(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）で示される、結晶性のＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩。
【化１】
0005460689.tif 000016
【請求項２】
Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶、
すなわち、粉末Ｘ線回折パターンが、５．９２±０．１０、８．６４±０．１０、１１．８６±０．１０、１６．５８±０．１０、１６．９４±０．１０、１７．８６±０．１０、１９．１２±０．１０、１９．６６±０．１０、２０．１２±０．１０、２３．４２±０．１０、２４．１４±０．１０、２４．８０±０．１０、および２６．７６±０．１０の回折角２θ（°）にピークを有することを特徴とするＡ型。
【請求項３】
粉末Ｘ線回折パターンが、９．８０±０．１０、１３．２８±０．１０、１４．７８±０．１０、１７．３６±０．１０、１８．６２±０．１０、２１．６２±０．１０、２２．１２±０．１０、２２．３８±０．１０、２３．１４±０．１０、２５．２０±０．１０、２７．２４±０．１０、２８．３４±０．１０、２８．７８±０．１０、３３．１２±０．１０、および４１．７０±０．１０の回折角２θ（°）にもピークを有することを特徴とする、請求項２に記載のＡ型。
【請求項４】
以下の工程を含む、請求項２または３に記載のＡ型の調製方法：
（ａ）式（Ｉ）の化合物を有機溶媒に溶解させて、溶液を生成させる工程；
【化２】
0005460689.tif 000017
（ｂ）攪拌下、式（Ｉ）の化合物とｐ−トルエンスルホン酸のモル比を１：１〜６の範囲に制御して、該有機溶液中、ｐ−トルエンスルホン酸から作成した溶液を滴下する工程；および
（ｃ）結晶性の沈殿を得て、その結晶をろ過し、洗浄して、目的の結晶を得る工程。
【請求項５】
工程（ｂ）において、式（Ｉ）の化合物とｐ−トルエンスルホン酸のモル比を１：３〜６の範囲に制御する、請求項４に記載のＡ型の調製方法。
【請求項６】
該有機溶媒が、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノ−ル、ブタノール、アセトン、アセトニトリル、ＤＭＳＯ、ＤＭＦ、プロパンジオール、およびこれらの混合物からなる群から選択される；および／または
工程（ａ）における式（Ｉ）の化合物の溶液が、３〜８ｇ／１００ｍＬの濃度である；および／または
工程（ｂ）におけるｐ−トルエンスルホン酸の溶液が、１０〜３０ｇ／１００ｍＬの濃度である
ことを特徴とする、請求項４または５に記載の方法。
【請求項７】
該有機溶媒が、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、テトラヒドロフランとメタノールとの混合物、テトラヒドロフランとエタノールとの混合物からなる群から選択される；および／または
工程（ａ）における式（Ｉ）の化合物の溶液が、４〜６ｇ／１００ｍＬの濃度である；および／または
工程（ｂ）におけるｐ−トルエンスルホン酸の溶液が、１５〜２５ｇ／１００ｍＬの濃度である
ことを特徴とする、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
該有機溶媒が、体積比が１：１〜３のテトラヒドロフランとメタノールとの混合物であることを特徴とする、請求項６または７に記載の方法。
【請求項９】
該有機溶媒が、体積比が１：２〜３のテトラヒドロフランとメタノールとの混合物であることを特徴とする、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＢ型結晶、
すなわち、粉末Ｘ線回折パターンが、４．７２±０．１０、１７．０４±０．１０、１９．３２±０．１０、および２４．１２±０．１０の回折角２θ（°）にピークを有することを特徴とするＢ型。
【請求項１１】
粉末Ｘ線回折パターンが、７．９２±０．１０、９．５４±０．１０、１１．９０±０．１０、１２．９４±０．１０、１４．３４±０．１０、１５．３２±０．１０、１７．８８±０．１０、２０．００±０．１０、２１．８０±０．１０、２２．４２±０．１０、２５．０８±０．１０、２５．８０±０．１０、２７．２８±０．１０、２８．００±０．１０、および２８．４４±０．１０の回折角２θ（°）にもピークを有することを特徴とする、請求項１０に記載のＢ型。
【請求項１２】
以下の工程を含む、請求項１０または１１に記載のＢ型の調製方法：
（ａ）請求項２または３に記載のＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶を、プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の混合物に、加熱して溶解させて、溶液を生成させる工程；
（ｂ）該溶液を４０〜８０℃の温度で、１〜２時間保温する工程；および
（ｃ）該溶液を冷却し、結晶性の沈殿を得て、その得られた混合物を放置して、結晶をろ過し、洗浄して、目的の結晶を得る工程。
【請求項１３】
該プロトン性溶媒が、水、または水とアルコールとの混合物である；および／または
該非プロトン性溶媒が、テトラヒドロフラン、エーテル、ジクロロメタン、アセトン、アセトニトリル、ＤＭＦ、およびこれらの混合物からなる群から選択される；および／または
工程（ａ）におけるＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶の溶液が、２〜１０ｇ／１００ｍＬの濃度である；および／または
プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の混合物における該プロトン性溶媒と該非プロトン性溶媒の体積比が、１：２〜４である、
請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
工程（ａ）におけるＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶の溶液が、４〜８ｇ／１００ｍＬの濃度である；および／または
プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の混合物における該プロトン性溶媒と該非プロトン性溶媒の体積比が、１：３〜４である、
請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
該プロトン性溶媒が水であり；該非プロトン性溶媒がテトラヒドロフランであり；該プロトン性溶媒と該非プロトン性溶媒の体積比が１：２〜４であり；および、工程（ａ）におけるＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶の溶液が、２〜１０ｇ／１００ｍＬの濃度であることを特徴とする、請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
該プロトン性溶媒が水であり；該非プロトン性溶媒がテトラヒドロフランであり；該プロトン性溶媒と該非プロトン性溶媒の体積比が１：３〜４であり；および、工程（ａ）におけるＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶の溶液が、４〜８ｇ／１００ｍＬの濃度であることを特徴とする、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＣ型結晶、
すなわち、粉末Ｘ線回折パターンが、３．４０±０．１０、６．８２±０．１０、７．５８±０．１０、１１．３０±０．１０、１４．８４±０．１０、１５．２４±０．１０、１７．２８±０．１０、１７．８６±０．１０、１８．３４±０．１０、２０．３２±０．１０、２２．９６±０．１０、２３．５０±０．１０、２４．１２±０．１０、２４．６２±０．１０、および２５．８６±０．１０の回折角２θ（°）にピークを有することを特徴とするＣ型。
【請求項１８】
粉末Ｘ線回折パターンが、９．０４±０．１０、１０．２６±０．１０、２２．４４±０．１０、２５．０６±０．１０、２６．９８±０．１０、２８．６２±０．１０、および２９．９８±０．１０の回折角２θ（°）にもピークを有することを特徴とする、請求項１７に記載のＣ型。
【請求項１９】
以下の工程を含む、請求項１７または１８に記載のＣ型の調製方法：
（ａ）請求項２または３に記載のＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶を、プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の混合物に溶解させる工程；
（ｂ）攪拌下、Ａ型とｐ−トルエンスルホン酸のモル比を１：１〜６の範囲に制御して、プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の該混合物中、ｐ−トルエンスルホン酸から作成した溶液を、滴下する工程；および
（ｃ）結晶性の沈殿を得て、その得られた混合物を放置して、結晶をろ過し、洗浄して、目的の結晶を得る工程。
【請求項２０】
工程（ｂ）において、Ａ型とｐ−トルエンスルホン酸のモル比を１：３〜６の範囲に制御する、請求項１９に記載のＣ型の調製方法。
【請求項２１】
該プロトン性溶媒が、水、または水とアルコールとの混合物である；および／または
該非プロトン性溶媒が、テトラヒドロフラン、エーテル、ジクロロメタン、アセトン、アセトニトリル、ＤＭＦ、およびこれらの混合物からなる群から選択される；および／または
工程（ａ）におけるＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶の溶液が、３〜７ｇ／１００ｍＬの濃度である；および／または
工程（ｂ）におけるｐ−トルエンスルホン酸の溶液が、１０〜３０ｇ／１００ｍＬの濃度である；および／または
プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の該混合物における該プロトン性溶媒と該非プロトン性溶媒の体積比が、１：１〜５である、
請求項１９に記載の方法。
【請求項２２】
工程（ａ）におけるＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶の溶液が、４〜６ｇ／１００ｍＬの濃度である；および／または
工程（ｂ）におけるｐ−トルエンスルホン酸の溶液が、１５〜２５ｇ／１００ｍＬの濃度である；および／または
プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の該混合物における該プロトン性溶媒と該非プロトン性溶媒の体積比が、１：３〜４である、
請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
工程（ａ）におけるＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶の溶液が、３〜７ｇ／１００ｍＬの濃度であり；工程（ｂ）におけるｐ−トルエンスルホン酸の溶液が、１０〜３０ｇ／１００ｍＬの濃度であり；該プロトン性溶媒が水であり；該非プロトン性溶媒がテトラヒドロフランであり；および、テトラヒドロフランと水の体積比が１〜５：１である、請求項１９に記載の方法。
【請求項２４】
工程（ａ）におけるＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶の溶液が、４〜６ｇ／１００ｍＬの濃度であり；工程（ｂ）におけるｐ−トルエンスルホン酸の溶液が、１５〜２５ｇ／１００ｍＬの濃度であり；該プロトン性溶媒が水であり；該非プロトン性溶媒がテトラヒドロフランであり；および、テトラヒドロフランと水の体積比が３〜４：１である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
請求項１〜３、１０、１１、１７および１８のいずれか記載の結晶型、ならびに薬学上許容される担体を含有する医薬組成物。
【請求項２６】
腫瘍の治療および／もしくは予防のための付加的な医薬を１つまたはそれ以上、さらに含有する、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
腫瘍の治療および／または予防のための医薬の調製における、請求項１〜３、１０、１１、１７および１８のいずれか記載の結晶型の使用。
【請求項２８】
腫瘍が、乳癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、胃癌、大腸癌、膵臓癌、および扁平上皮癌からなる群から選択される、請求項２７に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、４−フェニルアミノキナゾリン誘導体の多形に関する。特に、本発明は、式（Ｉ）の化合物（化学名は、Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドである。）のｐ−トルエンスルホン酸塩の多形、それらの調製方法、該多形を含有する医薬組成物、およびそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
プロテインチロシンキナーゼ（ＰＴＫ）は、通常の細胞成長に重要な役割を担っている１つの類型の酵素である。プロテインチロシンキナーゼは、ＡＴＰ由来のリン酸基をプロテイン基質の残基に移動させることを触媒する。多くの上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）はＰＴＫの作用を有しており、通常の細胞成長の制御にはこれらの受容体と成長因子の相互作用が必要である。しかしながら、ＥＧＦＲの過剰発現によって、それ自身によるチロシンキナーゼ作用による過剰な細胞増殖が引き起され、最終的には腫瘍が形成されうる。
【０００３】
上皮成長因子受容体ファミリーは、構造によって、ＥＧＦＲ（Ｅｒｂ−Ｂ１）、Ｅｒｂ−Ｂ２（ＨＥＲ−２／ｎｅｕ）、Ｅｒｂ−Ｂ３およびＥｒｂ−Ｂ４に分類することができる。これらの上皮成長因子受容体のすべては、大多数の癌と関係していることがすでに確かめられている。
【０００４】
異常な受容体キナーゼが癌の病因において重要な作用をしていることから、最近の抗癌剤の研究者は、特定のＰＴＫ阻害剤を可能性のある抗癌治療剤として開発することに注力している。ＰＴＫ阻害剤としてのキナゾリン誘導体の将来の癌治療適用のための研究は、広く魅力的になっている。
【０００５】
ＷＯ９６／３０３４７（中国特許出願ＣＮ９６１０２９９２）およびＷＯ９６／３３９８０は、４−（置換−フェニルアミノ）−キナゾリン誘導体、これらのプロドラッグ、これらの薬学上許容される塩、および過剰な細胞増殖を原因とする疾患を治療する際のこれらの使用に関する。
【０００６】
ＷＯ９９／０６３７８、ＷＯ２０００／３１０４８およびＷＯ２０００／０６５５５（中国特許出願ＣＮ９９８０８９４９）はまた、不可逆的なＰＴＫ阻害活性を有する置換キナゾリン誘導体に関する。
【０００７】
ＷＯ２００６／０７１０１７はまた、癌細胞の成長を阻害するいくつかのキナゾリン誘導体を記述する。
【０００８】
ＷＯ２００７／０８２４３４は、新規な４−フェニルアミノキナゾリン誘導体およびＰＴＫ阻害剤としてのその使用を記載する。また、その中で、実施例８で調製された化合物Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドが、ヒト扁平上皮癌細胞Ａ４３１、およびヒト乳癌細胞ＢＴ−４７４について相対的に良い成長抑制効果を有していることが、実験で証明されている。この化合物は、ヌードマウスに移植したヒト扁平上皮癌細胞Ａ４３１に対しても腫瘍抑制効果を有している。また、この化合物がＥｒｂ−Ｂ２キナーゼに対しても優れた阻害効果を有していることが、in vitro実験で証明されている。
【０００９】
結晶型によって、化合物の物理的性質が影響を受ける。異なる結晶格子構造のために、多くの結晶型を有する医薬化合物は、異なる外見（色、および針状晶、層状晶、粒状晶等の形状）だけではなく、異なる物理的性質（融点、溶解度、密度、安定性および吸湿性等）も有しうる。その結果、それらは、in vivoで異なる溶解性および吸収性の性質を示し、これによって、医薬化合物の臨床上の効果と安全性にある程度影響を与えるかもしれない。
【００１０】
特定の結晶型は、アモルファス状態または他の結晶型と比較すると、異なる熱力学的な性質を有する。融点測定器、熱重量分析（ＴＧＡ）または示差走査熱量測定（ＤＳＣ）等を研究室で用いて熱的特徴を測定することで、特定の結晶型、アモルファス状態、および他の結晶型を区別することができる。特定の結晶型は特別なスペクトル上の特徴を持ちうる。特定の結晶型は、例えば、粉末Ｘ線回折パターンとＩＲスペクトルの両方のデータによって特徴付けられる。
【００１１】
上記の文書は、ここにこの開示の中に参照として組み入れられる。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド（下記の式（Ｉ）に示した通り）  ｐ−トルエンスルホン酸塩の新規な多形、それらの調製方法、該多形を含有する医薬組成物、腫瘍の治療および／または予防のための医薬の調製におけるそれらの使用、ならびに哺乳動物における腫瘍の治療および／または予防の方法に関する。
【００１３】
要約すると、本発明は、以下の技術解決手段を提供する。
１．式（Ｉ）で示される、結晶性のＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩。
【００１４】
【化１】
0005460689.tif 000002
【００１５】
２．Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶、
すなわち、粉末Ｘ線回折パターンが、５．９２±０．１０、８．６４±０．１０、１１．８６±０．１０、１６．５８±０．１０、１６．９４±０．１０、１７．８６±０．１０、１９．１２±０．１０、１９．６６±０．１０、２０．１２±０．１０、２３．４２±０．１０、２４．１４±０．１０、２４．８０±０．１０、および２６．７６±０．１０の回折角２θ（°）にピークを有することを特徴とするＡ型。
【００１６】
３．該Ａ型の粉末Ｘ線回折パターンが、９．８０±０．１０、１３．２８±０．１０、１４．７８±０．１０、１７．３６±０．１０、１８．６２±０．１０、２１．６２±０．１０、２２．１２±０．１０、２２．３８±０．１０、２３．１４±０．１０、２５．２０±０．１０、２７．２４±０．１０、２８．３４±０．１０、２８．７８±０．１０、３３．１２±０．１０、および４１．７０±０．１０の回折角２θ（°）にもピークを有することを特徴とする、技術解決手段２記載のＡ型。
【００１７】
４．該Ａ型が、図１に実質的に示される粉末Ｘ線回折パターンを有することを特徴とする、技術解決手段２または３記載のＡ型。
【００１８】
５．該Ａ型が、図５に実質的に示されるＩＲスペクトルをも有することを特徴とする、技術解決手段４記載のＡ型。
【００１９】
６．以下の工程を含む、技術解決手段２〜５のいずれか記載のＡ型の調製方法：
（ａ）下式（Ｉ）で示される化合物を有機溶媒に溶解させて、溶液を生成させる工程；
【００２０】
【化２】
0005460689.tif 000003
【００２１】
（ｂ）攪拌下、式（Ｉ）の化合物とｐ−トルエンスルホン酸のモル比を１：１〜６、好ましくは１：３〜６の範囲に制御して、該有機溶液中、ｐ−トルエンスルホン酸から作成した溶液を滴下する工程；および
（ｃ）結晶性の沈殿を得て、その結晶をろ過し、洗浄して、目的の結晶を得る工程。
【００２２】
７．該有機溶媒が、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノ−ル、ブタノール、アセトン、アセトニトリル、ＤＭＳＯ、ＤＭＦ、プロパンジオール、およびこれらの混合物からなる群、好ましくは、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、テトラヒドロフランとメタノールとの混合物、テトラヒドロフランとエタノールとの混合物からなる群から選択されることを特徴とする、技術解決手段６記載の方法。
【００２３】
８．該有機溶媒が、体積比が１：１〜３、好ましくは１：２〜３のテトラヒドロフランとメタノールとの混合物である、技術解決手段７記載の方法。
【００２４】
９．工程（ａ）における式（Ｉ）の化合物の溶液が、３〜８ｇ／１００ｍＬ、好ましくは４〜６ｇ／１００ｍＬの濃度であることを特徴とする、技術解決手段６〜８のいずれか記載の方法。
【００２５】
１０．工程（ｂ）におけるｐ−トルエンスルホン酸の溶液が、１０〜３０ｇ／１００ｍＬ、好ましくは１５〜２５ｇ／１００ｍＬの濃度であることを特徴とする、技術解決手段６〜９のいずれか記載の方法。
【００２６】
１１．Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＢ型結晶、
すなわち、粉末Ｘ線回折パターンが、４．７２±０．１０、１７．０４±０．１０、１９．３２±０．１０、および２４．１２±０．１０の回折角２θ（°）にピークを有することを特徴とするＢ型。
【００２７】
１２．粉末Ｘ線回折パターンが、７．９２±０．１０、９．５４±０．１０、１１．９０±０．１０、１２．９４±０．１０、１４．３４±０．１０、１５．３２±０．１０、１７．８８±０．１０、２０．００±０．１０、２１．８０±０．１０、２２．４２±０．１０、２５．０８±０．１０、２５．８０±０．１０、２７．２８±０．１０、２８．００±０．１０、および２８．４４±０．１０の回折角２θ（°）にもピークを有することを特徴とする、技術解決手段１１記載のＢ型。
【００２８】
１３．該Ｂ型が、図２に実質的に示される粉末Ｘ線回折パターンを有することを特徴とする、技術解決手段１１または１２記載のＢ型。
【００２９】
１４．該Ｂ型が、図６に実質的に示されるＩＲスペクトルをも有することを特徴とする、技術解決手段１３記載のＢ型。
【００３０】
１５．以下の工程を含む、技術解決手段１１〜１４のいずれか記載のＢ型の調製方法：
（ａ）技術解決手段２〜５のいずれか記載のＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶を、プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の混合物に、加熱して溶解させて、溶液を生成させる工程；
（ｂ）該溶液を４０〜８０℃の温度で、１〜２時間保温する工程；および
（ｃ）該溶液を冷却し、結晶性の沈殿を得て、その得られた混合物を放置して、結晶をろ過し、洗浄して、目的の結晶を得る工程。
【００３１】
１６．該プロトン性溶媒が、水、または水とアルコールとの混合物である、技術解決手段１５記載の方法。
【００３２】
１７．該非プロトン性溶媒が、テトラヒドロフラン、エーテル、ジクロロメタン、アセトン、アセトニトリル、ＤＭＦ、およびこれらの混合物からなる群から選択される、技術解決手段１５または１６記載の方法。
【００３３】
１８．工程（ａ）におけるＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶の溶液が、２〜１０ｇ／１００ｍＬ、好ましくは４〜８ｇ／１００ｍＬの濃度である、技術解決手段１５〜１７のいずれか記載の方法。
【００３４】
１９．プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の該混合物における該プロトン性溶媒と該非プロトン性溶媒の体積比が、１：２〜４、好ましくは１：３〜４であることを特徴とする、技術解決手段１５〜１８のいずれか記載の方法。
【００３５】
２０．Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＣ型結晶、
すなわち、粉末Ｘ線回折パターンが、３．４０±０．１０、６．８２±０．１０、７．５８±０．１０、１１．３０±０．１０、１４．８４±０．１０、１５．２４±０．１０、１７．２８±０．１０、１７．８６±０．１０、１８．３４±０．１０、２０．３２±０．１０、２２．９６±０．１０、２３．５０±０．１０、２４．１２±０．１０、２４．６２±０．１０、および２５．８６±０．１０の回折角２θ（°）にピークを有することを特徴とするＣ型。
【００３６】
２１．粉末Ｘ線回折パターンが、９．０４±０．１０、１０．２６±０．１０、２２．４４±０．１０、２５．０６±０．１０、２６．９８±０．１０、２８．６２±０．１０、および２９．９８±０．１０の回折角２θ（°）にもピークを有することを特徴とする、技術解決手段２０記載のＣ型。
【００３７】
２２．該Ｃ型が、図３に実質的に示される粉末Ｘ線回折パターンを有することを特徴とする、技術解決手段２０または２１記載のＣ型。
【００３８】
２３．該Ｃ型が、図７に実質的に示されるＩＲスペクトルをも有することを特徴とする、技術解決手段２２記載のＣ型。
【００３９】
２４．以下の工程を含む、技術解決手段２０〜２３のいずれか記載のＣ型の調製方法：
（ａ）技術解決手段２〜５のいずれか記載のＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶を、プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の混合物に溶解させる工程；
（ｂ）攪拌下、該Ａ型とｐ−トルエンスルホン酸のモル比を１：１〜６、好ましくは１：３〜６の範囲に制御して、プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の該混合物中、ｐ−トルエンスルホン酸から作成した溶液を、滴下する工程；および
（ｃ）結晶性の沈殿を得て、その得られた混合物を放置して、結晶をろ過し、洗浄して、目的の結晶を得る工程。
【００４０】
２５．該プロトン性溶媒が、水、または水とアルコールとの混合物である、技術解決手段２４記載の方法。
【００４１】
２６．該非プロトン性溶媒が、テトラヒドロフラン、エーテル、ジクロロメタン、アセトン、アセトニトリル、ＤＭＦ、およびこれらの混合物からなる群から選択される、技術解決手段２４または２５記載の方法。
【００４２】
２７．工程（ａ）におけるＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶の溶液が、３〜７ｇ／１００ｍＬ、好ましくは４〜６ｇ／１００ｍＬの濃度である、技術解決手段２４〜２６のいずれか記載の方法。
【００４３】
２８．工程（ｂ）におけるｐ−トルエンスルホン酸の溶液が、１０〜３０ｇ／１００ｍＬ、好ましくは１５〜２５ｇ／１００ｍＬの濃度である、技術解決手段２４〜２７のいずれか記載の方法。
【００４４】
２９．プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の該混合物における該プロトン性溶媒と該非プロトン性溶媒の体積比が、１：１〜５、好ましくは１：３〜４であることを特徴とする、技術解決手段２４〜２８のいずれか記載の方法。
【００４５】
３０．技術解決手段１〜５、１１〜１４、および２０〜２３のいずれか記載の結晶型、ならびに薬学上許容される担体を含有する医薬組成物。
【００４６】
３１．腫瘍の治療および／もしくは予防のための付加的な医薬を１つまたはそれ以上、さらに含有する、技術解決手段３０記載の医薬組成物。
【００４７】
３２．腫瘍の治療および／または予防のための医薬の調製における、技術解決手段１〜５、１１〜１４、および２０〜２３のいずれか記載の結晶型の使用。
【００４８】
３３．それが必要な哺乳動物に、技術解決手段１〜５、１１〜１４、および２０〜２３のいずれか記載の結晶型を、治療および／または予防に有効な量、投与することを含む、哺乳動物における腫瘍の治療および／または予防のための方法。
【００４９】
３４．腫瘍が、乳癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、胃癌、大腸癌、膵臓癌、および扁平上皮癌からなる群から選択される、技術解決手段３２記載の使用、または技術解決手段３３の方法。
【発明を実施するための形態】
【００５０】
具体的には、本発明の第１の側面に従って、式（Ｉ）の化合物のｐ−トルエンスルホン酸塩の結晶が提供され、またそれぞれＡ型、Ｂ型およびＣ型と命名される式（Ｉ）の化合物のｐ−トルエンスルホン酸塩の３つの多形が提供される。
【００５１】
最初に、本発明は、５．９２±０．１０、８．６４±０．１０、１１．８６±０．１０、１６．５８±０．１０、１６．９４±０．１０、１７．８６±０．１０、１９．１２±０．１０、１９．６６±０．１０、２０．１２±０．１０、２３．４２±０．１０、２４．１４±０．１０、２４．８０±０．１０、および２６．７６±０．１０の回折角２θ（°）に高い強度のピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを持つ結晶を提供する。この結晶は本出願においてＡ型と定義される。
【００５２】
上記の特徴的な高い強度の回折ピークに加えて、該Ａ型の粉末Ｘ線回折パターンは、９．８０±０．１０、１３．２８±０．１０、１４．７８±０．１０、１７．３６±０．１０、１８．６２±０．１０、２１．６２±０．１０、２２．１２±０．１０、２２．３８±０．１０、２３．１４±０．１０、２５．２０±０．１０、２７．２４±０．１０、２８．３４±０．１０、２８．７８±０．１０、３３．１２±０．１０、および４１．７０±０．１０の回折角２θ（°）に中程度の強度のピークをも有する。
【００５３】
該Ａ型の粉末Ｘ線回折パターンは、図１に実質的に示される。下表に各々の相対強度を記述する。
【００５４】
【表１】
0005460689.tif 000004
【００５５】
Ａ型は図５に実質的に示されるＩＲスペクトルをも有する。
Ａ型は融点２４５℃の黄緑色の結晶性粉末である。
【００５６】
加えて、本発明は、４．７２±０．１０、１７．０４±０．１０、１９．３２±０．１０、および２４．１２±０．１０の回折角２θ（°）に強い強度のピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを持つ別の結晶をも提供する。この結晶は本出願においてＢ型と定義される。
【００５７】
上記の特徴的な高い強度の回折ピークに加えて、該Ｂ型の粉末Ｘ線回折パターンは、７．９２±０．１０、９．５４±０．１０、１１．９０±０．１０、１２．９４±０．１０、１４．３４±０．１０、１５．３２±０．１０、１７．８８±０．１０、２０．００±０．１０、２１．８０±０．１０、２２．４２±０．１０、２５．０８±０．１０、２５．８０±０．１０、２７．２８±０．１０、２８．００±０．１０、および２８．４４±０．１０の回折角２θ（°）に中程度の強度のピークをも有する。
【００５８】
Ｂ型の粉末Ｘ線回折パターンは、図２に実質的に示される。下表に各々の相対強度を記述する。
【００５９】
【表２】
0005460689.tif 000005
【００６０】
Ｂ型は図６に実質的に示されるＩＲスペクトルをも有する。
Ｂ型は融点２３５．４℃の淡黄色の結晶性粉末である。
【００６１】
加えて、本発明は、３．４０±０．１０、６．８２±０．１０、７．５８±０．１０、１１．３０±０．１０、１４．８４±０．１０、１５．２４±０．１０、１７．２８±０．１０、１７．８６±０．１０、１８．３４±０．１０、２０．３２±０．１０、２２．９６±０．１０、２３．５０±０．１０、２４．１２±０．１０、２４．６２±０．１０、および２５．８６±０．１０の回折角２θ（°）に強い強度のピークを有する粉末Ｘ線回折パターンを持つ結晶をも提供する。この結晶は本出願においてＣ型と定義される。
【００６２】
上記の特徴的な高い強度の回折ピークに加えて、該Ｃ型の粉末Ｘ線回折パターンは、９．０４±０．１０、１０．２６±０．１０、２２．４４±０．１０、２５．０６±０．１０、２６．９８±０．１０、２８．６２±０．１０、および２９．９８±０．１０の回折角２θ（°）に中程度の強度のピークをも有する。
【００６３】
Ｃ型の粉末Ｘ線回折パターンは、図３に実質的に示される。下表に各々の相対強度を記述する。
【００６４】
【表３】
0005460689.tif 000006
【００６５】
Ｃ型は図７に実質的に示されるＩＲスペクトルをも有する。
Ｃ型は融点２４４℃の黄色の結晶性粉末である。
【００６６】
本発明において、上記の３種類の結晶の粉末Ｘ線回折パターンは、ＲＩＧＡＫＵＤ／ＭＮＸ２５５０ＶＢ／ＰＣ  Ｘ線回折測定装置を用いて本技術分野で知られた方法で得られた。
【００６７】
粉末Ｘ線回折パターンにおいて、各々のピークはブラッグの式に基づく計算で確認され、各々のピーク値は、回折角２θ（°）で測定された。ピーク強度の区分は、各々のピークが同様の大きさであることのみを表す。本発明において、各々の結晶型の回折ピークの高さの中で最も高いピークを、相対強度が１００％であり、Ｉ０と定義される基礎ピークとした（例えば、Ａ型の基礎ピークとしては図１の５．９２の回折角２θ（°）のピーク、Ｂ型の基礎ピークとしては図２の４．７２の回折角２θ（°）のピーク、Ｃ型の基礎ピークとしては図３の２５．８６の回折角２θ（°）のピーク）。基礎ピークの高さに対する他のピークの高さの比を、相対強度Ｉ／Ｉ０とした。各々のピークの相対強度の定義を、下表に示した。
【００６８】
【表４】
0005460689.tif 000007
【００６９】
上記の３つの結晶のＩＲスペクトルは、ＦＴＩＲ−８４００Ｓ赤外分光光度計（島津製作所）を用いてＫＢｒ錠剤法で、本技術分野で公知の方法で測定された。上記の結晶の融点は、ＷＲＳ−２Ａ／２マイクロコンピューター融点装置を用いて、本技術分野で公知の方法で測定された。
【００７０】
装置または測定者の相違による誤差があるため、本技術分野の通常の知識を有する者は結晶の物理的性質を特徴付けるパラメーターにわずかな差異があることを理解する。従って、上記のパラメーターは本発明で提供される多形を特徴付けるための助けになるだけであって、本発明で提供される多形を限定するものとしてみなされるものではない。
【００７１】
本発明の第２の側面に従って、本発明の３つの多形の調製方法が提供される。
最初に、本発明は、以下の工程を含む、Ａ型の調製方法を提供する：
（ａ）式（Ｉ）の化合物を有機溶媒に溶解させて、溶液を生成させる工程；
【００７２】
【化３】
0005460689.tif 000008
【００７３】
（ｂ）攪拌下、式（Ｉ）の化合物とｐ−トルエンスルホン酸のモル比を１：１〜６、好ましくは１：３〜６の範囲に制御して、該有機溶液中、ｐ−トルエンスルホン酸から作成した溶液を滴下する工程；および
（ｃ）結晶性の沈殿を得て、その結晶をろ過し、洗浄して、目的の結晶であるＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型結晶を得る工程。
【００７４】
上記の有機溶媒は、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノ−ル、ブタノール、アセトン、アセトニトリル、ＤＭＳＯ、ＤＭＦ、プロパンジオール、およびこれらの混合物からなる群、好ましくは、テトラヒドロフラン、メタノール、エタノール、テトラヒドロフランとメタノールとの混合物、テトラヒドロフランとエタノールとの混合物からなる群から選択され、好ましくはテトラヒドロフランとメタノールとの混合物である。混合物におけるテトラヒドロフランとメタノールの体積比は、特定の結晶化効果を有するものであり、好ましい体積比は、１：１〜３、特に１：２〜３である。
【００７５】
上記工程（ａ）における式（Ｉ）の化合物の溶液は、３〜８ｇ／１００ｍＬ、好ましくは４〜６ｇ／１００ｍＬの濃度である。
【００７６】
上記工程（ｂ）におけるｐ−トルエンスルホン酸の溶液は、１０〜３０ｇ／１００ｍＬ、好ましくは１５〜２５ｇ／１００ｍＬの濃度である。
【００７７】
一般に、上記調製方法は、冷却、室温または加熱の条件下で実施される。反応温度の選択によって、異なる結晶を形成する効果があることは注目すべきであり、このことは、本技術分野の通常の知識を有する者にも知られている。本発明で用いられる結晶化温度は、−１０℃から用いられる溶媒の沸点の間であり、好ましくは０〜４０℃である。
【００７８】
さらに、本発明は、以下の工程を含む、Ｂ型の調製方法を提供する：
（ａ）Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩の上記のＡ型結晶を、プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の混合物に、加熱して溶解させて、溶液を生成させる工程；
（ｂ）該溶液を４０〜８０℃の温度で、１〜２時間保温する工程；および
（ｃ）該溶液を冷却し、結晶性の沈殿を得て、その得られた混合物を放置して、結晶をろ過し、洗浄して、目的の結晶であるＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩の上記のＢ型結晶を得る工程。
【００７９】
該プロトン性溶媒は、水、または水とメタノール、エタノール等のアルコールとの混合物であり、特に好ましくは水である。該非プロトン性溶媒は、テトラヒドロフラン、エーテル、ジクロロメタン、アセトン、アセトニトリル、ＤＭＦ、およびこれらの混合物からなる群から選択され、好ましくはテトラヒドロフランである。
【００８０】
プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の混合物における該プロトン性溶媒と該非プロトン性溶媒の体積比は、１：２〜４、好ましくは１：３〜４である。
【００８１】
工程（ａ）におけるＡ型結晶の溶液は、２〜１０ｇ／１００ｍＬ、好ましくは４〜８ｇ／１００ｍＬの濃度である。
【００８２】
通常、上記の冷却は、室温より低い温度までなされなければならない。上記の放置の時間は、Ｂ型が完全に沈殿する時が最も好ましく、より良い放置時間は、何度かの実験を通して、本技術分野の通常の知識を有する者にとって容易に決定できる。
【００８３】
また、本発明は、以下の工程を含む、Ｃ型の調製方法を提供する：
（ａ）Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩の上記のＡ型結晶を、プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の混合物に溶解させる工程；
（ｂ）攪拌下、該Ａ型とｐ−トルエンスルホン酸のモル比を１：１〜６、好ましくは１：３〜６の範囲に制御して、プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の該混合物中、ｐ−トルエンスルホン酸から作成した溶液を、滴下する工程；および
（ｃ）結晶性の沈殿を得て、その得られた混合物を放置して、結晶をろ過し、洗浄して、目的の結晶を得る工程。
【００８４】
該プロトン性溶媒は、水、または水とメタノール、エタノール等のアルコールとの混合物であり、特に好ましくは水である。該非プロトン性溶媒が、テトラヒドロフラン、エーテル、ジクロロメタン、アセトン、アセトニトリル、ＤＭＦ、およびこれらの混合物からなる群から選択され、好ましくはテトラヒドロフランである。
【００８５】
プロトン性溶媒と非プロトン性溶媒の該混合物における該プロトン性溶媒と該非プロトン性溶媒の体積比は、１：１〜５、好ましくは１：３〜４である。
【００８６】
工程（ａ）におけるＡ型の溶液は、３〜７ｇ／１００ｍＬ、好ましくは４〜６ｇ／１００ｍＬの濃度である。
【００８７】
工程（ｂ）におけるｐ−トルエンスルホン酸の溶液は、１０〜３０ｇ／１００ｍＬ、好ましくは１５〜２５ｇ／１００ｍＬの濃度である。
【００８８】
本発明において、用語「プロトン性溶媒」とは、水酸基（すなわち、−ＯＨ）を有する種類の溶媒を表し、例えば、水、メタノール、エタノール等のアルコールであり、好ましくは、水または水とメタノールもしくはエタノール等のアルコールとの混合物であり、特に好ましくは水である。用語「非プロトン性溶媒」とは、水酸基を有さない有機溶媒を表し、例えば、テトラヒドロフラン、エーテル、ジクロロメタン、アセトン、アセトニトリル、ＤＭＦ、およびこれらの混合物であり、好ましくはテトラヒドロフランである。
【００８９】
本発明の第３の側面に従って、本発明の結晶／多形および薬学上許容される担体を含有する医薬組成物が提供される。さらに、本発明は、治療または予防が必要な哺乳動物に、本発明の結晶／多形を、治療および／または予防に有効な量、投与することを含む、哺乳動物における腫瘍の治療および／または予防のための方法を提供する。
【００９０】
該医薬組成物は、経口、経直腸、非経口（例えば、静脈内、筋肉内または皮下)、又は局所のルートで哺乳動物（例えば、ヒト）に投与されうる。医薬組成物が用いられる際、治療または予防に有効な量の本発明の結晶／多形を含有する医薬組成物が、治療または予防が必要な哺乳動物（例えば、ヒト）に投与される。用語「治療または予防に有効な量」とは、獣医もしくは臨床医が求める哺乳動物（例えば、ヒト）の生物学的または医学的な反応に十分な活性化合物の量を表す。通常の医師、獣医および臨床医は、必要な疾患の治療または予防のための本発明の結晶／多形の有効量を容易に決定することができる。通常、それは、１日当たり０．０１〜２０ｍｇ／患者体重ｋｇ、好ましくは１日当たり０．１〜１０ｍｇ／患者体重ｋｇである。より具体的には、体重６０ｋｇの人の１日投与量は、通常、１〜１０００ｍｇ、好ましくは２０〜５００ｍｇである。具体的な投与量は、投与ルート、患者の年齢、性別、体重および健康状態、治療される特別な状態等の多くの要因に依存することは明らかであり、これらのすべては、熟練した医師の能力の範囲内である。ここで用いられる用語「哺乳動物」とは、ネコ、イヌ、ウサギ、ヤギ、ヒツジ、マウス、ヒト等を含むが、これらに限定されない。ヒトが特に好ましい。
【００９１】
本発明で提供される医薬組成物は、１つまたはそれ以上の腫瘍の治療および／もしくは予防のための他の薬剤をさらに含有してもよい。その腫瘍の治療および／または予防のための他の薬剤としては、シスプラチン等のＤＮＡの化学構造に作用する医薬；メトトレキサート（ＭＴＸ）、５−フルオロウラシル（５ＦＵ）等の核酸合成に影響を与える医薬；アドリアマイシン、エピルビシン、アクラシノマイシン、ミトラマイシン等の核酸転写に作用する医薬；パクリタキセル、ビノレルビン等のチューブリン合成に作用する医薬；アミノグルテチミド、レンタロン、レトロゾール、アナストロゾール等のアロマターゼ酵素の阻害薬；および、イマチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ等の細胞シグナル経路阻害薬から選択してもよい。
【００９２】
本発明の結晶／多形および医薬組成物の両方は、経口投与用の固形投与形態、例えばカプセル剤、錠剤、丸剤、粉薬、顆粒剤、ドラジェ剤（dragees）等に製剤化することができる。かかる固形製剤において、本発明で提供される結晶／多形は、少なくとも１つの通常の不活性の賦形剤（または担体）と混合することができる。この不活性の賦形剤（または担体）には、（ａ）デンプン、乳糖、ショ糖、ブドウ糖、マンニトールおよびケイ酸等の充填剤または溶解剤；（ｂ）ヒドロキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ショ糖およびアラビアゴム等の結合剤；（ｃ）グリセリン等の湿潤剤；（ｄ）寒天、炭酸カルシウム、馬鈴薯デンプンまたはキャッサバデンプン、アルギン酸、ケイ酸塩複合物、ポリビニルピロリドンおよび炭酸ナトリウム等の崩壊剤；（ｅ）パラフィン等の遅延させる溶媒；（ｆ）４級アンモニウム塩化合物等の吸収促進剤；（ｇ）セチルアルコール、モノステアリン酸グリセロール等の湿潤剤；（ｈ）カオリン等の吸収剤；および、（ｉ）タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ドデシル硫酸ナトリウムまたはこれらの混合物等の滑沢剤が、含まれるが、これらに限定されない。カプセル剤、錠剤および丸剤は、バッファーをも含むことができる。
【００９３】
錠剤、ドラジェ剤、カプセル剤、丸剤および顆粒剤等の固形投与形態は、腸溶性コーティングまたは本技術分野でよく知られている他の成分等のコーティングおよび外皮成分と共に調製することができる。これらは、乳白剤を含有してもよい。また、消化管の特定の部分に遅延的に、組成物中の活性化合物の放出を行うことができる。必要に応じて、活性化合物は、上記賦形剤の１つまたはそれ以上と共に、マイクロカプセルの中に製剤化することもできる。
【００９４】
本発明の結晶／多形および医薬組成物は、経口投与用の液体投与形態に製剤化することもできる。この液体投与形態には、薬学上許容される乳剤、溶液、懸濁剤、シロップ剤、チンキ剤が含まれる。活性化合物としての本発明で提供される結晶形に加えて、この液体投与形態は、エタノール、イソプロパノール、炭酸エチル、酢酸エチル、プロパンジオール、１，３−ブタンジオール、ジメチルホルムアミドおよび植物油、特に綿実油、落花生油、トウモロコシ胚芽油、オリーブオイル、ひまし油およびゴマ油またはこれらの混合物等の水、他の溶媒、溶解剤および乳化剤等の、本技術分野で通常用いられる不活性の希釈剤をも含むことができる。これらの不活性の希釈剤と別に、組成物は、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味料、香味料および芳香剤等の補助剤をも含有することができる。
【００９５】
本発明の医薬組成物が懸濁剤である場合、懸濁剤は、本発明によって提供される結晶／多形に加えて、エトキシ化イソオクタデカノール、ポリオキシエチレンソルビトールおよび無水ソルビタンエステル、微結晶セルロース、アルミニウムメトキシドおよび寒天、またはこれらの混合物等の懸濁化剤を、さらに含有してもよい。
【００９６】
本発明の結晶／多形および医薬組成物は、非経口的注射のための投与形態に、製剤化することができる。この投与形態には、生理学的に許容される無菌の水性または非水性の溶液、分散剤、懸濁剤または乳剤、および無菌の注射用溶液もしくは分散剤に再度溶解させることができる無菌の粉末剤が含まれる。該無菌の水性もしくは非水性の溶液、分散剤、懸濁剤または乳剤を調製するために、水性もしくは非水性の担体、希釈剤、溶媒または賦形剤を使用することができる。適した水性もしくは非水性の担体、希釈剤、溶媒または賦形剤には、水、エタノール、ポリオールおよびこれらの適した混合物が含まれる。
【００９７】
本発明の結晶／多形および医薬組成物は、局所投与のための投与形態に、製剤化することができる。この投与形態には、軟膏、粉薬、パッチ剤、スプレー剤および吸入剤が含まれる。本発明で提供される結晶／多形は、無菌条件下、生理学的に許容される担体、および保存剤、バッファーまたは必要であれば要求される高圧ガスと混合することができる。
【００９８】
他の側面において、本発明で提供される結晶／多形は、プロテインチロシンキナーゼによって仲介される疾患の治療および／または予防のための医薬の製造において、使用することができる。この疾患には、乳癌、非小細胞肺癌、卵巣癌、胃癌、大腸癌、膵臓癌、および扁平上皮癌等の腫瘍、特に悪性腫瘍が含まれる。
【００９９】
本発明の結晶／多形は、単独で、または他の薬学上許容される治療剤、特に他の抗腫瘍薬と組合せて投与してもよい。この治療剤としては、シスプラチン等のＤＮＡの化学構造に作用する医薬；メトトレキサート（ＭＴＸ）、５−フルオロウラシル（５ＦＵ）等の核酸合成に影響を与える医薬；アドリアマイシン、エピルビシン、アクラシノマイシン、ミトラマイシン等の核酸転写に作用する医薬；パクリタキセル、ビノレルビン等のチューブリン合成に作用する医薬；アミノグルテチミド、レンタロン、レトロゾール、アナストロゾール等のアロマターゼ酵素の阻害薬；および、イマチニブ、ゲフィチニブ、エルロチニブ等の細胞シグナル経路阻害薬が含まれるが、これらに限定されるものではない。組合される様々な成分は、同時にまたは連続して投与することができ、１つの製剤中でまたは別の製剤中で投与することができる。かかる組合せには、本発明で提供される結晶／多形と１つの付加的な活性成分との組合せだけではなく、本発明で提供される結晶／多形と２つ以上の他の活性成分との組合せも含まれる。
【０１００】
本発明の多形の主要な有利な点としては、以下のものが含まれる。
（ａ）本発明で提供されるＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩の多形は、吸湿の傾向がなく、相対的に良い熱安定性と光安定性を有する；
（ｂ）本発明で提供される多形は動物中で優れたバイオアベイラビリティを有することが、in  vivo実験から証明される；
（ｃ）本発明で提供される多形は優れた抗腫瘍活性を有していることが、実験から証明される；および
（ｄ）本発明で提供される多形は動物への投与で低い毒性と高い安全性を有することが、in  vivo実験から証明される。
【０１０１】
多形の調製方法の上記の記述から、本発明において、式（Ｉ）の化合物のｐ−トルエンスルホン酸塩の異なる溶媒での異なる溶解度を利用して、式（Ｉ）の化合物のｐ−トルエンスルホン酸塩の多形が得られる。これによって、式（Ｉ）の化合物のｐ−トルエンスルホン酸塩を精製するという目標が達成される。この精製方法は操作が容易であり、大量スケールで工業的製造にも適している。
【図面の簡単な説明】
【０１０２】
【図１】Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図２】Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＢ型の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図３】Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＣ型の粉末Ｘ線回折パターンを示す。
【図４】Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型、Ｂ型およびＣ型の粉末Ｘ線回折パターンを重ね合わせたパターンを示す。ここで、Ａ型の回折ピークは太い実線で、Ｂ型は細い実線で、Ｃ型は破線で表されている。
【図５】Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型のＩＲスペクトルを示す。
【図６】Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＢ型のＩＲスペクトルを示す。
【図７】Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド  ｐ−トルエンスルホン酸塩のＣ型のＩＲスペクトルを示す。
【０１０３】
本発明を、今、一定の実施例でさらに説明する。これら実施例は、本発明を例証するためだけにあり、その保護範囲を限定する意図はない。続く実施例の中で、特別な条件が記載されていない実験方法については、通常の条件または製造者によって提案される条件に従う。用いられる材料は、商業的に入手できるか、または公知の文献に記載の方法に基づいて、本技術分野の通常の知識を有する者によって容易に得ることができうる。ここで用いられている略号ＴＨＦはテトラヒドロフランを表し；ＤＭＳＯはジメチルスルホキシドを表し；ＤＭＦはジメチルホルムアミドを表し；ＰＶＰＰはポリビニルポリピロリドンを表し；ＰＶＰはポリビニルピロリドンを表し；ｉｇは胃内投与を表し；およびｉｖは静脈内注射を表す。別に示されていない場合は、量および百分率は、重量によって測定されている。
【実施例】
【０１０４】
実施例１：Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドの調製
工程Ａ：４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−６−ニトロキナゾリンの調製
４−クロロ−６−ニトロ−キナゾリン（ＷＯ２００７／０８２４３４を参考にして調製された）１．２０ｇ（５．７ｍｍｏｌ）および４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）−３−クロロ−アニリン（ＷＯ２００７／０８２４３４を参考にして調製された）１．３７ｇ（５．６ｍｍｏｌ）を、イソプロパノール８０ｍｌに溶解させて、３時間還流した。多量の黄色固体が反応系から沈殿し、ろ過した。ろ過したケーキを飽和炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨが８になるまで洗浄し、真空下で乾燥して、４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−６−ニトロキナゾリンと同定された黄色固体１．６２ｇ（３．７５ｍｍｏｌ）を、収率６７％で得た。
1H-NMR(400MHz, CDCl3):δ 11.30(1H, br), 9.54-9.48(1H, m), 8.45-8.41(1H, m), 8.31-8.25(1H, m), 7.98-7.89(1H, m), 7.50-7.47(1H, m), 7.35-7.26(1H, m), 7.05-6.96(1H, m), 6.90-6.80(2H, m), 7.74-7.60(2H, m), 4.84(2H, s).
【０１０５】
工程Ｂ：４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−６−アミノキナゾリンの調製
工程Ａの方法に従って調製された化合物４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−６−ニトロキナゾリン１．６０ｇ（３．７７ｍｍｏｌ）、還元鉄粉１．０５ｇ（１８．８５ｍｍｏｌ，５当量）、氷酢酸２ｍＬおよびメタノール４０ｍＬを還流冷却器を備えたフラスコに加えて、８５℃のオイルバス中で、２時間半、還流した。鉄粉をろ過で取り除いた。ろ液を酢酸エチルで希釈して、炭酸水素ナトリウム水溶液および水で続いて洗浄した。有機層を乾燥し、濃縮することで、４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−６−アミノキナゾリンと同定された黄色固体９００ｍｇ（２．２８ｍｍｏｌ）を、収率６１％で得た。
1H-NMR(400MHz, DMSO):δ 9.32(1H, s), 8.31(1H, s), 8.04(1H, d, J=2.64Hz), 7.73(1H, dd, J=2.64Hz, 8.80Hz), 7.54-7.43(2H, m), 7.36-7.28(3H, m), 7.26-7.14(3H, m), 5.57(2H, br), 5.27(2H, s).
【０１０６】
工程Ｃ：Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドの調製
工程Ｂの方法に従って調製された４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−６−アミノキナゾリン１．２ｇ（３．０４ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン０．６ｍＬ（４．５８ｍｍｏｌ，１．５当量）、塩化アクリロイル０．２８ｍＬ（３．３３ｍｍｏｌ，１．１当量）およびＴＨＦ４０ｍＬを氷浴による冷却下、加えた。反応温度を室温までゆっくりと上げた。３時間後、反応を終了させた。得られた混合物をろ過し、ろ過したケーキを中性になるまで水で洗浄し、乾燥することで、Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドと同定された黄色固体１．０ｇ（２．２３ｍｍｏｌ）を、収率６７％で得た。ＭＳ：４４９。融点：２２２〜２２５℃。
1H-NMR(400MHz, CDCl3+DMSO):δ 8.75(1H, s), 8.60-8.52(2H, m), 7.81(1H, d, J=2.44Hz), 7.69(2H, s), 7.54(1H, dd, J=2.56Hz, 8.92Hz), 7.30-7.22(2H, m), 7.18-7.08(2H, m), 6.96-6.86(2H, m), 6.37(2H, d, J=5.86Hz), 5.67(1H, t, J=5.86Hz), 5.06(2H, s).
【０１０７】
実施例２：Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩の結晶の調製
実施例１の方法に従って調製された化合物Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド３ｇ（６．６８ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフランおよびメタノールの混合物（ＴＨＦ／メタノール＝２／１，３０ｍＬ）に溶解させた。ｐ−トルエンスルホン酸（１当量，１．２７ｇ）のテトラヒドロフランおよびメタノールの混合物（ＴＨＦ／メタノール＝１／１）の溶液２４ｍＬをその反応系にゆっくりと滴下した。その後、滴下が終わった後、多量の黄色固体が反応系からゆっくりと沈殿した。固体をろ過し、水で洗浄し、真空下、乾燥することで、収率６３％、純度９２．５％で黄色の結晶性粉末２．６ｇ（４．１９ｍｍｏｌ）を得た。
【０１０８】
実施例３：Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型の調製
実施例１の方法に従って調製された化合物Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド３ｇ（６．６８ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフランおよびメタノールの混合物（ＴＨＦ／メタノール＝１／１，５０ｍＬ）に溶解させた。ｐ−トルエンスルホン酸（６当量，７．６２ｇ）のテトラヒドロフランおよびメタノールの混合物（ＴＨＦ／メタノール＝１／１）の溶液３８ｍＬをその反応系にゆっくりと滴下した。その後、滴下中に、多量の黄緑色固体が反応系からゆっくりと沈殿した。固体をろ過し、得られたケーキを水で洗浄し、真空下、乾燥することで、収率７０％で黄緑色の結晶性粉末２．９３ｇを得た。得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンは、図１に示された通りであった。本結晶のＩＲスペクトルは、図５に示された通りであった。本結晶の融点は、２４５℃であった。この結晶は、本出願のＡ型として定義された。
【０１０９】
実施例４：Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型の調製
実施例１の方法に従って調製された化合物Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミド３ｇ（６．６８ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフランおよびメタノールの混合物（ＴＨＦ／メタノール＝１／３，６０ｍＬ）に溶解させた。ｐ−トルエンスルホン酸（６当量，７．６２ｇ）のテトラヒドロフランおよびメタノールの混合物（ＴＨＦ／メタノール＝１／１）の溶液３８ｍＬをその反応系にゆっくりと滴下した。その後、滴下中に、多量の黄緑色固体が反応系からゆっくりと沈殿した。固体をろ過し、得られたケーキを水で洗浄し、真空下、乾燥することで、収率６１％で黄緑色の結晶性粉末２．５２ｇを得た。得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンは、図１に示された通りであった。本結晶のＩＲスペクトルは、図５に示された通りであった。本結晶の融点は、２４５℃であった。この結晶は、本出願のＡ型として定義された。
【０１１０】
実施例５：Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩のＢ型の調製
実施例３または４の方法に従って調製されたＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型３ｇ（４．８４ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフランおよび水の混合物（ＴＨＦ／水＝４／１，７０ｍＬ）に加えた。得られた混合物を、６５℃の温度までゆっくりと上げて、その温度を２０分間、継続して保ち、その後、室温までゆっくりと冷やし、その後、２℃で１６時間、放置した。得られた混合物をろ過し、得られたケーキを水で洗浄し、真空下、乾燥することで、収率５６％で淡黄色の結晶性粉末１．６８ｇを得た。得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンは、図２に示された通りであった。本結晶のＩＲスペクトルは、図６に示された通りであった。本結晶の融点は、２３５．４℃であった。この結晶は、本出願のＢ型として定義された。
【０１１１】
実施例６：Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩のＢ型の調製
実施例３または４の方法に従って調製されたＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型３ｇ（４．８４ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフランおよび水の混合物（ＴＨＦ／水＝２／１，７０ｍＬ）に加えた。得られた混合物を、６５℃の温度までゆっくりと上げて、その温度を２０分間、継続して保ち、その後、室温までゆっくりと冷やし、その後、２℃で１６時間、放置した。得られた混合物をろ過し、得られたケーキを水で洗浄し、真空下、乾燥することで、収率７６％で淡黄色の結晶性粉末２．３０ｇを得た。得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンは、図２に示された通りであった。本結晶のＩＲスペクトルは、図６に示された通りであった。本結晶の融点は、２３５．４℃であった。この結晶は、本出願のＢ型として定義された。
【０１１２】
実施例７：Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩のＣ型の調製
実施例３または４の方法に従って調製されたＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型３ｇ（４．８４ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフランおよび水の混合物（ＴＨＦ／水＝３／１，６０ｍＬ）に加えた。ｐ−トルエンスルホン酸（６当量，７．６２ｇ）のテトラヒドロフランおよびメタノールの混合物（ＴＨＦ／メタノール＝２／１）の溶液３８ｍＬをその反応系にゆっくりと滴下した。その後、滴下中に、多量の黄色固体が反応系からゆっくりと沈殿した。固体をろ過し、得られたケーキを水で洗浄し、真空下、乾燥することで、収率９５％で黄色の結晶性粉末２．８５ｇを得た。得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンは、図３に示された通りであった。本結晶のＩＲスペクトルは、図７に示された通りであった。本結晶の融点は、２４４℃であった。この結晶は、本出願のＣ型として定義された。
【０１１３】
実施例８：Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩のＣ型の調製
実施例３または４の方法に従って調製されたＮ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型３ｇ（４．８４ｍｍｏｌ）を、テトラヒドロフランおよび水の混合物（ＴＨＦ／水＝４／１，６０ｍＬ）に加えた。ｐ−トルエンスルホン酸（６当量，７．６２ｇ）のテトラヒドロフランおよびメタノールの混合物（ＴＨＦ／メタノール＝２／１）の溶液３８ｍＬをその反応系にゆっくりと滴下した。その後、滴下中に、多量の黄色固体が反応系からゆっくりと沈殿した。固体をろ過し、得られたケーキを水で洗浄し、真空下、乾燥することで、収率６５％で黄色の結晶性粉末１．９５ｇを得た。得られた結晶の粉末Ｘ線回折パターンは、図３に示された通りであった。本結晶のＩＲスペクトルは、図７に示された通りであった。本結晶の融点は、２４４℃であった。この結晶は、本出願のＣ型として定義された。
実施例９：熱安定性試験
少量のＡ型を取り、６０℃の高温環境下に置いて、１ケ月間、保存した。Ａ型の純度を、０日後、１０日後、３０日後に測定し、これに基づいてＡ型の熱安定性を推定した。Ｂ型およびＣ型の熱安定性についても、本方法で推定した。試験結果を下表に示した。
【０１１４】
【表５】
0005460689.tif 000009
【０１１５】
上記の試験結果によって、６０℃の高温保存で、Ａ型およびＢ型は純度についてほとんど変化しないが、Ｃ型の純度が少し低下することが示される。本発明で提供されるＡ型およびＢ型は優れた熱安定性を有し、Ｃ型は良い熱安定性を有することが示される。
実施例１０：光安定性試験
少量のＡ型を取り、４５００±５００ルックスの強度の照明環境下に置いて、１ケ月間、保存した。Ａ型の純度を、０日後、１０日後、３０日後に測定し、これに基づいてＡ型の光安定性を推定した。Ｂ型およびＣ型の光安定性についても、本方法で推定した。試験結果を下表に示した。
【０１１６】
【表６】
0005460689.tif 000010
【０１１７】
上記の試験結果によって、４５００±５００ルックスの強度の照明環境下の保存で、Ｂ型は純度についてほとんど変化しないが、Ａ型およびＣ型の純度が少し低下することが示される。本発明で提供されるＢ型は優れた光安定性を有し、Ａ型およびＣ型は良い光安定性を有することが示される。
実施例１１：吸湿性試験
少量のＡ型を取り、９２．５％の高湿度環境下に置いて、１ケ月間、保存した。Ａ型の純度を、０日後、１０日後、３０日後に測定し、これに基づいてＡ型の吸湿性を推定した。Ｂ型およびＣ型の吸湿性についても、本方法で推定した。試験結果を下表に示した。
【０１１８】
【表７】
0005460689.tif 000011
【０１１９】
上記の試験結果によって、９２．５％の高湿度環境下の保存で、Ａ型およびＢ型は純度についてほとんど変化しないが、Ｃ型の純度が少し低下することが示される。本発明で提供されるＡ型およびＢ型は高湿度環境下で非常に安定であり、Ｃ型は高湿度環境下で比較的、安定であることが示される。
【０１２０】
実施例９〜１１の結果から、本発明で提供される多形は、高温、照明または高湿度の環境で相対的に安定であることが示される。
実施例１２：ＳＤラット（スプラーグドーリーラット）における薬物吸収の試験
胃内投与（ｉｇ）：体重２００〜２５０ｇの健康な雄性ＳＤラット１６匹を無作為に４群に分けた。ラットそれぞれに、薬物：実施例１に従って調製された化合物（２１．６８ｍｇ／ｋｇ）、本化合物のｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型、Ｂ型またはＣ型（３０ｍｇ／ｋｇ）を、胃内投与した。投与から０．５、１．０、１．５、２．０、３．０、５．０、７．０、９．０、１２および２４時間後に、血液サンプルを取り、その後、単離して血漿を調製した。この血漿中の薬物の濃度を、液体クロマトグラフ／質量分析計の手段で測定し、濃度時間曲線を得た。
【０１２１】
主要な薬物動態パラメーターを、下表に示した。
【０１２２】
【表８】
0005460689.tif 000012
【０１２３】
静脈内注射（ｉｖ）：体重２００〜２５０ｇの健康な雄性ＳＤラット４匹に、式（Ｉ）の化合物のｐ−トルエンスルホン酸塩（５ｍｇ／ｋｇ）を、静脈内に投与した。投与から５分間、１５分間、０．５、１．５、２．０、３．０、４．０、５．０および７．０時間後に、血液サンプルを取り、その後、単離して血漿を調製した。この血漿中の薬物の濃度を、液体クロマトグラフ／質量分析計の手段で測定し、濃度時間曲線を得た。
【０１２４】
主要な薬物動態パラメーターを、下表に示した。
【０１２５】
【表９】
0005460689.tif 000013
【０１２６】
投与量で調整し、ＡＵＣ０−ｔで計算することで、実施例１で得られた式（Ｉ）の化合物は、ｉｇ投与において０．９５％の絶対的なバイオアベイラビリティを有しており、Ａ型のｉｇ投与における絶対的なバイオアベイラビリティは８．７５％であり、Ｂ型のｉｇ投与における絶対的なバイオアベイラビリティは８．７６％であり、Ｃ型のｉｇ投与における絶対的なバイオアベイラビリティは５．１７％であった。
実施例１３：
ＢＡＬＢ／ｃＡヌードマウスに移植したヒト扁平上皮癌Ａ４３１に対する腫瘍抑制効果
よく発達した固形腫瘍Ａ４３１を選択し、無菌条件下でいくつかの２〜３ｍｍの大きさの均一の小片に切断し、１つの小片を各々のＢＡＬＢ／ｃＡヌードマウスの右側の腋の下にトロカールを用いて皮下的に接種した。接種から７日後、マウスを無作為に群分けし、１３日間連続して、口を経由して胃内投与した。４日ごとに、腫瘍の長軸（ａ）と短軸（ｂ）を副尺付きノギスで測定した。式：Ｖ＝ａｂ２／２に従って、腫瘍の体積（ｍｍ３）を計算できた。試験された動物は、接種から２３日後に断頭殺害し、解剖して腫瘍を得た。腫瘍の重量を計測し、腫瘍抑制率を計算した。
【０１２７】
その結果を下表に示す。この結果から、式（Ｉ）の化合物のｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型が、顕著な腫瘍の抑制効果を有することが示される。
【０１２８】
【表１０】
0005460689.tif 000014
【０１２９】
ＢＡＬＢ／ｃＡヌードマウスに移植したヒト卵巣癌ＳＫＯＶ−３に対する腫瘍抑制効果
活発な成長期にある腫瘍ＳＫＯＶ−３を選択し、いくつかの約１．５ｍｍの大きさの均一の小片に切断し、それを無菌条件下でＢＡＬＢ／ｃＡヌードマウスの右側の腋の下にトロカールを用いて皮下的に接種した。ヌードマウスに移植された腫瘍の直径を副尺付きノギスで測定した。腫瘍が８０〜１００ｍｍ３の大きさに成長した時、無作為に動物を群分けした。試験される動物群に、３週間連続して１日１回、上記と同様に口を経由して胃内投与した。陽性対照の薬剤ＭＭＣ（マイトマイシン）は、初日に１回、５ｍｇ／ｋｇの投与量で静脈内投与した。陰性対照群には、０．５％ＣＭＣ−Ｎａ（カルボキシメチルセルロースナトリウム）を０．２ｍＬ／マウスの投与量で投与した。各週２回、腫瘍の長軸（ａ）と短軸（ｂ）を測定し、同時にヌードマウスの体重も測定した。式：Ｖ＝ａｂ２／２に従って、腫瘍の体積（ｍｍ３）を計算でき、それを基にして、相対腫瘍体積（ＲＴＶ）を計算した（計算式：ＲＴＶ＝Ｖｔ／Ｖ０、式中、Ｖ０は投与の群分け時点に測定された腫瘍体積を表し、Ｖｔは各々の時点で測定された腫瘍体積を表す）。相対腫瘍増殖率Ｔ／Ｃ（％）を坑腫瘍効果を評価する指標として選んだ。これは下式に従って計算することができる。
【０１３０】
Ｔ／Ｃ（％）＝（ＴＲＴＶ／ＣＲＴＶ）×１００
ＴＲＴＶ：処置群のＲＴＶ；ＣＲＴＶ：陰性対照群のＲＴＶ
有効性の評価標準：Ｔ／Ｃ（％）＞６０％は効果がないことを意味し、Ｔ／Ｃ（％）≦６０％は有効であることを意味する。
【０１３１】
その結果を下表に示す。この結果から、式（Ｉ）の化合物のｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型が、顕著な腫瘍の抑制効果を有することが示される。
【０１３２】
【表１１】
0005460689.tif 000015
【０１３３】
ヒト卵巣癌ＳＫＯＶ−３、ヒト肺癌Ｃａｌｕ−３およびヒト肺癌Ａ５４９をそれぞれ移植した腫瘍担持ヌードマウスに、上記実験方法に従って、本発明のＢ型（１００ｍｇ／ｋｇ）を３週間連続して１日２回、口を経由して胃内投与した。得られた相対腫瘍増殖率Ｔ／Ｃは、それぞれ２８．５％、３５．１％および５６．３％であった。
【０１３４】
ヒト卵巣癌ＳＫＯＶ−３、ヒト肺癌Ｃａｌｕ−３およびヒト肺癌Ａ５４９をそれぞれ移植した腫瘍担持ヌードマウスに、上記実験方法に従って、本発明のＣ型（１００ｍｇ／ｋｇ）を３週間連続して１日２回、口を経由して胃内投与した。得られた相対腫瘍増殖率Ｔ／Ｃは、それぞれ２３．２％、３９．４％および５８．７％であった。
【０１３５】
式（Ｉ）の化合物のｐ−トルエンスルホン酸塩のＢ型およびＣ型もまた、顕著な腫瘍の抑制効果を有することが示された。
実施例１４：長期投与の毒性試験
体重２００〜２５０ｇの健康な雄性ＳＤラット８０匹を無作為に１６群に分けた。ラットそれぞれに、式（Ｉ）の化合物のｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型、Ｂ型もしくはＣ型または何も含まない溶媒を胃内投与した（２０、５０、１００、５００または８００ｍｇ／ｋｇ・日の投与量の５つの試験群と、溶媒対照群が設置された）。４週間の連続投与後の結果から、以下のことが示された。２０、５０、１００、５００もしくは８００ｍｇ／ｋｇ・日の投与量のＡ型、Ｂ型またはＣ型の投与をそれぞれ受けたラットは、肉体的な徴候、外見、行動、活動または排泄物の形状において異常が観測されず、通常の食餌摂取をしていた。ラットの体重よび体重増加は、統計学的な相違がなく、溶媒対照群と基本的に同様であった。血液学、血液生化学、心電図、体温および尿についての観察結果から、様々な観察指標は対照群のものと同様であり、すべては正常の範囲内の変化であることが示された。以上より、式（Ｉ）の化合物のｐ−トルエンスルホン酸塩の多形は投与で毒性が低く、高い安全性を有していることが示された。
実施例１５：医薬組成物
以下の成分から、Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩を含有するカプセルが調製された。
【０１３６】
Ａ型                        １５ｇ
デンプン                    １５ｇ
乳糖                        ３０ｇ
ＰＶＰＰ                      ２．５ｇ
ＰＶＰ                        ２．５ｇ
滑石粉末                      ３ｇ
ドデシル硫酸ナトリウム        ４ｇ
従来の方法に従って、Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩のＡ型およびデンプンを混合し、篩にかけて、その後、上記の他の成分と均等に混合して、一般的なゼラチンカプセルに充填した。
実施例１６：医薬組成物
以下の成分から、Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩を含有する錠剤が調製された。
【０１３７】
Ｂ型                        ２０ｇ
デンプン                    ２０ｇ
乳糖                        ４０ｇ
ＰＶＰＰ                      ３ｇ
ＰＶＰ                        ３ｇ
滑石粉末                      １．６ｇ
ドデシル硫酸ナトリウム        ５ｇ
従来の方法に従って、Ｎ−｛４−［３−クロロ−４−（３−フルオロ−ベンジルオキシ）フェニルアミノ］−キナゾリン−６−イル｝−アクリルアミドのｐ−トルエンスルホン酸塩のＢ型およびデンプンを混合し、篩にかけて、その後、上記の他の成分と均等に混合して、直接、錠剤に圧縮成型した。
【０１３８】
本出願を通して言及された文章はすべて、ちょうどその各々が本出願に組み入れられると個別に援用したように、全体としてここに参照として組み入れられる。さらに、本技術分野の通常の知識を有する者が、本発明の上記内容を読んだ後、本発明の精神に背かずに、本発明に様々な変更または修正をなすことは、高く評価されるであろう。これらの形式の変更もまた、本出願の請求項に規定される範囲の中に含まれるであろう。
【図１】
0005460689.tif 000018
【図２】
0005460689.tif 000019
【図３】
0005460689.tif 000020
【図４】
0005460689.tif 000021
【図５】
0005460689.tif 000022
【図６】
0005460689.tif 000023
【図７】
0005460689.tif 000024