(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式１の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む、脱毛の予防・治療または育毛用組成物。
【化１】
0005511819.tif 000007
・・・（化学式１）
（式中、Ｒは、−ＣＯＲ１であり、Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ６アルキル基である。）
【請求項２】
前記組成物は、頭皮または毛髪で覆われた皮膚部位への局所適用に適することを特徴とする、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記組成物は、リポソーム、ナノエマルジョン、シャンプー、ヘアコンディショナー、またはヘアローションの剤型を有することを特徴とする、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
請求項１に記載の組成物を含む、脱毛の予防・治療または育毛用医薬品。
【請求項５】
請求項１に記載の組成物を含む、脱毛の予防・治療または育毛用医薬部外品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脱毛の予防・治療または育毛用組成物に係り、より具体的には、フィトスフィンゴシン−１−ホスフェート誘導体を含む養毛用または脱毛治療用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
男性の身体的特徴において、ポジティブな側面に該当する骨格筋の増加や生殖器の発達、精子形成、性的欲求などは、テストステロンの関与によって発生し、ネガティブな側面に該当するニキビ、皮脂の増加、脱毛、前立腺肥大症などは、当該組織へのジヒドロテストステロンの関与によって発生することが知られている。それらの中でも、男性に多く発生する脱毛について長い間研究が続けられてきたが、未だ脱毛および発毛のメカニズムに対しては正確に解明されていない。ところが、外貌を重視する現代社会では、益々脱毛の予防および治療の必要性が切実に求められている。
【０００３】
毛髪は、成長期、退行期および休止期の周期的な変化を規則的に繰り返す一つの生命体であって、各毛髪が独立に繰り返し生成・消滅しているので、常に一定の毛髪数を維持する。毛髪数は生れつき決まっているが、思春期以降の性ホルモンの影響による毛髪の成毛化過程を数の増加と勘違いする場合が多い。成長期は、毛嚢の活動と細胞分裂が盛んで毛髪が成長する時期であって、約２〜６年の期間を維持し、全体毛髪の約８５％がこれに該当する。成長期の毛球細胞は基質細胞からなる毛乳頭に包まれて円形をしており、新しい毛髪の生成のための細胞分裂が盛んな時期である。退行期は毛嚢の成長活動が停止して急速に萎縮する時期であり、この際の毛の模様は棍棒状に類似している。また、退行期は約２〜３週間進行し、全体毛髪の約５％がこれに該当する。休止期は、毛嚢の細胞活動が完全に消滅してしまった時期であって、２〜３ヶ月の期間を経る間に休止期の毛髪の基底部から新しく生えてきて成長する成長期の毛髪によって髪の毛が押し出されて脱落し、髪を梳かす、洗髪などといった機械的作用によって自然に抜ける。一般に、脱毛症とは、成長期の毛髪比率が少なくなり、退行期または休止期の毛髪比率が多くなって、非正常的に脱落する髪の毛の数が多くなることをいう。
【０００４】
このように、頭皮から毛髪が脱落する脱毛症の発生原因は様々であり、たとえば男性ホルモンの作用や精神的ストレス、頭皮における過酸化脂質の蓄積、薬物副作用、白血病または結核などの慢性疾患、放射線療法による副作用、栄養欠乏などがある。また、脱毛は一般に男性の悩みとして知られてきたが、最近では女性の脱毛や若い世代の脱毛の予防および治療に対する要求も高まってきた。
【０００５】
現在、毛髪成長および養毛剤として使用される薬物には、頭皮に十分な血液を循環させるための血管拡張剤や、男性ホルモンの作用を抑えるための女性ホルモン剤、テストステロンを５−ＤＨＴ（５−ｄｉｈｙｄｒｏｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ）に変換させる５α−レダクターゼを抑制する男性ホルモン活性抑制剤などがある。前記血管拡張剤としては塩化カプロニウム、ミノキシジルおよび各種植物抽出物などがあり、女性ホルモン剤としてはエストロゲン、エストラジオール、プロゲステロンなどがあり、男性ホルモン活性抑制剤としてはフィナステリド、ペンタデカン酸などがある。
【０００６】
ところが、前記脱毛治療剤の効果不十分もしくは副作用などにより、さらに効果的で安全な脱毛治療または育毛のための薬物の開発が求められている実情である。局所用または経口用に投与されるミノキシジルは、たとえば頭皮の紅斑、炎症、感染、刺激または疼痛といった皮膚への刺激があり、血圧降下効果があるので、血圧降下剤投与中の患者を含んだ高血圧患者には慎重な投与を必要とするなどの問題点がある。また、フィナステリドは、男性ホルモン活性抑制効果により発起不全や性欲減退などの欠点がある。
【０００７】
一方、フィトスフィンゴシンは、皮膚の角質層の脂質二重層を構成する要素のうち、４０％以上を占めているセラミド（ｃｅｒａｍｉｄｅ）を成す構成の一つである。よって、フィトスフィンゴシンは、体内に吸収されてセラミド合成を促進し、それ自体でも水分蒸発を防いで肌をしっとりと潤わせながら抗菌作用および皮膚鎮静作用もあって、保湿剤およびニキビ治療剤として使われている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
そこで、本発明者は、脱毛の治療または育毛に効果がある薬物の開発のために鋭意研究を重ねた結果、フィトスフィンゴシン−１−ホスフェート誘導体が脱毛の予防・治療および育毛に効果があることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
よって、本発明の目的は、フィトスフィンゴシン−１−ホスフェート誘導体を含む、脱毛の予防・治療または育毛用組成物を提供することにある。
【００１０】
本発明の他の目的は、前記脱毛の予防・治療または育毛用組成物を含む医薬品を提供することにある。
【００１１】
本発明の別の目的は、前記脱毛の予防・治療または育毛用組成物を含む医薬部外品を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
そこで、本発明者は、脱毛の治療または育毛に効果がある薬物の開発のために鋭意研究を重ねた結果、フィトスフィンゴシン−１−ホスフェート誘導体が脱毛の予防・治療および育毛に効果があることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
よって、本発明の目的は、フィトスフィンゴシン−１−ホスフェート誘導体を含む、脱毛の予防・治療または育毛用組成物を提供することにある。
【００１４】
本発明の他の目的は、前記脱毛の予防・治療または育毛用組成物を含む医薬品を提供することにある。
【００１５】
本発明の別の目的は、前記脱毛の予防・治療または育毛用組成物を含む医薬部外品を提供することにある。
【００１６】
上記目的を達成するために、本発明は、下記化学式１の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む、脱毛の予防・治療または育毛用組成物を提供する。
【００１７】
【化１】
0005511819.tif 000002
・・・（化学式１）
【００１８】
式中、Ｒは、水素または−ＣＯＲ１であり、Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ６アルキル基である。
【００１９】
また、本発明は、前記脱毛の予防・治療または育毛用組成物を含む医薬品を提供する。
【００２０】
また、本発明は、前記脱毛の予防・治療または育毛用組成物を含む医薬部外品を提供する。
【００２１】
以下、本発明をより詳細に説明する。
【００２２】
本発明において、全ての技術用語は、別途定義されない限り、本発明の関連分野における通常の当業者が一般に理解するのと同じ意味で使用される。また、本明細書には好適な方法または試料が記載されるが、これと類似または同等のものも本発明の範疇に含まれる。本明細書に参考文献として記載される全ての刊行物の全内容は本発明に参考として組み込まれる。
【００２３】
本発明者は、脱毛の予防・治療または育毛に効果がある物質を開発するために研究を行った結果、保湿剤およびニキビ治療剤として使用されているフィトスフィンゴシンの誘導体が、脱毛の予防・治療または育毛にミノキシジルと同等以上の効果がありながらも、従来のミノキシジルとは異なり、皮膚に対する刺激や高血圧患者には慎重に投与しなければならないなどの副作用がないため好ましいという事実を見出し、本発明に係る組成物を開発するに至った。
【００２４】
したがって、本発明のある観点によれば、下記化学式１の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む、脱毛の予防・治療または育毛用組成物を提供する。
【００２５】
【化１】
0005511819.tif 000003
・・・（化学式１）
【００２６】
式中、Ｒは、水素または−ＣＯＲ１であり、Ｒ１は、Ｃ１−Ｃ６アルキル基であり、好ましくは、Ｒは、水素またはＣ１−Ｃ３アルキル基である。
【００２７】
前記化学式１の化合物は、有機化学分野で公知の通常の知識を用いて製造することができ、たとえば、文献（Ｓ．Ｌｉ，Ｗ．Ｋ．Ｗｉｌｓｏｎ，Ｇ．Ｊ．Ｓｃｈｒｏｅｐｆｅｒ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｄ−ｒｉｂｏ−ｐｈｙｔｏｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ−１−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ａ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｍｏｄｕｌａｔｏｒ  ｏｆ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ，Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．４０：１１７−１２５，１９９９）に開示されている方法を用いて製造することができる。
【００２８】
前記化学式１の化合物が脱毛の治療・予防および育毛に効果を示すということは、下記実施例で立証された。具体的には、本発明の化合物に対してｂａｌｂ／ｃマウスを用いた育毛試験を行った。その結果、本発明の化合物は、現在ＦＤＡから脱毛治療剤として許可を受けて販売中のロゲイン５％（ミノキシジル５％液剤、ジョンソン・エンド・ジョンソン社）と同等以上の育毛効果を示した。また、本発明の化合物に対して新生血管の活性をＣＡＭ（ｃｈｏｒｉｏａｌｌａｎｔｏｉｃ  ｍｅｍｂｒａｎｅ）アッセイで測定し、陰性対照群としてのリン酸緩衝溶液、陽性対照群としてのスフィンゴシン−１−ホスフェート、および抑制対照群としての新生血管抑制剤ＴＭＰ（トリメチルフィトスフィンゴシン）と比較試験した。その結果、本発明の化合物は、新生血管生成の促進において著しく優れた結果を示した。よって、本発明の化学式１の化合物は、新生血管生成の促進によって脱毛の治療・予防および育毛に効果があるものと予想される。
【００２９】
本発明に係る前記組成物は、他の脱毛の予防・治療または育毛用薬物、または補助剤をさらに含んで複合製剤として使用できる。他の薬物または補助剤としてはレチノイン酸（ｒｅｔｉｎｏｉｃ  ａｃｉｄ）やミノキシジル（ｍｉｎｏｘｉｄｉｌ）、フィナステリド、亜鉛ペプチド、亜鉛オキシド、ビオチン、ゼニステイン、玉葱抽出物、カボチャ種子油、エミュー（Ｅｍｕ）油、緑茶抽出物、柳の皮抽出物などがあるが、これに限定されない。
【００３０】
本発明の前記組成物は、経口投与製剤、注射剤、座剤、経皮投与製剤、および経鼻投与製剤を含むが、これに限定されない任意の剤形に製剤化されて投与されてもよく、好ましくは頭皮または毛髪で覆われた皮膚部位への局所適用に適した形態に製剤化することができる。このような局所投与用製剤としては、リポソーム、ナノエマルジョン、シャンプー、ヘアコンディショナー、またはヘアローションなどがあり、これに限定されない。好ましくは、経皮吸収の増加により効果を促進させるために、リポソームまたはナノエマルジョンに製剤化する。前記組成物の製剤化の際に、薬剤学分野で公知になっているそれぞれの製剤の製造に適した、薬学的に許容される担体、希釈剤または添加剤を用いて製造することができる。
【００３１】
本発明の組成物は、前記化学式１の化合物を組成物全体に対して約０．１重量％〜１０重量％、好ましくは０．５重量％〜５重量％の範囲で含有することができ、化学式１の化合物の種類に応じて増減できる。
【００３２】
局所投与の際に、化学式１の化合物を脱毛の予防・治療または育毛のための部位に１日１回〜２回程度塗布することにより投与することができる。活性成分が１重量％のときを基準として１日塗布量は０．５〜３ｍｇ程度であり、塗布部位の面積に応じて増減できる。このような投与量および回数は患者の年齢、性別、脱毛の進行程度に応じて適切に増減して使用できる。
【００３３】
本発明に係る前記化学式１の化合物または薬学的に許容されるその塩は、脱毛の治療・予防または育毛に対する効果が優れるうえ、化学構造が簡単であって合成によって容易に製造できて経済的であり、リポソームやナノエマルジョンなどの脂質微粒球製剤への製剤化の際に毛嚢に容易に伝達できる。
【００３４】
また、従来から使用されてきた他の脱毛治療剤であるミノキシジルおよびフィナステリドに比べて皮膚刺激および副作用がないため、非常に好ましい。
【００３５】
前記本発明に係る化学式１の化合物を活性成分とする脱毛の治療・予防または育毛用組成物は、脱毛の治療・予防または育毛に効果がある医薬品または医薬部外品に完成品化することができる。
【００３６】
したがって、本発明の他の観点によれば、前記化学式１の化合物または薬学的に許容されるその塩を含む組成物、および薬学的に許容される担体または添加剤を含む医薬品または医薬部外品が提供される。
【発明の効果】
【００３７】
前述したように、本発明に係る脱毛の治療・予防または育毛用組成物は、優れる効果を示すのはもとより、リポソーム、ナノエマルジョンなどの脂質微粒球製剤への製剤化の際に毛嚢へ容易に伝達でき、従来から使用されてきた他の脱毛治療剤であるミノキシジルおよびフィナステリドに比べて皮膚刺激および副作用がないため、非常に好ましい。また、化学式１の化合物は、化学構造が簡単であって合成により容易に製造でき、経済的である。
【図面の簡単な説明】
【００３８】
【図１】ｂａｌｂ／ｃマウスの脇腹を除毛した後、Ｎ−アセチルフィトスフィンゴシン−１−ホスフェート（ＮＡＰＳ−１−Ｐ）含有リポソームを１日１回ずつ１４回塗布した後の結果を、非処理群と比較して撮影した写真である。
【図２】ｂａｌｂ／ｃマウスの脇腹を除毛した後、フィトスフィンゴシン−１−ホスフェート（ＰｈＳ−１−Ｐ）リポソームとＮＡＰＳ−１−Ｐリポソームを１日１回ずつ４週間塗布した後の結果を、対照群と共に比較して撮影した写真である。
【図３】ｂａｌｂ／ｃマウスの脇腹を除毛した後、ＮＡＰＳ−１−Ｐ０．５％含有リポソーム、ＮＡＰＳ−１−Ｐ１．０％含有リポソーム、および５％ミノキシジル液剤を１日１回ずつ４週間塗布した結果を、対照群と共に比較して撮影した写真である。
【図４】ＣＡＭアッセイ法を行う各段階を図式的に示したものである。
【図５】ＮＡＰＳ−１−Ｐ０．５％含有リポソーム、ＰｈＳ−１−Ｐ０．５％含有リポソーム、トリメチルフィトスフィンゴシン（ＴＭＰ）、およびリン酸緩衝液に対してＣＡＭアッセイを実施し、新生血管抑制効果を顕微鏡で観察した結果を撮影した写真である。
【発明を実施するための形態】
【００３９】
以下、本発明を下記実施例によってさらに具体的に説明する。ところが、これらの実施例は、本発明に対する理解を助けるためのものに過ぎず、本発明の範囲を限定するものではない。
【００４０】
＜実施例１：Ｎ−アセチルフィトスフィンゴシン−１−ホスフェート（ＮＡＰＳ−１−Ｐ）含有リポソームの製造（１）＞
Ｎ−アセチルフィトスフィンゴシン−１−ホスフェート（ＮＡＰＳ−１−Ｐ）を含有するリポソームを製造した。ＮＡＰＳ−１−Ｐは、文献（Ｓ．Ｌｉ，Ｗ．Ｋ．Ｗｉｌｓｏｎ，Ｇ．Ｊ．Ｓｃｈｒｏｅｐｆｅｒ，Ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  Ｄ−ｒｉｂｏ−ｐｈｙｔｏｓｐｈｉｎｇｏｓｉｎｅ−１−ｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ａ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｍｏｄｕｌａｔｏｒ  ｏｆ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ，Ｊ．Ｌｉｐｉｄ  Ｒｅｓ．４０：１１７−１２５，１９９９）に開示されている方法によって、Ｎ−アセチルフィトスフィンゴシンから製造して使用した。まず、７５％の大豆ホスファチジルコリン（Ｌｉｐｏｉｄ社）３ｇとＮＡＰＳ−１−Ｐ  ０．５ｇをエタノール２０ｇに溶解させた。メントール０．１ｇを溶かした蒸留水７６．４ｇを、ホスファチジルコリンとＮＡＰＳ−１−Ｐを溶かしたエタノール溶液にゆっくり添加した。添加するときに強く攪拌した。蒸留水をさらに添加し、１時間攪拌し続けた後、チップタイプソニケーターを用いて超音波処理し、しかる後に、０．２２μｍのメンブレンフィルターで濾過してＮＡＰＳ−１−Ｐ０．５％含有リポソームを製造した。ここに皮膚透過促進剤としてポロキサマー＋ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ２０）を付加して、本発明に係るナノエマルジョンを製造した。
【００４１】
＜実施例２：ＮＡＰＳ−１−Ｐ含有リポソームの製造（２）＞
ＮＡＰＳ−１−Ｐを０．５ｇの代わりに１．０ｇ使用する以外は実施例１と同様にして、ＮＡＰＳ−１−Ｐ１．０％含有リポソームを製造した。但し、牡丹の根皮抽出物および柳の皮抽出物の添加量に相当する分だけ蒸留水を少なく用いて、リポソームを製造した。
【００４２】
＜実施例３：ＮＡＰＳ−１−Ｐ含有リポソームの製造（３）＞
牡丹の根皮抽出物３ｇ、柳の皮抽出物５ｇおよび蒸留水を添加するときに一緒に付加し、ＮＡＰＳ−１−Ｐを１．０ｇ使用する以外は実施例１と同様にして製造した。但し、牡丹の根皮抽出物および柳の皮抽出物の添加量に相当する分だけ蒸留水を少なく用いて、リポソームを製造した。
【００４３】
＜実施例４：フィトスフィンゴシン−１−ホスフェート（ＰｈＳ−１−Ｐ）含有リポソームの製造（３）＞
ＮＡＰＳ−１−Ｐの代わりにフィトスフィンゴシン−１−ホスフェート（ＰｈＳ−１−Ｐ）を使用する以外は実施例１と同様にして、ＰｈＳ−１−Ｐ０．５％含有リポソームを製造した。
【００４４】
実施例１〜４で製造されたリポソームの組成を下記表１にまとめて示す。
【００４５】
【表１】
0005511819.tif 000004
【００４６】
＜実施例５：ＮＡＰＳ−１−Ｐ含有ナノエマルジョンの製造（１）＞
Ｎ−アセチルフィトスフィンゴシンを含有するナノエマルジョンを製造した。まず、７５％の大豆ホスファチジルコリン（Ｌｉｐｏｉｄ社）２ｇとＮＡＰＳ−１−Ｐ  ０．５ｇをエタノール１５ｇに溶解させた。その後、ＰＥＧ−８カプリリック／カプリックグリセリド（ＬＡＳ）１５ｇとイソプロピルミリステート３．０ｇを前記エタノール溶液に添加した。その後、メントール０．１ｇを溶かした蒸留水５７．４ｇを前記エタノール溶液に添加した後、軽く３０分〜１時間程度攪拌してナノエマルジョンを製造した。ここに皮膚透過促進剤としてポロキサマー＋ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ２０）を付加して、本発明に係るナノエマルジョンを製造した。
【００４７】
＜実施例６：ＮＡＰＳ−１−Ｐ含有ナノエマルジョンの製造（２）＞
ＮＡＰＳ−１−Ｐを０．５ｇの代わりに１．０ｇ使用する以外は実施例１と同様にして、ＮＡＰＳ−１−Ｐ１．０％含有リポソームを製造した。但し、ＮＡＰＳ−１−Ｐの含量が増えた分だけ蒸留水を少なく使用して、ナノエマルジョンを製造した。
【００４８】
＜実施例７：ＮＡＰＳ−１−Ｐ含有ナノエマルジョンの製造（３）＞
牡丹の根皮抽出物３ｇと柳の皮抽出物５ｇを蒸留水の添加時に一緒に付加し、ＮＡＰＳ−１−Ｐ  １．０ｇを使用する以外は実施例５と同様にして製造した。但し、牡丹の根皮抽出物および柳の皮抽出物の添加量に相当する分だけ蒸留水を少なく用いて、ナノエマルジョンを製造した。
【００４９】
＜実施例８：フィトスフィンゴシン−１−ホスフェート（ＰｈＳ−１−Ｐ）含有ナノエマルジョンの製造（３）＞
ＮＡＰＳ−１−Ｐの代わりにフィトスフィンゴシン−１−ホスフェート（ＰｈＳ−１−Ｐ）を使用する以外は実施例５と同様にして、ＰｈＳ−１−Ｐ０．５％含有ナノエマルジョンを製造した。
【００５０】
実施例５〜８で製造されたナノエマルジョンの組成を、下記表２にまとめて示す。
【００５１】
【表２】
0005511819.tif 000005
【００５２】
（実験例１）
＜Ｂａｌｂ／ｃマウスを用いた育毛試験（１）＞
５〜６週齢のｂａｌｂ／ｃマウスを購入して脇腹部分の毛を一部除去した後、除毛クリームを塗布して既存の毛を完全に除去した。完全に除毛されていないマウスは実験から排除した。除毛の後、無作為にマウスケージ当たり３匹ずつ飼育した。合計５ケージを用いた。
【００５３】
除毛の後に１日程度放置し、その後、実施例１で製造したＮＡＰＳ−１−Ｐ含有リポソームを除毛部位に１日１回ずつ塗布した。１４回塗布した後、非処理群と処理群の育毛の度合を比較した。１４回塗布した後で除毛部位を撮影した写真を、図１に示した。
【００５４】
図１の結果より確認できるように、非処理群では、毛が殆ど成長しておらず皮膚が外部に露出されているが、ＮＡＰＳ−１−Ｐ含有リポソームで処理した群では、除毛していない部分とほぼ区別が付かない程度に毛髪が成長している。よって、このような結果より、本発明に係る化合物が発毛を促進させることを明確に把握することができる。
【００５５】
（実験例２）
＜Ｂａｌｂ／ｃマウスを用いた育毛試験（２）＞
前記実施例で製造したＮＡＰＳ−１−Ｐ  ０．５％含有リポソーム（実施例１）、ＮＡＰＳ−１−Ｐ  １．０％含有リポソーム（実施例２）、およびＰｈＳ−１−Ｐ  ０．５％含有リポソーム（実施例４）に対して前記実験例１と同一の方式で育毛試験を行った。但し、１日１回ずつ塗布することを４週間持続した後、除毛した部位の写真を撮影した。陽性対照群として、ミノキシジル５％液剤の「ロゲイン５％」を用いた。その結果を、図２および図３に示す。
【００５６】
図２は、ＰｈＳ−１−ＰリポソームとＮＡＰＳ−１−Ｐリポソームを塗布した結果を対照群と共に比較して撮影した写真である。図３は、ＮＡＰＳ−１−Ｐ０．５％含有リポソーム、ＮＡＰＳ−１−Ｐ１．０％含有リポソーム、および５％ミノキシジル液剤を塗布した結果を対照群と共に比較して撮影した写真である。
【００５７】
図２の結果によれば、ＰｈＳ−１−ＰリポソームとＮＡＰＳ−１−Ｐリポソームの両方とも対照群に比べて毛髪成長促進効果があるが、ＮＡＰＳ−１−ＰがＰｈＳ−１−Ｐに比べて優れた毛髪成長促進効果を示すものと確認された。
【００５８】
図３の結果によれば、ＮＡＰＳ−１−Ｐリポソームは、０．５％に比べて１．０％含有リポソームの毛髪成長促進効果が優れることからみて、濃度の増加によって効果が良くなるものと確認された。また、ＮＡＰＳ−１−Ｐ１％リポソーム製剤は、脱毛治療剤として現在広く使われているミノキシジル５％液剤と同等以上の効果を有するものと確認された。
【００５９】
（実験例３）
＜新生血管生成能の測定＞
実施例１および実施例４でそれぞれ製造されたＮＡＰＳ−１−Ｐ  ０．５％含有リポソームおよびＰｈＳ−１−Ｐ  ０．５％含有リポソームを対象として、新生血管生成能を測定した。陰性対照群としてリン酸緩衝液を用い、陽性対照群としてスフィンゴシン−１−ホスフェート（ＰＳ−１−Ｐ）、抑制対照群として新生血管抑制剤のトリメチルフィトスフィンゴシン（ＴＭＰ）をそれぞれ用いて比較した。
【００６０】
新生血管生成能の測定はＣＡＭ（ｃｈｏｒｉｏａｌｌａｎｔｏｉｃ  ｍｅｍｂｒａｎｅ）アッセイで行った。この試験法は、新生血管の生成能を調べる一般な方法である。
【００６１】
鶏が産んで１日内の有精卵を購入し、３日後に、図４のｉ）に示すように卵白を注射器で６ｍＬ除去し、ｉｉ）に示すように卵の上部を開けるようにした。３日後には鶏の胚芽が発達するが、胚芽を包んでいる部分をＣＡＭという。その後、図４のｉｉｉ）に示すように、ＣＡＭ上に、試験薬物を点滴して乾かしたカバースリップをのせた。３日後、薬物による血管新生が起こったか否かを図４のｉｖ）のように顕微鏡で観察した。
【００６２】
ＮＡＰＳ−１−Ｐ  ０．５％含有リポソーム、ＰｈＳ−１−Ｐ  ０．５％含有リポソーム、ＴＭＰ、およびリン酸緩衝液に対して新生血管抑制効果を顕微鏡で観察した結果を、下記表３および図５に示す。
【００６３】
【表３】
0005511819.tif 000006
【００６４】
前記表３および図５から確認できるように、本発明に係る組成物の活性成分に該当するＰｈＳ−１−ＰおよびＮＡＰＳ−１−Ｐは、いずれも対照群に比べて新生血管生成能が高く、特にＮＡＰＳ−１−Ｐが最も高い新生血管生成能を示した。
【図４】
0005511819.tif 000008
【図１】
0005511819.tif 000009
【図２】
0005511819.tif 000010
【図３】
0005511819.tif 000011
【図５】
0005511819.tif 000012