(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）少なくとも２個の潜在反応性基を有する架橋剤と、（ｉｉ）該架橋剤と適合性のある繊維形成ポリマー物質とを含む、潜在反応性ナノ繊維。
【請求項２】
複数の潜在反応性ナノ繊維を含む表面被膜を有する物品であって、該ナノ繊維が、少なくとも２個の潜在反応性基を有する架橋剤と、該架橋剤と適合性のある繊維形成ポリマー物質とを含む、物品。
【請求項３】
複数の潜在反応性ナノ繊維を含む表面被膜を有する細胞培養物品であって、該ナノ繊維が、少なくとも２個の潜在反応性基を有する架橋剤と、該架橋剤と適合性のある繊維形成ポリマー物質とを含む、細胞培養物品。
【請求項４】
（ａ）少なくとも２個の潜在反応性基を有する架橋剤と、該繊維形成物質とを含有する組成物を調製するステップ、および（ｂ）ステップ（ａ）の組成物からナノ繊維を形成するステップを含む、潜在反応性ナノ繊維を生成する方法であって、形成された該ナノ繊維が、約１ｎｍ〜１００ミクロンの直径を有する、方法。
【請求項５】
基材の表面をコーティングする方法であって、（ａ）少なくとも２個の潜在反応性基を有する架橋剤と、該繊維形成物質とを含有する組成物を調製するステップ、（ｂ）ステップ（ａ）の組成物からナノ繊維を形成するステップ、および（ｃ）該表面を形成された該ナノ繊維と接触させるステップを含む方法。
【請求項６】
ナノ繊維の表面上に１種または複数の官能性ポリマーを固定化する方法であって、
（ａ）少なくとも２個の潜在反応性基を有する架橋剤と、該繊維形成物質とを含有する組成物を調製するステップ、
（ｂ）ステップ（ａ）の組成物から、ナノ繊維を形成するステップ、
（ｃ）該ナノ繊維を官能性ポリマーと接触させるステップ、ならびに
（ｄ）該ナノ繊維および該官能性ポリマーを処理して、該架橋剤の潜在反応性基を活性化させるステップ
を含む方法。
【請求項７】
前記ナノ繊維を形成するステップが、前記（ａ）の組成物を電気紡糸することを含む、請求項４〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記形成されたナノ繊維を処理して前記架橋剤の前記潜在反応性基のうちの少なくともいくらかを活性化させるステップをさらに含み、これによって、架橋ナノ繊維を形成する、請求項４〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記表面を処理して前記架橋剤の潜在反応性基を活性化させるステップをさらに含み、これによって、該架橋剤を介して前記ナノ繊維を該表面に結合させる、請求項５に記載の方法。
【請求項１０】
前記架橋剤が、モノマー物質またはポリマー物質である、請求項１に記載のナノ繊維。
【請求項１１】
前記潜在反応性基が、光化学的または熱的に活性化可能な基である、請求項１および１０のいずれか一項に記載のナノ繊維。
【請求項１２】
請求項１および１０〜１１のいずれか一項のいずれか一項に記載のナノ繊維であって、前記架橋剤が、（ａ）〜（ｇ）：
（ａ）Ｌ−（Ｄ−Ｔ−Ｃ（Ｒ１）（ＸＰ）ＣＨＲ２ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４）ｍ
（式中、Ｌは構造（Ｉ）：
【化１８】
0005393662.tif 000025
（式中、Ａ、ＢおよびＪが環を形成し、ＡおよびＪが、Ｃ＝Ｏであり、
Ｂは、ＮＲ１１であり、
Ｒ１１は、水素原子、アルキル基、アリール基であるか、またはＴとの結合を表している）
に従った式を有する連結基であり、
Ｄは、ＣＲ６Ｒ７であり、
Ｔは、（−ＣＨ２−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘまたは（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘであるか、あるいは結合を形成しており、
Ｒ１は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲ８Ｒ９であり、
Ｐは、水素原子または保護基であるが、但し、ＸがＮＲ８Ｒ９であるときは、Ｐは存在せず、
Ｒ２は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、または必要に応じて、Ｒ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされ得、
Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒ６およびＲ７は、各々独立に水素原子、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキル基であり、
Ｒ８およびＲ９は、各々独立に水素原子、アルキル、アリールまたはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、アルキル基またはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数であり、
ｘは、１から約５００までの整数である）、
（ｂ）Ｌ−（Ｔ−Ｃ（Ｒ１）（ＸＰ）ＣＨＲ２ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４）ｍ
（式中、Ｌは構造（Ｉ）：
【化１９】
0005393662.tif 000026
（式中、Ａ、ＢおよびＪが環を形成し、ＡおよびＪが、Ｃ＝Ｏであり、
Ｂは、ＮＲ１１であり、
Ｒ１１は、水素原子、アルキル基、アリール基であるか、またはＴとの結合を表している）
に従った式を有する連結基であり、
Ｔは、（−ＣＨ２−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘまたは（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘであるか、あるいは結合を形成しており、
Ｒ１は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲ８Ｒ９であり、
Ｐは、水素原子または保護基であるが、但し、ＸがＮＲ８Ｒ９であるときは、Ｐは存在せず、
Ｒ２は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、または必要に応じて、Ｒ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされ得、
Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒ８およびＲ９は、各々独立に水素原子、アルキル、アリールまたはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、アルキル基またはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数であり、
ｘは、１から約５００までの整数である）、
（ｃ）Ｌ−（ＧＴＺＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４）ｍ
（式中、Ｌは構造（Ｉ）：
【化２０】
0005393662.tif 000027
（式中、Ａ、ＢおよびＪが環を形成し、ＡおよびＪが、Ｃ＝Ｏであり、
Ｂは、ＮＲ１１であり、
Ｒ１１は、水素原子、アルキル基、アリール基であるか、または結合を表している）
に従った式を有する連結基であり、
Ｔは、（−ＣＨ２−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘであるか、または結合を形成しており、
Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｚは、Ｃ＝Ｏ、ＣＯＯ、またはＴが（−ＣＨ２−）ｘである場合、ＣＯＮＨであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、または必要に応じて、Ｒ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされ得、
Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、またはアルキル基もしくはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数であり、
ｘは、１から約５００までの整数である）、
（ｄ）Ｌ−（ＴＧＱＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４）ｍ
（式中、Ｌは構造（Ｉ）：
【化２１】
0005393662.tif 000028
（式中、Ａ、ＢおよびＪが環を形成し、ＡおよびＪが、Ｃ＝Ｏであり、
Ｂは、ＮＲ１１であり、
Ｒ１１は、水素原子、アルキル基、アリール基であるか、またはＴとの結合を表している）
に従った式を有する連結基であり、
Ｔは、（−ＣＨ２−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘであり、または結合を形成しており、
Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｑは、（−ＣＨ２−）ｐ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｐ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｐまたは（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｐであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、または必要に応じて、Ｒ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされ得、
Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、またはアルキル基もしくはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｐは、１から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数であり、
ｘは、１から約５００までの整数である）、
（ｅ）Ｌ−（−ＣＨ２−）ｘｘＣ（Ｒ１）（（Ｇ）Ｒ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４）２）ｍ
（式中、Ｌは構造（Ｉ）：
【化２２】
0005393662.tif 000029
（式中、Ａ、ＢおよびＪが環を形成し、ＡおよびＪが、Ｃ＝Ｏであり、
Ｂは、ＮＲ１１であり、
Ｒ１１は、水素原子、アルキル基、アリール基であるか、または結合を表している）
に従った式を有する連結基であり、
Ｒ１は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
各Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
各Ｒ３およびＲ４は、独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、または必要に応じて、Ｒ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされ得、
各Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
各Ｒは、水素原子、またはアルキル基もしくはアリール基であり、
各ｑは、１から約７までの整数であり、
各ｒは、０から約３までの整数であり、
各ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
各ｔは、１から約１０までの整数であり、
ｘｘは、１から約１０までの整数である）、
（ｆ）Ｌ−（−Ｃ（Ｒ１）（ＸＰ）ＣＨＲ２ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４）ｍ
（式中、Ｌは構造（Ｉ）：
【化２３】
0005393662.tif 000030
（式中、Ａ、ＢおよびＪが環を形成し、ＡおよびＪが、Ｃ＝Ｏであり、
Ｂは、ＮＲ１１であり、
Ｒ１１は、水素原子、アルキル基、アリール基であるか、または結合を表している）
に従った式を有する連結基であり、
Ｒ１は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲ８Ｒ９であり、
Ｐは、水素原子または保護基であるが、但し、ＸがＮＲ８Ｒ９であるときは、Ｐは存在せず、
Ｒ２は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、または必要に応じて、Ｒ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされ得、
Ｒ８およびＲ９は、各々独立に水素原子、アルキル、アリールまたはアリールアルキル基であり、
Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、アルキル基またはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数である）、ならびに
（ｇ）Ｌ−（ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４）ｍ
（式中Ｌは構造（Ｉ）：
【化２４】
0005393662.tif 000031
（式中、Ａ、ＢおよびＪが環を形成し、ＡおよびＪが、Ｃ＝Ｏであり、
Ｂは、ＮＲ１１であり、
Ｒ１１は、水素原子、アルキル基、アリール基であるか、または結合を表している）
に従った式を有する連結基であり、
Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、または必要に応じて、Ｒ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされ得、
Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、アルキル基またはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数である）
から選択される式を有する光化学架橋剤である、ナノ繊維。
【請求項１３】
前記架橋剤が、以下の式：
【化２５】
0005393662.tif 000032
を有するトリス［２−ヒドロキシ−３−（４−ベンゾイルフェノキシ）プロピル］イソシアヌレートである、請求項１および１０〜１１のいずれか一項に記載のナノ繊維。
【請求項１４】
前記繊維形成物質が、合成または天然のポリマーである、請求項１および１０〜１３のいずれか一項に記載のナノ繊維。
【請求項１５】
前記繊維形成物質が、ポリエステル、ポリアミド、ポリウレタン、ポリオルトエステル、ポリカプロラクトン、ポリイミノカーボネート、脂肪族カーボネート、ポリホスファゼン、ポリ酸無水物、およびそれらのコポリマーから選択される生分解性ポリマーである、請求項１および１０〜１４のいずれか一項に記載のナノ繊維。
【請求項１６】
前記繊維形成物質が、ペプチド、ヌクレオチドまたは糖のモノマー単位を有するポリマーを含む、請求項１および１０〜１４のいずれか一項に記載のナノ繊維。
【請求項１７】
前記繊維形成物質が、熱応答性のポリマー物質である、請求項１および１０〜１３のいずれか一項に記載のナノ繊維。
【請求項１８】
前記熱応答性のポリマー物質が、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）、またはポリエチレングリコール−ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）を含む、請求項１７に記載のナノ繊維。
【請求項１９】
前記繊維形成物質が２種以上のポリマー物質を含む、請求項１および１０〜１８のいずれか一項に記載のナノ繊維。
【請求項２０】
生物活性物質または官能性ポリマーを更に含む、請求項１および１０〜１９のいずれか一項に記載のナノ繊維。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般に、ナノ繊維およびナノ繊維改質表面に関する。より特定すれば、本発明は、各々が少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する、１種または複数の多官能架橋剤を含むナノ繊維を対象とする。潜在反応性で活性化可能な架橋剤を含有するナノ繊維は、基材の表面を改質するために使用され得る。
【背景技術】
【０００２】
ナノ繊維は、高い表面積、小さい繊維径、層の薄さ、高い透過性および低い基礎重量を含む独特な性質のために、多様な用途について検討されている。とりわけ、創傷包帯、バイオセンサーおよび組織工学用足場などの生物医学用途において、活性化学物質を組み入れる能力を有する機能化ナノ繊維に対して、より多くの関心が集まってきた。
【０００３】
ナノ繊維は、静電紡糸（電気紡糸とも称する）により作製され得る。繊維を形成できる液体および／または溶液の電気紡糸技法は、よく知られており、例えば、特許文献１および特許文献２などの多くの特許に記載されている。電気紡糸法は、液体に繊維を生成させるために、電場中への液体の導入を一般に伴う。こうした繊維は、一般に、収集用の引力電位で導体に引き寄せられる。液体が繊維に変換される間に、繊維は硬化および／または乾燥する。この硬化および／または乾燥は、液体の冷却、即ち液体が室温では通常固体になることにより、溶媒の蒸発、例えば脱水（物理的誘発硬化）により、または硬化機構（化学的誘発硬化）により起こし得る。
【０００４】
静電紡糸法は、例えば、特許文献１に開示されているように、マットまたは他の不織材料を創製するための繊維の使用を通常対象としてきた。直径範囲が５０ｎｍ〜５μｍのナノ繊維は、不織布またはナノ繊維配列メッシュに電気紡糸することができる。小さい繊維径のために、電気紡糸テキスタイルは、非常に高い表面積および小さい孔径を元来有する。こうした性質のために、電気紡糸布地は、膜、組織足場および他の生物医学用途を含む多くの用途に対して、有力な候補となる。最近、ナノ繊維の不織布膜を生成するための努力が、電気紡糸技法の使用に集中してきた。
【０００５】
ナノ繊維は、基材の表面を改質するために、使用することができる。大部分のナノ繊維表面は、生体分子を固定化する能力を得るために、処理されなければならない。生体適合性の改良を意図した合成生体用材料の表面改質は、広範に研究されてきており、多くの汎用技法が、ポリマーナノ繊維の改質に対して検討されてきた。例えば、Ｓａｎｄｅｒｓらは、非特許文献１において、電気紡糸ポリウレタン（ＰＵ）繊維表面上に、負荷電または正荷電モノマーのプラズマ誘発表面重合により異なる表面電荷を導入した。表面荷電ＰＵ繊維メッシュを５週間ラット皮下背面に埋め込み、組織適合性を評価したところ、負荷電表面は、繊維多孔性メッシュの生体用材料中に血管の内方成長を促進し得ることが判明した。Ｍａらは、非特許文献２において、グラフト化ポリメタクリル酸スペーサーを介して、ホルムアルデヒド前処理されたポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）のナノ繊維上にゼラチンをコンジュゲートしたところ、ゼラチン改質は、ＰＥＴナノ繊維上における内皮細胞（ＥＣ）の伸展および増殖を改善し、ＥＣの表現型を保持することも判明した。Ｃｈｕａらは、非特許文献３において、繊維表面上にＵＶグラフト化したポリ（アクリル酸）スペーサーに対する共役結合性のコンジュゲーションにより、ポリ（ｅ−カプロラクトン−ｃｏ−エチルエチレンホスフェート）（ＰＣＬＥＥＰ）のナノ繊維足場上にガラクトースリガンドを導入した。ガラクトシル化ＰＣＬＥＥＰナノ繊維の３Ｄ足場、ならびに機能性２Ｄ膜基材上で、肝細胞の付着、アンモニアの代謝、アルブミンの分泌、およびシトクロームＰ４５０の酵素活性を調べた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許第４０４３３３１号明細書
【特許文献２】米国特許第５５２２８７９号明細書
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】「Ｆｉｂｒｏ−Ｐｏｒｏｕｓ  Ｍｅｓｈｅｓ  Ｍａｄｅ  ｆｒｏｍ  Ｐｏｌｙｕｒｅｔｈａｎｅ  Ｍｉｃｒｏ−Ｆｉｂｅｒｓ：  Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｃｈａｒｇｅ  ｏｎ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ｒｅｓｐｏｎｓｅ」、Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  ２６巻、８１３〜８１８頁（２００５年）
【非特許文献２】「Ｓｕｒｆａｃｅ  Ｅｎｇｉｎｅｒｒｉｎｇ  ｏｆ  Ｅｌｅｃｔｏｓｐｕｎ  Ｐｏｌｙｅｔｈｙｌｅｎｅ  Ｔｅｒｅｐｈｔｈａｌａｔｅ  （ＰＥＴ）  Ｎａｎｏｆｉｂｅｒｓ  Ｔｏｗａｒｄｓ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａ  Ｎｅｗ  Ｍａｔｅｒｉａｌ  ｆｏｒ  Ｂｌｏｏｄ  Ｖｅｓｓｅｌ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ」、Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  ２６巻、２５２７〜２５３６頁（２００５年）
【非特許文献３】「Ｓｔａｂｌｅ  Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｒａｔ  Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ  Ｓｐｈｅｒｏｉｄｓ  ｏｎ  Ｇａｌａｃｔｏｓｙｌａｔｅｄ  Ｎａｎｏｆｉｂｅｒ  Ｓｃａｆｆｏｌｄ」、Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  ２６巻、２５３７〜２５４７頁（２００５年）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
上記にまとめた方法および技法は、コストがかかり、複雑で、または材料特異的である。したがって、より一般的で使い易く、温和な条件下で幅広い種類のナノ繊維に応用できる、表面改質手法に対する必要性が存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、例えば、以下を提供する：
（項目１）
１種または複数の天然または合成ポリマー物質と、エネルギー源に曝された際に共有結合を形成するための少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する、１種または複数の架橋剤とを含む、ナノ繊維。
（項目２）
上記潜在反応性・活性化可能基が、光化学的または熱的に活性化可能な基である、項目１に記載のナノ繊維。
（項目３）
上記エネルギー源が、放射エネルギーまたは熱エネルギーである、項目１に記載のナノ繊維。
（項目４）
上記放射エネルギーが、可視光線、紫外線、赤外線、Ｘ線、マイクロウェーブ、または他の電磁放射線である、項目３に記載のナノ繊維。
（項目５）
上記潜在反応性・活性化可能基が、同じまたは異なる活性化可能基である、項目１に記載のナノ繊維。
（項目６）
上記架橋剤が、モノマー物質またはポリマー物質である、項目１に記載のナノ繊維。
（項目７）
上記架橋剤が、二官能性または三官能性モノマー物質である、項目１に記載のナノ繊維。
（項目８）
生物活性物質または官能性ポリマーを更に含む、項目１に記載のナノ繊維。
（項目９）
上記生物活性物質が、ポリペプチド、タンパク質、オリゴヌクレオチド、多糖、核酸、エポキシド、酸無水物、アミド、アミン、カルボン酸、カーボネート、エステルまたはウレタンである、１個または複数の官能基を有する化合物である、項目８に記載のナノ繊維。
（項目１０）
上記官能性ポリマーが、カルボキシ、アミン、チオール、エポキシ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、イソシアネート、酸無水物、塩化シアヌリル、アルデヒド、アジド、アルキン、ホスフィンまたはヒドロキシなどの、１個または複数の官能基を含有するポリマーである、項目８に記載のナノ繊維。
（項目１１）
約１ｎｍ〜１００ミクロンの範囲の直径を有する、項目１に記載のナノ繊維。
（項目１２）
約１ｎｍ〜１０００ｎｍの範囲の直径を有する、項目１１に記載のナノ繊維。
（項目１３）
少なくとも約１０から少なくとも１００の範囲のアスペクト比を有する、項目１に記載のナノ繊維。
（項目１４）
上記ポリマー物質が、１種または複数の親水性、疎水性、両親媒性または熱応答性のポリマー物質である、項目１に記載のナノ繊維。
（項目１５）
上記ポリマー物質が、合成または天然の、生分解性または非生分解性ポリマーである、項目１に記載のナノ繊維。
（項目１６）
少なくとも１個の潜在反応性・活性化可能基のエネルギー源による活性化時に、基材の表面と結合するように適合されている、項目１に記載のナノ繊維。
（項目１７）
少なくとも１個の潜在反応性・活性化可能基のエネルギー源による活性化時に、生物活性物質と結合するように適合されている、項目１に記載のナノ繊維。
（項目１８）
１種または複数のポリマー物質と、少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する１種または複数の架橋剤とを組み合わせるステップ、およびその組合せから少なくとも１本のナノ繊維を形成するステップを含む、潜在反応性で活性化可能なナノ繊維を生成する方法であって、該ナノ繊維が、約１ｎｍ〜１００ミクロンの範囲の直径、および少なくとも１０から少なくとも１００の範囲のアスペクト比を有する、方法。
（項目１９）
上記組合せから少なくとも１本のナノ繊維を形成するステップが、上記組合せを電気紡糸することを含む、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
上記ポリマー物質が、１種または複数の合成または天然の、親水性、疎水性、両親媒性または熱応答性のポリマー物質である、項目１８に記載の方法。
（項目２１）
上記ポリマー物質および上記架橋剤と共に、生物活性物質を更に含む、項目１８に記載の方法。
（項目２２）
基材の表面をコーティングする方法であって、１種または複数のポリマー物質と、少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する１種または複数の架橋剤とを組み合わせるステップ、その組合せから少なくとも１本のナノ繊維を形成するステップ、該表面を該ナノ繊維と接触させるステップ、および該ナノ繊維と該表面との間に結合を形成するステップを含む方法。
（項目２３）
生物活性物質を、ポリマー物質、および少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する上記架橋剤と組み合わせるステップを更に含む、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
上記ナノ繊維と上記表面との間に上記結合を形成するステップが、上記潜在反応性・活性化可能基の少なくとも１個をエネルギー源で活性化して、上記ナノ繊維を上記表面に結合することを含む、項目２２に記載の方法。
（項目２５）
上記潜在反応性・活性化可能基の少なくとも１個を活性化して、上記ナノ繊維を生物活性物質に結合するステップを更に含む、項目２２に記載の方法。
（項目２６）
上記ナノ繊維を上記表面に結合するために、第１の潜在反応性・活性化可能基を、そして上記ナノ繊維を生物活性物質に結合するために、第２の潜在反応性・活性化可能基を、同時に活性化するステップを更に含む、項目２２に記載の方法。
（項目２７）
上記ポリマー物質が、親水性、疎水性、両親媒性または熱応答性のポリマー物質である、項目２２に記載の方法。
（項目２８）
複数のナノ繊維を含む表面被膜を有する物品であって、該ナノ繊維が、１種または複数の天然または合成ポリマー物質と、エネルギー源に曝された際に共有結合を形成するための少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する、１種または複数の架橋剤とを含む、物品。
（項目２９）
上記表面被膜が、生物活性物質を更に含み、該生物活性物質が、上記ナノ繊維に結合している、項目２８に記載の物品。
（項目３０）
上記ナノ繊維が、生物活性物質を更に含む、項目２８に記載の物品。
（項目３１）
上記ポリマー物質が、親水性、疎水性、両親媒性または熱応答性のポリマー物質である、項目２８に記載の物品。
（項目３２）
上記ナノ繊維が、上記物品の表面に結合している、項目２８に記載の物品。
（項目３３）
尿カテーテル、血管カテーテル、創傷排液チューブ、動脈移植片、軟組織用パッチ、手袋、シャント、ステント、気管カテーテル、ペースメーカー、除細動器、人工心臓置換弁、人工心臓またはバイオセンサーである、項目２８に記載の物品。
（項目３４）
スライド、マイクロタイターウェル、マイクロタイタープレート、ペトリ皿、組織培養スライド、組織培養プレート、細胞培養プレート、組織培養フラスコおよび瓶、細胞培養マイクロキャリアまたはクロマトグラフィー媒体である、項目２８に記載の物品。
（項目３５）
１種または複数の天然または合成ポリマー物質と、エネルギー源に曝された際に共有結合を形成するための少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する、１種または複数の架橋剤とを含む、少なくとも１本のナノ繊維を含んでいる表面被膜を備えた、細胞培養器具。
（項目３６）
上記ナノ繊維が、生物活性物質を更に含む、項目３５に記載の細胞培養器具。
（項目３７）
項目１から３６のいずれか一項に記載の架橋剤であって、次式：
ａ）Ｌ−（（Ｄ−Ｔ−Ｃ（Ｒ１）（ＸＰ）ＣＨＲ２ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
（式中、Ｌは連結基であり、
Ｄは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ５またはＣＲ６Ｒ７であり、
Ｔは、（−ＣＨ２−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘまたは（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘであり、
Ｒ１は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲ８Ｒ９であり、
Ｐは、水素原子または保護基であるが、但し、ＸがＮＲ８Ｒ９であるときは、Ｐは存在せず、
Ｒ２は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、またはＲ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされており、
Ｒ５およびＲ１０は、各々独立に水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒ６およびＲ７は、各々独立に水素原子、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキル基であり、
Ｒ８およびＲ９は、各々独立に水素原子、アルキル、アリールまたはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、アルキル基またはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数であり、
ｘは、１から約５００までの整数である）、
ｂ）Ｌ−（（Ｔ−Ｃ（Ｒ１）（ＸＰ）ＣＨＲ２ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
（式中、Ｌは連結基であり、
Ｔは、（−ＣＨ２−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘまたは（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘであり、
Ｒ１は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲ８Ｒ９であり、
Ｐは、水素原子または保護基であるが、但し、ＸがＮＲ８Ｒ９であるときは、Ｐは存在せず、
Ｒ２は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、またはＲ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされており、
Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒ８およびＲ９は、各々独立に水素原子、アルキル、アリールまたはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、アルキル基またはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数であり、
ｘは、１から約５００までの整数である）、
ｃ）Ｌ−（（ＧＴＺＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
（式中、Ｌは連結基であり、
Ｔは、（−ＣＨ２−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘであるか、または結合を形成しており、Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｚは、Ｃ＝Ｏ、ＣＯＯ、またはＴが（−ＣＨ２−）ｘである場合、ＣＯＮＨであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、またはＲ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされており、
Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、またはアルキル基もしくはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数であり、
ｘは、１から約５００までの整数である）、
ｄ）Ｌ−（（ＴＧＱＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
（式中、Ｌは連結基であり、
Ｔは、（−ＣＨ２−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘであり、または結合を形成しており、
Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｑは、（−ＣＨ２−）ｐ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｐ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｐまたは（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｐであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、またはＲ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされており、
Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、またはアルキル基もしくはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｐは、１から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数であり、
ｘは、１から約５００までの整数である）、
ｅ）Ｌ−（（−ＣＨ２−）ｘｘＣ（Ｒ１）（（Ｇ）Ｒ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））２）ｍ
（式中、Ｌは連結基であり、
Ｒ１は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
各Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
各Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、またはＲ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされており、各Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、各Ｒは、水素原子、またはアルキル基もしくはアリール基であり、
各ｑは、１から約７までの整数であり、
各ｒは、０から約３までの整数であり、
各ｓは、０から約３までの整数であり、
ａ．ｍは、２から約１０までの整数であり、
各ｔは、１から約１０までの整数であり、
ｘｘは、１から約１０までの整数である）、ならびに
ｆ）Ｌ−（（−Ｃ（Ｒ１）（ＸＰ）ＣＨＲ２ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
（式中、Ｌは連結基であり、
Ｒ１は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲ８Ｒ９であり、
Ｐは、水素原子または保護基であるが、但し、ＸがＮＲ８Ｒ９であるときは、Ｐは存在せず、
Ｒ２は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
ｂ．Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、またはＲ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされており、
Ｒ８およびＲ９は、各々独立に水素原子、アルキル、アリールまたはアリールアルキル基であり、
Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、アルキル基またはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数である）
を有する光化学架橋剤である架橋剤。
（項目３８）
項目１から３６のいずれか一項に記載の架橋剤であって、次式：
ａ）Ｌ−（（Ｄ−Ｔ−Ｃ（Ｒ１）（ＸＰ）ＣＨＲ２ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
（式中、Ｌは連結基であり、
Ｄは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ５またはＣＲ６Ｒ７であり、
Ｔは、（−ＣＨ２−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘまたは（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘであり、
Ｒ１は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲ８Ｒ９であり、
Ｐは、水素原子または保護基であるが、但し、ＸがＮＲ８Ｒ９であるときは、Ｐは存在せず、
Ｒ２は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、またはＲ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされており、
Ｒ５およびＲ１０は、各々独立に水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒ６およびＲ７は、各々独立に水素原子、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキル基であり、
Ｒ８およびＲ９は、各々独立に水素原子、アルキル、アリールまたはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、アルキル基またはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数であり、
ｘは、１から約５００までの整数である）
を有する光化学架橋剤である架橋剤。
（項目３９）
Ｌが、約２〜約１０個の間の炭素原子を有する分岐または非分岐アルキル鎖である、項目３８に記載の光化学架橋剤。
（項目４０）
Ｌが
【化１０】
0005393662.tif 000002
であり、ＤがＯであり、Ｔが（−ＣＨ２−）ｘであり、Ｒ１が水素原子であり、ＸがＯであり、Ｐが水素原子であり、Ｒ２が水素原子であり、ＧがＯであり、Ｒ３およびＲ４がフェニル基であり、ｍが３であり、ｘが１である、項目３８に記載の光化学架橋剤。
（項目４１）
Ｌが（−ＣＨ２−）ｙであり、ＤがＯであり、Ｔが（−ＣＨ２−）ｘであり、Ｒ１が水素原子であり、ＸがＯであり、Ｐが水素原子であり、Ｒ２が水素原子であり、ＧがＯであり、Ｒ３およびＲ４がフェニル基であり、ｍが２であり、ｘが１であり、ｙが２から約６までの整数である、項目３８に記載の光化学架橋剤。
（項目４２）
項目１から３６のいずれか一項に記載の架橋剤であって、次式：
Ｌ−（（Ｔ−Ｃ（Ｒ１）（ＸＰ）ＣＨＲ２ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
（式中、Ｌは連結基であり、
Ｔは、（−ＣＨ２−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘまたは（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘであり、
Ｒ１は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲ８Ｒ９であり、
Ｐは、水素原子または保護基であるが、但し、ＸがＮＲ８Ｒ９であるときは、Ｐは存在せず、
Ｒ２は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、またはＲ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされており、
Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒ８およびＲ９は、各々独立に水素原子、アルキル、アリールまたはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、アルキル基またはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数であり、
ｘは、１から約５００までの整数である）
を有する光化学架橋剤である架橋剤。
（項目４３）
項目４２に記載の光化学架橋剤であって、Ｌが、構造（Ｉ）：
【化１１】
0005393662.tif 000003
（式中ＡおよびＪが、各々独立に水素原子、アルキル基、アリール基であるか、またはＢと共に環式環を形成し、但し、ＡおよびＪが、各々独立に水素原子、アルキル基またはアリール基である場合は、Ｂは存在しておらず、
Ｂは、ＮＲ１１、Ｏまたは（−ＣＨ２−）ｚであり、
但し、Ａ、ＢおよびＪが環を形成する場合は、ＡおよびＪが、（−ＣＨ２−）ｚまたはＣ＝Ｏであり、
Ｒ１１は、水素原子、アルキル基、アリール基であるか、またはＴとの結合を表しており、
各ｚは、独立に０から３までの整数であり、
但し、ＡまたはＪのいずれかがＣ＝Ｏである場合は、Ｂが、ＮＲ１１、Ｏまたは（−ＣＨ２−）ｚであって、ｚは、少なくとも１でなければならない）
に従った式を有する光化学架橋剤。
（項目４４）
項目１から３６のいずれか一項に記載の光化学架橋剤であって、次式：
Ｌ−（（ＧＴＺＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
（式中、Ｌは連結基であり、
Ｔは、（−ＣＨ２−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘであり、または結合を形成しており、
Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｚは、Ｃ＝Ｏ、ＣＯＯ、またはＴが（−ＣＨ２−）ｘである場合、ＣＯＮＨであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、またはＲ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされており、
Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、またはアルキル基もしくはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数であり、
ｘは、１から約５００までの整数である）
を有する光化学架橋剤。
（項目４５）
項目４４に記載の光化学架橋剤であって、Ｌが、構造（Ｉ）：
【化１２】
0005393662.tif 000004
（式中ＡおよびＪが、各々独立に水素原子、アルキル基、アリール基であるか、またはＢと共に環式環を形成し、但し、ＡおよびＪが、各々独立に水素原子、アルキル基またはアリール基である場合は、Ｂは存在しておらず、
Ｂは、ＮＲ１１、Ｏまたは（−ＣＨ２−）ｚであり、
但し、Ａ、ＢおよびＪが環を形成する場合は、ＡおよびＪが、（−ＣＨ２−）ｚまたはＣ＝Ｏであり、
Ｒ１１は、水素原子、アルキル基、アリール基であるか、またはＴとの結合を表しており、
各ｚは、独立に０から３までの整数であり、
但し、ＡまたはＪのいずれかがＣ＝Ｏである場合は、Ｂが、ＮＲ１１、Ｏまたは（−ＣＨ２−）ｚであって、ｚは、少なくとも１でなければならない）
に従った式を有する光化学架橋剤。
（項目４６）
項目４５に記載の光化学架橋剤であって、Ｌが、構造（ＩＩ）：
【化１３】
0005393662.tif 000005
（式中Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７が、各々独立に水素原子、アルキルもしくはアリール基であるか、またはＴとの結合を表し、但し、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７の少なくとも２つは、Ｔと結合しており、各Ｋが、独立にＣＨまたはＮである）
に従った式を有する光化学架橋剤。
（項目４７）
項目１から３６のいずれか一項に記載の架橋剤であって、次式：
Ｌ−（（ＴＧＱＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
（式中、Ｌは連結基であり、
Ｔは、（−ＣＨ２−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘであり、または結合を形成しており、
Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｑは、（−ＣＨ２−）ｐ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｐ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｐまたは（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｐであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、またはＲ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされており、
Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、またはアルキル基もしくはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｐは、１から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数であり、
ｘは、１から約５００までの整数である）
を有する光化学架橋剤である架橋剤。
（項目４８）
項目４４に記載の光化学架橋剤であって、Ｌが、構造（Ｉ）：
【化１４】
0005393662.tif 000006
（式中ＡおよびＪが、各々独立に水素原子、アルキル基、アリール基であるか、またはＢと共に環式環を形成し、但し、ＡおよびＪが、各々独立に水素原子、アルキル基またはアリール基である場合は、Ｂは存在しておらず、
Ｂは、ＮＲ１１、Ｏまたは（−ＣＨ２−）ｚであり、
但し、Ａ、ＢおよびＪが環を形成する場合は、ＡおよびＪが、（−ＣＨ２−）ｚまたはＣ＝Ｏであり、
Ｒ１１は、水素原子、アルキル基、アリール基であるか、またはＴとの結合を表しており、
各ｚは、独立に０から３までの整数であり、
但し、ＡまたはＪのいずれかがＣ＝Ｏである場合は、Ｂが、ＮＲ１１、Ｏまたは（−ＣＨ２−）ｚであって、ｚは、少なくとも１でなければならない）
に従った式を有する光化学架橋剤。
（項目４９）
項目４８に記載の光化学架橋剤であって、Ｌが、構造（ＩＩ）：
【化１５】
0005393662.tif 000007
（式中Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７が、各々独立に水素原子、アルキルもしくはアリール基であるか、またはＴとの結合を表し、但し、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７の少なくとも２つは、Ｔと結合しており、各Ｋが、独立にＣＨまたはＮである）
に従った式を有する光化学架橋剤。
（項目５０）
項目１から３６のいずれか一項に記載の架橋剤であって、次式：
Ｌ−（（−ＣＨ２−）ｘｘＣ（Ｒ１）（（Ｇ）Ｒ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））２）ｍ
（式中、Ｌは連結基であり、
Ｒ１は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
各Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
各Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、またはＲ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされており、各Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、各Ｒは、水素原子、またはアルキル基もしくはアリール基であり、
各ｑは、１から約７までの整数であり、
各ｒは、０から約３までの整数であり、
各ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
各ｔは、１から約１０までの整数であり、
ｘｘは、１から約１０までの整数である）
を有する光化学架橋剤である架橋剤。
（項目５１）
項目５０に記載の光化学架橋剤であって、Ｌが、構造（Ｉ）：
【化１６】
0005393662.tif 000008
（式中ＡおよびＪが、各々独立に水素原子、アルキル基、アリール基であるか、またはＢと共に環式環を形成し、但し、ＡおよびＪが、各々独立に水素原子、アルキル基またはアリール基である場合は、Ｂは存在しておらず、
Ｂは、ＮＲ１１、Ｏまたは（−ＣＨ２−）ｚであり、
但し、Ａ、ＢおよびＪが環を形成する場合は、ＡおよびＪが、（−ＣＨ２−）ｚまたはＣ＝Ｏであり、
Ｒ１１は、水素原子、アルキル基、アリール基であるか、またはＴとの結合を表しており、
各ｚは、独立に０から３までの整数であり、
但し、ＡまたはＪのいずれかがＣ＝Ｏである場合は、Ｂが、ＮＲ１１、Ｏまたは（−ＣＨ２−）ｚであって、ｚは、少なくとも１でなければならない）
に従った式を有する光化学架橋剤。
（項目５２）
項目１から３６のいずれか一項に記載の架橋剤であって、次式：
Ｌ−（（−Ｃ（Ｒ１）（ＸＰ）ＣＨＲ２ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
（式中、Ｌは連結基であり、
Ｒ１は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲ８Ｒ９であり、
Ｐは、水素原子または保護基であるが、但し、ＸがＮＲ８Ｒ９であるときは、Ｐは存在せず、
Ｒ２は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基であり、
Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、またはＲ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされており、
Ｒ８およびＲ９は、各々独立に水素原子、アルキル、アリールまたはアリールアルキル基であり、
Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、アルキル基またはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数である）
を有する光化学架橋剤である架橋剤。
（項目５３）
Ｌが
【化１７】
0005393662.tif 000009
であり、Ｒ２０およびＲ２１が、各々個別に水素原子、アルキル基またはアリール基である、項目５２に記載の光化学架橋剤。
（項目５４）
項目１から３６のいずれか一項に記載の架橋剤であって、次式：
Ｌ−（（ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
（式中Ｌは連結基であり、
Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、
Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、またはＲ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされており、
Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、
Ｒは、水素原子、アルキル基またはアリール基であり、
ｑは、１から約７までの整数であり、
ｒは、０から約３までの整数であり、
ｓは、０から約３までの整数であり、
ｍは、２から約１０までの整数であり、
ｔは、１から約１０までの整数である）
の化合物である架橋剤。
（項目５５）
ナノ繊維の表面上に官能性ポリマーを固定化する方法であって、
（ａ）１種または複数のポリマー物質、および少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する１種または複数の架橋剤から、ナノ繊維を形成するステップ、
（ｂ）該ナノ繊維の露出表面を官能性ポリマーと接触させるステップ、
（ｃ）該ナノ繊維をエネルギー源に曝すことにより、該ナノ繊維の該表面と該官能性ポリマーとの間に共有結合を形成するステップ
を含む方法。
（項目５６）
上記官能性ポリマーが、生物活性物質と反応する、１つまたは複数のカルボキシ、エステル、エポキシ、ヒドロキシ、アミド、アミノ、チオ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、イソシアネート、酸無水物、アジド、アルデヒド、塩化シアヌリル、アルキンまたはホスフィン官能基を有するポリマーである、項目５５に記載の方法。
本発明の一実施形態によれば、ナノ繊維は、１種または複数の天然または合成ポリマー物質と、各々が少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する１種または複数の架橋剤とを含む。使用時に、光化学的または熱的な潜在反応基は、エネルギー源に曝されると共有結合を形成することになろう。適切なエネルギー源には、放射線および熱のエネルギーが挙げられる。幾つかの実施形態では、放射エネルギーは、可視光線、紫外線、赤外線、Ｘ線またはマイクロ波の電磁放射線である。
【００１０】
架橋剤は、少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有し得る。これらの潜在反応基は、同一でもよく、異なっていてもよい。例えば、潜在反応基は全て、光化学反応基でもよい。あるいは、本発明の他の実施形態では、架橋剤は、光化学的、熱的双方の反応基を含んでもよい。更に、架橋剤は、モノマー物質もしくはポリマー物質でもよく、またはモノマー、ポリマー双方の物質の混合物でもよい。
【００１１】
本発明の多様な実施形態によれば、ナノ繊維のポリマー物質は、所望の用途に応じて親水性、疎水性、両親媒性または熱応答性でもよい。本発明のまた更なる実施形態によれば、ナノ繊維は、生分解性または非生分解性ポリマーのいずれでもよい。本発明の更に更なる実施形態では、ナノ繊維は、生物活性物質を含んでもよい。
【００１２】
ナノ繊維は、通常、１ｎｍ〜１００ミクロンの範囲の直径を有し、１ｎｍ〜１０００ｎｍの範囲の直径を有し得る。ナノ繊維は、少なくとも約１０から少なくとも１００の範囲のアスペクト比を有し得る。
【００１３】
本発明の別の実施形態によれば、潜在反応性で活性化可能なナノ繊維は、１種または複数のポリマー物質と、各々が少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する１種または複数の架橋剤とを組み合わせ、その組合せから少なくとも１本のナノ繊維を形成することにより、生成される。ナノ繊維は、ポリマー物質および架橋剤を含有する組合せを電気紡糸することにより、形成し得る。本発明のまた更なる実施形態によれば、その組合せは、生物活性物質も含んでもよく、または後に生物活性物質と反応する官能性ポリマーと更に組み合わせてもよい。官能性ポリマーには、生物活性物質と反応する、１種または複数の官能基を有する任意の適切なポリマーが含まれる。こうしたポリマーの代表的官能基には、カルボキシ、エステル、エポキシ、ヒドロキシ、アミド、アミノ、チオ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、イソシアネート、酸無水物、アジド、アルデヒド、塩化シアヌリルまたはホスフィン基が挙げられる。
【００１４】
また別の実施形態によれば、本発明は、基材の表面をコーティングする方法を提供する。本発明の一実施形態によれば、該方法は、１種または複数のポリマー物質と、各々が少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する１種または複数の架橋剤とを組み合わせるステップ、その組合せから少なくとも１本のナノ繊維を形成するステップ、基材の表面をナノ繊維と接触させるステップ、およびナノ繊維と表面との間に結合を形成するステップを含む。本発明の更なる実施形態によれば、該方法は、潜在反応性・活性化可能基の少なくとも１つをエネルギー源で活性化して、ナノ繊維を生物活性物質と結合させるステップを含む。本発明の代替的実施形態によれば、該方法は、ナノ繊維を表面に結合するために、第１の潜在反応性・活性化可能基を、およびナノ繊維を生物活性物質に結合するために、第２の潜在反応性・活性化可能基を、同時に活性化するステップを含む。
【００１５】
更に別の実施形態によれば、本発明は、１種または複数の天然または合成ポリマー物質と、各々が少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する１種または複数の架橋剤とを含んだ複数のナノ繊維を含む、表面被膜を有する物品を提供する。幾つかの実施形態では、生物活性物質がナノ繊維に結合している。
【００１６】
更にまた別の実施形態によれば、本発明は、１種または複数のポリマー物質と、各々が少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する１種または複数の架橋剤とを含んだ少なくとも１本のナノ繊維を有する、表面被膜を含む細胞培養プレートである。
【００１７】
多数の実施形態が開示されるが、本発明の更に他の実施形態は、本発明の例示的実施形態を説明し、記載する以下の詳細な説明から、当業者には明らかとなろう。したがって、詳細な説明は、性質上、例示的であって限定的ではないと見なすべきである。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】図１Ａ〜１Ｄは、実施例１に記載の方法により調製した、ポリカプロラクトンの電子画像を示す図である。
【図２】図２は、実施例７に記載する、カルボキシおよびアミン基を含有するナノ繊維の官能基密度を示す図である。
【図３】図３は、実施例７に記載する、カルボキシおよびアミン基を含有するナノ繊維の官能基密度を示す図である。
【図４】図４は、実施例７に記載する、カルボキシおよびアミン基を含有するナノ繊維の官能基密度を示す図である。
【図５】図５は、実施例１０に記載する、ナノ繊維のタンパク質固定化量を示す図である。
【図６】図６は、実施例１１に記載する、ナノ繊維の西洋ワサビペルオキシダーゼ活性を示す図である。
【図７】図７は、実施例１２に記載する、ナノ繊維の酵素的分解をグラフ化した図である。
【図８】図８Ａ〜８Ｄは、実施例１２に記載する、酵素分解ナノ繊維の電子画像を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明は、潜在反応性で活性化可能なナノ繊維を対象とする。潜在反応性で活性化可能なナノ繊維は、基材の表面を改質して機能化表面を得るために、使用することができる。生物活性物質は、基材の表面上に露出した潜在反応基と反応することにより、ナノ繊維改質表面上に固定化し得る。通常、生物活性物質は、ナノ繊維改質表面上に固定化された後、その生物活性の少なくとも一部を保持している。
【００２０】
本発明の一実施形態によれば、ナノ繊維は、１種または複数の天然または合成ポリマー物質と、各々が少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する架橋剤とを含む。本発明の更なる実施形態によれば、ナノ繊維は、生分解性または非生分解性ポリマーでもよく、生物活性物質も含み得る。潜在反応性で活性化可能なナノ繊維は、潜在反応性・活性化可能基の少なくとも１個を活性化して、基材の表面と潜在反応性・活性化可能基との間に共有結合を形成することにより、ナノ繊維をその表面に結合することによって、基材の表面を改質するために使用することができる。残りの潜在反応性・活性化可能基（複数可）は、基材の表面上に接触可能に残され、基材表面の更なる改質のために使用され得る。
【００２１】
延伸、鋳型合成、相分離、自己集合または電気紡糸などの多くの加工技術が、ナノ繊維の調製に使用されてきた。一実施形態では、ナノ繊維は、１種または複数のポリマー物質と、少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する架橋剤とを含む、繊維形成性組合せの電気紡糸により形成することができる。本発明の代替的実施形態によれば、繊維形成性組合せは生物活性物質も含み得る。電気紡糸は、溶液または液体にナノ繊維を生成させるために、１種または複数のポリマーまたは他の繊維形成性の溶液もしくは液体を電場中へ導入することを一般に伴う。毛管出口を有するシリンジ中に保持された繊維形成性組合せに、強い静電場を印加すると、毛管出口からの繊維形成性組合せの懸垂液滴が、Ｔａｙｌｏｒコーンに変形する。電圧が閾値を超えると、電気力が液滴上の表面張力に打ち勝ち、溶液または液体の荷電ジェットが、Ｔａｙｌｏｒコーンの先端から放出される。次いで、放出ジェットは、低電位の対電極として作用する収集金属スクリーンへと移動する。そのジェットは、小さい荷電繊維または細繊維に分割され、存在する溶媒は全て蒸発して、後にはスクリーン上に形成された不織布マットが残される。
【００２２】
静電紡糸繊維は、非常に細い直径を有するように生成することができる。電気紡糸繊維の直径、粘稠度および均一性に影響するパラメーターには、繊維形成性組合せ中のポリマー物質および架橋剤濃度（添加量）、印加電圧、ならびに針・コレクター間距離が挙げられる。本発明の一実施形態によれば、ナノ繊維は、約１ｎｍ〜約１００μｍの範囲の直径を有する。他の実施形態では、約１ｎｍ〜約１０００ｎｍの範囲の直径を有する。更に、ナノ繊維は、少なくとも約１０から少なくとも約１００の範囲のアスペクト比を有し得る。微小な繊維径のために、該繊維は、質量単位当たり高い表面積を有することが理解されよう。この高い表面積対質量比のために、繊維形成性溶液または液体は、液体または溶媒和繊維形成物質から固体ナノ繊維へ１秒にも満たないうちに変換されることが可能である。
【００２３】
ナノ繊維の形成に使用されるポリマー物質は、架橋剤と適合性のある任意の繊維形成物質から選択し得る。意図する用途に応じて、繊維形成ポリマー物質は、親水性、疎水性または両親媒性でもよい。それに加え、繊維形成ポリマー物質は、熱応答性ポリマー物質でもよい。
【００２４】
合成または天然で、生分解性または非生分解性のポリマーは、ナノ繊維を形成し得る。「合成ポリマー」とは、合成で調製され、非天然モノマー単位を含むポリマーを指す。例えば、合成ポリマーは、アクリレートまたはアクリルアミド単位などの非天然モノマー単位を含むことができる。合成ポリマーは、付加重合、縮合重合またはフリーラジカル重合などの従来の重合反応により、通常形成される。合成ポリマーには、非天然モノマー単位（例えば、合成ペプチド、ヌクレオチドおよび糖誘導体）と組み合わせた天然ペプチド、ヌクレオチドおよび糖モノマー単位などの天然モノマー単位を有するものも含むことができる。こうした種類の合成ポリマーは、固相合成または可能な場合は組換えなどの標準的な合成技法により、生成することができる。
【００２５】
「天然ポリマー」とは、天然、組換えまたは合成のいずれかで調製され、ポリマー主鎖中では天然モノマー単位からなるポリマーを指す。幾つかの場合には、天然ポリマーを修飾、プロセシング、誘導体化、または他の処理をして、天然ポリマーの化学的および／または物理的性質を変化させてもよい。こうした例では、「天然ポリマー」という用語は、天然ポリマーに対する変化を反映するように、改変されよう（例えば、「誘導体化天然ポリマー」または「脱グリコシル化天然ポリマー」）。
【００２６】
ナノ繊維材料には、例えば、ポリオレフィン、ポリアセタール、ポリアミド、ポリエステル、セルロースエーテルおよびエステル、ポリアルキレンサルファイド、ポリアリーレンオキサイド、ポリスルホン、修飾ポリスルホンポリマー、ならびにそれらの混合物などの付加ポリマーおよび縮合ポリマー材料の双方を含み得る。こうした包括的部類に入る例示的材料には、ポリエチレン、ポリ（ε−カプロラクトン）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリプロピレン、ポリ（塩化ビニル）、ポリメチルメタクリレート（および他のアクリル樹脂）、ポリスチレンおよびそのコポリマー（ＡＢＡ型ブロックコポリマーを含む）、ポリ（フッ化ビニリデン）、ポリ（塩化ビニリデン）、様々な加水分解度（８７％〜９９．５％）のポリビニルアルコールが挙げられ、架橋型および非架橋型を取っている。例示的な付加ポリマーは、ガラス状（室温より高いＴｇ）になる傾向がある。これは、ポリ塩化ビニルおよびポリメチルメタクリレート、ポリスチレンポリマー組成物、またはポリフッ化ビニリデンおよびポリビニルアルコール材料では、アロイもしくは低結晶に当てはまる。
【００２７】
本発明の幾つかの実施形態では、ナノ繊維は、ポリアミド縮合ポリマーである。より特定の実施形態では、ポリアミド縮合ポリマーは、ナイロンポリマーである。用語「ナイロン」は、長鎖合成ポリアミド全ての総称である。通常、ナイロンの術語には、出発物質がＣ６ジアミンおよびＣ６二酸であることを示す、ナイロン−６，６などの一連のメンバーが含まれる（１つ目の数字がＣ６ジアミンを示し、２つ目の数字がＣ６ジカルボン酸化合物を示す）。別のナイロンは、少量の水の存在下でε−カプロラクタムの重縮合により作製し得る。この反応は、線状ポリアミドであるナイロン−６（ε−アミノカプロン酸の名でも知られている、環状ラクタムから作製される）を形成する。更に、ナイロンコポリマーも想定されている。コポリマーは、各種ジアミン化合物、各種二酸化合物および各種環状ラクタム構造を反応混合物中で組み合わせ、次いでモノマー物質がポリアミド構造中にランダムに配置したナイロンを形成することにより、作製することができる。例えば、ナイロン６，６−６，１０材料は、ヘキサメチレンジアミンならびにＣ６およびＣ１０の二酸ブレンドから製造されるナイロンである。ナイロン６−６，６−６，１０は、εアミノカプロン酸、ヘキサメチレンジアミン、ならびにＣ６およびＣ１０二酸物質のブレンドの共重合で製造されるナイロンである。
【００２８】
ブロックコポリマーも、ナノ繊維材料として使用することができる。ナノ繊維調製用の組成物の調製では、溶媒系は、両ブロックが溶媒中に溶解するように選択することができる。一例は、塩化メチレン中のＡＢＡ（スチレン−ＥＰ−スチレン）またはＡＢ（スチレン−ＥＰ）ポリマーである。このようなブロックコポリマーの例は、スチレン／ブタジエンおよびスチレン／水素化ブタジエン（エチレンプロピレン）を含むＫｒａｔｏｎＴＭ型のＡＢおよびＡＢＡブロックポリマー、ＰｅｂａｘＴＭ型のε−カプロラクタム／エチレンオキサイド、およびＳｙｍｐａｔｅｘＴＭ型のポリエステル／エチレンオキサイド、ならびにエチレンオキサイドおよびイソシアネートのポリウレタンである。
【００２９】
付加ポリマーとして、ポリフッ化ビニリデン、シンジオタクチックポリスチレン、フッ化ビニリデンとヘキサフルオロプロピレンとのコポリマー、ポリビニルアルコール、ポリ酢酸ビニル、ポリ（アクリロニトリル）とそのアクリル酸およびメタクリレートとのコポリマーなどの非晶質付加ポリマー、ポリスチレン、ポリ（塩化ビニル）およびその各種コポリマー、ポリ（メチルメタクリレート）およびその各種コポリマーなどは、低い圧力および温度で溶解するので、比較的容易に溶液紡糸をすることができる。ポリエチレンおよびポリプロピレンのような高結晶性ポリマーは、溶液紡糸をしようとすれば、より高い温度および高い圧力を一般に必要とする。
【００３０】
ナノ繊維は、ポリマー混合物、アロイ形式または架橋した化学結合構造中に、２種以上のポリマー物質を含むポリマー組成物からも形成することができる。２種の関連ポリマー物質をブレンドすることにより、有益な性質を有するナノ繊維を得ることができる。例えば、高分子量ポリ塩化ビニルは、低分子量ポリ塩化ビニルとブレンドすることができる。同様に、高分子量ナイロン材料は、低分子量ナイロン材料とブレンドすることができる。包括的ポリマー属の異なる種も、ブレンドすることができる。例えば、高分子量スチレン材料は、低分子量の高衝撃性ポリスチレンとブレンドすることができる。ナイロン−６材料は、ナイロン−６；６，６；６，１０コポリマーなどのナイロンコポリマーとブレンドすることができる。更に、８７％加水分解ポリビニルアルコールなどの低加水分解度のポリビニルアルコールは、９８〜９９．９％間およびそれより高い加水分解度の完全または超加水分解ポリビニルアルコールとブレンドすることができる。混合物中のこうした物質は全て、適当な架橋機構を用いて架橋することができる。ナイロンは、アミド連結部中の窒素原子と反応性がある架橋剤を用いて架橋することができる。ポリビニルアルコール材料は、ホルムアルデヒドなどのモノアルデヒド、尿素、メラミン−ホルムアルデヒド樹脂およびその類縁体、ホウ酸および他の無機化合物、ジアルデヒド、二酸、ウレタン、エポキシおよび他の既知の架橋剤などのヒドロキシ反応性物質を用いて、架橋することができる。架橋試薬は、反応してポリマー鎖間に共有結合を形成することにより、分子量、耐薬品性、全体的強度および耐機械的分解性を実質的に改良する。
【００３１】
生分解性ポリマーも、ナノ繊維構造と関連した物品の調製に使用することができる。生分解性材料としてこれまで研究された合成ポリマーの部類例には、ポリエステル、ポリアミド、ポリウレタン、ポリオルトエステル、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリイミノカーボネート、脂肪族カーボネート、ポリホスファゼン、ポリ酸無水物、およびそれらのコポリマーが挙げられる。例えば、埋込型医療具に関連して使用できる生分解性材料の具体例には、ポリ乳酸、ポリグリコリド、ポリジオキサノン、ポリ（ラクチド−ｃｏ−グリコリド）、ポリ（グリコリド−ｃｏ−ジオキサノン）、ポリ酸無水物、ポリ（グリコリド−ｃｏ−トリメチレンカーボネート）およびポリ（グリコリド−ｃｏ−カプロラクトン）が挙げられる。こうしたポリマーの他の生分解性ポリマーとのブレンドも、使用することができる。
【００３２】
幾つかの実施形態では、ナノ繊維は非生分解性ポリマーである。非生分解性ポリマーとは、一般に、非酵素的、加水分解的または酵素的に分解することができないポリマーを指す。例えば、非生分解性ポリマーは、プロテアーゼが起こし得る分解に耐性を示す。非生分解性ポリマーは、天然または合成ポリマーのいずれかを含み得る。
【００３３】
ナノ繊維を形成する組成物内に架橋剤を含めることにより、ナノ繊維は、広範囲の支持体表面と適合することが可能である。架橋剤は、所望の表面特性を付与するために、単独または他の物質と組み合わせて使用することができる。
【００３４】
適切な架橋剤には、放射線、電気エネルギーおよび熱エネルギーなどのエネルギー源に曝されると、他の物質と共有結合を形成できる少なくとも２個の潜在反応性・活性化可能基を有する、モノマー物質（低分子物質）またはポリマー物質のいずれかが挙げられる。一般に、潜在反応性・活性化可能基は、加えられた特定の外部エネルギーまたは刺激に応答して、活性種を生成する結果、隣接化学構造と共有結合を形成する化学実体である。潜在反応基は、保存条件下ではその共有結合を保持するが、外部エネルギー源で活性化されると、他の分子と共有結合を形成するような基である。幾つかの実施形態では、潜在反応基は、フリーラジカルなどの活性種を形成する。こうしたフリーラジカルには、外部から加えた電気、電気化学または熱エネルギーを吸収した際のナイトレン、カルベン（ｃａｒｂｉｎｅ）または励起状態ケトンを含み得る。既知のもしくは市販されている潜在反応基の多様な例が、米国特許第４９７３４９３号、米国特許第５２５８０４１号および米国特許第５５６３０５６号、米国特許第５６３７４６０号および米国特許第６２７８０１８号に報告されている。
【００３５】
トリクロロメチルトリアジンに基づく８種の市販多官能光架橋剤が、Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｐｒｏｄｕｉｔｓ  Ｃｈｉｍｉｑｕｅｓ  Ａｕｘｉｌｉａｉｒｅｓ  ｅｔ  ｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｅｓ  （Ｌｏｎｇｊｕｍｅａｕ，  Ｆｒａｎｃｅ）、Ｓｈｉｎ−Ｎａｋａｍａｒａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ、Ｍｉｄｏｒｉ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｃｏ．，  Ｌｔｄ．  またはＰａｎｃｈｉｍ  Ｓ．  Ａ．  （Ｆｒａｎｃｅ）から入手できる。その８種の化合物には、２，４，６−トリス（トリクロロメチル）−１，３，５トリアジン、２−（メチル）−４，６−ビス（トリクロロメチル）−１，３，５−トリアジン、２−（４−メトキシナフチル）−４，６−ビス（トリクロロメチル）−１，３，５−トリアジン、２−（４−エトキシナフチル）−４，６−ビス（トリクロロメチル）−１，３，５−トリアジン、４−（４−カルボキシフェニル）−２，６−ビス（トリクロロメチル）−１，３，５−トリアジン、２−（４−メトキシフェニル）−４，６−ビス（トリクロロメチル）−１，３，５−トリアジン、２−（１−エテン−２−２’−フリル）−４，６−ビス（トリクロロメチル）−１，３，５−トリアジンおよび２−（４−メトキシスチリル）−４，６−ビス（トリクロロメチル）−１，３，５−トリアジンが含まれる。
【００３６】
幾つかの実施形態では、潜在反応基は同じであるが、他の実施形態では、潜在反応基は異なり得る。例えば、潜在反応基は、放射線で共に活性化される２種の異なる基でもよい。他の実施形態では、１つの潜在反応基は放射線で活性化し得るが、もう１つの潜在反応基は熱で活性化し得る。適切な架橋剤には、二官能性、三官能性および多官能性モノマーおよびポリマー物質が含まれる。
【００３７】
熱的または熱エネルギーに反応する潜在反応基は、多様な反応性部分を包含し、熱分解して反応種を形成した後、共有結合を形成することになる既知の化合物を包含し得る。その共有結合により、架橋が隣接物質に結合することが可能になる。適切な熱反応基は、通常、熱感受性の、または熱不安定な結合をもつ一対の原子を有する。熱不安定な結合には、過酸化物結合などの酸素−酸素結合、窒素−酸素結合、および窒素−窒素結合が含まれる。このような結合は、８０〜２００℃を超えない範囲の温度で反応または分解することになろう。
【００３８】
熱発生したカルベンおよびナイトレンは共に、炭素結合挿入、移動、水素引抜きおよびダイマー形成を含む、多様な化学反応を受ける。カルベン発生剤の例には、ジアジリンおよびジアゾ化合物が含まれる。ナイトレン発生剤の例には、アリールアジド、特に過フッ化アリールアジド、アシルアジドおよびトリアゾリウムイリドが含まれる。それに加え、加熱した際に反応性三重項状態を形成する、ジオキセタンなどの基、またはラジカルアニオンおよびラジカルカチオンも、熱反応基の形成に使用され得る。
【００３９】
一実施形態では、架橋剤の熱反応基は、過酸化物の−（Ｏ−Ｏ）−基を含む。熱反応性の過酸化物含有基には、例えば、熱反応性ジアシル過酸化基、熱反応性パーオキシジカーボネート基、熱反応性ジアルキル過酸化基、熱反応性パーオキシエステル基、熱反応性パーオキシケタール基、および熱反応性ジオキセタン基が挙げられる。
【００４０】
ジオキセタンは、分子の環歪みのために、標準的な過酸化物と比較して低い温度で反応または分解する、４員環状過酸化物である。ジオキセタンの分解における初期段階は、Ｏ−Ｏ結合の切断であり、第２段階では、Ｃ−Ｃ結合を破壊して、励起三重項状態のカルボニルを１個、および励起一重項状態のカルボニルを１個創出する。励起三重項状態のカルボニルは、隣接物質から水素を引き抜き、２個のラジカル種を隣接物質上に１個および酸素の付いたそのカルボニルの炭素上に１個形成することができ、熱反応性ジオキセタンと隣接物質との間に新たな共有結合を形成することになろう。
【００４１】
代表的な熱反応性部分は、米国特許出願公開第２００６００３０６６９号に報告されており、他の代表的な熱潜在反応基は、米国特許第５２５８０４１号に報告されている。これらの文書は共に、参照により本明細書に組み込まれる。
【００４２】
紫外線または可視線などの電磁線に反応する潜在反応基は、通常、光化学反応基と呼称される。
【００４３】
潜在反応性・活性化可能なアリールケトンの形態をした潜在反応性・活性化可能種の使用は、有用である。例示的な潜在反応性・活性化可能なアリールケトンには、アセトフェノン、ベンゾフェノン、アントラキノン、アントロン、アントロン様ヘテロ環（即ち、１０位にＮ、ＯまたはＳを有するものなどのアントロンのヘテロ環類縁体）、およびそれらの置換（例えば、環置換）誘導体が挙げられる。アリールケトンの例には、アクリドン、キサントンおよびチオキサントンを含むアントロンのヘテロ環誘導体、ならびにそれらの環置換誘導体が挙げられる。特に、約３６０ｎｍより大きい励起エネルギーを有するチオキサントンおよびその誘導体は、有用である。
【００４４】
このようなケトンの官能基は、活性化／不活性化／再活性化サイクルを容易に受けることができるので、適している。ベンゾフェノンは、三重項状態への系間交差を受ける励起一重項状態の初期形成により、光化学的に励起できるので、例示的な光化学反応性・活性化可能基である。励起三重項状態は、水素原子の引抜き（例えば、支持体表面から）により炭素−水素結合中に挿入し、したがってラジカル対を創出することができる。ラジカル対のその後の崩壊によって、新たな炭素−炭素結合が形成される。反応性結合（例えば、炭素−水素）が結合するために利用できない場合、ベンゾフェノン基の紫外光誘発励起は可逆的であり、その分子は、エネルギー源を除いたときに基底状態エネルギー準位に戻る。ベンゾフェノンおよびアセトフェノンなどの光化学反応性・活性化可能なアリールケトンは、これらの基が、水中で多数回の再活性化を受け、そのためコーティング効率を増加させるため、特に重要である。
【００４５】
本発明の幾つかの実施形態では、光化学反応性架橋剤は、異なる３種の分子ファミリーに由来し得る。幾つかのファミリーは、１つまたは複数の親水性部分、即ちヒドロキシ基（保護されていることもある）、アミン、アルコキシ基などを含む。他のファミリーは、疎水性または両親媒性部分を含み得る。一実施形態では、そのファミリーは、次式：
Ｌ−（（Ｄ−Ｔ−Ｃ（Ｒ１）（ＸＰ）ＣＨＲ２ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
を有する。
【００４６】
Ｌは連結基である。Ｄは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ５またはＣＲ６Ｒ７である。Ｔは、（−ＣＨ２−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘまたは（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘである。Ｒ１は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基である。Ｘは、Ｏ、ＳまたはＮＲ８Ｒ９である。Ｐは、水素原子または保護基であるが、但し、ＸがＮＲ８Ｒ９であるときは、存在しない。Ｒ２は、水素原子、アルキル、アルキルオキシアルキル、アリール、アリールオキシアルキルまたはアリールオキシアリール基である。Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏである。Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、またはＲ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされている。Ｒ５およびＲ１０は、各々独立に水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基である。Ｒ６およびＲ７は、各々独立に水素原子、アルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキル基である。Ｒ８およびＲ９は、各々独立に水素原子、アルキル、アリールまたはアリールアルキル基であり、Ｒは、水素原子、アルキル基またはアリール基であり、ｑは、１から約７までの整数であり、ｒは、０から約３までの整数であり、ｓは、０から約３までの整数であり、ｍは、２から約１０までの整数であり、ｔは、１から約１０までの整数であり、ｘは、１から約５００までの整数である。
【００４７】
一実施形態では、Ｌは、約２〜約１０の間の炭素原子を有する分岐または非分岐アルキル鎖である。
【００４８】
別の実施形態では、Ｄは、酸素原子（Ｏ）である。
【００４９】
更に別の実施形態では、Ｔは、（−ＣＨ２−）ｘまたは（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘであり、ｘは、１または２である。
【００５０】
更にまた別の実施形態では、Ｒ１は、水素原子である。
【００５１】
また別の実施形態では、Ｘは酸素原子Ｏであり、Ｐは水素原子である。
【００５２】
別の実施形態では、Ｒ２は、水素原子である。
【００５３】
更に別の実施形態では、Ｇは、酸素原子Ｏである。
【００５４】
更にまた別の実施形態では、Ｒ３およびＲ４は、各々個別に、更に置換することができるアリール基であり、ｍは３である。
【００５５】
特定の一実施形態では、Ｌは
【００５６】
【化１】
0005393662.tif 000010
であり、ＤはＯであり、Ｔは（−ＣＨ２−）ｘであり、Ｒ１は水素原子であり、ＸはＯであり、Ｐは水素原子であり、Ｒ２は水素原子であり、ＧはＯであり、Ｒ３およびＲ４はフェニル基であり、ｍは３であり、ｘは１である。
【００５７】
また別の特定の実施形態では、Ｌは（−ＣＨ２−）ｙであり、ＤはＯであり、Ｔは（−ＣＨ２−）ｘであり、Ｒ１は水素原子であり、ＸはＯであり、Ｐは水素原子であり、Ｒ２は水素原子であり、ＧはＯであり、Ｒ３およびＲ４はフェニル基であり、ｍは２であり、ｘは１であり、ｙは２から約６までの整数であり、特にｙは２、４または６である。
【００５８】
ある種の実施形態では、ｘは、約１〜約５００、より特定すれば約１〜約４００、約１〜約２５０、約１〜約２００、約１〜約１５０、約１〜約１００、約１〜約５０、約１〜約２５または約１〜約１０までの整数である。
【００５９】
別の実施形態では、そのファミリーは、次式：
Ｌ−（（Ｔ−Ｃ（Ｒ１）（ＸＰ）ＣＨＲ２ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
を有し、Ｌ、Ｔ、Ｒ１、Ｘ、Ｐ、Ｒ２、Ｇ、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ、ｑ、ｒ、ｓ、ｍ、ｔおよびｘは、上記に定義した通りである。
【００６０】
一実施形態では、Ｌは、構造（Ｉ）：
【００６１】
【化２】
0005393662.tif 000011
に従った式を有する。
【００６２】
ＡおよびＪは、各々独立に水素原子、アルキル基、アリール基であるか、またはＢと共に環式環を形成し、但し、ＡおよびＪが、各々独立に水素原子、アルキル基またはアリール基である場合は、Ｂは存在しておらず、Ｂは、ＮＲ１１、Ｏまたは（−ＣＨ２−）ｚであり、但し、Ａ、ＢおよびＪが環を形成する場合は、ＡおよびＪが、（−ＣＨ２−）ｚまたはＣ＝Ｏであり、Ｒ１１は、水素原子、アルキル基、アリール基であるか、またはＴとの結合を表しており、各ｚは、独立に０から３までの整数であり、但し、ＡまたはＪのいずれかがＣ＝Ｏである場合は、Ｂが、ＮＲ１１、Ｏまたは（−ＣＨ２−）ｚであって、ｚは、少なくとも１でなければならない。
【００６３】
別の実施形態では、Ｔは、−ＣＨ２−である。
【００６４】
別の実施形態では、そのファミリーは、次式：Ｌ−（（ＧＴＺＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍを有し、Ｌ、Ｔ、Ｇ、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ１０、Ｒ、ｑ、ｒ、ｓ、ｍ、ｔおよびｘは、上記に定義した通りである。Ｚは、Ｔが（−ＣＨ２−）ｘである場合、Ｃ＝Ｏ、ＣＯＯまたはＣＯＮＨでもよい。
【００６５】
一実施形態では、Ｌは、構造（Ｉ）：
【００６６】
【化３】
0005393662.tif 000012
に従った式を有し、Ａ、Ｂ、Ｊ、Ｒ１１およびｚは、上記に定義した通りである。
【００６７】
別の実施形態では、Ｌは、構造（ＩＩ）：
【００６８】
【化４】
0005393662.tif 000013
に従った式を有する。
Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７は、各々独立に水素原子、アルキルもしくはアリール基であるか、またはＴとの結合を表し、但し、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７の少なくとも２つは、Ｔと結合しており、各Ｋは、独立にＣＨまたはＮである。
【００６９】
別の実施形態では、そのファミリーは、次式：
Ｌ−（（ＴＧＱＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
を有する。Ｌ、Ｇ、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ１０、Ｒ、ｑ、ｒ、ｓ、ｍ、ｔおよびｘは、上記に定義した通りである。Ｔは、（−ＣＨ２−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｘであるか、または結合を形成する。Ｑは、（−ＣＨ２−）ｐ、（−ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｐ、（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｐまたは（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−Ｏ−）ｐであり、ｐは、１から約１０までの整数である。
【００７０】
一実施形態では、Ｌは、構造（Ｉ）：
【００７１】
【化５】
0005393662.tif 000014
に従った式を有する。Ａ、Ｂ、Ｊ、Ｒ１１およびｚは、上記に定義した通りである。
【００７２】
別の実施形態では、Ｌは、構造（ＩＩ）：
【００７３】
【化６】
0005393662.tif 000015
に従った式を有する。Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７は、各々独立に水素原子、アルキルもしくはアリール基であるか、またはＴとの結合を表し、但し、Ｒ１２、Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６、Ｒ１７の少なくとも２つは、Ｔと結合しており、各Ｋは、独立にＣＨまたはＮである。
【００７４】
更にまた別の実施形態では、本発明の化合物は、Ｒ３およびＲ４が、共にフェニル基であり、ＣＯ、ＳまたはＣＨ２を介して一緒に繋ぎ合わされていることを条件とする。
【００７５】
また別の実施形態では、本発明の化合物は、Ｒ３およびＲ４が、共にフェニル基であるとき、そのフェニル基は、各々独立に、ＣＨ３Ｏ−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）ｎ−またはＣＨ３Ｏ（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）ｎ−などの少なくとも１個のアルキルオキシアルキル基、ＨＯ−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−、ＨＯ（−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）ｎ−またはＨＯ（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−）ｎ−などのヒドロキシル化アルコキシ基などで置換することができ、式中ｎは、１から約１０までの整数であることを条件とする。
【００７６】
別の実施形態では、そのファミリーは、次式：
Ｌ−（（（−ＣＨ２−）ｘｘＣ（Ｒ１）（（Ｇ）Ｒ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４）２）ｍ
を有する。
【００７７】
Ｌ、各Ｒ、Ｒ１、各Ｇ、各Ｒ３、各Ｒ４、各Ｒ１０、各ｑ、各ｒ、各ｓ、各ｔおよびｍは、上記に定義した通りであり、ｘｘは、１から約１０までの整数である。
【００７８】
一実施形態では、Ｌは、構造（Ｉ）：
【００７９】
【化７】
0005393662.tif 000016
に従った式を有する。Ａ、Ｂ、Ｊ、Ｒ１１およびｚは、上記に定義した通りである。
【００８０】
別の実施形態では、ＡおよびＢは、共に水素原子である。
【００８１】
更に別の実施形態では、ｘｘは、１である。
【００８２】
また別の実施形態では、Ｒ１は、Ｈである。
【００８３】
更にまた別の実施形態では、Ｇは（−ＣＨ２−）ｔＯ−であり、ｔは１である。
【００８４】
別の実施形態では、Ｒ３およびＲ４は、各々個別にアリール基である。
【００８５】
更にまた別の実施形態では、ｘｘは１であり、Ｒ１はＨであり、各Ｇは（−ＣＨ２−）ｔＯ−であり、ｔは１であり、Ｒ３およびＲ４の各々は、各々個別にアリール基である。
【００８６】
本発明の別の実施形態では、そのファミリーは、次式：
Ｌ−（（−Ｃ（Ｒ１）（ＸＰ）ＣＨＲ２ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４）ｍ
を有する。Ｌ、Ｒ、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｘ、Ｐ、Ｇ、ｑ、ｒ、ｓ、ｔおよびｍは、上記に定義した通りである。
【００８７】
一実施形態では、Ｌは
【００８８】
【化８】
0005393662.tif 000017
であり、Ｒ２０およびＲ２１は、各々個別に水素原子、アルキル基またはアリール基である。
【００８９】
別の実施形態では、Ｒ１は、Ｈである。
【００９０】
更に別の実施形態では、Ｘは、Ｏである。
【００９１】
また別の実施形態では、Ｐは、Ｈである。
【００９２】
更にまた別の実施形態では、Ｒ２は、Ｈである。
【００９３】
別の実施形態では、Ｇは（−ＣＨ２−）ｔＯ−であり、ｔは１である。
【００９４】
更に別の実施形態では、Ｒ３およびＲ４は、各々個別にアリール基である。
【００９５】
また別の実施形態では、Ｒ１はＨであり、ＸはＯであり、ＰはＨであり、Ｒ２はＨであり、Ｇは（−ＣＨ２−）ｔＯ−であり、ｔは１であり、Ｒ３およびＲ４は、各々個別にアリール基であり、Ｒ２０およびＲ２１は、共にメチル基である。
【００９６】
また別の実施形態では、本発明は、次式：
Ｌ−（（ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
を有する化合物のファミリーを提供する。Ｌ、Ｇ、Ｒ、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ１０、ｑ、ｒ、ｓ、ｍおよびｔは、上記に定義した通りである。
【００９７】
一実施形態では、Ｌは、
【００９８】
【化９】
0005393662.tif 000018
である。
【００９９】
別の実施形態では、Ｇは、Ｃ＝Ｏである。
【０１００】
更に別の実施形態では、Ｒ３およびＲ４は、各々個別にアリール基である。
【０１０１】
また別の実施形態では、ＧはＣ＝Ｏであり、Ｒ３およびＲ４は、各々個別にアリール基である。
【０１０２】
また別の実施形態では、本発明は、次式：
Ｌ−（（ＧＲ３Ｃ（＝Ｏ）Ｒ４））ｍ
を有する化合物のファミリーを提供する。Ｌは連結基であり、Ｇは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ１０、（ＣＨ２）ｔ−Ｏ−またはＣ＝Ｏであり、Ｒ３およびＲ４は、各々独立にアルキル、アリール、アリールアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基であり、またはＲ３およびＲ４は、（−ＣＨ２−）ｑ、（−ＣＨ２−）ｒＣ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＳ＝Ｏ（−ＣＨ２−）ｓもしくは（−ＣＨ２−）ｒＳ（Ｏ）２（−ＣＨ２−）ｓ、（−ＣＨ２−）ｒＮＲ（−ＣＨ２−）ｓを介して一緒に繋ぎ合わされており、Ｒ１０は、水素原子、またはアルキル、アリールもしくはアリールアルキル基であり、Ｒは、水素原子、アルキルまたはアリール基であり、ｑは、１から約７までの整数であり、ｒは、０から約３までの整数であり、ｓは、０から約３までの整数であり、ｍは、２から約１０までの整数であり、ｔは、１から約１０までの整数である。
【０１０３】
「アルキル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、明示した数の炭素原子（即ち、Ｃ１〜Ｃ６は、１〜６個の炭素原子を意味する）を有し、親のアルカン、アルケンまたはアルキンの単一炭素原子から、１個の水素原子を除くことにより誘導される、飽和または不飽和で、分岐、直鎖または環状の１価炭化水素基を指す。典型的なアルキル基には、それだけに限らないが、メチル；エタニル、エテニル、エチニルなどのエチル；プロパン−１−イル、プロパン−２−イル、シクロプロパン−１−イル、プロパ−１−エン−１−イル、プロパ−１−エン−２−イル、プロパ−２−エン−１−イル、シクロプロパ−１−エン−１−イル、シクロプロパ−２−エン−１−イル、プロパ−１−イン−１−イル、プロパ−２−イン−１−イルなどのプロピル；ブタン−１−イル、ブタン−２−イル、２−メチル−プロパン−１−イル、２−メチル−プロパン−２−イル、シクロブタン−１−イル、ブタ−１−エン−１−イル、ブタ−１−エン−２−イル、２−メチル−プロパ−１−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブタ−１−エン−１−イル、シクロブタ−１−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１−イン−１−イル、ブタ−１−イン−３−イル、ブタ−３−イン−１−イルなどのブチルなどが挙げられる。特定の飽和度を意図する場合、以下に定義するように、術語「アルカニル」、「アルケニル」および／または「アルキニル」が使用される。「低級アルキル」とは、１〜６個の炭素原子を有するアルキル基を指す。
【０１０４】
「アルカニル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、親アルカンの単一炭素原子から１個の水素原子を除くことにより誘導される、分岐、直鎖または環状の飽和アルキルを指す。典型的なアルカニル基には、それだけに限らないが、メタニル；エタニル；プロパン−１−イル、プロパン−２−イル（イソプロピル）、シクロプロパン−１−イルなどのプロパニル；ブタン−１−イル、ブタン−２−イル（ｓｅｃ−ブチル）、２−メチル−プロパン−１−イル（イソブチル）、２−メチル−プロパン−２−イル（ｔ−ブチル）、シクロブタン−１−イルなどのブタニルなどが挙げられる。
【０１０５】
「アルケニル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、親アルケンの単一炭素原子から１個の水素原子を除くことにより誘導される、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有する分岐、直鎖または環状の不飽和アルキルを指す。この基は、二重結合（複数可）に関してシスまたはトランスのいずれかの配座を取り得る。典型的なアルケニル基には、それだけに限らないが、エテニル；プロパ−１−エン−１−イル、プロパ−１−エン−２−イル、プロパ−２−エン−１−イル、プロパ−２−エン−２−イル、シクロプロパ−１−エン−１−イル、シクロプロパ−２−エン−１−イルなどのプロペニル；ブタ−１−エン−１−イル、ブタ−１−エン−２−イル、２−メチル−プロパ−１−エン−１−イル、ブタ−２−エン−１−イル、ブタ−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブタ−１−エン−１−イル、シクロブタ−１−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イルなどのブテニルなどが挙げられる。
【０１０６】
「アルキルオキシアルキル」とは、酸素原子を介して一緒に繋ぎ合わされた２個のアルキル基を有する部分を指す。適切なアルキルオキシアルキル基には、メチル基などのアルキル基を末端とする、ポリエチレンオキシド、ポリプロピレンオキシドなどのポリオキシアルキレンが挙げられる。このような化合物の一般式は、Ｒ’−（ＯＲ”）ｎまたは（Ｒ’Ｏ）ｎ−Ｒ”と表すことができ、式中ｎは、１から約１０までの整数であり、Ｒ’およびＲ”は、アルキルまたはアルキレン基である。
【０１０７】
「アルキニル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、親アルキンの単一炭素原子から１個の水素原子を除くことにより誘導される、少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を有する分岐、直鎖または環状の不飽和アルキルを指す。典型的なアルキニル基には、それだけに限らないが、エチニル；プロパ−１−イン−１−イル、プロパ−２−イン−１−イルなどのプロピニル；ブタ−１−イン−１−イル、ブタ−１−イン−３−イル、ブタ−３−イン−１−イルなどのブチニルなどが挙げられる。
【０１０８】
「アルキルジイル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、明示した数の炭素原子（即ち、Ｃ１〜Ｃ６は、１〜６個の炭素原子を意味する）を有し、親のアルカン、アルケンもしくはアルキンの異なる２個の各炭素原子から、１個の水素原子を除くことにより、または親のアルカン、アルケンもしくはアルキンの単一炭素原子から、２個の水素原子を除くことにより誘導される、飽和または不飽和で、分岐、直鎖または環状の２価炭化水素基を指す。２個の１価基中心、または２価基中心の各価標（ｖａｌｅｎｃｙ）は、同じまたは異なる原子との結合を形成することができる。典型的なアルキルジイル基には、それだけに限らないが、メタンジイル；エタン−１，１−ジイル、エタン−１，２−ジイル、エテン−１，１−ジイル、エテン−１，２−ジイルなどのエチルジイル；プロパン−１，１−ジイル、プロパン−１，２−ジイル、プロパン−２，２−ジイル、プロパン−１，３−ジイル、シクロプロパン−１，１−ジイル、シクロプロパン−１，２−ジイル、プロパ−１−エン−１，１−ジイル、プロパ−１−エン−１，２−ジイル、プロパ−２−エン−１，２−ジイル、プロパ−１−エン−１，３−ジイル、シクロプロパ−１−エン−１，２−ジイル、シクロプロパ−２−エン−１，２−ジイル、シクロプロパ−２−エン−１，１−ジイル、プロパ−１−イン−１，３−ジイルなどのプロピルジイル；ブタン−１，１−ジイル、ブタン−１，２−ジイル、ブタン−１，３−ジイル、ブタン−１，４−ジイル、ブタン−２，２−ジイル、２−メチル−プロパン−１，１−ジイル、２−メチル−プロパン−１，２−ジイル、シクロブタン−１，１−ジイル、シクロブタン−１，２−ジイル、シクロブタン−１，３−ジイル、ブタ−１−エン−１，１−ジイル、ブタ−１−エン−１，２−ジイル、ブタ−１−エン−１，３−ジイル、ブタ−１−エン−１，４−ジイル、２−メチル−プロパ−１−エン−１，１−ジイル、２−メタニリデン−プロパン−１，１−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，１−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，２−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，３−ジイル、ブタ−１，３−ジエン−１，４−ジイル、シクロブタ−１−エン−１，２−ジイル、シクロブタ−１−エン−１，３−ジイル、シクロブタ−２−エン−１，２−ジイル、シクロブタ−１，３−ジエン−１，２−ジイル、シクロブタ−１，３−ジエン−１，３−ジイル、ブタ−１−イン−１，３−ジイル、ブタ−１−イン−１，４−ジイル、ブタ−１，３−ジイン−１，４−ジイルなどのブチルジイルなどが挙げられる。特定の飽和度を意図する場合、術語のアルカニルジイル、アルケニルジイルおよび／またはアルキニルジイルが、使用される。２個の価標が同じ炭素原子上にあることを特に意図する場合、術語「アルキリデン」が使用される。「低級アルキルジイル」は、１〜６個の炭素原子を有するアルキルジイル基である。幾つかの実施形態では、アルキルジイル基は、基の中心が末端炭素にある、非環状の飽和アルカニルジイル基、例えば、メタンジイル（メタノ）、エタン−１，２−ジイル（エタノ）、プロパン−１，３−ジイル（プロパノ）、ブタン−１，４−ジイル（ブタノ）などである（下記に定義するアルキレンとも称する）。
【０１０９】
「アルキレン」とは、それ自体または別の置換基の一部として、親の直鎖アルカン、アルケンまたはアルキンの２個の各末端炭素原子から、１個の水素原子を除くことにより誘導される、飽和または不飽和の直鎖アルキルジイル基を指す。特定のアルキレン中に二重結合または三重結合が存在する場合、その位置は鉤括弧で示す。典型的なアルキレン基には、それだけに限らないが、メチレン（メタノ）；エタノ、エテノ、エチノなどのエチレン；プロパノ、プロパ［１］エノ、プロパ［１，２］ジエノ、プロパ［１］イノなどのプロピレン；ブタノ、ブタ［１］エノ、ブタ［２］エノ、ブタ［１，３］ジエノ、ブタ［１］イノ、ブタ［２］イノ、ブタ［１，３］ジイノなどのブチレンなどが挙げられる。特定の飽和度を意図する場合、術語のアルカノ、アルケノおよび／またはアルキノが使用される。幾つかの実施形態では、アルキレン基は、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキレンまたは（Ｃ１〜Ｃ３）アルキレンである。他の実施形態は、直鎖飽和アルカノ基、例えば、メタノ、エタノ、プロパノ、ブタノなどを包含する。
【０１１０】
「アリール」とは、それ自体または別の置換基の一部として、明示した数の炭素原子（即ち、Ｃ５〜Ｃ１５は、５〜１５個の炭素原子を意味する）を有し、親芳香環系の単一炭素原子から１個の水素原子を除くことにより誘導される、１価芳香族炭化水素基を指す。典型的なアリール基には、それだけに限らないが、アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、コロネン、フルオランテン、フルオレン、ヘキサセン、ヘキサフェン、ヘキサレン、ａｓ−インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン、オクタフェン、オクタレン、オバレン、ペンタ−２，４−ジエン、ペンタセン、ペンタレン、ペンタフェン、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン、プレイアデン、ピレン、ピラントレン、ルビセン、トリフェニレン、トリナフタレンなどに、ならびにそれらの水素化異性体に由来する基が挙げられる。幾つかの実施形態では、アリール基は、（Ｃ５〜Ｃ１５）アリール、あるいは（Ｃ５〜Ｃ１０）アリールである。他の実施形態は、フェニルおよびナフチルを包含する。
【０１１１】
「アリールアルキル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、炭素原子、通常は末端またはｓｐ３炭素原子に結合した水素原子の１つが、アリール基で置き換えられている非環式アルキル基を指す。典型的なアリールアルキル基には、それだけに限らないが、ベンジル、２−フェニルエタン−１−イル、２−フェニルエテン−１−イル、ナフチルメチル、２−ナフチルエタン−１−イル、２−ナフチルエテン−１−イル、ナフトベンジル、２−ナフトフェニルエタン−１−イルなどが挙げられる。特定のアルキル部を意図する場合、術語のアリールアルカニル、アリールアルケニルおよび／またはアリールアルキニルが使用される。好ましくは、アリールアルキル基は、（Ｃ７〜Ｃ３０）アリールアルキルであり、例えば、アリールアルキル基のアルカニル、アルケニルまたはアルキニル部は、（Ｃ１〜Ｃ１０）であり、アリール部は（Ｃ６〜Ｃ２０）であり、より好ましくは、あるいはアリールアルキル基は、（Ｃ７〜Ｃ２０）アリールアルキルであり、例えば、アリールアルキル基のアルカニル、アルケニルまたはアルキニル部は、（Ｃ１〜Ｃ８）であり、アリール部は（Ｃ６〜Ｃ１２）である。
【０１１２】
「アリールオキシアルキル」とは、アリール基およびアルキル基が酸素結合を介して一緒に繋ぎ合わされている部分を指す。適切なアリールオキシアルキル基には、メトキシフェニルまたはエトキシフェニルなどのフェニルオキシアルキレンが挙げられる。
【０１１３】
「シクロアルキル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、「アルキル」基の環状型を指す。典型的なシクロアルキル基には、それだけに限らないが、シクロプロピル；シクロブタニルおよびシクロブテニルなどのシクロブチル；シクロペンタニルおよびシクロアルケニルなどのシクロペンチル；シクロヘキサニルおよびシクロヘキセニルなどのシクロヘキシルなどが挙げられる。
【０１１４】
「シクロヘテロアルキル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、１個または複数の炭素原子（および付随する任意の水素原子）が、同じまたは異なるヘテロ原子で独立に置換えられている、飽和または不飽和の環式アルキル基を指す。炭素原子（複数可）に置き換わる典型的なヘテロ原子には、それだけに限らないが、Ｎ、Ｐ、Ｏ、Ｓ、Ｓｉなどが挙げられる。特定の飽和度を意図する場合、術語「シクロヘテロアルカニル」または「シクロヘテロアルケニル」が使用される。典型的なシクロヘテロアルキル基には、それだけに限らないが、エポキシド、イミダゾリジン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ピラゾリジン、ピロリジン、キヌクリジンなどに由来する基が挙げられる。
【０１１５】
「ハロゲン」または「ハロ」とは、それ自体または別の置換基の一部として、別途明記しない限り、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを指す。
【０１１６】
「ハロアルキル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、水素原子の１個または複数が、ハロゲンで置換えられているアルキル基を指す。したがって、用語「ハロアルキル」は、モノハロアルキル、ジハロアルキル、トリハロアルキルなどパーハロアルキルまでを包含することを意図している。例えば、「（Ｃ１〜Ｃ２）ハロアルキル」という表現は、フロオロメチル、ジフロオロメチル、トリフロオロメチル、１−フルオロエチル、１，１−ジフルオロエチル、１，２−ジフルオロエチル、１，１，１−トリフルオロエチル、パーフルオロエチルなどを包含する。
【０１１７】
「ヘテロアルキル、ヘテロアルカニル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、１個または複数の炭素原子（および付随する任意の水素原子）が、同じまたは異なるヘテロ原子基で各々独立に置換えられている、アルキル、アルカニル、アルケニルおよびアルキニル基をそれぞれ指している。典型的なヘテロ原子基には、それだけに限らないが、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｏ−Ｏ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｏ−Ｓ−、−ＮＲ’−、＝Ｎ−Ｎ＝、−Ｎ＝Ｎ−、−Ｎ＝Ｎ−ＮＲ’−、−ＰＨ−、−Ｐ（Ｏ）２−、−Ｏ−Ｐ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＳｎＨ２−などが挙げられ、式中Ｒ’は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリールまたは置換アリールである。
【０１１８】
「ヘテロアリール」とは、それ自体または別の置換基の一部として、親ヘテロ芳香環系の単一原子から１個の水素原子を除くことにより誘導される、１価ヘテロ芳香族基を指す。典型的なヘテロアリール基には、それだけに限らないが、アクリジン、アルシンドール、カルバゾール、β−カルボリン、ベンゾオキサジン、ベンズイミダゾール、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソオキサゾール、ナフチリジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペリミジン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール、キサンテンなどに由来する基が挙げられる。好ましくは、上記ヘテロアリール基は、５〜２０員ヘテロアリールであり、より好ましくは、５〜１０員ヘテロアリールである。適切なヘテロアリール基は、チオフェン、ピロール、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、インドール、ピリジン、キノリン、イミダゾール、オキサゾールおよびピラジンに由来する基である。
【０１１９】
「ヘテロアリールアルキル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、炭素原子、通常は末端またはｓｐ３炭素原子に結合した水素原子の１つが、ヘテロアリール基で置き換えられている非環式アルキル基を指す。特定のアルキル基を意図する場合、術語「ヘテロアリールアルカニル」「ヘテロアリールアルケニル」および／または「ヘテロアリールアルキニル」が使用される。幾つかの実施形態では、ヘテロアリールアルキル基は、６〜２１員ヘテロアリールアルキルであり、例えば、ヘテロアリールアルキルのアルカニル、アルケニルまたはアルキニル部は、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキルであり、ヘテロアリール部は、５〜１５員ヘテロアリールである。他の実施形態では、ヘテロアリールアルキルは、６〜１３員ヘテロアリールアルキルであり、例えば、アルカニル、アルケニルまたはアルキニル部は、（Ｃ１〜Ｃ３）アルキルであり、ヘテロアリール部は、５〜１０員ヘテロアリールである。
【０１２０】
「ヒドロキシアルキル」とは、それ自体または別の置換基の一部として、水素原子の１つまたは複数が、ヒドロキシ置換基で置き換えられているアルキル基を指す。したがって、用語「ヒドロキシアルキル」は、モノヒドロキシアルキル、ジヒドロキシアルキル、トリヒドロキシアルキルなどを包含することを意図している。
【０１２１】
「親芳香環系」とは、共役π電子系を有する環式または多環式不飽和環系を指す。「親芳香環系」の定義内に具体的に含まれるものは、１個または複数の環が芳香族であり、１個または複数の環が飽和または不飽和である、例えば、フルオレン、インダン、インデン、フェナレン、テトラヒドロナフタレンなどの縮合環系である。典型的な親芳香環系には、それだけに限らないが、アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、コロネン、フルオランテン、フルオレン、ヘキサセン、ヘキサフェン、ヘキサレン、インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン、オクタフェン、オクタレン、オバレン、ペンタ−２，４−ジエン、ペンタセン、ペンタレン、ペンタフェン、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン、プレイアデン、ピレン、ピラントレン、ルビセン、テトラヒドロナフタレン、トリフェニレン、トリナフタレンなど、ならびにそれらの多様な水素化異性体が挙げられる。
【０１２２】
「親ヘテロ芳香環系」とは、１個または複数の炭素原子（および付随する任意の水素原子）が、同じまたは異なるヘテロ原子で独立に置き換えられている親芳香環系を指す。炭素原子に置き換わる典型的なヘテロ原子には、それだけに限らないが、Ｎ、Ｐ、Ｏ、Ｓ、Ｓｉなどが挙げられる。「親ヘテロ芳香環系」の定義内に具体的に含まれるものは、１個または複数の環が芳香族であり、１個または複数の環が飽和または不飽和である、例えば、アルシンドール、ベンゾジオキサン、ベンゾフラン、クロマン、クロメン、インドール、インドリン、キサンテンなどの縮合環系である。典型的な親ヘテロ芳香環系には、それだけに限らないが、アルシンドール、カルバゾール、β−カルボリン、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソオキサゾール、ナフチリジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペリミジン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール、キサンテンなどが挙げられる。
【０１２３】
「脱離基」は、反応中に求核試薬により置き換えられる基である。適切な脱離基には、Ｓ（Ｏ）２Ｍｅ、−ＳＭｅまたはハロ（例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）が挙げられる。
【０１２４】
「連結基」は、２個以上の末端基間の中間部位として働く基である。連結基の性質は、広範に変化でき、１つの分子部分を別の部分から隔てるために有用な、原子または基の事実上任意の組合せを包含することができる。例えば、リンカーは、非環式炭化水素架橋（例えば、メタノ、エタノ、エテノ、プロパノ、プロパ［１］エノ、ブタノ、ブタ［１］エノ、ブタ［２］エノ、ブタ［１，３］ジエノなどの飽和または不飽和アルキレノ）、単環式もしくは多環式炭化水素架橋（例えば、［１，２］ベンゼノ、［２，３］ナフタレノなど）、単純な非環式ヘテロ原子もしくはヘテロアルキルジイル架橋（例えば、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｓ−Ｏ−、−ＮＨ−、−ＰＨ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−Ｓ（Ｏ）ＮＨ−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＨ−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ＝ＣＨ−ＣＨ２−など）、単環式もしくは多環式ヘテロアリール架橋（例えば、［３，４］フラノ、ピリジノ、チオフェノ、ピペリジノ、ピペラジノ、ピラジジノ、ピロリジノなど）、またはこのような架橋の組合せでもよい。
【０１２５】
「保護基」は、例えば、不安定な水素原子に代わってヒドロキシ酸素に付加される基である。適切なヒドロキシ保護基（複数可）には、エステル（アセテート、エチルアセテート）、エーテル（メチル、エチル）、エトキシル化誘導体（エチレングリコール、プロピレングリコール）などが挙げられ、保護基が除かれ、水素原子で置き換えられるように、酸性または塩基性いずれかの条件下で除くことができる。適当な保護基の選択、ならびにその結合および除去の合成戦略に対する指針は、例えば、Ｇｒｅｅｎｅ  ＆  Ｗｕｔｓ，  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、３版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  Ｉｎｃ．，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９９年）およびその中に引用された参考文献（以後では「Ｇｒｅｅｎｅ  ＆  Ｗｕｔｓ」）に見出し得る。
【０１２６】
本発明で使用し得る基材材料には、様々なものがある。ポリオレフィン、ポリスチレン、ポリ（メチル）メタクリレート、ポリアクリロニトリル、ポリ（酢酸ビニル）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ塩化（ビニル）などの塩素含有ポリマー材料、ポリオキシメチレン、ポリカーボネート、ポリアミド、ポリイミド、ポリウレタン、フェノール樹脂、アミノエポキシ樹脂、ポリエステル、シリコーン、セルロース系プラスチックおよびゴム様プラスチックなどのプラスチック類は、全て支持体として使用して、本明細書に記載するように改質できる表面を提供し得る。それに加え、熱分解炭素、パリレン被覆表面、およびガラス、セラミックまたは金属のシリル化表面で形成されたような支持体も、表面改質に適切である。
【０１２７】
本発明の方法では、支持体表面への生物活性物質の付着または結合を伴ってもよい。例えば、架橋剤を含むナノ繊維は、支持体表面の存在下で２個以上の潜在反応性・活性化可能基を有するように供給される。潜在反応性・活性化可能基の少なくとも１個は、活性化され、その表面に共有結合する。残りの潜在反応基は、不活性状態で残ることが可能であり、後に再活性化されることにより、生物活性物質に後に結合し、基材表面へ生物活性物質を結合させる。
【０１２８】
この方法の各ステップは、適切な任意の順序で行うことができる。例えば、本明細書に記載するような、架橋剤を含むナノ繊維は、疎水相互作用によって適切な支持体表面に物理的に吸収させる、または吸着させることができる。エネルギー源により活性化すると、潜在反応性・活性化可能基（例えば、ベンゾフェノン基）の少なくとも１個は、支持体表面で共有結合の形成を受ける。残りの未結合の潜在反応性・活性化可能基（複数可）の近傍に引抜き可能な水素が存在しない場合、エネルギー源が除かれることにより、その潜在反応性・活性化可能基は、励起状態から基底状態へ戻る。その後、こうした残りの潜在反応性・活性化可能基は、固定化するつもりの生物活性物質が存在し、処理済み表面が次回の照射に曝された場合、再活性化することができる。この方法は、「２段階」手法と表現することができ、第１ステップでは、潜在反応性で活性化可能なナノ繊維を施して潜在反応性で活性化可能な表面を創出し、第２ステップでは、生物活性物質を添加して、活性化された表面に付着させる。
【０１２９】
あるいは、「１段階」法と表現される方法は、本発明の潜在反応性で活性化可能なナノ繊維を生物活性物質と共に組み合わせ、または混合し、組成物を形成することを条件とする。生成する組成物は、エネルギー源による単一の活性化ステップで物質を表面改質するために、使用される。この場合、エネルギー源による活性化は、少なくとも１個の潜在反応性・活性化可能基の基材表面との共有結合形成を誘発するだけでなく、その表面上に存在する任意の隣接生物活性物質との共有結合形成も同時に誘発する。
【０１３０】
代替的な実施形態では、ナノ繊維が、ポリマー物質、少なくとも２個の潜在性・活性化可能基を有する架橋剤、および生物活性物質を含む組合せまたは混合物から形成される。潜在反応性・活性化可能基の少なくとも１個は、支持体表面で共有結合形成を受け、ナノ繊維をその基材表面に結合させる。残りの潜在反応性・活性化可能基（複数可）は、エネルギー源による活性化を受けて、第２の生物活性物質と反応することができる。あるいは、ナノ繊維中に組み入れた生物活性物質自体が、第２の生物活性物質と反応し、基材を更に機能化することができる。
【０１３１】
別の代替法では、本発明の潜在反応性で活性化可能なナノ繊維は、潜在反応基でそれ自体が官能化された分子の適用および結合の前に、基材表面の前処理に使用される。この方法は、特に困難な基材が最大限の被膜耐久性を必要とする状況において、有用である。このようにして、基材表面と潜在反応基で誘導体化した標的分子との間に形成される共有結合数は、所望の潜在反応基含有標的分子だけによる表面改質と比較して、通常、増加させることができる。
【０１３２】
支持体表面に付着させるために、本発明で使用する適切な生物活性分子または他の標的分子は、多様な一群の物質を包含する。標的分子は、非誘導体形態で使用でき、または予め誘導体とすることもできる。その上、標的分子は、単独で、または他種の標的分子と組み合わせて固定化することもできる。
【０１３３】
標的分子は、当該表面を本発明の潜在反応性で活性化可能なナノ繊維で下塗りした後に（例えば、逐次に）、表面に固定化することができる。あるいは、標的分子は、基材の表面に潜在反応性で活性化可能なナノ繊維を付着させる間に（例えば、と同時に）固定化される。
【０１３４】
通常、標的分子は、その表面および／またはその表面を有する器具もしくは物品に、特定の所望の性質を付与するように選択される。本発明の一実施形態によれば、標的の分子または物質は、生物活性物質である。ナノ繊維改質基材の表面上に固定化し得る、またはナノ繊維組成物の一部として供給され得る生物活性物質には、一般に、それだけに限らないが、以下のもの：酵素、タンパク質、炭水化物、核酸およびそれらの混合物が挙げられる。生物活性物質を含めた適切な標的分子の更なる例、およびそれらを通常使用して付与される表面性質は、以下の非限定的な一覧によって表される。
【０１３５】
【数１】
0005393662.tif 000019
【０１３６】
【数２】
0005393662.tif 000020
【０１３７】
【数３】
0005393662.tif 000021
標的分子は、官能性ポリマーであってもよい。官能性ポリマーは、更なる化学反応のために使用できる官能基を有するポリマーと定義される。官能基には、それだけに限らないが、カルボキシ、アミン、チオール、エポキシ、ＮＨＳ、アルデヒド、アジド、ホスフィンまたはヒドロキシが挙げられる。
【０１３８】
本発明の潜在反応性で活性化可能なナノ繊維は、フィルター、組織工学用足場、保護着、複合材料の強化およびセンサー技術を含む、多種多様な用途で使用することができる。
【０１３９】
本発明の潜在反応性で活性化可能なナノ繊維から作製し、またはそれでコーティングし、またはそれで処理することができる医療品には、それだけに限らないが、以下のもの：尿カテーテルおよび血管カテーテル（例えば、末梢および中心血管カテーテル）を含むカテーテル、創傷排液チューブ、動脈移植片、軟組織用パッチ、手袋、シャント、ステント、気管カテーテル、創傷包帯、縫合糸、ガイドワイヤーおよび補綴装具（例えば、心弁およびＬＶＡＤ）を挙げることができる。本発明に従って調製できる血管カテーテルには、それだけに限らないが、単腔および多腔中心静脈カテーテル、末梢挿入中心静脈カテーテル、救急注入カテーテル、経皮的シース導入システム、熱希釈カテーテルが挙げられ、それらには、このような血管カテーテルのハブおよびポート、ペースメーカー、除細動器、人工心臓および埋込型バイオセンサーなどの電子装置へのリードが含まれる。
【０１４０】
本発明の潜在反応性で活性化可能なナノ繊維から作製できる、またはそれでコーティングもしくは処理できる表面を有する、追加の物品には、それだけに限らないが、以下のもの：スライド、マイクロタイターウェル、マイクロタイタープレート、ペトリ皿、組織培養スライド、組織培養プレート、組織培養フラスコ、細胞培養プレート、あるいはカラム支持体および／またはクロマトグラフィー媒体を挙げることができる。
【０１４１】
別の実施形態では、本発明の潜在反応性で活性化可能なナノ繊維は、生体分子固定化用の顕微鏡スライドまたは「チップ」に適用することができる。
【０１４２】
また別の実施形態では、本発明の潜在反応性で活性化可能なナノ繊維は、細胞培養プレートの表面に適用することができる。
【０１４３】
以下の非限定的な実施例に関して、本発明を更に説明する。本発明の範囲から逸脱せずに、上記の実施形態に多くの変更を加えることができることは、当業者には明らかであろう。したがって、本発明の範囲は、本出願に記載の実施形態に限定せずに、特許請求の範囲の言葉で表現した実施形態、およびそうした実施形態の均等物によってのみ限定すべきである。別途指示しない限り、全てのパーセンテージは重量基準である。
【実施例】
【０１４４】
（実施例１）
電気紡糸光反応性ナノ繊維
平均分子量８０ｋＤａのポリ（ε−カプロラクトン）（ＰＣＬ）をＡｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，  ＷＩ）から購入した。０．１４ｇ／ｍｌのＰＣＬ溶液は、テトラヒドロフランおよびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドからなる有機溶媒混合物（１：１）１００ｍｌ中にＰＣＬ１４ｇを溶解し、室温で２４時間混合物を渦撹拌することにより、よく混合することによって調製した。光架橋剤含量（ＴｒｉＬｉｔｅ、
トリス［２−ヒドロキシ−３−（４−ベンゾイルフェノキシ）プロピル］イソシアヌレートなど）が重量パーセントで１％、５％および１０％のポリマー溶液は、ＰＣＬ溶液中に異なる量の架橋剤を添加することにより作製した。そのポリマー溶液を、２７Ｇの針をはめたプラスチック製シリンジに入れた。シリンジポンプ（ＫＤ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，  ＵＳＡ）を用いて、針先端にポリマー溶液を供給した。高電圧電源（Ｇａｍｍａ  Ｈｉｇｈ  Ｖｏｌｔａｇｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  ＵＳＡ）を用いて、針先端を帯電させた。針先端から一定の距離にある接地アルミホイル上に、ナノ繊維を収集した。次いで繊維メッシュを取り除き、真空チャンバー中に少なくとも４８時間入れて、残存有機溶媒を除いた後、デシケーター中に保存した。ナノ繊維は、顕微鏡下で評価した。他の光反応性ナノ繊維も、ＴｒｉＬｉｔｅ含有ポリマー溶液の電気紡糸により調製した。該ポリマーには、ナイロン６／６（Ａｌｄｒｉｃｈ）、ポリスチレン（Ｍｗ１７００００、Ａｌｄｒｉｃｈ）、ポリ（Ｎ−イソプロピルアクリルアミド）（ＰＩＰＡＡｍ、Ｍｗ２００００〜２５０００、Ａｌｄｒｉｃｈ）、およびＰＥＧ−ＰＩＰＡＡｍが含まれる。ＰＥＧ−ＰＩＰＡＡｍは、開始剤として過硫酸アンモニウム（Ａｌｄｒｉｃｈ）および触媒としてＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエチレンジアミン（Ａｌｄｒｉｃｈ）を用いる、水中でのＮ−イソプロピルアクリルアミド（Ａｌｄｒｉｃｈ）とポリ（エチレングリコール）メチルエーテルメタクリレート（Ｍｗ２０００、Ａｌｄｒｉｃｈ）とのフリーラジカル共重合により、合成した。光反応性ポリマーのＰＶＢ−ＢＰは、ポリ（ビニルブチラール）（Ｍｗ７００００〜１０００００、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ）と、４−ベンゾイル安息香酸（Ａｌｄｒｉｃｈ）および塩化オキサリル（Ａｌｄｒｉｃｈ）の反応で調製したベンゾフェノン酸クロリドとの反応により、合成した。光反応性ＰＶＢ−ＢＰナノ繊維は、ＴｒｉＬｉｔｅなしでＰＶＢ−ＢＰ溶液を電気紡糸することにより、調製した。電気紡糸条件は、表１にまとめてある。
【０１４５】
【表１】
0005393662.tif 000022
全てのナノ繊維の形態は、日立Ｓ−３５００Ｎ  ＳＥＭを用いて調べた。繊維試料は、炭素テープを用いてアルミニウムスタブ上に載せ、金でスパッタコーティングしてから観察した。ナノ繊維の平均直径は、少なくとも２０本の繊維の測定値に基づいて決定した。図１は、光架橋剤濃度の異なるナノ繊維の典型的なＳＥＭ像を示す。０％、１％、５％および１０％ナノ繊維の平均繊維径は、それぞれ２０８±１４６ｎｍ、２１２±８０ｎｍ、４５３±１４６ｎｍ、３１５±１６０ｎｍである。図１の全４種の配合物において、高多孔性の構造が観察された。
【０１４６】
（実施例２）
ポリマー析出による酸誘導体化ナノ繊維
ナノ繊維表面上にカルボン酸を付与するために、ポリ（アクリル酸）（ＰＡＡ）を用いた。平均分子量５ｋＤａのＰＡＡナトリウム塩をＡｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓから購入した。ある一定量の光反応性ＰＣＬナノ繊維メッシュを、石英円形皿（Ｑｕａｒｔｚ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，  Ｉｎｃ．，  Ｆａｉｒｐｏｒｔ  Ｈａｒｂｏｒ，  ＯＨ）の５０〜１００ｍｇ／ｍｌ  ＰＡＡ水溶液２０ｍｌ中に浸漬した。ナノ繊維中に捕捉された気泡を除くために、穏やかに撹拌した。次いで、ＵＶＰ  ＣＬ−１０００  Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ  Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｒ中の混合物に、ＵＶ照射を加えた（４０ワット、２５４ｎｍ、光源からの距離は１２．７ｃｍである）。ナノ繊維メッシュは、裏返して、ＵＶ照射を再び加えた。被覆ナノ繊維メッシュを脱イオン水で２４時間洗浄した後、一定重量になるまで真空下で乾燥した。
【０１４７】
（実施例３）
ポリマー析出によるアミン誘導体化ナノ繊維
表面上にアミノ基を付与するために、ポリ（ジメチルアクリルアミド−ｃｏ−アミノプロピルメタクリルアミド）（ＤＭＡ：ＡＰＭＡ８０／２０）を用いた。平均分子量５ｋＤａのそのコポリマーを、ＤＭＡおよびＡＰＭＡ塩酸塩のフリーラジカル共重合により合成した。ある一定量の光反応性ＰＣＬナノ繊維メッシュを、石英円形皿（Ｑｕａｒｔｚ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，  Ｉｎｃ．，  Ｆａｉｒｐｏｒｔ  Ｈａｒｂｏｒ，  ＯＨ）の５０ｍｇ／ｍｌ  ＰＤＭＡ／ＡＰＭＡ水溶液２０ｍｌ中に浸漬した。ナノ繊維中に捕捉された気泡を除くために、穏やかに撹拌した。次いで、ＵＶＰ  ＣＬ−１０００  Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ  Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｒ中の混合物に、ＵＶ照射を加えた（４０ワット、２５４ｎｍ、光源からの距離は１２．７ｃｍである）。ナノ繊維メッシュは、裏返して、ＵＶ照射を再び加えた。被覆ナノ繊維メッシュを脱イオン水で２４時間洗浄した後、一定重量になるまで真空下で乾燥した。
【０１４８】
（実施例４）
ポリマー析出によるエポキシ誘導体化ナノ繊維
表面上にエポキシ基を付与するために、ポリ（グリシジルメタクリレート）（Ｍｗ２５０００、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いた。ある一定量の光反応性ＰＣＬナノ繊維メッシュを、石英円形皿（Ｑｕａｒｔｚ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，  Ｉｎｃ．，  Ｆａｉｒｐｏｒｔ  Ｈａｒｂｏｒ，  ＯＨ）の５０ｍｇ／ｍｌポリ（グリシジルメタクリレート）水／ＤＭＳＯ溶液１０ｍｌ中に浸漬した。ナノ繊維中に捕捉された気泡を除くために、穏やかに撹拌した。次いで、ＵＶＰ  ＣＬ−１０００  Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ  Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｒ中の混合物に、ＵＶ照射を加えた（４０ワット、２５４ｎｍ、光源からの距離は１２．７ｃｍである）。ナノ繊維メッシュは、裏返して、ＵＶ照射を再び加えた。被覆ナノ繊維メッシュを脱イオン水で２４時間洗浄した後、一定重量になるまで真空下で乾燥した。
【０１４９】
（実施例５）
自己集合単分子層（ＳＡＭ）による酸誘導体化ナノ繊維
ナノ繊維表面上にカルボン酸を付与するために、ＳＡＭ酸を用いた。ＳＡＭ酸は、ＩＳｕｒＴｅｃ，  Ｉｎｃ．によって合成された。ある一定量の光反応性ＰＣＬナノ繊維メッシュを、石英円形皿（Ｑｕａｒｔｚ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，  Ｉｎｃ．，  Ｆａｉｒｐｏｒｔ  Ｈａｒｂｏｒ，  ＯＨ）の１．０ｍｇ／ｍｌ  ＳＡＭ酸水溶液中に浸漬した。ナノ繊維中に捕捉された気泡を除くために、穏やかに撹拌した。次いで、ＵＶＰ  ＣＬ−１０００  Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ  Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｒ中の混合物に、ＵＶ照射を加えた（４０ワット、２５４ｎｍ、光源からの距離は１２．７ｃｍである）。ナノ繊維メッシュは、裏返して、ＵＶ照射を再び加えた。被覆ナノ繊維メッシュを脱イオン水で２４時間洗浄した後、一定重量になるまで真空下で乾燥した。
【０１５０】
（実施例６）
グラフト重合による酸またはアミン誘導体化ナノ繊維
予め秤量したＰＣＬナノ繊維メッシュを、琥珀色ガラス瓶入りの５０ｍｇ／ｍｌのアクリル酸（Ａｌｄｒｉｃｈ）または３−アミノプロピルメタクリルアミド（ＡＰＭＡ・ＨＣｌ、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ）水溶液２０ｍｌ中に浸漬した。その混合物をアルゴンで２時間バブリングし、石英円形皿（Ｑｕａｒｔｚ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，  Ｉｎｃ．，  Ｆａｉｒｐｏｒｔ  Ｈａｒｂｏｒ，  ＯＨ）に移し、その後繊維メッシュの各面を２分間ＵＶで照射した（Ｈａｒｌａｎｄ  Ｍｅｄｉｃａｌ  ＵＶＭ４００，  ＭＮ、光源からの距離は８インチであった）。その後、試料を蒸留水で３回濯ぎ洗い、水で終夜洗浄し、凍結乾燥した。
【０１５１】
（実施例７）
官能基の特性決定
ナノ繊維上の官能基（即ち、カルボキシおよびアミノ）は、可逆的なイオン性色素結合により測定した。較正は、溶出に使用した溶媒中で各色素を用いて行った。蛍光／ＵＶ／可視測定は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ＤｅｖｉｃｅｓのＳｐｅｃｔｒａＭａｘ  Ｍ２  Ｍｕｌｔｉ−ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｒｅａｄｅｒ上で行った。
【０１５２】
カルボキシ基
ＰＣＬナノ繊維試料を、エタノール中の１０ｍｇ／ｍｌチオニン（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）１０ｍｌの中で、室温で終夜振盪し、エタノールで３回各３０秒間濯ぎ洗い、その後エタノールおよび水の１：１混合物中の０．０１Ｎ  ＨＣｌ溶液１０ｍｌに浸漬した。１．５時間振盪した後、溶液の蛍光を６２０ｎｍで記録した（励起４８５ｎｍ）。
【０１５３】
アミン基
ＰＣＬナノ繊維試料を、Ｏｒａｎｇｅ  ＩＩ（Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）の５０ｍｍｏｌ／Ｌ水溶液（ｐＨ３、ＨＣｌ）中で終夜、室温で振盪した。試料を水（ｐＨ３）で３回洗浄し、水（ｐＨ１２、ＮａＯＨ）１０ｍｌ中に浸漬した。１５分間振盪した後、溶液のＵＶ／可視吸収を４７９ｎｍで記録した。
【０１５４】
ナノ繊維表面上の官能基は、官能基と色素分子との１：１錯形成に基づいて決定した。
【０１５５】
官能基密度は、ナノ繊維１ｍｇ当たりの官能基のｎｍｏｌとして報告した（図２〜４）。図２は、１％、５％および１０％ナノ繊維上へのＰＡＡの析出により、それぞれ２８２、２０３および５７２ｎｍｏｌ／ｍｇのカルボキシ基密度が得られたことを示す。理論的には、直径が同じままであれば、架橋密度の高い方のナノ繊維は、官能基密度が高くなるはずである。しかし、５％ナノ繊維上の官能基密度は、１％ナノ繊維よりやや低かった。同じ質量のナノ繊維の直径が大きいほど、表面積が小さくなると思われることに留意されたい。そのため、５％ナノ繊維の方が、全重量で多量の架橋剤を有していても、繊維表面上の光学基が接触し難くなる結果、その表面上のＰＡＡ密度が低下するとも思われる。ＰＣＬのバルク密度（１．１２ｇ／ｍｌ）およびＳＥＭで決定したナノ繊維の直径を用いて、官能基ｎｍｏｌ／ｍｇナノ繊維の密度を、官能基数／ｎｍ２繊維表面に換算することができる。官能基密度の再計算値は、１％、５％および１０％ナノ繊維に対して１０基、１６基および３０基／ｎｍ２であった（表２）が、これらは全て、本発明者らが予想した最小密度レベルの０．１基／ｎｍ２を超えている。図３に示すように、（８０：２０）ＤＭＡ：ＡＰＭＡの析出により創出された表面上のアミン密度は、ＰＡＡの析出により生成したカルボキシ密度より低かったが、その原因の１つは、ＤＭＡ：ＡＰＭＡ上の２０％アミノ化対ＰＡＡ上の１００％カルボキシル化であった。光反応性ナノ繊維に対するＡＰＭＡのグラフト重合は、低アミン密度（２ｎｍｏｌ／ｍｇ、８ｎｍｏｌ／ｍｇおよび７ｎｍｏｌ／ｍｇ）を与え、低グラフト効率を示したが、その原因は、恐らく、モノマーＡＰＭＡにおける不純物の存在であった。図４は、３種の官能化法は全て、１％ナノ繊維上に高密度のカルボキシ基を生成でき、カルボキシ密度の高い方から低い方への順は、ＰＡＡ＞ＡＡグラフト＞酸−ＳＡＭであったことを示す。
【０１５６】
【表２】
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（実施例８）
多孔率測定
ナノ繊維メッシュの多孔率は、液体置換法で決定した。メッシュ試料を、Ｖ１体積のイソプロパノール（ＩＰＡ）を含む目盛付きシリンダー中に浸漬した。ＩＰＡを強制的に孔内に入れ、気泡を放散させるために、浴で超音波振動を加える。１０分後、その体積をＶ２と記録する。湿ったメッシュ試料をシリンダーから取り出した。残存ＩＰＡ体積はＶ３である。（Ｖ１−Ｖ３）は、繊維内に保持されたＩＰＡの体積であって、繊維内の孔空隙の体積を表すのに対し、（Ｖ２−Ｖ３）は、フィルターおよび孔空隙の全体積であった。したがって、フィルターの多孔率は、（Ｖ１−Ｖ３）／（Ｖ２−Ｖ３）として得られた。
【０１５７】
【表３】
0005393662.tif 000024
（実施例９）
生体分子固定化
西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ、ペルオキシダーゼＸＩＩ型、Ｓｉｇｍａ）を、ＥＤＣ／ＮＨＳカップリング法によりＰＣＬナノ繊維上に固定化した。カルボキシ官能化ナノ繊維メッシュを、１０ｍｇ／ｍｌのＥＤＣおよび５ｍｇ／ｍｌのＮＨＳを含有し、ｐＨ４．５に調整した新鮮な水溶液中に浸漬した。４℃で３０分間のシェーカー（１００ｒｐｍ）上でのインキュベーション後、活性化試料を取り出し、氷冷水で素早く濯ぎ洗い、タンパク質溶液（５．０μｇ／ｍｌ、ＰＢＳ、ｐＨ７．４）中に直ちに浸漬した。室温で２時間穏やかに撹拌した後、ナノ繊維を取り出し、ＰＢＳで濯ぎ洗いした後、ＰＢＳ−０．１％Ｔｒｉｔｏｎで終夜徹底的に洗浄した。タンパク質固定化ナノ繊維を濯ぎ洗い、分析してタンパク質および活性の検定値を求めた。
【０１５８】
（実施例１０）
ビシンコニン酸（ＢＣＡ）タンパク質アッセイ
タンパク質非特異吸着用のものを含め、ナノ繊維上のタンパク質担持量を、標準的ＢＣＡアッセイで決定した。予め秤量したタンパク質コンジュゲートナノ繊維を、２％ＳＤＳを含有する１．０Ｎ  ＮａＯＨ  ２ｍｌ中に、３７℃で終夜溶解した。次いで、溶液を１Ｎ  ＨＣｌで中和し、溶液１ｍｌを６．１Ｎ  ＴＣＡ溶液２５０μｌに添加した。４℃で１０分間のインキュベーション後、試料を１４ｋｒｐｍで５分間遠心し、タンパク質ペレットを形成した。ペレットを遠心により冷アセトン２００μｌで２回洗浄し、熱ブロック上で９５℃、５分間乾燥した。タンパク質ペレットを、０．１Ｎ  ＮａＯＨ中の５％ＳＤＳ溶液４０μｌに、および蒸留水９６０μｌに溶解した後、ＢＣＡアッセイキット（Ｐｉｅｒｃｅ，  Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，  ＩＬ）を用いたタンパク質アッセイに用いた。タンパク質担持量は、ナノ繊維の乾燥重量に対する固定化タンパク質の重量比率（％）として決定した。
【０１５９】
図５は、異なる表面改質による１％ナノ繊維上のタンパク質固定化量を示す。ＢＳＡは、較正曲線を作成するために用いた。ＰＡＡ改質ナノ繊維が、最高のタンパク質固定化（１．７μｇ／ｍｇ）を示し、次いでＡＡグラフト化ナノ繊維（１．４μｇ／ｍｇ）および酸−ＳＡＭ被覆ナノ繊維（０．７μｇ／ｍｇ）であった。この順は、１％ナノ繊維上のカルボキシ密度の順と相関している。
【０１６０】
（実施例１１）
固定化タンパク質の生物活性
固定化ＨＲＰの生物活性は、ＴＭＢ基質溶液を用いて決定した。基質溶液（ＫＰＬ）２ｍｌをＨＲＰコンジュゲートナノ繊維に添加した後に、発色が開始した。１０分後に硫酸を添加して、発色を停止させ、４５０ｎｍでの吸光度を測定した。固定化ＨＲＰの生物活性を計算するために、標準ＨＲＰ曲線を使用した。
【０１６１】
ＨＲＰ活性は、ＨＲＰ触媒ＴＭＢ酸化により測定した。図６に示すように、ＰＡＡ改質ナノ繊維上にコンジュゲートしたＨＲＰが、最高の活性を示し、酸−ＳＡＭ被覆およびＡＡグラフト化ナノ繊維上では、より低い活性が見出された。ＡＡグラフト化ナノ繊維上のタンパク質量が、酸−ＳＡＭ被覆ナノ繊維のその量のほぼ２倍であったことを考慮すると、類似の活性は、酸−ＳＡＭの方が、タンパク質コンジュゲーションにとって良好なスペーサー候補とも思われることを示している。ＰＡＡ析出とＡＡグラフト化との活性差は、ナノ繊維上のＰＡＡ鎖の配向が、タンパク質活性に重要な役割を果たし得ることを示唆している。
【０１６２】
（実施例１２）
光架橋ナノ繊維の分解
２種の分解用緩衝液：１）ＰＢＳ、ｐＨ７．４；２）Ｐ．  ｃｅｐａｃｉａ由来のリパーゼ５０Ｕ／ｍｌを有するＰＢＳ、の中で分解を試験した。分解試験用の試料は、以下のように調製した。電気紡糸の後、繊維を水中に浮かせて、アルミニウムコレクターから緩ませることにより、繊維をそのコレクターから取り出し、次いで凍結乾燥した。次いで、繊維メッシュをＵＶ照射（ＵＶＰ  ＣＬ−１０００  Ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ  Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｒ、４０ワット、２５４ｎｍ、光源からの距離は５インチである）下で１５分間架橋した。ナノ繊維４０〜５０ｍｇを１５ｍｌの遠心管中に入れ、１０ｍｌの分解用緩衝液を添加した。その管を、３７℃インキュベーター中のシェーカー上に置いた。試料を所定の時点に抜き取り、遠心により蒸留水で３回洗浄し、真空下で一定重量になるまで乾燥した。実験は、３回繰り返した。分解率は、次式のように計算した。
【０１６３】
％重量減少＝（Ｍ２−Ｍ１）／Ｍ１×１００％
式中、Ｍ２およびＭ１は、分解の後、および前のナノ繊維の質量である。
【０１６４】
分解性ポリマーの生体用材料としての重要な一特徴は、機能を果たした後に体内で消失し、除去するための第２の手術を必要としないことである。適用が異なれば、異なる分解速度が必要になる。材料の分解挙動を理解し、できればそれを制御することが重要である。分解は、分子量、結晶性、鎖の配向および他の形態的変数などのポリマーの物理化学的性質だけでなく、環境条件によっても影響される。この分解試験では、２つの条件：加水分解および酵素的分解を調べた。バルク材料として、ＰＣＬの分解は、高い疎水性および高い結晶度のために非常に遅いことがよく知られている。ＰＣＬをナノ繊維に作製した後では、表面積が大幅に増加するため、分解が速くなり得る。他方で、ベンゾフェノン基によるＰＣＬの架橋のために、分解速度が低下し得る。架橋剤の導入量が異なる４段階（０％、１％、５％、１０％ｗｔ／ｗｔ）のＰＣＬナノ繊維の分解を、リン酸緩衝塩水ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中、およびリパーゼ５０Ｕ／ｍｌを含有するＰＢＳ中で行った。その結果、ＰＢＳ中２３週間後に、架橋剤０％のＰＣＬナノ繊維では、１０．６６％の重量減少が見出されたのに対し、架橋剤１％、５％および１０％で架橋されたナノ繊維上では、分解の兆候が全く現れない（４％未満）ことが示された。しかし、リパーゼの存在下では、ナノ繊維が遥かに速く分解し、架橋剤０％、１％、５％および１０％のナノ繊維の重量減少は、２４時間後で９３．６％、４１．０％、８．６％および３．７％であった（図７）。光架橋は、ナノ繊維の分解に大いに影響すると結論される。分解速度は、架橋剤含量の増加と共に低下した。光架橋剤含量の変更によりナノ繊維の分解を調整することは、可能であり、この変更は、特に、様々な分解速度を要する様々な用途に１つの物質が必要な場合に、非常に有望である。ＳＥＭ像から、５時間後に、０％および１％のナノ繊維では、相当な分解が認められ、繊維表面が荒れてきたのに対し、５％および１０％のナノ繊維は、大体において完全性を保ち、繊維表面が滑らかなままであることが示された（図８）。
【０１６５】
（実施例１３）
ＵＶの直接照射を用いた、光反応性ＰＣＬナノ繊維へのリゾチームの固定化
ＩＳｕｒＴｅｃで電気紡糸した大型のナノ繊維シートから、ナノ繊維１６片を切り出した。繊維シートは、異なる４段階のＴｒｉＬｉｔｅ（ＴＬ）添加量を用いて調製した。そのＴｒｉＬｉｔｅ添加量は、０％、１％、５％および１０％であった。１６片中８片は、ＢＣＡタンパク質アッセイで使用するために調製し、その他の８片は、活性アッセイのために調製した。ナノ繊維片の各々は、リゾチームとのインキュベーションの前に秤量した。
【０１６６】
リゾチーム溶液は、ニワトリ卵白由来のリゾチーム（Ａｍｒｅｓｃｏ，  Ｓｏｌｏｎ，  ＯＨ）を用いて調製した。リゾチームは、ｄＨ２Ｏ中で５０ｍｇ／ｍｌに調製した。ナノ繊維は、リゾチーム溶液中で、室温で１時間振盪しながらインキュベートした。
【０１６７】
リゾチーム溶液中での１時間のインキュベーション後、ナノ繊維をリゾチーム溶液から取り出し、ＵＶ照射のためにＴｅｆｌｏｎ片上に置いた。その繊維を合計２分間照射した（片面３０秒間を２回ずつ）。
【０１６８】
ＵＶ照射後、ナノ繊維を新しいシンチレーションバイアルに入れ、ＰＢＳ／０．１％Ｔｒｉｔｏｎ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，  Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，  ＷＩ）２ｍｌで終夜洗浄することにより、未結合リゾチームを完全に除いた。ナノ繊維をシェーカー上で室温で洗浄した。
【０１６９】
ＰＢＳ／０．１％Ｔｒｉｔｏｎ中で終夜洗浄した後、各ナノ繊維片をｄＨ２Ｏで濯ぎ洗い、新しいシンチレーションバイアルに入れた。活性アッセイ用のナノ繊維片は、アッセイのために直ちに使用した。
【０１７０】
１Ｎ  ＮａＯＨ／２％ＳＤＳ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，  Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，  ＷＩ）溶液２ｍｌを、ＢＣＡタンパク質アッセイ用のナノ繊維片に添加して、それを溶解した。ナノ繊維をＮａＯＨ／ＳＤＳ溶液と３７℃で終夜インキュベートした。
【０１７１】
（実施例１４）
リゾチーム活性
Ａ．固定化リゾチームの活性アッセイ
ＥｎｚＣｈｅｋ（登録商標）リゾチームアッセイキット（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，  Ｅｕｇｕｅｎｅ，  ＯＲ）を用いて、ＮＦ上の固定化リゾチームの活性レベルを決定した。アッセイに用いた試薬は全て、キットの使用説明書に従って調製した。
【０１７２】
標準曲線は、キットの使用説明書に従って９６ウェルプレートにて調製した。基質溶液（キットの使用説明書に従ってキット試薬で調製した）１．５ｍｌを、ナノ繊維片を含んだ各シンチレーションバイアルに添加した。標準溶液およびナノ繊維片を、基質溶液と共に３７℃で１時間５０分間インキュベートした（遮光しておく）。
【０１７３】
基質溶液とのインキュベーション後、各ナノ繊維試料の上清１００μｌを、標準溶液を含有する９６ウェルプレートに添加して、同一物３点とし、蛍光を５１８ｎｍで測定した。
【０１７４】
Ｂ．ＢＣＡタンパク質アッセイ
１）トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）を用いたリゾチームの沈殿
トリクロロ酢酸（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，  Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，  ＷＩ）を用いて、溶解ナノ繊維を含有する溶液からリゾチームを沈殿させた。
【０１７５】
溶解ナノ繊維を含有する溶液は、１Ｎ  ＨＣｌを用いてｐＨ２に調整した後、エッペンドルフ管に入れた。次いで、ＴＣＡを溶液に添加し（１容積：４容積）、その管を氷上に１０分間置いた。
【０１７６】
氷上での１０分間のインキュベーション後、その管をミクロ遠心機（ｍｉｃｒｏｆｕｇｅ）中で１４０００ｒｐｍで５分間回転させた。上清を除き、タンパク質ペレットはそのまま残した。
【０１７７】
次いで、冷アセトン２００μｌを各管に添加して、ペレットを洗浄した。その管を１４０００ｒｐｍで５分間再び回転させ、上清を除いた。このアセトン洗浄は、合計３回のアセトン洗浄を２度繰り返した。
【０１７８】
最終のアセトン洗浄後、タンパク質ペレットを熱ブロック中で１０分間乾燥することにより、残存アセトンを完全に除いた。
【０１７９】
２）ＢＣＡアッセイ用タンパク質試料の調製
タンパク質ペレットの乾燥後、０．２Ｎ  ＮａＯＨ／５％ＳＤＳ溶液４０μｌを各管に添加して、ペレットを溶解した。次いで、ｄＨ２Ｏ  ９６０μｌを各管に添加して、全量を１ｍｌとした。タンパク質溶液は、アッセイのためにガラス試験管に移した。
【０１８０】
３）リゾチーム標準曲線の作成
標準曲線は、ｄＨ２Ｏ中のリゾチーム（Ａｍｒｅｓｃｏ，  Ｓｏｌｏｎ，  ＯＨ）を用いて作成した。１０種の標準溶液を、１０μｇ／ｍｌから０．０１９５μｇ／ｍｌまでの濃度に亘って、ガラス試験管中で調製した（標準溶液１種について全量１ｍｌ）。
【０１８１】
４）標準溶液および実験試料のＢＣＡ作用試薬とのインキュベーション
ＱｕａｎｔｉＰｒｏＴＭＢＣＡアッセイキット（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ，  Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，  ＷＩ）をアッセイに用いた。ＢＣＡ作用試薬１ｍｌ（キットの使用説明書に従って調製）を、標準溶液および実験試料の各々に添加した（管１本につき全量２ｍｌ）。次いで、標準溶液および試料を３７℃で３時間インキュベートした。標準溶液および実験溶液の２００μｌを９６ウェルプレートに添加して、同一物３点とし、吸光度を５６２ｎｍで測定した。
【０１８２】
その結果、相当量のリゾチームが、ＵＶ直接照射によりＰＣＬナノ繊維にコンジュゲートしたが、固定化リゾチームは、活性が限られており、ＵＶ直接照射中の活性の喪失を示すことが確認された。
【０１８３】
考察した例示的実施形態に、本発明の範囲から逸脱せずに、多様な改変および追加を行うことができる。例えば、上記の実施形態は特定の特徴に言及しているが、本発明の範囲は、特徴の異なる組合せを有する実施形態、および上記特徴の全ては含んでいない実施形態も包含する。したがって、本発明の範囲は、特許請求の範囲内に入るような全ての代替形態、改変形態および変形形態を、それらの全ての等価形態と共に包含することを意図している。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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