(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
XPF遺伝子の発現を抑制する化合物を有効成分として含有する、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤であって、該遺伝子の発現を抑制する化合物が、該遺伝子に対してRNAi効果を有する二本鎖RNAである、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤。
【請求項２】
二本鎖RNAが、XPF遺伝子のmRNAにおける連続する任意の20〜30塩基と相同な配列からなるセンスRNAおよび該センスRNAに相補的な配列からなるアンチセンスRNAからなる二本鎖RNAである、請求項１に記載のアポトーシス誘導剤。
【請求項３】
XPF遺伝子に対してRNAi効果を有する二本鎖RNAを発現し得るDNAを有効成分として含有する、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれかに記載のアポトーシス誘導剤を有効成分とする、抗癌剤。
【請求項５】
以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法。
（ａ）XPF遺伝子によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドと被検化合物を接触させる工程
（ｂ）前記タンパク質またはその部分ペプチドと被検化合物との結合活性を測定する工程
（ｃ）前記遺伝子によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドと結合する化合物を選択する工程
【請求項６】
以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法。
（ａ）XPF遺伝子を発現する細胞もしくは細胞抽出液と、被検化合物を接触させる工程
（ｂ）前記遺伝子の発現レベルを測定する工程
（ｃ）被検化合物の非存在下において測定した場合と比較して、該発現レベルを低下させる化合物を選択する工程
【請求項７】
以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法。
（ａ）XPF遺伝子の転写調節領域とレポーター遺伝子とが機能的に結合した構造を有するDNAを含む細胞または細胞抽出液と、被検化合物を接触させる工程
（ｂ）前記レポーター遺伝子の発現レベルを測定する工程
（ｃ）被検化合物の非存在下において測定した場合と比較して、前記発現レベルを低下させる化合物を選択する工程
【請求項８】
以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法。
（ａ）XPF遺伝子によってコードされるタンパク質、または該タンパク質を発現する細胞もしくは細胞抽出液と、被検化合物を接触させる工程
（ｂ）前記タンパク質の活性を測定する工程
（ｃ）被検化合物の非存在下において測定した場合と比較して、前記タンパク質の活性を低下させる化合物を選択する工程
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、染色体の安定化に関与する遺伝子を標的とする癌細胞特異的アポトーシス誘導剤、および該アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞においては、種々の機能（遺伝子）の働きによって、染色体が安定に保たれている。この染色体の安定化に寄与する、細胞における代表的な機能（遺伝子）としては、例えば、以下のようなものを挙げることができる。
【０００３】
（ａ）ヒト染色体不安定性疾患関連遺伝子
ヒト染色体不安定性疾患の患者由来細胞では、染色体の切断・欠失・転座・異数化が見られ、またこれら疾患の患者由来細胞はDNA損傷を引き起こす薬剤に対して感受性を示すなど、染色体の不安定化が生じていることから、ヒト染色体不安定性疾患関連遺伝子は染色体安定化に関与している。
【０００４】
（ｂ）染色体ＤＮＡの複製開始、複製フォークの進行を含む染色体ＤＮＡ複製反応
染色体ＤＮＡ複製反応は細胞が増殖する時に、染色体ＤＮＡを複製する役割を担っており、１個の細胞が２個に分裂する際に正確に染色体を２倍に複製して染色体数を維持する機能をもつ。
【０００５】
（ｃ）ＤＮＡ損傷チェックポイント
ＤＮＡ損傷チェックポイントは、細胞周期がＧ１期、Ｓ期、Ｇ２期、Ｍ期の各ステージから次のステージへ移行する際に、染色体に切断・化学修飾・架橋を含むDNA損傷をチェックする役割を担っており、次の細胞周期のステージへ移行する前に染色体上のDNA損傷を取り除く機能をもつ。
【０００６】
（ｄ）姉妹染色分体凝集・分離
姉妹染色分体凝集・分離は、体細胞において複製を終えた姉妹染色分体を娘細胞に正確に分離する役割を担っている。
【０００７】
（ｅ）塩基除去修復
塩基除去修復は、染色体ＤＮＡ中の塩基に酸化やメチル化を含む化学修飾損傷が生じた場合に、修飾された塩基を取り除く役割を担っている。
【０００８】
（ｆ）ミスマッチ除去修復
ミスマッチ除去修復は、染色体ＤＮＡ中の正しい塩基対Ｇ−ＣとＡ−Ｔ以外のミスマッチ塩基対を認識して、正しい塩基対に修復する役割を担っている。
【０００９】
（ｇ）ヌクレオチド除去修復
ヌクレオチド除去修復は、紫外線照射によって染色体ＤＮＡ中に生じる、シクロブタン型ピリミジン２量体や６−４光産物、またシスプラチンによって染色体ＤＮＡ中の隣り合った塩基の間で生じる、ＤＮＡ鎖内架橋などの損傷を認識して、損傷部を除去して修復する役割を担っている。
【００１０】
（ｈ）相同組換え修復
相同組換え修復は、塩基除去修復、ミスマッチ除去修復、ヌクレオチド除去修復などの修復機構が不完全で生じたＤＮＡ損傷、また染色体ＤＮＡ中に生じた切断、ギャップなどを含む様々なＤＮＡ損傷を、損傷をもたない相同染色体を鋳型として修復する役割を担っている。
【００１１】
（ｉ）非相同末端結合修復（非相同組換え修復）
非相同末端結合修復（非相同組換え修復）は、染色体ＤＮＡ中に生じた二重鎖切断の末端を結合して修復する役割を担っている。
【００１２】
（ｊ）二本鎖ＤＮＡ切断修復
二本鎖ＤＮＡ切断修復は、染色体ＤＮＡ中に生じた二重鎖切断を修復する役割を担っており、相同組換え修復や非相同末端結合修復（非相同組換え修復）がこの修復機構に含まれる。
【００１３】
（ｋ）ＤＮＡ複製後修復（ＤＮＡ損傷トレランス）
ＤＮＡ複製後修復（ＤＮＡ損傷トレランス）は、損傷をもつ染色体DNAが複製される場合に、損傷が存在するＤＮＡ鎖の複製を可能にする機構で、残されたＤＮＡ損傷は複製後に修復される。
【００１４】
（ｌ）ＤＮＡ架橋損傷修復
ＤＮＡ架橋損傷修復は、シスプラチンなどの架橋剤によって生じた、染色体内や染色体間におけるＤＮＡ架橋損傷を修復する役割を担っている。
【００１５】
（ｍ）ＤＮＡ−タンパク質架橋損傷修復
ＤＮＡ−タンパク質架橋損傷修復は、ＤＮＡ修復の反応中間体である酵素タンパク質−ＤＮＡの共有結合体が形成された場合、また、染色体DNA中の塩基とタンパク質の架橋結合が形成された場合に、共有結合体や架橋結合体を除去する役割を担っている。
【００１６】
（ｎ）ＤＮＡポリメラーゼ
ＤＮＡポリメラーゼは、複製、組換え、修復などの染色体安定化機構において、ＤＮＡ合成反応を行う役割を担っている。
【００１７】
（ｏ）ヌクレアーゼ
ヌクレアーゼは、複製、組換え、修復などの染色体安定化機構において、ＤＮＡ分解反応を行う役割を担っている。
【００１８】
（ｐ）ヌクレオチド浄化
ヌクレオチド浄化は、ＤＮＡ合成反応の基質となるヌクレオチド中の塩基に酸化やメチル化を含む化学修飾損傷が生じた場合に、修飾された塩基を取り除く役割を担っている。
【００１９】
（ｑ）クロマチン構造維持
クロマチン構造維持は、染色体の高次構造を介した複製、組換え、修復などの染色体安定化機構に働く。
【００２０】
（ｒ）テロメア構造維持
テロメア構造維持は、染色体末端のテロメア長の制御、テロメア領域の特殊な高次構造の形成・維持を介して、染色体安定化に重要な役割を担っている。
【００２１】
また、上記の機能に関連する種々の遺伝子について、染色体の安定化に関与することが報告されている。例えば、染色体の安定化に関与する種々の遺伝子について、様々な知見が報告されている（非特許文献１〜８３参照）。
しかしながら、染色体の安定化に関与する上述の機能（遺伝子）と、癌細胞特異的なアポトーシス誘導との関連は、これまでのところ知られていなかった。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００２２】
【非特許文献１】Wood, R.D., Mitchell, M., Sgourou, J. and Lindahl, T. (2001). Human DNA repair genes  Science, 291, 1284-1289.
【非特許文献２】Nyberg, K.A., Michelson, R.J., Putnam, C.W. and Weinert, T.A. (2002). Toward maintaining the genome: DNA damage and replication checkpoints  Annu.Rev.Genet. 36, 617-656.
【非特許文献３】Sogo, J.M., Lopes, M. and Foiani, M. (2002). Fork reversal and ssDNA accumulation at stalled replication forks owing to checkpoint defects  Science, 297, 599-602.
【非特許文献４】Casper, A.M., Ngheim, P., Arlt, M.F. and Glover, T.W. (2002). ATR regulates fragile site stability  Cell, 111, 779-789.
【非特許文献５】Zhou, B.-B.S. and Bartek, J. (2004). Targeting the checkpoint kinases: chemosensitization versus chemoprotection  Nature Review, 4, 1-10.
【非特許文献６】Rich, T., Allen, R. and Wyllie, A.H. (2000). Defying death after DNA damage  Nature, 407, 777-783.
【非特許文献７】Nigg, E.A. (2002).  Centrosome aberrations:cause or consequence of cancer progression  Nature Review, 2, 815-825.
【非特許文献８】Miller, H. and Grollman, A.P. (2003). DNA repair investigations using siRNA DNA repair, 2, 759-763.
【非特許文献９】Merchant, A.M., Kawasaki, Y., Chen, Y., Lei, M., Tye, B.K. (1997). A lesion in the DNA replication initiation factor Mcm10 induces pausing of elongation forks through chromosomal replication origins in Saccharomyces cerevisiae.  Mol Cell Biol., 17, 3261-3271.
【非特許文献１０】Tugal, T., Zou-Yang, X.H., Gavin, K., Pappin, D., Canas, B., Kobayashi, R., Hunt, T. and Stillman, B. (1998). The Orc4p and Orc5p subunits of the Xenopus and human origin recognition complex are related to Orc1p and Cdc6p  J.Biol.Chem., 273,32421-32429.
【非特許文献１１】Stoeber, K., Mills, A.D., Kubota, Y., Krude, T., Romanowski, P., Marheineke, K., Laskey, R.A. and Williams, G. (1998). Cdc6 protein causes premature entry into S phase in a mammalian cell-free system  EMBO J., 17, 7219-7229.
【非特許文献１２】Wohlschlegel, J.A., Dwyer, B.T., Dhar, S., Cvetic, C., Walter, J.C. and Dutta, A. (2000). Inhibition of eukaryotic DNA replication by Geminin binding to Cdt1  Science, 290, 2309-2312.
【非特許文献１３】McGarry, T. and Kirschner, M.W. (1998). Geminin, an inhibitor of DNA replication, is degraded during mitosis  Cell, 93, 1043-1053.
【非特許文献１４】Ishimi, Y., Komamura, Y., You, Z., Kimura, H. (1998). Biochemical function of mouse minichromosome maintenance 2 protein  J Biol Chem., 273, 8369-8375.
【非特許文献１５】Ishimi, Y. (1997) A DNA helicase activity is associated with an MCM4,-6, and -7 protein complex  J. Biol. Chem., 272, 24508-24513.
【非特許文献１６】Gozuacik, D., Chami, M., Lagorce, D., Faivre, J., Murakami, Y., Poch, O., Biermann, E., Knippers, R., Brechot, C. and Paterlini-Brechot, P. (2003) Identification and functional characterization of a new member of the human Mcm protein family: hMcm8  Nucleic Acids Res., 31, 570-579.
【非特許文献１７】Sato, N., Arai, K., Masai, H. (1997). Human and Xenopus cDNAs encoding budding yeast Cdc7-related kinases: in vitro phosphorylation of MCM subunits by a putative human homologue of Cdc7  EMBO J. 16, 4340-4351.
【非特許文献１８】Bernstein, H.S., Coughlin, S.R. (1998). A mammalian homolog of fission yeast Cdc5 regulates G2 progression and mitotic entry. J Biol Chem., 273, 4666-4671.
【非特許文献１９】Kubota, Y., Takase, Y., Komori, Y., Hashimoto, Y., Arata, T., Kamimura, Y., Araki, H., Takisawa, H. (2003).  A novel ring-like complex of Xenopus proteins essential for the initiation of DNA replication. Genes Dev., 17, 1141-1452.
【非特許文献２０】Kukimoto, I., Igaki, H. and Kanda, T. (1999).  Human CDC45 protein binds to minichromosome maintenance 7 protein and the p70 subunit of DNA polymerase alpha. Eur J Biochem. 265, 936-943.
【非特許文献２１】Stadlbauer, F., Brueckner, A., Rehfuess, C., Eckerskorn, C., Lottspeich, F., Forster, V., Tseng, B.Y. and Nasheuer, H.P. (1994).  DNA replication in vitro by recombinant DNA-polymerase-alpha-primase. Eur J Biochem. 222, 781-793.
【非特許文献２２】Bochkarev, A., Pfuetzner, R.A., Edwards, A.M. and Frappier, L. (1997).  Structure of the single-stranded-DNA-binding domain of replication protein A bound to DNA. Nature., 385, 176-181.
【非特許文献２３】Erdile, L.F., Wold, M.S. and Kelly, T. (1990).  The primary structure of the 32-kDa subunit of human replication protein A  J.Biol. Chem, 265, 3177-3182.
【非特許文献２４】Krishna, T.S., Kong, X.P., Gary, S., Burgers, P.M. and Kuriyan, J. (1996).  Crystal structure of the eukaryotic DNA polymerase processivity factor PCNA. Cell., 79, 1233-1243.
【非特許文献２５】Barnes, D.E., Johnston, L.H., Kodama, K., Tomkinson, A.E., Lasko, D.D. and Lindahl, T. (1990). Human DNA ligase I cDNA: cloning and functional expression in Saccharomyces cerevisiae. Proc Natl Acad Sci U S A., 87, 6679-6683.
【非特許文献２６】Poot, R.A., Dellaire, G., Hulsmann, B.B., Grimaldi, M.A., Corona, D.F., Becker, P.B., Bickmore, W.A. and Varga-Weisz, P.D. (2000). HuCHRAC, a human ISWI chromatin remodelling complex contains hACF1 and two novel histone-fold proteins. EMBO J., 19, 3377-3387.
【非特許文献２７】D'Arpa, P., Machlin, P.S., Ratrie, H. 3rd, Rothfield, N.F., Cleveland, D.W. and Earnshaw, W.C. (1988).  cDNA cloning of human DNA topoisomerase I: catalytic activity of a 67.7-kDa carboxyl-terminal fragment. Proc Natl Acad Sci U S A., 85, 2543-2547.
【非特許文献２８】Pouliot, J.J., Yao, K.C., Robertson, C.A., Nash, H.A. (1999). Yeast gene for a Tyr-DNA phosphodiesterase that repairs Topoisomerase I complex  Science, 286, 552-555.
【非特許文献２９】Cheng, T.J., Rey, P.G., Poon, T. and Kan, C.C. (2002).  Kinetic studies of human tyrosyl-DNA phosphodiesterase, an enzyme in the topoisomerase I DNA repair pathway. Eur J Biochem., 269, 3697-3704.
【非特許文献３０】Merkle, C.J., Karnitz, L.M., Henry-Sanchez, J.T. and Chen J. (2003).  Cloning and characterization of hCTF18, hCTF8, and hDCC1. Human homologs of a Saccharomyces cerevisiae complex involved in sister chromatid cohesion establishment J Biol Chem., 278, 30051-30056. Epub 2003 May 23.
【非特許文献３１】Sumara, I., Vorlaufer, E., Gieffers, C., Peters, B.H. and Peters, J.M. (2000).  Characterization of vertebrate cohesin complexes and their regulation in prophase. J Cell Biol., 151, 749-762.
【非特許文献３２】Shiloh, Y. (2001).  ATM and ATR: networking cellular responses to DNA damage. Curr Opin Genet Dev., 11, 71-77.
【非特許文献３３】Sanchez, Y., Wong, C., Thoma, R.S., Richman, R., Wu, Z., Piwnica-Worms, H., Elledge, S.J. (1997).  Conservation of the Chk1 checkpoint pathway in mammals: linkage of DNA damage to Cdk regulation through Cdc25. Science., 277, 1497-1501.
【非特許文献３４】Carney, J.P., Maser, R.S., Olivares, H., Davis, E.M., Le Beau, M., Yates, JR. 3rd, Hays, L., Morgan, W.F. and Petrini, J.H. (1998).  The hMre11/hRad50 protein complex and Nijmegen breakage syndrome: linkage of double-strand break repair to the cellular DNA damage response. Cell., 93, 477-486.
【非特許文献３５】Volkmer, E. and Karnitz, L.M. (1999).  Human homologs of Schizosaccharomyces pombe rad1, hus1, and rad9 form a DNA damage-responsive protein complex. J Biol Chem., 274, 567-70.
【非特許文献３６】Parker, A.E., Van de Weyer, I., Laus, M.C., Oostveen, I., Yon, J., Verhasselt, P. and Luyten, W.H. (1998).  A human homologue of the Schizosaccharomyces pombe rad1+ checkpoint gene encodes an exonuclease. J Biol Chem., 273, 18332-18339.
【非特許文献３７】Koken, M.H., Reynolds, P., Jaspers-Dekker, I., Prakash, L., Prakash, S., Bootsma, D., and Hoeijmakers, J.H. (1991).  Structural and functional conservation of two human homologs of the yeast DNA repair gene RAD6. Proc Natl Acad Sci U S A. 88, 8865-8869.
【非特許文献３８】Xin, H., Lin, W., Sumanasekera, W., Zhang, Y., Wu, X. and Wang, Z. (2000).  The human RAD18 gene product interacts with HHR6A and HHR6B. Nucleic Acids Res., 28, 2847-2854.
【非特許文献３９】Kim, J., Kim, J.H., Lee, S.H., Kim, D.H., Kang, H.Y., Bae, S.H., Pan, Z.Q. and Seo, Y.S. (2002).  The novel human DNA helicase hFBH1 is an F-box protein. J Biol Chem., 277, 24530-24537. Epub 2002 Apr 15.
【非特許文献４０】Masutani, C., Sugasawa, K., Yanagisawa, J., Sonoyama, T., Ui, M., Enomoto, T., Takio, K., Tanaka, K., van der Spek, P.J., Bootsma, D., et al. (1994).  Purification and cloning of a nucleotide excision repair complex involving the xeroderma pigmentosum group C protein and a human homologue of yeast RAD23. EMBO J., 13, 1831-1843.
【非特許文献４１】Schauber, C., Chen, L., Tongaonkar, P., Vega, I., Lambertson, D., Potts, W. and Madura, K. (1998). Rad23 links DNA repair to the ubiquitin/proteasome pathway. Nature., 391, 715-8.
【非特許文献４２】Henning, K.A., Li, L., Iyer, N., McDaniel, L.D., Reagan, M.S., Legerski, R., Schultz, R.A., Stefanini, M., Lehmann, A.R., Mayne, L.V., et al. (1995). The Cockayne syndrome group A gene encodes a WD repeat protein that interacts with CSB protein and a subunit of RNA polymerase II TFIIH. Cell., 82, 555-564.
【非特許文献４３】Selby, C.P. and Sancar, A. (1997).  Human transcription-repair coupling factor CSB/ERCC6 is a DNA-stimulated ATPase but is not a helicase and does not disrupt the ternary transcription complex of stalled RNA polymerase II. J Biol Chem., 272, 1885-1890.
【非特許文献４４】O'Donovan, A., Davies, A.A., Moggs, J.G., West, S.C. and Wood, R.D. (1994).  XPG endonuclease makes the 3' incision in human DNA nucleotide excision repair. Nature., 371, 432-435.
【非特許文献４５】Sijbers, A.M., de Laat, W.L., Ariza, R.R., Biggerstaff, M., Wei, Y.F., Moggs, J.G., Carter, K.C., Shell, B.K., Evans, E., de Jong, M.C., Rademakers, S., de Rooij, J., Jaspers, N.G., Hoeijmakers, J.H. and Wood, R.D. (1996). Xeroderma pigmentosum group F caused by a defect in a structure-specific DNA repair endonuclease. Cell., 86, 811-822.
【非特許文献４６】Keeney, S., Chang, G.J. and Linn, S. (1993). Characterization of a human DNA damage binding protein implicated in xeroderma pigmentosum E. J Biol Chem., 268, 21293-21300.
【非特許文献４７】Nakatsu, Y., Asahina, H., Citterio, E., Rademakers, S., Vermeulen, W., Kamiuchi, S., Yeo, J.P., Khaw, M.C., Saijo, M., Kodo, N., Matsuda, T., Hoeijmakers, J.H. and Tanaka, K. (2000).  XAB2, a novel tetratricopeptide repeat protein involved in transcription-coupled DNA repair and transcription. J Biol Chem., 275, 34931-34937.
【非特許文献４８】Olsen, L.C., Aasland, R., Wittwer, C.U., Krokan, H.E. and Helland, D.E. (1989). Molecular cloning of human uracil-DNA glycosylase, a highly conserved DNA repair enzyme. EMBO J., 8, 3121-3125.
【非特許文献４９】Hendrich, B. and Bird, A. (1998).  Identification and characterization of a family of mammalian methyl-CpG binding proteins. Mol Cell Biol., 18, 6538-6547.
【非特許文献５０】Aspinwall, R., Rothwell, D.G., Roldan-Arjona, T., Anselmino, C., Ward, C.J., Cheadle, J.P., Sampson, JR., Lindahl, T., Harris, P.C. and Hickson, I.D. (1997).  Cloning and characterization of a functional human homolog of Escherichia coli endonuclease III. Proc Natl Acad Sci U S A., 94, 109-114.
【非特許文献５１】Hazra, T.K., Kow, Y.W., Hatahet, Z., Imhoff, B., Boldogh, I., Mokkapati, S.K., Mitra, S. and  Izumi, T. (2002).  Identification and characterization of a novel human DNA glycosylase for repair of cytosine-derived lesions. J Biol Chem., 277, 30417-30420. Epub 2002 Jul 03.
【非特許文献５２】Morland, I., Rolseth, V,. Luna, L., Rognes, T., Bjoras, M. and Seeberg, E. (2002).  Human DNA glycosylases of the bacterial Fpg/MutM superfamily: an alternative pathway for the repair of 8-oxoguanine and other oxidation products in DNA. Nucleic Acids Res., 30, 4926-4036.
【非特許文献５３】Hadi, M.Z., Ginalski, K., Nguyen, L.H. and Wilson, D.M. 3rd. (2002).  Determinants in nuclease specificity of Ape1 and Ape2, human homologues of Escherichia coli exonuclease III. J Mol Biol., 316, 853-866.
【非特許文献５４】Ikejima, M., Noguchi, S., Yamashita, R., Ogura, T., Sugimura, T., Gill, D.M. and Miwa, M. (1990).  The zinc fingers of human poly(ADP-ribose) polymerase are differentially required for the recognition of DNA breaks and nicks and the consequent enzyme activation. Other structures recognize intact DNA. J Biol Chem., 265, 21907-21913.
【非特許文献５５】Jilani, A., Ramotar, D., Slack, C., Ong, C., Yang, X.M., Scherer, S.W. and Lasko, D.D. (1999).  Molecular cloning of the human gene, PNKP, encoding a polynucleotide kinase 3'-phosphatase and evidence for its role in repair of DNA strand breaks caused by oxidative damage. J Biol Chem., 274, 24176-24186.
【非特許文献５６】Jezewska, M.J., Galletto, R. and Bujalowski, W. (2002).  Dynamics of gapped DNA recognition by human polymerase beta. J Biol Chem., 277, 20316-20327. Epub 2002 Mar 23.
【非特許文献５７】Fishel, R., Ewel, A. and Lescoe, M.K. (1994).  Purified human MSH2 protein binds to DNA containing mismatched nucleotides. Cancer Res., 54, 5539-5542.
【非特許文献５８】Yuan, Z.Q., Gottlieb, B., Beitel, L.K., Wong, N., Gordon, P.H., Wang, Q., Puisieux, A., Foulkes, W.D. and Trifiro, M. (2002).  Polymorphisms and HNPCC: PMS2-MLH1 protein interactions diminished by single nucleotide polymorphisms. Hum Mutat., 19, 108-113.
【非特許文献５９】Wilson, D.M. 3rd, Carney, J.P., Coleman, M.A., Adamson, A.W., Christensen, M. and Lamerdin, J.E. (1998).  Hex1: a new human Rad2 nuclease family member with homology to yeast exonuclease 1. Nucleic Acids Res., 26, 3762-3768.
【非特許文献６０】Vaisman, A., Tissier, A., Frank, E.G., Goodman, M.F. and Woodgate, R. (2001).  Human DNA polymerase iota promiscuous mismatch extension. J Biol Chem. 2001 Aug 17;276(33):30615-22. Epub 2001 Jun 11.
【非特許文献６１】Tombline, G. and Fishel, R. (2002).  Biochemical characterization of the human RAD51 protein. I. ATP hydrolysis. J Biol Chem. 277, 14417-14425. Epub 2002 Feb 11.
【非特許文献６２】Tombline, G., Shim, K.S. and Fishel, R. (2002).  Biochemical characterization of the human RAD51 protein. II. Adenosine nucleotide binding and competition. J Biol Chem., 277, 14426-14433. Epub 2002 Feb 11.
【非特許文献６３】Tombline, G., Heinen, C.D., Shim, K.S. and Fishel, R. (2002).  Biochemical characterization of the human RAD51 protein. III. Modulation of DNA binding by adenosine nucleotides. J Biol Chem., 277, 14434-14442. Epub 2002 Feb 11.
【非特許文献６４】Masson, J.Y., Tarsounas, M.C., Stasiak, A.Z., Stasiak, A., Shah, R., McIlwraith, M.J., Benson, F.E. and West, S.C. (2001).  Identification and purification of two distinct complexes containing the five RAD51 paralogs. Genes Dev.,15, 3296-3307.
【非特許文献６５】Johnson, R.D., Liu, N. and Jasin, M. (1999).  Mammalian XRCC2 promotes the repair of DNA double-strand breaks by homologous recombination. Nature., 401, 397-399.
【非特許文献６６】Kanaar, R., Troelstra, C., Swagemakers, S.M., Essers, J., Smit, B., Franssen, J.H., Pastink, A., Bezzubova, O.Y., Buerstedde, J.M., Clever, B., Heyer, W.D. and Hoeijmakers, J.H. (1996). Human and mouse homologs of the Saccharomyces cerevisiae RAD54 DNA repair gene: evidence for functional conservation. Curr Biol, ;6, 828-838.
【非特許文献６７】Yarden, R.I., Pardo-Reoyo, S., Sgagias, M., Cowan, K.H. and Brody, L.C. (2002).  BRCA1 regulates the G2/M checkpoint by activating Chk1 kinase upon DNA damage. Nat Genet., 30, 285-289. Epub 2002 Feb 11.
【非特許文献６８】Mimori, T., Ohosone, Y., Hama, N., Suwa, A., Akizuki, M., Homma, M., Griffith, A.J. and Hardin, J.A. (1990).  Isolation and characterization of cDNA encoding the 80-kDa subunit protein of the human autoantigen Ku (p70/p80) recognized by autoantibodies from patients with scleroderma-polymyositis overlap syndrome. Proc Natl Acad Sci U S A., 87, 1777-1781.
【非特許文献６９】Li, Z., Otevrel, T., Gao, Y., Cheng, H.L., Seed, B., Stamato, T.D., Taccioli, G.E. and Alt, F,W. (1995).  The XRCC4 gene encodes a novel protein involved in DNA double-strand break repair and V(D)J recombination. Cell., 83, 1079-1089.
【非特許文献７０】Kim, S.H., Kaminker, P. and Campisi, J. (1999).  TIN2, a new regulator of telomere length in human cells. Nat Genet., 23, 405-412.
【非特許文献７１】Afshar, G. and Murnane, J.P. (1999).  Characterization of a human gene with sequence homology to Saccharomyces cerevisiae SIR2. Gene., 234, 161-168.
【非特許文献７２】Koike, G., Maki, H., Takeya, H., Hayakawa, H. and Sekiguchi, M. (1990).  Purification, structure, and biochemical properties of human O6-methylguanine-DNA methyltransferase. J Biol Chem., 265, 14754-14762.
【非特許文献７３】Ladner, R.D., McNulty, D.E., Carr, S.A., Roberts, G.D. and Caradonna, S.J. (1996). Characterization of distinct nuclear and mitochondrial forms of human deoxyuridine triphosphate nucleotidohydrolase. J Biol Chem., 271, 7745-7751.
【非特許文献７４】Sangoram, A.M., Saez, L., Antoch, M.P., Gekakis, N., Staknis, D., Whiteley, A., Fruechte, E.M., Vitaterna, M.H., Shimomura, K., King, D.P., Young, M.W., Weitz, C.J. and Takahashi, J.S. (1998).  Mammalian circadian autoregulatory loop: a timeless ortholog and mPer1 interact and negatively regulate CLOCK-BMAL1-induced transcription. Neuron., 21, 1101-13.
【非特許文献７５】Hiraoka, L.R., Harrington, J.J., Gerhard, D.S., Lieber, M.R. and Hsieh, C.L. (1995).  Sequence of human FEN-1, a structure-specific endonuclease, and chromosomal localization of the gene (FEN1) in mouse and human. Genomics., 25, 220-225.
【非特許文献７６】Liu, L., Mo, J., Rodriguez-Belmonte, E.M. and Lee, M.Y. (2000).  Identification of a fourth subunit of mammalian DNA polymerase delta. J Biol Chem., 275, 18739-18744.
【非特許文献７７】Li, Y., Pursell, Z.F. and Linn, S. (2000).  Identification and cloning of two histone fold motif-containing subunits of HeLa DNA polymerase epsilon. J Biol Chem., 275, 23247-23252.
【非特許文献７８】Hofmann, R.M. and Pickart, C.M. (1999).  Noncanonical MMS2-encoded ubiquitin-conjugating enzyme functions in assembly of novel polyubiquitin chains for DNA repair. Cell., 96, 645-653.
【非特許文献７９】Neddermann, P. and Jiricny, J. (1993).  The purification of a mismatch-specific thymine-DNA glycosylase from HeLa cells. J Biol Chem., 268, 21218-21224.
【非特許文献８０】Budd, M.E., Choe, W.C. and Campbell, J.L. (1995).  DNA2 encodes a DNA helicase essential for replication of eukaryotic chromosomes. J Biol Chem., 270, 26766-26769.
【非特許文献８１】Budd, M.E. and Campbell, J.L. (1995).  A yeast gene required for DNA replication encodes a protein with homology to DNA helicases. Proc Natl Acad Sci U S A., 92, 7642-7646.
【非特許文献８２】Tang, J. and Chu, G. (2002).  Xeroderma pigmentosum complementation group E and UV-damaged DNA-binding protein. DNA Repair (Amst)., 1, 601-616.
【非特許文献８３】Martin-Lluesma, S., Stucke, V.M. and Nigg, E.A. (2002).  Role of Hec1 in spindle checkpoint signaling and kinetochore recruitment of Mad1/Mad2. Science., 297, 2267-2270.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２３】
本発明は、癌細胞特異的なアポトーシス誘導剤の提供を課題とする。より詳しくは、染色体の安定化を阻害する化合物、染色体の安定化に関与する遺伝子の発現を阻害する化合物、または、該遺伝子によってコードされるタンパク質の機能を阻害する化合物を有効成分とする癌細胞特異的アポトーシス誘導剤、並びに該アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法の提供を課題とする。さらに、アポトーシス誘導剤を医薬組成物として製造する方法の提供を課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００２４】
本発明者らは上記の課題を解決すべく、細胞において染色体の安定化に関連する種々の機能について、該機能の異常によってアポトーシスが癌細胞特異的に誘導されるか否かについての検討を行った。細胞における染色体の安定化に関連する機能としては、染色体の安定化に深く関与する以下の機能を選択した。（ａ）ヒト染色体不安定性疾患関連遺伝子、（ｂ）染色体ＤＮＡの複製開始、複製フォークの進行を含む染色体ＤＮＡ複製反応、（ｃ）ＤＮＡ損傷チェックポイント、（ｄ）姉妹染色分体凝集・分離、（ｅ）塩基除去修復、（ｆ）ミスマッチ除去修復、（ｇ）ヌクレオチド除去修復、（ｈ）相同組換え修復、（ｉ）非相同末端結合修復（非相同組換え修復）、（ｊ）二本鎖ＤＮＡ切断修復、（ｋ）ＤＮＡ複製後修復（ＤＮＡ損傷トレランス）、（ｌ）ＤＮＡ架橋損傷修復、（ｍ）ＤＮＡ−タンパク質架橋損傷修復、（ｎ）ＤＮＡポリメラーゼ、（ｏ）ヌクレアーゼ、（ｐ）ヌクレオチド浄化、（ｑ）クロマチン構造維持、（ｒ）テロメア構造維持。
【００２５】
本発明者らは、上記の各種機能に関与する種々の遺伝子について、該遺伝子の発現抑制効果を有するsiRNAを用いて、該遺伝子の癌細胞におけるアポトーシス誘導効果を検討した。その結果、前記の各機能に関与する複数の遺伝子について、その発現を抑制することにより、癌細胞においてアポトーシスが誘導され、細胞増殖の抑制が引き起こされることを見出した。さらに本発明者らは、該遺伝子の発現を抑制しても、正常細胞（野生型細胞）についてはアポトーシスの誘導が起こらないことを初めて見出した。該遺伝子は、非常に優れた副作用の少ない抗癌剤（制癌剤）のターゲット分子と考えられる。
【００２６】
上述の結果から、上記の各種機能に関与する遺伝子の発現を抑制することにより、アポトーシスを誘導することが可能であることが示された。また、該遺伝子は、上記の各種機能に深く関与しており、通常、該遺伝子の発現が抑制されることにより、上記機能は細胞において正常に働かなくなる。従って、本発明者らによって見出された上記知見は、とりもなおさず、上記の各種機能の異常によって、癌細胞特異的にアポトーシスが誘導されることを示すものである。よって、上記の各種機能を阻害させる化合物は、癌細胞特異的なアポトーシス誘導作用を有するものと考えられる。
【００２７】
さらに、上記の各種機能の異常により、染色体が不安定化することが知られている。従って、細胞における染色体の不安定化が、癌細胞特異的なアポトーシス誘導の引き金となっていることが考えられる。即ち、細胞における染色体安定化を阻害する化合物、あるいは、染色体安定化に関与する遺伝子の機能を阻害する化合物は、癌細胞特異的なアポトーシス誘導剤となることが期待される。
【００２８】
本発明は、染色体の安定化を阻害する化合物、染色体の安定化に関与する遺伝子の発現を阻害する化合物、または、該遺伝子によってコードされるタンパク質の機能を阻害する化合物を有効成分とする癌細胞特異的アポトーシス誘導剤、並びに該アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法に関し、より詳しくは、
〔１〕  染色体の安定化を阻害する化合物を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤、
〔２〕  染色体の安定化の阻害が、以下の（ａ）〜（ｒ）のいずれかの機能を阻害することによる、〔１〕に記載のアポトーシス誘導剤、
（ａ）ヒト染色体不安定性疾患関連遺伝子
（ｂ）染色体ＤＮＡの複製開始、複製フォークの進行を含む染色体ＤＮＡ複製反応
（ｃ）ＤＮＡ損傷チェックポイント
（ｄ）姉妹染色分体凝集・分離
（ｅ）塩基除去修復
（ｆ）ミスマッチ除去修復
（ｇ）ヌクレオチド除去修復
（ｈ）相同組換え修復
（ｉ）非相同末端結合修復（非相同組換え修復）
（ｊ）二本鎖ＤＮＡ切断修復
（ｋ）ＤＮＡ複製後修復（ＤＮＡ損傷トレランス）
（ｌ）ＤＮＡ架橋損傷修復
（ｍ）ＤＮＡ−タンパク質架橋損傷修復
（ｎ）ＤＮＡポリメラーゼ
（ｏ）ヌクレアーゼ
（ｐ）ヌクレオチド浄化
（ｑ）クロマチン構造維持
（ｒ）テロメア構造維持
〔３〕  〔２〕の（ａ）〜（ｒ）のいずれかの機能に関与する遺伝子の発現を阻害する化合物を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤、
〔４〕  以下のいずれかに記載の遺伝子の発現を抑制する化合物を有効成分として含有する、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤、
APE2、ATR、BRCA1、Chk1、Cdc5、Cdc6、Cdc7、Cdc45、Cdt1、CSA、CSB、Ctf18、DDB1、DDB2、DNA2、DUT、Elg1、EndoV、Esp1、Exonuclease1、FBH1、FEN1、Geminin、Hus1、KNTC2 (NDC80)、Ku80、Ligase1、Mad2、MBD4、Mcm3、Mcm4、Mcm5、Mcm6、Mcm7、Mcm8、Mcm10、MGMT、MLH3、Mms4、MPG、MSH2、Mus81、NBS1、NEIL2、NEIL3、NTH1、Orc1、Orc3、PARP1、PCNA、Pif1、PMS1、PMS2、PNK、Pola p180、Pola p70、Pola Spp1(Prim2a)、Polb、Pold p125、Pole Dpb3、Pole Dpb4、Pole Pol2、Poli、Poll、Polm、Psf1、Psf2、Psf3、Rad1、Rad18、Rad23A、Rad23B、Rad51、Rad51D、Rad54、Rad6A、RPA34、RPA70、Scc1、Scc3、Sir2、SIRT1 (Sirtuin)、TDG、TDP1、TIMELESS、Tin2、Topoisomerase I、Topoisomerase IIIa、Topoisomerase IIIb、Ubc13、UNG、XAB2、XPC、XPF、XPG、Xrcc2、XRCC4
〔５〕  〔４〕に記載の各遺伝子の塩基配列が、配列番号：１〜６３７、８１０〜９０８に記載の塩基配列からなる群より選択される、〔４〕に記載のアポトーシス誘導剤、
〔６〕  〔４〕に記載のいずれかの遺伝子の発現を抑制する化合物が、該遺伝子に対してRNAi効果を有する二本鎖RNA(siRNA)である、〔４〕に記載のアポトーシス誘導剤、
〔７〕  二本鎖RNAが、〔４〕に記載のいずれかの遺伝子のmRNAにおける連続する任意の20〜30塩基と相同な配列からなるセンスRNAおよび該センスRNAに相補的な配列からなるアンチセンスRNAからなる二本鎖RNAである、〔６〕に記載のアポトーシス誘導剤、
〔７ｂ〕  RNAi効果を有する二本鎖RNAが、該二本鎖の一方の鎖が配列番号：７２４〜８０９（ただし、該配列において、末端のTTを除いた領域が二本鎖の一方の鎖を構成する）、または９７４〜１０６３のいずれかに記載の塩基配列であり、他方の鎖が該塩基配列と相補的な塩基配列であることを特徴とする二本鎖RNAである、〔６〕に記載のアポトーシス誘導剤、
〔７ｃ〕  RNAi効果を有する二本鎖RNAが、該二本鎖の一方の鎖が配列番号：７２４〜８０９（ただし、該配列において、末端のTTを除いた領域が二本鎖の一方の鎖を構成する）、または９７４〜１０６３のいずれかに記載の塩基配列において１もしくは少数の塩基が付加、欠失、置換された塩基配列であり、他方の鎖が該塩基配列と相補的な塩基配列であることを特徴とする二本鎖RNAであって、上記〔４〕に記載のいずれかの遺伝子の発現を抑制する機能を有する二本鎖RNAである、〔６〕に記載のアポトーシス誘導剤、
〔７ｄ〕  前記二本鎖RNAの一方の末端が閉じた構造である（ヘアピンを形成する）分子を有効成分として含有する、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤、
〔８〕  〔４〕に記載のいずれかの遺伝子に対してRNAi効果を有する二本鎖RNAを発現し得るDNAを有効成分として含有する、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤、
〔９〕  〔４〕に記載のいずれかの遺伝子の発現を抑制する化合物が以下の（ａ）または（ｂ）である、〔４〕に記載のアポトーシス誘導剤、
（ａ）前記遺伝子の転写産物、またはその一部に対するアンチセンス核酸
（ｂ）前記遺伝子の転写産物を特異的に開裂するリボザイム活性を有する核酸
〔１０〕  〔４〕に記載のいずれかの遺伝子によってコードされるタンパク質の機能を抑制する化合物を有効成分として含有する、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤、
〔１１〕  〔４〕に記載のいずれかの遺伝子によってコードされるタンパク質の機能を抑制する化合物が、以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかの化合物である、〔１０〕に記載のアポトーシス誘導剤、
（ａ）前記遺伝子によってコードされるタンパク質に対してドミナントネガティブの性質を有する変異体タンパク質
（ｂ）前記遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する抗体
（ｃ）前記遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する低分子化合物
〔１２〕  〔１〕〜〔１１〕のいずれかに記載のアポトーシス誘導剤を有効成分とする、抗癌剤、
〔１３〕  以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法、
（ａ）〔４〕に記載のいずれかの遺伝子によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドと被検化合物を接触させる工程
（ｂ）前記タンパク質またはその部分ペプチドと被検化合物との結合活性を測定する工程
（ｃ）前記遺伝子によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドと結合する化合物を選択する工程
〔１４〕  以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法、
（ａ）〔４〕に記載のいずれかの遺伝子を発現する細胞もしくは細胞抽出液と、被検化合物を接触させる工程
（ｂ）前記遺伝子の発現レベルを測定する工程
（ｃ）被検化合物の非存在下において測定した場合と比較して、該発現レベルを低下させる化合物を選択する工程
〔１５〕  以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法、
（ａ）〔４〕に記載のいずれかの遺伝子の転写調節領域とレポーター遺伝子とが機能的に結合した構造を有するDNAを含む細胞または細胞抽出液と、被検化合物を接触させる工程
（ｂ）前記レポーター遺伝子の発現レベルを測定する工程
（ｃ）被検化合物の非存在下において測定した場合と比較して、前記発現レベルを低下させる化合物を選択する工程
〔１６〕  以下の（ａ）〜（ｃ）の工程を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法、
（ａ）〔４〕に記載のいずれかの遺伝子によってコードされるタンパク質、または該タンパク質を発現する細胞もしくは細胞抽出液と、被検化合物を接触させる工程
（ｂ）前記タンパク質の活性を測定する工程
（ｃ）被検化合物の非存在下において測定した場合と比較して、前記タンパク質の活性を低下させる化合物を選択する工程
〔１７〕  以下の工程（ａ）および（ｂ）を含む、〔４〕または〔１０〕に記載のアポトーシス誘導剤を医薬組成物として製造する方法、
（ａ）〔１３〕〜〔１６〕のいずれかに記載の方法によって、化合物をスクリーニングする工程
（ｂ）該化合物を薬学上許容される担体と混合する工程、を提供するものである。
また、本発明の具体的な一態様においては、配列番号：７２４〜８０９、９７４〜１０６３のいずれかに記載の塩基配列を該二本鎖RNAの一方の鎖とするsiRNA分子（配列番号：７２４〜８０９、９７４〜１０６３のいずれかに記載の塩基配列と、その相補鎖からなるsiRNA分子）を有効成分として含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤、
〔１８〕  対象細胞へ、上記のいずれかのアポトーシス誘導剤を投与する（接触させる）工程を含む、該細胞のアポトーシスを誘導する方法、
〔１９〕  上記のアポトーシス誘導剤もしくは上記の抗癌剤を個体（癌患者等）へ投与する工程を含む、癌の治療方法、
〔２０〕  染色体の安定化を阻害する化合物（例えば、上記〔４〕に記載のいずれかの遺伝子の発現、または該遺伝子によってコードされるタンパク質の機能を抑制する化合物）のアポトーシス誘導剤の製造における使用、
〔２１〕  上記のアポトーシス誘導剤の抗癌剤の製造における使用、
を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００２９】
【図１】図１は、実施例にて用いた遺伝子名、アクセッション番号（Accession no.）、siRNA配列、配列番号、HeLa細胞における遺伝子発現抑制、MTTアッセイ（HeLa細胞）、Tunel法の結果、TIG3細胞における遺伝子発現抑制、MTTアッセイ（TIG3細胞）を示す。「HeLa細胞における遺伝子発現抑制」の列は、各遺伝子に対するsiRNAをそれぞれHeLa細胞に導入し、導入48時間後の各mRNAの発現をTaqman PCRにより定量した結果を示す。「MTTアッセイ（HeLa細胞）」の列は、各遺伝子に対するsiRNAをHeLa細胞に導入し、導入４日後の細胞生存率をMTTアッセイで調べた結果を示す。「Tunel法」の列は、染色が認められた場合、即ちアポトーシス陽性の場合をYESと表示した。「TIG3細胞における遺伝子発現抑制」の列は、各遺伝子に対するsiRNAをTIG3細胞に導入し、72時間後のmRNAの発現をTaqman PCRにより定量した結果を示す。NDは検出不能を示す。「MTTアッセイ（TIG3細胞）」の列は、各遺伝子に対するsiRNAをそれぞれTIG3細胞に導入し、４日後の細胞生存率をMTTアッセイで調べた結果を示す。  なお、遺伝子はそれぞれの有する機能によって分別した。
【図２】図２は、図１の続きの図である。
【図３】図３は、図２の続きの図である。
【図４】図４は、図３の続きの図である。
【図５】図５は、HeLa細胞における各遺伝子のmRNA発現の抑制によるアポトーシスの誘導を示す写真である。各遺伝子に対するsiRNAをそれぞれHeLa細胞に導入し、TUNEL法を用いて導入48時間後のHeLa細胞におけるアポトーシス誘導を検討した結果を示す。各図左の緑色（モノクロ図面を掲載）はアポトーシスが誘導された核を、各図右は視野に存在する細胞の核を示す。
【図６】図６は図５の続きの写真である。
【図７】図７は図６の続きの写真である。
【図８】図８は図７の続きの写真である。
【図９】図９は図８の続きの写真である。
【図１０】図１０は、anti-ssDNA抗体を用いて染色体DNA中の一本鎖DNAが露出した領域を免疫染色した結果を示す写真である。１遺伝子に対し、３枚組みの写真を示す。左からanti-ssDNA像、核染色像、重ね合わせ像である。
【図１１】図１１は、図１０の続きの図である。
【図１２】図１２は、図１１の続きの図である。
【図１３】図１３は、図１２の続きの図である。
【図１４】図１４は、図１３の続きの図である。
【図１５】図１５は、図１４の続きの図である。
【図１６】図１６は、図１５の続きの図である。
【図１７】図１７は、図１６の続きの図である。
【図１８】図１８は、図１７の続きの図である。
【図１９】図１９は、図１８の続きの図である。
【図２０】図２０は、図１９の続きの図である。
【図２１】図２１は、図２０の続きの図である。
【図２２】図２２は、図２１の続きの図である。
【図２３】図２３は、図２２の続きの図である。
【図２４】図２４は、図２３の続きの図である。
【図２５】図２５は、図２４の続きの図である。
【図２６】図２６は、図２５の続きの図である。
【図２７】図２７は、図２６の続きの図である。
【図２８】図２８は、実施例にて用いた遺伝子名、アクセッション番号（アクセッションNo.）、その他アクセッションNo.、siRNA配列、配列番号、HeLa細胞における遺伝子発現抑制、HeLa細胞における増殖抑制、TIG3細胞における遺伝子発現抑制、TIG3細胞における増殖抑制を示す。「40nM HeLa細胞における遺伝子発現抑制」の列は、各遺伝子に対するsiRNA配列をそれぞれHeLa細胞に導入し、導入48時間後の各mRNAの発現をTaqman PCRにより定量した結果を示す。「40nM HeLa細胞における増殖抑制」の列は、各遺伝子に対するsiRNA配列をそれぞれHeLa細胞に導入し、導入４日後の細胞生存率をMTTアッセイで調べた結果を示す。「40nM TIG3細胞における遺伝子発現抑制」の列は、各遺伝子に対するsiRNAをTIG3細胞に導入し、72時間後のmRNAの発現をTaqman PCRにより定量した結果を示す。なお、図中の「＊＊」は、“未決定(Not determined)”を表す。「40nM TIG3細胞における増殖抑制」の列は、各遺伝子に対するsiRNA配列をそれぞれTIG3細胞に導入し、導入４日後の細胞生存率をMTTアッセイで調べた結果を示す。  なお、遺伝子はそれぞれの有する機能によって分別した。
【図２９】図２９は、図２８の続きの図である。
【図３０】図３０は、図２９の続きの図である。
【図３１】図３１は、KNTC2(NDC80)遺伝子の別名、アクセッション番号（アクセッションNo.）、mRNA登録、siRNA ID、siRNA配列、配列番号、HeLa細胞におけるmRNA発現、HeLa細胞における増殖抑制、HeLa細胞におけるアポトーシス、HDF細胞におけるmRNA発現、HDF細胞における増殖抑制、HDF細胞におけるアポトーシスを示す。HeLa細胞における「mRNA発現」の列は、KNTC2(NDC80)遺伝子に対するsiRNA配列をそれぞれHeLa細胞に導入し、導入48時間後の各mRNAの発現をTaqman PCRにより定量した結果を示す。HeLa細胞における「増殖抑制」の列は、KNTC2(NDC80)遺伝子に対するsiRNA配列をそれぞれHeLa細胞に導入し、導入４日後の細胞生存率をMTTアッセイで調べた結果を示す。HeLa細胞における「アポトーシス」の列は、染色が認められた場合、即ちアポトーシス陽性の場合をYESと表示した。HDF細胞における「mRNA発現」の列は、KNTC2(NDC80)遺伝子に対するsiRNA配列をそれぞれHDF細胞に導入し、導入48時間後の各mRNAの発現をTaqman PCRにより定量した結果を示す。HDF細胞における「増殖抑制」の列は、KNTC2(NDC80)遺伝子に対するsiRNA配列をそれぞれHDF細胞に導入し、導入４日後の細胞生存率をMTTアッセイで調べた結果を示す。HDF細胞における「アポトーシス」の列は、染色が認められた場合、即ちアポトーシス陽性の場合をYESと表示した。
【図３２】図３２は、実施例にて用いた遺伝子名、siRNA ID、siRNA配列、配列番号、HeLa細胞におけるmRNA発現、HeLa細胞における増殖抑制、HeLa細胞におけるアポトーシス、HDF細胞におけるmRNA発現、HDF細胞における増殖抑制、HDF細胞におけるアポトーシスを示す。HeLa細胞におけるmRNA「発現」の列は、各遺伝子に対するsiRNA配列をそれぞれHeLa細胞に導入し、導入48時間後の各mRNAの発現をTaqman PCRにより定量した結果を示す。HeLa細胞における「増殖」抑制の列は、各遺伝子に対するsiRNA配列をそれぞれHeLa細胞に導入し、導入４日後の細胞生存率をMTTアッセイで調べた結果を示す。HeLa細胞における「アポトーシス」の列は、染色が認められた場合、即ちアポトーシス陽性の場合を＋（プラス）と表示した。HDF細胞におけるmRNA「発現」の列は、各遺伝子に対するsiRNA配列をそれぞれHDF細胞に導入し、導入48時間後の各mRNAの発現をTaqman PCRにより定量した結果を示す。HDF細胞における「増殖」抑制の列は、各遺伝子に対するsiRNA配列をそれぞれHDF細胞に導入し、導入４日後の細胞生存率をMTTアッセイで調べた結果を示す。HDF細胞における「アポトーシス」の列は、染色が認められた場合、即ちアポトーシス陽性の場合を＋（プラス）、アポトーシス陰性の場合を−（マイナス）と表示した。
【図３３】図３３は、HeLa細胞およびTIG3細胞におけるPif1、Mms4、TopoisomeraseIIIa、Mus81、SIRT1 (Sirtuin)、Esp1、MPG、Poll、Polm、EndoVの各遺伝子のmRNA発現の抑制によるアポトーシスの誘導を示す写真である。各遺伝子に対するsiRNAをそれぞれHeLa細胞およびTIG3細胞に導入し、TUNEL法を用いて導入48時間後のHeLa細胞および導入72時間後のTIG3細胞におけるアポトーシス誘導を検討した結果を示す。
【図３４】図３４は、図３３の続きの写真である。
【図３５】図３５は、HeLa細胞およびTIG3細胞におけるKNTC2(NDC80)遺伝子のmRNA発現の抑制によるアポトーシスの誘導を示す写真である。KNTC2(NDC80)遺伝子に対するsiRNAをそれぞれHeLa細胞およびTIG3細胞に導入し、TUNEL法を用いて導入48時間後のHeLa細胞および導入72時間後のTIG3細胞におけるアポトーシス誘導を検討した結果を示す。左側の写真にはアポトーシスが誘導された核が写っている。右側の写真には視野に存在する細胞の核が写っている。
【図３６】図３６は、anti-ssDNA抗体を用いて染色体DNA中の一本鎖DNAが露出した領域を免疫染色した結果を示す写真である。
【発明を実施するための形態】
【００３０】
本発明者らによって、細胞における染色体の安定化を阻害することにより、癌細胞（腫瘍細胞）において特異的にアポトーシスが誘導されることが見出された。
本発明はまず、染色体の安定化を阻害する化合物を含む、癌細胞特異的（癌細胞に対する）アポトーシス誘導剤を提供する。
【００３１】
本発明のアポトーシス誘導剤は、癌細胞に対して選択的にアポトーシス誘導作用を有することを特徴とするものである。本発明において「癌細胞特異的」とは、正常細胞に対しては実質的なアポトーシス誘導作用を示さず、癌細胞に対して実質的にアポトーシス誘導作用を示すことを言うが、好ましくは、正常細胞に対しては、アポトーシス誘導作用が見られず、癌細胞に対してアポトーシス誘導作用を有することを言う。
【００３２】
アポトーシスとは一般的に、生理的条件下で細胞自らが積極的に引き起こす細胞死を言う。アポトーシスの形態としては、例えば、細胞核の染色体凝集、細胞核の断片化、細胞表層微絨毛の消失、細胞質の凝集等が挙げられる。従って、本発明におけるアポトーシス誘導作用とは、例えば、細胞において上記のアポトーシスの形態を誘導する作用を指すが、必ずしも、上記の形態の誘導のみに限定されるものではない。当業者においては、細胞のアポトーシス誘導が起こっているか否かについて、適宜、判断することが可能である。
【００３３】
本発明の、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤は、例えばアポトーシス誘導作用を機序とする抗癌剤（制癌剤）となるものと考えられる。本発明のアポトーシス誘導剤は、癌細胞特異的にアポトーシスを誘導し、正常細胞にはアポトーシスが誘導されないことから、副作用の少ない、安全な抗癌剤となるものと期待される。
【００３４】
なお、本発明における「抗癌剤」は、制癌剤と表記することも可能である。また、前記「抗癌剤」は、「抗腫瘍剤」、「抗腫瘍薬剤」または「抗腫瘍医薬組成物」等と表現される場合もある。
【００３５】
本発明において「染色体の安定化が阻害される」とは、例えば、染色体ＤＮＡ中に修復されずに残った損傷が蓄積した状態となること等を指し、具体的には、染色体ＤＮＡ中に一本鎖が露出した領域が蓄積したり、二本鎖ＤＮＡ切断部分が多数出現する状態を指すが、必ずしもこのような状態に限定されない。
【００３６】
本発明における「染色体の安定化」は、例えば、細胞における以下の機能によって維持されている。従って、以下の機能を阻害することによって、染色体の安定化が阻害される。
（ａ）ヒト染色体不安定性疾患関連遺伝子
（ｂ）染色体ＤＮＡの複製開始、複製フォークの進行を含む染色体ＤＮＡ複製反応
（ｃ）ＤＮＡ損傷チェックポイント
（ｄ）姉妹染色分体凝集・分離
（ｅ）塩基除去修復
（ｆ）ミスマッチ除去修復
（ｇ）ヌクレオチド除去修復
（ｈ）相同組換え修復
（ｉ）非相同末端結合修復（非相同組換え修復）
（ｊ）二本鎖ＤＮＡ切断修復
（ｋ）ＤＮＡ複製後修復（ＤＮＡ損傷トレランス）
（ｌ）ＤＮＡ架橋損傷修復
（ｍ）ＤＮＡ−タンパク質架橋損傷修復
（ｎ）ＤＮＡポリメラーゼ
（ｏ）ヌクレアーゼ
（ｐ）ヌクレオチド浄化
（ｑ）クロマチン構造維持
（ｒ）テロメア構造維持
【００３７】
本発明の好ましい態様において、染色体の安定化阻害とは、例えば、上記の（ａ）〜（ｒ）のいずれかの機能を阻害することを挙げることができる。
即ち本発明の好ましい態様においては、上記（ａ）〜（ｒ）のいずれかの機能を阻害する化合物を含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤に関する。
【００３８】
本発明において、上記（ａ）〜（ｒ）のいずれかの機能を阻害するためには、例えば、該機能に関与する遺伝子（本明細書においては、「染色体安定化関連遺伝子」と記載する場合あり）の発現を阻害する、もしくは該遺伝子によってコードされるタンパク質の機能（活性）を阻害することが挙げられる。
【００３９】
上記の各機能に関与する遺伝子としては、例えば、以下の遺伝子を挙げることができるが、上記の各機能に関与する遺伝子であれば、特に制限されない。
【００４０】
（ａ）ヒト染色体不安定性疾患関連遺伝子
ヒト染色体不安定性疾患としては、例えば色素性乾皮症、コケイン症、ナイミーヘン症、血管拡張性失調症、ファンコニー貧血症、あるいは早老症等が挙げられる。これら各疾患に関連する遺伝子を以下に記載する。
・色素性乾皮症： (a1)XPB、(a2)XPD、(a3)XPG、(a4)XPF、(a5)XPC、(a6)RAD23B、(a7)CETN2、(a8)RAD23A、(a9)ERCC1
・コケイン症： (a10)CSA、(a11)CSB、(a12)XAB
・ナイミーヘン症： （a13）NBS1
・血管拡張性失調症： （a14）ATM
・ファンコニー貧血症： (a15)FANCA、(a16)FANCC、(a17)FANCD2、(a18)FANCE、(a19)FANCF、（a20）FANCG
・早老症： (a21)WRN、(a22)BLM、(a23)RTS
【００４１】
（ｂ）染色体ＤＮＡの複製開始、複製フォークの進行を含む染色体ＤＮＡ複製反応
(b1)Mcm10、(b2)Orc1、(b3)Orc3、(b4)Cdc6、(b5)Cdt1、(b6)Geminin、(b7)Mcm3、(b8)Mcm4、(b9)Mcm5、(b10)Mcm6、(b11)Mcm7、(b12)Mcm8、(b13)Cdc7、(b14)Cdc5、(b15)Psf1、(b16)Psf2、(b17)Psf3、(b18)Cdc45、(b19)Pola p180、(b20)Pola p70、(b21)Pola Spp1(Prim2a)、(b22)RPA70、(b23)RPA34、(b24)PCNA、(b25)Elg1、(b26)Ligase1、(b27)Pole Pol2、(b28)Pole Dpb3、(b29)Topoisomerase I、(b30)TDP1、(b31)Orc2、(b32)Orc4、(b33)Orc5、(b34)Orc6、(b35)Mcm2、(b36)Dbf4、(b37)TopBP1、(b38)Sld5、(b39)Pola Spp2、(b40)RFC1、(b41)RFC2、(b42)RFC3、(b43)RFC4、(b44)RFC5、(b45)Pif1、(b46)Pold p50、(b47)Pole Dpb2、(b48)Topoisomerase Iia、(b49)Topoisomerase Iib 、(b50)RPA14、(b51)FEN1、(b52)DNA2、(b53)Pold p125、(b54)Pold p68、(b55)Pold p12、(b56)Pole Dpb4
【００４２】
（ｃ）ＤＮＡ損傷チェックポイント
(c1)ATR、(c2)Chk1、(c3)NBS1、(c4)Hus1、(c5)Rad1、(c11)Mad2、(c12)BubR1、(c12)ATM、(c13)Rad50、(c14)Mre11、(c15)Mdc1、(c16)53BP1、(c17)Rad17、(c22)BubR1、(c23)ATRIP、(c24)Chk2、(c25)H2AX、(c26)RFC1、(c27)RFC2、(c28)RFC3、(c29)RFC4、(c30)RFC5、(c31)ATM、(c32)BRCA1、(c33)Chk1、(c34)Chk2、(c35)14-3-3eta、(c36)14-3-3sigma、(c37)cdc25A、(c38)cdc25c、(c39)wee1、(c40)ATR、(c41)ATRIP、(c42)Rad17、(c43)RFC2、(c44)RFC3、(c45)RFC4、(c46)RFC5、(c47)HUS1、(c48)Rad1、(c49)Rad9、(c50)P53、(c51)Rad50、(c52)Mre11、(c53)NBS1、(c54)TopBP1、(c55)53BP1、(c56)H2AX
【００４３】
（ｄ）姉妹染色分体凝集・分離
(d1)Ctf18、(d2)Scc1、(d3)Scc3、(d4)Dcc1、(d5)Trf4-1、(d6)Trf4-2、(d7)Smc1、(d8)Smc3、(d9)Pds1(Securin)、(d10)Mad2、(d11)BubR1、(d12)Esp1
【００４４】
（ｅ）塩基除去修復
(e1)UNG、(e2)MBD4、(e3)TDG、(e4)NTH1、(e5)NEIL2、(e6)NEIL3、(e7）APE2、(e8)PARP1、(e9)PNK、(e10)Polb、(e11)OGG1、(e12)APE1、(e13)XRCC1、(e14)Ligase3、(e15)SMUG1、(e16)TDG、(e17)MYH、(e18)MPG、(e19)NEIL1、(e20)ADPRT、(e21)ADPRTL2、(e22)MGMT、(e23)ABH1、(e24)ABH2、(e25)ABH3
【００４５】
（ｆ）ミスマッチ除去修復
(f1)MSH2、(f2)PMS1、(f3)PMS2、(f4)MLH3、(f5)Exonuclease1、(f6)MSH3、(f7)MSH6、(f8)MSH5、(f9)MLH1、(f10)MSH4、(f11)PMS2L3、(f12)Trex1、(f13)Trex2、(f14)PMS2L4
【００４６】
（ｇ）ヌクレオチド除去修復
(g1)XPC、(g2)Rad23A、(g3)Rad23B、(g4)CSA、(g5)CSB、(g6)XPG、(g7)XPF、(g8)DDB1、(g9)DDB2、(g10)XAB2、(g11)XPB、(g12)ERCC1、(g13)XPD、(g14)XPA、(g15)DDB2、(g16)Mms19、(g17)CETN2、(g18)RPA70、(g19)RPA34、(g20)RPA14、(g21)GTF2H1、(g22)GTF2H2、(g23)GTF2H3、(g24)GTF2H4、(g25)CDK7、(g26)CCNH、(g27)MNAT1、(g28)LigaseI、(g29)CSA、(g30)CSB
【００４７】
（ｈ）相同組換え修復
(h1)Rad51、(h2)Rad51L1、(h3)Rad51C、(h4)Rad51L3、(h5)DMC1、(h6)XRCC2、(h7)XRCC3、(h8)Rad52、(h9)Rad54L、(h10)Rad54B、(h11)BRCA1、(h12)BRCA2、(h13)Rad50、(h14)Mre11、(h15)NBS1、(h16)TopoisomeraseIIIa、(h17)TopoisomeraseIIIb、(h18)WHIP、(h19)WRN、(h20)BLM、(h21)RecQ1、(h22)RecQ5
【００４８】
（ｉ）非相同末端結合修復（非相同組換え修復）
(i1)Ku70、(i2)Ku80、(i3)DNA-pk、(i4)Ligase4、(i5)XRCC4、(i6)Artemis、(i7)WRN
【００４９】
（ｊ）二本鎖ＤＮＡ切断修復
(j1)Rad51、(j2)Rad51D、(j3)Xrcc2、(j4)Rad54、(j5)BRCA1、(j6)Ku80、(j7)XRCC4、(j8)Rad52、(j9)Rad51C、(j10)Dmc1、(j11)Rad54B、(j12)DNA-pk、(j13)Ku70、(j14)Ligase4、(j15)Rad51B、(j16)XRCC3、(j17)BRCA2、(j18)Artemis
【００５０】
（ｋ）ＤＮＡ複製後修復（ＤＮＡ損傷トレランス）
(k1)Rad6A、(k2)Rad6B、(k3)Rad18、(k4)Ubc13、(k5)FBH1
【００５１】
（ｌ）ＤＮＡ架橋損傷修復
(l1)FANCA、(l2)FANCC、(l3)FANCD2、(l4)FANCE、(l5)FANCF、(l6)FANCG
【００５２】
（ｍ）ＤＮＡ-タンパク質架橋損傷修復
(m1)TDP1
【００５３】
（ｎ）ＤＮＡポリメラーゼ
(n1)Poli、(n2)Polh、(n3)Polq、(n4)Polk、(n5)Polz(REV3)、(n6)Poll、(n7)Polm、(n8)Rev1、(n9)Polb、(n10)Polg、(n11)Pold p50、(n12)Pole Pol2、(n13)REV7、(n14)Poln、(n15)Pola P180、(n16)Pola p70、(n17)Pola Spp1、(n18)Pola Spp2、(n19)Pold p68、(n20)Pold p12、(n21)Pole Dpb2、(n22)Pole Dpb3、(n23)Pole Dpb4
【００５４】
（ｏ）ヌクレアーゼ
(o1)FEN1、(o2)TREX1、(o3)TREX2、(o4)Exonuclease1、(o5)SPO11、(o6)ENDO V、(o7)APE1、(o8)APE2、(o9)Mre11、(o10)Artemis
【００５５】
（ｐ）ヌクレオチド浄化
(p1)MTH1、(p2)DUT、(p3)p53R2
【００５６】
（ｑ）クロマチン構造維持
(q1)H2AX、(q2)Sir2、(q3)SIRT1 (Sirtuin)
【００５７】
（ｒ）テロメア構造維持
(r1)Tin2、(r2)Sir2、(r3)hTert、(r4)TRF1、(r5)TRF2、(r6)Tankyrase、(r7)Pot1、(r8)Rap1、(r9)Pif1
【００５８】
上記（ａ）〜（ｒ）の各機能に関与する遺伝子としては、好ましくは、後述の実施例に記載された遺伝子を好適に示すことができる。具体的には、以下に記載の遺伝子を挙げることができる。
APE2、ATR、BRCA1、Chk1、Cdc5、Cdc6、Cdc7、Cdc45、Cdt1、CSA、CSB、Ctf18、DDB1、DDB2、DNA2、DUT、Elg1、EndoV、Esp1、Exonuclease1、FBH1、FEN1、Geminin、Hus1、KNTC2 (NDC80)、Ku80、Ligase1、Mad2、MBD4、Mcm3、Mcm4、Mcm5、Mcm6、Mcm7、Mcm8、Mcm10、MGMT、MLH3、Mms4、MPG、MSH2、Mus81、NBS1、NEIL2、NEIL3、NTH1、Orc1、Orc3、PARP1、PCNA、Pif1、PMS1、PMS2、PNK、Pola p180、Pola p70、Pola Spp1(Prim2a)、Polb、Pold p125、Pole Dpb3、Pole Dpb4、Pole Pol2、Poli、Poll、Polm、Psf1、Psf2、Psf3、Rad1、Rad18、Rad23A、Rad23B、Rad51、Rad51D、Rad54、Rad6A、RPA34、RPA70、Scc1、Scc3、Sir2、SIRT1 (Sirtuin)、TDG、TDP1、TIMELESS、Tin2、Topoisomerase I、Topoisomerase IIIa、Topoisomerase IIIb、Ubc13、UNG、XAB2、XPC、XPF、XPG、Xrcc2、XRCC4
【００５９】
本発明の好ましい態様においては、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の発現、または、該遺伝子によってコードされるタンパク質の機能を抑制する化合物を有効成分として含有する、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤を提供する。
【００６０】
本明細書において記載された遺伝子名は、広く一般的に知られた名称であることから、当業者であれば、該遺伝子の塩基配列についての情報を、遺伝子名を基に、公共の文献データベース、あるいは、遺伝子データベース（例えば、GenBank等）から、適宜取得することができる。
【００６１】
本発明の上記のいずれかに記載の各遺伝子の塩基配列、および該遺伝子によってコードされるタンパク質のアミノ酸配列の具体例を、配列表に掲載する。上記遺伝子の配列情報が取得可能なNCBIのアクセッション番号、および該番号によって取得される遺伝子の塩基配列の配列番号との関係を表１〜１６に示す。また、本発明の上記の各遺伝子によってコードされるタンパク質のアミノ酸配列の一例についても、配列表に示す。
【００６２】
【表１】
0005390653.tif 000002
【００６３】
【表２】
0005390653.tif 000003
【００６４】
【表３】
0005390653.tif 000004
【００６５】
【表４】
0005390653.tif 000005
【００６６】
【表５】
0005390653.tif 000006
【００６７】
【表６】
0005390653.tif 000007
【００６８】
【表７】
0005390653.tif 000008
【００６９】
【表８】
0005390653.tif 000009
【００７０】
【表９】
0005390653.tif 000010
【００７１】
【表１０】
0005390653.tif 000011
【００７２】
【表１１】
0005390653.tif 000012
【００７３】
【表１２】
0005390653.tif 000013
【００７４】
【表１３】
0005390653.tif 000014
【００７５】
【表１４】
0005390653.tif 000015
【００７６】
【表１５】
0005390653.tif 000016
【００７７】
【表１６】
0005390653.tif 000017
【００７８】
なお、上記に記載の各遺伝子は、塩基配列中の多型の有無等により、同一の遺伝子であっても複数のアクセッション番号が付与されている場合がある。この「多型」とは、一塩基の置換、欠失、挿入変異からなる一塩基多型(SNPs)に限定されず、連続する数塩基の置換、欠失、挿入変異も含まれる。従って、上記の各遺伝子の塩基配列としては、必ずしも表１〜表１６に記載のアクセッション番号によって取得される配列、あるいは、配列番号：１〜６３７、８１０〜９０８に記載された配列に限定されない。同様に、上記の各遺伝子によってコードされるタンパク質のアミノ酸配列も、配列番号：６３８〜７２３、９０９〜９７３に記載されたアミノ酸配列に特に限定されない。
【００７９】
本発明の上記タンパク質は、配列番号：６３８〜７２３、９０９〜９７３に記載されたアミノ酸配列に限定されず、該アミノ酸配列において、１もしくは複数のアミノ酸残基が付加、欠失、置換、挿入されたアミノ酸配列からなるタンパク質であって、配列番号：６３８〜７２３、９０９〜９７３に記載されたタンパク質と機能的に同等なタンパク質が含まれる。
【００８０】
また、本発明の染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記の各遺伝子）は特に制限されるものではないが、通常、動物由来であり、より好ましくは哺乳動物由来であり、最も好ましくはヒト由来である。
【００８１】
即ち、本発明はヒトの癌細胞についての特異的なアポトーシス誘導剤に限定されず、ヒト以外の動物の癌細胞に対するアポトーシス誘導剤も本発明に含まれる。従って、本発明の遺伝子には、上記の各遺伝子についてのヒト以外の動物におけるホモログ（カウンターパート）遺伝子が含まれる。例えば、配列番号：１〜６３７、８１０〜９０８に記載の各塩基配列からなる遺伝子に対応する他の動物における内在性の遺伝子（ホモログ等）が含まれる。該塩基配列からなるDNAに対応する他の動物の内在性のDNAは、一般的に、該配列番号に記載のDNAと高い相同性を有する。高い相同性とは、50％以上、好ましくは70％以上、さらに好ましくは80％以上、より好ましくは90％以上(例えば、95％以上、さらには96％、97％、98％または99％以上)の相同性を意味する。この相同性は、mBLASTアルゴリズム(Altschul et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87: 2264-8; Karlin and Altschul (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 5873-7)によって決定することができる。また、該DNAは、生体内から単離した場合、該配列番号に記載のDNAとストリンジェントな条件下でハイブリダイズすると考えられる。ここで「ストリンジェントな条件」としては、例えば「2×SSC、0.1％SDS、50℃」、「2×SSC、0.1％SDS、42℃」、「1×SSC、0.1％SDS、37℃」、よりストリンジェントな条件として「2×SSC、0.1％SDS、65℃」、「0.5×SSC、0.1％SDS、42℃」および「0.2×SSC、0.1％SDS、65℃」の条件を挙げることができる。当業者においては、他の動物における本発明の上記の各遺伝子に相当する内在性遺伝子に関する情報（配列等）について、配列表に掲載された塩基配列を基に適宜取得することが可能である。
【００８２】
また本発明は、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の発現を抑制する化合物を提供する。
【００８３】
本発明の染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の発現を抑制する化合物としては、例えば、該遺伝子に対してRNAi（RNA interferance；RNA干渉）効果を有する二本鎖RNAを好適に挙げることができる。一般的にRNAiとは、標的遺伝子のmRNA配列と相同な配列からなるセンスRNAおよびこれと相補的な配列からなるアンチセンスRNAとからなる二本鎖RNAを細胞内に導入することにより、標的遺伝子mRNAの破壊を誘導し、標的遺伝子の発現が阻害される現象を言う。
【００８４】
RNAi機構の詳細については未だに不明な部分もあるが、DICERといわれる酵素（RNase III核酸分解酵素ファミリーの一種）が二本鎖RNAと接触し、二本鎖RNAがsmall interfering RNAまたはsiRNAと呼ばれる小さな断片に分解されるものと考えられている。本発明におけるRNAi効果を有する二本鎖RNAには、このsiRNAも含まれる。さらに、本発明の二本鎖RNAを発現し得るDNAもまた、本発明に含まれる。
【００８５】
本発明の好ましい態様においては、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の発現をRNAi効果により抑制し得るRNA(siRNA)であって、配列番号：７２４〜８０９、９７４〜１０６３のいずれかに記載の塩基配列からなるRNAと、該RNAと相補的な配列からなるRNAとがハイブリダイズした構造を含む二本鎖RNAを有効成分として含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤を提供する。
【００８６】
例えば、配列番号：７２４に記載の塩基配列（5'- ggaaaaucuggccacucucTT-3'）を含む本発明のsiRNAとは、以下のような構造のRNA分子を例示することができる。
0005390653.tif 000018
（上記「I」は水素結合を表す。）
【００８７】
なお、上記RNA分子において一方の端が閉じた構造の分子、例えば、ヘアピン構造を有するsiRNA(shRNA)も本発明に含まれる。即ち、分子内において二本鎖RNA構造を形成し得る分子もまた本発明に含まれる。
【００８８】
例えば、
5'-ggaaaaucuggccacucuc (xxxx)n gagaguggccagauuuucc-3'  のような分子もまた本発明に含まれる。（上記「(xxxx)n」は任意塩基および配列数からなるポリヌクレオチドを表す。）
【００８９】
上記siRNAの好ましい態様としては、染色体安定化関連遺伝子（例えば上記のいずれかに記載の遺伝子）の発現をRNAi効果により抑制し得るRNA(siRNA)であって、配列番号：７２４〜８０９、９７４〜１０６３のいずれかに記載の塩基配列からなるRNAと、該RNAと相補的な配列からなるRNAとがハイブリダイズした構造を含む二本鎖RNAを好適に示すことができる。ただし、二本鎖RNAの末端において、例えば、１もしくは複数のRNAが付加もしくは欠失された構造の二本鎖RNAもまた、本発明に含まれる。
【００９０】
即ち本発明は、本発明の二本鎖RNAを発現し得るDNA（ベクター）を提供する。本発明の上記二本鎖RNAを発現し得るDNA（ベクター）は、通常、該二本鎖RNAの一方の鎖をコードするDNA、および該二本鎖RNAの他方の鎖をコードするDNAが、それぞれ発現し得るようにプロモーターと連結した構造を有するDNAである。本発明の上記DNAは、当業者においては、一般的な遺伝子工学技術により、容易に作製することができる。より具体的には、本発明のRNAをコードするDNAを公知の種々の発現ベクターへ適宜挿入することによって、本発明の発現ベクターを作製することが可能である。
【００９１】
RNAiのために使用されるRNAは、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）もしくは該遺伝子の部分領域と完全に同一（相同）である必要はないが、完全な同一（相同）性を有することが好ましい。
【００９２】
本発明のRNAi効果を有する二本鎖RNAは、通常、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）のmRNAにおける連続する任意のRNA領域と相同な配列からなるセンスRNA、および該センスRNAに相補的な配列からなるアンチセンスRNAからなる二本鎖RNAである。上記「連続する任意のRNA領域」の長さは、通常20〜30塩基であり、好ましくは21〜23塩基である。例えば、配列番号：７２４〜８０９、９７４〜１０６３のいずれかに記載のRNAを一方の鎖とするsiRNAの長さを挙げることができるが、必ずしもこれらの長さに限定されない。しかしながら、そのままの長さではRNAi効果を有さないような長鎖のRNAであっても、細胞においてRNAi効果を有するsiRNAへ分解されることが期待されるため、本発明における二本鎖RNAの長さは、特に制限されない。また、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）のmRNAの全長もしくはほぼ全長の領域に対応する長鎖二本鎖RNAを、例えば、予めDICERで分解させ、その分解産物を本発明のアポトーシス誘導剤として利用することが可能である。この分解産物には、RNAi効果を有する二本鎖RNA分子(siRNA)が含まれることが期待される。この方法によれば、RNAi効果を有することが期待されるmRNA上の領域を、特に選択しなくともよい。即ち、RNAi効果を有する染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）のmRNA上の領域は、必ずしも正確に規定される必要はない。ただし、より好ましくは、後述の実施例において用いた各種siRNAを好適に示すことができる。
【００９３】
また、通常、末端に数塩基のオーバーハングを有する二本鎖RNAは、RNAi効果が高いことが知られており、本発明の二本鎖RNAは、末端に数塩基のオーバーハングを有することが望ましい。このオーバーハングを形成する塩基の長さは特に制限されない。また、このオーバーハングは、DNAおよびRNAのいずれであってもよい。好ましくは、2塩基のオーバーハングを例示することができる。本発明においては例えば、TT（チミンが2個）、UU（ウラシルが2個）、その他の塩基のオーバーハングを有する二本鎖RNA（最も好ましくは19塩基の二本鎖RNAと2塩基(TT)のオーバーハングを有する分子）を好適に用いることができる。本発明の二本鎖RNAには、このようにオーバーハングを形成する塩基がDNAであるような分子や、標的mRNA配列と相同な配列も含まれる。
【００９４】
例えば、オーバーハング部分の塩基がTTである場合には、本発明のsiRNA分子としては、
0005390653.tif 000019
のような分子（3'側にTTが付加された分子）を例示することができる。
【００９５】
本発明の上記「染色体安定化関連遺伝子に対してRNAi効果を有する二本鎖RNA」は、当業者においては、該二本鎖RNAの標的となる染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の塩基配列をもとに、適宜作製することができる。染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の塩基配列は、上述のように公共の遺伝子データベースから容易に取得することができる。一例を示せば、配列番号：１〜６３７、８１０〜９０８のいずれかに記載の塩基配列をもとに、本発明の二本鎖RNAを作製することができる。即ち、配列番号：１〜６３７、８１０〜９０８のいずれかに記載の塩基配列をもとに、該配列の転写産物であるmRNAの任意の連続するRNA領域を選択し、この領域に対応する二本鎖RNAを作製することは、当業者においては、容易に行い得ることである。また、該配列の転写産物であるmRNA配列から、より強いRNAi効果を有するsiRNA配列を選択する方法は、例えば文献（Reynold et al. Nature biotechnology 22. 326-330 (2004)、Ui-Tei et al. Nucleic Acids Res. 32. 936-948 (2004)、Boese Q, Leake D, Reynolds A, Read S, Scaringe SA, Marshall WS, Khvorova A. Mechanistic insights aid computational short interfering RNA design.Methods Enzymol. 2005;392:73-96.、Snove O Jr, Nedland M, Fjeldstad SH, Humberset H, Birkeland OR, Grunfeld T, Saetrom P. Designing effective siRNAs with off-target control. Biochem Biophys Res Commun. 2004;325(3):769-73.、Yiu SM, Wong PW, Lam TW, Mui YC, Kung HF, Lin M, Cheung YT. Filtering of Ineffective siRNAs and Improved siRNA Design Tool. Bioinformatics. 200515;21(2):144-51、Chalk AM, Wahlestedt C, Sonnhammer EL. Improved and automated prediction of effective siRNA. Biochem Biophys Res Commun. 2004;319(1):264-74.、Amarzguioui M, Prydz H. An algorithm for selection of functional siRNA sequences. Biochem Biophys Res Commun. 2004;316(4):1050-8.、Sioud M, Leirdal M. Potential design rules and enzymatic synthesis of siRNAs. Methods Mol Biol. 2004;252:457-69.）等を参考にして、当業者においては、適宜実施することが可能である。また、一方の鎖（例えば、配列番号：７２４〜８０９、９７４〜１０６３のいずれかに記載の塩基配列）が判明していれば、当業者においては容易に他方の鎖（相補鎖）の塩基配列を知ることができる。siRNAは、当業者においては市販の核酸合成機を用いて適宜作製することが可能である。また、所望のRNAの合成については、一般の合成受託サービスを利用することが可能である。
【００９６】
また、本発明におけるsiRNAは、必ずしも全てのヌクレオチドがリボヌクレオチド(RNA)でなくともよい。即ち、本発明において、siRNAを構成する１もしくは複数のリボヌクレオチドは、対応するデオキシリボヌクレオチドであってもよい。この「対応する」とは、糖部分の構造は異なるものの、同一の塩基種（アデニン、グアニン、シトシン、チミン（ウラシル））であることを指す。例えば、アデニンを有するリボヌクレオチドに対応するデオキシリボヌクレオチドとは、アデニンを有するデオキシリボヌクレオチドのことを言う。また、前記「複数」とは特に制限されないが、好ましくは２〜５個程度の少数を指す。
【００９７】
また、本発明の二本鎖RNAの基となる遺伝子（標的遺伝子）の配列は、必ずしも遺伝子全長の塩基配列が判明している必要はない。選択すべき任意の連続するRNA領域（例えば、20〜30塩基）が判明していればよい。従って、EST（Expressed Sequence Tag）等のようにmRNAの一部は判明しているが、全長が判明していない遺伝子断片からも、該断片の塩基配列を基に本発明の二本鎖RNAを作製することが可能である。以下に、GenBankデータベースにおいて、上記のいずれかに記載の遺伝子と高い相同性を示したEST配列のアクセッション番号を、各遺伝子名ごとに分けて記載する。但し、これらは多数存在するEST配列のうちの一例に過ぎず、当業者においては、適切なEST断片に関する情報を公共のデータベースから容易に取得することができる。
【００９８】
Mcm10：BQ230201、CK000876、BX324498、BM466246、BI086715、BE561621、BM781578、BE397209、BM781561、BF797760、BE268770、AI133628、BI860489、CA488245、BE018388、BM794417、AI005288、AV759891、BE536223、AI078425、BI023355、CB120985、AA305452、BX324497、AI636632、CB143720、BM465842、BM833978、AI962581、BE206240、BE536858、BQ432059、BX099770、BX346400、BE890219、BU542039、AI750442、BU542210、BQ929138、BG323332、AA312197、BG942019、BM755471、AA091854、BX346399、BG493975、T97047、BU615340、BG777950、BU618352、BG323324
【００９９】
Orc1：BM556110、AL558857、AL528479、AL530422、AU125429、BQ229865、BX370588、AL563154、BU552785、BQ055912、CD642483、BE903488、BU854876、BM908744、BF205157、BX372245、BQ230059、BX110476、BM743410、BG821765、AL530421、BI222366、BU198520、BF796650、BM476715、AL552393、AU127396、BM740840、BE781976、AL580583、BG391980、BM852299、CD654548、BQ423782、AW378723、AL582531、AL561250、BU194186、BQ048846、BG822626、AL552501、BU854819、BQ433201、BE782505、BG257286、BX281133、CF140351、BF795920、BG390855、BG831652、BF794915、BF797918、BG325714、AI651655、BM833692、BQ883238、BX474463、AI038384、AU129034、BP431296、BG328342、BP430683、H51719、AI739661、T96858、BE782390、BU630113、BG025019、BE937466、AA332534、AI343281、AU149094、BP430714、BI087773、AW393255、AU151220、BE076727、AI452809、AW877655、AI003527、AI391554、AW602975、AW877662、AA633915、BF108860、AU149996、T96859、R83277
【０１００】
Orc3：BM478060、BU509511、BQ718539、BU153003、AL533919、BQ220405、AU118962、BM550235、BG187255、AU117920、BQ719965、BQ716606、BQ953945、BU166296、AU119182、BI769170、BI819545、CD655888、BX409716、BI520392、BG214275、BI770086、BI091781、BM802602、BG187780、BU170385、BI769508、BX433033、BX507848、AU124361、BX488094、BM785800、BG205874、CD679490、BX490513、CB153029、AW967051、BM826548、AU139285、BG572634、AL533918、CB152486、AU136510、BE536929、BX352629、BQ102522、AW369628、AW449272、BF672680、BE882468、BX343146、BG943457、BF698289、CD702536、BF667912、AU280292、CA842624、BF674961、BF184165、BQ441255、BF794512、CD699734、AL600904、BX462706、BF215571、AL709158、AV753736、AI904063、CB123265、BX486937、BG214276、CD245870、BF059711、AI651375、BQ102253、AL711211、BF964587、AW500090、BM751168、CB963370、BI862225、AA442539、AW887723、AW801684、AV708200、BM152858、H17704、BF683230、BM848524、BQ772810、BQ361466、AL710982、CD242978、H11812、AA305227、AW607564、H94935、BU632641、BX328353、BI255412
【０１０１】
Cdc6：AL562624、AL521818、BM465884、BQ064897、BX451346、BX349920、BU846236、BQ675107、BI260747、BU633837、BG256606、BM464160、BQ228599、BG252312、BM559225、AL521819、BE907412、BQ070080、BU619893、BF698043、BE741201、AL526150、BG765988、BU173127、BF699051、AA502608、BG165110、AU129648、CA488634、BM450676、BF028885、CB135870、BF185000、BG026757、CA429336、BF977528、BF240966、BG766090、AI478744、BM803439、AA045217、AA813386、BE565947、BF571756、AL710150、BF307679、AA723372、BG721945、AI433558、BF208758、BI559407、BX482661、BF102841、BE779410、BQ441118、N69246、BF310791、CF123750、BI006635、BQ775002、AA907374、BM011340、CA429634、W03300、BM845715、AA113790、BF210909、BM706052、H59204、BI255053、AI424746、H59203、AI052065、BE073887、BE550416、AI341585、BG025851、BF221502、T83032、T90351、BG720011、AI953729、AI699473、BF115521、BF223422、AI808683、BE085836、AI699980、BX355209、BE086769、AW518847、AA099980、BE965778、AA836395、AI766778、BE869748、AI802324、AA584340、BE693538、AI567411
【０１０２】
Cdt1：BX332414、BQ935210、BU931977、BM811548、BU849056、BQ062875、BQ053758、BU187852、BX406047、AL555432、BQ278148、BX402195、BU845736、AL580756、BQ058496、AL581992、BX332413、AL557066、BU930971、BM016975、BX421258、BU190377、BQ960305、BG824304、AL520240、BM917547、BQ053108、AL582018、BG393757、AL520239、BF791881、BM019024、AL556319、BI092793、BI258203、AL559054、AL527465、AL558613、BU856820、AL524910、AL580393、BX333703、BQ063175、BG259986、BI335580、BG327660、BM556535、BI222927、BG251456、AL520887、BI224536、BI335105、AL524909、BQ053124、BI093258、BG745159、BX405984、AL515463、BE910713、AL518299、BQ054892、BQ053069、BI333817、AL518300、BU189533、BI260243、BF972427、BQ684815、BM695575、BQ652285、BQ649771、BQ647760、BQ647212、BQ645148、BG822442、AL581566、BQ652445、BQ649937、BE544515、AL577935、BX405983、BM927844、BE727635、AL515464、BU176676、BU931060、BU859159、BX366934、BX355022、BM800496、BM463356、BG389325、BU164161、BE388067、BX464574、BE778380、BF237902、BU158281、BM917445、BM809482
【０１０３】
Geminin：BM550773、AL522354、BI092791、BX375519、BX414734、AL562503、BI861855、BM471496、AL518006、BQ430578、AL580178、BG577005、BG032232、AL525229、AL518005、AL522353、CA417249、AU118695、BQ645204、BG612964、BI855710、BQ718513、BG577324、BI086620、AL558330、BG776051、BG777134、BE893489、BF967933、BG776192、AW996997、BF666338、BQ015308、BQ064691、CD366250、BE910343、BM699599、BG776218、BF029154、BU629613、CB992796、BG825264、BE613337、CB131959、CB049968、BQ772723、BE564333、BI759810、BF666672、BF808421、BF700297、BG337926、BE565866、BG776386、CD367234、BF213350、CB136099、BI830428、BG612435、BE535264、BQ575533、BF667576、BG505022、AA447810、CA442918、BU623074、BF696555、AA393139、CD708137、BF699912、BF967209、BF056288、CA503202、CA312813、BG530534、BF109418、AV756510、BG778341、AA235222、BI093913、BF248391、AI968057、CD686529、BU685799、BG777305、AV734242、AV689368、BF240393、AW006287、AI828103、BF003138、CB049969、BF947954、BF594599、BE048465、BG429246、BG180421、AI803434、AV734302、BE219705
【０１０４】
Mcm3：BM467763、AL551465、BQ066322、BQ061652、AL559830、BQ059704、BM471050、BU849776、AL545116、BQ063041、BU541430、BU860117、BM542415、AU124791、BU857116、BM453648、BQ056448、BM927480、BQ218351、BQ057647、BQ940737、AU119321、BX462455、BQ898140、CF995699、BI772155、AL549372、BQ214499、BU856617、BM007763、BI223143、BQ652945、BQ649476、BU509755、BQ058522、BQ641758、BQ064200、BG281527、AU133404、BE249947、BU601317、BU154249、BQ927115、BI457651、BX462766、BU558287、BQ051029、BM917594、AU134083、BM561561、CD656673、BQ422727、BQ058080、BM478599、BQ881515、BE795211、BI196606、BG034961、BE892181、BQ649956、BM479437、BG765473、AL527918、BE560376、BI261474、BI599305、BX348989、BE793456、BM461732、BE620320、BE783059、BE799563、BE561200、BQ064568、BE620857、BG681460、BE616575、AU124152、BM832703、BG392301、BG259417、AW083217、BI086286、BQ650935、BI259905、BG686972、CD642696、BI091236、CD655620、BI551396、BE778348、BG773437、BU193733、BE274144、BE891644、AW732422、AU131124、BG742232、BU178300、AU123260
【０１０５】
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【０１０６】
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【０１１７】
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【０１１８】
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【０１１９】
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【０１２０】
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【０１２１】
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【０１２２】
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【０１２３】
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【０１２４】
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【０１２５】
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【０１２６】
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【０１２７】
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【０１２８】
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【０１３０】
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【０１３７】
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【０１３８】
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【０１３９】
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【０１４０】
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【０１４１】
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【０１４２】
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【０１４３】
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【０１４４】
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【０１４５】
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【０１４６】
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【０１５５】
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【０１６５】
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【０１６６】
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【０１７０】
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【０１７５】
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【０１８４】
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【０１８５】
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【０１８６】
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【０１８７】
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【０１８８】
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【０１８９】
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【０１９０】
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【０１９１】
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【０１９２】
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【０１９３】
EndoV：BQ279208.1BM554738.1、BM911430.1、BI830073.1、BI829389.1、BG681481.1、BG819544.1、BI117355.1、BI551407.1、BQ287914.1、BQ050806.1、BQ024655.1、BQ021027.1、W87446.1、BM926784.1、BM128679.1、BM128571.1、BM128352.1、AA720808.1、AA452047.1、AA363057.1、AA351281.1、BU621053.1、BU553848.1、BU527982.1、BQ957094.1、AA056490.1、BQ923151.1、BQ923003.1、BQ772531.1、BQ435901.1、BQ429806.1、BQ429804.1、BQ427432.1、BQ417371.1、BQ342726.1、R14533.1、CB143295.1、AI370900.1、BX334744.2、BX355957.2、Z41683.1、AW157406.1、CK819308.1、CN288502.1、CN310874.1、CN310875.1、CN310876.1、AW975617.1、H09974.1、BE619534.1、BE905153.1、BE938460.1、BF686490.1、BF477753.1、AL541721.3、AL569045.3、BG749082.1、BI549266.1、BI550542.1、BI550562.1、BI837982.1、BI917934.1、BM007984.1、BM008131.1、BM043073.1、BM047737.1、BX092874.1、AI219827.1、AI249283.1、AA926664.1、AI223657.1、AI290823.1、AI300416.1、AI311040.1、AI349370.1、AI393803.1、AI307620.1、AI571214.1、AI635870.1、AI660440.1、AI681370.1、AI702794.1、AW001931.1、AW136860.1、AW204051.1、AW438764.1、BE041666.1、BE043347.1、BE049112.1、BE219425.1、BE219749.1、BE672512.1、BF194919.1、BF196166.1、BF718311.1、BF840896.1、BM662670.1、BM665527.1、BM671155.1、BM684408.1、BM689003.1、BM710007.1、BM711618.1、BM930887.1、AA451847.1、AA593804.1、AA617805.1、T96971.1
【０１９４】
KNTC2(NDC80)：BG612856.1、BG532554.1、BG531886.1、BI093871.1、BG500282.1、BI825656.1、BE561023.1、BE564344.1、BE565202.1、BE566742.1、BE903220.1、BQ233581.1、BQ425406.1、BF029347.1、CD557751.1、BU507911.1、BF977553.1、BF976962.1、BF700934.1、BF219086.1、BF244797.1、BF700668.1、BF246890.1、BF684028.1、BF667950.1、BF666100.1、BF665251.1、AU151690.2、BF540908.1、AU099103.1、BF576929.1,BG403284.1,BF589484.1、AL583281.3、AL583241.3、AL531915.3、AL531914.3、AL527360.3、BF984727.1、AL527307.3、BG257162.1、BF899120.1、BF994346.1、BF978548.1、BU633554.1、AA188980.1、AA188981.1、AA189047.1、AA211359.1、BU943322.1、AA249583.1、AA249666.1、CA311030.1、CA446863.1、AA312280.1、T89463.1、AA492580.1、AA628019.1、AA639709.1、AA700427.1、AA857356.1、AA878068.1、BG679506.1、BI087094.1、BI260526.1、N88235.1、BI861865.1、BM194061.1、BM453009.1、BM476696.1、BM806248.1、BM828736.1、BM995677.1、W72679.1、AL711170.1、AL710845.1、BQ307283.1、BQ307306.1、BQ776047.1、BQ776118.1、CN294243.1、CN294241.1、CN294240.1、CN294239.1、CN294238.1、CN294237.1、AW821289.1、AW955129.1、AW573107.1、AW449014.1、BP430527.1、AW069561.1、AI979323.1、BX453617.2、AI955047.1、AI954614.1、BX431751.2、BX372554.2、BX353230.2、BX351284.2、BX333981.2、AI913466.1、AI866885.1、BX284007.1、BF246242.1,AI660156.1、AI380253.1,BP369219.1 ,BF218992.1、BP282259.1、AU129601.1、BP283529.1、AI341287.1、BF084870.1、BP290528.1、BP242960.1、BP239153.1、CV030676.1、CN294245.1、CN294236.1、BF082771.1、BE503512.1、AI341285.1、BF038467.1、BE543964.1、CB150849.1、CB160181.1、BF001266.1、BE672102.1、CN294234.1、CN294233.1、R94766.1、CV363738.1、BE927464.1、AA911686.1、AV718407.2、BE940500.1、BE857720.1、BE889796.1、AV718036.1、BF687621.1、BF447144.1、CN294232.1、CN294235.1、CN294244.1、R92253.1
【０１９５】
本発明の好ましい態様においては、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）もしくは上記各ESTに対応するmRNAにおける、連続するRNA領域を一方の鎖とするRNAi効果を有する二本鎖RNA、を含むアポトーシス誘導剤を提供する。
【０１９６】
上述のように上記のいずれかに記載の遺伝子には、同一の遺伝子であっても種々の多型が含まれている場合がある。当業者においては、配列番号：１〜６３７、８１０〜９０８のいずれかに記載の塩基配列もしくは上記のEST配列に対し、例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子に関する公共の多型データベースからの情報を加味し、RNAi効果を有することが期待されるRNAの配列を適宜設計することができる。このようなRNAを含むアポトーシス誘導剤もまた本発明に含まれる。また、当業者においては、複数種作製された本発明の二本鎖RNAから、最適なRNAi効果を有するRNAを適宜選択してアポトーシス誘導剤とすることも可能である。
【０１９７】
本発明の上記「RNAi効果を有する二本鎖RNA」の具体例として、図１〜図４および図２８〜３２に記載の塩基配列（配列番号：７２４〜８０９、９７４〜１０６３のいずれかに記載の塩基配列）を該二本鎖RNAの一方の鎖とするsiRNA分子（配列番号：７２４〜８０９、９７４〜１０６３のいずれかに記載の塩基配列と、その相補鎖からなるsiRNA分子）を挙げることができる。即ち本発明の一つの態様としては、RNAi効果を有する二本鎖RNAの一方の鎖が配列番号：７２４〜８０９、９７４〜１０６３のいずれかに記載の塩基配列からなるsiRNA分子（配列番号：７２４〜８０９、９７４〜１０６３のいずれかに記載の塩基配列と、その相補鎖からなるsiRNA分子）を有効成分として含む、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤を提供する。
また、上記siRNA分子において二本鎖を形成する領域の一方のRNA配列は、必ずしも、上記の配列番号：７２４〜８０９、９７４〜１０６３のいずれかに記載の塩基配列と完全に同一であることに制限されない。例えば、該塩基配列において１もしくは複数の塩基が改変された配列からなる塩基配列を二本鎖RNAの一方の鎖とするsiRNA分子であっても、本発明の遺伝子の発現を抑制する機能を有するものであればよい。
即ち、本発明の好ましい態様において、RNAi効果を有する二本鎖RNAとは、該二本鎖の一方の鎖が配列番号：７２４〜８０９、または９７４〜１０６３のいずれかに記載の塩基配列において１もしくは複数の塩基が付加、欠失、置換された塩基配列であり、他方の鎖が該塩基配列と相補的な塩基配列であることを特徴とする二本鎖RNAであって、本発明の遺伝子の発現を抑制する機能を有する二本鎖RNAである。なお、上記「複数」とは、通常、少数を意味し、より具体的には、２〜１０を意味し、好ましくは２〜５を意味し、より好ましくは２〜３を意味する。
【０１９８】
また、本発明の好ましい態様としては、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の発現を抑制する化合物が以下の（ａ）または（ｂ）である、アポトーシス誘導剤を提供する。
（ａ）本発明の染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の転写産物、またはその一部に対するアンチセンス核酸
（ｂ）本発明の染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の転写産物を特異的に開裂するリボザイム活性を有する核酸
【０１９９】
本発明における「核酸」とはRNAまたはDNAを意味する。特定の内在性遺伝子の発現を阻害（抑制）する方法としては、アンチセンス技術を利用する方法が当業者によく知られている。アンチセンス核酸が標的遺伝子の発現を阻害する作用としては、以下のような複数の要因が存在する。すなわち、三重鎖形成による転写開始阻害、RNAポリメラーゼによって局部的に開状ループ構造が作られた部位とのハイブリッド形成による転写阻害、合成の進みつつあるRNAとのハイブリッド形成による転写阻害、イントロンとエキソンとの接合点におけるハイブリッド形成によるスプライシング阻害、スプライソソーム形成部位とのハイブリッド形成によるスプライシング阻害、mRNAとのハイブリッド形成による核から細胞質への移行阻害、キャッピング部位やポリ(A)付加部位とのハイブリッド形成によるスプライシング阻害、翻訳開始因子結合部位とのハイブリッド形成による翻訳開始阻害、開始コドン近傍のリボソーム結合部位とのハイブリッド形成による翻訳阻害、mRNAの翻訳領域やポリソーム結合部位とのハイブリッド形成によるペプチド鎖の伸長阻害、および発現制御領域と転写調節因子との相互作用部位とのハイブリッド形成による遺伝子発現阻害などである。このようにアンチセンス核酸は、転写、スプライシングまたは翻訳など様々な過程を阻害することで、標的遺伝子の発現を阻害する（平島および井上著、新生化学実験講座2 核酸IV遺伝子の複製と発現、日本生化学会編、東京化学同人、1993年、p.319-347）。
【０２００】
本発明で用いられるアンチセンス核酸は、上記のいずれの作用により染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の発現を阻害してもよい。一つの態様としては、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）のmRNAの5'端近傍の非翻訳領域に相補的なアンチセンス配列を設計すれば、遺伝子の翻訳阻害に効果的と考えられる。また、コード領域もしくは3'側の非翻訳領域に相補的な配列も使用することができる。このように、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の翻訳領域だけでなく、非翻訳領域の配列のアンチセンス配列を含む核酸も、本発明で利用されるアンチセンス核酸に含まれる。使用されるアンチセンス核酸は、適当なプロモーターの下流に連結され、好ましくは3'側に転写終結シグナルを含む配列が連結される。また臨床応用を考慮する場合、使用されるアンチセンス核酸は、通常、合成オリゴマーであり、ヌクレアーゼ分解に対する感受性を減らし、且つアンチセンス核酸としての活性を維持するために、リン酸エステル結合部のO（酸素）をS（硫黄）に置換したSオリゴ（ホスホロチオエート型オリゴヌクレオチド）の利用が一般に知られている。このSオリゴは現在ではアンチセンス薬として、直接患部に注入される臨床試験が行なわれている。本発明においてもこのSオリゴを好適に使用することができる。アンチセンス核酸の配列は、標的遺伝子またはその一部と相補的な配列であることが好ましいが、遺伝子の発現を有効に抑制できる限り、完全に相補的でなくてもよい。転写されたRNAは、標的遺伝子の転写産物に対して好ましくは90％以上、最も好ましくは95％以上の相補性を有する。アンチセンス核酸を用いて標的遺伝子の発現を効果的に抑制するには、アンチセンス核酸の長さは少なくとも15塩基以上であり、好ましくは100塩基以上であり、さらに好ましくは500塩基以上である。
【０２０１】
また、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の発現の阻害は、リボザイム、またはリボザイムをコードするDNAを利用して行うことも可能である。リボザイムとは触媒活性を有するRNA分子を指す。リボザイムには種々の活性を有するものが存在し、RNAを部位特異的に切断するリボザイムの設計も可能である。リボザイムには、グループIイントロン型やRNase Pに含まれるM1 RNAのように400ヌクレオチド以上の大きさのものもあるが、ハンマーヘッド型やヘアピン型と呼ばれる40ヌクレオチド程度の活性ドメインを有するものもある（小泉誠および大塚栄子、蛋白質核酸酵素、1990年、35、2191）。
【０２０２】
例えば、ハンマーヘッド型リボザイムの自己切断ドメインは、G13U14C15という配列のC15の3'側を切断するが、その活性にはU14とA9との塩基対形成が重要とされ、C15の代わりにA15またはU15でも切断され得ることが示されている（Koizumi, M.ら著、FEBS Lett、 1988年、228、228.）。基質結合部位が標的部位近傍のRNA配列と相補的なリボザイムを設計すれば、標的RNA中のUC、UUまたはUAという配列を認識する制限酵素的なRNA切断リボザイムが作出できる（Koizumi, M.ら著、FEBS Lett, 1988年、239, 285.、小泉誠および大塚栄子、蛋白質核酸酵素、1990年、35, 2191.、Koizumi, M.ら著、Nucl Acids Res、 1989年、17, 7059.）。
【０２０３】
また、ヘアピン型リボザイムも本発明の目的に有用である。このリボザイムは、例えばタバコリングスポットウイルスのサテライトRNAのマイナス鎖に見出される（Buzayan, JM., Nature, 1986年、323, 349.）。ヘアピン型リボザイムからも、標的特異的なRNA切断リボザイムを作出できることが示されている（Kikuchi, Y. & Sasaki, N., Nucl Acids Res, 1991, 19, 6751.、菊池洋, 化学と生物, 1992, 30, 112.）。このように、リボザイムを用いて本発明における染色体安定化関連遺伝子の転写産物を特異的に切断することで、該遺伝子の発現を阻害することができる。
【０２０４】
さらに本発明は、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質の機能（活性）を抑制する化合物を有効成分として含有する、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤に関する。
【０２０５】
本発明の染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質には、該タンパク質のアミノ酸配列において１若しくは複数のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列を含む、染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質の変異タンパク質もしくはホモログタンパク質であって、染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質と機能的に同等なタンパク質も含まれる。ここで「機能的に同等なタンパク質」とは、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質における機能（例えば、上述の（ａ）〜（ｓ）のいずれかの機能）と同様の機能を備えたタンパク質である。
【０２０６】
あるいは染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質のアミノ酸配列に対して、たとえば９０%以上、望ましくは９５%以上、更に望ましくは９９%以上の相同性を有するタンパク質を、染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質と機能的に同等なタンパク質として示すことができる。
【０２０７】
本発明の好ましい態様においては、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質の機能（活性）を抑制する化合物が、以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかに記載の化合物である、アポトーシス誘導剤を提供する。これらの化合物は、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質の機能もしくは活性を阻害する（低下させる）ことにより、癌細胞に対してアポトーシス誘導作用を有するものと考えられる。
（ａ）本発明の染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質に対してドミナントネガティブの性質を有する変異体タンパク質
（ｂ）本発明の染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質に結合する抗体
（ｃ）本発明の染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質に結合する低分子化合物
【０２０８】
上記（ａ）において「ドミナントネガティブの性質を有する変異体タンパク質」とは、内在性の野生型タンパク質の活性を消失もしくは低下させる機能を有する、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質変異体を指す。
【０２０９】
また上記（ｂ）の「抗体」は、当業者に公知の方法により調製することが可能である。ポリクローナル抗体であれば、例えば、次のようにして得ることができる。天然もしくは組換えの染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質、あるいはGSTとの融合タンパク質として大腸菌等の微生物において発現させたリコンビナントである染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質、またはその部分ペプチドをウサギ等の小動物に免疫し血清を得る。これを、例えば、硫安沈殿、プロテインAカラムおよびプロテインGカラム、DEAEイオン交換クロマトグラフィー、染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質や合成ペプチドをカップリングしたアフィニティーカラム等により精製することにより調製する。また、モノクローナル抗体であれば、例えば、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質若しくはその部分ペプチドをマウスなどの小動物に免疫を行い、同マウスより脾臓を摘出し、これをすりつぶして細胞を分離し、該細胞とマウスミエローマ細胞とをポリエチレングリコール等の試薬を用いて融合させ、これによりできた融合細胞（ハイブリドーマ）の中から、染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する抗体を産生するクローンを選択する。次いで、得られたハイブリドーマをマウス腹腔内に移植し、同マウスより腹水を回収し、得られたモノクローナル抗体を、例えば、硫安沈殿、プロテインAカラムおよびプロテインGカラム、DEAEイオン交換クロマトグラフィー、染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質や合成ペプチドをカップリングしたアフィニティーカラム等により精製することで、調製することが可能である。
【０２１０】
本発明の抗体は、本発明の染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質に結合し得るものであれば特に制限されず、上記ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体のほかに、ヒト抗体、遺伝子組み換えによるヒト型化抗体、さらにその抗体断片や抗体修飾物等も含まれる。
【０２１１】
抗体取得の感作抗原として使用される本発明の染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質は、その由来となる動物種に制限されないが哺乳動物、例えばマウス、ヒト由来のタンパク質が好ましく、特にヒト由来のタンパク質が好ましい。
【０２１２】
本発明において、感作抗原として使用されるタンパク質は、完全なタンパク質の他に該タンパク質の部分ペプチドであってもよい。タンパク質の部分ペプチドとしては、例えば、タンパク質のアミノ基（N）末端断片やカルボキシ（C）末端断片が挙げられる。本明細書における「抗体」とは通常、タンパク質の全長又は断片に反応する抗体を意味する。
【０２１３】
また、ヒト以外の動物に抗原を免疫して上記ハイブリドーマを得る他に、ヒトリンパ球、例えばEBウィルスに感染したヒトリンパ球をin vitroでタンパク質、タンパク質発現細胞又はその溶解物で感作し、感作リンパ球をヒト由来の永久分裂能を有するミエローマ細胞、例えばU266と融合させ、タンパク質への結合活性を有する所望のヒト抗体を産生するハイブリドーマを得ることもできる。本発明の抗体を人体に投与する目的（抗体治療）で使用する場合には、免疫原性を低下させるため、ヒト抗体やヒト型抗体が好ましい。
【０２１４】
染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質と結合することが既に知られている化合物として、例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子によってコードされるタンパク質に対するモノクローナルもしくはポリクローナル抗体を挙げることができる。
【０２１５】
本発明の染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の発現もしくは該遺伝子によってコードされるタンパク質の機能（活性）を抑制する化合物は、天然または人工の化合物のいずれであってもよい。通常、当業者に公知の方法を用いることによって製造または取得・単離可能な化合物である。例えば、有機化合物、無機化合物、核酸、タンパク質、ペプチド、糖などの単一化合物、あるいは、化合物ライブラリー、遺伝子ライブラリーの発現産物、細胞抽出物、細胞培養上清、発酵微生物産生物、海洋生物抽出物、植物抽出物等もしくは該抽出物から単離精製される化合物を挙げることができる。
【０２１６】
さらに本発明は、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤のスクリーニング方法を提供する。
本発明の上記方法の好ましい態様においては、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドと被検化合物との結合活性を指標とする方法である。通常、染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドと結合する化合物は、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質の機能を阻害する効果を有することが期待される。
【０２１７】
本発明の上記方法においては、まず、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドと被検化合物を接触させる。染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドは、被検化合物との結合を検出するための指標に応じて、例えば、染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドの精製された形態、細胞内または細胞外に発現した形態、あるいはアフィニティーカラムに結合した形態であり得る。この方法に用いる被検化合物は必要に応じて適宜標識して用いることができる。標識としては、例えば、放射標識、蛍光標識等を挙げることができる。
【０２１８】
本方法においては、次いで、染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドと被検化合物との結合活性を測定する。染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドと被検化合物との結合活性は、例えば、染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドに結合した被検化合物に付された標識によって測定することができる。また、細胞内または細胞外に発現している染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドへの被検化合物の結合により生じる該タンパク質の活性の変化を指標として測定することも可能である。
【０２１９】
本方法においては、次いで、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質またはその部分ペプチドと結合する被検化合物を選択する。
【０２２０】
本方法に用いる被検化合物としては、特に制限はない。例えば、天然化合物、有機化合物、無機化合物、核酸、タンパク質、ペプチド、糖などの単一化合物、並びに、化合物ライブラリー、遺伝子ライブラリーの発現産物、細胞抽出物、細胞培養上清、発酵微生物産生物、海洋生物抽出物、植物抽出物、人工作出化合物等が挙げられるが、これらに限定されない。
【０２２１】
本発明のスクリーニング方法の別の態様においては、まず染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）を発現する細胞もしくは細胞抽出液と、被検化合物を接触させる。上記「染色体安定化関連遺伝子を発現する細胞」としては、内因性の染色体安定化関連遺伝子を発現している細胞、または外来性の染色体安定化関連遺伝子が導入され、該遺伝子を発現している細胞を利用することができる。外来性の染色体安定化関連遺伝子が発現した細胞は、通常、該遺伝子を含む発現ベクターを宿主細胞へ導入することにより作製することができる。この発現ベクターは、当業者においては一般的な遺伝子工学技術によって作製することができる。本発明のスクリーニング方法において、染色体安定化関連遺伝子を発現する細胞として例えば、MCF7 (乳癌)、A549 (肺癌)、U2OS (骨肉腫)、C33A (子宮頚癌)、HT1080（繊維肉腫）、PA-1（卵巣の奇形癌）、Tera2（胎生期癌）、T24（膀胱癌）、K562（慢性骨髄性白血病）、Molt4（急性リンパ芽球性白血病）、A172（神経膠芽細胞腫）、HeLa（子宮頚癌）、HepG2 (肝癌)、ACC62 (メラノーマ)、KP4 (膵臓癌)、CaKi‐1 (腎臓癌)、MKN45 (胃癌)、LNcap (前立腺癌)、MDA-MB435 (乳癌)、EJ 1 （膀胱癌）、OVCAR3 （卵巣癌）等の各種腫瘍細胞を好適に使用することができる。
【０２２２】
上記染色体安定化関連遺伝子を発現する細胞への被検化合物の「接触」は、通常、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）を発現する細胞の培養液に被検化合物を添加することによって行うが、この方法に限定されない。被検化合物がタンパク質等の場合には、該タンパク質を発現するDNAベクターを、該細胞へ導入することにより、「接触」を行うことができる。
【０２２３】
次いで本方法においては、染色体安定化関連遺伝子の発現レベルを測定する。ここで「遺伝子の発現」には、転写および翻訳の双方が含まれる。遺伝子の発現レベルの測定は、当業者に公知の方法によって行うことができる。例えば、染色体安定化関連遺伝子を発現する細胞からmRNAを定法に従って抽出し、このmRNAを鋳型としたノーザンハイブリダイゼーション法またはRT-PCR法を実施することによって、該遺伝子の転写レベルの測定を行うことができる。また、上記の染色体安定化関連遺伝子を発現する細胞からタンパク質画分を回収し、該遺伝子によってコードされるタンパク質の発現をSDS-PAGE等の電気泳動法で検出することにより、遺伝子の翻訳レベルの測定を行うこともできる。さらに、上記遺伝子によってコードされるタンパク質に対する抗体を用いて、ウェスタンブロッティング法を実施することにより、該タンパク質の発現を検出し、遺伝子の翻訳レベルの測定を行うことも可能である。上記遺伝子によってコードされるタンパク質の検出に用いる抗体としては、検出可能な抗体であれば、特に制限はないが、例えばモノクローナル抗体、またはポリクローナル抗体の両方を利用することができる。
【０２２４】
本方法においては更に、被検化合物の非存在下において測定した場合（対照）と比較して、該発現レベルを低下させる化合物を選択する。このようにして選択された化合物は、癌細胞に対してアポトーシスを誘導する作用を有することが期待される。さらに、該化合物は、アポトーシス誘導を作用機序とする制癌剤（抗癌剤）となることが期待される。
【０２２５】
本発明の方法の更に別の態様においては、本発明の染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の発現レベルを低下させるような化合物を、レポーター遺伝子を利用してスクリーニングする方法である。
【０２２６】
本方法においては、まず、上記の染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の転写調節領域とレポーター遺伝子とが機能的に結合した構造を有するDNAを含む細胞または細胞抽出液と、被検化合物を接触させる。ここで「機能的に結合した」とは、上記の染色体安定化関連遺伝子の転写調節領域に転写因子が結合することにより、レポーター遺伝子の発現が誘導されるように、該遺伝子の転写調節領域とレポーター遺伝子とが結合していることをいう。従って、レポーター遺伝子が他の遺伝子と結合しており、他の遺伝子産物との融合タンパク質を形成する場合であっても、該遺伝子の転写調節領域に転写因子が結合することによって、該融合タンパク質の発現が誘導されるものであれば、上記「機能的に結合した」の意に含まれる。染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）のcDNA塩基配列に基づいて、当業者においては、ゲノム中に存在する該遺伝子の転写調節領域を周知の方法により取得することが可能である。
【０２２７】
本方法に用いるレポーター遺伝子としては、その発現が検出可能であれば特に制限されず、例えば、CAT遺伝子、lacZ遺伝子、ルシフェラーゼ遺伝子、およびGFP遺伝子等が挙げられる。「染色体安定化関連遺伝子の転写調節領域とレポーター遺伝子とが機能的に結合した構造を有するDNAを含む細胞」として、例えば、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の転写調節領域とレポーター遺伝子とが機能的に結合した構造を有するベクターが導入された細胞等が挙げられる。上記ベクターは、当業者においては一般的な遺伝子工学技術によって作製することができる。ベクターの細胞への導入は、一般的な方法、例えば、リン酸カルシウム沈殿法、電気パルス穿孔法、リポフェタミン法、マイクロインジェクション法等によって実施することができる。「染色体安定化関連遺伝子の転写調節領域とレポーター遺伝子とが機能的に結合した構造を有するDNAを含む細胞」には、染色体に該構造が挿入された細胞も含まれる。染色体へのDNA構造の挿入は、当業者に一般的に用いられる方法、例えば、ランダムインテグレーションや、相同組み換えを利用した遺伝子導入法により行うことができる。
【０２２８】
「染色体安定化関連遺伝子の転写調節領域とレポーター遺伝子とが機能的に結合した構造を有するDNAを含む細胞抽出液」とは、例えば、市販の試験管内転写翻訳キットに含まれる細胞抽出液に、染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）の転写調節領域とレポーター遺伝子とが機能的に結合した構造を有するDNAを添加したものを挙げることができる。
【０２２９】
本方法における「接触」は、「染色体安定化関連遺伝子の転写調節領域とレポーター遺伝子とが機能的に結合した構造を有するDNAを含む細胞」の培養液に被検化合物を添加する、または該DNAを含む上記の市販された細胞抽出液に被検化合物を添加することにより行うことができるが、これらの方法に限定されない。被検化合物がタンパク質の場合には、例えば、該タンパク質を発現するDNAベクターを、該細胞へ導入することにより接触を行うことも可能である。
【０２３０】
本方法においては、次いで、該レポーター遺伝子の発現レベルを測定する。レポーター遺伝子の発現レベルは、該レポーター遺伝子の種類に応じて、当業者に公知の方法により測定することができる。例えば、レポーター遺伝子がCAT遺伝子である場合には、該遺伝子産物によるクロラムフェニコールのアセチル化を検出することによって、レポーター遺伝子の発現量を測定することができる。レポーター遺伝子がlacZ遺伝子である場合には、該遺伝子発現産物の触媒作用による色素化合物の発色を検出することにより、また、ルシフェラーゼ遺伝子である場合には、該遺伝子発現産物の触媒作用による蛍光化合物の蛍光を検出することにより、さらに、GFP遺伝子である場合には、GFPタンパク質による蛍光を検出することにより、レポーター遺伝子の発現量を測定することができる。
【０２３１】
本方法においては、次いで、測定したレポーター遺伝子の発現レベルを、被検化合物の非存在下において測定した場合と比較して、低下させる化合物を選択する。このようにして選択された化合物は、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤となる。
【０２３２】
本発明の方法の別の態様においては、本発明の染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質の活性を指標とする、化合物のスクリーニング方法である。
【０２３３】
本方法においては、まず染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質、または該タンパク質を発現する細胞もしくは細胞抽出液と、被検化合物を接触させる。次いで、該タンパク質の活性を測定する。該タンパク質の活性としては、例えば、上記（ａ）〜（ｒ）に示した機能（活性）等を挙げることができる。当業者においては、スクリーニングにおいて指標とするタンパク質についての機能（活性）、および該機能（活性）の評価（測定）方法についての情報を、例えば、文献データベース等により適宜、入手することができる。
【０２３４】
一例を示せば、指標とされるタンパク質がMcm10である場合は、例えば、ARS(Autonomously replicating sequences)の挙動を二次元電気泳動で検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(MCB(1997)3261-3271.)。
【０２３５】
指標とされるタンパク質がOrc1である場合は、例えば、該タンパク質を含むOrc1-6の複合体形成、あるいはCaCl2存在下でのOrc1-6複合体の電気泳動的移動度の変化を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(1998)273,32421-32429.)。
【０２３６】
指標とされるタンパク質がOrc3である場合は、例えば、該タンパク質を含むOrc1-6の複合体形成、該タンパク質のOri特異的な結合を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JCB(1998)273,32421-32429.)。
【０２３７】
指標とされるタンパク質がCdc6である場合は、例えば、Cell-free DNA replication assayを用いて、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(EMBO(1998)17,7219-7229.)。
【０２３８】
指標とされるタンパク質がCdt1である場合は、例えば、該タンパク質とGemininとの結合を検出することによって、あるいはCell-free DNA replication assayを用いて、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Science(2000)290,2309-2312.)。
【０２３９】
指標とされるタンパク質がGemininである場合は、例えば、Cell-free DNA replication assayを用いたDNA複製阻害活性を検出することにより、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Cell(1998)93,1043-1053.)。
【０２４０】
指標とされるタンパク質がMcm3である場合は、例えば、該タンパク質を含むMcm2,3,5複合体によるMcm4,6,7のhelicase活性阻害活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(1998)273,8369-8375.)。
【０２４１】
指標とされるタンパク質がMcm4である場合は、例えば、該タンパク質を含むMcm4,6,7複合体によるssDNA結合活性、ATPase活性、Helicase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(1997)272,24508-24513.)。
【０２４２】
指標とされるタンパク質がMcm5である場合は、例えば、該タンパク質を含むMcm2,3,5複合体によるMcm4,6,7のhelicase活性阻害活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(1998)273,8369-8375.)。
【０２４３】
指標とされるタンパク質がMcm6である場合は、例えば、該タンパク質を含むMcm4,6,7複合体によるssDNA結合活性、ATPase活性、Helicase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(1997)272,24508-24513.)。
【０２４４】
指標とされるタンパク質がMcm7である場合は、例えば、該タンパク質を含むMcm4,6,7複合体によるssDNA結合活性、ATPase活性、Helicase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(1997)272,24508-24513.)。
【０２４５】
指標とされるタンパク質がMcm8である場合は、例えば、該タンパク質とMcm4,6,7複合体との結合を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Nucleic.Acids Res.(2003)31,570-579.)。
【０２４６】
指標とされるタンパク質がCdc7である場合は、例えば、MCM複合体を基質とした該タンパク質のリン酸化活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(EMBO(1997)16,4340-4351.)。
【０２４７】
指標とされるタンパク質がcdc5である場合は、例えば、該タンパク質の転写活性化能を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(1998)273,4666-4671.)。
【０２４８】
指標とされるタンパク質がPsf1である場合は、例えば、該タンパク質を含むPsf1-4とSld5によるGINS複合体形成、GINSによるDpb11,Sld3,Cdc47のOri配列への結合を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Genes&Dev. (2003)17,1153-1165.)。
【０２４９】
指標とされるタンパク質がPsf2である場合は、例えば、該タンパク質を含むPsf1-4とSld5によるGINS複合体形成、GINSによるDpb11,Sld3,Cdc47のOri配列への結合を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Genes&Dev. (2003)17,1153-1165.)。
【０２５０】
指標とされるタンパク質がPsf3である場合は、例えば、該タンパク質を含むPsf1-4とSld5によるGINS複合体形成、GINSによるDpb11,Sld3,Cdc47のOri配列への結合を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Genes&Dev. (2003)17,1153-1165.)。
【０２５１】
指標とされるタンパク質がCdc45である場合は、例えば、該タンパク質とMcm7、Pola p70との結合を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Eur.J.Biochem.265,936-943.)。
【０２５２】
指標とされるタンパク質がPola p180である場合は、例えば、該タンパク質を含むPola p180、p70、p58、p48による4量体形成、あるいはこの複合体のPrimerse、Polymerase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Eur.J.Biochem.222,781-793.)。
【０２５３】
指標とされるタンパク質がPola p70である場合は、例えば、該タンパク質を含むPola p180、p70、p58、p48による4量体形成、あるいはこの複合体のPrimase、Polymerase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Eur.J.Biochem.222,781-793.)。
【０２５４】
指標とされるタンパク質がPola Spp1(p58)である場合は、例えば、該タンパク質を含むPola p180、p70、p58、p48による4量体形成、あるいはこの複合体のPrimase、Polymerase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Eur.J.Biochem.222,781-793.)。
【０２５５】
指標とされるタンパク質がRPA70である場合は、例えば、該タンパク質のssDNAへの結合を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Nature(1997)385,176-181.)。
【０２５６】
指標とされるタンパク質がRPA34である場合は、例えば、該タンパク質のssDNAへの結合を検出することによって、あるいは該タンパク質を含むin vitro replication assayを用いて、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる。JBC(1990)265,3177-3182.
【０２５７】
指標とされるタンパク質がPCNAである場合は、例えば、該タンパク質を含むin vitro replication assayを用いて、、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC (1990) 265,3177-3182.)。
【０２５８】
指標とされるタンパク質がLigase1である場合は、例えば、該タンパク質を含むDNA ligation活性によって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(PNAS(1990)87,6679-6683.)。
【０２５９】
指標とされるタンパク質がPole Pol2である場合は、例えば、該タンパク質を含むPole精製標品のDNA合成活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(PNAS 1990 87: 6664-6668.)。
【０２６０】
指標とされるタンパク質がPole Dpb3である場合は、例えば、該タンパク質を含むPole精製標品のDNA合成活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(PNAS 1990 87: 6664-6668.)。
【０２６１】
指標とされるタンパク質がTopoisomerase1である場合は、例えば、plasmid DNAを基質とした該タンパク質のリラクシング活性を検出することよって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(PNAS(1988)85,2543-2547.)。 
【０２６２】
指標とされるタンパク質がTDP1である場合は、例えば、ssDNAの3’末端に結合させたチロシン残基の、該タンパク質による遊離活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Science(1999)286,552-555.)。
【０２６３】
指標とされるタンパク質がFEN1である場合は、例えば、5’-overhanging flap構造をもつ二本鎖DNAを基質とした、flap構造の除去活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Genomics(1995)25,220-225.)。
【０２６４】
指標とされるタンパク質がPold P125である場合は、例えば、該タンパク質とPold P68, P50, P12とのヘテロ4量体形成を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Biochemistry. 2002 41(44):13133-13142.)。
【０２６５】
指標とされるタンパク質がPole Dpb4である場合は、該タンパク質を含むPole精製標品のDNA合成活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(PNAS 1990 87: 6664-6668.)。
【０２６６】
指標とされるタンパク質がDNA2である場合は、例えば、ssDNA結合能、ATPase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(PNAS(1995)92,7642-7646.)。
【０２６７】
指標とされるタンパク質がATRである場合は、例えば、UV損傷部位をもった二本鎖DNAへの該タンパク質の結合、あるいはp53タンパク質を基質とした該タンパク質によるリン酸化を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(PNAS (2002) 99, 6673-6678.)。
【０２６８】
指標とされるタンパク質がChk1である場合は、例えば、p53タンパク質を基質とした該タンパク質によるリン酸化を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Genes Dev. (2000) 14, 289-300)。
【０２６９】
指標とされるタンパク質がNBS1である場合は、例えば、DNA損傷に応答した該タンパク質とMre11/Rad50との複合体形成を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Cell(1998)93,477-486.)。
【０２７０】
指標とされるタンパク質がHus1である場合は、例えば、DNA損傷に応答した該タンパク質とRad1,Rad9との複合体形成を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JCB(1999)274,567-570.)。
【０２７１】
指標とされるタンパク質がRad1である場合は、例えば、DNA損傷に応答した該タンパク質とRad1,Rad9との複合体形成を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JCB(1999)274,567-570.)。
【０２７２】
指標とされるタンパク質がMad2である場合は、例えば、該タンパク質とMad1との複合体形成を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Science274 (1996)246-248)。
【０２７３】
指標とされるタンパク質がCtf18である場合は、例えば、該タンパク質とCtf8,Dcc1との複合体形成を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(2003)30051-30056.)。
【０２７４】
指標とされるタンパク質がScc1である場合は、例えば、該タンパク質とSmc1,Smc3,Scc1との14S cohesin複合体形成を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JCB(2000)151,749-761.)。
【０２７５】
指標とされるタンパク質がScc3である場合は、例えば、該タンパク質とSmc1,Smc3,Scc1との14S cohesin複合体形成を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JCB(2000)151,749-761.)。
【０２７６】
指標とされるタンパク質がUNGである場合は、例えば、ssDNA中のdeoxyuridineを基質としたグリコシラーゼ活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(EMBO(1989)8,3121-3125.)。
【０２７７】
指標とされるタンパク質がMBD4である場合は、例えば、該タンパク質のメチル化CpG配列への結合活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(MCB(1998)18,6538-6547.)。
【０２７８】
指標とされるタンパク質がNTH1である場合は、例えば、該タンパク質のグリコシラーゼ活性やAP lyase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(PNAS(1997)94,109-114.)。
【０２７９】
指標とされるタンパク質がNEIL2である場合は、例えば、塩基に損傷をもったDNAを基質とした該タンパク質のAP lyase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(2002)277,30417-30420.)。
【０２８０】
指標とされるタンパク質がNEIL3である場合は、例えば、8-oxo, AP site, 5-ヒドロキシシトシンを含むDNAを基質とした該タンパク質のAP lyase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Nucleic Acids Res.(2002)316,853-866.)。
【０２８１】
指標とされるタンパク質がAPE2である場合は、例えば、該タンパク質のAP endonuclease活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JMB(2002)316,853-866.)。
【０２８２】
指標とされるタンパク質がPARP1である場合は、例えば、ADP-riboseを基質とした該タンパク質のニックDNA へのADP-ribose polymerase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(1990)35,21907-21913.)。
【０２８３】
指標とされるタンパク質がPNKである場合は、例えば、ologo(dT)を基質にしたpolynucleotide kinase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(1999)274,24176-24186.)。
【０２８４】
指標とされるタンパク質がPolbである場合は、例えば、該タンパク質のgap-filling polymerase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Biochemistry(1988)901-909.)。
【０２８５】
指標とされるタンパク質がMGMTである場合は、例えば、該タンパク質によるメチル化DNAからのメチル基転移反応を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(1990)265,14754-14762.)。
【０２８６】
指標とされるタンパク質がTDGである場合は、例えば、該タンパク質によるミスマッチチミジンの切断活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(1993)268,21218-21224.)。
【０２８７】
指標とされるタンパク質がMSH2である場合は、例えば、該タンパク質のミスマッチを含む二本鎖DNAへの結合を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Cancer Res.(1994)54,5539-5542.)。
【０２８８】
指標とされるタンパク質がPMS1である場合は、例えば、該タンパク質のDNA結合能、ATPase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Nucleic Acids Res. (2003) 31, 2025-2034.)。
【０２８９】
指標とされるタンパク質がPMS2である場合は、例えば、該タンパク質とMLH1との相互作用を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Hum.Mutat.19,108-113.)。
【０２９０】
指標とされるタンパク質がExonuclease1である場合は、例えば、該タンパク質のexonuclease活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Nucleic Acids Res.(1998)26,3762-3768.)。
【０２９１】
指標とされるタンパク質がXPCである場合は、例えば、該タンパク質のssDNAへの結合能を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(EMBO(1994)15,1831-1843.)。
【０２９２】
指標とされるタンパク質がRad23Aである場合は、例えば、該タンパク質のN末端での26S proteasomeとの相互作用、C末端でのRad4との結合を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Nature(1998)391,715-718.)。
【０２９３】
指標とされるタンパク質がRad23Bである場合は、例えば、該タンパク質のN末端での26S proteasomeとの相互作用、C末端でのRad4との結合を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Nature(1998)391,715-718.)。
【０２９４】
指標とされるタンパク質がCSAである場合は、例えば、該タンパク質とCSB,TFIIHとの相互作用を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Cell(1995)82,555-564.)。
【０２９５】
指標とされるタンパク質がCSBである場合は、例えば、該タンパク質のDNA依存的ATPase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(1997)272,1885-1890.)。
【０２９６】
指標とされるタンパク質がXPGである場合は、例えば、バブル構造をもつpartial duplexを基質とした該タンパク質のendonuclease活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Nature(1994)371,423-425.)。
【０２９７】
指標とされるタンパク質がXPFである場合は、例えば、該タンパク質とERCC1との複合体形成、stem-loop構造DNAを基質とした該タンパク質のendonuclease活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Cell(1996)86,811-822.)。
【０２９８】
指標とされるタンパク質がDDB1である場合は、例えば、該タンパク質のUV照射DNAへの結合を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(1993)268,21293-21300.)。
【０２９９】
指標とされるタンパク質がXAB2である場合は、例えば、該タンパク質とXPA, CSA, CSB, RNA polymeraseIIとの相互作用を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(2000)275,34931-34937.)。
【０３００】
指標とされるタンパク質がDDB2である場合は、例えば、該タンパク質のUV損傷DNAへの結合活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(DNA repair(2002)6,601-616.)。
【０３０１】
指標とされるタンパク質がTopoisomeraseIIIbである場合は、例えば、RecQ5 helicaseとの相互作用を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Nucleic Acids Res. (2000) 28, 1647-1655.)。
【０３０２】
指標とされるタンパク質がRad51である場合は、例えば、該タンパク質のssDNA依存性ATPase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(2002)277,14417-14425.)。
【０３０３】
指標とされるタンパク質がRad51Dである場合は、例えば、該タンパク質を含むRad51B/ Rad51C/ Rad51D/Xrcc2複合体のssDNAへの結合能、ssDNA依存的ATPase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Genes.Dev.(2001)15,329-3307.)。
【０３０４】
指標とされるタンパク質がXRCC2である場合は、例えば、該タンパク質を含むRad51B/ Rad51C/ Rad51D/Xrcc2複合体のssDNAへの結合能、ssDNA依存的ATPase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Nature(1999)401,397-399.)。
【０３０５】
指標とされるタンパク質がRad54である場合は、例えば、該タンパク質のDNA依存的ATPase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Curr.Biol(1996)6,828-838.)。
【０３０６】
指標とされるタンパク質がBRCA1である場合は、例えば、該タンパク質のE3 ubiquitin ligase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(EMBO J. (2002) 21, 6755-6762.)。
【０３０７】
指標とされるタンパク質がKu80である場合は、例えば、該タンパク質のDNA末端への結合、およびKu70との複合体形成を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(PNAS(1990)87,1777-1781.)。
【０３０８】
指標とされるタンパク質がXRCC4である場合は、例えば、該タンパク質とLigase4との結合、および該タンパク質のDNA結合を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Cell(1995)83,1079-1089.)。
【０３０９】
指標とされるタンパク質がUbc13である場合は、例えば、該タンパク質のユビキチンconjugating活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Cell(1999)96,645-653.)。
【０３１０】
指標とされるタンパク質がRad6Aである場合は、例えば、該タンパク質とRad18との複合体形成を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(PNAS(1991)88,8865-8869.)。
【０３１１】
指標とされるタンパク質がRad18である場合は、例えば、該タンパク質のDNA結合を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Nucleic.Acids Res.(2000)28,2847-2854.)。
【０３１２】
指標とされるタンパク質がFBH1である場合は、例えば、該タンパク質のhelicase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JCB(2002)277,24530-24537.)。
【０３１３】
指標とされるタンパク質がPoliである場合は、例えば、ミスマッチpartial duplex DNAからのprimer extension活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(2001)276,30615-30622.)。
【０３１４】
指標とされるタンパク質がDUT1である場合は、例えば、該タンパク質のdUTPase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(J. Biol. Chem., (1996) 271, 7745-7751.)。
【０３１５】
指標とされるタンパク質がTin2である場合は、例えば、該タンパク質とTRF1との相互作用を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Nat Genet(1999)23,405-412.)。
【０３１６】
指標とされるタンパク質がSir2である場合は、例えば、該タンパク質のヒストン脱アセチル化アッセイによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Gene(1999)234,161-168.)。
【０３１７】
指標とされるタンパク質がElg1である場合は、例えば、該タンパク質とRFC2、RFC3、RFC4、RFC5との複合体形成を検出する事によって、該タンパク質の機能を評価する事ができる（EMBO J. (2003) 22, 4304-4313.）。
【０３１８】
指標とされるタンパク質がTIMELESSである場合は、例えば、該タンパク質とmammalian clock Period proteins (mPERs)との複合体形成を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる（Science (2003) 302, 439-442.）。
【０３１９】
指標とされるタンパク質がPif1である場合は、例えば、該タンパク質のATP依存的helicase活性、DNA依存的ATPase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる。
【０３２０】
指標とされるタンパク質がMms4である場合は、例えば、該タンパク質とMus81タンパク質と複合体が有するendonuclease活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(2003)278,21715-21720.)。
【０３２１】
指標とされるタンパク質がTopoisomeraseIIIaである場合は、例えば、該タンパク質のtopoisomerase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Nucleic Acids Res.(2002)30,4823-4829.)。
【０３２２】
指標とされるタンパク質がMus81である場合は、例えば、該タンパク質とMms4タンパク質との複合体が有するendonuclease活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(JBC(2003)278,21715-21720.)。
【０３２３】
指標とされるタンパク質がSIRT1である場合は、例えば、該タンパク質のNAD依存性histone deacetylaseを検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Nature(2000)403,795-800.)。
【０３２４】
指標とされるタンパク質がESP1である場合は、例えば、該タンパク質のプロテアーゼ活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(FEBS Lett.(2002)528,246-250.)。
【０３２５】
指標とされるタンパク質がMPGである場合は、例えば、該タンパク質のglycosylase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Carcinogenesis(1996)17,2177-2182.)。
【０３２６】
指標とされるタンパク質がPollである場合は、例えば、該タンパク質のDNA polymerase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(J Biol Chem.(2000)275,31233-31238.)。
【０３２７】
指標とされるタンパク質がPolmである場合は、例えば、該タンパク質のDNA polymerase活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(J Biol Chem.(2002)277,44582-44587.)。
【０３２８】
指標とされるタンパク質がEndoVである場合は、例えば、該タンパク質のendonuclease活性を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる。
【０３２９】
指標とされるタンパク質がKNTC2 (NDC80)である場合は、例えば、該タンパク質とヒトNuf2タンパク質との複合体形成を検出することによって、該タンパク質の機能を評価（測定）することができる(Mol Biol Cell.(2005)16,519-531.)。
【０３３０】
次いで、被検化合物の非存在下において測定した場合と比較して、染色体安定化関連遺伝子によってコードされるタンパク質の活性を低下させる化合物を選択する。上記方法に使用する該遺伝子によってコードされるタンパク質は、変異を含まない全長タンパク質であることが好ましいが、該タンパク質と同等の活性を有するものであれば、一部のアミノ酸配列が置換および／あるいは欠失されたタンパク質であってもよい。
【０３３１】
また本発明は、本発明の癌細胞特異的アポトーシス誘導剤を有効成分として含有する抗癌剤（癌治療のための医薬組成物）を提供する。
【０３３２】
さらに本発明は、アポトーシス誘導剤もしくは抗癌剤を医薬組成物として製造する方法を提供する。本方法においてはまず、本発明の上記スクリーニング方法によって、癌細胞特異的アポトーシス誘導剤となる化合物を選択する。次いで、選択された化合物を薬学上許容される担体と混合する。これら薬学上許容される担体として、例えば界面活性剤、賦形剤、着色料、着香料、保存料、安定剤、緩衝剤、懸濁剤、等張化剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤等が挙げられるが、これらに制限されず、その他常用の担体を適宜使用することができる。
【０３３３】
本発明のアポトーシス誘導剤もしくは抗癌剤等の薬剤の製剤化にあたっては、常法に従い、必要に応じて上記担体を添加することができる。具体的には、軽質無水ケイ酸、乳糖、結晶セルロース、マンニトール、デンプン、カルメロースカルシウム、カルメロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、中鎖脂肪酸トリグリセライド、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油60、白糖、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類等を挙げることができる。
【０３３４】
上記薬剤の剤型の種類としては、例えば経口剤として錠剤、粉末剤、丸剤、散剤、顆粒剤、細粒剤、軟・硬カプセル剤、フィルムコーティング剤、ペレット剤、舌下剤、ペースト剤等、非経口剤として注射剤、坐剤、経皮剤、軟膏剤、硬膏剤、外用液剤等が挙げられ、当業者においては投与経路や投与対象等に応じた最適の剤型を選ぶことができる。染色体安定化関連遺伝子（例えば、上記のいずれかに記載の遺伝子）によってコードされるタンパク質を発現するDNA、染色体安定化関連遺伝子を抑制するアンチセンスRNA、リボザイム、siRNAを発現するDNAを生体内に投与する場合、レトロウイルス、アデノウイルス、センダイウイルスなどのウイルスベクターやリポソームなどの非ウイルスベクターを利用することができる。また、染色体安定化関連遺伝子を抑制する合成アンチセンス核酸や合成siRNAを生体内に投与する場合、リポソーム、高分子ミセル、カチオン性キャリアなどの非ウイルスベクターを利用することができる。投与方法としては、例えばin vivo法およびex vivo法を挙げることができる。
【０３３５】
本発明には、アポトーシス誘導作用を有する上記の医薬組成物も含まれる。
本発明の薬剤または医薬組成物の投与量は、剤型の種類、投与方法、患者の年齢や体重、患者の症状等を考慮して、最終的には医師の判断により適宜決定することができる。
【０３３６】
また本発明は、所望の癌細胞についてアポトーシスを誘導する方法に関する。該方法の好ましい態様としては、アポトーシスを誘導させたい細胞（対象細胞）へ、本発明のアポトーシス誘導剤を投与する（接触させる）工程を含む、該細胞のアポトーシスを誘導する方法である。例えば、本発明のアポトーシス誘導剤の有効成分が核酸である場合には、該薬剤（核酸）を対象細胞内へ導入させることが好ましい。
【０３３７】
さらに本発明は、本発明のアポトーシス誘導剤もしくは本発明の抗癌剤を個体（癌患者等）へ投与する工程を含む、癌の治療方法に関する。
上記の治療方法における個体とは、通常、癌疾患の患者を指し、特に制限されないが、好ましくはヒトである。個体への投与は、一般的には、例えば、動脈内注射、静脈内注射、皮下注射など当業者に公知の方法により行うことができる。投与量は、患者の体重や年齢、投与方法などにより変動するが、当業者であれば適当な投与量を適宜選択することが可能である。また、該化合物がDNAによりコードされうるものであれば、該DNAを遺伝子治療用ベクターに組込み、遺伝子治療を行うことも考えられる。遺伝子治療用ベクターとしては、例えば、レトロウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクターなどのウイルスベクターやリポソームなどの非ウイルスベクターなどを例示することができる。該ベクターを利用して、ex vivo法やin vivo法などにより患者へ目的のDNAの投与を行うことができる。また本発明の核酸を直接、個体へ投与することも可能である。
【０３３８】
さらに本発明は、染色体の安定化を阻害する化合物（例えば、本発明の遺伝子の発現、または該遺伝子によってコードされるタンパク質の機能を抑制する化合物等）のアポトーシス誘導剤もしくは抗癌剤の製造における使用に関する。
【０３３９】
なお、本明細書において引用された全ての先行技術文献は、参照として本明細書に組み入れられる。
【実施例】
【０３４０】
以下、実施例により本発明を具体的に説明するが、本発明は、これに限定されるものではない。
【０３４１】
本実施例において「染色体安定化に関連する遺伝子」として用いた遺伝子は、以下に示す９７個の遺伝子である：
APE2、ATR、BRCA1、Chk1、Cdc5、Cdc6、Cdc7、Cdc45、Cdt1、CSA、CSB、Ctf18、DDB1、DDB2、DNA2、DUT、Elg1、EndoV、Esp1、Exonuclease1、FBH1、FEN1、Geminin、Hus1、KNTC2 (NDC80)、Ku80、Ligase1、Mad2、MBD4、Mcm3、Mcm4、Mcm5、Mcm6、Mcm7、Mcm8、Mcm10、MGMT、MLH3、Mms4、MPG、MSH2、Mus81、NBS1、NEIL2、NEIL3、NTH1、Orc1、Orc3、PARP1、PCNA、Pif1、PMS1、PMS2、PNK、Pola p180、Pola p70、Pola Spp1(Prim2a)、Polb、Pold p125、Pole Dpb3、Pole Dpb4、Pole Pol2、Poli、Poll、Polm、Psf1、Psf2、Psf3、Rad1、Rad18、Rad23A、Rad23B、Rad51、Rad51D、Rad54、Rad6A、RPA34、RPA70、Scc1、Scc3、Sir2、SIRT1 (Sirtuin)、TDG、TDP1、TIMELESS、Tin2、Topoisomerase I、Topoisomerase IIIa、Topoisomerase IIIb、Ubc13、UNG、XAB2、XPC、XPF、XPG、Xrcc2、XRCC4
【０３４２】
〔実施例１〕  細胞培養
ヒト培養細胞として、HeLa（ヒト子宮頸部癌細胞）、TIG3（正常二倍体線維芽細胞)を使用した。これらのヒト培養細胞を10％ 牛胎児血清、50μg/mlゲンタマイシンを含むDulbecco's modified Eagle's mediumで37度、5％ CO2条件下で培養した。
【０３４３】
〔実施例２〕  染色体安定化に関連する遺伝子の発現抑制が癌細胞の増殖に及ぼす影響の検討
染色体安定化に関連する遺伝子の発現抑制が癌細胞の増殖に及ぼす影響を検討する目的で、上記各遺伝子に対するsiRNAを選定した。siRNAの合成は、株式会社キアゲン（東京）および、Dhamacon, Inc. (Colorado, USA)において行われた。
上記各遺伝子のsiRNA配列を図１〜４の「siRNA配列」の列に示す。なお、配列表にはセンス鎖のみ記載し、対応するアンチセンス鎖は配列表から省略した。また、各siRNA配列の「dTdT」の記載は配列表では「TT」と省略した。
【０３４４】
これらsiRNAをヒト子宮頸部癌由来HeLa細胞に導入した。具体的には、siRNAのトランスフェクションを行う24時間前に、24ウエルプレートにHeLa細胞を播種して生着させ、20−50％コンフレントの状態でトランスフェクションを行った。トランスフェクション試薬として、Oligofectoamine (Invitrogen)を使用し、添付のマニュアルに従ってトランスフェクションを行った。導入48時間後に上記各遺伝子のmRNAの発現をTaqman PCRにより定量した。
【０３４５】
詳しくは、siRNAをトランスフェクション後、48時間の細胞から、RNeasy Mini Kit（Qiagen）を用いて、全RNAを抽出した。定量的PCRには、ABI PRISM 7000 Sequence Detection System （Applied Biosystems）を用いた。上記各遺伝子および、β-アクチン遺伝子のRT-PCR用プライマーおよび、TaqManプローブを、Applied Biosystemsより購入した。RT-PCR反応試薬として、TaqMan One-Step RT-PCR Master Mix Reagents Kit (Applied Biosysytems)を用い、添付のマニュアルに従いRT-PCRを行った。β-アクチンを標準として用いて、比較定量を行った。
【０３４６】
コントロールRNA（NS）を導入した細胞における各mRNAの発現を100%として、各siRNAを導入した細胞における各mRNAの発現を比較したところ、図１〜４の「HeLa細胞における遺伝子発現抑制」の列に示すように、各遺伝子に対するsiRNAはそれぞれのmRNA発現を効率的に抑制した。
【０３４７】
〔実施例３〕  HeLa細胞の生存率
実施例２で選定した上記各遺伝子に対するsiRNAをそれぞれHeLa細胞に導入し、導入４日後の細胞生存率をMTTアッセイにより調べた。導入96時間後の生細胞数を、生細胞数測定試薬SF（ナカライテスク）を用いて測定した。
その結果、図１〜４の「MTTアッセイ（HeLa細胞）」の列に示すように、上記各遺伝子のsiRNAを導入したHeLa細胞において、顕著な生存率の低下が認められた。
【０３４８】
〔実施例４〕  siRNAのHeLa細胞におけるアポトーシス誘導効果
上記各遺伝子に対するsiRNAを導入したHeLa細胞における生存率の低下がアポトーシスによるものかどうかを調べた。各遺伝子に対するsiRNAをそれぞれHeLa細胞に導入し、TUNEL法を用いて導入48時間後のHeLa細胞におけるアポトーシス誘導を検討した。
【０３４９】
結果、図１〜４の「Tunel法」の列、および図５から図９の写真に示すように、上記各遺伝子に対するsiRNAを導入したHeLa細胞全てにおいて、顕著にアポトーシスの誘導が認められた。一方、コントロールRNA（NS）が導入されたHeLa細胞ではアポトーシスの誘導は認められなかった（図５の左上「非特異的」）。
即ち、本発明の上記の各遺伝子の発現を抑制することにより、効果的なアポトーシスの誘導が起こることが明らかとなった。
【０３５０】
〔実施例５〕  siRNAが正常細胞の増殖に及ぼす影響
上記各遺伝子に対するsiRNAが正常細胞であるヒト胎児肺由来二倍体線維芽細胞株TIG3細胞の増殖に及ぼす影響を検討した。トランスフェクション試薬としてLipofectoamine2000 (Invitrogen)を用い、TIG3細胞に上記各遺伝子に対するsiRNAをそれぞれ導入し、導入48時間後に上記各遺伝子のmRNAの発現をTaqman PCRにより測定した。この実験ではコントロールRNA（NS）を導入したTIG3細胞における各mRNAの発現を100%として、各siRNAを導入したTIG3細胞における各mRNAの発現を比較した。
【０３５１】
その結果、図１〜４の「TIG3細胞における遺伝子発現抑制」の列に示すように、各siRNAを導入したTIG3細胞では上記各遺伝子のmRNAの発現は、コントロールRNA（NS）を導入したTIG3細胞におけるこれらのmRNAの発現と比較して、顕著に抑制されていた。
【０３５２】
〔実施例６〕  TIG3細胞の生存率
上記のsiRNAをそれぞれTIG3細胞に導入し、導入４日後の細胞生存率をMTTアッセイにより調べた。その結果、図１〜４の「MTTアッセイ（TIG3細胞）」の列に示すように、上記各遺伝子に対するsiRNAを導入したTIG3細胞の生存率は、該siRNAを導入したHeLa細胞の生存率と比較して高く、顕著な低下は認められなかった。
上述の結果から、本発明の遺伝子の発現を抑制することによって、癌細胞特異的にアポトーシスが誘導されるものと考えられる。
【０３５３】
〔実施例７〕  抗シングル鎖DNA抗体を用いたゲノム崩壊過程の解析
anti-ssDNA（抗シングル鎖DNA）抗体は、一本鎖DNAを特異的に認識する抗体である。本来、二重鎖からなるDNAにおいて、DNA損傷等の染色体不安定化によりゲノム構造が崩壊すると、部分的に一本鎖領域が露出されると言われている。したがって本抗体を用いることにより、このゲノムの崩壊過程を特異的に認識し、可視化することが可能である。
【０３５４】
スライドガラス上にHeLa細胞を播種し、上記各遺伝子に対するsiRNAをトランスフェクションした。siRNA導入約３０時間後に細胞をホルマリンにて固定し、一次抗体としてanti-ssDNA抗体を反応させた。anti-ssDNA抗体に対する蛍光標識抗体を二次抗体として用い、共焦点レーザー顕微鏡にて観察した。その結果、図１０〜２７に示すように、一本鎖DNAを有する核が緑色に染色された。
即ち、上記の各遺伝子の発現を抑制することにより、一本鎖DNAの生成を伴うDNA損傷が生じることが確認された。
【０３５５】
〔実施例８〕  細胞培養
下記の実施例においては、「染色体安定化に関連する遺伝子」として、以下に示す１１個の遺伝子を用いた。
Pif1、Mms4、TopoisomeraseIIIa、Mus81、SIRT1 (Sirtuin)、Esp1、MPG、Poll、Polm、EndoV、KNTC2(NDC80)
また、ヒト培養細胞として、実施例１に記載のHeLa細胞およびTIG3細胞の他に、正常細胞としてヒト皮膚由来二倍体線維芽細胞(HDF細胞)を使用した。培養は、実施例１と同様の条件にて行った。
【０３５６】
〔実施例９〕  染色体安定化に関連する遺伝子の発現抑制が癌細胞の増殖に及ぼす影響の検討
染色体安定化に関連する上記１１個の遺伝子の発現抑制が癌細胞の増殖に及ぼす影響を検討する目的で、上記各遺伝子に対するsiRNAを選定した。siRNAの合成は、実施例２と同様に行った。
上記１１個の各遺伝子のsiRNA配列を図２８〜３２の「siRNA配列」の列に示す。なお、配列表にはセンス鎖のみ記載し、対応するアンチセンス鎖は配列表から省略した。
これらsiRNAをHeLa細胞へ導入した。具体的には、実施例２に記載の条件と同様にして実施した。導入48時間後に上記11遺伝子のmRNAの発現をTaqman PCRにより定量した。定量方法は実施例２と同様にして行った。
コントロールRNA（NS）を導入した細胞における各mRNAの発現を100%として、各siRNAを導入した細胞における各mRNAの発現を比較したところ、図２８〜３０の「40nM HeLa細胞における遺伝子発現抑制」の列、図３１のHeLa細胞における「mRNA発現」の列、あるいは図３２のHeLa細胞における「発現」の列に示すように、各遺伝子に対するsiRNAはそれぞれのmRNA発現を効率的に抑制した。
【０３５７】
〔実施例１０〕  HeLa細胞の生存率
上記１１個の各遺伝子に対するsiRNAをそれぞれHeLa細胞に導入し、導入４日後の細胞生存率をMTTアッセイにより調べた。導入96時間後の生細胞数を、生細胞数測定試薬SF（ナカライテスク）を用いて測定した。
その結果、図２８〜３０の「40nM HeLa細胞における増殖抑制」の列、図３１のHeLa細胞における「増殖抑制」の列、あるいは図３２のHeLa細胞における「増殖」の列に示すように、上記各遺伝子のsiRNAを導入したHeLa細胞において、顕著な生存率の低下が認められた。
【０３５８】
〔実施例１１〕  siRNAのHeLa細胞におけるアポトーシス誘導効果
上記１１個の各遺伝子に対するsiRNAを導入したHeLa細胞における生存率の低下がアポトーシスによるものかどうかを調べた。各遺伝子に対するsiRNAをそれぞれHeLa細胞に導入し、TUNEL法を用いて導入48時間後のHeLa細胞におけるアポトーシス誘導を検討した。
結果、図３１のHeLa細胞における「アポトーシス」の列、図３２のHeLa細胞における「アポトーシス」の列、さらに図３３および３４の「HeLa細胞」の写真、および図３５のHeLa細胞のTUNEL染色の写真に示すように、上記各遺伝子に対するsiRNAを導入したHeLa細胞全てにおいて、顕著にアポトーシスの誘導が認められた。
即ち、本発明の上記の各遺伝子の発現を抑制することにより、効果的なアポトーシスの誘導が起こることが明らかとなった。
【０３５９】
〔実施例１２〕  siRNAが正常細胞の増殖に及ぼす影響
上記１１個の各遺伝子に対するsiRNAが正常細胞であるヒト胎児肺由来二倍体線維芽細胞株TIG3細胞あるいはヒト皮膚繊維芽細胞株HDF細胞の増殖に及ぼす影響を検討した。トランスフェクション試薬としてLipofectoamine2000 (Invitrogen)を用い、TIG3細胞あるいはHDF細胞に上記各遺伝子に対するsiRNAをそれぞれ導入し、導入48時間後に上記各遺伝子のmRNAの発現をTaqman PCRにより測定した。この実験ではコントロールRNA（NS）を導入したTIG3細胞あるいはHDF細胞における各mRNAの発現を100%として、各siRNAを導入したTIG3細胞あるいはHDF細胞における各mRNAの発現を比較した。
【０３６０】
その結果、図２８〜３０の「40 nM TIG3細胞における遺伝子発現抑制」の列、図３１のHDF細胞における「mRNA発現」の列、あるいは図３２のHDF細胞における「発現」の列に示すように、各siRNAを導入したTIG3細胞あるいはHDF細胞では上記各遺伝子のmRNAの発現は、コントロールRNA（NS）を導入したTIG3細胞あるいはHDF細胞におけるこれらのmRNAの発現と比較して、顕著に抑制されていた。
【０３６１】
〔実施例１３〕  TIG3細胞あるいはHDF細胞の生存率
上記１１個の各遺伝子のsiRNAをそれぞれTIG3細胞あるいはHDF細胞に導入し、導入４日後の細胞生存率をMTTアッセイにより調べた。その結果、図２８〜３０の「40 nM TIG3細胞における増殖抑制」の列、図３１のHDF細胞における「増殖抑制」の列、あるいは図３２のHDF細胞の「増殖」の列に示すように、上記各遺伝子に対するsiRNAを導入したTIG3細胞あるいはHDF細胞の生存率は、該siRNAを導入したHeLa細胞の生存率と比較して高く、顕著な低下は認められなかった。
上述の結果から、本発明の遺伝子の発現を抑制することによって、癌細胞特異的にアポトーシスが誘導されるものと考えられる。
【０３６２】
〔実施例１４〕  抗シングル鎖DNA抗体を用いたゲノム崩壊過程の解析
スライドガラス上にHeLa細胞を播種し、Pif1、Mms4、TopoisomeraseIIIa、Mus81、SIRT1 (Sirtuin)、Esp1、MPG、Poll、Polm、EndoVの各遺伝子に対するsiRNAをトランスフェクションした。siRNA導入約３０時間後に細胞をホルマリンにて固定し、一次抗体としてanti-ssDNA抗体を反応させた。anti-ssDNA抗体に対する蛍光標識抗体を二次抗体として用い、共焦点レーザー顕微鏡にて観察した。その結果、図３６に示すように、一本鎖DNAを有する核が緑色に染色された。
即ち、上記の各遺伝子の発現を抑制することにより、一本鎖DNAの生成を伴うDNA損傷が生じることが確認された。
【産業上の利用可能性】
【０３６３】
本発明の、細胞における染色体安定化を阻害する化合物、あるいは、染色体安定化に関与する遺伝子の機能を阻害する化合物は、癌細胞特異的なアポトーシス誘導作用を有する。該化合物を含む医薬組成物は、アポトーシス誘導作用を機序とする副作用の少ない抗癌剤となるものと考えられる。本発明によって、染色体安定化に関する遺伝子を標的としたアポトーシス誘導作用を機序とする癌細胞特異的な抗癌剤が初めて提供された。
【０３６４】
ある化合物についてアポトーシス誘導作用を有することが分かった場合であっても、正常細胞に対するアポトーシス誘導作用の有無が不明な化合物は、医薬品として使用することは難しい。該化合物が正常細胞においてもアポトーシス誘導作用が見られる場合、副作用の危険を伴うからである。即ち、アポトーシス誘導作用が癌細胞特異的なものでなければ、実際に医薬品として使用することは、通常困難である。本発明の薬剤（化合物）は、アポトーシス誘導作用が癌細胞特異的である点で、非常に実用的かつ実効性の高い薬剤であると言える。
【０３６５】
また、染色体安定化の阻害により、癌細胞特異的にアポトーシスが誘導されるメカニズムについて、本発明者らによって見出された知見から、以下のように考察することが可能である。
【０３６６】
多くの癌細胞では癌抑制遺伝子であるp53に突然変異や欠損のあることが知られており、またＤＮＡ損傷チェックポイント機構に異常が生じて癌化するケースも知られている。p53やＤＮＡ損傷チェックポイント機構の異常な癌細胞では、機能的な染色体安定化遺伝子の発現がsiRNA等により抑制され機能しなくなると、染色体安定化機構が破綻して染色体ＤＮＡに生じた損傷を修復することができず、このような細胞では、修復されずに残っているＤＮＡ損傷が原因でアポトーシスが誘導されるものと考えられる。一方、二倍体線維芽細胞のような正常細胞では、機能的な染色体安定化遺伝子の発現がsiRNA等により抑制され機能しなくなると、p53やＤＮＡ損傷チェックポイント機構の作用により細胞周期が一時的に停止して、染色体ＤＮＡに生じた損傷が修復されるものと考えられる。
【０３６７】
本発明は、癌細胞特異的なアポトーシス誘導剤を提供したことに加えて、癌細胞特異的なアポトーシス誘導のメカニズムの解明における非常に有用な学術的な知見を提供するものである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【配列表】
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