(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
表面に凹部が形成された硬質の第１プレート部材と、該第１プレート部材の表面に積層された第１シート部材と、該第１シート部材の表面に積層された、厚さ方向に貫通する少なくとも１つの貫通穴および表裏面に形成された凹部を有する硬質の第２プレート部材と、該第２プレート部材の表面に積層された第２シート部材とを備え、前記第１プレート部材に形成された凹部内の第１空間と、前記第２プレート部材に形成された貫通穴内および凹部内の第２空間とを含む空間で試薬と検体とが混合されるマイクロ流路プレートであって、
前記第１シート部材は、前記第１空間と前記第２空間とを連通する連通穴を有し、
前記第２空間は、液体状の前記試薬が封入された試薬容器が収容される試薬収容空間と、前記検体が収容されるとともに該検体と前記試薬とが混合される混合空間と、前記試薬収容空間と前記混合空間とを連結する試薬流路と、前記混合空間と前記連通穴とを連結する上流側廃液流路とを含み、
前記第１空間は、前記混合空間から前記上流側廃液流路および前記連通穴を通って流出してきた前記試薬を含む廃液が貯溜される廃液溜空間と、前記連通穴と前記廃液溜空間とを連結する下流側廃液流路とを含み、
前記第２シート部材は、前記試薬収容空間に収容された前記試薬容器を直接押圧可能にする押圧穴を有することを特徴とするマイクロ流路プレート。
【請求項２】
前記第２プレート部材に形成された貫通穴および凹部は、厚さ方向に貫通する第１貫通穴と、前記第１貫通穴と連通するように該第２プレート部材の裏面に形成された第１凹部と、該第２プレート部材の表面に形成された第２凹部と、前記第１凹部と前記第２凹部とを連結する第２貫通穴と、前記第２凹部と前記第１シート部材の前記連通穴とを連結する第３貫通穴とを含み、
前記試薬収容空間は、前記第１貫通穴内および前記第１凹部内の空間からなり、
前記混合空間は、前記第２凹部内の空間からなり、
前記試薬流路は、前記第２貫通穴内の空間からなり、
前記上流側廃液流路は、前記第３貫通穴内の空間からなることを特徴とする請求項１に記載のマイクロ流路プレート。
【請求項３】
前記第２プレート部材は、該第２プレート部材表面の凹部が端部まで延びて形成された空気吸込口を有し、
前記第２空間は、前記第２プレート部材に形成された貫通穴内の空間からなり空気の吸い込みおよび吐き出しが行われるポンプ空間と、前記第２プレート部材の表面に形成された凹部内の空間からなり前記空気吸込口と前記ポンプ空間とを連結する空気吸込流路と、前記第２プレート部材の表面に形成された凹部内の空間からなり前記ポンプ空間と前記混合空間とを連結する空気吐出流路とをさらに含み、
前記第１プレート部材は、前記第１シート部材の前記ポンプ空間下方部分を押圧可能にする押圧穴を有し、
前記第２シート部材の前記空気吸込流路を覆う部分には、前記ポンプ空間から前記空気吸込口に空気が吐き出されるのを防ぐ逆流防止弁が設けられており、
前記第１シート部材の前記ポンプ空間下方部分および前記第２シート部材の前記ポンプ空間上方部分を連続的に押圧すると、前記空気吸込口から吸い込まれた空気が、前記空気吸込流路、前記ポンプ空間、および前記空気吐出流路を通って前記混合空間に流入し、前記混合空間内の前記廃液が、該空気によって押し出され、前記上流側廃液流路および前記下流側廃液流路を通って前記廃液溜空間に流入することを特徴とする請求項１または２に記載のマイクロ流路プレート。
【請求項４】
前記第２シート部材の表面に積層された硬質のバックプレート部材をさらに備え、
前記バックプレート部材は、前記第２シート部材の前記押圧穴と連通するとともに前記試薬収容空間に収容された前記試薬容器を直接押圧可能にする第１押圧穴と、前記第２シート部材の前記ポンプ空間上方部分を押圧可能にする第２押圧穴とを有することを特徴とする請求項３に記載のマイクロ流路プレート。
【請求項５】
前記バックプレート部材は、透明であり、
前記第２シート部材は、前記混合空間上方部分に前記検体を観察するため観察穴を有することを特徴とする請求項４に記載のマイクロ流路プレート。
【請求項６】
前記上流側廃液流路には、前記検体を通過させることなく前記廃液を通過させるフィルターが設けられていることを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載のマイクロ流路プレート。
【請求項７】
前記試薬容器は、ブリスターパックであることを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載のマイクロ流路プレート。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マイクロ流路プレートに関し、特にプレート部材と、該プレート部材の表面に積層されたシート部材とを備え、プレート部材の表面に形成された凹部内の空間で試薬と検体とが混合されるマイクロ流路プレートに関する。
【背景技術】
【０００２】
従来から、細胞や血液等の検体の検査を行うために、プレパラートが使用されている。一般にプレパラートは、スライドガラスと、該スライドガラスの表面に載せられた検体を覆うカバーガラスとからなるため、割れやすく、取扱いに注意を要する。また、プレパラートでは、スライドガラスの表面で検体と試薬とが混合されるため、スライドガラスの表面に検体を保持させたり、スライドガラスの表面に広がった過剰な試薬を除去したりする必要がある。
【０００３】
近年では、プラスチック基板を用いたマイクロ流路プレートが開発されている（例えば、特許文献１参照）。このマイクロ流路プレートでは、プラスチック基板の中央部分に円環状の凹部が形成されているため、検体をプラスチック基板に固着することなく、凹部内で試薬と混合することができる。また、このマイクロ流路プレートでは、上記プレパラートのようにスライドガラスやカバーガラスを使用していないため、スライドガラスやカバーガラスに起因する不具合は発生しない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】実用新案登録第３０５６６８０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、特許文献１に記載のマイクロ流路プレートでは、該マイクロ流路プレート内に試薬が収容されておらず、試薬を収容するための空間も設けられていないので、検体の検査（検体と試薬との混合）を行うためには、試薬をマイクロ流路プレートとは別に用意しておく必要があった。このため、特許文献１に記載のマイクロ流路プレートでは、検体の検査を行なうのに多くの手間と時間を要していた。
【０００６】
本発明は、上記の問題に鑑みてなされたものであり、簡単かつ迅速に検体の検査を行うことができるマイクロ流路プレートを提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記の課題を解決するために、本発明に係るマイクロ流路プレートは、表面に凹部が形成された硬質の第１プレート部材と、該第１プレート部材の表面に積層された第１シート部材と、該第１シート部材の表面に積層された、厚さ方向に貫通する少なくとも１つの貫通穴および表裏面に形成された凹部を有する硬質の第２プレート部材と、該第２プレート部材の表面に積層された第２シート部材とを備え、第１プレート部材に形成された凹部内の第１空間と、第２プレート部材に形成された貫通穴内および凹部内の第２空間とを含む空間で試薬と検体とが混合されるマイクロ流路プレートであって、第１シート部材は、第１空間と第２空間とを連通する連通穴を有し、第２空間は、液体状の試薬が封入された試薬容器が収容される試薬収容空間と、検体が収容されるとともに該検体と試薬とが混合される混合空間と、試薬収容空間と混合空間とを連結する試薬流路と、混合空間と連通穴とを連結する上流側廃液流路とを含み、第１空間は、混合空間から上流側廃液流路および連通穴を通って流出してきた試薬を含む廃液が貯溜される廃液溜空間と、連通穴と廃液溜空間とを連結する下流側廃液流路とを含み、第２シート部材は、試薬収容空間に収容された試薬容器を直接押圧可能にする押圧穴を有することを特徴とする。なお、上記試薬容器は、ブリスターパックとすることができる。
【０００８】
この構成によれば、第１プレート部材に試薬が収容される試薬収容空間が設けられているため、あらかじめ該試薬収容空間に試薬を収容しておくことができる。また、この構成によれば、第１プレート部材の第１空間と第２プレート部材の第２空間とが連結されているため、プレート部材の面積を大きくすることなく、試薬収容空間、廃液溜空間等の数や体積を増やすことができるとともに、より複雑な流路を形成することができる。さらに、この構成によれば、試薬収容空間に収容された試薬容器を直接押圧することができる。したがって、本発明に係るマイクロ流路プレートによれば、簡易かつ迅速に検体の検査を行うことができる。
【０００９】
本発明に係るマイクロ流路プレートでは、第２プレート部材に形成された貫通穴および凹部が、厚さ方向に貫通する第１貫通穴と、第１貫通穴と連通するように該第２プレート部材の裏面に形成された第１凹部と、該第２プレート部材の表面に形成された第２凹部と、第１凹部と第２凹部とを連結する第２貫通穴と、第２凹部と第１シート部材の連通穴とを連結する第３貫通穴とを含み、試薬収容空間が第１貫通穴内および第１凹部内の空間からなり、混合空間が第２凹部内の空間からなり、試薬流路が第２貫通穴内の空間からなり、上流側廃液流路が第３貫通穴内の空間からなっていてもよい。
【００１０】
さらに、上記第２プレート部材は、該第２プレート部材表面の凹部が端部まで延びて形成された空気吸込口を有し、上記第２空間は、第２プレート部材に形成された貫通穴内の空間からなり空気の吸い込みおよび吐き出しが行われるポンプ空間と、第２プレート部材の表面に形成された凹部内の空間からなり空気吸込口とポンプ空間とを連結する空気吸込流路と、第２プレート部材の表面に形成された凹部内の空間からなりポンプ空間と混合空間とを連結する空気吐出流路とをさらに含み、上記第１プレート部材は、第１シート部材のポンプ空間下方部分を押圧可能にする押圧穴を有することが好ましく、第２シート部材の空気吸込流路を覆う部分には、ポンプ空間から空気吸込口に空気が吐き出されるのを防ぐ逆流防止弁が設けられ、第１シート部材のポンプ空間下方部分および第２シート部材のポンプ空間上方部分を連続的に押圧すると、空気吸込口から吸い込まれた空気が、空気吸込流路、ポンプ空間、および空気吐出流路を通って混合空間に流入し、混合空間内の廃液が、該空気によって押し出され、上流側廃液流路および下流側廃液流路を通って廃液溜空間に流入することが好ましい。
【００１１】
これら構成によれば、ポンプ空間および廃液溜空間が設けられているため、第１シート部材のポンプ空間下方部分および第２シート部材のポンプ空間上方部分を連続的に押圧することで、混合空間内の廃液を空気吸込口から吸い込まれた空気によって押し出して廃液溜空間に流入させることができる。これにより、混合空間に試薬が溜まっていくのを防ぐことができる。
【００１２】
さらに、本発明に係るマイクロ流路プレートでは、第２シート部材の表面に積層された硬質のバックプレート部材をさらに備え、バックプレート部材は、第２シート部材の押圧穴と連通するとともに試薬収容空間に収容された試薬容器を直接押圧可能にする第１押圧穴と、第２シート部材のポンプ空間上方部分を押圧可能にする第２押圧穴とを有することが好ましい。
【００１３】
この構成によれば、第１シート部材が硬質の第１プレート部材と硬質の第２プレート部材とで挟まれており、かつ第２シート部材が硬質の第２プレート部材と硬質のバックプレート部材とで挟まれているため、密着性が向上し、第１シート部材と第１プレート部材との間、および第２シート部材と第２プレート部材との間から試薬が漏れるのを防ぐことができる。
【００１４】
さらに、上記バックプレート部材は、透明であり、上記第２シート部材は、混合空間上方部分に検体を観察するため観察穴を有することが好ましく、これにより、バックプレート部材の表面から顕微鏡を用いて検体を観察することができる。
【００１５】
さらに、本発明に係るマイクロ流路プレートは、上流側廃液流路に、検体を通過させることなく廃液を通過させるフィルターが設けられていることが好ましい。
【００１６】
この構成によれば、検体が廃液溜空間に流入してしまうのを防ぐことができるとともに、フィルター上で該検体を検査することができる。
【００１７】
なお、本明細書における用語「エラストマー」は、例えば、ゴム、熱可塑性エラストマー等の弾性を有する高分子材料からなるものとする。
【発明の効果】
【００１８】
本発明によれば、簡単かつ迅速に検体の検査を行うことができるマイクロ流路プレートを提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】第１の実施形態に係るマイクロ流路プレートであって、（ａ）は斜視図、（ｂ）は分解斜視図である。
【図２】第２の実施形態に係るマイクロ流路プレートであって、（ａ）は斜視図、（ｂ）は分解斜視図である。
【図３】第２の実施形態に係るマイクロ流路プレートのプレート部材であって、（ａ）は平面図、（ｂ）は底面図、（ｃ）は（ａ）のＡ−Ａ断面図である。
【図４】第２の実施形態に係るマイクロ流路プレートのシート部材であって、（ａ）は平面図、（ｂ）は底面図、（ｃ）は（ａ）のＢ−Ｂ断面図である。
【図５】図４（ａ）のＣ−Ｃ断面図であって、（ａ）は逆流防止弁が閉じた状態を示す図、（ｂ）は逆流防止弁が開いた状態を示す図である。
【図６】第２の実施形態に係るマイクロ流路プレートのバックプレート部材であって、（ａ）は平面図、（ｂ）は底面図、（ｃ）は（ａ）のＤ−Ｄ断面図である。
【図７】第３の実施形態に係るマイクロ流路プレートであって、（ａ）は斜視図、（ｂ）は分解斜視図である。
【図８】第３の実施形態に係るマイクロ流路プレートの第２プレート部材であって、（ａ）は平面図、（ｂ）は底面図、（ｃ）は（ａ）のＥ−Ｅ断面図、（ｄ）は（ａ）のＦ−Ｆ拡大断面図である。
【図９】第３の実施形態に係るマイクロ流路プレートあって、（ａ）は上流側廃液流路近傍、（ｂ）は試薬収容空間近傍の部分断面図である。
【図１０】第３の実施形態に係るマイクロ流路プレートの第１シート部材であって、（ａ）は平面図、（ｂ）は底面図、（ｃ）は（ａ）のＧ−Ｇ断面図である。
【図１１】第３の実施形態に係るマイクロ流路プレートの第１プレート部材であって、（ａ）は平面図、（ｂ）は底面図、（ｃ）は（ａ）のＨ−Ｈ断面図である。
【図１２】第３の実施形態に係るマイクロ流路プレートの第２シート部材であって、（ａ）は平面図、（ｂ）は底面図、（ｃ）は（ａ）のＩ−Ｉ断面図である。
【図１３】第３の実施形態に係るマイクロ流路プレートのバックプレート部材であって、（ａ）は平面図、（ｂ）は底面図、（ｃ）は（ａ）のＪ−Ｊ断面図である。
【図１４】第４の実施形態に係るマイクロ流路プレートであって、（ａ）は斜視図、（ｂ）は分解斜視図である。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
以下、本発明の好ましい実施形態について、図面を参照して説明する。
【００２１】
［第１の実施形態］
図１は、本発明の第１の実施形態に係るマイクロ流路プレートであって、（ａ）は斜視図、（ｂ）は分解斜視図である。同図に示すように、本実施形態に係るマイクロ流路プレート１００は、表面に凹部が形成された硬質のプレート部材１１０と、該プレート部材１１０の表面に積層されたシート部材１２０とを備え、凹部内の空間で試薬と検体とが混合されるよう構成されている。
【００２２】
プレート部材１１０は、透明なプラスチックからなるとともに表裏面に鏡面処理が施されている。プレート部材１１０のサイズは、幅２０．０ｍｍ、長さ８０．０ｍｍ、厚さ１．５ｍｍである。また、プレート部材１１０に形成された凹部内の空間には、混合空間１１１と、試薬収容空間１１２と、試薬流路１１６とが含まれている。
【００２３】
混合空間１１１は、プレート部材１１０の中央に形成された、直径７．０ｍｍ、深さ０．８ｍｍの円環状の凹部内の空間である。混合空間１１１では、検体が収容されるとともに、該検体と試薬収容空間１１２に収容された試薬とが混合される。なお、混合空間１１１には、検体を保持するための両面テープ等のトラップ機構や、過剰な試薬を吸収するためのフェルトや発泡体等の吸収機構を設けてもよい。
【００２４】
試薬収容空間１１２は、混合空間１１１に隣接して形成された、直径１０．０ｍｍ、深さ１．０ｍｍの円環状の凹部内の空間である。試薬収容空間１１２では、試薬が液体状もしくはブリスターパック等の容器に封入された状態で収容されている。
【００２５】
試薬流路１１６は、混合空間１１１と試薬収容空間１１２とを連結する、幅２．０ｍｍ、深さ０．４ｍｍの凹部内の空間である。
【００２６】
シート部材１２０は、幅２０．０ｍｍ、長さ８０．０ｍｍ、厚さ０．８ｍｍに成形されたエラストマーからなり、混合空間１１１、試薬収容空間１１２、および試薬流路１１６を覆うようにプレート部材１１０の表面に積層されている。
【００２７】
上記のように、本実施形態に係るマイクロ流路プレート１００では、試薬が収容される試薬収容空間１１２が設けられているため、あらかじめ該試薬収容空間１１２に試薬を収容しておくことができる。さらに、本実施形態に係るマイクロ流路プレート１００では、シート部材１２０がエラストマーからなるため、シート部材１２０の試薬収容空間１１２を覆う部分を押圧することにより、試薬収容空間１１２に収容された試薬を混合空間１１１に流入させることができる。したがって、本実施形態に係るマイクロ流路プレート１００によれば、簡単かつ迅速に検体の検査を行うことがでる。
【００２８】
［第２の実施形態］
図２は、本発明の第２の実施形態に係るマイクロ流路プレートであって、（ａ）は斜視図、（ｂ）は分解斜視図である。同図に示すように、本実施形態に係るマイクロ流路プレート２００は、表面に凹部が形成された硬質のプレート部材２１０と、該プレート部材２１０の表面に積層されたシート部材２２０と、該シート部材２２０の表面に積層されたバックプレート部材２３０とを備え、第１の実施形態に係るマイクロ流路プレート１００と同様に、凹部内の空間で試薬と検体とが混合されるよう構成されている。
【００２９】
プレート部材２１０は、幅２０．０ｍｍ、長さ８０．０ｍｍ、厚さ２．５ｍｍの透明なプラスチックからなる。図３（ａ）および（ｃ）に示すように、プレート部材２１０の表面に形成された凹部内の空間には、混合空間２１１と、試薬収容空間２１２、２１３と、ポンプ空間２１４と、廃液溜空間２１５と、複数の流路２１６ａ〜２１６ｆとが含まれる。また、プレート部材２１０は、凹部が端部まで延びて形成された空気吸込口２１７および廃液排出口２１８を有する。さらに、図３（ｂ）および（ｃ）に示すように、プレート部材２１０の裏面には、顕微鏡を用いて検体を観察するための凹部２１９が形成されている。なお、プレート部材２１０は、少なくとも混合空間２１１を形成する凹部の底面および裏面に形成された凹部２１９の底面に鏡面処理が施されている。
【００３０】
混合空間２１１および試薬収容空間２１２、２１３は、第１の実施形態に係るマイクロ流路プレート１００に設けられたものと同じものであり、本実施形態に係るマイクロ流路プレート２００では、二つの試薬収容空間２１２、２１３は混合空間２１１を中心とした対称位置に設けられている。この二つの試薬収容空間２１２、２１３には、それぞれ同種の、または異なる種類の試薬が、液体状もしくはブリスターパックに封入された状態で収容されている。
【００３１】
ポンプ空間２１４および廃液溜空間２１５は、混合空間２１１を中心に対称に形成された、直径１２．０ｍｍ、深さ１．８ｍｍの円環状の凹部内の空間である。シート部材２２０の該ポンプ空間２１４を覆う部分が連続的に押圧されることで、ポンプ空間２１４では、空気の吸い込みおよび吐き出しが行われ、該空気に押し出されて混合空間２１１から流出してきた試薬等を含む廃液が廃液溜空間２１５に貯溜される。
【００３２】
複数の流路２１６ａ〜２１６ｆには、混合空間２１１と試薬収容空間２１２、２１３とを連結する試薬流路２１６ａ、２１６ｂと、ポンプ空間２１４と混合空間２１１とを連結する空気吐出流路２１６ｃと、混合空間２１１と廃液溜空間２１５とを連結する廃液流路２１６ｄと、空気吸込口２１７とポンプ空間２１４とを連結する空気吸込流路２１６ｅと、廃液溜空間２１５と廃液排出口２１８とを連結する廃液排出流路２１６ｆとが含まれている。これらの流路２１６ａ〜２１６ｆのサイズは、幅２．０ｍｍ、深さ０．４ｍｍである。
【００３３】
シート部材２２０は、幅２０．０ｍｍ、長さ８０．０ｍｍ、厚さ０．８ｍｍに成形されたエラストマーからなる。また、図４に示すように、シート部材２２０の裏面には、試薬や空気が逆流するのを防ぐために、幅２．０ｍｍ、高さ０．４ｍｍの逆流防止弁２２１ａ〜２２１ｄが設けられている。具体的には、試薬が混合空間２１１から試薬収容空間２１２に逆流するのを防ぐための逆流防止弁２２１ａは、混合空間２１１と試薬流路２１６ａとの境界に設けられている。試薬が混合空間２１１から試薬収容空間２１３に逆流するのを防ぐための逆流防止弁２２１ｂは、混合空間２１１と試薬流路２１６ｂとの境界に設けられている。試薬が混合空間２１１からポンプ空間２１４に逆流するのを防ぐための逆流防止弁２２１ｃは、混合空間２１１と空気吐出流路２１６ｃとの境界に設けられている。ポンプ空間２１４内の空気が空気吸込口２１７から吐出されるのを防ぐための逆流防止弁２２１ｄは、空気吸込口２１７近傍に設けられている。
【００３４】
図５に示すように、逆流防止弁２２１ａ〜２２１ｄは、試薬または空気の正流方向に傾斜した形状の突起であり、シート部材２２０と一体的に成形されている。なお、正流方向とは、試薬の場合は試薬収容空間２１２、２１３から混合空間２１１を通って廃液溜空間２１５に向かう方向であり、空気の場合は空気吸込口２１７からポンプ空間２１４を通って混合空間２１１に向かう方向である。この逆流防止弁２２１ａ〜２２１ｄは、図５（ｂ）に示すように、試薬または空気が正流方向に流れる場合は、試薬または空気の流圧により開いた状態となる。一方、図５（ａ）に示すように、試薬等が逆流方向に流れようとする場合は、閉じた状態となり試薬または空気の流れを遮断する。
【００３５】
バックプレート部材２３０は、幅２０．０ｍｍ、長さ８０．０ｍｍ、厚さ０．８ｍｍのプラスチックからなる。図６に示すように、バックプレート部材２３０には、厚さ方向に貫通する円環状の複数の押圧穴２３１〜２３５が形成されている。複数の押圧穴２３１〜２３５には、シート部材２２０の混合空間２１１の上方を押圧可能にする、直径７．０ｍｍの押圧穴２３１と、シート部材２２０の試薬収容空間２１２、２１３の上方を押圧可能にする、直径１０．０ｍｍの押圧穴２３２、２３３と、シート部材２２０のポンプ空間２１４および廃液溜空間２１５の上方を押圧可能にする、直径１２．０ｍｍの押圧穴２３４、２３５とが含まれる。
【００３６】
また、図６（ａ）に示すように、バックプレート部材２３０の裏面には、プレート部材２１０の流路２１６ａ〜２１６ｆの上方に、幅４．０ｍｍ、厚さ０．２ｍｍのプラスチックからなる流路２１６ａ〜２１６ｆより幅広の凸部２３６が一体形成されている。また、同図に示すように、この凸部２３６は押圧穴２３１〜２３５の周縁にも形成されている。このため、シート２２０部材にかかる圧力は、凸部２３６とプレート部材２１０によって挟まれた部分（流路２１６ａ〜２１６ｆや混合空間２１１等の周縁部分）が最も高くなる。したがって、シート部材２２０とプレート部材２１０との密着性、特に、流路２１６ａ〜２１６ｆや混合空間２１１等の周縁部分の密着性が向上し、シート部材２２０とプレート部材２１０との間から試薬が漏れるのを防ぐことができる。
【００３７】
次に、本実施形態に係るマイクロ流路プレート２００を用いて、人の皮膚（検体）に寄生している真菌を検査する方法について説明する。
【００３８】
まず、皮膚を溶解するためのカセイカリ（試薬）が試薬収容空間２１２に収容され、真菌を染色するためのファンギフローラＹ（試薬）が試薬収容空間２１３に収容されたマイクロ流路プレート２００の混合空間２１１に、被験者から採取した皮膚を収容する。
【００３９】
皮膚を混合空間２１１に収容した後、プレート部材２１０とシート部材２２０とを、両面テープや接着剤等によりしっかりと貼り合わせる。なお、シート部材２２０とバックプレート部材２３０とは、あらかじめ貼り合わされている。
【００４０】
続いて、皮膚とカセイカリおよびファンギフローラＹとを混合するために、シート部材２２０の試薬収容空間２１２、２１３を覆う部分を押圧する。これにより、試薬収容空間２１２、２１３に収容されているカセイカリおよびファンギフローラＹが、それぞれ試薬流路２１６ａ、２１６ｂを通って、混合空間２１１に流入する。そして、混合空間２１１に収容されている皮膚と、カセイカリおよびファンギフローラＹとが混合され、皮膚の一部が溶解されるとともに該皮膚に寄生している真菌が染色される。
【００４１】
さらに、混合空間２１１内のカセイカリおよびファンギフローラＹや、溶解した皮膚等を含む廃液を混合空間２１１から流出させるために、シート部材２２０のポンプ空間２１４を覆う部分を連続的に押圧する（図２（ａ）の矢印１参照）。これにより、空気吸込口２１７から吸い込まれた空気（図２（ｂ）の矢印２参照）が、空気吸込流路２１６ｅ、ポンプ空間２１４、および空気吐出流路２１６ｃを通って混合空間２１１に流入し、混合空間２１１内の廃液が、該空気によって押し出され、廃液流路２１６ｄを通って廃液溜空間２１５に流入し、廃液排出口２１８から排出される（図２（ｂ）の矢印３参照）。その結果、混合空間２１１には、ファンギフローラＹによって染色された皮膚のみが残る。
【００４２】
そして、プレート部材２１０の裏面に形成された凹部２１９から顕微鏡で観察することにより、皮膚に真菌が寄生しているかどうか確認することができる。
【００４３】
なお、混合空間２１１に収容された皮膚は、両面テープ等のトラップ機構により保持されているが、シート部材２２０の混合空間２１１を覆う部分が押圧することで、シート部材２２０とトラップ機構とで皮膚を挟み、より確実に皮膚を保持することができる。
【００４４】
また、トラップ機構は、カセイカリに対して難溶性を示すとともにファンギフローラＹによって染色されない両面テープ等からなることが好ましい。同様に、プレート部材２１０は、ファンギフローラＹによって染色されないポリオレフィン等のベンゼン環を含まないプラスチックからなることが好ましい。
【００４５】
［第３の実施形態］
図７は、本発明の第３の実施形態に係るマイクロ流路プレートであって、（ａ）は斜視図、（ｂ）は分解斜視図である。同図に示すように、本実施形態に係るマイクロ流路プレート３００は、表面に凹部が形成された硬質の第１プレート部材３１０と、該第１プレート部材３１０の表面に積層された第１シート部材３２０と、該第１シート部材３２０の表面に積層された、厚さ方向に貫通する少なくとも１つの貫通穴および表裏面に形成された凹部を有する硬質の第２プレート部材３３０と、該第２プレート部材３３０の表面に積層された第２シート部材３４０と、該第２シート部材３４０の表面に積層されたバックプレート部材３５０とを備え、第１プレート部材３１０に形成された凹部内の第１空間と、第２プレート部材３３０に形成された貫通穴内および凹部内の第２空間とを含む空間で試薬と検体とが混合されるよう構成されている。
【００４６】
第２プレート部材３３０は、幅２０．０ｍｍ、長さ８０．０ｍｍ、厚さ２．５ｍｍのプラスチックからなる。図８に示すように、第２プレート部材３３０に形成された貫通穴内および凹部内の第２空間には、混合空間３３１と、試薬収容空間３３２、３３３と、ポンプ空間３３４と、上部廃液溜空間３３５と、複数の流路３３６ａ〜３３６ｅとが含まれている。また、第２プレート部材３３０は、凹部が端部まで延びて形成された空気吸込口３３７を有する。
【００４７】
複数の流路３３６ａ〜３３６ｅには、図８に示すように、貫通穴内の空間からなる試薬流路３３６ａ、３３６ｂおよび上流側廃液流路３３６ｃと、凹部内の空間からなる空気吸込流路３３６ｄおよび空気吐出流路３３６ｅとが含まれている。
【００４８】
試薬流路３３６ｂ（３３６ａ）は、図８（ｃ）に示すように、試薬収容空間３３３（３３２）を構成する凹部３３３ｂ（３３２ｂ）と混合空間３３１とを連結する、例えば直径０．５ｍｍの貫通穴内の空間である。
【００４９】
上流側廃液流路３３６ｃは、混合空間３３１と第１シート部材３２０の連通穴３２１とを連結する貫通穴内の空間であり、図８（ｄ）に示すように、裏面側に向かうにつれて直径が小さくなる上方部分と、直径が一定（２．０ｍｍ）の下方部分とからなる。上流側廃液流路３３６ｃの上方部分は、直径の最大値が１．０ｍｍ、最小値が０．５ｍｍである。一方、上流側廃液流路３３６ｃの下方部分には、図９（ａ）に示すように、検体を通過させることなく廃液を通過させるフィルター３３８と、該フィルター３３８を支持するためのブッシュ３３９が収容されている。なお、同図に示すように、ブッシュ３３９は第１シート部材３２０によって支持されている。
【００５０】
空気吸込流路３３６ｄは、図８（ａ）に示すように、空気吸込口３３７とポンプ空間３３４とを連結する、幅２．０ｍｍ、深さ０．５ｍｍの凹部内の空間である。空気吐出流路３３６ｅは、ポンプ空間３３４と混合空間３３１とを連結する、幅２．０ｍｍ、深さ０．３ｍｍの凹部内の空間である。
【００５１】
試薬収容空間３３３（３３２）は、図８に示すように、直径１０．０ｍｍの第１貫通穴３３３ａ（３３２ａ）内の空間と、該第１貫通穴３３３ａ（３３２ａ）と第２貫通穴３３６ｂ（３３６ａ）内の空間（試薬流路）とを連結するとともに該第１貫通穴３３３ａ（３３２ａ）の裏面側周縁に形成された第１凹部３３３ｂ（３３２ｂ）内の空間とからなる。また、試薬収容空間３３２、３３３には、図９（ｂ）に示すように、試薬を封入したブリスターパック３６０が収容されている。ブリスターパック３６０には、裏面側に舌片形状の突出部３６１が形成されており、該突出部３６１の先端部分には、試薬を注出するための注出口が形成されている。
【００５２】
混合空間３３１は、図８（ａ）に示すように、第２プレート部材３３０の表面に形成された第２凹部内の空間からなる。具体的には、第２凹部内の空間は、直径６．０ｍｍ、深さ０．５ｍｍの円環状の凹部内の空間と、該凹部の外周の一部に連続して形成された、深さ０．５ｍｍ、一辺の長さ２．０ｍｍの平面視三角形状の凹部内の空間とからなる。同図に示すように、混合空間３３１は、円環状の凹部の底面に試薬流路３３６ａ、３３６ｂが連結されており、三角形状の凹部の底面に第３貫通穴内の空間からなる上流側廃液流路３３６ｃが連結されている。
【００５３】
ポンプ空間３３４は、直径１２．０ｍｍの貫通穴内の空間である。ポンプ空間３３４では、第１シート部材３２０の該ポンプ空間３３４下方部分および第２シート部材３４０の該ポンプ空間３３４上方部分が連続的に押圧されると、空気の吸い込みおよび吐き出しが行われる。
【００５４】
上部廃液溜空間３３５は、直径１２．０ｍｍの貫通穴内の空間である。上部廃液溜空間３３５では、混合空間３３１から流出してきた試薬等を含む廃液が貯溜される。
【００５５】
第１シート部材３２０は、幅２０．０ｍｍ、長さ８０．０ｍｍ、厚さ０．７ｍｍに成形されたエラストマーからなる。図１０に示すように、第１シート部材３２０には、第２プレート部材３３０の上流側廃液流路３３６ｃと連通する、直径０．５ｍｍの連通穴３２１と、第２プレート部材３３０の上部廃液溜空間３３５と連通する、直径１２．０ｍｍの連通穴３２５とが形成されている。
【００５６】
第１プレート部材３１０は、幅２０．０ｍｍ、長さ８０．０ｍｍ、厚さ１．０ｍｍのプラスチックからなる。図１１に示すように、第１プレート部材３１０に形成された凹部内の第１空間には、下部廃液溜空間３１５と、下流側廃液流路３１６とが含まれている。下部廃液溜空間３１５は、第２プレート部材３３０の上部廃液溜空間３３５および第１シート部材３２０の連通穴３２５と連通する、直径１２．０ｍｍ、深さ０．５ｍｍの円環状の凹部内の空間である。下流側廃液流路３１６は、一端が第１シート部材３２０の連通穴３２１と連通するとともに他端が下部廃液溜空間３１５と連結する、幅２．０ｍｍ、深さ０．３ｍｍの凹部内の空間である。また、第１プレート部材３１０には、第１シート部材３２０のポンプ空間３３４下方部分を押圧可能にする、直径１２．０ｍｍの押圧穴３１４が形成されている。
【００５７】
第２シート部材３４０は、幅２０．０ｍｍ、長さ８０．０ｍｍ、厚さ０．７ｍｍに成形されたエラストマーからなる。図１２に示すように、第２シート部材３４０には、観察穴３４１と、押圧穴３４２、３４３と、連通穴３４５とが形成されている。観察穴３４１は、顕微鏡を用いて検体を観察するために第２プレート部材３３０の混合空間３３１上方に設けられた、平面視の形状が混合空間３３１の形状と同じ貫通穴である。押圧穴３４２、３４３は、第２プレート部材３３０の試薬収容空間３３２、３３３上方に設けられた、直径１０．０ｍｍの貫通穴である。連通穴３４５は、第２プレート部材３３０の上部廃液溜空間３３５と連通する、直径１２．０ｍｍの貫通穴である。また、第２シート部材３４０の裏面には、試薬や空気が逆流するのを防ぐために、幅２．０ｍｍ、高さ０．４ｍｍの逆流防止弁３４６ａ、３４６ｂが設けられている。逆流防止弁３４６ａは、混合空間３３１の試薬がポンプ空間３３４に逆流するのを防ぐために、混合空間３３１と空気吐出流路３３６ｅとの境界に設けられている。逆流防止弁３４６ｂは、ポンプ空間３３４内の空気が空気吸込口３３７から吐出されるのを防ぐために、空気吸込口３３７近傍に設けられている。
【００５８】
バックプレート部材３５０は、幅２０．０ｍｍ、長さ８０．０ｍｍ、厚さ０．７ｍｍの透明なプラスチックからなる。図１３に示すように、バックプレート部材３５０には、厚さ方向に貫通する円環状の複数の押圧穴３５２〜３５４および廃液排出口３５５が形成されている。押圧穴３５２、３５３は、第２シート部材３４０の押圧穴３４２、３４３と連通し、試薬収容空間３３２、３３３に収容されたブリスターパック３６０を直接押圧可能にする、直径１０．０ｍｍの貫通穴である。押圧穴３５４は、第２シート部材３４０のポンプ空間３３４上方を押圧可能にする、直径１２．０ｍｍの貫通穴である。廃液排出穴３５５は、第２シート部材３４０の連通穴３４５と連通する、直径１．０ｍｍの貫通穴である。
【００５９】
次に、本実施形態に係るマイクロ流路プレート３００を用いて、人の皮膚（検体）に寄生している真菌を検査する方法について説明する。
【００６０】
まず、カセイカリを封入したブリスターパック３６０ａが試薬収容空間３３２に収容され、ファンギフローラＹを封入したブリスターパック３６０ｂが試薬収容空間３３３に収容されたマイクロ流路プレート３００の混合空間３３１に、被験者から採取した皮膚を収容する。
【００６１】
皮膚を混合空間３３１に収容した後、第２シート部材３４０とバックプレート部材３５０とを、両面テープや接着剤等によりしっかりと貼り合わせる。なお、第１プレート部材３１０と第１シート部材３２０、第１シート部材３２０と第２プレート部材３３０、および第２プレート部材３３０と第２シート部材３４０とは、あらかじめ貼り合わされている。
【００６２】
続いて、皮膚とカセイカリおよびファンギフローラＹとを混合するために、バックプレート部材３５０の押圧穴３５２、３５３および第２シート部材３４０の押圧穴３４２、３４３からブリスターパック３６０ａ、３６０ｂを直接押圧する。これにより、ブリスターパック３６０ａ、３６０ｂに封入されているカセイカリおよびファンギフローラＹが、それぞれ試薬流路３１６ａ、３１６ｂを通って混合空間３３１に流入する。そして、混合空間３３１に収容されている皮膚と、カセイカリおよびファンギフローラＹとが混合され、皮膚の一部が溶解されるとともに該皮膚に寄生している真菌が染色される。
【００６３】
さらに、混合空間３３１の染色された皮膚をフィルター３３８の表面に移動させるために、第１シート部材３２０のポンプ空間３３４下方部分および第２シート部材３４０のポンプ空間３３４上方部分を連続的に押圧する（図７（ａ）の矢印１参照）。これにより、空気吸込口３３７から吸い込まれた空気（図７（ｂ）の矢印２参照）が、空気吸込流路３３６ｄ、ポンプ空間３３４、および空気吐出流路３３６ｅを通って混合空間３３１に流入し、混合空間２１１内の染色された皮膚と、カセイカリおよびファンギフローラＹ等の廃液とが、該空気によって上流側廃液流路３３６ｃに押し出される。そして、染色された皮膚は、上流側廃液流路３３６ｃに設けられたフィルター３３８の表面に移動する。一方、廃液は、フィルター３３８を通過した後に、連通穴３２１および下流側廃液流路３１６を通って下部廃液溜空間３１５に流入し、廃液排出口３５５から排出される（図７（ａ）の矢印３参照）。
【００６４】
そして、バックプレート部材３５０の第２シート部材３４０に形成された観察穴３４１上方部分から、フィルター３３８の表面を顕微鏡で観察することにより、皮膚に真菌が寄生しているかどうか確認することができる。
【００６５】
［第４の実施形態］
図１４は、本発明の第４の実施形態に係るマイクロ流路プレートであって、（ａ）は斜視図、（ｂ）は分解斜視図である。同図に示すように、本実施形態に係るマイクロ流路プレート４００は、プレート部材４１０がエラストマーからなり、シート部材４２０が透明なプラスチックからなる点を除いて、第１の実施形態に係るマイクロ流路プレート１００と同じである。
【００６６】
また、プレート部材４１０に形成された凹部内の空間には、第１の実施形態に係るマイクロ流路プレート１００と同様に、混合空間４１１と、試薬収容空間４１２と、混合空間４１１と試薬収容空間４１２とを連結する試薬流路４１６とが含まれる。なお、混合空間１１１には、検体を保持するためのトラップ機構が設けられている。トラップ機構は、試薬と反応しない両面テープ等である。
【００６７】
上記のように、本実施形態に係るマイクロ流路プレート４００では、プレート部材４１０がエラストマーからなるため、プレート部材４１０を折り曲げてトラップ機構を検体に擦り付けることで、簡単に検体を採取することができる。さらに、本実施形態に係るマイクロ流路プレート４００では、プレート部材４１０試薬収容空間４１２の下方部分を押圧することにより、試薬収容空間４１２に収容された試薬を混合空間４１１に流入させることができる。したがって、本実施形態に係るマイクロ流路プレート４００によれば、簡単かつ迅速に検体の検査を行うことができる。
【００６８】
以上、本発明の好ましい実施形態について説明してきたが、本発明はこれらの構成に限定されるものではない。
【００６９】
例えば、上記実施形態２および３では、検体として皮膚（真菌）を用い、試薬としてカセイカリおよびファンギフローラＹを用いた例を挙げて説明したが、血液中の抗体を検体とし、抗原および標識抗体を試薬として用いることにより、様々な疾患を検査することができる。この場合、検体や試薬にあわせて混合空間や試薬収容空間の数および位置等を、任意に変更することができる。
【００７０】
また、上記実施形態１および２では、混合空間１１１、２１１に、検体を保持するためのトラップ機構を設けているが、シート部材１２０、２２０の混合空間１１１、２１１を覆う部分に、トラップ機構を設けてもよい。
【００７１】
また、上記実施形態２および３では、空気吸込流路２１６ｅ、３３６ｄと空気吐出流路２１６ｃ、３３６ｅとの間にポンプ空間２１４、３３４を設けているが、空気吸込流路２１６ｅ、３３６ｄと空気吐出流路２１６ｃ、３３６ｅとを直接連結し、外部からポンプやシリンジ等を用いて空気を流入させてもよい。
【００７２】
また、上記実施形態２では、廃液流路２１６ｄと廃液排出流路２１７ｆとの間に廃液溜空間２１５を設けているが、廃液流路２１６ｄと廃液排出流路２１７ｆとを直接連結し、廃液をマイクロ流路プレート内に貯めることなく廃液排出口２１８から排出させてもよい。同様に、上記実施形態３では、第１プレート部材３１０に下部廃液溜空間３１５を設け、第２プレート部材３３０に下部廃液溜空間３３５を設けているが、下流側廃液流路３１６を第２プレート部材３３０の端部まで延設し、そこから廃液を排出させてもよい。なお、この場合、上部廃液溜空間３１５、連通穴３２５、３４５、上部廃液溜空間３３５、廃液排出口３５５は設けなくてもよい。
【００７３】
その他、本明細書に添付の特許請求の範囲内での種々の設計変更および修正を加え得ることは勿論可能である。
【符号の説明】
【００７４】
１００、２００、３００、４００    マイクロ流路プレート
１１０、２１０、４１０    プレート部材
３１０    第１プレート部材
３３０    第２プレート部材
１２０、２２０、４２０    シート部材
３２０    第１シート部材
３４０    第２シート部材
２３０、３５０    バックプレート部材
１１１、２１１、３３１、４１１    混合空間
１１２、２１２、２１３、３３２、３３３、４１２    試薬収容空間
２１４、３３４    ポンプ空間
２１５    廃液溜空間
３１５    下部廃液溜空間
３３５    上部廃液溜空間
２１７、３３７    空気吸込口
２１８、３５５    廃液排出口
２３１〜２３５、３１４、３４２、３４３、３５２、３５３    押圧穴
【図１】
0005466745.tif 000002
【図２】
0005466745.tif 000003
【図３】
0005466745.tif 000004
【図４】
0005466745.tif 000005
【図５】
0005466745.tif 000006
【図６】
0005466745.tif 000007
【図７】
0005466745.tif 000008
【図８】
0005466745.tif 000009
【図９】
0005466745.tif 000010
【図１０】
0005466745.tif 000011
【図１１】
0005466745.tif 000012
【図１２】
0005466745.tif 000013
【図１３】
0005466745.tif 000014
【図１４】
0005466745.tif 000015