(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
糖誘導体である安定化剤で安定化されたチオトロピウムの無水非結晶形態を含有する、噴霧乾燥された吸入可能粒子。
【請求項２】
ｉ）水を含んでいてもよい揮発性の水混和性溶媒中の、チオトロピウム塩、又はその溶媒和物、又はその任意の固形形態の溶液、及び
ｉｉ）水を含んでいてもよい揮発性の水混和性溶媒中の、安定化剤の溶液又は懸濁液
の混合物から噴霧乾燥されたものである、請求項１に記載の噴霧乾燥された吸入可能粒子。
【請求項３】
チオトロピウムが臭化チオトロピウムを含んでなる請求項１又は２に記載の噴霧乾燥された吸入可能粒子。
【請求項４】
糖誘導体がラクトースである請求項１から３の何れか一項に記載の噴霧乾燥された吸入可能粒子。
【請求項５】
１０μｍ以下の平均空気力学的粒子径を有する請求項１から４の何れか一項に記載の噴霧乾燥された吸入可能粒子。
【請求項６】
安定化剤で安定化されたチオトロピウムの非結晶形態が、チオトロピウムが分子状態で分散しているマトリックスを含む請求項１から５の何れか一項に記載の噴霧乾燥された吸入可能粒子。
【請求項７】
安定化剤で安定化されたチオトロピウムの非結晶形態が、安定化剤の表面に分散された非結晶チオトロピウムを含む請求項１から５の何れか一項に記載の噴霧乾燥された吸入可能粒子。
【請求項８】
臭化チオトロピウム及び安定化剤の重量に対する臭化チオトロピウム重量％は、０．１−１０％の間である、請求項３に記載の噴霧乾燥された吸入可能粒子。
【請求項９】
臭化チオトロピウム及び安定化剤の重量に対する臭化チオトロピウム重量％は、４−８％の間である、請求項８に記載の噴霧乾燥された吸入可能粒子。
【請求項１０】
粒子が、１５から２５０μｍの平均粒子径を有する一又は複数の粗賦形剤と混合されている請求項１から９の何れか一項に記載の噴霧乾燥された吸入可能粒子。
【請求項１１】
粗賦形剤がラクトースである請求項１０に記載の噴霧乾燥された吸入可能粒子。
【請求項１２】
請求項６、１０又は１１の何れか一項に記載の噴霧乾燥された吸入可能粒子を含有する薬学的組成物。
【請求項１３】
チオトロピウム塩基含有量が０．０２から０．８％である請求項１２に記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
吸入のためのカプセルの形態である請求項１２又は１３に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
カプセルがヒドロキシプロピルメチルセルロースを含んでなる請求項１４に記載の薬学的組成物。
【請求項１６】
請求項１から９の何れか一項に記載の噴霧乾燥された吸入可能粒子を調製する方法であって、
ａ）水を含んでいてもよい揮発性の水混和性溶媒中に安定化剤を溶解又は分散させて、溶液又は懸濁液を形成する工程；
ｂ）水を含んでいてもよい揮発性の水混和性溶媒中に、チオトロピウム塩、又はその溶媒和物、又はその任意の固形形態を溶解させる工程；
ｃ）工程ｂ）の溶液と工程ａ）の溶液又は懸濁液を混合する工程；及び
ｄ）工程ｃ）の溶液／懸濁液を噴霧乾燥させて、所望の粒子を得る工程
を具備する方法。
【請求項１７】
請求項１６に記載の工程ａ）からｄ）を含む、請求項１０又は１１に記載の噴霧乾燥された吸入可能粒子を調製する方法であって、１５から２５０μｍの平均粒子径を有する一又は複数の粗賦形剤と共に工程ｄ）の粒子を混合する工程を更に含む方法。  
【請求項１８】
工程ａ）において懸濁液が形成される場合、使用される溶媒は水を含まず、安定化剤は１−９μｍの平均粒子径を有する粒子の形態である請求項１６又は１７に記載の方法。
【請求項１９】
喘息又は慢性閉塞性肺疾患の治療に使用される請求項１から１１の何れか一項に記載の噴霧乾燥された吸入可能粒子。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
チオトロピウム含有吸入可能粒子
本発明は、チオトロピウムの安定化された非結晶（無定形、アモルファス）形態を安定化剤と共に含有する吸入可能粒子、及び一又は複数の粗賦形剤と混合されていてもよいこれらの粒子に関する。本発明はまたそれらを含有する薬学的組成物、その調製のための方法、及び喘息又は慢性閉塞性疾患（ＣＯＰＤ）の治療におけるそれらの使用にも関する。
【背景技術】
【０００２】
臭化チオトロピウムは、長時間作用型気管支拡張薬として使用される非常に効果的な抗コリン作用を持つムスカリン受容体アンタゴニストである。それは、欧州特許出願公開第４１８７１６号において最初に開示されたもので、次の化学構造を有している：
0005622730.tif 000002
臭化チオトロピウムは呼吸器疾患、特に慢性閉塞性気管支炎（ＣＯＰＤ）及び喘息の治療に使用されている。
【０００３】
この生成物の様々な塩（塩化物、臭化物、ヨウ化物など）並びにその様々な結晶型が知られている。
【０００４】
喘息やＣＯＰＤといった呼吸器疾患の治療では、活性物質を吸入によって投与することが有用である。他の吸入器（インヘラー）と比較して、ドライパウダー吸入器（ＤＰＩ）は、名目上の投与量範囲、つまり一回の吸入で投与できる活性物質の量に関して柔軟性をもたらし、これがそれらを投薬手段として特に興味深いものにしている。よって、ＤＰＩを用いて投与される活性物質を含む吸入可能パウダーの使用は特に重要である。
【０００５】
活性化合物は、肺の中まで到達し得るためには、吸入可能でなくてはならない；つまり、それは約１から１０μｍの粒子径で存在していなくてはならない。この粒径の超微粒子は、適切な溶媒からのプロセスが適切に選択され、制御され、実施されるならば、例えば微粒子化、適切な溶媒からの制御された沈殿又は噴霧乾燥によって、の微粒子化によって、得ることができる。
【０００６】
伝統的には、ドライパウダーは、粗賦形剤、典型的にはラクトースと混合された微粒子化された薬剤として製剤化されてきた。粗担体粒子と混合される微粒子化されたチオトロピウムのドライパウダー製剤は先行技術に開示されている。例えば、欧州特許出願公開第１２９２２８１号は、賦形剤の幾つかの混合工程を含む微粒子化を含む調製方法を開示している。しかしながら、微粒子化は再現性の低い方法であり、出発物質の小さなばらつきに大きく影響される。更に、Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ Ｉｎｇｅｌｈｅｉｍの市販医薬であるスピリーバ（Ｓｐｉｒｉｖａ（登録商標））を含む、そのような組成物は、分散性及び微粒子フラクションについて性能が劣っていることが明らかとなっている。更に、その調製方法では、長い複数回の混合工程を必要とするため、チオトロピウム、微細な担体及び粗担体の均一な混合物を得ることが難しい。他の例では、欧州特許出願公開第１５０８３３０号は、受容可能な賦形剤と混合されたチオトロピウムを含み、好ましくは結晶性の臭化チオトロピウム一水和物を含むカプセルを開示している。しかしながら、安定化剤は、非結晶チオトロピウム粒子と機械的に混合され、これは、安定化剤と非結晶チオトロピウムの間にストレートな接触がないことを意味する。
【０００７】
よって、従来技術の製剤の不都合を回避し、粉末混合物の均一性、粉末流動性及び／又は粉末の分散、及び空気力学的性質に関し改善を示す、チオトロピウムの吸入ドライパウダー組成物を改良する必要である。
【発明の概要】
【０００８】
発明者等は、高い度合いの均一性を示し、分散性における変動が小さい吸入可能なパウダー組成物を生じる安定化剤で安定化したチオトロピウムの無水非結晶形態を見出した。これらの要因は、活性物質の吸入可能割合が一定量で変動の可能性が低く、再現可能に放出されることを担保するのに重要である。本発明の組成物は、実施例に示されるように、適切なドライパウダー吸入器を使用することにより、改善された流動性、高い分散性及び高い微粒子フラクション（ＦＰＦ）をまた有している。
【０００９】
更に、所望の形態を得るのに精確で面倒なプロセスが必要とされる結晶形態を含む吸入可能粒子を調製する場合に生じるものとは異なり、本発明の吸入可能粒子は、それらが非結晶形態であるため、簡単で速やかなプロセスによって得ることが可能である。  
【００１０】
従って、本発明の第一の態様は、安定化剤、特に糖誘導体で安定化されたチオトロピウムの無水非結晶形態を含有する吸入可能粒子に関する。吸入可能粒子は、チオトロピウムが分子状態で密に分散しているか、又は非結晶チオトロピウムが安定化剤の表面に分散している、つまり安定化剤の粒子が非結晶チオトロピウムの薄層によって被覆されているマトリックスを含みうる。
【００１１】
特に高い有効性を示すチオトロピウムのような薬剤においては、所望される治療効果を達成するためにほんの少量の活性物質が各単一用量において必要とされるだけである。その結果、流活性物質は、動性のある粉末を得るためには、一又は複数の薬理学的に不活性な物質（適切な賦形剤）で希釈されなければならない。該希釈は、パウダー吸入器から適用される量が正確に所望の用量を含むようになされなければならない。これらの薬理学的に不活性な賦形剤は希釈剤としてだけでなく、粉末組成物に良好な流動性を与え、よって混合プロセスを容易にするその能力からも使用される。
【００１２】
粉末の流動性を向上させるために使用される一つのアプローチは、一又は複数の粗賦形剤を使用することに関する。超微粒粒子は強い付着力及び凝集性を示す傾向があり、それが次に流動性を低下させ、粉末凝集を生じせしめることから、担体として使用されるかかる粗賦形剤は、それらを吸入できないものとする粒子径を有していなければならない。よって、本発明の吸入可能粒子を、１５から２５０μｍの平均粒子径を持つ一又は複数の粗賦形剤と混合することには利点がある。
【００１３】
従って、本発明の他の態様は、安定化剤、特に糖誘導体で安定化されたチオトロピウムの非結晶形態を含有する吸入可能粒子に関し、ここで該粒子は１５から２５０μｍの平均粒子径を有する一又は複数の粗賦形剤と混合される。これらの粒子は、ここでは、一又は複数の粗賦形剤と混合される粒子とも称される。
【００１４】
本発明の安定化剤で安定化されたチオトロピウムの非結晶形態は、また微細な成分のみを使用して許容可能な流動性を持つドライパウダー製剤を得ることを可能にすることが見出された。以下に更に詳しく説明するが、これは、適切な希釈でのチオトロピウムと安定化剤の溶液から出発して適切な乾燥法によって吸入可能粒子を製造することによって達成することができる。よって、如何なる粗賦形剤も使用する必要がないそのような場合では、混合工程が必要とされない。
【００１５】
粗賦形剤を含まない吸入可能粒子と、一又は複数の粗賦形剤を含む吸入可能粒子を含む上述の本発明の吸入可能粒子は、適切な薬学的組成物の形態で、呼吸器疾患に冒された患者に投与されうる。従って、本発明の他の態様は、粗賦形剤を含まない吸入可能粒子と、一又は複数の粗賦形剤を含む吸入可能粒子を含む上述の本発明の吸入可能粒子を含有する薬学的組成物に関する。これらの組成物は以下に更に記載する。
【００１６】
本発明の吸入可能粒子は、チオトロピウム安定化剤溶液又は懸濁液から適切な乾燥方法によって簡便に調製され得る。従って、本発明の他の態様は、
ａ）水を含んでいてもよい揮発性の水混和性溶媒中に安定化剤を溶解又は分散させて、溶液又は分散液を形成する工程；
ｂ）水を含んでいてもよい揮発性の水混和性溶媒中に、チオトロピウム塩、又はその溶媒和物、又はその任意の固形形態を溶解させる工程；
ｃ）工程ｂ）の溶液と工程ａ）の溶液又は懸濁液を混合する工程；及び
ｄ）工程ｃ）の溶液／懸濁液を噴霧乾燥させて、所望の粒子を得る工程
を具備する吸入可能粒子を調製する方法に関する。
【００１７】
上述のように、安定化剤で安定化されたチオトロピウムの粒子は一又は複数の粗賦形剤と混合されうる。従って、本発明の他の態様は、上述の工程ａ）からｄ）を含む、その調製方法であって、１５から２５０μｍの平均粒子径を有する一又は複数の粗賦形剤と共に工程ｄ）の粒子を混合する工程を更に含む方法に関する。  
【００１８】
以前に記載されたように、本発明の組成物はある種の呼吸器疾患の治療に有用である。従って、本発明の他の態様は、喘息又は慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の治療において使用するための、先に記載された吸入可能粒子に関する。よって、この態様は、喘息又はＣＯＰＤの治療のための医薬の製造のための、先に記載された吸入可能粒子の使用に関し、また喘息又はＣＯＰＤの治療のための方法であって、それを必要とする患者において、粗賦形剤を伴わない吸入可能粒子と、一又は複数の粗賦形剤を有する吸入可能粒子を含む、本発明の先に定義された吸入可能粒子の有効量を投与することを含む方法として記載されうる。
【００１９】
本発明のこれらの態様は、以下に続く詳細な説明の項において更に記載される。特段の定義をしない限り、ここで使用されるあらゆる技術的及び科学的用語は、この発明が属する分野の通常の技量を有する者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有している。ここに記載されたものと同様の又は均等の方法及び材料を本発明の実施に使用することができる。明細書及び特許請求の範囲を通して、「含む」なる語及びその変化形は、他の技術的特徴、添加剤、成分、又は工程を排除することを意図するものではない。本発明の更なる態様、利点及び特徴は、明細書を検討すると当業者には明らかになるか又は本発明の実施により知得されうる。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】図１は、未処理の臭化チオトロピウム（Ａ）及び２５℃で６ヶ月保存した後の噴霧乾燥臭化チオトロピウム（Ｂ）のＰＸＲＤパターンを示す。
【図２】図２は、噴霧乾燥直後（Ａ）及び２５℃で６ヶ月保存した後（Ｂ）のエタノール−水の溶液から得た噴霧乾燥された臭化チオトロピウム−ラクトース粉末のＰＸＲＤパターンを示す。
【図３】図３は、溶液中のチオトロピウム−ラクトースから得た噴霧乾燥粉末の様々な倍率でのＳＥＭ画像を示す。
【図４】図４は、懸濁液中のチオトロピウム−ラクトースから得た噴霧乾燥粉末の様々な倍率でのＳＥＭ画像を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
本発明によれば、第一の態様は、上述の安定化剤で安定化されたチオトロピウムの無水非結晶形態を含む吸入可能粒子に関する。
【００２２】
チオトロピウムなる用語は、遊離のアンモニウムカチオンとしてチオトロピウムを、対イオンとしてアニオンを含む任意の薬学的に許容可能な塩を意味する。本発明の範囲内で使用されうる非限定的なチオトロピウム塩は、例えば、塩化物、臭化物、ヨウ化物、メタンスルホネート、パラ−トルエンスルホネート、ベンゼンスルホネート又はメチルサルフェートを含む化合物である。本発明によれば、安定化された非結晶形態で存在するチオトロピウムは無水である。好ましい実施態様では、本発明の吸入可能粒子は、安定化剤で安定化されたチオトロピウム塩の非結晶形態を含む。より好ましい実施態様では、チオトロピウム塩は臭化チオトロピウムである。チオトロピウム塩基なる用語は遊離のアンモニウムカチオンとしてのチオトロピウムを意味する。
【００２３】
ここに記載される安定化剤は、活性物質を安定化することができなくてはならない。これは、チオトロピウムの物理的転換（非結晶から結晶形態へ）及び／又は化学的分解（例えば加水分解、酸化又は任意の他の分解メカニズムによる）を防止するか又は遅延させるために本発明に係る組成物に使用することができる任意の薬学的に許容可能な不活性成分（つまり、任意の薬学的賦形剤）を意味する。それは、保存中（例えば２５℃／６０％ＲＨ、３０℃／６５％ＲＨ又は４０℃／７５％ＲＨ）の非結晶チオトロピウムの物理的転換又はその化学的分解が、吸入可能な粒子がその組成中に安定化剤及び非結晶チオトロピウムの双方を含むとき、非結晶のみを含有チオトロピウムのみを含む吸入可能粒子と比較して遅いことを意味する。
【００２４】
本発明の一実施態様では、安定化剤は糖誘導体でありうる。糖誘導体の非限定的な例は、例えば、グルコース又はアラビノースのような単糖類、ラクトース、サッカロース、マルトース又はトレハロースのような二糖類、デキストランのようなオリゴ糖及び多糖類、及びソルビトール、マンニトール、又はグリセロールのような多価アルコールである。好ましい実施態様では、安定化剤はラクトース（無水又は一水和物）である。
【００２５】
本発明の範囲内では、「非結晶（アモルファス）」なる用語は、粉末製剤が１０％未満の結晶性フラクションを含むことを意味する。
【００２６】
「吸入可能な」なる用語は、粒子が肺投与に適していることを意味する。吸入可能粒子は、粒子が肺に入り、場合によっては肺胞を通して全身性作用を発することができるように、吸入器によって分散され、吸入されうる。本発明の一実施態様では、チオトロピウムの非結晶マトリックス及び安定化剤を含む吸入可能な粒子は、１０μｍまでの平均空気力学的粒子径を有する。好ましい実施態様では、平均空気力学的粒子径は０．５−６μｍの範囲にある。
【００２７】
好ましい実施態様では、臭化チオトロピウム及び安定化剤の重量に対する臭化チオトロピウム重量％は、０．１−１０％の間、好ましくは４−８％の間からなる。
【００２８】
本発明において、吸入可能粒子は安定化剤で安定化されたチオトロピウムの非結晶形態を含む。本発明において記載される「チオトロピウムの安定化された非結晶形態」は、安定化剤及び非結晶チオトロピウムを含む吸入可能粒子を得るために本発明の範囲で使用ｓざれる製造方法によって得られる組成物を意味する。
【００２９】
「安定化された非結晶形態」なる用語は、ここで安定化剤で安定化されたチオトロピウムの非結晶形態が、ａ）チオトロピウムが分子状態で密に分散しているマトリックスを含む粒子、つまり、吸入可能粒子が安定化剤とチオトロピウムの双方を含む溶液を乾燥させることによって得られるもの；及びｂ）安定化剤の表面に分散した非結晶チオトロピウムを含む粒子、つまり安定化剤が非結晶チオトロピウムの薄層で被覆されている粒子で、その場合、吸入可能粒子が溶液中にチオトロピウムを含む安定化剤の懸濁液を乾燥させることによって得られるものを含む。
【００３０】
双方の場合、安定化剤と非結晶チオトロピウムとの間のストレートな接触（すなわち、安定化剤とチオトロピウムの分子間の密接な接触、又は安定化剤粒子と非結晶チオトロピウム被覆層の間の密接な接触）はチオトロピウムの安定化された非結晶形態を得るのに必要である。それは、非結晶チオトロピウムの良好な安定性が、安定化剤が非結晶チオトロピウム粒子と機械的に（つまり薬学的粉末の混合のために適切なミキサーを使用して）混合される混合工程の使用に基づく製造方法と比較して、吸入可能な粒子がこの発明に記載された製造方法を使用して得られるときに得られることを意味する。
【００３１】
良好な流動性を持つ吸入組成物を得るためには、チオトロピウムの安定化された非結晶形態を含む吸入可能粒子と一又は複数の粗賦形剤を有する安定化剤を混合させることが必要となりうる。
【００３２】
よって、チオトロピウム−安定化剤の比に応じて、安定化剤で安定化されたチオトロピウムの非結晶形態が、チオトロピウムが分子状態で密に分散しているマトリックスを含む場合、発明の薬学的組成物は、ａ）適切な乾燥方法を適用した後に得られる粒子から；又はｂ）適切な乾燥方法を適用した後に得られ、平均粒子径が１５から２５０μｍである一又は複数の粗賦形剤と簡便に混合された粒子の何れかから調製されうる。
【００３３】
安定化剤で安定化されたチオトロピウムの非結晶形態が安定化剤の表面に分散した非結晶チオトロピウムを含む場合、本発明の薬学的組成物は、適切な乾燥方法を適用した後に得られ、平均粒子径が１５から２５０μｍである一又は複数の粗賦形剤と簡便に混合された粒子から調製されなければならない。
【００３４】
本発明の好ましい実施態様では、一種類の粗賦形剤のみが使用され、それは好ましくは５０−１５０μｍの平均粒子径を有している。
【００３５】
安定化剤及び粗賦形剤は化学的に同一な又は異なった物質に基づいてもよい。特定の実施態様では、安定化剤及び粗賦形剤は同じ化学的化合物を含む。好ましい実施態様では、安定化剤、並びに粗賦形剤は、場合によっては一水和物の形態でもよいラクトースを含む。
【００３６】
発明の薬学的組成物は、好ましくは０．０２から０．８％のチオトロピウム塩基を含む。
【００３７】
ここに別の記述をしない限り、本発明の範囲に与えられたパーセントは常に重量パーセントである。
【００３８】
好ましくは、本発明の組成物は吸入用のカプセルの形態である。カプセルは、ゼラチン、セルロース誘導体、デンプン、デンプン誘導体、キトサン及び合成プラスチックのような様々な物質から形成されうる。好ましい実施態様では、カプセルはセルロース誘導体から形成される。このような誘導体の非限定的な例は、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース又はヒドロキシエチルセルロースである。本発明のより好ましい実施態様では、吸入カプセルはＨＰＭＣを含む。最も好ましい実施態様では、ＨＰＭＣカプセルは残余湿度が低い（含水量４％以下）。
【００３９】
本発明の吸入可能粒子は、適切な溶媒中の安定化剤の溶液又は懸濁液の何れかから出発して調製されうる。本方法の利点は、水に溶解した後に本発明の薬学的組成物が中性のｐＨ値を生じる点である。これは、肺の中性のｐＨ値は吸入後においても変化されるべきではないので肺の寛容という観点では非常に興味深い。
安定化剤の溶液から出発した場合、安定化剤を、水を含む水混和性溶媒に溶解させ（工程ａの溶液）、この溶液を同じ溶媒中のチオトロピウムから得た溶液と混合する（工程ｂの溶液）。この場合、当業者には明らかなように、これらの工程は、チオトロピウムと安定化剤を含む溶液を得るために、任意の順で実施されうる。適切な乾燥方法を適用した後、非結晶形態での活性に効率的な安定化効果を得るために、得られた結果の粒子は、安定化剤中に分子状態でチオトロピウムが密に分散しているマトリックス（つまり、チオトロピウムを含むラクトースのマトリックスが形成される）を含む。
【００４０】
先に記載されたように、使用されるチオトロピウム及び安定化剤の相対量に応じて、良好な流動性を持った組成物を得るために、得られた粒子を一又は複数の粗賦形剤と混合する必要はない。従って、好ましくはチオトロピウム／チオトロピウム及び安定化剤が０．０２から０．８％の、適切な希釈では、粗賦形剤をそれ以上加えることがなく、混合工程も必要とされないため、良好な粉末の均一性が達成される。
【００４１】
発明の吸入可能粒子が安定化剤の懸濁液から出発して調製される場合、工程ａ）及びｂ）は好ましくは別個に実施され、より好ましくは、安定化剤が、均一な安定化剤の懸濁液を得るため、活性成分の溶液（工程ｂの溶液）を加える前に最初に分散され、均質化される（例えば高速又は高圧ホモジナイザーを使用）。この場合、適切な乾燥方法の適用後、得られた粒子は、非結晶チオトロピウムを安定化剤の粒子の表面で分散せしめて含有する。この場合、安定化剤は好ましくは１−９μＭの平均粒子径を有している粒子の形態である。
【００４２】
上述した吸入可能粒子の調製に使用される溶媒系は、水を含んでいてもよい揮発性の水混和性溶媒を含む。上で説明したように、水の存在は安定化剤の溶液を生じせしめる一方、水が存在しないと上記安定化剤の懸濁液を生じせしめる。安定化剤の溶液が使用される場合、使用される安定化剤の量に応じて、適切な水混和性溶媒が安定化剤を全体的に可溶化するために加えられなければならない。他方、活性成分は常に溶解している。好ましくは、揮発性の水混和性溶媒は（Ｃ１-Ｃ４）-アルコールである。「（Ｃ１-Ｃ４）-アルコール」なる用語は、１から４の炭素原子を含む直鎖状又は分枝状アルキル鎖と一又は複数のヒドロキシル基を意味する。この用語は、限定しないが、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール及びブタノールを含む。発明の好ましい実施態様では、使用されるアルコール溶媒はエタノール又はイソプロパノールである。
【００４３】
乾燥方法は噴霧乾燥である。この方法は、平均粒子径及び粒度分布の正確な制御と、流動性や分散性のような巨視的な粉末特性の改善の達成に寄与する。典型的な噴霧乾燥機は０．５から３０μｍの範囲の粒子径の回収を可能にする。下限値は使用されるサイクロンの分離によって与えられる：これより小さい粒子はこれ以上分離することができず、フィルターに入る。
【００４４】
吸入可能粒子の調製のための記載した方法は、微粉化が再現性に乏しい方法で、出発材料の物理的性質に大きく依存するので、より再現性のある方法を使用することによって微粉化を回避するという利点を有する。本発明の場合、出発物質（チオトロピウム化合物）は、最初に溶解されるので、如何なる物理的形態であってもよい。よって、出発チオトロピウム化合物は、ラセミ体又はその任意のエナンチオマー又はその混合物を含む、任意のチオトロピウム塩又はその溶媒和物、又はその任意の固形形態であってもよい。
【００４５】
上述のように、本発明の吸入可能粒子は、向上した微粒子フラクションを示す。「微粒子フラクション(fine particle fraction)（ＦＰＦ）」は粉末の吸入可能部を表す。ＦＰＦは、名目上の用量との関係で５μｍに至らない空気力学的直径を有する粒子の用量（重量％で示す）である（微粒子用量／負荷用量×１００）。微粒子用量（ＦＰＤ）は、微粒子の空気力学的な評価に対する米国薬局方及び欧州薬局方に示された方法に記載された方法によって決定されうる。良好な分散性を持つ粉末では、ＦＰＦは２０％より大きく、好ましくは３０％より大きい。質量空気動力学的中央粒子径（ＭＭＡＤ）としても知られている「平均空気力学的粒径」なる用語は、粉末の粒子の５０％がより小さな空気力学的径を有する空気力学的粒子径を示す。
【実施例】
【００４６】
次の実施例は例示の手段として提供するもので、本発明を限定するものではない。
【００４７】
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）
噴霧乾燥製剤及び最終のチオトロピウム−ラクトース混合物中のチオトロピウム含有量の決定をＨＰＬＣによって実施した。
ＨＰＬＣシステムは、定量ポンプ、自動サンプラー及び２３８ｎｍに設定されたダイオードアレイＵＶ検出器を備えた高速液体クロマトグラフィー（ＨＰ１２００シリーズ、Agilent technologies, Belgium）から構成された。分離システムは、１２５ｍｍ×４ｍｍのステンレス鋼製（粒子径５μｍ）逆相Ｃ１８カラムである（Alltima, Alltech, Belgium）であった。体積１００μｌの試料を注入した。温度は３５℃に設定し、流量は０．８ｍｌ／分であった。全操作時間は１０分であった。
【００４８】
−緩衝液：ｏ−リン酸でｐＨ４に調節した１００ｍＭのＫＨ２ＰＯ４
−移動相：８０ｖｏｌのリン酸緩衝液：２０ｖｏｌのアセトニトリル
−希釈相：７５ｖｏｌの水：２５ｖｏｌのメタノール
【００４９】
チオトロピウムを含む標準液を表１に示す。
【００５０】
標準溶液
Ｓ１：１０ｍｌメタノール中の２．５ｍｇ臭化チオトロピウム一水和物（＝２００μｇ／ｍｌのチオトロピウム塩基)
Ｓ２：希釈相２５ｍｌ中に１．０ｍｌのＳ１溶液（＝８μｇ／ｍｌ）
0005622730.tif 000003
【００５１】
噴霧乾燥による安定なチオトロピウム製剤の調製
ａ）臭化チオトロピウム及び超微粒ラクトース（Lactochem, Borculo；平均粒子径約８μｍ）を含有する吸入可能粒子の調製
製剤を、Buchi Mini Spray Dryer B-191a (Buchi laboratory-Techniques, Switzerland)を使用する噴霧乾燥により、研究室規模で調製した。異なった溶液及び懸濁液を、様々な量の水を含むか又は含まないエタノール又はイソプロパノール中で調製した。
【００５２】
先ず、溶液（十分な量の水の存在下）又は懸濁液（水の不在下）を得るためにラクトースを溶媒媒体中に溶解又は分散させた。ついで、臭化チオトロピウムを溶媒媒体に溶解させ、得られた溶液又は懸濁液と溶液を混合した。水の不存在下で、チオトロピウムの溶液を加える前に、均質懸濁液を得るために、ラクトースを先ず分散し、均質化した（例えば高速又は高圧均質化を使用）。
【００５３】
調製物をついで絶えず攪拌しながら噴霧乾燥した。次の条件を噴霧乾燥中に使用した：噴霧空気流、８００ｌ／ｈ；乾燥空気流、３５ｍ３／ｈ；懸濁液供給速度、３.５−４．０ｇ／分；ノズルサイズ、０．５ｍｍ。入口の温度は７０℃又は１２０℃（水がある状態で）で確定され、これらの条件で、出口温度は４４℃から４６℃の間か又は６５℃から６８℃の間で変動した。得られた粉末をサイクロンに通し、容器に集めた。粉末を様々な温度条件（２５℃、４０℃及び６０℃）でデシケーターに保存した。
【００５４】
この方法に従って、次の実施例を得た：
【００５５】
実施例１：エタノール−水中のチオトロピウム−ラクトース溶液
エタノール                                 １００ｇ
水                                         １００ｇ
超微粒ラクトース                           ４．４８０ｇ
臭化チオトロピウム一水和物                 ０．３６０ｇ  
【００５６】
実施例２：イソプロパノール−水中のチオトロピウム−ラクトース溶液 
イソプロパノール                           １００ｇ
水                                         １００ｇ
超微粒ラクトース                           ４．４８０ｇ
臭化チオトロピウム一水和物                 ０．３６０ｇ
【００５７】
実施例３：エタノール中のチオトロピウム−ラクトース懸濁剤 
エタノール                                 ２００ｇ
超微粒ラクトース                           ４．４８０ｇ
臭化チオトロピウム一水和物                 ０．３６０ｇ
【００５８】
実施例４： イソプロパノール中のチオトロピウム−ラクトース懸濁液
イソプロパノール                           ２００ｇ
超微粒ラクトース                           ４．４８０ｇ
臭化チオトロピウム一水和物                 ０．３６０ｇ  
【００５９】
実施例５：エタノール−水中のチオトロピウム−ラクトース溶液
エタノール                                 １００ｇ
水 １００ｇ                                １００ｇ
メッシュ２００  ラクトース一水和物         ４．４８０ｇ
（平均粒子径７４μｍ）
臭化チオトロピウム一水和物                 ０．３６０ｇ  
【００６０】
実施例６：イソプロパノール−水中のチオトロピウム−ラクトース溶液 
イソプロパノール                           １００ｇ
水                                         １００ｇ
２００メッシュのラクトース一水和物         ４．４８０ｇ
（約７４μｍの平均粒子径）
臭化チオトロピウム一水和物                 ０．３６０ｇ
【００６１】
実施例７：エタノール−水中のチオトロピウム−ラクトース溶液
エタノール                                 ５００ｇ
水                                         ５００ｇ
超微粒ラクトース                           ８８．０２ｇ
臭化チオトロピウム一水和物                 ０．３６０ｇ
【００６２】
ｂ）粗賦形剤と混合した工程ａ）で得られた吸入可能粒子の調製：ラクトース一水和物２００メッシュ（約７４μｍの平均粒子径）又はローラー乾燥無水ラクトース（約１２０μｍの平均粒子径）
【００６３】
この目的に対して、研究室規模のよく知られている三次元運動ミキサー：Turbula 2C (Bachofen AG, Switzerland)を使用した。５０ｍＬの非架橋ポリエチレンプラスチック容器を内容積５０％まで満たし、４６．２ｒｐｍの混合速度で混合（約２０ｇ）を実施した。
【００６４】
約２５％のラクトースを、更なる薬剤の付着を減じるために先ずミキサーボウル壁に沿うようにして加えた。工程ａ）で得られた噴霧乾燥粉末をついで加え、ラクトースと手作業で混合した。ついで、残りのラクトースを加え、混合を約３０分間実施した。
【００６５】
実施例１は、粗賦形剤と混合され（一水和物ラクトース及び無水ラクトース）、バッチ１Ａ（実施例８）及び１Ｂ（実施例９）をそれぞれ得た。
実施例３は、粗賦形剤（一水和物ラクトース及び無水ラクトース）と混合してバッチ３Ａ（実施例１０）及び３Ｂ（実施例１１）をそれぞれ得た。
【００６６】
実施例８：混合操作（Turbula）−一水和物ラクトース
実施例１から工程ａ）のようにして得た噴霧乾燥粉末          １．２００ｇ  
ラクトース一水和物（７４μｍ、ＤＭＶ）                  ２０．８１０ｇ
全重量                                                  ２２．０１０ｇ
【００６７】
実施例９：混合操作（Turbula）−無水ラクトース
実施例１の工程ａ）のようにして得た噴霧乾燥粉末            １．２００ｇ  
無水ラクトース（１２０μｍ、ＤＭＶ）                    ２０．８１０ｇ
全重量                                                  ２２．０１０ｇ
【００６８】
実施例１０：混合操作（Turbula）−一水和物ラクトース
実施例３からの工程ａ）のようにして得た噴霧乾燥粉末        １．２００ｇ  
ラクトース一水和物（７４μｍ、ＤＭＶ）                  ２０．８１０ｇ
全重量                                                  ２２．０１０ｇ
【００６９】
実施例１１：混合操作（Turbula）−無水ラクトース
実施例３からの工程ａ）のようにして得た噴霧乾燥粉末        １．２００ｇ  
無水ラクトース（１２０μｍ、ＤＭＶ）                    ２０．８１０ｇ
全重量                                                  ２２．０１０ｇ
【００７０】
先の実施例の単位最終組成物
チオトロピウム（塩基）                                  １８μｇ
ラクトース一水和物（安定化剤）                            ０．２７７５ｍｇ
ラクトース一水和物又は無水物（粗賦形剤）                  ５．２０２５ｍｇ
【００７１】
これらの実施例では、臭化チオトロピウムの最終含有量は、全組成物に対して約０．３９重量％（チオトロピウム塩基では約０．３３％）であった。
【００７２】
粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）
【００７３】
粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）パターンを、放射線源（ＷＬ１＝１．５４０６Ａ、ＷＬ２＝１．５４４３９Ａ）としてＣｕ線を用い、４０ｋＶの電位、４０ｍＡの電流及び０.０２°／分のスキャン速度で２°から７０°の２θ範囲を使用する標準的操作で、シーメンス回折計Ｄ５０００（Siemens, Germany）を使用して運転した。
【００７４】
図１Ａ及び２Ａにおいて、ＰＸＲＤ分析は、実施例１に記載された組成物に従って、噴霧乾燥方法が、臭化チオトロピウム単独の溶液と臭化チオトロピウム−ラクトース溶液の両方を非結晶形態に転換させることを可能にすることを示している。しかしながら、図１Ｂに示されるように、非結晶形態は保存中に結晶性チオトロピウムに転換したので、非結晶噴霧乾燥臭化チオトロピウムは安定ではなかった。これに対して、図２Ｂに示されるように、噴霧乾燥粉末中にラクトースがある場合、貯蔵後であってもチオトロピウム−ラクトース非結晶形態としてチオトロピウムを安定化することが可能であった。
【００７５】
粒子径分析
粒子径をレーザー光散乱に基づく技術によって測定した。体積粒度分布を、適切なＳＯＰ（標準操作手順）と共に乾燥サンプリングシステム（Scirocco 2000, Malvern, UK）を使用してMalvern Mastersizer 2000(登録商標)レーザー回折計で測定した。
粒度分布は、質量−体積中央直径（ｄ（０，５））、すなわち５０％の試料が小さく、５０％が大きいミクロンサイズ、及び質量−体積平均直径は（Ｄ［４，３］）によって特徴づけられる。提供される値は少なくとも３回の測定の平均である。
【００７６】
粒子径分析によって、溶液（実施例１）中及び懸濁液（実施例３）中のラクトースから得られた噴霧乾燥製剤の両方が、肺の深部への投与に適した粒径特性を提供した。
【００７７】
実際、溶液及び懸濁液タイプの直径中央値ｄ（０，５）は各々２．９μｍ及び３．０μｍであり、同じ製剤の平均体積直径Ｄ［４，３］は各々１０．３μｍ及び１０．５μｍであった。更に、粒子の７０％以上が、良好な肺浸透のサイズの限界と一般的に考えられている５．０μｍ以下の粒子径を示した。
【００７８】
走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）
粒子径と形態の評価を、ＪＳＭ−６１０顕微鏡(Jeol, Japan)を使用して、走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）によって達成した。試料は二成分型エポキシ樹脂の薄膜上に散乱され、白金層で被覆された。観察中の加速は２５ｋＶであった。
【００７９】
図３は、実施例１に記載された組成に従って、様々な倍率で、溶液中のチオトロピウム−ラクトースから得た噴霧乾燥粉末のＳＥＭ画像を示す。
【００８０】
図４は、実施例３に記載された組成に従って、様々な倍率で、懸濁液中のチオトロピウム−ラクトースから得た噴霧乾燥粉末のＳＥＭ画像を示す。
【００８１】
ＳＥＭによって分析された製剤の形態及び表面構造は、噴霧乾燥された粉末が、ばらばらの凝集物から構成されていることを示している。凝集体のサイズは約１００−５００μｍまでの範囲であった。倍率が高いと、これらの凝集体がおよそミクロン範囲の小さな粒子から構成され、懸濁液からよりむしろ溶液から得られた粉末の場合により均一な球状形状を有していることが観察できる。
【００８２】
噴霧乾燥粉末中及び最終チオトロピウム−ラクトース混合物中の薬剤分布均質性の評価
薬剤分布均一性を、上述の方法を用いて、ＨＰＬＣから評価した。
【００８３】
表２に示された結果は、加重試料と称されるデータ（カプセル単位用量）、ＨＰＬＣ分析からの注入溶液中のチオトロピウム量、噴霧乾燥製剤中のチオトロピウム量（ｍｇ／ｇ及びパーセンテージで示す）を示す。これらのデータは、２つの噴霧乾燥バッチに対する相対的に均一な薬剤分布を示し、エタノール−水及びイソプロパノール−水を含む噴霧乾燥溶液に対して約７％及び６．７％の適切な薬物含有量を示す。
【００８４】
0005622730.tif 000004
【００８５】
インビトロ空気力学的評価
新しいチオトロピウム製剤に対する空気力学的粒度分布を、マルチステージ液体インピンジャー（ＭｓＬＩ）を用いて決定した。ドライパウダー吸入装置（Fantasmino(登録商標)）は第３ＨＰＭＣカプセルを備えている(Capsugel, France)。流量は、患者による吸気に対して典型的である４ｋＰａの圧力低下に調節し、２．４秒の間、１００ｌ／分の流量を生じた。５．５ｍｇの粉末（１８μｇのチオトロピウム）を充填した５つのカプセルを各試験に用いた。装置、喉、４つのステージ及びフィルター（ステージ５）中の薬剤沈着を高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）分析によって決定した。精度を上げるために、各試験は３回繰り返した。
【００８６】
参照製品スピリーバ（Spiriva(登録商標)）に対する空気力学的粒度分布を、ハンディハーラー（Handihaler(登録商標)）装置と共にＭｓＬＩを使用しゼラチンカプセルを含めて、決定した。
【００８７】
結果は、ステージ３、４及びフィルター（それぞれ５．２７μｍ、２．４０μｍ及び１．３２μｍのカットオフ直径）に対応するＦＰＤが、開発された製剤に対して４．９μｇ（２７％のＦＰＦ）及び６．４μｇ（３５％のＦＰＦ）の範囲内で変動することを示している。これらの結果は、参照製品と比較して有意に高いＦＰＤ値を示している。実際、スピリーバ(登録商標)に対して得られたＦＰＤ値は、８．９％のＦＰＦに相当する１．６μｇであった。
0005622730.tif 000005
【００８８】
新しい製剤の安定性の予備的評価
均一性を呈する３種の混合した粗一水和物ラクトース−チオトロピウム製剤、すなわち実施例８、９及び１０を、しっかりと密閉した容器中に配し、２５℃（室温）、４０℃及び６０℃で１５日及び１ヶ月、保存した。異なった試料のチオトロピウム含有量を、異なった保存時間で、以下に記載するＨＰＬＣ分析によって評価し、参照製品スピリーバ(登録商標)のものと比較した。    
【００８９】
得られた結果は、３バッチが３通りの保存温度で３０日の保存時間まで許容可能な安定性を呈することを示している。新しい製剤のチオトロピウム含有量は参照製品のものに匹敵した。
【００９０】
表４に、３０日間及び２５℃、４０℃及び６０℃における異なった製剤の安定性の値を示す。特に、と同様に、ＨＰＬＣによって決定されたチオトロピウム含有量のパーセンテージ並びに標準偏差（Ｓ．Ｄ．）値に表示がなされる。
【００９１】
0005622730.tif 000006
【図１】
0005622730.tif 000007
【図２】
0005622730.tif 000008
【図３】
0005622730.tif 000009
【図４】
0005622730.tif 000010