(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
【化３４】
0005643103.tif 000065
から選択される、化合物。
【請求項２】
ｍＰＥＧ３−Ｎ−カルバマゼピン、ｍＰＥＧ５−Ｎ−カルバマゼピン、ｍＰＥＧ３−Ｎ−アミトリプチリン、ｍＰＥＧ５−Ｎ−アミトリプチリン、またはｍＰＥＧ６−Ｎ−アミトリプチリンと、任意に、薬学的に許容される賦形剤とを含む、組成物。
【請求項３】
ｍＰＥＧ３−Ｎ−カルバマゼピン、ｍＰＥＧ５−Ｎ−カルバマゼピン、ｍＰＥＧ３−Ｎ−アミトリプチリン、ｍＰＥＧ５−Ｎ−アミトリプチリン、またはｍＰＥＧ６−Ｎ−アミトリプチリンを含む、薬学的組成物。
【請求項４】
錠剤、カプレット、カプセル、ジェルキャップ、トローチ、分散液、懸濁液、溶液、エリキシル剤、シロップ、薬用キャンディ、経皮パッチ、スプレー、坐剤または粉末として投与されるものである、請求項３に記載の薬学的組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
本出願は、米国特許法第１１９条（ｅ）に基づいて、２００７年１１月２８日に出願された米国仮特許出願第６１／００４，４８３号ならびに、２００８年９月１０日に出願された米国仮特許出願第６１／１９１，６３５号（ともにその内容全体を本明細書に援用する）の優先権の利益を主張するものである。
【０００２】
本発明は、（特に）化学修飾のない三環物質と比して特定の利点を有する、化学修飾された三環物質を含む。本明細書に記載の化学修飾された三環物質は、（特に）創薬、薬物療法、生理学、有機化学およびポリマー化学分野の用途に関するおよび／またはこのような用途を有する。
【背景技術】
【０００３】
気分の持続的な落ち込み、日常活動への興味の喪失、快感を得る能力の低下を特徴とする一般的な精神疾患のひとつに、臨床的鬱病（大鬱病性障害または単極性鬱病とも呼ばれる）がある。
【０００４】
「鬱」という用語は一般に、「気が塞いでいる」ときに一時的な気分の落ち込みを表すのに用いられているが、臨床的鬱病は心身や思考と関係があり、単純に本人の意志の力や本人が望んで取り除くことはできない深刻な疾患である。これは、個人の仕事や家族、学校生活、睡眠、食習慣、全体的な健康、人生を楽しむ力にも影響する、心身に障害を引き起こす疾患であることも多い。臨床的鬱病の過程は多岐にわたる。鬱が一生に一度の出来事の場合もあれば何度も再発する場合もあり、徐々に現れたり突然現れたりし、数ヵ月程度でおさまることもあれば一生の機能障害になることもある。鬱を抱えた状態は自殺の主要な危険因子のひとつである。また、鬱の人々は他の原因での死亡率も高い。臨床的鬱病は通常、心理療法、抗鬱薬または両者の組み合わせで治療される。
【０００５】
末梢神経の疾患のひとつに神経障害がある。神経損傷の４つの主な形態として、多発性神経障害、自律神経障害、単神経障害、多発単神経炎があげられる。より一層一般的な形態が、主に下肢に影響を与える末梢多発性神経障害である。また、腸神経障害などのそれほど一般的ではない他の神経障害もある。
【０００６】
糖尿病（すなわち糖尿病性神経障害）を除いて、神経障害の一般的な原因は、帯状疱疹感染、ＨＩＶ−ＡＩＤＳ、毒素、アルコール依存症、慢性的な外傷（反復性運動障害）または急性外傷（外科手術を含む）、神経毒性、セリアック病などの自己免疫症状である。神経障害痛は、末梢神経における癌の直接的な結果（腫瘍による圧迫など）、多くの化学療法薬の副作用そして電気的損傷の結果として、癌においては一般的である。多くの場合、神経障害は「特発性」であるが、これは原因が見当たらないことを意味する。
【０００７】
神経障害痛は通常、定常的な灼熱感および／または「ピリピリ感」および／または「電気ショック」のような感覚および／またはくすぐったさとして知覚される。違いは、「通常の」痛みが痛みの神経だけを刺激するのに対し、神経障害は同じ部分にある痛みの感覚神経と痛み以外の（さわり心地、温かさ、冷たさ）感覚神経の両方を惹起して、脊髄や脳が通常は受け取ることを想定していないシグナルを生成することが多い点にある。
【０００８】
神経障害痛は治療が困難な場合がある。無作為対照化試験の系統的レビューで、最適な治療薬は三環系薬、抗痙攣薬、およびカプサイシンであることが分かった。三環系抗鬱薬
は、主に臨床的鬱病や神経障害痛、夜尿症、およびＡＤＨＤの治療に適応される多数の用途に用いられているが、頭痛（偏頭痛を含む）、不安、不眠症、禁煙、神経性過食症、過敏性大腸症候群、発作性睡眠、病的泣き笑い、持続性吃逆、間質性膀胱炎、およびシガテラ中毒に、さらには統合失調症における補助剤として使用して効果が得られた事例もある。
【０００９】
通常、三環系抗鬱薬は、神経伝達物質であるノルエピネフリン、ドパミンまたはセロトニンが神経細胞に再取り込みされるのを阻害して作用すると考えられている。また、三環系薬は、ムスカリニックおよびヒスタミンＨ１〜Ｈ４受容体に対するさまざまな度合いの親和性を持つこともある。一般にノルエピネフリンとドパミンが刺激神経伝達物質であるとみなされるが、三環系抗鬱薬は、Ｈ１ヒスタミンに対する作用も高めるため、大半は鎮静作用も持ち、抗ヒスタミン化合物としても有用なことがある。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
抗鬱薬および抗痙攣薬は、悪夢、眠気、かすみ目、胃腸の動きと分泌の低下、排尿困難、高熱、および口渇症などの中枢神経系に対する副作用の可能性があるため、その用途は限られている。結果として、その用途に関連したこれらの副作用および／または他の副作用を低減できるのであれば、三環物質での薬物療法が改善されるであろう。よって、新規な三環系化合物を開発することに対するいまだに満たされていない大きな需要がある。
【００１１】
本発明は、従来技術におけるこれらの需要や他の需要に対処しようとするものである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物が得られる。
【００１３】
本発明の例示としての化合物は、以下の構造を有するものを含む。
【化１】
0005643103.tif 000002
式中、
Ｄは、ＣまたはＮであり、
Ｙは、未置換であるか、あるいは置換されていてもよい、−ＣＨ２−、−ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−Ｓ−、ＣＨ２−Ｏ−、ＣＨ２−ＮＨ−、−Ｓ−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２、−ＮＨ−ＣＨ２、−ＨＮ−、−Ｏ−、−Ｎ＝Ｃ−、−Ｃ＝Ｎ−、および−Ｓ−からなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである。
【００１４】
「三環系残基」は、（直接または間接的に）１つ以上の水溶性非ペプチドオリゴマーを結合するよう機能する１つ以上の結合が存在することで変化する三環系化合物の構造を有する化合物である。例示としての三環物質は、本明細書では式Ｉとして定義される構造のうちの少なくとも１つに包含される構造を有する。
【化２】
0005643103.tif 000003
式中、
ＤとＲ１とが一緒になって、−ＨＣ−Ｒ１、−Ｃ＝Ｒ１、および−ＨＮ−Ｒ１からなる群から選択され、
Ｒ１は、未置換であるか、あるいは置換されていてもよい、アルキル、アミノ、アシルアミノ、アシル、アミド、アリールオキシ、アルキルアミノ、約２個以上４個以下の炭素原子を有するジアルキルアミノ、ピペリジノ、ピロリジノ、Ｎ−（低級アルキル）−２−ピペリジル、モルホリノ、１−ピペリジニル、４−（低級アルキル）−１−ピペリジニル、４−（ヒドロキシル−低級アルキル）−１−ピペリジニル、および４−（メトキシ−低級アルキル）−１−ピペリジニルからなる群から選択され、
Ｙは、未置換であるか、あるいは置換されていてもよい、−ＣＨ２−、−ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−Ｓ−、ＣＨ２−Ｏ−、ＣＨ２−ＮＨ−、−Ｓ−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２、−ＮＨ−ＣＨ２、−ＨＮ−、−Ｏ−、−Ｎ＝Ｃ−、−Ｃ＝Ｎ−、および−Ｓ−からなる群から選択され、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９のうちの１つ以上が各々独立に、何もなし、未置換であるか、あるいは置換されていてもよい、水素、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、ケト、チオケト、アミノ、アシルアミノ、アシル、アミド、アリールオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ハロアルキル、アルコキシ、ジオキソ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルからなる群から選択される。
【００１５】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物と、任意に、薬学的に許容される賦形剤とを含む、組成物が得られる。
【００１６】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物を含み、当該化合物が剤形の形で存在する剤形が得られる。
【００１７】
本発明の１つ以上の実施形態では、水溶性非ペプチドオリゴマーを三環物質に共有結合的に結合することを含む、方法が得られる。
【００１８】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物を投与することを含む、方法が得られる。
【００１９】
本発明はまた、以下の項目を提供する。
（項目１）
安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系化合物残基を含む、化合物。
（項目２）
以下の構造
【化３４】
0005643103.tif 000004
を有し、
式中、
Ｄは、ＣまたはＮであり、
Ｙは、未置換であるか、あるいは置換されていてもよい、−ＣＨ２−、−ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−Ｓ−、ＣＨ２−Ｏ−、ＣＨ２−ＮＨ−、−Ｓ−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２、−ＮＨ−ＣＨ２、−ＨＮ−、−Ｏ−、−Ｎ＝Ｃ−、−Ｃ＝Ｎ−、および−Ｓ−からなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである、項目１に記載の化合物。
（項目３）
上記三環系化合物残基が、式
【化３５】
0005643103.tif 000005
で表される三環系化合物の残基であり、
式中、
ＤとＲ１とが一緒になって、−ＨＣ−Ｒ１、−Ｃ＝Ｒ１、および−ＨＮ−Ｒ１からなる群から選択され、
Ｒ１は、未置換であるか、あるいは置換されていてもよい、アルキル、アミノ、アシルアミノ、アシル、アミド、アリールオキシ、アルキルアミノ、約２個以上４個以下の炭素原子を有するジアルキルアミノ、ピペリジノ、ピロリジノ、Ｎ−（低級アルキル）−２−ピペリジル、モルホリノ、１−ピペリジニル、４−（低級アルキル）−１−ピペリジニル、４−（ヒドロキシル−低級アルキル）−１−ピペリジニル、および４−（メトキシ−低級アルキル）−１−ピペリジニルからなる群から選択され、
Ｙは、未置換であるか、あるいは置換されていてもよい、−ＣＨ２−、−ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−Ｓ−、ＣＨ２−Ｏ−、ＣＨ２−ＮＨ−、−Ｓ−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２、−ＮＨ−ＣＨ２、−ＨＮ−、−Ｏ−、−Ｎ＝Ｃ−、−Ｃ＝Ｎ−、および−Ｓ−からなる群から選択され、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９のうちの１つ以上が各々独立に、何もなし、未置換であるか、あるいは置換されていてもよい、水素、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、ケト、チオケト、アミノ、アシルアミノ、アシル、アミド、アリールオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ハロアルキル、アルコキシ、ジオキソ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルからなる群から選択される、項目２に記載の化合物。
（項目４）
上記三環系化合物残基が、式
【化３６】
0005643103.tif 000006
で表される三環系化合物の残基であり、
式中、
Ａは、ラジカル−（ＣＨ２）ｍ−と−ＣＨ＝ＣＨ−から選択されるブリッジであり、
ｍは、１以上３以下の整数であり、
ＸおよびＹは、水素とハロ（フルオロ、クロロ、およびブロモから選択）からなる群から選択され、
ＲおよびＲ’は、水素と１個以上５個以下の炭素原子を有する低級アルキルからなる群から選択され、
ｎは、１以上１２以下の整数である、項目３に記載の化合物。
（項目５）
上記三環系化合物残基が、式（３’−ジメチルアミノプロピリデン）−ジベンゾ（ａ，ｄ）−シクロヘプタ−１，４−ジエンＮ−オキシドで表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目６）
上記三環系化合物残基が、２−クロロ−１１−（１−ピペリジニル）ジベンズ（ｂ，ｆ）［１，４］オキサ−アゼピン、２−クロロ−１１−（１−ピペリジニル）ジベンズ（ｂ，ｆ）［１，４］オキサ−アゼピン塩酸塩、２−クロロ−１１−（１−ピペリジニル）ジベンズ（ｂ，ｆ）［１，４］オキサ−アゼピンフマラート、２−クロロ−１１−（１−ピペリジニル）ジベンズ（ｂ，ｆ）［１，４］オキサ−アゼピンスルフェート、および２−クロロ−１１−（１−ピペリジニル）ジベンズ（ｂ，ｆ）［１，４］オキサ−アゼピンジヘプタノアートからなる群から選択される式で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目７）
上記三環系化合物残基が、式５−（３’−ジメチルアミノ−２’−メチルプロピル）ジベンゾ［ａ，ｄ］［１，４］−シクロヘプタジエンで表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目８）
上記三環系化合物残基が、３−クロロ−５−（γ−ジメチルアミノ−プロピル）−イミノジベンジル、３−クロロ−５−（γ−ジメチルアミノ−プロピル）−イミノジベンジルの薬学的に許容される酸付加塩、および３−クロロ−５−（γ−ジメチルアミノ−プロピル）−イミノジベンジル塩酸塩からなる群から選択される式で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目９）
上記三環系化合物残基が、式
【化３７】
0005643103.tif 000007
で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目１０）
上記三環系化合物残基が、５−（γ−メチルアミノ−プロピル）−イミノジベンジルおよびその無毒の付加塩、Ｎ−（３−メチルアミノプロピル）−イミノジベンジル、およびＮ−（３−メチルアミノプロピル）−イミノジベンジル塩酸塩からなる群から選択される式で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目１１）
上記三環系化合物残基が、式
【化３８】
0005643103.tif 000008
（式中、Ｘは、２個以上３個以下の炭素原子を有するアルキレンであり、Ｙは、２個以上４個以下の炭素原子を有するジアルキルアミノ、ピロリジノ、ピペリジノ、およびモルホリノからなるクラスのメンバーであり、Ｒ１およびＲ２は、同義に、水素、メチル、およびエチルからなるクラスのメンバーを表し、Ｒ３およびＲ４は、同義に、水素、クロロ、メチル、エチル、メトキシ、およびエトキシからなるクラスのメンバーを表す）の１０−（塩基的置換）−１０，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｅ］［１，４］ジアゼピンからなる群から選択される式で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目１２）
上記三環系化合物残基が、式
【化３９】
0005643103.tif 000009
（式中、アルキレンは、２個以上４個以下の炭素を有し、少なくとも２個の炭素が複素環核からＸを分離し、Ｘは、炭素数２〜４個のジアルキルアミノ、ピリリジノ、ピペリジノ、およびモルホリノからなる群から選択され、各Ｙが独立に、水素、クロロ、メチル、メトキシ、およびエトキシからなる群から選択される）で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目１３）
上記三環系化合物残基が、式
【化４０】
0005643103.tif 000010
（式中、Ｒ１は、水素、メチル、およびエチルからなるクラスから選択され、−Ｘ−Ｙは、塩基性ラジカルであり、式中、Ｘは２個以上３個以下の炭素原子を含む炭化水素鎖であり、Ｙは、２個以上４個以下の炭素原子を有するジアルキルアミノ、ピペリジノ、ピロリジノ、Ｎ−（低級アルキル）−２−ピペリジル、モルホリノ、１−ピペリジニル、４−（低級アルキル）−１−ピペリジニル、４−（ヒドロキシル−低級アルキル）−１−ピペリジニル、および４−（メトキシ−低級アルキル）−１−ピペリジニルからなるクラスから選択され、Ｒ２およびＲ３は、水素、クロロ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、トリフルオロメチル、メチルメルカプト、およびエチルメルカプトからなるクラスから選択される）の置換５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｅ］［１，４］ジアゼピン誘導体からなる群から選択される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目１４）
上記三環系化合物残基が、式
【化４１】
0005643103.tif 000011
（式中、Ｒは、ＣＨ３とＣ２Ｈ５からなる群から選択されるメンバーであり、Ｒ１は、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＦ３、およびＣ２Ｈ５からなる群から選択されるメンバーである）で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目１５）
上記三環系化合物残基が、式１１−（３−ジメチルアミノプロピリデン）−６，１１−ジヒドロ−ジベンズ−（ｂ，ｅ）チエピンで表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目１６）
上記三環系化合物残基が、式
【化４２】
0005643103.tif 000012
（式中、Ｒ１は、水素とハロからなる群のメンバーであり、Ａは４−（β−ヒドロキシエチル−ピペリジノ）である）で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目１７）
上記三環系化合物残基が、式
【化４３】
0005643103.tif 000013
（式中、ｎは０〜１の整数であり、Ｒ１は１〜４個の炭素原子を有するアルキルである）で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目１８）
上記三環系化合物残基が、式
【化４４】
0005643103.tif 000014
（式中、ＸおよびＹが各々、水素、１〜４個の炭素原子を有するアルキル、１〜４個の炭素原子を有するアルコキシ、１〜４個の炭素原子を有するチオアルコキシ、クロロ、フルオロ、トリフルオロメチル、１〜４個の炭素原子を有するアシル、および１〜８個の炭素原子を有するジアルキルスルホンアミドからなる群から選択される）で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目１９）
上記三環系化合物残基が、式
【化４５】
0005643103.tif 000015
で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目２０）
上記三環系化合物残基が、式
【化４６】
0005643103.tif 000016
で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目２１）
上記三環系化合物残基が、式
【化４７】
0005643103.tif 000017
（式中、Ｒ２およびＲ３は各々、水素、フルオロ、クロロ、低級アルキル、低級アロキシ、低級アルキルチオ、およびトリフルオロメチルからなる群のメンバーであり、Ｚは、ジ−低級アルキルアミノである）で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目２２）
上記三環系化合物残基が、式
【化４８】
0005643103.tif 000018
で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目２３）
上記三環系化合物残基が、式
【化４９】
0005643103.tif 000019
（式中、アルキレンは炭素原子数２〜３のアルキレン鎖を表し、Ａｍは、低分子ジアルキルアミノラジカル、Ｎ−ピペリジノ−、Ｎ−モルホリノ−、およびＮ−ピロリジノラジカルからなる群から選択されるメンバーを表す）で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目２４）
上記三環系化合物残基が、式
【化５０】
0005643103.tif 000020
（式中、Ｙは、ＣＨ２−ＣＨ２とＣＨ＝ＣＨからなる群から選択され、
Ｒ１は、ＨとＣＨ３からなる群から選択され、
Ｒ２は、最大４個の炭素原子を有するアルキル基を表し
ｎは、１、２、および３からなる群から選択され、
Ｒ３は、フェニルと最大で３つの置換基（Ｆ、Ｃｌ、ＯＨ、ＣＦ３、ならびに最大４個の炭素原子を含むアルキルおよびアルコキシからなる群から選択される）で置換されたフェニルからなる群から選択され、およびフェニル基が、３，４−位に、アルキリデンジオキシ（最大で６個の炭素原子を有する）、シクロアルキリデンジオキシ（最大で６個の炭素原子を有する）、およびエチレンジオキシからなる群から選択される置換基を有し、Ｒ４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＯＣＨ３、ＣＦ３、およびＳＯ２Ｎ（ＣＨ３）２からなる群から選択される）で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目２５）
上記三環系化合物残基が、式
【化５１】
0005643103.tif 000021
（式中、Ｒ１およびＲ２は各々低級アルキル基であり、Ｘは、水素、ハロ、低級アルキル、および低級アルキルオキシからなる群から選択され、Ｙは、水素とハロからなる群から選択され、
【化５２】
0005643103.tif 000022
は、ジ−低級アルキルアミノ、ベンジル−低級アルキルアミノ、および複素環アミンラジカルからなる群から選択され、上記複素環アミンは、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、チアモルホリン、Ｎ１−低級アルキルピペリジン、および上記のＣ−低級アルキル誘導体からなる群から選択される）で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目２６）
上記三環系化合物残基が、式
【化５３】
0005643103.tif 000023
（式中、Ｒ１およびＲ２は各々低級アルキル基であり、Ｘは、水素、ハロ、低級アルキル、および低級アルキルオキシからなる群から選択され、Ｙは、水素とハロからなる群から選択され、
【化５４】
0005643103.tif 000024
は、ジ−低級アルキルアミノ、ベンジル−低級アルキルアミノ、飽和５員環を有する複素環アミンのラジカル、および飽和６員環を有する複素環アミンのラジカルからなる群から選択され、上記複素環アミンは、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、チアモルホリン、Ｎ１−低級アルキルピペリジン、および上記のＣ−低級アルキル誘導体からなる群から選択される）で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目２７）
上記三環系化合物残基が、式
【化５５】
0005643103.tif 000025
（式中、ＲおよびＲ’は、同一または異なっており、各々水素または１〜５個の炭素原子を有するアルキルを表し、Ｒ１は、水素、炭素原子数１〜５個のアルキルまたはベンジルである）で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目２８）
上記三環系化合物残基が、式
【化５６】
0005643103.tif 000026
（式中、Ｒは、水素、低級アルキル、フェニル、およびベンジルからなる群から選択される）で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目２９）
上記三環系化合物残基が、式
【化５７】
0005643103.tif 000027
（式中、ＸおよびＹが各々、水素とハロからなる群から選択されるメンバーを表す）で表される三環系化合物の残基である、項目３に記載の化合物。
（項目３０）
上記三環系化合物残基が、アミネプチン、アミトリプチリン、アミトリプチリノキシド、アモキサピン、ブトリプチリン、クロミプリミン、デメキシプチリン、デシプラミン、ジベンゼピン、ジメタクリン、ドチエピン、ドキセピン、フルアシジン、イミプラミン、イミプラミンＮ−オキシド、ロフェプラミン、メリトラセン、メタプラミン、ノルトリプチリン、オピプラモール、プロピゼピン、プロトリプチリン、キヌプラミン、チアネプチン、トリミプラミン、およびカルバマゼピンからなる群から選択される三環系化合物の残基である、項目１に記載の化合物。
（項目３１）
上記水溶性非ペプチドオリゴマーがポリ（アルキレンオキシド）である、項目１〜３０のいずれか一項に記載の化合物。
（項目３２）
上記ポリ（アルキレンオキシド）がポリ（エチレンオキシド）である、項目３１に記載の化合物。
（項目３３）
上記水溶性非ペプチドオリゴマーが１〜３０のモノマーで構成される、項目１〜３２のいずれか一項に記載の化合物。
（項目３４）
上記水溶性非ペプチドオリゴマーが１〜１０のモノマーで構成される、項目３３に記載の化合物。
（項目３５）
上記ポリ（アルキレンオキシド）がアルコキシまたはヒドロキシエンドキャッピング部分を含む、項目３１に記載の化合物。
（項目３６）
単一の水溶性非ペプチドオリゴマーが上記三環系化合物残基に結合されている、項目１〜３５のいずれか一項に記載の化合物。
（項目３７）
２つ以上の水溶性非ペプチドオリゴマーが上記三環系化合物残基に結合されている、項目１〜３６のいずれか一項に記載の化合物。
（項目３８）
上記三環系化合物残基が、安定した連結によって共有結合的に結合されている、項目１〜３７のいずれか一項に記載の化合物。
（項目３９）
上記三環系化合物残基が、分解可能な連結によって共有結合的に結合されている、項目１〜３８のいずれか一項に記載の化合物。
（項目４０）
上記連結がエーテル連結である、項目１〜３９のいずれか一項に記載の化合物。
（項目４１）
上記連結がエステル連結である、項目１〜４０のいずれか一項に記載の化合物。
（項目４２）
安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系化合物残基を含む化合物と、任意に、薬学的に許容される賦形剤とを含む、組成物。
（項目４３）
安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系化合物残基を含む化合物（ｃｏｍｐｏｕｎｄ）を含む化合物（ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｔｔｅｒ）であって、上記化合物（ｃｏｍｐｏｕｎｄ）が剤形で存在する、化合物。
（項目４４）
水溶性非ペプチドオリゴマーを三環系化合物に共有結合的に結合させることを含む、方法。
（項目４５）
安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系化合物残基を含む化合物を、これを必要とする被検体に投与することを含む、治療方法。
以下の詳細な説明と併せて読むことで、本発明の上記の目的および他の目的、態様、実施形態および特徴が、当業者らには一層完全に明らかになろう。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】単離したヒト心房筋細胞において、カルバマゼピンならびにそのコンジュゲートが０．１Ｈｚ（Ａ）と３Ｈｚ（Ｂ）でナトリウム電流に対しておよぼすブロック作用を示す。データは平均±ＳＥＭである。
【図２】単離したラット後根神経節細胞において、カルバマゼピンおよびそのコンジュゲートが０．１Ｈｚ（Ａ）と３Ｈｚ（Ｂ）でナトリウム電流に対しておよぼすブロック作用を示す。データは平均±ＳＥＭである。
【図３】単離した心筋および神経細胞において、０．１Ｈｚ（Ａ）と３Ｈｚ（Ｂ）でのカルバマゼピンおよびそのコンジュゲート１００μＭの平均（±ＳＥＭ）ナトリウム電流ブロックの割合を示す。
【図４】ラット前脳膜でのノルアドレナリントランスポーターに対するデシプラミンおよびそのコンジュゲートの平均（±ＳＥＭ）特異的結合の割合を示す。
【図５】標準的な鎮痛薬であるモルヒネに対する被験化合物の鎮痛活性を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２１】
発明の詳細な説明
本明細書で使用する場合、単数形の「ａ」「ａｎ」「ｔｈｅ」は、文脈からそうでないことが明らかな場合を除き、該当する対象の複数形も含む。
【００２２】
本発明について説明および権利請求するにあたり、下記の定義に基づいて以下の専門用語を使用する。
【００２３】
「水溶性非ペプチドオリゴマー」は、室温で水に対して少なくとも３５％（重量比）可溶、好ましくは７０％（重量比）を超え、一層好ましくは９５％（重量比）を超えて可溶なオリゴマーを示す。一般に、「水溶性の」オリゴマーの濾過していない水性調製物は、濾過後に同じ溶液で伝達される量の光の少なくとも７５％、一層好ましくは少なくとも９５％を伝達する。しかしながら、水溶性オリゴマーは、水に対して少なくとも９５％（重量比）可溶であるか、水に対して完全に可溶であるのが最も好ましい。「非ペプチド」に関しては、オリゴマーはアミノ酸残基数が３５％（重量比）未満のときに非ペプチドである。
【００２４】
「モノマー」「モノマーサブユニット」「モノマー単位」という用語は、本明細書では同義に用いられ、ポリマーまたはオリゴマーの基本構造単位のうちの１つを示す。ホモオリゴマーの場合、単一の繰り返し構造単位でオリゴマーが形成される。コオリゴマーの場合、２つ以上の構造単位が一定のパターンあるいはランダムに繰り返され、オリゴマーが形成される。本発明に関連して用いられる好ましいオリゴマーは、ホモオリゴマーである。水溶性非ペプチドオリゴマーは一般に、直列に結合されてモノマー鎖を形成する１つ以上のモノマーを含む。オリゴマーは、単一のモノマータイプ（すなわちホモオリゴマー）からでも２つまたは３つのモノマータイプ（すなわちコオリゴマー）からでも形成可能である。
【００２５】
「オリゴマー」は、約１から約３０個のモノマーを有する分子である。本発明で用いる具体的なオリゴマーは、詳細については後述する、直鎖、分岐鎖またはフォーク状などの多岐にわたる幾何学的形状を有するものを含む。
【００２６】
「ＰＥＧ」または「ポリエチレングリコール」とは、本明細書で使用する場合、水溶性ポリ（エチレンオキシド）を包含することを意図している。特に明記しないかぎり、「ＰＥＧオリゴマー」オリゴエチレングリコールは、実質的にすべての（好ましくはすべての）モノマーサブユニットがエチレンオキシドサブユニットであるものであるが、オリゴマーがたとえばコンジュゲーション用に明確なエンドキャッピング部分または官能基を含むものであってもよい。本発明で用いるＰＥＧオリゴマーは、たとえば合成変換時に末端酸素が置き換わるか否かに応じて、「−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−」または「−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−１ＣＨ２ＣＨ２−」という２つの構造のうちの１つを含む。上述したように、ＰＥＧオリゴマーの場合、変数「ｎ」は約１から３０の範囲、好ましくは約２から約３０の範囲であり、末端基と全体としてのＰＥＧのアーキテクチャは可変である。たとえば小
分子薬剤とのリンク用にＰＥＧがさらに官能基Ａを含む場合、この官能基が、ＰＥＧオリゴマーと共有結合的に結合すれば、（ｉ）酸素−酸素結合（−Ｏ−Ｏ−、ペルオキシド連結）も（ｉｉ）窒素−酸素結合（Ｎ−Ｏ、Ｏ−Ｎ）も形成されない。
【００２７】
「エンドキャップされた」「末端キャップされた」という表現は、本明細書では同義に用いられ、エンドキャッピング部分を有するポリマーの末端または端点を示す。一般に、必ずしもそうである必要はないが、エンドキャッピング部分は、ヒドロキシまたはＣ１〜２０アルコキシ基を含み、一層好ましくはＣ１〜１０アルコキシ基、なお一層好ましくはＣ１〜５アルコキシ基を含む。よって、エンドキャッピング部分の例としては、アルコキシ（メトキシ、エトキシ、ベンジルオキシなど）ならびにアリール、ヘテロアリール、シクロ、ヘテロシクロなどを含む。エンドキャッピング部分は、ポリマー中に末端モノマーの１つ以上の原子を含むことができる点を忘れてはならない［ＣＨ３Ｏ（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−およびＣＨ３（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−のエンドキャッピング部分「メトキシ」など］。また、上記の各々について飽和、不飽和、置換、未置換の形態も想定される。さらに、エンドキャッピング基は、シランであってもよい。エンドキャッピング基は、検出可能なラベルを有利に含み得る。ポリマーが、検出可能なラベルを含むエンドキャッピング基を有する場合、ポリマーおよび／またはポリマーが結合された部分（活性剤など）の量または場所を好適な検出器で判断することが可能である。このようなラベルは、限定することなく、蛍光剤、化学発光剤、酵素標識に用いられる部分、比色剤（染料など）、金属イオン、放射性部分、金粒子、量子ドットなどを含む。好適な検出器としては、光度計、フィルム、分光器などがあげられる。エンドキャッピング基は、リン脂質も有利に含み得る。ポリマーにリン脂質を含むエンドキャッピング基がある場合、このポリマーとそこから得られるコンジュゲートに特有の特性が付与される。例示としてのリン脂質には、限定することなく、ホスファチジルコリンと呼ばれるクラスのリン脂質から選択されるものがある。具体的なリン脂質としては、限定することなく、ジラウロイルホスファチジルコリン、ジオレイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン、ジステロイルホスファチジルコリン、ベヘノイルホスファチジルコリン、アラキドイルホスファチジルコリン、およびレシチンからなる群から選択されるものがあげられる。
【００２８】
「標的化部分」という用語は、本明細書では、本発明のコンジュゲートを標的化領域に局在させる一助となる（細胞に侵入、浸透または透過、あるいは受容体を結合する一助となるなど）分子構造を示すのに用いられる。好ましくは、標的化部分は、ビタミン、コファクター、抗体、抗原、受容体、ＤＮＡ、ＲＮＡ、シアリルルイスＸ抗原、ヒアルロン酸、糖類、細胞特異的レクチン、ステロイドまたはステロイド誘導体、ＲＧＤペプチド、細胞透過部分または細胞標的化部分、細胞表面レセプターのリガンド、血清成分またはさまざまな細胞内受容体または細胞外受容体に対するコンビナトリアル分子からなる。また、標的化部分は、脂質またはリン脂質を含むものであってもよい。例示としてのリン脂質は、限定することなく、ホスファチジルコリン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルエタノールアミンを含む。これらの脂質は、ミセルまたはリポソームなどの形をとってもよい。標的化部分は、検出可能なラベルをさらに含むものであってもよく、あるいは、検出可能なラベルが標的化部分として機能するものであってもよい。コンジュゲートが検出可能なラベルを含む標的化基を有する場合、ポリマーおよび／またはポリマーが結合される部分（活性剤など）の量および／または分布／場所を、好適な検出器で判断することが可能である。このようなラベルは、限定することなく、蛍光剤、化学発光剤、酵素標識に用いられる部分、比色剤（染料など）、金属イオン、放射性部分、金粒子、量子ドットなどを含む。
【００２９】
オリゴマーの幾何学的形状または全体としての構造に関する「分岐」とは、分岐点から２つ以上のポリマー「アーム」を有するオリゴマーを示す。
【００３０】
オリゴマーの幾何学的形状または全体としての構造に関する「フォーク状」とは、分岐点から延在する２つ以上の官能基（一般に１つ以上の原子を介して）を有するオリゴマーを示す。
【００３１】
「分岐点」とは、オリゴマーが直鎖構造から１つ以上の別のアームに分岐またはフォーク状に分かれる１つ以上の原子を含む二分岐点を示す。
【００３２】
「反応性」または「活性化された」という表現は、従来の有機合成条件下で容易にまたは実用的な速度で反応する官能基を示す。これは、反応しないか、反応に強力な触媒または非実用的な反応条件を必要とする基（すなわち「非反応性」または「不活性」基）とは対照的である。
【００３３】
反応混合物内の分子上に存在する官能基に関して「容易に反応しない」とは、その基が反応混合物中で所望の反応を生むのに効果的な条件下でほぼ原形を保つことを示す。
【００３４】
「保護基」は、特定の反応条件下で分子内の特定の化学的反応性官能基の反応を防止または阻止する部分である。保護基は、保護対象となる化学的反応性基のタイプ、ならびに使用される反応条件、分子内における別の反応基または保護基の存在次第で異なることがある。保護対象となることが可能な官能基には、一例として、カルボン酸基、アミノ基、ヒドロキシル基、チオール基、カルボニル基などがあげられる。代表的な保護基としては、カルボン酸に対する場合はエステル（ｐ−メトキシベンジルエステルなど）、アミド、ヒドラジド；アミノ基に対する場合はカルバメート（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルなど）やアミド；ヒドロキシル基に対する場合はエーテルやエステル；チオール基に対する場合はチオエーテルやチオエステル；カルボニル基に対する場合はアセタールやケタールなどがあげられる。このような保護基は当業者間で周知であり、たとえば、Ｔ．Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｇ．Ｍ．  Ｗｕｔｓ，  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ
Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，  Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｗｉｌｅｙ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９９９ならびにそこに引用されている参考文献に記載されている。
【００３５】
「保護された形態」の官能基とは、保護基を有する官能基を示す。本明細書で使用する場合、「官能基」という用語またはその同義語は、その保護された形態を包含する。
【００３６】
「生理学的に切断可能な」結合または「加水分解可能な」結合または「分解可能な」結合は、生理学的条件下で水と反応する（すなわち加水分解される）比較的弱い結合である。水中における結合の加水分解しやすさは、二つの中心原子を接続する連結の一般的なタイプだけではなく、これらの中心原子に結合する置換基にも左右されることがある。加水分解的に不安定または弱い適切な連結としては、カルボン酸エステル、リン酸エステル、無水物、アセタール、ケタール、アシルオキシアルキルエーテル、イミン、オルトエステル、ペプチド、オリゴヌクレオチド、チオエステル、チオールエステル、および炭素塩があげられるが、これに限定されるものではない。
【００３７】
「酵素的に分解可能な連結」は、１つ以上の酵素によって分解され得る連結を意味する。
【００３８】
「安定した」連結または結合とは、水中で実質的に安定している、すなわち生理学的条件下で長期間にわたって適当な程度まで加水分解されない、一般に共有結合である結合を示す。加水分解的に安定した連結の例として、炭素−炭素結合（脂肪族鎖におけるものなど）、エーテル、アミド、ウレタン、アミンなどがあげられるが、これに限定されるものではない。通常、安定した連結は、生理学的条件下で１日あたりの加水分解率が約１〜２
％未満のものである。代表的な化学結合の加水分解率は、たいていの標準的な化学テキストに掲載されている。
【００３９】
「実質的に」または「本質的に」とは、ほぼ全体的または完全にということを意味し、たとえば、特定の量の９５％以上、一層好ましくは９７％以上、なお一層好ましくは９８％以上、さらに一層好ましくは９９％以上、さらになお一層好ましくは９９．９％以上であり、９９．９９％以上が最も好ましい。
【００４０】
「単分散」とは、組成物中の実質的にすべてのオリゴマーが、クロマトグラフィまたは質量分析で測定した場合に分子量が明確な単一値であり、なおかつモノマー数も明確なオリゴマー組成物を示す。単分散オリゴマー組成物は、ある意味では純粋すなわち、モノマー数が大きく分布するのではなく実質的に単一かつ限定的（整数として）である。単分散オリゴマー組成物は、ＭＷ／Ｍｎ値が１．０００５以下、一層好ましくはＭＷ／Ｍｎ値が１．００００である。ひいては、単分散コンジュゲートからなる組成物とは、組成物中のすべてのコンジュゲートの実質的にすべてのオリゴマーのモノマー数が大きく分布するのではなく単一かつ限定的（整数として）であり、ＭＷ／Ｍｎ値が１．０００５、一層好ましくはＭＷ／Ｍｎ値が１．００００であることを意味する（オリゴマーが小分子薬剤由来の部分に結合していなかった場合）。しかしながら、単分散コンジュゲートからなる組成物は、溶媒、試薬、賦形剤などの１つ以上の非コンジュゲート物質を含むものであってもよい。
【００４１】
オリゴマー組成物に関する「二峰性」は、組成物中の実質的にすべてのオリゴマーについて、モノマー数が大きく分布するのではなく限定的で異なる２種類の数（整数として）のうちの１つであり、分子量の分布を分率と分子量でプロットした場合に、２つの識別可能な別のピークとして現れるオリゴマー組成物を示す。好ましくは、本明細書に記載したような二峰性オリゴマー組成物の場合、各ピークは通常、その平均を中心にして対称であるが、２つのピークの大きさが異なっていてもよい。理想的には、二峰性分布の各ピークの多分散度指数Ｍｗ／Ｍｎが１．０１以下であり、一層好ましくは１．００１以下、なお一層好ましくは１．０００５以下、最も好ましくはＭＷ／Ｍｎ値が１．００００である。ひいては、二峰性コンジュゲートからなる組成物は、組成物中のすべてのコンジュゲートの実質的にすべてのオリゴマーが、モノマー数が大きく分布するのではなく限定的で異なる２種類の数（整数として）のうちの１つであり、ＭＷ／Ｍｎ値が１．０１以下、一層好ましくは１．００１以下、なお一層好ましくは１．０００５以下、最も好ましくはＭＷ／Ｍｎ値が１．００００であることを意味する（オリゴマーが小分子薬剤由来の部分に結合していなかった場合）を意味する。しかしながら、二峰性コンジュゲートからなる組成物は、溶媒、試薬、賦形剤などの１つ以上の非コンジュゲート物質を含み得る。
【００４２】
「三環物質」は、一般に分子量が約１０００ダルトン未満で、本明細書に記載したような三環治療薬としてある程度の活性を有する有機、無機または有機金属化合物を示す。
【００４３】
「生体膜」は、少なくともいくつかの外来物質あるいは、そうでなければ望ましくない材料に対する関門として機能する、細胞または組織で構成される膜である。本明細書で使用する場合、「生体膜」は、たとえば、血液脳関門（ＢＢＢ）、血液脳脊髄液関門、血液胎盤関門、血液乳関門、血液精巣関門、ならびに膣粘膜や尿道粘膜、肛門粘膜、頬粘膜、舌下粘膜、および直腸粘膜を含む粘膜関門をはじめとする生理学的保護関門に関連した膜を含む。文脈からそうでないことが明らかな場合を除き、「生体膜」という用語は、中部消化管（胃および小腸など）に関連した膜を含まない。
【００４４】
「生体膜通過率」は、化合物が生体膜（血液脳関門（ＢＢＢ）など）を通過する機能の尺度となる。生体膜での分子の輸送を評価するには、多岐にわたる方法を用いることがで
きる。特定の生体関門（血液脳脊髄液関門、血液胎盤関門、血液乳関門、腸管関門など）に関する生体膜通過率の評価方法は、本明細書および／または関連の文献に記載されているおよび／または当業者が判断することができる。
【００４５】
本発明に関する「代謝率低下」とは、水溶性オリゴマーと結合していない小分子薬剤（すなわち小分子薬剤自体）または参照基準材料の代謝率と比較した場合における水溶性オリゴマー−小分子薬剤コンジュゲートの代謝率の測定可能な低下を示す。「初回通過代謝率低下」という特別な場合、小分子薬剤（または参照基準材料）および対応するコンジュゲートを経口投与する場合以外は、同一の「代謝率低下」が必要である。経口投与された薬剤は、胃腸から門脈循環に吸収され、体循環に達する前に肝臓を通過することもある。肝臓は薬剤代謝または生物トランスフォーメーションが最初に生じる部位であるため、相当な量の薬剤が体循環に達する前に代謝されることがある。初回通過代謝の度合いと、その低下を測定するには、多数の異なる方法を採ることができる。たとえば、動物血液試料を一定間隔で採取し、血漿または血清を液体クロマトグラフィ／質量分析で分析して代謝レベルを求めてもよい。初回通過代謝および他の代謝過程に関連する「代謝率低下」を測定するための他の技術は周知であり、本明細書および／または関連の文献に記載されているおよび／または当業者が判断することができるものである。好ましくは、本発明のコンジュゲートは、以下の値すなわち少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、および少なくとも約９０％のうちの少なくとも１つを満たす代謝率低下を提供できる。「経口的に生物学的に利用可能な」化合物（小分子薬剤またはそのコンジュゲートなど）は、経口投与時に２５％、好ましくは７０％を超えて生物学的利用可能なものであると好ましく、この場合の化合物の生物学的利用率は、未代謝の形態で体循環に達する投与された薬剤の一部である。
【００４６】
「アルキル」は、約１から２０原子長の範囲の炭化水素鎖を示す。このような炭化水素鎖は、好ましくは飽和であるが必ずしもそうでなくてもよく、分岐鎖であっても直鎖であってもよいが、一般に直鎖が好ましい。例示としてのアルキル基は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、２−メチルブチル、２−エチルプロピル、３−メチルペンチルなどを含む。本明細書で使用する場合、「アルキル」は、３個以上の炭素原子に言及する場合にシクロアルキルを含む。
【００４７】
「低級アルキル」は、１〜６個の炭素原子を含むアルキル基を示し、メチル、エチル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチルにより例示される直鎖であっても分岐鎖であってもよい。
【００４８】
「非干渉置換基」とは、分子中に存在する場合、一般に同一分子に含まれる他の官能基に対して非反応性である基のことである。
【００４９】
「アルコキシ」とは、Ｒがアルキルまたは置換アルキル、好ましくはＣ１〜Ｃ２０アルキル（メトキシ、エトキシ、プロピルオキシなど）、好ましくはＣ１〜Ｃ７である−Ｏ−Ｒ基を示す。
【００５０】
「薬学的に許容される賦形剤」または「薬学的に許容されるキャリア」とは、患者に対して毒物学的作用を有意に引き起こすことのない、本発明の組成物に含まれていてもよい成分を示す。
【００５１】
「アリール」という用語は、最大１４個の炭素原子を有する芳香族基を意味する。アリール基としては、フェニル、ナフチル、ビフェニル、フェナントレニル、ナフタレニルなどがあげられる。「置換フェニル」および「置換アリール」はそれぞれ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ
、Ｂｒ、Ｉ）、ヒドロキシ、シアノ、ニトロ、アルキル（Ｃ１〜６アルキルなど）、アルコキシ（Ｃ１〜６アルコキシなど）、ベンジルオキシ、カルボキシ、アリールなどから選択される１つ、２つ、３つ、４つまたは５つ（置換基１〜２個、１〜３個または１〜４個など）で置換されたフェニル基およびアリール基を示す。
【００５２】
化学部分は、全体をとおして主に一価の化学部分（アルキル、アリールなど）として定義かつ参照される。ただし、このような用語は、当業者には自明の適当な構造的状況下で対応する多価部分を示すためにも用いられる。たとえば、「アルキル」部分は通常、一価のラジカル（ＣＨ３−ＣＨ２−など）を示すが、特定の状況では二価の連結部分が「アルキル」になり得る。この場合、当業者であればアルキルを「アルキレン」という用語と等価な二価のラジカル（−ＣＨ２−ＣＨ２−など）として理解するであろう。（同様に、二価の部分が必要で「アリール」として言及されている場合、当業者であれば「アリール」という用語が対応する多価部分であるアリーレンを示すことは理解できるであろう）。すべての原子は、結合形成でのその通常の価数（すなわち、Ｈであれば１、炭素であれば４、Ｎであれば３、Ｏであれば２、ＳであればＳの酸化状態に応じて２、４または６）を有するものと理解される。
【００５３】
「薬理学的有効量」「生理学的有効量」「治療有効量」は、本明細書では同義に用いられ、血流または標的組織において所望のレベルの活性剤および／またはコンジュゲートを提供するのに必要な、組成物中に存在する水溶性オリゴマー−小分子薬剤コンジュゲートの量を意味する。厳密な量は、特定の活性剤、組成物の成分と物理的特徴、意図した患者個体群、患者の検討事項などの多数の要因に左右されることがあり、本明細書に記載の情報ならびに関連の文献で入手可能な情報に基づいて当業者が容易に判断できるものである。
【００５４】
「二官能性」オリゴマーは、そこに含まれる（一般に末端にて）２つの官能基を有するオリゴマーである。官能基同士が同じである場合、オリゴマーはホモ二官能性であると言われる。官能基同士が異なる場合、オリゴマーはヘテロ二官能性であると言われる。
【００５５】
本明細書に記載の塩基性反応剤または酸性反応剤は、中性で帯電されたその対応の任意の塩形態を含む。
【００５６】
「患者」という用語は、本明細書に記載されているようなコンジュゲートを投与することで予防可能または治療可能な症状があるか症状になりやすい生命体を示し、人間と動物の両方を含む。
【００５７】
「任意の」または「任意に」とは、その後ろで説明される状況が起こるかもしれないが必ずしもそうとはかぎらないことを意味するため、説明にはその状況が起こる場合と起こらない場合が含まれる。
【００５８】
「何もなし」とは、置換基がないことを示す。よって、置換基が何もない場合、その置換基を、得られる構造における化学結合または水素としてその構造で表すことができる。
【００５９】
上述したように、本発明は、（特に）安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物に関するものである。
【００６０】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環系化合物が、以下の式
【化３】
0005643103.tif 000028
で包含される構造を有し、
式中、
ＤとＲ１とが一緒になって、−ＨＣ−Ｒ１、−Ｃ＝Ｒ１、および−ＨＮ−Ｒ１からなる群から選択され、
Ｒ１は、未置換であるか、あるいは置換されていてもよい、アルキル、アミノ、アシルアミノ、アシル、アミド、アリールオキシ、アルキルアミノ、約２個以上４個以下の炭素原子を有するジアルキルアミノ、ピペリジノ、ピロリジノ、Ｎ−（低級アルキル）−２−ピペリジル、モルホリノ、１−ピペリジニル、４−（低級アルキル）−１−ピペリジニル、４−（ヒドロキシル−低級アルキル）−１−ピペリジニル、および４−（メトキシ−低級アルキル）−１−ピペリジニルからなる群から選択され、
Ｙは、未置換であるか、あるいは置換されていてもよい、−ＣＨ２−、−ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−Ｓ−、ＣＨ２−Ｏ−、ＣＨ２−ＮＨ−、−Ｓ−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２、−ＮＨ−ＣＨ２、−ＨＮ−、−Ｏ−、−Ｎ＝Ｃ−、−Ｃ＝Ｎ−、および−Ｓ−からなる群から選択され、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９のうちの１つ以上が各々独立に、何もなし、未置換であるか、あるいは置換されていてもよい、水素、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、カルボキシ、ケト、チオケト、アミノ、アシルアミノ、アシル、アミド、アリールオキシ、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ハロアルキル、アルコキシ、ジオキソ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、およびヘテロシクロアルキルからなる群から選択される、化合物が得られる。
【００６１】
具体的な三環系化合物の例として、アミネプチン、アミトリプチリン、アミトリプチリノキシド、アモキサピン、ブトリプチリン、クロミプリミン、デメキシプチリン、デシプラミン、ジベンゼピン、ジメタクリン、ドチエピン、ドキセピン、フルアシジン、イミプラミン、イミプラミンＮ−オキシド、ロフェプラミン、メリトラセン、メタプラミン、ノルトリプチリン、オピプラモール、プロピゼピン、プロトリプチリン、キヌプラミン、チアネプチン、トリミプラミン、およびカルバマゼピンからなる群から選択されるものがあげられる。
【００６２】
本発明の化合物の利点は、代謝を抑えつついくらか三環活性を保持する機能であると思われる。理論に拘泥されることを望むものではないが、オリゴマーが三環物質を代謝できる基質に対する化合物の全体としての親和性を下げるよう機能するため、三環系残基−ならびに本明細書に記載のオリゴマー含有化合物−−オリゴマーを含まない「もとの」三環構造との対照で−−は、容易には代謝されないと思われる。また（繰り返すが、理論に拘泥されるものではなく）、オリゴマーによって導入される余分な大きさ−−オリゴマーを含まない「もとの」三環構造との対照で−−は、化合物が血液脳関門を通過する機能を弱める。仮に三環物質の残基とオリゴマーとの連結が分解可能であるとしても、この化合物は依然として利点（初期吸収時の初回通過代謝を回避するなど）をもたらすものである。
【００６３】
別々のオリゴマー（比較的不純な組成物との対照でオリゴマーの単分散組成物または二峰性組成物からなど）を使ってオリゴマー含有化合物を形成することで、対応する小分子薬剤に関連した特定の特性を都合よく変更できることがある。たとえば、本発明の化合物は、非経口、経口、経皮、頬側、経肺または経鼻などの多数の好適な投与経路で投与する
と、血液脳関門での透過量が少なくなる。経口送達が想定される場合、本発明の化合物では、胃腸（ＧＩ）壁を通って体循環には入るが、血液脳関門の通過が低速、最小限、あるいは事実上存在しないことが好ましい。さらに、本発明の化合物は、オリゴマーをまったく含まない化合物の生物活性および生物学的利用率と比較すると、ある程度の生物活性ならびに生物学的利用率を維持する。
【００６４】
血液脳関門（「ＢＢＢ」）に関して、この関門は、血液から脳への薬剤の輸送を制限する。この関門は、しっかりとした結合部分で接合された独特な内皮細胞の連続層からなるものである。ＢＢＢの全表面積の９５％を超えて含まれる脳の毛細血管は、ほとんどの溶質や薬剤が中枢神経家に入る主な経路となる。
【００６５】
血液脳関門通過能の程度が容易には分からない化合物の場合、このような能力を判断するには、本明細書に記載したようなｉｎ  ｓｉｔｕラット脳灌流（「ＲＢＰ」）モデルなどの好適な動物モデルを使用すればよい。簡単に説明すると、ＲＢＰ技術では、頸動脈のカニューレ挿入後に制御された条件下における化合物溶液での灌流、続いて脈管性間隙に残っている化合物を取り除くための洗浄段階を必要とする。（このような分析は、Ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｅｘｔｏｎ，  ＰＡなどの医薬品開発業務受託機関で実施すればよい）。ＲＢＰモデルの一例では、カニューレを左頸動脈に留置して分枝部分を結紮する。単回灌流実験で、検体（一般に５マイクロモル濃度レベルであるが、必ずしもそうでなくてもよい）を含む生理的緩衝液を流量約１０ｍＬ／分で灌流する。３０秒後、灌流を停止し、化合物を含有しない緩衝液でさらに３０秒間、脳血管の内容物を洗い流す。次に、脳組織を取り出し、液体クロマトグラフにタンデム質量分析検出（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）を併用して化合物濃度を分析する。あるいは、分子内の極性原子（通常は、酸素、窒素、結合された水素）の表面寄与量の合計として定義される化合物の分子極性表面積（「ＰＳＡ」）の循環に基づいて血液脳関門の浸透性を推測することが可能である。ＰＳＡは、血液脳関門輸送などの化合物の輸送特性と相関することが明らかになっている。化合物のＰＳＡを判断する方法は、Ｅｒｔｌ，  Ｐ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｍｅｄ．  Ｃｈｅｍ．  ２０００，  ４３，  ３７１４〜３７１７；およびＫｅｌｄｅｒ，  Ｊ．，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｈａｒｍ．  Ｒｅｓ．  １９９９，  １６，  １５１４〜１５１９などに記載されている。
【００６６】
血液脳関門に関して、水溶性非ペプチドオリゴマー−小分子薬剤コンジュゲートでは、水溶性非ペプチドオリゴマーと結合していない小分子薬剤の通過率と比較すると血液脳関門通過率が低くなる。本明細書に記載の化合物での例示としての血液脳関門通過率の低下には、水溶性オリゴマーと結合していない小分子薬剤の血液脳関門通過率と比較した場合に、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％または少なくとも約９０％の低下を含む。本発明のコンジュゲートでの好ましい血液脳関門通過率の低下は、少なくとも約２０％である。
【００６７】
上述したように、本発明の化合物は三環系残基を含む。特定の化合物（この化合物が水溶性非ペプチドオリゴマーを含むか否かを問わない）が抗鬱薬、抗痙攣として、あるいは鎮痛薬として作用できるか否かを判断するためのアッセイについては後述する。
【００６８】
式に関して以下の段落で用いる変数、表記、記号は、他の段落とは関係ない場合もある。よって、各段落の表記と記号の定義は通常、特に明記しないかぎりはそれだけに限定され、他の段落での構文解析には用いないものとする。
【００６９】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質
が、以下の式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【化４】
0005643103.tif 000029
式中、
Ａは、ラジカル−（ＣＨ２）ｍ−と−ＣＨ＝ＣＨ−から選択されるブリッジであり、
ここで、
ｍは、１以上３以下の整数であり、
ＸおよびＹは、水素とハロ（フルオロ、クロロ、およびブロモから選択）からなる群から選択され、
ＲおよびＲ’は、水素と１個以上５個以下の炭素原子を有する低級アルキルからなる群から選択され、
ｎは、１以上１２以下の整数である。
【００７０】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が以下の式すなわち（３’−ジメチルアミノプロピリデン）−ジベンゾ（ａ，ｄ）−シクロヘプタ−１，４−ジエンＮ−オキシドに包含される構造およびまたはその塩酸付加塩を有する化合物が得られる。
【００７１】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式すなわち、２−クロロ−１１−（１−ピペリジニル）ジベンズ（ｂ，ｆ）［１，４］オキサ−アゼピン、２−クロロ−１１−（１−ピペリジニル）ジベンズ（ｂ，ｆ）［１，４］オキサ−アゼピン塩酸塩、２−クロロ−１１−（１−ピペリジニル）ジベンズ（ｂ，ｆ）［１，４］オキサ−アゼピンフマラート、２−クロロ−１１−（１−ピペリジニル）ジベンズ（ｂ，ｆ）［１，４］オキサ−アゼピンスルフェート、および２−クロロ−１１−（１−ピペリジニル）ジベンズ（ｂ，ｆ）［１，４］オキサ−アゼピンジヘプタノアートからなる群から選択される式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【００７２】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式すなわち５−（３’−ジメチルアミノ−２’−メチルプロピル）ジベンゾ［ａ，ｄ］［１，４］−シクロヘプタジエンに包含される構造を有する化合物が得られる。
【００７３】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式すなわち、３−クロロ−５−（γ−ジメチルアミノ−プロピル）−イミノジベンジル、３−クロロ−５−（γ−ジメチルアミノ−プロピル）−イミノジベンジルの薬学的に許容される酸付加塩、および３−クロロ−５−（γ−ジメチルアミノ−プロピル）−イミノジベンジル塩酸塩からなる群から選択される式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【００７４】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式すなわち、
【化５】
0005643103.tif 000030
からなる群から選択される式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【００７５】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式すなわち、５−（γ−メチルアミノ−プロピル）−イミノジベンジルおよびその無毒の付加塩、Ｎ−（３−メチルアミノプロピル）−イミノジベンジル、およびＮ−（３−メチルアミノプロピル）−イミノジベンジル塩酸塩からなる群から選択される式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【００７６】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、式
【化６】
0005643103.tif 000031
（式中、Ｘは、２個以上３個以下の炭素原子を有するアルキレンであり、Ｙは、２個以上４個以下の炭素原子を有するジアルキルアミノ、ピロリジノ、ピペリジノ、およびモルホリノからなるクラスのメンバーであり、Ｒ１およびＲ２は、同義に、水素、メチル、およびエチルからなるクラスのメンバーを表し、Ｒ３およびＲ４は、同義に、水素、クロロ、メチル、エチル、メトキシ、およびエトキシからなるクラスのメンバーを表す）で表される１０−（塩基的置換）−１０，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｅ］［１，４］ジアゼピンからなる群から選択される化合物である化合物が得られる。
【００７７】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環系残基が、式
【化７】
0005643103.tif 000032
（式中、アルキレンは、２個以上４個以下の炭素を有し、少なくとも２個の炭素が複素環核からＸを分離し、Ｘは、炭素数２〜４個のジアルキルアミノ、ピリリジノ、ピペリジノ、およびモルホリノからなる群から選択され、各Ｙが独立に、水素、クロロ、メチル、メトキシ、およびエトキシからなる群から選択される）の化合物からなる群から選択される化合物が得られる。
【００７８】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、式
【化８】
0005643103.tif 000033
（式中、Ｒ１は、水素、メチル、およびエチルからなるクラスから選択され、−Ｘ−Ｙは、塩基性ラジカルであり、式中、Ｘは２個以上３個以下の炭素原子を含む炭化水素鎖であり、Ｙは、２個以上４個以下の炭素原子を有するジアルキルアミノ、ピペリジノ、ピロリジノ、Ｎ−（低級アルキル）−２−ピペリジル、モルホリノ、１−ピペリジニル、４−（低級アルキル）−１−ピペリジニル、４−（ヒドロキシル−低級アルキル）−１−ピペリジニル、および４−（メトキシ−低級アルキル）−１−ピペリジニルからなるクラスから選択され、Ｒ２およびＲ３は、水素、クロロ、メチル、エチル、メトキシ、エトキシ、トリフルオロメチル、メチルメルカプト、およびエチルメルカプトからなるクラスから選択される）の置換５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｅ］［１，４］ジアゼピン誘導体からなる群から選択される化合物である化合物が得られる。
【００７９】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【化９】
0005643103.tif 000034
式中、Ｒは、ＣＨ３とＣ２Ｈ５からなる群から選択されるメンバーであり、Ｒ１は、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＦ３、およびＣ２Ｈ５からなる群から選択されるメンバーである。
【００８０】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【化１０】
0005643103.tif 000035
式中、Ｒは、ＣＨ３とＣ２Ｈ５からなる群から選択されるメンバーであり、Ｒ１は、Ｈ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＦ３、およびＣ２Ｈ５からなる群から選択されるメンバーである。
【００８１】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式すなわち、１１−（３−ジメチルアミノプロピリデン）−６，１１−ジヒドロ−ジベンズ−（ｂ，ｅ）チエピンに包含される構造を有する化合物が得られる。
【００８２】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【化１１】
0005643103.tif 000036
式中、Ｒ１は、水素とハロからなる群のメンバーであり、Ａは、４−（β−ヒドロキシエチル−ピペリジノ）である。
【００８３】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【化１２】
0005643103.tif 000037
式中、ｎは０〜１の整数であり、Ｒ１は１〜４個の炭素原子を有するアルキルである。
【００８４】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペ
プチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【化１３】
0005643103.tif 000038
式中、ＸおよびＹが各々、水素、１〜４個の炭素原子を有するアルキル、１〜４個の炭素原子を有するアルコキシ、１〜４個の炭素原子を有するチオアルコキシ、クロロ、フルオロ、トリフルオロメチル、１〜４個の炭素原子を有するアシル、および１〜８個の炭素原子を有するジアルキルスルホンアミドからなる群から選択される。
【００８５】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【化１４】
0005643103.tif 000039
【００８６】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【化１５】
0005643103.tif 000040
【００８７】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【化１６】
0005643103.tif 000041
式中、Ｒ２およびＲ３は各々、水素、フルオロ、クロロ、低級アルキル、低級アロキシ、低級アルキルチオ、およびトリフルオロメチルからなる群のメンバーであり、Ｚは、ジ−
低級アルキルアミノである。
【００８８】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【化１７】
0005643103.tif 000042
【００８９】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環系化合物が、遊離塩基と水溶性酸付加塩からなる群から選択され、前記遊離塩基が、式
【化１８】
0005643103.tif 000043
（式中、アルキレンは炭素原子数２〜３個のアルキレン鎖を表し、Ａｍは、低分子ジアルキルアミノラジカル、Ｎ−ピペリジノ−、Ｎ−モルホリノ−、およびＮ−ピロリジノラジカルからなる群から選択されるメンバーを表す）で表される化合物が得られる。
【００９０】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【化１９】
0005643103.tif 000044
式中、Ｙは、ＣＨ２−ＣＨ２とＣＨ＝ＣＨからなる群から選択され、
Ｒ１は、ＨとＣＨ３からなる群から選択され、
Ｒ２は、最大４個の炭素原子を有するアルキル基を表し、
ｎは、１、２、および３からなる群から選択され、
Ｒ３は、フェニルと最大で３つの置換基（Ｆ、Ｃｌ、ＯＨ、ＣＦ３、ならびに最大４個の炭素原子を含むアルキルおよびアルコキシからなる群から選択される）で置換されたフェニルからなる群から選択され、フェニル基が、３，４−位に、アルキリデンジオキシ（最大で６個の炭素原子を有する）、シクロアルキリデンジオキシ（最大で６個の炭素原子を有する）、およびエチレンジオキシからなる群から選択される置換基を有し、
Ｒ４は、Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、ＯＣＨ３、ＣＦ３、およびＳＯ２Ｎ（ＣＨ３）２からなる群か
ら選択される。
【００９１】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【化２０】
0005643103.tif 000045
式中、Ｒ１およびＲ２は各々低級アルキル基であり、Ｘは、水素、ハロ、低級アルキル、および低級アルキルオキシからなる群から選択され、Ｙは、水素とハロからなる群から選択され、
【化２１】
0005643103.tif 000046
は、ジ−低級アルキルアミノ、ベンジル−低級アルキルアミノ、および複素環アミンラジカルからなる群から選択され、前記複素環アミンは、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、チアモルホリン、Ｎ１−低級アルキルピペリジン、および上記のＣ−低級アルキル誘導体からなる群から選択される。
【００９２】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環物質が、以下の式に包含される構造を有する化合物が得られる。
【化２２】
0005643103.tif 000047
式中、Ｒ１およびＲ２は各々低級アルキル基であり、Ｘは、水素、ハロ、低級アルキル、および低級アルキルオキシからなる群から選択され、Ｙは、水素とハロからなる群から選択され、
【化２３】
0005643103.tif 000048
は、ジ−低級アルキルアミノ、ベンジル−低級アルキルアミノ、飽和５員環を有する複素環アミンのラジカル、および飽和６員環を有する複素環アミンのラジカルからなる群から選択され、前記複素環アミンは、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、チアモルホリン、Ｎ１−低級アルキルピペリジン、および上記のＣ−低級アルキル誘導体からなる群から選択される。
【００９３】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環系化合物が、式
【化２４】
0005643103.tif 000049
（式中、ＲおよびＲ’は、同一または異なっており、各々水素または１〜５個の炭素原子を有するアルキルを表し、Ｒ１は、水素、炭素原子数１〜５個のアルキルまたはベンジルである）で表される化合物が得られる。
【００９４】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環系化合物が、式
【化２５】
0005643103.tif 000050
（式中、Ｒは、水素、低級アルキル、フェニル、およびベンジルからなる群から選択される）で表される化合物が得られる。
【００９５】
本発明の１つ以上の実施形態では、安定したまたは分解可能な連結によって水溶性非ペプチドオリゴマーと共有結合的に結合された三環系残基を含む化合物であって、三環系化合物が、式
【化２６】
0005643103.tif 000051
（ＸおよびＹが各々、水素とハロからなる群から選択されるメンバーである）で表される化合物が得られる。
【００９６】
場合によっては、商業ソースから三環物質を得ることが可能である。また、化学合成によって三環物質を得ることも可能である。三環物質ならびに三環物質を調製するための合成方法の例は文献に記載されており、たとえば、独国特許出願公開第２０３０４９２Ａ１号明細書、同第２０３０４９２Ａ号明細書、独国特許出願公告第２０３０４９２Ｂ２号明細書、独国特許第２０３０４９２Ｃ３号明細書、英国特許第１１９１８００Ａ号明細書、米国特許第２５５４７３６号明細書、同第２９４８７１８号明細書、同第３１７７２０９号明細書、同第３２０５２６４号明細書、同第３２４４７４８号明細書、同第３２７１４５１号明細書、同第３２９９１３９号明細書、同第３３１２６８９号明細書、同第３４０９６４０号明細書、同第３４１９５４７号明細書、同第３４３８９８１号明細書、同第３４４２９４９号明細書、同第３４５４５５４号明細書、同第３４６７６５０号明細書、同第３５２７７６６号明細書、同第３５７４８５２号明細書、同第３６２２５６５号明細書、同第３６３７６６０号明細書、同第３６６３６９６号明細書、同第３７５８５２８号明細書、同第３９６３７７８号明細書に記載されている。これらの（ならびに他の）三環物質は各々、（直接的に、あるいは１つ以上の原子を介して）水溶性非ペプチドオリゴマーに共有結合的に結合可能である。
【００９７】
小分子薬剤の例示としての分子量としては、約９５０未満、約９００未満、約８５０未満、約８００未満、約７５０未満、約７００未満、約６５０未満、約６００未満、約５５０未満、約５００未満、約４５０未満、約４００未満、約３５０未満、約３００未満の分子量があげられる。
【００９８】
本発明で用いられる小分子薬剤は、キラルであれば、ラセミ混合物であってもよいし、単一の光学的に活性なエナンチオマーなどの光学的に活性な形態であってもよく、あるいはエナンチオマーの組み合わせまたは比（すなわち、スカレミック混合物）であってもよい。また、小分子薬剤は、１つ以上の幾何異性体を有することがある。幾何異性体に関して、組成物は、単一の幾何異性体または２つ以上の幾何異性体の混合物を含み得る。本発明で用いる小分子薬剤には、その普通の活性形態が可能なものであり、あるいは、若干の修飾を有するものであってもよい。たとえば、小分子薬剤は、オリゴマーの共有結合の前または後に、標的化剤、タグまたはこれに結合されたトランスポーターを有するものであってもよい。あるいは、小分子薬剤は、リン脂質（ジステアロイルホスファチジルエタノールアミンすなわち「ＤＳＰＥ」、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミンすなわち「ＤＰＰＥ」など）といったこれに結合された脂溶性部分または小さな脂肪酸を有するものであってもよい。しかしながら、場合によっては、小分子薬剤部分が脂溶性部分に対する結合を含まないことが好ましい。水溶性非ペプチドオリゴマーへのカップリング用の三環物質は、オリゴマーとの共有結合に適した遊離ヒドロキシル、カルボキシル、チオ、アミノ基など（すなわち「ハンドル」）を有する。また、反応性基の導入、好ましくはその既存の官能基のうちの１つをオリゴマーと薬剤との安定した共有連結の形成に適した官能基に変換することによって三環物質を修飾してもよい。どちらの方法についても実験の章で示す。
【００９９】
したがって、各オリゴマーは、エチレンオキシドまたはプロピレンオキシドなどのアルキレンオキシド；ビニルアルコール、１−プロペノールまたは２−プロペノールなどのオレフィンアルコール；ビニルピロリドン；ヒドロキシアルキルメタクリルアミドまたはヒドロキシアルキルメタクリレート（この場合、アルキルは好ましくはメチルである）；乳酸またはグリコール酸などのα−ヒドロキシ酸；ホスファゼン、オキサゾリン、アミノ酸、単糖などの炭化水素、マンニトールなどのアルジトール；Ｎ−アクリロイルモルホリンからなる群から選択される最大３種類のタイプのモノマーで構成される。好ましいモノマータイプとしては、アルキレンオキシド、オレフィンアルコール、ヒドロキシアルキルメタクリルアミドまたはメタクリレート、Ｎ−アクリロイルモルホリン、α−ヒドロキシ酸があげられる。好ましくは、各オリゴマーが独立して、この群から選択される２つのモノ
マータイプのコオリゴマーであるか、一層好ましくは、この群から選択される１つのモノマータイプのホモオリゴマーである。
【０１００】
コオリゴマーにおける２つのモノマータイプは、エチレンオキシドおよびプロピレンオキシドといった２つのアルキレンオキシドなどの同一のモノマータイプであってもよい。好ましくは、オリゴマーは、エチレンオキシドのホモオリゴマーである。通常は、必ずしもそうである必要はないが、小分子を共有結合的に結合していないオリゴマーの末端をキャップして、これを非反応性にする。あるいは、末端が反応性基を含むものであってもよい。末端が反応性基である場合、反応性基は、最終的なオリゴマーの形成条件下または小分子薬剤に対するオリゴマーの共有結合時に非反応性であるように選択されるか、必要に応じて保護される。一般的なひとつの末端官能基に、特にオリゴエチレンオキシドについてのヒドロキシルまたは−ＯＨがある。
【０１０１】
水溶性非ペプチドオリゴマー（本明細書にて提供するさまざまな構造における「ＰＯＬＹ」など）は、多数の異なる幾何学的形状のうち、どのような形状をとるものであってもよい。たとえば、水溶性非ペプチドオリゴマーは、直鎖、分岐鎖またはフォーク状であり得る。最も一般には、水溶性非ペプチドオリゴマーは直鎖または分岐鎖であり、たとえば、１つの分岐点を有する。本明細書の説明の多くはオリゴマーの例としてポリ（エチレンオキシド）に焦点を当てているが、本明細書にて提示する説明と構造は、上述した水溶性非ペプチドオリゴマーのいずれでも包含するよう容易に拡大適用可能である。
【０１０２】
リンカー部分を除く水溶性非ペプチドオリゴマーの分子量は通常、比較的低い。水溶性ポリマーの分子量の例示としての値には、約１５００ダルトン未満、約１４５０ダルトン未満、約１４００ダルトン未満、約１３５０ダルトン未満、約１３００ダルトン未満、約１２５０ダルトン未満、約１２００ダルトン未満、約１１５０ダルトン未満、約１１００ダルトン未満、約１０５０ダルトン未満、約１０００ダルトン未満、約９５０ダルトン未満、約９００ダルトン未満、約８５０ダルトン未満、約８００ダルトン未満、約７５０ダルトン未満、約７００ダルトン未満、約６５０ダルトン未満、約６００ダルトン未満、約５５０ダルトン未満、約５００ダルトン未満、約４５０ダルトン未満、約４００ダルトン未満、約３５０ダルトン未満、約３００ダルトン未満、約２５０ダルトン未満、約２００ダルトン未満、約１００ダルトン未満がある。
【０１０３】
水溶性非ペプチドオリゴマー（リンカーを除く）の分子量の例示としての範囲は、約１００から約１４００ダルトン、約１００から約１２００ダルトン、約１００から約８００ダルトン、約１００から約５００ダルトン、約１００から約４００ダルトン、約２００から約５００ダルトン、約２００から約４００ダルトン、約７５から１０００ダルトン、約７５から約７５０ダルトンがあげられる。
【０１０４】
好ましくは、水溶性非ペプチドオリゴマーのモノマー数は、以下の範囲すなわち、約１〜約３０（これらの値も含む）、約１〜約２５、約１〜約２０、約１〜約１５、約１〜約１２、約１〜約１０のうちの１つ以上に入る。特定の場合には、オリゴマー（および対応するコンジュゲート）で直列になっているモノマー数は、１、２、３、４、５、６、７または８のうちの１つである。別の実施形態では、オリゴマー（および対応するコンジュゲート）が、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９または２０のモノマーを含む。さらに他の実施形態では、オリゴマー（および対応するコンジュゲート）が、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９または３０のモノマーを直列に含む。よって、たとえば、水溶性非ペプチドポリマーがＣＨ３−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−を含む場合、「ｎ」は１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９または３０であり得る整数であり、以下の範囲すなわち、約１
〜約２５、約１〜約２０、約１〜約１５、約１〜約１２、約１〜約１０のうちの１つ以上に入り得る。
【０１０５】
水溶性非ペプチドオリゴマーが、１、２、３、４、５、６、７、８、９または１０のモノマーを有する場合、これらの値はそれぞれ、分子量が約７５、１１９、１６３、２０７、２５１、２９５、３３９、３８３、４２７、４７１ダルトンのメトキシエンドキャップされたオリゴ（エチレンオキシド）に対応する。オリゴマーが１１、１２、１３、１４または１５のモノマーを有する場合、これらの値はそれぞれ、約５１５、５５９、６０３、６４７、６９１ダルトンに対応する分子量のメトキシエンドキャップされたオリゴ（エチレンオキシド）に対応する。
【０１０６】
水溶性非ペプチドオリゴマーが（１つ以上のモノマーを段階的に加えてオリゴマーを三環物質に効果的に「成長させる」こととの対比で）三環物質に結合されている場合、水溶性非ペプチドオリゴマーの活性化された形態を含む組成物が単分散であると好ましい。しかしながら、二峰性組成物を用いる場合、この組成物は上記の任意の２つの数のモノマーを中心とした二峰性分布を持つことになる。たとえば、二峰性オリゴマーは、モノマーサブユニットについての以下の例示としての組み合わせのうちのいずれを有するものであってもよい。１−２、１−３、１−４、１−５、１−６、１−７、１−８、１−９、１−１０など；２−３、２−４、２−５、２−６、２−７、２−８、２−９、２−１０など；３−４、３−５、３−６、３−７、３−８、３−９、３−１０など；４−５、４−６、４−７、４−８、４−９、４−１０など；５−６、５−７、５−８、５−９、５−１０など；６−７、６−８、６−９、６−１０など；７−８、７−９、７−１０など；８−９、８−１０など。
【０１０７】
場合によっては、水溶性非ペプチドオリゴマーの活性化された形態を含む組成物が、上述したような一定範囲のモノマー単位を有する三峰性または四峰性のものである。オリゴマーの十分に定義された（すなわち、二峰性、三峰性、四峰性など）混合物を含むオリゴマー組成物を、オリゴマーの所望のプロファイルを得るように精製された単分散オリゴマーを混合して（モノマー数だけが異なる２種類のオリゴマーの混合物は二峰性であり、モノマー数だけが異なる３種類のオリゴマーの混合物は三峰性であり、モノマー数だけが異なる４種類のオリゴマーの混合物は四峰性である）調製することが可能であり、あるいは、所望かつ定義された分子量の範囲にあるオリゴマーの混合物を得るように「中心カット（ｃｅｎｔｅｒ  ｃｕｔ）」を回収する多分散オリゴマーのカラムクロマトグラフィで得ることが可能である。
【０１０８】
好ましくは単分子または単分散の組成物から水溶性非ペプチドオリゴマーを得るのが好ましい。すなわち、組成物中のオリゴマーは、分子量の分布ではなく同一の離散分子量値を有する。単分散オリゴマーの中には、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能なものなど商業ソースから購入可能なものもあるし、あるいは、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈなどの市販の開始材料から直接調製することも可能である。水溶性非ペプチドオリゴマーは、Ｃｈｅｎ  Ｙ．，  Ｂａｋｅｒ，  Ｇ．Ｌ．，  Ｊ．  Ｏｒｇ．  Ｃｈｅｍ．，  ６８７０〜６８７３  （１９９９）、国際公開第０２／０９８９４９号パンフレット、米国特許出願公開第２００５／０１３６０３１号明細書に記載されているようにして調製可能である。
【０１０９】
存在する場合、スペーサー部分（これによって水溶性非ペプチドポリマーが三環物質に結合）は、単結合、単一原子（酸素原子または硫黄原子など）、２つの原子または多数の原子であり得る。スペーサー部分は一般にもともと直鎖状であるが、必ずしもそうとはかぎらない。スペーサー部分「Ｘ」は、加水分解的に安定し、好ましくは酵素的にも安定している。好ましくは、スペーサー部分「Ｘ」は、鎖長が約１２原子未満のものであり、好
ましくは約１０原子未満、なお一層好ましくは約８原子未満、さらに一層好ましくは約５原子未満のものであり、この長さは単鎖の原子数を意図するものであって、置換基を数えたものではない。たとえば、Ｒオリゴマー−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−Ｒ’薬剤などの尿素連結は、鎖長が３原子（−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−）であるとみなす。選択的な実施形態において、連結にはさらにスペーサー基を含まない。
【０１１０】
場合によっては、スペーサー部分「Ｘ」が、エーテル、アミド、ウレタン、アミン、チオエーテル、尿素または炭素−炭素結合を含む。一般に、連結の形成には後述ならびに実施例にて例示するものなどの官能基を使用する。スペーサー部分は、それほど好ましくはないが、後述するように他の原子を含む（または他の原子と隣接または他の原子にフランクされた）ものであってもよい。
【０１１１】
具体的には、選択的な実施形態において、本発明のスペーサー部分Ｘは、以下のうちのいずれであってもよい。「−」（すなわち、三環系残基と水溶性非ペプチドオリゴマーとの間の安定したまたは分解可能であり得る共有結合）、−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｓ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＣＨ２−ＯＣ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−ＣＨ２−、−ＯＣ（Ｏ）−ＣＨ２−、Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ、−Ｃ（Ｓ）−、−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−ＣＨ２−ＣＨ２−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ２−、二価シクロアルキル基、−Ｎ（Ｒ６）−、Ｒ６は、Ｈであるか、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、アリール、および置換アリールからなる群から選択される有機ラジカルである。別のスペーサー部分として、アシルアミノ、アシル、アリールオキシ、１個以上５個以下の炭素原子を含有するアルキレンブリッジ、アルキルアミノ、約２個以上４個以下の炭素原子を有するジアルキルアミノ、ピペリジノ、ピロリジノ、Ｎ−（低級アルキル）−２−ピペリジル、モルホリノ、１−ピペリジニル、４−（低級アルキル）−１−ピペリジニル、
４−（ヒドロキシル−低級アルキル）−１−ピペリジニル、４−（メトキシ−低級アルキル）−１−ピペリジニルがあげられる。
【０１１２】
しかしながら、本発明の目的で、原子の群はこれがオリゴマーセグメントにすぐ隣接している場合は連結とはみなされず、この原子の群は、オリゴマー鎖を単に伸ばしただけの群であるという点でオリゴマーのモノマーと同一である。
【０１１３】
水溶性非ペプチドオリゴマーと小分子との間の連結「Ｘ」は一般に、オリゴマー（またはオリゴマーを三環物質に「成長させる」ことが望ましい場合は新生オリゴマー）の末端にある官能基と三環物質内の対応する官能基との反応によって形成される。以下、例示的な反応を簡単に説明する。たとえば、オリゴマーのアミノ基を小分子のカルボン酸または活性化されたカルボン酸誘導体と反応させるかその逆によって、アミド結合を生成することができる。あるいは、オリゴマーのアミンと薬剤の活性化された炭酸塩（炭酸スクシンイミジルまたは炭酸ベンゾトリアジルなど）との反応またはその逆では、カルバミン酸塩の結合が形成される。オリゴマーのアミンと薬剤のイソシアネート（Ｒ−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ）との反応またはその逆では、尿素結合（Ｒ−ＮＨ−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＨ−Ｒ’）が形成される。さらに、オリゴマーのアルコール（アルコキシド）基とハロゲン化アルキルまたは薬剤内のハロゲン化物との反応またはその逆では、エーテル結合（ｌｉｎｋａｇｅ）が形成される。さらに別のカップリング法においては、アルデヒド官能基（ｆｕｎｃｔｉｏｎ）を持つ小分子を還元的アミノ化によってオリゴマーのアミノ基とカップリングし、オリゴマーと小分子の間に第二級アミンの連結を形成する。
【０１１４】
特に好ましい水溶性非ペプチドオリゴマーは、アルデヒド官能基を有するオリゴマーである。この点について、オリゴマーは以下の構造を有することになる。ＣＨ３Ｏ−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−（ＣＨ２）ｐ−Ｃ（Ｏ）Ｈ［この場合、（ｎ）は１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０のうちの１つであり、（ｐ）は１、２、３、４、５、６、７のうちの１つである］を有する。好ましい（ｎ）の値としては３、５、７があげられ、好ましい（ｐ）の値としては２、３、４があげられる。
【０１１５】
官能基を持たない水溶性非ペプチドオリゴマーの末端は、非反応性になるようにキャップされている。オリゴマーがコンジュゲートの形成用以外で末端にさらに官能基を含む場合、その基は連結「Ｘ」の形成条件下で非反応性であるように選択されるか、連結「Ｘ」の形成時には保護される。
【０１１６】
上述したように、水溶性非ペプチドオリゴマーは、コンジュゲーションの前に少なくとも１つの官能基を含む。官能基は一般に、小分子に含まれるまたは小分子に導入される反応性基に応じて、小分子との共有結合のための求電子基または求核基を含む。オリゴマーまたは小分子のいずれかに存在し得る求核基の例としては、ヒドロキシル、アミン、ヒドラジン（−ＮＨＮＨ２）、ヒドラジド（−Ｃ（Ｏ）ＮＨＮＨ２）、チオールがあげられる。好ましい求核剤には、アミン、ヒドラジン、ヒドラジド、チオールがあり、特にアミンがある。オリゴマーに対して共有結合される小分子薬剤のほとんどは、遊離のヒドロキシル、アミノ、チオ、アルデヒド、ケトンまたはカルボキシル基を有する。
【０１１７】
オリゴマーまたは小分子のいずれかに存在し得る求電子官能基の例としては、カルボン酸、カルボン酸エステル、特にイミドエステル、オルトエステル、カーボネート、イソシアネート、イソチオシアネート、アルデヒド、ケトン、チオン、アルケニル、アクリレート、メタクリレート、アクリルアミド、スルホン、マレイミド、ジスルフィド、ヨード、エポキシ、スルホネート、チオスルホネート、シラン、アルコキシシラン、およびハロシランがあげられる。これらの群のさらに具体的な例として、スクシンイミジルエステルまたは炭酸塩、イミダゾイルエステルまたは炭酸塩、ベンゾトリアゾールエステルまたは炭
酸塩、ビニルスルホン、クロロエチルスルホン、ビニルピリジン、ピリジルジスルフィド、ヨードアセトアミド、グリオキサール、ジオン、メシレート、トシレート、およびトレシレート（２，２，２−トリフルオロエタンスルホネート）があげられる。
【０１１８】
また、チオン、チオン水和物、チオケタールなどのこれらの群のうちのいくつかの硫黄類似体、２−チアゾリジンチオンなど、ならびに上記の部分のいずれかの水和物または保護化誘導体（アルデヒド水和物、ヘミアセタール、アセタール、ケトン水和物、ヘミケタール、ケタール、チオケタール、チオアセタールなど）も含まれる。
【０１１９】
カルボン酸の「活性化された誘導体」とは、誘導体化していないカルボン酸よりも通常はかなり容易に求核剤と反応するカルボン酸誘導体を示す。活性化されたカルボン酸は、たとえば、酸ハロゲン化物（酸クロリドなど）、無水物、炭酸塩、エステルを含む。このようなエステルとしては、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル（ＮＨＳ）エステルまたはＮ−ヒドロキシフタルイミジルエステルなど、一般的形態−（ＣＯ）Ｏ−Ｎ［（ＣＯ）−］２で示されるイミドエステルがあげられる。また、イミダゾリルエステルやベンゾトリアゾールエステルも好ましい。特に好ましいのは、本件と同一出願人による米国特許第５，６７２，６６２号明細書に記載されているような、活性化されたプロピオン酸またはブタン酸のエステルである。これには、形態−（ＣＨ２）２〜３Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−Ｑの群を含むが、この場合のＱは、Ｎ−スクシンイミド、Ｎ−スルホスクシンイミド、Ｎ−フタルイミド、Ｎ−グルタルイミド、Ｎ−テトラヒドロフタルイミド、Ｎ−ノルボルネン−２，３−ジカルボキシイミド、ベンゾトリアゾール、７−アザベンゾトリアゾール、およびイミダゾールから選択されると好ましい。
【０１２０】
他の好ましい求電子基としては、炭酸スクシンイミジル、マレイミド、炭酸ベンゾトリアゾール、グリシジルエーテル、炭酸イミダゾイル、炭酸ｐ−ニトロフェニル、アクリレート、トレシレート、アルデヒド、およびオルトピリジルジスルフィドがあげられる。
【０１２１】
これら求電子基を、ヒドロキシ、チオまたはアミノ基などの求核剤と反応させ、さまざまな結合タイプを形成する。本発明で好ましいのは、加水分解的に安定した連結の形成を好む反応である。たとえば、オルトエステル、スクシンイミジルエステル、イミダゾリルエステル、ベンゾトリアゾールエステルを含むカルボン酸やその活性化された誘導体は、上記のタイプの求核剤と反応して、それぞれエステル、チオエステル、アミドを形成し、このうちアミドが加水分解的に最も安定である。炭酸スクシンイミジル、炭酸イミダゾリル、炭酸ベンゾトリアゾールをはじめとする炭酸塩は、アミノ基と反応してカルバミン酸塩を形成する。
イソシアネート（Ｒ−Ｎ＝Ｃ＝Ｏ）はヒドロキシル基またはアミノ基と反応して、それぞれ、カルバミン酸塩（ＲＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＯＲ’）または尿素（ＲＮＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＨＲ’）連結を形成する。アルデヒド、ケトン、グリオキサール、ジオン、これらの水和物またはアルコールアダクト（すなわち、アルデヒド水和物、ヘミアセタール、アセタール、ケトン水和物、ヘミケタール、ケタール）を、好ましくはアミンと反応させた後、必要があれば得られるイミンを還元して、アミン連結を得る（還元アミン化）。
【０１２２】
求電子官能基のなかには、チオールなどの求核基が結合する求電子二重結合を含むか追加可能であって、たとえば、チオエーテル結合を形成する。これらの基として、マレイミド、ビニルスルホン、ビニルピリジン、アクリレート、メタクリレート、アクリルアミドがあげられる。他の基は、求核基で置き換え可能な脱離基を含み、これには、クロロエチルスルホン、ピリジルジスルフィド（切断可能なＳ−Ｓ結合を含む）、ヨードアセトアミド、メシレート、トシレート、チオスルホネート、トレシレートが含まれる。エポキシドは、求核剤によって開環することで反応し、たとえばエーテルまたはアミン結合を形成する。オリゴマーと小分子の上述したものなどの相補的反応性基を伴う反応は、本発明のコ
ンジュゲートの調製に利用される。
【０１２３】
場合によっては、コンジュゲーションに適した官能基が三環物質にないこともある。この場合、コンジュゲーションに適した官能基を持つように、「もとの」三環物質を修飾（または「官能化」）することが可能である。たとえば、三環物質にアミド基はあるがアミン基が望ましい場合、Ｈｏｆｍａｎｎ転位、Ｃｕｒｔｉｕｓ転位（アミドがアジドに変換されたら）またはＬｏｓｓｅｎ転位（アミドがヒドロオキサミドに変換された後、トリレン−２−塩化スルホニル／塩基で処理したら）によって、このアミド基を修飾してアミン基にすることが可能である。
【０１２４】
カルボキシル基を持つ小分子三環物質のコンジュゲートを調製可能であるが、この場合、カルボキシル基を持つ小分子三環物質をアミノ末端オリゴマーエチレングリコールとカップリングして、小分子三環物質をオリゴマーに共有結合的に連結しているアミド基を有するコンジュゲートを提供する。これは、たとえば無水有機溶媒中にてカルボキシル基を持つ小分子三環物質とアミノ末端化オリゴマーエチレングリコールとをカップリング試薬（ジシクロヘキシルカルボジイミドすなわち「ＤＣＣ」など）の存在下で組み合わせて実現可能である。
【０１２５】
さらに、ヒドロキシル基を持つ小分子三環物質のコンジュゲートを調製可能であるが、この場合、ヒドロキシル基を持つ小分子三環物質をオリゴマーエチレングリコールハロゲン化物とカップリングし、エーテル（−Ｏ−）連結小分子コンジュゲートを得る。これは、たとえば水素化ナトリウムを用いてヒドロキシル基を脱プロトン化した後、ハロゲン化物末端化オリゴマーエチレングリコールと反応させて実現可能である。
【０１２６】
さらに、ヒドロキシル基を持つ小分子三環部分のコンジュゲートを調製可能である（たとえば、式Ｉに包含される構造を有する三環部分など）が、この場合、ヒドロキシル基を持つ小分子三環部分を、ハロフォーメート基［ＣＨ３（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎＯＣ（Ｏ）−ハロなどであり、ハロは、クロロ、ブロモ、ヨードである］を持つオリゴマーエチレングリコールにカップリングし、炭素塩［−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−］連結小分子コンジュゲートを得る。これは、たとえば、三環部分と、ハロフォーメート基を持つオリゴマーエチレングリコールとを求核触媒（４−ジメチルアミノピリジンすなわち「ＤＭＡＰ」）の存在下で組み合わせ、対応する炭酸塩連結コンジュゲートを得て実施可能である。
【０１２７】
もうひとつの例では、まずケトン基を還元して対応するヒドロキシル基を形成することで、ケトン基を持つ小分子三環物質のコンジュゲートを調製することが可能である。その後、ヒドロキシル基を持った小分子三環物質を本明細書に記載のようにしてカップリング可能である。
【０１２８】
さらに別の例では、アミン基を持つ小分子三環物質のコンジュゲートを調製することが可能である。ひとつの方法において、アミン基を持つ小分子三環物質とアルデヒドを持つオリゴマーとを好適な緩衝液に溶解させた後、好適な還元剤（ＮａＣＮＢＨ３など）を加える。還元後、得られるのはアミン基含有小分子三環物質のアミン基とアルデヒドを持つオリゴマーのカルボニル炭素との間のアミン連結である。
【０１２９】
アミン基を持つ小分子三環物質のコンジュゲートを調製するためのもうひとつの方法では、一般にカップリング試薬（ＤＣＣなど）の存在下にて、カルボン酸を持つオリゴマーとアミン基を持つ小分子三環物質とを組み合わせる。得られるのは、アミン基含有小分子三環物質のアミン基とカルボン酸を持つオリゴマーのカルボニルとの間に形成されるアミド連結である。
【０１３０】
本発明の例示としての化合物は、以下の構造を有するものを含む。
【化２７】
0005643103.tif 000052
式中、
Ｄは、ＣまたはＮであり、
Ｙは、未置換であるか、あるいは置換されていてもよい、−ＣＨ２−、−ＣＨ−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−Ｓ−、ＣＨ２−Ｏ−、ＣＨ２−ＮＨ−、−Ｓ−ＣＨ２−、−Ｏ−ＣＨ２、−ＮＨ−ＣＨ２、−ＨＮ−、−Ｏ−、−Ｎ＝Ｃ−、−Ｃ＝Ｎ−、および−Ｓ−からなる群から選択され、
Ｘは、スペーサー部分であり、
ＰＯＬＹは、水溶性非ペプチドオリゴマーである。
【０１３１】
本発明のコンジュゲートでは、血液脳関門通過率が下がる。さらに、このコンジュゲートは、未修飾の親小分子薬剤に対して、少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％またはそれを超える生物活性を維持する。
【０１３２】
本明細書に開示のコンジュゲートの全容は記載のとおりであるが、最適な大きさのオリゴマーを以下のようにして同定可能であると思われる。
【０１３３】
まず、単分散または二峰性水溶性オリゴマーから得られるオリゴマーを小分子薬剤にコンジュゲートする。好ましくは、薬剤は経口的に生物学的利用可能なものであり、それ自体が無視できない血液脳関門通過率を呈するものである。次に、適当なモデルを用いてコンジュゲートが血液脳関門を通過する能力を判断し、未修飾の親の薬剤の場合と比較する。結果が望ましいものであれば、すなわち、たとえば通過率が有意に低減されていれば、コンジュゲートの生物活性をさらに評価する。好ましくは、本発明による化合物は、親の薬剤に対して有意な度合いの生物活性を保つ、すなわち、親の薬剤の生物活性の約３０％を超え、あるいはなお一層好ましくは親の薬剤の生物活性の約５０％を超える。
【０１３４】
モノマーのタイプは同じであるがサブユニット数が異なるオリゴマーを用いて上記のステップを１回以上繰り返し、結果を比較する。
【０１３５】
コンジュゲート化されていない小分子薬剤と比較して、血液脳関門を通過しにくくした各コンジュゲートについて、その経口生物学的利用率を評価する。これらの結果に基づいて、すなわち、所定の小分子内の所定の位置または場所における小分子と、さまざまな大きさのオリゴマーのコンジュゲートとを比較した結果に基づいて、生体膜通過性の低下、経口生物学的利用率、生物活性の最適なバランスを有するコンジュゲートを提供する上で最も効果的なオリゴマーの大きさを決めることが可能である。オリゴマーが小さければ、そのようなスクリーニングが実行可能になり、結果として得られるコンジュゲートの特性を効果的に調整できる。オリゴマーの大きさを少しずつ大きくして、実験的な設計手法を採用することで、生体膜通過率の低下、生物活性、経口生物学的利用率のバランスが望ましいコンジュゲートを有効に同定することができる。場合によっては、薬剤の経口生物学的利用率を実際に増加させるのに、本明細書に記載したオリゴマーの結合が有効である。
【０１３６】
たとえば、当業者であれば常法による実験を用いて、まず分子量と官能基の異なる一連のオリゴマーを調製した後、コンジュゲートを患者に投与して定期的に血液および／または尿のサンプルを採取して必要なクリアランスのプロファイルを得ることで、経口生物学的利用率を改善するのに最適な分子サイズと連結を判断することができる。試験したコンジュゲートごとに一連のクリアランスのプロファイルが得られてしまえば、好適なコンジュゲートを特定することが可能である。
【０１３７】
動物モデル（齧歯類と犬）を使用して、経口薬剤輸送について研究することも可能である。また、ｉｎ  ｖｉｖｏ以外の方法として、齧歯類の反転腸管の組織切片やＣａｃｏ−２細胞の単層膜組織培養モデルがあげられる。これらのモデルは、薬剤の経口薬剤生物学的利用率を予測する上で有用である。
【０１３８】
三環物質または三環物質のコンジュゲートならびに水溶性非ペプチドポリマーが三環系治療薬としての活性を持つか否かを判断するには、このような化合物を試験すればよい。三環物質系化合物には、哺乳動物および鳥類で鎮静作用、催眠作用、抗不安作用、静穏作用、抗痙攣作用、筋弛緩作用がある。また、哺乳動物では抗鬱薬および鎮痛薬としての作用も呈する。
【０１３９】
さまざまな細胞系を用いる、受容体に対するｉｎ  ｖｉｔｒｏでの結合研究が製薬業界での定法となっている。
【０１４０】
鎮静作用：チムニー試験：この試験は、マウスが垂直のガラス製円筒から３０秒以内に逆戻りして外に出る能力を判断するものである。有効薬用量で、マウスの５０％がこれに失敗する（ＥＤ５０）。
【０１４１】
皿試験：ペトリ皿（直径１０ｃｍ、高さ５ｃｍ、部分的に木のかんな屑に埋めてある）の中にいるマウスは、処理しなければ極めて短時間でよじ登って外に出る。３分間を超えて皿の中に残っているマウスが精神安定状態を示す。ＥＤ５０はマウスの５０％が皿の中に残る試験化合物用量に等しい。
【０１４２】
台座試験：未処理のマウスは１分未満しか台座におらず、標準的なマウス飼育箱の床にはい戻る。落ち着いたマウスは１分間を超えて台座にとどまる。マウスの５０％を台座にとどまらせる化合物量を特定することで、ＥＤ５０（腹腔内投与）を判断する。
【０１４３】
ニコチン拮抗試験：６匹からなる群のマウスに被験化合物を注射する。３０分後、対照（未処理）マウスを含めてマウスにサリチル酸ニコチン（２ｍｇ／ｋｇ）を注射する。対照マウスでは過剰な刺激すなわち、（１）痙攣に続いて（２）強直性伸筋フィット（ｆｉｔ）、さらに（３）死亡が認められる。マウスの５０％が過剰な刺激を示さない化合物量を特定することで、ＥＤ５０（腹腔内投与）を判断する。
【０１４４】
ストリキニーネ（硫酸塩として）に対する拮抗：試験では、マウスに被験化合物を経口投与し、３０分後に３ｍｇ／ｋｇ硫酸ストリキニーネを腹腔内投与する。４時間後に生き残ったマウスが、筋弛緩剤および抗痙攣薬としての化合物の活性を反映している。
【０１４５】
抗鬱薬の主な機能は、鬱状態の個人を正常に機能するところまで戻すことにある。これは、健常な個体に過剰な刺激を生むアンフェタミンなどの精神刺激と慎重に区別する必要がある。
【０１４６】
抗鬱薬活性の評価には、多くの異なる方法が用いられてきており、現在も用いられている。通常、これらの方法では、レセルピンまたはテトラベナジンなどの降下剤に対する拮
抗あるいは特定化合物（すなわちヨヒンビンまたは３，４−ジヒドロキシフェニルアラニン）の毒性の相乗的な増加と、新たな化合物と他の周知の抗鬱薬との薬剤作用の比較を必要とする。単一の試験だけでは新たな化合物が抗鬱薬であるか否かを判断することはできないが、抗鬱作用があれば、さまざまな試験で実証されるプロファイルによってそれが確立される。そのような多数の試験については後述する。
【０１４７】
オキソトレモリン：［１−（４−ピロリジノ−２−ブチニル）−２−ピロリジノン］を用いる低体温試験。オキソトレモリン（ならびにアポモルヒネおよびテトラベナジン）は、マウスで低体温応答を生成する。この応答をアトロピンなどの抗コリン薬やイミプラミンなどの抗鬱薬でブロックする。マウスにオキソトレモリン１ｍｇを腹腔内注射する。薬剤投与前と投与３０分後に体温低下を電子温度計で直腸測定する。対照マウス（オキソトレモリン単独）と処理マウス（オキソトレモリンと被験化合物）の約４℃の差を利用して、被験化合物の拮抗作用を示す。
【０１４８】
ヨヒンビン凝集毒性の増強：マウスに抗鬱薬を注射し、３０分後に塩酸ヨヒンビンを生理食塩水に入れたものを３０ｍｇ注射する。２時間後、ＬＤ５０を判断する。通常、３０ｍｇのヨヒンビンではどのマウスも死なない。抗鬱薬の存在下でヨヒンビンを投与すると、ヨヒンビンの毒性増加が観察される。被験化合物のＥＤ５０値を判断する。
【０１４９】
アポモルヒネによる齧りの増強：塩酸アポモルヒネ１０ｍｇ／ｋｇの皮下注射の１時間前に、マウスに被験化合物を腹腔内投与する。続いて、裏側にセロファンの付いた吸収紙を底に敷いたプラスチック製の箱（６「×１１」×５インチ）にマウスを入れる。３０分経過した終了時における紙の損傷度に、０から４まで評点を付ける。評点３および４は、この試験で化合物がアポモルヒネの増強物質であることを示す。
【０１５０】
三環物質誘導体自体または三環物質のコンジュゲートあるいはその誘導体が活性（鎮痛活性など）を有するかどうかを判断するために、このような化合物を試験することが可能である。たとえば、Ｋｏｌｅｓｎｉｋｏｖ  ｅｔ  ａｌ．  （１９９９）  Ｊ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．  Ｅｘｐ．  Ｔｈｅｒ．  ２９０：  ２４７〜２５２に記載されているようにして、目的の化合物をマウスに局所投与して鎮痛を評価する。簡単に説明すると、目的の化合物を含有するＤＭＳＯ溶液に、表記の時間（一般には２分間）尾の遠位部分（２〜３ｃｍ）を浸す。尾の処理溶液に浸した部分に対して試験を実施する。このようにして投与した作用剤の鎮痛作用は尾の曝露部分だけに限定されるからである。抗侵害または鎮痛は、基線遅延の２倍よりも大きい個々の動物の尾フリック遅延として定義される。基線遅延は一般に、２．５〜３．０秒間の範囲であり、鎮痛動物での組織の損傷を最小限に抑える最大カットオフ遅延は１０秒間である。ＥＤ５０値を判断することが可能である。
【０１５１】
三環物質誘導体自体または三環物質のコンジュゲートあるいはその誘導体の鎮痛活性を評価するためのもうひとつの方法では、「苦悶試験」を実施可能である。簡単に説明すると、０．７％の酢酸溶液をマウスに投与（ｉ．ｐ．）し、苦悶応答数を１０分間数える。その後、試験対象となる化合物を［たとえば、注射（皮下注射など）］によってマウスに投与し、以下の式を用いて抗侵害を阻害率で定量化する。阻害率％＝［（対照応答−試験応答）／対照応答］×１００。
【０１５２】
また、本発明は、薬学的賦形剤との組み合わせで本明細書に記載のコンジュゲートを含む医薬品も含む。通常は、コンジュゲート自体が固体状（沈殿物など）であり、これを固体または液体状のいずれかの好適な薬学的賦形剤と組み合わせることが可能である。
【０１５３】
例示としての賦形剤には、限定することなく、炭水化物、無機塩、抗微生物剤、酸化防止剤、界面活性剤、緩衝液、酸、塩基、およびこれらの組み合わせからなる群から選択さ
れるものを含む。
【０１５４】
糖、アルジトール、アルドン酸、エステル化糖などの誘導体化糖および／または糖ポリマーなどの炭化水素が賦形剤として含まれていてもよい。具体的な炭化水素賦形剤としては、たとえば、フルクトース、マルトース、ガラクトース、グルコース、Ｄ−マンノース、ソルボースなどの単糖類、ラクトース、スクロース、トレハロース、セロビオースなどの二糖類、ラフィノース、メレジトース、マルトデキストリン、デキストラン、スターチなどの多糖、マンニトール、マルチトール、ラクチトール、キシリトール、ソルビトール、ミオイノシトールなどのアルジトールがあげられる。
【０１５５】
賦形剤には、クエン酸、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸ナトリウム、硝酸カリウム、リン酸二水素ナトリウム、リン酸水素ナトリウム、およびこれらの組み合わせなどの無機塩または緩衝液を含むことも可能である。
【０１５６】
調製物は、微生物の成長を防止または遅らせるための抗微生物剤を含むものであってもよい。本発明に適した抗微生物剤の非限定的な例として、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、ベンジルアルコール、塩化セチルピリジニウム、クロロブタノール、フェノール、フェニルエチルアルコール、硝酸フェニル水銀、チメロサール、およびこれらの組み合わせがあげられる。
【０１５７】
調製物には酸化防止剤も含有させることが可能である。酸化防止剤は、酸化を防止して調製物中のコンジュゲートまたは他の成分の劣化を防ぐために用いられる。本発明で用いられる好適な酸化防止剤としては、たとえば、パルミチン酸アスコルビル、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチル化ヒドロキシトルエン、次亜リン酸、モノチオグリセロール、没食子酸プロピル、重硫酸ナトリウム、スルホン酸ナトリウムホルムアルデヒド、メタ重亜硫酸ナトリウム、これらこれらの組み合わせがあげられる。
【０１５８】
界面活性剤を賦形剤として含有してもよい。例示としての界面活性剤には、「Ｔｗｅｅｎ  ２０」および「Ｔｗｅｅｎ  ８０」などのポリソルベート、Ｆ６８およびＦ８８などのプロロニック（いずれもＢＡＳＦ、Ｍｏｕｎｔ  Ｏｌｉｖｅ，  ＮＪから入手可能）；ソルビタンエステル；レシチンといったリン脂質および他のホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、脂肪酸および脂肪酸エステルなどの脂質；コレステロールなどのステロイド；ＥＤＴＡ、亜鉛、他のこのような好適なカチオンなどのキレート化剤がある。
【０１５９】
薬学的に許容される酸または塩基も賦形剤として調製物中に含有させることができるものである。使用可能な酸の非限定的な例として、塩酸、酢酸、リン酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、ギ酸、トリクロロ酢酸、硝酸、過塩素酸、リン酸、硫酸、フマル酸、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される酸があげられる。好適な塩基の例として、限定することなく、水酸化ナトリウム、酢酸ナトリウム、水酸化アンモニウム、水酸化カリウム、酢酸アンモニウム、酢酸カリウム、リン酸ナトリウム、リン酸カリウム、クエン酸ナトリウム、ギ酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム、フマル酸カリウム、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される塩基があげられる。
【０１６０】
組成物中のコンジュゲートの量は多数の要因次第で変わるが、組成物を単位用量の容器で保存する場合は、治療有効用量であると最適であろう。治療有効用量は、コンジュゲートの量を増やしながら繰り返し投与して、どの量で臨床的に望ましい端点が得られるかを判断することで、実験的に定められるものである。
【０１６１】
組成物中の個々の賦形剤の量は、賦形剤の活性と、組成物の特定の必要性に応じて変わ
る。一般に、個々の賦形剤の最適量は、常法による実験すなわち、さまざまな量の賦形剤（低量から高量まで）を含有する組成物を調製し、安定性および他のパラメータを試験した上で、有意な副作用を伴わずに最適な効果が得られる範囲を求めることで決定される。
【０１６２】
しかしながら、賦形剤は通常、約１％から約９９重量％、好ましくは約５％〜９８重量％の量で組成物中に存在し、一層好ましくは約１５〜９５重量％が賦形剤であって、濃度３０重量％未満が最も好ましい。
【０１６３】
上述した薬学的賦形剤ならびに他の賦形剤、薬学的組成物に関する一般的な教示内容は、”Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ＆  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ”，  １９ｔｈ  ｅｄ．，  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｌｉａｍｓ，
（１９９５）、”Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ’ｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ”，  ５２ｎｄ  ｅｄ．，  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ，  Ｍｏｎｔｖａｌｅ，  ＮＪ  （１９９８）、Ｋｉｂｂｅ，  Ａ．Ｈ．，  Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，  ３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ａｍｅｒｉｃａｎ
Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ，  Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，
Ｄ．Ｃ．，  ２０００に記載されている。
【０１６４】
薬学的組成物は、さまざまな形態を取り得るものであり、この点に関して本発明は何ら限定されるものではない。例示としての調製物は、最も好ましくは、錠剤、カプレット、カプセル、ジェルキャップ、トローチ、分散液、懸濁液、溶液、エリキシル剤、シロップ、薬用キャンディなどの経口投与に適した形態、経皮パッチ、スプレー、坐剤および粉末である。
【０１６５】
経口投与により活性のあるコンジュゲートについては経口剤形が好ましく、錠剤、カプレット、カプセル、ジェルキャップ、懸濁液、溶液、エリキシル剤、シロップが含まれ、任意にカプセル化された複数の顆粒、ビーズ、粉末またはペレットも含まれる。このような剤形は、医薬製剤の分野の人々には周知であり、関連のテキストに説明されている従来の方法で調製される。
【０１６６】
錠剤およびカプレットは、たとえば、標準的な錠剤処理方法と装置を用いて製造可能である。本明細書に記載のコンジュゲートを含む錠剤やカプレットの調製には、直接打錠や顆粒成型の技術が好ましい。コンジュゲートだけでなく、錠剤やカプレットは通常、薬学的に許容される不活性キャリア材料、たとえば、バインダー、潤滑剤、崩壊剤、フィラー、安定剤、界面活性剤、着色剤、流動化剤などを含む。バインダーは、錠剤に結合性をもたせ、錠剤が損なわれないようにするものである。好適なバインダー材料としては、スターチ（コーンスターチおよびα化したスターチを含む）、ゼラチン、糖（スクロース、グルコース、デキストロース、ラクトースを含む）、ポリエチレングリコール、ワックス、ならびにアカシアアルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、セルロースポリマー（ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、微結晶セルロース、エチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースなどを含む）、Ｖｅｅｇｕｍなどの天然ガムおよび合成ガムがあげられるが、これに限定されるものではない。潤滑剤は、粉末の流れをよくして、圧力を緩和した際の粒子キャッピング（すなわち粒子の破損）を防いで錠剤を製造しやすくするのに用いられる。有用な潤滑剤としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸があげられる。崩壊剤は、錠剤を崩壊しやすくするために用いられるものであり、通常は、スターチ、クレー、セルロース、アルギン、ガムまたは架橋ポリマーである。フィラーとしては、たとえば、二酸化ケイ素、二酸化チタン、アルミナ、タルク、カオリン、粉末セルロース、および微結晶性セルロースなどの材料、ならびにマンニトール、尿素、スクロース、ラクトース、デキストロース、塩化ナトリウム、およびソルビトールなどの可溶性材料があげられ
る。安定剤は、従来技術において周知のように、酸化反応など薬剤の分解反応を阻害あるいは遅延させるのに用いられる。
【０１６７】
カプセルも好ましい経口剤形であり、この場合、液体またはゲル（ジェルキャップの場合）または固体（顆粒、ビーズ、粉末、ペレットなどの微粒子を含む）の形でコンジュゲート含有組成物をカプセル化することが可能である。好適なカプセルとしては、ハードカプセルおよびソフトカプセルがあげられ、通常はゼラチン、スターチまたはセルロース材料で作られる。２ピースのハードゼラチンカプセルについては、ゼラチンバンドなどで封止するのが好ましい。
【０１６８】
実質的に乾燥状態（一般に粉末あるいはケークの形をとり得る凍結乾燥物または沈殿物として）の非経口製剤、ならびに一般に液体である注射用に調製された製剤も含まれ、これは乾燥状態の非経口製剤を再構成する段階を必要とする。注射前に固体組成物を再構成するための好適な希釈剤の例として、注射用静菌水、５％デキストロース水溶液、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー液、生理食塩水、滅菌水、脱イオン水、およびこれらの組み合わせがあげられる。
【０１６９】
場合によっては、非経口投与を想定した組成物は、非水溶液、懸濁液またはエマルション（いずれも一般に滅菌されている）の形をとり得る。非水性溶媒または溶媒剤の例として、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油やトウモロコシ油などの植物油、ゼラチン、およびオレイン酸エチルなどの注入可能な有機エステルがあげられる。
【０１７０】
本明細書に記載の非経口製剤はまた、保存剤、湿潤剤、乳化剤、分散助剤などのアジュバントを含むものであってもよい。製剤は、滅菌剤を加えたり、細菌を捕捉するフィルタを用いた濾過、放射線照射または加熱によって滅菌される。
【０１７１】
また、コンジュゲートは、従来の経皮パッチまたは他の経皮輸送系を用いて皮膚から投与可能であり、ここで、当該コンジュゲートは、皮膚に貼り付けられたときに薬剤送達装置として作用する積層構造内に含まれている。そのような構造において、コンジュゲートは、上側の裏打ち層の下にある層すなわち「リザーバ」に含まれる。積層構造は、単一のリザーバを含むものであってもよいし、複数のリザーバを含むものであってもよい。
【０１７２】
コンジュゲートを直腸投与用の坐剤として処方することも可能である。坐剤に関しては、カカオバター（カカオ脂）、ポリエチレングリコール、グリセリンゼラチン、脂肪酸、およびこれらの組み合わせなどの（室温では固体のままであるが、体温で軟化、溶融または溶解する賦形剤など）坐剤の基剤材料とコンジュゲートを混合する。坐剤は、たとえば、以下の段階を実施（必ずしもここにあげた順序でなくてもよい）して調製可能である。坐剤の基剤材料を溶融させて溶融物を形成し、コンジュゲートを（坐剤の基剤材料の溶融前または溶融後のいずれかで）取り入れ、溶融物を型に注ぎ、溶融物を冷却して（溶融物の入った型を室温環境に置くなど）坐剤を形成し、型から坐剤を取り出す。
【０１７３】
また、本発明は、コンジュゲートによる治療に応答する症状のある患者に、本明細書に記載したようなコンジュゲートを投与する方法を提供するものである。この方法は、通常は経口的に、治療有効量のコンジュゲート（好ましくは医薬品の一部として提供される）を投与することを含む。経肺、経鼻、頬側、直腸、舌下、経皮、非経口投与などの他の投与モードについても企図される。本明細書で使用する場合、「非経口」という用語は、皮下、静脈内、動脈内、腹腔内、心臓内、くも膜下腔内、および筋肉内注射、ならびに点滴注射を含む。
【０１７４】
非経口投与を用いる場合は、上述したものよりも若干大きな、分子量が約５００から３０Ｋダルトンの範囲にある（分子量が約５００、１０００、２０００、２５００、３０００、５０００、７５００、１００００、１５０００、２００００、２５０００、３００００またはそれをさらに上回るなど）オリゴマーを使う必要があるかもしれない。
【０１７５】
この投与方法を用いて、特定のコンジュゲートの投与により治療や予防が可能な症状であれば、どのような症状でも治療できる。特定のコンジュゲートでどの症状を有効に治療できるかは、当業者であれば自明であろう。実際の投与用量は、被検体の年齢や体重、全身状態、ならびに治療する症状の重篤度、医療行為従事者の判断、投与されるコンジュゲートによって決まる。治療有効量は当業者間で周知であるおよび／または関連の参考テキストおよび文献に説明されている。通常は、治療有効量は、約０．００１ｍｇから１０００ｍｇの範囲、好ましくは０．０１ｍｇ／日から７５０ｍｇ／日の用量、一層好ましくは０．１０ｍｇ／日から５００ｍｇ／日の用量である。
【０１７６】
特定のコンジュゲート（繰り返すが、好ましくは医薬品の一部として提供される）の単位薬用量も、臨床医の判断や患者側の需要などに応じて、多岐にわたる投与スケジュールで投与可能である。具体的な投与スケジュールは、当業者であれば分かるか、常法で実験的に決定可能である。例示としての投与スケジュールとしては、限定することなく、１日５回、１日４回、１日３回、１日２回、１日１回、週３回、週２回、週１回、月２回、月１回、およびこれらのいずれかの組み合わせがあげられる。臨床端点に達したら、組成物の投与を中断する。
【０１７７】
本発明のコンジュゲートを投与することに関する利点のひとつに、親の薬剤よりも初回通過代謝が少なくなり得ることがある。このような結果は、実質的に腸管を通過することで代謝される多くの経口投与薬にとって好都合である。このように、所望のクリアランスの特性が得られるオリゴマーの分子サイズ、連結、共有結合の位置を選択することによって、コンジュゲートのクリアランスを調節可能である。当業者であれば、本明細書に記載の教示内容に基づいて、オリゴマーの理想的な分子サイズを判断できる。対応する非コンジュゲート化小薬剤分子との比較でコンジュゲートでの初回通過代謝の好ましい低下は、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０、少なくとも約４０、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％である。
【０１７８】
よって、本発明は、活性剤の代謝を減らす方法を提供するものである。この方法は、各々が安定した連結によって水溶性オリゴマーと共有結合した小分子薬剤由来の部分からなる単分散または二峰性コンジュゲートを提供する（水溶性オリゴマーと結合していない小分子薬剤の代謝率と比較した場合、当該コンジュゲートの代謝率が低下する）ステップと、コンジュゲートを患者に投与するステップと、を含む。一般に、投与は、経口投与、経皮投与、頬側投与、経粘膜投与、膣内投与、直腸投与、非経口投与、および経肺投与からなる群から選択される１つのタイプの投与法で実施される。
【０１７９】
多くのタイプの代謝を低下させる上で有用（第Ｉ相と第ＩＩ相の両方の代謝を低下させることが可能）ではあるが、このコンジュゲートは、小分子薬剤が肝臓の酵素（チトクロムＰ４５０アイソフォームのうちの１つ以上など）および／または１つ以上の腸内酵素によって代謝される場合に、特に有用である。
【０１８０】
本明細書に引用した論文、書籍、特許、特許公開、他の刊行物はいずれも、その内容全体を本明細書に援用するものである。本明細書の教示内容と援用した従来技術との間に矛盾が生じた場合は、本明細書における教示内容の意味が優先する。
【０１８１】
実験
以上、特定の好ましい実施形態および特定の実施形態に関して本発明を説明してきたが、上記の説明ならびに以下の実施例は、例示を意図したものであり、本発明の範囲を限定するものではないことを理解されたい。本発明の範囲内の他の態様、利点、改変は、本発明が属する分野の当業者には自明であろう。
【０１８２】
添付の実施例で取り上げる非ＰＥＧ化学試薬はいずれも、特に明記しないかぎり、業務入手可能なものである。ＰＥＧマーの調製については、たとえば、米国特許出願公開第２００５／０１３６０３１号明細書に記載されている。
【０１８３】
１Ｈ  ＮＭＲ（核磁気共鳴）データはいずれも、ＮＭＲスペクトロメータで生成した。特定化合物ならびに化合物ソースの一覧を以下にあげておく。
【実施例】
【０１８４】
実施例１
デシプラミン小ＰＥＧコンジュゲーション誘導体
【化２８】
0005643103.tif 000053
【０１８５】
デシプラミン、イミノジベンジル、水素化ナトリウム（ＮａＨ）、１−ブロモ−３−クロロプロパン、リチウムアミド（ＬｉＮＨ２）をＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ  Ｌｏｕｉｓ，  ＭＯ）から購入した。ＤＣＭをＣａＨ２から蒸留した。ＤＭＦ（無水）、トルエン（無水）、その他の有機溶媒は購入時のまま使用した。
【０１８６】
デシプラミン（２．００ｇ、６．６０ｍｍｏｌ）をメタノール（４０ｍＬ）および飽和ＮａＨＣＯ３（８０ｍＬ）に溶解させた。反応物を室温で３０分間保持したところ、溶液のｐＨは＞１０であった。メタノールを減圧下で除去した後、水溶液をＤＣＭで抽出（５０ｍＬ＋２５ｍＬ×２）した。混合有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。得られた残渣を真空乾燥によって一晩かけて固化し、黄色っぽい試料（１．７９ｇ、＞１００％収率）を得た。
【０１８７】
上記の遊離デシプラミン（１７０ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（３．２ｍＬ）に溶解させた。ＮａＨ（４６ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ、３当量）を加え、反応物を室温で５分間保持した。ｍＰＥＧ３−Ｂｒ（２８３μＬ、１．２８ｍｍｏｌ、２当量）を加え、反応物を一晩（１６時間）攪拌しておいた。透明な溶液が得られたら、ＮＨ４Ｃｌ（５０ｍＬ）で反応をクエンチし、ＤＣＭで抽出（１５ｍＬ×３）した。有機相を混合し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。濾過後、ＤＣＭを蒸発させ、ＤＭＦを高真空下でロータリーエバポレータで脱水した。得られた残渣をＢｉｏｔａｇｅ  １２Ｍカラムに仕込み、１５ＣＶ内でＤＣＭ中２〜２０％メタノールで精製した。２５４ｎｍで生成物を監視し、回収した（１９４．７ｍｇ、７４％収率）。生成物と開始材料との混合物も回収して保管した。
【０１８８】
他のデシプラミン誘導体合成には、同様の手法を用いてｍＰＥＧ５−ＢｒおよびｍＰＥＧ８−Ｂｒを使用した。生成物の品質を、ＮＭＲ、分析的−ＨＰＬＣでキャラクタライズし、ＬＣ−ＭＳ／ＭＡＬＤＩで同定した。
【０１８９】
デシプラミン（５）：１Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  １．７７  （２Ｈ，  ｑ，  Ｊ＝６．９  Ｈｚ），  ２．３７  （３Ｈ，  ｓ），  ２．６１  （２Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝６．９  Ｈｚ），  ３．１６  （３Ｈ，  ｓ），  ３．７９  （２Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝６．９  Ｈｚ），  ６．９１  （２Ｈ，  ｄｔ，  Ｊ＝２．１，  ７．５  Ｈｚ），  ７．０７〜７．１２  （６Ｈ，  ｍ）。
【０１９０】
ｍＰＥＧ３−デシプラミン（６ａ）（ｎ＝３）：Ｒｆ＝０．３６  （ＤＣＭ  ：  ＭｅＯＨ＝１０：１），  ＲＰ−ＨＰＬＣ  （ｂｅｔａｓｉｌ  Ｃ１８，  ０．５  ｍＬ／分，  １０〜８０％  ＡＣＮ  １０分間）  ６．４９分間，  ＭＡＬＤＩ  （ＭＨ＋）  ４１３．３；  １Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  １．７３  （２Ｈ，  ｂｓ），  ２．１９  （３Ｈ，  ｂｓ），  ２．４４  （２Ｈ，  ｂｓ），  ２．５１  （２Ｈ，  ｂｓ），  ３．１５  （４Ｈ，  ｓ），  ３．３７  （３Ｈ，  ｓ），  ３．５１〜３．６６  （１０Ｈ，  ｍ），  ３．７６  （２Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝６．６  Ｈｚ），  ６．９０  （２Ｈ，  ｄｔ，  Ｊ＝１．２，  ７．５  Ｈｚ），  ７．０６〜７．１５  （６Ｈ，  ｍ）。
【０１９１】
ｍＰＥＧ５−デシプラミン（６ｂ）（ｎ＝５）：Ｒｆ＝０．３４  （ＤＣＭ  ：  ＭｅＯＨ＝１０：１），  ＲＰ−ＨＰＬＣ  （ｂｅｔａｓｉｌ  Ｃ１８，  ０．５  ｍＬ／分，  １０〜８０％  ＡＣＮ  １０分間）  ８．３１分，  ＭＡＬＤＩ  （ＭＮａ＋）  ５２３．３；  １Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  １．７４  （２Ｈ，  ｂｓ），  ２．１８  （３Ｈ，  ｂｓ），  ２．４３  （２Ｈ，  ｂｓ），  ２．５０  （２Ｈ，  ｂｓ），  ３．１５  （４Ｈ，  ｓ），  ３．３８  （３Ｈ，  ｓ），  ３．４９〜３．６６  （１８Ｈ，  ｍ），  ３．７６  （２Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝６．６  Ｈｚ），  ６．９０  （２Ｈ，  ｄｔ，  Ｊ＝１．２，  ７．５  Ｈｚ），  ７．０６〜７．１５  （６Ｈ，  ｍ）．
【０１９２】
ｍＰＥＧ８−デシプラミン（６ｃ）（ｎ＝８）：Ｒｆ＝０．３２  （ＤＣＭ  ：  ＭｅＯＨ＝１０：１），  ＲＰ−ＨＰＬＣ  （ｂｅｔａｓｉｌ  Ｃ１８，  ０．５  ｍＬ／分，  １０〜８０％  ＡＣＮ  １０分間）  ８．３５分間，  ＭＡＬＤＩ  （ＭＮａ＋）  ６５５．５；  １Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  １．７４  （２Ｈ，  ｂｓ），  ２．１８  （３Ｈ，  ｂｓ），  ２．４３  （２Ｈ，  ｂｓ），  ２．５１  （２Ｈ，  ｂｓ），  ３．１５  （４Ｈ，  ｓ），  ３．３７  （３Ｈ，  ｓ），
３．３８  （３Ｈ，  ｓ），  ３．５２〜３．６６  （３０Ｈ，  ｍ），  ３．７６  （２Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝６．６  Ｈｚ），  ６．９０  （２Ｈ，  ｄｔ，  Ｊ＝１．２，  ７．５  Ｈｚ），  ７．０６〜７．１５  （６Ｈ，  ｍ）。
【０１９３】
第２級アミン誘導体の全合成
【化２９】
0005643103.tif 000054
ＭＣＥマイクロ波反応管において、イミノジベンジル（１．９５ｇ、１０ｍｍｏｌ）をトルエン（１０ｍＬ）に懸濁させた。この溶液をＮ２下で保護した。１−ブロモ−３−クロロプロパン（１．４８ｍＬ、１５ｍｍｏｌ）を加えた後、溶液が室温で透明になった。
続いてＬｉＮＨ２（２７６ｍｇ、１２ｍｍｏｌ）を加え、管を密閉した。１２０℃で１８時間にわたり、マイクロ波反応を実施した。飽和ＮａＨＣＯ３水溶液を用いて反応をクエンチし、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ×２）で抽出した。混合有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。得られた残渣をＢｉｏｔａｇｅ  ２５Ｍカラムに仕込み、１５ＣＶでヘキサン中１〜６％ＥｔＯＡｃにて溶出した。純粋な試料画分を用いてＮＭＲを実施し、他の画分混合物をすべて組み合わせた。高真空下で一晩乾燥させた後、わずかに黄色っぽい生成物（２．５７ｇ、９５％収率）を回収した。
【０１９４】
ｍＰＥＧ７−デシプラミン：上記のイミノジベンジルアルキル化生成物の混合物（３２５ｍｇ、１．２ｍｍｏｌ）をｍＰＥＧ７−ＮＨ２（３４０μＬ、１．０ｍｍｏｌ）と一緒にマイクロ波反応管に加えた。Ｋ２ＣＯ３（２０７ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）をＨ２Ｏ（１ｍＬ）と一緒に加えた。開始材料が最表層に懸濁し、加熱されるまで水相の攪拌が困難であった。１２０℃で２時間にわたり、マイクロ波反応を実施した。反応物でのｍＰＥＧ−ＮＨ２の消失をＴＬＣで監視した。次に、反応物をＮａＨＣＯ３水溶液で希釈し、ＤＣＭ（１０ｍＬ×３）で抽出した。混合有機相をＭｇＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、溶媒を減圧下で除去した。得られた残渣をＢｉｏｔａｇｅ  ２５Ｍカラムに仕込み、２０ＣＶにてＤＣＭ中２〜１８％メタノール溶出で精製した。一晩乾燥させた後、無色の生成物（１９３ｍｇ、３４％収率）を回収した。所望の生成物をＮＭＲおよびＬＣ−ＭＳで同定し、分析的ＨＰＬＣによって純度が９８％を超えることが分かった。
【０１９５】
ｍＰＥＧ３−デシプラミン：上記と同様にして反応を実施した。しかしながら、生成物の混合物では、ＴＬＣでは分離できないモノ対ジ−アルキル化生成物の比がほぼ１：１であった。Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｆｌａｓｈ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（１２Ｍの逆相カラム、１６ＣＶで２５〜１００％ＣＡＮ）による精製で、所望の生成物（１８７ｍｇ、２５％収率）が９８％を超える純度で得られた。
【０１９６】
５−（３−クロロ−プロピル）−１０，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ｂ，ｆ］アゼピン（３０）：Ｒｆ＝０．２２  （Ｈｅｘ  ：  ＥｔＯＡｃ＝１６  ：１），  ＲＰ−ＨＰＬＣ  （ｂｅｔａｓｉｌ  Ｃ１８，  ０．５  ｍＬ／分，  １０〜８０％  ＡＣＮ  １０分間）  ９．５５分間，  ＬＣ−ＭＳ  （ＥＳＩ，  ＭＨ＋）  ２７２．２；  １Ｈ
ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ２．０４  （２Ｈ，  ｑ，  Ｊ＝６．６  Ｈｚ），  ３．１６  （４Ｈ，  ｓ），  ３．５７  （２Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝６．３
Ｈｚ），  ３．９０  （２Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝６．３  Ｈｚ），  ６．９３  （２Ｈ，  ｄｔ，  Ｊ＝１．２，  ６．９  Ｈｚ），  ７．０７〜７．１６  （６Ｈ，  ｍ）。
【０１９７】
Ｎ−ｍＰＥＧ３−３−（１０，１１−ジヒドロ−ジベンゾ［ｂ，ｆ］アゼピン−５−イル）−プロピルアミン（３４ａ）：Ｒｆ＝０．４３  （ＤＣＭ  ：  ＭｅＯＨ＝１０：１），  ＲＰ−ＨＰＬＣ  （ｂｅｔａｓｉｌ  Ｃ１８，  ０．５  ｍＬ／分，  １０〜８０％  ＡＣＮ  １０分間）  ６．４９分間，  ＬＣ−ＭＳ  （ＥＳＩ，  ＭＨ＋）  ３９９．３；  １Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  ２．０５〜２．１３  （２Ｈ，  ｍ），  ３．０５  （４Ｈ，  ｂｓ），  ３．１５  （４Ｈ，  ｓ），  ３．３１  （３Ｈ，  ｓ），  ３．４３〜３．５２  （６Ｈ，  ｍ），  ３．６０〜３．６４
（２Ｈ，  ｍ），  ３．７６  （２Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝６．０  Ｈｚ），  ３．８５  （２Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝６．０  Ｈｚ），  ６．９４  （２Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝７．４  Ｈｚ），  ７．０４〜７．１７  （６Ｈ，  ｍ）。
【０１９８】
Ｎ−ｍＰＥＧ７−３−（１０，１１−ジヒドロ−ジベンゾ［ｂ，ｆ］アゼピン−５−イル）−プロピルアミン（３４ｂ）：Ｒｆ＝０．４５  （ＤＣＭ  ：  ＭｅＯＨ＝１０：１），  ＲＰ−ＨＰＬＣ  （ｂｅｔａｓｉｌ  Ｃ１８，  ０．５  ｍＬ／分，  １０〜８０％  ＡＣＮ  １０分間）  ６．３９  分間，  ＬＣ−ＭＳ  （ＥＳＩ，  ＭＨ＋）  ５７
５．４；  １Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）  δ  １．９２〜１．９６
（２Ｈ，  ｍ），  ２．８１〜２．８８  （４Ｈ，  ｍ），  ３．１４  （４Ｈ，  ｓ），  ３．３６  （３Ｈ，  ｓ），  ３．５１〜３．６７  （２６Ｈ，  ｍ），  ３．８１  （２Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝６．３  Ｈｚ），  ６．９１  （２Ｈ，  ｔ，  Ｊ＝７．２  Ｈｚ），  ７．０５〜７．１４  （６Ｈ，  ｍ）。
【０１９９】
【表１−１】
0005643103.tif 000055
【０２００】
実施例２
ｍＰＥＧ−ｎ−カルバマゼピンの合成
【化３０】
0005643103.tif 000056
カルバマゼピン（１１８ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）を５ｍｌのＴＨＦに溶解させ、この溶液にＮａＨ（６０％、６０ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）を加えた。ｍＰＥＧｎ−Ｂｒ［ｎ＝３、５、７］（０．６ｍｍｏｌ）を加える前に混合物を５分間攪拌した。得られた混合物を室温にて１４時間攪拌した。固体を除去し、１５０ｍｌのジクロロメタンを加えた。有機相をＨ２Ｏ（２×１５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。粗生成物をカラムクロマトグラフィ（Ｂｉｏｔａｇｅ  Ｆｌａｓｈ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  Ｓｙｓｔｅｍ、［Ａ：ＭｅＯＨ、１〜４％（２０ＣＶ）、４〜６％（１０ＣＶ）、Ｂ：ＤＣＭ］で精製した。所望の生成物を粘着性のある油として得た（収率：６０〜８０％）。
【０２０１】
ｍＰＥＧ３−Ｎ−カルバマゼピン  １Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．４８〜７．３１  （ｍ，  ８Ｈ），  ６．９２  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．５９  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．５３  （ｍ，  ６Ｈ），  ３．４６  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．３８  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．３４  （ｍ，  ２Ｈ）．  ＬＣ−ＭＳ：  ３８３．２  （Ｍ  ＋  Ｈ）＋。
【０２０２】
ｍＰＥＧ５−Ｎ−カルバマゼピン  １Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．４８〜７．３１  （ｍ，  ８Ｈ），  ６．９２  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．６６〜３．５４  （ｍ，  １６Ｈ），  ３．４５  （ｍ，  ２Ｈ），  ３．３８  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．３３  （ｍ，  ２Ｈ）．  ＬＣ−ＭＳ：  ４７１．２  （Ｍ  ＋  Ｈ）＋。
【０２０３】
ｍＰＥＧ７−Ｎ−カルバマゼピン  １Ｈ  ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＣＤＣｌ３）：  δ  ７．４８〜７．３１  （ｍ，  ８Ｈ），  ６．９２  （ｓ，  ２Ｈ），  ３．６６〜３．５５  （ｍ，  １８Ｈ），  ３．５４〜３．５１  （ｍ，  ６Ｈ），  ３．４４
（ｍ，  ２Ｈ），  ３．３８  （ｓ，  ３Ｈ），  ３．３１  （ｍ，  ２Ｈ）．  ＬＣ−ＭＳ：  ５５９．３  （Ｍ  ＋  Ｈ）＋。
【０２０４】
実施例３
ｍＰＥＧｎ−Ｎ−アミトリプチリンコンジュゲートの合成
【化３１】
0005643103.tif 000057
【０２０５】
５−シクロプロピル−１０，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−オール（３）の合成：
攪拌機を取り付けた３つ首丸底フラスコに、（０．２４３ｇ、０．００９ｍｏｌ）のマグネシウムターニングと２．５ｍＬの乾燥ＴＨＦを入れた。反応物を攪拌して、金属を溶解させた。この時点で、温度を６０℃まで上昇させ、シクロプロピルブロミド（１．２１ｇ、０．０１０ｍｏｌ）を滴下して加えた。反応混合物を７０℃で１．５時間還流した後、６０℃まで温度を下げた。次に、（１．０４ｇ、０．００５ｍｏｌ）の１０，１１−ジヒドロ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−オンを滴下して加えた。添加時、溶液の色が紫になった。添加終了後に温度を７０℃まで上昇させた。反応物をさらに２時間還流し、ＨＰＬＣを用いて反応の進み具合を監視した。塩化アンモニウム／Ｈ２Ｏ（７．５ｍＬ）を加えて反応をクエンチし、フラスコを氷浴中に入れた。得られた溶液を濾過し、濾液を、ＤＣＭ（１００ｍＬ）を仕込んでおいた２５０ｍＬ容の分液漏斗に移した。次に、最後はＮａＣｌ／Ｈ２Ｏ溶液（８０ｍＬ）を加えた。有機相を除去し、Ｎａ２ＳＯ４上で２時間乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、生成物を真空下で一晩乾燥させた。１Ｈ  ＮＭＲおよびＬＣ／ＭＳによって生成物を確認した。（収率約５２％）。
【０２０６】
−５−（３−ブロモ−プロピリデン）−１０，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン（４）の合成：１００ｍＬ容の丸底フラスコに、５−シクロプロピル−１０，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテン−５−オール（０．１３０ｇ、０．０００６ｍｏｌ）を１ｍＬの酢酸と一緒に入れた。固体を溶解させ、溶解した時点で反応混合物を１０℃まで冷却した。次に、３３％臭化水素酸溶液（０．５ｍＬの臭化水素酸と０．５ｍＬの酢酸；合計１ｍＬ）をフラスコに加えた。反応の進み具合をＨＰＬＣで監視しながら反応物をさらに３０分間攪拌しておいた。次に、反応混合物を分液漏斗に移し、ＤＣＭ（１００ｍＬ）を加えた。有機層を回収し、Ｈ２Ｏ（１×１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で２時間乾燥させた。得られた生成物を、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（Ｂｉｏｔａｇｅ  ２５Ｍカラム）を用いてシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィで精製した。生成物を１Ｈ  ＮＭＲとＬＣ／ＭＳで確認した（収率約６２％）。
【０２０７】
ｍＰＥＧｎ−Ｎ−アミトリプチリン（６）の合成：１００ｍＬ容の丸底フラスコで、（０．１２０ｇ、０．０００４ｍｏｌ）の５−（３−ブロモ−プロピリデン）−１０，１１−ジヒドロ−５Ｈ−ジベンゾ［ａ，ｄ］シクロヘプテンとアセトン（１ｍＬ）を固体が完
全に溶解するまで混合した。次に、（０．１３７ｇ、０．０００８ｍｏｌ）のｍＰＥＧｎ−メチルアミンを加えた。最後に、（０．２６７ｇ、０．００２ｍｏｌ）のＫ２ＣＯ３をアセトン（５ｍＬ）と一緒に加えた。反応混合物を７０℃還流まで加熱した。８時間後、反応が終わっていることをＨＰＬＣで確認した。冷却後、フラスコにＤＣＭ（１００ｍＬ）を加え、得られた溶液を分液漏斗に入れた。有機層を除去し、ＮａＣｌ／Ｈ２Ｏ溶液（１×１００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で２時間乾燥させた。得られた生成物を、ＭｅＯＨ／ＤＣＭ（Ｂｉｏｔａｇｅ  ２５Ｍカラム）を用いてシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィで精製し、所望の生成物を得た。（収率約１３〜２０％）。
【０２０８】
ｍＰＥＧ３−Ｎ−アミトリプチリン：１Ｈ−ＮＭＲ  （３００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）  δ  ７．２４〜７．０２  （ｍ，  ８Ｈ），  ５．７９  （ｔ，  １Ｈ），  ３．５０〜３．４１  （ｍ，  １０Ｈ）  ，  ３．１８  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．７５  （ｂｒ，  ４Ｈ），  ２．４１〜２．５５  （ｍ，  ５Ｈ），  ２．１３  （ｂｒ，２Ｈ）
，  ２．０４  （ｓ，  ３Ｈ）；  ＬＣ−ＭＳ：  Ｃａｌｃ．  ４０９．４；  実測値。４１０．４  （ＭＨ＋）。
【０２０９】
ｍＰＥＧ５−Ｎ−アミトリプチリン：１Ｈ−ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．２２〜７．１４  （ｍ，  ８Ｈ），  ５．８５  （ｔ，  １Ｈ），  ３．５０〜３．４５  （ｍ，  ２０Ｈ）  ，  ３．２３  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．９０  （ｂｒ，  ４Ｈ），  ２．５１〜２．５０  （ｍ，  ５Ｈ），  ２．４１  （ｂｒ，２Ｈ）
，  ２．０１  （ｓ，  ３Ｈ）；  ＬＣ−ＭＳ：  Ｃａｌｃ．  ４９７．４；  実測値。４９８．４  （ＭＨ＋）。
【０２１０】
ｍＰＥＧ６−Ｎ−アミトリプチリン：１Ｈ−ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．２１〜７．１２  （ｍ，  ８Ｈ），  ５．８２  （ｔ，  １Ｈ），  ３．５１〜３．４３  （ｍ，  ２４Ｈ）  ，  ３．２３  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．９０  （ｂｒ，  ４Ｈ），  ２．５１〜２．５０  （ｍ，  ５Ｈ），  ２．４１  （ｂｒ，  ２Ｈ）  ，  ２．０７  （ｓ，  ３Ｈ）；  ＬＣ−ＭＳ：  Ｃａｌｃ．  ５４１．４；  実測値。５４２．３  （ＭＨ＋）。
【０２１１】
ｍＰＥＧ７−Ｎ−アミトリプチリン：１Ｈ−ＮＭＲ  （５００  ＭＨｚ，  ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．３５〜７．１５  （ｍ，  ８Ｈ），  ５．９０  （ｔ，  １Ｈ），  ３．５１〜３．２９  （ｍ，  ２８Ｈ）  ，  ３．２３  （ｓ，  ３Ｈ），  ２．８６  （ｂｒ，  ４Ｈ）  ２．７９〜２．４２  （ｍ，  ５Ｈ），  ２．３６  （ｂｒ，２Ｈ）  ，  ２．１０  （ｓ，  ３Ｈ）；  ＬＣ−ＭＳ：  Ｃａｌｃ．  ５８５．４；  実測値。５８６．３  （ＭＨ＋）。
【０２１２】
実施例４
ＰＥＧ−ドキセピン合成：
【化３２】
0005643103.tif 000058
【０２１３】
ＰＥＧ−ドキセピン合成（別の方法）：
【化３３】
0005643103.tif 000059
【０２１４】
実施例５
ヒスタミン受容体結合アッセイ
組換えヒトＨ１、Ｈ２、Ｈ３またはＨ４ヒスタミン受容体を発現するＣＨＯ細胞から調製した膜で、放射性リガンド結合アッセイを用いて、アミトリプチリンと４つのｍＰＥＧコンジュゲートの受容体結合親和性を評価した。
【０２１５】
さまざまな濃度の被験化合物の存在下、膜を一定濃度の放射性リガンドと一緒にインキュベートして、競合結合実験を実施した。使用した放射性リガンドは、各受容体サブタイプに特異的であった。アッセイ条件を表２にあげておく。インキュベーション後、膜を洗浄し、結合放射能を測定した。過剰な未標識リガンドの存在下で非特異的結合を測定した。この値を全結合から差し引いて、各被験化合物濃度での特異的結合を得た。
【０２１６】
ＩＣ５０値については用量応答曲線の非線形回帰分析結果から取得し、試験した最高濃度で＞５０％阻害を示した化合物にかぎって計算で求めた。Ｋｉについては、同一のアッセイ条件下で事前に求めた実験Ｋｄ値でＣｈｅｎｇ  Ｐｒｕｓｏｆｆ補正を用いて取得した。
【０２１７】
アミトリプチリンおよびｍＰＥＧ−アミトリプチリンコンジュゲートの結合親和性を表１に示す。アミトリプチリンおよびＰＥＧ−アミトリプチリンコンジュゲートは、Ｈ１受容体に対して高い親和性結合を示した。ＰＥＧコンジュゲーションによって結合親和性が２０分の１未満となり、この作用はＰＥＧサイズ依存性であった。
【０２１８】
Ｈ２受容体での結合親和性は、試験したすべての分子でＨ１受容体よりも大きさがほぼ３桁低かった。ｍＰＥＧコンジュゲーションによってＨ２受容体での結合親和性も低下し、この作用もＰＥＧサイズ依存性であった。
【０２１９】
Ｈ２受容体では、ｍＰＥＧ−６およびｍＰＥＧ−７アミトリプチリンのＫｉ値を判断することができなかった。これは、試験した最高濃度で＞５０％阻害を観察できなかったことによるものである。Ｈ２受容体での結合親和性の喪失（親に対して＞６３倍）は、Ｈ１受容体での結合親和性の喪失（親に対して＜２３倍）よりも大きかったことから、ｍＰＥＧコンジュゲーションによってＨ１：Ｈ２受容体選択性が「高まり」、ｍＰＥＧ−アミトリプチリンコンジュゲートをＨ１受容体に対して一層選択的にしたと思われる。Ｈ３およびＨ４受容体に対しては、試験した最高濃度で測定可能な結合が検出されなかった。アミ
トリプチリンおよびｍＰＥＧ−アミトリプチリンコンジュゲートの受容体結合選択性はＨ１＞＞＞Ｈ２＞Ｈ３＝Ｈ４であった。
【０２２０】
【表１−２】
0005643103.tif 000060
【０２２１】
【表２】
0005643103.tif 000061
【０２２２】
実施例６
ナトリウムチャネルアッセイ
単離した心筋（ヒト心房筋細胞）と神経（ラット後根神経節）細胞を用いて、ホールセルパッチクランプ法でカルバマゼピンとその３つのコンジュゲートがナトリウムチャネルに対しておよぼす影響をｉｎ  ｖｉｔｒｏにて評価し、そのブロック特性を判断した。
【０２２３】
心肺バイパス術を受けている患者の心臓から手術時に得たヒト右心房付属枝の標本からヒト筋細胞を取得した。この手順では、桿形のイオン耐性細胞が生成され、これを単離後２４時間以内に使用した（Ｃｒｕｍｂ  ｅｔ  ａｌ．，  １９９５，  Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２６８：Ｈ１３３５〜Ｈ１３４２）。
【０２２４】
生後１４〜１８日目のラットから後根神経節ニューロンを調製した（Ｂｌａｉｒ  ａｎｄ  Ｂｅａｎ，  ２００２，  Ｊ  Ｎｅｕｒｏｓｃｉ  ２２：１０２７７〜１０２９０）。動物にイソフルランで麻酔し、断頭し、神経節を取り出した。神経節片を処理して個々の細胞を生成し、これを単離後４８時間以内に使用した。
【０２２５】
高倍率可視拡大下で正確に顕微操作しながら２３±１℃でホールセルパッチクランプ技術を実施し、ナトリウム電流を測定した。ガラスピペットを精密研磨し、先端径１〜４μｍとした。電解質の「内側の」溶液（組成：１１５ｍＭのＣｓＦ、２０ｍＭのＣｓＣｌ、１０ｍＭのＮａＦ、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、５ｍＭのＥＧＴＡ；ＣｓＯＨでｐＨを７．２に調整）を一杯に充填したピペットの先端を細胞の上に位置決めした。細胞は「外側の」
バス溶液（１１５ｍＭの塩化ＴＭＡ、１０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＣｓＣｌ、１．８ｍＭのＣａＣｌ２、１．２ｍＭのＭｇＣｌ２、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１１ｍＭのデキストロース、ＴＭＡ−ＯＨでｐＨを７．４に調整からなる）中にあった。ピペットの先端の抵抗値は、内側の溶液が充填された状態で約１．０〜２．０ＭΩであった。次に、ピペット内に吸引力を加え、細胞膜を先端に貼り付けた。次に、別の吸引パルスで膜を破り、細胞内への電気的な導通状態を作った。次に、細胞内はパッチピペットを満たしていた溶液で透析状態になった。
【０２２６】
細胞膜の破裂（ホールセルモードに入った）後、細胞が内側の溶液で透析され、１Ｈｚ（３〜５分）のペースになったため、電流動態と振幅を安定させた（０．１Ｈｚでの一連の電圧パルスによって導いた電流を重畳した）。電圧パルスを保持電位の−１２０ｍＶから−２０ｍＶ（４０ｍｓパルス幅）までにしてナトリウム電流（ＩＮａ）を測定した。内向きのピーク電流をＩＮａで測定した。ペース速度０．１および３Ｈｚについて検討した。細胞に濃度０．１、１、３、１０、３０、１００μＭでの被験物品を累積的に加えた。化合物のストック溶液については、いずれも濃度１０ｍＭでＤＭＳＯにて調製した。細胞感度を試験するために、被験物品への曝露後に１μＭのＴＴＸ（テトロドトキシン）を加えた。２心筋細胞をＴＴＸに曝露するとＩＮａが４７．２および５６．８％低下した。２神経細胞をＴＴＸに曝露するとＩＮａが９３．２および９６．８％低下した。
【０２２７】
パッチクランプ増幅器（Ａｘｏｐａｔｃｈ  １−Ｂ，  Ａｘｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を用いて電流と電圧を記録した。電圧クランプパルスの生成とデータ取得については、電気生理学のソフトウェア（ｐＣＬＡＭＰバージョン９．２、Ａｘｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，  現ＭＤＳ，  Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，  ＣＡ）を用いてコンピュータで制御した。データを、被験物品導入前（対照）の電流振幅との比較で、被験物品の存在下での定常状態の作用に達した後の電流低下量として測定した電流振幅の低下率％で示した。各細胞が自己の対照として機能した。
【０２２８】
ＧｒａｐｈＰａｄのＰｒｉｓｍ  ５．０１ソフトウェアを使用して、心筋と神経細胞のＩＮａについて用量応答曲線の非線形回帰分析から近似のＩＣ５０値（表３）を得た。あるいは、ＩＮａの＞５０％阻害が得られなかった場合は、試験した最高濃度（１００μＭ）での平均阻害率±ＳＥＭについてデータを分析した。
【０２２９】
カルバマゼピンおよびそのＰＥＧコンジュゲートを、心筋と神経細胞のナトリウムチャネルの速度依存性阻害について試験した。ＰＥＧコンジュゲートはいずれも、心筋（図１）と神経細胞（図２）のナトリウムチャネルの両方で親化合物と同様の活性を示した。アッセイ条件下では、最大１００μＭの濃度を用いたときにすべての被験物品でナトリウムチャネルの不完全なブロックが生成され、信頼できるＩＣ５０は得られなかった。どの被験物品でも、神経細胞ＩＮａ対心筋ＩＮａの親和性が低くなった（図３）。親化合物の応答は、カルバマゼピンのほうが神経細胞ＩＮａ対心筋ＩＮａの親和性が低いことを示す刊行物にある報告と一致していた。これらのデータから、ＰＥＧコンジュゲーションでは、心筋と神経細胞のナトリウムチャネルで親のカルバマゼピンの固有の薬理は変化しないと思われる。
【０２３０】
【表３】
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【０２３１】
実施例７
ノルアドレナリントランスポーター結合アッセイ
ノルアドレナリントランスポーターを発現するラット前脳から調製した膜における放射性リガンド結合アッセイを用いてデシプラミンおよび５つのＰＥＧコンジュゲートの結合親和性を評価した。
【０２３２】
さまざまな濃度（親で０．１ｎＭ〜３μＭ、ＰＥＧコンジュゲートで３ｎＭ〜１００μＭ）の被験化合物の存在下、膜を１．０ｎＭの放射性リガンドである［３Ｈ］−ニソキセチンと一緒にインキュベートして、競合結合実験を実施した。５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．４）、３００ｍＭ  ＮａＣｌ、５ｍＭ  ＫＣｌ中、０〜４℃で４時間かけて反応を実施した。インキュベーション後、膜を洗浄し、結合放射能を測定した。コールドリガンドとして過剰なデシプラミン（１．０μＭ）の存在下で非特異的結合を測定した。この値を全結合から差し引いて各被験化合物濃度での特異的結合を得た。
【０２３３】
ＩＣ５０値については用量応答曲線（図４）の非線形回帰分析結果から取得し、試験した最高濃度で＞５０％阻害を示した化合物では計算で求めた。Ｋｉについては、これらのアッセイ条件下で事前に求めた実験Ｋｄ値でＣｈｅｎｇ  Ｐｒｕｓｏｆｆ補正を用いて取得した。
【０２３４】
デシプラミンおよびｍＰＥＧ−デシプラミンコンジュゲートの結合親和性を表４に示す。ＰＥＧ−デシプラミンコンジュゲートは、デシプラミンよりもノルアドレナリントランスポーターに対する親和性が低かった。ＰＥＧコンジュゲーションによって結合親和性が７３９分の１未満となり、この作用はコンジュゲーション部位での化学依存性であった。
【０２３５】
親と比較して、結合親和性の喪失は、同様のＰＥＧサイズ（それぞれ、親に対して７３９〜１０５８分の１と２９７２〜３３３６分の１）でｍＰＥＧ−ＮＨ−コンジュゲートよりもｍＰＥＧ−Ｎ−のほうが小さかった。
【０２３６】
【表４】
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【０２３７】
実施例８
ムスカリニック受容体結合アッセイ
Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３、Ｍ４またはＭ５ムスカリニックアセチルコリン受容体を発現するＣＨＯ細胞から調製した膜で、放射性リガンド結合アッセイを用いて、アミトリプチリンと４つのアミトリプチリン−ＰＥＧコンジュゲートの受容体結合親和性を評価した。さまざまな濃度の被験化合物の存在下、膜を一定濃度の放射性リガンドと一緒にインキュベートして、競合結合実験を実施した。すべての受容体サブタイプで、０．８ｎＭの３Ｈ−Ｎ−メチルスコポラミンを放射性リガンドとして使用した。５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ  ＨＣｌ、１０ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１ｍＭ  ＥＤＴＡを含有する緩衝液中にて、インキュベーションを２５℃で２時間実施した。インキュベーション後、膜を洗浄して結合放射能を測定した。コールドリガンドとしての過剰なアトロピンの存在下で非特異的結合を測定した。この値を全結合から差し引いて、各被験化合物濃度での特異的結合を得た。ＩＣ５０値については用量応答曲線の非線形回帰分析結果から取得し、試験した最高濃度で＞５０％阻害を示した化合物にかぎって計算で求めた。Ｋｉについては、これらのアッセイ条件下で事前に実験的に求めたＫｄ値でＣｈｅｎｇ  Ｐｒｕｓｏｆｆ補正を用いて取得した。
【０２３８】
５つのムスカリニック受容体サブタイプでのアミトリプチリンおよびＰＥＧコンジュゲートの結合親和性を表１にあげておく。アミトリプチリンは、すべてのムスカリニック受容体サブタイプにＫｉ値約１０〜９０ｎＭの範囲という高い結合親和性を示し、どのムスカリニック受容体サブタイプでも選択性がわずかであった。これとは対照的に。ＰＥＧコンジュゲートではすべてのサブタイプの結合親和性の顕著な低下が認められ、どの受容体サブタイプでもＫｉは１０分の１〜１００分の１に低下した。いくつかの事例では、試験した最高濃度で放射性リガンド結合の有意な阻害が得られなかったため、データには「有意な結合なし」と表示してある。これらのデータから、ＰＥＧコンジュゲーションによって、ムスカリニックアセチルコリン受容体に対するアミトリプチリンの結合親和性が有意に低下すると思われる。
【０２３９】
【表５】
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【０２４０】
実施例９
鎮痛薬アッセイ
鎮痛薬アッセイを使用して、特定の化合物がマウスにおける内臓痛を低減および／または予防可能か否かを判断した。
【０２４１】
このアッセイでは、オスのＣＤ−１マウス（１群あたり５〜８匹）を使用した。それぞれのマウスは、研究日に０．０１５〜０．０３０ｋｇであった。マウスを標準的なプロトコールで処理した。
【０２４２】
これらのマウスに、酢酸溶液投与の３０分前に、水溶性非ペプチドオリゴマーの共有結合のない化合物、水溶性非ペプチドオリゴマーを共有結合的に結合した化合物を含む対応する物質、あるいは対照溶液を、「あらかじめ処理した」単回用量で（ＩＶ、ＳＣ、ＩＰまたは経口的に）投与した。腹部の収縮、胴体のねじれとよがり、背中の反りと後肢の伸びを含み得る「苦悶」を誘発する刺激物質（酢酸）をマウスにＩＰ注射した。マウスに０．５％酢酸溶液を単回ＩＰ注射（０．１ｍＬ／体重１０ｇ）した。注射後、マウスを観察用のエンクロージャに戻し、挙動を観察した。注射後０〜２０分の間は収縮を数えた。マウスは１回使うだけにした。各被験物品を、１、３および１０ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝５動物／用量）で投与した。
【０２４３】
図５は、被験化合物対標準的な鎮痛薬であるモルヒネの鎮痛活性を示す。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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