(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉによる複素環式誘導体
【化１】
0005455130.tif 000038
（式中、
Ｌは、（ＣＨ２）ｍであり、ここで、ｍは１または２であり；
Ｒ１は、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−５シクロアルキル、Ｃ１−４アルキルオキシ、ハロゲンまたはＣＮであり、前記Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−５シクロアルキルおよびＣ１−４アルキルオキシは１個以上のハロゲンで置換されていてもよく；
Ｒ２は、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−５シクロアルキルまたはＣ１−４アルキルオキシであり、前記Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−５シクロアルキルおよびＣ１−４アルキルオキシは、ＯＨ、Ｃ１−４アルキルオキシおよびＮＲ９Ｒ１０から選択される置換基で置換されており；
Ｘ１−Ｘ３は、独立して、ＮまたはＣＲ３であり、ここで、Ｒ３はＨまたはメチルであり；
Ｙ１は、ＮＲ４であり、ここで、Ｒ４はＨまたはＣ１−４アルキルであり；
Ｙ２は、ＣＲ５であり、ここで、Ｒ５は、Ｈ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−８シクロアルキルまたはＣ６−１０アリールであり；
Ｒ６は、Ｈ、Ｃ１−４アルキルまたはＣ３−５シクロアルキルであり；
Ｙ３は、Ｓであり；
Ｙ４は、Ｎであり；
Ｒ９およびＲ１０は、独立して、Ｈ、またはＯ、ＳおよびＮから選択される１−２個のヘテロ原子を含む５−９員ヘテロアリール環系で置換されていてもよいＣ１−４アルキルであり、またはＲ９およびＲ１０はこれらが結合しているＮと一緒になって、Ｏ、ＳおよびＮから選択される別のヘテロ原子を含んでいてもよい４−６員飽和もしくは不飽和複素環を形成する。）
または薬学的に許容されるこの塩もしくは溶媒和物。
【請求項２】
Ｒ１がＣＦ３である、請求項１に記載の複素環式誘導体。
【請求項３】
Ｒ２が、ヒドロキシまたはＮＲ９Ｒ１０で置換されていてもよいメチルである、請求項１または請求項２に記載の複素環式誘導体。
【請求項４】
Ｘ１およびＸ２がＮであり、ならびにＸ３がＣＨである、請求項１から３のいずれか一項に記載の複素環式誘導体。
【請求項５】
Ｙ１のＮＲ４において、Ｒ４がＨまたはメチルである、請求項１から４のいずれか一項に記載の複素環式誘導体。
【請求項６】
Ｙ２のＣＲ５において、Ｒ５がＨまたはメチルである、請求項１から５のいずれか一項に記載の複素環式誘導体。
【請求項７】
Ｒ６がＨまたはメチルである、請求項１から６のいずれか一項に記載の複素環式誘導体。
【請求項８】
ｍが１である、請求項１から７のいずれか一項に記載の複素環式誘導体。
【請求項９】
【化２】
0005455130.tif 000039
から選択される複素環式誘導体または薬学的に許容されるこの塩もしくは溶媒和物。
【請求項１０】
治療で使用される、請求項１から９のいずれか一項に記載の複素環式誘導体。
【請求項１１】
請求項１から９のいずれか一項に記載の複素環式誘導体を、１種以上の薬学的に許容される佐剤と混合して含む、医薬品組成物。
【請求項１２】
ＡＭＰＡ受容体によって媒介されるシナプス応答の増強が必要とされる、精神疾患の治療または予防に使用される、請求項１から９のいずれか一項に記載の複素環式誘導体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、複素環式誘導体、これらの化合物を含む医薬品組成物および治療におけるこれらの使用に関し、詳細には、統合失調症、うつ病、学習および記憶障害などの、ＡＭＰＡ受容体によって媒介されるシナプス応答の増強が必要とされる精神疾患の、治療用または予防用薬物を製造するためのこれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｌ−グルタミン酸は、哺乳動物の中枢神経系（ＣＮＳ）内に位置付けられた最も豊富な興奮性神経伝達物質である。Ｌ−グルタミン酸は、認知、気分および運動機能の制御において有意な役割を演じ、これらのプロセスは、精神および神経障害で不均衡である。グルタメートの生理学的効果は、２つの受容体ファミリー：代謝調節型（Ｇ−タンパク質結合）受容体およびイオンチャネル型（リガンド開口型イオンチャネル）受容体を通して媒介される。イオンチャネル型受容体は、細胞外Ｌ−グルタミン酸に対する高速シナプス応答の媒介に関与する。イオンチャネル型グルタミン酸受容体は、分子上のおよび薬学的な相違に基づいて３つのサブクラスに分類され、これらを選択的に活性化することが明らかにされていた小分子作動薬にちなんだ名称が付けられている：ＡＭＰＡ（α−アミノ−３−ヒドロキシ−５−メチル−４−イソオキサゾール−プロピオン酸）、ＮＭＤＡ（Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸）およびカイニン酸（２−カルボキシ−３−カルボキシメチル−４−イソプロペニルピロリジン）。脳生理学におけるＡＭＰＡ受容体の重要性は広く認識されており、ＡＭＰＡ受容体は、ＣＮＳ内で高速興奮性アミノ酸伝達の大部分を制御し、シナプス可塑性にも寄与して学習および記憶などの様々な生理学的プロセスで役割を演ずることも示されている。このため、統合失調症、うつ病およびアルツハイマー病を含めた様々な臨床的徴候に対するＡＭＰＡ受容体の正のアロステリック調節物質の有用性に関する評価が高まりつつある。
【０００３】
ＡＭＰＡ受容体サブユニットは、４種の異なる遺伝子（ＧｌｕＲ１から４と呼ぶ。）によってコードされ、それぞれは、約９００アミノ酸のタンパク質を表す。個々のサブユニットは、大型細胞外Ｎ−末端ドメイン、Ｓ１およびＳ２と命名されたドメインによって形成されたＬ−グルタミン酸に関する細胞外リガンド結合部位からなる。膜貫通ドメインは、リエントラントループＭ２と共に、３つの膜貫通領域、Ｍ１、Ｍ３およびＭ４からなる。次いでこの後に、長い細胞内Ｃ−末端ドメインが続く。４種のＡＭＰＡ受容体サブユニット全ては、Ｓ２細胞外ドメインにおいて３８アミノ酸コード化エキソンの交互スライシングが異なる（１０未満のアミノ酸が異なっている。）、いわゆる「フリップ」および「フロップ」スプライスバリアントを含有する。ＡＭＰＡ受容体のさらなる不均一性は、ＲＮＡ編集から生じ、ＧｌｕＲ２サブユニットのポア領域（Ｍ２）に位置付けられたＱ／Ｒ部位が、最も有意である。天然ＧｌｕＲ２サブユニットの大部分が含むと考えられるＲバリアントは、著しく低下したカルシウム透過性によって特徴付けられる。他のＲ／Ｇ編集部位は、ＧｌｕＲ２、ＧｌｕＲ３およびＧｌｕＲ４のＳ２ドメイン内に位置付けられ、Ｇ形態は、脱感作からの回復動態で加速を示す。
【０００４】
脱感作および非活性化の動態は、グルタミン酸に対するシナプス応答の大きさおよび持続時間を制御するＡＭＰＡ受容体の重要な機能的性質である。脱感作および非活性化のプロセスは、作動薬結合部位から離れて結合しているがそれでも作動薬結合に影響を及ぼす、ＡＭＰＡ受容体の正のアロステリック調節物質によって、または確かに、開口および／または脱感作に関連した受容体の作動薬媒介型構造変化によって、調節することができる。その結果、これらの性質を特異的に標的とし、グルタミン酸作動性シグナル伝達の低下に関連した広く様々なＣＮＳ障害の治療での治療可能性を有することになる、薬物を開発するために、引き続き努力がなされている。これらの状態は、加齢性記憶障害、アルツハイマー病、パーキンソン病、うつ病、精神病、精神病を伴う認知欠陥、注意欠陥障害および注意欠陥多動性障害を含む。
【０００５】
ＡＭＰＡ受容体調節物質として働く、化合物の様々な構造的クラスが公知である（最近の概説として、Ｇ．Ｌｙｎｃｈ、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、２００６年、６、８２−８８頁参照）。例えば、アニラセタムに関連したいわゆるベンズアミド化合物（Ａ．Ａｒａｉら、Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．、２００２年、３０、１０７５−１０８５頁参照）、Ｓ−１８６８９などのベンゾチアジアジン誘導体（Ｂ．Ｐｉｒｏｔｔｅ、Ｊ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９８年、４１、２９４６−２９５９頁参照）およびビアリールプロピルスルホンアミド誘導体（Ｐ．Ｌ．Ｏｒｎｓｔｅｉｎら、Ｊ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０００年、４３、４３５４−４３５８頁参照）が存在する。ＡＭＰＡ受容体調節物質の別のクラスは、グルタミン酸調節物質として有用であるとして様々な複素環式化合物について詳述する、国際特許出願ＷＯ２００５／０４０１１０およびＷＯ２００５／０７０９１６に開示された。これらのクラスのそれぞれの化合物は、ＡＭＰＡ受容体の様々な度合いの増強作用を示す。
【０００６】
しかし、持続型ＡＭＰＡ受容体活性化は、てんかん発作およびその他の痙攣促進副作用を伴う（Ｙａｍａｄａ  Ｋ．Ａ．、Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ  ２０００年、９、７６５−７７７頁）。その結果、有益な治療効果と望ましくない神経毒性作用との間が最適に切り離される、さらなるＡＭＰＡ受容体調節物質が、依然として求められている。
【０００７】
Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．、１９９９年、６４６頁は、軟体動物駆除および幼虫駆除活性を有する新規な置換チエノ［２，３−ｄ］ピリミジオン誘導体およびその縮合生成物の合成に関する。しかし、そのような化合物がＡＭＰＡ受容体調節物質として有用になり得ることは示唆されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第２００５／０４０１１０号
【特許文献２】国際公開第２００５／０７０９１６号
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｇ．Ｌｙｎｃｈ、Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、２００６年、６、８２−８８頁
【非特許文献２】Ａ．Ａｒａｉら、Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．、２００２年、３０、１０７５−１０８５頁
【非特許文献３】Ｂ．Ｐｉｒｏｔｔｅ、Ｊ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１９９８年、４１、２９４６−２９５９頁
【非特許文献４】Ｐ．Ｌ．Ｏｒｎｓｔｅｉｎら、Ｊ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０００年、４３、４３５４−４３５８
【非特許文献５】Ｙａｍａｄａ  Ｋ．Ａ．、Ｅｘｐ．Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｒｕｇｓ  ２０００年、９、７６５−７７７頁
【非特許文献６】Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．、１９９９年、６４６頁
【発明の概要】
【００１０】
（発明の要旨）
第１の態様において、本発明は、式Ｉによる複素環式誘導体
【００１１】
【化１】
0005455130.tif 000002
（式中、
Ｌは、（ＣＨ２）ｍであり、ここで、ｍは１または２であり；
Ｒ１は、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−５シクロアルキル、Ｃ１−４アルキルオキシ、ハロゲンまたはＣＮであり、前記Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−５シクロアルキルおよびＣ１−４アルキルオキシは１個以上のハロゲンで置換されていてもよく；
Ｒ２は、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−５シクロアルキルまたはＣ１−４アルキルオキシであり、前記Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−５シクロアルキルおよびＣ１−４アルキルオキシは、ＯＨ、Ｃ１−４アルキルオキシおよびＮＲ９Ｒ１０から選択される置換基で置換されており；
Ｘ１−Ｘ３は独立してＮまたはＣＲ３であり、ここで、Ｒ３はＨまたはメチルであり；
Ｙ１はＮＲ４またはＣＨＲ４であり、ここで、Ｒ４はＨまたはＣ１−４アルキルであり；
Ｙ２はＮまたはＣＲ５であり、ここで、Ｒ５は、Ｈ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−８シクロアルキルまたはＣ６−１０アリールであり；
Ｒ６は、Ｈ、Ｃ１−４アルキルまたはＣ３−５シクロアルキルであり；
Ｙ３は、Ｏ、ＳまたはＮＲ７であり、ここで、Ｒ７は、ＨまたはＣ１−４アルキルであり；
Ｙ４は、ＮまたはＣＲ８であり、ここで、Ｒ８は、ＨまたはＣ１−４アルキルであり；
Ｒ９およびＲ１０は独立して、Ｈ、またはＯ、ＳおよびＮから選択される１−２個のヘテロ原子を含む５−９員ヘテロアリール環系で置換されていてもよいＣ１−４アルキルであり、またはＲ９およびＲ１０はこれらが結合しているＮと一緒になって、Ｏ、ＳおよびＮから選択される別のヘテロ原子を含んでいてもよい４−６員飽和もしくは不飽和複素環を形成する。）
または薬学的に許容されるこの塩もしくは溶媒和物に関する。
【００１２】
本明細書で使用されるＣ１−４アルキルという用語は、１−４個の炭素原子を有する分岐状または非分岐状アルキル基を表す。そのような基の例は、メチル、エチル、イソプロピルおよび第３級ブチルである。
【００１３】
本明細書で使用されるＣ３−８シクロアルキルという用語は、３−８個の炭素原子を有する分岐状または非分岐状の環状アルキル基を表す。そのような基の例は、シクロプロピル、シクロペンチルおよび２−メチルシクロヘキシルである。同様に、本明細書で使用されるＣ３−５シクロアルキルという用語は、３−５個の炭素原子を有する分岐状または非分岐状の環状アルキル基を表す。そのような基の例は、シクロプロピルおよびシクロペンチルである。
【００１４】
本明細書で使用されるＣ１−４アルキルオキシという用語は、１−４個の炭素原子を有する分岐状または非分岐状のアルキルオキシ基を表す。そのような基の例は、メトキシ、エトキシ、イソプロピルオキシおよび第３級ブチルオキシである。
【００１５】
本明細書で使用されるＣ６−１０アリールという用語は、６−１０個の炭素原子を有し、１個の環または一緒に縮合した２個の環、即ちその少なくとも一方が芳香族でなければならない環を含む、芳香族基を表す。そのような基の例には、フェニエルおよびナフチルが含まれる。
【００１６】
本明細書で使用されるハロゲンという用語は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を表す。
【００１７】
Ｏ、ＳおよびＮから選択される１−２個のヘテロ原子を含む５から９員ヘテロアリール環系の例には、限定するものではないがフラン、ピロール、チオフェン、イミダゾール、ピラゾール、チアゾール、ピリジン、ピリミジン、インドール、インダゾールおよびベンズチオフェンが含まれる。
【００１８】
Ｏ、ＳおよびＮから選択される別のヘテロ原子を含んでいてもよい４から６員飽和または不飽和複素環の例には、限定するものではないがピロール、イミダゾール、ピラゾール、チアゾール、ピリジン、ピペリジン、モルホリンおよびテトラヒドロピリジンが含まれる。
【００１９】
本明細書で使用される溶媒和物という用語は、溶媒および溶質（本発明では、式Ｉの化合物）によって形成された可変化学量論の複合体を指す。そのような溶媒は、溶質の生物活性を妨げることはできない。適切な溶媒の例には、限定するものではないが水、エタノールおよび酢酸が含まれる。
【００２０】
本発明の一実施形態において、ＬはＣＨ２である。別の実施形態では、Ｌが（ＣＨ２）２である。
【００２１】
本発明のその他の実施形態において、Ｒ１は、Ｃ１−４アルキル、Ｃ１−４アルキルオキシ、ハロゲンまたはＣＮであり、前記Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−４アルキルオキシは、１つ以上のハロゲンで置換されていてもよい。その他の実施形態では、Ｒ１は、Ｃ１−４アルキルまたはＣＮであり、前記Ｃ１−４アルキルは、１−３個のハロゲンで置換されていてもよい。その他の実施形態では、Ｒ１が、イソプロピル、第３級ブチル、ＣＮまたはトリフルオロメチルである。その他の実施形態では、Ｒ１がトリフルオロメチルである。
【００２２】
本発明の別の実施形態において、Ｒ２は、ＯＨ、Ｃ１−４アルキルオキシおよびＮＲ９Ｒ１０から選択される置換基で置換されたＣ１−４アルキルである。その他の実施形態では、Ｒ２が、ヒドロキシ、Ｃ１−４アルキルオキシまたはＮＲ９Ｒ１０で置換されていてもよいメチルであり、ここで、Ｒ９およびＲ１０は、先に定義された意味を有する。その他の実施形態では、Ｒ２がヒドロキシメチルまたはＣＨ２ＮＲ９Ｒ１０である。
【００２３】
本発明の別の実施形態において、Ｘ１およびＸ２はＮであり、Ｘ３はＣＲ３であり、ここで、Ｒ３は、先に定義された意味を有する。その他の実施形態で、Ｘ１およびＸ２はＮであり、Ｘ３はＣＨである。
【００２４】
本発明の別の実施形態において、Ｘ１およびＸ３はＮであり、Ｘ２はＣＲ３であり、ここで、Ｒ３は、先に定義された意味を有する。
【００２５】
本発明の別の実施形態において、Ｘ１はＣＲ３であり、Ｘ２およびＸ３はＮであり、ここで、Ｒ３は、先に定義された意味を有する。
【００２６】
本発明の別の実施形態において、Ｒ３はＨまたはメチルである。その他の実施形態で、Ｒ３はＨである。
【００２７】
本発明の別の実施形態において、Ｙ１はＮＲ４であり、ここで、Ｒ４は、先に定義された意味を有する。
【００２８】
本発明の別の実施形態において、Ｙ２はＮである。その他の実施形態では、Ｙ２がＣＲ５であり、ここで、Ｒ５は、先に定義された意味を有する。
【００２９】
本発明の別の実施形態において、Ｙ３はＯまたはＳである。その他の実施形態では、Ｙ３がＳである。その他の実施形態では、Ｙ３がＣＲ７であり、ここで、Ｒ７は、先に定義された意味を有する。
【００３０】
本発明の別の実施形態において、Ｙ４はＮである。その他の実施形態では、Ｙ４がＣＲ８であり、ここで、Ｒ８は、先に定義された通りである。
【００３１】
本発明の別の実施形態において、Ｒ４はＨまたはＣ１−４アルキルである。別の実施形態では、Ｒ４がＨまたはメチルである。その他の実施形態では、Ｒ４がＨである。その他の実施形態では、Ｙ１がＮＲ４であり、ここで、Ｒ４はＨまたはメチルである。その他の実施形態では、Ｙ１がＮＲ４であり、ここで、Ｒ４はＨである。
【００３２】
本発明の別の実施形態において、Ｒ５はＨ、Ｃ１−４アルキル、Ｃ３−８シクロアルキルまたはＣ６−１０アリールである。その他の実施形態では、Ｒ５がＨ、メチルまたはフェニルである。その他の実施形態では、Ｒ５がＨまたはメチルである。その他の実施形態では、Ｙ２がＣＲ５であり、ここで、Ｒ５はＨまたはメチルである。
【００３３】
本発明の別の実施形態において、Ｒ６はＨまたはＣ１−４アルキルである。別の実施形態では、Ｒ６がＨまたはメチルである。
【００３４】
本発明の別の実施形態において、Ｒ７およびＲ８は独立して、Ｈまたはメチルである。その他の実施形態では、Ｒ７およびＲ８がＨである。
【００３５】
本発明の別の実施形態において、Ｒ９およびＲ１０は独立して、ＨまたはＣ１−４アルキルである。その他の実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は独立して、Ｈ、またはピロール、イミダゾール、チアゾール、ピリジン、インドールもしくはインダゾールで置換されたＣ１−４アルキルである。その他の実施形態では、Ｒ９およびＲ１０は独立して、Ｈ、またはピロール、イミダゾール、チアゾール、ピリジン、インドールもしくはインダゾールで置換されたメチルである。
【００３６】
本発明のその他の実施形態において、Ｒ９およびＲ１０は、これらが結合しているＮと一緒になって、ピペリジン、モルホリン、ピロールまたはイミダゾール環を形成する。
【００３７】
本発明のその他の実施形態は、式ＩＩによる複素環式誘導体である
【００３８】
【化２】
0005455130.tif 000003
（式中、Ｒ１−Ｒ６およびｍは、先に定義された意味を有する。）。
【００３９】
本発明のその他の実施形態は、式ＩＩＩによる複素環式誘導体である
【００４０】
【化３】
0005455130.tif 000004
（式中、Ｒ１−Ｒ６およびｍは、先に定義された意味を有する。）。
【００４１】
本発明のその他の実施形態は、式ＩＶによる複素環式誘導体である
【００４２】
【化４】
0005455130.tif 000005
（式中、Ｒ１−Ｒ６、Ｒ８およびｍは、先に定義された意味を有する。）。
【００４３】
本発明のその他の実施形態は、式Ｖによる複素環式誘導体である
【００４４】
【化５】
0005455130.tif 000006
（式中、Ｒ１−Ｒ６およびｍは、先に定義された意味を有する。）。
【００４５】
本発明の別の実施形態は、以下から選択される複素環式誘導体
【００４６】
【化６】
0005455130.tif 000007
0005455130.tif 000008
または薬学的に許容されるこの塩もしくは溶媒和物である。
【発明を実施するための形態】
【００４７】
本発明の複素環式誘導体は、有機化学の分野で周知の方法によって調製される。例えば、Ｊ．Ｍａｒｃｈ、「Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ」第４版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓを参照されたい。合成手順の間、関係ある分子のいずれかで感受性または反応性基を保護することが必要および／または望ましいと考えられる。これは、Ｔ．Ｗ．ＧｒｅｅｎｅおよびＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｔｓ「Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」第２版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ａｎｄ  Ｓｏｎｓ、１９９１年に記載されているように、従来の保護基を用いて実現される。保護基は、当技術分野で周知の方法を使用して、従来の後続の段階で、必要に応じて除去される。
【００４８】
一般式（Ｉ）の複素環式誘導体の合成は、以下のスキーム１−５で概説するように実現することができる。
【００４９】
（４）などの複素環式誘導体は、スキーム１に示されるように調製される。クロロアセトニトリルおよびＨＣｌガスを適切な溶媒中に、例えばジオキサンに溶かしたものを用いて、アミノチオフェン誘導体（１）を処理することにより、クロロメチル誘導体（２）が得られる。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなどの塩基を例えばテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）およびＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶かしたものの存在下での、クロロメチル誘導体（２）とピラゾール誘導体（３）とのさらなる反応によって、付加物（４）が得られる。
【００５０】
【化７】
0005455130.tif 000009
【００５１】
アミノチオフェン誘導体（１）およびピラゾール誘導体（３）は、供給業者から得られ、または当業者に公知の文献手順または文献手順の修正例によって調製される。例えば、スキーム２に概略的に示されるように、アミノチオフェン誘導体（１）は、ジエチルアミンまたはＮ−メチルモルホリンなどの有機塩基の存在下およびエタノールなどの適切な溶媒中での、エチル−２−シアノアセテート、ケトン（５）および硫黄の縮合によって調製される。
【００５２】
【化８】
0005455130.tif 000010
【００５３】
置換アゾール誘導体は、スキーム３に示されるように調製してもよい。例えばトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムおよび酢酸を、Ｎ−メチル−２−ピロリジノン（ＮＭＰ）などの適切な溶媒中に溶かしたものを使用した、アルデヒド（７）の還元的アミノ化は、アミン（８）をもたらす。あるいは、ジエチルエーテルなどの適切な溶媒中に溶かした適切なグリニャール試薬でアルデヒド（７）を処理することにより、ヒドロキシアルキル誘導体（９）が得られる。例えば、水素化ホウ素ナトリウムをジクロロメタンおよびエタノールなどの適切な溶媒中に溶かしたものを使用した、アルデヒド（７）の還元は、アルコール（１０）をもたらす。（１０）の複素環式コアは、水素化ナトリウムおよびヨードメタンをＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）などの適切な溶媒中に溶かしたもので処理することによって、さらに生成することができ、その結果、Ｎ−メチル類似体（１１）が得られる。
【００５４】
【化９】
0005455130.tif 000011
【００５５】
タイプ（１２）のアルデヒド誘導体は、スキーム４に示されるように調製してもよい。水素化アルミニウムリチウムなどの試薬をＴＨＦなどの適切な溶媒に溶かしたものによる、タイプ（１３）のエステルの還元は、アルコール（１４）をもたらす。次いで二酸化マンガンまたは同様の試薬を、例えばアセトニトリル中に溶かしたもので酸化を行うことにより、アルデヒド（１３）が得られる。同様に、適切なグリニャール試薬、例えば臭化メチルマグネシウムを、適切な溶媒中に、例えばＴＨＦ中に溶かしたものによるエステル（１３）の処理は、ジアルキルアルコール（１５）をもたらす。
【００５６】
【化１０】
0005455130.tif 000012
【００５７】
タイプ（１９）のアルキルアミン誘導体は、スキーム５に図示されるように調製することができる。適切な塩基、例えばカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドを、例えばＴＨＦに溶かしたものの存在下、アルコール（１６）でクロロメチル誘導体（２）を処理することにより、中間体（１７）が得られる。例えば、塩化メタンスルホニルを例えばピリジンに溶かしたものとの反応による、アルコールから適切な脱離基への変換の後、適切な塩基を適切な溶媒中に溶かしたものの存在下、例えばカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドをジメチルスルホキシドに溶かしたものの存在下で、アミンによる置換を行うことにより、所望のアルキルアミン誘導体（１９）が得られる。
【００５８】
【化１１】
0005455130.tif 000013
【００５９】
本発明は、その範囲内に、例えば立体配置または幾何異性によって得られる、本発明による複素環式誘導体の全ての立体異性体も含む。そのような立体異性体は、鏡像異性体、ジアステレオマー、シスおよびトランス異性体などである。例えば、Ｒ２が１−ヒドロキシエチルである場合、化合物は１対の鏡像異性体として存在する。式Ｉの複素環式誘導体またはこの塩もしくは溶媒和物の個々の立体異性体の場合、本発明は、その他の立体異性体を実質的に含まない、即ち５％未満、好ましくは２％未満、特に１％未満のその他の立体異性体が付随する、前述の立体異性体を含む。任意の割合にある立体異性体の混合物、例えば実質的に当量の２種の鏡像異性体を含むラセミ混合物も、本発明の範囲内に含まれる。
【００６０】
キラル化合物の場合、純粋な立体異性体が得られる不斉合成の方法、例えばキラル誘導による合成、キラル中間体から始まる合成、エナンチオ選択的酵素変換、キラル媒体でのクロマトグラフィを使用した立体異性体の分離は、当技術分野で周知である。そのような方法は、Ｃｈｉｒａｌｉｔｙ  Ｉｎ  Ｉｎｄｕｓｔｒｙ（Ａ．Ｎ．Ｃｏｌｌｉｎｓ、Ｇ．Ｎ．ＳｈｅｌｄｒａｋｅおよびＪ．Ｃｒｏｓｂｙ編、１９９２年；Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ）に記載されている。
【００６１】
本発明の複素環式誘導体は、遊離塩基の形にあり、薬学的に許容される塩として、反応混合物から単離される。これらの塩は、有機または無機酸で前記遊離塩基を処理することによっても得られる。そのような酸の例には、限定するものではないが塩化水素、臭化水素、ヨウ化水素、硫酸、リン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、マレイン酸、マロン酸、メタンスルホン酸、フマル酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸およびアスコルビン酸が含まれる。
【００６２】
本発明の複素環式誘導体は、非晶質形態としても存在する。多数の結晶質形態も可能である。これら物理的形態の全ても、本発明の範囲内に含まれる。
【００６３】
溶媒和物の調製は、一般に公知である。したがって例えば、Ｍ．Ｃａｉｒａら、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉ．、９３（３）、６０１−６１１頁（２００４年）は、抗真菌性フルコナゾールの酢酸エチル中ならびに水からの、溶媒和物の調製について記述している。溶媒和物、半溶媒和物および水和物などの同様の調製は、Ｅ．Ｃ．ｖａｎ  Ｔｏｎｄｅｒら、ＡＡＰＳ  ＰｈａｒｍＳｃｉＴｅｃｈ．、５（１）、ａｒｔｉｃｌｅ  １２（２００４年）；およびＡ．Ｌ．Ｂｉｎｇｈａｍら、Ｃｈｅｍ．Ｃｏｍｍｕｎ．、６０３−６０４頁（２００１年）に記述されている。典型的な、非限定的プロセスでは、本発明の化合物を、所望量の所望の溶媒（有機物または水またはこれらの混合物）に、周囲温度よりも高い温度で溶解し、この溶液を、結晶を形成するのに十分な速度で冷却し、次いでこの結晶を、標準的な方法によって単離することを含む。例えばＩ．Ｒ．分光法などの分析的技法は、溶媒和物（または水和物）として、結晶中に溶媒（または水）が存在することを示す。
【００６４】
本発明は、天然に通常見出される原子質量または質量数とは異なる原子質量または質量数を有する原子によって１個以上の原子が置換されている点以外は、本明細書に列挙されるものと同一である、本明細書に記述され特許請求の範囲に記載された化合物の同位体標識化合物も包含する。本発明の化合物に組み込むことができる同位体の例には、それぞれ２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、および３６Ｃｌなど、水素、炭素、窒素、酸素、リン、フッ素および塩素の同位体が含まれる。
【００６５】
式Ｉの、ある同位体標識化合物（例えば、３Ｈおよび１４Ｃで標識されたもの）は、化合物および／または基質組織分配アッセイで有用である。トリチウム標識（即ち、３Ｈ）および炭素−１４（即ち、１４Ｃ）同位体は、これらの調製および検出可能性を容易にするのに特に好ましい。さらに、重水素（即ち、２Ｈ）などのより重い同位体による置換は、より大きな代謝安定性から得られるある治療上の利点をもたらすことができ（例えば、インビボ半減期の延長または投薬要件の減少）、したがって、ある状況では好ましいと考えられる。式Ｉの同位体標識化合物は、一般に、スキームおよび／または以下に示す実施例に開示されるものと同様の手順に従って、適切な同位体標識試薬を非同位体標識試薬の代わりに用いることにより、調製することができる。
【００６６】
本発明の化合物のプロドラッグも、本発明の範囲内で企図される。プロドラッグは、対象に投与したときに代謝またはその他の化学的プロセスによって変換されて、式Ｉの複素環式誘導体またはこの溶媒和物もしくは塩をもたらす、薬物前駆体として働く化合物である。例えば、Ｘ１がＮＨである場合、窒素基は、例えば対象に投与したときにアミドまたはカルバメートが元の遊離ヒドロキシル基に変換されることになるので、キャップすることができる。プロドラッグに関する考察が、Ｔ．ＨｉｇｕｃｈｉおよびＶ．Ｓｔｅｌｌａ、Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（１９８７年）ｔｈｅ  Ａ．Ｃ．Ｓ．  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ第１４巻およびＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ、（１９８７年）Ｅｄｗａｒｄ  Ｂ．Ｒｏｃｈｅら、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓに示されている。プロドラッグの使用に関する考察は、Ｔ．ＨｉｇｕｃｈｉおよびＷ．Ｓｔｅｌｌａ、「Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ」、ｔｈｅ  Ａ．Ｃ．Ｓ．  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ第１４巻およびＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ、Ｅｄｗａｒｄ  Ｂ．Ｒｏｃｈｅ編、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ、１９８７年によって示されている。
【００６７】
他の態様において、本発明の複素環式誘導体および薬学的に許容される塩および溶媒和物は、治療に有用である。したがって本発明の複素環式誘導体は、ＡＭＰＡ受容体によって媒介されるシナプス応答の増強が必要とされる、精神疾患を治療しまたは予防するための薬物の製造に、有用である。特に、複素環式誘導体は、神経変性障害、認知または記憶障害、記憶および学習障害、注意障害、外傷、卒中、癲癇、アルツハイマー病、うつ病、統合失調症、精神病性障害、不安症、自閉症、神経症用薬剤から生ずる障害もしくは疾患、物質乱用、アルコール性精神障害、パーキンソン病、睡眠障害もしくはナルコレプシー、または断眠から生ずるその他の障害を治療する薬物の製造に有用である。本発明はさらに、前述の疾患または障害のいずれかの治療で使用される、複素環式誘導体を含む。
【００６８】
本発明はさらに、本発明による複素環式誘導体または薬学的に許容されるこの塩もしくは溶媒和物の有効量を、その必要がある対象に投与するステップを含む、うつ病または前述の障害のいずれかに罹患しておりまたは罹患し易いヒトを含めた哺乳動物を治療するための方法を含む。有効量または治療上有効な量とは、上述の疾患を阻害するのに有効な、したがって所望の治療的な、寛解性の、阻害的なまたは予防的な効果をもたらすのに有効な、本発明の化合物または組成物の量を意味する。
【００６９】
治療効果を発揮することが求められる、本明細書で活性成分とも呼ばれる本発明の複素環式誘導体または薬学的に許容されるこの塩もしくは溶媒和物の量は、当然ながら、特定の化合物、投与経路、レシピエントの年齢および状態、治療がなされる特定の障害または疾患に応じて変わることになる。
【００７０】
上述の障害のいずれかに関して適切な一日量は、１日当たり、レシピエント（例えば、ヒト）の体重ｋｇ当たり０．００１から５０ｍｇの範囲内にあり、好ましくは１日当たり、体重ｋｇ当たり０．０１から２０ｍｇの範囲内にある。所望の用量は、１日の全体を通して適切な間隔を空けて投与される、多数回に分けたサブ用量として提示してもよい。
【００７１】
活性成分を単独で投与することが可能であるが、活性成分は、医薬品組成物として提示することが好ましい。したがって、本発明は、本発明による複素環式誘導体を、Ｇｅｎｎａｒｏら、Ｒｅｍｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ、Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ、２０００年；（特に第５部：ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ参照）に記載されているような、１種以上の薬学的に許容される添加物と混合して含む、医薬品組成物も提供する。「許容される」という用語は、組成物のその他の成分に対して適合性があり、そのレシピエントに有害ではないことを意味する。適切な添加物は、例えば、Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ、第２版；Ａ．ＷａｄｅおよびＰ．Ｊ．Ｗｅｌｌｅｒ編、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ、Ｌｏｎｄｏｎ、１９９４年に記載されている。組成物は、経口、経鼻、局所（経頬、舌下および経皮を含む。）、非経口（皮下、静脈内および筋肉内を含む。）または経直腸投与に適切なものを含む。
【００７２】
本発明による複素環式誘導体および１種以上の薬学的に許容される１種以上の添加物の混合物は、錠剤などの固体投薬単位に圧縮されていてもよく、またはカプセルもしくは坐剤に加工されていてもよい。薬学的に適切な液体を用いることによって、化合物は、溶液、懸濁液、エマルジョンの形をとる注射製剤として、またはスプレーとして、例えば鼻もしくはバッカルスプレーとして施用することもできる。投薬単位、例えば錠剤を作製する場合、充填剤、着色剤およびポリマー結合剤などの従来の添加剤の使用が考えられる。一般に、任意の薬学的に許容される添加剤を、使用することができる。本発明の化合物は、インプラント、パッチ、ゲルまたは即時および／または持続放出のための任意のその他の製剤で使用するのに適切である。
【００７３】
一緒に医薬品組成物を調製することができ投与することができる適切な充填剤には、ラクトース、デンプン、セルロースおよびこれらの誘導体などが含まれ、またはこれらが適切な量で使用される混合物が含まれる。非経口投与の場合、プロピレングリコールやブチレングリコールなど、薬学的に許容される分散剤および／または湿潤剤を含有する水性懸濁液、等張性生理食塩液および滅菌注射液を使用してもよい。
【００７４】
本発明はさらに、前述の医薬品組成物を、前記組成物に適切な包装材料と併せて含み、前記包装材料は、前述のように使用される組成物を使用するための、取扱説明書を含んでいる。
【００７５】
本発明は、その範囲を限定するものではない以下の実施例によって、さらに例示される。
【実施例１】
【００７６】
６−メチル−２−（（４−（（チアゾール−２−イルメチルアミノ）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【００７７】
ａ）（３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メタノール
【００７８】
【化１２】
0005455130.tif 000014
エチル３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレート（９５．００ｇ、０．４５６モル）を乾燥ＴＨＦ（１Ｌ）中に溶解し、得られた溶液をアセトン／氷浴中で冷却した。ＬｉＡｌＨ４のＴＨＦ（５５０ｍＬ、０．５５０モル）中１Ｍ溶液を温度＜１０℃を保持しながら３０分間かけて添加した。次いで冷却を止め、反応混合物をＲＴで４時間撹拌した。反応混合物を再び冷却し、１：１のＴＨＦ：水の溶液（２５０ｍＬ）を冷却しながら（温度＜２０℃を維持）添加し、その後、５Ｍ  ＨＣｌ（１６０ｍＬ）を添加して、中性／ｐＨ６にした。ＥｔＯＡｃ（１．５Ｌ）を添加し、この混合物を３０分間撹拌し、次いで一晩静置した。得られた灰色の顆粒状固体を、ジカライトに通して濾過することにより除去し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。合わせた濾液をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、その後、真空濃縮することにより、白色固体（７６．００ｇ、０．４５７モル、１００％）が得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＯＤ）：δ４．６１（ｓ、２Ｈ）、７．７５（ｓ、１Ｈ）
【００７９】
ｂ）３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド
【００８０】
【化１３】
0005455130.tif 000015
（３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メタノール（５４．００ｇ、０．３２５モル）をトルエン（２Ｌ）中に懸濁した。ＭｎＯ２（１１３．００ｇ、１．３０モル）および４Åモレキュラーシーブ粉末（５４．００ｇ）を添加した。反応混合物を、ディーンスタークトラップを用い、窒素中、還流下で５．５時間撹拌した。得られた混合物を高温で濾過し、ケークを冷ました後に、１：１のＤＣＭ：ＭｅＯＨ溶液で洗浄した（３×５００ｍＬ）。合わせた濾液を真空濃縮することにより、所望の生成物（５４．００ｇ、０．３２９モル、１００％）が得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）：δ８．７２（ｓ、１Ｈ）、９．９１（ｓ、１Ｈ）
【００８１】
ｃ）エチル２−アミノ−５−メチルチオフェン−３−カルボキシレート
【００８２】
【化１４】
0005455130.tif 000016
プロピオンアルデヒド（２９．００ｇ、０．４９９モル）、エチル−２−シアノアセテート（５６．５０ｇ、０．４９９モル）および硫黄（１５．９８ｇ、０．４９９モル）をエタノール（２７５ｍＬ）中に混合した撹拌混合物を、３０分間にわたり６５℃に加熱し、それと共にジエチルアミン（３６．５０ｇ、０．４９９モル）を１滴ずつ添加した。この混合物を、６５℃で１８時間撹拌し、次いで真空濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィ−シリカゲルによる精製および１０％ＥｔＯＡｃ：イソヘキサンでの溶離によって、所望の生成物が黄色の油（６９．００ｇ、０．３７２モル、７５％）として得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ  １８６［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８３】
ｄ）２−（クロロメチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン
【００８４】
【化１５】
0005455130.tif 000017
ＨＣｌガスを、エチル２−アミノ−５−メチルチオフェン−３−カルボキシレート（６９．００ｇ、０．３７２モル）およびクロロアセトニトリル（３３．７０ｇ、０．４４７モル）をジオキサン（６００ｍＬ）に混合した撹拌混合物中に、６時間バブリングした。次いで混合物を、約１００ｍＬの体積に真空濃縮して、水（１Ｌ）中に注ぎ、混合物をＮＨ４ＯＨで塩基性化した。濾過および炉内乾燥により、灰色の固体（約６０ｇ）が得られた。粗製材料をジオキサン（１Ｌ）中に懸濁し、２時間加熱還流し、その後、真空濃縮した。この結果、標題の化合物が灰色の固体（５７．８８ｇ、０．２７０モル、７２％）として得られた。
ＭＳ（ＥＳ１）：２１６ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【００８５】
ｅ）１−（（６−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド。
【００８６】
【化１６】
0005455130.tif 000018
３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（３．８２ｇ、２３．３ｍｍｏｌ）および２−（クロロメチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−（３Ｈ）−オン（５．００ｇ、２３．３ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ：ＤＭＦ（１８０ｍＬ：２０ｍＬ）中に懸濁し、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（５．２３ｇ、４６．６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物をＲＴで１８時間撹拌した。次いでこの混合物をＥｔＯＡｃ（５００ｍＬ）で希釈し、水（２００ｍＬ）と共に振盪させた。分離した水相を希ＨＣｌ溶液でｐＨ５に酸性化し、有機層と共に再度振盪させた。次いで分離した有機物をブラインで洗浄し（２×２００ｍＬ）、ＭｇＳＯ４で乾燥し、その後、真空濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィ−シリカゲルによる精製および５０％イソヘキサン：ＥｔＯＡｃ、次いでＥｔＯＡｃによる溶離によって、所望の生成物が薄黄色の固体（４．６５ｇ、１３．６ｍｍｏｌ、５８％）として得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：３４１ｍ／ｚ［Ｍ−Ｈ］−。
【００８７】
ｆ）６−メチル−２−（（４−（（チアゾール−２−イルメチルアミノ）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【００８８】
【化１７】
0005455130.tif 000019
１−（（６−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（０．５５ｇ、１．６２ｍｍｏｌ）およびチアゾール−２−イルメタナミン（９２５ｍｇ、８．１０ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１１ｍＬ）に混合した混合物を、酢酸（１ｍＬ）でｐＨ５に酸性化し、その後、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（１．７２ｇ、８．１０ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物をＲＴで一晩撹拌した。反応混合物をＭｅＯＨでクエンチ処理し、ＳＣＸカラムに通し、ＭｅＯＨ中に溶かした２ＭのＮＨ３で溶離した。サンプルを真空濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィ−シリカゲルによる精製および３−５％ＭｅＯＨ：ＤＣＭでの溶離（リットル当たりＤＩＰＥＡが３滴）の後、２回目のフラッシュカラムおよび３−４％ＭｅＯＨ：ＤＣＭでの溶離（リットル当たりＤＩＰＥＡが３滴）によって、標題の生成物が白色固体（１７２ｍｇ、０．３９１ｍｍｏｌ、２４％）として得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：４４１ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【実施例２】
【００８９】
２−（（４−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【００９０】
ａ）２−（３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）プロパン−２−オール
【００９１】
【化１８】
0005455130.tif 000020
エチル３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルボキシレート（６４９ｍｇ、３．１２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（６．５０ｍＬ）中に溶かした撹拌溶液に、その温度が０℃以下に維持されるように、臭化メチルマグネシウム（２．５７ｇ、２１．５ｍｍｏｌ）を１５分間にわたり１滴ずつ添加した。反応混合物を一晩撹拌し、ＲＴにした。この段階での分析は、未反応の出発物質が存在することを示した。反応混合物をもう一度＜１０℃に冷却し、さらに臭化メチルマグネシウム（２．５７ｇ、２１．５ｍｍｏｌ）を１５分間にわたり１滴ずつ添加し、得られた白色懸濁液をさらに２４時間撹拌した。反応混合物を−５℃に冷却し、飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液でクエンチ処理した。混合物を真空濃縮し、残留物をジエチルエーテルと水との間で分配した。有機層を分離し、飽和ブラインで洗浄し（×２）、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮することにより、粗製生成物が黄色の油として得られ、これを静置して一部を凝固した。フラッシュカラムクロマトグラフィ−シリカゲルによる精製および４０％ＥｔＯＡｃ：イソヘキサンでの溶離によって、標題の生成物が白色固体（４１７ｍｇ、２．１４９ｍｍｏｌ、６９％）として得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：１９３ｍ／ｚ［Ｍ−Ｈ］−。
【００９２】
ｂ）２−（（４−（２−ヒドロキシプロパン−２−イル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メトキシ）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【００９３】
【化１９】
0005455130.tif 000021
２−（３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）プロパン−２−オール（７３ｍｇ、０．３７６ｍｍｏｌ）およびカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１２７ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（２ｍＬ）に混合した混合物を、約２分間撹拌した。この混合物に、２−（クロロメチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン（８１ｍｇ、０．３７６ｍｍｏｌ）を添加し、得られた混合物を１８時間撹拌した。得られた混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液でクエンチ処理し、真空濃縮した。残留物をＤＣＭと水との間で分配し、有機層を分離した。水層をさらにＤＣＭで抽出し、合わせた有機物を飽和ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮することにより、薄黄色のガムが得られた。ガムを分取ＬＣＭＳで精製することにより、生成物が白色固体（５ｍｇ、０．０１４ｍｍｏｌ、４％）として得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：３７１ｍ／ｚ［Ｍ−Ｈ］−。
【実施例３】
【００９４】
２−（（４−（２−ヒドロキシエチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【００９５】
【化２０】
0005455130.tif 000022
２−（３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）エタノール（５０ｍｇ、０．２７８ｍｍｏｌ）、２−（クロロメチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン（６０ｍｇ、０．２７８ｍｍｏｌ）およびカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（６２ｍｇ、０．０７ｍＬ、０．５５５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３ｍＬ）に混合した混合物を、７５℃に４時間加熱した。反応混合物をＲＴまで冷まし、その後、濾過し、真空濃縮した。残留物を分取逆相ＨＰＬＣで精製することにより、標題の化合物が白色固体（３２ｍｇ、０．０８９ｍｍｏｌ、３２％）として得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：３５９ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【実施例４】
【００９６】
２−（（４−（１−ヒドロキシエチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【００９７】
【化２１】
0005455130.tif 000023
１−（（６−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（１００ｍｇ、０．２９２ｍｍｏｌ）をジエチルエーテル（１０ｍＬ）中に溶解し、ドライアイス／アセトン浴で−７８℃に冷却した。反応は、窒素雰囲気中で行った。臭化メチルマグネシウム（３５ｍｇ、０．２９２ｍｍｏｌ）を１滴ずつ添加し、反応混合物をそのままＲＴに温め、２時間撹拌した。水を添加し、反応混合物をＥｔＯＡｃ中に抽出した（×３）。合わせたＥｔＯＡｃ層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。分取逆相ＨＰＬＣで精製することにより、標題の生成物（８ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ、８％）が得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：３５９ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【実施例５】
【００９８】
２−（（４−（ヒドロキシメチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【００９９】
【化２２】
0005455130.tif 000024
１−（（６−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（１００ｍｇ、０．２９２ｍｍｏｌ）を１：１のＤＣＭ：ＭｅＯＨ溶液（２ｍＬ）中に溶解し、水素化ホウ素ナトリウム（３３ｍｇ、０．８７６ｍｍｏｌ）を添加した。３０分後、混合物を、水（１ｍＬ）を添加することによってクエンチ処理し、次いで真空濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィ−シリカゲルによる精製および３％ＭｅＯＨ：ＤＣＭでの溶離によって、白色固体が得られ、これをイソプロパノールから再結晶し、凍結乾燥することによって、標題の化合物が白色固体（２８ｍｇ、０．０８１ｍｍｏｌ、２８％）として得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：３４３ｍ／ｚ［Ｍ−Ｈ］−。
【実施例６】
【０１００】
２−（（４−（ヒドロキシメチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−３，６−ジメチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【０１０１】
【化２３】
0005455130.tif 000025
２−（（４−（ヒドロキシメチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−（３Ｈ）−オン（２４０ｍｇ、０．６９７ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）中に溶解した。ＮａＨ（１７ｍｇ、０．７０８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を６０℃で１時間加熱し、次いでＲＴまで冷まし、その後、さらに氷／塩浴で０℃に冷却した。ヨードメタン（１．１４ｇ、０．５０ｍＬ、８．０３ｍｍｏｌ）を一度に添加し、反応混合物をＲＴで１時間撹拌し、次いでそのままＲＴに温め、その後、一晩静置した。反応混合物を２Ｍ  ＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃ中に抽出した（×３）。ＥｔＯＡｃをブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。分取逆相ＨＰＬＣでの精製によって、標題の生成物が白色固体（７６ｍｇ、０．２１３ｍｍｏｌ、３１％）として得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：３５９ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【実施例７】
【０１０２】
６−メチル−２−（（４−（（ピリジン−３−イルメチルアミノ）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【０１０３】
【化２４】
0005455130.tif 000026
３−（アミノメチル）ピリジン（４７ｍｇ、０．４３８ｍｍｏｌ）および１−（（６−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（３０ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）をＮＭＰ（３ｍＬ）に溶かした溶液を、１０％ＡｃＯＨをＮＭＰ（２００μｌ）に溶かしたものと一緒に、３０分間振盪し、その後、トリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウム（９３ｍｇ、０．４３８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を一晩振盪させた。混合物を、１：１のＡｃＯＨ：ＭｅＯＨ（２００μｌ）を添加することによってクエンチ処理し、コットンウールに通して濾過し、分取ＬＣＭＳによって精製した。次いで同じサンプルをＳＣＸカートリッジ内に流下させ、７ＭのＮＨ３をＭｅＯＨ（５ｍＬ）に溶かしたもので溶離することにより、標題の生成物が白色固体（２７ｍｇ、０．０６３ｍｍｏｌ、１２％）として得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：４３５ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【実施例８】
【０１０４】
６−メチル−２−（（４−（（チアゾール−５−イルメチルアミノ）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）チエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【０１０５】
【化２５】
0005455130.tif 000027
実施例７と同様の手法で、チアゾール−５−イル−メチルアミン塩酸塩（５０ｍｇ、０．４３８ｍｍｏｌ）を３−（アミノメチル）ピリジンの代わりに使用することにより、標題の化合物（７ｍｇ、０．０１５ｍｍｏｌ、１７％）が得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：４４１ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【実施例９】
【０１０６】
２−（（４−（（（１Ｈ−ベンゾ［ｄ］イミダゾール−２−イル）メチルアミノ）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【０１０７】
【化２６】
0005455130.tif 000028
実施例７と同様の手法で、２−（アミノメチル）ベンズイミダゾール二塩酸塩水和物（６５ｍｇ、０．４３８ｍｍｏｌ）を３−（アミノメチル）ピリジンの代わりに使用することにより、標題の化合物（１０ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ、２４％）が得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：４７４ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【実施例１０】
【０１０８】
２−（（４−（（（１Ｈ−イミダゾール−２−イル）メチルアミノ）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【０１０９】
【化２７】
0005455130.tif 000029
実施例７と同様の手法で、１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルアミン（５０ｍｇ、０．５１１ｍｍｏｌ）を３−（アミノメチル）ピリジンの代わりに使用することにより、標題の化合物（８ｍｇ、０．０１９ｍｍｏｌ、１８％）が得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：４２４ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【実施例１１】
【０１１０】
２−（（４−（ヒドロキシメチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−６−メチル−５−フェニルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【０１１１】
ａ）１−（（６−メチル−４−オキソ−５−フェニル−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド。
【０１１２】
【化２８】
0005455130.tif 000030
３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（１００ｍｇ、０．６０９ｍｍｏｌ）およびカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１３７ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（３ｍＬ）中に懸濁した撹拌懸濁液に、２−（クロロメチル）−６−メチル−５−フェニルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン（１７７ｍｇ、０．６０９ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液をＲＴで２日間撹拌した。反応混合物を水でクエンチ処理し、真空濃縮することにより、粗製生成物がベージュ色の固体（９７ｍｇ、０．２３２ｍｍｏｌ、３８％）として得られた。この材料を、さらに精製することなく使用した。
【０１１３】
ｂ）２−（（４−（ヒドロキシメチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−６−メチル−５−フェニルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【０１１４】
【化２９】
0005455130.tif 000031
１−（（６−メチル−４−オキソ−５−フェニル−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（９７ｍｇ、０．２３２ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（２ｍＬ）およびＭｅＯＨ（２ｍＬ）中に溶かした撹拌溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（２６ｍｇ、０．６９６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を一晩撹拌した。水素化ホウ素ナトリウム（５３ｍｇ、１．３９ｍｍｏｌ）を添加し、混合物をさらに２０時間撹拌した。反応混合物を水でクエンチ処理し、真空濃縮した。残留物を１：１のＤＭＳＯ：ＭｅＣＮに吸収させ、濾過し、分取ＬＣＭＳで精製することにより、標題の生成物が白色固体（１０ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ、１０％）として得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：４２１ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【実施例１２】
【０１１５】
２−（（４−（２−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【０１１６】
ａ）２−（１−（（６−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メタンスルホネート
【０１１７】
【化３０】
0005455130.tif 000032
２−（（４−（２−ヒドロキシエチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン（１．９９ｇ、５．５５ｍｍｏｌ）を、ピリジン（０．４４ｇ、２０ｍＬ、５．５５ｍｍｏｌ）中に完全に溶解し、アセトン／塩化ナトリウム／氷浴中で冷却した。内部温度を−１０℃で維持した。塩化メシル（２．０７ｇ、１．４０ｍＬ、１８．１ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加し、温度を発熱させて０℃にした。混合物を、０℃で１時間撹拌し、脱イオン水を、固体が析出するまで添加した。反応混合物を濾過し、水で洗浄し、真空濃縮することにより、標題の化合物が薄黄色の固体（２．１１ｇ、４．８３ｍｍｏｌ、８７％）として得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：４３７ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１１８】
ｂ）２−（（４−（２−（１Ｈ−イミダゾール−１−イル）エチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン
【０１１９】
【化３１】
0005455130.tif 000033
２−（１−（（６−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）エチルメタンスルホネート（１５０ｍｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）、１Ｈ−イミダゾール（２３ｍｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）およびカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（１１６ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）を、ＤＭＳ（３ｍＬ）中に溶解し、得られた混合物を、マイクロ波照射によって３０分間７０℃に加熱した。粗製混合物のＬＣＭＳ分析は、不完全な反応であることを示し、したがって混合物を、マイクロ波照射によって１時間１００℃に加熱した。混合物を濾過し、分取ＬＣＭＳによって精製した。次いでサンプルをＳＣＸカートリッジ内で流下させ、２ＭのＮＨ３をＭｅＯＨに溶かしたもので溶離することによって、標題の生成物（１５ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ、１１％）が得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：４０９ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【実施例１３】
【０１２０】
Ｎ−（（１−（（６−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル）アセトアミド。
【０１２１】
ａ）２−（（４−（アミノメチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【０１２２】
【化３２】
0005455130.tif 000034
１−（（６−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−（トリフルオロエチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−カルバルデヒド（２．９２ｍｍｏｌ、１ｇ）およびヒドロキシアルキルアミン塩酸塩（３．２１ｍｍｏｌ、０．２２３ｇ）のエタノール（７ｍＬ）中溶液を、８０℃に加熱し、この温度を３時間維持した。反応混合物を室温に冷まし、エーテルおよびヘプタンで希釈し、その後、得られた沈殿物を濾過によって収集した。得られた固体を酢酸（５ｍＬ）および亜鉛（７．７９ｍｍｏｌ、０．５１０ｇ）に吸収させ、その全体を、超音波によって時々撹拌しながら、室温で３日間撹拌した。反応混合物をセライトに通して濾過し、パッドをＭｅＯＨで洗浄し、その後、濾液を減圧下で濃縮した。残留物をＭｅＯＨ中に溶解し、同じ溶媒で平衡にしたＳＣＸカートリッジに適用し、その後、２Ｎ  ＮＨ３／ＭｅＯＨで溶離することにより、薄黄色の固体（２７１ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ、５０．６％）が得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：３４４ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【０１２３】
ｂ）Ｎ−（（１−（（６−メチル−４−オキソ−３，４−ジヒドロチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−２−イル）メチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−４−イル）メチル）アセトアミド。
【０１２４】
【化３３】
0005455130.tif 000035
２−（（４−（アミノメチル）−３−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピラゾール−１−イル）メチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン（０．０８７ｍｍｏｌ、３０ｍｇ）およびＤＩＰＥＡ（０．１７５ｍｍｏｌ、０．０２９ｍｌ、２２．５９ｍｇ）のＤＣＭ（１ｍＬ）中溶液に、塩化アセチル（０．１７５ｍｍｏｌ、０．０１２ｍｌ、１３．７２ｍｇ）を添加した。その全体を室温で一晩撹拌し、その後、反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物を逆相ＨＰＬＣで精製することによって、白色固体（８．７ｍｇ、２３ｍｍｏｌ、２５．８％）が得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：３８６ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋。
【実施例１４】
【０１２５】
２−（（３−（ヒドロキシメチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）メチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【０１２６】
ａ）メチル−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボキシレート
【０１２７】
【化３４】
0005455130.tif 000036
５０ｍＬの丸底フラスコに、水素化ナトリウム（３．２４ｍｍｏｌ、７８ｍｇ）をＥｔ２Ｏ（５ｍＬ）を溶かしたものを添加した。ｐ−トルエンスルホニルメチルイソシアニド（３．２４ｍｍｏｌ、６３４ｍｇ）および（Ｅ）−メチル−４，４，４−トリフルオロメチルブト−２−エノエート（３．２４ｍｍｏｌ、５００ｍｇ）の混合物を、Ｅｔ２Ｏ：ＤＭＳＯ（１５ｍＬ：７．５ｍＬ）が２：１の混合物に添加した。この混合物はやや温かくなり、これを３０分間撹拌した。Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）を添加し、反応混合物をＥｔ２Ｏで抽出した（３×２０ｍＬ）。合わせたＥｔ２Ｏ層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で除去することにより、粗製生成物（５９０ｍｇ）が黄／オレンジ色の固体として得られた。フラッシュシリカクロマトグラフィカラム（溶離剤  １：４  ＥｔＯＡｃ：ヘプタン）による精製によって、所望の生成物（１５４ｍｇ、０．７９７ｍｍｏｌ、２５％）が得られた。
１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＭｅＯＤ）：δ３．７９（ｓ、３Ｈ）、７．２０（ｓ、１Ｈ）、７．５０（ｓ、１Ｈ）
【０１２８】
ｂ）２−（（３−（ヒドロキシメチル）−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピロール−１−イル）メチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン。
【０１２９】
【化３５】
0005455130.tif 000037
バイアルに、メチル−４−（トリフルオロメチル）−１Ｈ−ピロール−３−カルボキシレート（０．１２９ｍｍｏｌ、２５ｍｇ）および水素化ナトリウム（油中６０％分散液、０．４３２ｍｍｏｌ、１０．４ｍｇ）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶かしたものを添加した。２−（クロロメチル）−６−メチルチエノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オン（０．１２９ｍｍｏｌ、２７．８ｍｇ）を添加した。反応物を６５℃で３時間加熱し、次いで室温に冷まし、一晩静置した。Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）を添加し、反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出した（３×１０ｍＬ）。合わせたＥｔＯＡｃ層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で除去することにより、粗製中間体が得られた。この中間体をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解し、ＬｉＡｌＨ４のＴＨＦ中溶液を添加した（２Ｍ、１．２９５ｍｍｏｌ、０．６５ｍＬ）。反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いでＭｅＯＨ（５ｍＬ）を慎重に添加し、次いで室温で３０分間撹拌した。溶媒を減圧下で除去することにより、粗製生成物が得られ、これをＨＰＬＣで精製することにより、所望の生成物（２．５ｍｇ、７．３μｍｏｌ、６％）が得られた。
ＭＳ（ＥＳＩ）：３４４ｍ／ｚ［Ｍ＋Ｈ］＋
【実施例１５】
【０１３０】
生物学的アッセイ
Ａ：Ｃａ２＋流入蛍光アッセイ
本発明における化合物は、ＦＬＥＸｓｔａｔｉｏｎ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、ＣＡ製）などであるがこれらに限定するものではない当技術分野で標準的な技法を使用して、ＡＭＰＡ（ＧｌｕＲ１）受容体の正の調節を通して媒介されたＣａ２＋流入を測定する、生物学的アッセイを使用して試験することができる。蛍光プローブを使用する光学式読取りを用いて、細胞内イオン濃度または膜電位のイオンチャネル依存性変化を測定する。このアッセイは、グルタミン酸依存性Ｃａ２＋応答を生成するための、官能性ホモマーＧｌｕＲ１（ｉ）ＡＭＰＡ受容体のＣａ２＋コンダクタンスを利用する。イオンチャネルを通したＣａ２＋の流入は、ＦＬＥＸｓｔａｔｉｏｎのＦｌｕｏ−３（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、ＣＡ）などであるがこれに限定するものではないカルシウム感受性色素を使用して、細胞内Ｃａ２＋レベルの増加を通して間接的に測定される。正のＡＭＰＡ受容体調節物質は、グルタミン酸の存在下で、ＦＬＥＸｓｔａｔｉｏｎのカルシウム感受性色素Ｆｌｕｏ−３を使用して、細胞内Ｃａ２＋レベルの増加を通して間接的に測定することができる、イオンチャネルを通したＣａ２＋の流入をもたらすことになる。
【０１３１】
ＨＥＫ．ＧｌｕＲ１（ｉ）細胞を、１０％ｆｅｔａｃｌｏｎｅ  ＩＩ、１％非必須アミノ酸および１５０μｇ／ｍＬハイグロマイシンが補われたＤＭＥＭ中に、３７℃／５％ＣＯ２で維持した。アッセイの２４時間前に、細胞をトリプシンで回収し、Ｃｏｓｔａｒ  ９６ウェルクリアボトムブラックプレートにウェル当たり３．５×１０４の密度で播く。
【０１３２】
細胞に、５μＭのｆｌｕｏ３−ＡＭをＤＭＥＭ培地に加えたものを、ハイグロマイシンが存在しない状態で添加し、３７℃／５％ＣＯ２で１時間温置する。色素投入後、細胞を、０．６２５ｍＭのプロベネシド（陰イオン交換タンパク質用阻害剤）を含有する低カルシウム溶液（１０ｍＭ  ｈｅｐｅｓ、ｐＨ７．４、１６０ｍＭ  ＮａＣｌ、４．５ｍＭ  ＫＣｌ、２ｍＭ  ＣａＣｌ２、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１０Ｍｍグルコース）２００μｌで１回洗浄して、色素を除去する。次いで低カルシウム溶液２００μｌを、各ウェルに添加する。Ｆｌｅｘｓｔａｔｉｏｎは、高カルシウム溶液（１０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓ、ｐＨ７．４、１６０ｍＭ  ＮａＣｌ、４．５ｍＭ  ＫＣｌ、２０ｍＭ  ＣａＣｌ２、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２および１０ｍＭグルコース）中５０μｌのグルタミン酸＋／−試験化合物を各ウェルに添加し、次に起こる応答がＦＬＥＸｓｔａｔｉｏｎでモニタされる。本発明の化合物は、０．３μＭから３０μＭの範囲のＥＣ５０値を有するＡＭＰＡ受容体の、正の調節を示す。例えば、実施例１は、１μＭのＥＣ５０をもたらした。
【０１３３】
Ｂ：パッチクランプ記録法
パッチクランプ技法のホールセル記録（Ｈａｍｉｌｌら、Ｐｆｌｕｇｅｒｓ  Ａｒｃｈ．１９８１年、３９、８５−１００頁）を使用して、生後ラット皮質ニューロンからグルタミン酸によって誘発された電流を測定した。培養物を載せたガラスカバースリップを、倒立顕微鏡（Ｎｉｋｏｎ、Ｋｉｎｇｓｔｏｎ、ＵＫ）のステージ上に載置された記録チャンバ（Ｗａｒｎｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ  Ｃｏｒｐ．、Ｈａｍｄｅｎ、ＣＴ）に移した。記録チャンバは、１−２ｍｌの細胞外溶液（１４５ｍＭ  ＮａＣｌ、５．４ｍＭ  ＫＣｌ、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、０．８ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１．８  ＣａＣｌ２、１０ｍＭグルコースおよび３０ｍＭスクロース、１Ｍ  ＮａＯＨでｐＨ７．４に調製されたもの）を含有し、１ｍｌ／分の速度で常に精査された。記録は、Ａｘｏｐａｔｃｈ  ２００Ｂ増幅器（Ａｘｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｌｔｄ．、Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ、ＣＡ）を使用して、室温（２０−２２℃）で行った。
【０１３４】
データの獲得および解析は、Ｓｉｇｎａｌソフトウェア（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ  Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌｔｄ．、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、ＵＫ）を使用して行った。ピペットは、モデルＰ−８７電極プラー（Ｓｕｔｔｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｃｏ．、Ｎｏｖａｒｔｏ、ＣＡ）を使用して、ＧＣ１２０Ｆ−１０ガラス（Ｈａｒｖａｒｄ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ、Ｅｄｅｎｂｒｉｄｇｅ  ＵＫ）から製造した。パッチ電極は、細胞内溶液（１４０ｍＭグルコン酸カリウム、２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１．１ｍＭ  ＥＧＴＡ、５ｍＭホスホクレアチン、３ｍＭ  ＡＴＰ、０．３ｍＭ  ＧＴＰ、０．１ｍＭ  Ｃａｃａ２、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１Ｍ  ＫＯＨでｐＨ７．４に調節したもの）で満たした場合、３−５ＭＱの間の典型的な抵抗を有していた。
【０１３５】
細胞を、−６０ｍＶの保持電位で電圧固定し、グルタミン酸（０．５ｍＭ）を、１２チャネル半高速薬物適用デバイス（ＤＡＤ−１２、Ｄｉｇｉｔｉｍｅｒ  Ｌｔｄ．、Ｗｅｌｗｙｎ  Ｇａｒｄｅｎ  ｃｉｔｙ、ＵＫ）を使用して適用した。作動薬であるグルタミン酸を、３０秒ごと１秒の割合で適用した。この応答は、ホールセル記録を使用して、時間と共に「低下」しなかった。適用と適用の間に生理食塩液を流し、それによって、系内のあらゆるデッドボリュームを一掃した。各適用ごとに、ベースラインおよび定常電流の差から定常電流をプロットし、３００ｍｓにわたる範囲で平均した。
【０１３６】
細胞外溶液中の化合物の２種の溶液を作製し、その一方にグルタミン酸溶液を含ませ、他方には含めなかった。プロトコルは：１０秒の化合物適用、１秒の化合物＋グルタミン酸適用、次いで１０秒の生理食塩液による洗浄、次いで１０秒の遅延であった。化合物が可溶性ではない場合、０．５％ＤＭＳＯを共溶媒として使用した。結果を、細胞外溶液における本発明の化合物の１０ｐＭ濃度での、定常電流のパーセンテージの増加として表１に示す。この技法を使用すると、実施例１は、１０μＭでの定常電流に２３５±４４％の増加を示した。