給源の油に応じて異なり得る。例えば、パーム油及びヤシ油からは、一般に、１〜１０％のＣ６、３０〜６０％のＣ８、３０〜６０％のＣ１０、１〜１０％のＣ１０を含有するＭＣＴが得られる。Ｒ１、Ｒ２及びＲ３で約９５％超のＣ８を含有するＭＣＴは、オクタン酸をグリセリンに半合成的にエステル結合させることによって調製することができる。Ｃ８の総量が約５０％かつ／又はＣ１０の総量が約５０％であるＭＣＴを含む混合物も本発明において有用である。これらのＭＣＴ組成物の商業的供給源は当業者が利用可能であり、また、当業者に知られている。そのようなＭＣＴは同様の作用を示し、本明細書におけるＭＣＴという語に包含される。
【００４４】
「有効量」は、本明細書に記載の化合物、物質又は組成物の、特定の生物学的結果を得るのに有効な量を指す。そのような生物学的結果としては、これらに限らないが、次のうちの少なくとも１つが挙げられる。特に加齢動物又は老齢動物における、認知機能の増強、肝機能の改善、昼間の活動の増加、学習の改善、注意力の改善、社会的行動の改善、運動能力の改善、及び／又は脳血管機能の改善。様々な実施形態において、「有効量」は、上述の性質、例えば、認知機能又は認知能力、学習速度又は学習能力、問題解決能力、注意持続時間及び課題若しくは問題に集中する能力、運動機能又は運動能力、社会的行動等の低下を、軽減、予防し、又は遅延させるのに適した量を指す。個体又は集団におけるそのような低下の予防、軽減又は遅延は、コホート（例えば、対照動物、又は処置を受けなかったコホート集団）に対して相対的であることが好ましい。そのような有効な活性は、例えば、本発明の組成物を動物又は動物の集団に投与することによって達成することができる。
【００４５】
「認知機能」という語は、精神の安定、記憶／想起能力、問題解決能力、推理能力、思考能力、判断能力、学習能力、知覚、洞察力、注意力及び認識のうちの少なくとも１つを含む（これらに限定されない）、脳の、特別、正常又は適切な生理活動を指す。「認知機能の増強」又は「認知機能の改善」は、精神の安定、記憶／想起能力、問題解決能力、推理能力、思考能力、判断能力、学習能力、知覚、洞察力、注意力及び認識のうちの少なくとも１つを含む（これらに限定されない）、脳の、特別、正常又は適切な生理活動におけるあらゆる改善（当技術分野で好適な任意の手段によって測定された改善）を指す。
【００４６】
「行動」は、本明細書では広義で用いられ、所与の刺激又は一連の条件に応答又は反応して動物が行うあらゆることを指す。「行動の増強」又は「行動の改善」は、所与の刺激又は一連の条件に応答又は反応して動物が行うあらゆることにおけるあらゆる改善を指す。
【００４７】
「運動能力」は、動物において動作に影響し、又は動作を引き起こす組織の生物学的活動を指す。そのような組織としては、筋肉及び運動ニューロンが挙げられる（これらに限定されない）。「運動能力の増強」又は「運動能力の改善」は、動物において動作に影響し、又は動作を引き起こす組織の生物学的活動におけるあらゆる改善を指す。
【００４８】
個体（表現型）における、上述の範疇又は特定の種類の性質又は機能の「低下」は、一般に、当該性質又は機能の改善又は増強の反対である。組成物の（上述の）「有効量」は、低下を完全に予防し、又は低下を実質的に予防する（低下を「予防する」）か、ある期間にわたって、又はある時点で低下の程度又は速度を軽減する（低下を「軽減する」）か、或いは低下の開始、程度又は進行を遅延させる（低下を「遅延させる」）、のに必要な量とすることができる。「低下」の予防、軽減又は遅延は、疾患に罹っていない加齢動物を扱う場合、より有用な比較基準となることが多い。予防、軽減及び遅延は、対照、又は処置を受けていない（例えば、関心対象の食餌又は栄養補助食品を給餌されていない）コホート、に対して相対的と見なすことができる。有害な性質又は状態の開始に関する予防、軽減又は遅延、或いは特定の機能の低下の速度に関する予防、軽減又は遅延は、個体ベースで、又は（いくつかの実施形態では）集団ベースで、測定、検討することができる。低下の予防、軽減又は遅延の正味の効果は、単位時間当たり、又は所定のエンドポイントで、認知、運動又は行動機能の低下がより少ないことである。つまり、理想的には、個体について、又は集団において、認知、運動又は行動機能は、可能な限り長い時間、可能な限り高いレベルに維持される。本発明の目的のために、個体は、対照の個体、群又は集団と比較することができる。同様に、集団は、実在の個体、個体について規格化された測定値、又は群若しくは集団と比較することができる。
【００４９】
本明細書において、「加齢（ａｇｉｎｇ）」とは、動物が、その特定の種の平均寿命の５０％を超えている程度に高齢であることを意味する。本明細書において、加齢動物は、場合により、「高齢（ａｇｅｄ）」又は「老齢（ｇｅｒｉａｔｒｉｃ）」又は「年配（ｅｌｄｅｒｌｙ）」と呼ばれる。例えば、ある品種のイヌの平均年齢が１０年である場合、５歳を超える当該品種内のイヌは老齢と見なされるであろう。健常な加齢動物は、既知の疾患、特に結果を混乱させる可能性がある認知障害関連疾患、を有しない動物である。健常な加齢動物を用いる研究では、コホート動物も、健常な加齢動物であることが好ましいが、適当な、認知、運動又は行動機能を有する他の健常な動物も、比較検体として用いるのに適している可能性がある。特定の疾患診断又は認知、運動若しくは行動制限を伴う動物が用いられる場合、コホート動物は、同様に診断されているか、或いは当該疾患又は認知、運動若しくは行動制限について同様の徴候を示す動物を含む方がよい。
【００５０】
本発明は、任意の動物、好ましくは哺乳動物、より好ましくはコンパニオンアニマルに関する。「コンパニオンアニマル」とは任意の飼いならされた動物であり、ネコ、イヌ、ウサギ、モルモット、フェレット、ハムスター、マウス、スナネズミ、ウマ、雌ウシ、ヤギ、ヒツジ、ロバ、ブタ等を含む（これらに限定されない）。ある実施形態では、目下のところ、イヌ及びネコが好ましい。ある実施形態では哺乳動物はヒトを含むが、ヒトが特に除外されている他の実施形態は同様に好ましい。
【００５１】
本明細書において、「食品」又は「食品組成物」という語は、ヒトを含む動物による摂取が意図され、動物に栄養を提供する組成物を意味する。本明細書において、「ヒトによる摂取のために処方された食品」とは、ヒトによる摂取が特に意図された任意の組成物である。「ペットフード」とは、ペットによる、好ましくはコンパニオンアニマルによる摂取が意図された組成物である。「完全かつ栄養的にバランスの取れたペットフード」とは、目的のレシピエント又は摂取個体に必要なすべての既知の栄養素を、例えば、コンパニオンアニマル栄養学の分野で世間に認められた専門家の勧告に基づいて、適切な量及び割合で含有するペットフードである。したがって、そのような食品は、補足的な栄養源を添加することなく、生命を維持し、又は繁殖を促進するための食餌摂取の唯一の供給源としての機能を果たすことができる。栄養的にバランスの取れたペットフード組成物は、当技術分野で広く知られており、広く用いられている。
【００５２】
本明細書において、「栄養補助食品」とは、動物の通常の食餌に加えて摂取されることが意図された製品である。栄養補助食品は、任意の形態、例えば、固体、ｌｉｄ、ゲル、錠剤、カプセル、粉末等の形態を取ることができる。それらは、使いやすい剤形で提供されるのが好ましい。いくつかの実施形態では、それらは、バルクの消費者パッケージ（例えば、バルク粉末又はバルク液体）として提供される。他の実施形態では、サプリメントはバルク量で提供されて、他の食品、例えば、スナック、おやつ、サプリメントバー、飲料等に含有される。
【００５３】
本明細書で提供される組成物は一般に「長期」摂取が意図されており、場合により、本明細書において「長期にわたる」期間と呼ばれる。本明細書において、「長期」投与は、一般に、１カ月を超える期間を指す。２、３又は４カ月より長い期間が好ましい。５、６、７、８、９又は１０カ月より長い期間を含むより長期にわたる期間も好ましい。１１カ月又は１年を超える期間も好ましい。１、２、３年又はそれ以上にわたる長期使用も本明細書で意図されている。ある加齢動物の場合は、当該動物が、その生涯の残りの期間、定期ベースで当該組成物の摂取を続けることが想定されている。本明細書において、「定期ベース」は、少なくとも毎週の、組成物の投与又は摂取を指す。より頻繁な投与又は摂取（例えば、週２回又は３回）が好ましい。少なくとも１日１回の摂取を含む投与計画は、更に好ましい。当業者は、実現されるケトン体（又は特定のケトン体）の血中レベルが、投与頻度の有用な決定基準となり得ることを認識するであろう。本発明においては、本明細書に特に例示されたかどうかにかかわらず、測定対象化合物の血中レベルを許容可能な範囲内に維持することを可能にする任意の頻度は有用と見なすことができる。当業者は、投与頻度は、摂取又は投与されている組成物の関数であり、組成物によっては、測定対象化合物（例えば、ケトン体）の所望の血中レベルを維持するために、より多いか少ない頻度の投与が必要となる可能性があることを認識するであろう。
【００５４】
本明細書において、「経口投与」又は「経口的に投与する」という語は、本明細書に記載の１種又は複数種の組成物を動物が摂取するか、或いは人間が動物にそれを給餌することを指図されているか又は実際に給餌することを意味する。人間が組成物を給餌することを指図されている場合、そのような指図は、その組成物の使用は、前述の利点、例えば、認知機能の増強、肝機能の改善、昼間の活動の増加、学習の改善、注意力の改善、社会的行動の改善、運動能力の改善、及び／又は脳血管機能の改善、又はそのような機能若しくは性質の低下の予防、軽減又は遅延、を提供するであろうことを人に指示及び／又は告知するものであってもよい。そのような指図は、口頭の指図［例えば、医師、獣医師若しくはその他の医療従事者からの口答の指示、又はラジオ若しくはテレビ媒体による指示（すなわち広告）］であっても、また、文書による指図［例えば、医師、獣医師若しくはその他の医療従事者からの文書による指示（例えば、処方箋）、営業専門家又は営業組織からの文書による指示（例えば、マーケティング冊子、パンフレット又は他の案内書）、文書媒体（例えば、インターネット、電子メール又は他のコンピューター関連媒体）、及び／又は当該組成物に付随したパッケージ（例えば、当該組成物が収納された容器上のラベル）］であってもよい。
【００５５】
組成物：
いくつかの様々な態様では、本発明は、動物における、認知機能、運動機能、及び／又は行動の改善、或いはそれらの低下の予防、軽減又は遅延、に有効な量で中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、動物は、認知機能、運動機能又は行動能力のいくらかの低下又は減退を経験しやすくされる。他の実施形態では、関心対象の動物は、本明細書で定義された加齢動物又は老齢動物である。好ましくは、動物は、他の点では健康である。ＭＣＴは、成分又は添加剤として組成物中に存在することができる。好ましい実施形態では、組成物は、少なくとも１つのＭＣＴ供給源を含む。
【００５６】
一態様では、加齢哺乳動物における認知機能、運動能力、脳血管機能又は行動のうちの１つ又は複数の低下を改善し、又は予防するのに有効な量で中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を含む組成物が提供される。加齢哺乳動物又は老齢哺乳動物は、その平均寿命の少なくとも約５０％に到達しているであろう。上記組成物は、哺乳動物における少なくとも１種のケトン体の血中濃度を増加させる。ＭＣＴは、一般式［Ｉ］：
【化３】
0005537809.tif 000004
のものであり、式中、グリセロール骨格にエステル結合したＲ１、Ｒ２及びＲ３は、各々独立に、５〜１２個の炭素を有する脂肪酸である。様々な実施形態において、組成物は、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の約９５％超をＣ８脂肪酸として有するＭＣＴを含む。一実施形態では、残りのＲ１、Ｒ２及びＲ３は、好ましくは、又は専らＣ６又はＣ１０脂肪酸である。
【００５７】
本明細書において、「哺乳動物」という語は、ヒトを一般に含むが、ある実施形態について、ヒトが、交互に除外され得るよう意図されている場合がある。特定の実施形態では、測定される改善が、専らヒトの特徴（例えば、言葉の応答性）の評価を必要とする場合、ヒトが哺乳動物として対象になることは明白である。したがって、ある実施形態では、提供される組成物及び方法が、ヒトに向けられることを意図する。しかし、本発明の実施形態が、ヒトを対象とする既存の行為又は組成物を包含すると解釈されない場合、ヒトは特に除外される。したがって、ある実施形態では、哺乳動物は、ヒトではない哺乳動物を含む。
【００５８】
他の実施形態では、哺乳動物は、特に、コンパニオンアニマル（例えば、ペット、又は長期か短期かを問わず人に世話される動物）である。好ましい実施形態では、コンパニオンアニマルはイヌ又はネコである。
【００５９】
一実施形態では、哺乳動物は、本明細書で定義された健常な加齢哺乳動物である。そのような実施形態では、動物は、当業者によって判定される認知障害の明白な兆し又は実質的な症状又は徴候を有しているとは分からないであろう。動物は、他の健康問題、加齢に伴う健康問題でさえ有する可能性があるが、それらは、好ましくは、動物の認知、運動又は行動機能に実質的に影響しないような性質である。したがって、当業者は、加齢動物又は老齢動物を、完全に「健康である」と分類することが不可能である場合があるが、本明細書で提供される方法及び組成物を実践するのにそのようにする必要がないことを認識するであろう。他の実施形態では、加齢動物は、正式な診断によって判定されるか、或いは認知障害若しくは運動障害の顕著な特徴又はそのような障害の行動上の徴候等によって判定されるかにかかわらず、加齢性の認知障害を有するものと特に理解される。一実施形態では、哺乳動物は、加齢性の認知障害に関連する表現型を有し、例えば、動物は、年齢に伴う認知、運動又は行動の障害の、次の表現型発現のうちの１つ又は複数を有する。例えば、当該表現型を有しない対照哺乳動物と比較した、想起能力の低下、短期記憶の喪失、学習速度の低下、学習能力の低下、問題解決能力の低下、注意持続時間の低下、運動能力の低下、錯乱の増大、又は認知症。
【００６０】
一実施形態では、本発明の組成物は、ペットフード等の食品組成物である。ある実施形態では、組成物は、ＭＣＴに加えて、乾燥重量ベースで、約１５〜５０％のタンパク質、約５〜４０％の脂肪、約１５〜６０％の炭水化物、５〜１０％の灰分を更に含み、約５〜２０％の水分含量を有する食品組成物である。ある実施形態では、食品は、食餌に要求されるものをすべて供給することが意図されている。スナック、ペットのおやつ（例えば、ビスケット）、栄養バー、及び錠剤、カプセル、ゲル、ペースト、エマルジョン、カプレット等を含む他の形態の食品又は栄養補助食品（以下で説明される）、として有用な組成物も提供される。場合により、食品組成物は、乾燥組成物（例えば、ペットフード用キブル）、半湿潤組成物、湿潤組成物又はそれらの混合物とすることができる。
【００６１】
別の実施形態では、本発明の組成物は、特にヒトによる摂取のために処方された食品である。これらは、ヒトの食餌に要求されるものを供給することが意図された食品及び栄養素、並びにヒト用の他の栄養補助食品を含む。一実施形態では、ヒトによる摂取のために処方された食品は、完全かつ栄養的にバランスが取れており、他では、それらは、バランスの良い食餌又は処方された食餌とともに用いられるための栄養補助食品として意図されている。
【００６２】
別の実施形態では、組成物は、フードサプリメント、例えば、グレービー、飲用水、飲料、液体濃縮物、ゲル、ヨーグルト、粉末、顆粒、ペースト、懸濁液、かみでのある食物（ｃｈｅｗ）、チョコレートチップ（ｍｏｒｓｅｌ）、おやつ、スナック、ペレット、ピル、カプセル、錠剤、又は任意の他の送達形態である。栄養補助食品は、特定の種、又はコンパニオンアニマル等の個々の動物、又はヒトによる摂取のために特に処方することができる。一実施形態では、栄養補助食品は、比較的濃縮された用量のＭＣＴを含むことができ、そのため、サプリメントは、少量で動物に投与することができるか、動物への投与前に希釈することができる。いくつかの実施形態では、栄養補助食品又は他のＭＣＴ含有組成物は、例えば、用量を調整するため、より美味にするため、又はより小用量でより頻繁な投与を可能にするために、動物への投与前に水等と混合することが必要な場合がある。
【００６３】
ＭＣＴ含有組成物は、冷蔵又は冷凍することができる。ＭＣＴは、組成物の他の成分と予めブレンドして、必要とする有利な量を提供することができ、乳化し、ペットフード組成物、栄養補助食品、又はヒトによる摂取のために処方された食品上にコーティングすることができ、或いは、例えば粉末又は混合物を用いて、ＭＣＴを摂取するか、動物にＭＣＴを提供する前に、組成物に添加することができる。
【００６４】
一実施形態では、組成物は、当該組成物を投与された動物における認知機能及び行動を増強するのに有効な量でＭＣＴを含む。ペットフード及びヒトによる摂取のために処方された食品について、組成物の割合としてのＭＣＴの量は、乾燥物質ベースで、組成物の約１％から約３０％の範囲であるが、より少ない又はより多い割合を供給することもできる。様々な実施形態において、この量は、乾燥重量ベースで、組成物の、約１．０％、１．５％、２．０％、２．５％、３．０％、３．５％、４．０％、４．５％、５．０％、５．５％、６％、６．５％、７％、７．５％、８％、８．５％、９％、９．５％、１０％、１０．５％、１１％、１１．５％、１２％、１２．５％，１３％，１３．５％、１４％、１４．５％、１５％、１５．５％、１６％、１６．５％、１７％、１７．５％、１８％、１８．５％、１９％、１９．５％、２０％、２０．５％、２１％、２１．５％、２２％、２２．５％、２３％、２３．５％、２４％、２４．５％、２５％、２５．５％、２６％、２６．５％、２７％、２７．５％、２８％、２８．５％、２９％、２９．５％、３０％、又はそれ以上である。栄養補助食品は、数倍高い濃度のＭＣＴを含有するように処方して、錠剤、カプセル、液体濃縮物又は他の類似の剤形での動物への投与に適したものとしてもよいし、或いは水での希釈、ペットフード上への噴霧若しくは散在、他の類似の投与様式によって、投与前に希釈してもよい。栄養補助食品については、ＭＣＴ単独を、動物に直接投与するか、又は動物の通常の食物に直接施すことができる。様々な実施形態において、栄養補助食品処方物は約３０％から約１００％のＭＣＴを含有するが、より少ない量も用いることができる。
【００６５】
ＭＣＴの供給源には、合成又は天然の任意の適当な供給源が含まれる。ＭＣＴの天然供給源の例として、植物供給源、例えば、ココナツ及びヤシ油、パーム核及びパーム核油、並びに動物供給源、例えば、任意の様々な種からの乳汁が挙げられる。
【００６６】
様々な実施形態において、組成物は、場合により、補助物質、例えば、ミネラル、ビタミン、塩、調味料、着色剤及び保存剤を含む。補助ミネラルの例（これらに限定されない。）として、カルシウム、亜リン酸、カリウム、ナトリウム、鉄、塩化物、ホウ素、銅、亜鉛、マグネシウム、マンガン、ヨウ素、セレン等が挙げられる。補助ビタミンの例（これらに限定されない。）として、ビタミンＡ、任意のビタミンＢ、ビタミンＣ，ビタミンＤ、ビタミンＥ及びビタミンＫが挙げられ、前述の様々な塩、エステル又は他の誘導体を含む。追加の栄養補助食品、例えば、任意の形態のナイアシン、パントテン酸、イヌリン、葉酸、ビオチン、アミノ酸、並びにそれらの塩及び誘導体も含めることができる。更に、この組成物は、有利な長鎖ポリ不飽和脂肪酸、例えば、（ｎ−３）及び／又は（ｎ−６）脂肪酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、及びそれらの組合せを含むことができる。
【００６７】
本明細書で提供される組成物は、場合により、一般的な神経の健康を促進若しくは維持するか、認知機能を更に増強する、１種又は複数種の補助物質を含む。そのような物質として、例えば、コリン、ホスファチジルセリン、α−リポ酸、ＣｏＱ１０、アセチル−Ｌ−カルニチン、及び植物由来の１種若しくは複数種の成分（例えば、ギンコ  ビローバ、バコパ  モニエラ、コンバルブルス  プルリカウリス（Ｃｏｎｖａｌｖｕｌｕｓ  ｐｌｕｒｉｃａｕｌｉｓ）及び／又はロイコジュム  アエスリブム（Ｌｅｕｃｏｊｕｍ  ａｅｓｌｉｖｕｍ））を含有する、薬草の成分又は抽出物が挙げられる。
【００６８】
様々な実施形態において、本明細書で提供されるペットフード又は栄養補助食品組成物は、好ましくは、乾燥重量ベースで約１５％から約５０％の粗タンパク質を含む。粗タンパク質物質は、動物、植物又はその他にかかわらず、任意の供給源からの１種又は複数種のタンパク質を含む。例えば、ダイズ、綿実、ピーナッツ等の植物性タンパク質は、本発明で用いるのに適している。カゼイン、アルブミン等の動物性タンパク質、及びブタ、子ヒツジ、ウマ、家禽、魚を含む食肉タンパク質、又はそれらの組合せは有用である。
【００６９】
上記組成物は、乾燥重量ベースで約５％から約４０％の脂肪を更に含むことができる。上記組成物は、炭水化物源を更に含むことができる。上記組成物は、典型的には、乾燥重量ベースで約１５％から約６０％の炭水化物を含む。そのような炭水化物の例として、穀物若しくは穀類、例えば、米、トウモロコシ、モロコシ、アルファルファ、オオムギ、ダイズ、アブラナ、カラスムギ、コムギ、又はそれらの混合物が挙げられる。上記組成物は、場合により、乾燥ホエー等の炭水化物を含む他の成分及び他の乳製品若しくは副産物を含む。
【００７０】
ある実施形態では、組成物は、少なくとも１つの繊維源も含む。食物又は餌において用いるのに適した任意の種々の可溶性又は不溶性繊維を利用することができ、そのようなものは当業者の知るところであろう。現在好ましい繊維源として、ビートパルプ（サトウダイコン由来）、アラビアゴム、タルハゴム、オオバコ、米糠、イナゴマメガム、柑橘パルプ、ペクチン、短鎖オリゴフルクトースに付加されたフラクトオリゴ糖、マンナンオリゴフルクトース（ｍａｎｎａｎｏｌｉｇｏｆｒｕｃｔｏｓｅ）、ダイズ繊維、アラビノガラクタン、ガラクトオリゴ糖、アラビノキシラン、又はそれらの混合物が挙げられる。或いは、繊維源は、発酵性繊維とすることができる。発酵性繊維は、コンパニオンアニマルの免疫系に利益を提供することが以前より指摘されている。腸内のプロバイオティック微生物の増殖を増強するためのプロバイオティック組成物を提供する、発酵性繊維又は当業者に知られている他の組成物も、上記組成物に取り込まれることによって、動物の免疫系に、本発明によって提供される利益の強化を助長することができる。更に、プロバイオティック微生物（例えば、ラクトバチルス種又はビフィドバクテリウム種）を、上記組成物に加えることができる。
【００７１】
一実施形態では、組成物は、完全かつ栄養的にバランスの取れたペットフードである。この状況において、ペットフードは、ペットフード処方及び製造の当業者によって認識されるように、湿潤フード、乾燥フード、又は中間水分含量のフードとすることができる。「湿潤フード」は、典型的には、缶又はホイル袋で販売され、典型的には、約７０％から約９０％の範囲の水分含量を有するペットフードを表す。「乾燥フード」は、湿潤フードと類似の組成物であるが、典型的には約５％から約１５％の範囲の限られた水分を含み、例えば、小さなビスケット様キブルとして与えられるペットフードを表す。組成物及び栄養補助食品は、成動物のために、又は高齢動物若しくは若年動物のために特に処方することができ、例えば、子イヌ、子ネコ又は「年長動物」のために特に適合した処方物は、当技術分野で知られており、市販されている。一般に、特殊化した処方物は、特定の段階の成長又は年齢の動物にとって適切なエネルギー及び栄養要件を含むこととなる。過体重の動物、又は他の健康問題を有する動物のための処方物も、当技術分野で知られており、本発明で用いるのに適している。
【００７２】
ある実施形態では、組成物は、完全でバランスの取れた食品（例えば、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｕｎｃｉｌ、１９８５年、Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｄｏｇｓ、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ａｃａｄｅｍｙ  Ｐｒｅｓｓ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ  Ｄ．Ｃ．又はＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｆｅｅｄ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  Ｏｆｆｉｃｉａｌｓ、Ｏｆｆｉｃｉａｌ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  １９９６に記載されているもの）を提供する。他の実施形態では、組成物は、そのような食品と併せて用いられることが意図されている。すなわち、本明細書で提供される、ある実施形態によるＭＣＴを含む組成物は、高品質な市販食品と併せて用いられる。本明細書において、「高品質な市販食品」は、例えば、イヌに対する、上記のＮａｔｉｏｎａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｃｏｕｎｃｉｌの勧告において示される、重要な栄養素の８０％以上の消化率をもたらすように製造された食餌を指す。同様の高い栄養素基準は、他の動物に対しても用いられるであろう。
【００７３】
当業者は、所与の組成物に加えられる適切な量のＭＣＴを、どのように決定するかを理解するであろう。考慮に入れることのできるそのような要因として、組成物の種類（例えば、ペットフード組成物、栄養補助食品、又はヒトによる摂取のために処方された食品）、様々な動物による、特定の種類の組成物の平均摂取量、意図された、又は必要とされるＭＣＴの用量、目的のレシピエント又は摂取個体にとっての最終製品の嗜好性及び許容性、組成物が調製される製造条件、購入者にとっての利便性、及び包装の考慮事項が挙げられる。好ましくは、組成物に加えられるＭＣＴの濃度は、動物のエネルギー及び栄養素の必要量に基づいて計算される。ＭＣＴは、ペットフード組成物、栄養補助食品、又はヒトが摂取するための食品の処方の一部としてか、或いは前述のものに対するコーティング又は添加物としてかにかかわらず、組成物の製造及び／又は加工の間、いつでも添加することができる。
【００７４】
当業者は、本明細書に提供される組成物は、当技術分野で知られている任意の適当な方法、例えば、Ｗａｌｔｈａｍ  Ｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｄｏｇ  ａｎｄ  Ｃａｔ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ、編集  ＡＴＢ  Ｅｄｎｅｙ、Ａ．Ｒａｉｎｂｉｒｄによる章、５７から７４頁の「Ａ  Ｂａｌａｎｃｅｄ  Ｄｉｅｔ」という表題、Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ  Ｏｘｆｏｒｄに記載されている方法によって処方し、製造することができることを認識するであろう。
【００７５】
方法：
本発明の別の態様は、動物、特に老齢動物における認知機能、運動機能及び行動のうちの１つ又は複数を改善し、かつ／又はそれらの低下を予防、軽減し、若しくは遅延させるための方法であって、この動物における認知機能及び行動を改善し、及び／又はそれらの低下を予防、軽減し、若しくは遅延させるのに有効な量でＭＣＴを含む組成物を動物に投与することを含む方法を提供する。
【００７６】
したがって、一態様では、哺乳動物における認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下を予防、軽減し、又は遅延させるための方法が提供される。一実施形態では、哺乳動物は加齢動物又は老齢動物である。この方法は、
（ａ）認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下を有するか、そのリスクのある加齢哺乳動物等の哺乳動物を同定するステップと、
（ｂ）この哺乳動物における認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下を予防、軽減し、又は遅延させるのに有効な量で中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を含む組成物を、長期かつ定期ベースでこの哺乳動物に投与するステップと、
を含む。ある実施形態では、上記組成物は、哺乳動物における少なくとも１種のケトン体の血中濃度を増加させる。上記で提供された組成物と同様に、本発明で用いられるＭＧＴは、一般に、式［Ｉ］：
【化４】
0005537809.tif 000005
で表されるものであり、式中、グリセロール骨格にエステル結合したＲ１、Ｒ２及びＲ３は、各々独立に、５〜１２個の炭素を有する脂肪酸である。ある実施形態では、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の約９５％超は８炭素長である。残りのＲ１、Ｒ２及びＲ３は、いくつかの実施形態では、炭素数６又は１０の脂肪酸である。他の実施形態では、少なくとも又はおよそ３０、４０又は５０％超のＲ１、Ｒ２及びＲ３はＣ８であり、かつ／或いは、少なくとも又はおよそ３０、４０又は５０％超のＲ１、Ｒ２及びＲ３はＣ１０である。一実施形態では、約５０％のＲ１、Ｒ２及びＲ３はＣ８であり、約５０％のＲ１、Ｒ２及びＲ３はＣ１０である。
【００７７】
一実施形態では、この方法は、哺乳動物における少なくとも１種のケトン体の濃度をモニターするステップを更に含む。当業者は、ケトン体の血中濃度又は血漿濃度を、一括して、又は個別に測定するための既知の方法が存在することを認識するであろう。すべてのそのような方法は、哺乳動物におけるケトン濃度をモニターすることにおいて、本発明で用いるのに適している。
【００７８】
この方法の一実施形態では、投与される組成物は、β−ヒドロキシ酪酸、アセト酢酸及びアセトンの各々の量が、特に、当該組成物を与えられていない哺乳動物と比較して、哺乳動物の血中で上昇するようなＭＣＴを含む。
【００７９】
様々な実施形態において、この方法は、投与ステップを含み、組成物は、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸又はＶＬＤＬのうちの１つ又は複数の、哺乳動物の血中量を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含むか、或いはアラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸及びＶＬＤＬの各々の量が哺乳動物の血中で低下する。
【００８０】
他の実施形態では、投与される組成物は、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ又はクエン酸塩のうちの１つ又は複数の、哺乳動物の血中量を上昇させるのに有効な量でＭＣＴを含み、更に他の実施形態では、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ及びクエン酸塩の各々の量が哺乳動物の血中で上昇する。
【００８１】
一実施形態では、この方法は、投与ステップを含み、組成物は、哺乳動物の血中で、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ及びクエン酸塩の各々の量を上昇させ、かつアラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸及びＶＬＤＬの各々の量を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む。
【００８２】
この方法の他の実施形態では、投与される組成物は、脳への血流を改善し、又は血液脳関門の完全性を改善し、又はその両方を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む。そのような改善は、個体を用いて経時的に、又は当該組成物を与えられていない対照と比較して測定することができる。
【００８３】
本明細書で提供される様々な実施形態において、投与される組成物は、ペットフード、栄養補助食品、又はヒトによる摂取のために処方された食品であり、多くの実施形態において、哺乳動物はコンパニオンアニマルである。ある実施形態では、コンパニオンアニマルはネコ又はイヌである。
【００８４】
投与される組成物は、この方法の様々な用途において、乾燥重量ベースで少なくとも約１％から約３０％のＭＣＴを含む。ある実施形態では、投与ステップは、少なくとも１日１回を含む定期ベースで行われる。いくつかの現在好ましい実施形態では、組成物は、毎日の食餌計画の一部として、少なくとも約１週間投与される。２、３又は更に４週間の期間も用いられる。１から３カ月、又は４カ月間、組成物を投与することは、本明細書に例示されている。他の実施形態では、投与は、４、５、６、７、８、９、１０、１１又は更に１２カ月間に及ぶことが意図されている。更に長い用途では、１、２、３年又はそれ以上に及ぶ投与期間が想定されている。そのような実施形態では、ケトアシドーシス等について、動物を少なくとも定期的にモニターすることが有用である場合があるが、本明細書で提供される組成物又は方法が、長期の投与後でさえ、ケトアシドーシスをもたらすことになるという証拠は存在しない。他の実施形態では、組成物の投与は、動物の残りの生涯（例えば、本明細書で定義される高齢又は老齢の状態に最近達したばかりの動物の平均寿命の後半）にわたって継続される。
【００８５】
一実施形態では、組成物は、毎日の食餌計画の一部として、少なくとも約１週間、約３カ月間、又は最低約１年間投与される。
【００８６】
一実施形態では、投与される組成物は、血中尿素窒素を低下させるか、タンパク質分解を減少させるのに有効な量でＭＣＴを含む。別の実施形態では、組成物は、酵素アラニンアミノトランスフェラーゼの量又は活性を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む。
【００８７】
一実施形態では、提供される方法は、投与ステップを含み、組成物は、コンパニオンアニマルの社会的行動を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む。そのような改善は、自己の種又はヒト等の他の種との交流を含むことができる。
【００８８】
本発明のこの態様のある実施形態については、組成物は、本明細書で例示されるように、ペットフード組成物、栄養補助食品、又はヒトによる摂取のために処方された食品である。動物は、上述のような飼いならされた動物又はコンパニオンアニマルを含み得る。或いは、本発明が、当業者に知られている従来の方法又は組成物を包含すると解釈される場合を除き、ヒトを含み得る。ある実施形態では、動物は、コンパニオンアニマル、例えばイヌ又はネコである。別の実施形態では、動物はヒトである。
【００８９】
組成物は、任意の様々な選択的な投与経路によって動物に投与することができる。そのような経路としては、経口、鼻腔内、静脈内、筋肉内、胃内、幽門通過、皮下、直腸等が挙げられる（これらに限定されない）。好ましくは、組成物は経口的に投与される。
【００９０】
投与は、必要に応じた、又は要望に応じた基準、例えば、毎月１回、毎週１回、毎日、又は１日１回超とすることができる。同様に、投与は、１日おき、１週間おき、又は１カ月おき、３日に１回、３週間に１回、又は３カ月に１回、４日に１回、４週間に１回、４カ月に１回、等とすることができる。投与は、１日当たり複数回とすることができる。通常の食餌の要件に対するサプリメントとして利用される場合、組成物は、動物に直接投与するか、或いは、毎日の餌若しくは食物と接触させ、又は混合することができる。毎日の餌又は食物として利用される場合、投与は当業者に周知であろう。
【００９１】
投与は、例えば、動物における食餌計画の一部として、定期ベースで行うこともできる。食餌計画は、動物における認知機能及び行動を増強させるのに有効な量でＭＣＴを含む組成物の、動物による定期的な摂取をもたらすことを含むことができる。定期的な摂取は、毎日又は毎週ベースで、１日１回、又は１日当たり２、３、４回若しくはそれ以上とすることができる。同様に、定期的な投与は、１日おき若しくは１週間おき、３日に１回若しくは３週間に１回、４日に１回若しくは４週間に１回、５日に１回若しくは５週間に１回、又は６日に１回若しくは６週間に１回とすることができ、そのような食餌計画では、投与は１日当たり複数回とすることができる。定期的な投与の目的は、本明細書に例示された好ましい日用量のＭＣＴを動物に提供することにある。
【００９２】
ＭＣＴの日用量は、動物の体重（ＢＷ）１ｋｇ当たりのＭＣＴのグラムに換算して測定することができる。ＭＣＴの日用量は、動物のＢＷ１ｋｇ当たり、約０．０１ｇから約１０．０ｇの範囲とすることができる。好ましくは、ＭＣＴの日用量は、動物のＢＷ１ｋｇ当たり、約０．１ｇから約５ｇである。より好ましくは、ＭＣＴの日用量は、動物の１ｋｇ当たり、約０．５ｇから約３ｇである。更に好ましくは、ＭＣＴの日用量は、動物の１ｋｇ当たり、約１ｇから約２ｇである。
【００９３】
本発明の方法によれば、食餌計画の一部としての投与を含む、ＭＣＴ含有組成物の投与は、動物の妊娠から全生涯の範囲にわたることができる。好ましくは、ＭＣＴを含む組成物は、老齢動物に投与される。異なる種の動物は、異なる速度で高齢に到達するが、当業者は、所与の種がいつ高齢に到達したかを理解し、認識するであろう。ＭＣＴを含む組成物を投与する、所与の動物についての適切な年齢の判定は、当業者によって日常的に遂行することができる。
【００９４】
更に別のそのいくつかの態様では、加齢哺乳動物における認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つを改善し、又はそれらの低下を予防、軽減し、若しくは遅延させるための方法が提供される。この方法は、
（ａ）加齢性の認知障害疾患を有しない加齢哺乳動物（場合により、本明細書で、健常な加齢哺乳動物と呼ばれる。）を同定するステップと、
（ｂ）この哺乳動物における認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下を改善し、又は予防、軽減し、若しくは遅延させるのに有効な量で中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を含む組成物を、本明細書で定義される長期かつ定期ベースでこの哺乳動物に投与するステップであって、前記組成物は、この哺乳動物における少なくとも１種のケトン体の血中濃度を増加させるステップと、
（ｃ）投与ステップの間、少なくとも定期的に、哺乳動物における、少なくとも１種のケトン体の濃度、及び認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つを測定するステップと、
（ｄ）少なくとも１種のケトン体の濃度及び認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動の測定結果を、投与組成物を与えられていない対照動物と比較するステップと、
（ｅ）ケトン体の濃度を、認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動の測定結果と相関させ、それにより、当該組成物の投与の結果として、認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下の予防、軽減又は遅延を実現させるステップと、
を一般に含む。
【００９５】
前述の方法、及び本明細書の他の箇所で提供される方法において、ＭＣＴは、式［Ｉ］：
【化５】
0005537809.tif 000006
のものであり、式中、グリセロール骨格にエステル結合したＲ１、Ｒ２及びＲ３は、各々独立に、５〜１２個の炭素を有する脂肪酸である。ある実施形態では、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の約９５％超は８炭素長である。残りのＲ１、Ｒ２及びＲ３は、いくつかの実施形態では、炭素数６又は１０の脂肪酸である。
【００９６】
この方法の一実施形態では、投与される組成物は、β−ヒドロキシ酪酸、アセト酢酸及びアセトンの各々の量が、特に、当該組成物を与えられていない哺乳動物と比較して、哺乳動物の血中で上昇するようなＭＣＴを含む。
【００９７】
様々な実施形態において、この方法は、投与ステップを含み、組成物は、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸又はＶＬＤＬのうちの１つ又は複数の、哺乳動物中の血中量を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含むか、或いはアラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸及びＶＬＤＬの各々の量が哺乳動物の血中で低下する。
【００９８】
他の実施形態では、投与される組成物は、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ又はクエン酸塩のうちの１つ又は複数の、哺乳動物の血中量を上昇させるのに有効な量でＭＣＴを含み、更に他の実施形態では、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ及びクエン酸塩の各々の量が哺乳動物の血中で上昇する。
【００９９】
一実施形態では、この方法は、投与ステップを含み、組成物は、哺乳動物の血中で、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ及びクエン酸塩の各々の量を上昇させることに加えて、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸及びＶＬＤＬの各々の量を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む。
【０１００】
この方法の他の実施形態では、投与される組成物は、脳への血流を改善し、又は血液脳関門の完全性を改善し、又はその両方を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む。血流及び完全性のそのような改善は、哺乳動物において、経時的に、又は当該組成物を与えられていない対照と比較して評価することができる。
【０１０１】
様々な実施形態において、組成物は、ペットフード、栄養補助食品、又はヒトによる摂取のために処方された食品である。この組成物、その製造方法及びそのようなものを投与する方法は、本発明の以前の態様において説明したものと同一であり、そのような開示は、全体としてここで繰り返される必要はない。
【０１０２】
本明細書で提供される様々な実施形態において、投与される組成物は、ペットフード、栄養補助食品、又はヒトによる摂取のために処方された食品であり、多くの実施形態において、哺乳動物はコンパニオンアニマルである。ある実施形態では、コンパニオンアニマルはネコ又はイヌである。
【０１０３】
投与される組成物は、この方法の様々な用途において、乾燥重量ベースで少なくとも約１％から約３０％のＭＣＴを含む。ある実施形態では、投与ステップは、少なくとも１日１回を含む定期ベースで行われる。いくつかの現在好ましい実施形態では、組成物は、毎日の食餌計画の一部として、少なくとも約１週間投与される。２、３又は更に４週間の期間も用いられる。１から３カ月、又は４カ月間、組成物を投与することは、本明細書に例示されている。他の実施形態では、投与は、４、５、６、７、８、９、１０、１１又は更に１２カ月間に及ぶことが意図されている。更に長い用途では、１、２、３年又はそれ以上に及ぶ投与期間が想定されている。そのような実施形態では、ケトアシドーシス等について、動物を少なくとも定期的にモニターすることが有用である場合があるが、本明細書で提供される組成物又は方法が、長期の投与後でさえ、ケトアシドーシスをもたらすことになるという証拠は存在しない。他の実施形態では、組成物の投与は、動物の残りの生涯（例えば、本明細書で定義される高齢又は老齢の状態に最近達したばかりの動物の平均寿命の後半）にわたって継続される。
【０１０４】
一実施形態では、組成物は、毎日の食餌計画の一部として、少なくとも約１週間、約３カ月、又は最低約１年投与される。
【０１０５】
一実施形態では、投与される組成物は、血中尿素窒素を低下させるか、又はタンパク質分解を減少させるのに有効な量でＭＣＴを含む。別の実施形態では、組成物は、アラニンアミノトランスフェラーゼの量又は活性を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む。
【０１０６】
一実施形態では、提供される方法は、投与ステップを含み、組成物は、コンパニオンアニマルの社会的行動を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む。そのような改善は、自己の種又はヒト等の他の種との交流を含むことができる。
【０１０７】
本発明の別の態様では、健常な加齢哺乳動物の集団における認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下を予防、軽減し、又は遅延させるための方法が提供される。そのような方法は、認知、運動又は行動機能の低下を改善、予防、軽減し、又は遅延させるための、食餌療法及び栄養療法の開発及び処方に有用である。この方法は、以下のことを一般に含む。
（ａ）健常な加齢哺乳動物の集団を同定すること。好ましい実施形態では、この哺乳動物は、加齢性の認知障害の診断、又はそのような状態の明らかな徴候を有しない。
（ｂ）この集団を、少なくとも対照群及び１つ又は複数の試験群に分割すること。当業者は、実験デザインの統計的方法及び利用可能な動物集団により、試料集団が適切に分割可能な群の数を決定できることを認識するであろう。
（ｃ）中鎖トリグリセリド（ＭＣＴ）を、哺乳動物個体の血中の少なくとも１種のケトン体レベルを上昇させ、上昇させたレベルを維持するのに有効な量で含む組成物を送達するための、少なくとも１つの食餌ベース送達系又は食餌ベース療法を処方すること。食餌ベース送達系の処方は、主要栄養素及び微量栄養素、エネルギー所要量等を含む、集団の栄養／食餌の要件に基づくものであり、食餌の一部としてＭＣＴを更に含む。好ましくは、ＭＣＴは、食品処方物中に直接提供されるが、本発明の他の態様に関して本明細書で以前に説明された任意の形態で、食品処方物へのサプリメントとして含めることもできる。ＭＣＴは、上記に提供された式［Ｉ］のものであり、前述と同様に、グリセロール骨格にエステル結合したＲ１、Ｒ２及びＲ３は、各々独立に、５〜１２個の炭素を有する脂肪酸である。
【０１０８】
本明細書で定義される長期かつ定期ベースで、試験群の各個体に特定の処方物が提供される。したがって、各試験群は、ＭＣＴを含む組成物を送達する処方物を投与されるが、対照群は、ＭＣＴを含む組成物を投与されず、むしろＭＣＴを欠いているが、主要栄養素及び微量栄養素、エネルギー含有量、繊維等の点で等価な類似処方物を受ける。
（ｄ）対照群及び試験群において、認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つを比較すること。当技術分野で既知の測定法及び方法を、ここでは容易に適用することができ、当業者は、実験又は集団の要求に従って、そのような機能の更なる有用な測定法を容易に開発することができる。
（ｅ）ＭＣＴを含む組成物を送達するための食餌ベース送達系のうちのいずれが、認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下の予防、軽減又は遅延において有効であったかを決定すること。
（ｆ）最後に、上記のステップ（ｅ）において決定された食餌ベース送達系を、加齢哺乳動物の集団に投与し、それにより、認知機能、運動機能、脳血管機能又は行動のうちの少なくとも１つの低下を予防、軽減し、又は遅延させること。
【０１０９】
一実施形態では、試験食餌を提供するための「長期かつ定期ベース」は、少なくとも約１週間から約１年の期間にわたる少なくとも１日１回を含む。より長い期間は、本発明での使用が意図されたものであり、そのような長い期間は、例えば、予防、軽減若しくは遅延を改善するために、又は嗜好性、利便性等を改善するために、処方された送達系を反復する前に微調整を伴う場合がある。
【０１１０】
一実施形態では、この方法は、対照群及び試験群の各哺乳動物における少なくとも１種のケトン体の濃度をモニターするステップを更に含む。ある実施形態では、β−ヒドロキシ酪酸、アセト酢酸及びアセトンの各々の量が上昇する。
【０１１１】
様々な実施形態において、系又は療法によって送達される組成物は、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸又はＶＬＤＬのうちの１つ又は複数の血中レベルを低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む。別の実施形態では、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸及びＶＬＤＬの各々のレベルが低下する。別の実施形態では、組成物は、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ又はクエン酸塩のうちの１つ又は複数の血中レベルを上昇させるのに有効な量でＭＣＴを含む。更に他の実施形態では、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ及びクエン酸塩の各々のレベルが上昇する。一実施形態では、組成物は、アラニン、分岐鎖アミノ酸、総リポタンパク質、不飽和脂肪酸及びＶＬＤＬの各々のレベルを低下させるのに有効な量でＭＣＴを含むが、グルタミン、フェニルアラニン、ＨＤＬ及びクエン酸塩の各々のレベルは上昇する。
【０１１２】
この方法の他の実施形態では、投与される組成物は、脳への血流を改善し、又は血液脳関門の完全性を改善し、又はその両方を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む。血流及び完全性のそのような改善は、哺乳動物において、経時的に、又は当該組成物を与えられていない対照と比較して評価することができる。それらはまた、平均して、例えば対照群に対して相対的になり得る。
【０１１３】
様々な実施形態において、組成物は、ペットフード、栄養補助食品、又はヒトによる摂取のために処方された食品である。この組成物、加えてその製造方法及びそのようなものを投与する方法は、本発明の以前の態様において説明したものと同一であり、そのような開示はそこで提供されている。
【０１１４】
本明細書で提供される様々な実施形態において、投与される組成物は、ペットフード、栄養補助食品、又はヒトによる摂取のために処方された食品であり、多くの実施形態において、哺乳動物はコンパニオンアニマルである。ある実施形態では、コンパニオンアニマルはネコ又はイヌである。
【０１１５】
投与される組成物は、この方法の様々な用途において、乾燥重量ベースで少なくとも約１％から約３０％のＭＣＴを含む。ある実施形態では、投与ステップは、少なくとも１日１回を含む定期ベースで行われる。いくつかの現在好ましい実施形態では、組成物は、毎日の食餌計画の一部として、少なくとも約１週間投与される。２、３又は更に４週間の期間も用いられる。１から３カ月又は４カ月間、組成物を投与することは、本明細書に例示されている。他の実施形態では、投与は、４、５、６、７、８、９、１０、１１又は更に１２カ月間に及ぶことが意図されている。更に長い用途では、１、２、３年又はそれ以上に及ぶ投与期間が想定されている。そのような実施形態では、ケトアシドーシス等について、動物を少なくとも定期的にモニターすることが有用である場合があるが、本明細書で提供される組成物又は方法が、長期の投与後でさえ、ケトアシドーシスをもたらすことになるという証拠は存在しない。他の実施形態では、組成物の投与は、動物の残りの生涯（例えば、本明細書で定義される高齢又は老齢の状態に最近達したばかりの動物の平均寿命の後半）にわたって継続される。
【０１１６】
一実施形態では、組成物は、毎日の食餌計画の一部として、少なくとも約１週間、約３カ月又は最低約１年投与される。
【０１１７】
一実施形態では、投与される組成物は、血中尿素窒素を低下させるか、タンパク質分解を減少させるのに有効な量でＭＣＴを含む。別の実施形態では、組成物は、アラニンアミノトランスフェラーゼの量又は活性を低下させるのに有効な量でＭＣＴを含む。
【０１１８】
一実施形態では、提供される方法は、投与ステップを含み、組成物は、コンパニオンアニマルの社会的行動を改善するのに有効な量でＭＣＴを含む。そのような改善は、自己の種又はヒト等の他の種との交流を含むことができる。
【０１１９】
以下の実施例は、本発明を更に詳細に説明するために提供される。これらの実施例は、本発明を例示するためのものであり、限定することは意図されていない。
【０１２０】
〔実施例１〕
（動物及び食餌）
年齢が８〜１１歳の範囲の５４匹の動物を、物体弁別及び逆転学習試験での、基準までの誤り（ｅｒｒｏｒｓ−ｔｏ−ｃｒｉｔｅｒｉｏｎ）を用いて、認知機能において等価な３つの処置群に分割した（表１）。これらの動物は、病理学的状態が何もなく、健常な高齢のイヌと見なされた。対照群である第１の群は、約１０％の水分、約２６％の粗タンパク質、約１６％の脂肪、約６％の灰分からなる基本食餌をＭＣＴの補充なしに与えた。この基本食餌は、一般にコンパニオンアニマルの食餌に用いられる成分、例えば、酒米、鶏肉、全粒小麦、家禽副産物食、トウモロコシグルテン食、トウモロコシ穀粒、動物性脂肪、トウモロコシふすま、乾燥卵製品、調味料、ビタミン、ミネラル等からなっていた。これらの実験のために動物に投与されるＭＣＴは、一般式：
【化６】
0005537809.tif 000007
のものであり、これらの用途において、９５％超のＲ１、Ｒ２及びＲ３は、炭素骨格中に８個の炭素を有し、グリセロール骨格にエステル結合した脂肪酸である。残りの脂肪酸は、Ｃ６又はＣ１０含有脂肪酸である。
【０１２１】
第２の群は、１ｇ／ｋｇ／日のＭＣＴを補充した基本食餌を与えられた。第３の群は、２ｇ／ｋｇ／日のＭＣＴを補充した基本食餌を与えられた。試験物質は、イヌの通常の食物に添加し、３日にわたって徐々に導入した。すなわち、１日目はＭＣＴの最大用量の３分の１を、２日目は３分の２を投与し、３日目に全用量を投与した。調査期間中、被験動物には試験物質を与え続けた。すべての被験動物に予め事前訓練プロトコールを経験させて、動物を試験器具に慣れさせ、また、認知能力のベースライン測定値を得た。すべての群について、動物に与えた食物又は食物−油混合物の量は、式：ｋｃａｌ  ｒｅｑ＝（ＢＷ０．７５）（７０）（２）［式中、ＢＷは、動物の体重（キログラム）である。］を用いて計算した。これは、ＢＷに対して同じ量のカロリーを動物に与え、群内の各動物のＢＷを維持するために行った。
【０１２２】
動物に対する調査は、３つの別々の群（以下、コホートと呼ばれる。）ごとに開始された。まず、第１のコホート（３２個体）について調査を開始した。第２のコホート（１０個体）は、約２カ月後に調査を開始した。第３のコホート（１２個体）は、第２のコホートの約３週間後に調査を開始した。認知試験は、動物が全量の試験物質を含有する食物を食べ始めてから９日後に開始した。
【０１２３】
全般的に見れば、動物は、処置に対して良好な耐容性を示した。１匹の動物は、ＭＣＴが食物と組み合わされたスラリーからなる処置用食餌を摂取しないことがあった。そのため、この動物を対照群に再割り当てした。
【０１２４】
計画した用量は１ｇ／ｋｇ／日及び２ｇ／ｋｇ／日であったが、すべての動物が全用量を摂取したわけではない可能性がある。ＭＣＴ油は、乾燥キブル中に手作業で混合したので、キブルがコーティングされただけでなく、容器の側面もコーティングされた。そのため、容器をなめなかった動物は全用量を摂取していない。更に、動物には、毎日の割当量を０．５時間以内に摂取することを要求したが、すべての動物が全割当量を毎日摂取したわけではない。
【０１２５】
【表１−１】
0005537809.tif 000008
【０１２６】
【表１−２】
0005537809.tif 000009
【０１２７】
【表１−３】
0005537809.tif 000010
【０１２８】
〔実施例２〕
（血液分析）
血液学及び生化学試験を、ベースライン、９日目及び約３０日毎に、動物が認知試験を完了するまで行った。血液化学及び血液学試験は、一般的な健康の指標として、また、処置に対する動物の応答の尺度としてモニターした。追加の血清試料及び血漿試料も採取し、保管した。同じ速度で全調査が完了しなかったので、すべての動物が、等しい数の血液試料を採取されたわけでなかった。そのため、調査０日目（Ｔ０）、９日目（Ｔ１）、３９日目（Ｔ２）、６９日目（Ｔ３）、９９日目（Ｔ４）、１２９日目（Ｔ５）に得られた血液学及び生化学試験結果のみを分析に含めた。
【０１２９】
各血液測定結果は、処置群（０、１、２ｇ／ｋｇ／日）を被験体間変数とし、時点（Ｔ０、Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３、Ｔ４、Ｔ５）を被験体内変数とする別々の反復測定ＡＮＣＯＶＡを用いて分析した。コホート（第１、２、３）は共変量として機能した。
【０１３０】
血液測定は、β−ヒドロキシ酪酸（ＢＨＢ）のスクリーニングレベルも含んでいた。処置に対する応答はＢＨＢレベルに基づいていて、これは、予想された用量依存増加を示した（図１）。図１から明らかなように、より多い用量のＭＣＴ（２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を与えられた群は、ベースライン（調査０日目）を除いてすべての時点で最高レベルのＢＨＢを示した。１ｇ／ｋｇ／日群も、上昇したレベルのＢＨＢを示したが、それらは２ｇ／ｋｇ／日群より低かった。ケトン体産生食を与えられたヒト及びげっ歯類と同様に、ＢＨＢレベルは最初に最高になり、次いで、処置の約１カ月後にわずかに低いレベルで安定化した。イヌの間で、ＭＣＴ処置に対する応答の差異が観察された。各処置群の１匹の動物はＢＨＢレベルの増加を示さず、非応答犬と見なした。一般に、処置された動物の５％だけが、一貫した処置応答（ベースラインレベルと等しいか、これより低い平均処置ＢＨＢレベルで定義される。）を示さなかった。この観察結果は、老齢犬、特にケトン体産生食に応答して、ＢＨＢレベルを上昇させることができないイヌ（報告済み）、にとって重要な意味を有する。
【０１３１】
ＭＣＴ油は高エネルギー栄養素なので、血清グルコース、コレステロール及びトリグリセリドのレベルを検査した。全体として、これらの変数の間で、処置に関連した効果は観察されなかったが、両処置群は、処置の３カ月（Ｔ４）、４カ月（Ｔ５）後に、わずかに上昇したコレステロールレベルを示すことが判明した（図５）。
【０１３２】
処置によりアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）レベルが低下する（図２参照）ことのいくつかの証拠が存在したが、処置群の経時的変化は統計的に有意でなく、ＡＬＴレベルのベースラインの差異は無視できなかった。
【０１３３】
図３は、全タンパク質濃度が、対照群（０ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）と比較して、１ｇ／ｋｇ／日群及び２ｇ／ｋｇ／日群で低い傾向があったことを示す。全タンパク質は、０ｇ／ｋｇ／日群と比較して、２ｇ／ｋｇ／日群で一貫してより低かった。観察された差異は、調査の終了時に近づくにつれてより明らかとなった（図３）。
【０１３４】
図４は、２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ／日を与えられた群についてのデータから明らかなように、血中尿素窒素（ＢＵＮ）濃度が、食餌に応答して変化し得ることを示す。ベースラインで対照群と等価であるにもかかわらず、この高用量群は、調査のいくつかの時点で有意に低い量のＢＵＮを示した（図４）。２ｇ／ｋｇ／日群は、概して、対照群より低いＢＵＮ濃度を示し、それらは、時間Ｔ１（９日目）、Ｔ２（３９日目）、Ｔ４（９９日目）で、統計的により低かった。更に、２ｇ／ｋｇ／日群におけるＴ４でのＢＵＮ濃度は、対照群及び１ｇ／ｋｇ／日群より統計的に低かった。ＢＵＮ濃度は、クレアチニンレベルとともに、腎機能の指標としてよく用いられる。血中のクレアチニンの変化は観察されなかったので（データは示さず）、処置動物において腎機能が損なわれたことはなさそうである。
【０１３５】
いずれの処置動物においても、代謝性アシドーシスの証拠は観察されなかった。ナトリウムは不変のままであり、アシドーシスの徴候は存在しなかった（データは示さず）。
【０１３６】
概して、いずれの処置群においても、ＭＣＴに対する有害な応答の徴候は観察されず、すべての群の動物は、調査期間中、健康な状態を保持した。ＭＣＴは、ＢＵＮレベル及びＡＬＴレベルに示されるように、健康全般に有益な影響を与える可能性がある。
【０１３７】
〔実施例３〕
（イヌの活動及び行動に対する処置効果の分析）
活動分析：  活動リズムは、Ｍｉｎｉ−Ｍｉｔｔｅｒ（登録商標）Ａｃｔｉｗａｔｃｈ−１６（登録商標）活動モニタリングシステムを用いて測定した。活動量（ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｃｏｕｎｔ）は、３日の期間にわたって３０秒毎に記録した。これらのデータから、（１）日没から日の出まで（夜間）、（２）日の出から日没まで（昼間）、の２つの時間帯について、平均活動レベルを計算した。更に、日の出と活動開始との間の平均の遅れ（３０分の活動期間（３０−ｍｉｎｕｔｅ  ｂｏｕｔ  ｏｆ  ａｃｔｉｖｉｔｙ）として定義される。）を、日の出前の活動開始を負のスコアで表して、各動物について計算した。
【０１３８】
行動分析：  新奇性試験（ｃｕｒｉｏｓｉｔｙ  ｔｅｓｔ）及び人との交流試験（ｈｕｍａｎ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ  ｔｅｓｔ）という２つの異なる試験を実施して、自発的行動、探索的行動及び社会的行動の変化を評価した。試験は、処置開始前に１回（ベースライン）、処置の約２カ月後に１回、計２回実施した。定量化した自発的行動には、総自発運動、排尿、嗅ぐ動作、毛づくろいの頻度及び時間、不活動（ｉｎａｃｔｉｖｉｔｙ）、立ち上がり（ｒｅａｒｉｎｇ）、発声、跳躍が含まれた。これらの行動を、新奇性試験及び人との交流試験の両方で定量化した。探索的行動は、新奇性試験を用いて定量化し、これにより、動物の、その環境における物体への干渉の時間及び性質の両方を測定した。社会的行動は、人との交流試験を用いて定量化した。
【０１３９】
結果：  新奇性試験については、動物を、７個の物体を含むオープンフィールドの活動領域（約８’×１６’）に配置し、その行動を、１０分間にわたって記録し、定量化した。この試験は、自発的行動及び探索的行動の測定結果を提供した。新奇性試験では、自発運動の量において、わずかに有意な群間差異が存在した［Ｆ（２，４６）＝２．５２１、ｐ＝０．０９１］。２ｇ／ｋｇ／日群は、対照群及び１ｇ／ｋｇ／日と比較して、大きなレベルの自発運動を示したが、事後試験では統計的有意性を示さなかった（図６）。同様の傾向が人との交流試験で観察されたが、統計的有意性は示さなかった（図６）。
【０１４０】
不活動：  新奇性試験の分析により、処置アセスメントでの不活動の有意な増加が明らかになった［Ｆ（２，４６）＝６．４１８、ｐ＝０．０１５］。処置群と時間との有意な相互作用も存在した［Ｆ（２，４６）＝３．６７４、ｐ＝０．０３３］。事後試験では、統計的な有意性を示さなかったが（ｐ＞０．１０）、対照群は、不活動の大きな増加を示し、１ｇ／ｋｇ／日群及び２ｇ／ｋｇ／日は、ベースラインと処置の間で、それぞれ不活動の減少又はわずかな増加を示した（図８、１０）。人との交流試験において、有意な群効果［Ｆ（２，４６）＝４．１８２、ｐ＝０．０２１］、及び処置アセスメントでの不活性の減少への傾向［Ｆ（２，４６）＝２．７６０、ｐ＝０．１０３］が存在した。図９に示されるように、１ｇ／ｋｇ／日群は、２ｇ／ｋｇ／日（ｐ＝０．０１７）群及び対照（ｐ＝０．５０９）群より活動が少なかった。
【０１４１】
人との交流試験の間、動物を、オープンフィールドの活動領域（約８’×１６’）に配置し、部屋の中央に親しい人を座らせた。この人には、消極的な状態を保ち、イヌと交流しないよう指示した。動物の行動を、１０分間にわたって記録し、定量化した。この試験は、自発的行動及び社会的行動の測定結果を提供した。親しい人との交流の時間及びタイプは年齢及び認知能力と強く相関することが以前に報告されている（Ｓｉｗａｋら、２００１年）。認知機能が損なわれていない若年のイヌは、典型的には、１０分間のほとんどを、人と交流し、人と身体的接触を行う（例えば、人のひざに座る、反応を得るために人の腕を軽くつつく）ことに費やす。認知機能が損なわれていない高齢のイヌも、その時間のほとんどを、人と交流することに費やすが、あまり人と身体接触せず（例えば、人の足元に座り、人を眺める）、これは、Ｓｉｗａｋら（２００１年）によって「ニアタイム（ｎｅａｒ  ｔｉｍｅ）」と定義されている。痴呆のイヌは、人を無視する傾向があり、人と接触したり、人の近くで費やしたりする時間がほとんどない。
【０１４２】
各行動について、反復測定ＡＮＣＯＶＡを用いてデータを分析した。処置群（０、１、２ｇ／ｋｇ／日）が被験体間変数、調査フェーズ（ベースライン、処置）が被験体内変数、コホート（第１、２、３）が共変量である。事後試験にはボンフェローニ補正を用いた。非応答犬を除外した同様の分析も行った。
【０１４３】
各行動について、ベースラインからの変化を、処置活動レベルからベースライン活動レベルを差し引くことによって計算した。正のスコアは、行動の頻度／時間の増加を示し、負のスコアは減少を示す。各活動試験からのデータは、群（０、１、２ｇ／ｋｇ／日）を被験体間変数とし、コホート（第１、２、３）を共変量とする別々のＭＡＮＣＯＶＡを用いて分析した。従属変数は、所定の行動試験で定量化された各行動である。この分析を、非応答犬を除外して繰り返した。
【０１４４】
行動のエンドポイントは、従来認知と関連付けられていた行動が、ＭＣＴ処置によって影響されたかどうかを判定するのに貢献した。第２の目的は、他の行動の変化を観察することができるかどうかを判定することであった。
【０１４５】
２ｇ／ｋｇ／日のＭＣＴの処置は自発的行動に正の効果を示した。２ｇ／ｋｇ／日群は、新奇性試験、人との交流試験及びＡｃｔｉｗａｔｃｈ装置を用いて評価すると、より高い総活動レベルを示した（図６、７）。自発運動の増加は、ベースライン及び処置の両方で見られたが、Ａｃｔｉｗａｔｃｈ装置を用いると、昼間の活動レベルに対する、処置に関連する効果も見られた。更に、低用量群及び対照群は、反復試験で活動の低下を示したが、高用量群の活動レベルは安定な状態を保った。活動の低下は、ある程度活動領域への慣れに起因している可能性がある。これが低下の主因となることはありそうもない。それは、以前の報告により、反復試験において、ビーグル犬のオープンフィールド活動が比較的安定な状態を保つことが示されているからである（Ｓｉｗａｋら、２００１年）。２ｇ／ｋｇ／日群において、立ち上がりの有意な低下も存在した（図１１、１２）。
【０１４６】
物体上に排尿する頻度：  物体上に排尿する頻度において、全般的に群間差異が存在した［Ｆ（２，４６）＝４．０９８、ｐ＝０．０２３］。図１３に示されるように、対照群は、１ｇ／ｋｇ／日群（ｐ＝０．０４５）又は２ｇ／ｋｇ／日群（ｐ＝０．０４９）のいずれよりも頻繁に物体上に排尿した。
【０１４７】
物体を持ち上げる頻度：  物体を持ち上げる頻度において、全般的に群間差異が存在した［Ｆ（２，４６）＝２．５７１、ｐ＝０．０８７］。１ｇ／ｋｇ／日群は、残りの群と比較して頻繁に物体を持ち上げた（図１４）が、事後試験では統計的有意性を示さなかった。
【０１４８】
全般的に見て、ＭＣＴ処置は、社会的行動を前向きに改変した。処置アセスメントの間、両処置群は、人との接触の時間の増加を示したが、対照群は、人との接触時間の減少を示した。これに対して、対照群は、処置アセスメントにおいて、人の近くにいる時間の増加を示した（図１５〜１８）。したがって、両処置群は、認知機能が損なわれていない若年のイヌにおいて通常観察される社会的行動の増大を示した。これに対して、対照群は、その類の社会的行動に関して変化を示した。「痴呆になっていない若年のイヌ」の行動は、ヒトの近くで（但し、接触せずに）時間を費やすといった、「痴呆になっていない高齢のイヌ」の行動に変化した。
【０１４９】
ホームケージ内の昼間及び夜間の活動レベルを、Ａｃｔｉｗａｔｃｈを用いて観察し、記録した。Ｓｉｗａｋら（２００３年）は、痴呆になった高齢の動物が、夜間の活動の増加及び日の出と活動開始との間のより大きな遅れを特徴とする、非常に不規則な活動パターンを示すことを報告している。
【０１５０】
２ｇ／ｋｇ／日の動物は、処置条件下で昼間の活動レベルの有意な増加を示した（図１９）。残りの群も、昼間の活動レベルの小さな増加を示した。この増加は、ある程度、施設での動物及びスタッフの数の増加に起因している。活動開始の遅れはいかなる処置効果ももたらさなかったが、すべての動物は、処置フェーズの間、日の出と活動開始との間のより大きな遅れを示した。この効果はおそらく季節的な差異に起因する。Ａｃｔｉｗａｔｃｈによる処置アセスメントは、主として、日の出の遅い秋に行った。しかし、スタッフは、同時にシフトを開始する（これは、処置アセスメント中は日の出前であったであろう）ことを続けた。
【０１５１】
〔実施例４〕
（イヌの認知に対する処置効果の分析）
動物を、弁別課題及び逆転学習課題の両方での、基準までの誤りに基づいて処置群に分割した。処置群が、最初に認知能力についてバランスの取れていることを保証するために、３つの分析を行った。すべての分析において、課題（弁別対逆転）は被験体内変数として機能し、従属変数は、弁別及び逆転での基準までの誤りであった。
【０１５２】
遅延非位置合わせ（ＤＮＭＰ）：  第１の認知課題である遅延非位置合わせ課題は、複雑な学習能力及び視空間作業記憶の測定結果を提供した。しばらくの間、動物に、空間的位置を覆っているブロックを提示した。この動物は、短い遅延時間にわたってその位置を記憶し、遅延後、新奇な位置を覆っている物体を選択する必要があった。最初の訓練の間、遅延を５秒に固定した。課題学習後、遅延を次第に増加させた最大記憶プロトコールで動物を試験した。習得フェーズに関して、生データは、２段階の学習基準に達するための誤り、セッション及び試行、又は４０セッション（４８０回の試行）にわたる誤り（動物が課題を学習することができなかった場合）からなっていた。最大の記憶フェーズに関して、生データは、動物が４０セッション以内で２段階の学習基準に合格することができた最長の遅延（秒）からなっていた。
【０１５３】
データは、群（０、１、２ｇ／ｋｇ）を被験体間変数とし、コホート（第１、２、３）を共変量とするＭＡＮＣＯＶＡを用いて分析した。従属変数は、習得フェーズ及び最大記憶能力での、基準までの誤り、セッション及び試行であった。
【０１５４】
結果は、基準までのセッション及び試行の両方の測定結果に対する有意な効果によって示されるように、高用量群において、概して改善された学習を示した。課題を学習するのが最も遅かったのは１ｇ／ｋｇ／日群であったので、用量依存効果の証拠は存在しなかった（図２０、２１）。最大記憶能力に有意な効果は観察されなかったが、処置動物は、より大きな最大記憶能力を示す傾向があった（図２２）。これらの結果は、４個体（１ｇ／ｋｇ／日群の３個体、０ｇ／ｋｇ／日群の１個体）のデータの欠如によってある程度混乱させられた。これらの動物が５秒の遅延での課題を習得することができなかったことにより、これらの動物は最大記憶試験から除外され、その結果、最も劣っている動物が２つの群から除外されることになった。
【０１５５】
孤立項弁別（ｏｄｄｉｔｙ  ｄｉｓｃｒｉｍｉｎａｔｉｏｎ）：  第２の認知課題では、複雑な規則の学習及び選択的注意を評価した。動物は、３つ（２つの同一物体及び１つの異なる物体）のうちの異なる物体を選択する必要があった。動物は、２段階の学習基準を達成するために、最大２０セッションを受けた。より良好に学習を定量化するために、第２の孤立項の方が第１の孤立項より難易度が高い２つの水準の孤立項を用いた。基準までの誤り、セッション及び試行、又は２０セッション（４００回の試行）にわたる誤り（動物が２０セッション以内に学習することができなかった場合）を用いることによって、各難易度での学習を測定した。
【０１５６】
全般的な処置効果は、統計的に有意でなかった。しかし、両水準の孤立項弁別において、２ｇ／ｋｇ／日群の動物はより早く課題を学習した（図２３、２４）。この課題での有意性の欠如は、多くの動物が、割り当てられた時間内に学習基準を達成することができなかったこと（すなわち天井効果）によってある程度混乱させられた。更に、合格／不合格の頻度のカイ二乗も、２ｇ／ｋｇ／日群のより良好なパフォーマンスを支持していた。
【０１５７】
運動課題習得及び遂行：  最後の認知機能測定は、運動習得及び遂行課題からなっていた。しばらくの間、動物に、足を用いて食物報酬を獲得するように訓練した。まず、動物が食物を首尾よく獲得することのできる最大距離を決定した。動物は、１回のセッションの間に少なくとも１回、食物報酬に到達することができなくなるまで、各距離で２回のセッションを受けた。続いて、動物の最大距離、最大半量距離、及び０ｃｍの距離（対照）、の３つの距離で、食物に到達する時間を測定して、課題の遂行を評価した。習得フェーズでの生データは、動物が、最大距離（食物報酬を首尾よく獲得することのできる最大距離として定義される）、学習セッション（各距離での第１セッション）の間の平均待ち時間（ａｖｅｒａｇｅ  ｌａｔｅｎｃｙ）及び練習セッション（各距離での第２セッション）の間の平均待ち時間からなっていた。遂行フェーズでの生データは、各距離（０ｃｍ、最大半量距離及び最大距離）での応答までの平均待ち時間からなっていた。
【０１５８】
２ｇ／ｋｇ／日の動物は、１ｇ／ｋｇ／日群及び０ｇ／ｋｇ／日群のいずれよりも長い最大距離を達成することができた（図２５）。前者の比較は統計的に有意であった。更に、効果は有意でなかったが、２ｇ／ｋｇ／日群は、試験の初日に、任意の所与の距離において、より短い待ち時間を有するようであった。これらの知見は、２ｇ／ｋｇ／日群の動物において手続き学習が改善されたことを示す。しかし、この解釈は、イヌのサイズに由来する潜在的効果を考慮していない。より大きなイヌは、本質的により長い足を有し、おそらくその結果、より長い距離に到達できたかもしれない。この要因が、本データに有意に影響したことはありそうもない。それは、より小さな動物が、より大きな動物と同じ距離に到達することができたからである。
【０１５９】
待ち時間に対する予期された距離依存効果が、調節可能な運動課題で観察された。動物は、その最大半量距離を提示されると有意に遅く、その最大距離を提示されると応答が更に遅かった。処置効果は、課題のこのフェーズに関しては観察されなかった。
【０１６０】
一般に、認知のエンドポイントは、２ｇ／ｋｇ／日の用量のＭＣＴは認知を増強する効果を有するが、１ｇ／ｋｇ／日は治療量以下であったことを示す。更に、運動課題に関する結果は、高用量が、健康の改善の結果として運動能力に影響し得るという解釈を支持する。
【０１６１】
〔実施例５〕
（イヌの脳及び脳血管系のＭＲＩ分析）
ＭＲＩを、第１のコホートについて、処置開始後約１．５カ月に得た。画像は、３０の被験動物から得た。第２及び第３のコホートの動物は、処置期間をまだ開始していなかったので、対照群内に置いた。表２は、ＭＲＩ分析についての群の内訳を示す。ＭＲＩのエンドポイントは、ＭＣＴが、脳代謝の生理的変化を誘導できたことを示すことを目的とする二次的な測定であった。処置群の動物は一部のみを含めたが、これは、測定の性質上、大きな試料サイズを得ることが非常に困難であったためである。例えば、頸動脈が画像内で明瞭に識別できないと、適切な制御信号を用いることができない。それにもかかわらず、ＭＲＩ所見は、ＭＣＴ処置のわずか１．５カ月後に脳内の生理的変化の証拠を提供した。
【０１６２】
【表２−１】
0005537809.tif 000011
【０１６３】
【表２−２】
0005537809.tif 000012
【０１６４】
血液量指数：  血液量指数（ＢＶＩ）は、Ｔ１−動的ＭＲＩ及び造影剤（Ｇｄ  ＤＴＰＡ−ＢＭＡ、Ｏｍｎｉｓｃａｎ（登録商標））を用いて、脳構造内の血液量を測定したものである。ＢＶＩは、次の４つの領域について測定した。（１）前頭前野−前頭領域、（２）視床、（３）海馬、（４）小脳。
【０１６５】
ＢＶＩは、領域（前頭前野−前頭皮質、視床、海馬、小脳）を被験体内変数とし、群（０ｇ／ｋｇ／日、１ｇ／ｋｇ／日、２ｇ／ｋｇ／日）を被験体間変数とする反復測定ＡＮＯＶＡを用いて分析した。
【０１６６】
血液量の領域特異的差異が観察された。前頭前野−前頭皮質は最大の指数（最大の血液量）を示し、視床は最小の血液量を示した。ＢＶＩは群間でも異なっていた。２ｇ／ｋｇ／日群は、０ｇ／ｋｇ／日群より有意に少ない血液量を示した（図２６）。
【０１６７】
血液漏出指数：  血液漏出指数（ＢＬＩ）は、脳からの血液の漏出を測定したものである。ＢＬＩを、Ｔ１−動的ＭＲＩ及び造影剤（Ｇｄ  ＤＴＰＡ−ＢＭＡ、Ｏｍｎｉｓｃａｎ（登録商標））を用いて繰り返し画像を撮ることにより求めて、脳血管系内の造影剤の量を、投与された全量の関数として求めた。ＢＬＩは、次の４つの領域について測定した。（１）前頭前野−前頭領域、（２）視床、（３）海馬、（４）小脳。
【０１６８】
ＢＬＩは、領域（前頭前野−前頭皮質、視床、海馬、小脳）を被験体内変数とし、群（０ｇ／ｋｇ／日、１ｇ／ｋｇ／日、２ｇ／ｋｇ／日）を被験体間変数とする反復測定ＡＮＯＶＡを用いて分析した。
【０１６９】
ＢＶＩと同様に、領域特異的効果が観察され、前頭前野−前頭皮質は最大の漏出を示し、視床は最少の漏出を示した。処置効果も、血液漏出測定に関して明らかであった。２ｇ／ｋｇ／日群は、対照群より有意に少ない漏出を示した（図２７）。これらの知見は、高用量の動物の脳内の血液が脳の不適当な部位に漏出しないことを示している。
【０１７０】
血液脳関門指数：  血液脳関門指数（ＢＢＢＩ）は、脳構造内の血液脳関門の漏出度を測定したものである。高スコアは、脳への血液脳関門を通じた漏出がより多いことを示す。ＢＢＢＩは、Ｔ１−動的ＭＲＩ及び造影剤（Ｇｄ  ＤＴＰＡ−ＢＭＡ、Ｏｍｎｉｓｃａｎ（登録商標））を用いて測定した。ＢＢＢＩは、次の４つの領域について測定した。（１）前頭前野−前頭領域、（２）視床、（３）海馬、（４）小脳。
【０１７１】
ＢＢＢＩは、領域（前頭前野−前頭皮質、視床、海馬、小脳）を被験体内変数とし、群（０ｇ／ｋｇ／日、１ｇ／ｋｇ／日、２ｇ／ｋｇ／日）を被験体間変数とする反復測定ＡＮＯＶＡを用いて分析した。
【０１７２】
領域の差異は観察されなかったが、わずかに有意な処置効果が存在した。２ｇ／ｋｇ／日群は、１ｇ／ｋｇ／日及び０ｇ／ｋｇ／日の動物のいずれよりも小さいＢＢＢ漏出度を示した（図２８）。
【０１７３】
局所脳血液量：  局所脳血液量指数（ｒＣＢＶＩ）は、Ｔ２−灌流ＭＲＩ及び造影剤（Ｇｄ  ＤＴＰＡ−ＢＭＡ  Ｏｍｎｉｓｃａｎ（登録商標））を用いて、脳構造内の局所脳血液量を測定したものである。ｒＣＢＶＩを、灰白質及び白質の両方について測定した。
【０１７４】
ｒＣＢＶＩは、組織の種類（灰白質、白質）を被験体内変数とし、群（０ｇ／ｋｇ／日、１ｇ／ｋｇ／日、２ｇ／ｋｇ／日）を被験体間変数とする反復測定ＡＮＯＶＡを用いて分析した。
【０１７５】
わずかに有意な処置効果が観察され、２ｇ／ｋｇ／日の動物は、０ｇ／ｋｇ／日の動物より大きなｒＣＢＶを示した（図２９）。
【０１７６】
〔実施例６〕
（ＭＣＴ誘導性代謝変化の、ＮＭＲベースの栄養メタボノミクス）
対照食餌、及び１日当たり、体重１ｋｇ当たり１ｇ又は２ｇのＭＣＴを含む食餌、を用いたイヌの調査からの試料を、ＮＭＲを用いて分析して、メタボノミック（ｍｅｔａｂｏｎｏｍｉｃ）な変化を評価した。メタボノミクス（場合により、メタボロミクスとも呼ばれる。）は、生理的刺激、遺伝子操作等の変化に対する生物系の動的かつマルチパラメトリックな代謝反応の定量的測定を行う研究である。任意の細胞、体液、組織、器官又は生物体の、任意の時点の、又は経時的な代謝プロファイルはこの技術で調べることができる。差異及び処置効果を見出すことを容易にするために、統計解析の強力な方法が用いられる。一般に行われ、ここでも実行される統計解析は、目的変数が指定されない解析（ｕｎｓｕｐｅｒｖｉｓｅｄ  ａｎａｌｙｓｉｓ）（主成分分析（ＰＣＡ）等）及び目的変数が指定される解析（ｓｕｐｅｒｖｉｓｅｄ  ａｎａｌｙｓｉｓ）（部分最小二乗判別解析（ＰＬＳ−ＤＡ）、直交部分最小二乗判別解析（Ｏ−ＰＬＳ−ＤＡ）等）の両方を含む。まず、ＰＣＡを用いて異常値を識別した。ＰＬＳ＿ＤＡを用いることによって、代謝の解釈にとって有用なクラスター化を可能にしつつ、定義されたクラスと相関しない代謝情報を除去した。Ｘ行列（ＮＭＲスペクトル）及びＹ行列（試験される処置クラス又は時点）が、第１の部分がＸ及びＹに共通であり、第２の部分が特定のＸの変動（「構造ノイズ」）を含み、第３の部分が残差分散を含む３つの部分に分離されるように、Ｏ−ＰＬＳ−ＤＡを用いて更に修正した。データのＯ−ＰＬＳ−ＤＡ負荷（Ｏ−ＰＬＳ−ＤＡ  ｌｏａｄｉｎｇ）により、調査対象の代謝効果のより良好な予測的解釈及びより正確な解釈が可能になる。
【０１７７】
負荷プロット（ｌｏａｄｉｎｇ  ｐｌｏｔ）を構築して、クラスター／群の分離等に関与する化合物を同定した。用いたソフトウェアには、Ｍａｔｌａｂ及びＳｉｍｃａ  Ｐ＋１１が含まれていた。
【０１７８】
血漿試料は、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ−６００分光器の、６６０．２２ＭＨｚでの通常の１Ｈ−ＮＭＲを用いて測定した。試料を無作為の順序で測定した。
【０１７９】
以下の取得パラメーターを用いた。
ＮＯＥＳＹ−プレサチュレーション：  Ｄ−９０°−ｔ１−９０°−自由誘導減衰（ＦＩＤ）を得る。ここで、Ｄ１は緩和遅延（２．０ｓ）であり、その間に、水の共鳴が選択的に照射される。ｔ１は、３ｍｓの固定間隔である。水の共鳴は、混合時間（ｔｍ、１００ｍｓ）の間に２回目の照射をされた。
Ｃａｒｒ−Ｐｕｒｃｅｌｌ−Ｍｅｉｂｏｏｍ−Ｇｉｌｌ（ＣＰＭＧ）：  Ｄ１［−９０°−（Ｔ−１８０°−Ｔ）ｎ−（ＦＩＤ）］。スピンエコーループ時間（ｓｐｉｎ−ｅｃｈｏ  ｌｏｏｐ  ｔｉｍｅ）（２ｎ  Ｔ）は、６４ｍｓに設定した。２．０ｓの緩和時間を適用した。
【０１８０】
スペクトル処理のために、ＮＯＥＳＹプレサチュレーションのデータセットについて、フーリエ変換前に、０．３Ｈｚのラインブロードニング（ＬＢ）に対応する指数関数をＦＩＤに乗じ、また、ＣＰＭＧのデータセットについて、１．０Ｈｚのラインブロードニング（ＬＢ）に対応する指数関数をＦＩＤに乗じた。得られた各スペクトルは、正確な粗調整（ｓｈｉｍｍｉｎｇ）及び水抑制のために目視で確認し、続いて、ＴＯＰＳＰＩＮ（バージョン１．３．、Ｂｒｕｋｅｒ、Ｋａｒｌｓｒｕｂｅ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて、位相及びベースラインの歪みを補正した。化学シフトの較正は、５．２３ｐｐｍでのグルコースのαアノマープロトンのダブレットシグナルを用いて行った。
【０１８１】
ピークの指定は、ＡＭＩＸビューアー（バージョン３．６．８、Ｂｒｕｋｅｒ）を用いて行った。スペクトルを、位相調整、ベースライン及び較正操作によって処理した後、上述の統計解析にかけた。
【０１８２】
Ｏ−ＰＬＳ−ＤＡ解析の選択された結果を、図３０、３１及び３２に示す。これらの図から明らかなように、各動物は名前で識別され、クラスターは、色で最もよく見ることができる。図３０及び３１は各々、同じ主成分分析を示すが、図３０は、０、１及び２ｇ  ＭＣＴ用量での処置を施した群の各動物についてのデータを示し、図３１は、０及び２ｇ  ＭＣＴ用量での処置のデータのみを示すことによって単純化されている。分離は、密集の少ないプロット上の方が見やすい。図３２は、異なる一組の主成分についての、対照群（０ｇ  ＭＣＴ）及び高用量群（２ｇ  ＭＣＴ）のデータを示す。
【０１８３】
このデータにより、以下の結論をメタボローム研究から引き出すことが可能となる。
【０１８４】
食餌のＭＣＴ補充は、アラニン、分岐鎖アミノ酸、リポタンパク質、不飽和脂肪酸及び尿素の濃度の減少をもたらす。ＭＣＴ補充は、ケトン体（β−ヒドロキシ酪酸、アセト酢酸、アセトン）の予期された増加をもたらした。これはまた、グルタミン及びフェニルアラニンの増加をもたらした。リポタンパク質、超低密度リポタンパク質（ＶＬＤＬ）及びカイロミクロンの減少、並びに高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）及びクエン酸塩の増加も観察された。更なる変化が、調査過程にわたって見られた。代謝物のイソ酪酸、酢酸、ギ酸、及び３．３９ｐｐｍでのシグナルは、時間とともに増加した。他方、乳酸は、時間とともに減少した。
【０１８５】
結論として、処置群の関数及び時間の関数としてのメタボローム解析データはいずれも、長期にわたって食餌のＭＣＴを与えられた動物での代謝変化のより深い理解を得るのに有用であった。このような長期補充を通じて達成することのできる変化の詳細な状況は、行動、運動及び認知機能のデータ、並びに基本的な血液化学分析結果と合わせることによって認識することができる。
【０１８６】
〔実施例７〕
（ネコにおける加齢性の認知機能低下）
認知機能／低下の有用なモデルを他の動物で開発することができるかどうかを判定することも興味の対象である。行動の徴候及び脳の病理の加齢に伴う変化を、ネコに関して報告する。しかし、ネコが、加齢性の認知機能低下を起こすという証拠は限られている。イヌ及びヒトの両方において、実行機能は高齢化の初期に損なわれる。本研究では、ｔ−迷路試験での、３つの異なる年齢群のネコのパフォーマンスを調査することによって、加齢性の認知機能の変化を検討した。作業仮説は、実行機能の尺度である逆転学習のパフォーマンスは、ネコでは年齢の増加とともに低下する、というものであった。
【０１８７】
材料及び方法：
被験動物は、年齢に基づいて３つの群に分割された２５匹の家ネコであった。成体群は、３．０４〜４．１７歳の１０個体からなり、高齢群は、７．６９〜９．０３歳の７匹のネコからなり、年長群は、１０．９１〜１５．０５歳の８匹のネコからなっていた。ｔ−迷路は、スタートボックス、ランウェイ及び２つのゴールボックスの、４つの異なる領域を有する木製の器具である。試行の最初に、被験動物に、スタート領域を出発させ、左右の両方に分岐したランウェイに入らせた。被験動物が、ランウェイの後に位置した２つのゴールボックスのうちのいずれか１つに入った時点で、選択（左又は右）が行われたものとした。
【０１８８】
本研究では、被験動物を３つのフェーズで試験した。第１フェーズは、被験動物の選好を、最も頻繁に入ったゴールボックスに基づいて判定する１日である。弁別フェーズである第２フェーズの間、被験動物には、迷路を走ることを要求し、その被験動物にとって好ましい側を選択した場合にのみ報酬を与えた。被験動物が、８０％超の正しい選択をするという学習基準に到達したら、その被験動物を、逆転フェーズである第３フェーズに進ませた。このフェーズでは、正しい選択が、その被験動物にとって好ましくない側となるように、報酬が与えられる側を切り替えた。次いで、ネコを、学習基準に到達するまで試験した。弁別及び逆転での誤りを、年齢群を被験体間変数とし、試験フェーズを被験体内変数とする反復測定ＡＮＯＶＡを用いて分析した。
【０１８９】
結果：
結果を表７．１に示す。示した結果は、調査の各フェーズ（例えば、弁別（ＤＩＳＣ）、逆転（ＲＥＶ）等）で、動物によって犯された誤りの数である。有意なフェーズ効果及び年齢効果が初期の分析で見出された。予期されたとおり、ネコは、弁別より逆転において多くの誤りを犯した。観察された年齢効果は、若年群と比較して、高齢群及び年長群において全般的な誤りの増加を示した。更に、若年の動物と比較して、高齢ネコ及び年長ネコにおいて逆転での誤りが増加したことから明らかなように、年齢群と試験フェーズとの間にわずかに有意な相関性が見出された。弁別の誤りにおいて差異は見出されなかった。図３３は、Ｔ−迷路課題における成ネコ及び年長ネコの分析結果を示す。グラフ上の「年長ネコ」は、表７．１中の「高齢」ネコ及び「年長」ネコの結果を合わせたものである。
【０１９０】
考察及び結論：
この調査により、他の種のように、ネコにおいても、実行機能が年齢によって損なわれることが示された。更に、この障害は、ネコの高齢化の比較的初期に起こる。この研究は、ネコは、高齢化とともに年齢依存性の認知機能低下を示し、高齢のネコにおいて観察される行動の変化は、認知機能の変化及び脳の高齢化に起因する可能性がある、という仮説を支持する。
【０１９１】
【表３】
0005537809.tif 000013
【０１９２】
参考文献：
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２１．  Ｔａｐｐ  ＰＤ，Ｓｉｗａｋ  ＣＴ，Ｅｓｔｒａｄａ  Ｊ，Ｍｕｇｇｅｎｂｕｒｇ  ＢＡ，Ｈｅａｄ  Ｅ，Ｃｏｔｍａｎ  ＣＷ，ａｎｄ  Ｍｉｌｇｒａｍ  ＮＷ  （２００３）  Ｓｉｚｅ  ａｎｄ  ｒｅｖｅｒｓａｌ  ｌｅａｒｎｉｎｇ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｂｅａｇｌｅ  ｄｏｇ  ａｓ  ａ  ｍｅａｓｕｒｅ  ｏｆ  ｅｘｅｃｕｔｉｖｅ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｃｏｎｔｒｏｌ  ｉｎ  ａｇｉｎｇ．  Ｌｅａｒｎｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍｅｍｏｒｙ  １０：６４−７３．
２２．  ＶａｎＩｔａｌｌｉｅ  ＴＢ  ａｎｄ  Ｎｕｆｅｒｔ  ＴＨ  （２００３）  Ｋｅｔｏｎｅｓ：  ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ’ｓ  ｕｇｌｙ  ｄｕｃｋｌｉｎｇ．  Ｎｕｔｒ．Ｒｅｖ．  ６１：３２７−４１．
２３．  Ｗａｒｄｌａｗ  ＪＭ，Ｓａｎｄｅｒｃｏｃｋ  ＰＡＧ，Ｄｅｎｎｉｓ  ＭＳ，Ｓｔａｒｒ  Ｊ  （２００３）  Ｉｓ  ｂｒｅａｋｄｏｗｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｂｌｏｏｄ−ｂｒａｉｎ  ｂａｒｒｉｅｒ  ｒｅｓｐｏｎｓｉｂｌｅ  ｆｏｒ  Ｌａｃｕｎａｒ  ｓｔｒｏｋｅ，ｌｅｕｋｏａｒａｉｏｓｉｓ，ａｎｄ  ｄｅｍｅｎｔｉａ？  Ｓｔｒｏｋｅ  ３４：８０６−８１２．
【０１９３】
本発明は、以上に記載された実施形態及び以上に例示された実施形態に限定されず、添付の「特許請求の範囲」の範囲内で変更及び修正が可能である。
【図面の簡単な説明】
【０１９４】
【図１】経時的な平均血中ＢＨＢ濃度。試験中の複数時点での血中ＢＨＢ濃度（μｍｏｌ／リットル）のグラフである。記号は次の処置群を表す。黒丸＝対照群（０ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）；白丸＝１ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日；三角＝２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日。同一の文字は統計的有意差を示す。
【図２】食餌中に提供されるＭＣＴの関数としてのアラニンアミノトランスフェラーゼ酵素活性。酵素アラニンアミノトランスフェラーゼ（「ＡＬＴ」）の活性（Ｕ／Ｌ）のグラフであり、活性が、提供されるＭＣＴの用量によって変化することを示す。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。ＡＬＴ活性は、ＭＣＴを与えられていない対照群（０ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）において最も高い傾向があった。
【図３】調査過程にわたる血中の総タンパク質濃度。図は、各食餌群における、試料中の総タンパク質量（ｇ／Ｌ）の経時的変化を示す。記号は次の処置群を表す。黒丸＝対照群（０ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）；白丸＝１ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日；三角＝２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日。総タンパク質は、０ｇ／ｋｇ／日群と比較して、１ｇ／ｋｇ／日群及び２ｇ／ｋｇ／日において低かった。これらの差異は、調査の終了時に特に明白であった。
【図４】経時的な血中尿素窒素濃度。血中尿素窒素（ＢＵＮ）濃度は、２ｇ／ｋｇ／日処置群で最も低い傾向があった。記号は次の処置群を表す。黒丸＝対照群（０ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）；白丸＝１ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日；三角＝２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日。
【図５】コレステロールレベル。コレステロール濃度は、初めは、対照群より、ＭＣＴを与えられた群において低かったが、調査９９日目までに、処置群のコレステロールが増加し、対照群のレベルより高くなった。記号は次の処置群を表す。黒丸＝対照群（０ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）；白丸＝１ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日；三角＝２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日。
【図６】総自発運動に反映される行動活性に対する食餌中のＭＣＴの影響。２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日を与えられた動物は、新奇性試験及び人への活動・行動試験のいずれにおいても、対照群又はより低い用量のＭＧＴを与えられた群より統計的に大きな総自発運動（ＴＬＡ）を示した。
【図７】人との交流試験中の総自発運動に対する食餌中のＭＣＴの影響。記号は次の処置群を表す。黒丸＝対照群（０ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）；白丸＝１ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日；三角＝２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日。対照群及び低用量（１ｇ／ｋｇ／日）群は、わずかな総自発運動の変化しか示さなかったが、２ｇ／ｋｇ／日群は、ベースラインから処置フェーズに向けて総自発運動の低下を示した。
【図８】新奇性試験の結果に対する食餌中のＭＣＴの影響。対照群は不活動の大きな増加を示したが、２ｇ／ｋｇ／日及び１ｇ／ｋｇ／日でＭＣＴを与えられた群は、それぞれ、ベースラインと処置の間で、不活動のはるかに小さな増加及び不活動の減少を示した。記号は次の処置群を表す。黒丸＝対照群（０ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）；白丸＝１ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日；三角＝２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日。
【図９】人との交流試験の結果に対する食餌中のＭＣＴの影響。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。２ｇ／ｋｇ／日群は、他の群より少ない不活動を示した。同一の文字は統計的有意差を示す。
【図１０】食餌中のＭＣＴの結果としての、新奇性試験における不活動レベルの変化。新奇性試験において、１ｇ／ｋｇ／日群の動物は不活動の減少（ｍｓｅｃ）を示したが、残りの群は、増加（対照群）又は実質的な変化なし（２ｇ／ｋｇ／日）であった。０ｇ／ｋｇ／日群は、この試験において不活動の最大の増加を示した。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。同一の文字は統計的有意差を示す。
【図１１】好奇心からの立ち上がり頻度に対する食餌のＭＣＴの影響。２ｇ／ｋｇ／日群は立ち上がり頻度の大きな減少を示したが、残りの群はわずかな変化しか示さなかった。ベースラインにおいて、２ｇ／ｋｇ／日群は、文字（ａ）で示されるように、対照と有意に異なっていたが、１ｇ／ｋｇ／日群との差異は、わずかに有意であるにすぎなかった。記号は次の処置群を表す。黒丸＝対照群（０ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）；白丸＝１ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日；三角＝２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日。
【図１２】好奇心からの立ち上がり頻度の変化。調査において、ＭＣＴを２ｇ／ｋｇ／日与えられた動物は、好奇心目的の立ち上がりの頻度の大きな減少を示した。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。文字（ａ）は、他の群との有意な差異を示す。
【図１３】食餌中のＭＣＴの関数としての、物体への排尿頻度。対照動物は、ＭＣＴを１ｇ／ｋｇ／日及び２ｇ／ｋｇ／日与えられた群の動物より、有意に頻繁に物体上に排尿した。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。文字（ａ）は、当該群が残りの群と有意に異なっていたことを示す。
【図１４】食餌中のＭＣＴの関数としての、好奇心から物体を持ち上げる頻度。１ｇ／ｋｇ／日群の動物は、残りの群の動物より頻繁に物体を持ち上げた。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。
【図１５】人と接触する時間に対する食餌のＭＣＴの影響。ＭＣＴを１ｇ／ｋｇ／日与えられた動物は、処置フェーズの間、人と接触する時間の増加を示す傾向があった。対照群の動物は、人との接触の減少を示す傾向があった。記号は次の処置群を表す。黒丸＝対照群（０ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）；白丸＝１ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日；三角＝２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日。
【図１６】食餌のＭＣＴの関数としての、人と接触する時間の変化。ＭＣＴを与えられた動物は、人と接触する時間の増加（ｍｓｅｃ）を示す傾向があったが、対照の動物は減少を示した。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。同一の文字は統計的有意差を示す。
【図１７】食餌中のＭＣＴの関数としての、ヒトの近くに存在する頻度。対照の動物は、いずれの処置群よりも頻繁にヒトの近くに存在する傾向があった。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。
【図１８】食餌中のＭＣＴの関数としての、ヒトの近くに存在する時間。対照群は、いずれの処置群よりも長くヒトの近くに存在した。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。文字（ａ）は、対照群が残りの群より有意に大きかったことを示す。
【図１９】昼間及び夜間の活動に対する食餌のＭＣＴの影響。ＭＣＴを２ｇ／ｋｇ／日与えられた動物群は、昼間に残りの群より活動的である傾向があり、より高用量のＭＣＴにより、夜間の活動が増加することなく昼間の活動レベルが増加した。記号は次の処置群を表す。黒丸＝対照群（０ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）；白丸＝１ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日；三角＝２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日。
【図２０】遅延非位置合わせでの基準までの誤りの数に対する、食餌のＭＣＴの影響。ＭＣＴを２ｇ／ｋｇ／日与えられた動物群は、対照群（０ｇ／ｋｇ／日）又はより低い用量のＭＣＴを与えられた群（１ｇ／ｋｇ／日）のいずれよりも、ＤＮＭＰを学習する際に誤りが少ない傾向があった。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。
【図２１】遅延非位置合わせでの基準までのセッションの数に対する、食餌のＭＣＴの影響。２ｇ／ｋｇ／日を与えられた動物群は、ＤＮＭＰを学習するのに要するセッションがより少ない傾向があった。同一の文字は統計的有意差を示す。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。
【図２２】最大記憶スコアに対する食餌のＭＣＴの影響。食餌のＭＣＴを与えられた群の動物は、対照動物より大きな最大記憶スコアを示したが、その差異は統計的に有意なものではなかった。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。
【図２３】孤立項弁別での基準までの誤りの数に対する、食餌のＭＣＴの影響。ＭＣＴを２ｇ／ｋｇ／日与えられた動物は、２つの孤立項試験の各々について、学習するのに誤りがより少なかったが、差異は統計的に有意なものではなかった。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。
【図２４】孤立項弁別での基準までのセッションの数に対する、食餌のＭＣＴの影響。ＭＣＴを２ｇ／ｋｇ／日与えられた動物は、２つの孤立項試験の各々について、学習するのに要するセッションがより少なかった。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。差異は統計的に有意なものではなかった。
【図２５】運動課題習得及び遂行に対する食餌のＭＣＴの影響。ＭＣＴを２ｇ／ｋｇ／日与えられた動物は、運動課題習得試験で、より長い距離から食物を回収することができた。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。同一の文字（ａ）は統計的有意差を示す。
【図２６】食餌のＭＣＴの関数としての血液量指数。ＭＣＴを２ｇ／ｋｇ／日与えられた群の動物は、他の群より少ない血液量（ＢＶ）指数を示した。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。同一の文字は、わずかに有意な差異を示す。
【図２７】食餌のＭＣＴの関数としての脳血液漏出指数。ＭＣＴを２ｇ／ｋｇ／日与えられた群の動物は、ＭＣＴを与えられていないか、より少ないＭＣＴを与えられた群より、脳血液漏出が少なかった。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。同一の文字は統計的有意差を示す。
【図２８】食餌のＭＣＴの関数としての血液脳関門指数。ＭＣＴを２ｇ／ｋｇ／日与えられた群の動物は、残りの群より少ない血液脳関門（ＢＢＢ）漏出を示す傾向があった。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。
【図２９】食餌のＭＣＴの関数としての局所脳容積指数。ＭＣＴを２ｇ／ｋｇ／日与えられた群の動物は、対照群及び１ｇ／ｋｇ／日群より多くの局所脳血液量（ｒＣＢＶ）を示す傾向があった。各バーは、食餌計画の一環として特定の投与量のＭＣＴを与えられた調査群（０、１又は２ｇ  ＭＣＴ／ｋｇ（体重）／日）を表す。同一の文字は統計的な傾向を示す。
【図３０】全処置群についての主成分分析。実施例６に記載のメタボロームＮＭＲ解析に基づく主成分分析（ＰＣＡ）。Ｘ軸及びＹ軸が示されている。データは、Ｏ−ＰＬＳ−ＤＡを用いて統計的に分析し、クラスター化した。
【図３１】対照群及び食餌ＭＣＴ  ２ｇ／ｋｇ／日群についての主成分分析。明確化のために、図３０に示したＰＣＡの分析結果から、低用量（ＭＣＴ  １ｇ／ｋｇ／日）のデータを取り除いた分析結果。データは、Ｏ−ＰＬＳ−ＤＡを用いて統計的に分析し、クラスター化した。
【図３２】対照群及び食餌ＭＣＴ  ２ｇ／ｋｇ／日群についての追加的ＰＣＡ。Ｏ−ＰＬＳ−ＤＡによるメタボローム解析データの分析及びクラスター化を示す更なる例。
【図３３】Ｔ−迷路課題において成ネコ及び年長ネコによって犯された誤り。グラフ上の「年長ネコ」は、表７．１中の「高齢」ネコ及び「年長」ネコの結果を合わせたものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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