(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
サツマイモを２０％（w/vol）を超えて６０％（w/vol）までの濃度で含有する液体培地を用いて、麹菌を培養する工程を包含する芋液体麹の製造方法であって、
該サツマイモが、サツマイモの全長を基準にして両端を端から１０〜２０％の長さ分除去して得られたサツマイモの肉質部からなり、
得られる芋液体麹はβ−グルコシダーゼ活性が２０Ｕ／ｍｌ以下であり、耐酸性α−アミラーゼ活性が１５Ｕ／ｍｌ以上であり、グルコアミラーゼ活性が５５Ｕ／ｍｌ以上である、芋液体麹の製造方法。
【請求項２】
得られる芋液体麹は耐酸性α−アミラーゼ活性が３０Ｕ／ｍｌ以上である請求項１に記載の芋液体麹の製造方法。
【請求項３】
得られる芋液体麹はグルコアミラーゼ活性が９５．７Ｕ／ｍｌ以上である請求項１又は２に記載の芋液体麹の製造方法。
【請求項４】
得られる芋液体麹はβ−グルコシダーゼ活性が５Ｕ／ｍｌ以下である請求項１〜３のいずれか一項に記載の芋液体麹の製造方法。
【請求項５】
前記サツマイモがコガネセンガン、アケムラサキ、高系１４号、シロサツマ、シロユタカ、ジョイホワイト、種子島ゴールド、ベニハヤト、種子島ろまん、安納紅、安納こがね、ベニサツマ、ベニオトメ、ベニアズマ、アヤムラサキ及びジョイレッドからなる群から選択される少なくとも一種である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の芋液体麹の製造方法。
【請求項６】
前記麹菌が白麹菌、黒麹菌又は黄麹菌である請求項１〜５のいずれか一項に記載の芋液体麹の製造方法。
【請求項７】
前記麹菌が、白麹菌としてアスペルギルス・カワチ、黒麹菌としてアスペルギルス・アワモリ又は黄麹菌としてアスペルギルス・オリゼである請求項６に記載の芋液体麹の製造方法。
【請求項８】
前記液体培地は、麹菌が育成及び増殖するのに必要な栄養として、窒素源、硫酸塩及びリン酸塩からなる群から選択される少なくとも一種を含有する請求項１〜７のいずれか一項に記載の芋液体麹の製造方法。
【請求項９】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の芋液体麹の製造方法によって得られる芋液体麹。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、芋液体麹の製造方法に関し、特に、β−グルコシダーゼ活性が抑制された芋液体麹の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
芋焼酎は、一般に、まず、芋に酵素を作用させて、芋に含まれているデンプンを糖に分解（即ち糖化）しながら、添加した酵母により発酵させ、発酵物を蒸留及び精製することにより製造される。
【０００３】
芋のデンプンを糖化するためにはアミラーゼ等の糖加水分解酵素が必要であり、酵素の供給源としては麹が用いられる。麹としては、通常は固体培養の米麹が使われる。この米麹は製造及び入手が容易だからである。
【０００４】
酵素の供給源として固体培養の芋麹が使用されることもある。この芋麹を使用した芋焼酎は純芋焼酎（芋１００％から製造された焼酎）と呼ばれ、米麹を用いた通常の芋焼酎に比べ、芋特有の香味が強く、差別化された酒質として評価されている。
【０００５】
特許文献１には、培養原料として表面が外皮で覆われた芋類を含む液体培地で麹菌を培養することにより芋液体麹を製造することが記載されている。この芋液体麹の製造方法は焙炒又は脱汁等の特別な前処理を必要とせず、芋液体麹の製造を簡便に行うことができる。
【０００６】
非特許文献１には、芋焼酎の特徴香に数種のモノテルペンアルコールが寄与しており、芋に存在するβ−グルコシドのような配糖体からモノテルペンアルコールを遊離させるために、麹のβ−グルコシダーゼ活性を制御することが重要であることが記載されている。
【０００７】
非特許文献２には、米麹のもろみ中のβ−グルコシダーゼ活性が芋焼酎の特有の香味に寄与し、β−グルコシダーゼ活性が少ないと芋焼酎の特有の香味が少ないライトタイプとなることが記載されている。
【０００８】
焼酎の香味に関する消費者の嗜好は多様であり、芋特有の香味が低く抑えられたライトタイプな芋焼酎も人気がある。
【０００９】
それゆえ、芋麹を使用した純芋焼酎において、芋特有の香味が低く抑えられたライトタイプの純芋焼酎を造ることが可能になれば、純芋焼酎に対する新たな需要が喚起される。また、このライトタイプの純芋焼酎と従来の芋特有の香味が強い純芋焼酎とをブレンドすることにより、香味の強弱が調節された純芋焼酎を自由に製造することが可能になる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特開２００７−７４９１０
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】太田、醸造協会誌； 86(4), 250-254, 1991
【非特許文献２】太田、醸造協会誌； 86(7), 536-539, 1991
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、純芋焼酎を製造するために十分な糖化力を有しながら、β−グルコシダーゼ活性が抑制された芋液体麹を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本発明は、サツマイモを１５〜６０％（w/vol）の濃度で含有する液体培地を用いて、麹菌を培養する工程を包含する芋液体麹の製造方法を提供する。
【００１４】
ある一形態においては、前記サツマイモがサツマイモの肉質部からなる。
【００１５】
ある一形態においては、前記サツマイモの肉質部が、サツマイモの全長を基準にして両端を１０〜２０％の長さ分除去して得られたものである。
【００１６】
ある一形態においては、前記サツマイモがコガネセンガン、アケムラサキ、高系１４号、シロサツマ、シロユタカ、ジョイホワイト、種子島ゴールド、ベニハヤト、種子島ろまん、安納紅、安納こがね、ベニサツマ、ベニオトメ、ベニアズマ、アヤムラサキ及びジョイレッドからなる群から選択される少なくとも一種である。
【００１７】
ある一形態においては、前記麹菌が白麹菌、黒麹菌又は黄麹菌である。
【００１８】
ある一形態においては、得られる芋液体麹は糖加水分解酵素活性が増強され、β−グルコシダーゼ活性が抑制されたものである。
【００１９】
ある一形態においては、前記β−グルコシダーゼ活性が２０Ｕ／ｍｌ以下である。
【００２０】
ある一形態においては、前記糖加水分解酵素活性が少なくとも耐酸性α−アミラーゼ活性、α−アミラーゼ活性又はグルコアミラーゼ活性である。
【００２１】
ある一形態においては、前記耐酸性α−アミラーゼ活性が１５Ｕ／ｍｌ以上であり、前記グルコアミラーゼ活性が５５Ｕ／ｍｌ以上である。
【００２２】
また、本発明は、上記いずれかに記載の芋液体麹の製造方法によって得られる芋液体麹を提供する。
【発明の効果】
【００２３】
本発明の方法によれば、酒類を製造するために十分な糖化力を有しながら、β−グルコシダーゼ活性が抑制された芋液体麹が提供される。この芋液体麹を用いることで、芋特有の香味を低く抑えた純芋焼酎を製造することが可能になる。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】芋液体麹の製造に使用する液体培地中の芋濃度に対する芋液体麹の耐酸性α−アミラーゼ活性及びグルコアミラーゼ活性の変化を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
液体培地
本発明の方法で用いる液体培地は、麹菌が生育及び増殖するのに必要な栄養又は該栄養を含む培養原料を水中に溶解又は懸濁させた液体である。かかる栄養には、例えば、炭素源、窒素源、無機塩類などが含まれる。
【００２６】
炭素源としては、サツマイモを用いる。サツマイモは芋焼酎の製造に使用される種類のものであれば、特に限定されない。例えば、コガネセンガン、アケムラサキ、高系１４号、シロサツマ、シロユタカ、ジョイホワイト、種子島ゴールド、ベニハヤト、種子島ろまん、安納紅、安納こがね、ベニサツマ、ベニオトメ、ベニアズマ、アヤムラサキ及びジョイレッド等が使用される。中でも好ましいサツマイモはコガネセンガン及びジョイホワイトである。また、サツマイモは、生のサツマイモであっても、蒸煮したサツマイモであっても良い。
【００２７】
生のサツマイモを用いることで、作業の効率化や、加工が不要のためエネルギー効率の面でも優位になる。
【００２８】
サツマイモは細長い不定根の一部が栄養分を蓄えて肥大した塊根である。サツマイモの形状は、それゆえ略円筒形であり、長さ方向の前後が徐々に細くなって末端部が形成されている。つまり、サツマイモの末端部は、細長い不定根から塊根の肥大が開始する部分及び長さ方向に沿ってその反対側に存在する肥大が終了する部分である。サツマイモの末端部付近は、肉質である中央部と異なって、繊維質で硬い部分と認識されている。
【００２９】
サツマイモは、好ましくは、肉質である中央部、すなわち、繊維質で硬い末端部付近以外の部分である肉質部を用いる。得られる芋液体麹のβ−グルコシダーゼ活性が有効に抑制されるからである。繊維質で硬いサツマイモの末端部と肉質部の境界は厳密に決定することは困難である。
【００３０】
しかし、経験的に両部分を区別することは可能である。一般には、サツマイモの全長を基準にして端から約１０〜２０％の長さ分に上記末端部が含まれる。サツマイモの末端部の長さは、一個のサツマイモの一方の端及び他方の端について、独立して決定してよい。
【００３１】
例えば、サツマイモの肉質部は、サツマイモの全長を基準にして両端から上記末端部を含むと考えられる長さ分除去することにより得られる。この場合、除去される末端部の長さは、一個のサツマイモの一方の端及び他方の端について、同一であっても相違していてもよい。
【００３２】
サツマイモの肉質部は、そのまま又は適当な寸法に裁断して用いればよい。サツマイモは表面の少なくとも一部が外皮で覆われたままのものであってよく、外皮が剥かれて表面が外皮で覆われていないものであってもよい。また、麹菌の培養原料としてサツマイモのみを使用することが要求されない場合は、炭素源として芋類、穀類又はこれらの成分を併用してもよい。
【００３３】
サツマイモは、液体培地１００ｍｌに対して１５〜６０ｇ添加される割合の量で用いられる。つまり、液体培地中の前記サツマイモの濃度は１５〜６０％（w/vol）、好ましくは１５〜５０％（w/vol）、より好ましくは２０〜４０％（w/vol）となる。サツマイモの濃度が１５％（w/vol）未満であると糖加水分解酵素活性が不十分になり、６０％（w/vol）を超えると、培養液の粘性が高くなる。
【００３４】
窒素源としては、麹菌が育成及び増殖するのに必要な窒素供給源であれば特に限定はない。有機物としては、例えば、酵母菌体又はその処理物（例えば、酵母菌体分解物、酵母エキスなど）等が挙げられ、無機物としては、例えば、硝酸塩が挙げられる。
【００３５】
硝酸塩としては硝酸カリウム、硝酸ナトリウムなどを用いることができ、特に硝酸カリウムが好ましい。窒素源は、単独で用いる他、２種類以上の有機物及び／又は無機物を組み合せて使用してもよい。
【００３６】
窒素源の添加量は、麹菌の増殖を促進する程度であれば特に限定はないが、有機物としては０．１〜２％(w/voｌ)、好ましくは０．５〜１．０％（w/vol）である。また、無機物としての硝酸塩の添加量は０．０５〜２．０％（w/vol）、好ましくは０．１〜２．０％（w/vol）、もっとも好ましくは０．２〜１．５％（w/vol）である。
【００３７】
添加量が上限値を超える場合及び下限値未満である場合は、酵素生産が促されないため、やはり好ましくない。
【００３８】
その他の栄養
本発明に用いる液体培地には、炭素源又は窒素源の他に、硫酸塩及びリン酸塩を添加し含有させることができる。これらの無機塩類を併用することにより、酵素活性が増強される。
【００３９】
例えば、硫酸塩としては硫酸カルシウム、硫酸マグネシウム７水和物、硫酸鉄７水和物、硫酸アンモニウムなどを用いることができる。これらの無機塩類は、単独で用いることもでき、２種以上を組み合わせて用いることもできる。
【００４０】
また、液体培地における上記の無機塩類の濃度は、麹菌培養物中に糖加水分解酵素や食物繊維分解酵素、タンパク分解酵素などの酵素が生成、蓄積される程度のものに調整される。例えば、リン酸塩の場合は０．０５〜１．０％（w/vol）、好ましくは０．１〜０．８％（w/vol）とする。
【００４１】
液体培地には、前述の窒素源や無機塩類以外の有機物や無機塩類等も、栄養源として適宜添加することができる。これらの添加物は麹菌の培養に一般に使用されているものであれば特に限定はないが、有機物としては小麦麩、コーンスティープリカー、大豆粕、脱脂大豆等を、無機塩類としてはアンモニウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩等の水溶性の化合物を挙げることができ、２種類以上の有機物及び／又は無機塩類を同時に使用してもよい。
【００４２】
これらの添加量は麹菌の増殖を促進する程度であれば特に限定はないが、有機物としては０．１〜５％（w/vol）程度、無機塩類としては０．１〜１％（w/vol）程度添加するのが好ましい。
【００４３】
上限値を超えてこれらの栄養源を添加した場合は、麹菌の増殖を阻害するため好ましくない。また、添加量が下限値未満である場合は、酵素生産が促されないため、やはり好ましくない。
【００４４】
上記の培養原料及び窒素源を水と混合することにより得られる麹菌の液体培地は、必要に応じて滅菌処理を行なってもよく、処理方法には特に限定はない。例としては、高温高圧滅菌法を挙げることができ、１２１℃で１５分間行なえばよい。
【００４５】
液体麹の製造
滅菌した液体培地を培養温度まで冷却後、麹菌を液体培地に接種する。培地に接種する麹菌の形態は任意であり、胞子又は菌糸を用いることができる。
【００４６】
麹菌の液体培地への接種量には特に制限はないが、液体培地１ｍｌ当り、胞子であれば１×１０４〜１×１０６個程度、菌糸であれば前培養液を０．１〜１０％程度接種することが好ましい。
【００４７】
麹菌の培養温度は、生育に影響を及ぼさない限りであれば特に限定はないが、好ましくは２５〜４５℃、より好ましくは３０〜４０℃で行なうのがよい。培養温度が低いと、麹菌の増殖が遅くなるため雑菌による汚染が起きやすくなる。培養時間は２４〜１２０時間が適当である。
【００４８】
本発明で用いる麹菌としては、グルコアミラーゼ、耐酸性α−アミラーゼ、α−アミラーゼなどの糖加水分解酵素、セルラーゼ、β−グルコシダーゼ、キシラナーゼなどの食物繊維分解酵素等の生産能を有する麹菌が好ましい。具体的には、白麹菌としてはアスペルギルス・カワチ（Aspergillus kawachii）等、黒麹菌としてはアスペルギルス・アワモリ（Asperigillus awamori）又はアスペルギルス・ニガー（Aspergillus niger）、黄麹菌としてはアスペルギルス・オリゼ（Asperigillus oryzae）又はアスペルギルス・ソーヤ（Aspergillus soyae）等が挙げられる。
【００４９】
白麹菌としてはアスペルギルス・カワチが好ましい。黒麹菌としてはアスペルギルス・アワモリが好ましい。黄麹菌としてはアスペルギルス・オリゼが好ましい。
【００５０】
これらの麹菌は１種類の菌株による培養、又は同種若しくは異種の２種類以上の菌株による混合培養のどちらでも用いることができる。これらは胞子又は前培養により得られる菌糸のいずれの形態のものを用いても問題はないが、菌糸を用いる方が対数増殖期に要する時間が短くなるので好ましい。
【００５１】
これらの麹菌のうち、より好ましいものはアスペルギルス・カワチ等の白麹菌及びアスペルギルス・アワモリ等の黒麹菌である。また、特に好ましい麹菌はアスペルギルス・カワチ等の白麹菌である。糖加水分解酵素活性の増強効果、及びβ−グルコシダーゼ活性の抑制効果が得られ易いからである。
【００５２】
培養装置は、液体培養を行なうことができるものであればよいが、麹菌は好気培養を行なう必要があるので、酸素や空気を培地中に供給できる好気的条件下で行なう必要がある。また、培養中は培地中の原料、酸素、及び麹菌が装置内に均一に分布するように撹拌をするのが好ましい。撹拌条件や通気量については、培養環境を好気的に保つことができる条件であればいかなる条件でもよく、培養装置、培地の粘度等により適宜選択すればよい。
【００５３】
上記の培養法で培養することにより、デンプンを分解する酵素などの酵素活性を有する液体麹が得られる。
【００５４】
ここでいう液体麹には、液体培養した培養物そのもの、培養物の上清液、培養物を濾過又は遠心分離等することにより得られる清澄液、それらの濃縮物等が含まれる。又、液体麹の乾燥物等も液体麹の同等物であり、酵素源として同様に使用することができる。
【００５５】
本発明の液体麹は、未濃縮の状態で、例えば、次に示す酵素活性を示すことが好ましい。各酵素活性の測定は実施例に説明する方法に準じて行なわれる。
【００５６】
耐酸性α−アミラーゼ（ＡＳＡＡ）活性については、１５Ｕ／ｍｌ以上、好ましくは３０Ｕ／ｍｌ以上、より好ましくは３５Ｕ／ｍｌ以上。
【００５７】
α−アミラーゼ（ＡＡ）活性については、２５０Ｕ／ｍｌ以上、好ましくは３００Ｕ／ｍｌ以上、より好ましくは３５０Ｕ／ｍｌ以上。
【００５８】
グルコアミラーゼ（ＧＡ）活性については、５５Ｕ／ｍｌ以上、好ましくは１００Ｕ／ｍｌ以上、より好ましくは１２０Ｕ／ｍｌ以上。
【００５９】
β−グルコシダーゼ（ＢＧＬ）活性については、２０Ｕ／ｍｌ以下、好ましくは１０Ｕ／ｍｌ以下、より好ましくは５Ｕ／ｍｌ以下。β−グルコシダーゼ活性は、芋焼酎の特徴香であるモノテルペンアルコールの生成に寄与する。そのため、β−グルコシダーゼ活性が低いことは、芋特有の香味を低く抑えた純芋焼酎を得るために有効である。
【００６０】
液体麹の用途
本発明の製造方法で得られた芋液体麹は、焼酎、清酒、しょうゆ、味噌、みりん及び甘酒等の発酵飲食品を製造するための酵素源として固体麹と同様に用いることができる。本発明の製造方法で得られた芋液体麹を芋焼酎を製造するための酵素源として使用すると純芋焼酎が製造されるため、特に好ましい。
【００６１】
芋焼酎の製造
芋焼酎の製造は、一般的な米（固体）麹を用いた芋焼酎の製造とほぼ同様の方法で行うことができ、もろみ仕込み段階において、米麹の代わりに芋液体麹を用いればよい。
【００６２】
本発明において、芋焼酎の発酵原料（いわゆる掛け原料）としては、サツマイモ、ジャガイモ、キャッサバ等の芋類を用いることができ、特に制限されない。
【００６３】
この掛け原料としての芋類は、生のまま使用することができるが、凍結乾燥させたもの（乾燥芋）や乾燥粉砕させたもの（サツマイモパウダーなど）も用いることができる。また、これらの芋類は、洗浄後、先端や病痕を切除し、蒸し、破砕・細断などの前処理を経て発酵工程に供されるが、これらの前処理方法は原料の種類や芋液体麹の酵素活性などに応じて適宜選択すればよい。
【００６４】
また、上記した芋液体麹を用いて芋焼酎を製造する場合には、全工程を液相で行なうことができる。全工程を液相で行なう芋焼酎の製造方法としては、例えば、サツマイモを掛け原料とする場合、サツマイモを約８０℃の高温で耐熱性酵素剤を使用して溶かして液化した後、これに上記した芋液体麹、及び酵母を添加することでアルコール発酵させたもろみを、常圧蒸留法又は減圧蒸留法等により蒸留して製造する方法が挙げられる。
【００６５】
また、得られた液体麹の一部を次の液体麹製造におけるスターターとして用いることもできる。このように液体麹を連続的に製造することにより、安定的な生産が可能になると同時に、生産効率の向上も図ることができる。
【００６６】
また、本発明の液体麹は、その高い酵素活性から、酵素製剤、並びに消化剤などの医薬品などとしての利用も可能である。この場合、得られた麹菌培養物を所望の程度に濃縮・精製し、適当な賦形剤、増粘剤、甘味料などを添加して常法により製剤化すればよい。
【実施例】
【００６７】
以下、本発明を実施例によってより具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００６８】
実施例１
１．麹菌
菌株として、白麹菌に関する標準株であるアスペルギルス・カワチ（ＮＢＲＣ４３０８株）を準備した。
【００６９】
２．前培養方法
６５％精白大麦８％（w/vol）、ＫＮＯ３０．２％（w/vol）、ＫＨ２ＰＯ４０．３％（w/vol）の組成を有する前培養培地１００ｍｌを、容量５００ｍｌのバッフル付三角フラスコに入れ、１２１℃、１５分間オートクレーブ滅菌し、室温冷却後、麹菌の胞子１白金耳を接種した。その後、温度３７℃、１００ｒｐｍにて２４時間回転振盪培養を行った。
【００７０】
３．本培養方法
生のコガネセンガンの全長の約１５％分だけ両端（末端部）を切り落とした。残された肉質部の外皮を剥き、適当な大きさに切り分け、液体培地のサツマイモ濃度に応じて必要な量を収集した。収集した肉質部の量は、各液体培地毎に、５ｇ、１０ｇ、１５ｇ、２０ｇ、３０ｇ、４０ｇ、５０ｇ、６０ｇ及び８０ｇとした。
【００７１】
ＫＮＯ３０．４％（w/vol）、ＫＨ２ＰＯ４０．６％（w/vol）の組成を有する水溶液（ｐＨ無調整）１００ｍｌに上記培養原料を添加し、これらを５００ｍｌ容のバッフル付三角フラスコに入れ、１２１℃、１５分間オートクレーブ滅菌し、室温冷却後、前培養液を２ｍｌ接種した。その後、３７℃、１００ｒｐｍにて７２時間回転振盪培養を行った。
【００７２】
４．酵素活性の測定
本培養を行った培養液から遠心分離により得た培養上清液を芋液体麹として、酵素活性を測定した。測定方法は次の通りである。
【００７３】
耐酸性α−アミラーゼ（ＡＳＡＡ）活性：
培養上清液１．０ｍｌに１００ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ３．０）９．０ｍｌを添加して３７℃で１時間酸処理を行なった後に、α−アミラーゼ測定キット（キッコーマン製）を用いて測定した。
【００７４】
グルコアミラーゼ（ＧＡ）活性：
国税庁所定分析法に従い測定した。具体的には、デンプン溶液１．０ｍｌに２００ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ５．０）０．２ｍｌを加え、４０℃で５分間予熱した。これに培養上清液０．１ｍｌを加え、４０℃で２０分間反応させ、１Ｎ水酸化ナトリウム溶液０．１ｍｌを添加して反応を停止させた。その後３０分間放置し、１Ｎ塩酸溶液０．１ｍｌを加えて中和した。別に対照として、デンプン溶液１ｍｌに０．２Ｍ酢酸緩衝液０．２ｍｌを加え、４０℃で５分間予熱し、１Ｎ水酸化ナトリウム溶液０．１ｍｌを加えた後に培養上清液０．１ｍｌを添加し、以下上記と同様に操作した。反応液中に生成したグルコース量はグルコースCII-テストワコー（和光純薬製）を用いて測定した。
【００７５】
グルコアミラーゼ活性は、可溶性デンプンから４０℃で６０分間に１ｍｇのブドウ糖を生成する活性を１単位として表した。
【００７６】
５．測定結果
それぞれの培養原料を使用して得られた芋液体麹のＡＳＡＡ活性及びＧＡ活性の測定結果を表１及び図１に示す。
【００７７】
［表１］
0005618705.tif 000002
【００７８】
測定結果より、培養原料としてサツマイモの肉質部を使用した場合、培地中のサツマイモ濃度が１５〜６０％の範囲において芋液体麹のＡＳＡＡ活性及びＧＡ活性が増強され、酒類の製造に十分な糖化力が予想される。
【００７９】
実施例２及び比較例１
１．芋液体麹の製造
培養原料として使用するサツマイモの部位及び量を次のように変更すること以外は実施例１と同様にして芋液体麹を製造した。
【００８０】
実施例２の培養原料として、外皮を剥いた生のコガネセンガンの肉質部を１５ｇ、２０ｇ、４０ｇ及び６０ｇ収集した。
【００８１】
また、比較例１の培養原料として、外皮を剥く前に切り落とされたコガネセンガンの末端部（外皮あり）を９ｇ収集した。比較例のサツマイモの量は、アミラーゼ系酵素の活性がほぼ同等になるように考慮して、決定した。
【００８２】
２．酵素活性の測定
得られた芋液体麹の酵素活性を測定した。測定方法は、ＡＳＡＡ活性及びＧＡ活性については実施例１と同様にして行い、β−グルコシダーゼ（ＢＧＬ）活性については次のように行った。測定結果を表２に示す。
【００８３】
β−グルコシダーゼ（ＢＧＬ）活性：
４ｍＭ ｐ−ニトロフェニル−β−Ｄ−グルコピラノシド溶液０．２５ｍｌに５０ｍＭ酢酸緩衝液(ｐＨ５．０)０．５ｍｌの混合溶液を３７℃で約５分間予備加温した後、培養上清０．２５ｍｌを加え、よく混合して反応を開始した。３７℃で正確に１５分間反応させた後、２００ｍＭ炭酸ナトリウム溶液２．０ｍｌを加えてよく混合し、反応を停止させた。この反応終了液を吸光度測定用セルに入れ、波長４１０ｎｍで吸光度を測定した。ブランク値の測定として、上記反応液を３７℃で２０分間加熱し、２００ｍＭ炭酸ナトリウム溶液２．０ｍｌを加えた後に、培養上清を加えてよく混合した液の吸光度を測定した。予め準備した検量線をもとに、遊離生成したp-ニトロフェノール量を算出する。
【００８４】
ＢＧＬ活性は、ｐ−ニトロフェニル−β−Ｄ−グルコピラノシドに作用して３７℃、1分間に１ｎｍｏｌのｐ−ニトロフェノールを遊離する力価を１単位と定義した。
【００８５】
［表２］
0005618705.tif 000003
【００８６】
測定結果より、培養原料としてサツマイモの肉質部を使用した場合、芋液体麹のＡＳＡＡ活性及びＧＡ活性が増強されるが、ＢＧＬ活性は抑制される。
【００８７】
実施例３
１．芋液体麹の製造
培養原料として、外皮を剥いていない生のコガネセンガンの肉質部及び外皮を剥いた生のコガネセンガンの肉質部をそれぞれ２０ｇ使用すること以外は実施例１と同様にして芋液体麹を製造した。
【００８８】
２．酵素活性の測定
実施例２と同様にして得られた芋液体麹の酵素活性を測定した。測定結果を表３に示す。
【００８９】
［表３］
0005618705.tif 000004
【００９０】
測定結果より、培養原料として外皮を有する肉質部及び有しない肉質部を使用した場合、共に芋液体麹のＡＳＡＡ活性及びＧＡ活性が増強されるが、ＢＧＬ活性は抑制されており、肉質部の外皮の有無が麹菌の酵素生産性に与える影響は少ない。
【００９１】
実施例４
１．芋液体麹の製造
培養原料として、大きさ及び個数が相違する生のコガネセンガンの肉質部（外皮なし）を３０ｇ使用すること以外は実施例１と同様にして芋液体麹を製造した。
【００９２】
２．酵素活性の測定
実施例２と同様にして得られた芋液体麹の酵素活性を測定した。測定結果を表４に示す。
【００９３】
［表４］
0005618705.tif 000005
【００９４】
測定結果より、培養原料として大きさ及び個数が相違する肉質部を使用した場合、全て芋液体麹のＡＳＡＡ活性及びＧＡ活性が増強されるが、ＢＧＬ活性は抑制されており、肉質部の大きさ及び個数が麹菌の酵素生産性に与える影響は少ない。
【００９５】
実施例５
１．芋液体麹の製造
培養原料として、品種が相違する生のサツマイモの肉質部（外皮なし）を２０ｇ及び３０ｇ使用すること以外は実施例１と同様にして芋液体麹を製造した。
【００９６】
２．酵素活性の測定
実施例２と同様にして得られた芋液体麹の酵素活性を測定した。測定結果を表５に示す。
【００９７】
［表５］
0005618705.tif 000006
【００９８】
測定結果より、培養原料として品種が相違するサツマイモの肉質部を使用した場合、全て芋液体麹のＡＳＡＡ活性及びＧＡ活性が増強されるが、ＢＧＬ活性は抑制されており、サツマイモの品種が麹菌の酵素生産性に与える影響は少ない。
【００９９】
実施例６
１．芋液体麹の製造
アスペルギルス・カワチの代わりに、黒麹菌に関する標準株であるアスペルギルス・アワモリ（ＮＢＲＣ４３８８株）を用い、本培養時に生のコガネセンガン（外皮なし）を２０ｇ使用すること以外は実施例１と同様にして芋液体麹を製造した。
【０１００】
２．酵素活性の測定
実施例２と同様にして得られた芋液体麹の酵素活性を測定した。測定結果を表６に示す。
【０１０１】
［表６］
0005618705.tif 000007
【０１０２】
測定結果に示されるように、麹菌として黒麹菌を使用した場合でも、白麹菌の場合と同様に、芋液体麹のＡＳＡＡ活性及びＧＡ活性が増強されるが、ＢＧＬ活性は抑制された。
【０１０３】
実施例７
１．芋液体麹の製造
アスペルギルス・カワチの代わりに、黄麹菌に関する標準株であるアスペルギルス・オリゼ（ＲＩＢ４０株）を用い、本培養時に生のコガネセンガン（外皮なし）を２０ｇ使用すること以外は実施例１と同様にして芋液体麹を製造した。
【０１０４】
２．酵素活性の測定
得られた芋液体麹のα−アミラーゼ（ＡＡ）活性を測定した。測定方法は、次の通りである。測定結果を表７に示す。
【０１０５】
α−アミラーゼ（ＡＡ）活性：
α−アミラーゼ測定キット（キッコーマン製）を用いて測定した。
【０１０６】
［表７］
0005618705.tif 000008
【０１０７】
測定結果より、麹菌として黄麹菌を培養した場合は、芋液体麹のＡＡ活性が増強された。
【０１０８】
実施例８
１．芋液体麹の製造
培養原料として、外皮を剥いた蒸煮したコガネセンガンの肉質部及び外皮を剥いた生のコガネセンガンの肉質部をそれぞれ３０ｇ使用すること以外は実施例１と同様にして芋液体麹を製造した。
【０１０９】
２．酵素活性の測定
実施例１と同様にして得られた芋液体麹の酵素活性を測定した。測定結果を表８に示す。
【０１１０】
［表８］
0005618705.tif 000009
【０１１１】
測定結果より、培養原料として蒸煮した芋の肉質部及び生の芋の肉質部を使用した場合、共に芋液体麹のＡＳＡＡ活性及びＧＡ活性が増強されており、肉質部の蒸煮の有無が麹菌の酵素生産性に与える影響は少ない。
【図１】
0005618705.tif 000010