(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
モクセンナ、メドハギ、ジュンケイボク、オオゴチョウ、リュウキュウハギ、ソウシジュおよびハマセンナよりなる群から選ばれるマメ科植物抽出物を有効成分とするチロシナーゼ活性阻害剤。
【請求項２】
マメ科植物抽出物が、水と低級アルコールの混液から抽出されたものである請求項１記載のチロシナーゼ活性阻害剤。
【請求項３】
メドハギ、ジュンケイボク、オオゴチョウ、リュウキュウハギ、ソウシジュおよびハマセンナよりなる群から選ばれるマメ科植物抽出物を有効成分とするチロシナーゼ活性阻害剤を含有する美白化粧料。
【請求項４】
マメ科植物抽出物が、水と低級アルコールの混液から抽出されたものである請求項３記載の美白化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、チロシナーゼ活性阻害剤に関し、更に詳細には、メラニン生成に関係するチロシナーゼを効果的に阻害するチロシナーゼ活性阻害剤およびこれを利用する美白化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、皮膚の日焼けや、シミ、そばかす等を防ぐ目的で、数多くの美白化粧料が市販されている。これらの美白化粧料には、色素物質であるメラニンの生成を防ぐ成分が含まれているが、その多くは、メラニン生成の律速酵素であるチロシナーゼを阻害するチロシナーゼ活性阻害物質である。
【０００３】
このチロシナーゼ活性阻害物質の代表的なものとしては、コウジ酸やアルブチン等が知られている。このうちコウジ酸は、コウジカビの培養発酵物中に生産されるものであり、そのチロシナーゼ阻害活性は高いが、経口摂取による発癌性の報告や、白血球減少作用等の副作用の報告もあり、安全性が十分に確保されているとは言い難い。また、アルブチンは、ウワウルシやコケモモの抽出物中から得ることができる化合物で、安全性はほぼ確認されているものであるが、そのチロシナーゼ阻害活性は、コウジ酸に比べ弱いという問題があった。
【０００４】
更に、上記以外の植物から得たチロシナーゼ活性阻害成分を得た報告もなされているが（特許文献１〜６等）、より優れた、新たなチロシナーゼ活性阻害成分の提供に関する要望は依然として強いものがあった。
【特許文献１】特開平５−２９４８１９号
【特許文献２】特開平６−３０５９７８号
【特許文献３】特開平１０−１１４６７０号
【特許文献４】特開２００３−５５１８９
【特許文献５】特開２００６−１７６４２０
【特許文献６】特開２００６−６９９５４
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、優れた活性を有しながら安全性の高い、新しいチロシナーゼ活性阻害剤を提供することを、その課題とするものである。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、沖縄県の植物資源に着目し、チロシナーゼ阻害活性を有するものについて鋭意検索を行ったところ、マメ科植物は優れたチロシナーゼ阻害活性を有することを見出し、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち本発明は、マメ科植物抽出物を有効成分とするチロシナーゼ活性阻害剤である。
【０００８】
また本発明は、上記チロシナーゼチロシナーゼ活性阻害剤を含有する皮膚外用剤および美白化粧料である。
【発明の効果】
【０００９】
本発明のチロシナーゼ活性阻害剤の有効成分であるマメ科植物の抽出物は、優れたチロシナーゼ阻害活性を有し、しかも安全性が高いものである。
【００１０】
従って、本発明のチロシナーゼ活性阻害剤は、美白成分として、皮膚外用剤、美白化粧料などに利用することができるものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明のチロシナーゼ活性阻害剤の有効成分は、マメ科植物を抽出処理に付すことにより得られる抽出物である。このマメ科植物としては、好ましくは、モクセンナ（Cassia glauca Lam）、メドハギ（Lespedeza cuneata(Dum.Cours.)G.Dom）、ジュンケイボク（Peltophorum Peltophorum）、オオゴチョウ（Caesalpinia pulcherrima Sw）、リュウキュウハギ（Lespedeza liukiuensis）、ソウシジュ（Acacia confusa）、ハマセンナ（Ormocarpum cochinchinense）等が挙げられる。また、抽出溶媒としては、水や低級アルコールが挙げられるが、水−低級アルコールの混液が好ましい。
【００１２】
上記マメ科植物の抽出処理は、例えば、マメ科植物の葉、花、葉茎あるいは全草を乾燥させた後、これを切断ないし粉砕し、その５ないし２０重量倍の抽出溶媒を加え、室温ないし１００℃、好ましくは３０ないし５０℃で、１２ないし１５０時間、好ましくは、２４ないし４８時間浸漬することにより行われる。この抽出に当たっては、振蕩撹拌ないしは機械撹拌することが好ましい。
【００１３】
次いで、この抽出物を、産業用ろ紙、ケイ藻土、遠心分離、メンブレインフィルターなどを用いる固液分離手段で清澄化することにより、マメ科植物抽出物を得ることができる。
【００１４】
このマメ科植物抽出物は、必要により公知の精製手段、例えば、適切な各種カラムクロマトグラフィー、限外濾過等を用いて更に精製し、チロシナーゼ活性阻害剤とすることもできる。また、必要に応じて、公知の乾燥手段、例えばスプレードライ、凍結乾燥、ドラム乾燥等により粉末化したチロシナーゼ活性阻害剤とすることもできる。
【００１５】
以上のようにして得られる本発明のチロシナーゼ活性阻害剤は、常法に従い、皮膚外用剤や美白化粧料に配合して使用することができる。
【００１６】
例えば、美白化粧料とする場合は、公知の化粧料基剤に、上記チロシナーゼ活性阻害剤を、例えば、０．００１ないし５質量％程度配合し、常法に従って、化粧液、乳液、クリーム、ペーストとすればよい。
【実施例】
【００１７】
次に参考例および実施例を挙げ、本発明を更に詳しく説明するが、本発明はこれら実施例等に何ら制約されるものではない。
【００１８】
参  考  例  １
マメ科植物抽出物の取得：
マメ科植物として、モクセンナ、メドハギ、ジュンケイボク、オオゴチョウ、リュウキュウハギ、ソウシジュおよびハマセンナを入手し、それらを下記抽出操作に付し、マメ科植物抽出物を、植物エキスとして得た。
【００１９】
（  抽出操作  ）
各マメ科植物を部位別に適当な大きさに裁断した後、それぞれを６０℃で１２時間乾燥させ、これを遠心粉砕器（ＭＲＫ−Ｒｅｔｓｃｈｍ,ＺＭ−１００）を用いて粉砕した。０.５ｍｍのスクリーンを通過したものを集め、これについて、高速溶媒抽出装置（日本ダイオネクス社製、ＡＳＥ−２００）を用いて溶媒抽出を行った。即ち、それぞれ乾燥重量で２ｇの試料を８ｇのケイソウ土とともに抽出セルに装填し、５０％エタノール溶液をにより、抽出温度８０℃、抽出時間１０分、圧力１５００ｐｓｉ、抽出回数２回で、合計５０ｍｌの植物エキスを得た。
【００２０】
実  施  例  １
参考例１で得られた植物エキスを、イオン交換水で１０倍希釈し（以下、「試料溶液」という）、チロシナーゼ阻害活性試験に供した。まず、チロシナーゼ（マッシュルーム由来、Ｓｉｇｍａ社製）を、イオン交換水で４０Ｕ／ｍｌに調整し、酵素溶液とした。また、３,４−ジヒドロキシ−Ｌ−フェニルアラニン（以下、「ＤＯＰＡ」という；Ｓｉｇｍａ社製）を、イオン交換水で２.５ｍＭに調整し、基質溶液とした。更に、１／１５Ｍリン酸バッファー（ｐＨ６.８）を緩衝液として用いた。
【００２１】
酵素反応は、９６穴マイクロプレートにて行った。マイクロプレートの各ウェルに緩衝液１００μｌ、酵素溶液４０μｌおよび試料溶液２０μｌを加え、充分混合撹拌し、２３℃で３分間プレインキュベートした。プレインキュベート後に基質溶液５０μｌを添加し、直ちに４９０ｎｍにおける吸光度（Ａｓ０）を測定した。２３℃で１０分間酵素反応を行い、反応１０分後の吸光度（Ａｓ１０）を測定した。さらに、試料溶液２０μｌの代わりに５％エタノール溶液２０μｌを加えた系および酵素溶液４０μｌの代わりに緩衝液４０μｌを加えた系において同様に反応させ、それぞれの場合における反応開始直後および１０分後の吸光度（Ａｃ０、Ａｃ１０及びＡｂ０、Ａｂ１０）を測定した。チロシナーゼ阻害活性は以下の式により算出した。
【００２２】
チロシナーゼ阻害率（％）＝１００−［［（Ａｓ１０−Ａｂ１０）―
（Ａｓ０−Ａｂ０）］／（Ａｃ１０−Ａｃ０）×１００］
【００２３】
各試料溶液におけるチロシナーゼ阻害活性を表１に示す。また、試料溶液を減圧乾固し、５％エタノール溶液に所定濃度で再溶解したものを使用し、その濃度を段階的に減少させて上記チロシナーゼ阻害活性試験を行い、チロシナーゼ阻害活性が５０％になる濃度、すなわち試料溶液におけるチロシナーゼの５０％阻害濃度（ＩＣ５０，ｍｇ／ｍｌ）を内挿法により求めた。その結果を表２に示す。
【００２４】
【表１】
0005531263.tif 000002
【００２５】
【表２】
0005531263.tif 000003
【００２６】
表１および表２から明らかなように、本発明のマメ科植物抽出物は、優れたチロシナーゼ阻害活性を有していた。
【００２７】
実  施  例  ２
美  白  化  粧  料  ：
下記組成、製法により美白化粧料を調製した。このものは優れた美白作用を有していた。
（  組  成  ）                                                （質量％）
（１）モクセンナ抽出物＊                                    ０.１
（２）ジプロピレングリコール                                ５
（３）ＰＥＧ４００                                          ５
（４）エタノール                                          １０
（５）キサンタンガム                                        ０.５
（６）ＰＯＥ（６−２０）ソルビタンモノステアリン酸          １
エステル
（７）オレイルアルコール                                    ０.５
（８）アスコルビン酸                                        ２
（９）ビタミンＥアセテート                                  ０.２
（１０）精  製  水                                          残  量
*  実施例１のモクセンナ（花）の抽出物
【００２８】
（  製  法  ）
（イ）（10）に、（５）、（２）、（３）および（８）をこの順に逐次溶解させる。
（ロ）（４）に、（１）、（６）、（７）および（９）をこの順に逐次溶解させる。
（ハ）（イ）で得た水溶液と、（ロ）で得たエタノール水溶液を真空乳化器を用いて
混合した後、容器に充填して乳液状の美白化粧料を得る。
【産業上の利用可能性】
【００２９】
本発明のマメ科植物抽出物は優れたチロシナーゼ阻害活性を有するものであった。
【００３０】
従って、このマメ科植物抽出物を有効成分とするチロシナーゼ活性阻害剤は、皮膚外用剤や美白化粧料の有効成分として有利に使用することができるものである。