(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象による過食を制御または減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを含む、対象における過食を制御するための医薬組成物であって、該対象が感情的に意気消沈している場合に過食を行う、および／または、該対象が不安症障害と診断されており、該アミリンまたはアミリン・アゴニストが配列番号：３−２５３のいずれか１に記載のアミノ酸配列を含む、該医薬組成物。
【請求項２】
対象による過食を制御または減少するのに有効な量が、医薬組成物を投与しない場合の過食スケール（BES）総スコアと比較して対象のBES総スコアを減少するのに有効な量である請求項１記載の医薬組成物。
【請求項３】
対象による過食を制御または減少するのに有効な量が、医薬組成物を投与しない場合の過食スケール（BES）カテゴリーと比較して対象のBESカテゴリーを変化するのに有効な量であって、該BESカテゴリーが重度から中度に、重度から軽度にまたは中度から軽度に変化する請求項１記載の医薬組成物。
【請求項４】
該アミリンまたはアミリン・アゴニストが、配列番号：３−１２７のいずれか１に記載のアミノ酸配列を含む、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項５】
該アミリンまたはアミリン・アゴニストが、配列番号：１６に記載のアミノ酸配列（プラムリンチド）を含む、請求項１記載の医薬組成物。
【請求項６】
低脂肪食品に対する対象の好みを増加するかまたは高脂肪食品もしくは甘い食品に対する対象の好みを減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを含み、該アミリンまたはアミリン・アゴニストが配列番号：３−２５３のいずれか１に記載のアミノ酸配列を含む、医薬組成物。
【請求項７】
該アミリンまたはアミリン・アゴニストが、配列番号：３−１２７のいずれか１に記載のアミノ酸配列を含む、請求項６記載の医薬組成物。
【請求項８】
該アミリンまたはアミリン・アゴニストが、配列番号：３−９のいずれか１に記載のアミノ酸配列を含む、請求項６記載の医薬組成物。
【請求項９】
該アミリンまたはアミリン・アゴニストが、配列番号：１６に記載のアミノ酸配列（プラムリンチド）を含む、請求項６記載の医薬組成物。
【請求項１０】
対象の代謝速度を増大するのに有効な量でアミリンまたはアミリン・アゴニストを含む、対象の代謝速度をモデュレートするための医薬組成物であって、該アミリンまたはアミリン・アゴニストが配列番号：３−２５３のいずれか１に記載のアミノ酸配列を含む、該医薬組成物。
【請求項１１】
該アミリンまたはアミリン・アゴニストが、配列番号：３−１２７のいずれか１に記載のアミノ酸配列を含む、請求項１０記載の医薬組成物。
【請求項１２】
該アミリンまたはアミリン・アゴニストが、配列番号：１６に記載のアミノ酸配列（プラムリンチド）を含む、請求項１０記載の医薬組成物。
【請求項１３】
対象が、アミリンまたはアミリン・アゴニストを含まない場合と比較して減少したカロリー取り込みを有する請求項１０記載の医薬組成物。
【請求項１４】
対象の体重およびウエスト周りが、アミリンまたはアミリン・アゴニストを含まない場合と比較して減少する請求項１０記載の医薬組成物。
【請求項１５】
対象が肥満である請求項１０記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願への相互参照
本願は、2005年3月31日に出願された米国仮特許出願番号60/667,335号、2005年3月31日に出願された米国仮特許出願番号60/666,681号、2005年4月28日に出願された米国仮特許出願番号60/675,441号ならびに2006年1月20日に出願された米国仮特許出願番号60/760,583号の優先権の利益を主張し、すべての目的のためにそれぞれの全体の内容をここに組み込む。
【０００２】
技術分野
本開示は、医学分野、特に健康、食事療法および栄養の分野に関連する。本開示は、 この発表はペプチドの使用と特にアミリンおよびアミリン・アゴニストの使用に関連している。
【背景技術】
【０００３】
アミリン、カルシトニン、カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)、アドレノメデュリン(ADM)、およびインターメディン(別名「AFP-6」)を含むペプチドホルモンのアミリン・ファミリーは、一般に代謝の条件および障害と関係するペプチドホルモンのファミリーである。 アミリン・ファミリーのペプチドホルモンの生物作用が２の密接に関連する。タイプIIのgによってタンパク質つながれるレセプター、カルシトニンのレセプター(CTR)およびレセプター(CRLR)のようなカルシトニンのレセプターへの不良部分によって一般に仲介されることが報告された。 クローンとして作る機能調査はその、CGRP、ADMおよびCTRかCRLRおよびレセプターの活動変更タンパク質(傾斜路)の異なった組合せと相互アミリン示した。 カルシトニン、CGRP、ADMおよびアミリンのための機能レセプターを発生させるように傾斜路のco表現がCTRかCRLR要求されると考えられ。AFP-6のための特定のレセプターは報告されなかった; 但し、結合の調査はAFP-6がアミリン家族のすべての知られていたレセプターに結合することを示す。
【０００４】
従って一般に、アミリンは胃内容排出を調整し、グルカゴンの分泌および滋養分を抑制し、循環のブドウ糖の出現の率を調整する。人間の試験では重量か体重増加を減らすために、アミリンのアナログ、プラムリンチドは、示されていた。 アミリンは糖尿病および肥満のような新陳代謝の条件の処理で有利かもしれない。 苦痛、骨の障害、胃炎を扱うか、脂質、特にトリグリセリドを調整するか、または脂肪の優先損失および細いティッシュの倹約のようなボディ構成に影響を与えるのに使用されていなさい。、例えば、米国特許第5,175,145、5,677,279、5,405,831、6114,304号、ならびに米国特許出願番号2002-0010133、2003-0130177、2004-0022807および2005-0197287を参照されたい。 
【０００５】
ホルモンのカルシトニン(ct)は引き起こされたhypercalcemiaに応じて分泌および急速な高カルシウム血症効果の示された。 CTは血漿カルシウムに効果を水平にし、禁じ、osteoclast機能をそしてオステオポローシス.の処置のために広く利用されているもたらす。 治療上、サケCT(sCT)は骨密度を増加し、最低の悪影響のひび率を減らすようである。 ctはまたPagetの骨組の1つ以上の地域の拡大されたか、または変形させた骨で起因するかもしれない慢性の骨格障害である骨の病気のために療法として過去の25年にわたって首尾よく使用された。 ctはこの効果のためのメカニズムがはっきり理解されないがオステオポローシス.の間に経験される骨痛に対する鎮痛性の効果のためにまた広く利用されている。
【０００６】
カルシトニン遺伝子関連ペプチド(CGRP)は、レセプターが神経系および心血管系を含む体内で広く分布する神経ペプチドである。このペプチドは感覚神経伝達を調整するようで、今までに発見された最も有効な内生の血管拡張ペプチドの1つである。CGRPについて報告された生物学的作用は下記のものを含んでいる: 炎症におけるサブスタンスＰのモデュレーション、神経筋接合部のニコチンレセプター活性、膵臓酵素分泌の刺激、胃酸分泌の減少、末梢血管拡張、心臓加速、神経−モデュレーション、カルシウム代謝の調節、骨形成刺激、食物取込みの減少 （Wimalawansa(1997) Crit Rev Neurobiol. 11:167-239)。 
【０００７】
アドレノメデュリン(ADM)はそれ以外のペプチドを含んでいるもっと多くの組織と一緒にほとんどいたるところにで発現している。 Hinsonら(2000) Endocrine Reviews 21:138 -167は、血管拡張、細胞増殖、ホルモン分泌の調節規則、およびナトリウム尿排泄亢進を含む生物作用の範囲の、心血管系、細胞増殖、中枢神経系および内分泌系に対するADMの作用を詳述している。
【０００８】
AFP-6(すなわち、インターメディン)の発現は、下垂体および胃腸管に主に存在する。イン・ビボ(in vivo)の実験において、AFP-6の投与は、正常および自然発生高血圧ラットの両方における血圧低下に通じ、マウスにおけるAFP-6のイン・ビボ(in vivo)投与は、胃内容排出および食物取り込みの抑制に通じた(Rohら，(2004) J. Biol. Chem. 279:7264 - 7274.)。
【０００９】
アメリカ人の約64%が体重過多または肥満(大体約97,000,000人の成人)と推定されており、一般的にこれらの数字は増加していると考えられている。肥満または体重過多であることは、高血圧；脂質異常症；２型糖尿病；冠動脈疾患；卒中；胆嚢疾患；骨関節症；睡眠時無呼吸症候群および呼吸性の問題；ならびに子宮内膜、乳房、前立腺および大腸のガンの罹患率の危険性を実質的に高め得る。より重い体重は、すべての原因の死亡率の増大とも関連している。さらに、肥満または体重過多であることは、彼または彼女自身に関するネガティブなイメージをヒトに起こし得る。
【００１０】
ヒトにおいて、体重過多または肥満である患者は、25以上の ボディマス指数(BMI)を有するものと考えられる。BMIは、身長に対する体重の関係（または割合）を表現する一般的な尺度である。それは、キログラムでのヒトの体重をメートルの彼または彼女の身長で除する数学式である(すなわち、重量/(身長)2)。25から29.9のBMIを有する個人は体重過多であると考えられ、30から39.9のBMIを有する個人は肥満と考えられ、40以上のBMIを有する個人は病的な肥満であると考えられる。25以上のBMIを有するすべての成人（年齢１８歳以上）は体重過多および肥満の結果として早期の死亡および無力の危険性にあると考えられる。これらの健康的な危険性は、個人の肥満の程度が増大するにつれてより大きくなる。
【００１１】
これらの理由について、肥満を治療することにおける膨大な関心が存在する。現存する療法は、標準的な食事療法およびエクササイズ、非常に低カロリー食事療法、習慣療法、および食欲抑制剤、発熱剤、食物吸収阻害剤を含む薬物療法、顎部針金施術、腰部束縛およびバルーンのような機械的デバイス、胃バイパスのような外科的手術が含まれる。Jungら,(1991) Clinical Endocrinology 35: 11-20; Bray(1992) Am. J. Clin. Nutr. 55: 538S-544S.
【００１２】
しかしながら、一般的に、脂肪の損失は望まれるが、徐脂肪体重(タンパク質)の損失は望まれない。 徐脂肪体重は代謝的および生理学的に非常に活動的であり、サイズは一般的に遺伝的に決まり、維持される。徐脂肪体重はすべての身体タンパク質を含む。すべてのタンパク質分子はホメオスタシスを維持する役割を有するため、真のタンパク質の貯蔵は存在しない。身体タンパク質の損失は個人の健康に対して有害であると考えられる。徐脂肪体重のタンパク質の大部分は、骨格筋の固まりにある。徐脂肪体重は体重当たり５０−６０％筋肉重量であり、残りは骨および腱である。タンパク質は、筋肉、内臓、赤血球および結合組織中の重要な細胞構造を構成する。代謝を指示する酵素、免疫機能を維持する抗体もタンパク質である。したがって、身体の脂肪を減少しつつ徐脂肪体重の損失を予防または最小限化することが望ましい。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
その形態にかかわらず、カロリー制限は、身体タンパク質の異化を引き起こすことができ、負の窒素バランスを生じ得る。したがって、タンパク質補充食事療法は、カロリー制限の間の窒素損失を少なくする手段として人気を博している。タンパク質を控えた修飾絶食は、青年期における体重低下に有効であることが報告されている（Leeら,(1992) Clin.Pediatr.31:234-236）。しかしながら、これらの食事療法は適度な窒素倹約だけしか生成することができない。 徐脂肪体重を保存しまたはその損失を最小限化しながら、脂肪損失を促進する有効な方法に対する要望が存在する。
【００１４】
食べることは、食欲、食物アベイラビリティー、家族、同等者および文化的習慣を含む多くの要素によって制御され、自発的な制御で試みられる。健康に求められるよりも細い体重への食事療法は、現在のファッション傾向、特別な食物の、およびある活動および専門職における販売キャンペーンによって非常に促進される。摂食障害は、食物取り込みの極度かつ不健全な減少ならびに重度の過食のような摂食行動、ならびに身体形態または体重についての苦脳感または極度な関心における重大な不安を含んでいる。研究者らは、どのようにしておよびなぜ、ある時点において、通常よりもより少量または多量の食物を摂食するような初期の自発的な行動にあるヒトにおける制御を超えて動かし、摂食障害に発展するかをするかを研究している。食欲制御の基礎生物学および長期間の過食または飢餓によるその変化に対する研究は、膨大な複雑さを明らかにするが、長期間にわたる実施では摂食障害の新たな薬理学的治療に通じる可能性がある。
【００１５】
摂食障害の主なタイプは、神経性無食欲症および神経性食欲昂進症である。第３のタイプ、過食障害が示唆されているが、いまだ正式な精神医学診断として認められていない。摂食障害は思春期または早期成人期の間に頻繁に発病するが、いくつかの報告は、その開始は小児期または後期成人期の間に生じ得ることを示している。摂食障害は、鬱病、物質濫用および不安症障害のような他の精神医学的障害と頻繁に同時発病する。また、摂食障害に苦しむヒトは、死に至ることもある重篤な心臓の病気および腎臓不全を含む広範囲の身体的な健康合併症を経験し得る。したがって、真性および処理できる疾患としての摂食障害の認識は、極めて重要である。
【００１６】
身体組成を修飾し、ならびに、肥満症および摂食障害ならびに関連する疾患および障害を制御し、予防し、または治療する有効な方法および組成物に対する要望がいまだ存在する。
【００１７】
本明細書に引用するすべての特許、特許出願および刊行物は、その全体において参照によって本明細書に取り込む。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
１の態様において、提供する方法は、対象における過食を制御する方法における、アミリン・アナログおよびアミリン誘導体を含むアミリンまたはアミリン・アゴニストの使用を含む。１の形態において、過食を制御する方法を提供し、ここに方法は、それを必要とする対象に、対象による過食を制御または減少させるのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。１の形態において、対象が過食で最もありそうである日の時に対象に有効量のアミリンまあたはアミリン・アゴニストを投与することを含む、対象における過食を制御するための方法を提供する。１の形態において、対象が過食でなさそうな日の時に空腹を抑制する少なくとも１の他の薬剤を対象に投与することをさらに含む、対象における過食を制御するための方法を提供する。いくつかの形態において、空腹を抑制する少なくとも１の他の薬剤は、シブトラミン、オーリスタット、ＰＹＹまたはＰＹＹアナログ、リモナバントのようなＣＢ−１アンタゴニスト、レプチンまたはレプチン・アナログ、またはフェンテルミンである。いくつかの形態において、空腹を抑制する少なくとも１の他の薬剤は、アミリンよりも長いイン・ビボ(in vivo)半減期を有する。
【００１９】
１の形態において、過食を制御するための方法を提供し、該方法は、それを必要とする対象に、ストレスをかけた条件に応答した対象による過食を制御または減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。もう１の形態において、過食を制御するための方法を提供し、該方法は、それを必要とする対象に、ストレスをかけた条件に応答していない対象による過食を制御または減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。
【００２０】
対象が過食の制御を必要としているいくつかの形態において、過食の制御は、過食発生の頻度における減少、過食発生の期間の減少、過食発生の間に消費される全体量の減少、過食発生の開始に抵抗することの困難性における減少、またはそれらのいずれかの組合せを含む。対象が過食の制御を必要としているいくつかの形態において、対象は身体的に空腹でない場合に多量の食物を摂食し、対象は身体的に空腹でない場合に多量の食物を摂食し、対象は不愉快に完全になるまで食物を摂食し、対象は経済的に苦しむ場合に食物を摂食し、対象は強迫神経症のような不安症障害と診断され、該対象は強迫神経症問題を有すると診断され、対象は、薬剤乱用者またはアルコール濫用者、あるいはそれらのいずれかの組合せを有すると考えられる。
【００２１】
１の態様において、提供する発明は、対象の食物の好みを修飾するための、アミリン・アナログおよびアミリン誘導体を含むアミリンまたはアミリン・アゴニストの使用を含む。１の形態において、食物の好みを修飾することが望まれる対象に、投与しない場合の対象の食物の好みと比較して対象の食物の好みを修飾するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む、対象の食物の好みを修飾するための方法を提供する。
【００２２】
いくつかの形態において、食物の好みの修飾は、高脂肪食物に対する好みの減少、高脂肪食物の取り込みの減少、甘い食物に対する好みの減少、甘い食物の取り込みの減少、チョコレート製食物に対する好みの減少、チョコレート製食物の取り込みの減少、塩味食物の好みの減少、塩味食物の取り込みの減少、またはそれらのいずれかの組合せを含む。いくつかの形態において、食物好みの修飾は、低脂肪食物の好みの増加、低脂肪食物の取り込みの増加、または両方を含む。
【００２３】
１の形態において、食物好みを修飾することが望ましい対象に、ストレスをかけた条件に応答した対象の食物好みを修飾するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む、対象の食物好みを修飾する方法を提供する。１の形態において、ストレスをかけた条件に応答しない対象の食物好みを修飾するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む、対象の食物好みを修飾するための方法を提供する。
【００２４】
１の態様において、提供する方法は、対象の食物渇望を治療、減少または予防するための、アミリン・アナログおよびアミリン誘導体を含むアミリンまたはアミリン・アゴニストの使用を含む。１の形態において、対象の食物渇望を治療、減少または予防するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む、対象の食物渇望を治療、減少または予防するための方法を提供する。いくつかの形態において、対象は、甘い食物、チョコレート製食物、塩味食物、塩辛い食物、脂肪過多食物、またはそれらのいずれかの組合せを渇望する。いくつかの形態において、対象の食物渇望の治療は、特定の食物の渇望の頻度の減少、特定の食物の渇望の期間の減少、特定の食物の渇望の強度の減少、特定の食物の抵抗する渇望の困難製の減少、特定の食物を摂食する頻度の減少、またはそれらのいずれかの組合せを含む。
【００２５】
１の態様において、提供する方法は、対象における減少したカロリー取り込みと関連するストレスを減少するための、アミリン・アナログおよびアミリン誘導体を含むアミリンまたはアミリン・アゴニストの使用を含む。１の形態において、減少したカロリー取り込みと関連する対象のストレスを減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む、対象の減少したカロリー取り込みと関連するストレスを減少するための方法を提供する。１の形態において、減少したカロリー取り込みと関連する対象のストレスは、鬱病として現れる。
【００２６】
１の態様において、提供する方法は、対象における体重損失を生じる薬剤を摂取することによって引き起こされるストレスを減少するための、アミリン・アナログおよびアミリン誘導体を含むアミリンまたはアミリン・アゴニストの使用を含む。１の形態において、体重損失を生じる薬剤を摂取することによって引き起こされる対象のストレスを減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む、対象における体重損失を生じる薬剤を摂取することによって引き起こされるストレスを減少するための方法を提供する。１の形態において、体重損失を生じる薬剤を摂取することによって引き起こされる対象のストレスは、シブトラミンおよびリモナバントのような脳を標的する薬剤によって引き起こされる。
【００２７】
１の態様において、提供する方法は、対象の代謝速度をモデュレートする方法における、アミリン・アナログおよびアミリン誘導体を含むアミリンまたはアミリン・アゴニストの使用を含む。１の形態において、対象の代謝速度を増加するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む、対象の代謝速度を増加するための方法を提供する。もう１の形態において、対象の代謝速度を保存するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む、対象の代謝速度を保存するための方法を提供する。もう１の形態において、対象の代謝速度の減少を減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む、対象の代謝速度の減少を減少するための方法を提供する。いくつかの形態において、対象の代謝速度のかかる減少は、減少したカロリー食事療法、制限された食事療法または体重損失に起因し得る。
【００２８】
もう１の形態において、対象における少なくとも１の代謝プラトーを減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む、対象における少なくとも１の代謝プラトーを減少するための方法を提供する。いくつかの形態において、代謝プラトーにおける減少は、代謝プラトーの期間の減少、代謝プラトーの頻度の減少、代謝プラトーの開始の遅延、またはそれらのいずれかの組合せである。
【００２９】
対象の代謝速度をモデュレートするまたは代謝プラトーを対象において減少するいくつかの形態において、対象における代謝速度は、実質的に同様または同じ条件下で同一の期間にわたってアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与しない他は同一の対象と比較して少なくとも約５％増加する。
【００３０】
対象の代謝速度をモデュレートするまたは代謝プラトーを対象において減少するいくつかの形態において、対象は、減少したカロリー食事療法の途中、制限された食事療法の途中、体重を損失している途中、減少したカロリー食事療法を開始しているまたは制限された食事療法を開始している。対象の代謝速度をモデュレートまたは代謝プラトーを対象において減少するいくつかの形態において、対象の徐脂肪体重は、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与で減少せず、または徐脂肪体重は増加する。いくつかの形態において、対象は減少した代謝速度を発病する危険性にある。対象が減少したカロリー食事療法または制限された食事療法を開始しているいくつかの形態において、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与は、減少したカロリー食事療法または制限された食事療法を開始する際または前に開始する。対象の代謝速度が増加するいくつかの形態において、対象は、境界パーソナリティー障害または鬱病のような精神障害と診断されている。
【００３１】
もう１の一般的態様において、提供する方法は、対象における脂肪組成または分布を変化させるための、アミリン・アナログおよびアミリン誘導体を含むアミリンまたはアミリン・アゴニストの使用を含む。１の形態において、対象の代謝速度を増加させるのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む、患者の代謝速度を増加することによって対象における脂肪量を減少するための方法を提供する。代謝速度の増加によって対象の脂肪量を減少するいくつかの形態において、対象の徐脂肪体重は、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与で減少せず、維持され、あるいは増加する。代謝速度の増加によって対象の脂肪量を減少するいくつかの形態において、脂肪量は、例えば、全体重の少なくとも１％で、全体重のパーセントとして減少する。代謝速度における増加によって対象の脂肪量が減少するいくつかの形態において、対象は、減少したカロリー食事療法または制限された食事療法の途中である。
【００３２】
いくつかの形態において、対象の脂肪分布を変化するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む、対象における脂肪分布を変化させるための方法を提供する。１の形態において、対象におけるより好ましい脂肪分布を生成するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む、対象におけるより好ましい脂肪分布を生成するための方法を提供する。１の形態において、対象における異所性の脂肪沈着を予防または減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む、対象における異所性脂肪沈着を予防または減少するための方法を提供する。もう１の形態において、対象における内臓脂肪の量を減少させるのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む、対象における内臓脂肪の量を減少するための方法を提供する。
【００３３】
対象の脂肪分布を変化するいくつかの形態において、方法は、多嚢胞性卵巣症候群、メタボリック症候群および心血管疾患よりなる群から選択される代謝障害の発病の危険性を減少する。対象の脂肪分布を変化するいくつかの形態において、方法は、アミリンまたはアミリン・アゴニスト投与の時点の対象と比較して、内臓脂肪に対する皮下脂肪のより高い割合を生じる。対象の脂肪分布を変化するいくつかの形態において、方法は、異所性脂肪に対する皮下脂肪のより高い割合を生じる。対象の脂肪分布を変化するいくつかの形態において、方法は、異所性脂肪の減少または内臓脂肪の減少またはそれらの組合せを生じる。対象の脂肪分布を変化するいくつかの形態において、方法は、さらに、例えば筋肉細胞重量の増加の結果としての、徐脂肪体重の増加をさらに生じる。対象の脂肪分布を変化するいくつかの形態において、内臓脂肪または異所性脂肪または両方は、皮下脂肪よりも大きな速度で代謝される。
【００３４】
もう１の態様において、提供する方法は、病的肥満対象における体重を減少するための、アミリン・アナログおよびアミリン誘導体を含むアミリンまたはアミリン・アゴニストの使用を含む。１の形態において、該対象の体重を病的肥満未満に減少し、対象の体重をさらに減少させるのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む、病的肥満対象における体重を減少するための方法を提供する。１の形態において、提供する方法は、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与前に、最初に対象のBMIを40未満のレベルまで減少することを含む。病的肥満対象の体重を減少するいくつかの形態において、病的肥満対象は、40以上のボディマス指数を有する。１の形態において、対象の体重を減少させるのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む、40より低いBMIを有する対象における体重を減少するための方法を提供する。
【００３５】
病的肥満対象の体重をアミリンまたはアミリン・アゴニストの投与の前に減少するいくつかの形態において、対象の体重は、カロリー取り込みを減少すること、身体活動を増加すること、薬剤療法、肥満外科手術、またはそれらのいずれかの組合せによって減少する。１の形態において、肥満外科手術は胃バイパス外科手術である。いくつかの形態において、方法は、さらに、有効量の少なくとも第２の肥満減少剤、例えばシブトラミン、オーリスタット、レプチン、またはリモナバントの投与を含む。いくつかの形態において、アミリンまたはアミリン・アゴニストは、少なくとも第２の肥満減少剤と、同時または順次のいずれかで、同時投与する。
【００３６】
もう１の態様において、提供する方法は、対象における体重を減少するために、１日当たり１回以上、巨丸剤用量でアミリン・アナログおよびアミリン誘導体を含むアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。いくつかの形態において、アミリンまたはアミリン・アゴニストは、体重損失を引き起こすことが公知である少なくとも１の他の薬剤と、同時または順次のいずれかで、同時投与する。
【００３７】
もう１の態様において、提供する方法は、対象の体重を減少するための、連続用量で、アミリン・アナログおよびアミリン誘導体を含むアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。いくつかの形態において、アミリンまたはアミリン・アゴニストは、体重損失を引き起こすことが公知である少なくとも１の他の薬剤と、同時または順次のいずれかで、同時投与する。いくつかの形態において、投与する体重損失を引き起こすことが公知である少なくとも１の他の薬剤は、巨丸剤用量または連続用量として投与する。
【００３８】
もう１の態様において、提供する方法は、肥満外科手術を受けた対象における骨損失を減少するための方法を提供する。１の形態において、対象における骨損失を減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む、肥満外科手術を受けた対象における骨損失を減少するための方法を提供する。骨損失をアミリンまたはアミリン・アゴニストで治療するいくつかの形態において、方法は、さらに、骨損失を治療するのに有効であることが公知である少なくとも１の他の薬剤、例えば、リセドロネート、アレンドロネート、ラロキシフェン、カルシトニンまたはテリパリチド（teriparitide）の投与を含む。
【００３９】
もう１の態様において、提供する方法は、対象における熱発生を増加するための、アミリン・アナログおよびアミリン誘導体を含むアミリンまたはアミリン・アゴニストの使用を含む。１の形態において、対象における熱発生を増加するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む、対象における熱発生を増加するための方法を提供する。
【００４０】
もう１の態様において、提供する方法は、対象における酸化代謝を増加するための、アミリン・アナログおよびアミリン誘導体を含むアミリンまたはアミリン・アゴニストの使用を含む。１の形態において、対象における酸化代謝を増加するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む、対象における酸化代謝を増加するための方法を提供する。
【００４１】
本発明は、肥満、摂食障害、および関連する症状、障害および疾患の制御、治療および予防、ならびに、これらの症状を治療するのに有効な薬物を製造するための、本発明のアミリンまたはアミリン・アゴニストおよび組成物の使用にも関する。
【００４２】
図１Ａ−１Ｄは、ストレスおよび非−ストレス条件下の飼料好みに対するアミリンの効果を示したグラフである。これらのグラフにおいて、Ｒは抵抗性ストレスに付した動物を示し、Ｃは抵抗性ストレスに付していない対照動物を示す。図１Ａは、ベースラインのパーセントとしての餌に対するスクロース平均割合を示す。図１Ｂは合計餌消費を示し、図１Ｃは消費した平均合計ｋｃａｌを示し、図１Ｄは消費したｋｃａｌでの平均スクロースを示す。
【００４３】
図２は高脂肪餌からのカロリー取り込みのパーセントに対するアミリンの効果を示すグラフである。
【００４４】
図３は高脂肪餌および低脂肪餌からの合計カロリー取り込みに対するアミリンの効果を示すグラフである。
【００４５】
図４は食物好み実験における体重増加に対するアミリンの効果を示すグラフである。
【００４６】
図５は食物好み実験における体重組成に対するアミリンの効果を示すグラフである。
【００４７】
図６は過食スケール平均トータルスコア（binge eating scale mean total score）に対するアミリンの効果を示すグラフである。白抜きバーはすべてのプラセボ受容者（ｎ＝５３）を表し、黒塗りバーはプラムリンチドTID受容者（ｎ＝５９）を表し、網掛けバーはプラムリンチドCSI受容者（ｎ＝４７）を表す。
【００４８】
図７はベースラインからの、過食スケール平均トータルスコアの変化を示すグラフである。
【００４９】
図８は、１−１４日目にビヒクル（円）またはアミリン（三角）のいずれかを受容し、その後はビヒクルのみ受容したDIOラットによる２８日にわたる累積食物取り込みを示すグラフである。
【００５０】
図９は、１−１４日目にビヒクル（円）またはアミリン（三角）のいずれかを受容し、その後はビヒクルのみ受容したDIOラットにおけるパーセント体重（ビヒクル補正済み）における変化を示すグラフである。
【００５１】
図１０Ａおよび１０Ｂは、１−１４日目にビヒクルまたはアミリンを投与し、１５−２８日目にビヒクルのみ投与した場合の体重に対する効果を示すグラフである。図１０Ａは身体脂肪に対する効果を示すグラフであり、図１０Ｂは身体タンパク質に対する効果を示すグラフである。
【００５２】
図１１は実施例化合物、化合物２の用量に対する一晩絶食マウスにおける食物消費における用量依存性の減少を示すグラフである。
【００５３】
図１２Ａおよび１２Ｂは、食餌誘導した肥満（DIO）ラットにおける、カロリー取り込み（図１２Ａ）および体重（図１２Ｂ）に対するアミリン・アゴニストの効果を示すグラフである。
【００５４】
図１３は、実施例化合物による身体組成に対する効果を示すグラフである。
【００５５】
図１４Ａおよび１４Ｂは、胃内容排出（図１４Ａ）および低カルシウム血症（図１４Ｂ）に対する実施例化合物（化合物１）の効果を示すグラフである。
【００５６】
図１５はDIOラットにおける体重に対する、単独またはシブトラミンと組み合わせたアミリンの効果を示すグラフである。黒塗り四角はビヒクルを表し、黒塗り円はシブトラミン単独を示し、白抜き三角はアミリン単独を表し、黒塗り三角はアミリンおよびシブトラミンの組合せを表す。
【００５７】
図１６Ａおよび１６Ｂは、２週間にわたってシブトラミン（３ｍｇ／ｋｇ／日）およびアミリン（１００μｇ／ｋｇ／日）を単独または組み合わせた投与の体重に対する効果を示すグラフである。図１６Ａは身体脂肪に対する効果を示すグラフであり、図１６Ｂは身体タンパク質に対する効果を示すグラフである。
【００５８】
図１７は、体重に対する、単独またはアミリン（１００μｇ／ｋｇ／日）と組み合わせた、CB-1アンタゴニストの用量の一定範囲の投与の効果を示すグラフである。囲んだ領域中の組合せの時系列を図１８Ａおよび１８Ｂに示す。
【００５９】
図１８Ａおよび１８Ｂは、体重に対する、単独または組合せのCB-1アンタゴニストおよびアミリンの投与の効果を示すグラフである。図１８Ａは単独または組合せのいずれかの、CB-1アンタゴニスト（１ｍｇ／ｋｇ／日）およびアミリン（１００μｇ／ｋｇ／日）の投与の効果を示し、図１８Ｂは単独または組合せのいずれかのCB-1アンタゴニスト（３ｍｇ／ｋｇ／日）およびアミリン（１００μｇ／ｋｇ／日）の投与の効果を示す。
【発明を実施するための最良の形態】
【００６０】
本発明者らは、肥満、摂食障害、および関連する症状および障害の制御、治療および予防に有用な種々の方法および組成物を発見した。１の態様において、それが望まれるまたはそれを必要とする対象における体重を減少するための方法、ならびに、代謝割合および熱発生の変化のような体重損失と関連する治療または予防条件を提供する。もう１の態様において、有効量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む、病的肥満対象における体重を減少するための方法を提供する。また、肥満外科手術と関連する骨損失を減少するための方法も提供する。もう１の態様において、過食、食物渇望、および食物関連ストレス障害のような摂食と関連する症状または障害を制御、予防または治療するための方法を提供する。
【００６１】
本開示は、アミリンおよびアミリン・アゴニストが、ストレスおよび非−ストレス条件の両方の下で対象における食物好みを修飾することができるという驚くべき発見にも関連する。したがって、もう１の態様において、食物好みを修飾するための方法を提供する。食物好みにおける修飾には、ある種の食物タイプに対する好みの変化、ある種の食物タイプの取り込みの量の変化、渇望の頻度の変化、渇望の期間、渇望の強度、渇望に抵抗する困難性、およびそれらのいずれかの組合せが含まれる。いくつかの形態において、食物好みは、甘い食物、チョコレート製食物、塩味食物、およびそれらのいずれかの組合せに対する好みが含まれる。
【００６２】
本明細書に記載する方法は、かかる症状および障害の制御、予防または治療のためにアミリンまたはアミリン・アゴニストの投与を使用する。
【００６３】
「肥満」とは、本開示の目的について一般的に30を超えるボディマス指数として定義され、体重を減少するまたは体重増加を予防する必要のあるまたはそれを望む、30未満のボディマス指数を有する者を含むいずれの対象も「肥満」の範囲に入る。したがって、30未満のBMIおよび25以上（体重過多と考えられる）または25以下のBMIを有する対象も、本発明の対象に含まれる。病的肥満とは、40以上のBMIをいう。１の形態において、「それを必要とする対象」は肥満である。インスリン耐性、グルコース不寛容である、あるいはいずれかの形態の真性糖尿病（１、２型または妊娠糖尿病）はこの方法から恩恵を受け得る。もう１の形態において、対象は、過食または食物渇望のような摂食に関連する条件に苦しむまたはそれに対して感受性であるものとし得る。
【００６４】
「対象」は、ヒトを含むいずれの哺乳動物も含み得る。「対象」は、ペット（例えば、イヌ、ネコ、ウマ）、ならびに他の動物（例えば、雌ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ）も含み得る。本明細書に開示する方法から恩恵を受け得る対象は、体重過多または肥満とし得る；しかしながら、それらは細身とすることもできる。本明細書に開示する方法から恩恵を受け得る対象は、体重を損失することが望まれる、または過食、もしくは食物渇望のような摂食疾患のような摂食障害を有し得る。本明細書に開示する方法から恩恵を受け得る対象は、食物好みを修飾することが望まれるものとし得る。それらは、これらの症状に加えて代謝障害または症状を有し得る。例示的な代謝障害は、糖尿病、メタボリック症候群、インスリン耐性、および脂質異常症を含む。対象はいずれの年齢ともし得る。したがって、これらの障害は、若年成人および成人（本明細書中では、６５歳以下の者と定義する）ならびに幼児、小児、青年および年配者（本明細書中では、６５歳を超える者と定義する）において見出し得る。事実、ある種の人口セグメントは、青年期および早期成人における摂食障害のような特定の症状を有する傾向が特にある場合がある。
【００６５】
「代謝速度」とは、時間の単位当たりに遊離する／消費されるエネルギーの量を意味する。単位時間当たりの代謝は、食物消費、熱として放出されるエネルギー、または代謝プロセスで使用された酸素によって見積もることができる。体重の損失を欲する場合は、一般的により高い代謝速度を有することが望ましい。例えば、高い代謝速度を有する個人は、その活性について低い代謝速度を有する個人よりも、活動を行うためにより大きいエネルギーを消費することができる（身体がより大きいカロリーを燃焼する）。
【００６６】
本明細書で用いる「徐脂肪重量」または「徐脂肪体重」とは筋肉および骨をいう。徐脂肪体重は脂肪を含まない体重を必ずしも示すものではない。徐脂肪体重は、中枢神経系（脳および脊髄）、骨髄および内部器官内に小さいパーセント（ほぼ３％）の脂肪を含む。徐脂肪体重は密度の観点で測定する。脂肪重量および徐脂肪重量を測定する方法は、限定するものではないが、水中計量、空気置換プレチスモグラフ、ｘ線、二重線ｘ線吸収率（DEXA）スキャン、MRIおよびCTスキャンを含む。１の形態において、脂肪重量および徐脂肪重量は、水中計量を用いて測定する。
【００６７】
「脂肪分布」とは、身体中の脂肪沈着の場所を意味する。脂肪沈着のかかる場所は、皮下、内臓および異所性の脂肪沈着を含む。
【００６８】
「皮下脂肪」とは、皮膚表面直下の脂質の沈着を意味する。対象における皮下脂肪の量は、皮下脂肪の測定に利用し得るいずれの方法を用いても測定し得る。皮下脂肪を測定する方法は当該技術分野において知られており、出典明示して本明細書の一部とみなす米国特許第6,530,886号に記載されたものである。
【００６９】
「内臓脂肪」とは、腹部内脂肪組織としての脂肪の沈着を意味する。内臓脂肪は生器官を取り囲み、肝臓によって代謝されて血液コレステロールを生成し得る。内臓脂肪は、多嚢胞性卵巣症候群、メタボリック症候群および心血管疾患のような症状の増加した危険性と関連し得る。
【００７０】
「異所性脂肪保存」とは、徐脂肪体重を構成する組織および器官（例えば、骨格筋、心臓、肝臓、膵臓、腎臓、血管）の内およびその周りの脂質沈着を意味する。一般的に、異所性脂肪保存は身体内の古典的脂肪組織の外側の脂質の蓄積である。
【００７１】
本明細書で用い、かつ当該技術分野においてよく理解されるように、「治療」は臨床的結果を含む有利または望ましい結果を得るためのアプローチである。疾患、障害または症状を「治療する」または「和らげる」とは、障害を治療しない場合と比較して、障害または疾患状態またはその両方の症状の望ましくない臨床的病変を少なくするおよび／または進行の時系列を遅くするまたは長くする程度を意味する。本明細書に開示する方法の目的について、有益または望ましい臨床的結果には、限定されるものではないが、検出可能または検出不可能にかかわりなく、１またはそれを超える症状の緩和または改善、障害の程度の消滅、障害の安定化した（すなわち、悪化しない）状態、障害進行の遅延または鈍化、障害の改善または軽減、および緩解（部分的または全体的にかかわらず）を含む。「治療」は、治療を受けない場合に予想される生存と比較した、長期間の生存も意味し得る。さらに、治療することは、１の用量の投与によって必ずしも起こる必要はなく、一連の用量の投与でしばしば起こるものであってもよい。したがって、疾患、障害または症状の治療上有効量量、それらを和らげるのに十分な量、または治療するのに十分な量は、１またはそれを超える投与で投与することができる。
【００７２】
本明細書中で用いる「ある」および「その」という単数形は、別段指摘しない限りまたは明細書の文脈から明らかでない限り、複数の参照を包含する。例えば、文脈から明らかなように、「ある」アミリン・アゴニストは、１またはそれを超えるアミリン・アゴニストを包含し得る。
【００７３】
１の態様において、本明細書に提供する方法を用いて、対象における代謝速度を増加し、対象における代謝速度における減少を減少し、または対象における代謝速度を保存する。１の形態において、代謝速度は、徐脂肪身体組織を超えるエネルギー源としての身体脂肪の優先的使用を含み得る。１の態様において、徐脂肪体重は、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与後に減少しない。もう１の態様において、徐脂肪体重の減少は、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与後に少なくなるまたは保存される。まだもう１の態様において、徐脂肪体重は、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与後に増加する。エネルギー源としての脂肪についてのかかる優先性は、治療期間の開始および終了時の全体重および脂肪含量を測定することによって確認されるように、徐脂肪組織に対する脂肪組織の量を比較することによって決定し得る。代謝速度の増加は、アミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することなしに実質的に同様または同一の条件下で別の期間にわたる対象によるカロリーまたはもう１のエネルギー源のより高いレベルの使用である。いくつかの形態において、対象の代謝速度は、アミリンまたはアミリン・アゴニストを投与しない場合と比較して対象のカロリー取り込みが減少するにもかかわらず増加する。カロリー取り込みは、例えば、アミリンまたはアミリン・アゴニストを投与しない場合と比較して、減少したカロリー食事療法、制限した食事療法、または増加した飽満または空腹の減少に起因して、減少し得る。１の形態において、代謝速度は、対象において少なくとも５％増加し、他の形態において、代謝速度は、アミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することなく実質的に同様または同一の条件下で別の期間にわたる対象によるカロリーまたは他のエネルギー源の使用のレベルと比較して、対象において少なくとも約10%、15%、20%、 25%、30%、または35%増加する。代謝速度の増加は、呼吸熱量計を使用して測定する。この形態で使用するアミリンまたはアミリン・アゴニストの有効量は、対象における代謝速度を増加するのに有効な量である。
【００７４】
もう１の形態において、方法を提供して、対象における代謝速度の減少を減少させる。かかる代謝速度における減少は、例えば減少したカロリー食事療法、制限された食事療法または体重損失に起因する、代謝速度の減少に通じるいずれの症状または栄養学的もしくは身体的様式の結果とし得る。制限された食事療法は、必ずしもカロリーに基づく必要はなく、食事療法において許容される食物のタイプまたは食物の量またはその両方に対する許容または禁止、またはその両方を含む。例えば、個々の食事療法として、身体は、より低いカロリー取り込みに基づく減少した代謝速度で補われる。本質において、身体は食物に対する要求性をダウンレギュレートし、それによってより少ない食物で生存する。食事療法を続けるにしたがい、カロリー取り込みに対する閾値が減少する。食事療法を終了すると、個人は典型的には低くなったカロリー取り込み閾値およびより低い基底代謝速度のために、普通の食事療法を摂食しつつ体重を獲得する（NIH Technology Assessment Conference Panel(1992) Ann. Intern. Med. 116:942-949；Wadden(1993) Ann. Intern. Med. 119:688-693）。１の態様において、代謝速度の損失が減少したカロリー食事療法または体重損失の結果である対象における代謝速度の損失を減少するために、方法を提供する。かかる方法の使用によって、代謝速度における対象の減少は、対象において少なくとも約10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、50%、60%、70%、80%、90%または95%減少する。そのような方法については、条件または栄養学的もしくは身体的様式を開始する時にアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することが望ましいかも知れず、それは代謝速度における損失または減少に通じる。しかしながら、条件または栄養学的もしくは身体的様式を開始する前に、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与を開始することも意図される。１の例において、代謝速度は、呼吸熱量計を用いて測定する。この形態において使用するアミリンまたはアミリン・アゴニストの有効量は、対象における代謝速度の減少を減少するのに有効な量である。
【００７５】
もう１の態様において、代謝プラトーを減少するための方法を提供し、方法は、対象に有効量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。１の形態において、対象は体重を損失しているか、または体重を損失しており、これらは例えば減少したカロリー食事療法、増加したエクササイズまたはそれらの組合せに起因する。「代謝プラトー」とは、カロリーまたはエネルギー入力における変化に身体が調節する間の安定した代謝速度の時間を意味する。カロリー入力または消費における変化は、例えば減少したカロリー食事療法または増加した身体活動の結果とし得る。かかるプラトーは、例えば体重損失が鈍化または終止した場合の体重損出様式の間に認められる。１の形態において、本発明の方法は、アミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することなく、実質的に同様または同一の条件下で同じ時間にわたる同一の対象の代謝プラトーの時間と比較して対象における代謝プラトーの期間を減少する。もう１の形態において、提供する方法は、アミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することなく実質的に同様のまたは同じ条件下で同一期間にわたる同一の対象における代謝プラトーの頻度と比較して、代謝プラトーの頻度を減少する。いまだもう１の形態において、提供する方法は、アミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することなく実質的に同様のまたは同じ条件下で同一期間にわたる同一の対象における代謝プラトーの開始と比較して、代謝プラトーの開始を遅延する。１の形態において、代謝プラトーは、減少したまたは存在しない体重損失の期間を作図することによって同定する。１の形態において、少なくとも１の代謝プラトーが減少する。他の形態において、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９または１０の代謝プラトーが減少する。もう１の態様において、代謝プラトーは、同一または同様の条件下でアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与していない対象と比較して、１日遅延する。他の態様において、代謝プラトーは、対象において２日、３日、４日、５日、６日、１週間、１０日、２週間または３週間遅延する。
【００７６】
いまだもう１の形態において、対象における代謝速度を保存するために方法を提供する。１の形態において、対象は、例えば、減少したカロリー食事療法、制限された食事療法、または予想された体重損失の開始に起因して、代謝速度を損失する危険性にあり得る。代謝速度の保存は、アミリンまたはアミリン・アゴニストを投与せずに実質的に同様または同一の条件下で、同一の期間にわたるほかは同一の対象によるカロリーまたはもう１のエネルギー源の使用のレベルの維持である。１の態様において、代謝速度は、代謝速度における減少を生じる事象の開始の前に、対象の代謝速度の15％以内に維持される。他の態様において、代謝速度は、対象の代謝速度の10％以内、7％以内、5％以内、3％以内またはそれ未満以内に維持される。１の態様において、アミリンまたはアミリン・アゴニストは、減少したカロリー食事療法、制限された食事療法、またはエクササイズ様式の開始時に投与する。
【００７７】
代謝速度は、例えば呼吸熱量計を用いることによって、かかる速度を決定するのに有用ないずれの方法を用いて評価し得る。代謝速度をアッセイするためのかかる方法およびデバイスは当該技術分野において知られており、例えば米国特許第4,572,208、4,856,531、6,468,222、6,616,615、6,013,009、および6,475,158号に記載されている。あるいは、動物の代謝速度は、食事療法期間の後に動物によって触媒された徐脂肪組織−対−脂肪組織を測定することによって評価することができる。したがって、総体重および脂肪含量は、食餌療法期間の終わりに測定することができる。ラットでは、総体脂肪を決定するために頻繁に使用される方法は、後腹膜脂肪パッド、後腹膜に位置する脂肪の塊、後腹膜と後腹膜壁側との間の領域に位置する脂肪の塊を外科的に取り出し、計量することである。パッド重量は、動物のパーセント身体脂肪に直接的に関係すると考えられる。ラットにおける体重と身体脂肪との関係は線形であるため、肥満動物は対応するより高いパーセントの身体脂肪および後腹膜脂肪パッドの重量を有する。
【００７８】
もう１の態様において、対象における代謝速度を増加させることによって脂肪重量を減少するための方法を提供し、ここに方法は、対象の代謝速度を増加することによって脂肪重量を減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。脂肪重量は、総体重のパーセントとして表すことができる。いくつかの態様において、脂肪重量は、治療の経過にわたって少なくとも1%、少なくとも5%、少なくとも10%、少なくとも15%、少なくとも20%、または少なくとも25%減少する。１の態様において、対象の徐脂肪体重は治療の間に減少しない。もう１の態様において、対象の徐脂肪体重は治療の間に維持されるか、または増加する。もう１の態様において、対象は減少したカロリー食事療法または制限された食事療法の途中である。「減少したカロリー食事療法」とは、同一の対象の通常の食事療法と比較して、対象が１日当たりにより少ないカロリーを摂取することを意味する。１の例において、対象は１日当たり少なくとも50の少ないカロリーを消費する。他の例において、対象は１日当たり少なくとも100、150、 200、250、300、400、500、600、700、800、900、1000の少ないカロリーを消費する。
【００７９】
１の形態において、対象の脂肪分布を変化するための方法を提供し、ここに方法は、対象の脂肪分布を変化させるのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。１の態様において、変化は、対象における内臓脂肪または異所性脂肪、またはその両方の増加した代謝から生じる。いくつかの形態において、方法は、皮下脂肪についてよりも、少なくとも約5%、10%、15%、20%、25%、30%、40%または50%大きい率の内臓脂肪または異所性脂肪またはその両方の代謝を含む。１の態様において、方法は好ましい脂肪分布を生じる。１の形態において、好ましい脂肪分布は、内臓脂肪、異所性脂肪、またはその両方に対する皮下脂肪の増加した比率である。１の態様において、方法は、例えば筋細胞重量の増加の結果としての、徐脂肪体重の増加を含む。
【００８０】
もう１の形態において、対象における皮下脂肪の量を減少するための方法を提供し、ここに方法は、それを必要とする対象に、対象の皮下脂肪の量を減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。１の形態において、皮下脂肪の量は、少なくとも約5%対象において減少する。他の形態において、皮下脂肪の量は、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与前の対象と比較して少なくとも約10%、15%、20%、25%、30%、40%、または50%減少する。
【００８１】
本明細書に記載する方法は、対象の内臓脂肪の量を減少するために使用することができる。1の例において、内臓脂肪は少なくとも約5%対象において減少する。 他の例において、内臓脂肪は、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与前における対象と比較して、少なくとも約10%、15%、20%、25%、30%、40%または50%対象において減少する。内臓脂肪は、対象における内臓脂肪の量を決定するのに利用し得るいずれの手段を介して測定することができる。かかる方法は、例えばCTスキャンおよびMRIによる、例えば、腹部トモグラフィーを含む。内臓脂肪を測定するための他の方法は、例えば、米国特許第6,864,415、6,850,797および6,487,445号に記載されている。
【００８２】
１の形態において、対象の異所性脂肪の蓄積を防ぐかまたは異所性脂肪の量を減少するための方法を提供し、ここに方法は、それを必要とする対象に、対象における異所性脂肪の蓄積を防ぐかまたは異所性脂肪の量を減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。1の例において、異所性脂肪の量は、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与前の対象と比較して、少なくとも約5%対象において減少する。他の例において、異所性脂肪の量は、少なくとも約10%、15%、20%、25%、30%、40%または50%減少する。あるいは、異所性脂肪の量は、対象における皮下脂肪と比較して、5%、10%、15%、20%、25%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%または100%比例して減少する。異所性脂肪は、異所性脂肪を測定するために利用できるいずれの方法を使用して対象において測定することができる。
【００８３】
もう１の形態において、対象におけるより好ましい脂肪分布を作り出すための方法を提供し、ここに方法は、好ましい脂肪分布を作り出すのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。１の形態において、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与は、対象における内臓脂肪または異所性脂肪の量、またはその両方を減少する。１の形態において、方法は、皮下脂肪における減少を超える、内臓脂肪または異所性脂肪またはそれら両方の組合せの量を優先的に減少する。そのような方法は、内臓脂肪または異所性脂肪に対する皮下脂肪のより高い比率を生じる。 そのような改善された比率は、心血管疾患、多嚢胞性卵巣症候群、メタボリック症候群、またはそれらのいずれかの組合せの発病の減少した危険性を生じ得る。１の形態において、異所性または内臓脂肪は、皮下脂肪よりも5%大きい比率で代謝される。他の形態において、異所性または内臓脂肪は、皮下脂肪よりも少なくとも10%、15%、20%、25%、30%、50%、60%、70%、80%、90%または100%大きな割合で代謝される。
【００８４】
いまだもう１の態様において、提供する方法は、グルココルチコ・ステロイドと組み合わせた治療上有効量のアミリンまたはアミリン・アゴニストの使用を含む。グルココルチコ・ステロイドは、脂肪重量を増加し、徐脂肪体重を減少する逆効果を有する。したがって、グルココルチコ・ステロイドの使用が有利である条件の下において、アミリンまたはアミリン・アゴニストはグルココルチコ・ステロイドと結合して使用し得ることが意図される。
【００８５】
もう１の形態において、人体測定変数（例えば、ウエストの円周、臀部の円周、ヒップに対するウエストの比率）を変化するための方法を提供する。ウエストの円周は腹部肥満の測定である。１の形態において、対象のウエストの円周を減少するための方法を提供し、ここに方法は、それを必要とする対象に、対象のウエストの円周を減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。１の形態において、対象のウエストの円周は、少なくとも約1%減少する。他の形態において、対象のウエストの円周は、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与前における対象と比較して、少なくとも約2%、3%、4%、5%、6%、7%、8%、9%または10%減少する。１の形態において、対象のウエストの円周は、少なくとも約1cm減少する。他の形態において、対象のウエストの円周は、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与前の対象と比較して、少なくとも約2cm、3cm、4cm、5cmまたは6cm減少する。
【００８６】
もう１の形態において、対象の臀部の円周を減少するための方法を提供し、ここに方法は、それを必要とする対象に、対象の臀部の円周を減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。１の形態において、対象の臀部の円周は、少なくとも約1%減少する。他の形態において、対象のウエストの円周は、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与前の対象と比較して、少なくとも約2%、3%、4%、5%または6%減少する。１の形態において、対象のウエストの円周は、少なくとも約1cm減少する。他の形態において、対象のウエストの円周は、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与前の対象と比較して少なくとも約2cm、3cm、4cm、5cmまたは6cm減少する。 
【００８７】
また、最初に対象の体重を病的肥満であるよりも低いレベルまで減少し、ついで、有効量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与して対象の体重をさらに減少することによって病的肥満対象における体重を減少するための方法を提供する。対象の体重を病的肥満のもの未満にするための方法は、カロリー取り込みを減少すること、身体的活動を増加すること、薬物療法、胃バイパス外科手術のような肥満外科手術、または前記した方法のいずれかの組合せを含む。１の態様において、アミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することは、さらに対象の体重を減少する。もう１の形態において、対象の体重をさらに減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することによって、40以下のBMIを有する対象のボディマス指数（BMI）を減少するための方法を提供する。
【００８８】
もう１の態様において、代謝障害を発病する危険性を減少するための方法を提供し、ここに方法は、対象の体重を減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。
【００８９】
もう１の態様において、摂食行動を制御または修飾するための方法を提供し、ここに方法は、それを必要とする対象に、対象による摂食行動を制御または修飾するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。１の形態において、過食を制御するための方法を提供し、ここに方法は、それを必要とする対象に、対象による過食を制御または抑制するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。１の形態において、アミリンまたはアミリン・アゴニストは、対象が最も過食しそうな日の時点で投与する。１の態様において、過食は、１）大部分のヒトが同様の時間の間および同様の環境下で摂食するであろうよりも明らかに大きい食物の量を、分離した時間に（例えば、いずれかの２時間以内）、摂食すること、および２）発症の間の摂食に対する制御の欠乏の感覚（例えば、摂食を中止できず、または何をまたはどの位摂食しているかの制御ができない感じ）によって特徴付けられる。１の形態において、過食を制御するのに使用するためのアミリン・アゴニストは、アミリンよりもより長いイン・ビボ(in vivo)半減期を有するアゴニストである。
【００９０】
１の形態において、過食を減少するための方法を提供し、ここに方法は、それを必要とする対象に、対象による過食を減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。過食の減少は、アミリンまたはアミリン・アゴニストを投与しない場合の頻度、期間、量および抵抗性と比較して、過食発症の頻度、過食発症の期間、過食発症の間に消費した合計量、過食発症の開始に抵抗する困難性、およびそれらのいずれかの組合せの減少を含む。例えば、それ自体、例として、1の形態において、方法は、過食発症の頻度における減少を含むことができる。もう１の形態において、方法は、過食発症の期間の減少を含むことができる。いまだもう１の形態において、方法は、過食発症の間に消費される合計量の減少を含むことができる。いまだもう１の形態において、方法は、過食発症の開始に抵抗する困難性の減少を含み得る。
【００９１】
いくつかの形態において、過食は、ストレスまたは非−ストレス条件下における、甘い食物、チョコレート製食物、塩味食物、高脂肪食物、またはそれらのいずれかの組合せの特異的な過食である。１の形態において、過食は、高脂肪食物を含む塩味食物の特異的な過食である。１の形態において、過食は、ストレスおよび非−ストレス条件下の両方での、甘い食物の特異的な過食である。
【００９２】
過食は、質問および過食スケール（Binge Eating Scale（BES））を用いて決定または測定することができる。過食の程度は、（各個別アイテムのスコアを合計することによって計算した）総BESスコアに基づいて、３のカテゴリーに分けることができる（軽度、中度、重度）。したがって、対象のBESスコアを減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストをそれを必要とする対象に投与することを含む、対象のBESスコアを減少するための方法を提供する。いくつかの形態において、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与は、例えば、重度から中度に、重度から軽度に、または中度から軽度に、対象のBESカテゴリーを変化する。
【００９３】
過食の兆候のいくつかは、身体的に空腹でない場合に多量の食物を摂食すること、迅速に摂食すること、彼または彼女がどの位食べているか、不快なほど十分にまで食べている、またはそれらの組合せについて当惑して感じるため食物を隠すことを含む。多くの過食者は、感情的な摂食者である、すなわち彼らの過食は彼らの感情状態によって誘発される（例えば、ある過食者は彼らが悲しい時に摂食し、ある者は彼らが幸せである時に摂食し、ある者は彼らがストレス下にある時に摂食する）。多数の過食者は、強迫障害、衝撃制御問題（impulse control problem）のような不安障害；または境界パーソナリティー障害または鬱病のような人格障害に苦しんでいる。１の形態において、過食はストレス条件に応答する。他の過食者は、薬物濫用者またはアルコール濫用者のような物質濫用者である。神経性食欲昂進症を有すると診断される過食者が存在するように、過食障害を有するすべての者が体重過多というわけではない。
【００９４】
過食する対象は頻繁に日の特定の時間にそのようにし、したがって治療は対象が最も過食しそうな時にしたがって調節すべきである。例えば、対象が夜の午後7以後に大抵過食するならば、対象はアミリンまたはアミリン・アゴニストを午後７時の直前に投与すべきである。１の形態において、対象は彼らが過食に敏感である時にアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与する。 他の形態において、対象は彼らが過食に敏感である少なくとも約15分、少なくとも約30分、少なくとも約45分、少なくとも約1時間、少なくとも約1時間および30分、または少なくとも約2時間前に前にアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与する。
【００９５】
この形態におけるアミリンまたはアミリン・アゴニストの有効量は、過食に対する対象の欲求を抑制するまたは制御するのに有効な量である。したがって、アミリンまたはアミリン・アゴニストの有効量は、対象およびかれらの過食に対する欲求のレベルに依存して変化する。なお、過食に対する対象の欲求が１日のある時点において他の時点よりも小さい場合は、用量をそれにしたがって調節して、１日のある時点のより少ない用量を提供することができ、対象が過食に対してより高い欲求を有する１日のある時点でより高い用量を提供することができる。他の形態において、対象は、彼らが過食に対して高い欲求を有する前、少なくとも約15分、少なくとも約30分、少なくとも約45分、少なくとも約1時間、少なくとも約1時間30分、または少なくとも2時間にピーク投与量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与する。いくつかの形態において、アミリンまたはアミリン・アゴニスト投与量は、25μgないし240μg、あるいはそれよりより高いまたはより低い投与量とし得る。
【００９６】
過食および他の摂食行動を制御するある種の方法において、アミリンまたはアミリン・アゴニストは治療の間に対象に投与される唯一の抗−肥満または体重減少剤である。
【００９７】
過食を制御する他の方法において、対象は、さらに、空腹を抑制するまたは食欲を制御することが知られている少なくとも１の他の薬剤を投与し得る。かかる薬剤は、限定されるものではないが、リモナバント、シブトラミン、オーリスタット、エキセンジンまたはそのアナログ、PYYまたはそのアナログ、CB-1、レプチンおよびフェンテルミンを含む。
【００９８】
もう１の形態において、対象における食物好みを修飾するための方法を提供し、ここに方法は、それを必要とする対象に、対象における食物好みを修飾するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。本明細書に記載するように、本発明の方法は、ストレス条件下の食物好みの修飾、ならびに非−ストレス条件下の食物好みの修飾を含む。１の形態において、食物好みは、甘い食物、チョコレート製食物、塩味食物、高脂肪食物、低脂肪食物およびそれらのいずれかの組合せに対する好みを含む。それ自体、一例として、1の形態において、方法は、対象における甘い食物に対する好みを修飾するために提供し、ここに方法は、甘い食物に対する好みを修飾することが望ましい対象に有効量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含み、ここに該量は甘い食物に対する対象の好みを修飾するのに有効である。もう１の形態において、方法は、チョコレート製食物に対する好みを修飾するために提供する。もう１の形態において、方法は、塩味食物に対する好みを修飾するために提供する。もう１の形態において、方法は、高低脂肪食物に対する好みを修飾するために提供する。
【００９９】
食物好みの修飾は、アミリンまたはアミリン・アゴニストを投与しない場合の頻度、期間、強度または抵抗性と比較した、かかる食物に対する好みの減少、かかる食物の取り込みの量の減少、もう１の食物タイプを超える１の食物タイプの好みの向上、かかる食物に対する渇望の頻度の変化、かかる食物に対する渇望の期間、かかる食物に対する渇望の強度、かかる食物に対する渇望に抵抗する困難性、かかる食物に対する渇望に応答した摂食の頻度、およびそれらの組合せを含み得る。
【０１００】
いまだもう１の形態において、方法は、甘い食物に対する対象の好みを減少することを含み得る。いまだもう１の形態において、方法は、チョコレート製食物に対する対象の好みを減少することを含み得る。 いまだもう１の形態において、方法は、塩味食物に対する対象の好みを減少することを含み得る。いまだもう１の形態において、方法は、高脂肪食物に対する対象の好みを減少することを含み得る。いまだもう１の形態において、方法は、低脂肪食物に対する対象の好みを増加することを含み得る。いまだもう１の形態において、方法は、甘い食物を超える塩味食物に対する対象の好みを高めることを含み得る。いまだもう１の形態において、方法は、チョコレート製食物を超える塩味食物に対する対象の好みを高めることを含み得る。いまだもう１の形態において、方法は、高脂肪食物を超える低脂肪食物に対する対象の好みを高めることを含み得る。
【０１０１】
もう１の形態において、対象の食物渇望を治療する、減少する、または予防する方法を提供し、方法は、対象に、対象における食物渇望を治療、減少または予防するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。食物渇望とは、特定のタイプの食物に対する対象の欲望を意味することを意図する。最も普通の食物渇望は、チョコレートのような砂糖を含む食物に対する渇望、および塩辛いスナックおよび脂質スナックのような塩味食物に対する渇望が含まれる。食物渇望は、当該技術分野において知られているまたは食物渇望を研究しているヒトによって作成された質問を用いて測定することができる。かかる質問好ましくは数字スケール上の食物渇望のレベルをランクし、食物渇望を有しなければ対象を0とし、対象が厳しい食物渇望を有する場合には10（1-10のスケールである場合）とする。質問は、好ましくは対象がどのタイプの食物を渇望しているかの質問も含むであろう。
【０１０２】
１の形態において、方法は、甘い食物、チョコレート製食物、塩味食物、高脂肪食物などに対する渇望の対象の頻度を減少することを含み得る。もう１の形態において、方法は、甘い食物、チョコレート製食物、塩味食物、高脂肪食物ほかに対する対象の渇望の持続期間を減少することを含み得る。いまだもう１の形態において、方法は、甘い食物、チョコレート製食物、塩味食物、高脂肪の食物ほかに対する対象の渇望の強度を減少することを含み得る。いまだもう１の形態において、方法は、甘い食物、チョコレート製食物、塩味食物、高脂肪の食物ほかに対する抵抗する渇望の困難性を減少することを含み得る。 いまだもう１の形態において、方法は、甘い食物、チョコレート製食物、塩味食物、高脂肪の食物ほかに対する渇望に応答した対象の摂食の頻度を減少することを含み得る。いまだもう１の形態において、方法は、甘い食物の対象の取り込みを減少することを含み得る。いまだもう１の形態において、方法は、チョコレート製食物の対象の取り込みを減少することを含み得る。いまだもう１の形態において、方法は、塩味食物の対象の取り込みを減少することを含み得る。いまだもう１の形態において、方法は、高脂肪食物の対象の取り込みを減少することを含み得る。
【０１０３】
食物渇望を治療する方法のためのアミリンまたはアミリン・アゴニストの有効な量は、特定のタイプの食物に対する対象の欲求を減少するのに有効な量である。したがって、有効量は、治療する対象および特定の食物に対する彼らの欲求の強度に依存して異なる。例えば、ストレスに苦しんでいるヒトは苦しんでいないヒトよりも砂糖を含む食物を懇願し、したがって、より高い用量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを要求するかもしれない。また、多嚢胞性卵巣症候群に苦しんでいる個人は炭水化物で高い食物を懇願し得、したがって、より高用量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを要求するかもしれない。
【０１０４】
もう１の形態において、対象における減少したカロリー取り込みに関連するストレスを減少する方法を提供し、方法は、それを必要とする対象に減少したカロリー取り込みと関連するストレスを減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。減少したカロリー取り込みと関連するストレスとは、対象によって消費されるカロリーの減少によってもたらされる鬱病または不安症の感情を意味することを意図する。ストレスを減少するとは、（良好な生存および気分の全体的感覚を改善することによって）鬱病の患者の状態を改善する、または対象の不安症の感じを減少することを意味することを意図する。減少したカロリー取り込みと関連するストレスを減少する方法のための有効量のアミリンまたはアミリン・アゴニストは、対象の鬱病（または良好な生存および気分の感覚）を改善するのに有効な量または不安症の感情を減少するのに有効な量である。したがって、有効量は、治療する対象および減少したカロリー取り込みによって生じる鬱病または不安症の強度に依存して異なる。
【０１０５】
体重を減少するとは、治療の過程の間（治療の過程が数日、数週間、数ヶ月または数年にかかわらず）にわたる彼／彼女の総体重の一部分を対象が損失することを意味する。あるいは、体重を減少することは、徐脂肪重量に対する脂肪重量の比率における減少（換言すれば、総体重に対応する損失の必要なしに、対象は脂肪重量を失うが、徐脂肪重量は維持または獲得する）と定義することができる。この形態において投与するアミリンまたはアミリン・アゴニストの有効量は、治療の過程にわたって対象の体重を減少するのに有効な量、あるいは、治療の過程にわたって脂肪重量の対象のパーセントを減少するのに有効な量である。ある種の形態において、対象の体重は、治療の過程にわたって、少なくとも約1%、少なくとも約5%、少なくとも約10%、少なくとも約15%、または少なくとも約20%減少する。あるいは、対象の脂肪重量のパーセントは、治療の過程にわたって、少なくとも1%、少なくとも5%、少なくとも10%、少なくとも15%、少なくとも20%、または少なくとも25%減少する。
【０１０６】
ある種の形態において、方法は、１日当たり１ないしそれを超える回数、巨丸剤用量で有効量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む対象における体重を減少するための方法を提供する。巨丸剤用量は、薬の断続的な投与である（連続的な注入に対して）。対象は１日当たりの1以上の巨丸剤用量を投与することができる。 巨丸剤用量は、それが対象に投与される場合にはいつであっても同じとすることができ、あるいは、他と比べて１日のある時点により大きい巨丸剤用量が対象に投与されるように調節することができる。ある種の処方、例えば徐放性処方でのアミリンまたはアミリン・アゴニストの投与では、巨丸剤をより少ない頻度、例えば３日毎に１回、１週間に１回、１週間に２回、１ヶ月に１回投与することができる。なお、巨丸剤用量の間の時間は、好ましくは以前の巨丸剤用量で投与した薬剤が対象の血流から消失することを許容する十分に長い。いくつかの形態において、アミリンよりもより長い半減期を有するアミリン・アゴニストを投与する。
【０１０７】
他の形態において、方法は、対象の体重を減少するために提供し、連続用量で有効量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。連続用量とは、例えば静脈内注射または経皮パッチによる、薬剤の連続注入を意味することを意図する。あるいは、連続用量は、一定の期間にわたって対象系に薬剤を放出する制御放出型のカプセルまたは錠剤の形態で経口投与し得る。連続用量によって投与する場合、薬剤は約1時間にわたって放出され、より好ましくは薬剤は約2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、18または24時間の一定期間にわたって放出される。
【０１０８】
いくつかの形態において、体重を減少するための方法を提供し、ここにアミリンまたはアミリン・アゴニストは体重損失を引き起こすことが知られている１の他の薬剤と同時投与しない。他の形態において、体重を減少するための方法を提供し、ここに体重損失を引き起こすことが知られている少なくとも１の他の薬剤は、アミリンまたはアミリン・アゴニストと一緒に対象に同時投与する。かかる他の薬剤は多数の手段のうちのいずれかによってこの体重損失効果を有し得、それには限定されるものではないが、空腹を抑制すること、食欲を制御すること、代謝を増加することほかが含まれる。１の形態において、体重損失を引き起こすことが知られている少なくとも1の他の薬剤は、アミリンまたはアミリン・アゴニストと同時投与する。「同時投与」とは、アミリンおよびアミリン・アゴニストを、第２の肥満減少化合物と単一の投与として、別の用量として同時に投与することを、または順次に投与することを意味する。順次投与または逐次投与とは、体重損失を引き起こすことが知られている第２の薬剤の前または後のいずれかにアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することをいう。１の態様において、アミリンまたはアミリン・アゴニストは、体重損失を引き起こすことが知られている少なくとも１の他の薬剤の約30分前または後に、より好ましくは、体重損失を引き起こすことが知られている少なくとも１の他の薬剤の約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11または12時間前または後に投与する。体重損失を引き起こすことが知られている少なくとも１の他の薬剤は、巨丸剤用量としてまたは連続用量として投与することができる。
【０１０９】
アミリンおよびアミリン・アゴニストは、ストレスおよびその効果に対して減少または保護し、共有にかかる米国特許出願60/667,335および60/760,583号ならびに2006年3月31日に出願された代理人PCT出願ファイル番号0110-PCT0に記載されているような不安緩解、抗鬱および抗精神病効果を有する。
【０１１０】
もう１の形態において、体重損失を引き起こす薬剤を摂取することに関連するストレスを減少する方法を提供し、方法は、それを必要とする対象に、体重損失を引き起こす薬剤を摂取することに関連するストレスを減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。体重損失を引き起こす薬剤の摂取と関連するストレスとは、対象によって消費されるカロリーの減少によってもたらされる鬱病または不安症の感情を意味することを意図する。ストレスを減少するとは、（良好な生存および気分の全体的な感じを改善することによって）鬱病の状態を改善することまたは不安症の感情を減少することを意味することを意図する。
【０１１１】
リモナバントおよびシブトラミンのような、脳を標的化することによって食欲を制御する市販されているまたは臨床試験したの薬剤は、それらを摂取する対象に鬱病または不安症の感情を引き起こすことがある。リモナバントは脳中の内因性カンナビノイド受容体、ならびに脂肪組織中の受容体を標的にし、それは食物渇望において役割を果たすことが知られている。シブトラミンは脳中のノルエピネフリンおよびセロトニンの活性を増加することによって働くと考えられている。アミリンおよびアミリン・アゴニストは、対象の抑鬱状態を改良することおよび/または対象の不安症レベルを減少することによって、そのような薬剤の使用によって引き起こされる鬱病または不安症の対象の感情を改善する。
【０１１２】
体重損失を引き起こす薬剤を摂取することによって引き起こされるストレスを減少する方法のための有効量のアミリンまたはアミリン・アゴニストは、鬱病を改善する（または良好な生存または気分の感覚）のに有効な量、または不安症の感覚を減少するのに有効な量である。したがって、有効量は、治療する対象および体重損失を引き起こす薬剤の使用によって引き起こされる鬱病または不安症の強度によって依存して異なる。
【０１１３】
もう１の態様において、肥満外科手術外科を施した対象における骨損失を減少する方法を提供し、方法は、それを必要とする対象に、対象における骨損失を減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。骨損失とは、外科手術前の対象の骨密度と比較した骨密度における減少を意味することを意図する。 骨損失を減少するとは、肥満外科手術を施したが本発明の方法によって治療していない同様の対象と比較して、いずれの骨損失も予防するまたは骨損失を減少することを意味することを意図する。骨損失は、DEXA骨デンシトメトリーの使用を含むいずれの知られている方法によって測定して骨密度を測定し得る。肥満外科手術は、限定されるものではないが、Sapala-Wood Micropouch roux-en-Y胃バイパス外科手術、アジャスタブル胃バンディング、垂直にバンドを付けたガストロプラスチー、roux-en-Y胃バイパス、ビリオパンクレアティック（biliopancreatic）転換および十二指腸スイッチを含む。
【０１１４】
肥満外科手術を施した対象の骨損失を減少する方法のためのアミリンまたはアミリン・アゴニストの有効量は、骨再吸収を防ぐか、または減速するのに有効な量である。アミリンまたはアミリン・アゴニストに加えて、対象は骨損失を防ぐか、または減速することが当該技術分野で知られているさらなる薬剤を投与することができる。そのような薬剤は、限定されるものではないが、リセドロネート、アレンドロネート、ラロキシフェン、カルシトニンおよびテリパリチドを含む。
【０１１５】
もう１の形態において、対象の熱発生を増加する方法を提供し、方法は、それを必要とする対象に、対象において熱発生を増加するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。熱発生は、身体の代謝速度を増加することによってカロリーを熱として放出するプロセスである。 熱発生は、サプリメント、栄養および冷気への曝露を含む少数のメカニズムによって活性化される。
【０１１６】
もう１の形態において、対象における酸化代謝を増加する方法を提供し、方法は、それを必要とする対象に、対象における酸化代謝を増加するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。酸化代謝は、それによって、酸素を用いて炭水化物(砂糖)からエネルギーを作るプロセスである。
【０１１７】
もう１の態様において、充足感を引き起こす方法を提供し、ここに方法は、それを必要とするまたは欲求する対象に、対象において充足感または堪能感を引き起こすのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。１の形態において、方法は、対象における充実感を引き起こすために提供し、方法は、それを必要とするまたは欲求する対象に、投与しない場合の充実感または堪能感を誘導するよりもより少ない食物を対象が食べた後に対象において充実感または堪能感を誘導するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。いくつかの形態において、アミリンまたはアミリン・アゴニストの投与は、対象が少なくとも約5%より少ない食物、少なくとも約10%より少ない食物、少なくとも約15%より少ない食物、少なくとも約20%より少ない食物、または少なくとも約25%より少ない食物を食べた後に充実感または堪能感を誘導するアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与する。
【０１１８】
いまだもう１の態様において、対象の空腹を制御する方法を提供し、ここに方法は、対象における空腹を制御するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。
【０１１９】
いまださらなる態様において、対象における堪能感を持続する方法を提供し、ここに方法は、堪能感を持続するのに有効なアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。
【０１２０】
いまだもう１の態様において、食物との対象の没頭を減少するか、改善するか、または予防する方法を提供し、ここに方法は、対象における食物との没頭を減少、改善、または予防するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。
【０１２１】
さらなる態様において、対象におけるカロリー取り込みを減少する方法を提供し、ここに方法は、対象に対して食事または軽食への置換として有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。いまださらなる態様において、食事のサイズを減少することによるカロリー取り込みを減少する方法を提供し、ここに方法は、対象によって摂食される食事のサイズを減少するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを該対象に投与することを含む。
【０１２２】
もう１の態様において、食物取り込みを制御する方法を提供し、ここに方法は、食物取り込みを制御または抑制することを対象に引き起こすのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。減少したカロリーまたは制限的食事療法に従って保障または援助するための方法を提供し、ここに方法は、該対象に有効量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含む。もう１の形態において、対象のカロリー取り込みを制御する方法を提供し、ここに方法は、対象がもっとも甘い食物または塩味食物を過食または食べそうな時の１日の特定の時間に有効量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。
【０１２３】
さらなる態様において、ホメオスタティスのためのボディの傾向がより健康な設定に調節されるように対象の設定を調節する方法を提供し、ここに方法は、有効量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを該対象に投与することを含む。もう１の形態において、体重損失を維持するか、または失われた体重を維持する方法を提供し、ここに方法は、対象における体重損失または対象によって失われた体重を維持するのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。１の形態において、失われた体重は、対象の設定を再設定することによって維持する。
【０１２４】
もう１の形態において、対象における肥満減少剤の副作用を改善、緩和、または防ぐ方法を提供し、方法は、対象によって摂取された肥満減少剤の有害な副作用を改善、緩和または防ぐのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。もう１の形態において、対象における肥満減少剤の有害な精神的副作用を改善、緩和、または防ぐ方法を提供し、方法は、肥満減少剤の有害な精神的副作用を改善、緩和、または防ぐのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。
【０１２５】
もう１の形態において、対象における肥満減少剤の有害な胃腸副作用を改善、緩和、または防ぐ方法を提供し、方法は、対象によって摂取された肥満減少剤の有害な胃腸副作用を改善、緩和または防ぐのに有効な量のアミリンまたはアミリン・アゴニストを対象に投与することを含む。かかる形態において、アミリンまたはアミリン・アゴニストは胃保護効果を有する。
【０１２６】
さらに、アミリンまたはアミリン・アゴニストを少なくとも１の他の肥満減少（または抗−肥満）または体重減少薬剤と同時投与する本明細書に記載する発明の態様のいずれかにおいて、少なくとも１の他の肥満減少（または抗−肥満）または体重減少薬剤と組み合わせたアミリンまたはアミリン・アゴニストの使用は、相乗効果を生じる。
【０１２７】
アミリンまたはアミリン・アゴニストを少なくとも１の他の肥満減少（または抗−肥満）または体重減少薬剤と同時投与する本明細書に記載する態様において、少なくとも１の他の肥満減少（または抗−肥満）または体重減少薬剤と組み合わせたアミリンまたはアミリン・アゴニストの使用は、同一の効果でもって、少なくとも１の化合物に対するより低い投与量要求性を生じる。
【０１２８】
もう１の態様において、本明細書に記載する方法において有用なアミリンまたはアミリン・アゴニストを肥満または摂食障害もしくは症状の制御、予防または治療に有用な１またはそれを超える他の有効成分と組合せることも可能である。例えば、１の形態において、対象のBMIを減少するのに有効な量で少なくとも第２の肥満減少剤と組み合わせたアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することによって40以下のBMIを有する対象のBMIを減少するための方法を提供する。かかる第２の肥満減少化合物は、シブトラミン、オーリスタット、レプチンおよびリモナバントを含む。 例えば、アミリンまたはアミリン・アゴニストは、単一投与量形態、または必要な対象に対する同時もしくは逐次投与を意図する分離した投与量形態で、1またはそれを超える他の化合物と組合せ得る。１の形態において、アミリンまたはアミリン・アゴニストは第２の肥満減少化合物と同時投与し、例えば、第２の肥満減少化合物との単一投与として、分離した用量として同時に、または化合物の投与を数秒、数分または数時間の時間で分離し得る逐次投与として投与することができる。逐次投与は、肥満減少、例えばアミリンまたはアミリン・アゴニストの第１の過程につづく、もう１の肥満減少剤の少なくとも１の過程の投与を含む。治療過程は重複してもしなくてもよい。
【０１２９】
逐次投与する場合、組合せ物は２またはそれを超える投与で投与することができる。別の形態において、異なる経路によって１またはそれを超えるアミリンまたはアミリン・アゴニストおよび１またはそれを超えるさらなる有効成分を投与することが可能である。当業者であれば、種々の有効成分を、肥満または摂食障害もしくは症状の制御、予防、改善、緩和または治療を増大するまたは相乗的に高めるように作用し得るアミリンまたはアミリン・アゴニストと組み合わせて投与し得ることも認識するであろう。
【０１３０】
本明細書に記載する方法によれば、少なくとも１の他の肥満減少（または抗−肥満）または体重幻想剤と同時投与する場合、アミリンまたはアミリン・アゴニストは（１）結合した処方において同時処方化もしくは投与し、または同時に送達し得；（２）交互に送達し得、または分離した処方として平行して送達し得；または（３）当該技術分野において知られているいずれか他の組合せ療法様式による、とし得る。交互療法で送達する場合、提供する方法は、例えば、分離した溶液、エマルジョン、懸濁液、錠剤、ピルまたはカプセル剤中で、または分離した注射器での異なる注射によって、有効成分を逐次に投与または送達することを含み得る。一般的に、交互療法の間は、有効投与量の各有効成分を逐次に、すなわち連続して投与し、一方、同時療法においては、有効投与量の２またはそれを超える有効成分を一緒に投与する。間欠的な組合せ療法の種々の順序も使用することができる。
【０１３１】
ある種の形態において、本明細書に提供する化合物は、例えば、PYYおよびPYYアゴニスト、GLP-1およびGLP-1アゴニスト、DPPIVインヒビター、CCKおよびCCKアゴニスト、エキセンジンおよびエキセンジン・アゴニスト、GIPおよびGIPアゴニスト、およびレプチンおよびレプチン・アゴニストのような他の市販の食事療法支援剤または他の抗−肥満剤と使用し得る。最近開発された提供する方法において使用するさらなる抗−肥満剤も、本発明の方法において関心がある。他の抗−肥満剤は、フェンテルミン、フェンフルアミン、シブトラミン、リモナバントおよびオーリスタットを含む。
【０１３２】
それ自体、1つの態様において、アミリンまたはアミリン・アゴニストは、肥満または摂食障害もしくは症状の制御、予防または治療のための組合せ療法の一部として使用し得る。肥満を治療するまたは体重を減少するために組合せ療法の一部として使用する好ましい化合物には、限定されるものではないが、神経伝達物質または神経イオンチャネルに影響する中枢神経剤を含み、それには抗鬱薬(ブプロピオン)、ノルアドレナリン再取り込みインヒビター(GW320659)、選択的セロトニン2cレセプターアゴニスト、選択的5HT 2cレセプターアゴニスト、抗発作薬(トピラメート、ゾニズアミド)、いくつかのドーパミン・アンタゴニストおよびカンナビノイド-1レセプター・アンタゴニスト(CB-1受容体アンタゴニスト）(リモナバント)；レプチン／インシュリン／中枢神経系経路剤、それにはレプチン・アナログ、レプチン輸送および／またはレプチンレセプターのプロモーター、繊毛様神経栄養因子(アキソカイン)、神経ペプチドＹおよびアグーチ関連ペプチド・アンタゴニスト、プロ−オピオメラノコルチンおよびコカインおよびアンフェタミン調節転写プロモーター、α−メラノサイト刺激的ホルモン・アナログ、メラノコルチンメラノコルチン-４受容体アゴニスト、インシュリン／活性に影響する剤、それはタンパク質−チロシンホスファターゼ−１Ｂインヒビター、ペルオキシソーム延長因子活性化受容体−γ受容体アンタゴニスト、短機能ブロモクリプチン(エルゴセット)、ソマトスタチン・アゴニスト(オクトレオチド)およびアジポネクチン／Acrp30(ファモキシンまたは脂肪酸代謝の酸化誘発剤)を含み；胃腸−神経経路剤、それはコレシストキニン活性(CCK)、PYY活性、NPY活性およびPP活性を増加するものを含み、グルカゴン様ペプチド−１活性を高め(エキセンジン4、リラグルチド、ジペプチジル・ペプチダーゼＩＶインヒビター)を増加し、グレリン活性を減少するもの、ならびにアミリン・アナログ（プラムリンチド）が含まれ；休止代謝速度を増加し得る剤（選択的β-3刺激剤／アゴニスト、非カップリングタンパク質ホモログ、および甲状腺受容体アゴニスト）；他の多くの多様な剤、それにはメラニン濃縮ホルモンアンタゴニスト、フィトスタノール・アナログ、機能オイル、P57、アミラーゼ・インヒビター、成長ホルモンフラグメント、硫酸デヒドロエピアンドロステロン、含脂肪細胞１１Ｂ−ヒドロキシステロイド・デヒドロゲナーゼ１型のアンタゴニスト、コルチコトロピン放出ホルモンアゴニスト、脂肪酸合成のインヒビター（セルセニンおよびC75)、カルボキシペプチダーゼ・インヒビター、インダノン/インダノール、アミノステロイド(トロダスクエミン／トロダルアミン（trodusquemine/trodulamine）)、および他の胃腸リパーゼ・インヒビター(ATL962)が含まれ；デクストロアンフェタミンのようなアンフェタミン；他の感神経興奮作動性のアドレナリン作動性の剤、それにはフェンターミン、ベンズフェンタミン、フェンジメトラジン、マジンドールおよびジエチルプロピオンが含まれる。
【０１３３】
他の好ましい化合物は、エコピパム；オキシントモデュリン（OM）；グルコース依存性インスリン親和性ポリペプチド（GIP）；胃放出ペプチド；ニューロメディンＢ；エンテロスタチン；アンフェブタモン、SR-58611;CP-045598;AOD-0604; QC-BT16; rGLP-1; 1426(HMR-1426);N-5984;ISIS-113715; ソラベグロン; SR-147778; Org-34517;メラノタン-II; セチリスタット; c-2735; c-5093; c-2624; APD-356; ラダファキシン;フルアステロン; GP-389255; 856464; S-2367; AVE-1625; T-71;オレイル-エストロン; ペプチドYY [3-36]鼻内; アンドロゲン受容体アゴニスト; PYY 3-36; DOV-102677; タガトース; SLV-319; 1954  (Aventis Pharma AG); オキシントモデュリン、チアキス;ブロモクリプチン、PLIVA; 糖尿病／高脂血症療法、Yissum; CKD-502; 甲状腺受容体ベータ・アゴニスト; ベータ−3アドレナリン受容体アゴニスト; CDK-Aアゴニスト; ガラニン・アンタゴニスト; ドーパミンD1/D2アゴニスト; メラノコルチン・メデュレーター; ベロンガミン; 神経ペプチドＹアンタゴニスト; メラニン濃縮ホルモン受容体アンタゴニスト; 二重PPARアルファ／ガンマ・アゴニスト; CGEN-P-4; キナーゼインヒビター; ヒトMCH受容体・アンタゴニスト; GHS-Rアンタゴニスト; グレリン受容体アゴニスト; DG70インヒビター; コチニン; CRF-BPインヒビター;ウロコルチン・アゴニスト; UCL-2000;インペンタミン; β-3アドレナリン作動性受容体; ペンタペプチドMC4アゴニスト; トロデュスクエミン; GT-2016; C-75; CPOP; MCH-1受容体アンタゴニスト; RED-103004;アミノステロール;オレキシン-1アンタゴニスト; 神経ペプチド Y5受容体アンタゴニスト; DRF-4158; PT-15; PTPアーゼ・インヒビター; A37215; SA-0204; 糖脂質代謝物; MC-4 アゴニスト; プロデュレスタン; PTP-1Bインヒビター; GT-2394; 神経ペプチド Y5アンタゴニスト; メラノコルチン受容体メデュレーター; MLN-4760; PPARガンマ／デルタ二重アゴニスト; NPY5RA-972; 5-HT2C受容体アゴニスト; 神経ペプチド Y5受容体アンタゴニスト(フェニル尿素アナログ); AGRP/MC4アンタゴニスト; 神経ペプチド Y5アンタゴニスト(ベンゾイミダゾール);グルココルチコイド・アンタゴニスト; MCHR1アンタゴニスト; アセチルCoAカルボキシラーゼ・インヒビター; R-1496; HOB1メデュレーター; NOX-B11; ペプチドYY 3-36(エリゲン); 5-HT 1メデュレーター; 膵臓リパーゼ・インヒビター; GRC-1087; CB-1アンタゴニスト; MCH-1アンタゴニスト; LY-448100;ボムベシンBRS3アゴニスト;グレリン・アンタゴニスト; MC4アンタゴニスト; ステアロイルCoAデサチュラーゼ・メデュレーター; H3ヒスタミン・アンタゴニスト; PPARpanアゴニスト; EP-01492; ホルモン感受性リパーゼ・インヒビター; 脂肪酸結合タンパク質4インヒビター; チオラクトン誘導体; タンパク質チロシン・ホスファターゼ1Bインヒビター; MCH-1アンタゴニスト; P-64; PPARガンマリガンド; メラニン濃縮ホルモン・アンタゴニスト; チアゾール・ガストロキネティクス; PA-452; T-226296; A-331440; イムノ薬剤ワクチン; 糖尿病または肥満治療(Bioagency, Biofrontea Discovery GmbH); P-7(ゲンフィット); DT-011M; PTP1Bインヒビター; 抗−糖尿病ペプチドコンジュゲート; KATPアゴニスト; 肥満療法(レキシコン); 5-HT2 アゴニスト; MCH-1受容体アンタゴニスト; GMAD-1/GMAD-2; STG-a-MD; 神経ペプチドＹアンタゴニスト; 血管新生インヒビター;Ｇタンパク質共役受容体アゴニスト; ニコチン治療剤(ChemGenex); 抗肥満剤(Abbott); 神経ペプチドＹメデュレーター; メラニン濃縮ホルモン; GW-594884A; MC-4Rアゴニスト; ��スタミンH3アンタゴニスト; オーファンGPCRメデュレーター; MITO-3108; NLC-002; HE-2300; IGF/IBP-2-13; 5-HT2C アゴニスト; ML-22952; 神経ペプチドＹ受容体アンタゴニスト; AZ-40140; 抗肥満療法(日清製粉); GNTI; メラノコルチン受容体メデュレーター; アルファ−アミラーゼ・インヒビター; 神経ペプチドＹ１アンタゴニスト; ベータ3アドレナリン受容体アゴニスト; ob遺伝子産物(Eli Lilly ＆ Co.); SWR-0342-SA; ベータ−3アドレナリン受容体アゴニスト; SWR-0335; SP-18904; 経口インシュリン模倣物; ベータ−3アドレナリン受容体アゴニスト; NPY-1アンタゴニスト; β-3 アゴニスト; 肥満療法(7TM Pharma); 11ベータ-ヒドロキシステロイド・デヒドロゲナーゼ(HSD)1インヒビター; QRX-431; E-6776; RI-450; メラノコルチン-4アンタゴニスト; メラノコルチン 4受容体アゴニスト; 肥満療法(CuraGen); レプチン模倣物; A-74498; 第二世代レプチン; NBI-103; CL-314698; CP-114271; ベータ−3アドレナリン受容体アゴニスト; NMI-8739; UCL-1283; BMS-192548; CP-94253; PD-160170; ニコチンのアゴニスト; LG-100754; SB-226552; LY-355124; CKD-711; L-751250; PPARインヒビター; Gタンパク質療法; 肥満療法(Amylin Pharmaceuticals Inc.); BW-1229; モノクローナル抗体(ObeSys/CAT); L-742791;(s) - シブトラミン; MBU-23; YM-268; BTS-78050; tubby様タンパク質遺伝子; ゲノミクス(摂食障害; Allelix/Lilly); MS-706; GI-264879A; GW-409890; FR-79620アナログ; 肥満療法(Hybrigenics SA); ICI-198157; ESP-A; 5-HT2C アゴニスト; PD-170292; AIT-202; LG-100641; GI-181771; 抗−肥満療法(Genzyme); レプチン・メデュレーター; GHRH模倣物; 肥満療法(山之内製薬株式会社); SB-251023; CP-331684; BIBO-3304; コレステン−3−オン; LY-362884; BRL-48962; NPY-1アンタゴニスト; A-71378; ジデスメチルシブトラミン（登録商標）; アミド誘導体; 肥満療法(ブリストルマイヤーズ・スクイブ社); 肥満療法(Ligand Pharmaceuticals Inc.); LY-226936; NPYアンタゴニスト; CCK-Aアゴニスト; FPL-14294; PD-145942; ZA-7114; CL-316243; SR-58878; R-1065; BIBP-3226; HP-228; タリベグロン; FR-165914; AZM-008; AZM-016; AZM-120; AZM-090; ベメロフェリン; BMS-187257; D-3800; AZM-131; 遺伝子の発見(Axys/Glaxo); BRL-26830A; SX-013;ERRメデュレーター; アジプシン; AC-253; A-71623; A-68552; BMS-210285; TAK-677; MPV-1743; 肥満療法(Modex); GI-248573; AZM-134; AZM-127; AZM-083; AZM-132; AZM-115; エキソピパム; SSR-125180;肥満療法(Melacure Therapeutics AB); BRL-35135; SR-146131; P-57; AZM-140; CGP-71583A; RF-1051; BMS-196085; マニファキシン; ベータ-3 アゴニスト; DMNJ(Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology); BVT-5182; LY-255582; SNX-024; ガラニン・アゴニスト; ニューロキニン-3 アンタゴニスト; デクスフェンフルアミン; マジンドール; ジエチルプロピオン; フェンジメトラジン; ベンゾフェンタミン; アムフェブトモン;セルトラリン; メトフォルミン; AOD-9604; ATL-062; BVT-933; GT389-255; SLV319; HE-2500; PEG-axokine; L-796568;およびABT-239を含む。
【０１３４】
いくつかの形態において、アミリンまたはアミリン・アゴニストと組合せて使用するための化合物は、リモナバント、シブトラミン、オーリスタット、PYYまたはそのアナログ、CB-1アンタゴニスト、レプチン、フェンテルミンおよびエキセンジン・アナログを含む。例示的な投薬の範囲は、フェンテルミン樹脂(午前中に30mg)、塩酸フェンフルラミン(一日に三回20mg)、およびフェンテルミン樹脂(午前中に15mg)および塩酸フェンフルラミン(夕食前の30mg)の組合せ、およびシブトラミン(10-20mg)を含む。 Weintraubら(1984) Arch. Intern. Med. 144:1143-1148年。
【０１３５】
他の形態において、提供する方法は、少なくとも1の他の抗−肥満剤と組み合わせたアミリンまたはアミリン・アゴニストの投与を含むが、但し、少なくとも１の他の抗−肥満剤は、NPY1受容体アンタゴニスト、NPY5受容体アンタゴニスト、NPY2受容体アゴニスト、NPY4受容体アゴニスト、レプチン、レプチン誘導体、レプチン・アゴニスト、CNTF、CNTFアゴニスト／メデュレーター、CNTF誘導体、MCH1Rアンタゴニスト、MCH2Rアンタゴニスト、メラノコルチン 4アゴニスト、MC4受容体アゴニスト、カンナビノイド受容体(CB-1)アンタゴニスト／逆アゴニスト、グレリン・アンタゴニスト、５HT2アゴニスト、セロトニン再取り込みインヒビター、セロトニン輸送インヒビター、エキセンジン、エキセンジン誘導体、エキセンジン・アゴニスト、GLP-1、GLP-1アナログ、GLP-1アゴニスト、DPP-IVインヒビター、オピオイド・アンタゴニスト、オレキシン・アンタゴニスト、メタボトロピック・グルタミン酸のサブタイプ5受容体アンタゴニスト、ヒスタミン3アンタゴニスト／逆のアゴニスト、またはトピラメートではない。ある種の形態において、提供する方法は、少なくとも１の他の抗−肥満剤と組み合わせたアミリンまたはアミリン・アゴニストを投与することを含むが、但し、該少なくとも１の他の抗−肥満剤はフェンテルミン、リモナバント、またはシブトラミンではない。
【０１３６】
アミリンおよびアミリン・アゴニストは、グルコース依存性インスリン親和性ポリペプチド(GIP)アナログのようなメタボリック・シンドロームを治療するのに有用な化合物と投与することもできる。他の形態において、本明細書にき債する化合物は、他の鎮痛薬、免疫抑制剤、または他の抗炎症剤と一緒に使用し得る。
【０１３７】
本明細書に開示する方法の文脈において有用な化合物は、アミリンおよびアミリン・アゴニストを含む。一般的に、アミリンおよびアミリン・アゴニストは、アミリン、アドレノメデュリン(「ADM」)、カルシトニン(「CT」)、カルシトニンの遺伝子関連ペプチド(「CGRP」)、インターメディン(別名「AFP-6」)および関連ペプチドのようなアミリン・ファミリーのペプチドホルモンを含む。天然のアミリン・ファミリーのペプチドホルモンは当該技術分野において知られており、アゴニストペプチドのアナログおよび誘導体のようなものである。ある種の天然のペプチド、アゴニストペプチド・アナログおよび誘導体を本明細書に記載するが、本明細書に記載する特性を有するいずれの公知のアミリンファミリーペプチドも、本明細書に開示する方法と結合して使用し得ることは理解されるべきである。
【０１３８】
当業者によって認識されるように、アミリンファミリーペプチド・ホルモンは、一般的に生理学的に発現される場合はＣ−末端アミド化されているが、本明細書に提供する方法および組成物の目的ではその必要はない。換言すれば、これらのペプチドのＣ−末端は遊離−ＯＨまたは−ＮＨ２基を有していてもよい。本明細書に記載するように、これらのペプチドは他の翻訳後修飾を有していてもよい。
【０１３９】
「アミリン」とは、アミリンといわれ、膵臓のベータ細胞から分泌されるヒト・ペプチドホルモン、それらの種変異型を意味し、その例は出典明示して本明細書の一部とみなす米国特許第5,234,906号に記載されている。より詳細には、アミリンは、栄養取り込みに応答して膵臓ベータ細胞によってインスリンと通常は同時分泌される３７アミノ酸のポリペプチド・ホルモンである(例えば、Kodaら(1992) Lancet 339:1179 -1180を参照されたい)。この意味において「アミリン」、「野生型アミリン」および「天然アミリン」すなわち、非修飾アミリンは交換可能に使用される。アミリンはまた時々「IAPP」ともいう。
【０１４０】
「アゴニスト」とは、アミリンの生物活性を誘導する化合物を意味し、例えば、例えば、本明細書に記載する受容体結合／競合実験のような当該技術分野で知られている測定法によって評価した場合に、４、３、２、１桁の大きさでアミリンよりも良好な効能を有する。例えば、アミリン・アゴニストは、天然アミリンよりも３、５、１０、５０、１００、５００、１００倍以上の活性を有し得る。あるいは、アゴニストは、例えば、天然アミリンよりも２、５、１０、１５または２０倍低い活性を有し得る。
【０１４１】
１の形態において、アゴニストなる用語は、天然アミリンのものに類似する生物作用を誘導する化合物をいい、例えば（１）天然ヒト参照ペプチドに類似する本明細書に記載する食物好みを修飾することに活性を有する、および／または（２）天然ヒト参照ペプチドに類似する本明細書に記載する代謝速度を変化することに活性を有する化合物をいう。１の形態において、アゴニストなる用語は、天然アミリンのものと類似する生物作用を誘導する化合物をいい、例えば天然ヒト参照ペプチドに類似する本明細書に記載する肥満または摂食障害もしくは症状を制御、予防または治療することに活性を有する化合物をいう。１の形態において、アゴニストなる用語は、天然アミリンのものに類似する生物作用を誘導する化合物をいい、例えば（１）天然ヒト参照ペプチドに類似する食物取り込み、胃内容物排出、膵臓分泌または体重損失アッセイ（出典明示して本明細書の一部とみなす2005年2月11日に出願したPCT出願番号PCT／US2005／004631）に活性を有する、および／または（２）アミリンと、参照受容体アッセイまたは競合結合アッセイにおいて特異的に結合する化合物をいう。１の形態において、アゴニストはかかるアッセイにおいて、１μMよりも良好なアフィニティーで結合し、もう１の形態において、１―５μMのアフィニティーで結合する。かかるアゴニストは、アミリンの活性フラグメントまたは小さい化学分子を含むポリペプチドを含み得る。いくつかの形態において、アゴニストはペプチドであり、小さい化学分子ではない。しかしながら、ある種の形態において、サケ・カルシトニン、カルシトニン、CGRP、ADM、AFP-6および／またはそれらの関連するアナログは、但し書きでもってアミリン・アゴニストの範囲から排除される場合がある。ある種の形態において、アミリン・アゴニストは、小さい化学分子ではなく、小さい化学分子は但し書きでもってアミリン・アゴニストの範囲から排除される場合がある。
【０１４２】
「アナログ」とは、アミリンまたはアミリン・ペプチドの領域と同一の少なくともいくつかのアミノ酸を有する、挿入、置換、伸長および／または欠損を含むアミリンの配列に由来する配列を有するペプチドを意味する。アナログは、天然アミリンと少なくとも50または55％のアミノ酸配列同一性を有し得、または少なくとも70%、80%、90%または95%のアミノ酸配列同一性を有し得る。１の形態において、そのようなアナログは保存的か非保存的アミノ酸置換（非天然アミノ酸およびＬおよびＤ型を含む）を含み得る。アナログは、アゴニストを有する化合物およびアンタゴニスト活性を有する化合物を含む。アミリン・アゴニストのアナログは、本明細書に記載するアナログであって、アミリン・アゴニストとして機能する。アナログは、本明細書に定義するように、誘導体も含む。
【０１４３】
「誘導体」は、天然アミリンまたはアナログのアミノ酸配列を有する分子として定義されるが、さらにそのアミノ酸側鎖、α−炭素原子、末端アミノ基または末端カルボン酸基の１またはそれを超えるものに化学修飾を有する。化学修飾は、限定されるものではないが、化学基を付加すること、新たな結合を作ること、および化学基を除去することを含む。アミノ酸側鎖の修飾は、限定されるものではないが、リシンε−アミノ基のアシル化、アルギニン、ヒスチジンまたはリシンのＮ−アルキル化、グルタミン酸またはアスパラギン酸のカルボン酸基のアルキル化、およびグルタミンまたはアスパラギンの脱アミド化を含む。末端アミノの修飾は、限定されるものではないが、デスアミノ、Ｎ−低級アルキル、Ｎ−ジ−低級アルキル、束縛されたアルキル（例えば、分岐型、環状、縮合、アダマンチル）およびＮ−アシル修飾を含む。末端カルボキシ基の修飾は、限定されるものではないが、アミド、低級アルキルアミド、束縛されたアルキル（例えば、分岐型、環状、縮合、アダマンチル）アルキル、ジアルキルアミド、および低級アルキルエステル修飾を含む。低級アルキルはＣ１−Ｃ４アルキルである。さらに、１またはそれを超える側鎖基または末端基は、合成化学の当業者に知られている保護基によって保護し得る。アミノ酸のα−炭素は、モノまたはジメチル化されていてもよい。
【０１４４】
一般的に、アミノ酸配列に関して、「修飾」なる用語は、置換、挿入、伸長、欠損および誘導化を単独または組み合わせて含む。いくつかの形態において、ペプチドは、「非必須」アミノ酸残基の１またはそれを超える修飾を含み得る。この文脈において、「非必須」アミノ酸残基は、ペプチド（例えばアナログ・ペプチド）の活性（例えば、アゴニスト活性）を破壊または実質的に減少することなく、新規なアミノ酸配列に変化し得る、例えば欠失または置換し得る残基である。いくつかの形態において、ペプチドは、「必須」アミノ酸残基の１またはそれを超える修飾を含み得る。この文脈において、「必須」アミノ酸残基は、新規のアミノ酸配列中で変化、例えば欠失または置換した場合に、参照ペプチドの活性が実質的に減少または破壊する残基である。必須アミノ酸残基を変化するかかる形態において、修飾したペプチドは、提供する方法において使用するアミリンの活性を有し得る。置換、挿入および欠損は、Ｎ−末端またはＣ−末端に存在し得、あるいは成分ペプチドホルモンの内部部分に存在し得る。例えば、ペプチドは、ペプチド分子全体を通して連続様式または間隔をあけての両方で、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれを超える置換を含み得る。単独または置換と組み合わせて、ペプチドは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれを超える挿入を、再度、ペプチド分子全体を通して連続様式または間隔をあけての両方で含み得る。ペプチドは、単独または置換および／または挿入と組み合わせて、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれを超える欠失を、再度、ペプチド分子全体を通して連続様式または間隔をあけての両方で含み得る。ペプチドは、単独または置換、挿入および／または欠失と組み合わせて、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれを超えるアミノ酸付加も含み得る。
【０１４５】
置換には、保存的アミノ酸置換が含まれる。「保存的アミノ酸置換」は、アミノ酸残基が同様の側鎖、または物理化学的特性（例えば、静電気、水素結合、等配電子、疎水性特徴）を有するアミノ酸残基で置き換えられたものである。アミノ酸は、天然に発生するものでも天然に発生しないもの（非天然）であってもよい。同様の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは当該技術分野で知られている。これらのファミリーには、塩基性側鎖を有するアミノ酸（例えば、リシン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸)、非荷電極性側鎖を有するアミノ酸(例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、チロシン、メチオニン、システイン)、非極性側鎖を有するアミノ酸(例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、トリプトファン)、β−分岐型側鎖を有するアミノ酸（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）および芳香族側鎖を有するアミノ酸（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）が含まれる。置換は、非保存型変化も含み得る。
【０１４６】
「アミノ酸」または「アミノ酸残基」とは、天然アミノ酸、非天然アミノ酸、および修飾したアミノ酸を意味する。別段指摘しない限り、名称による一般的または具体的なアミノ酸についてのいずれかの言及は、それらの構造がかかる立体異性体形を許容する場合にはＤおよびＬ立体異性体の両方をいうことを含む。天然アミノ酸はアラニン(Ala)、アルギニン(Arg)、アスパラギン(Asn)、アスパラギン酸(Asp)、システイン(Cys)、グルタミン(Gln)、グルタミン酸(Glu)、グリシン(Gly)、ヒスチジン(His)、イソロイシン(Ile)、ロイシン(Leu)、リシン(Lys)、メチオニン(Met)、フェニルアラニン(Phe)、プロリン(Pro)、セリン(Ser)、トレオニン(Thr)、トリプトファン(Trp)、チロシン(Tyr)およびバリン(Val)を含む。非天然アミノ酸は、限定されるものではないが、ホモリシン、ホモアルギニン、ホモセリン、アゼチジンカルボン酸、2-アミノアジピン酸、3-アミノアジピン酸、ベータアラニン、アミノプロピオン酸、2-アミノ酪酸、4-アミノ酪酸、6-アミノカプロン酸、2-アミノヘプタン酸、2-アミノイソ酪酸、3-アミノイソ酪酸、2-アミノピメリン酸、第三級ブチルグリシン、2,4-ジアミノイソ酪酸、デスモシン、2,2-ジアミノピメリン酸、2,3-ジアミノプロピオン酸、N-エチルグリシン、N-エチルアスパラギン、ホモプロリン、ヒドロキシリジン、アロヒドロキシリジン、3-ヒドロキシプロリン、4-ヒドロキシプロリン、イソデスモシン、アロイソロイシン、N-メチルアラニン、N-メチルグリシン、N-メチルイソロイシン、N-メチルペンチルグリシン、N-メチルバリン、ナフトアラニン、ノルバリン、ノルロイシン、オルニチン、ペンチルグリシン、ピペコール酸、ピログルタメートおよびチオプロリンを含む。 さらなる非天然アミノ酸は、可逆的または不可逆的に化学的にブロックされた修飾された、またはそのＮ−末端アミノ基または側鎖で化学的に修飾されたアミノ酸残基を含み、例えば、Ｎ−メチル化ＤおよびＬアミノ酸または残基であり、そこでは側鎖官能基がもう１の官能基に化学的に修飾されている。例えば、修飾されたアミノ酸は、メチオニンスルフォキシド；メチオニンスルフォン; アスパラギン酸(ベータ−メチルエステル)、アスパラギン酸の修飾されたアミノ酸; N-エチルグリシン、グリシンの修飾されたアミノ酸；またはアラニンカルボキサミド、アラニンの修飾されたアミノ酸を含む。組み込むことができるさらなる残基は、Sandbergら(1998) J. Med. Chem. 41:2481-2491に記載されている。
【０１４７】
代わりがMarkushのグループ、以上1可能なアミノ酸を含んでいる例えば、各アミノ酸の位置にすっかり書かれることが注意されるべきである。 とりわけ熟視され、Markushのグループの各メンバーがべきでことがそれにより別の形態別に考慮されるから成り立つ、Markushのグループが単一ユニットとして読まれるべきでない。
【０１４８】
よく芸術で理解されるように、「順序アイデンティティ」は順序の比較によって定められるように2つ以上のポリペプチド順序または2つ以上のpolynucleotide順序間の関係、である。 芸術において、「アイデンティティ」はまたそのような順序の一連間のマッチによって定められるようにポリペプチドまたはpolynucleotide順序間の順序のrelatednessのある程度を、意味できる。 アイデンティティは知られていた方法によってLesk記述されている、AMのED。、オックスフォード大学の出版物、ニューヨーク(1988年)容易にを含むがそれに限定されず、それら計算の分子生物学で計算する、ことができる; Biocomputing: 情報科学およびゲノムのプロジェクト、スミス、D.W.のED。、学術出版物、ニューヨーク1993年; 順序データ、部I、グリフィン、AMおよびグリフィン、H.G.、edsのコンピューター分析。、Humanaの出版物、ニュージャージー(1994年); 分子生物学、フォンHeinje、g.の学術出版物(1987年)の順序の分析; 順序の分析のプライマー、Gribskov、m.およびDevereux、j.、eds。、Stocktonの出版物、ニューヨーク(1991年); そしてCarillo、h.およびLipman、d.のシャムjの応用数学、48:1073(1988年)。 アイデンティティを定める方法はテストされる順序間の最も大きいマッチを与えるように設計されている。 さらに、アイデンティティを定める方法は公に利用できるプログラムで集成される。 2つの順序間のアイデンティティを定めるのに使用することができる計算機プログラムは含んでいるが、に、GCG限られない(Devereuxの等(1984年の)核酸は12:387を研究する; 続きの5つの送風プログラム、3およびタンパク質順序の問い合わせヌクレオチド順序の問い合わせ(BLASTN、BLASTXおよびTBLASTX)のためにのために設計されている2は設計した(BLASTPおよびTBLASTN)(人間工学12:76 - 80のCoulsonの(1994年の)傾向; Birrenの等(1997年の)ゲノムの分析1:543 - 559)。 送風XプログラムはNCBIおよび他の源(送風マニュアル、Altschul、s.、等、NCBI NLM NIH、Bethesda、MD 20894から公に利用できる; Altschul等(1990年の) j. mol。 biol. 215:403 - 410)。 また有名なスミス船頭のアルゴリズムがアイデンティティを定めるのに使用することができる。
【０１４９】
ポリペプチド順序の比較のための変数は普通次が含まれている: アルゴリズム: needlemanおよびWunsch(1970年の) j. mol。 biol. 48:443 - 453; 比較のマトリックス: hentikoffおよびHentikoff(1992年の) ProcからのBLOSSUM62。 国民。 Acad。 Sci。 米国89:10915 - 10919; ギャップの罰: 12; ギャップの長さの罰: 4。 これらの変数と使用することができるプログラムは公に利用できるので遺伝学コンピュータグループからの「ギャップ」プログラム(「GCG」)、マディソン、WI。 終わりのギャップのための罰と共に上記の変数はペプチド比較のための既定のパラメータでない。 NCBIのBLASTPプログラムが合成調節の既定のパラメータと使用されない１の形態において、10という値、3の単語のサイズ、11のBLOSUM62マトリックス、ギャップ延長費用、1の終わりのギャップ延長費用、送風延長(ビットで) 7のためのdropoff(x)を、ギャップを作られた直線(ビットで) 15のためのxのdropoffの価値、およびギャップを作られた直線(ビットで) 25のための最終的なxのdropoffの価値期待しなさい。
【０１５０】
核酸の分子順序の比較のための変数は次が含まれている: アルゴリズム: needlemanおよびWunsch(1970年の) j. mol。 生物。 48:443 - 453; 比較のマトリックス: マッチ- +10; 不適当な組み合わせ= 0; ギャップの罰: 50; ギャップの長さの罰: 3。 核酸の分子のための既定のパラメータがGCGからの比較そして「ギャップ」プログラムを配列すると同時にここに使用されるように、「アイデンティティ%」は上記の変数、版10.2を使用して断固としたである。
【０１５１】
本明細書全体を通して、アミノ酸配列は、参照ペプチドに近接するポジションａからポジションｂのアミノ酸をいうことができる。例えば、1-7 hアミリンは、包括的に、この例においては参照ペプチドである、ヒト・アミリン(配列番号：１）のポジション１からポジション７のアミノ酸配列をいう。参照ペプチドに対する修飾は、修飾に近接する修飾のポジションとして示し得る。例えば、(2Asp 7Lys) 1-7 hアミリンは、ポジション２のCysからAspへの修飾およびポジション７のCysからLysへの修飾を含むヒト・アミリンのポジション1から７のアミノ酸配列を表す。もう１の例として、18Arg25,28Pro-h-アミリンは、ポジション18のHisからArgへの修飾、ポジション２５のAlaからProへの修飾、およびポジション２８のSerからProへの修飾を有するヒト・アミリンのアミノ酸配列を表す。
【０１５２】
ヒト・アミリン(hアミリンまたはh-アミリン)は以下のアミノ酸配列を有する： Lys Cys Asn Thr Ala Thr Cys Ala Thr Gln Arg Leu Ala Asn Phe Leu Val His Ser Ser Asn Asn Phe Gly Ala Ile Leu Ser Ser Thr Asn Val Gly Ser Asn Thr Tyr(配列番号：1)。ラット・アミリン(rアミリン)は以下の配列を有する: KCNTATCATQRLANFLVRSSNNLGPVLPPTNVGSNTY(配列番号：2)。あらゆる種からのアミリンの使用が意図される。
【０１５３】
本明細書に開示する方法で使用することが意図されるアミリン・アゴニストは、米国特許第5,686,411、6,114,304、および6,410,511号、およびPCT国際公開番号WO 93/10146に記載されたものを含む。そのような化合物は式Iを有するものを含む:
1A1-X-Asn-Thr-5Ala-Thr-Y-Ala-Thr-10Gln-Arg-Leu-B1-Asn-15Phe-Leu-C1-D1-E1-20F1-G1-Asn-H1-Gly-25I1-J1-Leu-K1-L1-30Thr-M1-Val-Gly-Ser-35Asn-Thr-Tyr(配列番号：3)
式中、A1はLys、Ala、Serまたは水素である; 
B1は Ala 、Serまたはthrである; 
C1はVal、LeuまたはIleである; 
D1はHisまたはArgである; 
E1はSerまたはThrである; 
F1はSer、Thr、GlnまたはAsnである; 
G1はAsn、GlnまたはHisである; 
H1はPhe、LeuまたはTyrである; 
I1は Ala またはProである; 
J1はIle、Val、 Ala またはLeuである; 
K1はSer、Leuプロ、Ileまたはthrである; 
L1はSer、ProまたはThrである;
M1はAsn、Asp、またはGlnである;
XおよびYは互いに化学的に結合して分子間結合を形成する側鎖を有する独立して選択されるアミノ酸残基である。
【０１５４】
Ｃ−末端部分は、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、アラルキルアミノ、アルキルオキシ、アリールオキシ、アラルキルオキシまたはカルボキシルとし得る。ＸおよびＹに好適な側鎖は、ジスルフィド結合を形成し得るアルキルスルフヒドリルから誘導された基；環状ラクタムを形成することができるアルキル酸およびアルキルアミン；縮合し得る、および還元してアルキルアミン架橋を形成し得るアルキルアルデヒドまたはアルキルハライドおよびアルキルアミン；または結合してアルキル、アルケニル、アルキニル、エーテルまたはチオエーテル結合を形成し得る側鎖を含む。例示的なアルキル鎖は、約１ないし約６の炭素原子を有する低級アルキル基を含む。
【０１５５】
本明細書に提供する使用のさらなる態様、組成物および方法は、架橋していない配列番号：３のアゴニスト・アナログに指向され、ここにＸおよびＹは独立してAla、Ser、Cys、Val、LeuおよびIle、またはSerまたはCysのアルキル、アリール、またはアラルキルエステルおよびエーテルから選択される。
【０１５６】
例示的な化合物は、限定されるものではないが、des-1Lys- h- アミリン(配列番号：４）、28Pro-h-アミリン(配列番号：5)、25,28,29Pro-h-アミリン(配列番号：6)、18Arg25,28Pro-h-アミリン(配列番号：7)、およびdes-1Lys-18Arg-25,28Pro h-アミリン(配列番号：8)を含み、これらはすべて、処置した試験動物においてイン・ビボ(in vivo)でアミリン活性を示す。アミリンの活性特徴を有することに加えて、本明細書に提供するある種の化合物は、ヒト・アミリンと比較した場合により望ましい溶解度および安定性特徴を有することも見出された。これらの化合物の例は、25Pro26Val28,29Pro-h-アミリン(配列番号：９）、25,28,29Pro-h-アミリンおよび18Arg25,28Pro-h-アミリンを含む。
【０１５７】
他の化合物は、18Arg25,28,29Pro-h-アミリン(配列番号：10)、des-1Lys18Arg25,28,29Pro- h-アミリン(配列番号：11)、des-1Lys25,28,29Pro- h-アミリン(配列番号：12)、25Pro26Val28,29Pro-h-アミリン(配列番号：13)、23Leu25Pro26Val28,29Pro-h-アミリン(配列番号：14)、23Leu25Pro26Val28Pro-h-アミリン(配列番号：15)、des1Lys23Leu25Pro26Val28Pro h アミリン(配列番号：16)、18Arg23Leu25Pro26Val28Pro-h-アミリン(配列番号：17)、18Arg23Leu25,28,29Pro-h-アミリン(配列番号：18)、18Arg23Leu25,28Pro-h-アミリン(配列番号：19)、17Ile23Leu25,28,29Pro-h-アミリン(配列番号：20)、17Ile25,28,29Pro-h-アミリン(配列番号：21)、des1Lys17Ile23Leu25,28,29Pro h アミリン(配列番号：22)、17Ile18Arg23Leu-h-アミリン(配列番号：23)、17Ile18Arg23Leu26Val29Pro-h-アミリン(配列番号：24)、17Ile18Arg23Leu25Pro26Val28,29Pro-h-アミリン(配列番号：25)、13Thr21His23Leu26Ala28Leu29Pro31Asp-h-アミリン(配列番号：26)、13Thr21His23Leu26Ala29Pro31Asp-h-アミリン(配列番号：27)、des1Lys13Thr21His23Leu26Ala28Pro31Asp h アミリン(配列番号：28)、13Thr18Arg21His23Leu26Ala29Pro31Asp-h-アミリン(配列番号：29)、13Thr18Arg21His23Leu28,29Pro31Asp-h-アミリン(配列番号：30)、および13Thr18Arg21His23Leu25Pro26Ala28,29Pro31Asp-h-アミリン(配列番号：31)を含む。
【０１５８】
本明細書に開示するお麩法において使用することが意図されるアミリン・アゴニストは、インターメディンまたはAFP-6ペプチドを含む。「インターメディン」または「AFP-6」とは、いずれかの生理学的形態のヒト・ペプチドホルモンおよびその種変異型を意味する。天然AFP-6ペプチドは当該技術分野で知られており、機能性AFP-6ペプチドアナログ、誘導体およびハイブリッドとして知られている。当該技術分野で知られている生物活性を示す当該技術分野で知られているいずれのAFP-6ペプチド、アナログまたは誘導体も、本明細書に開示する組成物および方法と結合して使用し得る。１の形態において、AFP-6ペプチド、アナログおよび誘導体は、天然AFP-6の少なくとも１のホルモン活性を有する。ある種の形態において、AFP-6ペプチド、アナログ、誘導体およびハイブリッドは、天然AFP-6が特異的に結合することができる受容体のアゴニストである。
【０１５９】
本明細書に開示する方法における使用が意図されるアミリン・アゴニストは、米国仮特許出願60/617,468およびPCT出願番号PCT/US05/036456に記載されているAFP-6アナログを含む。成熟AFP-6ペプチドはインターメディンとしても知られ、以下のアミノ酸配列を有する
TQAQLLRVGCVLGTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：32)。AFP-6またはAFP-6アナログは、C−末端でアミド化されていても、されていなくてもよい。かかるAFP-6アナログは、式IIを有するものを含む：
X1-X2-X3-X4-X5-X6-X7-X8-QVQNLSHRLWQL-X21-X22-X23-X24-X25-X26-X27- X28-SAPV-X33-PSSPHSY(配列番号：33)
式中、X1は不存在、TQAQLLRVG(配列番号：34)、配列番号：34のいずれか１またはそれを超える連続するアミノ酸、C1-C18アルキル、置換型アルキルまたはヘテロアリール基から選択される置換基を有するN-アリールまたはN-アシル;
X2は側鎖がアミド結合を介して結合し得るM、S、C、置換型L、K、DまたはE、あるいはX8と結合、例えばジスルフィドまたはアミド結合、を形成し得るいずれかのアミノ酸；
X3はV、D、L、G、N、A、またはSである;
X4はV、D、L、G、N、A、SまたはTである;
X5はV、D、L、G、N、A、またはSである;
X6はV、D、L、G、N、A、S、または不存在である;
X7はT、S、Hse(ホモSER)、Ahb((S)-2-アミノ-3-ヒドロキシ-3-メチル酪酸)または(Ahp)(2R,3R)-2-アミノ-3-ヒドロキシ-4-メチルペンタン酸;
X8はM、S、C、置換型L、K、DまたはE、またはX2と結合、例えばジスルフィドまたはアミド結合を形成し得るいずれかのアミノ酸； 
X21はM、G、P、A、または不存在である;
X22はM、G、P、A、または不存在である;
X23はM、G、P、A、または不存在である;
X24はM、G、P、A、または不存在である;
X25はM、G、P、A、または不存在である;
X26はRまたは不存在であり、ここにX26が不存在の場合、X27は不存在である;
X27はQまたは不存在であり、ここにX27が不存在である場合、X26は不存在であり;
X28はDまたはEである;
X33はDまたはEである;ならびに
その生物学的に活性なフラグメント。
【０１６０】
他の形態において、AFP-6アナログは、式（III)：
X1-X2-QNLSHRLWQL-X13-X14-X15-X16-X17-X18-X19-X20-SAPV-X25-PSSPHSY(配列番号：35)のアミノ酸配列を有する化合物を含みあるいはそれからなる活性領域を含む、
式中、
X1はQまたは不存在である;
X2はVまたは不存在である;
X13はM、G、P、A、または不存在である;
X14はM、G、P、A、または不存在である
X15はM、G、P、A、または不存在である;
X16はM、G、P、A、または不存在である;
X17はM、G、P、A、または不存在である、
X18はRまたは不存在であり、ここにX18が不存在である場合、X19は不存在であり；
X19はQまたは不存在であり、ここにX19が不存在である場合、X18は不存在であり；
X20はDまたはEである;
X25はDまたはEである;および
その生物学的に活性なフラグメント。
【０１６１】
開示する方法で使用する例示的なAFP-6アナログのアミノ酸配列は以下のものを含む：
RVGCVLGTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：36)
GCVLGTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：37)
CVLGTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：38)
QVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：39)
VQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：40)
VQNLSHRLQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：41)
TQAQLLRVGCVLGTCQVQNLSHRLWQLRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：42)
TQAQLLRVGCVLGTCQVQNLSHRLWQLDSAPVDPSSPHSY(配列番号：43)
VGCVLGTCQVQNLSHRLWQLRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：44)
CVLGTCQVQNLSHRLWQLRQESAPVEPSSPHSY(配列番号：45)
TQAQLLRVGCSNLSTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：46)
TQAQLLRVGCNTATCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：47)
RVGCGNLSTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：48)
TQAQLLRVGCDTATCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：49)
TQAQLLRVGCGNLSTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：50)
TQAQLLRVGMVLGTMQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：51)
GMVLGTMQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：52)
VGMVLGTMQVQNLSHRLWQLRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：53)
RVGCGNLSTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：54)
VGCGNLSTCQVQNLSHRLWQLRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：55)
VCNTATCQVQNLSHRLWQLRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：56)
GCNTATCQVQNLSHRLWQLRQDSAPVDPSSPHSY(配列番号：57)
TQAQLLRVGCVLGTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQESAPVEPSSPHSY(配列番号：58)
TQAQLLRVGCVLGTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVEPSSPHSY(配列番号：59)
GTMQVQNLSHRLWQLRQDSAPVEPSSPHSY(配列番号：60)
VGCVLGTCQVQNLSHRLWQLMGPAGRQDSAPVEPSSPHSY(配列番号：61)
VGCVLGTCQVQNLSHRLWQLRQDSAPVEPSSPHSY(配列番号：62)
GCNTATCQVQNLSHRLWQLRQDSAPVEPSSPHSY(配列番号：63)
GCSNLSTCQVQNLSHRLWQLRQDSAPVEPSSPHSY(配列番号：64)
GCGNLSTCQVQNLSHRLWQLRQDSAPVEPSSPHSY(配列番号：65)
GCVLGTCQVQNLSHRLWQLRQESAPVEPSSPHSY(配列番号：66)。
【０１６２】
他の例示的なAFP-6アナログおよび誘導体は、各々出典明示して本明細書の一部とみなす米国特許第6,965,013号およびPCT国際公開番号WO2004/048547に開示されている。
【０１６３】
本明細書に開示する方法に使用することが意図されるアミリン・アゴニストは、出典明示して本明細書の一部とみなす米国特許第6,087,334号に同定されたアナログを含む。かかる有用なアミリン・アゴニストは、式VIのアナログを含む： X1-Xaa1-X2-Xaa2-X3-Xaa3-X4-Xaa4-X5-Xaa5-X6(配列番号：67) 
式中、
X1はLys、Argまたは不存在である; 
X2はXaa6Xaa7Xaa8Xaa9(配列番号：68)またはZ-Xaa10SerThrであるが、但し、X2がZ-Xaa10SerThrである場合、X1およびXaa1は両方不存在である; 
X3はAlaThr、AlaSer、SerMet、GluThrまたはValThrである; 
X4はArgLeuAla、HisLeuAla、ArgIleAla、LysIleAla、ArgMetAla、HisMetAla、LysMetAlaまたはArgLeuThrである; 
X5はPheLeu、PheIle、PheMet、TyrLeu、TyrIle、TyrMet、TrpIleまたはTrpMetである; 
X6はArgSerSerGlyTyr(配列番号：69)、LysSerSerGlyTyr(配列番号：70)、HisSerSerGlyTyr(配列番号：71)、ProSerSerGlyTyr(配列番号：72)、ArgSerArgGlyTyr(配列番号：73)、ArgThrSerGlyTyr(配列番号：74)、ArgAlaSerGlyTyr(配列番号：75)、AlaSerSerGlyTyr(配列番号：76)、ArgSerAlaGlyTyr(配列番号：77)、HisSerAlaGlyTyr(配列番号：78)、ArgSerGlyTyr(配列番号：79)、ArgSer、LysSer、HisSer、ArgThr、ProSerまたはArgである; 
Xaa1はCysまたは不存在である; 
Xaa2はCysまたは Ala である; 
Xaa3はGln、AlaまたはAsnである; 
Xaa4はAsn、Ala またはGlnである; 
Xaa5はVal、Ala 、Ile、Met、Leu、ペンチルGly、またはt-ブチルGlyである; 
Xaa6はAsn、GlnまたはAspである; 
Xaa7はThr、Ser、Met、Val、Ser LeuまたはIleである; 
Xaa8は Ala またはValである; 
Xaa9はThrまたはSerである; 
Xaa10はLeu、Val、MetまたはIleである;
Zは約１ないし約８の炭素原子のアルカノイル基または不存在である;
およびその医薬上許容される塩。
【０１６４】
アミリンアゴニストはここに表われた方法の使用で含んでいる米国pat. application No. 60/543,275と参照によってここに完全に組み込まれるpct application No. PCT/US2005/004631で記述されているアミリン家族のペプチド、アナログおよびdertivativesを(LHC(ループ螺旋形のCterminusの)ペプチドとここに言われる)熟視した。
【０１６５】
方法の使用のためのLHCのペプチドはここに表われた3または縛りのカルシトニン、アミリン、CGRP、またはアミリン、カルシトニン、またはCGRP受容体の少なくとも1に組合せの少なくとも1つの生物学的作用にアゴニストとして行為を提供した。 模範的なLHCのペプチド受容体の結合の活動そして生物活動は米国pat. application No. 60/543,275とpct application No. PCT/US2005/004631で記述されている。 では一般的面、これらのポリペプチドアゴニストs持少なくともループ地域のアミリンまたはカルシトニンおよびアナログそれから、α螺旋形地域の少なくとも部分のα螺旋形地域のカルシトニンまたはアナログそれからまたはα螺旋形地域持部分のアミリン α螺旋形地域およびカルシトニン α螺旋形地域または彼等のそれぞれアナログ、およびCターミナル尾のアミリンまたはカルシトニンまたはアナログそれから、という条件でCターミナル尾のカルシトニンまたはカルシトニンアナログあないプロリン(プロ)、ヒドロキシプロリン(Hyp)、homoserine(hse)または誘導体のhse。 
【０１６６】
ある特定の形態において、これらのLHCのペプチドにカルシトニンまたはカルシトニンのアナログのαの螺旋形の地域のアミリンまたはアミリンのアナログのループ地域、少なくとも部分、およびアミリンまたはアミリンアナログCターミナル尾がある。 他の形態において、これらのLHCのペプチドにカルシトニンまたはカルシトニンのアナログのαの螺旋形の地域のカルシトニンまたはカルシトニンのアナログのループ地域、少なくとも部分、およびアミリンまたはアミリンアナログCターミナル尾がある。 静かでは他の形態に、これらのLHCのペプチドカルシトニンまたはカルシトニンのアナログのαの螺旋形の地域のアミリンまたはアミリンのアナログのαの螺旋形の地域そして少なくとも部分のアミリンまたはアミリンのアナログのループ地域、少なくとも部分、およびアミリンまたはアミリンアナログCターミナル尾がある。 でけれども他の形態に、これらのLHCのペプチドカルシトニンまたはカルシトニンのアナログのαの螺旋形の地域のアミリンまたはアミリンのアナログのαの螺旋形の地域そして少なくとも部分のカルシトニンまたはカルシトニンのアナログのループ地域、少なくとも部分、およびアミリンまたはアミリンアナログCターミナル尾がある。 静かなけれども他の形態において、これらのLHCのペプチドにカルシトニンまたはカルシトニンのアナログのαの螺旋形の地域のアミリンまたはアミリンのアナログのαの螺旋形の地域そして少なくとも部分のアミリンまたはアミリンのアナログのループ地域、部分またはカルシトニンまたはカルシトニンのアナログのαの螺旋形の地域または少なくとも部分、およびカルシトニンまたはカルシトニンアナログCターミナル尾がある。
【０１６７】
ある特定の形態において、これらのLHCのペプチドのループ地域は更にそれからアミリンまたはカルシトニンのループおよびアナログからの取り替えを含むこれ以上より1つ、2つ、3つ、か4つの修正を、挿入、または削除含み得る。 これらのLHCのペプチドにN帽子の地域から成り立つループのNターミナル部分で付加的な修正があるかもしれないことが更にそれアセチル、isocaproyl、3,6-dioxyoctanoic酸、または1アミノ4,7,10 trioxa 13 tridecanamineのsuccinimic酸のような疎水性か親水性の特徴を持つかもしれない熟視される。 修正は更に1つ、2の3つ以上の付加的なアミノ酸を含むかもしれない。 これは基づいて芸術更に例証されるものがに現在の適用で多数の言及への多くの修正を余りに可能にするが、の技術の1によって理解される区域。
【０１６８】
そのような有用なアミリンアゴニストは式Vのアミノ酸配列を含むLHCペプチドを含み得る：
Xaa1 X Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Y Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Xaa18 Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xaa27 Xaa28 Xaa29 Xaa30 Xaa31 Xaa32(配列番号：80)
式中、
Xaa1はA、C、hC(ホモCys)、D、E、F、I、L、K、hK(ホモLys)、R、hR (ホモArg)、S、Hse(ホモSer)、T、G、Q、N、M、Y、W、P、Hyp(ヒドロキシPro)、H、Vまたは不存在である;
Xaa3はA、D、E、N、Q、G、V、R、K、hK、hR、H、I、L、M、または不存在である;
Xaa4はA、I、L、S、Hse、T、V、M、または不存在である;
Xaa5はA、S、T、Hse、Y、V、I、L、またはMである;
Xaa6はT、A、S、Hse、Y、V、I、L、またはMである;
Xaa8はA、V、I、L、F、またはMである;
Xaa9はL、T、S、Hse、V、I、またはMである;
Xaa10はG、H、Q、K、R、N、hK、またはhRである;
Xaa11はK、R、Q、N、hK、hR、またはHである;
Xaa12はL、I、V、F、M、W、またはYである;
Xaa13はA、F、Y、N、Q、S、Hse、またはTである;
Xaa14はA、D、E、G、N、K、Q、R、H、hR、またはhKである;
Xaa15はA、D、E、F、L、S、Y、I、V、またはMである;
Xaa16はL、F、M、V、Y、またはIである;
Xaa17はH、Q、N、S、Hse、T、またはVである;
Xaa18はK、hK、R、hR、H、u(CIT)、またはn(ORN)である;
Xaa19はF、L、S、Hse、V、I、T、または不存在である;
Xaa20はH、R、K、hR、hK、N、Q、または不存在である;
Xaa21はT、S、Hse、V、I、L、Q、N、または不存在である;
Xaa22はF、L、M、V、Y、またはIである;
Xaa23はPまたはHypである;
Xaa24はP、Hyp、R、K、hR、hK、またはHである;
Xaa25はT、S、Hse、V、I、L、F、またはYである;
Xaa26はN、Q、D、またはEである;
Xaa27はT、V、S、F、I、またはLである;
Xaa28はGまたはAである;
Xaa29はS、Hse、T、V、I、L、またはYである;
Xaa30はE、G、K、N、D、R、hR、hK、H、またはQである;
Xaa31はA、T、S、Hse、V、I、L、F、またはYである; そして
Xaa32はF、P、Y、Hse、S、T、またはHypである;
ＸおよびＹは、結合を作り出すことができ、独立して、互いに化学的に結合して、ジスルフィド結合；アミド結合；環状ラクタムを形成し得るアルキル酸およびアルキルアミン；縮合しおよび還元されてアルキルアミンまたはイミン架橋を形成し得るアルキルアルデヒドまたはアルキルハライドおよびアルキルアミン；または結合してアルキル、アルケニル、アルキニル、エーテルまたはチオエーテル結合を形成し得る側鎖のような分子間架橋を形成する側鎖を有する残基から選択される。
【０１６９】
アルキル鎖は、約１ないし６の炭素原子を有する低級アルキル基を含み得る。ある種の形態において、分子間結合は、ジスルフィド、アミド、イミン、アミン、アルキルまたはアルケン結合である。ある種の形態において、ＸおよびＹは、独立して、Ser、Asp、Glu、Lys、Orn、またはCysから選択される。ある特定の形態において、ＸおよびＹはCysおよびCysである。他の形態において、ＸおよびＹは、SerそしてSerである。いまだ他の形態において、ＸおよびＹはAspおよびLysまたはLysおよびAspである。
【０１７０】
有用なアミリン・アゴニストは、また式VIのアミノ酸配列を含むLHCペプチドも含み得る:
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Xaa18 Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 P Xaa24 T N Xaa27 g s Xaa30 Xaa31 Xaa32(配列番号：81)
式中、
Xaa1はA、C、D、F、I、K、S、T、または不存在である;
Xaa2はC、D、S、または不存在である;
Xaa3はA、D、N、または不存在である;
Xaa4はA、L、T、または不存在である;
Xaa5はAまたはSである;
Xaa6はT、A、S、またはVである;
Xaa7はC、K、またはAである;
Xaa8はA、V、LのorMである;
Xaa9はLまたはTである;
Xaa10はG、H、またはQである;
Xaa11はK、R、Q、またはhArgである;
Xaa12はL、W、またはYである;
Xaa13はA、F、N、Q、S、またはTである;
Xaa14はA、D、E、G、N、K、Q、またはRである;
Xaa15はA、D、E、F、L、S、またはYである;
Xaa16はL、またはFである;
Xaa17はH、Q、S、またはVである;
Xaa18はK、R、hArg、u(Cit)、またはn(Orn)である;
Xaa19はF、L、S、または不存在である;
Xaa20はH、Q、または不存在である;
Xaa21はT、N、または不存在である;
Xaa22はF、L、M、V、またはYである;
Xaa24はPまたはRである;
Xaa27はTまたはVである;
Xaa30はE、G、K、またはNである;
Xaa31はAまたはTである; そして
Xaa32はF、P、またはYである。
【０１７１】
有用なアミリン・アゴニストは、また式VIIのアミノ酸配列を含むLHCペプチドを含み得る:
Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 T Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 l Xaa13 Xaa14 Xaa15 L Xaa17 Xaa18 Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 P Xaa24 T N Xaa27 G S Xaa30 Xaa31 Xaa32、(配列番号：82)
式中、
Xaa1はA、C、F、I、K、S、または不存在である;
Xaa2はC、D、またはSである;
Xaa3はA、DまたはNである;
Xaa4はA、LまたはTである;
Xaa5はAまたはSである;
Xaa7はCまたはKである;
Xaa8はAまたはVである;
Xaa9はLまたはTである;
Xaa10はG、H、またはQである;
Xaa11はK、R、またはhArgである;
Xaa13はA、F、N、S、またはTである;
Xaa14はA、D、E、G、N、Q、またはRである;
Xaa15はA、E、F、L、S、またはYである;
Xaa17はH、S、またはVである;
Xaa18はK、R、hArg、u(Cit)、またはn(Orn)である;
Xaa19はF、L、またはSである;
Xaa20はHまたはQである;
Xaa21はTまたはNである;
Xaa22はF、L、M、V、またはYである;
Xaa24はPまたはRである;
Xaa27はT、またはVである;
Xaa30はE、G、K、またはNである;
Xaa31はA、またはTである; そして
Xaa32はF、P、またはYである。
[00172]有用なアミリンアゴニストはまた方式VIIIでアミノ酸順序を含むLHCのペプチドを含むかもしれない: Xaa1 Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 Xaa10 Xaa11 Xaa12 Xaa13 Xaa14 Xaa15 Xaa16 Xaa17 Xaa18 Xaa19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 P Xaa24 T N Xaa27 g s Xaa30 Xaa31 Xaa32(配列番号：83)
Xaa1はa、c、d、f、k、T、または不存在である;
Xaa2はa、c、d、s、または不存在である;
Xaa3はa、d、n、または不存在である;
Xaa4はa、l、T、または不存在である;
Xaa5はaまたはsである;
Xaa6はa、s、T、またはvである;
Xaa7はa、c、またはkである;
Xaa8はa、l、m、またはvである;
Xaa9はlまたはTである;
Xaa10はg、h、またはqである;
Xaa11はk、q、またはrである;
Xaa12はl、w、またはyである;
Xaa13はa、n、q、s、またはTである;
Xaa14はa、d、e、g、k、n、q、またはrである;
Xaa15はa、d、e、f、l、s、またはyである;
Xaa16はfまたはlである;
Xaa17はh、q、sまたはvである;
Xaa18はk、またはrである;
Xaa19はf、l、s、または不存在である;
Xaa20はh、k、q、または不存在である;
Xaa21はq、T、または不存在である;
Xaa22はf、l、またはyである;
Xaa24はpまたはrである;
Xaa27はTまたはvである;
Xaa30はe、kまたはnである;
Xaa31はaまたはTである; そして
Xaa32はf、y、または不存在である。
【０１７２】
一般的な態様において、式V、VI、VIIまたはVIIIの配列は、さらに、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12またはそれを超える置換、挿入、欠失、伸長および／または誘導体化の修飾を含む。ある種の形態において、式V、VI、VIIまたはVIIIの配列は、ポジション24に欠失を含む。ある種の形態において、式V、VI、またはVIIの配列はポジション22および23のアミノ酸間に挿入されたValを含む。他の形態において、式V、VIまたはVIIの配列は、ポジション22および23の間に挿入されたGlnを含む。 いまだ他の形態において、式V、VIまたはVIIの配列は、ポジション22および23の間にGln-Thr-Tyrの配列を含む。いまだ他の態様において、式V、VI、またはVIIの配列は、ポジション22および23の間にLeu-Gln-Thr-Tyr(配列番号：84）の配列を含む。もう１の一般的態様において、式V、VI、またはVIIの修飾は、N-末端に存在し得る。ある種の形態において、式V、VI、またはVIIのN−末端部分は付加されたオクチルグリシンを有する。他の形態において、式V、VI、またはVIIのN-末端部分は付加されたイソキャップを有する。他の形態は、出典明示して本明細書の一部とみなすPCT出願番号PCT/US2005/004631に記載されている。
【０１７３】
示す部分に修飾を有するヒト・アミリン(配列番号：1、ｈアミリン）、ラット・アミリン(配列番号：2; rアミリン)、およびサケ・カルシトニン(sCT) CSNLSTCVLGKLSQELHKLQTYPRTNTGSGTP(配列番号：85）に参照して記載する例示的化合物は、以下のものを含む：
(1-7 hアミリン)(18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：86); 
(1-7 hアミリン)(11,18Arg22Leu 8-27sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：87); 
(1-7 hアミリン)(11,18Arg24Pro 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：88); 
(1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-24 sCT)(30-37 hアミリン)(配列番号：89); 
(1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-21 sCT)(27-37 rアミリン)(配列番号：90); 
(8Val9Leu10Gly 1-15hアミリン)(18Arg 16-27 sCT)(31-37 hアミリン)(配列番号：91); 
(1Ala 1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：92); 
(3Ala 1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：93); 
(4Ala 1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：94); 
(6Ala 1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：95); 
(2Ala11,18Arg 1-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：96); 
(イソキャップ-7Ala11,18Arg 5-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：97); 
(4Ala11,18Arg 1-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：98); 
(5Ala11,18Arg 1-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：99); 
(6Ala11,18Arg 1-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：100); 
(1-7 hアミリン)(11Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：101); 
(13Ser14Gln15Glu 1-16 hアミリン)(17Arg30Asn32Tyr 17-32 sCT)(配列番号：102); 
(3Ala11,18Arg 1-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：103); 
(アセチル2,7Agy11,18Arg 1-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：104); 
(アセチル2,7Agy 1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：105); 
(イソキャップ-7Ala10Aib11Lys(For)17Aib18Lys(For）5-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：106); 
(イソキャップ-7Ala10Aib11Lys（For）17Aib18Lys（For）5-24sCT)(30-37 hアミリン)(配列番号：107); 
(イソキャップ-7Ala10Aib11Lys（For）17Aib18Lys（For）5-22 sCT)(28,29Pro 28-37のhアミリン)(配列番号：108); 
(イソキャップ-7Ala10Aib11Lys（For）17Aib18Lys（For）5-21 sCT)(28,29Pro 27-37のhアミリン)(配列番号：109); 
(1-7 hアミリン)(LLQQWQKLLQKLKQ(配列番号：110))(28Pro29Arg32Thr 27-37 hアミリン)(配列番号：111); 
(1-7 hアミリン)(LLQQLQKLLQKLKQY(配列番号：112))(28Pro29Arg32Thr 28-37 hアミリン)(配列番号：113); 
(6Ser 1-7h アミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：114); 
(6Val 1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：115); 
(1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-18 sCT)(28Pro29Arg32Thr 27-37 hアミリン)(配列番号：116); 
(1-7 hアミリン)(11Arg 8-17 sCT)(28Pro29Arg32Thr 27-37 hアミリン)(配列番号：117); 
(1-7 hアミリン)(11Arg 8-16 sCT)(27Tyr28Pro29Arg32Thr 27-37 hアミリン)(配列番号：118); 
(1-7 hアミリン)(11Arg 8-15sCT)(27Tyr28Pro29Arg32Thr 27-37 hアミリン)(配列番号：119); 
(1-7 hアミリン)(11Arg 8-14 sCT)(27Tyr28Pro29Arg32Thr 27-37 hアミリン)(配列番号：120); 
(1-7 hアミリン)(11,18Lys（For）8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：121); 
(6DThr 1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：122); 
(アセチル1 7 hアミリン)(11,18Lys(PEG5000) 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：123); 
(アセチル1Ala 1-7 hアミリン)(11Lys(PEG5000) 18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：124); 
(アセチル1Ala 1-7 hアミリン)(11Arg18Lys(PEG5000) 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：125); 
(1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-21 sCT)(19-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：126); 
(1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-21 sCT)(18Leu 18-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：127); 
(1-7 hアミリン)(8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：128); 
(5Ser 1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：129); 
(1-12 hアミリン)(18Arg 13-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：130); 
(1-12 hアミリン)(18Arg 13-24 sCT)(30-37 hアミリン)(配列番号：131); 
(5Ser15Glu18Arg 1-18hアミリン)(19-24 sCT)(30-37 hアミリン)(配列番号：132; 
(6Hse 1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：133); 
(6Ahb 1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：134); 
(6Ahp 1-7hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：135); 
6Thr(OPO3H2) 1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：136); 
(7Ala11,18Arg 5-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：137); 
(1-7 hアミリン)(11,18Orn 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：138); 
(1-7 hアミリン)(11,18Cit 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：139); 
(1-7 hアミリン)(11,18ホモLys 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：140); 
(L-オクチルグリシン-1-7hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：141); 
(N-3,6-ジオキサオクタノイル-1-7-hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：142); 
(シクロ(1-7)-1Asp7Lys11,18Arg 1-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：143); 
(シクロ(2-7)-2Asp7Lys 1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：144); 
(シクロ(2-7) hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：145); 
(1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン-9Anc)(配列番号：146); 
(1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン-L-オクチルグリシン)(配列番号：147); 
(N-イソカプロイル-1-7-hアミリン)(11,18Arg 8-27sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：148); 
(1-7 hアミリン)(11,18ホモArg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：149); 
(1Phe 1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCT)(33-37 hアミリン)(配列番号：150); 
(1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-24 sCT)(32Thr 30-37のhアミリン)(配列番号：151); 
(1-7 hアミリン)(11,18Arg 8-27 sCt)(33-37 hアミリンlin)(配列番号：152); 
(15Glu18Arg 1 - 18 hアミリン)(19-24 sCT)(30-37 hアミリン)(配列番号：153); 
(13Ala14Asp15Phe 1-18 hアミリン)(19-23 sCT)(30-37 hアミリン)(配列番号： 154);および
(2-18 hアミリン)(19-23 sCT)(30-36 hアミリン)(配列番号：155)。上記したもののような本願明細書に記載する組成物および方法に有益ペプチドは、酸またはアミドの形態となり得る。
【０１７４】
ここに提供される構成および方法の使用のためのまた模範的なペプチドは下記のものを含んでいる:
KCNTATCVLGKLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：156)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLPRTNTGSNTY(配列番号：157)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPPTNTGSNTY(配列番号：158)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNVGSNTY(配列番号：159)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLPPTNVGSNTY(配列番号：160)
KCNTATCVLGRLANFLHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：161)
ACNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：162)
KCNAATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：163)
KCNTAACVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：164)
CANLSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：165)
イソカプロイル-STAVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：166)
CSNASTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：167)
CSNLATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：168)
CSNLSACVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：169)
KCNTATCVLGRLSQELHKLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：170)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSGTP(配列番号：171)
CSALSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：172)
AC(Agy) SNLST(Agy) VLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY 配列番号：：: 173)
ac-K(Agy) NTAT(Agy) VLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：174)
イソカプロイル-STAVL(Aib) RLSQELRLQTYPRTNTGSGTP(配列番号：175)
イソカプロイル-STAVLG [k（For）]LSQELH [k（For）]LQTYPRTNTGSGTP(配列番号：176)
イソカプロイル-STAVL(Aib) [k（For）]LSQEL(Aib) [k（For）]LQTYPRTNTGSNTY(配列番号：177)
イソカプロイル-STAVL(Aib) [k（For）]LSQEL(Aib) [k（For）]LQTYPRTNVGSNTY(配列番号：178)
KCNTATCLLQQLQKLLQKLKQYPRTNTGSNTY(配列番号：179)
KCNTASCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：180)
KCNTAVCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：181)
KCNTATCVLGRLSQELHRYPRTNTGSNTY(配列番号：：: 182)
KCNTATCVLG [k（For）]LSQELH [k（For）l] QTYPRTNTGSNTY(配列番号：183)
KCNTA(dThr) CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：184)
KCNTA(dAh) CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：185)
ACACNTATCVLGRLSQELHK(PEG5000) LQTYPRTNTGSNTY(配列番号：186)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：187)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTLLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：188)
KCNTATCVLGKLSQELHKLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：189)
KCNTSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：190)
KCNTATCATQRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：191)
KCNTATCATQRLSQELHRLQTYPRTNVGSNTY(配列番号：192)
KCNTSTCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSNTY(配列番号：193)
KCNTA(hse) CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：194)
KCNTA(Ahb) CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：195)
KCNTA(Ahp) CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：196)
KCNTAT(OPO3H2) CVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：197)
KCNTATCVLG(orn) LSQELH(orn) LQTYPRTNTGSNTY(配列番号：198)
KCNTATCVLG(Cit) LSQELH(Cit) LQTYPRTNTGSNTY(配列番号：199)
KCNTATCVLG(hK) LSQELH(hK) LQTYPRTNTGSNTY(配列番号：200)
L-オクチルグリシンKCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：201)
N-3,6-ジオキサオクタノイル-CNTATCVLGRLSQELHRLQTVPRTNTGSNTY(配列番号：202)
KCNTATCMLGRYTQDFHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：203)
DSNLSTKVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：204)
KDNTATKVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：205)
CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：206)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(9Anc)(配列番号：207)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(L-octylglycine)(配列番号：208)
N-イソカプロイル-KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：209)
KCNTATCVLG(hR) LSQELH(hR) LQTYPRTNTGSNTY(配列番号：210)
FCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：211)
KCNTATCVLGRLSQELH(Cit) LQTYPRTNTGSNTY(配列番号：212)
KCNTATCVLGRLSQELH(orn) LQTYPRTNTGSNTY(配列番号：213)
ICNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：214)
1-オクチルグリシン-CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：215)
イソカプロイル-CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：216)
KCNTATCVLG(Cit) LSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：217)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(4ABU)(配列番号：218)
イソカプロイル-KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(4ABU)(配列番号：219)
KCNTSTCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSEAF(配列番号：220)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPTNVGSEAF(配列番号：221)
KCNTATCVLGRLSRSLHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：222)
KCNTATCVTHRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：223)
KCNTATCVLGRLADFLHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：224)
CNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNT(配列番号：225)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQNFVPRTNTGSNTY(配列番号：226)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSETF(配列番号：227)
ACDTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：228)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSKAF(配列番号：229)
KCDTATCVTHRLAGLLSRSQTYPRTNTGSNTY(配列番号：230)
KCNTATCVLGRLADALHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：231)
KCNTATCVLGRLAAFLHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：232)
SCNTATCVLGRLADFLHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：233)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTMPRTNTGSNTY(配列番号：234)
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTVPRTNTGSNTY(配列番号：235)
KCNTATCVLGRLNEYLHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：236)
SCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：237)
KCNTATCVLGRLTEFLHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：238)
KCNTATCVLGRLAEFLHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：239)
KCNTATCVLGRLTDYLHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：240)
KCNTATCVLGRLAQFLHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：241)
KCNTATCVLGRLADFLHRFQTFPRTNTGSNTY(配列番号：242)
KCNTATCVLGRLADFLHRFHTFPRTNTGSNTY(配列番号：243)
KCNTATCVLGRLADFLHRFQTFPRTNTGSGTP(配列番号：244)
CNTATCVLGRLADFLHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：245)
KCDTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：246)
KCNTATCVLGRLFDFLHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：247)
k CNTATCVLGRLAAALHRLQTYPRTNTGSNTY(SEQ ID NO:248) 
TCDTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(SEQ ID NO:249) 
CSNLSTCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSNTY(SEQ ID NO:250) 
KCNTATCATQRLANELVRLQTYPRTNVGSNTY(SEQ ID NO:251) 
CSNLSTCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(SEQ ID NO:252) 
KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(SEQ ID NO:253).
【０１７５】
いくつかの形態において、アミノ酸配列KCNTATCVLGRLSQELHRLQTYPRTNTGSNTY(配列番号：253）を含む化合物は、開示する方法において特に使用する。
【０１７６】
ここに記載するように、本明細書に開示される組成物および方法で有用なアミリンファミリー・ペプチドホルモンには、アドレノメデュリン（ＡＤＭ）ペプチドもまた含まれる。「アドレノメデュリン」または「ＡＤＭ」とは、ヒト・ペプチドホルモンおよびその変異型の化学種を意味する。ＡＤＭは連続的酵素的切断およびアミド化を通じて、１８５個のアミノ酸プレプロホルモンから生じる。このプロセスは、５２個のアミノ酸生理活性ペプチドの遊離で終了する。ここで開示される組成物および方法において、技術分野で公知の生物学的活性を示すあらゆる公知のＡＤＭペプチド、アナログ、または誘導体を使用してもよい。一の形態において、ＡＤＭペプチド、アナログ、および誘導体は、天然ＡＤＭペプチドの少なくとも１つのホルモン活性を有する。特定の形態において、ＡＤＭペプチド、アナログ、および誘導体は、天然ＡＤＭが特異的に結合できる受容体の作用物質である。
【０１７７】
ここに記載するように、本明細書に開示される組成物および方法で有用なアミリンファミリー・ペプチドホルモンには、カルシトニン（ＣＴ）ペプチドもまた含まれる。「カルシトニン」または「ＣＴ」とは、サケカルシトニン（ｓＣＴ）をはじめとする、ヒト・ペプチドホルモンおよびその化学種変異型を意味する。ＣＴは、より大きなプロホルモンから切断される３２個のアミノ酸のペプチドである。それはアミノ末端に環の形状を取らせる単一ジスルフィド結合を含有する。天然ＣＴペプチドは技術分野で公知であり、機能性ＣＴペプチドアナログ、誘導体、およびハイブリッドについてもまた同様である。ここで開示される組成物および方法で、技術分野で公知の生物学的活性を示す技術分野で公知のあらゆるＣＴペプチド、アナログ、または誘導体を使用してもよい。一の形態において、ＣＴペプチド、アナログ、および誘導体は、天然ＣＴペプチドの少なくとも１つのホルモン活性を有する。特定の形態において、ＣＴペプチド、アナログ、および誘導体は、天然ＣＴが特異的に結合できる受容体の作用物質である。ＣＴペプチドアナログ、誘導体、およびハイブリッドは、技術分野で公知のようにアミド化されてもよく、または酸の形態であってもよい。例示的なＣＴアナログおよび誘導体としては、参照によって本明細書に援用する米国特許第4，652，627号、4，606，856号、4，604，238号、4，597，900号、4，537，716号、4，497，731号、4，495，097号、4，444，981号、4，414，149号、4，401，593号、および4，397，780号で開示されるものが挙げられるが、これに限定されるものではない。
【０１７８】
ここに記載するように、本明細書に開示される組成物および方法で有用なアミリンファミリー・ペプチドホルモンには、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）もまた含まれる。「カルシトニン遺伝子関連ペプチド」または「ＣＧＲＰ」とは、あらゆる生理的形態のヒト・ペプチドホルモンおよびその種変異型を意味する。ＣＧＲＰは３７個のアミノ酸のペプチドであり、カルシトニンｍＲＮＡ前駆体の代案のスプライシングからコードされ発現される。ここで開示される組成物および方法で、技術分野で公知の生物学的活性を示す技術分野で公知のあらゆるＣＧＲＰ、ＣＧＲＰアナログ、またはＣＧＲＰ誘導体を使用してもよい。一形態において、ＣＧＲＰペプチド、アナログ、および誘導体は、天然ＣＧＲＰの少なくとも１つのホルモン活性を有する。特定の形態において、ＣＧＲＰペプチド、アナログ、および誘導体は、天然ＣＧＲＰが特異的に結合できる受容体の作用物質である。ＣＧＲＰペプチド、アナログ、および誘導体は、技術分野で公知のようにアミド化されてもよく、または酸形態であってもよい。例示的なＣＧＲＰアナログおよび誘導体としては、参照によって本明細書に援用する米国特許第4，697，002号；および4，687，839号で開示されるものが挙げられるが、これに限定されるものではない。
【０１７９】
作用物質およびアナログの誘導体もまた提供される方法に含まれ、そこでは個々のアミノ酸の立体化学が１つ以上の特異的部位で（Ｌ）／Ｓから（Ｄ）／Ｒに転化してもよい。提供される方法にはまた、Ａｓｎ、Ｓｅｒおよび／またはＴｈｒ残基のグリコシル化によって変性された、作用物質およびアナログも含まれる。提供される方法で有用な化合物はまた、ここで述べられるペプチド（天然、作用物質、アナログ、および誘導体）の生物学的に活性な断片であってもよい。
【０１８０】
より少ないペプチド特性を含有するアミリンの作用物質およびアナログが、提供される方法に含まれる。このようなペプチド模倣物質としては、例えば次の−ＣＯ−ＮＨ−アミド結合置換の１つ以上が挙げられる。デプシペプチド（−ＣＯ−Ｏ−）、イミノメチレン（−ＣＨ２−ＮＨ−）、ｔｒａｎｓ−アルケン（−ＣＨ＝ＣＨ−）、β−エナミノニトリル（−Ｃ（＝ＣＨ−ＣＮ）−ＮＨ−）、チオアミド（−ＣＳ−ＮＨ−）、チオメチレン（−Ｓ−ＣＨ２−または−ＣＨ２−Ｓ−）、メチレン（−ＣＨ２−Ｃ２−）、およびレトロ−アミド（−ＮＨ−ＣＯ−）。
【０１８１】
提供される方法で使用される化合物は、様々な無機および有機酸および塩基と塩を形成する。このような塩としては、例えばＨＣｌ、ＨＢｒ、Ｈ２ＳＯ４、Ｈ３ＰＯ４、トリフルオロ酢酸、酢酸、ギ酸、メタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、マレイン酸、フマル酸、およびショウノウスルホン酸などの有機および無機酸により調製される塩が挙げられる。塩基によって調製される塩としては、例えばアンモニウム塩、アルカリ金属塩（ナトリウムおよびカリウム塩など）、およびアルカリ土類塩（カルシウムおよびマグネシウム塩など）が挙げられる。特定の形態において、化合物は、酢酸塩、塩酸塩、およびトリフルオロ酢酸塩を形成する。
【０１８２】
ここで提供される組成物および方法で有用なアミリン作用物質にはまた、上述のようなアミリンおよびそのアナログ断片、ならびにその内容をここで参照によって援用するEP 289287で述べられるものも含まれてもよい。アミリン作用物質アナログは、配列番号１に少なくとも６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、または９９％のアミノ酸配列同一性を有する化合物、またはアミリン活性を有するここで具体的に述べるアミリンアナログのいずれかであってもよい。アミリン作用物質にはまた、例えば小型分子化学に基づくものなどの小型化学分子および非ペプチド分子も含まれてもよい。いくつかの形態において、アミリン作用物質は小型化学分子ではない。
【０１８３】
アミリンファミリーペプチドまたはアナログの誘導体もまた、技術分野で公知である。このような誘導体としては、様々な長さのポリエチレングリコール（ＰＥＧ）または脂肪酸鎖（例えばステアリル、パルミトイル、オクタノイルなど）などの１つ以上の水溶性ポリマー分子に共役するアミリンファミリー・ペプチドホルモンおよびアナログ、またはポリ−ｈｉｓ、ポリ−ａｒｇ、ポリ−ｌｙｓ、ポリ−ａｌａなどのポリアミノ酸、およびポリ−ｈｉｓ−ａｌａ、ポリ−ａｒｇ−ａｌａ、およびポリ−ｌｙｓ−ａｌａなどのポリアミノ酸の組み合わせの付加によるものが挙げられる。ペプチドまたはそのアナログの変性は、短いアルキルおよび束縛アルキル（例えば分枝、環式、縮合、アダマンチル）、および芳香族基などの小型分子置換基も含むことができる。ここで述べられるように、このようなポリマー共役および小型分子置換基修正は、ＮまたはＣ末端で、またはペプチド中のアミノ酸残基側鎖で単独で起きてもよい。代案としては、ペプチドに沿って誘導体化の複数部位があってもよい。リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸，またはシステインによる１つ以上のアミノ酸の置換は、誘導体化のための追加的部位を提供するかもしれない。例えば米国特許第5，824，784号および5，824，778号を参照されたい。形態によっては、ペプチドは、１、２，または３個のポリマー分子に共役してもよい。
【０１８４】
例示的な水溶性ポリマー分子は、約５００〜約２０，０００ダルトンの範囲の分子量を有する。場合によっては、水溶性ポリマー分子はアミノ、カルボキシル、またはチオール基に結合し、ＮまたはＣ末端で、またはリジン、アスパラギン酸、グルタミン酸、またはシステイン側鎖で結合されてもよい。代案としては、水溶性ポリマー分子はジアミンおよびジカルボン酸基と結合していてもよい。形態によっては、ペプチドはリジンアミノ酸上のεアミノ基を通じて、１、２、または３個のＰＥＧ分子に結合する。
【０１８５】
誘導体にはまた、アミリンファミリー・ペプチドホルモン、または１つ以上のアミノ酸残基に化学変換があるアナログが含まれてもよい。このような化学変換としては、アミド化、グリコシル化、アシル化、硫酸化、リン酸化、アセチル化、および環化が挙げられる。化学変換は、ＮまたはＣ末端またはペプチド配列内のアミノ酸残基側鎖で単独で起きてもよい。一形態において、これらのペプチドのＣ末端は、遊離−ＯＨまたは−ＮＨ２基を有してもよい。もう１の形態において、、Ｎ末端は、イソブチルオキシカルボニル基、イソプロピルオキシカルボニル基、ｎ−ブチルオキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、イソカプロイル基（ｉｓｏｃａｐ）、オクタニル基、オクチルグリシン基（Ｇ（Ｏｃｔ））、または８−アミノオクタン酸基でキャッピングされていてもよい。一形態において、環化はジスルフィド架橋の形成を通じてであることができる。代案としては、ペプチドに沿って複数の化学変換部位があってもよい。
【０１８６】
「アミリン活性」には、ここでの用法では下で述べられるように、技術分野で公知の活性の少なくとも１つが含まれてもよい。アミリン活性にはまた、食物の嗜好を修正する、過食症を修正する、食物への強い欲求を修正するアミリンの能力、またはそのあらゆる組み合わせが含まれてもよい。一般にアミリン作用物質またはアミリン作用物質アナログは化合物と称されて認識され、それは１つ以上の受容体と直接にまたは間接的に相互作用または結合することで、アミリンの作用を模倣する。それらはまた、アミリノ模倣物質とも称される。
【０１８７】
アミリン作用物質および／またはアナログとしての活性は、側坐核受容体結合アッセイ、ヒラメ筋アッセイ、胃内容排出アッセイをはじめとする様々なスクリーニングアッセイを実施することで、または哺乳類において低カルシウム血症を誘発するまたは食後高血糖を低下させる能力によって、確認および定量できる。アミリン活性のために化合物を試験する方法は、技術分野で公知である。アミリン作用物質を試験するための例示的なスクリーニング方法およびアッセイについては、参照によって本明細書に援用する米国特許第5，264，372号および5，686，411号で述べられる。
【０１８８】
受容体結合アッセイは、化合物が膜結合アミリン受容体と特異的に結合する能力を測定する競合アッセイである。アッセイで使用される膜製剤の出所は、側坐核および周辺領域からの膜を含んでなる前脳基底核である。アッセイされる化合物は、１２５Ｉボルトンハンターラットアミリンがあるこれらの受容体製剤への結合に関して競合する。結合量（Ｂ）がリガンド濃度の対数の関数としてプロットされる競合曲線は、カリフォルニア州サンディエゴのグラフパッド・ソフトウェア（ＧｒａｐｈＰＡＤ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ（ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡ））からの４−パラメーターロジスティック式への非線形回帰（インプロット（ＩＮＰＬＯＴ）プログラム）、またはメリーランド州２０８９２ベセズダのＮＩＨ（ＮＩＨ（Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．２０８９２））からのデリーン（ＤｅＬｅａｎ）らのオールフィット（ＡＬＬＦＩＴ）プログラム（ＡＬＬＦＩＴ、バージョン２．７）による分析を使用して、コンピューターにより分析される。Munsonら，(1980) Anal．Biochem．107：220-239。
【０１８９】
ヒラメ筋中のアミリン作用物質／アナログの生物学的活性アッセイは、以前述べられた方法を使用して実施してもよく(Leightonら，(1988) Nature 335：632-635；Cooperら，(1988) Proc．Natl．Acad．Sci．USA 85：7763-7766)、そこではインシュリンが刺激するグリコーゲン合成を阻害を測定して、アミリン作用物質活性を評価してもよい。手短に述べると、例示的な方法は、１２時間絶食させたオスのウィスター系ラットから調製されたヒラメ筋細片を含む。筋肉の腱をステンレス鋼クリップへの付着前に結紮する。３．５ｍＬのクレブス−リンゲル重炭酸緩衝液、７ｍＭ  Ｎ−２−ヒドロキシエチル−ピペラジン−Ｎ’−２−エタン−スルホン酸、ｐＨ７．４、および５．５ｍＭピルビン酸を含有するエルレンマイアーフラスコ内で、筋肉細片をプレインキュベートする。フラスコを密封し、１９：１（ｖ／ｖ）の比率のＯ２とＣＯ２で連続的にガス処理する。振動水浴内において筋肉をこの培地中で３０分間３７℃でプレインキュベーションした後に、筋肉細片を［Ｕ−１４Ｃ］グルコース（０．５μＣｉ／ｍＬ）およびインシュリン（１００μＵ／ｍＬ）を添加した同一の培地（ピルビン酸を除く）を含有する同様のバイアルに移す。フラスコを密封して、１時間のインキュベーション中、最初の１５分間再度ガス処理する。インキュベーション期間終了後に、筋肉を拭いて液体Ｎ２中で迅速に凍結する。インキュベーション培地中の乳酸濃度は分光光度法で判定でき、グリコーゲン中への［Ｕ−１４Ｃ］グルコース組み込みが測定される。
【０１９０】
胃内容排出速度を測定する方法は、例えばYoungら，(1995) Diabetologia 38：642-648で開示される。フェノールレッド法において、意識のあるラットに胃管によって、メチルセルロースおよびフェノールレッド指示薬を含有する無熱量のゲルを与えた。胃管投与の２０分後、ハロタンを使用して動物を麻酔し、胃を露出して幽門および下部食道括約筋で鉗子固定して除去し、アルカリ性溶液中で切開した。胃内容物は、波長５６０ｎｍの吸光度によって測定されるアルカリ性溶液中のフェノールレッドの強度から導き出してもよい。トリチウム化グルコース法において、意識のあるラットに胃管でトリチウム化グルコース水を与える。ラットを尾部で穏やかに拘束し、リドカインを使用して尾部先端を麻酔する。尾部血液から分離された血漿内のトリチウムを様々な時点で収集し、β計測器内で検出する。試験化合物は、常態では胃管投与の約１分前に投与する。
【０１９１】
アミリン作用物質化合物は受容体結合アッセイにおいて、約１未満〜５ｎＭ程度、いくつかの形態では約１ｎＭ未満、そしていくつかの形態では約５０ｐＭ未満の活性を示すかもしれない。ヒラメ筋アッセイにおいては、アミリン作用物質化合物は約１未満〜１０マイクロモル濃度の程度のＥＣ５０値を示すかもしれない。胃内容排出アッセイにおいて、アミリン作用物質化合物は１００μｇ／ラット未満程度のＥＤ５０値を示す。
【０１９２】
ここで述べられるペプチドは、例えば自動化または半自動化ペプチド合成機、標準組み換え技術または両者を使用して、技術分野で公知の化学ペプチド合成技術を使用して調製してもよい。同様に、標準的な化学的、生化学的、または生体内（ｉｎ  ｖｉｖｏ）方法を使用して、ペプチド誘導体を生成してもよい。
【０１９３】
ペプチドは、従来の技術に従って溶液中または固体担体上で合成されてもよい。様々な自動化された合成機が市販され、公知のプロトコルに従って使用してもよい。例えばStewartら，(1984) Solid Phase Peptide Synthesis、2d．ed．，Pierce Chemical Co．；Tamら，(1983) J．Am．Chem．Soc．105： 6442；Merrifield(1986) Science 232： 341-347；およびBaranyら，(1979) The Peptides、Grossら，eds．，Academic Press、NY、1-284を参照されたい。固相ペプチド合成は、自動化または半自動化ペプチド合成機を使用して実施してもよい。典型的にこのような技術を使用して、樹脂上の生長するペプチド鎖に付着するα−Ｎ−カルバモイル保護されるアミノ酸およびアミノ酸は、ジイソプロピルエチルアミンなどの塩基の存在下で、ジシクロヘキシルカルボジイミドおよび１−ヒドロキシベンゾトリアゾールなどのカップリング剤の存在下で、ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリジノンまたは塩化メチレンなどの不活性溶剤中において室温でカップリングされる。α−Ｎ−カルバモイル保護基はトリフルオロ酢酸またはピペリジンなどの試薬を使用して得られたペプチド−樹脂から除去され、ペプチド鎖に付加する次の所望のＮ保護アミノ酸でカップリング反応が繰り返される。適切なＮ−保護基は技術分野でよく知られており、ｔ−ブチルオキシカルボニル（ｔＢｏｃ）およびフルオレニルメトキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）が例として挙げられる。例えば固相ペプチド合成は、ＮＭＰ／ＨＯＢｔ（オプション１）システムおよびキャッピングを伴うｔＢｏｃまたはＦｍｏｃ化学を使用して、例えばカリフォルニア州フォスターシティのアプライド・バイオシステムズ・インコーポレーテッド（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  Ｉｎｃ．（Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，ＣＡ））からのモデル４３０Ａのような自動化されたペプチド合成機により実施してもよい（Applied Biosystems User’s Manual for the ABI 430A Peptide Synthesizer，Version 1．3B July 1，1988，section 6：49-70参照）。ペプチドはまた、ケンタッキー州ルーイビルのアドバンスド・ケムテック（Ａｄｖａｎｃｅｄ  ＣｈｅｍＴｅｃｈ（Ｌｏｕｉｓｖｉｌｌｅ，ＫＹ））からの合成機（モデルＭＰＳ３５０）を使用してアセンブルしてもよい。ペプチドは例えばマサチューセッツ州ミルフォードのウォーターズ・コーポレーション（（Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐ．（Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ））からのウォーターズ（Ｗａｔｅｒｓ）（登録商標）ＤＥＬＴＡ−ＰＲＥＰ（商標）３０００システム、およびカリフォルニア州ヘスペリアのグレース・バイダック（Ｇｒａｃｅ  Ｖｙｄａｃ）（Ｈｅｓｐｅｒｉａ，ＣＡ））からのＣ４、Ｃ８、またはＣ１８分取カラム（１０μ、２．２×２５ｃｍ）を使用して、ＲＰ−ＨＰＬＣ（分取および分析）によって精製してもよい。ペプチドは容易に合成され、次に特定の活性があるペプチドを同定するようにデザインされたアッセイでスクリーニングできる。ペプチドを合成および精製するその他の方法は、当業者には公知である。
【０１９４】
代案としては、ここで開示されるペプチドを技術分野でよく知られている組み換え技術によって生成してもよい。例えばSambrookら，(1989) Molecular Cloning： A Laboratory Manual、2d ed．，Cold Spring Harbor、NYを参照されたい。組み換え技術によって生成されたペプチドは、ポリヌクレオチドから発現されてもよい。当業者はこのような様々なペプチド断片をコードするＤＮＡおよびＲＮＡをはじめとするポリヌクレオチドが、コドン使用頻度の縮重度を考慮して野生型ｃＤＮＡから得られてもよく、または必要に応じて改変されてもよいことを理解するであろう。これらのポリヌクレオチド配列は、微生物宿主においてＲＮＡの転写および翻訳を容易にするコドンを組み込んでもよい。このような製造順序は、技術分野でよく知られている方法に従って容易に構築できる。上のポリヌクレオチドはまた、任意にＮ末端メチオニル残基をコードしてもよい。上のポリヌクレオチドはまた、任意に適切なアミド形成のためのＣ末端グリシル残基をコードしてもよい。ここで提供される組成物および方法で有用な非ペプチド化合物は、技術分野で公知の方法によって調製してもよい。例えばホスフェート含有アミノ酸およびこのようなアミノ酸を含有するペプチドは、技術分野で公知の方法を使用して調製してもよい。例えばBartlettら，(1986) Bioorg．Chem．14：356-377を参照されたい。
【０１９５】
例えば細菌、酵母、藻類、昆虫細胞、植物細胞、および哺乳類および鳥類細胞などの動物細胞をはじめとする多様な細胞タイプを使用して、ペプチドコード配列を包含し、発現してもよい。組み換えバクテリオファージ、プラスミドまたはコスミドＤＮＡ発現ベクターで形質転換された細菌などの微生物と、酵母発現ベクターで形質転換された酵母と、ウイルス発現ベクター（例えばバキュロウイルス（ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ））に感染した昆虫細胞系と、ウイルス発現ベクター（例えばカリフラワーモザイクウイルス（ＣａＭＶ）、タバコモザイクウイルス（ＴＭＶ））で形質移入され、または細菌発現ベクター（例えばＴｉまたはｐＢＲ３２２プラスミド）で形質転換された植物細胞系、または動物細胞系をはじめとするが、これに限定されるものではない、多様な発現ベクター／宿主系を使用してもよい。組み換えタンパク質生成で有用な哺乳類細胞および細胞系としては、ＶＥＲＯ（アフリカミドリザル腎臓）細胞、ＨｅＬａ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞系、ＣＯＳ細胞（ＣＯＳ−７など）、ＷＩ３８（ヒト肺線維芽細胞）、幼若ハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、ＨｅｐＧ２、３Ｔ３、ＲＩＮ、マディン−ダービーイヌ腎臓上皮（ＭＤＣＫ）細胞、Ａ５４９、ＰＣ１２、Ｋ５６２、および２９３細胞が挙げられるが、これに限定されるものではない。ポリペプチド組み換え発現のための例示的なプロトコルについては、技術分野でよく知られている。
【０１９６】
宿主細胞系統は、発現ペプチドを処理する、またはペプチド活性を提供するのに有用な特定の翻訳後変性を生じる特定能力について選択してもよい。このようなポリペプチドの変性としては、アセチル化、カルボキシル化、グリコシル化、リン酸化、脂質化、アシル化、およびアミド化、例えばカルボキシ末端アミド化が挙げられるが、これに限定されるものではない。ポリペプチドから「プレプロ」を切断する翻訳後処理はまた、正しい挿入、折りたたみおよび／または機能のためにも重要かもしれない。ＣＨＯ、ＨｅＬａ、ＭＤＣＫ、２９３、ＷＩ３８などの異なる宿主細胞は、このような翻訳後活性のための特異的細胞機構および特徴的な機序を有し、導入異質タンパク質の正しい変性および処理を確実にするように選択されてもよい。
【０１９７】
ここで述べられるペプチドは、自動化されたペプチド合成および組み換え技術双方の組み合わせを使用して生成されてもよい。例えばペプチドは、欠失、置換、およびペグ化による挿入をはじめとする変性の組み合わせを含有してもよい。このようなペプチドは、段階的に生成されてもよい。例えば第１段階において、欠失、置換、挿入の変性、およびそのあらゆる組み合わせを含有する中間体ペプチドは、述べられたように組み換え技術によって生成されてもよい。次に任意の精製ステップ後、（例えばカリフォルニア州サンカルロスのネクター・セラピューティックス（Ｎｅｋｔａｒ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（Ｓａｎ  Ｃａｒｌｏｓ、ＣＡ））からの）適切なペグ化試薬による化学修飾を通じて中間体ペプチドをペグ化して、所望のペプチドを生じさせる。ペプチドのアミド化もまた、段階的に実施してもよい。当業者は、欠失、置換、挿入、誘導から選択される変性、および技術分野でよく知られておりここで考察するその他の変性手段の組み合わせを含有するペプチドに、上述の手順を一般化して適用してもよいことを理解するであろう。
【０１９８】
ここで述べられるペプチドはまた、例えばU．S．Application Publication Nos．2003-0191291、2003-0208046、および2004-0115774で述べられるものをはじめとする技術分野で公知の化学ライゲーションスキームを使用して生成されてもよい。化学ライゲーションとは、その各部分が、それぞれがユニークにもう一方と非可逆的共有結合を形成できる相互に反応性の官能基を持つ、２つの化学部分の共有結合を伴う化学選択的反応を指す。第１および第２の構成要素上に存在するユニークな相互に反応性の官能基を使用してライゲーション反応を化学選択的にできる。例えばペプチドおよびポリペプチドの化学ライゲーションは、適合性でユニークな相互に反応性のＣ末端およびＮ末端アミノ酸残基を持つ、ペプチドまたはポリペプチドセグメントの化学選択的反応を伴う。化学ライゲーションは、（１）ユニークに反応性のＣ末端基を持つ第１のペプチドまたはポリペプチドと、（２）ユニークに反応性のＮ末端基を持つ第２のペプチドまたはポリペプチドとの共有結合ライゲーションを含み、その中ではＣ末端とＮ末端反応性基が間に非可逆的共有結合を形成する。それはまた、Ｎ末端とＮ末端の、そしてＣ末端とＣ末端のライゲーションも含む。特に化学ライゲーションには、保護されないペプチドセグメントのライゲーションに適用できるあらゆる化学選択的反応化学が含まれる。いくつかの異なる化学反応がこの目的のために利用されており、例としては天然化学ライゲーション、オキシム形成化学ライゲーション、チオエステル形成ライゲーション(Schnolzerら，(1992) Science 256：221-225；Gieselmanら，(2001) Org．Lett．3：1331-1334)、チオエーテル形成ライゲーション(Englebretsenら，(1995) Tot．Leffs．36：8871-8874)、ヒドラゾン形成ライゲーション(Gaertnerら,(1994) Bioconj．Chem．5：333-338)、およびチアゾリジン形成ライゲーションおよびオキサゾリジン形成ライゲーション(Zhangら，(1998) Proc．Natl．Acad．Sci．USA 95：9184-9189；PCT Publication No．WO 95/00846；米国特許第5，589，356号)；およびシュタウディンガーアミド形成化学ライゲーション(Saxonら，(2000) Org．Leff．2：2141-2143)が挙げられる。
【０１９９】
特定のライゲーション化学反応のための反応条件は、一般にライゲーションのために用いられるペプチドまたはポリペプチドセグメントの所望の相互作用を維持するように選択される。例えばｐＨおよび温度、ライゲーション構成要素の水溶性、第１のセグメントと第２のセグメントの比率、反応混合物の含水量および組成物を変動させてライゲーションを最適化できる。ライゲーションセグメントを異なる程度に可溶化する試薬の添加または除外をさらに使用して、所望のライゲーション反応の特異性および速度を調節し、すなわちペプチドまたはポリペプチドセグメントの溶解性を操作することで反応性基の曝露および提示を調節してもよい。反応条件は、所望の化学選択的反応生成物をアッセイして１つ以上の内部および／または外部対照と比較して、容易に判定される。これらの方法は、ライゲーション部位に天然アミド結合を発生させるための頑強な方法であることが立証されている。
【０２００】
合成のために利用されるペプチド、ペプチドまたはポリペプチドセグメントのデザインと併せて、ポリペプチド主鎖が構築される。ペプチドおよびポリペプチド主鎖合成において有用な方法については、例えば米国特許出願番号2004-0138412（拡張天然化学ライゲーション）、2003-0208046（擬天然化学ライゲーション）、2005-0261473（望まれない副生物形成を排除するための化学ライゲーションにおける酸性Ｃ末端アミノ酸のためのカルボキシ保護ストラテジー）、2005-0064538および2005-0113563（ライゲーション効率の改善された天然化学ライゲーションおよび３つ以上の構成要素による化学ライゲーション）、PCT Application Publication Nos．WO2004/105685（置換可能なリンカーを使用した水性適合性固相化学ライゲーション）およびWO2004/060925（水溶性ポリマー性保護基による多重ポリマーライゲーションおよび所望の付加物によるそれらの置換）、および米国特許第6，307，018号および6，184，344号（天然化学ライゲーション）、6，326，468号（固相天然化学ライゲーション）、6，217，873号（ポリオキシム化合物）、6，174，530号（均質ポリオキシム組成物）、6，001，364号（ヘテロ−ポリオキシム化合物）、および6，451，543号（脂質−マトリックス補助合成）で述べられる。一般に化学ライゲーションによるペプチドまたはポリペプチド主鎖の合成は、様々なポリペプチド主鎖セグメントをアセンブルするために選択されたライゲーション化学に基づいて選択された適切なライゲーション部位と、特定の標的ペプチドについて選択された可逆的（または切断可能）ポリマー付着化学と、特定のポリマー付着部位の選択を伴う。天然化学ライゲーションが用いられる場合、システインライゲーション部位は、適切な天然のシステイン残基について標的ポリペプチド主鎖アミノ酸配列をスキャニングして判定される。「拡張天然化学ライゲーション」が用いられる場合、ライゲーション部位は、頑強なライゲーションを可能にする、適切な天然のライゲーション部位接合部について標的ポリペプチド主鎖アミノ酸配列スキャニングして選択できる。拡張天然化学ライゲーションは、システイン残基におけるライゲーションに限定されないので、あらゆる数の残基がライゲーション部位接合部としての役割を果たしてもよい。場合によっては、天然および拡張天然化学ライゲーションの組み合わせがデザインの一部であってもよい。
【０２０１】
一形態において、天然化学ライゲーションを使用して、全長ポリペプチド鎖の一部または全部を発生させる。天然のペプチド主鎖中に存在するシステインは、化学ライゲーション部位として使用できる。代案としては、所望のライゲーション接合部が適切なシステインを欠いている場合、その部位で天然化学ライゲーションを可能にするように、そのポジションにある非システインアミノ酸をシステインによって置換でき、またはシステインを挿入できる。所望ならば、新たに導入されたシステインをそのポジションの元のアミノ酸に対応する擬アミノ酸残基に転換できる。天然化学ライゲーション部位におけるシステインの変換による擬アミノ酸の形成は「擬天然化学ライゲーション」と称される。代案としては、システインがポリマー保護基変性のための部位に導入される場合、標的ポリペプチド中の変性が望まれない全てのその他のシステインが保護されるという条件で、側鎖チオールをチオール反応性水溶性ポリマーコンストラクトの付着のために活用できる。もう１の形態において、、拡張天然化学ライゲーションを利用して、全長ポリペプチド鎖の一部または全部を発生させる。天然化学ライゲーションなどのチオエステル媒介ライゲーションのために使用されるペプチドは標準プロトコルに従っても作成でき、例えば米国特許第6，307，018号および6，184，344号を参照されたい。
【０２０２】
ここでの用法において、「精製ペプチド」という用語は、その他の構成要素から単離された組成物を指すことが意図され、そこではペプチドはその天然に得られる状態と比べてあらゆる程度に精製される。したがって精製ペプチドは、それが天然に存在する環境と関係なくペプチドとも称される。一般に「精製された」とは、分画されて様々なその他の構成要素が除去され、実質的に生物学的活性を保持するペプチド組成物を指す。「実質的に精製された」という用語が使用される場合、この命名は、組成物の約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％以上をペプチドが含むような、その中でペプチドが組成物の主要構成要素を含む組成物を指す。
【０２０３】
ここで述べられる方法によって発生したペプチドを精製することが望ましいかもしれない。ペプチド精製技術は当業者によく知られている。これらの技術は、１つのレベルで、ポリペプチドおよび非ポリペプチド画分への細胞環境の粗分画を伴う。その他のタンパク質からポリペプチドを分離した後、クロマトグラフィーおよび電気泳動技術を使用して当該ポリペプチドをさらに精製し、部分的または完全な精製（または均質性への精製）を達成してもよい。精製技術としては、例えば硫酸アンモニウム、ＰＥＧ、抗体などでの沈殿と、熱変性とそれに続く遠心分離と、イオン交換、ゲル濾過、逆相、ヒドロキシルアパタイト、および親和性クロマトグラフィーなどのクロマトグラフィーステップと、等電点電気泳動と、ゲル電気泳動法と、これらとその他の技術の併用とが挙げられる。純粋ペプチドの調製に特に適した分析的方法は、イオン交換クロマトグラフィー、排除クロマトグラフィー、ポリアクリルアミドゲル電気泳動法、および等電点電気泳動である。ペプチドを精製する特に効率的な方法は、逆相ＨＰＬＣと、それに続く液体クロマトグラフィー／質量分析法（ＬＣ／ＭＳ）およびマトリックス補助レーザー脱離イオン化（ＭＡＬＤＩ）質量分析法による精製品の特性決定である。純度の追加的確認は、アミノ酸分析を判定して得られる。一般に技術分野で公知のように、様々な精製ステップを行う順序を変更しても、または特定のステップを除外しても、なおも実質的に精製されたタンパク質またはペプチド調製のための適切な方法がもたらされると考えられる。
【０２０４】
ペプチドが常にそれらの最も精製された状態で提供される一般要件はない。確かに実質的に精製度のより低い生成物が、特定の形態で用途を有することが考察される。部分的精製は、より少ない精製ステップの組み合わせを使用して、または同じ一般精製スキームの異なる形態を使用して達成されてもよい。例えばＨＰＬＣ装置を使用して実施されたカチオン交換カラムクロマトグラフィーが、一般に低圧クロマトグラフィーシステムを使用した同一技術よりも大きな精製「倍数」をもたらすであろうことが理解される。より低い相対精製度を示す方法は、タンパク質生成物の全回収率、またはペプチド活性の維持に利点を有するかもしれない。いくつかの形態において、アニオン交換と免疫親和性クロマトグラフィーの組み合わせを使用して、ここで述べられる精製ペプチド組成物を生成してもよい。
【０２０５】
アミリン、アミリン作用物質、アミリンアナログ、およびアミリン誘導体（この節で「アミリン化合物」と称される）は、単回または多回用量のどちらかで、単独でまたは薬学的に許容可能なキャリアまたは賦形剤と組み合わせて投与されてもよい。したがって薬学的に許容可能な希釈剤、保存料、溶解剤、乳化剤、アジュバント、および／またはアミリン化合物送達に有用なキャリアと共に、治療的または予防的に有効量の少なくとも１つのアミリン化合物または薬学的に許容可能なその塩を含んでなる医薬組成物が提供される。これらの医薬化合物は、薬学的に許容可能なキャリアまたは希釈剤、ならびにRemington’s Pharmaceutical Sciences by E． W． Martinで開示されるものなどの従来の技術に従ったあらゆるその他の公知のアジュバントおよび賦形剤と共に調合されてもよい。Wangら，(1988) Journal of Parenteral Science and Technology Technical Report No．10，Supp．42：2Sもまた参照されたい。アミリンまたはアミリン作用物質の例示的な調合物は、参照によって本明細書に援用する米国特許第6，410，511号および米国特許出願番号2003-0092606にある。
【０２０６】
ここで提供される例示的な一用途は、過食症の治療または予防のために、このようなアミリン化合物を末梢性に投与することである。ここで提供される別の例示的な用途は、食物の嗜好または食物への強い欲求を修正するために、このようなアミリン化合物を末梢性に投与することである。ここで提供される別の例示的な用途は、対象の代謝率を修正するために、このようなアミリン化合物を末梢性に投与することである。
【０２０７】
一般に化合物は、患者に投与するための安定した安全な医薬組成物に調合されてもよい。ここで述べられる方法で使用するために考察される医薬製剤は、およそ０．０１〜６．０％（ｗ／ｖ）または０．０５〜１．０％の化合物と、最終組成物のｐＨを約３．０〜約７．０にするおよそ０．０２から０．５％（ｗ／ｖ）の酢酸、リン酸、クエン酸またはグルタミン酸緩衝液と、およそ１．０〜１０％（ｗ／ｖ）の炭水化物または多価アルコール等張化剤、そして任意にｍ−クレゾール、ベンジルアルコール、メチル−、エチル−、プロピル−およびブチル−パラベン、およびフェノールよりなる群から選択されるおよそ０．００５〜１．０％（ｗ／ｖ）の保存料を含んでなる。このような保存料は、一般に調合されるペプチドが多回使用製品に含まれる場合に含まれる。
【０２０８】
特定の形態において、医薬製剤は、例えば約０．０１％〜約９８％（ｗ／ｖ）、または約１〜約９８％（ｗ／ｖ）、または８０％〜９０％（ｗ／ｖ）、または約０．０１％〜約５０％（ｗ／ｖ）、またはこの形態では約１０％〜約２５％（ｗ／ｖ）などの一連の濃度の化合物を含有してもよい。十分な量の注射用水を使用して所望の溶液濃度を得てもよい。
【０２０９】
所望ならば、塩化ナトリウムなどの追加的等張化剤、ならびにその他の公知の賦形剤もまた存在してよい。場合によってはこのような賦形剤は、調合物の全体的張性の維持に有用である。賦形剤はここで述べる調合物中に様々な濃度で含まれてもよい。例えば賦形剤は、約０．０２％〜約２０％（ｗ／ｗ）、約０．０２％〜０．５％（ｗ／ｗ）、約０．０２％〜約１０％（ｗ／ｗ）、または約１％〜約２０％（ｗ／ｗ）の濃度範囲で含まれてもよい。さらに調合物それ自体と同様に、賦形剤は固体（粉末を含む）、液体、半固体またはゲルの形態で含まれてもよい。
【０２１０】
ここで述べられるように、例えば水または水性／有機溶剤混合物または懸濁液などの多様な液体ビヒクルが、本ペプチド調合物中で使用するのに適している。医薬製剤は例えば固体、半固体または液体などの様々な形態で構成されていてもよい。「固体」という用語は、ここでの用法において、例えば粉末および凍結乾燥調合物をはじめとする、この用語の全ての通常の使用を包含することを意味する。ここで述べられる調合物は凍結乾燥されてもよい。
【０２１１】
緩衝液、緩衝液溶液、および緩衝された溶液と言う用語は、水素イオン濃度またはｐＨに言及して使用される場合、酸またはアルカリ添加時の、または溶剤による希釈時のｐＨ変化に抵抗するシステム、特に水性溶液の能力を指す。酸または塩基添加時のｐＨ変化が小さい緩衝された溶液の特徴は、弱酸と弱酸の塩、または弱塩基と弱塩の塩のどちらかの存在である。前者システムの例は、酢酸と酢酸ナトリウムである。添加されるヒドロニウムまたはヒドロキシルイオンの量が、緩衝液システムがそれを中和する能力を超えない限りｐＨ変化はわずかである。いくつかの形態において、アミリン化合物が、例えばｐＨ約３．０〜約８．０、ｐＨ約３．５〜約７．４、ｐＨ約３．５〜約６．０、またはｐＨ約３．５〜約５．０の等張緩衝液溶液などの水性キャリア中に懸濁している。特定の形態において、調合物のｐＨが約３．５〜約５．０、または約３．５〜約６．５、または約３．７〜約４．３、または約３．８〜約４．２の範囲に維持される。特定のｐＨは約４．０であってもよい。理論による拘束を求めるものではないが、医薬製剤のｐＨが５．５を超えるいくつかの形態において、貯蔵寿命が約２年未満になるようにペプチドの化学分解が加速されるかもしれないと現在理解されている。
【０２１２】
有用な緩衝液としては、クエン酸ナトリウム／クエン酸、およびリン酸ナトリウム／リン酸、および酢酸ナトリウム／酢酸緩衝液が挙げられる。特定の形態において、アミリン化合物の緩衝液は、酢酸緩衝液（例えば最終調合物濃度約１〜５ｍＭ、例えば１．５ｍＭから約６０ｍＭ）、リン酸緩衝液（例えば最終調合物濃度約１〜５ｍＭ、例えば１．５ｍＭから約３０ｍＭ）またはグルタミン酸緩衝液（例えば最終調合物濃度が約１〜５ｍＭ、例えば１．５ｍＭから約６０ｍＭ）である。いくつかの形態において、緩衝液は酢酸緩衝液（例えば最終調合物濃度約５ｍＭ〜約３０ｍＭ）である。
【０２１３】
本調合物には安定剤が含まれてもよいが、重要なことには必ずしも必要ない。しかし含める場合は、本調合物の実行において有用な安定剤は炭水化物または多価アルコールである。本調合物の実行において有用な適切な安定剤は、およそ１．０〜１０％（ｗ／ｖ）の炭水化物または多価アルコールである。多価アルコールおよび炭水化物は、それらの主鎖中に同一の特徴、すなわちタンパク質安定化に関与する−ＣＨＯＨ−ＣＨＯＨ−を共有する。多価アルコールとしては、ソルビトール、マンニトール、グリセロール、およびポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のような化合物が挙げられる。これらの化合物は直鎖分子である。他方、マンノース、リボース、スクロース、フルクトース、トレハロース、マルトース、イノシトール、および乳糖などの炭水化物は、ケトまたはアルデヒド基を含有してもよい環式分子である。これらの２つのクラスの化合物は、高温および凍結解凍または凍結乾燥処理によって引き起こされる変性に対して、タンパク質を安定化するのに効果的なことが実証されている。対象が糖尿病を有する形態において、適切な炭水化物としては、ガラクトース、アラビノース、乳糖または糖尿病患者に悪影響を及ぼさないあらゆるその他の炭水化物、すなわち代謝されて許容できないほど高濃度の血中グルコースを形成しない炭水化物が挙げられる。このような炭水化物は、糖尿病に適しているとして技術分野でよく知られている。スクロースおよびフルクトースは、非糖尿病対象において化合物と共に使用するのに適する（例えば肥満症または過食症の治療）。
【０２１４】
特定の形態において、安定剤が含まれる場合、化合物はソルビトール、マンニトール、イノシトール、グリセロール、キシリトール、およびポリプロピレン／エチレングリコールコポリマーなどの多価アルコール、ならびに分子量２００、４００、１４５０、３３５０、４０００、６０００、および８０００の様々なＰＥＧによって安定化される。マンニトールは特定の多価アルコールの例である。ここで述べられる凍結乾燥調合物の別の有用な特徴は、それらの安定性を維持する役目を果たすのと同じ調合物構成要素による、凍結乾燥調合物の張性の維持である。マンニトールはこの目的で使用される特定の多価アルコールである。
【０２１５】
米国薬局方（ＵＳＰ）は、多回用量容器中に含有される製剤には、静菌剤または静真菌剤濃縮物中の抗微生物剤が添加されなくてはならないと述べる。それらは使用時に適切な濃度で存在して、皮下針およびシリンジで、またはペン型注射器などのその他の侵襲的送達手段を使用して内容の一部を取り出す間に、製剤中に不注意に導入される微生物の増殖を防止しなくてはならない。抗微生物剤は、調合物のその他の全構成要素との適合性を確実にするために評価されるべきであり、それらの活性は、１つの調合物中で効果的な特定薬剤が、別の調合物中で無効でないことを確実にするために、完全な調合物中で評価されるべきである。特定の抗微生物剤が１つの調合物中で効果的であるが、別の調合物では効果的でないことを見いだすことは珍しいことではない。
【０２１６】
保存料は、一般的な薬学的意味において微生物の生育を防止する物質であり、この目的で医薬製剤に添加されて、結果として生じる微生物による調合物腐敗を回避してもよい。保存料の量は多くないものの、それでもなおそれはペプチドの全体的安定性に影響できる。微生物活動の防止は、例えばパラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどの様々な抗細菌および抗真菌剤によってもたらすことができる。医薬組成物中で使用される保存料は０．００５〜１．０％（ｗ／ｖ）の範囲であることができるが、単独またはその他のと組み合わされた各保存料の典型的な範囲は次のとおりである。ベンジルアルコール（０．１〜１．０％）、またはｍ−クレゾール（０．１〜０．６％）、またはフェノール（０．１〜０．８％）、またはメチル（０．０５〜０．２５％）とエチル−またはプロピル−またはブチル−（０．００５％〜０．０３％）パラベンとの組み合わせ。パラベンはパラヒドロキシ安息香酸の低級アルキルエステルである。各保存料の詳細な説明は“Remington's Pharmaceutical Sciences”ならびにPharmaceutical Dosage Forms： Parenteral Medications，Vol. 1，2nd ed.，Avisら， Ed.，Mercel Dekker，New York，N.Y.(1992)に記載されている。
【０２１７】
限定する意図はないが、２５，２８，２９Ｐｒｏ−ｈ−アミリンであるプラムリンチドは、液体形態にあるとき、ガラス容器内でガラスに吸着する傾向を有さないので、医薬製剤をさらに安定化する界面活性剤が必要でない。しかし液体形態にあるときこのような傾向を有する化合物については、それらの調合物中で界面活性剤を使用すべきである。次にこれらの調合物を凍結乾燥してもよい。界面活性剤は疎水性中断および塩橋分離の双方によって、タンパク質変性引き起こすことが多い。界面活性剤部分とタンパク質上の反応性部位の間の強力な相互作用のために、比較的低濃度の界面活性剤が強力な活性を発揮するかもしれない。しかしこの相互作用の賢明な使用は、界面または表面変性に対してタンパク質を安定化できる。ペプチドをさらに安定化できる界面活性剤が、任意に全調合物の約０．００１〜０．３％（ｗ／ｖ）の範囲で存在してもよく、ポリソルベート８０（すなわち、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート）、ＣＨＡＰＳ（登録商標）（すなわち、３−［（３−クロラミドプロピル）ジメチルアンモニオ］１−プロパンスルホネート）、ブリッジ（ＢＲＩＪ）（登録商標）（例えば（ポリオキシエチレン（２３）ラウリルエーテルであるブリッジ（Ｂｒｉｊ）３５）、ポロキサマー、または別の非イオン性界面活性剤などが挙げられる。
【０２１８】
選択される等張化剤次第で、塩化ナトリウムまたはその他の塩を添加して、医薬製剤の張性を調節することもまた望ましいかもしれない。しかしこれは任意であり、選択される特定の調合物に依存する。非経口調合物は典型的に等張または実質的に等張であってもよい。
【０２１９】
非経口製品のための適切なビヒクルは水である。非経口投与に適した質の水は、蒸留または逆浸透のどちらかによって調製できる。注射用水が、医薬品注射用調合物中で使用するのに好ましい水性ビヒクルである。
【０２２０】
医薬製剤中にその他の成分が存在することも可能である。このような追加的成分としては、例えば湿潤剤、乳化剤、油、抗酸化剤、増量剤、張性調節剤、キレート剤、金属イオン、油性ビヒクル、タンパク質（例えばヒト血清アルブミン、ゼラチンまたはタンパク質）、および両性イオン（例えばアミノ酸などのベタイン、タウリン、アルギニン、グリシン、リジン、およびヒスチジン）が挙げられる。さらにポリマー溶液、またはポリマーとの混合物は、ペプチドの制御放出の機会を提供する。このような追加的成分は、もちろんここで提供する医薬製剤の全体的安定性に悪影響を及ぼすべきでない。
【０２２１】
特に液体が水性の場合、完全に不活性であり、またはそれが含有する液体に何らかの様式で影響しない容器はないので、容器もまた注射調合物の不可分の一部であり、構成要素と見なしてもよい。したがって特定の注射のための容器の選択は、容器組成物、ならびに溶液、およびそれが受ける処理の考察に基づくべきである。必要ならば例えばホイートンガラス・カンパニー（Ｗｈｅａｔｏｎ  Ｇｌａｓｓ  Ｃｏ．）からのホイートン（Ｗｈｅａｔｏｎ）タイプＩホウケイ酸塩ガラス＃３３（ホイートンタイプＩ−３３）またはその同等物などのホウケイ酸塩ガラスの使用によって、バイアルのガラス表面へのペプチドの吸着もまた最小化できる。製造のために許容可能な同様のホウケイ酸塩ガラスバイアルおよびカートリッジのその他の供給業者としては、キンベルガラス・カンパニー（Ｋｉｍｂｅｌ  Ｇｌａｓｓ  Ｃｏ．）、ウェスト・カンパニー（Ｗｅｓｔ  Ｃｏ．）、ブンダーガラス有限責任会社（Ｂｕｅｎｄｅｒ  Ｇｌａｓ  ＧＭＢＨ）、およびフォーマ・ビトラム（Ｆｏｒｍａ  Ｖｉｔｒｕｍ）が挙げられる。化合物の生物学的および化学的特性は、ホイートンタイプＩ−３３ホウケイ酸塩血清バイアル内で、５％マンニトールおよび０．０２％トウィーン８０の存在下で化合物の０．１ｍｇ／ｍＬおよび１０ｍｇ／ｍＬの最終濃度に調合および凍結乾燥することで、安定化してもよい。
【０２２２】
多回用量バイアル内に皮下シリンジから針を導入して、針が引き抜かれたら即座に再シール形成を提供できるように、各バイアルの開口端は典型的にアルミニウム帯によって定ポジションに保持されるゴム栓クロージャーで密封される。ウェスト（Ｗｅｓｔ）４４１６／５０、４４１６／５０（テフロン仕上げ）および４４０６／４０、アボット（Ａｂｂｏｔｔ）５１３９またはあらゆる同等の栓などのガラスバイアルのための栓が、注射用医薬品のためクロージャーとして使用できる。これらの栓はペプチドならびにその他の調合物構成要素と適合性である。これらの栓は、例えば栓が少なくとも約１００回の注射に耐えるような患者使用パターンを使用して試験されると、栓完全性試験に合格する。代案としてはペプチドは、引き続く水戻しのためのバイアル、シリンジまたはカートリッジ内で凍結乾燥できる。ここで提供される液体調合物は、１または２チャンバーカートリッジ、または１または２チャンバーシリンジ内に充填できる。
【０２２３】
上述の医薬製剤構成要素のそれぞれは、技術分野で公知であり、ここでその全体を参照によって援用するPharmaceutical Dosage Forms： Parenteral Medications，Vol. 1，2nd ed.，Avisら， Ed.，Mercel Dekker，New York，N.Y. 1992で述べられる。
【０２２４】
上の液体調合物の製造プロセスは、一般に配合、無菌濾過、および充填ステップを伴う。配合手順は、成分の特定順序での溶解（例えば保存料とそれに続く安定剤／張性剤、緩衝液、およびペプチド）または同時溶解を伴う。
【０２２５】
例えば非非経口の代案の調合物は、滅菌を必要としないかもしれない。しかし滅菌が所望されまたは必要ならば、ここで提供されるペプチド医薬製剤を開発する上であらゆる適切な滅菌プロセスを使用できる。典型的な滅菌プロセスとしては、濾過、蒸気（湿式加熱）、乾式加熱、ガス（例えば酸化エチレン、ホルムアルデヒド、塩素二酸化、酸化プロピレン、β−プロピオラクトン、オゾン、クロロピクリン、過酢酸臭化メチルなど）、放射線源への曝露、および無菌取り扱いが挙げられる。濾過は、ここで述べられる液体調合物のための滅菌の典型的な方法である。無菌濾過は、順次つながっていてもよい０．４５μｍおよび０．２２μｍ（１または２）を通す濾過を伴う。濾過後、溶液を適切なバイアルまたは容器に充填する。
【０２２６】
一形態において、医薬製剤は非経口投与が意図される。投与の適切な経路としては、筋肉内、静脈内、皮下、皮内、関節内、くも膜下腔内、乳房内、眼球後、肺内（例えば制御放出）、経皮などが挙げられる。投与の皮下経路は１つの特定経路である。粘膜送達もまた特に適切である。これらの粘膜経路としては、液体、半固体または固体形態ペプチドの投与を伴ってもよい、経口、経鼻、舌下、肺、肛門、膣、およびバッカル経路が挙げられるが、これに限定されるものではない。これらの経路を通じた投与は、非経口送達と比べて低下した生体利用能のために、所望の生物学的効果を得るのに実質的により多くのペプチドを必要とする。さらに非経口制御放出送達は、ポリマー性マイクロカプセル、マトリックス、溶液、インプラント、および装置を形成して、それらを非経口的にまたは外科的手段によって投与して達成できる。制御放出調合物の例は、参照によって本明細書に援用する米国特許第6,368,630号、6,379,704号、および5,766,627号で述べられる。これらの剤形は、ポリマーマトリックスまたは装置内へのいくらかのペプチドの捕捉のために、より低い生体利用能を有するかもしれない。例えば米国特許第6,379,704号、6,379,703号、および6,296,842号を参照されたい。
【０２２７】
それを必要とする対象を治療し、または治療を助けるのに１回または多回用量で効果的な化合物量を含有する投薬量単位形態で、アミリン化合物を提供してもよい。非経口投与は、最初の大量瞬時投与とそれに続く薬剤製品の治療的循環レベルを維持するための連続の輸液で実施してもよい。経皮注射または送達に続いて何時間もまたは何日もかけて治療的に有効量の製剤が血流内に送達されるように、持続性または「デポー」徐放製剤の形態を使用してもよい。当業者は、例えば患者年齢および体重、患者の健康状態、および治療する病状を勘案して、個々の患者の良好な医療行為および臨床病状で判定されるように、効果的な投薬量および投与計画を容易に最適化する。
【０２２８】
典型的に約０．００１μｇ／ｋｇ体重／日〜約１０００μｇ／ｋｇ体重／日の間の投薬量を使用してもよいが、当業者は認識するようにその前後の量を使用してもよい。典型的な用量は、下限で１日当たり約０．５μｇ、１μｇ、５μｇ、１０μｇ、５０μｇ〜１００μｇから、上限で約１００μｇ、５００μｇ、１ｍｇ、５ｍｇ、１０ｍｇ、５０ｍｇまたは１００ｍｇの医薬品化合物を含有してもよい。１用量あたり０．１μｇ〜１ｍｇの化合物などのその他の用量範囲も考察される。したがって例示的な用量は、１用量あたり３０、６０、１２０、２４０、または３６０μｇの化合物であってもよい。１日当たりの用量は別々の単位用量で送達されてもよく、または２４時間にわたり、または２４時間内のあらゆる時間にわたり連続的に提供されてもよい。１日当たりの服用回数は、１日当たり１〜約４回であってもよいが、より多くてもよい。投薬は毎日１回以上、または毎週１回以上または毎月１回以上などより低頻度であってもよく、ここで述べるようにその他の組成物と併せてもよい。本方法および組成物は、ここで述べる投薬量に限定されるものではないことに留意すべきである。
【０２２９】
いくつかの形態において、５０ｋｇの患者に単回または分割用量で投与される効果的な用量は、典型的に約０．５〜３０μｇ〜約５ｍｇ／日、約１０〜３０μｇ〜約２ｍｇ／日、約５〜１００μｇ〜約１ｍｇ／日、または約５μｇ〜約５００μｇ／日の範囲である。いくつかの形態において、投薬量は約０．０１〜約１００μｇ／ｋｇ／用量の間である。その他の形態において、組成物は、１μｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲の用量、または０．１ｍｇ／ｋｇ〜約５０ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲の用量のアミリン化合物を送達するように調合される。例えば経口投与などの特定の経路のための投薬量は、生体利用能低下を補うために例えば約５〜１００倍増大させてもよい。
【０２３０】
連続的送達は、連続輸液の形態であることができる。例示的な用量および輸液速度としては、別々の用量あたり０．００５ｎｍｏｌ／ｋｇ〜約２０ｎｍｏｌ／ｋｇ、または連続輸液で約０．０１／ｐｍｏｌ／ｋｇ／分〜約１０ｐｍｏｌ／ｋｇ／分が挙げられる。これらの用量および輸液は、静脈内投与（ｉ．ｖ．）または皮下投与（ｓ．ｃ．）によって送達できる。静脈内投与される医薬組成物の例示的な総用量／送達が約２μｇ〜約８ｍｇ／日であってもよいのに対し、皮下投与される医薬組成物の総用量／送達は約６μｇ〜約１６または２４ｍｇ／日であってもよい。
【０２３１】
次の実施例は例証のために提供されるが、本発明を限定するものではない。
【実施例】
【０２３２】
実施例１：カロリー摂取量低下ポリペプチドの合成
アミリンおよびアミリンペプチド作用物質は、標準ポリペプチド合成方法を使用して合成できる。このような方法については、以下および参照によってその全体を本明細書に援用する米国特許第6,610,824号および5,686,411号で述べられる。
【０２３３】
ポリペプチドはアプライド・バイオシステムズ・インコーポレーテッドからのＦｍｏｃ保護アミノ酸を使用して、ノバビオケム（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）からの４−（２'−４'−ジメトキシフェニル）−ＦｍｏｃアミノメチルフェノキシアセトアミドノルロイシンＭＢＨＡ樹脂０．５５ｍｍｏｌｅ／ｇ）上にアセンブルされる。一般に、合成全体を通じて単一カップリングサイクルが使用され、Ｆａｓｔ  Ｍｏｃ（ＨＢＴＵ活性化）化学反応が用いられる。しかしいくつかのカップリングポジションにおいて、効率が予期されるよりも低いかもしれず、二重カップリングが必要である。ピペリジンを使用した生育するペプチド鎖の脱保護（Ｆｍｏｃ基除去）も同様に、常に効率的でないかもしれず、二重脱保護が必要とされる。完了したペプチド樹脂の最終脱保護は、アプライド・バイオシステムズ・インコーポレーテッドからの標準法（切断技術入門（Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｃｌｅａｖａｇｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ）に従って、トリエチルシラン（０．２ｍＬ）、エタンジチオール（０．２ｍＬ）、アニソール（０．２ｍＬ）、水（０．２ｍＬ）、およびトリフルオロ酢酸（１５ｍＬ）の混合物を使用して達成される。ペプチドはエーテル／水（５０ｍＬ）中で沈殿され、遠心分離される。沈殿物を氷酢酸で戻して凍結乾燥する。凍結乾燥ペプチドを水に溶解し、次に粗生成物純度を判定する。溶剤Ａ（水中の０．１％ＴＦＡ）および溶剤Ｂ（ＡＣＮ中の０．１％ＴＦＡ）を精製および分析ステップで使用する。様々なポリペプチドを含有する溶液を分取Ｃ−１８カラムに入れて精製する（溶剤Ａ中の１０％〜４０％の溶剤Ｂ、４０分間）。Ｃ−１８分析カラムを使用して画分の純度をアイソクラチックに判定する。純粋画分をプールして、上で同定されたペプチドを提供する。凍結乾燥ペプチドの分析的ＲＰ−ＨＰＬＣ（溶剤Ａ中の濃度勾配３０％〜６０％の溶剤Ｂ３０分間）で、滞留時間を判定する。
【０２３４】
例えばアミリンおよびアミリンペプチド作用物質は、０．０５０〜０．１００ｍｍｏｌで０．４３〜０．４９ｍｍｏｌ／ｇの負荷で、ノバビオケム（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）からのリンク（Ｒｉｎｋ）アミド樹脂を使用して、プロテイン・テクノロジーズ・インコーポレーテッド（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉｎｃ．）からのシンフォニー（Ｓｙｍｐｈｏｎｙ）ペプチド合成機上でアセンブルしてもよい。Ｆｍｏｃアミノ酸（５．０当量、０．２５０〜０．５００ｍｍｏｌ）残基を１−メチル−２−ピロリジノン中に０．１０Ｍの濃度に溶解する。その他の全試薬（ＨＢＴＵ、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）は、０．５５Ｍジメチルホルムアミド溶液として調製する。次にＨＢＴＵ（２．０当量、０．１００〜０．２００ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物（１．８当量、０．０９０〜０．１８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（２．４当量、０．１２０〜０．２４０ｍｍｏｌ）を使用して、Ｆｍｏｃ保護アミノ酸を樹脂結合アミノ酸に２時間カップリングする。最後のアミノ酸カップリング後に、ジメチルホルムアミド中の２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンを使用してペプチドを１時間脱保護する。ひとたびペプチド配列が完成したらシンフォニーペプチド合成機をプログラムして、樹脂を切断する。９３％ＴＦＡ、３％フェノール、３％水、および１％トリイソプロピルシランを使用して、樹脂からのペプチドのトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）の切断を１時間実施する。ｔｅｒｔ−ブチルメチルエーテルを使用して切断されたペプチドを沈殿させ、遠心分離によりペレット化して凍結乾燥する。ペレットを水（１０〜１５ｍＬ）に再溶解して濾過し、Ｃ１８カラムおよび０．１％ＴＦＡ含有アセトニトリル／水勾配を使用して、逆相ＨＰＬＣにより精製する。得られたペプチドを逆相ＨＰＬＣによって均質性に精製し、純度をＬＣＭＳで確認する。
【０２３５】
脂肪酸（例えばオクタン酸およびステアリン酸）による本発明のペプチドのＮキャッピングの一般手順は、次のとおりである。リンクアミド樹脂上のペプチド（０．１ｍｍｏｌ）をＮＭＰ（５ｍＬ）に懸濁する。別のバイアル内で、ＨＢＴＵ（０．３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０．３ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍＬ）に溶解し、ＤＩＥＡ（０．６ｍｍｏｌ）の添加がそれに続く。この溶液を樹脂に添加して、この懸濁液を２時間振盪する。溶剤を濾過してＮＭＰ（５ｍＬ×４）およびＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）で完全に洗浄し乾燥させて、ＴＦＡ切断を１時間施す。切断および精製後の所望のペプチドの収率は約４０ｍｇである。市販の活性化ＰＥＧエステルを使用して、リジンの遊離ε−アミノ基または精製ペプチド末端アミノ基の溶液内でＰＥＧ変性を実施してもよい。逆相ＨＰＬＣによって得られたペグ化誘導体を均質性に精製し、純度をＬＣ／ＭＳおよびＭＡＬＤＩ−ＭＳで確認する。
【０２３６】
実施例２：スクロース食物への嗜好に対するアミリンの効果
食物嗜好を修正するアミリンの能力を動物モデルで調べた。オスのスプラーグドーリー（Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ）（登録商標）ラットに糖禁断パラダイムを施して、糖摂取量に対するストレスの効果について観察した。簡単に述べると、ラットにビヒクルまたはラットアミリン（３００μｇ／ｋｇ／日）を含有するＡＬＺＥＴ（登録商標）浸透圧ポンプを移植した。全てのラットに標準固形飼料、水、および３０％スクロース飲料への自由なアクセスを提供する。引き続いてスクロース飲料を除去し、ラットの半数に毎日３時間の穏やかな拘束ストレスを３日間連続して施した。３日後、スクロースが提供され、その１日当たり平均消費量を４日間にわたり測定した。固形飼料摂取量もまた３日間の禁断およびストレス、およびそれに続くスクロースが再度導入された４日にわたり測定する。スクロース再導入中の４日間は、拘束はしなかった。アッセイ結果を図１（Ａ〜Ｄ）に示し、＊はＡＮＯＶＡおよびＦｉｓｈｅｒ  ＬＳＤ  ｐｏｓｔ−ｈｏｃ分析によりＰ＜０．０５である。
【０２３７】
このモデルにおいて、慢性ストレスは、糖（美味な飼料）として摂取される全カロリーの割合を刺激する。図１Ａに示すように、拘束によって誘発されるストレス（食塩水、Ｒ）は、固形飼料消費に対する平均スクロースの比率を（ベースラインの％として）ストレス誘発のない対照の消費量（食塩水、Ｃ）よりも顕著に増大させる。図１Ａはまた、アミリン投与が、拘束誘発性ストレスの結果として予期される固形飼料消費量に対する平均スクロースの比率増大を防止することも示す。アミリン投与ストレス誘発ラット（アミリン、Ｒ）とアミリン投与非ストレス対照ラット（アミリン、Ｃ）との間で、スクロースと固形飼料との比率（ベースラインの百分率として表される）を比較されたい。またアミリン投与ストレス誘発ラット（アミリン、Ｒ）と対照ビヒクル（食塩水）投与ストレス誘発ラット（食塩水、Ｒ）のスクロースと固形飼料の比率も比較されたい。示されるように、アミリン投与はこのストレス誘発性の美味な摂食応答を低下させる。
【０２３８】
図１Ｂおよび１Ｃは、それぞれ固形飼料消費量および総キロカロリーである、異なる観点からの拘束ストレスアッセイからの同じ結果を示す。図１Ｂおよび１Ｃは、固形飼料摂取量および総キロカロリーの全体的ストレス誘発性減少が、治療群では対照群と比べてあまりはっきりしないことを示す。図１Ｄは、アミリンがストレス条件および非ストレス条件の双方で、ビヒクル処理対照と比べて、スクロース摂取量を減少させることを実証する。要約するとストレスは一般に、単純糖に富んだまたは美味な食餌と、単純糖および脂肪（例えば標準ラット固形飼料）が比較的低い食餌の間の均衡を移動させると考えられる。アミリン投与なしのストレスは、拘束ストレスを受けた動物で固形飼料消費量を顕著に低下させ（図１Ｂ）、これはストレスに対する典型的な応答である。しかしアミリン投与治療群は、ストレス条件下および非ストレス条件下の双方で、スクロースに特有の低下を示すように見える。
【０２３９】
実施例３：高脂肪食物への嗜好に対するアミリンの効果
食物嗜好を修正するアミリンの能力を動物モデルで調べた。麻酔下で肩甲骨間領域に皮下移植されたカリフォルニア州クパチーノのデュレクト・コーポレーション（Ｄｕｒｅｃｔ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ｃｕｐｅｒｔｉｎｏ，ＣＡ））からの浸透圧ポンプ（＃２ＭＬ４）を通じて、成体オスラット（４９０ｇ）をラットアミリン（３００μｇ／ｋｇ／日）で１１週間治療した。動物は（ウィスコンシン州マディソンのハーランテックラッド（Ｈａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄ（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ））からの低脂肪固形飼料（６％脂肪ｋｃａｌ、５４％コーンデンプンｋｃａｌ、＃７０１２）、およびニュージャージー州ニューブランズィックのリサーチ・ダイエッツ（Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔｓ（Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ））からの高脂肪固形飼料（「美味な固形飼料」）（５８％脂肪ｋｃａｌおよび２６％スクロースｋｃａｌ、＃Ｄ１２３１１）の双方にアクセスを有した。食物摂取量および体重を毎週測定した。テキサス州ヒューストンのエコーＭＲＩ（ＥｃｈｏＭＲＩ（Ｈｏｕｓｔｏｎ，ＴＸ））からのＭＲＩ（ラット用Ｅｃｈｏ  ＭＲＩ）によって、治療の直前および治療の終わりに脂肪および除脂肪組織量（１００ｇの体重あたりの組織として表される）を測定した。
【０２４０】
これらの実験からの結果を図２〜５に示し、そこではデータは平均±ＳＥＭとして表され、各群の対象数は括弧内に示される。図２に示すように、１１週間の治療全体を通じてアミリン処理ラットは、対照よりも総カロリー摂取のより少ない百分率を高脂肪固形飼料から消費した（ビヒクル＝６３１５±１１１ｋｃａｌ対アミリン＝５３０９±２０２ｋｃａｌ（Ｐ’ｓ<０．０５））。総食物摂取量については、図３に示すようにアミリン治療ラットは、ビヒクル治療ラットと比べてよりも少ないカロリーを高脂肪固形飼料から、より多くのカロリーを低脂肪固形飼料から得た。低脂肪固形飼料に対する主要な効果は、ビヒクル＝２７１±４２ｋｃａｌ対アミリン＝６３３±１４５ｋｃａｌであり、％総カロリーに対する主要な効果は、ビヒクル＝４．３±０．６％対アミリン＝１２．２±３．２％（Ｐ’ｓ<０．０５）であった。
【０２４１】
図４に示すように治療期間全体を通じて、アミリン治療により体重増加が低下した（ビヒクル＝１２６±１０ｇ対アミリン＝５０±１１ｇ（Ｐ’ｓ<０．０５））。治療前後の脂肪および除脂肪組織変化を調べた。図５に示すように、アミリン投与は体脂肪量を減少させたが、除脂肪組織量に対しては何の効果も有さなかった。体脂肪量において、全質量の％での変化はビヒクルで３．７±０．９％であり、アミリン（Ｐ＜０．０５）では−３．６±１．０％であった。除脂肪組織において、全質量の％での変化はビヒクルで−０．５３±０．２１％であり、アミリンで０．０８±０．２３％であった（有意差なし）。
【０２４２】
アミリン投与はまた、動物においてエネルギー支出も増大させる。オハイオ州コロンバスのコロンバス・インストゥルメンツ（Ｃｏｌｕｍｂｕｓ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ（Ｃｏｌｕｍｂｕｓ，ＯＨ））オキシマックス（Ｏｘｙｍａｘ）動物モニタリングシステムを使用して、経時的に酸素消費量および二酸化炭素発生を測定して、エネルギー支出を評価した。これらの測定から熱（ｋｃａｌ）を計算して、エネルギー支出を評価した。１１週間目に、アミリンは対照と比べて２４時間エネルギー支出を増大させた（明期暗期増大＝９．７％、暗期増大＝６．６％、Ｐ’ｓ＜０．０５）。
【０２４３】
アミリン作用物質について実施した同一研究は、総カロリー摂取量の減少において、アミリン作用物質がアミリンよりも効果的であることを実証した。アミリン作用物質群の美味な食物からのカロリー摂取量はアミリンとほぼ等しく、低脂肪固形飼料からのカロリー摂取量はアミリン群よりも低かった。
【０２４４】
食物嗜好に関しては、研究全体を通じてアミリン治療ラットは、対照と比べてより多くのカロリー、およびより多くの低脂肪固形飼料からの総カロリー百分率を消費した。これらの結果から、カロリー摂取量低下が、低脂肪固形飼料対美味な固形飼料の相対嗜好低下、および増大するエネルギー支出と共に、アミリンの重量低下特性に寄与することが示唆される。
【０２４５】
実施例４：アミリン作用物質の飽食および過食症に対する効果
摂食行動を制御し、またはそれに影響するアミリン作用物質プラムリンチドの能力をヒト被験者で調べた。アセスメントのために、単純盲検でプラセボを対照とする研究において、２４時間食物摂取量（ＦＩ、不断給餌）、体重、空腹感および満腹感、および多食症（過食症尺度、ＢＥＳ）を測定した。プラムリンチドまたはプラセボによる６週間の治療のために、摂食障害のない肥満の被験者（５０／５０％女性／男性、ＢＭＩ  ３５．６１±３．９８ｋｇ／ｍ２、平均±ＳＤ）を無作為化した。６週間にわたりプラムリンチド（１８０μｇ）を食事に先だって毎日３回（ＴＩＤ）皮下投与し、生活習慣介入は提供しなかった（ＴＩＤ評価可能Ｎ＝５９、プラセボ評価可能Ｎ＝２５）。研究の別の部門において、６週間にわたる５０μｇ／時間の連続の皮下輸液（ＣＳＩ）を通じてプラムリンチドを投与し、生活習慣介入は提供しなかった（ＣＳＩ評価可能Ｎ＝５３、プラセボ評価可能Ｎ＝２２）。被験者の経過観察評価を治療休止の４週間後に実施した。食物摂取量および体重の測定に加えて、被験者を治療前日、治療の１日目、および４３日目に、１２時間観察期間にわたり空腹感および満腹感についても評価した。研究中に、総ＢＥＳスコアに基づいて被験者を軽度、中度、または重度の多食重篤性で分類した。
【０２４６】
６週間後、プラムリンチドＴＩＤで治療された被験者は、２４時間食物摂取量（−４８９±１８３ｋｃａｌ；Ｐ＜０．０１）および体重（−２．２±０．５％；Ｐ＜０．０００１）において、ベースラインからの顕著なプラセボ補正減少を経験した。一般に、治療前日、治療の１日目、および４３日目において、平均空腹感および満腹感評定プロフィールは、各治療群（プラムリンチドＴＩＤ、プラムリンチドＣＳＩ、およびプールしたプラセボ）内で同様であり、それらはまた治療群間でも同様であった。プールしたプラセボ群と比較して、プラムリンチドＴＩＤ被験者では平均総カロリー摂取量が治療の１日目におよそ１７％、そして４３日目に１５％低下し、またプラムリンチドＣＳＩ被験者では１日目におよそ２２％、そして４３日目に７％低下したという事実にもかかわらず、空腹感および満腹感評定は同様であった。したがって空腹感を抑制して、プラセボ治療被験者と同様の満腹感レベルを誘発するのに、プラムリンチド治療被験者ではより少ない食物摂取量が必要であった。したがってプラムリンチドは、食事の飽食効果を増強する。
【０２４７】
プラムリンチド治療被験者はまた、図６および７に示すように平均総ＢＥＳスコアの減少、および平均ＢＥＳスコアにおけるベースラインからの顕著なプラセボ補正減少も経験した（−４５±１３％；Ｐ＜０．０１）。プラセボ治療被験者よりも大きな割合のプラムリンチド治療被験者が、より低い多食重篤性カテゴリー（２４．６％対１２．５％）に移行する、多食重篤性における顕著な移行（Ｐ＜０．０５）があった。６週間のＴＩＤ治療後、８３．１％のプラムリンチド治療被験者および５６．０％のプラセボ治療被験者は軽度と分類された（ベースラインでそれぞれ６４．４％および５２．０％と比べて）。研究のＴＩＤおよびＣＳＩ部門双方の総スコアに基づいた過食症尺度重篤性分類については、表１を参照されたい。プラムリンチド治療休止の４週間後、総ＢＥＳスコアのベースラインからの減少は、もはや統計学的に顕著でなかった（図７）。これらの結果は、アミリン作用物質が、摂食行動、特に摂食行動の強制的側面について改善された制御を提供することを示唆する。
【０２４８】
【表１】
0005415067.tif 000002
百分率は各治療中の評価可能被験者数を基準とする
【０２４９】
実施例５：人体計測パラメーターに対するアミリン作用物質の効果
重量およびウエスト回りおよび腰回りなどの人体計測パラメーターに影響する、アミリン作用物質プラムリンチドの能力をヒト被験者で調べた。無作為化二重盲検プラセボ対照研究において、肥満（ＢＭＩ≧３０ｋｇ／ｍ２〜≦５０ｋｇ／ｍ２）非糖尿病者、および非インシュリン治療されるタイプＩＩ真性糖尿病肥満者へのプラムリンチド投与に対応した、体重および人体計測パラメーターの変化、ならびに血糖コントロール指標（例えばＨｂＡ１ｃ）、血清脂質、およびグルコース耐性を評価した。研究は２０４人の被験者と、１２０μｇ、１８０μｇ、または２４０μｇのプラムリンチドＴＩＤのプラムリンチド用量と、１週間のプラセボ導入期間、１６週間の薬物適用期間、および８週間の薬物不使用の経過観察期間の研究期間とから構成された。
【０２５０】
要約すれば、１６週間の治療後に、最初の体重の３．５２ｋｇ（３．６％）の統計学的に顕著なプラセボ補正平均体重減少が経験され（ｐ＜０．０００１、評価可能集団）、３１％の被験者は≧５％の体重減少があり、それに対してプラセボ治療群では２％のみが体重減少した（ｐ＜０．０００１、評価可能集団）。体重減少は、非糖尿病被験者およびタイプＩＩ糖尿病被験者の双方で明白であった。顕著な体重減少は、肥満症の全クラスの被験者において達成され、最も明白な体重減少はクラスＩ肥満症の被験者であった（ＢＭＩ＜３５ｋｇ／ｍ２）。肥満症クラス別の被験者におけるプラセボ補正体重減少は次のとおりであった。ＢＭＩ＜３５ｋｇ／ｍ２の被験者では４．２４±０．９１ｋｇ（４．７８±１．０％、ｐ＜０．０００１）、ＢＭＩ≧３５ｋｇ／ｍ２〜＜４０ｋｇ／ｍ２の被験者では２．８４±１．４５ｋｇ（２．６３±１．３９％、ｐ＜０．０５）、およびＢＭＩ≧４０ｋｇ／ｍ２の被験者では１．３６±１．３０ｋｇ（１．２９±１．０９％、ｐ＜０．０５）。ベースラインＢＭＩ階層別（評価可能集団Ｎ＝１４５）のベースライン体重に＞５％減少を達成した被験者の百分率を表２に要約する。
【０２５１】
【表２】
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【０２５２】
プラムリンチド群において観察された進行性の体重減少は、腹部肥満症の尺度であるウエスト回りの進行性の減少を伴った。１６週間の治療に続いて、プラムリンチド群は、ウエスト回りに２．６９±１．０８ｃｍ（ｐ＜０．０１）のプラセボ補正減少、および腰回りに２．６９±０．８２ｃｍ（ｐ＜０．０１）（最小二乗平均±ＳＥ）のプラセボ補正減少を有した。したがってプラムリンチドによる治療は、肥満の個人に顕著な体重減少と、ウエストおよび腰回りの顕著な低下をもたらした。
【０２５３】
実施例６：体組成に対する効果
スプラーグドーリーラットにおける食餌誘発性肥満症（ＤＩＯ）は、肥満症およびエネルギー恒常性制御の研究に役立つモデルである。マサチューセッツ州ウィルミントンのチャールス・リバー・ラボラトリーズ・インコーポレーテッド（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ））からの同系交配ＤＩＯ（レビン（Ｌｅｖｉｎ））易発性ラット（ｎ＝６／群）を使用して、アミリン投与の効果を研究した。薬剤治療に先だって、ラットをリサーチ・ダイエッツ（Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔｓ）からの中度高脂肪食（脂肪から３２％ｋｃａｌ、Ｄ１２２６Ｂ）の不断給餌におよそ６週間保った。肥育期間終了時に、それらは約５５０ｇの平均体重を有した。全てのラットは、２２℃、１２／１２時間明暗サイクルで、１匹ずつ箱型ケージ内で飼育した。カリフォルニア州のデュレクト・コーポレーションからの皮下浸透圧ミニポンプによってアミリンを投与した。カリフォルニア州トランスのペプチシンサ（Ｐｅｐｔｉｓｙｎｔｈａ（Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡ））からのラットアミリンを滅菌水中の５０％ＤＭＳＯに溶解し、１００ｍｇ／ｋｇ／日（約２３ｎｍｏｌ／ｋｇ／日）の速度で注入した。１４日目にミニポンプを除去して、ビヒクルに含有するポンプに置き換えた。体組成について、薬剤治療前そして実験終了時に、ラットをエコー・メディカル・システムズ（Ｅｃｈｏ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍ）からの専用齧歯類ＮＭＲ機器内でスキャンし、それによって脂肪および除脂肪組成物の％変化計算（例えば処理後体脂肪％−ベースラインでの体脂肪％＝体脂肪％の変化）が可能であった。
【０２５４】
図８および９に示すように、薬剤治療中に、アミリンは累積食物摂取量および体重（２〜１４日、ｐ＜０．０５対ビヒクル対照）を顕著に低下させた。ビヒクルのみを含有するポンプによる休薬期間中、食物摂取量および体重は迅速にビヒクル対照レベルに戻った。研究終了時の体組成分析は、同様の体重（２８日目）にもかかわらず、アミリン（１〜１４日）治療された動物はなおも、アミリンを投与されなかった動物より低い体脂肪％を有することを明らかにした（図１０Ａ）。またアミリン治療された動物は、ビヒクルのみを投与された動物よりも高い除脂肪身体量％も有した（図１０Ｂ）。
【０２５５】
実施例７．食物への強い欲求に対するアミリンの効果
食物への強い欲求に対するアミリンおよびアミリン作用物質の効果は、次のようにして研究してもよい。無作為化盲検プラセボ対照研究デザインを使用する。およそ１８０人の肥満ヒト被験者を研究に参加させ、３分の１を無作為にプラセボに、および３分の２を無作為にプラムリンチドなどのアミリンアナログ作用物質に分けてもよい。研究は、ベースライン食物摂取量、摂食パターン、満腹／空腹、食物快楽度、食物への強い欲求、過食症、体重、体組成などを評価するための最初の１週間の入院期間を伴う。次に研究は、５週間の通院期間に移行し、その間に体重、体組成、および摂食制御アンケートの全てを使用して様々なパラメーターを評価してもよい。次に２〜３日の入院期間で、研究の積極的治療期間を終了し、経過観察食物摂取量、摂食パターン、満腹／空腹、食物快楽度、食物への強い欲求、過食症、体重、体組成など評価する。一般に研究全体を通じて、ストレス条件は誘発せず、生活習慣および／または食餌変化または抑制は実行しない。モニターする研究終点としては、体重、体組成（例えばウエスト回り、体脂肪量、無脂肪量）、食物摂取量、空腹／満腹、食物への強い欲求、満腹効率、過食症などが挙げられる。
【０２５６】
このような研究において、研究被験者が、注射および輸液双方による投与全体を通じて、食物への強い欲求の頻度および強度の低下を経験することが意外にも見いだされた。被験者が、注射および輸液双方による投与全体を通じて、食物への強い欲求に抵抗することの困難さ、ならびに食物への強い欲求に答えた摂食頻度の減少を報告することもまた見いだされた。研究被験者はまた、注射および輸液双方による投与全体を通じて、特に甘い食物、およびチョコレート食品に対する強い欲求の著しい減少も報告した。研究被験者はまた、注射および輸液双方による投与全体を通じて、塩味の（ｓａｖｏｒｙ）食物への強い欲求の減少も報告したが、その程度はより低かった。これらの研究結果は、アミリンおよびアミリン作用物質が食物嗜好、特に甘い、チョコレート味、および塩味の食物への食物嗜好を修正するという意外な発見を実証する。
【０２５７】
実施例８．受容体結合アッセイ
最初に、ポリペプチドをアッセイで使用して、アミリン、カルシトニン、およびＣＧＲＰ受容体への結合能力を判定できる。アミリン受容体、カルシトニン受容体、およびＣＧＲＰ受容体との相互作用を判定するための結合アッセイについては、例えば参照によってその全体を本明細書に援用するU．S． Pat． No． 5，264，372で述べられる。
【０２５８】
より詳細に述べると、本発明の化合物のアミリン受容体への結合の評価は、次のようにして実施できる。１２５Ｉ−ラットアミリン（ボルトンハンターＮ末端リジン標識）はイリノイ州アーリントンハイツのアマーシャム・コーポレーション（Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（Ａｒｌｉｎｇｔｏｎ  Ｈｅｉｇｈｔｓ，ＩＬ））から購入する。未標識のペプチドは、カリフォルニア州トランスのベイケム・インコーポレーテッド（ＢＡＣＨＥＭ  Ｉｎｃ．（Ｔｏｒｒａｎｃｅ，ＣＡ））およびカリフォルニア州ベルモントのペニンスラ・ラボラトリーズ（Ｐｅｎｉｎｓｕｌａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｂｅｌｍｏｎｔ，ＣＡ））から得られる。
【０２５９】
オスのスプラーグドーリー（登録商標）ラット（２００〜２５０ｇ）を断頭により殺処分する。脳を除去して、冷リン酸緩衝液（ＰＢＳ）に入れる。嗅索によって側方に結合し、これらの嗅索から内側に４５度の角度で延びる視床下部の頭側に、腹側面から切開を入れる。側坐核および周辺領域を含有するこの前脳基底部組織を秤量し、氷冷２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ緩衝液（２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ酸、２３℃においてＮａＯＨでｐＨ７．４に調節）中で均質化する。１５分間４８，０００×ｇの遠心分離によって、新鮮な緩衝液中で膜を３回洗浄する。０．２ｍＭフェニルメチルスルホニルフッ化物（ＰＭＳＦ）を含有する２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ緩衝液中に、最終膜ペレットを再懸濁する。
【０２６０】
１２５Ｉ−アミリン結合を測定するために、０．５ｍｇ／ｍＬバシトラシン、０．５ｍｇ／ｍＬウシ血清アルブミン、および０．２ｍＭ  ＰＭＳＦを含有する２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ緩衝液中の１２〜１６ｐＭの１２５Ｉ−アミリンと共に、４ｍｇの原湿潤重量の組織からの膜をインキュベートする。溶液を２℃で６０分間インキュベートする。０．３％ポリエチレンイミン中で４時間予浸して、放射標識ペプチドの非特異的結合を低下させたニュージャージー州クリフトンのワットマン・インコーポレーテッド（Ｗｈａｔｍａｎ  Ｉｎｃ．（Ｃｌｉｆｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．））からのＧＦ／Ｂガラス繊維フィルターを通した濾過によって、インキュベーションを終結する。フィルターを濾過直前に５ｍＬの冷ＰＢＳで、濾過直後に１５ｍＬの冷ＰＢＳで洗浄する。フィルターを除去して、計数効率７７％でγカウンター内で放射能を評価する。１０−１２〜１０−６Ｍの未標識の試験化合物存在下で結合を測定して競合曲線を生じさせ、カリフォルニア州サンディエゴのグラフパッド・ソフトウェアからの４−パラメーターロジスティック式（インプロットプログラム（Ｉｎｐｌｏｔ  Ｐｒｏｇｒａｍ））を使用して、非線形回帰によって分析する。
【０２６１】
このアッセイにおいて、測定ＩＣ５０約５０ｐＭで、精製ヒトアミリンがその受容体に結合する。本発明の試験化合物の結果を表３に記載し、化合物のそれぞれが顕著な受容体結合活性を有することを示す。
【０２６２】
ＣＧＲＰ受容体に対する本発明の化合物の結合の評価は、１２５ＩｈＣＧＲＰと、ＣＧＲＰ受容体を発現することが知られているＳＫ−Ｎ−ＭＣ細胞から調製された膜とを使用したこと以外は、本質的にアミリンについて述べたのと同様であった(Muff et．al．，(1992) Ann N Y Acad Sci．657：106-116)。１３，５００ｃｐｍ  １２５Ｉ−ｈＣＧＲＰ／ウェルまたは２１．７ｐＭ／ウェル（アマーシャム（Ａｍｅｒｓｈａｍ））を使用したこと以外は、アミリンについて述べたのと同様にして結合アッセイを実施した。
【０２６３】
カルシトニン受容体の結合は、技術分野で公知のように、カルシトニン受容体を発現するＣＨＯ細胞またはＴ４７Ｄ細胞を使用して研究してもよい(Muff et．al．，(1992) Ann N Y Acad Sci．657：106-116 and Kuestner et．al．(1994) Mol．Pharmacol．46：246-255)。
【０２６４】
【表３】
0005415067.tif 000004
ｎｔ：試験せず
【０２６５】
実施例９食物摂取量に対するポリペプチドの活性
メスＮＩＨ／スイスマウス（８〜１４週齢）を１２：１２時間の明暗サイクルで集団飼育した。断りのある場合を除き、水および標準ペレットマウス固形飼料食餌を不断給餌した。動物を実験の１日前におよそ１５００時間絶食させた。
【０２６６】
０分の時点で、全ての動物に、２００ｕＬ／マウスの容積でビヒクルまたはポリペプチドの腹腔内注射をして、即座にあらかじめ秤量した（１０〜１５ｇ）の標準固形飼料を与えた。３０、６０、１２０、および１８０分目に食物を除去して秤量し、消費された食物量を判定した。食物摂取量に対する治療の効果を対照と比較した％変化で表す。
【０２６７】
図１１に示すように、化合物２は、２５〜３００ｎｍｏｌ／ｋｇの用量で、注射後３０分に用量依存性に食物摂取量を低下させた。表４は２５ｎｍｏｌ／ｋｇの用量で、末梢性投与（腹腔内注射）されたポリペプチドによる低下した食物摂取量を描写する。３０、６０、１２０、および１８０分の時点のデータは、ビヒクルと比べて累積食物摂取量の％低下を示す。
【０２６８】
【表４−１】
0005415067.tif 000005
【表４−２】
0005415067.tif 000006
【表４−３】
0005415067.tif 000007
【表４−４】
0005415067.tif 000008
【表４−５】
0005415067.tif 000009
ｎｔ＝実施せず
【０２６９】
実施例１０．体重およびカロリー摂取量減少に対する本発明の化合物の活性
１匹ずつ飼育したオススプラーグドーリー（登録商標）ラット（３５０ｇ、１２時間の明暗サイクル）を高脂肪食餌（脂肪から５８％ｋｃａｌ）で４週間維持した。肥育期間終了時に、デュレクト・コーポレーションからの１４日間浸透圧ポンプを麻酔下で肩甲骨間に移植した。ラットは２．９ｎｍｏｌ／ｋｇ／日の用量で、ビヒクル（５０％ＤＭＳＯ）またはポリペプチドを連続的に送達するポンプを受け入れた。食物摂取量および体重の測定を毎週行った。図１２Ａおよび１２Ｂは、ポリペプチド化合物３、化合物４、または化合物５が、１４日間の試験期間全体を通じて、カロリー摂取量および体重増加の低下をそれぞれ生じたことを示す（＊Ｐ＜０．０５、それぞれのビヒクル−高脂肪群との比較）。表５はいくつかの化合物について、１および２週間目の％体重減少を示す。
【０２７０】
【表５】
0005415067.tif 000010
＊Ｐ＜０．０５、対照との比較
【０２７１】
実施例１１．体組成
１匹ずつ飼育したオススプラーグドーリー（登録商標）ラット（４２０ｇ、１２時間の明暗サイクル）高脂肪食餌（脂肪から５８％ｋｃａｌ）で４週間維持した。肥育期間終了時に、デュレクト・コーポレーションからの１４日間浸透圧ポンプを麻酔下で肩甲骨間に移植した。ラットは７０ｎｍｏｌ／ｋｇ／日の用量で、ビヒクル（５０％ＤＭＳＯ）または化合物１を連続的に送達するポンプを受け入れた。動物を１２日目に殺処分した。死体を即座に凍結し、ウィスコンシン州マディソンのコーヴァンス・ラボラトリーズ（Ｃｏｖａｎｃｅ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ））による化学分析によって、体組成（脂肪およびタンパク質）を測定した。図１３は、化合物１で処理したラットにおいて総体重の％として、対照と比べて脂肪含量が低下したことを示す。さらに化合物１は、除脂肪含量％を増大させた。
【０２７２】
実施例１２．胃内容排出およびイオンカルシウム
胃管投与トリチウム化グルコースの血漿中への出現を測定して、胃内容排出をモニターした。対象は、意識のあるオスのスプラーグドーリー（登録商標）ラット（７〜９週齢、１２：１２時間明暗サイクル）であり、実験開始まで食物および水を不断給餌した。投与に先だって、食物および水を除去した。−５分の時点で、ペプチドまたはビヒクル（２００μＬ食塩水）を皮下投与した。０分の時点で、デラウェア州ウィルミントンのデュポン（Ｄｕｐｏｎｔ（Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ，ＤＥ））からの５μＣｉＤ−［３−３Ｈ］グルコースを含有する１ｍＬ滅菌水溶液を口咽頭管によって投与した。２０分の時点で、局所麻酔剤（ハリケーン（Ｈｕｒｒｉｃａｉｎｅ）（登録商標）、２０％ベンゾカイン液体）を尾部先端に塗布した。ｔ＝４０分の時点で尾部先端を小刀で結紮し、約２５０μＬの血液をヘパリン治療試験管内に収集した。次にマサチューセッツ州メドフィールドのチバ／コーニング・インコーポレーテッド（Ｃｉｂａ／Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｉｎｃ．（Ｍｅｄｆｉｅｌｄ，ＭＡ））からのチバ／コーニング（Ｃｉｂａ／Ｃｏｒｎｉｎｇ）６３４Ｃａ／ｐＨ分析器を使用して、血漿を即座にイオン化カルシウムについてアッセイした。０．５ｍＬの水＋カリフォルニア州コスタメサのＩＣＮ（ＩＣＮ（Ｃｏｓｔａ  Ｍｅｓａ，ＣＡ））からの２ｍＬのエコライト（Ｅｃｏｌｉｔｅ）シンチレーションカクテルの調製されたシンチレーションバイアルに、１０μＬの血漿サンプルをピペットで移し、ボルテックスして、メリーランド州ゲーサーズバーグのＬＫＢ−ワラック（ＬＫＢ−Ｗａｌｌａｃ（Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤ））からのβカウンター（１２０９ラックβ（Ｒａｃｋ−ｂｅｔａ））内で、バイアル毎に１分間カウントした。
【０２７３】
図１４Ａにおいて、点は平均±６匹のラット（給餌、意識あり）の標準偏差を表す。示された用量のペプチドを０分の時点で皮下注射した。ｃｐｍ分析のために血液を３５分後に収集した。＊全点ｐ＜０．００１、対食塩水対照、ＡＮＯＶＡ、ダネット検定。非線形回帰から：ＥＤ５０＝２．３μｇ／ｋｇ、Ｂｏｔｔｏｍ＝２５ｃｐｍ／１０μＬ、Ｔｏｐ＝３２８ｃｐｍ／１０μＬ。血漿ｃｐｍの最大低下−９２％、適合度ｒ２＝０．９９９２。
【０２７４】
図１４Ｂにおいて、点は平均±６匹のラット（給餌、意識あり）の標準偏差を表す。示された用量のペプチドを０分の時点で皮下注射した。ｃｐｍ分析のために血液を３５分後に収集した。＊Ｐ＜０．００１、対食塩水対照、ＡＮＯＶＡ、ダネット検定。非線形回帰から：ＥＤ５０＝１．１μｇ／ｋｇ、Ｂｏｔｔｏｍ＝１．２ｍｍｏｌ／Ｌ、Ｔｏｐ＝１．３ｍｍｏｌ／Ｌ。血漿ｉＣａの最大低下−１４％、適合度ｒ２＝０．９９３６。
【０２７５】
実施例１３．併用療法：アミリン＋シブトラミン
チャールス・リバー・ラボラトリーズ（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒｓ  Ｌａｂｓ）から同系交配ＤＩＯ易発性ラットを得た。これらのラットは、比較的高脂肪高エネルギーの食餌によって肥満になりやすいＣｒｌ：ＣＤ（登録商標）（ＳＤ）ＢＲラット系統から開発された（レビン（Ｌｅｖｉｎ）１９９７）。ラットは、２２℃、１２／１２時間明暗サイクルで１匹ずつ箱型ケージ内で飼育した。薬剤治療に先だって、ラットをリサーチ・ダイエッツ（Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔｓ）からの中度高脂肪食（脂肪から３２％ｋｃａｌ、Ｄ１２２６Ｂ）不断給餌におよそ６週間保った。肥育期間終了時に、それらは典型的に約５００ｇの平均体重を有した。次にラットを治療群毎に分けて、デュレクト・コーポレーションからの２個の皮下ミニポンプを移植した。１個のポンプはビヒクル（水中の５０％ＤＭＳＯ）またはアミリン（１００μｇ／ｋｇ／日）のどちらかを含有するのに対し、もう一方のポンプは滅菌水またはシブトラミン（３ｍｇ／ｋｇ／日）のどちらかを含有した。
【０２７６】
図１５に示すように、アミリン単独またはシブトラミン単独のどちらもおよそ５％の体重変化（ビヒクル補正済み）が観察されたのに対し、アミリンとシブトラミンの併用は、およそ１２％の体重変化（ビヒクル補正済み）が生じた。体脂肪量低下もまた、アミリン単独またはシブトラミン単独治療のどちらでも明白であり、アミリンとシブトラミン双方を組み合わせて投与すると相乗的効果が得られた（図１６Ａ）。アミリンを単独で投与すると除脂肪（タンパク質）体重が増大するのに対し、シブトラミンを単独でまたはアミリンと組み合わせて投与しても除脂肪（タンパク質）体重は比較的無変化であった（図１６Ｂ）。
【０２７７】
実施例１４．併用療法：アミリン＋ＣＢ−１拮抗薬
チャールス・リバー・ラボラトリーズ（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒｓ  Ｌａｂｓ）から得られたＤＩＯ易発性ラットを２２℃、１２／１２時間明暗サイクルで１匹ずつ箱型ケージ内で飼育した。薬剤治療に先だって、ラットをリサーチ・ダイエッツ（Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔｓ）からの中度高脂肪食（脂肪から３２％ｋｃａｌ、Ｄ１２２６Ｂ）不断給餌におよそ６週間保った。肥育期間終了時に、それらは典型的に約５００ｇの平均体重を有した。次にラットを治療群毎に分けて、デュレクト・コーポレーションからの皮下ミニポンプを移植し、経口胃管を挿入した。ミニポンプがビヒクル（水中の５０％ＤＭＳＯ）またはアミリン（１００μｇ／ｋｇ／日）のどちらかを含有したのに対し、経口胃管では滅菌水または一連の用量のＣＢ−１拮抗薬（０．１、０．３、１．０、３．０、１０．０ｍｇ／ｋｇ／日）のどちらかが投与された。２週間後の体重変化を図１７に示し、これらの組み合わせの２つ（囲み円）を図１８Ａおよび１８Ｂにより詳細に明らかにする。
【０２７８】
例証の目的で実施例を提供して前述の説明により本発明が開示されるが、本発明の実施は、全ての通常のバリエーション、適応、または修正を特許請求される発明の範囲内として包含するものと理解される。したがって説明および実施例は、本発明の範囲を制限すると解釈すべきではではないものとする。
【図面の簡単な説明】
【０２７９】
【図１Ａ】図１Ａは、ストレスおよび非−ストレス条件下の飼料好みに対するアミリンの効果を示したグラフである。これらのグラフにおいて、Ｒは抵抗性ストレスに付した動物を示し、Ｃは抵抗性ストレスに付していない対照動物を示す。図１Ａは、ベースラインのパーセントとしての餌に対するスクロース平均割合を示す。図１Ｂは合計餌消費を示し、図１Ｃは消費した平均合計ｋｃａｌを示し、図１Ｄは消費したｋｃａｌでの平均スクロースを示す。
【図１Ｂ】図１Ｂは、ストレスおよび非−ストレス条件下の飼料好みに対するアミリンの効果を示したグラフである。これらのグラフにおいて、Ｒは抵抗性ストレスに付した動物を示し、Ｃは抵抗性ストレスに付していない対照動物を示す。図１Ｂは合計餌消費を示す。
【図１Ｃ】図１Ｃは、ストレスおよび非−ストレス条件下の飼料好みに対するアミリンの効果を示したグラフである。これらのグラフにおいて、Ｒは抵抗性ストレスに付した動物を示し、Ｃは抵抗性ストレスに付していない対照動物を示す。図１Ｃは消費した平均合計ｋｃａｌを示す。
【図１Ｄ】図１Ｄは、ストレスおよび非−ストレス条件下の飼料好みに対するアミリンの効果を示したグラフである。これらのグラフにおいて、Ｒは抵抗性ストレスに付した動物を示し、Ｃは抵抗性ストレスに付していない対照動物を示す。図１Ｄは消費したｋｃａｌでの平均スクロースを示す。
【図２】図２は高脂肪餌からのカロリー取り込みのパーセントに対するアミリンの効果を示すグラフである。
【図３】図３は高脂肪餌および低脂肪餌からの合計カロリー取り込みに対するアミリンの効果を示すグラフである。
【図４】図４は食物好み実験における体重増加に対するアミリンの効果を示すグラフである。
【図５】図５は食物好み実験における体重組成に対するアミリンの効果を示すグラフである。
【図６】図６は過食スケール平均トータルスコア（binge eating scale mean total score）に対するアミリンの効果を示すグラフである。白抜きバーはすべてのプラセボ受容者（ｎ＝５３）を表し、黒塗りバーはプラムリンチドTID受容者（ｎ＝５９）を表し、網掛けバーはプラムリンチドCSI受容者（ｎ＝４７）を表す。
【図７】図７はベースラインからの、過食スケール平均トータルスコアの変化を示すグラフである。
【図８】図８は、１−１４日目にビヒクル（円）またはアミリン（三角）のいずれかを受容し、その後はビヒクルのみ受容したDIOラットによる２８日にわたる累積食物取り込みを示すグラフである。
【図９】図９は、１−１４日目にビヒクル（円）またはアミリン（三角）のいずれかを受容し、その後はビヒクルのみ受容したDIOラットにおけるパーセント体重（ビヒクル補正済み）における変化を示すグラフである。
【図１０Ａ】図１０Ａは、１−１４日目にビヒクルまたはアミリンを投与し、１５−２８日目にビヒクルのみ投与した場合の体重に対する効果を示すグラフである。図１０Ａは身体脂肪に対する効果を示すグラフである。
【図１０Ｂ】図１０Ｂは、１−１４日目にビヒクルまたはアミリンを投与し、１５−２８日目にビヒクルのみ投与した場合の体重に対する効果を示すグラフである。図１０Ｂは身体タンパク質に対する効果を示すグラフである。
【図１１】図１１は実施例化合物、化合物２の用量に対する一晩絶食マウスにおける食物消費における用量依存性の減少を示すグラフである。
【図１２Ａ】図１２Ａは、食餌誘導した肥満（DIO）ラットにおける、カロリー取り込み（図１２Ａ）に対するアミリン・アゴニストの効果を示すグラフである。
【図１２Ｂ】図１２Ｂは、食餌誘導した肥満（DIO）ラットにおける、体重（図１２Ｂ）に対するアミリン・アゴニストの効果を示すグラフである。
【図１３】図１３は、実施例化合物による身体組成に対する効果を示すグラフである。
【図１４Ａ】図１４Ａは、胃内容排出（図１４Ａ）に対する実施例化合物（化合物１）の効果を示すグラフである。
【図１４Ｂ】図１４Ｂは、低カルシウム血症（図１４Ｂ）に対する実施例化合物（化合物１）の効果を示すグラフである。
【図１５】図１５はDIOラットにおける体重に対する、単独またはシブトラミンと組み合わせたアミリンの効果を示すグラフである。黒塗り四角はビヒクルを表し、黒塗り円はシブトラミン単独を示し、白抜き三角はアミリン単独を表し、黒塗り三角はアミリンおよびシブトラミンの組合せを表す。
【図１６Ａ】図１６Ａは、２週間にわたってシブトラミン（３ｍｇ／ｋｇ／日）およびアミリン（１００μｇ／ｋｇ／日）を単独または組み合わせた投与の体重に対する効果を示すグラフである。図１６Ａは身体脂肪に対する効果を示すグラフである。
【図１６Ｂ】図１６Ｂは、２週間にわたってシブトラミン（３ｍｇ／ｋｇ／日）およびアミリン（１００μｇ／ｋｇ／日）を単独または組み合わせた投与の体重に対する効果を示すグラフである。図１６Ｂは身体タンパク質に対する効果を示すグラフである。
【図１７】図１７は、体重に対する、単独またはアミリン（１００μｇ／ｋｇ／日）と組み合わせた、CB-1アンタゴニストの用量の一定範囲の投与の効果を示すグラフである。囲んだ領域中の組合せの時系列を図１８Ａおよび１８Ｂに示す。
【図１８Ａ】図１８Ａは、体重に対する、単独または組合せのCB-1アンタゴニストおよびアミリンの投与の効果を示すグラフである。図１８Ａは単独または組合せのいずれかの、CB-1アンタゴニスト（１ｍｇ／ｋｇ／日）およびアミリン（１００μｇ／ｋｇ／日）の投与の効果を示す。
【図１８Ｂ】図１８Ｂは、体重に対する、単独または組合せのCB-1アンタゴニストおよびアミリンの投与の効果を示すグラフである。図１８Ｂは単独または組合せのいずれかのCB-1アンタゴニスト（３ｍｇ／ｋｇ／日）およびアミリン（１００μｇ／ｋｇ／日）の投与の効果を示す。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
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【図１１】
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【図１２Ａ】
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【図１２Ｂ】
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【図１３】
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【図１４Ａ】
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【図１４Ｂ】
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【図１５】
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【図１６Ａ】
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【図１６Ｂ】
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【図１７】
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【図１８Ａ】
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【図１８Ｂ】
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【配列表】
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