(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
丹参２．６〜６．８重量部、香附子０．６〜１．７重量部、木香０．６〜１．７重量部、紅花１．１〜３．４重量部、芍薬１．１〜３．４重量部、及びセンキュウ１．１〜３．４重量部を構成生薬として含有する冠元顆粒を有効成分として含有することを特徴とする医薬用神経ペプチドＷ発現増強剤。
【請求項２】
丹参２．６〜６．８重量部、香附子０．６〜１．７重量部、木香０．６〜１．７重量部、紅花１．１〜３．４重量部、芍薬１．１〜３．４重量部、及びセンキュウ１．１〜３．４重量部を構成生薬として含有する冠元顆粒を有効成分として含有することを特徴とする医薬用摂食抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、冠元顆粒を有効成分として含有する神経ペプチドＷ発現増強剤及び摂食抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
一般に、高カロリ食、飲酒・喫煙、運動不足等の生活習慣が原因で生ずる症状として肥満が知られている。肥満は、高血圧、高血糖、高脂血症、高尿酸血症等の生活習慣病、癌等の病気の主要な原因となっている。さらに、これらの生活習慣病は、心筋梗塞、脳梗塞等の成人病の原因とされる動脈硬化症の危険因子として知られ、社会的に重大な問題となっている。肥満の症状は、カロリ制限等の食生活の改善、適度な運動以外に根本的な改善法が確立されていないのが現状である。肥満に該当する人は、健常者に比べ、心筋梗塞や脳梗塞を発症するリスクが高いため、症状を改善するための予防剤や治療剤の開発が急務となっている。
【０００３】
従来より、非特許文献１に開示されるように摂食調節に関わるペプチドとして神経ペプチドＷ（Neuropeptide W；ＮＰＷ）が知られている。神経ペプチドＷは、ラットを用いた試験により、脳内投与量依存的に摂餌量及び体重増加率が有意に減少することが知られている。また、抗ＮＰＷＩｇＧ投与後、暗期摂餌量が有意に増加することが確認されている。したがって、神経ペプチドＷに着目することにより、肥満等の摂食制限が必要な症状や疾患の予防・治療に対する新たなアプローチが見出されるものと期待されている。
【０００４】
ところで、従来より生薬成分として「活血化お」の作用を有する紅花（コウカ）、芍薬（シャクヤク）、センキュウ及び丹参（タンジン）の４種類の薬草と、理気作用を有する香附子（コウブシ）及び木香（モッコウ）の２種類の薬草を所定の配合割合で調合した冠元顆粒が知られている。従来より、冠元顆粒は各種有効成分により中年以降又は高血圧傾向のある者の頭痛、肩こり、めまい、動悸等の症状改善に適用されている。また、特許文献１，２に記載されるような、細胞の老化を抑制する作用や糖尿病の合併症を抑制する作用も知られている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】伊達紫, 新たな神経ペプチドNeuropeptide Wの摂食調節に関する研究, 肥満研究, Vol.10, No.2, 2004, 203-20 5
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２００６−２８１５５号公報
【特許文献２】特開２００６−６３０７６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
この発明は、本発明者らの鋭意研究の結果、天然薬草成分からなる冠元顆粒が神経ペプチドＷの発現増強作用を有するという新規な薬理作用を見出したことによりなされたものである。その目的とするところは、神経ペプチドＷ発現増強作用に優れた神経ペプチドＷ発現増強剤及び摂食抑制作用に優れた摂食抑制剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記目的を達成するために請求項１記載の発明の医薬用神経ペプチドＷ発現増強剤は、丹参２．６〜６．８重量部、香附子０．６〜１．７重量部、木香０．６〜１．７重量部、紅花１．１〜３．４重量部、芍薬１．１〜３．４重量部、及びセンキュウ１．１〜３．４重量部を構成生薬として含有する冠元顆粒を有効成分として含有することを特徴とする。
【０００９】
請求項２記載の医薬用摂食抑制剤は、丹参２．６〜６．８重量部、香附子０．６〜１．７重量部、木香０．６〜１．７重量部、紅花１．１〜３．４重量部、芍薬１．１〜３．４重量部、及びセンキュウ１．１〜３．４重量部を構成生薬として含有する冠元顆粒を有効成分として含有することを特徴とする。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、神経ペプチドＷ発現増強作用に優れた神経ペプチドＷ発現増強剤及び摂食抑制作用に優れた摂食抑制剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】冠元顆粒を投与した場合の神経ペプチドＷのｍＲＮＡ発現増強作用を示すグラフ。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明を神経ペプチドＷ発現増強剤に具体化した一実施形態を説明する。
本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤は、有効成分として冠元顆粒を含有する。本実施形態の有効成分である冠元顆粒は、生薬成分として「活血化お」の作用を有する紅花（コウカ）、芍薬（シャクヤク）、センキュウ及び丹参（タンジン）の４種類の薬草と、理気作用（気のめぐりを改善する）を有する香附子（コウブシ）及び木香（モッコウ）の２種類の薬草を所定の配合割合で調合した漢方薬（漢方方剤）である。
【００１３】
この冠元顆粒は、１９６０年代に中国で脳・心血管疾患に対する治療薬の研究から誕生し、１９６９年には９種類の生薬からなる冠心一号方、続いて１９７８年には５種類の生薬（丹参、芍薬、センキュウ、紅花、降香）からなる冠心二号方が誕生し、さらに降香を木香、香附子に置き換えた冠元顆粒が１９９０年に日本で医薬品として承認された。
【００１４】
冠元顆粒に含まれる各構成生薬の配合割合は、丹参２．６〜６．８重量部、香附子０．６〜１．７重量部、木香０．６〜１．７重量部、紅花１．１〜３．４重量部、芍薬１．１〜３．４重量部、センキュウ１．１〜３．４重量部が好ましく、丹参、香附子、木香、紅花、芍薬及びセンキュウが重量比で４：１：１：２：２：２であるのがより好ましい。この冠元顆粒は、従来より中年以降又は高血圧傾向のあるものの頭痛、頭重、肩こり、めまい、動悸等の諸症状を改善する効能・効果を有していることが知られている。
【００１５】
丹参はシソ科（Labiatae）の多年草タンジン（Salvia miltiorrhiza Bunge）の根である。香附子はカヤツリグサ科（Cyperaceae）の多年草ハマスゲ（Cyperus rotundus Linne）の根茎である。木香はキク科（Compositae）の多年草サウスレアラパア（Aucklandia lappa Decne (Saussurea lappa Clarke)）の根である。紅花はキク科（Compositae）の１〜２年草木ベニバナ（Carthamus tinctorius Linne）の管状花である。芍薬はボタン科（Paeoniaceae）の多年草シャクヤク（Paeonia lactiflora Pallas）の根である。センキュウはセリ科（Umbelliferae）の多年草センキュウ（Cnidium officinale Makino）の根茎である。
【００１６】
この冠元顆粒は、前記構成生薬を所定の配合割合で混合し、この混合物全重量の５〜３０倍量、好ましくは１０〜２０倍量の水にて熱水抽出した後、抽出された熱水抽出液（冠元顆粒エキス）を濃縮及び乾燥することにより製造される顆粒状品である。前記濃縮及び乾燥は常用手段、例えば減圧蒸発濃縮法、スプレードライ法、凍結乾燥法等により行われる。この冠元顆粒の製造方法によれば、例えば、丹参４．５ｇ、香附子１．１２５ｇ、木香１．１２５ｇ、紅花２．２５ｇ、芍薬２．２５ｇ及びセンキュウ２．２５ｇ（合計１３．５ｇ）から、固形分４．５ｇの冠元顆粒が得られる。このように製造された冠元顆粒は、本実施形態において神経ペプチドＷ発現増強剤として用いられる。
【００１７】
こうして得られた冠元顆粒（固形物）は、そのまま散剤や粉剤等の形態で服用してもよく、或いは適当な賦形剤、基剤、乳化剤、溶剤、安定剤等の添加剤とともに顆粒剤、錠剤、カプセル剤、丸剤、坐剤、液剤、注射剤等の形態に加工して投与してもよい。また、前記乾燥前の熱水抽出液又はその濃縮液を基に、ドリンク剤等の形態に加工して服用することも可能である。
【００１８】
神経ペプチドＷ発現増強剤は、有効成分としての冠元顆粒を成人１日当たり好ましくは１〜２０ｇ、さらに好ましくは４．５ｇ程度投与するように処方され、前記１日当たりの投与量を１日複数回（３回程度）に分けて食間又は空腹時に服用するように処方されることが特に好ましい。冠元顆粒を有効成分とする神経ペプチドＷ発現増強剤は、漢方薬等の医薬品に含有させることにより、医薬品としての用途で利用可能である。
【００１９】
次に、上記のように構成された神経ペプチドＷ発現増強剤の作用を説明する。
神経ペプチドＷ発現増強剤は、有効成分として配合される冠元顆粒により、脳内に存在する神経ペプチドＷに対応する遺伝子の発現を増強（促進）する作用を発揮する。神経ペプチドＷは、もともとオーファンＧＰＣＲであるＧＰＲ７とＧＰＲ８の内在性リガンドとして、ブタの視床下部から最初に見出されたペプチドである。神経ペプチドＷは、３０アミノ酸残基よりなるＮＰＷ３０とＮ末端から２４番目と２５番目のアミノ酸、アルギニンの位置で切断されたＮＰＷ２３の２つの分子型があり、生体内ではほぼ１：１の割合で存在している。合成ＮＰＷ３０とＮＰＷ２３はいずれもほぼ同用量でＧＰＲ７とＧＰＲ８に結合し、細胞内のｃＡＭＰ蓄積を抑制する。神経ペプチドＷは、ヒト、ラット、マウスでも同定されており、種族間のアミノ酸相同性は９０％以上と相同性が高いことが知られている。
【００２０】
神経ペプチドＷの内在性リガンドであるＧＰＲ７は、視床下部室傍核や弓状核などの摂食調節に重要な部位に存在するため、神経ペプチドＷと摂食調節との関連が示唆されている。実際、従来よりＧＰＲ７遺伝子欠損マウスは、過食や肥満を呈することが確認されている。また、神経ペプチドＷは、ラットを用いた試験により、脳内投与量依存的に摂餌量及び体重増加率が有意に減少することが確認されている（非特許文献１参照）。また、抗ＮＰＷＩｇＧ投与後、暗期摂餌量が有意に増加することが確認されている。
【００２１】
したがって、神経ペプチドＷ発現増強剤は、肥満等の摂食制限が必要な症状の予防・治療に好ましく適用することができる。また、高血圧、高血糖、高脂血症、高尿酸血症等の生活習慣病の患者であって、カロリ制限、摂食制限が必要な患者の治療に好ましく適用することができる。また、神経性大食症（過食症）の患者の治療に好ましく適用することができる。また、摂食欲求を減退させることにより、非摂食時における精神的な負担を軽減することができる。そのため、ダイエットにおける摂食調節の際に好ましく用いることができる。
【００２２】
本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤によれば、以下のような効果を得ることができる。
（１）本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤は、６種類の生薬成分が配合される冠元顆粒を有効成分として含有する。したがって、冠元顆粒の摂取により神経ペプチドＷの発現を増強・促進する作用を有効に発揮することができる。
【００２３】
（２）本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤は、有効成分である冠元顆粒により、特に、神経ペプチドＷの機能である摂食抑制作用を有効に発揮することができる。したがって、肥満体質の改善に好適に用いることができる。
【００２４】
（３）本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤は、有効成分である冠元顆粒により、特に、神経ペプチドＷの機能である摂食抑制作用を有効に発揮することができる。したがって、高血圧、高血糖、高脂血症、高尿酸血症等の生活習慣病の患者であって、カロリ制限、摂食制限が必要な患者の治療に好適に用いることができる。
【００２５】
（４）本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤は、有効成分である冠元顆粒により、特に、神経ペプチドＷの機能である摂食抑制作用を有効に発揮することができる。したがって、神経性大食症の患者の治療に好適に用いることができる。
【００２６】
（５）本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤は、有効成分である冠元顆粒により、特に、神経ペプチドＷの機能である摂食抑制作用を有効に発揮することができる。したがって、摂食欲求を減退させることにより、非摂食時における精神的な負担を軽減することができる。
【００２７】
（６）本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤は、有効成分である冠元顆粒により、特に、神経ペプチドＷの機能である摂食抑制作用を有効に発揮することができる。したがって、ダイエットにおける摂食調節の際に好適に用いることができる。
【００２８】
（７）本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤は、天然の植物を原料とするとともに既に広く使用されている漢方薬を基礎としていることから、副作用の心配がない。
（８）また、本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤に有効成分として配合される冠元顆粒は、その他の薬効（頭痛、頭重、肩こり、めまい、動悸等の諸症状を改善する効能・効果、糖尿病の合併症を抑制する作用）を有しているため、摂取によりそれらの効能も期待することができる。
【００２９】
なお、本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤は、次のように変更して具体化することも可能である。
・本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤は、有効成分である冠元顆粒により、特に、神経ペプチドＷの機能である摂食抑制作用を有効に発揮することができる。したがって、冠元顆粒を有効成分とする摂食抑制剤として構成してもよい。
【００３０】
・本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤は、有効成分である冠元顆粒により、特に、神経ペプチドＷの機能である摂食抑制作用を有効に発揮することができる。したがって、冠元顆粒を有効成分とする抗肥満剤として構成してもよい。
【００３１】
・本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤は、例えば肥満等の症状を有する者の体質改善、及び摂食抑制が必要な各種疾患に好ましく適用される。しかしながら、治療の用途のみならず、健常者が肥満や生活習慣病等の予防のために摂取してもよい。
【００３２】
・本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤は、摂食抑制時のストレスを低減する作用を有する。したがって、冠元顆粒を有効成分とする摂食抑制時におけるストレス低減剤又は食欲減退剤として構成してもよい。
【００３３】
・本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤は、摂食抑制時のストレス低減又は食欲を減退する作用を有する。したがって、冠元顆粒を有効成分とするダイエット剤として構成してもよい。
【００３４】
・本実施形態の神経ペプチドＷ発現増強剤は、ヒト以外の動物、例えば、ウマ、ウシ、ブタのような家畜（非ヒト哺乳動物）、ニワトリ等の家禽、或いは犬、猫、ラット及びマウス等のペット（各種飼養動物）に投与してもよい。
【実施例】
【００３６】
次に、各試験例を挙げて前記実施形態をさらに具体的に説明する。
試験例１（冠元顆粒投与マウスに対する神経ペプチドＷのＲＮＡの発現の影響）
（冠元顆粒の調製）
本試験に用いた冠元顆粒の構成生薬及びその含有量は、２．２５ｇの芍薬、２．２５ｇのセンキュウ、２．２５ｇの紅花、１．１２５ｇの香附子、１．１２５ｇの木香及び４．５ｇの丹参からなる。これらの構成生薬を調合したものに２０倍量の水を加えて１００℃で１時間熱水抽出した。次いで、ろ過後に減圧濃縮して溶媒を留去したところ、収率４４％の冠元顆粒（冠元顆粒エキス）が得られた。
【００３７】
（実験動物）
実験動物は、体重２５〜３０ｇのｄｄＹ系雄性マウス(紀和実験動物研究所)を用いた。
（投与スケジュールと試料採取）
冠元顆粒の粉末を蒸留水で溶かし、３００ｍｇ／ｋｇに調製したものを、強制摂取によりマウスに２週間連続経口投与（０．２５〜０．３ｍＬ／日）を行った。尚、コントロール群は蒸留水のみ与えた。３００ｍｇ／ｋｇの冠元顆粒を２週間投与したマウスの脳を摘出し、半脳をＴＲＩＺＯＬ試薬１．８ｍＬに入れ、ホモジナイズし、試験試料とした。
【００３８】
（リアルタイムＰＣＲ）
作製した脳サンプル（対照（コントロール）群、冠元顆粒投与群：各４サンプル）からInvitrogen推奨のプロトコルでtotal RNAを抽出し、RNeasy Plus Mini kit（QIAGEN社製）を使用してＲＮＡを精製した。精製したRNA試料はReverTra Ace（TOYOBO社製）を用いて、ｃＤＮＡに逆転写した。cDNAにTHUNDERBIRD SYBR qPCR Mix（TOYOBO社製）を使用し、ABI 7500（Applied Biosystems社製）により、リアルタイムPCRを行いΔＣｔ値と対コントロール比を算出した。このとき、β−アクチンをハウスキーピング遺伝子とした。リアルタイムＰＣＲに使用したプライマーとして、ＮＰＷ：配列番号１（forward）、ＮＰＷ：配列番号２（reverse)、β−アクチン：配列番号３（forward）、及びβ−アクチン：配列番号４（reverse）を使用した。結果を図１に示す。
【００３９】
（結果）
図１に示されるように、冠元顆粒を２週間、マウスに経口投与したところ、神経ペプチドＷのｍＲＮＡ発現量は、対照群に比べて５．７倍増加した。ΔＣｔ値は、対照６．５±０．３、冠元顆粒４．０±０．４であった。尚、数値は、平均±標準偏差を示す。したがって、冠元顆粒の神経ペプチドＷの発現誘導が、摂食調節に関する新たな冠元顆粒の効能の発揮につながると考えられる。
【００４０】
次に、上記実施形態及び別例から把握できる技術的思想について、以下に追記する。
（ａ）冠元顆粒を有効成分とする摂食抑制時におけるストレス低減剤。
（ｂ）前記神経ペプチドＷ発現増強剤を有効成分として含有する医薬品。従って、この（ｂ）に記載の発明によれば、神経ペプチドＷ発現増強剤を効率的に摂取することができる。
【００４１】
（ｃ）冠元顆粒を有効成分とするダイエット剤。
【図１】
0005462323.tif 000002
【配列表】
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