(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（−）鏡像異性体としての一般式（Ｉ）の化合物
【化１】
0005612610.tif 000012
［式中、ｎは０または１であり、
Ｒ１およびＲ２は同じであっても異なっていてもよく、かつ
−  １個または複数のハロゲン原子によって場合により置換されている直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ６アルキル、
−  ＯＲ３｛ここで、Ｒ３は、１個もしくは複数のハロゲン原子またはＣ３〜Ｃ７シクロアルキル基で場合により置換されている直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ６アルキルである｝、および
−  ＨＮＳＯ２Ｒ４｛ここで、Ｒ４は、１個または複数のハロゲン原子で場合により置換されている直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ４アルキルである｝
からなる群から選択され、
ここで、Ｒ１およびＲ２の少なくとも一方はＨＮＳＯ２Ｒ４である］
薬学的に許容されるその無機もしくは有機塩、水和物または溶媒和物。
【請求項２】
Ｒ１がＨＮＳＯ２Ｒ４［ここで、Ｒ４はメチルである］であり、Ｒ２がＯＲ３［ここで、Ｒ３はシクロプロピルメチルである］であり、かつｎが０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１がＨＮＳＯ２Ｒ４［ここで、Ｒ４はメチルである］であり、Ｒ２がＯＲ３［ここで、Ｒ３はシクロプロピルメチルである］であり、かつｎが１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１がＯＲ３であり、Ｒ２がＨＮＳＯ２Ｒ４［ここで、Ｒ４はメチルである］であり、かつｎが１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１がメチルであり、Ｒ２がＨＮＳＯ２Ｒ４［ここで、Ｒ４はメチルである］であり、かつｎが１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１およびＲ２の両方がＨＮＳＯ２Ｒ４［ここで、Ｒ４はメチルである］であり、かつｎが０である、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１およびＲ２の両方がＨＮＳＯ２Ｒ４［ここで、Ｒ４はメチルである］であり、かつｎが１である、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
請求項１から７に記載の化合物の調製方法であって、アルデヒド（１）
【化２】
0005612610.tif 000013
をメチルジクロロピリジン（２）
【化３】
0005612610.tif 000014
と反応させてラセミアルコール（３）
【化４】
0005612610.tif 000015
を取得し、これを対応するＮ−オキシド誘導体（４）に場合により酸化するステップと、
（３）または（４）を、（Ｓ）−ナプロキセンまたは（Ｓ）−アセチルマンデル酸等のキラル酸と縮合して、ジアステレオマー混合物（１０）
【化５】
0005612610.tif 000016
または（５）
【化６】
0005612610.tif 000017
をそれぞれ取得するステップと、
ジアステレオ異性体混合物（１０）または（５）を、クロマトグラフィーまたは結晶化によって、それぞれ２つの単一ジアステレオ異性体（１１）
【化７】
0005612610.tif 000018
および（１３）
【化８】
0005612610.tif 000019
または（６）
【化９】
0005612610.tif 000020
および（８）
【化１０】
0005612610.tif 000021
に分離して、開裂後にアルコール（＋）（１４）
【化１１】
0005612610.tif 000022
または（＋）（７）
【化１２】
0005612610.tif 000023
および（−）（９）
【化１３】
0005612610.tif 000024
を得るステップと、
次いで、化合物（＋）（１４）または（＋）（７）を、適切な安息香酸（１５）
【化１４】
0005612610.tif 000025
と反応させて、一般式（Ｉ）の化合物［式中、Ｒ１およびＲ２は、請求項１で定義された通りである］を得るステップと
を含む方法。
【請求項９】
一般式（ＩＩ）の化合物
【化１５】
0005612610.tif 000026
［式中、ｎは請求項１で定義された通りであり、下方にアスタリスク付きで表示されている炭素原子は（Ｓ）配置を示す］。
【請求項１０】
請求項１から７に記載の式（Ｉ）の化合物と、β２アゴニスト、Ｍ３アンタゴニストおよびコルチコステロイドのクラスから選択される第２の薬学的活性成分とを含む医薬製剤。
【請求項１１】
第２の薬学的活性成分がホルモテロールまたはカルモテロールである、請求項１０に記載の医薬製剤。
【請求項１２】
請求項１から７に記載の式（Ｉ）の化合物または請求項１０もしくは１１に記載の医薬製剤と、１種または複数の薬学的に許容される担体および／または添加剤とを含む医薬組成物。
【請求項１３】
薬剤を製造するための請求項１から７に記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項１４】
喘息およびＣＯＰＤ等、気道閉塞を特徴とする呼吸器管の疾患の予防および／または治療のための医薬製剤を製造するための、請求項１から７に記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項１５】
請求項１２に記載の医薬組成物を含むことを特徴とする、単回もしくは多回用量ドライパウダー吸入器、定量吸入器およびソフトミストネブライザーから選択される、器具。
【請求項１６】
請求項１２に記載の医薬組成物と、単回もしくは多回用量ドライパウダー吸入器、定量吸入器およびソフトミストネブライザーから選択される、該医薬組成物を封入するための器具と、を含むキット。
【請求項１７】
アレルギー性鼻炎の予防および／または治療のための医薬製剤を製造するための、請求項１から７に記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【請求項１８】
アトピー性皮膚炎の予防および／または治療のための医薬製剤を製造するための、請求項１から７に記載の式（Ｉ）の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）酵素の阻害剤に関する。より詳細には、本発明は、１−フェニル−２−ピリジニルアルキルアルコール誘導体、その調製方法、それらを含む組成物、それらの組合せおよび治療的使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
気道閉塞は、喘息および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）を含む若干数の重篤な呼吸器疾患を特徴づけるものである。気道閉塞につながる事象は、気道壁の浮腫、粘液産生の増加および炎症を含む。
【０００３】
喘息およびＣＯＰＤ等の呼吸器疾患を治療するための薬物は、現在、吸入によって投与されている。全身経路に勝る吸入経路の利点の１つは、薬物を作用部位に直接送達し、いかなる全身性副作用も回避し、故に、より迅速な臨床応答およびより高い治療可能比を提供する可能性である。
【０００４】
吸入コルチコステロイドは、喘息に最適であり、かつ気管支拡張薬β２−アゴニストと共に急性症状の軽減に最適な現在の維持療法であり、これらが該疾患の現在の療法の主体となっている。ＣＯＰＤの現在の管理は、ほとんどが、吸入抗コリン薬および吸入β２−アドレナリン受容体アゴニストを用いる気管支拡張療法を利用する対症性のものである。しかしながら、コルチコステロイドは、喘息においては炎症応答を低減するが、ＣＯＰＤにおいては低減しない。
【０００５】
喘息およびＣＯＰＤ等の炎症性呼吸器疾患の治療に対するその抗炎症作用の点で調査中である別のクラスの治療剤は、ホスホジエステラーゼ酵素（ＰＤＥ）、特にホスホジエステラーゼ４型（以後、ＰＤＥ４と称する）の阻害剤によって代表される。
【０００６】
ＰＤＥ４阻害剤として作用する種々の化合物が開示されてきた。しかしながら、ロリプラムおよびピクラミラスト等、第１世代の数種のＰＤＥ４阻害剤の有用性は、中枢神経系におけるＰＤＥ４に対する作用に起因する、および消化管内の壁細胞におけるＰＤＥ４に対する作用に起因する、悪心、胃酸分泌および嘔吐等、それらの望ましくない副作用のために限定されていた。
【０００７】
前記副作用の原因は、広範に調査されてきた。
【０００８】
ＰＤＥ４は、特に中枢神経系および壁細胞に存在する高親和性ロリプラム結合部位つまりＨＰＤＥ４、ならびに低親和性ロリプラム結合部位つまりＬＰＤＥ４として指定された異なる立体配座を表す２つの異なる形態で存在し（Jacobitz, Sら、Mol. Pharmacol、1996、50、891〜899）、免疫細胞および炎症細胞において見られることが分かっている。いずれの形態も触媒活性を呈するようであるが、阻害剤に対するそれらの感受性に関しては異なっている。特に、ＬＰＤＥ４に対してより高い親和性を有する化合物は、悪心、嘔吐および胃液分泌増加等の副作用を誘発する傾向が低いようである。
【０００９】
ＬＰＤＥ４を標的とする試みは、シロミラストおよびロフルミラスト等の第２世代ＰＤＥ４阻害剤の選択性においてわずかな改善をもたらした。しかしながら、これらの化合物にさえ、ＬＰＤＥ４に対する良好な選択性は備わっていない。
【００１０】
選択的ＬＰＤＥ４阻害活性を有する化合物は、WO 2009/018909において開示されている。
【００１１】
１−フェニル−２−ピリジニルアルキレンアルコールおよびＰＤＥ４阻害剤としてのそれらの使用も、WO 2008/006509において記載されている。
【００１２】
本発明は、優れたＬＰＤＥ４選択性を有する一連の強力な新規ＰＤＥ４阻害剤を提供する。
【００１３】
驚いたことに、ベンゾエート残基上におけるスルホンアミド置換基の存在は、効力を著しく改善することが分かった。
【００１４】
その上、驚いたことに、（−）鏡像異性体（下方にアスタリスクが付けられた炭素原子を参照）である本発明のスルホニルアミド誘導体は、対応する（＋）鏡像異性体およびラセミ体よりも強力であることが分かった。
【００１５】
今や、呼吸器管の炎症性または閉塞性疾患の治療において、本発明の化合物を長時間作用型β２−アゴニストと組み合わせて使用すると、予想外に有益な治療効果、特に相乗効果が達成されることが分かっている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１６】
【特許文献１】WO 2009/018909
【特許文献２】WO 2008/006509
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１７】
発明の概要
本発明は、ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）酵素の阻害剤として作用する（−）鏡像異性体としての一般式（Ｉ）の化合物、その調製方法、それらを含む組成物、およびそれらの治療的使用
【００１８】
【化１】
0005612610.tif 000002
【００１９】
［式中、
ｎは０または１であり、
Ｒ１およびＲ２は同じであっても異なっていてもよく、かつ
−  １個または複数のハロゲン原子によって場合により置換されている直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ６アルキル、
−  ＯＲ３｛ここで、Ｒ３は、１個もしくは複数のハロゲン原子またはＣ３〜Ｃ７シクロアルキル基で場合により置換されている直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ６アルキルである｝、および
−  ＨＮＳＯ２Ｒ４｛ここで、Ｒ４は、１個または複数のハロゲン原子で場合により置換されている直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ４アルキルである｝
からなる群から選択され、
ここで、Ｒ１およびＲ２の少なくとも一方はＨＮＳＯ２Ｒ４である］
を対象とする。
【００２０】
本発明は、薬学的に許容されるその水和物、溶媒和物、付加錯体、無機または有機塩、例えば、ナトリウム、カリウムおよびリジン塩も包含する。
【００２１】
本発明は、スキーム１で報告される通りの式（Ｉ）の化合物の調製方法であって、アルデヒド（１）をメチルジクロロピリジン（２）と反応させてラセミアルコール（３）を取得するステップを含む方法も対象とする。次いで、この後者を、（Ｓ）−ナプロキセンまたは（Ｓ）−アセチルマンデル酸等のキラル酸と縮合して、スキーム１の経路１または２のように、ジアステレオマー混合物（１０）または（５）をそれぞれ取得する。それぞれ単一ジアステレオ異性体（１１）および（１３）または（６）および（８）への分離を、クロマトグラフィー、結晶化または他の周知の方法によって行い、開裂後、それぞれ鏡像異性アルコール（−）（１２）および（＋）（１４）または（＋）（７）および（−）（９）を得る。最後に、適切な安息香酸（１５）、鏡像異性体（＋）（１４）または（＋）（７）との反応により、一般式（Ｉ）の化合物を得る。
【００２２】
本発明は、式（Ｉ）の化合物［式中、ｎはスキーム１で報告される通り０である］の調製方法であって、任意の鏡像異性アルコール、例えば（＋）（１４）の、安息香酸（１５）との反応を含む方法も対象とする。
【００２３】
本発明は、式（Ｉ）の化合物［式中、ｎはスキーム１で報告される通り１である］の調製方法であって、３−クロロ過安息香酸、過酢酸または過酸化水素等の酸化剤を利用する鏡像異性アルコール（＋）（１４）の酸化によってアルコール（＋）鏡像異性体（７）を取得し、これを式の安息香酸（１５）と反応させて式（Ｉ）の化合物［式中、ｎは１である］を得ることを含む方法も対象とする。
【００２４】
本発明は、式（Ｉ）の化合物［式中、ｎはスキーム１で報告される通り１である］の調製方法であって、３−クロロ過安息香酸、過酢酸または過酸化水素等の酸化剤を利用する式（Ｉ）のエステル［式中、ｎは０である］の酸化を含む方法も対象とする。
【００２５】
本発明は、一般式（ＩＩ）の中間化合物
【００２６】
【化２】
0005612610.tif 000003
【００２７】
［式中、ｎは上記で定義された通りであり、かつ下方にアスタリスク付きで表示されている炭素原子は（Ｓ）配置を示す］
も対象とする。
【００２８】
本発明は、式（Ｉ）の化合物と、１種または複数の薬学的に許容される担体および／または添加剤とを含む医薬組成物も提供する。
【００２９】
本発明は特に、吸入による投与に適した医薬調製物を提供する。
【００３０】
本発明は、式（Ｉ）の化合物と、長時間作用型β２アゴニスト、Ｍ３アンタゴニストおよびコルチコステロイドのクラスから選択される第２の成分との組合せも提供する。
【００３１】
本発明は、式（Ｉ）の化合物と、カルモテロール、ＧＳＫ−６４２４４４、インダカテロール、ミルベテロール、アルホルモテロール、ホルモテロール、サルブタモール、ホルモテロール、レバルブテロール、テルブタリン、ＡＺＤ−３１９９、ＢＩ−１７４４−ＣＬ、ＬＡＳ−１００９７７、バンブテロール、イソプロテレノール、プロカテロール、クレンブテロール、レプロテロール、フェノテロールおよびＡＳＦ−１０２０からなる群から選択される長時間作用型β２アゴニストとの組合せも提供する。
【００３２】
本発明は、式（Ｉ）の化合物と、アクリジニウム、チオトロピウム、イプラトロピウムおよびオキシトロピウムからなる群から選択されるＭ３アンタゴニストとの組合せも提供する。
【００３３】
本発明は、式（Ｉ）の化合物と、デキサメタゾン、フルチカゾン、フルチカゾンフロエート、プレドニゾロン、ベタメタゾン、ブデソニド、モメタゾン、モメタゾンフロエート、トリアムシノロンアセトニド、シクレソニド、ＴＰＩ−１０２０、ベクロメタゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、プレドニゾン、デフラザコルト、ヒドロコルチゾン、ＱＡＥ−３９７およびフルニソリドからなる群から選択されるコルチコステロイドとの組合せも提供する。
【００３４】
好ましい実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の化合物とホルモテロールまたはカルモテロールとの組合せを提供する。
【００３５】
本発明は、薬剤として使用するための、式（Ｉ）の化合物も提供する。
【００３６】
ＰＤＥ４受容体の活性が関係し、ＰＤＥ４受容体活性の阻害が望まれる任意の疾患の予防または治療用の薬剤の調製における、式（Ｉ）の化合物の使用も提供される。
【００３７】
本発明は、ＰＤＥ４受容体の活性が関係し、ＰＤＥ４受容体活性の阻害が望まれる任意の疾患の予防または治療ための方法であって、それを必要とする患者に、治療有効量の式（Ｉ）の化合物を投与するステップを含む方法も提供する。
【００３８】
上記の使用または方法は、式（Ｉ）の化合物を、単独で、または先に報告したもののうち他の有効成分と組み合わせてのいずれかで含む。
【００３９】
ＰＤＥ４受容体の活性およびＰＤＥ４受容体の阻害が関係する上記の疾患は、喘息およびＣＯＰＤ等、気道閉塞を特徴とする呼吸器管の疾患を含む。
【００４０】
さらに、本発明は、ＰＤＥ４のインビトロ阻害のための式（Ｉ）の化合物の使用も対象とする。
【００４１】
本発明は、式（Ｉ）の化合物を含む、単回もしくは多回用量ドライパウダー吸入器、定量吸入器またはソフトミストネブライザーであってよいデバイスも対象とする。
【００４２】
本発明は、式（Ｉ）の化合物の医薬組成物を、単独で、または１種もしくは複数の薬学的に許容される担体および／もしくは添加剤と混和された追加の医薬成分と組み合わせて、ならびに、単回もしくは多回用量ドライパウダー吸入器、定量吸入器またはソフトミストネブライザーであってよいデバイスを含むキットも対象とする。
定義
用語「ハロゲン原子」は、本明細書において使用される場合、フッ素、塩素、臭素およびヨウ素を含む。
【００４３】
本明細書において使用される場合、Ｃ１〜Ｃ６またはＣ１〜Ｃ４アルキル等、表現「直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃｘアルキル［ここで、ｘは１を超える整数である］」は、炭素原子の数が１からｘ（例えば、１から６または１から４）の範囲内である直鎖または分枝鎖アルキル基を指す。故に、アルキル基の例は、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル等を含み得る。
【００４４】
場合により、前記基中、１個または複数の水素原子は、ハロゲン原子、好ましくは塩素またはフッ素によって置き換えられていてよい。
【００４５】
本明細書において使用される場合、表現「Ｃ３〜Ｃ７シクロアルキル」は、３から７個の環炭素原子を含有する環式非芳香族炭化水素基を指す。故に、それらの例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルおよびシクロヘプチルを含み得る。
【００４６】
キラル化合物に言及する場合、別段の定めがない限り、本明細書における「実質的に純粋な」純度は、少なくとも約９７％を超えて、好ましくは９９％を超えて、最も好ましくは９９．９％を超えてキラル的に純粋であることを意味する。
【図面の簡単な説明】
【００４７】
【図１】図は、本発明の好ましい実施形態のための相乗作用の存在を示す。ＯＡ＝オボアルブミン（Ｏｖｏａｌｂｕｍｉｎ）Ｃ１＝３−シクロプロピルメトキシ−４−メタンスルホニルアミノ−安息香酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−エチルエステルＣＡＲＭ＝カルモテロール発明の詳細な説明  本発明は、ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）酵素の阻害剤として作用する化合物を対象とする。
【００４８】
前記化合物は、環状ヌクレオチド、特に環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）の、それらの不活性５’−モノヌクレオチド形態への変換を阻害する。
【００４９】
気道において、環状ヌクレオチドの、特にｃＡＭＰの細胞内レベル上昇に対する生理学的応答は、マスト細胞、マクロファージ、Ｔリンパ球、好酸球および好中球等の免疫細胞および炎症誘発性細胞の活性の抑制につながり、ＩＬ−１、ＩＬ−３および腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）等のサイトカインを含む炎症性メディエーターの放出の減少をもたらす。該応答は、気道平滑筋弛緩および浮腫の減少にもつながる。
【００５０】
ＰＤＥ４の触媒部位は以前に同定されており、２つのサブポケット、例えばＳ０およびＳ１が存在する疎水性領域と、同じく金属イオンを拡散させるサブポケットＳ２および疎水性ポケットの中央から約９０°分枝しているサブポケットＳ３を含む、金属イオンＺｎ２＋およびＭｇ２＋を含有する親水性領域とを主として含む。
【００５１】
公知の化合物のほとんどには、置換カテコール（ｃａｔｈｅｃｏｌ）基等の疎水性領域のサブポケットＳ０およびＳ１と相互作用することができる部分、ならびに、Ｓ２サブポケットの金属イオン、例えばピリジンまたはピロリドン等の複素環と間接的に相互作用することができる別の部分が備わっている。
【００５２】
本発明は、置換カテコール部分を利用してサブポケットＳ０およびＳ１との相互作用を、また他の公知のＰＤＥ４阻害剤のようなピリジン環を利用して金属イオン領域との相互作用を維持することができるが、スルホニルアミノ−安息香酸基の存在については、サブポケットＳ３との追加の相互作用を確立することができるものとは異なる化合物を対象とする。
【００５３】
特に、本発明は、薬学的に許容されるその無機および有機塩、水和物、溶媒和物または付加錯体を含む、先に定義した通りの一般式（Ｉ）の化合物に関する。
【００５４】
【化３】
0005612610.tif 000004
【００５５】
式（Ｉ）の化合物の好ましい群は、
−  Ｒ１がＨＮＳＯ２Ｒ４であり、Ｒ２がＯＲ３であり、かつｎが０である、
−  Ｒ１がＨＮＳＯ２Ｒ４であり、Ｒ２がＯＲ３であり、かつｎが１である、
−  Ｒ１がＨＮＳＯ２Ｒ４［ここで、Ｒ４はメチルである］であり、Ｒ２がＯＲ３［ここで、Ｒ３はシクロプロピルメチルである］であり、かつｎが０である、
−  Ｒ１がＨＮＳＯ２Ｒ４［ここで、Ｒ４はメチルである］であり、Ｒ２がＯＲ３［ここで、Ｒ３はシクロプロピルメチルである］であり、かつｎが１である、
−  Ｒ１が直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ２がＨＮＳＯ２Ｒ４であり、かつｎが０である、
−  Ｒ１がメチルであり、Ｒ２がＨＮＳＯ２Ｒ４［ここで、Ｒ４はメチルである］であり、かつｎが０である、
−  Ｒ１が直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ２がＨＮＳＯ２Ｒ４であり、かつｎが１である、
−  Ｒ１がメチルであり、Ｒ２がＨＮＳＯ２Ｒ４［ここで、Ｒ４はメチルである］であり、かつｎが１である、
−  Ｒ２が直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ１がＨＮＳＯ２Ｒ４であり、かつｎが０である、
−  Ｒ２がメチルであり、Ｒ１がＨＮＳＯ２Ｒ４［ここで、Ｒ４はメチルである］であり、かつｎが０である、
−  Ｒ２が直鎖または分枝鎖Ｃ１〜Ｃ６アルキルであり、Ｒ１がＨＮＳＯ２Ｒ４であり、かつｎが１である、
−  Ｒ２がメチルであり、Ｒ１がＨＮＳＯ２Ｒ４［ここで、Ｒ４はメチルである］であり、かつｎが１である、
−  Ｒ１がＯＲ３であり、Ｒ２がＨＮＳＯ２Ｒ４であり、かつｎが０である、
−  Ｒ１がＯＲ３であり、Ｒ２がＨＮＳＯ２Ｒ４であり、かつｎが１である、
−  Ｒ１がＯＲ３［ここで、Ｒはシクロプロピルメチルである］であり、Ｒ２がＨＮＳＯ２Ｒ４であり、Ｒ４がメチルであり、かつｎが１である、
−  Ｒ１がＯＲ３であり、Ｒ２がＨＮＳＯ２Ｒ４であり、かつｎが１である、
−  Ｒ１およびＲ２の両方がＨＮＳＯ２Ｒ４であり、かつｎが０である、
−  Ｒ１およびＲ２の両方がＨＮＳＯ２Ｒ４［ここで、Ｒ４はメチルである］であり、かつｎが０である、
−  Ｒ１およびＲ２の両方がＨＮＳＯ２Ｒ４であり、かつｎが１である、
−  Ｒ１およびＲ２の両方がＨＮＳＯ２Ｒ４［ここで、Ｒ４はメチルである］であり、かつｎが１である
化合物である。
【００５６】
一般式（Ｉ）の化合物は、下方にアスタリスク付きの炭素原子によって現在表示されている１つの不斉中心を少なくとも含有し、したがって、光学立体異性体として存在することが、当業者には明らかであろう。
【００５７】
本発明は、下方にアスタリスク付きで表示されている炭素原子において配置（Ｓ）を有する（−）鏡像異性体である式（Ｉ）の化合物を対象とする。
【００５８】
本発明は、下方にアスタリスク付きで表示されている炭素原子が（Ｓ）配置を示す式（ＩＩ）の中間化合物も対象とする。
【００５９】
式（Ｉ）の化合物は、ｎＭ範囲内のＰＤＥ４酵素に対するインビトロ阻害活性を示し、該化合物には、ＣＯＰＤの動物モデルにおいて、気管内投与時、肺における顕著な活性が与えられている。
【００６０】
該化合物は、短時間の全身作用の指標である、血奬中では検出不可能な、肺における持続性肺レベルも呈し得る。
【００６１】
好ましい実施形態によれば、本発明は、以下で報告される式（Ｉ）の化合物を提供する。
【００６２】
【表１】
0005612610.tif 000005
【００６３】
上記の化合物は便宜上（−）鏡像異性体として同定されているが、該化合物は、アスタリスクが付けられた炭素原子において（Ｓ）配置を有する。そのため、同化合物を、下記の表のように同定してもよい。
【００６４】
【表２】
0005612610.tif 000006
【００６５】
有利なことに、それらのＩＣ５０値の決定によって取得される通り、本発明の化合物は、ＨＰＤＥ４に対するものよりも高いＬＰＤＥ４に対する選択性を特徴とする。
【００６６】
ＬＰＤＥ４の場合、ＩＣ５０は、Cortijo Jら、Br J Pharmacol、1993、108：562〜568において記載されている通りに評価したｃＡＭＰ消失の５０％阻害を生じさせる試験化合物のモル濃度である。代わってＨＰＤＥ４の場合、ＩＣ５０は、Duplantier AJら、J Med Chem、1996、39：120〜125に記載されている通りに評価した［Ｈ３］ロリプラムの結合の５０％阻害を生じさせる試験化合物のモル濃度である。
【００６７】
好ましくは、本発明の化合物についてのＨＰＤＥ４／ＬＰＤＥ４のＩＣ５０比は、５を超え、より好ましくは１０を超え、より一層好ましくは２０を超え、最も好ましくは１００を超える。
【００６８】
式（Ｉ）の化合物は、公知の方法に従って慣習的に調製できる。使用され得る方法のいくつかを以下に記載し、スキーム１において報告する。
【００６９】
【化４】
0005612610.tif 000007
【００７０】
式（Ｉ）の化合物の調製のための手順
本発明の特定の実施形態によれば、式（Ｉ）の化合物は、例えば、スキーム１において記載されている合成経路に準じて調製できる。
【００７１】
ラセミアルコール（３）は、アルデヒド（１）をメチルジクロロピリジン（２）と反応させることによって調製できる。
【００７２】
経路１−  ラセミアルコール（３）は、ラセミ混合物を適切なキラル補助基と反応させ、それによりジアステレオ異性体の混合物を取得することによって等、公知の方法によって（−）（１２）および（＋）（１４）鏡像異性体に分離できる。そのようなジアステレオ異性体は、結晶化によってもしくはクロマトグラフィーによって、または公知の方法に従って酵素を利用して、分離できる。その後、キラル補助基をジアステレオ異性体から除去して、所望のキラルアルコールを単一鏡像異性体として得ることができる。代替として、アルコールラセミ混合物を、公知の方法に従い、キラル固定相を用いるクロマトグラフィーを利用して分割してもよい（参照：「Enantiomer Separation: Fundamentals and Practical Methods」、F. Toda、Springer- Verlag、2004；「Drug Stereochemistry: Analytical Methods and Pharmacology」、Irving W. Wainer、CRC Press、1993）。
【００７３】
特に、ラセミアルコール（３）は（Ｓ）−ナプロキセン等のキラル酸と縮合することができ、取得したジアステレオマー混合物（１０）をクロマトグラフィーによって２つの単一ジアステレオ異性体（１１）および（１３）に分離することができる。水性溶媒中での加水分解による、またはアルコール溶媒中でのアルコール分解による、酸性または塩基性条件を使用する単一ジアステレオマーエステルの開裂後、鏡像異性的に純粋なアルコール中間体（−）（１２）および（＋）（１４）が取得され得る。
【００７４】
経路２−  従来の方法に従って行われたラセミ体（３）の酸化によって取得されたラセミ体（４）を、（Ｓ）−アセチルマンデル酸等のキラル酸と反応させて、２つのジアステレオ異性体の混合物（５）を取得することができる。ジエチルエーテルでの粉砕およびイソプロパノール、エタノールまたはメタノール等の溶媒中における結晶化によって、またはクロマトグラフ分離によって、単一ジアステレオマーエステル（６）および（８）が取得され得る。
【００７５】
水性溶媒中での加水分解による、またはアルコール溶媒中でのアルコール分解による、酸性または塩基性条件を使用する単一ジアステレオマーエステルの開裂後、鏡像異性的に純粋なアルコール中間体（＋）（７）および（−）（９）が取得され得る。
【００７６】
一般式（Ｉ）の化合物［式中、ｎは０である］は、適正な鏡像異性アルコール（＋）（１４）を、安息香酸（１５）と、リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）、ＮａＨまたはジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）等の適切な強塩基の存在下、かつ１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）またはＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）等の縮合剤の存在下、ジクロロメタン等の溶媒中で反応させることによって調製できる。ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、クロロホルム、ジオキサン、または当業者に公知である任意の他の非プロトン性溶媒等、他の溶媒を使用してもよい。特定の実施形態において、反応は、溶媒の不在下で行われることもある。
【００７７】
式（Ｉ）の化合物［式中、ｎは１である］は、対応する式（Ｉ）の化合物［式中、ｎは０である］を、３−クロロ過安息香酸、過酢酸または過酸化水素等の酸化剤を利用して、クロロホルム、ジクロロメタンまたは酢酸等の溶媒中で酸化させることによって調製できる（経路Ｂ）。
【００７８】
代替として、式（Ｉ）の化合物［式中、ｎは１である］は、最初に前述の動作条件を利用してアルコール鏡像異性体（＋）（１４）を酸化させ、それにより、アルコール鏡像異性体（＋）（７）を取得することによって調製することもできる。所与のアルコール鏡像異性体と式（１５）の安息香酸との間の後続反応により、上記の式（Ｉ）の化合物［式中、ｎは０である］が提供される（経路Ａ）。
【００７９】
ラセミアルコール（３）の酸化によって変化して取得されたラセミアルコール（４）からの（＋）（７）および（−）（９）鏡像異性体の分離は、ラセミアルコール（３）の鏡像異性体の分離について上記で記載した通り、公知の方法によって行われ得る。
【００８０】
当業者であれば、スキーム１において報告されている合成ステップに対する任意選択の変形が、本発明の化合物の調製にも適用され得ることを承知しているはずである。
【００８１】
本出願人らは、特に、所望化合物またはその中間体を得られるように実施され得る反応の順序と、溶媒、任意選択の酸化剤、縮合剤等を含む、適合される動作条件の選択とに言及する。
【００８２】
例として、不要な副反応を引き起こすかもしれない化学反応性置換基が、出発材料またはその中間体のいずれか中に存在する場合、反応が起こる前に、同置換基の適切な保護が行われ得る。
【００８３】
類推によると、次いで、上記の化学反応性置換基または基を遊離形態で再度取得するように、後続の脱保護が行われ得る。
【００８４】
官能基の保護および脱保護については、「Protective Groups in Organic Chemistry」、第3版、T. W. GreeneおよびP.G.M. Wuts、Wiley-Interscience（1999）および「Protecting Groups」、P.J. Kocienski、Georg Thieme Verlag（1994）において記載されている。
【００８５】
本発明の化合物の調製のための本方法およびその改良形によれば、式（１）および（２）の出発材料ならびに任意の追加反応物［（例えば式（１５）のもの］、キラル補助基、溶媒、または用いられる作用物質は、公知であるか、または公知の方法に従って容易に調製できる。
【００８６】
本発明は、１種または複数の薬学的に許容される担体、例えばRemington's Pharmaceutical Sciences Handbook、第XVII版、Mack Pub.、N.Y.、U.S.Aにおいて記載されているものと混和された、式（Ｉ）の化合物の医薬組成物も提供する。
【００８７】
例は、賦形剤（スクロース、マンニトール、ラクトース、デンプン等）、ならびに、懸濁化剤、可溶化剤、緩衝剤、結合剤、崩壊剤、保存剤、着色剤、香味剤、滑沢剤等を含む公知の添加剤を含む。持続放出カプセル剤、錠剤およびゲル剤も、本発明の化合物を投与するのに有利である。
【００８８】
本発明の化合物の投与は、患者のニーズに従って、例えば、経口的に、経鼻的に、非経口的に、例えば、皮下に、静脈内に、筋肉内に、胸骨内におよび注入によって、吸入によって、経直腸的に、経膣的に、局所的に、局部的に、経皮的に、ならびに眼内投与によって、遂行され得る。本発明の化合物を投与するために、錠剤、ゲルキャップ剤、カプセル剤、カプレット剤、顆粒剤、ロゼンジ剤および混合散剤等の固体形態を含む種々の固体経口剤形が使用され得る。
【００８９】
本発明の化合物を投与するために、水性および非水性液剤、乳剤、懸濁剤、シロップ剤、ならびにエリキシル剤を含む種々の液体経口剤形を使用してもよい。そのような剤形は、水等の公知の適切な不活性賦形剤、ならびに、保存剤、湿潤剤、甘味料、香味剤、および本発明の化合物を乳化し、かつ／または懸濁させるための作用物質等の公知の適切な添加剤も含有し得る。本発明の化合物は、例えば、等張性無菌溶液の形態で静脈内に注射され得る。他の公知の調製物も可能である。
【００９０】
本発明の前記化合物の直腸投与用の坐剤は、化合物を、ココアバター、サリチレートおよびポリエチレングリコール等の適切な添加剤と混合することによって調製できる。
【００９１】
膣内投与用の製剤は、有効成分に加えて従来の担体を含有する、クリーム剤、ゲル剤、ペースト剤、フォーム剤またはスプレー剤処方の形態であってよい。
【００９２】
局所投与のために、医薬組成物は、クリーム剤、軟膏剤、リニメント剤、ローション剤、乳剤、懸濁剤、ゲル剤、液剤、ペースト剤、散剤、スプレー剤、および皮膚、眼、耳または鼻への投与に適した点滴剤の形態であってよい。局所投与は、例えば経皮パッチ剤を利用する経皮投与を伴ってもよい。
【００９３】
呼吸器管の疾患の治療のために、本発明の化合物は、好ましくは吸入によって投与される。
【００９４】
吸入用調製物は、吸入用散剤、噴射剤含有定量エアゾール剤または噴射剤を含有しない吸入用製剤を含む。
【００９５】
ドライパウダーとしての投与のために、公知の単回または多回用量吸入器が利用され得る。その場合、散剤が、ゼラチン、プラスチックもしくは他のカプセル、カートリッジまたはブリスターパック内に、あるいはレザバー内に充填され得る。
【００９６】
本発明の化合物に対し概して化学的に不活性である賦形剤または担体、例えば、ラクトースまたは呼吸性画分を改善するのに適した任意の他の添加物を、本発明の粉末化合物に添加してよい。
【００９７】
ヒドロフルオロアルカン等の噴射剤ガスを含有する吸入用エアゾール剤は、本発明の化合物を溶液または分散形態のいずれかで含有し得る。噴射剤駆動の製剤は、共溶媒、安定剤および場合により他の添加剤等の他の成分も含有し得る。
【００９８】
本発明の化合物を含む噴射剤を含有しない吸入用製剤は、水性、アルコール性または水アルコール性媒質中の溶液または懸濁液の形態であってよく、該製剤は、公知のジェット式もしくは超音波式ネブライザーによって、またはＲｅｓｐｉｍａｔ（登録商標）等のソフトミストネブライザーによって送達され得る。
【００９９】
本発明の化合物は、唯一の活性剤として、または、呼吸器障害の治療において現在使用されている成分、例えば、β２−アゴニスト、コルチコステロイドおよびＭ３アンタゴニストを含む、１種もしくは複数の他の薬学的有効成分と組み合わせて投与され得る。
【０１００】
本発明の化合物の投薬量は、治療される特定の疾患、症状の重症度、投与経路、投与間隔の頻度、利用される特定の化合物、化合物の有効性、毒性プロファイルおよび薬物動態プロファイルを含む様々な要因によって決まり得る。
【０１０１】
有利なことに、式（Ｉ）の化合物は、例えば、０．００１から１０００ｍｇ／日の間、好ましくは０．１から５００ｍｇ／日の間に含まれる投薬量で投与され得る。
【０１０２】
吸入経路によって投与される場合、式（Ｉ）の化合物の投薬量は、有利なことに、０．０１から２０ｍｇ／日の間、好ましくは０．１から１０ｍｇ／日の間に含まれる。
【０１０３】
好ましくは、単独のまたは他の有効成分と組み合わせた式（Ｉ）の化合物は、喘息、慢性気管支炎および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）等、任意の閉塞性呼吸器疾患の予防および／または治療のために投与され得る。
【０１０４】
しかしながら、式（Ｉ）の化合物は、ＰＤＥ４受容体の活性が関係しており、かつＰＤＥ４受容体活性の阻害が望まれる任意の疾患、またはＰＤＥ４活性によって媒介される病状（例えば、ＰＤＥ４が過剰発現または過剰活性している病状）の予防および／または治療のために投与され得る。そのような疾患の例は、アトピー性皮膚炎、蕁麻疹、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、春季カタル等のアレルギー性病状、好酸球性肉芽腫、乾癬、炎症性関節炎、関節リウマチ、敗血性ショック、潰瘍性結腸炎、クローン病、心筋および脳の再灌流傷害、慢性糸球体腎炎、内毒素性ショック、嚢胞性線維症、動脈再狭窄、アテローム性動脈硬化症、角化症、リウマチ様脊椎炎、変形性関節炎、発熱（ｐｙｒｅｓｉｓ）、真性糖尿病、塵肺症、毒性およびアレルギー性接触湿疹、アトピー性湿疹、脂漏性湿疹、単純苔癬、日焼け、肛門性器部のそう痒、円形脱毛症、肥厚性瘢痕、円板状エリテマトーデス、全身性エリテマトーデス、毛包性および広範性膿皮症（ｗｉｄｅ−ａｒｅａ  ｐｙｏｄｅｒｍｉａｓ）、内因性および外因性座瘡、酒さ性座瘡、ベーチェット（Ｂｅｇｈｅｔ’ｓ）病、アナフィラクトイド紫斑病性腎炎、炎症性腸疾患、白血病、多発性硬化症、消化器疾患、自己免疫疾患等を含む。
【０１０５】
該疾患の例は、アルツハイマー病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、多系統萎縮症（ＭＳＡ）、統合失調症、パーキンソン病、ハンチントン病、ピック病、鬱病、脳卒中および脊髄損傷等の神経および精神障害も含む。
【０１０６】
ここから、下記の例によって本発明をさらに説明する。
例１
１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−エタノール（３）の調製
５０ｍｌの乾燥ＴＨＦ中の３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−ベンズアルデヒド（５．００ｇ）および３，５−ジクロロ−４−メチルピリジン（２．５７ｇ）の溶液を、−３０℃に冷却した。
【０１０７】
温度を−３０℃から−２０℃の間に維持しながら、固体カリウムｔ−ブトキシド（ｔＢｕＯＫ、１．９６ｇ）を小分けにして添加し、それにより、暗赤色溶液を取得した。添加の完了後、混合物を−３０℃で１時間撹拌した。次いで、温度を−５℃から−１０℃の間に維持しながら、ＮＨ４Ｃｌの飽和水溶液（５０ｍｌ）を反応混合物に添加した。反応混合物の色が黄色に変わった。
【０１０８】
次いで、混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を蒸発除去した。残留物を石油エーテル／ＥｔＯＡｃ＝８／２の混合物３０ｍｌで処理し、沈澱物を濾過し、乾燥させて、４．８３ｇの表題化合物を取得し、これをさらに精製することなく次のステップにおいて用いた。
ＭＳ／ＥＳＩ＋  ４０４−４０６  ［ＭＨ］＋。
例２
１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イル）−エタノール（４）の調製
化合物（３）（１３．０ｇ）をＣＨ２Ｃｌ２（２５０ｍｌ）に溶解し、次いでｍ−クロロ過安息香酸（１６．５ｇ）を添加し、得られた溶液を室温で２時間撹拌した。Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（２５．４ｇ）を添加し、混合物を室温で１時間激しく撹拌した。固体残留物を濾過除去し、溶液を１Ｎ  ＮａＯＨ（３×１００ｍｌ）で洗浄し、次いで有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を蒸発除去して、１０．３ｇの所望生成物（４）を白色固体として得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。
ＭＳ／ＥＳＩ＋  ４２０−４２２  ［ＭＨ］＋。
例３
アセトキシ−フェニル−酢酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イル）−エチルエステル（５，ジアステレオ異性体の混合物）の調製
化合物（４）（１９．９５ｇ）、（Ｓ）−アセチルマンデル酸（９．２２ｇ）、１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩（１８ｇ）および４−ジメチルアミノピリジン（２．８９ｇ）を、Ｎ２雰囲気下、乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（３００ｍｌ）に溶解した。反応混合物を室温で終夜撹拌した。ＮａＨＣＯ３の５％水溶液（２００ｍｌ）を添加し、水相をＣＨ２Ｃｌ２（３×１００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を減圧下で蒸発させて、表題化合物（５）を２つのジアステレオ異性体の混合物（３２ｇ）として得た。２つのジアステレオ異性体の分離については、例４および６において記載する。
例４
（＋）−アセトキシ−フェニル−酢酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イル）−エチルエステル（６）の調製
粗製ジアステレオマー混合物（５）（３２ｇ）をＥｔ２Ｏ（１００ｍｌ）で粉砕し、音波破砕し、濾過した。ジアステレオ異性体が豊富な固体混合物（６）を取得するために、手順を４回繰り返した。この固体をｉＰｒＯＨ（８０ｍｌ）から結晶化し、濾過して、ジアステレオマー純度が９５％超である９．６５ｇの化合物（６）を得た。ジアステレオマー純度は、ＨＰＬＣ分析およびキラルセル（Ｃｈｉｒａｃｅｌ）ＯＤカラム上で実施した分析用キラルＨＰＬＣ（ヘキサン：イソプロパノール  ４０：６０による定組成溶離、流量０．４５ｍｌ／分、保持時間＝２７．２分）によって決定した。
ＭＳ／ＥＳＩ＋  ５９６，５９８  ［ＭＨ］＋。
’１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）ｐｐｍ  ８．５７（ｓ，２Ｈ），７．２７〜７．４４（ｍ，５Ｈ），６．９１〜７．１８（ｍ，１Ｈ），７．０３（ｔ，１Ｈ），６．７１〜６．７９（ｍ，２Ｈ），５．９５（ｄｄ，１Ｈ），５．８５（ｓ，１Ｈ），３．７２（ｄｄ，１Ｈ），３．６０（ｄｄ，１Ｈ），３．４１（ｄｄ，１Ｈ），３．２３（ｄｄ，１Ｈ），２．１３（ｓ，３Ｈ），１．０７〜１．３１（ｍ，１Ｈ），０．４８〜０．７２（ｍ，２Ｈ），０．２１〜０．４４（ｍ，２Ｈ）
［α］Ｄ＝＋１４°（ｃ＝０．５４，ＭｅＯＨ）
例５
（＋）−１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イル）−エタノール（７）の調製
化合物（６）（６．４２ｇ）をメタノール（３５０ｍｌ）に懸濁させ、次いでＮａＨＣＯ３の飽和溶液（１７５ｍｌ）を添加した。白色懸濁液を室温で終夜激しく撹拌した。反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（７００ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３の５％水溶液（３００ｍｌ）で洗浄し、水相をＣＨ２Ｃｌ２（２×３００ｍｌ）で抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を真空下で蒸発除去した。取得した粗白色固体をＥｔ２Ｏ（２×１００ｍｌ）で粉砕し、濾過して、鏡像異性体純度が９９％超である３．８８ｇの化合物（７）を得た。鏡像異性体純度は、キラルセルＯＤカラム上で実施した分析用キラルＨＰＬＣ（ヘキサン：イソプロパノール  ３０：７０による定組成溶離、流量０．３５ｍｌ／分、保持時間＝２２．３分）によって決定した。
ＭＳ／ＥＳＩ＋  ４２０−４２２  ［ＭＨ］＋。
’１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）ｐｐｍ  ８．５１（ｓ，２Ｈ），７．１１（ｄ，１Ｈ），７．０５（ｄ，１Ｈ），６．８８（ｄｄ，１Ｈ），７．０１（ｔ，１Ｈ），５．５９（ｄ，１Ｈ），４．８４（ｄｄ，１Ｈ），３．８９（ｄｄ，１Ｈ），３．８４（ｄｄ，１Ｈ），３．１８（ｄｄ，１Ｈ），３．０２（ｄｄ，１Ｈ），１．０３〜１．３５（ｍ，１Ｈ），０．４６〜０．６７（ｍ，２Ｈ），０．２４〜０．４６（ｍ，２Ｈ）
［α］Ｄ＝＋６８°（ｃ＝０．５，ＭｅＯＨ）
例６
（＋）−アセトキシ−フェニル−酢酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イル）−エチルエステル（８）の調製
粗製ジアステレオマー混合物（５）をＥｔ２Ｏ（１００ｍｌ）で粉砕し、音波破砕し、濾過した。手順を４回繰り返し、濾液を収集し、減圧下で蒸発させて、ジアステレオ異性体が豊富な固体混合物（８）を得、これをｉＰｒＯＨ（１００ｍｌ）から結晶化して、６．４ｇの化合物（８）を、ジアステレオマー純度が９９％超である白色固体として得た。ジアステレオマー純度は、ＨＰＬＣ分析およびキラルセルＯＤカラム上で実施した分析用キラルＨＰＬＣ（ヘキサン：イソプロパノール  ４０：６０による定組成溶離、流量０．４５ｍｌ／分、保持時間＝２１．６分）によって決定した。
ＭＳ／ＥＳＩ＋  ５９６，５９８  ［ＭＨ］＋。
１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）ｐｐｍ  ８．２７（ｓ，２Ｈ），７．２７〜７．４５（ｍ，５Ｈ），７．２０（ｄ，１Ｈ），７．０８（ｄ，１Ｈ），７．００（ｄｄ，１Ｈ），７．０８（ｔ，１Ｈ），５．９７（ｄｄ，１Ｈ），５．８５（ｓ，１Ｈ），３．９３（ｄｄ，１Ｈ），３．８９（ｄｄ，１Ｈ），３．３３（ｄｄ，１Ｈ），３．１７（ｄｄ，１Ｈ），２．０７（ｓ，３Ｈ），１．１４〜１．３８（ｍ，１Ｈ），０．５０〜０．７１（ｍ，２Ｈ），０．２１〜０．４７（ｍ，２Ｈ）
［α］Ｄ＝＋２６°（ｃ＝０．５５，ＭｅＯＨ）
例７
（−）−１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イル）−エタノール（９）の調製
化合物（８）（１．１８ｇ）をメタノール（５０ｍｌ）に懸濁させ、次いでＮａＨＣＯ３の飽和溶液（２５ｍｌ）を添加した。白色懸濁液を室温で２４時間激しく撹拌した。反応混合物をＣＨ２Ｃｌ２（７００ｍｌ）で希釈し、次いでＮａＨＣＯ３の５％水溶液（３００ｍｌ）を添加し、相を分離した。水相をＣＨ２Ｃｌ２（２×１００ｍｌ）で抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を真空下で蒸発除去した。取得した粗白色固体を、Ｅｔ２Ｏ（５０ｍｌ）で２回、ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）で１回粉砕し、次いで濾過して、鏡像異性体純度が９９％超である０．７４ｇの化合物（７）を得た。鏡像異性体純度は、キラルセルＯＤカラム上で実施した分析用キラルＨＰＬＣ（ヘキサン：イソプロパノール  ３０：７０による定組成溶離、流量０．３５ｍｌ／分、保持時間＝２４．０分）によって決定した。
ＭＳ／ＥＳＩ＋  ４２０−４２２  ［ＭＨ］＋。
’１Ｈ  ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）ｐｐｍ  ８．５１（ｓ，２Ｈ），７．１１（ｄ，１Ｈ），７．０５（ｄ，１Ｈ），６．８８（ｄｄ，１Ｈ），７．０１（ｔ，１Ｈ），５．５９（ｄ，１Ｈ），４．８４（ｄｔ，１Ｈ），３．８９（ｄｄ，１Ｈ），３．８４（ｄｄ，１Ｈ），３．１８（ｄｄ，１Ｈ），３．０２（ｄｄ，１Ｈ），１．０８〜１．３２（ｍ，１Ｈ），０．４７〜０．６６（ｍ，２Ｈ），０．２６〜０．４５（ｍ，２Ｈ）
［α］Ｄ＝−６１°（ｃ＝０．５，ＭｅＯＨ）
例８
２−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−プロピオン酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−エチルエステル（１０，ジアステレオ異性体１１および１３の混合物）
化合物（３）（１２．０ｇ）をＤＭＦ（１００ｍｌ）に溶解し、次いで、（Ｓ）−２−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−プロピオン酸（７．５ｇ）、４−ジメチルアミノピリジン（３．６ｇ）および１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩（５．７ｇ）を添加した。室温で４時間撹拌後、水（１０００ｍｌ）を添加した。混合物をＥｔＯＡｃ（５００ｍｌ×２）で抽出し、合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を減圧下で蒸発除去して１７．０ｇの油を得、これをＥｔＯＨから結晶化させ、それにより、１１．５ｇの表題化合物をジアステレオマー（１１）および（１３）の混合物として取得した。
１Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ  ８．４３及び８．６０（２ｓ，各１Ｈ，２Ｈ），７．５１〜７．６８（ｍ，３Ｈ），７．１０〜７．２３（ｍ，３Ｈ），６．８５〜６．９７（ｍ，２Ｈ），６．５１〜６．６８（ｍ，１Ｈ），６．２２〜６．９７（ｔ，１Ｈ，ＣＨＦ２），６．００〜６．１３（ｍ，１Ｈ），３．９３〜３．９５（ｓ，３Ｈ，ＯＣＨ３），３．７２〜３．８４（ｍ，２Ｈ），３．０７〜３．５７（ｍ，３Ｈ），１．４２〜１．４５（ｄ，３Ｈ，ＣＨ３），０．９４〜１．２５（ｍ，１Ｈ），０．５１〜０．６７（ｍ，２Ｈ），０．１２〜０．３６（ｍ，２Ｈ）．
ＭＳ／ＥＳＩ＋  ６１６，６１８［ＭＨ］＋
例９
（＋）−２−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−プロピオン酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−エチルエステル（２番目に溶離したジアステレオ異性体）（１３）
化合物は、ダイソーゲル１０μｍ、５０×３００ｍｍカラム；溶離液：ｎ−ヘキサン／メチル−ｔｅｒｔ−ブチル−エーテル／イソプロピルアルコール：９０／９．９／０．１；流量：８０ｍｌ／分；充填：１回の注射当たり３００ｍｇ；溶離時間：１１から２０分までを使用するＨＰＬＣ分離によって、例８のジアステレオマー混合物から単離した。収集した画分を蒸発させ、残留物をｎ−ヘキサン／イソプロピル−アルコールから結晶化した。
１Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ  ８．６０（ｓ，２Ｈ），７．６８〜７．７５（ｍ，２Ｈ），７．５８〜７．５９（ｍ，１Ｈ），７．２７〜７．２９（ｄ，１Ｈ），７．１２〜７．２４（ｍ，２Ｈ），６．９８〜７．０４（ｍ，１Ｈ），６．７３〜６．７８（ｄｄ，１Ｈ），６．６７〜６．６８（ｄ，１Ｈ），６．６０〜７．３５（ｔ，１Ｈ，ＣＨＦ２），５．９９〜６．０６（ｍ，１Ｈ），３．８４〜３．８７（ｍ，４Ｈ），３．４７〜３．５５（ｍ，２Ｈ），３．３２〜３．４１（ｄｄ，１Ｈ），３．２２〜３．２９（ｍ，１Ｈ），１．３３〜１．３７（ｄ，３Ｈ，ＣＨ３），０．９６〜１．０３（ｍ，１Ｈ），０．４３〜０．５２（ｍ，２Ｈ），０．１３〜０．２１（ｍ，２Ｈ）．
ＭＳ／ＥＳＩ＋  ６１６，６１８［ＭＨ］＋
［α］Ｄ＝＋５２．８°（ｃ＝０．５，ＭｅＯＨ）
例１０
（＋）−２−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−プロピオン酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−エチルエステル（最初に溶離したジアステレオ異性体）（１１）
化合物は、ダイソーゲル１０μｍ、５０×３００ｍｍカラム；溶離液：ｎ−ヘキサン／メチル−ｔｅｒｔ−ブチル−エーテル／イソプロピル−アルコール：９０／９．９／０．１；流量：８０ｍｌ／分；充填：１回の注射当たり３００ｍｇ；溶離時間：７から１０分までを使用するＨＰＬＣ分離によって、例８のジアステレオマー混合物から単離した。収集した画分を蒸発させ、残留物をｎ−ヘキサン／イソプロピル−アルコールから結晶化した。
１Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ  ８．２７（ｓ，２Ｈ），７．６４〜７．８０（ｍ，２Ｈ），７．５６〜７．５７（ｍ，１Ｈ），７．２８〜７．２９（ｄ，１Ｈ），７．１４〜７．２０（ｍ，３Ｈ），６．６８〜７．４２（ｔ，１Ｈ，ＣＨＦ２），６．９３〜６．９８（ｍ，２Ｈ），６．００〜６．０７（ｍ，１Ｈ），３．８８〜３．９２（ｍ，４Ｈ），３．７１〜３．８４（ｍ，２Ｈ），３．３９〜３．５１（ｄｄ，１Ｈ），３．１６〜３．２５（ｄｄ，１Ｈ），１．３３〜１．３７（ｄ，３Ｈ，ＣＨ３），１．０８〜１．２３（ｍ，１Ｈ），０．５０〜０．５９（ｍ，２Ｈ），０．３４〜０．２６（ｍ，２Ｈ）．
ＭＳ／ＥＳＩ＋  ６１６，６１８［ＭＨ］＋
［α］Ｄ＝＋４５°（ｃ＝０．５，ＭｅＯＨ）
例１１
（＋）−１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−エタノール（１４）
メタノール（１１０ｍｌ）中の（＋）−２−（６−メトキシ−ナフタレン−２−イル）−プロピオン酸−１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−エチルエステル（１３）（１４．０ｇ）の懸濁液に、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（５．１ｇ）を添加した。得られた混合物を室温で２時間撹拌して、透明な溶液を取得した。初期沈殿物（混濁溶液）に、撹拌しながら水をゆっくり添加した。
【０１０９】
さらに６０分間撹拌後、沈殿した固体を濾過し、水で洗浄し、クロロホルム（１００ｍｌ）に溶解した。溶液を硫酸ナトリウムで乾燥させ、溶媒を真空下で除去した。残留物をクロロホルム／ヘキサン＝１／２．５中で結晶化して、８．１ｇの白色固体を取得した。
１Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ  δ  ８．４５（ｓ，２Ｈ），７．１９〜７．０８（ｄ，１Ｈ），７．０６〜７．００（ｄ，１Ｈ），６．９５〜６．８５（ｄｄ，１Ｈ），６．９９〜６．２４（ｔ，１Ｈ，ＣＨＦ２），５．１８〜５．００（ｍ，１Ｈ），３．９８〜３．７８（ｍ，２Ｈ），３．５４〜３．３５（ｍ，１Ｈ），３．３１〜３．１５（ｍ，１Ｈ），２．０４〜１．９４（ｄ，１Ｈ，ＯＨ），１．４０〜１．１４（ｍ，１Ｈ），０．７５〜０．５３（ｍ，２Ｈ），０．５０〜０．２９（ｍ，２Ｈ）．
ＭＳ／ＥＳＩ＋  ４０４，４０６［ＭＨ］＋．
［α］Ｄ＝＋９．３５°（ｃ＝１，ＣＨＣｌ３）．
例１２
（−）−１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−エタノール（１２）
ジアステレオ異性体（１１）から出発し、例１０の手順に準じて、アルコール（１２）を取得した。
ＭＳ／ＥＳＩ＋  ４０４，４０６  ［ＭＨ］＋。
［α］Ｄ＝−９．１５°  （ｃ＝１、ＣＨＣＬ３）。
例１３
アルコール（１４）の酸化によるアルコール（７）の調製
化合物（１４）（３．０ｇ）をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍｌ）に溶解した。７０％ｍ−クロロ過安息香酸（５．４ｇ）を添加し、得られた溶液を室温で１８時間撹拌した。次いで、固体Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（５ｇ）を添加し、混合物を室温で３０分間激しく撹拌した。固体残留物を濾過除去し、有機溶液を追加の１００ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３×１００ｍｌ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を蒸発除去した。残留物をＥｔＯＡｃ（２０ｍｌ）中で粉砕して１．９ｇの所望生成物７を白色固体として得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。
１Ｈ  ＮＭＲ（２００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ  ８．１４（ｓ，２Ｈ），７．１８〜７．０９（ｄ，１Ｈ），７．０７〜７．０２（ｄ，１Ｈ），６．９２〜６．８３（ｄｄ，１Ｈ），７．０１〜６．２２（ｔ，１Ｈ，ＣＨＦ２），５．１０〜４．９６（ｍ，１Ｈ），３．９６〜３．８４（ｄ，２Ｈ），３．４５〜３．２９（ｍ，１Ｈ），３．２３〜３．０７（ｍ，１Ｈ），３．２４〜３．１７（ｄ，１Ｈ，ＯＨ），１．４１〜１．６７（ｍ，１Ｈ），０．７５〜０．５３（ｍ，２Ｈ），０．５０〜０．２９（ｍ，２Ｈ）．
ＭＳ／ＥＳＩ＋  ４２０，４２２［ＭＨ］＋
［α］Ｄ＝＋６５．０°（ｃ＝０．５，ＭｅＯＨ）
例１４
アルコール（１２）の酸化によるアルコール（９）の調製
アルコール（９）は、出発材料としてアルコール（１４）の代わりにアルコール（１２）を使用し、例１３において記載されている手順に準じて取得できる。
ＭＳ／ＥＳＩ＋  ４２０，４２２  ［ＭＨ］＋。
［α］Ｄ＝−６０．６°  （ｃ＝０．５、ＭｅＯＨ）。
例１５
（−）−３−シクロプロピルメトキシ−４−メタンスルホニルアミノ−安息香酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−１−ピリジン−４−イル）−エチルエステル（Ｃ１）の調製
ステップ１：３−シクロプロピルメトキシ−４−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メタンスルホニル）−アミノ安息香酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−エチルエステル
１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩（２．８５ｇ）を、乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（１８０ｍｌ）中の、アルコール（１４）（２．０ｇ）、４−ジメチルアミノピリジン（０．３ｇ）、３−シクロプロピルメトキシ−４−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メタンスルホニル）−アミノ−安息香酸（２．０ｇ）の溶液に、室温にて窒素雰囲気下で添加した。
【０１１０】
室温で終夜撹拌後、混合物を５％ＨＣｌ水溶液（２×１００ｍｌ）で洗浄し、有機相を分離し、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（２×１００ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固した。粗製物を、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーにより勾配溶離（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ  １０／１から６／４）で精製して、１．４ｇの表題化合物を得た。
【０１１１】
ステップ２：Ｃ１の調製
３−シクロプロピルメトキシ−４−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メタンスルホニル）−アミノ−安息香酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−エチルエステル（１．４ｇ）をＣＨ２Ｃｌ２（１４０ｍｌ）に溶解した。ジオキサン中ＨＣｌの４Ｍ溶液（４０ｍｌ）を添加し、得られた混合物を室温で２４時間撹拌した。次いで、反応混合物を蒸発乾固し、残留物をｉＰｒＯＨ（５０ｍｌ）中で、その後ＥｔＯＨ（５０ｍｌ）、続いてＥｔ２Ｏ（７０ｍｌ）中で粉砕して、０．８８０ｇの化合物（Ｃ１）を得た。
【０１１２】
Ｃ１の分析的特徴を表１において報告する。
【０１１３】
【表３】
0005612610.tif 000008
【０１１４】
同様にして、下記の化合物が調製され得る。
・（−）−４−シクロプロピルメトキシ−３−メタンスルホニルアミノ−安息香酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−エチルエステル、
・（−）−３，４−ビス−メタンスルホニルアミノ−安息香酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−エチルエステル、
・（−）−３−メタンスルホニルアミノ−４−メチル−安息香酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−ピリジン−４−イル）−エチルエステル及び
・（−）−４−メタンスルホニルアミノ−３−メチル−安息香酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イル）−エチルエステル。
例１６
（−）−３−シクロプロピルメトキシ−４−メタンスルホニルアミノ−安息香酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イル）−エチルエステル（Ｃ２）の調製
化合物（Ｃ２）は、アルコール中間体（７）から出発し、例１５と同じ合成手順に従って調製した。代替として、化合物（Ｃ２）は、化合物（Ｃ１）から出発し、下記の例１７において記載する通りに調製できる。
例１７
化合物（Ｃ１）から出発する（−）−３−シクロプロピルメトキシ−４−メタンスルホニルアミノ−安息香酸１−（３−シクロプロピルメトキシ−４−ジフルオロメトキシ−フェニル）−２−（３，５−ジクロロ−１−オキシ−ピリジン−４−イル）−エチルエステル（Ｃ２）の調製
化合物（Ｃ１）（０．６９ｇ）をＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍｌ）に溶解した。７０％ｍ−クロロ過安息香酸（０．３５５ｇ）を添加し、得られた溶液を室温で１８時間撹拌した。次いで、固体Ｎａ２Ｓ２Ｏ３（０．２４４ｇ）を添加し、混合物を室温で３０分間激しく撹拌した。固体残留物を濾過除去し、有機溶液を追加の２０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（３×２０ｍｌ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を蒸発除去した。残留物をＥｔＯＨ（２０ｍｌ）中で粉砕して、０．７１０ｇの所望化合物（Ｃ２）を白色固体として得た。
【０１１５】
下記の化合物は、適切な試薬を使用し、同じ経路に準じて調製した。
【０１１６】
【表４−１】
0005612610.tif 000009
【０１１７】
【表４−２】
0005612610.tif 000010
【０１１８】
記載されている最終化合物の合成において用いたカルボン酸中間体は、市販されているか、または既に公知であるか、または公知の方法に従って合成される。
例１８
３−シクロプロピルメトキシ−４−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メタン−スルホニル）−アミノ−安息香酸の合成
【０１１９】
【化５】
0005612610.tif 000011
【０１２０】
ステップ１：３−ヒドロキシ−４−ニトロ−安息香酸メチルエステル
３−ヒドロキシ−４−ニトロ−安息香酸（１０ｇ）をＭｅＯＨ（５００ｍｌ）に溶解した。９６％Ｈ２ＳＯ４（２ｍｌ）を添加し、混合物を６０℃に１８時間加熱した。反応混合物を約２００ｍｌに濃縮し、ＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（２×２０ｍｌ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を蒸発除去して、１０．５ｇの所望中間体を産出した。
【０１２１】
ステップ２：３−シクロプロピルメトキシ−４−ニトロ−安息香酸メチルエステル
３−ヒドロキシ−４−ニトロ−安息香酸メチルエステル（１０．５ｇ）を、Ｎ２雰囲気下、乾燥ＤＭＦ（１５０ｍｌ）に溶解した。Ｋ２ＣＯ３（２４．３ｇ）、ＫＩ（２．６ｇ）およびシクロプロピルメチルブロミド（１０．３ｍｌ）を添加し、混合物を５０℃で６時間撹拌した。反応混合物を水（３００ｍｌ）で希釈し、Ｅｔ２Ｏ（２×２００ｍｌ）で抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を蒸発除去して、１２．７ｇの所望中間体を産出した。
【０１２２】
ステップ３：４−アミノ−３−シクロプロピルメトキシ−安息香酸メチルエステル
３−シクロプロピルメトキシ−４−ニトロ−安息香酸メチルエステル（１２．７ｇ）をＭｅＯＨ（１００ｍｌ）およびＥｔＯＡｃ（１００ｍｌ）に溶解し、１０％Ｐｄ／Ｃ（１．０ｇ、２０ｍｌの水に懸濁させたもの）を添加し、混合物をパール装置（Ｈ２：２０ｐｓｉ）内で５時間水素化した。３７％ＨＣｌを添加し（１０ｍｌ）、水素化を追加で２時間続けて、完全変換を達成した。触媒をセライトパッドで濾過し、混合物をＥｔＯＡｃ（２００ｍｌ）で希釈し、ＮａＨＣＯ３の飽和水溶液（２×１００ｍｌ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を蒸発除去して、１０．７ｇの所望中間体を産出した。
【０１２３】
ステップ４：３−シクロプロピルメトキシ−４−メタンスルホニルアミノ−安息香酸メチルエステル
メチル３−（シクロプロピルメトキシ）−４−アミノベンゾエート（８．８６ｇ）を、室温にてＮ２雰囲気下でピリジン（８０ｍＬ）に溶解した。塩化メタンスルホニル（４．０４ｍＬ）を添加し、混合物を室温で１８時間撹拌した。反応混合物を蒸発乾固し、粗製物を１Ｎ  ＨＣｌ（５００ｍＬ）で処理し、ＣＨ２Ｃｌ２（３×２００ｍＬ）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を蒸発除去して、１１．７ｇの所望中間体を産出した。
ＭＳ／ＥＳＩ＋  ３００  ［ＭＨ］＋。
【０１２４】
ステップ５：３−シクロプロピルメトキシ−４−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メタンスルホニル）−アミノ−安息香酸メチルエステル
３−シクロプロピルメトキシ−４−メタンスルホニルアミノ−安息香酸メチルエステル（３．０ｇ）をＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍｌ）に溶解した。ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ、１．２２ｇ）およびＢｏｃ２Ｏ（２．１８ｇ）を添加し、混合物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を５％ＨＣｌ水溶液（２×５０ｍｌ）で洗浄し、有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を蒸発除去した。残留物をＥｔ２Ｏ中で粉砕し、濾過して４．０ｇの所望中間体を得、これをさらに精製することなく次のステップにおいて使用した。
【０１２５】
ステップ６：３−シクロプロピルメトキシ−４−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メタンスルホニル）−アミノ−安息香酸
シクロプロピルメトキシ−４−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル−Ｎ−メタンスルホニル）−アミノ−安息香酸メチルエステル（４．０ｇ）をＭｅＯＨ（１００ｍｌ）に溶解した。１Ｎ  ＮａＯＨ（１５ｍｌ）を添加し、得られた混合物を室温で１時間撹拌し、次いで５０℃に２時間加熱した。次いで、反応混合物をＥｔＯＡｃ（２５０ｍｌ）で希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ（２×１００ｍｌ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、溶媒を蒸発除去して、３．５ｇの所望酸誘導体を得た。
ＭＳ／ＥＳＩ＋  ３８６  ［ＭＨ］＋。
説明
＊ＮＭＲ
ｓ＝一重項
ｄ＝二重項
ｔ＝三重項
ｑ＝四重項
ｄｄ＝二重項の二重項
ｍ＝多重項
ｂｒ＝広域
ＥＳＩ＝エレクトロスプレー
本発明の化合物の薬理学的活性
例１９
末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）アッセイにおけるＰＤＥ４阻害活性のインビトロ決定
末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）におけるリポ多糖体（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓｈａｃｃａｒｉｄｅｓ）（ＬＰＳ）誘導性腫瘍壊死因子−アルファ（ＴＮＦ−α放出に対して、ＰＤＥ４阻害剤によって及ぼされる公知の阻害活性に基づくアッセイを、以前に記載された方法（Hatzelmann Aら、J. Pharmacol. Exp. Ther.、2001、297：267〜279；Draheim Rら、J. Pharmacol. Exp. Ther.、2004、308：555〜563に従って実行する。
【０１２６】
凍結保存ヒトＰＢＭＣ（１００μｌ／ウェル）を、９６ウェルプレート（１０５細胞／ウェル）中、その濃度が１０−１２Ｍから１０−６Ｍまでの範囲である試験化合物の存在下または不在下（５０マイクロｌ）で３０分間インキュベートする。その後、ＬＰＳ（３ｎｇ／ｍｌ）を添加する。
【０１２７】
９５％空気および５％ＣＯ２の雰囲気下、加湿インキュベーター内３７℃で１８時間インキュベーション後、培養培地を収集し、ＥＬＩＳＡによってＴＮＦ−αを測定する。
【０１２８】
化合物Ｃ１からＣ６に関する結果は、ＬＰＳ誘導性ＴＮＦ−α放出の５０％阻害（ＩＣ５０）を生じさせる試験化合物のモル濃度の平均±９５％信頼限界として表現され、０．０６から４．４ｎＭの間に含まれる。阻害化合物の不在下におけるＬＰＳ誘導性ＴＮＦ−α産生を１００％、ＬＰＳの不在下におけるＰＢＭＣの基礎ＴＮＦ−α産生を０％と仮定して、試験した化合物の効果をＴＮＦ−α放出の阻害パーセンテージとして算出する。
例２０
低親和性ＬＰＤＥ４を阻害する能力対高親和性ＨＰＤＥ４を競合する能力の評価
ＬＰＤＥ４およびＨＰＤＥ４に対する親和性は、Cortijo Jら、Br J Pharmacol、1993、108：562〜568およびDuplantier AJら、J Med Chem、1996、39：120〜125においてそれぞれ以前に記載された通りに評価する。
【０１２９】
試験化合物の濃度は、１０−１２Ｍから１０−５Ｍの間の範囲である。化合物Ｃ１からＣ６について試験されたＬＰＤＥ４およびＨＰＤＥ４に対する親和性の値は、８２から４７７の間に含まれる。
【０１３０】
ＬＰＤＥ４の場合、ＩＣ５０はｃＡＭＰ消失の５０％阻害を生じさせる試験化合物のモル濃度であり、一方、ＨＰＤＥ４の場合、ＩＣ５０は［Ｈ３］ロリプラムの結合の５０％阻害を生じさせる試験化合物のモル濃度である。
【０１３１】
結果は、本発明の化合物が、ナノモル未満の親和性を有するＬＰＤＥ４を阻害し、ＨＰＤＥ４と比べＬＰＤＥ４に対してはるかに選択的であることを示す。
例２１
モルモット気管におけるカルバコール誘導性収縮に対する、カルモテロール／Ｃ１の多剤混合薬の相乗活性
雄オボアルブミン（ＯＡ）感作モルモットからジグザグ気管断片を取得し、気管から２つの標本を取得する。各標本を、酸素化した（Ｏ２９５％およびＣＯ２５％）規定のクレブスヘンゼライト液で満たした２０ｍｌの浴槽に入れ、３７℃に維持する。気管標本を、１ｇの静止張力（ｒｅｓｔｉｎｇ  ｔｏｎｅ）下、等張力変換器（ｉｓｏｍｅｔｒｉｃ  ｆｏｒｃｅ  ｔｒａｎｓｄｕｃｅｒｓ）に接続する。６０分の平衡期間後、気管標本をＣ１（１０−７Ｍ）、カルモテロール（３＊１０−１０Ｍ）で３０分間前処理し、Ｃ１とカルモテロールまたはビヒクルとをそれぞれ会合させ、続いてＯＡ（１０−１０〜１０−５ｇ／ｍｌ）の累積投与を行う。ＯＡ投与の終了時に、最大濃度のカルバコール（１０−５Ｍ）を添加して、各標本の最大収縮を達成する。効果は、カルバコール誘導性最大応答のパーセント値（１００％）として表現される。
【０１３２】
Ｃ１（１０−７Ｍ）による標本の３０分間の前処理は、ＯＡ誘導性収縮の２３％の阻害を引き起こした。同様に、カルモテロール（３＊１０−１０Ｍ）によって生じた阻害は１８％である。
【０１３３】
Ｃ１（１０−７Ｍ）およびカルモテロール（３＊１０−１０Ｍ）の組合せは、ＯＡ誘導性収縮の９３％の低減を引き起こした。
【０１３４】
この研究は、カルモテロールおよびＣ１がいずれも、モルモット気道におけるカルバコール誘導性収縮をアンタゴナイズするのに効力があることを示す。その上、それらの相補的分子の作用機序を踏まえ、機能的アゴニズム−アンタゴニズムの枠組みで、固定組合せは、モルモット気管におけるコリン作動性収縮の制御において相乗効果を表す。
【図１】
0005612610.tif 000027