(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）または（Ｉ’）で表される化合物、または医薬的に許容されるその塩。
【化１】
0005558710.tif 000032
式中、Ｒ1およびＲ4は、同じであるか異なり、アミノ酸側鎖部分を表し、各Ｒ6は、同じであるか異なり、水素またはＣ1−Ｃ4アルキルを表し、ならびにＰｒ1およびＰｒ2は、水素であり、
各アミノ酸側鎖が、−Ｈ、−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｃ2−Ｃ6アルケニル、−Ｌ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ’、−Ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’、−Ｌ−Ａ、−Ｌ−ＮＲ’’Ｒ’’、−Ｌ−Ｈｅｔ−Ｃ（Ｏ）−Ｈｅｔ−Ｒ’’および−Ｌ−Ｈｅｔ−Ｒ’’から選択される部分であり、Ｌが、Ｃ1−Ｃ6アルキレン基であり、Ａが、フェニルまたは５員から６員ヘテロアリール基であり、各Ｒ’が、同じであるか異なり、Ｃ1−Ｃ4アルキルを表し、各Ｒ’’が、同じであるか異なり、ＨまたはＣ1−Ｃ6アルキルを表し、各−Ｈｅｔ−が、同じであるか異なり、−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ’’’）−および−Ｓ−から選択されるヘテロ原子スペーサーであり、各Ｒ’’’が、同じであるか異なり、ＨまたはＣ1−Ｃ4アルキルを表し、
Ｒ2が、−Ｈであり、
Ｒ3が、−Ｈ、−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’、−Ｌ−ＮＲ’’Ｒ’’および−Ｌ−Ｎ（Ｒ’’）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’から選択され、Ｌ及びＲ’’は、それぞれ前記Ｌ及びＲ’’と同じである。
【請求項２】
Ａが、フェニルである、請求項１に記載の化合物または医薬的に許容されるその塩。
【請求項３】
−Ｈｅｔ−が、−Ｏ−または−ＮＲ’’’である、請求項１又は請求項２に記載の化合物または医薬的に許容されるその塩。
【請求項４】
Ｒ1が、−Ｈおよび−Ｃ1−Ｃ6アルキルから選択される部分である、請求項１から請求項３のいずれか一項に記載の化合物または医薬的に許容されるその塩。
【請求項５】
各アミノ酸側鎖が、−（ＣＨ2）2−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3、−（ＣＨ2）4−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3、−（ＣＨ2）3−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ2、−ＣＨ2−ＣＨ2ＯＨまたは−（ＣＨ2）2−ＣＨ2ＮＨ2である、請求項１から請求項４のいずれか一項に記載の化合物または医薬的に許容されるその塩。
【請求項６】
Ｒ4が、−Ｈおよび−Ｃ1−Ｃ4アルキルから選択される部分である、請求項１から請求項５のいずれか一項に記載の化合物または医薬的に許容されるその塩。
【請求項７】
Ｒ6が、−Ｈである、請求項１から請求項６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
前記化合物が、式（２）、（２’）、（４）、（４’）、（５）、（５’）、（７）、（７’）、（８）、（８’）、（９）または（９’）の化合物である、請求項１に記載の化合物または医薬的に許容されるその塩。
【化２】
0005558710.tif 000033
【化３】
0005558710.tif 000034
【化４】
0005558710.tif 000035
【請求項９】
請求項１から請求項８のいずれか１項に記載の化合物または医薬的に許容されるその塩と、医薬的に許容される担体または希釈剤とを含む医薬組成物。
【請求項１０】
経口、直腸内、非経口、鼻孔内もしくは経皮投与または吸入もしくは坐剤による投与に適する形態である、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
錠剤、カプセル、トローチ、ロゼンジ、水性もしくは油性懸濁剤、分散性粉末もしくは顆粒または舌下錠の形態である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＨＤＡＣの阻害剤として作用する特定のデプシペプチドに関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）は、アセチル化リシン残基の加水分解を触媒する亜鉛金属酵素である。ヒストンにおいて、これはリシンをそれらの正常なプロトン化状態に戻し、またこれはヌクレオソームにおいて緊密なＤＮＡパッケージングを生じさせる真核性転写制御の包括的メカニズムである。加えて、可逆的リシンアセチル化は、非ヒストンタンパク質にとっての重要な調節プロセスである。従って、ＨＤＡＣを修飾することができる化合物は、重要な治療上の可能性を有する。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
２つの天然産物デプシペプチド、ＦＫ２２８およびスピルコスタチン（Ｓｐｉｒｕｃｈｏｓｔａｔｉｎ）Ａには、ＨＤＡＣ阻害剤としての可能性があるとの報告がある。しかし、これらの天然産物を化学的に修飾してさらなる類似体を生じさせる可能性は、非常に限られている。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
驚くべきことに、今般、下に記載する一般式（Ｉ）および（Ｉ’）の化合物がＨＤＡＣの阻害剤として作用することを発見した。従って本発明は、ＨＤＡＣの阻害剤として使用するための医薬品の製造における、式（Ｉ）もしくは（Ｉ’）
【０００５】
【化１５】
0005558710.tif 000002
【０００６】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4は、同じであるか異なり、アミノ酸側鎖部分を表し、各Ｒ6は、同じであるか異なり、水素またはＣ1−Ｃ4アルキルを表し、ならびにＰｒ1およびＰｒ2は、同じであるか異なり、水素またはチオール保護基を表す）
のＦＫ２２８類似体である化合物、そのアイソスターまたは医薬的に許容されるその塩の使用を提供する。
【０００７】
さらに、本発明は、ＨＤＡＣの阻害剤として使用するための医薬品の製造における、上で定義したＦＫ２２８類似体または医薬的に許容されるその塩の使用を提供する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本明細書で用いられる場合、用語「アミノ酸側鎖部分」は、天然および非天然アミノ酸中に存在する任意のアミノ酸側鎖を指す。非天然アミノ酸由来のアミノ酸側鎖部分の例（括弧内にそれらが由来するアミノ酸を示す）は、−（ＣＨ2）2−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3（ｔ−ブトキシカルボニルメチルアラニン）、−（ＣＨ2）4−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3（Ｎε−（ｔ−ブトキシカルボニル）−リシン）、−（ＣＨ2）3−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ2（シトルリン）、−ＣＨ2−ＣＨ2ＯＨ（ホモセリン）および−（ＣＨ2）2−ＣＨ2ＮＨ2（オルニチン）である。特に、−（ＣＨ2）3−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ2（シトルリン）、−ＣＨ2−ＣＨ2ＯＨ（ホモセリン）および−（ＣＨ2）2−ＣＨ2ＮＨ2（オルニチン）を挙げることができる。
【０００９】
Ｃ1−Ｃ6アルキル基または部分は、線状である場合もあり、または分枝状である場合もある。一般に、それは、Ｃ1−Ｃ4アルキル基または部分、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチルおよびｔ−ブチルである。好ましい例としては、メチル、ｉ−プロピルおよびｔ−ブチルが挙げられる。
【００１０】
Ｃ2−Ｃ6アルケニル基または部分は、線状である場合もあり、または分枝状である場合もある。一般に、それは、Ｃ2−Ｃ4アルケニル基または部分である。アルケニルラジカルは、一または二不飽和であり、さらに好ましくは一不飽和であることが好ましい。例としては、ビニル、アリル、１−プロペニル、イソプロペニル、１−ブテニル、２−ブテニルおよび３−ブテニルが挙げられる。
【００１１】
アルキレン基は、二価である前記アルキル基である。
【００１２】
前記チオール保護基は、一般に、
（ａ）チオエーテルを形成してチオール基を保護する保護基、例えば、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ（例えば、メトキシ）、Ｃ1−Ｃ6アシルオキシ（例えば、アセトキシ）、ヒドロキシおよびニトロにより所望により置換されているベンジル基、ピコリル、ピコリル−Ｎ−オキシド、アントリルメチル、ジフェニルメチル、フェニル、ｔ−ブチル、アダマンチル、Ｃ1−Ｃ6アシルオキシメチル（例えば、ピバロイルオキシメチル、ｔ−ブトキシカルボニルオキシメチル）、
（ｂ）モノチオ、ジチオまたはアミノチオアセタールを形成してチオール基を保護する保護基、例えば、Ｃ1−Ｃ6アルコキシメチル（例えば、メトキシメチル、イソブトキシメチル）、テトラヒドロピラニル、ベンジルチオメチル、フェニルチオメチル、チアゾリジン、アセトアミドメチル、ベンズアミドメチル、
（ｃ）チオエステルを形成してチオール基を保護する保護基、例えば、ｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、アセチルおよびその誘導体、ベンゾイルおよびその誘導体；または
（ｄ）カルバミン酸チオエステルを形成してチオール基を保護する保護基、例えば、カルバモイル、フェニルカルバモイル、Ｃ1−Ｃ6アルキルカルバモイル（例えば、メチルカルバモイルおよびエチルカルバモイル）
である。
【００１３】
一般に、Ｐｒ1およびＰｒ2は、同じであるか異なり、各々、水素を表すか、チオエーテル、モノチオ、ジチオもしくはアミノチオアセタール、チオエステルまたはカルバミン酸チオエステルを形成してチオール基を保護する保護基を表す。好ましくは、Ｐｒ1およびＰｒ2は、同じであるか異なり、各々、水素を表すか、Ｃ1−Ｃ6アルコキシ（例えば、メトキシ）、Ｃ1−Ｃ6アシルオキシ（例えば、アセトキシ）、ヒドロキシおよびニトロにより所望により置換されているベンジル基、ピコリル、ピコリル−Ｎ−オキシド、アントリルメチル、ジフェニルメチル、フェニル、ｔ−ブチル、アダマンチル、Ｃ1−Ｃ6アシルオキシメチル（例えば、ピバロイルオキシメチル、ｔ−ブトキシカルボニルオキシメチル）、Ｃ1−Ｃ6アルコキシメチル（例えば、メトキシメチル、イソブトキシメチル）、テトラヒドロピラニル、ベンジルチオメチル、フェニルチオメチル、チアゾリジン、アセトアミドメチル、ベンズアミドメチル、ｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、アセチルおよびその誘導体、ベンゾイルおよびその誘導体、カルバモイル、フェニルカルバモイルおよびＣ1−Ｃ6アルキルカルバモイル（例えば、メチルカルバモイルおよびエチルカルバモイル）から選択される保護基を表す。最も好ましくは、Ｐｒ1およびＰｒ2は、水素である。
【００１４】
１つの実施形態において、前記アミノ酸側鎖部分は、天然アミノ酸由来のものである。天然アミノ酸由来のアミノ酸側鎖部分の例（括弧内にそれらが由来するアミノ酸を示す）は、−Ｈ（グリシン）、−ＣＨ3（アラニン）、−ＣＨ（ＣＨ3）2（バリン）、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2（ロイシン）、−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3（イソロイシン）、−（ＣＨ2）4ＮＨ2（リシン）、−（ＣＨ2）3ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ2（アルギニン）、−ＣＨ2−（５−１Ｈ−イミダゾリル）（ヒスチジン）、−ＣＨ2ＣＯＮＨ2（アスパラギン）、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＮＨ2（グルタミン）、−ＣＨ2ＣＯＯＨ（アスパラギン酸）、−ＣＨ2ＣＨ2ＣＯＯＨ（グルタミン酸）、−ＣＨ2−フェニル（フェニルアラニン）、−ＣＨ2−（４−ＯＨ−フェニル）（チロシン）、−ＣＨ2−（３−１Ｈ−インドリル）（トリプロファン）、−ＣＨ2ＳＨ（システイン）、−ＣＨ2ＣＨ2ＳＣＨ3（メチオニン）、−ＣＨ2ＯＨ（セリン）、および−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ3（トレオニン）である。
【００１５】
１つの実施形態において、各アミノ酸側鎖は、天然アミノ酸中に存在するアミノ酸側鎖部分であるか、−（ＣＨ2）2−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3（ｔ−ブトキシカルボニルメチルアラニン）、−（ＣＨ2）4−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3（Ｎε−（ｔ−ブトキシカルボニル）−リシン）、−（ＣＨ2）3−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）ＮＨ2（シトルリン）、−ＣＨ2−ＣＨ2ＯＨ（ホモセリン）または−（ＣＨ2）2−ＣＨ2ＮＨ2（オルニチン）である。
【００１６】
本発明の好ましい実施形態において、各アミノ酸側鎖は、−Ｈ、−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｃ2−Ｃ6アルケニル、−Ｌ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ’、−Ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’、−Ｌ−Ａ、−Ｌ−ＮＲ’’Ｒ’’、−Ｌ−Ｈｅｔ−Ｃ（Ｏ）−Ｈｅｔ−Ｒ’’および−Ｌ−Ｈｅｔ−Ｒ’’から選択される部分であり、Ｌは、Ｃ1−Ｃ6アルキレン基であり、Ａは、フェニルまたは５員から６員ヘテロアリール基であり、各Ｒ’は、同じであるか異なり、Ｃ1−Ｃ4アルキルを表し、各Ｒ’’は、同じであるか異なり、ＨまたはＣ1−Ｃ6アルキルを表し、各−Ｈｅｔ−は、同じであるか異なり、ならびに−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ’’’）−および−Ｓ−から選択されるヘテロ原子スペーサーであり、各Ｒ’’’は、同じであるか異なり、ＨまたはＣ1−Ｃ4アルキルを表す。
【００１７】
基Ａが、５員から６員ヘテロアリール基であるとき、それは、例えば、フラニル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ピリジル、ピリダジル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニルであり得る。しかし、一般には、各Ａ部分は、フェニルである。
【００１８】
ヘテロ原子スペーサー基Ｈｅｔは、一般に、−Ｏ−または−Ｎ（Ｒ’’’）−である。さらに一般的には、−Ｏ−または−Ｎ（Ｈ）−である。
【００１９】
好ましくは、各アミノ酸側鎖は、−Ｈ、−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’、−Ｌ−Ａ、−Ｌ−ＮＲ’’Ｒ’’および−Ｌ−Ｎ（Ｒ’’）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’から選択される部分であり、Ｌ、ＡおよびＲ’’は、先に定義したとおりである。
【００２０】
一般に、本発明の化合物のアミノ酸側鎖部分は、−（ＣＨ2）2−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3、−（ＣＨ2）4−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3、−（ＣＨ2）2−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−ＣＨ2−Ｃ6Ｈ5、−Ｈ、−ＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3、−（ＣＨ2）4ＮＨ2、ＣＨ2ＳＨ、−ＣＨ2ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2ＯＨおよび−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ3から選択される。さらに一般的には、アミノ酸側鎖部分は、−Ｈ、−ＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3、−（ＣＨ2）4ＮＨ2、ＣＨ2ＳＨ、−ＣＨ2ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2ＯＨおよび−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ3から選択される。
【００２１】
好ましくは、アミノ酸側鎖部分は、−Ｈ、−ＣＨ3、−（ＣＨ2）2−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3、−（ＣＨ2）4−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3、−（ＣＨ2）2−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−ＣＨ2−Ｃ6Ｈ5、−（ＣＨ2）4ＮＨ2および−ＣＨ（ＣＨ3）2から選択される。本発明の１つの実施形態において、アミノ酸側鎖部分は、−Ｈ、−ＣＨ3および−ＣＨ（ＣＨ3）2から選択される。
【００２２】
一般に、Ｒ1は、−Ｈ、−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｃ2−Ｃ6アルケニル、−Ｌ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ’、−Ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’、−Ｌ−Ａ、−Ｌ−ＮＲ’’Ｒ’’、−Ｌ−Ｈｅｔ−Ｃ（Ｏ）−Ｈｅｔ−Ｒ’’および−Ｌ−Ｈｅｔ−Ｒ’’から選択されるアミノ酸側鎖部分であり、Ｌ、Ｒ’、Ｒ’’、−Ｈｅｔ−およびＲ’’’は、先に定義したとおりである。好ましくは、Ｒ1は、−Ｈ、−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’、−Ｌ−Ａ、−Ｌ−ＮＲ’’Ｒ’’および−Ｌ−Ｎ（Ｒ’’）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’から選択される部分であり、Ｌ、ＡおよびＲ’’は、先に定義したとおりである。さらに好ましくは、Ｒ1は、−Ｈおよび−Ｃ1−Ｃ6アルキルから選択される部分である。さらにいっそう好ましくは、Ｒ1は、−Ｃ1−Ｃ4アルキル、特にイソプロピルである。
【００２３】
一般に、Ｒ2は、−Ｈ、−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｃ2−Ｃ6アルケニル、−Ｌ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ’、−Ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’、−Ｌ−Ａ、−Ｌ−ＮＲ’’Ｒ’’、−Ｌ−Ｈｅｔ−Ｃ（Ｏ）−Ｈｅｔ−Ｒ’’および−Ｌ−Ｈｅｔ−Ｒ’’から選択されるアミノ酸側鎖部分であり、Ｌ、Ｒ’、Ｒ’’、−Ｈｅｔ−およびＲ’’’は、先に定義したとおりである。好ましくは、Ｒ2は、−Ｈ、−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’、−Ｌ−Ａ、−Ｌ−ＮＲ’’Ｒ’’および−Ｌ−Ｎ（Ｒ’’）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’から選択される部分であり、Ｌ、ＡおよびＲ’’は、先に定義したとおりである。さらに好ましくは、Ｒ2は、−Ｈおよび−Ｃ1−Ｃ4アルキルから選択される部分である。さらにいっそう好ましくは、Ｒ2は、−Ｈ、−ＣＨ3または−ＣＨ（ＣＨ3）2である。さらにより好ましくは、Ｒ2は−Ｈまたは−ＣＨ3である。
【００２４】
一般に、Ｒ3は、−Ｈ、−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｃ2−Ｃ6アルケニル、−Ｌ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ’、−Ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’、−Ｌ−Ａ、−Ｌ−ＮＲ’’Ｒ’’、−Ｌ−Ｈｅｔ−Ｃ（Ｏ）−Ｈｅｔ−Ｒ’’および−Ｌ−Ｈｅｔ−Ｒ’’から選択されるアミノ酸側鎖部分であり、Ｌ、Ｒ’、Ｒ’’、−Ｈｅｔ−およびＲ’’’は、先に定義したとおりである。好ましくは、Ｒ3は、−Ｈ、−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’、−Ｌ−Ａ、−Ｌ−ＮＲ’’Ｒ’’および−Ｌ−Ｎ（Ｒ’’）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’から選択される部分であり、Ｌ、ＡおよびＲ’’は、先に定義したとおりである。
【００２５】
さらに好ましくは、Ｒ3は、−（ＣＨ2）2−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3、−（ＣＨ2）4−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3、−（ＣＨ2）2−Ｃ（Ｏ）ＯＨ、−ＣＨ2−Ｃ6Ｈ5、−ＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）2または−（ＣＨ2）4ＮＨ2である。
【００２６】
一般に、Ｒ4は、−Ｈ、−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｃ2−Ｃ6アルケニル、−Ｌ−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ’、−Ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’、−Ｌ−Ａ、−Ｌ−ＮＲ’’Ｒ’’、−Ｌ−Ｈｅｔ−Ｃ（Ｏ）−Ｈｅｔ−Ｒ’’および−Ｌ−Ｈｅｔ−Ｒ’’から選択されるアミノ酸側鎖部分であり、Ｌ、Ｒ’、Ｒ’’、−Ｈｅｔ−およびＲ’’’は、先に定義したとおりである。好ましくは、Ｒ4は、−Ｈ、−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’、−Ｌ−Ａ、−Ｌ−ＮＲ’’Ｒ’’および−Ｌ−Ｎ（Ｒ’’）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’から選択される部分であり、Ｌ、ＡおよびＲ’’は、先に定義したとおりである。さらに好ましくは、Ｒ4は、水素、−Ｃ1−Ｃ6アルキルまたは−Ｃ2−Ｃ6アルケニルである。さらにいっそう好ましくは、Ｒ4は、水素または−Ｃ1−Ｃ4アルキル、さらに好ましくは水素である。
【００２７】
一般に、各Ｒ6は、同じであるか異なり、水素または−Ｃ1−Ｃ2アルキルである。好ましくは、各Ｒ6は、水素である。
【００２８】
１つの実施形態において、本発明は、式（Ｉ）の化合物である、上で定義したとおりのＦＫ２２８類似体、そのアイソスターまたは医薬的に許容されるその塩を提供する。
【００２９】
本発明の好ましい化合物は、式中のＲ1が、−Ｈおよび−Ｃ1−Ｃ6アルキルから選択され、Ｒ2が、−Ｈおよび−Ｃ1−Ｃ4アルキルから選択され、Ｒ3が、−Ｈ、−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’、−Ｌ−Ａ、−Ｌ−ＮＲ’’Ｒ’’および−Ｌ−Ｎ（Ｒ’’）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’（この場合、Ｌ、ＡおよびＲ’’は、先に定義したとおりである）から選択され、Ｒ4が、−Ｈおよび−Ｃ1−Ｃ6アルキルから選択され、ならびにＲ6が、同じであるか異なり、水素または−Ｃ1−Ｃ2アルキルである、上で定義したＦＫ２２８類似体、それらのアイソスターおよびそれらの医薬的に許容される塩である。
【００３０】
本発明のさらに好ましい化合物は、（ａ）式中のＲ1が、−Ｃ1−Ｃ4アルキルであり、Ｒ2が、−Ｈおよび−ＣＨ3から選択され、Ｒ3が、−Ｈ、−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’、−Ｌ−Ａ、−Ｌ−ＮＲ’’Ｒ’’および−Ｌ−Ｎ（Ｒ’’）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’（この場合、Ｌ、ＡおよびＲ’’は、先に定義したとおりである）から選択され、Ｒ4が、−Ｈであり、各Ｒ6が、−Ｈである式（Ｉ）の化合物、それらのアイソスターおよびそれらの医薬的に許容される塩、ならびに（ｂ）式中のＲ1が、−Ｃ1−Ｃ4アルキルであり、Ｒ2が、−Ｈおよび−ＣＨ3から選択され、Ｒ3が、−Ｈ、−Ｃ1−Ｃ6アルキル、−Ｌ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’、−Ｌ−Ａ、−Ｌ−ＮＲ’’Ｒ’’および−Ｌ−Ｎ（Ｒ’’）−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’’（この場合、Ｌ、ＡおよびＲ’’は、先に定義したとおりである）から選択され、Ｒ4が、−Ｈであり、Ｒ6が、−Ｈであり、Ｐｒ1およびＰｒ2が、水素である式（Ｉ’）の化合物、それらのアイソスターおよびそれらの医薬的に許容される塩である。
【００３１】
式（Ｉ）のさらに特に好ましい化合物は、式中の
Ｒ1が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ2が、−ＣＨ3であり、Ｒ3が、−ＣＨ3であり、Ｒ4が、水素であり、およびＲ6が、−Ｈである、
Ｒ1が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ2が、−Ｈであり、Ｒ3が、−（ＣＨ2）2−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3であり、Ｒ4が、水素であり、およびＲ6が、−Ｈである、
Ｒ1が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ2が、−Ｈであり、Ｒ3が、−（ＣＨ2）2−Ｃ（Ｏ）−ＯＨであり、Ｒ4が、水素であり、およびＲ6が、−Ｈである、
Ｒ1が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ2が、−Ｈであり、Ｒ3が、−（ＣＨ2）−Ｃ6Ｈ5であり、Ｒ4が、水素であり、およびＲ6が、−Ｈである、
Ｒ1が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ2が、−Ｈであり、Ｒ3が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ4が、水素であり、およびＲ6が、−Ｈである、
Ｒ1が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ2が、−Ｈであり、Ｒ3が、−（ＣＨ2）4−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3であり、Ｒ4が、水素であり、およびＲ6が、−Ｈである；または
Ｒ1が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ2が、−Ｈであり、Ｒ3が、−（ＣＨ2）4−ＮＨ2であり、Ｒ4が、水素であり、およびＲ6が、−Ｈである
化合物、およびそれらの医薬的に許容される塩である。
【００３２】
式（Ｉ’）のさらに特に好ましい化合物は、式中の
Ｒ1が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ2が、−ＣＨ3であり、Ｒ3が、−ＣＨ3であり、Ｒ4が、水素であり、およびＲ6が、−Ｈであり、Ｐｒ1およびＰｒ2が、水素である、
Ｒ1が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ2が、−Ｈであり、Ｒ3が、−（ＣＨ2）2−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3であり、Ｒ4が、水素であり、およびＲ6が、−Ｈであり、Ｐｒ1およびＰｒ2が、水素である、
Ｒ1が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ2が、−Ｈであり、Ｒ3が、−（ＣＨ2）2−Ｃ（Ｏ）−ＯＨであり、Ｒ4が、水素であり、およびＲ6が、−Ｈであり、Ｐｒ1およびＰｒ2が、水素である、
Ｒ1が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ2が、−Ｈであり、Ｒ3が、−（ＣＨ2）−Ｃ6Ｈ5であり、Ｒ4が、水素であり、およびＲ6が、−Ｈであり、Ｐｒ1およびＰｒ2が、水素である、
Ｒ1が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ2が、−Ｈであり、Ｒ3が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ4が、水素であり、およびＲ6が、−Ｈであり、Ｐｒ1およびＰｒ2が、水素である、
Ｒ1が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ2が、−Ｈであり、Ｒ3が、−（ＣＨ2）4−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ（ＣＨ3）3であり、Ｒ4が、水素であり、およびＲ6が、−Ｈであり、Ｐｒ1およびＰｒ2が、水素である；または
Ｒ1が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ2が、−Ｈであり、Ｒ3が、−（ＣＨ2）4−ＮＨ2であり、Ｒ4が、水素であり、Ｒ6が、−Ｈであり、ならびにＰｒ1およびＰｒ2が、水素である
化合物、およびそれらの医薬的に許容される塩である。
【００３３】
好ましいＦＫ２２８類似体は、式（２）または（２’）である。
【００３４】
【化１６】
0005558710.tif 000003
【００３５】
別の好ましいＦＫ２２８類似体は、式（３）または（３’）である。
【００３６】
【化１７】
0005558710.tif 000004
【００３７】
別の好ましいＦＫ２２８類似体は、式（４）または（４’）である。
【００３８】
【化１８】
0005558710.tif 000005
【００３９】
別の好ましいＦＫ２２８類似体は、式（５）または（５’）である。
【００４０】
【化１９】
0005558710.tif 000006
【００４１】
別の好ましいＦＫ２２８類似体は、式（６）または（６’）である。
【００４２】
【化２０】
0005558710.tif 000007
【００４３】
別の好ましいＦＫ２２８類似体は、式（７）または（７’）である。
【００４４】
【化２１】
0005558710.tif 000008
【００４５】
別の好ましいＦＫ２２８類似体は、式（８）または（８’）である。
【００４６】
【化２２】
0005558710.tif 000009
【００４７】
別の好ましいＦＫ２２８類似体は、式（９）または（９’）である。
【００４８】
【化２３】
0005558710.tif 000010
【００４９】
本発明の１つの実施形態において、ＦＫ２２８類似体は、式（ＩＩ）または（ＩＩ’）である。
【００５０】
【化２４】
0005558710.tif 000011
【００５１】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ6、Ｐｒ1およびＰｒ2は、先に定義したとおりである）
本発明のもう１つの実施形態において、ＦＫ２２８類似体は、式（ＩＩＩ）または（ＩＩＩ’）である。
【００５２】
【化２５】
0005558710.tif 000012
【００５３】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｐｒ1およびＰｒ2は、先に定義したとおりである）
本発明のもう１つの実施形態において、ＦＫ２２８類似体は、式（ＩＶ）または（ＩＶ’）である。
【００５４】
【化２６】
0005558710.tif 000013
【００５５】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｐｒ1およびＰｒ2は、先に定義したとおりである）
本発明のもう１つの実施形態において、ＦＫ２２８類似体は、式（Ｖ）または（Ｖ’）である。
【００５６】
【化２７】
0005558710.tif 000014
【００５７】
（式中、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3、Ｐｒ1およびＰｒ2は、先に定義したとおりである）
さらなる実施形態において、本発明は、ＨＤＡＣの阻害剤として使用するための医薬品の製造における、式（ＶＩ）
【００５８】
【化２８】
0005558710.tif 000015
【００５９】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、同じであるか異なり、アミノ酸側鎖部分を表し、ならびにＲ4は、水素、Ｃ1−Ｃ6アルキルまたはＣ2−Ｃ6アルケニルである）
の化合物、そのアイソスターまたは医薬的に許容されるその塩の使用を提供する。
【００６０】
一般に、この実施形態において、Ｒ1は、天然アミノ酸由来のアミノ酸側鎖部分である。好ましくは、この実施形態において、Ｒ1は、−Ｈ、−ＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3、−（ＣＨ2）4ＮＨ2、−ＣＨ2ＳＨ、−ＣＨ2ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2ＯＨまたは−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ3である。さらに好ましくは、Ｒ1は、−Ｈ、−ＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2または−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3である。最も好ましくは、Ｒ1は、−ＣＨ（ＣＨ3）2である。
【００６１】
一般に、この実施形態において、Ｒ2は、天然アミノ酸由来のアミノ酸側鎖部分である。好ましくは、Ｒ2は、−Ｈ、−ＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3、−（ＣＨ2）4ＮＨ2、−ＣＨ2ＳＨ、−ＣＨ2ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2ＯＨまたは−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ3である。さらに好ましくは、Ｒ2は、−Ｈ、−ＣＨ3または−ＣＨ（ＣＨ3）2である。最も好ましくは、Ｒ2は、−Ｈである。
【００６２】
一般に、この実施形態において、Ｒ3は、天然アミノ酸由来のアミノ酸側鎖部分である。好ましくは、Ｒ3は、−Ｈ、−ＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3、−（ＣＨ2）4ＮＨ2、−ＣＨ2ＳＨ、−ＣＨ2ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2ＯＨまたは−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ3である。さらに好ましくは、Ｒ3は、−Ｈ、−ＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2または−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3である。最も好ましくは、Ｒ3は、−ＣＨ3である。
【００６３】
一般に、この実施形態において、Ｒ4は、水素またはＣ1−Ｃ6アルキルである。好ましくは、Ｒ4は、水素またはＣ1−Ｃ2アルキルである。さらに好ましくは、Ｒ4は、水素である。
【００６４】
この実施形態において、本発明の好ましい化合物は、式中の
Ｒ1が、−Ｈ、−ＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3、−（ＣＨ2）4ＮＨ2、−ＣＨ2ＳＨ、−ＣＨ2ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2ＯＨまたは−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ3であり、
Ｒ2が、−Ｈ、−ＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3、−（ＣＨ2）4ＮＨ2、−ＣＨ2ＳＨ、−ＣＨ2ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2ＯＨまたは−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ3であり、
Ｒ3が、−Ｈ、−ＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3、−（ＣＨ2）4ＮＨ2、−ＣＨ2ＳＨ、−ＣＨ2ＣＨ2ＳＣＨ3、−ＣＨ2ＯＨまたは−ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ3であり；および
Ｒ4が、水素またはＣ1−Ｃ2アルキルである、
式（ＶＩ）の化合物である。
【００６５】
この実施形態の好ましい態様において、本発明は、式中の
Ｒ1が、−Ｈ、−ＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2または−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3であり、
Ｒ2が、−Ｈ、−ＣＨ3または−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、
Ｒ3が、−Ｈ、−ＣＨ3、−ＣＨ（ＣＨ3）2、−ＣＨ2ＣＨ（ＣＨ3）2または−ＣＨ（ＣＨ3）ＣＨ2ＣＨ3であり；および
Ｒ4が、水素である、
式（ＶＩ）の化合物を提供する。
【００６６】
この実施形態の特に好ましい化合物は、式（ＶＩ）中のＲ1が、−ＣＨ（ＣＨ3）2であり、Ｒ2が、−Ｈであり、Ｒ3が、−ＣＨ3であり、およびＲ4が、水素である。
【００６７】
この実施形態のさらに好ましい化合物は、式（ＩＩＩ）の化合物である。
【００６８】
【化２９】
0005558710.tif 000016
【００６９】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、先に定義したとおりである）
この実施形態のさらに好ましい化合物は、式（ＩＶ）の化合物である。
【００７０】
【化３０】
0005558710.tif 000017
【００７１】
（式中、Ｒ1、Ｒ2およびＲ3は、先に定義したとおりである）
本発明の化合物は、新規であると考えられ、従って本発明は、式（Ｉ）の化合物、そのアイソスターまたは医薬的に許容されるその塩を提供する。さらに、本発明は、式（Ｉ）の化合物または医薬的に許容されるその塩を提供する。
【００７２】
本発明は、ヒトまたは動物を治療する方法において使用するための、式（Ｉ）の化合物、そのアイソスターまたは医薬的に許容されるその塩も提供する。さらに本発明は、ヒトまたは動物を治療する方法において使用するための、式（Ｉ）の化合物または医薬的に許容されるその塩も提供する。
【００７３】
本発明の化合物は、高い治療効果を示すので、特に有利である。また、そのテトラペプチドコアを容易に合成することができるので、有利である。
【００７４】
本明細書で用いられる場合、医薬的に許容される塩は、医薬的に許容される酸または塩基との塩である。医薬的に許容される酸は、無機酸（例えば、塩酸、硫酸、リン酸、二リン酸、臭化水素酸または硝酸）と有機酸（例えば、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、アスコルビン酸、コハク酸、酒石酸、安息香酸、酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸またはｐ−トルエンスルホン酸）の両方を含む。医薬的に許容される塩基としては、アルカリ金属（例えば、ナトリウムまたはカリウム）およびアルカリ土類金属（例えば、カルシウムまたはマグネシウム）水酸化物、ならびに有機塩基、例えば、アルキルアミン、アラルキルアミンまたは複素環式アミンが挙げられる。
【００７５】
本明細書で用いられる場合、用語「アイソスター」は、ある原子または原子群と別の、概して類似している、原子または原子群の交換の結果として生じた化合物を指す。式（Ｉ）の化合物において、アイソステリック基を含有する部分は、好ましくは、−ＮＨ−ＣＨＲ1−ＣＯ−、−ＮＨ−ＣＨＲ2−ＣＯ−Ｏ−および−ＮＨ−ＣＯ−ＣＨＲ3−ＮＨ−ＣＯ−である。式（Ｉ）の化合物において、アイソステリック基を含有する部分は、さらに好ましくは、−ＮＨ−ＣＨＲ1−ＣＯ−および−ＮＨ−ＣＨＲ2−ＣＯ−Ｏ−である。このようなアイソスターの例は、式中の部分−ＮＨ−が、−ＣＨ2−、−Ｏ−または−Ｓ−により置換されている、部分−ＣＯ−が、−ＣＳ−または−Ｃ（＝ＮＨ）−により置換されている、および部分−Ｏ−が、−Ｓ−、ＣＨ2−または−ＮＨ−により置換されている、式（Ｉ）の化合物である。
【００７６】
本発明の化合物は、式（Ｉ）に示すキラリティーを有する。しかし、基Ｒ1、Ｒ2およびＲ3の空間配置に起因して化合物内に追加のキラル中心が形成される場合がある。疑いを避けるために、本明細書に描かれている化学構造は、ラセミおよび非ラセミ混合物ならびに純粋なエナンチオマーおよび／またはジアステレオマーを含む、これらの追加のキラル中心を随伴する立体異性体配置のすべてを包含することを意図する。
【００７７】
疑いを避けるために、本発明は、インビボで反応して本発明の化合物またはそのアイソスターもしくは医薬的に許容される塩を生じさせるプロドラッグも包含する。
【００７８】
本発明の好ましい化合物は、光学異性体である。従って、例えば、キラル中心を１つだけ含有する式（Ｉ）の好ましい化合物としては、実質的に純粋な形態のＲ異性体、実質的に純粋な形態のＳエナンチオマー、および過剰なＲエナンチオマーまたは過剰なＳエナンチオマーを含有するエナンチオマー混合物が挙げられる。
【００７９】
本発明は、式（Ｉ）の化合物、そのアイソスターまたは医薬的に許容されるその塩および医薬的に許容される担体または希釈剤も提供する。
【００８０】
前記医薬組成物は、一般に、８５重量％以下の本発明の化合物を含有する。さらに一般的には、それは、５０重量％以下の本発明の化合物を含有する。好ましい医薬組成物は、無菌であり、発熱物質を含まない。さらに、本発明により提供される医薬組成物は、実質的に純粋な光学異性体である本発明の化合物を、一般に含有する。好ましくは、本医薬組成物は、式（Ｉ）の化合物またはそのアイソスターの医薬的に許容される塩を含む。
【００８１】
本ＦＫ２２８類似体は、従来の経路、例えば、以下の図式（この場合、基Ｒ1からＲ4は、上で定義したとおりである）を用いて調製することができる。
【００８２】
【化３１】
0005558710.tif 000018
【００８３】
段階（ａ）において、側鎖Ｒ2を有するアミノ酸エステルを、側鎖Ｒ1を有する第二のアミノ酸と縮合させて、ジペプチドを得る。段階（ｂ）において、そのジペプチドを保護システイン誘導体と縮合させて、トリペプチドを得る。段階（ｃ）において、そのトリペプチドをアミノ酸とカップリングさせて、保護テトラペプチドを生じさせる。段階（ｄ）において、そのテトラペプチドのＮ末端を脱保護し、その遊離アミンを、β−ヒドロキシ酸誘導体（式中、Ｒ5は、一時的ブロッキング基であり、これを除去して、Ｒ5がＨである化合物を生じさせることができ、およびＸは、Ｙｕｒｅｋ−Ｇｅｏｒｇｅ，Ａ．；Ｈａｂｅｎｓ，Ｆ．；Ｂｒｉｍｍｅｌｌ，Ｍ．；Ｐａｃｋｈａｍ，Ｇ．；Ｇａｎｅｓａｎ，Ａ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００４，１２６，１０３０−１０３１に報告されているようなキラル補助基である）とカップリングさせる。段階（ｅ）においてそのエステル基を加水分解し、その後、段階（ｆ）において環化し、（ｇ）においてジスルフィド結合を形成させて、二環式デプシペプチド化合物（Ｉ）の合成を完了する。
【００８４】
Ｒ6が水素以外である本発明の化合物は、Ｒ6が水素である本発明の対応する化合物もしくは中間体をアルキル化することにより、または適切に置換された出発材料を使用することにより、得ることができる。
【００８５】
式（Ｉ’）の化合物は、ジスルフィド結合を開裂するように上記段階（ｇ）の生成物を反応させることによって、得ることができる。一般に、このジスルフィド結合の開裂は、ジスルフィド結合を有するタンパク質の還元処理のために一般に使用されるチオール化合物、例えば、メルカプトエタノール、チオグリコール酸、２−メルカプトエチルアミン、ベンゼンチオール、パラチオクレゾールおよびジチオトレイトールを使用して達成される。好ましくは、メルカプトエタノールおよびジチオトレイトールを使用する。例えば透析またはゲル濾過により、過剰のチオール化合物を除去することができる。あるいは、例えば電解、テトラヒドロホウ酸ナトリウム、水素化アルミニウムリチウムまたは亜流酸塩を使用して、ジスルフィド結合を開裂することができる。
【００８６】
Ｐｒ1および／またはＰｒ2が水素以外である式（Ｉ’）の化合物は、Ｐｒ1および／またはＰｒ2が水素である対応する化合物にチオール保護基を導入することによって、調製することができる。この態様において、この反応に用いられるチオール保護基の導入に適する薬剤は、その導入される保護基に依存して適切に決定される。例としては、その対応する保護基の塩化物（例えば、塩化ベンジル、塩化メトキシベンジル、塩化アセトキシベンジル、塩化ニトロベンジル、塩化ピコリル、塩化ピコリル−Ｎ−オキシド、塩化アントリルメチル、塩化イソブトキシメチル、塩化フェニルチオメチル）およびその対応する保護基のアルコール（例えば、ジフェニルメチルアルコール、アダマンチルアルコール、アセトアミドメチルアルコール、ベンズアミドメチルアルコール）、ジニトロフェニル、イソブチレン、ジメトキシメタン、ジヒドロピランならびにクロロギ酸ｔ−ブチルが挙げられる。
【００８７】
当業者には理解されるように、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3およびＲ4の１つが、官能基、例えば、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨ2または−ＣＯＯＨを有するときには、その導入後のもう１つの反応のためにその基を保護することが好ましい場合がある。このような場合、問題の基は、その導入後、別の段階で保護してもよいし、またはそれを導入する時点で既に保護されていてもよい。当業者は、これに関して使用することができる適当な保護基を知っていることであろう。
【００８８】
このようにして得たＦＫ２２８類似体を、適切な酸または塩基での処理により、塩化することができる。上記プロセスのうちのいずれかによって得られたラセミ混合物は、標準的な技術、例えばキラルクロマトグラフィーカラムでの溶離によって分解することができる。
【００８９】
本発明の好ましい化合物は、スベロイルアニリドヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）と少なくとも等しいＨＤＡＣ阻害活性を有する。従って、さらなる実施形態において、本発明は、ＳＡＨＡにより示されるものに少なくとも等しいＨＤＡＣ阻害活性を有する化合物を選択するためのプロセスであって、式（Ｉ）または（Ｉ’）の化合物を調製することを含み、該調製は以下を含む該プロセス：
（ｉ）式（ＶＩ）の化合物と式（ＶＩＩ）の化合物を反応させ、
【００９０】
【化３２】
0005558710.tif 000019
【００９１】
（式中、Ｒ1およびＲ2は、上で定義したとおりであり、Ｒ7は、Ｃ1−Ｃ4アルキルまたはＣ2−Ｃ4アルケニルであり、ならびにＹは、アミノ保護基である）
（ｉｉ）得られた中間体を脱保護し、それを式（ＶＩＩＩ）の化合物と反応させ、
【００９２】
【化３３】
0005558710.tif 000020
【００９３】
（式中、Ｙ’は、アミノ保護基であり、およびＹ’’は、水素または保護基である）
（ｉｉｉ）得られた中間体を脱保護し、それを式（ＩＸ）の化合物と反応させ、
【００９４】
【化３４】
0005558710.tif 000021
【００９５】
（式中、Ｒ3は、上で定義したとおりであり、およびＹ’’’は、アミノ酸保護基である）
（ｉｖ）得られた中間体を脱保護し、それを式（Ｘ）の化合物と反応させ、
【００９６】
【化３５】
0005558710.tif 000022
【００９７】
（式中、Ｒ4は、上で定義したとおりであり、Ｒ5は、水素またはヒドロキシ保護基であり、ＬＧは、脱離基であり、およびＹ’’’’は、水素または保護基である）
（ｖ）得られた中間体上のβ−ヒドロキシ基を所望により脱保護して、Ｒ5保護基を除去し、それをＨで置換し、
（ｖｉ）得られた中間体を加水分解および環化すること、
（ｖｉｉ）得られた中間体を、所望により、ジスルフィド結合を形成させるように反応させ、そしてジスルフィド結合が形成される場合には、得られた化合物中のジスルフィド結合を所望により開裂し、得られた化合物がチオール基を含有する場合には、チオール保護基を所望により導入し；および
（ｖｉｉｉ）得られた化合物をスクリーニングして、ＨＤＡＣ阻害剤としてのその活性を測定する。
【００９８】
一般に、段階（ｖｉ）において、エステル基の加水分解は、環化の前に行う。
【００９９】
一般に、段階（ｖｉｉ）において、ＤＴＴ（ジチオトレイトール）を使用して、ジスルフィド結合の開裂を行う。
【０１００】
様々な実体を保護基Ｙ、Ｙ’、Ｙ’’、Ｙ’’’およびＹ’’’’に用いることができること、ならびにその好ましい実体が、それぞれの場合、存在する特定の基の性質に依存することは、当業者には理解されるであろう。
【０１０１】
基Ｙ、Ｙ’およびＹ’’’は、例えば、ｔ−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）または９−フルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）であり得る。一般に、それらはＦｍｏｃである。
【０１０２】
基Ｙ’’およびＹ’’’’は、例えば、トリチル（Ｔｒｔ）であり得る。
【０１０３】
当業者は、脱離基ＬＧについての適する実体を知っている。例えば、それは、Ｙｕｒｅｋ−Ｇｅｏｒｇｅ，Ａ．ら（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００４，１２６，１０３０−１０３１）において説明されているような、そのＮ原子により結合されているチアゾリジンチオン基などのキラル補助基であり得る。あるいは、それは、−ＯＨ基であり得る。
【０１０４】
基Ｒ7は、一般に、Ｃ1−Ｃ4アルキルまたはＣ1−Ｃ4アルケニル基である。さらに一般的には、メチルまたはアリルである。
【０１０５】
様々なアッセイが、ＨＤＡＣ阻害についての試験に適すること、およびそれらを用いて、段階（ｖｉｉ）から得られた化合物の活性を測定し、既知ＨＤＡＣ阻害剤ＳＡＨＡのものと比較できることは、当業者には理解される。従って、ＨＤＡＣに対する試験化合物のＩＣ50を、例えば、あるインビトロアッセイで決定し、その同じアッセイ条件下でのＳＡＨＡのＩＣ50と比較することができる。試験化合物が、ＳＡＨＡのものに等しいか、それより低いＩＣ50値を有する場合、それは、ＳＡＨＡにより示されるものに少なくとも等しいＨＤＡＣ阻害活性を有すると理解されよう。
【０１０６】
好ましい実施形態において、本発明は、段階（ｖｉｉｉ）におけるスクリーニング段階が、インビトロＨＤＡＣアッセイである、上で定義したＳＡＨＡにより示されるものに少なくとも等しいＨＤＡＣ阻害活性を有する化合物を選択するためのプロセスを提供する。一般に、前記アッセイは、様々な濃度の試験化合物およびＳＡＨＡを希釈Ｈｅｌａ核抽出物と接触させて、Ｈｅｌａ核抽出物に対するその試験化合物およびＳＡＨＡのＩＣ50を決定することを含む。同じアッセイ条件下でのＳＡＨＡのＩＣ50と等しいかそれより低い、Ｈｅｌａ核抽出物に対して測定されたＩＣ50値を有する試験化合物は、ＳＡＨＡにより示されるものに少なくとも等しい阻害活性を有すると理解されよう。一般に、前記アッセイは、ＨＤＡＣ蛍光活性アッセイキット（英国のバイオモール（Ｂｉｏｍｏｌ））を使用して行い、それらの試験化合物は、分析する前に還元する。前記アッセイ試験は、例えば、下の標題「活性アッセイ５」の下で説明するとおり行うことができる。
【０１０７】
もう１つの実施形態において、本発明は、ＳＡＨＡにより示されるものに少なくとも等しいヒト癌細胞増殖阻害活性を有する化合物を選択するためのプロセスを提供し、このプロセスは、上で定義したように段階（ｉ）から（ｖｉｉ）により式（Ｉ）または（Ｉ’）の化合物を調製すること、その後、（ｖｉｉｉ）得られた化合物をスクリーニングして、ヒト癌細胞増殖阻害剤としてのその活性を測定することを含む。
【０１０８】
様々なアッセイがヒト癌細胞増殖阻害についての試験に適し、それらを用いて、段階（ｖｉｉ）から得られた化合物の活性を測定し、ＳＡＨＡのものと比較できることは、当業者には理解されるであろう。従って、ヒト癌細胞増殖に対する試験化合物のＩＣ50を、例えば、あるインビトロアッセイで決定することができ、その同じアッセイ条件下でのＳＡＨＡのＩＣ50と比較することができる。試験化合物が、ＳＡＨＡの活性に等しいかそれより低いＩＣ50値を有する場合、それは、ＳＡＨＡにより示される活性に少なくとも等しい阻害活性を有すると理解されよう。一般に、この実施形態における段階（ｖｉｉｉ）は、様々な濃度の試験化合物およびＳＡＨＡを、ＭＣＦ７乳癌細胞系、ＨＵＴ７８  Ｔ細胞白血病細胞系、Ａ２７８０卵巣癌細胞系、ＰＣ３またはＬＮＣＡＰ前立腺癌細胞系と接触させて、その細胞系に対するその試験化合物およびＳＡＨＡのＩＣ50を決定することを含む、インビトロアッセイを含む。同じアッセイ条件下でのＳＡＨＡのＩＣ50に等しいかそれより低い、これらの細胞系のうちのいずれかに対して測定したＩＣ50値を有する試験化合物は、ＳＡＨＡの活性に少なくとも等しい阻害活性を有すると理解されよう。一般にこの実施形態において、前記アッセイは、商標シクワント（ＣｙＱｕａｎｔ）アッセイシステム（米国のモレキュラー・プローブス社（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．））を用いて行う。前記アッセイ試験は、例えば、下の標題「活性アッセイ６」および／または「活性アッセイ１」の下で説明するとおり行うことができる。
【０１０９】
もう１つの好ましい実施形態において、本発明は、ＳＡＨＡにより示される活性に少なくとも等しい抗炎症活性を有する化合物を選択するためのプロセスを提供し、このプロセスは、上で定義したように段階（ｉ）から（ｖｉｉ）により式（Ｉ）または（Ｉ’）の化合物を調製すること、その後、（ｖｉｉｉ）そのようにして得られた化合物をスクリーニングして、その抗炎症活性を測定することを含む。
【０１１０】
様々なアッセイが化合物の抗炎症活性の評価に適することは、当業者には理解されよう。ＳＡＨＡを基準にした試験化合物の抗炎症活性は、ＳＡＨＡを基準にして、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）からのＴＮＦαの生産の阻害に関する化合物の活性を測定することにより、判定することができる。従って、ＰＢＭＣからのＴＮＦαの生産を阻害する試験化合物の能力を、例えば、あるアッセイにおいて判定し、その同じアッセイ条件下でのＳＡＨＡの活性と比較することができる。試験化合物が、同じアッセイ条件下でのＳＡＨＡの活性に等しいかそれより高いＴＮＦα生産に対するインビトロ阻害活性を有する場合、それは、ＳＡＨＡにより示される活性に少なくとも等しい抗炎症活性を有すると理解されよう。一般に、段階（ｖｉｉｉ）は、登録商標クアンティキン（Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ）ヒト−αアッセイキット（英国、アビンドン（Ａｂｉｎｇｄｏｎ，ＵＫ）のアール・アンド・ディー・システムズ（Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ））を使用して行う。前記アッセイ試験は、例えば、下の標題「活性アッセイ７」の下で説明するとおり行うことができる。
【０１１１】
この実施形態のもう１つの態様において、ＳＡＨＡを基準にした試験化合物の抗炎症活性は、ＳＡＨＡを基準にしてＢａｌｂ／ｃマウスにおける炎症の阻害に関する化合物の活性を評価することにより判定することができる。試験化合物が、同じ試験条件下でのＳＡＨＡのものに等しいかそれより高いインビボ阻害活性を有する場合、それは、ＳＡＨＡにより示される活性に少なくとも等しい抗炎症活性を有すると理解されよう。一般に、この実施形態における段階（ｖｉｉｉ）は、化学物質負荷（ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｃｈａｌｌｅｎｇｅ）により誘発されたＢａｌｂ／ｃマウスにおける炎症の阻害に関する試験化合物およびＳＡＨＡのインビボ活性を評価することにより行う。一般に、前記化学物質負荷は、前記マウスへのオキサラゾンまたはアセトンの局所投与を含む。この実施形態において、調査中の化合物は、その化学物質負荷の前に適用される場合もあり、または後に適用される場合もある。このような方針に沿った抗炎症活性の評価は、例えば、下の標題「活性アッセイ８」の下で説明するとおり行うことができる。
【０１１２】
もう１つの好ましい実施形態において、本発明は、ＳＡＨＡにより示される活性に少なくとも等しいＭＣＦ７細胞における主Ｇ２／Ｍ期停止または細胞死の誘導に関する活性を有する化合物を選択するためのプロセスを提供し、このプロセスは、上で定義したように段階（ｉ）から（ｖｉｉ）により式（Ｉ）または（Ｉ’）の化合物を調製すること、その後、（ｖｉｉｉ）得られた化合物をスクリーニングして、ＳＡＨＡを基準にしてＭＣＦ７細胞における主Ｇ２／Ｍ期停止または細胞死の誘導に関する活性を測定することを含む。スクリーニング段階（ｖｉｉｉ）は、例えば、下の標題「活性アッセイ３」の下で説明するとおり行うアッセイを含むことができる。
【０１１３】
上で説明したスクリーニングにおいて、試験化合物の好ましい形態は、そのスクリーニング段階の性質に依存する。従って、スクリーニング段階が、下の「活性アッセイ５」の下で説明するようなインビトロアッセイである場合、その試験化合物は、好ましくは、上で定義したとおりの式（Ｉ’）の化合物である。しかし、スクリーニング段階が、細胞系に合わない場合には、試験化合物は、好ましくは、式（Ｉ）の化合物である。
【０１１４】
本発明の化合物は、ＨＤＡＣの阻害剤であることが分かる。従って、本発明の化合物は、治療に有用である。
【０１１５】
本発明の化合物およびそれらを含む組成物は、様々な剤形で投与することができる。１つの実施形態において、本発明の化合物を含む医薬組成物は、経口、直腸内、非経口、鼻孔内もしくは経皮投与または吸入もしくは坐剤による投与に適する形式で調合することができる。典型的な投与経路は、非経口、鼻孔内もしくは経皮投与または吸入による投与である。
【０１１６】
本発明の化合物は、経口的に、例えば錠剤、トローチ、ロゼンジ、水性または油性懸濁剤、分散性粉末または顆粒として、投与することができる。本発明の好ましい医薬組成物は、経口投与に適する組成物、例えば、錠剤およびカプセルである。
【０１１７】
本発明の化合物は、皮下的であっても、静脈内的であっても、筋肉内的であっても、胸骨内的であっても、経皮的であっても、または注入法によっても、非経口的に投与することもできる。本化合物は、坐剤として投与することもできる。
【０１１８】
１つの好ましい投与経路は、吸入である。吸入薬の主な利点は、経口経路により摂取される多くの薬物と比較して、血液供給が豊富な領域へのそれらの直接送達である。例えば、肺胞は、膨大な表面積および豊富な血液供給を有するので、および初回通過代謝が回避されるので、吸収が非常に速い。
【０１１９】
従って、本発明の好ましい医薬組成物は、吸入に適するものを含む。本発明は、そのような医薬組成物が含有されている吸入装置も提供する。一般に、前記装置は、定量噴霧式吸入器（ＭＤＩ）であり、この吸入器には、この吸入器から薬物を押出すための医薬的に許容される化学的噴射剤が含有されている。一般に、前記噴射剤は、フルオロカーボンである。
【０１２０】
さらに好ましい吸入装置は、ネブライザーを含む。ネブライザーは、加圧下の空気または酸素を用いて、鼻および口に装着する「マスク」を通して薬物の細かい液体ミストを送達することができる装置である。これらは、乳児、小児および実際に病気の全年齢の患者を含む、吸入器を使用することができない喘息患者を治療するために、多くの場合使用される。
【０１２１】
上記吸入装置は、例えば、噴射剤を用いずに本発明の化合物を送達することができる、回転式吸入器またはドライパウダー用吸入器であってもよい。
【０１２２】
一般に、前記吸入装置は、スペーサーを含む。スペーサーは、個体が下気道に大量の薬物を直接吸入できるようにする装置であり、喉ではなく下気道に行くようにするためのものである。多数のスペーサーが、吸入器の末端に適合し、あるものについては、薬物のキャニスターがその装置に適合する。保留チャンバおよび逆止め弁を有するスペーサーは、薬物が気道に逃げるのを防止する。多くの人々、特に小児および老人には、定量噴霧式吸入器からパフを発射するために必要な動作と吸入を調整することが難しいことがある。これらの患者には、スペーサーの使用が特に推奨される。
【０１２３】
もう１つの好ましい投与経路は、鼻孔内投与である。鼻孔の高透過性組織は、薬物を非常に受け入れやすく、錠剤形の薬物よりはるかに迅速、且つ、効率的に薬物を吸収する。経鼻薬物送達は、注射より痛くなく、侵襲でなく、患者間にあまり不安を生じさせない。薬物は、錠剤形で送達される薬物より少ない用量で経鼻送達することができる。この方法による吸収は非常に迅速であり、初回通過代謝が回避され、従って、患者間でのばらつきが低減される。さらに、経鼻送達装置は、正確な計測用量で薬物を投与することができる。従って、本発明の医薬組成物は、一般に、鼻孔内投与に適する。さらに、本発明は、このような医薬組成物が含有されている鼻孔内用装置も提供する。
【０１２４】
さらに好ましい投与経路は、経皮投与である。従って本発明は、本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩を含有する経皮パッチも提供する。舌下投与も好ましい。従って本発明は、本発明の化合物または医薬的に許容されるその塩を含む舌下錠も提供する。
【０１２５】
本発明の化合物は、一般に、医薬的に許容される担体または希釈剤と共に投与するために調合される。例えば、固体経口剤形は、活性化合物と共に、希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、サッカロース、セルロース、トウモロコシデンプンまたは馬鈴薯デンプン；滑沢剤、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウムもしくはステアリン酸カルシウム、および／またはポリエチレングリコール；結合剤、例えば、デンプン、アラビアゴム、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースまたはポリビニルピロリドン；崩壊剤、例えば、デンプン、アルギン酸、アルジネートまたはデンプングリコール酸ナトリウム；飽和剤；染料；甘味剤；湿潤剤、例えば、レシチン、ポリソルベート、ラウリルスルフェート；および一般に、医薬調合物に使用される非毒性で薬理学的に不活性な物質を含有することがある。このような医薬製剤は、既知の方法で、例えば、混合、造粒、タブレット形成、糖衣またはフィルムコーティングプロセスによって、製造することができる。
【０１２６】
経口投与用の分散液は、シロップ、乳剤および懸濁剤であり得る。シロップは、担体として、例えば、サッカロースまたはサッカロースとグリセリンおよび／またはマンニトールおよび／またはソルビトールを含有することがある。
【０１２７】
懸濁剤および乳剤は、担体として、例えば、天然ゴム、寒天、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、またはポリビニルアルコールを含有することがある。筋肉内注射用の懸濁剤または溶液は、活性化合物と共に、医薬的に許容される担体、例えば、滅菌水、オリーブ油、オレイン酸エチル、グリコール、例えばプロピレングリコール、および所望される場合には、適量の塩酸リドカインを含有することがある。
【０１２８】
注射または注入用の溶液は、担体として、例えば滅菌水を含有することがあり、または好ましくは、滅菌等張食塩水溶液の形態であり得る。
【０１２９】
本発明の化合物は、ＨＤＡＣにより媒介される状態の治療または予防において、治療上、有用である。従って本発明は、ＨＤＡＣにより媒介される状態の治療または予防に使用するための医薬品の製造における、式（Ｉ）の化合物または医薬的に許容されるその塩の使用を提供する。ＨＤＡＣにより媒介される状態に罹患しているまたは罹患しやすい患者の治療方法も提供し、この方法は、式（Ｉ）の化合物、そのアイソスターまたは医薬的に許容されるその塩の有効量を前記患者に投与することを含む。
【０１３０】
１つの実施形態において、本発明の化合物は、ＨＤＡＣの別の既知阻害剤、例えばＳＡＨＡと併用することができる。この実施形態において、この併用製品は、同時に、別にまたは逐次的に使用するために各医薬品を含むように調合することができる。
【０１３１】
従って本発明は、（ａ）上で定義したとおりの本発明のＦＫ２２８類似体またはそのアイソスターもしくは医薬的に許容される塩；および（ｂ）同時に、別にまたは逐次的に使用するためのＨＤＡＣの別の既知阻害剤、例えばＳＡＨＡを含む製品を提供する。
【０１３２】
従って本発明は、ＨＤＡＣの別の既知阻害剤、例えばＳＡＨＡとの併用投与で使用するための医薬品の製造において使用するための、上で定義したとおりの本発明のＦＫ２２８類似体またはそのアイソスターもしくは医薬的に許容される塩の使用も提供する。
【０１３３】
当業者は、ＨＤＡＣの他の既知阻害剤を知っている。例えば、米国特許第２００４０２６６７６９号に適する例が与えられている。例としては、スピルコスタチンＡ、ＦＲ−９０１２２８、トリコスタチンＡおよびＳＡＨＡが挙げられる。
【０１３４】
本発明の化合物は、癌の治療と予防の両方に使用することができ、ならびに単独療法または併用療法で使用することができる。併用療法において使用されるとき、本発明の化合物は、一般に、小化合物、放射線、抗体ベースの療法（例えば、ヘルセプチンおよびリツキシマブ）、抗癌剤接種、遺伝子療法、細胞療法、ホルモン療法またはサイトカイン療法と共に使用される。
【０１３５】
本発明の好ましい実施形態において、本発明の化合物は、癌の治療において別の化学療法薬または抗腫瘍薬と併用される。このような他の化学療法薬または抗腫瘍薬の例としては、ミトキサントロン、ビンカアルカロイド、例えばビンクリスチンおよびビンブラスチン、アントラサイクリン、抗生物質、例えばダウノルビシンおよびドキソルビシン、アルキル化剤、例えばクロラムブシルおよびメルファラン、タキサン、例えばパクリタキセル、抗葉酸剤、例えばメトトレキサートおよびトムデックス、エピポドフィロトキシン、例えばエトポシド、カンプトテシン、例えばイリノテカンおよびその活性代謝産物ＳＮ３８ならびにＤＮＡメチル化阻害剤、例えばＷＯ  ０２／０８５４００に開示されているＤＮＡメチル化阻害剤が挙げられる。
【０１３６】
従って、癌を軽減させるために同時に、別にまたは逐次的に使用するための併用製剤として、本発明の化合物と別の化学療法薬または抗腫瘍薬を含有する製品を、本発明に従って提供する。別の化学療法薬または抗腫瘍薬との併用投与により癌を軽減するために使用する医薬品の製造における、上で定義したＦＫ２２８類似体またはそのアイソスターまたは医薬的に許容されるその塩の使用も、本発明に従って提供する。本発明の化合物および前記他の薬剤は、任意の順序で投与することができる。これら両方の場合において、本発明の化合物および他の薬剤は、共に投与することができ、または別々に投与する場合には、医師により決定されるような任意の順序で投与することができる。
【０１３７】
ＨＤＡＣは、いくつかの異なる疾病の病理および／または総合的症状の一因であると考えられるので、阻害による被験者におけるＨＤＡＣ活性の低減を用いて、これらの疾病に治療的に対処することができる。本発明のＨＤＡＣ阻害剤を使用して治療することができる様々な疾病の例を本明細書で説明する。本明細書に開示するもの以外のさらなる疾病が、後に、様々な経路においてＨＤＡＣが果す生物学的役割がさらに完全に理解されるにつれて、同定されることがあることに留意する。
【０１３８】
本発明のＨＤＡＣ阻害剤を使用して治療することができる適応症の１つのセットは、望ましくないまたは無制御の細胞増殖を伴うものである。このような適応症としては、良性腫瘍、様々なタイプの癌、例えば原発腫瘍および腫瘍転移、再狭窄（例えば、冠動脈、頚動脈および脳の病変）、内皮細胞の異常刺激（アテローム硬化症）、手術に起因する体組織への傷害、異常創傷治癒、異常血管形成、組織の線維増多を生じさせる疾病、反復運動障害、高度な血管新生がない組織の疾患、ならびに臓器移植に関連した増殖反応が挙げられる。ＨＤＡＣ阻害剤のさらに具体的な適応症としては、前立腺癌、肺癌、急性白血病、多発性骨髄腫、膀胱癌、腎癌、乳癌、結腸直腸癌、神経芽腫および黒色腫が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１３９】
１つの実施形態において、望ましくない、無制御の細胞増殖に関連した疾病を治療するための方法を提供する。この方法は、無制御細胞増殖に罹患している患者に、その無制御細胞増殖が低減されるような、本発明のＨＤＡＣ阻害剤の治療有効量を投与することを含む。使用される阻害剤の特定の投薬量は、その疾病状態の重症度、投与経路、および担当医により決定され得る関連因子に依存する。一般に、許容される有効な日用量は、無制御細胞増殖を有効に遅速または排除するために十分な量である。
【０１４０】
本発明のＨＤＡＣ阻害剤を他の薬剤と併用して、望ましくない無制御の細胞増殖を阻害することもできる。本発明のＨＤＡＣ阻害剤と併用することができる他の抗細胞増殖剤の例としては、レチノイド酸およびその誘導体、２−メトキシエストラジオール、商標アンジオスタチン（ＡＮＧＩＯＳＴＡＴＩＮ）タンパク質、商標エンドスタチン（ＥＮＤＯＳＴＡＴＩＮ）タンパク質、スラミン、スクアラミン、メタロプロテイナーゼ−Ｉの組織阻害剤、メタロプロテイナーゼ−２の組織阻害剤、プラスミノゲンアクチベータ阻害剤−１、プラスミノゲンアクチベータ阻害剤−２、軟骨由来阻害剤、パクリタキセル、血小板第４因子、硫酸プロタミン（クルペイン）、硫酸化キチン誘導体（ズワイガニの甲羅（ｑｕｅｅｎ  ｃｒａｂ  ｓｈｅｌｌｓ）から調製されたもの）、硫酸化多糖類ペプチドグリカン複合体（ｓｐ−ｐｇ）、スタウロスポリン、例えばプロリン類似体（（１−アゼチジン−２−カルボン酸（ＬＡＣＡ）、シスヒドロキシプロリン、ｄ，１−３，４−デヒドロプロリン、チアプロリン）を含めた基質代謝の調節剤、β−アミノプロピオニトリルフマレート、４−プロピル−５−（４−ピリジニル）−２（３Ｈ）−オキサゾロン；メトトレキセート、ミトキサントロン、ヘパリン、インターフェロン、２  マクログロブリン−血清、ｃｈｉｍｐ−３、キモスタチン、β−シクロデキストリンテトラデカスルフェート、エポネマイシン；フマギリン、金チオリンゴ酸ナトリウム、ｄ−ペニシラミン（ＣＤＰＴ）、β−１−アンチコラゲナーゼ−血清、α２−抗プラスミン、ビスアントレン、ロベンザリット二ナトリウム、ｎ−（２−カルボキシフェニル−４−クロロアントロニル酸二ナトリウムすなわち「ＣＣＡ」、サリドマイド；ａｎｇｏｓｔａｔｉｃ  ステロイド、カルボキシアミノイミダゾール；メタロプロテイナーゼ阻害剤、例えばＢＢ９４が挙げられるが、これらに限定されない。使用することができる他の抗血管形成剤としては、抗体、好ましくはこれらの血管由来増殖因子：ｂＦＧＦ、ａＦＧＦ、ＦＧＦ−５、ＶＥＧＦアイソフォーム、ＶＥＧＦ−Ｃ、ＨＧＦ／ＳＦおよびＡｎｇ−１／Ａｎｇ−２に対するモノクローナル抗体が挙げられる。Ｆｅｒｒａｒａ  Ｎ．およびＡｌｉｔａｌｏ，Ｋ．「血管由来増殖因子およびそれらの阻害剤の臨床適用（Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ）」（１９９９）Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ５：１３５９−１３６４。
【０１４１】
一般に、良性腫瘍における細胞は、それらの分化特徴を保持し、完全無制御様式では分裂しない。良性腫瘍は、通常、局在し、転移性ではない。本発明のＨＤＡＣ阻害剤を使用して治療することができる良性腫瘍の具体的なタイプとしては、血管腫、肝細胞腺腫、海綿状血管腫、局在性結節性過形成、聴神経腫、神経線維腫、胆管腺腫、胆管嚢胞腺腫、線維腫、リンパ腫、平滑筋腫、中皮腫、奇形腫、粘液腫、肝小結節再生過形成、トラコーマおよび化膿性肉芽腫が挙げられる。
【０１４２】
悪性腫瘍の場合、細胞は未分化となり、身体の成長制御シグナルに応答せず、無制御様式で増す。悪性腫瘍は、侵襲性であり、また遠位部位に拡大する（転移する）ことができる。悪性腫瘍は、一般に、２つのカテゴリー：原発腫瘍および続発性腫瘍に分けられる。原発腫瘍は、それらが見出される組織から直接発生する。続発性腫瘍、すなわち転移は、身体の他の場所で起こったが、今は遠隔器官に拡大している腫瘍である。一般的な転移経路は、血管またはリンパ系により拡大する隣接構造への直接増殖、ならびに組織面および体腔（腹水、脳脊髄液など）に沿ってのトラッキングである。
【０１４３】
本発明のＤＨＡＣ阻害剤を使用して治療することができる、原発または続発性いずれかの癌または悪性腫瘍の具体的なタイプとしては、白血病、乳癌、皮膚癌、骨癌、前立腺癌、肝癌、肺癌、脳癌、喉頭癌、胆嚢癌、膵臓癌、直腸癌、副甲状腺癌、甲状腺癌、副腎癌、神経組織癌、頭頚部癌、結腸癌、胃癌、気管支癌、腎癌、基底細胞癌、潰瘍性タイプと乳頭状タイプの両方の扁平上皮癌、転移性皮膚癌、骨肉腫、ユーイング肉腫、細網細胞肉腫、骨髄腫、巨細胞腫、小細胞肺癌、胆石、島細胞腫瘍、原発性脳腫瘍、急性および慢性リンパ球性および顆粒球性腫瘍、ヘアリーセル腫瘍、腺腫、過形成、髄様癌、褐色細胞腫、粘膜神経腫、腸神経節細胞種、過形成性角膜神経腫瘍、マルファン様体型腫瘍、ウィルムス腫瘍、精上皮腫、卵巣腫瘍、平滑筋腫、子宮頚部形成異常および上皮内癌、神経芽細胞種、網膜芽腫、軟部組織肉腫、悪性カルチノイド、局所的皮膚病変、菌状息肉腫、横紋筋肉腫、カポジ肉腫、骨原性および他の肉腫、悪性高カルシウム血症、腎細胞腫瘍、真性多血症、腺癌、多形性神経膠芽腫、白血病、リンパ腫、悪性黒色腫、類表皮癌、ならびに他の癌腫および肉腫が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４４】
本発明のＨＤＡＣ阻害剤を使用して、手術中の体組織への傷害に起因する異常細胞増殖を治療することもできる。これらの傷害は、様々な手術手順、例えば関節手術、腸手術およびケロイド瘢痕化の結果として生じ得る。線維症性組織を生じさせる疾病としては、気腫が挙げられる。本発明を用いて治療することができる反復運動障害としては、手根管症候群が挙げられる。本発明を用いて治療することができる細胞増殖性障害の一例は、骨腫瘍である。
【０１４５】
本発明のＨＤＡＣ阻害剤を使用して治療することができる、臓器移植に関連した増殖応答としては、潜在的臓器拒絶反応または関連併発症の一因となる増殖応答が挙げられる。具体的には、これらの増殖応答は、心臓、肺、肝臓、腎臓および他の体器官または器官系の移植中に発生し得る。
【０１４６】
本発明を用いて治療することができる異常血管形成としては、関節リウマチ、虚血性再潅流関連脳浮腫および傷害、皮質性虚血、卵巣過形成および血管過多、（多嚢胞性卵巣症候群）、子宮内膜症、乾癬、糖尿病性網膜症、ならびに他の眼球の血管由来の疾病、例えば未熟児網膜症（水晶体後線維形成性）、黄斑変性、角膜移植後拒絶反応、神経血管性緑内障およびオスター・ウェーバー症候群に随伴する異常血管形成が挙げられる。
【０１４７】
本発明に従って治療することができる無制御血管形成に関連した疾病の例としては、網膜／脈絡膜血管新生および角膜血管新生が挙げられるが、これらに限定されない。網膜／脈絡膜血管新生の例としては、ベスト病、近視、眼陥凹、ジュタルガルト病、パジェット病、静脈閉塞症、動脈閉塞症、鎌状赤血球貧血、サルコイド、梅毒、弾性線維性仮性黄色腫頚動脈ａｐｏ構造疾患、慢性ブドウ膜炎／硝子体炎、マイコバクテリア感染症、ライム病、全身性エリテマトーデス、未熟児網膜症、イールズ病、糖尿病性網膜症、黄斑変性、ベーチェット病、網膜炎または脈絡膜炎に起因する感染、推定眼ヒストプラズマ症、扁平部炎、慢性網膜剥離、過粘稠度症候群、トキソプラズマ症、外傷およびレーザー後併発症、ルベオーシスに関連した疾病（隅角の血管新生）、ならびにすべての形態の増殖性硝子体網膜症を含む線維血管性組織または線維組織の異常増殖に起因する疾病が挙げられるが、これらに限定されない。角膜血管新生の例としては、流行性角結膜炎、ビタミンＡ欠乏症、コンタクトレンズ装着時間過剰（ｃｏｎｔａｃｔ  ｌｅｎｓ  ｏｖｅｒｗｅａｒ）、アトピー性角膜炎、上方輪部角膜炎、翼状片乾性角膜炎、シューグレン病、酒さ性角膜炎、フクテリン症、糖尿病性網膜症、未熟児網膜症、角膜移植後拒絶反応、モーレン潰瘍、テリエン辺縁変性、辺縁表皮剥離（ｍａｒｇｉｎａｌ  ｋｅｒａｔｏｌｙｓｉｓ）、多発性動脈炎、ウェグナー病、強膜炎、類天疱瘡の放射状角膜切開、血管新生緑内障および水晶体後方線維増殖、梅毒、マイコバクテリア感染症、脂質変性、化学熱傷、細菌性潰瘍、真菌性潰瘍、単純疱疹感染症、帯状疱疹感染症、原虫感染症ならびにカポジ肉腫が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４８】
無制御の血管形成に関連した慢性炎症性疾患も、本発明のＨＤＡＣ阻害剤を使用して治療することができる。慢性炎症は、炎症性細胞の流入を維持する毛細血管の芽の継続的形成に依存する。炎症細胞の流入および存在が肉芽を生じさせ、そうして慢性炎症状態を維持する。ＨＤＡＣ阻害剤を単独で使用または他の抗炎症薬と併用して血管形成を阻害することにより、肉芽形成を予防することができ、従って、疾病を軽減させることができる。慢性炎症性疾患の例としては、炎症性腸疾患、例えばクローン病および潰瘍性大腸炎、乾癬、サルコイドーシス、および関節リウマチが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４９】
炎症性腸疾患、例えば、クローン病および潰瘍性大腸炎は、胃腸管内の様々な部位における慢性炎症および血管形成を特徴とする。例えば、クローン病は、最も一般的には遠位回腸および結腸に影響及ぼす慢性経壁性炎症性疾患として発生するが、口から肛門および肛門周囲領域までの胃腸管のあらゆる部分においても発生し得る。クローン病の患者は、一般に、腹痛、発熱、食欲低下、体重減少および腹部膨満を伴う慢性下痢を有する。潰瘍性大腸炎は、結腸粘膜において発生する慢性で非特異的な炎症性および潰瘍性疾患でもあり、血性下痢の存在を特徴とする。一般に、これらの炎症性腸疾患は、炎症性細胞の柱体によって包囲された新たな毛細血管の芽を伴う、胃腸管全体にわたる慢性肉芽腫性炎症によって引き起こされる。これらの阻害剤による血管形成の阻害は、それらの芽の形成を阻害し、肉芽腫の形成を防止するはずである。炎症性腸疾患は、皮膚病変などの追加の腸性症状発現も示す。このような病変は、炎症および血管形成を特徴とし、胃腸管以外の多数の部位で発生し得る。本発明のＨＤＡＣ阻害剤による血管形成の阻害は、炎症性細胞の流入を低減させ、病変形成を予防することができる。
【０１５０】
サルコイドーシスはもう１つの慢性炎症性疾患であり、これは多系統型肉芽腫性疾患として特徴付けられる。この疾病の肉芽腫は、身体のあらゆる場所で形成し得る。従って、それらの症状は、肉芽腫の部位、およびその疾病が活性であるかどうかに依存する。肉芽腫は、炎症性細胞の恒常的供給をもたらす血管形成性毛細血管芽によって作られる。血管形成を阻害する本発明のＨＤＡＣ阻害剤の使用により、そのような肉芽腫形成を阻害することができる。乾癬も慢性および再発性炎症性疾患であり、これは、様々なサイズの丘疹およびプラークを特徴とする。これらの阻害剤を単独で使用または他の抗炎症薬と併用することによる治療は、それらの特徴的病変を維持するために必要な新たな血管の形成を防止し、患者の症状を軽減させるはずである。
【０１５１】
関節リウマチ（ＲＡ）も、末梢関節の非特異的炎症を特徴とする慢性炎症性疾患である。関節滑膜表層内の血管が、血管形成されると考えられている。新たな血管網の形成に加えて、内皮細胞が、パンヌス成長および軟骨破壊を招く因子および反応性酸素種を放出する。血管形成に関与する因子は、関節リウマチの慢性炎症状態に積極的に貢献し、前記状態の維持を助長することができる。本発明のＨＤＡＣ阻害剤を単独で使用または他の抗ＲＡ剤と併用することによる治療は、慢性炎症を維持するために必要な新たな血管の形成を防止することができる。
【０１５２】
さらに、本発明の化合物は、心臓／血管系疾患、例えば、肥大、高血圧症、心筋梗塞、再潅流、虚血性心疾患、アンギナ、不整脈、高コレステロール血症、アテローム硬化症および卒中の治療において使用することができる。さらに、これらの化合物は、神経変性疾患／ＣＮＳ障害、例えば、卒中、ハンチングトン病、筋萎縮性側索硬化症およびアルツハイマー病を含む急性および慢性神経疾患を治療するために使用することができる。
【０１５３】
本発明の化合物は、抗微生物剤、例えば抗菌剤として使用することもできる。従って本発明は、細菌感染症の治療において使用するための化合物も提供する。本発明の化合物は、ウイルス、細菌、真菌および寄生虫感染に対する抗感染症化合物として使用することができる。感染症の例としては、（プラスモディウム属（ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）、クリプトスポリジウム・パルヴム（ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ  ｐａｒｖｕｍ）、トキソプラズマ・ゴンヂ（ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎｄｉｉ）、サルコシスティス・ニューロナ（ｓａｒｃｏｃｙｓｔｉｓ  ｎｅｕｒｏｎａ）およびエイメリア属（Ｅｉｍｅｒｉａ）種を含む）原虫寄生虫感染症が挙げられる。
【０１５４】
本発明の化合物は、望ましくないまたは無制御の細胞増殖の治療に、好ましくは良性腫瘍／過形成および悪性腫瘍の治療に、さらに好ましくは悪性腫瘍の治療に、ならびに最も好ましくはＣＣＬ、乳癌およびＴ細胞リンパ腫の治療に、特に適する。
【０１５５】
本発明の好ましい実施形態において、本発明の化合物は、癌、心肥大症、慢性心不全、炎症状態、心血管疾患、ヘモグロビン異常症、サラセミア、鎌状赤血球症、ＣＮＳ障害、自己免疫疾患、糖尿病、骨粗しょう症、ＭＤＳ、良性前立腺肥大症、口腔白板症、遺伝的代謝性疾患、感染症、ルビンス−テイビ（Ｒｕｂｅｎｓ−Ｔａｙｂｉ）、脆弱Ｘ症候群もしくはα−１アンチトリプシン欠損症を軽減させるために、または創傷治癒を加速させるために、または毛包を保護するために、または免疫抑制薬として使用される。
【０１５６】
一般に、前記炎症状態は、皮膚の炎症状態（例えば、乾癬、アクネおよび湿疹）、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、関節リウマチ（ＲＡ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、クローン病または大腸炎である。
【０１５７】
一般に、前記癌は、慢性リンパ球性白血病、乳癌、前立腺癌、卵巣癌、中皮腫またはＴ細胞リンパ腫である。
【０１５８】
一般に、前記心血管疾患は、高血圧症（ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ）、心筋梗塞（ＭＩ）、虚血性心疾患（ＩＨＤ）（再潅流）、狭心症、不整脈、高コレステロール血症、高脂血症、アテローム硬化症、卒中、心筋炎、うっ血性心不全、原発性および続発性ｉｅ拡張型（うっ血型）心筋症、肥大性心筋症、収縮性心筋症、末梢血管疾患、頻脈、高血圧（ｈｉｇｈ  ｂｌｏｏｄ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ）または血栓症である。
【０１５９】
一般に、前記遺伝的代謝性疾患は、嚢胞性線維症（ＣＦ）、ペルオキソーム形成不全（ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｂｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｄｉｓｏｒｄｅｒ）または副腎性白質ジストロフィーである。
【０１６０】
一般に、本発明の化合物は、臓器移植後に免疫抑制薬として使用される。
【０１６１】
一般に、前記感染症は、ウイルス、細菌、真菌または寄生虫感染症、特に、黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、瘡プロピオニバクテリウム（Ｐ．ａｃｎｅ）、カンジダ属またはアスペルギルス属による感染症である。
【０１６２】
一般に、前記ＣＮＳ障害は、ハンチングトン病、アルツハイマー病、多発性硬化症または筋萎縮性側索硬化症である。
【０１６３】
好ましくは、この実施形態において、本発明の化合物は、癌、心肥大症、慢性心不全、炎症状態、心血管疾患、ヘモグロビン異常症、サラセミア、鎌状赤血球症、ＣＮＳ障害、自己免疫疾患、糖尿病または骨粗しょう症を軽減するために使用されるか、免疫抑制薬として使用される。
【０１６４】
最も好ましくは、本発明の化合物は、慢性リンパ球性白血病、乳癌、前立腺癌、卵巣癌、中皮腫、Ｔ細胞リンパ腫、心肥大症、慢性心不全または皮膚の炎症状態、特に、乾癬、アクネもしくは湿疹を軽減するために使用される。
【０１６５】
本発明の化合物は、動物の治療、好ましくは哺乳動物の治療、さらに好ましくはヒトの治療に使用することができる。
【０１６６】
本発明の化合物は、適切な場合には、このような状態の発生率を低下させるために予防的に使用することができる。
【０１６７】
本発明の化合物の治療有効量を患者に投与する。典型的な用量は、その具体的な化合物の活性、治療すべき被験者の年齢、体重および状態、その疾病のタイプおよび重症度、ならびに投与頻度および経路に従って、体重のｋｇ当たり約０．００１から５０ｍｇである。好ましくは、日用量レベルは、５ｍｇから２ｇである。
【０１６８】
以下の実施例は、本発明を説明するものである。しかし、これらは、いかなる点においても本発明を限定するものではない。これに関連して、実施例セクションにおいて用いている特定のアッセイは、ＨＤＡＣの阻害に関する活性の指標を提供するためだけに設計されたものであること理解することが重要である。所与の化合物のＨＤＡＣ拮抗薬としての活性を判定するために利用できるアッセイは多数あり、従って、いずれか１つの特定のアッセイにおける否定的な結果に決定力があるわけではない。
【０１６９】
［実施例］
（Ｅ）−（１Ｓ，７Ｒ，１０Ｓ，２１Ｒ）−７−イソプロピル−２１−メチル−２−オキサ−１２，１３−ジチア−５，８，２０，２３−テトラアザ−ビシクロ［８．７．６］トリコス−１６−エン−３，６，９，１９，２２−ペンタオン（以後、化合物００１と呼ぶ）は、下に示す図式を用いて調製した。
【０１７０】
【化３６】
0005558710.tif 000023
【０１７１】
［（Ｒ）−２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−３−メチル−ブチリルアミノ］−酢酸メチルエステル（２）の調製
ＣＨ2Ｃｌ2（５０ｍＬ）中のＦｍｏｃ保護Ｄ−バリン（２．７０ｇ、７．９６ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＥＤＡＣ・ＨＣｌ（１．８３ｇ、９．５５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１．３０ｇ、９．５５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３．８ｍＬ、２７．８６ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１５分間攪拌した後、グリシンメチルエステル（１、１．０ｇ、７．９６ｍｍｏｌ）を添加し、その反応混合物を４時間攪拌し、ＣＨ2Ｃｌ2（５０ｍＬ）で希釈し、水（２５ｍＬ）、１０％  ＨＣｌ（２５ｍＬ）、５％  ＮａＨＣＯ3（２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２５ｍＬ）溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、濃縮して、オフホワイトの固体を得、それをＣＨ3ＣＮから再結晶させて、２を白色の固体として得た（２．８１ｇ、８６％）：融点＝１４８〜１５０℃；［α］22D−７．３２（ｃ  ０．５０、ＣＨＣｌ3）；［α］22D−７．３２（ｃ  ０．５０、ＣＨＣｌ3）；ＩＲ  νmax  ３２８７、１７５０、１６９０、１６４９、１５３５ｃｍ-1；1Ｈ  ＮＭＲ  ４００ＭＨｚ  ７．７５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、７．５７（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、７．３９（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、７．２８（ｍ，２Ｈ）、６．５４（ｓ，１Ｈ）、５．４４（ｓ，１Ｈ）、７．４３−４．３８（ｍ，２Ｈ）、４．２１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．０１−３．９６（ｍ，３Ｈ）、３．７２（ｓ，３Ｈ）、２．１６（ｍ，１Ｈ）、０．９６（ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，６Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ  １００ＭＨｚ  １７１．７（Ｃ）、１７０．１（Ｃ）、１５６．６（Ｃ）、１４３．９（Ｃ）、１４１．４（Ｃ）、１２７．８（ＣＨ）、１２７．２（ＣＨ）、１２５．２（ＣＨ）、１２０．１（ＣＨ）、６７．２（ＣＨ2）、６０．４（ＣＨ）、５２．５（ＣＨ）、４７．３（ＣＨ3）、４１．２（ＣＨ2）、３１．２（ＣＨ）、１９．３（ＣＨ3）、１７．９（ＣＨ）；ＭＳ  ｍ／ｚ  ４３２．９（Ｍ＋Ｎａ）+、８４２．８（２Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１７２】
｛（Ｒ）−２−［（Ｓ）−２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−３−（トリチルスルファニル）−プロピオニルアミノ］−３−メチル−ブチリルアミノ｝−酢酸メチルエステル（３）の調製
室温でＣＨ3ＣＮ（４８．５ｍＬ）中の２（１．０ｇ、２．４４ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、Ｅｔ2ＮＨ（２．５ｍＬ）を添加した。３時間、室温で攪拌した後、その反応混合物をヘキサン（１００ｍＬ）で希釈し、濃縮して、粗製アミンを無色の油として得た。ＣＨ3ＣＮ（２５ｍＬ）中のＦｍｏｃ−（ＳＴｒｔ）−Ｄ−システイン（１．７０ｇ、２．９ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＥＤＡＣ・ＨＣｌ（５６１．０ｍｇ、２．９３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３９６ｍｇ、２．９３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１．３１ｍＬ、７．３２ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１５分間攪拌した後、その粗製アミンを添加し、その反応混合物を４時間攪拌し、溶媒を除去し、残留物をＣＨ2Ｃｌ2（１００ｍＬ）に溶解し、水（２５ｍＬ）、１０％  ＨＣｌ（２５ｍＬ）、５％  ＮａＨＣＯ3（２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２５ｍＬ）溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、溶媒を除去して、オフホワイトの固体を得、それをＣＨ3ＣＮから再結晶させて、３を白色の固体として得た（１．４６ｇ、７９％）：［α］22D−２．３５（ｃ  ０．５０、ＣＨＣｌ3）；ＩＲ  νmax  ３２６７、１６４６、１５４３ｃｍ-1；1Ｈ  ＮＭＲ  ４００ＭＨｚ  ７．７６（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、７．５４（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）、７．３９−７．２１（ｍ  １９Ｈ）、６．８７（ｓ，１Ｈ）、６．２３（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ）、５．０４（ｄ，Ｊ＝７．０，１Ｈ）、４．３７（ｄ，Ｊ＝７．０，２Ｈ）、４．２９（ｄｄ，Ｊ＝８．６，Ｊ＝５．０，１Ｈ）、４．１７（ｔ，Ｊ＝６．５，１Ｈ）、３．９６（ｍ，１Ｈ）、３．７２（ｄｄ，，Ｊ＝１８．１，Ｊ＝５．０，１Ｈ）、３．６５（ｓ，３Ｈ）、３．６０（ｍ，１Ｈ）、２．７０（ｄ，Ｊ＝６．５，２Ｈ）、２．３０（ｍ，１Ｈ）、１．７０（ｓ，１Ｈ）、０．８７（ｄｄ，Ｊ＝１３．０，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ  １００ＭＨｚ  １７０．６（Ｃ）、１７０．５（Ｃ）、１７０．１（Ｃ）、１５６．２（Ｃ）、１４４．３（Ｃ）、１４３．８（Ｃ）、１４３．７（Ｃ）１４１．４（Ｃ）、１２９．６（ＣＨ）、１２８．４（ＣＨ）、１２８．０（ＣＨ）、１２７．８（ＣＨ）、１２７．２（ＣＨ）、１２５．１（ＣＨ）、１２０．２（ＣＨ）、６７．６（ＣＨ）、６７．２（ＣＨ2）、５８．４（ＣＨ）、５４．３（ＣＨ）、５２．４（ＣＨ3）、４７．１（ＣＨ）、４０．９（ＣＨ2）、３３．６（ＣＨ2）、３０．０（ＣＨ）、１９．４（ＣＨ3）、１７．４（ＣＨ3）；ＭＳ  ｍ／ｚ  ７７７．８（Ｍ＋Ｎａ）+。Ｃ45Ｈ45Ｎ3Ｏ6Ｓについての分析計算値：７１．５０；Ｈ，６．００；Ｎ，５．５６。実測値  Ｃ，７１．４２；Ｈ，５．９９；Ｎ，５．５５。
【０１７３】
（（Ｒ）−２−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−プロピオニルアミノ］−３−トリチルスルファニル−プロピオニルアミノ｝−３−メチル−ブチリルアミノ）−酢酸メチルエステル（４）の調製
室温でＣＨ3ＣＮ（３０ｍＬ）中の３（４００ｍｇ、０．５３ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、Ｅｔ2ＮＨ（１．５ｍＬ）を添加した。３時間、室温で攪拌した後、その反応混合物をヘプタン（６０ｍＬ）で希釈し、濃縮して、粗製アミンを無色の油として得た。ＣＨ3ＣＮ（２５ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ｄ−アラニン（１９８ｍｇ、０．６３６ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＥＤＡＣ・ＨＣｌ（１２２．０ｍｇ、０．６３４ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（８６ｍｇ、０．６３６ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（５０２μＬ、１．９１ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１５分間攪拌した後、その粗製アミンを添加し、その反応混合物を１８時間攪拌し、溶媒を除去し、残留物をＣＨ2Ｃｌ2（５０ｍＬ）に溶解し、水（１５ｍＬ）、１０％  ＨＣｌ（１５ｍＬ）、５％  ＮａＨＣＯ3（１５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１５ｍＬ）溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、溶媒を除去して、オフホワイトの固体を得、それをＣＨ3ＣＮから再結晶させて、４を白色の固体として得た（６７０ｍｇ、８１％）：融点＝１９５〜１９７℃；［α］22D  ＋５．１（ｃ  ０．５０、ＣＨＣｌ3）；ＩＲ  νmax  ３２６７、３０５４、１７４４、１７０６、１６３５、１５３１．１ｃｍ-1；1Ｈ  ＮＭＲ  ４００ＭＨｚ  ７．７５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、７．５２（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、７．３９（ｍ，７Ｈ）、７．２６−７．１５（ｍ，１３Ｈ）、６．７９（ｓ，１Ｈ）、６．６２（ｓ，１Ｈ）、５．４７（ｓ，１Ｈ）、４．４３−４．２８（ｍ，４Ｈ）、４．１３（ｍ，１Ｈ）、４．０１（ｍ，１Ｈ）、３．８８（ｓ，２Ｈ）、３．６３（ｓ，３Ｈ）、２．８１（ｍ，１Ｈ）、２．５２（ｍ，１Ｈ）、２．２６，（ｍ，１Ｈ）、１．３０（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．９４（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．８９（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ  １００ＭＨｚ  １７２．７、１７１．１、１７０．２、１５６．１、１４４．４、１４３．９、１４３．８、１４１．４、１２９．６、１２８．３、１２７．９、１２７．２、１２７．１、１２５．１、１２０．１、５８．５、５２．７、５２．３、５０．８、４７．２、４１．０、３３．５、３０．４、１９．３、１９．０、１７．７；ＭＳ  ｍ／ｚ  ８４９．２（Ｍ＋Ｎａ）+、８６５．１（Ｍ＋Ｋ）+。
【０１７４】
（（Ｒ）−２−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−２−（（Ｅ）−（Ｓ）−３−ヒドロキシ−７−トリチルスルファニル−ヘプト−４−エノイルアミノ）−プロピオニルアミノ］−３−トリチルスルファニル−プロピオニルアミノ｝−３−メチル−ブチリルアミノ）−酢酸メチルエステル（６）の調製
【０１７５】
【化３７】
0005558710.tif 000024
【０１７６】
室温でＣＨ3ＣＮ（１０ｍＬ）中の４（１３７ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、Ｅｔ2ＮＨ（０．５ｍＬ）を添加した。５時間、室温で攪拌した後、その反応混合物をヘプタン（３０ｍＬ）で希釈し、溶媒を除去し、ＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）を添加し、濾過し、濃縮して、粗製アミンを無色の油として得た。ＣＨ2Ｃｌ2（４ｍＬ）中のその粗製アミンの攪拌溶液に、０℃で５（８４．０ｍｇ、０．１４９ｍｍｏｌ、Ｙｕｒｅｋ−Ｇｅｏｒｇｅ，Ａ．；Ｈａｂｅｎｓ，Ｆ．；Ｂｒｉｍｍｅｌｌ，Ｍ．；Ｐａｃｋｈａｍ，Ｇ．；Ｇａｎｅｓａｎ，Ａ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００４，１２６，１０３０−１０３１における手順に従って調製したもの）およびＤＭＡＰ（２．２ｍｇ、０．０１７６ｍｍｏｌ）を添加した。室温で８時間攪拌した後、溶媒を除去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（溶離剤  ３０〜４０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、６を白色のガラスとして得た（１２７ｍｇ、８５％）：融点＝１９１〜１９３℃；［α］22D−１８．０（ｃ  ０．５０、ＣＨＣｌ3）；ＩＲ  νmax  ３２７２、３０６４、１７５８、１６９２、１６２１ｃｍ-1；1Ｈ  ＮＭＲ  ４００ＭＨｚ（５％  ＣＤ3ＯＤ／ＣＤＣｌ3）７．４０（ｍ，１２Ｈ）、７．２５（ｍ，１２Ｈ）、７．２０（ｍ，６Ｈ）、６．９６および６．８８（不安定なＮＨ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．４９（ｄｔ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，６．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．３７（ｄｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，６．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．３２（ｍ，２Ｈ）、４．２２（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．９８（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．９２（ｄ，Ｊ＝１８．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．７２（ｄ，Ｊ＝１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、３．６７（ｓ，３Ｈ）、２．６４（ｄｄ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ，７．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．５８（ｄｄ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ，７．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．５６−２．１８（ｍ，９Ｈ）、２．１１（ｑ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）、１．３１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）、０．９１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ  １００ＭＨｚ（５％  ＣＤ3ＯＤ／ＣＤＣｌ3）１７３．０、１７２．０、１７１．３、１７０．５、１７０．２、１４４．９、１４４．２、１３２．８、１２９．９、１２９．７、１２９．６、１２９．５、１２８．２、１２８．１、１２７．９、１２７．１、１２６．７、６９．６、６７．１、６６．７、５８．９、５８．８、５２．７、５２．２、５０．０、４９．８、４９．６、４９．５、４９．４、４９．１、４３．７、４０．９、４０．８、３３．１、３１．５、３１．３、３０．０、１９．２、１７．５；ＭＳ  ｍ／ｚ  １０５０．４（Ｍ＋２Ｎａ）+。
【０１７７】
（（Ｒ）−２−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−２−（（Ｅ）−（Ｓ）−３−ヒドロキシ−７−トリチルスルファニル−ヘプト−４−エノイルアミノ）−プロピオニルアミノ］−３−トリチルスルファニル−プロピオニルアミノ｝−３−メチル−ブチリルアミノ）−酢酸（７）の調製
０℃で４：１  ＴＨＦ／Ｈ2Ｏ（４．０ｍＬ）中の６（２２０ｍｇ、０．２２２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＬｉＯＨ（１１ｍｇ、０．４４０ｍｍｏｌ）を添加した。１時間攪拌した後、その反応混合物をＨ2Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、２Ｍ  ＫＨＳＯ4でｐＨ４〜５に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和ＮａＣｌ（１５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、濃縮して、白色の固体を得、それをエーテルと研和して、７を白色の固体として得（１９９．５ｍｇ、９１％）、それをそのまま次の段階で直接使用した。融点＝１９１〜１９３℃；［α］22D−１８．５（ｃ  ０．５０、ＣＨＣｌ3）；ＩＲ  νmax  ３４１３、１７１１、１６７８、１６３０、１４５１ｃｍ-1；1Ｈ  ＮＭＲ  ４００ＭＨｚ（５％  ＣＤ3ＯＤ／ＣＤＣｌ3）７．３０（ｍ，１２Ｈ）、７．１６（ｍ，１２Ｈ）、７．１３（ｍ，６Ｈ）、５．４３（ｄｔ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，６．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．３０（ｄｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，６．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．２７（ｍ，２Ｈ）、４．２１（ｍ，１Ｈ）、３．９９（ｍ，１Ｈ）、３．７５（ｓ，２Ｈ）、３．７７（ｍ，ｂｒ，６Ｈ）、２．５５（ｄｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，６．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．４４（ｄｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，７．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．２１（ｍ，２Ｈ）、２．１２（ｍ，３Ｈ）、２．０２（ｍ，２Ｈ）、１．２３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．８３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．８０（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ  １００ＭＨｚ（５％  ＣＤ3ＯＤ／ＣＤＣｌ3）１７３．０、１７２．１、１７１．６、１７１．５、１７０．５、１４４．９、１４４．３、１３２．７、１２９．８、１２９．６、１２９．５、１２８．２、１２７．９、１２７．０、１２６．７、６９．５、６７．１、６６．７、５８．７、５２．７、４３．５、４０．９、３３．２、３１．５、３１．３、３０．３、１９．２、１９．１、１７．６；ＭＳ  ｍ／ｚ  １０１３．２（Ｍ＋Ｎａ）+。
【０１７８】
（６Ｒ，９Ｓ，１２Ｒ，１６Ｓ）−６−イソプロピル−１２−メチル−１６−（（Ｅ）−４−トリチルスルファニル−ブト−１−エニル）−９−トリチルスルファニルメチル−１−オキサ−４，７，１０，１３−テトラアザ−シクロヘキサデカン−２，５，８，１１，１４−ペンタオン（８）の調製
０℃でＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中のヒドロキシル酸７（１００ｍｇ、０．１０２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＣＨ2Ｃｌ2（０．５ｍＬ）中のＤＣＣ（２８．２ｍｇ、０．１３７ｍｍｏｌ）の溶液を１滴ずつ添加した。３０分間、０℃で攪拌した後、ＣＨ2Ｃｌ2（５１ｍＬ）中のＤＭＡＰ（２．５ｍｇ、０．０２１３ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、その後、１６時間、室温で攪拌した。固体沈殿物を濾過して除去し、その濾液をＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）で洗浄した。有機層を水（１０ｍＬ）、５％  ＫＨＳＯ4（１０ｍＬ）、５％  ＮａＨＣＯ3（１０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１０ｍＬ）溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（溶離剤  ３０〜５０％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、８を白色のガラスとして得た（３７ｍｇ、３８％）。
【０１７９】
（Ｅ）−（１Ｓ，７Ｒ，１０Ｓ，２１Ｒ）−７−イソプロピル−２１−メチル−２−オキサ−１２，１３−ジチア−５，８，２０，２３−テトラアザ−ビシクロ［８．７．６］トリコス−１６−エン−３，６，９，１９，２２−ペンタオン（化合物００１）の調製
ＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中のＩ2（３７．１ｍｇ、０．１４６ｍｍｏｌ）の強力攪拌溶液に、ＭｅＯＨ（２０ｍＬ）中の保護ジオール８（３５ｍｇ、０．０３６５ｍｍｏｌ）を５分かけて１滴ずつ添加した。さらに１０分間攪拌した後、０．２Ｍ  クエン酸緩衝液（４ｍＬ）中の０．２Ｍ  アスコルベートを添加し、有機相を濃縮し、１：１  ＥｔＯＡｃ／ＮａＣｌ（２０ｍＬ）を添加し、ＥｔＯＡｃ（５×２５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機抽出物を乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、溶媒を除去した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（溶離剤  １〜６％  ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ3）によって精製して、化合物００１を白色の固体として得た（１１．８ｍｇ、６７％）：［α］22D−９８．０（ｃ  ０．５０、ＣＨＣｌ3）；ＩＲ  νmax  ３３００、２４７７、１７３４、１６５９、１５２６、１４４６ｃｍ-1；1Ｈ  ＮＭＲ  ４００ＭＨｚ  ７．４１（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．２３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．３７（ｓ，１Ｈ）、５．９４（ｄｔ，Ｊ＝１６．５，７．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．７８−５．７１（ｍ，１Ｈ）、４．８６（ｍ，１Ｈ）、４．２６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、４．１７（ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．０８（ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．４４（ｄｄ，Ｊ＝１４．５Ｈｚ，１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．２２（ｄ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．８８−２．５６（ｍ，８Ｈ）、１．４９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）、０．９８（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）、０．９２（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ  １００ＭＨｚ  １７３．２、１７１．９、１７０．９、１７０．１、１６８．３、１２９．８、７０．２、６４．４、５５．９、５１．７、４１．７、３８．２、３７．９、３５．７、３１．０、２６．９、２０．２、１９．７、１５．４；ＨＲＭＳ  ｍ／ｚ  ５０９．１４９５（Ｍ＋Ｎａ）+  予測値  ５０９．１４９９。
【０１８０】
式（Ｉ）によって表される類似体の合成のための一般手順。
【０１８１】
段階（ａ）において、側鎖Ｒ2を有するアミノ酸エステルを、側鎖Ｒ1を有する第二のアミノ酸と縮合させて、ジペプチドを得る。段階（ｂ）において、そのジペプチドを保護システイン誘導体と縮合させて、トリペプチドを得る。段階（ｃ）において、そのトリペプチドをアミノ酸とカップリングさせて、保護テトラペプチドを生じさせる。段階（ｄ）において、そのテトラペプチドのＮ末端を脱保護し、その遊離アミンをβ−ヒドロキシ酸誘導体とカップリングさせる。本発明の好ましい実施形態では、Ｒ4およびＲ5は、Ｈであり、Ｘは、Ｙｕｒｅｋ−Ｇｅｏｒｇｅ，Ａ．；Ｈａｂｅｎｓ，Ｆ．；Ｂｒｉｍｍｅｌｌ，Ｍ．；Ｐａｃｋｈａｍ，Ｇ．；Ｇａｎｅｓａｎ，Ａ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００４，１２６，１０３０−１０３１において報告されているようなキラル補助基である。段階（ｅ）においてそのエステル基を加水分解し、その後、段階（ｆ）において環化し、（ｇ）においてジスルフィド結合を形成して、二環式デプシペプチド化合物（Ｉ）の合成を完了する。
【０１８２】
【化３８】
0005558710.tif 000025
【０１８３】
一般図式による類似体９Ａ〜Ｆの合成。
【０１８４】
【化３９】
0005558710.tif 000026
【０１８５】
［（Ｒ）−２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−３−メチル−ブチリルアミノ］−酢酸メチルエステル（２Ａ）の調製。
【０１８６】
ＣＨ2Ｃｌ2（５０ｍＬ）中のＦｍｏｃ保護Ｄ−バリン（２．７０ｇ、７．９６ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＥＤＡＣ・ＨＣｌ（１．８３ｇ、９．５５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１．３０ｇ、９．５５ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（３．８ｍＬ、２７．８６ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１５分間攪拌した後、グリシンメチルエステル（１Ａ、１．０ｇ、７．９６ｍｍｏｌ）を添加し、その反応混合物を４時間攪拌し、ＣＨ2Ｃｌ2（５０ｍＬ）で希釈し、水（２５ｍＬ）、１０％  ＨＣｌ（２５ｍＬ）、５％  ＮａＨＣＯ3（２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２５ｍＬ）溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、濃縮して、オフホワイトの固体を得、それをＣＨ3ＣＮから再結晶させて、２Ａを白色の固体として得た（２．８１ｇ、８６％）：融点＝１４８〜１５０℃；［α］22D−７．３２（ｃ  ０．５０、ＣＨＣｌ3）；ＩＲ  νmax  ３２８７、１７５０、１６９０、１６４９、１５３５ｃｍ-1；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．７５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、７．５７（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、７．３９（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、７．２８（ｍ，２Ｈ）、６．５４（ｓ，１Ｈ）、５．４４（ｓ，１Ｈ）、４．４３−４．３８（ｍ，２Ｈ）、４．２１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．０１−３．９６（ｍ，３Ｈ）、３．７２（ｓ，３Ｈ）、２．１６（ｍ，１Ｈ）、０．９６（ｔ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，６Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７１．７（Ｃ）、１７０．１（Ｃ）、１５６．６（Ｃ）、１４３．９（Ｃ）、１４１．４（Ｃ）、１２７．８（ＣＨ）、１２７．２（ＣＨ）、１２５．２（ＣＨ）、１２０．１（ＣＨ）、６７．２（ＣＨ2）、６０．４（ＣＨ）、５２．５（ＣＨ）、４７．３（ＣＨ3）、４１．２  （ＣＨ2）、３１．２（ＣＨ）、１９．３（ＣＨ3）、１７．９（ＣＨ）；ＭＳ  ｍ／ｚ  ８４２．８（３０％，［２Ｍ＋Ｎａ］+）、４３２．９（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）。
【０１８７】
｛（Ｒ）−２−［（Ｓ）−２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−３−（トリチルスルファニル）−プロピオニルアミノ］−３−メチル−ブチリルアミノ｝−酢酸メチルエステル（３Ａ）の調製。
【０１８８】
室温でＣＨ3ＣＮ（４８．５ｍＬ）中の２Ａ（１．０ｇ、２．４４ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、Ｅｔ2ＮＨ（２．５ｍＬ）を添加した。３時間、室温で攪拌した後、その反応混合物をヘキサン（１００ｍＬ）で希釈し、濃縮して、粗製アミンを無色の油として得た。ＣＨ3ＣＮ（２５ｍＬ）中のＦｍｏｃ−（ＳＴｒｔ）−Ｄ−システイン（１．７０ｇ、２．９ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＥＤＡＣ・ＨＣｌ（５６１．０ｍｇ、２．９３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３９６ｍｇ、２．９３ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１．３１ｍＬ、７．３２ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１５分間攪拌した後、その粗製アミンを添加し、その反応混合物を４時間攪拌し、溶媒を除去し、残留物をＣＨ2Ｃｌ2（１００ｍＬ）に溶解し、水（２５ｍＬ）、１０％  ＨＣｌ（２５ｍＬ）、５％  ＮａＨＣＯ3（２５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２５ｍＬ）溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、溶媒を除去して、オフホワイトの固体を得、それをＣＨ3ＣＮから再結晶させて、３Ａを白色の固体として得た（１．４６ｇ、７９％）：［α］22D−２．３５（ｃ  ０．５０、ＣＨＣｌ3）；ＩＲ  νmax  ３２６７、１６４６、１５４３ｃｍ-1；1Ｈ  ＮＭＲ  ４００ＭＨｚ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．７６（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、７．５４（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）、７．３９−７．２１（ｍ  １９Ｈ）、６．８７（ｓ，１Ｈ）、６．２３（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ）、５．０４（ｄ，Ｊ＝７．０，１Ｈ）、４．３７（ｄ，Ｊ＝７．０，２Ｈ）、４．２９（ｄｄ，Ｊ＝８．６，Ｊ＝５．０，１Ｈ）、４．１７（ｔ，Ｊ＝６．５，１Ｈ）、３．９６（ｍ，１Ｈ）、３．７２（ｄｄ，，Ｊ＝１８．１，５．０，１Ｈ）、３．６５（ｓ，３Ｈ）、３．６０（ｍ，１Ｈ）、２．７０（ｄ，Ｊ＝６．５，２Ｈ）、２．３０（ｍ，１Ｈ）、１．７０（ｓ，１Ｈ）、０．８７（ｄｄ，Ｊ＝１３．０，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７０．６（Ｃ）、１７０．５（Ｃ）、１７０．１（Ｃ）、１５６．２（Ｃ）、１４４．３（Ｃ）、１４３．８（Ｃ）、１４３．７（Ｃ）１４１．４（Ｃ）、１２９．６（ＣＨ）、１２８．４（ＣＨ）、１２８．０（ＣＨ）、１２７．８（ＣＨ）、１２７．２（ＣＨ）、１２５．１（ＣＨ）、１２０．２（ＣＨ）、６７．６（ＣＨ）、６７．２（ＣＨ2）、５８．４（ＣＨ）、５４．３（ＣＨ）、５２．４（ＣＨ3）、４７．１（ＣＨ）、４０．９（ＣＨ2）、３３．６（ＣＨ2）、３０．０（ＣＨ）、１９．４（ＣＨ3）、１７．４（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ  ｍ／ｚ  ７７７．８（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）。Ｃ45Ｈ45Ｎ3Ｏ6Ｓについての分析計算値：７１．５０；Ｈ，６．００；Ｎ，５．５６。実測値  Ｃ，７１．４２；Ｈ，５．９９；Ｎ，５．５５。
【０１８９】
（（Ｒ）−２−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−プロピオニルアミノ］−３−トリチルスルファニル−プロピオニルアミノ｝−３−メチル−ブチリルアミノ）−酢酸メチルエステル（４Ａ）の調製。
【０１９０】
室温でＣＨ3ＣＮ／ＣＨ2Ｃｌ2（１：１，６０ｍＬ）中の３Ａ（９００ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、Ｅｔ2ＮＨ（３ｍＬ）を添加した。３時間、室温で攪拌した後、その反応混合物をヘプタン（６０ｍＬ）で希釈し、濃縮して、粗製アミンを無色の油として得た。ＣＨ2Ｃｌ2（３０ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ｄ−アラニン（５２９ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＥＤＡＣ・ＨＣｌ（３２６ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２３０ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６２７μＬ、３．６ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１０分間攪拌した後、ＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）中のその粗製アミンの溶液を添加し、その反応混合物を１８時間攪拌した。その後、その反応物を水（１５ｍＬ）、１０％  ＨＣｌ（１５ｍＬ）、５％  ＮａＨＣＯ3（１５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１５ｍＬ）溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、溶媒を除去して、オフホワイトの固体を得、それをＣＨ3ＣＮから再結晶させて、４Ａを白色の固体として得た（８１０ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ、８２％）：融点＝１９５〜１９７℃；［α］22D  ＋５．１（ｃ  ０．５０、ＣＨＣｌ3）；ＩＲ  νmax  ３２６７、３０５４、１７４４、１７０６、１６３５、１５３１．１ｃｍ-1；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．７５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、７．５２（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、７．３９（ｍ，７Ｈ）、７．２６−７．１５（ｍ，１３Ｈ）、６．７９（ｓ，１Ｈ）、６．６２（ｓ，１Ｈ）、５．４７（ｓ，１Ｈ）、４．４３−４．２８（ｍ，４Ｈ）、４．１３（ｍ，１Ｈ）、４．０１（ｍ，１Ｈ）、３．８８（ｓ，２Ｈ）、３．６３（ｓ，３Ｈ）、２．８１（ｍ，１Ｈ）、２．５２（ｍ，１Ｈ）、２．２６，（ｍ，１Ｈ）、１．３０（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．９４（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．８９（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７２．７、１７１．１、１７０．２、１５６．１、１４４．４、１４３．９、１４３．８、１４１．４、１２９．６、１２８．３、１２７．９、１２７．２、１２７．１、１２５．１、１２０．１、５８．５、５２．７、５２．３、５０．８、４７．２、４１．０、３３．５、３０．４、１９．３、１９．０、１７．７；ＬＲＭＳ  ｍ／ｚ  ８４９．２（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）、８６５．１（２０％，［Ｍ＋Ｋ］+）。
【０１９１】
（（Ｒ）−２−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−２−（（Ｅ）−（Ｓ）−３−ヒドロキシ−７−トリチルスルファニル−ヘプト−４−エノイルアミノ）−プロピオニルアミノ］−３−トリチルスルファニル−プロピオニルアミノ｝−３−メチル−ブチリルアミノ）−酢酸メチルエステル（６Ａ）の調製。
【０１９２】
室温でＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＣＮ（３：２，１５０ｍＬ）中の４Ａ（７６０ｍｇ、０．９２ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、Ｅｔ2ＮＨ（７．５ｍＬ）を添加した。５時間、室温で攪拌した後、その反応混合物をヘプタン（６０ｍＬ）で希釈し、溶媒を除去し、ＣＨ2Ｃｌ2（５０ｍＬ）を添加し、濾過し、濃縮して、粗製アミンを無色の油として得た。ＣＨ2Ｃｌ2（３０ｍＬ）中のその粗製アミンの攪拌溶液に、室温でＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中の５（６７２ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ、Ｙｕｒｅｋ−Ｇｅｏｒｇｅ，Ａ．；Ｈａｂｅｎｓ，Ｆ．；Ｂｒｉｍｍｅｌｌ，Ｍ．；Ｐａｃｋｈａｍ，Ｇ．；Ｇａｎｅｓａｎ，Ａ．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２００４，１２６，１０３０−１０３１における手順に従って調製したもの）およびＤＭＡＰ（１５ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）及びＤＭＡＰ（１５mg、０．１２mmol）を添加した。室温で１２時間攪拌した後、溶媒を除去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（溶離剤  １０〜１００％  ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2）によって精製して、６Ａとして白色のガラスを得た（７４０ｍｇ、８０％）：融点＝１９１〜１９３℃；［α］22D−１８．０（ｃ  ０．５０、ＣＨＣｌ3）；ＩＲ  νmax  ３２７２、３０６４、１７５８、１６９２、１６２１ｃｍ-1；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，５％  ＣＤ3ＯＤ／ＣＤＣｌ3）δ７．４０（ｍ，１２Ｈ）、７．２５（ｍ，１２Ｈ）、７．２０（ｍ，６Ｈ）、６．９６および６．８８（不安定なＮＨ，ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．４９（ｄｔ，Ｊ＝１５．０Ｈｚ，６．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．３７（ｄｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，６．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．３２（ｍ，２Ｈ）、４．２２（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．９８（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．９２（ｄ，Ｊ＝１８．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．７２（ｄ，Ｊ＝１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、３．６７（ｓ，３Ｈ）、２．６４（ｄｄ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ，７．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．５８（ｄｄ，Ｊ＝１３．０Ｈｚ，７．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．５６−２．１８（ｍ，９Ｈ）、２．１１（ｑ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ）、１．３１（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）、０．９１（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，５％  ＣＤ3ＯＤ／ＣＤＣｌ3）δ１７３．０、１７２．０、１７１．３、１７０．５、１７０．２、１４４．９、１４４．２、１３２．８、１２９．９、１２９．７、１２９．６、１２９．５、１２８．２、１２８．１、１２７．９、１２７．１、１２６．７、６９．６、６７．１、６６．７、５８．９、５８．８、５２．７、５２．２、５０．０、４９．８、４９．６、４９．５、４９．４、４９．１、４３．７、４０．９、４０．８、３３．１、３１．５、３１．３、３０．０、１９．２、１７．５；ＬＲＭＳ  ｍ／ｚ  １０５０．４（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）。
【０１９３】
（（Ｒ）−２−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−２−（（Ｅ）−（Ｓ）−３−ヒドロキシ−７−トリチルスルファニル−ヘプト−４−エノイルアミノ）−プロピオニルアミノ］−３−トリチルスルファニル−プロピオニルアミノ｝−３−メチル−ブチリルアミノ）−酢酸（７Ａ）の調製
０℃でＴＨＦ（１５ｍＬ）中の６Ａ（７００ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、Ｈ2Ｏ（２．４ｍＬ）中のＬｉＯＨ（２５ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。１時間攪拌した後、その反応混合物をＨ2Ｏ（３０ｍＬ）で希釈し、１Ｍ  ＫＨＳＯ4でｐＨ３〜４に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（３×３０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和ＮａＣｌ（１５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、濃縮して、白色の固体を得、それをエーテルと研和して、７Ａを白色の固体として得（６９３ｍｇ、９９％）、それをそのまま次の段階で直接使用した。融点＝１９１〜１９３℃；［α］22D−１８．５（ｃ  ０．５０、ＣＨＣｌ3）；ＩＲ  νmax  ３４１３、１７１１、１６７８、１６３０、１４５１ｃｍ-1；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，５％  ＣＤ3ＯＤ／ＣＤＣｌ3）δ７．３０（ｍ，１２Ｈ）、７．１６（ｍ，１２Ｈ）、７．１３（ｍ，６Ｈ）、５．４３（ｄｔ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，６．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．３０（ｄｄ，Ｊ＝１５．５Ｈｚ，６．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．２７（ｍ，２Ｈ）、４．２１（ｍ，１Ｈ）、３．９９（ｍ，１Ｈ）、３．７５（ｓ，２Ｈ）、３．７７（ｍ，ｂｒ，６Ｈ）、２．５５（ｄｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，６．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．４４（ｄｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，７．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．２１（ｍ，２Ｈ）、２．１２（ｍ，３Ｈ）、２．０２（ｍ，２Ｈ）、１．２３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．８３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．８０（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，５％  ＣＤ3ＯＤ／ＣＤＣｌ3）δ１７３．０、１７２．１、１７１．６、１７１．５、１７０．５、１４４．９、１４４．３、１３２．７、１２９．８、１２９．６、１２９．５、１２８．２、１２７．９、１２７．０、１２６．７、６９．５、６７．１、６６．７、５８．７、５２．７、４３．５、４０．９、３３．２、３１．５、３１．３、３０．３、１９．２、１９．１、１７．６；ＬＲＭＳ  ｍ／ｚ  １０１３．２（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）。
【０１９４】
（６Ｒ，９Ｓ，１２Ｒ，１６Ｓ）−６−イソプロピル−１２−メチル−１６−（（Ｅ）−４−トリチルスルファニル−ブト−１−エニル）−９−トリチルスルファニルメチル−１−オキサ−４，７，１０，１３−テトラアザ−シクロヘキサデカン−２，５，８，１１，１４−ペンタオン（８Ａ）の調製。
【０１９５】
ＣＨ2Ｃｌ2（１６０ｍＬ）中の無水２−メチル−６−ニトロ安息香酸（ＭＮＢＡ）（２８９ｍｇ、０．８４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（２０５ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（２：１、６００ｍＬ）中の酸７Ａ（６９３ｍｇ、０．７０ｍｍｏｌ）の溶液を５時間かけて１滴ずつ添加した。さらに１２時間後、１Ｍ  ＨＣｌ（１５０ｍＬ）を添加し、ＣＨ2Ｃｌ2（３×１００ｍＬ）で抽出した。その後、合わせた有機相を飽和ＮａＨＣＯ3（１５０ｍＬ）、続いてブライン（８０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、濾過し、濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（溶離剤  ５０〜１００％  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、８Ａを白色のガラスとして得た（４７８ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ、７０％）。［α］22D−７．０（ｃ  ０．５０、ＣＨＣｌ3）；ＩＲ  νmax  １７３５、１６５９、１５２６ｃｍ-1；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．４３−７．３３（ｍ，１２Ｈ）、７．３２−７．１３（ｍ，２０Ｈ）、６．７７（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）、６．５４（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．５８（ｄｔ，Ｊ＝１５．１，６．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．４４−５．２９（ｍ，２Ｈ）、４．５５（ｄｄ，Ｊ＝１６．８，９．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．４６（ｄｄ，Ｊ＝９．５，４．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．８９（５重線，（ｄｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．７７（ｄｔ，Ｊ＝８．３，５．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．４３（ｄｄ，Ｊ＝１６．８，２．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．０３（ｄｄ，Ｊ＝１２．６，８．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．６１−２．４９（ｍ，３Ｈ）、２．１８（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、２．１１−１．９５（ｍ，２Ｈ）、１．３８（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．９４（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）、０．９０（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７４．０（Ｃ）、１７０．９（Ｃ）、１７０．８（Ｃ）、１６９．８（Ｃ）、１６９．３（Ｃ）、１４４．９（Ｃ）、１４４．３（Ｃ）、１３３．２（ＣＨ）、１２９．７（ＣＨ）、１２９．５（ＣＨ）、１２８．３（ＣＨ）、１２８．０（ＣＨ）、１２７．２（ＣＨ）、１２６．８（ＣＨ）、７２．３（ＣＨ）、６７．３（Ｃ）、６６．８（Ｃ）、５８．３（ＣＨ）、５５．９（ＣＨ）、５０．５（ＣＨ）、４１．７（２  ｘ  ＣＨ2）、３２．５（ＣＨ2）、３１．３（ＣＨ2）、３１．２（ＣＨ2）、２８．８（ＣＨ）、１９．８（ＣＨ3）、１９．８（ＣＨ3）、１７．２（ＣＨ3）、１６．７（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ  ９９６（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）、９７４（１０％，［Ｍ＋Ｈ］+）。
【０１９６】
（Ｅ）−（１Ｓ，７Ｒ，１０Ｓ，２１Ｒ）−７−イソプロピル−２１−メチル−２−オキサ−１２，１３−ジチア−５，８，２０，２３−テトラアザ−ビシクロ［８．７．６］トリコス−１６−エン−３，６，９，１９，２２−ペンタオン（９Ａ）の調製
ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９：１、１０００ｍＬ）中のＩ2（１１２０ｍｇ、４．４２ｍｍｏｌ）の強力攪拌溶液に、ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９：１、５００ｍＬ）中の保護ジオール８Ａ（４３０ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を３０分かけて１滴ずつ添加した。さらに３０分間攪拌した後、０．１Ｍ  チオ硫酸ナトリウム（３００ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１００ｍＬ）を添加し、ＣＨ2Ｃｌ2（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、濾過し、溶媒を除去した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（溶離剤  １〜６％  ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2）によって精製して、９Ａ（２０５ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ、９６％）を白色の固体として得た：［α］22D−９８．０（ｃ  ０．５０、ＣＨＣｌ3）；ＩＲ  νmax  ３３００、２４７７、１７３４、１６５９、１５２６、１４４６ｃｍ-1；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．４６（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．３３（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）、７．２８（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ）、６．６０（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ，１Ｈ）、５，９５（ｄｔｄ，Ｊ＝１６．１，６．５，２．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．８０−５．７０（ｍ，２Ｈ）、４．８５（ｄｄｄ，Ｊ＝９．８，８．５，３．８Ｈｚ，１Ｈ）、４．２１（ｑｄ，Ｊ＝７．３，３．８Ｈｚ，１Ｈ）、４．１１（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，２Ｈ）、３．４４（ｄｄ，Ｊ＝１５．６，１０．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．２０（ｄｄ，Ｊ＝１０．３，６．８Ｈｚ，１Ｈ）、３．０１−２．９５（ｍ，２Ｈ）、２．９２（ｄｄ，Ｊ＝１５．６，４．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．８５−２．５８（ｍ，５Ｈ）、１．４９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，３Ｈ）、０．９８（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）、０．９２（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ  １００ＭＨｚ  １７３．３（Ｃ）、１７１．６（Ｃ）、１７１．０（Ｃ）、１６９．４（Ｃ）、１６８．２（Ｃ）、１３０．４（ＣＨ）、１３０．３（ＣＨ）、６９．８（ＣＨ）、６４．９（ＣＨ）、５４．５（ＣＨ）、５２．０（ＣＨ）、４２．４（２  ｘ  ＣＨ2）、３８．７（ＣＨ2）、３８．６（ＣＨ2）、３２．７（ＣＨ2）、２７．５（ＣＨ）、２０．８（ＣＨ3）、２０．１（ＣＨ3）、１６．７（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ  ９９５（５０％，［２Ｍ＋Ｎａ］+）、５０９（８０％，［Ｍ＋Ｎａ］+）、４８７（１００％，［Ｍ＋Ｈ］+）；ＨＲＭＳ  ｍ／ｚ  ５０９．１４９５（Ｍ＋Ｎａ）+  予測値  ５０９．１４９９。
【０１９７】
（（Ｒ）−２−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−３−フェニル−プロピオニルアミノ］−３−トリチルスルファニル−プロピオニルアミノ｝−３−メチル−ブチリルアミノ）−酢酸メチルエステル（４Ｂ）の調製。
【０１９８】
室温でＣＨ3ＣＮ／ＣＨ2Ｃｌ2（１：１、６０ｍＬ）中の３Ａ（８３６ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、Ｅｔ2ＮＨ（３ｍＬ）を添加した。室温で３時間攪拌した後、その反応混合物をヘプタン（６０ｍＬ）で希釈し、濃縮して、粗製アミンを無色の油として得た。ＣＨ2Ｃｌ2（３０ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ｄ−フェニルアラニン（６５０ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＥＤＡＣ・ＨＣｌ（３２６ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２３０ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６２７μＬ、３．６ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１０分間攪拌した後、ＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）中のその粗製アミンの溶液を添加し、その反応混合物を１２時間攪拌した。その後、その反応物を水（１５ｍＬ）、１０％  ＨＣｌ（１５ｍＬ）、５％  ＮａＨＣＯ3（１５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１５ｍＬ）溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、溶媒を除去して、オフホワイトの固体を得、それをＣＨ3ＣＮから再結晶させて、４Ｂを白色の固体として得た（８００ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ、８０％）；ＩＲ  νmax  ３２６４、３０５３、１７４２、１７０１、１６３６、１５３２ｃｍ-1；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．７５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、７．４６（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、７．４１−７．３１（ｍ，８Ｈ）、７．３０−７．０７（ｍ，１６Ｈ）、７．０１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、６．５４（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、５．２９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、４．４８−４．３２（ｍ，３Ｈ）、４．２５−４．１３（ｍ，１Ｈ）、４．１０（ｔ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．９９−３．７６（ｍ，３Ｈ）、３．６５（ｓ，３Ｈ）、３．１０−２．８８（ｍ，２Ｈ）、２．８３−２．６９（ｍ，１Ｈ）、２．４９（ｄｄ，Ｊ＝１３．０，６．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．３６−２．２２，（ｍ，１Ｈ）、０．９３（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，６Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ  １００ＭＨｚ  １７１．２（Ｃ）、１７１．０（Ｃ）、１７０．２（Ｃ）、１７０．０（Ｃ）、１５６．２（Ｃ）、１４４．３（Ｃ）、１４３．９（Ｃ）、１４３．７（Ｃ）、１４１．４（Ｃ）、１３６．０（Ｃ）、１２９．５（ＣＨ）、１２９．３（ＣＨ）、１２９．０（ＣＨ）、１２８．３（ＣＨ）、１２７．９（ＣＨ）、１２７．４（ＣＨ）、１２７．２（ＣＨ）、１２７．１（ＣＨ）、１２５．２（ＣＨ）、１２０．１（ＣＨ）、６７．３（ＣＨ2）、５８．６（ＣＨ）、５６．２（ＣＨ）、５２．８（ＣＨ）、５２．３（ＣＨ3）、４７．２（ＣＨ）、４１．０（ＣＨ2）、３８．３（ＣＨ2）、３３．５（ＣＨ2）、３０．２（ＣＨ）、１９．４（ＣＨ3）、１７．７（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ  １８２８（３０％，［２Ｍ＋Ｎａ］+）、９２５（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）。
【０１９９】
（（Ｒ）−２−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−２−（（Ｅ）−（Ｓ）−３−ヒドロキシ−７−トリチルスルファニル−ヘプト−４−エノイルアミノ）−３−フェニル−プロピオニルアミノ］−３−トリチルスルファニル−プロピオニルアミノ｝−３−メチル−ブチリルアミノ）−酢酸メチルエステル（６Ｂ）の調製。
【０２００】
室温でＣＨＣｌ3／ＣＨ3ＣＮ（１：１、１４ｍＬ）中の４Ｂ（２４５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、Ｅｔ2ＮＨ（１ｍＬ）を添加した。室温で５時間攪拌した後、その反応混合物をヘプタン（１０ｍＬ）で希釈し、溶媒を除去して、粗製アミンを無色の油として得た。ＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）中のその粗製アミンの攪拌溶液に、室温でＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中の５（１９３ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（４ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１２時間攪拌した後、溶媒を除去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（溶離剤  ２〜４％  ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2）によって精製して、６Ｂ（１９０ｍｇ、６４％）を白色の固体として得た；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．４６−７．０５（ｍ，３７Ｈ）、６．８５（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、６．３４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、５．４４（ｄｔ，Ｊ＝１５．３，６．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．２９（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，６．２Ｈｚ，１Ｈ）、４．７４（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．３７（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．３３−４．２５（ｍ，１Ｈ）、４．２０−４．０８（ｍ，１Ｈ）、３．９３−３．７４（ｍ，２Ｈ）、３．６５（ｓ，３Ｈ）、３．３１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、３．０６（ｄｄ，Ｊ＝１４．３，５．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．９６（ｄｄ，Ｊ＝１４．３，７．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．５９（ｄｄ，Ｊ＝１２．５，６．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．３３−２．０８（ｍ，５Ｈ）、２．０４（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、０．９０（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，６Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７１．９（Ｃ）、１７１．２（Ｃ）、１７１．１（Ｃ）、１７０．４（２  ｘ  Ｃ）、１４５．０（Ｃ）、１４４．３（Ｃ）、１３６．１（Ｃ）、１３２．５（ＣＨ）、１３０．１（ＣＨ）、１２９．７（ＣＨ）、１２９．５（ＣＨ）、１２９．３（ＣＨ）、１２８．８（ＣＨ）、１２８．２（ＣＨ）、１２８．０（ＣＨ）、１２７．３（ＣＨ）、１２７．１（ＣＨ）、１２６．７（ＣＨ）、６９．８（ＣＨ）、６７．１（Ｃ）、６６．８（Ｃ）、５８．９（ＣＨ）、５４．４（ＣＨ）、５２．６（ＣＨ）、５２．３（ＣＨ3）、４３．７（ＣＨ2）、４１．０（ＣＨ2）、３７．６（ＣＨ2）、３３．８（ＣＨ2）、３１．５（ＣＨ2）、３１．４（ＣＨ2）、３０．３（ＣＨ）、１９．３（ＣＨ3）、１７．９（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ  １１０４（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）、１０８２（５０％，［Ｍ＋Ｈ］+）。
【０２０１】
（６Ｒ，９Ｓ，１２Ｒ，１６Ｓ）−１２−ベンジル−６−イソプロピル−１６−（（Ｅ）−４−トリチルスルファニル−ブト−１−エニル）−９−トリチルスルファニルメチル−１−オキサ−４，７，１０，１３−テトラアザ−シクロヘキサデカン−２，５，８，１１，１４−ペンタオン（８Ｂ）の調製
０℃のＴＨＦ（１０ｍＬ）中のメチルエステル６Ｂ（１８０ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｈ2Ｏ（１．５ｍＬ）中のＬｉＯＨ（６ｍｇ、０．２５）の溶液を添加した。１時間後、その反応を１Ｍ  ＨＣｌ（６ｍＬ）の添加により停止させた。ＣＨＣｌ3（５０ｍＬ）を添加し、有機相を分離し、ＣＨＣｌ3（２×１０ｍＬ）で抽出した。有機相をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、濾過し、真空下で濃縮して、粗製酸７Ｂ（１７９ｍｇ、定量的）を白色の固体として得、それを次の段階で直ちに使用した：（ＥＳ-）ｍ／ｚ  １０６６（１００％，［Ｍ−Ｈ］-）。
【０２０２】
ＣＨ2Ｃｌ2（４０ｍＬ）中のＭＮＢＡ（６８ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（４９ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（１５：１、１６０ｍＬ）中の酸７Ｂ（１７９ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の溶液を３時間かけて１滴ずつ添加した（注意：先ず、ＴＨＦに酸を溶解し、その後、ＣＨ2Ｃｌ2を添加する）。さらに１４時間後、１Ｍ  ＨＣｌ（４０ｍＬ）の添加により反応を停止させた。有機相を（ＣＨ2Ｃｌ2で抽出しながら）分離し、ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）、そしてブライン（２０ｍＬ）で順次洗浄した。合わせた有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、濾過し、真空下で濃縮して、黄色の油を得た。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（３０〜７０％  ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2）による精製によって、８Ｂ（１０８ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ、６０％）を白色の固体として得た；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．４２−７．０８（ｍ，３５Ｈ）、７．０５（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）、６．９６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、６．５４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、５．４６（ｄｔ，Ｊ＝１５．３，６．５Ｈｚ，２Ｈ）、５．２１（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，６．６Ｈｚ，１Ｈ）、４．４９（ｄｄ，Ｊ＝１３．５，４．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．３２（ｄｄ，Ｊ＝１６．８，９．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．１６−４．０６（ｍ，１Ｈ）、３．８５（ｂｒ  ｑ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．０２−２．８２（ｍ，４Ｈ）、２．６５−２．５３（ｍ，２Ｈ）、２．４０（ｄｄ，Ｊ＝１４．６，３．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．２３（ｄｄ，Ｊ＝１４．６，１１．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．１０（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、１．９７−１．８４（ｍ，２Ｈ）、０．９８（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．９２（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７３．５（Ｃ）、１７０．８（Ｃ）、１７０．７（Ｃ）、１６９．９（２  ｘ  Ｃ）、１４４．９（Ｃ）、１４４．２（Ｃ）、１３６．３（Ｃ）、１３２．７（ＣＨ）、１２９．６（ＣＨ）、１２９．５（ＣＨ）、１２９．３（ＣＨ）、１２８．９（ＣＨ）、１２８．３（ＣＨ）、１２８．０（ＣＨ）、１２７．９（ＣＨ）、１２７．３（ＣＨ）、１２７．１（ＣＨ）、１２６．７（ＣＨ）、７２．２（ＣＨ）、６７．３（Ｃ）、６６．７（Ｃ）、５８．３（ＣＨ）、５５．８（２  ｘ  ＣＨ）、４２．０（ＣＨ2）、４１．４（ＣＨ2）、３６．７（ＣＨ2）、３２．３（ＣＨ2）、３１．３（ＣＨ2）、３１．１（ＣＨ2）、２８．７（ＣＨ）、１９．８（ＣＨ3）、１７．２（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ  １０７１（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）、１０６６（１０％，［Ｍ＋ＮＨ4］+）、１０４９（１０％，［Ｍ＋Ｈ］+）。
【０２０３】
（Ｅ）−（１Ｓ，７Ｒ，１０Ｓ，２１Ｒ）−２１−ベンジル−７−イソプロピル−２−オキサ−１２，１３−ジチア−５，８，２０，２３−テトラアザ−ビシクロ［８．７．６］トリコス−１６−エン−３，６，９，１９，２２−ペンタオン（９Ｂ）の調製。
【０２０４】
ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９：１、２３０ｍＬ）中のＩ2（２５４ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）の強力攪拌溶液に、ビス−トリチル８Ｂ（１０５ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）の溶液を３０分かけて１滴ずつ添加した。さらに３０分間後、チオ硫酸ナトリウム（０．０５Ｍ、１００ｍＬ）、続いてブライン（１０ｍＬ）の添加により反応を停止させた。有機相を分離し、水性相をＣＨ2Ｃｌ2（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、濾過し、真空下で濃縮して、白色の固体を得た。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（１〜３．５％  ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2）による精製によって、二環式デプシペプチド９Ｂ（４３ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、７５％）を白色の固体として得た：［α］25D−９８（ｃ  ０．０５、１：１  ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ3）；ＩＲ  νmax  ３２８０、１７３２、１６２７、１５３８、１４４５ｃｍ-1；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，１９：１  ＣＤ3ＯＤ／ＣＤＣｌ3）δ７．３５−７．１８（ｍ，５Ｈ）、５．８６−５．７６（ｍ，１Ｈ）、５．７４−５．６６（ｍ，２Ｈ）、４．６２（ｄｄ，Ｊ＝１１．３，４．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．４５（ｄｄ，Ｊ＝９．３，５．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．２８（ｄ，Ｊ＝１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、３．７７（ｄ，Ｊ＝１７．６Ｈｚ，１Ｈ）、３．３９（ｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．２７−３．１７（ｍ，２Ｈ）、３．１１−２．９９（ｍ，３Ｈ）、２．９７−２．８３（ｍ，２Ｈ）、２．８１（ｄｄ，Ｊ＝１３．６，２．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．７０−２．５３（ｍ，３Ｈ）、０．９６（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）、０．９２（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，１９：１  ＣＤ3ＯＤ／ＣＤＣｌ3）δ１７３．８（Ｃ）、１７３．２（Ｃ）、１７２．９（Ｃ）、１７１．３（Ｃ）、１６９．４（Ｃ）、１３７．７（ＣＨ）、１３１．３（ＣＨ）、１３１．３（ＣＨ）、１２９．７（ＣＨ）、１２９．６（ＣＨ）、１２８．０（ＣＨ）、７１．９（ＣＨ）、６５．９（ＣＨ）、５８．３（ＣＨ）、５８．１（ＣＨ）、４２．６（ＣＨ2）、３９．３（２  ｘ  ＣＨ2）、３６．９（ＣＨ2）、３６．８（ＣＨ2）、３１．８（ＣＨ2）、２８．１（ＣＨ）、２０．６（ＣＨ3）、２０．５（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ  ５８０（５０％，［２Ｍ＋Ｎａ］+）、５６３（１００％，［Ｍ＋ＮＨ4］+）、５６３（１０％，［Ｍ＋Ｈ］+）。
【０２０５】
（（Ｒ）−２−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−３−メチル−ブチリルアミノ］−３−トリチルスルファニル−プロピオニルアミノ｝−３−メチル−ブチリルアミノ）−酢酸メチルエステル（４Ｃ）の調製。
【０２０６】
室温でＣＨ3ＣＮ／ＣＨ2Ｃｌ2（１：１、６０ｍＬ）中の３Ａ（８３６ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、Ｅｔ2ＮＨ（３ｍＬ）を添加した。室温で３時間攪拌した後、その反応混合物をヘプタン（６０ｍＬ）で希釈し、濃縮して、粗製アミンを無色の油として得た。ＣＨ2Ｃｌ2（４０ｍＬ）中のＦｍｏｃ−Ｄ−バリン（５７７ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＥＤＡＣ・ＨＣｌ（３２６ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（２３０ｍｇ、１．７ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（６２７μＬ、３．６ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１０分間攪拌した後、ＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）中のその粗製アミンの溶液を添加し、その反応混合物を１２時間攪拌した。その後、その反応物を水（１５ｍＬ）、１０％  ＨＣｌ（１５ｍＬ）、５％  ＮａＨＣＯ3（１５ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（１５ｍＬ）溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ2ＳＯ4）、濾過し、溶媒を除去して、オフホワイトの固体を得、それをＣＨ3ＣＮから再結晶させて、４Ｃを白色の固体として得た（７３４ｍｇ、０．８６ｍｍｏｌ、７８％）；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．７４（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、７．５３（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、７．４２−７．３２（ｍ，９Ｈ）、７．３０−７．１９（ｍ，９Ｈ）、７．１６（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ）、６．８０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．５７（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．５２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．４４（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．３８（ｄｄ，Ｊ＝１０．５，７．５Ｈｚ，１Ｈ）、４．２５（ｄｄ，Ｊ＝１０．５，７．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．１７−３．９５（ｍ，３Ｈ）、３．８７（ｄｄ，Ｊ＝１８．１，５．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．７８（ｄｄ，Ｊ＝１８．１，５．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．６３（ｓ，３Ｈ）、２．７１（ｄｄ，Ｊ＝１２．５，６．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．５３（ｄｄ，Ｊ＝１２．５，６．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．２１（ｓｅｐｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．０７−１．９３（ｍ，１Ｈ）、０．９３−０．８３（ｍ，１２Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ  １００ＭＨｚ  １７１．５（Ｃ）、１７１．１（Ｃ）、１７０．２（２  ｘ  Ｃ）、１５６．６（Ｃ）、１４４．４（Ｃ）、１４４．０（Ｃ）、１４３．８（Ｃ）、１４１．４（Ｃ）、１２９．６（ＣＨ）、１２８．３（ＣＨ）、１２７．９（ＣＨ）、１２７．２（ＣＨ）、１２７．１（ＣＨ）、１２５．２（ＣＨ）、１２０．１（ＣＨ）、６７．３（ＣＨ2）、６７．２（Ｃ）、６０．３（ＣＨ）、５８．５（ＣＨ）、５２．５（ＣＨ）、５２．３（ＣＨ）、４７．３（ＣＨ）、４１．０（ＣＨ2）、３３．８（ＣＨ2）、３１．５（ＣＨ）、３０．５（ＣＨ）、１９．２（２  ｘ  ＣＨ3）、１８．０（ＣＨ3）、１７．８（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ  １８３２（１０％，［２Ｍ＋Ｎａ］+）、８７７．５（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）。
【０２０７】
（（Ｒ）−２−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−２−（（Ｅ）−（Ｓ）−３−ヒドロキシ−７−トリチルスルファニル−ヘプト−４−エノイルアミノ）−３−メチル−ブチリルアミノ］−３−トリチルスルファニル−プロピオニルアミノ｝−３−メチル−ブチリルアミノ）−酢酸メチルエステル（６Ｃ）の調製。
【０２０８】
室温でＣＨＣｌ3／ＣＨ3ＣＮ（１：１、１４ｍＬ）中の４Ｃ（２３５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、Ｅｔ2ＮＨ（１ｍＬ）を添加した。室温で５時間攪拌した後、その反応混合物をヘプタン（１０ｍＬ）で希釈し、溶媒を除去して、粗製アミンを無色の油として得た。ＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）中のその粗製アミンの攪拌溶液に、室温でＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中の５（１９３ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の溶液およびＤＭＡＰ（４ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）を添加した。室温で１２時間攪拌した後、溶媒を除去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（溶離剤  １〜３％  ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2）によって精製して、６Ｃ（２３０ｍｇ、８１％）を白色の固体として得た；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．４２−７．３８（ｍ，１２Ｈ）、７．３０−７．１４（ｍ，２０Ｈ）、６．７４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、６．３９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、５．４９（ｄｔｄ，Ｊ＝１５．３，６．５，０．８Ｈｚ，１Ｈ）、５．３６（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，６．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．３９−４．２６（ｍ，３Ｈ）、４．１６−４．０６（ｍ，１Ｈ）、３．８３（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ）、３．６５（ｓ，３Ｈ）、３．３３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、２．６０（ｄｄ，Ｊ＝１２．８，７．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．５４（ｄｄ，Ｊ＝１２．８，６．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．３７（ｄｄ，Ｊ＝１４．０，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．３０−２．０２（ｍ，７Ｈ）、０．９０（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．８９（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．８８（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．８５（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７２．１（Ｃ）、１７１．４（Ｃ）、１７１．２（Ｃ）、１７０．５（Ｃ）、１７０．３（Ｃ）、１４５．０（Ｃ）、１４４．３（Ｃ）、１３２．６（ＣＨ）、１３０．２（ＣＨ）、１２９．７（ＣＨ）、１２９．５（ＣＨ）、１２８．３（ＣＨ）、１２８．０（ＣＨ）、１２７．１（ＣＨ）、１２６．８（ＣＨ）、６９．８（ＣＨ）、６７．１（Ｃ）、６６．８（Ｃ）、５９．０（ＣＨ）、５８．９（ＣＨ）、５２．５（ＣＨ）、５２．３（ＣＨ3）、４３．９（ＣＨ2）、４１．０（ＣＨ2）、３３．７（ＣＨ2）、３１．５（２  ｘ  ＣＨ2）、３０．４（ＣＨ）、３０．２（ＣＨ2）、１９．５（ＣＨ3）、１９．３（ＣＨ3）、１７．９（２  ｘ  ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ  １０５６（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）、１０５１（５０％，［Ｍ＋ＮＨ4］+）。
【０２０９】
（６Ｒ，９Ｓ，１２Ｒ，１６Ｓ）−６，１２−ジイソプロピル−１６−（（Ｅ）−４−トリチルスルファニル−ブト−１−エニル）−９−トリチルスルファニルメチル−１−オキサ−４，７，１０，１３−テトラアザ−シクロヘキサデカン−２，５，８，１１，１４−ペンタオン（８Ｃ）の調製
０℃で、ＴＨＦ（１２ｍＬ）中のメチルエステル６Ｂ（２２０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｈ2Ｏ（２ｍＬ）中のＬｉＯＨ（７．６ｍｇ、０．３２）の溶液を添加した。１時間後、１Ｍ  ＨＣｌ（６ｍＬ）の添加により反応を停止させた。ＣＨＣｌ3（５０ｍＬ）を添加し、有機相を分離し、ＣＨＣｌ3（２×１５ｍＬ）で抽出した。有機相をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、濾過し、真空下で濃縮して、粗製酸７Ｃ（２１７ｍｇ、定量的）を白色の固体として得、それを次の段階で直ちに使用した：（ＥＳ-）ｍ／ｚ  １０１７（１００％，［Ｍ−Ｈ］-）。
【０２１０】
ＣＨ2Ｃｌ2（５０ｍＬ）中のＭＮＢＡ（９０ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（６２ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（１５：１、２００ｍＬ）中の酸７Ｃ（２１７ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の溶液を３時間かけて１滴ずつ添加した（注意：先ず、ＴＨＦに酸を溶解し、その後、ＣＨ2Ｃｌ2を添加する）。さらに１４時間後、１Ｍ  ＨＣｌ（４０ｍＬ）の添加により反応を停止させた。有機相を（ＣＨ2Ｃｌ2で抽出しながら）分離し、ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）、そしてブライン（２０ｍＬ）で順次洗浄した。合わせた有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、濾過し、真空下で濃縮して、黄色の油を得た。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（３０〜７０％  ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2）による精製によって、８Ｃ（１３０ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ、６２％）を白色の固体として得た；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．８８（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、７．４２−７．３４（ｍ，１２Ｈ）、７．２９−７．１４（ｍ，１９Ｈ）、６．２０（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．６２−５．５０（ｍ，２Ｈ）、５．３１（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，６．４Ｈｚ，１Ｈ）、４．３６（ｄｄ，Ｊ＝１７．３，８．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．２４（ｄｄ，Ｊ＝８．５，４．５Ｈｚ，１Ｈ）、４．１１（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．６５−３．５６（ｍ，１Ｈ）、３．４２（ｄ，Ｊ＝１４．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．９９（ｔ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．６４（ｄｄ，Ｊ＝１２．０，６．３Ｈｚ，１Ｈ）、２．５０（ｄｄ，Ｊ＝１５．１，２．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．３５（ｄｄ，Ｊ＝１４．８，９．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．１７（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、２．０６−１．８６（ｍ，３Ｈ）、１．８４−１．７２（ｍ，１Ｈ）、０．９１（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）、０．８８（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，６Ｈ）、０．８３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７３．８（Ｃ）、１７２．２（Ｃ）、１７１．０（Ｃ）、１６９．５（Ｃ）、１６８．９（Ｃ）、１４５．０（Ｃ）、１４４．４（Ｃ）、１３２．７（ＣＨ）、１２９．７（ＣＨ）、１２８．２（ＣＨ）、１２８．１（ＣＨ）、１２８．０（ＣＨ）、１２７．０（ＣＨ）、１２６．８（ＣＨ）、７２．２（ＣＨ）、６７．３（Ｃ）、６６．８（Ｃ）、５８．８（ＣＨ）、５８．７（ＣＨ）、５８．４（ＣＨ）、４２．１（ＣＨ2）、４１．９（ＣＨ2）、３２．０（ＣＨ2）、３１．５（ＣＨ2）、３１．３（ＣＨ）、３１．２（ＣＨ2）、２９．４（ＣＨ）、１９．６（ＣＨ3）、１９．４（ＣＨ3）１８．５（ＣＨ3）、１７．０（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ  １０２３（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）、１０１８（６０％，［Ｍ＋ＮＨ4］+）。
【０２１１】
（Ｅ）−（１Ｓ，７Ｒ，１０Ｓ，２１Ｒ）−７，２１−ジイソプロピル−２−オキサ−１２，１３−ジチア−５，８，２０，２３−テトラアザ−ビシクロ［８．７．６］トリコス−１６−エン−３，６，９，１９，２２−ペンタオン（９Ｃ）の調製。
【０２１２】
ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９：１、２８０ｍＬ）中のＩ2（３０５ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）の強力攪拌溶液に、ビス−トリチル８Ｃ（１２０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の溶液を３０分かけて１滴ずつ添加した。さらに３０分間後、チオ硫酸ナトリウム（０．０５Ｍ、１００ｍＬ）、続いてブライン（１０ｍＬ）の添加により反応を停止させた。有機相を分離し、水性相をＣＨ2Ｃｌ2（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、濾過し、真空下で濃縮して、白色の固体を得た。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（１〜４％  ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2）による精製によって、二環式デプシペプチド９Ｃ（６０ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、９７％）を白色の固体として得た：［α］25D−１０５．７（１：１  ＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ3、ｃ  ０．１５）；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ５．７６−５．６３（ｍ，３Ｈ）、４．５２（ｄｄ，Ｊ＝１１．３，４．７Ｈｚ，１Ｈ）、３．９６（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ）、３．７４（ｄ，Ｊ＝１７．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．３８（ｄ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，１Ｈ）、３．１９−３．１１（ｍ，２Ｈ）、３．０９−２．９６（ｍ，３Ｈ）、２．９０（ｄｄ，Ｊ＝１３．６，２．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．７１−２．６２（ｍ，２Ｈ）、２．５８−２．４４（ｍ，１Ｈ）、２．３１−２．１８（ｍ，１Ｈ）、１．１１（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．０９（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．０１（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）、０．９１（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ１７１．８（Ｃ）、１７１．７（Ｃ）、１７０．７（Ｃ）、１７０．４（Ｃ）、１６８．３（Ｃ）、１３０．０（ＣＨ）、１２９．６（ＣＨ）、６９．８（ＣＨ）、６４．６（ＣＨ）、６１．９（ＣＨ）、５４．８（ＣＨ）、４２．２（ＣＨ2）、３９．３（ＣＨ2）、３７．５（ＣＨ2）、３７．１（ＣＨ2）、３２．１（ＣＨ2）、２９．２（ＣＨ）、２７．３（ＣＨ）、２０．６（ＣＨ3）、２０．０（ＣＨ3）、１９．４（ＣＨ3）、１９．０（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ  ５３７（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）、５１５（９０％，［Ｍ＋Ｈ］+）。
【０２１３】
（（Ｒ）−２−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−６−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−（９Ｈ−フルオレン−９−イルメトキシカルボニルアミノ）−ヘキサノイルアミノ］−３−トリチルスルファニル−プロピオニルアミノ｝−３−メチル−ブチリルアミノ）−酢酸メチルエステル（４Ｄ）の調製。
【０２１４】
アルゴン下でトリペプチド３Ａ（５４８ｍｇ、０．７ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2／ＣＨ3ＣＮ（４４ｍＬ、１：１）に溶解し、その後、攪拌しながらジエチルアミン（１．６５ｍＬ、１６ｍｍｏｌ）を添加し、その反応混合物を室温で４．５時間攪拌した。その後、ヘキサン（１００ｍＬ）をその反応混合物に添加し、溶媒を真空下で除去し、これを再びヘキサン（３×２５ｍＬ）で繰り返した。その後、その粗製アミンを高真空下で４０分間乾燥させた。その後、アルゴン下で攪拌しながら、ＣＨ3ＣＮ（１６．５ｍＬ）中のＰｙＢｏｐ（５５８ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ）およびＦｍｏｃ−Ｄ−リシン（Ｂｏｃ）−ＯＨ（４７７ｍｇ、１ｍｍｏｌ）の溶液にジイソプロピルエチルアミン（０．４５ｍＬ、２．６ｍｍｏｌ）を添加した。得られた３の脱保護アミンをＣＨ2Ｃｌ2（１９ｍＬ）に添加し、その反応混合物を室温で１６時間攪拌した。その後、真空下で溶媒を除去し、形成した固体をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（溶離剤  ６：４  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）によって精製して、４Ｄ（５７１ｍｇ、０．５７ｍｍｏｌ、８１％）を白色の固体として得た：Ｒf  ０．１７  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（６：４）：［α］D26＝＋４７（ｃ  ０．３、ＭｅＯＨ）；ＩＲ  ３２９４、１７４４、１６４６、１５１５、１４４５（ｍ）；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．７４（ｄ，Ｊ＝８．０，２Ｈ）、７．５６−７．５１（ｍ，２Ｈ）、７．４２−７．３４（ｍ，８Ｈ）、７．３０−７．１７（ｍ，１１Ｈ）、７．０２（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、６．９４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、６．５９（ｄ，Ｊ＝８．０３Ｈｚ，１Ｈ）、５．７５（ｓ，１Ｈ）、４．３８−４．２１（ｍ，２Ｈ）、４．１８（ｄｄ，Ｊ＝８．５，６．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．１５−４．０５（ｍ，２Ｈ）、３．８７（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，３Ｈ）、３．５５（ｓ，３Ｈ）、３．０３（ｂｒ  ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ）、２．７６−２．６７（ｍ，１Ｈ）、２．６６−２．５８（ｍ，１Ｈ）、２．２０−２．１０（ｍ，１Ｈ）、１．９３−１．８４（ｍ，２Ｈ）、１．８２−１．７２（ｍ，１Ｈ）、１．７０−１．５９（ｍ，１Ｈ）、１．４３（ｓ，９Ｈ）、１．５０−１．３０（ｍ，３Ｈ）、０．８９（ｄ，Ｊ＝７．０２Ｈｚ，３Ｈ）、０．８４（ｄ，Ｊ＝７．０３Ｈｚ，３Ｈ）、13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７２．６（Ｃ）、１７１．４（Ｃ）、１７０．６（Ｃ）、１７０．６（Ｃ）、１５６．６（Ｃ）、１５６．３（ＣＯ）、１４４．４（Ｃ）、１４４．３（Ｃ）、１４３．９（Ｃ）、１４３．８（Ｃ）、１４１．４（Ｃ）、１２９．７（ＣＨ）、１２９．５（ＣＨ）、１２８．３（ＣＨ）、１２８．２（ＣＨ）、１２７．２（ＣＨ）、１２７．１（ＣＨ）、１２５．２（ＣＨ）、１２０．０（ＣＨ）、６７．４（ＣＨ2）、４７．２（ＣＨ3）、４１．１（ＣＨ2）、４０．０（ＣＨ2）、３３．５（ＣＨ2）、３１．９（ＣＨ2）、３０．３（ＣＨ2）、２９．８（ＣＨ）、２８．６（ＣＨ3）、２２．５（ＣＨ2）、１９．４（ＣＨ3），１７．９（ＣＨ3）、５２．３（ＣＨ）、５２．８（ＣＨ）、５５．１（ＣＨ）、５９．０（ＣＨ）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）１００７．０（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）。
【０２１５】
（（Ｒ）−２−｛（Ｓ）−２−［（Ｒ）−６−ｔ−ブトキシカルボニルアミノ−２−（（Ｓ）−３−ヒドロキシ−７−トリチルスルファニル−ヘプト−４−エノイルアミノ）−ヘキサノイルアミノ］−３−トリチルスルファニル−プロピオニルアミノ｝−３−メチル−ブチリルアミノ）−酢酸メチルエステル（６Ｄ）の調製。
【０２１６】
ＣＨ2Ｃｌ2（１３．５ｍＬ）およびＣＨ3ＣＮ（１６．５ｍＬ）中のテトラペプチド４Ｄ（２０１ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン下で、トリエチルアミン（１ｍＬ、９．６ｍｍｏｌ）を添加し、その反応混合物を５時間攪拌した。その後、真空下で溶媒を除去し、これをヘキサン（２×１０ｍＬ）で繰り返した。その後、ＣＨ2Ｃｌ2（７ｍＬ）中のその粗製アミンの溶液にＤＭＡＰ（４ｍｇ、０．０３ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＣＨ2Ｃｌ2（７ｍＬ）中の５（１５８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。その後、その反応物を１８時間攪拌した。その後、真空下で溶媒を除去し、形成した固体をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（溶離剤  ６：４〜７：３  ＥｔＯＡｃ：ヘキサン）によって精製して、６Ｄ（１３６ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ、６０％）を白色の固体として得た；融点８５〜８７℃；Ｒf  ０．２９  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（８：２）；［α］29D＝＋１９（ｃ  ０．４９、ＣＨ2Ｃｌ2）；ＩＲ（薄膜）３２８９、１７５１、１６８７、１６３４、１５２１、１４９０、１４４３；1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．４２−７．３５（ｍ，１５Ｈ）、７．２９−７．１６（ｍ，１７Ｈ）、６．９５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．８０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．４８（ｄｔ，Ｊ＝１５．１，６．５Ｈｚ，１Ｈ，）、５．３５（ｄｄ，Ｊ＝１５．１，６．０Ｈｚ，１Ｈ，）、４．６５（ｓ，１Ｈ）、４．４６−４．３５（ｍ，２Ｈ）、４．２１（ｄｄ，Ｊ＝８．５，６．５２Ｈｚ，１Ｈ）、４．０４−３．９６（ｍ，１Ｈ）、３．９３（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．８９−３．８１（ｍ，２Ｈ）、３．６２（ｓ，３Ｈ）、３．０２（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，２Ｈ）、２．６０−２．４５（ｍ，２Ｈ）、２．３５−２．００（ｍ，９Ｈ）、１．８５−１．７４（ｍ，１Ｈ）、１．６６−１．５４（ｍ，１Ｈ）、１．４０（ｓ，９Ｈ）、１．４７−１．２５（ｍ，２Ｈ）、０．８８（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ，）、０．８４（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７２．３（Ｃ）、１７２．２（Ｃ）、１７１．５（Ｃ）、１７０．７（Ｃ）、１７０．５（Ｃ）、１５６．２（Ｃ）、１４５．０（Ｃ）、１４５．０（Ｃ）、１４４．３（Ｃ）、１３２．９（ＣＨ）、１２９．７（ＣＨ）、１２９．６（ＣＨ）、１２９．５（ＣＨ）、１２９．５（ＣＨ）、１２８．２（ＣＨ）、１２８．２（ＣＨ）、１２８．０（ＣＨ）、１２７．０（ＣＨ）、１２６．７（ＣＨ）、６９．５（ＣＨ）、６７．１（ＣＨ2）、６６．７（ＣＨ2）、５８．６（ＣＨ）、５２．９（ＣＨ）、５２．６（ＣＨ）、５２．３（ＣＨ）、５２．２（ＣＨ3）、４４．２（ＣＨ2）、４１．１（ＣＨ2）、４０．１（ＣＨ2）、３３．９（ＣＨ2）、３１．４（ＣＨ2）、３１．０（ＣＨ2）、３１．０（ＣＨ2）、３０．６（ＣＨ）、２９．８（ＣＨ2）、２８．６（ＣＨ3）、２２．６（ＣＨ2）、１９．３（ＣＨ3）、１８．０（ＣＨ3）、ＭＳ（ＥＳ+）１１８５（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）、１１６３（４０％，［Ｍ＋Ｈ+）。
【０２１７】
｛４−［（６Ｒ，９Ｓ，１２Ｒ）−６−イソプロピル−２，５，８，１１，１４−ペンタオキソ−１６−（（Ｓ）−４−トリチルスルファニル−ブト−１−エニル）−９−トリチルスルファニルメチル−１−オキサ−４，７，１０，１３−テトラアザ−シクロヘキサデク−１２−イル］−ブチル｝−カルバミン酸ｔ−ブチルエステル（８Ｄ）の調製。
【０２１８】
０℃で、ＴＨＦ（１．９ｍＬ）中の６Ｄ（１３６ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の溶液に、水（０．５ｍＬ）中のＬｉＯＨ（６．８ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、その反応混合物を５５分間攪拌した。その後、ｐＨが３〜４の間に低下するまでクエン酸を１滴ずつ添加し、その後、水（３．７ｍＬ）、続いてＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）を添加した。層を分離し、生成物をＥｔＯＡｃ（２×１０ｍＬ）で抽出した。その後、合わせた有機層を飽和ブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4で乾燥させ、溶媒を真空下で除去して、粗製酸７Ｄ（１３２ｍｇ、定量的）を白色の固体として得、それを次の段階で直ちに使用した：ＬＲＭＳ（ＥＳ-）１１４７（１００％，［Ｍ−Ｈ］-）。
【０２１９】
その後、ＣＨ2Ｃｌ2（２５ｍＬ）中のＭＮＢＡ（４７ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（３３ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ2Ｃｌ2（９６ｍＬ）中の酸７Ｄ（１３２ｍｇ，０．１１ｍｍｏｌ）の溶液を１０時間かけて１滴ずつ添加し、その反応混合物をさらに９．５時間、室温で攪拌した。その後、０．２％  ＨＣｌ（５０ｍＬ）を添加し、形成した層を分離し、有機層を硫酸水素ナトリウム（３０ｍＬ）および飽和ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、真空下で濃縮して、褐色の固体を得た。その後、これをＥｔＯＡｃ／ヘキサン（６：４）の溶離剤を用い、それを（３：１）に増加させるフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、生成物８Ｄ（５２ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ、４２％）を白色の固体として得た：Ｒf  ０．０７  ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（６：４）；［α］25D＝−７６（ｃ  ０．１、ＣＨ2Ｃｌ2）；ＩＲ（薄膜）３２７１  １７３９（ｍ）、１６８３、１６４１、１５３６、１４９０、１４４４、１３９１；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．５４（ｓ，１Ｈ）、７．４４−７．３６（ｍ，１２Ｈ）、７．３０−７．１７（ｍ，１９Ｈ）、６．８０（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ，）、６．４７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．５８（ｄｔ，Ｊ＝１５．１，７．０Ｈｚ，１Ｈ，）、５．４７（ｔｄ，Ｊ＝６．５，２．５Ｈｚ，１Ｈ，）、５．３９（ｄｄ，Ｊ＝１５．１，６．５Ｈｚ，１Ｈ）、４．６８（ｓ，１Ｈ）、４．２９（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．２０（ｄｄ，Ｊ＝１７．１，７．５Ｈｚ，１Ｈ）、４．１６（ｄｄ，Ｊ＝９．０，６．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．５３（ｄｄ，Ｊ＝１７．１，５．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．４４（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．００−２．９０（ｍ，２Ｈ）、２．６６（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）、２．５５−２．４８（ｍ，１Ｈ）、２．３９（ｄｄ，Ｊ＝１５．１，８．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．３０−２．１５（ｍ，３Ｈ）、２．１３−２．０１（ｍ，４Ｈ）、１．６８−１．５８（ｍ，１Ｈ）、１．５１（ｄｄ，Ｊ＝１３．５，７．０Ｈｚ，１Ｈ，）、１．４０（ｓ，９Ｈ）、１．４５−１．３４（ｍ，２Ｈ）、１．３６−１．２８（ｍ，２Ｈ）、１．３１−１．２３（ｍ，２Ｈ）、０．８９（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）、０．８４（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ，）、13Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７３．１（Ｃ）、１７１．３（Ｃ）、１７１．３（Ｃ）、１６９．８（Ｃ）、１６８．９（Ｃ）、１５６．２（Ｃ）、１４５．０（Ｃ）、１４４．５（Ｃ）、１３２．６（ＣＨ）、１２９．７（ＣＨ）、１２８．２（ＣＨ）、１２８．０（ＣＨ）、１２７．０（ＣＨ）、１２６．８（ＣＨ）、７９．１（ＣＨ）、６７．５（Ｃ）、６６．８（Ｃ）、５８．７（ＣＨ）、５３．１（ＣＨ）、５３．０（ＣＨ）、４２．０（ＣＨ2）、４１．８（ＣＨ2）、４０．２（ＣＨ2）、３２．２（ＣＨ2）、３１．５（ＣＨ2）、３１．４（ＣＨ2）、３１．２（ＣＨ2）、３１．０（ＣＨ2）、２９．７（ＣＨ）、２８．６（ＣＨ3）、２２．８（ＣＨ2）、１９．５（ＣＨ3）、１７．６（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）１１５２（１００％，［Ｍ＋Ｎａ+］）。
【０２２０】
［４−（（７Ｒ，１０Ｓ，１４Ｓ，２１Ｒ）−７−イソプロピル−３，６，９，１９，２２−ペンタオキソ−２−オキサ−１２，１３−ジチア−５，８，２０，２３−テトラアザ−ビシクロ［８．７．６］トリコス−１６−エン−２１−イル）−ブチル］−カルバミン酸ｔ−ブチルエステル（９Ｄ）の調製。
【０２２１】
ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９：１）（１４８ｍＬ）中のヨウ素（１１７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の攪拌溶液に、ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９：１）（７７ｍＬ）中の８Ｄ（５２ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）の溶液を３０分かけて１滴ずつ添加し、その後、その反応混合物をさらに３０分間攪拌させておき、その後、チオ硫酸ナトリウム（１２８ｍＬ、０．０２Ｍ）を添加した。層を分離し、その生成物をＣＨ2Ｃｌ2（３×２５ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ4で乾燥させ、真空下で溶媒を除去した。その後、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（溶離剤  ２：９８〜８：９２  ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2）による精製を行い、それによって９Ｄ（３ｍｇ、０．００５ｍｍｏｌ、１０％）を白色の固体として得た：Ｒf  ０．０５  ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2（５：９５）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）６６６．８（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）。
【０２２２】
（Ｒ）−２−（（Ｒ）−２−｛（Ｒ）−２−［（Ｒ）−２−（（Ｅ）−（Ｓ）−３−ヒドロキシ−９，９，９−トリフェニル−ノン−４−エノイルアミノ）−プロピオニルアミノ］−５，５，５−トリフェニル−ペンタノイルアミノ｝−３−メチル−ブチリルアミノ）−プロピオン酸メチルエステル（６Ｅ）の調製。
【０２２３】
ＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（１：１、３０ｍＬ）中のＨ2Ｎ−Ｄ−Ａｌａ−Ｄ−Ｃｙｓ（ＳＴｒｔ）−Ｄ−Ｖａｌ−Ｄ−Ａｌａ−ＯＭｅ（９６ｍｇ、０．１５５ｍｍｏｌ、米国、ＣＡ  ９２１２１−１５１０のバイオペピド社（Ｂｉｏｐｅｐｉｄｅ  Ｃｏ．）から購入したもの、純度約６０％）の溶液に、ＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中の５（８７ｍｇ、０．１５５ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、続いてＤＭＡＰ（２ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を添加した。１８時間後、その反応混合物を真空下で濃縮した。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（１〜３．５％  ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2）による精製によって、ビス−トリチル６Ｅ（５５ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ、３５％）を溶解度の低い白色の固体として得た：ＬＲＭＳ（５μｍ  粒径、３．０×５０ｍｍ、１．２５ｍＬ／分で５分間にわたって５％メタノール（０．１％  ＨＣＯＯＨ）／Ｈ2Ｏから１００％への線形勾配で、ＸＴｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ18カラムを使用する、ＨＰＬＣ  ＥＳ+。その後、１．５ｍＬ／分で５分間、１００％メタノール（０．１％  ＨＣＯＯＨ））室温＝７．９３分、ｍ／ｚ  １０４１．７（１００％、［Ｍ＋Ｎａ］+）、１０１９．７（３０％、［Ｍ＋Ｈ］+）。
【０２２４】
（３Ｒ，６Ｒ，９Ｓ，１２Ｒ，１６Ｓ）−６−イソプロピル−３，１２−ジメチル−１６−（（Ｅ）−４−トリチルスルファニル−ブト−１−エニル）−９−トリチルスルファニルメチル−１−オキサ−４，７，１０，１３−テトラアザ−シクロヘキサデカン−２，５，８，１１，１４−ペンタオン（８Ｅ）の調製。
【０２２５】
０℃で、ＴＨＦ（５ｍＬ）中のメチルエステル６Ｅ（８１ｍｇ、０．０８０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｈ2Ｏ（０．８ｍＬ）中のＬｉＯＨ（３ｍｇ、０．１２）の溶液を添加した。１時間後、１Ｍ  ＨＣｌ（１０ｍＬ）の添加により反応を停止させた。ＣＨＣｌ3（２０ｍＬ）を添加し、有機相を分離し、ＣＨＣｌ3（２×１０ｍＬ）で抽出した。有機相をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、真空下で濃縮して、粗製酸７Ｅ（８０ｍｇ、定量的）を白色の固体として得、それを次の段階で直ちに使用した：ＬＲＭＳ（ＥＳ-）ｍ／ｚ  １００３（１００％，［Ｍ−Ｈ］-）。
【０２２６】
ＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）中のＭＮＢＡ（３５ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（２５ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（７５：５、８０ｍＬ）中の酸７Ｅ（８０ｍｇ、０．０８０ｍｍｏｌ）の溶液を３時間かけて１滴ずつ添加した。さらに１４時間後、１Ｍ  ＨＣｌ（２５ｍＬ）の添加により反応を停止させた。有機相を（ＣＨ2Ｃｌ2で抽出しながら）分離し、ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）そしてブライン（２０ｍＬ）で順次洗浄した。合わせた有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、真空下で濃縮して、黄色の油を得た。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（７０〜１００％  ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2）による精製によって、８Ｅ（３４ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ、４３％）を白色の固体として得た：1Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．４９−７．０８（ｍ，３３Ｈ）、６．３１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、５．５７（ｄｔ，Ｊ＝１５．３，６．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．４７（ｑ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ）、５．３６（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，６．８Ｈｚ，１Ｈ）、４．４５（５重線，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．２１（５重線，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．８７（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）、３．５９（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、２．９２（ｄｄ，Ｊ＝１２．５，８．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．５５（ｄｄ，Ｊ＝１２．５，５．４Ｈｚ，１Ｈ）、２．５１−２．３６（ｍ，２Ｈ）、２．１７（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ）、２．０５−１．８６（ｍ，３Ｈ）、１．３６（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．３３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．８８（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ）、０．８３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ  ３Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７３．６（Ｃ）、１７０．８（Ｃ）、１７０．４（Ｃ）、１７０．２（Ｃ）、１６９．７（Ｃ）、１４４．９（Ｃ）、１４４．４（Ｃ）、１３２．９（ＣＨ）、１２９．７（ＣＨ）、１２９．６（ＣＨ）、１２８．２（ＣＨ）、１２８．１（ＣＨ）、１２８．０（ＣＨ）、１２７．０（ＣＨ）、１２６．８（ＣＨ）、７２．０（ＣＨ）、６７．２（Ｃ）、６６．８（Ｃ）、６１．４（ＣＨ）、５５．３（ＣＨ）、４９．９（ＣＨ）、４９．５（ＣＨ）、４１．３（ＣＨ2）、３２．４（ＣＨ2）、３１．４（ＣＨ2）、３１．３（ＣＨ2）、２９．８（ＣＨ）、１９．８（ＣＨ3）、１８．４（ＣＨ3）、１７．９（ＣＨ3）、１７．８（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ  １００９（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）、９８７（１０％，［Ｍ＋Ｈ］+）。
【０２２７】
（Ｅ）−（１Ｓ，４Ｒ，７Ｒ，１０Ｓ，２１Ｒ）−７−イソプロピル−４，２１−ジメチル−２−オキサ−１２，１３−ジチア−５，８，２０，２３−テトラアザ−ビシクロ［８．７．６］トリコス−１６−エン−３，６，９，１９，２２−ペンタオン（９Ｅ）の調製。
【０２２８】
ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９：１、１００ｍＬ）中のＩ2（８７ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）の溶液に、ビス−トリチル８Ｅ（３４ｍｇ、０．０３４ｍｍｏｌ）の溶液を３０分かけて１滴ずつ添加した。さらに３０分間後、チオ硫酸ナトリウム（０．０５Ｍ、２５ｍＬ）、続いてブライン（１０ｍＬ）の添加により反応を停止させた。有機相を分離し、水性相をＣＨ2Ｃｌ2（３×１５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、濾過し、その後、真空下で濃縮することにより、白色の固体を得た。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（３〜５％  ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2）による精製によって、環化デプシペプチド９Ｅ（１０ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ、６０％）を白色の固体として得た：［α］25D−５１．８（ｃ  ０．４５、ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．５２（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．４０（ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，１Ｈ）、６．９４（ｄ，Ｊ＝９．５Ｈｚ，１Ｈ）、６．４６（ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．２３−６．１０（ｍ，１Ｈ）、５．８０−５．７２（ｍ，２Ｈ）、５．０６（ｄｄｄ，Ｊ＝１０．０，６．８，３．７Ｈｚ，１Ｈ）、４．４７（５重線，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．２０（ｑｄ，Ｊ＝７．３，３．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．８１（ｄｄ，Ｊ＝１４．３，６．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．９６−２．７７（ｍ，３Ｈ）、２．７６−２．６４（ｍ，５Ｈ）、２．６１（ｄｄ，Ｊ＝１３．５，２．２Ｈｚ，１Ｈ）、１．４９（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、１．４８（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）、０．９５（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）、０．９３（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ１７４．９（Ｃ）、１７３．９（Ｃ）、１７２．４（Ｃ）、１７２．２（Ｃ）、１７２．０（Ｃ）、１３１．９（ＣＨ）、１３１．１（ＣＨ）、７１．８（ＣＨ）、６７．２（ＣＨ）、５６．３（ＣＨ）、５３．０（ＣＨ）、５０．７（ＣＨ）、４０．４（ＣＨ2）、３９．９（ＣＨ2）、３９．３（ＣＨ2）、３４．４（ＣＨ2）、２８．７（ＣＨ）、２０．７（ＣＨ3）、２０．３（ＣＨ3）、１７．７（ＣＨ3）、１６．４（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ  １０２４（２００％，［２Ｍ＋Ｎａ］+）、５２３（５０％，［Ｍ＋Ｎａ］+）、５０１（１００％，［Ｍ＋Ｈ］+）。
【０２２９】
（Ｒ）−４−（（Ｅ）−（Ｓ）−３−ヒドロキシ−７−トリチルスルファニル−ヘプト−４−エノイルアミノ）−４−｛（Ｓ）−１−［（Ｒ）−１−（メトキシカルボニルメチル−カルバモイル）−２−メチル−プロピルカルバモイル］−２−トリチルスルファニル−エチルカルバモイル｝−酪酸ｔ−ブチルエステル（６Ｆ）の調製。
【０２３０】
ＣＨ2Ｃｌ2（４０ｍＬ）中のＨ2Ｎ−Ｄ−Ｇｌｕ（ＯtＢｕ）−Ｄ−Ｃｙｓ（ＳＴｒｔ）−Ｄ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−ＯＭｅ（１４５ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ、米国、ＣＡ  ９２１２１−１５１０のバイオペピド社（Ｂｉｏｐｅｐｉｄｅ  Ｃｏ．）から購入したもの、純度約６０％）の溶液に、ＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）中の５（１１３ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の溶液を添加し、続いてＤＭＡＰ（２．５ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）を添加した。１８時間後、その反応物を真空下で濃縮した。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（１〜３％  ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2）による精製によって、６Ｆ（９７ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ、４４％）を白色の固体として得た：1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．４６−７．３３（ｍ，１２Ｈ）、７．３２−７．１３（ｍ，２０Ｈ）、７．０７（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、６．７７（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ）、５．４６（ｄｔ，Ｊ＝１５．３，６．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．３４（ｄｄ，Ｊ＝１５．３，６．３Ｈｚ，１Ｈ）、４．４０−４．２３（ｍ，３Ｈ）、４．１１−３．８６（ｍ，２Ｈ）、３．７９（ｄｄ，Ｊ＝１７．８，５．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．７０−３．５８（ｍ，１Ｈ）、３．６４（ｓ，３Ｈ）、３．０６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、２．６３（ｄｄ，Ｊ＝１２．８，７．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．５３（ｄｄ，Ｊ＝１２．８，５．８Ｈｚ，１Ｈ）、２．４８−２．１２（ｍ，６Ｈ）、２．１１−１．８５（ｍ，４Ｈ）、１．４１（ｓ，９Ｈ）、０．９２（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，３Ｈ）、０．９１（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７３．７（Ｃ）、１７２．３（Ｃ）、１７１．６（Ｃ）、１７１．３（Ｃ）、１７０．４（Ｃ）、１７０．３（Ｃ）、１４５．０（Ｃ）、１４４．３（Ｃ）、１３３．６（ＣＨ）、１３０．３（ＣＨ）、１２９．７（ＣＨ）、１２９．５（ＣＨ）、１２８．２（ＣＨ）、１２８．０（ＣＨ）、１２７．１（ＣＨ）、１２６．７（ＣＨ）、８１．５（Ｃ）、７０．０（ＣＨ）、６７．１（Ｃ）、６６．７（Ｃ）、５９．３（ＣＨ）、５４．６（ＣＨ）、５３．０（ＣＨ）、５２．２（ＣＨ3）、４４．１（ＣＨ2）、４１．０（ＣＨ2）、３３．３（ＣＨ2）、３２．２（ＣＨ2）、３１．４（ＣＨ2  ｘ  ２）、２９．９（ＣＨ）、２８．１（ＣＨ3）、２６．１（ＣＨ2）、１９．３（ＣＨ3）、１７．７（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ  １１４２（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）。
【０２３１】
３−［（６Ｒ，９Ｓ，１２Ｒ，１６Ｓ）−６−イソプロピル−２，５，８，１１，１４−ペンタオキソ−１６−（（Ｅ）−４−トリチルスルファニル−ブト−１−エニル）−９−トリチルスルファニルメチル−１−オキサ−４，７，１０，１３−テトラアザ−シクロヘキサデク−１２−イル］−プロピオン酸ｔ−ブチルエステル（８Ｆ）の調製。
【０２３２】
０℃で、ＴＨＦ（５ｍＬ）中のメチルエステル６Ｆ（９８ｍｇ、０．０８８ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｈ2Ｏ（０．８ｍＬ）中のＬｉＯＨ（３ｍｇ、０．１３）の溶液を添加した。１時間後、１Ｍ  ＨＣｌ（１５ｍＬ）の添加により反応を停止させた。ＣＨＣｌ3（２０ｍＬ）を添加し、有機相を分離し、ＣＨＣｌ3（２×１０ｍＬ）で抽出した。有機相をブライン（１５ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、真空下で濃縮して、粗製酸７Ｆ（９６ｍｇ、定量的）を白色の固体として得、それを次の段階で直ちに使用した：（ＥＳ-）ｍ／ｚ  １１０３（１００％，［Ｍ−Ｈ］-）。
【０２３３】
ＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）中のＭＮＢＡ（３６ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（２５ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）の溶液に、ＣＨ2Ｃｌ2／ＴＨＦ（７５：２、７７ｍＬ）中の酸７Ｆ（９６ｍｇ、０．０８７ｍｍｏｌ）の溶液を３時間かけて１滴ずつ添加した。さらに１４時間後、１Ｍ  ＨＣｌ（２５ｍＬ）の添加により反応を停止させた。有機相を（ＣＨ2Ｃｌ2で抽出しながら）分離し、ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）そしてブライン（２０ｍＬ）で順次洗浄した。合わせた有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、真空下で濃縮して、黄色の油を得た。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（５０〜７０％  ＥｔＯＡｃ／ＣＨ2Ｃｌ2、その後、＋０．１％  ＭｅＯＨ）による精製によって、８Ｆ（５３ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ、５６％）を白色の固体として得た：1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ７．４４−７．３２（ｍ，１２Ｈ）、７．３１−７．１５（ｍ，１９Ｈ）、７．１１−７．０３（ｍ，２Ｈ）、６．６８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、５．５８（ｄｔ，Ｊ＝１５．６，６．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．４３（ｄｄｄ，Ｊ＝９．５，７．０，３．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．３３（ｄｄ，Ｊ＝１５．６，７．０Ｈｚ，１Ｈ）、４．４４（ｄｄ，Ｊ＝１７．０，９．６Ｈｚ，１Ｈ）、４．３０（ｄｄ，Ｊ＝９．０，４．５Ｈｚ，１Ｈ）、４．０４（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．５９（ｍ，１Ｈ）、３．５０（ｄｄ，Ｊ＝６．５，２．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．０７（ｔ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．６０−２．４５（ｍ，３Ｈ）、２．４２−２．２３（ｍ，３Ｈ）、２．２２−２．１２（ｍ，２Ｈ）、２．０８−１．８９（ｍ，４Ｈ）、１．４０（ｓ，９Ｈ）、０．８８（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）、０．８３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７３．４（Ｃ）、１７２．６（Ｃ）、１７１．１（Ｃ）、１７０．９（Ｃ）、１７０．０（Ｃ）、１６９．０（Ｃ）、１４５．０（Ｃ）、１４４．３（Ｃ）、１３３．２（ＣＨ）、１２９．７（ＣＨ）、１２９．６（ＣＨ）、１２８．３（ＣＨ）、１２８．０（ＣＨ）、１２７．１（ＣＨ）、１２６．８（ＣＨ）、８１．３（Ｃ）、７２．１（ＣＨ）、６７．３（Ｃ）、６６．８（Ｃ）、５８．７（ＣＨ）、５６．８（ＣＨ）、５４．１（ＣＨ）、４１．９（ＣＨ2）、４１．３（ＣＨ2）、３２．４（ＣＨ2）、３１．８（ＣＨ2）、３１．４（ＣＨ2）、３１．２（ＣＨ2）、２９．０（ＣＨ）、２８．２（ＣＨ3）、２５．９（ＣＨ2）、１９．７（ＣＨ3）、１７．２（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ  １１０９（１００％，［Ｍ＋Ｎａ］+）、１０８７（５０％，［Ｍ＋Ｈ］+）。
【０２３４】
３−（（Ｅ）−（１Ｓ，７Ｒ，１０Ｓ，２１Ｒ）−７−イソプロピル−３，６，９，１９，２２−ペンタオキソ−２−オキサ−１２，１３−ジチア−５，８，２０，２３−テトラアザ−ビシクロ［８．７．６］トリコス−１６−エン−２１−イル）−プロピオン酸ｔ−ブチルエステル（９Ｆ）の調製。
【０２３５】
ＣＨ2Ｃｌ2／ＭｅＯＨ（９：１、１３０ｍＬ）中のＩ2（１１７ｍｇ、０．４６ｍｍｏｌ）の溶液に、ビス−トリチル８Ｆ（５０ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）の溶液を３０分かけて１滴ずつ添加した。さらに３０分間後、チオ硫酸ナトリウム（０．０５Ｍ、５０ｍＬ）、続いてブライン（２０ｍＬ）の添加により反応を停止させた。有機相を分離し、水性相をＣＨ2Ｃｌ2（３×２５ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相を乾燥させ（ＭｇＳＯ4）、その後、真空下で濃縮することにより、白色の固体を得た。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（１〜３％  ＭｅＯＨ／ＣＨ2Ｃｌ2）による精製によって、二環式デプシペプチド９Ｆ（１９ｍｇ、０．０３２ｍｍｏｌ、６９％）を白色の固体として得た：［α］25D−７６．７（ｃ  ０．６０、ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ８．１５（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ）、７．３５（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．２３（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ）、７．１１（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ）、６．０５（ｄｄｔ，Ｊ＝１５．５，７．０，２．０Ｈｚ，１Ｈ）、５．８４−５．７３（ｍ，２Ｈ）、４．９７（ｔｄ，Ｊ＝８．０，４．５Ｈｚ，１Ｈ）、４．１８−４．０１（ｍ，３Ｈ）、３．６１（ｄｄ，Ｊ＝１５．１，８．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．２４（ｄｄ，Ｊ＝１０．５，６．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．９５−２．７５（ｍ，５Ｈ）、２．７３−２．６２（ｍ，３Ｈ）、２．５１（ｄｄ，Ｊ＝１３．６，２．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．４２（ｄｄｄ，Ｊ＝１８．０，９．０，３．５Ｈｚ，１Ｈ）、２．１９−２．０４（ｍ，２Ｈ）、１．８３（ｓ，９Ｈ）、０．９８（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）、０．９２（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ3）δ１７５．７（Ｃ）、１７１．８（Ｃ）、１７１．７（Ｃ）、１７０．９（Ｃ）、１６９．９（Ｃ）、１６８．２（Ｃ）、１３０．２（ＣＨ）、１２９．６（ＣＨ）、８２．６（Ｃ）、６９．４（ＣＨ）、６５．４（ＣＨ）、５７．６（ＣＨ）、５３．８（ＣＨ）、４２．４（ＣＨ2）、４０．０（２  ｘ  ＣＨ2）、３８．６（ＣＨ2）、３４．１（ＣＨ2）、３３．１（ＣＨ2）、２８．２（ＣＨ3）、２７．４（ＣＨ）、２４．９（ＣＨ2）、２０．６（ＣＨ3）、２０．２（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ+）ｍ／ｚ  ６２３（９０％，［Ｍ＋Ｎａ］+）、６０１（１００％，［Ｍ＋Ｈ］+）。
【０２３６】
３−（（Ｅ）−（１Ｓ，７Ｒ，１０Ｓ，２１Ｒ）−７−イソプロピル−３，６，９，１９，２２−ペンタオキソ−２−オキサ−１２，１３−ジチア−５，８，２０，２３−テトラアザ−ビシクロ［８．７．６］トリコス−１６−エン−２１−イル）−プロピオン酸（１０Ｆ）の調製。
【０２３７】
ＣＨ2Ｃｌ2（１．５ｍＬ）中の９Ｆ（１２ｍｇ、０．０２ｍｍｏｌ）およびＥｔ3ＳｉＨ（１０μＬ、０．０６ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＦＡ（１５０μＬ、２．０ｍｍｏｌ）を添加した。６時間後、溶媒を除去し、残留物をシリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（１０％  メタノール／ＣＨ2Ｃｌ2、その後、＋１％  ＡｃＯＨ）によって精製して、１０Ｆ（５．６ｍｇ、０．０１ｍｍｏｌ、５５％）を白色の固体として得た：［α］25D−６３．４（ｃ  ０．２５、ＭｅＯＨ）；1Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ７．５（１  ｘ  ＮＨが観察された，ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．８１（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１６．８，６．８，４．８，２．５Ｈｚ，１Ｈ）、５．７５−５．６７（ｍ，２Ｈ）、４．６２（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．０，８．０，５．５Ｈｚ，１Ｈ）、４．２８（ｄ，Ｊ＝１７．５Ｈｚ，１Ｈ）、４．１５（ｄｄ，Ｊ＝９．０，６．０Ｈｚ，１Ｈ）、３．７８（ｄ，Ｊ＝１７．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．４３（ｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，１Ｈ）、３．２０−３．１０（ｍ，２Ｈ）、３．０７−３．００（ｍ，２Ｈ）、２．９４−２．８１（ｍ，１Ｈ）、２．８２（ｄｄ，Ｊ＝１３．２，２．２Ｈｚ，１Ｈ）、２．７３−２．５０（ｍ，４Ｈ）、２．３８（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，１Ｈ）、２．２３−１．９９（ｍ，２Ｈ）、０．９８（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）、０．９２（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ）；13Ｃ−ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤ3ＯＤ）δ１７６．５（Ｃ）、１７４．０（Ｃ）、１７３．５（Ｃ）、１７３．０（Ｃ）、１７１．６（Ｃ）、１６９．５（Ｃ）、１３１．４（ＣＨ）、１３１．３（ＣＨ）、７２．１（ＣＨ）、６６．０（ＣＨ）、５８．５（ＣＨ）、５７．０（ＣＨ）、４２．７（ＣＨ2）、３９．７（ＣＨ2）、３９．４（ＣＨ2）、３６．８（ＣＨ2）、３１．８（ＣＨ2）、３１．６（ＣＨ2）、２８．２（ＣＨ3）、２６．６（ＣＨ2）、２０．６（ＣＨ3）、２０．５（ＣＨ3）；ＬＲＭＳ（ＥＳ-）ｍ／ｚ  ５４３（１００％，［Ｍ−Ｈ］-）。
【０２３８】
［結果］
［活性アッセイ１］
本発明者らは、ＭＣＦ７ヒト乳癌細胞および正常ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ）の増殖を阻害するスベロイルアニリドヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）、既知ＨＤＡＣ阻害剤、および化合物００１（７頁の式（２）の化合物）の能力を比較した。
【０２３９】
方法；細胞増殖アッセイは、商標シクワント（ＣｙＱｕａｎｔ）アッセイシステム（米国のモレキュラー・プローブス社（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．））をその製造業者の説示に従って使用して行った。このシステムは、細胞の核酸に結合すると蛍光が増強されて、細胞数５０から２５０，０００の間の線形検出範囲での細胞数の決定を可能にする、有標緑色蛍光色素を利用する。エストロゲン受容体陽性ＭＣＦ７乳癌細胞（ＥＣＡＡＣ）およびＮＨＤＦ細胞（英国のキャンブレックス（Ｃａｍｂｒｅｘ））を９６ウエルプレートに、１ウエル当たり１００μＬの細胞培養基中に細胞数１０００の密度で、プレーティングした。化合物は、最低５時間後、細胞培養基中の系列希釈物で、２×最終濃度での１００μＬ量で添加した。６日後、そのプレートを吸い取り紙の上で逆さにすることにより細胞培養基を除去し、細胞を２００μＬのＰＢＳで１回、穏やかに洗浄した。直ちにプレートを−８０℃で最低１時間冷凍し、その後、解凍した。上記製造業者の説示に従って作った色素を補足した２００μＬの１ｘ  シクワント細胞溶解緩衝液を各ウエルに直ちに添加し、室温で３〜５分間インキュベートした。その後、サイトフルーアＩＩ蛍光マルチウエルプレートリーダー（Ｃｙｔｏｆｌｕｏｒ  ＩＩ  Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ  Ｍｕｌｔｉｗｅｌｌ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ）およびサイトフルーアＩＩソフトウェアと励起用に４８０ｎｍおよび最大発光用に５２０ｎｍのフィルターを用いて、各ウエルについての蛍光を測定した。細胞増殖は、二重反復試験サンプルの平均値について、未処理細胞サンプル（＝１００％）を基準にしたパーセンテージとして判定した。増殖阻害曲線を用いて、ＩＣ50値を導出した。
【０２４０】
図１は、ＭＣＦ７および正常ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ）に対する化合物００１およびＳＡＨＡの効果を示すものである。ＭＣＦ７およびＮＨＤＦを指示濃度の化合物と共にインキュベートした。６日後、未処理細胞（＝１００％）を基準にした細胞増殖を、商標シクワント（ＣｙＱｕａｎｔ）アッセイを用いて判定した。溶媒対照としての等量のＤＭＳＯは、細胞増殖に対してまったく効果がなかった（示されていない）。データは、二重反復判定についての平均±標準偏差であり、複数の実験の代表値である。
【０２４１】
結果；細胞増殖は、これらの化合物により阻害された。重要なこととして、阻害剤間および細胞タイプ間に差があった。増殖阻害についての平均ＩＣ50（±ＳＤ）を複数の実験から計算した。それらを下の表１に示す。
【０２４２】
【表１】
0005558710.tif 000027
【０２４３】
化合物００１は、癌細胞増殖の強力な阻害剤であった。重要なこととして、化合物００１は、現在ＩＩ相試験中のＳＡＨＡ（ｐ＝０．００３、スチューデントｔ検定）より有意に強力であった。両方の化合物が、ＮＨＤＦに対してＭＣＦ７での方が比較的有効であった。これは、悪性細胞に対する選択性の証拠となる。ＨＵＴ７８  Ｔ細胞白血病細胞を使用して行った（上で説明したように行った）同様の試験は、化合物００１がこれらの細胞の増殖も阻害することを明示した（データは示さない）。
【０２４４】
［活性アッセイ２］
本発明者らは、ＨＤＡＣ媒介抑制に応答することが以前に証明されているＳＶ４０プロモーターを化合物００１（７頁の式（２）の化合物）が活性化するかどうかを調査した。
【０２４５】
方法．本発明者らは、ルシフェラーゼ遺伝子の上流にクローニングされたＳＶ４０即時初期プロモーターが組み込まれたレポーター構築物を含有するＭＣＦ７細胞由来の安定なクローンを作製した。トランスファスト（Ｔｒａｎｓｆａｓｔ）トランスフェクション試薬を使用して、ｐＧＬ２−Ｂａｓｉｃ（ＳＶ４０／ルシフェラーゼレポーター）（英国のプロメガ（Ｐｒｏｍｅｇａ））およびｐｃＤＮＡ３（ネオマイシン耐性遺伝子を発現するもの）をＭＣＦ７細胞にトランスフェクトした。２４時間後、トリプシン処理により細胞を回収し、低密度でプレーティングした。翌日、Ｇ４１８をその増殖培地に添加した。〜２１日後、個々の薬物耐性コロニーを単離し、培養した。本発明者らは、さらなる研究のためにＨＤＡＣ阻害剤の添加後に高いルシフェラーゼ活性誘発レベルを明示したクローン（２．１．１細胞）を選択した。化合物００１の効果を検査するために、２．１．１細胞を様々な濃度の化合物００１または対照として等量のＤＭＳＯと共にインキュベートした。翌日、細胞を回収し、プロメガ（Ｐｒｏｍｅｇａ）ルシフェラーゼアッセイシステムおよびトップカウント（パーキン・エルマー）（ＴｏｐＣｏｕｎｔ（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ））を使用してルシフェラーゼ活性を検出した。
【０２４６】
図２は、ＨＤＡＣ応答性ＳＶ４０プロモーターの活性に対する化合物００１の効果を示すものである。ＳＶ４０プロモーターが安定的に組み込まれたルシフェラーゼレポータープラスミドを含有するＭＣＦ７由来細胞を、指示濃度の化合物００１、または溶媒対照としてのＤＭＳＯで処理した。ルシフェラーゼ活性は、約１６時間後に判定した。データは、二重反復で行った単一の実験から導出したものであり、複数の実験の代表である。
【０２４７】
結果；この実験は、化合物００１が、ＳＶ４０即時初期プロモーターのＨＤＡＣ媒介抑制を効果的に逆行させることを示す。
【０２４８】
［活性アッセイ３］
本発明者らは、ＭＣＦ７細胞における細胞周期分布および生存に対する化合物００１（７頁の式（２）の化合物）およびＳＡＨＡの効果を調査した。
【０２４９】
方法；図の説明文に詳述されているように、ＭＣＦ７細胞を様々な時間、指示濃度の化合物と共にインキュベートするか、対照として未処理で放置した。細胞を回収し、以前に説明されている（Ｐｕｒｏｈｉｔら，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｃａ  ８５，５８４−９  ２０００）ようなヨウ化プロピジウム染色法およびフローサイトメトリーを用いて細胞周期の異なる期における細胞の比率を判定した。全細胞を基準にして、＜Ｇ０／Ｇ１含量（プレＧ０）を有する細胞の比率を、先ず計算した。細胞周期の異なる期（Ｇ０／Ｇ１、Ｓ、Ｇ２／Ｍ）にある細胞の比率は、その細胞周期内の全細胞（すなわち、＜Ｇ０／Ｇ１含量を有する細胞を引いた全細胞）に対する比率として計算した。
【０２５０】
図３は、ＭＣＦ７細胞における細胞周期分布および生存に対する化合物００１およびＳＡＨＡの効果を示すものである。ＭＣＦ７細胞を指示濃度（各々、増殖阻害についてのＩＣ50値の１０倍までに相当する）の化合物、または溶媒対照としてのＤＭＳＯと共に、２４、４８または７２時間インキュベートした。細胞周期の異なる期にある細胞の比率は、フローサイトメトリーによって判定した。データは、１に正規化される未処理細胞にを基準にして、２つの別の実験から導出された平均値±ＳＤを示すものである。
【０２５１】
結果；この図は、等価有効濃度で、化合物００１およびＳＡＨＡが、ＭＣＦ７細胞において主Ｇ２／Ｍ期停止および細胞死を誘導することを示している。
【０２５２】
［活性アッセイ４］
本発明者らは、ＭＣＦ７乳癌細胞および心筋細胞におけるヒストンアセチル化に対する化合物００１（７頁の式（２）の化合物）の効果を調査した。
【０２５３】
方法；心筋細胞を、Ｃｈｅｍｂｉｏｃｈｅｍ．２００５  Ｊａｎ；６（１）：１６２−７０に記載されているように準備し、指示濃度の化合物００１と共に２４時間インキュベートした。ＭＣＦ７細胞を指示濃度の化合物００１と共に２４時間インキュベートした。アップステート・バイオテック（Ｕｐｓｔａｔｅ  Ｂｉｏｔｅｃｈ）からの抗体を使用し、以前に説明されている（Ｂｒｉｍｍｅｌｌら．Ｂｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．１９９９  Ｎｏｖ；８１（６）：１０４２−５１）ように、ウエスタンブロッティングによって、全ヒストンＨ４アセチル化、またはヒストンＨ４−Ｋ８もしくはヒストンＨ３−Ｋ９の特異的アセチル化の発現を分析した。
【０２５４】
図４は、ヒストンアセチル化に対する化合物００１の効果を示すものである。（Ａ）ＭＣＦ７細胞を化合物００１と共に２４時間インキュベートした。ヒストンＨ４アセチル化を免疫ブロッティングによって測定した。（Ｂ）心筋細胞を指示化合物００１と共に２４時間インキュベートした。ヒストンＨ４アセチル化を免疫ブロッティングによって測定した。（Ｃ）ＭＣＦ７細胞を化合物００１と共に２４時間インキュベートした。ヒストンＨ３−Ｋ９およびヒストンＨ４−Ｋ８アセチル化を免疫ブロッティングによって測定した。
【０２５５】
結果；この実験は、化合物００１が、アセチル化ヒストンＨ４の蓄積ならびに特異的ヒストンＨ３−Ｋ９およびヒストンＨ４−Ｋ８アセチル化を誘導することを示している。本発明者らは、化合物００１が、原発性慢性リンパ球性白血病細胞においてアセチル化ヒストンＨ４のレベルを増加させることも実証した（データは示さない）。
【０２５６】
［活性アッセイ５］
本発明者らは、インビトロＨＤＡＣ活性を阻害する化合物の能力を分析した。インビトロＨＤＡＣアッセイは、ＨＤＡＣ蛍光活性アッセイキット（英国のバイオモール（Ｂｉｏｍｏｌ））をその製造業者の説示に従って使用して行った。化合物は、分析前に還元した。一晩、室温で、光から保護して、１ｍＭの化合物をＤＭＳＯ中３０ｍＭのＤＴＴで還元した。その後、９６ウエルプレートでの反応を準備した。各反応について、１０μＬの化合物（アッセイ用緩衝液中の必要濃度の５倍）を１５μＬの希釈Ｈｅｌａ核抽出物（アッセイ用緩衝液中３０倍）と混合した。各化合物についての系列希釈物を準備した。Ｈｅｌａ抽出物のみを含有する反応物およびアッセイ用緩衝液のみを含む反応物も準備した。２５μＬの希釈した商標フルーア・ド・リス（Ｆｌｕｏｒ  ｄｅ  Ｌｙｓ）基質（アッセイ用緩衝液中１００倍）を各反応物に添加し、その後、それらを３７℃で１時間インキュベートした。５０μＬの商標フルーア・ド・リス（Ｆｌｕｏｒ  ｄｅ  Ｌｙｓ）顕色剤（アッセイ用緩衝液中２０倍の希釈剤、加えて、１００倍希釈したＴＳＡ）の添加により反応を停止させた。その後、反応物を室温で１０分間インキュベートし、その後、サイトフルーアＩＩ蛍光マルチウエルプレートリーダーおよびサイトフルーアＩＩソフトウェアと励起用に３６０ｎＭおよび発光用に４６０ｎＭに設定したフィルターを用いて蛍光を測定した。インビトロＨＤＡＣ活性の阻害は、二重反復試験サンプルの平均値について、Ｈｅｌａ抽出物のみの反応物を基準にしたパーセンテージとして判定した。ＩＣ50値は、グラフパッド・プリズム（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ）ソフトウェアを使用して計算した。
【０２５７】
【表２】
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【０２５８】
［活性アッセイ６］
本発明者らは、ヒト癌細胞のインビトロ増殖を阻害する化合物の能力を分析した。細胞増殖アッセイは、商標シクワント（ＣｙＱｕａｎｔ）アッセイシステム（米国のモレキュラー・プローブス社（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．））をその製造業者の説示に従って用いて行った。ＭＣＦ７乳癌細胞、Ａ２７８０卵巣癌細胞ならびにＰＣ３およびＬＮＣＡＰ前立腺癌細胞を、９６ウエルプレートに、ウエル当たり１００μＬの細胞培養基中、ＭＣＦ７細胞については細胞数１０００、またはＡ２７８０／ＰＣ３／ＬＮＣＡＰ細胞については細胞数５０００の密度でプレーティングした。化合物は、最低５時間後、細胞培養基中の系列希釈で、２×最終濃度での１００μＬ量で添加した。４日後（Ａ２７８０、ＰＣ３もしくはＬＮＣＡＰ細胞）または６日後（ＭＣＦ７細胞）、プレートを吸い取り紙の上で逆さにすることにより細胞培養基を除去し、細胞を２００μＬのＰＢＳで１回、穏やかに洗浄した。直ちにプレートを−８０℃で最低１時間冷凍し、その後、解凍した。製造業者の説示に従って作った色素を補足した２００μＬの１ｘ  シクワント細胞溶解緩衝液を各ウエルに直ちに添加し、室温で３〜５分間インキュベートした。その後、サイトフルーアＩＩ蛍光マルチウエルプレートリーダーおよびサイトフルーアＩＩソフトウェアと励起用に４８０ｎｍおよび最大発光用に５２０ｎｍのフィルターを用いて、各ウエルについての蛍光を測定した。細胞増殖は、二重反復試験サンプルの平均値について、未処理細胞サンプル（＝１００％）を基準にしたパーセンテージとして判定した。増殖阻害曲線を用いて、ＩＣ50値を導出した。
【０２５９】
【表３】
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【０２６０】
［活性アッセイ７］
本発明者らは、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）からのＴＮＦαの生産を阻害する化合物の能力を分析した。ＴＮＦ−αイムノアッセイは、登録商標クアンティキン（Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ）ヒトＴＮＦ−αアッセイキット（英国、アビンドン（Ａｂｉｎｇｄｏｎ，ＵＫ）のアール・アンド・ディー・システムズ（Ｒ＆Ｄ  ｓｙｓｔｅｍｓ））をその製造業者の説示に従って使用して行った。商標フィコール・パクー（Ｆｉｃｏｌ  ｐａｑｕｅ）プラス（英国、アマシャム（Ａｍｅｒｓｈａｍ，ＵＫ）のジーイー・ヘルスケア（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用してヒト全血を分離し、ＰＢＭＣを、２４ウエルプレートに、ウエル当たり５００μＬの細胞培養基中２．５×１０6の密度でプレーティングした。１時間後、化合物を、６×最終濃度での１００μＬ量で添加した。５時間後、リポ多糖類（ＬＳＰ；英国、プール（Ｐｏｏｌｅ，ＵＫ）のシグマ（Ｓｉｇｍａ））を６０×最終濃度の１０μＬ量で添加し、プレートを混合し、３７℃、５％ＣＯ2で一晩、放置した。プレートを遠心分離し、細胞上清を新たなプレートに移した。登録商標クアンティキン（Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ）アッセイ試薬および標準物質をその製造業者の説示に従って調製した。登録商標クアンティキン（Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ）アッセイプレートは、５０μＬのアッセイ希釈液ＲＤ１Ｆを各ウエルに添加することにより準備した。この後、２００μＬの標準物質または１００μＬの校正物質希釈液、加えて、１００μＬの細胞上清を添加し、これを２時間、室温（ＲＴ）でインキュベートした。洗浄緩衝液を使用してプレートを４回洗浄した。最終洗浄後、プレートを清浄なペーパータオルで軽くたたいてすべての残留緩衝液を除去した。２００μＬのＴＮＦ−αコンジュゲートを各ウエルに添加し、１時間、室温でインキュベートした。その後、プレートを前のとおり洗浄した。光から保護しながら等量の着色試薬ＡおよびＢを添加することにより必要量の基質溶液を調製し、光から保護して、この混合物の２００μＬを各ウエルに添加し、２０分間、室温でインキュベートした。５０ｕＬの停止溶液を基質溶液と同じオーダーで各ウエルに添加し、バイオラド（Ｂｉｏｒａｄ）６８０・９６ウエルプレートリーダー（英国、ヘメルヘムステッド（Ｈｅｍｅｌ  Ｈｅｍｐｓｔｅａｄ，ＵＫ）のバイオラド（Ｂｉｏ−Ｒａｄ））を用い、５７０ｎｍのλ補正で、４５０ｎｍで、プレートを読み取った。ＴＮＦ−αレベルは、ｎｍでの吸収を用い、二重反復試験サンプルの平均値について判定し、校正ゼロ値をすべての結果から減算して、このアッセイにおける校正物質希釈液の添加を補正した。
【０２６１】
【表４】
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【０２６２】
［活性アッセイ８］
本発明者らは、マウスにおいて炎症を阻害する化合物９Ａ（７頁の式（２）の化合物）の能力を分析した。毛を刈った腹部の皮膚に５％（ｗ／ｖ）オキサゾロンを塗布することにより、Ｂａｌｂ／ｃマウスを感作した。７日後、左耳に３％（ｗ／ｖ）オキサゾロンおよび右耳にアセトンを局所塗布することによりマウスの炎症を惹起（ｃｈａｌｌｅｎｇｅ）した。３０分後、アセトンに溶解した試験化合物を耳（背側および腹側の面）に塗布した。２４時間後、マウスを安楽死させ、耳の重量を測定した。阻害％は、次の式（Ｗは、平均重量である）。
【０２６３】
阻害％＝１−（（Ｗ刺激薬+試験材料−Ｗヒ゛ヒクル  ｘ  １００）／（刺激薬ノミ−Ｗヒ゛ヒクル））
を用いて決定した。
【０２６４】
【表５】
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【図面の簡単な説明】
【０２６５】
【図１】ＭＣＦ７および正常ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＨＤＦ）に対する化合物００１およびＳＡＨＡの効果を示す。
【図２】ＨＤＡＣ応答性ＳＶ４０プロモーターの活性に対する化合物００１の効果を示す。
【図３】ＭＣＦ７細胞における細胞周期分布および生存に対する化合物００１およびＳＡＨＡの効果示す。
【図４】ヒストンアセチル化に対する化合物００１の効果を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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