(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉａ）：
【化１】
0005570223.tif 000015
［式中、
Ｘは、ＣＨであり；
Ｒ１は、（ａ）１〜３個のハロゲンで置換されていてもよく、−ＣＮで置換されていてもよい、Ｃ１−３アルキル；（ｂ）−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ；（ｃ）−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ１−３アルキル；（ｄ）−ＣＨ＝ＣＨ−フェニルであって、ここでフェニルは、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨで置換されていてもよい：そして
Ｒ３はＢｒである］
で示される、請求項１記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項２】
以下の化合物から選択される、請求項１記載の式（Ｉａ）で示される化合物又は薬学的に許容されるその塩：
【化２】
0005570223.tif 000016
【請求項３】
請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩、及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項４】
２型糖尿病治療のための医薬の製造における、請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩の使用。
【請求項５】
癌の治療のための医薬の製造における、請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩の使用。
【請求項６】
（１）請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩；
（２）以下からなる群より選択される１種以上の化合物
（ａ）ＰＰＡＲガンマアゴニスト及び部分アゴニスト；
（ｂ）ビグアニド；
（ｃ）ＧＰＲ４０アゴニスト；
（ｄ）ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰ−ＩＶ）阻害剤；
（ｅ）インスリン又はインスリン模倣薬；
（ｆ）スルホニルウレア；
（ｇ）α−グルコシダーゼ阻害剤；
（ｈ）患者の脂質プロフィールを改善する薬剤であって、以下の群から選択されるもの （ｉ）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤；（ｉｉ）胆汁酸キレート剤；（ｉｉｉ）ニコチニルアルコール、ニコチン酸又はその塩；（ｉｖ）ＰＰＡＲαアゴニスト；（ｖ）コレステロール吸収阻害剤；（ｖｉ）アシルＣｏＡ：コレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ）阻害剤；（ｖｉｉ）ＣＥＴＰ阻害剤；及び（ｖｉｉｉ）フェノール性抗酸化剤；
（ｉ）ＰＰＡＲα／γ二重アゴニスト；
（ｊ）ＰＰＡＲδアゴニスト；
（ｋ）抗肥満化合物；
（ｌ）回腸胆汁酸輸送阻害剤；
（ｍ）抗炎症性薬剤；
（ｎ）グルカゴン受容体アンタゴニスト；
（ｏ）ＧＬＰ−１；
（ｐ）ＧＩＰ−１；
（ｑ）ＧＬＰ−１類似体；及び
（ｒ）ＨＳＤ−１阻害剤；並びに
（３）薬学的に許容される担体；
を含む医薬組成物。
【請求項７】
式（Ｘ）：
【化３】
0005570223.tif 000017
で示される、請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項８】
請求項７に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩、及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項９】
２型糖尿病治療のための医薬の製造における、請求項７に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩の使用。
【請求項１０】
（１）式（Ｘ）：
【化４】
0005570223.tif 000018
で示される第一の化合物又は薬学的に許容されるその塩；
（２）以下からなる群より選択される第二の化合物
（ａ）ＰＰＡＲガンマアゴニスト及び部分アゴニスト；
（ｂ）ビグアニド；
（ｃ）ＧＰＲ４０アゴニスト；
（ｄ）ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰ−ＩＶ）阻害剤；
（ｅ）インスリン又はインスリン模倣薬；
（ｆ）スルホニルウレア；
（ｇ）α−グルコシダーゼ阻害剤；
（ｈ）患者の脂質プロフィールを改善する薬剤であって、以下の群から選択されるもの （ｉ）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤；（ｉｉ）胆汁酸キレート剤；（ｉｉｉ）ニコチニルアルコール、ニコチン酸又はその塩；（ｉｖ）ＰＰＡＲαアゴニスト；（ｖ）コレステロール吸収阻害剤；（ｖｉ）アシルＣｏＡ：コレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ）阻害剤；（ｖｉｉ）ＣＥＴＰ阻害剤；及び（ｖｉｉｉ）フェノール性抗酸化剤；
（ｉ）ＰＰＡＲα／γ二重アゴニスト；
（ｊ）ＰＰＡＲδアゴニスト；
（ｋ）抗肥満化合物；
（ｌ）回腸胆汁酸輸送阻害剤；
（ｍ）抗炎症性薬剤；
（ｎ）グルカゴン受容体アンタゴニスト；
（ｏ）ＧＬＰ−１；
（ｐ）ＧＩＰ−１；
（ｑ）ＧＬＰ−１類似体；及び
（ｒ）ＨＳＤ−１阻害剤；並びに
（３）薬学的に許容される担体；
を含む医薬組成物。
【請求項１１】
前記ビグアニドはメトホルミンである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記ジペプチジルペプチダーゼＩＶ阻害剤は、シタグリプチン、サクサグリプチン若しくはビルダグリプチン、又は薬学的に許容されるその塩である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記ジペプチジルペプチダーゼＩＶ阻害剤は、シタグリプチン又は薬学的に許容されるその塩である、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記第二の化合物はスルホニルウレアである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記スルホニルウレアは、グリメピリド又はグリピジドである、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記ＰＰＡＲγアゴニストは、ピオグリタゾン又はロシグリタゾンである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
２型糖尿病治療のための医薬の製造における、
式（Ｘ）：
【化５】
0005570223.tif 000019
で示される第一の化合物又は薬学的に許容されるその塩；及び
以下からなる群より選択される第二の化合物
（ａ）ＰＰＡＲガンマアゴニスト及び部分アゴニスト；
（ｂ）ビグアニド；
（ｃ）ＧＰＲ４０アゴニスト；
（ｄ）ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰ−ＩＶ）阻害剤；
（ｅ）インスリン又はインスリン模倣薬；
（ｆ）スルホニルウレア；
（ｇ）α−グルコシダーゼ阻害剤；
（ｈ）患者の脂質プロフィールを改善する薬剤であって、以下の群から選択されるもの （ｉ）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤；（ｉｉ）胆汁酸キレート剤；（ｉｉｉ）ニコチニルアルコール、ニコチン酸又はその塩；（ｉｖ）ＰＰＡＲαアゴニスト；（ｖ）コレステロール吸収阻害剤；（ｖｉ）アシルＣｏＡ：コレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ）阻害剤；（ｖｉｉ）ＣＥＴＰ阻害剤；及び（ｖｉｉｉ）フェノール性抗酸化剤；
（ｉ）ＰＰＡＲα／γ二重アゴニスト；
（ｊ）ＰＰＡＲδアゴニスト；
（ｋ）抗肥満化合物；
（ｌ）回腸胆汁酸輸送阻害剤；
（ｍ）抗炎症性薬剤；
（ｎ）グルカゴン受容体アンタゴニスト；
（ｏ）ＧＬＰ−１；
（ｐ）ＧＩＰ−１；
（ｑ）ＧＬＰ−１類似体；及び
（ｒ）ＨＳＤ−１阻害剤；並びに
の使用。
【請求項１８】
前記ビグアニドはメトホルミンである、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
前記ジペプチジルペプチダーゼＩＶ阻害剤は、シタグリプチン、サクサグリプチン若しくはビルダグリプチン、又は薬学的に許容されるその塩、又はその組み合わせである、請求項１７に記載の使用。
【請求項２０】
前記ジペプチジルペプチダーゼＩＶ阻害剤は、シタグリプチン又は薬学的に許容されるその塩である、請求項１７に記載の使用。
【請求項２１】
前記第二の化合物はスルホニルウレアである、請求項１７に記載の使用。
【請求項２２】
前記ＰＰＡＲγアゴニストは、ピオグリタゾン又はロシグリタゾンである、請求項１７に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はＰＴＰ−１Ｂの阻害剤であり、２型糖尿病及び他のＰＴＰ−１Ｂ媒介疾患の治療に有利であり得る新しい部類のホスホン酸誘導体に関する。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質チロシンホスファターゼは、様々な制御過程に関わる基質を脱リン酸化する膜透過性又は細胞内酵素の一大ファミリーである（Ｆｉｓｃｈｅｒら、１９９１，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５３：４０１−４０６）。タンパク質チロシンホスファターゼ−１Ｂ（ＰＴＰ−１Ｂ）は、種々のヒトの組織に大量に存在する５０ｋｄまでの細胞内タンパク質である（Ｃｈａｒｂｏｎｎｅａｕら、１９８９，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８６：５２５２−５２５６；Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ，１９９３，Ｒｅｃｅｐｔｏｒ、３：１−１５）。
【０００３】
多くのタンパク質がＰＴＰ−１Ｂの基質である。１つの重要な基質はインスリン受容体である。インスリンがその受容体に結合すると、受容体が、最も顕著には、キナーゼ触媒ドメインのチロシン１１４６、１１５０及び１１５１で自動リン酸化される（Ｗｈｉｔｅ  ＆  Ｋａｈｎ，１９９４，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９：１−４）。これはインスリン受容体チロシンキナーゼの活性化を惹起し；このキナーゼはインスリンシグナル伝達事象を伝播する種々のインスリン受容体基質（ＩＲＳ）タンパク質をリン酸化し、さらに下流でインスリンの種々の生物学的作用を媒介する。
【０００４】
ケネディら（Ｋｅｎｎｅｄｙら、１９９９，Ｓｃｉｅｎｃｅ、２８３：１５４４−１５４８）は、タンパク質チロシンホスファターゼＰＴＰ−１Ｂがインスリンシグナル伝達経路のネガティブの制御因子であることを示しているが、このことはこの酵素の阻害剤が２型糖尿病の治療に有益であり得ることを示唆している。ＰＴＰ−１Ｂ欠損マウスは糖尿病と肥満の両方に抵抗を示す。
【０００５】
２型糖尿病及び関連する疾患を治療するためにＰＴＰ−１Ｂ阻害剤を使用することについてのさらなる支持は、２型糖尿病の動物モデルにおいてＰＴＰ−１Ｂに特異的なアンチセンスオリゴヌクレオチドの使用により提供されている。動物モデルにおいてＰＴＰ−１Ｂをアンチセンスオリゴヌクレオチドにより阻害すると、血糖値とインスリン値が正常化する（Ｚｉｎｋｅｒら、２００２，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９９：１１３５７）。
【０００６】
それ故、ＰＴＰ−１Ｂを阻害する化合物は、２型糖尿病を治療し及び／又は制御するための、また必要な患者のグルコース耐性を改善するための有用性を有すると期待される。ＰＴＰ−１Ｂの阻害剤は、糖尿病前症患者の糖尿病発症を遅延させるために、そして糖尿病前症患者の糖尿病進行を予防するために有用であるとも期待される。ＰＴＰ−１Ｂ阻害剤はまた肥満及び脂質異常症の治療に有用性を有するであろう。ＰＴＰ−１Ｂを阻害することによる糖尿病治療用のヒト薬物は、これまで成功裏に開発されたことはない。ＰＴＰ−１Ｂを阻害する新しい化合物が必要である。
【０００７】
ＰＴＰ−１Ｂの過剰発現及び上昇レベルが数種の癌細胞株、例えば、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、乳癌、卵巣癌及び前立腺癌に観察されており、これらの及び他の癌細胞のキナーゼ活性を制御する上でのＰＴＰ−１Ｂの調節的役割を示唆している。例えば、Ｌｉｕら、Ｊ  Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，１９９６，２７１：３１２９０−３１２９５；Ｋｅｎｎｅｔｈら、Ｍｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ，１９９８，１８：２９６５−２９７５；Ｗｅｉｎｅｒら、Ｊ  Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．，１９９６，８６：３７２−３７８を参照されたい。従って、ＰＴＰ−１Ｂ活性の阻害は、これらのまた他の癌の治療又は予防の重要な目標となり得る。従って、ＰＴＰ−１Ｂ阻害剤は、癌の治療又は予防に、また発症した癌の進行を減速するために有用であり得る。
多くの研究はまた、ＰＴＰ−１Ｂ阻害剤が神経変性疾患の治療又は予防に有用であり得ることを示唆している。
【発明の概要】
【０００８】
発明の要旨
式（Ｉ）で示される化合物は、薬学的に許容されるその塩及びそのプロドラッグを含め、糖尿病及び関連する医学的症状の治療に有用なＰＴＰ−１Ｂ阻害剤であり、また他のＰＴＰ−１Ｂ媒介疾患又は症状の治療にも有用であり得る。
【０００９】
【化１】
0005570223.tif 000002
【００１０】
式（Ｉ）で示される化合物において、
Ｘは、ＣＨ及びＮから選択され；
Ｒ１は、（ａ）１〜３個のハロゲンで置換されていてもよく、また−ＯＨ、１〜３個のハロゲンで置換されていてもよい−ＯＣ１−３アルキル、−ＳＯｘＣ１−３アルキル及び−ＣＮから選択される１個の基で置換されていてもよいＣ１−３アルキル；（ｂ）−Ｃ（＝Ｏ）Ｈ；（ｃ）１〜３個のハロゲンで置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ１−３アルキル；（ｄ）−ＣＮ；（ｅ）−ＨＣ＝ＮＯＨ；（ｆ）−（ＣＨ３）Ｃ＝ＮＯＨ；（ｇ）１〜３個のハロゲンで置換されていてもよい−ＨＣ＝ＮＯＣ１−３アルキル；（ｈ）１〜３個のハロゲンで置換されていてもよい−（ＣＨ３）Ｃ＝ＮＯＣ１−３アルキル；（ｉ）１〜３個のハロゲンで置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ１−３アルキル；（ｊ）−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＲ６；（ｋ）−ＣＨ＝ＣＨ−フェニルであって、ここで−ＣＨ＝ＣＨ−は、ハロゲン及び１〜３個のＦで置換されていてもよいＣ１−２アルキルから独立して選択される１〜２個の置換基で置換されていてもよく；（ｌ）−ＣＨ２ＣＨ２−フェニルであって、ここで−ＣＨ２ＣＨ２−は、ハロゲン及び１〜３個のＦで置換されていてもよいＣ１−２アルキルから独立して選択される１〜４個の置換基で置換されていてもよく；（ｍ）フェニル；（ｎ）−ＨＥＴ−フェニルであって、ここでＨＥＴは、Ｏ、Ｎ及びＳから選択される１〜３個のヘテロ原子を含む５員又は６員のヘテロ芳香族環であり；（ｏ）−Ｃ≡Ｃ−フェニル；及び（ｐ）−ＣＨ２−フェニルであって、ここで−ＣＨ２−フェニルの−ＣＨ２−基は、ハロゲン及び１〜３個のＦで置換されていてもよいＣ１−２アルキルから独立して選択される１〜２個の置換基で置換されていてもよい；からなる群より選択され、
ただし、フェニル及びＨＥＴはすべての出現において、（ｉ）ハロゲン、（ｉｉ）１〜３個のハロゲンで置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ１−３アルキル、（ｉｉｉ）−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、（ｉｖ）１〜３個のハロゲンで置換されていてもよいＣ１−３アルキル、（ｖ）１〜３個のハロゲンで置換されていてもよい−ＯＣ１−３アルキル、（ｖｉ）−ＳＯｘＭｅ、及び（ｖｉｉ）−ＳＯ２ＮＨ２、から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ６は、Ｈ、１〜３個のハロゲンで置換されていてもよいＣ１−３アルキル、フェニル及び−ＣＨ２−フェニルからなる群より選択され、ただし、両出現におけるフェニルは、（ｉ）ハロゲン、（ｉｉ）１〜３個のハロゲンで置換されていてもよい−Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ１−３アルキル、（ｉｉｉ）−Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、（ｉｖ）１〜３個のハロゲンで置換されていてもよいＣ１−３アルキル、及び（ｖ）１〜３個のハロゲンで置換されていてもよい−ＯＣ１−３アルキル、から独立して選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ２及びＲ４は、独立して、Ｈ、ハロゲン、−ＣＨ３、−ＣＦ３、−ＯＣＨ３及び−ＯＣＦ３から選択され；
Ｒ３はハロゲンであり、当該ハロゲンは、式（Ｉ）の縮合芳香族環に−ＣＦ２ＰＯ（ＯＲ５）２基に対してオルトの位置で結合し；
各Ｒ５基は、独立して、Ｈ及び１〜３個のハロゲンで置換されていてもよいＣ１−３アルキルからなる群より選択され；そして
ｘは０、１又は２である。
【００１１】
式（Ｉ）で示される化合物を用いて、糖尿病、肥満及び他の疾患及び症状を治療及び制御する方法を本明細書に開示する。医薬組成物及び併用療法についても本明細書に開示する。
【００１２】
本明細書に開示した化合物は、新しい部類のＰＴＰ−１Ｂ阻害剤である。当該化合物のうちの１つ（実施例７Ｂ）の構造と名称は、下記の２つの公表文献に、ＰＴＰ−１Ｂ阻害剤として開示された。該化合物の合成については、これらの公表文献に開示されなかった：（１）Ｍｏｎｔａｌｉｂｅｔら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２００４，６８：１８０７−１８１４；（２）Ｍｏｎｔａｌｉｂｅｔら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００６，２８１，Ｎｏ．８：５２５８−５２６６。
【００１３】
発明の詳細な説明
式（Ｉ）で示される化合物は以下に要約するように、多くの実施態様を有する：
本発明は上記の化合物を包含し、さらに（可能な場合には）該化合物の個々のジアステレオマー、エナンチオマー及びエピマー、及びラセミ混合物を含むそのジアステレオマー及び／又はエナンチオマーの混合物を包含する。本明細書に開示した具体的立体化学が好適ではあるが、他の立体異性体、例えば、ジアステレオマー、エナンチオマー、エピマー及びこれらの混合物も、ＰＴＰ−１Ｂ媒介疾患の治療に用途を有し得る。不活性であるか、又は活性の低いジアステレオマー及びエナンチオマーは、受容体及び活性化メカニズムに関係する科学研究にとって有用である。
【００１４】
本発明はまた、該化合物の薬学的に許容される塩、及び該化合物と薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物をも包含する。該化合物は特にインスリン耐性、２型糖尿病、並びに２型糖尿病及びインスリン耐性と関連する脂質異常症の治療に有用である。該化合物はまた肥満の治療にも有用である。それらはまた特定の種類の癌の治療に、また患者において発症した癌の進行の減速にも有用である。それらはまた、神経変性疾患の進行の治療、予防又は減速にも有用である。
【００１５】
本明細書に開示した化合物は、（ａ）当該化合物又は薬学的に許容されるその塩、及び（ｂ）薬学的に許容される担体、を含有する医薬組成物に使用してもよい。該化合物は１種以上の他の活性な医薬成分を含む医薬組成物に使用してもよい。該化合物はまた式（Ｉ）で示される化合物又は薬学的に許容されるその塩を唯一の有効成分とする医薬組成物にも使用してもよい。
【００１６】
式（Ｉ）で示される化合物又は薬学的に許容されるその塩は、ヒト又は他の哺乳動物患者において２型糖尿病の治療のための医薬の製造に使用してもよい。
２型糖尿病の治療法は、式（Ｉ）で示される化合物若しくは薬学的に許容されるその塩、又は該化合物を含有する医薬組成物の治療上有効な量を、治療の必要な患者に投与することを含む。式（Ｉ）で示される化合物のその他の医学的用途については、以下に記載する。
【００１７】
略号
略号及び用語は、有機化学、医化学、薬理学及び医薬の分野で一般的に使用され、またこれらの分野の実務家が周知であるものを本明細書で使用する。代表的な略号と定義について以下に提示する：
【００１８】
Ａｃはアセチル［ＣＨ３Ｃ（Ｏ）−］である；Ａｃ２Ｏは無水酢酸である；９−ＢＢＮは９−ボラビシクロ［３．３．１］ノナンである；Ｂｎはベンジルである；ＢＯＣはｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルである；ＤＩＡＤはジイソプロピルアゾジカルボキシレートである；ＤＩＢＡＬは水素化ジイソブチルアルミニウムである；ＤＭＦはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドである；ＤＭＳＯはジメチルスルホキシドである；ＥＤＡＣ（又はＥＤＣ）は１−エチル−３−［３−（ジメチルアミノ）プロピル］−カルボジイミドＨＣｌである；Ｅｔ３Ｎはトリエチルアミンである；Ｅｔはエチルである；ＥｔＯＡｃは酢酸エチルである；ＥｔＯＨはエタノールである；３−Ｆ−Ｐｈは３−フルオロフェニルである；ＨＣｌは塩酸である；ＨＯＢｔは１−ヒドロキシベンゾトリアゾールである；ＨＰＬＣは高速液体クロマトグラフィーである；ＬＣＭＳは質量スペクトル検出装備ＨＰＬＣである；ＬＧは脱離基である；Ｍはモル濃度である；ｍｍｏｌはミリモルである；Ｍｅはメチルである；ＭｅＯＨはメタノールである；ＭｓＣｌは塩化メタンスルホニルである；Ｎは規定濃度である；ＮａＨＭＤＳはナトリウム・ヘキサメチルジシリアジドである；ＮａＯＡｃは酢酸ナトリウムである；ＮａＯｔＢｕはナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドである；ＮＭＯはＮ−メチルモルホリンＮ−オキシドである；ＮＭＰはＮ−メチルピロリジノンである；Ｐｄ（ｄｂａ）２はトリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウムである；ＰｄＣｌ２（Ｐｈ３Ｐ）２はジクロロビス−（トリフェニルホスフィン）パラジウムである；ＰＧは不特定の保護基を意味する；Ｐｈはフェニルである；ＰｈＭｅはトルエンである；ＰＰｈ３はトリフェニルホスフィンである；ＰＭＢはパラ−メトキシベンジルである；ＲＴは室温である；ＴＢＡＦはフッ化テトラブチルアンモニウムである；ＴＢＳはｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルである；ｔＢｕはｔｅｒｔ−ブチルである；Ｔｆはトリフレートである；ＴＦＡはトリフルオロ酢酸である；ＴＨＦはテトラヒドロフランである；ＴＬＣは薄層クロマトグラフィーである；ＴＭＳはトリメチルシリルである；ＴＰＡＰは過ルテニウム酸テトラプロピルアンモニウムである。
【００１９】
定義
「Ａｃ」はアセチル、すなわちＣＨ３Ｃ（＝Ｏ）−である。
「アルキル」は、その炭素鎖について別に定義をしない限り、直鎖又は分枝、又はその組み合わせであってもよい飽和の炭素鎖を意味する。アルコキシ及びアルカノイルなどの「ａｌｋ」の接頭辞を有する他の基もまた、その炭素鎖について別に定義をしない限り、直鎖又は分枝、又はその組み合わせであってもよい。アルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｓｅｃ−及びｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニルなどを包含する。
【００２０】
「アルケニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を含み、直鎖又は分枝、又はその組み合わせであってもよい炭素鎖を意味する。アルケニルの例は、ビニル、アリル、イソプロペニル、ペンテニル、へキセニル、ヘプテニル、１−プロペニル、２−ブテニル、２−メチル−２−ブテニルなどを包含する。
【００２１】
「アルキニル」は、少なくとも１つの炭素−炭素三重結合を含み、直鎖又は分枝、又はその組み合わせであってもよい炭素鎖を意味する。アルキニルの例は、エチニル、プロパルギル、３−メチル−１−ペンチニル、２−ヘプチニルなどを包含する。
【００２２】
「シクロアルキル」は、特定の炭素原子数を有する飽和の炭素環を意味する。この用語はアリール基に縮合する炭素環を記載するために使用してもよい。シクロアルキルの例は、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルなどを包含する。シクロアルケニル環は環内に二重結合を含む。
「アリール」は炭素環芳香族構造に言及するために共通に使用する。最も共通のアリール基はフェニル及びナフチルである。フェニルは一般に最も好適なアリール基である。
【００２３】
「ヘテロ環」とは、Ｎ、Ｓ及びＯから選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含む飽和若しくは部分不飽和の環又は環系を意味し、その場合のヘテロ原子数と環の大きさ及び不飽和度（もしあれば）が本明細書にて定義される。へテロ環の例は、テトラヒドロフラン、ピペラジン、ピペリジン及びモルホリンを包含する。
【００２４】
「ヘテロアリール」とは、本明細書により具体的に定義するように、Ｎ、Ｏ及びＳ（ＳＯ及びＳＯ２を含む）から選択される少なくとも１個の環へテロ原子を含むヘテロ芳香環を意味する。ヘテロアリールの例は、ピロリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、ピリジル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、フラニル、トリアジニル、チエニル、ピリミジル、ピリダジニル、ピラジニル、ベンズイソオキサゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチオフェニル（Ｓ−オキシド及びジオキシドを含む）、フロ（２，３−ｂ）ピリジル、キノリル、インドリル、イソキノリル、キナゾリニル、ジベンゾフラニルなどを包含する。
「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素を包含する。
「Ｍｅ」はメチルを表わす。
【００２５】
「薬学的に許容される」という成句は、本明細書では、正常な医学的判断を用い、そしてあらゆる適用可能な政府の規制に従い、ヒト又は動物への投与に安全かつ適切である化合物、物質、組成物、塩及び／又は用量形態について言及する場合に使用する。
【００２６】
医薬組成物におけるように「組成物」という用語は、有効成分及び担体を構成する不活性成分とを含有する生成物、並びに任意の２種以上の成分の組み合わせ、錯体形成若しくは凝集により、又は１種以上の成分の解離により、又は１種以上の成分の他の型の反応若しくは相互作用により、直接又は間接に生じる任意の生成物を包含するものとする。従って、本発明の医薬組成物は、本発明の化合物と薬学的に許容される担体とを混合することにより調製される任意の組成物をも包含する。
置換基「テトラゾール」とは、２Ｈ−テトラゾール−５−イル置換基及びその互変異性体を意味する。
【００２７】
光学異性体−ジアステレオマー−幾何異性体−互変異性体
式（Ｉ）で示される化合物は１個以上の不斉中心を含んでもよく、従って、ラセミ体、ラセミ混合物、単一エナンチオマー、個々のジアステレオマー及びジアステレオマー及び／又はエナンチオマーの混合物として存在してもよい。本発明は式（Ｉ）で示される化合物のかかる異性体形状のすべてを含むことを意味する。具体的には、本発明の化合物は少なくとも３個の不斉中心を有する。追加の不斉中心は当該分子上の種々の置換基の性質に依存して存在してもよい。可能な光学異性体、立体異性体及びジアステレオマーのすべてが混合物中に、及び純粋な又は部分的精製の化合物として、本発明の範囲内に包含されるものとする（すなわち、不斉中心のすべての可能な組み合わせが純粋な化合物として、又は混合物中で）。
【００２８】
本明細書に記載の化合物の一部のものは、オレフィン二重結合を含んでもよく、別に断りのない限り、Ｅ及びＺの両方の幾何学的異性体を含むものとする。
本明細書に記載の化合物の一部は、異なる水素の付着点をもつものとして存在してもよく、これを互変異性体という。一例はケトンとそのエノール型であり、ケト−エノール互変異性体として知られる。個々の互変異性体並びにその混合物は、式（Ｉ）で示される化合物と共に包含される。
【００２９】
１個以上の不斉中心をもつ式（Ｉ）で示される化合物は、当該技術分野にて周知の方法により、ジアステレオ異性体、エナンチオマーなどに分離してもよい。
あるいは、エナンチオマー及びキラル中心をもつ他の化合物は、光学的に純粋な出発物質及び／又は既知の立体配位の試薬を用いて立体特異的合成により合成してもよい。
【００３０】
塩
用語「薬学的に許容される塩」とは、薬学的に許容される非毒性塩基又は酸、例えば、無機又は有機の塩基及び無機又は有機の酸から調製する塩をいう。無機塩基から誘導される塩には、アルミニウム、アンモニウム、カルシウム、銅、第一鉄、第二鉄、リチウム、マグネシウム、マンガン塩、亜マンガン塩、カリウム、ナトリウム、亜鉛などの塩を包含する。特に好適な塩は、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム及びナトリウムの塩である。固体形状の塩は１種を超える結晶構造で存在してもよく、また水和物の形状であってもよい。薬学的に許容される有機非毒性塩基から誘導される塩には、一級、二級及び三級のアミン、天然産置換アミンなどの置換アミン、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂、例えば、アルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ’−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどの塩を包含する。
【００３１】
本発明化合物が塩基性である場合、又はその構造内に塩基性置換基を有する場合、塩は無機及び有機の酸を含む薬学的に許容される非毒性酸から調製してもよい。かかる酸には、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グルタミン酸、臭化水素酸、塩酸、イセチオン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムコ酸、硝酸、パモ酸、パントテン酸、リン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、ｐ−トルエンスルホン酸などを包含する。特に好適な酸は、クエン酸、臭化水素酸、塩酸、マレイン酸、リン酸、硫酸及び酒石酸である。
本明細書にて使用する場合、式（Ｉ）で示される化合物への言及は、薬学的に許容される塩も含むことを意味することが理解されよう。
【００３２】
代謝物−プロドラッグ
本発明は治療的に活性な代謝物を含み、その場合、当該代謝物自体も本請求項の範囲に入る。本発明はまたプロドラッグをも包含する；プロドラッグはそれらを患者に投与したときに、あるいは患者に投与した後に、請求項の化合物に変換される化合物である。一部の事例において、本出願の請求項の化学構造はそれ自体がプロドラッグであってもよい。
【００３３】
用途
本明細書に具体的に例示された化合物は、インビトロのアッセイが示すように、ＰＴＰ−１Ｂ酵素の阻害において、良好な有効性を示す。該化合物は一般にアッセイの項に記載する酵素アッセイにおいて、２μＭ未満のＩＣ５０値を示し、好ましくは１μＭ未満のＩＣ５０値を有する。
【００３４】
ＰＴＰ−１Ｂの阻害剤は、インスリン感受性を改善し、糖尿病の予防又は治療に、インスリン耐性が存在する場合にはグルコース耐性及びインスリン感受性を改善する上で、そして肥満を治療又は予防する上で、すべてかかる治療を必要とする哺乳動物、又はかかる治療が有益であり得る哺乳動物、例えばヒトにおいて用途を有し得る。該化合物はさらに一般的には２型糖尿病（非インスリン依存性糖尿病、又はＮＩＤＤＭ）の治療に有用である。また該化合物はトリグリセリド及び脂質の有益な低減を惹起し得る。
【００３５】
ＰＴＰ−１Ｂを阻害する化合物は、２型糖尿病に伴う多くの症状、例えば、高脂血症、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症（低ＨＤＬレベルを有利に上昇することを含む）、アテローム性動脈硬化症、血管再狭窄、膵臓炎、脂肪細胞腫瘍、脂肪細胞癌腫（例えば、脂肪肉腫）、脂質異常症、炎症性腸疾患、一般的な炎症及びインスリン耐性が構成要素である他の障害などの治療、予防又は制御に有用でもあり得る。
【００３６】
当該化合物は、糖尿病患者において、及びグルコース耐性障害及び／又は糖尿病前症症状にある非糖尿病患者において、糖及び脂質を低下させる上で有効であることが期待される。該化合物は、糖尿病患者又は糖尿病前症患者においてしばしば発生する高インスリン血症を、これらの患者においてしばしば発生する血漿グルコースレベルの揺れを調節することによって改善し得る。該化合物はまた、インスリン耐性を治療又は低下させる上で有効であり得る。本化合物は妊娠性糖尿病の治療又は予防において有効であり得る。
【００３７】
本明細書に記載の化合物、組成物及び医薬はまた、メタボリックシンドロームと関連する有害な続発症の危険を低減する上で、及びアテローム性動脈硬化症の進行の危険を低下させ、アテローム性動脈硬化症の発症を遅延させ、及び／又はアテローム性動脈硬化症の続発症の危険性を低下させる上でも有効であり得る。アテローム性動脈硬化症の続発症には、アンギナ、跛行、心臓発作、卒中、その他を含む。
【００３８】
高血糖症を管理下に置くことにより、該化合物はまた、血管再狭窄及び糖尿病性網膜症の遅延又は予防にも有効であり得る。
本発明の化合物はまたβ細胞機能を改善するか又は修復する上で有用性を有し、その結果、それらは１型糖尿病の治療に、又は２型糖尿病の患者のインスリン治療の必要性を遅延若しくは予防する上で有用となり得る。
【００３９】
ＰＴＰ−１Ｂの過剰発現及び上昇レベルが数種の癌細胞株、例えば慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、乳癌、卵巣癌及び前立腺癌に観察されており、これらの及び他の癌細胞のキナーゼ活性を制御する上でのＰＴＰ−１Ｂの調節的役割を示唆している。従って、ＰＴＰ−１Ｂ活性の阻害はこれらの癌及び他の癌を治療又は予防するための重要な目標を構成し得る。従って、該化合物は、癌、例えば前立腺癌、乳癌、卵巣癌、多発性骨髄腫、白血病、メラノーマ、リンパ腫、腎臓癌及び膀胱癌などの治療又は予防に使用してもよい。
該化合物はまた、神経変性疾患の治療に用途を有してもよい。
【００４０】
該化合物は一般に以下の１種以上の疾患の治療に有効である：（１）２型糖尿病（非インスリン依存性糖尿病又はＮＩＤＤＭとしても知られる）；（２）高血糖症；（３）グルコース耐性障害；（４）インスリン耐性；（５）肥満；（６）脂質障害；（７）混合型又は糖尿病性脂質異常症；（８）高脂血症；（９）高トリグリセリド血症；（１０）高コレステロール血症；（１１）低ＨＤＬコレステロール；（１２）高ＬＤＬコレステロール；（１３）高アポＢリポタンパク質血症；（１４）アテローム性動脈硬化症とその続発症；（１４）血管再狭窄；（１５）腹部肥満；（１６）網膜症；（１７）メタボリックシンドローム；（１８）高血圧；（１９）インスリン耐性；（１９）癌、及び（２０）神経変性疾患。
【００４１】
本発明の一態様は、混合型又は糖尿病性脂質異常症、高コレステロール血症、アテローム性動脈硬化症、低ＨＤＬ値、高ＬＤＬ値、高脂血症及び／又は高トリグリセリド血症の治療と制御の方法であって、かかる治療の必要な患者に、式（Ｉ）を有する化合物の治療上有効な量を投与することを含む方法を提供する。該化合物は単独で使用してもよく、又は有利には、コレステロール生合成阻害剤と共に、特に、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、例えばロバスタチン、シンバスタチン、ロスバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、リバスタチン又はイタバスタチンと共に投与してもよい。該化合物はまた有利には、他の脂質低下薬物、例えば、コレステロール吸収阻害剤（例えば、スタノールエステル類、チケシド（ｔｉｑｕｅｓｉｄｅ）などのステロールグリコシド類及びエゼチミベ（ｅｚｅｔｉｍｉｂｅ）などのアゼチジノン類）、ＡＣＡＴ阻害剤（アバシミベ（ａｖａｓｉｍｉｂｅ）など）、ＣＥＴＰ阻害剤（例えば、トルセトラピブ（ｔｏｒｃｅｔｒａｐｉｂ）及び国際公開出願ＷＯ２００５／１００２９８、ＷＯ２００６／０１４４１３及びＷＯ２００６／０１４３５７号各明細書に記載されたもの）、ナイアシン及びナイアシン受容体アゴニスト、胆汁酸キレート剤、ミクロソームトリグリセリド輸送阻害剤及び胆汁酸再吸収阻害剤などと組み合わせて使用してもよい。これらの併用治療は、高コレステロール血症、アテローム性動脈硬化症、高脂血症、高トリグリセリド血症、脂質異常症、高ＬＤＬ及び低ＨＤＬなどを含む１種以上の関連症状の治療又は制御に有効であり得る。
【００４２】
式（Ｉ）で示される化合物又は薬学的に許容されるその塩は、上記の１種以上の疾患を治療する必要のある患者に該化合物の治療上有効な量を投与することによる治療方法に使用してもよい。式（Ｉ）で示される化合物又は薬学的に許容されるその塩は、１種以上のリストされた疾患を治療するための医薬の製造において使用してもよい。
【００４３】
投与及び投与量範囲
本発明の化合物の有効な用量を哺乳動物、とりわけヒトに提供するために、任意の適切な投与経路を使用してもよい。例えば、経口、直腸、局所、非経口、経眼球、経肺、経鼻などを使用してもよい。用量形態は、錠剤、トローチ、分散剤、懸濁剤、液剤、カプセル、クリーム、軟膏、エーロゾルなどを含む。好ましくは、式（Ｉ）で示される化合物は経口投与する。
【００４４】
使用される有効成分の有効な用量は、使用される特定の化合物、投与方法、治療する症状及び治療する症状の重篤度によって変わってもよい。かかる用量は当業者に容易に確認され得る。
【００４５】
糖尿病及び／又は高血糖症又は高トリグリセリド血症又は式（Ｉ）で示される化合物が適応とされる他の疾患を治療又は制御する場合、本発明化合物を動物体重１ｋｇあたり約０．１ミリグラムないし約１００ミリグラムの１日用量で投与し、好ましくは、１日１回の用量で、又は１日２回ないし６回の分割用量で、又は持続性放出の形態で投与すると、一般的に満足な結果が得られる。最も大きい大型哺乳動物に対して、合計１日用量は約１．０ミリグラムないし約１０００ミリグラムである。７０ｋｇの成人の場合、合計の１日用量は一般に約１ミリグラムないし約５００ミリグラムである。特に強力な化合物の場合、成人に対する用量は０．１ｍｇと少なくてもよい。一部の事例において、１日用量は１ｇｍもの多さでもよい。用法用量はこの範囲内で調整してもよく、又はこの範囲外で最適の治療応答を提供するように調整してもよい。
【００４６】
経口投与は通常、錠剤又はカプセルを用いて実施する。錠剤及びカプセルにおける用量の例は、０．１ｍｇ、０．２５ｍｇ、０．５ｍｇ、１ｍｇ、２ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ及び７５０ｍｇである。他の経口形態も同じ又は同様の用量であってもよい。これらの錠剤及びカプセルは、１日１回、１日２回、１日３回又は１日４回、投与してもよい。１日１回の投与が一般に好ましい。
【００４７】
医薬組成物
本発明の別の態様では、式（Ｉ）で示される化合物及び薬学的に許容される担体を含有する医薬組成物を提供する。本発明の医薬組成物は、有効成分としての式（Ｉ）で示される化合物又は薬学的に許容されるその塩、並びに薬学的に許容される担体及び場合により他の治療用成分を含有する。用語「薬学的に許容される塩」とは、無機の塩基又は酸及び有機の塩基又は酸を含む薬学的に許容される非毒性の塩基又は酸から調製される塩をいう。医薬組成物は、プロドラッグを投与する場合、プロドラッグ又は薬学的に許容されるその塩を含有してもよい。
【００４８】
当該組成物は、経口、直腸、局所、非経口（皮下、筋肉内及び静脈内を含む）、眼球用（眼科用）、経肺（鼻腔又は口腔吸入）、又は鼻腔投与に適する組成物を含み、任意の事例において最も適する経路は、処置する症状の性質と重篤度、及び有効成分の性質に依存する。それらは簡便には単位投与形態で提供され、また薬学の技術分野にて周知の任意の方法により調製してもよい。
【００４９】
実際に使用する場合、式（Ｉ）で示される化合物は、常套の製薬混合法に従って、有効成分として緊密に薬学的担体の混合物に組み合わせてもよい。担体は投与のために所望とされる製剤の形状、例えば、経口又は非経口（静脈内を含む）用の形状に応じて様々な形態を採ってもよい。経口投与形態として組成物を調製する場合、例えば、懸濁液、エリキシル及び溶液のような経口用液状製剤の場合、水、グリコール、油、アルコール、芳香剤、保存剤、着色剤などの任意の通常の製剤媒体を使用してもよい；経口用固形製剤、例えば、粉末、ハード及びソフト・カプセル及び錠剤とする場合、デンプン、糖、微結晶セルロース、賦形剤、顆粒化剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤などの担体を使用してもよく、液状製剤よりも固形経口製剤が好適である。
【００５０】
それらの投与が容易であることから、錠剤及びカプセルが最も有利な経口投与単位形状の代表である；その場合には明らかに固形の製剤担体が使用される。所望により、錠剤は標準的な水性又は非水性技法により被覆してもよい。かかる組成物及び製剤は、少なくとも０．１パーセントの活性化合物を含有するものである。これらの組成物中の活性化合物の含有率は、勿論、変化し、簡便には用量単位重量の約２パーセントないし約６０パーセントとしてもよい。かかる治療上有用な組成物中の活性化合物の量は、有効な用量が得られる量である。活性化合物はまた鼻腔内に、例えば、液滴又はスプレーとして投与してもよい。
【００５１】
錠剤、ピル、カプセルなどはまた、結合剤、例えばトラガントガム、アラビアゴム、トウモロコシデンプン又はゼラチン；添加剤、例えばリン酸二カルシウム；崩壊剤、例えばトウモロコシデンプン、バレイショデンプン、アルギン酸；滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム；及び甘味剤、例えばスクロース、ラクトース又はサッカリンなどを含有してもよい。投与単位形態がカプセルである場合、上記のタイプの物質に加えて、脂肪油などの液状担体を含んでもよい。
【００５２】
一部の例では、投与すべき化合物又は塩の溶解度に依拠して、該化合物又は塩を油中の溶液として製剤化することが有利であり得る；溶液としては、１種以上の中鎖脂肪酸のトリグリセリドなどの油、トリアセチンなどの親油性溶媒、親水性溶媒（例えば、プロピレングリコール）、又はこれらの２種以上の混合物中の溶液であり、さらに場合により１種以上のイオン性又は非イオン性の界面活性剤、例えばラウリル硫酸ナトリウム、ポリソルベート８０、ポリエトキシル化トリグリセリド及び１種以上の中鎖脂肪酸のモノ及び／又はジグリセリドなどを含む。界面活性剤（とりわけ、２種以上の界面活性剤）を含む溶液は、水との接触でエマルジョン又はマイクロエマルジョンを形成する。該化合物はまた、水溶性ポリマーに製剤化してもよく、加熱融解押出及びスプレードライなどの方法により無定形相として分散され；かかるポリマーは酢酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣＡＳ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣＳ）及びポリビニルピロリジノンなどを含み、ホモポリマー及びコポリマーを含む。
【００５３】
様々な他の物質がコーティング剤として又は投与単位の物理的形状を修飾するために存在してもよい。例えば、錠剤はセラック、糖又はその両方により被覆されてもよい。シロップ又はエリキシルは、有効成分に加えて、甘味剤としてのスクロース、保存剤としてのメチル及びプロピルパラベン、色素及びチェリー又はオレンジ香気などの芳香剤を含んでいてもよい。
【００５４】
式（Ｉ）で示される化合物は非経口的にも投与してもよい。これら活性化合物の溶液又は懸濁液は、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリソルベート８０、並びに中鎖及び長鎖脂肪酸のモノ及びジグリセリドなどの界面活性剤又はその混合物と適宜混合した水中で調製してもよい。分散液は、グリセロール、液状ポリエチレングリコール及びその油中混合物中で調製してもよい。保存及び使用の通常の条件下、これらの製剤は微生物の増殖を防止するために保存剤を含む。
【００５５】
注射用に適する医薬形状は、無菌の水溶液又は分散液、及び無菌の注射用水溶液又は分散液の即席調製用の無菌粉末を含む。すべての事例において、その形状は無菌でなければならず、また容易に注射筒処理し得る程度に液状でなければならない。それは製造及び貯蔵条件下で安定でなければならず、また細菌や真菌などの微生物の汚染作用に対処して保存しなければならない。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール及び液状ポリエチレングリコール）、その適切な混合物及び植物油などを含む溶媒又は分散媒体であってもよい。
【００５６】
併用療法
式（Ｉ）で示される化合物は、式（Ｉ）で示される化合物が有用である疾患又は症状の治療又は改善においても有用であり得る他の薬物と組み合わせて使用してもよい。かかる他の薬物は、それが通常用いられる経路及び量で、式（Ｉ）で示される化合物と同時に、又は連続して投与してもよい。２型糖尿病、インスリン耐性、肥満、メタボリックシンドローム及びこれらの疾患に伴って同時に罹病する疾病を有する患者を治療する場合に、１種を超える薬物を共通して投与する。本発明化合物は一般にこれらの症状に対して１種以上の他の薬物をすでに摂取している患者に投与してもよい。該化合物はしばしば１種以上の抗糖尿病薬、例えばメトホルミン、スルホニルウレア及び／又はＰＰＡＲアゴニストなどによる治療をすでに受けている患者に、当該患者の血糖値が治療に適切に応答していない場合に投与する。
【００５７】
式（Ｉ）で示される化合物を１種以上の他の薬物と同時に使用する場合、かかる他の薬物と式（Ｉ）で示される化合物とを含有する単位投与形態の医薬組成物が好適である。しかし、併用療法はまた、式（Ｉ）で示される化合物と１種以上の他の薬物とを異なる重なり合うスケジュールに基づいて投与する療法も包含する。１種以上の他の有効成分と組み合わせて使用する場合、本発明化合物と他の有効成分は、それぞれを単独で使用する場合よりも低用量で使用してもよいことが予測される。従って、本発明の医薬組成物は、式（Ｉ）で示される化合物に加えて、１種以上の他の有効成分を含有する組成物を包含する。
【００５８】
式（Ｉ）で示される化合物と組み合わせて投与してもよく、別々に又は同じ医薬組成物中で投与してもよい他の有効成分の例は、限定されるものではないが、以下のとおりである：
（ａ）ＰＰＡＲガンマアゴニスト及び部分アゴニスト；例えばグリタゾン及び非グリタゾンを含む（例えば：トログリタゾン、ピオグリタゾン、エングリタゾン、ＭＣＣ−５５５、ロシグリタゾン、バラグリタゾン、ネトグリタゾン、Ｔ−１３１、ＬＹ−３００５１２、ＬＹ−８１８、及びＷＯ０２／０８１８８、ＷＯ２００４／０２０４０８及びＷＯ２００４／０２０４０９号に開示された化合物）；
（ｂ）ビグアニド、例えばメトホルミン及びフェンホルミン；
（ｃ）ＧＰＲ４０アゴニスト；
（ｄ）ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰ−ＩＶ）阻害剤、例えばシタグリプチン、サキサグリプチン及びビルダグリプチン；
（ｅ）インスリン又はインスリン模倣薬；
（ｆ）スルホニルウレア、例えばトルブタミド、グリメピリド、グリピジド及び関連物質；
（ｇ）α−グルコシダーゼ阻害剤（アカルボースなど）；
（ｈ）患者の脂質プロフィールを改善する薬剤、例えば、（ｉ）ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤（ロバスタチン、シンバスタチン、ロスバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、リバスタチン、イタバスタチン、ＺＤ−４５２２及び他のスタチン類）；（ｉｉ）胆汁酸キレート剤（コレスチラミン、コレスチポール及び架橋デキストランのジアルキルアミノアルキル誘導体）；（ｉｉｉ）ナイアシン受容体アゴニスト、ニコチニルアルコール、ニコチン酸、又はその塩；（ｉｖ）ＰＰＡＲαアゴニスト、例えばフェノフィブリン酸誘導体（ゲムフィブロジル、クロフィブレート、フェノフィブレート及びベザフィブラート）；（ｖ）コレステロール吸収阻害剤、例えばエゼチミベ；（ｖｉ）アシルＣｏＡ：コレステロールアシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ）阻害剤、例えばアバシミベ；（ｖｉｉ）ＣＥＴＰ阻害剤、例えばトルセトラピブ、及び（ｖｉｉｉ）フェノール性抗酸化剤、例えばプロブコール；
（ｉ）ＰＰＡＲα／γ二重アゴニスト、例えばムラグリタザール（ｍｕｒａｇｌｉｔａｚａｒ）、テサグリタザール（ｔｅｓａｇｌｉｔａｚａｒ）、ファルグリタザール（ｆａｒｇｌｉｔａｚａｒ）及びＪＴ−５０１；
（ｊ）ＰＰＡＲδアゴニスト、例えばＷＯ９７／２８１４９号に記載されたもの；
（ｋ）抗肥満化合物、例えばフェンフルラミン、デクスフェンフルラミン、フェンチラミン、シブトラミン、オルリスタット、ニューロペプチドＹ５阻害剤、Ｍｃ４ｒアゴニスト、カンナビノイド受容体１（ＣＢ−１）アンタゴニスト／インバースアゴニスト及びβ３アドレナリン作動性受容体アゴニスト；
（ｌ）回腸胆汁酸輸送阻害剤；
（ｍ）アスピリン、非ステロイド抗炎症性薬物、グルココルチコイド、アズルフィジン及びシクロオキシゲナーゼ２選択的阻害剤などの炎症性症状に使用するための薬剤；
（ｎ）グルカゴン受容体アンタゴニスト；
（ｏ）ＧＬＰ−１、
（ｐ）ＧＩＰ−１、
（ｑ）ＧＬＰ−１類似体、例えばエクセンディン、例えばエクセナチド（ビエッタ（Ｂｙｅｔｔａ）、及び
（ｒ）ヒドロキシステロールデヒドロゲナーゼ−１（ＨＳＤ−１）阻害剤。
【００５９】
上記の組み合わせは、本発明の化合物と、他の１種の活性化合物との組み合わせのみならず、２種以上の他の活性化合物との組み合わせをも包含する。限定するものではない例としては、式（Ｉ）を有する化合物と、ビグアニド、スルホニルウレア、ＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素阻害剤、他のＰＰＡＲアゴニスト、ＧＰＲ４０アゴニスト、ＤP−ＩＶ阻害剤及び抗肥満化合物から選択される２種以上の活性化合物との組み合わせを包含する。
【００６０】
生物活性測定用アッセイ法
本出願化合物の活性は、以下のＰＴＰ−１Ｂ阻害活性用のアッセイ法を用いて証明される。
【００６１】
ホスファターゼ・アッセイ・プロトコール
材料：
ＥＤＴＡ：エチレンジアミン四酢酸（シグマ）
ＤＭＨ：Ｎ，Ｎ’−ジメチル−Ｎ，Ｎ’−ビス（メルカプトアセチル）ヒドラジン（Ｒ．Ｓｉｎｇｈ  ａｎｄ  Ｇ．Ｍ．Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅｓ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．５６，ｐｐ．２３３２−２３３７，（１９９１）に公開された合成）；ＤＴＴと置き換え可能；ジチオスレイトール・ビストリス−２，２−ビス（ヒドロキシメチル）２，２’，２”−ニトリロトリエタノール（シグマ）トリトンＸ−１００−オクチルフェノールポリ（エチレン−グリコールエーテル）１０（ピアース）
抗体：抗−グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ・ウサギ（Ｈ及びＬ）フラクション（モレキュラー・プローブ）
【００６２】
酵素：ヒト組換えＰＴＰ−１Ｂ：アミノ酸１−３２０含有、ＧＳＴ酵素（グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ）又はアフィニティクロマトグラフィーにより精製したＦＬＡＧペプチドに縮合（Ｈｕｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ，１９９７，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７２，８４３−８５２）。野生型は活性部位システイン（２１５）を含むが、突然変異体は活性部位セリン（２１５）を含む。
トリチル化ペプチド：Ｂｚ−ＮＥＪＪ−ＣＯＮＨ２、Ｍｗｔ．８０８、実験式、Ｃ３２Ｈ３２Ｔ２Ｏ１２Ｐ２Ｆ４
【００６３】
保存液
（１０×）アッセイバッファー    ５００ｍＭビストリス（シグマ）ｐＨ６．２
ＭＷ＝２０９．２
２０ｍＭ−ＥＤＴＡ（ギブコ／ＢＲＬ）
保存：４℃にて
【００６４】
日々新たに調製：
アッセイバッファー（１×）      ５０ｍＭビストリス
（室温）                        ２ｍＭ−ＥＤＴＡ
５ｍＭ−ＤＭＨ（ＭＷ＝２０８）
【００６５】
酵素希釈
バッファー（氷上維持）          ５０ｍＭビストリス
２ｍＭ−ＥＤＴＡ
５ｍＭ−ＤＭＨ
２０％グリセロール（シグマ）
０．０１％トリトンＸ−１００（ピアース）
【００６６】
抗体希釈
バッファー（氷上維持）          ５０ｍＭビストリス
２ｍＭ−ＥＤＴＡ
【００６７】
ＩＣ５０結合アッセイ・プロトコール：
特異的ホスファターゼに対する放射性リガンドの結合を潜在的に阻害する化合物（リガンド）を９６穴プレート中で以下のようにスクリーニングする：
【００６８】
各ウエルに以下の溶液を２５℃で以下の時系列で添加する：
１．アッセイバッファー１１０μｌ。
２．アッセイバッファー（１×）中の５０ｍＭトリチル化ＢｚＮ−ＥＪＪ−ＣＯＮＨ２１０μｌ、２５℃で。
３．ＤＭＳＯ中の試験化合物１０μｌを１０段階の異なる濃度に系列希釈し（最終ＤＭＳＯ、約５％ｖ／ｖ）、２５℃で二重試験。
４．酵素希釈バッファー中の３．７５μｇ／ｍｌ精製ヒト組換えＧＳＴ−ＰＴＰ−１Ｂを１０μｌ。
５．プレートを２分間振盪する。
６．抗体希釈バッファーに希釈した０．３μｇ／μｌの抗−グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ（抗−ＧＳＴ）ウサギＩｇＧ（モレキュラー・プローブス）１０μｌを２５℃で。
７．プレートを２分間振盪する。
８．プロテインＡ−ＰＶＴ  ＳＰＡビーズ（アマーシャム）５０μｌを２５℃で。
９．プレートを５分間振盪する。マイクロベータ９６穴プレートカウンターにて結合シグナルを定量する。
１０．非特異的シグナルを、抗−ＧＳＴ抗体の不在下の酵素−リガンドの結合と定義する。
１１．１００％結合活性は、抗−ＧＳＴ抗体の存在下の酵素−リガンドの結合と定義するが、試験リガンドの不在下の非特定の結合を差し引く。
１２．阻害率（パーセント）はそれに準じて計算する。
１３．ＩＣ５０値は４−パラメータ／多重部位方程式により、非線形回帰適合から近似し（“Ｒｏｂｕｓｔ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ”，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｗｉｌｅｙ，Ｐ．Ｊ．Ｈｕｂｅｒ（１９８１）に記載あり）、ｎＭ単位で記録する。
１４．１０μＭで９０％を超える阻害を示す試験リガンド（化合物）は活性であると定義する。
【００６９】
酵素アッセイＰＴＰ−１Ｂ
アッセイバッファー    ５０ｍＭビストリス（ｐＨ＝６．３）
２ｍＭ−ＥＤＴＡ
５ｍＭ−Ｎ，Ｎ’−ジメチル−Ｎ，Ｎ’−ビス
（メルカプトアセチル）ヒドラジン（ＤＭＨ）
基質：１０ｍＭフルオレセイン二リン酸（ＦＤＰ）−２０℃で保存
（１０ｍＭ−ＤｉＦＭＵＰも使用してもよい）
酵素希釈バッファー    ５０ｍＭビストリス（ｐＨ＝６．３）
２ｍＭ−ＥＤＴＡ
５ｍＭ−ＤＭＨ
２０％（ｖ／ｖ）グリセロール
０．０１％トリトンＸ−１００
【００７０】
アッセイは９６穴プレート中、室温で実施した。反応混合物は１７０μｌ中に、５０ｍＭ−ビス−トリス（ｐＨ＝６．３）、２ｍＭ−ＥＤＴＡ、５ｍＭ−Ｎ，Ｎ’−ジメチル−Ｎ，Ｎ’−ビス（メルカプトアセチル）ヒドラジン（ＤＭＨ）及び１０μＭフルオレセイン二リン酸（ＦＤＰ）又は６，８−ジフルオロ−４−メチルウンベリフェリルリン酸（ＤｉＦＭＵＰ）を含んでいた。ＤＭＳＯに溶解した１０系列の濃度（段階希釈）の試験化合物（阻害剤）１０μｌ又は対照としてのＤＭＳＯのみを各ウエルに加え、プレートを２分間混合した。反応は、２０μｌの希釈したＰＴＰ−１Ｂ（５０ｍＭビス／トリス（ｐＨ＝６．３）、２ｍＭ−ＥＤＴＡ、５ｍＭ−ＤＭＨ、２０％グリセロール及び０．０１％トリトンＸ−１００中、ＦＤＰを５０ｎＭ、ＤｉＦＭＵＰを０．５ｎＭ）を加えることにより開始させた。ホスファターゼ活性は１５〜３０分間連続して、蛍光産物フルオレセイン一リン酸（ＦＭＰ）又は６，８−ジフルオロ−７−ヒドロキシル−４−クマリン（ＤｉＦＭＵ）の出現をモニターすることにより追跡した；この際、スペクトロマックス・ジェミニ蛍光プレートリーダー（モレキュラー・プローブス）を用い、ＦＤＰについては励起を４４０ｎｍ、発光を５３０ｎｍ（カットオフフィルターは５２５ｎｍ）とし、ＤｉＦＭＵＰについては励起３６０ｎｍ、発光４５０ｎｍ（カットオフフィルターは４３５ｎｍ）とした。アッセイはすべて少なくとも二重測定にて実施した。ＦＭＰ又はＤｉＦＭＵ形成の初期速度を阻害剤の濃度に対してプロットし、データを４−パラメータ方程式に適合させ、適合の変曲点がＩＣ５０となる。
【００７１】
可逆性アッセイ
ＰＴＰ１Ｂについての酵素アッセイと同じ試薬。ＩＣ５０値は上記のように９６穴プレート中、化合物について１０μＭのＦＤＰ及び５ｎＭのＰＴＰ１Ｂ（最終濃度）を用いて決定した。ホスファターゼ活性は１０分間追跡した。反応混合物の４０倍希釈は別の９６穴プレートで、ＦＤＰ反応混合物５μｌを１０μＭ−ＤｉＦＭＵＰ含有のアッセイバッファー１９５μｌに移すことにより得た。ＤｉＦＭＵの産生は３０分間追跡した。ＦＤＰ反応とＤｉＦＭＵＰ反応両方についてのデータは、４−パラメータ方程式に適合させ、ＦＤＰとＤｉＦＭＵＰ反応両方についての適合の変曲点でＩＣ５０値を決定した。化合物はＦＤＰからＤｉＦＭＵＰバッファーに希釈してＩＣ５０値が＞２０倍シフトした場合に逆転可能であった。
【００７２】
ラットでの薬物動態
ラットにおける経口薬物動態
手順：
カナダの動物愛護に関する審議会指針に従って該動物を収容し、給餌し、飼育する。
雄性スプラーグ−ドーリーラット（３２５〜３７５ｇ）を各ＰＯ血中レベルの検討に先立ち、一夜絶食する。
【００７３】
ラットを１匹ずつ拘束装置に容れ、その箱をしっかりと固定する。ゼロ血液サンプルは尾部先端の一部を切除する（１ｍｍ以下）ことにより採取する。次いで、尾部をしっかりとした穏やかな動きで先端から付け根まで押さえつけ、血液を搾り出す。約１ｍＬの血液をヘパリン添加バキュティナー管に採取する。
化合物は必要に応じて１０ｍＬ／ｋｇの標準投与容量で調製し、１６ゲージ３”摂食針を胃に挿入し、経口投与する。
【００７４】
引き続く採血はゼロ採血と同じ方法で実施するが、再度尾部に傷をつける必要はない。尾部をガーゼ片で清拭し、適宜ラベルを貼った管に上記同様に絞り／押し出す。
サンプル採取直後に、血液を遠心分離し、明瞭にマークしたバイアルに容れ、分析時までフリーザー中に保存する。
【００７５】
ＰＯ投与後、ラット血液レベルの判定のための典型的時点は以下のとおりである：
０、１５ｍｉｎ、３０ｍｉｎ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ
４時間時点での採血後、ラットに任意に食餌を与える。水については検討期間中終始与える。
【００７６】
媒体
ＰＯラット血中レベル判定には、以下の媒体を使用してもよい：
ＰＥＧ２００／３００／４００：２ｍＬ／ｋｇに制限
メトセル０．５％〜１．０％：１０ｍＬ／ｋｇ
トウィーン８０：１０ｍＬ／ｋｇ
【００７７】
ＰＯ血中レベルのための化合物は懸濁液の形状であってもよい。より良好な溶解のために、該溶液は約５分間ソニケーター（超音波処理機）上に設置してもよい。
分析のために、一部分を等容量のアセトニトリルで希釈し、遠心分離してタンパク質沈殿を除去する。上清はＵＶ検出を有するＣ−１８ＨＰＬＣカラムにそのまま注入する。定量は既知量の薬物を加えた清浄血液サンプルに関して実施する。バイオアベイラビリティ（Ｆ）はｉ．ｖ．（静脈内）対ｐ．ｏ．（経口）につき曲線下面積（ＡＵＣ）を比較することにより評価する。
【００７８】
【数１】
0005570223.tif 000003
【００７９】
クリアランス速度は以下の関係式から計算する：
【００８０】
【数２】
0005570223.tif 000004
【００８１】
ＣＬの単位はｍＬ／ｈ・ｋｇ（ミリリットル／時間・キログラム）
【００８２】
ラットにおける静脈内投与薬物動力学
手順：
カナダの動物愛護に関する審議会指針に従って動物を収容し、給餌し、飼育する。
雄性スプラーグ−ドーリーラット（３２５〜３７５ｇ）を、吊り床、籠状蓋、給水瓶及び食餌を備えたプラスチック靴箱様籠に収容する。
化合物は必要に応じて１ｍＬ／ｋｇの標準投与容量で調製する。
【００８３】
ラットはゼロ血液サンプル用に出血させ、ＣＯ２鎮静下に投薬する。ラットは１匹ずつ予めＣＯ２を入れたチャンバーに収容し、ラットが正向反射を失ったとき、直ちに取り出す。次いで、ラットを拘束板上に置き、ＣＯ２送達用ノーズコーンを口輪に被せ、ラットを輪ゴムで板上に拘束する。ピンセットとハサミで頚静脈を露出し、ゼロサンプルを取り、測定した用量の化合物を頚静脈に注射する。注射部位に軽い指圧を加え、ノーズコーンを取り去る。時間を記録する。これをゼロ時点とする。
【００８４】
尾部の先端の一部を切除する（１〜２ｍｍ）を付けることで５分間出血させる。次いで、尾部をしっかりとした穏やかな動きで先端から付け根まで押さえつけ、尾部から血液を搾り出す。約１ｍＬの血液をヘパリン添加採血バイアルに採取する。引き続く出血は同じ様式で行うが、再度尾部に傷をつける必要はない。尾部をガーゼ片で清拭し、適宜ラベルを貼った管に上記同様に出血させる。
【００８５】
Ｉ．Ｖ．投与後のラット血液レベル判定のための典型的時点は以下のとおりである：
０、５ｍｉｎ、１５ｍｉｎ、３０ｍｉｎ、１ｈ、２ｈ、６ｈ
又は  ０、５ｍｉｎ、３０ｍｉｎ、１ｈ、２ｈ、４ｈ、６ｈ。
【００８６】
媒体
ＩＶラット血中レベル判定には、以下の媒体を使用してもよい：
デキストロース：                                    １ｍＬ／ｋｇ
２−ヒドロキシプロピル−ｂ−シクロデキストリン      １ｍＬ／ｋｇ
ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）：動物１匹につき０．１ｍＬ投与容量に限定
ＰＥＧ２００：４０％無菌水と混合した６０％以下  −  １ｍＬ／ｋｇ
もし溶液に濁りがある場合には、デキストロースと共に、重炭酸ナトリウム又は炭酸ナトリウムを加えてもよい。
【００８７】
分析のために、一部分を等容量のアセトニトリルで希釈し、遠心分離してタンパク質沈殿を除去する。上清はＵＶ検出を有するＣ−１８ＨＰＬＣカラムにそのまま注入する。定量は既知量の薬物を加えた清浄血液サンプルに関して実施する。バイオアベイラビリティ（Ｆ）はｉ．ｖ．（静脈内）対ｐ．ｏ．（経口）につき曲線下面積（ＡＵＣ）を比較することにより評価する。
【００８８】
【数３】
0005570223.tif 000005
【００８９】
クリアランス速度は以下の関係式から計算する：
【００９０】
【数４】
0005570223.tif 000006
【００９１】
ＣＬの単位はｍＬ／ｈ・ｋｇ（ミリリットル／時間・キログラム）である。
【００９２】
ＰＴＰ−１Ｂ未処理細胞アッセイ
組換えバキュロウイルス転移ベクターの構築と昆虫細胞
簡単に説明すると、Ｂａｃ−ｔｏ−Ｂａｃバキュロウイルス発現システム（ギブコ−ＢＲＬ、ミシッサウガ、オンタリオ、カナダ）を用い、ＰＴＰ１Ｂ  ｃＤＮＡ（エリクソン博士（Ｄｒ．Ｒ．Ｌ．Ｅｒｉｋｓｏｎ；ハーバード大学、米国）から入手）を、ｐＦＡＳＴＢＡＣドナープラスミド（ｃＤＮＡ（ＰＴＰ１Ｂ−ＦＬ）の５’末端にＦＬＡＧ配列を含むように設計する）にクローン化する。組換えプラスミドを適格ＤＨ１０ＢＡＣ大腸菌細胞に形質転換する。遺伝子転移と抗生物質選択の後、組換えバクミドＤＮＡを、選択した大腸菌コロニーから単離し、ｓｆ９昆虫細胞（インビトロゲン、サンディエゴ、カリフォルニア、米国）に形質移入するために使用する。ｓｆ９細胞は、攪拌フラスコ中、サマーズとスミスのプロトコール（Ｓｕｍｍｅｒｓ  ａｎｄ  Ｓｍｉｔｈ，Ａ  ｍａｎｕａｌ  ｆｏｒ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ  Ｖｅｃｔｏｒｓ  ａｎｄ  Ｉｎｓｅｃｔ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（バキュロウイルスベクター法と昆虫培養手法の手引き），Ｂｕｌｌｅｔｉｎ  Ｎｏ．１５５５  テキサスＡ＆Ｍ大学、テキサス農学実験ステーション、カレッジステーション、テキサス、１９８７年）に従い、１０％熱不活性化胎児血清（ギブコ−ＢＲＬ）を含むグレーセス（Ｇｒａｃｅｓ）捕捉培地（ギブコ−ＢＲＬ、ミシッサウガ、オンタリオ、カナダ）中で２８℃で培養する。
【００９３】
未処理細胞アッセイ
ＰＴＰ１Ｂ−ＦＬを発現する感染ｓｆ９細胞及び模擬感染細胞を、５分間、４６０ｒｐｍ（４８ｇ）のゆるやかな遠心分離（ベックマンＧＳ−６Ｒ）により２９ｈｐｉ（感染後の時間）に収穫する。細胞をアッセイバッファー（１５ｍＭヘペスで緩衝化したハンク溶液、ｐＨ７．４；シグマ（セントルイス、ミズーリ、米国）から入手）中で１回洗浄し、３００ｒｐｍ（２１ｇ）で１０分間、再遠心分離する。次いで、この細胞をアッセイバッファー中でゆるやかに再懸濁し、トリパンブルー排除による細胞密度と生存度用のヘマサイトメーターを用いて試験する。アッセイはトムテック・クァドラ９６ピペット分配ロボットを用い、各添加ごとに細胞をゆるやかに混合するようにプログラムして実施する。２００μＬのアッセイバッファーに、２×１０５個のＰＴＰ発現細胞又は模擬感染細胞を９６穴ポリプロピレンプレートの各ウエルに分配し、試験化合物又はＤＭＳＯ媒体（３μＬ）と共に１５分間、３７℃で予備インキュベートする。予備インキュベートした細胞を最終濃度１０ｍＭのｐＮＰＰ（リン酸ｐ−ニトロフェニル；シグマ−アルドリッチ・カナダ社から入手；オークビル、オンタリオ）で１５分間チャレンジし、４℃で遠心分離し、基質加水分解の量を、分光光度法によりＯＤ４０５で定量する。
【００９４】
経口グルコース負荷試験
経口グルコース負荷試験は知覚反応のあるツッカー（Ｚｕｃｋｅｒ）肥満ｆａ／ｆａラット又は肥満ｏｂ／ｏｂマウス（１２週令以上）にて実施する。実験に使用する前に、動物は１６〜１８時間絶食とする。試験化合物又は媒体は、２ｇ／ｋｇ体重の用量でグルコース溶液を経口投与する６０分前に、腹腔内又は経口で与える。血糖値はメディセンス・グルコメーターを用いて、グルコース投与の前後、異なる時点で採取した尾部出血サンプルから測定する。血糖値の時間曲線を作成し、１２０分間の曲線下面積（ＡＵＣ）を計算する（グルコース投与時をゼロ時とする）。阻害率（パーセント）は媒体−対照群をゼロ・パーセント阻害として、ＡＵＣを用いて決定する。
【００９５】
別の検討において、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスに、３ないし４週間、高脂肪（３５％）及び高炭水化物（３６％）食餌（バイオサーブ（Ｂｉｏｓｅｒｖ）；フレンチタウン、ニュージャージーから入手）を給餌する；この時点で５０〜１００％の基線体重を得る。経口グルコース負荷試験は上記と同様に実施する。
【００９６】
実施例
以下の実施例は本発明を説明するために提供するものであり、如何なる方法でも本発明を限定するものと解釈されるものではない。本発明の範囲は添付の請求項により規定される。
【００９７】
本明細書に開示した化合物の調製方法は、以下の工程図及び実施例にて説明する。出発物質は市販品として入手し得るか、又は文献上既知の手法により若しくは説明どおりに調製する。本発明はさらに上記定義の式（Ｉ）で示される化合物の調製法を提供する。一部の事例において、前記工程図を実施する順序は、反応を容易にするために又は不所望の反応産物を回避するために変更してもよい。以下の実施例は説明することを目的として提供するものであり、開示された発明を制限しようとするものではない。
【００９８】
実施例１
３−（（Ｅ）−２−｛５−ブロモ−６−［ジフルオロ（ホスホノ）メチル］−２−ナフチル｝エテニル）安息香酸
【００９９】
【化２】
0005570223.tif 000007
【０１００】
工程１：６−アミノ−５−ブロモ−２−ナフトエ酸メチル
６−アミノ−２−ナフトエ酸メチル（０．５ｇ）のＴＨＦ（１０ｍｌ）中の溶液に、三臭化ピリジニウム（０．８７ｇ）を加えた。反応混合物を０℃で１時間攪拌し、次いで、ＳｉＯ２のパッドで濾過し、ヘキサンで洗浄した。有機洗浄液を蒸発乾固し、残渣をフラッシュクロマトグラフィーによりヘキサンで溶出精製して標題化合物を得た。
【０１０１】
工程２：５−ブロモ−６−ヨード−２−ナフトエ酸メチル
６−アミノ−５−ブロモ−２−ナフトエ酸メチル（７００ｍｇ）の水（５ｍＬ）中の溶液に、０℃でＨ２ＳＯ４を加えた。反応混合物を３０分間攪拌した。次いで、ＮａＮＯ２（０．３ｇ）の水５ｍＬ中の溶液を滴下し、混合物を９０分間攪拌した。この溶液に０℃でＫＩ溶液（１．１ｇ／水５ｍＬ）を加えた。反応液を室温で一夜攪拌し、その後飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を混合物に加えた。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、抽出液をＮａ２ＳＯ４で乾燥した。有機抽出液を蒸発乾固し、残渣をフラッシュクロマトグラフィーによりヘキサンで溶出精製して標題化合物を得た。
【０１０２】
工程３：（５−ブロモ−６−ヨード−２−ナフチル）メタノール
５−ブロモ−６−ヨード−２−ナフトエ酸メチル（０．３７ｇ、０．９５ｍｍｏｌ）のトルエン（１０ｍＬ）中の溶液に、−７８℃でＤＩＢＡＬ（１Ｍ溶液、ＰｈＭｅ中；３ｍＬ，３ｍｍｏｌ）を滴下した。温度を１時間で０℃に上昇させた。１Ｍ−ＨＣｌ（１０ｍＬ）を加えて反応を停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。有機抽出液を蒸発乾固し、標題化合物を得た。
【０１０３】
工程４：１−ブロモ−６−（ブロモメチル）−２−ヨードナフタレン
ＰＯＢｒ３（６６２ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（４．５ｍＬ）中の溶液に、０℃でＤＭＦ（２．２５ｍＬ）を滴下した。反応液を１０分間攪拌し、次いで、（５−ブロモ−６−ヨード−２−ナフチル）メタノール（２８０ｍｇ、０．７７ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中の溶液を加えた。反応混合物を３０分間攪拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を加えて反応を停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。有機抽出液を蒸発乾固し、標題化合物を得て、このものをそのまま次工程で使用した。
【０１０４】
工程５：（５−ブロモ−６−ヨード−２−ナフチル）メチルホスホン酸ジエチル
工程４からの１−ブロモ−６−（ブロモメチル）−２−ヨードナフタレン（２７０ｍｇ）に、亜リン酸トリエチル（４ｍＬ）を加えた。反応混合物を１時間加熱還流し、高真空蒸留により過剰の亜リン酸トリエチルを除去し、標題生成物を得た。
【０１０５】
工程６：３−［（Ｅ）−２−（５−ブロモ−６−ヨード−２−ナフチル）エテニル］安息香酸メチル
工程５からの（５−ブロモ−６−ヨード−２−ナフチル）メチルホスホン酸ジエチル（２５０ｍｇ）のＴＨＦ（５ｍＬ）中の溶液に、０℃でＮａＨ（６０％／鉱油；１７ｍｇ）を加えた。反応混合物を１時間攪拌し、３−ホルミル安息香酸メチル（８５ｍｇ）を加え、室温で１時間攪拌を続けた。この混合物に飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を加えて反応を停止させ、ＥｔＯＡｃで抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥、蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより５％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出精製して標題化合物を得た。
【０１０６】
工程７：３−（（Ｅ）−２−｛５−ブロモ−６−［（ジエトキシホスホリル）（ジフルオロ）メチル］−２−ナフチル｝エテニル）安息香酸メチル
この生成物は、文献（Ｓ．Ｓｈｉｂｕｙａ、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、１９９７，５３．３，８１５）の手法に従い、３−［（Ｅ）−２−（５−ブロモ−６−ヨード−２−ナフチル）エテニル］安息香酸メチルから、臭化（（ジエトキシホスフィニル）ジフルオロメチル）亜鉛との反応により得た。
【０１０７】
工程８：３−（（Ｅ）−２−｛５−ブロモ−６−［ジフルオロ（ホスホノ）メチル］−２−ナフチル｝エテニル）安息香酸
工程７からの３−（（Ｅ）−２−｛５−ブロモ−６−［（ジエトキシホスホリル）（ジフルオロ）メチル］−２−ナフチル｝エテニル）安息香酸メチル（３５ｍｇ）の加水分解は、ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中、ＴＭＳＢｒ（２ｍＬ）を用いて、室温で一夜実施した。混合物を蒸発乾固させ、残渣をエタノールに溶解した。これを再度蒸発乾固させ、このプロセスを３回繰り返した。反応残渣を水に溶解し、１Ｎ−ＮａＯＨで処理し、標題生成物をナトリウム塩として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ８．５２（ｄ，１Ｈ），８．３０（ｓ，１Ｈ），８．１５（ｍ，２Ｈ），７．９５−８．０５（ｍ，３Ｈ），７．７２（ｄ１Ｈ），７．６０（ｍ，３Ｈ）。
【０１０８】
実施例２
３−（（Ｅ）−２−｛６−ブロモ−７−｛ジフルオロ（ホスホノ）メチル］−２−ナフチル｝エテニル）安息香酸
【０１０９】
【化３】
0005570223.tif 000008
【０１１０】
工程１：３−ブロモ−７−メチル−２−ナフトアルデヒド
文献（Ｓｕｎ，Ｑ．，Ｌａｖｏｉｅ  Ｅ．Ｊ．；Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ；１９９６，４３，（４），７３７−７４３）記載どおりに、７−メチル−２−ナフトアルデヒド（４３０ｍｇ）、Ｎ，Ｎ，Ｎ’−トリメチルエチレンジアミン（５００ｍｇ）、ＢｕＬｉ（１．６Ｍ／ヘキサン；４．９５ｍＬ）及びテトラフルオロジブロモエタン（２．５ｍＬ）から、標題生成物を産生させた。
【０１１１】
工程２：（３−ブロモ−７−メチル−２−ナフチル）（ヒドロキシ）メチルホスホン酸ジエチル
亜リン酸ジエチル（０．２２ｍＬ）のＴＨＦ（５ｍＬ）中の溶液に、−７８℃でＬｉＨＭＤＳ（１当量の１Ｍ  ＴＨＦ溶液）を加えた。反応混合物を−７８℃で１時間攪拌した。３−ブロモ−７−メチル−２−ナフトアルデヒドの溶液を滴下し、反応液を０℃で一夜攪拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液で反応を停止し、ＥｔＯＡｃで抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。有機抽出液を蒸発乾固し、残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより、５０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出精製して標題生成物を得た。
【０１１２】
工程３：３−ブロモ−７−メチル−２−ナフトイルホスホン酸ジエチル
塩化オキサリル（０．１５ｍＬ）のＣＨ２Ｃｌ２（２．５ｍＬ）中の溶液に、−７８℃でＤＭＳＯ（０．２３ｍＬ）を加えた。反応液を１０分間攪拌し、その後、（３−ブロモ−７−メチル−２−ナフチル）（ヒドロキシ）メチルホスホン酸ジエチル（１６０ｍｇ）のＣＨ２Ｃｌ２（２．５ｍＬ）中の溶液を滴下した。反応液を−７８℃で１時間攪拌し、その後、トリエチルアミン（０．６６ｍＬ）を混合物に加え、温度を室温まで上昇させた。水（５ｍＬ）を加え、混合物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。有機抽出液を併合し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発乾固して標題生成物を得て、このものはそのまま次工程で使用した。
【０１１３】
工程４：（３−ブロモ−７−メチル−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチルホスホン酸ジエチル
３−ブロモ−７−メチル−２−ナフトイルホスホン酸ジエチル（１６０ｍｇ）のＣＨＣｌ３（３ｍＬ）中の溶液に、−７８℃で三フッ化（ジエチルアミノ）イオウ（０．４４ｍＬ）を加えた。反応液を室温で５時間攪拌し、次いで、氷／水／ＣＨ２Ｃｌ２混合物上に注いだ。有機抽出液を５０％ＮＨ４ＯＨ／水及び食塩水で逆洗浄した。次いで、抽出液をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発乾固した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより、４０％へキサン／ＥｔＯＡｃで溶出精製して標題生成物を得た。
【０１１４】
工程５：［３−ブロモ−７−（ブロモメチル）−２−ナフチル］（ジフルオロ）メチルホスホン酸ジエチル
（３−ブロモ−７−メチル−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチルホスホン酸ジエチル（２００ｍｇ）のＣＣｌ４（１２ｍＬ）中の溶液に、ＮＢＳ（９０ｍｇ）及び触媒量の過酸化ベンゾイルを加えた。混合物を２時間還流し、次いで、ヘキサンで希釈した。この溶液をセライトのパッドで濾過し、ヘキサンで洗浄した。ヘキサン洗浄液を蒸発乾固させ、標題生成物を得た。
【０１１５】
工程６：｛６−ブロモ−７−［（ジエトキシホスホリル）（ジフルオロ）メチル］−２−ナフチル｝メチルホスホン酸ジエチル
亜リン酸ジエチル（０．２２ｍＬ）のトルエン（５ｍＬ）中の溶液に、０℃でＮａＨ（６０％／鉱油、２０ｍｇ）を加えた。反応混合物を１時間攪拌し、次いで、［３−ブロモ−７−（ブロモメチル）−２−ナフチル］（ジフルオロ）メチルホスホン酸ジエチル（２２０ｍｇ）のトルエン（２ｍＬ）中の溶液を滴下した。反応液を０℃で１時間攪拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液で反応を停止し、ＥｔＯＡｃで抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。有機抽出液を蒸発乾固し、残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより、５０％ＥｔＯＡｃ／へキサンで溶出精製して標題化合物を得た。
【０１１６】
工程７：３−（（Ｅ）−２−｛６−ブロモ−７−［（ジエトキシホスホリル）（ジフルオロ）メチル］−２−ナフチル｝エテニル）安息香酸メチル
｛６−ブロモ−７−［（ジエトキシホスホリル）（ジフルオロ）メチル］−２−ナフチル｝メチルホスホン酸ジエチル（１９０ｍｇ）及び３−ホルミル安息香酸メチル（６０ｍｇ）の脱ガスＴＨＦ（５ｍＬ）中の溶液に、−７８℃で、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（ＴＨＦ中１Ｍ溶液；０．３５ｍＬ）を加え、その反応溶液を０℃で１時間攪拌した。混合物に飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を加えて反応停止し、ＥｔＯＡｃで抽出し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発乾固した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより、２５％ＥｔＯＡｃ／へキサンで溶出精製して標題生成物を得た。
【０１１７】
工程８：３−（（Ｅ）−２−｛６−ブロモ−７−｛ジフルオロ（ホスホノ）メチル］−２−ナフチル｝エテニル｝安息香酸
工程７からの３−（（Ｅ）−２−｛６−ブロモ−７−［（ジエトキシホスホリル）（ジフルオロ）メチル］−２−ナフチル｝エテニル）安息香酸メチル（１２０ｍｇ）の加水分解は、ＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のＴＭＳＢｒ（２ｍＬ）を用いて、室温で一夜実施した。混合物を蒸発乾固させ、残渣をエタノールに溶解した。これを再度蒸発乾固させ、このプロセスを３回繰り返した。反応残渣を水に溶解し、１Ｎ−ＮａＯＨで処理し、標題生成物をナトリウム塩として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ８．８４（ｓ，１Ｈ），８．２２（ｓ，１Ｈ），８．１２（ｓ，１Ｈ），８．０５（ｓ，１Ｈ），７．８８（ｍ，２Ｈ），７．７８（ｄ，１Ｈ），７．７０（ｄ，１Ｈ），７．４０（ｍ，３Ｈ）。
【０１１８】
実施例３〜６：
【０１１９】
【化４】
0005570223.tif 000009
【０１２０】
実施例３
（３−ブロモ−７−メチル−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチルホスホン酸
（３−ブロモ−７−メチル−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチルホスホン酸ジエチル（０．１ｇ；実施例２、工程４から）をＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中、ＴＭＳＢｒ（２ｍＬ）で、室温にて一夜加水分解した。混合物を蒸発乾固させ、残渣をエタノールに溶解した。これを再度蒸発乾固させ、このプロセスを３回繰り返した。反応残渣を水に溶解し、１Ｎ−ＮａＯＨで処理して標題生成物をナトリウム塩として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ８．１５（ｄ，２Ｈ），７．７０（ｍ，２Ｈ），７．４５（ｄ，１Ｈ），２．５０（ｓ，３Ｈ）。
【０１２１】
実施例４
［３−ブロモ−７−（シアノメチル）−２−ナフチル］（ジフルオロ）メチルホスホン酸
［３−ブロモ−７−（ブロモメチル）−２−ナフチル］（ジフルオロ）メチルホスホン酸ジエチル（０．０６ｇ；実施例２、工程５から）のＤＭＳＯ（３ｍＬ）中の溶液に、ＮａＣＮ（１８ｍｇ）を加えた。反応液を室温で１時間攪拌した。水を加えて反応を停止させ、エーテルで２回抽出した。有機抽出液をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発乾固した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより、２０％ＥｔＯＡｃ／へキサンで溶出精製してホスホン酸エステル（２０ｍｇ）を得た。［３−ブロモ−７−（シアノメチル）−２−ナフチル］（ジフルオロ）メチルホスホン酸ジエチルは、ＴＭＳＢｒ（２ｍＬ）中で室温にて一夜加水分解した。混合物を蒸発乾固させ、残渣をエタノールに溶解した。これを再度蒸発乾固させ、このプロセスを３回繰り返した。反応残渣を水に溶解し、１Ｎ−ＮａＯＨで処理して標題生成物をナトリウム塩として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ８．４０（ｄ，１Ｈ），８．３４（ｓ，１Ｈ），８．１３（ｓ，１Ｈ），−８．０５（ｄ，１Ｈ），７．７２（ｄ１Ｈ），４．２０（ｓ，２Ｈ）。
実施例５
【０１２２】
（３−ブロモ−７−ホルミル−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチルホスホン酸
［３−ブロモ−７−（ブロモメチル）−２−ナフチル］（ジフルオロ）メチルホスホン酸ジエチル（０．２ｇ；実施例２、工程５から）のジオキサン５ｍＬ中の溶液に、Ｎ−メチルモルホリンＮ−オキシド（０．１７ｇ）を加えた。反応混合物を１時間還流した。混合物に飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を加えて反応停止し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、抽出液をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより１０〜２０％ＥｔＯＡｃ／へキサンで溶出精製して、（３−ブロモ−７−ホルミル−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチルホスホン酸ジエチル（０．１５グラム）を得て、これをＣＨ２Ｃｌ２（１ｍＬ）中のＴＭＳＢｒ（２ｍＬ）で、室温にて一夜加水分解した。混合物を蒸発乾固させ、残渣をエタノールに溶解した。これを再度蒸発乾固させ、このプロセスを３回繰り返した。反応残渣を水に溶解し、１Ｎ−ＮａＯＨで処理して標題生成物をナトリウム塩として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ１０．２２（ｓ，１Ｈ），８．７０（ｓ，１Ｈ），８．５１（ｓ，１Ｈ），８．４２（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｍ２Ｈ）。
【０１２３】
実施例６
（７−アセチル−３−ブロモ−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチルホスホン酸
工程１：［３−ブロモ−７−（１−ヒドロキシエチル）−２−ナフチル］（ジフルオロ）メチルホスホン酸ジエチル
（３−ブロモ−７−ホルミル−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチルホスホン酸ジエチル（０．１ｇ；実施例５）のＴＨＦ（１ｍＬ）中の溶液に、−７８℃で、ＭｅＭｇＢｒ（ＴＨＦ中３Ｎ溶液、７９μＬ）を加えた。温度を０℃に上昇させ、１時間攪拌した。混合物に飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を加えて反応停止し、ＥｔＯＡｃで抽出し、有機抽出液をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、蒸発乾固した。残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより１０〜３０％へキサン／ＥｔＯＡｃで溶出精製して、標題生成物を得た。
【０１２４】
工程２：（７−アセチル−３−ブロモ−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチルホスホン酸ジエチル
工程１からの［３−ブロモ−７−（１−ヒドロキシエチル）−２−ナフチル］（ジフルオロ）メチルホスホン酸ジエチル（２０ｍｇ）のＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）中の溶液に、０℃で、デス−マーチン試薬（２４ｍｇ）を加えた。温度を室温まで上昇させ、反応液を１時間攪拌した。反応液をＳｉＯ２のパッドで濾過し、３０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンで溶出し、有機物を蒸発乾固した。残渣をニートのＴＭＳＢｒ（３ｍＬ）に溶解して加水分解し、室温で一夜攪拌した。混合物を蒸発乾固し、残渣をエタノールに溶解した。これを再度蒸発乾固させ、このプロセスを３回繰り返した。反応残渣を水に溶解し、トルエンと共蒸留し、ポンプで高真空として標題生成物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤ３ＯＤ）：δ８．７９（ｄ，１Ｈ），８．５０（ｓ，１Ｈ），８．３９（ｓ，１Ｈ），８．１５（ｄ，１Ｈ），８．０２（ｄ１Ｈ），２．７５（ｓ，３Ｈ）。
【０１２５】
実施例７
［（３−ブロモ−６−シアノ−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸
【０１２６】
【化５】
0005570223.tif 000010
【０１２７】
工程１〜３：６，７−ジブロモ−２−ナフトニトリル
文献記載の手法（Ｈａｎａｃｋ，Ｍ．，Ｇｒｏｂｈａｎｓ，Ｒ．；Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．１９９２，１２５，１２４３−１２４７）に従って、市販品として入手し得る４，５−ジブロモ−ｏ−キシレンから２工程で、又は市販品として入手し得る４−ブロモ−ｏ−キシレンから３工程で、６，７−ジブロモ−２−ナフトニトリルを調製し得る。
【０１２８】
工程４：７−ブロモ−６−ヨード−２−ナフトニトリル及び６−ブロモ−７−ヨード−２−ナフトニトリル
６，７−ジブロモ−２−ナフトニトリル（１５ｇ）及びＴＭＳＣｌ（６．７３ｍＬ）のＴＨＦ（２５０ｍＬ）中の溶液に、−７８℃で激しく攪拌しながら、ｎ−ＢｕＬｉ（５３ｍＬ；１．６Ｍ／ヘキサン；予め−２０℃に冷却）を素早く加え、その混合物をさらに５分間攪拌し、飽和ＮＨ４Ｃｌで反応停止した。次いで、混合物を酢酸エチルで抽出し、有機層を水及び食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過した。濾液を濃縮し、粗生成物をカラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物を黄色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）（２つの位置異性体の混合物）：δ８．５３（ｓ，１Ｈ），８．４２（ｓ，１Ｈ），８．３３（ｓ，１Ｈ），８．３０（Ｓ，１ｈ），８．２３（Ｓ，１ｈ），８．２０（Ｓ，１ｈ），８．１８（ｄ，１Ｈ），８．０７（ｄ，１Ｈ），７．８２−７．７７（ｍ，２Ｈ），０．５０（ｓ，１８Ｈ）。
【０１２９】
上記生成物のジクロロメタン（２５０ｍＬ）中の溶液に、過剰のＩＣｌを加え、その混合物を室温で１時間攪拌した。次いで、この溶液をすべてのＩＣｌが消費されるまで１０％Ｎａ２Ｓ２Ｏ３で洗浄した。次いで、この溶液を水及び食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過した。濾液を濃縮し、残渣をエーテル／ヘキサンから再結晶して、所望の生成物を得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）（２つの位置異性体の混合物）：δ８．７４（ｓ，１Ｈ），８．７３（ｓ，１Ｈ），８．４６−８．４４（ｍ，４Ｈ），８．１０−８．０７（ｍ，２ｈ），７．８４−７．８１（ｍ，２Ｈ）。
【０１３０】
工程５：［（３−ブロモ−６−シアノ−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル及び［（３−ブロモ−７−シアノ−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル
火炎乾燥丸底フラスコにＣｕＢｒ（９９．９９９％）及びＴＨＦ（１０ｍＬ）を入れ、文献記載の手法（Ｓ．Ｓｈｉｂｕｙａ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９９７，５３．３，８１５）に従って、臭化（（ジエトキシホスフィニル）ジフルオロメチル）亜鉛（２９ｍＬ；１．７２Ｍ／ＴＨＦ）を加えた。この懸濁液をＮ２下で１５分間攪拌した。次いで、７−ブロモ−６−ヨード−２−ナフトニトリル（７．１ｇ）を固形物として加え、その混合物を一夜４５℃に加熱し、室温に冷却した。次いで、懸濁液に半飽和ＮＨ４Ｃｌを加えて反応停止し、１：１エーテル／酢酸エチルで抽出した（３×）。抽出液を常法どおりに処理し、粗生成物を得て、これを先ずフラッシュクロマトグラフィー（４０％酢酸エチル／ヘキサン）により精製した。次いで、２種類の位置異性体をＨＰＬＣにより分離した。５０％酢酸エチル／ヘキサンによる溶出は、先に極性の低い異性体［（３−ブロモ−７−シアノ−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチルを与えた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ８．７２（ｓ，１Ｈ），８．５４（ｓ，１Ｈ），８．４６（ｓ，１Ｈ），８．１９（ｄ，１Ｈ），７．９５（ｄ，１Ｈ），４．２６（ｍ，４Ｈ），１．３３（ｔ，６Ｈ）。
【０１３１】
それに続く溶出はより極性の高い異性体［（３−ブロモ−６−シアノ−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチルを与えた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ８．５６（ｓ，２Ｈ），８．４３（ｓ，１Ｈ），８．３５（ｄ，１Ｈ），７．９３（ｄ，１Ｈ），４．２６（ｍ，４Ｈ），１．３３（ｔ，６Ｈ）。
【０１３２】
工程６：［（３−ブロモ−７−シアノ−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸（７ａ）
［（３−ブロモ−７−シアノ−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル（２．２ｇ）のジクロロメタン（５ｍＬ）溶液とＴＭＳＢｒ（７ｍＬ）を一夜攪拌し、濃縮した。残渣はジクロロメタン（２×）、エタノール／水（２×）と共蒸発させ、次いで、メタノール（２０ｍＬ）に溶解した。次いで、アンモニア（３０％）を激しく攪拌しながら加え、混合物を濃縮し、メタノールと共蒸発させた（３×）。固形残渣をエーテルで洗浄し、所望の生成物を白色粉末として得た。ＭＳ（−ＥＳＩ）：ｍ／ｚ３６０．０及び３６１．９（Ｍ−１）−。
注記：［（３−ブロモ−６−シアノ−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸（７ｂ）は工程６に記載の方法と同様の方法で得た。ＭＳ（−ＥＳＩ）：ｍ／ｚ３６０．０，３６１．９。
【０１３３】
実施例８ａ
［｛２−［（フェニルアミノ）カルボニル］−６−ブロモキノリン−７−イル｝（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸
【０１３４】
【化６】
0005570223.tif 000011
【０１３５】
工程１：（４−ブロモ−３−ヨードフェニル）アミン
３−ヨードアニリン（１２ｍＬ、１００ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２（４００ｍＬ）中の溶液に、−１０℃で、２，４，４，６−テトラブロモ−２，５−シクロヘキサジエノン（４５．１ｇ、１１０ｍｍｏｌ）を分割して加え、その間、内部温度は−１０℃に維持した。４時間攪拌した後、１Ｎ−ＮａＯＨ（１５０ｍＬ）を加え、その生成物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出した。併合した抽出液を水、次いで食塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。真空下濃縮した後、粗生成物を２：１のヘキサン：トルエンで再結晶して、所望の生成物を得た。
【０１３６】
工程２：６−ブロモ−７−ヨード−２−メチルキノリン
（４−ブロモ−３−ヨードフェニル）アミン（１１．９３ｇ、４０ｍｍｏｌ）に、濃ＨＣｌ（６ｍｌ）、ｐ−クロラニル（９．８３ｇ、１当量）及びイソプロパノール（２０ｍｌ）を加え、その混合物を加熱還流した。次いで、クロトンアルデヒド（３．９８ｍｌ）のイソプロパノール（３．８ｍｌ）中の溶液を、シリンジポンプにより０．１ｍｌ／分の速度で添加し、添加終了後、さらに４０分間、混合物を還流下に攪拌した。この混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃ及び５％水性ＮＨ４ＯＨで希釈した。生成物をＥｔＯＡｃで抽出し、有機層を水及び食塩水で数回洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。粗生成物を沸騰トルエン（３００ｍｌ）にできるだけ溶解し、シリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィーにより０〜５％勾配のＥｔＯＡｃ／トルエンで精製した。第一の生成物は６−ブロモ−７−ヨード−２−メチルキノリンであり、それに続きその異性体６−ブロモ−５−ヨード−２−メチルキノリンであった。
【０１３７】
６−ブロモ−７−ヨード−２−メチルキノリン：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ８．５８（ｓ，１Ｈ），８．３２（ｓ，１Ｈ），８．２０（ｄ，１Ｈ），７．４８（ｄ，１Ｈ），２．６８（ｓ，３Ｈ）。
６−ブロモ−５−ヨード−２−メチルキノリン：１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）：δ８．４５（ｄ，１Ｈ），８．０１（ｄ，１Ｈ），７．９２（ｄ，１Ｈ），７．５３（ｄ，１Ｈ），２．７２（ｓ，３Ｈ）。
【０１３８】
工程３：［（６−ブロモ−２−メチルキノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル
本生成物は文献記載の手法（Ｓ．Ｓｈｉｂｕｙａ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  １９９７，５３．３，８１５）に従い、６−ブロモ−７−ヨード−２−メチルキノリンから臭化（（ジエトキシホスフィニル）ジフルオロメチル）亜鉛との反応により得た。
【０１３９】
工程４：［（６−ブロモ−２−ホルミルキノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル
工程３の生成物（１．２４ｇ、３．０４ｍｍｏｌ）に、ジオキサン（１５ｍｌ）中、二酸化セレン（３８８ｍｇ、１．１５当量、真空下にトーチにて乾燥）を加え、混合物を１．３時間、１００℃に加熱した。溶媒を蒸発させ、残渣をシリカ上のフラッシュクロマトグラフィーにより３０％ＥｔＯＡｃ／トルエンで精製し、標題生成物を黄色固体として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ１０．１６（ｓ，１Ｈ），８．６３，（ｄ，１Ｈ），８．４８（ｓ，１Ｈ），８．５３（ｓ，１Ｈ），８．１３（ｄ，１Ｈ），４．３０（ｍ，４Ｈ），１．３３（ｔ，６Ｈ）。
【０１４０】
工程５：６−ブロモ−７−［（ジエトキシホスホリル）（ジフルオロ）メチル］キノリン−２−カルボン酸
文献（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，１９９３，２９５）記載のように、ギ酸（１ｍｌ）中、工程４の生成物（１０５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）に、３０％過酸化水素（０．１３ｍＬ、１ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物を室温で一夜攪拌した。溶媒を蒸発させ、無水エタノールを加えた。これを３回繰返し、残りのエタノールを蒸発させ、標題生成物を油として得た。
１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，アセトン−ｄ６）δ８．６３，（ｓ，１Ｈ），８．４９（ｓ，２Ｈ），８．４５（ｓ，１Ｈ），４．３０（ｍ，４Ｈ），１．３３（ｔ，６Ｈ）。
【０１４１】
工程６：［｛２−［（フェニルアミノ）カルボニル］−６−ブロモキノリン−７−イル｝（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル
ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ）中、工程５の生成物（１０９ｍｇ）に、ＥＤＣＩ（９６ｍｇ）、アニリン（０．１ｍＬ）及びヒューニッヒ塩基（０．１ｍＬ）を加えた。この溶液を室温で３時間攪拌し、濃縮後にシリカゲル上のフラッシュクロマトグラフィー（１０〜２５％ＥｔＯＡｃ／トルエンの勾配）に付し、当該アミドを得た。
ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ１０．２，（ｓ，１Ｈ），８．６（ｓ，１Ｈ），８．５（ｄ，１Ｈ），８．４５（ｄ，１Ｈ），８．４（ｓ，１Ｈ），７．４−７．０（ｍ，５Ｈ），４．３０（ｍ，４Ｈ），１．３３（ｔ，６Ｈ）。
【０１４２】
工程７：［｛２−［（フェニルアミノ）カルボニル］−６−ブロモキノリン−７−イル｝（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸（８）
［（３−ブロモ−７−シアノ−２−ナフチル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル（２．２ｇ）のジクロロメタン（５ｍＬ）及びＴＭＳＢｒ（７ｍＬ）中の溶液を一夜攪拌し、濃縮した。残渣をジクロロメタン（２×）、エタノール／水（２×）と共蒸発させ、次いで、メタノール（２０ｍＬ）に溶解した。次いで、アンモニア（３０％）を激しく攪拌しながら加え、混合物を濃縮し、メタノールと共蒸発させた（３×）。固形残渣をエーテルで洗浄し、所望の生成物を白色粉末として得た。ＭＳ（−ＥＳＩ）：ｍ／ｚ４５７．２及び４５６．３（Ｍ−１）−。
【０１４３】
下記の表は、上記の工程図と同様の方法で調製した実施例８ａに類似の誘導体を示す：
【０１４４】
【表１】
0005570223.tif 000012
【０１４５】
実施例９ａ〜９ｉ
（６−ブロモ−２−置換キノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸
以下の表の化合物は脚注に示すように、工程図５（実施例８）及び工程図６（表２の最終事項である実施例９−Ｉ）に記載した中間体から調製した。
【０１４６】
実施例９ｉ（表２）：
［（６−ブロモ−２−シアノキノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジアンモニウム
【０１４７】
【化７】
0005570223.tif 000013
【０１４８】
工程１：［（６−ブロモ−２−（（ヒドロキシイミノ）メチル）キノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル
［（６−ブロモ−２−ホルミルキノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル（５２５ｍｇ、１．２４４ｍｍｏｌ）［実施例８、工程４］のエタノール（１２ｍＬ）中の攪拌溶液に、室温で、ヒドロキシルアミン塩酸塩（１３０ｍｇ、１．８６５ｍｍｏｌ）及び酢酸ナトリウム（５０８ｍｇ、３．７３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を７０℃で１時間攪拌した。これを次いで炭酸水素ナトリウム水に注ぎ、酢酸エチル（１００ｍＬ）で抽出し、炭酸水素ナトリウム水（２×）、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、真空下濃縮して、粗［（６−ブロモ−２−［（Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］キノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチルを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ）（アセトン−ｄ６）：１１．１９（１Ｈ，ｓ），８．４４（１Ｈ，ｓ），８．３９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７２Ｈｚ），８．３６（１Ｈ，ｓ），８．２９（１Ｈ，ｓ），８．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７２Ｈｚ），４．３４−４．２６（４Ｈ，ｍ），．３６−１．２９（６Ｈ，ｍ）。
【０１４９】
工程２：［（６−ブロモ−２−シアノキノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル
［（６−ブロモ−２−［（Ｅ）−（ヒドロキシイミノ）メチル］キノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル（５２０ｍｇ、１．１８９ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（３０ｍＬ）中の攪拌溶液に、室温で、トリフェニルホスフィン（１．２４８ｇ、４．７６ｍｍｏｌ）及び四塩化炭素（２３０μＬ、２．３８３ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１００℃で１時間攪拌した。これを真空下に濃縮乾固し、フラッシュクロマトグラフィー用のシリカゲルに予め吸着させ、トルエン中の酢酸エチル（２０％〜３０％）で溶出して、［（６−ブロモ−２−シアノキノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチルを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ）（アセトン−ｄ６）：８．７２（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５２Ｈｚ），８．６３（１Ｈ，ｓ），８．４３（１Ｈ，ｓ），８．１３（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５２Ｈｚ），４．３６−４．２６（４Ｈ，ｍ），１．４１−１．２９（６Ｈ，ｍ）．ＭＳ（＋ＥＳＩ）＝４１９．０及び４２１．０。
【０１５０】
工程３：［（６−ブロモ−２−シアノキノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジアンモニウム
［（６−ブロモ−２−シアノキノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル（３７０ｍｇ、０．８８３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（９）中の攪拌溶液に、０℃でブロモトリメチルシラン（１．１５ｍＬ、８．８３ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を室温で一夜攪拌した。これを濃縮乾固し、ジクロロメタン（２×）と共蒸発させた。残渣にエタノール（５ｍＬ）を加え、これを２０分間攪拌した。これを濃縮乾固し、エタノール（２×）と共蒸発させた。残渣をメタノール（８ｍＬ）に溶解し、メタノール中の２．０Ｍアンモニア（４．４ｍＬ、８．８０ｍｍｏｌ）を滴下した。これを２０分間攪拌し、濃縮乾固し、ジエチルエーテルに懸濁した。沈殿物を濾取し、［（６−ブロモ−２−シアノキノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジアンモニウムを得た。
１Ｈ  ＮＭＲ  δ（ｐｐｍ）（ＣＤ３ＯＤ）：８．６９（１Ｈ，ｓ），８．４８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５０Ｈｚ），８．３９（１Ｈ，ｓ），７．８９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．５０Ｈｚ），ＭＳ（−ＥＳＩ）＝３６１．０及び３６３．０。
【０１５１】
【表２】
0005570223.tif 000014
【０１５２】
９ａ）実施例１、工程８同様に、［（６−ブロモ−２−メチルキノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル（実施例８、工程３）のＴＭＳＢｒ加水分解により調製。
９ｂ）６−ブロモ−５−ヨード−２−メチルキノリン（実施例８、工程２）から、臭化（（ジエトキシホスフィニル）ジフルオロメチル）亜鉛（Ｓ．Ｓｈｉｂｕｙａ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、１９９７，ｖｏｌ５３．ｎｏ３，８１５）と反応させ、次いで、実施例１、工程８同様に、ＴＭＳＢｒ加水分解することにより調製。
９ｃ）実施例１、工程８同様に、［（６−ブロモ−２−ホルミルキノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル（実施例８、工程４）のＴＭＳＢｒ加水分解により調製。
９ｄ）［（６−ブロモ−２−ホルミルキノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル（実施例８、工程４）に、−７８〜−１０℃で、ＴＨＦ中、メチルマグネシウムを付加し、次いで実施例１、工程８同様に、ＴＭＳＢｒ加水分解により調製。
９ｅ）［（６−ブロモ−２−（１−ヒドロキシエチル）キノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル（実施例９ｄ）をＥｔＯＡｃ中、室温で１．５時間、ＭｎＯ２で酸化し、次いで実施例１、工程８同様に、ＴＭＳＢｒ加水分解により調製。
９ｆ）［（６−ブロモ−２−（１−ヒドロキシエチル）キノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル（実施例９ｄ）を塩化メタンスルホニル及び大過剰のＤＢＵと、ＣＨ２Ｃｌ２中、室温で数時間反応させ、次いで実施例１、工程８同様に、ＴＭＳＢｒ加水分解により調製。
９ｇ）［（６−ブロモ−２−ホルミルキノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル（実施例８、工程４）と、ヒドロキシルアミン塩酸塩（２当量）及び酢酸ナトリウム三水和物（４当量）とを還流エタノール中５時間反応させ、次いで実施例１、工程８同様に、ＴＭＳＢｒ加水分解により調製。
９ｈ）［（６−ブロモ−２−アセチルキノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル（実施例９ｅ）とメトキシアミン塩酸塩（３当量）とをピリジン中８０℃で２時間反応させ、次いで実施例１、工程８同様に、ＴＭＳＢｒ加水分解により調製。
９ｉ）［（６−ブロモ−２−（（ヒドロキシイミノ）メチル）キノリン−７−イル）（ジフルオロ）メチル］ホスホン酸ジエチル（実施例９ｇ）をＣＨ３ＣＮ中、トリフェニルホスフィン及びＣＣｌ４と脱水反応させ（Ｓｙｎｔｈ．Ｃｏｍｍｕｎ．１９９０，２７８５）、次いでＴＭＳＢｒ加水分解（実施例９ｉ）により調製。