(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
塩形態の式：
【化３１】
0005528817.tif 000078
によって表される化合物であって、対イオンが薬学的に許容される酸の陰イオンである、化合物。
【請求項２】
前記対イオンが、アセタート、ベンゼンスルホナート、ベンゾアート、ブロミド、ブチラート、クロリド、ｐ−クロロベンゾアート、シトラート、ジフェニルアセタート、ホルマート、フッ化物、ｏ−ヒドロキシベンゾアート、ｐ−ヒドロキシベンゾアート、１−ヒドロキシナフタレン−２−カルボキシラート、３−ヒドロキシナフタレン−２−カルボキシラート、ヨウ化物、ラクタート、マラート、マレアート、メタンスルホナート、ニトラート、ホスファート、プロピオナート、スクシナート、スルファート、タルトラート、トリフルオロアセタートおよびトリフェニルアセタートから選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記対イオンが、ブロミド、ヨウ化物およびトリフルオロアセタートから選択される、請求項２に記載の化合物。
【請求項４】
請求項１に記載の化合物および薬学的に許容されるキャリアを含む、医薬組成物。
【請求項５】
前記化合物は微粉化された形態である、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
第二の治療薬をさらに含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項７】
前記第二の治療薬は、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ステロイド系抗炎症薬、ホスホジエステラーゼ−４阻害剤およびこれらの組み合わせから選択される、請求項６に記載の組成物。
【請求項８】
β２アドレナリン受容体アゴニストおよびステロイド系抗炎症薬をさらに含む、請求項４に記載の組成物。
【請求項９】
薬物の製造のための請求項１に記載の化合物の使用。
【請求項１０】
前記薬物は肺障害の処置に有用である、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】
前記肺障害は慢性閉塞性肺疾患または喘息である、請求項１０に記載の使用。
【請求項１２】
前記薬物は気管支を拡張させるのに有用である、請求項９に記載の使用。
【請求項１３】
前記薬物は哺乳動物のムスカリン受容体に拮抗するのに有用である、請求項９に記載の使用。
【請求項１４】
請求項１に記載の化合物のリサーチツールとしての使用。
【請求項１５】
請求項１に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項１６】
肺障害を処置するための、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１７】
前記肺障害は慢性閉塞性肺疾患または喘息である、請求項１６に記載の組成物。
【請求項１８】
気管支を拡張させるための、請求項１５に記載の組成物。
【請求項１９】
哺乳動物のムスカリン受容体に拮抗するための、請求項１５に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ムスカリン受容体アンタゴニスト活性または抗コリン作用を持つ第四級アンモニウム化合物に関する。本発明はさらに、そうした化合物を含む医薬組成物、そうした化合物の調製プロセスおよび肺障害の処置に使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ：ｃｈｒｏｎｉｃ  ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ  ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  ｄｉｓｅａｓｅ）および喘息などの肺障害または呼吸器障害の患者は世界全体で数百万人にのぼり、これらの障害は、最も罹患率が高く、死亡の主要な原因になっている。
【０００３】
ムスカリン受容体アンタゴニストは気管支保護作用があることが知られており、したがって、その化合物は、ＣＯＰＤおよび喘息などの呼吸器障害の処置に有用である。ムスカリン受容体アンタゴニストをそうした障害の処置に使用する場合、通常、吸入で投与する。しかしながら、吸入で投与しても、多くの場合、ムスカリン受容体アンタゴニストのかなりの量が全身循環に吸収され、口内乾燥、散瞳および心血管系の副作用などの全身性副作用が引き起こされる。
【０００４】
さらに、吸入されるムスカリン受容体アンタゴニストの多くは、作用持続時間が比較的短く、１日数回投与する必要がある。そうした連日反復投与の方法は、不便であるばかりでなく、求められる頻回の投薬スケジュールに対する患者の服薬不遵守が原因で、処置が不十分になるリスクが高い。
【０００５】
そのため、新しいムスカリン受容体アンタゴニストが望まれている。特に、高度の効力を持ち、吸入での投与の際に全身性副作用が少ないほか、作用持続時間が長いため１日１回あるいは週１回の投与でも構わないムスカリン受容体アンタゴニストが望まれている。さらに、受容体に対する親和性が高く、受容体の半減期が長いムスカリン受容体アンタゴニストも求められている。そうした化合物は、ＣＯＰＤおよび喘息などの肺障害の処置に特に有効であると同時に、口内乾燥および便秘などの副作用の低減または解消に有効であると期待されている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、例えば、以下を提供する：
（項目１）
塩形態または双性イオン形態の式Ｉ：
【化５７−１】
0005528817.tif 000002
の化合物であって、式中：
ａおよびｂは独立に０または１〜５の整数であり；
Ｒ１およびＲ２は各々独立に、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、シアノ、ハロ、−ＯＲａ、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ、−ＳＲａ、−Ｓ（Ｏ）Ｒａ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒａおよび−ＮＲｂＲｃから選択され；Ｒａは各々独立に、水素、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニルおよび−Ｃ３〜６シクロアルキルから選択され；ＲｂおよびＲｃは各々独立に、水素、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニルまたは−Ｃ３〜６シクロアルキルから選択され；またはＲｂおよびＲｃは、それらが結合している窒素原子と一緒になってＣ３〜６複素環を形成し；または隣接する２つのＲ１基または隣接する２つのＲ２基は、一緒になって−Ｃ３〜６アルキレン、−Ｃ２〜４アルキレン−Ｏ−または−Ｏ−Ｃ１〜４アルキレン−Ｏ−を形成し；
Ｒ３は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３ａＲ３ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＨ２ＮＨ２から選択され；Ｒ３ａおよびＲ３ｂは独立に、水素、−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ２〜６アルケニル、−Ｃ２〜６アルキニル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、−Ｃ６〜１０アリール、−Ｃ２〜９ヘテロアリール、−Ｃ３〜６複素環および−（ＣＨ２）１〜２−Ｒ３ｃから選択され、Ｒ３ｃは、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、−Ｃ６〜１０アリール、−Ｃ２〜９ヘテロアリールおよび−Ｃ３〜６複素環から選択され；またはＲ３ａおよびＲ３ｂは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、窒素、酸素または硫黄から選択されるさらに１個のヘテロ原子を任意に含むＣ３〜６複素環を形成し；
ｃは０または１〜３の整数であり；
Ｒ４は各々独立に、フルオロまたは−Ｃ１〜４アルキルであり；
ｄは１または２であり、
【化５７−２】
0005528817.tif 000003
は任意の二重結合を示し；
Ｒ５は、−Ｃ１〜６アルキル、−ＣＨ２−Ｃ２〜６アルケニル、−ＣＨ２−Ｃ２〜６アルキニルおよび−ＣＨ２ＣＯＲ５ａから選択され；Ｒ５ａは、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキルおよび−ＮＲ５ｂＲ５ｃから選択され；Ｒ５ｂおよびＲ５ｃは独立に、Ｈおよび−Ｃ１〜６アルキルから選択され；
Ｑは、−Ｃ０〜５アルキレン−Ｑ’−Ｃ０〜１アルキレン−であり、Ｑ’は、−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＳＯ２−ＮＲＱ１−、−ＮＲＱ１−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＱ１Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＱ１−、ＮＲＱ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲＱ３−、−ＮＲＱ２−Ｃ（Ｓ）−ＮＲＱ３−、−Ｃ＝Ｎ−Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−および−Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−ＲＱ４）−から選択され、ＲＱ１は、水素または−Ｃ１〜４アルキルであり、ＲＱ２およびＲＱ３は独立に、水素、−Ｃ１〜４アルキルおよび−Ｃ３〜６シクロアルキルから選択され、またはＲＱ２およびＲＱ３は一緒になって−Ｃ２〜４アルキレンまたは−Ｃ２〜３アルケニレンを形成し、ＲＱ４は、−Ｃ１〜４アルキルまたはベンジルであり；
ｅは０または１〜５の整数であり；
Ｒ６は各々独立に、ハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ０〜２アルキレン−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜４アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２および−Ｎ＋（Ｏ）Ｏから選択され；
Ｒ１〜３、Ｒ３ａ〜３ｃ、Ｒ４〜６およびＲａ〜Ｒｃにおけるアルキル基、アルケニル基、アルキレン基、アルキニル基およびシクロアルキル基はそれぞれ任意に、１〜５個のフルオロ原子で置換されており；Ｒ５におけるアルキル基、アルケニル基およびアルキニル基はそれぞれ任意に、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、−ＯＨおよびフェニルから独立に選択される１〜２個の置換基で置換されており；Ｒ１〜２、Ｒ３ａ〜３ｃおよびＲａ〜ｃにおけるシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基および複素環基はそれぞれ任意に、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、シアノ、ハロ、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ（Ｏ）（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｃ１〜４アルキル）、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜４アルキル）および−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されており、アルキル基、アルケニル基およびアルキニル基はそれぞれ任意に、１〜５個のフルオロ置換基で置換されており；Ｑにおける−ＣＨ２−基はそれぞれ任意に、−Ｃ１〜２アルキル、−ＯＨおよびフルオロから独立に選択される１個または２個の置換基で置換されている、化合物
またはその薬学的に許容される塩。
（項目２）
ａは０または１である、項目１に記載の化合物。
（項目３）
ｂは０である、項目１に記載の化合物。
（項目４）
Ｒ３は−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３ａＲ３ｂである、項目１に記載の化合物。
（項目５）
Ｒ３ａおよびＲ３ｂは独立に、水素および−Ｃ１〜４アルキルから選択される、項目４に記載の化合物。
（項目６）
Ｒ３ａおよびＲ３ｂは水素である、項目５に記載の化合物。
（項目７）
ｃは０である、項目１に記載の化合物。
（項目８）
ａおよびｂは０である、項目７に記載の化合物。
（項目９）
ａは１であり、ｂは０である、項目７に記載の化合物。
（項目１０）
ｄは１であり、上記二重結合が存在しない、項目１に記載の化合物。
（項目１１）
ｄは２であり、上記二重結合が存在する、項目１に記載の化合物。
（項目１２）
Ｒ５は−Ｃ１〜６アルキルである、項目１に記載の化合物。
（項目１３）
Ｒ５は−ＣＨ３である、項目１２に記載の化合物。
（項目１４）
−Ｃ０〜５アルキレン−Ｑ’−Ｃ０〜１アルキレン−は、−Ｃ１〜３アルキレン−Ｑ’−Ｃ０〜１アルキレン−である、項目１に記載の化合物。
（項目１５）
−Ｃ０〜５アルキレン−Ｑ’−Ｃ０〜１アルキレン−は、−Ｃ３アルキレン−Ｑ’−Ｃ０〜１アルキレン−である、項目１４に記載の化合物。
（項目１６）
Ｑ’は、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＱ１Ｃ（Ｏ）−、−ＮＲＱ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲＱ３−、−ＮＲＱ２−Ｃ（Ｓ）−ＮＲＱ３−および−Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−ＲＱ４）−から選択される、項目１に記載の化合物。
（項目１７）
Ｑ’は−ＮＲＱ１Ｃ（Ｏ）−であり、ＲＱ１は水素である、項目１６に記載の化合物。
（項目１８）
Ｑ’は−ＮＲＱ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲＱ３−および−ＮＲＱ２−Ｃ（Ｓ）−ＮＲＱ３−から選択され、ＲＱ２およびＲＱ３は水素である、項目１６に記載の化合物。
（項目１９）
Ｑ’は−Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−ＲＱ４）−であり、ＲＱ４は−ＣＨ３またはベンジルである、項目１６に記載の化合物。
（項目２０）
Ｑ’は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−および−ＯＣ（Ｏ）−から選択される、項目１６に記載の化合物。
（項目２１）
−Ｃ０〜５アルキレン−Ｑ’−Ｃ０〜１アルキレン−は、−（ＣＨ２）２、−、−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）５−、−（ＣＨ２）６−、−（ＣＨ２）２−ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）２−Ｃ≡Ｃ−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）３−Ｏ−、−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−Ｏ−、−（ＣＨ２）３−Ｏ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）３−Ｓ−、−（ＣＨ２）３−Ｓ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）３−ＳＯ２−、−（ＣＨ２）３−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）２−ＯＣ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）２−ＮＲＱ１Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）ＮＲＱ１−ＣＨ２、−（ＣＨ２）２−ＮＲＱ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲＱ３−、−ＣＨ２−Ｃ＝Ｎ−Ｏ−、−（ＣＨ２）２−Ｓ−Ｓ−および−（ＣＨ２）３−Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−ＲＱ４）−から選択され、式中、ＲＱ１、ＲＱ２およびＲＱ３は水素であり、ＲＱ４は−Ｃ１〜４アルキルまたはベンジルである、項目１に記載の化合物。
（項目２２）
−Ｃ０〜５アルキレン−Ｑ’−Ｃ０〜１アルキレン−は、−Ｃ０〜５アルキレン−Ｑ’−である、項目１に記載の化合物。
（項目２３）
ｅは０である、項目１に記載の化合物。
（項目２４）
ｅは１である、項目１に記載の化合物。
（項目２５）
Ｒ６は、ハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜４アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２および−Ｎ＋（Ｏ）Ｏから選択される、項目２４に記載の化合物。
（項目２６）
ｅは２であり、Ｒ６の１個はハロであり、第二のＲ６はハロおよび−Ｏ−Ｃ１〜４アルキルから選択される、項目１に記載の化合物。
（項目２７）
式Ｉ’：
【化５８】
0005528817.tif 000004
を持つ化合物であって、式中、Ｘは薬学的に許容される酸の陰イオンである、項目１に記載の化合物。
（項目２８）
Ｘは、アセタート、ベンゼンスルホナート、ベンゾアート、ブロミド、ブチラート、クロリド、ｐ−クロロベンゾアート、シトラート、ジフェニルアセタート、ホルマート、フッ化物、ｏ−ヒドロキシベンゾアート、ｐ−ヒドロキシベンゾアート、１−ヒドロキシナフタレン−２−カルボキシラート、３−ヒドロキシナフタレン−２−カルボキシラート、ヨウ化物、ラクタート、マラート、マレアート、メタンスルホナート、ニトラート、ホスファート、プロピオナート、スクシナート、スルファート、タルトラート、トリフルオロアセタートおよびトリフェニルアセタートから選択される、項目２７に記載の化合物。
（項目２９）
Ｘは、ブロミド、ヨウ化物およびトリフルオロアセタートから選択される、項目２８に記載の化合物。
（項目３０）
以下の式Ｉ’ａを持つ、項目２７に記載の化合物。
【化５９】
0005528817.tif 000005
（項目３１）
以下の式Ｉ’ｂを持つ、項目３０に記載の化合物。
【化６０】
0005528817.tif 000006
（項目３２）
式Ｉ’ｄ：
【化６１】
0005528817.tif 000007
を持つ化合物であって、ａおよびｂは独立に、０または１であり；Ｒ１およびＲ２はそれぞれ−ＯＲａであり、式中、Ｒａは水素であり；
Ｑは、−（ＣＨ２）２−、−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）５−、−（ＣＨ２）６−、−（ＣＨ２）２−ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）２−Ｃ≡Ｃ−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）３−Ｏ−、−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−Ｏ−、−（ＣＨ２）３−Ｏ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）３−Ｓ−、−（ＣＨ２）３−Ｓ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）３−ＳＯ２−、−（ＣＨ２）３−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）２ＯＣ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）２−ＮＲＱ１Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）ＮＲＱ１−ＣＨ２、−（ＣＨ２）２−ＮＲＱ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲＱ３−、−ＣＨ２−Ｃ＝Ｎ−Ｏ−、−（ＣＨ２）２−Ｓ−Ｓ−および−（ＣＨ２）３−Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−ＲＱ４）−から選択され、ＲＱ１、ＲＱ２およびＲＱ３は水素であり、ＲＱ４は−Ｃ１〜４アルキルまたはベンジルであり；ｅは０、１または２であり；Ｒ６は各々独立に、ハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜４アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２および−Ｎ＋（Ｏ）Ｏから選択される、項目３１に記載の化合物。
（項目３３）
Ｒ６における上記アルキルは任意に３個のフルオロ原子で置換されており；Ｑにおける−ＣＨ２−基の１個は任意に−ＯＨで置換されている、項目３２に記載の化合物。
（項目３４）
式Ｉ’ｅ：
【化６２】
0005528817.tif 000008
を持つ化合物であって、ａは０または１であり；Ｒ１は−ＯＲａであり、式中、Ｒａは水素であり；Ｑは、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）２−ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）２−Ｃ≡Ｃ−、−（ＣＨ２）３−Ｏ−、−（ＣＨ２）３−Ｓ−、−（ＣＨ２）３−Ｃ（Ｏ）−および−（ＣＨ２）２ＯＣ（Ｏ）−から選択され；ｅは０、１または２であり；Ｒ６は各々独立に、ハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−ＯＨおよび−Ｓ−Ｃ１〜４アルキルから選択される、項目３２に記載の化合物。
（項目３５）
任意に置換されていない、項目３４に記載の化合物。
（項目３６）
以下の式Ｉ’ｃを持つ、項目２７に記載の化合物。
【化６３】
0005528817.tif 000009
（項目３７）
式Ｉ’’ａ：
【化６４】
0005528817.tif 000010
を持つ化合物であって、式中、Ｘ−は薬学的に許容される酸の陰イオンである、項目１に記載の化合物。
（項目３８）
項目１に記載の化合物および薬学的に許容されるキャリアを含む、医薬組成物。
（項目３９）
上記化合物は微粉化された形態である、項目３８に記載の組成物。
（項目４０）
第二の治療薬をさらに含む、項目３８に記載の組成物。
（項目４１）
上記第二の治療薬は、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ステロイド系抗炎症薬、ホスホジエステラーゼ−４阻害剤およびこれらの組み合わせから選択される、項目４０に記載の組成物。
（項目４２）
β２アドレナリン受容体アゴニストおよびステロイド系抗炎症薬をさらに含む、項目３８に記載の組成物。
（項目４３）
項目１に記載の化合物を調製するプロセスであって、
（ａ）式ＩＩ：
【化６５】
0005528817.tif 000011
の化合物を式ＩＩＩ：
【化６６】
0005528817.tif 000012
の化合物と反応させて、式中、Ｌ１は脱離基を表し、式ＩＶ：
【化６７】
0005528817.tif 000013
の化合物を生成し、式ＩＶの化合物をＲ５基を含む有機基質と反応させるプロセス；または
（ｂ）式Ｖ：
【化６８】
0005528817.tif 000014
の化合物を式ＩＩＩの化合物と反応させるプロセス；または
（ｃ）式Ｖの化合物を式ＶＩ：
【化６９】
0005528817.tif 000015
の化合物と反応させ、式中、Ｌ２は脱離基を表し、式ＶＩＩ：
【化７０】
0005528817.tif 000016
の化合物を生成し、式ＶＩＩの化合物を式ＶＩＩＩ：
【化７１】
0005528817.tif 000017
の化合物と反応させ、式中、Ｌ３は脱離基を表し、Ｑ’、ＡおよびＢは：
【化７２】
0005528817.tif 000018
と定義され、塩形態または双性イオン形態の上記生成物を回収するプロセス
を含む、プロセス。
（項目４４）
項目４３に記載のプロセスにより調製される、化合物。
（項目４５）
薬物の製造のための項目１に記載の化合物の使用。
（項目４６）
上記薬物は肺障害の処置に有用である、項目４５に記載の使用。
（項目４７）
上記肺障害は慢性閉塞性肺疾患または喘息である、項目４６に記載の使用。
（項目４８）
上記薬物は気管支を拡張させるのに有用である、項目４５に記載の使用。
（項目４９）
上記薬物は哺乳動物のムスカリン受容体に拮抗するのに有用である、項目４５に記載の使用。
（項目５０）
項目１に記載の化合物のリサーチツールとしての使用。
本発明は、ムスカリン受容体アンタゴニスト活性または抗コリン作用を持つ新規な第四級アンモニウム化合物を提供する。本発明の化合物は、様々な特性の中でも特に関連化合物と比較してムスカリン受容体サブタイプｈＭ２およびｈＭ３に対する結合親和性の向上、受容体の半減期の長期化、治療ウインドウの拡大、あるいは、効力の向上が認められている。したがって、本発明の化合物は、肺障害を処置する治療薬として有用かつ有利であると期待されている。
【０００７】
本発明の一態様は、塩形態または双性イオン形態の式Ｉ：
【０００８】
【化１−１】
0005528817.tif 000019
を持つ化合物であって、式中：
ａおよびｂは独立に０または１〜５の整数であり；
Ｒ１およびＲ２は各々独立に、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、シアノ、ハロ、−ＯＲａ、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ、−ＳＲａ、−Ｓ（Ｏ）Ｒａ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒａおよび−ＮＲｂＲｃから選択され；Ｒａは各々独立に、水素、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニルおよび−Ｃ３〜６シクロアルキルから選択され；ＲｂおよびＲｃは各々独立に、水素、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニルまたは−Ｃ３〜６シクロアルキルから選択され；またはＲｂおよびＲｃは、それらが結合している窒素原子と一緒になってＣ３〜６複素環を形成し；または隣接する２つのＲ１基または隣接する２つのＲ２基は、一緒になって−Ｃ３〜６アルキレン、−Ｃ２〜４アルキレン−Ｏ−または−Ｏ−Ｃ１〜４アルキレン−Ｏ−を形成し；
Ｒ３は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３ａＲ３ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＨ２ＮＨ２から選択され；
Ｒ３ａおよびＲ３ｂは独立に、水素、−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ２〜６アルケニル、−Ｃ２〜６アルキニル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、−Ｃ６〜１０アリール、−Ｃ２〜９ヘテロアリール、−Ｃ３〜６複素環および−（ＣＨ２）１〜２−Ｒ３ｃから選択され、Ｒ３ｃは、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、−Ｃ６〜１０アリール、−Ｃ２〜９ヘテロアリールおよび−Ｃ３〜６複素環から選択され；またはＲ３ａおよびＲ３ｂは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、窒素、酸素または硫黄から選択されるさらに１個のヘテロ原子を任意に含むＣ３〜６複素環を形成し；
ｃは０または１〜３の整数であり；
Ｒ４は各々独立に、フルオロまたは−Ｃ１〜４アルキルであり；
ｄは１または２であり、
【０００９】
【化１−２】
0005528817.tif 000020
は任意の二重結合を示し；
Ｒ５は、−Ｃ１〜６アルキル、−ＣＨ２−Ｃ２〜６アルケニル、−ＣＨ２−Ｃ２〜６アルキニルおよび−ＣＨ２ＣＯＲ５ａから選択され；Ｒ５ａは、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキルおよび−ＮＲ５ｂＲ５ｃから選択され；Ｒ５ｂおよびＲ５ｃは独立に、Ｈおよび−Ｃ１〜６アルキルから選択され；
Ｑは、−Ｃ０〜５アルキレン−Ｑ’−Ｃ０〜１アルキレン−であり、Ｑ’は、−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＳＯ２−ＮＲＱ１−、−ＮＲＱ１−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＱ１Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＱ１−、−ＮＲＱ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲＱ３−、−ＮＲＱ２−Ｃ（Ｓ）−ＮＲＱ３−、−Ｃ＝Ｎ−Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−および−Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−ＲＱ４）−から選択され、ＲＱ１は、水素または−Ｃ１〜４アルキルであり、ＲＱ２およびＲＱ３は独立に、水素、−Ｃ１〜４アルキルおよび−Ｃ３〜６シクロアルキルから選択されるか、またはＲＱ２およびＲＱ３は一緒になって−Ｃ２〜４アルキレンまたは−Ｃ２〜３アルケニレンを形成し、ＲＱ４は−Ｃ１〜４アルキルまたはベンジルであり；
ｅは０または１〜５の整数であり；
Ｒ６は各々独立に、ハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ０〜２アルキレン−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜４アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２および−Ｎ＋（Ｏ）Ｏから選択され；
Ｒ１〜３、Ｒ３ａ〜３ｃ、Ｒ４〜６およびＲａ〜Ｒｃにおけるアルキル基、アルケニル基、アルキレン基、アルキニル基およびシクロアルキル基はそれぞれ任意に、１〜５個のフルオロ原子で置換されており；Ｒ５におけるアルキル基、アルケニル基およびアルキニル基はそれぞれ任意に、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、−ＯＨおよびフェニルから独立に選択される１〜２個の置換基で置換されており；Ｒ１〜２、Ｒ３ａ〜３ｃおよびＲａ〜ｃにおけるシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基および複素環基はそれぞれ任意に、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、シアノ、ハロ、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ（Ｏ）（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｃ１〜４アルキル）、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜４アルキル）および−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されており、アルキル基、アルケニル基およびアルキニル基はそれぞれ任意に、１〜５個のフルオロ置換基で置換されており；Ｑにおける−ＣＨ２−基はそれぞれ任意に、−Ｃ１〜２アルキル、−ＯＨおよびフルオロから独立に選択される１個または２個の置換基で置換されている、化合物
またはその薬学的に許容される塩に関する。
【００１０】
本発明の一態様は、式Ｉ’：
【００１１】
【化２】
0005528817.tif 000021
を持つ第四級アンモニウム化合物であって、式中、Ｘ−は、薬学的に許容される酸の陰イオンであり；Ｒ１〜６、ａ〜ｅおよびＱは先に定義したとおりである、化合物またはその薬学的に許容される塩に関する。本発明の別の態様は、式Ｉ’ａ：
【００１２】
【化３】
0005528817.tif 000022
を持つ第四級アンモニウム化合物であって、式中、Ｒ１〜２、Ｒ３ａ〜３ｂ、Ｒ５〜６、ａ、ｂ、ｅ、ＱおよびＸ−は先に定義したとおりである、化合物またはその薬学的に許容される塩に関する。式Ｉ’の特定の一実施形態では、Ｑは、−Ｃ２〜５アルキレン−Ｑ’−である。本発明のさらに別の態様は、式Ｉ’ｂ：
【００１３】
【化４】
0005528817.tif 000023
を持つ第四級アンモニウム化合物であって、式中、Ｒ６、ｅ、ＱおよびＸ−は先に定義したとおりである、化合物またはその薬学的に許容される塩に関する。式Ｉ’ｂの特定の一実施形態では、Ｑは、−Ｃ２〜５アルキレン−Ｑ’−である。本発明の別の態様は、式Ｉ’ｃ：
【００１４】
【化５】
0005528817.tif 000024
を持つ第四級アンモニウム化合物であって、式中、Ｒ１〜２、Ｒ３ａ〜３ｂ、Ｒ５〜６、ａ、ｂ、ｅ、ＱおよびＸ−は先に定義したとおりである、化合物またはその薬学的に許容される塩に関する。式Ｉ’ｃの特定の一実施形態では、Ｑは、−Ｃ２〜５アルキレン−Ｑ’−である。
【００１５】
式Ｉの化合物の中で特に注目される化合物は、Ｍ３受容体サブタイプに対する結合の阻害解離定数（Ｋｉ）が１００ｎＭ以下、詳細には５０ｎＭ以下、より詳細には１０ｎＭ以下、さらにより詳細には１．０ｎＭ以下である化合物である。
【００１６】
本発明の別の態様は、薬学的に許容されるキャリアおよび本発明の化合物を含む医薬組成物に関する。そうした組成物は任意に、ステロイド系抗炎症薬（たとえば、コルチコステロイド）、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ホスホジエステラーゼ−４阻害剤およびこれらの組み合わせなど、他の治療薬を含んでもよい。したがって、本発明のなお別の態様では、医薬組成物は、本発明の化合物、第二の作用薬および薬学的に許容されるキャリアを含む。本発明の別の態様は、本発明の化合物および第二の作用薬を含む作用薬の組み合わせに関する。本発明の化合物については、追加薬（単数または複数）とともに製剤化しても、別々に製剤化してもよい。別に製剤化する場合、追加薬（単数または複数）に薬学的に許容されるキャリアを含めてもよい。このため、本発明のなお別の態様は、医薬組成物の組み合わせであって、本発明の化合物および薬学的に許容される第一のキャリアを含有する第一の医薬組成物と、第二の作用薬および薬学的に許容される第二のキャリアを含有する第二の医薬組成物とを含む、組み合わせに関する。本発明はまた、たとえば、第一の医薬組成物および第二の医薬組成物が別々の医薬組成物であるそうした医薬組成物を含むキットに関する。
【００１７】
本発明の化合物はムスカリン受容体アンタゴニスト活性を持ち、したがって、ムスカリン受容体の遮断により処置される疾患または障害に罹患している患者を処置する治療薬として有用であると期待されている。このため、本発明の一態様は、患者の気管支を拡張させる方法であって、本発明の化合物を気管支拡張作用が生じる量で患者に投与することを含む、方法を対象とする。本発明はまた、慢性閉塞性肺疾患または喘息などの肺障害を処置する方法であって、本発明の化合物を治療有効量で患者に投与することを含む、方法を対象とする。本発明の別の態様は、哺乳動物のムスカリン受容体に拮抗する方法であって、本発明の化合物をムスカリン受容体に拮抗する量で哺乳動物に投与することを含む、方法に関する。
【００１８】
本発明の化合物は、ムスカリン受容体アンタゴニスト活性を持つため、リサーチツールとしても有用である。したがって、本発明の一態様は、本発明の化合物をリサーチツールとして使用する方法であって、本発明の化合物を用いて生物学的アッセイを行うことを含む、方法に関する。本発明の化合物を用いて、新しい化学物質を評価してもよい。このため、本発明の別の態様は、生物学的アッセイにおいて被検化合物を評価する方法であって、（ａ）被検化合物を用いて生物学的アッセイを行い第一のアッセイ値を得ることと、（ｂ）本発明の化合物を用いて生物学的アッセイを行い第二のアッセイ値を得ることとを含み、ステップ（ａ）をステップ（ｂ）の前、ステップ（ｂ）の後あるいはステップ（ｂ）と同時に行い、さらに（ｃ）ステップ（ａ）で得られた第一のアッセイ値とステップ（ｂ）で得られた第二のアッセイ値とを比較することを含む、方法に関する。例示的な生物学的アッセイとして、哺乳動物を用いたムスカリン受容体結合アッセイおよび気管支保護作用アッセイが挙げられる。本発明のさらに別の態様は、ムスカリン受容体を含む生物系またはサンプルの研究方法であって、（ａ）生物系またはサンプルを本発明の化合物と接触させること、および（ｂ）生物系またはサンプルに対して化合物が引き起こす作用を判定することを含む、方法を対象とする。
【００１９】
本発明はまた、本発明の化合物の調製に有用なプロセスおよび中間体を対象とする。したがって、本発明の別の態様は、本発明の化合物を調製するプロセスであって、（ａ）式ＩＩの化合物を式ＩＩＩの化合物と反応させて式ＩＶの化合物を製造し、式ＩＶの化合物をＲ５基を含む有機基質と反応させるプロセス、または（ｂ）式Ｖの化合物を式ＩＩＩの化合物と反応させるプロセス、または（ｃ）式Ｖの化合物を式ＶＩの化合物と反応させて式ＶＩＩの化合物を製造して式ＶＩＩの化合物を式ＶＩＩＩの化合物と反応させるプロセス、および塩形態または双性イオン形態の生成物を回収して式Ｉの化合物またはＩ’を得るプロセスを含み、式ＩＩ〜ＶＩＩＩの化合物は本明細書に定義したとおりである、プロセスに関する。他の態様では、本発明は、本明細書に記載のプロセスのいずれかで調製される生成物を対象とする。
【００２０】
本発明のなお別の態様は、薬物の製造、特に哺乳動物の肺障害の処置またはムスカリン受容体の拮抗に有用な薬物の製造のための本発明の化合物の使用を対象とする。本発明のさらに別の態様は、リサーチツールとしての本発明の化合物の使用に関する。本発明の他の態様および実施形態も本明細書に開示する。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明は、塩形態または双性イオン形態の式Ｉ：
【００２２】
【化６】
0005528817.tif 000025
を持つ化合物またはその薬学的に許容される塩を対象とする。さらに詳しくいえば、本発明は、式Ｉ’：
【００２３】
【化７】
0005528817.tif 000026
を持つ第四級アンモニウム化合物であって、式中、Ｘ−は、薬学的に許容される酸の陰イオンである、化合物またはその薬学的に許容される塩を対象とする。「第四級アンモニウム化合物」という語は、水酸化アンモニウムまたはアンモニウム塩から得られ、ＮＨ４−イオンの４個の水素原子がすべて有機基で置換されている化合物をいう。
【００２４】
本明細書で使用する場合、「本発明の化合物」という語は、式Ｉの化合物ならびに式Ｉ’、Ｉ’ａ、Ｉ’ｂ、Ｉ’ｃ、Ｉ’ｄおよびＩ’ｅで表される化学種を含むことを意図している。本発明の化合物は、第四級アンモニウム塩であり、たとえば、イオン交換クロマトグラフィーのような最新の方法を用いて、異なる塩形態間で変換してもよい。また、化合物を溶媒和物の形で得てもよく、そうした溶媒和物も本発明の範囲内に含まれる。したがって、当業者であれば、本明細書で化合物に関して述べる場合、たとえば、「本発明の化合物」に関して述べる場合は、他に記載がない限り、式Ｉの化合物ばかりでなく、その化合物の任意の薬学的に許容される塩形態および薬学的に許容される溶媒和物を含むことを認識するであろう。
【００２５】
本発明の化合物は、１つまたは複数のキラル中心を含んでもよく、したがって、いくつかの立体異性体が存在しても構わない。そうしたキラル中心が存在する場合、本発明は、他に記載がない限り、ラセミ混合物、純粋な立体異性体（すなわち、鏡像異性体またはジアステレオマー）、立体異性体に富んだ混合物および同種のものを対象とする。立体化学を一切考慮せずに化学構造を示す場合、あらゆる可能な立体異性体がその化学構造に包含されることが理解されよう。したがって、たとえば、「式Ｉの化合物」という語は、化合物のあらゆる可能な立体異性体を含むことを意図している。同様に、本明細書で特定の立体異性体を示したり、命名したりする際、他に記載がない限り、本発明の組成物にわずかながら他の立体異性体が存在する場合があることを当業者であれば理解するであろう。ただし、そうした他の異性体の存在により、組成物全体としての有用性は消失するものではない。個々の鏡像異性体については、好適なキラル固定相または担体を用いたキラルクロマトグラフィーなどの当該技術分野において周知の多くの方法により、あるいは、鏡像異性体をジアステレオマーに化学変換し、ジアステレオマーをクロマトグラフィーまたは再結晶などの従来の手段で分離してから鏡像異性体を再生成することにより、得ることができる。さらに、他に記載がない限り、本発明の化合物のシス−トランスまたはＥ／Ｚ異性体（幾何異性体）、互変異性体およびトポ異性体も、適切である場合、本発明の範囲内に含まれる。
【００２６】
特に、ｄが１であるとき、式Ｉの化合物は、以下の部分式（見やすくするため任意の置換基を示してしていない）の符号＊で示した炭素原子にキラル中心を含む：
【００２７】
【化８−１】
0005528817.tif 000027
本発明の一実施形態では、符号＊で示した炭素原子は、（Ｒ）配置である。この実施形態では、式Ｉの化合物は、符号＊で示した炭素原子が（Ｒ）配置であるか、この炭素原子が（Ｒ）配置である立体異性形態に富んでいる。別の実施形態では、符号＊で示した炭素原子は、（Ｓ）配置である。この実施形態では、式Ｉの化合物は、符号＊で示した炭素原子が（Ｓ）配置であるか、この炭素原子が（Ｓ）配置である立体異性形態に富んでいる。
【００２８】
また、本発明の化合物およびその合成に使用する化合物は、同位体で標識された化合物を含んでもよく、すなわち、１個または複数個の原子が、主に自然界に見出される原子質量と異なる原子質量を持つ原子を富化されている。式Ｉの化合物に組み込んでもよい同位元素の例として、たとえば、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏおよび１７Ｏがあるが、これに限定されるものではない。
【００２９】
本発明の化合物は、ムスカリン受容体アンタゴニスト活性を持つことが分かっている。本発明の化合物は、様々な特性の中でも特に関連化合物に比べてムスカリン受容体サブタイプｈＭ２およびｈＭ３に対する結合親和性の向上、受容体の半減期の長期化、効力の向上が認められており、肺障害を処置する治療薬として有用であると期待されている。
【００３０】
本発明の化合物の命名のために本明細書で使用する命名法については、本明細書の実施例に示してある。こうした命名については、市販品のＡｕｔｏＮｏｍソフトウェア（ＭＤＬ，Ｓａｎ  Ｌｅａｎｄｒｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）で行う。
【００３１】
代表的な実施形態
以下の置換基および値は、本発明の種々の態様および実施形態の代表的な例を提供することを意図している。こうした代表的な値は、そうした態様および実施形態をさらに規定および説明することを意図するものであるが、他の実施形態を除外したり、本発明の範囲を限定したりすることを意図するものではない。この点で、特に記載がない限り、特定の値または置換基を好ましいと表現しても、他の値または置換基を本発明から除外することを決して意図するものではない。
【００３２】
ａおよびｂの値は独立に、０、１、２、３、４または５であり；特に独立に０、１または２であり；さらにより詳細には０または１である。一実施形態では、ａは０または１である。別の実施形態では、ｂは０である。一実施形態では、ａおよびｂはともに０である。別の実施形態では、ａは１であり、ｂは０である。
【００３３】
Ｒ１およびＲ２が存在する場合はそれぞれ、それが結合しているフェニル環の２位、３位、４位、５位または６位にあってもよい。Ｒ１およびＲ２は各々独立に、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、シアノ、ハロ、−ＯＲａ、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ（Ｏ）ＮＲｂＲｃ、−ＳＲａ、−Ｓ（Ｏ）Ｒａ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ２および−ＮＲｂＲｃから選択される。Ｒａは各々独立に、水素、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニルおよび−Ｃ３〜６シクロアルキルから選択される。ＲｂおよびＲｃは各々独立に、水素、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニルまたは−Ｃ３〜６シクロアルキルから選択される。あるいは、ＲｂおよびＲｃは、それらが結合している窒素原子と一緒になってＣ３〜６複素環を形成する。別の実施形態では、隣接する２つのＲ１基または隣接する２つのＲ２基は、一緒になって−Ｃ３〜６アルキレン、−Ｃ２〜４アルキレン−Ｏ−または−Ｏ−Ｃ１〜４アルキレン−Ｏ−を形成する。一実施形態では、Ｒ１またはＲ２は独立に、−Ｃ１〜４アルキル（たとえば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル）、フルオロ、クロロ、−ＯＲａ（たとえば、ヒドロキシ、メトキシ、エトキシ）、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル（たとえば、−ＣＯＯＣＨ３）および−ＮＲｂＲｃ（たとえば、ＮＨ２）から選択される。別の特定の実施形態では、Ｒ１は、−Ｃ１〜４アルキルおよび−ＯＲａから選択される。
【００３４】
前述のＲ１、Ｒ２、Ｒａ、ＲｂおよびＲｃにおけるアルキル基、アルケニル基、アルキレン基、アルキニル基およびシクロアルキル基はそれぞれ、１〜５個のフルオロ原子で置換されていてもよい。たとえば、Ｒ１またはＲ２は、ジフルオロメチル、トリフルオロメチルおよび２，２，２−トリフルオロエチルなどの−Ｃ１〜４アルキルまたは−ＯＲａであってもよく、Ｒａはジフルオロメチルまたはトリフルオロメチルである。さらに、Ｒ１、Ｒ２、Ｒａ、ＲｂおよびＲｃにおけるシクロアルキル基はそれぞれ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、シアノ、ハロ、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ（Ｏ）（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｃ１〜４アルキル）、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜４アルキル）および−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよく、これらのアルキル基、アルケニル基およびアルキニル基はそれぞれ、１〜５個のフルオロ置換基で置換されていてもよい。
【００３５】
Ｒ３は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３ａＲ３ｂ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＨ２ＮＨ２から選択される。Ｒ３ａおよびＲ３ｂは独立に、水素、−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ２〜６アルケニル、−Ｃ２〜６アルキニル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、−Ｃ６〜１０アリール、−Ｃ２〜９ヘテロアリール、−Ｃ３〜６複素環および−（ＣＨ２）１〜２−Ｒ３ｃから選択される。Ｒ３ｃは、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、−Ｃ６〜１０アリール、−Ｃ２〜９ヘテロアリールおよび−Ｃ３〜６複素環から選択される。一実施形態では、Ｒ３は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３ａＲ３ｂである。一実施形態では、Ｒ３ａおよびＲ３ｂは独立に、水素または−Ｃ１〜４アルキルである。別の実施形態ではＲ３ａおよびＲ３ｂは独立に、水素またはメチルおよびエチルなどの−Ｃ１〜２アルキルである。なお別の実施形態では、Ｒ３ａおよびＲ３ｂはともに水素である。あるいは、Ｒ３ａおよびＲ３ｂは、それらが結合している窒素原子と一緒になって、窒素、酸素または硫黄から選択されるさらに１個のヘテロ原子を任意に含むＣ３〜６複素環を形成する。代表的な複素環として、ピロリジン−１−イル、ピペリジン−１−イル、ピペラジン−１−イル、４−Ｃ１〜４アルキルピペラジン−１−イル、モルホリン−４−イルおよびチオモルホリン−４−イルがあるが、これに限定されるものではない。
【００３６】
前述のＲ３およびＲ３ａ〜３ｃにおけるアルキル基、アルケニル基、アルキニル基およびシクロアルキル基はそれぞれ、１〜５個のフルオロ原子で置換されていてもよい。たとえば、Ｒ３は、−ＣＦ３であってもよい。さらに、Ｒ３ａ〜３ｃにおけるアリール基、シクロアルキル基、ヘテロアリール基および複素環基はそれぞれ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、シアノ、ハロ、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ（Ｏ）（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｃ１〜４アルキル）、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜４アルキル）および−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されていてもよく、これらのアルキル基、アルケニル基およびアルキニル基はそれぞれ、１〜５個のフルオロ置換基で置換されていてもよい。
【００３７】
ｃの値は、０、１、２または３であり；特に０、１または２であり；さらにより詳細には０または１である。一実施形態では、ｃは０である。別の実施形態では、ａ、ｂおよびｃはそれぞれ０を表す。
【００３８】
Ｒ４が存在する場合は各々独立に、フルオロまたは−Ｃ１〜４アルキルから選択される。複数のＲ４置換基が存在する場合、すなわち、ｃが２または３である場合、置換基は、同じ炭素原子にあっても、異なる炭素原子にあってもよい。例示的なＲ４基として、メチル、エチルおよびフルオロがあるが、これに限定されるものではない。Ｒ４におけるアルキル基は、１〜５個のフルオロ原子で置換されていてもよい。たとえば、Ｒ４はジフルオロメチルでも、トリフルオロメチルでも構わない。
【００３９】
ｄの値は１または２であり、
【００４０】
【化８−２】
0005528817.tif 000028
は任意の二重結合を示す。一実施形態では、ｄが１であり、二重結合は存在しない。すなわち、「ｄ」で規定される環はピロリジン環である。一実施形態では、ピロリジン環の３位の立体中心（すなわち、１−カルバモイル−１，１−ジフェニルメチル基を持つ炭素原子）の立体化学は、（Ｓ）である。別の実施形態では、この立体中心の立体化学は（Ｒ）である。一実施形態では、ｄが１であり、二重結合が存在する。すなわち、「ｄ」で規定される環がテトラヒドロピリジン環である。
【００４１】
Ｒ５は、−Ｃ１〜６アルキル、−ＣＨ２−Ｃ２〜６アルケニル、−ＣＨ２−Ｃ２〜６アルキニルおよび−ＣＨ２ＣＯＲ５ａから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ５は存在しなくてもよい。Ｒ５ａは、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキルおよび−ＮＲ５ｂＲ５ｃから選択され、Ｒ５ｂおよびＲ５ｃは独立に、Ｈおよび−Ｃ１〜６アルキルから選択される。一実施形態では、Ｒ５は、−ＣＨ３または−ＣＨ２ＣＨ３などの−Ｃ１〜６アルキルであり、特定の実施形態では、Ｒ５は、−ＣＨ３である。前述のＲ５におけるアルキル基、アルケニル基およびアルキニル基はそれぞれ、１〜５個のフルオロ原子で置換されていてもよい。たとえば、Ｒ５は、−ＣＦ３であってもよい。さらに、前述のＲ５におけるアルキル基、アルケニル基およびアルキニル基はそれぞれ、１〜２個の−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル基、−ＯＨ基およびフェニル基で置換されていてもよい。
【００４２】
Ｑは、−Ｃ０〜５アルキレン−Ｑ’−Ｃ０〜１アルキレン−である。Ｑ’は、−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＳＯ２−ＮＲＱ１−、−ＮＲＱ１−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＱ１Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＱ１−、−ＮＲＱ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲＱ３−、−ＮＲＱ２−Ｃ（Ｓ）−ＮＲＱ３−、−Ｃ＝Ｎ−Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−および−Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−ＲＱ４）−から選択される。ＲＱ１は、水素または−Ｃ１〜４アルキルである。特定の一実施形態では、ＲＱ１は水素である。ＲＱ２およびＲＱ３は独立に、水素、−Ｃ１〜４アルキルおよび−Ｃ３〜６シクロアルキルから選択される。あるいは、ＲＱ２およびＲＱ３は、一緒になって−Ｃ２〜４アルキレンまたは−Ｃ２〜３アルケニレンを形成してもよい。特定の一実施形態では、ＲＱ２およびＲＱ３は、ともに水素である。ＲＱ４は、−Ｃ１〜４アルキルまたはベンジルである。一実施形態では、ＲＱ４は、−ＣＨ３などの−Ｃ１〜４アルキルである。特定の一実施形態では、ＲＱ４はベンジルである。特定の一実施形態では、Ｑ’は、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＱ１Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＱ１−、−ＮＲＱ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲＱ３−、−ＮＲＱ２−Ｃ（Ｓ）−ＮＲＱ３−および−Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−ＲＱ４）−から選択される。別の特定の実施形態では、Ｑ’は、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−および−ＯＣ（Ｏ）−から選択される。
【００４３】
Ｑ’をＮ＋原子に連結するリンカーである−Ｃ０〜５アルキレン−は、結合（炭素原子０）でも、１個、２個、３個、４個または５個の炭素原子を持っていてもよい。特定の一実施形態では、このリンカーは、−Ｃ２〜５アルキレン−であり、他の特定の実施形態では、−Ｃ１〜３アルキレン−であり、なお別の実施形態では、−Ｃ３アルキレン−である。−Ｃ０〜５アルキレン−リンカーにおける−ＣＨ２−基はそれぞれ、−Ｃ１〜２アルキル、−ＯＨおよびフルオロから独立に選択される１個または２個の置換基で置換されていてもよい。特定の一実施形態では、リンカーは、−（ＣＨ２）３−であり、−ＣＨ２−基の１個は、たとえば−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−のように−ＯＨで置換されている。
【００４４】
Ｑ’をフェニル環に連結するリンカーである−Ｃ０〜１アルキレン−は、結合（炭素原子０）でも、１個の炭素原子を持っていてもよい。特定の一実施形態では、このリンカーは、結合である。−Ｃ０〜１アルキレン−リンカーにおける−ＣＨ２−基はそれぞれ、−Ｃ１〜２アルキル、−ＯＨおよびフルオロから独立に選択される１個または２個の置換基で置換されていてもよい。
【００４５】
特定の実施形態では、−Ｃ０〜５アルキレン−Ｑ’−Ｃ０〜１アルキレン−は、−（ＣＨ２）２−、−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）５−、−（ＣＨ２）６−、−（ＣＨ２）２−ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）２−Ｃ≡Ｃ−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）３−Ｏ−、−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−Ｏ−、−（ＣＨ２）３−Ｏ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）３−Ｓ−、−（ＣＨ２）３−Ｓ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）３−ＳＯ２−、−（ＣＨ２）３−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）２−ＯＣ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）２−ＮＲＱ１Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）ＮＲＱ１−ＣＨ２、−（ＣＨ２）２−ＮＲＱ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲＱ３−、−ＣＨ２−Ｃ＝Ｎ−Ｏ−、−（ＣＨ２）２−Ｓ−Ｓ−および−（ＣＨ２）３−Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−ＲＱ４）−の１つであり、ＲＱ１、ＲＱ２およびＲＱ３は、水素であり、ＲＱ４は、−Ｃ１〜４アルキルまたはベンジルである。
【００４６】
ｅの値は、０、１、２、３、４または５である。一実施形態では、ｅは０、１または２である。
【００４７】
Ｒ６が存在する場合は各々独立に、ハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ０〜２アルキレン−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜４アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２および−Ｎ＋（Ｏ）Ｏから選択される。特定の一実施形態では、Ｒ６は、ハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜４アルキル、−Ｎ（ＣＨ３）２および−Ｎ＋（Ｏ）Ｏから選択される。一実施形態では、Ｒ６は、フルオロ、クロロおよびブロモなどのハロである。特定の実施形態では、ｅは１であり、Ｒ６は、フルオロまたはクロロであり、別の実施形態では、ｅは２であり、Ｒ６基はともにフルオロであるか、あるいは、Ｒ６基はともにクロロであるか、あるいは、一方のＲ６基はフルオロであり、他方のＲ６基はクロロである。別の実施形態では、Ｒ６は、−ＣＨ３などの−Ｃ１〜４アルキルである。一実施形態では、Ｒ６は−ＯＨである。一実施形態では、Ｒ６は−Ｃ１〜４アルキレン−ＯＨである。一実施形態では、Ｒ６はシアノである。一実施形態では、Ｒ６は−ＣＯＯＨなどの−Ｃ０〜２アルキレン−ＣＯＯＨである。一実施形態では、Ｒ６は−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ３などの−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキルである。一実施形態では、Ｒ６は−Ｏ−ＣＨ３などの−Ｏ−Ｃ１〜４アルキルである。一実施形態では、Ｒ６は−Ｓ−ＣＨ３などの−Ｓ−Ｃ１〜４アルキルである。一実施形態では、Ｒ６は−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ３などの−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜４アルキルである。なお別の実施形態では、Ｒ６は、−Ｎ（ＣＨ３）２などの−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２である。一実施形態では、Ｒ６は−Ｎ＋（Ｏ）Ｏである。Ｒ６におけるアルキル基は、１〜５個のフルオロ原子で置換されていてもよい。たとえば、Ｒ６は−ＣＦ３でも、−ＯＣＦ３でもよい。
【００４８】
Ｘ−は、薬学的に許容される酸の陰イオンである。「薬学的に許容される酸の陰イオン」という語は、薬学的に許容される酸の陰イオン性対イオンの意味で用いる。薬学的に許容される無機酸の例には、限定としてではなく例示として、ホウ酸、炭酸、ハロゲン化水素（臭化水素、塩化水素、フッ化水素またはヨウ化水素）酸、硝酸、リン酸、スルファミン酸および硫酸ならびに水酸化物がある。薬学的に許容される有機酸の例には、限定としてではなく例示として、脂肪族ヒドロキシル酸（たとえば、クエン酸、グルコン酸、グリコール酸、乳酸、ラクトビオン酸、リンゴ酸および酒石酸）、脂肪族モノカルボン酸（たとえば、酢酸、酪酸、ギ酸、プロピオン酸およびトリフルオロ酢酸）、芳香族カルボン酸（たとえば、安息香酸、ｐ−クロロ安息香酸、ジフェニル酢酸、ゲンチシン酸、馬尿酸およびトリフェニル酢酸）、アミノ酸（たとえば、アスパラギン酸およびグルタミン酸）、芳香族ヒドロキシル酸（たとえば、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、１−ヒドロキシナフタレン−２−カルボン酸および３−ヒドロキシナフタレン−２−カルボン酸）、アスコルビン酸、ジカルボン酸（たとえば、フマル酸、マレイン酸、シュウ酸およびコハク酸）、グルコロン酸、マンデル酸、粘液酸、ニコチン酸、オロト酸、パモ酸、パントテン酸、スルホン酸（たとえば、ベンゼンスルホン酸、カンホスルホン酸、エジシル酸、エタンスルホン酸、イセチオン酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２，６−ジスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸）、キシナホ酸および同種のものがある。一実施形態では、薬学的に許容される酸は、酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、酪酸、ｐ−クロロ安息香酸、クエン酸、ジフェニル酢酸、ギ酸、臭化水素酸、塩化水素酸、フッ化水素酸またはヨウ化水素酸、ｏ−ヒドロキシ安息香酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、１−ヒドロキシナフタレン−２−カルボン酸、３−ヒドロキシナフタレン−２−カルボン酸、乳酸、リンゴ酸、マレイン酸、メタンスルホン酸、硝酸、リン酸、プロピオン酸、コハク酸、硫酸、酒石酸、トリフルオロ酢酸およびトリフェニル酢酸から選択される。別の実施形態では、薬学的に許容される酸は、臭化水素酸、ヨウ化水素酸およびトリフルオロ酢酸から選択され、一実施形態では、陰イオンは、アセタート、ベンゼンスルホナート、ベンゾアート、ブロミド、ブチラート、クロリド、ｐ−クロロベンゾアート、シトラート、ジフェニルアセタート、ホルマート、フッ化物、ｏ−ヒドロキシベンゾアート、ｐ−ヒドロキシベンゾアート、１−ヒドロキシナフタレン−２−カルボキシラート、３−ヒドロキシナフタレン−２−カルボキシラート、ヨウ化物、ラクタート、マラート、マレアート、メタンスルホナート、ニトラート、ホスファート、プロピオナート、スクシナート、スルファート、タルトラート、トリフルオロアセタート、ビフェニルアセタートおよびトリフェニルアセタートから選択される。なお別の実施形態では、陰イオンは、ブロミド、ヨウ化物およびトリフルオロアセタートから選択される。
【００４９】
一実施形態では、Ｒ３は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３ａＲ３ｂであり、ｃは０であり、ｄは１である。したがって、本発明はまた、式Ｉ’ａ：
【００５０】
【化９】
0005528817.tif 000029
を持つ第四級アンモニウム化合物であって、式中、Ｒ１〜２、Ｒ３ａ〜３ｂ、Ｒ５〜６、ａ、ｂ、ｅ、ＱおよびＸ−は、式Ｉに定義するとおりである、化合物またはその薬学的に許容される塩も対象とする。別の実施形態では、Ｒ３は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり、Ｒ５は−ＣＨ３であり、ａ、ｂおよびｃは０である、ｄは１である。したがって、本発明はまた、式Ｉ’ｂ：
【００５１】
【化１０】
0005528817.tif 000030
を持つ第四級アンモニウム化合物であって、式中、Ｒ６、ｅ、ＱおよびＸ−は、式Ｉに定義するとおりである、化合物またはその薬学的に許容される塩も対象とする。別の実施形態では、Ｒ３は−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２であり、Ｒ５は−ＣＨ３であり、ａ、ｂおよびｃは０であり、ｄは２である。したがって、本発明はまた、式Ｉ’ｃ：
【００５２】
【化１１】
0005528817.tif 000031
を持つ第四級アンモニウム化合物であって、式中、Ｒ１〜２、Ｒ３ａ〜３ｂ、Ｒ５〜６、ａ、ｂ、ｅ、ＱおよびＸ−は式Ｉに定義するとおりである、化合物またはその薬学的に許容される塩を対象とする。
【００５３】
本発明はまた、式Ｉ’ｄ：
【００５４】
【化１２】
0005528817.tif 000032
を持つ第四級アンモニウム化合物であって、式中、ａおよびｂは独立に０または１であり；Ｒ１およびＲ２はそれぞれ−ＯＲａであり、Ｒａは水素であり；Ｑは、−（ＣＨ２）２−、−（ＣＨ２）３−、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）５−、−（ＣＨ２）６−、−（ＣＨ２）２−ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）２−Ｃ≡Ｃ−、−（ＣＨ２）２−Ｏ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）３−Ｏ−、−ＣＨ２−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ２−Ｏ−、−（ＣＨ２）３−Ｏ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）３−Ｓ−、−（ＣＨ２）３−Ｓ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）３−ＳＯ２−、−（ＣＨ２）３−Ｃ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）２−ＯＣ（Ｏ）−、−（ＣＨ２）２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ２−、−（ＣＨ２）２−ＮＲＱ１Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）ＮＲＱ１−ＣＨ２、−（ＣＨ２）２−ＮＲＱ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＲＱ３−、−ＣＨ２−Ｃ＝Ｎ−Ｏ−、−（ＣＨ２）２−Ｓ−Ｓ−および−（ＣＨ２）３−Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−ＲＱ４）−から選択され、ＲＱ１、ＲＱ２およびＲＱ３は水素であり、ＲＱ４は−Ｃ１〜４アルキルまたはベンジルであり；ｅは０、１または２であり；Ｒ６は各々独立に、ハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ０〜４アルキレン−ＯＨ、シアノ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜４アルキル、−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２および−Ｎ＋（Ｏ）Ｏから選択される、化合物またはその薬学的に許容される塩も対象とする。各部分は任意に、式Ｉに定義したとおり置換されていてもよく、特定の一実施形態では、Ｒ６におけるアルキルは任意に、３個のフルオロ原子で置換されており、Ｑにおける−ＣＨ２−基の１個は任意に−ＯＨで置換されている。
【００５５】
別の実施形態では、本発明は、式Ｉ’ｅ：
【００５６】
【化１３】
0005528817.tif 000033
を持つ第四級アンモニウム化合物であって、式中、ａは０または１であり；Ｒ１は−ＯＲａであり、Ｒａは水素であり；Ｑは、−（ＣＨ２）４−、−（ＣＨ２）２−ＣＨ＝ＣＨ−、−（ＣＨ２）２−Ｃ≡Ｃ−、−（ＣＨ２）３−Ｏ−、−（ＣＨ２）３−Ｓ−、−（ＣＨ２）３−Ｃ（Ｏ）−および−（ＣＨ２）２−ＯＣ（Ｏ）−から選択され；ｅは０、１または２であり；Ｒ６は各々独立に、ハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−ＯＨおよび−Ｓ−Ｃ１〜４アルキルから選択される、化合物またはその薬学的に許容される塩を対象とする。各部分はすべて任意に、式Ｉに定義するとおり置換されていてもよいが、特定の一実施形態では、化合物は任意に置換されていない。
【００５７】
さらに別の実施形態では、本発明は、式Ｉ’’ａ、Ｉ’’ｂ、Ｉ’’ｃまたはＩ’’ｄ：
【００５８】
【化１４】
0005528817.tif 000034
【００５９】
【化１５】
0005528817.tif 000035
を持つ第四級アンモニウム化合物であって、式中、Ｘ−は、薬学的に許容される酸の陰イオンである、化合物またはその薬学的に許容される塩も対象とする。特定の一実施形態では、本発明は、式Ｉ’’ａの化合物を対象とする。
【００６０】
式Ｉの化合物の特定の群は、２００７年２月２３日に出願された米国特許仮出願第６０／９０３，１１０号に開示されているものである。この群は、塩形態または双性イオン形態の式Ｉ’’’：
【００６１】
【化１６−１】
0005528817.tif 000036
の化合物であって、式中、ａ’およびｂ’は独立に、０または１〜５の整数であり；Ｒ１’およびＲ２’は各々独立に、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、シアノ、ハロ、−ＯＲａ’、−ＳＲａ’、−Ｓ（Ｏ）Ｒａ’、−Ｓ（Ｏ）２Ｒａ’および−ＮＲｂ’ＲＣ’から選択され；Ｒａ’は各々独立に、水素、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニルおよび−Ｃ３〜６シクロアルキルから選択され；Ｒｂ’およびＲＣ’は各々独立に、水素、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニルまたは−Ｃ３〜６シクロアルキルから選択され；またはＲｂ’およびＲＣ’は、それらが結合している窒素原子と一緒になってＣ３〜６複素環を形成し；または隣接する２つのＲ１’基または隣接する２つのＲ２’基は、一緒になって−Ｃ３〜６アルキレン、−Ｃ２〜４アルキレン−Ｏ−または−Ｏ−Ｃ１〜４アルキレン−Ｏ−を形成し；Ｒ３’は、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３ａ’Ｒ３ｂ’、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−ＣＮ、−ＯＨ、−ＣＨ２ＯＨおよび−ＣＨ２ＮＨ２から選択され；Ｒ３ａ’およびＲ３ｂ’は独立に、水素、−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ２〜６アルケニル、−Ｃ２〜６アルキニル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、−Ｃ６〜１０アリール、−Ｃ２〜９ヘテロアリール、−Ｃ３〜６複素環および−（ＣＨ２）１〜２−Ｒ３ｃ’から選択され、Ｒ３ｃ’は、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、−Ｃ３〜６シクロアルキル、−Ｃ６〜１０アリール、−Ｃ２〜９ヘテロアリールおよび−Ｃ３〜６複素環から選択され；またはＲ３ａ’およびＲ３ｂ’は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、窒素、酸素または硫黄から選択されるさらに１個のヘテロ原子を任意に含むＣ３〜６複素環を形成し；ｃ’は０であるか、１〜３の整数であり；Ｒ４’は各々独立に、フルオロまたは−Ｃ１〜４アルキルであり；ｄ’は１または２であり、
【００６２】
【化１６−２】
0005528817.tif 000037
は任意の二重結合を示し；Ｒ５’は、−Ｃ１〜６アルキル、−ＣＨ２−Ｃ２〜６アルケニル、−ＣＨ２−Ｃ２〜６アルキニルおよび−ＣＨ２ＣＯＲ５ａ’から選択され；Ｒ５ａ’は、−ＯＨ、−Ｏ−Ｃ１〜６アルキルおよび−ＮＲ５ｂ’Ｒ５ｃ’から選択され；Ｒ５ｂ’およびＲ５ｃ’は独立に、Ｈおよび−Ｃ１〜６アルキルから選択され；Ｑ’は、−ＣＨ２−、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−、−ＳＯ２−、−ＳＯ２−ＮＲＱ１’−、−ＮＲＱ１’−ＳＯ２−、−Ｃ（Ｏ）−、−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＲＱ１’Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲＱ１’−、ＮＲＱ２’−Ｃ（Ｏ）−ＮＲＱ３’−、−ＮＲＱ２’−Ｃ（Ｓ）−ＮＲＱ３’−、−ＣＨ（ＯＨ）−および−Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−ＲＱ４’）−から選択され、ＲＱ１’は水素または−Ｃ１〜４アルキルであり、ＲＱ２’およびＲＱ３’は独立に、水素、−Ｃ１〜４アルキルおよび−Ｃ３〜６シクロアルキルから選択され、またはＲＱ２’およびＲＱ３’は一緒になって−Ｃ２〜４アルキレンまたは−Ｃ２〜３アルケニレンを形成し、ＲＱ４’は、−Ｃ１〜４アルキルまたはベンジルであり；ｅ’は、０または１〜５の整数であり；Ｒ６’は各々独立に、ハロ、−Ｃ１〜４アルキル、−ＯＨ、−Ｃ１〜４アルキル−ＯＨ、シアノ、−ＣＯＯＨ、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ１〜４アルコキシ、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１〜４アルキルおよび−Ｎ＋（Ｏ）Ｏから選択され；Ｒ１’〜３’、Ｒ３ａ’〜３ｃ’、Ｒ４’〜６’およびＲａ’〜ｃ’におけるアルキル基、アルケニル基、アルキレン基、アルキニル基およびシクロアルキル基はそれぞれ任意に、１〜５個のフルオロ原子で置換されており；Ｒ５’におけるアルキル基、アルケニル基およびアルキニル基はそれぞれ任意に、−Ｃ１〜４アルコキシ、−ＯＨおよびフェニルから独立に選択される１〜２個の置換基で置換されており；Ｒ１’〜２’、Ｒ３ａ’〜３ｃ’およびＲａ’〜ｃ’におけるシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基および複素環基はそれぞれ任意に、−Ｃ１〜４アルキル、−Ｃ２〜４アルケニル、−Ｃ２〜４アルキニル、シアノ、ハロ、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ−Ｃ１〜４アルキル、−Ｓ（Ｏ）（Ｃ１〜４アルキル）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｃ１〜４アルキル）、−ＮＨ２、−ＮＨ（Ｃ１〜４アルキル）および−Ｎ（Ｃ１〜４アルキル）２から独立に選択される１〜３個の置換基で置換されており、アルキル基、アルケニル基およびアルキニル基はそれぞれ任意に、１〜５個のフルオロ置換基で置換されており；−（ＣＨ２）０〜５−における−ＣＨ２−基はそれぞれ任意に、−Ｃ１〜２アルキル、−ＯＨおよびフルオロから独立に選択される１個または２個の置換基で置換されている、化合物；またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００６３】
さらに、式Ｉの目的となる特定の化合物は、以下の実施例に記載される化合物およびその薬学的に許容される塩を含む。
【００６４】
定義
本発明の化合物、組成物、方法およびプロセスについて記載する際、以下の用語は、他に記載がない限り、以下の意味を持つ。さらに、本明細書で使用する場合、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈上明らかに他の意味に解すべき場合を除き、対応する複数形を含む。「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」および「持つ（ｈａｖｉｎｇ）」という語は、排他的でないことを意図しており、記載された要素以外に他の要素が存在する場合があることを意味する。
【００６５】
「アルキル」という語は、一価の飽和炭化水素基を意味し、直鎖でも分枝でもよい。他に定義しない限り、そうしたアルキル基は一般に、１〜１０個の炭素原子を含み、たとえば−Ｃ１〜２アルキル、−Ｃ１〜４アルキルおよび−Ｃ１〜６アルキルがある。代表的なアルキル基として、たとえば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−ヘプチル、ｎ−オクチル、ｎ−ノニル、ｎ−デシルおよび同種のものが挙げられる。
【００６６】
本明細書で使用する個々の用語に炭素原子の具体的な数を用いる場合、炭素原子の数をその用語の前に下付き文字として示す。たとえば、「−Ｃ１〜６アルキル」という語は、許容可能な任意の立体配置にある１〜６個の炭素原子を持つアルキル基を意味する。
【００６７】
「アルキレン」という語は、二価の飽和炭化水素基を意味し、直鎖でも分枝でもよい。他に定義しない限り、そうしたアルキレン基は一般に、１〜１０個の炭素原子を含み、たとえば、Ｃ０〜１アルキレン、Ｃ０〜５アルキレン、Ｃ１〜４アルキレン、Ｃ２〜４アルキレン、Ｃ２〜５アルキレンおよびＣ３〜６アルキレンがある。代表的なアルキレン基として、たとえば、メチレン、エタン−１，２−ジイル（「エチレン」）、プロパン−１，２−ジイル、プロパン−１，３−ジイル、ブタン−１，４−ジイル、ペンタン−１，５−ジイルおよび同種のものが挙げられる。アルキレンという語が、Ｃ０〜１アルキレンまたはＣ０〜５アルキレンなどゼロ炭素を含む場合、その語は、単結合を含むことを意図していることが理解されよう。
【００６８】
「アルケニル」という語は、一価の不飽和炭化水素基を意味し、直鎖でも分枝でもよく、少なくとも１個、一般には１個、２個または３個の炭素−炭素二重結合を持つ。他に定義しない限り、そうしたアルケニル基は通常、２〜１０個の炭素原子を含み、たとえば、−Ｃ２〜４アルケニルおよび−Ｃ２〜６アルケニルがある。代表的なアルケニル基として、たとえば、エテニル、ｎ−プロペニル、イソプロペニル、ｎ−ブト−２−エニル、ｎ−ヘキス−３−エニルおよび同種のものが挙げられる。「アルケニレン」という語は、二価のアルケニル基を意味し、例示的なアルケニレン基として−Ｃ２〜３アルケニレンがある。
【００６９】
「アルコキシ」という語は、式−Ｏ−アルキルの一価の基を意味し、アルキルは、本明細書に定義するとおりである。他に定義しない限り、そうしたアルキル基は一般に、１〜１０個の炭素原子を含み、たとえば、−Ｏ−Ｃ１〜４アルキルおよび−Ｏ−Ｃ１〜６アルキルがある。代表的なアルコキシ基として、たとえば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、イソブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシおよび同種のものが挙げられる。
【００７０】
「アルキニル」という語は、一価の不飽和炭化水素基を意味し、直鎖でも分枝でもよく、少なくとも１個、一般には１個、２個または３個の炭素−炭素三重結合を持つ。他に定義しない限り、そうしたアルキニル基は通常、２〜１０個の炭素原子を含み、たとえば、−Ｃ２〜４アルキニルおよび−Ｃ２〜６アルキニルがある。代表的なアルキニル基として、たとえば、エチニル、ｎ−プロピニル、ｎ−ブト−２−イニル、ｎ−ヘキス−３−イニルおよび同種のものが挙げられる。「アルキニレン」という語は、二価のアルキニル基を意味し、例示的なアルキニレン基として、−Ｃ２〜３アルキニレンが挙げられる。
【００７１】
「アミノ保護基」という語は、アミノ基の好ましくない反応を防止するのに好適な保護基を意味する。代表的なアミノ保護基として、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ：ｔｅｒｔ−ｂｕｔｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）、トリチル（Ｔｒ：ｔｒｉｔｙｌ）、ベンジルオキシカルボニル（Ｃｂｚ：ｂｅｎｚｙｌｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）、９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ：ｆｌｕｏｒｅｎｙｌｍｅｔｈｏｘｙｃａｒｂｏｎｙｌ）、ホルミル、トリメチルシリル（ＴＭＳ：ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｓｉｌｙｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ：ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｄｉｍｅｔｈｙｌｓｉｌｙｌ）および同種のものがあるが、これに限定されるものではない。
【００７２】
「アリール」という語は、単環（すなわち、フェニル）または縮合環（すなわち、ナフタレン）を持つ一価の芳香族炭化水素を意味する。他に定義しない限り、そうしたアリール基は一般に６〜１０個の炭素環原子を含み、たとえば、−Ｃ６〜１０アリールがある。代表的なアリール基として、たとえば、フェニルおよびナフタレン−１−イル、ナフタレン−２−イルおよび同種のものが挙げられる。
【００７３】
「シクロアルキル」という語は、一価の飽和炭素環式炭化水素基を意味する。他に定義しない限り、そうしたシクロアルキル基は一般に３〜１０個の炭素原子を含み、たとえば、−Ｃ３〜６シクロアルキルがある。代表的なシクロアルキル基として、たとえば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよび同種のものが挙げられる。
【００７４】
「二価の炭化水素基」という語は、主として炭素原子および水素原子で構成され、任意に１個または複数個のヘテロ原子を含む、二価の炭化水素基を意味する。そうした二価の炭化水素基は、分枝でも非分枝でも、飽和でも不飽和でも、非環式でも環式でも、脂肪族でも芳香族でも、あるいは、これらの組み合わせでもよい。二価の炭化水素基は任意に、炭化水素鎖に組み込まれたヘテロ原子または炭化水素鎖に結合した置換基としてのヘテロ原子を含んでもよい。
【００７５】
「ハロ」という語は、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを意味する。
【００７６】
「ヘテロアリール」という語は、単環または２個の縮合した環を持ち、環に窒素、酸素または硫黄から選択される少なくとも１個のヘテロ原子（一般には１〜３個のヘテロ原子）を含む、一価の芳香族基を意味する。他に定義しない限り、そうしたヘテロアリール基は一般に、合計５〜１０個の環原子を含み、たとえば、−Ｃ２〜９ヘテロアリールがある。代表的なヘテロアリール基として、たとえば、ピロール、イミダゾール、チアゾール、オキサゾール、フラン、チオフェン、トリアゾール、ピラゾール、イソキサゾール、イソチアゾール、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、ピリミジン、トリアジン、インドール、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンゾイミダゾール、ベンズチアゾール、キノリン、イソキノリン、キナゾリン、キノキサリンおよび同種のもののような一価の化学種が挙げられ、結合点は、結合が可能な任意の炭素環原子または窒素環原子にある。
【００７７】
「複素環」または「複素環の」という語は、単環または複数の縮合した環（ｃｏｎｄｅｎｓｅｄ  ｒｉｎｇ）を持ち、環に窒素、酸素または硫黄から選択される少なくとも１個のヘテロ原子（一般には１〜３個のヘテロ原子）を含む、一価の飽和または不飽和（芳香族を除く）基を意味する。他に定義しない限り、そうした複素環基（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  ｇｒｏｕｐ）は一般に、合計２〜９個の環炭素原子を含み、たとえば、−Ｃ３〜６複素環がある。代表的な複素環基（ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  ｇｒｏｕｐ）として、たとえば、ピロリジン、イミダゾリジン、ピラゾリジン、ピペリジン、１，４−ジオキサン、モルホリン、チオモルホリン、ピペラジン、３−ピロリンおよび同種のもののような一価の化学種が挙げられ、結合点は、結合が可能な任意の炭素環原子または窒素環原子にある。
【００７８】
「脱離基」という語は、求核置換反応などの置換反応において、他の官能基または原子で置換が可能な官能基または原子を意味する。たとえば、代表的な脱離基として、クロロ基、ブロモ基およびヨード基；メシラート、トシラート、ブロシラート、ノシラートおよび同種のものなどのスルホン酸エステル基；およびアセトキシ、トリフルオロアセトキシおよび同種のものなどのアシルオキシ基があるが、これに限定されるものではない。
【００７９】
「任意に置換されている」という語は、該当する基が非置換であってもよいし、１〜３回または１〜５回など１回または複数回置換されていてもよいことを意味する。たとえば、１〜５個のフルオロ原子で「任意に置換されている」アルキル基は、非置換でもよいし、１個、２個、３個、４個または５個のフルオロ原子を含んでいてもよい。
【００８０】
「薬学的に許容される」という語は、ある材料が生物学的またはその他の点で望ましいことをいう。たとえば、「薬学的に許容されるキャリア」という語は、望ましくない生物学的作用を起こしたり、組成物の他の成分と有害な相互作用を起こしたりすることなく、組成物に組み込んで、患者に投与できる材料をいう。そうした薬学的に許容される材料は一般に、毒性学的検査および製造検査に要求される基準に適合しており、米国食品医薬品局が好適な不活性成分として認定した材料を含む。
【００８１】
「溶媒和物」という語は、たとえば、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩のような溶質の１個または複数個の分子と、溶媒の１個または複数個の分子とにより形成される複合体または凝集体を意味する。そうした溶媒和物は一般に、溶質および溶媒のモル比が実質的に固定している結晶性固体である。代表的な溶媒として、たとえば、水、メタノール、エタノール、イソプロパノール、酢酸および同種のものが挙げられる。溶媒が水の場合、形成される溶媒和物は水和物である。
【００８２】
「治療有効量」という語は、処置が必要な患者に投与する際に処置を行うのに十分な量を意味する。特に、「有効」量は、所望の結果を得るのに必要な量であり、「治療有効」量は、所望の治療効果を得るのに必要な量である。たとえば、ムスカリン受容体に拮抗する場合の「有効量」は、ムスカリン受容体拮抗量である。同様に、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）を処置する治療有効量は、所望の治療結果を達成する量であり、治療結果は、疾患の予防でも、寛解でも、抑制でも、軽減でもよい。
【００８３】
本明細書で使用する場合、「処置する」または「処置」という語は、哺乳動物（特にヒト）などの患者の疾患または医学的状態（ＣＯＰＤなど）を処置することまたはその処置を意味し、（ａ）疾患または医学的状態の発生の予防、すなわち、患者の予防的処置；（ｂ）疾患または医学的状態の寛解、すなわち、患者の疾患または医学的状態の排除または退行；（ｃ）疾患または医学的状態の抑制、すなわち、患者の疾患または医学的状態の発症を遅延または停止させること；または（ｄ）患者の疾患または医学的状態の症状の軽減を含む。たとえば、「ＣＯＰＤを処置する」という語は、ＣＯＰＤの発症の予防、ＣＯＰＤの寛解、ＣＯＰＤの抑制およびＣＯＰＤの症状の軽減を含むことになる。「患者」という語は、処置または疾患の予防を必要とするヒトなどの動物、疾患の予防処置を現在受けているか、特定の疾患または医学的状態の処置を受けているヒトなどの動物、さらに本発明の化合物が評価されたり、アッセイで使用されたりする被験体、たとえば、動物モデルを含むことを意図している。
【００８４】
本明細書で使用する他の用語はすべて、それらが関係する当業者が理解している通常の意味を持つことを意図している。
【００８５】
一般的な合成手順
本発明の化合物については、以下の一般的な方法、実施例に記載の手順を用いて、容易に入手できる出発材料から調製してもよいし、当業者に知られている他の方法、試薬および出発材料を用いて調製してもよい。以下の手順は、本発明の特定の実施形態を説明し得るものであるが、同一または類似の方法を用いて、または当業者に知られている他の方法、試薬および出発材料を用いることで、本発明の他の実施形態も同様に調製することができることが理解されよう。さらに、典型的または好ましいプロセス条件（すなわち、反応温度、時間、反応物のモル比、溶媒、圧力など）を示す場合、他に記載がない限り、他のプロセス条件を用いてもよいことも理解されよう。最適な反応条件は一般に、使用する個々の反応物、溶媒および量など様々な反応パラメータによって異なるものであるが、当業者であれば、通常の最適化手順により好適な反応条件を容易に判定できる。
【００８６】
さらに、当業者には明らかなように、ある種の官能基に好ましくない反応が起こらないように、従来の保護基が必要または望ましい場合がある。特定の官能基に好適な保護基、およびそうした官能基の保護および脱保護に好適な条件および試薬に何を選択するかは、当該技術分野において公知である。好ましくない反応を防止するために保護してもよい官能基として、たとえば、カルボキシ基、アミノ基、ヒドロキシル基、チオール基、カルボニル基および同種のものがある。代表的なカルボキシ保護基として、メチル、エチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ベンジル（Ｂｎ：ｂｅｎｚｙｌ），ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ：ｐ−ｍｅｔｈｏｘｙｂｅｎｚｙｌ）、９−フルロエニルメチル（Ｆｍ）、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）、ジフェニルメチル（ベンズヒドリル、ＤＰＭ：ｄｉｐｈｅｎｙｌｍｅｔｈｙｌ）および同種のものなどのエステル；アミドおよびヒドラジドがあるが、これに限定されるものではない。アミノ基の代表的な保護基として、カルバマート（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルなど）およびアミドが挙げられる。代表的なヒドロキシル保護基として、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、トリエチルシリル（ＴＥＳ：ｔｒｉｅｔｈｙｌｓｉｌｙｌ）、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）および同種のものなど、トリＣ１〜６アルキルシリル基のようなシリル基；ホルミル、アセチルおよび同種のものなど、Ｃ１〜６アルカノイル基のようなエステル（アシル基）；ベンジル（Ｂｎ）、ｐ−メトキシベンジル（ＰＭＢ）、９−フルオレニルメチル（Ｆｍ）、ジフェニルメチル（ベンズヒドリル、ＤＰＭ）および同種のものなどのアリールメチル基；およびエーテルがあるが、これに限定されるものではない。チオール基の代表的な保護基として、チオエーテルおよびチオエステルが挙げられる。カルボニル基の代表的な保護基として、アセタールおよびケタールが挙げられる。必要に応じて、本明細書に記載の保護基以外の保護基を用いてもよい。たとえば、多くの保護基およびその導入および除去については、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  ＹｏｒＫ，１９９９およびそこに引用された参考文献に記載されている。
【００８７】
たとえば、以下の例示的なプロセスの１つまたは複数により、式Ｉの化合物を調製することができる：
（ａ）式ＩＩ：
【００８８】
【化１７】
0005528817.tif 000038
の化合物を式ＩＩＩ：
【００８９】
【化１８】
0005528817.tif 000039
の化合物と反応させ、式中、Ｌ１は脱離基を表し、式ＩＶ：
【００９０】
【化１９】
0005528817.tif 000040
の化合物を製造し、式ＩＶの化合物を、Ｒ５基を含む有機基質と反応させるプロセス；または
（ｂ）式Ｖ：
【００９１】
【化２０】
0005528817.tif 000041
の化合物を式ＩＩＩの化合物と反応させるプロセス；または
（ｃ）式Ｖの化合物を式ＶＩ：
【００９２】
【化２１】
0005528817.tif 000042
の化合物と反応させ、式中、Ｌ２は脱離基を表し、Ａは以下に定義するとおりであり、式ＶＩＩ：
【００９３】
【化２２】
0005528817.tif 000043
の化合物を製造し、式ＶＩＩの化合物を式ＶＩＩＩ：
【００９４】
【化２３】
0005528817.tif 000044
の化合物と反応させ、式中、Ｌ３は脱離基を表し、Ｑ’、ＡおよびＢは、以下の表に記載するとおりに定義され：
【００９５】
【化２４】
0005528817.tif 000045
塩形態または双性イオン形態の生成物を回収するプロセス。
【００９６】
得られた反応生成物の式Ｉの化合物は、第四級アンモニウム化合物であり、当該技術分野においてよく知られている好適な溶媒で容易に結晶化できる。その結晶は、第四級アンモニウム塩である。
【００９７】
こうした反応では、存在する個々の置換基に応じて、１つまたは複数の保護基を用いてもよい。そうした保護基を使用する場合、式Ｉの化合物を得る通常の手順を用いて除去する。
【００９８】
プロセス（ａ）
式ＩＩと式ＩＩＩの化合物間の反応であるプロセス（ａ）では、Ｌ１で表す脱離基は、たとえば、クロロ、ブロモまたはヨードなどのハロでも、メシラートまたはトシラートなどのスルホン酸エステル基でもよい。一実施形態では、Ｌ１はブロモである。この反応は、たとえば、ジイソプロピルエチルアミンのような第三級アミンなど、塩基の存在下で行うと都合がよい。簡便な溶媒として、アセトニトリルなどのニトリル、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ：ｄｉｍｅｔｈｙｌｆｏｒｍａｍｉｄｅ）およびジメチルアセトアミド（ＤＭＡ：ｄｉｍｅｔｈｙｌａｃｅｔａｍｉｄｅ）がある。この反応は、０℃〜１００℃の範囲の温度で実施すると都合がよい。その後、反応生成物を、抽出、再結晶、クロマトグラフィーおよび同種のものなど通常の手順を用いて単離する。
【００９９】
所望の生成物の遊離塩基形である式ＩＶの化合物を好適な溶媒に溶解し、次いで有機基質と接触させる。例示的な溶媒として、トルエン、ＤＭＡおよびＣＨ３ＣＮが挙げられる。有機基質は一般に、有機ハロゲン化合物などの薬学的に許容される酸である。この基質は、たとえば、−Ｃ１〜６アルキルのようなＲ５基を含み、この基は、１〜５個のフルオロ原子および／または１〜２−Ｏ−Ｃ１〜６アルキル、−ＯＨおよびフェニル基ならびに脱離基で置換されていてもよく、脱離基の例として、ヨウ化物またはブロミドなどのハロゲン化物がある。例示的な基質として、ヨウ化メチル、メチルブロミド、ヨウ化エチル、ヨウ化プロピル、ベンジルブロミドおよびヨウ化ベンジルが挙げられる。
【０１００】
場合によっては、プロセス（ａ）に続いて第二の反応を行い、式Ｉの別の化合物を得てもよい。たとえば、Ｑ’が−Ｓ−である式Ｉの化合物を形成し、その化合物を酸化反応に付して、Ｑ’が−Ｓ（Ｏ）−または−ＳＯ２−である化合物を製造してもよい。さらに、Ｑ’が−Ｃ（Ｏ）−である式Ｉの化合物を形成し、その化合物をＨ２Ｎ−Ｏ−ＲＱ４とのイミン形成反応に付して、Ｑ’が−Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−ＲＱ４）−である化合物を製造してもよい。
【０１０１】
式ＩＩの化合物は、当該技術分野において公知であり、あるいは、よく知られた手順を用いて市販されている出発材料および試薬から調製することができる。たとえば、この化合物については、開示内容全体を参照によって本明細書に援用するＣｒｏｓｓらに対する米国特許第５，０９６，８９０号に記載されているように調製してもよい。あるいは、式ＩＩの化合物を、式１：
【０１０２】
【化２５】
0005528817.tif 000046
の化合物（式中、Ｐ１はベンジル基などのアミノ保護基を表す）を脱保護して調製しても構わない。ベンジル基は、たとえば、水素またはアンモニウムホルマートおよびパラジウムなどの第ＶＩＩＩ族金属触媒を用いた還元により除去すると都合がよい。任意に、この反応を、ギ酸、酢酸、塩酸、臭化水素酸、硫酸および同種のものなど酸の存在下で行う。
【０１０３】
式２：
【０１０４】
【化２６】
0005528817.tif 000047
のカルボン酸を、アミド結合形成条件下で式ＨＮＲ３ａＲ３ｂのアミンと反応させ、Ｒ３が−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３ａＲ３ｂである式１の化合物を調製してもよい。式２の化合物については、好ましくは塩酸、臭化水素酸または硫酸などの酸の水溶液を用いて、式３：
【０１０５】
【化２７】
0005528817.tif 000048
の化合物を加水分解することで調製することができる。式３の化合物を、Ｃｒｏｓｓらに対する米国特許第５，０９６，８９０号に記載されているように調製してもよい。
【０１０６】
触媒量の酸、好ましくは塩酸、臭化水素酸または硫酸の存在下で、式２のカルボン酸をＣ１〜４アルキルアルコールと反応させて、Ｒ３が−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｃ１〜４アルキルである式１の化合物を調製してもよい。Ｃｒｏｓｓらに対する米国特許第５，０９６，８９０号に記載されているように、Ｒ３が−ＣＮである式１の化合物を調製しても構わない。式４：
【０１０７】
【化２８】
0005528817.tif 000049
のエステルをフェニルリチウムまたはフェニルマグネシウムブロミドなどのフェニルの求核源と反応させて、Ｒ３が−ＯＨである式１の化合物を調製してもよい。
【０１０８】
式２のカルボン酸を水素化ホウ素ナトリウム、リチウムアルミニウムヒドリドまたはボランなどの還元剤と反応させて、Ｒ３が−ＣＨ２ＯＨである式１の化合物を調製してもよい。
【０１０９】
式３のニトリルをリチウムアルミニウムヒドリドまたはジイソブチルアルミニウムヒドリドなどの還元剤と反応させて、Ｒ３が−ＣＨ２ＮＨ２である式１の化合物を調製してもよい。
【０１１０】
式ＩＩＩの化合物は、一般に知られており、あるいは、よく知られている合成方法を用いて、容易に入手できる出発材料から調製することができる。
【０１１１】
プロセス（ｂ）
プロセス（ｂ）では、式Ｖの化合物および式ＩＩＩの化合物間の反応を、ピロリジンをハロゲン化化合物と反応させる既知の手順を用いて行ってもよい。この反応は、約２０〜１２０℃の範囲、より一般的には約２０〜８０℃の範囲の温度で有機溶媒中において行うのが一般的である。好適な有機溶媒として、アセトニトリル、ジメチルスルホキシド、ジメチルアセトアミド、エーテルおよびアセトンが挙げられる。式Ｖの化合物については、式ＩＩの化合物を、プロセス（ａ）に記載されているようなＲ５基を含む有機基質と反応させることで調製してもよい。
【０１１２】
プロセス（ｃ）
プロセス（ｃ）では、式Ｖ、式ＶＩおよび式ＶＩＩＩの化合物間の反応条件は、それぞれＡ基およびＢ基によって異なる。Ｌ３で表す脱離基は、たとえば、ハロ、一般にはブロモであってもよい。式ＶＩおよび式ＶＩＩＩの化合物は、一般に知られており、あるいは、よく知られている合成方法を用いて、容易に入手できる出発材料から調製することができる。
【０１１３】
プロセス（ｃ）のいくつかの反応（たとえば、Ｑ’が−ＮＲＱ１Ｃ（Ｏ）−であるとき）は、カップリング反応になる。そうした反応では、酸性部分を含む化合物は、反応性誘導体の形をとってもよい。たとえば、無水物またはカルボン酸クロリドなどのカルボン酸ハロゲン化物を形成することで、カルボン酸を活性化してもよい。したがって、カルボン酸クロリドは、カルボン酸の反応性誘導体である。あるいは、カルボジイミド、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート（ＨＡＴＵ）および同種のものなど、通常のカルボン酸／アミンカップリング試薬を用いて、カルボン酸を活性化してもよい。同様に、スルホン酸部分およびチオ酸部分を誘導体化しても構わない。この反応は、カルボニルジイミダゾールなどの好適なカップリング剤を用いて、通常の条件下で行う。一般には、トリフルオロ酢酸およびジクロロメタンなどの溶媒の存在下で反応を行い、−１０℃〜１００℃の範囲の温度で実施すると都合がよい。
【０１１４】
プロセス（ｃ）の残りの反応（たとえば、Ｑ’が−Ｏ−であるとき）は、アルキル化反応である。この反応は、ＤＭＦまたはＤＭＡなどの好適な溶媒を用いて、通常の条件下で行い、室温から１００℃の範囲の温度で実施すると都合がよい。
【０１１５】
さらに、プロセス（ｃ）は、ＲＱ２および／またはＲＱ３部分が水素である場合の式Ｉの形成化合物も示す。そうした化合物は、ＲＱ２および／またはＲＱ３がＣ１〜４アルキル部分またはＣ３〜６シクロアルキル部分であるか、または、一緒になってアルキレン結合またはアルケニレン結合を形成する、式１の化合物に容易に変換できる。
【０１１６】
本発明の代表的な化合物またはその中間体を調製するための具体的な反応条件および他の手順に関する詳細は、以下の実施例に示す。
【０１１７】
医薬組成物および製剤
本発明の化合物は一般に、医薬組成物または製剤の形で患者に投与する。そうした医薬組成物については、以下に限定されるものではないが、吸入、経口的、経鼻的、局所的（経皮など）および非経口的投与モードなど、許容可能な任意の投与経路により、患者に投与することができる。さらに、本発明の化合物を、たとえば１日複数回、１日１回または週１回で経口投与してもよい。個々の投与モードに好適であれば、本発明の化合物のどのような形態（すなわち、遊離塩基、薬学的に許容される塩、溶媒和物など）も、本明細書で考察した医薬組成物中に用いることができることが理解されよう。
【０１１８】
したがって、一実施形態では、本発明は、薬学的に許容されるキャリアおよび本発明の化合物を含む医薬組成物を対象とする。組成物は、必要に応じて、他の治療薬および／または配合剤を含んでもよい。さらに、本明細書では、「本発明の化合物」を「作用薬」と呼ぶことがある。
【０１１９】
本発明の医薬組成物は一般に、治療有効量の本発明の化合物を含む。しかしながら、医薬組成物は治療有効量を超える量で含む場合（すなわち、バルク組成物）があるし、治療有効量を下回る量で含む場合（すなわち、反復投与して治療有効量になるように設計された個々の単位用量）もあることを、当業者であれば認識するであろう。一実施形態では、組成物は、約０．０１〜１０ｗｔ％など、たとえば、約０．０１〜３０ｗｔ％のように約０．０１〜９５ｗｔ％の作用薬を含有し、実際の量は、製剤自体、投与経路、投与頻度によって異なる。別の実施形態では、吸入に好適な組成物は、たとえば、約０．０１〜３０ｗｔ％の作用薬を含み、なお他の実施形態は、約０．０１〜１０ｗｔ％の作用薬を含む。
【０１２０】
本発明の医薬組成物には、任意の従来のキャリアまたは賦形剤を用いてもよい。個々のキャリアまたは賦形剤あるいはキャリアまたは賦形剤の組み合わせに何を選択するかは、個々の患者の処置に使用する投与モードまたは医学的状態もしくは病状のタイプによって異なる。これに関連した特定の投与モードに好適な組成物の調製は、十分に医薬品技術分野の当業者の範囲内である。また、そうした組成物に使用するキャリアまたは賦形剤は、市販されている。さらなる例示として、従来の製剤技法は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｈｉｔｅ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ（２０００）；およびＨ．Ｃ．Ａｎｓｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，７ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｈｉｔｅ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，Ｍａｒｙｌａｎｄ（１９９９）に記載されている。
【０１２１】
薬学的に許容されるキャリアになり得る材料の代表的な例として、ラクトース、グルコースおよびスクロースなどの糖；コーンスターチおよびポテトスターチなどのデンプン；微結晶性セルロースなどのセルロースおよびその誘導体（カルボキシルメチルセルロースナトリウム、エチルセルロースおよび酢酸セルロースなど）；粉末トラガント；モルト；ゼラチン；タルク；カカオバターおよび坐剤ワックスなどの賦形剤；ピーナッツ油、綿実油、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油および大豆油などの油；プロピレングリコールなどのグリコール；グリセリン、ソルビトール、マンニトールおよびポリエチレングリコールなどのポリオール；オレイン酸エチルおよびエチルラウラートなどのエステル；寒天；水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなどの緩衝剤；アルギン酸；パイロジェンフリー水；等張食塩水；リンゲル液；エチルアルコール；リン酸塩緩衝溶液；クロロフルオロカーボンおよびヒドロフルオロカーボンなどの噴霧剤圧縮ガス；および医薬組成物中での使用に適合した他の無毒性物質があるが、これに限定されるものではない。
【０１２２】
医薬組成物は一般に、作用薬を薬学的に許容されるキャリアおよび１種または複数種の任意の成分と十分かつ本質的に混合またはブレンドして調製する。次いで、得られた均一にブレンドした混合物を、従来の手順および機器を用いて、錠剤、カプセル、ピル、キャニスター、カートリッジ、ディスペンサーおよび同種のものにしてもよいし、それらに充填してもよい。
【０１２３】
一実施形態では、医薬組成物は、吸入投与に好適である。吸入投与に好適な組成物は一般に、エアロゾルまたは粉末の形態である。通常、そうした組成物を、以下に例を示すネブライザー吸入器、乾燥粉末吸入器または定量吸入器など、よく知られている送達装置を用いて、投与する。
【０１２４】
本発明の特定の実施形態では、ネブライザー吸入器を用いて、作用薬を含む組成物を吸入で投与する。そうしたネブライザー装置は一般に、高速気流を発生させて、組成物を霧状のものとして噴霧して患者の気道に運ぶ。したがって、作用薬をネブライザー吸入器用に製剤化する場合、好適なキャリアに溶解して溶液を形成するのが一般的である。あるいは、作用薬を微粉化し、好適なキャリアと組み合わせて、呼吸用のサイズに微粉化された粒子の懸濁液を形成してもよい。微粉化とは一般に、粒子の少なくとも約９０パーセントの質量中央径を約１０μｍ未満にすることと定義される。「質量中央径」という語は、粒子の質量の半分が、直径がより大きい粒子に含まれ、半分は直径がより小さい粒子に含まれる、直径を意味する。
【０１２５】
好適なネブライザー装置として、Ｒｅｓｐｉｍａｔ（登録商標）Ｓｏｆｔ  Ｍｉｓｔ（商標）Ｉｎｈａｌｅｒ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、ＡＥＲｘ（登録商標）Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ａｒａｄｉｇｍ  Ｃｏｒｐ．）およびＰＡＲＩ  ＬＣ  Ｐｌｕｓ Ｒｅｕｓａｂｌｅ  Ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ（Ｐａｒｉ  ＧｍｂＨ）が挙げられる。ネブライザー吸入器用の例示的な組成物は、約０．０５μｇ／ｍＬ〜約１０ｍｇ／ｍＬの本発明の化合物を含有する等張水溶液を含む。一実施形態では、そうした溶液のｐＨは約４〜６である。
【０１２６】
本発明の別の特定の実施形態では、乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ：ｄｒｙ  ｐｏｗｄｅｒ  ｉｎｈａｌｅｒ）を用いて、作用薬を含む組成物を吸入で投与する。そうしたＤＰＩでは一般に、吸気の過程で患者の気流に分散する易流動性の粉末として作用薬を投与する。易流動性の粉末を得るには、一般に作用薬を、ラクトース、デンプン、マンニトール、デキストロース、ポリ乳酸、ポリラクチド−コ−グリコリドおよびこれらの組み合わせなどの好適な賦形剤とともに製剤化する。一般には、作用薬を微粉化し、賦形剤と組み合わせて吸入に好適なブレンドを形成する。このため、本発明の一実施形態では、作用薬は、微粉化された形態である。たとえば、ＤＰＩに使用できる代表的な組成物は、粒度が約１μｍ〜約１００μｍの乾燥ラクトース（たとえば、乾燥粉砕したラクトース）および微粉化した作用薬の粒子を含む。そうした乾燥粉末製剤については、たとえば、ラクトースを作用薬と組み合わせて、次いで、その成分を乾燥ブレンドして製造する。あるいは、必要に応じて、賦形剤を用いずに作用薬を製剤化してもよい。その後、一般には組成物をＤＰＩまたはＤＰＩ用の吸入カートリッジまたはカプセルに充填する。ＤＰＩは、当業者によく知られており、そうした装置が多数市販されている。代表的な装置には、Ａｅｒｏｌｉｚｅｒ（登録商標）（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ａｉｒｍａｘ（商標）（ＩＶＡＸ）、ＣｌｉｃｋＨａｌｅｒ（登録商標）（Ｉｎｎｏｖａｔａ  Ｂｉｏｍｅｄ）、Ｄｉｓｋｈａｌｅｒ（登録商標）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、Ｄｉｓｋｕｓ（登録商標）またはＡｃｃｕｈａｌｅｒ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、Ｅａｓｙｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｏｒｉｏｎ  Ｐｈａｒｍａ）、Ｅｃｌｉｐｓｅ（商標）（Ａｖｅｎｔｉｓ）、ＦｌｏｗＣａｐｓ（登録商標）（Ｈｏｖｉｏｎｅ）、Ｈａｎｄｉｈａｌｅｒ（登録商標）（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、Ｐｕｌｖｉｎａｌ（登録商標）（Ｃｈｉｅｓｉ）、Ｒｏｔａｈａｌｅｒ（登録商標）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、ＳｋｙｅＨａｌｅｒ（商標）またはＣｅｒｔｉｈａｌｅｒ（商標）（ＳｋｙｅＰｈａｒｍａ）、Ｔｗｉｓｔｈａｌｅｒ（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ）、Ｔｕｒｂｕｈａｌｅｒ（登録商標）（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、Ｕｌｔｒａｈａｌｅｒ（登録商標）（Ａｖｅｎｔｉｓ）および同種のものがある。
【０１２７】
本発明のなお別の特定の実施形態では、定量吸入器（ＭＤＩ：ｍｅｔｅｒｅｄ−ｄｏｓｅ  ｉｎｈａｌｅｒ）を用いて、作用薬を含む組成物を吸入で投与する。そうしたＭＤＩは一般に、噴射剤圧縮ガスを用いて一定量の作用薬を放出する。したがって、定量製剤は一般に、ＣＣｌ３Ｆなどのクロロフルオロカーボンまたは１，１，１，２−テトラフルオロエタン（ＨＦＡ１３４ａ）および１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパン（ＨＦＡ２２７）などのヒドロフルオロアルカン（ＨＦＡ：ｈｙｄｒｏｆｌｕｏｒｏａｌｋａｎｅ）のような液化噴射剤に溶かした作用薬の溶液または懸濁液を含む。ただし、クロロフルオロカーボンはオゾン層に影響を与えることが懸念されるため、通常、ＨＦＡが好ましい。ＨＦＡ製剤の任意の追加成分として、エタノールまたはペンタンなどの共溶媒およびソルビタントリオレアート、オレイン酸、レシチンおよびグリセリンなどの界面活性剤がある。たとえば、Ｐｕｒｅｗａｌらに対する米国特許第５，２２５，１８３号、欧州特許第０７１７９８７  Ａ２号（Ｍｉｎｎｅｓｏｔａ  Ｍｉｎｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ）および国際公開第９２／２２２８６号（Ｍｉｎｎｅｓｏｔａ  Ｍｉｎｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ）を参照されたい。ＭＤＩ用の代表的な組成物は、約０．０１〜５ｗｔ％の作用薬；約０〜２０ｗｔ％のエタノール；および約０〜５ｗｔ％の界面活性剤を含み、残りはＨＦＡ噴射剤である。そうした組成物については一般に、冷却または加圧したヒドロフルオロアルカンを、作用薬、エタノール（存在する場合）および界面活性剤（存在する場合）を含む好適な容器に加えて、調製する。懸濁液を調製するには、作用薬を微粉化し、次いで、噴射剤と組み合わせる。その後、この製剤を、ＭＤＩの一部を形成するエアロゾル缶に充填する。ＭＤＩは、当業者によく知られており、多くのそうした装置が市販されている。代表的な装置には、ＡｅｒｏＢｉｄ  Ｉｎｈａｌｅｒ  Ｓｙｓｔｅｍ（Ｆｏｒｅｓｔ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、Ａｔｒｏｖｅｎｔ  Ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ  Ａｅｒｏｓｏｌ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ）、Ｆｌｏｖｅｎｔ（登録商標）（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）、Ｍａｘａｉｒ  Ｉｎｈａｌｅｒ（３Ｍ）、Ｐｒｏｖｅｎｔｉｌ（登録商標）Ｉｎｈａｌｅｒ（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ）、Ｓｅｒｅｖｅｎｔ（登録商標）Ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ  Ａｅｒｏｓｏｌ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ）および同種のものがある。あるいは、界面活性剤のコーティングを、微粉化した作用薬の粒子に噴霧乾燥させて、懸濁液製剤を調製してもよい。たとえば、国際公開第９９／５３９０１号（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｔｄ．）および国際公開第００／６１１０８号（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｔｄ．）を参照されたい。
【０１２８】
呼吸用の粒子を調製するプロセスおよび吸入投薬に好適な製剤および装置のさらなる例は、Ｂｒｉｇｇｎｅｒらに対する米国特許第５，８７４，０６３号；Ｔｒｏｆａｓｔに対する同第５，９８３，９５６号；Ｊａｋｕｐｏｖｉｃらに対する同第６，２２１，３９８号；Ｇａｏらに対する同第６，２６８，５３３号；Ｂｉｓｒａｔらに対する同第６，４７５，５２４号；およびＣｏｏｐｅｒに対する同第６，６１３，３０７号に記載されている。
【０１２９】
別の実施形態では、医薬組成物は、経口投与に好適である。経口投与に好適な組成物は、カプセル、錠剤、ピル、ロゼンジ、カシェ、糖衣錠、粉末、顆粒；水性または非水性液体中の溶液または懸濁液；水中油型または油中水型液体エマルジョン；エリキシル剤またはシロップ；および同種のものの形態であってよく、それぞれが所定量の作用薬を含む。
【０１３０】
固形剤形（すなわち、カプセル、錠剤、ピルおよび同種のもの）による経口投与を意図している場合、組成物は一般に、作用薬と、クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムなどの１種または複数種の薬学的に許容されるキャリアとを含む。さらに、固形剤形は、デンプン、微結晶性セルロース、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトールおよび／またはケイ酸などの充填剤または増量剤；カルボキシメチルセルロース、アルギナート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよび／またはアカシアなどのバインダー；グリセロールなどの湿潤薬；寒天（ａｇａｒ−ａｇａｒ）、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のシリカートおよび／または炭酸ナトリウムなどの崩壊剤；パラフィンなどの溶解遅延剤；第四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤；セチルアルコールおよび／またはグリセロールモノステアラートなどの湿潤剤；カオリンおよび／またはベントナイト粘土などの吸収剤；タルク、カルシウムステアラート、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムおよび／またはこれらの混合物などの滑沢剤；着色剤；および緩衝剤を含んでもよい。
【０１３１】
さらに、医薬組成物には、剥離剤、湿潤剤、コーティング剤、甘味剤、香味料および芳香剤、保存剤および酸化防止剤が存在してもよい。錠剤、カプセル、ピルおよび同種のものの例示的なコーティング剤には、セルロースアセタートフタラート、ポリビニルアセタートフタラート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタラート、メタクリル酸−メタクリル酸エステルコポリマー、セルロースアセタートトリメリタート、カルボキシメチルエチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセタートスクシナートおよび同種のものなどの腸溶コーティングに使用するコーティング剤がある。薬学的に許容される酸化防止剤の例として、アスコルビン酸、システインヒドロクロリド、重硫酸ナトリウム、メタ重硫酸ナトリウム  亜硫酸ナトリウムおよび同種のものなどの水溶性酸化防止剤；アスコルビルパルミタート、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、レシチン、没食子酸プロピル、アルファ−トコフェロールおよび同種のものなどの油溶性酸化防止剤；およびクエン酸、エチレンジアミン四酢酸、ソルビトール、酒石酸、リン酸および同種のものなどの金属キレート化剤が挙げられる。
【０１３２】
また、たとえば、様々な割合でヒドロキシプロピルメチルセルロースを用いて、または他のポリマーマトリックス、リポソームおよび／またはミクロスフェアを用いて、組成物を製剤化して作用薬の放出を遅延または制御してもよい。さらに、本発明の医薬組成物については、乳白剤を含んでもよく、胃腸管の特定の部分のみに、あるいは、そうした部分に優先的に（任意に遅延性に）作用薬が放出されるように製剤化しても構わない。使用してもよい包埋組成物の例として、重合物質およびワックスがある。さらに、適切な場合には、作用薬は、上述の賦形剤の１種または複数種とともにマイクロカプセルの形態をとってもよい。
経口投与に好適な液体剤形として、たとえば、薬学的に許容されるエマルジョン、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップおよびエリキシル剤が挙げられる。液体剤形は一般に、作用薬と、たとえば、水または他の溶媒、溶解補助剤および乳化剤（エチルアルコール、イソプロピルアルコール、エチルカルボナート、酢酸エチル、ベンジルアルコール、ベンジルベンゾアート、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（たとえば、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコールおよびソルビタンの脂肪酸エステルならびにこれらの混合物など）のような不活性希釈液とを含む。懸濁液は、たとえば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールエステル、ソルビタンエステル、微結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天（ａｇａｒ−ａｇａｒ）およびトラガントならびにこれらの混合物などの懸濁化剤を含んでもよい。
【０１３３】
経口投与を意図している場合、本発明の医薬組成物を単位剤形にパッケージングしてもよい。「単位剤形」という語は、患者への投薬に好適な物理的に分離したユニットをいう。言い換えれば、各ユニットは、単独あるいは１つまたは複数の追加ユニットと組み合わせて所望の治療効果が得られるように計算された所定量の作用薬を含む。たとえば、そうした単位剤形は、カプセル、錠剤、ピルおよび同種のものでもよい。
【０１３４】
また、本発明の化合物を、非経口（たとえば、皮下、静脈内、筋肉内または腹腔内注射）的に投与してもよい。そうした投与の場合、作用薬を、無菌の溶液、懸濁液またはエマルジョンに加えて提供する。そうした製剤を調製する例示的な溶媒として、水、食塩水、プロピレングリコールなどの低分子量アルコール、ポリエチレングリコール、油、ゼラチン、オレイン酸エチルなどの脂肪酸エステルおよび同種のものが挙げられる。典型的な非経口製剤は、作用薬の無菌水溶液（ｐＨ４〜７）である。また、非経口製剤は、１種または複数種の可溶化剤、安定剤、保存剤、湿潤剤、乳化剤および分散剤を含んでもよい。これらの製剤については、無菌注射用媒体、滅菌剤、濾過、照射または熱を用いて、無菌にすることができる。
【０１３５】
さらに、既知の経皮送達系および賦形剤を用いて、本発明の化合物を経皮的に投与してもよい。たとえば、本化合物を、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールモノラウラート、アザシクロアルカン−２−オンおよび同種のものなどの浸透エンハンサーと混合し、パッチまたは類似の送達系に導入してもよい。必要に応じて、そうした経皮用組成物中に、ゲル化剤、乳化剤および緩衝液などの追加の賦形剤を用いても構わない。
【０１３６】
必要に応じて、本発明の化合物を、１種または複数種の他の治療薬と組み合わせて投与してもよい。したがって、一実施形態では、本発明の組成物は任意に、本発明の化合物と同時投与する他の薬剤を含んでもよい。たとえば、組成物は、他の気管支拡張剤（たとえば、ＰＤＥ３阻害剤、アデノシン２ｂモジュレーターおよびβ２アドレナリン受容体アゴニスト）；抗炎症薬（たとえば、コルチコステロイドおよび糖質コルチコイドなどのステロイド系抗炎症薬；非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ：ｎｏｎ−ｓｔｅｒｏｉｄａｌ  ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ  ａｇｅｎｔ）；およびＰＤＥ４阻害剤）；他のムスカリン受容体アンタゴニスト（すなわち、抗コリン薬（ａｎｔｉｃｈｌｏｌｉｎｅｒｇｉｃ  ａｇｅｎｔ））；抗感染症薬（たとえば、グラム陽性およびグラム陰性抗生物質および抗ウイルス薬）；抗ヒスタミン剤；プロテアーゼ阻害剤；求心性遮断薬（たとえば、Ｄ２アゴニストおよびニューロキニンモジュレーター）；およびこれらの組み合わせの群から選択される１種または複数種の薬剤（「第二の薬（単数または複数）」ともいう）をさらに含んでもよい。そうした治療薬の多くの例が、当該技術分野において周知であり、その例を以下に示す。本発明の化合物を第二の薬と組み合わせることで、場合によっては、２種の組成物の投与により、場合によっては、作用薬および第二の薬を含む単一組成物の投与により、２剤併用療法、すなわち、ムスカリン受容体アンタゴニスト活性および第二の薬（たとえば、β１アドレナリン受容体アゴニスト）に関係する活性を実現できる。したがって、本発明のなお別の態様では、医薬組成物は、本発明の化合物、第二の作用薬および薬学的に許容されるキャリアを含む。さらに、第三、第四の作用薬などを本組成物に含ませてもよい。たとえば、組成物は、本発明の化合物；コルチコステロイド、β２アドレナリン受容体アゴニストから選択される第二の薬；ホスホジエステラーゼ−４阻害剤およびその組み合わせ；および薬学的に許容されるキャリアを含んでもよい。特定の実施形態では、組成物は、本発明の化合物、β２アドレナリン受容体アゴニストおよびステロイド系抗炎症薬を含む。併用療法の場合、投与される本発明の化合物の量および第二の薬の量は、単独療法で投与される量未満であるのが一般的である。
【０１３７】
本発明の化合物については、第二の作用薬と物理的に混合して２つの薬を含む組成物を形成してもよいし、あるいは、薬がそれぞれ別々の組成物として存在してもよく、それを患者に同時投与または連続投与する。たとえば、従来の手順および機器を用いて、本発明の化合物を第二の作用薬と組み合わせて、本発明の化合物および第二の作用薬を含む作用薬の組み合わせを形成してもよい。さらに、この作用薬を薬学的に許容されるキャリアと組み合わせて、本発明の化合物、第二の作用薬および薬学的に許容されるキャリアを含む医薬組成物を形成しても構わない。この実施形態では、組成物の各成分を混合またはブレンドして、物理的混合物を生成するのが一般的である。その後、この物理的混合物を、本明細書に記載の経路のいずれかにより治療有効量で投与する。
【０１３８】
あるいは、患者に投与する前の作用薬は、別々のままでもよい。この実施形態では、投与前に薬を物理的に混ぜ合わせずに、別の組成物として同時または異なる時間に投与する。そうした組成物については、キットに別々に包装してもよいし、一緒に包装してもよい。第二の薬を異なる時間に投与する場合、本発明の化合物の投与後２４時間未満に投与するのが一般的である。他の実施形態では、こうした時限的関係は、本発明の化合物の投与後１２時間未満、８時間未満、６時間未満、４時間未満、３時間未満、１時間未満、３０分未満、１０分未満、１分未満または直後である。こうした投与は、連続投与とも呼ばれる。したがって、作用薬ごとに異なるコンパートメント（たとえば、ブリスターパック）を採用した吸入送達装置を用いて、他の作用薬と同時または連続的に本発明の化合物を吸入で投与してもよい。この場合、連続的とは、本発明の化合物の投与直後に投与することを意味しても、所定の時間後（たとえば、１時間後または３時間後）に投与することを意味してもよい。あるいは、この組み合わせを、異なる送達装置、すなわち、薬ごとに１つの送達装置を用いて、投与してもよい。さらに、薬を異なる投与経路で、すなわち、一方の薬を吸入により、他方の薬を経口投与により、送達しても構わない。
【０１３９】
一実施形態では、キットは、本発明の方法を実施するのに十分な量で、本発明の化合物を含有する第一の剤形および本明細書に記載する１種または複数種の第二の薬を含有する少なくとも１つの他の剤形を含む。第一の剤形および第二の（または第三などの）剤形はともに、患者の疾患または医学的状態を処置または予防する作用薬を治療有効量で含む。
【０１４０】
第二の薬（単数または複数）を含ませる場合、第二の薬は治療有効量で存在する。言い換えれば、本発明の化合物と同時投与したときに、通常、第二の薬を治療上の有益な作用が得られる量で投与する。第二の薬は、薬学的に許容される塩、溶媒和物、任意に純粋な立体異性体などの形をとってもよい。したがって、以下に記載する第二の薬は、そうした形をすべて含むことを意図しており、市販されているか、あるいは、通常の手順および試薬を用いて調製することができる。第二の薬の好適な用量一般には、約０．０５μｇ／日〜約５００ｍｇ／日の範囲にある。
【０１４１】
特定の実施形態では、本発明の化合物を、β２アドレナリン受容体アゴニストと組み合わせて投与する。代表的なβ２アドレナリン受容体アゴニストとして、アルブテロール、ビトルテロール、フェノテロール、ホルモテロール、インダカテロール、イソエタリン、レバルブテロール、メタプロテレノール、ピルブテロール、サルブタモール、サルメファモール、サルメテロール、テルブタリンおよび同種のものがあるが、これに限定されるものではない。本発明の化合物と組み合わせて使用してもよい他のβ２アドレナリン受容体アゴニストとして、３−（４−｛［６−（｛（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−［４−ヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）−フェニル］エチル｝アミノ）−ヘキシル］オキシ｝ブチル）ベンゼンスルホンアミドおよび３−（−３−｛［７−（｛（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−［４−ヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル｝−アミノ）ヘプチル］オキシ｝−プロピル）ベンゼンスルホンアミドおよび国際公開第０２／０６６４２２号（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｔｄ．）に開示された関連化合物；３−［３−（４−｛［６−（［（２Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−［４−ヒドロキシ−３−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチル｝アミノ）ヘキシル］オキシ｝ブチル）−フェニル］イミダゾリジン−２，４−ジオンおよび国際公開第０２／０７０４９０号（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｔｄ．）に開示された関連化合物；３−（４−｛［６−（｛（２Ｒ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル｝アミノ）ヘキシル］オキシ｝ブチル）−ベンゼンスルホンアミド、３−（４−｛［６−（｛（２Ｓ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル｝アミノ）ヘキシル］オキシ｝ブチル）−ベンゼンスルホンアミド、３−（４−｛［６−（｛（２Ｒ／Ｓ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル｝アミノ）ヘキシル］オキシ｝ブチル）−ベンゼンスルホンアミド、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−３−（４−｛［６−（｛（２Ｒ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル｝アミノ）ヘキシル］−オキシ｝ブチル）ベンゼンスルホンアミド、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−３−（４−｛［６−（｛（２Ｓ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル｝アミノ）−ヘキシル］オキシ｝ブチル）−ベンゼンスルホンアミド、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブチル）−３−（４−｛［６−（｛（２Ｒ／Ｓ）−２−［３−（ホルミルアミノ）−４−ヒドロキシフェニル］−２−ヒドロキシエチル｝アミノ）ヘキシル］−オキシ｝ブチル）ベンゼンスルホンアミドおよび国際公開第０２／０７６９３３号（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｔｄ．）に開示された関連化合物；４−｛（１Ｒ）−２−［（６−｛２−［（２，６−ジクロロベンジル）オキシ］エトキシ｝ヘキシル）アミノ］−１−ヒドロキシエチル｝−２−（ヒドロキシメチル）フェノールおよび国際公開第０３／０２４４３９号（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｔｄ．）に開示された関連化合物；Ｎ−｛２−［４−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−��−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチル｝−（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−（３−ホルムアミド−４−ヒドロキシフェニル）エチルアミンおよびＭｏｒａｎらに対する米国特許第６，５７６，７９３号に開示された関連化合物；Ｎ−｛２−［４−（３−フェニル−４−メトキシフェニル）アミノフェニル］エチル｝−（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−（８−ヒドロキシ−２（１Ｈ）−キノリノン−５−イル）エチルアミンおよびＭｏｒａｎらに対する米国特許第６，６５３，３２３号に開示された関連化合物があるが、これに限定されるものではない。特定の実施形態では、β２−アドレノセプターアゴニストは、Ｎ−｛２−［４−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチル｝−（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−（３−ホルムアミド−４−ヒドロキシフェニル）エチルアミンの結晶性一塩酸塩である。一般に、β２−アドレノセプターアゴニストについては、１用量当たり約０．０５〜５００μｇを与えるのに十分な量で投与する。
【０１４２】
特定の実施形態では、本発明の化合物をステロイド系抗炎症薬と組み合わせて投与する。代表的なステロイド系抗炎症薬として、ベクロメタゾンジプロピオナート；ブデソニド；ブチキソコルトプロピオナート；２０Ｒ−１６α，１７α−［ブチリデンビス（オキシ）］−６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１７β−（メチルチオ）アンドロスタ−４−エン−３−オン（ＲＰＲ−１０６５４１）；シクレソニド；デキサメタゾン；６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソアンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステル；６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−１７α−［（４−メチル−１，３−チアゾール−５−カルボニル）オキシ］−３−オキソアンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステル；６α，９α−ジフルオロ−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソ−１７α−プロピオニルオキシアンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸（Ｓ）−（２−オキソテトラヒドロフラン−３Ｓ−イル）エステル；フルニソリド；フルチカソンプロピオナート；メチルプレドニゾロン；モメタゾンフロアート；プレドニゾロン；プレドニゾン；ロフレポニド；ＳＴ−１２６；トリアムシノロンアセトニド；および同種のものがあるが、これに限定されるものではない。一般に、ステロイド系抗炎症薬に関しては、１用量当たり約０．０５〜５００μｇを与えるのに十分な量で投与する。
【０１４３】
例示的な組み合わせとして、本発明の化合物をβ２アドレナリン受容体アゴニストとしてのサルメテロールと、およびステロイド系抗炎症薬としてのフルチカソンプロピオナートと同時投与する。他の例示的な組み合わせとして、本発明の化合物をβ２−アドレノセプターアゴニストとしてのＮ−｛２−［４−（（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−フェニルエチルアミノ）フェニル］エチル｝−（Ｒ）−２−ヒドロキシ−２−（３−ホルムアミド−４−ヒドロキシフェニル）エチルアミンの結晶性一塩酸塩と、およびステロイド系抗炎症薬としての６α，９α−ジフルオロ−１７α−［（２−フラニルカルボニル）オキシ］−１１β−ヒドロキシ−１６α−メチル−３−オキソアンドロスタ−１，４−ジエン−１７β−カルボチオ酸Ｓ−フルオロメチルエステルと同時投与する。
【０１４４】
他の好適な組み合わせには、たとえば、ＮＳＡＩＤ（クロモグリク酸ナトリウム；ネドクロミルナトリウム；ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ：ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓｔｅｒａｓｅ）阻害剤（たとえば、テオフィリン、ＰＤＥ４阻害剤または混合ＰＤＥ３／ＰＤＥ４阻害剤など）；ロイコトリエンアンタゴニスト（たとえば、モンテロイカスト）；ロイコトリエン合成の阻害剤；ｉＮＯＳ阻害剤；トリプターゼ阻害剤およびエラスターゼ阻害剤などのプロテアーゼ阻害剤；β−２インテグリンアンタゴニストおよびアデノシン受容体アゴニストまたはアンタゴニスト（たとえば、アデノシン２ａアゴニスト）；サイトカインアンタゴニスト（たとえば、インターロイキン抗体（αＩＬ抗体）、特にαＩＬ−４治療剤、αＩＬ−１３治療剤またはその組み合わせなどのケモカインアンタゴニスト）；またはサイトカイン合成の阻害剤のような他の抗炎症薬がある。
【０１４５】
特定の実施形態では、本発明の化合物をホスホジエステラーゼ−４（ＰＤＥ４）阻害剤または混合ＰＤＥ３／ＰＤＥ４阻害剤と組み合わせて投与する。代表的なＰＤＥ４または混合ＰＤＥ３／ＰＤＥ４阻害剤として、ｃｉｓ４−シアノ−４−（３−シクロペンチルオキシ−４−メトキシフェニル）シクロヘキサン−１−カルボン酸、２−カルボメトキシ−４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシフェニル）シクロヘキサン−１−オン；ｃｉｓ−［４−シアノ−４−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシフェニル）シクロヘキサン−１−オール］；ｃｉｓ−４−シアノ−４−［３−（シクロペンチルオキシ）−４−メトキシフェニル］シクロヘキサン−１−カルボン酸および同種のものまたはその薬学的に許容される塩があるが、これに限定されるものではない。他の代表的なＰＤＥ４阻害剤または混合ＰＤＥ４／ＰＤＥ３阻害剤として、ＡＷＤ−１２−２８１（ｅｌｂｉｏｎ）；ＮＣＳ−６１３（ＩＮＳＥＲＭ）；Ｄ−４４１８（ＣｈｉｒｏｓｃｉｅｎｃｅおよびＳｃｈｅｒｉｎｇ−Ｐｌｏｕｇｈ）；ＣＩ−１０１８またはＰＤ−１６８７８７（Ｐｆｉｚｅｒ）；国際公開第９９／１６７６６号（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ）に開示されたベンゾジオキソール化合物；Ｋ−３４（Ｋｙｏｗａ  Ｈａｋｋｏ）；Ｖ−１１２９４Ａ（Ｎａｐｐ）；ロフルミラスト（Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ）；国際公開第９９／４７５０５号（Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ）に開示されたプタラジノン化合物；プマフェントリン（Ｂｙｋ−Ｇｕｌｄｅｎ、現在はＡｌｔａｎａ）；アロフィリン（Ａｌｍｉｒａｌｌ−Ｐｒｏｄｅｓｆａｒｍａ）；ＶＭ５５４／ＵＭ５６５（Ｖｅｒｎａｌｉｓ）；Ｔ−４４０（Ｔａｎａｂｅ  Ｓｅｉｙａｋｕ）；およびＴ２５８５（Ｔａｎａｂｅ  Ｓｅｉｙａｋｕ）が挙げられる。
【０１４６】
特定の実施形態では、本発明の化合物をムスカリンアンタゴニスト（すなわち、抗コリン薬）と組み合わせて投与する。代表的なムスカリンアンタゴニストとして、アトロピン、アトロピンスルファート、アトロピンオキシド、メチルアトロピンニトラート、ホマトロピンヒドロブロミド、ヒヨスチアミン（ｄ，ｌ）ヒドロブロミド、スコポラミンヒドロブロミド、イプラトロピウムブロミド、オキシトロピウムブロミド、チオトロピウムブロミド、メタンテリン、プロパンテリンブロミド、アニソトロピンメチルブロミド、クリジニウムブロミド、コピロラート（ロビヌル）、ヨウ化イソプロパミド、メペンゾラートブロミド、トリジヘキセチルクロリド（パチロン）、ヘキソシクリウムメチルスルファート、シクロペントラートヒドロクロリド、トロピカミド、トリヘキシフェニジルヒドロクロリド、ピレンゼピン、テレンゼピン、ＡＦ−ＤＸ１１６およびメトクトラミンおよび同種のものがあるが、これに限定されるものではない。
【０１４７】
特定の実施形態では、本発明の化合物を抗ヒスタミン剤（すなわち、Ｈ１受容体アンタゴニスト）と組み合わせて投与する。代表的な抗ヒスタミン剤として、カルビノキサミンマレアート、クレマスチンフマラート、ジフェニルヒドラミンヒドロクロリドおよびジメンヒドリナートなどのエタノールアミン；ピリルアミンアムレアート、トリペレナミンヒドロクロリドおよびトリペレナミンシトラートなどのエチレンジアミン；クロルフェニラミンおよびアクリバスチンなどのアルキルアミン；ヒドロキシジンヒドロクロリド、ヒドロキシジンパモアート、シクリジンヒドロクロリド、シクリジンラクタート、メクリジンヒドロクロリドおよびセチリジンヒドロクロリドなどのピペラジン；アステミゾール、レボカバスチンヒドロクロリド、ロラタジンまたはそのデスカルボエトキシアナログ、テルフェナジンおよびフェキソフェナジンヒドロクロリドなどのピペリジン；アゼラスチンヒドロクロリド；および同種のものがあるが、これに限定されるものではない。
【０１４８】
以下の製剤は、本発明の代表的な医薬組成物を示す。
【０１４９】
ＤＰＩによる投与のための例示的な組成物
本発明の化合物（０．２ｍｇ）を微粉化してから、ラクトース（２５ｍｇ）とブレンドする。次いで、このブレンドした混合物をゼラチン吸入カートリッジに充填する。ＤＰＩなどを用いて、カートリッジの内容物を投与する。
【０１５０】
本発明の微粉化した化合物（１００ｍｇ）を粉砕したラクトース（２５ｇ）（たとえば、約８５％以下の粒子のＭＭＤが約６０μｍ〜約９０μｍ、１５％以上の粒子のＭＭＤが１５μｍ未満であるラクトース）とブレンドする。次いで、ブレンドした混合物を、１用量当たり約１０〜５００μｇの本発明の化合物を与えるのに十分な量で、剥離可能なブリスターパックの個々のブリスターに充填する。ＤＰＩを用いてブリスターの内容物を投与する。
【０１５１】
あるいは、本発明の微粉化した化合物（１ｇ）を、粉砕したラクトース（２００ｇ）とブレンドして、化合物と粉砕したラクトースの重量比が１：２００のバルク組成物を形成する。ブレンドした組成物を、１用量当たり約１０〜５００μｇの本発明の化合物を送達できるＤＰＩに詰める。
【０１５２】
あるいは、本発明の微粉化した化合物（１００ｍｇ）および微粉化したβ２アドレナリン受容体アゴニスト（５００ｍｇ）を、粉砕したラクトース（３０ｇ）とブレンドする。次いで、ブレンドした混合物を、１用量当たり約１０μｇ〜約５００μｇの本発明の化合物を与えるのに十分な量で、剥離可能なブリスターパックの個々のブリスターに充填する。ＤＰＩを用いてブリスターの内容物を投与する。
【０１５３】
ＭＤＩに使用する例示的な組成物
本発明の微粉化した化合物（１０ｇ）を、レシチン（０．２ｇ）を脱イオン水（２００ｍＬ）に溶解して調製した溶液に分散させる。得られた懸濁液を噴霧乾燥させてから、微粉化し、平均径が約１．５μｍ未満の粒子を含む微粉化組成物を形成する。その後、ＭＤＩで投与する際は、１用量当たり約１０μｇ〜約５００μｇの本発明の化合物を与えるのに十分な量で、微粉化組成物を、加圧した１，１，１，２−テトラフルオロエタンを含むＭＤＩカートリッジに充填する。
【０１５４】
あるいは、平均サイズを１０μｍ未満に微粉化した粒子としての本発明の化合物（５ｇ）を、脱イオン水の１００ｍＬに溶解した０．５ｇのトレハロースおよび０．５ｇのレシチンから形成されたコロイド溶液に分散させて、５ｗｔ％の本発明の化合物、０．５ｗｔ％レシチンおよび０．５ｗｔ％トレハロースを含む懸濁液を調製する。この懸濁液を噴霧乾燥させ、得られた材料を、平均径が１．５μｍ未満の粒子に微粉化する。粒子を、加圧した１，１，１，２−テトラフルオロエタンとともにキャニスターに充填する。
【０１５５】
ネブライザー吸入器に使用する例示的な組成物
本発明の化合物（２５ｍｇ）をクエン酸塩緩衝（ｐＨ５）等張食塩水（１２５ｍＬ）に溶解する。この混合物を撹拌し、化合物が溶解するまで超音波で処理する。溶液のｐＨを点検し、必要に応じて、１Ｎの水性水酸化ナトリウムをゆっくりと加えてｐＨ５に調整する。この溶液を、１用量当たり約１０μｇ〜約５００μｇの本発明の化合物を与えるネブライザー装置を用いて投与する。
【０１５６】
経口投与用の例示的な硬ゼラチンカプセル
本発明の化合物（５０ｇ）、噴霧乾燥したラクトース（４４０ｇ）およびステアリン酸マグネシウム（１０ｇ）を十分にブレンドする。次いで、得られた組成物を硬ゼラチンカプセルに充填する（１カプセル当たり組成物５００ｍｇ）。
【０１５７】
経口投与用の例示的な懸濁液
以下の成分を混合し、懸濁液１０ｍＬ当たり１００ｍｇの化合物を含む懸濁液を形成する：
【０１５８】
【化２９】
0005528817.tif 000050
注射による投与のための例示的な注射用製剤
本発明の化合物（０．２ｇ）を０．４Ｍの酢酸ナトリウム緩衝液溶液（２．０ｍＬ）とブレンドする。必要に応じて、０．５Ｎの水性塩酸または０．５Ｎの水性水酸化ナトリウムを用いて、得られた溶液のｐＨをｐＨ４に調整し、次いで、十分な注射用蒸留水を加えて総容量を２０ｍＬにする。その後、この混合物を無菌フィルター（０．２２ミクロン）で濾過し、注射による投与に好適な無菌溶液を得る。
【０１５９】
有用性
本発明の化合物は、ムスカリン受容体アンタゴニスト活性を持ち、一実施形態では、ナノモル濃度で作用する。一実施形態では、本発明の化合物は、Ｍ２ムスカリン受容体サブタイプの活性よりもＭ３ムスカリン受容体サブタイプの活性の阻害に対して選択的である。別の実施形態では、本発明の化合物は、Ｍ１、Ｍ４およびＭ５ムスカリン受容体サブタイプの活性よりもＭ３およびＭ２ムスカリン受容体サブタイプの活性の阻害に対して選択的である。さらに、本発明の化合物は、望ましい作用持続時間を持つと期待されている。このため、別の特定の実施形態では、本発明は、約２４時間を超える作用持続時間を持つ化合物を対象とする。さらに、本発明の化合物は、吸入で投与した場合、吸入で投与する他の既知のムスカリン受容体アンタゴニスト（チオトロピウムなど）に比べて、有効な用量での口内乾燥などの副作用が少ないと期待されている。
【０１６０】
Ｍ３受容体サブタイプに対する化合物の親和性の尺度の１つは、受容体に対する結合の阻害解離定数（Ｋｉ）である。本発明の化合物は、たとえば、インビトロ放射性リガンド置換アッセイで測定した場合、Ｍ３受容体サブタイプに対するＫｉが１００ｎＭ以下であると期待されている。特に注目される化合物は、Ｋｉが５０ｎＭ以下の化合物であり、別の実施形態では、この化合物のＫｉは１０ｎＭ以下であり、なお別の実施形態では、この化合物のＫｉは１．０ｎＭ以下である。さらに特に注目される化合物は、Ｋｉが５００ｐＭ以下の化合物であり、別の実施形態では、この化合物のＫｉは２００ｐＭ以下である。場合によって、本発明の化合物は、ムスカリン受容体アンタゴニスト活性が乏しいことがある点に注意する必要がある。そうした場合でも、その化合物はリサーチツールとしてなお有用であることを当業者であれば認識するであろう。
【０１６１】
さらに特に注目されるのは、投薬２４時間後のＩＤ５０が１００μｇ／ｍＬ以下である化合物、より詳細には投薬２４時間後のＩＤ５０が３０μｇ／ｍＬ以下である化合物である。
【０１６２】
ムスカリン受容体拮抗活性などの本発明の化合物の特性を判定する例示的なアッセイは、実施例に記載されており、限定としてではなく例示として、（たとえば、アッセイ１に記載されているような）ｈＭ１、ｈＭ２、ｈＭ３、ｈＭ４およびｈＭ５ムスカリン受容体結合を測定するアッセイがある。本発明の化合物のムスカリン受容体拮抗活性を判定する有用な機能アッセイには、限定としてではなく例示として、リガンドによる細胞内サイクリックアデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ：ｃｙｃｌｉｃ  ａｄｅｎｏｓｉｎｅ  ｍｏｎｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ）の変化、リガンドによる酵素アデニリルシクラーゼ（ｃＡＭＰを合成）の活性の変化、グアノシン５’−Ｏ−（γ−チオ）トリホスファート（［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ）とＧＤＰとの受容体触媒による交換を介した、単離膜への［３５Ｓ］ＧＴＰγＳの取り込みにおけるリガンドによる変化、リガンドによる細胞内遊離カルシウムイオンの変化（たとえば、蛍光連結イメージングプレートリーダーまたはＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ、Ｉｎｃ．社製のＦＬＩＰＲ（登録商標）で測定）および同種のものを測定するアッセイがある。例示的なアッセイは、アッセイ２に記載する。本発明の化合物は、上述のアッセイまたは類似の性質を持つアッセイのいずれかにおいて、ムスカリン受容体の活性化に拮抗したり、それを減弱させたりすると期待されており、こうした研究では一般に約０．１〜１００ナノモルの範囲の濃度で用いる。このため、前述のアッセイは、治療上の有用性、たとえば、本発明の化合物の気管支拡張活性の判定に有用である。
【０１６３】
本発明の化合物の他の特性および有用性については、当業者によく知られている種々のインビトロおよびインビボアッセイを用いて明らかにすることができる。たとえば、Ｅｉｎｔｈｏｖｅｎモデルなどの動物モデルを用いて、インビボで本発明の化合物の効力を測定してもよい。簡単に説明すると、麻酔動物（Ｅｉｎｔｈｏｖｅｎモデル）を用いて、化合物の気管支拡張活性を評価し、気道抵抗の代替測定値として換気圧を用いる。たとえば、Ｅｉｎｔｈｏｖｅｎ（１８９２）Ｐｆｕｇｅｒｓ  Ａｒｃｈ．５１：３６７−４４５；およびＭｏｈａｍｍｅｄ  ｅｔ  ａｌ．（２０００）Ｐｕｌｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ  １３（６）：２８７−９２およびラットＥｉｎｔｈｏｖｅｎモデルについて記載するアッセイ３を参照されたい。一実施形態では、ラットＥｉｎｔｈｏｖｅｎモデルを用いて、１００μｇ／ｍｌの用量で投与した本発明の化合物は、２４時間での気管支収縮反応が阻害率３５％以上を示し、別の実施形態では、２４時間で阻害率７０％以上を示す。他の有用インビボアッセイは、（たとえば、アッセイ４に記載されているような）ラット唾液分泌抑制剤アッセイである。
【０１６４】
さらに、本発明の第四級化合物には、たとえば、投薬２４時間後のインビトロまたはインビボでの効力の向上に見られるように、対応する非第四級の化合物に対して驚くべき利点がある。たとえば、非第四級の化合物の２つの鏡像異性体：
【０１６５】
【化３０】
0005528817.tif 000051
は、ｈＭ３に対するＫｉ値がそれぞれ１．５および２．９ｎＭ（６時間で測定）を示すのに対し、（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（３−フェニルスルファニルプロピル）ピロリジニウム（実施例２）および（Ｒ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（３−フェニルスルファニルプロピル）ピロリジニウム（実施例５−１１）：
【０１６６】
【化３１】
0005528817.tif 000052
などの本発明の第四級化合物は、ｈＭ３に対するＫｉ値が０．５ｎＭ未満（６時間で測定）を示す。
【０１６７】
本発明の化合物は、ムスカリン受容体が関与する医学的状態を処置するのに有用な治療薬として期待されている。このため、治療有効量の本発明のムスカリン受容体アンタゴニストを投与することで、ムスカリン受容体の遮断により処置される疾患または障害に罹患している患者を処置できると予想される。そうした医学的状態として、たとえば、慢性閉塞性肺疾患（たとえば、慢性および喘鳴性気管支炎および気腫）、喘息、肺線維症、アレルギー性鼻炎、鼻漏および同種のものなど、可逆性気道閉塞に関連するような肺障害または疾患が挙げられる。ムスカリン受容体アンタゴニストで処置できる他の医学的状態には、過活動膀胱または排尿筋過活動およびその症状などの泌尿生殖器障害；過敏性腸症候群、憩室疾患、アカラシア、胃腸運動亢進障害および下痢などの胃腸管障害；洞性徐脈などの心不整脈；パーキンソン病；アルツハイマー病などの認知障害；月経困難症（ｄｉｓｍｅｎｏｒｒｈｅａ）；および同種のものがある。
【０１６８】
１用量で投与される作用薬の量または１日の総投与量については、事前に設定しておいてもよいし、患者の状態の性質および重症度、処置対象の状態、年齢、体重および患者の全身状態、作用薬に対する患者の忍容性、投与経路、投与される作用薬および任意の第二の薬の活性、有効性、薬物動態および毒性学プロファイルなどの薬理学的な項目および同種のものなど、多くの要因を考慮に入れて個々の患者ごとに判定してもよい。疾患または医学的状態（ＣＯＰＤなど）に罹患している患者の処置に関しては、所定の薬用量から始めてもよいし、処置を行っている医師が判定した薬用量から始めてもよく、疾患または医学的状態の症状の予防、寛解、抑制または軽減に必要な一定期間継続する。一般には、そうした処置を受けている患者を常にモニターし、治療の有効性を判定する。たとえば、ＣＯＰＤを処置する際は、努力呼気肺活量（１秒で測定）が著しく改善した場合、それを用いて処置の有効性判定してもよい。本明細書に記載の他の疾患および状態の類似の指標については、当業者によく知られており、処置を行っている医師にとって容易に入手できる。医師が持続的にモニターすれば、作用薬の最適量をいつでも確実に投与できるだけでなく、処置期間を判定しやすくなる。このことは、第二の薬をさらに投与しているとき、その選択、薬用量および治療期間の調整が必要になる場合もあるため、特に注目される。こうして、治療クールを通じて処置レジメンおよび投薬スケジュールを調整するため、所望の有効性を示す最低量の作用薬を投与することができ、さらに、疾患または医学的状態の処置が成功するために必要な場合に限り、投与を継続することができる。
【０１６９】
したがって、一実施形態では、本発明の化合物は、ヒトおよびそのコンパニオンアニマル（たとえば、イヌ、ネコなど）などの哺乳動物の平滑筋障害の処置に有用である。そうした平滑筋障害として、たとえば、過活動膀胱、慢性閉塞性肺疾患および過敏性腸症候群がある。一般に、平滑筋障害またはムスカリン受容体が関与する他の障害の処置に好適な用量は、約０．１５μｇ／ｋｇ／日〜約５ｍｇ／ｋｇ／日など、作用薬約０．１４μｇ／ｋｇ／日〜約７ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。これは、７０ｋｇの平均的なヒトの場合、１日に作用薬約１０μｇ〜約５００ｍｇになる。
【０１７０】
特定の実施形態では、本発明の化合物は、治療有効量の本化合物を患者に投与することにより、ヒトのような哺乳動物のＣＯＰＤまたは喘息などの肺障害または呼吸器障害の処置に有用である。通常、肺障害の処置用量は、約１０〜１５００μｇ／日の範囲である。「ＣＯＰＤ」という語は、Ｂａｒｎｅｓ（２０００）Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４３：２６９−７８およびそこに引用された参考文献の教示内容に例示されているような慢性閉塞性気管支炎および気腫などの様々な呼吸状態を含むことを当業者であれば理解するであろう。肺障害の処置に使用する場合、本発明の化合物は任意に、β２−アドレノセプターアゴニスト；コルチコステロイド、非ステロイド性抗炎症薬またはこれらの組み合わせなど、他の治療薬と組み合わせて投与する。
【０１７１】
吸入で投与する場合、本発明の化合物は通常、気管支を拡張させる作用を持つ。このため、方法態様のもう１つでは、本発明は、患者の気管支を拡張させる方法であって、本発明の化合物を気管支拡張作用が生じる量で患者に投与することを含む、方法を対象とする。通常、気管支を拡張させる治療有効用量は、約１０〜１５００μｇ／日の範囲である。
【０１７２】
別の実施形態では、本発明の化合物を用いて過活動膀胱を処置する。過活動膀胱の処置に使用する場合、典型的な用量は、約１．０〜５００ｍｇ／日の範囲である。なお別の実施形態では、本発明の化合物を用いて過敏性腸症候群を処置する。過敏性腸症候群の処置に使用する場合、一般に、本発明の化合物を経口投与または直腸内投与し、典型的な用量は、約１．０〜５００ｍｇ／日の範囲である。
【０１７３】
本発明の化合物は、ムスカリン受容体アンタゴニスト活性を持つため、ムスカリン受容体を含む生物系またはサンプルを調査したり、研究したりするリサーチツールとしても有用である。そうした研究では、Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３、Ｍ４および／またはＭ５ムスカリン受容体を含む任意の好適な生物系またはサンプルを用いてもよい。研究は、インビトロで行っても、インビボで行ってもよい。そうした研究に適した代表的な生物系またはサンプルとして、細胞、細胞抽出物、形質膜、組織サンプル、摘出臓器、哺乳動物（たとえば、マウス、ラット、モルモット、ウサギ、イヌ、ブタ、ヒトなど）および同種のものがあるが、これに限定されるものではない。哺乳動物は、特に注目される。本発明の特定の一実施形態では、本発明の化合物をムスカリン受容体に拮抗する量で投与して、哺乳動物のムスカリン受容体に拮抗させる。さらに、本発明の化合物を用いた生物学的アッセイを行うことで、この化合物をリサーチツールとして用いてもよい。
【０１７４】
リサーチツールとして使用する場合、一般には、ムスカリン受容体を含む生物系またはサンプルを、ムスカリン受容体に拮抗する量の本発明の化合物と接触させる。生物系またはサンプルを化合物に曝露した後、放射性リガンド結合アッセイにおける結合または機能アッセイにおけるリガンドによる変化を測定したり、あるいは、哺乳動物を用いた気管支保護作用アッセイにおいて化合物により得られる気管支保護作用量を判定したりするなど、従来の手順および機器を用いて、ムスカリン受容体に拮抗する作用を判定する。曝露は、細胞または組織と化合物との接触、化合物の哺乳動物への投与（たとえば、腹腔内投与または静脈内投与）などを包含する。こうした判定ステップは、反応の測定、すなわち、定量解析を含んでもよいし、観察、すなわち、定性解析を含んでもよい。反応の測定では、たとえば、放射性リガンド結合アッセイなど従来の手順および機器を用いて、生物系またはサンプルに対する本化合物の作用の判定を行い、機能アッセイにおいてリガンドによる変化の判定を行う。アッセイ結果を用いて活性レベルのほか、所望の結果を得るのに必要な化合物の量、すなわち、ムスカリン拮抗量を判定してもよい。一般に、判定ステップでは、ムスカリン受容体リガンドによる作用の判定を行うことになる。
【０１７５】
さらに、本発明の化合物を、他の化学物質を評価するためのリサーチツールとして用いてもよく、したがって、本発明の化合物は、たとえば、ムスカリン受容体結合活性を持つ新しい化合物を発見するためのスクリーニングアッセイにも有用である。このように、本発明の化合物をアッセイにおける標準物質として用いて、被検化合物を用いて得られた結果を本発明の化合物を用いて得られた結果と比較して、ほぼ同等またはより優れた結合性を持つ被検化合物があれば、それを同定することができる。たとえば、被検化合物または被検化合物の１群に関するムスカリン受容体結合データ（たとえば、インビトロ放射性リガンド置換アッセイで判定）を、本発明の化合物のムスカリン受容体結合データと比較して、所望の特性を持つ被検化合物、たとえば、本発明の化合物とほぼ同等またはそれよりも優れた結合性を持つ被検化合物があれば、それを同定する。あるいは、たとえば、哺乳動物を用いた気管支保護作用アッセイにおいて、被検化合物および本発明の化合物の気管支保護作用を判定し、このデータを比較して、ほぼ同等またはより優れた気管支保護作用がある被検化合物を同定してもよい。本発明のこの態様は、別の実施形態として、（適切なアッセイによる）比較データの作成および目的の被検化合物を同定するための試験データの解析の両方を含む。したがって、被検化合物については、生物学的アッセイにおいて（ａ）被検化合物を用いて生物学的アッセイを行い第一のアッセイ値を得るステップと、（ｂ）本発明の化合物を用いて生物学的アッセイを行い第二のアッセイ値を得るステップとを含み、ステップ（ａ）をステップ（ｂ）の前、ステップ（ｂ）の後あるいはステップ（ｂ）と同時に行い、さらに（ｃ）ステップ（ａ）で得られた第一のアッセイ値とステップ（ｂ）で得られた第二のアッセイ値とを比較するステップを含む方法により、評価してもよい。例示的な生物学的アッセイとして、ムスカリン受容体結合アッセイが挙げられる。
【実施例】
【０１７６】
以下の調製および実施例は、本発明の具体的な実施形態を説明するために提供する。しかしながら、こうした具体的な実施形態は、特に記載がない限り、いかなる意味でも本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【０１７７】
以下の略語は、他に記載がない限り、以下の意味を持ち、本明細書で使用する任意の他の略語で定義されていないものは、標準的な意味を持つ：
ＡＣ  アデニリルシクラーゼ
ＡＣＮ  アセトニトリル
ＢＳＡ  ウシ血清アルブミン
ｃＡＭＰ  ３’−５’サイクリックアデノシン一リン酸
ＣＨＯ  チャイニーズハムスターの卵巣
ｃＭ５  クローン化チンパンジーＭ５受容体
ＤＣＭ  ジクロロメタン（すなわち、塩化メチレン）
ＤＩＰＥＡ  Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン
ｄＰＢＳ  ダルベッコのリン酸塩緩衝生理食塩水
ＤＭＡ  Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド
ＥＤＴＡ  エチレンジアミン四酢酸
ＥｔＯＡｃ  酢酸エチル
ＥｔＯＨ  エタノール
ＦＢＳ  ウシ胎仔血清
ＦＬＩＰＲ  蛍光イメージングプレートリーダー
ＨＢＳＳ  ハンクス緩衝塩溶液
ＨＥＰＥＳ  ４−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラジンエタンスルホン酸
ｈＭ１  クローン化ヒトＭ１受容体
ｈＭ２  クローン化ヒトＭ２受容体
ｈＭ３  クローン化ヒトＭ３受容体
ｈＭ４  クローン化ヒトＭ４受容体
ｈＭ５  クローン化ヒトＭ５受容体
ＩＰＡｃ  酢酸イソプロピル
ＭＣｈ  メチルコリン
ＭｅＯＨ  メタノール
ＭＴＢＥ  メチルｔ−ブチルエーテル
ＴＦＡ  トリフルオロ酢酸
ＴＦＡ塩  トリフルオロアセタート塩
ＴＨＦ  テトラヒドロフラン。
【０１７８】
本明細書で使用する任意の他の略語で定義されていないものは、一般に受け入れられている標準的な意味を持つ。他に記載がない限り、試薬、出発材料および溶媒などの材料はすべて、商業事業者（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｆｌｕｋａ  Ｒｉｅｄｅｌ−ｄｅ  Ｈａｅｎおよび同種のものなど）から購入し、追加の精製を行うことなく使用した。反応は、他に記載がない限り、窒素雰囲気下で行った。反応混合物の進行は、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ：ｔｈｉｎ  ｌａｙｅｒ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）、分析高速液体クロマトグラフィー（ａｎａｌ．ＨＰＬＣ：ｈｉｇｈ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ｌｉｑｕｉｄ  ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）および質量分析法でモニターした。詳細については、反応の具体的な例において以下に別々に記載する。反応ごとに具体的に記載してあるように、反応混合物を後処理した。通常、反応混合物を、抽出法、ならびに温度依存性結晶化、溶媒依存性結晶化および沈殿などの他の精製方法で精製した。さらに、分取ＨＰＬＣでも、反応混合物を通常通り精製した。
【０１７９】
調製１
２，２−ジフェニル−２−（Ｓ）−ピロリジン−３−イルアセトアミド
【０１８０】
【化３２】
0005528817.tif 000053
（Ｓ）−１−ベンジル−３−（ｐ−トルエンスルホニルオキシ）ピロリジン（１ａ）：０℃、窒素下で（Ｓ）−１−ベンジル−３−ピロリジノール（４４．３ｇ、０．２５ｍｏｌ）および１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（３３．７ｇ、０．３ｍｏｌ）を２５０ｍＬのＭＴＢＥに溶かした撹拌溶液に、ｐ−トルエンスルホニルクロリド（５２．４ｇ、０．２７５ｍｏｌ）を２０分にわたり分割して加えた。混合物を０℃で１時間撹拌した。氷浴を除去し、周囲温度で一晩（２０±５時間）混合物を撹拌した。ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）、続いて飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２５０ｍＬ）を加えた。得られた混合物を周囲温度で１時間撹拌した。この層を分離し、その有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２５０ｍＬ）；飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２５０ｍＬ）；飽和ＮａＣｌ水溶液（２５０ｍＬ）で洗浄してから、硫酸ナトリウム（８０ｇ）で乾燥させた。硫酸ナトリウムを濾別し、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で洗浄し、溶媒を減圧除去して中間体（１ａ）７８．２ｇをオフホワイトの固体として得た（９４％収率）。５．０ミクロン粒度を含むＹＭＣ  ＯＤＳＡ  Ｃ１８  ４．６×５０ｍｍカラムを用いて、ＨＰＬＣ解析を行った。２２０ｎｍのＵＶ吸光度で検出した。使用した移動相は、以下のとおりである（体積百分率）：Ａ：ＭｅＯＨ／水／ＴＦＡ（１０／９０／０．１；およびＢ：ＭｅＯＨ／水／ＴＦＡ（９０／１０／０．１）。Ａに溶かした０〜１００％Ｂの流量を５分にわたり４．０ｍＬ／分として、この中間体の純度を９５％と判定した。
【０１８１】
（Ｓ）−１−ベンジル−３−（１−シアノ−１，１−ジフェニルメチル）−ピロリジン（１ｂ）：０℃でジフェニルアセトニトリル（１２．１８ｇ、６１．８ｍｍｏｌ）を無水ＴＨＦ（１２０ｍＬ）に溶かした撹拌溶液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１０．６０ｇ、９４．６ｍｍｏｌ）を５分にわたり加えた。混合物を０℃で１時間撹拌した。０℃で混合物に、中間体（１ａ）（２０．４８ｇ、６１．３ｍｍｏｌ）を一度に加えた。冷浴を除去し、混合物を５〜１０分間撹拌すると、混合物は、褐色の均一溶液になった。次いで、混合物を一晩（２０±５時間）４０℃で加熱した。混合物（鮮黄色の懸濁液）を周囲温度まで放冷してから、水（１５０ｍＬ）を加えた。次いで、ＴＨＦの大部分を減圧除去し、ＩＰＡｃ（２００ｍＬ）を加えた。この層を分離し、その有機層を飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１５０ｍＬ）；飽和ＮａＣｌ水溶液（１５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、硫酸ナトリウム（５０ｇ）で乾燥させた。硫酸ナトリウムを濾別し、ＩＰＡｃ（２０ｍＬ）で洗浄し、溶媒を減圧除去して中間体（１ｂ）２３．８８ｇを淡褐色の油として得た（＞９９％収率）。上述のＨＰＬＣ方法を用いて、中間体（１ｂ）の純度を７５％と判定した（主に過剰なジフェニルアセトニトリルが混入していた）。
【０１８２】
（Ｓ）−３−（１−シアノ−１，１−ジフェニルメチル）ピロリジン（１ｃ）：中間体（１ｂ）をＩＰＡｃ（約１ｇ／１０ｍＬ）に溶解し、この溶液を等量の１Ｎ水性ＨＣｌと混合した。得られた層を分離し、その水層を等量のＩＰＡｃで抽出した。この有機層を合わせて、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。溶媒を減圧除去して（Ｓ）−１−ベンジル−３−（１−シアノ−１，１−ジフェニルメチル）ピロリジンヒドロクロリドを淡黄色の泡沫状固体とし得た。（Ｓ）−１−ベンジル−３−（１−シアノ−１，１−ジフェニルメチル）ピロリジンヒドロクロリド（８．５５ｇ、２１．９８ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（４４ｍＬ）に溶かした撹拌溶液に、パラジウム炭素（１．７１ｇ）およびアンモニウムホルマート（６．９３ｇ、１０９．９ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を３時間撹拌しながら、５０℃に加熱した。混合物を周囲温度まで冷却し、水（２０ｍＬ）を加えた。得られた混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドで濾過し、ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）で洗浄した。濾液を回収し、ＭｅＯＨの大部分を減圧除去した。残留物をＩＰＡｃ（１００ｍＬ）および１０％水性炭酸ナトリウム（５０ｍＬ）と混合した。得られた層を分離し、その水層をＩＰＡｃ（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、硫酸ナトリウム（２０ｇ）で乾燥させた。硫酸ナトリウムを濾別し、ＩＰＡｃ（２０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を減圧除去して中間体（１ｃ）５．７５ｇを淡黄色の油として得た（ＨＰＬＣにより９９．７％収率、７１％純度）。
【０１８３】
２，２−ジフェニル−２−（Ｓ）−ピロリジン−３−イルアセトアミド：磁気撹拌子および窒素入口を備えた２００ｍＬのフラスコに、中間体（１ｃ）（２．５１ｇ）および８０％Ｈ２ＳＯ４（１９．２ｍＬ；１６ｍＬの９６％Ｈ２ＳＯ４および３．２ｍＬのＨ２Ｏで事前に調製）を充填した。次いで、混合物を２４時間、あるいは、出発材料が消費されたことをＨＰＬＣが示すまで、９０℃で加熱した。混合物を周囲温度まで放冷してから、氷（体積約５０ｍＬ）に注いだ。氷浴中で撹拌しながらｐＨが約１２になるまで、混合物に５０％ＮａＯＨ水溶液をゆっくりと加えた。ＤＣＭ（２００ｍＬ）を加え、水溶液と混合すると、硫酸ナトリウムが析出し、これを濾別した。濾液を回収し、その層を分離した。水層をＤＣＭ（１００ｍＬ）で抽出し、その有機層を合わせて、硫酸ナトリウム（５ｇ）で乾燥させた。硫酸ナトリウムを濾別し、ＤＣＭ（１０ｍＬ）で洗浄した。溶媒を減圧除去して、粗生成物を淡黄色の泡沫状固体として得た（約２．２ｇ、ＨＰＬＣにより８６％純度）。
【０１８４】
この粗生成物を、撹拌しながらＥｔＯＨ（１８ｍＬ）に溶解した。この溶液に、Ｌ−酒石酸（１．８ｇ）をＥｔＯＨ（１４ｍＬ）に溶かした温溶液を加え、得られた混合物を一晩（１５±５時間）撹拌した。得られた沈殿物を濾過で単離し、オフホワイトの固体を得た（約３．２ｇ、ＨＰＬＣにより＞９５％純度）。この固体にＭｅＯＨ（１５ｍＬ）を加え、得られたスラリーを７０℃で一晩（１５時間）撹拌した。スラリーを周囲温度まで放冷し、濾過後に白色の固体を得た（約２．６ｇ、ＨＰＬＣにより＞９９％純度）。この固体に、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）および１Ｎ水性ＮａＯＨ（２５ｍＬ）を加えた。この混合物を、２つの層が形成されるまで混合し、次いで、その層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、硫酸ナトリウム（１０ｇ）で乾燥させた。硫酸ナトリウムを、濾過で除去し、溶媒を減圧蒸発させ、表題化合物１．５５ｇをオフホワイトの泡沫状固体として得た（５８％収率）。
【０１８５】
Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＣＤ−２  Ｃ１８カラムを用いてＨＰＬＣ解析を行った。２５４ｎｍのＵＶ吸光度で検出を行った。使用した移動相は、以下のとおりである（体積百分率）：Ａ：ＭｅＯＨ／水／ＴＦＡ（５／９５／０．１）；およびＢ：ＭｅＯＨ／水／ＴＦＡ（９５／５／０．１）。Ａに溶かした０〜１００％Ｂの流量を１５分にわたり１．０ｍＬ／分として、この化合物の純度を＞９９％と判定した。
【０１８６】
調製２
２−［（Ｓ）−１−（３−フェノキシプロピル）ピロリジン−３−イル］−２，２−ジフェニルアセトアミド
【０１８７】
【化３３】
0005528817.tif 000054
バイアルに、ＡＣＮ（１ｍＬ）に溶かした２，２−ジフェニル−２−（Ｓ）−ピロリジン−３−イルアセトアミド（４２．０ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ；調製１に記載されているとおり調製した）および３−ブロモプロポキシベンゼン（２３．７μＬ、０．１５ｍｍｏｌ）と、ＤＩＰＥＡ（７８μＬ、０．４５ｍｍｏｌ）とを加えた。この混合物を７０℃に一晩加熱した。一晩後、反応物を室温まで冷却し、濃縮した。この混合物を逆相ＨＰＬＣ（グラジエント溶出、１０〜５０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ）でクロマトグラフィーに供し、４９．０ｍｇ（９２％純度）の表題化合物（５６％収率）をトリフルオロアセタート塩として得た。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ＋］Ｃ２７Ｈ３０Ｎ２Ｏ２の計算値４１５．２３；実測値４１５．２。
（実施例１）
（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（３−フェノキシプロピル）ピロリジニウム
【０１８８】
【化３４】
0005528817.tif 000055
バイアルに、ＤＭＡ（１ｍＬ）に溶かした２−［（Ｓ）−１−（３−フェノキシプロピル）ピロリジン−３−イル］−２，２−ジフェニルアセトアミド（７９ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ；調製２に記載されているとおり調製した）と、ヨウ化メチル（０．０９３ｍＬ、１．５ｍｍｏｌ）とを加え、この混合物を８０℃で２時間撹拌した。次いで、混合物を室温まで冷却し、濃縮した。混合物を逆相ＨＰＬＣ（グラジエント溶出、１０〜５０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ）でクロマトグラフィーに供し、３５．０ｍｇ（８５％純度）の表題化合物（３６％収率）をＴＦＡ塩として得た。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２Ｏ２の計算値４２９．２５；実測値４２９．６。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００  ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：２．２９（２Ｈ，ｍ），２．６８（１Ｈ，ｓ），２．９０（５Ｈ，ｓ），２．９８（５Ｈ，ｓ），３．３７（２Ｈ，ｍ），３．５９（２Ｈ，ｍ）３．９５（Ｈ，ｍ），４．０６（２Ｈ，ｔ），５．９３（２Ｈ，ｓ），６．９（４Ｈ，ｍ），７．２８（７Ｈ，ｍ）。
【０１８９】
調製３
２−（（Ｓ）−１−メチルピロリジン−３−イル）−２，２−ジフェニルアセトアミド
【０１９０】
【化３５】
0005528817.tif 000056
丸底フラスコに、２，２−ジフェニル−２−（Ｓ）−ピロリジン−３−イルアセトアミド（２．８ｇ、１０．０ｍｍｏｌ；調製１に記載されているとおり調製した）、ＭｅＯＨ（３０ｍＬ）、次いでホルムアルデヒド（２ｍＬ、３０％水、２４．６ｍｍｏｌ）を撹拌しながら加えた。次いで、この溶液を窒素、その後水素でパージした。混合物を水素下で一晩撹拌した。次いで、混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドで濾過し、減圧濃縮してから、Ｈ２Ｏ／ＡＣＮ（１：１混合物、１ｇ固体／２０ｍＬ溶媒混合物）に溶解した。混合物を一晩室温で撹拌した。最後に、混合物を濾過してから、乾燥させ表題化合物２．７ｇをオフホワイトの泡沫状固体として得た（９６．４％収率）。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ＋］Ｃ１９Ｈ２２Ｎ２Ｏの計算値２９４．３９；実測値２９５．０。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００  ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：１．７３（１Ｈ，ｓ），１．９７（２Ｈ，ｍ），２．２７（３Ｈ，ｓ），２．４２（１Ｈ，ｑ），２．５５（１Ｈ，ｍ），２．６７（１Ｈ，ｔ），２．７５（１Ｈ，ｍ），３．４６（１Ｈ，ｍ），５．６３（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．２６（８Ｈ，ｍ），７．４１（２Ｈ，ｍ）。
（実施例２）
（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（３−フェニルスルファニルプロピル）ピロリジニウム
【０１９１】
【化３６】
0005528817.tif 000057
バイアルに、ＤＭＡ（１０ｍＬ）に溶かした２−（（Ｓ）−１−メチルピロリジン−３−イル）−２，２−ジフェニルアセトアミド（３００ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ；調製３に記載されているとおり調製した）と、３−クロロプロピルスルファニルベンゼン（２００ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）とを加えた。この混合物にヨウ化ナトリウム（３０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を窒素下で脱気してから、一晩９０℃に加熱した。次いで、混合物を濃縮し、逆相ＨＰＬＣ（グラジエント溶出、１０〜５０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ）でクロマトグラフィーに供し、表題化合物４９．０ｍｇ（９２％純度）をＴＦＡ塩として得た。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２ＯＳの計算値：４４５．２３；実測値：４４５．１。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００  ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：１．９７（１Ｈ，ｍ），２．２０（１Ｈ，ｍ），２．７０（２Ｈ，ｓ），２．８８（２Ｈ，ｓ），２．９３（２Ｈ，ｓ），３．３（１Ｈ，ｍ），３．４（１Ｈ，ｍ），３．５２（１Ｈ，ｍ），３．８９（２Ｈ，ｍ），４．０３（２Ｈ，ｍ），４．３０（１Ｈ，ｔ），５．６３（１Ｈ，ｄ）５．９４（１Ｈ，ｓ）７．２０（２Ｈ，ｍ），７．３５（１３Ｈ，ｍ）。
【０１９２】
調製４
（Ｓ）−１−（３−ブロモプロピル）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチルピロリジニウムブロミド
【０１９３】
【化３７】
0005528817.tif 000058
丸底フラスコ中で、ＤＭＡ（３０ｍＬ）に２，２−ジフェニル−２−（Ｓ）−ピロリジン−３−イルアセトアミド（２．８ｇ、１０ｍｍｏｌ；調製１に記載されているとおり調製した）および１，３−ジブロモプロパン（６．８ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）を溶解した。この混合物を撹拌し、油浴に８０℃で２時間浸した。混合物を室温まで冷却し、撹拌しながらエチルエーテル（２００ｍＬ）を加えた。すぐに白色沈殿物が形成された。この混合物を一晩撹拌した。白色沈殿物を濾過し、真空乾燥機で乾燥させ、表題化合物６．６ｇを白色の固体として得た（収率＝９５％）。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２２Ｈ２８ＢｒＮ２Ｏ２の計算値４１５．１４；実測値４１７．２。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００  ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：１．８６（３Ｈ，ｓ），２．２０（２Ｈ，ｍ），２．４０（１Ｈ，ｍ），２．７３（１Ｈ，ｍ），２．７８（１Ｈ，ｓ），３．４９（６Ｈ，ｍ），３．８９（１Ｈ，ｍ），４．０６（２Ｈ，ｍ），４．３８（１Ｈ，ｔ），５．８０（１Ｈ，ｂｒ  ｄ），６．３２（１Ｈ，ｂｒ  ｓ），７．３４（１０Ｈ，ｍ）。
（実施例３）
（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３，５−ジフルオロフェノキシ）プロピル］−１−メチル−ピロリジニウム
【０１９４】
【化３８】
0005528817.tif 000059
丸底フラスコに、ＤＭＡ（１０ｍＬ）に溶かした（Ｓ）−１−（３−ブロモプロピル）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチルピロリジニウムブロミド（９００ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ；調製４に記載されているとおり調製した）を加えた。この混合物に、３，５−ジフルオロフェノール（２８８ｍｇ、２．２ｍｍｏｌ）、続いて炭酸カリウム（０．５ｇ、３．６ｍｍｏｌ）を加え、激しく撹拌した。混合物を室温で一晩撹拌した。次いで、混合物を濃縮し、逆相ＨＰＬＣ（グラジエント溶出、１０〜５０％ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ）でクロマトグラフィーに供し、７５．０ｍｇ（９９％純度）の表題化合物（６％収率）をＴＦＡ塩として得た。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２Ｏ２の計算値：４６５．２４；実測値：４６５．２。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００  ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：２．１０（１Ｈ，ｓ），２．１９（２Ｈ，ｓ），２．６７（３Ｈ，ｓ），２．８０（１Ｈ，ｓ），３．２５（３Ｈ，ｓ），３．５３（１Ｈ，ｔ），３．６７（２Ｈ，ｓ），３．８７（２Ｈ，ｓ），４．０１（２Ｈ，ｓ），４．２０（１Ｈ，ｔ），５．８０（１Ｈ，ｄ），６．３８（３Ｈ，ｍ），６．５３（１Ｈ，ｄ）。
【０１９５】
調製５
１−（３−ブロモプロピルスルファニル）−３，５−ジフルオロベンゼン
【０１９６】
【化３９】
0005528817.tif 000060
丸底フラスコに、ＡＣＮ（５０ｍＬ）に溶かした３，５−ジフルオロベンゼンチオール（４．９ｇ、３３．８ｍｍｏｌ）を加えた。３−ブロモ−１−プロパノール（４．７ｇ、３４．０ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（６．４ｇ、４６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で３時間撹拌した。次いで、混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドで濾過し、溶媒を減圧下で除去した。次いで、この粗材料を無水ＤＣＭ（１００ｍＬ）に溶解した。混合物にトリフェニルホスフィンジブロミド（２５ｇ、５９ｍｍｏｌ）を加えてから、これを２時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残留物をＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）に懸濁し、１時間撹拌し、濾過して固体を除去した。濾液を減圧下で濃縮し、次いで、５０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（２００ｍＬ）で希釈し、Ｃｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドおよびシリカゲルで濾過した。次いで、この溶液を減圧下で濃縮し表題化合物（５．８ｇ）を得た。（実施例４）
（１Ｒ，３Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３，５−ジフルオロフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム
【０１９７】
【化４０】
0005528817.tif 000061
ＤＭＡ（３３ｍＬ）に溶かした２，２−ジフェニル−２−（Ｓ）−ピロリジン−３−イルアセトアミド（３．５ｇ、１２．５ｍｍｏｌ；調製１に記載されているとおり調製した）をＤＩＰＥＡ（３．５ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）と組み合わせ、続いて１−（３−ブロモプロピルスルファニル）−３，５−ジフルオロベンゼン（３．５ｇ、１３．１ｍｍｏｌ；調製５に記載されているとおり調製した）を加えた。この混合物を室温で１４時間撹拌した。ヨウ化メチル（３．１ｍＬ、５０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を７０℃で２時間撹拌した。次いで、混合物を減圧濃縮した。得られた生成物は、第四級アミンを中心とした２種のジアステレオマー混合物であった。このジアステレオマーを、３７％（ＡＣＮ／Ｈ２Ｏ／０．１％ＴＦＡ）イソクラティックグラジエントでＬＵＮＡ  Ｃ−１８カラムを用いた逆相ＨＰＬＣにより４５分かけて分離し、表題化合物１．５ｇをＴＦＡ塩として得た。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２ＯＳの計算値４８１．２１；実測値４８１．２。
（実施例５）
前の実施例に記載した手順に従い、適切な出発材料および試薬を代用し、以下の式を持つ化合物５−１〜５−２３をＴＦＡ塩としてさらに調製した：
【０１９８】
【化４１】
0005528817.tif 000062
（５−１）  ３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−フェネチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２７Ｈ３１Ｎ２Ｏの計算値３９９．２４；実測値３９９．０。
（５−２）  ３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（３−フェニルプロピル）ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２Ｏの計算値４１３．２６；実測値４１３．０。
（５−３）  ３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（６−フェニルヘキシル）ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ３１Ｈ３９Ｎ２Ｏの計算値４５５．３１；実測値４５５．４。
（５−４）  ３−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチルピロリジン−１−イル］−プロピオン酸フェニルエステル。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｎ２Ｏ３の計算値４４３．２３；実測値４４３．２。
（５−５）  ２−［（Ｓ）−１−（２−ベンジルオキシエチル）−１−メチルピロリジン−３−イル］−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２Ｏ２の計算値４２９．２５；実測値４２９．２。
（５−６）  Ｎ−｛２−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチルピロリジン−１−イル］エチル｝ベンズアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２Ｎ３Ｏ２の計算値４４２．２５；実測値４４２．２。
（５−７）  ２−［（Ｓ）−１−メチル−１−（４−フェニルブチル）ピロリジン−３−イル］−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏの計算値４２７．２８；実測値４２７．２。
（５−８）  安息香酸２−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチルピロリジン−１−イル］エチルエステル。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｎ２Ｏ３の計算値４４３．２３；実測値４４３．２。
（５−９）  （Ｒ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（４−フェニルブチル）ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏの計算値４２７．２８；実測値４２７．２。
（５−１０）  （Ｒ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（３−フェノキシプロピル）ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２Ｏ２の計算値４２９．２５；実測値４２９．２。
（５−１１）  （Ｒ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（３−フェニルスルファニルプロピル）ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２ＯＳの計算値４４５．２３；実測値４４５．２。
（５−１２）  （Ｒ）−１−（２−ベンゾイルオキシエチル）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｎ２Ｏ３の計算値４４３．２３；実測値４４３．２。
（５−１３）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（４−オキソ−４−フェニルブチル）ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３３Ｎ２Ｏ２の計算値４４１．２５；実測値４４１．２。
（５−１４）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（５−フェニルペンチル）ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ３０Ｈ３７Ｎ２Ｏの計算値４４１．２９；実測値４４１．２。
（５−１５）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−［２−（３−フェニルウレイド）エチル］ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ４Ｏ２の計算値４５７．２６；実測値４５７．２。
（５−１６）  （Ｓ）−１−（ベンジルカルバモイルメチル）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２Ｎ３Ｏ２の計算値４４２．２５；実測値４４２．２。
（５−１７）  （Ｓ）−１−ベンジルオキシカルボニルメチル−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｎ２Ｏ３の計算値４４３．２３；実測値４４３．２。
（５−１８）  ２−（（Ｓ）−１−｛４−［（Ｅ）−メトキシイミノ］−４−フェニルブチル｝−１−メチルピロリジン−３−イル）−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ３０Ｈ３６Ｎ３Ｏ２の計算値４７０．２８；実測値４７０．２。
（５−１９）  ２−（（Ｓ）−１−｛４−［（Ｅ）−ベンジルオキシイミノ］−４−フェニルブチル｝−１−メチルピロリジン−３−イル）−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ３６Ｈ４０Ｎ３Ｏ２の計算値５４６．３１；実測値５４６．４。
（５−２０）  ２−［（１Ｓ，３Ｓ）−１−メチル−１−（３−フェニルスルファニルプロピル）−ピロリジン−３−イル］−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２ＯＳの計算値４４５．２３；実測値４４５．２。
（５−２１）  ２−［（１Ｒ，３Ｓ）−１−メチル−１−（３−フェニルスルファニルプロピル）−ピロリジン−３−イル］−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２ＯＳの計算値４４５．２３；実測値４４５．２。
（５−２２）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（４−フェニル−ブト−３−イニル）ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３１Ｎ２Ｏの計算値４２３．２４；実測値４２３．２。
（５−２３）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（（Ｅ）−４−フェニル−ブト−３−エニル）ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３３Ｎ２Ｏの計算値４２５．２６；実測値４２５．２。
（５−２４）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（２−フェノキシイミノエチル）ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２７Ｈ３０Ｎ３Ｏ２の計算値４２９．２３；実測値４２８．２。
（５−２５）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（３−フェニルジスルファニルプロピル）ピロリジニウム  ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２ＯＳ２の計算値４７８．２０；実測値４７７．２。
（実施例６）
前の実施例に記載した手順に従い、適切な出発材料および試薬を代用し、以下の式を持つ化合物６−１〜６−３０をＴＦＡ塩としてさらに調製した：
【０１９９】
【化４２】
0005528817.tif 000063
【０２００】
【化４３】
0005528817.tif 000064
（６−１）  ３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−［２−（４−ニトロフェニル）エチル］ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２７Ｈ３０Ｎ３Ｏ３の計算値４４４．２３；実測値４４４．０。
（６−２）  ３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（４−フルオロフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２ＦＮ２Ｏ２の計算値４４７．２４；実測値４４７．０。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００  ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：２．２０（３Ｈ，ｍ），２．７３（４Ｈ，ｄ），２．９０（１Ｈ，ｍ），３．３５（５Ｈ，ｓ），３．５３（１Ｈ，ｔ），３．６８（２Ｈ，ｔ）４．２９（１Ｈ，ｔ），  ４．３１（１Ｈ，ｔ），５．７４（１Ｈ，ｓ），６．１５（１Ｈ，ｄ），６．７７（２Ｈ，ｍ）６．７９（２Ｈ，ｍ）７．２６（１１Ｈ，ｍ）。
（６−３）  ３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［２−（４−ヒドロキシフェニル）エチル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２７Ｈ３１Ｎ２Ｏ２の計算値４１５．２４；実測値４１５．０。
（６−４）  ４−トリフルオロメトキシ安息香酸２−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチルピロリジン−１−イル］エチルエステル。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３０Ｆ３Ｎ２Ｏ４の計算値５２７．２２；実測値５２７．２。
（６−５）  Ｎ−｛２−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチルピロリジン−１−イル］エチル｝−４−メトキシベンズアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３４Ｎ３Ｏ３の計算値４７２．２６；実測値４７２．２。
（６−６）  ４−ジメチルアミノ安息香酸２−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチルピロリジン−１−イル］エチルエステル。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ３０Ｈ３６Ｎ３Ｏ３の計算値４８６．２８；実測値４８６．２。
（６−７）  ４−メトキシ安息香酸２−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチルピロリジン−１−イル］エチルエステル。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３３Ｎ２Ｏ４の計算値４７３．２４；実測値４７３．２。
（６−８）  ２−｛（Ｓ）−１−［４−（４−メトキシフェニル）ブチル］−１−メチルピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ３０Ｈ３７Ｎ２Ｏ２の計算値４５７．２９；実測値４５７．４。
（６−９）  ２−［（Ｓ）−１−メチル−１−（３−ｐ−トリルオキシプロピル）ピロリジン−３−イル］−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏ２の計算値４４３．２７；実測値４４３．２。
（６−１０）  ４−｛３−［（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチルピロリジン−１−イル］プロポキシ｝安息香酸メチルエステル。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ３０Ｈ３５Ｎ２Ｏ４の計算値４８７．２６；実測値４８７．２。
（６−１１）  ２−｛（Ｓ）−１−［（Ｓ）−３−（４−フルオロフェノキシ）−２−ヒドロキシプロピル］−１−メチルピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２ＦＮ２Ｏ３の計算値４６３．２４；実測値４６３．２。
（６−１２）  ２−｛（Ｓ）−１−［３−（４−ヒドロキシフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２Ｏ３の計算値４４５．２５；実測値４４５．２。
（６−１３）  ２−｛（Ｓ）−１−［３−（４−クロロフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２ＣｌＮ２Ｏ２の計算値４６３．２２；実測値４６３．２。
（６−１４）  ２−｛（Ｓ）−１−［３−（４−ブロモフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２ＢｒＮ２ＯＳの計算値５２３．１４；実測値５２３．２。
（６−１５）  ２−｛（Ｓ）−１−［３−（４−クロロフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２ＣｌＮ２ＯＳの計算値４７９．１９；実測値４７９．２。
（６−１６）  ２−｛（Ｓ）−１−［３−（４−メトキシフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏ２Ｓの計算値４７５．２４；実測値４７５．２。
（６−１７）  ２−｛１−［４−（４−ブロモフェニル）−４−オキソ−ブチル］−１−メチルピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３２ＢｒＮ２Ｏ２の計算値５１９．１６；実測値５１９．２。
（６−１８）  ２−｛１−メチル−１−［３−（４−ニトロフェノキシ）プロピル］ピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２Ｎ３Ｏ４の計算値４７４．２４；実測値４７４．２。
（６−１９）  ２−｛１−［３−（４−メトキシフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏ３の計算値４５９．２６；実測値４５９．２。
（６−２０）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［４−（４−フルオロフェニル）−４−オキソブチル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３２ＦＮ２Ｏ２の計算値４５９．２４；実測値４５９．２。
（６−２１）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［４−（４−ヒドロキシフェニル）−４−オキソブチル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３３Ｎ２Ｏ３の計算値４５７．２５；実測値４５７．２。
（６−２２）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［４−（４−メトキシフェニル）−４−オキソブチル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ３０Ｈ３５Ｎ２Ｏ３の計算値４７１．２６；実測値４７１．２。
（６−２３）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（４−オキソ−４−ｐ−トリルブチル）ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ３０Ｈ３５Ｎ２Ｏ２の計算値４５５．２７；実測値４５５．２。
（６−２４）  （Ｓ）−１−［３−（４−アセチルアミノフェニルスルファニル）プロピル］−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ３０Ｈ３６Ｎ３Ｏ２Ｓの計算値５０２．２５；実測値５０２．２。
（６−２５）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−［３−（４−メチルスルファニルフェニルスルファニル）プロピル］ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２ＯＳ２の計算値４９１．２２；実測値４９１．２。
（６−２６）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（４−フルオロフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２ＦＮ２ＯＳの計算値４６３．２２；実測値４６３．６。
（６−２７）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（３−ｐ−トリルスルファニルプロピル）ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２ＯＳの計算値４５９．２５；実測値４５９．２。
（６−２８）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−［３−（４−メチルスルファニルフェノキシ）プロピル］ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏ２Ｓの計算値４７５．２４；実測値４７５．２。
（６−２９）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［４−（４−クロロフェニル）−４−オキソブチル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３２ＣｌＮ２Ｏ２の計算値４７５．２２；実測値４７５．２。
（６−３０）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（４−ヒドロキシフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２Ｏ２Ｓの計算値４６１．２３；実測値４６１．２。
（実施例７）
前の実施例に記載した手順に従い、適切な出発材料および試薬を代用し、以下の式を持つ化合物７−１〜７−８をＴＦＡ塩としてさらに調製した：
【０２０１】
【化４４】
0005528817.tif 000065
（７−１）  ２−［（Ｓ）−１−メチル−１−（３−ｏ−トリルオキシプロピル）−ピロリジン−３−イル］−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏ２の計算値４４３．２７；実測値４４３．２。
（７−２）  ２−｛（Ｓ）−１−［３−（２−ブロモフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２ＢｒＮ２Ｏ２の計算値５０７．１６；実測値５０７．２。
（７−３）  ２−｛（Ｓ）−１−［３−（２−フルオロフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２ＦＮ２Ｏ２の計算値４４７．２４；実測値４４７．２。
（７−４）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（２−フルオロフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２ＦＮ２ＯＳの計算値４６３．２２；実測値４６３．２。
（７−５）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（２−クロロフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２ＣｌＮ２ＯＳの計算値４７９．１９；実測値４７９．２。
（７−６）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［４−（２−クロロフェニル）−４−オキソブチル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３２ＣｌＮ２Ｏ２の計算値４７５．２２；実測値４７５．２。
（７−７）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（２−ヒドロキシフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２Ｏ３の計算値４４５．２５；実測値４４５．２。
（７−８）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（２−ヒドロキシフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２Ｏ２Ｓの計算値４６１．２３；実測値４６１．２。
（実施例８）
前の実施例に記載した手順に従い、適切な出発材料および試薬を代用し、以下の式を持つ化合物８−１〜８−１７をＴＦＡ塩としてさらに調製した：
【０２０２】
【化４５】
0005528817.tif 000066
（８−１）  ２−［（Ｓ）−１−メチル−１−（３−ｍ−トリルオキシプロピル）ピロリジン−３−イル］−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏ２の計算値４４３．２７；実測値４４３．２。
（８−２）  ２−｛（Ｓ）−１−［３−（３−クロロフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２ＣｌＮ２Ｏ２の計算値４６３．２２；実測値４６３．２。
（８−３）  ２−｛（Ｓ）−１−［３−（３−シアノフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３２Ｎ３Ｏ２の計算値４５４．２５；実測値４５４．２。
（８−４）  ２−｛（Ｓ）−１−［３−（３−クロロフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジン−３−イル｝−２，２−ジフェニルアセトアミド。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２ＣｌＮ２ＯＳの計算値４７９．１９；実測値４７９．２。
（８−５）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３−フルオロ−フェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２ＦＮ２ＯＳの計算値４６３．２２；実測値４６３．２。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００  ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：１．９０（２Ｈ，ｍ），２．０５（１Ｈ，ｍ），２．１４（２Ｈ，ｂｒ  ｍ），２．６２（３Ｈ，ｓ），２．８６（２Ｈ，ｔ），３．０２（２Ｈ，ｍ），３．２２（１Ｈ，ｓ），３．３３（１Ｈ，ｓ），３．４５（１Ｈ，ｔ），３．５９（１Ｈ，ｄ），３．７０（１Ｈ，ｔ），３．８７（２Ｈ，ｍ），４．１８（１Ｈ，ｍ），５．８７（１Ｈ，ｄ），６．３５（１Ｈ，ｓ），７．０（４Ｈ，ｍ），７．３（１０Ｈ，ｍ）。
（８−６）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−［３−（３−トリフルオロメチルフェニルスルファニル）プロピル］ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３２Ｆ３Ｎ２ＯＳの計算値５１３．２２；実測値５１３．２。
（８−７）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−［３−（３−トリフルオロメトキシフェニルスルファニル）プロピル］ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３２Ｆ３Ｎ２Ｏ２Ｓの計算値５２９．２１；実測値５２９．２。
（８−８）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［（３−フルオロベンジルカルバモイル）メチル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１ＦＮ３Ｏ２の計算値４６０．２４；実測値４６０．２。
（８−９）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３−メトキシフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏ３の計算値４５９．２６；実測値４５９．２。
（８−１０）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３−フルオロフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２ＦＮ２Ｏ２の計算値４４７．２４；実測値４４７．２。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００  ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：２．０６（１Ｈ，ｓ），２．１８（２Ｈ，ｓ），２．６７（２Ｈ，ｓ），２．７９（１Ｈ，ｓ），３．２６（３Ｈ，ｓ），３．３８（１Ｈ，ｓ），３．５３（１Ｈ，ｔ），３．６８（１Ｈ，ｓ），３．８８（２Ｈ，ｔ），４．０３（２Ｈ，ｔ），４．１６（１Ｈ，ｍ），５．８２（１Ｈ，ｄ），６．６（３Ｈ，ｍ），６．５１（１Ｈ，ｓ），７．１８（１Ｈ，ｍ），７．３（１０Ｈ，ｍ）。
（８−１１）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−メチル−１−（３−ｍ−トリルスルファニルプロピル）ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２ＯＳの計算値４５９．２５；実測値４５９．２。
（８−１２）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［４−（３−メトキシフェニル）−４−オキソブチル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ３０Ｈ３５Ｎ２Ｏ３の計算値４７１．２６；実測値４７１．２。
（８−１３）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３−ヒドロキシフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２Ｏ３の計算値４４５．２５；実測値４４５．２。
（８−１４）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［２−（３−フルオロベンゾイルオキシ）エチル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３０ＦＮ２Ｏ３の計算値４６１．２２；実測値４６１．２。
（８−１５）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３−ヒドロキシフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３３Ｎ２Ｏ２Ｓの計算値４６１．２３；実測値４６１．２。
（８−１６）  （Ｒ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３−フルオロフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３２ＦＮ２Ｏ２の計算値４４８．２４；実測値４４７．２。
（８−１７）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［４−（３−フルオロフェニル）ブト−３−イニル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３０ＦＮ２Ｏの計算値４４２．２３；実測値４４１．２。
（実施例９）
前の実施例に記載した手順に従い、適切な出発材料および試薬を代用し、以下の式を持つ化合物９−１〜９−１０をＴＦＡ塩としてさらに調製した：
【０２０３】
【化４６】
0005528817.tif 000067
（９−１）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３，５−ジフルオロフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２ＯＳの計算値４８１．２１；実測値４８１．２。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３，３００  ＭＨｚ）δ（ｐｐｍ）：２．０２（３Ｈ，ｍ），２．６３（ｓ，３Ｈ），２．７８（１Ｈ，ｓ），２．８８（１Ｈ，ｓ），３．０５（１Ｈ，ｍ），３．２４（１Ｈ，ｓ），３．３４（１Ｈ，ｓ），３．４８（１Ｈ，ｓ），３．６１（１Ｈ，ｓ），３．７２（１Ｈ，ｓ），３．８６（２Ｈ，ｍ），４．１４（１Ｈ，ｍ），５．８０（２Ｈ，ｄ），６．２２（１Ｈ，ｓ），６．６２（１Ｈ，ｑ），６．７９（２Ｈ，ｄｄ），７．３５（１０Ｈ，ｍ）。
（９−２）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−｛２−［３−（３，５−ジフルオロフェニル）ウレイド］エチル｝−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ４Ｏ２の計算値４９３．２４；実測値４９３．２。
（９−３）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−（３，５−ジフルオロベンジルオキシカルボニルメチル）−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ２９Ｆ２Ｎ２Ｏ３の計算値４７９．２１；実測値４７９．２。
（９−４）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３，５−ジフルオロベンジルオキシ）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３３Ｆ２Ｎ２Ｏ２の計算値４７９．２５；実測値４７９．２。
（９−５）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３，５−ジフルオロベンゼンスルフィニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２Ｏ２Ｓの計算値４９７．２１；実測値４９７．２。
（９−６）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３，５−ジフルオロベンゼンスルホニル）プロピル］−１−メチル−ピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２Ｏ３Ｓの計算値５１３．２０；実測値５１３．２。
（９−７）  （１Ｓ，３Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３，５−ジフルオロフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２ＯＳの計算値４８２．２１；実測値４８２．２。
（９−８）  （１Ｓ，３Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３，５−ジフルオロフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２Ｏ２の計算値４６６．２４；実測値４６５．２。
（９−９）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［４−（３，５−ジフルオロフェニル）ブト−３−イニル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ２９Ｆ２Ｎ２Ｏの計算値４６０．２２；実測値４５９．２。
（９−１０）  （Ｒ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３，５−ジフルオロフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２Ｏ２の計算値４６６．２４；実測値４６５．２。
【０２０４】
調製６
（３−メトキシフェニル）フェニルアセトニトリル
【０２０５】
【化４７】
0005528817.tif 000068
１−（クロロフェニルメチル）−３−メトキシベンゼン（５．５ｇ、２４ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１００ｍＬ）に溶かした溶液を０℃まで冷却した。この撹拌溶液にトリメチルシリルシアニド（３．５ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）を加えた。次いで、ヘプタン（０．７５ｍＬ、．７５ｍｍｏｌ）に溶かした１．０Ｍの四塩化スズを加えた。この溶液を２時間撹拌してから、ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）でクエンチした。溶媒を減圧下で除去した。次いで、この粗材料をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、表題化合物を得た（２．２ｇ、１０ｍｍｏｌ）。
【０２０６】
調製７
（（Ｓ）−１−ベンジルピロリジン−３−イル）（３−メトキシフェニル）フェニルアセトニトリル
【０２０７】
【化４８】
0005528817.tif 000069
（３−メトキシフェニル）フェニルアセトニトリル（５．２ｇ、２３ｍｍｏｌ；調製６に記載されているとおり調製した）をＴＨＦ（１００ｍＬ）に溶かした撹拌溶液に、トルエン−４−スルホン酸（Ｓ）−１−ベンジルピロリジン−３−イルエステル（７．２ｇ、２２ｍｍｏｌ）を加え、続いてカリウムｔ−ブトキシド（４．０ｇ、３６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を８０℃に１時間加熱してから放冷し、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）を加えた。この混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドで濾過した。混合物を飽和ＮａＣｌ水溶液（１００ｍＬ）で洗浄し、有機相を分離し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過した。溶媒を減圧下で除去した。この粗材料をシリカゲルクロマトグラフィーで精製して表題化合物を得た（６．２ｇ、１７ｍｍｏｌ）。ＭＳ  ｍ／ｚ：[Ｍ＋Ｈ＋］Ｃ２６Ｈ２６Ｎ２Ｏの計算値、３８２．５；実測値３８３．４。
【０２０８】
調製８
２−（３−ヒドロキシフェニル）−２−フェニル−２−（Ｓ）−ピロリジン−３−イル−アセトアミド
【０２０９】
【化４９】
0005528817.tif 000070
（（Ｓ）−１−ベンジルピロリジン−３−イル）−（３−メトキシフェニル）フェニルアセトニトリル（６．２ｇ、１６ｍｍｏｌ；調製７に記載されているとおり調製した）をｔ−ブチルアルコール（１５０ｍＬ）に溶かした撹拌溶液に、ＫＯＨ（３５ｇ、６２０ｍｍｏｌ）を加えた。反応フラスコに還流冷却器および窒素入口を備え付け、これを１１０℃で１４日間撹拌した。混合物を室温まで放冷した。混合物に、水（１２０ｍＬ）およびエーテル（１００ｍＬ）を加えた。次いで、この有機相を分離し、水相を２回エーテル（それぞれ１００ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、ＭｇＳＯ４で乾燥させてから濾過した。溶媒を減圧下で除去し、次いで、この粗材料をＤＣＭ（２５０ｍＬ）に溶解し、０℃まで冷却した。この撹拌溶液に、ＤＣＭ（３０ｍＬ、３０ｍｍｏｌ）に溶かした１．０Ｍの三臭化ホウ素を加え、この混合物を０℃で９０分間撹拌した。次いで、混合物を、３０％アンモニアおよび氷の撹拌溶液に加えた。次いで、混合物をＣｅｌｉｔｅ（登録商標）パッドで濾過してから飽和ＮａＣｌ水溶液（２００ｍＬ）で洗浄した。この有機相をＭｇＳＯ４で乾燥させてから濾過した。溶媒を減圧下で除去した。次いで、この粗材料を通常の水素化条件に付して表題化合物を得た。ＭＳ  ｍ／ｚ：｛Ｍ＋Ｈ＋］Ｃ１８Ｈ２０Ｎ２Ｏ２の計算値２９６．３６；実測値２９７．６。
【０２１０】
この材料を用いて実施例１０−３の化合物を調製した。
（実施例１０）
前の実施例に記載した手順に従い、適切な出発材料および試薬を代用し、以下の式を持つ化合物１０−１〜１０−３をＴＦＡ塩としてさらに調製した：
【０２１１】
【化５０】
0005528817.tif 000071
（１０−１）  （Ｓ）−３−［カルバモイル−ビス−（４−ヒドロキシフェニル）メチル］−１−［３−（３，５−ジフルオロフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２Ｏ３Ｓの計算値５１４．２０；実測値５１３．２。
（１０−２）  （Ｓ）−３−［（Ｓ）−カルバモイル−（４−ヒドロキシフェニル）フェニルメチル］−１−［３−（３，５−ジフルオロフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２Ｏ２Ｓの計算値４９８．２１；実測値４９７．２。
（１０−３）  （Ｓ）−３−［カルバモイル−（３−ヒドロキシフェニル）フェニルメチル］−１−［３−（３，５−ジフルオロフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２Ｏ２Ｓの計算値４９８．２１；実測値４９７．２。
（実施例１１）
前の実施例に記載した手順に従い、適切な出発材料および試薬を代用し、以下の式を持つ化合物１１−１〜１１−３をＴＦＡ塩としてさらに調製した：
【０２１２】
【化５１】
0005528817.tif 000072
（１１−１）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３−フルオロ−４−メトキシフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３４ＦＮ２Ｏ２Ｓの計算値４９３．２３；実測値４９３．２。
（１１−２）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３，４−ジフルオロフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２Ｏ２の計算値４６５．２４；実測値４６５．２。
（１１−３）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（３，４−ジフルオロフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２ＯＳの計算値４８１．２１；実測値４８１．２。
（実施例１２）
前の実施例に記載した手順に従い、適切な出発材料および試薬を代用し、以下の式を持つ化合物１２−１〜１２−２をＴＦＡ塩としてさらに調製した：
【０２１３】
【化５２】
0005528817.tif 000073
（１２−１）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（２，３−ジフルオロフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２Ｏ２の計算値４６５．２４；実測値４６５．２。
（１２−２）（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［２−（２，３−ジフルオロベンゾイルオキシ）エチル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ２９Ｆ２Ｎ２Ｏ３の計算値４７９．２１；実測値４７９．２。
（実施例１３）
前の実施例に記載した手順に従い、適切な出発材料および試薬を代用し、以下の式を持つ化合物１３−１〜１３−２をＴＦＡ塩としてさらに調製した：
【０２１４】
【化５３】
0005528817.tif 000074
（１３−１）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（２，４−ジフルオロフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２Ｏ２の計算値４６５．２４；実測値４６５．２。
（１３−２）  （Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（２，４−ジフルオロフェニルスルファニル）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２ＯＳの計算値４８１．２１；実測値４８１．２。
（実施例１４）
前の実施例に記載した手順に従い、適切な出発材料および試薬を代用し、以下の式を持つ化合物１４をＴＦＡ塩としてさらに調製した：
【０２１５】
【化５４】
0005528817.tif 000075
（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［３−（２，６−ジフルオロフェノキシ）プロピル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ３１Ｆ２Ｎ２Ｏ２の計算値４６５．２４；実測値４６５．２。
（実施例１５）
前の実施例に記載した手順に従い、適切な出発材料および試薬を代用し、以下の式を持つ化合物１５をＴＦＡ塩としてさらに調製した：
【０２１６】
【化５５】
0005528817.tif 000076
（Ｓ）−３−（カルバモイルジフェニルメチル）−１−［２−（２，５−ジフルオロベンゾイルオキシ）エチル］−１−メチルピロリジニウム。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２８Ｈ２９Ｆ２Ｎ２Ｏ３の計算値４７９．２１；実測値４７９．２。
（実施例１６）
前の実施例に記載した手順に従い、適切な出発材料および試薬を代用し、以下の式を持つ化合物１６−１〜１６−３をＴＦＡ塩としてさらに調製した：
【０２１７】
【化５６】
0005528817.tif 000077
（１６−１）  （Ｓ）−３−（カルバモイルフェニル−ｍ−トリルメチル）−１−メチル−１−（４−フェニルブチル）ピロリジニウム（Ｒ１＝３−メチル）。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ３０Ｈ３７Ｎ２Ｏの計算値４４１．２９；実測値４４１．２。
（１６−２）  （Ｓ）−３−（カルバモイルフェニル−ｐ−トリルメチル）−１−メチル−１−（４−フェニルブチル）ピロリジニウム（Ｒ１＝４−メチル）。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ３０Ｈ３７Ｎ２Ｏの計算値４４１．２９；実測値４４１．２。
（１６−３）  （Ｓ）−３−［カルバモイル（４−ヒドロキシフェニル）フェニルメチル］−１−メチル−１−（４−フェニルブチル）ピロリジニウム（Ｒ１＝４−ヒドロキシ）。ＭＳ  ｍ／ｚ：［Ｍ＋］Ｃ２９Ｈ３５Ｎ２Ｏ２の計算値４４３．２７；実測値４４３．２。
【０２１８】
アッセイ１
放射性リガンド結合アッセイ
ｈＭ１、ｈＭ２、ｈＭ３およびｈＭ４ムスカリン受容体サブタイプを発現している細胞から調製した膜
クローン化ヒトｈＭ１、ｈＭ２、ｈＭ３およびｈＭ４ムスカリン受容体サブタイプを安定発現しているＣＨＯ細胞株をそれぞれ、１０％ＦＢＳおよび２５０μｇ／ｍＬのＧｅｎｅｔｉｃｉｎを補充したＨＡＭ’ｓ  Ｆ−１２からなる培地で、コンフルエントに近い状態まで増殖させた。この細胞を、３７℃、５％ＣＯ２インキュベーターで増殖させ、ｄＰＢＳに溶かした２ｍＭのＥＤＴＡで剥離した。６５０×ｇで５分遠心分離して細胞を集めて、細胞ペレットを−８０℃で凍結保存するか、あるいは、すぐに膜を調製した。膜の調製では、細胞ペレットを溶解緩衝液に再懸濁し、Ｐｏｌｙｔｒｏｎ  ＰＴ−２１００組織破砕機（Ｋｉｎｅｍａｔｉｃａ  ＡＧ；２０秒×２バースト）でホモジナイズした。粗膜を、４０，０００×ｇ、４℃で１５分間遠心した。次いで、この膜ペレットを再懸濁緩衝液で再懸濁し、Ｐｏｌｙｔｒｏｎ組織破砕機で再びホモジナイズした。この膜懸濁液のタンパク質濃度を、Ｌｏｗｒｙ，Ｏ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １９３：２６５（１９５１）に記載の方法で判定した。膜をすべてアリコートとして−８０℃で凍結保存するか、すぐに使用した。調製済みｈＭ５受容体膜のアリコートをＰｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒから直接購入し、使用時まで−８０℃で保存した。
【０２１９】
ムスカリン受容体サブタイプｈＭ１、ｈＭ２、ｈＭ３、ｈＭ４およびｈＭ５に関する放射性リガンド結合アッセイ
総アッセイ容積１０００μＬの９６ウェルマイクロタイタープレートで、放射性リガンド結合アッセイを行った。ｈＭ１、ｈＭ２、ｈＭ３、ｈＭ４またはｈＭ５ムスカリンサブタイプのいずれかを安定発現しているＣＨＯ細胞膜をアッセイ緩衝液で希釈し、以下の指定の標的タンパク質濃度（μｇ／ウェル）とした：ｈＭ１の場合１０μｇ、ｈＭ２の場合１０〜１５μｇ、ｈＭ３の場合１０〜２０μｇ、ｈＭ４の場合１０〜２０μｇおよびｈＭ５の場合１０〜１２μｇ。膜を、アッセイプレートへの添加前にＰｏｌｙｔｒｏｎ組織破砕機（ｄｉｓｒｕｐｔｏｒ）を用いて短時間（１０秒）ホモジナイズした。放射性リガンドのＫＤ値を判定する飽和結合研究を、０．００１ｎＭ〜２０ｎＭの範囲の濃度でＬ−［Ｎ−メチル−３Ｈ］スコポラミンメチルクロリド（［３Ｈ］−ＮＭＳ）（ＴＲＫ６６６，８４．０  Ｃｉ／ｍｍｏｌ，Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｂｕｃｋｉｎｇｈａｍｓｈｉｒｅ，Ｅｎｇｌａｎｄ）を用いて行った。被検化合物のＫｉ値を判定するための置換アッセイを、１ｎＭおよび１１種の被検化合物濃度で［３Ｈ］−ＮＭＳを用いて行った。最初に、被検化合物を希釈緩衝液で４０μＭの濃度に溶解し、次いで、希釈緩衝液で４００ｆＭ〜４μＭの範囲の最終濃度に５倍段階希釈した。アッセイプレートへの添加順序および添加量は、以下のとおりであった：０．１％ＢＳＡを含む８２５μＬのアッセイ緩衝液、２５μＬの放射性リガンド、１００μＬの希釈被検化合物および５０μＬの膜。アッセイプレートを６時間３７℃でインキュベートした。結合反応を、０．３％ポリエチレンイミン（ＰＥＩ：ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅｉｍｉｎｅ）で前処理したＧＦ／Ｂガラス繊維フィルタープレート（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ  Ｉｎｃ．，Ｗｅｌｌｅｓｌｅｙ，ＭＡ）での急速濾過により停止させた。フィルタープレートを洗浄用緩衝液（１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ）で３回リンスして、非結合放射能を除去した。次いで、プレートを風乾し、５０μＬのＭｉｃｒｏｓｃｉｎｔ−２０液体シンチレーション流体（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｉｎｃ．，Ｗｅｌｌｅｓｌｅｙ，ＭＡ）を各ウェルに加えた。次いで、このプレートを、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｔｏｐｃｏｕｎｔ液体シンチレーションカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｉｎｃ．，Ｗｅｌｌｅｓｌｅｙ，ＭＡ）でカウントした。結合データについては、１部位競合モデルを用いてＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）で非線形回帰分析により解析した。Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式（Ｃｈｅｎｇ  Ｙ；Ｐｒｕｓｏｆｆ  Ｗ．Ｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ２２（２３）：３０９９−１０８（１９７３））を用いて、観察されたＩＣ５０値および放射性リガンドのＫＤ値から被検化合物のＫｉ値を算出した。Ｋｉ値をｐＫｉ値に変換して、幾何平均および９５％信頼区間を決定した。次いで、データ報告のため、これらの要約統計量をＫｉ値に逆変換した。
【０２２０】
このアッセイでは、Ｋｉ値が低いと、検査対象の受容体に対する被検化合物の結合親和性が高いことが示される。このアッセイで検査した本発明の例示的な化合物は、このアッセイのＭ３ムスカリン受容体サブタイプに対するＫｉ値が約１２０ｎＭ未満であることが明らかにされた。より典型的には、これら化合物のＫｉ値は約５０ｎＭ未満であり、中にはＫｉ値が約１０ｎＭ未満または約１．０ｎＭ未満の化合物もあった。
【０２２１】
アッセイ２
ムスカリン受容体機能効力アッセイ
ｃＡＭＰ蓄積のアゴニストによる阻害を阻止
このアッセイでは、ｈＭ２受容体を発現しているＣＨＯ−Ｋ１細胞を用いて、フォルスコリンが関与するｃＡＭＰ蓄積へのオキソトレモリンの阻害作用を阻止する被検化合物の能力を測定することで、被検化合物の機能効力を判定する。
【０２２２】
１２５Ｉ−ｃＡＭＰを含むＦｌａｓｈｐｌａｔｅ  Ａｄｅｎｙｌｙｌ  Ｃｙｃｌａｓｅ  Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  Ａｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍ（ＮＥＮ  ＳＭＰ００４Ｂ、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）を用いて、製造者の指示に従いラジオイムノアッセイフォーマットでｃＡＭＰアッセイを行う。
【０２２３】
アッセイ１に記載されているように、細胞をｄＰＢＳで１回リンスし、トリプシン−ＥＤＴＡ溶液（０．０５％トリプシン／０．５３ｍＭ  ＥＤＴＡ）で剥離する。剥がした細胞を、５０ｍＬのｄＰＢＳ中で６５０×ｇ、５分間の遠心分離で２回洗浄する。次いで、この細胞ペレットを１０ｍＬのｄＰＢＳに再懸濁し、細胞をＣｏｕｌｔｅｒ  Ｚ１  Ｄｕａｌ  Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｃｏｕｎｔｅｒ（Ｂｅｃｋｍａｎ  Ｃｏｕｌｔｅｒ，Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ，ＣＡ）でカウントする。細胞を再び６５０×ｇで５分間遠心し、刺激緩衝液で１．６×１０６〜２．８×１０６細胞／ｍＬのアッセイ濃度に再懸濁する。
【０２２４】
最初に、被検化合物を、４００μＭの濃度になるように希釈緩衝液（１ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ（０．１％）を加えたｄＰＢＳ）に溶解し、次いで、希釈緩衝液で段階希釈して１００μＭ〜０．１ｎＭの範囲の最終モル濃度とする。同様の要領でオキソトレモリンを希釈する。
【０２２５】
ＡＣ活性のオキソトレモリンによる阻害を測定するため、２５μＬのフォルスコリン（ｄＰＢＳで２５μＭの最終濃度に希釈）、２５μＬの希釈オキソトレモリンおよび５０μＬの細胞をアゴニストアッセイウェルに加える。オキソトレモリンにより阻害されるＡＣ活性を被検化合物が阻止する能力を測定するため、２５μＬのフォルスコリンおよびオキソトレモリン（ｄＰＢＳでそれぞれ２５μＭおよび５μＭの最終濃度に希釈）２５μＬの希釈被検化合物および５０μＬの細胞を、残りのアッセイウェルに加える。
【０２２６】
反応物を３７℃で１０分間インキュベートし、１００μＬの氷冷検出緩衝液を加えて止める。プレートをシールし、室温で一晩インキュベートし、翌朝ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ＴｏｐＣｏｕｎｔ液体シンチレーションカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  Ｉｎｃ．，Ｗｅｌｌｅｓｌｅｙ，ＭＡ）でカウントする。産生されたｃＡＭＰの量（ｐｍｏｌ／ウェル）を、製造者のユーザーマニュアルに記載されているとおり、サンプルおよびｃＡＭＰ標準物質に観察される数に基づき算出する。データを、非線形回帰、１部位競合式を用いてＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）で非線形回帰分析により解析する。Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式を用いて、オキソトレモリンの濃度反応曲線のＥＣ５０およびオキソトレモリンアッセイ濃度をそれぞれＫＤおよび［Ｌ］として、Ｋｉを算出する。Ｋｉ値をｐＫｉ値に変換して、幾何平均および９５％信頼区間を決定する。その後、データ報告のため、これらの要約統計量をＫｉ値に逆変換する。
【０２２７】
このアッセイでは、Ｋｉ値が低いと、検査対象の受容体において被検化合物の機能活性が高いことが示される。本発明の例示的な化合物は、ｈＭ２受容体を発現しているＣＨＯ−Ｋ１細胞において、フォルスコリンが関与するｃＡＭＰ蓄積のオキソトレモリンによる阻害に対する阻止のＫｉ値が約１００ｎＭ未満であると期待されている。
【０２２８】
アゴニストによる［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合の遮断
第２の機能アッセイでは、ｈＭ２受容体を発現しているＣＨＯ−Ｋ１細胞を用いて、オキソトレモリン刺激による［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合を遮断する被検化合物の能力を測定することで、化合物の機能効力を判定できる。
【０２２９】
使用時に凍結膜を解凍し、次いで、アッセイ緩衝液希釈し、標的組織最終濃度を１ウェル当たり５〜１０μＧタンパク質とする。膜を、Ｐｏｌｙｔｒｏｎ  ＰＴ−２１００組織破砕機を用いて短時間ホモジナイズしてから、アッセイプレートに加える。
【０２３０】
各実験において、アゴニスト、オキソトレモリンによる［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合刺激のＥＣ９０値（最大反応の９０％を示す有効濃度）を判定する。
【０２３１】
オキソトレモリン刺激による［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合を阻害する被検化合物の能力を判定するため、以下を９６ウェルプレートの各ウェルに加える：［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ（０．４ｎＭ）を含む２５μＬのアッセイ緩衝液、２５μＬのオキソトレモリン（ＥＣ９０）およびＧＤＰ（３μＭ）、２５μＬの希釈被検化合物およびｈＭ２受容体を発現している２５μＬのＣＨＯ細胞膜。次いで、アッセイプレートを３７℃で６０分間インキュベートする。アッセイプレートを、ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ９６ウェルハーベスターを用いて、１％ＢＳＡで前処理したＧＥ／Ｂフィルターで濾過する。プレートを氷冷洗浄用緩衝液で３秒間３回リンスしてから、風乾または真空乾燥する。Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ−２０シンチレーション液（５０μＬ）を各ウェルに加え、各プレートをシールし、放射能をトップカウンター（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）でカウントする。データを、非線形回帰、１部位競合式を用いてＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｓｏｆｔｗａｒｅパッケージ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）で非線形回帰分析により解析する。Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ  式を用いて、被検化合物の濃度反応曲線のＩＣ５０値およびアッセイにおけるオキソトレモリン濃度をそれぞれＫＤおよび［Ｌ］（リガンド濃度）として、Ｋｉを算出する。
【０２３２】
このアッセイでは、Ｋｉ値が低いと、検査対象の受容体において被検化合物の機能活性が高いことが示される。本発明の例示的な化合物は、ｈＭ２受容体を発現しているＣＨＯ−Ｋ１細胞において、オキソトレモリン刺激による［３５Ｓ］ＧＴＰγＳ結合の遮断のＫｉ値が約１００ｎＭ未満であると期待されている。
【０２３３】
ＦＬＩＰＲアッセイを用いた、アゴニストが関与するカルシウム放出の遮断
Ｇｑタンパク質に結合するムスカリン受容体サブタイプ（Ｍ１、Ｍ３およびＭ５受容体）は、アゴニストがこの受容体に結合すると、ホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ：ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅ  Ｃ）回路を活性化する。その結果、活性化されたＰＬＣは、ホスファチルイノシトールジホスファート（ＰＩＰ２）をジアシルグリセロール（ＤＡＧ：ｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ）およびホスファチジル−１，４，５−トリホスファート（ＩＰ３）に加水分解し、次いで、細胞内貯蔵から、すなわち、小胞体および筋小胞体からカルシウム放出が起こる。ＦＬＩＰＲ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）アッセイは、遊離カルシウムの結合時に蛍光を発するカルシウム感受性色素（Ｆｌｕｏ−４ＡＭ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ）を用いて、こうした細胞内カルシウムの増加を利用するものである。ＦＬＩＰＲによりこの蛍光現象をリアルタイムで測定する。ＦＬＩＰＲは、ヒトＭ１およびＭ３受容体ならびにチンパンジーＭ５受容体を含むクローン化細胞の単層から、蛍光の変化を検出する。アンタゴニスト効力については、アゴニストが関与する細胞内カルシウムの増加を阻害するアンタゴニストの能力により判定することができる。
【０２３４】
ＦＬＩＰＲカルシウム刺激アッセイでは、アッセイを行う前夜、ｈＭ１、ｈＭ３およびｃＭ５受容体を安定発現しているＣＨＯ細胞を９６ウェルＦＬＩＰＲプレートに播種する。播種した細胞を、ＦＬＩＰＲ緩衝液（カルシウムおよびマグネシウムを含まないＨＢＳＳに溶かした１０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）、２ｍＭの塩化カルシウム、２．５ｍＭのプロベネシド）を含むＣｅｌｌｗａｓｈ（ＭＴＸ  Ｌａｂｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．）で２回洗浄し、増殖培地を除去し、ＦＬＩＰＲ緩衝液を５０μＬ／ウェル残す。次いで、この細胞を、４μＭのＦＬＵＯ−４ＡＭ（２×溶液を作製）５０μＬ／ウェルと３７℃、５％二酸化炭素で４０分間インキュベートする。色素のインキュベーション期間後、細胞をＦＬＩＰＲ緩衝液で２回洗浄し、５０μＬ／ウェルの最終容積を残す。
【０２３５】
アンタゴニスト効力を判定するには、最初に、ＥＣ９０濃度でのオキソトレモリン刺激に対するアンタゴニスト効力を後で測定できるように、細胞内Ｃａ２＋放出に対するオキソトレモリンの用量依存的刺激を判定する。まず、細胞を、化合物希釈緩衝液と２０分間インキュベートし、続いてアゴニストを加える。この添加は、ＦＬＩＰＲが行う。式ＥＣＦ＝（（Ｆ／１００−Ｆ）＾１／Ｈ）＊ＥＣ５０とともに、以下のＦＬＩＰＲ測定およびデータ整理のセクションに詳述される方法に従い、オキソトレモリンのＥＣ９０値を得る。刺激プレートで３×ＥＣＦのオキソトレモリン濃度を調製し、ＥＣ９０濃度のオキソトレモリンを、アンタゴニスト阻害アッセイプレートの各ウェルに加える。
【０２３６】
ＦＬＩＰＲに使用するパラメータは、曝露時間０．４秒、レーザー強度０．５ワット、励起波長４８８ｎｍおよび発光波長５５０ｎｍである。ベースラインについては、アゴニストの添加前、１０秒間の蛍光の変化を測定して判定する。アゴニスト刺激の後、ＦＬＩＰＲにより、１．５分間０．５〜１秒ごとに蛍光の変化を連続的に測定して最大蛍光変化を得る。
【０２３７】
蛍光の変化は、各ウェルの最大蛍光からベースライン蛍光を差し引いたものとして表す。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）でシグモイド用量反応が組み込まれたモデルを用いて、非線形回帰により薬剤濃度の対数に対して、生データを解析する。Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ  式（Ｃｈｅｎｇ  ＆  Ｐｒｕｓｏｆｆ，１９７３）に従い、ＫＤとしてオキソトレモリンのＥＣ５０値を、リガンド濃度にはオキソトレモリンのＥＣ９０を用いてＰｒｉｓｍにより、アンタゴニストのＫｉ値を判定する。
【０２３８】
このアッセイでは、Ｋｉ値が低いと、検査対象の受容体において被検化合物の機能活性が高いことが示される。本発明の例示的な化合物は、ｈＭ３受容体を安定発現しているＣＨＯ細胞において、アゴニストが関与するカルシウム放出を遮断するＫｉ値が約１００ｎＭ未満であると期待されている。
【０２３９】
アッセイ３
ラットＥｉｎｔｈｏｖｅｎアッセイ
このインビボアッセイを用いて、ムスカリン受容体アンタゴニスト活性を示す被検化合物の気管支保護作用を評価する。
【０２４０】
被検化合物をすべて滅菌水で希釈し、吸入経路（ＩＨ：ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ  ｒｏｕｔｅ）を介して投薬する。ラット（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ、雄性、２５０〜３５０ｇ）を、ＬＣ  Ｓｔａｒ  Ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ  Ｓｅｔから発生するエアロゾルに曝露する。エアロゾルは、ガスの混合物（５％ＣＯ２／９５％空気）で送る。６匹のラットを保持できるパイ型の投薬チャンバーで、被検化合物溶液をそれぞれ１０分かけて噴霧する。化合物吸入後の所定の時点で、Ｅｉｎｔｈｏｖｅｎアッセイを行う。
【０２４１】
肺評価を始める３０分前に、動物をイナクチン（チオブタバルビタール、１２０ｍｇ／ｋｇ腹腔内）で麻酔する。頸静脈に、食塩水で満たしたポリエチレンカテーテル（ＰＥ−５０）を埋め込み、ＭＣｈの注入に使用する。次いで、気管を切除し、１４Ｇ針でカニューレ処置し、肺評価の間ラットの換気に使用する。手術が終了したならば、一回拍出量を１ｍｌ／１００ｇ体重として２．５ｍｌ量を超えないように１分当たり９０ストロークの速度に設定したピストン式レスピレーターを用いて、ラットを換気する。
【０２４２】
呼吸ごとに起こる圧力の変化を測定する。ベースライン値を少なくとも２．５分間集めてから、ラットに、気管支収縮剤ＭＣｈを２倍ずつ増量（５、１０、２０、４０および８０μｇ／ｍｌ）して非累積的にチャレンジする。ＭＣｈについては、２ｍＬ／ｋｇ／分の速度でシリンジポンプから２．５分間注入する。研究の終了時に、動物を安楽死させる。
【０２４３】
処置した動物における換気圧（ｃｍ  Ｈ２Ｏ）の変化を、対照動物と比較したＭＣｈ反応の阻害率で表す。このアッセイでは、阻害率の値が高いと、被検化合物に気管支保護作用があることが示される。このアッセイでは、１００μｇ／ｍｌの用量で検査した本発明の例示的な化合物は、３５％を超える阻害率を示すと期待されており、中には、７０％を超える阻害率を示すもの、９０％を超える阻害率を示すものもあると期待されている。
【０２４４】
１．５時間後のＩＤ５０の判定
ラットＥｉｎｔｈｏｖｅｎアッセイにおいて、投薬１．５時間後の標準的なムスカリンアンタゴニストを評価した。検査対象の５種類の標準物質の効力（ＩＤ５０）の順序を、イプラトロピウム（４．４μｇ／ｍｌ）＞チオトロピウム（６μｇ／ｍｌ）＞デス−メチル−チオトロピウム（１２μｇ／ｍｌ）＞グリコピロラート（１５μｇ／ｍｌ）＞ＬＡＳ−３４２３７（２４μｇ／ｍｌ）と判定した。同様に、投薬１．５時間後の被検化合物の効力を判定する。
【０２４５】
６および２４時間のＩＤ５０の判定
さらに、標準物質チオトロピウムおよびイプラトロピウムについては、ラットＥｉｎｔｈｏｖｅｎアッセイで投薬２４時間後および／または６時間後も評価した。イプラトロピウム（１０および３０μｇ／ｍｌ）は、投薬６時間後の効力が１．５時間の効力に比べて約３倍低かった。この時点（６時間）で観察された活性の低下は、臨床現場でその作用持続時間が比較的短いことと整合している。チオトロピウムは、作用の発現が遅く、気管支保護作用がピークに達したのは投薬６時間後であった。チオトロピウムの６時間と２４時間の効力値には有意差が認められず、その効力値は、１．５時間の効力と比べて約２倍であった。同様に、被検化合物の作用の発現ならびに６時間および２４時間の効力値を判定する。
【０２４６】
アッセイ４
ラット唾液分泌抑制剤アッセイ
アッセイ３に記載したとおり、ラット（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ、雄性、２５０−３５０ｇ）に投薬、麻酔およびカニューレ処置を行う。手術後の所定時点に、動物を、背側を上に頭が傾斜（２０°の傾斜）の下方になるように置く。あらかじめ秤量しておいたガーゼパッドを動物の口に挿入し、ムスカリンアゴニストピロカルピン（ＰＩＬＯ：ｐｉｌｏｃａｒｐｉｎｅ）（３ｍｇ／ｋｇ、静脈内）を投与する。ＰＩＬＯの前後のガーゼパッドの重量を判定することにより、ＰＩＬＯ投薬後１０分間に産生される唾液を重量測定法で測定する。唾液分泌抑制剤の作用は、対照動物と比較した唾液分泌の阻害率で表す。
【０２４７】
１、６および２４時間のＩＤ５０の判定
被検化合物の全身曝露の評価および肺選択性インデックス（ＬＳＩ：ｌｕｎｇ  ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎｄｅｘ）の算出を行うため、ラット唾液分泌抑制剤アッセイを開発した。標準物質のチオトロピウムを、投薬１時間後、６時間後および２４時間後にこのモデルで評価した。ピロカルピン誘導唾液分泌反応のチオトロピウムによる阻害は、投薬６時間後に最も強力であることが明らかになった。この知見は、Ｅｉｎｔｈｏｖｅｎアッセイで観察されたピーク作用と整合している。
【０２４８】
このモデルは、Ｒｅｃｈｔｅｒ，「Ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｔｉｃｈｏｌｉｎｅｒｇｉｃ  ｄｒｕｇ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｉｎ  ｍｉｃｅ  ｂｙ  ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ  ａｇａｉｎｓｔ  ｐｉｌｏｃａｒｐｉｎｅ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｓａｌｉｖａｔｉｏｎ」Ａｔａ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｏｘｉｃｏｌ  ２４：２４３−２５４（１９９６）に記載された手順の変更形態である。ビヒクル処置した動物の唾液の平均重量を、処置前の各時点で算出し、その処置前の時点での平均重量を、投薬ごとに唾液分泌の阻害率を計算するのに使用する。
【０２４９】
このアッセイにおいて検査される本発明の例示的な化合物は、ＩＤ５０値が１００μｇ／ｍｌ（２４時間で測定）未満を示すと期待されており、中にはＩＤ５０値が３０μｇ／ｍｌ未満、２０μｇ／ｍｌ未満、さらに１５μｇ／ｍｌ未満を示す化合物もあると期待されている。
【０２５０】
唾液分泌抑制剤のＩＤ５０と気管支保護作用のＥＤ５０との比を用いて、被検化合物の見掛けの肺選択性インデックスを計算する。通常、好ましいのは、見掛けの肺選択性インデックスが約５を超える化合物である。
【０２５１】
本発明について、その具体的な態様または実施形態を参照しながら記載してきたが、本発明の真の精神および範囲から逸脱することなく、様々な変更が可能であったり、等価物に置き換えたりしてもよいことを当業者であれば理解するであろう。さらに、適用される特許法（ｓｔａｔｕｅｓ）および規則で認められる範囲で、本明細書に引用する刊行物、特許および特許出願についてはすべて、文書をそれぞれ参照によって本明細書に個々に援用してあるのと同じ程度に、参照によってその全体を本明細書に援用する。