(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
１）トラネキサム酸０．１〜１０質量％と、２）パンテティン−Ｓ−スルホン酸又はその塩と、３）クワ科植物のエキス０．１〜１０質量％とを含有し、パンテティン−Ｓ−スルホン酸又はその塩とトラネキサム酸の質量比が１：１０００００〜１：１０であることを特徴とする、皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、皮膚外用剤に関し、更に詳細には、美白用の化粧料に好適な皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
化粧料に於いて、皮膚におけるメラニンの産生量を抑制し、皮膚の色を白く保つことは一大テーマとなっており、チロシナーゼ活性阻害作用 、メラノーマにおけるメラニン産生の抑制作用を指標に多くの化合物がスクリーニングされ、種々の美白素材が開発されてきている。この様な素材としては、例えば、トラネキサム酸やその誘導体（例えば、特許文献１、特許文献２、特許文献３を参照）、アスコルビン酸リン酸エステル塩やアスコルビン酸グルコシドなどのアスコルビン酸誘導体、アルブチンのようなハイドロキノン誘導体（例えば、特許文献４を参照）等がこれまでこの様な素材として開発されてきている。これらの素材は、美白のための医薬部外品有効成分としての承認も得られている。これらの成分を含む化粧料を投与することにより、皮膚のメラニンの産生は抑制され、皮膚の色は明るく、美しい方向へ変化させることが出来るようになってきているが、この様な変化が充分に満足できるほどの大きさであるとは言い難いのが現状であり、この様な変化をより如実に誘起する化粧料の開発が望まれていると言える。
【０００３】
特に、トラネキサム酸やその誘導体はメラニン産生抑制作用が存するばかりでなく、抗炎症作用をも有しているので、色素沈着の原因となると言われている炎症も抑えることが出来ることから（例えば、特許文献５を参照）、これらの成分のメラニン産生抑制作用を向上せしめることは、特に意義深いものであると考えられている。
【０００４】
又、パンテティン−Ｓ−スルホン酸及び／又はその塩は、メラニン産生抑制作用を有すると同時に、ラジカル補足作用も有し、メラニンの産生を抑えるとともに、メラニン産生の亢進の原因となった因子によって誘起された、皮膚の損傷を修復する作用が存すると考えられているが（例えば、特許文献６を参照）、かかる成分と前記トラネキサム酸類とを組み合わせて皮膚外用剤に含有せしめる技術は全く知られていないし、この様な組み合わせにより、著しいメラニン産生抑制作用が発現することも全く知られていない。
【０００５】
更に、クワ科植物について、クワ科クワの樹皮が「ソウハクヒ」の名称の漢方生薬であり、かかる「ソウハクヒ」の抽出物がメラニン産生抑制作用を有することは既に知られているが（例えば、特許文献７を参照）、かかる成分と前記トラネキサム酸類とを組み合わせて皮膚外用剤に含有せしめる技術は全く知られていないし、この様な組み合わせにより、著しいメラニン産生抑制作用が発現することも全く知られていない。
【０００６】
一方、メラニンの産生において、メラノサイトのみならず、ケラチノサイトがその生成に係わっていることが近年明らかになっており（例えば、非特許文献１、非特許文献２を参照）、Ｂ−１６細胞などのメラノーマを用いたスクリーニングに比して、メラノサイトとケラチノサイトとを共培養する条件下で、素材のメラニン産生抑制作用をスクリーニングする方が、よりｉｎ  ｖｉｖｏに近い条件でのスクリーニングと考えられるようになってきている。しかしながら、メラニン産生抑制素材において、この様なスクリーニング系で、有効性が認められる素材については、まだあまり見つかっていないのが現状である。
【特許文献１】特開平０１−９３５１９号公報
【特許文献２】特開平０９−２３５２６１号公報
【特許文献３】特開２００４−３０７３５３号公報
【特許文献４】特開平０２−１４２７１４号公報
【特許文献５】特開２００１−３１５８０号公報
【特許文献６】特開２００３−１１３０７１号公報
【特許文献７】特開２００６−１０４１１８号公報
【非特許文献１】Ｃｅｃｃａｒｅｌｌｉ  Ｓ．  ｅｔ  ａｌ  ；Ｊ  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｄｅｒｍａｔｏｌ．  ２００５  ；１２５（６）：１１９０−９，”Ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ｍｅｌａｎｏｓｏｍｅ  ｔｒａｎｓｆｅｒ  ｔｏ  ｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｓ．”
【非特許文献２】Ｂｅｒｅｎｓ  Ｗ．  ｅｔ  ａｌ；Ｐｉｇｍｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｓ．  ２００５  ；１８（５）：３７０−８１．；”Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｆｏｒ  ａｓｓａｙｉｎｇ  ｍｅｌａｎｏｓｏｍｅ  ｔｒａｎｓｆｅｒ．”
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、この様な状況下為されたものであり、トラネキサム酸、トラネキサム酸誘導体及びそれらの塩などのトラネキサム酸類のメラニン産生抑制作用を向上せしめる手段を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
この様な状況に鑑みて、本発明者らは、トラネキサム酸、トラネキサム酸誘導体及びそれらの塩などのトラネキサム酸類のメラニン産生抑制作用を向上せしめる手段を求めて、鋭意研究努力を重ねた結果、パンテティン−Ｓ−スルホン酸、その塩又はクワ科植物のエキスを、トラネキサム酸類に組み合わせることによりその効果を著しく高めることが出来ることを見いだし、発明を完成させるに至った。即ち、本発明は、以下に示す通りである。
（１）  １）トラネキサム酸０．１〜１０質量％と、２）パンテティン−Ｓ−スルホン酸又はその塩と、３）クワ科植物のエキス０．１〜１０質量％とを含有し、パンテティン−Ｓ−スルホン酸又はその塩とトラネキサム酸の質量比が１：１０００００〜１：１０であることを特徴とする、皮膚外用剤。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、トラネキサム酸、トラネキサム酸誘導体及びそれらの塩などのトラネキサム酸類のメラニン産生抑制作用を向上せしめる手段を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
＜１＞  本発明の必須成分であるトラネキサム酸類
本発明の皮膚外用剤はトラネキサム酸類を必須成分として含有する。該トラネキサム酸類は、トラネキサム酸、トラネキサム酸の塩、トラネキサム酸誘導体及びトラネキサム酸誘導体の塩である。
上記トラネキサム酸誘導体としては、トラネキサム酸のアルキルアミド、エステル、多量体などが挙げられる。
上記トラネキサム酸のアルキルアミドとしては、炭素原子数１〜４のアルキルアミドが
例示できる。中でも、トラネキサム酸メチルアミド（トランス−４−アミノメチルシクロヘキサンカルボン酸メチルアミド）、トラネキサム酸エチルアミド（トランス−４−アミノメチルシクロヘキサンカルボン酸メチルアミド）が好適に例示できる。
上記トラネキサム酸のエステルとしては、炭素原子数１〜３０のアルキルエステル、炭素原子数１〜３０のアルキル基、ハロゲン原子、カルボキシル基などが置換していてもよいフェニルエステルが例示できる。中でも、４−（トランス−アミノメチルシクロヘキサンカルボン酸４’−ヒドロキシフェニルエステル、２−（トランス−４−アミノメチルシクロヘキシルカルボニルオキシ）−５−ヒドロキシ安息香酸が好適に例示できる。
上記トラネキサム酸の多量体としては、トラネキサム酸２量体（トランス−４−（トランス−アミノメチルシクロヘキサンカルボニル）アミノメチルシクロヘキサンカルボン酸）が例示できる。
上記誘導体についてはその製造方法は既に知られている。トラネキサム酸自身は既に有効成分として、医薬、化粧料で実績のあるものであり、試薬としてもアルドリッチ・ジャパン社などから購入することが出来る。上記トラネキサム酸の多量体は、例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）等のペプチド合成試薬を利用して、重合させて合成することが出来る。
上記トラネキサム酸の塩及びトラネキサム酸誘導体の塩としては、通常、化粧料や医薬で使用される塩であれば特段の限定なく使用でき、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、トリエチルアミン塩、トリエタノールアミン塩、モノエタノールアミン塩等の有機アミン塩、リジン塩、アルギン酸塩等の塩基性アミノ酸塩等が好適に例示できる。
本発明の皮膚外用剤においては、上記トラネキサム酸類を単独でも、２種以上組み合わせても含有できる。上記トラネキサム酸類の含有量は、皮膚外用剤全量に対して上記トラネキサム酸類の総量で、０．１〜１０質量％が好ましく、より好ましくは、１〜５質量％である。０．１質量％未満の含有量では、メラニン産生抑制作用を発現しない場合が存し、１０質量％を超える含有量では、メラニン産生抑制作用が頭打ちになり、徒に処方の安定性を損なう場合が存するからである。
【００１１】
＜２＞  本発明の皮膚外用剤の必須成分であるパンテティン−Ｓ−スルホン酸、その塩、クワ科植物のエキス
本発明の皮膚外用剤は、パンテティン−Ｓ−スルホン酸、その塩及びクワ科植物のエキスから選択される１種乃至は２種以上を含有することを特徴とする。
上記パンテティン−Ｓ−スルホン酸は遊離酸のみではなく、塩の形で使用することも出来る。また、パンテティン−Ｓ−スルホン酸は光学的異性体が存在する。Ｄ−体、ＤＬ−体、いずれも本発明に使用できるが、好ましくはＤ−体である。
上記パンテティン−Ｓ−スルホン酸の塩としては、皮膚外用剤で使用されるものであれば、特段の限定無く使用でき、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、トリエチルアミン塩、トリエタノールアミン塩、モノエタノールアミン塩等の有機アミン塩、リジン塩、アルギン酸塩等の塩基性アミノ酸塩等が好適に例示できる。中でもアルカリ土類金属塩が好ましく、カルシウム塩が特に好ましい。これは皮膚外用剤の形態で生体利用性が高いためである。
上記パンテティン−Ｓ−スルホン酸及びその塩は既知の化合物であり、既に化粧料原料として市販されているものが存し、かかる市販品を購入して使用することが出来る。この様な市販品としては、パンテティン−Ｓ−スルホン酸のカルシウム塩である「パンテティンＳスルホン酸ＣＡ−７０」（相互薬工株式会社）が好適に例示できる。
【００１２】
上記クワ科植物のエキスとしては、クワなどのクワ属、イチジクなどのイチジク属、コウゾなどのカジノキ属の植物のエキスが好ましく例示でき、クワ属の植物のエキスが特に好ましく、中でもクワ科クワ属クワのエキスが特に好ましい。
上記エキスの作製に使用する植物体の部位としては、特段の限定はないが、葉、果実、樹皮などが好適に例示でき、樹皮を用いることが特に好ましい。
上記エキスとしては、圧搾液、溶媒抽出物或いはそれらの揮散成分除去物等が好ましく例示でき、溶媒抽出物が特に好ましい。該溶媒抽出物の作製に用いる抽出溶媒としては、極性溶媒が好ましく、水、或いは、エタノール、イソプロピルアルコール、プロピレングリコール、１，３−ブタンジオール、グリセリン等のアルコールが特に好ましく例示できる。中でも、１，３−ブタンジオールと水の混液（混合質量比１：９〜９：１）やエタノールと水の混液（混合質量比１：９〜９：１）が好ましく例示できる。この様な溶媒を用いた抽出は、クワ科植物の植物体１質量部に、溶媒１〜１０質量部を加え、所望により攪拌を加え、室温であれば数日間、沸点付近の温度であれば数時間浸漬し、室温まで冷却した後、必要に応じて、濾過などで不溶物を取り除いて用いることが出来る。製造例については後述する。
また、上記エキスが本願発明の皮膚外用剤の製造に好適か、否かについては、下記に示すヒトメラノサイト単独培養系で上記エキスを１質量％の濃度で共存させた場合において、共存しなかった場合に比してメラノサイトの産生量が５０％以下であるか否かで判断することが可能である。この様なスクリーニングは次に示す方法によって行われる。
【００１３】
＜ヒトメラノサイト単独培養系での細胞毒性及びメラニン産生抑制作用の評価方法＞
（１）使用細胞
正常ヒト表皮メラノサイト（Ｄａｒｋｌｙ、クラボウ社製）
（２）培地
細胞増殖添加剤（ＨＭＧＳ）含有Ｍｅｄｉｕｍ  ２５４（クラボウ社製）
（３）細胞培養方法、並びに細胞毒性及びメラニン産生抑制作用の評価方法
上記培地に上記細胞濃度が６×１０4 ｃｅｌｌｓ／ｍＬとなるように細胞懸濁液を調製する。該細胞懸濁液を２４穴プレート（ＭＵＬＴＩＷＥＬＬTM ２４ｗｅｌｌ、ベクトンディッキンソン社製）に、各ウェルの液量が０．５ｍＬとなるように播種し、ＣＯ2インキュベーターにて３７℃で、一晩（Ｏ／Ｎ）培養する。各ウェルの前記細胞培養液に被験物質を終濃度が目的濃度になるように添加後、各ウェルに［14Ｃ］−２−Ｔｈｉｏｕｒａｃｉｌ（０．２５μＣｉ）を添加し、ＣＯ2インキュベーターにて３７℃で、７２ｈｒ培養する。該培養後、各ウェルの培地を除去し、新しい上記培地を添加した後、ＷＳＴ−８（同仁化学研究所社製）（０．０２ｍＬ））を添加し、ＣＯ2インキュベーターにて３７℃で２〜３ｈｒ培養する。該培養後、各ウェルの培養液の吸光度を、プレートリーダー（ＭＯＤＥＬ６８０、バイオラッド社製）を用い４５０ｎｍ及び６５０ｎｍの波長で測定し、４５０ｎｍの吸光度から６５０ｎｍの吸光度を差し引いた値を用いて細胞毒性を評価する。尚、評価は、被験物質を添加した培養液の吸光度に対する被験物質を添加しないコントロールの吸光度の比を用い、百分率で表す（以下、該百分率で表された値は細胞増殖率ともいう）。
該細胞毒性評価後、各ウェルの細胞は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ（−））にて洗浄し、１００％トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）溶液を添加後、さらに氷冷水を加え、ＴＣＡが１０〜１５％となるように調整し、チューブ（全容１．５ｍＬ）に回収する。該チューブに回収された細胞を含む調製液は氷中にて１５ｍｉｎ静置後、１５，０００ｒｐｍ、４℃、５ｍｉｎで遠心して、上清を除去後、さらに氷冷１０％ＴＣＡを添加し、５，０００ｒｐｍ、４℃、５ｍｉｎで遠心し、上清を除去する。これに、０．０５ｍＬのＳｏｌｕｅｎｅ−３５０（パーキンエルマー社製）を添加し沈殿物を溶解後、１ｍＬのＡＱＵＡＳＯＬ−２（パーキンエルマー社製）を添加、攪拌し、14Ｃ活性（ｄｐｍ）を液体シンチレーションカウンター（ＬＳＣ−６１００、アロカ社製）を用いて測定し、メラニン産生抑制作用を評価する。尚、評価は、被験物質を添加した培養系の14Ｃ活性に対する被験物質を添加しないコントロールの14Ｃ活性の比を用い、百分率で表す（以下、該百分率で表された値はメラニン産生率ともいう）。
【００１４】
＜製造例１＞
クワ科クワ属クワの樹皮１Ｋｇに５０％エタノール水溶液１０Ｋｇを加え、攪拌下３時間加熱還流を行い、室温まで冷却した後、濾過で不溶物を取り除き、エキス１（ソウハクヒエキス）を得た。上記メラニン産生抑制作用の評価方法における被験物質として、このエキス１を、１質量％濃度（終濃度）となるように添加し評価した結果、メラニン産生率は４３％であった。
【００１５】
＜製造例２＞
製造例１の５０％エタノール水溶液を５０％ １，３−ブタンジオール水溶液に代えて、同様に操作し、エキス２を得た。上記メラニン産生抑制作用の評価方法における被験物質として、このエキス２を、１質量％濃度（終濃度）となるように添加し評価した結果、メラニン産生率は５０％以下であった。
【００１６】
上記パンテティン−Ｓ−スルホン酸若しくはその塩、又はクワ科植物のエキスは、トラネキサム酸、トラネキサム酸の塩、トラネキサム酸誘導体及びトラネキサム酸誘導体の塩などのトラネキサム酸類のメラニン産生抑制作用を向上せしめる作用を有する。
この様な作用を発揮するためには、パンテティン−Ｓ−スルホン酸及び／又はその塩（以下、パンテティン−Ｓ−スルホン酸等ともいう）であれば、皮膚外用剤全量に対して上記パンテティン−Ｓ−スルホン酸等の総量として、０．００１〜０．１質量％含有させることが好ましく、より好ましくは、０．００５〜０．０５質量％である。
一方、クワ科植物のエキスであれば、皮膚外用剤全量に対して上記クワ科植物のエキスを０．１〜１０質量％含有させることが好ましく、０．５〜５質量％がより好ましい。或いは、上記クワ科植物のエキスは、上記メラニン産生抑制作用の評価方法において、メラニン産生率が５０％以下となる濃度を少なくとも含有させることが好ましい。
パンテティン−Ｓ−スルホン酸等と、クワ科植物のエキスとは、それぞれを単独で含有させることも出来るし、両者をともに含有させることも出来る。特に好ましいのは、効果が増大する、パンテティン−Ｓ−スルホン酸等と、クワ科植物のエキスとをともに含有する形態である。パンテティン−Ｓ−スルホン酸等及びクワ科植物のエキスの含有量が上記下限値を下回った場合には、トラネキサム酸のメラニン産生抑制作用を増強出来ない場合が存し、上記上限値を超えてもトラネキサム酸のメラニン産生抑制作用を増強作用は頭打ちになり、処方自由度を阻害する場合が存する。
また、パンテティン−Ｓ−スルホン酸等とトラネキサム酸類の組合せによるメラニン産生抑制作用の相乗効果の発揮には、パンテティン−Ｓ−スルホン酸等とトラネキサム酸類の質量比が１：１０００００〜１：１０が好ましく、１：１００００〜１：１００がより好ましく、１：１０００〜１：２００が特に好ましい。
一方、クワ科植物のエキスとトラネキサム酸類の組合せによるメラニン産生抑制作用の相乗効果の発揮には、クワ科植物のエキスとトラネキサム酸類の質量比が１００：１〜１：１００が好ましく、１０：１〜１：１０がより好ましく、２：１〜１：２が特に好ましい。
【００１７】
＜３＞  本発明の皮膚外用剤
本発明の皮膚外用剤は、前記必須成分を含有することを特徴とする。ここで、本発明における皮膚外用剤とは、皮膚に外用で投与されるものであれば特段の限定はなく、例えば、医薬部外品を包含する化粧料、皮膚外用医薬、皮膚外用雑貨等が好適に例示できる。特に好ましいものは、化粧料であり、特にメラニン産生抑制作用に基づく美白のための医薬部外品が好適に例示できる。これはトラネキサム酸類がメラニン産生抑制作用に基づく美白作用の有効成分であることを厚生労働省によって認められているためである。その一方、トラネキサム酸類には、抗炎症作用も存することが知られており、抗炎症作用を目的作用とする医薬部外品も存する。この様な抗炎症作用を目的作用とする医薬部外品であっても、「１）トラネキサム酸、その塩及びその誘導体から選択される１種乃至は２種以上と
、２）パンテティン−Ｓ−スルホン酸、その塩及びクワ科植物のエキスから選択される１種乃至は２種以上とを含有する」と言う構成を充足する限りにおいて、本発明の皮膚外用剤の技術的範囲に属する。
【００１８】
本発明の皮膚外用剤においては、かかる成分以外に、通常皮膚外用剤で使用される任意成分を含有することが出来る。この様な任意成分としては、例えば、水添されていても良い、マカデミアナッツ油、アボガド油、トウモロコシ油、オリーブ油、ナタネ油、ゴマ油、ヒマシ油、サフラワー油、綿実油、ホホバ油、ヤシ油、パーム油、液状ラノリン、硬化ヤシ油、硬化油、モクロウ、硬化ヒマシ油、牛脂、ミツロウ、キャンデリラロウ、カルナウバロウ、イボタロウ、ラノリン、還元ラノリン、硬質ラノリン、ホホバロウ等のオイル、ワックス類；流動パラフィン、形質イソパラフィン、オリーブなどの植物油を原料として加工されて得られるものであっても良いスクワラン、プリスタン、オゾケライト、パラフィン、セレシン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス、水添ポリイソブテン等の炭化水素類；オレイン酸、イソステアリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、ウンデシレン酸等の高級脂肪酸類；ラウリルアルコール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、イソステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、オクチルドデカノール、ミリスチルアルコール、セトステアリルアルコール等の高級アルコール等；イソオクタン酸セチル、パルミチン酸セチル、ステアリン酸セチル、ミリスチン酸イソプロピル、イソステアリン酸ヘキシルデシル、アジピン酸ジイソプロピル、セバチン酸ジ−２−エチルヘキシル、乳酸セチル、リンゴ酸ジイソステアリル、ジ−２−エチルヘキサン酸エチレングリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、ジ−２−ヘプチルウンデカン酸グリセリン、トリ−２−エチルヘキサン酸グリセリン、トリ−２−エチルヘキサン酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、テトラ−２−エチルヘキサン酸ペンタンエリトリット、ネオペンチルグリコールジイソオクタネート、イソオクタン酸トリグリセリド、イソステアリン酸トリグリセリド、カプリン酸トリグリセリド、イソステアリン酸イソステアリル等の合成エステル油類；ジメチルポリシロキサン（ジメチコン）、メチルフェニルポリシロキサン（フェニルメチコン）、ジフェニルポリシロキサン等の鎖状ポリシロキサン；オクタメチルシクロテトラシロキサン（シクロメチコン）、デカメチルシクロペンタシロキサン、ドデカメチルシクロヘキサンシロキサン等の環状ポリシロキサン；アミノ変性ポリシロキサン、ポリエーテル変性ポリシロキサン、アルキル変性ポリシロキサン、フッ素変性ポリシロキサン等の変性ポリシロキサン等のシリコーン油等の油剤類；脂肪酸セッケン（ラウリン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム等）、ラウリル硫酸カリウム、アルキル硫酸トリエタノールアミンエーテル等のアニオン界面活性剤類；塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、ラウリルアミンオキサイド等のカチオン界面活性剤類；イミダゾリン系両性界面活性剤（２−ココイル−２−イミダゾリニウムヒドロキサイド−１−カルボキシエチロキシ２ナトリウム塩等）、ベタイン系界面活性剤（アルキルベタイン、アミドベタイン、スルホベタイン等）、アシルメチルタウリン等の両性界面活性剤類；ソルビタン脂肪酸エステル類（ソルビタンモノステアレート、セスキオレイン酸ソルビタン等）、グリセリン脂肪酸類（モノステアリン酸グリセリン等）、プロピレングリコール脂肪酸エステル類（モノステアリン酸プロピレングリコール等）、硬化ヒマシ油誘導体、グリセリンアルキルエーテル、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステル類（ＰＯＥソルビタンモノオレエート、モノステアリン酸ポリオキエチレンソルビタン等）、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−ソルビットモノラウレート等）、ＰＯＥグリセリン脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−グリセリンモノイソステアレート等）、ＰＯＥ脂肪酸エステル類（ポリエチレングリコールモノオレート、ＰＯＥジステアレート等）、ＰＯＥアルキルエーテル類（ＰＯＥ２−オクチルドデシルエーテル等）、ＰＯＥアルキルフェニルエーテル類（ＰＯＥノニルフェニルエーテル等）、プルロニック型類、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル類（ＰＯＥ・ＰＯＰ２−デシルテトラデシルエーテル等）、テトロニック類、ＰＯＥヒマシ油・硬化ヒマシ油誘導体（ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ硬化ヒマシ油等）、ショ糖
脂肪酸エステル、アルキルグルコシド等の非イオン界面活性剤類；脂肪酸ナトリウム石鹸、脂肪酸カリウム石鹸などの脂肪酸石鹸；ポリエチレングリコール、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、エリスリトール、ソルビトール、キシリトール、マルチトール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ジグリセリン、イソプレングリコール、１，２−ペンタンジオール、２，４−ヘキサンジオール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−オクタンジオール等の多価アルコール類；ピロリドンカルボン酸ナトリウム、乳酸、乳酸ナトリウム等の保湿成分類；表面を処理されていても良い、マイカ、タルク、カオリン、合成雲母、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、無水ケイ酸（シリカ）、酸化アルミニウム、硫酸バリウム等の粉体類、；表面を処理されていても良い、ベンガラ、黄酸化鉄、黒酸化鉄、酸化コバルト、群青、紺青、酸化チタン、酸化亜鉛の無機顔料類；表面を処理されていても良い、雲母チタン、魚燐箔、オキシ塩化ビスマス等のパール剤類；レーキ化されていても良い赤色２０２号、赤色２２８号、赤色２２６号、黄色４号、青色４０４号、黄色５号、赤色５０５号、赤色２３０号、赤色２２３号、橙色２０１号、赤色２１３号、黄色２０４号、黄色２０３号、青色１号、緑色２０１号、紫色２０１号、赤色２０４号等の有機色素類；ポリエチレン末、ポリメタクリル酸メチル、ナイロン粉末、オルガノポリシロキサンエラストマー等の有機粉体類；パラアミノ安息香酸系紫外線吸収剤；アントラニル酸系紫外線吸収剤；サリチル酸系紫外線吸収剤、；桂皮酸系紫外線吸収剤、；ベンゾフェノン系紫外線吸収剤；糖系紫外線吸収剤；２−（２’−ヒドロキシ−５’−ｔ−オクチルフェニル)ベンゾトリアゾール、４−メトキシ−４’−ｔ−ブチルジベンゾイルメタン等の紫外線吸収剤類；エタノール、イソプロパノール等の低級アルコール類；ビタミンＡ又はその誘導体、ビタミンＢ６塩酸塩、ビタミンＢ６トリパルミテート、ビタミンＢ６ジオクタノエート、ビタミンＢ２又はその誘導体、ビタミンＢ１２、ビタミンＢ１５又はその誘導体等のビタミンＢ類；α−トコフェロール、β−トコフェロール、γ−トコフェロール、ビタミンＥアセテート等のビタミンＥ類、ビタミンＤ類、ビタミンＨ、ピロロキノリンキノン等のビタミン類等；フェノキシエタノール等の抗菌剤、ポリメタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン、メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン・アルキルメタクリレートコポリマーなどの保水性ポリマー及び／又はその塩、トレハロース、硫酸化トレハロース及び／又はその塩等の保水性糖誘導体などが例示できる。
【００１９】
かかる任意成分のうち、炭化水素類としては１気圧、２５℃の条件で液状の炭化水素が好ましく、かかる炭化水素としては、流動パラフィン、形質イソパラフィン、オリーブなどの植物油を原料として加工されて得られるものであっても良いスクワラン、「パールリーム」（油化産業株式会社製）等が好適に例示でき、かかる成分の含有量としては、皮膚外用剤全量に対して、１〜１０質量％が好ましく例示できる。
エステル油類としては、１気圧、２５℃の条件で液状の性状を示す分岐鎖脂肪酸のエステルと、１気圧、２５℃の条件で固体の性状を示す直鎖脂肪酸のトリグリセライド或いは直鎖脂肪酸と直鎖高級アルコールのエステルとを１：４〜２：１の割合に組み合わせて、含有させることが好ましい。前記分岐鎖脂肪酸のエステルとしては、イソオクタン酸セチル、ネオペンチルグリコールジイソオクタネート、イソオクタン酸トリグリセリド、イソステアリン酸トリグリセリド、イソステアリン酸イソステアリルなどが好ましく例示でき、前記直鎖脂肪酸のトリグリセライドとしては、水添ヤシ油、水添牛脂、水添オリーブ油などの水添油脂や「ウィテプゾルＥ７５」（ヒュルスＡ．Ｇ．製）、カプリン酸トリグリセリドなどの合成飽和脂肪酸トリグリセリドが例示でき、直鎖脂肪酸と直鎖高級アルコールのエステルとしては、ミツロウ、「合成ゲイロウ」（油化産業株式会社製）、パルミチン酸セチル、ステアリン酸セチルなどが好適に例示できる。これらの油脂の総量は、皮膚外用剤全量に対して、１〜１０質量％が好ましく例示できる。
高級アルコールとしては、飽和の高級アルコールを含有することが好ましく、該飽和の高級アルコールとしては、ラウリルアルコール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、セトステアリルアルコール（セチルアルコールとステアリルアルコールの混合物）、ベヘニルアルコールなどが好ましく例示できる。かかる成分は皮
膚外用剤全量に対して、１〜１０質量％含有されることが好ましい。
乳化剤としては、非イオン界面活性剤と脂肪酸石鹸の組み合わせ、或いは、非イオン界面活性剤のみを用いることが好ましく、前記非イオン界面活性剤としてはポリオキシエチレンが付加していても良いソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンが付加していても良い脂肪酸モノグリセリド、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテルなどが好適に例示でき、脂肪酸石鹸としては脂肪酸ナトリウム石鹸乃至は脂肪酸カリウム石鹸が好適に例示できる。非イオン界面活性剤の好ましい含有量は皮膚外用剤全量に対して、１〜５質量％であり、４．５質量％以下であることが特に好ましい。脂肪酸石鹸の好ましい含有量は皮膚外用剤全量に対して、１〜３質量％である。
シリコーン油としては、ジメチルポリシロキサン（ジメチコン）、メチルフェニルポリシロキサン（フェニルメチコン）、オクタメチルシクロテトラシロキサン（シクロメチコン）などの１気圧、２５℃で液状のものを含有することが好ましく、皮膚外用剤全量に対して、０．５〜５質量％含有することが好ましい。
また、ポリメタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン、メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン・アルキルメタクリレートコポリマーなどの保水性ポリマー及び／又はその塩、トレハロース、硫酸化トレハロース及び／又はその塩等の保水性糖誘導体を含有することが好ましく、これらの含有量は、皮膚外用剤全量に対して、０．００５〜１質量％が好ましい。かかる保水性ポリマー、保水性糖誘導体を含有することにより、色素沈着に引き続いて起こりやすい、皮膚バリア機能の低下を抑制することが出来る。この為に、これらの成分を含有することは本発明の皮膚外用剤において特に好ましい。
本発明の皮膚外用剤は、これまで述べた必須成分と任意成分とを常法に従って処理することにより製造することができる。本発明の皮膚外用剤は、皮膚に塗布することができるものであれば特に限定されず、ローション、乳液、エッセンス、クリーム、オイルゲル、水性ゲルなどの剤形を挙げることができる。本発明の皮膚外用剤としては、乳液乃至はクリームなどの乳化剤形、より好ましくは、水中油乳化剤形であることが好ましい。
【実施例】
【００２０】
以下に、実施例を挙げて本発明の皮膚外用剤について、更に詳細に説明を加えるが、本発明の範囲はこれら実施例に限定されるものではない。
【００２１】
＜実施例１＞
［メラノサイト・ケラチノサイト共培養系での検討］
（１）  使用細胞
正常ヒト表皮メラノサイト（Ｄａｒｋｌｙ、クラボウ社製）及び正常ヒト成人乳房表皮ケラチノサイト (クラボウ社製)
（２）  培地
細胞増殖添加剤（ＨＭＧＳ）含有Ｍｅｄｉｕｍ  ２５４（クラボウ社製)及び細胞増殖添加剤（ＨＫＧＳ）含有Ｈｕｍｅｄｉａ−ＫＢ２(クラボウ社製)
（３）  細胞培養方法、並びに細胞毒性及びメラニン産生抑制作用の評価方法
上記培地に上記正常ヒト表皮メラノサイト（Ｄａｒｋｌｙ、クラボウ社製）及び正常ヒト成人乳房表皮ケラチノサイトの濃度がそれぞれ６×１０4 ｃｅｌｌｓ／ｍＬとなるように細胞懸濁液を調製する。該二種の細胞を有する細胞懸濁液を２４穴プレート（ＭＵＬＴＩＷＥＬＬTM ２４ｗｅｌｌ、ベクトンディッキンソン社製）に、各ウェルの液量が０．５ｍＬとなるように播種し、ＣＯ2インキュベーターにて３７℃で、一晩（Ｏ／Ｎ）培養する。各ウェルの前記細胞培養液に表１に示す被験物質を表１に示す終濃度となるように添加後、各ウェルに［14Ｃ］−２−Ｔｈｉｏｕｒａｃｉｌ（０．２５μＣｉ）を添加し、ＣＯ2インキュベーターにて３７℃で、７２ｈｒ培養する。該培養後、各ウェルの培地を除去し、新しい上記培地を添加した後、ＷＳＴ−８（同仁化学研究所社製）（０．０２ｍＬ）を添加し、ＣＯ2インキュベーターにて３７℃で２〜３ｈｒ培養する。該培養後、各ウェルの培養液の吸光度を、プレートリーダー（ＭＯＤＥＬ６８０、バイオラッド社製）
を用い４５０ｎｍ及び６５０ｎｍの波長で測定し、４５０ｎｍの吸光度から６５０ｎｍの吸光度を差し引いた値を用いて細胞毒性を評価する。尚、評価は、被験物質を添加した培養液の吸光度に対する被験物質を添加しないコントロールの吸光度の比を用いる（百分率で表す）。
該細胞毒性評価後、各ウェルの細胞は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ（−））にて洗浄し、１００％トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）溶液を添加後、さらに氷冷水を加え、ＴＣＡが１０〜１５％となるように調整し、チューブ（１．５ｍＬ）に回収する。該チューブに回収された細胞を含む調製液は氷中にて１５ｍｉｎ静置後、１５，０００ｒｐｍ、４℃、５ｍｉｎで遠心して、上清を除去後、さらに氷冷１０％ＴＣＡを添加し、５，０００ｒｐｍ、４℃、５ｍｉｎで遠心し、上清を除去する。これに、０．０５ｍＬのＳｏｌｕｅｎｅ−３５０（パーキンエルマー社製）を添加し沈殿物を溶解後、１ｍＬのＡＱＵＡＳＯＬ−２（パーキンエルマー社製）を添加、攪拌し、14Ｃ活性（ｄｐｍ）を液体シンチレーションカウンター（ＬＳＣ−６１００、アロカ社製）を用いて測定し、メラニン産生抑制作用を評価する。尚、評価は、被験物質を添加した培養系の14Ｃ活性に対する被験物質を添加しないコントロールの14Ｃ活性の比を用い、百分率で表す（非特許文献２を参照）。
【００２２】
結果を図１に示す（表１に記載の標識は図１の標識と一致する）。図１に示すとおり、パンテティン−Ｓ−スルホン酸カルシウム（「パンテティンＳスルホン酸ＣＡ−７０」；相互薬工株式会社製）、クワエキス（製造例１のエキス１）の添加により、トラネキサム酸のメラニン産生抑制作用が、上記メラノサイト・ケラチノサイト共培養系において、顕著に向上していることがわかる。この時、細胞毒性は非添加と殆ど変わらないことも注目すべきことである。
【００２３】
【表１】
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【００２４】
＜実施例２＞
表２に示す処方に従い、本発明の皮膚外用剤である、クリーム１を製造した。即ち、イ、ロの成分をそれぞれ８０℃に加温して、攪拌下、イにロを徐々に加え乳化し、攪拌冷却してクリーム１を得た。該クリーム１は優れた美白作用を有していた。
【００２５】
【表２】
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【００２６】
＜実施例３＞
表３に示す処方に従い、実施例２と同様の方法で、クリーム２を製造した。該クリーム２は優れた美白作用を有していた。
【００２７】
【表３】
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【００２８】
＜実施例３＞
表４に示す処方に従い、実施例２と同様の方法で、クリーム３を製造した。
【００２９】
【表４】
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【産業上の利用可能性】
【００３０】
本発明は、化粧料などの皮膚外用剤に適用できる。
【図面の簡単な説明】
【００３１】
【図１】実施例１の結果を示す図である。図１において、「ＮＴ」は無処理（被験物質を添加しないコントロール）、「ＰａｎＳＣ」は被験物質としてＤ−パンテティン−Ｓ−スルホン酸カルシウム（０．５×１０-3質量％）を添加した実験区、  「ｔ−ＡＭＣＨＡ」は被験物質としてトラネキサム酸（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）を添加した実験区、「＋ＰａｎＳＣ」は被験物質としてトラネキサム酸（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）及びＤ−パンテティン−Ｓ−スルホン酸カルシウム（０．５×１０-3質量％）を添加した実験区、「＋クワ」は被験物質としてトラネキサム酸（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）、Ｄ−パンテティン−Ｓ−スルホン酸カルシウム（０．５×１０-3質量％）及びクワエキス（製造例１のエキス１；ソウハクヒエキス）（１質量％）を添加した実験区を示す。
【図１】
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