(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
真菌または細菌によって生じる疾患に対して植物体を処置または保護するための、活性成分としての酵母細胞壁の使用。
【請求項２】
真菌または細菌に対する植物体の免疫防御を誘導または刺激するための、活性成分としての酵母細胞壁の使用。
【請求項３】
植物体またはその一部に対する、活性成分としての酵母細胞壁の適用を含んでなる、真菌または細菌によって生じる疾患に対する植物体の処置または保護のための方法。
【請求項４】
植物体またはその一部に対する、活性成分としての酵母細胞壁の適用を含んでなる、植物体の免疫防御を誘導または刺激するための方法。
【請求項５】
前記植物体が、禾本科植物および双子葉植物、一年生、越年生および多年生植物、野菜、コムギ、オオムギおよびイネを含む穀物、トウモロコシ、モロコシ、キビ、油料種子、エンドウ、ジャガイモ、ビート、サトウキビ、タバコ、木質植物、樹木、果樹もしくは果樹ではない、つる性植物、観賞植物から選択される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項６】
前記植物体が、果樹である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項７】
前記真菌が、アルテルナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）種属、アスコチタ（Ａｓｃｏｃｈｙｔａ）種、ボトリティス（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）種、ブレミア（Ｂｒｅｍｉａ）種、サーコスポラ（Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ）種、クラドスポリウム（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）種、コレトトリチューム（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ）種、エリシフェ（Ｅｒｙｓｉｐｈｅ）種、フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）種、グロエオスポリウム（Ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｕｍ）種、グイグナルディア（Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａ）種、ヘルミンゾスポリウム（Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ）種、マルソニナ（Ｍａｒｓｓｏｎｉｎａ）種、モリニア（Ｍｏｎｉｌｉａ）種、ミコスファエレラ（Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ）種、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｉｕｍ）種、ペロノスポラ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ）種、ペジキュラ（Ｐｅｚｉｃｕｌａ）種、フラグミディウム（Ｐｈｒａｇｍｉｄｉｕｍ）種、Ｐ．インフェスタンス（Ｐ．ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）を含むフィトフトラ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｏｒａ）種、Ｐ．ビチコラ（Ｐ．ｖｉｔｉｃｏｌａ）を含むプラスモパラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ）種、ポドスファエラ（Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ）種、Ｐ．ブラッシカエ（Ｐ．ｂｒａｓｓｉｃａｅ）を含むシュードセルコスポレラ（Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒｅｌｌａ）種、シュードペロノスポラ（Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ）種、シュードペジザ（Ｐｓｅｕｄｏｐｅｚｉｚａ）種、パクシニア（Ｐｕｃｃｉｎｉａ）種、Ｐ．グラミニス（Ｐ．ｇｒａｍｉｎｉｓ）、ピシウム（Ｐｙｔｈｉｕｍ）種、Ｒベタエ（Ｒ  ｂｅｔａｅ）を含むラムラリア（Ｒａｍｕｌａｒｉａ）種、リゾクトニア（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）種、クモノスカビ（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）種、リンコスポリウム（Ｒｙｎｃｈｏｓｐｏｒｉｕｍ）種、スクレロチニア（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ）種、セプトリア（Ｓｅｐｔｏｒｉａ）種、スファエロテカ（Ｓｐｈａｅｒｏｔｈｅｃａ）種、タフリナ（Ｔａｐｈｒｉｎａ）種、ウンシヌラ（Ｕｎｃｉｎｕｌａ）種、ウスティラゴ（Ｕｓｔｉｌａｇｏ）種およびベンツリア（Ｖｅｎｔｕｒｉａ）種から選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項８】
酵母細胞壁が、サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）種のものである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項９】
酵母細胞壁が、酵母細胞の溶解、続いて可溶性および不溶性画分の分離、次いで、「酵母細胞壁」と呼ばれる前記不溶性画分を回収することによって生成される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項１０】
前記不溶性画分が、遠心分離により前記可溶性画分を取り除くことによって回収される、請求項９に記載の使用または方法。
【請求項１１】
酵母細胞壁が脱脂される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項１２】
酵母細胞壁が１または数種の調合薬剤をさらに伴う、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項１３】
前記調合薬剤が、噴霧に適合し、かつ単独または混合された形で、界面活性剤、分散剤、保存剤、湿潤剤、乳化剤および粘着剤から選択される、請求項１２に記載の使用または方法。
【請求項１４】
酵母細胞壁が、殺真菌剤、抗ウイルス剤または抗細菌剤をさらに伴う、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項１５】
酵母細胞壁が、１つ以上の植物免疫防御エリシターをさらに伴う、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項１６】
感染のレベルおよび／または接種原の拡散を減少させることによって、植物衛生保護の全体的な有効性を増加させるための、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項１７】
部分的または完全な植物衛生保護を長期間得るための、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項１８】
酵母細胞壁が、乾燥または液体形態で濃縮された植物検疫組成物にある、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項１９】
酵母細胞壁が即時使用可能な組成物にある、請求項１〜１８のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項２０】
酵母細胞壁が、葉または土壌に噴霧することによって投与される、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項２１】
酵母細胞壁が、土壌に噴霧すること、機械的組み入れによって、根に投与され、肥料、土壌改良剤、プレミックスなどと混合される、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項２２】
酵母細胞壁が、植物体全体またはその一部に投与される、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項２３】
酵母細胞壁が、表面流去点まで噴霧することによって生成物が適用される場合、酵母細胞壁の１ｍｇ／ｌを超える有効量で、または少量の水を使用して噴霧する場合、１ｇ／ヘクタールを超える有効量で適用もしくは使用される、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項２４】
酵母細胞壁が、表面流去点まで噴霧することによって生成物が適用される場合、酵母細胞壁の１〜２５０ｍｇ／ｌを含んでなる有効量で、または少量の水を伴って噴霧する場合、１〜２５０ｇ／ヘクタールを含んでなる有効量で適用もしくは使用される、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項２５】
酵母細胞壁が、１つもしくは他のいくつかの処置の代わりにおよび／またはそれと組み合わせて使用される、請求項１〜２４のいずれか一項に記載の使用または方法。
【請求項２６】
活性物質のファミリーに対して耐性の真菌または細菌の発達を防止または制限する方法であって、
植物体が、前記活性物質のファミリーに対する耐性株の選択圧を減少させるため、または、活性成分としての酵母細胞壁による前記植物体の処置と交代もしくは組み合わせでの、前記活性物質のファミリーに由来する物質による植物体の処置において、活性成分としての酵母細胞壁によって処置される方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、真菌、ウイルスおよび細菌のような多様な病原因子に対して植物体を保護するための組成物ならびに方法に関する。本発明は、単独あるいは他の植物保護手段の代わりにおよび／またはそれと組み合わせて使用することができ、複数の植物種の処置に適切である。
【背景技術】
【０００２】
病原因子のうち、真菌性または隠花植物性疾患の原因である真菌は、最も大きな経済的影響を及ぼす。各植物種は、それらの生命力、成長ならびに究極的に作物の品質および／または量を強度に減少させることが可能である１つ以上の主要な疾患にかかり易い。
【０００３】
土壌条件および肥沃化、変異感受性、成長システム（先の作物、栽培、１ヘクタールあたりの植物体または種苗の数、剪定システムなど）、および特に気候条件のような多様なパラメータが疾患の発症に影響を及ぼす。しかし、これらのパラメータのいくつかに基づく措置は、一般的に、疾患によって生じる障害を十分に制限するには至らない。そのため、これらの障害を回避し、収穫量を最大にし、そして確保するために、栽培従事者らは、適切な時期に、作物保護製品、しばしば、保護物で作物を処置する。少なからず、使用される製品は化学物質である。それらのほとんどは、極めて効果的であるが、それらを使用する人に健康上の危険性を生じ、そして処置された生産物上、土壌中および排水中に残留物を残し得る。さらに、同じ代謝部位に作用する特定の殺真菌剤の反復使用は、株をこれらの殺真菌剤に対して耐性にする。
【０００４】
これに対抗するために、同じファミリーの農薬製品による１年間あたりの処置回数を制限し、異なる作用機序を有する化学物質のファミリーと交代させ、そして病原因子に不都合な他のすべての手段を使用する必要がある。
【０００５】
（発明の要約）
この状況において、植物疾患に対する代替的解決のための実際的かつ重要な必要性がある。理想的には、これらの解決は、現存の化学殺真菌剤とは異なる方法で作用すべきであり、生産物上および環境内において化学残留物を残すべきではなく、そしてそれを使用する人に対して、より安全かつ健康的であるべきである。植物体におけるこれらの病原因子、およびそれらの耐性株の発生を防止し、ならびに発達を制限し、そしてヒトおよび環境に対する危険性を制限するために、そのような処置は、単独あるいは現行の化学的処置もしくは他のすべての処置の代わりにおよび／またはそれと組み合わせて使用され得る。
【０００６】
本発明は、病原因子に対する植物体の処置または保護のための新規の組成物および方法を提供する。特に、本発明は、意外にも、酵母細胞壁が、病原因子による感染に対して植物体を効率的に保護する能力を有することを証明することに関与する。この効果は、単純に植物体を細胞壁に接触させることを介して、例えば、噴霧することによって、得られる。
【０００７】
得られる結果は、酵母細胞壁による植物体の処置が、植物体の処置された器官または処置された一部（接触点における直接作用）だけではなく、後に出現する任意の器官に対しても保護を提供することを示す。細胞壁は、植物体の内部を貫通して細胞液によって輸送され得ず、従って、それは、全身的作用ではない。同時に、そのような結果は、植物の免疫防御機構の誘導を示唆し、従って、１ヶ月もしくはそれ以上の長期間の保護、ならびに本発明の組成物および方法の多目的作用を想定することが可能である。
【０００８】
従って、本発明の１つの実施態様は、病原因子、特に、真菌、細菌もしくはウイルスによって生成されるかまたは生じる疾患に対して植物体を処置あるいは保護するための酵母細胞壁、または酵母細胞壁を含んでなる組成物の使用に関与する。
【０００９】
本発明の別の実施態様は、病原因子に対する植物の免疫防御を誘導もしくは刺激するための酵母細胞壁、または酵母細胞壁を含んでなる組成物の使用に関与する。
【００１０】
本発明はまた、酵母細胞壁または酵母細胞壁を含んでなる組成物を植物体もしくはその一部に適用することを含んでなる、病原因子、特に、真菌、細菌もしくはウイルスによって生成されるかまたは生じる疾患に対して植物体を処置あるいは保護するための方法に関する。
【００１１】
本発明のさらなる実施態様は、酵母細胞壁または酵母細胞壁を含んでなる組成物を植物体もしくはその一部に適用することからなる、（病原因子に対する）植物の免疫防御機構を誘導または刺激するための方法である。
【００１２】
以下の本文にさらに記載されているように、本発明は、すべてのタイプの植物、特に、禾本科植物および双子葉植物、一年生、越年生および多年生植物、野菜、コムギ、オオムギおよびイネを含む穀物、トウモロコシ、モロコシ、キビ、油料種子、エンドウ（ｐｒｏｔｅａｇｉｎｏｕｓ）、ジャガイモ、ビート、サトウキビ、タバコ、木質植物、樹木（果樹もしくは果樹ではない）、つる性植物、または観賞植物などに適用することができる。さらに、病原因子は、真菌、細菌、ウイルス、マイコプラズマ、スピロプラズマまたはウイロイドのような多様なタイプであり得る。
【００１３】
本発明において使用される酵母細胞壁は、任意の種の酵母、特に、サッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属、特に、出芽酵母（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）に由来することができ、そして以下の本文に記載の当業者に公知の技術、特に、自己消化、分離、濃縮などに従って入手または調製することができる。
【００１４】
本発明のさらなる実施態様は、酵母細胞壁を含んでなる（植物薬学的）組成物に関し、これは、植物体に投与もしくは適用することができるか、またはそれかもしくはその任意の特定の器官のみ、特に、葉、花、実、茎、幹または根と接触される。そのような組成物は、植物薬学的生成物として記載することができる。
【００１５】
前記組成物は、濃縮されたもしくは液体ではない、湿潤性のもしくは粉末ではない、分散性のまたは他のペレットの形態、あるいは処置、例えば、水もしくは他のキャリアにおける希釈、懸濁などの後に植物体の地上部もしくは土壌に噴霧すること、または植物体の根において溶液を供給することなどによって標的化される植物体の器官への酵母細胞壁の適用に適応した他のすべての形態であり得る。
【００１６】
好ましくは、本発明の組成物は、製剤、分散剤、安定化剤、界面活性剤などをさらに含んでなることができる。
【００１７】
本発明の別の目的は、殺真菌剤、抗ウイルス剤または抗細菌剤と組み合わされた酵母細胞壁を含んでなる（植物薬学的）組成物に関し、そのため、それらは、同時に、個々にまたは異なる時間に適用することができる。
【００１８】
本発明はまた、場合により、病原因子に対する別の効力のある処置の代わりにもしくはそれと組み合わせて、酵母細胞壁、または酵母細胞壁を含んでなる組成物の適用を含む植物体における病原因子によって生じる疾患を克服する方法に関する。
【００１９】
本発明はまた、活性物質の特定のグループに対して耐性な病原体の発達を防止または制限する方法に関し、ここで、植物体は、前記活性物質のグループに対する耐性株の選択圧を減少させるため、酵母細胞壁あるいは酵母細胞壁を含んでなる組成物によって処置される；またはここで、前記活性物質のグループ由来の物質による植物体の処置が、酵母細胞壁もしくは酵母細胞壁を含んでなる組成物による前記植物体の処置と交代または組み合わせられる。
【００２０】
本発明はまた、感染のレベルを減少させるおよび／または接種原の放出を制限することによって、植物衛生保護の全体的有効性を増加させるための酵母細胞壁を含んでなる組成物の使用に関する。
【００２１】
本発明はまた、例えば、少なくとも１ヶ月半の長期の一部的または完全な植物衛生保護を得るための酵母細胞壁を含んでなる組成物の使用を目的とする。
【００２２】
本発明はまた、消費可能な生産物中またはその上、作物または植物体の処置中の土壌および水中における農薬製品からの残留物の量を制限する方法に関する。本方法は、酵母細胞壁または酵母細胞壁を含んでなる組成物による前記作物もしくは植物の処置を含む。
【００２３】
本発明はまた、有機もしくは生態系農業における疾患を防止または処置するための酵母細胞壁あるいは酵母細胞壁を含んでなる組成物の使用に関する。
【００２４】
（発明の詳細な説明）
先に記載のように、本発明は、防止または治療として植物における病原因子を克服するための方法および生成物に関する。特に、本発明は、酵母細胞壁の有利かつ意外な特性の証明に依存し、そして病原因子によって生じる植物疾患の克服におけるそれらの使用を提案する。
【００２５】
本発明は、特に、酵母細胞壁が、本発明の組成物によって直接処置された植物体の器官または一部（即ち、それらは、接触部位において直接作用する）、およびまた、処置後に出現する植物の器官または一部をも保護することが可能であるという知見に基づく。細胞壁は、植物体を貫通して細胞液によって輸送され得ず、それは全身的作用ではない。しかし、植物体全体および新たに形成される器官に保護が拡散することは、β−アミノ酪酸、２，６−ジクロロイソニコチン酸、アシベンゾラル−ｓ−メチル、またはいくつかの藻類抽出物を使用する既知のもの（特許もしくは特許出願の仏国特許第２，８６８，２５３号明細書；国際公開第０３／０９２３８４号パンフレット；国際公開第９７／１４３１０号パンフレットおよび国際公開第９９／５３７６１号パンフレット）のような免疫防御機構の誘導または刺激を示唆し、そして１ヶ月もしくはそれ以上の長期間の保護、および本発明の組成物の多目的作用の考慮を可能にする。
【００２６】
さらに、本発明に従えば、酵母細胞壁は病原因子に直接影響を及ぼさないため、それらが耐性を引き起こす可能性は低い。
【００２７】
本発明において開示した結果は、精製された分子を使用する必要はないが、しかし、酵母細胞壁の成分が予め単離または分離されることなく、酵母細胞壁全体が活性であることを示しているため、特に意外なことである。さらに、酵母細胞壁のさらなる化学修飾の必要性がない。
【００２８】
従って、本発明は、病原因子によって生じる疾患に対する植物体の保護のための酵母細胞壁または酵母細胞壁を含んでなる組成物の使用に関する。
【００２９】
本発明はまた、病原因子に対する植物の免疫防御を誘導もしくは刺激するための酵母細胞壁または酵母細胞壁を含んでなる組成物の使用に関する。
【００３０】
本発明はまた、酵母細胞壁または酵母細胞壁を含んでなる組成物の植物、もしくはその一部への適用を含む、病原因子に対する植物の免疫防御を誘導または刺激する方法に関する。
【００３１】
本発明において使用される酵母細胞壁は、異なる種の酵母または可能ならばそれらの混合物から生成することができる。パン酵母が好適である。パン酵母は、参考書「Ｙｅａｓｔ  ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ」の第６章「Ｂａｋｅｒ’ｓ  ｙｅａｓｔ  ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ」において開示されるような増殖または好気的増殖によって必然的に生成されるサッカロマイセス（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）属に属する酵母である。酵母はまた、ビール酵母、醸造酵母または蒸留酵母であり得る。他のタイプの酵母、例えば、クリヴェロマイセス（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ）種、ピキア（Ｐｉｃｈｉａ）種、メシニコウィア（Ｍｅｔｓｃｈｎｉｋｏｗｉａ）種およびカンジダ（Ｃａｎｄｉｄａ）種群由来の酵母属も本発明に関して使用することができる。
【００３２】
酵母は、概してエンベロープおよび内容物からなる細胞である。エンベロープは「細胞壁」と呼ばれる。
【００３３】
酵母「細胞壁」と呼ばれる産業用生成物は、当該技術分野において公知の技術により、場合により、混合物として、異なるタイプの酵母から異なる方法で生成することができる。
【００３４】
本方法の特定の実施態様では、酵母細胞壁は、例えば、サッカロマイセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）の酵母細胞の溶解（自己消化または他者消化）、続いて、例えば、遠心分離のような物理的手段による可溶性および不溶性画分、次いで、不溶性画分を回収することによって生成することができる。この方法では、不溶性画分は、典型的に、遠心分離により可溶性画分を取り除くことによって回収される。不溶性画分は「酵母細胞壁」と呼ばれる。得られる可溶性画分は、澄明な色で僅かに濁りがあり、「酵母抽出物」と呼ばれる。
【００３５】
酵母の自己消化は、それ自体の酵素による酵母の細胞内容物の加水分解である。それは、典型的には、一定の物理学的な培地条件において酵母を懸濁することによって、および／または酵母の死およびその酵素の細胞体への遊離を生じる活性化因子との接触において、達成される。細胞内容物の加水分解は、可溶性化合物を生成する。この分離および回収される可溶性画分は「酵母抽出物」を構成する。前記分離工程から回収される不溶性画分は、「酵母細胞壁」として公知の生成物を構成する。この生成物は、酵母の細胞骨格、ならびに自己消化または他者消化により可溶化しなかった膜および成分を含む。不溶性画分は、一般的に、酵母細胞壁の水性懸濁液を介して回収され、その乾燥物含有量は、典型的に、１０〜１５％（重量／容積）である。細胞壁は、全酵母細胞の乾燥重量の約２５〜４５％、平均で約３５％に相当する。
【００３６】
細胞壁は、さらに、抽出または分画、例えば、脱脂のような化学処置に供することができる。本発明の好適な実施態様では、改変されていない、特に、そのような処置に供されない酵母細胞壁を使用することができる。
【００３７】
本発明では、同じタイプの酵母またはその異なるタイプもしくは種由来の酵母細胞壁または酵母細胞壁を含んでなる任意の組成物を使用することができる。
【００３８】
そのような生成物はまた、市販されており、特に、Ｂｉｏｓｐｒｉｎｇｅｒ  ＳＡ（Ｆ−９４  Ｍａｉｓｏｎｓ−Ａｌｆｏｒｔ）からのＳｐｒｉｎｇｃｅｌｌ８００１  ０ＰＷまたはＰｒｏｄｅｓａ（Ｂｒａ．Ｖａｌｉｎｈｏｓ）からのＰｒｏｎａｄｙがある。
【００３９】
本発明では、様々な程度の脱水を伴う酵母細胞壁を含んでなるすべての生成物を、原料物質として使用することができる。好適な実施態様では、酵母細胞壁の水性懸濁液が、好ましくは、２０％未満の濃度の乾燥物含有量、より好ましくは、１７％未満もしくは、さらに１４％でも使用される。好適な別の実施態様では、例えば、噴霧による液体懸濁液の乾燥から誘導され、そして８０％を超える、好ましくは、８５、９０、９３もしくは９５％を超える乾燥物含有量を含んでなる生成物が使用される。
【００４０】
本発明の特定の実施態様では、植物衛生（もしくは植物薬学的）組成物（または調製物）を、それらの適用のために液体または固体と混合されるように、多少濃縮して調製することができ、上記で規定したように有効成分として酵母細胞壁を含んでなる。職業的農業は、しばしば、噴霧のために水で希釈されるか、または仕上げられた土壌のための肥料または改善剤と混合される濃縮された植物衛生生成物を使用する。従って、特定の実施態様では、本発明の組成物は、乾燥または液体製剤における濃縮された植物衛生組成物である。
【００４１】
本発明の別の特定の実施態様では、場合により、液体または固体形態の即時使用可能な組成物が調製される。即時使用可能な製剤では、（酵母細胞壁を含んでなる）有効成分は、植物体に対する使用に適切なキャリア、例えば、噴霧器に充填するための液体、肥料、地下成長基質などと既に混合されている。
【００４２】
そのような生成物または組成物は、有効成分に加えて、任意の適応された調合薬剤を含むことができる。
【００４３】
それ故、本発明の特定の実施態様は、すべての組成物、特に、酵母細胞壁を含んでなる植物薬学的または植物衛生組成物に関する。
【００４４】
第１の実施態様に従えば、組成物は、乾燥組成物、例えば、粉末または顆粒である。
【００４５】
別の実施態様では、組成物は、液体組成物、好ましくは、水性液体である。それは、特に、懸濁液、ゲル、クリーム、ペーストなどであり得る。
【００４６】
好適な実施態様では、組成物は、１つ以上の調合薬剤をさらに含有する。一般的に、本発明に従う組成物は、有効成分の（重量で）約０．１％〜９９．９％および１つ以上の固体または液体調合薬剤を含有する。
【００４７】
調合薬剤は、輸送を可能にするか、または、輸送、有効成分の貯蔵、操作および／または植物体もしくはその一部への適用を容易にするかもしくは最適化するための任意の化合物あるいは任意の不活な物質からなり得る。そのような薬剤は本発明の目的に適切であり、有効な薬剤の保存、貯蔵中もしくは処置浸漬液の調製における使用中に懸濁液において細胞壁または他の活性物質を維持するための薬剤、抗コケ剤、抗ダスト剤、植物体に対する粘着剤などである。こうした薬剤は固体または液体であり得、そして単独または混合して使用される。
【００４８】
調合薬剤、および特に、噴霧に適したそれらのものは、界面活性剤、分散剤、保存剤、湿潤剤、乳化剤、粘着剤、緩衝剤などから選択することができ、そして単独または混合して使用することができる。
【００４９】
特定の実施態様では、組成物は、別の有効な薬剤、好ましくは、殺真菌剤、抗細菌剤または抗ウイルス剤をさらに含む。殺真菌剤は、例えば、有機農薬殺真菌剤あるいはイオウおよび／または銅に基づく無機鉱物殺真菌剤から選択することができる。
【００５０】
現在利用可能な有機農薬殺真菌剤の例には、特に、クロロタロニルを含むクロロニトリル類、マンコゼブのようなジチオカルバメート類を含むカルバメート類、カプタンを含むフタルイミド類、スルホンアミド類、グアニジン類、キノン類、キノリン類、チアジアジン類、アニリド類、ヒドロキシアニリド類、およびフェニルアミド類、イミダゾリノン類、オキサゾリジンジオン類、ストロビルリン類、シアノイミダゾール類、フルアジナム、ジノカップ、シルチオファム、ジカルボキシイミド類、フルジオキソニル、有機リン剤、プロパモカルブＨＣｌ、ジフェニルアミン、ピリジルアミン類、イミダゾール類、ピリミジン類、ヒドロキシピリミジン類、アニリノピリミジン類、トリアゾール類、スピロキサミン、モルホリン類およびピペリジン類を含むステロール生合成阻害剤（ＳＢＩ）、フェンヘキサミド、ヒメキサゾール、ゾキサミド、ジエトフェンカルブ、ベンゾイミダゾール類、ペンシクロン、キノキシフェン、イプロバリカルブ、シモキサニル、ジメトモルフ、ホスホン酸塩、トリアジン類などがある。
【００５１】
本発明はまた、植物防御のエリシターとして作用する１つ以上の成分、例えば、β−アミノ酪酸、２，６−ジクロロイソニコチン酸、アシベンゾラル−ｓ−メチル、またはいくつかの藻類抽出物（特許もしくは特許出願の仏国特許第２，８６８，２５３号明細書、国際公開第０３／０９２３８４号パンフレット；国際公開第９７／１４３１０号パンフレットおよび国際公開第９９／５３７６１号明細書）の代わりに、それと共同でまたは組み合わせて使用することができる。そのような化合物の例には、特に、ラミナリンおよびウルバン（ｕｌｖａｎ）類がある。
【００５２】
本発明の生成物または組成物は、異なる方法でおよび異なる処置プロトコルまたはプログラムに従って適用され得る。
【００５３】
好適な実施態様に従えば、生成物または組成物は、特に、葉の噴霧もしくは土壌粉砕によって適用される。
【００５４】
代替的には、生成物または組成物は、肥料、培養支持物、散水などとの混合として適用することができる。組成物はまた、肥料、土壌改良剤、プレミックスなどとの混合物として、土壌に噴霧すること、機械的組み入れによって、根に投与され得る。
【００５５】
それ故、本発明は、有効成分として酵母細胞壁を含んでなる任意の組成物、特に、植物薬学的（もしくは植物衛生）または即時使用可能なものに関する。そのような組成物は、例えば、噴霧または粉末形態で、特に、家庭内もしくは園芸用途のための植物に対する適用に適した１つ以上の賦形剤を有利に含んでなる。そのような組成物は、植物に対するそれらの同時、個別、または連続的適用のための１つ以上のさらなる有効な薬剤、例えば、殺真菌剤、抗細菌剤、抗ウイルス剤あるいは１つもしくはいくらかの肥料をさらに含んでなり得る。例えば、土壌取り込みのための肥料または培養支持物と混合された他の即時使用可能な組成物を使用することができる。
【００５６】
本発明の生成物または組成物は、植物体全体、またはその１つ以上の一部のみ、例えば、葉、茎、花、幹および／または根に適用することができる。それらはまた、作付けされているかもしくは作付けされていない（ｉｎ  ｃｒｏｄ  ｏｒ  ｎｏｔ）植物繁殖の材料、例えば、種苗、種子、または植物体に対して使用することができる。それらの作用機序により、本発明の生成物は、有意な期間、可能ならば１ヶ月以上の間、病原因子に対して効率的に植物を保護すべきである。反復適用は、選択された間隔で使用者により意図することができる。
【００５７】
適用される量は、特に、処置される病原因子、植物のタイプ、使用される組み合わせなどに依存して、当業者によって規定される。適用される量は、好ましくは、病原因子に対して植物体を保護するか、またはこの病原因子の発達および影響を制限または停止するのに十分である。この量は、例えば、耕地において試験することによって決定することができる。
【００５８】
本発明に従えば、組成物は、表面流去点まで噴霧するために生成物が使用される場合、１ｍｇ／ｌの酵母細胞壁を超える有効量で、または少量の水を伴って噴霧する場合、１ｇ／ヘクタールを超える有効量で適用もしくは使用される。好ましくは、有効量は、表面流去点まで噴霧するために生成物が使用される場合、１〜１０００ｍｇ／ｌの酵母細胞壁であり、またはさらに、他の場合、１〜１０００ｇ／ヘクタールである。
【００５９】
特定の実施態様では、組成物は、表面流去点まで噴霧するために生成物が使用される場合、１〜２５０ｍｇ／ｌの酵母細胞壁、好ましくは、２．５ｍｇ〜２５ｍｇ／ｌの有効量で、またはさらに、他の場合、例えば、少量の水を伴って噴霧する場合、１〜２５０ｇ／ヘクタール、好ましくは、２．５〜２５ｇ／ヘクタールの間の有効量で適用もしくは使用される。使用される用量とは別に、組成物は、多様な濃度で生成、輸送および／または販売され得る。この方法では、例えば、生成物が乾燥形態である場合、それは、９６重量％の酵母細胞壁を含有することができる。液体生成物は、乾燥材料において例えば、１３％酵母細胞壁を含んでなる懸濁された形態であり得る。生成物はまた、即時使用可能であり得、即ち、約２５ｍｇ／ｌの濃度で酵母細胞壁を含んでなる。本発明の生成物中またはそれらの適用中の有効な物質の濃度は、当業者によって適応され得、上記より高い用量が使用され得る。
【００６０】
さらに、先に記載のように、本発明の生成物および組成物は、１つ以上の他の処置の代わりにおよび／またはそれと組み合わせて使用することができる。
【００６１】
本発明はまた、抗真菌処置の代わりにもしくはそれと組み合わせて、酵母細胞壁、または酵母細胞壁を含んでなる組成物を植物体に適用することを含む、植物体において真菌によって生じる疾患を克服する方法に関与する。
【００６２】
本発明の１つの特定の実施態様は、抗細菌処置の代わりにもしくはそれと組み合わせて、酵母細胞壁、または酵母細胞壁を含んでなる組成物の植物体に対する適用を含む、植物体において細菌によって生じる疾患を克服する方法に関与する。
【００６３】
本発明の別の特定の実施態様は、殺真菌剤のファミリーに対する耐性病原体の発達を防止および制限するための方法に関し、ここで、植物体は、殺真菌剤の前記ファミリーに耐性な株の選択圧が減少されるため、酵母細胞壁、または酵母細胞壁を含んでなる組成物によって処置され、あるいはここで、殺真菌剤の前記ファミリー由来の物質による植物体の処置は、酵母細胞壁、または酵母細胞壁を含んでなる組成物の処置と交代されるかもしくは組み合わされる。
【００６４】
本発明の別の実施態様は、抗細菌剤のファミリーに対する耐性細菌株の発達を防止または制限するための方法に関し、ここで、植物体は、抗細菌剤の前記ファミリーに耐性な株の選択圧が減少されるため、酵母細胞壁、または酵母細胞壁を含んでなる組成物によって処置され、あるいはここで、抗細菌剤の前記ファミリー由来の物質による植物体の処置は、酵母細胞壁、または酵母細胞壁を含んでなる組成物の処置と交代されるか、もしくはそれと組み合わせて使用される。
【００６５】
本発明は、開放耕地、果樹園、森林、温室もしくは室内または園芸プラントにおける任意の植物体に適用することができる。本発明はまた、禾本科植物および双子葉植物、一年生、越年生および多年生植物、野菜、コムギ、オオムギおよびイネを含む穀物、トウモロコシ、モロコシ、キビ、油料種子、エンドウ、ジャガイモ、ビート、サトウキビ、タバコ、木質植物、樹木、果樹もしくは果樹ではない、つる性植物、観賞植物などに適用することもできる。
【００６６】
第１の特定の実施態様に従えば、植物は、果樹、例えば、特に、リンゴ樹木、ナシ樹木およびカンキツ樹木から選択される仁果類果樹である。
【００６７】
別の特定の実施態様では、植物は、つる性植物、穀物、特に、コムギ、カノーラ、ビート、ポテト、豆類、トマト、キュウリ、レタスまたはイチゴから選択される。
【００６８】
本発明は、任意の特定のタイプの植物に限定されず、すべての植物体に対して使用することができる。
【００６９】
本発明の方法は、すべてのタイプの病原因子、特に、真菌、ウイルス、細菌、マイコプラズマ、スピロプラズマまたはウイロイドを克服するために使用することができる。病原因子の若干の例として、真菌のアルテルナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）種属、例えば、Ａ．ソラニ（Ａ．ｓｏｌａｎｉ）、アスコキタ（Ａｓｃｏｃｈｙｔａ）種、例えば、Ａ．ファバエ（Ａ．ｆａｂａｅ）またはＡ．ピノデラ（Ａ．ｐｉｎｏｄｅｌｌａ）、ボトリティス（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）種、例えば、Ｂ．シネレア（Ｂ．ｃｉｎｅｒｅａ）、ブレミア（Ｂｒｅｍｉａ）種、例えば、Ｂ．ラクツカエ（Ｂ．ｌａｃｔｕｃａｅ）、サーコスポラ（Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ）種、例えば、テンサイ褐斑病菌（Ｃ．ｂｅｔｉｃｏｌａ）、クラドスポリウム（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）種、例えば、Ｃ．アリー・セパエ（Ｃ．ａｌｌｉｉ−ｃｅｐａｅ）、コレトトリチューム（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ）種、例えば、Ｃ．グラミニコラ（Ｃ．ｇｒａｍｉｎｉｃｏｌａ）、エリシフェ（Ｅｒｙｓｉｐｈｅ）種、例えば、Ｅ．グラミニス（Ｅ．ｇｒａｍｉｎｉｓ）、フザリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）種、例えば、Ｆ．オキシスポルム（Ｆ．ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）およびＦ．ロセウム（Ｆ．ｒｏｓｅｕｍ）、グロエオスポリウム（Ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｕｍ）種、例えば、Ｇ．フルクチゲヌム（Ｇ．ｆｒｕｃｔｉｇｅｎｕｍ）、グイグナルディア（Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａ）種、例えば、Ｇ．ビドウェリー（Ｇ．ｂｉｄｗｅｌｌｉｉ）、ヘルミントスポリウム（Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ）種、例えば、Ｈ．トリチシ・レペンチス（Ｈ．ｔｒｉｔｉｃｉ−ｒｅｐｅｎｔｉｓ）、マルスソニア（Ｍａｒｓｓｏｎｉｎａ）種、例えば、Ｍ．ロサエ（Ｍ．ｒｏｓａｅ）、モリニア（Ｍｏｎｉｌｉａ）種、例えば、Ｍ．フルクチゲナ（Ｍ．ｆｒｕｃｔｉｇｅｎａ）、ミコスファエレラ（Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ）種、例えば、Ｍ．ブラスシシコラ（Ｍ．ｂｒａｓｓｉｃｉｃｏｌａ）、ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｉｕｍ）種、例えば、リンゴ青カビ病菌（Ｐ．ｅｘｐａｎｓｕｍ）またはカンキツ緑カビ病菌（Ｐ．ｄｉｇｉｔａｔｕｍ）、ペロノスポラ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ）種、例えば、Ｐ．パラシチカ（Ｐ．ｐａｒａｓｉｔｉｃａ）、ペジキュラ（Ｐｅｚｉｃｕｌａ）種、フラグミディウム（Ｐｈｒａｇｍｉｄｉｕｍ）種、例えば、Ｐ．ルビ・イダエイ（Ｐ．ｒｕｂｉ−ｉｄａｅｉ）、Ｐ．インフェスタンス（Ｐ．ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）を含むフィトフトラ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｏｒａ）種、Ｐ．ビチコラ（Ｐ．ｖｉｔｉｃｏｌａ）を含むプラスモパラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ）種、ポドスファエラ（Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ）種、例えば、Ｐ．レウコトリカ（Ｐ．ｌｅｕｃｏｔｒｉｃｈａ）、Ｐ．ブラッシカエ（Ｐ．ｂｒａｓｓｉｃａｅ）を含むシュードセルコスポレラ（Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒｅｌｌａ）種、シュードペロノスポラ（Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ）種、例えば、Ｐ．クベンシス（Ｐ．ｃｕｂｅｎｓｉｓ）、シュードペジザ（Ｐｓｅｕｄｏｐｅｚｉｚａ）種、例えば、Ｐ．メディカギニス（Ｐ．ｍｅｄｉｃａｇｉｎｉｓ）、パクシニア（Ｐｕｃｃｉｎｉａ）種、Ｐ．グラミニス（Ｐ．ｇｒａｍｉｎｉｓ）、ピシウム（Ｐｙｔｈｉｕｍ）種、Ｒベタエ（Ｒ  ｂｅｔａｅ）を含むラムラリア（Ｒａｍｕｌａｒｉａ）種、リゾクトニア（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）種、例えば、Ｒ．ソラニ（Ｒ．ｓｏｌａｎｉ）、クモノスカビ（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）種、例えば、Ｒ．ニグリカンス（Ｒ．ｎｉｇｒｉｃａｎｓ）、Ｒ．セカリス（Ｒ．ｓｅｃａｌｉｓ）のようなリンコスポリウム（Ｒｙｎｃｈｏｓｐｏｒｉｕｍ）種、Ｓスクレオチオルム（Ｓ  ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）のようなスクレロチニア（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ）種、セプトリア（Ｓｅｐｔｏｒｉａ）種、例えば、Ｓ．ノドルム（Ｓ．ｎｏｄｏｒｕｍ）またはＳ．トリチシ（Ｓ．ｔｒｉｔｉｃｉ）、Ｓ．マクラリス（Ｓ．ｍａｃｕｌａｒｉｓ）のようなスファエロテカ（Ｓｐｈａｅｒｏｔｈｅｃａ）種、タフリナ（Ｔａｐｈｒｉｎａ）種、例えば、Ｔプルニ（Ｔ  ｐｒｕｎｉ）、ウンシヌラ（Ｕｎｃｉｎｕｌａ）種、例えば、Ｕ．ネカター（Ｕ．ｎｅｃａｔｏｒ）、ウスティラゴ（Ｕｓｔｉｌａｇｏ）種、例えば、Ｕ．トリチシ（Ｕ．ｔｒｉｔｉｃｉ）およびベンツリア（Ｖｅｎｔｕｒｉａ）種、例えば、Ｖ．イナエクアリス（Ｖ．ｉｎａｅｑｕａｌｉｓ）がある。
【００７０】
リンゴ樹木の腐敗病の原因である特定の病原因子は、リンゴ黒星病菌（Ｖｅｎｔｕｒｉａ  ｉｎａｅｑｕａｌｉｓ）である。
【００７１】
作物に影響を及ぼす細菌の例として、特に、種のコリネバクテリウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、クラビバクター（Ｃｌａｖｉｂａｃｔｅｒ）、クルトバクテリウム（Ｃｕｒｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ）、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、キサントモナス（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ）、エルビニア（Ｅｒｗｉｎｉａ）種および属、特に、Ｅ．アミロボラ（Ｅ．ａｍｙｌｏｖｏｒａ）、Ｅ．カロトボラ（Ｅ．ｃａｒｏｔｏｖｏｒａ）、Ｅ．クリサンテミ（Ｅ．ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉ）が挙げられる。作物に感染するウイルスの例には、例えば、タバコモザイクウイルスまたはポテトＹウイルスがある。
【００７２】
本発明の１つの特定の実施態様は、特に果樹における腐敗病、より詳細には、リンゴ樹木の腐敗病の処置のための酵母細胞壁または酵母細胞壁を含んでなる組成物の使用に関する。本発明の別の方法は、酵母細胞壁または酵母細胞壁を含んでなる組成物の適用を含む、特に果樹、より詳細には、リンゴ樹木における腐敗病の処置のための方法に関する。
【００７３】
本発明の別の実施態様は、前記植物、もしくはその一部に対する酵母細胞壁または酵母細胞壁を含んでなる組成物の適用を含む、特に果樹における腐敗病に対する植物の免疫防御機構を誘導または刺激する方法に関する。
【００７４】
本発明の別の実施態様は、殺真菌剤に対する耐性のベンツリア（Ｖｅｎｔｕｒｉａ）株の発達を防止または制限する方法に関し、ここで、前記殺細菌剤による植物体の処置は代わりに使用されるか、または酵母細胞壁もしくは酵母細胞壁を含んでなる組成物による前記植物の処置と組み合わせられる。特定の実施態様では、方法は、耐性のベンツリア・イネクアリス（Ｖｅｎｔｕｒｉａ  ｉｎｅｑｕａｌｉｓ）および／またはベンツリア・ピリナ（Ｖｅｎｔｕｒｉａ  ｐｉｒｉｎａ）株の発達を制限するために使用される。
【００７５】
本発明の別の特定の実施態様は、有機もしくは生態系農業における腐敗病を防止または処置するための酵母細胞壁あるいは酵母細胞壁を含んでなる組成物の使用に関する。
【００７６】
本出願の別の特定の実施態様は、特に、ビートにおけるセルコスポリシス（ｃｅｒｃｏｓｐｏｒｉｏｓｉｓ）の処置のための酵母細胞壁または酵母細胞壁を含んでなる組成物の使用に関する。本発明の別の実施態様は、植物もしくはその一部に対する酵母細胞壁または酵母細胞壁を含んでなる組成物の適用を含む、特に、ビートにおけるセルコスポリシス（ｃｅｒｃｏｓｐｏｒｉｏｓｉｓ）の処置のための方法に関する。
【００７７】
本発明の別の実施態様は、植物もしくはその一部に対する酵母細胞壁または酵母細胞壁を含んでなる組成物の適用を含む、特に、ビートにおけるセルコスポリシス（ｃｅｒｃｏｓｐｏｒｉｏｓｉｓ）に対する植物の免疫防御機序を誘導または刺激するために使用される方法に関する。
【００７８】
本発明の別の実施態様は、有機もしくは生態系農業におけるセルコスポリシス（ｃｅｒｃｏｓｐｏｒｉｏｓｉｓ）を防止または処置するための酵母細胞壁あるいは酵母細胞壁を含んでなる組成物の使用に関与する。
【００７９】
本発明の他の実施態様および利点を以下の実施例に示すが、これは例示であり、包括的なものとみなされるべきではない。
【実施例】
【００８０】
実施例１：リンゴ腐敗病に対して酵母の膜を使用する組成物の有効性の試験
腐敗病は、リンゴ樹木におけるリンゴ黒星病菌（Ｖｅｎｔｕｒｉａ  ｉｎａｅｑｕａｌｉｓ）による仁果類果樹に影響を及ぼす主な疾患である。
【００８１】
葉が処置されない場合、腐敗病は、作物の価値の７０％までについて収量および品質の消失をもたらし、これにより、樹木栽培者は、自らの果樹園を、シーズン全体を通して１０〜１５回の植物衛生処置で保護するようになり、重大な経済的および環境的影響が示唆される。
【００８２】
使用される有効成分の量は、リンゴ樹木に対して全体的に使用される有効な農薬成分の半分以上の寄与に相当し、１つの作物が植物衛生生成物のほとんどを使用する。そのような寄与は、土壌、水および果実自体において有意な量の残留物を発生する。
【００８３】
腐敗病に対して現在利用可能な処置は、４つのファミリーの生成物に分類することができる：
接触による生成物は、皮を貫通せず、従って、雨によって洗い落とされ易く、移動せず、そして処置後に出現する新たな器官が保護されず、このために、新たな器官（葉、果実）が発芽し、成長するため、再度処置する必要がある。
アニリノピリミジン類は一部的に貫通するが、処置後に出現する器官を保護せず、ベンツリア（Ｖｅｎｔｕｒｉａ）の耐性株を選択する。
ストロビルリン類は、僅かに植物体に移動可能であり、耐性株を発達させる。
ステロール生合成阻害剤（ＳＢＩ）は全身作用を有し、細胞液中に拡散する。従って、それらは、処置後に発達する器官を保護する。これらの生成物もまた、耐性を発達させる。
【００８４】
耐性を制限するには、ほんの２または３回の同じファミリー由来の農薬製品の使用およびファミリーの交代を必要とする。
【００８５】
これらの状況では、耐久性の効果を生成し、かつ何ら化学的残留物を提供しない、異なって作用する新規の組成物が、樹木栽培者、消費者および環境に現実的に有利である。
【００８６】
この第１の実施例は、腐敗病に対するリンゴ樹木の保護のための酵母細胞壁の有効性を実証する。
【００８７】
材料および方法
試験は、管理された条件下、リンゴ苗木の植え付け時に温室において行った。
【００８８】
放任受粉で採種した種子の集団を、砂を充填したペトリ皿において４℃で春化処理させ、９０〜１２０日間、飽和状態まで湿らせた。砂の湿気を１５日間ごとに維持した。
【００８９】
最初の種子の発芽から、種子を、プラスチック製４０×３０×１５ｃｍのシードトレイに、１トレイあたり６０個の種子を植え、そのうち５０個のみを試験のために保持した。種子を、肥料混合物（２ｋｇ／ｍ３のＮＰＫ７−７−１０および２ｋｇ／ｍ３のＮＰＫ１５−８−１２が緩徐に放出する）を含む園芸用土（ＤＣＭ社製ＣｏｍｂｉＴｒｅｅ  Ｂ  ＭＧ）を敷いて再水化されたピートプラグに置いた。
【００９０】
トレイを、園芸用土で再び覆い、湿らせ、そして１８℃の土壌に置く前に、１週間、約１０℃の温度で保持した。場合により、試験中、殺虫剤を使用した。
【００９１】
種苗を、３〜４枚の伸長した葉の段階から１週間空けて２回連続処置した。第２の処置の３日後に、病原体（リンゴ黒星病菌（Ｖｅｎｔｕｒｉａ  ｉｎａｅｑｕａｌｉｓ））を播種した。播種１４および２１日後に観察を行った。
【００９２】
統計的フレームワークは３回反復を含み、それぞれ５０種苗のトレイに対応させた。
【００９３】
試験では、それぞれ、２．５ｍｇ／ｌ、２５ｍｇ／ｌおよび２５０ｍｇ／ｌの細胞壁を添加した酵母細胞壁の３つの用量の水性懸濁液（脱塩水）ＯＹを、脱塩水で処置したコントロールと比較した。
【００９４】
ここで使用した細胞壁は、９６％細胞壁の乾燥物含有量を伴うＢｉｏｓｐｒｉｎｇｅｒ  ＳＡＳ由来のＳｐｒｉｎｇｃｅｌｌ８００１生成物（Ｍａｉｓｏｎｓ−Ａｌｆｏｒｔ、仏国）である。
【００９５】
【表１】
0005570726.tif 000002
【００９６】
処置は、手動の５００ｍｌ噴霧器（ＢＩＲＣＨＭＥＩＥＲ）を用いて、振盪後、噴霧することにより行った。表面流去点までに噴霧を停止した。処置の前日までに最後に新たに伸長した葉を「Ｆ１」と命名し、葉柄への固定リンクによって標識した。
【００９７】
組成物によって処置されていなかった、処置後最初に新たに形成または伸長した葉を、「Ｆ０」と呼んだ。この葉が形成されたが、しかし、処置時に伸長しなかった場合、それは、噴霧中に掩蔽した。処置の３日後に播種を行った。Ｆ０は、この期間中に少なくとも一部的に伸長した。
【００９８】
接種原のリンゴ黒星病菌（Ｖｅｎｔｕｒｉａ  ｉｎａｅｑｕａｌｉｓ）を以下のとおりに調製した。
【００９９】
夏季中、異なる果樹園から、斑点の生じた葉を回収した。２０日間の乾燥後、葉をプラスチックバック中に置き、−１８℃で冷凍した。使用日に、葉を、２００ｍｌの雨水を含んでなる１リットル瓶に置き、そして手動で１０分間振盪した。懸濁液を布でろ過し、そして得られた容積を測定した。
【０１００】
得られた分生子を、顕微鏡下、２カウントの２×１４４平方を伴うＢｕｅｒｋｅｒ血球計数器上で計数し、その平均を算出した。この分生子の数をＢｕｅｒｋｅｒの定数（２５０，０００）で乗じることにより、前日に行われた試験の結果生じた分生子発芽因子で補正された生存分生子数を得た。
【０１０１】
このデータに基づいて、胞子の懸濁液を希釈して、１ｍｌあたり１５０，０００の生存分生子を入手した。１０００植物体に播種するためには、約１リットルの懸濁液が必要である。
【０１０２】
１ｍｌあたり１５０，０００のベンツリア（Ｖｅｎｔｕｒｉａ）生存分生子の懸濁液を伴って手動で噴霧することによって、植物体に播種し、４８時間の飽和ミスト室に移した。
【０１０３】
スコアをＦ１およびＦ０に割り当てたが、これは葉表面の百分率としての葉の胞子形成表面を示す。
【０１０４】
５０植物体あたりの平均スコアを、それぞれの反復から算出した。それぞれのプロトコル（または方法）の３回反復の平均は、それぞれのプロトコルの平均を提供した。最終的に、アボット（Ａｂｏｔｔ）の式を用いて有効性を算出した：
有効性＝［（「水」スコア）−（試験した方法についてのスコア）］／（「水」スコア）
【０１０５】
結果
結果を以下の表２に示す。
【０１０６】
【表２】
0005570726.tif 000003
【０１０７】
結果は、本発明の生成物が、Ｆ１葉および処置後に形成するＦ０葉の両方について、胞子表面の有意な減少を誘導することが可能であることを示す。
【０１０８】
この最後の場合では、細胞壁は、植物体を貫通して細胞液によって輸送され得ず、従って、それは、おそらく全身的作用ではない。しかし、この結果は、植物の免疫防御機構の誘導を示唆する。
【０１０９】
実施例２：酵母細胞壁を含んでなる組成物の腐敗病に対する有効性の試験
ポットにおける接木植物体上で試験を行った。３つの種を使用した：Ｍ９根茎上に接木された「レネット・デ・キャプサン（Ｒｅｉｎｅｔｔｅ  ｄｅｓ  Ｃａｐｕｃｉｎｓ）」、「ジョナゴールド（Ｊｏｎａｇｏｌｄ）」、および「レネット・ド・ワレフ（Ｒｅｉｎｅｔｔｅ  ｄｅ  Ｗａｌｅｆｆｅ）」。それらがすべて、試験時間において同じ段階にあるように、植物体を、異なる時間においてプラスチックトンネル下で成長させた。レネット・ド・ワレフ（Ｒｅｉｎｅｔｔｅ  ｄｅ  Ｗａｌｅｆｆｅ）で開始し、次いで、１５日後に、レネット・デ・キャプサン（Ｒｅｉｎｅｔｔｅ  ｄｅｓ  Ｃａｐｕｃｉｎｓ）、次いで、１週間後に、ジョナゴールド（Ｊｏｎａｇｏｌｄ）とした。
【０１１０】
植物体を品種によって標識し、そして播種の前に処置の方法を受けさせた。
【０１１１】
処置の方法、接種原の調製、播種および観察は、実施例１に記載のものに類似する。
【０１１２】
植物体を、１０日間離して連続的に２回処置した。第２の処置の翌日、最後に伸長した葉「Ｆ１」を同定した。
【０１１３】
第２の処置の２日後、病原体（リンゴ黒星病菌（Ｖｅｎｔｕｒｉａ  ｉｎａｅｑｕａｌｉｓ））を、ミスト室において直接１．５×１０５分生子／ｍｌの用量を使用して、播種した。播種に続いて、ミスト室中、１８℃で４８時間のインキュベーションを行い、次いで、植物体を、１８±２℃の温度および８０±１０％の相対湿度を伴う箱に保持した。
【０１１４】
研究を以下のとおりに統括した：
【０１１５】
【表３】
0005570726.tif 000004
【０１１６】
ＯＹ２酵母細胞壁は、９６％細胞壁の乾燥物含有量を伴うＢｉｏｓｐｒｉｎｇｅｒ  ＳＡＳ由来の２５ｍｇ／ｌのＳｐｒｉｎｇｃｅｌｌ８００１生成物（Ｍａｉｓｏｎｓ−Ａｌｆｏｒｔ）、仏国）の水性懸濁液に相当する。
【０１１７】
最後の２枚の処置した葉（Ｆ２およびＦ１）の播種後２１日目に、ならびに１被験体あたり約２５枚の葉について処置後新たに形成される葉（Ｆ０）に対して観察を行った。結果を以下の表４に示す。
【０１１８】
【表４】
0005570726.tif 000005
【０１１９】
すべての品種およびすべてのタイプの葉に対する平均有効性は、６０．８％であり、Ｆ２およびＦ１処置の葉では平均で６８．８％、および新たに形成したＦ０葉では４６．６％であった。
【０１２０】
この有効性は、同じ期間においてＢＡＢＡにより達成されたものと同様であったが、しかし、それより常に高かった。
【０１２１】
処置後４１日での観察を、以下の結果に示した。
【０１２２】
【表５】
0005570726.tif 000006
【０１２３】
この時、新たな葉が伸長した。Ｆ−１およびＦ−２、ならびに疾患は、再播種を伴わない自然混入により進行した。
【０１２４】
平均有効性は、すべての品種およびすべてのタイプの葉について６３．４％を示した。それは、処置した葉、Ｆ１およびＦ２について７６％、および新たに形成した葉：Ｆ０、Ｆ−１およびＦ−２について５０％の平均に到達した。
【０１２５】
さらに、有効性は、同じ期間においてＢＡＢＡに類似するが、しかし、それより常に高い。
【０１２６】
農薬製品のそれ（７〜１５日間の間）を超える殺真菌効果の長期間の持続に留意することは重要である。
【０１２７】
実施例３：ビートにおけるセルコスポリシス（ｃｅｒｃｏｓｐｏｒｉｏｓｉｓ）に対する保護の試験
温室において、ビートにおけるセルコスポリシス（ｃｅｒｃｏｓｐｏｒｉｏｓｉｓ）に対する小規模試験を行った。この真菌性疾患は、テンサイ褐斑病菌（Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｂｅｔｉｃｏｌａ）によって生じる。
【０１２８】
セルコスポリシス（ｃｅｒｃｏｓｐｏｒｉｏｓｉｓ）に対するそれらの感受性が公知であるＦＯＲＴＩＳ品種のビート種子を発芽体に植え付けた。それらの出現時に、稚苗を、温室中のポットにおいて、２４℃、毎日１６時間の光期間を伴って、植えた。
【０１２９】
試験スケジュールは、方法（または目的）あたり２ブロック（２回反復）の８つの植物体からなった。
【０１３０】
植物体を、４葉段階において、酵母細胞壁を含んでなる溶液を葉に噴霧することによって、１回処置した。
【０１３１】
ＯＹと命名された溶液は、水性懸濁液中の酵母細胞壁（Ｂｉｏｓｐｒｉｎｇｅｒ  ＳＡＳ由来のＳｐｒｉｎｇｃｅｌｌ８００１、９６％細胞壁の乾燥物含有量を伴う）からなった。
【０１３２】
処置は、振盪後、手動の噴霧器を使用して、得られた溶液を噴霧することよりなった。ビートの４葉段階において行われた処置は、十分に発達した最後の２つの葉を標的化し、そして葉の両面は、表面流去点まで覆われた。
【０１３３】
処置した植物体を、基質の通例の散水によって維持された一定の湿度を伴う密閉した空間内に保持した。
【０１３４】
１週間後、６葉段階で、１ｍｌあたり２００００胞子のテンサイ褐斑病菌（Ｃ．ｂｅｔｉｃｏｌａ）株５２４の分生子懸濁液を、葉の両面に表面流去点まで噴霧することによって植物体に播種し、次いで、植物体を湿潤雰囲気で保持した。
【０１３５】
「Ｕｎｉｔｅ  ｄｅ  Ｐｈｙｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｅ  ｄｅ  ｌａ  Ｆａｃｕｌｔｅ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔａｉｒｅ  ｄｅ  Ｇｅｍｂｌｏｕｘ」（Ｂｅｌｇｉｕｍ）より提供されるテンサイ褐斑病菌（Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｂｅｔｉｃｏｌａ）の株５２４を、その積極的性質から選択した。この株を、個別化されたコロニーでＶ８培地上、ペトリ皿において培養した。増殖室中、２４℃の温度における５日間の暗所インキュベーション後、個別化されたコロニーを、３ｍｌの滅菌蒸留水を含有する滅菌試験チューブ中に回収した。次いで、得られた溶液をボルテックス撹拌し、病原体の分生子を遊離させた。次いで、分生子懸濁液を使用して、新たに調製したＶ８培地を含有する新しいペトリ皿に植えた。調製した培養物を、２４℃で、１６時間の光周期による増殖室においてインキュベートした。１週間のインキュベーション後、培養物を回収し、そして分生子懸濁液を、外科用メス刃を使用して培養物の表面を蒸留水中へ剥ぎ取ることによって、調製した。次いで、分生子懸濁液中の分生子の数を、Ｂｕｅｒｋｅｒ細胞チャンバを使用して計数し、そして分生子懸濁液を、１ミリリットルの蒸留水あたり２０，０００分生子に調整した。
【０１３６】
また、播種された植物体を高湿度で保持した。
【０１３７】
徴候の程度をＴｈｅ  Ｒｏｙａｌ  Ｂｅｌｇｉａｎ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｂｅｅｔ（ＩＲＢＡＢ）により使用される目視尺度を用いて１ヶ月後に評価した。それは、０〜９の１０個の数値で示し、９は、葉の表面の１００％が健康（病巣によって被覆されていない）であることを示し、０は葉の表面の０％が健康（病巣によって被覆されていない）であることを示す。
【０１３８】
処置は、以下の表６に記載の異なる濃度ＯＹ１、ＯＹ２、ＯＹ３を伴うＯＹと命名された細胞壁懸濁液を使用して行われる。
【０１３９】
【表６】
0005570726.tif 000007
【０１４０】
２回反復を平均した各方法に割り当てられたスコアを、以下の表７において報告する。
【０１４１】
【表７】
0005570726.tif 000008
【０１４２】
本実施例では、細胞壁は、「不良」の基準から「極めて良好」の平均的な障害基準にまで及ぶことが可能である。
【０１４３】
実施例４：セプトリア（ｓｅｐｔｏｒｉａ）に対するコムギの保護の試験
セプトリア（Ｓｅｐｔｏｒｉａ）（セプトリア・ノドルム（Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｎｏｄｏｒｕｍ）および／またはセプトリア・トリチシ（Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｔｒｉｔｉｃｉ））は、作物の４０％までの収量の損失を引き起こす欧州におけるコムギの主要な葉疾患である。化学的防除は、一般的に、２〜３節段階における全身処置、続いて出穂段階における処置からなる。
【０１４４】
本試験は、酵母細胞壁に基づく生成物の早期使用が疾患の出現を遅らせ、最初の化学処置に取って代わって農家および消費者に毒性学的レベル（残留物）および環境レベルでの便益性をもたらしうることを示す。
【０１４５】
材料および方法
試験は、仏国の開放耕地において、２００５年１０月６日に開始したオルバンティス（Ｏｒｖａｎｔｉｓ）品種の軟質冬コムギの作物に対して行った。
【０１４６】
試験は、ＣＥＢ方法Ｎ°Ｍ１８９（Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ  ｄｅｓ  Ｅｓｓａｉｓ  Ｂｉｏｌｏｇｉｑｕｅｓ，ｄｅ  ｌ’Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｆｒａｎｃａｉｓｅ  ｐｏｕｒ  ｌａ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｄｅｓ  Ｐｌａｎｔｅｓ，Ｐａｒｉｓ）に従い、適正実験実施（Ｇｏｏｄ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ）標準を尊重して行った。
【０１４７】
統計的フレームワークは、フィッシャー（Ｆｉｓｈｅｒ）の乱塊法よりなった。それぞれの方法は、４回反復からなり、それぞれ、８×２．５ｍ（２０ｍ２）の基本的なプロットに相当した。
【０１４８】
試験は、ＯＹと命名された水性懸濁液中で用いられた酵母細胞壁（ＢｉｏｓｐｒｉｎｇｅｒＳＡＳからのＳｐｒｉｎｇｃｅｌｌ８００１、９６％細胞壁の乾燥物含有量）の効果を、それらがセプトリオサ（ｓｅｐｔｏｒｉｏｓａ）に対する処置プログラムの開始時に用いられた場合に比較することを目的とした。
【０１４９】
ここで用いられる化学対照は、１Ｌ／ヘクタールで使用されるＯｐｕｓ（エポキシコナゾール１２５ｇ／Ｌ、ＢＡＳＦ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）である。
【０１５０】
処置は、２．５０ｍの噴霧ブームによって供給される手押し車噴霧器を使用して、２００Ｌ／ヘクタールで行った。
【０１５１】
使用した方法に依存して、処置プログラムは、以下の表に示されるように変動した。すべての方法は、第１の処置の４０日後に、Ｏｐｕｓ  １Ｌ／ヘクタールを受け入れた。
【０１５２】
【表８】
0005570726.tif 000009
【０１５３】
セプトロシス（ｓｅｐｔｏｒｏｓｉｓ）発病の頻度および強度を評価するために、試験期間に５回の観察を行った。
・観察１：Ｔ１における２００６年４月４日（ＢＢＣＨ３１）：１ｃｍの穂の段階
・観察２：Ｔ３における２００６年４月２８日（ＢＢＣＨ３２）：第２の節段階；
・観察３：Ｔ４における２００６年５月１５日（ＢＢＣＨ３９）：最後の葉の開放段階。
・観察４：Ｔ４における２００６年５月２９日＋１５日間（ＢＢＣＨ５５）：中期出穂段階
・観察５：ＢＢＣＨ７１における２００６年６月２２日：水性穀粒段階。
【０１５４】
従って、試験スケジュールは、以下のとおりである（Ｎ＝観察）：
【表９】
0005570726.tif 000010
【０１５５】
各観察について、頻度および強度は、３葉段階（Ｆ１、Ｆ２、Ｆ３）において決定され、ここで、Ｆ１は２５本の無作為に選択された葉柄について完全に開くまでの最後の葉を指す。
【０１５６】
頻度は、セプトリオサ（ｓｅｐｔｏｒｉｏｓａ）に罹患した葉の百分率に相当する。
【０１５７】
強度は、疾患に罹患した葉表面の平均百分率に相当する。
【０１５８】
２５の葉柄の平均を、各反復について算出した。各方法について４回反復の平均は、各方法についての平均を生じる。最後に、アボット（Ａｂｏｔｔ）の方法を使用して、有効性を算出した。
【０１５９】
結果
最初の４回の観測において、疾患の強度は弱いままであった（非処置コントロールにおいて＞３％）。ＯＹ方法の有効性においては、統計的有意性が認められなかった。５回目の観測時に、疾患が認められ、その強度はＦ３葉における非処置コントロールについて９５％より高かった。
【０１６０】
この時、結果、差異の程度、および有効性の百分率は以下のとおりである：
【０１６１】
【表１０】
0005570726.tif 000011
【０１６２】
結果は、第１の処置の８０日後にＦ１およびＦ２における疾患の強度の有意な減少を示し、使用したＯＹ用量に関係しない。さらに、ＯＹによるＦ１およびＦ２についての観察された平均有効性は、すべて、Ｏｐｕｓ化学対照で観察されたものに統計的に等価である。
【０１６３】
実施例５：炭疽病（ａｎｔｈｒａｃｎｏｓｅ）に対するエンドウ（ｐｒｏｔｅａｇｉｎｏｕｓ  ｐｅａ）の保護の試験
炭疽病（Ａｎｔｈｒａｃｎｏｓｅ）は、エンドウに影響を及ぼす主要な葉疾患の１つであり、穀粒の収量を強度に減少させる。それは、真菌アスコキタ・ピシ（Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ｐｉｓｉ）によって生じる。
【０１６４】
材料および方法
試験は、仏国の開放耕地において、３月２２日に開始したルミナ（Ｌｕｍｉｎａ）品種の春エンドウの作物に対して行った。
【０１６５】
試験は、ＣＥＢ方法Ｎ°Ｍ２１５（Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ  ｄｅｓ  Ｅｓｓａｉｓ  Ｂｉｏｌｏｇｉｑｕｅｓ，ｄｅ  ｌ’Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｆｒａｎｃａｉｓｅ  ｐｏｕｒ  ｌａ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ  ｄｅｓ  Ｐｌａｎｔｅｓ，Ｐａｒｉｓ）に従い、適正実験実施（Ｇｏｏｄ  Ｅｘｐｅｒｉｅｍｅｎｔａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ）標準を尊重して行った。
【０１６６】
統計的フレームワークは、フィッシャー（Ｆｉｓｈｅｒ）の乱塊法からなる。それぞれの方法は、４回反復からなり、それぞれ、８×２．５ｍ（２０ｍ２）の基本的なプロットに対応した。
【０１６７】
試験は以下のものを含む：
・２つのコントロール：１つの乾燥コントロールおよび１つの水で処置されたコントロール：方法１および２
・２回適用された１つの化学対照（Ｄｉｔｈａｎｅ  Ｎｅｏｔｅｃ：マンコゼブ７５％、Ｄｏｗ  Ａｇｒｏｓｃｉｅｎｃｅ）：方法３
・ＯＹと命名された、異なる濃度を伴う水性懸濁液において使用される酵母細胞壁（Ｂｉｏｓｐｒｉｎｇｅｒ  ＳＡＳからのＳｐｒｉｎｇｃｅｌｌ８００１、９６％細胞壁の乾燥物含有量）による３つの方法、方法４〜６：
○方法４：２５ｇ／ヘクタール
○方法５：２５０ｇ／ヘクタール
○方法６：２５ｇ／ヘクタール、次いで、２５ｇ／ヘクタールの、１週間離した２つの処置
【０１６８】
処置は、２．５０ｍの噴霧ブームによって供給される手押し車噴霧器を使用して、２００Ｌ／ヘクタールで行った。
【０１６９】
第１の適用は、７〜８葉段階において２００６年５月１７日に行った。
【０１７０】
人工的混入を、ＡＲＢＩＯＴＥＣＨ社より提供されるオオムギ穀粒（２０ｋｇの穀粒／１０００ｍ２）においてアスコキタ・ピシ（Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ｐｉｓｉ）の菌糸体および新鮮胞子を使用して、２００６年５月１９日に行った。
【０１７１】
処置を以下のとおりに適用した：
【０１７２】
【表１１】
0005570726.tif 000012
【０１７３】
葉における炭疽病（ａｎｔｈｒａｃｎｏｓｅ）の発病の頻度および強度を評価するために、ＢＢＣＨ６７段階（開花段階）において２００６年６月１０日に観察した。
【０１７４】
従って、試験スケジュールは、以下のとおりである（Ｎ＝観察）：
【０１７５】
【表１２】
0005570726.tif 000013
【０１７６】
観察中、頻度および強度を、基本的プロットに対し、２５の葉柄について３葉段階（低−中−高）で評価した。
【０１７７】
頻度は、疾患に罹患した葉の百分率に対応する。
【０１７８】
強度は、罹患した葉表面の平均百分率に対応する。
【０１７９】
２５の葉柄の平均を、各反復について算出した。各方法について４回反復の平均は、各方法についての平均を生じる。最終的に、アボット（Ａｂｏｔｔ）の方法を用いて有効性を算出した。
【０１８０】
方法間の差異の有意性を決定するため、分散を分析し、そしてノイマン−ケウルス（Ｎｅｕｍａｎ−Ｋｅｕｌｓ）検定を行った（同じ文字：５％の危険率で同一の結果；異なる文字：５％の危険率で異なる結果）。
【０１８１】
結果
人工的混入にもかかわらず、炭疽病（ａｎｔｈｒａｃｎｏｓｅ）感染は、かなり弱いままであった（非処置コントロールにおいて強度＜８％）。
【０１８２】
有効性についての観察、結果および百分率を以下の表に示す。
【０１８３】
【表１３】
0005570726.tif 000014
【０１８４】
高レベルはすでに発病されなかったため、評価は低および中レベルに関する。試験したＯＹの用量の全ては、化学対照のそれと等価な有効性を提供した。
【０１８５】
実施例６：オイジウム（ｏｉｄｉｕｍ）（エリシフェ・ネカトル（Ｅｒｙｓｉｐｈｅ  ｎｅｃａｔｏｒ））に対するつる性植物の保護の試験
オイジウム（Ｏｉｄｉｕｍ）（ウンシヌラ・ネカトル（Ｕｎｃｉｎｕｌａ  ｎｅｃａｔｏｒ）、エリシフェ・ネカトル（Ｅｒｙｓｉｐｈｅ  ｎｅｃａｔｏｒ））は、つる性植物の領域およびタイプに依存して異なる強度を伴うすべてのブドウ園に存在する、つる性植物の真菌性疾患である。それは、世界中で最も広範に知られている、つる性植物疾患である。オイジウム（Ｏｉｄｉｕｍ）は、つる性植物のすべての器官で発病し、極めて顕著な保護の消失を生じ得る。
【０１８６】
材料および方法
試験を、温室、ポットにおいて、サンソー（Ｃｉｎｓａｕｔ）品種の稚苗に対して行った。条件を調節し、混入を人工的に行った。
【０１８７】
種苗を、温室で１芽挿しから成長させ、そして均質な組を作製した。
【０１８８】
統計的フレームワークは、各１つずつのポットを伴う６つの反復を含んでなる。平均から最も遠い結果を有する反復は解析中に除いた。
【０１８９】
処置を、非空気補助スプレーおよび植物体全体を被覆する一定圧を伴うスプレーベンチを使用して行い、そして１つの同じ組における植物体を同時に処置した。ベンチは、一定の速度でレール上を移動するスプレートロリーからなり、５つのノズル（各側に２つおよび植物体の下方に１つ）を含んだ。処置の容積は、１ヘクタールあたり６００リットルに等価であった。
【０１９０】
処置中、葉のレベルを、新たに形成された葉（処置後に形成された）に対する処置の効果の観察を可能にするために、十分に発達した第３の葉の下に固定された着色されたリンクによりマークした。
【０１９１】
処置を、人工混入の１４または７日前に適用した。１組の植物を、混入の１４日前、次いで７日前に２回処置した。
【０１９２】
試験した生成物は、ＯＹと命名された水性懸濁液中で使用した酵母細胞壁（Ｂｉｏｓｐｒｉｎｇｅｒ  ＳＡＳからのＳｐｒｉｎｇｃｅｌｌ８００１、９６％細胞壁の乾燥物含有量を伴う）であった。
【０１９３】
４つの用量について試験した：
・用量Ｎ／１０：２．５ｇ／ヘクタール
・用量Ｎ：２５ｇ／ヘクタール
・用量２Ｎ：５０ｇ／ヘクタール
・用量１０Ｎ：２５０ｇ／ヘクタール
【０１９４】
用量を、以下の処置スケジュールに従って試験した：
【０１９５】
【表１４】
0005570726.tif 000015
【０１９６】
真菌材料は、殺真菌剤に対して正常な感受性を伴う株由来の分生子からなった。
【０１９７】
試験におけるすべての植物体を、プレキシグラス播種塔内の植物体上の胞子の乾燥散布により混入処理した。
【０１９８】
用いられた真菌材料は、生存している葉または植物体上で予め大量に倍化させたオイジウム（ｏｉｄｉｕｍ）由来の胞子からなった。用いられた接種原は、つる性植物オイジウム（ｏｉｄｉｕｍ）について１２〜１４日齢であった。播種の量を、播種塔内部の植物体のレベルで置いたマラッセ（Ｍａｌａｓｓｅｚ）細胞を用いて確認した。１ｃｍ２あたり８００〜１０００胞子の密度を使用した。
【０１９９】
全ての植物は、それらの混入処置後、昼間に１４時間の明期を伴う２１±２℃の気候室においてインキュベーションに供した。各試験条件を、小型の封入物において、他のものから全体を単離した。
【０２００】
植物体をこの条件で１４日間保持した。この期間の終了時に、真菌の障害を観察した。
【０２０１】
観察
より高い葉レベルＦ２、Ｆ１およびＦ０（処置後に形成される葉）の葉をスコアに割り当てた。各葉を、目視観察によって評価した。すべての葉が罹患したため、頻度（疾患に罹患した葉の百分率）を示さなかった。強度（罹患した葉表面の平均百分率）を、０〜１００の尺度で評価した。
【０２０２】
平均強度に基づいて、アボット（Ａｂｏｔｔ）の方法を使用して有効性を算出し、そして分散を分析した。てノイマン−ケウルス（Ｎｅｕｍａｎ−Ｋｅｕｌｓ）検定は、方法間の差異の有意性の評価を可能にした（同じ文字：５％の危険率で同一の結果；異なる文字：５％の危険率で異なる結果）。
【０２０３】
結果
【０２０４】
【表１５】
0005570726.tif 000016
【０２０５】
播種１４日前の単回適用は葉を保護しなかった。
【０２０６】
しかし、混入７日前に行われた適用は、オイジウム（ｏｉｄｉｕｍ）に対して保護効果を示した。用量が強度であるほど（５０ｇ／ｈａヘクタールにおいて２Ｎおよび２５０ｇ／ヘクタールにおいて１０Ｎ）、より強力な効果を示した。
【０２０７】
播種１４日前の２５ｇ／ヘクタール（用量Ｎ）の適用、それに続く、播種７日前の同一の適用は、優れた結果を生じた。
【０２０８】
実施例７：べと菌（ｄｏｗｎｙ  ｍｉｌｄｅｗ）（プラスモパラ・ビチコラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ  ｖｉｔｉｃｏｌａ））に対するつる性植物の保護の試験
ミルデュー（Ｍｉｌｄｅｗ）は、真菌（プラスモパラ・ビチコラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ  ｖｉｔｉｃｏｌａ））由来である。世界中のほとんどのブドウ園で多様な程度で存在し、それが処置されない場合、それは、全壊点まで作物の収量および品質を害する。
【０２０９】
材料および方法
試験を、温室、ポットにおいて、カルベネ・ソーヴィニオン（Ｃａｂｅｒｎｅｔ−Ｓａｕｖｉｇｎｏｎ）品種の稚苗に対して行った。試験条件を制御し、混入を人工的に行った。
【０２１０】
植物体を、温室で１芽挿しから生成させ、そして均質な組を作製した。
【０２１１】
統計的フレームワークは、各１つずつのポットを伴う６つの反復を含む。平均から最も遠い結果を有する反復を解析中に除いた。
【０２１２】
処置を、非空気補助スプレーおよび植物体全体を被覆する一定圧を伴うスプレーベンチを使用して行い、そして１つの同じ組における植物体を同時に処置した。ベンチは、一定の速度でレール上を移動するスプレートロリーからなり、５つのノズル（各側に２つおよび植物体の下方に１つ）を含んだ。処置の容積は、１ヘクタールあたり６００リットルに等価であった。
【０２１３】
処置中、葉のレベルを、新たに形成された葉（処置後に形成された）に対する処置の効果の観察を可能にするために、十分に発達した第３の葉の下に固定された着色されたリンクによりマークした。
【０２１４】
処置を、人工混入の１４または７日前に適用した。植物の組を、混入の１４日前、次いで７日前の２回、処置した。
【０２１５】
試験した生成物は、ＯＹと命名された水性懸濁液中で使用した酵母細胞壁（Ｂｉｏｓｐｒｉｎｇｅｒ  ＳＡＳからのＳｐｒｉｎｇｃｅｌｌ８００１、９６％細胞壁の乾燥物含有量を伴う）であった。
【０２１６】
４つの用量について試験した：
・用量Ｎ／１０：２．５ｇ／ｈａ
・用量Ｎ：２５ｇ／ｈａ
・用量２Ｎ：５０ｇ／ｈａ
・用量１０Ｎ：２５０ｇ／ｈａ
【０２１７】
用量を、以下の処置スケジュールに従って試験した：
【０２１８】
【表１６】
0005570726.tif 000017
【０２１９】
殺真菌剤に本来感受性である株プラスモパラ・ビチコラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ  ｖｉｔｉｃｏｌａ）由来のスポロシストの懸濁液を噴霧することによって、植物体に同時に播種した。
【０２２０】
スポロシスト懸濁液は、混入の直前に調製した。入れ替えた水で感染した葉を洗浄することによって、真菌の胞子形成物を採集した。マラッセ（Ｍａｌａｓｓｅｚ）細胞を使用して、滴定を行った。使用した濃度は５００００胞子／ｍｌであった。
【０２２１】
１０ｍｌの胞子懸濁液を、植物体、葉の下面に噴霧した。現存する葉のすべてのレベルで、それぞれの植物体に個々に混入させた。
【０２２２】
次いで、植物体を方法ごとに再グループ化し、別個の封入物に単離した。
【０２２３】
植物体を、疾患の発達に好適にするために噴霧（ｆｏｇｇｉｎｇ）下で、２１℃の温度、１日あたり１４時間の明期で、８日間保持した。この期間の終了時に観察を行った。
【０２２４】
観察
それぞれの葉を目視で観察した。すべての葉が罹患したため、頻度（疾患に罹患した葉の百分率）を評価しなかった。
【０２２５】
強度（罹患した葉表面の平均百分率）を０〜１００の尺度で評価した。
【０２２６】
平均強度に基づいて、アボット（Ａｂｏｔｔ）の方法を使用して有効性を算出した。
【０２２７】
結果
強度および有効性の結果を、処置した葉または新たに形成されたおよび従って、非処置の葉として再グループ化した。
【０２２８】
【表１７】
0005570726.tif 000018
【０２２９】
すべての試験した細胞壁の用量が、処置から混入の間の期間にかかわらず、処置したまたは新たに形成された葉のミルデュー（ｍｉｌｄｅｗ）に対して効果を及ぼした。
【０２３０】
有効性は用量と共に増加する傾向にあった。
【０２３１】
実施例８：ミルデュー（ｍｉｌｄｅｗ）に対するつる性植物の保護についての開放耕地試験。
材料および方法
試験は、仏国のボルドー（Ｂｏｒｄｅａｕｘ）近郊の開放耕地において、カルベネ・ソーヴィニオン（Ｃａｂｅｒｎｅｔ−Ｓａｕｖｉｇｎｏｎ）品種のつる性植物に対して行った。試験は、適正実験実施（Ｇｏｏｄ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ）標準を尊重して行った。
【０２３２】
試験ポットを備え付け、そして２００６年５月２５日、ＢＢＣＨ５５段階で最初の適用を行った。統計的フレームワークは、フィッシャー（Ｆｉｓｈｅｒ）の乱塊法からなる。それぞれの方法は、４回反復からなり、それぞれ、１０のつる性植物ストックの基本的なプロットに相当した。試験は以下のものを含む：
・１つの非処置コントロール；
・水性懸濁液（Ｂｉｏｓｐｒｉｎｇｅｒ  ＳＡＳからのＳｐｒｉｎｇｃｅｌｌ８００１、９６％細胞壁の乾燥物含有量）においてＯＹを使用する２つの方法。
【０２３３】
処置を、Ｓｏｌｏミスト機を使用して１０００Ｌ／ヘクタールで行った。
【０２３４】
処置を、５月２５日（ＢＢＣＨ５５段階）から週単位で行った。
【０２３５】
【表１８】
0005570726.tif 000019
【０２３６】
適用前に観察を行った。疾患の出現が遅かったため、２００６年８月１８日に観察を行った。
【０２３７】
１つの基本的プロットあたり５０枚の無作為に採取した葉、即ち、各つる性植物の葉柄から５枚について、葉に対する頻度および強度を評価した。
【０２３８】
頻度は、疾患に罹患した葉の百分率に相当する。強度は、罹患した葉表面の平均百分率に相当する。
【０２３９】
５０枚の葉の平均を、各反復について算出した。各方法について４回反復の平均から方法の平均を導く。
【０２４０】
最後に、平均強度に基づいて、アボット（Ａｂｏｔｔ）の方法を使用して有効性を算出した。
【０２４１】
結果
有効性の結果および百分率は以下のとおりである。
【０２４２】
【表１９】
0005570726.tif 000020
【０２４３】
生成物の有効を、２つの試験した用量、１００および２５０ｇ／ヘクタールで観察した。