(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
0005519670.tif 000095
［式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜６アルキルアミノ、又はＣ１〜６アルコキシであり；
ｍは、３、４、又は５の値を有している整数であり；
ｎは、０〜３の値を有している整数であり；
ｐは、１又は２の値を有している整数である］
で表される化合物又はその塩。
【請求項２】
Ｒ１が、（１Ｓ）−１−メチルブチルオキシである、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項３】
ｎが、０である、請求項１又は２に記載の化合物又はその塩。
【請求項４】
ｎが、１である、請求項１又は２に記載の化合物又はその塩。
【請求項５】
ｎが、２である、請求項１又は２に記載の化合物又はその塩。
【請求項６】
以下：
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛３−［（テトラヒドロ−２−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エチル］アミノ｝プロピル）−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］ブチル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛５−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］ペンチル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛４−［（３Ｒ）−テトラヒドロ−３−フラニルアミノ］ブチル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；及び
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛４−［（３Ｓ）−テトラヒドロ−３−フラニルアミノ］ブチル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
並びにこれらの塩；
からなるリストから選択される化合物又はその塩。
【請求項７】
活性治療剤として使用するための、請求項１〜６のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項８】
アレルギー疾患及びその他の炎症性病態、感染症、並びにガンの治療で使用するための、請求項１〜６のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩。
【請求項９】
請求項１〜６のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩の治療有効量を含む、アレルギー疾患及びその他の炎症性病態、感染症、並びにガンの治療のための医薬組成物。
【請求項１０】
請求項１〜６のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩と、１種又はそれ以上の薬学的に許容される希釈剤又は担体とを含んでいる医薬組成物。
【請求項１１】
抗原又は抗原組成物と、請求項１〜６のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩とを含む、病気の治療又は予防のためのワクチン組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、化合物、それらの製造方法、それらを含む組成物、さまざまな疾患、特にアレルギー性疾患や他の炎症性疾患（例えば、アレルギー性鼻炎及び喘息）、感染性疾患、及び癌の治療におけるそれらの使用、並びにワクチンアジュバントとしてのそれらの使用に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
脊椎動物は微生物の侵入によって絶えず脅かされており、そのため感染性病原体を排除するための免疫防御機構を進化させてきた。哺乳類では、この免疫システムは２つの分岐からなり、すなわち、自然免疫（innate immunity）と獲得免疫（acquired immunity）である。生体防御の最前線は自然免疫システムであって、このシステムはマクロファージと樹状細胞によって媒介される。獲得免疫は感染の後期段階で病原体の排除に関与し、さらには免疫記憶を作り出すこともできる。獲得免疫は、遺伝子再構成を受けた抗原特異的受容体をもつリンパ球の膨大なレパートリーのため、非常に特異的である。
【０００３】
自然免疫応答は当初は非特異的であると考えられたが、今では、自己と各種病原体を区別できることが知られている。自然免疫システムは、生殖細胞系によりコードされた、限られた数のパターン認識受容体（Pattern-Recognition Receptor：ＰＲＲ）（これらの受容体はいくつかの重要な特徴を有する）を介して微生物を認識する。
【０００４】
Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）は、ヒトにおいて記述された１０のパターン認識受容体の１ファミリーである。ＴＬＲは主に自然免疫細胞により発現され、そこでのそれらの役割は、感染の兆候について環境を監視して、活性化されると、侵入する病原体の排除に狙いを定めた防御機構を作動させることである。ＴＬＲによって誘発された初期の自然免疫応答は感染の広がりを制限する一方で、それらにより誘発された前炎症性サイトカインとケモカインが抗原提示細胞、Ｂ細胞及びＴ細胞の動員と活性化をもたらす。ＴＬＲは適応免疫応答の性質を調節して、樹状細胞活性化とサイトカイン放出による適切な保護を与えることができる（非特許文献１）。さまざまなＴＬＲアゴニストから見られる応答の様相は、活性化される細胞のタイプによって異なる。
【０００５】
ＴＬＲ７はＴＬＲサブグループ（ＴＬＲ３、７、８及び９）のメンバーであって、非自己核酸の検出を専門に扱うようになったエンドソーム区画に局在する。ＴＬＲ７はｓｓＲＮＡの認識による抗ウイルス防御において重要な役割を果たす（非特許文献２；及び非特許文献３）。ＴＬＲ７はヒトでは制限された発現プロファイルを有し、主としてＢ細胞と形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）により発現され、それほど多くはないが単球によっても発現される。形質細胞様ＤＣはリンパ球由来樹状細胞の特異な集団（末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の０．２〜０．８％）であり、ウイルス感染に応答して高レベルのインターフェロンα（ＩＦＮα）とインターフェロンβ（ＩＦＮβ）を分泌する主要なＩ型インターフェロン産生細胞である（非特許文献４）。
【０００６】
アレルギー性疾患は、アレルゲンに対するＴｈ２に偏った免疫応答と関連している。Ｔｈ２応答はＩｇＥレベルの上昇を伴い、ＩｇＥが肥満細胞に作用することで、アレルゲンに対する過敏性が促進され、結果として、例えばアレルギー性鼻炎に見られる症状が生じる。健康な個体においては、アレルゲンに対する免疫応答はＴｈ２／Ｔｈ１が混在した調節性Ｔ細胞応答によってバランスがとれている。ＴＬＲ７リガンドは、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでＴｈ２サイトカインを抑制してＴｈ１サイトカイン放出を高めること、また、ｉｎ  ｖｉｖｏではアレルギー性肺モデルにおいてＴｈ２型炎症反応を改善することが示されている（非特許文献５；非特許文献６；非特許文献７）。したがって、ＴＬＲ７リガンドはアレルギー体質の個体に見られる免疫応答のバランスを取り戻して、疾患の改善をもたらす可能性がある。
【０００７】
哺乳動物において有効な自然免疫応答の発生の中心となるものは、インターフェロンと他のサイトカインの誘導をもたらす機構であり、こうしたサイトカイン類は細胞に作用して多くの効果を引き出している。そのような効果として、抗感染性遺伝子発現の活性化、強力な抗原特異的免疫を推進するための細胞での抗原提示の活性化、及び食細胞における食作用の促進が挙げられる。
【０００８】
最初、インターフェロンはウイルス感染から細胞を保護しうる物質として記載された（非特許文献８）。ヒトでは、Ｉ型インターフェロンは、インターフェロンα（ＩＦＮα）の少なくとも１３のアイソフォームとインターフェロンβ（ＩＦＮβ）の１つのアイソフォームをコードする第９染色体上の遺伝子によりコードされた関連タンパク質のファミリーである。組換えＩＦＮαは最初に承認された生物学的治療薬であり、ウイルス感染症と癌の重要な治療薬となっている。細胞への直接的な抗ウイルス活性はもちろんのこと、インターフェロンは免疫応答の強力なモジュレーターであって、免疫系の細胞に作用することも知られている。
【０００９】
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）疾患の一次治療として、インターフェロンの組合せはウイルス量を減らす上で、また、一部の被験者ではウイルス複製を完全になくす上で、非常に有効である。しかしながら、多くの患者は持続的なウイルス応答を示すことに失敗しており、こうした患者ではウイルス量が抑制されない。さらに、インターフェロンの注射による治療は多くの望ましくない副作用を伴うことがあり、コンプライアンスに影響を与えることがわかっている（非特許文献９）。
【００１０】
自然免疫応答（Ｉ型インターフェロンと他のサイトカインの活性化を含む）を刺激しうる小分子化合物の投与は、ウイルス感染症をはじめとするヒト疾患の治療又は予防のための重要な戦略になると考えられる。この種の免疫調節型戦略は、感染症だけでなく、癌（非特許文献１０）、アレルギー性疾患（非特許文献６）、過敏性腸疾患のような他の炎症性疾患（非特許文献１１）にも有用であり、さらにワクチンアジュバント（非特許文献１２）としても有用でありうる化合物を同定する可能性を有している。
【００１１】
動物モデルにおいて、イミキモド（imiquimod）は局所的（非特許文献１３；非特許文献１４）又は全身的（非特許文献１５）のいずれにもアジュバント活性を示した。レシキモド（resiquimod）と他の関連ＴＬＲ７／８アゴニストもまた、アジュバント活性を示すことがわかっている（非特許文献１６；非特許文献１７；Wille-Reece U. et alの特許文献１）。
【００１２】
Ｉ型インターフェロンの誘導をもたらす作用機構は一部しか理解されていない。多くの細胞型においてインターフェロンの誘導につながる可能性がある１つの機構は、ＲＮＡヘリカーゼＲＩＧ−Ｉ及びＭＤＡ５による二本鎖ウイルスＲＮＡの認識である。この機構は、細胞のセンダイウイルス感染によりインターフェロンが誘導される一次機構であると考えられる。
【００１３】
インターフェロン誘導のさらなる機構はＴＬＲ依存性シグナル伝達事象を介するものである。ヒトでは、形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）が専門的なインターフェロン産生細胞であって、例えばウイルス感染に応答して、大量のインターフェロンを産生することができる。こうしたｐＤＣはＴＬＲ７及びＴＬＲ９を優先的に発現することが示されており、これらの受容体がそれぞれウイルスＲＮＡ又はＤＮＡで刺激されると、インターフェロンαの発現が誘導される。
【００１４】
ＴＬＲ７及びＴＬＲ９のオリゴヌクレオチドアゴニスト、並びにＴＬＲ７の小分子プリン系アゴニストは、動物及びヒトにおいてこれらの細胞型からインターフェロンαを誘導できることが記載されている（非特許文献１８）。ＴＬＲ７アゴニストとして、イミダゾキノリン化合物（例えば、イミキモド、レシキモド）、オキソアデニン類似体、さらにヌクレオシド類似体（例えば、ロキソリビン（loxoribine）、７−チア−８−オキソグアノシン）が挙げられ、これらはインターフェロンαを誘導することが久しく知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００６／０４５８８５号明細書
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】Akira S. et al, Nat. Immunol., 2001: 2, 675-680
【非特許文献２】Diebold S. S. et al, Science, 2004: 303, 1529-1531
【非特許文献３】Lund J. M. et al, PNAS, 2004: 101, 5598-5603
【非特許文献４】Liu Y-J, Annu. Rev. Immunol., 2005: 23, 275-306
【非特許文献５】Fili L. et al, J. All. Clin. Immunol., 2006: 118, 511-517
【非特許文献６】Moisan J. et al, Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol., 2006: 290, L987-995
【非特許文献７】Tao et al, Chin. Med. J., 2006: 119, 640-648
【非特許文献８】Isaacs & Lindemann, J. Virus Interference. Proc. R. Soc. Lon. Ser. B. Biol. Sci. 1957: 147, 258-267
【非特許文献９】Dudley T, et al, Gut, 2006: 55(9), 1362-3
【非特許文献１０】Krieg. Curr. Oncol. Rep., 2004: 6(2), 88-95
【非特許文献１１】Rakoff-Nahoum S., Cell., 2004, 23, 118(2): 229-41
【非特許文献１２】Persing et al. Trends Microbiol. 2002: 10(10 Suppl), S32-7
【非特許文献１３】Adams S. et al, J. Immunol., 2008, 181:776-84
【非特許文献１４】Johnston D. et al, Vaccine, 2006, 24:1958-65
【非特許文献１５】Fransen F. et al, Infect. Immun., 2007, 75:5939-46
【非特許文献１６】Ma R. et al, Biochem. Biophys. Res. Commun., 2007, 361: 537-42
【非特許文献１７】Wille-Reece U. et al, Proc. Natl. Acad. Sci USA, 2005, 102: 15190-4
【非特許文献１８】Takeda K. et al, Annu. Rev. Immunol., 2003: 21, 335-76
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１７】
小分子プリン様化合物がＩ型インターフェロンと他のサイトカインをどのようにして誘導できるかは、これら既知の誘導物質の分子標的が確認されていないため、依然不明のままである。しかし、ヒトインターフェロンＩＦＮαの小分子誘導物質を（作用機構にかかわりなく）特徴づけるために、ヒトドナー初代細胞を化合物で刺激することに基づくアッセイ戦略が開発されたので、それを本明細書において開示する。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明の特定の化合物はヒトインターフェロンの誘導物質であることが判明し、これらの化合物はヒトインターフェロンの既知の誘導物質に対して改善されたプロファイル（例えば、効力増強）を保持し、また、ＴＮＦαに対してＩＦＮαへの増強された選択性を示すことができる。例えば、本発明の特定の化合物はＴＮＦα誘導と比べてＩＦＮα誘導について１００倍を上回る選択性を示す。ヒトインターフェロンを誘導する化合物は、さまざまな疾患の治療に、例えばアレルギー性疾患や他の炎症性疾患（例えば、アレルギー性鼻炎、喘息）、感染性疾患及び癌の治療に有用であると考えられ、また、ワクチンアジュバントとしても役立つ可能性がある。
【００１９】
本発明の特定の化合物は強力な免疫調節剤であり、したがって、それらの取り扱いには注意が必要である。
【００２０】
第１の態様で、式（Ｉ）：
【化１】
0005519670.tif 000002
【００２１】
［式中、
Ｒ１は、Ｃ１〜６アルキルアミノ、又はＣ１〜６アルコキシであり；
ｍは、３、４、又は５の値を有している整数であり；
ｎは、０〜３の値を有している整数であり；
ｐは、１又は２の値を有している整数である］
で表される化合物又はその塩が提供される。
【００２２】
さらなる実施形態においては、Ｒ１は、ｎ−ブチルオキシである。
【００２３】
さらなる実施形態においては、Ｒ１は、（１Ｓ）−１−メチルブチルオキシである。
【００２４】
さらなる実施形態においては、Ｒ１は、ｎ−ブチルアミノである。
【００２５】
さらなる実施形態においては、ｍは、３である。
【００２６】
さらなる実施形態においては、ｍは、４である。
【００２７】
さらなる実施形態においては、ｍは、５である。
【００２８】
さらなる実施形態においては、ｎは、０である。
【００２９】
さらなる実施形態においては、ｎは、１である。
【００３０】
さらなる実施形態においては、ｎは、２である。
【００３１】
さらなる実施形態においては、ｎが０である場合、
【化２】
0005519670.tif 000003
【００３２】
基への−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ−基の結合点における立体化学は、Ｒ配置にある。
【００３３】
さらなる実施形態においては、ｎが０である場合、その
【化３】
0005519670.tif 000004
【００３４】
基への−（ＣＨ２）ｍ−ＮＨ−基の結合点における立体化学は、Ｓ配置にある。
【００３５】
さらなる実施形態においては、ｐは、１である。
【００３６】
さらなる実施形態においては、ｐは、２である。
【００３７】
式（Ｉ）で表される化合物のサブセットが存在するが、それは式（Ｉ’）で表される化合物である。つまり、さらなる態様で、式（Ｉ’）：
【化４】
0005519670.tif 000005
【００３８】
［式中、
Ｒ１’は、Ｃ１〜６アルキルアミノ、又はＣ１〜６アルコキシであり；
ｍ’は、３の値を有している整数であり；
ｎ’は、０〜３の値を有している整数であり；
ｐ’は、１又は２の値を有している整数である］
で表される化合物及びその塩が提供される。
【００３９】
さらなる実施形態においては、Ｒ１’は、ｎ−ブトキシである。
【００４０】
さらなる実施形態においては、Ｒ１’は、（１Ｓ）−１−メチルブチルオキシである。
【００４１】
さらなる実施形態においては、Ｒ１’は、ｎ−ブチルアミノである。
【００４２】
さらなる実施形態においては、ｎ’は、０である。
【００４３】
さらなる実施形態においては、ｎ’は、１である。
【００４４】
さらなる実施形態においては、ｎ’は、２である。
【００４５】
さらなる実施形態においては、ｐ’は、１である。
【００４６】
さらなる実施形態においては、ｐ’は、２である。
【００４７】
以下のリストには式（Ｉ）で表される化合物の例が提供されている：
６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−｛３−［（２Ｒ）−テトラヒドロ−２−フラニルアミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−｛３−［（２Ｓ）−テトラヒドロ−２−フラニルアミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−３−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エチル］アミノ｝プロピル）−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛３−［（テトラヒドロ−２−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エチル］アミノ｝プロピル）−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−（ブチルアミノ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−（ブチルアミノ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エチル］アミノ｝プロピル）−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−（ブチルアミノ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−（ブチルアミノ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ブチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］ブチル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛５−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］ペンチル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛４−［（３Ｒ）−テトラヒドロ−３−フラニルアミノ］ブチル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；及び
６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛４−［（３Ｓ）−テトラヒドロ−３−フラニルアミノ］ブチル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン；
並びにこれらのものの塩。これらは、本発明のさらなる態様を形成するものである。
【００４８】
つまり、本発明のさらなる態様として、治療等で使用するための式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）が提供される。
【００４９】
式（Ｉ）で表される化合物又はその薬学的に許容される塩が治療で使用される場合、それは、活性治療剤として使用されることは、解ると思われる。
【００５０】
つまりアレルギー疾患や他の炎症性病態、感染症、及びガンの治療で使用するための式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）も提供される。
【００５１】
つまりアレルギー性鼻炎の治療で使用するための式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）も提供される。
【００５２】
つまり喘息の治療で使用するための式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）も提供される。
【００５３】
つまり式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）を含んでいるワクチンアジュバントも提供される。
【００５４】
抗原又は抗原組成物と式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）とを含んでいる免疫原性組成物がさらに提供される。
【００５５】
抗原又は抗原組成物と式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）とを含んでいるワクチン組成物がさらに提供される。
【００５６】
抗原又は抗原組成物と式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）とを含んでいる免疫原性組成物を、病気に罹っている又は罹りやすいヒト対象に投与することを含む、病気の治療又は予防方法がさらに提供される。
【００５７】
抗原又は抗原組成物と式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）とを含んでいるワクチン組成物を、病気に罹っている又は罹りやすい患者ヒト対象に投与することを含む、病気の治療又は予防方法がさらに提供される。
【００５８】
抗原又は抗原組成物を含んでいる、病気の治療又は予防用免疫原性組成物を製造するための、式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）の使用がさらに提供される。
【００５９】
抗原又は抗原組成物を含んでいる、病気の治療又は予防用ワクチン組成物を製造するための、式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）の使用がさらに提供される。
【００６０】
アレルギー疾患や他の炎症性病態、感染症、及びガンの治療用医薬を製造するための、式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）の使用がさらに提供される。
【００６１】
アレルギー性鼻炎の治療用医薬を製造するための、式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）の使用がさらに提供される。
【００６２】
喘息の治療用医薬を製造するための、式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）の使用がさらに提供される。
【００６３】
アレルギー性鼻炎の治療方法がさらに提供され、この方法には、投与を必要としているヒト対象に、式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）の治療有効量を投与することが含まれる。
【００６４】
喘息の治療方法がさらに提供され、この方法には、投与を必要としているヒト対象に、式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）の治療有効量を投与することが含まれる。
【００６５】
本発明は、さらなる態様で、少なくとも１種の他の治療活性剤と一緒に式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）を含んでいる組み合わせを提供する。
【００６６】
式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）と１種又はそれ以上の薬学的に許容される希釈剤又は担体とを含んでいる医薬組成物がさらに提供される。
【００６７】
式（Ｉ）で表される化合物（又はその薬学的に許容される塩）と１種又はそれ以上の薬学的に許容される希釈剤又は担体を混合することを含む、医薬組成物の調製方法も提供される。
【００６８】
式（Ｉ）で表される化合物及びその塩は本明細書に記載する方法によって調製され得る。そしてこれは本発明のさらなる態様を形成するものである。
【００６９】
つまり、式（Ｉ）で表される化合物を調製するための方法が提供され、その方法は、式（ＩＩ）：
【化５】
0005519670.tif 000006
【００７０】
［式中、Ｒ１、ｍ、ｎ、及びｐは、式（Ｉ）で表わされる化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｒ２は、Ｃ１〜６アルキルである］で表される化合物を脱保護すること、及び、そのあと、必要なら、以下の場合による各工程：
（ｉ）．必要な保護基の除去；
（ｉｉ）．そのようにして生成した化合物の塩の調製；
のうちの１つ又はそれ以上を行うこと、を含む。
【００７１】
本発明には、本明細書に記載した各実施形態及び各態様のあらゆる組み合わせが、包含される。
【発明を実施するための形態】
【００７２】
本発明は、当業者が知っている用語、また当業者が解る用語で記載される。引用しやすいように一部の用語が本明細書以下に定義される。一部の用語が定義されているという事実は、しかしながら、定義されている用語は、その通常の意味とは整合性がない意味で使われていると取るべきでなく、あるいは、別の言い方をすると、定義されていない用語は不定である又は通常の、認められている意味内では使われていないことを意味すると取るべきでない。むしろ、本明細書で使われている用語は、すべて、本発明の範囲を当業者が解ることができるように、本発明を記載していると、考えている。以下の各定義は、定義されている各用語を明確にしようとするものであって、それを限定しようとするものではない。
【００７３】
「アルキル」への言及には、６個までの炭素原子（例えば４個までの炭素原子又は２個までの炭素原子）を含有しているその対応するアルキルの直鎖脂肪族異性体及び分枝鎖脂肪族異性体のいずれもへの言及が含まれる。「アルキル」へのそのような言及は、アルキル基が、別の基、例えばアルキルアミノ又はアルコキシ基の一部分である場合も、当てはまる。そのようなアルキル基及びアルキル基を含有している基の例は、Ｃ１〜６アルキル、Ｃ１〜６アルキルアミノ、及びＣ１〜６アルコキシである。
【００７４】
「ヘテロ環」又は「ヘテロシクリル」への言及は、３〜６個の炭素原子及び１個の、窒素であるヘテロ原子を含有している単環式飽和へテロ環式脂肪族環のことを言っている。そのようなヘテロ環式環は、アゼチジン又はアゼチジニル、ピロリジン又はピロリジニル、ピペリジン又はピペリジニル、及びアゼピン又はアゼピニルである。
【００７５】
「ハロゲン」への言及は、ヨウ素、臭素、塩素又はフッ素、典型的にはフッ素、臭素、又は塩素、のことを言っている。「ハロ」への言及は、ヨード、ブロモ、クロロ又はフルオロ、典型的にはフルオロ、ブロモ、又はクロロ、のことを言っている。
【００７６】
本明細書において、本発明の化合物への言及は遊離塩基としての、又は塩（例えば、製薬上許容される塩）としての、式（Ｉ）の化合物を意味すると理解すべきである。
【００７７】
式（Ｉ）の化合物の塩には、製薬上許容される塩と、製薬上許容されないが、式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩の製造に有用でありうる塩が含まれる。塩は特定の無機もしくは有機酸、又は特定の無機もしくは有機塩基から誘導することができる。
【００７８】
本発明は、その範囲内に、式（Ｉ）の化合物の塩のすべての可能な化学量論的及び非化学量論的形態を包含する。
【００７９】
塩の例としては、製薬上許容される塩がある。製薬上許容される塩には酸付加塩と塩基付加塩が含まれる。適当な塩の概説については、Berge et al., J. Pharm. Sci., 66:1-19 (1977)を参照されたい。
【００８０】
式（Ｉ）の化合物の製薬上許容される酸付加塩の例としては、臭化水素酸塩、塩酸塩、硫酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフタレンスルホン酸塩、及びフェニルスルホン酸塩が挙げられる。
【００８１】
製薬上許容される塩基性塩の例としては、ナトリウム塩及びカリウム塩のようなアルカリ金属塩、及びカルシウム塩及びマグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩が挙げられる。
【００８２】
塩の形成は、当技術分野でよく知られた手法を用いて、例えば、溶液からの沈殿とその後の濾過、又は溶媒の蒸発により、行うことができる。
【００８３】
一般的には、製薬上許容される酸付加塩は、式（Ｉ）の化合物を適当な強酸（例えば、臭化水素酸、塩酸、硫酸、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、又はナフタレンスルホン酸）と、場合により有機溶媒のような適当な溶媒中で、反応させて塩を形成させることにより得られ、通常その塩は例えば結晶化と濾過により単離される。
【００８４】
理解されるように、多くの有機化合物は、溶媒（その溶媒中でそれらが反応したり、その溶媒からそれらが沈殿したり、結晶化される）との複合体を形成することがある。こうした複合体は「溶媒和物」として知られている。例えば、水との複合体は「水和物」として公知である。沸点の高い溶媒及び／又は水素結合を形成しやすい溶媒（例えば、水、エタノール、イソプロピルアルコール、及びＮ−メチルピロリジノン）を用いて溶媒和物を形成することが可能である。溶媒和物の同定方法としては、限定するものではないが、ＮＭＲ及び微量分析が挙げられる。式（Ｉ）の化合物の溶媒和物は本発明の範囲内である。本明細書中で用いる「溶媒和物」という用語は、遊離塩基化合物とその塩の双方の溶媒和物を包含する。
【００８５】
本発明の化合物のいくつかはキラル原子及び／又は多重結合を含むことができ、それゆえ１以上の立体異性体として存在しうる。本発明は、個々の立体異性体であろうと、それらの混合物（ラセミ体を含む）であろうと、本発明の化合物のあらゆる立体異性体（光学異性体を含む）を包含する。どの立体異性体も１０重量％未満（例えば、５重量％未満、又は０．５重量％未満）の他の立体異性体を含むことができる。例えば、どの光学異性体も１０重量％未満（例えば、５重量％未満、又は０．５重量％未満）のその鏡像異性体を含んでよい。
【００８６】
本発明の化合物のいくつかは互変異性体として存在することができる。当然のことながら、本発明は、個々の互変異性体であろうと、それらの混合物であろうと、本発明の化合物のあらゆる互変異性体を包含する。
【００８７】
本発明の化合物は結晶形又は非晶形で存在することができる。さらに、本発明の化合物の一部の結晶形は多形として存在することができ、それらのすべてが本発明の範囲内に含まれる。本発明の化合物の最も熱力学的に安定した多形体が特に興味深いものである。
【００８８】
本発明の化合物の多形体は、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）、赤外分光法（ＩＲ）、ラマン分光法、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、熱重量分析（ＴＧＡ）、及び固体核磁気共鳴（ｓｓＮＭＲ）を含むがこれらに限らない、いくつかの慣用分析技術を用いて特性解析し、区別することができる。
【００８９】
前述のことから理解されるように、式（Ｉ）の化合物の溶媒和物、水和物、異性体及び多形体、並びにそれらの塩及び溶媒和物は本発明の範囲内に含まれる。
【００９０】
式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩が有益な効果を奏する可能性がある疾患の例としては、アレルギー性疾患や他の炎症性疾患（例えば、アレルギー性鼻炎及び喘息）、感染性疾患、及び癌が挙げられる。式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩はワクチンアジュバントとしても使用できる可能性がある。
【００９１】
免疫反応のモジュレーターとして、式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩は、アジュバントとして単独で又は組み合わせて、以下のような炎症性もしくはアレルギー性疾患を含むがそれらに限らない免疫介在疾患の治療及び／又は予防にも有用でありうる：喘息、アレルギー性鼻炎及び鼻結膜炎、食物アレルギー、過敏性肺疾患、好酸球性肺炎、遅延型過敏性疾患、アテローム性動脈硬化症、膵炎、胃炎、大腸炎、変形性関節炎、乾癬、サルコイドーシス、肺線維症、呼吸窮迫症候群、細気管支炎、慢性閉塞性肺疾患、副鼻腔炎、嚢胞性線維症、光線性角化症、皮膚異形成、慢性蕁麻疹、湿疹及びあらゆるタイプの皮膚炎。
【００９２】
式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩はさらに、気道ウイルス増悪及び扁桃腺炎を含むがこれらに限らない呼吸器感染症に対する反応の治療及び／又は予防にも有用でありうる。本化合物はまた、以下の疾患を含むがそれらに限らない自己免疫疾患の治療及び／又は予防にも有用でありうる：慢性関節リウマチ、乾癬性関節炎、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群、強直性脊椎炎、強皮症、皮膚筋炎、糖尿病、移植片拒絶（移植片対宿主病を含む）、炎症性腸疾患（クローン病及び潰瘍性大腸炎を含むが、これらに限らない）。
【００９３】
式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩はさらに、以下のウイルスによって引き起こされる疾患を含むがそれらに限らない感染性疾患の治療に有用でありうる：肝炎ウイルス（例：Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス）、ヒト免疫不全ウイルス、パピローマウイルス、ヘルペスウイルス、呼吸器系ウイルス（例：インフルエンザウイルス、ＲＳウイルス、ライノウイルス、メタ肺炎ウイルス、パラインフルエンザウイルス、ＳＡＲＳ）、及び西ナイルウイルス。式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩はさらに、例えば細菌、真菌又は原生動物によって引き起こされる微生物感染症の治療にも有用でありうる。これらには、限定するものではないが、結核、細菌性肺炎、アスペルギルス症、ヒストプラスマ症、カンジダ症、ニューモシスチス症、ハンセン病、クラミジア症、クリプトコッカス症、クリプトスポリジウム症、トキソプラズマ症、リーシュマニア症、マラリア、及びトリパノソーマ症が含まれる。
【００９４】
式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩はさらに、さまざまな癌の治療、特に免疫療法に応答することが知られている癌の治療にも有用でありうる。かかる癌としては、限定するものではないが、腎細胞癌、肺癌、乳癌、結腸直腸癌、膀胱癌、黒色腫、白血病、リンパ腫及び卵巣癌が挙げられる。
【００９５】
当業者には理解されるように、本明細書での治療又は治療法への言及は、疾患に応じて、確立された疾患の治療だけでなく予防にも及ぶものである。
【００９６】
本明細書中に記載する通り、式（Ｉ）の化合物とその製薬上許容される塩は治療薬として有用である。
【００９７】
式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩は、都合のよい方法で投与するために製剤化することができる。
【００９８】
式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩は、例えば、経口、局所、吸入、鼻腔内、口腔、非経口（例えば、静脈内、皮下、皮内、筋内）、又は直腸投与のために製剤化される。一態様において、式（Ｉ）の化合物とその製薬上許容される塩は経口投与用に製剤化される。さらなる態様では、式（Ｉ）の化合物とその製薬上許容される塩が局所投与、例えば鼻腔内又は吸入投与のために製剤化される。
【００９９】
経口投与用の錠剤及びカプセル剤は、以下のような慣用添加剤を含むことができる：結合剤、例えばシロップ、アラビアビム、ゼラチン、ソルビトール、トラガカント、デンプン糊、セルロース、もしくはポリビニルピロリドン；充填剤、例えば乳糖、微結晶性セルロース、糖、トウモロコシデンプン、リン酸カルシウム、もしくはソルビトール；滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、ポリエチレングリコール、もしくはシリカ；崩壊剤、例えばジャガイモデンプン、クロスカルメロースナトリウム、もしくはグリコール酸デンプンナトリウム；又は湿潤剤、例えばラウリル硫酸ナトリウム。当技術分野でよく知られた方法により錠剤をコーティングしてもよい。
【０１００】
経口液体製剤は、例えば、水性もしくは油性の懸濁液剤、溶液剤、乳剤、シロップ剤又はエリキシル剤の形にすることができ、また、水や他の適当なビヒクルを用いて用時調製するための乾燥製品として提示することもできる。そのような液体製剤は以下のような慣用添加剤を含むことができる：懸濁化剤、例えばソルビトールシロップ、メチルセルロース、グルコース／糖シロップ、ゼラチン、ヒドロキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ステアリン酸アルミニウムゲル、もしくは水添食用脂；乳化剤、例えばレシチン、ソルビタンモノオレエート、もしくはアラビアゴム；非水性ビヒクル（食用油を含む）、例えばアーモンド油、分留ヤシ油、油性エステル、プロピレングリコール、もしくはエチルアルコール；又は防腐剤、例えばｐ−ヒドロキシ安息香酸メチルもしくはプロピル、もしくはソルビン酸。これらの製剤はさらに、緩衝塩類、香味剤、着色剤及び／又は甘味剤（例：マンニトール）を適宜含んでもよい。
【０１０１】
経鼻投与用の組成物には、点滴により又は加圧ポンプにより鼻に投与される水性組成物が含まれる。適当な組成物はそのために希釈剤又は担体として水を含む。肺又は鼻に投与するための組成物は１種以上の添加剤、例えば１種以上の懸濁化剤、１種以上の防腐剤、１種以上の界面活性剤、１種以上の等張化剤、１種以上の共溶媒を含むことができ、また、組成物のｐＨを調製するための成分、例えば緩衝剤系を含むことができる。さらに、これらの組成物は酸化防止剤（例えば、メタ重亜硫酸ナトリウム）及び矯味剤のような他の添加剤を含んでもよい。組成物はまた、鼻や他の気道領域にネブライゼーション（噴霧化）によって投与することもできる。
【０１０２】
経鼻投与用の組成物は、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を鼻腔（標的組織）の全域に送達することを可能にし、さらに、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩が標的組織と接触したままで長期間とどまることを可能にするものである。経鼻投与用組成物の適当な投与方式は、患者が鼻腔をきれいにした後で鼻からゆっくり吸入することである。吸入中は、組成物を一方の鼻孔に投与して、その間他方の鼻孔を手で圧迫する。その後この手順を他方の鼻孔で繰り返す。一般には、上記の手順により鼻孔あたり１又は２回のスプレーを１日１、２又は３回、理想的には１日１回投与する。１日１回の投与に適する経鼻投与用組成物が特に興味深いものである。
【０１０３】
懸濁化剤は、もし含まれるならば、組成物の全重量に基づいて０．１〜５％（ｗ／ｗ）、例えば１．５％〜２．４％（ｗ／ｗ）の量で通常存在する。製薬上許容される懸濁化剤の例としては、限定するものではないが、Ａｖｉｃｅｌ（登録商標）（微結晶性セルロース及びカルボキシメチルセルロースナトリウム）、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ビーガム（ｖｅｅｇｕｍ）、トラガカント、ベントナイト、メチルセルロース、キサンタンガム、カルボポール及びポリエチレングリコールが挙げられる。
【０１０４】
肺又は鼻に投与するための組成物は１種以上の添加剤を含むことができ、１種以上の防腐剤を含めることによって微生物又は真菌による汚染及び繁殖から保護される。製薬上許容される抗菌剤又は防腐剤の例としては、限定するものではないが、第４級アンモニウム化合物（例えば、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、セトリミド、塩化セチルピリジニウム、塩化ラウラルコニウム、及び塩化ミリスチルピコリニウム）、水銀剤（例えば、硝酸フェニル水銀、酢酸フェニル水銀、及びチメロサール）、アルコール剤（例えば、クロロブタノール、フェニルエチルアルコール、及びベンジルアルコール）、抗菌エステル（例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸のエステル）、キレート化剤（例えば、エデト酸ナトリウム（ＥＤＴＡ））、並びに他の抗菌剤（例えば、クロルヘキシジン、クロロクレゾール、ソルビン酸とその塩（例：ソルビン酸カリウム）、及びポリミキシンが挙げられる。製薬上許容される抗真菌剤又は防腐剤の例としては、限定するものではないが、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、プロピオン酸ナトリウム、メチルパラベン、エチルパラベン、プロピルパラベン、及びブチルパラベンが挙げられる。防腐剤は、もし含まれるならば、組成物の全重量に基づいて０．００１〜１％（ｗ／ｗ）、例えば０．０１５％〜０．５％（ｗ／ｗ）の量で存在する。
【０１０５】
組成物（例えば、少なくとも１種の化合物が懸濁状態で存在する組成物）は、その組成物の水相への医薬粒子の溶解を促進するように機能する１種以上の界面活性剤を含むことができる。例えば、用いる界面活性剤の量は混合中に起泡をおこさない量である。製薬上許容される界面活性剤の例としては、脂肪アルコール、エステル及びエーテル、例えばポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート（ポリソルベート８０）、マクロゴールエーテル、及びポロキサマーが挙げられる。界面活性剤は組成物の全重量に基づいて約０．０１〜１０％（ｗ／ｗ）、例えば０．０１〜０．７５％（ｗ／ｗ）、例えば約０．５％（ｗ／ｗ）の量で存在しうる。
【０１０６】
１種以上の等張化剤は体液（例えば、鼻腔内の液体）との等張性を達成するために加えられ、その結果、刺激性の程度が軽減される。製薬上許容される等張化剤の例として、限定するものではないが、塩化ナトリウム、デキストロース、キシリトール、塩化カルシウム、グルコース、グリセリン、及びソルビトールが挙げられる。等張化剤は、もし存在するのであれば、組成物の全重量に基づいて０．１〜１０％（ｗ／ｗ）、例えば４．５〜５．５％（ｗ／ｗ）、例えば約５．０％（ｗ／ｗ）の量で含めることができる。
【０１０７】
本発明の組成物は適当な緩衝剤の添加により緩衝化することができ、かかる緩衝剤としては、例えばクエン酸ナトリウム、クエン酸、トロメタモール、リン酸塩、例えばリン酸二ナトリウム（例えば、１２水和物、７水和物、２水和物及び無水物）、又はリン酸ナトリウム及びこれらの混合物がある。
【０１０８】
緩衝剤は、もし存在するのであれば、組成物の全重量に基づいて０．１〜５％（ｗ／ｗ）、例えば１〜３％（ｗ／ｗ）の量で含めることができる。
【０１０９】
矯味剤の例としては、スクラロース、スクロース、サッカリン又はその塩、フルクトース、デキストロース、グリセロール、コーンシロップ、アスパルテーム、アセスルファムＫ、キシリトール、ソルビトール、エリスリトール、グリチルリチン酸アンモニウム、タウマチン、ネオテーム（neotame）、マンニトール、メントール、ユーカリ油、ショウノウ、天然香味剤、人工香味剤、及びこれらの組み合わせが挙げられる。
【０１１０】
１種以上の共溶媒は、医薬化合物及び／又は他の添加剤の溶解を助けるために加えられる。製薬上許容される共溶媒の例としては、限定するものではないが、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、エチレングリコール、グリセロール、エタノール、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ３００又はＰＥＧ４００）、及びメタノールが挙げられる。一実施形態では、共溶媒がプロピレングリコールである。
【０１１１】
共溶媒は、もし存在するのであれば、組成物の全重量に基づいて１〜２５％（ｗ／ｗ）、例えば１〜１０％（ｗ／ｗ）の量で含めることができる。
【０１１２】
吸入投与用の組成物には、水性、有機もしくは水性／有機混合物、乾燥粉末又は結晶性組成物が含まれ、これらは加圧ポンプ又は吸入器（例えば、貯蔵ドライパウダー吸入器、１回量ドライパウダー吸入器、前計量型複数回量ドライパウダー吸入器、鼻吸入器又は加圧エアロゾル吸入器、ネブライザ又はインサフレータ）によって気道に投与される。適当な組成物はそのために希釈剤又は担体として水を含み、また、緩衝剤、等張化剤といった慣用添加剤を含んでもよい。水性組成物はまた、ネブライゼーション（噴霧化）によって鼻や他の気道部位に投与することもできる。そうした組成物は、適当な液化噴射剤の使用により、加圧パック（例えば、定量噴霧器）から送達される水性溶液又は懸濁液又はエアロゾルでありうる。
【０１１３】
鼻に（例えば、鼻炎の治療のため）又は肺に局所投与するための組成物には、加圧エアロゾル組成物、及び加圧ポンプにより鼻腔に送達される水性組成物が含まれる。加圧せずに鼻腔への局所投与に適する組成物が特に興味深いものである。適当な組成物はそのために希釈剤又は担体として水を含む。肺又は鼻投与用の水性組成物には緩衝剤、等張化剤といった慣用添加剤を含めてもよい。水性組成物はまた、ネブライゼーション（噴霧化）によって鼻に投与することもできる。
【０１１４】
液体ディスペンサは一般に液体組成物を鼻腔に送達するために用いられる。液体組成物は水性でも非水性でもよいが、通常は水性である。そのような液体ディスペンサは分注ノズル又は分注オリフィスを備えており、液体ディスペンサのポンプ機構にユーザーの力が加わると、そこから定量の液体組成物が分注される。そうした液体ディスペンサは一般に複数回量の液体組成物の貯蔵容器を備えており、それらの用量が連続ポンプ作動時に分注可能である。分注ノズル又はオリフィスは、鼻腔への液体組成物の噴霧分注のためにユーザーの鼻孔に挿入するように構成することができる。上記タイプの液体ディスペンサは国際特許出願公開番号である国際公開第２００５／０４４３５４号パンフレット（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｉｍｉｔｅｄ）に記載され、説明されている。そのディスペンサは、液体組成物を含むための容器に取り付けた圧縮ポンプを備えた液体排出装置を収容するハウジングを有する。そのハウジングは指で操作できる少なくとも１つのサイドレバーを有し、そのレバーはハウジングに対して内側に動くことができ、カムの手段によってハウジング内で上方に容器を動かしてポンプを圧縮させ、ポンプステムからハウジングの鼻ノズルを通って定量の組成物を送り出す。一実施形態では、その液体ディスペンサは国際公開第２００５／０４４３５４号パンフレットの図３０〜４０に示された一般的なタイプのものである。
【０１１５】
式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を含む水性組成物はまた、国際特許出願公開番号である国際公開第２００７／１３８０８４号パンフレット（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｉｍｉｔｅｄ）に例えばその図２２〜４６を参照して開示されるような、あるいは英国特許出願番号ＧＢ０７２３４１８．０（Ｇｌａｘｏ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｉｍｉｔｅｄ）に例えばその図７〜３２を参照して開示されるような、ポンプによって送達することもできる。そのポンプはＧＢ０７２３４１８．０の図１〜６に開示されるアクチュエータによって作動される。
【０１１６】
吸入により肺に局所送達するためのドライパウダー組成物は、例えば、吸入器又はインサフレータで用いるために、例えばゼラチンのカプセルもしくはカートリッジ、又は例えば積層アルミホイルのブリスターに入れて、提供することができる。パウダーブレンド組成物は一般に、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩と適当な粉末基剤（担体／希釈剤／賦形剤）、例えば単糖類、二糖類又は多糖類（例：乳糖、デンプン）との吸入用パウダーミックスを含む。ドライパウダー組成物はまた、薬物と担体のほかに、さらなる添加剤（例えば、３成分剤（ternary agent）、例えば糖エステル（例：セロビオースオクタアセテート）、ステアリン酸カルシウム、又はステアリン酸マグネシウム）を含んでもよい。
【０１１７】
一実施形態において、吸入投与に適する組成物は、適当な吸入器具の内側に取り付けた医薬パックに設けられた複数の密閉用量容器に取り込むことができる。それらの容器は一つずつ破れるか、剥がせるか、又は他のやり方で開くことができ、当技術分野で知られるように、その用量のドライパウダー組成物は吸入器具のマウスピースで吸い込むことにより投与される。医薬パックはさまざまな形状、例えば円板又は細長いストリップの形状をとることができる。代表的な吸入器具はＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ社から販売されているＤＩＳＫＨＡＬＥＲＴＭ及びＤＩＳＫＵＳＴＭである。
【０１１８】
ドライパウダー吸入組成物はまた、吸入器具内のバルク貯蔵容器に入れて供給することができ、その器具には貯蔵容器から吸入チャネルに定量の組成物を計量するための計量機構が備わっており、計量された用量は患者が吸入器具のマウスピースで吸い込むことにより吸入可能である。このタイプの市販器具の例はＴＵＲＢＵＨＡＬＥＲＴＭ（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ社）、ＴＷＩＳＴＨＡＬＥＲＴＭ（Ｓｃｈｅｒｉｎｇ社）及びＣＬＩＣＫＨＡＬＥＲＴＭ（Ｉｎｎｏｖａｔａ社）である。
【０１１９】
ドライパウダー吸入組成物のさらなる送達方法は、定量の組成物をカプセルに入れて（カプセルあたり１回量を）提供することであり、そのカプセルは、一般には必要に応じて患者によって、吸入器具に投入される。その器具はカプセルを破裂させるか、突き刺すか、又は他のやり方で開放する手段を備えており、結果として、患者が器具のマウスピースで吸い込むとき、定量を患者の肺に送り込むことができる。この種の器具の市販品の例として、ＲＯＴＡＨＡＬＥＲＴＭ（ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ社）及びＨＡＮＤＩＨＡＬＥＲＴＭ（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ  Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍ社）を挙げることができる。
【０１２０】
吸入に適する加圧エアロゾル組成物は、懸濁液又は溶液のいずれであってもよく、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩と適当な噴射剤を含むことができる。噴射剤は、例えば、フルオロカーボンもしくは水素含有クロロフルオロカーボン又はこれらの混合物、特に１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，１，１，２，３，３，３−ヘプタフルオロ−ｎ−プロパン又はこれらの混合物である。エアロゾル組成物は、場合により、当技術分野でよく知られた別の組成物用添加剤を含んでもよく、例えば、界面活性剤（例：オレイン酸、レシチン、又はオリゴ乳酸もしくはその誘導体、例えば国際公開第９４／２１２２９号パンフレット及び国際公開第９８／３４５９６号パンフレット（Ｍｉｎｎｅｓｏｔａ  Ｍｉｎｉｎｇ  ａｎｄ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ）に記載されるもの）及び共溶媒（例：エタノール）を含むことができる。加圧組成物は一般にバルブ（例えば、定量バルブ）で閉じられたキャニスタ（例えば、アルミ製キャニスタ）内に保持され、そのキャニスタはマウスピースを備えたアクチュエータに内蔵される。
【０１２１】
軟膏剤、クリーム剤及びゲル剤は、例えば、適当な増粘剤及び／又はゲル化剤及び／又は溶媒を添加した水性又は油性基剤を用いて製剤化することができる。こうして、そのような基剤は、例えば、水及び／又は油（例えば、液状パラフィン又はラッカセイ油やヒマシ油のような植物油）、又は溶媒（例えば、ポリエチレングリコール）を含みうる。増粘剤及びゲル化剤は、基剤の性質に応じて使用され、軟パラフィン、ステアリン酸アルミニウム、セトステアリルアルコール、ポリエチレングリコール、羊毛脂、蜜蝋、カルボキシポリメチレン及びセルロース誘導体、及び／又はグリセリルモノステアレート及び／又は非イオン性乳化剤を含む。
【０１２２】
ローション剤は水性又は油性基剤を用いて製剤化することができ、一般には１種以上の乳化剤、安定化剤、分散剤、懸濁化剤、又は増粘剤をさらに含む。
【０１２３】
外用の粉剤は、適当な粉末基剤、例えばタルク、乳糖又はデンプンを用いて製剤化することができる。点滴剤は、１種以上の分散剤、可溶化剤、懸濁化剤又は防腐剤をも含む水性又は非水性基剤を用いて製剤化することができる。
【０１２４】
式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩は、例えば、活性成分を皮膚に送達するパッチ剤や他の器具（例：加圧ガス器具）に構成することによって、経皮送達用に製剤化することができる。
【０１２５】
口腔投与用の組成物は従来の方法で製剤化される錠剤又はロゼンジ剤の形をとることができる。
【０１２６】
式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩はさらに、例えばカカオ脂や他のグリセリドのような慣用の座薬用基剤を含む、座薬としても製剤化することができる。
【０１２７】
式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩はさらに、ボーラス注射又は持続注入による非経口投与のために製剤化することができ、単位投薬形態で、例えばアンプル、バイアル、少量注入薬液、又はプレフィルドシリンジ（pre-filled syringes）として、あるいは防腐剤を添加した複数回使用容器（multidose containers）で提示される。かかる組成物は水性もしくは非水性ビヒクル中の溶液、懸濁液又はエマルションのような形態をとることができ、酸化防止剤、緩衝剤、抗菌剤及び／又は等張化剤といった処方用添加剤を含むことができる。あるいはまた、活性成分は適当なビヒクル（例えば、無菌の発熱物質フリーの水）を用いて用時調製される粉末形態であってもよい。乾燥固体提示形態は、無菌粉末を個々の滅菌容器に無菌的に充填するか、又は無菌溶液を各容器に無菌的に充填して凍結乾燥することにより調製することができる。
【０１２８】
式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩はまた、ワクチンの活性を調節するためのアジュバントとしてワクチンと一緒に処方することができる。この種の組成物は、１種以上の抗体もしくは抗体フラグメント又は抗原成分（タンパク質、ＤＮＡ、生きているもしくは死滅した細菌及び／又はウイルス、又はウイルス様粒子を含むが、これらに限らない）を、１種以上のアジュバント活性のある成分（アルミニウム塩、油性及び水性エマルション、熱ショックタンパク質、リピドＡ調製物及び誘導体、糖脂質、他のＴＬＲアゴニスト（例えば、ＣｐＧ  ＤＮＡ又は類似物質）、サイトカイン（例えば、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−１２又は類似物質）を含むが、これらに限らない）とともに含むことができる。
【０１２９】
式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩は単独で、又は他の治療薬と組み合わせて用いることができる。式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩並びに他の活性薬剤は一緒に投与しても、別々に投与してもよく、別々に投与する場合は、投与を同時に行っても、任意の順序で連続して行ってもよい。式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩及び他の活性薬剤の量並びに相対的な投与タイミングは、所望の複合的治療効果が得られるように選択される。式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩と他の治療薬との組み合わせの投与は、両方の化合物を含む単一の医薬組成物で、又は各組成物がいずれか一方の化合物を含む別個の医薬組成物で同時に行うことができる。あるいはまた、その組み合わせを別々に連続して投与してもよく、その場合には一方の治療薬を最初に投与して、他方を後で投与するか、又はその逆にする。こうした連続投与は時間的に接近していても離れていてもよい。
【０１３０】
式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩は、ウイルス感染の予防又は治療に有用な１種以上の薬剤と組み合わせて使用することができる。そのような薬剤の例には、限定するものではないが、以下が含まれる：ポリメラーゼ阻害剤、例えば国際公開第２００４／０３７８１８号パンフレットに開示されるもの、並びに国際公開第２００４／０３７８１８号パンフレット及び国際公開第２００６／０４５６１３号パンフレットに開示されるもの；ＪＴＫ−００３、ＪＴＫ−０１９、ＮＭ−２８３、ＨＣＶ−７９６、Ｒ−８０３、Ｒ１７２８、Ｒ１６２６、並びに国際公開第２００６／０１８７２５号パンフレット、国際公開第２００４／０７４２７０号パンフレット、国際公開第２００３／０９５４４１号パンフレット、米国特許出願公開第２００５／０１７６７０１号明細書、国際公開第２００６／０２００８２号パンフレット、国際公開第２００５／０８０３８８号パンフレット、国際公開第２００４／０６４９２５号パンフレット、国際公開第２００４／０６５３６７号パンフレット、国際公開第２００３／００７９４５号パンフレット、国際公開第０２／０４４２５号パンフレット、国際公開第２００５／０１４５４３号パンフレット、国際公開第２００３／０００２５４号パンフレット、ＥＰ１０６５２１３、国際公開第０１／４７８８３号パンフレット、国際公開第２００２／０５７２８７号パンフレット、国際公開第２００２／０５７２４５号パンフレットに開示されるもの及び類似の薬剤；複製阻害剤、例えばアシクロビル、ファムシクロビル、ガンシクロビル、シドフォビル、ラミブジン及び類似の薬剤；プロテアーゼ阻害剤、例えばＨＩＶプロテアーゼ阻害剤のサキナビル、リトナビル、インジナビル、ネルフィナビル、アンプレナビル、ホスアンプレナビル、ブレカナビル、アタザナビル、チプラナビル、パリナビル、ラシナビル、及びＨＣＶプロテアーゼ阻害剤のＢＩＬＮ２０６１、ＶＸ−９５０、ＳＣＨ５０３０３４；及び類似の薬剤；ヌクレオシド及びヌクレオチド逆転写酵素阻害剤、例えばジドブジン、ジダノシン、ラミブジン、ザルシタビン、アバカビル、スタビジン、アデホビル、アデホビルジピボキシル、ホジブジン（fozivudine）、トドキシル（todoxil）、エムトリシタビン（emtricitabine）、アロブジン（alovudine）、アムドキソビル（amdoxovir）、エルブシタビン（elvucitabine）、及び類似の薬剤；非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（イムノカル（immunocal）、オルチプラズ（oltipraz）等の抗酸化活性を有する薬剤を含む）、例えばネビラピン、デラビルジン、エファビレンツ（efavirenz）、ロビリデ（loviride）、イムノカル（immunocal）、オルチプラズ（oltipraz）、カプラビリン（capravirine）、ＴＭＣ−２７８、ＴＭＣ−１２５、エトラビリン（etravirine）、及び類似の薬剤；侵入阻害剤、例えばエンフュービルタイド（enfuvirtide）（Ｔ−２０）、Ｔ−１２４９、ＰＲＯ−５４２、ＰＲＯ−１４０、ＴＮＸ−３５５、ＢＭＳ−８０６、５−Ｈｅｌｉｘ及び類似の薬剤；インテグラーゼ阻害剤、例えばＬ−８７０、１８０及び類似の薬剤；出芽阻害剤、例えばＰＡ−３４４、ＰＡ−４５７、及び類似の薬剤；ケモカイン受容体阻害剤、例えばビクリビロック（vicriviroc）（Ｓｃｈ−Ｃ）、Ｓｃｈ−Ｄ、ＴＡＫ７７９、マラビロック（maraviroc）（ＵＫ−４２７，８５７）、ＴＡＫ４４９、並びに国際公開第０２／７４７６９号パンフレット、国際公開第２００４／０５４９７４号パンフレット、国際公開第２００４／０５５０１２号パンフレット、国際公開第２００４／０５５０１０号パンフレット、国際公開第２００４／０５５０１６号パンフレット、国際公開第２００４／０５５０１１号パンフレット、及び国際公開第２００４／０５４５８１号パンフレットに開示されるもの、及び類似の薬剤；ノイラミニダーゼ阻害剤、例えばＣＳ−８９５８、ザナミビル、オセルタミビル、ペラミビル及び類似の薬剤；イオンチャネル阻害剤、例えばアマンタジン又はリマンタジン及び類似の薬剤；並びに干渉ＲＮＡ及びアンチセンスオリゴヌクレオチド、例えばＩＳＩＳ−１４８０３及び類似の薬剤；作用機序が確認されてない抗ウイルス剤、例えば国際公開２００５／１０５７６１号パンフレット、国際公開第２００３／０８５３７５号パンフレット、国際公開第２００６／１２２０１１号パンフレットに開示されるもの、リバビリン、及び類似の薬剤。式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩はさらに、ウイルス感染の予防又は治療に有用でありうる、例えば以下のような１種以上の他の薬剤と併用することもできる；免疫療法剤（例：インターフェロン又は他のサイトカイン／ケモカイン、サイトカイン／ケモカイン受容体モジュレーター、サイトカインアゴニスト又はアンタゴニスト、及び類似の薬剤）；並びに治療用ワクチン、抗線維化剤、抗炎症剤、例えばコルチコステロイド又は非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）及び類似の薬剤。
【０１３１】
式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩は、アレルギー性疾患、炎症性疾患、自己免疫疾患の予防又は治療に有用でありうる、例えば以下のような１種以上の他の薬剤と併用することができる；抗原免疫療法剤、抗ヒスタミン剤、ステロイド剤、ＮＳＡＩＤ、気管支拡張剤（例：β２アゴニスト、アドレナリン作動薬、抗コリン作動薬、テオフィリン）、メトトレキセート、ロイコトリエンモジュレーター及び類似の薬剤；モノクローナル抗体療法剤、例えば抗ＩｇＥ、抗ＴＮＦ、抗ＩＬ−５、抗ＩＬ−６、抗ＩＬ−１２、抗ＩＬ−１及び類似の薬剤；受容体療法剤、例えばエタネルセプト及び類似の薬剤；抗原非特異的免疫療法剤（例：インターフェロン又は他のサイトカイン／ケモカイン、サイトカイン／ケモカイン受容体モジュレーター、サイトカインアゴニスト又はアンタゴニスト、ＴＬＲアゴニスト及び類似の薬剤）。
【０１３２】
式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩は、癌の予防又は治療に有用でありうる例えば以下のような１種以上の他の薬剤と併用することができる；化学療法剤、例えばアルキル化剤、トポイソメラーゼ阻害剤、代謝拮抗剤、抗有糸分裂剤、キナーゼ阻害剤及び類似の薬剤；モノクローナル抗体療法剤、例えばトラスツズマブ（trastuzumab）、ゲムツズマブ（gemtuzumab）及び他の類似の薬剤；並びにホルモン療法剤、例えばタモキシフェン、ゴセレリン及び類似の薬剤。
【０１３３】
本発明による医薬組成物は単独で、又は他の治療領域（例えば、胃腸疾患）における少なくとも１種の治療薬と組み合わせて、使用することもできる。さらに、本発明による組成物は遺伝子置換療法と組み合わせて用いることもできる。
【０１３４】
本発明は、さらなる態様において、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を少なくとも１種の他の治療薬とともに含む組合せを包含する。
【０１３５】
上記の組合せは使用のために医薬組成物の形で都合よく提示することができ、したがって、上記の組合せを少なくとも１種の製薬上許容される希釈剤又は担体とともに含む医薬組成物は本発明のさらなる態様を表す。
【０１３６】
式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩の治療に有効な量はいくつかの要因に左右される。例えば、レシピエントの種、年齢及び体重、治療を必要とする正確な病状及びその重症度、組成物の性質、並びに投与経路が考慮される要因である。治療に有効な量は最終的に医師の判断により決定されるべきである。それでも、疾患にかかっているヒトを治療するための本発明の化合物の有効量は、一般的に、０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇ（レシピエントの体重）／日の範囲である。より一般的には、有効量は０．００１〜１０ｍｇ／ｋｇ（体重）／日の範囲である。こうして、７０ｋｇの成人について、１日あたりの実際の量は通常７〜７００ｍｇとなる。投与経路が経鼻及び吸入による場合、７０ｋｇ成人の常用量は１μｇ〜１ｍｇ／日の範囲である。この量は１日１回で投与してもよいし、１日の合計量が同じになるように１日数回（例えば、２、３、４、５回又はそれ以上）に分けて投与してもよい。式（Ｉ）の化合物の製薬上許容される塩の有効量は、式（Ｉ）の化合物の有効量の比率として、又はその製薬上許容される塩それ自体として決定することができる。同様の用量が本明細書に記載の他の疾患の治療にも適している。
【０１３７】
式（Ｉ）の化合物及びその製薬上許容される塩は適切な頻度で（例えば、週に１〜７回）投与することもできる。正確な投与計画は、当然のことながら、治療適応症、患者の年齢及び状態、所定の投与経路等の要因によるだろう。
【０１３８】
医薬組成物は単位用量あたり予め決められた量の活性成分を含む単位投薬形態で提示することができる。そうした単位は、非限定的な例として、治療される疾患、投与経路、患者の年齢、体重及び状態に応じて、０．５ｍｇ〜１ｇの式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を含有する。好適な単位投薬組成物は、本明細書中で上記したように、１日量又は分割量（あるいはその適切な一部）の活性成分を含むものである。この種の医薬組成物は製薬分野でよく知られた方法により製造することができる。
【０１３９】
こうしてさらに、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩と、１種以上の製薬上許容される希釈剤又は担体とを含む医薬組成物が提供される。
【０１４０】
また、式（Ｉ）の化合物又はその製薬上許容される塩を、１種以上の製薬上許容される希釈剤又は担体と混合することを含んでなる、医薬組成物の調製方法が提供される。
【０１４１】
本明細書及び特許請求の範囲を通して、文脈上他の意味に解すべき場合を除き、用語「含む」と、「含んでなる」や「含んでいる」等の変形語は、記載した整数もしくはステップ又は整数もしくはステップのグループを含むことを意味し、他の整数もしくはステップ又は整数もしくはステップのグループを除外することを意味するものでないことが理解されよう。
【０１４２】
式（Ｉ）の化合物及びその塩は以下に記載する方法によって製造することができ、こうした方法は本発明のさらなる態様を構成する。
【０１４３】
つまり、式（Ｉ）で表わされる化合物を調製するための方法が提供され、その方法は、式（ＩＩ）：
【化６】
0005519670.tif 000007
【０１４４】
［式中、Ｒ１、ｍ、ｎ、及びｐは、式（Ｉ）で表わされる化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｒ２は、Ｃ１〜６アルキルである］で表される化合物を脱保護すること、及び、そのあと、必要なら、以下の場合による各工程：
（ｉ）．必要保護基を除去する工程；
（ｉｉ）．そのようにして生成された化合物の塩を調製する工程；
の１つ又はそれ以上を行うこと、を含む。
【０１４５】
例えば、式（ＩＩ）で表わされる化合物を、適する酸の溶液（例えば塩化水素の１，４−ジオキサン中溶液）の存在下にある適する溶媒に溶解させ、適する温度（例えば３５〜４０℃）で適する時間期間（例えば２〜７２時間）撹拌する。その溶媒を、例えば窒素流下で、除去し、その残留物を適する溶媒（例えばメタノール）に溶解させ、イオン交換カートリッジ（例えばアミノプロピルＳＰＥカートリッジ）に負荷する。このカートリッジを適する溶媒（例えばメタノール）で溶離し、その溶媒を除去して、式（Ｉ）で表わされる化合物を得る。
【０１４６】
式（ＩＩ）で表わされる化合物は、式（ＩＩＩ）：
【化７】
0005519670.tif 000008
【０１４７】
［式中、Ｒ１は、式（Ｉ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｒ２は、式（ＩＩ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りである］で表される化合物（例えば式（ＩＩＩ）で表される化合物の塩例えばそのトリフルオロ酢酸塩）と、式（ＩＶ）：
【化８】
0005519670.tif 000009
【０１４８】
［式中、Ｘは、脱離基（例えばハロ基、例えばブロモ基）である］で表される化合物を反応させ、そのあと式（Ｖ）：
【化９】
0005519670.tif 000010
【０１４９】
［式中、ｎ及びｐは、式（Ｉ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りである］で表される化合物（又は式（Ｖ）で表される化合物の塩例えばその塩酸塩）と適する塩基（例えば水酸化ナトリウム水溶液）の存在下で反応させることによって、調製され得る。
【０１５０】
例えば、この式（ＩＩＩ）で表される化合物のトリフルオロ酢酸塩を適する塩基（例えばＫ２ＣＯ３）と適する溶媒（例えばＤＭＦ）中で適する時間期間（例えば１〜２時間）適する温度（例えば４５〜５５℃）で撹拌する。この反応混合物を冷却させ、式（ＩＶ）で表される化合物を加える。この反応混合物を適する温度（例えば１８〜２５℃）で適する時間期間（例えば３５〜４５分）撹拌する。式（Ｖ）で表される化合物のその塩酸塩を適する塩基（例えばＮａＯＨ水溶液）と適する時間期間（例えば５〜１０分）震盪する。適する有機溶媒（例えばＤＣＭ）を加え、この混合物を相分離カートリッジに通す。その溶媒を、例えばロータリーエバポレーターを用いることによって、緩い条件下で除去する。その式（Ｖ）で表される化合物のその遊離塩基をこの反応混合物に加え、そのあと適する塩基（例えばトリエチルアミン）を加え、この混合物を適する温度（１８〜２５℃）で適する時間期間（１４〜１８時間）撹拌する。水を加え、この混合物を適する溶媒（例えばＤＣＭ）で抽出する。その有機抽出液を疎水フリットを用いて分離させ、その溶媒を、そのあと、例えば窒素流下で、除去する。この粗製の生成物を、このあと、例えば、クロマトグラフィーによって、精製する。
【０１５１】
別法として、式（ＩＩ）で表される化合物は、式（ＶＩ）：
【化１０】
0005519670.tif 000011
【０１５２】
［式中、Ｒ１及びｍは、式（Ｉ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｒ２は、式（ＩＩ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｘは、脱離基（例えばハロ基、例えばブロモ基）である］で表される化合物を式（Ｖ）で表される化合物（又は式（Ｖ）で表される化合物の塩例えばその塩酸塩）と反応させることによって、調製され得る。
【０１５３】
例えば、その塩酸塩としての式（Ｖ）で表される化合物を適する塩基（例えばＮａＯＨ水溶液）と適する温度（例えば周囲温度）で適する時間期間（例えば４〜６分）震盪する。この式（Ｖ）で表される化合物のその遊離塩基を適する溶媒（例えばＤＣＭ）で抽出し、その溶媒を、例えばロータリーエバポレーターを用いて、低温で除去する。この式（Ｖ）で表される化合物のその遊離塩基をこのあと適する溶媒（例えばＤＭＦ）中にある式（ＶＩ）で表される化合物に加え、適する塩基（例えばトリエチルアミン）を加える。この混合物を適する温度（例えば３０〜４０℃）で適する時間期間（例えば１４〜１８時間）撹拌し、そのあと式（Ｖ）で表される化合物のその塩酸塩を加え、この反応物を適する温度（例えば４０〜５０℃）で適する時間期間（例えば１４〜１８時間）撹拌し、そのあと式（Ｖ）で表される化合物のその遊離塩基のさらなる部分を加え、この反応物を適する温度（例えば３０〜４０℃）で適する時間期間（例えば１４〜１８時間）撹拌する。水を加え、この混合物を適する溶媒（例えばＤＣＭ）で疎水フリットに通して抽出する。その溶媒を、このあと、例えば窒素流下で除去する。この粗製生成物を、このあと、例えば、クロマトグラフィーによって、精製する。
【０１５４】
別法として、ｎが１〜３である、式（ＩＩ）で表される化合物は、式（ＶＩＩ）：
【化１１】
0005519670.tif 000012
【０１５５】
［式中、Ｒ１及びｍは、式（Ｉ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｒ２は、式（ＩＩ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りである］で表される化合物を、式（ＶＩＩＩ）：
【化１２】
0005519670.tif 000013
【０１５６】
［式中、ｎ及びｐは、式（Ｉ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りである］で表される化合物を、還元的アミノ化条件下で反応させることによって、調製され得る。
【０１５７】
例えば、適する溶媒（例えばＤＣＭ）中にある式（ＶＩＩ）で表される化合物に式（ＶＩＩＩ）で表される化合物を加える。適する還元剤（例えばＮａＢＨ（ＯＡｃ）３）及び適する溶媒（例えばＤＣＭ）を加え、そのあと適するカルボン酸（例えば酢酸）を加える。この混合物を適する温度（例えば２８〜２５℃）にて適する雰囲気（例えば窒素の雰囲気）下で適する時間期間（例えば４〜６時間）撹拌する。この混合物を適する塩基（例えばＮａＨＣＯ３水溶液）でクエンチし、適する溶媒（例えばＤＣＭ）で希釈する。この有機層を、例えば疎水フリットを用いて、単離し、その溶媒を減圧下で除去する。この粗製生成物を、このあと、例えば、クロマトグラフィーによって、精製する。
【０１５８】
式（ＶＩ）で表される化合物は、式（ＩＩＩ）で表される化合物（例えば式（ＩＩＩ）で表される化合物の塩例えばそのトリフルオロ酢酸塩）と式（ＩＶ）で表される化合物と反応させることによって、調製され得る。
【０１５９】
例えば、適する溶媒（例えばＤＭＦ）中にある式（ＩＩＩ）で表される化合物のそのトリフルオロ酢酸塩と適する塩基（例えば炭酸カリウム）の混合物を適する温度（例えば４５〜５５℃）で適する雰囲気（例えば窒素の雰囲気）下で適する時間期間（例えば１時間）加熱する。この混合物を適する温度（例えば周囲温度）まで冷却させ、式（ＩＶ）で表される化合物を加える。この混合物を適する温度（例えば４５〜５５℃）で適する時間期間（例えば１４〜１８時間）加熱する。この混合物を適する温度（例えば周囲温度）まで冷却させ、水で希釈し、適する溶媒（例えばＤＣＭ）で抽出する。この有機抽出液を合わせ、例えば疎水フリットに通すことにより、単離し、水で希釈し、適する溶媒（例えばＤＣＭ）で抽出する。この有機抽出液を合わせ、例えば疎水フリットに通すことにより、単離し、乾固まで蒸発させて、式（ＶＩ）で表される化合物を得る。
【０１６０】
式（ＶＩＩ）で表される化合物は、式（ＩＸ）：
【化１３】
0005519670.tif 000014
【０１６１】
［式中、Ｒ１及びｍは、式（Ｉ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｒ２は、式（ＩＩ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りである］で表される化合物を脱保護することによって、調製され得る。
【０１６２】
例えば、式（ＩＸ）で表される化合物を適する溶媒（例えばエタノール）に溶解させ、ヒドラジン一水和物を加え、この混合物を適する温度（例えば周囲温度）で適する時間期間（例えば８〜１２時間）撹拌する。この反応混合物をこのあと減圧下で濃縮し、その残留物を適する溶媒（例えばＤＣＭ）に懸濁させ、適する時間期間（例えば１〜２時間）撹拌する。この懸濁液を濾過し、そしてその濾過された固形物を適する溶媒（例えばＤＣＭ）で洗浄する。この濾液及び洗浄液をこのあと水で洗浄し、乾燥させる。この溶液を減圧下で濃縮して、式（ＶＩＩ）で表される化合物を得る。
【０１６３】
式（ＩＸ）で表される化合物は、式（ＩＩＩ）で表される化合物を式（Ｘ）：
【化１４】
0005519670.tif 000015
【０１６４】
［式中、ｍは、式（Ｉ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｘは、脱離基（例えばハロ基、例えばブロモ基）である］で表される化合物と反応させることによって、調製され得る。
【０１６５】
例えば、式（ＩＩＩ）で表される化合物を適する溶媒（例えばＤＭＦ）に溶解させ、適する塩基（例えば炭酸カリウム）を加える。この懸濁液を適する温度（例えば室温）で適する時間期間（例えば１５分）撹拌する。式（Ｘ）で表される化合物を加え、この懸濁液を適する温度（例えば室温）で適する時間期間（例えば１８〜１２時間）激しく撹拌する。この反応混合物を適する溶媒（例えば酢酸エチル）で抽出し、水及びブラインで洗浄し、そして乾燥させる。その式（ＩＸ）で表される化合物は、この溶媒から、例えば、結晶化により、得られる。
【０１６６】
式（ＩＩＩ）で表される化合物の塩は、式（ＸＩ）：
【化１５】
0005519670.tif 000016
【０１６７】
［式中、Ｒ１は、式（Ｉ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｒ２は、式（ＩＩ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｐは、保護基（例えばトリフルオロ酢酸）である］で表される化合物を脱保護することによって、調製され得る。
【０１６８】
例えば、適する酸（例えばトリフルオロ酢酸）を、適する溶媒（例えばメタノール）中にある式（ＸＩ）で表される化合物の溶液に加える。この混合物を適する温度（例えば周囲温度）で適する時間期間（例えば４８〜７２時間）撹拌して、懸濁液を得る。この反応混合物をこのあと減圧下で濃縮し、そのあと適する溶媒（例えば酢酸エチル）で希釈する。得られた混合物を濾過し、少量の適する溶媒（例えば酢酸エチル）でその濾液が無色になるまで洗浄する。この残留物を、空気中、そのあと減圧下で乾燥させて、式（ＩＩＩ）で表される化合物のその塩を得る。その濾液は濃縮され得るもので、その濃縮物を少量の適する溶媒（例えば酢酸エチル）で希釈し、そのあと濾過し、乾燥させて、式（ＩＩＩ）で表される化合物のその塩の第２の収穫物を得る。
【０１６９】
式（ＩＩＩ）で表される化合物（例えば式（ＩＩＩ）で表される化合物の塩例えばトリフルオロ酢酸塩）は、式（ＸＩＩ）：
【化１６】
0005519670.tif 000017
【０１７０】
［式中、Ｒ１は、式（Ｉ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｐは、式（ＸＩ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りである］で表される化合物を、適するハロゲン化剤（例えばＮ−ブロモスクシンイミド）を反応させ、そのあとアルコキシドアニオン（例えばメトキシドアニオン）と反応させ、次いで適する酸（例えばトリフルオロ酢酸）の存在下に単離することによっても、調製され得る。
【０１７１】
例えば、適する乾燥溶媒（例えば乾燥クロロホルム）中適する温度（例えば周囲温度）にある式（ＸＩＩ）で表される粗製化合物の溶液に、適するハロゲン化剤（例えばＮ−ブロモスクシンイミド）を少しずつ適する時間期間（例えば５分）をかけて加える。この溶液を適する温度（例えば周囲温度）で適する時間期間（例えば２５〜３５分）撹拌する。この反応混合物をこのあと水で洗浄し、その有機相を、例えば、疎水フリットに通すことにより、乾燥させ、減圧下で濃縮する。得られた固形物を適する乾燥溶媒（例えば乾燥メタノール）に溶解させ、適するアルコキシド（例えば溶液ナトリウムメトキシド／メタノール）を、適する温度（例えば周囲温度）の不活性雰囲気（例えば窒素の雰囲気）下で加える。この反応混合物を、凝縮器を取り付けて、適する温度（例えば６０〜７０℃）で適する時間期間（例えば１２〜１８時間）加熱する。この反応混合物をこのあと冷却させ、減圧下で濃縮させる。この残留物をこのあと適する溶媒（例えば酢酸エチル）に取り込み、適切な媒体（例えば飽和塩化アンモニウム水溶液）に注ぎ入れる。この有機層を分離させ、水でさらに洗浄し、乾燥（例えば硫酸マグネシウムで）させ、濾過し、減圧下で濃縮する。適切な温度（例えば周囲温度）にある適切な乾燥溶媒（例えば乾燥メタノール）中この物質の溶液に、適する酸（例えばトリフルオロ酢酸）を加える。この反応物を適する時間期間（例えば２５〜３５時間）撹拌し、減圧下で濃縮する。
【０１７２】
式（ＸＩ）で表される化合物は、式（ＸＩＩＩ）：
【化１７】
0005519670.tif 000018
【０１７３】
［式中、Ｒ１は、式（Ｉ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｐは、式（ＸＩ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｑは、ハロゲン原子（例えば臭素原子）である］で表される化合物をアルコキシドアニオン（例えばメトキシドアニオン）と反応させることによって、調製され得る。
【０１７４】
例えば、適する溶媒（例えばメタノール）中式（ＸＩＩＩ）で表される化合物の溶液を、適する溶媒（例えばメタノール）中の適切なアルコキシド（例えばナトリウムメトキシド）の溶液と適する時間期間（例えば４〜５時間）還流に加熱する。この反応混合物を減圧下で濃縮し、適する有機溶媒（例えば酢酸エチル）と適する水性媒体（例えば飽和塩化アンモニウム水溶液）とに分配させる。この有機相を分離させ、洗浄し（例えばブラインで）、例えば疎水フリットに通すことにより、乾燥させる。その溶媒をこのあと減圧下で除去する。
【０１７５】
式（ＸＩＩＩ）で表される化合物は、式（ＸＩＩ）で表される化合物を適切なハロゲン化剤（例えばＮ−ブロモスクシンイミド）と反応させることによって、調製され得る。
【０１７６】
例えば、式（ＸＩＩ）で表される化合物を適する溶媒（例えばクロロホルム）に溶解させ、適する温度（例えば０〜０．５℃）まで冷却させる。この溶液に、その温度を約３℃以下に維持しながら、適するハロゲン化剤（例えばＮ−ブロモスクシンイミド）を加える。この溶液を適する温度（例えば２〜３℃で適する時間期間（例えば３０〜４５分）撹拌し、そのあと適する温度（例えば周囲温度）まで昇温させ、適する時間期間（例えば５〜７時間）撹拌する。この反応混合物をこのあと水で洗浄し、その有機相を乾燥させ、例えば、疎水フリットを用いてその水相から分離させる。その有機溶媒をこのあと除去し、その粗製生成物を、例えば、クロマトグラフィーによって、精製する。
【０１７７】
Ｒ１がＣ１〜６アルコキシである式（ＸＩＩ）で表される化合物は、式（ＸＩＶ）：
【化１８】
0005519670.tif 000019
【０１７８】
［式中、Ｐは、式（ＸＩ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｔは、適する脱離基（例えばハロゲン原子、例えばフッ素原子又は塩素原子）である］で表される化合物を、式（ＸＶ）：
【化１９】
0005519670.tif 000020
【０１７９】
［式中、Ｒ１は、Ｃ１〜６アルコキシであり、Ｍは、適するアルカリ金属リガンド例えばナトリウムである］で表される化合物の、式（ＸＶＳ）：
【化２０】
0005519670.tif 000021
【０１８０】
［式中、その式（ＸＶ）で表される化合物中のそのＲ１基は、この式（ＸＶＳ）で表される溶媒のそのＲ１基と同じである］で表される溶媒中に調製されている、溶液と反応させることによって、調製され得る。
【０１８１】
例えば、式（ＸＶ）で表される化合物例えばナトリウムｔ−ブトキシドを、式（ＸＶＳ）で表される溶媒に加える。この混合物を均質になるまで撹拌し、そのあと式（ＸＩＶ）で表される化合物を加える。この反応混合物を適する温度（例えば５０〜１００℃）に適する時間期間（例えば１２〜１８時間）加熱する。その溶媒を減圧下で十分除去し、適する溶媒（例えばジエチルエーテル）と水とに分配させる。この有機相を分離させ、その水相をさらなる溶媒で再抽出する。その有機層をこのあと単離し、合わせ、適する乾燥剤（例えば無水硫酸マグネシウム）を用いて乾燥させる。この乾燥剤を濾過により除去し、その溶媒をその生成物から減圧下で除去する。
【０１８２】
Ｒ１がＣ１〜６アルキルアミノである式（ＸＩＩ）で表される化合物は、式（ＸＩＶ）で表される化合物を式（ＸＶＩ）：
【化２１】
0005519670.tif 000022
【０１８３】
［式中、Ｒ１は、Ｃ１〜６アルキルアミノである］で表される化合物と反応させることによって、調製され得る。
【０１８４】
例えば、式（ＸＩＶ）で表される化合物を、適する不活性雰囲気（例えば窒素の雰囲気）下の適する温度（例えば周囲温度）にある適する乾燥溶媒（例えば乾燥エチレングリコール）中式（ＸＶＩ）で表される化合物の溶液に加える。この反応混合物を適する温度（例えば１１０〜１３０℃）で適する時間期間（例えば１２〜１８時間）加熱する。この反応物をこのあと適する温度（例えば周囲温度）まで冷却させ、適する溶媒（例えば酢酸エチル）で希釈し、水で洗浄する。この有機層を適する乾燥剤（例えば無水硫酸マグネシウム）で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、Ｒ１がＣ１〜６アルキルアミノである式（ＸＩＩ）で表される化合物を得る。
【０１８５】
式（ＸＩＶ）で表される化合物は、式（ＸＶＩＩ）：
【化２２】
0005519670.tif 000023
【０１８６】
［式中、Ｐは、式（ＸＩ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｔは、式（ＸＩＶ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｖは、適する脱離基（例えばハロゲン原子、例えば塩素原子）である］で表される化合物をアンモニアアルコール溶液（例えばアンモニアイソ−プロピルアルコール溶液）と反応させることによって、調製され得る。
【０１８７】
例えば、式（ＸＶＩＩ）で表される化合物をアンモニアアルコール溶液（例えば２Ｍアンモニア／イソ−プロピルアルコール溶液）と適する温度（例えば５０〜６０℃）で適する時間期間（例えば５〜６時間）加熱する。この反応混合物をこのあと適する温度（例えば周囲温度）で適する時間期間（例えば１２〜１８時間）静置したままにしておく。そのアンモニアアルコール溶液（例えば２Ｍアンモニア／イソ−プロピルアルコール溶液）のさらなる量を加えて、その得られたケイキを崩壊させ、この反応混合物をさらなる時間期間（例えば８〜１０時間）、その反応が完結するまで、加熱する。水をこの反応混合物に加え、その固形物を濾過により除去し、適する洗浄媒体（例えばイソプロピルアルコールと水の混合物）で洗浄し、そのあと、例えば吸引下の空気乾燥により、乾燥させて、式（ＸＩＶ）で表される化合物の第１の収穫物を得る。その濾液をさらなる時間期間（例えば１２〜１８時間）静置させておき、濾過及び乾燥によりその得られた式（ＸＩＶ）で表される化合物の第２の収穫物を単離する。
【０１８８】
式（ＸＩＶ）で表される化合物は、式（ＸＶＩＩＩ）：
【化２３】
0005519670.tif 000024
【０１８９】
［式中、Ｔは、式（ＸＩＶ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りであり、Ｖは、式（ＸＶＩＩ）で表される化合物に対して本明細書中先に定義した通りである］で表される化合物を、式（ＸＩＸ）：
【化２４】
0005519670.tif 000025
【０１９０】
［式中、ＰＵは、その保護基Ｐの適する前駆体（例えば３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラニル基）である］で表される化合物と反応させ、そのあとアンモニアアルコール溶液（例えばアンモニア／イソ−プロピルアルコール溶液）と反応させることによっても、調製され得る。
【０１９１】
例えば、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物を式（ＸＶＩＩＩ）で表される化合物／適する乾燥溶媒（例えば乾燥酢酸エチル）溶液に加える。この反応混合物を適する温度（例えば５０〜６０℃）に加熱し、式（ＸＩＸ）で表される化合物を加える。この反応物を適する温度（例えば５０〜６０℃）で適する時間期間（例えば１〜２時間）加熱し、その溶媒を減圧下で除去する。この得られた固形物のアンモニアアルコール溶液（例えば２Ｍアンモニア／イソ−プロピルアルコール溶液）中懸濁液を、凝縮器を取り付けて、適する不活性雰囲気（例えば窒素雰囲気）下の適する温度（例えば６０〜７０℃）で適する時間期間（例えば４〜５時間）加熱する。この反応混合物を水に注ぎ入れ、適する時間期間（例えば１２〜１８時間）冷却させる。この得られた沈殿物を濾過により単離し、乾燥させる。
【０１９２】
式（ＸＩＶ）で表される化合物は、式（ＸＶＩＩＩＡ）：
【化２５】
0005519670.tif 000026
【０１９３】
［式中、Ｔは、フッ素原子である］で表される化合物を適する保護剤（例えばシリル化剤例えばＮ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド）と反応させ、そのあとその式（ＸＶＩＩＩ）で表される保護された化合物を式（ＸＩＸＥ）：
【化２６】
0005519670.tif 000027
【０１９４】
［式中、ＰＵは、その保護基Ｐの適する前駆体（例えば３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラニル基）であり、Ｅは、アセチルオキシ基（例えばアセタート基）である］で表される化合物と反応させることによっても、調製され得る。
【０１９５】
例えば、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミドを式（ＸＶＩＩＩ）で表される化合物の適する無水溶媒（例えば無水アセトニトリル）中懸濁液に加え、その得られる混合物を還流に加熱し、その温度に適する時間期間（例えば１〜３時間）保持する。この反応混合物をこのあと適する温度（例えば０〜５℃）まで冷却させる。式（ＸＩＸＥ）で表される化合物の適する無水溶媒（例えば無水アセトニトリル）中溶液をこのあとゆっくり加え、そのあとルイス酸（例えばトリメチルシリルトリフルオロメタンスルホナート）を滴下で加える。この反応混合物を適する温度（例えば８〜１５℃）まで昇温させ、さらなる時間期間（例えば１〜２時間）撹拌する。この混合物をこのあと適する塩基（例えば１Ｍ炭酸ナトリウム）を加えることによりクエンチする。さらなる水をこのあとこの懸濁液に加える。その水層及び無機固形物の大半を分離した。この有機層を、さらなる沈殿を促すために撹拌しながら０〜５℃まで冷却させる。その固形物をこのあと濾過により回収し、乾燥させた。
【０１９６】
略記号
以下のリストは、本明細書中で使われている一部の略記号の定義を提供するものである。このリストは網羅的ではないことは解ると思われるが、本明細書中以下に定義されていない略記号の意味は、当業者には、明らかであると思われる。
【０１９７】
ＤＣＭ：  ジクロロメタン
ＤＭＥ：  １，２−ジメトキシエタン
ＤＭＦ：  Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド
ＥｔＯＡｃ：  酢酸エチル
Ｅｔ２Ｏ：  ジエチルエーテル
ｈ：  時間
ＨＣｌ：  塩酸
ＨＰＬＣ：  高性能液体クロマトグラフィー
ＩＳＣＯ  Ｃｏｍｐａｎｉｏｎ：  ＵＶ吸収フラクション分析器装着自動フラッシュクロマトグラフィー（Ｐｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌｉｍｉｔｅｄ（Ｂａｓｉｎｇｓｔｏｋｅ，Ｈａｎｔｓ．，ＲＧ２４  ８ＰＺ，ＵＫ）から販売）
ＭＤＡＰ  ＨＰＬＣ：  ２溶媒勾配及びエレクトロスプレー質量分光法フラクション分析を用いるＣ１８カラムでの逆相ＨＰＬＣ
ＭｅＯＨ：  メタノール
ｍｉｎ：  分
ＮＢＳ：  Ｎ−ブロモスクシンイミド
ストリッピング：  減圧下での溶媒の除去
ＴＢＭＥ：  第三級ブチルメチルエーテル
ＴＦＡ：  トリフルオロ酢酸
ｉＰｒ：  イソ−プロピル
ｔ−Ｂｕ：  ｔｅｒｔ−ブチル
Ｍｓ：  メシル
Ａｃ：  アセチル
ｎ−Ｂｕ：  ｎ−ブチル
Ｐｈ：  フェニル
【０１９８】
本明細書中先に記載した合成方法がスキーム１にまとめられている。
【０１９９】
（スキーム１）
【化２７】
0005519670.tif 000028
【０２００】
スキーム１の各合成ステップのそれぞれについての典型的な反応条件が以下に提供されている：
Ａ：ジヒドロピラン／パラトルエンスルホン酸、例えば５０℃で３〜６時間；
Ａ１：ジヒドロピラン／パラトルエンスルホン酸、例えば５０℃で１時間、そのあとアンモニア／ｉＰｒＯＨ、例えば６０℃で４時間、そのあと水を加え、周囲温度まで１２〜１８時間かけて冷却させる；
Ａ２：ＢＳＡ／ＭｅＣＮ、還流、０℃まで冷却、そのあとＴＨＰアセタート／ＭｅＣＮ、１０℃まで昇温、そのあとＮａＨＣＯ３（ａｑ．）；
Ｂ：アンモニア／ｉＰｒＯＨ、例えば５０℃で５時間、そのあと周囲温度で１２〜１８時間、そのあと５０℃で９時間；
Ｃ：
Ｘ＝ＮＨ（ＲＡ＝Ｃ１〜６アルキル）に対しては、ＲＡＮＨ２／エチレングリコール例えば１２０℃で１２〜１８時間；
Ｘ＝Ｏ．ＲＡＯＨ（ＲＡ＝Ｃ１〜６アルキル）に対しては、ＮａＯｔＢｕ／ジメトキシエタン例えば９３〜１１０℃で１２〜１８時間；
Ｃ１：ＮＢＳ／ＣＨＣｌ３例えば０〜５℃で３０分そのあと周囲温度で０．５〜１時間、ＮａＯＭｅ／ＭｅＯＨ、例えば６５℃、１２〜１８時間、そのあとＴＦＡ／ＭｅＯＨ例えば周囲温度で１８〜６５時間；
Ｄ：ＮＢＳ／ＣＨＣｌ３例えば０〜５℃で３０分そのあと周囲温度で３６〜４８時間；
Ｅ：ＮａＯＭｅ／ＭｅＯＨ例えば還流４〜６時間；
Ｆ：ＴＦＡ／ＭｅＯＨ例えば周囲温度で１８〜６５時間；
Ｇ：
Ｋ２ＣＯ３、ＤＭＦ、５０℃、１時間そのあと例えば１，３−ジブロモプロパン、２０℃４０ｍｉｎ、そのあと室温で式（Ｖ）のアミン及びＥｔ３Ｎ；又は
Ｋ２ＣＯ３、ＤＭＦ、５０℃、１時間そのあと例えば１，３−ジブロモプロパン、２０℃４０ｍｉｎ、そのあと室温で式（Ｖ）のアミン及びバートン塩基；
Ｇ１：Ｋ２ＣＯ３／ＤＭＦ、１，３−ジブロモプロパン、ＤＭＦ、５０℃一晩；
Ｇ２：式（Ｖ）のアミン、Ｅｔ３Ｎ、ＤＭＦ、３５〜４５℃、一晩；
Ｇ３：Ｋ２ＣＯ３／ＤＭＦ、そのあと式（Ｘ）の化合物、室温で１０ｈｒ；
Ｇ４：ＮＨ２．ＮＨ２、Ｈ２Ｏ、ＥｔＯＨ、室温１０ｈｒ；
Ｇ５：式（ＶＩＩＩ）の化合物、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３、ＤＣＭ、室温５ｈｒ；
Ｈ：ＨＣｌ／ジオキサン、そのあと周囲温度で１８時間。
【０２０１】
式（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩＩＩ）、（Ｘ）、（ＸＩＩ）、（ＸＩＶ）、（ＸＶ）、（ＸＶＩ）、（ＸＶＩＩ）、（ＸＶＩＩＩ）、及び（ＸＶＩＩＩＡ）で表される各化合物は市販されており（例えばＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（ＵＫ）から）、また、公知の手順、例えば、J. March, Advanced Organic Chemistry, 6th Edition (2007), WileyBlackwellやComprehensive Organic Synthesis (Trost B.M. and Fleming I., (Eds.), Pergamon Press, 1991)（その手順に関連しているものとしてそれぞれを参照により本明細書に組み込む）のような合成方法についての標準的な参考書物に開示されている手順、と同じようにしても調製され得る。
【０２０２】
本明細書に記載されている合成経路に用いられ得る他の保護基の例及びその除去方法は、T. W. Greene 'Protective Groups／Organic Synthesis', 4th Edition, J. Wiley and Sons, 2006（そのような手順に関連しているものとして参照により本明細書に組み込む）中に見出され得る。
【０２０３】
本明細書中先に記載した反応又は方法のいずれに対しても、通常の加熱の方法及び冷却の方法が用いられ得、例えば温度調節されたオイルバス又はホットブロック、及びアイス／ソルト又はドライアイス／アセトンバスが、それぞれ、用いられ得る。通常の単離の方法、例えば水性又は非水性溶媒からの抽出又はそれへの抽出が、用いられ得る。無水硫酸マグネシウム（又は無水硫酸ナトリウム）と震盪、又は、疎水フリットに通過、のような、通常の有機溶媒、溶液、又は抽出液の乾燥方法が用いられ得る。通常の精製方法、例えば結晶化やクロマトグラフィー（例えばシリカゲルクロマトグラフィーや逆相クロマトグラフィー）が、必要に応じ、用いられ得る。結晶化は、通常の溶媒、例えば、酢酸エチル、メタノール、エタノール、又はブタノール、あるいはこれらのものの水性混合物、を用いて行われ得る。具体的な反応時間温度は、典型的には、反応追跡法、例えば薄層クロマトグラフィーやＬＣ−ＭＳ、によって測定され得ることは解ると思われる。
【０２０４】
適切な場合には本発明の各化合物の個々の異性形は、通常の手順、例えば、ジアステレオ異性体誘導体の分別結晶化又はキラル高性能液体クロマトグラフィー（キラルＨＰＬＣ）、を用いて、個々の異性体として調製され得る。
【０２０５】
化合物のその絶対立体化学は、通常の方法（例えばＸ線結晶学）を用いて測定され得る。
【０２０６】
以下の実施例を参照してもらうことで本発明の態様を例示するが、それらは、その実施例によって、決して限定されるものではない。
【実施例】
【０２０７】
一般実験詳細
Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ  Ｉｎｃ．（Ｔｏｒｏｎｔｏ，Ｏｎｔａｒｉｏ，Ｍ５Ｈ２Ｌ３，Ｃａｎａｄａ）製ＡＣＤ／Ｎａｍｅ  ＰＲＯ  ６．０２化学物質命名ソフトウエアを用いて化合物は命名された。
【０２０８】
本明細書中で言及されているＬＣＭＳ装置Ａ〜Ｈの実験詳細は以下の通りである。
【０２０９】
装置Ａ
カラム：５０ｍｍ×２．１ｍｍ  ＩＤ、１．７μｍ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８
流量：１ｍＬ／ｍｉｎ
温度：４０℃
ＵＶ検出範囲：２１０〜３５０ｎｍ
質量スペクトル：交互スキャンポジティブ及びネガティブモードエレクトロスプレーイオン化を用いる質量分光計で記録
【０２１０】
溶媒：  Ａ：０．１％ｖ／ｖギ酸／水
Ｂ：０．１％ｖ／ｖギ酸アセトニトリル
【０２１１】
勾配：  時間（ｍｉｎ） Ａ％ Ｂ％
０            ９７          ３
１．５              ０      １００
１．９              ０      １００
２．０            ９７          ３
【０２１２】
装置Ｂ
カラム：３０ｍｍ×４．６ｍｍ  ＩＤ、３．５μｍ  Ｓｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８カラム
流量：３ｍＬ／ｍｉｎ
温度：３０℃
ＵＶ検出範囲：２１０〜３５０ｎｍ
質量スペクトル：交互スキャンポジティブ及びネガティブモードエレクトロスプレーイオン化を用いる質量分光計で記録
【０２１３】
溶媒：  Ａ：０．１％ｖ／ｖギ酸／水溶液
Ｂ：０．１％ｖ／ｖギ酸アセトニトリル
【０２１４】
勾配：  時間（ｍｉｎ） Ａ％ Ｂ％
０            ９７          ３
０．１            ９７          ３
４．２              ０      １００
４．８              ０      １００
４．９            ９７          ３
５．０            ９７          ３
【０２１５】
装置Ｃ
カラム：５０ｍｍ×２．１ｍｍ  ＩＤ、１．７μｍ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ  Ｃ１８
流量：１ｍＬ／ｍｉｎ
温度：４０℃
ＵＶ検出範囲：２１０〜３５０ｎｍ
質量スペクトル：交互スキャンポジティブ及びネガティブモードエレクトロスプレーイオン化を用いる質量分光計で記録
【０２１６】
溶媒：  Ａ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム／水（アンモニア溶液でｐＨ１０に調整）
Ｂ：アセトニトリル
【０２１７】
勾配：  時間（ｍｉｎ） Ａ％ Ｂ％
０            ９９          １
１．５              ３        ９７
１．９              ３        ９７
２．０              ０      １００
【０２１８】
装置Ｄ
カラム：５０ｍｍ×４．６ｍｍ  ＩＤ、３．５μｍ  ＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８カラム
流量：３ｍＬ／ｍｉｎ
温度：３０℃
ＵＶ検出範囲：２１０〜３５０ｎｍ
質量スペクトル：交互スキャンポジティブ及びネガティブモードエレクトロスプレーイオン化を用いる質量分光計で記録
【０２１９】
溶媒：  Ａ：１０ｍＭ重炭酸アンモニウム／水（アンモニア溶液でｐＨ１０に調整）
Ｂ：アセトニトリル
【０２２０】
勾配：  時間（ｍｉｎ） Ａ％ Ｂ％
０            ９９          １
０．１            ９９          １
４．０              ３        ９７
５．０              ３        ９７
【０２２１】
クロマトグラフィー精製は、典型的には、充填シリカゲルカートリッジを用いて行われた。このＦｌａｓｈｍａｓｔｅｒ  ＩＩは、Ａｒｇｏｎａｕｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｌｔｄから販売されている自動式マルチユーザーフラッシュクロマトグラフィー装置であり、これには使い捨ての、順相、Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ（ＳＰＥ）カートリッジ（２ｇ〜１００ｇ）が用いられている。これには勾配法で流すための四成分オンライン溶媒混合が設けられている。溶媒、流量、勾配プロファイル及びコレクション条件を管理する多機能オープンアクセスソフトウエアを用いてサンプルは列に並ばされる。この装置には、自動ピークカット、コレクション及びトラッキングを可能にするＫｎａｕｅｒ可変波長ＵＶ検出器及びＧｉｌｓｏｎ  ＦＣ２０４フラクションコレクター２台が装着されている。
【０２２２】
窒素流を用いた溶媒除去は、Ｒａｄｌｅｙｓ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓａｆｆｒｏｎ  Ｗａｌｄｅｎ，Ｅｓｓｅｘ，ＣＢ１１  ３ＡＺ，ＵＫ）から販売のＧｒｅｅｎＨｏｕｓｅ  Ｂｌｏｗｄｏｗｎ装置で３０〜４０℃にて行われた。
【０２２３】
１Ｈ  ＮＭＲスペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ  ＤＰＸ  ４００又はＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＤＲＸ又はＶａｒｉａｎ  Ｕｎｉｔｙ  ４００スペクトルメーター（すべて４００ＭＨｚで動作）でＣＤＣｌ３かＤＭＳＯ−ｄ６中で記録された。用いた内部標準は、テトラメチルシランか、又はＣＤＣｌ３にとっては７．２５ｐｐｍに、又は、ＤＭＳＯ−ｄ６にとっては２．５０ｐｐｍにあるその残留のプロトン化された溶媒であった。
【０２２４】
質量直結自動分取ＨＰＬＣ（Mass Directed AutoPreparative HPLC）は、以下に書いてある条件下で行われた。そのＵＶ検出は、波長２１０ｎｍ〜３５０ｎｍから得られる平均されたシグナルであり、マススペクトルは、交互スキャンポジティブ及びネガティブモードエレクトロスプレーイオン化を用いる質量分光計で記録された。
【０２２５】
方法Ａ：
方法ＡはＸＢｒｉｄｇｅ  Ｃ１８カラム（典型的には１５０ｍｍ×１９ｍｍ  ｉ．ｄ．  ５μｍパッキング直径）で周囲温度にて行われた。用いた溶媒は：
Ａ＝１０ｍＭ重炭酸アンモニウム水溶液（アンモニア溶液でｐＨ１０に調整）
Ｂ＝アセトニトリル
であった。
【０２２６】
方法Ｂ：
方法ＢはＳｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８カラム（典型的には１５０ｍｍ×３０ｍｍ  ｉ．ｄ．  ５μｍパッキング直径）で周囲温度にて行われた。用いた溶媒は：
Ａ＝０．１％ｖ／ｖギ酸／水溶液
Ｂ＝０．１％ｖ／ｖギ酸／アセトニトリル溶液
であった。
【０２２７】
方法Ｃ：
方法ＣはＳｕｎｆｉｒｅ  Ｃ１８カラム（典型的には１５０ｍｍ×３０ｍｍ  ｉ．ｄ．  ５μｍパッキング直径）で周囲温度にて行われた。用いた溶媒は：
Ａ＝０．１％ｖ／ｖトリフルオロ酢酸／水溶液
Ｂ＝０．１％ｖ／ｖトリフルオロ酢酸／アセトニトリル溶液
であった。
【０２２８】
方法Ｄ：
方法ＤはＡｔｌａｎｔｉｓ  Ｃ１８カラム（典型的には１００ｍｍ×３０ｍｍ  ｉ．ｄ．  ５μｍパッキング直径）で周囲温度にて行われた。用いた溶媒は：
Ａ＝０．１％ｖ／ｖギ酸／水溶液
Ｂ＝０．１％ｖ／ｖギ酸／アセトニトリル溶液
であった。
【０２２９】
実施例
中間体１：２，６−ジクロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン
【化２８】
0005519670.tif 000029
【０２３０】
２，６−ジクロロプリン（２５．０ｇ）（例えば、Ａｌｄｒｉｃｈ（ＵＫ）から販売）に酢酸エチル（２６０ｍＬ）、そのあとｐ−トルエンスルホン酸（０．２５３ｇ）を加えた。この混合物を５０℃まで加熱し、そのあと３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（１６．８ｇ）を加えた。この反応混合物をこのあと５０℃で４時間加熱した。この反応混合物を真空で蒸発させて、その表題化合物を黄色の固形物（３６．９ｇ）として得た。  
1H NMR (CDCl3)：8.35 (1H, s), 5.77 (1H, dd), 4.20 (1H, m), 3.79 (1H, m), 2.20-1.65 (6H, m)。
【０２３１】
中間体２：２−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化２９】
0005519670.tif 000030
【０２３２】
２，６−ジクロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン（３６．９ｇ）を２Ｍアンモニア／イソプロパノール（２５０ｍＬ）と５０℃で５時間加熱した。周囲温度に一晩静置させた後、さらなる量の２Ｍアンモニア／イソプロパノール（１００ｍＬ）を加えて、その得られたケイクを崩壊させ、この反応混合物をその反応が完結するまでさらに９時間加熱した。この反応混合物に水（７０ｍＬ）を加え、その黄色の固形物を濾別した。この固形物をイソプロピルアルコール：水（５：１（ｖ／ｖ）、６０ｍＬ）で洗浄し、そのあと吸引下で空気乾燥させて、最初の収穫物を得た。その濾液を一晩静置させた後再濾過して沈殿物を単離し、これと上記の固形物を真空で乾燥させた。最初の収穫物は純粋であったが、この２番目の収穫物質はきわめて微量の不純物（最初の収穫物には見られない孤立ブロードシグナル３．５ｐｐｍ）を示したが、それ以外は同じであった。固形物第１の収穫物は（２８．４ｇ）、固形物第２の収穫物は（３．４２ｇ）。  
1H NMR (CDCl3)：8.01 (1H, s), 5.98 (2H, broad s), 5.70 (1H, dd), 4.16 (1H, m), 3.78 (1H, m), 2.15-1.60 (6H, mに重なる)。
【０２３３】
中間体２（別法）：２−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化３０】
0005519670.tif 000031
【０２３４】
溶液２，６−ジクロロプリン（２５ｇ）（例えば、Ａｌｄｒｉｃｈ（ＵＫ）から販売）／乾燥酢酸エチル（２００ｍＬ）にｐ−トルエンスルホン酸一水和物（２３５ｍｇ）を加えた。この反応物を５０℃まで加熱し、３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ピラン（１８．１ｍＬ）を１回で加えた。この反応物を５０℃で１時間撹拌し、その溶媒を減圧下で除去した。これにより黄色の固形物がもたらされた。この固形物（およそ３６ｇ）の２．０Ｍアンモニア／イソプロパノール（４６０ｍＬ）中懸濁液を凝縮器が取り付けられた窒素下６０℃で４時間加熱した。この反応物を水（５０ｍＬ）に注ぎ入れ、一晩そのままにして冷却させた。この沈殿物を濾過し、ロータリーエバポレーター（６０℃）で３０分間乾燥させて、その表題化合物を白から外れた色の固形物（３１ｇ（９３％、２ステップ））として得た。  
ＭＳ計算（Ｃ１０Ｈ１２ＣｌＮ５Ｏ）＋＝２５４，２５６
ＭＳ実測（エレクトロスプレー）：（Ｍ）＋＝２５４，２５６（３：１）
1H NMR ((CD3)2SO)：δ 8.43 (1H, s), 7.82 (2H, s), 5.55 (1H, dd), 4.00 (1H, m), 3.69 (1H, m), 2.21 (1H, m), 1.95 (2H, m), 1.74 (1H, m), 1.56 (2H, m)。
【０２３５】
中間体３：２−ブトキシ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化３１】
0005519670.tif 000032
【０２３６】
ブタン−１−オール（７６ｍＬ）にナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１５．２ｇ）を少しずつ加えた（注意：反応混合物は温かくなる）。これを均質になるまで撹拌（およそ１５ｍｉｎ）してから、２−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（１０．０ｇ）をそのあとこの得られた淡黄色溶液に加えた。この反応混合物を、このあと、一晩、１００℃に加熱した。この反応混合物をストリッピングして、ブタン−１−オールを可能な限り除去し、そのあとジエチルエーテルと水とに分配させた。そのジエチルエーテル相を分離させ、その水相をジエチルエーテルでさらに再抽出した。合わせた有機層を硫酸マグネシウム（無水）で乾燥させた。硫酸マグネシウムを濾別し、濾液をストリッピングして茶色の粘稠な油状物を得、これをトルエンと共沸させ（３回）、一晩高真空下に置いておき、ジクロロメタンが入った新しいフラスコに移し、ストリッピングし、高真空下に置いて、その表題化合物を茶色のガラス状物（９．４５ｇ）として得た。  
1H NMR (CDCl3)：7.85 (1H, s), 5.92 (2H, broad s), 5.64 (1H, d), 4.32 (2H, t), 4.14 (1H, m), 3.75 (1H, m), 2.10-1.95 (3H, mに重なる), 1.81-1.58 (5H, mに重なる), 1.50 (2H, m), 0.97 (3H, t)。
【０２３７】
中間体４：８−ブロモ−２−ブトキシ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化３２】
0005519670.tif 000033
【０２３８】
２−（ブトキシ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（９．４５ｇ）をクロロホルム（５０ｍＬ）に溶解させ、０℃まで冷却させた（アイス−バス）。この溶液に温度を３℃以下に保ちながらＮ−ブロモスクシンイミド（６．０７ｇ）を少しずつ加えた。これにより暗緑色の溶液が得られ、これを２．５℃で３０分間撹拌し、そのあと室温まで昇温させて、６時間撹拌した。この反応混合物をこのあと水（１００ｍＬ、２回）で洗浄した。疎水フリットを用いて有機相を乾燥／分離させ、蒸発させて、黒茶色のガム状物を得、これを、０→５０％酢酸エチル：シクロヘキサンの勾配溶離を用いるシリカクロマトグラフィー（１２０ｇ）（ＩＳＣＯ）により精製して、その表題化合物を淡黄色の固形物（８．３７ｇ）として得た。  
1H NMR (CDCl3)：5.61 (1H, dd), 5.49 (2H, broad s), 4.32 (2H, m), 4.17 (1H, m), 3.71 (1H, m), 3.04 (1H, m), 2.11 (1H, broad d), 1.89 -1.45 (6H, mに重なる), 1.50 (2H, m), 0.97 (3H, t)。
【０２３９】
中間体５：２−ブトキシ−８−メトキシ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化３３】
0005519670.tif 000034
【０２４０】
８−ブロモ−２−（ブトキシ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（８．３７ｇ）を２５％ナトリウムメトキシド／メタノール（１４．４ｍＬ）及びメタノール（６５ｍＬ）と４．５時間還流に加熱した。この反応混合物を減圧下で濃縮し、酢酸エチルと飽和塩化アンモニウム溶液とに分配させた。有機相を分離し、酢酸エチルに繰り返し抽出させた。有機相を合わせ、ブラインで洗浄した（２回）。その水相を分離させた後その有機相を疎水フリットに通し、蒸発させて、淡茶色のガム状物を得、これを高真空下に置いて泡状物（７．５２ｇ）を得たが、これは周囲圧力でガム状物（７．３４ｇ）に崩壊し、一晩固化させて、その表題化合物を黄色の非晶質固形物として得た。  
ＭＳ計算（Ｃ１５Ｈ２３Ｎ５Ｏ３）＋＝３２１
ＭＳ実測（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋＝３２２
1H NMR (CDCl3)：5.50 (1H, dd), 5.17 (2H, broad s), 4.29 (2H, t), 4.12 (3H, s and 1H, m), 3.70 (1H, m), 2.77 (1H, m), 2.05 (1H, m), 1.82-1.63 (6H, mに重なる), 1.50 (2H, m), 0.97 (3H, t)。
【０２４１】
中間体６：２−ブトキシ−８−メトキシ−９Ｈ−プリン−６−アミントリフルオロ酢酸塩
【化３４】
0005519670.tif 000035
【０２４２】
溶液２−（ブトキシ）−８−（メトキシ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（７．３４ｇ）／メタノール（１００ｍＬ）にトリフルオロ酢酸（１０ｍＬ）を加えた。この混合物を周囲温度でその週末にかけて撹拌して、懸濁液を得た。この反応混合物を少しの量まで濃縮し（濃厚スラリー）、そのあと酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈した。この得られたスラリーを濾過し、少量の酢酸エチルでその濾液が無色になるまで洗浄した。残っている固形物を、空気で、そのあと真空で乾燥させて、その表題化合物を白色の固形物（６．２０ｇ）として得た。前に得られた濾液を先と同じように濃縮してスラリーを得、これを少量の酢酸エチル（１０ｍＬ）で希釈し、そのあと濾過し、乾燥させた。この第２の収穫物を白色の固形物（０．２７６ｇ）として単離した。ＮＭＲによるとこの両者は同じであった。  
ＭＳ計算（Ｃ１０Ｈ１５Ｎ５Ｏ２）＋＝２３７
ＭＳ実測（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋＝２３８
1H NMR (CD3OD)：4.47 (2H, t), 4.15 (3H, s), 1.80 (2H, m), 1.50 (2H, m), 0.99 (3H, t)（交換性ＮＨ２、ＮＨ及びＣＯＯＨプロトンは認められず）。
【０２４３】
中間体７：Ｎ２−ブチル−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−２，６−ジアミン
【化３５】
0005519670.tif 000036
【０２４４】
室温及び窒素下にある溶液２−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（１０ｇ）／乾燥エチレングリコール（５０ｍＬ）にｎ−ブチルアミン（１６ｍＬ）を１回で加えた。この反応物を１２０℃で一晩加熱した。この反応物を室温まで冷却させ、酢酸エチル（１５０ｍＬ）で希釈し、水（２×５０ｍＬ）で洗浄した。この有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。これによりその表題化合物を粘稠な緑色の油状物（１０．２ｇ）として得、これを、次のステップで、さらに精製することなく用いた。  
ＭＳ計算（Ｃ１４Ｈ２２Ｎ６Ｏ）＋＝２９０
ＭＳ実測（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋＝２９１
1H NMR ((CD3)2SO)：δ 7.8 (1H, s), 6.6 (2H, s), 6.2 (1H, t), 5.4 (1H, dd), 4.0 (1H, m), 3.6 (1H, m), 3.2 (2H, m), 2.2 (1H, m), 1.9 (1H, m), 1.8 (1H, m), 1.7 (1H, m), 1.5 (2H, m), 1.4 (2H, m), 1.3 (2H, m), 0.9 (3H, t)。
【０２４５】
中間体８：Ｎ２−ブチル−８−メトキシ−９Ｈ−プリン−２，６−ジアミントリフルオロ酢酸塩
【化３６】
0005519670.tif 000037
【０２４６】
室温にある溶液粗製Ｎ２−ブチル−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−２，６−ジアミン（およそ１０．２ｇ）／乾燥クロロホルム（１００ｍＬ）にＮ−ブロモスクシンイミド（６．３ｇ）を少しずつ５分かけて加えた。この暗色溶液を室温で３０分間撹拌した。この反応混合物を水（２０ｍＬ）で洗浄した。その有機相を疎水フリットに通し、真空で濃縮した。これによりベージュ色の固形物を得、これを乾燥メタノール（１００ｍＬ）に溶解させ、室温及び窒素下でナトリウムメトキシド溶液（２５重量％／メタノール、２４ｍＬ）を１回で加えた。この反応物を、凝縮器を取り付けて、一晩６５℃で加熱した。この反応物を冷却させ、真空で濃縮した。この得られたオレンジ色の残留物を酢酸エチル（１５０ｍＬ）に取り込み、飽和塩化アンモニウム水溶液（５０ｍＬ）に注ぎ入れた。その有機層を分離し、水（５０ｍＬ）でさらに洗浄した。この有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。室温にあるこの物質／乾燥メタノール（７０ｍＬ）にトリフルオロ酢酸（７ｍＬ）を１回で加えた。この反応物を３０時間撹拌し、真空で濃縮して、暗褐色の固形物を得た。これをジエチルエーテル（２０ｍＬ）に取り込み、粉砕した。この固形物を濾過して、その表題化合物をベージュ色の固形物（３．３ｇ、３５％、４ステップ）として得た。  
ＭＳ計算（Ｃ１０Ｈ１６Ｎ６Ｏ）＋＝２３６
ＭＳ実測（エレクトロスプレー）：（Ｍ＋Ｈ）＋＝２３７
1H NMR ((CD3)2SO)：δ  13.3-12.3 (1H, br.m), 8.6-7.3 (2H, m), 4.05 (3H, s), 3.28 (2H, m), 1.52 (2H, m), 1.33 (2H, m), 0.89 (3H, t)（残っている交換性プロトンは透明でない）。
【０２４７】
中間体９：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化３７】
0005519670.tif 000038
【０２４８】
方法Ａ
ナトリウムｔ−ブトキシド（４８．５ｇ、５０５ｍｍｏｌ）を室温にある（Ｓ）−２−ペンタノール（例えば、Ｊｕｌｉｃｈ  Ｃｈｉｒａｌ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｇｅｒｍａｎｙ）から販売）（１８５ｍｌ）に少しずつ加え、均質になるまで撹拌した（反応は発熱であることに注意）。２−クロロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（３２ｇ、１２６ｍｍｏｌ）を加え、この反応混合物を７０℃で７２時間加熱した。この反応物を室温まで冷却させ、酢酸エチル（５００ｍｌ）と水（５００ｍｌ）とに分配させた。その有機相を飽和塩化ナトリウム溶液（１００ｍｌ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し、蒸発させた。この残留物をエーテルで粉砕し、その固体物質を濾過した。この沈殿物をエーテルで再洗浄し、その濾液を合わせ、蒸発させた。この粗製物質（約３０ｇ）をＤＭＳＯ：メタノール（１：１）に溶解させ、２５→６５％アセトニトリル（＋０．１％ＴＦＡ）−水（＋０．１％ＴＦＡ）／８カラム体積の勾配を用いる逆相（Ｃ１８）カラム（３３０ｇ）でのクロマトグラフィーにより精製し、そのフラクションを飽和炭酸ナトリウム水溶液で直ちに中和した。適切なフラクションを合わせ、ジクロロメタンと飽和炭酸水素ナトリウム水溶液とに分配させた。この有機相を疎水フリットに通し、濾過し、蒸発させて、その表題化合物を淡いクリーム色の泡状物（１４．９７ｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｂ）：ｔＲＥＴ＝２．２１ｍｉｎ；ＭＨ＋３０６。
【０２４９】
方法Ｂ
ナトリウムｔ−ブトキシド（２０６ｇ、２．１４４ｍｏｌ）を２Ｌ丸底フラスコ中の（Ｓ）−２−ペンタノール（例えば、Ｊｕｌｉｃｈ  Ｃｈｉｒａｌ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｇｅｒｍａｎｙ）から販売）（７２０ｍｌ、６．５８ｍｏｌ）に加えた。この混合物を５０℃でそのナトリウムｔ−ブトキシドが全部溶解するまで加熱した。２−フルオロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（１３０ｇ、５４８ｍｍｏｌ）をこのあと５分かけて少しずつ加えた。３時間後ＬＣＭＳ分析はその出発物質の完全消費を示したのでこの混合物を氷／水（３Ｌ）に注ぎ入れ、そのあとメチルｔ−ブチルエーテルで抽出した。これはエマルジョン形成をもたらしたのでこの混合物をセライトに通して濾過し、その有機相を分離した。この水層をこのあと固体ＮａＣｌで処理し、そのあとメチルｔ−ブチルエーテルで再抽出した。この有機抽出物を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、そのあと蒸発させて、その表題化合物を淡褐色のガム状物（１５８．５９ｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．６５ｍｉｎ；ＭＨ＋３０６。
【０２５０】
中間体１０：８−ブロモ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化３８】
0005519670.tif 000039
【０２５１】
Ｎ−ブロモスクシンイミド（１２．１６ｇ、６８．３ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下の＜５℃にある撹拌溶液２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（１４．９ｇ、４８．８ｍｍｏｌ）／クロロホルム（８０ｍｌ）に５ｍｉｎかけて少しずつ加えた。この反応混合物を＜５℃で５時間撹拌し、そのあと飽和炭酸水素ナトリウム溶液（８０ｍｌ）そのあと水（８０ｍｌ）で洗浄し、その溶媒を除去した。この残留の泡状物をＤＣＭ（５０ｍｌ）に溶解させ、水（５０ｍｌ）そのあとブライン（５０ｍｌ）で洗浄した。この合わせた水相をＤＣＭ（５０ｍｌ）で洗浄した。この合わせた有機層を疎水フリットに通して乾燥させ、そしてその溶媒を真空で除去して、その表題化合物をオレンジ色の泡状物（１８．５ｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝３．０６ｍｉｎ；ＭＨ＋３８４／３８６。
【０２５２】
中間体１１：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化３９】
0005519670.tif 000040
【０２５３】
８−ブロモ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（７．１ｇ、１８．４８ｍｍｏｌ）を無水メタノール（７０ｍＬ）に溶解させ、溶液ナトリウムメトキシド（２５％）／メタノール（８ｍｌ）を窒素の雰囲気下で少しずつ加えた。この溶液を窒素雰囲気下の還流９０℃で４時間加熱した。さらなるナトリウムメトキシド／メタノール（２５％溶液、３ｍｌ）を加え、この反応物を６０℃でさらに１６時間撹拌した。さらなる量のナトリウムメトキシド／メタノール（２５％溶液、５ｍｌ）を加え、この反応物を９０℃でさらに７時間撹拌した。その溶媒をロータリーエバポレーターで除去し、その粗製の生成物をＥｔＯＡｃ（７５ｍｌ）と飽和塩化アンモニウム溶液（７５ｍｌ）とに分配させた。その有機層をブライン（７５ｍｌ）で洗浄した。その溶媒をロータリーエバポレーターで除去して、その表題化合物を淡いオレンジ色の泡状物（６ｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝３．０８ｍｉｎ；ＭＨ＋３３６。
【０２５４】
中間体１２：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−１Ｈ−プリン−６−アミントリフルオロアセタート
【化４０】
0005519670.tif 000041
【０２５５】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（６ｇ、１７．８９ｍｍｏｌ）をメタノール（５０ｍＬ）に溶解させた。トリフルオロ酢酸（２０．６７ｍＬ、２６８ｍｍｏｌ）を滴下で加え、そしてこの混合物を窒素雰囲気下の２０℃で７２時間撹拌した。その溶媒を真空で除去し、そしてその得られた固形物を酢酸エチルで洗浄し、濾過した。その濾液をストリッピングし、その残留物を酢酸エチルで洗浄した。この合わせた固体残留物を真空オーブン中で２時間乾燥させて、その表題化合物を白から外れた色の固形物（５．３ｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｃ）：ｔＲＥＴ＝０．７６ｍｉｎ；ＭＨ＋２５２。
【０２５６】
中間体１３：２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（２Ｒ）−テトラヒドロ−２−フラニルアミノ］プロピル｝−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−６−アミン
【化４１】
0005519670.tif 000042
【０２５７】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−１Ｈ−プリン−６−アミントリフルオロアセタート（７０ｍｇ、０．１９９ｍｍｏｌ）をＫ２ＣＯ３（６８．９ｍｇ、０．４９８ｍｍｏｌ）／ＤＭＦ（１ｍｌ）と５０℃で１時間撹拌した。この反応混合物を冷却させ、１，３−ジブロモプロパン（０．０２０ｍＬ、０．１９９ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を２０℃で４０ｍｉｎ撹拌した。（３Ｓ）−テトラヒドロ−３−フランアミンヒドロクロリド（４９．３ｍｇ、０．３９９ｍｍｏｌ）をＮａＯＨ水溶液（０．９９６ｍＬ、１．９９３ｍｍｏｌ）と５ｍｉｎ間震盪し、ＤＣＭ（２×３ｍｌ）を加え、この混合物を相分離カートリッジに通した。その溶媒をロータリーエバポレーターによる蒸発によりマイルドな条件下で除去した。この遊離塩基をその反応混合物に加え、そのあとトリエチルアミン（０．０５６ｍＬ、０．３９９ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を２０℃で１６時間撹拌した。（３Ｓ）−テトラヒドロ−３−フランアミンヒドロクロリド（４９．３ｍｇ、０．３９９ｍｍｏｌ）をＮａＯＨ（０．９９６ｍＬ、１．９９３ｍｍｏｌ）と５ｍｉｎ間震盪し、ＤＣＭ（２×３ｍｌ）を加え、そしてこの混合物を相分離カートリッジに通し、直接その反応混合物に加えた。トリエチルアミン（０．０５６ｍＬ、０．３９９ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を２０℃で１６時間撹拌した。水を加え、この混合物を疎水フリットに通してＤＣＭ（２×５ｍｌ）で抽出した。その溶媒を窒素ブローダウンにより除去した。このサンプルを１：１ＭｅＯＨ：ＤＭＳＯ（１ｍＬ）に溶解させ、Ｍａｓｓ  Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ＡｕｔｏＰｒｅｐ（方法Ａ）により精製した。その溶媒を窒素流下で乾燥させて、その表題化合物を白色の固形物（３ｍｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．１４ｍｉｎ；ＭＨ＋３６５。
【０２５８】
中間体１４：２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（２Ｓ）−テトラヒドロ−２−フラニルアミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化４２】
0005519670.tif 000043
【０２５９】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−１Ｈ−プリン−６−アミントリフルオロアセタート（１００ｍｇ、０．２８５ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（９８ｍｇ、０．７１２ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍＬ）中５０℃で１時間撹拌した。この反応物を冷却させ、１，３−ジブロモプロパン（０．０２９ｍＬ、０．２８５ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を２０℃で４０ｍｉｎ間撹拌した。（３Ｒ）−テトラヒドロ−３−フランアミンヒドロクロリド（３５．２ｍｇ、０．２８５ｍｍｏｌ）及びＮ’’−（１，１−ジメチルエチル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルグアニジン（１４６ｍｇ、０．８５４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ  １ｍｌ中２０℃で４０ｍｉｎ間撹拌した。この得られた遊離塩基とされる混合物をその最初の反応容器に加え、この混合物を１６時間２０℃で撹拌した。水（２ｍｌ）及びブライン（２ｍｌ）をこの混合物に加えた。その生成物を疎水分離カートリッジを用いてＤＣＭ（２×５ｍｌ）で抽出し、その溶媒をＮ２ブローダウン装置で除去した。このサンプルを１：１ＭｅＯＨ：ＤＭＳＯ（１ｍＬ）に溶解させ、Ｍａｓｓ  Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ＡｕｔｏＰｒｅｐ（方法Ａ）により精製した。その溶媒を窒素流下で乾燥させて、その表題化合物を白色の固形物（７ｍｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．１５ｍｉｎ；ＭＨ＋３６５。
【０２６０】
中間体１５：２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化４３】
0005519670.tif 000044
【０２６１】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−１Ｈ−プリン−６−アミントリフルオロアセタート（７０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）及びＫ２ＣＯ３（６８．８ｍｇ、０．０５０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍｌ）中５０℃で１時間撹拌した。この反応物を冷却させ、１，３−ジブロモプロパン（０．０２０ｍＬ、０．２ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を２０℃で４０ｍｉｎ撹拌した。（テトラヒドロ−２−フラニルメチル）アミン（０．４１ｍｌ、０．２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．０５６ｍｌ、０．４ｍｍｏｌ）／ＤＭＦ（１ｍｌ）を加え、この反応混合物を室温で１６時間撹拌した。水（２ｍｌ）及びブライン（２ｍｌ）をこの混合物に加えた。その生成物を疎水分離カートリッジを用いてＤＣＭ（２×５ｍｌ）で抽出し、その溶媒をＮ２ブローダウン装置で除去した。そのサンプルを１：１  ＭｅＯＨ：ＤＭＳＯ（１ｍＬ）に溶解させ、Ｍａｓｓ  Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ＡｕｔｏＰｒｅｐ（方法Ａ）により精製した。その溶媒を窒素流下で乾燥させて、その表題化合物を白色の固形物（２０ｍｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．３５ｍｉｎ；ＭＨ＋３７９。
【０２６２】
中間体１６：２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−３−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化４４】
0005519670.tif 000045
【０２６３】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−１Ｈ−プリン−６−アミントリフルオロアセタート及び（テトラヒドロ−３−フラニルメチル）アミンヒドロクロリドから中間体１４と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．２４ｍｉｎ；ＭＨ＋３７９。
【０２６４】
中間体１７：２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エチル］アミノ｝プロピル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化４５】
0005519670.tif 000046
【０２６５】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−１Ｈ−プリン−６−アミントリフルオロアセタート及び２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エタンアミンから中間体１５と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｃ）：ｔＲＥＴ＝０．８５ｍｉｎ；ＭＨ＋３９３。
【０２６６】
中間体１８：２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化４６】
0005519670.tif 000047
【０２６７】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−１Ｈ−プリン−６−アミントリフルオロアセタート及び（テトラヒドロ−２Ｈ−ピランｌ−２−イルメチル）アミンヒドロクロリドから中間体１４と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．５５ｍｉｎ；ＭＨ＋３９３。
【０２６８】
中間体１９：２−｛３−［６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−９−イル］プロピル｝−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン
【化４７】
0005519670.tif 000048
【０２６９】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン（７．５ｇ、３１．６ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１００ｍＬ）に溶解させ、炭酸カリウム（４．３７ｇ、３１．６ｍｍｏｌ）を加えた。この懸濁液を室温で１５ｍｉｎ間撹拌した後、２−（３−ブロモプロピル）−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン（８．００ｇ、２９．８ｍｍｏｌ）を加え、この懸濁液を室温で１０時間激しく撹拌した。この反応混合物を酢酸エチルで抽出し、水、ブラインで洗浄し、乾燥させた。この粗製の物質をＥｔＯＡｃ／ジエチルエーテルから再結晶させて、その表題化合物を３つの異なるバッチ（２．０２ｇ）、（２．４４ｇ）及び（１．６０ｇ）で得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｂ）：ｔＲＥＴ＝２．１６ｍｉｎ；ＭＨ＋４２５。
【０２７０】
中間体２０：９−（３−アミノプロピル）−２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化４８】
0005519670.tif 000049
【０２７１】
２−｛３−［６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−９−イル］プロピル｝−１Ｈ−イソインドール−１，３（２Ｈ）−ジオン（６．０６ｇ、１４．２８ｍｍｏｌ）をエタノール（６０ｍＬ）に溶解させ、ヒドラジン一水和物（６．００ｍＬ）を加え、周囲温度で１０時間撹拌した。この得られた混合物を減圧下で濃縮し、その残留物をＤＣＭ（１００ｍｌ）に懸濁させ、１時間撹拌した。この懸濁液を濾過し、そしてその濾過された固形物をＤＣＭ（１０ｍｌ）で洗浄した。この濾液及び洗浄液を水（５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させた。この有機溶液を減圧下で濃縮して、その表題化合物を白から外れた色の固形物（２．７４ｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｂ）：ｔＲＥＴ＝１．１０ｍｉｎ；ＭＨ＋２９５。
【０２７２】
中間体２１：２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化４９】
0005519670.tif 000050
【０２７３】
テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−カルバルデヒド（１９．３９ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）を９−（３−アミノプロピル）−２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）／ＤＣＭ（１ｍｌ）に加えた。ナトリウムトリアセトオキシボロヒドリド（７２．０ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）及びＤＣＭ（１ｍｌ）を加え、そのあと酢酸（０．０２４ｍＬ、０．４２５ｍｍｏｌ）を加えた。この混合物を窒素下の２０℃で５時間撹拌した。この混合物をＮａＨＣＯ３（５ｍｌ）でクエンチし、ＤＣＭ（２ｍｌ）で希釈した。この有機層を疎水フリットを用いて分離し、その溶媒を真空で除去した。このサンプルを１：１ＭｅＯＨ：ＤＭＳＯ（１ｍＬ）に溶解させ、Ｍａｓｓ  Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ＡｕｔｏＰｒｅｐ（方法Ａ）により精製した。その溶媒を窒素流下で乾燥させて、その表題化合物を白色の固形物（４７ｍｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．４０ｍｉｎ；ＭＨ＋３９３。
【０２７４】
中間体２２：２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化５０】
0005519670.tif 000051
【０２７５】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−１Ｈ−プリン−６−アミントリフルオロアセタート及び（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミンから中間体１５と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．３２ｍｉｎ；ＭＨ＋３９３。
【０２７６】
中間体２３：２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化５１】
0005519670.tif 000052
【０２７７】
２−（２−ブロモエチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン（３２．８ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）及び９−（３−アミノプロピル）−２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２ｍｌ）に溶解させた。トリエチルアミン（０．０２４ｍｌ、０．１７ｍｍｏｌ）を加え、この反応物を室温で１６時間撹拌した。さらなる２−（２−ブロモエチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン（３２．８ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．０２４ｍｌ、０．１７ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を５０℃で３時間加熱した。この混合物をＤＣＭ（５ｍｌ）で希釈し、水（２ｍｌ）で洗浄した。この有機層を疎水フリットを用いて分離し、その溶媒を窒素ブローダウン装置で除去した。このサンプルを１：１ＭｅＯＨ：ＤＭＳＯ（１ｍＬ）に溶解させ、Ｍａｓｓ  Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ＡｕｔｏＰｒｅｐ（方法Ａ）で精製した。その溶媒を窒素流下で乾燥させて、その表題化合物を透明な油状物（１８ｍｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．５５ｍｉｎ；ＭＨ＋４０７。
【０２７８】
中間体２４：２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化５２】
0005519670.tif 000053
【０２７９】
９−（３−アミノプロピル）−２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン及び３−（２−ブロモエチル）テトラヒドロ−２Ｈ−ピランから中間体２３と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．４２ｍｉｎ；ＭＨ＋４０７。
【０２８０】
中間体２５：２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化５３】
0005519670.tif 000054
【０２８１】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−１Ｈ−プリン−６−アミントリフルオロアセタート、１，３−ジブロモプロパン、及び２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルエチル）アミンから中間体１５と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．３９ｍｉｎ；ＭＨ＋４０７。
【０２８２】
中間体２６：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化５４】
0005519670.tif 000055
【０２８３】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−１Ｈ−プリン−６−アミントリフルオロアセタート、１，３−ジブロモプロパン、及び（テトラヒドロ−２−フラニルメチル）アミンから中間体１５と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｃ）：ｔＲＥＴ＝０．９８ｍｉｎ；ＭＨ＋３９３。
【０２８４】
中間体２７：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エチル］アミノ｝プロピル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化５５】
0005519670.tif 000056
【０２８５】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−１Ｈ−プリン−６−アミントリフルオロアセタート、１，３−ジブロモプロパン、及び［２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エチル］アミンから中間体１５と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｃ）：ｔＲＥＴ＝０．８９ｍｉｎ；ＭＨ＋４０７。
【０２８６】
中間体２８：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化５６】
0005519670.tif 000057
【０２８７】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−１Ｈ−プリン−６−アミントリフルオロアセタート、１，３−ジブロモプロパン、及び（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４ｙｌメチル）アミンから中間体１５と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｃ）：ｔＲＥＴ＝０．９７ｍｉｎ；ＭＨ＋４０７。
【０２８８】
中間体２９：Ｎ２−ブチル−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−２，６−ジアミン
【化５７】
0005519670.tif 000058
【０２８９】
Ｎ２−ブチル−８−メトキシ−９Ｈ−プリン−２，６−ジアミントリフルオロ酢酸塩、１，３−ジブロモプロパン、及び２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルエチル）アミンから中間体１５と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｃ）：ｔＲＥＴ＝０．９１ｍｉｎ；ＭＨ＋３７８。
【０２９０】
中間体３０：Ｎ２−ブチル−８−（メチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エチル］アミノ｝プロピル）−９Ｈ−プリン−２，６−ジアミン
【化５８】
0005519670.tif 000059
【０２９１】
Ｎ２−ブチル−８−メトキシ−９Ｈ−プリン−２，６−ジアミントリフルオロ酢酸塩、１，３−ジブロモプロパン、及び［２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エチル］アミンから中間体２６と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｃ）：ｔＲＥＴ＝０．９ｍｉｎ；ＭＨ＋３９２。
【０２９２】
中間体３１：Ｎ２−ブチル−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−２，６−ジアミン
【化５９】
0005519670.tif 000060
【０２９３】
Ｎ２−ブチル−８−メトキシ−９Ｈ−プリン−２，６−ジアミントリフルオロ酢酸塩、１，３−ジブロモプロパン、及び（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミンから中間体１５と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｃ）：ｔＲＥＴ＝０．８９ｍｉｎ；ＭＨ＋３９２。
【０２９４】
中間体３２：Ｎ２−ブチル−８−（メチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−９Ｈ−プリン−２，６−ジアミン
【化６０】
0005519670.tif 000061
【０２９５】
Ｎ２−ブチル−８−メトキシ−９Ｈ−プリン−２，６−ジアミントリフルオロ酢酸塩、１，３−ジブロモプロパン、及び２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラニル−２−イルエチル）アミンヒドロクロリドから中間体１４と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｃ）：ｔＲＥＴ＝０．９８ｍｉｎ；ＭＨ＋４０６。
【０２９６】
中間体３３：２−フルオロ−９−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化６１】
0005519670.tif 000062
【０２９７】
Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド（９７５ｍＬ、３．９８８ｍｏｌ）を１０Ｌ調節式実験室反応器中にある撹拌懸濁液２−フルオロ−１Ｈ−プリン−６−アミン（２００ｇ、１．３０６ｍｍｏｌ）（例えば、ＡｌｌｉｅｄＳｉｇｎａｌ（ＵＳ）から販売）／無水アセトニトリル（４Ｌ）に加え、この得られた混合物を還流まで加熱し、その温度に２時間維持した。そのサーキュレーターをこのあと再プログラムし、その反応混合物を０℃まで冷却させた。溶液テトラヒドロピラニルアセタート（Tetrahedron Letters 2006, 47(27), 4741に調製は記載）（２８２ｇ、１．９５９ｍｏｌ）／無水アセトニトリル（５００ｍＬ）をこのあと滴下漏斗を介してゆっくり加え、そのあとトリメチルシリルトリフルオロメタンスルホナート（２８３ｍＬ、１．５６７ｍｏｌ）を滴下漏斗を介して滴下で加えた。有意な発熱は認められなかった。そのサーキュレーター温度を１０℃に再調節し、撹拌をさらに１時間維持した。この混合物をこのあと１Ｍ炭酸ナトリウム（４Ｌ）を加えることによりクエンチした。固体沈殿物が認められ、そのｐＨをチェックすると塩基性であった。さらなる水をこの懸濁液に加え（１Ｌ）、静置しておくと各層が分かれ、その水層は有意な固体無機物を含有していた。この水性・無機固形物の大半を分離した。その有機層はなおかなりの固形物を含有していたので、さらなる沈殿を促進するために撹拌しながら０℃まで冷却させた。その固形物を濾過により回収し、そのパッドを十分よく水で洗浄し、そのあと４０℃の真空で一晩乾燥させて、その表題化合物をクリーム色をした固形物（１５２．８ｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝１．７１ｍｉｎ；ＭＨ＋＝２３８。
【０２９８】
中間体３４：９−（４−クロロブチル）−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化６２】
0005519670.tif 000063
【０２９９】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−１Ｈ−プリン−６−アミン（１ｇ、２．７４ｍｍｏｌ）＋炭酸カリウム（０．９４６ｇ、６．８４ｍｍｏｌ）／ＤＭＦ（１２．５ｍＬ）を窒素下で撹拌し、５０℃で１時間加熱した。この混合物を周囲温度まで冷却させ、１−ブロモ−４−クロロブタン（０．３１５ｍＬ、２．７４ｍｍｏｌ）を加え、周囲温度の窒素下で一晩撹拌を続けた。この混合物をこのあと酢酸エチルと水とに分配させた。この水層を酢酸エチルで洗浄し、その合わせた有機抽出物を飽和ブラインで洗浄し、疎水フリットに通し、真空で蒸発させた。この残留物（１．０３２２ｇ）をジクロロメタンに溶解させ、アミノカートリッジ（７０ｇ）に負荷し、４０分かけての０→１００％酢酸エチル／シクロヘキサン勾配を用いて溶離した。生成物フラクションを合わせ、蒸発させて、その表題化合物を白から外れた色の固形物（６６７ｍｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝３．０１ｍｉｎ；ＭＨ＋＝３４２／３４４。
【０３００】
中間体３５：９−（５−クロロペンチル）−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化６３】
0005519670.tif 000064
【０３０１】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミントリフルオロアセタート（６００ｍｇ、１．６４２ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（５６７ｍｇ、４．１１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１０ｍｌ）中６０℃で１時間窒素下で撹拌した。この反応物を室温まで冷却させて１−ブロモ−５−クロロｐｅｎｔａｎｅ（０．２１６ｍｌ、１．６４２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（０．３４３ｍｌ、２．４６４ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を窒素下の２０℃で１６時間撹拌した。この混合物をこのあと水（１０ｍｌ）及びブライン（１０ｍｌ）で希釈し、ＤＣＭ（２×１０ｍｌ）で抽出した。この合わせた有機抽出物を蒸発させ、その残留物をＤＣＭに溶解させ、４０分かけての０→１００％酢酸エチル／シクロヘキサン勾配のＦｌａｓｈｍａｓｔｅｒ  ＩＩ（７０ｇアミノプロピルカートリッジ）を用いるカラムクロマトグラフィーにより精製した。その適切なフラクションを合わせ、真空で蒸発させて、その表題化合物を黄色のガム状物（４３０ｍｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝４．１５ｍｉｎ；ＭＨ＋＝３５６／３５８。
【０３０２】
中間体３６：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ブチル］−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化６４】
0005519670.tif 000065
【０３０３】
９−（４−クロロブチル）−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン（７０ｍｇ、０．２０５ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１７９ｍＬ、１．０２４ｍｍｏｌ）＋ヨウ化ナトリウム（３０．７ｍｇ、０．２０５ｍｍｏｌ）＋テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−アミン（６２．１ｍｇ、０．６１４ｍｍｏｌ）／アセトニトリル（１．５ｍＬ）と混合し、一晩窒素下７０℃で加熱し、そのあと週末にかけて周囲温度に置いておいた。そのアセトニトリルを窒素下で蒸発させ、その残留物を重炭酸ナトリウム水溶液とジクロロメタンとに分配させた。その水相をジクロロメタンで再抽出し、その合わせた有機抽出物を疎水フリットに通し、窒素下で蒸発させて、アンバー色の油状物を得た。この物質を１：１ＤＭＳＯ：ＭｅＯＨ（２×１ｍｌ）に溶解させ、Ｍａｓｓ  Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ＡｕｔｏＰｒｅｐ（方法Ａ）により２回の注入で精製した。フラクション含有生成物を合わせ、ブローダウン装置で窒素下で蒸発させて、その表題化合物を無色の油状物（３０．３５ｍｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．３６ｍｉｎ；ＭＨ＋４０７。
【０３０４】
中間体３７：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−［５−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ペンチル］−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化６５】
0005519670.tif 000066
【０３０５】
９−（５−クロロペンチル）−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン及びテトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−アミンから中間体３６と同じようにしてだが７０℃でさらに２０時間加熱して調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．４６ｍｉｎ；ＭＨ＋４２１。
【０３０６】
中間体３８：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−｛４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］ブチル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化６６】
0005519670.tif 000067
【０３０７】
９−（４−クロロブチル）−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン及び（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミンから中間体３６と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．４３ｍｉｎ；ＭＨ＋４２１。
【０３０８】
中間体３９：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−｛５−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］ペンチル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化６７】
0005519670.tif 000068
【０３０９】
９−（５−クロロペンチル）−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン及び（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミンから中間体３６と同じようにしてだが７０℃でさらに２０時間加熱して調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．５３ｍｉｎ；ＭＨ＋４３５。
【０３１０】
中間体４０：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−｛４−［（３Ｒ）−テトラヒドロ−３−フラニルアミノ］ブチル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化６８】
0005519670.tif 000069
【０３１１】
９−（４−クロロブチル）−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン及び（３Ｒ）−テトラヒドロ−３−フランアミンから中間体３６と同じようにしてだが７０℃でさらに２０時間加熱して調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．３２ｍｉｎ；ＭＨ＋３９３。
【０３１２】
中間体４１：２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−｛４−［（３Ｓ）−テトラヒドロ−３−フラニルアミノ］ブチル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン
【化６９】
0005519670.tif 000070
【０３１３】
９−（４−クロロブチル）−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９Ｈ−プリン−６−アミン及び（３Ｓ）−テトラヒドロ−３−フランアミンから中間体４０と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．３３ｍｉｎ；ＭＨ＋３９３。
【０３１４】
実施例１：６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−｛３−［（２Ｒ）−テトラヒドロ−２−フラニルアミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化７０】
0005519670.tif 000071
【０３１５】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（２Ｒ）−テトラヒドロ−２−フラニルアミノ］プロピル｝−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−６−アミン（３ｍｇ、８．２３μｍｏｌ）を４Ｍ  ＨＣｌ／１，４−ジオキサン（０．０５ｍＬ、０．２ｍｍｏｌ）とメタノール（２ｍＬ）中４０℃で３時間撹拌した。その溶媒を窒素流下のＲａｄｌｅｙｓブローダウン装置を用いてストリッピングした。このサンプルをメタノールに負荷し、メタノールを用いるアミノプロピル（ＮＨ２）カートリッジでのＳＰＥ（２ｇ）により精製した。その適切なフラクションを合わせ、窒素流下で乾燥させて、その表題化合物を白色の固形物（２．８ｍｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝１．９６ｍｉｎ；ＭＨ＋３５１。
【０３１６】
実施例２：６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−｛３−［（２Ｓ）−テトラヒドロ−２−フラニルアミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化７１】
0005519670.tif 000072
【０３１７】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（２Ｓ）−テトラヒドロ−２−フラニルアミノ］プロピル｝−８，９−ジヒドロ−７Ｈ−プリン−６−アミンから実施例１と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｃ）：ｔＲＥＴ＝０．７７ｍｉｎ；ＭＨ＋３５１。
【０３１８】
実施例３：６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化７２】
0005519670.tif 000073
【０３１９】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−６−アミンから実施例１と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．１３ｍｉｎ；ＭＨ＋３６５。
【０３２０】
実施例４：６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−３−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化７３】
0005519670.tif 000074
【０３２１】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−３−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−６−アミン（１１ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）及び４Ｍ  ＨＣｌ／１，４−ジオキサン（０．１６０ｍＬ、０．６３９ｍｍｏｌ）を２０℃で１６時間メタノール（１ｍＬ）中で撹拌した。その溶媒をＮ２ブローダウンにより除去した。このサンプルをメタノールに負荷し、メタノールを用いるアミノプロピル（ＮＨ２）カートリッジ（２ｇ）でのＳＰＥにより精製した。その適切なフラクションを合わせ、窒素流下で乾燥させて、その粗製生成物を白色の固形物として得た。このサンプルを１：１ＭｅＯＨ：ＤＭＳＯ（１ｍＬ）に溶解させ、Ｍａｓｓ  Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ＡｕｔｏＰｒｅｐ（方法Ａ）により精製した。その溶媒をＲａｄｌｅｙｓブローダウン装置で窒素流下で乾燥させて、その表題化合物を白色の固形物（５．６ｍｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．０３ｍｉｎ；ＭＨ＋３６５。
【０３２２】
実施例５：６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エチル］アミノ｝プロピル）−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化７４】
0005519670.tif 000075
【０３２３】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エチル］アミノ｝プロピル）−９Ｈ−プリン−６−アミンから実施例１と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．１６ｍｉｎ；ＭＨ＋３７９。
【０３２４】
実施例６：６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化７５】
0005519670.tif 000076
【０３２５】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−６−アミンから実施例４と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．２９ｍｉｎ；ＭＨ＋３７９。
【０３２６】
実施例７：６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化７６】
0005519670.tif 000077
【０３２７】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−６−アミンから実施例１と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．１５ｍｉｎ；ＭＨ＋３７９。
【０３２８】
実施例８：６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化７７】
0005519670.tif 000078
【０３２９】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−６−アミンから実施例１と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．０８ｍｉｎ；ＭＨ＋３７９。
【０３３０】
実施例９：６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化７８】
0005519670.tif 000079
【０３３１】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−９Ｈ−プリン−６−アミンから実施例１と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．３３ｍｉｎ；ＭＨ＋３９３。
【０３３２】
実施例１０：６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化７９】
0005519670.tif 000080
【０３３３】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−３−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−９Ｈ−プリン−６−アミンから実施例１と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．１９ｍｉｎ；ＭＨ＋３９３。
【０３３４】
実施例１１：６−アミノ−２−（ブチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化８０】
0005519670.tif 000081
【０３３５】
２−（ブチルオキシ）−８−（メチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−９Ｈ−プリン−６−アミンから実施例１と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．１５ｍｉｎ；ＭＨ＋３９３。
【０３３６】
実施例１２：６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛３−［（テトラヒドロ−２−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化８１】
0005519670.tif 000082
【０３３７】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−６−アミンから実施例４と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．２７ｍｉｎ；ＭＨ＋３７９。
【０３３８】
実施例１３：６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エチル］アミノ｝プロピル）−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化８２】
0005519670.tif 000083
【０３３９】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エチル］アミノ｝プロピル）−９Ｈ−プリン−６−アミンから実施例４と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｃ）：ｔＲＥＴ＝０．９ｍｉｎ；ＭＨ＋３９３。
【０３４０】
実施例１４：６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化８３】
0005519670.tif 000084
【０３４１】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−６−アミンから実施例１と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．２２ｍｉｎ；ＭＨ＋３９３。
【０３４２】
実施例１５：６−アミノ−２−（ブチルアミノ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化８４】
0005519670.tif 000085
【０３４３】
Ｎ２−ブチル−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２−フラニルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−２，６−ジアミンから実施例１と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．１１ｍｉｎ；ＭＨ＋３６４。
【０３４４】
実施例１６：６−アミノ−２−（ブチルアミノ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エチル］アミノ｝プロピル）−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化８５】
0005519670.tif 000086
【０３４５】
Ｎ２−ブチル−８−（メチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２−フラニル）エチル］アミノ｝プロピル）−９Ｈ−プリン−２，６−ジアミンから実施例１と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．１４ｍｉｎ；ＭＨ＋３７８。
【０３４６】
実施例１７：６−アミノ−２−（ブチルアミノ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］プロピル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化８６】
0005519670.tif 000087
【０３４７】
Ｎ２−ブチル−８−（メチルオキシ）−９−｛３−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］プロピル｝−９Ｈ−プリン−２，６−ジアミンから実施例１と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．０６ｍｉｎ；ＭＨ＋３７８。
【０３４８】
実施例１８：６−アミノ−２−（ブチルアミノ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化８７】
0005519670.tif 000088
【０３４９】
Ｎ２−ブチル−８−（メチルオキシ）−９−（３−｛［２−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）エチル］アミノ｝プロピル）−９Ｈ−プリン−２，６−ジアミンから実施例４と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．３３ｍｉｎ；ＭＨ＋３９２。
【０３５０】
実施例１９：６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ブチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化８８】
0005519670.tif 000089
【０３５１】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−［４−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ブチル］−９Ｈ−プリン−６−アミン（３０．３５ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）をメタノール（２．０ｍＬ）に溶解させ、４Ｍ  ＨＣｌ／１，４−ジオキサン（０．４６７ｍＬ、１．８６６ｍｍｏｌ）で処理し、週末にかけて栓をしたバイアル中で撹拌した。その溶媒を窒素下で蒸発させ、その残留物をメタノールに溶解させ、アミノプロピルＳＰＥカートリッジ（２ｇ、２カラム体積のメタノールで前処理済み）に流し落とし、１カラム体積のメタノールで洗い落とした。この溶離液をブローダウン装置で窒素下で蒸発させて、その表題化合物を白から外れた色の固形物（２８．３４ｍｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．１６ｍｉｎ；ＭＨ＋３９３。
【０３５２】
実施例２０：６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−［５−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ペンチル］−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化８９】
0005519670.tif 000090
【０３５３】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−［５−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルアミノ）ペンチル］−９Ｈ−プリン−６−アミン（３５．４７ｍｇ、０．０８４ｍｍｏｌ）をメタノール（２．３ｍＬ）中で撹拌し、４Ｍ  ＨＣｌ／１，４−ジオキサン（０．５２７ｍＬ、２．１０９ｍｍｏｌ）で処理した。この反応物を栓をしたバイアル中で一晩撹拌し、そのあと窒素下で蒸発させ、その残留物を１：１ＤＭＳＯ：ＭｅＯＨ（１ｍＬ）に溶解させ、Ｍａｓｓ  Ｄｉｒｅｃｔｅｄ  ＡｕｔｏＰｒｅｐ（方法Ａ）により精製した。生成物含有フラクションを合わせ、窒素ブローダウン装置で蒸発させて、その表題化合物を白から外れた色のガム状物（２３．２８ｍｇ）として得た。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．２５ｍｉｎ；ＭＨ＋４０７。
【０３５４】
実施例２１：６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］ブチル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化９０】
0005519670.tif 000091
【０３５５】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−｛４−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］ブチル｝−９Ｈ−プリン−６−アミンから実施例１９と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．２１ｍｉｎ；ＭＨ＋４０７。
【０３５６】
実施例２２：６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛５−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］ペンチル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化９１】
0005519670.tif 000092
【０３５７】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−｛５−［（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−４−イルメチル）アミノ］ペンチル｝−９Ｈ−プリン−６−アミンから実施例２０と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．２９ｍｉｎ；ＭＨ＋４２１。
【０３５８】
実施例２３：６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛４−［（３Ｒ）−テトラヒドロ−３−フラニルアミノ］ブチル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化９２】
0005519670.tif 000093
【０３５９】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−｛４−［（３Ｒ）−テトラヒドロ−３−フラニルアミノ］ブチル｝−９Ｈ−プリン−６−アミンから実施例２０と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．１４ｍｉｎ；ＭＨ＋３７９。
【０３６０】
実施例２４：６−アミノ−２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−９−｛４−［（３Ｓ）−テトラヒドロ−３−フラニルアミノ］ブチル｝−７，９−ジヒドロ−８Ｈ−プリン−８−オン
【化９３】
0005519670.tif 000094
【０３６１】
２−｛［（１Ｓ）−１−メチルブチル］オキシ｝−８−（メチルオキシ）−９−｛４−［（３Ｓ）−テトラヒドロ−３−フラニルアミノ］ブチル｝−９Ｈ−プリン−６−アミンから実施例２０と同じようにして調製した。  
ＬＣＭＳ（装置Ｄ）：ｔＲＥＴ＝２．１４ｍｉｎ；ＭＨ＋３７９。
【０３６２】
生物学的データ
本発明の化合物のｉｎ  ｖｉｔｒｏ生物学的活性を以下のアッセイ又は類似のアッセイに従って試験した：
凍結保存ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を用いるインターフェロン−α誘導アッセイ
化合物の調製
化合物をＤＭＳＯに溶解した。ＤＭＳＯを用いて連続２倍希釈液を調製し、０．２５μｌを３８４ウェルの透明Ｇｒｅｉｎｅｒポリプロピレンプレートに分注した。
【０３６３】
ＰＢＭＣの調製
健康なヒト提供者から最大２００ｍｌの血液サンプルを採取した。Ｌｅｕｃｏｓｅｐチューブに入れた１５ｍｌ  Ｆｉｃｏｌｌのグラジエントに２５ｍｌ量の全血を重層し、１０００ｇで２０分遠心した。血漿／ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ界面にあるバンドの細胞を慎重に分離し、ＰＢＳで２回洗浄した（４００ｇで５分遠心して回収した）。最終ペレットを凍結用媒体（９０％加熱不活化血清、１０％ＤＭＳＯ）中に懸濁して４×１０７個／ｍｌの細胞濃度とした。その後、懸濁した細胞を速度制御フリーザーで凍結保存（冷凍）し、−１４０℃で最大４ヶ月間貯蔵した。
【０３６４】
インキュベーション及びインターフェロン−αアッセイ
アッセイ直前に、凍結保存（冷凍）ＰＢＭＣのバイアルを３７℃の水浴で急速解凍した。細胞をトリパンブルーで１：１０に希釈してカウントした。次にＰＢＭＣを増殖培地［１０％ウシ胎仔血清（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）、ペニシリン＋ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ社カタログ番号２５０３０−０２４、１：５０）、Ｌ−グルタミン２ｍＭ、及び１０００単位／ｍｌ組換えヒトＩＦＮ−γ（Ｐｒｅｐｒｏｔｅｃｈ社カタログ番号３００−０２）を含有するＲＰＭＩ１６４０］で１×１０６個／ｍｌの密度に希釈し、５０μｌ／ウェルを、０．２５μｌのＤＭＳＯ又は０．２５μｌのＤＭＳＯ中の試験化合物を加えた３８４ウェルの透明Ｇｒｅｉｎｅｒポリプロピレンプレートに分注した。化合物の最高最終濃度は（高活性化合物についてカーブフィット（曲線適合）を得るため）通常５０μＭ又は５μＭとした。プレートを５％ＣＯ２、３７℃で２４時間インキュベートした。
【０３６５】
ＰＢＭＣ上清中のＩＦＮ−αを定量するためにマルチアイソフォーム・イムノアッセイを用いた。ヒトＩＦＮ−αに対するウサギポリクローナル抗体（カタログ番号３１１０１、Ｓｔｒａｔｅｃｈ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）をアッセイ緩衝液（１０％ウシ胎仔血清を含むＲＰＭＩ１６４０、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）で１：１００００に希釈し、２０μｌをＭＳＤ（Ｍｅｓｏ−Ｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）社のシングルスモールスポット３８４ウェルＧＡＲ（ヤギ抗ウサギ抗体コーティング）プレートの各ウェルに加えた。そのプレートを激しく振とうしながら室温で１時間インキュベートした。ＰＢＳで３回洗浄した後、２０μｌの細胞上清をプレートの各ウェルに添加した。その後プレートを激しく振とうしながら室温で１時間インキュベートした。ＩＦＮ−αに対するモノクローナル抗体のペア（カタログ番号２１１００及び２１１１２、Ｓｔｒａｔｅｃｈ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）をｓｕｌｆｏ−ＴＡＧ（ＭＳＤ社）で標識し、アッセイ緩衝液で１：１０００に希釈して、２０μｌをプレートの各ウェルに加えた。プレートを激しく振とうしながら室温で１時間さらにインキュベートした。ＰＢＳで３回洗浄した後、３０μｌの×２Ｔ緩衝液（ＭＳＤ社）を各ウェルに加えて、プレートをＭＳＤ  Ｓｅｃｔｏｒ  ６０００プレートリーダーで読み取った。
【０３６６】
データは１μＭのレシキモド（resiquimod）（ｎ＝１６）及びＤＭＳＯ（ｎ＝１６）の内部プレート対照に対して標準化した。ｐＥＣ５０値は、試験化合物の２倍連続希釈１１ポイントから、ＡｃｔｉｖｉｔｙＢａｓｅのＩＲＬＳを用いて４パラメータ・カーブフィットにより誘導した。
【０３６７】
結果
実施例１〜２４の化合物は、平均ｐＥＣ５０が＞５であった。実施例１２、１３及び１９は平均ｐＥＣ５０が＞７．０であり、実施例２０〜２４はｐＥＣ５０が＞８．０であった。
【０３６８】
新鮮なヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を用いるインターフェロン−α及びＴＮＦ−α誘導アッセイ
化合物の調製
化合物をＤＭＳＯに溶解し、Ｂｉｏｍｅｋ２０００を用いてＤＭＳＯで連続希釈して１００×所要濃度範囲を得た。ＢｉｏｍｅｋＦＸを用いて、１μｌの試験化合物を９６ウェルの組織培養プレートに移した。提供者ごとに各化合物を２回反復してアッセイした。各プレートは標準としてＴＬＲ７／８アゴニストのレシキモド（resiquimod）の希釈系列を含み、１１列は１μｌの２００μＭレシキモドを含んでいた（２μＭの最終濃度を与え、レシキモドに対する近似最大応答を定めるために用いた）。
【０３６９】
ＰＢＭＣの調製
２人のヒト提供者から血液サンプルをヘパリンナトリウム（１０Ｕ／ｍｌ）中に採取した。Ｌｅｕｃｏｓｅｐチューブに入れた１５ｍｌ  Ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅの上に２５ｍｌ量の全血を重層し、８００ｇで２０分遠心して、血漿／ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅ界面のバンドを慎重に分離した。回収した細胞を２５００ｒｐｍで１０分遠心し、ペレットを１０ｍｌの培地［１０％ｖ／ｖウシ胎仔血清（ＦＣＳ、低エンドトキシン）、１００Ｕ／ｍｌペニシリンＧ、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン、１０ｍＭ  Ｌ−グルタミン及び１×非必須アミノ酸を添加したＲＰＭＩ１６４０（低エンドトキシン）］に再懸濁した。トリパンブルー及び血球計でカウントした細胞を用いて細胞の１：２０希釈液を調製した。ＰＢＭＣを希釈して２×１０６個／ｍｌの最終濃度とし、この細胞懸濁液１００μｌを、試験化合物の希釈液１μｌを含むウェルに加えた。
【０３７０】
インキュベーション並びにインターフェロン−α及びＴＮＦ−αのアッセイ
細胞調製物を２４時間（３７℃、９５％空気、５％ＣＯ２）インキュベートし、その後Ｂｉｏｍｅｋ  ＦＸを用いて上清のサンプルを取り出し、ＭＳＤ（Ｍｅｓｏｓｃａｌｅ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）社製の電気化学発光測定装置を用いてＩＦＮ−αとＴＮＦ−αの両方をアッセイした。ＩＦＮ−αアッセイは上記の方法と同様にして実施した。ＴＮＦ−αアッセイはキットの使用説明書（カタログ番号Ｋ１１１ＢＨＢ）の通りに実施した。
【０３７１】
放出されたサイトカインは、２μＭレシキモド対照（１１列）に対するパーセントとして表した。このパーセントを化合物濃度に対してプロットして、応答に対するｐＥＣ５０を非線形最小二乗カーブフィッティングにより求めた。ＩＦＮ−α応答に関しては、一般に４パラメータ・ロジスティックモデル（４  ｐａｒａｍｅｔｅｒ  ｌｏｇｉｓｔｉｃ  ｍｏｄｅｌ）を選択した。ＴＮＦ応答に関しては、明確な最大応答が得られた（すなわち、その応答に明確なプラトーが認められた）場合には、通常４パラメータモデルを採用した。曲線の上方漸近線が明確に定まらなかった場合には、一般にカーブフィッティングを１００％の最大応答（すなわち、２μＭレシキモドに対する応答）に制限し、また、試験した最高濃度の応答がレシキモドの応答より大きかった場合にはその最高濃度の応答に制限した。一部の曲線は一方又は両方のサイトカインについて釣鐘形をしており、その釣鐘形応答の下り勾配上のサイトカインデータ（すなわち、最大応答を与える濃度より高い濃度）は、通常ピーク応答のすぐ上の濃度を除いて、ほとんどの場合フィットから除外した。したがって、カーブフィッティングは用量応答曲線の上り勾配に集中していた。
【０３７２】
結果
実施例３、５、８、９、及び１６は、ＩＦＮ−α及びＴＮＦ−αの誘導に対して＞６及び＜５の平均ｐＥＣ５０をそれぞれ示し、実施例１２、１３、及び１４は、ＩＦＮ−α及びＴＮＦ−αの誘導に対して＞７及び＜６の平均ｐＥＣ５０をそれぞれ示した。