(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式：
【化１】
0005406838.tif 000043
（式中、ＸがＯであり、
ＹがＯ又はＮＲＢであり、
Ａがシクロアルキル、アリール又は複素環であり、
Ｒ１が水素、ＯＲＢ、Ｎ（ＲＢ）２、ＳＲＢ、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール若しくは複素環であり、
Ｒ２が必要に応じて置換された低級アルキルであり、
各Ｒ３が独立してハロゲン又は必要に応じて置換されたアルキルであり、及び／又は２つのＲ３が必要に応じて置換されたシクロアルキル又は複素環を与えるように結合して一緒に環の形を取ってもよく、
各Ｒ４がシアノ、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、ＲＣ、ＯＲＣ、Ｎ（ＲＣ）２、ＮＨＣ（Ｏ）ＲＣ、Ｃ（Ｏ）ＲＣ、Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＣ）２、又はＳＯ２ＲＣであり、
各ＲＢが独立して、水素、又は必要に応じて置換されたアルキルであり、
各ＲＣが独立して、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、ヘテロアルキル、アリール、複素環、アルキルアリール若しくはアルキル複素環であり、
ｎが０〜８であり、
ｍが０〜４である）
の化合物、又はその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
ＹがＮＲＢである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ａがアリールである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ａが複素環である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１が水素である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２がメチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ３が必要に応じて置換された低級アルキルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ３がメチルである、請求項７に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ４がハロゲンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ４が臭素又はフッ素である、請求項９に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ４がＲＣである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ４がＣ（Ｏ）ＮＨＲＣである、請求項１に記載の化合物。
【請求項１３】
式：
【化２】
0005406838.tif 000044
（式中、ＸがＯ又はＮＲＡであり、
Ｒ１が水素、ＯＲＢ、Ｎ（ＲＢ）２、ＳＲＢ、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール若しくは複素環であり、
Ｒ２が水素、ハロゲン、シアノ、ＯＲＢ、Ｎ（ＲＢ）２、ＳＲＢ又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール若しくは複素環であり、
各Ｒ３が独立してハロゲン又は必要に応じて置換されたアルキルであり、及び／又は２つのＲ３が必要に応じて置換されたシクロアルキル又は複素環を与えるように結合して一緒に環の形を取ってもよく、
各Ｒ４がシアノ、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、ＲＣ、ＯＲＣ、Ｎ（ＲＣ）２、ＮＨＣ（Ｏ）ＲＣ、Ｃ（Ｏ）ＲＣ、Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＣ）２、又はＳＯ２ＲＣであり、
ＲＡが水素、シアノ、ニトロ、ＲＡ１、ＳＯ２ＲＡ１、又はＳＯ２Ｎ（ＲＡ１）２であり、
各ＲＡ１が独立して、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、ヘテロアルキル、アリール、複素環、アルキルアリール若しくはアルキル複素環であり、
各ＲＢが独立して、水素、又は必要に応じて置換されたアルキルであり、
各ＲＣが独立して、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、ヘテロアルキル、アリール、複素環、アルキルアリール若しくはアルキル複素環であり、
ｎが０〜８であり、
ｍが０〜４である）の化合物、又はその薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
式：
【化３】
0005406838.tif 000045
を有する、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
式：
【化４】
0005406838.tif 000046
を有する、請求項１４に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
１．発明の分野
本発明は、様々な疾患及び障害を治療するキナーゼ阻害剤と、それらを含む組成物と、それらを使用する方法とに関する。
【０００２】
本願は、２００７年８月８日付けで出願された米国仮特許出願第６０／９５４，６９８号明細書に対する優先権を主張し、その内容の全てが参照により本明細書中に援用される。
【背景技術】
【０００３】
２．背景
タンパク質キナーゼは、ＡＴＰから受容タンパク質へのγ−リン酸基の移動を触媒する酵素群である。ヒトゲノムは、５００種類を超える様々なタンパク質キナーゼをコードすると推測され、その多くが癌及び炎症を含む広範な疾患及び障害に関与している。
【０００４】
ＬＩＭキナーゼ（ＬＩＭＫ）は、ｐ５３経路と結び付いている。例えば、国際公開第０２／０９９０４８号パンフレットを参照されたい。ＬＩＭＫは、２つのＮ末端ＬＩＭモチーフとＣ末端タンパク質キナーゼドメインとの特有の組合せを有する小さいサブファミリーのキナーゼに属する。これらのＬＩＭモチーフ及びキナーゼドメインは、幾つかの推定カゼインキナーゼを含有する高プロリン領域及び高セリン領域とマップキナーゼ認識部位とによって結び付く。ＬＩＭキナーゼ及びそれらの経路タンパク質が、アクチン細胞骨格のＲｈｏ誘導性の再組織化に寄与すると考えられる（同上）。ＬＩＭキナーゼファミリー成員には、ＬＩＭキナーゼ１（ＬＩＭＫ１）及びＬＩＭキナーゼ２（ＬＩＭＫ２）が含まれる。両方がコフィリンをリン酸化し、Ｒｈｏファミリー依存性のアクチン細胞骨格再構成（rearrangement）を調節する（同上）。
【０００５】
ＬＩＭキナーゼ阻害剤が癌治療に提唱されている（同上）。また、ＬＩＭＫ阻害剤が、柱細胞（trabecular cells）におけるアクチン脱重合を促進すること及び眼圧を低下させることによって、緑内障を治療するのに有用であり得ることも示唆されている。国際公開第０４／０４７８６８号パンフレットを参照されたい。
【０００６】
多種多様のケモタイプを有する非常に多くの化合物がキナーゼ阻害剤として報告されている。例えば、ＬＩＭＫ阻害剤として有用であるという報告があるフェニル置換ピリミジン化合物が開示されている。国際公開第２００６／０８４０１７号パンフレットを参照されたい。ピロール［２，３−ｄ］ピリミジン系化合物がＪａｎｕｓ  Ｋｉｎａｓｅ３阻害剤として開示されている。例えば米国特許出願公開第２００４／００５８９２２号明細書を参照されたい。広範な他の化合物の中で、有望なＡＫＴタンパク質キナーゼ阻害剤として幾つかのピロール［２，３−ｄ］ピリミジン系化合物も開示されている。米国特許出願公開第２００５／０１３０９５４号明細書を参照されたい。幾つかのピロール［２，３−ｄ］ピリミジン系キナーゼ阻害剤が癌治療に有用であるという報告がある。２００６年２月１５日付で出願された米国特許出願第１１／３５４，６３６号明細書を参照されたい。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００７】
３．発明の概要
本発明は一部、式Ｉ及び式ＩＩ：
【０００８】
【化１】
0005406838.tif 000002
【０００９】
の化合物、及びその薬学的に許容される塩に関し、その置換基が本明細書で規定される。これらの式の特定の化合物はＬＩＭＫ２の強力な阻害剤である。
【００１０】
本発明の一実施の形態は、本明細書で開示の化合物（例えば式Ｉ及び式ＩＩの化合物）を含む薬学的製剤（formations）を包含する。
【００１１】
別の実施の形態は、癌、炎症性の疾患及び障害、並びに緑内障、神経変性又は感染症等の視力に影響を与える疾患及び障害（例えば眼の疾患及び障害）を含む、ＬＩＭＫ２によって影響される様々な疾患及び障害の治療、管理及び予防のために本明細書に開示の化合物を使用する方法を包含する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
４．図面の簡単な説明
【図１】以下の実施例に記載のブタ前房器官培養灌流アッセイにおける本発明の化合物の効果を示す図である。ここで、本発明の化合物を含有する０．１μＭ溶液は時間に応じて流出量を増大させることを見出した。
【図２】以下の実施例に記載の高眼圧モデルにおける本発明の化合物の効果を示す図である。雌Ｆ２野生型マウスを用いた。この図におけるデータは、マウスの眼への化合物の局所適用後１時間で得た。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
５．詳細な説明
本発明は一部、ＬＩＭキナーゼ２（ＬＩＭＫ２）の新規の阻害剤の発見に基づき、これは様々な疾患及び障害を治療、管理、及び／又は予防するのに用いられ得る。
【００１４】
５．１．定義
特に明示のない限り、「アルケニル」という用語は、２〜２０（例えば２〜１０又は２〜６）個の炭素原子を有し、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含む直鎖、分岐鎖、及び／又は環式の炭化水素を意味する。代表的なアルケニル部分としては、ビニル、アリル、１−ブテニル、２−ブテニル、イソブチレニル、１−ペンテニル、２−ペンテニル、３−メチル−１−ブテニル、２−メチル−２−ブテニル、２，３−ジメチル−２−ブテニル、１−ヘキセニル、２−ヘキセニル、３−ヘキセニル、１−ヘプテニル、２−ヘプテニル、３−ヘプテニル、１−オクテニル、２−オクテニル、３−オクテニル、１−ノネニル、２−ノネニル、３−ノネニル、１−デセニル、２−デセニル、及び３−デセニルが挙げられる。
【００１５】
特に明示のない限り、「アルコキシ」という用語は、−Ｏ−アルキル基を意味する。アルコキシ基の例としては、−ＯＣＨ３、−ＯＣＨ２ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）２ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）３ＣＨ３、−Ｏ（ＣＨ２）４ＣＨ３、及び−Ｏ（ＣＨ２）５ＣＨ３が挙げられるが、これらに限定されない。
【００１６】
特に明示のない限り、「アルキル」という用語は、１〜２０（例えば１〜１０又は１〜４）個の炭素を有する直鎖、分岐鎖、及び／又は環式（「シクロアルキル」）の炭化水素を意味する。１〜４個の炭素を有するアルキル部分は「低級アルキル」と称される。アルキル基の例としては、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブチル、イソブチル、ペンチル、ヘキシル、イソヘキシル、ヘプチル、４，４−ジメチルペンチル、オクチル、２，２，４−トリメチルペンチル、ノニル、デシル、ウンデシル、及びドデシルが挙げられるが、これらに限定されない。シクロアルキル部分は単環又は多環であってもよく、例としてはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、及びアダマンチルが挙げられる。アルキル部分のさらなる例は直鎖部分、分岐部分、及び／又は環状部分（例えば、１−エチル−４−メチル−シクロヘキシル）を有する。「アルキル」という用語は飽和炭化水素、並びにアルケニル部分及びアルキニル部分を含む。
【００１７】
特に明示のない限り、「アルキルアリール」又は「アルキル−アリール」という用語は、アリール部分に結合したアルキル部分を意味する。
【００１８】
特に明示のない限り、「アルキルヘテロアリール」又は「アルキル−ヘテロアリール」という用語は、ヘテロアリール部分に結合したアルキル部分を意味する。
【００１９】
特に明示のない限り、「アルキル複素環」又は「アルキル−複素環」という用語は、複素環部分に結合したアルキル部分を意味する。
【００２０】
特に明示のない限り、「アルキニル」という用語は、２〜２０（例えば２〜２０又は２〜６）個の炭素原子を有し、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含む直鎖、分岐鎖、又は環式の炭化水素を意味する。代表的なアルキニル部分としては、アセチレニル、プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル、１−ペンチニル、２−ペンチニル、３−メチル−１−ブチニル、４−ペンチニル、１−ヘキシニル、２−ヘキシニル、５−ヘキシニル、１−ヘプチニル、２−ヘプチニル、６−ヘプチニル、１−オクチニル、２−オクチニル、７−オクチニル、１−ノニニル、２−ノニニル、８−ノニニル、１−デシニル、２−デシニル、及び９−デシニルが挙げられる。
【００２１】
特に明示のない限り、「アリール」という用語は、芳香環、又は炭素原子及び水素原子で構成される芳香環若しくは一部が芳香環の系を意味する。アリール部分は共に結合又は縮合した複数の環を含んでも良い。アリール部分の例としては、アントラセニル、アズレニル、ビフェニル、フルオレニル、インダン、インデニル、ナフチル、フェナントレニル、フェニル、１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン、及びトリルが挙げられるがこれらに限定されない。
【００２２】
特に明示のない限り、「アリールアルキル」又は「アリール−アルキル」という用語は、アルキル部分に結合したアリール部分を意味する。
【００２３】
特に明示のない限り、「ハロゲン」及び「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素を包含する。
【００２４】
特に明示のない限り、「ヘテロアルキル」という用語は、炭素原子の少なくとも１つがヘテロ原子（例えばＮ、Ｏ又はＳ）に置換されているアルキル部分（例えば直鎖、分岐鎖又は環式）を表す。
【００２５】
特に明示のない限り、「ヘテロアリール」という用語は、炭素原子の少なくとも１つがヘテロ原子（例えばＮ、Ｏ又はＳ）に置換されているアリール部分を意味する。例としては、アクリジニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾイソチアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾキナゾリニル、ベンゾチアゾリル、ベンズオキサゾリル、フリル、イミダゾリル、インドリル、イソチアゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、オキサゾリル、フタラジニル、ピラジニル、ピラゾリル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピリミジル、ピロリル、キナゾリニル、キノリニル、テトラゾリル、チアゾリル、及びトリアジニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００２６】
特に明示のない限り、「ヘテロアリールアルキル」又は「ヘテロアリール−アルキル」という用語は、アルキル部分に結合したヘテロアリール部分を意味する。
【００２７】
特に明示のない限り、「複素環」という用語は、炭素、水素及び少なくとも１つのヘテロ原子（例えばＮ、Ｏ又はＳ）で構成される芳香族、部分芳香族又は非芳香族の単環式又は多環式の環又は環系を表す。複素環には、共に縮合又は結合した複数（すなわち２つ以上）の環を含んでもよい。複素環はヘテロアリールを含む。例としては、ベンゾ［１，３］ジオキソリル、２，３−ジヒドロ−ベンゾ［１，４］ジオキシニル、シンノリニル、フラニル、ヒダントイニル、モルホリニル、オキセタニル、オキシラニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリジノニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロピリミジニル、テトラヒドロチオフェニル、テトラヒドロチオピラニル、及びバレロラクタミルが挙げられるがこれらに限定されない。
【００２８】
特に明示のない限り、「複素環アルキル」及び「複素環−アルキル」という用語は、アルキル部分に結合した複素環部分を表す。
【００２９】
特に明示のない限り、「ヘテロシクロアルキル」という用語は、非芳香族の複素環を表す。
【００３０】
特に明示のない限り、「ヘテロシクロアルキルアルキル」又は「ヘテロシクロアルキル−アルキル」という用語は、アルキル部分に結合したヘテロシクロアルキル部分を表す。
【００３１】
特に明示のない限り、「ＬＩＭＫ２  ＩＣ５０」という用語は、以下の実施例に記載のｉｎ  ｖｉｔｒｏヒトＬＩＭキナーゼ２阻害アッセイを用いて求められた化合物のＩＣ５０である。
【００３２】
特に明示のない限り、「管理する（manage）」、「管理している（managing）」及び「管理（management）」という用語は、疾患又は障害を既に患っている患者において、特定の疾患又は障害の再発を予防すること、及び／又は疾患又は障害を患っている患者の寛解時間を延長させることを包含する。この用語は、疾患又は障害の閾値、発症、及び／又は継続期間を調節すること、又は患者が疾患若しくは障害に対して応答する方法を変えることを包含する。
【００３３】
特に明示のない限り、「薬学的に許容される塩」という用語は、薬学的に許容される非毒性の酸又は塩基（無機酸及び無機塩基並びに有機酸及び有機塩基を含む）から調製される塩を表す。好適な薬学的に許容される塩基付加塩としては、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、及び亜鉛から生成される金属塩、又はリジン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）、及びプロカインから生成される有機塩が挙げられるが、これらに限定されない。好適な非毒性の酸としては、酢酸、アルギン酸、アントラニル酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エテンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、フロ酸、ガラクツロン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グリコール酸、臭化水素酸、塩化水素酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、硝酸、パモン酸、パントテン酸、フェニル酢酸、リン酸、プロピオン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、硫酸、酒石酸、及びｐ−トルエンスルホン酸等の無機酸及び有機酸が挙げられるが、これらに限定されない。特定の非毒性酸としては、塩化水素酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、及びメタンスルホン酸が挙げられる。したがって、特定の塩の例としては、塩酸塩及びメシル酸塩が挙げられる。他のものも当該技術分野において既知である。例えばRemington's Pharmaceutical Sciences（第１８版、Mack Publishing, Easton PA: 1990）、及びRemington: The Science and Practice of Pharmacy（第１９版、Mack Publishing, Easton PA: 1995）を参照されたい。
【００３４】
特に明示のない限り、「強力なＬＩＭＫ２阻害剤」は、ＬＩＭＫ２  ＩＣ５０が約２５０ｎＭ未満である化合物である。
【００３５】
特に明示のない限り、「予防する（prevent）」、「予防している（preventing）」及び「予防（prevention）」という用語は、患者が特定の疾患又は障害への罹患し始める前に行う処置を意図するものであり、疾患若しくは障害の重症度を阻害若しくは軽減させる。換言すると、この用語は予防法を包含する。
【００３６】
特に明示のない限り、化合物の「予防的に有効な量」は、疾患若しくは病態、又は疾患若しくは病態に関連する１つ若しくは複数の症状を予防する、又はその再発を予防するのに十分な量である。化合物の「予防的に有効な量」は、単独で又は他の薬剤と併用して、疾患の予防において予防的利点を与える治療剤の量を意味する。「予防的に有効な量」という用語は、予防法を全体的に改善する、又は別の予防剤の予防的な有効性を高める量を包含し得る。
【００３７】
特に明示のない限り、「立体異性体混合物」という用語は、ラセミ混合物、及び立体異性体的に豊富な混合物を包含する（例えば、Ｒ／Ｓ＝３０／７０、３５／６５、４０／６０、４５／５５、５５／４５、６０／４０、６５／３５及び７０／３０）。
【００３８】
特に明示のない限り、「立体異性体的に純粋である」という用語は、化合物の１つの立体異性体を含み、その化合物の他の立体異性体を実質的に含まない組成物を意味する。例えば、１つの立体中心を有する化合物の立体異性体的に純粋である組成物は、化合物の反対の立体異性体を実質的に含まない。２つの立体中心を有する化合物の立体異性体的に純粋である組成物は、化合物の他のジアステレオマーを実質的に含まない。典型的な立体異性体的に純粋である化合物は、約８０重量％を超える化合物の１つの立体異性体と、約２０重量％未満の化合物の他の立体異性体とを含むか、約９０重量％を超える化合物の１つの立体異性体と、約１０重量％未満の化合物の他の立体異性体とを含むか、約９５重量％を超える化合物の１つの立体異性体と、約５重量％未満の化合物の他の立体異性体とを含むか、約９７重量％を超える化合物の１つの立体異性体と、約３重量％未満の化合物の他の立体異性体とを含むか、又は約９９重量％を超える化合物の１つの立体異性体と、約１重量％未満の化合物の他の立体異性体とを含む。
【００３９】
特に明示のない限り、「置換された」という用語は、化学構造又は部分を記載するために用いる場合は、その構造又は部分の誘導体を表し、ここで、水素原子の１つ又は複数は、アルコール、アルデヒド、アルコキシ、アルカノイルオキシ、アルコキシカルボニル、アルケニル、アルキル（例えば、メチル、エチル、プロピル、ｔ−ブチル）、アルキニル、アルキルカルボニルオキシ（−ＯＣ（Ｏ）アルキル）、アミド（例えば、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−アルキル−、−アルキルＮＨＣ（Ｏ）アルキル）、アミジニル（例えば、−Ｃ（ＮＨ）ＮＨ−アルキル−、−Ｃ（ＮＲ）ＮＨ２）、アミン（アルキルアミノ、アリールアミノ、アリールアルキルアミノ等の第１級、第２級及び第３級のアミン）、アロイル、アリール、アリールオキシ、アゾ、カルバモイル（例えば、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−アルキル−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−アルキル）、カルバミル（例えば、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨ−アルキル、ＣＯＮＨ−アリール、ＣＯＮＨ−アリールアルキル）、カルボニル、カルボキシル、カルボン酸、カルボン酸無水物、カルボン酸塩化物、シアノ、エステル、エポキシド、エーテル（例えば、メトキシ、エトキシ）、グアニジノ、ハロ、ハロアルキル（例えば、−ＣＣｌ３、−ＣＦ３、−Ｃ（ＣＦ３）３）、ヘテロアルキル、ヘミアセタール、イミン（第１級及び第２級）、イソシアネート、イソチオシアネート、ケトン、ニトリル、ニトロ、オキソ、ホスホジエステル、スルフィド、スルホンアミド（例えばＳＯ２ＮＨ２）、スルホン、スルホニル（アルキルスルホニル、アリールスルホニル及びアリールアルキルスルホニルを含む）、スルホキシド、チオール（例えばスルフヒドリル、チオエーテル）並びに尿素（例えば、−ＮＨＣＯＮＨ−アルキル−）（これらに限定されない）等の化学的部分又は官能基で置換される。
【００４０】
特に明示のない限り、化合物の「治療的に有効な量」は、疾患若しくは病態の治療若しくは管理において治療的利点を与えるのに、又は疾患若しくは病態に関連した１つ又は複数の症状を遅延化又は最小化するのに十分な量である。化合物の「治療的に有効な量」は、疾患又は病態の治療又は管理に治療的利点を与える、治療剤の単独の又は他の療法を併用した量を意味する。「治療的に有効な量」という用語は、療法全体を改善させるか、疾患若しくは病態の症状若しくは病因を軽減若しくは回避するか、又は別の治療剤の治療的有効性を高める量を包含することができる。
【００４１】
特に明示のない限り、「治療する（treat）」、「治療している（treating）」及び「治療（treatment）」という用語は、患者が特定の疾患又は障害を患っている間に行う処置を意図し、これによって疾患若しくは障害の重症度が軽減するか、又は疾患若しくは障害の進行が遅延若しくは減速する。
【００４２】
特に明示のない限り、「挙げられる（複数）（include）」という用語は、「挙げられる（include）が、限定されない」と同じ意味を有し、「挙げられる（単数）（includes）」という用語は、「挙げられるが、限定されない」と同じ意味を有する。同様に、「等」という用語は、「等（限定されない）」と同じ意味を有する。
【００４３】
特に明示のない限り、一連の名詞の直前にくる１つ又は複数の形容詞は、それぞれの名詞を修飾するものとして解釈される。例えば、「必要に応じて置換されたアルキル、アリール又はヘテロアリール」という語句は、「必要に応じて置換されたアルキル、必要に応じて置換されたアリール又は必要に応じて置換されたヘテロアリール」と同じ意味を有する。
【００４４】
特に明示のない限り、化合物又は化合物属の構造若しくは名称は、この化合物又は化合物属の全ての形態と、この化合物又は化合物属を含む全ての組成物とを包含する。
【００４５】
より大きい化合物の一部分を形成する化学的部分は、単一分子として存在する場合に一般的に指す名称、又はその基を一般的に指す名称を用いて本明細書に記載され得ることに留意すべきである。例えば、「ピリジン」及び「ピリジル」という用語は、他の化学的部分と結合する部分を記載するのに用いる場合に、同じ意味を表す。したがって、「ＸＯＨ（式中、Ｘはピリジルである）」及び「ＸＯＨ（式中、Ｘはピリジンである）」という２つの語句は同じ意味を表し、ピリジン−２−オール、ピリジン−３−オール及びピリジン−４−オールの化合物を包含する。
【００４６】
構造の立体化学、又は構造の一部分が例えば太線又は破線で示されない場合、構造又は構造の一部分はその全ての立体異性体を包含すると解釈されることに留意すべきである。さらに、満足な原子価を有しないことが図で示された任意の原子はこの原子価を満たすのに十分な水素原子と結合すると推測される。さらに、一本の破線に平行して一本の実線で示された化学結合は、原子価が許容する場合、単結合及び二重（例えば、芳香族）結合の両方を包含する。
【００４７】
５．２．化合物
本発明の一実施形態は、式Ｉ：
【００４８】
【化２】
0005406838.tif 000003
【００４９】
（式中、ＸがＯ又はＮＲＡであり、ＹがＯ、ＮＲＢ又はＣ（ＲＢ）２であり、Ａがシクロアルキル、アリール又は複素環であり、Ｒ１が水素、ＯＲＢ、Ｎ（ＲＢ）２、ＳＲＢ、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール若しくは複素環であり、Ｒ２が水素、ハロゲン、シアノ、ＯＲＢ、Ｎ（ＲＢ）２、ＳＲＢ又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール若しくは複素環であり、各Ｒ３が独立してハロゲン又は必要に応じて置換されたアルキルであり、及び／又は２つのＲ３が必要に応じて置換されたシクロアルキル又は複素環を与えるように結合して一緒に環の形を取ってもよく、各Ｒ４がシアノ、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、ＲＣ、ＯＲＣ、Ｎ（ＲＣ）２、ＮＨＣ（Ｏ）ＲＣ、Ｃ（Ｏ）ＲＣ、Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＣ）２、ＣＳＯ２ＲＣ、ＣＳＯ２Ｎ（ＲＣ）２、又はＳＯ２ＲＣであり、ＲＡが水素、シアノ、ニトロ、ＲＡ１、ＳＯ２ＲＡ１、ＳＯ２ＮＲＡ１、又はＳＯ２Ｎ（ＲＡ１）２であり、各ＲＡ１が独立して、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、ヘテロアルキル、アリール、複素環、アルキルアリール若しくはアルキル複素環であり、各ＲＢが独立して、水素、又は必要に応じて置換されたアルキルであり、各ＲＣが独立して、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、ヘテロアルキル、アリール、複素環、アルキルアリール若しくはアルキル複素環であり、ｎが０〜８であり、ｍが０〜４である）の化合物、又はその薬学的に許容される塩を包含する。
【００５０】
本発明の特定の実施形態において、ＸがＯであり、ＹがＣ（ＲＢ）２であり、１つのＲＢが水素であり、他のＲＢが置換アルキルである場合、Ａはクロロフェニル又はジクロロフェニルではない。別の実施形態では、ＸがＯである場合、ＹはＣ（ＲＢ）２ではない。
【００５１】
式Ｉの或る特定の化合物は、式：
【００５２】
【化３】
0005406838.tif 000004
【００５３】
を有する。
【００５４】
特定の化合物は、式：
【００５５】
【化４】
0005406838.tif 000005
【００５６】
を有する。
【００５７】
本発明の別の実施形態は、式ＩＩ：
【００５８】
【化５】
0005406838.tif 000006
【００５９】
（式中、ＸがＯ又はＮＲＡであり、ＹがＯ、ＮＲＢ又はＣ（ＲＢ）２であり、Ａがシクロアルキル、アリール又は複素環であり、Ｒ１が水素、ＯＲＢ、Ｎ（ＲＢ）２、ＳＲＢ、又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール若しくは複素環であり、Ｒ２が水素、ハロゲン、シアノ、ＯＲＢ、Ｎ（ＲＢ）２、ＳＲＢ又は必要に応じて置換されたアルキル、アリール若しくは複素環であり、各Ｒ３が独立してハロゲン又は必要に応じて置換されたアルキルであり、及び／又は２つのＲ３が必要に応じて置換されたシクロアルキル又は複素環を与えるように結合して一緒に環の形を取ってもよく、各Ｒ４がシアノ、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、ＲＣ、ＯＲＣ、Ｎ（ＲＣ）２、ＮＨＣ（Ｏ）ＲＣ、Ｃ（Ｏ）ＲＣ、Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＲＣ）２、ＣＳＯ２ＲＣ、ＣＳＯ２Ｎ（ＲＣ）２、又はＳＯ２ＲＣであり、ＲＡが水素、シアノ、ニトロ、ＲＡ１、ＳＯ２ＲＡ１、ＳＯ２ＮＲＡ１、又はＳＯ２Ｎ（ＲＡ１）２であり、各ＲＡ１が独立して、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、ヘテロアルキル、アリール、複素環、アルキルアリール若しくはアルキル複素環であり、各ＲＢが独立して、水素、又は必要に応じて置換されたアルキルであり、各ＲＣが独立して、水素、又は必要に応じて置換されたアルキル、ヘテロアルキル、アリール、複素環、アルキルアリール若しくはアルキル複素環であり、ｍが０〜４であり、ｐが０〜３であり、ｑが０〜２である）の化合物、又はその薬学的に許容される塩を包含する。
【００６０】
式ＩＩの特定の化合物は、式：
【００６１】
【化６】
0005406838.tif 000007
【００６２】
を有する。
【００６３】
本明細書で開示の様々な式に関して、適用可能な場合、本発明の特定の実施形態はＸがＯであるようなものである。他では、ＸがＮＲＡであり、ＲＡが例えば、シアノである。
【００６４】
幾つかでは、ＹがＮＲＢであり、ＲＢが例えば水素である。
【００６５】
幾つかでは、Ａが必要に応じて置換されたアリール（例えば置換されたフェニル）である。他では、Ａが必要に応じて置換された複素環である。
【００６６】
幾つかでは、Ｒ１が水素である。
【００６７】
幾つかでは、Ｒ２が必要に応じて置換された低級アルキル（例えばメチル）である。
【００６８】
幾つかでは、Ｒ３が必要に応じて置換された低級アルキル（例えばメチル）である。
【００６９】
幾つかでは、Ｒ４がハロゲン（例えば臭素、フッ素）である。他では、Ｒ４がＲｃ、Ｃ（Ｏ）ＮＨＲＣ、ＣＳＯ２ＲＣ又はＣＳＯ２ＮＨＲＣであり、ＲＣが例えば、必要に応じて置換された低級アルキル又はヘテロアルキルである。特定の実施形態では、ＲＣが−（ＣＨ２）２Ｎ（ＣＨ３）２である。幾つかの実施形態では、ＲＣが必要に応じて置換された複素環（例えば必要に応じて置換されたピペリジン）である。
【００７０】
本発明の特定の化合物は強力なＬＩＭＫ２阻害剤である。或る特定の化合物は、ＬＩＭＫ２  ＩＣ５０が約１００ｎＭ、７５ｎＭ、５０ｎＭ、２５ｎＭ又は１０ｎＭ未満である。
【００７１】
５．３．合成方法
本発明の化合物は、当該技術分野に既知の方法によって調製され得る。例えば、米国特許出願公開第２００４／００５８９２２号明細書及び同第２００５／０１３０９５４号明細書を参照されたい。
【００７２】
ピロロピリミジンは、当該技術分野で既知の様々な方法によって調製され得る。例えば、West, J. Org. Chem. 26:4959（1961）；Aono et al、欧州特許第０７３３６３３号明細書を参照されたい。１つのアプローチは、２００６年１０月２３日付けで出願された米国特許出願第６０／８５３，８９１号明細書に示され、以下のスキーム１で示される：
【００７３】
【化７】
0005406838.tif 000008
【００７４】
次に、当該技術分野で既知の方法を用いて、得られる４−ヒドロキシピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン化合物を、対応する４−クロロ化合物（以下のスキーム２における化合物１（ａ））に変換する。例えば、West, J. Org. Chem. 26:4959（1961）を参照されたい。次に、この化合物を用いて、以下のスキーム２に示されるように、本発明の化合物を調製する：
【００７５】
【化８】
0005406838.tif 000009
【００７６】
スキーム２で示されたように、ピロロピリミジン１（ａ）を適切な条件下で（例えばｉ−ＰｒＯＨ中で加熱して）ピペラジンと縮合し、置換ピロロピリミジン１（ｂ）を形成する。好適な置換カップリング剤（例えばイソシアネート）１（ｃ）によるこの新たなピペラジンの処理によって、最終化合物が生成される。所望に応じて、この化合物を本発明に包含される様々な他のものに変換するために、既知の方法を用いることができる。
【００７７】
５．４．使用方法
本発明は、ＬＩＭＫ２を阻害する方法であって、ＬＩＭＫ２を強力なＬＩＭＫ２阻害剤に接触させることを含む、方法を包含する。好ましい強力なＬＩＭＫ２阻害剤は本発明の化合物（即ち本明細書で開示の化合物）である。
【００７８】
特定の実施形態は、患者において炎症性の疾患又は障害を治療、管理又は予防する方法であって、それを必要とする患者に、治療的に又は予防的に有効な量の本発明の化合物を投与することを含む、方法を包含する。
【００７９】
別の実施形態は、患者において癌を治療、管理又は予防する方法であって、それを必要とする患者に、治療的に又は予防的に有効な量の本発明の化合物を投与することを含む、方法を包含する。
【００８０】
別の実施形態は、患者において眼圧を低下させる方法であって、それを必要とする患者においてＬＩＭＫ２活性又は発現を阻害することを含む、方法を包含する。一方法では、ＬＩＭＫ２活性は、患者の眼を強力なＬＩＭＫ２阻害剤に接触させることによって阻害される。特定の強力なＬＩＭＫ２阻害剤は、式Ｉ又は式ＩＩを有する。別の方法では、ＬＩＭＫ２発現は、患者の眼に、ＬＩＭＫ２の発現を阻害する化合物（例えばｓｉＲＮＡ）を投与することによって阻害される。
【００８１】
別の実施形態は、患者において視力に影響を与える疾患又は障害を治療、管理又は予防する方法であって、それを必要とする患者においてＬＩＭＫ２活性又は発現を阻害することを含む、方法を包含する。一方法では、ＬＩＭＫ２活性は、患者の眼を強力なＬＩＭＫ２阻害剤に接触させることによって阻害される。特定の強力なＬＩＭＫ２阻害剤は、式Ｉ又は式ＩＩを有する。別の方法では、ＬＩＭＫ２発現は、患者の眼に、ＬＩＭＫ２の発現を阻害する化合物（例えばｓｉＲＮＡ）を投与することによって阻害される。視力に影響を与える疾患及び障害としては、緑内障、神経変性疾患、及び感染性疾患が挙げられる。
【００８２】
５．５．薬学的製剤
本発明は、１つ又は複数の本発明の化合物を含む薬学的組成物を包含する。或る特定の薬学的組成物は、患者への経口投与、経粘膜投与（例えば鼻、舌下、膣、口腔、又は直腸）、非経口投与（例えば皮下、静脈内、ボーラス注入、筋肉内、又は動脈内）、経皮投与、局所性投与及び点眼（例えば、局所、硝子体内）投与に好適な単一の単位剤形である。
【００８３】
剤形の例としては、限定されるものではないが、錠剤；キャプレッツ；軟ゼラチンカプセル等のカプセル；カシェ（cachets）；トローチ；ロゼンジ；分散液；坐剤；軟膏；パップ（湿布）；ペースト；粉末；包帯剤；クリーム；硬膏；溶液；パッチ；エアロゾル（例えば経鼻スプレー又は吸入器）；ゲル；懸濁液（例えば水性又は非水性の液体懸濁液、水中油型エマルジョン、又は油中水型液体エマルジョン）、溶液、及びエリキシルを含む患者への経口投与又は経粘膜投与に好適な液体剤形；患者への非経口投与に好適な液体剤形；並びに再構成して患者への非経口投与に好適な液体剤形を提供することができる無菌固体（例えば結晶性又は非結晶性の固体）が挙げられる。
【００８４】
製剤は、投与方式に合わせる必要がある。例えば、経口投与は、本発明の化合物を消化管内での分解から保護するために腸溶性コーティングが必要である。同様に、製剤は作用部位への活性成分（複数可）の送達を容易にする成分を含有し得る。例えば、化合物は、分解酵素から保護し、循環系における輸送を容易にし、細胞膜を通って細胞内部位へ至るこれらの送達を行う、リポソーム製剤で投与され得る。
【００８５】
剤形の組成、形状、及び種類は、典型的にはその用途に応じて異なる。例えば、疾患の急性期治療に用いる剤形は、１つ又は複数の活性成分を、同一疾患の慢性期治療に用いる剤形よりも多量に含有することができる。同様に、非経口剤形は、１つ又は複数の活性成分を、同一疾患を治療するために用いる経口剤形よりも少量含有することができる。本発明が包含する特定の剤形が互いに変化するこれら及び他の方法は、当業者には容易に明らかである。例えばRemington's Pharmaceutical Sciences、第１８版（Mack Publishing, Easton PA: 1990）を参照されたい。
【００８６】
５．５．１．経口剤形
経口投与に好適な本発明の薬学的組成物は、錠剤（例えばチュアブル錠）、キャプレッツ、カプセル、及び液体（例えば香りのするシロップ）（これらに限定されない）等の個別の剤形として提供することができる。このような剤形は所定量の活性成分を含有し、当業者に既知の製薬法によって調製することができる。例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences、第１８版、（Mack Publishing, Easton PA: 1990）を参照されたい。
【００８７】
典型的な経口剤形は、慣用の薬学的配合技法に従い、密接な混合剤中で活性成分（複数可）を少なくとも１つの賦形剤と組み合わせることによって調製する。賦形剤は、投与に望ましい製剤の形態に応じて広範な形態を取ることができる。
【００８８】
投与のしやすさのため、錠剤及びカプセルが最も有益な経口単位剤形である。必要に応じて、錠剤は、標準の水性又は非水性技法によってコーティングすることができる。このような剤形は、慣用の製薬法でも調製することができる。一般に、薬学的組成物及び剤形は、活性成分を液体担体、微粉固体担体、又は両方と均一且つ密接に混合し、次に生成物を必要に応じて所望の形状にすることによって調製する。崩壊剤は、固体剤形に組み込み、迅速な溶解を容易にすることができる。また、滑沢剤を組み込んで、剤形（例えば錠剤）の製造を容易にすることができる。
【００８９】
５．５．２．非経口剤形
非経口剤形は、皮下、静脈内（ボーラス注入を含む）、筋肉内、及び動脈内を含むがこれらに限定されないさまざまな経路によって患者に投与することができる。典型的には汚染物質に対する患者の自然の防御を介さずに投与するため、非経口剤形は特に滅菌されているか、又は患者に投与する前に滅菌可能である。非経口剤形の例としては、すぐに注入できる溶液、注入のために薬学的に許容されるビヒクルにすぐに溶解又は懸濁できる乾燥産物、すぐに注入できる懸濁液、及びエマルジョンが挙げられるが、これらに限定されない。
【００９０】
本発明の非経口剤形を提供するために用いることができる好適なビヒクルは、当業者に既知である。例としては、注射用水（ＵＳＰ）；塩化ナトリウム注射液、リンゲル液、デキストロース注射液、デキストロース及び塩化ナトリウム注射液、及び乳酸加リンゲル液等であるがこれらに限定されない水性ビヒクル；エチルアルコール、ポリエチレングリコール、及びポリプロピレングリコール等であるがこれらに限定されない水混和性ビヒクル；並びにトウモロコシ油、綿実油、ラッカセイ油、ゴマ油、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、及び安息香酸ベンジル等であるがこれらに限定されない非水性ビヒクルが挙げられるが、これらに限定されない。
【００９１】
５．５．３．経皮剤形、局所剤形、及び粘膜剤形
経皮剤形、局所剤形、及び粘膜剤形としては、点眼液、スプレー、エアロゾル、クリーム、ローション、軟膏、ゲル、溶液、乳濁液、懸濁液、又は当業者に既知の他の形態が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences、第１８版（Mack Publishing, Easton PA: 1990）、及びIntroduction to Pharmaceutical Dosage Forms、第４版（Lea & Febiger, Philadelphia: 1985）を参照されたい。経皮剤形としては、皮膚に貼付し、所定時間装用することにより、所望量の活性成分の透過が可能となり得る、「リザーバ型」パッチ又は「マトリクス型」パッチが挙げられる。
【００９２】
経皮剤形、局所剤形、及び粘膜剤形を提供するために使用され得る好適な賦形剤（例えば、担体及び希釈剤）並びに他の材料は、薬学の当業者に既知であり、所定の薬学的組成物又は剤形を適用する特定の組織に依存する。
【００９３】
治療する特定組織に応じて、本発明の活性成分による治療前に、治療と同時に、又は治療に続いて、さらなる構成成分を使用し得る。例えば、透過亢進剤を使用して、組織への活性成分の送達を補助し得る。
【００９４】
また、薬学的組成物若しくは剤形のｐＨ、又は薬学的組成物若しくは剤形が適用される組織のｐＨを調整して、１つ又は複数の活性成分の送達を改善し得る。同様に、溶媒担体の極性、そのイオン強度、又は張性（tonicity）を調整して、送達を改善し得る。また、送達が改善するように、ステアリン酸塩等の化合物を薬学的組成物又は剤形に添加して、１つ又は複数の活性成分の親水性又は親油性を有利に変化させ得る。この点に関して、ステアリン酸塩は、製剤用の脂質ビヒクル、乳化剤又は界面活性剤、及び送達亢進剤又は透過亢進剤として作用し得る。活性成分の異なる塩、水和物、又は溶媒和物を使用して、得られた組成物の性質をさらに調整し得る。
【００９５】
５．５．４．点眼剤形
本発明の化合物は、水溶液、水性懸濁液及び軟膏を用いて、眼に送達することができる。当業者が気付いているように、点眼製品は、眼の微生物汚染を防ぐために最終包装中で無菌でなければならない。包装を一度開けると、無菌性を維持するのに保存料を使用する必要がある。点眼製剤は、製剤のｐＨ、緩衝能、粘性、及び張性を制御する必要もある。好ましい製剤は、ｐＨが約６．５〜８．５であり、緩衝能が約０．０１〜０．１である。特定の製剤は等張である。特定の製剤は、粘性が約２５ｃｐｓ〜５０ｃｐｓである。
【００９６】
活性医薬成分（ＡＰＩ）をその作用部位に効果的に送達する安全なビヒクルを提供するのに使用され得る成分は、既知であるが、ＡＰＩの物理的及び化学的な特徴に応じて変わる。
【００９７】
適切に緩衝化した水溶液を水溶性の化合物の送達に使用してもよい。典型的には、溶液組成物において、組成物の粘性を増大するのに高分子成分を使用する。好適なポリマーの例としては、セルロースポリマー（例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、エチルヒドロキシエチルセルロース）、合成ポリマー（例えばカルボキシビニルポリマー、ポリビニルアルコール）、多糖類（例えばキサンタンガム、グアーガム及びデキストラン）及びそれらの混合物が挙げられる。例えば、米国特許第４，１３６，１７３号明細書及び同第７，２４４，４４０号明細書を参照されたい。化合物を送達するのに懸濁液を使用してもよい。高分子成分は典型的には、不溶性成分の懸濁又は容易な再分散性の維持に役立つ物理的安定性助剤として懸濁組成物中で使用される（同上）。
【００９８】
製剤の無菌性を確保するのに、保存料を使用してもよい。好適な保存料としては、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、クロロブタノール、酢酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、チメロサール、メチルパラベン及びプロピル−パラベンが挙げられる。また、酸化を受けやすい製剤の安定性を確保するために、抗酸化剤を使用してもよい。好適な抗酸化剤としては、エチレンジアミン四酢酸、重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム及びチオ尿素が挙げられる。
【実施例】
【００９９】
６．実施例
本発明の態様は、以下の実施例から理解することができるが、その範囲に限定されない。
【０１００】
６．１．実施例１：（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキサミド
【０１０１】
【化９】
0005406838.tif 000010
【０１０２】
表題の化合物を幾つかの工程で調製した。
Ａ．  （Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル ２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシレートの調製。（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル ２−メチルピペラジン−１−カルボキシレート（３ｇ、１５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３ｍｌ）、及び４−クロロ−５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（２ｇ、１２ｍｍｏｌ）をイソプロパノール（１０ｍｌ）に添加した。溶液を封止圧力管中で１２時間１２０℃で加熱した。反応物を真空下で濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィ（８０ｇ  ＳｉＯ２、０％〜５％  ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２、５０分）によって精製し、クリーンな（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル ２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシレート（１．５ｇ、４．５ｍｍｏｌ、３８％）を得た。
【０１０３】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、クロロホルム−ｄ）δｐｐｍ１０．４２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、８．３９（ｓ，１Ｈ）、６．９６（ｓ，１Ｈ）、４．４０（ｄ，Ｊ＝６．０６Ｈｚ，１Ｈ）、３．８３〜４．０１（ｍ，２Ｈ）、３．４３（ｔｄ，Ｊ＝１２．５７，３．４１Ｈｚ，１Ｈ）、３．３２（ｄｄ，Ｊ＝１２．７６，３．９２Ｈｚ，１Ｈ）、３．０７（ｔｄ，Ｊ＝１２．３２，３．４１Ｈｚ，１Ｈ）、２．４４（ｓ，３Ｈ）、１．５０（ｓ，９Ｈ）、１．２４（ｄ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝３３２。
Ｂ．  （Ｓ）−５−メチル−４−（３−メチルピペラジン−１−イル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンの調製。工程Ａ由来のＢｏｃ保護ピペラジン（１．５ｇ、４．５ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸とジクロロメタンとの１：１混合物（１０ml）に添加した。反応物を一晩撹拌した後、真空下で濃縮して、ジクロロメタンで希釈し、飽和重炭酸ナトリウム水溶液で中和した。層を分離し、水層をより多くのジクロロメタンで戻し抽出した。合わせた有機画分をＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮し、（Ｓ）−５−メチル−４−（３−メチルピペラジン−１−イル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（０．８０ｇ、３．５ｍｍｏｌ、７６％）を得た。
【０１０４】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δｐｐｍ８．２４（ｓ，１Ｈ）、７．０５（ｄ，Ｊ＝１．０１Ｈｚ，１Ｈ）、３．９７〜４．０４（ｍ，２Ｈ）、３．００〜３．１４（ｍ，４Ｈ）、２．７４（ｄｄ，Ｊ＝１２．８８，１０．３６Ｈｚ，１Ｈ）、２．４５（ｄ，Ｊ＝１．０１Ｈｚ，３Ｈ）、１．１９（ｄ，Ｊ＝６．３２Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝２３２。
Ｃ．  （Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキサミドの調製。−５℃のトリホスゲン（０．３０ｇ、１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（７０ｍｌ）に、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）及びトリエチルアミン（０．６０ｍｌ、４．３ｍｍｏｌ）中の３−ブロモ−４−フルオロアニリン（０．１９ｇ、１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で２０分間撹拌した後、ＣＨ２Ｃｌ２（３０ｍｌ）中の工程Ｂ由来の（Ｓ）−５−メチル−４−（３−メチルピペラジン−１−イル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（０．２３ｇ、１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を１．５時間撹拌した後、真空下で濃縮した。残渣を調製ＨＰＬＣで精製し、白色固体として（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキサミド（６５ｍｇ）を得た。
【０１０５】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール−ｄ４）δｐｐｍ８．３６（ｓ，１Ｈ）、７．７４（ｄｄ，Ｊ＝６．３，２．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄｄｄ，Ｊ＝８．９，４．２，２．６Ｈｚ，１Ｈ）、７．２４（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．１３（ｔ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，１Ｈ）、４．５５〜４．６２（ｍ，１Ｈ）、４．３３〜４．４１（ｍ，１Ｈ）、４．１８（ｄｄ，Ｊ＝１３．０，１．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．０４〜４．１２（ｍ，１Ｈ）、３．８５（ｄｄ，Ｊ＝１３．０，４．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．５７〜３．６８（ｍ，２Ｈ）、２．４９（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．２８（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４４７．３。
【０１０６】
６．２．実施例２：（Ｓ）−３−（２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキサミド）フェニルジメチルカルバメート
【０１０７】
【化１０】
0005406838.tif 000011
【０１０８】
Ａ．  ３−アミノフェニル−Ｎ，Ｎ−ジメチルカルバメートの調製：３−ニトロフェノール（１．０ｇ、７．２ｍｍｏｌ）をピリジン（１．７ｍｌ、２１．６ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．５ｍｌ、１０．８ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジメチルクロロカルバメート（０．７９ｍｌ、８．６ｍｍｏｌ）で３日間処理した。反応物をＨ２Ｏでクエンチし、１５分間撹拌して、Ｅｔ２Ｏで希釈し、１ＭのＮａＨＳＯ４水溶液、Ｈ２Ｏ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液及びブラインで（戻し抽出を伴う）洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。残渣を、ＡｃｏＨ（０．４２ｍｌ）を有するＴＨＦ（３６ｍｌ）中の１０％  Ｐｄ／Ｃ（５０湿潤％（% wet）、１．２６ｇ、０．５９ｍｍｏｌ）でバルーン圧Ｈ２での１８時間の処理によって水素化した。反応物をＥｔＯＡｃを用いセライトを通して濾過し、真空下で濃縮した。残渣を、フラッシュクロマトグラフィ（４０ｇ  ＳｉＯ２、０％〜４％  ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製し、３−アミノフェニル−Ｎ，Ｎ−ジメチルカルバメート（１．１５ｇ、６．４ｍｍｏｌ、８９％）を得た。
【０１０９】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δｐｐｍ７．１２（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．５２（ｔ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ）、６．５０（ｔ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ）、６．４６（ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．７１（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、３．０８（ｓ，３Ｈ）、３．０１（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝１８１。
Ｂ．  （Ｓ）−３−（２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキサミド）フェニルジメチルカルバメートの調製：０℃でトリホスゲン（１０４ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液（７．５ｍｌ）に、ゆっくりＴＨＦ（２．５ｍｌ）中の工程Ａ由来の３−アミノフェニルＮ，Ｎ−ジメチルカルバメート（１８０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を０℃で１５分間、及び室温で１５分間撹拌した。実施例１、工程Ｂ由来の（Ｓ）−５−メチル−４−（３−メチルピペラジン−１−イル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（２３１ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を１時間撹拌し、ＭｅＯＨでクエンチして、ＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ２Ｏ、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液及びブラインで洗浄して、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィ（４０ｇ  ＳｉＯ２、０％〜８％  ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製し、凍結乾燥させて、白色固体として（Ｓ）−３−（２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキサミド）フェニルジメチルカルバメート（３６５ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ、８４％）を得た。
【０１１０】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δｐｐｍ９．８２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、８．４０（ｓ，１Ｈ）、７．３１（ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ）、７．２４（ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ）、７．１０〜７．１９（ｍ，１Ｈ）、６．９５（ｓ，１Ｈ）、６．８０（ｄｄ，Ｊ＝６．８，１．３Ｈｚ，１Ｈ）、６．６０（ｓ，１Ｈ）、４．３７（ｄｄｄ，Ｊ＝６．２，３．３，３．２Ｈｚ，１Ｈ）、４．１４（ｄｄ，Ｊ＝１２．５，１．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．９１〜３．９８（ｍ，２Ｈ）、３．５４（ｔｄ，Ｊ＝１２．３，３．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．４５（ｄｄ，Ｊ＝１２．９，４．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．１８（ｔｄ，Ｊ＝１２．３，３．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．０９（ｓ，３Ｈ）、３．０１（ｓ，３Ｈ）、２．４５（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．３２（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４３８。
【０１１１】
６．３．実施例３：Ｎ−（３−ブロモフェニル）−３−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボキサミド
【０１１２】
【化１１】
0005406838.tif 000012
【０１１３】
Ａ．  ｔｅｒｔ−ブチル３−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボキシレートの調製。４−クロロ−５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（２５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）及びｔｅｒｔ−ブチル３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボキシレート（３０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）のイソプロパノール溶液（２ｍｌ）に、トリエチルアミン（３６μＬ、０．２６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物をマイクロ波で１８０℃で３０分間加熱した後、真空下で濃縮した。残渣を調製ＨＰＬＣ（Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ３０×５０ｍｍ、１０％〜９０％  ０．０１％ＴＦＡを有するＨ２Ｏ／ＭｅＯＨ、１５分、３５ｍｌ／分、２２０ｎｍ）によって精製し、ｔｅｒｔ−ブチル３−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボキシレート（３５ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ、６６％）を得た。
Ｂ．４−（３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）−５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン二塩酸塩の調製。工程Ａ由来のＢｏｃ保護ジアザビシクロ［３．２．１］オクタンを、ジオキサン（４ｍｌ）中の４ＭのＨＣｌに溶解した。反応物を１時間撹拌し、真空下で濃縮して、４−（３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−３−イル）−５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン二塩酸塩（３０ｍｇ、０．０９３ｍｍｏｌ、９１％）を得た。
Ｃ．Ｎ−（３−ブロモフェニル）−３−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボキサミドの調製。工程Ｂ由来のジアザビシクロ［３．２．１］オクタンを、Ｎ２下で乾燥ＴＨＦ（３ｍｌ）に溶解し、３−ブロモイソシアネート（３０μＬ、０．１１ｍｍｏｌ）を添加した。３時間撹拌した後、反応物を濃縮して、残渣を調製ＨＰＬＣによって精製し、１．５ｍｇのＮ−（３−ブロモフェニル）−３−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−３，８−ジアザビシクロ［３．２．１］オクタン−８−カルボキサミドを得た。
【０１１４】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＭｅＯＤ）：δ５．４５（１Ｈ，ｓ）、７．６９（１Ｈ，ｓ）、７．３（１Ｈ，ｍ）、７．１（３Ｈ，ｍ）、４．５２（２Ｈ，ｍ）、２．２（２Ｈ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，ｄ）、２．１８（２Ｈ，Ｊ＝１２．４Ｈｚ，ｄ）、２．３８（３Ｈ，ｓ）、１．９４（２Ｈ，ｍ）、２．２５（２Ｈ，ｍ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４４３。
【０１１５】
６．４．実施例４：２−（３−ブロモフェニル）−７−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１，３（２Ｈ，５Ｈ）−ジオン
【０１１６】
【化１２】
0005406838.tif 000013
【０１１７】
実施例１、工程Ｂ由来のピペラジンと同様に調製したメチル４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−２−カルボキシレート（３０ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液１．５ｍｌに、ゆっくり３−ブロモイソシアネート（１３μＬ、０．１ｍｍｏｌ）を添加した。出発材料を消費するまで（ＬＣ／ＭＳによってモニタリングして）、混合物を室温で撹拌した。溶媒を真空下で除去し、残渣を調製ＨＰＬＣによって精製して、白色固体として２−（３−ブロモフェニル）−７−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）テトラヒドロイミダゾ［１，５−ａ］ピラジン−１，３（２Ｈ，５Ｈ）−ジオンを得た。
【０１１８】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．２７（ｓ，１Ｈ）、７．７１（ｓ，１Ｈ）、７．３９〜７．５８（ｍ，３Ｈ）、７．１６（ｓ，１Ｈ）、４．５８〜４．６２（ｍ，１Ｈ）、４．４９〜４．５１（ｍ，１Ｈ）、４．１５〜４．２１（ｍ，２Ｈ）、３．２０〜３．４１（ｍ，３Ｈ）、２．４６（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４４１，４４３。
【０１１９】
６．５．実施例５：（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド（carboximidamide）
【０１２０】
【化１３】
0005406838.tif 000014
【０１２１】
Ａ．  フェニルＮ−３−ブロモフェニル−Ｎ’−シアノカルバムイミデート（cyanocarbamimidate）の調製。３−ブロモアニリン（１．４４ｇ、８．４ｍｍｏｌ）、ジフェニル−Ｎ−シアノカルボンイミデート（２ｇ、８．４ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２０ｍｌ）に添加した。溶液を５０℃で一晩加熱し、室温まで冷却して、生成物を沈降させた。白色結晶固体を濾過し、フェニルＮ−３−ブロモフェニル−Ｎ’−シアノカルバムイミデート（２ｇ、６．３ｍｍｏｌ、７５％）を得た。
【０１２２】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δｐｐｍ７．５９（ｔ，Ｊ＝２．０２Ｈｚ，１Ｈ）、７．４２〜７．４７（ｍ，２Ｈ）、７．４０（ｄｄｄ，Ｊ＝８．１５，１．４５，１．２６Ｈｚ，１Ｈ）、７．３１〜７．３６（ｍ，２Ｈ）、７．２４〜７．２９（ｍ，２Ｈ）、７．１３〜７．１８（ｍ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝３１６，３１８。
Ｂ．  （Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミドの調製。工程Ａ由来のシアノカルバムイミデート（９．４８ｇ、３０ｍｍｏｌ）、実施例１、工程Ｂ由来の（Ｓ）−５−メチル−４−（３−メチルピペラジン−１−イル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（６．９３ｇ、３０ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（４．１６ｍｌ、３０ｍｍｏｌ）をＭｅＣＮ（２５０ｍｌ）中で組み合わせて、６時間８５℃まで加熱した。反応物を室温まで冷却し、真空下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィ（７５０ｇ  ＳｉＯ２、０％〜７％  ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製し、黄色発泡体を得た。この物質をＭｅＯＨに溶解し、６０℃で１５分間活性炭と共に撹拌した。セライトを通して混合物を濾過し、多量のＭｅＯＨと１０％  ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２とで洗浄して、真空下で濃縮した。再び残渣をフラッシュクロマトグラフィ（７５０ｇ  ＳｉＯ２、０％〜７％  ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製した。得られた物質をＭｅＯＨに溶解し、水を添加して、生成物を粉砕した（crash out）。混合物を真空下で濃縮し、生成物を水で再懸濁して、凍結乾燥し、非晶質の白色固体として、（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド（８．１７ｇ、５７％、ＣＨＮ解析に基づき１．２５当量のＨ２Ｏ）の水和物を得た。
【０１２３】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δｐｐｍ１１．６０（ｓ，１Ｈ）、９．５０（ｓ，１Ｈ）、８．２２（ｓ，１Ｈ）、７．２５（ｍ，３Ｈ）、７．０７（ｍ，２Ｈ）、４．５１（ｍ，１Ｈ）、４．００（ｍ，１Ｈ）、３．９１（ｍ，１Ｈ）、３．８４（ｍ，１Ｈ）、３．５３（ｍ，１Ｈ）、３．３２（ｍ，１Ｈ）、３．０８（ｍ，１Ｈ）、２．３７（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．２４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４５３，４５５；Ｃ２０Ｈ２１ＢｒＮ８・１．２５Ｈ２Ｏに関するＣＨＮ分析計算値：Ｃ，５０．４８；Ｈ，４．９８；Ｎ，２３．５５。実測値：Ｃ，５０．１８；Ｈ，４．５８；Ｎ，２３．５３。
【０１２４】
６．６．実施例６：（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド
【０１２５】
【化１４】
0005406838.tif 000015
【０１２６】
Ａ．  フェニルＮ−３−クロロフェニル−Ｎ’−シアノカルバムイミデートの調製。ジフェニル−Ｎ−シアノカルボンイミデート（２ｇ、８．４ｍｍｏｌ）及び３−クロロアニリン（０．８８ｍｌ、８．４ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２０ｍｌ）に添加した。溶液を５０℃で一晩加熱し、室温まで冷却して、生成物を沈降させた。白色結晶固体を濾過し、フェニルＮ−３−クロロフェニル−Ｎ’−シアノカルバムイミデート（２ｇ、７．３ｍｍｏｌ、８８％）を得た。
【０１２７】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δｐｐｍ７．４２〜７．４８（ｍ，３Ｈ）、７．２８〜７．３６（ｍ，２Ｈ）、７．２４〜７．２７（ｍ，２Ｈ）、７．１３〜７．１８（ｍ，２Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝２７２。
Ｂ．  （Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミドの調製。工程Ａ由来のシアノカルバムイミデート（０．４７ｇ、１．７ｍｍｏｌ）、実施例１、工程Ｂ由来の（Ｓ）−５−メチル−４−（３−メチルピペラジン−１−イル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（０．４０ｇ、１．７ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１ｍｌ）をアセトニトリル（１０ｍｌ）に添加した。混合物を封止圧力管内で４時間８５℃で加熱した。溶媒を蒸発させ、残渣をフラッシュクロマトグラフィ（８０ｇ  ＳｉＯ２、０％〜５％  ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２、５０分）によって精製し、（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド（０．３２ｇ、０．７９ｍｍｏｌ、４６％）を得た。
【０１２８】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δｐｐｍ８．２２（ｓ，１Ｈ）、７．３１（ｔ，Ｊ＝７．９６Ｈｚ，１Ｈ）、７．０１〜７．１６（ｍ，４Ｈ）、４．１５（ｄ，Ｊ＝１３．１４Ｈｚ，１Ｈ）、４．００（ｄ，Ｊ＝１３．３９Ｈｚ，１Ｈ）、３．９１（ｄ，Ｊ＝１３．１４Ｈｚ，１Ｈ）、３．６５（ｄ，Ｊ＝３．２８Ｈｚ，１Ｈ）、３．４７（ｄｄ，Ｊ＝１３．１４，３．７９Ｈｚ，１Ｈ）、３．３４（ｓ，１Ｈ）、３．０９〜３．２５（ｍ，１Ｈ）、２．４４（ｓ，３Ｈ）、１．３２（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４０９。
【０１２９】
６．７．実施例７：（Ｓ）−Ｎ’−シアノ−Ｎ−（３−フルオロフェニル）−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド
【０１３０】
【化１５】
0005406838.tif 000016
【０１３１】
実施例６、工程Ａ由来のフェニルＮ−３−クロロフェニル−Ｎ’−シアノカルバムイミデートと同様に調製したフェニルＮ’−シアノ−Ｎ−（３−フルオロフェニル）カルバムイミデート（０．５５ｇ、２．２ｍｍｏｌ）、実施例１、工程Ｂ由来の（Ｓ）−５−メチル−４−（３−メチルピペラジン−１−イル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（０．５０ｇ、２．２ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１ｍｌ）をアセトニトリル（１０ｍｌ）に添加した。混合物を封止圧力管内で４時間８５℃で加熱した。溶媒を蒸発させ、残渣を調製ＨＰＬＣ（Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ３０×２５０ｍｍカラム、１０％〜１００％  ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ（１０ｍＭのＮＨ４ＯＡｃ）、１８分、４５ｍｌ／分）によって精製し、（Ｓ）−Ｎ’−シアノ−Ｎ−（３−フルオロフェニル）−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド（０．２３ｇ、０．５８ｍｍｏｌ、２７％）を得た。
【０１３２】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δｐｐｍ８．２８（ｓ，１Ｈ）、７．３１〜７．４９（ｍ，１Ｈ）、７．０８（ｄ，Ｊ＝１．０１Ｈｚ，１Ｈ）、６．８９〜７．０２（ｍ，２Ｈ）、４．６３〜４．７４（ｍ，１Ｈ）、４．２０（ｄ，Ｊ＝１３．１４Ｈｚ，１Ｈ）、４．０６（ｄ，Ｊ＝１３．３９Ｈｚ，１Ｈ）、３．９７（ｄ，Ｊ＝１１．１２Ｈｚ，１Ｈ）、３．６７〜３．８６（ｍ，１Ｈ）、３．５４（ｄｄ，Ｊ＝１３．１４，３．７９Ｈｚ，１Ｈ）、３．３８（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、３．１８〜３．２９（ｍ，１Ｈ）、２．５０（ｄ，Ｊ＝１．０１Ｈｚ，２Ｈ）、１．３９（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝３９３。
【０１３３】
６．８．実施例８：（Ｓ）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド
【０１３４】
【化１６】
0005406838.tif 000017
【０１３５】
実施例５、工程Ａ由来のＮ−３−ブロモフェニル−Ｎ’−シアノカルバムイミデートと同様に調製したフェニルＮ’−シアノ−Ｎ−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）カルバムイミデート（３６ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）、実施例１、工程Ｂ由来の（Ｓ）−５−メチル−４−（３−メチルピペラジン−１−イル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（３５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．０５ｍｌ、０．３６ｍｍｏｌ）をマイクロ波容器内のイソプロパノール中に組み合わせた。反応物をマイクロ波条件下で１４０℃で３０分間加熱した。溶媒を蒸発させ、残渣をＣＨ２Ｃｌ２（３×１０ｍｌ）で洗浄した。粗生成物を調製ＨＰＬＣによって精製し、白色固体として（Ｓ）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）−ピペラジン−１−カルボキシイミダミドを得た。
【０１３６】
１Ｈ（ＣＤ３ＯＤ）：δｌ．３４９〜１．６５（３Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，ｄ）、２．０２８〜２．０５４（広幅，Ｎ−Ｈ）；３．５１５〜３．５４７（１Ｈ，ｍ）、３．６１１〜３．７３６（２Ｈ，ｍ）、４．０５９〜４．０９２（１Ｈ，Ｊ＝１３．２Ｈｚ，ｄ）、４．５６１〜４．５９５（１Ｈ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，ｄ）、４．６４３〜４．７０６（２Ｈ，ｍ）６．７０（１Ｈ，ｓ）、７．１９（１Ｈ，ｓ）、７．４２８〜７．４４９（２Ｈ，ｍ）、７．５４９〜７．５８８（２Ｈ，ｍ）、８．２０３（１Ｈ，ｓ，広幅）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４２９。
【０１３７】
６．９．実施例９：（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモ−４−フルオロフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド
【０１３８】
【化１７】
0005406838.tif 000018
【０１３９】
表題の化合物を、実施例６由来の（Ｓ）−Ｎ−（３−クロロフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミドと同じように調製した。
【０１４０】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δｐｐｍ８．２３（ｓ，１Ｈ）、７．４２（ｄｄ，Ｊ＝５．８，２．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．１３〜７．２４（ｍ，２Ｈ）、７．０４（ｓ，１Ｈ）、４．６２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、４．１６（ｄ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，１Ｈ）、４．０３（ｄ，Ｊ＝１３．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．９２（ｄ，Ｊ＝１３．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．６３〜３．７３（ｍ，１Ｈ）、３．４９（ｄｄ，Ｊ＝１３．０，３．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．２１（ｔｄ，Ｊ＝１２．４，３．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．４５（ｓ，３Ｈ）、１．３３（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４７１，４７３。
【０１４１】
６．１０．実施例１０：Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−２，５−ジメチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド
【０１４２】
【化１８】
0005406838.tif 000019
【０１４３】
Ａ．  ４−（２，５−ジメチルピペラジン−１−イル）−５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンの調製。トランス−２，５−ジメチルピペラジン（１ｇ、８．８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（１ｍｌ）及び４−クロロ−５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（２ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）をイソプロパノール（１０ｍｌ）に添加した。溶液をマイクロ波で１５０℃で６時間加熱した後、真空下で濃縮した。この物質を調製ＨＰＬＣ（Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ３０×２５０ｍｍカラム、１０％〜１００％  ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ（１０ｍＭのＮＨ４ＯＡｃ）、１８分、４５ｍｌ／分）によって精製し、４−（トランス−２，５−ジメチルピペラジン−１−イル）−５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（０．３０ｇ、１４％）を得た。
【０１４４】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム−ｄ）δｐｐｍ８．４９（ｓ，１Ｈ）、６．９５（ｓ，１Ｈ）、３．６２〜３．７０（ｍ，１Ｈ）、３．４６〜３．５７（ｍ，１Ｈ）、３．２０〜３．２７（ｍ，１Ｈ）、２．９５（ｑ，Ｊ＝７．４１Ｈｚ，１Ｈ）、２．８１（ｄｄ，Ｊ＝１２．６３，９．６０Ｈｚ，１Ｈ）、２．０８（ｓ，３Ｈ）、１．３１（ｄ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，３Ｈ）、１．１５（ｔ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，４Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝２４６。
Ｂ．  Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−２，５−ジメチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミドの調製：工程Ａ由来のジメチルピペラジン（８０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）、実施例５、工程Ａ由来のフェニルＮ−３−ブロモフェニル−Ｎ’−シアノカルバムイミデート（１００ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２０ｍｌ）をイソプロパノール（１０ｍｌ）に添加した。混合物をマイクロ波で１５０℃で２０分間加熱した後、真空下で濃縮した。この物質を調製ＨＰＬＣ（Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ３０×２５０ｍｍカラム、１０％〜１００％  ＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ（１０ｍＭのＮＨ４ＯＡｃ）、１８分、４５ｍｌ／分）によって精製し、（Ｅ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−２，５−ジメチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド（２９ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ、１９％）を得た。
【０１４５】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δｐｐｍ８．２１（ｓ，１Ｈ）、７．２３〜７．３２（ｍ，３Ｈ）、７．０８〜７．１５（ｍ，１Ｈ）、７．０２（ｓ，１Ｈ）、４．６０（ｂｒ．ｓ．，２Ｈ）、３．８５（ｄ，Ｊ＝２．５３Ｈｚ，３Ｈ）、３．６３（ｄ，Ｊ＝１２．３８Ｈｚ，１Ｈ）、２．４３（ｓ，３Ｈ）、１．２６（ｄ，Ｊ＝６．８２Ｈｚ，３Ｈ）、１．１８（ｄ，Ｊ＝６．５７Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４６９。
【０１４６】
６．１１．実施例１１：（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−イソプロピル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド
【０１４７】
【化１９】
0005406838.tif 000020
【０１４８】
Ａ．  （Ｓ）−４−（３−イソプロピルピペラジン−１−イル）−５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンの調製。（Ｓ）−３−イソプロピルピペラジン−２，５−ジオン（１００ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）の無水ＴＨＦ溶液に、ＴＨＦ（１．２ｍｌ、１．２ｍｍｏｌ）中、１Ｍの水素化アルミニウムリチウムを添加した。反応物を１時間還流し、室温まで冷却し、Ｈ２Ｏでクエンチし、濾過した後、真空下で濃縮して、（Ｓ）−２−イソプロピルピペラジンを得た。この物質を、トリエチルアミン（１ｍｌ）及びイソプロパノール（２ｍｌ）中の４−クロロ−５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（８５．５ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）と組合せた。反応物をマイクロ波で１８０℃で３０分間加熱し、真空下で濃縮して、ＥｔＯＡｃに溶解し、Ｈ２Ｏで洗浄して、真空下で濃縮し、（Ｓ）−４−（３−イソプロピルピペラジン−１−イル）−５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンを得て、さらに精製せずに続けた。
Ｂ．  （Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−イソプロピル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミドの調製。工程Ａ由来のピペラジンを、封止管内のイソプロパノール中の実施例５、工程Ａ由来のフェニルＮ−３−ブロモフェニル−Ｎ’−シアノカルバムイミデート（４０ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）と組合せた。出発材料が残らなくなるまでＬＣ／ＭＳでモニタリングして、反応物を１２０℃に加熱した後、真空下で濃縮した。残渣を調製ＨＰＬＣ（Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８  ５ｕ  ３０×１００ｍｍ、１０％〜１００％溶媒Ｂ、グラジエント時間＝１３分、流速＝４５ｍｌ／分、波長＝２２０ｎｍ、溶媒Ａ＝１０ｍＭの酢酸アンモニウム水溶液、溶媒Ｂ＝アセトニトリル）によって精製し、白色固体として（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−イソプロピル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド（２．２ｍｇ、７％）を得た。
【０１４９】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δ（ｐｐｍ）８．３５（ｓ，１Ｈ）、７．３（ｄ，１Ｈ）、７．２９（ｍ，１Ｈ）、７．１（ｓ，１Ｈ，）７．１９（ｓ，１Ｈ）、７．１３（ｄ，１Ｈ）、３．６ｄｍ，２Ｈ）、３．５（ｍ，２Ｈ）、３．３（ｍ，２Ｈ）、２．４６（ｓ，３Ｈ）、１．４４（ｍ，２Ｈ）、０．９３（ｍ，６Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４８２。
【０１５０】
６．１２．実施例１２：（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−２−（２−（メチルチオ）エチル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド
【０１５１】
【化２０】
0005406838.tif 000021
【０１５２】
Ａ．  （Ｓ）−３−（２−（メチルチオ）エチル）ピペラジン−２，５−ジオンの調製。Ｌ−メチオニンメチルエステルＨＣｌ（１ｇ、５ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２中に入れ、塩化クロロアセチル（５９８μＬ、７．５ｍｍｏｌ）を撹拌しながら添加した。１０分の撹拌後、飽和ＮａＯＨ水溶液（１ｍｌ）を添加した。反応物を２０分間撹拌し、ＣＨ２Ｃｌ２層を分離し、Ｈ２Ｏ（２×）で洗浄して、真空下で濃縮した。残渣を１００℃で１．５時間、ＭｅＯＨ中の７Ｎのアンモニアで処理した。反応物を真空下で濃縮し、その粗生成物を使用する（Ｓ）−３−（２−（メチルチオ）エチル）ピペラジン−２，５−ジオンを得た。
Ｂ．  （Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−２−（２−（メチルチオ）エチル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミドの調製。工程Ａ由来のジオンを使用して、表題の化合物を、実施例１１由来の（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−イソプロピル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミドと同じように調製した。
【０１５３】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δ（ｐｐｍ）８．３５（ｓ，１Ｈ）、７．３（ｄ，１Ｈ）、７．２９（ｍ，１Ｈ）、７．１（ｓ，１Ｈ，）７．１９（ｓ，１Ｈ）、７．１３（ｄ，１Ｈ）、４．２４（Ｍ，２ｈ）、３．９９（ｍ，１Ｈ）、３．６（ｍ，２Ｈ）、３．４（ｍ，２Ｈ）、２．４（ｍ，２Ｈ）、２．３（ｓ，３Ｈ）、１．９７（ｍ，１Ｈ）、１．９１（ｓ，３Ｈ）、１．７９（ｍ，１Ｈ）；）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝５１４。
【０１５４】
６．１３．実施例１３：（Ｓ）−フェニルＮ−シアノ−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルブイミデート（carbimidate）
【０１５５】
【化２１】
0005406838.tif 000022
【０１５６】
実施例１、工程Ｂ由来の（Ｓ）−５−メチル−４−（３−メチルピペラジン−１−イル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（３４７ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）及びジフェニル−Ｎ−シアノカルボンイミデート（３５７ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（３ｍｌ）中で組合せて、５０℃で２時間加熱した後、室温で一晩撹拌した。反応物を真空下で濃縮し、残渣をフラッシュクロマトグラフィ（４０ｇ  ＳｉＯ２、０％〜５％  ＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２）によって精製し、オフホワイトの固体として（Ｓ）−フェニルＮ−シアノ−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルブイミデート（４８１ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ、８６％）を得た。
【０１５７】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＭｅＯＤ）δｐｐｍ８．２４（ｓ，１Ｈ）、７．４１〜７．４７（ｍ，２Ｈ）、７．２８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．１８（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）、７．０４（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．７２（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ）、４．１７〜４．２９（ｍ，２Ｈ）、３．９６（ｄｔ，Ｊ＝１３．４，１．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．７８（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．５，１１．９，３．４Ｈｚ，１Ｈ）、３．５５（ｄｄ，Ｊ＝１３．４，４．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．２１〜３．２９（ｍ，１Ｈ）、２．４５（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．３８（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝３７６。
【０１５８】
６．１４．実施例１４：（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（６−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド
【０１５９】
【化２２】
0005406838.tif 000023
【０１６０】
Ａ．  ４−クロロ−６−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンの調製。封止管内で、エチル ２−アミノ−５−メチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボキシレート（１５０ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ、文献の手順、J. Heterocyclic Chem., 23:1555 （1985）に従って調製）をホルムアミド（４．５ｍｌ）、ギ酸（２．３ｍｌ）及びＤＭＦ（１．０ｍｌ）に溶解し、１２時間１５５℃に加熱した。反応物を濃縮した後、ＮａＨＣＯ３溶液に溶解し（taken up with）、ＤＣＭで抽出し、６−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−オール（７０ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ、５１％、ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝１５０）を得た。この物質をオキシ塩化リン（５ｍｌ）に溶解し、１時間１１０℃に加熱した。反応物を濃縮し、ＮａＨＣＯ３に溶解し、ＤＣＭで抽出して、４−クロロ−６−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（４０ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ、５０％）を得た。ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝１６８。
Ｂ．  （Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（６−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミドの調製。工程Ａ由来のピロロピリミジンを用いて、表題の化合物を実施例５由来の（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミドと同じように調製した。
【０１６１】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．１２（１Ｈ，ｓ）、７．２９（３Ｈ，ｍ）、７．１２（１Ｈ，ｍ）、６．３８（１Ｈ，ｓ）、４．５９（２Ｈ，ｍ）、４．８３（１Ｈ，Ｊ＝１３．６Ｈｚ，ｄ）、３．７２（３Ｈ，ｍ）、２．４（３Ｈ，ｓ）、１．３１（３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，ｄ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４５５。
【０１６２】
６．１５．実施例１５：（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−４−（５−クロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ’−シアノ−２−メチルピペラジン−１−カルボキシイミダミド
【０１６３】
【化２３】
0005406838.tif 000024
【０１６４】
Ａ．  ４，５−ジクロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンの調製：４−クロロ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（０．５ｇ、３．２６ｍｍｏｌ）を無水ＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍｌ）中で懸濁し、Ｎ−クロロスクシンイミド（０．８７ｇ、６．５２ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を３日間還流した後、室温に冷却した。白色固体を濾過によって回収し、５−ジクロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（０．５４ｇ、２．９ｍｍｏｌ、８８％）を得た。
【０１６５】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．５７（１Ｈ，ｓ）、７．６０（１Ｈ，ｓ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝１８８。
（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−４−（５−クロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ’−シアノ−２−メチルピペラジン−１−カルボキシイミダミドの調製。工程Ａ由来のピロロピリミジンを用いて、表題の化合物を、実施例８由来の（Ｓ）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミドと同じように調製した。
【０１６６】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．２９（ｓ，１Ｈ）、７．１２〜７．３４（ｍ，５Ｈ）、４．６４（ｓ，１Ｈ）、４．４１〜４．４３（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，１Ｈ）、４．１６〜４．１９（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ）、３．９８〜４．０２（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，１Ｈ）、３．７１〜３．７８（ｔ，Ｊ＝１４Ｈｚ，１Ｈ）、３．４７〜３．５２（ｍ，１Ｈ）、３．２１〜３．２８（ｍ，１Ｈ）、１．３５〜１．３６（ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４７５。
【０１６７】
６．１６．実施例１６：（Ｓ）−４−（５−クロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（３−（イソプロピルカルバモイル）フェニル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキサミド
【０１６８】
【化２４】
0005406838.tif 000025
【０１６９】
実施例２由来の（Ｓ）−３−（２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキサミド）フェニルジメチルカルバメートと同じように、表題の化合物を実施例１５、工程Ａ由来の４，５−ジクロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンから調製した。
【０１７０】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．２８（ｓ，１Ｈ）、７．８１（ｓ，１Ｈ）、７．３６〜７．５４（ｍ，３Ｈ）、７．３１（ｓ，１Ｈ）、４．５７〜４．５９（ｍ，１Ｈ）、４．４３〜４．４６（ｄ，Ｊ＝１２Ｈｚ，１Ｈ）、４．１８〜４．２４（ｍ，２Ｈ）、４．０４〜４．０８（ｄ，Ｊ＝１６Ｈｚ，ｌＨ）、３．６２〜３．６８（ｍ，１Ｈ）、３．４４〜３．４８（ｍ，１Ｈ）、３．１９〜３．２３（ｍ，１Ｈ）、１．３３〜１．３８（ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，３Ｈ）、１．２６〜１．２７（ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，６Ｈ）。ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４５６。
【０１７１】
６．１７．実施例１７：Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド
【０１７２】
【化２５】
0005406838.tif 000026
【０１７３】
表題の化合物を、実施例８由来の（Ｓ）−Ｎ’−シアノ−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（３−（トリフルオロメチル）フェニル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミドと同じ手順によって、４−クロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンから調製した。
【０１７４】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．１８（ｓ，１Ｈ）、７．０５〜７．３５（ｍ，５Ｈ）、６．６６（ｓ，１Ｈ）、４．５１〜４．７４（ｍ，３Ｈ）、３．９８〜４．０９（ｍ，１Ｈ）、３．３５〜３．７４（ｍ，３Ｈ）、１．３２〜１．３３（ｄ，Ｊ＝４Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４４１。
【０１７５】
６．１８．実施例１８：（Ｓ）−４−（５−シアノ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（３−（イソプロピルカルバモイル）フェニル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキサミド
【０１７６】
【化２６】
0005406838.tif 000027
【０１７７】
Ａ．  ５−ブロモ−４−クロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンの調製。４−クロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（１．２ｇ、７．８ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２溶液（２５ｍｌ）に、ＣＨ２Ｃｌ２（２５ｍｌ）中のＮ−ブロモアセトアミド（１．１８６ｇ、８．６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を４０分間還流温度で加熱した後、室温に冷却し、真空下で濃縮して、オフホワイトの固体を得た。冷水（４０ｍｌ）を固体に添加した後、濾過によって回収して、冷水（５ｍｌ）で洗浄し、真空下で乾燥させた。生成物を最小量のイソプロパノールから再結晶化して、純粋な５−ブロモ−４−クロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（１．４７５ｇ、８１．５％）を得た。
【０１７８】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．５７２（ｓ，１Ｈ）、７．６６５（ｓ，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝２３２。
Ｂ．  ５−ブロモ−４−クロロ−７−（フェニルスルホニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンの調製。０℃で工程Ａ由来の５−ブロモ−４−クロロ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（１．１７ｇ、５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍｌ）中のスラリーに、ＮａＨ（鉱油中６０％、０．２８ｇ、７ｍｍｏｌ）を添加した。１５分の撹拌後、塩化ベンゼンスルホニル（０．６４ｍｌ、５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を室温に温め、２時間撹拌して、白色固体を沈降させた。より多くのＤＭＦ（５ｍｌ）を添加し、反応物を１０ｍｌの水でクエンチした。固体を濾過で回収し、真空下で乾燥させ、白色固体として５−ブロモ−４−クロロ−７−（フェニルスルホニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（１．６２ｇ、４．３５ｍｍｏｌ、８７％）を得て、それをさらに精製することなく続けた。ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝３７３。
Ｃ．  （Ｓ）−５−ブロモ−４−（３−メチルピペラジン−１−イル）−７−（フェニルスルホニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジンの調製。工程Ｂ由来のピロロピリミジン（７６ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）と（Ｓ）−２−メチルピペラジン（２１ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）とのイソプロパノール（２ｍｌ）中の混合物に、トリエチルアミン（０．１１ｍｌ、０．８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波によって８０℃で５分間加熱し、真空下で濃縮して、粗（Ｓ）−５−ブロモ−４−（３−メチルピペラジン−１−イル）−７−（フェニルスルホニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（６５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、７５％）を得て、それを次の工程に直接使用した。ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４３７。
Ｄ．  （Ｓ）−４−（５−ブロモ−７−（フェニルスルホニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（３−（イソプロピルカルバモイル）フェニル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキサミドの調製。０℃でＮ２下で、トリホスゲン（１５ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（１ｍｌ）に、ＴＨＦ（１ｍｌ）中の３−アミノ−Ｎ−イソプロピルベンズアミド（２５ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（４３μＬ、０．３ｍｍｏｌ）の溶液を滴下した。混合物を０℃で１５分間、及び室温でさらに１５分間撹拌した。ＴＨＦ（１ｍｌ）中の工程Ｃ由来のピペラジン（６５ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を室温で一晩撹拌した後、ＭｅＯＨ及びＫ２ＣＯ３（９７ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）でクエンチし、濾過した。溶液を真空下で濃縮し、調製ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−４−（５−ブロモ−７−（フェニルスルホニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（３−（イソプロピルカルバモイル）フェニル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキサミド（７０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ、７７％）を得た。ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝６４１。
Ｅ．  （Ｓ）−４−（５−シアノ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（３−（イソプロピルカルバモイル）フェニル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキサミドの調製。工程Ｄ由来の（Ｓ）−４−（５−ブロモ−７−（フェニルスルホニル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（３−（イソプロピルカルバモイル）−フェニル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキサミド（７０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（２ｍｌ）に、Ｚｎ（ＣＮ）２（２６ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）及びＰｄ（ＰＰｈ３）４（１３ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をマイクロ波で１５０℃で３分間加熱し、室温まで冷却し、セライトパッドを通して濾過した。溶液を真空下で濃縮して、残渣をＮａＯＨ及びＭｅＯＨで２時間処理した。生成物を調製ＨＰＬＣによって精製し、白色固体として、（Ｓ）−４−（５−シアノ−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ−（３−（イソプロピルカルバモイル）フェニル）−２−メチルピペラジン−１−カルボキサミドを得た。
【０１７９】
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：δ８．３７（ｓ，１Ｈ）、８．０７（ｓ，１Ｈ）、７．７９（ｓ，１Ｈ）、７．３２〜７．６１（ｍ，３Ｈ）、４．５２〜４．６５（ｍ，２Ｈ）、４．３０〜４．４２（ｍ，１Ｈ）、４．１８〜４．１６（ｍ，１Ｈ）、４．０２〜４．１３（ｍ，１Ｈ）、３．５７〜３．７６（ｍ，２Ｈ）、３．３８〜３．４７（ｍ，１Ｈ）、１．３１〜１．３３（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，３Ｈ）、１．２６〜１．２８（ｄ，Ｊ＝８Ｈｚ，６Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４４７。
【０１８０】
６．１９．実施例１９：（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ’−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド
【０１８１】
【化２７】
0005406838.tif 000028
【０１８２】
Ａ．  ジフェニルメチルスルホニルカルボンイミデートの調製。
【０１８３】
ジクロロジフェノキシメタン（２ｇ、７．４６ｍｍｏｌ）及びメチルスルホンアミド（１．５６ｇ、１６．４１ｍｍｏｌ）をＥｔＯＡｃ（１５ｍｌ）に溶解して、還流まで１２時間加熱した。混合物を冷却し、真空下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィ（２０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）による粗混合物の精製によって、ジフェニルメチルスルホニルカルボンイミデート（０．７５ｇ、２．５９ｍｍｏｌ、３５％）を得た。
【０１８４】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム）δｐｐｍ７．３８〜７．４３（ｍ，４Ｈ）、７．３０（ｍ，２Ｈ）、７．２１（ｍ、４Ｈ）、３．０１（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝２９２。
Ｂ．  フェニルＮ−３−ブロモフェニル−Ｎ’−（メチルスルホニル）カルバムイミデートの調製。
【０１８５】
工程Ａ由来のジフェニルメチルスルホニルカルボンイミデート（０．７５ｇ、２．５９ｍｍｏｌ）と３−ブロモアニリン（０．２８ｍｌ、２．５９ｍｍｏｌ）とをアセトニトリル（５ｍｌ）に溶解し、７０℃で１２時間加熱した。反応物を室温まで冷却し、真空下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィ（３０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）による精製によって、フェニルＮ−３−ブロモフェニル−Ｎ’−（メチルスルホニル）カルバムイミデート（０．５０ｇ、１．３５ｍｍｏｌ、５２％）を得た。
【０１８６】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム）δｐｐｍ９．２５（ｓ，１Ｈ）、７．５４（ｍ，１Ｈ）、７．４０（ｍ，３Ｈ）、７．２６（ｍ，２Ｈ）、７．１３（ｍ，２Ｈ）、２．９６（ｓ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝３６９，３７１。
Ｃ．  （Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ’−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミドの調製。工程Ｂ由来のカルバムイミデート（１００ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）、実施例１、工程Ｂ由来の（Ｓ）−５−メチル−４−（３−メチルピペラジン−１−イル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（６３ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（７７μｌ、０．２７ｍｍｏｌ）をＭｅＣＮ（１．５ｍｌ）中で組み合わせ、還流まで２時間加熱した。混合物を濃縮し、調製ＨＰＬＣによって精製して、（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ’−（メチルスルホニル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミドを得た。
【０１８７】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール）δｐｐｍ８．１９（ｓ，１Ｈ）、７．４０（ｓ，１Ｈ）、７．３０（ｍ，２Ｈ）、７．１６（ｍ，１Ｈ）、７．０１（ｓ，１Ｈ）、４．４６（ｍ，１Ｈ）、４．０１（ｍ，１Ｈ）、３．７８（ｍ，２Ｈ）、３．５２（ｍ，１Ｈ）、３．４０（ｍ，１Ｈ）、３．０８（ｍ，１Ｈ）、２．９８（ｓ，３Ｈ）、２．３９（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．２６（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝５０６，５０８。
【０１８８】
６．２０．実施例２０：（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ’−スルファモイルピペラジン−１−カルボキシイミダミド
【０１８９】
【化２８】
0005406838.tif 000029
【０１９０】
Ａ．  ジフェニルスルファモイルカルボンイミデートの調製。ジクロロジフェノキシメタン（１ｇ、３．７２ｍｍｏｌ）及びスルファミド（０．７２ｇ、７．４４ｍｍｏｌ）をＭｅＣＮ（１０ｍｌ）に溶解し、室温で１８時間撹拌した。混合物を真空下で濃縮し、フラッシュクロマトグラフィ（２０％〜４０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、無色油としてジフェニルスルファモイルカルボンイミデート（０．６９ｇ、２．３４ｍｍｏｌ、６３％）を得た。
【０１９１】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール）δｐｐｍ７．４３〜７．４７（ｍ，４Ｈ）、７．２４〜７．３３（ｍ，６Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝２９３。
Ｂ．  フェニルＮ−３−ブロモフェニル−Ｎ’−スルファモイルカルバムイミデートの調製。工程Ａ由来のジフェニルスルファモイルカルボンイミデート（０．０５ｇ、０．１７ｍｍｏｌ）及び３−ブロモアニリン（１８μｌ、０．１７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（０．５ｍｌ）に溶解し、１２時間７０℃に加熱した。反応物を真空下で濃縮し、フェニルＮ−３−ブロモフェニル−Ｎ’−スルファモイルカルバムイミデートを得て、それを次の反応に粗生成物で続けた。
Ｃ．（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ’−スルファモイルピペラジン−１−カルボキシイミダミドの調製。工程Ｂ由来の粗カルバムイミデート（約２５ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）、実施例１、工程Ｂ由来の（Ｓ）−５−メチル−４−（３−メチルピペラジン−１−イル）−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（１６ｍｇ、０．６８ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（１０μｌ、０．０６８ｍｍｏｌ）をＭｅＣＮ（０．５ｍｌ）中で組み合わせて、２時間７０℃に加熱した。混合物を濃縮し、調製ＨＰＬＣによって精製して、白色固体として、（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ’−スルファモイルピペラジン−１−カルボキシイミダミド（４ｍｇ、０．００７５ｍｍｏｌ、１１％）を得た。
【０１９２】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール）δｐｐｍ８．１９（ｓ，１Ｈ）、７．３１（ｍ，１Ｈ）、７．２０（ｍ，１Ｈ）、７．１１〜７．１５（ｍ，２Ｈ）、７．０７（ｍ，１Ｈ）、４．４３（ｍ，１Ｈ）、４．０３（ｍ，１Ｈ）、３．７６（ｍ，２Ｈ）、３．４７（ｍ，１Ｈ）、３．３５（ｍ，ｌＨ）、３．０５（ｍ，１Ｈ）、２．３９（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．２５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝５０７，５０９。
【０１９３】
６．２１．実施例２１：（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−Ｎ’−（Ｎ−（（ジメチルアミノ）メチレン）スルファモイル）−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボキシイミダミド
【０１９４】
【化２９】
0005406838.tif 000030
【０１９５】
実施例２０、工程Ｃ由来の粗（Ｓ）−Ｎ−（３−ブロモフェニル）−２−メチル−４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）−Ｎ’−スルファモイルピペラジン−１−カルボキシイミダミド（約２５ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（０．５ｍｌ）に溶解し、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドジメチルアセタール（７μｌ）を添加した。混合物を室温で２０分間撹拌した後、濃縮した。混合物を調製ＨＰＬＣによって精製し、白色固体として所望の化合物（５ｍｇ、０．００８８ｍｍｏｌ、１３％）を得た。
【０１９６】
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール）δｐｐｍ８．１９（ｓ，１Ｈ）、８．０２（ｓ，１Ｈ）、７．２８（ｍ，２Ｈ）、７．１０（ｍ，２Ｈ）、７．０１（ｓ，１Ｈ）、４．４８（ｍ，１Ｈ）、４．０３（ｍ，１Ｈ）、３．７９（ｍ，２Ｈ）、３．４９（ｍ，１Ｈ）、３．３６（ｍ，１Ｈ）、３．０５（ｍ，１Ｈ）、２．９７（ｓ，３Ｈ）、２．８６（ｓ，３Ｈ）、２．３９（ｄ，Ｊ＝１．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．２５（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝５６２，５６４。
【０１９７】
６．２２．実施例２２：４−フルオロ−Ｎ−（３−（２−（４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエチル）フェニル）ベンズアミド
【０１９８】
【化３０】
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【０１９９】
Ａ．  ２−（３−ニトロフェニル）−１−（ピペラジン−１−イル）エタノンの調製。２−（３−ニトロフェニル）アセチルクロリド（０．２０ｍｌ、１．０ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２ｍｌ）中のｔｅｒｔ−ブチル ピペラジン−１−カルボキシレート（０．１９ｇ、１．０ｍｍｏｌ）と飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１ｍｌ）との強く撹拌した混合物に添加した。反応物を１時間撹拌した後、有機層を分離し、ＭｇＳＯ４のプラグを通して濾過して、真空下で濃縮した。残渣をＣＨ２Ｃｌ２中のＴＦＡで処理し、Ｂｏｃ基を取り除いて、２−（３−ニトロフェニル）−１−（ピペラジン−１−イル）エタノンを得て、それを粗生成物で続けた。
Ｂ．  １−（４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）−２−（３−ニトロフェニル）エタノンの調製。工程Ａ由来の２−（３−ニトロフェニル）−１−（ピペラジン−１−イル）エタノン（０．３２ｇ、０．９ｍｍｏｌ）、４−クロロ−５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン（０．１６８ｇ、１．０ｍｍｏｌ）及びジイソプロピルエチルアミン（０．１ｍｌ）をイソプロパノール中で組み合わせて、８０℃で２４時間加熱した。生成物を調製ＨＰＬＣによって単離し、１−（４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）−２−（３−ニトロフェニル）エタノンを得た。
Ｃ． ４−フルオロ−Ｎ−（３−（２−（４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエチル）フェニル）ベンズアミドの調製。工程Ｂ由来の１−（４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）−２−（３−ニトロフェニル）エタノン（０．１３ｇ、０．３ｍｍｏｌ）のイソプロパノール（２ｍｌ）溶液に、ＳｎＣｌ２（０．１９ｇ、１ｍｍｏｌ）及び１滴の濃ＨＣｌ水溶液を添加した。反応物を２時間還流で加熱し、アニリン生成物を標準的な手順で単離した。この物質の一部（３５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）をＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）及び飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（２ｍｌ）に溶解した。ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中の塩化４−フルオロベンゾイル（１６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）を強く撹拌しながら滴下した。反応物を２時間撹拌した後、標準的な手順で展開した。生成物を調製ＨＰＬＣ、その後の調製ＴＬＣによって単離し、４−フルオロ−Ｎ−（３−（２−（４−（５−メチル−７Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）−２−オキソエチル）フェニル）ベンズアミドを得た。ＭＳ（ＥＳ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＝４７３。
【０２００】
６．２３．付加的な化合物
付加的な化合物を本明細書に記載され、且つ当該技術分野で既知の方法を用いて調製した。これらの化合物の幾つかを、それらの実測質量と共に以下に列挙した。
【０２０１】
【表１−１】
0005406838.tif 000032
【０２０２】
【表１−２】
0005406838.tif 000033
【０２０３】
【表１−３】
0005406838.tif 000034
【０２０４】
【表１−４】
0005406838.tif 000035
【０２０５】
【表１−５】
0005406838.tif 000036
【０２０６】
【表１−６】
0005406838.tif 000037
【０２０７】
【表１−７】
0005406838.tif 000038
【０２０８】
【表１−８】
0005406838.tif 000039
【０２０９】
【表１−９】
0005406838.tif 000040
【０２１０】
【表１−１０】
0005406838.tif 000041
【０２１１】
【表１−１１】
0005406838.tif 000042
【０２１２】
６．２４．ＬＩＭＫ２の発現及び精製
ＬＩＭＫ２は、ＢＡＣ−ｔｏ−ＢＡＣ（登録商標）バキュロウイルス発現系（Invitrogen）を用いて発現した。取扱説明書に記載の製造業者の指示に従って、組換えバキュロウイルスを作製した。要するに、組換えバクミド（bacmid）を生成するために、ＬＩＭＫ２インサートを保有するプラスミド（ｐＦａｃｔＢａｃ１又はｐＦａｓｔＢａｃＨＴ）をＭＡＸ効率ＤＨ１０Ｂａｃコンピテント大腸菌に形質転換した。ＤＨ１０Ｂａｃ大腸菌宿主株は、ミニａｔｔＴｎ７標的部位を有するバキュロウイルスシャトルベクター（バクミド）と、ヘルパープラスミドとを含有し、ｐＦａｓｔＢａｃベクター上のミニＴｎ７因子と、バクミド上のミニａｔｔＴｎ７標的部位との間の転位後に組換えバクミドの生成を可能にする。転位反応が、ヘルパープラスミドによって供給される転位タンパク質の存在下で起こる。細胞をプレート培養し、取扱説明書に記載のように、白色のコロニーをバクミド単離のために摘み出した。
【０２１３】
単離バクミドＤＮＡをＳＦ９細胞にトランスフェクトし、組換えバキュロウイルスを生成し、トランスフェクション後５日目に、ウイルスを回収した。ウイルスを０．２の感染多重度（ＭＯＩ）でＴ７５フラスコ内で増幅させた。タンパク質発現のために５のＭＯＩでＳＦ９細胞に感染させるのに、増幅ウイルスを使用した。
【０２１４】
ＬＩＭＫ２構築物の小規模精製のために、組換えバキュロウイルスを感染させたＳｆ９細胞の培養液５０ｍｌを使用した。細胞を５００×ｇで５分間の遠心分離によって採取した。それから、細胞を溶解緩衝液（細胞１ｇ当たり５倍量）中で再懸濁した。一般的な溶解緩衝液は以下のものを含有する：５０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ  ８．０）、３００ｍＭのＫＣｌ、１０％  グリセロール、１％  ＮＰ−４０、１５ｍＭのイミダゾール、１ｍＭのベンズアミジン、及びRocheの完全プロテアーゼ阻害剤（細胞溶解液５０ｍｌ当たり１錠）。１４０００ｐｓｉ〜２００００ｐｓｉの液体圧でＭｉｃｒｏ  ｆｌｕｉｄｉｃｓ  Ｍｉｃｒｏ  ｆｌｕｉｄｉｚｅｒ  Ｍ−１１ＯＹに１回通して細胞懸濁液を溶解させ、その後４℃で１５分間６００００×ｇで溶解液を遠心分離した。
【０２１５】
それから、上清を、ニトリロ三酢酸ＮＴＡに共有結合するコバルトイオンを含有するクロマトグラフィマトリクスに直接入れた。クロマトグラフィマトリクスは、タンパク質ローディング（loading）溶液と同じバッファ中で平衡化した。イオン荷電樹脂は典型的に、充填（packed）樹脂１ｍｌ当たり５ｍｇ〜１０ｍｇのヒスチジンタグ付けタンパク質と同等の結合能を有する。カラムに入れることができる抽出物の量は、抽出物中の可溶性ヒスチジンタグ付けタンパク質の量によって変わる。それからこのカラムを、初めに５０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）、３００ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロール、１％  ＮＰ−４０、１５ｍＭのイミダゾール、１ｍＭのベンズアミジンで；２番目に、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）、５００ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロール及び２０ｍＭのイミダゾールで；３番目に、２０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）、１００ｍＭのＫＣｌ、１０％グリセロール及び２０ｍＭイミダゾールで段階的に洗浄し、その後同じバッファ中の２５０ｍＭのイミダゾールで溶出した。それから、ＬＩＭＫ２タンパク質溶液を、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ及びタンパク質のカルボキシル末端と内部触媒ドメインとの両方に指向性を有する市販の抗体を用いるウェスタンブロットで解析した。保存の目的で、このタンパク質を、５０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ７．５）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．１％  ＢＭＥ、０．０３％  Ｂｒｉｊ−３５及び５０％グリセロールに透析した。
【０２１６】
大規模ＬＩＭＫ２精製を、１０Ｌの培養量でＷａｖｅ  Ｂｉｏｒｅａｃｔｏｒ（Wave Biotech）において行った。１ｍＬ当たり２〜３×１０６個の生存細胞の細胞培養液１０ＬをＭＯＩ＝５ｐｆｕ／細胞で感染させ、感染後４８時間で採取した。
【０２１７】
６．２５．ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  ＬＩＭＫ２阻害アッセイ
ＬＩＭＫ２阻害剤を同定するのに用いられるｉｎ  ｖｉｔｒｏアッセイを開発した。解析の読み出しは、ＡＴＰ基質から固定ミエリン塩基性タンパク質被覆フラッシュプレート（Perkin Elmer Biosciences）への３３Ｐの取り込みであり、これは、プレートリーダーを備えるシンチレーションカウンタ（TopCount, Packard Bioscience, Meriden, CT）で計測した。３８４ウェルの平らなＭＢＰフラッシュプレートを用いて、総アッセイ量が５０μｌであった。ＨＴＳプログラムは、希釈のためにＢｉｏｍｅｋ  ＦＸを利用した。
【０２１８】
各アッセイでは、成分及び条件は以下の通りであった：２００ｎｇの酵素をアッセイバッファ（１×アッセイバッファは、３０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ８．０）、５ｍＭのＤＴＴ及び１０ｍＭのＭｇＣｌ２を含有する）、１０μＭのＡＴＰ、０．２μＣｉ［γ−３３Ｐ］−ＡＴＰ及び１０μＭの潜在的阻害化合物においてインキュベートした。反応物を室温で６０分間インキュベートし、７５μｌの停止／洗浄バッファ（１×停止／洗浄バッファは、５０ｍＭのＥＤＴＡ及び２０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ７．４）を含有する）で３回洗浄した後、プレートをシンチレーションカウンタで読み取った。異なる濃度のスタウロスポリン（４００ｎＭ、２００ｎＭ、１００ｎＭ及び５０ｎＭ；BIOMOL（Plymouth Meeting, PA）で購入）を各プレートの対照として使用した。
【０２１９】
６．２６．ブタ前房器官培養灌流アッセイ
新たに除核した眼は、地方の食肉解体場から入手した。眼は、死後すぐに回収し、氷上に置いた。ブタを屠殺後４時間以内に、前房解剖を行った。灌流のために前眼部を準備するために、初めに眼窩外筋を全て取り除き、１％ヨウ素（Veterinary Products Laboratories, Phoenix, AZ）中に３０秒間眼窩を浸漬させることによって眼を清浄にした。それから、眼窩の後部周辺で輪状切開を行い、視神経を含む強膜のこの後部切片を取り除き、廃棄した。次に、眼の前部における流出隅角（outflow angle）を損うことなく、硝子体、網膜、水晶体及び脈絡膜を慎重に取り除いた。虹彩の内部中心環も取り除いた。それから、清浄且つ解剖した前房を灌流チャンバに置いた。遠位強膜と灌流チャンバとの間に高真空グリース（Dow Corning Corp., Midland, MI）を付け、４Ｃ（５／１６’’）３  Ｏｚ矯正用ゴムバンド（ORMCO Corp., Glendora, CA）の代わりに眼を固定することによって、眼の周りからの意図せぬ漏出を防いだ。一度固定すれば、灌流機構（set-up）は灌流培地で満たされる。灌流培地は、４．５ｇ／ＬのＤ−グルコース、２００単位／ｍｌのペニシリンＧ、２００μｇ／ｍｌの硫酸ストレプトマイシン及び０．２ｍＭのＬ−グルタミンを添加したＤＭＥＭ（Invitrogen, Grand Island, NY）であった。それから、培地で満たされた灌流機構を注入管及びプログラム可能なシリンジポンプに繋いだ。シリンジポンプと灌流チャンバとの間にインラインで血圧センサ（WPI, Sarasota, FL）を置くことによって、圧力をモニタリングした。このセンサは、Ｂｒｉｄｇｅ−８増幅器（WPI, Sarasota, FL）を通してシグナルを送った。増幅シグナルをＭＰ−１００データ獲得システム（WPI. Sarasota, FL）によってデジダル読み出しシグナルに変換し、ＡｃｑＫｎｏｗｌｅｄｇｅソフトウェア（WPI. Sarasota, FL）を用いてデータを解析した。漏出のために定常的な圧力を維持できない灌流チャンバ機構はいずれもこのアッセイから取り除かれた。
【０２２０】
４つの前房灌流機構を作製したら、２μｌ／分の速度で培地を灌流させながら、前房を数時間３５℃に温めた。灌流機構が安定したら、１回目の１５ｍｌの対照培地の交換を行った。交換速度は５ｍｌ／分であった。それから、灌流機構は、２μｌ／分の流速の一晩ベースラインを確立した。翌朝、２回目の対照培地の交換を同じように行った。この２回目の交換は、化合物試験に対する２時間ベースラインを確立するために用いた。１ｍｍＨｇ以下のドリフトを有しない２時間ベースラインを確立した後、化合物培地の交換を行った。化合物培地の交換は、４つの内２つの灌流機構で行った。残りの灌流機構ではビヒクル培地の交換を行った。全ての交換は、５ｍｌ／分の速度及び２５ｍｌの交換量で行った。交換後、灌流機構を少なくとも４時間、２μｌ／分の速度で灌流させた。房水流出率（Outflow facility）は、得られたＩＯＰ圧（ｍｍＨｇ）を流速（μｌ／分）で除算することによって算出した。時間０、即ち２時間のベースライン後で、且つ化合物／ビヒクル交換前の時間からの相対的差異として、データをプロットした。
【０２２１】
６．２７．デキサメタゾン誘導性高眼圧症モデル
１日当たり約０．１ｍｇのデキサメタゾン（ｄｅｘ）を放出するように、２８日齢のマウスのＡｌｚｅｔ浸透圧ミニポンプ（DURECT Corp., Cupertino, CA）に、水溶性のｄｅｘのＰＢＳ溶液（Sigma, St. Louis, MO）を満たした。ポンプがｄｅｘで満たされると、ポンプは、３７℃で６０時間、ＰＢＳ中で平衡化することが可能であった。平衡化したポンプは、２５ｇ〜３５ｇと秤量された野生型Ｃ５７：１２９  Ｆ２ハイブリッドマウスの背面に皮下で外科的に設置した。外科切開部は、５−０編み絹（braided silk）（ROBOZ, Gaithersburg, MD）で縫合し、試験期間全体を通して、抗生物質軟膏で処理した。眼圧（ＩＯＰ）を、ＴｏｎｏＬａｂ（Colonial Medical Supply Co., Franconia, NH）眼圧計を用いてこれらのマウスで測定した。マウスに、イソフルランで軽く鎮静をかけ、０．５％プロパラカイン（Akorn, Buffalo Grove, IL）で局所麻酔を行った後、ＩＯＰを測定した。ベースラインＩＯＰを、ミニポンプ設置（implantation）の１日前に測定した。ミニポンプ設置後、１週間に２、３回、４週間、ＩＯＰを測定した。潜在的な眼圧降下化合物による薬理学試験を、設置後２１日〜２８日目に行った。
【０２２２】
６．２８．ｉｎ  ｖｉｖｏ効果
上記のブタ前房器官培養灌流アッセイにおいて従来の流出に影響を与えることが見出された本発明の化合物を、その後マウス高眼圧症モデルで検査した。
【０２２３】
図１で示されたように、本発明の化合物の１００μＭ溶液によって、ビヒクル対照に比べて、ブタ灌流アッセイにおいて従来の流出が有意に増大した。また図２で示したように、同じ化合物の局所投与によって、雌Ｆ２野生型の高眼圧マウスにおいて眼圧が有意に下がった。この図のデータは、局所処理後１時間で得られた。
【０２２４】
上記で言及した全ての公報（例えば、特許及び特許出願）はその全体が、参照により本明細書中に援用される。
【図１】
0005406838.tif 000047
【図２】
0005406838.tif 000048