(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記化学式１０で表される化合物からなる肌美白剤。
【化１】
0005583346.tif 000020
【請求項２】
前記肌美白は、しみ改善または皮膚の過色素沈着の改善であることを特徴とする、請求項１に記載の肌美白剤。
【請求項３】
化粧水、スキンローション、クリーム、ファンデーション、エッセンス、ゲル、パック、フォームクレンジング、せっけん及び軟膏からなる群より選択されたいずれか１つの剤形を製造するための、請求項１に記載の肌美白剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メラニン生成、メラニン細胞の分化と成熟などに関与するｃ−Ｋｉｔ活性阻害剤、しみやそばかすの改善などの肌美白に有用な肌美白剤、及びこれを有効成分として含む肌美白用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ｃ−Ｋｉｔは、受容体型チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）のクラスIIIに属する受容体であって、メラニン細胞の生存、増殖及び分化に関与すると知られている。ＵＶに露出した肌ではメラニン細胞の数が増加するが、この過程でｃ−Ｋｉｔが重要な役割をする。Ｋ１４（ケラチンプロモーター）−スチール因子（steel factor）形質転換マウスの場合、毛嚢のメラニン細胞を生成、分化させる「ニッチ（niche）」で増加したＳＣＦがメラニン細胞を増殖、分化させてニッチの外へ出すことが確認され、胎児のときにｃ−Ｋｉｔの抗体であるＡＣＫ２を処理したマウスは、白い毛と白い皮膚を持っていた（Nature 416, 854-860, 2002）。
【０００３】
本来、ｃ−Ｋｉｔは美白剤よりは抗癌剤開発のターゲットとしてより多く研究されてきた。イマチニブ（グリベック、ＳＴＩ−５７１、ノバルティス、イーストハノーバー、ＮＪ、ＵＳＡ）はＢｃｒ−Ａｂｌキナーゼをターゲットとする白血病などの抗癌剤として広く知られている。ところが、イマチニブが処方された６人の患者から、肌の色素減少現象が現われ、これはイマチニブがＢｃｒ−Ａｂｌの外にもｃ−Ｋｉｔの活性を押さえて現われた結果であった。よって、ＳＣＦ／ｃ−Ｋｉｔがヒトのメラニン細胞の成長、維持に必須の役割を果たしていることが分かる（Cancer 98, 2483-7, 2003）。
【０００４】
一方、ｃ−ｋｉｔの配位子であるＳＣＦは、しみ（Melasma）の病変部位で正常部位より過量発現し（大韓皮膚科学会誌2005;43(8):1046-1052）、紫外線による肌の黒化（UVB-Melanosis）、老人性色素斑（Lentigo senilis）及び皮膚線維腫（Dermatofibroma）、カフェ・オレ斑（Caffe aure macule）のような病的な肌の過多黒化症状で過量発現することが報告されている（Pigment Cell Research 17:96-110.2004）。
【０００５】
ｃ−Ｋｉｔは活性化されると、ＭＡＰキナーゼを活性化させ、さらにへリックス−ループ−へリックス、ロイシンジッパータンパク質であるＭｉｔｆ（microphthalmia-associated transcription factor）をリン酸化させて活性の状態にする。活性化されたＭｉｔｆはチロシナーゼ、Ｔｙｒｐ−２などのメラニン生成酵素の転写を活性化させてメラニン色素を生成させる。紫外線を浴びると、ケラチノサイトで分泌されるＳＣＦが、ｃ−Ｋｉｔの存在する前駆体メラニン細胞の成熟したメラニン細胞への分化を促進し、さらにメラニン合成に関与する酵素の転写を促進することでメラニン色素の合成を促進する。
【０００６】
このように、ｃ−Ｋｉｔは紫外線によりメラニン合成を促進させる信号伝達に主に関与している。したがって、ｃ−Ｋｉｔに対する活性を阻害できれば、抗癌効果の外にメラニン細胞の分化及び成熟を阻害することができる。
【０００７】
白くきれいな肌を持ちたいことは全ての人の一般的な所望であるが、メラニン合成が肌内で過度に起きると、肌トーンを暗くし、しみ、そばかすなどができる。したがって、肌内のメラニン色素の合成を阻害すれば、肌トーンを明るくして肌美白を実現できるだけでなく、紫外線、ホルモン、及び遺伝的な原因に起因して発生し得るしみ、そばかす、老人性色素斑、皮膚線維腫、カフェ・オレ斑（Caffe aure macule）などの皮膚の過色素沈着症を改善して肌美白を実現することができる。
【０００８】
そこで、従来はハイドロキノンやアスコルビン酸、コジック酸、グルタチオンのようなチロシナーゼに阻害活性を持つ物質を軟膏や化粧料のような肌適用組成物に配合して、しみ、そばかすの改善など肌美白を実現しようとした。しかし、ハイドロキノンは所定の美白効果は認められるが、肌刺激がひどく使用量が極めて制限される。また、アスコルビン酸は酸化され易く、これを配合した化粧料のような組成物が変色、変臭されるなどの問題が生じる。一方、グルタチオン、システインなどのチオール系化合物は特有の不快な匂いがして経皮吸収にも問題があるだけでなく、これらの配糖体及び誘導体も極性が高くて配合成分としては使用し難い。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
したがって、本発明の技術的課題は、メラニン合成や抗癌作用などに関与するｃ−Ｋｉｔの活性を阻害できるｃ−Ｋｉｔ活性阻害剤を提供することにある。
【００１０】
また、本発明が達成しようとする他の技術的課題は、肌に対する副作用がなく安全に使用でき、色素沈着の阻害効果に優れた肌美白剤、及びこれを含む肌美白用組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
上記の技術的課題を解決するために、本発明は下記化学式１ないし１０で表される化合物からなる群より選択されたフラボン誘導体からなるｃ−Ｋｉｔ活性阻害剤を提供する。
【化１】
0005583346.tif 000002
【化２】
0005583346.tif 000003
【化３】
0005583346.tif 000004
【化４】
0005583346.tif 000005
【化５】
0005583346.tif 000006
【化６】
0005583346.tif 000007
【化７】
0005583346.tif 000008
【化８】
0005583346.tif 000009
【化９】
0005583346.tif 000010
【化１０】
0005583346.tif 000011
【００１２】
また、本発明は前記化学式１ないし１０で表される化合物からなる群より選択されたフラボン誘導体からなる肌美白剤、及びこれらのうちいずれか１つ以上を有効成分として含む肌美白用組成物を提供する。
【発明の効果】
【００１３】
肌美白用組成物において、前記フラボン誘導体の含量は組成物の総重量を基準に０．０００００１ないし１０重量％であることが望ましいが、このようなフラボン誘導体は化粧水、スキンローション、クリーム、ファンデーション、エッセンス、ゲル、パック、フォームクレンジング、せっけん、軟膏などの多様な剤形に添加されて肌美白効果を奏することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
以下、本発明をより詳細に説明する。
【００１５】
本発明は、前記化学式１の６−メトキシフラボン（６−メトキシ−２−フェニル−４Ｈ−クロメン−４−ワン、Ｃ１６Ｈ１２Ｏ３、ＣＡＳ Ｎｏ．２６９６４−２４−９）、前記化学式２の３，７−ジヒドロキシフラボン（Ｃ１５Ｈ１０Ｏ４、ＣＡＳ Ｎｏ．４９２−００−２）、前記化学式３の３，６−ジヒドロキシフラボン（Ｃ１５Ｈ１０Ｏ４、ＣＡＳ Ｎｏ．０８２３８−４１−１）、前記化学式４の３−ヒドロキシ−６−メチルフラボン（６−メチル−３−ヒドロキシフラボン、Ｃ１６Ｈ１２Ｏ３、ＣＡＳ Ｎｏ．６９７１−１８−２）、前記化学式５の３，３’−ジヒドロキシフラボン（Ｃ１５Ｈ１０Ｏ４、ＣＡＳ Ｎｏ．５５９７７−０９−８）、前記化学式６の６，２’，３’−トリヒドロキシフラボン（Ｃ１５Ｈ１０Ｏ５、ＣＡＳ Ｎｏ．１０８２３８−４７−７）、前記化学式７の６，４’−ジメトキシ−３−ヒドロキシフラボン（Ｃ１７Ｈ１４Ｏ５、ＣＡＳ Ｎｏ．９３１７６−０２−４）、前記化学式８の４’−ヒドロキシ−β−ナフトフラボン（Ｃ１９Ｈ１２Ｏ３、ＣＡＳ Ｎｏ．９８１６６−７２−４）、前記化学式９の３，７，３’−トリヒドロキシフラボン（Ｃ１５Ｈ１０Ｏ５）、及び前記化学式１０のジオスメチン（５，７−ジヒドロキシ−２−（３−ヒドロキシ−４−メトキシ−フェニル）−クロメン−４−ワン、Ｃ１６Ｈ１２Ｏ６、ＣＡＳ Ｎｏ．５２０−３４−３）のフラボン誘導体のうちいずれか１つからなるｃ−Ｋｉｔ阻害剤を提供する。
【００１６】
特に、前記化学式１０のジオスメチン（Diosmetin）は、キンゴウカン（Acacia farnesiana）、アキレア・アシアティカ（Achillea asiatica）、長葉アルニカ（Arnica longifolia）、アルテミシア・ルティフォリア（Artemisia rutifolia）、アルテミシア・ブルガリス（Artemisia vulgaris）、カレリアナ・チオノピラ（Caleriana chionophila）、ナズナ（Capsella bursa-pastoris）、レモン（Citrus limon）、ジャショウシ（Cnidium monnieri）、オキナワオオガヤツリ（Cyperus alopecuroides）、ゲンチアナ・バルバタ（Gentiana barbata）、ヒエラキウム・コンポシトゥーム（Hieracium compositum）、ルナリア・マクルーラ（Lnaria macroura）、スペアミント（Mentha spicata）、オリガガヌム・ブルガレ（Origaganum vulgare）、ペダリウム・ミュレックス（Pedalium murex）、ペトロセリヌム・クリスパム（Petroselinum crispum）、ローズマリー（Rosmarinus officinalis）、サルビア・カンディディッシマ（Salvia candidissima）、サルビア・ヌタンス（Salvia nutans）、サルビア・レプタンス（Salvia reptans）、ソロセリス・フッケリアナ（Soroseris hookeriana）、ステモディア・ビスコース（Stemodia viscose）、タナケツム・ヴルガレ（Tanacetum vulgare）、トダリア・フロリバンダ（Toddalia floribunda）、シンブラ・カピタータ（Thymbra capitata）、ティムス・ヒルタス（Thymus hirtus）、ティムス・ブルガリス（Thymus vulgaris）、プレーリーバーベナ（Verbena bipinnatifida）、バレリアナ・カーダミンス（Valeriana cardamines）、バレリアナ・エリオフィラ（Valeriana eriophylla）、バレリアナ・フェドチェンコイ（Valeriana fedtschenkoi）、バレリアナ・ラクシフロラ（Valeriana laxiflora）、ビシア・トルンカトラ（Vicia truncatula）、クサントロエア・ハスチル・ドチ（Xanthorrhoea hastiledurch）、及びクサントロエア・ハスチラ（Xanthorrhoea hastila）などの植物の成分として報告されている物質である。このようなジオスメチンは、抗バクテリア効果（Planta Medica, 70(6), 2004, 509-514）、抗アレルギー効果（Bioorg. Med. Chem., 10(10), 2002, 3123-3228）、抗炎症効果（J. haram. Pharmacol., 50(9), 1998, 1096-1074）などがあると知られている。
【００１７】
本発明者らはメラニン生成及びメラニン細胞の分化と成熟などに関与するｃ−Ｋｉｔの活性を阻害する物質に対する研究を重ねた結果、前述したフラボン誘導体が非常に強力なｃ−Ｋｉｔの活性阻害能を示すことを明らかにして本発明の完成に至った。
【００１８】
すなわち、前述したフラボン誘導体はｃ−Ｋｉｔの活性を阻害するため、抗癌効果の外にもメラニン細胞の分化と成熟及びメラニン合成に関与する酵素の合成も阻害する多機能肌美白剤として使用することができる。特に、前述したフラボン誘導体のようなｃ−Ｋｉｔ活性阻害剤は、メラニン合成の信号伝達初期に働くことで少量でも効果的な肌美白効果を果たすことができる。
【００１９】
本発明において「肌美白効果」とは、肌の色をより白くする効果の外にしみ、そばかす、老人性色素斑、皮膚線維腫、皮膚の過色素沈着など肌の色に係わる望ましくない現状の改善効果を含む包括的な意味である。
【００２０】
前述した化学式１ないし１０のフラボン誘導体は市販のものである。但し、前記化学式１０のジオスメチンは甘菊（Chrysanthemum morifoliumの花）から抽出したものを用いることがさらに望ましい。ジオスメチンを甘菊から抽出する方法を例示すれば次のようであるが、本発明の範囲は本発明に記載された抽出対象や抽出方法に限定されない。
【００２１】
生薬材として市販される甘菊を購入して細かく粉砕し、粉砕物乾燥重量に対して５ないし２０倍体積のメタノールで、還流冷却器が設けられた抽出器にて５０ないし１００℃で１ないし５時間加熱して抽出する。その結果物をろ布でろ過した後、残渣を同じ方法で１回以上ずつさらに抽出する。抽出液を合わせて減圧濃縮した後、凍結乾燥又は噴霧乾燥して乾燥抽出物を得る。得られた甘菊のメタノール抽出物から有効成分を確認するために、メタノール抽出物を１０倍の水に懸濁させた後、同量のヘキサン溶媒で分画して非極性物質を除去した。その後、残った水層に対して同量のブタノール溶媒で溶媒分画して甘菊ブタノール分画を得た。製造された甘菊ブタノール分画は、溶離液としてクロロホルム、メタノール混合溶媒を用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーで有効成分を分離し、得られた有効成分は分取用ＨＰＬＣを使って同一条件で精製する。精製された有効成分は核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）及び質量分析（Mass）を通じてジオスメチンと確認することができる。
【００２２】
前述した化学式１ないし１０の純粋なフラボン誘導体またはジオスメチン抽出物は、それぞれ単独でまたは２種以上混合して化粧水、スキンローション、クリーム、ファンデーション、エッセンス、ゲル、パック、フォームクレンジング、せっけんなどの化粧料や軟膏のような多様な組成物に有効量添加され、肌美白効果を奏することができる。
【００２３】
肌美白効果と経済性を考慮するとき、前記フラボン誘導体の添加量は組成物総重量を基準に０．０００００１ないし１０重量％であることが望ましいが、さらに望ましくは０．０００１ないし１重量％である。
【実施例】
【００２４】
以下、本発明を具体的に説明するために実施例を挙げて詳細に説明する。しかし、本発明による実施例は多くの他の形態に変形することができ、本発明の範囲が後述する実施例によって限定されると解釈されてはならない。本発明の実施例は、当業界で平均的な知識を持つ者に本発明をより完全に説明するために提供される。
【００２５】
＜化学式１ないし９のフラボン誘導体の評価＞
市販されている化学式１ないし９のフラボン誘導体化合物を購入して使用した。各フラボン誘導体化合物を最終濃度が１μＭになるようにして３８４ウェルプレートの各ウェルに入れ、ｃ−Ｋｉｔ ＲＴＫ及びＡＴＰも３８４ウェルプレートの各ウェルに添加して常温で１次反応させた。その後、基質としてビオチン化ポリ［グルタミン：チロシン］（４：１）を添加して２次酵素反応を行った。
【００２６】
基質と結合するようにストレプトアビジンが被覆されたドナービーズ（donor bead）、及び抗体（Ｐ−Ｔｙｒ−１００）が結合された受容体ビーズを含むキャプチャ緩衝液（capture buffer）を添加して３次反応を行った。基質のリン酸化程度はＦｕｓｉｏｎＴＭマイクロプレート分析装置を用いてアルファスクリーン信号を測定することで決める。また、従来ｃ−Ｋｉｔ阻害剤として知られたチロフォスチンＡ５１（Tyrphostin A51）を用いて阻害効果を比べた。
【００２７】
アルファスクリーン信号を正確に測定するためにそれぞれの試料に対して３回ずつ実験を行った。ｃ−Ｋｉｔに対する阻害率を求めるために、陽性対照群には試料の代わりにＤＭＳＯを加え、陰性対照群には試料の代わりにＤＭＳＯを加え、さらに酵素の代わりに緩衝液を加えた。
【００２８】
ｃ−Ｋｉｔに対する活性阻害率（％）は、感知された信号から次の式によって計算した。結果を表１にまとめた。
阻害率（％）＝（試料の平均値−陰性対照群の平均値）／（陽性対照群の平均値−陰性対照群の平均値）×１００
【表１】
0005583346.tif 000012
【００２９】
表１の結果から、化学式１ないし９のフラボン誘導体化合物はｃ−Ｋｉｔの活性阻害剤として知られているチロフォスチンＡ５１と比べ、より低い濃度でｃ−Ｋｉｔ活性の強力な抑制能があることが分かる。
【００３０】
前述したフラボン誘導体化合物のうちの一部を下記表２に記載した成分と含量で化粧料であるクリームに添加し、美白効果を評価した。
【表２】
0005583346.tif 000013
【００３１】
前述した組成で製造したクリームに対する肌美白効果を検証するために、次のように色素沈着阻害及びしみ改善実験を実施した。
【００３２】
［色素沈着阻害効果実験］
健康な男女２０人を選定して両腕の下膊部に直径７ｍｍの穴が６個ずつ２列あるアルミホイルを貼り、腕から１０ｃｍ離れた距離からＯＲＩＥＬソーラーシミュレーター１０００Ｗ（ORIEL solar simulator 1000W）を使って６０ｍＪ／ｃｍ２の光量を照射した。照射の前に７０％エタノール水溶液で照射部位をきれいに洗浄した。照射の３日前から調査後３週目まで、１日２回製造例１ないし３及び比較例１によって製造された基剤を一対の同じ行に塗布した。
【００３３】
それぞれに対して製造例と比較例の色素沈着度を目視で判定し、製造例が比較例に比べて色素沈着を抑制した程度を効果あり、差異なしの２段階で評価した。その結果は表３のようである。
【表３】
0005583346.tif 000014
【００３４】
表３の結果から分かるように、製造例１ないし３のフラボン誘導体含有クリームは、被験者２０人のうち少なくとも１０人に対して美白効果を示し、肌内で如何なる副作用も現われなかった。
【００３５】
［しみ改善効果実験］
しみのある健康な女性１０人を選定して顔面部のしみ部位に１日２回製造例１によって製造された基剤を３週間塗布した。
【００３６】
実験終了後、専門家により色素沈着度を目視で判定し、且つ、被験者の主観的判断によってしみの改善程度を判定して、製造例１のクリームのしみ改善に対し効果あり、効果なしの２段階で評価した。その結果は表４のようである。
【表４】
0005583346.tif 000015
【００３７】
表４の結果から分かるように、製造例１によって製造された６−メトキシフラボンを含むクリームは、被験者１０人のうち少なくとも６人に対してしみ改善効果を示し、如何なる副作用も現われなかった。
【００３８】
＜化学式１０のジオスメチン抽出物製造及び評価＞
［実施例１］
生薬材として市販されている乾燥した甘菊を購入して細かく粉砕し、粉砕物１０ｋｇに対してメタノール１５０Ｌで、還流冷却器が設けられた抽出器にて７０℃で３時間加熱して抽出した。抽出物をろ布でろ過した後、残渣を同じ方法で１回以上さらに抽出した。抽出液を合わせて減圧濃縮し、乾燥抽出物１．２ｋｇを得た。
【００３９】
［実施例２］
実施例１で製造された甘菊メタノール抽出物１ｋｇを１０Ｌの水に懸濁させた後、ヘキサンを１０Ｌずつ加え、３回溶媒分画してヘキサン分画を除去した。その後、残った水層に対してブタノールを１０Ｌずつ加え、３回溶媒分画してブタノール分画を得て、これを減圧濃縮して乾燥物１２５ｇを得た。
【００４０】
［実施例３］
実施例１で製造された甘菊メタノール抽出物１ｋｇを１０Ｌの水に懸濁させた後、エチルアセテートを１０Ｌずつ加え、３回溶媒分画してエチルアセテート分画を得た。これを減圧濃縮して乾燥物２３０ｇを得た。
【００４１】
［実施例４］
実施例２で製造された甘菊ブタノール可溶分画１００ｇを溶離液としてクロロホルム、メタノール混合溶媒を用いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーで有効分画を得た。この分画から分取用ＨＰＬＣを使って有効成分１．２ｇを得た。分離した有効成分は核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）及び質量分析（Mass）を通じて（図１ないし３参照）、次のように、前記化学式１０で表したジオスメチンであると確認した。
分子式：Ｃ１６Ｈ１２Ｏ６
分子量：３００．２７
融点：２６０ないし２６４℃
ＵＶ（λａｘ、ｎｍ）（ＭｅＯＨ）：２７２、３４２
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）σ：３Ｈ（６．６９、ｓ）、６Ｈ（６．１３、ｓ）、８Ｈ（６．３９、ｓ）、２’Ｈ（７．４１、ｓ）、５’Ｈ（７．０６、ｄ、８．６Ｈｚ）、６’Ｈ（７．５１、ｄ、８．６Ｈｚ）、５−ＯＨ（１２．８９、ｂｒ）、７−ＯＨ（１０．０、ｂｒ）、４’−ＯＭｅ（３．８５、ｓ）
【００４２】
［ｃ−Ｋｉｔ活性阻害効果］
前記実施例１（メタノール抽出物）及び実施例２（ブタノール可溶分画）の濃度がそれぞれ２０μｇ／ｍｌになるように、実施例４（ジオスメチン）は最終濃度が０．３μＭになるようにして、前述した化学式１ないし９のフラボン誘導体化合物の評価方法と同様に評価した。その結果を下記表５に示した。
【表５】
0005583346.tif 000016
【００４３】
表５の結果から、ジオスメチンを含む粗抽出物である実施例１及び２の試料はｃ−Ｋｉｔに対する阻害率が高く、精製したジオスメチンである実施例４の試料はｃ−Ｋｉｔの活性阻害剤として知られているチロフォスチンＡ５１と比べても、同等レベルで優れたｃ−Ｋｉｔ活性の抑制能があることが分かる。
【００４４】
［美白効果評価］
ジオスメチンを化粧料に添加したときの美白効果を評価するために、下記表６に記載された成分と含量でクリームを製造した。
【表６】
0005583346.tif 000017
【００４５】
表６によって製造したクリームに対する色素沈着阻害効果を前述した製造例１ないし３に対する評価方法と同様に評価した。その結果を下記表７に示した。
【表７】
0005583346.tif 000018
【００４６】
表７の結果から分かるように、製造例４のジオスメチンを含むクリームは被験者２０人のうち１４人に対して美白効果を示し、肌内で如何なる副作用も現われなかった。
【００４７】
［しみ改善効果］
しみのある健康な女性１０人を選定して顔面部のしみ部位に１日２回製造例４によって製造された基剤を３週間塗布した。
【００４８】
実験終了後、専門家により色素沈着度を目視で判定し、且つ、被験者の主観的判断によってしみの改善程度を判定して、製造例４のしみ改善に対して効果あり、効果なしの２段階で評価した。その結果は下記表８のようである。
【表８】
0005583346.tif 000019
【００４９】
表８の結果から分かるように、製造例４によって製造されたジオスメチンを含むクリームは被験者１０人のうち７人に対してしみ改善効果を示した。
【産業上の利用可能性】
【００５０】
このように、前述した本発明のフラボン誘導体は効果的なｃ−Ｋｉｔ活性阻害剤である。特に、前述したフラボン誘導体は肌に対する副作用がなく、メラニン生成及びメラニン細胞の分化と成熟を阻害するので、これらを有効成分として含む化粧料などの組成物はしみ、そばかす、老人性色素斑、皮膚線維腫、カフェ・オレ斑（Caffe aure macule）などの皮膚の過色素沈着症を改善して肌美白の実現に非常に効果的に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００５１】
【図１】図１は、本発明の一実施例により抽出及び精製されたジオスメチンのＨ１−ＮＭＲスペクトルグラフである。
【図２】図２は、本発明の一実施例により抽出及び精製されたジオスメチンのＣ１３ＮＭＲスペクトルグラフである。
【図３】図３は、本発明の一実施例により抽出及び精製されたジオスメチンの質量分析スペクトルグラフである。
【図１】
0005583346.tif 000021
【図２】
0005583346.tif 000022
【図３】
0005583346.tif 000023