(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
メタコリンと製薬級のラクトースとのヒトの肺胞および下部気道へ送達するのに好適な複合粒子からなることを特徴とする喘息検出用乾燥粉末メタコリン製剤。
【請求項２】
前記粒子が０．１μｍ〜１０μｍの径を有する請求項１に記載の喘息検出用製剤。
【請求項３】
前記粒子が２μｍ〜８μｍの径を有する請求項１に記載の喘息検出用製剤。
【請求項４】
前記粒子が２μｍ〜５μｍの径を有する請求項１に記載の喘息検出用製剤。
【請求項５】
前記粒子が球状である請求項１に記載の喘息検出用製剤。
【請求項６】
前記粒子が、小さい凹部がある表面を有する請求項１に記載の喘息検出用製剤。
【請求項７】
メタコリンの量が０．１〜１０．５％重量である請求項１に記載の喘息検出用製剤。
【請求項８】
喘息検出用メタコリン製剤の調製方法であって、
（a）メタコリン、製薬級のラクトースおよび液体担体を混合して、流動性混合物を生成すること、および
（b）該流動性混合物を乾燥して、ヒトの肺胞および下部気道へ送達するのに好適なメタコリン／ラクトース複合粒子を生成する条件において複合材料を生成すること
からなることを特徴とする喘息検出用メタコリン製剤の調製方法。
【請求項９】
前記液体担体が水である請求項８に記載の喘息検出用メタコリン製剤の調製方法。
【請求項１０】
前記流動性混合物中のラクトース対メタコリンの比率が、０．００１：１０〜１０：０．０００１重量部であり、かつメタコリン濃度が０．００５〜１％重量／容量まで変化する請求項８に記載の喘息検出用メタコリン製剤の調製方法。
【請求項１１】
前記流動性混合物が噴霧乾燥される請求項８に記載の喘息検出用メタコリン製剤の調製方法。
【請求項１２】
入口における噴霧乾燥機の温度が１２０〜１７０℃の間にあり、かつ出口の温度が５０〜１００℃の間にある請求項１１に記載の喘息検出用メタコリン製剤の調製方法。
【請求項１３】
ヒスタミンと製薬級のラクトースとの複合粒子からなることを特徴とする喘息検出用乾燥粉末ヒスタミン製剤。
【請求項１４】
前記粒子が０．１μｍ〜１０μｍの径を有する請求項１３に記載の喘息検出用製剤。
【請求項１５】
前記粒子が２μｍ〜８μｍの径を有する請求項１３に記載の喘息検出用製剤。
【請求項１６】
前記粒子が２μｍ〜５μｍの径を有する請求項１３に記載の喘息検出用製剤。
【請求項１７】
前記粒子が球状である請求項１３に記載の喘息検出用製剤。
【請求項１８】
前記粒子が、小さい凹部がある表面を有する請求項１３に記載の喘息検出用製剤。
【請求項１９】
ヒスタミンの量が０．１〜１０．５％重量である請求項１３に記載の製剤。
【請求項２０】
喘息検出用ヒスタミン製剤の調製方法であって、
（a）ヒスタミン、製薬級のラクトースおよび液体担体を混合して、流動性混合物を生成すること、および
（b）該流動性混合物を乾燥して、ヒトの肺胞および下部気道へ送達するのに好適なヒスタミン／ラクトース複合粒子を生成する条件において複合材料を生成すること
からなることを特徴とする喘息検出用ヒスタミン製剤の調製方法。
【請求項２１】
前記液体担体が水である請求項２０に記載の喘息検出用ヒスタミン製剤の調製方法。
【請求項２２】
前記流動性混合物中のラクトース対ヒスタミンの比率が０．００１：１０〜１０：０．０００１重量部であり、かつヒスタミン濃度が０．００５〜１％重量／容量まで変化する請求項２０に記載の喘息検出用ヒスタミン製剤の調製方法。
【請求項２３】
前記流動性混合物が噴霧乾燥される請求項２０に記載の喘息検出用ヒスタミン製剤の調製方法。
【請求項２４】
入口における噴霧乾燥機の温度が１２０〜１７０℃の間にあり、かつ出口の温度が５０〜１００℃の間にある請求項２０に記載の喘息検出用ヒスタミン製剤の調製方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】    （発明の分野）
本発明は、喘息の検出に使用される改良製剤、新規製剤の製造方法および同製剤による喘息検出法に関する。好ましくは、同製剤は活性成分としてメタコリンまたはヒスタミンを含む。
【０００２】    （発明の背景）
喘息は、人口の５−１０%が罹患する一般的な呼吸器疾患である。この病気は、断続呼吸、咳、気道炎症、および、多くの刺激に対する過敏性によって特徴づけられる。喘息の診断は、既往歴、検診およびいくつかの検査室試験に基づいてなされる。非特異的気管支性過敏症を診断するための、最も重要な検査室における試験はメタコリン・チャレンジである。
【０００３】  メタコリン・チャレンジ（ＭＣ）は、気管支過敏を測定するのに使用される主要な試験であり、喘息診断用の重要な検査室試験である。メタコリンは非喘息患者に比べて、喘息患者により高度の気道狭さくをもたらす気管支収縮剤である。各投与後に、呼吸機能（例えば、ＦＥＶＩ）の低下がある限度（例えば、ＦＥＶＩにおける２０％低下）を越えるまで、またはＭＣの最大投与量の投下後に患者の呼吸機能を測定する。しかし、このＭＣを広く使用することは、下記を含むいくつかの理由から制限される。
１．ＭＣは技術的に実施することが難しい。（a）この試験は、噴霧器によって、被験者に最大約１０種類の異なる濃度のメタコリン（通常は、倍増の用量）を吸引させることによって実施される。メタコリンは溶液状であって、技術者は様々の濃度を調製しなければならない。これは時間がかかり、誤り易く、コストがかかる。（b）必要な装置が比較的大掛かりになる。例えば、噴霧器には、コンプレッサーまたは圧搾ガスタンクが必要となる。さらに、この装置は使い捨てではないので、毎使用後に洗浄し、滅菌しなければならない。さらに、噴霧器の出力を定期的にチェックしなければならない。（c）吸入されるメタコリンの適正量を搬送するためには、噴霧器に取り付ける装置（例えば、用量測定装置）が必要である。このような問題全てによって、ＭＣを実施することは比較的困難となる。したがって、この試験は通常、内科医の診察室ではなく、装置が完備された検査室で行われる。さらに、必要となる装置に起因して、多数の患者のスクリーニングには適しない。
２．品質管理：様々の濃度のメタコリンを調製する必要があるため、溶液調製時における間違い、および適正な用量投与の順番を間違えるなどの可能性がある。
３．安全性：溶液の調製において間違いが生じる可能性があるために、患者が高用量の投与を受け、それが重度の気管支狭さくを招く可能性がある。
【０００４】  このようなことから、前述した困難を克服する喘息検出法が従来から求められている。
【０００５】    （発明の概要）
本発明は、喘息検出用に使用される改良製剤を提供するものである。この新規な製剤は、喘息の診断となる気道狭さくを試験するために、吸入器によって直接吸入可能な粉末製剤として使用する、メタコリンまたはヒスタミンを容易に提供するものである。吸入器から放出される用量を変えることによって、様々の濃度で試験を実施することが可能である。これは、様々の濃度でいくつかの異なるメタコリン溶液を調製しなければならない、従来のメタコリンチャレンジ試験の欠点を解消するものである。従来の方法では時間がかかり、間違いが起きやすく、かつ、コストがかかる。それとは対照的に、本発明の方法では、自分で投与するか、あるいは、ほんのわずか指示してもらうことで投与が可能である。
【０００６】  一つの態様として、本発明は、乾燥した粒状形態のメタコリンまたはヒスタミンからなる喘息検出用製剤を提供する。本製剤は、メタコリンまたはヒスタミンおよび担体の混合物である不連続粒子からなる複合材料である。本発明の好ましい実施形態において本製剤の粒子は、メタコリンまたはヒスタミン／糖複合粒子（この場合、糖が担体である）である。一つの好ましい実施形態においては、メタコリンまたはヒスタミンは、薬学的に許容し得る糖、好ましくは、製薬級の糖と混合される。糖は、標準等級および製薬級の糖であることが好ましい。
【０００７】  担体によってメタコリンまたはヒスタミンがヒトの肺胞および下側の気道に搬送されるように、メタコリンまたはヒスタミンは担体と混合される。本製剤の複合粒子は、吸入によってメタコリンがヒトの肺胞および下側の気道に搬送されるのが可能となる平均粒径を有するように形成される。本製剤における粒子の大きさは、好ましくは０．１μｍから１０μｍ、さらに好ましくは２μｍから８μｍ、最も好ましくは２μｍから５μｍである。
【０００８】  他の態様において、本発明は、喘息検出用メタコリンまたはヒスタミン製剤の製造方法であって、
（a）メタコリンまたはヒスタミン、製薬級の糖および液状の担体を混合して流動性混合物を製造し、
（b）ヒトの肺胞や下側の気道に搬送するのに好適な、メタコリンまたはヒスタミン／糖複合粒子を含む複合材料を製造する条件下において、前記流動性混合物を乾燥させること
からなる製造方法を提供する。
【０００９】  一つの実施形態において、前記液状の担体は水である。
【００１０】  流動性混合物をスプレー乾燥によって乾燥することが好ましい。一つの実施形態においては、流動性混合物を乾燥前に霧状にする。流動性混合物をスプレー乾燥するための条件は、所望の粒径が生成されるように調節される。一つの実施形態では、流動性混合物を実質的に球形の粒子が形成される条件下で乾燥することが好ましい。流動性混合物を、くぼんだ面を有する球形粒子が形成される条件下で乾燥することがさらに好ましい。
【００１１】  さらに他の実施形態において、本発明は、ヒトの喘息検出法であって、（a）吸い込める大きさの粒子を含む、本発明の乾燥した粒状形態のメタコリンまたはヒスタミンの有効量をヒトに吸入させ、（b）気道狭さくを測定し、この気道狭さくが喘息の診断となることを特徴とする喘息検出法を提供する。
【００１２】  本発明の一つの利点は、ここに開示された方法によって製造される粒子は、肺胞や肺の小気道に搬送されるのによく適合しており、ヒトの咽喉または上側の気道にほとんど、もしくは、全く衝撃を与えないので、好ましくも刺激作用をもたらさないことである。
【００１３】  本発明のその他の目的、特徴および利点は、下記の詳細な説明から明らかとなろう。しかし、詳細な説明や特定の実施例は本発明の好ましい実施形態を示すものではあるが、説明のためにのみ示されているものであることを理解しなければならない。なぜならば、本発明の精神や範囲内における各種の変更、修正が、この詳細な説明から、当業者には明らかになるからである。
【００１４】    （発明の詳細な説明）
メタコリン製剤
前述したように、本発明は、喘息検出に使用される乾燥した粒状形態のメタコリンからなるメタコリン製剤を提供する。このメタコリン製剤は、ユーザーが吸入するのに好適な形態のメタコリンまたはヒスタミンおよび担体の混合物である、不連続粒子からなる複合材料である。本発明の好ましい実施形態では、本製剤の粒子は、メタコリンまたはヒスタミン／糖複合粒子（この場合、糖が担体である）である。好ましくは、糖はラクトースである。特に、本製剤は、肺の肺胞や比較的小さい気道でも運ばれるように、ヒトが吸引した空気中で移動する固形の、不連続な流動性粒子からなる。
【００１５】  このメタコリン製剤の粒径は、メタコリンを吸入した時に肺胞や下側の気道に搬送されるのに十分な大きさである、「吸い込むことのできる粒径」である。この粒子は患者の咽喉に停滞したり衝撃を与えたりしないことが好ましく、さもなければ咽喉に刺激を与えてしまうことになる。好ましくは、本製剤における粒子の大きさは、質量中央流体力学的直径（ＭＭＡＤＤ）に基づいて、０．１μｍから１０μｍであり、さらに好ましくは２μｍから８μｍ、最も好ましくは２μｍから５μｍである。
【００１６】  好ましい実施形態においては、メタコリンは薬学的に許容し得る糖と混合される。当業者であれば、選択される糖は吸入して安全でなければならないことが理解されよう。糖は、ラクトース、デキストロース、グルコース、マルトース、トレハロース、または、これらの混合物から選択されることが好ましく、最も好ましいのはラクトースである。糖は天然または合成の糖であってもよく、また、糖の類似体または誘導体を含んでいてもよい。糖は担体として作用するため、賦形剤として許容し得る糖であれば、いかなる形態のものでも使用可能である。糖はＣＰ、ＵＳＰ、ＮＦ、ＢＰ、ＥＰ、またはＢＰＣなどの製薬級のものが好ましい。また、糖は所望の製剤の形成を実現する等級のものでなければならない。糖は前処理やスプレー乾燥されていないことが好ましい。糖は「標準等級」の糖であることが好ましく、例えば、Ｆｏｒｍｏｓｔから市販されている＄１３０のＲｅｇｕｌａｒ  ＮＦ  ラクトースモノハイドレートのような等級が好ましい。従って、原料として使用される糖は、水に容易に溶解する乾燥粉末の形態を有しているものである。
【００１７】  本発明のメタコリン製剤は、
（a）メタコリン、製薬級糖および液体担体を合体して流動性混合物を製造すること、および、
（b）該流動性混合物を、ヒトの肺胞や下気道に搬送するのに好適なメタコリン／糖複合粒子を含む複合材料を製造し得る条件下において乾燥させること
を含む方法によって調製することができる。
【００１８】  メタコリンは、液体担体にたいして可溶または混和可能であれば、いかなる形態のメタコリンであってもよい。例えば、メタコリンはメタコリン塩基であってもよい。あるいは、または上記に加えて、メタコリンは塩であってもよい。メタコリンは、薬理学的に活性を有するメタコリン類縁体またはメタコリン誘導体であってもよく、あるいは、単独または他の活性物質との併用でメタコリンの作用を模倣する物質であってもよい。
【００１９】  液体担体は、流動性混合物を形成するのに十分な程度に糖およびメタコリンと混合し得る薬剤である。液体担体は、全体が均一組成であることが好ましい流動性混合物が形成されるようにメタコリンに混合し、さらに糖を溶解し得るあらゆる単独の液体または複数の液体であることができる。メタコリン塩基は一般に水との混合が可能であり、メタコリン塩製剤は一般に水に溶解可能である。さらに、ラクトースのような糖類は水に溶解が可能である。従って、メタコリンの塩基および／または塩製剤のいかんに拘わらず、液体担体は水を含んでいてよい。塩を使用する場合、液体担体はメタコリンと糖を溶解する。メタコリン塩基を使用する場合は、液体担体は糖を溶解し、液相塩基と混合し、全体に均一な溶液を作る（例えば、液体担体は液体塩基と混合が可能である）。水は好ましい液体担体であるが、水と併用して、または、水に代えて他の液体を使用してもよい。例えば、代わりの液体を単独で使用または水と併用して、液体担体中に固相物質を溶解させ、またはメタコリン塩基を分散させるのに用いてもよい。例えば、代わりの液体を単独で使用または水と併用して、液体担体中に固相物質を溶解させ、またはニコチン塩基を分散させるのに用いてもよい。
【００２０】  さらに別の好ましい実施形態においては、液体担体はアルコールと水の混合物を含んでいてよい。この水とアルコールとは、共沸混合物を形成する。メタコリン塩基製剤は、アルコールに簡単に溶解する。しかしながら、ラクトースはアルコールに可溶ではない。本実施形態に関連して、流動性混合物は比較的少ない水を含むが、それによって流動性混合物の乾燥速度および／または乾燥製剤中の水分量の乾燥速度を助長するようになっていてもよい。
【００２１】  好ましくはアルコールは第一アルコールである。さらに、アルコールは好ましくは低級アルキルアルコール（すなわち、Ｃ１〜Ｃ５）である。メタコリン塩基溶液用溶媒として使用することができる特に好ましいアルコールはエタノールである。エタノールはCP級であってもよいが、好ましくはUSP級である。しかしながら、できれば塩基性溶液中におけるアルコールの使用は回避することが好ましいことが理解されよう。
【００２２】  液体担体は、アルコールが共溶媒として必要な場合、アルコールに比べ過剰量の水を含むことが好ましい。このような形態においては、混合物は小さい割合のアルコールと大きい割合の水とを含むことが好ましい。アルコールが必要な場合、液体担体におけるアルコールの水に対する比は約１：１〜１：１０であり、好ましくは約１：２〜１：８であり、さらに好ましくは約
【００２３】  液体担体（例えば水）をメタコリンと混合して液体混合物を生成し、次にこの混合物に糖を添加することができる。従って、糖とメタコリン塩とを水（または他の適当な液体担体）に溶解して流動性混合物を形成することができる。別法として、糖を水に溶解し、メタコリン塩基をその水と混合して流動性混合物を形成してもよい。前記乾燥、流動性混合物を生成するために、メタコリン、液体担体および糖はどのような順序で合体してもよいことが理解されよう。
【００２４】  本発明の好ましい実施形態においては、メタコリン化合物を水に添加し、比較的均一な溶液になるまで混合する。糖は水に溶解する。その後、水に溶解させたメタコリンから成る混合物をこの糖水溶液に添加し、流動性製剤が生成されるまで混合する。混合は、従来技術で既知の如何なる手段で実行してもよい。
【００２５】  用いる液体混合物の量は流動性混合物を生成するのに十分な量である。好ましい実施形態に関して言えば、この混合物はBuchi-B191 Spray Dryerのような噴霧乾燥機に投入直前に微細に分割する（例えば、この流動性混合物を小孔を通過させる）。この小孔は、粒径の形成が本発明の好ましい範囲内で起こることを可能にする大きさを有する。望ましい孔径は当業者には直ちに明らかであろう。
【００２６】  従って、この流動性混合物は、好ましくは、簡単に微細に分割が可能な、液体等のような形態である。ある実施形態では、この流動性混合物は、乾燥前に微粒噴霧器（好ましくは、回転式微粒噴霧器）を通過させることによって微細に分割することが可能である。
【００２７】  流動性混合物に溶解するメタコリンの糖に対する比は、飛沫乾燥製剤におけるメタコリンの濃度に応じて変動する。製剤処理上の制限から、この分野では、通常は担体が活性成分に比べて粉末製剤重量の実質的部分を占める。使用される糖の量はメタコリンの量に比べ、飛沫乾燥製剤が従来技術で既知の乾燥粉末吸引器を使用することが可能となる程度に十分なものでなければならない。従って、流動性混合物におけるメタコリンの糖に対する比は変化させることができるが、重量部で、好ましくは約０．００１：１０〜約１０：０．００１、さらに好ましくは約０．００５：１０〜約１．５：１０、もっとも好ましくは約０．０５：１０〜約１：１０である。さらに、流動性混合物におけるメタコリンの濃度は変化させることができるが、重量／体積（ｗ／ｖ）（すなわちｇ／１００ｍＬ）として、好ましくは約０．００５〜約１、さらに好ましくは約０．０１〜約０．６、もっとも好ましくは約０．０１〜約０．３である。
【００２８】  流動性混合物は肺の肺胞や小気道への移動が可能になる大きさを有する粒子を生成するよう乾燥させる。粒子は、粒子の流体力学的直径中央値（MMAD）に基づいて、好ましくは約０．１μｍ〜約１０μｍ、さらに好ましくは約２μｍ〜約８μｍ、もっとも好ましくは約２．０μｍ〜約５μｍの粒径を有する。この流動性混合物は、噴霧乾燥機を用いるなどして急速に乾燥させるのが好ましい。しかしながら、適当な大きさの粒子を生成することが可能な他の乾燥法（例えば、流動床乾燥の使用等）を用いることも可能である。
【００２９】  流動性液体は、好ましくは球形ないし実質的に球形の粒子を生成するよう急速に乾燥させる。このような粒子は、回転式微粒噴霧器を用いて、流動性液体を噴霧乾燥機に投入することによって、または流動性液体を、Buchi-B191 Spray Dryerのような回転式微粒噴霧器を有さない噴霧乾燥機の適当な大きさの小孔を通過させることによって形成することができる。
【００３０】  噴霧乾燥機の作動条件は、肺の肺胞や小気道に移動可能な程度の大きさの粒子を生成するように調節される。回転式微粒噴霧器を用いる場合、回転式微粒噴霧器は、液体供給速度を約２〜約２０ｍＬ／分、さらに好ましくは２〜約１０ｍＬ／分、もっとも好ましくは約２〜約５ｍＬ／分とするよう作動させることができる。回転式微粒噴霧器は、約１０，０００〜約３０，０００ｒｐｍ、さらに好ましくは約１５，０００〜約２５，０００ｒｐｍ、もっとも好ましくは約２０，０００〜約２５，０００ｒｐｍで作動させることができる。
【００３１】  噴霧乾燥機は、液体担体を急速に放出させるのには十分であるが、糖とメタコリンの温度をこれら化合物が分解し始める温度までは上昇させることのないような温度で作動させる。従って、噴霧乾燥機は、好ましくは約１２０〜約２１０℃、より好ましくは約１２０〜約１７０℃、さらに好ましくは約１６０℃の入口温度において、かつ、好ましくは約５０〜約１３０℃、さらに好ましくは約５０〜約１００℃、さらに好ましくは約７０〜約１００℃、もっとも好ましくは約８１℃の出口温度にて作動させる。
【００３２】  製剤粒子は、球形または他の流体力学的形態のものである。このような粒子は、バルクで保存された場合に凝集する傾向を有さない。さらに、噴霧乾燥工程時において液体担体を十分急速に放出することによって平坦でない、あるいは「凹（窪み）付き」表面を有する製剤粒子を生成してもよい。この非平坦表面は粒子が空中を移動中に渦を起こし、それによって粒子に流体力学的浮遊力を供給する。これはユーザーが吸引する空気中における粒子の浮遊、滞在を助長することになり、その結果、本製剤粒子の、肺胞、小気道への移動能力を向上させる。
【００３３】  最終製品（メタコリン・ラクトース複合体）は、所期の各種濃度のメタコリンを含む。その濃度は、好ましくは約０．１〜約２０％（重量／重量）、さらに好ましくは約０．１〜約１０．５％、もっとも好ましくは約０．５〜約１０％である。
【００３４】ヒスタミン製剤
前述のメタコリン製剤調製法はヒスタミンの乾燥粒状製剤の調製にも使用が可能である。
【００３５】喘息検出法
本発明の新規メタコリンおよびヒスタミン製剤は、喘息の検出のための使用が可能である。従って、本発明は、ヒトにおける喘息検出法であって、（a）ヒトに吸引可能な大きさの粒子を含む乾燥粒状剤形のメタコリンまたはヒスタミンの有効量を気道に吸引させること、および（b）気道狭さくを測定することを含み、気道の狭さくが喘息の診断となることを特徴とする喘息検出法を提供する。
【００３６】  「呼吸可能な大きさの粒状物」とは、ヒトの肺の気道に吸引されることは可能であるが、ヒトの口内や咽喉には付着しない粒子を意味する。この粒子は、MMADに基づいて規定すると、好ましくは０．１μｍ〜１０μｍ、さらに好ましくは２μｍ〜８μｍ、もっとも好ましくは２μｍ〜５μｍである。好ましくは、このメタコリンまたはヒスタミン製剤は製薬級の糖、さらに好ましくはラクトースを含む。
【００３７】  このメタコリンまたはヒスタミン製剤は、小型、携帯用で、簡便な慣用の乾燥粉末吸引器によって投与が可能である。筐体、患者に空気流を供給するよう設計された空気導管および薬剤を空気導管へ導く導入手段を有する呼吸活性化吸引器が一般に従来技術において既知のものであるが、これらについては、Wetterlinの米国特許第4,524,769号、Bell et al., J. Pharmaceut. Sci. 60:1559, 1971、およびNewman et al., Eur. Res. J. 2:247, 1989を参照されたい。適当な吸引器の実例としては、SPINHALER（商品名）、TURHALER（同）、ROTAHALER（同）、CYCLOHALER（同）、INHALATOR（同）、および、DISKHALER（同）が挙げられる。呼吸活性化吸引器は、加圧式エロゾール吸引器とは以下の点で異なる。すなわち、呼吸活性化吸引器はユーザーの吸気によって活性化されることによって薬剤が安定的に肺の深部領域にまで引き込まれるという点である。
【００３８】  本発明の方法を実施するためには、被試験者は呼吸活性化吸引器から前記メタコリンまたはヒスタミン製剤を吸引する。好ましくは、被験者は一連の試験を受け、その各試験においてメタコリンまたはヒスタミンの用量が次第に高められる。各試験後に被験者は、好ましくは従来技術で既知の技法により１秒当り強制呼気容量（FEV1）を測定することによって気道狭さくを検出される。気道狭さくが検出された場合、その被験者は喘息にかかっていることになる。一般に、基礎コントロール値と比較してFEV1値において２０％以上の減少がある場合、その被験者は喘息にかかっている。
【００３９】  下記の実施例は、本発明を何ら限定するものではなく、本発明を例示するためのものである。
【００４０】（実施例）
（実施例１）
（メタコリン製剤調製のための予備試験）
１）  受容した材料の特性決定
受容した材料について走査型電子顕微鏡（SEM）を用いてその特性を決定した。これによって、噴霧乾燥による好適な複合剤形成条件を定めるのに有用な情報が得られた。
２）  ２−５μｍ粒子のメタコリン／ラクトース複合粉末を生成するための実行試験
a）ラクトースに対し５重量％メタコリンの薬剤粉末
初期の実験から、噴霧乾燥法によって水溶液から２〜５μｍの粒径範囲を有する球状薬剤粒子を生成することが可能であることが示された。噴霧操作条件の調節は、粒径範囲の厳密な規定を可能にする。寸法要求を満たすためには、小滴の大きさ分布は狭く、かつ乾燥前の凝集を防ぐために滞在時間は短くなければならない。回転式微粒噴霧器を備えた検査室球体器を用いて実験を行った。結果を表１に示す。粒径はSEMによる推定値であることに注意されたい。熱重量分析（TGA）またはX線分析またはレーザー回折を用いたならばさらに厳密な分析が実行可能であろう。
３）  適切な噴霧乾燥条件の決定
乾燥温度、微粒噴霧器回転輪の回転速度、溶液の供給速度、および溶質の濃度を要求される仕様に従った複合粉末を生成するよう実験的に定めた。結果を表１と２にまとめる。
【００４１】（実施例２）
メタコリン製剤の調製
表３に示すように、いくつかのメタコリン製剤を調製した。表３に挙げた量のメタコリンとラクトースを、４８５グラムの水に加えた。この混合物を、溶液が透明になるまで攪拌した（約５分）。この混合物をBuchi Mini Spray Dryer-B191により気流速度６００ｍｌ／分において噴霧乾燥した。入口、出口の温度は表３に示す通りである。このメタコリンとラクトースの溶液を表３に示す流速設定で乾燥器に供給した。結果を、表３に挙げる。
【００４２】  メタコリン−ラクトース複合製剤におけるメタコリン含量の定量を、従来技術で既知の標準法を用いて毛管電気泳動にて行った（検出波長=２１４ｎｍ）。ラクトース  メタコリンにおけるアセチル-β-メタコリン・クロリドを下記のパラメータを用いて定量した。
カラム：９７ｃｍ長の被覆されていない内径５０μｍのカラム
波長：２１４ｎｍ
間接検出
注入：５秒
電圧：３０kV
緩衝液：２０ｍＭイミダゾール、ｐＨ３．０
【００４３】  毛管は注入前に２分間緩衝液で濯いだ。緩衝液は５０ｍｌの水に１３６ｍｇのイミダゾールを溶解して調製した。次に、ｐＨを０．５Ｎ  ＨＣｌによって３．０に調整した。次に、容積を水によって１００ｍｌに調整した。次に、この緩衝液を０．４５μｍフィルターを用いて濾過した。アセチル-β-メタコリン・クロリド標準液（１ｍｇ／ｍＬ）を、１０００ｍＬの水に１００ｍｇの標準物を投入することによって調製した。
【００４４】  粒径はＳＥＭ顕微鏡検査によって求めた。注意すべきことは、表３に挙げた粒径は製剤中の全ての粒径がこれ以下であるという値の推定値を示すものである。レーザー回折法を用いたさらに厳密な測定を行ったならば、粒子の流体力学的直径の中央値（MMAD）は、約２ミクロンと約５ミクロンの間にあることが示されるであろう。
【００４５】  メタコリン製剤は、最終製剤においてメタコリンが０．５、２．０、５．０および１０％重量／重量となるよう調製した（表３の実施例番号１３-１６を参照）。これらの製剤は全て良好な流動性を示した。メタコリン・ラクトース複合製剤において、約１０％よりも多い量（すなわち、約１０．２５％を越える量）のメタコリン含有量を有する実施例１２は、表３に示す条件下で、湿っているか、あるいは極めて湿っている化合物を生成した。これは、乾燥粉末吸引器に対する望ましい流動性を有していなかった。条件を変えることによって、それより高濃度のメタコリンにおいても、乾燥した最終製剤を生成することが可能である。
【００４６】  噴霧乾燥機のある範囲の入口・出口温度は有効なものであるが、３５％の溶液供給速度においては、噴霧乾燥機の最適入口温度は１６０℃であり、一方、最適出口温度は８１℃であった。
【００４７】  以上本発明を現在のところ好ましい実施例と考えられるものを参照しながら説明してきたが、本発明は上に開示された実施例に限定されるものではないことは理解されるべきである。逆に、本発明は、請求の範囲の精神と範囲内に含まれる様々の修正や等価的な配置をも包含カバーするものである。
【００４８】  上記した全ての刊行物、特許および特許出願は、それらを引用することによって、それら刊行物、特許または特許出願それぞれの全体が特異的ならびに個別的に含められることを意図した場合と同程度に本出願に含められるものとする。
［表１］表１  適切な噴霧乾燥条件の決定用試験マトリックス
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＊ＳＥＭ顕微鏡写真から評価
【表２】
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【表３】
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