(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
メタノール溶媒和物の形である式６８２の化合物。
【化１】
0005563558.tif 000029
【請求項２】
結晶形である請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
以下のステップを含む、メタノール溶媒和物である式６８２の化合物の調製方法：
【化２】
0005563558.tif 000030
（i）式６８２−９の化合物をＨ２Ｏ／ジオキサンの混合液中でパルミチン酸無水物で処理して式６８２の化合物を形成すること；
（ii）ステップ（i）で形成された産物をメタノールで処理してメタノール溶媒和物である式６８２の化合物（形態Ｋ）を形成すること；
（iii）ステップ（ii）で形成されたメタノール溶媒和物である式６８２の化合物（形態Ｋ）を単離すること；
（iv）任意でステップ（iii）の産物を再結晶化により精製すること。
【請求項４】
請求項３に記載の方法により得られた産物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、癌の治療及び／又は予防において治療上有用なピリミジンヌクレオシドである、２´−シアノ−２´−デオキシ−Ｎ４−パルミトイル−１−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシンの合成に有用な中間体の調製に関する。特に本発明は、２´−シアノ−２´−デオキシ−Ｎ４−パルミトイル−１−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシンの調製方法の改善を提供する。
【背景技術】
【０００２】
増殖性疾患の治療におけるピリミジンヌクレオシドの治療的使用は、当技術分野において多く記録されている。例を挙げれば、市販のピリミジン系抗腫瘍剤には、５−フルオロウラシル（Duschinsky, R., et al., J. Am. Chem. Soc., 79, 4559 (1957)）、テガフール（Hiller, SA., et al., Dokl. Akad. Nauk USSR, 176, 332 (1967)）、ＵＦＴ（Fujii, S., et al., Gann, 69, 763 (1978)）、カルモフール（Hoshi, A., et al., Gann, 67, 725 (1976)）、ドキシフルリジン（Cook, A. F., et al., J. Med. Chem., 22, 1330 (1979)）、シタラビン（Evance, J. S., et al., Proc. Soc. Exp. Bio. Med., 106. 350 (1961)）、アンシタビン（Hoshi, A., et al., Gann, 63, 353, (1972)）及びエノシタビン（Aoshima, M., et al., Cancer Res., 36, 2726 (1976)）が含まれる。
【０００３】
欧州公開特許公報第５３６９３６号（Sankyo Company Limited社）は、有用な抗腫瘍活性を示すことが示された、１−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシンの様々な２´−シアノ−２´−デオキシ−誘導体を開示している。欧州公開特許公報第５３６９３６号に開示の特定の化合物の１つは、２´−シアノ−２´−デオキシ−Ｎ４−パルミトイル−１−β−Ｄ−アラビノフラノシルシトシン（以下では、「６８２」又は「ＣＹＣ６８２」と呼ぶ）であり、この化合物をここでさらに検討する。
【０００４】
ＣＹＣ６８２は、１−（２−Ｃ−シアノ−２−ジオキシ−β−Ｄ−アラビノ−ペントフラノシル）−Ｎ４−パルミトイルシトシンとしても知られ（Hanaoka, K., et al, Int. J. Cancer, 1999:82:226-236; Donehower R, et al, Proc Am Soc Clin Oncol, 2000: abstract 764; Burch, PA, et al, Proc Am Soc Clin Oncol, 2001: abstract 364）、ヌクレオシドＣＮＤＡＣ、１−（２−Ｃ−シアノ−２−デオキシ−β−Ｄ−アラビノ−ペンタフラノシル）−シトシンの経口投与される新規２´−デオキシシチジン抗代謝プロドラッグである。
【０００５】
【化１】
0005563558.tif 000002
【０００６】
ＣＹＣ６８２は、自発的ＤＮＡ鎖切断作用を有し、様々な細胞株、異種移植及び転移性癌モデルにおいて強力な抗腫瘍活性をもたらす点で、ゲムシタビン等の他のヌクレオシド代謝物と異なる独特の作用機序を有する。
【０００７】
ＣＹＣ６８２は、経口での生物学的利用能並びに固形腫瘍での前臨床データでゲムシタビン（主要な市販ヌクレオシド類似体）及び５−ＦＵ（広範に用いられている抗代謝薬）より活性が向上していることを鑑み、多くの研究で注目されてきた。ＣＹＣ６８２が結腸癌のモデルにおいて強力な抗癌活性を示したことを、最近研究者が報告している。同じモデルにおいてＣＹＣ６８２は、生存率を高める点において、さらには結腸癌転移の肝臓への拡大を予防する点においても、ゲムシタビン又は５−ＦＵのどちらよりも優れていることが見出された（Wu M, et al, Cancer Research, 2003:63:2477-2482）。現在までのところ、様々な癌の患者の第I相データが示唆するのは、ＣＹＣ６８２は人間における耐容性が良く、用量制限毒性として骨髄抑制を伴うということである。
【０００８】
さらに近年の研究は、ＣＹＣ６８２の様々な結晶形態に注目し（例えば、Sankyo Company Limited社出願の国際公開公報第０２／０６４６０９号参照）、安定性の向上を示してより容易な処理を可能とするＣＹＣ６８２含有処方を最適化してきた（例えば、Cyclacel Limited社出願の国際公開公報第０７／０７２０６１号参照）。
【０００９】
欧州公開特許公報第５３６９３６号に記載のＣＹＣ６８２の調製（以下の模式図１参照）は、シチジン［１］をＤＭＦ中でパルミチン酸無水物と反応させてＮ４−パルミトイルシチジン［２］を形成し、引き続いて１，３−ジクロロ−１，１，４，４−テトライソプロピルジシロキサン（ＣＩＰＳ）で保護して中間体［３］を形成することを伴う。ジクロロメタン中でピリジニウムジクロマート／無水酢酸で［３］を酸化させて中間体ケトン［４］を作製し、しかるのちにそれをエチルアセテート中でシアン化ナトリウム及びリン酸２水素ナトリウム２水和物と反応させてシアノヒドリン［５］を形成する。しかるのちに中間体［５］をＮ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン、フェノキシチオカルボニルクロリド及びトリエチルアミンと反応させて中間体［６］を形成し、引き続いてそれをトルエン中でＡＩＢＮ及びトリブチルスズヒドリドと反応させて中間体［７］を得る。ＴＨＦ中で酢酸及びテトラブチルアンモニウムフルオリドで［７］を脱保護し、所望の産物であるＣＹＣ６８２を得る。
【００１０】
【化２】
0005563558.tif 000003
【００１１】
上述の経路をさらに修正したものが、日本国公開特許公報第０７０５３５８６号（Sankyo Company Limited社）に開示されている。特に日本国公開特許公報第０７０５３５８６号は、酸化のステップが２，２，６，６−テトラメチルピペリジニルオキシフリーラジカル（ＴＥＭＰＯ）、ＮａＯＣｌ及びアルカリ金属ハロゲン化物を用いて達成されうることを開示している（下の模式図２の［３ａ］から［４ａ］への変換を参照）。さらに、ケトン［４ａ］からシアノヒドリン中間体［５ａ］への変換は、［４ａ］をＮａＣＮの代わりにアセトンシアノヒドリンで処理することにより達成されうる。結果として生じたシアノヒドリン［５ａ］をしかるのちに２−ナフチルクロロチオホルメートで処理し、中間体［６ａ］を得ることができる。
【００１２】
【化３】
0005563558.tif 000004
【００１３】
しかしながら、これら修正にもかかわらず、上述の経路は比較的低い収量及び／又は高度の可変性と関連付けられており、それゆえ改良された合成法の必要性が強調される。
【００１４】
したがって本発明は、ＣＹＣ６８２の調製方法の改良を提供することを目的とする。より具体的には本発明は、ＣＹＣ６８２の収量の向上をもたらす合成経路及び／又はこの化合物の大量調製に適する合成経路を提供することを目的とする。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】欧州公開特許公報第５３６９３６号
【特許文献２】国際公開公報第０２／０６４６０９号
【特許文献３】国際公開公報第０７／０７２０６１号
【特許文献４】日本国公開特許公報第０７０５３５８６号
【非特許文献】
【００１６】
【非特許文献１】Duschinsky, R., et al., J. Am. Chem. Soc., 79, 4559 (1957)
【非特許文献２】Hiller, SA., et al., Dokl. Akad. Nauk USSR, 176, 332 (1967)
【非特許文献３】Fujii, S., et al., Gann, 69, 763 (1978)
【非特許文献４】Hoshi, A., et al., Gann, 67, 725 (1976)
【非特許文献５】Cook, A. F., et al., J. Med. Chem., 22, 1330 (1979)
【非特許文献６】Evance, J. S., et al., Proc. Soc. Exp. Bio. Med., 106. 350 (1961)
【非特許文献７】Hoshi, A., et al., Gann, 63, 353, (1972)
【非特許文献８】Aoshima, M., et al., Cancer Res., 36, 2726 (1976)
【非特許文献９】Hanaoka, K., et al, Int. J. Cancer, 1999:82:226-236
【非特許文献１０】Donehower R, et al, Proc Am Soc Clin Oncol, 2000
【非特許文献１１】Burch, PA, et al, Proc Am Soc Clin Oncol, 2001
【非特許文献１２】Wu M, et al, Cancer Research, 2003:63:2477-2482
【発明の概要】
【００１７】
本発明の第１の態様は、式６８２−４の化合物の調製方法に関する。
【００１８】
【化４】
0005563558.tif 000005
【００１９】
前記方法は以下のステップを含む：
（i）式６８２−１の化合物を式６８２−２´の化合物へと変換すること；
（ii）前記式６８２−２´の化合物を式６８２−３の化合物へと変換すること；及び
（iii）前記式６８２−３の化合物を式６８２−４の化合物へと変換すること。
【００２０】
【化５】
0005563558.tif 000006
【００２１】
有益なことに、−ＮＨ２保護基よりも前にＣＩＰＳ保護基を組み込むために合成の最初の２つのステップを逆転させることで、より良質の中間体物質６８２−４がもたらされ、この物質はＣＹＣ６８２の調製において、引き続くシアノヒドリンとの反応のための基質を形成する。
【００２２】
本発明の第２の態様は、式６８２−９又は式６８２の化合物の調製方法に関する。
【００２３】
【化６】
0005563558.tif 000007
【００２４】
前記方法は以下のステップを含む：
（Ａ）上述の通り式６８２−４の中間体を調製すること；
（Ｂ）前記式６８２−４の化合物を式６８２−９の化合物へと変換すること；及び
（Ｃ）任意で前記式６８２−９の化合物を式６８２の化合物へと変換すること。
【００２５】
本発明の第３の態様は、式６８２−５の化合物の調製方法に関し、前記方法は、式６８２−４の化合物をヘプタン中でアセトンシアノヒドリン及びＮＥｔ３で処理することを含む。
【００２６】
【化７】
0005563558.tif 000008
【００２７】
有益なことに、ヘプタン中のアセトンシアノヒドリン及びＮＥｔ３の使用により、以前に当技術分野において知られていた反応条件と比較して、中間体６８２−５の収量の向上及びより容易な精製がもたらされる。
【００２８】
本発明の第４の態様は、式６８２−９又は式６８２の化合物の調製方法に関する。
【００２９】
【化８】
0005563558.tif 000009
【００３０】
前記方法は以下のステップを含む：
（Ａ″）上述の通り式６８２−５の中間体を調製すること；
（Ｂ″）前記式６８２−５の化合物を式６８２−９の化合物へと変換すること；及び
（Ｃ″）任意で前記式６８２−９の化合物を式６８２の化合物へと変換すること。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
上述の通り、本発明の第１の態様は式６８２−４の化合物の調製方法に関し、前記方法は以下のステップを含む：
（i）式６８２−１の化合物を式６８２−２´の化合物へと変換すること；
（ii）前記式６８２−２´の化合物を式６８２−３の化合物へと変換すること；及び
（iii）前記式６８２−３の化合物を式６８２−４の化合物へと変換すること。
【００３２】
有益なことに、最初にステップ（i）でＣＩＰＳ保護基を組み込むことにより固体産物６８２−２´が得られるのであり、望ましくない副産物及び過剰なＣＩＰＳ保護基試薬を除去するため、この産物を（例えば、洗浄により）より容易に精製することができる。一度精製されれば、しかるのちにこのように作製された固体６８２−２´中間体をアシル化して中間体６８２−３が得られ、引き続いてこの中間体を酸化させることで中間体６８２−４が得られる。６８２−２´を固形で精製することが可能となることで、方法の引き続くステップにおける使用のためのより良質の物質がもたらされ、より高い収量と再現性の向上がもたらされる。さらに特筆すべきは、上述の経路によってより上質な中間体６８２−４がもたらされることであり、かかる中間体はＣＹＣ６８２の合成において引き続くシアノヒドリン反応の基質である。
【００３３】
本発明の好ましい実施形態の１つにおいて、ステップ（i）は、前記式６８２−１の化合物をピリジン中で１，３−ジクロロ−１，１，４，４−テトライソプロピルジシロキサン（ＣＩＰＳ）で処理することを含む。この反応のさらなる詳細については、Org. Process Dev., ,4., 172 (2000); 米国特許公報第６，５３１，５８４号Ｂ１(2003); Org. Lett., .8., 55 (2006)に報告されている。
【００３４】
本発明の好ましい実施形態の１つにおいて、ステップ（ii）は、前記式６８２−２´の化合物をＥｔＯＨ中で無水酢酸で処理することを含む。或いは、ＤＭＦを溶剤として用いてもよい［Angew. Chem.Int.Ed, 43, 3033 (2004)参照］。
【００３５】
ステップ（iii）において化合物６８２−３を６８２−４へと変換する酸化剤は、当業者によく知られている。例を挙げれば、この変換はDess-Martinペルヨージナン酸化［Helv. Chim. Acta, 85, 224 (2002) 及び J. Org. Chem., 55, 5186 (1990)に記載の方法と類似］、Swern酸化［Org. Process Res. Dev., 4, 172 (2000) 及び J. Med Chem., 48, 5504 (2005)］、ピリジニウムジクロマートでの酸化又は２，２，６，６−テトラメチルピペリジニルオキシフリーラジカル（ＴＥＭＰＯ）及びＮａＯＣｌでの酸化により達成されうる。
【００３６】
本発明の特に好ましい実施形態の１つにおいて、ステップ（iii）は、前記式６８２−３の化合物をアルカリ金属ハロゲン化物及びＮａＯＣｌ存在下で２，２，６，６−テトラメチルピペリジニルオキシフリーラジカル（ＴＥＭＰＯ）で酸化させることを含む。この反応のさらなる詳細については、日本国公開特許公報第０７０５３５８６号（Sankyo Company Limited社）に記載されている。
【００３７】
本発明のまた別の態様は、式６８２−９又は式６８２の化合物の調製方法に関し、前記方法は以下のステップを含む：
（Ａ）上述の通り式６８２−４の中間体を調製すること；
（Ｂ）前記式６８２−４の化合物を式６８２−９の化合物へと変換すること；及び
（Ｃ）任意で前記式６８２−９の化合物を式６８２の化合物へと変換すること。
【００３８】
好ましい実施形態の１つにおいて、ステップ（Ｂ）は以下のステップを含む：
【００３９】
【化９】
0005563558.tif 000010
【００４０】
（Ｂ１）前記式６８２−４の化合物を式６８２−５の化合物へと変換すること；
（Ｂ２）前記式６８２−５の化合物を式６８２−６の化合物へと変換すること；
（Ｂ３）前記式６８２−６の化合物を式６８２−７の化合物へと変換すること；及び
（Ｂ４）前記式６８２−７の化合物を式６８２−９の化合物へと変換すること。
【００４１】
好ましい実施形態の１つにおいて、ステップ（Ｂ１）は、前記式６８２−４の化合物をＨ２Ｏ／ＥｔＯＨ中でＮａＣＮ／ＮａＨＣＯ３で処理することを含む。
【００４２】
また別の好ましい実施形態において、ステップ（Ｂ１）は、前記式６８２−４の化合物をエチルアセテート中でＮａＣＮ／ＮａＨ２ＰＯ４．２Ｈ２Ｏで処理することを含む。この反応のさらなる詳細については、欧州公開特許公報第５３６９３６号（Sankyo Company Limited社）に見出されるであろう。
【００４３】
また別の好ましい実施形態において、ステップ（Ｂ１）は、前記式６８２−４の化合物をジクロロメタン中でアセトンシアノヒドリン／ＫＨ２ＰＯ４で処理することを含む。この反応のさらなる詳細については、日本国公開特許公報第０７０５３５８６号（Sankyo Company Limited社）に見出されるであろう。
【００４４】
特に好ましい実施形態の１つにおいて、ステップ（Ｂ１）は、前記式６８２−４の化合物をヘプタン中でアセトンシアノヒドリン及びＮＥｔ３で処理することを含む。この反応のさらなる詳細については、下の本発明の第２の態様に記載されている。
【００４５】
さらにまた別の好ましい実施形態において、ステップ（Ｂ１）は、前記式６８２−４の化合物をジクロロメタン中でＴＭＳＣＮ及びＡｌＣｌ３で処理することを含む。この反応のさらなる詳細については、Tet, 60, 9197 (2004)に記載されている。
【００４６】
好ましくは、ステップ（Ｂ２）は、前記式６８２−５の化合物をＮＥｔ３及びジメチルアミノピリジンの存在下で２−ナフチルクロロチオホルメートで処理することを含む。この反応のさらなる詳細については、日本国公開特許公報第０７０５３５８６号（Sankyo Company Limited社）に記載されている。
【００４７】
或いは、ステップ（Ｂ２）は、前記式６８２−５の化合物をＮＥｔ３及びジメチルアミノピリジンの存在下でフェノキシルチオカルボニルクロリドで処理することを含む。この反応のさらなる詳細については、欧州公開特許公報第５３６９３６号（Sankyo Company Limited社）に見出されるであろう。
【００４８】
好ましくは、ステップ（Ｂ３）は、前記式６８２−６の化合物をトルエン中でトリス（トリメチルシリル）シラン（ＴＴＭＳＳ）及びアゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）で処理することを含む。この試薬の使用のさらなる詳細については、J Org. Chem., 53, 3641 (1988)及びTett. Lett., 44, 4027 (2003)に見出されるであろう。
【００４９】
或いは、ステップ（Ｂ３）は、欧州公開特許公報第５３６９３６号（Sankyo Company Limited社）に記載のように、前記式６８２−６の化合物をトルエン中でトリブチルスズヒドリド及びアゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）で処理することを含む。
【００５０】
ステップ（Ｂ４）における前記式６８２−７の化合物からのＣＩＰＳ保護基の除去及び引き続く遊離塩基６８２−９の遊離は、当業者によく知られた方法を用いて達成されるであろう。好ましくは、ステップ（Ｂ４）は、前記式６８２−７の化合物をＨＣｌ／ＭｅＯＨで処理し、しかるのちにそのようにして作製された中間体を塩基で処理して式６８２−９の化合物を形成することを含む。この反応のさらなる詳細については、欧州公開特許公報第５３６９３６号（Sankyo Company Limited社）に見出されるであろう。
【００５１】
好ましくは、ステップ（Ｃ）は、前記式６８２−９の化合物をＨ２Ｏ／ジオキサンの混合液中でパルミチン酸無水物で処理することを含む。この変換に適した他の条件は、当業者によく知られている。
【００５２】
本発明のさらなる態様は、式６８２−５の化合物の調製方法に関し、前記方法は式６８２−４の化合物をヘプタン中でアセトンシアノヒドリン及びＮＥｔ３で処理することを含む。
【００５３】
【化１０】
0005563558.tif 000011
【００５４】
有益なことに、ヘプタン中でのアセトンシアノヒドリン及びＮＥｔ３の使用は、当技術分野で以前に知られていた反応条件と比較して、中間体６８２−５の収量の向上及びより容易な精製をもたらす。
【００５５】
先行技術におけるこの変換の条件は、典型的には２相反応混合液(例えば、水／エチルアセテート)中でのＮａＣＮ又はアセトンシアノヒドリン、及びトリエチルアミンの使用を伴い、ケトン出発物質６８２−４と２つの可能なシアノヒドリン異性体との間の平衡をもたらす。対照的に、ヘプタン中でのシアノヒドリン及びＮＥｔ３の使用は、２つの可能なシアノヒドリン産物のうちの一方のみの形成に有用である；所望のシアノヒドリン産物はヘプタンに溶けず、溶液から沈殿する一方で、他方の異性体及び出発ケトン６８２−４は溶液中に残る。この沈殿がLe Chatelierの原理に従い平衡を完成へと推進し、そのことで所望のシアノヒドリンの収量の向上をもたらす。さらに、固体の形成は中間体６８２−５の作製をより容易にする。
【００５６】
好ましい実施形態の１つにおいて、方法はさらに式６８２−３の化合物から前記式６８２−４の化合物を調製するステップを含む。
【００５７】
【化１１】
0005563558.tif 000012
【００５８】
適切な酸化条件は、上で本発明の第１の態様に関して述べた通りである。より好ましくは、方法は式６８２−３の化合物を２，２，６，６−テトラメチルピペリジニルオキシフリーラジカル（ＴＥＭＰＯ）及びＮａＯＣｌと反応させることを含む。
【００５９】
好ましい実施形態の１つにおいて、方法はさらに式６８２−２の化合物から前記式６８２−３の化合物を調製するステップを含む。
【００６０】
【化１２】
0005563558.tif 000013
【００６１】
より好ましくは、方法は前記式６８２−２の化合物をピリジン中で１，３−ジクロロ−１，１，４，４−テトライソプロピルジシロキサン（ＣＩＰＳ）と反応させることを含む。この変換に適した条件は、上で本発明の第１の態様に関して述べた通りである。
【００６２】
好ましい実施形態の１つにおいて、方法はさらに式６８２−１の化合物から前記式６８２−２の化合物を調製するステップを含む。
【００６３】
【化１３】
0005563558.tif 000014
【００６４】
より好ましくは、方法は前記式６８２−１の化合物をＥｔＯＨ中でＡｃ２Ｏと反応させることを含む。この変換に適した条件は、上で本発明の第１の態様に関して述べた通りである。
【００６５】
好ましい実施形態の１つにおいて、方法はさらに式６８２−２´の化合物から前記式６８２−３の化合物を調製するステップを含む。
【００６６】
【化１４】
0005563558.tif 000015
【００６７】
より好ましくは、方法は前記式６８２−２´の化合物をＥｔＯＨ中でＡｃ２Ｏと反応させることを含む。
【００６８】
好ましい実施形態の１つにおいて、方法はさらに式６８２−１の化合物から前記式６８２−２´の化合物を調製するステップを含む。
【００６９】
【化１５】
0005563558.tif 000016
【００７０】
より好ましくは、方法は式６８２−１の化合物をピリジン中で１，３−ジクロロ−１，１，４，４−テトライソプロピルジシロキサン（ＣＩＰＳ）と反応させることを含む。
【００７１】
本発明のさらなる態様は、式６８２−９又は式６８２の化合物を調製する方法に関する。
【００７２】
【化１６】
0005563558.tif 000017
【００７３】
前記方法は以下のステップを含む：
（Ａ″）上述の通り式６８２−５の中間体を調製すること；
（Ｂ″）前記式６８２−５の化合物を式６８２−９の化合物へと変換すること；及び
（Ｃ″）任意で前記式６８２−９の化合物を式６８２の化合物へと変換すること。
【００７４】
好ましくは、この実施形態に関して、ステップ（Ｂ″）は以下のステップを含む：
【００７５】
【化１７】
0005563558.tif 000018
【００７６】
（Ｂ２″）前記式６８２−５の化合物を式６８２−６の化合物へと変換すること；
（Ｂ３″）前記式６８２−６の化合物を式６８２−７の化合物へと変換すること；及び
（Ｂ４″）前記式６８２−７の化合物を式６８２−９の化合物へと変換すること。
【００７７】
好ましくは、ステップ（Ｂ２″）は、前記式６８２−５の化合物をＮＥｔ３及びジメチルアミノピリジンの存在下で２−ナフチルクロロチオホルメートで処理することを含む。このステップに適した条件は、上で本発明の第１の態様に関して述べた通りである。
【００７８】
好ましくは、ステップ（Ｂ３″）は、前記式６８２−６の化合物をトルエン中でトリス（トリメチルシリル）シラン（ＴＴＭＳＳ）及びアゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）で処理することを含む。このステップに適した条件は、上で本発明の第１の態様に関して述べた通りである。
【００７９】
好ましくは、ステップ（Ｂ４″）は、前記式６８２−７の化合物をＨＣｌ／ＭｅＯＨで処理し、しかるのちにそのようにして作製された中間体を塩基で処理して式６８２−９の化合物を形成することを含む。これらステップに適した条件は、上に本発明の第１の態様に関して述べた通りである。
【００８０】
好ましくは、ステップ（Ｃ″）は、前記式６８２−９の化合物をＨ２Ｏ／ジオキサンの混合液中でパルミチン酸無水物で処理することを含む。
【００８１】
本発明はさらに、本発明を限定しない実施例及び以下の図への言及により記述される。
【図面の簡単な説明】
【００８２】
【図１】図１は、先行技術の手順を修正したものである、経路１を介するＣＹＣ６８２の合成を示す。
【図２】図２は、本発明の好ましい実施形態の１つに従った、経路１ａを介するＣＹＣ６８２の合成を示す。
【実施例１】
【００８３】
ステップ１：６８２−１→６８２−２´
【００８４】
【化１８】
0005563558.tif 000019
【００８５】
Org. Process Dev., 4, 172 (2000); 米国特許公報第６５３１５８４号Ｂ１ (2003); Org.Lett., 8, 55 (2006)。
【００８６】
シチジン（８．０ｇ、３２．８９ｍｍｏｌ）をピリジン（２×１５ｍｌ）で共沸混合することにより予備乾燥し、しかるのちにピリジン（２２ｍｌ）及びアルゴンでパージされた容器中に懸濁させた。１，３−ジクロロ−１，１，４，４−テトライソプロピルジシロキサン（１２．０ｍｌ、３５．４０ｍｍｏｌ）を室温で２０分間にわたり滴下した。３２℃までの緩やかな発熱が観察された。白い沈殿物が徐々にフラスコの底に沈殿した。この沈殿物は、よく攪拌することにより拡散し、結果として生じた懸濁液を一晩攪拌した。この混合液を水（２００ｍｌ）に注ぎ込み、ＥｔＯＡｃ（３×２００ｍｌ）で抽出した。有機相を洗浄し（ブライン）、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し蒸発させて白い固体を得た。これをヘプタンと共に粉砕し、濾過してヘプタン（１００ｍｌ）、続いて軽石油エーテル（２×５０ｍｌ）で洗浄した。１３．４６ｇ（８４％）が得られた。処理の最後の段階で、ヘプタンを酢酸イソプロピルに置き換えてもよい。
【実施例２】
【００８７】
ステップ２：６８２−２´→６８２−３
【００８８】
【化１９】
0005563558.tif 000020
【００８９】
６８２−２´（１０．０ｇ、２０．５９ｍｍｏｌ）をエタノール（２００ｍｌ）中に懸濁させ、無水酢酸（６．９ｍｌ、７２．０６ｍｍｏｌ）を滴下した（発熱なし）。混合液を２時間加熱した（油浴６５℃―内部温度５０〜５３℃）。Ｔｌｃ（７％  ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）によって、産物が微量の出発物質のみを有することが示された。さらに３ｍｌの無水酢酸を付加し（発熱なし）、加熱をさらに１．５時間続けた。Ｔｌｃによって出発物質は一切検出されなかった。混合液を室温まで冷却し、ＥｔＯＨをＲＶ上で蒸発させた。５％  ＮａＨＣＯ３（１００ｍｌ）を付加し（ＣＯ２↑）、混合液を１：１  ＴＢＤＭＥ／ヘプタン（３×１００ｍｌ）で抽出した。有機相を洗浄し（ブライン）、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し蒸発させて白い泡（１０．４３ｇ、９６％）を得た。
【実施例３】
【００９０】
ステップ３：６８２−３→６８２−４
【００９１】
【化２０】
0005563558.tif 000021
【００９２】
６８２−３（８．０ｇ、１５．１５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ（１２０ｍｌ）中に溶解させ、氷浴中で１０℃まで冷却した。Dess-Martinペルヨージナン（１２．５８ｇ、２８．７８ｍｍｏｌ）を少量ずつ付加し、付加漏斗をＤＣＭ（２０ｍｌ）ですすいだ。結果として生じた濁った溶液を冷却しながら１０分間、しかるのちに室温で一晩攪拌した。混合液をＥｔ２Ｏ（４５０ｍｌ）で希釈し、Ｎａ２Ｓ２Ｏ３．５Ｈ２Ｏ（３８．５ｇ）が溶解されたａｑ  ＮａＨＣＯ３（２００ｍｌ）で洗浄した。水相をＥｔ２Ｏ（２００ｍｌ）で抽出した。有機相を洗浄し（ｓａｔ  ＮａＨＣＯ３、続いてブライン）、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、濾過し蒸発させて硬いが砕けやすい白い泡を得た。ＮＭＲにより、出発物質の約７．５％が残存していることが示された。粗産物をＤＣＭ（１５０ｍｌ）中に再溶解させ、さらに２．５ｇ（５．８９ｍｍｏｌ）のDess-Martinペルヨージナンで前と同じように処理した。反応混合液を前と同じように（９ｇ  Ｎａ２Ｓ２Ｏ３．５Ｈ２Ｏを用いて）処理し、所望の産物７．５４ｇ（９５％）を白い泡として得た。
【実施例４】
【００９３】
ステップ４：６８２−４→６８２−５
【００９４】
【化２１】
0005563558.tif 000022
【００９５】
６８２−４（７００ｍｇ、１．３３ｍｍｏｌ）の一部をヘプタン（７ｍｌ）中に溶解させ、濁った溶液を得た。アセトンシアノヒドリン（０．２５ｍｌ、２．６６ｍｍｏｌ）を絶え間なく付加し、続いてトリエチルアミン（１９μｌ、０．１３ｍｍｏｌ）を滴下した。混合液を室温で攪拌すると、徐々に濁ってきた。約２０分後には、反応混合液は濃いペースト状の懸濁液となった。１時間後のＬＣＭＳにより、出発物質が存在しないことが示された。混合液を氷浴で冷却して濾過した。収集した白い固体を冷たいヘプタン（約１５ｍｌ）で、続いて軽石油エーテル（約５ｍｌ）で洗浄した。産物を真空下４０℃で乾燥させた。６７３ｍｇ（９１％）が得られた。
【実施例５】
【００９６】
ステップ５：６８２−５→６８２−６
【００９７】
【化２２】
0005563558.tif 000023
【００９８】
トルエン中の２−ナフチルクロロチオホルメート溶液（２−ＮＴＦ）（２５％溶液、１．８２ｋｇ／ｋｇ  ６８２−５）を、ジクロロメタン（１０Ｌ／ｋｇ  ６８２−５）中の６８２−５及び４−ジメチルアミノピリジン（０．２２ｋｇ／ｋｇ  ６８２−５）に、５℃以下で付加する。トリエチルアミン（０．２２ｋｇ／ｋｇ  ６８２−５）を０〜１０℃で、１０℃以下の温度を維持する速さで反応混合液にゆっくりと付加する。混合液を０〜１０℃に維持し、ＨＰＬＣでモニターする。反応を、６８２−５の含有量が５２．０％になるまで継続させる。反応の完了後、１％ｗ／ｗリン酸２水素ナトリウム水溶液（１０ｋｇ／ｋｇ  ６８２−５）を、１０〜２５℃の温度を維持する速さで付加する。相が分離し、水相をさらなるジクロロメタン（４．５Ｌ／ｋｇ  ６８２−５）で抽出する。分相後、有機相を１回分の低パイロジェン水（low pyrogen water）（１０Ｌ／ｋｇ  ６８２−５）で洗浄し、併せてジクロロメタンライン洗浄（dichloromethane line wash）での蒸留のために移す。有機相を減圧下３０℃以下で濃縮する。メタノール（３Ｌ／ｋｇ  ６８２−５）を加え、濃縮を継続させる。さらにメタノールを加え（１０Ｌ／ｋｇ  ６８２−５）、産物を少なくとも１時間、５℃以下で顆粒化させる。産物を２つまでのロードで遠心分離により単離する。それぞれのロードを０〜５℃の冷たいメタノール（１．５Ｌ／ｋｇ  ６８２−５）で洗浄し、その後真空下４５℃までの温度で乾燥させて一定重量とする。
【実施例６】
【００９９】
ステップ６：６８２−６→６８２−７
【０１００】
【化２３】
0005563558.tif 000024
【０１０１】
ラジカル開始剤Ｖａｚｏ６７（２，２´−アゾビス［２−メチルブチロニトリル］）（０．０５ｋｇ／ｋｇ  ６８２−６）及びトリス（トリメチルシリル）シラン（ＴＴＭＳＳ）（０．４１ｋｇ／ｋｇ  ６８２−６）を、トルエン（４．５Ｌ／ｋｇ  ６８２−６）中の中間体６８２−６に付加する。反応混合液を７０℃まで加熱し、６５〜７５℃で少なくとも１時間攪拌し、その後モニターする。混合液をＨＰＬＣでモニターする。反応を、６８２−６含有量が×２．０％になるまで継続させる。もし必要であれば、さらなる開始剤及びＴＴＭＳＳを付加することもできる。反応完了後、混合物をエチルシクロヘキサン（２０Ｌ／ｋｇ  ６８２−６）に６５℃〜７５℃でゆっくり付加する。反応混合液を少なくとも２．５時間かけて０〜５℃まで冷却し、この温度で維持する。結果として生じた固体を３つまでのロードで遠心分離により単離する。それぞれのロードを０〜５℃の冷たいエチルシクロヘキサン（１Ｌ／ｋｇ  ６８２−６）で洗浄する。産物を真空下４５℃までの温度で乾燥させて一定重量とする。
【実施例７】
【０１０２】
ステップ７：６８２−７→６８２−８
【０１０３】
【化２４】
0005563558.tif 000025
【０１０４】
加水分解を達成するために、６８２−７をメタノール（２．３４Ｌ／ｋｇ  ６８２−７）及び塩酸（３６％、０．４８Ｌ／ｋｇ  ６８２−７）に４８〜５２℃で溶解させる。６８２−９（５ｇ／ｋｇ  ６８２−７）をメタノール（１４０ｍＬ／ｋｇ  ６８２−７）中で塩酸（２９ｍＬ／ｋｇ  ６８２−７）で処理することにより６８２−８シードを調製し、その後反応混合液に補充する。反応混合液を５３〜６０℃で少なくとも２時間加熱し、ＨＰＬＣでモニターする。反応を、保持時間約５．２５におけるピークが５１２．０％になるまで継続させる。反応完了時に、混合液を少なくとも１００分かけて１０〜１５℃まで冷却する。エチルアセテート（１０Ｌ／ｋｇ  ６８２−７）を１０〜１５℃で少なくとも２５分かけて付加し、混合液を少なくとも３０分かけて０〜５℃まで冷却する。混合液を５℃未満で少なくとも１時間顆粒化させる。産物を２つまでのロードで遠心分離により単離し、それぞれのロードをメタノール（０．３８Ｌ／ｋｇ  ６８２−７）とエチルアセテート（１．１１Ｌ／ｋｇ  ６８２−７）との０〜５℃の冷たい混合液で洗浄する。産物を真空下４５℃までの温度で乾燥させて一定重量とする。
【実施例８】
【０１０５】
ステップ８：６８２−８→６８２−９
【０１０６】
【化２５】
0005563558.tif 000026
【０１０７】
１５〜３０℃のメタノール（３．９Ｌ／ｋｇ  ６８２−８）：ジクロロメタン（１０Ｌ／ｋｇ  ６８２−８）混合液中に６８２−８を懸濁させたものにトリエチルアミン（０．４１ｋｇ／ｋｇ  ６８２−８）を付加することにより、塩酸塩６８２−８を中性化する。溶解がトリエチルアミンの付加で生じる。反応混合液を１５〜３０℃で少なくとも１０分間攪拌し、水での希釈後に試料のｐＨを確認する。ｐＨ９〜９．５の範囲であることが期待される。中間体６８２−９は高ｐＨで異性化を起こしうる。酢酸（０．２５ｋｇ／ｋｇ  ６８２−８）を攪拌しながらゆっくり、３０℃未満の温度を維持する速さで付加し、ｐＨの範囲を４．０〜４．５に調節して結晶化を誘発する。もし必要であれば、さらなる酢酸を付加してもよい。しかるのちに混合液をジクロロメタン（２５Ｌ／ｋｇ  ６８２−８）で希釈し、０〜５℃まで冷却する。混合液を０〜５℃で少なくとも１時間攪拌し、産物を２つまでのロードで遠心分離により単離する。それぞれのロードを、メタノール（０．６３Ｌ／ｋｇ  ６８２−８）及びジクロロメタン（４．４Ｕｋｇ  ６８２−８）の冷たい混合液で洗浄する。産物を真空下４５℃までの温度で乾燥させて一定重量にする。
【実施例９】
【０１０８】
ステップ９：６８２−９→６８２
【０１０９】
【化２６】
0005563558.tif 000027
【０１１０】
６８２は、欧州公開特許公報第５３６９３６号の実施例１〜４に開示の方法に従って得ることができる。中間体６８２−９はＣＹＣ６８２に変換され、最初はメタノール溶媒和物である形態Ｋとして単離される。形態Ｋは、懸濁形態変化反応（a suspension form change reaction）により半水化物である形態Ｂへと変換される。形態Ｋ又は形態Ｂはさらに、再結晶化により精製されうる。再結晶化により形態Ｋが得られ、しかるのちにこの形態Ｋは形態Ｂへと変換又は再変換される。
【０１１１】
（i）６８２：形態Ｋ
パルミチン酸無水物（３．５３ｋｇ／ｋｇ  ６８２−９）を１，４−ジオキサン（２０Ｌ／ｋｇ  ６８２−９）及び低パイロジェン水（low pyrogen water）（１．０Ｌ／ｋｇ  ６８２−９）中の６８２−９の混合液に付加し、反応混合液を８０〜９０℃（標的温度８０〜８５℃）まで加熱する。反応をＨＰＬＣによりモニターし、６８２−９含有量が５２．０％になるまで継続させる。反応完了時に、混合液を熱濾過し、フィルターを７０〜９０℃の１，４−ジオキサン（１０Ｌ／ｋｇ  ６８２−９）で洗浄する。結果として生じた濾液を併せ６０℃以下（標的内部温度４５〜５５℃以下）で元の体積（７．３Ｌ／ｋｇ  ６８２−９）の３０％未満にまで濃縮する。水含有量をKarl Fischer滴定で確認する。もし水含有量が＜２％であれば、さらなるジオキサンを付加し、蒸留を繰り返す。もし必要であれば、１，４−ジオキサンを付加し、混合液を元の体積の３０％まで希釈する。エチルシクロヘキサン（４８．３Ｌ／ｋｇ  ６８２−９）及び１，４−ジオキサン（３．６６Ｌ／ｇ  ６８２−９）を付加し、温度を４３〜４７℃の範囲に調節する。メタノール（３．２３Ｌ／ｋｇ  ６８２−９）を４０〜４５℃で少なくとも５分間かけて付加する。
【０１１２】
別の反応器中で、ＣＹＣ６８２種結晶（形態Ｂ）（１０ｇ／ｋｇ  ６８２−９）を、エチルシクロヘキサン（１３３３ｍＬ／ｋｇ  ６８２−９）、１，４−ジオキサン（１７７ｍＬ／ｋｇ  ６８２−９）及びメタノール（８９ｍＬ／ｋｇ  ６８２−９）（１５：２：１  ｖ／ｖ／ｖ）の混合液に付加する。結果として生じた混合液を、２０〜２５℃で少なくとも１時間攪拌し、しかるのちに４０〜４５℃の粗反応溶液に付加する。形態Ｋの結晶化が生じたのち、反応混合液を４０〜４５℃で少なくともさらに３０分間攪拌する。反応混合液を２０〜２３℃まで少なくとも１２０分間かけて冷却し、２０〜２３℃の範囲で少なくとも１時間維持する。結果として生じた固体を２つまでのロードで遠心分離により単離し、それぞれのロードをエチルシクロヘキサン（７．５Ｌ／ｋｇ  ６８２−９）、１，４−ジオキサン（１．０Ｌ／ｋｇ  ６８２−９）及びメタノール（０．５Ｕｋｇ  ６８２−９）の０〜５℃の混合液で洗浄する。産物を真空下３５〜４０℃で乾燥させて一定重量とし、ＣＹＣ６８２（形態Ｋ）を得る。
【０１１３】
（ii）６８２：形態Ｂ
ＣＹＣ６８２（形態Ｋ）を、約１．５〜２％低パイロジェン水（１６９．３ｍＵｋｇ  ＣＹＣ６８２）を含有するメチルアセテート（８．９Ｌ／ｋｇ  ＣＹＣ６８２）中に懸濁させる。懸濁液を２０〜２５℃（標的温度２２〜２４℃）で１．５時間攪拌し、形態変換を引き起こす。産物をNutsche濾過で単離し、メチルアセテート（２．２Ｌ／ｋｇ  ＣＹＣ６８２）及び低パイロジェン水（４２．３ｍＵｋｇ  ＣＹＣ６８２）の２０〜２５℃の混合液で洗浄する。産物を真空下４０℃以下で乾燥させて一定重量とし、ＣＹＣ６８２（形態Ｂ）を得る。
【０１１４】
ＣＹＣ６８２（形態Ｋ又はＢ）の再結晶化
ＣＹＣ６８２（形態Ｋ又はＢ）を１，４−ジオキサン（３．３３Ｌ／ｋｇ  ＣＹＣ６８２）及びエチルシクロヘキサン（２５Ｌ／ｋｇ  ＣＹＣ６８２）の混合液中に懸濁させ、混合液を４３〜４７℃の範囲に調節する。メタノール（１．６６Ｌ／ｋｇ  ＣＹＣ６８２）を４０〜５０℃で少なくとも５分間かけて付加し、溶解を達成する。ＣＹＣ６８２形態Ｂの溶解を達成するため、さらに過熱して６０℃とすることが必要とされてもよい。
【０１１５】
別の反応器中で、ＣＹＣ６８２種結晶（４〜１５ｇ／ｋｇ  ＣＹＣ６８２）を、エチルシクロヘキサン、１，４ジオキサン及びメタノール（１５：２：１  ｖ／ｖ／ｖ）の混合液に上の（i）節に記載のように付加する。結果として生じた混合液を２０〜２５℃で少なくとも１時間攪拌し、しかるのちに粗反応溶液に４０〜４５℃で付加する。形態Ｋの結晶化が生じたのち、反応混合液を４０〜４５℃で少なくともさらに３０分間攪拌する。反応混合液を２０〜２３℃にまで少なくとも１２０分間かけて冷却し、２０〜２３℃の範囲で少なくとも１時間維持する。結果として生じた固体を２つまでのロードで遠心分離により単離し、それぞれのロードを、エチルシクロヘキサン（３．８５２Ｌ／ｋｇ  ＣＹＣ６８２）、１，４−ジオキサン（０．５１４Ｌ／ｋｇ  ＣＹＣ６８２）及びメタノール（２５７ｍＬ／ｋｇ  ＣＹＣ６８２）の０〜５℃の混合液で洗浄する。産物を真空下３５〜４０℃で乾燥させて一定重量とし、ＣＹＣ６８２（形態Ｋ）を得る。
［比較例］
【０１１６】
比較研究
出願人による研究は、本願請求の方法ステップが以前に当技術分野において用いられていた方法に対し、収量の向上をもたらすことを示してきた。例を挙げれば、下の表１は、経路１（図１参照；先行技術の方法）及び経路１ａ（図２参照；本発明に沿う）におけるそれぞれのステップの収量を比較している。
【０１１７】
【表１】
0005563558.tif 000028
【０１１８】
表１が示すのは、合成における最初の２つのステップの逆転（経路１ａ、すなわち、アシル化ステップの前にＣＩＰＳ保護基を組み込むこと）と、シアン化ステップにおけるアセトンシアノヒドリン／ヘプタンの使用とにより、中間体６８２−５が高収量でもたらされるということである。比較すれば、ＣＩＰＳ保護基を組み込む前のアシル化の実施（経路１）と、当技術分野に知られた標準的なシアン化条件（例えば、Ｈ２Ｏ／ＥｔＯＡＣ中のＮａＣＮ、ＮａＨＣＯ３）の使用とにより、はるかに低い収量の６８２−５（３８％）がもたらされる。全体として２つの経路を比較すると、経路１では１９．９％のＣＹＣ６８２が得られるのに対し、経路１ａでは３９．８％のＣＹＣ６８２が得られる。
【０１１９】
本発明に記載の態様の様々な修正やバリエーションは、本発明の範囲と趣旨から逸脱することなく、当業者にとって明らかである。本発明が具体的な好ましい実施形態との関連で記載されているとはいえ、本願請求項記載の発明がかかる具体的実施形態に不当に限定されるべきでないことは理解されるべきである。実際、本発明を実施する記載の方法の、当業者にとって自明である様々な修正が、本願請求項の範囲内であると意図される。
【図１】
0005563558.tif 000031
【図２】
0005563558.tif 000032