(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式
【化１】
0005555239.tif 000033
(ここで：
XはNH又はS；
mは0、1、2、又は3；
nは0、1、2、3、又は4；
R1はアルキル、置換されたアルキル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、アラルキル、置換されたアラルキル、ヘテロアラルキル、置換されたヘテロアラルキル、ハロ、ニトロ、シアノ、-OR、-SR、-C(O)R、-OC(O)R、-C(O)OR、-NR2、-SO2OR、-OSO2R、-SO2NR2、-NR3SO2R、-CONR2、-NR3COR、又は-NR3C(O)ORであり、
R2はアルキル、置換されたアルキル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、アラルキル、置換されたアラルキル、ヘテロアラルキル、置換されたヘテロアラルキル、ハロ、ニトロ、又はシアノ、又は-OR、-SR、-C(O)R、-OC(O)R、-C(O)OR、-NR2、-SO2OR、-OSO2R、-SO2NR2、-NR3SO2R、-CONR2、-NR3COR、及び-NR3C(O)ORであり、ここでRは、独立して水素、アルキル、置換されたアルキル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、アラルキル、置換されたアラルキル、ヘテロアラルキル又は置換されたヘテロアラルキルであり、及びR3は水素又はC1-C3アルキルであり、及びここでアルキルは飽和又は不飽和（但し、芳香族的な不飽和ではない）の直鎖、分岐、又は環状のC1−C10炭化水素から炭素原子上の１つの水素を除去して得られる１価の基である。）
の化合物又はその塩。
【請求項２】
XがNHである請求項1記載の化合物。
【請求項３】
XがSである請求項1記載の化合物。
【請求項４】
mが少なくとも1である請求項2又は3いずれかに記載の化合物。
【請求項５】
mが1又は2である請求項4記載の化合物。
【請求項６】
mが1である請求項5記載の化合物。
【請求項７】
R1がピリミジンの4-位にある、請求項6記載の化合物。
【請求項８】
R1が、メチル、メトキシ又はトリフルオロメチルである、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
mが2である請求項5記載の化合物。
【請求項１０】
1つのR1がピリミジンの4-位にある請求項9記載の化合物。
【請求項１１】
R1がメチル、メトキシ、又はトリフルオロメチルである請求項10記載の化合物。
【請求項１２】
他のR1がヒドロキシ、カルボキシ、-NR'2、含窒素ヘテロアリール、-NR'2又は含窒素ヘテロアリールで置換されたC1-C6アルキル、-OR4、-SR4、-C(O)R4、-OC(O)R4、-C(O)OR4、-NR42、-SO2OR4、-OSO2R4、-SO2NR42、-NR3SO2R4、-CONR42、-NR3COR4、及び-NR3C(O)OR4であり、ここでR3は水素又はC1-C3アルキルであり、R4は、-NR'2又は窒素含有ヘテロ環で置換されたC1-C6アルキルであり、各R'は独立に水素又はC1-C3アルキルであり、又はNR'2は一緒になってシクロアミノである、請求項10又は11に記載の化合物。
【請求項１３】
nが0である請求項1ないし12のいずれかに記載の化合物。
【請求項１４】
nが少なくとも1である請求項1ないし12のいずれかに記載の化合物。
【請求項１５】
nが1又は2である請求項14記載の化合物。
【請求項１６】
nが1である請求項15記載の化合物。
【請求項１７】
R2がヒドロキシ、カルボキシ、-NR'2、含窒素ヘテロアリール、-NR'2又は含窒素ヘテロアリールで置換されたC1-C6アルキル、-OR4、-SR4、-C(O)R4、-OC(O)R4、-C(O)OR4、-NR42、-SO2OR4、-OSO2R4、-SO2NR42、-NR3SO2R4、-CONR42、-NR3COR4、及び-NR3C(O)OR4であり、ここでR3は水素又はC1-C3アルキルであり、R4は-NR'2又は含窒素ヘテロアリールで置換されたC1-C6アルキルであり、各R'は独立に水素又はC1-C3アルキルであり、又は-NR'2は一緒になってシクロアミノである、請求項16記載の化合物。
【請求項１８】
nが2である請求項15記載の化合物。
【請求項１９】
1つのR2がヒドロキシ、カルボキシ、-NR'2、含窒素ヘテロアリール、-NR'2又は含窒素ヘテロアリールで置換されたC1-C6アルキル、-OR4、-SR4、-C(O)R4、-OC(O)R4、-C(O)OR4、-NR42、-SO2OR4、-OSO2R4、-SO2NR42、-NR3SO2R4、-CONR42、-NR3COR4、及び-NR3C(O)OR4であり、ここでR3は水素又はC1-C3アルキルであり、R4は-NR'2又は含窒素ヘテロアリールで置換されたC1-C6アルキルであり、各R'は独立に水素又はC1-C3アルキルであり、又は-NR'2は一緒になってシクロアミノである、請求項18記載の化合物。
【請求項２０】
下表に記載の化合物1Aないし146A：
【表１−１】
0005555239.tif 000034
【表１−２】
0005555239.tif 000035
【表１−３】
0005555239.tif 000036
【表１−４】
0005555239.tif 000037
【表１−５】
0005555239.tif 000038
【表１−６】
0005555239.tif 000039
【表１−７】
0005555239.tif 000040
【表１−８】
0005555239.tif 000041
【表１−９】
0005555239.tif 000042
【表１−１０】
0005555239.tif 000043
【表１−１１】
0005555239.tif 000044
【表１−１２】
0005555239.tif 000045
【表１−１３】
0005555239.tif 000046
【表１−１４】
0005555239.tif 000047
【表１−１５】
0005555239.tif 000048
【表１−１６】
0005555239.tif 000049
【表１−１７】
0005555239.tif 000050
【表１−１８】
0005555239.tif 000051
【表１−１９】
0005555239.tif 000052
及びそれらの塩のいずれかから選択される化合物。
【請求項２１】
2-(5-{[3-(4-モルホリニル)プロピル]アミノカルボニル}-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-(6-{[3-(4-モルホリニル)プロピル]アミノカルボニル}-ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-(5-{[3-(4-モルホリニル)プロピル](エチル)アミノカルボニル}-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-[5-(ピペラジン-1-カルボニル)-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-{5-[(ジエチルアミノメチル)カルボニルアミノ]-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン}-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-{5-[(S)-(1-メチルピロリジン-2-イル)カルボニルアミノ]-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン}-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-{5-[(1-アミノ-1-メチルエチル)カルボニルアミノ]-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン}-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-{5-[(RS)-(1-メチルピペリジン-2-イル)カルボニルアミノ]-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン}-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-(5-{[2-(4-メチルピペラジン-1-イル)エチル]カルボニルアミノ}-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-(6-{[2-(イミダゾール-1-イル)エチル]ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン})-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-(6-{[2-(1、1-ジオキソチオモルホリン-4−イル）エチル]ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン})-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-(6-{[2-(モルホリン-4−イル）エチル]ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン})-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-(6-{[2-(イミダゾール-1-イル)エチルオキシ]ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン})-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-(1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)-2-[4-メチル-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アセトアミド、
2-(5-{[(ジエチルアミノメチル)カルボニル](エチル)アミノ}-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-{5-[(S)-(1-メチルピペリジン-2-イル)カルボニルアミノ]-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン}-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-{5-[(R)-(1-メチルピペリジン-2-イル)カルボニルアミノ]-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン}-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-{5-[(S)-(1-メチルピロリジン-2-イル)カルボニルアミノ]-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン}-2-[4-メチル-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アセトアミド、
2-(5-{[(S)-(1-メチルピロリジン-2-イル)カルボニル](エチル)アミノ}-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、及び
2-(5-{[(ピペリジン-1-イルメチル)カルボニル](エチル)アミノ}-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
及びそれらの塩から選択される化合物。
【請求項２２】
2-(5-{[3-(4-モルホリニル)プロピル](エチル)アミノカルボニル}-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-{5-[(ジエチルアミノメチル)カルボニルアミノ]-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン}-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-(5-{[2-(4-メチルピペラジン-1-イル)エチル]カルボニルアミノ}-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-(5-{[(ジエチルアミノメチル)カルボニル](エチル)アミノ}-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-{5-[(S)-(1-メチルピペリジン-2-イル)カルボニルアミノ]-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン}-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
2-{5-[(R)-(1-メチルピペリジン-2-イル)カルボニルアミノ]-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン}-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、及び
2-(5-{[(S)-(1-メチルピロリジン-2-イル)カルボニル](エチル)アミノ}-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、
及びそれらの塩から選択される化合物。
【請求項２３】
請求項1ないし22のいずれかに記載の化合物及び賦形剤を含んでなる医薬組成物。
【請求項２４】
癌の治療に用いるための治療剤の製造における請求項1ないし22のいずれかに記載の化合物の使用。
【請求項２５】
キナーゼの阻害に用いるための治療剤の製造における請求項1ないし22のいずれかに記載の化合物の使用。 
【請求項２６】
キナーゼがオーロラキナーゼまたはVEGFR2キナーゼである請求項25に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、2-[1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミド及び2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミド、及びそれらの塩、それらを含有する医薬組成物、及びそれらのキナーゼ阻害剤として、及び癌の治療における使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
モートロックらの「選択的オーロラキナーゼ阻害剤の開発における進展」, Curr. Topics Med. Chem. 2005, 5, 199 213、及びカルバジャらの「オーロラキナーゼ：癌治療における新たな標的」, Clin. Cancer Res. 2006, 12, 6869 6875、において論じられているように、オーロラファミリーのキナーゼは、有糸分裂の制御に関与している。3つのうちの2つのヒトオーロラキナーゼはオーロラA及びオーロラBであり、しばしばヒトの癌において過剰発現されるのに対し、オーロラA遺伝子はそれ自身が、多くの癌において増幅される。それゆえ、オーロラキナーゼ阻害剤を固形腫瘍(例えば、結腸直腸、肺、乳房、膵臓、及び膀胱癌)及び血液腫瘍(例えば、急性リンパ性白血病(ALL)、慢性骨髄性白血病(CmL)、ホジキン及び非ホジキンリンパ腫、及び骨髄異形性症候群(MDS))の治療のための抗癌化合物として、開発することに相当な関心が寄せられてきた。以下を含む多くの化合物が臨床試験に至った：バーテックス及びメルク社のVX-680/MK-0457を含み、これは臨床試験第II相まで至ったが、現在は中止されており、現在は後継の化合物VX-689(MK-5108)に置き換えて開発されている；アステックス社のAT9283；アストラゼネカ社のAZD 1152；エントレメッド(Entremed)社のENMD-2076及びENMD-981693；ミレニアム(Millennium)社のMLN-8054及びMLN-8237；ネルビアノ(Nerviano)社のPHA-739358；ライジェル(Rigel)社のR763；サネシス(Sunesis)社のSNS-314等。
【０００３】
フェレラ及びカーベルらの「治療標的としての血管形成」, Nature 2005, 438, 967 974及び、より最近ではエリス及びヒックリンらの「VEGF-標的治療：抗癌活性のメカニズム」, Nature Rev. Cancer 2008, 8, 579 591 において論じられているように、VEGF-A及びその受容体を標的とした血管形成阻害は、非常に有望な癌治療の戦略であると考えられている。2つのVEGFR2キナーゼ阻害剤；スニチニブ(ファイザー社のスーテント(登録商標))及びソラフェニブ(バイエル社/オニキス社のネクサバール(登録商標))は既に米国において腎臓癌の治療薬として承認を受けているのに対し、スニチニブもまた胃腸癌の治療薬として承認を受けている。数多くの他のVEGFR2キナーゼ阻害化合物の開発が進んでおり、その中では、固形腫瘍(例えば、乳房、卵巣、肺及び結腸直腸)及び血液腫瘍の両方に対する、GSK社のパゾパニブ、ノバルティス社のバタラニブ、ファイザー社のアクシチニブ、アストラゼネカ社のバンデタニブ等がある。また、ベバシズマブ(ジェネンテック社のアバスチン(登録商標))は、VEGFR2キナーゼ阻害剤ではなく、抗-VEGF抗体であり、脳腫瘍への適用が検討されており、他の固形腫瘍と同様にVEGFR2キナーゼ阻害剤もまた適用され得ることが示唆されている。
【０００４】
これらの多くの化合物は、[0002]において示したオーロラキナーゼ阻害剤又は[0003]において示したVEGFR阻害剤であり、該キナーゼの特異的阻害剤ではないが、むしろ選択的キナーゼであり、また、他のキナーゼにも作用する。例えば、ソラフェニブ及びスニチニブはまた、Rafキナーゼ 及び他のキナーゼに対して顕著な効果を有し、サイクラセル(Cyclacel)社のCYC116は、IC50が全て100nMである、オーロラキナーゼA、B及びC、VEGFR2キナーゼ及びFlt3を阻害することが報告されている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
強力なオーロラキナーゼ阻害剤であり、またVEGFR2キナーゼも阻害する化合物を抗癌剤として開発することが望ましい。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
第1の態様としては、本発明は、式A
【化１】
0005555239.tif 000002
の化合物及びそれらの塩に関し、
ここで、
XはNH又はS；
mは0、1、2又は3；
nは0、1、2、3又は4；
R1はアルキル、置換されたアルキル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、アラルキル、置換されたアラルキル、ヘテロアラルキル、置換されたヘテロアラルキル、ハロ、ニトロ又はシアノ又は-OR、-SR、-C(O)R、-OC(O)R、-C(O)OR、-NR2、-SO2OR、-OSO2R、-SO2NR2、-NR3SO2R、-CONR2、-NR3COR、及び-NR3C(O)ORであり、ここでRはそれぞれ独立して水素、アルキル、置換されたアルキル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、アラルキル、置換されたアラルキル、ヘテロアラルキル又は置換されたヘテロアラルキルであり、及び、R3は水素又はC1-C3アルキルであり；及び
R2はアルキル、置換されたアルキル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、アラルキル、置換されたアラルキル、ヘテロアラルキル、置換されたヘテロアラルキル、ハロ、ニトロ又はシアノ又は-OR、-SR、-C(O)R、-OC(O)R、-C(O)OR、-NR2、-SO2OR、-OSO2R、-SO2NR2、-NR3SO2R、-CONR2、-NR3COR、及び-NR3C(O)ORであり、ここでそれぞれRは、独立して水素、アルキル、置換されたアルキル、ヘテロアルキル、置換されたヘテロアルキル、アリール、置換されたアリール、ヘテロアリール、置換されたヘテロアリール、アラルキル、置換されたアラルキル、ヘテロアラルキル又は置換されたヘテロアラルキルであり、及びR3は水素又はC1-C3アルキルである。
【０００７】
本発明の第2ないし6の態様は、本発明の第1の態様の化合物のキナーゼ阻害剤、特にオーロラキナーゼ(とりわけ、オーロラキナーゼA及びB)阻害剤、及び任意にVEGFR2キナーゼ阻害剤としての使用であり、本発明の第1の態様の化合物を含む医薬組成物、本発明の第1の態様の化合物の、キナーゼ阻害剤としての使用、及び本発明の第1の態様の化合物の治療剤の製造における使用、及び本発明の第1の態様の化合物を用いた治療方法である。
【０００８】
本発明の第7の態様としては、本発明の第1の態様の化合物の製造方法である。
【０００９】
本発明の好ましい態様は、明細書によって、及び本出願の請求項2-25の側面により特徴づけられる。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
定義
【００１１】
「アルキル」は、直鎖、分岐、又は環状でありうる飽和又は不飽和(しかし、芳香族不飽和ではない)C1-C10炭化水素の炭素原子から一つの水素を除いた得られる一価の置換基を意味する。例えば、メチル、エチル、プロピル、1-プロペニル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、ヘキシル、シクロペンチル、シクロペンテン-1-イル、シクロプロピルメチル、シクロヘキシル、及びシクロヘキシルメチルがある。飽和アルキル(シクロアルキルを含む)、及びC1-C6アルキル(「低級アルキル」)、特にC1-C3アルキルは、模範的である。本出願における「アルキル」の定義は、従来の定義よりも広く、通常「シクロアルキル」、「シクロアルキルアルキル」、「アルケニル」、及び「アルキニル」と呼ばれるものを含むことに留意されたい。
【００１２】
「置換されたアルキル」は、3つまでのハロゲン原子で置換されたアルキル及び/又はニトロ、シアノ、-OR、-SR、-COR、-OC(O)R、-C(O)OR、-NR2、-SO2OR、-OSO2R、-SO2NR2、-NRSO2R、-CONR2、-NRCOR、及び-NRC(O)ORからなる群から選択される3つまでの置換基で置換されたアルキルであり、ここで、それぞれRは独立して、任意に水素であってもよく、任意にR’-置換されたアルキル、任意にR’-置換されたヘテロアルキル、任意にR’-置換されたアリール、任意にR’-置換されたヘテロアリール、任意にR’-置換されたアラルキル又は、任意にR’-置換されたヘテロアラルキルであり、それぞれR’は、ハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、メルカプト、アミノ、シクロアミノ、C1-3アルキル、C1-3アルキルオキシ及び-C(O)O-C1-3アルキルから独立して選択される1ないし3つの置換基を有していてもよく(好ましくは、ハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、メルカプト、アミノ、シクロアミノ、C1-3アルキル及びC1-3アルキルオキシから選択される1ないし3の置換基である)、又は任意にR’-置換されたアルカン-ジイル又は任意にR’-置換されたヘテロアルカン-ジイル(特に、窒素及び-NR2の2つのR基がシクロアミノ基を形成した基)によって置換されていてもよい、2つのR基が一緒になって4-6員環を形成していてもよい。それゆえ、例えば、置換されたアルキル基は、トリフルオロメチル、3-クロロプロピル、及び2-(モルホリン-4-イル)エチルを含んでいてもよい。
【００１３】
「ヘテロアルキル」は、アルキルにおいて1ないし3の炭素原子が、O、S、SO2又はNR(ここで、RはH又はハロゲン又はヒドロキシで任意に置換されたC1-3アルキル)で置き換えられており、3-オキサペンチルのような直鎖；5又は6の原子を環に含んでいる単環、例えば、2-テトラヒドロフラニル、2-ピロリジニル、3-ピペリジニル、2-ピペラジニル、4-メチル-1-ピペラジニル、4-ジヒドロピラニル、及び3-モルホリニル；及びテトラヒドロフラン-2-イルメチル及びピペリジン-3-イルエチルのような基を含む。ヘテロアルキルは、環窒素が酸化されて形成されたN-オキシドを含むことを意味する。「置換されたヘテロアルキル」は、置換されたアルキルにおいて上述した態様により置換されたヘテロアルキルを意味する。「シクロアミノ」基は、それが一部を形成する分子の残りの部分と結合している窒素原子を含む5ないし7員環原子を有する環状ヘテロアルキルを意味し、さらにO、S、SO2、及びNR(ここで、RはH又はハロゲン、ヒドロキシ、又は1又は2のフェニル基で任意に置換されたC1-3アルキルである)から選択されるものを任意に含んでいてもよい。4-メチル-1-ピペラジニル、4-(2-ヒドロキシエチル)-1-ピペラジニル、4-(ジフェニルメチル)-1-ピペラジニル及び4-モルホリニルは、シクロアミノ基の例である。本発明の化合物は、あらゆる-NR2基がシクロアミノ基によって置換された化合物も含む。
【００１４】
「アリール」は、炭素から1つの水素を除いた6ないし14の環原子を含む芳香族 炭化水素から得られた一価の基であり、単環(例えば、フェニル)、縮合環、例えば縮合2環(例えば、ナフチル)又は結合した多環、例えば、結合2環(例えば、ビフェニルイル)がある。好ましいアリールはフェニルである。
【００１５】
「置換されたアリール」は、3つまでの置換基で置換されたアリールを意味し、置換基はハロ、ニトロ、シアノ、-OR、C1-3アルキル又はC1-3アルキルオキシ(それぞれ任意にハロ又は-NR2で置換されていてもよい。)、-SR、-COR、-OC(O)R、-C(O)OR、-NR2、-SO2OR、-OSO2R、-SO2NR2、-NRSO2R、-CONR2、-NRCOR及び-NRC(O)ORから選択され、ここで、Rはそれぞれ独立して、水素、任意にR’-置換されたアルキル、任意にR’-置換されたヘテロアルキル、任意にR’-置換されたアリール、任意にR’-置換されたヘテロアリール、任意にR’-置換されたアラルキル又は任意にR’-置換されたヘテロアラルキル(好ましくは、水素又は任意にR’-置換されたアルキル)であり、それぞれR’-はハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、メルカプト、アミノ、シクロアミノ、C1-3アルキル、C1-3アルキルオキシ及びC(O)Oアルキル(好ましくは、ハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、メルカプト、アミノ、シクロアミノ、C1-3アルキル又はC1-3アルキルオキシである。)から独立して選択された、1ないし3の置換基で置換されていてもよく、又は2つのR基は、一緒になって4ないし6員環を形成してもよく、これは任意に、R’-置換されたアルカン-ジイル又はR’-置換されたヘテロアルカン-ジイル(特に、NR2の窒素及び2つのR基は、シクロアミノ基を形成してもよい)で置換されていてもよい。また2つの隣接する置換基は、メチレンジオキシ又はエチレンジオキシ基を形成してもよい。置換されたアリール基は、ハロ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、メルカプト、アミノ、任意にハロ-置換されたC1-3アルキル及び任意にハロ-置換されたC1-3アルキルオキシからなる群から選択される3つまでの置換基で置換されたアリール基を意味し、例えば、このように置換されたフェニルを含む。好ましい置換されたアリールは、置換されたフェニルを意味する。
【００１６】
「アラルキル」は、アリールで置換されたアルキルを意味し、例えば、ベンジル及びフェネチルがある。好ましいアラルキルはベンジルである。「置換されたアラルキル」は、アリール及びアルキルの1つ又は両方が、置換されたアリール及び置換されたアルキルにおいて上述した態様により置換されていてもよい。好ましい置換されたアラルキルは置換されたベンジルである。
【００１７】
「ハロゲン」又は「ハロ」は、F、Cl、Br、Iを意味し；特にF又はClである。
【００１８】
「ヘテロアリール」は、環炭素から1つの水素を除くことにより、環原子のうち1ないし4(好ましくは1ないし3)がO、S、N又はNR(ここでRは、H又はC1-3アルキル)、好ましくはO、S又はNRによって置換されていてもよい、5ないし14環原子を含む環状炭化水素から得られる一価の芳香族を意味し；これは、5又は6環原子の単環、例えばフラニル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、イミダゾリル、ピリジニル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリミジニル等及び二環、例えばベンゾチアゾリル、プリニル及びベンズイミダゾリルを含む。単環は、好ましくは、ヘテロアリール基であり、それには、窒素が酸化されてN-オキシドを形成したヘテロアリールを含む。「置換されたヘテロアリール」は、上述の置換されたアリールにおいて示した態様により置換されたヘテロアリールを意味する。
【００１９】
「ヘテロアラルキル」は、ヘテロアリールにより置換されたアルキル、例えば、2-チエニルメチルがある。「置換されたヘテロアラルキル」は、置換されたアラルキルにおいて上述した態様により置換されていることを意味する。
【００２０】
「合成する」とは、反応性置換基を典型的にはより複雑な置換基へと変換することをいい、例えば、アミンをアミド又はスルホンアミドへ、カルボキシ基をエステル又はアミドへ、ヒドロキシをエステル、及び窒素上の1つ以上の水素原子を有するアミド又はスルホンアミドを、任意に置換されたアルキル、ヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール、アラルキル又はヘテロアラルキル基によって置換することをいう。「保護された」とは、有機合成における従来の意味を有し、すなわち、反応が行われている間の条件下で、反応性置換基を非反応性置換基に一時的に変換することを言い；例えば、アミンをカルバメートとして保護することを言う。
【００２１】
「溶解性促進基」は、水中での化合物の溶解性を促進する置換基であり、例えば、ヒドロキシ及び塩形成基、例えばカルボキシ及び非-アミドのアミノ基、特に非-アミドの酸付加塩形成可能なアミノ基；又は、例えばヒドロキシで置換された低級アルキル置換基のような、１つ以上のこれらの基をサブグループとして含む基を言う。好ましい溶解性促進基は、NR’2-(ここで、R’-はそれぞれ独立して、水素又はC1-C3アルキルであり、又は-NR’2が一緒になってシクロアミノを形成するものである。)又は窒素-含有ヘテロアリール；-NR’2で置換された低級アルキル(ここで、R’-はそれぞれ独立して、水素又はC1-C3アルキルであり、又は-NR’2が一緒になってシクロアミノを形成するものである。)又は窒素-含有ヘテロアリール；及び式-OR、-SR、-C(O)R、-OC(O)R、-C(O)OR、-NR2、-SO2OR、-OSO2R、-SO2NR2、-NR3SO2R、-CONR2、-NR3COR、及び-NR3C(O)ORを有する基であり、ここで、Rは、-NR’2で置換された低級アルキル(ここで、-R’はそれぞれ独立して、水素又はC1-C3アルキルであり、又は-NR’2が一緒になってシクロアミノを形成するものである。)又は窒素-含有ヘテロアリールであり、R3は水素又はC1-C3アルキルである。
【００２２】
「塩」は、「本発明の化合物」と題する部分で説明する。
【００２３】
「治療上の有効量」は、癌の治療のためにヒトに投与された場合に癌を治療するのに十分な用量を意味する。癌を「治療すること(Treating)」又は「治療(treatment)」は以下の1つ以上を含む：
(1)  癌の増殖を限定/阻害すること、すなわち、その成長を限定/補足すること、
(2)  癌の広がりを減少/妨げること、すなわち、転移を減少/妨げること、
(3)  軽減すること、すなわち、癌の後退を生じさせること、
(4)  癌の再発を減少/妨げること、及び
(5)  癌の症状を軽減すること。
【００２４】
「併用療法」は、癌の化学療法の経過において、本発明の最初の態様の化合物及び他の治療剤をを投与することを意味する。そのような併用療法は、他の抗癌治療剤の投与の前、経過において、及び/又は後に本発明の最初の態様の化合物を投与することを含む。本発明の最初の態様の化合物の投与は、他の抗癌治療剤の投与と別であってもよく、当該投与の数週間前または後であってもよいが、通常は、本発明の最初の態様の化合物の投与は、他の抗癌治療剤(例えば、一用量の化学療法剤の投与、分子標的治療剤、生物治療又は放射線治療)から48時間以内に行われ、最も日常的には24時間以内である。
【００２５】
「を含む(Comprising)」又は「を含有する(containing)」及びそれらの文法的変形は、含有を意味する言葉であり、限定がなく、述べた成分、群、ステップ等の存在を明記する意味であるが、他の成分、群、ステップ等の存在を排除するものではない。それゆえ「を含む(comprising)」は、「からなる(consisting of)」、「実質的に〜からなる(consisting substantially of)」又は「のみからなる(consisting only of）」ことを意味せず；及び、例えば、「を含む(comprising)」製剤は、その化合物を含まなければならないが、他の活性成分及び/又は賦形剤を含みうる。
【００２６】
本発明の化合物
【００２７】
式Aの化合物の塩(例えば、薬学的に許容される塩)は、本発明に含まれ、この出願の組成物、方法及び用途において有用である。そのような塩は好ましくは、薬学的に許容される酸から形成される。また、さらなる薬学的塩、それらの選択、製造、及び用途の議論に関しては例えば、スタール及びウエルマス編「薬学的に許容される塩ハンドブック(Handbook of Pharmaceutically Acceptable Salts)」, (2002), Verlag Helvetica Chimica Acta, Zurich, Switzerland を参照されたい。文脈がその他を意味している場合を除き、本発明の化合物に言及する場合、その化合物及びその塩の両方を言う。
【００２８】
これらの塩は、無機又は有機塩基と反応する酸性プロトンが存在する場合に形成される塩を含む。典型的には、親化合物を、適切なカチオンを含む、過剰量のアルカリ性試薬、例えば、水酸化物、カーボネート、アルコキシドを処置することによる。カチオン、例えば、Na+、K+、Ca2+、Mg2+及びNH4+は、薬学的に許容される塩に存在するカチオンの例である。それゆえ、適切な無機塩基には、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム及び水酸化ナトリウムがある。また塩は、有機塩基、例えば、1級、2級及び3級アミン塩、天然由来の置換アミンを含む、置換アミン、及び、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、2-ジメチルアミノエタノール、トロメタミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、N-アルキルグルカミン、テオブロミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、N-エチルピペリジン等を含む環状アミンを用いて製造される。
【００２９】
本発明の化合物の最初の態様が、例えばアミノ基のような塩基性基を含む場合、それは酸付加塩を用いて製造されうる。化合物の酸付加塩は、親化合物及び過剰量の酸を用いて適切な溶媒中において標準的な方法により製造され、酸には、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸(硫酸及び重硫酸塩を生成する)、硝酸、リン酸等、及び有機酸、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、サリチル酸、4-トルエンスルホン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、シクロペンタンプロピオン酸、乳酸、2-(4-ヒドロキシベンゾイル)安息香酸、1,2-エタンジスルホン酸、2-ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、4-クロロベンゼンスルホン酸、2-ナフタレンスルホン酸、カンファースルホン酸、4-メチルビシクロ[2.2.2.]オクト-2-エン-1-カルボン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、4,4’-メチレンビス(3-ヒドロキシ-2-ナフトエ)酸、3-フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、tert-ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルクロン酸、グルタミン酸、3-ヒドロキシ-2-ナフトエ酸、ステアリン酸、ムコン酸等がある。
【００３０】
本発明の化合物には、以下の1つ以上が当てはまる式Aの化合物を含む：
1.a  XはS；又は
1.b  XはNH；
2.  mは少なくとも1、好ましくは1又は2；
3.  R1基(mが1の場合)又はR1基は、4-位(すなわち、ピリミジン環上、2つの窒素原子うちの1つに隣接しており：mが2又は3である場合、及び命名において優位な他の置換基がある場合には6-位である)の基であり、例えば(好ましくは)4-メチル、4-メトキシ又は4-トリフルオロメチルであり；
4.  mが2の場合、他のR1基は、5-又は6-位にあり、特に6-位である(最初のR1基が4-位にある場合の定義)；典型的には、小さい分子(例えば、メチル、メトキシ、カルボキシル又はC1-C3アルコキシカルボニル)又は分子の物理化学的性質を促進する基、例えば溶解性促進基であり；
5.  nは少なくとも1であり、好ましくは1又は2であり；
6.  R2基(nが1の場合)又はR2基(nが少なくとも2の場合)には、分子の物理化学的性質を促進する基、例えば溶解性促進基である。
【００３１】
一般的に、これらのより多くの特徴を有する方が少ない特徴を有する化合物よりも好ましく；特に、一般にその特徴を持たない化合物に比べて、これらの特徴のうちの1つの特徴を追加することは、一般にはその特徴を持たない化合物に比べて好ましい化合物を生じる。
【００３２】
互変異性体及び命名
【００３３】
本発明の化合物は、本出願においては、2-[1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミド及び2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミドと命名され示される。すなわち、ベンゾイミダゾール/ベンゾチアゾール部分と2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミド部分の間においてエキソ環状二重結合を有する化合物である。しかし、当該分野において通常の知識を有する者にとっては、化合物は互変異性体であり、命名され、イミダゾール/チアゾール環において二重結合を有し、2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミドに対してエキソ環状二重結合を有することは、明らかであろう。また、エキソ環状結合が単結合になるとアセトアミド2-位の炭素において、固有のキラリティはなく、またベンゾイミダゾール/ベンゾチアゾール部分に対して、分子の2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミド部分は回転しうるため、エキソ環状が２つになるとE及びZ異性体は互変異性体となる。さらに、アミド及びピリミジン環におけるケト-エノール互変異性体が可能である。さらに、例えば4-と7-位、及び5-と6-位は、ベンゾイミダゾールにおいて等価であるため、ベンゾイミダゾールにおいてはさらに対称性が生じる。それゆえ、化合物は少なくとも潜在的にコンホメーションの互換性が広く存在し、本明細書及び請求項における化合物の説明又は命名は。コンホメーションに限定する意図ではなく、その化合物において適用されうる全てのコンホメーションを含む。
【００３４】
対照のため、本明細書及び請求項において2-[1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミド又は2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミド誘導体として命名されている式Ａの各化合物は、IUPAC命名規則が優先する。それゆえ、例えば、化合物39A：式
【化２】
0005555239.tif 000003
の化合物は、2-(5-{[3-(4-モルホリニル)プロピル]アミノカルボニル}-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミドと命名され、化合物40A：式
【化３】
0005555239.tif 000004
の化合物は、2-(6-{[3-(4-モルホリニル)プロピル]アミノカルボニル}-ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミドと命名される。
【００３５】
以下の実施例及び表の化合物、例えば、1Aないし146Aのうちのいずれか及びそれらの塩；特に化合物39Aないし41A、60A、75A、77A、81A、82A、83A、95A、100A、101A、117A、138A、139A及び142Aないし146Aのうちのいずれか及びそれらの塩；特に41A、75A、83A、139A、142A、143A及び145Aのうちのいずれか及びそれらの塩を含み、本出願の明細書及び請求項において記載されている本発明の各化合物を含む。本発明の組成物及び方法は、前述の文におけるいずれかにおいて言及した化合物の組成物及び方法を含む。
【００３６】
化合物の製造
【００３７】
一般的合成法の議論における、以下に示す各反応スキームにおいて、ベンゾイミダゾール/ベンゾチアゾール又はピリミジンにおけるベンゼン環において置換基は示さないが、後の明細書及び実施例において説明するように、置換基が存在しうることは明らかであろう(所望の化合物の最終置換基、又は化合物のコアの形成の後に修飾される、それらの最終置換基の前駆体の置換基いずれにおいても)。
【００３８】
第1の一般的合成法は、ベンゾチアゾール及びベンゾイミダゾール-ベースの化合物の両方に適用可能であり、2-[1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]アセトニトリル又は2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]アセトニトリルの形成が関与し、続いてピリミジンとカップリングし、ニトリルの加水分解によりアミドを生成する(順序はいずれであってもよい)反応は、以下の反応スキーム1に示す。
【化４】
0005555239.tif 000005
【００３９】
合成の最初の部分の、最初のステップにおいては、ベンゼン-1,2-ジアミン(1、X=NH)又は2-アミノチオフェノール(1、X=S)を2-(アルコキシカルボニル)-3,3-ビス(メチルチオ)アクリロニトリル 2、例えば、エチル又はtert-ブチルエステルとカップリングさせ、2-シアノ-2-[1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]アセテート又は2-シアノ-2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]アセテート 3を得る。反応は、アルカノール、例えば、エタノール中で行われ、任意にアミン塩基、例えば、4-ジメチルアミノピリジン存在下、加熱して行ってもよい。第2のステップにおいては、アルコキシカルボニル基を加水分解、例えば塩基による加水分解でエトキシカルボニル基、又は酸加水分解により、好ましくはtert-ブトキシカルボニル基を除去し、2-[1H-ベンゾイミダゾール-2-イル]アセトニトリル又は2-[ベンゾチアゾール-2-イル]アセトニトリル 4を得る。
【００４０】
2-(エトキシカルボニル)-3,3-ビス(メチルチオ)アクリロニトリルは市販されており、その製造方法は文献に記載されており；tert-ブチルアナログは、同一の方法により容易に製造される。
【００４１】
合成の第2の部分においては、2-[1H-ベンゾイミダゾール-2-イル]アセトニトリル又は2-[ベンゾチアゾール-2-イル]アセトニトリル 4をピリミジンとカップリングさせ、及び続いてアミドへと加水分解する、又は加水分解してからカップリングさせる。化合物4が、2-[1H-ベンゾイミダゾール-2-イル]アセトニトリルである場合、ベンゾイミダゾールの窒素原子の1つをアミノ保護基、例えばN-アルキル化を避けるため、tert-ブトキシカルボニルによって保護する。カップリング/加水分解経路において、化合物4は、続いてピリミジン 5 [Lは、脱離基、例えばCl、メチルスルホニル又はメチルチオ]とカップリングさせ、強塩基、例えば水素化ナトリウム又はリチウムヘキサメチルジシラザンの存在下、例えばテトラヒドロフランのような非プロトン性極性溶媒中、2-[1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトニトリル又は2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトニトリル 6を生成する。化合物6は、続いて濃硫酸で加水分解し、最終の2-[1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミド又は2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミド 8を得る。加水分解/カップリング経路においては、前述のステップは逆に行う：化合物4のニトリル体はアミドに加水分解され、化合物7を得、化合物7は続いてピリミジン 5とカップリングし、化合物8を得る。
【００４２】
第2の一般的合成法も、ベンゾチアゾール及びベンゾイミダゾール-ベースの化合物の両方に適用でき、2-[1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトニトリル又は2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトニトリルが関与し、続くニトリルの加水分解によりアミドを生成するが、それは下の反応スキーム2に説明する。
【化５】
0005555239.tif 000006
【００４３】
合成の最初のステップにおいては、ベンゼン-1,2-ジアミン(1、X=NH)、又は2-アミノチオフェノール(1、X=S)を3，3-ビス(メチルチオ)-2-(ピリミジン-2-イル)アクリロニトリル 9とカップリングさせ、2-[1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトニトリル又は2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトニトリル 6を生成する。反応は、全般に、反応スキーム1の最初の半分の第1のステップにおいて用いたのと同一の条件において行われる。第2のステップにおいては、反応スキーム1に示すように、式6の化合物は、加水分解し2-[1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミド又は2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミド 8を得た。
【００４４】
反応スキーム2に示すように、3，3-ビス(メチルチオ)-2-(ピリミジン-2-イル)アクリロニトリル 9は、ピリミジンと2-シアノ酢酸エステル(例えば、tert-ブチルエステル)カップリングをさせることにより製造され、続くエステル基の除去により2-(2-ピリミジニル)アセトニトリル 11を得、これをキサントゲン酸塩、続いてヨウ化メチルと反応させ、ジチオケタールを得る。3，3-ビス(メチルチオ)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アクリロニトリルの製造は準備的実施例4において示す。
【００４５】
第3の一般的合成法は、反応スキーム3に示すように、ベンゾチアゾール-ベースの化合物に適用され、2-(ピリミジン-2-イル)アセトニトリル又は2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミドと2-クロロ-ベンゾチアゾールのカップリングにより行われ、必要であれば、続いてニトリルの加水分解を行う。
【化６】
0005555239.tif 000007
【００４６】
合成においては、ベンゾチアゾール10 [Lは脱離基である]を2-(ピリミジン-2-イル)アセトニトリル 11又は2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミド 12と強塩基、例えば水素化ナトリウムの存在下、非プロトン性極性溶媒中、例えば、テトラヒドロフラン中においてカップリングさせ、2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトニトリル 6又は2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミド 8を生成する。式6の化合物が製造されると、反応スキーム1に示すように式8の化合物へと加水分解される。
【００４７】
第4の一般的合成法も、ベンゾチアゾール-ベースの化合物に適用され、2-(ピリミジン-2-イル)アセトニトリル又は2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミドを、典型的にはアニリンから生成されるフェニルイソチオシアナートとカップリングさせ、続いて閉環反応、及び必要であればニトリルの加水分解を行う(反応スキーム4)。この方法は、置換されたアニリンの製造が、よく知られているため、特に、ベンゾチアゾールのベンゼン環の複雑な側鎖の化合物に用いられる。
【化７】
0005555239.tif 000008
【００４８】
合成の最初のステップにおいては、フェニルイソチオシアナート 14(アニリンとチオホスゲンの反応により容易に製造できる)を2-(ピリミジン-2-イル)アセトニトリル 11又は2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミド 12と、塩基の存在下3-(フェニルアミノ)-2-(ピリミジン-2(1H)-イリデン)-3-チオキソ-プロピオニトリル 15又は3-(フェニルアミノ)-2-(ピリミジン-2-イル)-3-チオキソプロパンアミド 16を生成する。第2のステップにおいては、式の化合物15又は16の閉環反応は、臭素/酢酸又はカリウムフェリシアニドのような試薬との反応により行われ、2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトニトリル 6又は2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミド 8を生成する。式6の化合物が製造されると、続いて式8の化合物へと加水分解される(反応スキーム1)。
【００４９】
第5の一般的合成法もまたベンゾチアゾール-ベースの化合物に適用され、2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]マロノニトリルの生成が関与し、続いてニトリル基のイミデートへ、さらにアミジンへと変換される。アミジンは、β-ジケトン又はピリミジン環形成のための等価体と反応させ、他のニトリルは、対応するカルボキサミドに加水分解され；又はアミジン-ニトリルは加水分解された後にβ-ジケトン又は等価体と反応させる(反応スキーム5)。この方法は、出発物質としての置換されたピリミジンが入手できない場合に特に魅力的である。
【化８】
0005555239.tif 000009
【００５０】
第1のステップにおいて、ベンゾチアゾール 10 [反応スキーム4に示すとおりLは脱離基である]はマロノニトリルと強塩基、例えばナトリウムエトキシドの存在下、エタノール中で反応させ、2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]マロノニトリル 17を得る。このニトリルの極性溶媒中における懸濁液の塩化水素ガスとの反応により、2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-シアノアセトイミデート 18を得、イミデートとアンモニアの反応により対応する2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-シアノアセトアミジン 19を生成する。化合物19は続いてβ-ジケトン又は等価体、例えば2,4-ペンタンジオン又はエチル-3-オキソ-4,4,4-トリフルオロブチラートと反応させ、塩基、例えばナトリウムエトキシド存在下、非プロトン性溶媒中、強熱(例えば、電磁波)により式6の化合物であるピリミジン環[置換基は示していない]を生成する。最後に、式6の化合物は、加水分解して式8の化合物を得る(反応スキーム1)。順序を逆にすると、加水分解がカップリングよりも先に行われ、反応スキーム1示すように加水分解が先行するので、カップリングはより穏やかな条件下で行うことができる。
【００５１】
式Ａの化合物は、酸付加塩の形成において当該分野の通常の知識を有する者によく知られた技術を用いて、適切な酸と反応させることにより塩に変換される。用いる酸及び反応条件は、薬学的に許容される塩を生成し、単離及び生成に簡便な、例えば固体(例えば、アモルファス又は結晶)を生成するものが、選択される。
【００５２】
化合物の用途、組成物及びその用途
【００５３】
本発明の第2の態様は、癌の治療のための、本発明の第1の態様の化合物のキナーゼ阻害剤としての使用、特にオーロラキナーゼ阻害剤及び任意にVEGFR2キナーゼ阻害剤としての使用である。本発明の第3の態様は、本発明の第1の態様の化合物及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物である。本発明の第4の態様は、癌の治療のための、キナーゼ阻害剤としての本発明の第1の態様の化合物の使用である；及び本発明の第5の態様は、特に癌の治療のための、キナーゼ阻害の治療薬の製造における化合物の使用である。
【００５４】
本発明の第1の態様の化合物は、治療される対象及び対象の状態の性質に対して適切ないかなる経路で投与されてもよい。投与経路は、静脈内、腹腔内、筋肉内、及び皮下注射を含む注射による投与を含み、経粘膜又は経皮送達、局所的な適用、経鼻スプレー、坐剤等又は経口であってもよい。製剤は、リポソーム製剤、乳濁液、任意に粘膜又は経皮を介する製剤によって投与されてもよい。これらの投与方法のそれぞれの適切な製剤は、レミントン：The Science and Practice of Pharmacy, 20th ed., A. Gennaro, ed., Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, Pennsylvania, U.S.A.において見出される。典型的な製剤は、経口又は静脈内注射のための溶液である。典型的な投与形態は、経口投与のための錠剤又はカプセル剤、静脈内注射のための溶液、及び静脈内注射のために溶液として再構成されるための凍結乾燥散剤である。
【００５５】
意図した投与形態により、医薬組成物は、固体、半固体又は液体の投与形態であり、好ましくは正確な用量の投与のための単回投与のために適切なユニット投与形態である。活性化合物の有効量に加え、組成物は、薬学的に用いられる、活性化合物を製剤に変換するプロセスを促進するアジュバントを含む、適切な薬学的に許容される適切な賦形剤を含んでいてもよい。「薬学的に許容される賦形剤」は、賦形剤又は活性化合物の生物活性の有効性を妨害せず、投与された場合に対象にとって毒性がない、又は望ましくないことをもたらさない賦形剤の混合物をいう。
【００５６】
固体組成物、従来の賦形剤、例えば、医薬品グレードのマンニトール、乳糖、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルク、セルロース、グルコース、ショ糖、炭酸マグネシウム等がある。液体の薬理学的投与組成物は、例えば、本明細書中に記載した活性化合物を溶解、分散等させて製剤化され、及び任意に水又は水溶性の賦形剤中に存在する薬学的アジュバント、例えば、水、生理食塩水、水溶性デキストロース等により溶液又は懸濁液を含んでいてもよい。必要であれば、医薬組成物は、少量の非毒性の補助的な賦形剤、例えば、湿潤剤又は乳化剤、pH緩衝剤等、例えば、酢酸ナトリウム、ソルビタンモノラウラート、トリエタノールアミン酢酸ナトリウム、オレイン酸トリエタノールアミン等を含んでいてもよい。
【００５７】
経口投与には、組成物は、一般に錠剤又はカプセル剤の形態が取られ、又は水性又は非水性溶液、溶液、懸濁液又はシロップが用いられる。錠剤及びカプセル剤は好ましくは経口投与形態である。経口投与用の錠剤及びカプセル剤は、一般には、1つ以上の賦形剤、例えば、乳糖及びトウモロコシデンプンを含む。滑沢剤、例えば、ステアリン酸マグネシウムもまた典型的に加えられる。液体懸濁液が用いられる場合、活性薬剤は、乳化及び懸濁化賦形剤と組み合わせて用いられる。必要であれば、香料、着色及び甘味剤も添加される。経口製剤に組み込まれる他の任意の賦形剤は、保存剤、懸濁剤、増粘剤等がある。
【００５８】
注射用製剤は従来の形態により、液体の溶液又は懸濁液、注射の前に適切に液体に溶媒和又は懸濁され、又は乳濁液とされる固体、又はリポソーム製剤として製造される。また滅菌注射製剤は、非毒性の非経口的に許容される希釈剤又は溶媒における滅菌注射用溶液又は懸濁液としてである。用いられうる、許容される担体及び溶媒は、水、リンガー溶液及び等張塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌、不揮発油、脂肪酸エステル又はポリオールが、溶媒又は懸濁媒体として従来用いられてきた。
【００５９】
また本発明の医薬組成物は、非経口投与のために凍結乾燥形態に製剤される。凍結乾燥製剤は、使用前に、水又は他の媒体を添加することにより再構成され、さらに、適切な希釈剤で希釈される。液体製剤は一般には、緩衝、等張、水性溶液である。適切な希釈剤の例は、等張生理食塩水溶液、5% デキストロース水溶液、及びナトリウム又は酢酸アンモニウム溶液の緩衝液である。組成物を促進又は安定させ、又は組成物の製造を促進するため薬学的に許容される固体又は液体賦形剤加えてもよい。
【００６０】
典型的には、本発明の医薬組成物は、癌治療の組成物の使用を指示するためのラベル、指示又はその両方を有するコンテナに包装される。
【００６１】
医薬組成物は、本発明の化合物は、1つ以上の薬学的活性薬剤を追加的に含んでいてもよい。これらの追加的な活性薬剤は、典型的には癌治療に有用であり、又は本発明の化合物による癌治療を促進する。
【００６２】
化合物の使用方法
【００６３】
本発明の第1の態様の化合物は、インビトロ及びインビボ実施例において示すように、ヒト癌細胞株に対して活性があり、それゆえ、ヒトの癌治療のためのヒトの癌の化学療法剤として、有用であると考えられる。
【００６４】
それゆえ、本発明の第6の態様は、ヒトに、本発明の第1の態様の化合物の治療上の有効量、又は本発明の第3の態様の医薬組成物を投与することによる、ヒトの癌治療の方法を含む。任意に、例えば、癌治療としてすでに行われている治療のような、他の癌治療をもさらに含む。
【００６５】
本発明の方法により特に治療できる癌は、オーロラキナーゼ阻害剤及び血管形成阻害剤(例えば、VEGFR2キナーゼ阻害剤)、及び特に1つ以上のオーロラキナーゼを発現する癌である。そのような癌は、上述の段落[0002]及び[0003]及びそれらの段落において引用された文書に示された方法を含む。本発明の方法により治療される癌は、特に固形腫瘍、例えば、結腸直腸、肺、乳房、卵巣、膵臓、膀胱、脳、胃腸の、及び腎臓癌、及び血液腫瘍、例えば、白血病、特にALL及びCML、リンパ腫、及び骨髄異形性症候群を含む。
【００６６】
ヒトに投与される本発明の第1の態様の化合物の用量(単独であっても、又は一般的には本発明の第3の態様の組成物として)は、単独であっても他の抗癌治療剤とともに用いられる場合(本発明の第1の態様の化合物が他の抗癌治療剤とともに用いられる場合には)であっても、治療上の有効量であり；同様に、本発明の第1の態様の化合物とともに用いられる場合に、ヒトに投与される他の抗癌治療剤の用量も同様である。しかし、本発明の第1の態様の化合物及び他の抗癌治療剤が組み合わせて癌化学療法において用いられる場合には、いずれかの治療上の有効量は、それぞれは単独でヒトに投与された場合に治療に効果的な量よりも少量であり得る。癌治療においては、治療においてよくある毒性又は治療相互の毒性の可能性があるという理由のみで各治療における最大耐量よりも減少させて用いることが通常である。
【００６７】
本発明の第1の態様の化合物、又は本発明の第3の態様の医薬組成物は、それゆえ、選択した化合物又は組成物の治療上の有効量を投与することにより、そのような治療を必要とするヒトにおける癌治療において用いられる。本発明の化合物の治療上の有効量は、10ないし10,000 mg/m2、例えば、30ないし3000 mg/m2又は100ないし1000 mg/m2の範囲である。投薬は、1ないし35日間隔であり得；例えば、1ないし5週間隔、特に1、2、3、又は4週間隔で約500ないし1000 mg/m2、又は数日間であれば(例えば、5又は7日)1回/日を含む、より高い頻度で2、3、又は4週ごとに投与を繰り返し、又は、また6-72時間の持続注入で、2、3、又は4週ごとに投与を繰り返してもよい。適切な用量及び投与頻度は、当該分野の通常の知識を有する者及びこの開示によって容易に決定できる。本発明の化合物が投与された場合に、許容できない毒性効果は生じないと考えられる。
【００６８】
癌治療における当該分野の通常の知識を有する者は、目的の癌及び疾患のステ-ジについて不必要な試験をすることなく個人の知識及び本発明の開示により、本発明の第1の態様の化合物の治療上の有効量及び(本発明の第1の態様の化合物が化学療法の併用剤の一部として投与される場合には)他の抗癌治療剤の治療上の有効量を確定できる。
【実施例】
【００６９】
実施例
【００７０】
以下の実施例は、本発明の化合物の製造を説明し、及び、それらのインビトロ及びインビボでの抗癌活性を予測する。
【００７１】
準備的実施例及び合成例
【００７２】
本発明の化合物は、有機化学の従来の方法により製造される。例えば、ラーロック「Comprehensive Organic Transformations」, Wiley-VCH, New York, New York, U.S.Aを参照されたい。ある場合には、保護基が導入され、後に除去される。適切な保護基は、グリーンら、「Protective Groups in Organic Synthesis」, 2nd ed., 1991, John Wiley and Sons, New York, New York, U.S.A に記載されている。本発明の化合物は、一般的には、以下の実施例に示すように、又は当該分野の熟練に知られた手段により模範的な合成を変更することにより、本発明の前半に説明した合成スキームに従い合成される。準備的実施例は、本発明の化合物の合成において有用な中間体の製造について言及する；本発明の化合物の合成例に言及する。化合物番号は、これらの実施例の直後にある表について言及している。
【００７３】
準備的実施例1：N-エチル-3-(4-モルホリニル)プロパン-1-アミンの製造：化合物41Aの側鎖中間体
【００７４】
3-(4-モルホリニル)プロパン-1-アミン(35.0 g, 243 mmol)をテトラヒドロフラン(THF, 250 mL)に溶解させ、二炭酸-ジ-tert-ブチル(58.0 g, 266 mmol)及びN,N-ジイソプロピルエチルアミン(DIPEA, 84 mL， 484 mmol)を加え、溶液を終夜攪拌した。溶媒を除去し、残渣を酢酸エチル(EA)及び1.2M 塩酸(300 mL)に分散させた。pHを飽和炭酸水素ナトリウム水溶液7にし、層を分離した。水層を酢酸エチル(各150 mL)で2回抽出し、酢酸エチル層を合わせ、食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。溶媒を除去し、tert-ブチル 3-(4-モルホリニル)プロピルカルバメートを得た(39 g)。Tert-ブチル 3-(4-モルホリニル)プロピルカルバメート(3.5 g, 14.3 mmol)をTHF(30 mL)に溶解させ、水素化ナトリウム(60%鉱油分散物, 1.03 g, 25.8 mmol)を部分に分けて加えた。５分間攪拌後、ヨウ化エチル(13.4 g, 86.0 mmol)を加え、混合物を60℃とし、7時間、続いて室温で終夜攪拌した。水(5 mL)を加え、溶媒を除去した。残渣は、酢酸エチルに溶解させ、溶液を食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を除去し、粗tert-ブチル エチル[3-(4-モルホリニル)プロピル]カルバメート(2.5 g)を得た。シリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、92：8のジクロロメタン/メタノール(DCM/MeOH)で溶出し、tert-ブチル エチル[3-(4-モルホリニル)プロピル]カルバメート(1.4 g)を得た。精製したtert-ブチル エチル[3-(4-モルホリニル)プロピル]カルバメート(350 mg, 1.3 mmol)は、4.0M塩化水素-ジオキサン(5 mL, 20 mmol)溶液に溶解させ、45分間攪拌した。水を溶液に加え、2M水酸化ナトリウム水溶液で塩基性にした。生成物を、酢酸エチルで抽出し、酢酸エチル抽出物を食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。酢酸エチルの除去によりN-エチル-3-(4-モルホリニル)プロパン-1-アミン(50 mg)を得た。
【００７５】
準備的実施例2  4-トリフルオロメチル-2-メチルチオ-6-(ピリジン-2-イル)ピリミジンの製造：化合物11A(反応スキーム1)の中間体
【００７６】
4,4,4-トリフルオロ-1-(ピリジン-2-イル)ブタン-1,3-ジオン(1.0 g, 4.6 mmol)のエタノール(10 mL)溶液に2-メチル-2-チオプソイドウレア硫酸塩(0.64 g, 4.6 mmol)続いて、ナトリウムエトキシド(21重量% エタノール溶液, 3.0 mL, 9 mmol)を加えた。混合物を、9時間加熱還流し、室温に冷却し、酢酸エチルで抽出した。酢酸エチルを水で洗浄し、減圧下、溶媒を除去した。粗生成物をクロマトグラフィーによって精製し、クロロホルム/MeOH=49：1で溶出し、4-トリフルオロメチル-2-メチルチオ-6-(ピリジン-2-イル)ピリミジン (0.21 g, 収率17%)をオフホワイトの固形物として得た。
【００７７】
準備的実施例3  (2-クロロ-4-トリフルオロメチルピリミジン-5-イル)(4-メチルピペラジン-1-イル)メタノンの製造：化合物130A（反応スキーム1)の中間体
【００７８】
N-メチルピペラジン(0.11 mL, 1 mmol)を2-クロロ-4-トリフルオロメチルピリミジン-5-カルボニルクロライド(0.24 g, 1 mmol)のDCM(4 mL)溶液に0℃で加えた。混合物を、室温で1時間攪拌し、続いて真空下溶媒を除去し、(2-クロロ-4-トリフルオロメチルピリミジン-5-イル)(4-メチルピペラジン-1-イル)メタノンを固体として得た。
【００７９】
他の2-クロロ-置換されたピリミジン：化合物131Aないし136Aの中間体は類似の方法により製造した。
【００８０】
準備的実施例4  3，3-ビス(メチルチオ)-2-[(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アクリロニトリルの製造：反応スキーム2の中間体
【００８１】
tert-ブチル 2-シアノ-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2(1H)-イリデン]アセテート。tert-ブチル 2-シアノアセテート(97.45 g, 690 mmol)を無水THF(1 L)に溶解させ、窒素下、氷浴で90分間攪拌した。1MヘキサメチルジシラザンリチウムのTHF(690 mL, 690 mmol)溶液を滴下した。混合物は、さらに1時間攪拌し、続いて2-クロロ-4-トリフルオロメチルピリミジン(105 g, 590 mmol)を滴下した。混合物は50℃に加熱し、窒素下3時間攪拌し、冷却し、減圧下溶媒を除去した。塩酸(1N)を残渣に加え、pH1-2とした。固形沈殿を濾過により集め、真空下乾燥し、tert-ブチル 2-シアノ-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2(1H)-イリデン]アセテート(135 g, 収率82%)を黄檗色の固体として、LC/MSによる分析により＞98%純度で得た。tert-ブチル 2-シアノ-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2(1H)-イリデン]アセテート(48 g；166 mmol)を4M 塩化水素のジオキサン(415 mL, 1.66 mol)に懸濁させ、混合物を室温で6時間攪拌し、続いて、減圧下濃縮し、2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトニトリル(31 g, 収率100%)を橙色油状物として、LC/MSによる分析により純度＞98%で得た。2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトニトリル(31.0 g；166 mmol)のアブソルートエタノール(800 mL)溶液に、攪拌下、エチルキサントゲン酸カリウム(26.6 g；166 mmol)、続いて炭酸カリウム(45.8 g；332 mmol)を加えた。混合物は、100℃に加熱し3時間攪拌し、室温に冷却し、ヨードメタン(47.1 g；332 mmol)を滴下し、1N 塩酸(2 L)を加えた。生じた混合物を、DCM(1.5 L)で抽出し、DCM層を2回食塩水(各1 L)で洗浄した。溶媒は、減圧下除去し、3，3-ビス(メチルチオ)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アクリロニトリル(36 g, 収率75%)を、LC/MSによる分析により＞95%の純度で、薄茶色の固体として得た。
【００８２】
準備的実施例5  4-[(1H-イミダゾール-1-イル)メチル]ベンゼン-1,2-ジアミンの製造：化合物90A(反応スキーム1又は2)の中間体
【００８３】
炭酸カリウム(1.18 g, 8.54 mmol)を、攪拌下、4-(ブロモメチル)-2-フルオロ-1-ニトロベンゼン(2.0 g, 8.55 mmol)及びイミダゾール(584 mg, 8.58 mmol)のアセトニトリル(40 mL)溶液に加え、混合物を室温で3.5時間攪拌し、溶媒は減圧下、除去し、残渣を水と酢酸エチルに分散させた。水層を3回酢酸エチルで抽出し、酢酸エチル層を合わせ、1M 塩酸で3回抽出した。合わせた水層のpHを5M水酸化ナトリウム水溶液で8とし、生成した乳状の溶液を3回酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層を合わせ、食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。濾過と濃縮により、1-(3-フルオロ-4-ニトロベンジル)-1H-イミダゾール(914 mg)を得、これは約15%のビス−アルキル化イミダゾール副生成物を含んでいる。1-(3-フルオロ-4-ニトロベンジル)-1H-イミダゾール(914 mg)を、エタノール性アンモニア溶液(2M NH3, 55 mL)で80℃に加熱した封管で2日間処置した。冷却後、溶媒を除去し、5-[(1H-イミダゾール-1-イル)メチル]-2-ニトロベンゼンアミン(1.0 g)を橙色の固体として得た。5-[(1H-イミダゾール-1-イル)メチル]-2-ニトロベンゼンアミン(1.0 g, 4.77 mmol)を10%ジメチルホルムアミドのエタノール(44 mL)溶液に溶解させ、10%パラジウム炭素(130 mg, 0.12 mmol)を加えた。溶液を脱気し、水素風船を付けて1日攪拌した。続いて脱気し、溶液をMeOHで希釈し、珪藻土で濾過し、4-[(1H-イミダゾール-1-イル)メチル]ベンゼン-1,2-ジアミン(1.08 g)を茶色の油状物として得た。
【００８４】
準備的実施例6  N-(3,4-ジアミノフェニル)-2-(1H-イミダゾール-1-イル)アセトアミドの製造：化合物86A(反応スキーム1又は2)の中間体 
【００８５】
1H-イミダゾール-1-イル酢酸(284 mg, 2.25 mmol)及び2-ニトロベンゼン-1,4-ジアミン(324 mg, 2.12 mmol)のアセトニトリル(20 mL)溶液に3ジエトキシホスホリルオキシ-1,2,3-ベンゾトリアジン-4(3H)-オン(DEPBT, 632 mg, 2.11 mmol)及びトリエチルアミン(600 μL, 4.4 mmol)を加えた。混合物は、4日間室温で攪拌した。赤色沈殿を濾過により集め、アセトニトリルで洗浄し、N-(4-アミノ-3-ニトロフェニル)-2-(1H-イミダゾール-1-イル)アセトアミド(430 mg, 収率88%)を98%純度で得た。N-(4-アミノ-3-ニトロフェニル)-2-(1H-イミダゾール-1-イル)アセトアミド(430 mg, 1.65 mmol)のエタノール(20 mL)溶液は、大気圧下、10%パラジウム炭素(100 mg, 0.09 mmol)を用いて、室温で終夜水素化した。混合物を濾過し、青色の溶液を得た。減圧下溶媒を除去し、N-(3,4-ジアミノフェニル)-2-(1H-イミダゾール-1-イル)アセトアミドを青色の半固体(413 mg)として得た。
【００８６】
準備的実施例7  N-(3,4-ジアミノフェニル)-2-(ジエチルアミノ)アセトアミドの製造：化合物75A(反応スキーム1又は2)の中間体
【００８７】
2-ニトロベンゼン-1,4-ジアミン(1.55 g, 10.1 mmol)、N,N-ジエチルグリシンナトリウム塩(1.61 g, 10.6 mmol)及びDEPBT(3.02 g, 10.0 mmol)をアセトニトリル(75 mL)に懸濁させた。トリエチルアミン(2.8 mL， 20.0 mmol)を加え、溶液は終夜室温で攪拌した。生成した茶色の沈殿を濾過し、捨てた。濾液を濃縮し、残渣を酢酸エチル及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液に分散させた。有機層を水、続いて食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下溶媒を除去した。残渣をエタノール(50 mL)に溶解させ、大気圧下、10%パラジウム-チャコール(1.0 g, 0.9 mmol)を用いて室温で終夜、水素化した。濾過し、減圧下濃縮し、N-(3,4-ジアミノフェニル)-2-(ジエチルアミノ)アセトアミドを薄茶色の半固体として得、固化させ静置すると青色に変化した。
【００８８】
準備的実施例8  4-(ピリジン-3-イル)-ベンゼン-1,2-ジアミンの製造：化合物107A(反応スキーム1又は2)の中間体
【００８９】
4-アミノ-3-ニトロフェニルボロン酸ピナコールエステル(1.60 g, 6.06 mmol)、3-ブロモピリジン(1.10 g, 6.96 mmol)、炭酸セシウム(3.33 g, 10.22 mmol)及び1,1’-ビス(ジフェニルホスフィノ)フェロセン-パラジウム(II)ジクロライドDCM複合体(491 mg, 0.60 mmol)をジメチルホルムアミド(20 mL)に懸濁させた。溶液を真空で数回脱気し、アルゴン雰囲気に置き換えた。続いてこれを65℃に加熱し、6時間攪拌した。冷却後、酢酸エチル(100 mL)及び水(40 mL)を加えた。追加の水(50 mL)を有機層に添加したところ、沈殿が分液漏斗において生成した。二層の溶液を濾過し、濾液を分液漏斗に移し、分離した。有機層を2回水(各50 mL)、続いて食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウム乾燥し、減圧下濃縮し、2-ニトロ-4-(ピリジン-3-イル)ベンゼンアミン(1.18 g)を得た。2-ニトロ-4-(ピリジン-3-イル)ベンゼンアミン(700 mg, 3.26 mmol)のエタノール/酢酸エチル＝1：1(40 mL)溶液を大気圧下、10%パラジウム炭素(90 mg, 0.08 mmol)を用いて室温で2日間水素化した。濾過及び減圧下濃縮し、4-(ピリジン-3-イル)-ベンゼン-1,2-ジアミンを得た(621 mg)。
【００９０】
準備的実施例9  N-(3,4-ジアミノフェニル)-2-(ジエチルアミノ)-N-エチルアセトアミドの製造：化合物139A(反応スキーム1又は2)の中間体
【００９１】
2-ニトロベンゼン-1,4-ジアミン(2.00 g；13.1 mmol)、二炭酸-ジ-tert-ブチル(3.14 g, 14.4 mmol)及びDIPEA(2.6 mL；14.9 mmol)のジオキサン(40 mL)溶液を40分間還流し、室温まで冷却した。混合物は、減圧下濃縮し、酢酸エチル(100 mL)に注いだ。酢酸エチル溶液は、水で洗浄し、酢酸エチルで水層を抽出した。有機層を合わせて飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮し、茶色の固体として、tert-ブチル 3-アミノ-4-ニトロフェニルカルバメートを定量的に得た。tert-ブチル 3-アミノ-4-ニトロフェニルカルバメート(2.74 g；10.8 mmol)の無水THF(50 mL)溶液中、水素化ナトリウム(油中60wt%分散液, 0.868 g, 21.7 mmol)を部分に分けて、10分以上かけて加えた。混合物は、さらに5分間室温で攪拌し、続いてヨードエタン(950 μL；11.9 mmol)を加えた。溶液は20時間攪拌し、水(1 mL)を加え、溶液を減圧下濃縮した。残渣は酢酸エチル及び水に分散させ、層を分離した。水層を酢酸エチルで2回抽出し、有機層を集め、水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び食塩水で洗浄した。有機層は、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮し、モノ及びジエチル化生成物の混合物を得た(2.18 g)。これをシリカゲルカラムクロマトグラフィーで、酢酸エチル/ヘキサン＝1：4で溶出して精製し、tert-ブチル 4-アミノ-3-ニトロフェニル(エチル)カルバメート(0.534 g)を橙色の固体として得た。tert-ブチル 4-アミノ-3-ニトロフェニル(エチル)カルバメート(0.514 g；1.83 mmol)の4M塩酸/ジオキサン(10 mL)溶液を、周囲温度で3時間攪拌した。溶媒を減圧下留去し、残渣を水に溶解させた。pHを1M水酸化ナトリウム水溶液を用いて10に調整し、水層を酢酸エチルで3回抽出した。有機抽出物を合わせて食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮し、N1-エチル-3-ニトロベンゼン-1,4-ジアミン(0.311 g)を紫色の固体として得た。N1-エチル-3-ニトロベンゼン-1,4-ジアミン(0.208 g；1.38 mmol)をアセトニトリル(10 mL)に溶解させ、N,N-ジエチルグリシンナトリウム塩(0.192 g；1.25 mmol)及びDEPBT(0.375 g；1.25 mmol)、続いてトリエチルアミン(577 μL；4.14 mmol)を加えた。混合物は、室温で8時間攪拌し；さらに、攪拌下N,N-ジエチルグリシンナトリウム塩(0.192 g；1.25 mmol)、DEPBT(0.375 g；1.25 mmol)、及びトリエチルアミン(577 μL；4.14 mmol)を加え、63時間攪拌した。固体を濾過により除去し、濾液を減圧下濃縮した。残渣に水を加え、pHを飽和炭酸水素ナトリウム水溶液により10とした。この溶液を、酢酸エチルで3回抽出し、有機層を合わせ、水及び食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮し、N-(4-アミノ-3-ニトロフェニル)-2-(ジエチルアミノ)-N-エチルアセトアミド(0.303 g)を茶色の油状物として得た。N-(4-アミノ-3-ニトロフェニル)-2-(ジエチルアミノ)-N-エチルアセトアミド(0.092 g；0.31 mmol)のエタノール(5 mL)溶液を、10%パラジウム炭素(11 mg)の存在下、室温で22時間水素化した。混合物を珪藻土で濾過し、メタノールで洗浄し、濾液を減圧下濃縮し、N-(3,4-ジアミノフェニル)-2-(ジエチルアミノ)-N-エチルアセトアミドを茶色の油状物として定量的に得た。
【００９２】
準備的実施例10  4-(4-メチルピペラジン-1-イル)ベンゼン-1,2-ジアミンの製造：化合物119A(反応スキーム1又は2)の中間体
【００９３】
5-フルオロ-2-ニトロベンゼンアミン(3.0 g, 18.1 mmol)、トリエチルアミン(5.0 mL， 36.3 mmol)、及び1-メチルピペラジン(2.0 mL， 18.1 mmol)のジオキサン(25 mL)溶液を18時間加熱還流した。室温に冷却後、混合物を減圧下濃縮し、残渣をDCM(100 mL)に溶解させた。この溶液を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、続いて食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮し、5-(4-メチルピペラジン-1-イル)-2-ニトロベンゼンアミン(3.25 g)を茶色の固体として得た。5-(4-メチルピペラジン-1-イル)-2-ニトロベンゼンアミン(3.25 g；13.7 mmol)の無水エタノール(40 mL)溶液を大気圧下、10%パラジウム炭素(0.30 g；2.7 mmol)を用いて、室温で17時間反応させて、水素化した。混合物は、珪藻土で濾過し、減圧下濃縮し、4-(4-メチルピペラジン-1-イル)ベンゼン-1,2-ジアミンを得た(2.36 g)。
【００９４】
準備的実施例11  4-[2-(1H-イミダゾール-1-イル)エトキシ]ベンゼンアミンの製造：化合物117A(反応スキーム4)の中間体
【００９５】
1-(ヒドロキシエチル)イミダゾール(5.30 g；47.3 mmol)を無水THF(50 mL)に溶解させ、氷浴で冷却した。水素化ナトリウム(油中60wt%分散液, 2.08 g, 52.0 mmol)を10分以上かけて加えた。氷浴をはずし、混合物を室温で20分間攪拌した。1-フルオロ-4-ニトロベンゼン(5.0 mL， 47.2 mmol)の無水THF(10 mL)溶液を5分以上かけて加え、さらに1.5時間攪拌した。水(数mL)を注意深く加え、混合物を減圧下濃縮した。残渣を酢酸エチル(75 mL)及び水(75 mL)に分散させ、層を分離した。水層を酢酸エチルで2回抽出し、有機層を合わせて1N塩酸で3回抽出した。これらの酸性抽出物のpHは、続いて5N水酸化ナトリウム水溶液を用いて7に調整し、生成した乳状の溶液を酢酸エチルで3回抽出した。有機抽出物を合わせて水及び食塩水で洗浄し、続いて硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮して、1-(2-(4-ニトロフェノキシ)エチル)-1H-イミダゾールを茶色の油状物として得た(5.46 g)。(2-(4-ニトロフェノキシ)エチル)-1H-イミダゾール(5.46 g；2.34 mmol)のエタノール(60 mL)溶液を大気圧下、10%パラジウム炭素(0.40 g)を用いて室温で20時間水素化した。混合物は、珪藻土で濾過し、続いて、減圧下濃縮し、4-[2-(1H-イミダゾール-1-イル)エトキシ]ベンゼンアミンを白色の固形物として得た(4.56 g)。
【００９６】
4-[3-(4-メチルピペラジン-1-イル)プロポキシ]ベンゼンアミンは、1-(3-ヒドロキシプロピル)-4-メチルピペラジンを用いて同様の方法により製造し；4-[2-(4-メチルピペラジン-1-イル)エトキシ]ベンゼンアミンは、1-(2-ヒドロキシエチル)-4-メチルピペラジンを用いて同様の方法により製造し；4-[2-(4-モルホリン-1-イル)エトキシ]ベンゼンアミンは、4-(2-ヒドロキシエチル)モルホリンを用いて同様の方法により製造し；及び4-[2-(ジメチルアミノ)エトキシ]ベンゼンアミンは、2-(ジメチルアミノ)エタノールを用いて同様の方法により製造した。酸素-結合側鎖を有する他のアニリンは、同様の方法により製造し；例えばある場合には、3-ヒドロキシピリジンから
4-(ピリジン-3-イルオキシ)ベンゼンアミンの製造、及び4-(3-ヒドロキシプロピル)モルホリンからの4-[3-(4-モルホリン-1-イル)プロポキシ]ベンゼンアミンの製造は、炭酸カリウムのような塩基を用いて、より刺激の少ない反応条件下で十分に行われた。3-[2-(4-モルホリン-1-イル)エトキシ]ベンゼンアミンは、3-ニトロフェノール及び4-(2-クロロエチル)モルホリン及び炭酸セシウムを塩基として用いて製造した；及び他の酸素-結合側鎖を有するアニリンは同様に製造した。
【００９７】
準備的実施例12  4-[4-(ピペリジン-1-イル)ピペリジン-1-イル]ベンゼンアミンの製造：化合物121A(反応スキーム4)の中間体
【００９８】
1-フルオロ-4-ニトロベンゼン(1.3 mL， 12.3 mmol), トリエチルアミン(6.0 mL；43.0 mmol)及び4-(ピペリジン-1-イル)ピペリジン(2.36 g；14.0 mmol)のジオキサン(10 mL)溶液は、18時間加熱還流した。室温に冷却した後、混合物を減圧下濃縮し、残渣をDCM(150 mL)に溶解させた。DCM溶液は、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び食塩水で洗浄し、続いて硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮し、黄色の固体を生成した。ヘキサンを加え、懸濁液に短時間、超音波をかけた。濾過により固体を集めてヘキサンで洗浄し、1-(4-ニトロフェニル)-4-(ピペリジン-1-イル)ピペリジン(3.05 g)を黄色の固体として得た。1-(4-ニトロフェニル)-4-(ピペリジン-1-イル)ピペリジン(3.05 g；10.5 mmol)のエタノール(20 mL)溶液を大気圧下、10%パラジウム炭素(0.251 g)を用いて室温で17時間水素化した。混合物は、珪藻土で濾過し、減圧下濃縮し、4-[4-(ピペリジン-1-イル)ピペリジン-1-イル]ベンゼンアミン(2.01 g)を紫/桃色固体として得た。
【００９９】
4-[4-(モルホリン-4-イル)ピペリジン-1-イル]ベンゼンアミンは、4-(モルホリン-1-イル)ピペリジンから同様に製造し；4-(4-メチルピペラジン-1-イル)ベンゼンアミンは、1-メチルピペラジンから同様に製造し；及び、N1-メチル-N1-[2-(ピペリジン-1-イル)エチル]ベンゼン-1,4-ジアミンは、N-メチル-2-(ピペリジン-1-イル)エタンアミンから同様に製造した。窒素-結合側鎖を有する他のアニリンは、一般に、化合物123A及び124Aの側鎖のように1級又は2級窒素を有するため、最初の1-フルオロ-4-ニトロベンゼンとのカップリングの後、tert-ブトキシカルボニルで保護し、生成物のアニリンが用いられる最終加水分解ステップの前に保護基は除去し、同様に製造した。
【０１００】
準備的実施例13  4-[(1H-イミダゾール-1-イル)メチル]ベンゼンアミンの製造：化合物89A(反応スキーム4)の中間体
【０１０１】
攪拌下、炭酸カリウム(2.00 g；14.6 mmol)を1-(ブロモメチル)-4-ニトロベンゼン(3.20 g；14.8 mmol)及びイミダゾール(1.00 g；14.7 mmol)のアセトニトリル(60 mL)溶液に加えた。混合物は、室温で17時間攪拌し、続いて減圧下濃縮した。残渣は酢酸エチル及び水に分散させ、層を分離した。水層を2回酢酸エチルで抽出し、有機層を合わせて水及び食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮し、1-(4-ニトロベンジル)-1H-イミダゾールを赤/茶色の油状物として得た(1.27 g)。1-(4-ニトロベンジル)-1H-イミダゾール(2.67 g；13.1 mmol)のエタノール(100 mL)溶液を、大気圧下、10%パラジウム炭素(0.285 g)を用いて室温で4.5時間水素化した。混合物は、珪藻土で濾過し、減圧下濃縮し、4-[(1H-イミダゾール-1-イル)メチル]ベンゼンアミンを白色の固形物として得た(2.24 g)。
【０１０２】
4-[(モルホリン-4-イル)メチル]ベンゼンアミンは、モルホリンから同様に製造し、及び4-[(4-メチルピペラジン-1-イル)メチル]ベンゼンアミンは、1-メチルピペラジンから同様に製造した。メチレン-結合側鎖を有する他のアニリンは、一般に、化合物94Aの側鎖のように1級又は2級窒素を有するため、最初の1-フルオロ-4-ニトロベンゼンとのカップリングの後、tert-ブトキシカルボニルで保護し、生成物のアニリンが用いられる最終加水分解ステップの前に保護基は除去し、同様に製造した。同様に、化合物95Aの側鎖のように、メチレン-結合側鎖を有する他のアニリンは、例えば、1-(2-ブロモエチル)-4-ニトロベンゼンを出発物質として用いて同様に製造した。
【０１０３】
他の側鎖を有するアニリンは、その熟練を有するとみなされる当該分野における熟練にとって、及びこの開示によって容易に製造され、反応スキーム4の合成において役立つであろう。例えば、ジエチル-(4-ニトロベンジル)ホスホナートは、ウィティッヒ反応において、ピリジン-3-カルボキサールアルデヒドとともに用いられ、及び生成した3-(4-ニトロスチリル)ピリジンを水素化することにより、4-[2-(ピリジン-3-イル)エチル]ベンゼンアミンを得、これを用いて化合物99Aを製造し、そのアニリンを用いて化合物97A及び98Aを同様に製造し；4-ニトロベンズアルデヒドは、グリオキサール及びアンモニアと反応させ、2-(4-ニトロフェニル)-1H-イミダゾールを得、これをヨウ化メチルを用いてN-メチル化し、続いて塩化スズにより4-(1-メチル-1H-イミダゾール-2-イル)ベンゼンアミンを得、化合物106Aの製造に用い；2-フルオロ-4-ニトロ安息香酸を、シュウ酸クロリドを用いて対応する塩化ベンゾイルに変換し、3-(モルホリン-4-イル)プロパン-1-アミンと反応させ、還元して4-アミノ-2-フルオロ-N-[3-(モルホリン-4−イル)プロピル]ベンズアミドとし、化合物50Aの製造に用い；及び、4-ニトロベンゼンスルホニルクロライドは、2-(モルホリン-4-イル)エタン-1-アミンと反応させ、続いて塩化スズを用いて還元して、4-アミノ-N-[2-(モルホリン-4-イル)エチル]ベンゼンスルホンアミドとし、化合物128Aの合成に用いた。
【０１０４】
準備的実施例14  (R)-N-(3,4-ジアミノフェニル)-1-メチルピペリジン-2-カルボキサミドの製造：化合物143A(反応スキーム2)の中間体
【０１０５】
攪拌下、O-(ベンゾトリアゾール−1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウム-ヘキサフルオロホスフェート(HBTU, 4.96 g, 13.1 mmol)を、(R)-N-Boc-2-ピペリジンカルボン酸(3.00 g, 13.1 mmol)及びDIPEA(9.0 mL， 51.2 mmol)の無水DMF(50 mL)溶液に加えた。混合物は、室温で5分間攪拌し、続いて2-ニトロ-1,4-フェニレンジアミン(3.00 g, 13.1 mmol)を加えた。混合物は、さらに18時間攪拌し、続いてDMF蒸発させた。残渣を水(200 mL)及び酢酸エチル(100 mL)に分散させ、層を分離した。水層をさらに抽出し、さらに2回酢酸エチル(各100 mL)で抽出し、有機抽出物を合わせて、水、1M炭酸ナトリウム溶液、水、及び食塩水(各100 mL)で洗浄した。溶液は、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮し、(R)-tert-ブチル 2-[(4-アミノ-3-ニトロフェニル)アミノカルボニル]ピペリジン-1-カルボキシラートを茶色の固体として得た(4.80 g)。
【０１０６】
(R)-tert-ブチル 2-[(4-アミノ-3-ニトロフェニル)アミノカルボニル]ピペリジン-1-カルボキシラート(4.80 g, 13.2 mmol)をジオキサン(100 mL)に懸濁させ、塩化水素(4Mジオキサン溶液75 mL)を加えた。生成した暗色の溶液を室温で3.5時間攪拌し、黄/茶色の懸濁液を生成した。固体を濾過により集め、高真空下、短時間乾燥した。固体は、水に懸濁させ、pHは、1M炭酸ナトリウム溶液によりpH 8に調整し、生成した懸濁液を15分攪拌した。固体を集め、高真空下で乾燥し、(R)-N-(4-アミノ-3-ニトロフェニル)ピペリジン-2-カルボキサミド塩酸塩を橙色の固体として得た(2.08 g)。これに1M炭酸ナトリウム溶液(200 mL)を加え、酢酸エチル(3回)で抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮し、(R)-N-(4-アミノ-3-ニトロフェニル)ピペリジン-2-カルボキサミドを橙色の泡沫として得た(1.77g)。
【０１０７】
(R)-N-(4-アミノ-3-ニトロフェニル)ピペリジン-2-カルボキサミド(2.09g, 7.9mmol)をMeOH(50 mL)に溶解し、パラホルムアルデヒド(0.95 g)及びナトリウムシアノボロハイドライド(0.50 g, 8.0 mmol)を加えた。混合物は、室温で70分攪拌し、水を滴下した。溶媒を蒸発させ、残渣を水及び酢酸エチル(各150 mL)に分散させた。層を分離し酢酸エチルで水層を抽出した(2回×100 mL)。合わせた酢酸エチル層を食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮し、(R)-N-(4-アミノ-3-ニトロフェニル)-1-メチルピペリジン-2-カルボキサミドを、橙色の泡沫として得(2.17 g)、さらなる精製をすることなく次の反応に用いた。
【０１０８】
(R)-N-(4-アミノ-3-ニトロフェニル)-1-メチルピペリジン-2-カルボキサミド(2.17 g, 7.8 mmol)のエタノール(75 mL)溶液は、真空下で脱気し、アルゴンで置換した。10%パラジウム炭素(0.44 g)を加え、混合物は再び真空下で脱気した。水素を風船により導入し、反応は、室温で23時間行った。混合物は、アルゴンを注入することにより脱気し、続いて珪藻土のパッドで濾過した。濾液を濃縮し、(R)-N-(3,4-ジアミノフェニル)-1-メチルピペリジン-2-カルボキサミドを紫色の固体として得た(1.78 g)。
【０１０９】
(S)-N-(3,4-ジアミノフェニル)-1-メチルピペリジン-2-カルボキサミド：化合物142Aの中間体は、(S)-N-Boc-2-ピペリジンカルボン酸を出発物質として、同一の方法により製造した。
【０１１０】
準備的実施例15  (S)-N-(3,4-ジアミノフェニル)-N-エチル-1-メチルピロリジン-2-カルボキサミドの製造：化合物145A(反応スキーム2)の中間体
【０１１１】
2-ニトロ-1,4-フェニレンジアミン(10.0 g, 65.3 mmol)、二炭酸-ジ-tert-ブチル(15.7 g, 71.8 mmol)及びDIPEA(13.5 mL， 71.8 mmol)のジオキサン(150 mL)溶液を1時間緩やかに加熱還流させて、室温まで冷却した。溶媒を留去し、残渣をDCM(500 mL)及び水(200 mL)に分散させ、層を分離した。水層をDCM(2×200 mL)で2回抽出し、DCM層を合わせ、食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮しtert-ブチル 4-アミノ-3-ニトロフェニルカルバメートを茶色の固体として得た(16.6 g)。
【０１１２】
水素化ナトリウム(鉱油中60wt%分散液、5.24 g, 131 mmol)を、攪拌下、部分に分けて25分以上かけて、tert-ブチル 4-アミノ-3-ニトロフェニルカルバメート(16.6 g, 65.6 mmol)の無水THF(200 mL)溶液に加えた。混合物は、さらに10分間攪拌し、ヨードエタンを加えた(5.2 mL， 65.0 mmol)。混合物は、室温で22時間攪拌し、少量の水を加えてクエンチした。溶媒を留去し、残渣を酢酸エチル及び食塩水(各300 mL)に分散させた。層を分離し、酢酸エチルで水層を抽出した(2×150 mL)。酢酸エチル層を合わせて食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮し茶色のガム状物質を得(16.0 g)、これを、30%酢酸エチル、70%ヘキサンを溶出液とする、クロマトグラフィーによって精製し、tert-ブチル 4-アミノ-3-ニトロフェニル(エチル)カルバメートを茶色の泡沫として得た(3.59g)。
【０１１３】
前ステップのtert-ブチル 4-アミノ-3-ニトロフェニル(エチル)カルバメートをジオキサン(35 mL)に溶解させ、塩化水素(4Mジオキサン溶液35 mL)を加えた。混合物は、室温で18時間攪拌し、続いて、溶媒を留去した。残渣を水(200 mL)に溶解させ、溶液を、5M水酸化ナトリウム溶液でpH10とした。溶液は、酢酸エチルで抽出し(3×100 mL)、酢酸エチル層を集めて、食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮しN1-エチル-3-ニトロベンゼン-1,4-ジアミンを紫色の固体として得た(1.68 g)。
【０１１４】
攪拌下、トリエチルアミン(1.0 mL， 7.33 mmol)を、N1-エチル-3-ニトロベンゼン-1,4-ジアミン(440 mg, 2.43 mmol)、N-メチル-L-プロリン(314 mg, 2.43 mmol)及びDEPBT(727 mg, 2.43 mmol)のアセトニトリル(15 mL)溶液に加えた。混合物を室温で攪拌し、1、2及び3日後、部分に分けたN-メチル-L-プロリン(314 mg, 2.43 mmol)、DEPBT(727 mg, 2.43 mmol)及びトリエチルアミン(1.0 mL， 7.33 mmol)を加えた。さらに1日攪拌後、混合物を濃縮し、残渣を酢酸エチルに注いだ(75 mL)。酢酸エチル溶液を水及び1M炭酸ナトリウム溶液で2回抽出した。水及び1M炭酸ナトリウム溶液抽出物を酢酸エチルで逆抽出し(4回)、酢酸エチル層を合わせて食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮し、(S)-N-(4-アミノ-3-ニトロフェニル)-N-エチル-1-メチルピロリジン-2-カルボキサミドを橙/茶色の油状物として得た(388 mg)。これをエタノール中、10%パラジウム炭素(153 mg)を触媒として用いて水素化した。水素雰囲気下(風船)終夜攪拌後、混合物を珪藻土のパッドで濾過し、濾液を濃縮し、(S)-N-(3,4-ジアミノフェニル)-N-エチル-1-メチルピロリジン-2-カルボキサミドを得た(335 mg)。
【０１１５】
合成例1  2-[1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミドの合成：化合物1A(反応スキーム1)
【０１１６】
2-[1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イル]アセトニトリル(10 g, 64 mmol)、炭酸-ジ-tert-ブチル(16.6 g, 76 mmol)及びトリエチルアミン(8.8 mL， 64 mmol)のTHF(180 mL)溶液を室温で終夜攪拌した。溶媒を真空下留去し、粗生成物をクロロホルムに溶解させ、水、1N塩酸及び飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した。クロロホルム層を硫酸マグネシウムで乾燥し、真空下溶媒を留去し、2-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ベンゾイミダゾール-2(3H)-イル]アセトニトリル(15 g)を固体として得た。
【０１１７】
2-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ベンゾイミダゾール-2(3H)-イル]アセトニトリル(6 g, 23 mmol)のTHF(50 mL)溶液を60%水素化ナトリウムの鉱油(1.38 g, 35 mmol)のテトラヒドロフラン(85 mL)懸濁液に0℃で10分以上かけて加えた。懸濁液は0℃で15分攪拌し、2-クロロ-4-トリフルオロメチルピリミジン(2.79 mL， 23 mmol)を加えた。混合物は、室温に昇温し、終夜攪拌し、水(300 mL)、続いて1N 塩酸(40 mL)を加えた。粗生成物は、クロロホルムで抽出し、水(各100 mL)で2回抽出した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、真空下溶媒を留去し、2-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトニトリルを茶色の油状物として得た(8.17 g)。
【０１１８】
2-[1-(tert-ブトキシカルボニル)ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトニトリル(8.1 g, 20 mmol)を濃硫酸(30 mL)に溶解させ、溶液をゆっくりと氷/水(100 mL)に加え、室温に昇温し、終夜攪拌した。混合物は0℃に冷却し、氷に注ぎ、50%水酸化ナトリウム水溶液で中和した。水を加え、粗生成物をクロロホルム/イソプロパノール=4：1で抽出した。有機層は硫酸マグネシウムで乾燥し、真空下溶媒を留去し、固体は逆相プレパラティブHPLCで精製して、2-[1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド(1.18 g, 全収率18%)を黄色の固体として得た。
【０１１９】
例えば化合物4A、132A、135A及び138Aは、適切に置換された出発物質を用いて、この一般法により製造された。
【０１２０】
合成例2  2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミドの合成：化合物2A(反応スキーム1)
【０１２１】
2-(ベンゾチアゾール-2-イル)アセトニトリル(0.69 g, 4 mmol)を部分に分けて、95%水素化ナトリウム(0.21 g, 6 mmol)のTHF(12 mL)懸濁液に加えた。生成した黄色の懸濁液を室温で30分間攪拌し、2-クロロピリミジン(0.45 g, 4 mmol)を加えた。混合物は、3日間攪拌し、暗色の溶液に水を加えた。混合物を1N塩酸で酸性にし、生成した沈殿を濾過により集め、水及びアセトニトリルで洗浄し、真空下乾燥し、2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトニトリルを茶色の固体として得た。
【０１２２】
2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトニトリル(0.1 g, 0.39 mmol)を濃硫酸(2 mL)に溶解させ、室温で5時間攪拌した。混合物は0℃に冷却し、氷に注ぎ、50%水酸化ナトリウム水溶液で中和した。精製した沈殿を濾過により集め、逆相プレパラティブにより精製し、2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(ピリミジン-2-イル)アセトアミドを黄色の固体として得た(42 mg, 収率40%)。
【０１２３】
例えば、化合物3A、16A、18A、21A、22A及び23Aは、適切に置換された出発物質を用いて、この一般法により製造した。化合物5Aは、化合物3Aのニトリル中間体から製造した。該中間体のメタノール溶液を1M水酸化リチウム水溶液を用いて、室温で2日加水分解し、1N塩酸で中和し、沈殿を濾過し、水及びアセトニトリルで洗浄し、乾燥して2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(5-カルボキシ-4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトニトリルを得た。これを濃硫酸で加水分解し、精製して2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(5-カルボキシ-4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド化合物5Aを得た。化合物24Aも同様の方法で、化合物23Aのニトリル中間体から製造した。
【０１２４】
合成例3  2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-[5-(4-メチルピペラジン-1-カルボニル)-4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル]アセトアミドの合成：化合物130A(反応スキーム1)
【０１２５】
攪拌下、2-(ベンゾチアゾール-2-イル)アセトニトリル(2.05 g, 12 mmol)を部分に分けて10分以上かけて濃硫酸(5 mL)に加えた。混合物は4時間攪拌し、続いて氷/水に注いだ。精製した沈殿を酢酸エチルに加えて抽出し、食塩水で洗浄し、続いて有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、真空下溶媒を留去し、2-(ベンゾチアゾール-2-イル)アセトアミド(1.02 g)を橙色の固体として得た。
【０１２６】
99%水素化ナトリウム(50.8 mg, 2.1 mmol)を2-(ベンゾチアゾール-2-イル)アセトアミド(103 mg, 0.53 mmol)のTHF(2 mL)懸濁液に加え、生成した黄色の懸濁液を室温で15分攪拌した。混合物は、0℃に冷却し、(2-クロロ-4-トリフルオロメチルピリミジン-5-イル)(4-メチルピペラジン-1-イル)メタノン(0.18 g, 0.53 mmol)を加えた。混合物は室温で終夜攪拌し、続いて減圧下溶媒を留去した。残渣を水に懸濁させ、1N塩酸でpHを7とした。濾過により固体を集め、酢酸エチル及び水に分散させた。酢酸エチルを分離し、食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧濃縮した。生成物を逆相プレパラティブにより精製し、2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-[5-(4-メチルピペラジン-1-カルボニル)-4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル]アセトアミド塩酸塩を黄色の固体として得た(87 mg, 収率33%)。
【０１２７】
化合物2A、131A及び134A、例えば、適切に置換した出発物質を用いて、この一般法により製造した。 
【０１２８】
合成例4  2-(5-{[3-(4-モルホリニル)プロピル]アミノカルボニル}-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミドの合成：化合物39A(反応スキーム2)
【０１２９】
3，3-ビス(メチルチオ)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アクリロニトリル(682 mg, 2.34 mmol)、3,4-ジアミノ安息香酸(392 mg, 2.57 mmol, 1.1当量)及び4-ジメチルアミノピリジン(143 mg, 1.17 mmol, 0.5 当量)のエタノール(3 mL)溶液を、150℃において0.5時間電磁波で加熱した。混合物は室温に冷却し、濃縮し、塩酸(1 mL)を加え、混合物は0.5時間静置した。生成した沈殿を濾過により集め、エタノール及びアセトニトリルで洗浄し、真空下乾燥し、2-[5-カルボキシ-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(3-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトニトリルを茶色の固体として得た(450 mg, 1.29 mmol, 収率55%)。
【０１３０】
前ステップで得た2-[5-カルボキシ-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトニトリル(450 mg, 1.29 mmol)を、濃硫酸(2 mL)に溶解し、50℃で6時間加熱した。混合物は室温に冷却し、室温下、急速に攪拌しているところへ、水(500 mL)を滴下した。生成した沈殿を濾過により集め、水で洗浄し、真空下乾燥し、2-[5-カルボキシ-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミドを暗褐色の固体として得た(322 mg, 0.88 mmol, 収率68%)。
【０１３１】
2-[5-カルボキシ-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド(630 mg, 1.73 mmol)のジメチルホルムアミド(20 mL)溶液に、室温で、DIPEA(661 μL, 3.79 mmol, 2.2当量)、HBTU(720 mg, 1.90 mmol, 1.1当量)を加えた。5分後、3-(4-モルホリニル)プロパン-1-アミン(277 μL, 1.90 mmol, 1.1当量)を加え、混合物は室温で3時間攪拌した。混合物は、酢酸エチル(50 mL)で希釈し、5%炭酸水素ナトリウム水溶液(各50 mL)で3回洗浄した。酢酸エチル層は、デカントし、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧濃縮し黄色の固体を得た。約2 mLの4.0M塩化水素/ジオキサンを加え、混合物を15分間攪拌し、続いて減圧濃縮し、2-(5-{[3-(4-モルホリニル)プロピル]アミノカルボニル}-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド塩酸塩を黄色の固体として得た(750 mg, 1.52 mmol, 収率88%)。
【０１３２】
例えば、化合物33A、34A、41A、44A、45A、48A、51A、53A、73A、77A、79Aないし83A、86A及び142Aないし146Aは、適切に置換した出発物質を用いて、この一般法により製造した。
【０１３３】
合成例5  2-(6-{[3-(4-モルホリニル)プロピル]アミノカルボニル}-ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミドの合成：化合物40A(反応スキーム2)
【０１３４】
4-アミノ-3-メルカプト安息香酸(768 mg, 4.5 mmol)、3，3-ビス(メチルチオ)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アクリロニトリル(1.45 g, 5.0 mmol, 1.1当量)、4-ジメチルアミノピリジン(550 mg, 4.5 mmol, 1当量)及び炭酸カリウム(622 mg, 4.5 mmol, 1当量)のエタノール(20 mL)混合物は、160℃で0.4時間、電磁波中で加熱した。混合物は室温に冷却し、DCMで希釈し、1M塩酸で洗浄した。DCM層をデカントし、濾過し、及び減圧濃縮し、2-[6-カルボキシベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトニトリルを茶色の固体として得た(729 mg, 収率40%)。
【０１３５】
2-[6-カルボキシベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトニトリル(620 mg, 1.70 mmol)の濃硫酸(5 mL)溶液を50℃で10時間加熱した。混合物は室温に冷却し、急速に攪拌する中、室温の水(100 mL)を滴下した。生成した沈殿を濾過により集め、水及びヘキサンで洗浄し、真空下乾燥し、2-[6-カルボキシベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド茶色の固体として得た(587 mg, 収率90%)。
【０１３６】
室温において、2-[6-カルボキシベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド(350 mg, 0.92 mmol)のアセトニトリル(5 mL)溶液に、トリエチルアミン(250 μL, 1.79 mmol, 2当量)、DEPBT(299 mg, 1.0 mmol, 1.1当量)及び3-(4-モルホリニル)プロパン-1-アミン(134 μL, 0.92 mmol, 1.0当量)を加え、混合物は黄-茶色の沈殿が生成するまで室温で攪拌した。沈殿は濾過により集め、アセトニトリルで洗浄し、真空下乾燥し、黄色固体を得た。約2 mLの4.0 M塩化水素/ジオキサンを加え、混合物を15分攪拌し、減圧下濃縮し、2-(6-{[3-(4-モルホリニル)プロピル]アミノカルボニル}-ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド塩酸塩を黄色の固体として得た(340 mg, 収率73%)。
【０１３７】
合成例6  2-[6-ニトロベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミドの合成：化合物26A(反応スキーム3)
【０１３８】
2-(メチルチオ)-6-ニトロ-1,3-ベンゾチアゾール(226 mg, 1.0 mmol)のエタノール(3.5 mL)溶液に2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトニトリル(187 mg, 1.0 mmol)及び炭酸カリウム(207 mg, 1.5 mmol)を加えた。橙色の混合物は、電磁波で160℃において15分反応させ、続いて酢酸エチル(60 mL)に注いだ。有機層は、1N 塩酸(各25 mL)で2回、食塩水(25 mL)及び水(5 mL)で洗浄し、続いて硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下濃縮し、2-(6-ニトロベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトニトリルを黄色の固体として得た(349 mg, 収率96%)。
【０１３９】
2-(6-ニトロベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン)-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトニトリル(296 mg, 0.81 mmol)は濃硫酸に溶解させた(3.0 mL)。赤みを帯びた混合物を50℃で8時間、続いて冷水(25 mL)に注いだ。黄色の沈殿を、濾過により集め、ヘキサン(30 mL)で洗浄し、真空下乾燥し、2-[6-ニトロベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミドを橙色の固体として得た(280 mg, 収率89%)。
【０１４０】
化合物32Aは、化合物26Aから以下の通り製造した。2-[6-ニトロベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド(280 mg, 0.73 mmol)のMeOH(25 mL)溶液を10%パラジウム炭素(200 mg)のMeOH(10 mL)スラリーに注ぎ、混合物は水素雰囲気下、大気圧下で24時間攪拌した。混合物は濾過し、濾液を濃縮して、粗2-[6-アミノベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミドを赤色粉末として得た。これをフラッシュカラムで精製し、酢酸エチル/MeOH=19：1の溶出液によりクロマトグラフィーで溶出し、純粋な2-[6-アミノベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド、化合物32Aを黄色の粉末として得た(160 mg, 収率62%)。
【０１４１】
化合物76Aは、化合物32Aから以下の通り製造した。N-(tert-ブトキシカルボニル)グリシン塩酸塩(20 mg)のDMF(5 mL)溶液に、O-(7-アザベンゾトリアゾール−1-イル)-N,N,N’,N’-テトラメチルウロニウム-ヘキサフルオロホスフェート(190 mg)、トリエチルアミン(388μL, 3.88 mmol)及び2-[6-アミノベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド(141 mg)を加えた。混合物は室温で1時間攪拌し、続いて酢酸エチル(50 mL)に注いだ。酢酸エチル層は、10%炭酸水素ナトリウム水溶液(各30 mL)で3回、及び水(各15 mL)で3回洗浄し、続いて硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、減圧下濃縮し、2-{6-[(tert-ブチルオキシカルボニルアミノ)アセチルアミノ]ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン}-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミドを茶色の泡状物として得た。2-{6-[(Tert-ブチルオキシカルボニルアミノ)アセチルアミノ]ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン}-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド(80 mg, 156 mmol)を4N塩化水素-ジオキサン(5.0 mL， 20 mmol)に溶解させ、混合物を室温で2時間攪拌した。混合物は、濃縮し、2-{6-[(2-アミノアセチル)アミノ]ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン}-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミドをベージュの固体として得た(50 mg)。他のアミド側鎖を有する化合物は、同様に化合物32Aから製造した。
【０１４２】
合成例7  2-{6-[2-(1H-イミダゾール-1-イル)エトキシ]ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン}-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミドの合成：化合物117A(反応スキーム4)
【０１４３】
攪拌下、氷冷下、4-[2-(1H-イミダゾール-1-イル)エトキシ]ベンゼンアミン(1.00 g；4.92 mmol)及び炭酸水素ナトリウム(2.07 g；24.6 mmol)のクロロホルム(100 mL)及び水(50 mL)の2層溶液に、チオホスゲン(452 μL；5.90 mmol)のクロロホルム(10 mL)溶液を5分以上かけて加えた。混合物は氷浴中で20分間攪拌し、水層及び有機層を分離し、クロロホルム(50mL)で抽出した。クロロホルム層を合わせ、食塩水で洗浄し、続いて硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮し、1-[2-(4-イソチオシアナートフェノキシ)エチル]-1H-イミダゾールを黄色油状物として得た(1.41 g)。
【０１４４】
水素化ナトリウム(60重量%の油分散物, 0.531 g, 13.3 mmol)を攪拌下、2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド(0.911 g；4.43 mmol)のTHF(20 mL)溶液に10分以上かけて滴下した。続いて、1-[2-(4-イソチオシアナートフェノキシ)エチル]-1H-イミダゾール(1.21 g；4.92 mmol)のTHF(10 mL)溶液を、15分以上かけて加えた。混合物はさらに1時間室温で攪拌し、水(1 mL)を加え、混合物を減圧下濃縮した。残渣に水(75 mL)を加え、2N塩酸でpHを7に調整し、混合物を酢酸エチルで3回抽出した。酢酸エチル抽出物を集め、食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮し、3-{4-[2-(1H-イミダゾール-1-イル)エトキシ]フェニルアミノ}-3-チオキソ-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)プロパンアミドを橙色の半固体として得た(1.47 g)。
【０１４５】
3-{4-[2-(1H-イミダゾール-1-イル)エトキシ]フェニルアミノ}-3-チオキソ-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)プロパンアミド(1.47 g, 3.29 mmol)の氷酢酸(10 mL)溶液を水浴で冷やし、臭素(126 μL, 2.46 mmol)の氷酢酸(1 mL)溶液を10分以上かけて滴下した。混合物は、室温に昇温し、さらに35分攪拌し、酢酸をデカントした。残渣は、真空下乾燥し、続いて、アセトニトリル/水に溶解させ、逆相プレパラティブにより精製し、2-{6-[2-(1H-イミダゾール-1-イル)エトキシ]ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン}-2-(4-トリフルオロメチルピリミジン-2-イル)アセトアミド塩酸塩を橙色の固体として得た(0.406 g)。
【０１４６】
例えば、化合物50A、52A、89A、91A、93Aないし95A、97Aないし101A、103A、104A、106A、108A、110Aないし116A、118A及び120Aないし129Aは、適切に置換した出発物質を用いて、この一般法により製造した。 
【０１４７】
合成例8  2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン-2-[4-tert-ブチル-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アセトアミドの合成：化合物7A(反応スキーム5)
【０１４８】
2-クロロベンゾチアゾール(1.0 mL， 8.1 mmol)及びマロノニトリル(534 mg；8.1 mmol)のアセトニトリル(4 mL)溶液に、攪拌下、ナトリウムエトキシド(21重量%のエタノール溶液3.0 mL, 8.0 mmol)を加えた。混合物は室温で4日間攪拌し、、続いて2M塩酸を加えた。固体を濾過により集め、アセトニトリルで洗浄し、真空下乾燥し、2-(ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン)マロノニトリルを白色の固形物として得た(770 mg)。
【０１４９】
2-(ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン)マロノニトリル(0.45 g, 2.25 mmol)のジオキサン(10 mL)及びエタノール(10 mL)懸濁液を0℃に冷却し、塩化水素ガスを10分間注入した。混合物は、室温に昇温し、続いて50℃に加熱して終夜攪拌した。生成した沈殿を濾過により集め、アセトニトリルで洗浄し、真空下乾燥し、2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-シアノアセトイミデートを白色の固形物として得た(0.43 g)。
【０１５０】
2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-シアノアセトイミデート(0.4 g, 1.6 mmol)のエタノール(5mL)懸濁液を圧力チューブに加え、続いて-78℃とし、アンモニアガスを注入した。混合物は、室温まで昇温し、3日間攪拌した。溶媒を真空下留去し、2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-シアノアセトアミジンをベージュの固体として得た。
【０１５１】
2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-シアノアセトアミジン(0.2 g, 0.92 mmol)をジメチルスルホキシド(1 mL)及び1,1,1-トリフルオロ-5,5,-ジメチル-2,4-ヘキサンジオン(320 μL, 1.84 mmol)に溶解させ、ナトリウムエトキシド(21 重量%エタノール溶液, 0.6 mL, 1.84 mmol)を加えた。溶液は、180℃に20分間、電磁波で加熱し、酢酸エチルに溶解させ、1N塩酸及び水で洗浄した。溶媒を留去し、2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-tert-ブチル-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アセトニトリルをベージュの固体として得た。
【０１５２】
2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-tert-ブチル-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アセトニトリル(150 mg, 0.39 mmol)を濃硫酸(1.5 mL)に溶解させ、終夜、室温で攪拌した。混合物は、0℃に冷却し、氷に注ぎ、50%水酸化ナトリウム水溶液で中和した。生成物は、クロロホルムで抽出し、乾燥し、茶色の固体(57 mg)を得、逆相プレパラティブにより精製し、2-[ベンゾチアゾール-2(3H)-イリデン]-2-(4-tert-ブチル 6-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アセトアミド(13 mg)を黄色の固体として得た。
【０１５３】
合成例9  2-{5-[(S)-(1-メチルピロリジン-2-イル)カルボニルアミノ]-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン}-2-[4-メチル-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アセトアミドの合成：化合物144A
【０１５４】
1,1,1--トリフルオロ-2,4-ペンタンジオン(5.00 g；32.4 mmol)及びヘミ硫酸S-メチルイソチオウレア(4.06 g；29.2 mmol)のピリジン(3.75 mL)及び水(62 mL)溶液を1日間加熱還流した。混合物は室温に冷却し、クロロホルムで抽出し、クロロホルム抽出物を水で洗浄し、4-メチル-2-(メチルチオ)-6-(トリフルオロメチル)ピリミジンをオフ白色の固形物として得た(4.60g, 22.1 mmol)。これをMeOH(60 mL)に溶解させ、OXONE(登録商標)(27.1 g, 44.2 mmol)の水溶液(100 mL)を10分以上かけて加えた。混合物は室温で4時間攪拌し、続いて酢酸エチル抽出した。酢酸エチルを水で洗浄し、濃縮し、4-メチル-2-(メチルスルホニル)-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン(4.8 g)を白色の固形物として得た。攪拌下、水素化ナトリウム(60%の鉱油分散物, 0.16 g；4.0 mmol)をエチル シアノアセテート(0.21 mL；2.0 mmol)のTHF(8 mL)溶液に加え、生成した懸濁液を室温で15分攪拌した。4-メチル-2-(メチルスルホニル)-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン(0.48 g；2.0 mmol)を加え、混合物を終夜攪拌した。水を加え、続いて1M 塩酸でpH 3-4とした。生成した固体を濾過し、水で洗浄し、高真空下乾燥し、エチル 2-シアノ-2-[4-メチル-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アセテート塩酸塩を薄い黄色の固体として得た(0.43 g)。
【０１５５】
4-ニトロ-1,2-フェニレンジアミン(50 mg；0.32 mmol)及びエチル 2-シアノ-2-[4-メチル-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アセテート塩酸塩(101 mg；0.32 mmol)を電磁波で198℃として3分間加熱した。酢酸(1.5 mL)を加え、混合物は、100℃に加熱して6時間攪拌した。固体を濾過により集め、アセトニトリルで洗浄し、高真空下乾燥し、2-[4-メチル-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]-2-(5-ニトロ-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)アセトニトリル(59 mg)を黄色の固体として得た。2-[4-メチル-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]-2-(5-ニトロ-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)アセトニトリル(55 mg；0.15 mmol)のDMF(3 mL)溶液を10% パラジウム炭素(11 mg)を用いて水素化した。混合物を珪藻土で濾過し、メタノールで洗浄し、濾液を濃縮し、2-(5-アミノ-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン)-2-[4-メチル-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アセトニトリルを得、これをDMF(1 mL)に溶解させ、N-メチル-L-プロリン(19.3 mg；0.16 mmol)、HBTU(56.8 mg；0.15 mmol)、及びDIPEA(104.5 μL；0.60 mmol)のDMF(1 mL)溶液に加えた。混合物は5時間攪拌し、続いて酢酸エチル及び水に分散させた。酢酸エチル層を乾燥し、濃縮し、2-{5-[(S)-(1-メチルピロリジン-2-イル)カルボニルアミノ]-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン}-2-[4-メチル-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アセトニトリルを茶色の油状物として(65 mg)得た。 2-{5-[(S)-(1-メチルピロリジン-2-イル)カルボニルアミノ]-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン}-2-[4-メチル-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アセトニトリル(65 mg)を濃硫酸に溶解させ、室温で終夜攪拌した。混合物は、氷水及びアセトニトリルで希釈し、室温まで昇温し、逆相プレパラティブにより精製し(Peeke Ultro 120, 7 μm；C18Q, 250×30 mm カラム；流速42 mL/分；移動相は、95% 水：5% アセトニトリル(0.01% 塩酸含有)及び5% 水：95% アセトニトリル(0.01% 塩酸含有))、2-{5-[(S)-(1-メチルピロリジン-2-イル)カルボニルアミノ]-1H-ベンゾイミダゾール-2(3H)-イリデン}-2-[4-メチル-6-(トリフルオロメチル)ピリミジン-2-イル]アセトアミド塩酸塩を黄色の固体として得た(18 mg)。
【０１５６】
一つ以上の上述の方法又はここに記載していない類似の方法により製造した式Ａの化合物を以下の表に示す。全ての式Ａの化合物を同定し、純度を確認するため分析した。純度にはHPLCを用い、同定には質量分析(正イオン又は負イオン)及びNMR(1H及び/又は13C)の1つ以上を用い、想定した化合物をよい純度で確認した。他の式Ａの化合物は、同様に製造した。
【０１５７】
代表的な式Ａの化合物は、以下の化合物を含む(親化合物の「計算精密質量」；他を示さない限り、質量分析は、陽イオン化であり、M+Hの質量を示す。)：
【表１−１】
0005555239.tif 000010
【表１−２】
0005555239.tif 000011
【表１−３】
0005555239.tif 000012
【表１−４】
0005555239.tif 000013
【表１−５】
0005555239.tif 000014
【表１−６】
0005555239.tif 000015
【表１−７】
0005555239.tif 000016
【表１−８】
0005555239.tif 000017
【表１−９】
0005555239.tif 000018
【表１−１０】
0005555239.tif 000019
【表１−１１】
0005555239.tif 000020
【表１−１２】
0005555239.tif 000021
【表１−１３】
0005555239.tif 000022
【表１−１４】
0005555239.tif 000023
【表１−１５】
0005555239.tif 000024
【表１−１６】
0005555239.tif 000025
【表１−１７】
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【表１−１８】
0005555239.tif 000027
【表１−１９】
0005555239.tif 000028
【０１５８】
本発明の他の化合物は、当該分野の通常の知識を有する者の熟練及びこの開示による方法を用いて同様に製造された。
【０１５９】
インビトロ実施例
【０１６０】
以下の実施例は、本発明の最初の態様の化合物による癌関連キナーゼ(オーロラA及びB及びVEGFR2キナーゼ)の阻害作用、及びインビトロにおけるヒト癌細胞株に対する細胞毒性/細胞分裂停止効果を表す。これらの結果は、他の抗癌剤がこれらのアッセイにおいてヒトに対して抗癌活性を示したのと同じように、ヒトの癌の化学療法における効果を予測すると考えられる。
【０１６１】
HL60(ヒト前骨髄球性白血病)細胞株及びHCT116(ヒト大腸癌)は、アメリカ合衆国培養細胞系統保存機関(Manassas, Virginia, U.S.A.)及びHUVEC-2(正常ヒト臍帯静脈内皮細胞)はBDバイオサイエンス(Bedford, Massachusetts, U.S.A.)から入手した。オーロラAキナーゼは、アップステートバイオテック(Upstate Biotech)社(Billerica, Massachusetts, U.S.A.)から入手した；オーロラBキナーゼは、BPSバイオサイエンス社(San Diego, California, U.S.A.)；及びVEGFR2キナーゼはセル・シグナリング・テクノロジー社(Danvers, Massachusetts, U.S.A.)から入手した。IMAP FP スクリーニングエクスプレスキットは、モレキュラーデバイシズ(Molecular Devices)社(Sunnyvale, California, U.S.A.)；セルタイター-グロー(CellTiter-Glo)アッセイキットは、プロメガ社(Madison, Wisconsin, U.S.A.)；及び、細胞内DNAサイトメトリー分析試薬キット及びBrdU標識及び検出キットは、ロシュ・ダイアグノスティックス(Indianapolis, Indiana, U.S.A.)から入手した。全ての製品は製造者の指示に従って使用した。キナーゼ阻害アッセイ及びヒストンリン酸化(p-H3)アッセイは、2回ずつ(duplicate)行い、細胞毒性及びHUVEC細胞増殖アッセイは、3回ずつ(triplicate)、いずれも溶媒をコントロールとして行った。
【０１６２】
インビトロ実施例1：オーロラA及びB キナーゼアッセイ
【０１６３】
オーロラAキナーゼアッセイ：
試験化合物は、ジメチルスルホキシド(DMSOによる3倍段階希釈により8つの濃度を作製)に溶解させ、1mM ジチオスレイトールを含むキナーゼ反応緩衝液(IMAP FPスクリーニングエクスプレス社)において、オーロラAキナーゼとともに室温で5分間、インキュベートした(最終DMSO濃度2.5%)。キナーゼ反応は、100nM フルオレセイン標識PKAtide及び10μM アデノシン-三リン酸(ATP)を加えて開始し、45分間室温で行い、その後、結合試薬を加えて停止させた(結合緩衝液Aに対し、1：400希釈)。30分間室温で振蘯しながらインキュベートし、蛍光偏光をLJLプレートリーダーで測定した。オーロラBキナーゼアッセイ：オーロラAキナーゼアッセイと同様に行ったが、オーロラBキナーゼをオーロラAキナーゼの代わりに用いた。
【０１６４】
インビトロ実施例2：VEGFR2キナーゼアッセイ
【０１６５】
このアッセイは、オーロラAキナーゼアッセイと同様に行われ、VEGFR2キナーゼを用いて、CSKtideを基質として、6μM ATP及び1mM MnCl2とともに、キナーゼ反応時間を1時間として、結合緩衝液A/結合緩衝液B(1：1)中において結合試薬の希釈を1：1200とした。
【０１６６】
インビトロ実施例3：ヒストンリン酸化(p-H3)アッセイ
【０１６７】
対数増殖期にあるHCT116細胞を、2.5×104細胞/ウエルで96-ウエルプレートに播種し、終夜結合させた。試験化合物は、DMSOで希釈し(3倍の段階希釈による8濃度)、細胞(0.5% DMSO最終濃度)に加え、及び細胞を4時間インキュベートした。細胞は、冷リン酸緩衝生理食塩水(PBS)で3回洗浄し、ライシスバッファーを加えた。30分間、4℃で浸透し、遠心分離し、上清を「ドット-ブロット」装置によりニトロセルロース膜に移した。ウエルを洗浄した後、膜をウエスタンブロット法のために加工した。p-H3及びβ-アクチンの検出は、同じ膜状において、ウサギ抗p-H3 一次抗体及びマウス抗β-アクチン抗体を用いて、続いてヤギ抗ウサギIRDye800二次抗体及びヤギ抗マウスAlexaFluor 680抗体を用いて行った。膜はオデッセイスキャナでスキャンした。
【０１６８】
インビトロ実施例4：HL60及びHCT116細胞毒性アッセイ
【０１６９】
対数増殖期にある細胞をトリプシン化し、遠沈により集め、少量の新鮮な培地に懸濁させ、生存細胞の密度をトリパンブルー染色によって決定した。細胞は、新鮮な培地によって希釈し(HL60については、1×104細胞/mL、HCT116 細胞については、4×103細胞/mL)、試験化合物(濃度は、0.1μMないし200μM/DMSO, 50 μL)は、希釈の直後に加えて0.5%DMSO最終濃度とし、続いて懸濁液150 μL/ウエルを、96-ウエルプレートに加え、終夜インキュベートし、接着細胞の場合には、接着させた。細胞は、3日間培養した(約3回のダブリングタイム)。続いて細胞を遠沈により集め、培養上清の100 μLをCellTiter Glo試薬によって置き換えた。室温で15分インキュベートし、プレートをルミノメーターで読んだ。
【０１７０】
インビトロ実施例5：HUVEC VEGF-依存性細胞増殖アッセイ.
【０１７１】
HUVEC-2 細胞を、104細胞/ウエルで完全培地中0.1% ゼラチンでコーティングされた96-ウエルプレートに播種した。37℃で終夜インキュベートした後、細胞をPBSで2回洗浄し、0.1% ウシ胎児血清/199培地を加え、細胞を1日インキュベートした。化合物は、DMSOで段階希釈し、細胞に加え、0.5%DMSO最終濃度とした。2時間後、VEGF(25 ng/mL)を加え；さらに1日後、5-ブロモ-2-デオキシウリジン(BrdU, 10μM)を加え、増殖細胞を標識し、細胞はもう1日インキュベートした。続いてプレートをロッシュBrdU標識及び検出キットを用いて加工し、化合物のVEGF-依存性抗増殖活性を決定した。
【０１７２】
式Ａの化合物は、これらのインビトロアッセイにおいて、以下の結果を示した。全ての数字は0ないし1だった；数字「＞ｘ」は、最大限よりも大きいことを示す。
【表２−１】
0005555239.tif 000029
【表２−２】
0005555239.tif 000030
【表２−３】
0005555239.tif 000031
【表２−４】
0005555239.tif 000032
【０１７３】
インビトロ実施例6：HL60及びHCT116 細胞の細胞周期分析
【０１７４】
細胞を接着させるために、対数増殖期にある細胞を75 mLフラスコに播種し、収穫の日における細胞培養が80%コンフルエントよりも少なくなるように播種の密度を選択した。試験化合物(DMSO溶媒)は、およそのIC80となるように、最終DMSO濃度が0.1%となるようにを加え、続いて細胞をさらに1，2，3日間インキュベートした。インキュベートに続いて、細胞を収穫し、冷やしたPBSで洗浄し、75%エタノール水溶液で固定し、-20℃でさらなる分析まで保存した。細胞周期の状態を反映する細胞内DNA成分を決定するため、固定した細胞をリン酸緩衝生理食塩水で2回洗浄し、続いてRNアーゼで37℃、30分間処置した。続いてそれらをヨウ化プロピジウムで染色し、続いてFACSCaliburシステム(ベクトン-ジッキンソン社)を用いてFACS分析をした。試験した全ての化合物は、HL60細胞において染色体倍加現象に続きアポトーシスを誘導し、HCT116細胞における染色体倍加現象は、オーロラキナーゼB阻害を示す。
【０１７５】
インビボ実施例
【０１７６】
インビボ実施例1：HL60 異種移植アッセイ：経口投与
【０１７７】
雄無胸腺nu/nuマウス、6-8週齢(約20 g)に、右前脇腹の皮下にHL60細胞株(ヒト前骨髄球性白血病)、約1×107細胞を埋め込んだ。抗菌薬無添加培地において少なくとも2代継代培養した。癌の埋め込みから約6日後、癌の大きさが約50-250 mgとなり、マウスを処置群に帰属させた。試験化合物は、15 mg/mLとなるように25重量%ヒドロキシプロピル β-シクロデキストリン水溶液に溶解させた。マウスの群は、担体コントロールとともに化合物39A、41A、75A、77A、85A、95A、及び101Aを150 mg/Kgとなるよう強制経口投与により1日1回、第1-5及び8-10日に処置の始めに投与した。癌の増殖阻害は、処置の最終日の1-2日後に測定した。このアッセイにおいて全ての化合物が活性を有し、担体に対して、化合物39Aが47%阻害、化合物41Aが81%阻害、化合物75Aが72%阻害、化合物77Aが75%阻害、化合物85Aが45%阻害、化合物95Aが59%阻害、及び化合物101Aが38%阻害の癌の増殖阻害を示した。同様に化合物139A、141A、142A、及び143Aは、pH5の0.1M 酢酸ナトリウム 4、10、10及び10 mg/mLに溶解させ、40、100、100、及び100 mg/mLを投与し、担体に対して65%、49%、89%及び65%阻害を示した。
【０１７８】
インビボ実施例2：HCT116 異種移植アッセイ
【０１７９】
雄無胸腺nu/nuマウス、6-8週齢(約20 g)に、右前脇腹の皮下にHCT116(ヒト大腸癌)、約1×107細胞を埋め込んだ。抗菌薬無添加培地において少なくとも2代継代培養した。癌の埋め込みから約14-21日後、癌の大きさが約50-250 mgとなり、マウスを処置群に帰属させた。試験化合物は、15 mg/mLとなるように25重量%ヒドロキシプロピル β-シクロデキストリン水溶液に溶解させた。マウスの群は、担体コントロールとともに化合物39A、40A、60A、75A、95A、及び117Aを150 mg/Kgとなるよう強制経口投与により1日1回、第1-5及び8-12日に処置の始めに投与した。癌の増殖阻害は、処置の最終日の9日後に測定した。このアッセイにおいて全ての化合物が活性を有し、担体に対して、化合物39Aが56%阻害、化合物40Aが18%阻害、化合物60Aが37%阻害、化合物75Aが60%阻害、化合物95Aが61%阻害、及び化合物117Aが42%阻害の癌の増殖阻害を示した。同様に化合物139AをpH5の0.1M 酢酸ナトリウム4 mg/mLに溶解させ、40 mg/mLを投与し、担体に対して46%阻害を示した。
【０１８０】
製剤実施例
【０１８１】
製剤実施例1  経口投与製剤
【０１８２】
固体経口投与製剤は以下を組み合わせることにより製造した：
本発明の化合物                            25.0%(重量/重量)
ステアリン酸マグネシウム                  0.5%(重量/重量)
デンプン                                  2.0%(重量/重量)
ヒドロキシプロピルメチルセルロース        1.0%(重量/重量)
微結晶セルロース                          71.5%(重量/重量)
そして、例えば、100 mgの本発明の化合物を含有する錠剤又は硬質ゼラチンカプセル剤に充填した。錠剤は、必要であれば、フィルム形成剤の懸濁液(例えば、 ヒドロキシプロピルメチルセルロース)、色素(例えば、二酸化チタン)、及び可塑剤(例えば、フタル酸ジエチル)を適用し、及び溶媒を蒸発させることによりフィルムを乾燥させることによりコーティングした。
【０１８３】
製剤実施例2  静注投与製剤
【０１８４】
静注投与製剤は、例えば、100 mgの本発明の化合物を含有し、1% w/vの濃度のリン酸緩衝生理食塩水に、本発明の化合物を、例えば、薬学的に許容される塩として、溶解させることにより製造し；例えば、滅菌濾過により溶液を滅菌し、滅菌コンテナに封入することにより行われる。
【０１８５】
あるいは、凍結乾燥製剤は、例えば、薬学的に許容される塩として、本発明の化合物を、例えば、上述したリン酸緩衝生理食塩水のリン酸緩衝液のような適切な緩衝液中に再び溶解させ、溶液を滅菌し、適切な滅菌バイアルに封入し、溶液を凍結乾燥させるために水を除去し、バイアルをシールすることにより製造される。凍結乾燥製剤は、滅菌水を添加することにより再構成し、再構成した溶液は、さらに投与のために、例えば、0.9% 塩化ナトリウム静脈内点滴又は5% デキストロース静脈内点滴溶液とともに希釈される。