(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｖｈ（可変重鎖）およびＶｌ（可変軽鎖）抗体鎖がそれぞれ、配列番号２９１および配列番号２９２によって同定される配列を含むか、または重鎖および軽鎖抗体鎖がそれぞれ、配列番号２８９および配列番号２９０によって同定される配列を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分。
【請求項２】
ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分が少なくとも二重特異性抗体またはそのフラグメントである、請求項１に記載の単離された抗体またはその抗原結合部分。
【請求項３】
請求項１または２に記載の単離された抗体またはその抗原結合部分をコードする核酸。
【請求項４】
請求項３に記載の核酸を含むベクター。
【請求項５】
請求項３に記載の核酸または請求項４に記載のベクターを含む宿主細胞。
【請求項６】
請求項１または２に記載のＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分の産生のための方法であって、抗体またはその結合部分の発現を可能にし、そして培養物から抗体またはその結合部分を回収することを可能にする条件下で、請求項５に記載の宿主細胞を培養することを含む、方法。
【請求項７】
請求項１または２に記載の単離された抗体またはその抗原結合部分を含む医薬組成物。
【請求項８】
少なくとも１つのさらなる治療用薬剤をさらに含む、請求項７記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本明細書において提供する技術は、抗体、それらの抗原結合部位、および誘導体、抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体をコードする核酸、ならびに相補的核酸、ベクターおよび核酸を含有する宿主細胞に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＴＮＦαは、単球およびマクロファージを含む白血球細胞によって産生されるサイトカインである。サイトカインは、感染または癌のような病態に応答して、免疫系を刺激および活性化する。ＴＮＦαは、敗血症、感染、自己免疫疾患、移植拒絶および移植片対宿主病を含むヒトの多様な疾患および異常に関与すると考えられている。さらに加えて、ＴＮＦαが過剰に発現すると、関節リウマチまたは乾癬のような免疫学的異常が生じ得える。
【０００３】
ヒトの疾患においてＴＮＦαが果たす役割を考慮すると、ＴＮＦαに結合する抗体は、ＴＮＦα活性を阻害するための治療に使用することが求められている。（例えば、Ｓａｌｆｅｌｄらの特許文献１、Ｃｒｅａらの特許文献２、および非特許文献１を参照のこと）。従って、高い親和性および／または遅い解離速度論でＴＮＦαに結合することが可能なヒト抗体、それらの抗原結合部分、および誘導体を開発することが重要である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】US patent 6,090,382
【特許文献２】WO2006/014477
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】Rajpal, et al., PNAS 102:8466-8471
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本明細書では、ＴＮＦαに結合することが可能な抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体を提供する。いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合部分は、それぞれ、配列番号１および２の重鎖および軽鎖またはそれらの可変領域を含む基本抗体またはその抗原結合部分と比較して、ＴＮＦαに対する改善された特性（例えば、親和性）を有する。本明細書において提供する抗体ならびに抗原結合部分および誘導体の重鎖および軽鎖配列を、基本配列と比較した、１つ以上の改変を有する基本配列に関して説明する。アミノ酸配列の改変については、残基番号の前に野生型アミノ酸および後にその位置における変異体アミノ酸を提供することによって、指定する。例えば、野生型のアスパラギン酸の代わりに配列番号１の３１位または残基３１においてグリシンを有する重鎖では、アミノ酸の１文字命名コードを使用して、「Ｄ３１Ｇ」として指定される。
【０００７】
ＴＮＦ−αに結合することが可能な抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体を提供する。いくつかの実施形態では、抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖またはその可変領域を含む。
【０００８】
いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【０００９】
いくつかの実施形態では、抗体、その抗原結合部分または誘導体は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｖ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖、ならびにＶ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｖ１９６Ａ  Ｔ１８０Ｉ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
【００１０】
いくつかの実施形態では、ＴＮＦ−αに結合することが可能な抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分は、配列番号１のアミノ酸３１〜３５を含む重鎖ＣＤＲ１領域、配列番号１のアミノ酸５０〜６６を含む重鎖ＣＤＲ２領域ならびに配列番号１のアミノ酸９９〜１００を含む重鎖ＣＤＲ３領域を含み、そしてＤ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの変更を有し、そしてここで、抗体またはその抗原結合部分は、場合により、配列番号２のアミノ酸２４〜３４を含む軽鎖ＣＤＲ１領域、配列番号２のアミノ酸５０〜５６を含む軽鎖ＣＤＲ２領域および配列番号２のアミノ酸８９〜９７を含む軽鎖ＣＤＲ３領域をさらに含み、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する。
【００１１】
抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体の重鎖および軽鎖をコードする核酸配列もまた、本明細書において提供する。核酸配列によってコードされる基本重鎖アミノ酸配列を、配列番号１に示す。基本重鎖アミノ酸配列をコードするサンプル核酸配列を、配列番号３に示す。核酸配列によってコードされる基本軽鎖アミノ酸配列を、配列番号２に示す。基本軽鎖アミノ酸配列をコードするサンプル核酸配列を、配列番号４に示す。
【００１２】
抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体は、関節リウマチ、炎症性腸疾患、乾癬、およびクローン病のような疾患ならびにＴＮＦαに関係する他の疾患の治療のために、患者に投与しようとする組成物を調製するために使用することができる。抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体はまた、ＴＮＦαを検出するか、または生物学的サンプルにおけるＴＮＦαのレベルを測定するための診断アッセイのようなアッセイにも使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】基本Ｆａｂの重鎖（配列番号１）および軽鎖（配列番号２）のアミノ酸配列を示す；重鎖および軽鎖の両方のＣＤＲ１、２、および３に、示すような下線を付す。
【図２】野生型の軽鎖、または対応する基本Ｆａｂ配列（野生型）と比較して、示された改変を伴う軽鎖と共に、ＣＤＲ−１において示された改変を伴う重鎖を有する本明細書において提供するＦａｂ変異体を示す表である。
【図３Ａ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図２由来の示されたＦａｂ変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ（homogenous time-resolved energy transfer assay）由来のデータを示す図表である。
【図３Ｂ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図２由来の示されたＦａｂ変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図３Ｃ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図２由来の示されたＦａｂ変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図４】対応する基本重鎖配列（野生型）と比較した、ＣＤＲ−２において示された改変残基を有する本明細書において提供する重鎖変異体を示す表である。
【図５Ａ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図４由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図５Ｂ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図４由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図６】対応する基本重鎖配列（野生型）と比較した、ＣＤＲ−３において示された改変残基を有する本明細書において提供する重鎖変異体を示す表である。
【図７Ａ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図６由来の示された変異体を含むＦａｂを使用するＥＬＩＳＡ由来のデータを示す図表である。
【図７Ｂ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図６由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図８】対応する基本軽鎖配列（野生型）と比較した、ＣＤＲ−１において示された改変残基を有する本明細書において提供する軽鎖変異体を示す表である。
【図９Ａ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図８由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図９Ｂ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図８由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図９Ｃ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図８由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図９Ｄ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図８由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図９Ｅ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図８由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図９Ｆ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図８由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図９Ｇ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図８由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１０】野生型の重鎖、または対応する基本配列（野生型）と比較して、示された改変を伴う重鎖と共に、ＣＤＲ−２において示された改変残基および他の改変残基を有する本明細書において提供する軽鎖変異体を示す表である。
【図１１Ａ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１１Ｂ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１１Ｃ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１１Ｄ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１１Ｅ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１１Ｆ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１１Ｇ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１１Ｈ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１１Ｉ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１０由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１２】対応する基本配列（野生型）と比較した、ＣＤＲ−３において示された改変残基および他の改変残基を有する本明細書において提供する軽鎖変異体を示す表である。
【図１３Ａ】ＦａｂＨＵＭまたはＦａｂＡ１と比較した、図１２由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１３Ｂ】ＦａｂＨＵＭまたはＦａｂＡ１と比較した、図１２由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１３Ｃ】ＦａｂＨＵＭまたはＦａｂＡ１と比較した、図１２由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１３Ｄ】ＦａｂＨＵＭまたはＦａｂＡ１と比較した、図１２由来の示された変異体を含むＦａｂを使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１３Ｅ】ＥＬＩＳＡアッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１４】対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
【図１５Ａ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１４由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１５Ｂ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１４由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１５Ｃ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１４由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１５Ｄ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１４由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１５Ｅ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１４由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１６】それぞれ、配列番号１および２をコードするサンプル核酸配列（配列番号３および配列番号４）を示す。
【図１７】対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
【図１８Ａ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１８Ｂ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図１９】対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
【図２０】ＦａｂＨＵＭと比較した、図１９由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２１】対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
【図２２Ａ】ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２２Ｂ】ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２２Ｃ】ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２２Ｄ】ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２２Ｅ】ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２２Ｆ】ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２２Ｇ】ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２２Ｈ】ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２２Ｉ】ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２２Ｊ】ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２２Ｋ】ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１Ｑと比較した、図２１由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２３】対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
【図２４Ａ】ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）またはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２３由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２４Ｂ】ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）またはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２３由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２４Ｃ】ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）またはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２３由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２４Ｄ】ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）またはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２３由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２４Ｅ】ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）またはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２３由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２４Ｆ】ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）またはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２３由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２５】対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
【図２６Ａ】ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）、ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１ＱまたはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２５由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２６Ｂ】ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）、ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１ＱまたはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２５由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２６Ｃ】ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）、ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１ＱまたはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２５由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２６Ｄ】ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）、ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１ＱまたはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２５由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２６Ｅ】ＦａｂＨＵＭ（ＦａｂＡ１）、ＦａｂＨｕｍ−Ｄ３１ＱまたはＦａｂｃｂ１−３と比較した、図２５由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２７】対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
【図２８Ａ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図２７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２８Ｂ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図２７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２８Ｃ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図２７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２８Ｄ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図２７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２８Ｅ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図２７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２８Ｆ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図２７由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図２９】対応する基本配列（野生型）と比較した、示された改変残基を伴う重鎖および軽鎖を有する本明細書において提供する変異体を示す表である。
【図３０Ａ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図２９由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図３０Ｂ】ＦａｂＨＵＭと比較した、図２９由来の示された変異体を使用する均一時間分解エネルギー移動アッセイ由来のデータを示す図表である。
【図３１Ａ】表面プラズモン共鳴解析によって決定された、ＦａｂＨｕｍと比較した、本明細書において提供する変異体の結合定数ｋａ、解離定数ｋｄおよび親和定数ＫＤを示す表である。
【図３１】図３１Ｂは、ＦａｂＨｕｍの表面プラズモン共鳴解析由来のデータを示すグラフである。図３１Ｃは、ＵＲＳ＿４．２ａ＿５２の表面プラズモン共鳴解析由来のデータを示すグラフである。
【図３２】ＦａｂＨＵＭと本発明の変異体とを比較した細胞ベースのＴＮＦ−α中和アッセイの結果を示すグラフである。
【図３３】本発明のいくつかの変異体の配列を示す。
【図３４】本発明のいくつかの変異体の全長抗体配列を示す（それぞれ、ＵＲＳ＿２．１ｂ＿９．０＿１−重鎖、ＵＲＳ＿２．１ｂ＿９．０＿１−軽鎖、ＵＲＳ＿２．１＿Ｈ２＿３＿７２−重鎖、ＵＲＳ＿２．１＿Ｈ２＿３＿７２−軽鎖、ＨＵＭＩＲＡ−重鎖、ＨＵＭＩＲＡ−軽鎖；配列番号４５７−４６２）。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本明細書では、ＴＮＦαに結合することが可能な抗体、それらの抗原結合部分、および誘導体（本明細書では「抗体」とも称する）を開示する。抗体は、それぞれ、配列番号１および２の重鎖および／または軽鎖可変領域のアミノ酸配列において１つ以上の改変を含む。免疫グロブリンの軽鎖および重鎖の両方の領域が抗原結合部位を含有することは、当業者に周知である。抗原結合部位を含有する領域は、４つの比較的不変な「フレームワーク領域」（ＦＲ）および３つの高度に可変な「超可変領域」（ＨＶ）からなる。ＨＶは、抗原に対する表面相補性を形成することによって、抗原への結合部位を構成し、そして特異性を決定するため、それらは、「相補性決定領域」、またはＣＤＲと呼ばれ、そしてＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３で示され、そして番号付けは、それぞれ、重鎖または軽鎖のＮ末端のＣＤＲ１から始まる。
【００１５】
いくつかの実施形態では、抗体は、重鎖の可変領域内に独特なＣＤＲ１領域を含む。抗体またはその抗原結合部位もしくは誘導体は、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、およびＡ４０Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１を含む重鎖可変領域を含み得、そしてさらに、場合により、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、およびＴ１８０Ｉからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列の軽鎖可変領域を含む。例えば、抗体またはその抗原結合部位もしくは誘導体は、配列番号１または配列番号１の残基３０〜３５を含み得、ここで、残基３１はＨであり、そして残基３２はＦである；またはここで、残基３１はＧであり、そして残基３２はＦもしくはＱである；またはここで、残基３１はＮである；またはここで、残基３２はＳである；またはここで、残基３１はＴであり、そして残基３２はＦである；またはここで、残基３はＧであり、そして配列番号１の残基３２はＦである；またはここで、配列番号１の残基３１はＲである。他の実施形態では、残基３１はＱであり、そしてさらに、場合により、配列番号２を有する軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基１８０はＩである；またはここで、配列番号１の残基３２はＳもしくはＦであり、そして場合により、配列番号２を有する軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基１６６はＲである；またはここで、配列番号１の残基３１はＨであり、そしてさらに、場合により、配列番号２の配列を有する軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基４０はＶであり、そして配列番号２の残基１２９はＡである。
【００１６】
他の実施形態では、抗体は、重鎖の可変領域内に独特なＣＤＲ２領域を含む。例えば、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、配列番号１または配列番号１の残基５０〜６６を含み得、ここで、残基５０はＧである；またはここで、残基５８はＴもしくはＶである。
【００１７】
他の実施形態では、抗体は、重鎖の可変領域内に独特なＣＤＲ３領域を含む。例えば、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、配列番号１または配列番号１の残基９９〜１１０を含み得、ここで、残基１０３はＰである。
【００１８】
加えて、抗体、その抗原結合部分、または誘導体の重鎖可変領域は、Ｄ３１Ｈ、Ｄ３１Ｑ、Ｙ３２Ｓ、およびＳ１００Ｋからなる群から選択される配列番号１の少なくとも１つの改変をさらに含み得る。
【００１９】
いくつかの実施形態では、抗体は、軽鎖の可変領域内に独特なＣＤＲ１領域を含む。抗体またはその抗原結合部位もしくは誘導体は、配列番号２または配列番号２のアミノ酸２３〜３４を含み、そしてＲ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、およびＩ２９Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する軽鎖可変領域を含み得る。例えば、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、配列番号２または配列番号２の残基２３〜３４を含み得、ここで、残基２４はＬであり、そして配列番号２の残基２５はＳもしくはＧであり、そして場合によりここで、配列番号２の残基２９はＬである；またはここで、残基２４はＡもしくはＴである；またはここで、残基２５はＳもしくはＴであり、そして場合によりここで、残基２７はＭである；またはここで、残基２７はＹ、Ｖ、もしくはＷであり、そして場合によりここで、残基２６はＴである；またはここで、残基２８はＳ、Ｐ、Ｒ、もしくはＬであり、そして場合によりここで、残基２９はＬもしくはＶである。
【００２０】
いくつかの実施形態では、抗体は、軽鎖の可変領域内に独特なＣＤＲ２領域を含む。抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、配列番号２または配列番号２のアミノ酸５０〜５６を含み、そしてＳ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する軽鎖可変領域を含み得、そしてさらに、場合により、配列番号１のアミノ酸配列を含み、そしてＥ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する重鎖を含む。例えば、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、配列番号２または配列番号２のアミノ酸５０〜５６を含み得、ここで、残基５３はＷである；あるいはここで、残基５２は、Ｗ、Ｇ、もしくはＮである；またはここで、残基５３はＹ、Ｆ、もしくはＶであり、そして場合によりここで、残基５２はＮであるか、または場合によりここで残基５７はＳである；あるいはここで、残基５３はＳであり、そして残基２１４はＧであり、そしてさらに、場合により、配列番号１のアミノ酸配列を有する重鎖を含み、ここで、残基６５はＲであり、そして残基６６はＮである；あるいはここで、配列番号２の残基５４はＳもしくはＴであり、そして場合により、ここで、残基５５はＩ、Ｋ、もしくはＬである；あるいはここで、残基５６はＲである。
【００２１】
いくつかの実施形態では、抗体は、軽鎖の可変領域内に独特なＣＤＲ３領域を含む。抗体またはその抗原結合部位もしくは誘導体は、配列番号２または配列番号２のアミノ酸８９〜９７を含み、そしてＶ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する軽鎖可変領域を含み得る。例えば、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、配列番号２または配列番号２のアミノ酸８９〜９７を含み得、ここで、残基９４はＰであり、そして残基９５はＭであり、そして場合により、ここで、残基１５はＭである；またはここで、残基９２はＩであり、そして場合によりここで、残基９３はＱであり、そして残基９４はＰである；またはここで、残基９２はＤであり、そして残基９３はＭである；またはここで、配列番号２の残基９３はＭであり、そして場合により、ここで、残基９４はＰである；またはここで、残基９３はＱであり、そして場合によりここで、残基９４はＰである；またはここで、残基９３はＫであり、そして残基９４はＳである；またはここで、残基９４はＰであり、そして残基９５は、Ｑ、Ａ、Ｓ、Ｍ、Ｅ、およびＶからなる群から選択される。
【００２２】
加えて、抗体、その抗原結合部分、または誘導体の軽鎖可変領域は、Ｑ２７Ｌ、Ｑ２７Ｙ、Ｑ２７Ｋ、Ｉ２９Ｌ、Ｔ５３Ｓ、Ｑ５５Ｌ、Ｎ９２Ｄ、Ｒ９３ＫおよびＡ９４Ｐからなる群から選択される配列番号２の少なくとも１つの改変をさらに含み得る。
【００２３】
本明細書に記載の様々な実施形態は相補的なものであり得、そして本明細書に含有される技術を鑑みて、当業者によって理解される様式で組み合わせるかまたは共に使用することができる。それ故、本明細書において提供する抗体、その抗原結合部分、および誘導体はまた、上記のバリエーションの組み合わせを含む。例えば、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｋ、Ｒ９３ＱおよびＡ９４Ｐからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する配列番号２を含み得、そして場合により、配列番号２の配列を有し、そしてＤ３１Ｈ、Ｄ３１Ｑ、Ｙ３２Ｆ、およびＹ３２Ｓからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する重鎖を含む。
【００２４】
いくつかの実施形態では、抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体は、それぞれ、配列番号１および２の重鎖および軽鎖の可変領域を含む抗体、その抗原結合部分、または誘導体と比較して、ＴＮＦαに対する改善された親和性を有する。改善された親和性は、改善された解離定数ＫＤまたは改善されたｋｏｆｆ速度定数の関数であり得る。いくつかの実施形態では、改善されたＫＤ解離定数または改善されたｋｏｆｆ速度定数は、配列番号１のアミノ酸配列を有する重鎖の可変領域および配列番号２のアミノ酸配列を有する軽鎖の可変領域を含む抗体またはその抗原結合フラグメントより少なくとも１．５倍低いか、または２、３、もしくは４倍低い。
【００２５】
好適な実施形態では、改善されたＫＤ解離定数または改善されたｋｏｆｆ速度定数は、配列番号１のアミノ酸配列を有する重鎖の可変領域および配列番号２のアミノ酸配列を有する軽鎖の可変領域を含む抗体またはその抗原結合フラグメントより少なくとも１０倍低いか、または１５、２０、３０倍低い。
【００２６】
いくつかの実施形態では、抗体、その抗原結合部分、もしくは誘導体またはそれらをコードする核酸が単離される。単離された生物学的成分（例えば、核酸分子またはタンパク質、例えば、抗体）は、成分が天然に存在する生物体の細胞中の他の生物学的成分、例えば、他の染色体および染色体外ＤＮＡおよびＲＮＡ、タンパク質ならびにオルガネラから実質的に分離または精製されている成分である。「単離」されている核酸およびタンパク質として、標準的な精製方法によって精製された核酸およびタンパク質が挙げられる。この用語はまた、宿主細胞における組み換え発現によって調製された核酸およびタンパク質ならびに化学的に合成された核酸を包含する。
【００２７】
本明細書では、アミノ酸を、アミノ酸の名称、３文字略称または１文字略称を使用して言及する。以下の表は、標準的なアミノ酸のリストを、それらの略称と共に示す。
【００２８】
【表１】
0005570998.tif 000002
【００２９】
特定のアミノ酸バリエーションおよびこのバリエーションをコードする核酸に加えて、バリエーションの保存的アミノ酸置換を本明細書において提供する。そのような置換は、保存的な置換であり、例えば、ここで、変異体アミノ酸は、同じ一般タイプのもう１つのアミノ酸によって置き換えられる。アミノ酸は、それらの側鎖に応じて、酸性、塩基性、中性および極性、または中性および非極性ならびに／あるいは芳香族性に分類することができる。変異体アミノ酸位置の好適な置換として、同じ位置に変異体アミノ酸と同じ１つ以上の分類を有する置換が挙げられる。それ故、一般に、アミノ酸、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、およびＨｉｓは塩基性であり；アミノ酸、アスパラギン酸およびグルタミン酸は酸性であり；アミノ酸、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、およびＡｓｎは中性極性であり；アミノ酸、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、およびＬｅｕは非極性脂肪族性であり、そしてアミノ酸、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、およびＴｙｒは芳香族性である。ＧｌｙおよびＡｌａは小さなアミノ酸であり、そしてＶａｌ、ＩｌｅおよびＬｅｕは脂肪族性アミノ酸である。
【００３０】
本明細書に記載のように、抗体の抗原結合フラグメントおよびその誘導体は、抗原に特異的に結合する抗体の任意の部分を含む。例えば、抗体の抗原−結合フラグメントは、１つ以上の免疫グロブリン鎖が、全長ではないが、抗原に特異的に結合することが可能である分子を含む。用語「その抗原結合フラグメント」内に包含される結合フラグメントの例として、例えば、（ｉ）Ｆａｂフラグメント、例えば、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価のフラグメント；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）２フラグメント、ヒンジ領域におけるジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂフラグメントを含む二価のフラグメント；（ｉｉｉ）ＶＨおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄフラグメント；（ｉｖ）抗体のシングルアームのＶＬおよびＶＨドメインからなるＦｖフラグメント、（ｖ）ＶＨドメインからなるｄＡｂフラグメント（Ward et al., (1989) Nature 341:544-546）；ならびに（ｖｉ）抗原に特異的に結合することが可能な十分なフレームワーク、例えば、可変領域の抗原結合部分を有する単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が挙げられる。軽鎖可変領域の抗原結合部分および重鎖可変領域の抗原結合部分、例えば、Ｆｖフラグメント、ＶＬおよびＶＨの２つのドメインは、組み換え方法を使用して、それらを、ＶＬおよびＶＨ領域が対合して、一価の分子を形成する単一のタンパク質鎖にすることが可能な合成リンカーによって、接続することができる（単一鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として既知である；例えば、Bird et al. (1988) Science 242:423-426；およびHuston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883を参照のこと）。そのような一本鎖抗体もまた、用語「その抗原−結合フラグメント」内に含有されることが意図される。これらの抗体フラグメントは、当業者に公知の従来の技術を使用して作製され、そしてフラグメントは、結合能について、無傷（ｉｎｔａｃｔ）な抗体と同じ様式で、スクリーニングされる。上記の抗体、その抗原結合部分、または誘導体はまた、上記のＴＮＦ−α結合ドメインに加えて、ダイアボディ（Ｄｉａｂｏｄｉｅｓ）、Ｂｉｓ−ｓｃＦｖｓ、二重特異性Ｆａｂ２または三重特異性Ｆａｂ３のような他のタンパク質および／またはエピトープのような結合親和性を伴う１つ以上のさらなるドメイン（P. Holliger and P. J. Hudson, Nature Biotechnology, 2005, Vol. 23, Number 9, page 1126-1136を参照のこと）を含む組み換え結合タンパク質を包含する。これらの結合タンパク質は、当業者に公知の従来の技術を使用して作製され、そしてフラグメントは、結合能について、無傷（ｉｎｔａｃｔ）な抗体と同じ様式で、スクリーニングされる。加えて、抗体、その抗原結合部分、または誘導体は、ヒト抗体であり、例えば、ヒト起源であり得るか、またはヒト化され得る。ヒト抗体またはそのフラグメントもしくは誘導体が好適である一方、本発明の分子において用いることができる他の抗体は、マウス、キメラおよびヒト化抗体である。これらのキメラまたはヒト化抗体および抗体フラグメントは、当業者に公知の従来の技術を使用して作製される。ヒトモノクローナル抗体またはそのフラグメントおよび誘導体が好適である。
【００３１】
加えて、抗体、その抗原結合部分、または誘導体を誘導体化して、例えば、その生化学的安定性を改善するか、またはそれを検出可能な標識物もしくは治療用薬剤にコンジュゲートすることができる。例えば、抗体、その抗原結合部分、または誘導体を、ポリエチレングリコール（「ＰＥＧ」）、セルロース、デキストラン、アガロース、またはアミノ酸コポリマーのようなポリマー骨格にコンジュゲートすることができる。誘導体化の他の例として、放射性同位元素、フルオロフォア、化学発光剤、細胞毒製剤および酵素による標識が挙げられる。これらの修飾は、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体がＴＮＦαに結合する能力が無傷（ｉｎｔａｃｔ）の状態を保つように、当業者によって、容易に行うことができる。
【００３２】
遺伝子コードが縮重しており、即ち、２つ以上のコドントリプレットが、同じアミノ酸をコードすることができることが、当業者に周知である。従って、本明細書において提供する核酸はまた、異なるコドンを使用して、同じアミノ酸配列をコードする代替的配列を含む。さらに加えて、本明細書において提供する核酸はまた、本明細書において提供する抗体、その抗原結合フラグメントおよびその誘導体をコードする核酸のコード配列および相補配列の両方を含む。
【００３３】
本明細書において提供する改変された重鎖および軽鎖またはその可変領域は、当該分野において標準的な方法によって作製することができる。例えば、改変された重鎖を作製するために、得られる変異誘発された配列が改変された重鎖をコードするように、当業者は、基本核酸配列を変異誘発することができる。一実施形態では、重鎖の基本配列を配列番号３に示す。同様に、改変された軽鎖を作製するために、得られる変異誘発された配列が改変された軽鎖をコードするように、当業者は、配列番号４を変異誘発することができる。本明細書に記載のように、遺伝子コードの縮重のため、基本ヌクレオチド配列は、配列番号３または４に示す配列とは異なり得、そしてなお、それぞれ、配列番号１または２のアミノ酸配列をコードすることが理解される。
【００３４】
当業者は、所望される重鎖または軽鎖をコードする配列を容易に変異誘発することができ、なおここで、核酸配列は、アミノ酸配列をコードするために、異なるコドンを使用する。変異誘発に使用すべき核酸は、例えば、当該技術分野において公知の化学合成方法を使用して、または例えば、基本配列を作製するためのオリゴヌクレオチドのＰＣＲアセンブリもしくはオリゴヌクレオチドのライゲーションによって、作製することができる。核酸配列における改変は、（例えば、オリゴヌクレオチド変異誘発によって）コード核酸内の予め決定された位置における特定の変化を組み入れるように設計されたオリゴヌクレオチドを使用して、作製することができる。Kunkle et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 82:488-492 (1985)に記載の変異誘発方法は、適切な方法である。当該技術分野において公知の他の適切な方法として、ＰＣＲ変異誘発が挙げられる。部位特異的変異誘発（Carter et al., Nucl. Acids Res., 13:4331 (1986)；Zoller et al., Nucl. Acids Res., 10:6487 (1987))、カセット変異誘発Wells et al., Gene, 34:315 (1985)、制限選択変異誘発(Wells et al., Philos. Trans. R. Soc. London SerA, 317:415 (1986)）。改変された重鎖または軽鎖をコードするポリヌクレオチドはまた、例えば、改変されたアミノ酸配列をコードする核酸配列の直接合成によっても作製することができる。
【００３５】
本明細書において提供する抗体、その抗原結合部分、または誘導体は、宿主細胞における軽鎖および重鎖またはその部分をコードする核酸配列の組み換え発現によって調製することができる。抗体、その抗原結合部分、または誘導体を組み換え的に発現させるために、軽鎖および重鎖が宿主細胞において発現されるように、軽鎖および／または重鎖あるいはそれらの部分をコードするＤＮＡフラグメントを担持する１つ以上の組み換え発現ベクターで、宿主細胞をトランスフェクトすることができる。Sambrook, Fritsch and Maniatis (eds), Molecular Cloning; A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor, N.Y., (1989), Ausubel, F. M. et al. (eds.) Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates, (1989)およびＢｏｓｓらによるU.S. Pat. No. 4,816,397に記載の方法論のような標準的な組み換えＤＮＡ方法論を使用して、重鎖および軽鎖をコードする核酸を調製および／または入手し、これらの核酸を組み換え発現ベクターに組み入れ、そしてベクターを宿主細胞に導入する。
【００３６】
加えて、重鎖および／または軽鎖の可変領域をコードする核酸配列を、例えば、全長抗体鎖、ＦａｂフラグメントまたはｓｃＦｖをコードする核酸配列に変換することができる。ＶＬまたはＶＨをコードするＤＮＡフラグメントは、（２つのＤＮＡフラグメントによってコードされるアミノ酸配列がインフレームであるように）例えば、抗体定常領域または可撓性リンカーをコードするもう１つのＤＮＡフラグメントに作動可能に連結することができる。ヒト重鎖および軽鎖の定常領域の配列は当該技術分野において公知であり（例えば、Kabat, E. A., el al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242を参照のこと）、そしてこれらの領域を包含するＤＮＡフラグメントは、標準的なＰＣＲ増幅によって得ることができる。
【００３７】
ｓｃＦｖをコードするポリヌクレオチド配列を作製するために、ＶＬおよびＶＨ領域が可撓性リンカーで接続された連続する単一鎖のタンパク質として、ＶＨおよびＶＬ配列を発現させることができるように、ＶＨおよびＶＬをコードする核酸を、可撓性リンカーをコードするもう１つのフラグメントに作動可能に連結することができる（例えば、Bird et al. (1988) Science 242:423-426；Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879-5883；McCafferty et al., Nature (1990) 348:552-554を参照のこと）。
【００３８】
抗体、その抗原結合部分または誘導体を発現させるために、標準的な組み換えＤＮＡ発現方法を使用することができる（例えば、Goeddel; Gene Expression Technology. Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, Calif. (1990)を参照のこと）。例えば、所望されるポリペプチドをコードするＤＮＡを、発現ベクターに挿入することができ、次いで、発現ベクターは、適切な宿主細胞にトランスフェクトされる。いくつかの実施形態では、重鎖および軽鎖をコードするＤＮＡは、個別のベクターに挿入される。他の実施形態では、重鎖および軽鎖をコードするＤＮＡは、同じベクターに挿入される。調節配列の選択を含む発現ベクターの設計は、宿主細胞の選択、所望されるタンパク質の発現のレベルおよび発現が構成性であるかまたは誘導性であるかのような因子の影響を受けることが理解される。
【００３９】
哺乳動物宿主細胞発現のための好適な調節配列として、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）から誘導されるプロモーターおよび／またはエンハンサー（例えば、ＣＭＶプロモーター／エンハンサー）、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）（例えば、ＳＶ４０プロモーター／エンハンサー）、アデノウイルス、（例えば、アデノウイルス主要後期プロモーター（ＡｄＭＬＰ））およびポリオーマのような哺乳動物細胞において高レベルのタンパク質発現を指令するウイルスエレメントが挙げられる。ウイルス調節エレメント、およびそれらの配列のさらなる説明については、例えば、ＳｔｉｎｓｋｉによるU.S. 5,168,062、ＢｅｌｌらによるU.S. 4,510,245およびＳｃｈａｆｆｎｅｒらによるU.S. 4,968,615を参照のこと。組み換え発現ベクターはまた、複製開始点および選択マーカーを含むことができる(例えば、ＡｘｅｌらによるU.S. 4,399,216、4,634,665およびU.S. 5,179,017を参照のこと）。適切な選択マーカーとして、ベクターが導入されている宿主細胞にＧ４１８、ハイグロマイシンまたはメトトレキサートのような薬物に対する耐性を付与する遺伝子が挙げられる。例えば、ジヒドロ葉酸レダクターゼ（ＤＨＦＲ）遺伝子は、メトトレキサートに対する耐性を付与し、そしてｎｅｏ遺伝子はＧ４１８に対する耐性を付与する。
【００４０】
発現ベクターの宿主細胞へのトランスフェクションは、エレクトロポレーション、リン酸カルシウム沈殿、およびＤＥＡＥ−デキストラントランスフェクションのような標準的な技術を使用して、行うことができる。
【００４１】
本明細書において提供する抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体を発現する適切な哺乳動物宿主細胞として、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ細胞）（Urlaub and Chasin, (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216-4220に記載のｄｈｆｒ−  ＣＨＯ細胞を含む、例えば、R. J. Kaufman and P. A. Sharp (1982) Mol. Biol. 159:601-621における記載のようにＤＨＦＲ選択マーカーと共に使用する)、ＮＳＯ骨髄腫細胞、ＣＯＳ細胞およびＳＰ２細胞が挙げられる。いくつかの実施形態では、発現されたタンパク質が、宿主細胞が増殖する培養培地に分泌されるように、発現ベクターが設計される。抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体は、標準的なタンパク質精製方法を使用して、培養培地から回収することができる。
【００４２】
抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体はまた、例えば、ＲｏｂｉｎｓｏｎらのU.S. 6,204,023および（Carter et al., Bio/Technology 10:163-167 (1992)に記載の適切なベクターを使用して、原核細胞においても産生させることができる。発現ベクターは、発現されたポリペプチドを、グラム陰性菌のペリプラズム空間、またはグラム陽性菌もしくは酵母の細胞外空間に分泌させるように設計することができるか、あるいはポリペプチドを、細胞内、例えば、封入体に保持させることができる。重鎖および軽鎖抗体ならびにそれらのフラグメントの本明細書において提供する配列は、発現をそれぞれの空間に指向する機能的エレメントに作動可能に連結させることができ、そのような機能的エレメントは、例えば、リーダー配列を含むことは、当業者に周知である。それぞれ、発現されたポリペプチドをペリプラズム空間から単離することができるか、または封入体を宿主細胞から単離することができる。例えば、Ｆａｂ’−ＳＨフラグメントを大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）から直接回収し、そして化学的に結合させて、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントを形成させることができる（Carter et al., (1992)）。別の実施形態では、抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体は、例えば、U.S.5,204,244に記載のように、相同組み換えによって産生させてもよい。
【００４３】
本明細書に記載のベクターにおいてＤＮＡをクローニングまたは発現させるための適切な宿主細胞は、上記の原核細胞、酵母、または高等真核細胞である。原核細胞に加えて、糸状菌または酵母のような真核微生物は、本明細書において提供する抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体に適切なクローニングまたは発現宿主である。サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）は、適切な真核宿主微生物である。もう１つの適切な酵母宿主は、シゾサッカロマイセス・ポンベ（Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｐｏｍｂｅ）である。本明細書において提供するグリコシル化抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体の発現に適切な宿主細胞として、哺乳動物、植物、および昆虫細胞が挙げられる。抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体は、ハイドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、組み換えタグ精製（例えば、ＨＡ−タグ、Ｍｙｃ−タグ、Ｈｉｓ−タグ）およびアフィニティークロマトグラフィーを含むが、これらに限定されない標準的なタンパク質精製方法を使用して、培養培地から回収することができる。
【００４４】
宿主細胞を、抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体産生のための上記の発現またはクローニングベクターで形質転換し、そしてプロモーターを含むか、形質転換体を選択するか、または所望される配列をコードする遺伝子を増幅するのに適切であるように改変された従来の栄養培地において培養する。Ｈａｍ’ｓ  Ｆ１０、Ｍｉｎｉｍａｌ  Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ  Ｍｅｄｉｕｍ（（ＭＥＭ）、ＲＰＭＩ−１６４０、およびＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ’ｓ  Ｍｅｄｉｕｍ（ＤＭＥＭ）のような市販の培地は、宿主細胞を培養するのに適切である。温度、ｐＨなどのような培養条件は、発現のために選択される宿主細胞によって先に使用された条件であり、そして当業者には明らかであろう。
【００４５】
組み換え技術を使用する場合、抗体を、細胞内、ペリプラズム空間に産生させるか、または培地に直接分泌させることができる。第１の工程として抗体を細胞内に産生させる場合、粒状破砕物（宿主細胞もしくは溶解されたフラグメントのいずれか）が、例えば、遠心分離または限外ろ過によって取り出される。Carter et al., Bio/Technology 10:163-167 (1992)は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ)のペリプラズム空間に分泌される抗体を単離するための手順について説明している。簡単に説明すると、細胞ペーストを、酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）、ＥＤＴＡ、およびフッ化フェニルメチルスルホニル（ＰＭＳＦ）の存在下、約３０分間、融解する。細胞破砕物は、遠心分離によって取り出すことができる。抗体が培地に分泌される場合、そのような発現系由来の上清を、一般的に最初に、市販のタンパク質濃縮フィルター、例えば、ＡｍｉｃｏｎまたはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｐｅｌｌｉｃｏｎ限外ろ過ユニットを使用して、濃縮する。ＰＭＳＦのプロテアーゼ阻害剤を、タンパク質分解を阻害するための上記の工程のいずれかに含めてもよく、そして抗生物質を、外来性コンタミナントの増殖を防止するために含めてもよい。
【００４６】
細胞から調製される抗体組成物は、例えば、イオン交換クロマトグラフィー、疎水性相互作用クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、ハイドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、およびアフィニティークロマトグラフィーを使用して精製することができる。
【００４７】
抗体、それらの抗原結合フラグメントおよびそれらの誘導体は、ＥＬＩＳＡアッセイおよび／またはＨＴＲＦアッセイ（いずれの当業者にも公知である他のアッセイ形式を適用することもできる）によって、ＴＮＦ−αに結合することが認められている。本明細書において提供する抗体、その抗原結合フラグメントおよびその誘導体の多くは、抗ＴＮＦαモノクローナル抗体Ｄ２Ｅ７（配列番号１および配列番号２を含む）のＦａｂフラグメントと同様に、少なくともＴＮＦ−αに結合する。アッセイでは、Ｄ２Ｅ７の抗原結合フラグメントと比較して、変異体の多くが、減少したオフ速度（ｏｆｆ−ｒａｔｅ）を有することが実証される。
【００４８】
本明細書において提供する抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体は、それを必要とする患者に投与することができる。抗体、その抗原結合部分または誘導体を投与するために、多様な経路を使用することができる。臨床的に許容されない有害作用を引き起こすことなく、有効なレベルの活性化合物を生じる任意の形態を意味する、医学的に許容できる任意の投与形態を使用して、抗体、その抗原結合部分または誘導体を投与することができる。そのような投与形態として、経口、舌下、局所、点鼻、経皮または非経口経路が挙げられる。用語「非経口」は、皮下、静脈内、筋肉内、または輸注を含む。
【００４９】
抗体、その抗原結合部分または誘導体は、一回で、連続的に、例えば、連続ポンプによって、または定期的な間隔で、投与することができる。定期的間隔は、１週間に１回、１週間に２回、または１箇月に１回であってもよい。適切な体液性、細胞性免疫および／または臨床応答を誘発するために、投薬を、１箇月、２箇月、３箇月もしくはそれ以上の期間行うことができる。特定の組成物の複数回の投薬の所望される時間間隔は、当業者による過度の実験を伴うことなく、決定することができる。抗体またはその抗原結合フラグメントの投与のための他のプロトコルは、当業者に周知であり、投与量、投与スケジュール、投与部位、投与形態などは、前述と異なる。
【００５０】
なおもう１つの実施形態では、本明細書において提供する抗体、それらの抗原結合部分、または誘導体を使用して、生物学的サンプルにおいて、インビボ、エクスビボまたはインビトロでＴＮＦαを検出することができる。適切な生物学的サンプルとして、例えば、ＴＮＦαを含有することが予想される組織サンプル、体液サンプルまたは細胞サンプルが挙げられる。これは、例えば、抗体とＴＮＦα（サンプル中に存在する場合）との間の複合体の形成を可能にする条件下で、試験しようとするサンプルを、場合により、コントロールサンプルを伴って、抗体、その抗原結合部分、または誘導体と接触させることによって、達成することができる。次いで、複合体形成を、例えば、酵素免疫吸着測定法（ＥＬＩＳＡ）を使用して、検出することができる。
【００５１】
１つの実施形態では、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体、またはその抗原結合部分、もしくは誘導体であって、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。なおもう１つの実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であり、ここで、配列番号１における改変は、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、およびＡ４０Ｖからなる群から選択され、そしてＴ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、およびＴ１８０Ｉからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖をさらに含む。
【００５２】
もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＨであり、そして配列番号１の残基３２はＦである。
【００５３】
もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＧであり、そして配列番号１の残基３２はＦまたはＱである。
【００５４】
もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３２はＳである。
【００５５】
もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＴであり、そして配列番号１の残基３２はＦである。
【００５６】
さらに加えて、もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＱであり、そして配列番号２を有する軽鎖をさらに含み、ここで、配列番号２の残基１８０はＩである。
【００５７】
もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＮである。
【００５８】
もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＮであり、そして配列番号１の残基３２はＳまたはＦである。さらなる実施形態は、配列番号２の配列を有する軽鎖をさらに含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であり、ここで、配列番号２の残基１６６はＲである。
【００５９】
もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＨであり、そして配列番号２の配列を有する軽鎖をさらに含み、ここで、配列番号２の残基４０はＶであり、そして配列番号２の残基１２９はＡである。
【００６０】
もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＴであり、そして配列番号１の残基３２はＦである。
【００６１】
もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＧであり、そして配列番号１の残基３２はＦである。
【００６２】
もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体であって、ここで、配列番号１の残基３１はＲである。
【００６３】
もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体であって、ここで、配列番号１の残基５０はＧである。
【００６４】
もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体であって、ここで、配列番号１の残基５８はＴまたはＶである。
【００６５】
もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体であって、ここで、配列番号１の残基１０３はＰである。
【００６６】
もう１つの実施形態は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体であって、ここで、重鎖は、Ｄ３１Ｈ、Ｄ３１Ｑ、Ｙ３２Ｓ、およびＳ１００Ｋからなる群から選択される少なくとも１つの改変をさらに含む。
【００６７】
もう１つの実施形態は、配列番号１のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む抗体またはその抗原結合フラグメントより少なくとも１．５倍低いＫＤ解離定数またはＫｏｆｆ速度定数を有するＱ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む上記の単離された抗体である。
【００６８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体、またはその抗原結合部分、もしくは誘導体をコードする核酸であって、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｒ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。さらなる実施形態は、上記の核酸を含むベクターである。なおさらなる実施形態は、上記の核酸を含む宿主細胞である。
【００６９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。さらに加えて、実施形態は、上記の単離された抗体または抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２における改変は、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、およびＩ２９Ｖからなる群から選択される。
【００７０】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、およびＩ２９Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基２４はＬであり、そして配列番号２の残基２５はＳまたはＧである。さらなる実施形態は、上記の抗体であって、ここで、配列番号２の残基２５はＳであり、そしてここで、配列番号２の残基２９はＬである。
【００７１】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、およびＩ２９Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基２４はＡまたはＴである。
【００７２】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、およびＩ２９Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基２５はＳまたはＴである。なおさらなる実施形態は、上記の抗体であり、ここで、配列番号２の残基２７はＭである。
【００７３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、およびＩ２９Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基２７はＹ、Ｖ、またはＷである。さらなる実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基２６はＴである。
【００７４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、およびＩ２９Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２の残基２８はＳ、Ｐ、Ｒ、またはＬである。さらなる実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基２９はＬまたはＶである。
【００７５】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。さらなる実施形態は、上記の単離された抗体または抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基５３はＷである。
【００７６】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、配列番号２の残基５２はＷ、Ｇ、またはＮである。
【００７７】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、配列番号２の残基５２はＮであり、そして配列番号２の残基５３はＹ、Ｆ、またはＶである。
【００７８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、配列番号２の残基５３はＹ、Ｆ、またはＶであり、そして配列番号２の残基５７はＳである。
【００７９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、配列番号２の残基５３はＳであり、そして配列番号２の残基２１４はＧであり、そしてさらに、配列番号１のアミノ酸配列を有する重鎖を含み、ここで、残基６５はＲであり、そして残基６６はＮである。
【００８０】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、配列番号２の残基５４はＳ、またはＴである。さらなる実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基５５はＩ、Ｋ、またはＬである。
【００８１】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、配列番号２の残基５６はＲである。
【００８２】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２における改変は、Ｖ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択される。なおさらなる実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基１５はＭであり、配列番号２の残基９４はＰであり、そして配列番号２の残基９５はＭである。
【００８３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２における改変は、Ｖ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択され、ここで、配列番号２の残基９２はＩである。さらなる実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基９３はＱであり、そして配列番号２の残基９４はＰである。
【００８４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２における改変は、Ｖ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択され、ここで、配列番号２の残基９２はＤであり、そして配列番号２の残基９３はＭである。
【００８５】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２における改変は、Ｖ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択され、ここで、配列番号２の残基９３はＭである。さらなる実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基９４はＰである。
【００８６】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２における改変は、Ｖ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択され、ここで、配列番号２の残基９３はＱである。さらなる実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、配列番号２の残基９４はＰである。
【００８７】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２における改変は、Ｖ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択され、配列番号２の残基９３はＫであり、そして配列番号２の残基９４はＳである。
【００８８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体は、Ｖ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｔ１８０Ｉ、Ｖ１９６Ａ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、配列番号２における改変は、Ｖ１５Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択され、ここで、配列番号２の残基９４はＰであり、そして配列番号２の残基９５は、Ｑ、Ａ、Ｓ、Ｍ、Ｅ、およびＶからなる群から選択される。
【００８９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、軽鎖は、Ｑ２７Ｌ、Ｑ２７Ｙ、Ｑ２７Ｋ、Ｉ２９Ｌ、Ｔ５３Ｓ、Ｑ５５Ｌ、Ｎ９２Ｄ、Ｒ９３ＫおよびＡ９４Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの改変をさらに含む。
【００９０】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分もしくは誘導体であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分もしくはその誘導体は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、そしてさらに、Ｅ６５ＲおよびＧ６６Ｎからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、ここで、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分は、配列番号１のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む抗体またはその抗原結合フラグメントより少なくとも１．５倍低いＫＤ解離定数またはＫｏｆｆ速度定数を有する。
【００９１】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｖ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖、ならびにＶ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｖ１９６Ａ  Ｔ１８０Ｉ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。さらなる実施形態は、配列番号１のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号２のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む抗体またはその抗原結合フラグメントより少なくとも１．５倍低いＫＤ解離定数またはＫｏｆｆ速度定数を有する上記の単離された抗体またはその抗原結合部分である。
【００９２】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分は、Ｑ３Ｒ、Ｄ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ４０Ｖ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する配列番号１のアミノ酸配列を含む重鎖、ならびにＶ１５Ｍ、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｙ４９Ｓ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、Ｐ９５Ｖ、Ｔ１２９Ａ、Ｑ１６６Ｒ、Ｖ１９６Ａ  Ｔ１８０Ｉ、およびＣ２１４Ｇからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する配列番号２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、ここで、軽鎖は、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｋ、Ｒ９３ＱおよびＡ９４Ｐからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する。さらに実施形態は、上記の単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重鎖は、Ｄ３１Ｈ、Ｄ３１Ｑ、Ｙ３２Ｆ、およびＹ３２Ｓからなる群から選択される配列において少なくとも１つの改変を有する。
【００９３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体またはその抗原結合部分は、配列番号１のアミノ酸３１〜３５を含む重鎖ＣＤＲ１領域、配列番号１のアミノ酸５０〜６６を含む重鎖ＣＤＲ２領域ならびに配列番号１のアミノ酸９９〜１００を含む重鎖ＣＤＲ３領域を含み、そしてＤ３１Ｇ、Ｄ３１Ｎ、Ｄ３１Ｔ、Ｄ３１Ｒ、Ｙ３２Ｆ、Ｙ３２Ｑ、Ｍ３４Ｉ、Ａ５０Ｇ、Ｉ５８Ｔ、Ｉ５８Ｖ、Ｅ６５Ｒ、Ｇ６６Ｎ、およびＳ１０３Ｐからなる群から選択される少なくとも１つの変更を有し、そしてここで、抗体またはその抗原結合部分は、さらに場合により、配列番号２のアミノ酸２４〜３４を含む軽鎖ＣＤＲ１領域、配列番号２のアミノ酸５０〜５６を含む軽鎖ＣＤＲ２領域および配列番号２のアミノ酸８９〜９７を含む軽鎖ＣＤＲ３領域をさらに含み、Ｒ２４Ｌ、Ｒ２４Ａ、Ｒ２４Ｔ、Ｒ２５Ｓ、Ｒ２５Ｇ、Ｒ２５Ｔ、Ｓ２６Ｔ、Ｑ２７Ｍ、Ｑ２７Ｖ、Ｑ２７Ｗ、Ｇ２８Ｓ、Ｇ２８Ｐ、Ｇ２８Ｒ、Ｇ２８Ｌ、Ｉ２９Ｖ、Ｓ５２Ｎ、Ｓ５２Ｇ、Ｓ５２Ｗ、Ｔ５３Ｗ、Ｔ５３Ｙ、Ｔ５３Ｇ、Ｔ５３Ｆ、Ｔ５３Ｖ、Ｌ５４Ｓ、Ｌ５４Ｔ、Ｑ５５Ｉ、Ｑ５５Ｋ、Ｓ５６Ｒ、Ｇ５７Ｓ、Ｖ５８Ｍ、Ｎ９２Ｉ、Ｒ９３Ｑ、Ｒ９３Ｍ、Ａ９４Ｓ、Ｐ９５Ｑ、Ｐ９５Ａ、Ｐ９５Ｓ、Ｐ９５Ｍ、Ｐ９５Ｅ、およびＰ９５Ｖからなる群から選択される少なくとも１つの改変を有する。
【００９４】
もう１つの実施形態は、Ｖｈ（可変重鎖）抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４３、４４、および４５によって同定されるＶｈＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そしてＶｌ（可変軽鎖）抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４９、５０および５１によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であるが、但し、Ｖｈ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４６、４７、および４８によって同定されるＶｈＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そしてＶｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号５２、５３および５４によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分を含まない。さらに実施形態は、それぞれ、配列番号４６３および配列番号４６４によって同定される重鎖および軽鎖を有する抗体より少なくとも３倍低い親和定数ＫＤまたはｋｏｆｆ速度定数でＴＮＦ−αに結合することが可能な上記の単離された抗体またはその抗原結合部分である。さらなる好適な実施形態は、３０ｐＭ未満、より好ましくは、１０ｐＭ以下の親和定数ＫＤでＴＮＦ−αに結合することが可能な上記の単離された抗体またはその抗原結合部分である。
【００９５】
もう１つの実施形態は、Ｖｈ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４３、４４、および４５によって同定されるＶｈＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域を含み、そしてＶｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４９、５０および５１によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であるが、但し、Ｖｈ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４６、４７、および４８によって同定されるＶｈＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そしてＶｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号５２、５３および５４によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分を含まない。
【００９６】
もう１つの実施形態は、Ｖｈ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４３、４４、および４５によって同定されるＶｈＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そしてＶｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４９、５０および５１によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そして重鎖Ｖｈ領域は、３０位においてＧを有する、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分である。Ｖｈ領域の３０位は、標準的な番号付けによって同定される（例えば、Kabat, E. A., el al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242を参照のこと）。
【００９７】
もう１つの実施形態は、Ｖｈ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４３、４４、および４５によって同定されるＶｈＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域を含み、そしてＶｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４９、５０および５１によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域を含み、そして重鎖Ｖｈ領域は、３０位においてＧを有する、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分である。Ｖｈ領域の３０位は、標準的な番号付けによって同定される（例えば、Kabat, E. A., el al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242を参照のこと）。
【００９８】
もう１つの実施形態は、単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列が配列番号５５によって同定されるＶｈＣＤＲ１領域を含む。
【００９９】
もう１つの実施形態は、単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列が配列番号５５によって同定されるＶｈＣＤＲ１領域を含み、そしてここで、重鎖Ｖｈ領域は３０位においてＧを有する。Ｖｈ領域の３０位は、標準的な番号付けによって同定される（例えば、Kabat, E. A., el al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242を参照のこと）。
【０１００】
もう１つの実施形態は、単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列が配列番号５５によって同定されるＶｈＣＤＲ１領域を含み、そしてここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４９、５０および５１によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含む。
【０１０１】
もう１つの実施形態は、単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列が配列番号５５によって同定されるＶｈＣＤＲ１領域を含み、そしてここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４９、５０および５１によって同定されるＶｌＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域のうちの少なくとも１つを含み、そしてここで、重鎖Ｖｈ領域は、３０位においてＧを有する。Ｖｈ領域の３０位は、標準的な番号付けによって同定される（例えば、Kabat, E. A., el al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242を参照のこと）。
【０１０２】
もう１つの実施形態は、単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列が配列番号５６によって同定されるＶｌＣＤＲ３領域を含む。
【０１０３】
もう１つの実施形態は、単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列が、それぞれ、配列番号４３、４４、および４５によって同定されるＶｈＣＤＲ１領域のうちの少なくとも１つを含み、そしてここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列が配列番号５６によって同定されるＶｌＣＤＲ３領域を含む。
【０１０４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２０、２１、２２、２３、２４、２５および２６からなる配列の群に含まれる配列を含むが、但し、配列番号４０によって同定される配列を含まない。
【０１０５】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２１、２２、２３、２４、２５および２６からなる配列の群に含まれる配列を含む。
【０１０６】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２０によって同定される配列を含むが、但し、配列番号４０によって同定される配列を含まない。
【０１０７】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２１によって同定される配列を含む。
【０１０８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２２によって同定される配列を含む。
【０１０９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２３によって同定される配列を含む。
【０１１０】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２４によって同定される配列を含む。
【０１１１】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２５によって同定される配列を含む。
【０１１２】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号２６によって同定される配列を含む。
【０１１３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号２７によって同定される配列を含むが、但し、配列番号４２によって同定される配列を含まない。
【０１１４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号２８によって同定される配列を含む。
【０１１５】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号２９によって同定される配列を含む。
【０１１６】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３０によって同定される配列を含む。
【０１１７】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３１によって同定される配列を含む。
【０１１８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３２によって同定される配列を含む。
【０１１９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３３によって同定される配列を含む。
【０１２０】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３４によって同定される配列を含む。
【０１２１】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３７によって同定される配列を含む。
【０１２２】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号３８によって同定される配列を含む。
【０１２３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２０、２１、２２、２３、２４、２５および２６からなる配列の群に含まれる配列、ならびに配列番号２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３７および３８からなる配列の群に含まれる配列を含むが、但し、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖が、それぞれ、配列番号４０および配列番号４２によって同定される配列を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分を含まない。
【０１２４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２０および配列番号２７によって同定される配列を含むが、但し、ＶｈおよびＶｌ鎖が、それぞれ、配列番号４０および配列番号４２によって同定される配列を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分を含まない。
【０１２５】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号２７によって同定される配列を含む。
【０１２６】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号２７によって同定される配列を含む。
【０１２７】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号２７によって同定される配列を含む。
【０１２８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号２７によって同定される配列を含む。
【０１２９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２５および配列番号２７によって同定される配列を含む。
【０１３０】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２６および配列番号２７によって同定される配列を含む。
【０１３１】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号３７によって同定される配列を含む。
【０１３２】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号３７によって同定される配列を含む。
【０１３３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号３８によって同定される配列を含む。
【０１３４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号３８によって同定される配列を含む。
【０１３５】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２０および配列番号３１によって同定される配列を含む。
【０１３６】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号３１によって同定される配列を含む。
【０１３７】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号３１によって同定される配列を含む。
【０１３８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号３１によって同定される配列を含む。
【０１３９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号３１によって同定される配列を含む。
【０１４０】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２０および配列番号２８によって同定される配列を含む。
【０１４１】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号２８によって同定される配列を含む。
【０１４２】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号２８によって同定される配列を含む。
【０１４３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号２８によって同定される配列を含む。
【０１４４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号２８によって同定される配列を含む。
【０１４５】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号２９によって同定される配列を含む。
【０１４６】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号２９によって同定される配列を含む。
【０１４７】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号２９によって同定される配列を含む。
【０１４８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号２９によって同定される配列を含む。
【０１４９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号３０によって同定される配列を含む。
【０１５０】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号３０によって同定される配列を含む。
【０１５１】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号３０によって同定される配列を含む。
【０１５２】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号３０によって同定される配列を含む。
【０１５３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号３２によって同定される配列を含む。
【０１５４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号３２によって同定される配列を含む。
【０１５５】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号３２によって同定される配列を含む。
【０１５６】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号３２によって同定される配列を含む。
【０１５７】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号３３によって同定される配列を含む。
【０１５８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号３３によって同定される配列を含む。
【０１５９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号３３によって同定される配列を含む。
【０１６０】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号３３によって同定される配列を含む。
【０１６１】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２１および配列番号３４によって同定される配列を含む。
【０１６２】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２２および配列番号３４によって同定される配列を含む。
【０１６３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２３および配列番号３４によって同定される配列を含む。
【０１６４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２４および配列番号３４によって同定される配列を含む。
【０１６５】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号５によって同定される配列を含むが、但し、配列番号３９によって同定される配列を含まない。
【０１６６】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号６によって同定される配列を含む。
【０１６７】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号７によって同定される配列を含む。
【０１６８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号８によって同定される配列を含む。
【０１６９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号９によって同定される配列を含む。
【０１７０】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号１０によって同定される配列を含む。
【０１７１】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号１１によって同定される配列を含む。
【０１７２】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１２によって同定される配列を含むが、但し、配列番号４１によって同定される配列を含まない。
【０１７３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１３によって同定される配列を含む。
【０１７４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１４によって同定される配列を含む。
【０１７５】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１５によって同定される配列を含む。
【０１７６】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１６によって同定される配列を含む。
【０１７７】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１７によって同定される配列を含む。
【０１７８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１８によって同定される配列を含む。
【０１７９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１９によって同定される配列を含む。
【０１８０】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号３６によって同定される配列を含む。
【０１８１】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号３５によって同定される配列を含む。
【０１８２】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号５、６、７、８、９、１０および１１からなる配列の群に含まれる配列、ならびに配列番号１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、３５および３６からなる配列の群に含まれる配列を含むが、但し、重鎖および軽鎖が、それぞれ、配列番号３９および配列番号４１によって同定される配列を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分を含まない。
【０１８３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号５および配列番号１２によって同定される配列を含むが、但し、重鎖および軽鎖が、それぞれ、配列番号３９および配列番号４１によって同定される配列を含む、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分を含まない。
【０１８４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１２によって同定される配列を含む。
【０１８５】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１２によって同定される配列を含む。
【０１８６】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１２によって同定される配列を含む。
【０１８７】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１２によって同定される配列を含む。
【０１８８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号１０および配列番号１２によって同定される配列を含む。
【０１８９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号１１および配列番号１２によって同定される配列を含む。
【０１９０】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号３５によって同定される配列を含む。
【０１９１】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号３５によって同定される配列を含む。
【０１９２】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号３６によって同定される配列を含む。
【０１９３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号３６によって同定される配列を含む。
【０１９４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号５および配列番号１６によって同定される配列を含む。
【０１９５】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１６によって同定される配列を含む。
【０１９６】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１６によって同定される配列を含む。
【０１９７】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１６によって同定される配列を含む。
【０１９８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１６によって同定される配列を含む。
【０１９９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号５および配列番号１３によって同定される配列を含む。
【０２００】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１３によって同定される配列を含む。
【０２０１】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１３によって同定される配列を含む。
【０２０２】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１３によって同定される配列を含む。
【０２０３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１３によって同定される配列を含む。
【０２０４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１４によって同定される配列を含む。
【０２０５】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１４によって同定される配列を含む。
【０２０６】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１４によって同定される配列を含む。
【０２０７】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１４によって同定される配列を含む。
【０２０８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１５によって同定される配列を含む。
【０２０９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１５によって同定される配列を含む。
【０２１０】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１５によって同定される配列を含む。
【０２１１】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１５によって同定される配列を含む。
【０２１２】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１７によって同定される配列を含む。
【０２１３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１７によって同定される配列を含む。
【０２１４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１７によって同定される配列を含む。
【０２１５】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１７によって同定される配列を含む。
【０２１６】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１８によって同定される配列を含む。
【０２１７】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１８によって同定される配列を含む。
【０２１８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１８によって同定される配列を含む。
【０２１９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１８によって同定される配列を含む。
【０２２０】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号６および配列番号１９によって同定される配列を含む。
【０２２１】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号７および配列番号１９によって同定される配列を含む。
【０２２２】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号８および配列番号１９によって同定される配列を含む。
【０２２３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号９および配列番号１９によって同定される配列を含む。
【０２２４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｈ抗体鎖は、配列番号１４９、２６５、２７１、２９１、２９５、３０３、３０９、３１３、３２１、３５９、４０１、４０２および４５３からなる配列の群に含まれる配列を含む。
【０２２５】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、Ｖｌ抗体鎖は、配列番号１５０、２６６、２７２、２９２、２９６、３０４、３１０、３１４、３２２、３６０および４５４からなる配列の群に含まれる配列を含む。
【０２２６】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号１４９、２６５、２７１、２９１、２９５、３０３、３０９、３１３、３２１、３５９、４０１、４０２および４５３からなる配列の群に含まれる配列、ならびに配列番号１５０、２６６、２７２、２９２、２９６、３０４、３１０、３１４、３２２、３６０および４５４からなる配列の群に含まれる配列を含む。
【０２２７】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖は、配列番号１４７、２６３、２６９、２８９、２９３、３０１、３０７、３１１、３１９、３５７、３７３および３９９からなる配列の群に含まれる配列を含む。
【０２２８】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体軽鎖は、配列番号１４８、２６４、２７０、２９０、２９４、３０２、３０８、３１２、３２０、３５８、３７４および４００からなる配列の群に含まれる配列を含む。
【０２２９】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、抗体重鎖および軽鎖は、それぞれ、配列番号１４７、２６３、２６９、２８９、２９３、３０１、３０７、３１１、３１９、３５７、３７３および３９９からなる配列の群、ならびに配列番号１４８、２６４、２７０、２９０、２９４、３０２、３０８、３１２、３２０、３５８、３７４および４００からなる配列の群に含まれる配列を含む。
【０２３０】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号１４９および配列番号１５０によって同定される配列を含む。
【０２３１】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号１４７および配列番号１４８によって同定される配列を含む。
【０２３２】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２６５および配列番号２６６によって同定される配列を含む。
【０２３３】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号２６３および配列番号２６４によって同定される配列を含む。
【０２３４】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２７１および配列番号２７２によって同定される配列を含む。
【０２３５】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号２６９および配列番号２７０によって同定される配列を含む。
【０２３６】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２９１および配列番号２９２によって同定される配列を含む。
【０２３７】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号２８９および配列番号２９０によって同定される配列を含む。
【０２３８】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号２９５および配列番号２９６によって同定される配列を含む。
【０２３９】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号２９３および配列番号２９４によって同定される配列を含む。
【０２４０】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号３０３および配列番号３０４によって同定される配列を含む。
【０２４１】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号３０１および配列番号３０２によって同定される配列を含む。
【０２４２】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号３０９および配列番号３１０によって同定される配列を含む。
【０２４３】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号３０７および配列番号３０８によって同定される配列を含む。
【０２４４】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号３１３および配列番号３１４によって同定される配列を含む。
【０２４５】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号３１１および配列番号３１２によって同定される配列を含む。
【０２４６】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号３２１および配列番号３２２によって同定される配列を含む。
【０２４７】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号３１９および配列番号３２０によって同定される配列を含む。
【０２４８】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号３５９および配列番号３６０によって同定される配列を含む。
【０２４９】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号３５７および配列番号３５８によって同定される配列を含む。
【０２５０】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号３７５および配列番号３７６によって同定される配列を含む。
【０２５１】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号３７３および配列番号３７４によって同定される配列を含む。
【０２５２】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号４０１および配列番号４０２によって同定される配列を含む。
【０２５３】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号３９９および配列番号４００によって同定される配列を含む。
【０２５４】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、ＶｈおよびＶｌ抗体鎖は、それぞれ、配列番号４５３および配列番号４５４によって同定される配列を含む。
【０２５５】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重および軽抗体鎖は、それぞれ、配列番号４５１および配列番号４５２によって同定される配列を含む。
【０２５６】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重鎖は、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７２、配列番号７４、配列番号７８、配列番号７９、配列番号１０３、配列番号１０６、配列番号１１２、配列番号１３９、配列番号１４１、配列番号１４３、配列番号１４５、配列番号１４７、配列番号１５１、配列番号１５３、配列番号１５５、配列番号１５７、配列番号１５９、配列番号１６１、配列番号１６３、配列番号１６５、配列番号１６７、配列番号１６９、配列番号１７１、配列番号１７３、配列番号１７５、配列番号１７７、配列番号１７９、配列番号１８１、配列番号１８３、配列番号１８５、配列番号１８７、配列番号１８９、配列番号１９１、配列番号１９３、配列番号１９５、配列番号１９７、配列番号１９９、配列番号２０１、配列番号２１０、配列番号２１４、配列番号２１５、配列番号２１６、配列番号２１７、配列番号２１９、配列番号２２１、配列番号２２３、配列番号２２５、配列番号２２７、配列番号２２９、配列番号２３１、配列番号２３３、配列番号２３５、配列番号２３７、配列番号２３９、配列番号２４１、配列番号２４３、配列番号２４５、配列番号２４７、配列番号２４９、配列番号２５１、配列番号２５３、配列番号２５５、配列番号２５７、配列番号２５９、配列番号２６１、配列番号２６３、配列番号２６７、配列番号２６９、配列番号２７３、配列番号２７５、配列番号２７７、配列番号２７９、配列番号２８１、配列番号２８３、配列番号２８５、配列番号２８７、配列番号２８９、配列番号２９３、配列番号２９７、配列番号２９９、配列番号３０１、配列番号３０５、配列番号３０７、配列番号３１１、配列番号３１５、配列番号３１７、配列番号３１９、配列番号３２３、配列番号３２５、配列番号３２７、配列番号３２９、配列番号３３１、配列番号３３３、配列番号３３５、配列番号３３７、配列番号３３９、配列番号３４１、配列番号３４３、配列番号３４５、配列番号３４７、配列番号３５１、配列番号３５３、配列番号３５５、配列番号３５７、配列番号３６１、配列番号３６３、配列番号３６５、配列番号３６７、配列番号３６９、配列番号３７１、配列番号３７３、配列番号３７５、配列番号３７７、配列番号３７９、配列番号３８１、配列番号３８３、配列番号３８５、配列番号３８７、配列番号３８９、配列番号３９１、配列番号３９３、配列番号３９５、配列番号３９７、配列番号３９９、配列番号４０３、配列番号４０５、配列番号４０７、配列番号４０９、配列番号４１１、配列番号４１３、配列番号４１５、配列番号４１７、配列番号４１９、配列番号４２１、配列番号４２３、配列番号４２５、配列番号４２７、配列番号４２９、配列番号４３１、配列番号４３３、配列番号４３５、配列番号４３７、配列番号４４１、配列番号４４３、配列番号４４５、配列番号４４７、配列番号４４９、配列番号４５１、配列番号４５７、配列番号４５９、および配列番号４６１からなる配列の���に含まれる配列を含む。
【０２５７】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、軽鎖は、配列番号６４、配列番号７１、配列番号７３、配列番号８０、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、配列番号８４、配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、配列番号１００、配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１、配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号１１７、配列番号１１８、配列番号１１９、配列番号１２１、配列番号１２２、配列番号１２３、配列番号１２４、配列番号１２５、配列番号１２６、配列番号１２７、配列番号１２８、配列番号１２９、配列番号１３０、配列番号１３１、配列番号１３２、配列番号１３３、配列番号１３４、配列番号１３５、配列番号１３６、配列番号１３７、配列番号１３８、配列番号１４０、配列番号１４２、配列番号１４４、配列番号１４６、配列番号１４８、配列番号１５０、配列番号１５２、配列番号１５４、配列番号１５６、配列番号１５８、配列番号１６０、配列番号１６２、配列番号１６４、配列番号１６６、配列番号１６８、配列番号１７０、配列番号１７２、配列番号１７４、配列番号１７６、配列番号１７８、配列番号１８０、配列番号１８２、配列番号１８４、配列番号１８６、配列番号１８８、配列番号１９０、配列番号１９２、配列番号１９４、配列番号１９６、配列番号１９８、配列番号２００、配列番号２０２、配列番号２０３、配列番号２０４、配列番号２０５、配列番号２０６、配列番号２０７、配列番号２０８、配列番号２０９、配列番号２１１、配列番号２１２、配列番号２１３、配列番号２１８、配列番号２２０、配列番号２２２、配列番号２２４、配列番号２２６、配列番号２２８、配列番号２３０、配列番号２３２、配列番号２３４、配列番号２３６、配列番号２３８、配列番号２４０、配列番号２４２、配列番号２４４、配列番号２４６、配列番号２４８、配列番号２５０、配列番号２５２、配列番号２５４、配列番号２５６、配列番号２５８、配列番号２６０、配列番号２６２、配列番号２６４、配列番号２６６、配列番号２６８、配列番号２７０、配列番号２７２、配列番号２７４、配列番号２７６、配列番号２７８、配列番号２８０、配列番号２８２、配列番号２８４、配列番号２８６、配列番号２８８、配列番号２９０、配列番号２９２、配列番号２９４、配列番号２９６、配列番号２９８、配列番号３００、配列番号３０２、配列番号３０４、配列番号３０６、配列番号３０８、配列番号３１０、配列番号３１２、配列番号３１４、配列番号３１６、配列番号３１８、配列番号３２０、配列番号３２２、配列番号３２４、配列番号３２６、配列番号３２８、配列番号３３０、配列番号３３２、配列番号３３４、配列番号３３６、配列番号３３８、配列番号３４０、配列番号３４２、配列番号３４４、配列番号３４６、配列番号３４８���配列番号３５０、配列番号３５２、配列番号３５４、配列番号３５６、配列番号３５８、配列番号３６０、配列番号３６２、配列番号３６４、配列番号３６６、配列番号３６８、配列番号３７０、配列番号３７２、配列番号３７４、配列番号３７６、配列番号３７８、配列番号３８０、配列番号３８２、配列番号３８４、配列番号３８６、配列番号３８８、配列番号３９０、配列番号３９２、配列番号３９４、配列番号３９６、配列番号３９８、配列番号４００、配列番号４０４、配列番号４０６、配列番号４０８、配列番号４１０、配列番号４１２、配列番号４１４、配列番号４１６、配列番号４１８、配列番号４２０、配列番号４２２、配列番号４２４、配列番号４２６、配列番号４２８、配列番号４３０、配列番号４３２、配列番号４３４、配列番号４３６、配列番号４３８、配列番号４４０、配列番号４４２、配列番号４４４、配列番号４４６、配列番号４４８、配列番号４５０、配列番号４５２、配列番号４５４、配列番号４５８、および配列番号４６０からなる配列の群に含まれる配列を含む。
【０２５８】
もう１つの好適な実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な単離された抗体またはその抗原結合部分であって、ここで、重鎖は、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、配列番号６１、配列番号６２、配列番号６３、配列番号６５、配列番号６６、配列番号６７、配列番号６８、配列番号６９、配列番号７０、配列番号７２、配列番号７４、配列番号７８、配列番号７９、配列番号１０３、配列番号１０６、配列番号１１２、配列番号１３９、配列番号１４１、配列番号１４３、配列番号１４５、配列番号１４７、配列番号１５１、配列番号１５３、配列番号１５５、配列番号１５７、配列番号１５９、配列番号１６１、配列番号１６３、配列番号１６５、配列番号１６７、配列番号１６９、配列番号１７１、配列番号１７３、配列番号１７５、配列番号１７７、配列番号１７９、配列番号１８１、配列番号１８３、配列番号１８５、配列番号１８７、配列番号１８９、配列番号１９１、配列番号１９３、配列番号１９５、配列番号１９７、配列番号１９９、配列番号２０１、配列番号２１０、配列番号２１４、配列番号２１５、配列番号２１６、配列番号２１７、配列番号２１９、配列番号２２１、配列番号２２３、配列番号２２５、配列番号２２７、配列番号２２９、配列番号２３１、配列番号２３３、配列番号２３５、配列番号２３７、配列番号２３９、配列番号２４１、配列番号２４３、配列番号２４５、配列番号２４７、配列番号２４９、配列番号２５１、配列番号２５３、配列番号２５５、配列番号２５７、配列番号２５９、配列番号２６１、配列番号２６３、配列番号２６７、配列番号２６９、配列番号２７３、配列番号２７５、配列番号２７７、配列番号２７９、配列番号２８１、配列番号２８３、配列番号２８５、配列番号２８７、配列番号２８９、配列番号２９３、配列番号２９７、配列番号２９９、配列番号３０１、配列番号３０５、配列番号３０７、配列番号３１１、配列番号３１５、配列番号３１７、配列番号３１９、配列番号３２３、配列番号３２５、配列番号３２７、配列番号３２９、配列番号３３１、配列番号３３３、配列番号３３５、配列番号３３７、配列番号３３９、配列番号３４１、配列番号３４３、配列番号３４５、配列番号３４７、配列番号３５１、配列番号３５３、配列番号３５５、配列番号３５７、配列番号３６１、配列番号３６３、配列番号３６５、配列番号３６７、配列番号３６９、配列番号３７１、配列番号３７３、配列番号３７５、配列番号３７７、配列番号３７９、配列番号３８１、配列番号３８３、配列番号３８５、配列番号３８７、配列番号３８９、配列番号３９１、配列番号３９３、配列番号３９５、配列番号３９７、配列番号３９９、配列番号４０３、配列番号４０５、配列番号４０７、配列番号４０９、配列番号４１１、配列番号４１３、配列番号４１５、配列番号４１７、配列番号４１９、配列番号４２１、配列番号４２３、配列番号４２５、配列番号４２７、配列番号４２９、配列番号４３１、配列番号４３３、配列番号４３５、配列番号４３７、配列番号４４１、配列番号４４３、配列番号４４５、配列番号４４７、配列番号４４９、配列番号４５１、配列番号４５７、配列番号４５９、および配列番号４６１からなる配列の���に含まれる配列を含み、そしてここで、軽鎖は、配列番号６４、配列番号７１、配列番号７３、配列番号８０、配列番号８１、配列番号８２、配列番号８３、配列番号８４、配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、配列番号１００、配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１、配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号１１７、配列番号１１８、配列番号１１９、配列番号１２１、配列番号１２２、配列番号１２３、配列番号１２４、配列番号１２５、配列番号１２６、配列番号１２７、配列番号１２８、配列番号１２９、配列番号１３０、配列番号１３１、配列番号１３２、配列番号１３３、配列番号１３４、配列番号１３５、配列番号１３６、配列番号１３７、配列番号１３８、配列番号１４０、配列番号１４２、配列番号１４４、配列番号１４６、配列番号１４８、配列番号１５０、配列番号１５２、配列番号１５４、配列番号１５６、配列番号１５８、配列番号１６０、配列番号１６２、配列番号１６４、配列番号１６６、配列番号１６８、配列番号１７０、配列番号１７２、配列番号１７４、配列番号１７６、配列番号１７８、配列番号１８０、配列番号１８２、配列番号１８４、配列番号１８６、配列番号１８８、配列番号１９０、配列番号１９２、配列番号１９４、配列番号１９６、配列番号１９８、配列番号２００、配列番号２０２、配列番号２０３、配列番号２０４、配列番号２０５、配列番号２０６、配列番号２０７、配列番号２０８、配列番号２０９、配列番号２１１、配列番号２１２、配列番号２１３、配列番号２１８、配列番号２２０、配列番号２２２、配列番号２２４、配列番号２２６、配列番号２２８、配列番号２３０、配列番号２３２、配列番号２３４、配列番号２３６、配列番号２３８、配列番号２４０、配列番号２４２、配列番号２４４、配列番号２４６、配列番号２４８、配列番号２５０、配列番号２５２、配列番号２５４、配列番号２５６、配列番号２５８、配列番号２６０、配列番号２６２、配列番号２６４、配列番号２６６、配列番号２６８、配列番号２７０、配列番号２７２、配列番号２７４、配列番号２７６、配列番号２７８、配列番号２８０、配列番号２８２、配列番号２８４、配列番号２８６、配列番号２８８、配列番号２９０、配列番号２９２、配列番号２９４、配列番号２９６、配列番号２９８、配列番号３００、配列番号３０２、配列番号３０４、配列番号３０６、配列番号３０８、配列番号３１０、配列番号３１２、配列番号３１４、配列番号３１６、配列番号３１８、配列番号３２０、配列番号３２２、配列番号３２４、配列番号３２６、配列番号３２８、配列番号３３０、配列番号３３２、配列番号３３４、配列番号３３６、配列番号３３８、配列番号３４０、配列番号３４２、配列番号３４４、配列番号３４６、配列番号３４８、配列番号３５０、配列番号３５２、配列番号３５４、配列番号３５６、配列番号３���８、配列番号３６０、配列番号３６２、配列番号３６４、配列番号３６６、配列番号３６８、配列番号３７０、配列番号３７２、配列番号３７４、配列番号３７６、配列番号３７８、配列番号３８０、配列番号３８２、配列番号３８４、配列番号３８６、配列番号３８８、配列番号３９０、配列番号３９２、配列番号３９４、配列番号３９６、配列番号３９８、配列番号４００、配列番号４０４、配列番号４０６、配列番号４０８、配列番号４１０、配列番号４１２、配列番号４１４、配列番号４１６、配列番号４１８、配列番号４２０、配列番号４２２、配列番号４２４、配列番号４２６、配列番号４２８、配列番号４３０、配列番号４３２、配列番号４３４、配列番号４３６、配列番号４３８、配列番号４４０、配列番号４４２、配列番号４４４、配列番号４４６、配列番号４４８、配列番号４５０、配列番号４５２、配列番号４５４、配列番号４５８、配列番号４６０、配列番号４６２からなる配列の群に含まれる配列を含む。好適な組み合わせを、表２に例示するが、ここで、図において使用したバインダーの命名法に従って、バインダーを列挙する。重鎖も軽鎖も列挙していない場合、Ｄ２Ｅ７由来のそれぞれの重鎖または軽鎖（それぞれ、配列番号１または２）を使用する。
【０２５９】
さらなる好適な実施形態は、それぞれ、配列番号４６３および配列番号４６４によって同定される重鎖および軽鎖を有する抗体より少なくとも３倍低い、好ましくは、５倍低い、より好ましくは１０倍低い親和定数ＫＤまたはｋｏｆｆ速度定数でＴＮＦ−αに結合することが可能な上記の単離された抗体またはその抗原結合部分である。さらなる好適な実施形態は、３０ｐＭ未満、より好ましくは、１０ｐＭ以下の親和定数ＫＤでＴＮＦ−αに結合することが可能な上記の単離された抗体またはその抗原結合部分である。
【０２６０】
さらなる実施形態は、哺乳動物起源、好ましくは、霊長類、マウス、ラットおよびブタからなる群から選択される哺乳動物由来のＴＮＦ−αに結合することが可能な上記の単離された抗体またはその抗原結合部分である。より好適な実施形態は、霊長類起源、好ましくは、ヒト、ヒヒ、マーモセット、チンパンジー、カニクイザルおよびアカゲザルからなる群から選択される霊長類由来のＴＮＦ−αに結合することが可能な上記の単離された抗体またはその抗原結合部分である。もう１つのより好適な実施形態は、ヒトＴＮＦ−αに結合することが可能な上記の単離された抗体またはその抗原結合部分である。さらなる好適な実施形態は、ヒトＴＮＦ−αに特異的に結合することが可能な上記の単離された抗体またはその抗原結合部分である。
【０２６１】
より好適な実施形態は、ＴＮＦ−αを中和することが可能な上記の単離された抗体またはその抗原結合部分である。
【０２６２】
もう１つの実施形態では、ＴＮＦ−αに結合することが可能な上記の単離された抗体またはそれらの抗原結合部分は、少なくとも二重特異性抗体またはそのフラグメントであって、ここで、少なくとも１つのＶｈＣＤＲ１−３、ＶｌＣＤＲ１−３、Ｖｈ、Ｖｌ、重鎖または軽鎖は、本発明の上記のＶｈＣＤＲ１−３、ＶｌＣＤＲ１−３、Ｖｈ、Ｖｌ、重鎖または軽鎖のうちの少なくとも１つを含む。
【０２６３】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な上記の単離された抗体またはそれらの抗原結合部分をコードする核酸である。さらなる実施形態は、上記の核酸を含むベクターである。なおさらなる実施形態は、上記の核酸を含む宿主細胞である。
【０２６４】
もう１つの実施形態は、ＴＮＦ−αに結合することが可能な上記の単離された抗体またはそれらの抗原結合部分の産生方法であって、前記方法は、抗体またはその結合部分の発現を可能にする条件下で請求項１４の宿主細胞を培養し、そして抗体またはその結合部分を培養物から回収することを含む。
【０２６５】
もう１つの実施形態は、上記の抗体またはそれらの抗原結合部分および薬学的に許容できるキャリアを含む医薬組成物である。さらなる実施形態は、少なくとも１つのさらなる治療用薬剤をさらに含む上記の医薬組成物である。
【０２６６】
図２は、変異体重鎖および軽鎖の表を示す。基本配列（野生型）と比較したアミノ酸配列における改変を、太字で示す。「アミノ酸番号」は、配列番号１に示される番号付けに従うアミノ酸の位置を指す。図３Ａ〜３Ｃは、図２の変異体と基本重鎖および軽鎖（それぞれ、配列番号１および２）ＦａｂＨＵＭを含むＦａｂとを比較した均一時間分解エネルギー移動アッセイ（ＨＴＲＦ（登録商標））の結果を示す。６６５／６２０比の低い方が、改善された親和性を示し、従って、図表において示されるように、図２の変異体はすべて、ＴＮＦαに対する親和性が、陽性コントロール、ＦａｂＨＵＭと少なくとも同じ強度である。
【０２６７】
図４は、基本配列と比較した、ＣＤＲ２において変動を有する変異体重鎖の表を示す。基本配列（野生型）と比較したアミノ酸配列における改変を、太字で示す。「アミノ酸番号」は、配列番号１に示される番号付けに従うアミノ酸の位置を指す。図５Ａ〜５Ｂは、図４の変異体とＦａｂＨＵＭとを比較したＨＴＲＦ（登録商標）の結果を示す。図表において示されるように、図４の変異体はすべて、ＴＮＦαに対する親和性が、陽性コントロール、ＦａｂＨＵＭと少なくとも同じ強度である。
【０２６８】
図７は、基本配列と比較した、ＣＤＲ３において変動を有する変異体重鎖の表を示す。基本配列（野生型）と比較したアミノ酸配列における改変を、太字で示す。「アミノ酸番号」は、配列番号１に示される番号付けに従うアミノ酸の位置を指す。図８Ａは、示した変異体を使用したＥＬＩＳＡアッセイの結果を示す。図８Ｂは、図６の変異体とＦａｂＨＵＭとを比較したＨＴＲＦ（登録商標）の結果を示す。図表に示すように、図７の変異体は、陽性コントロール、ＦａｂＨＵＭに匹敵するＴＮＦαに対する親和性を有した。
【０２６９】
図８は、基本配列と比較した、ＣＤＲ１において変動を有する変異体軽鎖の表を示す。基本配列（野生型）と比較したアミノ酸配列における改変を、太字で示す。「アミノ酸番号」は、配列番号２に示される番号付けに従うアミノ酸の位置を指す。図９Ａ〜９Ｇは、図８の変異体とＦａｂＨＵＭとを比較したＨＴＲＦ（登録商標）の結果を示す。図表において示されるように、図８の変異体の多くは、ＴＮＦαに対する親和性が、陽性コントロール、ＦａｂＨＵＭと少なくとも同じ強度である。
【０２７０】
図１０は、変異体において同一の変動を有する変異体軽鎖および基本配列と比較して配列において同一の変動を有する重鎖の表を示す。基本配列（野生型）と比較したアミノ酸配列における改変を、太字で示す。「アミノ酸番号」は、それぞれ、配列番号２または１に示される番号付けに従うアミノ酸の位置を指す。図１１Ａ〜１１Ｉは、図１０の変異体とＦａｂＨＵＭとを比較したＨＴＲＦ（登録商標）の結果を示す。図表において示されるように、図１０の変異体の多くは、ＴＮＦαに対する親和性が、陽性コントロール、ＦａｂＨＵＭと少なくとも同じ強度である。
【０２７１】
図１２は、基本配列と比較した、配列において同一の変動を有する変異体軽鎖の表を示す。基本配列（野生型）と比較したアミノ酸配列における改変を、太字で示す。「アミノ酸番号」は、配列番号２に示される番号付けに従うアミノ酸の位置を指す。図１３Ａ〜１３Ｄは、図１２の変異体とＦａｂＨＵＭとを比較したＨＴＲＦ（登録商標）の結果を示す。図表において示されるように、図１２の変異体の多くは、ＴＮＦαに対する親和性が、陽性コントロール、ＦａｂＨＵＭと少なくとも同じ強度である。図１３Ｅは、ＥＬＩＳＡアッセイの結果を示す。図１３Ｅに示すように、単一置換Ｎ９２Ｉは、ＴＮＦαに対する親和性の改善を生じたが、この同じ置換は、Ｒ９３Ｑ；Ａ９４Ｐ二重変異体の親和性も増加する。従って、三重変異体Ｎ９２Ｉ；Ｒ９３Ｑ；Ａ９４Ｐは、相乗的な親和性の改善を示す。
【０２７２】
図１４は、基本配列と比較した、配列において同一の変動を有する変異体軽鎖および変異体重鎖の表を示す。基本配列（野生型）と比較したアミノ酸配列における改変を、太字で示す。「アミノ酸番号」は、それぞれ、配列番号２および１に示される番号付けに従うアミノ酸の位置を指す。図１５Ａ〜１５Ｅは、図１４の変異体とＦａｂＨＵＭとを比較したＨＴＲＦ（登録商標）の結果を示す。図表において示されるように、図１４の変異体の多くは、ＴＮＦαに対する親和性が、陽性コントロール、ＦａｂＨＵＭと少なくとも同じ強度である。
【実施例】
【０２７３】
全長抗体の発現：
Ｄ２Ｅ７ならびに変異体軽鎖および重鎖遺伝子を、個別にｐＣＥＰ４（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にクローニングした。標準的な手順に従い、ＰＥＩを使用して、２５０ｍｌ三角フラスコ中６０ｍｌの容積において、軽鎖および重鎖ベクターを、ＨＥＫ細胞に同時トランスフェクトした。０．２５％ＧＰＮ３（Ｏｒｇａｎｏｔｅｃｈｎｉｅ）を補充した２９３ｆｒｅｅｓｔｙｌｅ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）において、細胞を増殖させた。５日後、上清を回収し、そして分析した。配列については、図３４を参照のこと。
【０２７４】
ＴＮＦ−α中和細胞ベースバイオアッセイ：
ＴＮＦ−応答性細胞を、３８４ウェルプレートにプレート化し、そして１晩インキュベートした。３００ｐｇ／ｍｌのＴＮＦを、様々な抗体濃度と共に、３０分間、室温でプレインキュベートした。混合物を細胞に添加し、そして６時間、３７℃でインキュベートした。製造者の指示に従い、カスパーゼｇｌｏ  ３／７キット（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、ＴＮＦ誘導性カスパーゼ活性化を測定した。本発明の変異体は、ＴＮＦ−α誘導性アポトーシスを抑制する中和抗体である（図３２を参照のこと）。
【０２７５】
ＳＰＲ解析：
表面プラズモン共鳴解析：標準的なアミンカップリングを使用して、ＰｒｏｔｅＯｎ  ＸＰＲバイオセンサ（ＢｉｏＲａｄ  Ｌａｂｏｒｉｔｏｒｉｅｓ）内のＧＬＣセンサチップに、ＴＮＦα調製物を固定化した。表面を、スルホ−ＮＨＳ／ＥＤＣ（０．０１Ｍ／０．０４Ｍ）で５分間、活性化し、次いで、ＴＮＦαを、１０ｍＭ酢酸Ｎａ、ｐＨ４．５中１μｇ／ｍｌ、５分間、注入し、そして最後に、表面を、１ＭエタノールアミンｐＨ８．１の５分間注入によってブロッキングした。ＴＮＦα固定化レベルは、４００〜５００ＲＵの間であった。Ｆａｂを、最大濃度の１０ｎＭから３倍希釈系列で試験した。ランニング緩衝液は、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１５０ｍＭのＮａＣｌ、ｐＨ７．４を含有し、０．００５％ｔｗｅｅｎ−２０および０．１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡを伴った。結合データを、２５℃で回収した。Ｓｃｒｕｂｂｅｒ（Ｂｉｏｌｏｇｉｃ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｐｔｙ  Ｌｔｄ，Ａｕｓｔｒａｌｉａ）を使用して、応答データを簡単な１：１相互作用モデルに広域に当てはめることによって、結合速度論を決定した。図３１は、本発明のいくつかの変異体について、ＳＰＲ解析のデータを示す。
【０２７６】
表１は、本発明の変異体および対応する配列番号を示している。例えば、ＵＲＳ＿１ｉ！Ｌ＿１．１２Ａ＿２０．１＿２の重鎖の配列は配列番号６３を有し、そしてＵＲＳ＿１ｉ！Ｌ＿１．１２Ａ＿２０．１＿２の軽鎖の配列は配列番号６４を有する。対応する重鎖および軽鎖が示されていない場合、Ｄ２Ｅ７の重鎖または軽鎖を使用する。
【０２７７】
【表２−１】
0005570998.tif 000003
【表２−２】
0005570998.tif 000004
【表２−３】
0005570998.tif 000005
【表２−４】
0005570998.tif 000006
【表２−５】
0005570998.tif 000007
【表２−６】
0005570998.tif 000008
【表２−７】
0005570998.tif 000009
【表２−８】
0005570998.tif 000010
【表２−９】
0005570998.tif 000011
【表２−１０】
0005570998.tif 000012
【表２−１１】
0005570998.tif 000013
【表２−１２】
0005570998.tif 000014
【表２−１３】
0005570998.tif 000015
【表２−１４】
0005570998.tif 000016
【表２−１５】
0005570998.tif 000017
【表２−１６】
0005570998.tif 000018
【表２−１７】
0005570998.tif 000019
【表２−１８】
0005570998.tif 000020
【０２７８】
本発明は、本発明の趣旨または本質的な特徴から逸脱することなく、他の特定の形態で具現化してもよい。従って、上記の実施形態は、あらゆる点で、ここに記載の本発明を限定するのではなく、例示的であると考えるべきである。それ故、本発明の範囲は、上記の説明ではなく、添付の特許請求の範囲によって示され、従って、特許請求の範囲の意味および均等の範囲内で行われるすべての変更が、本明細書に包含されることが意図される。
【図１】
0005570998.tif 000021
【図２】
0005570998.tif 000022
【図３Ａ】
0005570998.tif 000023
【図３Ｂ】
0005570998.tif 000024
【図３Ｃ】
0005570998.tif 000025
【図４】
0005570998.tif 000026
【図５Ａ】
0005570998.tif 000027
【図５Ｂ】
0005570998.tif 000028
【図６】
0005570998.tif 000029
【図７Ａ】
0005570998.tif 000030
【図７Ｂ】
0005570998.tif 000031
【図８】
0005570998.tif 000032
【図９Ａ】
0005570998.tif 000033
【図９Ｂ】
0005570998.tif 000034
【図９Ｃ】
0005570998.tif 000035
【図９Ｄ】
0005570998.tif 000036
【図９Ｅ】
0005570998.tif 000037
【図９Ｆ】
0005570998.tif 000038
【図９Ｇ】
0005570998.tif 000039
【図１０】
0005570998.tif 000040
【図１１Ａ】
0005570998.tif 000041
【図１１Ｂ】
0005570998.tif 000042
【図１１Ｃ】
0005570998.tif 000043
【図１１Ｄ】
0005570998.tif 000044
【図１１Ｅ】
0005570998.tif 000045
【図１１Ｆ】
0005570998.tif 000046
【図１１Ｇ】
0005570998.tif 000047
【図１１Ｈ】
0005570998.tif 000048
【図１１Ｉ】
0005570998.tif 000049
【図１２】
0005570998.tif 000050
【図１３Ａ】
0005570998.tif 000051
【図１３Ｂ】
0005570998.tif 000052
【図１３Ｃ】
0005570998.tif 000053
【図１３Ｄ】
0005570998.tif 000054
【図１３Ｅ】
0005570998.tif 000055
【図１４】
0005570998.tif 000056
【図１５Ａ】
0005570998.tif 000057
【図１５Ｂ】
0005570998.tif 000058
【図１５Ｃ】
0005570998.tif 000059
【図１５Ｄ】
0005570998.tif 000060
【図１５Ｅ】
0005570998.tif 000061
【図１６】
0005570998.tif 000062
【図１７】
0005570998.tif 000063
【図１８Ａ】
0005570998.tif 000064
【図１８Ｂ】
0005570998.tif 000065
【図１９】
0005570998.tif 000066
【図２０】
0005570998.tif 000067
【図２１】
0005570998.tif 000068
【図２２Ａ】
0005570998.tif 000069
【図２２Ｂ】
0005570998.tif 000070
【図２２Ｃ】
0005570998.tif 000071
【図２２Ｄ】
0005570998.tif 000072
【図２２Ｅ】
0005570998.tif 000073
【図２２Ｆ】
0005570998.tif 000074
【図２２Ｇ】
0005570998.tif 000075
【図２２Ｈ】
0005570998.tif 000076
【図２２Ｉ】
0005570998.tif 000077
【図２２Ｊ】
0005570998.tif 000078
【図２２Ｋ】
0005570998.tif 000079
【図２３】
0005570998.tif 000080
【図２４Ａ】
0005570998.tif 000081
【図２４Ｂ】
0005570998.tif 000082
【図２４Ｃ】
0005570998.tif 000083
【図２４Ｄ】
0005570998.tif 000084
【図２４Ｅ】
0005570998.tif 000085
【図２４Ｆ】
0005570998.tif 000086
【図２５】
0005570998.tif 000087
【図２６Ａ】
0005570998.tif 000088
【図２６Ｂ】
0005570998.tif 000089
【図２６Ｃ】
0005570998.tif 000090
【図２６Ｄ】
0005570998.tif 000091
【図２６Ｅ】
0005570998.tif 000092
【図２７】
0005570998.tif 000093
【図２８Ａ】
0005570998.tif 000094
【図２８Ｂ】
0005570998.tif 000095
【図２８Ｃ】
0005570998.tif 000096
【図２８Ｄ】
0005570998.tif 000097
【図２８Ｅ】
0005570998.tif 000098
【図２８Ｆ】
0005570998.tif 000099
【図２９】
0005570998.tif 000100
【図３０Ａ】
0005570998.tif 000101
【図３０Ｂ】
0005570998.tif 000102
【図３１】
0005570998.tif 000103
【図３１Ａ】
0005570998.tif 000104
【図３２】
0005570998.tif 000105
【図３３−１】
0005570998.tif 000106
【図３３−２】
0005570998.tif 000107
【図３３−３】
0005570998.tif 000108
【図３３−４】
0005570998.tif 000109
【図３３−５】
0005570998.tif 000110
【図３３−６】
0005570998.tif 000111
【図３４−１】
0005570998.tif 000112
【図３４−２】
0005570998.tif 000113
【配列表】
0005570998000001.app