(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｇａｌβ１−４Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ、Ｇａｌβ１−４Ｇａｌβ１−３Ｇｌｃ、Ｇａｌβ１−６Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ、Ｇａｌβ１−６Ｇａｌβ１−４Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃのいずれか（但し、式中Ｇａｌはガラクトース残基、Ｇｌｃはグルコース残基を表す）を含むガラクトオリゴ糖を水素添加することにより得られる還元ガラクトオリゴ糖を有効成分とする腸間膜脂肪低減剤。
【請求項２】
３糖を１５〜８０質量％、４糖以上を２〜３０質量％含む還元ガラクトオリゴ糖を有効成分とする請求項１記載の腸間膜脂肪低減剤。
【請求項３】
還元ガラクトオリゴ糖の糖組成が、単糖２５〜３５質量％、２糖２３〜３３質量％、３糖３０〜４０質量％、４糖以上２〜１２質量％である請求項１又は２記載の腸間膜脂肪低減剤。
【請求項４】
さらに、乳酸菌、又はビフィドバクテリウム属細菌を含有することを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項記載の腸間膜脂肪低減剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、腸間膜脂肪低減剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、日本において、欧米化された動物性脂肪の多い食事を摂取する機会が多くなり、肥満者が増加している。肥満になると心疾患、糖尿病、高血圧などの生活習慣病の発症リスクが高まるため、肥満を改善して健康な身体を維持することは、予防医学の観点から重要である。
【０００３】
肥満には皮下組織に脂肪が蓄積する皮下脂肪型肥満と、臓器の間に脂肪が蓄積する内臓脂肪型肥満の２つの型がある。内臓脂肪組織は、プラスミノーゲン・アクチベーター・インヒビター（ＰＡＩ−１）や腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）の炎症性サイトカインを活発に分泌している。ＰＡＩ−１は、動脈硬化の促進に関与し、ＴＮＦ−αは、インスリン抵抗性を引き起こす。そのため、皮下脂肪型肥満よりも、内臓脂肪型肥満の方が、高血圧、高脂血症、糖尿病などの他の生活習慣病を合併しやすいことが報告されている（非特許文献１）。
また、内臓脂肪組織の量が多くなると、血中のアディポネクチン量が減少する。アディポネクチンは、インスリン感受性増強作用、抗動脈硬化作用などを有する脂肪組織特異的ホルモン因子であり、「低アディポネクチン血症」は、糖尿病や動脈硬化症などの発症において、それらの上流に位置する根幹病態であることが明らかとなっている（非特許文献２）。
また、過栄養や運動不足によって肥大化した脂肪組織から多く分泌されるＭＣＰ−１（ｍｏｎｏｃｙｔｅ  ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ  ｐｒｏｔｅｉｎ−１）は、マクロファージの脂肪組織への浸潤を促し、この浸潤したマクロファージと脂肪組織が相互作用することによって炎症が引き起こされ、インスリン抵抗性の発症へと繋がると考えられている。近年の研究では、脂肪組織によってＭＣＰ−１の発現が異なることが明らかとなっており、副睾丸脂肪、腎臓脂肪、皮下脂肪に比べ、腸間膜脂肪からのＭＣＰ−１の分泌量が顕著に高いことが示されている（非特許文献３）。このように、同じ内臓脂肪組織であっても、腸間膜脂肪が肥満に起因する炎症反応に重要な働きを示す可能性が示唆されている。
【０００４】
したがって、生活習慣病を中心としたこれらの疾患の症状を予防又は改善するためには、内臓脂肪の蓄積を低減させること、特に腸間膜脂肪の蓄積を低減させることが有効であると考えられる。
【０００５】
腸間膜脂肪を低減させるためには生活習慣の改善、具体的には、食事量の低減と運動量の増加が必要である。しかし、これらを継続して実践するのは難しい。
そこで、日常の食生活で摂取することにより、手軽に腸間膜脂肪を低減し、生活習慣病の予防に役立つ食品素材及びそれを含む飲食品並びに医薬の開発が望まれている。
そのような腸間膜脂肪低減効果を有する食品素材は、既にいくつか報告されており、その代表的なものとして、カテキン（特許文献１）を挙げることができるが、カテキンは強い苦味を有するため、飲食品として日常的に摂取するには、風味上の問題がある。その他の腸間膜脂肪低減効果を有する食品素材としては、コージオリゴ糖（特許文献２）などを例示することができる。
【０００６】
一方、ガラクトオリゴ糖は、一般的には乳糖にβ−ガラクトシダーゼ等の酵素を作用させた時に生成するオリゴ糖の総称であり、高温下や酸性条件下でも安定であるといった物性的な特徴を生かし、様々な食品に利用されている。
また、ガラクトオリゴ糖には、経口摂取することにより奏される様々な生理活性があることが知られている。例えば、炎症性腸疾患予防・治療効果（特許文献３）、二次胆汁酸低下効果（特許文献４）、血中脂質代謝改善効果（特許文献５）が報告されている。また、腸間膜脂肪低減効果についても報告されている（特許文献６）。
【０００７】
一方、糖アルコールの一種であるソルビトール及びラクトチールに体脂肪低減効果があることが報告されている（非特許文献４）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００２−３２６９３２号公報
【特許文献２】特開２００５−２８１１８８号公報
【特許文献３】特開平１１−１１６４８４号公報
【特許文献４】特開平８−４０９１３号公報
【特許文献５】特開平１−２４２５２９号公報
【特許文献６】特開２０１０−６７１８号公報
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ａｄｉｐｏｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．３，Ｎｏ．１，２４−３１（２００６）
【非特許文献２】Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖｏｌ．３９，Ｎｏ．４，  ４１６−４２３（２００２）
【非特許文献３】Ｏｂｅｓｉｔｙ，Ｖｏｌ．１４，Ｎｏ．８，１３５３−１３６２（２００６）
【非特許文献４】Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．４４０−４４７（２００７）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明の目的は、日常的に手軽に摂取できる腸間膜脂肪低減剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
そこで、本発明者らは、鋭意検討した結果、還元ガラクトオリゴ糖に、内臓脂肪のうちでも特に腸間膜脂肪（組織）に対して低減効果があることを見出し、本発明を完成するに至った。
ここでいう腸間膜とは、小腸（空腸と回腸）の大部分を支持する、腹壁に付着した二重の腹膜をいい、腸間膜脂肪（組織）とは腸間膜に蓄積する脂肪（組織）をいう。
【００１２】
すなわち、本発明は、還元ガラクトオリゴ糖を有効成分とする腸間膜脂肪低減剤を提供するものである。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の腸間膜脂肪低減剤は、手軽に飲食可能な還元ガラクトオリゴ糖を有効成分として含み、これをそのまま、あるいは各種の飲食品や医薬などに配合して摂取することにより、腸間膜脂肪を低減することができ、腸間膜脂肪の蓄積に起因する生活習慣病の予防又は改善が期待できる。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明の腸間膜脂肪低減剤は、還元ガラクトオリゴ糖を有効成分として含むものである。
本発明に用いられる還元ガラクトオリゴ糖は、ガラクトオリゴ糖を水素添加することにより得ることが出来る。ガラクトオリゴ糖は、乳糖を原料とした場合、一般的には乳糖やグルコース等が混在したガラクトオリゴ糖含有糖として得られるため、本発明におけるガラクトオリゴ糖には、ガラクトオリゴ糖含有糖も含むものとする。また、本発明の還元ガラクトオリゴ糖には、乳糖やグルコースの糖アルコールであるラクチトールやソルビトール等が混在した還元ガラクトオリゴ糖含有糖も含むものとする。
水素添加手段としては、特に限定されないが、高圧接触還元法や水素化ホウ素ナトリウム等の還元剤を添加する薬剤法が用いられる。高圧接触還元法においては、例えば触媒としてスポンジニッケルを用いて水素添加する方法がより好ましい。より詳細には、３０〜８０％（ｗ／ｖ）のガラクトオリゴ糖に対して０.０２〜５重量％のスポンジニッケル触媒の存在下で、１００〜２００℃で、水素圧２〜１５ＭＰａで１〜５時間水素添加するのが好ましい。水素添加反応終了後は、活性炭処理、イオン交換処理等により精製して用いるのが好ましい。
【００１５】
原料として用いるガラクトオリゴ糖は、分子内にガラクトースを一分子以上含む２〜８糖のオリゴ糖であれば特に限定されるものではなく、例えば、一般式：Ｇａｌ−（Ｇａｌ）ｎ−Ｇｌｃ（但し、式中Ｇａｌはガラクトース残基、Ｇｌｃはグルコース残基、ｎは１〜６の整数を表す）で表される３糖以上のオリゴ糖；Ｇａｌ−Ｇａｌや乳糖の異性体などのガラクトシル２糖などが挙げられる。これらを単独で又は２種以上組み合わせて用いてもよい。
また、上記オリゴ糖の結合様式についても特に限定されるものではなく、例えばβ１−６、β１−３、β１−４、β１−２、α１−３、α１−６結合などが挙げられる。
【００１６】
上記一般式において、ｎは１〜４が好ましく、特に１〜２が好ましい。
３糖のガラクトオリゴ糖としては、Ｇａｌβ１−４Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃ、Ｇａｌβ１−４Ｇａｌβ１−３Ｇｌｃ、Ｇａｌβ１−６Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃなどが挙げられる。
また、４糖のガラクトオリゴ糖としては、Ｇａｌβ１−６Ｇａｌβ１−４Ｇａｌβ１−４Ｇｌｃなどが挙げられる。
【００１７】
上記ガラクトオリゴ糖は、如何なる方法で得られたものでもよく、例えば、ガラクトオリゴ糖を含む天然物から単離・精製する方法や、原料に酵素或いは酵素を産生する微生物を作用させる方法により得られたものを使用することができる。また、市販のガラクトオリゴ糖、例えば、ヤクルト薬品工業株式会社製のオリゴメイトＳ−ＨＰ、オリゴメイト５５Ｎ、日新製糖株式会社製のカップオリゴなどを使用することもできる。
【００１８】
ガラクトオリゴ糖を天然物から単離・精製する方法は、何ら限定されるものではなく、常法により単離・精製することができる。ガラクトオリゴ糖を含む天然物の種類は、何ら限定されるものではなく、例えば、哺乳動物の乳汁などが挙げられる。
【００１９】
ガラクトオリゴ糖を、酵素或いは酵素を産生する微生物を作用させて製造する方法は、常法により行うことができ、例えば、原料に直接酵素を作用させる方法や、原料を含んだ培地中で酵素を産生する微生物を培養する方法などが挙げられる。
【００２０】
上記、酵素或いは酵素を産生する微生物を用いてガラクトオリゴ糖を製造する方法において、用いる原料としては、例えば乳糖、ガラクトースなどを含む原料を挙げることができ、乳糖を含む原料が好ましい。
乳糖を含む原料としては、例えば、市販の乳糖、乳汁、粉乳、チーズホエーなどが挙げられる。当該乳汁は、そもそもガラクトオリゴ糖を含むものであるが、乳糖も含むため、酵素を作用させる方法でガラクトオリゴ糖を製造する際の原料として使用してもよい。
【００２１】
この際用いる酵素としては、ガラクトオリゴ糖を得ることができる酵素であれば特に限定されるものではなく、例えば、原料中の乳糖を加水分解し、分解により生じたガラクトースを乳糖やグルコースに転移させることができる酵素、具体的にはβ−ガラクトシダーゼやα−ガラクトシダーゼなどが挙げられる。これらの酵素は、単独で或いは２種以上を組み合わせて使用することができる。また、２種以上の酵素を用いる場合には、同時に又は順次作用させてもよい。ガラクトオリゴ糖の製造において、前記酵素を作用させる条件は、特に限定されるものではないが、一般的には、原料濃度は１０〜７０％、ｐＨは３〜８、酵素濃度は０．０１〜１００ｕｎｉｔｓ／ｍＬ、温度は２０〜７０℃、反応時間は２時間〜３日間が適当である。
【００２２】
なお、前記した酵素は、市販されているものを好適に使用することができるが、酵素を生合成する哺乳動物や植物の組織、又は酵素を産生する微生物の菌体又は培養上清等から常法に従って得られるものも好適に利用することができる。中でも微生物の菌体又は培養上清から得られる酵素は、酵素活性が高いものが多いため、これを用いることが好ましい。また、後述の通り、酵素を産生する微生物は、そのまま直接培養することにより、所望の酵素反応を達成することが出来るなどの利点を有するため、有用である。
【００２３】
ここで、ガラクトオリゴ糖製造用の酵素を産生する微生物としては、例えば、ストレプトコッカス・サーモフィルス、ラクトバチルス・ブルガリクス、クリベロマイセス・フラギリス、クリベロマイセス・ラクチス、アスペルギルス・オリゼ、ペニシリウム・ムルチカラ、リゾプス・オリゼ、バチルス・サーキュランス、クリプトコッカス・ローレンティ、スポロボロマイセス・シンギュラリス、サッカロミセス・フラギリス、リポマイセス・リポファ、ステリグマトマイセス・エリビエアエ、ロドトルラ・ミヌタ及びシロバシディウム・マグナムなどが挙げられ、特に、スポロボロマイセス・シンギュラリス及びクリベロマイセス・ラクチスが好ましい。
これらの微生物から酵素を製造するには、用いる微生物に適した条件で培養を行い、目的に応じて、得られる菌体又はその培養上清から常法に従って、酵素を単離・生成すればよい。例えば、培養により得た菌体を超音波又は界面活性剤により破砕し、不溶物を除去する方法、若しくは、クロマトグラフィーを用いて精製する方法を挙げることができる。
【００２４】
また、前記した酵素を産生する微生物は、原料を含む培地中で直接培養することもできる。この場合の培養条件は、特に制限されるものではなく、用いる微生物の培養に適した条件で行えばよいが、一般的には、原料濃度は１０〜７０％、ｐＨは３〜８、温度は２０〜７０℃、培養時間は２時間〜３日間が適当である。
また、培養方法についても、特に限定されるものではなく、例えば、液体培地に微生物を添加し、培養する方法や微生物を担体に固定し、固定化増殖菌体として培養する方法を挙げることができる。
【００２５】
ガラクトオリゴ糖を水素添加して得られた還元ガラクトオリゴ糖の重合度別組成は、原料ガラクトオリゴ糖の重合度別組成と同様である。還元ガラクトオリゴ糖の組成としては、単糖０〜４０質量％、２糖０〜５０質量％、３糖１５〜８０質量％、４糖以上２〜３０質量％であるのが好ましく、単糖２５〜３５質量％、２糖２３〜３３質量％、３糖３０〜４０質量％、４糖以上２〜１２質量％であるのが特に好ましい。これらの含有率は、すべて固形分あたりの含有率である。
【００２６】
後記実施例に示すように、還元ガラクトオリゴ糖は、ラットを用いた実験において、内臓脂肪のうち腸間膜脂肪組織を有意に減少させたことから、当該還元ガラクトオリゴ糖は、腸間膜脂肪低減剤として使用することができる。
【００２７】
ここで、近年の研究の結果、腸間膜脂肪の蓄積は、アディポネクチンの分泌を減少させ、ＰＡＩ−１の産生を亢進することが明らかとなった。アディポネクチンは、脂肪細胞から分泌される、抗動脈硬化、抗炎症、抗糖尿病、抗高血圧作用を持つ生理活性物質である。一方、ＰＡＩ−１は、アディポネクチンと同様に脂肪細胞から分泌される、血栓や血管病変を進展させる生理活性物質である。
また、前記背景技術に示すとおり、近年の研究では、脂肪組織によってＭＣＰ−１（ｍｏｎｏｃｙｔｅ  ｃｈｅｍｏａｔｔｒａｃｔａｎｔ  ｐｒｏｔｅｉｎ−１）の発現が異なることが明らかとなっており、副睾丸脂肪、腎臓脂肪、皮下脂肪に比べ、腸間膜脂肪からのＭＣＰ−１の分泌量が顕著に高いことが示されている（非特許文献３）。このＭＣＰ−１は、組織内で炎症を引き起こしたり、インスリン抵抗性の発症に関与していると考えられている。このように、同じ内臓脂肪組織であっても、腸間膜脂肪が肥満に起因する炎症反応及び当該炎症によって引き起こされるインスリン抵抗性の発症に重要な働きを示す可能性が示唆されている。このような背景から、内臓脂肪のなかでも特に腸間膜脂肪の蓄積抑制がインスリン抵抗性の抑制に繋がるのではないかと期待されている。
【００２８】
したがって、本発明の腸間膜脂肪低減剤は、腸間膜脂肪の低減作用又は腸間膜脂肪の蓄積抑制作用を有するので、アディポネクチンの減少やＰＡＩ−１の産生上昇を抑制すること、またインスリン抵抗性を抑制することが期待でき、糖尿病、高血圧、高脂血症などの生活習慣病を予防又は改善することができ、さらに肥満とこれ以外の糖尿病などが重複し、動脈硬化性疾患（心筋梗塞や脳梗塞）を起こすリスクが高い状態であるメタボリックシンドローム（代謝異常症候群、マルチプルリスクファクター症候群、内臓脂肪蓄積症候群）の予防や改善などに大きな効果を奏することが期待される。
【００２９】
また、本発明の腸間膜脂肪低減剤には、他の成分を配合してもよく、例えば乳酸菌、ビフィドバクテリウム属細菌等を配合するのが、腸間膜脂肪低減効果をさらに向上させる点で好ましい。ここで、ビフィドバクテリウム属細菌としては、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・ロンガム、ビフィドバクテリウム・インファンティス、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・カテヌラタム、ビフィドバクテリウム・シュードカテヌラタム、ビフィドバクテリウム・アンギュラタム等が挙げられる。これらのビフィドバクテリウム属細菌は、還元ガラクトオリゴ糖１ｇ（乾物重量）に対し、生菌数で１０2〜１０12（ＣＦＵ）配合するのが好ましい。
【００３０】
また、還元ガラクトオリゴ糖は、安全性、嗜好性共に問題はなく、単独で直接経口摂取してもよい。また、還元ガラクトオリゴ糖に必要に応じて賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、被膜剤、乳化剤、分散剤、溶剤安定化剤などを適宜添加して、錠剤、顆粒剤、散剤、粉末剤、カプセル剤、シロップ剤などの経口製剤などに製造して使用しても良い。
さらに、還元ガラクトオリゴ糖を既存の飲食品、例えば、パン、チューインガム、クッキー、チョコレート、菓子、シリアル、ジャム、アイスクリーム、ヨーグルト、ゼリー、ジュース、コーヒー、ココア、乳酸菌飲料などに添加することも可能であり、通常の固形食品の摂取が困難な人のための流動食にも添加することが可能である。
【００３１】
本発明の腸間膜脂肪低減剤を経口投与する場合の投与量に制限はないが、１回の投与量として還元ガラクトオリゴ糖０．１〜１０ｇ、１日当たりの総投与量として還元ガラクトオリゴ糖０．１〜２０ｇが好ましい。また、本発明の腸間膜脂肪低減剤は、一度に１日の必要量の全量を摂取してもよいし、数回に分けて摂取してもよい。
【実施例】
【００３２】
以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００３３】
製造例１：還元ガラクトオリゴ糖の製造
オリゴメイト５５Ｎ（ヤクルト薬品工業）のＢｒｉｘを５０に調整したもの２７ｋｇにスポンジニッケル触媒を２.５％添加し、撹拌しながら１２０〜１３０℃まで昇温し、水素圧を７〜８ＭＰａまで上げて水素化を完了させた。スポンジニッケル触媒を除去した後に、常法に従って、活性炭、ケイソウ土ろ過、イオン交換樹脂による精製を行ない、Ｂｒｉｘ３０の還元ガラクトオリゴ糖液糖(ラクチトール、ソルビトール、ガラクチトールを含む)を得た。なお、反応後の反応液に残存する還元糖の量（ベルトラント法、ガラクトース換算）は、反応前の３０.３％から０.０５％にまで低下していたことから、水素添加反応が十分に進行していることを確認した。
【００３４】
得られた還元ガラクトオリゴ糖及び原料ガラクトオリゴ糖の糖組成を表１に示す。
【００３５】
【表１】
0005570244.tif 000002
【００３６】
実施例１
Ａ．方法
（１）被検試料
ガラクトオリゴ糖としてオリゴメイト５５Ｎ（ヤクルト薬品工業株式会社）をイオン交換樹脂が充填されたクロマト分離装置に供して３糖以上画分を分画し、これを凍結乾燥したもの（ＧＯＳ、糖組成：３糖７７．６％、４糖１９．２％、５糖以上１％）を、還元ガラクトオリゴ糖として上記製造例１で得られたもの（ＯＭ−ＯＨ）を用いた。
【００３７】
（２）動物実験
使用動物
Ｗｉｓｔａｒラット（Ｊｃｌ：Ｗｉｓｔａｒ、雄、６週齢、日本クレア株式会社）を使用した。
被験飼料
ＡＩＮ−９３Ｍをベースとして、脂肪のエネルギー比が４０％になるようにコーンスターチをラードに置換した高脂肪食を基本飼料（Ｃｏｎｔ）とした（表２）。これに、ＧＯＳ、ＯＭ−ＯＨを、それぞれ５％となるようにコーンスターチと置換して配合した。
実験スケジュール
入荷後７日間はＭＦ固形飼料（オリエンタル酵母工業株式会社）の自由摂取による馴化飼育を行なった。馴化飼育終了後、体重がほぼ一定になるように３群（１群３匹）に分け、被験飼料を３２日間投与した。飼料と水は自由摂取とし、体重は週に１回、飼料摂取量は週に３回測定した。
解剖は午前９：３０−１２：３０の間に、非絶食下で塩化ペントバルビタールによる麻酔下で実施した。解剖時には、腸間膜脂肪、精巣周囲脂肪、及び腎周囲脂肪を摘出して重量を測定した。
【００３８】
【表２】
0005570244.tif 000003
【００３９】
（３）統計解析
実験結果は平均値±標準誤差で示した。
【００４０】
Ｂ．結果
（１）成長結果
成長結果を表３に示した。ＧＯＳとＯＭ−ＯＨ投与群の間で、終体重、飼料摂取量、摂取熱量ともに大きな差はみられなかった。
【００４１】
【表３】
0005570244.tif 000004
【００４２】
（２）内臓脂肪重量
内臓脂肪重量の結果を表４に示した。
【００４３】
【表４】
0005570244.tif 000005
【００４４】
表４から明らかなようにガラクトオリゴ糖（ＧＯＳ）よりも還元ガラクトオリゴ糖（ＯＭ−ＯＨ）の方が腸間膜脂肪低減効果が強いことが判明した。
【００４５】
実施例２
Ａ．方法
（１）被検試料
還元ガラクトオリゴ糖として上記製造例１で得られたもの（ＯＭ−ＯＨ）を、ソルビトールとして特級試薬（Ｄ−ソルビトール、シグマアルドリッチジャパン株式会社）を、ラクチトールとして特級試薬（ラクチトール一水和物、和光純薬工業株式会社）を、ビフィドバクテリウム属細菌としてビフィドバクテリウム・ブレーベ（ＢｂｒＹ）粉末、（ビフィズス菌末ＦＤＰ；約１．０×１０11ＣＦＵ／ｇ、ヤクルト薬品工業株式会社）を用いた。
【００４６】
（２）動物実験
使用動物
Ｗｉｓｔａｒラット（Ｊｃｌ：Ｗｉｓｔａｒ、雄、６週齢、日本クレア株式会社）を使用した。
被験飼料
実施例１と同様に、ＡＩＮ−９３Ｍをベースとして、脂肪エネルギー比が４０％になるようにコーンスターチをラードに置換した高脂肪食に、ＢｂｒＹを加えた粉末飼料を基本食（Ｃｏｎｔ）とした。また、これにＯＭ−ＯＨ、及びソルビトールとラクチトールの混合物（ＳＬ）（構成比＝１１：７；ＯＭ−ＯＨ中における構成比と同様）を、それぞれ５％となるようにコーンスターチに置換して配合した（表５）。飼料は給餌器を使用して給餌し、ビフィズス菌生菌数を１０8〜１０9ＣＦＵ／ｇ  ｄｉｅｔの範囲に維持できる３日以内に飼料交換を実施した。
【００４７】
実験スケジュール
入荷後７日間はＭＦ固形飼料（オリエンタル酵母工業株式会社）の自由摂取による馴化飼育を行なった。馴化飼育終了後、体重がほぼ一定になるように３群（１群８匹）に分け、被験飼料を５週間投与した。体重は週に１回、飼料摂取量は週に３回測定した。
解剖は、３時間の絶食の後、ソムノペンチル（ペントバルビタールナトリウム４５．４ｍｇ／ｋｇ  ｂｏｄｙ  ｗｅｉｇｈｔ  ｉ．ｐ．）による麻酔下で実施した。腸間膜脂肪、精巣周囲脂肪、及び腎周囲脂肪を摘出して重量を測定した。
【００４８】
【表５】
0005570244.tif 000006
【００４９】
（３）統計解析
実験結果は平均値±標準偏差で示した。パラメトリックＴｕｋｅｙ多重比較にて統計処理を行ない、危険率５％未満において有意差ありと判定した。統計解析には、ＳＡＳ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ８．２（ＳＡＳ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｉｎｃ．）を使用した。
【００５０】
Ｂ．結果
【００５１】
（１）内臓脂肪重量
内臓脂肪重量の結果を表６に示した。
【００５２】
【表６】
0005570244.tif 000007
【００５３】
表６より、還元ガラクトオリゴ糖（ＯＭ−ＯＨ）はソルビトールとラクチトールの混合物（ＳＬ）よりも腸間膜脂肪低減効果が強かった。
【００５４】
これらの結果から、還元ガラクトオリゴ糖は、ソルビトールやラクチトール、さらにガラクトオリゴ糖に比べて強い腸間膜脂肪低減効果を示した。
【００５５】
また、表６に示した還元ガラクトオリゴ糖（ＯＭ−ＯＨ）の腸間膜脂肪低減効果は、実施例１の腸間膜脂肪低減効果（表４）よりも強いことから、ビフィズス菌と組み合わせることにより、還元ガラクトオリゴ糖の腸間膜脂肪低減効果はさらに強まることが明らかとなった。