(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
洗浄用液体組成物であって、炭素６個より長いアルキル基を含む化合物を含まず、タンパク質分解酵素を含む一種以上の酵素、水溶性グリコールエーテル溶媒を含む溶媒系、少なくとも一種のアニオン性ヒドロトロピー剤を含み、組成物中の前記グリコールエーテルに対する前記少なくとも一種のヒドロトロピー剤のモル比は、１．１：１より大きい、組成物。
【請求項２】
組成物が、プロテアーゼに加えて幾つかの追加的加水分解酵素を含み、前記加水分解酵素は、リパーゼ、セルラーゼ及びアミラーゼを含むが、これらに限定されない、請求項１に記載の液体組成物。
【請求項３】
ヒドロトロピー剤が、式：
【化３】
0005479894.tif 000015
（式中、Ｒ１及びＲ２は、独立に、水素又は１〜６個の炭素を有するアルキル基である）で示される水溶性アニオン性ヒドロトロピー剤からなる群から選択されるアニオン性ヒドロトロピー剤である、請求項１又は請求項２に記載の液体組成物。
【請求項４】
ヒドロトロピー剤が、式：
【化４】
0005479894.tif 000016
で示される水溶性アニオン性ヒドロトロピー剤からなる群から選択されるアニオン性ヒドロトロピー剤である、請求項３に記載の液体組成物。
【請求項５】
Ｒ１及びＲ２が、１〜４個の炭素を有するアルキル基である、請求項３又は４に記載の液体組成物。
【請求項６】
Ｒ１及びＲ２が、１〜２個の炭素を有するアルキル基である、請求項３〜５のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項７】
ヒドロトロピー剤が、キシレンスルホン酸又はクメンスルホン酸の塩である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項８】
ヒドロトロピー剤：グリコールエーテルの重量比が、１．２：１より大きい、請求項１〜７のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項９】
ヒドロトロピー剤：グリコールエーテルの重量比が、１．５：１より大きい、請求項１〜８のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項１０】
使用に際し、濃縮物１部に対して少なくとも水２０部で希釈されるように調製された濃縮物であって、ヒドロトロピー剤が一つ以上の短い（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル側鎖を有する水溶性芳香族スルホン酸塩を含む群から選択される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項１１】
使用に際し、濃縮物１部に対して少なくとも水１００〜１０００部で希釈されるように調製された濃縮物であって、ヒドロトロピー剤が一つ以上の短い（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル側鎖を有する水溶性芳香族スルホン酸塩を含む群から選択される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項１２】
溶媒が、少なくとも一種のグリコールエーテル、少なくとも一種の多価アルコール、及びホウ素化合物もしくはホウ酸イオンを含有する水の組み合わせを含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項１３】
ヒドロトロピー剤対タンパク質分解酵素の重量比が、４００：１〜２００：１である、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項１４】
ヒドロトロピー剤対タンパク質分解酵素の重量比が、３００：１〜３５０：１である、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項１５】
タンパク質分解酵が、プロテアーゼである、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項１６】
ヒドロトロピー剤の濃度が２５％を超えない、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項１７】
グリコールエーテル対多価アルコールのモル比が、０．２：１〜１：１である、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項１８】
医療用洗浄剤として使用されるために配合される、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項１９】
工業用洗浄剤として使用されるために配合される、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項２０】
冷却コイルの洗浄において使用されるために配合される、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の液体組成物。
【請求項２１】
洗浄を必要とする医療機器を洗浄する方法であって、前記医療機器と請求項１〜１８のいずれか一項に記載の組成物を接触させる工程を含む方法。
【請求項２２】
洗浄を必要とする空調機部品を洗浄する方法であって、前記空調機部品と請求項１〜１７のいずれか一項に記載の組成物を接触させる工程を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一般的な洗浄に使用するため、特に医療機器の洗浄に使用するための組成物であって、汚れの除去及びタンパク質消化に効果的であると共に低発泡性のままである組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
手術又は診断検査に随伴する医療手当後の感染が、広く報告されている。これらの感染のうちかなりの数が、再使用可能な機器の不適切な再処理に起因していると考えられている。
【０００３】
工業規模での機器の洗浄は、二つのステップを伴う。第一のステップで機器を洗浄し、第二のステップで通常は「高度消毒」又は「殺菌」水準にまでこれを消毒する。第一のステップで使用済みの品目を適切に洗浄し損じると、第二のステップの有効性が損なわれうることが一般的に受け入れられている。機器からヒトタンパク質を除去することは相当な難題を意味する。この難題は、例えば耐温度性及び化学的不活性のいずれでもない材料を活用した内視鏡のような医療機器が開発されるにつれて、よりいっそう難しいものとなっている。
【０００４】
医療機器の効果的な洗浄のためには、調製品は汚れの除去に効果的であり、タンパク質消化に効果的であり、そして耐発泡性である必要がある。さらに、製品には安定性と長い保管寿命を有することが求められる。
【０００５】
これらの要求は、互いに矛盾した目的となる傾向にある。泡の発生を避けるため、病院の洗浄／殺菌「再処理」システムで使用される汚れ除去用調製品は、主に高アルカリ性の非発泡性洗剤を活用してきたが、その使用は、酵素及び柔軟な内視鏡構造物の材料の両方と相容れない。中性に近い「酵素性洗剤」（酵素と洗剤の両方を含む調製品）の使用は、タンパク質の除去に比較的効果的であり、かつ内視鏡に対して安全であることが見出され、そして実現されるべき許容されうる汚れ除去のレベルを可能にする。しかしながら、「酵素性洗剤」中の酵素はタンパク質を除去するのに役立つ一方で、脂肪及び炭化水素を除去するためには界面活性剤が必要であった。「酵素性洗剤」は、界面活性剤を含ませることにより許容しえない程度の泡を産生する傾向にある。
【０００６】
泡の発生は、手動での洗浄浴中の機器の視覚化を妨害し、手動での洗浄の際に洗浄液が汚れに到達することを妨げ、そして自動洗浄機（例えばトンネル洗浄機）中の水流及び洗浄液の循環を妨害するため望ましくない。泡には機器の内腔をふさぐ傾向があり、内腔の内側の効果的な洗浄を妨げる。酵素を主剤とした洗浄剤を再処理設備において使用していた時には、泡が容積を充填する傾向にあり、したがって水流及び撹拌が妨害されることにより洗浄サイクルが妨げられた。さらに、設備は排出困難となり、正常な脱水が妨げられ、以降の洗浄サイクルを汚染し得る病原菌を含んだ泡残渣を残すこととなる。洗浄剤は表面から除かれる微生物を死滅させないため、これは交差感染のリスクを著しく上昇させる。泡に覆われた機器は、殺菌可能になる前に追加の処理と洗浄が必要である。次第に、追加の人件費、時間及び水の消費コストは許容し得ないと認識されるようになった。複数のガイドラインと基準が、この問題を認め、医療機器の洗浄に発泡性洗剤を使用することに対して警告している（例えば、ＡＳ４１８７：２００３又はＡＳ４８１５：２００６）。
【０００７】
この問題は認められていたものの、今日に至るまで満足に克服されていない。泡発生の問題に対して二つの解決策が活用されてきたが、今日に至るまでいずれの取り組みも市場の需要を満足させることに成功していない。
【０００８】
第一の取り組みでは、洗浄組成物又は洗浄機に消泡剤が添加されていたが、消泡剤は医療機器上に許容されない残渣を残すため満足のいくものではなかった。第二の取り組みでは、例えばアルキレンオキシド付加物のような「低発泡性」ノニオン系洗剤と呼ばれるものを使用する試みがなされた。これらは、処理した表面上に、消泡剤によるものと似た望ましくない油性残渣の皮膜を残す傾向があり、さらに霞んだ溶液を産生して、洗浄サイクル中の可視性を低下させる。結論としては、市販されている製剤は、不十分な洗浄性又は高発泡性のいずれかである傾向があり、したがって医療機器の洗浄には適さないか、あるいは適用される界面活性剤による酵素の変性に起因して不安定である傾向があり、不十分な保管寿命を呈する。
【０００９】
Cheetham (Australian Infection Control, Sept 2005, 10, 3, p103-109)は、八つの製造者から提供され、市場で主要な、酵素を主剤とした医療機器洗浄剤１７種を比較した（表１）。
【００１０】
【表１】
0005479894.tif 000002
【００１１】
ＳＤＳ−ＰＡＧＥの手法を用い、様々な洗浄剤製品にさらす前後における、標準化された血液タンパク質の群の分子量を比較することにより、製品を試験した。Cheethamは、試験した製品の半分は、製造者の指示に従って使用した場合には、僅かなタンパク質消化を示すか、あるいはタンパク質消化を全く示さず、二つの製品（Rapid 70500 及び Rapid 70501−共に 3M から提供され、それぞれ RMEC 70500 及び RMEC 70501 としても知られる）だけが高度のタンパク質消化をもたらしたことを報告した。Cheethamは発泡特性や安定性に関する報告はしなかった。本出願人は、高度のタンパク質消化をもたらした二つの製品を試験し、一方は高水準の発泡を示し、他方はアルキレンオキシドブロックコポリマーを含有して処理後の表面上に望ましくない油性残渣を残す。さらに、容易に阻害される酵素との共存下では両方とも良好な安定性を示す一方で、阻害しにくい酵素との共存下では両方とも乏しい安定性を示した。
【００１２】
さらに、医療機器の洗浄に関して問題の概要を述べたが、汚れの除去及びタンパク質の消化に効果的であり、かつ耐発泡性である洗浄組成物への要望は、医療機器の洗浄に関する分野に限ったものではない。そのような特性は、安定性及び長い保管寿命と共に、さまざまな洗浄用途において望ましいものである。
【００１３】
低発泡性洗浄組成物が望ましいさらなる分野は、空調及び空冷の分野である。例えば、生鮮食品冷却室は、前記室と一体になっているファンを取り付けられた冷却ユニットにより温度が制御されている。ファンは、冷却された冷却コイル型熱交換器を通して室内に周囲の空気を引き入れる。空気の冷却プロセスは、熱交換器の低温度表面に湿気が凝結することによる湿度の低下をもたらす。継続的に濡れているか、もしくは湿っている周囲表面は、生物膜により覆われることが知られている。この生物膜は熱交換効率を低下させるだけでなく、室内への微生物汚染源として非常に重要な可能性を有しており、従って望ましくない。
【００１４】
現在のところ、熱交換コイルから生物膜を除く既存の方法の数は、ごく限られている。生物膜は、摩擦ブラシ又は高圧水により除去され得る。冷却羽の間の空間が効率的なブラッシングには不十分であり、そしてブラッシングが非常に面倒な工程となってしまうほど表面積が広大であるため、この方法には問題があるということが分かっている。薄いアルミニウム切片によりできている冷却羽を損傷するため、高圧水は望ましくないことが分かっている。
【００１５】
別の方法としては、熱交換コイルを強アルカリ又は強酸で洗浄してもよい。アルカリ又は酸は、最終的には生物膜を除くものであるが、両方ともアルミニウム羽及びこれらが取り付けられている銅製の冷却チューブに重大な腐食損傷をもたらすため、この方法には問題があるということが分かっている。この腐食により、熱交換コイルの耐用年数が著しく制限される。
【００１６】
したがって、多量の泡を産生することなく作用する、効果的であり、かつ非腐食性の洗浄薬剤を手に入れることが望ましい。
【００１７】
本明細書全体にわたる先行技術のいかなる議論も、そのような先行技術が、周知であること又は本技術分野における一般知識の一部を成すことを承認するものとみなされるべきではない。
【００１８】
本発明の目的
本発明の目的は、改良された洗浄用組成物を提供することであり、特には医療機器の洗浄において先行技術の欠点の少なくとも幾つかを防ぐか、又は改善する洗浄用組成物を提供することである。本発明の好ましい実施態様の目的は、洗浄用組成物を提供することであり、特には医療機器の洗浄において低発泡性であり、優れた酵素保管安定性を有し、そして汚れの除去及びタンパク質消化に効果的である洗浄用組成物を提供することである。
【００１９】
本発明の簡単な記述
本発明は、高い水準で汚れを除去し、優れたプロテアーゼ安定性を呈し、そして残渣を望ましくない水準で残すことなく発泡を許容しうる水準にまで減少させる液体組成物を提供する。本組成物は、非常に高い酵素保管寿命安定性を呈する。
【００２０】
広い態様において本発明は、洗浄用の液体を提供し、ここで前記組成物は界面活性剤を含まず、プロテアーゼを含む一種以上の酵素、水溶性グリコールエーテル溶媒を含む溶媒系、及び少なくとも一種のアニオン性ヒドロトロピー剤を含み、そして、組成中の前記グリコールエーテルに対する前記少なくとも一種のヒドロトロピー剤のモル比は、前記一種以上の酵素の活性を保つように選択される。
【００２１】
第一の態様によれば、本発明は医療機器を洗浄するための液体組成物を提供し、ここで前記組成物は界面活性剤を含まず、プロテアーゼを含む一種以上の酵素、水溶性グリコールエーテル溶媒を含む溶媒系、及び少なくとも一種のアニオン性ヒドロトロピー剤を含み、そして、組成中の前記グリコールエーテルに対する前記少なくとも一種のヒドロトロピー剤のモル比は、前記一種以上の酵素の活性を保つように選択される。
【００２２】
文脈が別のものを明らかに求めない限り、明細書及び請求項を通して、用語「含む」「含んでいる」等は、排他的又は完全な意味とは対抗するように、包含的な意味で解釈されるべきであり、いいかえれば、「含むが、これに限定されない」という意味である。
【００２３】
好ましい実施態様においては、組成物は、プロテアーゼに加えて幾つかの追加的な加水分解酵素を含み、前記加水分解酵素は、リパーゼ、セルラーゼ及びアミラーゼを含むが、これらに限定されない。
【００２４】
望ましくは、ヒドロトロピー剤は、下式：
【００２５】
【化１】
0005479894.tif 000003
【００２６】
そしてより好ましくは、下式：
【００２７】
【化２】
0005479894.tif 000004
で示される水溶性アニオン性ヒドロトロピー剤からなる群から選択され、炭素６個より長いアルキル側鎖を有さないアニオン性ヒドロトロピー剤である。
【００２８】
好ましいヒドロトロピー剤においては、Ｒ１及びＲ２は独立に１〜６個の炭素を有するアルキル基であるが、Ｒ１又はＲ２は場合により水素であってもよい。好ましいヒドロトロピー剤は、短鎖（６個より少なく、好ましくは１〜４個の炭素であり、より好ましくは１〜２個の炭素である）を有する。非常に好ましいヒドロトロピー剤は、水溶性キシレンスルホン酸（Ｒ１がメチルであり、Ｒ２がメチルである）及びクメンスルホン酸（Ｒ１がイソプロピルであり、Ｒ２が水素である）の塩である。
【００２９】
アニオン性ヒドロトロピー剤及びグリコールエーテル溶媒の両方が強いタンパク質（及び酵素）変性剤であると認識されているため、本発明の組成物が上記の要求の全てを有することは、驚くべきことである：
−非発泡性
−優れた酵素保管寿命安定性
−標準的医療汚れに対する優れた洗浄性能
−望ましくない残渣を残さない
【００３０】
第二の態様によれば、本発明は、第一の態様の組成物であって、ヒドロトロピー剤：グリコールエーテルのモル比が１．１：１より大きくなるように選択された組成物を提供する。より好ましくは、ヒドロトロピー剤：グリコールエーテルの重量比は１．２：１より大きく、あるいはさらに好ましくは１．５：１より大きい。
【００３１】
第三の態様によれば、本発明は、使用に際して濃縮物１部に対して少なくとも水２０部（好ましい態様においては濃縮物１部に対して水１００〜１０００部）で希釈されるように調製された濃縮物での第一又は第二の態様の組成物を提供し、ここで、ヒドロトロピー剤は一つ以上の短い（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル側鎖を有する水溶性芳香族スルホン酸塩を含む群から選択される。
【００３２】
第四の態様によれば、本発明は、第一又は第二の態様の組成物であって、溶媒が少なくとも一種のグリコールエーテル、少なくとも一種の多価アルコール、及びホウ素もしくはホウ酸イオンを含有する水の組み合わせを含む組成物を提供する。
【００３３】
第五の態様によれば、本発明は、上述の態様のいずれかの組成物であって、組成物の各成分が、炭素６個より長いアルキル側鎖を含む化合物を除くように選択される組成物を提供する。
【００３４】
濃度比は、保管中の酵素劣化の防止に決定的な影響を及ぼす。ヒドロトロピー剤対タンパク質分解酵素の重量比は、４００：１〜２００：１、より好ましくは３００：１〜３５０：１であるべきであり、そしてヒドロトロピー剤の濃度は２５％を超えるべきではない。るグリコールエーテル対多価アルコールのモル比は、好ましくは０．２：１〜１：１である。
【００３５】
本発明の組成物は、医療機器の洗浄に特に適しており、主にその用途に関して記述してきた。しかしながら、当然のことながら、本発明の洗浄組成物がその用途に限られることは決してない。これらは、表面から生物学的物質を取り除くことが望まれるいかなる状況においても使用してよく、これには工業及び家庭用途があり、例えばタンパク質性材料により汚染された湿潤表面の洗浄や冷却コイルの洗浄がある。本発明の組成物は、冷却塔の内側及び水を伴う熱交換器の熱交換表面の洗浄において特に効率的であることが見出されている。
【００３６】
実施例：
本発明の組成物は、実施例１、２、３に示されている。これらは、主として組成物中のグリコールエーテルに対するキシレンスルホン酸ナトリウムのモル比がそれぞれ１．１：１、１．２：１及び１．６：１であるという点において互いに異なっている。
【００３７】
【表２】
0005479894.tif 000005
【００３８】
【表３】
0005479894.tif 000006
【００３９】
【表４】
0005479894.tif 000007
【００４０】
比較例４及び５は実施例１に類似しているが、ヒドロトロピー剤対グリコールエーテルの比は比較例４においては１．０：１．０であり、比較例５においては０．９：１である。
【００４１】
【表５】
0005479894.tif 000008
【００４２】
使用に際しては、本発明の組成物は濃縮物として２５℃で少なくとも１８ヶ月保管してもよく、使用前に水道水で２０：１〜１０００：１に希釈される。
【００４３】
上記に示され、そして表１で特定されている、Cheethamにより評価された組成物のうち、最上のものの性能を以下の表２にまとめる。表２には、１２種の市販されている洗浄剤を、次の観点：保管寿命プロテアーゼ安定性（列２、３）、汚れ除去効率（列４）、残留泡の高さ（列５）及び潜在的残渣の存在において要約した形で比較している。汚れ除去の観点において最も効果的であった三つの市販されている組成物は、Cidezyme、3M Rapid 70505及び3M 70500であり、これらは全て１０を得点した。しかしながら、これらのうち3M Rapid 70500は５００mlの高さの残留泡を産生し、これは許容し得ず、他方で3M Rapid 70505は油性の残渣を残し、これもまた満足のいかないものであった。Cidezymeは、残留物を全く残すことなく、残留泡の高さについての試験に合格した。しかしながらCidezymeは、安定及び不安定プロテアーゼ保管寿命安定性試験の両方において不合格であった。これと比較して、本発明の実施例１、２、３の製剤は優れた汚れ除去を達成し、各試験に合格した。
【００４４】
【表６】
0005479894.tif 000009
【００４５】
以下の表３は、比較例４及び５の結果を示す。これらの例は、ヒドロトロピー剤対グリコールエーテルのモル比が、前記一種以上の酵素の活性を保つように選択されておらず、それぞれ１．０：１及び０．９：１より低くなっているという点において実施例１〜３と異なる。これは、例示された組成物において安定性を達成するためには、ヒドロトロピー剤対グリコールエーテルのモル比を１．１：１より高くなるように選択するべきであることを示している。しかしながら、他の組成物の選択されるべき比については、ここに開示される教示を考慮し、本発明の範囲内で決定することができる。
【００４６】
【表７】
0005479894.tif 000010
【００４７】
上記の表２及び３のデータを用意するために用いられた試験の詳細及び得られた結果を、以下に示す。
【００４８】
１．汚れ除去試験
範囲：本方法は、模した医療汚れの除去における洗浄剤及び洗剤の相対的効率の定性的及び／又は定量的評価を可能にする。
【００４９】
Browne指示計ストリップ（STF負荷検査ストリップ（Albert Browne Ltd Leicester UK））は、トンネル洗浄機、単槽洗浄消毒装置等の洗浄効率の記録を確かにし、かつ援助するように設計されている。この指示計は、タンパク質を主体とした汚れを両面に塗布されたプラスチック基板からなる。これは、除くのが非常に困難な医療汚れを模したものである。洗剤処理後にストリップ上に残留している汚れの量は、視覚的に評価できる。
【００５０】
汚れ除去試験のサンプル調製
９９±０．５mlの水道水を入れた１２５mlビーカーを水槽中に置き、約３０分かけて所要の温度と平衡させた。次に、各ビーカーに所要量の試験製品／洗剤サンプルを加え、穏やかに撹拌した。ビーカーを一つ対照として残し、試験製品の代わりに水を１ml加えた。これらの溶液をさらに５分置いて温度と平衡させた。
【００５１】
Browne STF負荷検査指示計ストリップ（Browneストリップ）を半分に切り（試験ストリップを二つ得るため）、各ビーカーに加えた。ビーカーの寸法は、ストリップを斜めに配置させ、かつ完全に試験溶液に浸すことができるように選択される。
【００５２】
所定の時間間隔の終わりに、清浄なピンセットを用いて、ストリップのいずれの側の汚れ斑点とも接触することが無いように注意深くストリップを取り除いた。次に、ストリップを清浄な水道水に短時間浸し、濡れたまま干した。ストリップを乾燥させた後、これらを白色紙上に置き、視覚的評価のために写真撮影した。
【００５３】
汚れ除去の程度の判断
汚れ除去の程度の判断は、一般的には０〜１０の階級で測定され、ここで０が最も低い程度であり（視覚的な汚れの除去無し）、１０が最も高い程度である（完全に汚れを除去）。
【００５４】
（ｂ）汚れ除去結果
市販されている酵素性洗剤のうち最上のもの（Cheethamによる−添付の表１参照）を、上記の汚れ除去試験を用い、表４に示される結果により、本発明の製剤と比較した。
【００５５】
【表８】
0005479894.tif 000011
【００５６】
２．プロテアーゼ保管寿命安定性試験
範囲：本試験は、酵素性製剤の材料を、その保管中にプロテアーゼ活性を保つ能力の観点から比較することを可能にする。酵素活性は、時間の経過に伴いタンパク質変性及び自己タンパク質分解（自己消化）により低下することが知られている。これらのプロセスは、温度の上昇により劇的に加速される（１０℃の温度上昇毎に変性の速度が８倍になる。）時間の経過に伴うタンパク質分解活性の消失を、各製品について定量し、各製剤についてパーセント表示した。
【００５７】
手順：研究対象の洗浄剤中に残存している全てのプロテアーゼを、各製品を蓋をしたビーカー中で２〜３分穏やかに沸騰させることで変性させ、
１．冷却し、プロテアーゼ試験ストリップを用いてタンパク質分解活性が無いことを確認し、
２．試験するプロテアーゼを１０％ｗ／ｗで加えた。「試験Ａ」では安定プロテアーゼ（Savinase Ultra 16XL, Novozymesより入手）を使用した。「試験Ｂ」では比較的不安定な酵素（Savinase 16L, Novozymesより入手）を使用した。実用的であれば、同一のアッセイにおいて良く安定化された酵素と安定化されていない酵素の両方が使用される−例えば、Novozymes から入手されるSavinase Ultra 16XL 及び Savinase 16Lである。
３．調製したサンプルをそれぞれ三つに分割し、４、２５及び４０℃で保管した。
４．アッセイを行い、初期プロテアーゼ活性を記録した。
５．１４日後、各サンプルについて残存しているプロテアーゼ活性をアッセイした。各温度におけるプロテアーゼ活性消失のパーセントを記録した。
【００５８】
表５中の安定及び不安定プロテアーゼの両方において初期プロテアーゼ活性消失が５％以下であった場合を「合格」と見なした。
【００５９】
（ｂ）安定及び不安定プロテアーゼ保管寿命試験の結果
表４に載っている各組成物について得られた上記の安定及び不安定プロテアーゼ保管寿命試験の結果を表５に示す：
【００６０】
【表９】
0005479894.tif 000012
【００６１】
３．泡体積試験及び残渣存在試験
原理（泡体積）
ガラス瓶を備えた市販型ミキサーを用い、２５±１℃で〜６０００rpmにて３０秒間混合し、次に泡を含めた試験流体の全体積の増加を測定することにより泡体積の増加を決定した。
【００６２】
装置
ミキサー：市販ミキサーのMoulinexを用いた。ガラス瓶は体積目盛りがついていた（２０〜２５mlの印）。
【００６３】
手順（泡体積）
１．１０ｓブレンド及び新鮮な蒸留水のサンプルを使用した蒸留水で、混合により感知できる泡が発現しなくなるまでミキサーを洗浄して濯いだ。泡が持続する場合には、アルコールで洗浄し、続いて少なくとも３回蒸留水で濯いだ。
２．製造者が推奨する希釈法を用いて溶液を５００ml調製した。
３．試験液体を清浄なガラスボトル又は瓶に入れ、定温の水槽中に水位が空気／試験流体界面の少なくとも１０mm上になるような深さで、２５±１℃で最短１時間、最長２時間保管した。
４．試験液体をミキサーの瓶に注いだ。
５．いかなる泡も無視して、試験液体の体積を測定し、記録した。これを、初期体積Ｉとした。
６．選択された速度において３０±１秒混合した。
７．ミキサーを止め、速やかに泡を含めた全体積を測定した。溶液の初期体積（I）を差し引き、泡体積として記録した。
残存泡の高さが１００より低いものを「合格」として受け入れた。
【００６４】
残渣存在試験
範囲：もしあれば、油性残渣を記録する。
【００６５】
方法：油性残渣は、解剖顕微鏡及び側面照明を用い、ガラススライド上で容易に観測できる。あらかじめ洗浄された顕微鏡ガラススライドを、希釈された酵素性洗浄剤中に浸し、次にスライドを、蒸留水を入れたビーカー中に一度浸すことによりやさしく濯いだ。スライドを濡れたまま干し、残渣の存在をアッセイした。
【００６６】
いかなる検出可能な残渣も「不合格」である。残渣の検出が無いと「合格」である。
【００６７】
（ｂ）残存泡体積及び残渣存在試験の結果
表４に載っている各組成物について得られた上記の泡体積及び残渣存在試験の結果を表６に示す：
【００６８】
【表１０】
0005479894.tif 000013
【００６９】
更なる例として、添付の図１〜４は泡の発生／残渣特性の違いを説明する。図１〜４は、濃縮物を容器に量り入れて次に必要量の水を加えるという、通常の使用手順を模している。結果を、撹拌することなく写真撮影した。
【図面の簡単な説明】
【００７０】
【図１】図１は、3M Rapid Multi enzyme Cleaner 70500（Cheethamの研究において最も良い性能を示した二つのうちの一つ）を満たした容器中の医療機器を示している。泡により、機器は殆ど見えない。
【図２】図２は、液体の上に安定な量の泡を有する、ビーカー中の同じ商品（3M Rapid Multi enzyme Cleaner 70500）を示している。
【図３】図３は、最も良い性能を示した他方（3M Rapid 70505）を示している。曇った液体中に、視認可能な望ましくない乳状の残渣が懸濁している。
【図４】図４は、図１の、本発明の組成物（実施例２）を適用した場合に対応する。
【００７１】
例示された各組成物に関して、プロテアーゼに対するヒドロトロピー剤の比及び多価アルコールに対するＤＰＭの比を表７に示す。
【００７２】
【表１１】
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【００７３】
実施例７−熱交換器の洗浄
本発明の低発泡性組成物を使用して熱交換器を洗浄した。２ステップの工程を適用した。
【００７４】
先ず最初に、熱交換器に上記の実施例１〜３で記載したような本発明の酵素性洗浄剤をスプレーした。酵素性洗浄剤は、典型的には非常に汚れた熱交換器については酵素性洗浄剤１部に対して水５０部の比率で希釈し、汚れがこれほどひどくはない熱交換器については酵素性洗浄剤１部に対して水１００部までの比率で希釈した。
【００７５】
洗浄剤を生物学的物質に浸透させ、これを消化させるために、汚染された表面中にしみ込ませた。しみ込ませる時間は、熱交換器上の汚れの深さによるが、典型的には１０〜２０分である。
【００７６】
次に、熱交換器を低圧の水でスプレーし、羽に対する物理的損傷を加えることなく消化された汚染物質を除去した。泡により障害されるコイルの量が最小限であったため、消化された汚染物質は容易に除去された。
【００７７】
この工程は、このスプレー段階中に泡をおびただしく発生する傾向を有する従来の酵素性調製物により洗浄を行うことと対照的であった。泡は汚染物質粒子を懸濁させ、更なるスプレーを必要とする領域を視界から隠す。
【００７８】
したがって、発泡性が非常に低いか、あるいは非発泡性である酵素性調製物を使用することは大いに有利であることが示された。
【００７９】
特定の実施例を参照して本発明を説明したが、ここに開示された発明の概念の範囲から外れることなく、当業者にとってここに示された教示から明らかである程度にまで本製剤を変更してもよい。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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