(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
６２Ｃｕ放射性薬剤の作製に用いられる製造装置において、
加圧可能な溶離液容器であって、溶離液容器の加圧を制御する手段と、溶離液容器からの溶離液の放出を制御する手段とを有する溶離液容器と、
体積が２５〜１００μｌと小さく、親放射性同位体である６２Ｚｎと不可逆的に結合し、６２Ｃｕを選択的に溶液に放出する能力を有した樹脂ビーズを含み、溶離液容器の下方に配置されたカラムとを備えており、
カラムは、該カラムと溶離液容器との間に設けられており、充填ポートからカラムに入る６２Ｚｎの溶液を選択的に受け入れる手段と、溶離液容器から出てカラムに入って通過し、カラムの下方に配置された調剤用排出点に至る溶離液の流れを制御する手段とを有しており、
カラムを通過した溶離液は、緩衝液で希釈されることなく且つ緩衝液が加えられることなく調剤用排出点に至り、該調剤用排出点は針の先端である、
製造装置。
【請求項２】
放射性薬剤の生成品当たり、カラムは０．１ｍｌから０．３ｍＬの溶離液で溶離される、請求項１の製造装置。
【請求項３】
放射性薬剤を作製するキットと請求項１の製造装置の組合せであって、
上記キットは、下の化学式を持つ、凍結乾燥又はフリーズドライされたビス(チオセミカルバゾン)化合物を含み、セプタムで閉じられたバイアルを備えており、
【化１】
0005469794.tif 000006
上記において、Ｒ１及びＲ２は、それぞれ独立に水素又はヒドロカルビル基であり、Ｒ３は水素、ヒドロカルビル又はアリール基であり、Ｒ４は水素又はヒドロカルビル基であり、これら何れかのヒドロカルビル又はアリール基は、炭素原子の代わりにＯ、Ｎ、Ｓ、Ｐ及びＳｉからなる群から選ばれたヘテロ原子を、又は、水素原子の代わりにハロゲン原子を含んでおり、
バイアルには、適切な賦形剤(膨張性薬剤)と、バイアルの中身を戻すために用いられる注射用蒸留水と共に、請求項１の製造装置のカラムから流出した溶離液と混合されると、ｐＨを５．５〜７．５の範囲に調節することに加えて生理的等張にするように調節する化合物とが更に含まれている、
組合せ。
【請求項４】
セプタムで閉じられたバイアルは、０．２μｇ〜４μｇのビス(チオセミカルバゾン)化合物を含む、請求項３の組合せ。
【請求項５】
６２Ｃｕ放射性薬剤を製造する方法において、
溶離液容器の加圧を制御する工程と、
溶離液容器から溶離液を放出し、体積が２５〜１００μｌと小さく、親放射性同位体である６２Ｚｎと不可逆的に結合し、６２Ｃｕを選択的に溶液に放出する能力を有した樹脂ビーズを含み、溶離液容器の下方に位置するカラムを通して、緩衝液で希釈することなく且つ緩衝液が加えることなく、カラムの下方に位置する調剤用排出点へと流す工程と、
調剤用排出点から、水で戻される凍結乾燥又はフリーズドライのビス(チオセミカルバゾン)化合物を包含するセプタムで閉じられたバイアルへと溶離液を導いて、注入用溶液を作製する工程とを含んでおり、
調剤用排出点は針の先端であり、
化合物の化学式は以下の通りであって、
【化２】
0005469794.tif 000007
ここにおいて、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ独立に水素又はヒドロカルビル基であって、Ｒ３は水素、ヒドロカルビル又はアリール基であって、Ｒ４は水素又はヒドロカルビル基であって、これら何れかのヒドロカルビル又はアリール基は、炭素原子の代わりにＯ、Ｎ、Ｓ、Ｐ及びＳｉからなる群から選ばれたヘテロ原子を、又は、水素原子の代わりにハロゲン原子を含んでいる、
方法。
【請求項６】
溶離液が調剤用排出点へと６２Ｃｕを運ぶ、請求項５の方法。
【請求項７】
放射性薬剤の生成品当たり、０．１乃至０．３ｍＬの溶離液が、１００〜５００μＬ／分の流量でカラムを通って放出される、請求項５の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２００３年９月提出の米国仮出願第６０／５０１，１５６号の利益を主張する。
【背景技術】
【０００２】
ポジトロン断層法(ＰＥＴ)は、極めて高感度な撮像技術であり、その他の放射性核種撮像方式に比べて、数多くの実用上の利点を有している。これまで、その医療現場での利用の広まりは、最も一般的に使用される半減期の短いＰＥＴ用放射性核種(15Ｏ、13Ｎ、11Ｃ、18Ｆ)の製造に必要となる専用(in-house)の生物医学用サイクロトロンの価格の高さや、運転コスト、そして、メンテナンス費用といった経済的理由から、限られたものにとどまっていた。ＰＥＴの利点はよく知られていたものの、これらの高い費用を相殺できるほど十分なものではなかった。さらには、半減期の短い放射性核種を専用サイクロトロンを使用して迅速に作製することについて、ＦＤＡの規制は厳しいものであった。
【０００３】
この１０年間で、ＰＥＴの放射性薬剤の作製及び配送において、重要な変化があった。18Ｆの可能性の発見がそれである。18Ｆは、小さなサイクロトロンで作製することができ、限定的な配送には十分な長さである１１０分の半減期をもっていたため、ＰＥＴ放射性薬剤の商用流通網がいくつか生じるに至った。これらの努力は、グルコース類似体(18Ｆ−ＦＤＧ)に向けられたものであり、この類似体は、サイクロトロンを備えており、地方に配置された薬局を通じて流通される。これら薬局の各々が地方にある数多くの医療施設に提供できることから、北アメリカにおけるＰＥＴセンターの数は、２０００年には２３０施設であったのが、２００３年には６０３施設にまで膨れ上がった。同時に、大多数の施設がサイクロトロンを自前で持たず、商業的に製造及び流通する18Ｆ−ＦＤＧにもっぱら依存している。つまりは、ＰＥＴは単一のトレーサーによる方式となってしまっており、その他のトレーサーを効率的に配送する方法に欠けている。
【０００４】
研究所や病院における十分な数の研究は、各種の銅(II)ビス(チオセミカルバゾン)錯体(complexes)が、ＰＥＴ薬剤として利用できることを示唆している。有望な例として、銅(II)62Ｃｕピルブアルデヒドビス(Ｎ４−メチルチオセミカルバゾン)、即ち62Ｃｕ−ＰＴＳＭの改善が続けられており、これは、心筋、脳、腎臓及び腫瘍のパーフュージョン剤(perfusion agent)としての利用が実証されている。この薬剤は、９．７分という好ましい短さの半減期をもつため、患者に与える放射線量を減らすことができ、患者を撮像する一度の短いセッションの間に複数の試験を連続して行うことを可能とする。
【０００５】
さらには、62Ｃｕは、半減期が９．３時間である62Ｚｎを基礎とする生成装置で製造されるので、62Ｃｕ−ＰＴＳＭは、地域又は国レベルのいずれの配送システムによっても、容易に病院に配送することができる。専用サイクロトロンによって製造する場合と異なり、規制機関は、生成装置を使用した配送を認めやすい。
【０００６】
ビス(チオセミカルバゾン)群の薬剤では、その他に、62Ｃｕエチルグリオキサール(ethylglyoxal)ビス(チオセミカルバゾン)、即ち62Ｃｕ−ＥＴＳが人体研究されている。62Ｃｕ−ＰＴＳＭと構造上似ているが、62Ｃｕ−ＥＴＳは、大きな血流速度においてより線形吸収(linear uptake)するので、心筋かん流や肝臓血流の測定等の用途について、より優れたＰＥＴ用パーフュージョントレーサーを提供することができるだろう。この数年間、もう一つのビス(チオセミカルバゾン)リガンドであるジアセチル−ビス(Ｎ４−メチルチオセミカルバゾン)、即ちＨ2ＡＴＳＭについての研究が進められて、この化合物を銅を用いて標識したものが、低酸素状態用造影剤(hyproxia imaging agent)として非常に有望であることが明らかになった。それは、均一なパーフュージョン画像(homogeneous perfusion images)にて、腫瘍内で不均一に集積して、集積が低酸素状態の不均一性を反映していることを強力に示唆している。また、放射線標識されたＨ2ＡＴＳＭは、実験的な冠動脈閉塞が引き起こした低酸素状態が反映された、「ホットスポット」のある心筋画像を描き出している。さらに、Ｃｕ−ＡＴＳＭによる腫瘍の低酸素状態の画像は、病気の予後及び放射線治療の効果と関連があるという、数件の臨床結果が知られている。このように、62Ｃｕ−ＡＴＳＭは、心臓や神経の病気の診断だけではなく、腫瘍の治療にも役立つＰＥＴ画像を生み出す、非常に価値あるツールとなる可能性を持っている。９．７分という62Ｃｕの短い半減期は、臨床での１度の短い撮像過程に、複数の放射線医薬を組み合わせることを可能にする。例えば、62Ｃｕ−ＡＴＳＭによる検査のすぐそばで、62Ｃｕ−ＰＴＳによる腫瘍潅流と腫瘍低酸素状態の撮像を組み合わせて行うことで、非常に定量的で正確な腫瘍低酸素状態の評価を行える。最後に、62Ｃｕ放射線医薬品は、生成装置を用いずに製造される60Ｃｕ、61Ｃｕ及び64Ｃｕに比べると、かなり経済的に配送できる。
【０００７】
現在のところ圧倒的に、放射性画像(nuclear imaging)の最大の用途は、冠状動脈疾患の分析における心筋潅流の撮像にとどまっている。そのような撮像行為は、全ての放射性の検査の５０％以上を数えるが、解像度が非常に低くて、減衰補正の効果は少ないような単一光子撮像(single photon imaging)と、ストレス下にある冠動脈における血流量の変化の追跡能に乏しい99mＴｃを基礎とするトレーサーとを用いて行われている。この分野におけるＰＥＴの完全な可能性を知るためには、パーフュージョントレーサーとして特に効果的な、18Ｆ−ＦＤＧではない別のトレーサーを配送する手段が必要がであることは明白である。
【０００８】
米国特許第５，５７３，７４７号の記載にあるように、インライン合成法(method of in-line synthesis)によって作製されたビス(チオセミカルバゾン)族であって、62Ｃｕで標識された薬剤を製造するようなモジュール式の62Ｚｎ／62Ｃｕ生成装置が開発されてきた。62Ｃｕの９．７分という半減期は、放射線医薬の合成を容易にするのに十分な長さであると同時に、以前の投与による62Ｃｕのバックグラウンドに干渉されることなく、適度に短い間隔で複数の撮像作業を連続して行うのには十分な短さである。また、このような検査は、適度な時間、およそ４０分の間隔をおけば、18Ｆ−ＦＤＧなどの他の薬剤によるものでも構わない。撮像行為を連続して行えることは極めて有益である。というのも、これは心筋血流の評価に好ましい方法だからである。このような検査には、薬理学的又は実験ストレスの間、心筋における集積の位置的比較がそれによって安定していることが必要である。現在では、６時間という半減期を持つ99mＴｃトレーサーによって行われているそのような作業が、62Ｃｕの短い半減期によって改善されることになる。
【０００９】
生成装置で作製される62Ｃｕは、２つの配送モデルのうちの１つを利用して、容易に医療施設に配送できる。親である62Ｚｎ(これは子である62Ｃｕ同位体へと崩壊する)の持つ９．３時間という半減期は、１９ＭｅＶのサイクロトロンを用いて、18Ｆのラジオファーマシー(radiopharmacies)内又はその近くで製造することを可能とする。このような62Ｚｎ／62Ｃｕ生成装置は、すでに18Ｆのために整備されている地域配送網とまさに同じものを利用して配送できる。あるいは、親である62Ｚｎを、２、３の大きな集中施設において２５ＭｅＶを超えるサイクロトロンを用いて製造し、生成装置に充填して、それを地域のラジオファーマシーに又は直接病院に搬送することも可能である。
【００１０】
62Ｚｎ／62Ｃｕ生成装置を用いることには、規制の上でも数多くの利点がある。現在、ほぼ全てのＦＤＡ認可の放射線薬剤は、よく統制された状態にある中央商業施設で作製され、管理下にある地域の病院に配送される。生成システムを用いた配送は、一般的によく認められた行為であるとともに、99mＴｃの配送に主として用いられる手段でもあり、これは現行の核医学における大多数の実務上の要求に応えるものである。多数の病院内に設置されたサイクロトロンで放射線医薬が製造されるようなことは、現実の枠組みとして、ＦＤＡが承認していないし、承認するようなことはあり得ない。対照的に、米国特許第５，５７３，７４７号の62Ｚｎ／62Ｃｕ生成装置のような放射線核種生成システムは、ＦＤＡで承認されたＧＭＰ作製の代替となりうる。
【００１１】
米国特許第５，５７３，７４７号に記載されたインライン合成式生成装置は、限られた臨床試験においては非常にうまく機能しているが、医療用途について大規模で商業的に実現することが難しいという欠点を持っている。あらゆる62Ｚｎ／62Ｃｕ生成装置がたった一日の利用にしか耐えないことを考慮すれば、システムを簡素化し、製品コストを下げることに対して、あらゆる可能な手段を尽くすことは不可欠である。また、米国特許第５，５７３，７４７号の生成装置に関して言えば、使用者によって繰り返し入れられることになる生成装置のセプタム(septum)に関して、ＦＤＡが強い懸念を表明している。つまり、「密閉され、あらかじめ消毒された空の瓶の中に直接回収される」製品が望ましく、生成装置を無菌状態に保つために求められる。米国特許第５，５７３，７４７号の生成装置のチューブセットは、製造コストがかかり、ＦＤＡは、再使用間の消毒性に関しても、留保を表明している。それによると、「製品は流体の複雑な流路を持ってる。この欠陥に対する対処として、計測試験を追加して、システムの完全性を示す必要がある。しかしながら、設計と、リサイクルの問題を考慮すると、十分な試験が可能であるか疑わしい。設計の改善が必要となるだろう」と述べている。さらには、米国特許第５，５７３，７４７号の62Ｚｎ／62Ｃｕ生成装置では、その内部のポンプを含めると、生成装置のハウジングの大きさは相当に膨れ上がって、輸送量の高騰を招いてしまう。さらには、７５０μｌカラムに要する大きなシールドの運搬は非常に重く(３５ポンド)、医療おいて１日の寿命しかない生成装置システムのコストの大きな部分を、輸送費が占めることとなる。こうしたわけで、62Ｚｎ／62Ｃｕ生成装置の重量と大きさを減らすためにあらゆる手段が講じられるべきである。もう一つの重大な制約は、３３ｍＬという注入量の大きさである。このような大きな容量が必要とされるわけは、溶離液溶液(eluant solution)の高い塩類含有量にあり、等張液を得るためには、注入用蒸留水(ＳＷＦＩ)で希釈しなければならない。この注入量の大きさゆえ、技術者の過度の被爆を避けるために、重くかさばるシールドが必要となり、また簡便な瓶合成技術を利用することができない。さらに、注入量が大きいと、過敏な患者に不都合をきたす恐れがあり、注射時間が長引いて、そのことにより、典型的なＰＥＴ定量分析に必要な入力関数(input function)を確定するのが困難になる。米国特許第５，５７３，７４７号の62Ｚｎ／62Ｃｕ生成装置においては、生成装置内部でリガンドの付加が行われるため、装置を非常に複雑にすることなく製造できるのは、ただ一種の放射性薬剤でしかない。この制約は不幸なことであり、特に、数種の非常に有用な62Ｃｕ放射性薬剤の有効性と、２種又はそれを超える薬剤を用いた近接検査を応用することの魅力と照らし合わせるならばなおさらのことである。例えば腫瘍や心筋潅流は、62Ｃｕ−ＡＴＳＭによる低酸素状態のスキャンによって即座に追跡することができる。そのようなパーフュージョンスキャンは、低酸素状態の有意義で定量的な評価を達成するためには不可欠である。
【００１２】
複数のＰＥＴ放射性薬剤の作製を容易で互換性のあるように行えるシステムや方法に対する需要がなおも存在することは明らかである。
【発明の開示】
【００１３】
新しいシステムでは、単純化された溶離液のみの生成装置と、凍結乾燥(lyophilizeｄ)又はフリーズドライ(freeze dried)されたリガンドを用いる合成技術に基づいたキットとを利用することで、複数のＰＥＴ放射性薬剤を容易で互換性のあるように作製できる。すなわち、単に凍結乾燥されたリガンドのバイアルキット(vial kit)を取り換えるだけで、同じ１つの62Ｚｎ／62Ｃｕ生成装置を用いながら、62Ｃｕによって標識された放射性薬剤(62Ｃｕリガンド)を、互換性のあるようにいくらでも合成できる。互換性のある放射性薬剤の作製について付け加えると、凍結乾燥されたキットの形態を用いることから、製造現場ではよく知られている通り、高い安定性と低コストという十分な利益を得られる。さらに、そのように作製された放射性薬剤では単位用量が大幅に減少するため、患者の快適さを向上させ、投与にかかる時間も改善される。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
高度に単純化及び小型化された生成装置が図１に示されている。これは、溶離及び滅菌されたパイロジェンフリー(pyrogen-free)な62Ｃｕ2+のみを生成する。生成装置のカラム(10)のサイズを小さくしたことによって、溶出する62Ｃｕの量について必要とされる減少を容易にする。生成装置は、１つの溶離液容器(1)と、体積が２５〜１００μＬである小さなカラム(10)とを備えており、密閉された容離液容器(1)内に適度に圧力をかけることによって溶出がなされる。加圧によって、充填と溶出のプロセスを効率化及び簡素化することができ、米国特許第５，５７３，７４７号の62Ｚｎ／62Ｃｕ生成装置が必要とした蠕動ポンプが不要になる。カラムの小型化は、５０ｍＣｉの62Ｚｎの質量がわずか１０ｎｇであることから可能となり、これは、ちょうどＡＧ１Ｘ８樹脂ビーズの１μＬにおける吸着能の０．８％に相当する。この革新によって、カラム体積を１５分の１に縮小し、最新のタングステン合金のシールド(9)を使用し、さらに蠕動ポンプを廃することで、カラム周囲に必要だったシールドの重さを劇的に減少させることを達成し、そのことによって、搬送コストを相当に減らすことになる。しかしながら、カラム体積の縮小で得られるもっとも重要な利益は、１５という相応な因子で、放射性薬剤製品の注入量を減らせることにある。食塩１．８Ｍ ＮａＣｌ、０．２Ｍ ＨＣＬ溶離液溶液は、ＮａＡｃ緩衝液と共に、等張にするために６倍に希釈しなければならないので、凍結乾燥リガンドキットによる合成には、流出体積(elution volumes)が小さいことが不可欠である。この流出体積を大幅に減少させた効果によって、小型の生成装置、つまり「マイクロジェネレーター」によって、現実的な大きさ(例えば＜５ｍＬ)の受け取りバイアル(17)に、注入可能な等張ＰＥＴ放射性薬剤を作製できる。
【００１５】
62Ｚｎ／62Ｃｕ小型生成装置は図１に示されており、４つの主要な部分を含んでいる。すなわち、樹脂製の小型カラム(10)、溶離液容器(1)、充填ポート(8)、および溶離ポート(14)である。システムの要部である構成部品は、体積が大幅に縮小されたホウケイ酸塩ガラスのカラムである。ある実施例では、このカラムは全長２．９ｃｍで、内径２ｍｍ、外径６ｍｍである。このカラムの上部及び下部は、一般的な８ｍｍの厚さでバイアル状に閉じられている。厚さ３ｍｍ、細孔径３０ミクロンのガラスフリットが、カラムの底から５ｍｍに溶接されている。このカラムは、５０μｌのＡＧ１Ｘ８、つまり２００から４００メッシュの陰イオン交換樹脂によって計量線まで満たされる。カラムへの入口及び出口には、１９．５ゲージ(外径１ｍｍ、内径０．７ｍｍ)の耐食性金属チューブ(例えば、Ｉｎｃｏｎｅｌ ６２５)の小片が用いられる。カラム内の空隙容量(void volume)を小さくするために、カラムの入口及び出口のチューブは、１．６ｍｍ×７ｍｍのバイトンセプタムを通って突き出る。セプタムの０．５ｍｍの孔はチューブの挿入を容易にし、チューブは、８ｍｍのアルミクリンプシールを用いてクリンプシールされる。小型カラム(10)の詳細寸法は重要ではなく、ＳＷＦＩと混合されて、約５ｍＬの体積を上回らない等張の注入液を作り出す場合に、単位容量の62Ｃｕ溶離液を提供するように決定される。
【００１６】
カラム上側にある「Ｔ字型」接続部により、可撓性チューブ(例えば、Pharmed tubing [Cole-Parmer])の短い部分で動作するピンチバルブ(5)(6)を操作して、溶離液容器(1)又は充填ポート(8)からカラム(10)へと至るような流れの接続を可能にする。オートクレーブ後の滅菌を確実にし、システムに入ってくる滅菌されていない流体による汚染を避けるために、０．２２μｍの親水性(ＰＶＤＦ)滅菌フィルター(4a)が、充填ライン上に設置されている。充填ラインの末端には、ＨＰＬＣ接続部(7)があり、生成装置を容易に且つ滅菌状態のまま、図２に示された充填装置に取り付け、取り外すことを可能とする。図１のピンチバルブ(11)は、ソレノイド式又は手動式のアクチュエータ(12)によって調整され、カラム(10)の下に配置される。ピンチバルブ(11)を開閉することによって、流出プロセスが制御される。カラム(10)の下にバルブを配置することで、カラムの樹脂ベッド(resin bed)内の圧力を一定に保ち、それによって、溶解していた気体による気泡の発生を防ぐ。ピンチバルブの下には、針固定用支持部材(13)があり、キットのバイアル(17)のセプタムを貫いて針(14)が挿入されている間、針(14)を確実に固定する。図１に示されているように、着脱自在な上部を有するバイアル用シールド(15)が設けられ、バイアル用シールド(15)内にあるバイアル用キャビティの上には入口ポート(16)が設けられている。昇降調節機構(18)が、バイアル用シールド(15)内にある凍結乾燥されたリガンドのバイアル(17)を動かして、生成装置の溶出用針(14)が入ると、流出用針(14)は、入口ポートによってバイアル(17)のセプタムに至る。
【００１７】
溶離液容器は、５０ｍｌのセラムバイアル(serum vial)であってよく、２０ｍｍのグレーのブチルセプタムと、アルミのクリンプシールとを備えている。カラムを通る流量はこの容器のヘットスペースで維持される圧力で制御される。そのボトルは、圧力ソース(3)によって加圧され、０．２２μｍの疎水性(ＰＴＦＥ)滅菌フィルター(4b)を通り、図１に示されるピンチバルブ(2)によって密閉される。
【００１８】
充填装置は図２に示されており、圧空駆動式搬送システム用に設計されている。３ｍｌの円すい形のテフロン(登録商標)製バイアル(25)が、充填用容器(loading vessel)として使用される。この容器を充填用容器としての使用に適するようにするために、底に若干小さめした孔が空けられ、容器は１００℃に加熱される。加熱後、内径０．５ｍｍ、外径１．６ｍｍのチューブ(例えば、テフロン)が開口に素早く挿入される。冷却された後、熱圧着によってラインは確実に固定される。このラインは、充填剤容器(25)から２ｃｍ下側に配置されているガイガープローブ(28)(これは(27)によってシールドされている)を横切る。これにより、管内にある放射性溶液の存在又は不存在が瞬時に判別されて表示される。
【００１９】
充填剤容器の蓋のセプタムには２つの穿孔が空けられ、内径０．５ｍｍのチューブ(例えばテフロン)が挿入可能になっている。一方は充填剤容器の加圧に用いられ、他方は、精製された62Ｚｎを充填剤容器に充填するために用いられる。ピンチクランプ(23)は、容器(215)へと導かれる圧空管路上に配置され、これによって、洗浄容器(26)と充填剤容器(25)の圧力差が可能となって、相互接続された流路が満たされる。圧力源(21)から加えられる圧力は、デジタル式圧力変換器(22)(例えば、オメガＰＸ１７０)によって正確に計測される。圧力源と洗浄容器及び充填剤容器の間の接続は、内径０．５ｍｍのテフロンチューブを用いて行われる。タイゴンチューブ(内径１．５ｍｍ)は、圧力変換器と充填圧力システムを接続する。
【００２０】
洗浄容器(26)のセプタムには、充填剤容器(25)と同様に２つの穿孔があって、それらには内径０．５ｍｍのチューブが挿入される。一方のラインは洗浄容器を加圧するもので、他方のラインは２Ｍ ＨＣｌを充填ラインへと提供する。洗浄容器から流れ出るラインは、３方向ＨＰＬＣセレクタバルブ(29)へとつながる。このバルブにより、洗浄容器から充填剤容器に至る流れで流体ラインを満たし、充填剤容器から生成装置の充填ポート(8)(図１)に至る流れで生成装置に充填し、洗浄容器から生成装置の充填ポート(8)に至る流れにで流体ラインを満たして生成装置に充填できる。充填装置の充填ラインの末端には、素早くＨＰＬＣクイックコネクト(30)があり、生成装置の充填ポート(8)への接続を提供している。
【００２１】
充填された放射能(例えば、62Ｚｎ)は、図２の円錐状の充填剤容器(25)へと送り込まれ、充填システムで前処理される。前処理には、洗浄容器から送られる２ＭのＨＣｌで全てのラインを満たす工程が含まれる。充填工程は、以下の通りである。ピンチクランプ(23)は、大気圧下で閉じられて、３方向ＨＰＬＣバルブ(29)に端を発して充填剤容器(25)で終わるラインを、洗浄容器(26)から送られる２ＭのＨＣｌで満たすのを助ける。その後、３方向バルブが回転されて、洗浄容器から充填ラインへに至る流路が選択されて、そのラインに液体が同様に満たされる。充填装置の出力部(30)は、連続した液体の流れに気泡が入らないように、生成装置の充填ポート(8)に接続される。溶離液容器(1)から「Ｔ字型」接続部への間に位置するピンチクランプ(5)は、62Ｚｎが溶離液容器に流入しないように閉じられており、そして、２Ｍ ＨＣｌが、洗浄容器(26)(図２)から生成装置のカラム(10)へと運ばれ、望ましい導入流量が達成される。３方向バルブが切り替えられて、62Ｚｎ溶液が、充填剤容器(25)から生成装置のカラム(10)へと導入される。充填作業の間、ガイガープローブ(28)の測定値が結果的に急激に下がることで、３方向バルブが充填容器から洗浄容器へと切り替わったことが信号で伝えられる。そして、生成装置のカラム(10)は２５６μｌの溶離液で洗われる。その後、充填容器が切り離され、生成装置のカラム(10)が使用可能になる。
【００２２】
あらゆるビス(チオセミカルバゾン)誘導体(derivatives)は、同じ方法で、容易且つ積極的にＣｕをキレートする。図８は、銅(II)イオンのキレート化を描いており、これは、側鎖基Ｒｘ(ｘ＝１，２，３又は４)が何であるかに拘わらず成立する。それは、Ｃｕ+2イオンが、Ｒｘの構成にはほとんど影響されないように、化合物内で窒素及び硫黄原子の混成軌道と相互作用するからである。リガンド内のπ共役系はこの反応内で保たれて、置換基は、この共役系の範囲外であって、キレート化のメカニズムには加わらない。銅イオンが硫黄原子に結合する場合、電子の再配置が起きて、その結果、２つの窒素−炭素二重結合が形成されて、２つのＨ＋原子が失われる。リガンド錯体においては、銅原子は、銅２＋の状態では一般的な四角構造(square configuration)で結合する。表１は、ビス(チオセミカルバゾン)錯体の一部リストであり、これは文献として既に報告されているものである。以下にビス(チオセミカルバゾン)錯体の構造を示す。
【００２３】
【化３】
0005469794.tif 000002
【００２４】
【表１】
0005469794.tif 000003
【００２５】
【表２】
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【００２６】
これらの化合物は、キレート化反応が非常に似ているが、側鎖基Ｒｘが異なるために、生体内において化学的及び物理的に非常に異なった特質を示す。例えば、Ｈ2ＡＴＳＭとＨ2ＰＴＳＭは側鎖基Ｒ2が異なるのみだが、水／オクタノール分配係数は０．３４も異なる(表２参照)。また、異なった側鎖基で置換することで、さまざまな血中の化合物への銅化合物の結合をかなり変化させることが可能となる。このような効果は、高度に種依存的であることが知られている。特に、Ｃｕ−ＰＴＳＭは、人間を除く大多数の動物種において血液との結合力が低いが、人間にあっては極めて高い結合を示し、高い流速において非線形な集積を引き起こす。一方、異形(variant)Ｃｕ−ＥＴＳは血漿との可逆的結合性が低いために、心臓や腎臓等の血流速度が速い臓器の撮影用途において、Ｃｕ−ＰＴＳＭよりも効果的な血流トレーサーとなる。
【００２７】
図９は、チオール媒介によるＣｕII−ＰＴＳＭの細胞内での分解と、それに関する通常細胞内における62Ｃｕビス(チオセミカルバゾン)錯体を説明しており、ＣｕII−ＰＴＳＭの細胞内での分解は、これを静脈投与した後において62Ｃｕ放射性標識が「マイクロスフェア様」の細胞組織で長く保持されることと原因であると信じられている。非荷電で脂肪親和性の銅(II)ビス(チオセミカルバゾン)錯体は、細胞壁を容易に抜けて拡散するので、細胞内に遍在するグルタチオンなどのチオールと直ちに反応して還元分解する。チオールの硫黄からＣｕ(II)ビス(チオセミカルバゾン)錯体への電子移動は、ビス(チオセミカルバゾン)リガンドからＣｕ(I)を分離させて、細胞内の高分子と結合(及び効果的に捕捉)させる。別のＣｕIIビス(チオセミカルバゾン)錯体は明確な還元能を有しており、それが細胞内での捕捉に大きな効果を発揮する。ＣｕＡＴＳＭは、例えば、１００ｍＶにおけるＣｕＰＴＳＭ又はＣｕＥＴＳよりも低い酸化還元能をもつ。その結果として、通常酸素状態の(normoxic)細胞組織内では還元されず、したがってすぐさま洗い流される。しかしながら、低酸素状態の細胞組織内においては、ＣｕＡＴＳＭのＣｕ(II)は、電子キャリア(酸素)が欠けるために、直ち及び不可逆的にＣｕ(I)に還元されて保持される。
【００２８】
放射性標識されたＣｕビス(チオセミカルバゾン)化合物を合成する新しい方法は、凍結乾燥状態のリガンドを使用することを中核としている。凍結乾燥又はフリーズドライは、凍結して真空状態においた後に製品から水分が除去されるプロセスであって、液相を経ることなく、氷を固体から気体へと直接に昇華させることを可能とする。このプロセスは、溶質の結晶化を効果的に防げるので、通常のように固体状態のまま行う場合と比較して、溶質が遥かに容易に溶ける。無菌凍結乾燥の後、乾燥した結果のケーキは無菌状態を保っており、製薬業界でよく知られているような水溶液に保持される場合よりも、長期間の保存に耐える。問題のリガンドを含む溶液は、賦形剤とともに凍結乾燥されて、２〜５ｍｌのバイアルに保存される。バイアルの中身は、注入用滅菌水(ＳＷＦＩ)を、又は酢酸ナトリウムなどの緩衝剤を含んだＳＷＦＩを加えるだけで、ほぼ瞬時に溶解する(戻される)。62Ｚｎ／62Ｃｕ生成装置又はその他のソースから提供される滅菌された放射性Ｃｕ2+溶液を、その後バイアルに加えて、放射性標識されたＣｕ−リガンド錯体が即座に作製される。このような即時の合成法は、実際の医療現場において、62Ｃｕ(ｔ1/2＝９．７分)などの半減期の短い薬剤を利用するためには不可欠である。62Ｃｕを62Ｚｎ／62Ｃｕ生成装置から得る場合、溶液は、１．８Ｍ ＮａＣｌ、０．２Ｍ ＨＣｌからなるのが好ましく、バイアルの中身は、２モルを超える酢酸ナトリウム又はその他の中和剤と多量のＳＷＦＩを含んでおり、ＳＷＦＩは、62Ｃｕを含む溶液と共に用いられて、最終的な注入液の浸透圧を血液に近い値(７．７ａｔｍ)にし、ｐＨを最も好ましくは５．５〜７．０の範囲内にする。
【００２９】
凍結乾燥を基礎としたキット合成法を用いて、ビス(チオセミカルバゾン)リガンドの相溶性(compatibility)を評価する試験が、Ｈ2ＰＴＳＭをモデル化合物として用いて行われた。これらの試験では、第１にリガンドの凍結乾燥と即時の再構成の実現可能性が評価された。ビス(チオセミカルバゾン)化合物のあらゆるものは水に非常に溶けにくい。その結果、凍結乾燥に要する主たる水溶液を用意するために、結晶状態のＨ2ＰＴＳＭが、ジメチルスルホキシド(ＤＭＳＯ)中に最大濃度で溶かされた(２００ｍｇ／ｍＬ  Ｈ2ＰＴＳＭ)。リガンドの溶解性はＤＭＳＯにて高いことから、極めて少量のこの溶液が水に加えられて、リガンドの濃度が２μｇ／ｍＬであるような、ほとんどＤＭＳＯを含まない水溶液が作製された。リガンドの沈殿の可能性を低減するために、ＤＭＳＯ溶液は、素早くかき混ぜながら湯(９０℃)に加えられた。この溶液は、その後室温にまで冷却されて、分光光度計を用いて有効性が測定された。水溶液に含まれる極めて少量のＤＭＳＯは、凍結乾燥の過程で水分とともに昇華することが望ましい。凍結乾燥の後の有効性を最大化するために、賦形剤(ブドウ糖［６．７ｍｇ／ｍＬ］、トレハロース［６．７ｍｇ／ｍＬ］又は酢酸ナトリウム［５．４ｍｇ／ｍＬ］のいずれか)が加えられた。賦形剤を加える目的は、凍結乾燥の間、ケーキの中に分散した状態を保つことで、リガンドの結晶化を防ぐことにあった。酢酸ナトリウムにはさらなる役割があって、62Ｚｎ／62Ｃｕ生成装置の流出液０．１〜０．１５ｍＬを加えることで、最終製品が適切なｐＨになるように緩衝する。結晶化した状態を水溶液に戻すのは極めて困難なので、リガンドの結晶化は何をもってしても避けなければならない。賦形剤を加えた２μｇ／ｍｌのリガンドを含む溶液は、２ｍＬのバイアルにつき１ｍｌずつに分けられ、凍結乾燥された。バイアルの凍結乾燥は、まず試料を−７０℃まで２時間冷却し、その後、(凍結乾燥器内の)バイアルを２時間−２０℃に保つことで行われた。最後に、冷凍が終了し、１８時間の真空(２５〜５０ｍＴｏｒｒ)サイクルが開始された。真空サイクルの最後に、バイアルは窒素ガス下でクリンプシールされた。
【実施例】
【００３０】
[実施例１]
生成装置のカラムを通る溶離液供給における加圧方法を評価するために、溶離液容器内の圧力に変化を加え、単位時間あたりに流出した体積を計測することによって、流量が決定された。望ましい流出流量は、３．６ｍｌ／分で流出する７５０μＬのカラムの生成装置からスケーリングすることで推定される。各デザインにおける樹脂ベッド体積の比に従って流量をスケーリングすることで、新たなシステムについて、２４０μｌ／分の流量が示された。溶離液容器は、最初に５ｍｌの溶離液を溜めている。医療現場で予想される最大のカラムの使用である、流出体積当たり約０．１２ｍｌで２０回流出する場合を考えると、溶離液の体積にして２．４ｍｌの減少であり、これは流出圧力においてわずか５％の違いを生じるのみであり、毎日の臨床使用での最大貯蔵期限である１日間にわたって使用したとしても、臨床使用において無視できる流量の差違である。
【００３１】
圧力を加える流出方法によって、目標流出量である２４０μｌ／分が達成された。実験では、溶離液容器に５〜１５ｐｓｉｇの範囲に亘って圧力が加えられた。流出したサンプルの重量が量られて、特定の圧力下における流量が決定された。カラムの性能に与える流量変化の効果を調べるために、それぞれ５又は１０秒区切りで、３０秒、６０又は１２０秒間における種々の圧力下の流出特性が集められた。全ての流出及びフラクション(fraction)は、Ｃａｐｉｎｔｅｃ製ＣＲＣ−１５Ｒによって即座に計測され、流出開始時点に対して減衰補正を行った。これら流出及びフラクションは同時に、単位時間当たりに流出した体積で測定された。
【００３２】
簡素化された小型生成装置及びバイアル合成法に関する予備実験が行われた。これら試験の主目的は、製品の実現可能性を示し、物理的な大きさ及び体積を劇的に小さくした生成器カラムの十分な性能を示すことにあった。第２に、ポンプに代えて、受動圧を使った簡単なカラム流出方法の実現可能性が検討された。
【００３３】
全部で４つのカラムが充填及び評価された。４つのカラムの全ては、１０μｍｌ／分の流量で充填された。様々な充填体積が評価されて、ブレークスルー(breakthrough)と生成性能(yield performance)が求められた。体積は、０．１５ｍｌから１．５ｍｌの範囲にされた。充填される放射能を順次増大して試験を行ない、潜在的な放射線障害がカラムの性能に与えるあらゆる効果が評価された。放射能の範囲は２．９ｍＣｉから７８ｍＣｉであった。
【００３４】
選択された流出サンプルのブレークスルーは、ＮａＩウェルカウンタ(サール モデル １１９７)にて62Ｃｕが完全に崩壊した後にカウントされた(流出後４時間)。精製した62Ｚｎがシステムの較正に使用された。ブレークスルーは、生成装置のコラムの62Ｚｎで溶離液溶液の62Ｚｎを割った比として報告される。それらは、同じ時点にて崩壊する。
【００３５】
プロトタイプの４つの小型生成装置が作製された。各々は、５０ｍＬのガラス製溶離液容器を採用しており、容器は、５０μＬの樹脂で満たされたカラムにチューブを用いて直接に接続されて、出力チューブのラインに結合された。流出は、較正された手動ピンチクランプの開閉によって調節された。クランプは、チューブにかかる超過圧力が掛かるのを避けるように設計及び調整された。溶離液容器を加圧するために、容器のヘッドスペースから延びるチューブラインに圧力源が接続された(図１の(3)を参照)。圧力駆動される流れの実現可能性を示し、圧力と流量間の関係を確立するために、０〜１５ｐｓｉｇの容器圧力について、流出サンプルが集められて質量が計測された。さらに、流量の再現性を確立する実験が慎重に行われた。62Ｚｎ溶液は、１０μＬ／分の充填量で、それぞれのカラムに充填された。非常に小さな樹脂ベッドへの潜在的な放射線障害の影響を検証するために、２．９．Ｃｉから７８ｍＣｉの範囲の放射能が調査された。０．１５ｍＬ〜１．５ｍＬの範囲について、62Ｃｕの産出(yield)と62Ｚｎのブレークスルーに充填体積が与える影響についても調査された。各生成装置について、持続時間が３０秒と６０秒である流出サンプルが、２日間にわたって繰り返し回収された。また、流出サンプルが、連続して５〜１０秒おきに回収された。試料の放射能レベルは線量較正器(Ｃａｐｉｎｔｅｃ製ＣＲＣ−１５)で分析されて、流出特性と産出量の推定値を得るために減衰補正された。62Ｃｕの崩壊後(流出後４時間以上)、サンプルはＮａＩ内でカウントされて、ブレークスルーが測定された。
【００３６】
流量試験において、望ましい流量である５０〜２００μＬ／３０秒を達成するためには、１〜２ｐｓｉｇの圧力が適当であるとの結果が示された。しかしながら、このような低い圧力では、気温や溶離液の量の変化によって、流量に重大な影響が生じた。これらの因子の影響を小さくするために、容器の圧力をおおよそ１０倍に増し、圧力−流量試験を５〜１５ｐｓｉｇの圧力で再度行った。付随して、溶離液容器とカラムの間にある内径が小さいチューブを長くすることで、これらの高圧下において、所望の流量が維持された。図３にみるように、流量と容器の圧力は、きわめて密接な直線関係を示す。したがって、最適な流量は、一度確立されてしまえば、容器圧力に対応するように選択することで容易に達成できる。試験結果はまた、圧力駆動の流れは高度な再現可能性を有することを示しており、それは図４の細いピークで示されている。１０ｐｓｉｇでは、３０秒の流出は、中間値１０６．２μＬを示し、標準偏差は１％より小さかった。
【００３７】
図３に示された方程式と理想気体の法則を用いて、溶離液の体積と温度の変化が、３０秒の流出で供給される量に与える影響を見積ることができる。容器の初期圧力を１０ｐｓｉｇと仮定すると、流量は〜１０６μＬ／３０秒になり、初期温度は華氏７７度であり、温度が華氏１０度下がっても、供給量は４．０μＬのみ減少する。溶離液の体積が２．１２ｍＬ減少すると、これは２０回の１０６μＬの流出に相当するのだが、供給量にしておよそ９．７μＬ減少する。溶離液の体積と周辺温度のこうした変化は、臨床使用における極端なコンディションを正しく表している。不慮の事態が共に起こったとしても、供給量には僅かな変化(１３％未満)のみが起こり、それは医療用途においては妥当なものであろう。
【００３８】
プロトタイプの小型生成装置は、予備実験において極めてよい成績を残した。表３は、４つの小型生成装置と、医療現場で現行の一般的な生成装置とについて、産出とブレークスルーを示したデータである。プロトタイプの全ての生成装置において、最初の３０秒の流出における平均産出値(流出した62Ｃｕ／カラムの62Ｚｕ)は現行の生成装置の産出と同等又はおおよそ５０％上回っている。これらの結果は、小型化されたカラムを用いても、適切な生成量を達成できるという仮説をはっきりと支持している。さらには、図５に示すように、２日の試験期間を通じて繰り返し流出を行うという条件下においても、高い生成量は維持された。
【００３９】
予備試験によって、生成装置の性能に影響を与える複数の因子が明らかになった。第１に、時間と共に、樹脂カラムを押し流される溶離液が増えるごとに、産出は増大する(図５参照)。第２に、充填体積が減ると最初は産出も減少する。例えば、生成装置Ｚ１２３はＺ１２２の１０分の１の体積で充填されたが(１５０μｌ対１．５ｍｌ)、すると産出はざっと平均して１０％減少した(表１参照)。おそらくは、充填体積が少ない条件下では、62Ｚｎの放射能がカラム頂部の近くでナローバンドに樹脂に捕捉される。結果として、62Ｃｕがカラム出口に到達する前に、より大きな量を樹脂に流さなければならない。流出特性は(図６参照)、この仮説を支持している。これらの特性では、流出体積に対して放射能濃度がプロットされている。図６(ａ)に見るように、Ｚ１２３は、Ｚ１２２に比べてより遅れて放射線のピークを示す。その結果、充填体積が少ない生成装置では、３０秒の流出において、より多くのピーク及びテールが切り捨てられることになって、産出が少なくなる。図５が示唆するように、適切な溶離液が樹脂ベッドを通過した後には、この産出は上昇するであろう。図６(ｂ)は、Ｚ１２３において、４８及び１１８のベッド体積の溶離液がカラムを透過した後の流出特性を示している。本図に示されているように、後の特性の方が、早く且つ鋭いピークを示している。
【００４０】
【表３】
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【００４１】
表３に示す結果は、親である放射性同位体の62Ｚｎのブレークスルーは、米国特許第５，５７３，７４７号のモジュラー生成装置では、かなり低いレベルに保たれていることを示している。充填溶液量がより大きくなるように製造された小型生成装置(Ｚ１２１−１２２など)は、現行の医療用生成装置と同程度のブレークスルーを示した。しかし、生成装置Ｚ１２３には、より少量でより濃度が高い62Ｚｎ溶液が充填され、初期ブレークスルーレベルにおいて劇的な減少を実現している。小さな充填体積が、低いブレークスルーレベルを保つために有効であることを示している(図７参照)。充填体積が最も少ないＺ１２３では、〜４０のベッド体積(〜２０回の流出)を溶離液が通過した後もブレークスルーは２倍の増大に留まっており、Ｚ１２１及びＺ１２２では約１０倍に増大するのに比べて対照的である。
【００４２】
まとめると、先行試験の結果は、劇的に小型化したカラムは、産出とブレークスルーのような重要なパラメータに関しては、現行の生成装置と同様に作動でき、それらの能力は、期待される臨床利用の過程を通じて維持される。試験結果はまた、スケールを小さくしたカラムでも優れた性能を示し得ることを示唆している。先行試験結果がさらに示唆することには、圧力駆動の流出は高度に再現可能であり、供給量の変化は受認限度内に収まっている。総合すれば、これらの発見は、ここに提示される小型生成装置の設計の実現可能性を強力に指示している。
【００４３】
[実施例２]
無作為に選択された凍結乾燥バイアルについて実験が行われて、凍結乾燥前のリガンドと、戻した後のリガンドの濃度を比較した。ビス(チオセミカルバゾン)リガンドの濃度の計測に関する信頼でき感度の高い技術は、ＵＶ／ＶＩＳスペクトロスコピー分析を用いて実現された。この技術は、リガンドが積極的に銅イオンキレート化することと、結果として産出する銅化合物が、はっきりと視認できる吸光度のピークを持つことに基づいている。各バイアルの中身は、１．０ｍＬの脱イオン化された水で戻されて、水晶分光光度計のキュベットで３．０ｍＬに希釈され、結果として、溶液に１００％戻った状態で０．６７μｇ／ｍＬの濃度となった。過度のＣｕＣｌ2(１μｇ)が加えられて、Ｃｕ−ＰＴＳＭの定量的な形成が可能となる。このプロセスは素早く達成されて(２〜３分)、ＵＶ／ＶＩＳスペクトルが３０秒以内に測定された。このようにして、瞬時の再構成の実現可能性が評価された。スペクトルは、３種の賦形剤溶液(ブドウ糖、トレハロース、酢酸ナトリウム)内のＣｕ−ＰＴＳＭと、賦形剤を含まないＣｕ−ＰＴＳＭ参照溶液から得られた。
【００４４】
第２の試験では、小型生成装置で製造された62Ｃｕ2+を有した再構成凍結乾燥リガンドによる体内の放射性標識の実現可能性が評価されて、放射化学的純度が高い62ＣｕＰＴＳＭが製造された。Ｃｕ−ＰＴＳＭの組成及び純度は、薄膜クロマトグラフィー(ＴＬＣ)を用いて計測された。凍結乾燥Ｈ2ＰＴＳＭ(２μｇ)とトレハロース賦形剤は、０．４Ｍ酢酸ナトリウム(緩衝剤)１０５μＬと脱イオン化水１．５ｍＬを用いて凍結乾燥バイアル内で戻されて、生成装置の溶離液(１．８Ｍ ＮａＣｌと０．２Ｍ ＨＣｌ)１０５μｌに加えて、等張にするために必要な２倍のモル濃度の緩衝剤及び希釈水が供給された。バイアルは３０秒間攪拌されて、その後１０分間静置された。バイアルのゴムストッパーは外され、小型カラムから流出した１０５μＬをそのままバイアルに供給した。溶液の混合物は、数秒間丁寧にかき混ぜられて、３０秒間室温で放置された。その後直ちに、複製された０．５μＬアリコートが、Ｃ１８及びシリカゲルのＴＬＣプレート上の１．０ｃｍのマーク位置に落とされた。ガラスプレートはディベロップメントタンク(development tank)の中に置かれ、１００％エタノールの移動相において３０分間処理された。さらに、参照62Ｃｕ2+イオンプレートが別個に処理された。この試験において、脂溶性の62ＣｕＰＴＳＭ化合物が溶体と共にに移動するにも拘わらず、あらゆるＣｕ2+イオンは原点にとどまった。ストロー検知器をベースとしたスキャナが用いられて、各プレートの各トラックの放射線文分布が計測された。各トラックで少なくとも１０，０００カウントが検出された。
【００４５】
上記の技術を用いて、リガンドと賦形剤のケーキを含む凍結乾燥したバイアルが製造された。製造は、３つの試験賦形剤全てを用いて成功裏に遂行された。さらに、瞬時の再構成の実現可能性に関する試験は、すばらしい結果を残した。吸光度スペクトルを、図１０〜１３に示す。図１０は、濃度０．６７μｇ／ｍＬの非凍結乾燥Ｈ2ＰＴＳＭ溶液の吸光度スペクトルと(●で示す)、０．５μｇのＣｕＣｌ2を３ｍｌキュベットに加えて作製されたＣｕ−ＰＴＳＭ溶液の吸光度スペクトル(■で示す)とを示している。図から読み取れるであるように、銅イオンを投与すると、Ｈ2ＰＴＳＭの吸光度のピーク(３２０ｎｍ)は消失し、代わりに特徴的なＣｕ−ＰＴＳＭ(４６２ｎｍおよび３０８ｎｍ)に置き変わり、Ｈ2ＰＴＳＭからＣｕ−ＰＴＳＭへの完全な置換がなされたことが示されている。Ｈ2ＰＴＳＭが凍結乾燥バイアルから戻ることの効果は、このＣｕ−ＰＴＳＭスペクトルを比較参照することで確かめられるであろう。図１１、図１２及び図１３は、アセテート、ブドウ糖およびトレハロースのそれぞれの賦形剤について、２つの代表的な凍結乾燥バイアルから得られるスペクトルを夫々示している。比較のために、各パネルは、図１０にみられる凍結乾燥されていないＣｕ−ＰＴＳＭの参照スペクトルを含んでいる。これらに示されているように、賦形剤３種の全てについて、凍結乾燥リガンドから得られるスペクトルは、参照スペクトルとほとんど同じに見える。これらの結果は、凍結乾燥リガンド完全かつ迅速に戻せることを示している。
【００４６】
図１４は、Ｃ１８上の62ＣｕＰＴＳＭと、シリカゲル媒体上の62ＣｕＰＴＳＭと、62Ｃｕ2+イオンのＴＬＣカウント特性である。予期されるように、62ＣｕＰＴＳＭの特性について(図１４(ａ)及び(ｂ)参照)、移動する単一の放射性の種が観測されており、それぞれのトラックにある単一のピークによってそのことは示されている。Ｒｆ値は、２本のトラックに亘って平均すると、Ｃ１８とシリカゲルについて、夫々０．４９と０．７２になった。これらの値は、他の方法を用いて作製された62ＣｕＰＴＳＭについて常に得られるＲｆ値と一致する。反対に、図１４(ｃ)に示すように、銅イオンは両方の媒体において原点に残り、62Ｃｕ2+イオンのＲｆ値は、Ｃ１８とシリカゲルとについて、夫々０．２３と０．１９になった。62ＣｕＰＴＳＭのデータ(図１４(ａ)及び(ｂ))に参照ピークが見られないことは、リガンドと結合した後に銅イオンが全く残っていないことを示している。62ＣｕＰＴＳＭの放射化学的純度の平均は、ＴＬＣデータ(ｎ＝４)に基づくと、９６％であった。
【００４７】
62Ｚｎ／62Ｃｕ小型生成装置及び凍結乾燥リガンドキットは、広範な放射性薬剤を合成するために、半減期の短いＰＥＴ用同位体の供給源として、臨床でのＰＥＴ撮影の進歩に重大な役割を果たす。小型生成装置は、キット合成技術を伴って、現行の規制と、放射性薬剤の配送の商業上の枠組みとにシームレスに適合できる。１つのセンターは、さらされたターゲットを処理し、必要な放射化学的処理をして62Ｚｎを純化し、多数の生成装置を充填できる。交換可能なキットが同じ生成装置に採用されているため、合成技術は柔軟に軟に利用でき、経済的である。62Ｚｎ／62Ｃｕ小型生成装置及び凍結乾燥リガンドキットは、腫瘍学、心臓学、神経学における臨床でのＰＥＴ撮影の進歩に主要な役割を果たす。最後に、生成装置の小型化によって、医療現場において便利な薬剤の投与量を可能にし、搬送及び標識化を容易にする。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】図１は、高度に単純化及び小型化された生成装置を示しており、この生成装置は、溶出菌されてパイロジェンフリー(pyrogen-free)な62Ｃｕ2+のみを製造する。
【図２】図２は、充填装置を描いており、図１の生成装置に62Ｚｎを充填するために用いられる。
【図３】図３は、図１の生成装置から流出する溶離液の流量と、図１の生成装置の溶離液容器のヘッドスペースにかかる圧力との関係を示している。
【図４】図４は、図１の生成装置の流量の再現性(reproducibility)を描いている。
【図５】図５は、図１の生成装置(Ｚ１２２)のカラムを通過する溶離液のベッド容量(bed volumes)に対する産出(溶出した62Ｃｕ／カラム上の62Ｚｎ)の関係を示している。
【図６】図６(ａ)は、２種の生成装置の溶離特性を示し、一方(Ｚ１２２)は、６６．１ｍＣｉの62Ｚｎ溶液１．５ｍｌを充填したものであり、他方(Ｚ１２３)は７８．０ｍＣｉの62Ｚｎ溶液１５０μｌを充填したものである。図６(ｂ)は、生成装置の一種(Ｚ１２３)において、４８及び１１８のベッド体積の溶離液がカラムを通過するに設定した後における溶出特性を示している。
【図７】図７は、62Ｚｎの充填が異なる数種の生成装置においての62Ｚｎのブレイクスルーレベル(breakthrough levels)を示している。
【図８】図８は、銅(II)イオンのキレート化を示しており、これは側鎖基Ｒｘ(ｘ＝１，２，３又は４)の何であるに関わらず有効である。
【図９】図９は、チオール媒介によるＣｕII−ＰＴＳＭの細胞内での分解と、それに関する通常細胞内における62Ｃｕビス(チオセミカルバゾン)錯体を説明しており、ＣｕII−ＰＴＳＭの細胞内での分解は、これを静脈投与した後において62Ｃｕ放射性標識が「マイクロスフェア様」の細胞組織で長く保持されることと原因であると信じられている。
【図１０】図１０は、濃度が０．６７μｇ／ｍＬである凍結乾燥していないＨ2ＰＴＳＭ(●で示す)溶液と、３ｍＬキュベットにＣｕＣｌ2を０．５μｇ加えて作製したＣｕ−ＰＴＳＭ(■で示す)溶液とについて、参照吸収度のスペクトルを示している。
【図１１】図１１は、アセテート賦形剤として用いられる、代表的な２種の凍結乾燥バイアルから得られるスペクトルを表している。
【図１２】図１２は、ブドウ糖賦形剤として用いられる、代表的な２種の凍結乾燥バイアルから得られるスペクトルを表している。
【図１３】図１３は、トレハロース賦形剤として用いられる、代表的な２種の凍結乾燥バイアルから得られるスペクトルを表している。
【図１４】図１４は、Ｃ１８及びシリカゲル媒体上の62ＣｕＰＴＳＭと、イオンの62Ｃｕ2＋とに関して得られたＴＬＣカウントの結果である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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