(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式II
【化１】
0005412519.tif 000234
〔式中、
Ｙは１〜３個の置換基で置換されているシクロヘキシルであり；
Ｒ１は水素、−ＮＨ２、またはハロであり；
Ｒ１２はそれぞれ独立して水素、およびハロからなる群から選択され；そして
Ｒ５はシクロヘキシル、フェニル、およびピリジルから選択され、ここで、該シクロヘキシル、該フェニル、および該ピリジルは、ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−４アルキル、およびＯＣ１−４アルキルから選択される３個までの置換基でそれぞれ独立して置換されていてよい。〕
の化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｙがヒドロキシル、アミノ、Ｃ１−４アルキル、およびＣ１−４ハロアルキルから選択される１〜３個の置換基で置換されている、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｙがメチル、ヒドロキシル、アミノ、およびＣＦ３から選択される１〜３個の置換基で置換されている、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が水素、アミノ、またはフルオロである、請求項２に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ５がピリジルまたはフェニルである、請求項２に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ５がハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、およびＣ１−４アルキルから選択される３個までの置換基で置換されているフェニルである、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｙがメチル、ヒドロキシル、アミノ、およびＣＦ３から選択される１〜３個の置換基で置換されており；Ｒ１が水素であり；そしてＲ５がフルオロ、ヒドロキシル、メチル、エチル、メトキシ、およびプロポキシから選択される３個までの置換基で置換されているフェニルである、請求項５に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ５が２,６−ジフルオロフェニルである、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
次のものからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物：
Ｎ−(４−((３Ｓ,５Ｓ)−３−アミノ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；
３−アミノ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｒ,４Ｓ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミド；
Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ,５Ｓ)−３−アミノ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド)；
３−アミノ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；および
Ｎ−(４−((３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド、
またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物および癌を処置するための他の薬剤を含む、医薬組成物。
【請求項１２】
該他の薬剤がイリノテカン、トポテカン、ゲムシタビン、５−フルオロウラシル、ロイコボリンカルボプラチン、シスプラチン、タキサン類、テザシタビン、シクロホスファミド、ビンカアルカロイド、イマチニブ(Gleevec)、アントラサイクリン類、リツキシマブ、およびトラスツマブから選択される、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
モロニー(Maloney)のプロウイルス組込みキナーゼ(ＰＩＭキナーゼ)活性の調節により状態を処置するための医薬の製造のための、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１４】
状態が肺、膵臓、甲状腺、卵巣、膀胱、乳房、前立腺、または結腸の癌腫、黒色腫、骨髄性白血病、多発性骨髄腫および赤白血病、絨毛結腸腺腫、および骨肉腫から選択される癌である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
モロニー(Maloney)のプロウイルス組込みキナーゼ(ＰＩＭキナーゼ)活性の調節による状態の処置に使用するための、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１６】
状態が肺、膵臓、甲状腺、卵巣、膀胱、乳房、前立腺、または結腸の癌腫、黒色腫、骨髄性白血病、多発性骨髄腫および赤白血病、絨毛結腸腺腫、および骨肉腫から選択される癌である、請求項１５に記載の化合物。
【請求項１７】
次のものからなる群から選択される、請求項１に記載の化合物：
【表１】
0005412519.tif 000235
【表２】
0005412519.tif 000236
【表３】
0005412519.tif 000237
【表４】
0005412519.tif 000238
【表５】
0005412519.tif 000239
【表６】
0005412519.tif 000240
【表７】
0005412519.tif 000241
【表８】
0005412519.tif 000242
【表９】
0005412519.tif 000243
【表１０】
0005412519.tif 000244
【表１１】
0005412519.tif 000245
【表１２】
0005412519.tif 000246
【表１３】
0005412519.tif 000247
【表１４】
0005412519.tif 000248
【表１５】
0005412519.tif 000249
【表１６】
0005412519.tif 000250
【表１７】
0005412519.tif 000251
【表１８】
0005412519.tif 000252
【表１９】
0005412519.tif 000253
【表２０】
0005412519.tif 000254
、またはその薬学的に許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２００８年９月２日出願の米国仮出願番号６１／０９３,６６６および２００９年７月１５日出願の米国仮出願番号６１／２２５,６６０に対し、３５  Ｕ.Ｓ.Ｃ. §１１９(ｅ)の下の利益を主張し、これらはその全体を引用により本明細書に包含させる。
【０００２】
発明の分野
本発明は、新規化合物およびその互変異性体および立体異性体、およびその薬学的に許容される塩類、エステル類、代謝物またはプロドラッグ、薬学的に許容される担体を伴う新規化合物の組成物、および癌の予防または処置における新規化合物単独または少なくとも１個の付加的治療剤と組み合わせた使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
背景
マウスでのモロニーレトロウイルス感染および宿主細胞ゲノムへのゲノム組込みはリンパ腫の発症を引き起こす。モロニー(Maloney)のプロウイルス組込みキナーゼ(ＰＩＭキナーゼ)が、このレトロウイルス組込み事象により転写的に活性化され得るいくつもの癌原遺伝子の一つとして同定され(Cuypers HT et al., “Murine leukemia virus-induced T-cell lymphomagenesis: integration of proviruses in a distinct chromosomal region,” Cell 37(1):141-50 (1984); Selten G, et al., “Proviral activation of the putative oncogene Pim-1 in MuLV induced T-cell lymphomas” EMBO J 4(7):1793-8 (1985))、それ故、このキナーゼの過発現とその発癌能の間の相関が確立された。配列相同性分析は、３個の極めて相同なＰｉｍキナーゼ(Ｐｉｍ１、２および３)が存在することを証明し、Ｐｉｍ１はレトロウイルス組込みにより元々同定された癌原遺伝子である。さらに、Ｐｉｍ１またはＰｉｍ２を過発現するトランスジェニックマウスでは、Ｔ細胞リンパ腫の発症が増え(Breuer M et al., “Very high frequency of lymphoma induction by a chemical carcinogen in pim-1 transgenic mice” Nature 340(6228):61-3 (1989))、一方ｃ−ｍｙｃと同時の過発現はＢ細胞リンパ腫発症と関連する(Verbeek S et al., “Mice bearing the E mu-myc and E mu-pim-1 transgenes develop pre-B-cell leukemia prenatally” Mol Cell Biol 11(2):1176-9 (1991))。それ故、これらの動物モデルは、造血器腫瘍におけるＰｉｍ過発現と発癌の間の強い相関を確立する。これらの動物モデルに加えて、Ｐｉｍ過発現が多くの他のヒト悪性腫瘍で報告されている。Ｐｉｍ１、２および３の過発現は多くの造血器腫瘍(Amson R et al., “The human protooncogene product p33pim is expressed during fetal hematopoiesis and in diverse leukemias,” PNAS USA 86(22):8857-61 (1989); Cohen AM et al., “Increased expression of the hPim-2 gene in human chronic lymphocytic leukemia and non-Hodgkin lymphoma,” Leuk Lymph 45(5):951-5 (2004), Huttmann A et al., “Gene expression signatures separate B-cell chronic lymphocytic leukaemia prognostic subgroups defined by ZAP-70 and CD38 expression status,” Leukemia 20:1774-1782 (2006))および前立腺癌(Dhanasekaran SM, et al., “Delineation of prognostic biomarkers in prostate cancer,” Nature 412(6849):822-6 (2001); Cibull TL, et al., “Overexpression of Pim-1 during progression of prostatic adenocarcinoma,” J Clin Pathol 59(3):285-8 (2006))で報告されており、一方Ｐｉｍ３の過発現は頻繁に肝細胞癌腫(Fujii C, et al., "Aberrant expression of serine/threonine kinase Pim-3 in hepatocellular carcinoma development and its role in the proliferation of human hepatoma cell lines," Int J Cancer 114:209-218 (2005))および膵臓癌((Li YY et al., “Pim-3, a proto-oncogene with serine/threonine kinase activity, is aberrantly expressed in human pancreatic cancer and phosphorylates bad to block bad-mediated apoptosis in human pancreatic cancer cell lines,” Cancer Res 66(13):6741-7 (2006))で観察されている。
【０００４】
Ｐｉｍ１、２および３は、増殖因子類およびサイトカイン類に応答して造血細胞の生存および増殖に通常機能するセリン／スレオニンキナーゼ類である。Ｊａｋ／Ｓｔａｔ経路を介するサイトカイン類のシグナル伝達は、Ｐｉｍ遺伝子の転写およびタンパク質の合成を活性化する。キナーゼＰｉｍ活性にさらなる翻訳後修飾は必要ない。それ故、下流へのシグナル伝達は、主に転写／翻訳およびタンパク質ターンオーバーレベルで制御されている。Ｐｉｍキナーゼ類の基質は、Ｂｃｌ−２ファミリーメンバーＢＡＤ(Aho T et al., “Pim-1 kinase promotes inactivation of the pro-apoptotic Bad protein by phosphorylating it on the Ser112 gatekeeper site,: FEBS Letters 571: 43-49 (2004))のようなアポトーシスのレギュレーター、ｐ２１ＷＦＡ１／ＣＩＰ１(Wang Z, et al., “Phosphorylation of the cell cycle inhibitor p21Cip1/WAF1 by Pim-1 kinase,” Biochem Biophys Acta 1593:45- 55 (2002))、ＣＤＣ２５Ａ(１９９９)、Ｃ−ＴＡＫ(Bachmann M et al., “The Oncogenic Serine/Threonine Kinase Pim-1 Phosphorylates and Inhibits the Activity of Cdc25C-associated Kinase 1 (C-TAK1).  A novel role for Pim-1 at the G2/M cell cycle checkpoint,” J Biol Chem 179:48319-48328 (2004))およびＮｕＭＡ(Bhattacharya N, et al., “Pim-1 associates with protein complexes necessary for mitosis,” Chromosoma 111(2):80-95 (2002))のような細胞周期レギュレーターおよびタンパク質合成レギュレーター４ＥＢＰ１(Hammerman PS et al., “Pim and Akt oncogenes are independent regulators of hematopoietic cell growth and survival,” Blood 105(11):4477-83 (2005))を含む。これらのレギュレーターにおけるＰｉｍ(類)の役割は、アポトーシスからの保護および細胞増殖および成長の促進と一致する。それ故、癌におけるＰｉｍ(類)の過発現は、癌細胞の生存および増殖に役割を有し、それ故、その阻害は、それらが過発現している癌の処置に有効な方法であるはずであると考えられている。実際ｓｉＲＮＡでのＰｉｍ(類)発現のノックダウンは、増殖の阻害と細胞死をもたらすことを示すいくつかの報告がある(Dai JM, et al., “Antisense oligodeoxynucleotides targeting the serine/threonine kinase Pim-2 inhibited proliferation of DU-145 cells,” Acta Pharmacol Sin 26(3):364-8 (2005); Fujii et al. 2005; Li et al. 2006)。さらに、造血器腫瘍での数種の既知の癌遺伝子の突然変異による活性化による影響の少なくとも一部が、Ｐｉｍ(類)を介してもたらされると考えられる。例えば、ｐｉｍ発現の下方制御を標的とすると、Ｆｌｔ３およびＢＣＲ／ＡＢＬにより形質転換された造血細胞の生存が損なわれる(Adam et al. 2006)。それ故、Ｐｉｍ１、２および３の阻害剤はこれらの悪性腫瘍の処置に有用である。癌および骨髄増殖性疾患処置における可能性のある役割に加えて、かかる阻害剤は、自己免疫性疾患、アレルギー反応および臓器移植拒絶症候群におけるような他の病的状態における免疫細胞の拡張の制御に有用である。この観念は、ＩＬ−１２およびＩＦＮ−αによるＴｈ１ヘルパーＴ細胞の分化が、Ｐｉｍ１および２の両方の発現を誘発するとの発見により支持される(Aho T et al., “Expression of human Pim family genes is selectively up-regulated by cytokines promoting T helper type 1, but not T helper type 2, cell differentiation,” Immunology 116: 82-88 (2005))。さらに、Ｐｉｍ(類)の発現は、免疫抑制性ＴＧＦ−βにより両細胞型で阻害される(Aho et al. 2005)。これらの結果は、Ｐｉｍキナーゼ類が、自己免疫性疾患、アレルギー反応および組織移植拒絶における免疫学的応答を統合するヘルパーＴ細胞の初期分化過程に関与することを示唆する。
【０００５】
毛細血管の増殖を阻害する、腫瘍増殖を阻止する、癌を処置する、細胞周期停止を調節する、および／またはＰｉｍ１、Ｐｉｍ２およびＰｉｍ３のような分子を阻害する化合物、およびかかる化合物を含む医薬製剤および医薬が必要とされ続けている。かかる化合物、医薬製剤、および医薬を、それを必要とする患者または対象に投与する方法も必要とされ続けている。
【発明の概要】
【０００６】
発明の要約
式Ｉ
【化１】
0005412519.tif 000002
〔式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４は独立してＣＲ２およびＮから選択される；但しＸ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４の少なくとも１個、最大２個がＮである；
Ｙはシクロアルキル、部分的に不飽和のシクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、該群の各基は４個までの置換基で置換されていてよく；
Ｚ２およびＺ３は独立してＣＲ１２およびＮから選択され；但しＺ２およびＺ３の最大１個がＮであってよい；
Ｒ１は水素、−ＮＨＲ３、ハロ、ヒドロキシル、アルキル、シアノ、およびニトロからなる群から選択され；
Ｒ２およびＲ１２は、各々独立して水素、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈおよび、置換されたまたは置換されていないアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、および部分的に飽和されたシクロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ３は水素、−ＣＯ−Ｒ４および、置換されたまたは置換されていないアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４はアルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択され；そして
Ｒ５は置換されたまたは置換されていないアリール、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、ヘテロアリール、部分的に不飽和のシクロアルキルおよびアルキルからなる群から選択される基であり、ここで該置換基Ｒ５の各々は、ハロ、シアノ、アミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、カルボニル、カルボアルコキシ、アミノカルボキシ、置換アミノカルボニル、アミノスルホニル、置換アミノスルホニルおよびアルコキシアルキルから選択される４個までの置換基で置換されていてよい。〕
である新規化合物、およびその立体異性体、互変異性体および薬学的に許容される塩類が提供される。
【０００７】
ある態様において、Ｘ２がＮであり、そしてＸ１、Ｘ３およびＸ４がＣＲ２である、新規式Ｉの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【０００８】
ある態様において、Ｒ２が水素、メチル、エチル、ハロ、シアノから選択される、新規式Ｉの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【０００９】
ある態様において、Ｚ２およびＺ３がＣＲ１２である、式Ｉの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【００１０】
ある態様において、Ｒ１２が水素、ハロ、メチル、エチルおよびシアノである、式Ｉの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【００１１】
他の態様において、式II
【化２】
0005412519.tif 000003
〔式中、
Ｙはシクロヘキシル、部分的に不飽和のシクロヘキシル、およびヘテロシクロ−Ｃ５−アルキルからなる群から選択され、該群の各基は４個までの置換基で置換されていてよく；
Ｒ１は水素、−ＮＨＲ３、ハロ、ヒドロキシル、アルキル、Ｃ３−４シクロアルキル、シアノ、およびニトロからなる群から選択され；
Ｒ１２は独立して水素、ハロ、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈおよび、置換されたまたは置換されていないアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、および部分的に飽和されたシクロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ３は水素、−ＣＯ−Ｒ４および、置換されたまたは置換されていないアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４はアルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択され；そして
Ｒ５は水素および、置換されたまたは置換されていないアルキル、Ｃ６−シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択される基であり、ここで該置換基Ｒ５の各々は、ハロ、シアノ、アミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、カルボニル、カルボアルコキシ、アミノカルボキシ、置換アミノカルボニル、アミノスルホニル、置換アミノスルホニルおよびアルコキシアルキルから選択される４個までの基で置換されていてよい。〕
である新規化合物、およびその立体異性体、互変異性体および薬学的に許容される塩類が提供される。
【００１２】
ある態様において、Ｙが置換されたまたは置換されていないシクロアルキル、シクロアルケニル、ピペリジニルおよびピペラジニルからなる群から選択され、該群の各基が４個までの置換基で置換されている、式ＩまたはIIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。ある態様において、Ｙは、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシ、置換アミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキルおよびＣ３−４シクロアルキルからなる群から選択される４個までの置換基で置換されている。さらに別の態様において、Ｙはメチル、プロピル、ｉ−プロピル、エチル、ヒドロキシル、アミノ、ハロ、モノハロＣ１−３アルキル、トリハロＣ１−３アルキルおよびジハロＣ１−３アルキルからなる群から選択される４個までの置換基で置換されている。
【００１３】
ある態様において、Ｙが置換されたまたは置換されていないシクロヘキシル、シクロヘキシニル、およびピペリジニルからなる群から選択され、該群の各基が４個までの置換基で置換されている新規式IIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【００１４】
ある態様において、Ｙが水素、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシ、置換アミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキルおよびＣ３−４シクロアルキルから独立して選択される４個までの置換基で置換されている新規式IIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。ある態様において、置換基はメチル、プロピル、ｉ−プロピル、エチル、ヒドロキシル、アミノ、ハロ、モノハロＣ１−３アルキル、トリハロＣ１−３アルキルおよびジハロＣ１−３アルキルから独立して選択される。
【００１５】
ある態様において、Ｒ１２が水素、ハロ、メチル、エチルおよびシアノから選択される、式IIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【００１６】
ある態様において、Ｙが置換されたまたは置換されていないシクロヘキシル、シクロヘキセニル、ピペリジニル、ピペラジニルからなる群から選択され、ここで、該Ｙ基がメチル、エチル、ヒドロキシル、アミノ、およびメトキシから選択される３個までの置換基で置換されていてよく；Ｒ１が水素、およびアミノからなる群から選択され；そしてＲ１２が独立して水素、ハロ、またはメチルである、式ＩまたはIIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【００１７】
ある態様において、Ｙが置換シクロヘキシル、シクロヘキセニル、ピペリジニル、およびピペラジニルからなる群から選択され；Ｒ１が水素、−ＮＨ２、ハロ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−４シクロアルキル、および−ＣＮからなる群から選択され；Ｒ１２が独立して水素、ハロ、Ｃ１−４アルキル、およびアミノからなる群から選択され；そしてＲ５が置換されたまたは置換されていないフェニル、シクロヘキシル、シクロペンチル、チアゾール、ピリジル、ピリミジルおよびピラジニルからなる群から選択され、ここで、該Ｒ５基はハロ、水素、メチル、置換アミノカルボニルおよびアルコキシからなる群から選択される３個までの置換基で置換されていてよい、式IIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【００１８】
代表的態様において、Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド、Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ,５Ｓ)−３−アミノ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド。Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド、３−アミノ−Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド、およびＮ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド、および３−アミノ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミドからなる群から選択される式ＩまたはIIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【００１９】
他の面において、本発明は、処置を必要とするヒトまたは動物対象におけるモロニー(Maloney)のプロウイルス組込みキナーゼ(ＰＩＭキナーゼ)に関連する障害の処置方法であって、該対象に対象のＰＩＭ活性を阻害するのに有効な一定量の式ＩまたはIIの化合物を投与することを含む、方法を提供する。
【００２０】
他の面において、本発明は、処置を必要とするヒトまたは動物対象におけるＰＩＭ関連障害の処置方法であって、該対象に対象の腫瘍増殖を減少または阻止するのに有効な一定量の式ＩまたはIIの化合物を投与することを含む、方法を提供する。
【００２１】
さらに別の面において、本発明は、処置を必要とするヒトまたは動物対象におけるＰＩＭ関連障害の処置方法であって、該対象に、対象の腫瘍増殖を減少または阻止するのに有効な一定量の式ＩまたはIIの化合物を癌を処置するための少なくとも１個の他の薬剤と組み合わせて投与することを含む、方法を提供する。
【００２２】
さらに別の面において、本発明は、一般的に癌治療に用いられるため、少なくとも１個の式ＩまたはIIの化合物を癌の処置のための１種以上の他の薬剤と組み合わせて含む治療組成物を提供する。
【００２３】
本発明の化合物は、造血器腫瘍、癌腫(例えば、肺、肝臓、膵臓、卵巣、甲状腺、膀胱または結腸の)、黒色腫、骨髄障害(例えば、骨髄性白血病、多発性骨髄腫および赤白血病)、腺腫(例えば、絨毛結腸腺腫)、肉腫(例えば、骨肉腫)を含む癌、自己免疫性疾患、アレルギー反応および臓器移植拒絶症候群の処置に有用である。
【００２４】
本発明は、さらに、発明の詳細な記載に記載する組成物、使用方法、および製造方法を提供する。
【００２５】
図面の記載
本発明の前記の面および多くの付随する利点は、添付の図面と共に、以下の詳細な記載を参照することにより、理解が深まるにつれてさらに容易に認識されよう。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１】実施例１４４に記載するＫＭＳ１１−ｌｕｃ異種移植モデルにおける評価による実施例９９の化合物の効果を示すグラフである。
【図２】実施例１４４に記載するＫＭＳ１１−ｌｕｃ異種移植モデルにおける評価による実施例７０の化合物の効果を示すグラフである。
【図３】実施例１４４に記載するＫＭＳ１１−ｌｕｃ異種移植モデルにおける評価による実施例９６の化合物の効果を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
詳細な記載
本発明の前記面によって、式Ｉ：
【化３】
0005412519.tif 000004
〔式中、
Ｘ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４は独立してＣＲ２およびＮから選択される；但しＸ１、Ｘ２、Ｘ３およびＸ４の少なくとも１個、最大２個がＮである；
Ｙはシクロアルキル、部分的に不飽和のシクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、該群の各基は４個までの置換基で置換されていてよく；
Ｚ２およびＺ３は独立してＣＲ１２およびＮから選択され；但しＺ２およびＺ３の最大１個がＮであってよい；
Ｒ１は水素、−ＮＨＲ３、ハロ、ヒドロキシル、アルキル、シアノ、およびニトロからなる群から選択され；
Ｒ２およびＲ１２は、各々独立して水素、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈおよび、置換されたまたは置換されていないアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、および部分的に飽和されたシクロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ３は水素、−ＣＯ−Ｒ４および、置換されたまたは置換されていないアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４はアルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択され；そして
Ｒ５からなる群から選択され置換されたまたは置換されていないアリール、Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、ヘテロアリール、部分的に不飽和のシクロアルキルおよびアルキルからなる群から選択される基であり、ここで該置換基Ｒ５の各々は、ハロ、シアノ、アミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−６シクロアルキル、アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、カルボニル、カルボアルコキシ、アミノカルボキシ、置換アミノカルボニル、アミノスルホニル、置換アミノスルホニルおよびアルコキシアルキルから選択される４個までの置換基で置換されていてよい。〕
である新規化合物、およびその立体異性体、互変異性体および薬学的に許容される塩類が提供される。
【００２８】
ある態様において、Ｘ２がＮであり、そしてＸ１、Ｘ３およびＸ４がＣＲ２である、新規式Ｉの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【００２９】
ある態様において、Ｒ２が水素、メチル、エチル、ハロ、シアノから選択される、新規式Ｉの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【００３０】
ある態様において、Ｚ２およびＺ３がＣＲ１２である、式Ｉの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【００３１】
ある態様において、Ｒ１２が水素、ハロ、メチル、エチルおよびシアノである、式Ｉの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【００３２】
他の態様において、式II
【化４】
0005412519.tif 000005
〔式中、
Ｙはシクロヘキシル、部分的に不飽和のシクロヘキシル、およびヘテロシクロ−Ｃ５−アルキルからなる群から選択され、該群の各基は４個までの置換基で置換されていてよく；
Ｒ１は水素、−ＮＨＲ３、ハロ、ヒドロキシル、アルキル、Ｃ３−４シクロアルキル、シアノ、およびニトロからなる群から選択され；
Ｒ１２は独立して水素、ハロ、ヒドロキシル、アミノ、ニトロ、シアノ、ＳＯ３Ｈおよび、置換されたまたは置換されていないアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミノ、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、および部分的に飽和されたシクロアルキルからなる群から選択され；
Ｒ３は水素、−ＣＯ−Ｒ４および、置換されたまたは置換されていないアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択され；
Ｒ４はアルキル、置換アルキル、アルコキシ、置換アルコキシ、アミノ、置換アミノ、およびアルキルアミノからなる群から選択され；そして
Ｒ５は水素および、置換されたまたは置換されていないアルキル、Ｃ６−シクロアルキル、アリールおよびヘテロアリールからなる群から選択される基である。〕
である新規化合物、およびその立体異性体、互変異性体および薬学的に許容される塩類が提供される。
【００３３】
ある態様において、Ｙが置換されたまたは置換されていないシクロアルキル、シクロアルケニル、ピペリジニルおよびピペラジニルからなる群から選択され、該群の各基が４個までの置換基で置換されている、式ＩまたはIIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩を提供する。ある態様において、Ｙが置換されたまたは置換されていないシクロヘキシル、シクロヘキシニル、およびピペリジニルからなる群から選択され、該群の各基が４個までの置換基で置換されている、式ＩまたはIIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩を提供する。ある態様において、Ｙは、水素、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシ、置換アミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキルおよびＣ３−４シクロアルキルから選択される４個までの置換基で置換されている。さらに別の態様において、Ｙはメチル、プロピル、ｉ−プロピル、エチル、ヒドロキシル、アミノ、ハロ、モノハロＣ１−３アルキル、トリハロＣ１−３アルキルおよびジハロＣ１−３アルキルから選択される４個までの置換基で置換されている。
【００３４】
ある態様において、Ｒ１が水素、アミノまたはフルオロである、式ＩまたはIIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。一態様は、表Ｉまたは表IIから選択される式IIの化合物を提供する。
【００３５】
ある態様において、Ｒ５が置換されたまたは置換されていないアリール、Ｃ５−Ｃ６シクロアルキル、ヘテロアリール、部分的に不飽和のＣ５−Ｃ６シクロアルキルおよびＣ１−Ｃ４アルキルから選択され、ここで、各該基がハロ、シアノ、アミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−５シクロアルキル、アルコキシ、ニトロ、カルボキシ、カルボニル、カルボアルコキシ、アミノカルボキシ、置換アミノカルボニル、アミノスルホニル、置換アミノスルホニルおよびアルコキシアルキルから選択される４個までの基で置換されていてよい、式ＩまたはIIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。ある態様において、Ｒ５が置換されたまたは置換されていないフェニルであり、ここで、該フェニル基が水素、シアノ、ニトロ、ハロ、ヒドロキシル、アミノ、アルコキシ、置換アミノ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４ハロアルキルおよびＣ３−４シクロアルキルから選択される４個までの置換基で置換されていてよい、式ＩまたはIIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。ある態様において、Ｒ５が２,６−ジフルオロ(fluoror)フェニルである、式ＩまたはIIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【００３６】
ある態様において、Ｒ１２が水素、ハロ、メチル、エチルおよびシアノから選択される、式ＩまたはIIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。ある態様において、Ｙが置換されたまたは置換されていないシクロヘキシル、シクロヘキセニル、ピペリジニル、ピペラジニルからなる群から選択され、ここで、該Ｙ基がメチル、エチル、ヒドロキシル、アミノ、およびメトキシから選択される３個までの置換基で置換されていてよく；Ｒ１が水素、およびアミノからなる群から選択され；そしてＲ１２が独立して水素、ハロ、またはメチルである、式ＩまたはIIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【００３７】
ある態様において、Ｙが置換シクロヘキシル、シクロヘキセニル、ピペリジニル、およびピペラジニルからなる群から選択され；Ｒ１が水素、−ＮＨ２、ハロ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−４シクロアルキル、および−ＣＮからなる群から選択され；Ｒ１２が独立して水素、ハロ、Ｃ１−４アルキル、およびアミノからなる群から選択され；そしてＲ５が置換されたまたは置換されていないフェニル、シクロヘキシル、シクロペンチル、チアゾール、ピリジル、ピリミジルおよびピラジニルからなる群から選択され、ここで、該Ｒ５基はハロ、水素、メチル、置換アミノカルボニルおよびアルコキシから選択される３個までの置換基で置換されていてよい、式IIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩が提供される。
【００３８】
本発明の好ましい態様は、Ｙが１〜３個の置換基で置換されたシクロヘキシルであり、該置換基は好ましくはヒドロキシル、アミノ、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４ハロアルキルから選択され、より好ましくはメチル、ヒドロキシル、アミノ、およびＣＦ３から選択され、そして最も好ましくはメチル、アミノ、およびヒドロキシから選択され；Ｒ１が水素、ＮＨ２、またはハロ(好ましくは、Ｒ１が水素、アミノまたはフルオロ、より好ましくは、Ｒ１が水素)であり；Ｒ１２が独立して水素またはハロ(好ましくは、各Ｒ１２が水素、クロロまたはフルオロ)であり；Ｒ５がシクロヘキシル、フェニル、またはピリジルであり、ここで、該シクロヘキシル、該フェニルおよび該ピリジルは各々独立してハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−４アルキル、およびＣ１−４アルコキシから選択される３個までの置換基で置換されている(好ましくは、Ｒ５が各々ハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−４アルキルまたはＣ１−４アルコキシから独立して選択される３個までの置換基で置換されているピリジルまたはフェニルであり、より好ましくは、Ｒ５がハロ、ヒドロキシル、Ｃ１−４アルコキシおよびＣ１−４アルキルから独立して選択される３個までの置換基で置換されているフェニルであり、最も好ましくは、フルオロ、ヒドロキシル、メチル、エチル、メトキシ、またはプロポキシから選択される３個までの置換基で置換されているフェニルであり、最も好ましくは、Ｒ５が２,６−ジフルオロフェニルである)、式IIの化合物である。
【００３９】
本発明のさらに別の好ましい態様は、Ｙがメチル、ヒドロキシル、およびアミノで置換されたピペリジニルであり；Ｒ１が水素、ＮＨ２、またはフルオロであり；Ｒ１２が独立して水素、およびハロからなる群から選択され；そしてＲ５がピリジル、フルオロピリジル、シクロヘキシル、またはフェニルであり、ここで、該フェニルはフルオロ、ヒドロキシル、およびメチルから選択される３個までの置換基で置換されており、好ましくはＲ５はジフルオロフェニルである、式IIの化合物を提供する。さらに好ましい態様において、好ましくはＹが３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イルであり；Ｒ１が水素であり；そしてＲ５が２,６−ジフルオロフェニルである。
【００４０】
代表的態様において、好ましい式ＩまたはIIの化合物、またはその立体異性体、互変異性体、または薬学的に許容される塩は、Ｎ−(４−((３Ｓ,５Ｓ)−３−アミノ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；３−アミノ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｒ,４Ｓ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミド；Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；３−アミノ−Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロ−３−メチルフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；３−アミノ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；Ｎ−(４−((３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ,５Ｓ)−３−アミノ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド)；Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；３−アミノ−Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；および３−アミノ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミドからなる群から選択される。
【００４１】
他の面において、本発明は、処置を必要とするヒトまたは動物対象におけるモロニー(Maloney)のプロウイルス組込みキナーゼ(ＰＩＭキナーゼ)に関連する障害の処置方法であって、該対象に対象のＰＩＭ活性を阻害するのに有効な一定量の式ＩまたはIIの化合物を投与することを含む、方法を提供する。本発明の好ましい態様は、モロニー(Maloney)のプロウイルス組込みキナーゼ(ＰＩＭキナーゼ)活性の調節により状態を処置する方法であって、かかる処置を必要とする患者に有効量の式Ｉの化合物を投与することを含む、方法を提供する。
【００４２】
他の面において、本発明は、処置を必要とするヒトまたは動物対象におけるＰＩＭ関連障害の処置方法であって、該対象に対象の腫瘍増殖を減少または阻止するのに有効な一定量の式ＩまたはIIの化合物を投与することを含む、方法を提供する。さらに別の面において、本発明は、処置を必要とするヒトまたは動物対象におけるＰＩＭ関連障害の処置方法だって、該対象に対象の腫瘍増殖を減少または阻止するのに有効な一定量の式ＩまたはIIの化合物を癌を処置するための少なくとも１個の他の薬剤と組み合わせて投与することを含む、方法を提供する。
【００４３】
さらに別の面において、本発明は、一般的に癌治療に用いられるため、少なくとも１個の式ＩまたはIIの化合物を、癌の処置のための１種以上の他の薬剤と組み合わせて含む治療組成物を提供する。本発明は、それ故に式Ｉまたは式IIの化合物を含む医薬組成物を提供する。この面の好ましい態様は、Ｎ−(４−((３Ｓ,５Ｓ)−３−アミノ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；３−アミノ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｒ,４Ｓ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミド；Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；３−アミノ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；Ｎ−(４−((３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ,５Ｓ)−３−アミノ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド)；Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；３−アミノ−Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；３−アミノ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；３−アミノ−Ｎ−(４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド；およびＮ−(４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３−アミノ−４−ヒドロキシ−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロ−３−メチルフェニル)−５−フルオロピコリンアミドから選択される化合物を含む医薬組成物を提供する。他の好ましい態様は、さらに癌を処置するための他の薬剤を含む医薬組成物を提供し、ここで、好ましくは該他の薬剤がイリノテカン、トポテカン、ゲムシタビン、５−フルオロウラシル、ロイコボリンカルボプラチン、シスプラチン、タキサン類、テザシタビン、シクロホ���ファミド、ビンカアルカロイド、イマチニブ(Gleevec)、アントラサイクリン類、リツキシマブ、およびトラスツマブから選択される。
【００４４】
本発明の化合物は、造血器腫瘍、癌腫(例えば、肺、肝臓、膵臓、卵巣、甲状腺、膀胱または結腸の)、黒色腫、骨髄障害(例えば、骨髄性白血病、多発性骨髄腫および赤白血病)、腺腫(例えば、絨毛結腸腺腫)、肉腫(例えば、骨肉腫)を含む癌、自己免疫性疾患、アレルギー反応および臓器移植拒絶症候群の処置に有用である。
【００４５】
本発明のさらに別の面は、モロニー(Maloney)のプロウイルス組込みキナーゼ(ＰＩＭキナーゼ)活性の調節により状態を処置するための医薬の製造のための、式Ｉまたは式IIの化合物の使用を提供する。本発明のこの面の好ましい態様において、状態は肺、膵臓、甲状腺、卵巣、膀胱、乳房、前立腺、または結腸の癌腫、黒色腫、骨髄性白血病、多発性骨髄腫および赤白血病、絨毛結腸腺腫、および骨肉腫から選択される癌である。
【００４６】
他の面において、本発明は、処置を必要とするヒトまたは動物対象におけるＰｉｍ１、Ｐｉｍ２およびＰｉｍ３からなる群から選択される少なくとも１個のキナーゼの活性を阻害するか、またはＰｉｍ１、Ｐｉｍ２およびＰｉｍ３の少なくとも１個が仲介する生物学的状態を処置する方法であって、該対象に、対象における該キナーゼを阻害するのに有効な量で少なくとも１個の式ＩまたはIIの化合物を投与することを含む、方法に関する。治療化合物は、かかる阻害剤を必要とする患者(例えば、異常セリン／スレオニンキナーゼ受容体シグナル伝達が仲介する癌を有する患者)の処置に有用である。
【００４７】
定義
“ＰＩＭ阻害剤”は、ここでは、以下に記載するＰＩＭ枯渇アッセイで測定して、ＰＩＭキナーゼ活性に関して約１００μMを超えない、より典型的に約５０μMを超えないＩＣ５０を示す化合物を述べるために使用する。
【００４８】
句“アルキル”は、ヘテロ原子を含まないアルキル基を言う。それ故この句は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシルなどのような直鎖アルキル基を含む。この句はまた、単なる例示として示す次のものを含み、これらに限定されない直鎖アルキル基の分枝鎖異性体も含む：−ＣＨ(ＣＨ３)２、−ＣＨ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＣＨ３)、−ＣＨ(ＣＨ２ＣＨ３)２、−Ｃ(ＣＨ３)３、−Ｃ(ＣＨ２ＣＨ３)３、−ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２、−ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＣＨ３)、−ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ２ＣＨ３)２、−ＣＨ２Ｃ(ＣＨ３)３、−ＣＨ２Ｃ(ＣＨ２ＣＨ３)３、−ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＣＨ３)、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＣＨ３)、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ２ＣＨ３)２、−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ(ＣＨ３)３、−ＣＨ２ＣＨ２Ｃ(ＣＨ２ＣＨ３)３、−ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２、−ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)２、−ＣＨ(ＣＨ２ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＣＨ３)など。それ故、アルキル基は、一級アルキル基、二級アルキル基、および三級アルキル基を含む。好ましいアルキル基は、１〜１２個の炭素原子を有する直鎖および分枝鎖アルキル基を含む。好ましい“アルキル”の定義は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、およびｎ−ブチルのようなＣ１−４直鎖アルキル基を言う。好ましいアルキルの定義はまた、ＣＨ(ＣＨ３)２、ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２、ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ３、Ｃ(ＣＨ３)３、ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ(ＣＨ３)２、ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)ＣＨ２ＣＨ３、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ(ＣＨ３)２、およびＣＨ(ＣＨ２ＣＨ３)２などを含むＣ３−５分枝鎖アルキル基を含む。
【００４９】
用語“アルケニル”は、少なくとも一個所の不飽和がある、すなわち、隣接する２個の炭素原子が二重結合により結合している、上に定義したアルキル基を意味する。用語“アルキニル”は、隣接する２個の炭素原子が三重結合により結合している、アルキル基を意味する。用語“アルコキシ”は、−ＯＲ(ここで、Ｒはアルキルである)を意味する。
【００５０】
ここで使用する用語“ハロゲン”または“ハロ”は、クロロ基、ブロモ基、フルオロ基およびヨード基を意味する。“ハロアルキル”は、１個以上のハロゲン原子で置換されたアルキル基を意味する。用語“ハロアルキル”は、それ故モノハロアルキル、ジハロアルキル、トリハロアルキルなどを含む。代表的モノハロアルキル基は−ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ２Ｃｌ、−ＣＨ２ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ２ＣＨ２Ｃｌ、−ＣＨ(Ｆ)ＣＨ３、−ＣＨ(Ｃｌ)ＣＨ３を含み；代表的ジハロアルキル基はＣＨＣｌ２、−ＣＨＦ２、−ＣＣｌ２ＣＨ３、−ＣＨ(Ｃｌ)ＣＨ２Ｃｌ、−ＣＨ２ＣＨＣｌ２、−ＣＨ２ＣＨＦ２を含み；代表的トリハロアルキル基は−ＣＣｌ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ２ＣＨ２Ｃｌ、−ＣＦ２ＣＨ２Ｆ、−ＣＨ(Ｃｌ)ＣＨＣｌ２、−ＣＨ(Ｆ)ＣＨＦ２を含み；そして代表的ペルハロアルキル基は−ＣＣｌ３、−ＣＦ３、−ＣＣｌ２ＣＣｌ３、−ＣＦ２ＣＦ３を含む。
【００５１】
“アミノ”は、ここでは基−ＮＨ２を言う。用語“アルキルアミノ”は、ここでは基−ＮＲＲ’(ここで、ＲおよびＲ’は独立して水素または低級アルキルから選択される)を言う。用語“アリールアミノ”は、ここでは、基−ＮＲＲ’(ここで、Ｒはアリールであり、そしてＲ’は水素、低級アルキル、またはアリールである)を言う。用語“アラルキルアミノ”は、ここでは、基−ＮＲＲ’(ここで、Ｒは低級アラルキルであり、そしてＲ’は水素、低級アルキル、アリール、または低級アラルキルである)を言う。用語シアノは、基−ＣＮを言う。用語ニトロは基−ＮＯ２を意味する。
【００５２】
用語“アルコキシアルキル”は、基−ａｌｋ１−Ｏ−ａｌｋ２(ここで、ａｌｋ１はアルキルまたはアルケニルであり、そしてａｌｋ２はアルキルまたはアルケニルである)を意味する。用語“低級アルコキシアルキル”は、ａｌｋ１が低級アルキルまたは低級アルケニルであり、そしてａｌｋ２が低級アルキルまたは低級アルケニルであるアルコキシアルキルを言う。用語“アリールオキシアルキル”は、基−アルキル−Ｏ−アリールを意味する。用語“アラルコキシアルキル”は、基−アルキレニル−Ｏ−アラルキル(ここで、アラルキルは低級アラルキルである)を言う。
【００５３】
用語“アミノカルボニル”は、ここでは、基−Ｃ(Ｏ)−ＮＨ２を言う。“置換アミノカルボニル”は、ここでは、基−Ｃ(Ｏ)−ＮＲＲ’(ここで、Ｒは低級アルキルであり、そしてＲ’は水素または低級アルキルである)を言う。ある態様において、ＲおよびＲ’は、それらが結合しているＮ原子と一体となって“ヘテロシクロアルキルカルボニル”基を形成し得る。用語“アリールアミノカルボニル”は、こでは、基−Ｃ(Ｏ)−ＮＲＲ’(ここで、Ｒはアリールであり、そしてＲ’は水素、低級アルキルまたはアリールである)を言う。“アラルキルアミノカルボニル”は、ここでは、基−Ｃ(Ｏ)−ＮＲＲ’(ここで、Ｒは低級アラルキルであり、そしてＲ’は水素、低級アルキル、アリール、または低級アラルキルである)を言う。
【００５４】
“アミノスルホニル”は、ここでは、基−Ｓ(Ｏ)２−ＮＨ２を言う。“置換アミノスルホニル”は、ここでは、基−Ｓ(Ｏ)２−ＮＲＲ’(ここで、Ｒは低級アルキルであり、そしてＲ’は水素または低級アルキルである)を言う。用語“アラルキルアミノスルホニルアリール”は、ここでは、基−アリール−Ｓ(Ｏ)２−ＮＨ−アラルキル(ここで、アラルキルは低級アラルキルである)を言う。
【００５５】
“カルボニル”は、二価基−Ｃ(Ｏ)−を言う。“カルボキシ”は、−Ｃ(＝Ｏ)−ＯＨを言う。“アルコキシカルボニル”は、エステル−Ｃ(＝Ｏ)−ＯＲ(ここで、Ｒはアルキルである)を言う。“低級アルコキシカルボニル”は、エステル−Ｃ(＝Ｏ)−ＯＲ(ここで、Ｒは低級アルキルである)を言う。“シクロアルキルオキシカルボニル”は、−Ｃ(＝Ｏ)−ＯＲ(ここで、Ｒはシクロアルキルである)を言う。
【００５６】
“シクロアルキル”は、単環式または多環式、炭素環式アルキル置換基を言う。カルボシクロアルキル基は、全環原子が炭素であるシクロアルキル基を言う。典型的シクロアルキル置換基は、３〜８骨格(すなわち、環)原子を有し、各骨格原子は炭素またはヘテロ原子である。用語“ヘテロシクロアルキル”は、ここでは、環構造内に１〜５個、より典型的に１〜４個のヘテロ原子を有するシクロアルキル置換基を言う。本発明の化合物において用いる適当なヘテロ原子は、窒素、酸素、および硫黄である。代表的ヘテロシクロアルキル部分は、例えば、モルホリノ、ピペラジニル、ピペリジニルなどを含む。カルボシクロアルキル基は、全環原子が炭素であるシクロアルキル基を言う。シクロアルキル置換基に関連して使用するとき、用語“多環式”は、ここでは縮合および非縮合アルキル環構造を言う。用語“部分的に不飽和のシクロアルキル”、“部分的に飽和されたシクロアルキル”、および“シクロアルケニル”は、全て、一個所の不飽和がある、すなわち、隣接する２個の環原子が二重結合または三重結合により結合している、シクロアルキル基を意味する。説明的例は、シクロヘキシニル、シクロヘキシニル、シクロプロペニル、シクロブチニルなどを含む。
【００５７】
ここで使用する用語“置換ヘテロ環”、“ヘテロ環基”または“ヘテロ環”は、窒素、酸素、および硫黄から選択される１個のヘテロ原子を含む任意の３員または４員環または窒素、酸素、または硫黄からなる群から選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５員または６員環を言う；ここで、５員環は、０−２個の二重結合を有し、６員環は０−３個の二重結合を有する；ここで、窒素および硫黄原子は場合により酸化されていてよい；ここで、窒素および硫黄ヘテロ原子は場合により四級化されていてよい；そして上記ヘテロ環のいずれかがベンゼン環または他の上記で独立して定義した５員または６員ヘテロ環に縮合している任意の二環基を含む。ここで使用する用語“ヘテロシクロアルキル”は、１〜３個の窒素、酸素、または硫黄からなる群から選択されるヘテロ原子を含む５員または６員環を言い、ここで、該環は二重結合を有しない。例えば、用語ヘテロシクロ−Ｃ５−アルキルは、５個の炭素原子と１個のＮのようなヘテロ原子を含む６員環を意味する。用語“ヘテロ環”は、それ故に、窒素がヘテロ原子であるならびに一部および完全に飽和された環を含む。好ましいヘテロ環は、例えば：ジアザピニル、ピリル、ピロリニル、ピロリジニル、ピラゾリル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピリジル、ピペリジニル、ピラジニル、ピペラジニル、Ｎ−メチルピペラジニル、アゼチジニル、Ｎ−メチルアゼチジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、オキサゾリル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリル、イソアゾリジニル、モルホリニル、チアゾリル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、インドリル、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、フリル、チエニル、トリアゾリルおよびベンゾチエニルを含む。
【００５８】
ヘテロ環式部分は、置換されていないか、またはヒドロキシ、ハロ、オキソ(Ｃ＝Ｏ)、アルキルイミノ(ＲＮ＝、ここで、Ｒは低級アルキルまたは低級アルコキシ基である)、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アシルアミノアルキル、アルコキシ、チオアルコキシ、ポリアルコキシ、低級アルキル、シクロアルキルまたはハロアルキルから独立して選択される種々の置換基で一置換または二置換または三置換されていてよい。
【００５９】
ヘテロ環基は、有機および医薬品化学分野の技術を有する者には本開示と併せて明らかな通り、種々の位置で結合してよい。
【００６０】
代表的ヘテロ環は、例えば、イミダゾリル、ピリジル、ピペラジニル、ピペリジニル、アゼチジニル、チアゾリル、フラニル、トリアゾリルベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、キノキサリニル、フタラジニル、インドリル、ナフトピリジニル、インダゾリル、およびキノリジニルを含む。
【００６１】
“アリール”は、３〜１４骨格炭素またはヘテロ原子を有する、場合により置換されていてよい単環式および多環式芳香族基を言い、炭素環式アリール基およびヘテロ環式アリール基の両方を含む。炭素環式アリール基は、芳香環の全環原子が炭素であるアリール基を言う。用語“ヘテロアリール”は、ここでは芳香環内に環原子として１〜４個のヘテロ原子を有し、残りの環原子が炭素原子であるアリール基を言う。アリール置換基と関連して使用するとき、用語“多環式アリール”は、ここでは、例えば、ベンゾジオキソゾロ(これは、フェニル基に縮合したヘテロ環構造を有する、すなわち、ナフチルなど)のような、少なくとも１個の環構造が芳香族である縮合および非縮合環構造を言う。本発明の化合物で置換基として用いる例示的アリール部分は、フェニル、ピリジル、ピリミジニル、チアゾリル、インドリル、イミダゾリル、オキサジアゾリル、テトラゾリル、ピラジニル、トリアゾリル、チオフェニル、フラニル、キノリニル、プリニル、ナフチル、ベンゾチアゾリル、ベンゾピリジル、およびベンゾイミダゾリルなどを含む。
【００６２】
“場合により置換されていてよい”または“置換”は、１個以上の水素原子の一価または二価基での置換を言う。適当な置換基は、例えば、ヒドロキシ、ニトロ、アミノ、イミノ、シアノ、ハロ、チオ、スルホニル、チオアミド、アミジノ、イミジノ、オキソ、オキサミジノ、メトキサミジノ、イミジノ、グアニジノ、スルホンアミド、カルボキシル、ホルミル、低級アルキル、ハロ低級アルキル、低級アルキルアミノ、ハロ低級アルキルアミノ、低級アルコキシ、ハロ低級アルコキシ、低級アルコキシアルキル、アルキルカルボニル、アミノカルボニル、アリールカルボニル、アラルキルカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロアラルキルカルボニル、アルキルチオ、アミノアルキル、シアノアルキル、アリールなどを含む。
【００６３】
置換基それ自体置換されていてよい。置換基の上を置換する置換基は、カルボキシル、ハロ；ニトロ、アミノ、シアノ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノカルボニル、−ＳＲ、チオアミド、−ＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２Ｒまたはシクロアルキル(ここで、Ｒは典型的に水素、ヒドロキシルまたは低級アルキルである)であり得る。
【００６４】
置換された置換基が直鎖基を含むとき、該置換は鎖内(例えば、２−ヒドロキシプロピル、２−アミノブチルなど)または末端(例えば、２−ヒドロキシエチル、３−シアノプロピルなど)で起こり得る。置換された置換基は共有結合した炭素原子またはヘテロ原子の直線状、分枝状または環状配置であり得る。上記定義は許容されない置換パターン(例えば、５個のフルオロ基で置換されたメチルまたは他のハロゲン原子で置換されたハロゲン原子)を含むことを意図しないと解釈されるべきである。かかる許容されない置換パターンは当業者に周知である。
【００６５】
また、本発明の化合物、またはその立体異性体、ならびにそのいずれかの薬学的に許容される塩類、エステル類、代謝物およびプロドラッグが互変異性の対象であり得て、それ故に分子の１原子のプロトンが他の原子にシフトし、分子の原子環の化学結合がその結果再配置される種々の互変異性体形態で存在し得ることは、当業者には当然である。例えば、March, Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structures, Fourth Edition, John Wiley & Sons, pages 69-74 (1992)参照。ここで使用する用語“互変異性体”は、プロトンシフトにより生じた化合物を言い、全ての互変異性体形態が、存在し得る限り、本発明に含まれると解釈すべきである。
【００６６】
本発明の化合物、またはその互変異性体、ならびにそのいずれかの薬学的に許容される塩類、エステル類、代謝物およびプロドラッグは、不斉に置換された炭素原子を含み得る。かかる不斉に置換された炭素原子は、鏡像体、ジアステレオマー、および絶対立体化学における(Ｒ)−または(Ｓ)−形態のように定義され得る他の立体異性形態で存在する本発明の化合物をもたらし得る。その結果、本発明の化合物の全てのかかる可能な異性体、光学的に純粋な形態の個々の立体異性体、それらの混合物、ラセミ混合物(または“ラセミ体”)、ジアステレオマー混合物、ならびに一ジアステレオマーは本発明に包含される。ここで使用する用語“Ｓ”および“Ｒ”配置は、IUPAC 1974 RECOMMENDATIONS FOR SECTION E, FUNDAMENTAL STEREOCHEMISTRY, Pure Appl. Chem. 45:13 30 (1976)により定義されている。用語αおよびβは、環状化合物の環位置について用いる。対象平面のα側は、優位の置換基が低番号位置に位置する側である。対象平面の逆側に位置する置換基は、βの記号が割り当てられる。この使用は、“α”が“平面の下側”を意味し、絶対配置を意味する環状立体母核(cyclic stereoparent)についての使用と異なることを注意すべきである。ここで使用する用語αおよびβ配置は、CHEMICAL ABSTRACTS INDEX GUIDE-APPENDIX IV (1987) paragraph 203に定義されている。
【００６７】
ここで使用する用語“薬学的に許容される塩類”は、式ＩまたはIIの化合物の非毒性酸またはアルカリ土類金属塩類を言う。これらの塩類は式ＩまたはIIの化合物の最終単離および精製の間にその場で、または別に塩基または酸官能基と適当な有機または無機酸または塩基をそれぞれ反応させることにより製造できる。代表的塩類は次のものを含み、これらに限定されない：酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン酸塩、ジグルコン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、フマル酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩(proionate)、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩およびウンデカン酸塩。また、塩基性窒素含有基は、メチル、エチル、プロピル、およびブチルの塩化物、臭化物およびヨウ化物のような低級アルキルハライド類；ジメチル、ジエチル、ジブチル、およびジアミルの硫酸エステルのようなジアルキル硫酸エステル、デシル、ラウリル、ミリスチルおよびステアリルの塩化物、臭化物およびヨウ化物のような長鎖ハライド類、ベンジルおよびフェネチルの臭化物のようなアラルキルハライド類などで四級化してよい。水または油可溶性または分散性生成物をそれにより得る。
【００６８】
薬学的に許容される酸付加塩類の形成に用い得る酸類の例は、塩酸、硫酸およびリン酸のような無機酸類、およびシュウ酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、コハク酸およびクエン酸のような有機酸類を含む。塩基付加塩類は、式Ｉの化合物の最終単離および精製の間にその場で、または別にカルボン酸部分と薬学的に許容される金属カチオンの水酸化物、炭酸塩または重炭酸塩またはアンモニア、または有機一級、二級または三級アミンのような適当な塩基を反応させることにより製造できる。薬学的に許容される塩類は、ナトリウム塩、リチウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、アルミニウム塩などのようなアルカリおよびアルカリ土類金属類のカチオン、ならびに非毒性アンモニウム、四級アンモニウム、およびアンモニウム、テトラメチルアンモニウム、テトラエチルアンモニウム、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、エチルアミンなどを含み、これらに限定されないアミンカチオンを含み、これらに限定されない。塩基付加塩類の形成に有用な他の代表的有機アミン類の例は、ジエチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジンなどを含む。
【００６９】
ここで使用する用語“薬学的に許容されるエステル”は、インビボで加水分解されるエステル類を言い、ヒト体内で容易に分解して親化合物またはその塩を遊離するものを含む。適当なエステル基は、例えば、薬学的に許容される脂肪族カルボン酸類、特にアルカン酸、アルケン酸、シクロアルカン酸およびアルカン二酸に由来するものであり、ここで、各アルキル部分またはアルケニル部分は、有利には６個を超えない炭素原子を有する。特定のエステル類の例は、ギ酸エステル、酢酸エステル、プロピオン酸エステル、酪酸エステル、アクリル酸エステルおよびエチルコハク酸エステルを含む。
【００７０】
ここで使用する用語“薬学的に許容されるプロドラッグ”は合理的な医学的判断の範囲内で、合理的な利益／リスク比に対応して、過度の毒性、刺激、アレルギー応答などを起こさずにヒトおよび下等動物の組織と接触させて使用するのに適当であり、意図される使用に有効である、本発明の化合物のプロドラッグ、ならびに可能であれば本発明の化合物の双性イオン形態を言う。用語“プロドラッグ”は、インビボで、例えば血中の加水分解により上記式の親化合物に急速に変換される化合物を言う。詳細な記載がT. Higuchi and V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14 of the A.C.S. Symposium SeriesおよびEdward B. Roche, ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987に提供されており、その両方を引用により本明細書に包含させる。
【００７１】
ここに記載した全ての式は、化合物の標識されていない形態ならびに同位体標識された形態も意図する。同位体標識された化合物は、１個以上の原子が選択した原子質量または質量数を有する原子で置き換えられている以外、ここに記載する式により表される構造を有する。本発明の化合物に包含できる同位体は、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素、および塩素の同位体、例えばそれぞれ２Ｈ、３Ｈ、１１Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｆ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、３６Ｃｌ、１２５Ｉを含む。本発明は、種々の同位体標識されたここに定義した化合物、例えば放射性同位体、例えば３Ｈ、１３Ｃ、および１４Ｃが存在するものを含む。かかる同位体標識された化合物は代謝試験(１４Ｃを用いて)、反応速度論試験(例えば２Ｈまたは３Ｈを用いて)、薬物または基質組織分布アッセイを含む検出または造影法、例えば陽電子放出断層撮影(ＰＥＴ)または単一光子放射型コンピュータ断層撮影法(ＳＰＥＣＴ)、または患者の放射線処置に有用である。特に、１８Ｆ標識化合物は、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴに特に望ましい。同位体標識された本発明の化合物およびそのプロドラッグは、一般に、スキームまたは実施例に開示した方法の実施によりおよび以下に記載する製造により、同位体標識されていない反応材を容易に利用可能な同位体標識された反応材に置き換えることにより製造できる。
【００７２】
さらに、重い同位体、特に重水素(すなわち、２ＨまたはＤ)での置換は、大きな代謝安定性に起因するある種の治療的利点、例えばインビボ半減期延長または必要投与量減少または治療指数改善を提供し得る。本文脈での重水素は、式Ｉの化合物の置換基と見なされると解釈すべきである。かかる重い同位体、特に重水素の濃度は、同位体富化係数により定義され得る。ここで使用する用語“同位体富化係数”は、特定の同位体の同位体存在量および天然存在量の比を意味する。本発明の化合物における置換基が重水素であると示されているとき、かかる化合物は、少なくとも３５００(各指定された重水素原子で５２.５％重水素取り込み)、少なくとも４０００(６０％重水素取り込み)、少なくとも４５００(６７.５％重水素取り込み)、少なくとも５０００(７５％重水素取り込み)、少なくとも５５００(８２.５％重水素取り込み)、少なくとも６０００(９０％重水素取り込み)、少なくとも６３３３.３(９５％重水素取り込み)、少なくとも６４６６.７(９７％重水素取り込み)、少なくとも６６００(９９％重水素取り込み)、または少なくとも６６３３.３(９９.５％重水素取り込み)の各指定された重水素原子の同位体富化係数を有する。
【００７３】
同位体標識された式Ｉの化合物は、一般に当業者に既知の慣用方法を使用して、または添付する実施例および製造に記載した方法に準じて、先に用いた標識されていない反応材に代えて適当な同位体標識された反応材を使用して製造できる。
【００７４】
本発明の化合物、またはその互変異性体、プロドラッグおよび立体異性体、ならびにそれらのいずれかの薬学的に許容される塩類、エステル類およびプロドラッグは、インビボでヒトまたは動物体内または細胞での代謝を介して処理され、代謝物を生じることは当業者には当然である。ここで使用する用語“代謝物”は、親化合物の投与後対象で生じる全ての誘導体の化学式を意味する。誘導体は、親化合物から、例えば、酸化、還元、加水分解、またはコンジュゲーションのような種々の生化学的変換により製造され得て、例えば、オキシド類および脱メチル化誘導体を含む。本発明の化合物の代謝物は、当分野で既知の日住的な方法を使用して同定し得る。例えば、Bertolini, G. et al., J. Med. Chem. 40:2011-2016 (1997); Shan, D. et al., J. Pharm. Sci. 86(7):765-767; Bagshawe K., Drug Dev. Res. 34:220-230 (1995); Bodor, N., Advances in Drug Res. 13:224-331 (1984); Bundgaard, H., Design of Prodrugs (Elsevier Press 1985); and Larsen, I. K., Design and Application of Prodrugs, Drug Design and Development (Krogsgaard-Larsen et al., eds., Harwood Academic Publishers, 1991)参照。式Ｉの化合物、式IIの化合物、またはそれらの互変異性体、プロドラッグおよび立体異性体、ならびにそれらのいずれかの薬学的に許容される塩類、エステル類およびプロドラッグの代謝物である個々の化学化合物は本発明の範囲内に入ると解釈すべきである。
【００７５】
用語“癌”は、例えば、癌腫(例えば、肺、膵臓、甲状腺、卵巣、膀胱、乳房、前立腺、または結腸の)のような固形癌、黒色腫、骨髄障害(例えば、骨髄性白血病、多発性骨髄腫および赤白血病)、腺腫(例えば、絨毛結腸腺腫)および肉腫(例えば、骨肉腫)を含む、Ｐｉｍキナーゼ阻害により好都合に処置できる癌疾患を言う。
【００７６】
合成法
本発明の化合物は当業者に既知の方法により得ることができる。例えば、スキーム１に示す通り、シクロヘキサンジオン類を、モノトリフラート類を介して対応するシクロヘキセノンボロン酸エステル類に変換し、これを４−クロロ、３−ニトロピリジンを用いてパラジウム介在炭素結合形成させて、ニトロピリジン置換シクロヘキセノン類Ｉを得る。エノン官能基の還元によりシクロヘキセノールIIを得ることができ、これをアルコール保護して、ニトロおよびアルケン還元、アミドカップリングし、脱保護してシクロヘキサノールアミド類IIIを得ることができる。シクロヘキセノールIIをまたフタルイミドと光延反応して、保護されたアミノシクロヘキセンIVを得ることもできる。ニトロおよびアルケン還元後、フタルイミド保護アミノシクロヘキシルピリジルアニリンＶａをアミドカップリングおよび脱保護して、アミノシクロヘキサンアミド類VIを得ることができる。対応するＢｏｃ保護アミノシクロヘキサンピリジルアニリンＶｂをまたシクロヘキセノールIIから次の方法で製造できる：アルコール保護、アルケンおよびニトロ還元、ピリジルアミンＣｂｚ保護、シリルエーテル脱保護、シクロヘキサノンへのDess-Martin酸化、ベンジルアミンでの還元的アミノ化、ＣｂｚおよびＢｎ脱保護および一級脂肪族アミンＢｏｃ保護。アミド生成物IIIおよびVIにおいて、Ｒ２がハロまたはトリフラートであるならば、アミド類IIIおよびVIを標準修飾により修飾して、Ｒ２に置換アリール類、アルキル類およびヘテロアリール類を入れることができる。例えば、Ｒ２がＢｒであるならば、ボロン酸類または有機金属試薬との反応により、または対応するボロン酸エステルへの変換およびアリール／ヘテロアリールハライド類またはトリフラート類との反応により、様々なＲ２修飾が可能である。
【００７７】
【化５】
0005412519.tif 000006
【００７８】
あるいは、スキーム２に示す通り、シクロヘキセノールIIを脱水して、シクロヘキサジエンを得て、エポキシド化(ブロモヒドリン形成およびＨＢｒ除去を介してまたはｍＣＰＢＡから直接)およびアジドエポキシド開環により、シクロヘキセニルアジドアルコールVIを得ることができる。シクロヘキセニルアジドアルコールVIをアジド還元、アルコール保護およびアルケンおよびニトロ還元によりｔｒａｎｓ保護アミノヒドロキシアニリンVIIａに変換できる。あるいは、シクロヘキセニルアジドアルコールVIをアジド還元およびＢｏｃ保護により保護ｃｉｓアミノヒドロキシアニリンVIIｂに変換し、ｃｉｓ環状カルバメートにアルコールメシル化および分子内環化し、Ｂｏｃ保護およびアルケンおよびニトロ還元してよい。得られたシクロヘキシルピリジルアニリン類VIIａおよびVIIｂを、アミドカップリング、アセテートまたは環状カルバメート開裂およびＢｏｃ脱保護により対応するピリジンアミド類VIIIａおよびVIIIｂに変換できる。Ｒ２がハロまたはトリフラートであるならば、アミド類VIIIａおよびVIIIｂをアミド結合形成後および完全脱保護にさらに標準修飾により修飾して、Ｒ２に置換アリール類、アルキル類およびヘテロアリール類を挿入できる。例えば、Ｒ２がＢｒであるならば、ボロン酸類または有機金属試薬との反応により、または対応するボロン酸エステルへの変換とアリール／ヘテロアリールハライド類またはトリフラート類との反応により、種々のＲ２修飾が可能である。
【００７９】
【化６】
0005412519.tif 000007
【００８０】
あるいは、スキーム３に示す通り、次の通り三置換５−アルキル、４−ヒドロキシ、３−アミノピペリジン類を製造し、修飾して三置換５−アルキル、４−ヒドロキシ、３−アミノピペリジニルピリジンアミド類IXを製造できる。ガーナーアルデヒドと(Ｒ)−４−ベンジル−３−プロピオニルオキサゾリジン−２−オンを反応させ、得られたアルコールをＴＢＳ保護して化合物Ｘを得る。オキサゾリジノンの還元とアジド基の挿入により、中間体XIを得る。酸性条件下の脱保護により対応するアミノアルコールを遊離させ、それをＢｏｃ基で保護し、一級アルコールでのメシル化して、中間体XIIを得る。アジドの還元によりピペリジン形成させ、続いて４−クロロ−３−ニトロピリジンと還元させ、アミンに還元し、対応するカルボン酸とカップリングさせ、脱保護して、三置換５−メチル,４−ヒドロキシ−３−アミノピペリジニルピリジンアミド類IXを得る。Ｒ１がハロまたはトリフラートであるならば、アミドIXをアミド結合形成後および完全脱保護にさらに標準修飾により修飾して、Ｒ１に置換アリール類、アルキル類およびヘテロアリール類を挿入できる。例えば、Ｒ１がＢｒであるならば、ボロン酸類または有機金属試薬との反応により、または対応するボロン酸エステルへの変換とアリール／ヘテロアリールハライド類またはトリフラート類との反応により、種々のＲ１修飾が可能である。
【００８１】
【化７】
0005412519.tif 000008
【００８２】
あるいは、スキーム４に示す通り、次の通り三置換５−メチル、４−ヒドロキシ、３−アミノピペリジン類を製造し、三置換５−メチル、４−ヒドロキシ、３−アミノピペリジニルアミド類XIIIに変換できる。クロチルボロン酸エステル類とＳｅｒＯＢｎアルデヒドの反応、環状カルバメート形成、アルケン酸化的開裂および還元によりヒドロキシル化合物XIVを得る。ベンジル脱保護、ビトシル化およびｐ−メトキシベンジルアミンとの反応、およびアミン脱保護により、ピペリジンXVを得る。置換ピペリジンXVとハロニトロ置換アレーン類またはヘテロアレーン類の反応、カルバメート保護、ニトロ還元、アミドカップリング、環状カルバメート開環および脱保護により、三置換５−メチル、４−ヒドロキシ、３−アミノピペリジニルアミド類XIIIを得る。Ｒ３がハロまたはトリフラートであるならば、アミドXVをさらに標準修飾により修飾して、Ｒ３に置換アリール類、アルキル類およびヘテロアリール類を挿入できる。例えば、Ｒ３がＢｒであるならば、ボロン酸類または有機金属試薬との反応、または対応するボロン酸エステルへの変換およびアリール／ヘテロアリールハライド類またはトリフラート類との反応により、種々のＲ３修飾が可能である。
【００８３】
【化８】
0005412519.tif 000009
【００８４】
本発明の化合物は、インビトロおよび／またはインビボで癌細胞の増殖阻害に有用である。本化合物は単独で、または薬学的に許容される担体または賦形剤と共に組成物で使用してよい。適当な薬学的に許容される担体または賦形剤は、例えば、リン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、単糖類、二糖類、デンプン、ゼラチン、セルロース、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、デキストロース、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン、ポリビニルピロリジノン、低分子量蝋、イオン交換樹脂など、ならびにこれらのいずれか２種以上の組合せのような、例えば、加工剤(processing agents)および薬剤送達修飾剤および促進剤である。他の適当な薬学的に許容される賦形剤は、本明細書に引用して包含する“Remington's Pharmaceutical Sciences,” Mack Pub. Co., New Jersey (1991)に記載されている。
【００８５】
有効量の本発明の化合物は、一般にここに記載するアッセイのいずれかにより、当業者に既知の他のＰｉｍキナーゼ活性アッセイにより、または癌の症状の阻止または軽減により測定して、Ｐｉｍ活性を検出可能に阻害するのに十分である全ての量を含む。一投与形態を製造するために担体物質と組合せ得る活性成分の量は、処置する宿主および特定の投与方式によって変わる。しかしながら、いずれかの特定の患者に対する特定の投与量は、特定の用いる化合物の活性、年齢、体重、一般的健康、性別、食習慣、投与時間、投与経路、排泄速度、併用剤および治療を受けている特定の疾患の重症度を含む種々の因子によって変わることは理解されよう。ある状況での治療有効量は日常的な実験により容易に決定でき、通常の医師の技術および判断の範囲内である。
【００８６】
本発明の目的で、治療有効投与量は、一般に宿主に一回または分割投与で投与される総１日量であり、例えば、１日０.００１〜１０００mg／kg体重以上、好ましくは１日１.０〜３０mg／kg体重の量であり得る。投与量単位組成物は、１日量をもたらすかかる量の分割量を含み得る。
【００８７】
本発明の化合物は経口、非経腸、舌下、エアロゾル化または吸入スプレー、直腸、または局所的に、所望により通常の非毒性の薬学的に許容される担体、アジュバント、および媒体を含む投与量単位製剤で投与してよい。局所投与はまた、経皮パッチまたはイオン電気泳動デバイスのような経皮投与の使用も含み得る。ここで使用する用語非経腸は、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内注射、または輸液法を含む。
【００８８】
注射可能製剤、例えば、滅菌注射可能水性または油性懸濁液は、適当な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を使用して、既知の技術に従い製剤できる。滅菌注射可能製剤はまた、非毒性の非経腸的に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌注射可能溶液または懸濁液、例えば、１,３−プロパンジオール中の溶液でもあり得る。用い得る許容される媒体および溶媒は、とりわけ水、リンゲル溶液、および等張塩化ナトリウム溶液である。加えて、滅菌、固定油が、溶媒または懸濁媒体として慣用的に用いられる。この目的のために、合成モノ−またはジ−グリセリド類を含む全ての無刺激性固定油を用い得る。加えて、オレイン酸のような脂肪酸類は、注射製剤の製造に有用である。
【００８９】
医薬の直腸投与用坐薬は、医薬と、常温で固体であるが直腸温度で液体であり、それ故に直腸で融解して薬剤を放出するカカオバターおよびポリエチレングリコール類のような適当な非刺激性賦形剤を混合することにより製造できる。
【００９０】
経口投与用固体投与量形態は、カプセル剤、錠剤、丸薬、散剤、および顆粒剤を含む。かかる固体投与量形態において、活性化合物は、スクロース、ラクトースまたはデンプンのような少なくとも１個の不活性希釈剤と混合し得る。かかる投与量形態はまた、通常の方法に従い、不活性希釈剤以外のさらなる物質、例えば、ステアリン酸マグネシウムのような滑剤も含み得る。カプセル剤、錠剤、および丸薬の場合、投与量形態はまた緩衝剤を含み得る。錠剤および丸薬は、さらに腸溶性コーティングを施され得る。経口投与用液体投与量形態は、一般的に当分野で使用される水のような不活性希釈剤を含む、薬学的に許容されるエマルジョン剤、液剤、懸濁液剤、シロップ剤、およびエリキシル剤を含み得る。かかる組成物はまた湿潤剤、乳化剤および懸濁化剤、シクロデキストリン類、および甘味剤、香味剤、および芳香剤のようなアジュバントも含み得る。
【００９１】
本発明の化合物をまたリポソームの形で投与できる。当分野で既知の通り、リポソームは一般にリン脂質または他の脂質物質に由来する。リポソームは、水性媒体に分散する単または多相状水和液晶により形成される。リポソームを形成できる全ての非毒性の、生理学的に許容されかつ代謝可能な脂質を使用できる。リポソーム形態の本組成物は、本発明の化合物に加えて、安定化剤、防腐剤、賦形剤などを含み得る。好ましい脂質は、天然および合成両方のリン脂質およびホスファチジルコリン類(レシチン類)である。リポソームを形成する方法は当分野で既知である。例えば、Prescott, Ed., Methods in Cell Biology, Volume XIV, Academic Press, New York, N.W., p. 33 et seq. (1976)参照。
【００９２】
本発明の化合物を唯一の活性成分として投与でき、それらはまた癌の処置に使用される１種以上の他の薬剤と組み合わせて使用することもできる。本発明の化合物はまた既知治療剤および抗癌剤との組合せも有用であり、ここに開示する化合物と他の抗癌剤または化学療法剤との組合せは本発明の範囲内にある。かかる薬剤の例は、Cancer Principles and Practice of Oncology, V. T. Devita and S. Hellman (editors), 6th edition (Feb. 15, 2001), Lippincott Williams & Wilkins Publishersに見ることができる。当業者は、本薬剤の特定の特徴と、関与する癌に基づき、どの薬剤との組合せが有用であるか識別できる。かかる抗癌剤は次のものを含み、これらに限定されない：エストロゲン受容体モジュレーター、アンドロゲン受容体モジュレーター、レチノイド受容体モジュレーター、細胞毒性／細胞増殖抑制剤、抗増殖剤、プレニル−タンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤および他の血管形成阻害剤、細胞増殖および生存シグナル伝達の阻害剤、アポトーシス誘発剤および細胞周期チェックポイントを阻害する薬剤。本発明の化合物はまた放射線治療と併用したときも、有用である。
【００９３】
それ故、本発明の一態様において、本発明の化合物はまた、例えば、エストロゲン受容体モジュレーター、アンドロゲン受容体モジュレーター、レチノイド受容体モジュレーター、細胞毒性剤、抗増殖剤、プレニル−タンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ阻害剤、ＨＩＶプロテアーゼ阻害剤、逆転写酵素阻害剤、および他の血管形成阻害剤を含む、既知抗癌剤と組み合わせても使用する。
【００９４】
本発明の現在好ましいある態様において、癌の処置のために本発明の化合物と組み合わせるのに有用な代表的薬剤は、例えば、イリノテカン、トポテカン、ゲムシタビン、５−フルオロウラシル、ロイコボリンカルボプラチン、シスプラチン、タキサン類、テザシタビン、シクロホスファミド、ビンカアルカロイド、イマチニブ(Gleevec)、アントラサイクリン類、リツキシマブ、トラスツマブ、ならびに他の癌化学療法剤を含む。
【００９５】
本発明の化合物と組み合わせて用いる上記薬剤は、引用により本明細書に包含させるPhysicians' Desk Reference (PDR) 47th Edition (1993)に示される治療量で、または当業者に既知のかかる治療に有用な量で使用する。
【００９６】
本発明の化合物および他の抗癌剤は、推奨される最大臨床投与量またはそれより少ない用量で投与できる。本発明の組成物中の複数活性化合物の投与量は、投与経路、疾患の重症度および患者の応答によって、所望の治療応答が得られるように変え得る。組合せは、別々の組成物として、または両剤を含む一投与形態として投与できる。組合せとして投与するとき、治療剤は、同時にまたは異なる時点で投与する別の組成物として製剤してよく、または治療剤は一組成物として投与してよい。
【００９７】
一態様において、本発明は、ヒトまたは動物対象におけるＰｉｍ１、Ｐｉｍ２またはＰｉｍ３の阻害方法を提供する。本方法は、有効量の式ＩまたはIIの化合物のいずれかの態様の化合物、または薬学的に許容されるその塩を、それを必要とする対象に投与することを含む。
【００９８】
本発明を、説明のために提供し、本発明を限定する意図はない、以下の実施例を参照して、より容易に理解されよう。
【実施例】
【００９９】
以下の実施例について、好ましい態様の化合物をここに記載する方法、または、当分野で既知の他の方法を使用して合成した。
【０１００】
本化合物および／または中間体を、Waters Milleniumクロマトグラフィーシステムを2695 Separation Module(Milford, MA)で使用する高速液体クロマトグラフィー(ＨＰＬＣ)により特徴付けした。分析的カラムは、Alltech(Deerfield, IL)からの逆相Phenomenex Luna C18  −５μ、４.６×５０mmである。典型的に５％アセトニトリル／９５％水から出発し、１０分間にわたり１００％アセトニトリルまで進む勾配溶出(流速２.５mL／分)を使用した。全溶媒は０.１％トリフルオロ酢酸(ＴＦＡ)を含んだ。化合物を、２２０nmまたは２５４nmで吸収する紫外線光(ＵＶ)により検出した。ＨＰＬＣ溶媒はBurdick and Jackson(Muskegan, MI)またはFisher Scientific(Pittsburgh, PA)からであった。
【０１０１】
数例で、純度を、例えば、Baker-Flex Silica Gel 1B2-Fフレキシブルシートのようなガラスまたはプラスチック裏打ちシリカゲルプレートを使用する薄層クロマトグラフィー(ＴＬＣ)で評価した。ＴＬＣ結果は、紫外線光下で視覚的にまたは既知のヨウ素蒸気および他の種々の染色技術を使用して容易に検出された。
【０１０２】
質量分光学分析を、３種のＬＣＭＳ装置で行った：Waters System(Alliance HT HPLCとMicromass ZQ質量分光計；カラム：Eclipse XDB-C18、２.１×５０mm；勾配：５−９５％(または３５−９５％、または６５−９５％または９５−９５％)アセトニトリルの水溶液と０.０５％ＴＦＡを４分間；流速０.８mL／分；分子量範囲２００−１５００；コーン電圧２０Ｖ；カラム温度４０℃)、別のWaters System(ACQUITY UPLCシステムとZQ 2000システム；カラム：ACQUITY UPLC HSS-C18、１.８μm、２.１×５０mm；勾配：５−９５％(または３５−９５％、または６５−９５％または９５−９５％)アセトニトリルの水溶液と０.０５％ＴＦＡを１.３分間；流速１.２mL／分；分子量範囲１５０−８５０；コーン電圧２０Ｖ；カラム温度５０℃)またはHewlett Packard System(Series 1100 HPLC；カラム：Eclipse XDB-C18、２.１×５０mm；勾配：５−９５％アセトニトリルの水溶液と０.０５％ＴＦＡを４分間；流速０.８mL／分；分子量範囲１５０−８５０；コーン電圧５０Ｖ；カラム温度３０℃)。全ての質量をプロトン化親イオンのものとして報告した。
【０１０３】
核磁気共鳴(ＮＭＲ)分析を、いくつかの化合物でVarian 400 MHz NMR(Palo Alto, CA)で行った。スペクトル参照は、ＴＭＳまたは溶媒の既知化学シフトであった。
【０１０４】
予備分離は、Flash 40クロマトグラフィーシステムおよびKP-Sil、60A(Biotage, Charlottesville, VA)を使用して、またはフラッシュカラムクロマトグラフィーによりシリカゲル(２３０−４００メッシュ)充填材を使用して、またはＨＰＬＣによりWaters 2767 Sample Manager、C-18逆相カラム、３０×５０mm、流速７５mL／分を使用して行う。Flash 40 Biotageおよびフラッシュカラムクロマトグラフィーに用いる典型的溶媒は、ジクロロメタン、メタノール、酢酸エチル、ヘキサン、アセトン、水性アンモニア(または水酸化アンモニウム)、およびトリエチルアミンである。逆相ＨＰＬＣに用いる典型的溶媒は、種々の濃度のアセトニトリルおよび水と０.１％トリフルオロ酢酸である。
【０１０５】
好ましい態様に従う有機化合物は互変異性の現象を示し得ることは理解されるべきである。本明細書では可能な互変異性体形態の一つのみしか示すことができないが、好ましい態様は、記載された構造の全ての互変異性体形態を包含すると理解すべきである。
【０１０６】
本発明は、説明のためにここに記載した態様に限定されず、上記開示の範囲内に入るその全ての形態を包含すると解釈すべきである。
【０１０７】
以下の実施例ならびに本明細書を通して、次の略語は次の意味を有する。定義されていなければ、その用語は一般に許容される意味を有する。
【表１】
0005412519.tif 000010
【０１０８】
３−オキソシクロヘキサ−１−エニルトリフルオロメタンスルホネートの合成
【化９】
0005412519.tif 000011
シクロヘキサン−１,３−ジオン(１当量)のＤＣＭ(０.４Ｍ)溶液に、Ｎａ２ＣＯ３(１.０当量)を添加し、０℃に冷却した。Ｔｆ２Ｏ(１.０当量)のＤＣＭ(５Ｍ)溶液を、１時間にわたり、室温で窒素雰囲気下に滴下した。添加後、反応を２時間撹拌した(暗赤色溶液)。溶液を濾過し、濾液に飽和ＮａＨＣＯ３を添加し(注意深く)、有機物を抽出し、塩水、続いてＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗物質をさらに精製せずに次工程に使用した。３−オキソシクロヘキサ−１−エニルトリフルオロメタンスルホネートを６７％収率で得た。トリフラートは貯蔵により分解し、次反応に直ぐに使用しなければならない。LC/MS = 244.9/286.0 (M+HおよびM+CH3CN);Rt = 0.88分。
【０１０９】
３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)シクロヘキサ−２−エノンの合成
【化１０】
0005412519.tif 000012
３−オキソシクロヘキサ−１−エニルトリフルオロメタンスルホネート(１.０当量)の脱気ジオキサン(０.３Ｍ)溶液に、ビス(ピナコラート)ジボロン(２.０当量)、ＫＯＡｃ(３.０当量)、およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を添加した。反応を８０℃で２時間加熱し、濾過した。ジオキサン溶液をさらに精製せずに次工程に使用した。LC/MS = 140.9 (M+Hのボロン酸)。
【０１１０】
３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノンの合成
【化１１】
0005412519.tif 000013
３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)シクロヘキサ−２−エノン(１.０当量)の脱気ジオキサンおよび２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３中の溶液に、４−クロロ−３−ニトロピリジン(１.２当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を添加した。反応を油浴中１１０℃で２時間加熱した。室温に冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏを添加して、多量のエマルジョンを含む暗色の溶液を得た。固体を除くために濾過し、有機相を抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗物質を酢酸エチルおよびヘキサン(１：１)で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノン(５５％、２工程)を得た。LC/MS = 219 (M+H), LC = 2.294分。
【０１１１】
３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノールの合成
【化１２】
0005412519.tif 000014
３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノン(１.０当量)の溶液に、ＥｔＯＨ(０.２Ｍ)およびＣｅＣｌ３−７Ｈ２Ｏ(１.３当量)を添加した。反応を０℃に冷却し、ＮａＢＨ４(１.３当量)を少しずつ添加した。２時間、０℃で撹拌し、水の添加によりクエンチし、濃縮してＥｔＯＨを除去し、ＥｔＯＡｃを添加し、有機物を抽出し、塩水、続いてＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノール(９９％)を得た。LC/MS = 221.1 (M+H), LC = 2.235分。
【０１１２】
２−(３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニル)イソインドリン−１,３−ジオンの合成
【化１３】
0005412519.tif 000015
３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノール(１.０当量)、トリフェニルホスフィン(１.５当量)およびフタルイミド(１.５当量)のＴＨＦ(０.３Ｍ)溶液に、０℃で(Ｅ)−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジアゼン−１,２−ジカルボキシレート(１.５当量)を滴下した。反応を０℃で２時間撹拌した。真空で濃縮乾固し、粗物質をＥｔＯＡｃおよびヘキサン(１：１で５％メタノール含有)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、２−(３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニル)イソインドリン−１,３−ジオン(６３％収率)を得た。LC/MS = 350.3 (M+H), LC = 3.936分。
【０１１３】
２−(３−(３−アミノピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニル)イソインドリン−１,３−ジオンの合成
【化１４】
0005412519.tif 000016
２−(３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニル)イソインドリン−１,３−ジオン(１.０当量)のＡｃＯＨ(０.３８Ｍ)溶液に、Ｆｅ(６.０当量)を添加し、反応を室温で２時間撹拌した。濾過し、メタノールで洗浄し、濾液を濃縮した。粗物質に酢酸エチルおよび飽和ＮａＨＣＯ３を添加し、有機物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、２−(３−(３−アミノピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニル)イソインドリン−１,３−ジオンを黄色濃ガム状物として９６％収率で得た。LC/MS = 320.0 (M+H), LC = 2.410分。
【０１１４】
２−(３−(３−アミノピリジン−４−イル)シクロヘキシル)イソインドリン−１,３−ジオンの合成
【化１５】
0005412519.tif 000017
２−(３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニル)イソインドリン−１,３−ジオン(１.０当量)の酢酸(０.１Ｍ)溶液に１０％Ｐｄ／Ｃ(０.２当量)を添加し、反応をＨ２バルーン下撹拌した。３日間後、反応をセライトを通して濾過し、酢酸エチルおよびメタノールで洗浄し、濾液を酢酸エチルで希釈し、２回飽和２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３で洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質をヘキサンおよび酢酸エチルで摩砕して、２−(３−(３−アミノピリジン−４−イル)シクロヘキシル)イソインドリン−１,３−ジオンを７３％収率で得た。LC/MS = 322.2 (M+H), Rt = 0.64分。
【０１１５】
５,５−ジメチル−３−オキソシクロヘキサ−１−エニルトリフルオロメタンスルホネートの合成
【化１６】
0005412519.tif 000018
３首丸底フラスコに、５,５−ジメチルシクロヘキサン−１,３−ジオン(１.０当量)をＤＣＭ(０.２Ｍ)に溶解した。炭酸ナトリウム(１.１当量)を添加し、混合物をＮ２下、磁気撹拌しながら氷／塩水浴で約−５℃に冷却した。ＤＣＭで希釈したトリフル酸無水物(１.０５当量)を添加用漏斗を通して９０分間にわたり滴下した。添加完了後、反応を約０℃で１時間撹拌した。ＬＣＭＳおよび１Ｈ  ＮＭＲによると、まだ出発物質が残っていた。さらに炭酸ナトリウム(０.５１当量)およびトリフル酸無水物(０.５０当量)を添加した。２時間後、混合物を粗い焼結ガラス漏斗を通して濾過し(ケーキをＤＣＭで洗浄)、エレンマイヤーフラスコに移し、ｐＨ＝７になるまで激しく撹拌しながら飽和水性重炭酸ナトリウムを注意深く添加してクエンチし、分液漏斗に移し、層を分離した。有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、５,５−ジメチル−３−オキソシクロヘキサ−１−エニルトリフルオロメタンスルホネートを得て、それをさらに精製せずに次工程に使用した。LC/MS (m/z):MH+=273.1, Rt=1.03。
【０１１６】
５,５−ジメチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)シクロヘキサ−２−エノンの合成
【化１７】
0005412519.tif 000019
５,５−ジメチル−３−オキソシクロヘキサ−１−エニルトリフルオロメタンスルホネート(１.０当量)、カリウムアセテート(３.０当量)、およびビス(ピナコラート)ジボロン(２.０当量)の全反応材を、丸底フラスコ中の１,４−ジオキサン(０.２Ｍ)に添加し、１０分間、混合物にＮ２をバブリングして脱気した。ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)−ＤＣＭ付加物(０.０３当量)を添加し、反応をＮ２下、一夜還流冷却器を備えた油浴で、８０℃で加熱した。混合物を室温に冷却し、粗い焼結ガラス漏斗を通して濾過し、ケーキを１,４−ジオキサンで濯いで、５,５−ジメチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)シクロヘキサ−２−エノンの１,４−ジオキサン溶液を得て、これをさらに精製せずに次工程に使用した。LC/MS (m/z):MH+(ボロン酸) = 169.1, Rt = 0.50。
【０１１７】
５,５−ジメチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノンの合成
【化１８】
0005412519.tif 000020
ボロン酸エステル５,５−ジメチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)シクロヘキサ−２−エノン(１.０当量)を丸底フラスコ中で１,４−ジオキサンに溶解し、溶液にＮ２を３０分間バブリングして脱気した。４−クロロ−３−ニトロ−ピリジン(１.３当量)および２Ｍ(水性)炭酸ナトリウム(２.０当量)を添加し、Ｎ２を１０分間バブリングし、ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ)−ＤＣＭ(０.０５当量)を添加した。反応混合物を１１０℃で２時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃおよび水に添加した。得られた混合物をセライトを通して濾過し、ケーキをＥｔＯＡｃで洗浄した。有機層を分離し、水性物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出、ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：１０〜２：１)で精製して、５,５−ジメチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノン(４６.７％、３工程で)を得た。LC/MS (m/z):MH+=247.2, Rt=0.79。
【０１１８】
５,５−ジメチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノールの合成
【化１９】
0005412519.tif 000021
５,５−ジメチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノン(１.０当量)、およびＣｅＣｌ３−７Ｈ２Ｏ(１.２当量)のＭｅＯＨ(０.２Ｍ)にＮａＢＨ４(１.０当量)を０℃で添加した。溶液を１時間撹拌し、５mLの水の添加によりクエンチした。揮発物を真空で除去し、残留物をＥｔＯＡｃおよびＨ２Ｏに分配した。有機層を分離し、塩水で洗浄した。合わせた水性物をＥｔＯＡｃで逆抽出し、有機物を塩水で洗浄した。合わせた有機物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をカラム(５％メタノールの１：１酢酸エチルおよびヘキサン溶液)で精製して、５,５−ジメチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノール(７４％)を得た。LC/MS (m/z):MH+=249.2, Rt=0.76。
【０１１９】
２−(５,５−ジメチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)−シクロヘキサ−２−エニル)イソインドリン−１,３−ジオンの合成
【化２０】
0005412519.tif 000022
０℃に冷却した５,５−ジメチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノール(１.０当量)、トリフェニルホスフィン(１.５当量)、およびフタルイミド(１.５当量)のＴＨＦ(０.２Ｍ)の均一溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルアゾジカルボキシレート(１.５当量)のＴＨＦ溶液を添加した。混合物を０℃で２時間撹拌した。反応を真空で濃縮した。残留物をカラム(５％メタノールの１：１酢酸エチルおよびヘキサン溶液)で精製して、２−(５,５−ジメチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニル)イソインドリン−１,３−ジオン(９９％)を得た。LC/MS (m/z):MH+=378.2, Rt=1.10。
【０１２０】
２−(３−(３−アミノピリジン−４−イル)−５,５−ジメチル−シクロヘキサ−２−エニル)イソインドリン−１,３−ジオンの合成
【化２１】
0005412519.tif 000023
２−(５,５−ジメチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニル)イソインドリン−１,３−ジオン(１当量)の酢酸(０.１Ｍ)溶液に窒素を１０分間通気した。１０％Ｐｄ／Ｃ(０.１０当量)を添加した。反応混合物を室温で一夜、水素雰囲気下に撹拌した。固体をセライト濾過により除去し、ＥｔＯＡｃおよびＭｅＯＨで濯いだ。濾液を濃縮し、ＥｔＯＡｃで希釈し、２回飽和水性２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をカラム(５％メタノールの１：１酢酸エチルおよびヘキサン溶液)で精製して、２−(３−(３−アミノピリジン−４−イル)−５,５−ジメチルシクロヘキサ−２−エニル)イソインドリン−１,３−ジオン(８９％)を得た。LC/MS (m/z):MH+=348.3, Rt=0.79。
【０１２１】
２−(５−(３−アミノピリジン−４−イル)−３,３−ジメチルシクロヘキシル)イソインドリン−１,３−ジオンの合成
【化２２】
0005412519.tif 000024
２−(３−(３−アミノピリジン−４−イル)−５,５−ジメチルシクロヘキサ−２−エニル)イソインドリン−１,３−ジオン(１.０当量)の酢酸(０.１Ｍ)溶液に窒素を１０分間通気した。１０％Ｐｄ／Ｃ(０.１当量)を添加した。反応混合物を４５℃、３００psiの水素雰囲気下、スチールボンベ中で一夜および６５℃、３００psiで５時間撹拌した。固体をセライト濾過により除去し、ＥｔＯＡｃおよびＭｅＯＨで濯いだ。濾液を濃縮し、ＥｔＯＡｃで希釈し、２回飽和水性２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をカラム(５％メタノールの１：１酢酸エチルおよびヘキサン溶液)で精製して、２−(５−(３−アミノピリジン−４−イル)−３,３−ジメチルシクロヘキシル)イソインドリン−１,３−ジオン(５３％)を得た。LC/MS (m/z):MH+=350.3, Rt=0.78。鏡像体的に純粋な２−((１Ｒ,５Ｒ)−５−(３−アミノピリジン−４−イル)−３,３−ジメチルシクロヘキシル)イソインドリン−１,３−ジオンおよび２−((１Ｓ,５Ｓ)−５−(３−アミノピリジン−４−イル)−３,３−ジメチルシクロヘキシル)イソインドリン−１,３−ジオンをキラルＨＰＬＣで分割した(分析についてのＲｔ＝それぞれ７.５２６分および１３.１０５分；ヘキサン：エタノール＝８０：２０(ｖ：ｖ)、Chiralcel OJ-H  １００×４.６mm、１mL／分。予備分離について、ヘキサン：エタノール＝８０：２０(ｖ：ｖ)、Chiralcel OJ-H(２５０×２０mm、２０mL／分)。1H NMR (CDCl3): δ 8.04 (s, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.82 (m, 2H), 7.71 (m, 2H), 7.06 (d, 1H), 4.54 (m, 1H), 3.71 (m, 2H), 2.89 (m, 1H), 2.23-2.44 ( m, 2H), 1.90 (m, 1H), 1.20-1.60 (m, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.07 (s, 3H)。
【０１２２】
４−(シクロヘキサ−１,３−ジエニル)−３−ニトロピリジンの合成
【化２３】
0005412519.tif 000025
３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノール(１.０当量)溶液に、ジオキサン(０.１８Ｍ)およびｐ−ＴＳＡ(１.１当量)を添加した。溶液を１００℃で４時間加熱した。室温に冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３および酢酸エチルで後処理し、有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗物質を１００％ＤＣＭで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、４−(シクロヘキサ−１,３−ジエニル)−３−ニトロピリジンを黄色油状物として得た(２７％収率)。LCMS (m/z):203.1 (MH+), LC Rt = 3.53分, 1H-NMR (CDCl3):9.02 (s, 1H), 8.70 (d, J=5.3, 1H), 7.30 (d, J=5.3, 1H), 6.15-6.17 (m, 1H), 6.02-6.11 (m, 2H), 2.35-2.38 (m, 4H)。
【０１２３】
(＋／−)−２−アジド−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノールの合成
【化２４】
0005412519.tif 000026
４−(シクロヘキサ−１,３−ジエニル)−３−ニトロピリジン(１.０当量)のＤＣＭ(０.１Ｍ)溶液に、ＮａＨＣＯ３(１.２当量)を添加して黄色溶液を得た。０℃に冷却し、ｍ−ＣＰＢＡ(１.０当量)を固体として溶液に一度に添加した。反応を０℃で３.５時間撹拌した。ＴＬＣおよびＬＣ／ＭＳの両方でモニターした。生成物をＭ＋Ｈ＝２３７(ジオール)；Ｒｔ＝０.４１分としてＵＰＬＣでイオン化した。反応を飽和ＮａＨＣＯ３でクエンチし、ＤＣＭ(３回)抽出した。有機相をさらに塩水、続いてＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、粗エポキシドを黄色油状物として得て、それをさらに精製せずに使用した。
【０１２４】
上記粗物質のＥｔＯＨおよび水(３：１)溶液(曇った黄色溶液)に、ＮａＮ３(２.０当量)およびＮＨ４Ｃｌ(２.０当量)を添加して、透明オレンジ色溶液を得た。反応を１６時間撹拌し、濃縮した。ＥｔＯＡｃおよび水を添加し、有機相をさらにＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、褐色油状物を得た。油状物をシリカゲルに載せ、カラムクロマトグラフィー(ＩＳＣＯ、０−５０％ＥｔＯＡｃ)で精製して、(＋／−)−２−アジド−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノールを黄色油状物として得た(４４％、２工程で)。LCMS (m/z) = 262 (MH+), LC Rt = 2.35分。
【０１２５】
(＋／−)−４−(３−アジド−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)シクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジンの合成
【化２５】
0005412519.tif 000027
(＋／−)−２−アジド−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノール(１.０当量)のＤＣＭ(０.１５Ｍ)溶液に、ＴＢＳＣｌ(２.０当量)、イミダゾール(２.０当量)およびＤＭＡＰ(０.１当量)を室温で添加した。１８時間後、水を添加し、有機物を塩水、続いてＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗物質をシリカに載せ、酢酸エチルおよびヘキサン(２０％)で溶出するカラムクロマトグラフィー(ＩＳＣＯ)で精製した。(＋／−)−４−(３−アジド−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)シクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジンを黄色油状物として６０％収率で得た。LCMS (m/z):376.3 (MH+), LC Rt =5.848分。
【０１２６】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニルカルバメートの合成
【化２６】
0005412519.tif 000028
丸底フラスコに(＋／−)−４−(３−アジド−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)シクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジン(１.０当量)およびピリジン(０.１Ｍ)を添加して黄色溶液を得た。水酸化アンモニウム(１０：１  ピリジン：水酸化アンモニウム)、ＰＭｅ３(３.０当量)を添加した。反応は１０分間後に暗褐色に変わった。室温で１.５時間撹拌した。ＥｔＯＨの添加によりクエンチし、濃縮した。さらに２回繰り返した。粗物質に飽和ＮａＨＣＯ３およびジオキサン(１：１、０.１Ｍ)を添加した。Ｂｏｃ２Ｏ(１.０当量)を添加した。１時間、室温で撹拌した。Ｈ２ＯおよびＥｔＯＡｃで洗浄し、有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ＩＳＣＯ、５：１  Ｈｅｘ／ＥｔＯＡｃ)で精製した。純粋フラクションを集め、濃縮して、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニルカルバメートを泡状物として得た。LCMS (m/z):450.3 (MH+), LC Rt = 5.83分。
【０１２７】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル３−(３−アミノピリジン−４−イル)−６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)シクロヘキサ−２−エニルカルバメートの合成
【化２７】
0005412519.tif 000029
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニルカルバメート(１.０当量)のＡｃＯＨ(０.１８Ｍ)溶液にＦｅ(６.０当量)を添加し、反応を２０時間撹拌した。反応をメタノールで希釈することにより後処理し、濾過し、濾液を濃縮した。粗物質に酢酸エチルおよび飽和ＮａＨＣＯ３を添加し、有機物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル３−(３−アミノピリジン−４−イル)−６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)シクロヘキサ−２−エニルカルバメートを黄色油状物として９４％収率で得た。LCMS (m/z):420.3 (MH+), LC Rt = 3.88分。
【０１２８】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)シクロヘキシルカルバメートの合成
【化２８】
0005412519.tif 000030
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル３−(３−アミノピリジン−４−イル)−６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)シクロヘキサ−２−エニルカルバメート(１.０当量)のＭｅＯＨ(０.１Ｍ)溶液に、Ｐｄ／Ｃ(２０重量％)を添加し、反応を水素バルーン下、１８時間撹拌した。反応のＬＣ／ＭＳはジアステレオマー混合物を示し、反応を濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄し、濾液を濃縮した。粗物質を分取ＨＰＬＣ(ＤＭＳＯ中)で精製し、純粋フラクションを合わせ、固体ＮａＨＣＯ３で中和し、酢酸エチルで抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、生成物Ａ(８％収率)および生成物Ｂ(５１％収率)を得た。
生成物Ａ：LCMS (m/z):422.4 (MH+), LC Rt = 3.75分。
生成物Ｂ：LCMS (m/z):422.4 (MH+), LC Rt =3.94分。
【０１２９】
１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イルトリフルオロメタンスルホネートの合成
【化２９】
0005412519.tif 000031
１,４−ジオキサスピロ[４.５]デカン−８−オン(１.０当量)をエーテル(０.１Ｍ)に溶解し、−１５℃で撹拌し、１Ｍ  ＮａＨＭＤＳ(１.０５当量)を添加し、７０分間撹拌し、Ｔｆ２Ｏ(１.０５当量)を添加し、反応をゆっくりｒｔに温めた。混合物を２８時間撹拌し、飽和水性ＮａＨＣＯ３および水で洗浄した。水性層を合わせ、エーテルで抽出した。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をカラム(エチルエーテル：ヘキサン＝１：４)で精製して、１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イルトリフルオロメタンスルホネート(６５％)を得た。LC/MS(m/z):MH+=289.0, Rt=0.97. HPLC Rt=3.77。
【０１３０】
４,４,５,５−テトラメチル−２−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イル)−１,３,２−ジオキサボロランの合成
【化３０】
0005412519.tif 000032
１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イルトリフルオロメタンスルホネート(１.０当量)のジオキサン(０.５Ｍ)溶液に窒素を３０分間通気した。４,４,４’,４’,５,５,５’,５’−オクタメチル−２,２’−ビ(１,３,２−ジオキサボロラン)(１.０当量)、ＫＯＡｃ(３.０当量)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.２当量)を添加し、溶液を密閉ボンベ中、８０℃で撹拌した。反応をセライトパッドで濾過し、濾液に酢酸エチルを添加し、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をカラム(酢酸エチル：ヘキサン＝１：１)で精製して、４,４,５,５−テトラメチル−２−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イル)−１,３,２−ジオキサボロラン(９５％)を得た。ＬＣ／ＭＳ(ｍ／ｚ)：ＭＨ＋＝２６７.１、Ｒｔ＝０.９５。
【０１３１】
３−ニトロ−４−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イル)ピリジンの合成
【化３１】
0005412519.tif 000033
ＤＭＥ(０.２Ｍ)および２Ｍ  水性炭酸ナトリウム(１.７当量)の溶液に窒素を２０分間通気した。４−クロロ−３−ニトロピリジン(１.６当量)、４,４,５,５−テトラメチル−２−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イル)−１,３,２−ジオキサボロラン(１.０当量)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を添加し、密閉ボンベ中、１１０℃で撹拌した。反応をその温度で３.５時間撹拌した。反応を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をカラム(酢酸エチル：ヘキサン＝１：１と１０％メタノール)で精製して、３−ニトロ−４−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イル)ピリジン(８３％)を得た。LC/MS(m/z):MH+=263.2, Rt=0.71。
【０１３２】
４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノンの合成
【化３２】
0005412519.tif 000034
３−ニトロ−４−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イル)ピリジン(１.０当量)のＣＨ２Ｃｌ２(０.２Ｍ)中２０％ＴＦＡ中の混合物を室温で一夜撹拌した。溶媒を減圧下除去した。残留物を酢酸エチル(２００mL)で溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３(３０mL)、および飽和ＮａＣｌ(３０mL)で洗浄した。有機物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノン(８５％)を得た。粗生成物をさらに精製せずに次工程に使用した。LC/MS(m/z):MH+=218.9, Rt=0.60
【０１３３】
４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノールの合成
【化３３】
0005412519.tif 000035
４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノン(１.０当量)のメタノール(０.２Ｍ)溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(１.８当量)を０℃で添加した。反応混合物を０℃で２時間撹拌した。メタノールを減圧下除去した。残留物を酢酸エチル(２００mL)で溶解し、飽和ＮａＣｌ(３０mL)で洗浄した。有機物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノール(８５％)を得た。粗生成物をさらに精製せずに次工程に使用した。LC/MS(m/z):MH+=221.0, Rt=0.55
【０１３４】
４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エニルメタンスルホネートの合成
【化３４】
0005412519.tif 000036
４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノール(１.０当量)およびＤＩＰＥＡ(２.５当量)のＣＨ２Ｃｌ２(０.１５Ｍ)溶液に、メタンスルホニルクロライド(１.８当量)を０℃で添加した。反応混合物を０℃で１時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し(２００mL)、および飽和ＮａＣｌ(３０mL)で洗浄した。有機物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エニルメタンスルホネート(９３％)を得た。残留物をさらに精製せずに次工程に使用した。LC/MS(m/z):MH+=299.0, Rt=0.70
【０１３５】
４−(シクロヘキサ−１,３−ジエニル)−３−ニトロピリジンの合成
【化３５】
0005412519.tif 000037
４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エニルメタンスルホネート(１.０当量)のテトラヒドロフラン(０.１Ｍ)溶液に、ＤＢＵ(１.８当量)を室温で添加した。反応混合物をｒｔで一夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルし(２００mL)で希釈、飽和ＮａＣｌ(３０mL)で洗浄した。有機物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をカラム(５％メタノールの１：１酢酸エチルおよびヘキサン溶液)で精製して、４−(シクロヘキサ−１,３−ジエニル)−３−ニトロピリジンを得た。LC/MS(m/z):MH+=203.2, Rt=0.85。
【０１３６】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル６−ヒドロキシ−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニルカルバメートの合成
【化３６】
0005412519.tif 000038
(＋／−)−２−アジド−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノール(１.０当量)のピリジンおよびＮＨ４ＯＨ(８：１、０.２３Ｍ)中の溶液に、トリメチルホスフィン(３.０当量)を室温で添加した。混合物を室温で３時間撹拌した。溶媒を除去した。残留物にエタノールを添加した。エタノールを真空で除去して、完全なアンモニアの除去を確実にした。残留物を１,４−ジオキサンおよび飽和水性重炭酸ナトリウムに溶解し、Ｂｏｃ２Ｏ(１.０当量)のＴＨＦ溶液を混合物に添加した。得られた混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＣｌで洗浄した。有機物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をカラム(５％メタノールの１：１酢酸エチルおよびヘキサン溶液)で精製して、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル６−ヒドロキシ−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニルカルバメート(８２％)を得た。ＬＣ／ＭＳ(ｍ／ｚ)：ＭＨ＋＝３３６.０、Ｒｔ＝０.７１
【０１３７】
(＋／−)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エニルメタンスルホネートの合成
【化３７】
0005412519.tif 000039
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル６−ヒドロキシ−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニルカルバメート(１.０当量)およびトリエチルアミン(１.５当量)のＣＨ２Ｃｌ２(０.２Ｍ)溶液に、メタンスルホニルクロライド(１.２当量)を０℃で添加した。混合物を２時間、その温度で撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＣｌで洗浄した。有機物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、(＋／−)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エニルメタンスルホネート(８５％)を得て、それをさらに精製せずに次工程に使用した。LC/MS(m/z):MH+=414.0, Rt=0.82
【０１３８】
(＋／−)−５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−３,３ａ,７,７ａ−テトラヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−２(６Ｈ)−オンの合成
【化３８】
0005412519.tif 000040
(＋／−)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エニルメタンスルホネート(１.０当量)のピリジン(０.２１Ｍ)中の混合物を１１０℃で１０分間、マイクロ波中で撹拌した。ピリジンを減圧下除去した。残留物を酢酸エチルに溶解し、飽和ＮａＣｌで洗浄した。有機物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、(＋／−)−５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−３,３ａ,７,７ａ−テトラヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−２(６Ｈ)−オン(８５％)を得て、それをさらに精製せずに次工程に使用した。LC/MS(m/z):MH+=262.1, Rt=0.49
【０１３９】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソ−３ａ,６,７,７ａ−テトラヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化３９】
0005412519.tif 000041
(＋／−)−５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−３,３ａ,７,７ａ−テトラヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−２(６Ｈ)−オン(１.０当量)、ＴＥＡ(１.８当量)、および触媒量のＤＭＡＰのＣＨ２Ｃｌ２(０.１９Ｍ)溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート(１.２当量)を室温で添加した。反応混合物を１時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル(１００mL)で希釈し、飽和ＮａＣｌ(３０mL)で洗浄した。有機物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をカラム(５％メタノールの１：１酢酸エチルおよびヘキサン溶液)で精製して、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソ−３ａ,６,７,７ａ−テトラヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレート(９８％)を得た。LC/MS(m/z):MH+=306.0, Rt=0.75
【０１４０】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化４０】
0005412519.tif 000042
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソ−３ａ,６,７,７ａ−テトラヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレート(１.０当量)のメタノールおよび酢酸エチル(１：１、０.１Ｍ)中の溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ(０.１当量)を添加した。得られた混合物をＨ２雰囲気下、６時間撹拌した。固体を濾過により除去した。濾液を減圧下濃縮して、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレート(８７％)を得て、それをさらに精製せずに次工程に使用した。LC/MS(m/z):MH+=334.1, Rt=0.51。
【０１４１】
５−メチル−３−オキソシクロヘキサ−１−エニルトリフルオロメタンスルホネートの合成
【化４１】
0005412519.tif 000043
５−メチルシクロヘキサン−１,３−ジオン(１.０当量)のＤＣＭ(０.５Ｍ)溶液に、Ｎａ２ＣＯ３(１.１当量)を添加し、０℃に冷却した。Ｔｆ２Ｏ(１.０当量)のＤＣＭ(５.０Ｍ)溶液を、１時間にわたり、０℃で窒素雰囲気下に滴下した。添加後、反応を１時間、室温で撹拌した(暗赤色溶液)。溶液を濾過し、濾液をｐＨ＝７になるまで激しく撹拌しながら飽和ＮａＨＣＯ３を注意深く添加することによりクエンチした。溶液を分液漏斗に移し、層を分離した。有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、高真空下で１５分間乾燥させて、５−メチル−３−オキソシクロヘキサ−１−エニルトリフルオロメタンスルホネートを明黄色油状物として７８％収率で得た。トリフラートは貯蔵により分解し、次反応に直ぐに使用しなければならない。LC/MS=259.1/300.1 (M+HおよびM+CH3CN)；Rt = 0.86分, LC = 3.84分. 1H-NMR (400MHz, CDCl3) δ ppm:6.05 (s, 1H), 2.70 (dd, J=17.2, 4.3, 1H), 2.53 (dd, J=16.6, 3.7, 1H), 2.48-2.31 (m, 2H), 2.16 (dd, J=16.4, 11.7, 1H), 1.16 (d, J=5.9, 3H)。
【０１４２】
５−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)シクロヘキサ−２−エノンの合成
【化４２】
0005412519.tif 000044
５−メチル−３−オキソシクロヘキサ−１−エニルトリフルオロメタンスルホネート(１.０当量)の脱気ジオキサン(０.７Ｍ)溶液に、ビス(ピナコラート)ジボロン(２.０当量)、ＫＯＡｃ(３.０当量)、およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０３当量)を添加した。反応を８０℃で１０時間加熱し(最初の急速な加熱は、溶液上部へのオレンジ色泡状物の発熱形成をもたらすため、加熱浴を泡状物が無くなるまで除き、この時点で８０℃に再加熱することはよいように思える)、室温に冷却し、粗い焼結ガラス漏斗を通して濾過した。ケーキをさらにジオキサで洗浄し、濾液溶液をさらに精製せずに次工程に使用した。LC/MS = 155.1 (ボロン酸のM+H);Rt = 0.41分, LC = 1.37分。
【０１４３】
５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノンの合成
【化４３】
0005412519.tif 000045
５−メチル−３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)シクロヘキサ−２−エノン(１.０当量)の脱気ジオキサン(０.５Ｍ)および２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(２当量)中の溶液に４−クロロ−３−ニトロピリジン(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を添加した。反応を還流冷却器に入れ、油浴で１１０℃で１時間加熱した。室温に冷却し、セライトのパッドを通して濾過し、パッドを酢酸エチルで洗浄し、濾液を真空で濃縮した。残留物をさらに８０℃でロータリーエバポレーター上に１時間ポンプ輸送し、ボロネート副産物(Ｍ＋Ｈ＝１０１)を昇華により除去した。残留物を塩水および酢酸エチルに分配し、層を分離し、水性相をさらに酢酸エチルで抽出し(４×)、有機物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質をＤＣＭで充填し、２−５０％酢酸エチルおよびヘキサンで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製した。純粋フラクションを真空で濃縮して、オレンジ色油状物を得た。油状物を種晶と共に高真空下(〜５００mtorr)に置き、オレンジ色固体を得た。固体をさらにヘキサンでの摩砕により精製して、５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノン(４８％２工程)を得た。LC/MS = 233.2 (M+H);Rt = 0.69分, LC = 2.70分. 1H-NMR (400MHz, CdCl3) δ ppm:9.31 (s, 1H), 8.88 (d, J=5.1, 1H), 7.30 (d, J=5.1, 1H), 6.00 (d, J=2.4, 1H), 2.62 (dd, J=16.4, 3.5, 1H), 2.53-2.34 (m, 3H), 2.23 (dd, J=16.1, 11.7, 1H), 1.16 (d, J=6.3, 3H)。
【０１４４】
ｃｉｓ−(＋／−)−５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノールの合成
【化４４】
0005412519.tif 000046
５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノン(１.０当量)のＥｔＯＨ(０.３Ｍ)溶液にＣｅＣｌ３−７Ｈ２Ｏ(１.２当量)を添加した。反応を０℃に冷却し、ＮａＢＨ４(１.２当量)を少しずつ添加した。１時間、０℃で撹拌し、水の添加によりクエンチし、濃縮してＥｔＯＨを除去し、ＥｔＯＡｃを添加し、有機物を抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、ｃｉｓ−(＋／−)−５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノール(９４％)を得た。LC/MS = 235.2 (M+H), LC = 2.62分。
【０１４５】
４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジンの合成
【化４５】
0005412519.tif 000047
５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノール(１.０当量)のＤＭＦ(０.５Ｍ)溶液に、イミダゾール(４.０当量)およびＴＢＤＭＳＣｌ(２.５当量)を添加した。１８時間撹拌後溶液をＥｔＯＡｃおよびＨ２Ｏに分配し、分離した。さらにＨ２Ｏ(３×)およびＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒除去後、４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジン(８５％)を得た。LC/MS = 349.2 (M+H), LC = 5.99分。
【０１４６】
４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)ピリジン−３−アミンの合成
【化４６】
0005412519.tif 000048
不均質な４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジン(１.０当量)および鉄(６.０当量)の酢酸輸液を、０.４Ｍ濃度で、２時間激しく撹拌した。混合物をセライトパッドを通し、ＭｅＯＨで溶出した。揮発物を真空で除去後、残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、Ｎａ２ＣＯ３(飽和)、ＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、揮発物を真空で除去して、４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)ピリジン−３−アミン(７８％)を得た。LCMS(m/z):319.3 (MH+);LC Rt = 3.77分。
【０１４７】
４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−アミンの合成
【化４７】
0005412519.tif 000049
４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジン(１.０当量)のメタノール溶液に、０.１Ｍの濃度で、１０％パラジウム炭素(０.１当量)を添加した。得られた不均質溶液を水素雰囲気下に置き、１５時間撹拌した。この時点で混合物をセライトのパッドを通して濾過し、メタノールで溶出した。揮発物を真空で除去して、４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−アミン(９０％)を得た。LCMS(m/z):321.3 (MH+);LC Rt = 3.85分。
【０１４８】
ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル４−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イルカルバメートの合成
【化４８】
0005412519.tif 000050
ｃｉｓ−(＋／−)−４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−アミンのジクロロメタン溶液に、０.５Ｍの濃度で、ベンジル２,５−ジオキソピロリジン−１−イルカーボネート(１.１当量)およびＤＭＡＰ(０.０５当量)を添加した。１６時間、ｒｔで撹拌後、さらにベンジル２,５−ジオキソピロリジン−１−イルカーボネート(０.５５当量)およびＤＭＡＰ(０.０３当量)を添加した。さらに２４時間、ｒｔで撹拌後、さらにベンジル２,５−ジオキソピロリジン−１−イルカーボネート(０.１当量)およびＤＭＡＰ(０.０３当量)を添加した。さらに１８時間撹拌後溶液をＥｔＯＡｃおよびＮａ２ＣＯ３(飽和)に分配し、分離した。さらにＮａ２ＣＯ３(飽和)(２×)およびＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒除去後、ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル４−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イルカルバメートを得た。粗物質をそのまま使用した。LC/MS = 455.3 (M+H), LC = 4.39分。
【０１４９】
ｃｉｓ−(＋／−)ベンジル４−(３−ヒドロキシ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イルカルバメートの合成
【化４９】
0005412519.tif 000051
ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル４−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イルカルバメートを、１：２：１  ６Ｎ  ＨＣｌ／ＴＨＦ／ＭｅＯＨ中、０.１Ｍの濃度でｒｔで６時間撹拌した。６Ｎ  ＮａＯＨの添加によりｐＨ＝７に調節し、揮発物を真空で除去した。水性層をＥｔＯＡｃで抽出し、有機物をＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、揮発物を真空で除去後、ｃｉｓ−(＋／−)ベンジル４−(３−ヒドロキシ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イルカルバメートを得た。粗物質をそのまま使用した。LC/MS = 341.2 (M+H), LC = 2.38分。
【０１５０】
ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル４−(３−メチル−５−オキソシクロヘキシル)ピリジン−３−イルカルバメートの合成
【化５０】
0005412519.tif 000052
０℃のｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル４−(３−ヒドロキシ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イルカルバメートの湿ＣＨ２Ｃｌ２溶液に、０.１６Ｍの濃度で、Dess-Martinペルヨージナン(１.５当量)を添加し、溶液を１８時間撹拌し、その間ｒｔに温めた。溶液をＥｔＯＡｃおよび１：１  １０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３／ＮａＨＣＯ３(飽和)に分配し、分離した。さらに１：１  １０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３／ＮａＨＣＯ３(飽和)(２×)およびＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、溶媒除去し、シリカゲルクロマトグラフィー(７５−１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン)で精製して、ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル−４−(３−メチル−５−オキソシクロヘキシル)ピリジン−３−イルカルバメートを白色固体として得た(５３％、５工程)。LC/MS = 339.2 (M+H)。
【０１５１】
ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル４−(−３−(ベンジルアミノ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イルカルバメートの合成
【化５１】
0005412519.tif 000053
ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル−４−(３−メチル−５−オキソシクロヘキシル)ピリジン−３−イルカルバメート(１.０当量)およびベンジルアミン(３.０当量)のＭｅＯＨ溶液を、０.２５Ｍの濃度で、ｒｔで２時間撹拌した。−７８℃浴で冷却後、ＬｉＢＨ４(１.１当量、ＴＨＦ中２.０Ｍ)を添加し、溶液を１６時間にわたり撹拌しながらｒｔに温めた。溶液をＥｔＯＡｃおよびＮａＨＣＯ３(飽和)に分離し、分離し、ＮａＨＣＯ３(飽和)およびＮａＣｌ(飽和)でさらに洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、揮発物を真空で除去後、ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル４−(−３−(ベンジルアミノ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イルカルバメートを異性体の４：１混合物として得て、全ｃｉｓが優勢であり、LC/MS = 430.3 (M+H), LC = 0.62分であった。
【０１５２】
ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル(−３−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−メチルシクロヘキシルカルバメートの合成
【化５２】
0005412519.tif 000054
ｃｉｓ−(＋／−)−ベンジル４−(−３−(ベンジルアミノ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イルカルバメート(１.０当量)のメタノール溶液に、０.０７Ｍの濃度で、２０％水酸化パラジウム炭素(０.２当量)を添加した。得られた不均質溶液を水素雰囲気下に置き、１４時間撹拌した。この時点で反応をＡｒで通気し、Ｂｏｃ２Ｏ(１.０当量)を添加し、溶液を８時間撹拌した。さらにＢｏｃ２Ｏ(１.０当量)を添加し、溶液をさらに１６時間撹拌した。この時点で混合物をセライトのパッドを通して濾過し、メタノールで溶出した。揮発物を真空で除去後、シリカゲルクロマトグラフィー(２.５−２.５ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２と０.１％ＤＩＥＡ)および１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンからの再結晶により精製して、ｃｉｓ−(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル(−３−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−メチルシクロヘキシルカルバメート(４９％)を得た。LCMS(m/z):306.3 (MH+), LC Rt = 2.59分。純粋鏡像体をキラルクロマトグラフィーにより得ることができた。
【０１５３】
(＋／−)−４−(５−メチルシクロヘキサ−１,３−ジエニル)−３−ニトロピリジンの合成
【化５３】
0005412519.tif 000055
(＋／−)−５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノール(１.０当量)のジオキサン(０.１Ｍ)溶液に、ｐ−ＴＳＡ(１.０当量)を添加し、反応を１００℃で３時間撹拌した。溶液を室温に冷却し、中性アルミナのパッドを通し、ＥｔＯＡｃで溶出して、(＋／−)−４−(５−メチルシクロヘキサ−１,３−ジエニル)−３−ニトロピリジンを黄色油状物として６８％収率で得た。LC/MS = 217.1 (M+H), LC = 3.908分。
【０１５４】
(＋／−)−２−アジド−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノールの合成
【化５４】
0005412519.tif 000056
(＋／−)−４−(５−メチルシクロヘキサ−１,３−ジエニル)−３−ニトロピリジン(１.０当量)のＤＣＭ(０.１Ｍ)溶液に、０℃で、ｍ−ＣＰＢＡ(１.１当量)を添加し、反応を室温に温めた。３時間後、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３でクエンチし、ＤＣＭで抽出し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄色油状物を得た。粗物質をエタノールおよび水(３：１、０.１Ｍ)に溶解し、ナトリウムアジド(２.０当量)および塩化アンモニウム(２.０当量)を添加した。反応を４時間撹拌し、真空で濃縮した。粗物質に酢酸エチルおよび水を添加し、有機相を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質を酢酸エチルおよびヘキサン(１：１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、(＋／−)−２−アジド−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノールを油状物として４９％収率で得た。LC/MS = 276.1 (M+H), Rt = 0.71分。
【０１５５】
ｔｅｒｔ−ブチル(＋／−)−６−ヒドロキシ−５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニルカルバメートの合成
【化５５】
0005412519.tif 000057
(＋／−)−２−アジド−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノール(１.０当量)のピリジンおよび水酸化アンモニウム(８：１、０.０８Ｍ)中の溶液に、トリメチルホスフィン(３.０当量)を添加し、褐色溶液を室温で２時間撹拌した。エタノールを混合物に添加し、溶液を真空で濃縮した(２×)。粗混合物をジオキサンおよび飽和ＮａＨＣＯ３(１：１、０.０８Ｍ)に溶解し、Ｂｏｃ２Ｏ(１.０当量)を添加した。溶液を室温で２時間撹拌し、酢酸エチルおよび水に分配した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。粗生成物を酢酸エチルおよびヘキサン(１：１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、ｔｅｒｔ−ブチル(＋／−)−６−ヒドロキシ−５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニルカルバメートを６９％収率で得た。LC/MS = 350.1 (M+H), Rt = 0.76分。
【０１５６】
(＋／−)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エニルメタンスルホネートの合成
【化５６】
0005412519.tif 000058
ｔｅｒｔ−ブチル(＋／−)−６−ヒドロキシ−５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニルカルバメート(１.０当量)のＤＣＭ(０.０９Ｍ)溶液に、トリエチルアミン(１.５当量)を添加した。反応混合物を０℃に冷却し、ＭｓＣｌ(１.２当量)を反応に添加し、３時間撹拌した。溶液に水を添加し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質を酢酸エチルおよびヘキサン(１：１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、(＋／−)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エニルメタンスルホネートを白色泡状物として６５％収率で得た。LC/MS = 428.2 (M+H), Rt = 0.88分。
【０１５７】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル７−メチル−５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソ−３ａ,６,７,７ａ−テトラヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化５７】
0005412519.tif 000059
(＋／−)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エニルメタンスルホネート(１.０当量)のピリジン(０.２Ｍ)溶液を、マイクロ波容器中、１１０℃で１０分間加熱した。オレンジ色溶液を濃縮乾固し、酢酸エチルおよび水に分配することにより後処理した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質をＤＣＭ(０.２Ｍ)に溶解し、トリエチルアミン(１.８当量)、Ｂｏｃ２Ｏ(１.２当量)を反応に添加した。室温で４０分間撹拌後、反応を真空で濃縮し、酢酸エチルおよびヘキサン(１：１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル７−メチル−５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソ−３ａ,６,７,７ａ−テトラヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートを白色泡状物として６６％収率で得た。LC/MS = 376.0 (M+H), Rt = 0.87分。
【０１５８】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−アミノピリジン−４−イル)−７−メチル−２−オキソヘキサヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化５８】
0005412519.tif 000060
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル７−メチル−５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソ−３ａ,６,７,７ａ−テトラヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレート(１.０当量)のＭｅＯＨおよび酢酸エチル(１：１、０.０７Ｍ)中の溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ(０.１当量)を添加し、反応を水素雰囲気下、室温で撹拌した。反応完了後、溶液をセライトのパッドを通して濾過し、ＭｅＯＨおよび酢酸エチルで洗浄し、濾液を真空下で濃縮乾固して、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−アミノピリジン−４−イル)−７−メチル−２−オキソヘキサヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートをジアステレオマー混合物として＞９９％収率で得た。LC/MS = 348.2 (M+H), Rt = 0.50分。
【０１５９】
(＋／−)−６−ブロモ−５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノールの合成
【化５９】
0005412519.tif 000061
４−(５−メチルシクロヘキサ−１,３−ジエニル)−３−ニトロピリジン(１.０当量)のＴＨＦおよび水(１：１、０.１３Ｍ)の溶液に、ＮＢＳ(１.５当量)を添加し、反応を室温で３０分間撹拌した。完了後、酢酸エチルおよび水を反応に添加し、有機相を塩水、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質を酢酸エチルおよびヘキサン(１：１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、(＋／−)−６−ブロモ−５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノールを黄色油状物として８０％収率で得た。LC/MS = 315.0/313.0 (M+H), LC = 2.966分。
【０１６０】
(＋／−)−２−アジド−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノールの合成
【化６０】
0005412519.tif 000062
(＋／−)−６−ブロモ−５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノール(１.０当量)のＴＨＦ(０.１Ｍ)溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド(１.５当量)を添加した。反応はほとんど即座にオレンジ色から黒色に変わった。ＴＬＣにより、生成物の形成は３０分後に明確である。飽和塩化アンモニウムおよび酢酸エチルの添加によりクエンチした。有機相を塩水、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物をエタノールおよび水(３：１、０.１Ｍ)に溶解し、塩化アンモニウム(２.０当量)およびナトリウムアジド(２.０当量)を添加した。暗オレンジ色反応を室温で一夜撹拌した。生成物への変換は、ＬＣ／ＭＳで示されるとおり明確である。反応を濃縮してエタノールを除去し、酢酸エチルおよび水を添加し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質を酢酸エチルおよびヘキサン(１：１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、(＋／−)−２−アジド−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノールを５５％収率で得た。LC/MS = 276.0 (M+H), LC = 2.803分。
【０１６１】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル６−ヒドロキシ−５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニルカルバメートの合成
【化６１】
0005412519.tif 000063
(＋／−)−２−アジド−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エノール(１.０当量)のピリジンおよび水酸化アンモニウム(８：１、０.０８Ｍ)中の溶液に、トリメチルホスフィン(３.０当量)を添加し、褐色溶液を室温で２時間撹拌した。完了後、ＥｔＯＨを添加し、溶液を真空で濃縮した。さらにエタノールを添加し、反応を再び濃縮した。ジオキサンおよび飽和ＮａＨＣＯ３(１：１、０.０８Ｍ)、Ｂｏｃ２Ｏ(１.０当量)を粗物質に添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌し、水および酢酸エチルを添加した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。粗生成物を酢酸エチルおよびヘキサン(１：１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル６−ヒドロキシ−５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニルカルバメート(５９％)を得た。LC/MS = 350.1 (M+H), Rt:0.76分。
【０１６２】
(＋／−)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エニルアセテートの合成
【化６２】
0005412519.tif 000064
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル６−ヒドロキシ−５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニルカルバメート(１.０当量)のピリジン(０.１Ｍ)溶液に、Ａｃ２Ｏ(２.０当量)を添加し、反応を室温で一夜撹拌した。完了後、反応を濃縮乾固し、酢酸エチルおよび水で後処理した。有機相を塩水、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、(＋／−)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エニルアセテートを９４％収率で得た。LC/MS = 392.2 (M+H), Rt = 0.94分。
【０１６３】
(＋／−)−４−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−６−メチルシクロヘキシルアセテートの合成
【化６３】
0005412519.tif 000065
脱気した(＋／−)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エニルアセテート(１.０当量)のＭｅＯＨおよびＥｔＯＡｃ(１：１、０.１Ｍ)中の溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ(０.１当量)を添加し、反応を室温で水素バルーン下、３日間撹拌した。完了後、溶液をセライトのパッドを通して濾過し、パッドを酢酸エチルで洗浄し、濾液を濃縮した。粗物質は約１０％の望まない異性体を含んだ。粗物質を酢酸エチル(〜２０％)およびヘキサンに溶解し、全て溶解するまで加熱した。溶液を室温で２日間静置した。沈殿を冷却して、(＋／−)−４−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−６−メチルシクロヘキシルアセテートを純粋生成物として５９％収率で得た。LC/MS = 364.3 (M+H), Rt = 0.63分。
【０１６４】
２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エニルメタンスルホネートの合成
【化６４】
0005412519.tif 000066
ｔｅｒｔ−ブチル６−ヒドロキシ−５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エニルカルバメート(１.０当量)のＤＣＭ(０.０９Ｍ)溶液に、トリエチルアミン(１.５当量)を添加し、反応を０℃に冷却した。ＭｓＣｌ(１.２当量)を反応に添加し、３時間撹拌した。さらに１.０当量のＭｓＣｌを反応に添加し、さらに２時間撹拌した。水の添加により反応を後処理し、有機相を塩水、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。粗生成物を酢酸エチルおよびヘキサン(１：１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エニルメタンスルホネートを白色泡状物として６５％収率で得た。LC/MS = 428.2 (M+H), LC:3.542分。
【０１６５】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル７−メチル−５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソ−３ａ,６,７,７ａ−テトラヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化６５】
0005412519.tif 000067
(＋／−)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エニルメタンスルホネート(１.０当量)のピリジン(０.２Ｍ)溶液を、マイクロ波中、１１０℃で１０分間加熱した。オレンジ色反応を真空下濃縮し、粗物質を酢酸エチルおよび水に溶解し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空で濃縮した。粗物質をＤＣＭ(０.２Ｍ)に溶解し、トリエチルアミン(１.８当量)、Ｂｏｃ２Ｏ(１.２当量)を添加した。反応を４０分間撹拌し、濃縮乾固した。粗物質をヘキサンおよび酢酸エチル(１：１)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル７−メチル−５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソ−３ａ,６,７,７ａ−テトラヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートを白色泡状物として６６％収率で得た。LC/MS = 376.0 (M+H), LC:3.424分。
【０１６６】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−アミノピリジン−４−イル)−７−メチル−２−オキソヘキサヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化６６】
0005412519.tif 000068
脱気した(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル７−メチル−５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソ−３ａ,６,７,７ａ−テトラヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレート(１.０当量)のＭｅＯＨおよびＥｔＯＡｃ(１：１、０.１Ｍ)中の溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ(０.１当量)を添加した。反応を水素バルーン下、一夜撹拌した。完了後、溶液をセライトのパッドを通して濾過し、パッドを酢酸エチルで洗浄した。濾液を真空で濃縮して、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−アミノピリジン−４−イル)−７−メチル−２−オキソヘキサヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートを、所望の生成物として黄色泡状物として９３％収率で得た。LC/MS = 348.1 (M+H), Rt = 055分。
【０１６７】
((＋／−)−(１Ｒ,２Ｒ,６Ｓ)−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エン−１,２−ジオールおよび(＋／−)−(１Ｒ,２Ｓ,６Ｓ)−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エン−１,２−ジオール)の合成
【化６７】
0005412519.tif 000069
(＋／−)−(１Ｓ,５Ｓ,６Ｓ)−６−ブロモ−５−メチル−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−２−エノール(１.０当量)のＴＨＦ(０.１Ｍ)溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド(１.５当量)を室温で添加した。反応混合物を１０分間撹拌した。反応混合物をＮＨ４Ｃｌ溶液でクエンチし、水および塩水で洗浄することにより、ＥｔＯＡｃで後処理した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾取し、真空で乾燥させた。粗生成物をさらに精製せずに次工程に使用した。Rf = 0.5 (50%EtOAc/ヘキサン). LCMS:MH+ 251.2(ジオールとして), Rt =0.49分。粗(＋／−)−４−((１Ｓ,５Ｓ)−５−メチル−７−オキサビシクロ[４.１.０]ヘプト−２−エン−３−イル)−３−ニトロピリジン(１.０当量)の２：１  ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ(０.１Ｍ)溶液に、酢酸(０.３当量)を室温で添加した。反応混合物を１６時間、室温で撹拌した。ＮａＨＣＯ３溶液でクエンチ後、反応混合物を濃縮して、ＣＨ３ＣＮの大部分を除去し、残留物をＥｔＯＡｃおよび水に分配した。合わせた有機層を水および塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。ジオール混合物((＋／−)−(１Ｒ,２Ｒ,６Ｓ)−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エン−１,２−ジオールおよび(＋／−)−(１Ｒ,２Ｓ,６Ｓ)−６−メチル−４−(３−ニトロピリジン−４−イル)シクロヘキサ−３−エン−１,２−ジオール)を３３.１％収率で白色固体として、フラッシュカラムクロマトグラフィーにより得た。Rf = 0.3 (100%EtOAc;ジオールはTLCで分離不可能であった). LCMS:MH+ 251.2, Rt =0.49分。
【０１６８】
(＋／−)−４−((３Ｓ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジンおよび(＋／−)−４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジンの合成
【化６８】
0005412519.tif 000070
ジオール混合物(１.０当量)のＤＭＦ(０.３Ｍ)溶液に、ＴＢＤＭＳＣｌ(７.０当量)およびイミダゾール(９当量)を室温で添加した。反応混合物を室温で一夜撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ３でクエンチ後、反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機層を水および塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。混合物を連続的自動化シリカカラムクロマトグラフィー(ＥｔＯＡｃおよびヘキサンで勾配溶出)および分取逆相ＨＰＬＣ(５５％−９５％アセトニトリルの水溶液、５％−９５％アセトニトリルの水溶液で流す)で精製して、(＋／−)−４−((３Ｓ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジン(２７.２％)および(＋／−)−４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジン(５０.２％)を得た。LCMS:MH+ 479.2, Rt =1.60および1.63分。
【０１６９】
４−((１Ｓ,３Ｓ,４Ｓ,５Ｒ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−アミンおよび４−((１Ｒ,３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−アミンの合成
【化６９】
0005412519.tif 000071
(＋／−)−４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジン(１.０当量)のエタノール／ＥｔＯＡｃ溶液に、０.１Ｍの濃度で、１０％パラジウム炭素(０.１当量)を添加した。得られた不均質溶液を水素雰囲気下に置き、１４時間撹拌した。この時点で混合物をセライトのパッドを通して濾過し、ＥｔＯＡｃで溶出した。揮発物を真空で除去し、粗物質を自動化シリカカラムクロマトグラフィー(Ｒｆ  ＝  ０.２、４０％ＥｔＯＡｃのヘプタン溶液)で精製して、純粋ラセミ生成物を得た。LCMS:MH+ 451.3, Rt =1.35分。ラセミ化合物をキラルクロマトグラフィー(ＩＣカラム、１mL／分、５％ＩＰＡのヘプタン溶液)で分割して、４−((１Ｓ,３Ｓ,４Ｓ,５Ｒ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−アミン(６.０１分)および４−((１Ｒ,３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−アミン(８.３４分)を得た。
【０１７０】
４−((１Ｒ,３Ｒ,４Ｓ,５Ｒ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−アミンおよび４−((１Ｓ,３Ｓ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−アミンの合成
【化７０】
0005412519.tif 000072
(＋／−)−４−((３Ｓ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジン(１.０当量)のエタノール溶液に、０.１Ｍの濃度で、１０％パラジウム炭素(０.１当量)を添加した。得られた不均質溶液を水素雰囲気下に置き、１４時間撹拌した。この時点で混合物をセライトのパッドを通して濾過し、エタノールで溶出した。揮発物を真空で除去し、粗物質を自動化シリカカラムクロマトグラフィー(Ｒｆ  ＝  ０.２、４０％ＥｔＯＡｃのヘプタン溶液)で精製して、純粋ラセミ生成物(５０.４％)を得た。LCMS:MH+ 451.3, Rt =1.35分。ラセミ化合物をキラルクロマトグラフィー(ＩＣカラム、１mL／分、５％ＩＰＡのヘプタン溶液)で分割して、４−((１Ｒ,３Ｒ,４Ｓ,５Ｒ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−アミン(６.９８分)および４−((１Ｓ,３Ｓ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−アミン(８.６７分)を得た。
【０１７１】
ナトリウム６−(メトキシカルボニル)−３−オキソ−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−１−エノラートの合成
【化７１】
0005412519.tif 000073
新たに製造したナトリウム(１.０当量)のｔ−ＢｕＯＨ(１Ｍ)溶液に、エチルアセトアセテート(１.０当量)を添加し、混合物を氷浴上でさらに１５分間撹拌した。エチル４,４,４−トリフルオロクロトネート(１.０当量)を滴下し、混合物を室温でさらに３０分間撹拌した。２時間還流後、混合物を冷却し、ヘキサンを添加した。沈殿を濾過し、さらに精製せずにナトリウム６−(メトキシカルボニル)−３−オキソ−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−１−エノラート(４６％)を得た。LC/MS(m/z):MH+ = 253.1, Rt = 0.70分。
【０１７２】
５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサン−１,３−ジオンの合成
【化７２】
0005412519.tif 000074
ナトリウム６−(メトキシカルボニル)−３−オキソ−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−１−エノラート(１.０当量)を１Ｍ  ＮａＯＨ(１.０当量)に溶解し、混合物を１時間還流した。室温に冷却後、混合物を５Ｍ  硫酸で酸性化した。混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。水で洗浄後、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、溶媒を減圧下除去して、５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサン−１,３−ジオンを得て、それをさらに精製せずに次工程に使用した。(９８％)。LC/MS(m/z):MH+ =181.1, Rt = 0.55分。
【０１７３】
３−オキソ−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−１−エニルトリフルオロメタンスルホネートの合成
【化７３】
0005412519.tif 000075
５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサン−１,３−ジオン(１.０当量)のＤＣＭ(０.２３Ｍ)懸濁液に、ＴＥＡ(１.２当量)を添加して、透明溶液を得た。混合物を０℃に冷却した。Ｔｆ２Ｏ(１.０５当量)のＤＣＭ溶液を滴下した。反応混合物をその温度で２時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭで希釈し、水、水性ＮａＨＣＯ３、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、３−オキソ−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−１−エニルトリフルオロメタンスルホネートを得て、それを次工程に直接使用した。LC/MS(m/z):MH+ = 313.0, Rt = 1.02分。
【０１７４】
３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−２−エノンの合成
【化７４】
0005412519.tif 000076
全ての反応材３−オキソ−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−１−エニルトリフルオロメタンスルホネート(１.０当量)、ＮａＯＡｃ(３.０当量)、およびビス(ピナコラート)ジボロン(２.０当量)を丸底フラスコ内の１,４−ジオキサン(０.２３Ｍ)に添加し、１０分間、混合物にＮ２をバブリングして脱気した。ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ).ＣＨ２Ｃｌ２付加物(０.１当量)を添加し、反応をＮ２下、２時間還流冷却器を備えた油浴で、８０℃で加熱した。混合物を室温に冷却し、粗い焼結ガラス漏斗を通して濾過し、ケーキを約１０mL  １,４−ジオキサンで濯いで、３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−２−エノンの１,４−ジオキサン溶液を得て、それを次工程に直接使用した。LC/MS(m/z):MH+ = 209.1 (ボロン酸), Rt=0.60分。
【０１７５】
３−(３−ニトロピリジン−４−イル)−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−２−エノンの合成
【化７５】
0005412519.tif 000077
丸底フラスコでボロン酸エステル３−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−２−エノン(１.０当量)を１,４−ジオキサン(０.１４Ｍ)に溶解し、溶液にＮ２を３０分間バブリングして脱気した。４−クロロ−３−ニトロピリジン(１.３当量)および水性Ｎａ２ＣＯ３(２Ｍ、２.０当量)を添加し、Ｎ２を１０分間バブリングし、ＰｄＣｌ２(ｄｐｐｆ).ＣＨ２Ｃｌ２付加物(０.１当量)を添加した。反応混合物を１００℃で２時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃを添加し、塩水。得られた混合物をセライトを通して濾過し、ケーキをＥｔＯＡｃで洗浄した。有機層を分離し、塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー(溶出、ＥｔＯＡｃ：ヘキサン＝１：１０〜２：１)で精製して、３−(３−ニトロピリジン−４−イル)−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−２−エノン(７３％、ジケトンから３工程で)を得た。LC/MS(m/z):MH+ = 287.1, Rt = 0.85分。
【０１７６】
ｃｉｓ−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−２−エノールの合成
【化７６】
0005412519.tif 000078
３−(３−ニトロピリジン−４−イル)−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−２−エノン(１.０当量)を塩化セリウム(III)７水和物(１.０当量)および無水エタノール(０.１７)と混合した。混合物を環境温度で全固体が溶解するまで撹拌した。混合物を氷浴で冷却し、ＮａＢＨ４(１.２当量)を少しずつ添加した。反応を氷浴上で１時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をカラム(１：１  酢酸エチルおよびヘキサン)で精製して、ｃｉｓ−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−２−エノール(６６％)を得た。LC/MS(m/z):MH+ = 289.2, Rt = 0.72分。
【０１７７】
ｃｉｓ−４−(３−アジド−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジンの合成
【化７７】
0005412519.tif 000079
ｃｉｓ−３−(３−ニトロピリジン−４−イル)−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−２−エノール(１.０当量)のＤＣＭ(０.１４Ｍ)溶液に、ＴＥＡ(２.５当量)、ＭｓＣｌ(１.８当量)を室温で添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を除去した。残留物をＤＭＦ(０.１９Ｍ)に溶解し、混合物にナトリウムアジド(１.２当量)を添加した。得られた混合物を室温で１時間撹拌した。さらに１.２当量のナトリウムアジドを添加した。混合物を室温で一夜撹拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、ヘプタン、飽和ＮａＣｌで洗浄した。有機物をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をカラム(１：１  酢酸エチルおよびヘキサン)で精製して、ｃｉｓ−４−(３−アジド−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジン(５８％)を得た。LC/MS(m/z):MH+ = 314.1, Rt=0.96分。
【０１７８】
ｔｅｒｔ−ブチル(１Ｒ,３Ｒ,５Ｓ)−３−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキシルカルバメートの合成
【化７８】
0005412519.tif 000080
ｃｉｓ−４−(３−アジド−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキサ−１−エニル)−３−ニトロピリジン(１.０当量)のエタノール(０.１３Ｍ)溶液をＮ２で２０分間バブリングした。反応混合物にＢｏｃ−無水物(１.５当量)およびＰｄ／Ｃ(０.２当量)を添加した。反応混合物を室温でＨ２雰囲気下、一夜撹拌した。固体をセライトでの濾過により除去し、ＥｔＯＨで濯いだ。残留物をカラム(５％メタノールの１：１酢酸エチルおよびヘキサン溶液)で精製して、ラセミｃｉｓ−３−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキシルカルバメート(５７％)を得た。LC/MS(m/z):MH+ = 360.2, Rt = 0.72分。鏡像体的に純粋なｔｅｒｔ−ブチル(１Ｒ,３Ｒ,５Ｓ)−３−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキシルカルバメートおよびＮ−(４−((１Ｓ,３Ｓ,５Ｒ)−３−アミノ−５−(トリフルオロメチル)シクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミドをキラルＨＰＬＣで分割した(分析についてのＲｔ＝それぞれ８.１４分および１０.５９分；ヘプタン：イソプロパノール＝９０：１０(ｖ：ｖ)、Chiralcel IC  １００×４.６mm、１mL／分。予備分離について、ヘプタン：イソプロパノール＝９０：１０(ｖ：ｖ)、Chiralcel IC  ２５０×２０mm、１５mL／分)。
【０１７９】
(Ｒ)−４−ベンジル−３−((２Ｒ,３Ｒ)−３−((Ｒ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−３−ヒドロキシ−２−メチルプロパノイル)オキサゾリジン−２−オンの合成
【化７９】
0005412519.tif 000081
(Ｒ)−４−ベンジル−３−((２Ｒ,３Ｒ)−３−((Ｒ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−３−ヒドロキシ−２−メチルプロパノイル)オキサゾリジン−２−オンを、(Ｒ)−４−ベンジル−３−プロピオニルオキサゾリジン−２−オンおよびＲ−グリセルアルデヒドアセトニドから出発して、鏡像体化合物について報告されている方法で製造した(Proc.Nat.Acad.Sciences, 101, 33, 2004, pages 12042-12047)。
【０１８０】
(Ｒ)−４−ベンジル−３−((２Ｒ,３Ｒ)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−３−((Ｒ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−メチルプロパノイル)オキサゾリジン−２−オンの合成
【化８０】
0005412519.tif 000082
(Ｒ)−４−ベンジル−３−((２Ｒ,３Ｒ)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−３−((Ｒ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−メチルプロパノイル)オキサゾリジン−２−オンを、(Ｒ)−４−ベンジル−３−((２Ｒ,３Ｒ)−３−((Ｒ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−３−ヒドロキシ−２−メチルプロパノイル)オキサゾリジン−２−オンから出発して、鏡像体化合物について報告されている方法で製造した(Proc.Nat.Acad.Sciences, 101, 33, 2004, pages 12042-12047)。
【０１８１】
(２Ｓ,３Ｒ)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−３−((Ｒ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−メチルプロパン−１−オールの合成
【化８１】
0005412519.tif 000083
(Ｒ)−４−ベンジル−３−((２Ｒ,３Ｒ)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−３−((Ｒ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−メチルプロパノイル)オキサゾリジン−２−オン(１.０当量)およびエタノール(３.０当量)のＴＨＦ(０.０９Ｍ)溶液に、ＬｉＢＨ４(１.０当量)を−４０℃で添加した。反応混合物をゆっくりｒｔに温め、その温度で１２時間撹拌した。溶液を−４０℃に再冷し、さらにＬｉＢＨ４(０.３当量)を添加した。ｒｔに再び温め、２時間撹拌後、溶液をジエチルエーテルで希釈し、１Ｎ  ＮａＯＨを添加した。得られた混合物を酢酸エチルで抽出し、有機層を分離し、ＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(１０−３０％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘプタン)で精製して、(２Ｓ,３Ｒ)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−３−((Ｒ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−メチルプロパン−１−オールを(７５％)で得た。LC/MS = 247.1 (M+H-ketal-H2O), Rt = 0.64分。
【０１８２】
((１Ｒ,２Ｓ)−３−アジド−１−((Ｒ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−メチルプロポキシ)(ｔｅｒｔ−ブチル)ジメチルシランの合成
【化８２】
0005412519.tif 000084
(２Ｓ,３Ｒ)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−３−((Ｒ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−メチルプロパン−１−オール(１.０当量)、ＤＩＡＤ(２.０当量)、およびＰＰｈ３(２.０当量)のＴＨＦ(０.１８Ｍ)溶液に、ＤＰＰＡ(１.０当量、ＴＨＦ中１Ｍ溶液)を添加した。反応混合物を室温で一夜撹拌した。揮発物を真空下で除去した後、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(２−３−５％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘプタン)で精製して、((１Ｒ,２Ｓ)−３−アジド−１−((Ｒ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−メチルプロポキシ)(ｔｅｒｔ−ブチル)ジメチルシラン(６２％)を得た。1H-NMR (400MHz, CDCl3): δ 4.04-4.10 (m, 1H), 3.94 (dd, J=8.0, 6.4, 1H), 3.72 (d, J=7.2, 1H), 3.53 (t, J=8.0, 1H), 3.36 (dd, J=12, 8.0, 1H), 3.19 (dd, J=12.0, 6.7, 1H), 1.52-1.60 (m, 1H), 1.41 (s, 3H), 1.34 (s, 3H), 0.92 (d, J=7.2, 3H), 0.90 (s, 9 H), 0.12 (s, 3H), 0.09 (s, 3H)。
【０１８３】
(２Ｒ,３Ｒ,４Ｓ)−５−アジド−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−４−メチルペンタン−１,２−ジオールの合成
【化８３】
0005412519.tif 000085
((１Ｒ,２Ｓ)−３−アジド−１−((Ｒ)−２,２−ジメチル−１,３−ジオキソラン−４−イル)−２−メチルプロポキシ)(ｔｅｒｔ−ブチル)ジメチルシラン(１.０当量)のＭｅＯＨ(０.１Ｍ)溶液に、ＰＰＴＳ(１.０当量)を添加し、混合物をｒｔで１４時間、５０℃で２時間および８０℃で１時間撹拌した。揮発物を真空下で除去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(１０−２５％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘプタン)で精製して、(２Ｒ,３Ｒ,４Ｓ)−５−アジド−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−４−メチルペンタン−１,２−ジオール(４０％)を得た。
【０１８４】
(２Ｒ,３Ｒ,４Ｓ)−５−アジド−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−２−ヒドロキシ−４−メチルペンチル４−メチルベンゼンスルホネートの合成
【化８４】
0005412519.tif 000086
ｔｅｒｔ−ブチル(２Ｒ,３Ｒ,４Ｓ)−５−アジド−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−ヒドロキシ−４−メチルペンタン−２−イルカルバメート(１.０当量)のピリジン(０.２Ｍ)溶液にｐＴｓＣｌ(１.３当量)を０℃で添加した。混合物をこの温度で１６時間維持した。揮発物を真空で除去し、残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(１０−１５−２０％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘプタン)で精製し、(２Ｒ,３Ｒ,４Ｓ)−５−アジド−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−２−ヒドロキシ−４−メチルペンチル４−メチルベンゼンスルホネートを得た。
【０１８５】
(２Ｒ,３Ｒ,４Ｓ)−５−アジド−２,３−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−４−メチルペンチル４−メチルベンゼンスルホネートの合成
【化８５】
0005412519.tif 000087
(２Ｒ,３Ｒ,４Ｓ)−５−アジド−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−２−ヒドロキシ−４−メチルペンチル４−メチルベンゼンスルホネート(１.０当量)および２,６−ルチジン(３.４当量)の溶液に、ＴＢＤＭＳＯＴｆ(１.７当量)を０℃で添加した。溶液を７時間撹拌し、その間にｒｔまで温めた。溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、１０％ＣｕＳＯ４、Ｈ２Ｏ、Ｎａ２ＣＯ３(飽和)、ＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物シリカゲルカラムクロマトグラフィー(２.５−５−１０−２０％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘプタン)で精製して、(２Ｒ,３Ｒ,４Ｓ)−５−アジド−２,３−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−４−メチルペンチル４−メチルベンゼンスルホネート(７５％)を得た。
【０１８６】
４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルピペリジン−１−イル)−３−ニトロピリジンの合成
【化８６】
0005412519.tif 000088
(２Ｒ,３Ｒ,４Ｓ)−５−アジド−２,３−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−４−メチルペンチル４−メチルベンゼンスルホネートのＥｔＯＨ(０.０５Ｍ)溶液をアルゴンで脱気した。ＤＩＥＡ(１.５当量)、１０％Ｐｄ／Ｃ(０.１当量)を添加した。反応混合物を水素バルーン下に３時間撹拌した。溶液をアルゴンで脱気および通気し、その時点で４−クロロ−３−ニトロピリジン(１.５当量)およびさらにＤＩＥＡ(１.５当量)を添加した。ｒｔで１５時間撹拌後溶液を濾過してＰｄ／Ｃを除去し、揮発物を真空で除去した。残留物を酢酸エチルで希釈し、Ｎａ２ＣＯ３(飽和)、ＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(１０−１５％ＥｔＯＡｃ／ｎ−ヘプタン)で精製して、４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルピペリジン−１−イル)−３−ニトロピリジン(４０％)を得た。LC/MS = 482.4 (M+H), Rt = 1.26分。
【０１８７】
４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンの合成
【化８７】
0005412519.tif 000089
４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルピペリジン−１−イル)−３−ニトロピリジン(１.０当量)のエタノール溶液に、０.０５Ｍの濃度で、１０％パラジウム炭素(０.１当量)を添加した。得られた不均質溶液を水素雰囲気下に置き、１４時間撹拌した。この時点で混合物をセライトのパッドを通して濾過し、エタノールで溶出した。揮発物を真空で除去して、４−((３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルピペリジン−１−イル)ピリジン−３−アミンを得た。LC/MS = 452.4 (M+H), Rt = 1.31分。
【０１８８】
(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル４−((１Ｒ,２Ｒ)−３−((Ｒ)−４−ベンジル−２−オキソオキサゾリジン−３−イル)−１−ヒドロキシ−２−メチル−３−オキソプロピル)−２,２−ジメチルオキサゾリジン−３−カルボキシレートの合成
【化８８】
0005412519.tif 000090
(Ｒ)−４−ベンジル−３−プロピオニルオキサゾリジン−２−オン(１.０当量)のＤＣＭ(０.１３Ｍ)溶液に、ＴｉＣｌ４(１.０当量)を−４０℃で添加した。混合物を−４０℃で１０分間撹拌し(黄色懸濁液)、ＤＩＰＥＡ(２.５当量)を添加し(暗赤色溶液)、０℃で２０分間撹拌した。(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル４−ホルミル−２,２−ジメチルオキサゾリジン−３−カルボキシレート(１.０当量)のＤＣＭ(０.５Ｍ)溶液を滴下し、得られた混合物を１.５時間撹拌した。反応を水性塩化アンモニウムの添加によりクエンチし、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機相を分離し、塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物を酢酸エチルおよびヘキサン(１：４)で溶出するカラムクロマトグラフィーで精製して、(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル４−((１Ｒ,２Ｒ)−３−((Ｒ)−４−ベンジル−２−オキソオキサゾリジン−３−イル)−１−ヒドロキシ−２−メチル−３−オキソプロピル)−２,２−ジメチルオキサゾリジン−３−カルボキシレートを主生成物(５：２)として５８％収率で得た。LC/MS = 363.3 (M+H-Boc), Rt = 1.09分。
【０１８９】
(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル４−((１Ｒ,２Ｒ)−３−((Ｒ)−４−ベンジル−２−オキソオキサゾリジン−３−イル)−１−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−２−メチル−３−オキソプロピル)−２,２−ジメチルオキサゾリジン−３−カルボキシレートの合成
【化８９】
0005412519.tif 000091
(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル４−((１Ｒ,２Ｒ)−３−((Ｒ)−４−ベンジル−２−オキソオキサゾリジン−３−イル)−１−ヒドロキシ−２−メチル−３−オキソプロピル)−２,２−ジメチルオキサゾリジン−３−カルボキシレート(１.０当量)およびルチジン(１.８当量)のＤＣＭ(０.１Ｍ)溶液に、ＴＢＳＯＴｆ(１.４当量)を−４０℃で添加した。反応混合物を−４０℃で２時間撹拌した。溶液を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３、飽和ＮａＣｌで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物を酢酸エチルおよびヘキサン(１：４)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル４−((１Ｒ,２Ｒ)−３−((Ｒ)−４−ベンジル−２−オキソオキサゾリジン−３−イル)−１−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−２−メチル−３−オキソプロピル)−２,２−ジメチルオキサゾリジン−３−カルボキシレートを主生成物(５：２)として８３％収率で得た。LC/MS = 577.3 (M+H), Rt = 1.33分(Frac 65%-95%方法)。
【０１９０】
(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル４−((１Ｒ,２Ｓ)−１−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−３−ヒドロキシ−２−メチルプロピル)−２,２−ジメチルオキサゾリジン−３−カルボキシレートの合成
【化９０】
0005412519.tif 000092
(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル４−((１Ｒ,２Ｒ)−３−((Ｒ)−４−ベンジル−２−オキソオキサゾリジン−３−イル)−１−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−２−メチル−３−オキソプロピル)−２,２−ジメチルオキサゾリジン−３−カルボキシレート(１.０当量)およびエタノール(３.０当量)のＴＨＦ(０.０９Ｍ)溶液に、ＬｉＢＨ４(３.０当量)を−３０℃で添加した。反応混合物を０℃に温め、その温度で３時間撹拌した。溶液をジエチルエーテルで希釈し、１Ｎ  ＮａＯＨを添加した。得られた混合物を酢酸エチルで抽出し、有機層を分離し、飽和ＮａＣｌで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物を酢酸エチルおよびヘキサン(１：４)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル４−((１Ｒ,２Ｓ)−１−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−３−ヒドロキシ−２−メチルプロピル)−２,２−ジメチルオキサゾリジン−３−カルボキシレートを主生成物(５：２比)として７１％収率で得た。LC/MS = 304.3 (M+H-Boc), Rt = 0.95分(Frac 65%-95%方法)。
【０１９１】
(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル４−((１Ｒ,２Ｓ)−３−アジド−１−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−２−メチルプロピル)−２,２−ジメチルオキサゾリジン−３−カルボキシレートの合成
【化９１】
0005412519.tif 000093
(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル４−((１Ｒ,２Ｓ)−１−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−３−ヒドロキシ−２−メチルプロピル)−２,２−ジメチルオキサゾリジン−３−カルボキシレート(１.０当量)、ＤＩＡＤ(２.０当量)、およびＰＰｈ３(２.０当量)のＴＨＦ(０.１８Ｍ)溶液に、ＤＰＰＡ(２.０当量、ＴＨＦ中１Ｍ溶液)を添加した。反応混合物を室温で一夜撹拌した。揮発物を真空下で除去した後、残留物を酢酸エチルおよびヘキサン(１：６)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル４−((１Ｒ,２Ｓ)−３−アジド−１−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−２−メチルプロピル)−２,２−ジメチルオキサゾリジン−３−カルボキシレートを主生成物(５：２)として８６％収率で得た。LC/MS = 329.3 (M+H-Boc), Rt = 1.40分(Frac 65%-95%方法)。
【０１９２】
ｔｅｒｔ−ブチル(２Ｒ,３Ｒ,４Ｓ)−５−アジド−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−ヒドロキシ−４−メチルペンタン−２−イルカルバメートの合成
【化９２】
0005412519.tif 000094
(Ｒ)−ｔｅｒｔ−ブチル４−((１Ｒ,２Ｓ)−３−アジド−１−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−２−メチルプロピル)−２,２−ジメチルオキサゾリジン−３−カルボキシレート(１.０当量)のＥｔＯＨ(０.１Ｍ)溶液に、ＰＰＴＳ(１.３当量)を添加し、混合物を２日間還流した。揮発物を真空下で除去し、残留物をＤＣＭ(０.１Ｍ)に溶解し、ＤＩＥＡ(１.５当量)およびＢｏｃ２Ｏ(１.０当量)を反応に添加し混合物。溶液を３時間撹拌した。溶媒を減圧下除去し、残留物を酢酸エチルで希釈し、水で洗浄し、水性ＮａＨＳＯ４、水性ＮａＨＣＯ３、飽和ＮａＣｌ、有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物を酢酸エチルおよびヘキサン(１：３)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、ｔｅｒｔ−ブチル(２Ｒ,３Ｒ,４Ｓ)−５−アジド−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−ヒドロキシ−４−メチルペンタン−２−イルカルバメートを主異性体(５：２)として７０％収率で得た。LC/MS = 289.3 (M+H-Boc), Rt = 0.76分(Frac 65%-95%方法)。
【０１９３】
(２Ｒ,３Ｒ,４Ｓ)−５−アジド−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−４−メチルペンチルメタンスルホネートの合成
【化９３】
0005412519.tif 000095
ｔｅｒｔ−ブチル(２Ｒ,３Ｒ,４Ｓ)−５−アジド−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−１−ヒドロキシ−４−メチルペンタン−２−イルカルバメート(１.０当量)のピリジン(０.２Ｍ)溶液に、ＭｓＣｌ(１.３当量)、ＤＭＡＰ(触媒量)を０℃で添加した。混合物をその温度で１時間撹拌した。溶液をエーテルおよび酢酸エチル(４：１)で希釈し、水性ＮａＨＳＯ４、飽和ＮａＨＣＯ３、塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物を酢酸エチルおよびヘキサン(１：３)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、(２Ｒ,３Ｒ,４Ｓ)−５−アジド−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−４−メチルペンチルメタンスルホネートを主異性体(５：２)として９０％収率で得た。LC/MS = 367.3 (M+H-Boc), Rt = 0.81分(Frac 65%-95%方法)。
【０１９４】
ｔｅｒｔ−ブチル(３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化９４】
0005412519.tif 000096
(２Ｒ,３Ｒ,４Ｓ)−５−アジド−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−４−メチルペンチルメタンスルホネートのＭｅＯＨ(０.０９Ｍ)溶液を窒素で２０分間脱気した。ＤＩＥＡ(２.５当量)、１０％Ｐｄ／Ｃ(０.１当量)を添加した。反応混合物を水素バルーン下、２時間撹拌した。溶液を濾過し、濾液を真空で濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル(３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルピペリジン−３−イルカルバメートを主異性体(５：２)として＞９９％収率で得た。LC/MS = 345.2 (M+H-Boc), Rt = 0.95および0.99分。
【０１９５】
ｔｅｒｔ−ブチル(３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチル−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化９５】
0005412519.tif 000097
ｔｅｒｔ−ブチル(３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルピペリジン−３−イルカルバメート(１.０当量)のｉ−ＰｒＯＨ(０.０９Ｍ)溶液に、ＤＩＥＡ(２.５当量)および４−クロロ−３−ニトロピリジン(１.５当量)を添加した。反応混合物を６０℃で２時間撹拌した。揮発物を真空下で除去し、残留物を酢酸エチルで希釈し、飽和ＮａＣｌで洗浄した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質を酢酸エチルおよびヘキサン(１：２)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、ｔｅｒｔ−ブチル(３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチル−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメートを７６％収率で得た。LC/MS = 467.3 (M+H), Rt = 1.09分。
【０１９６】
ｔｅｒｔ−ブチル(３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルピペリジン−３−イルカルバメートの合成
【化９６】
0005412519.tif 000098
ｔｅｒｔ−ブチル(３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチル−１−(３−ニトロピリジン−４−イル)ピペリジン−３−イルカルバメート(１.０当量)のＭｅＯＨ(０.０５Ｍ)溶液を窒素で２０分間脱気した。１０％Ｐｄ／Ｃ(０.２当量)を混合物に添加し、溶液を水素バルーン下に３時間撹拌した。反応を濾過し、濾液を減圧下濃縮して、ｔｅｒｔ−ブチル(３Ｒ,４Ｒ,５Ｓ)−１−(３−アミノピリジン−４−イル)−４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルピペリジン−３−イルカルバメートを所望の生成物として９４％収率で得た。LC/MS = 437.4 (M+H), Rt = 1.08分. 1H-NMR (300MHz, CDCl3): δ 8.01 (s, 1H), 7.95 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.44 (br s, 1H), 3.74 (br s, 2H), 3.59-3.55 (m, 1H), 3.25-3.13 (m, 2H), 2.47-2.35 (m, 2H), 1.89 (br s, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.04 (d, J = 6.0, 3H), 0.92 (s, 9H), 0.13 (d, J = 9.0, 6H)。
【０１９７】
ｔｅｒｔ−ブチル(２Ｒ)−１−(ベンジルオキシ)−３−ヒドロキシ−４−メチルヘキサ−５−エン−２−イルカルバメートの合成
【化９７】
0005412519.tif 000099
Ｎ−Ｂｏｃ、Ｏ−ベンジル−Ｄ−セリンアルデヒド(１.０当量)のＤＣＭ(０.１Ｍ)溶液に、−７８℃で、Ａｒ雰囲気下、(Ｚ)−２−(ブト−２−エニル)−４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン(１.１当量)を添加し、透明溶液を１６時間撹拌し、その間それをｒｔに温めた。溶液をＥｔＯＡｃに添加し、Ｈ２Ｏ(３×)、およびＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、ｐシリカゲルクロマトグラフィー(１５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン)で精製して、ｔｅｒｔ−ブチル(２Ｒ)−１−(ベンジルオキシ)−３−ヒドロキシ−４−メチルヘキサ−５−エン−２−イルカルバメート(５４％)を１Ｈ  ＮＭＲで判断して異性体の３：１混合物として得た。LCMS(m/z):236.3 (MH+-Boc);LC Rt = 4.37および4.51分。
【０１９８】
(４Ｒ)−４−(ベンジルオキシメチル)−５−(ブト−３−エン−２−イル)オキサゾリジン−２−オンの合成
【化９８】
0005412519.tif 000100
(２Ｒ)−１−(ベンジルオキシ)−３−ヒドロキシ−４−メチルヘキサ−５−エン−２−のＴＨＦ(０.１Ｍ)溶液に、鉱油中６０％水素化ナトリウム(１.５当量)を添加した。３日間撹拌後、反応をＮＨ４Ｃｌ(飽和)の添加によりクエンチし、溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、ＮＨ４Ｃｌ(飽和)およびＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、シリカゲルクロマトグラフィー(５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン)で精製して、(４Ｒ)−４−(ベンジルオキシメチル)−５−(ブト−３−エン−２−イル)オキサゾリジン−２−オン(８９％)を３：１混合物として得た。LCMS(m/z):262.2 (MH+);LC Rt = 3.47分。
【０１９９】
(４Ｒ)−４−(ベンジルオキシメチル)−５−(１−ヒドロキシプロパン−２−イル)オキサゾリジン−２−オンの合成
【化９９】
0005412519.tif 000101
(４Ｒ)−４−(ベンジルオキシメチル)−５−(ブト−３−エン−２−イル)オキサゾリジン−２−オン(１.０当量)の２：１ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ(０.０４Ｍ)溶液に、オスミウムｔｅｔｒオキシド４％Ｈ２Ｏ溶液(０.０７当量)および過ヨウ素酸ナトリウム(３.０当量)を添加した。３時間撹拌後、白色沈殿を濾過し、ＥｔＯＡｃで濯いだ。合わせた濾液を真空で濃縮し、残留物をＥｔＯＡｃに溶解し、ＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗アルデヒドをＥｔＯＨ(０.０８Ｍ)に溶解し、０℃に冷却後、水素化ホウ素ナトリウム(２.０当量)を添加した。１５時間撹拌し、室温にした後、反応をＨ２Ｏの添加によりクエンチした。２０分間撹拌後、ＥｔＯＨを真空で除去し、ＥｔＯＡｃを添加し、溶液を１Ｎ  ＨＣｌ、ＮａＨＣＯ３(飽和)およびＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、(４Ｒ)−４−(ベンジルオキシメチル)−５−(１−ヒドロキシプロパン−２−イル)オキサゾリジン−２−オンを異性体の３：１混合物として得た(６０％)。LCMS(m/z):266.1 (MH+);LC Rt = 2.28分。
【０２００】
(４Ｒ)−４−(ヒドロキシメチル)−５−(１−ヒドロキシプロパン−２−イル)オキサゾリジン−２−オンの合成
【化１００】
0005412519.tif 000102
(４Ｒ)−４−(ベンジルオキシメチル)−５−(１−ヒドロキシプロパン−２−イル)オキサゾリジン−２−オン(１.０当量)のメタノール溶液に、０.１Ｍの濃度で、１０％パラジウム炭素(０.１当量)を添加した。得られた不均質溶液を水素雰囲気下に置き、１５時間撹拌した。この時点で混合物をセライトのパッドを通して濾過し、メタノールで溶出した。揮発物を真空で除去して、(４Ｒ)−４−(ヒドロキシメチル)−５−(１−ヒドロキシプロパン−２−イル)オキサゾリジン−２−オン(９９％)を得た。LCMS(m/z):176.1 (MH+)。
【０２０１】
２−((４Ｒ)−２−オキソ−４−(トシルオキシメチル)オキサゾリジン−５−イル)−プロピル４−メチルベンゼンスルホネートの合成
【化１０１】
0005412519.tif 000103
(４Ｒ)−４−(ヒドロキシメチル)−５−(１−ヒドロキシプロパン−２−イル)オキサゾリジン−２−オン(１.０当量)のピリジン(０.１５Ｍ)溶液に、０℃で、ｐ−トルエンスルホニルクロライド(２.１当量)を添加した。溶液を１４時間撹拌しながらｒｔに温め、その時点でＥｔＯＡｃを添加し、溶液をＨ２Ｏ(３×)、ＣｕＳＯ４(飽和)(２×)、Ｈ２Ｏ、Ｎａ２ＣＯ３(飽和)およびＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー(７５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン溶離剤)で精製して、２−((４Ｒ)−２−オキソ−４−(トシルオキシメチル)オキサゾリジン−５−イル)プロピル４−メチルベンゼンスルホネート(６８％)を得た。LCMS(m/z):484.1 (MH+);LC Rt = 4.06分。
【０２０２】
(３ａＲ,７Ｒ,７ａＳ)−５−(４−メトキシベンジル)−７−メチルヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−２(３Ｈ)−オンおよび(３ａＲ,７Ｓ,７ａＲ)−５−(４−メトキシベンジル)−７−メチルヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−２(３Ｈ)−オンの合成
【化１０２】
0005412519.tif 000104
２−((４Ｒ)−２−オキソ−４−(トシルオキシメチル)オキサゾリジン−５−イル)プロピル４−メチルベンゼンスルホネート(１.０当量)、ジイソプロピルエチルアミン(３.０当量)およびパラ−メトキシベンジルアミン(１.５当量)のＮＭＰ(０.０５Ｍ)溶液を、１００℃で１４時間加熱した。溶液を直接ＲＰ  ＨＰＬＣで精製した。生成物フラクションをＥｔＯＡｃおよびＮａ２ＣＯ３(ｓ)の添加により脱塩し、さらにＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、２個の別々の異性体の(３ａＲ,７Ｒ,７ａＳ)−５−(４−メトキシベンジル)−７−メチルヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−２(３Ｈ)−オンおよび(３ａＲ,７Ｓ,７ａＲ)−５−(４−メトキシベンジル)−７−メチルヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−２(３Ｈ)−オン(２７％および８％)を得た。LCMS(m/z):277.2 (MH+)、0.40および0.42分で。
【０２０３】
(３ａＲ,７Ｒ,７ａＳ)−７−メチルヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−２(３Ｈ)−オンの合成
【化１０３】
0005412519.tif 000105
(３ａＲ,７Ｒ,７ａＳ)−５−(４−メトキシベンジル)−７−メチルヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−２(３Ｈ)−オン(１.０当量)のメタノール溶液に、０.１Ｍの濃度で、２０％水酸化パラジウム炭素(０.３当量)を添加した。得られた不均質溶液を水素雰囲気下に置き、２時間撹拌した。この時点で混合物をセライトのパッドを通して濾過し、メタノールで溶出した。揮発物を真空で除去して、(３ａＲ,７Ｒ,７ａＳ)−７−メチルヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−２(３Ｈ)−オン(９９％)を得た。LCMS(m/z):157.1 (MH+), 0.16分。
【０２０４】
(３ａＲ,７Ｒ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル７−メチル−５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化１０４】
0005412519.tif 000106
４−クロロ−３−ニトロピリジン(１.３当量)および(３ａＲ,７Ｒ,７ａＳ)−７−メチルヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−２(３Ｈ)−オン(１.５当量)のＣＨ２Ｃｌ２溶液を、０.１Ｍの濃度で、ｒｔで４８時間撹拌し、ピペリジン(０.４当量)を添加して、過剰の４−クロロ−３−ニトロピリジンを消費させた。さらに２時間撹拌後、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート(２.０当量)およびジメチルアミノピリジン(０.１当量)を添加した。４時間撹拌後、溶液をＥｔＯＡｃおよびＮａＨＣＯ３(飽和)に分離し、さらにＮａＨＣＯ３(飽和)、およびＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、シリカゲルクロマトグラフィーで精製して、(３ａＲ,７Ｒ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル７−メチル−５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)カルボキシレート(６２％)を得た。LCMS(m/z):379.0 (MH+), 0.58分。
【０２０５】
(３ａＲ,７Ｒ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−アミノピリジン−４−イル)−７−メチル−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化１０５】
0005412519.tif 000107
(３ａＲ,７Ｒ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル７−メチル−５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレート(１.０当量)のメタノール溶液に、０.１Ｍの濃度で、１０％パラジウム炭素(０.１当量)を添加した。得られた不均質溶液を水素雰囲気下に置き、１４時間撹拌した。この時点で混合物をセライトのパッドを通して濾過し、メタノールで溶出した。揮発物を真空で除去して、(３ａＲ,７Ｒ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−アミノピリジン−４−イル)−７−メチル−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートを得た。LCMS(m/z):349.1 (MH+);LC Rt = 2.06分。
【０２０６】
(３ａＲ,７Ｓ,７ａＲ)−７−メチルヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−２(３Ｈ)−オンの合成
【化１０６】
0005412519.tif 000108
(３ａＲ,７Ｓ,７ａＲ)−５−(４−メトキシベンジル)−７−メチルヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−２(３Ｈ)−オン(１.０当量)のメタノール溶液に、０.１Ｍの濃度で、２０％水酸化パラジウム炭素(０.３当量)を添加した。得られた不均質溶液を水素雰囲気下に置き、２時間撹拌した。この時点で混合物をセライトのパッドを通して濾過し、メタノールで溶出した。揮発物を真空で除去して、(３ａＲ,７Ｓ,７ａＲ)−７−メチルヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−２(３Ｈ)−オン(９９％)を得た。LCMS(m/z):157.1 (MH+), 0.17分。
【０２０７】
(３ａＲ,７Ｓ,７ａＲ)−ｔｅｒｔ−ブチル７−メチル−５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化１０７】
0005412519.tif 000109
４−クロロ−３−ニトロピリジン(１.３当量)および(３ａＲ,７Ｓ,７ａＲ)−７−メチルヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−２(３Ｈ)−オン(１.５当量)のＣＨ２Ｃｌ２溶液を、０.１Ｍの濃度で、ｒｔで４８時間撹拌し、ピペリジン(０.４当量)を添加して、過剰の４−クロロ−３−ニトロピリジンを消費させた。さらに２時間撹拌後、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート(２.０当量)およびジメチルアミノピリジン(０.１当量)を添加した。４時間撹拌後、溶液をＥｔＯＡｃおよびＮａＨＣＯ３(飽和)に分離し、さらにＮａＨＣＯ３(飽和)、およびＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、シリカゲルクロマトグラフィー(７５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン溶離剤)で精製して、(３ａＲ,７Ｓ,７ａＲ)−ｔｅｒｔ−ブチル７−メチル−５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレート(３５％)を得た。LCMS(m/z):379.0 (MH+). LC Rt = 2.42分。
【０２０８】
(３ａＲ,７Ｒ,７ａＳ)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−アミノピリジン−４−イル)−７−メチル−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化１０８】
0005412519.tif 000110
(３ａＲ,７Ｓ,７ａＲ)−ｔｅｒｔ−ブチル７−メチル−５−(３−ニトロピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレート(１.０当量)のメタノール溶液に、０.１Ｍの濃度で、１０％パラジウム炭素(０.１当量)を添加した。得られた不均質溶液を水素雰囲気下に置き、１４時間撹拌した。この時点で混合物をセライトのパッドを通して濾過し、メタノールで溶出した。揮発物を真空で除去して、(３ａＲ,７Ｓ,７ａＲ)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−アミノピリジン−４−イル)−７−メチル−２−オキソヘキサヒドロオキサゾロ[４,５−ｃ]ピリジン−３(２Ｈ)−カルボキシレートを得た。LCMS(m/z):349.1 (MH+);LC Rt = 2.18分。
【０２０９】
方法１
メチル３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロ(difluro)フェニル)ピコリナートの合成
【化１０９】
0005412519.tif 000111
メチル３−アミノ−６−ブロモピコリナート(１.０当量)、２,６−ジフルオロフェニル−ボロン酸(３.０当量)、およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１当量)の３：１  ＤＭＥ／２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(０.５Ｍ)溶液を、１２０℃で１５分間間隔でマイクロ波照射した。反応を濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。有機物をＨ２Ｏ(２５mL)と分配し、さらにＮａＣｌ(飽和)(２５mL)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、揮発物を真空で除去した。残留物をＥｔＯＡｃで希釈し、シリカゲルプラグを通し、揮発物を真空で除去して、メチル３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリナート(４７％)を得た。LCMS(m/z):265.1 (MH+);LC Rt = 2.70分
【０２１０】
６−(２,３−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸の合成
【化１１０】
0005412519.tif 000112
６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)のＤＭＥおよび２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(３：１、０.２５Ｍ)中の溶液に、２,３−ジフルオロフェニルボロン酸(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)をマイクロ波バイアル中で添加した。バイアをマイクロ波で１２０℃で３０分間加熱した。混合物を酢酸エチルで希釈し、１Ｎ  ＮａＯＨを添加した。有機相を分離し、３回１Ｎ  ＮａＯＨおよび１回６Ｎ  ＮａＯＨで抽出した。合わせた水性相を濾過し、濃ＨＣｌの添加によりｐＨ１に酸性化し、酢酸エチルで抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、６−(２,３−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸を７８％で得た。LC/MS = 254.1 (M+H), Rt = 0.75分。
【０２１１】
方法２
３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸の合成
【化１１１】
0005412519.tif 000113
メチル３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリナート(１.０当量)のＴＨＦ(０.５Ｍ)溶液に、１Ｍ  ＬｉＯＨ(４.０当量)を添加した。４時間撹拌後、６０℃、１Ｎ  ＨＣｌ(４.０当量)を添加し、ＴＨＦを真空で除去した。得られた固体を濾過し、冷Ｈ２Ｏ(３×２０mL)で濯いで、３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸(９０％)を得た。LCMS(m/z):251.1 (MH+);LC Rt = 2.1分。
【０２１２】
３−アミノ−６−(２−フルオロ−５−プロポキシフェニル)ピコリン酸の合成
【化１１２】
0005412519.tif 000114
方法１に従い、３−アミノ−６−ブロモピコリン酸(１.０当量)および２−フルオロ−５−プロポキシフェニルボロン酸(１.５当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を使用して、３−アミノ−６−(２−フルオロ−５−プロポキシフェニル)ピコリン酸を７５％収率で得た。LC/MS = 291.0 (M+H), Rt = 0.81分。
【０２１３】
３−アミノ−５−フルオロ−６−(２−フルオロ−５−プロポキシフェニル)ピコリン酸の合成
【化１１３】
0005412519.tif 000115
方法１に従い、３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)および２−フルオロ−５−プロポキシフェニルボロン酸(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を使用して、３−アミノ−５−フルオロ−６−(２−フルオロ−５−プロポキシフェニル)ピコリン酸を２８％収率で得た。LC/MS = 309.1 (M+H), Rt = 1.00分。
【０２１４】
メチル３−アミノ−５−フルオロ−６−(２−フルオロフェニル)ピコリナートの合成
【化１１４】
0005412519.tif 000116
方法１に従い、メチル３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリナート(１.０当量)および２−フルオロ−フェニルボロン酸(１.５当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を使用して、メチル３−アミノ−５−フルオロ−６−(２−フルオロフェニル)ピコリナートを＞９９％収率で得た。LC/MS = 265.0 (M+H), Rt = 0.77分。
【０２１５】
３−アミノ−５−フルオロ−６−(２−フルオロフェニル)ピコリン酸の合成
【化１１５】
0005412519.tif 000117
方法２に従い、３−アミノ−５−フルオロ−６−(２−フルオロフェニル)ピコリナート(１.０当量)およびＬｉＯＨ(５.０当量)を使用して、３−アミノ−５−フルオロ−６−(２−フルオロフェニル)ピコリン酸を９０％収率で得た。LC/MS = 251.1 (M+H), Rt = 0.80分。
【０２１６】
メチル３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリナートの合成
【化１１６】
0005412519.tif 000118
方法１に従い、メチル３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリナート(１.０当量)および２,６−ジフルオロフェニルボロン酸(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を使用して、３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリナートを９４％収率で得た。LC/MS = 283.0 (M+H), Rt = 0.76分。
【０２１７】
３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸の合成
【化１１７】
0005412519.tif 000119
方法２に従い、３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリナート(１.０当量)およびＬｉＯＨ(１.０当量)を使用して、３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸を７９％収率で得た。LC/MS = 269.0 (M+H), Rt = 0.79分。
【０２１８】
５−フルオロ−６−(２−フルオロフェニル)ピコリン酸の合成
【化１１８】
0005412519.tif 000120
方法１に従い、６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)および２−フルオロフェニルボロン酸(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を使用して、５−フルオロ−６−(２−フルオロフェニル)ピコリン酸を４３％収率で得た。LC/MS = 236.1 (M+H), Rt = 0.72分。
【０２１９】
６−(３,４−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸の合成
【化１１９】
0005412519.tif 000121
方法１に従い、６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)および３,４−ジフルオロフェニルボロン酸(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を使用して、６−(３,４−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸を７０％収率で得た。LC/MS = 254.1 (M+H), Rt = 0.81分。
【０２２０】
６−(２,５−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸の合成
【化１２０】
0005412519.tif 000122
方法１に従い、６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)および２,５−ジフルオロフェニルボロン酸(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を使用して、６−(２,５−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸を８０％収率で得た。LC/MS = 254.1 (M+H), Rt = 0.74分。
【０２２１】
６−(２,４−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸の合成
【化１２１】
0005412519.tif 000123
方法１に従い、６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)および２,４−ジフルオロフェニルボロン酸(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を使用して、６−(２,４−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸を７９％収率で得た。LC/MS = 254.1 (M+H), Rt = 0.75分。
【０２２２】
５−フルオロ−６−(２−フルオロ−５−プロポキシフェニル)ピコリン酸の合成
【化１２２】
0005412519.tif 000124
方法１に従い、６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)および２−フルオロ−５−プロポキシフェニルボロン酸(１.５当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を使用して、５−フルオロ−６−(２−フルオロ−５−プロポキシフェニル)ピコリン酸を得た。LC/MS = 294.2 (M+H), Rt = 0.95分。
【０２２３】
６−(２−フルオロフェニル)ピコリン酸の合成
【化１２３】
0005412519.tif 000125
方法１に従い、６−ブロモピコリン酸(１.０当量)および２−フルオロフェニルボロン酸(１.５当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を使用して、６−(２−フルオロフェニル)ピコリン酸を９３％収率で得た。LC/MS = 218.0 (M+H), Rt = 0.66分。
【０２２４】
６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸の合成
【化１２４】
0005412519.tif 000126
方法１に従い、６−ブロモピコリン酸(１.０当量)および２,６−ジフルオロフェニルボロン酸(１.５当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を使用して、６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸を３８％収率で得た。LC/MS = 236.0 (M+H), Rt = 0.87分。
【０２２５】
６−(２−フルオロ−５−メトキシフェニル)ピコリン酸の合成
【化１２５】
0005412519.tif 000127
方法１に従い、６−ブロモピコリン酸(１.０当量)および２−フルオロ−５−メトキシフェニルボロン酸(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１５当量)を使用して、６−(２−フルオロ−５−メトキシフェニル)ピコリン酸を９５％収率で得た。LC/MS = 248.2 (M+H), Rt = 0.78分。
【０２２６】
６−(２−フルオロ−５−プロポキシフェニル)ピコリン酸の合成
【化１２６】
0005412519.tif 000128
方法１に従い、６−ブロモピコリン酸(１.０当量)および２−フルオロ−５−プロポキシフェニルボロン酸(１.５当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１５当量)を使用して、６−(２−フルオロ−５−プロポキシフェニル)ピコリン酸を２０％収率で得た。LC/MS = 276.0 (M+H), Rt = 0.87分。
【０２２７】
６−(２,６−ジフルオロ−４−メトキシフェニル)ピコリン酸の合成
【化１２７】
0005412519.tif 000129
方法１に従い、６−ブロモピコリン酸(１.０当量)および２,６−ジフルオロ−４−メトキシフェニルボロン酸(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１５当量)を使用して、６−(２,６−ジフルオロ−４−メトキシフェニル)ピコリン酸を４２％収率で得た。LC/MS = 266.1 (M+H), Rt = 0.75分。
【０２２８】
３−フルオロ−６−(２−フルオロフェニル)ピコリン酸の合成
【化１２８】
0005412519.tif 000130
方法１に従い、６−ブロモ−３−フルオロピコリン酸(１.０当量)および２−フルオロフェニルボロン酸(１.５当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)を使用して、３−フルオロ−６−(２−フルオロフェニル)ピコリン酸を８１％収率で得た。LC/MS = 236.1 (M+H), Rt = 0.72分。
【０２２９】
３−フルオロ−６−(２−フルオロ−５−メトキシフェニル)ピコリン酸の合成
【化１２９】
0005412519.tif 000131
方法１に従い、６−ブロモ−３−フルオロピコリン酸(１.０当量)および２−フルオロ−５−メトキシフェニルボロン酸(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１５当量)を使用して、３−フルオロ−６−(２−フルオロ−５−メトキシフェニル)ピコリン酸を８９％収率で得た。LC/MS = 266.1 (M+H), Rt = 0.79分。
【０２３０】
５−フルオロ−６−(２−フルオロ−５−メトキシフェニル)ピコリン酸の合成
【化１３０】
0005412519.tif 000132
方法１に従い、６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)および２−フルオロ−５−メトキシフェニルボロン酸(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１５当量)を使用して、５−フルオロ−６−(２−フルオロ−５−メトキシフェニル)ピコリン酸を８６％収率で得た。LC/MS = 266.1 (M+H), Rt = 0.79分。
【０２３１】
６−(４−(ベンジルオキシ)−２−フルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸の合成
【化１３１】
0005412519.tif 000133
方法１に従い、６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)および４−(ベンジルオキシ)−２−フルオロフェニルボロン酸(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１５当量)を使用して、６−(４−(ベンジルオキシ)−２−フルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸を２８％収率で得た。LC/MS = 342.1 (M+H), Rt = 1.05分。
【０２３２】
６−(４−(ベンジルオキシ)−２−フルオロフェニル)−３−フルオロピコリン酸の合成
【化１３２】
0005412519.tif 000134
方法１に従い、６−ブロモ−３−フルオロピコリン酸(１.０当量)および４−(ベンジルオキシ)−２−フルオロフェニルボロン酸(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１５当量)を使用して、６−(４−(ベンジルオキシ)−２−フルオロフェニル)−３−フルオロピコリン酸を４１％収率で得た。LC/MS = 342.1 (M+H), Rt = 1.06分。
【０２３３】
６−(２,６−ジフルオロ−４−メトキシフェニル)−３−フルオロピコリン酸の合成
【化１３３】
0005412519.tif 000135
方法１に従い、６−ブロモ−３−フルオロピコリン酸(１.０当量)および２,６−ジフルオロ−４−メトキシフェニルボロン酸(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１５当量)を使用して、６−(２,６−ジフルオロ−４−メトキシフェニル)−３−フルオロピコリン酸を９％収率で得た。LC/MS = 284.0 (M+H), Rt = 0.74分。
【０２３４】
６−シクロヘキセニル−５−フルオロピコリン酸の合成
【化１３４】
0005412519.tif 000136
方法１に従い、６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)およびシクロヘキセニルボロン酸(１.３当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１５当量)を使用して、６−シクロヘキセニル−５−フルオロピコリン酸を６１％収率で得た。LC/MS = 222.0 (M+H), Rt = 0.52分。
【０２３５】
方法３
６−シクロヘキシル−５−フルオロピコリン酸の合成
【化１３５】
0005412519.tif 000137
脱気した６−シクロヘキセニル−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)のＭｅＯＨ(０.０７Ｍ)溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ(０.１当量)を添加し、反応を水素バルーン下、一夜撹拌した。溶液を濾過し、ＭｅＯＨで濯ぎ、濾液を濃縮して、６−シクロヘキシル−５−フルオロピコリン酸を６５％収率で得た。LC/MS = 224.2 (M+H), Rt = 0.95分。
【０２３６】
５−フルオロ−６−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イル)ピコリン酸の合成
【化１３６】
0005412519.tif 000138
方法１に従い、６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)および４,４,５,５−テトラメチル−２−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イル)−１,３,２−ジオキサボロラン(２.０当量)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.２当量)を使用して、５−フルオロ−６−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イル)ピコリン酸を得た。LC/MS = 280.2 (M+H), Rt = 0.66分。
【０２３７】
メチル５−フルオロ−６−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イル)ピコリナートの合成
【化１３７】
0005412519.tif 000139
５−フルオロ−６−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イル)ピコリン酸(１.０当量)のＤＣＭ(０.３Ｍ)溶液に、ＥＤＣ−ＨＣｌ(１.０当量)、ＤＭＡＰ(１.０当量)、およびＭｅＯＨ(１０当量)を添加した。反応混合物を室温で５日間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水で洗浄し、塩水、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物を２５−５０％酢酸エチルのヘキサン溶液で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、メチル５−フルオロ−６−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イル)ピコリナートを所望の生成物として３５％収率で得た。LC/MS = 294.2 (M+H), Rt = 0.79分。
【０２３８】
メチル５−フルオロ−６−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デカン−８−イル)ピコリナートの合成
【化１３８】
0005412519.tif 000140
脱気したメチル５−フルオロ−６−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デク−７−エン−８−イル)ピコリナート(１.０当量)のＭｅＯＨ(０.０７Ｍ)溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ(０.１当量)を添加し、反応を水素バルーン下、一夜撹拌した。溶液を濾過し、ＭｅＯＨで濯ぎ、濾液を濃縮して、メチル５−フルオロ−６−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デカン−８−イル)ピコリナートを９１％収率で得た。LC/MS = 296.2 (M+H), Rt = 0.83分。
【０２３９】
メチル５−フルオロ−６−(４−オキソシクロヘキシル)ピコリナートの合成
【化１３９】
0005412519.tif 000141
メチル５−フルオロ−６−(１,４−ジオキサスピロ[４.５]デカン−８−イル)ピコリナート(１.０当量)のアセトンおよび水(１：１、０.０４Ｍ)溶液に、シュウ酸脱水和物(２.０当量)を添加し、反応混合物を３日間撹拌した。溶液を固体ＮａＨＣＯ３の添加により中和し、混合物を酢酸エチルおよび塩水に添加し、有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。メチル５−フルオロ−６−(４−オキソシクロヘキシル)ピコリナートを９８％収率で得た。LC/MS = 252.1 (M+H), Rt = 0.68分。
【０２４０】
メチル５−フルオロ−６−(４−ヒドロキシシクロヘキシル)ピコリナートの合成
【化１４０】
0005412519.tif 000142
０℃のメチル５−フルオロ−６−(４−オキソシクロヘキシル)ピコリナート(１.０当量)のＭｅＯＨ(０.０８Ｍ)溶液に、ＮａＢＨ４を添加した。溶液を室温に一夜温め、酢酸エチルおよび塩水に分配し、有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、メチル５−フルオロ−６−(４−ヒドロキシシクロヘキシル)ピコリナートを２異性体の混合物(５：１)として得た。LC/MS = 254.2 (M+H), Rt = 0.63分。
【０２４１】
メチル６−(４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)シクロヘキシル)−５−フルオロピコリナートの合成
【化１４１】
0005412519.tif 000143
メチル５−フルオロ−６−(４−ヒドロキシシクロヘキシル)ピコリナート(１.０当量)のＤＭＦ(０.１５Ｍ)溶液に、イミダゾール(４.０当量)およびＴＢＤＭＳＣｌ(２.５当量)を添加した。反応混合物を室温で２日間撹拌し、酢酸エチルに添加し、水で洗浄し、塩水、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、メチル６−(４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)シクロヘキシル)−５−フルオロピコリナートを９７％収率で異性体の混合物(３：１)として得た。LC/MS = 368.3 (M+H), Rt = 1.4および1.42分。
【０２４２】
６−(４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)シクロヘキシル)−５−フルオロピコリン酸の合成
【化１４２】
0005412519.tif 000144
メチル６−(４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)シクロヘキシル)−５−フルオロピコリナート(１.０当量)のＴＨＦ／ＭｅＯＨ(２：１、０.０９Ｍ)溶液に、ＬｉＯＨ(１.５当量)を添加した。反応混合物を一夜室温で撹拌し、１Ｎ  ＨＣｌおよび酢酸エチルを添加し、有機相を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、６−(４−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)シクロヘキシル)−５−フルオロピコリン酸を異性体の混合物(３：１)として８２％収率で得た。LC/MS = 354.2 (M+H), Rt = 1.38および1.41分。
【０２４３】
６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸の合成
【化１４３】
0005412519.tif 000145
２−ブロモ−３−フルオロ−６−メチルピリジン(１.０当量)のＨ２Ｏ(３０mL)溶液に、過マンガン酸カリウム(１.０当量)を添加した。溶液を１００℃で５時間加熱し、その時点でさらに過マンガン酸カリウム(１.０当量)を添加した。さらに４８時間加熱後物質をセライト(４cm×２インチ)を通して濾過し、Ｈ２Ｏ(１５０mL)で濯いだ。合わせた水性物を１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ＝４に酸性化し、酢酸エチル(２００mL)で抽出し、ＮａＣｌ(飽和)で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸(１７％)を白色固体として得た。LCMS(m/z):221.9 (MH+);LC Rt = 2.05分。
【０２４４】
方法４
２−(２,６−ジフルオロフェニル)−３−フルオロ−６−メチルピリジンの合成
【化１４４】
0005412519.tif 000146
２−ブロモ−３−フルオロ−６−メチルピリジン(１.０当量)のＴＨＦおよび水(１０：１、０.２Ｍ)溶液に、２,６−ジフルオロフェニルボロン酸(２.０当量)およびカリウムフルオライド(３.３当量)を添加した。反応を１０分間脱気し、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(０.０５当量)を添加し、トリ−ｔ−ブチルホスフィン(０.１当量)を添加した。反応を６０℃で１時間撹拌し、その時点で、全出発物質が消費されていることがＬＣ／ＭＳで示された。反応を室温に冷却し、酢酸エチルおよび水に分配し、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質をＥｔＯＨで０.１Ｍまで希釈し、０.５当量のＮａＢＨ４を添加して、ｄｂａを還元した。反応を１時間、室温で撹拌し、水でクエンチし、真空で濃縮してエタノールを除去した。生成物をエーテルで抽出し、塩水で洗浄し、有機物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質をシリカゲルに載せ、ヘキサンおよび酢酸エチル(０％−１０％酢酸エチル)で溶出するカラムクロマトグラフィー(ＩＳＣＯ)で精製した。純粋フラクションを合わせ、濃縮して、２−(２,６−ジフルオロフェニル)−３−フルオロ−６−メチルピリジンを明黄色油状物として８６％収率で得た。LC/MS = 224.0 (M+H), Rt = 0.84分。
【０２４５】
方法５
６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸の合成
【化１４５】
0005412519.tif 000147
２−(２,６−ジフルオロフェニル)−３−フルオロ−６−メチルピリジン(１.０当量)の水(０.０５Ｍ)溶液に、ＫＭｎＯ４(２.０当量)を添加し、反応を一夜加熱還流した。さらに２.０当量のＫＭｎＯ４を添加し、還流でさらに８時間撹拌した。溶液を室温に冷却し、セライトを通して濾過し、水で洗浄した。濾液を６Ｎ  ＨＣｌでｐＨ＝３に酸性化し、白色沈殿を濾過した。濾液をさらにｐＨ＝１に酸性化し、再び濾過した。濾液を生成物が水性層からなくなるまで抽出した。有機相を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。残留物を酢酸エチルに溶解し、１Ｎ  ＮａＯＨで洗浄し、水性層をｐＨ＝１に酸性化し、白色結晶を濾過した。生成物を合わせて、６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリン酸を３２％収率を白色固体として得た。LC/MS = 254.0 (M+H), Rt = 0.71分。
【０２４６】
６−(２,６−ジフルオロフェニル)−３−フルオロ−２−メチルピリジンの合成
【化１４６】
0005412519.tif 000148
６−ブロモ−３−フルオロ−２−メチルピリジン(１.０当量)のエタノールおよびトルエン(１：１、０.２Ｍ)溶液に、２,６−ジフルオロフェニルボロン酸、ＤＩＥＡ(５当量)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(０.２当量)を添加した。反応をマイクロ波で１２０℃で３０分間加熱した。溶液を濾過し、酢酸エチルで濯いだ。揮発物を真空で除去し、粗物質を酢酸エチルおよびヘキサン(２.５−２０％酢酸エチル)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製した。純粋フラクションの濃縮により、６−(２,６−ジフルオロフェニル)−３−フルオロ−２−メチルピリジンを８８％収率で得た。LC/MS = 224.1 (M+H), Rt = 0.87分。
【０２４７】
６−(２,６−ジフルオロフェニル)−３−フルオロピコリン酸の合成
【化１４７】
0005412519.tif 000149
方法５に従い、６−(２,６−ジフルオロフェニル)−３−フルオロ−２−メチルピリジン(１.０当量)および過マンガン酸カリウム(６.０当量)を使用して、６−(２,６−ジフルオロフェニル)−３−フルオロピコリン酸を３０％収率で得た。LC/MS = 254.1 (M+H), Rt = 0.70分。
【０２４８】
２−(２,６−ジフルオロ−３−メトキシフェニル)−３−フルオロ−６−メチルピリジンの合成
【化１４８】
0005412519.tif 000150
方法４に従い、２−ブロモ−３−フルオロ−６−メチルピリジン(１.０当量)および２,６−ジフルオロ−３−メトキシフェニルボロン酸(２.０当量)を使用して、２−(２,６−ジフルオロ−３−メトキシフェニル)−３−フルオロ−６−メチルピリジンを６０％収率で得た。LC/MS = 254.1 (M+H), Rt = 0.85分。
【０２４９】
６−(２,６−ジフルオロ−３−メトキシフェニル)−５−フルオロピコリン酸の合成
【化１４９】
0005412519.tif 000151
方法５に従い、２−(２,６−ジフルオロ−３−メトキシフェニル)−３−フルオロ−６−メチルピリジン(１.０当量)および過マンガン酸カリウム(４.０当量)を使用して、６−(２,６−ジフルオロ−３−メトキシフェニル)−５−フルオロピコリン酸を２７％収率で得た。LC/MS = 284.1 (M+H), Rt = 0.75分。
【０２５０】
３−フルオロ−６−メチル−２−(２,３,５−トリフルオロフェニル)ピリジンの合成
【化１５０】
0005412519.tif 000152
２−ブロモ−３−フルオロ−６−メチルピリジン(１.０当量)のジオキサン(０.２Ｍ)溶液に、２,３,５−トリフルオロフェニルボロン酸およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１当量)を添加した。水性炭酸ナトリウム(２Ｍ溶液、２.０当量)を添加し、反応をマイクロ波で１２０℃で１５分間加熱した。溶液を酢酸エチルおよび飽和ＮａＨＣＯ３に分配し、有機相を塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗物質を酢酸エチルおよびヘキサン(１：３)で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、３−フルオロ−６−メチル−２−(２,３,５−トリフルオロフェニル)ピリジンを８７％収率で得た。LC/MS = 242.1 (M+H), Rt = 0.98分。
【０２５１】
５−フルオロ−６−(２,３,５−トリフルオロフェニル)ピコリン酸の合成
【化１５１】
0005412519.tif 000153
３−フルオロ−６−メチル−２−(２,３,５−トリフルオロフェニル)ピリジン(１.０当量)の水およびｔ−ＢｕＯＨ(２：１、０.０６Ｍ)溶液に、過マンガン酸カリウム(１０当量)を添加し、溶液を９０℃で５時間加熱した。室温に冷却後、溶液を濾過し、濾液を減圧下濃縮して、５−フルオロ−６−(２,３,５−トリフルオロフェニル)ピコリン酸を８９％収率で得た。LC/MS = 272.0 (M+H), Rt = 0.80分。
【０２５２】
メチル６−ブロモ−５−フルオロピコリナートの合成
【化１５２】
0005412519.tif 000154
６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸(１.０当量)のメタノール(０.２Ｍ)溶液に、Ｈ２ＳＯ４(４.２当量)を添加し、反応を室温で２時間撹拌した。ＬＣ／ＭＳでモニターして反応完了後、反応を酢酸エチルで希釈し、飽和水性ＮａＨＣＯ３でゆっくりクエンチした。反応を分液漏斗に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮して、メチル６−ブロモ−５−フルオロピコリナートを白色固体(＞９９％)として得た。LC/MS = 233.9/235.9 (M+H), Rt = 0.69分。
【０２５３】
方法６
メチル６−(３−(ベンジルオキシ)−２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリナートの合成
【化１５３】
0005412519.tif 000155
メチル６−ブロモ−５−フルオロピコリナート(１.０当量)のＴＨＦおよび水(１０：１、０.１Ｍ)溶液に、３−(ベンジルオキシ)−２,６−ジフルオロフェニルボロン酸(２.５当量)およびカリウムフルオライド(３.３当量)を添加した。反応を窒素で脱気し、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(０.２５当量)およびトリ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィン(０.５当量)を添加し、反応を８０℃で１時間加熱した。ＬＣ／ＭＳ分析は、出発物質から生成物への完全な変換を示した。反応を室温に冷却し、真空で濃縮し、シリカゲルに縮合した。粗生成物を酢酸エチルおよびヘキサン(０％〜３０％酢酸エチル)で溶出するＩＳＣＯフラッシュクロマトグラフィーで精製して、メチル６−(３−(ベンジルオキシ)−２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリナートを所望の生成物として明黄色油状物として９６％収率で得た。LC/MS = 374.0 (M+H), Rt = 1.07分。
【０２５４】
メチル６−(３−(ベンジルオキシ)−２,６−ジフルオロフェニル)ピコリナートの合成
【化１５４】
0005412519.tif 000156
方法６に従い、メチル６−ブロモピコリナート(１.０当量)および３−(ベンジルオキシ)−２,６−ジフルオロフェニルボロン酸(２.５当量)を使用して、メチル６−(３−(ベンジルオキシ)−２,６−ジフルオロフェニル)ピコリナートを明黄色固体として９５％収率で得た。LC/MS = 356.2 (M+H), Rt = 1.03分。
【０２５５】
メチル６−(２,６−ジフルオロ−４−メトキシフェニル)−５−フルオロピコリナートの合成
【化１５５】
0005412519.tif 000157
方法６に従い、メチル６−ブロモピコリナート(１.０当量)および２,６−ジフルオロ−４−メトキシフェニルボロン酸(２.５当量)を使用して、メチル６−(２,６−ジフルオロ−４−メトキシフェニル)−５−フルオロピコリナートを白色固体として８５％収率で得た。LC/MS = 298.0 (M+H), Rt = 0.89分。
【０２５６】
６−(２,６−ジフルオロ−４−メトキシフェニル)−５−フルオロピコリン酸の合成
【化１５６】
0005412519.tif 000158
メチル６−(２,６−ジフルオロ−４−メトキシフェニル)−５−フルオロピコリナート(１.０当量)のＴＨＦ／ＭｅＯＨ(２：１、０.０９Ｍ)溶液に、ＬｉＯＨ(１.５当量)を添加し、反応を室温で１時間撹拌した。溶液を１Ｎ  ＨＣｌでクエンチし、酢酸エチルで抽出し、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、６−(２,６−ジフルオロ−４−メトキシフェニル)−５−フルオロピコリン酸を８４％収率で得た。LC/MS = 284.1 (M+H), Rt = 0.76分。
方法７
【０２５７】
メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−ヒドロキシフェニル)−５−フルオロピコリナートの合成
【化１５７】
0005412519.tif 000159
メチル６−(３−(ベンジルオキシ)−２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリナート(１.０当量)のメタノール(０.１Ｍ)溶液に、１０％Ｐｄ／Ｃ(０.１当量)の酢酸エチル溶液を添加した。反応を水素雰囲気下に置き、２時間撹拌した。完了後、溶液をセライトのパッドで濾過し、パッドをメタノールで洗浄し、濾液を真空で濃縮して、メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−ヒドロキシフェニル)−５−フルオロピコリナートを灰色油状物として８６％収率で得た。LC/MS = 284.0 (M+H), Rt = 0.90分。
【０２５８】
メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−ヒドロキシフェニル)ピコリナートの合成
【化１５８】
0005412519.tif 000160
方法７に従い、メチル６−(３−(ベンジルオキシ)−２,６−ジフルオロフェニル)ピコリナート(１.０当量)を使用して、メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−ヒドロキシフェニル)ピコリナートを明褐色固体として、９６％収率で得た。LC/MS = 266.0 (M+H), Rt = 0.68分。
【０２５９】
メチル６−(２−フルオロ−５−ホルミルフェニル)ピコリナートの合成
【化１５９】
0005412519.tif 000161
メチル６−ブロモピコリナート(１.０当量)のＤＭＥ(０.０３Ｍ)溶液に、マイクロ波バイアル中、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.０５当量)、２−フルオロ−５−ホルミルフェニルボロン酸(１.５当量)および２Ｍ  Ｎａ２ＣＯ３(２当量)を添加した。反応物を１２０℃で２０分間加熱した。所望の生成物と対応するカルボン酸の混合物がＬＣ／ＭＳで検出され、反応を酢酸エチルで希釈し、ＨＣｌ(ｐＨ＝５)で洗浄し、酸性相を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮して、明褐色固体を得た。固体をＭｅＯＨに溶解し、３当量のＴＭＳ−ジアゾメタンで室温で処理した。カルボン酸の対応するメチルエステルへの変換後、反応を真空で濃縮し、粗物質を３０％酢酸エチルのヘキサン溶液で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ＩＳＣＯ)で精製して、メチル６−(２−フルオロ−５−ホルミルフェニル)ピコリナートを黄色固体として５８％収率で得た。LC/MS = 260.0 (M+H), Rt = 0.70分。
【０２６０】
(Ｅ)−メチル６−(２−フルオロ−５−(プロプ−１−エニル)フェニル)ピコリナートの合成
【化１６０】
0005412519.tif 000162
メチル６−(２−フルオロ−５−ホルミルフェニル)ピコリナート(１.０当量)のＭｅＯＨ(０.１７Ｍ)溶液に、エチルトリフェニルホスホニウムブロマイド(１.０当量)、ナトリウムメトキシド(１.５当量)を添加した。反応を６５℃で５時間加熱し、室温に冷却し、真空で濃縮した。粗物質を５０％酢酸エチルのヘキサン溶液で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ＩＳＣＯ)で精製して、(Ｅ)−メチル６−(２−フルオロ−５−(プロプ−１−エニル)フェニル)ピコリナートを白色固体として８１％収率で得た。LC/MS = 272.0 (M+H), Rt = 0.73分。
【０２６１】
メチル６−(２−フルオロ−５−プロピルフェニル)ピコリナートの合成
【化１６１】
0005412519.tif 000163
(Ｅ)−メチル６−(２−フルオロ−５−(プロプ−１−エニル)フェニル)ピコリナート(１.０当量)のＭｅＯＨ(０.０４Ｍ)に１０％Ｐｄ／Ｃ(０.５当量)を添加し、反応を水素雰囲気下に置き、一夜撹拌した。混合物をセライトのパッドで濾過し、ＭｅＯＨで洗浄した。濾液を真空で濃縮して、メチル６−(２−フルオロ−５−プロピルフェニル)ピコリナートを明灰色油状物として９７％収率で得た。LC/MS = 274.2 (M+H), Rt = 0.61分。
【０２６２】
６−(２−フルオロ−５−プロピルフェニル)ピコリン酸の合成
【化１６２】
0005412519.tif 000164
メチル６−(２−フルオロ−５−プロピルフェニル)ピコリナート(１.０当量)のＴＨＦ溶液に、水酸化リチウム(１０当量)を添加し、反応を室温で１時間撹拌した。ＴＨＦ溶媒を真空で除去し、残った塩基相を濃ＨＣｌで酸性化した。水性層を酢酸エチルで抽出し(２×)、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮して、６−(２−フルオロ−５−プロピルフェニル)ピコリン酸を３５％収率で得た。LC/MS = 260.2 (M+H), Rt = 0.36分。
【０２６３】
方法８
メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−(トリフルオロメチル−スルホニルオキシ)フェニル)−５−フルオロピコリナートの合成
【化１６３】
0005412519.tif 000165
メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−ヒドロキシフェニル)−５−フルオロピコリナート(１.０当量)のＤＣＭ(０.２Ｍ)溶液に、ＤＩＥＡ(２.０当量)および１,１,１−トリフルオロ−Ｎ−フェニル−Ｎ−(トリフルオロメチルスルホニル)メタンスルホンアミド(１.５当量)を添加した。反応を一夜、室温で撹拌した。溶液を水でクエンチし、有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。粗物質を酢酸エチルおよびヘキサン(０−３０％酢酸エチル)で溶出するＩＳＣＯクロマトグラフィーで精製した。純粋フラクションを濃縮して、メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−(トリフルオロメチルスルホニルオキシ)フェニル)−５−フルオロピコリナートを所望の生成物として透明油状物として６８％収率で得た。LC/MS = 416.1 (M+H), Rt = 1.08分。
【０２６４】
メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−(トリフルオロメチルスルホニルオキシ)−フェニル)ピコリナートの合成
【化１６４】
0005412519.tif 000166
方法８に従い、メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−(トリフルオロメチルスルホニルオキシ)フェニル)−５−フルオロピコリナート(１.０当量)を使用して、メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−(トリフルオロメチルスルホニルオキシ)フェニル)ピコリナートを無色油状物として、＞９９％収率で得た。LC/MS = 397.9 (M+H), Rt = 1.03分。
【０２６５】
６−(２,６−ジフルオロ−３−メチルフェニル)−５−フルオロピコリン酸の合成
【化１６５】
0005412519.tif 000167
メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−(トリフルオロメチルスルホニルオキシ)フェニル)−５−フルオロピコリナート(１.０当量)のジオキサンおよび水(１０：１、０.１５Ｍ)溶液に、メチルボロン酸(３.０当量)および炭酸カリウム(３.０当量)を添加した。反応を窒素で１０分間脱気し、Ｐｄ(ＰＰｈ３)４(０.１当量)を溶液に添加し、１００℃で３時間加熱した。反応のＬＣ／ＭＳはこの時点でカルボン酸生成物への完全な変換を示した(Ｍ＋Ｈ＝２６８)。室温に冷却し、水および酢酸エチルを添加した。２層を分離し、水性相を濃ＨＣｌでｐＨ＝１に酸性化し、酢酸エチルで抽出した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮して、６−(２,６−ジフルオロ−３−メチルフェニル)−５−フルオロピコリン酸を透明油状物として９７％収率で得た。LC/MS = 268.1 (M+H), Rt = 0.82分。
【０２６６】
メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−メチルフェニル)ピコリナートの合成
【化１６６】
0005412519.tif 000168
メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−(トリフルオロメチルスルホニルオキシ)−フェニル)ピコリナート(１.０当量)のトルエン溶液に、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１当量)、ジメチル亜鉛(３.０当量)を添加した。溶液はオレンジ色から輝黄色に変わった。反応を８０℃で２時間加熱し、この時点で、ＬＣ／ＭＳ分析は生成物への完全な変換を示した。反応を室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮して、メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−メチルフェニル)ピコリナートを褐色油状物として、定量的収率で得た。LC/MS = 264.0 (M+H), Rt = 0.90分。
【０２６７】
６−(２,６−ジフルオロ−３−メチルフェニル)ピコリン酸の合成
【化１６７】
0005412519.tif 000169
メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−メチルフェニル)ピコリナート(１.０当量)のＴＨＦ溶液に、水酸化ナトリウム(１０当量)を添加し、反応を２時間撹拌した。溶液を酢酸エチルで希釈し、１Ｎ  ＮａＯＨ(２×)で洗浄した。合わせた塩基性水性物を合わせ、濃ＨＣｌで酸性化した。酸性水性相を酢酸エチルで抽出し(２×)、合わせた有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮して、６−(２,６−ジフルオロ−３−メチルフェニル)ピコリン酸を白色固体として８５％収率で得た。LC/MS = 250.0 (M+H), Rt = 0.76分。
【０２６８】
６−(３−エチル−２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸の合成
【化１６８】
0005412519.tif 000170
メチル６−(２,６−ジフルオロ−３−(トリフルオロメチルスルホニルオキシ)−フェニル)ピコリナート(１.０当量)のトルエン(０.１５Ｍ)溶液に、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ２−ＤＣＭ(０.１当量)、ジエチル亜鉛(３.０当量)を添加した。溶液はオレンジ色から輝黄色に変わった。反応を７０℃で２時間加熱し、この時点で、ＬＣ／ＭＳ分析は、加水分解生成物、所望の生成物および未知副産物の１：３：１比の混合物を示した。反応を室温に冷却し、酢酸エチルで希釈し、１Ｎ  ＮａＯＨ(２×)で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮して、褐色油状物を得た。油状物をＴＨＦに再溶解し、１Ｎ  ＮａＯＨで１時間処理した。反応を酢酸エチルで希釈し、１Ｎ  ＮａＯＨ(２×)で洗浄した。塩基性洗液を合わせ、濃ＨＣｌで酸性化し、酢酸エチル(３×)で抽出した。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空で濃縮して、６−(３−エチル−２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸を明褐色油状物として＞９９％収率で得た。LC/MS = 264.1 (M+H), Rt = 0.88分。
【０２６９】
方法９
各１当量のアミン、カルボン酸、ＨＯＡＴおよびＥＤＣのＤＭＦ中の均一溶液を、０.５Ｍ濃度で、２４時間静置し、この時点で水および酢酸エチルを添加した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、酢酸エチルおよびヘキサンで溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、所望の保護アミド生成物を得た。あるいは粗反応混合物を直接ＨＰＬＣで精製した。凍結乾燥後、保護アミド生成物のＴＦＡ塩を得た。あるいは、ＨＰＬＣフラクションをＥｔＯＡｃおよび固体Ｎａ２ＣＯ３に添加し、分離し、ＮａＣｌ(飽和)で洗浄できた。ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、揮発物を真空で除去し、保護アミド生成物を遊離塩基として得た。あるいは、粗反応混合物をさらに精製せずに脱保護工程に使用した。
【０２７０】
Ｎ−Ｂｏｃ保護アミンが存在したら、それを過剰の４Ｍ  ＨＣｌ／ジオキサンで１４時間処理することにより、または２５％ＴＦＡ／ＣＨ２Ｃｌ２で２時間処理することにより除去できた。揮発物を真空で除去後、物質をＲＰ  ＨＰＬＣで精製し、凍結乾燥して、アミド生成物をＴＦＡ塩として得た。あるいは、ＨＰＬＣフラクションをＥｔＯＡｃおよびに添加し、分離し、ＮａＣｌ(飽和)で洗浄できた。ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、揮発物を真空で除去し遊離塩基を得た。ＭｅＣＮ／Ｈ２Ｏに溶解し、１当量の１Ｎ  ＨＣｌを添加し、凍結乾燥し、アミド生成物のＨＣｌ塩を得た。
【０２７１】
Ｎ−Ｂｏｃ１,２アミノアルコール環状カルバメートが存在したら、Ｂｏｃ脱保護前に環状カルバメートをＣｓ２ＣＯ３(０.５当量)のエタノール溶液で、０.１Ｍの濃度で３時間処理し、開裂できた。揮発物を真空で除去後、Ｂｏｃアミノ基を上記の通り脱保護した。
【０２７２】
Ｎ−Ｂｏｃ、ＯＡｃ基が存在したら、Ｂｏｃ脱保護前に、アセテート基をＫ２ＣＯ３(２.０当量)のエタノール溶液で、０.１Ｍの濃度で２４時間処理することにより開裂できた。
【０２７３】
Ｎ−フタルイミド基が存在したら、アミンをヒドラジンのＭｅＯＨ溶液で、６５℃で３時間処理することにより脱保護できた。冷却し、白色沈殿を濾取し、濾液を濃縮し、ＲＰ  ＨＰＬＣで精製して、アミノアミド生成物を得た。
【０２７４】
ＴＢＤＭＳエーテルが存在したら、それをＢｏｃ除去前に、６Ｎ  ＨＣｌ、ＴＨＦ、メタノール(１：２：１)で室温で１２時間処理することにより脱保護した。揮発物を真空で除去後、Ｂｏｃアミノ基を上記の通り脱保護した。あるいは、ＴＢＤＭＳエーテルおよびＢｏｃ基を、両方とも６Ｎ  ＨＣｌ、ＴＨＦ、メタノール(１：２：１)で処理し、ｒｔで２４時間、または６０℃で３時間加熱して、両方とも脱保護できた。
【０２７５】
ＯＭｅ基が存在したら、それを１Ｍ  ＢＢｒ３のＤＣＭ溶液(２.０当量)で２４時間処理することにより脱保護できた。水を滴下し、揮発物を真空で除去した。物質を上記の通り、逆相ＨＰＬＣで精製した。
【０２７６】
ＯＢｎ基が存在したら、それを、１０％Ｐｄ／Ｃ(０.２当量)で、水素雰囲気下、酢酸エチルおよびメタノール(１：２)で処理して脱保護できた。完了後、反応をセライトを通して濾過し、メタノールで洗浄し、濾液を真空で濃縮した。
【０２７７】
(＋／−)−３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノ−４−ヒドロキシシクロヘキサ−１−エニル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミドの合成
【化１６９】
0005412519.tif 000171
方法９に従い、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル３−(３−アミノピリジン−４−イル)−６−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)シクロヘキサ−２−エニルカルバメートおよび３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸をカップリングおよび脱保護して、(＋／−)−３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノ−４−ヒドロキシシクロヘキサ−１−エニル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミドをＴＦＡ塩として得た。LCMS(m/z):438.2 (MH+), LC Rt = 2.00分。
【０２７８】
(＋／−)−３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノ−４−ヒドロキシシクロヘキシル)−ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミドの合成
【化１７０】
0005412519.tif 000172
方法９に従い、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)シクロヘキシルカルバメートおよび３−アミノ−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリン酸をカップリングおよび脱保護して、(＋／−)−３−アミノ−Ｎ−(４−(３−アミノ−４−ヒドロキシシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)ピコリンアミドをＴＦＡ塩として１８％収率で得た。LCMS(m/z):440.3 (MH+), C Rt = 2.04分。
【０２７９】
方法９の方法に従い、次の化合物を製造した：
【表２】
0005412519.tif 000173
【表３】
0005412519.tif 000174
【０２８０】
【表４】
0005412519.tif 000175
【表５】
0005412519.tif 000176
【０２８１】
【表６】
0005412519.tif 000177
【表７】
0005412519.tif 000178
【０２８２】
【表８】
0005412519.tif 000179
【表９】
0005412519.tif 000180
【０２８３】
【表１０】
0005412519.tif 000181
【表１１】
0005412519.tif 000182
【０２８４】
【表１２】
0005412519.tif 000183
【表１３】
0005412519.tif 000184
【０２８５】
【表１４】
0005412519.tif 000185
【表１５】
0005412519.tif 000186
【０２８６】
【表１６】
0005412519.tif 000187
【表１７】
0005412519.tif 000188
【０２８７】
【表１８】
0005412519.tif 000189
【表１９】
0005412519.tif 000190
【０２８８】
６−ブロモ−Ｎ−(４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−
１−エニル)ピリジン−３−イル)−５−フルオロピコリンアミドの合成
【化１７１】
0005412519.tif 000191
方法９に従い、４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)ピリジン−３−アミンおよび６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸をカップリングさせ、ＥｔＯＡｃを添加し、Ｈ２Ｏで洗浄し、ＮａＣｌ(飽和)およびＭｇＳＯ４で乾燥させ、６−ブロモ−Ｎ−(４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)ピリジン−３−イル)−５−フルオロピコリンアミドを得た。LCMS(m/z):455.3 (MH+);LC Rt = 2.09分。
【０２８９】
６−ブロモ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−(１,３−ジオキソイソインドリン−２−イル)−シクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−５−フルオロピコリンアミドの合成
【化１７２】
0005412519.tif 000192
方法９に従い、２−(３−(３−アミノピリジン−４−イル)シクロヘキシル)イソインドリン−１,３−ジオンおよび６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸をカップリングさせ、ＥｔＯＡｃを添加し、Ｈ２Ｏで洗浄し、ＮａＣｌ(飽和)およびＭｇＳＯ４で乾燥させ、６−ブロモ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−(１,３−ジオキソイソインドリン−２−イル)シクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−５−フルオロピコリンアミドを得た。LCMS(m/z):523.2/525.2 (MH+);LC Rt = 3.31分。
【０２９０】
３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−(１,３−ジオキソイソインドリン−２−イル)シクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−５−フルオロピコリンアミドの合成
【化１７３】
0005412519.tif 000193
方法９に従い、２−(３−(３−アミノピリジン−４−イル)シクロヘキシル)イソインドリン−１,３−ジオンおよび３−アミノ−６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸をカップリングさせ、ＥｔＯＡｃを添加し、Ｈ２Ｏで洗浄し、ＮａＣｌ(飽和)およびＭｇＳＯ４で乾燥させ、３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−(１,３−ジオキソイソインドリン−２−イル)シクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−５−フルオロピコリンアミドを得た。LCMS(m/z):538.1/540.1 (MH+);LC Rt = 3.46分。
【０２９１】
ｔｅｒｔ−ブチル(１Ｓ,３Ｒ,５Ｓ)−３−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)−ピリジン−４−イル)−５−メチルシクロヘキシルカルバメートの合成
【化１７４】
0005412519.tif 000194
方法９に従い、ｔｅｒｔ−ブチル(１Ｓ,３Ｒ,５Ｓ)−３−(３−アミノピリジン−４−イル)−５−メチルシクロヘキシルカルバメートおよび６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸をカップリングさせ、ＥｔＯＡｃを添加し、Ｈ２Ｏで洗浄し、ＮａＣｌ(飽和)およびＭｇＳＯ４で乾燥させ、ｔｅｒｔ−ブチル(１Ｓ,３Ｒ,５Ｓ)−３−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−５−メチルシクロヘキシルカルバメートを得た。LCMS(m/z):507.1/509.1 (MH+), Rt = 0.90分。
【０２９２】
(１Ｒ,２Ｒ,４Ｒ,６Ｓ)−４−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−６−メチルシクロヘキシルアセテートの合成
【化１７５】
0005412519.tif 000195
方法９に従い、(１Ｒ,２Ｒ,４Ｒ,６Ｓ)−４−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−６−メチルシクロヘキシルアセテートおよび６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸をカップリングさせ、ＥｔＯＡｃを添加し、Ｈ２Ｏで洗浄し、ＮａＣｌ(飽和)およびＭｇＳＯ４で乾燥させ、(１Ｒ,２Ｒ,４Ｒ,６Ｓ)−４−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−６−メチルシクロヘキシルアセテートを得た。LCMS(m/z):567.2 (MH+), Rt = 0.82分。
【０２９３】
(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−７−メチル−２−オキソヘキサヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化１７６】
0005412519.tif 000196
方法９に従い、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−アミノピリジン−４−イル)−７−メチル−２−オキソヘキサヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートおよび６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸をカップリングさせ、ＥｔＯＡｃを添加し、Ｈ２Ｏで洗浄し、ＮａＣｌ(飽和)およびＭｇＳＯ４で乾燥させ、(＋／−)−ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−７−メチル−２−オキソヘキサヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートを得た。LCMS(m/z):549.2/551.2 (MH+), Rt = 0.78分。
【０２９４】
ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートの合成
【化１７７】
0005412519.tif 000197
方法９に従い、ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−アミノピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートおよび６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸をカップリングさせ、ＥｔＯＡｃを添加し、Ｈ２Ｏで洗浄し、ＮａＣｌ(飽和)およびＭｇＳＯ４で乾燥させ、ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレートを得た。LCMS(m/z):537.1 (MH+);LCMS Rt = 0.71分。
【０２９５】
６−ブロモ−Ｎ−(４−((１Ｒ,５Ｒ)−５−(１,３−ジオキソイソインドリン−２−イル)−３,３−ジメチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−５−フルオロピコリンアミドの合成
【化１７８】
0005412519.tif 000198
方法９に従い、２−((１Ｒ,５Ｒ)−５−(３−アミノピリジン−４−イル)−３,３−ジメチルシクロヘキシル)イソインドリン−１,３−ジオンおよび６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸をカップリングさせ、ＥｔＯＡｃを添加し、Ｈ２Ｏで洗浄し、ＮａＣｌ(飽和)およびＭｇＳＯ４で乾燥させ、６−ブロモ−Ｎ−(４−((１Ｒ,５Ｒ)−５−(１,３−ジオキソイソインドリン−２−イル)−３,３−ジメチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−５−フルオロピコリンアミドを得た。LCMS(m/z):551/553 (MH+), Rt = 0.95分。
【０２９６】
Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｒ,４Ｓ,５Ｒ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミドの合成
【化１７９】
0005412519.tif 000199
方法９に従い、４−((１Ｒ,３Ｒ,４Ｓ,５Ｒ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−アミンおよび６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸をカップリングさせ、ＥｔＯＡｃを添加し、Ｈ２Ｏで洗浄し、ＮａＣｌ(飽和)およびＭｇＳＯ４で乾燥させ、Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｒ,４Ｓ,５Ｒ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミドを得た。LCMS(m/z):652.5, 652.4 (MH+);LC Rt = 5.82分。
【０２９７】
Ｎ−(４−((１Ｓ,３Ｓ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミドの合成
【化１８０】
0005412519.tif 000200
方法９に従い、４−((１Ｓ,３Ｓ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−アミンおよび６−ブロモ−５−フルオロピコリン酸をカップリングさせ、ＥｔＯＡｃを添加し、Ｈ２Ｏで洗浄し、ＮａＣｌ(飽和)およびＭｇＳＯ４で乾燥させ、Ｎ−(４−((１Ｓ,３Ｓ,４Ｒ,５Ｓ)−３,４−ビス(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミドを得た。LCMS(m/z):652.5, 652.4 (MH+);LC Rt = 5.83分。
方法１０
【０２９８】
６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロ−Ｎ−(４−(３−ヒドロキシ−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドの合成
【化１８１】
0005412519.tif 000201
６−ブロモ−Ｎ−(４−(３−(ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ)−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)ピリジン−３−イル)−５−フルオロピコリンアミド(１.０当量)、２,６−ジフルオロフェニルボロン酸(３.０当量)、テトラキストリフェニルホスフィン(０.２当量)およびトリエチルアミン(３.０当量)の１：１  ＥｔＯＨ／トルエン(０.１Ｍ)溶液を、１２０℃でマイクロ波照射により１２００秒間加熱した。冷却後、揮発物を真空で除去し、鈴木生成物を直接逆相ＨＰＬＣで精製した。生成物フラクションを凍結乾燥し、得られたＴＢＤＭＳエーテルを方法９に記載の通り脱保護し、ＲＰ  ＨＰＬＣ精製および凍結乾燥して、６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロ−Ｎ−(４−(３−ヒドロキシ−５−メチルシクロヘキサ−１−エニル)ピリジン−３−イル)ピコリンアミドをＴＦＡ塩として得た。LCMS(m/z):438.2 (MH+);LC Rt = 2.00分。
【０２９９】
Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−
６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミドの合成
【化１８２】
0005412519.tif 000202
６−ブロモ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−(１,３−ジオキソイソインドリン−２−イル)シクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−５−フルオロピコリンアミド(１.０当量)、２,６−ジフルオロフェニルボロン酸(３.０当量)、テトラキストリフェニルホスフィン(０.２当量)およびトリエチルアミン(３.０当量)の１：１  ＥｔＯＨ／トルエン(０.１Ｍ)予液を、１２０℃で、マイクロ波照射により１２００秒間加熱した。冷却後、揮発物を真空で除去し、鈴木生成物を直接逆相ＨＰＬＣで精製した。生成物フラクションを凍結乾燥し、得られたフタルイミド基を方法９に記載の通り脱保護し、ＲＰ  ＨＰＬＣ精製および凍結乾燥により、Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミドをＴＦＡ塩として得た。LCMS(m/z):427.2 (MH+);LC Rt = 2.26分。
【０３００】
３−アミノ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミドの合成
【化１８３】
0005412519.tif 000203
３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−(１,３−ジオキソイソインドリン−２−イル)シクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−５−フルオロピコリンアミド(１.０当量)、２,６−ジフルオロフェニルボロン酸(３.０当量)、テトラキストリフェニルホスフィン(０.２当量)およびトリエチルアミン(３.０当量)の１：１  ＥｔＯＨ／トルエン(０.１Ｍ)溶液を、１２０℃で、マイクロ波照射により１２００秒間加熱した。冷却後、揮発物を真空で除去し、鈴木生成物を直接逆相ＨＰＬＣで精製した。生成物フラクションを凍結乾燥し、得られたフタルイミド基を方法９に記載の通り脱保護し、ＲＰ  ＨＰＬＣ精製および凍結乾燥して、３−アミノ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミドをＴＦＡ塩として得た。LCMS(m/z):442.2 (MH+);LC Rt = 2.24分。
【０３０１】
Ｎ−(４−(３−アミノ−４−ヒドロキシシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−
６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミドの合成
【化１８４】
0005412519.tif 000204
ｔｅｒｔ−ブチル５−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−オキソヘキサヒドロベンゾ[ｄ]オキサゾール−３(２Ｈ)−カルボキシレート(１.０当量)、２,６−ジフルオロフェニルボロン酸(３.０当量)、テトラキストリフェニルホスフィン(０.２当量)およびトリエチルアミン(３.０当量)の１：１  ＥｔＯＨ／トルエン(０.１Ｍ)溶液を、１２０℃で、マイクロ波照射により１２００秒間加熱した。冷却後、揮発物を真空で除去し、鈴木生成物を直接逆相ＨＰＬＣで精製した。生成物フラクションを凍結乾燥し、得られた環状カルバメートおよびＢｏｃ基を方法９に記載の通り脱保護し、ＲＰ  ＨＰＬＣ精製および凍結乾燥により、Ｎ−(４−(３−アミノ−４−ヒドロキシシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミドをＴＦＡ塩として得た。LCMS(m/z):443.2 (MH+);LC Rt = 2.11分。
【０３０２】
５−アミノ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−３,３’−ジフルオロ−２,４’−ビピリジン−６−カルボキサミドの合成
【化１８５】
0005412519.tif 000205
３−アミノ−６−ブロモ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−(１,３−ジオキソイソインドリン−２−イル)シクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−５−フルオロピコリンアミド(１.０当量)、３−フルオロピリジン−４−イルボロン酸(３.０当量)、テトラキストリフェニルホスフィン(０.２当量)およびトリエチルアミン(３.０当量)の１：１  ＥｔＯＨ／トルエン(０.１Ｍ)溶液を、１２０℃で、マイクロ波照射により１２００秒間加熱した。冷却後、揮発物を真空で除去し、鈴木生成物を直接逆相ＨＰＬＣで精製した。生成物フラクションを凍結乾燥し、得られたフタルイミド基を方法９に記載の通り脱保護し、ＲＰ  ＨＰＬＣ精製および凍結乾燥により、５−アミノ−Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ)−３−アミノシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−３,３’−ジフルオロ−２,４’−ビピリジン−６−カルボキサミドをＴＦＡ塩として得た。LCMS(m/z):425.1 (MH+);LC Rt = 2.08分。
【０３０３】
Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ,５Ｓ)−３−アミノ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロ−３−ヒドロキシフェニル)−５−フルオロピコリンアミドの合成
【化１８６】
0005412519.tif 000206
ｔｅｒｔ−ブチル(１Ｓ,３Ｒ,５Ｓ)−３−(３−(６−ブロモ−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−５−メチルシクロヘキシルカルバメート(１.０当量)の溶液に、マイクロ波バイアル中、２,６−ジフルオロ−３−ヒドロキシフェニルボロン酸(５.０当量)、ＫＦ(５.５当量)およびＰｄ２(ｄｂａ)３(０.２当量)、そしてＴＨＦおよび水(１０：１、０.０３Ｍ)を添加した。この混合物にＰ(ｔ−Ｂｕ)３(０.４当量)を添加し、反応をマイクロ波で１００℃で３０分間加熱した。有機相を分離し、水性層を酢酸エチルで洗浄し、有機物を合わせ、真空で濃縮した。粗混合物を分取ＨＰＬＣで精製し、生成物フラクションを凍結乾燥し、得られたＢｏｃ基を方法９に記載の通り脱保護し、ＲＰ  ＨＰＬＣ精製および凍結乾燥により、Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｓ,５Ｓ)−３−アミノ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロ−３−ヒドロキシフェニル)−５−フルオロピコリンアミドをＴＦＡ塩として得た。LCMS(m/z):457.2 (MH+);LC Rt = 2.17分。
【０３０４】
方法１０を使用して、次の化合物を製造した：
【表２０】
0005412519.tif 000207
【表２１】
0005412519.tif 000208
【０３０５】
【表２２】
0005412519.tif 000209
【０３０６】
実施例１３９
Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｒ,４Ｓ,５Ｓ)−３−アミノ−４−フルオロ−５−メチルシクロヘキシル)−ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミドの合成
【化１８７】
0005412519.tif 000210
ｔｅｒｔ−ブチル(１Ｒ,２Ｒ,３Ｓ,５Ｒ)−５−(３−(６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミド)ピリジン−４−イル)−２−ヒドロキシ−３−メチルシクロヘキシルカルバメート(１.０当量)のＤＣＭ(０.０４Ｍ)溶液に、０℃でＤＡＳＴ(１.０当量)を添加した。反応を１.５時間、０℃で撹拌し、ＴＦＡ(１０当量)を反応に添加した。２時間後、反応を真空で濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣで精製して、Ｎ−(４−((１Ｒ,３Ｒ,４Ｓ,５Ｓ)−３−アミノ−４−フルオロ−５−メチルシクロヘキシル)ピリジン−３−イル)−６−(２,６−ジフルオロフェニル)−５−フルオロピコリンアミドをＴＦＡ塩として得た。LCMS(m/z):459.3 (MH+);LC Rt = 2.39分。
【０３０７】
ＬＣ／ＭＳおよびＬＣ特徴付けに加えて、代表的化合物を１Ｈ−ＮＭＲにより分析した。以下は、本発明の化合物の典型的スペクトルである。
【表２３】
0005412519.tif 000211
【表２４】
0005412519.tif 000212
【０３０８】
実施例１４０
Ｐｉｍ１  ＡＴＰ枯渇アッセイ
ＰＩＭ１の活性を、ペプチド基質へのキナーゼ触媒リン酸転移に由来するＡＴＰ枯渇を定量するためのルシフェラーゼ−ルシフェリンを利用するＡＴＰ検出試薬を使用して測定する。試験する化合物を１００％ＤＭＳＯに溶解し、直接白色３８４ウェルプレートに０.５μl／ウェルで分配する。反応を開始するために、アッセイ緩衝液(５０mM  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７.５、５mM  ＭｇＣｌ２、１mM  ＤＴＴ、０.０５％ＢＳＡ)中の１０μlの５nM  Ｐｉｍ１キナーゼおよび８０μM  ＢＡＤペプチド(ＲＳＲＨＳＳＹＰＡＧＴ−ＯＨ)を各ウェルに添加する。１５分間後、アッセイ緩衝液中１０μlの４０μM  ＡＴＰを添加する。最終アッセイ濃度は２.５nM  ＰＩＭ１、２０μM  ＡＴＰ、４０μM  ＢＡＤペプチドおよび２.５％ＤＭＳＯである。反応を約５０％のＡＴＰが枯渇するまで行い、２０μｌキナーゼGlo Plus(Promega Corporation)溶液の添加により停止させる。停止させた反応を１０分間インキュベートし、残ったＡＴＰをVictor2(Perkin Elmer)上での発光により検出する。前記実施例化合物をＰｉｍ１  ＡＴＰ枯渇アッセイでアッセイし、以下の表３に示すＩＣ５０値を示すことが判明した。最大阻害濃度の半分であるＩＣ５０は、インビトロでその標的を５０％阻害するのに必要な試験化合物の濃度を示す。
【０３０９】
実施例１４１
Ｐｉｍ２  ＡＴＰ枯渇アッセイ
ＰＩＭ２の活性を、ペプチド基質へのキナーゼ触媒リン酸転移に由来するＡＴＰ枯渇を定量するためのルシフェラーゼ−ルシフェリンを利用するＡＴＰ検出試薬を使用して測定する。試験する化合物を１００％ＤＭＳＯに溶解し、直接白色３８４ウェルプレートに０.５μl／ウェルで分配する。反応を開始するために、アッセイ緩衝液(５０mM  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７.５、５mM  ＭｇＣｌ２、１mM  ＤＴＴ、０.０５％ＢＳＡ)中の１０μlの１０nM  Ｐｉｍ２キナーゼおよび２０μM  ＢＡＤペプチド(ＲＳＲＨＳＳＹＰＡＧＴ−ＯＨ)を各ウェルに添加する。１５分間後、アッセイ緩衝液中１０μlの８μM  ＡＴＰを添加する。最終アッセイ濃度は５nM  ＰＩＭ２、４μM  ＡＴＰ、１０μM  ＢＡＤペプチドおよび２.５％ＤＭＳＯ。反応を約５０％のＡＴＰが枯渇するまで行い、２０μｌキナーゼGlo Plus(Promega Corporation)溶液の添加により停止させる。停止させた反応を１０分間インキュベートし、残ったＡＴＰをVictor2(Perkin Elmer)上での発光により検出する。前記実施例化合物をＰｉｍ２  ＡＴＰ枯渇アッセイでアッセイし、以下の表３に示すＩＣ５０値を示すことが判明した。
【０３１０】
実施例１４２
Ｐｉｍ３  ＡＴＰ枯渇アッセイ
ＰＩＭ３の活性を、ペプチド基質へのキナーゼ触媒リン酸転移に由来するＡＴＰ枯渇を定量するためのルシフェラーゼ−ルシフェリンを利用するＡＴＰ検出試薬を使用して測定する。試験する化合物を１００％ＤＭＳＯに溶解し、直接白色３８４ウェルプレートに０.５μl／ウェルで分配する。反応を開始するために、１０μlの１０nM  Ｐｉｍ３キナーゼおよび２００μM  ＢＡＤペプチド(ＲＳＲＨＳＳＹＰＡＧＴ−ＯＨ)のアッセイ緩衝液(５０mM  ＨＥＰＥＳ  ｐＨ７.５、５mM  ＭｇＣｌ２、１mM  ＤＴＴ、０.０５％ＢＳＡ)を各ウェルに添加する。１５分間後、１０μlの８０μM  ＡＴＰのアッセイ緩衝液を添加する。最終アッセイ濃度は５nM  ＰＩＭ１、４０μM  ＡＴＰ、１００μM  ＢＡＤペプチドおよび２.５％ＤＭＳＯ。反応を約５０％のＡＴＰが枯渇するまで行い、２０μｌキナーゼGlo Plus(Promega Corporation)溶液の添加により停止させる。停止させた反応を１０分間インキュベートし、残ったＡＴＰをVictor2(Perkin Elmer)上での発光により検出する。前記実施例化合物をＰｉｍ３  ＡＴＰ枯渇アッセイでアッセイし、以下の表３に示すＩＣ５０値を示すことが判明した。
【０３１１】
実施例１４３
細胞増殖アッセイ
ＫＭＳ１１(ヒト骨髄腫細胞株)を１０％ＦＢＳ、ピルビン酸ナトリウムおよび抗生物質を添加したＩＭＤＭで培養した。細胞を、アッセイの日に、同じ培地中２０００細胞／ウェルの密度で９６ウェル組織培養プレートに外側のウェルを空けて播種した。ＭＭ１.ｓ(ヒト骨髄腫細胞株)を、１０％ＦＢＳ、ピルビン酸ナトリウムおよび抗生物質を添加したＲＰＭＩ１６４０で添加した。細胞を、アッセイの日に、５０００細胞／ウェルの密度で９６ウェル組織培養プレートに外側のウェルを空けて播種した。
【０３１２】
ＤＭＳＯ中に調製した化合物を、ＤＭＳＯで所望の最終濃度の５００倍に希釈し、培養培地で最終濃度の２倍に希釈した。等容量の２倍化合物を、９６ウェルプレートの細胞に添加し、３７℃で３日間インキュベートした。
３日間後、プレートを室温に平衡化し、等容量のCellTiter-Glow Reagent(Promega)を培養ウェルに添加した。プレートを短く撹拌し、発光シグナルをルミノメーターで測定した。ＤＭＳＯのみで処理した細胞で見られるシグナル対対照化合物で処理した細胞で見られるシグナルを計算し、試験した化合物についてＥＣ５０値(すなわち、細胞において最大効果の５０％を得るために必要な試験化合物濃度)を表３に示す通り決定するのに使用した。
【０３１３】
実施例１４０(Ｐｉｍ１  ＡＴＰ枯渇アッセイ)、１４１(Ｐｉｍ２  ＡＴＰ枯渇アッセイ)、および１４２(Ｐｉｍ３  ＡＴＰ枯渇アッセイ)に記載する方法を使用して、先の実施例の化合物のＩＣ５０濃度を、以下の表３に示す通り決定した。
【０３１４】
実施例１４３(細胞増殖アッセイ)に記載する方法を使用して、実施例化合物のＥＣ５０濃度を、ＫＭＳ１１細胞で表３に示す通り決定した。
【表２５】
0005412519.tif 000213
【表２６】
0005412519.tif 000214
【０３１５】
【表２７】
0005412519.tif 000215
【表２８】
0005412519.tif 000216
【０３１６】
【表２９】
0005412519.tif 000217
【表３０】
0005412519.tif 000218
【０３１７】
【表３１】
0005412519.tif 000219
【表３２】
0005412519.tif 000220
【０３１８】
【表３３】
0005412519.tif 000221
【表３４】
0005412519.tif 000222
【０３１９】
【表３５】
0005412519.tif 000223
【表３６】
0005412519.tif 000224
【０３２０】
【表３７】
0005412519.tif 000225
【表３８】
0005412519.tif 000226
【０３２１】
【表３９】
0005412519.tif 000227
【表４０】
0005412519.tif 000228
【０３２２】
【表４１】
0005412519.tif 000229
【表４２】
0005412519.tif 000230
【０３２３】
【表４３】
0005412519.tif 000231
【表４４】
0005412519.tif 000232
【０３２４】
実施例１４４
生物学的方法：多発性骨髄腫異種移植モデルにおける薬理学標的調節および効果試験
Suzanne Trudel(University Health Network, Toronto, Canada)から得たＫＭＳ１１−ｌｕｃ多発性骨髄腫癌細胞、レトロウイルストランスフェクションにより達成した安定なルシフェラーゼを発現し、１０％熱不活性化ウシウシ血清と１％グルタミン(Invitrogen, Inc.)を添加したＤＭＥＭで維持した。雌ＳＣＩＤ／ｂｇマウス(８−１２週齢、２０−２５ｇ、Charles River)を全インビボ薬理学試験に使用した。マウスを実験動物の人道的処置および扱いに関する州および国のガイドラインに従い飼育、維持し、餌および水を自由に与えた。癌細胞を対数増殖期中期培養から回収し、生存細胞計数を自動化細胞カウンター(Vi-CELL, Beckman-Coulter)で行い、細胞を等部のＨＢＳＳおよびMatrigel(Invitrogen, Inc.)に再懸濁した。１０００万個の各マウスの右脇腹に細胞を皮下注射した。化合物処置を、ＰＫ／ＰＤ試験については腫瘍サイズが２５０−３５０mm３に達したとき、そして効果試験については１５０−２５０mm３に達したときに開始し、腫瘍容積はStudyDirectorソフトウェア(StudyLog Systems, Inc.)を使用して決定した。全化合物処置は経口投与で行った。
【０３２５】
ＰＫ／ＰＤ経時的試験におけるインビボ標的調節のために、腫瘍担持マウスに１回経口投与量の媒体または化合物を種々の濃度で投与した。投与１時間、８時間および２４時間後、腫瘍組織および血液サンプルを個々のマウスから採取した。摘出した腫瘍組織を急速冷凍し、液体窒素冷却した冷凍乳鉢および乳鉢を使用して粉砕した。血液サンプルを心臓穿刺により採り、血漿をリチウムヘパリンおよび血漿セパレーター(BD Microtainer)を含む遠沈管を使用して分離した。凍結腫瘍サンプルを、無ＥＤＴＡプロテアーゼ阻害剤(Roche)、ホスファターゼ阻害剤１および２、および１Ｍ  ＮａＦ(Sigma)を添加した冷緩衝液(Meso Scale Discovery)中で、製造者の指示に従い融解した。ダウンス装置またはMagNA Lyser(Roche)でホモジネーション後、３００×ｇで３０分間、４℃で遠心後に透明上清を得て、タンパク質濃度をＢＣＡ(BioRad)で決定した。標的調節を、製造者の指示に従い、Meso Scale phospho-BadSer112/total Bad duplex kitを使用して決定した。簡単に言うと、等量のタンパク質をMeso Scale phospho-Serine112/total Bad duplex９６ウェルプレート(Ｍeso Scale Discovery)に入れ、サンプルを３０分間、室温でまたは一夜４℃で、振盪しながらインキュベートした。プレートを１×ＭＳＤ洗浄緩衝液を洗浄し、Sulfo-Tag検出抗体をウェルに添加し、１時間、室温で振盪しながらインキュベートした。プレートを再び洗浄し、捕捉した検体をウェルにRead Buffer Tを添加した後に検出した。プレートをSECTOR Imager 6000 Instrument(Meso Scale Discovery)で読んだ。ｐＢａｄからのシグナルと全Ｂａｄからのシグナルの比をサンプル間の生存の補正に使用した。以下の表に示すデータは、媒体対照群に対して標準化した、代表的本発明の化合物による全Ｂａｄリン酸化に対するｐＢａｄＳｅｒ１１２リン酸化の阻害パーセントとして示す。調節の程度を、媒体対照に対する、パーセントとして示す(ｎ.ｄ.、測定せず)。
【表４５】
0005412519.tif 000233
【０３２６】
効果試験について、腫瘍担持マウスを、StudyDirectorソフトウェア(StudyLog Systems, Inc.)を使用して、１５０−２５０mm３の範囲の等しい腫瘍体積変化の群に無作為化した。無作為化後、マウスに、最初は２００μlから複数の化合物濃度を１日１回または２回経口投与した。腫瘍増殖および動物体重を少なくとも週に２回測定し、処置関連毒性の可能性をモニターするために毎日の臨床観察を使用した。動物を、腫瘍体積が２５００mm３を超えたら、または体重が最初の測定から２０％を超えて減ったら試験から除いた。
【０３２７】
実施例９９の化合物の効果を、ＫＭＳ１１−ｌｕｃ異種移植モデルで評価し、マウスに実施例９９の化合物を１日２回５０および１００mg／kg、および１日１回１００mg／kgで１４日間経口投与した。腫瘍サイズがおおよそ２５０mm３に到達したとき投与を開始した。図１に示す通り、実施例９９の化合物はインビボで用量依存的効果を示し、腫瘍増殖阻害が５０mg／kg１日２回(９２％)および１００mg／kg１日２回(４％緩解)で観察された。１００mg／kgの１日１回投与は、１日２回より効果が低かった(６５％)。これらの結果はｐＢａｄＳｅｒ１１２調節の程度および強度と相関し、徹底的かつ長時間の標的調節が最大効果に必要であることを示唆する。
【０３２８】
実施例７０の化合物の効果を、ＫＭＳ１１−ｌｕｃ異種移植モデルで評価し、マウスに実施例８０の化合物を１日２回２５および５０mg／kg、および１日１回１００mg／kgで１４日間経口投与した。腫瘍サイズがおおよそ２２５mm３に到達したとき投与を開始した。図２に示す通り、実施例７０の化合物はインビボで用量依存的効果を示し、腫瘍増殖阻害が２５mg／kg(６５％)および５０mg／kg(１００％)で観察された。顕著な腫瘍増殖阻害がまた１００mg／kg１日１回(８４％)でも観察された。
【０３２９】
実施例９６の化合物の効果を、ＫＭＳ１１−ｌｕｃ異種移植モデルで評価し、マウスに実施例９６の化合物を１日２回２５および５０mg／kg、および１日１回１００mg／kgで１４日間経口投与した。腫瘍サイズがおおよそ２２５mm３に到達したとき投与を開始した。図３に示す通り、化合物実施例９６の化合物はインビボで用量依存的効果を示し、腫瘍増殖阻害が２５mg／kg(６７％)、および５０mg／kg(９６％)で観察された。顕著な腫瘍増殖阻害がまた１００mg／kg１日１回(８８％)でも観察された。
【０３３０】
本発明の好ましい態様を説明し、記載しているが、本発明の精神および範囲から逸脱することなく多くの変化をなし得ることは認識されよう。
【図１】
0005412519.tif 000255
【図２】
0005412519.tif 000256
【図３】
0005412519.tif 000257