(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）成分を、１０〜８５：１０〜８５：５〜６０の質量比（但し、（Ａ）＋（Ｂ）＋（Ｃ）＝１００とする）で含有し、且つ（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）の３成分の合計した含有量が、２０質量％以上であることを特徴とするβグルカン組成物を有効成分とする血糖値上昇抑制剤。
（Ａ）分子量が５０万以上の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｂ）分子量が２万以上５０万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｃ）分子量が５００以上２万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
【請求項２】
上記（Ｃ）成分が、下記の（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分からなり、該（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分を１５〜８５：８５〜１５の質量比で含有することを特徴とする請求項１記載の血糖値上昇抑制剤。
（Ｃ１）分子量が５００以上６０００未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｃ２）分子量が６０００以上２万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
【請求項３】
澱粉類及び糖類の合計した含有量が８０質量％以下である請求項１又は２記載の血糖値上昇抑制剤。
【請求項４】
下記の（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）成分を、１０〜８５：１０〜８５：５〜６０の質量比（但し、（Ａ）＋（Ｂ）＋（Ｃ）＝１００とする）で含有し、且つ（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）の３成分の合計した含有量が、２０質量％以上であることを特徴とするβグルカン組成物を有効成分とするインスリン分泌促進剤。
（Ａ）分子量が５０万以上の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｂ）分子量が２万以上５０万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｃ）分子量が５００以上２万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
【請求項５】
上記（Ｃ）成分が、下記の（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分からなり、該（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分を１５〜８５：８５〜１５の質量比で含有することを特徴とする請求項４記載のインスリン分泌促進剤。
（Ｃ１）分子量が５００以上６０００未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｃ２）分子量が６０００以上２万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
【請求項６】
澱粉類及び糖類の合計した含有量が８０質量％以下である請求項４又は５記載のインスリン分泌促進剤。
【請求項７】
血糖値上昇抑制剤又はインスリン分泌促進剤用βグルカン組成物を製造する方法であって、
下記の（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）成分を、１０〜８５：１０〜８５：５〜６０の質量比（但し、（Ａ）＋（Ｂ）＋（Ｃ）＝１００とする）で含有し、且つ（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）の３成分の合計した含有量が、２０質量％以上となるように、βグルカンの分子量分布が異なる２種以上の穀類粉抽出物を混合することを特徴とする、βグルカン組成物の製造方法。
（Ａ）分子量が５０万以上の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｂ）分子量が２万以上５０万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｃ）分子量が５００以上２万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
【請求項８】
血糖値上昇抑制剤又はインスリン分泌促進剤用βグルカン組成物を製造する方法であって、
下記の（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）成分を、１０〜８５：１０〜８５：５〜６０の質量比（但し、（Ａ）＋（Ｂ）＋（Ｃ）＝１００とする）で含有し、且つ（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）の３成分の合計した含有量が、２０質量％以上となるように、穀類粉と穀類粉抽出物を混合することを特徴とするβグルカン組成物の製造方法。
（Ａ）分子量が５０万以上の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｂ）分子量が２万以上５０万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｃ）分子量が５００以上２万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
【請求項９】
上記穀類粉が、分級操作によりβ−１、３−１、４−グルカン含量が高められたものであることを特徴とする請求項８記載のβグルカン組成物の製造方法
【請求項１０】
糊化度が２５％以上となるように糊化処理する工程を含むことを特徴とする請求項８又は９記載のβグルカン組成物の製造方法
【請求項１１】
上記穀類粉及び／又は穀類粉抽出物が、加水分解処理されたものであることを特徴とする請求項７〜１０の何れか１項に記載のβグルカン組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規なβグルカン組成物及びその製造方法、該βグルカン組成物を含有する飲食品、該βグルカン組成物を有効成分とする医薬品に関する。
【背景技術】
【０００２】
生活習慣病の一つである二型糖尿病は、近年わが国において患者数が増加しており、糖尿病境界領域に該当する人（耐糖能異常を呈し、糖尿病の可能性を否定できない人)を含めると既に１０００万人を超えたとされ、糖尿病患者のケアと共に、この糖尿病境界領域に該当する人を糖尿病患者にさせない糖尿病予防が重要な課題となっている。
【０００３】
インスリンは血糖値降下作用を示すホルモンであり、食事中に含まれる澱粉類や糖類（糖類）の摂取により血中グルコース濃度が増大することによって膵臓のランゲルハンス島β細胞より分泌され、血糖値上昇を調節する作用を有する。糖尿病患者ではこのインスリン分泌が抑制されるため、食後に血糖値が低下しないことから様々な病態が発症する。従って、糖尿病患者においてはインスリンの分泌を促進することが必要である。
【０００４】
また、耐糖能異常を呈する人においては、空腹時(絶食時)の血糖値は健常人と同様である場合が多いが、経口ブドウ糖負荷試験（ＯＧＴＴ）を実施した場合、健常人よりも高い血糖値パターンをとる(負荷後２時間後で血糖値１４０ｍｇ／ｄｌ以上２００ｍｇ／ｄｌ以下)ことが特徴である。
【０００５】
この耐糖能異常により引き起こされる高血糖状態、高血糖状態の持続、或いは急激な血糖値の変化（急激な上昇や低下）は、糖尿病境界領域に該当する人が糖尿病患者へ移行する場合の危険因子として考えられており、血糖値の急激な上昇を抑制することが重要であるとされている。
【０００６】
上記のような理由から、食後に引き起こされる急激な血糖値の上昇を抑制し、糖尿病境界領域に該当する人が糖尿病患者へ移行するのを遅らせるためには、日常的に摂取する飲食品によって耐糖能異常を改善し、ひいては糖尿病を予防することができる飲食品が有用であり、その開発が近年求められている。
【０００７】
ここで、オーツ麦や大麦等の穀類やキノコや酵母等に多く含まれているβグルカンが血糖値上昇抑制効果やコレステロール低下作用を有しており、生活習慣病の予防に有効であることが知られている。
例えば、大麦やオーツ麦等の穀類粉の摂取によって食後血糖値の上昇が抑制され（例えば、非特許文献１及び２参照）、その作用がβグルカン含有量と相関する（例えば、非特許文献３参照）ことが報告されており、更には、これらの穀類から抽出されβグルカン含有量が高められた穀類粉抽出物によって、血糖値上昇抑制効果や血中コレステロール低下の効果を検証した報告例もある（例えば、非特許文献４参照）。そしてこのような穀類βグルカンによる血糖値上昇抑制は、糖の吸収遅延効果によるものであるとされている(例えば、非特許文献２、５及び６参照）。
【０００８】
従って、血糖値上昇抑制効果を得るためには、βグルカンを含む大麦粉やオーツ麦等の穀類粉を摂取すること等が有効であると考えられる。しかし、穀類粉は水溶性が低いため日常的に摂取する飲食品には不適当であるという問題や、通常の穀類粉に含まれるβグルカン含量は低いため、効果を発揮するに足りる量を摂取しようとすれば大量に摂取しなければならないという難点があり、そのため、βグルカンを濃縮した穀類粉や穀類粉抽出物を利用するのが有効とされてきた。（例えば、特許文献１、２及び３参照）。
【０００９】
しかし、最近になって、βグルカンの生理機能性は、βグルカンの物性、分子量、含有量等に影響されることも判ってきた（例えば、非特許文献7参照）。しかし、βグルカンの分子量分布と血糖値上昇抑制効果等をはじめとする生理機能性評価との関係については未だ知られていなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特開２００３−０８１９９９号公報
【特許文献２】特開２００５−０８２５１７号公報
【特許文献３】特開２００３−２８６１７５号公報
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Bourdon I, Yokoyama W, Davis P, Hudson C, Backus R, Richter D, Knuckles B, Schneeman BO., Am J Clin Nutr 69, 55-63 (1999)
【非特許文献２】M. E. Pick, Z. J. Hawrysh, M. I. Gee and E. Toth, International Journal of Food Sciences and Nutrition Vol. 49, No. 1, 71-78（1998）
【非特許文献３】Yokoyama, W.H., Hudson, C.A., Knuckles, B.E., Chiu, M.C.M, Sayre, R.N., Turnlans, J.R. and B.O. Schneeman, Cereal Chemistry 74, 293-296 (1997)
【非特許文献４】Biorklund M, van Rees A, Onning G Eur. J. Clin. Nutr. Vol. 59, 1272-1281 (2005)
【非特許文献５】P Wursch and FX Pi-Sunyer., Diabetes Care 20, 1774-1780 (1997)
【非特許文献６】池上幸江、土橋文江、中村カホル、印南  敏  日本栄養・食糧学会誌 Vol.44 No.6 447-454（1991）
【非特許文献７】Wood PJ, Braaten JT, Scott FW, Riedel KD, Wolynetz MS, Collins MW, Br J Nutr Vol. 72,731-743 (1994)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
従って、本発明の目的は、インスリン分泌促進、血糖値上昇抑制等糖尿病改善に優れた効果を示し、水溶性が良好であるβグルカン組成物を提供することにある。また、本発明の目的は、該特徴を有するβグルカン組成物を、簡単な操作で且つ短時間に得ることができる製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明者らは、βグルカンの分子量に着目し、様々な分子量のβグルカン組成物、更には様々な分子量分布を持つβグルカン組成物の血糖値上昇抑制効果やインスリン分泌促進効果を検証した結果、驚くべきことに、従来から知られている高分子量のβグルカン分子単独よりも、これらに加えて低分子量のβグルカン分子を一定割合で含有するβグルカン組成物、即ち、高分子領域のβグルカン分子と低分子領域のβグルカン分子を合わせもつ、より幅広い分子量分布をもつβグルカン組成物がより優れた効果を示すことを知見し、本発明に至ったものである。
【００１４】
本発明は、上記知見から得られたものであり、  下記の（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）成分を、１０〜８５：１０〜８５：５〜６０の質量比（但し、（Ａ）＋（Ｂ）＋（Ｃ）＝１００とする）で含有し、且つ（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）の３成分の合計した含有量が、２０質量％以上であることを特徴とするβグルカン組成物を有効成分とする血糖値上昇抑制剤を提供するものである。
（Ａ）分子量が５０万以上の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｂ）分子量が２万以上５０万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｃ）分子量が５００以上２万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
【００１５】
また、本発明は、下記の（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）成分を、１０〜８５：１０〜８５：５〜６０の質量比（但し、（Ａ）＋（Ｂ）＋（Ｃ）＝１００とする）で含有し、且つ（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）の３成分の合計した含有量が、２０質量％以上であることを特徴とするβグルカン組成物を有効成分とするインスリン分泌促進剤を提供するものである。
（Ａ）分子量が５０万以上の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｂ）分子量が２万以上５０万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｃ）分子量が５００以上２万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
【００１８】
また、本発明は、血糖値上昇抑制剤又はインスリン分泌促進剤用βグルカン組成物を製造する方法であって、
下記の（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）成分を、１０〜８５：１０〜８５：５〜６０の質量比
（但し、（Ａ）＋（Ｂ）＋（Ｃ）＝１００とする）で含有し、且つ（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）の３成分の合計した含有量が、２０質量％以上となるように、βグルカンの分子量分布が異なる２種以上の穀類粉抽出物を混合することを特徴とする、βグルカン組成物の製造方法を提供するものである。
（Ａ）分子量が５０万以上の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｂ）分子量が２万以上５０万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｃ）分子量が５００以上２万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
【００１９】
また、本発明は、  血糖値上昇抑制剤又はインスリン分泌促進剤用βグルカン組成物を製造する方法であって、
下記の（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）成分を、１０〜８５：１０〜８５：５〜６０の質量比（但し、（Ａ）＋（Ｂ）＋（Ｃ）＝１００とする）で含有し、且つ（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）の３成分の合計した含有量が、２０質量％以上となるように、穀類粉と穀類粉抽出物を混合することを特徴とするβグルカン組成物の製造方法を提供するものである。
（Ａ）分子量が５０万以上の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｂ）分子量が２万以上５０万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｃ）分子量が５００以上２万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
【発明の効果】
【００２０】
本発明によれば、インスリン分泌促進、血糖値上昇抑制に優れた効果を示し、水溶性が良好であるβグルカン組成物を提供することができる。また該βグルカン組成物は、インスリン分泌促進、血糖値上昇抑制により、メタボリックシンドロームの予防、糖尿病の予防、心疾患の予防、ひいては動脈硬化症の予防に役立つ。
また、本発明の製造方法によれば、上記βグルカン組成物を簡単な操作で且つ短時間で得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】図１はβグルカン組成物１を被検サンプルとした場合の糖尿病境界領域のヒト(n=5)を対象に75gOGTT(75g経口ブドウ糖負荷試験)を行った場合における血糖値変化量を示す図である。
【図２】図２はβグルカン組成物１を被検サンプルとした場合の糖尿病境界領域のヒト(n=5)を対象に75gOGTT(75g経口ブドウ糖負荷試験)を行った場合におけるインスリン変化量を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
以下、本発明のβグルカン組成物について、好ましい実施形態に基づき詳細に説明する。
本発明のβグルカン組成物は、下記の（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）成分を、１０〜８５：１０〜８５：５〜６０の質量比（但し、（Ａ）＋（Ｂ）＋（Ｃ）＝１００とする）で含有するものである。
（Ａ）分子量が５０万以上の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｂ）分子量が２万以上５０万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｃ）分子量が５００以上２万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
尚、（Ａ）成分の分子量の上限は、β−１、３−１、４−グルカンが水溶性である限り特に制限されないが、好ましくは１２０以下、より好ましくは９０以下とする。
【００２３】
この（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）の３成分を含有するβグルカン組成物でないと、優れたインスリン分泌促進効果や血糖値上昇抑制効果が得られない。
また、（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）の３成分の含有量の質量比（但し、（Ａ）＋（Ｂ）＋（Ｃ）＝１００とする）は、１０〜８５：１０〜８５：５〜６０の範囲内であることが必要であり、好ましくは、２５〜６８：２０〜５５：１２〜４０の範囲内、より好ましくは２５〜３５：２５〜５０：２５〜４０の範囲内である。
【００２４】
また、本発明のβグルカン組成物において、（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）の各成分の含有量は、（Ａ）成分が好ましくは２５〜３０質量％、より好ましくは５〜１８質量％であり、（Ｂ）成分が好ましくは２．５〜４３質量％、より好ましくは５〜２５質量％であり、（Ｃ）成分が好ましくは２．５〜３５質量％、より好ましくは５〜２０質量％である。
尚、（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）の３成分の合計した含有量は、本発明のβグルカン組成物中、好ましくは１０〜８５質量％、より好ましくは１５〜７０質量％であり、更に好ましくは２０〜５０質量％である。
【００２５】
本発明のβグルカン組成物においては、特に（Ｃ）成分が、下記の（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分からなり、該（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分を、好ましくは１５〜８５：８５〜１５、より好ましくは３０〜７０：７０〜３０の質量比で含有するものであることが、より高い血糖値上昇抑制効果とインスリン分泌促進効果を有する点で好ましい。
（Ｃ１）分子量が５００以上６０００未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｃ２）分子量が６０００以上２万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
【００２６】
本発明のβグルカン組成物において、「水溶性β−１、３−１、４−グルカン」とは、βグルカン組成物を飲食品として或いは医薬品として投与した際に有効に働くβ−１、３−１、４−グルカンのことであり、その含有量は以下の方法により測定される。
【００２７】
＜水溶性β−１、３−１、４−グルカン含量の測定方法＞
組成物中の水溶性β−１、３−１、４−グルカン含量の測定は、ＭｃＣｌｅａｒｙ法（酵素法）を採用した。具体的には、β−１，３−１，４−グルカン含量測定キット（型番Ｋ−ＢＧＬＵ）（メガザイム社製）を使用する。先ず、５００μｍ（３０メッシュ）のふるいにかけた測定サンプルについて、予め水分含量を測定（赤外線水分計、型番ＦＤ−２３０、Ｋｅｔｔ社製）し、無水物質量Ｗ（ｍｇ）を算出する。これとは別に、この測定サンプル１０ｍｇを１７ｍｌチューブに取り、５０％（ｖ／ｖ）エタノール溶液を２００μｌ加え、分散させる。次に４ｍｌの２０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）を加え、よく混合した後、煮沸した湯浴中にて１分間加温する。よく混合し、更に２分間、湯浴中で加熱する。遠心分離にて上清を得て、５０℃に冷却後、５分間放置してから、各チューブにリケナーゼ酵素溶液（キットに付属するバイアルを２０ｍｌの２０ｍＭリン酸緩衝液で希釈、残量は凍結保存）の２００μｌ（１０Ｕ）を加え、５０℃にて１時間反応させる。チューブに２００ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ４．０）を５ｍｌ加えて、静かに混合する。室温に５分間放置し、遠心分離にて上清を得る。上清１００μｌを３本のチューブに取り、１本には１００μｌの５０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ４．０）を、他の２本には１００μｌ（０．２Ｕ）のβグルコシターゼ溶液（キットに付属するバイアルを２０ｍｌの５０ｍＭ酢酸緩衝液で希釈、残量は凍結保存）を加え、５０℃にて１０分間反応させる。３ｍｌのグルコースオキシターゼ／ペルオキシターゼ溶液を加えて、５０℃にて２０分間反応させ、各サンプルの５１０ｎｍにおける吸光度（ＥＡ）を測定する。これとは別に、グルコース１００μｇを含む３ｍｌのグルコースオキシダーゼ／ペルオキシダーゼ溶液の吸光度（ＥＧ）を測定する。これらの測定結果から、次式により水溶性β−１，３−１，４−グルカン含量は求められる。
【００２８】
水溶性β−１，３−１，４−グルカン含量（％，ｗ／ｗ）＝（ＥＡ）×（Ｆ／Ｗ）×８．４６
式中、Ｆ及びＷは次の通りである。
Ｆ＝（１００）／（グルコース１００μｇの吸光度ＥＧ）
Ｗ＝無水物質量（ｍｇ）
【００２９】
本発明のβグルカン組成物には、従来公知の他の生理活性成分、例えば、コレステロール上昇抑制剤、血圧上昇抑制剤、血中コレステロール調節機能剤、血糖値上昇抑制作用剤、腸内細菌叢改善剤、整腸作用剤、抗ガン作用剤、抗アレルギー作用剤、消化吸収調節作用剤、老化防止剤、抗酸化剤、血行促進剤、免疫調節剤等を配合してもよい。
【００３０】
これら生理活性成分の具体的な例を挙げると、血中脂質濃度を適正化する高度不飽和脂肪酸（ＥＰＡ、ＤＨＡ）、血清コレステロールを調節する植物ステロール及びそのエステル化物、ジアシルグリセロール、γリノレン酸、αリノレン酸、リノール酸、共役リノール酸等の不飽和脂肪酸、ビートファイバー、コーンファイバー、サイリウム種皮、茶ポリフェノール、レシチン、血圧降下に有効なカツオ節ペプチド、イワシペプチド、カゼインドデカペプチド、大豆分離蛋白質等、腸内環境を改善して整腸作用に働く乳酸菌、グルコン酸、オリゴ糖、各種食物繊維等を含む食品や医薬品である。その他、健康機能性を有することが知られている成分として、具体例を列挙すると、クロレラ、スピルリナ、プロポリス、キチン、キトサン、デオキシリボ核酸、リボ核酸、霊芝、アガリクス、銀杏葉エキス、らかん果、ウコン、ガルシニア、アップルファイバー、ギムネマ、コラーゲン、ブルーベリー、アロエ、ノコギリヤシ、カプサンチン、ルテイン、β−クリプトキサンチン、レニン、タウリン、カゼイン、コラーゲン、グルコサミン、カゼインホスホペプチド（ＣＰＰ）、ミルクベーシックプロテイン（ＭＢＰ）、ラクトフェリン、グルタチオン、テアニン、ギャバ、アスパルテーム、キシリトール、リカルデント、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、フコイダン、コンドロイチン、ヒアルロン酸、セルロース、ペクチン、難消化デキストリン、グルコマンナン、イヌリン、フラクタン、シクロフラクタン、ジフラクトース、レバン、ムチン、フラボノイド、ポリフェノール、カテキン、タンニン、アントシアニン、ルチン、ケルセチン、大豆イソフラボン、大豆サポニン、大豆グロブリン、クロロゲン酸、クエン酸、乳酸、リンゴ酸、カプサイシン、ゴマリグナン、アリシン、カフェイン、クロロフィル、ナツトウキナーゼ、βラクトグロブリン、植物発酵酵素、メバロン酸、葉緑素、ローヤルゼリー、高麗人参、プルーン、カモミール、タイム、セージ、ペパーミント、レモンバーム、マロウ、オレガノ、キャットニップティー、ヤロー、ハイピスカス、エキネシア等のハーブ類、ビタミン類、カルシウム含有化合物等のカルシウム強化剤、鉄含有化合物等の鉄分強化剤、必須ミネラルを含有するミネラル強化剤、さらには動植物抽出成分、海藻抽出成分、生薬成分等の天然由来成分の生理活性成分等が挙げられる。
【００３１】
本発明のβグルカン組成物には、例えば、組成物自体或いは組成物を添加した飲食品が、ダマや固まりになる等の不均一化を抑制する目的で、必要に応じて、澱粉類、ｐＨ調整剤、乳化剤、酸化防止剤、β−１，３−１，４−グルカン以外の多糖類、酵素類、動植物や微生物由来の蛋白素材、品質安定剤等のその他の成分を、本発明の効果を阻害しない範囲内で添加することもできる。
【００３２】
上記澱粉類としては、大麦澱粉、小麦澱粉、米澱粉、オーツ麦澱粉、コーンスターチ等の穀類澱粉、ジャガイモ澱粉、甘薯澱粉、タピオカ澱粉等の根茎類澱粉等を例示することができ、これらの１種又は２種以上を使用することができる。
【００３３】
上記ｐＨ調整剤としては、リン酸塩類、例えば、リン酸一ナトリウム、リン酸二ナトリウム、リン酸三ナトリウム、ピロリン酸ナトリウム、ポリリン酸ナトリウム、トリポリリン酸ナトリウム、ピロリン酸カリウム、ヘキサメタリン酸ナトリウム、メタリン酸ナトリウム、メタリン酸カリウム、その他の種々の有機酸、例えば、酢酸、乳酸、クエン酸、グルコン酸、コハク酸、酒石酸、フマル酸、アスコルビン酸、酸性ピロリン酸、クロロゲン酸、リンゴ酸、及びそれらの塩類や、アルカリ剤物質である、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素力リウム、炭酸カリウム、炭酸水素アンモニウム等、一般的に用いられるｐＨ調整剤を例示することができ、これらの１種又は２種以上を使用することができる。
【００３４】
上記乳化剤としては、例えば、グリセリン脂肪酸エステル、蔗糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、有機酸モノクリセリド、酢酸モノグリセリド、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン縮合リシノレイン酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ステナロイル乳酸カルシウム、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、レシチン、酵素処理レシチン等、一般的に用いられる乳化剤を例示することができ、これらの１種又は２種以上を使用することができる。
【００３５】
上記酸化防止剤としては、例えば、トコフェロール、Ｌ−アスコルビン酸、エリソルビン酸塩類、カテキン、タンニン、アントシアニン、茶ポリフェノール等のポリフェノール類、Ｌ−アスコルビン酸ステアリン酸エステル、Ｌ−アスコルビン酸ナトリウム等を例示することができ、これらの１種又は２種以上を使用することができる。
【００３６】
上記β−１，３−１，４−グルカン以外の多糖類としては、アップルファイバー、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、アルギン酸プロピレングリコールエステル、アラビアガム、イヌリン、カシアガム、カラヤガム、寒天、カードラン、カラギーナン、カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）、カルボキシメチルセルロースカルシウム、キサンタンガム、キチン、キトサン、グアーガム、グルコマンナン、コーンファイバー、コンドロイチン、サイリウム種皮、ジェランガム、水溶性大豆多糖類、セルロース、タマリンド種子多糖類、大豆食物繊維、タラガム、トガントガム、ヘミセルロース、ヒアルロン酸、ビートファイバー、微細セルロース、プルラン、ファーセレラン、フコイダン、フラクタン、ぺクチン、マンナン、ムチン、レバン、ローカストビーンガム、及びこれらの分解物等を例示することができ、これらの１種又は２種以上を使用することができる。
【００３７】
上記酵素類としては、アミラーゼ、インベルターゼ、カタラーゼ、セルラーゼ、キシラナーゼ、パパイン、プロテアーゼ、ペクチナーゼ、リゾチーム、リパーゼ、トリプシン、パンクレアチン、ブロメライン、ペプシン、ペプチダーゼ、アクチニジン等を例示することができ、これらの１種又は２種以上を使用することができる。
【００３８】
上記動植物や微生物由来の蛋白素材としては、全卵粉末、卵白や卵黄末、乳蛋白、大豆蛋白、小麦分離蛋白、血漿蛋白、エンドウ豆蛋白、酵母抽出物、ホエー等のアルブミン、カゼインナトリウム、カゼインホスホペプチド（ＣＰＰ）、ゼラチン、可溶性コラーゲン、カツオ節ペプチド、イワシペプチド、カゼインドデカペプチド等を例示することができ、これらの１種又は２種以上を使用することができる。
【００３９】
上記品質安定剤としては、環状オリゴ糖、デキストリン、難消化デキストリン、シクロフラクタン、ジフラクトース、グルコサミン、炭酸ナトリウム、リンゴ酸ナトリウム、プロピレングリコール、サイクロデキストリン、カルシウム塩類、例えば、塩化カルシウム、クエン酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、グリセロリン酸カルシウム、酸性ピロリン酸カルシウム、水酸化カルシウム、炭酸カルシウム、乳酸カルシウム、硫酸カルシウム、第一リン酸カルシウム、第二リン酸カルシウム、第三リン酸カルシウム、パントテン酸カルシウム、ピロリン酸二水素カルシウム、サンゴカルシウム、ドロマイト、卵殻カルシウム、牛骨粉カルシウム、ほたて貝殻カルシウム、ミルクカルシウム、鉄類、例えば、塩化第二鉄、クエン酸鉄、クエン酸鉄アンモニウム、コハク酸クエン酸鉄ナトリウム、乳酸鉄、ピロリン酸第一鉄、ピロリン酸第二鉄、硫酸第一鉄、グルコン酸第一鉄、ヘム鉄、レバー粉末、糖類（ブドウ糖、果糖、蔗糖、乳糖、異性化糖、キシロース、トレハロース、カップリングシュガー、パラチノース、ソルボース、還元澱粉糖化飴、マルトース、エリスリトール、還元キシロオリゴ糖、ラクツロース、フラクトオリゴ糖、ガラクトオリゴ糖等）、糖アルコール類（キシリトール、マルチトール、マンニトール、ソルビトール、ポリデキストロース、還元パラチノース、還元水あめ等）、パーム油、ヤシ油、大豆油、綿実油等の油脂類等を例示することができ、これらの１種又は２種以上を使用することができる。
【００４０】
本発明のβグルカン組成物における上記その他の成分の含有量は特に制限されないが、合計して５０質量％以下となるように配合するのが好ましく、より好ましくは３０質量％以下となるように配合するのが好ましい。
【００４１】
上記その他の成分のうち、澱粉類や糖類は、血糖値を上昇させる作用を有するため、本発明のβグルカン組成物においては、組成物中で好ましくは合計で８０質量％以下、より好ましくは６０質量％以下、更に好ましくは５０質量％以下とすることが好ましい。
【００４２】
本発明のβグルカン組成物は、その形状については特に制限されないが、水や水分含量の高い飲食品に添加した際の溶解性が高いことから、粉末状又は顆粒状であることが好ましい。粉末状の場合、その好ましい平均粒径は１０〜３００μｍ、より好ましくは１０〜７５μｍであり、顆粒状の場合、その好ましい平均粒径は１０〜３０００μｍ、より好ましくは１００〜１０００μｍである。
【００４３】
以上説明した本発明のβグルカン組成物は、優れた生体調節機能性や生理活性機能、例えば、インスリン分泌促進作用、脂質代謝改善作用、血糖値上昇抑制作用、コレステロール低下作用、血糖値低下作用、生活習慣病予防・改善作用等を有し、水への溶解性に優れ、以下に説明するように食品及び医薬品等に好ましく使用できる。
【００４４】
本発明の飲食品は、上記βグルカン組成物を含有するものである。上記飲食品としてはたとえば、加工油脂製品、ベーカリー製品、菓子類、麺類、穀類加工品、乳製品、スープ類、飲料、調味料類、畜肉加工品、水産加工品、調理食品、健康食品、低カロリー食品、アレルギー患者用食品、乳児用食品、老人用食品、美容食品、薬用食品、或いはそれらの冷凍食品、レトルト食品、インスタント食品、缶詰等を挙げることができるが、上記βグルカン組成物は、水溶性が良好であるため、水や水分の多い飲食品に添加する際も、ダマができにくく、均一に分散させることが可能であること、β−１、３−１、４−グルカンの効果は水に溶解した状態でもっとも高い効果を呈することから、飲食品としては、液状飲食品であることが好ましい。
【００４５】
上記液状飲食品の例としては、コンソメスープ、コーンポタージュスープ、玉子スープ、中華スープ、シチュー、カレー等のスープ、オレンジジュース、トマトジュース、バナナジュース、野菜ジュース、果汁又は果肉入りのジュース等のジュース、コーラ、サイダー等の炭酸飲料、牛乳、加工乳、ヨーグルト、乳清飲料等の乳飲料、醤油、ソース、たれ、ジャム、ケチャップ等の調味料、コーヒー、ココア、紅茶、日本茶、ウーロン茶、豆乳飲料、乳酸菌飲料、アルコール飲料、ビタミン飲料、健康飲料、ドリンク剤及びゼリー状飲料が挙げられるが、摂食時にお湯又は水等を加え液状として飲食する、これらの飲食品の濃縮物や乾燥品等のいわゆる即席の飲食品も含まれる。
【００４６】
本発明の飲食品における本発明のβグルカン組成物の含有量は特に制限がなく、適宜選択することができるが、飲食品が飲料の場合は、水溶性β−１、３−１、４−グルカンとして、好ましくは０．００１〜３０質量％、より好ましくは０．０１〜１０質量％となる量である。
【００４７】
本発明の血糖値上昇抑制剤は、上記βグルカン組成物を有効成分として含有するものであり、本発明のβグルカン組成物をそのまま血糖値上昇抑制剤として使用可能であるが、本発明の効果を損なわない範囲で従来公知の賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、乳化剤等の添加剤と混合して、例えばペースト状、粉末状、顆粒状等の形態で製剤化してもよい。      
【００４８】
本発明の血糖値上昇抑制剤における上記βグルカン組成物の含有量は、その求められる血糖値上昇抑制効果に応じ適宜設定可能であるが、水溶性β−１、３−１、４−グルカンとして、好ましくは１０〜１００質量％、より好ましくは２０〜１００質量％、更に好ましくは５０〜１００質量％となる量である。
【００４９】
本発明の血糖値上昇抑制剤を投与する場合、投与量は対象とする人の年令、耐糖能異常の程度等により異なるため一概には言えないが、食前又は食事中に、食事１回あたり、水溶性β−１、３−１、４−グルカンとして、好ましくは１５〜７０００ｍｇ、より好ましくは３０〜３０００ｍｇ、更に好ましくは７０〜１７００ｍｇである。
【００５０】
そして、通常１日あたりでは、水溶性β−１、３−１、４−グルカンとして、好ましくは３０〜２００００ｍｇ、より好ましくは６０〜１００００ｍｇ、更に好ましくは１５０〜５０００ｍｇである。
【００５１】
本発明のインスリン分泌促進剤は、上記βグルカン組成物を有効成分として含有するものであり、本発明のβグルカン組成物をそのままインスリン分泌促進剤として使用可能であるが、本発明の効果を損なわない範囲で従来公知の賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、乳化剤等の添加剤と混合して、例えばペースト状、粉末状、顆粒状等の形態で製剤化してもよい。
【００５２】
本発明のインスリン分泌促進剤における上記βグルカン組成物の含有量は、その求められるインスリン分泌促進効果に応じ適宜設定可能であるが、好ましくは水溶性β−１、３−１、４−グルカンとして、好ましくは１０〜１００質量％、より好ましくは２０〜１００質量％、更に好ましくは５０〜１００質量％となる量である。
【００５３】
本発明のインスリン分泌促進剤を投与する場合、投与量は対象とする人の年令、耐糖能異常の程度等により異なるため一概には言えないが、食前又は食事中に、食事１回あたり、水溶性β−１、３−１、４−グルカンとして、好ましくは１５〜７０００ｍｇ、より好ましくは３０〜３０００ｍｇ、更に好ましくは７０〜１７００ｍｇである。
【００５４】
そして、通常１日あたりでは、水溶性β−１、３−１、４−グルカンとして、３０〜２００００ｍｇ、より好ましくは６０〜１００００ｍｇ、更に好ましくは１５０〜５０００ｍｇである。
【００５５】
次に、本発明のβグルカン組成物の好ましい製造方法について述べる。
本発明のβグルカン組成物は、下記の（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）成分を、１０〜８５：１０〜８５：５〜６０の質量比（但し、（Ａ）＋（Ｂ）＋（Ｃ）＝１００とする）で含有するように、βグルカンの分子量分布の異なる２種以上の穀類粉抽出物を混合する方法、或いは、穀類粉の1種又は２種以上と穀類粉抽出物の1種又は２種以上とを混合することによって得ることができる。尚、後者の方法の場合、穀類粉と穀類粉抽出物に用いる穀類粉とは、同一でも異なっていてもよい。
（Ａ）分子量が５０万以上の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｂ）分子量が２万以上５０万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
（Ｃ）分子量が５００以上２万未満の水溶性β−１、３−１、４−グルカン
【００５６】
上記穀類粉としては、β−１，３−１，４−グルカンを多く含有するイネ科植物を使用することが好ましく、ライムギ、ライ小麦、米、小麦、大麦、オーツ麦、ヒエ、アワ、トウモロコシ等を例示することができるが、β−１、３−１、４−グルカンをより多く含有することから、大麦粉及び／又はオーツ麦を使用することがより好ましい。
【００５７】
上記穀類粉の部位としては、その種実の皮部、種実の外皮部（穎）、穂軸部、茎部、葉部、胚、胚乳部等を使用することができる。ここで、種実の皮部としては、いわゆるふすま、ぬか、であり、種実の外皮部としてはモミガラ、穂軸部としてはコーンコブ、茎部としてはイナワラ、ムギワラ等がある。これらのなかでもβ−１，３−１，４−グルカン含量の高い点で大麦の胚乳部を使用することが特に好ましい。
【００５８】
大麦の胚乳部としては、大麦粒を外周部より削り９０質量％としたもの、好ましくは８０質量％以下としたものがよい。また、原料としてβ−１，３−１，４−グルカン含量の高い大麦品種を使用するのがよく、例えば、米澤モチ、坊主モチ、カシマムギ、ダイシモチ、ウルチミノリムギ、ミノリムギ、ＬＴ２６、ウルチＪＥＮＡ８４−１、Ｇｏｄｉｖａ、ベニハダカ、ウルチＨ−ＨＯＲ４０９７／６６、Ｎｅｐａ１１６８４、Ｒｉｓｏ８６、四Ｒ系１１６４等の品種やこれを母本とした派生品種が使用できる。
【００５９】
上記穀類粉としては、分級操作によりβ−１、３−１、４−グルカン含量が高められたものを使用することが、分子量が５０万以上の水溶性β−１、３−１、４−グルカンの含有量を上記の好ましい範囲とすることが容易である点から好ましい。
【００６０】
上記分級操作は、少なくとも胚乳部分を５０質量％以上含む穀類を、粒子径５００μｍ以上の粒子が１０体積％以下、好ましくは５体積％以下、より好ましくは０であり、且つ粒子径４０μｍ以下の粒子が３０〜９５体積％、好ましくは４０〜７０体積％、より好ましくは４８〜６０体積％となるように粉砕する工程Ａ、及び該工程Ａで得られた粉砕物から粒子径５０〜５００μｍの粒子が８０体積％以上、好ましくは９０体積％以上、より好ましくは９９体積％以上の画分を得る工程Ｂを有する。
【００６１】
上記工程Ａの粉砕方法は、常法に従えば良く、例えば、ローラー式粉砕機、衝撃式粉砕機、ハンマーミル（粉砕機）、石臼粉砕機等の粉砕機を使用して粉砕すればよい。
【００６２】
また、上記工程Ｂの分画方法は特に制限されず、例えば穀類の分級に通常用いられる篩い、気流分級等により分画し、或いは篩い分画では、例えば、所望の粗さのスクリーンを用いて一定時間、篩い分画して、スクリーン上の画分を分取すればよい。
【００６３】
上記穀類粉抽出物としては、上記穀類粉から、温水、冷水、或いは有機溶媒等を用いて抽出処理を行なって得たものを使用するとよい。
【００６４】
上記抽出処理の方法としては、穀類粉に、例えば２〜１００倍量、好ましくは３〜１０倍量の抽出溶液を加え、０．５〜２４時間攪拌抽出を行い、常法により固液分離し、上清を濃縮或いはそのまま乾燥させて穀類粉抽出物とする方法を挙げることができる。
【００６５】
上記抽出溶液としては、水、温水、熱水或いは塩溶液、更には酸、アルカリ性の水溶液、有機溶媒等を挙げることができるが、これらの中でも、水、温水又は熱水で抽出することが好ましく、３０℃以上６０以下の温水で抽出することがより好ましい。
【００６６】
また、抽出時に抽出促進剤等を加えてもよい。更には、抽出処理の際に、抽出溶媒として、酸、アルカリ性の水溶液を使用する方法や、酵素溶液を使用する方法により、抽出と加水分解を同時に行ってもよい。
【００６７】
また、上記穀類粉及び／又は穀類粉抽出物は加水分解処理されたものであってもよく、また穀類粉と穀類粉抽出物を混合した後に加水分解処理を行なってもよい。この加水分解処理を行なうことにより、上記（Ｃ２）成分を多く含有するβグルカン組成物を得ることが可能となる。
【００６８】
また、上記加水分解方法としては、加熱処理、酸やアルカリ処理、酵素処理等通常の多糖類を加水分解する方法が使用できるが、なかでも、上記（Ｃ２）成分を高い濃度で生成させることが可能な点で、酵素処理が最適である。
【００６９】
上記酵素処理で用いる酵素としては、具体的には、リケナーゼ（EC 3.2.1.73）、セルラーゼ（EC 3.2.1.4）が挙げられ、この他、エンド型のβグルカナーゼ、１，３−β−Ｄ−グルカナーゼ、１，４−β−Ｄ−グルカナーゼやこれらの複合酵素等を用いることもできる。
尚、市販の酵素製剤には、これらの活性を含んだペクチナーゼ、キシラナーゼ、ヘミセルラーゼ、細胞壁溶解酵素、抽出物の粘度低減作用を示す酵素、果汁の成分の沈降防止用酵素製剤、ビールや果汁等の粘度を低下させる目的や濾過速度を促進するための目的で使用する酵素製剤等があり、上記低分子βグルカンを生成させる目的でこれらの酵素製剤も使用することができるが、これらの酵素製剤には、βグルカンを２糖であるセロビオース、単糖のグルコースにまで分解する活性が存在する。
【００７０】
従って、上記（Ｃ２）成分を得るためには、β−１，３−１，４−Ｄ−グルカンを重合度２以下まで加水分解しない酵素を使用することが好ましい。
これに該当する市販の酵素製剤としては、例えば、リケナーゼ（日本バイオコン社製）、セレミックス（ノボザイム社製）、グレイナーゼ（大和化成工業社製）、フィニザイム（ノボザイム社製）、セルクラスト（ノボザイム社製）、ウルトラフロＬ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ社製）、ビスコザイムＬ（Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ社製）、スミチームＮＸ（新日本化学工業社製）、セルロシンＴ２（エイチビィアイ社製）、スミチームＡＲＳ（新日本化学工業社製）が挙げられる。また、これらの酵素製剤からリケナーゼ活性を有する酵素を単離精製して使用してもよい。
【００７１】
本発明のβグルカン組成物の製造方法においては、糊化度が２５％以上、好ましくは３０％以上となるように糊化処理する工程を含むことが好ましい。これは、穀類粉は澱粉を多く含有し、該澱粉は水不溶性であるため、このような穀類粉を使用して得られたβグルカン組成物は当然にして水溶性が低いものであること、また、穀類粉においては、β−１、３−１、４−グルカンは澱粉と強く結合していることが多いため、このようなβ−１、３−１、４−グルカンは水溶性βグルカンとはならないことから、糊化工程により澱粉を糊化することで、水不溶性のβ−１、３−１、４−グルカンを水溶性β−１、３−１、４−グルカンに変換することが可能であるためである。また、糊化度の上限は１００％であるが、水に添加した際の分散性が良好であること、及び、得られる水溶液の粘度が高くなりすぎないことから、９０％以下とすることが好ましく、より好ましくは８５％以下とする。
【００７２】
上記糊化処理は、穀類粉に対して行なってもよく、また穀類粉と穀類粉抽出物を混合した後に行なってもよいが、より安定した品質のβグルカン組成物が得られる点で、穀類粉と穀類粉抽出物を混合した後に行なうことが好ましい。
【実施例】
【００７３】
以下に実施例及び比較例を挙げ、本発明を更に説明するが、本発明はこれらに制限されるものではない。
尚、以下の実施例及び比較例において、水溶性β−１，３−１，４−グルカン含量、総β−１，３−１，４−グルカン含量、糊化度、並びに、（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分含量の測定は、下記の通り行った。
【００７４】
＜水溶性β−１，３−１，４−グルカン含量の測定方法＞
水溶性β−１，３−１，４−グルカン含量の測定は、ＭｃＣｌｅａｒｙ法（酵素法）を採用した。具体的にはβ−１，３−１，４−グルカン含量測定キット（型番Ｋ−ＢＧＬＵ）（メガザイム社製）を使用した。先ず、５００μｍ（３０メッシュ）のふるいにかけた測定サンプルについて、予め水分含量を測定（赤外線水分計、型番ＦＤ−２３０、Ｋｅｔｔ社製）し、無水物質量Ｗ（ｍｇ）を算出した。これとは別に、この測定サンプル１０ｍｇを１７ｍｌチューブに取り、５０％（ｖ／ｖ）エタノール溶液を２００μｌ加え、分散させた。次に４ｍｌの２０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６．５）を加え、よく混合した後、煮沸した湯浴中にて１分間加温した。よく混合し、更に２分間、湯浴中で加熱した。遠心分離にて上清を得て、５０℃に冷却後、５分間放置してから、各チューブにリケナーゼ酵素溶液（キットに付属するバイアルを２０ｍｌの２０ｍＭリン酸緩衝液で希釈、残量は凍結保存）の２００μｌ（１０Ｕ）を加え、５０℃にて１時間反応させた。チューブに２００ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ４．０）を５ｍｌ加えて、静かに混合した。室温に５分間放置し、遠心分離にて上清を得た。上清１００μｌを３本のチューブに取り、１本には１００μｌの５０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ４．０）を、他の２本には１００μｌ（０．２Ｕ）のβグルコシターゼ溶液（キットに付属するバイアルを２０ｍｌの５０ｍＭ酢酸緩衝液で希釈、残量は凍結保存）を加え、５０℃にて１０分間反応させた。３ｍｌのグルコースオキシターゼ／ペルオキシターゼ溶液を加えて、５０℃にて２０分間反応させ、各サンプルの５１０ｎｍにおける吸光度（ＥＡ）を測定した。これとは別に、グルコース１００μｇを含む３ｍｌのグルコースオキシダーゼ／ペルオキシダーゼ溶液の吸光度（ＥＧ）を測定する。これらの測定結果から、次式により水溶性β−１，３−１，４−グルカン含量を求めた。
【００７５】
水溶性β−１，３−１，４−グルカン含量（％，ｗ／ｗ）＝（ＥＡ）×（Ｆ／Ｗ）×８．４６
式中、Ｆ及びＷは次の通りである。
Ｆ＝（１００）／（グルコース１００μｇの吸光度ＥＧ）
Ｗ＝無水物質量（ｍｇ）
【００７６】
＜総β−１，３−１，４−グルカン含量の測定方法＞
２分間湯浴中で加熱後の遠心分離を行なわない以外は、水溶性β−１，３−１，４−グルカン含量の測定方法と同様の方法で、総β−１，３−１，４−グルカン含量を求めた。
【００７７】
＜（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分含量の測定方法＞
各βグルカン組成物に含まれる水溶性β−１、３−１、４−グルカンの分子量分布、即ち、（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分含量については次の通り測定した。
【００７８】
先ず、被検サンプル10mgに10mlの蒸留水を加え、煮沸した湯浴中にて１分間加温した。よく混合し、更に２分間、湯浴中で加熱した。遠心分離にて上清を得て、上澄みをディスポーザブルシリンジフィルターユニット（セルロースアセテート膜、0.45μm、アドバンテック社製)にてフィルター濾過し、分子量分布測定用サンプルとした。次に、このサンプルを、以下に示したHPLCシステムを使用して分子量分布を測定した。尚、分子量分布の測定に使用した大麦粉は、阿部精麦社製の大麦粉（βグルカン含有量4.6％）である。
カラム; TSK GEL G6000PWXL (東ソー)-Shodex Sugar SB-802 (昭和電工)、カラム温度60℃、流速 0.5ml/min、RI及びUV (280nm)による検出(45℃)、サンプルアフ゜ライ量50μl (被験サンプル濃度 1 mg/ml)、溶出溶媒はMilli-Q水によるイソクラチック溶出とした。
得られたカラムトグラムから、GPC解析ソフト (GPC-8020 model II データ解析  Ver.4.20、東ソー株式会社)を用いて、βグルカン分子量分布、即ち、（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分含量を求めた。
【００７９】
尚、GPC上でのピーク成分がβグルカンに由来することを以下の方法によって確認した。
即ち、上記分子量測定用サンプル1mlにリケナーゼ酵素溶液 (Megazyme, 1000U/mL, Lot.60502)を0.2Uとなるよう添加し、55℃にて一晩反応させた。この溶液を分析例-2と同様の方法にて分析した。
上記分析結果から、リケナーゼ処理によりβグルカンに相当するピークは消失すること、全サンプルにおいて、消失した面積値に相当する面積値のピークが3〜4糖に相当するリテンションタイム（37.5〜39.5分）において確認されたことから、上記（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分含量の測定方法により検出されたGPC上でピーク成分はβグルカンであり、これらがリケナーゼにより主に3〜4糖にまで分解されたものとみなすことができる。
【００８０】
＜糊化度測定方法＞
糊化度の測定は、食品分析法のグルコアミラーゼ法により行った。先ず、測定サンプル２０ｇにエタノール２００ｍｌを加え、１分間撹拌した後、遠心分離（８０００回転／分・５分）し、得られた沈殿にエタノール２００ｍｌを加えた。これを１分間撹拌した後、再度遠心分離（８０００回転／分・５分）し、得られた沈殿にエーテル２００ｍｌを加えた。これを、１分間撹拌した後、再度遠心分離（８０００回転／分・５分）し、得られた沈殿を乾燥した。得られた沈殿の乾燥物１００ｍｇに蒸留水８ｍｌを加えて均一な懸濁液とした。２ｍｌを２本の試験管に取り、１本には１．６ｍｌの２ｍｏｌ／ｌ酢酸緩衝液（ｐＨ４．８）と０．４ｍｌの蒸留水を加え、測定サンプル液とした。もう１本には０．２ｍｌの１０ｍｏｌ／ｌ水酸化ナトリウムを加えて完全に溶解させた後、１．６ｍｌの２ｍｏｌ／ｌ酢酸、４ｍｌの酢酸を加え、完全糊化サンプル液とした。これらのサンプル液に１ｍｌのグルコアミラーゼ液（２．６３単位）を加えて、３７℃で６０分間反応させた。反応終了後、反応液０．５ｍｌに、２５ｍｍｏｌ／ｌ塩酸２０ｍｌを加えて撹拌し、ソモジー・ネルソン法によりグルコース量（糖量）を定量した。糊化度を次式から算出した。
糊化度（％）＝（サンプル液中の糖量／完全糊化サンプル液中の糖量）×１００
【００８１】
＜βグルカン組成物の製造＞
実施例１
平成１８年度新潟県産のミノリムギを外周部より削り、とう精歩合６０％とした大麦粒（胚乳部分含量１００質量％）をローラー式粉砕機で粉砕した。得られた粉砕物の１０ｋｇを１４０メッシュの篩にて６０分間処理し、篩上の画分４．３ｋｇを得た。これを粉砕機（ピンミルDD-2-3.7、槇野産業）にて粉砕して大麦粉Ｓを得た。
一方、３０L撹拌槽に酵素製剤（セルクラストR：ノボザイム社製）を１０ｍｌ含有する１０Lの水道水を加えて撹拌しながら、大麦粉Ｓの２ｋｇを加え、50℃にて2時間、βグルカンの抽出を行った。連続遠心機（H-660、株式会社コクサン）にて上清（βグルカン抽出物）８ｋｇを得た。βグルカン抽出物は、レオニーダー（梶原工業）にて８０℃、減圧下で約４倍に濃縮し、―２０℃にて凍結後、自然解凍してから遠心分離にて沈殿を回収、凍結乾燥して２７０ｇの穀類粉抽出物Ｓを得た。
上記大麦粉Ｓと上記穀類粉抽出物Ｓを８０：２０の質量比で混合した後、ニーダー（ベンチニーダーPNV-1(入江商会）)に投入し、水分含量４０質量％となるまで加水した後、８５℃にて１２０分加熱処理し、これを、水流ポンプでの減圧乾燥により水分含量７．０％まで乾燥した後、粉砕機（商品名：ミクロパウダー、ウエスト社製）の粒度つまみを１０ミクロンにセットして更に粉砕し、本発明のβグルカン組成物１とした。
得られたβグルカン組成物１の水溶性β−１、３−１、４−グルカン含量、総β−１，３−１，４−グルカン含量、糊化度、（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分の質量比については表１に記載した。
水１００ｍｌに、得られたβグルカン組成物１を１０ｇ添加し、攪拌したところ容易に溶解し、水溶性が良好であることが確認された。
【００８２】
実施例２
平成１６年度茨城県産のカシマムギを外周部より削り、とう精歩合６０％とした大麦粒（胚乳部分含量１００質量％）をローラー式粉砕機で粉砕した。得られた粉砕物の４ｋｇを１４０メッシュの篩にて６０分間処理し、篩上の画分８８０ｇを得た。これをピンミル粉砕機（ピンミルDD-2-3.7、槇野産業）にて粉砕して大麦粉Ｕを得た。
一方、３０L撹拌槽に１０Lの水道水を加え、撹拌しながら、上記大麦粉Ｓの２ｋｇを加え、60℃にて４時間、βグルカンの抽出を行った。連続遠心機（H-660、株式会社コクサン）にて上清（βグルカン抽出物）８ｋｇを得た。βグルカン抽出物は、レオニーダー（梶原工業）にて８０℃、減圧下で約４倍に濃縮し、―２０℃にて凍結後、自然解凍してから遠心分離にて沈殿を回収、凍結乾燥して２２０ｇの穀類粉抽出物Ｔを得た。
上記大麦粉Ｕと上記穀類粉抽出物Ｔを７０：３０の質量比で混合した後、ニーダー（ベンチニーダーPNV-1(入江商会）)に投入し、水分含量４０質量％となるまで加水した後、８５℃にて１２０分加熱処理し、これを、水流ポンプでの減圧乾燥により水分含量７．０％まで乾燥した後、粉砕機（商品名：ミクロパウダー、ウエスト社製）の粒度つまみを１０ミクロンにセットして更に粉砕し、本発明のβグルカン組成物２とした。
得られたβグルカン組成物２の水溶性β−１、３−１、４−グルカン含量、総β−１，３−１，４−グルカン含量、糊化度、（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分の質量比については表１に記載した。
水１００ｍｌに、得られたβグルカン組成物２を１０ｇ添加し、攪拌したところ容易に溶解し、水溶性が良好であることが確認された。
【００８３】
実施例３
上記大麦粉Ｓとオーツ麦由来のβグルカン（メガザイム社製、βグルカン含有量90％）を８９：１１の質量比で混合した後、ニーダー（ベンチニーダーPNV-1(入江商会）)に投入し、水分含量４０質量％となるまで加水した後、８５℃にて１２０分加熱処理し、これを、水流ポンプでの減圧乾燥により水分含量７．０％まで乾燥した後、粉砕機（商品名：ミクロパウダー、ウエスト社製）の粒度つまみを１０ミクロンにセットして更に粉砕し、本発明のβグルカン組成物３とした。
得られたβグルカン組成物３の水溶性β−１、３−１、４−グルカン含量、総β−１，３−１，４−グルカン含量、糊化度、（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分の質量比については表１に記載した。水１００ｍｌに、得られたβグルカン組成物３を１０ｇ添加し、攪拌したところ容易に溶解し、水溶性が良好であることが確認された。
【００８４】
実施例４
大麦粉Ｓに５倍量の水を添加し、セレミックス（ノボザイム社製）を対粉0.01％(w/w)となるよう添加、40℃で1時間、酵素処理を行った。その後、85℃で30分加熱することにより酵素反応を停止し、得られた溶液は全量を凍結乾燥し酵素処理物Ｓを得た。
一方、市販のファイバースノーに水道水を加え、含浸後、水分含量１６％として気流式粉砕機（西村機械）にて粉砕して大麦粉砕物を得た。その１０ｋｇを１４０メッシュの篩にて６０分間処理し、篩上の画分３．２ｋｇを得た。これを粉砕機（ピンミルDD-2-3.7、槇野産業）にて更に粉砕して大麦粉Ｔを得た。大麦粉Ｔを90℃にて30分間、加熱してから10倍量の水を添加し、85℃にて１時間撹拌抽出して、遠心分離にて上清を得た。上清を凍結乾燥して穀類粉抽出物Ｕを得た。
上記酵素処理物Ｓと上記穀類粉抽出物Ｔと上記穀類粉抽出物Ｕを２０：６７：１３の質量比で混合し、本発明のβグルカン組成物４とした。
得られたβグルカン組成物４の水溶性β−１、３−１、４−グルカン含量、総β−１，３−１，４−グルカン含量、糊化度、（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分の質量比については表１に記載した。  水１００ｍｌに、得られたβグルカン組成物４を１０ｇ添加し、攪拌したところ容易に溶解し、水溶性が良好であることが確認された。
【００８５】
実施例５
上記大麦粉Ｓの１００ｇに２Lの蒸留水を添加し、85℃にて20分間攪拌抽出した。その後、全量を遠心分離して上清を得て、得られた上清を−20℃で凍結、その後、融解した。凍結融解後の溶液は遠心分離し、得られた上清に等量のエタノールを加え、生成する沈殿物を吸引ろ過にて回収した。得られた沈殿物を４℃の蒸留水にて洗浄後、凍結乾燥して穀類粉抽出物Ｖを得た。
一方、３Ｌ容器に上記穀類粉抽出物Ｓの１００ｇに１０倍量の水を添加し、懸濁状態とさせた後、酵素（グレイナーゼ：大和化成社製）を対大麦粉0.01％となるよう添加し、２時間、50℃にて撹拌して酵素処理を行った。処理後、そのまま凍結乾燥して酵素処理物Ｔを得た。
上記大麦粉Ｕと穀類粉抽出物Ｔと穀類粉抽出物Ｖと酵素処理物Ｔを２０：９：５７：１４の質量比で混合し、本発明のβグルカン組成物５とした。
得られたβグルカン組成物５の水溶性β−１、３−１、４−グルカン含量、総β−１，３−１，４−グルカン含量、糊化度、（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分の質量比については表１に記載した。水１００ｍｌに、得られたβグルカン組成物５を１０ｇ添加し、攪拌したところ容易に溶解し、水溶性が良好であることが確認された。
【００８６】
比較例１
上記穀類粉抽出物Ｖをそのまま、比較例のβグルカン組成物６とした。
得られたβグルカン組成物６の水溶性β−１、３−１、４−グルカン含量、総β−１，３−１，４−グルカン含量、糊化度、（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分の質量比については表１に記載した。
水１００ｍｌに、得られたβグルカン組成物６を１０ｇ添加し、攪拌したところ容易に溶解し、水溶性が良好であることが確認された。
【００８７】
比較例２
上記酵素処理物Ｔをそのまま、比較例のβグルカン組成物７とした。
得られたβグルカン組成物７の水溶性β−１、３−１、４−グルカン含量、総β−１，３−１，４−グルカン含量、糊化度、（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分の質量比については表１に記載した。  水１００ｍｌに、得られたβグルカン組成物７を１０ｇ添加し、攪拌したところ容易に溶解し、水溶性が良好であることが確認された。
【００８８】
比較例３
市販のファイバースノーをそのまま、比較例のβグルカン組成物８とした。
得られたβグルカン組成物８の水溶性β−１、３−１、４−グルカン含量、総β−１，３−１，４−グルカン含量、糊化度、（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｃ１）及び（Ｃ２）成分の質量比については表１に記載した。
水１００ｍｌに、得られたβグルカン組成物８を１０ｇ添加し、攪拌したところダマが発生し、水溶性が不良であることが確認された。
【００８９】
【表１】
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【００９０】
＜マウスによる血糖値上昇抑制試験＞
上記実施例１〜５及び比較例１〜３で得られた、βグルカン組成物１〜８を用いて、下記の方法により、血糖値上昇抑制試験を行なった。
各群5匹の5週齢Balb/c雄性マウス(日本クレア株式会社)にMF(オリエンタル酵母工業株式会社製)を入舎後4日間投与し十分に馴化させた。試験前日一晩(18時間)絶食後、糖負荷試験を行った。被検サンプルの評価は、被検サンプル400mg及び、グルコースを2000mg/kg体重となるよう同時に経口投与した。コントロールにはグルコースのみを2000mg/kg体重の経口投与とした。糖負荷前及び糖負荷後30分後、60分後、120分後に尾静脈より採血を行い、簡易型血糖値測定装置フリースタイルキッセイメーター(ニプロ株式会社製)にて血糖値をそれぞれ測定した。また、血糖値曲線下面積(ΔAUC)を算出し、糖負荷後60分後までにおけるコントロールに対する各サンプルの血糖値曲線下面積(ΔAUC)の減少率(%)を求め、結果を表２に記載した。
【００９１】
【表２】
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【００９２】
＜ヒトによる血糖値上昇抑制試験及びインスリン分泌促進試験＞
上記実施例１で得られたβグルカン組成物１を用いて、糖尿病境界領域ボランティアを対象に75g経口ブドウ糖負荷試験(75g OGTT)によって、血糖値上昇抑制試験及びインスリン分泌促進試験を行なった。
試験方法は次のとおりである。βグルカン組成物１(5g)を水(200ml)に溶かした溶液を摂取したのちに75gブドウ糖負荷(トレーランG75, 味の素株式会社製造)を行った。コントロールとしては水(200ml)を摂取したのち、糖負荷を行った。糖負荷前及び糖負荷後から15, 30, 60, 90, 120分後のインスリン濃度変化を測定した。また、同時に血中グルコース濃度(血糖値)変化も測定した。尚、境界領域のヒトの選別は75g糖負荷試験における判定区分と判定基準(葛谷ら、糖尿病、42(5), 385, 1999)に準じておこない、糖負荷試験のコントロールにおいて糖尿病域にも正常域にも属さない者を該当者とした。
その結果を図１（血糖値上昇抑制試験結果）、及び、図２（インスリン分泌促進試験結果）に示す。
その結果、耐糖能異常を呈するいわゆる糖尿病境界領域を対象としたボランティアの場合(n=5)、βグルカン組成物１の摂取によって糖負荷後の血糖値の上昇抑制効果が認められた。即ち、糖負荷後60分における血糖値はコントロールに比べて有意に(p<0.05)低値を示した(コントロール、225±38.6mg/dlに対しβグルカン組成物１摂取群209.2±34.3mg/dl、p=0.03)。
また、糖負荷後、コントロールに比べてβグルカン組成物１を摂取した場合はインスリン分泌は糖負荷15分後から増大傾向を示し、負荷後60分においては有意なインスリン分泌の増大が確認された(コントロール、67.8±14.6μU/mlに対しサンプルA摂取群76.3±13.6μU/ml、p=0.06)。
また負荷後60分以降について、コントロール時ではインスリン分泌が試験終了の負荷後120分までにおいても依然減少傾向を迎えていないのに対し、βグルカン組成物１摂取後では負荷後60分以降インスリンの分泌は低下を示しておりインスリン分泌の改善が見られている。
これらの結果から糖尿病境界領域のヒトに対して、本発明のβグルカン組成物の血糖上昇抑制効果、インスリン分泌促進効果が認められた。
【図１】
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【図２】
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