(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマートと、（ｂ）フルオメツロンとを含み、３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマート：フルオメツロンの重量比が１：２〜１：３である、相乗的抗真菌微生物組成物。
【請求項２】
（ａ）３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマートと、（ｂ）フルオメツロンとを含み、３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマート：フルオメツロンの重量比が４：１〜１：１である、相乗的抗オーレオバシディウムプルランス、クラドスポリウムヘルバラム、アスペルギルスニガー、アルターナリアアルターナタまたはトリコデルマビリデ組成物。
【請求項３】
（ａ）３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマートと、（ｂ）フルオメツロンとを含み、３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマート：フルオメツロンの重量比が１：２〜１：３である、相乗的抗クロレラ属、クロレラケスレリ、イシクラゲ、キャロスリックスパリエンティナ、スミレモまたはトレンテポーリアオダラタ組成物。
【請求項４】
（ａ）３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマートと、（ｂ）フルオメツロンとを含み、３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマート：フルオメツロンの重量比が４：１〜１：１である、相乗的抗イシクラゲまたはユレモ属組成物。
【請求項５】
（ａ）３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマートと、（ｂ）フルオメツロンとを含み、３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマート：フルオメツロンの重量比が４：１〜３：１である、相乗的抗キャロスリックスパリエンティナ組成物。
【請求項６】
（ａ）フルオメツロンと、（ｂ）ピリチオン亜鉛とを含み、フルオメツロン：ピリチオン亜鉛の重量比が１：３〜１：５または２：１である、相乗的抗アルターナリアアルターナタまたはオーレオバシディウムプルランス組成物。
【請求項７】
（ａ）フルオメツロンと、（ｂ）ピリチオン亜鉛とを含み、フルオメツロン：ピリチオン亜鉛の重量比が１：１または６：１〜２：１である、相乗的抗アスペルギルスニガーまたはペニシリウムフニクロサム組成物。
【請求項８】
（ａ）フルオメツロンと、（ｂ）ピリチオン亜鉛とを含み、フルオメツロン：ピリチオン亜鉛の重量比が１：１または６：１である、相乗的抗キャロスリックスパリエンティナ、トレンテポーリアオダラタまたはスミレモ組成物。
【請求項９】
（ａ）フルオメツロンと、（ｂ）ピリチオン亜鉛とを含み、フルオメツロン：ピリチオン亜鉛の重量比が１：５〜１：１０または６：１である、相乗的抗クロレラ属、クロレラケスレリまたはイシクラゲ組成物。
【請求項１０】
（ａ）フルオメツロンと、（ｂ）チアベンダゾールとを含み、フルオメツロン：チアベンダゾールの重量比が１：１、１：５または４：１〜２：１である、相乗的抗アルターナリアアルターナタまたはオーレオバシディウムプルランス組成物。
【請求項１１】
（ａ）フルオメツロンと、（ｂ）チアベンダゾールとを含み、フルオメツロン：チアベンダゾールの重量比が６：１〜１：１０である、相乗的抗クラドスポリウムヘルバラムまたはトリコデルマビリデ組成物。
【請求項１２】
（ａ）フルオメツロンと、（ｂ）チアベンダゾールとを含み、フルオメツロン：チアベンダゾールの重量比が１：１〜１：３または４：１〜２：１である、相乗的抗キャロスリックスパリエンティナ、トレンテポーリアオダラタ及びスミレモ組成物。
【請求項１３】
（ａ）フルオメツロンと、（ｂ）ジヨードメチル−ｐ−トリルスルホンとを含み、フルオメツロン：ジヨードメチル−ｐ−トリルスルホンの重量比が６：１〜２：１または１：１〜１：３である、相乗的抗アスペルギルスニガーまたはペニシリウムフニクロサム組成物。
【請求項１４】
（ａ）フルオメツロンと、（ｂ）ジヨードメチル−ｐ−トリルスルホンとを含み、フルオメツロン：ジヨードメチル−ｐ−トリルスルホンの重量比が１：１〜１：１０である、相乗的抗キャロスリックスパリエンティナ、スミレモまたはトレンテポーリアオダラタ組成物。
【請求項１５】
（ａ）フルオメツロンと、（ｂ）ジヨードメチル−ｐ−トリルスルホンとを含み、フルオメツロン：ジヨードメチル−ｐ−トリルスルホンの重量比が６：１、２：１または１：５〜１：１０である、相乗的抗クロレラ属、クロレラケスレリまたはイシクラゲ組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は２００９年８月５日に出願された米国仮特許出願第６１／２７３，５３０号および２０１０年５月５日に出願された米国仮特許出願第６１／３３１，４２３号の３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．１１９（ｅ）の下での優先権の利益を主張する。
本発明は殺生物剤の組み合わせに関し、この組み合わせは個々の抗微生物化合物について観察されるであろうよりも高い活性を有する。
【背景技術】
【０００２】
少なくとも２種類の抗微生物化合物の組み合わせの使用は潜在的な市場を広げることができ、使用濃度およびコストを低減させることができ、かつ廃棄物を低減させることができる。ある場合には、市販の抗微生物化合物は、ある種の微生物、例えば、いくつかの抗微生物化合物に耐性の微生物に対する弱い活性のせいで高い使用濃度でさえ微生物の効果的な制御を提供することができない。特定の最終使用環境における微生物の全体的な制御を提供するために、異なる抗微生物化合物の組み合わせが場合によっては使用される。例えば、米国特許第６，１９７，８０５号は３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマート（ＩＰＢＣ）と２−（メトキシカルボニルアミノ）ベンゾイミダゾールとの組み合わせを開示するが、この文献は本願で特許請求される組み合わせのいずれも示唆していない。さらに、特に乾燥膜コーティングにおける微生物の効果的な制御を提供するために、様々な株の微生物に対して向上した活性を有する抗微生物化合物のさらなる組み合わせについての必要性が存在している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】米国特許第６，１９７，８０５号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明によって取り組まれる課題は、抗微生物化合物のそのような追加の組み合わせを提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は（ａ）３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマートと、（ｂ）フルオメツロンとを含み、３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマート：フルオメツロンの重量比が１０：１〜１：１０である、相乗的抗微生物組成物に関する。
本発明は（ａ）３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマートと、（ｂ）フルオメツロンと、（ｃ）４，５−ジクロロ−２−ｎ−オクチル−４−イソチアゾリン−３−オン（ＤＣＯＩＴ）とを含み、３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマート：フルオメツロンの重量比が３：１〜１：２であり、並びに３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマート：４，５−ジクロロ−２−ｎ−オクチル−４−イソチアゾリン−３−オンの重量比が８：１〜４：１である、相乗的抗微生物組成物にさらに関する。
本発明は（ａ）３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマートと、（ｂ）フルオメツロンと、（ｃ）ジヨードメチル−ｐ−トリルスルホン（ＤＩＭＴＳ）とを含み、３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマート：フルオメツロンの重量比が３：１〜１：２であり、並びに３−ヨード−２−プロピニル−ブチルカルバマート：ジヨードメチル−ｐ−トリルスルホンの重量比が８：１〜４：１である、相乗的抗微生物組成物にさらに関する。
本発明は（ａ）フルオメツロンと、（ｂ）２−ｎ−オクチル−４−イソチアゾリン−３−オン（ＯＩＴ）とを含み、フルオメツロン：ＯＩＴの重量比が１：１〜１：２である、相乗的抗微生物組成物にさらに関する。
本発明は（ａ）フルオメツロンと、（ｂ）ピリチオン亜鉛（ＺＰＴ）とを含み、フルオメツロン：ＺＰＴの重量比が１０：１〜１：１５である、相乗的抗微生物組成物にさらに関する。
本発明は（ａ）フルオメツロンと、（ｂ）チアベンダゾール（ＴＢＺ）とを含み、フルオメツロン：ＴＢＺの重量比が１０：１〜１：１５である、相乗的抗微生物組成物にさらに関する。
本発明は（ａ）フルオメツロンと、（ｂ）ジヨードメチル−ｐ−トリルスルホン（ＤＭＩＴＳ）とを含み、フルオメツロン：ＤＭＩＴＳの重量比が１０：１〜１：１５である、相乗的抗微生物組成物にさらに関する。
【発明を実施するための形態】
【０００６】
本明細書において使用される場合、文脈が明らかに他のことを示さない限りは以下の用語は指定された定義を有する。フルオメツロンは１，１−ジメチル−３−（α，α，α−トリフルオロ−ｍ−トリル）ウレアである。用語「抗微生物化合物」とは、微生物の成長を阻止し、または成長を制御することができる化合物をいい；抗微生物化合物には、適用される用量レベル、システム条件および望まれる微生物制御の水準に応じて、殺バクテリア剤、静バクテリア剤、殺真菌剤、静真菌剤、殺藻剤および静藻剤が挙げられる。用語「微生物」には、例えば、真菌（例えば、酵母およびカビ）、バクテリアおよび藻類が挙げられる。以下の略語が本明細書を通して使用される：ｐｐｍ＝重量基準の１００万分率（重量／重量）、ｍＬ＝ミリリットル、ＡＴＣＣ＝アメリカンタイプカルチャーコレクション、およびＭＩＣ＝最小阻止濃度。他に特定されない限りは、温度は摂氏度（℃）であり、パーセンテージに関する言及は重量基準（重量％）である。本発明の組成物中の抗微生物化合物のパーセンテージは組成物中の活性成分の全重量、すなわち、溶媒、担体、分散剤、安定化剤もしくは存在しうる他の物質の量を除いた抗微生物化合物自体に基づく。
【０００７】
抗微生物組成物がＩＰＢＣおよびフルオメツロンを含む本発明のある実施形態においては、ＩＰＢＣ：フルオメツロンの重量比は８：１〜１：７、好ましくは６：１〜１：５、好ましくは５：１〜１：５、好ましくは６：１〜１：４、好ましくは５：１〜１：４、好ましくは４：１〜１：４、好ましくは５：１〜１：３、好ましくは４：１〜１：３である。
【０００８】
抗微生物組成物がＩＰＢＣ、フルオメツロンおよびＤＣＯＩＴを含む本発明のある実施形態においては、ＩＰＢＣ：フルオメツロンの重量比は２：１〜１：２、好ましくは３：１〜１：１、好ましくは２：１〜１：１であり、ＩＰＢＣ：ＤＣＯＩＴの重量比は７：１〜４：１、好ましくは８：１〜５：１、好ましくは７：１〜５：１、好ましくは６：１〜５：１である。
【０００９】
抗微生物組成物がＩＰＢＣ、フルオメツロンおよびＤＩＭＴＳを含む本発明のある実施形態においては、ＩＰＢＣ：ＤＩＭＴＳの重量比は２：１〜１：２、好ましくは３：１〜１：１、好ましくは２：１〜１：１であり、ＩＰＢＣ：ＤＩＭＴＳの重量比は７：１〜４：１、好ましくは８：１〜５：１、好ましくは７：１〜５：１、好ましくは６：１〜５：１である。
【００１０】
抗微生物組成物がフルオメツロンおよびＺＰＴを含む本発明のある実施形態においては、フルオメツロン：ＺＰＴの重量比は１０：１〜１：１２、好ましくは８：１〜１：１２、好ましくは１０：１〜１：１０、好ましくは８：１〜１：１０、好ましくは７：１〜１：１０、好ましくは６：１〜１：１０である。
【００１１】
抗微生物組成物がフルオメツロンおよびＴＢＺを含む本発明のある実施形態においては、フルオメツロン：ＴＢＺの重量比は１０：１〜１：１２、好ましくは８：１〜１：１２、好ましくは１０：１〜１：１０、好ましくは８：１〜１：１０、好ましくは７：１〜１：１０、好ましくは６：１〜１：１０である。
【００１２】
抗微生物組成物がフルオメツロンおよびＤＭＩＴＳを含む本発明のある実施形態においては、フルオメツロン：ＤＭＩＴＳの重量比は１０：１〜１：１２、好ましくは８：１〜１：１２、好ましくは１０：１〜１：１０、好ましくは８：１〜１：１０、好ましくは７：１〜１：１０、好ましくは６：１〜１：１０である。
【００１３】
本発明のある実施形態においては、本発明の抗微生物組み合わせは液体組成物、特に水性媒体中のポリマーの分散物に組み込まれる。殺生物剤の組み合わせは建築材料、例えば、接着剤、コーキング材、目地材、シーラント、ウォールボードなど、塗料、コーティング、ポリマー、プラスチック、合成および天然ゴム、紙製品、ガラス繊維シート、断熱材、外断熱仕上げシステム、屋根用および床用フェルト、建築用プラスター、木材製品および木材−プラスチック複合体の保存に特に有用である。本発明のある実施形態においては、抗微生物組成物は、本明細書に開示される殺生物剤の組み合わせを含むラテックス塗料もしくは他の液体コーティング組成物である。殺生物剤の組み合わせは塗料もしくは他の液体コーティング組成物の適用の後で得られる乾燥膜コーティングの保存に有用である。ある実施形態においては、抗微生物組成物は本明細書に開示された殺生物剤の組み合わせの１種以上を含むアクリルラテックス塗料、またはこの塗料を表面に適用して得られた乾燥膜コーティングである。
【００１４】
典型的には、微生物の成長を制御するための本発明の殺生物剤の組み合わせの量は１００ｐｐｍ〜１０，０００ｐｐｍ活性成分である。本発明のある実施形態においては、組成物の活性成分は、少なくとも３００ｐｐｍ、好ましくは少なくとも５００ｐｐｍ、好ましくは少なくとも６００ｐｐｍ、好ましくは少なくとも７００ｐｐｍの量で存在する。ある実施形態においては、組成物の活性成分は８，０００ｐｐｍ以下、好ましくは６，０００ｐｐｍ以下、好ましくは５，０００ｐｐｍ以下、好ましくは４，０００ｐｐｍ以下、好ましくは３，０００ｐｐｍ以下、好ましくは２，５００ｐｐｍ以下、好ましくは２，０００ｐｐｍ以下、好ましくは１，８００ｐｐｍ以下、好ましくは１，６００ｐｐｍ以下の量で存在する。上で言及された濃度は殺生物剤の組み合わせを含む液体組成物中のものであり、乾燥膜コーティングにおける殺生物剤の濃度はより高いであろう。
【００１５】
本発明は、特許請求の範囲に特定された殺生物剤の組み合わせのいずれかを建築材料、特に乾燥膜コーティングに組み込むことにより、建築材料、特に乾燥膜コーティングにおける微生物の成長を妨げるための方法も包含する。
【００１６】
フルオメツロンはＩＰＢＣ、ＤＣＯＩＴ、ＯＩＴ、ＺＰＴ、ＤＩＭＴＳおよびＴＢＺの１種より多くと一緒にされることができ、本明細書の他のところには開示されていない、相乗的３成分もしくはより多くの成分の組み合わせを生じさせることができる。
【実施例】
【００１７】
サンプル調製：殺生物剤を含まない白色アクリルラテックス塗料のサンプルが５０ｍｌの量で準備された。その塗料中で必要な活性成分濃度を生じさせる様に、それぞれの殺生物剤が後添加された。試験された殺生物剤合計濃度は７５０、１５００、２５００および５０００ｐｐｍであった。殺生物剤添加の後で、各サンプルは最低３０秒間、手作業で混合され、次いで３分間ペイントシェーカー（ＲＥＤ  ＤＥＶＩＬ）にかけられた。この塗料サンプルのそれぞれ、並びに対照サンプル（殺生物剤を含んでいない）が使用されて、３ｍｉｌのバードバーアプリケータを使用して黒色プラスチック−ビニルクロライド／アセタートコポリマーパネル（レネタ、ニュージャージー州モーウォー）上に膜を製造した。これらパネルは、太陽光への直接の曝露を避けつつ５日間完全に乾燥させられた。正方形のディスク（１５ｍｍ２）が各パネルから切り出されて、真菌および藻類有効性試験のための基材として使用された。このサンプルサイズは、このサンプルディスクが試験プレートのウェルに配置された場合の寒天境界を可能にした。
【００１８】
試験条件：微生物の成長をサポートするために、適切な培地（緑藻植物（Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｔｅｓ）についてＢＯＬＤの３Ｎ、シアノバクテリアについてはＢＧ−１１、および真菌についてはＰＤＡ）が使用された。試験プレートは、藻類については、室温（２５℃〜２６℃）で、サイクル化された明暗環境で３週間維持された。真菌有効性試験のためのプレートは３０℃で３週間維持された。インキュベーション期間の終わりに、サンプルは目に見える微生物の成長によって覆われた領域のパーセントについて集計された。
【００１９】
【表１】
0005514311.tif 000002
【００２０】
【表２】
0005514311.tif 000003
【００２１】
藻類有効性試験：改変されたＡＳＴＭ５５８９
ＡＳＴＭ５５８９は藻類汚損に対する様々なコーティング（塗料を含む）の抵抗性を決定するための標準加速試験方法である。高スループットスクリーニングを提供するために、この方法はペトリ皿から１２ウェルプレートにスケールダウンされた。滅菌鉗子を用いて１つの試験片が塗布面が上を向くように寒天プラグの中央（上に）に配置された。各ウェルには、表面（塗料膜およびそれを取り囲む寒天）全体が均一に覆われるのを確実にするように、１５０μｌの生物（１×１０８ｃｆｕ／ｍｌ）が接種された。このプレートは室温（２５℃〜２６℃）で明相（ＯＴＴ−Ｌｉｔｅモデル＃ＯＴＬ４０１２Ｐ、４０ワット、２６Ｋルーメン）および暗相への周期的な曝露を伴い、３週間にわたってインキュベートされた。各週の終わりに、覆われた領域のパーセントについて５％刻みで、覆われた合計領域が評価された。プレートを評定しつつ、阻止の区域について表記がなされた。
【００２２】
真菌有効性試験：改変されたＡＳＴＭ５５９０
ＡＳＴＭ５５９０は真菌汚損に対する様々なコーティング（塗料を含む）の抵抗性を決定するための標準加速試験方法である。高スループットスクリーニングを提供するために、この方法はペトリ皿から１２ウェルプレートにスケールダウンされた。試験をセットアップするために、寒天プラグが滅菌１２ウェルプレートの各ウェルの底に配置された。滅菌鉗子を用いて１つの試験片が塗布面が上を向くように寒天プラグの中央（上に）に配置された。各ウェルには、表面（塗料膜およびそれを取り囲む寒天）全体が均一に覆われるのを確実にするように、１５０μｌの生物（１×１０６ｃｆｕ／ｍｌ）が接種された。このプレートは水分の存在下で３０℃で３週間にわたってインキュベートされた。２週間後から各週の終わりに、覆われた合計領域パーセントが評価され、記録され、並びに５％刻みで記録された。
【００２３】
相乗効果指数（ＳＩ）
ＳＩは、Ｆ．Ｃ．Ｋｕｌｌらの方法（アプライドマイクロバイオロジー（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ）Ｖｏｌ．９（１９６１））に基づいて計算される。この検討においてＳＩは、試験された各微生物に対する個々の殺生物剤によって示される阻止パーセントに基づいて選択された最小阻止濃度で、以下の式に基づいて計算された。
ＳＩ＝Ｑａ／ＱＡ＋Ｑｂ／ＱＢ＋Ｑｃ／ＱＣ＋．．．．．
Ｑａ＝混合物中での殺生物剤Ａの濃度
ＱＡ＝この殺生物剤だけの場合の殺生物剤Ａの濃度
Ｑｂ＝混合物中での殺生物剤Ｂの濃度
ＱＢ＝この殺生物剤だけの場合の殺生物剤Ｂの濃度
Ｑｃ＝混合物中での殺生物剤Ｃの濃度
ＱＣ＝この殺生物剤だけの場合の殺生物剤Ｃの濃度
【００２４】
この式における１未満のＳＩ値は、混合された殺生物剤の相乗効果が存在することを示す。
【００２５】
実施例１
この試験は、ＩＰＢＣ：フルオメツロン（Ｆｌｕｏ）の重量比４：１〜１：１のＩＰＢＣとフルオメツロンとの混合物の性能を調査するために行われた。これら混合物は広いスペクトルの真菌および藻類に対して非常に良好な相乗効果を示した。試験されたそれぞれの混合物は、試験されたＩＰＢＣ：フルオメツロンの全ての比率で少なくとも１種の生物に対して相乗効果を示した。３週間の曝露後の結果は藻類については表１に、および真菌については表２に示される。
【００２６】
【表３】
0005514311.tif 000004
【００２７】
【表４】
0005514311.tif 000005
【００２８】
実施例２
この試験は、ＩＰＢＣ：フルオメツロン（Ｆｌｕｏ）の重量比１：２〜１：３のＩＰＢＣとフルオメツロンとの混合物の性能を調査するために行われた。これら混合物は広いスペクトルの真菌および藻類に対して非常に良好な相乗効果を示した。試験されたそれぞれの混合物は、試験されたＩＰＢＣ：フルオメツロンの全ての比率で少なくとも１種の生物に対して相乗効果を示した。３週間の曝露後の結果は藻類については表３に、および真菌については表４に示される。
【００２９】
【表５】
0005514311.tif 000006
【００３０】
【表６】
0005514311.tif 000007
【００３１】
実施例３：３成分殺生物剤混合物
表５および６に記載されるように、これら混合物も試験された各重量比で様々な生物に対して相乗効果を示した。
【００３２】
【表７】
0005514311.tif 000008
【００３３】
【表８】
0005514311.tif 000009
【００３４】
実施例４：さらなる殺生物剤混合物
生物およびその成長培地は前記実施例に示される通りである。
サンプル調製：殺生物剤を含まない白色アクリルラテックス塗料に、試験される最大合計活性成分濃度をもたらすように、殺生物剤の単一種もしくは混合物が後添加された。次いで、この塗料は殺生物剤を含まないアクリルラテックス塗料で、７５〜１２．５％ｗ／ｗの濃度範囲に希釈され、試験のための所望の濃度を得た。試験された殺生物剤混合物の種類に応じて、殺生物剤合計濃度は２００〜５０００ｐｐｍで変動する。殺生物剤添加もしくは希釈の後で、各サンプルは少なくとも１分間均一が達成されるまで手作業で混合された。この塗料サンプルのそれぞれ、並びに対照サンプル（殺生物剤を含んでいない）が使用されて、３ｍｉｌのバードバーアプリケータを使用して黒色プラスチック−ビニルクロライド／アセタートコポリマーパネル（レネタ、ニュージャージー州モーウォー）上に膜を製造した。これらパネルは、太陽光への直接の曝露を避けつつ少なくとも２日間完全に乾燥させられた。正方形のディスク（０．５インチ２、１３ｍｍ２）が各パネルから切り出されて、真菌および藻類有効性試験のための基材として使用された。このサンプルサイズは、このサンプルディスクが試験プレートのウェルに配置された場合の寒天境界を可能にした。それぞれのサンプルは二重に試験された。
【００３５】
試験条件：微生物の成長をサポートするために、適切な培地（緑藻植物（Ｃｈｌｏｒｏｐｈｙｔｅｓ）についてＢＯＬＤの３Ｎ、シアノバクテリアについてはＢＧ−１１、および真菌についてはＰＤＡ）が使用された。試験プレートは、藻類については、室温（２５℃〜２６℃）で、サイクル化された明暗環境で４週間維持された。真菌有効性試験のためのプレートは３０℃で４週間維持された。インキュベーション期間の終わりに、サンプルは目に見える微生物の成長によって覆われた領域のパーセントについて集計された。
【００３６】
藻類有効性試験：改変されたＡＳＴＭ５５８９
ＡＳＴＭ５５８９は藻類汚損に対する様々なコーティング（塗料を含む）の抵抗性を決定するための標準加速試験方法である。高スループットスクリーニングを提供するために、この方法はペトリ皿から６ウェルプレートにスケールダウンされた。滅菌鉗子を用いて１つの試験片が塗布面が上を向くように寒天プラグの中央（上に）に配置された。藻類接種物は等しい濃度（１×１０６ｃｆｕ／ｍｌ）で等しい体積（接種されるサンプルの数に応じて変化する）の同様に成長している生物を混合することにより準備された。この試験においては、グロエオカプサ（Ｇｌｏｅｏｃａｐｓａ）ｓｐ．およびユレモ属（Ｏｓｃｉｌｌａｔｏｒｉａ）ｓｐ．はＢＧ−１１培地で成長させられたシアノバクテリアの混合物であった。
クロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ）ｓｐ．、クロレラケスレリ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ  ｋｅｓｓｌｅｒｉ）およびイシクラゲ（Ｎｏｓｔｏｃ  ｃｏｍｍｕｎｅ）はＢｏｌｄ培地で成長させられ、混合された単細胞緑藻植物である。スミレモ（Ｔｒｅｎｔｅｐｏｈｌｉａ  ａｕｒｅａ）、トレンテポーリアオダラタ（Ｔｒｅｔｅｐｏｈｌｉａ  ｏｄｏｒａｔａ）およびキャロスリックスパリエンティナ（Ｃａｌｏｔｒｉｘ  ｐａｒｉｅｎｔｉｎａ）はＢｏｌｄ培地で成長させられ、混合された糸状藻類である。各ウェルには、表面（塗料膜およびそれを取り囲む寒天）全体が均一に覆われるのを確実にするように、４００μｌの生物混合物（１×１０６ｃｆｕ／ｍｌ）が接種された。このプレートは室温（２５℃〜２６℃）で明相（ＯＴＴ−Ｌｉｔｅモデル＃ＯＴＬ４０１２Ｐ、４０ワット、２６Ｋルーメン）および暗相への周期的な曝露を伴い、４週間にわたってインキュベートされた。各週の終わりに、覆われた領域のパーセントについて５％刻みで、覆われた合計領域が評価された。プレートを評定しつつ、阻止の区域について表記がなされた。
【００３７】
真菌有効性試験：改変されたＡＳＴＭ５５９０
ＡＳＴＭ５５９０は真菌汚損に対する様々なコーティング（塗料を含む）の抵抗性を決定するための標準加速試験方法である。高スループットスクリーニングを提供するために、この方法はペトリ皿から６ウェルプレートにスケールダウンされた。試験をセットアップするために、寒天プラグが滅菌６ウェルプレートの各ウェルの底に配置された。滅菌鉗子を用いて１つの試験片が塗布面が上を向くように寒天プラグの中央（上に）に配置された。真菌接種物は等しい濃度（約１×１０６ｃｆｕ／ｍｌ）かつ等しい体積（試験されるサンプルの数に応じて）の同様に成長している生物を混合することにより準備された。クラドスポリウムヘルバラム（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｈｅｒｂａｒｕｍ）がオーレオバシディウムプルランス（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）と混合された。アスペルギルスニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）がペニシリウムフニクロサム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｆｕｎｉｃｕｌｏｓｕｍ）と混合された。アルターナリアアルターナタ（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ａｌｔｅｒｎａｔａ）がトリコデルマビリデ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｖｉｒｉｄｅ）と混合された。各ウェルに４００μｌの生物混合物（約１×１０６ｃｆｕ／ｍｌ）が接種され、表面全体（塗料膜およびそれを取り囲む寒天）が均一に覆われたことを確実にした。このプレートは水分の存在下で３０℃で４週間にわたってインキュベートされた。２週間後から各週の終わりに、覆われた合計領域パーセントが評価され、記録され、並びに５％刻みで記録された。結果は以下の表７〜１１に示される。
【００３８】
【表９】
0005514311.tif 000010
注：真菌に対して試験されたフルオメツロンの最大濃度は５０００ｐｐｍであるので、この濃度は推定ＳＩを算出するために使用される。未満の印（＜）を用いることによる補正はＳＩ＜１のこの関連するデータに対してのみ含まれる。
ＮＥ＝試験された濃度での終点なし。
【００３９】
【表１０】
0005514311.tif 000011
【００４０】
【表１１】
0005514311.tif 000012
【００４１】
【表１２】
0005514311.tif 000013
【００４２】
【表１３】
0005514311.tif 000014