(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
有効成分として、式（１）：
【化１】
0005546807.tif 000021
（ＲはＨまたは糖である）
で表される化合物を含む、ＰＰＡＲα、δおよび／またはγのリガンド剤。
【請求項２】
肥満、肥満に伴い発症するインスリン抵抗性、高脂血症、高血圧または糖尿病を予防および／または改善するための、請求項１記載のＰＰＡＲα、δおよび／またはγのリガンド剤。    
【請求項３】
医薬品の形態である、請求項２記載のＰＰＡＲα、δおよび／またはγのリガンド剤。  
【請求項４】
式（１）：
【化２】
0005546807.tif 000022
（ＲはＧｌｃである）
で表される化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＰＰＡＲリガンド剤に関する。より具体的には、肥満、肥満に伴い発症するインスリン抵抗性、高脂血症、高血圧または糖尿病を予防および／または改善する作用を有するＰＰＡＲα、δおよび／またはγのリガンド剤に関する。さらに、ＰＰＡＲα、δおよび／またはγのリガンド作用を有する新規化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体（Ｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒ−ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：ＰＰＡＲs）は、リガンド依存的に転写を制御する核内受容体で、ＰＰＡＲα、ＰＰＡＲδ（ＰＰＡＲβ）、ＰＰＡＲγの３種のサブタイプの存在が知られている。
【０００３】
ＰＰＡＲαの主要調節臓器は肝臓であり、ＰＰＡＲαが活性化することにより、肝臓における脂肪の燃焼が促進され、血中・肝臓・骨格筋の中性脂肪含量が減少し、インスリン抵抗性が改善される。
【０００４】
ＰＰＡＲδはＰＰＡＲβとも呼ばれ、特に骨格筋を中心とした強力なエネルギー代謝促進作用、脂肪酸燃焼促進作用をつかさどっていることが明らかとなっている。ＰＰＡＲδアゴニスト（ＧＷ５０１５１６）を用いた実験では、ＰＰＡＲδの活性化により、骨格筋の脂肪酸酸化が亢進し、高脂肪食による肥満やインスリン抵抗性も抑制されたことが示されている。
【０００５】
ＰＰＡＲγの主要調節臓器は脂肪組織である。ＰＰＡＲγのアゴニストであるチアゾリジン誘導体は、ＰＰＡＲγを介して肥大脂肪細胞のアポトーシスと前駆脂肪細胞から小型脂肪細胞への分化による生成より、肥大脂肪細胞を小型脂肪細胞に置き換えることにより、インスリン抵抗性を改善することが報告されている（非特許文献１）。
【０００６】
このように、ＰＰＡＲsは生体内の糖、脂質代謝の制御に関与しているのみならず、肥満、高脂血症、高血圧、糖尿病などの生活習慣病、癌、炎症性疾患、動脈硬化症などの疾患の発症への関与が明らかとなっている（非特許文献２）。
【０００７】
メタボリックシンドロームにおいて、肥満は他のリスクファクター、インスリン抵抗性、高脂血症、高血圧、糖尿病などの上流に位置しており、したがって、肥満を改善することにより、他のリスクファクターをも改善することが可能である。すなわち、ＰＰＡＲのリガンド剤はＰＰＡＲを活性化することにより、生体内における脂質代謝を促進し、蓄積した脂肪を減少させることにより、肥満を予防および改善し、さらに肥満に伴い発症するインスリン抵抗性、高脂血症、高血圧、糖尿病を予防および改善することが可能である（非特許文献３）。
【０００８】
ウリ科植物の抽出物の抗肥満作用が報告されている（特許文献１）。その内容は、タワシヘチマ(Ｌｕｆｆａ ｃｙｌｉｎｄｒｉｃａ  Ｌ．)由来の、インスリン分泌促進作用やサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用による肥満および糖尿病の予防および治療効果である。また、ウリ科植物、タワシヘチマ由来の有効成分であるデヒドロジコニフェリルアルコールが、ＰＰＡＲαおよびδの働きを活性化させ、脂肪前駆細胞からの脂肪生成を抑制すると報告されている（特許文献２および３）。
【０００９】
ウリ科の植物であるトカドヘチマ（Ｌｕｆｆａ ａｃｕｔａｎｇｕｌａ  Ｒｏｘｂ．）は、インドから東南アジア、中国南部にかけて広く栽培され、未熟果実を野菜として利用している。果実ジュースのエーテル抽出物に細胞毒性を示すククルビタシン類（ｃｕｃｕｒｂｉｔａｃｉｎｓ）が存在するという報告（非特許文献４）、幼苗、根、完熟種子はククルビタシン類を含むという報告がある（非特許文献５）。しかし、トカドヘチマ抽出物がＰＰＡＲリガンド作用を示すことは知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特開2005-139136
【特許文献２】特表2007-513150
【特許文献３】特表2007-515407
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】（門脇孝、第１２４回日本医学会シンポジウム、脂肪細胞によるインスリン抵抗性の分子機構）
【非特許文献２】日本臨床６３巻４号（２００５−４）
【非特許文献３】Journal of Clinical and Experimental Medicine (IGAKU NO AYUMI) vol.220 No.1 (2007) “ＰＰＡＲと疾患“
【非特許文献４】Silapa-Archa,Weena et al.: Warasan Phesatchasat (1981),8(1),p.5
【非特許文献５】Gry, J. et al.: Cucurbitacin in plant food. Norden Nordic Counil of Ministers, TemaNord （2006）， 556 ，p.34
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
ＰＰＡＲリガンド剤は、肥満を予防および／または改善することが期待され、さらにはメタボリックシンドロームのリスクファクターであるインスリン抵抗性、高脂血症、高血圧または糖尿病などを予防および／または改善することが期待される。しかし、既存のＰＰＡＲリガンド剤は、医薬品の長期投与による副作用などが危惧されるほか、食品由来のポリフェノール類などには、十分なＰＰＡＲリガンド作用が得られないなどの問題点がある。  
【００１３】
本発明の目的は、安全で、優れたＰＰＡＲリガンド剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明者らは、上記課題を解決するため、長期摂取しても安全で副作用の少ないＰＰＡＲリガンドを天然由来の４２０種類の植物に求め、鋭意探索した結果、トカドヘチマの抽出物に高いＰＰＡＲリガンド活性があることを見出した。さらに、トカドヘチマ抽出物中から新規化合物である式（１）：
【００１５】
【化１】
0005546807.tif 000002
【００１６】
（Ｒは糖である）
で表わされる化合物を精製し、この化合物が強いＰＰＡＲリガンド作用を有することを見出した。本発明はこれらの知見に基づいて完成したものである。
【００１７】
すなわち本発明は、次の［１］〜［７］である。  
［１］  トカドヘチマの溶媒抽出物を有効成分とするＰＰＡＲα、δおよび／またはγのリガンド剤。
［２］  溶媒がアルコール類または含水アルコール類である、［１］記載のＰＰＡＲα、δおよび／またはγのリガンド剤。
［３］  有効成分として、式（１）：
【００１８】
【化２】
0005546807.tif 000003
【００１９】
（ＲはＨまたは糖である）
で表される化合物を含む、［１］または［２］記載のＰＰＡＲα、δおよび／またはγのリガンド剤。
［４］  肥満、肥満に伴い発症するインスリン抵抗性、高脂血症、高血圧または糖尿病を予防および／または改善するための、［１］〜［３］のいずれかに記載のＰＰＡＲα、δおよび／またはγのリガンド剤。    
［５］  飲食品の形態である、［４］記載のＰＰＡＲα、δおよび／またはγのリガンド剤。    
［６］  医薬品の形態である、［４］記載のＰＰＡＲα、δおよび／またはγのリガンド剤。  
［７］  式（１）：
【００２０】
【化３】
0005546807.tif 000004
【００２１】
（Ｒは糖である）
で表される化合物。
【発明の効果】
【００２２】
本発明のＰＰＡＲリガンド剤は、ＰＰＡＲα、δおよびγに対して優れたリガンド活性を示し、かつ、食物として摂取されている植物由来であり、安全性が高い。したがって、本発明により、優れたＰＰＡＲリガンド剤が提供され、肥満、肥満に伴うインスリン抵抗性、高脂血症、高血圧、糖尿病などを予防および/または改善に有効な飲食物、医薬品の形態であるＰＰＡＲリガンド剤が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】図１は、トカドヘチマの未熟果実（９月収穫）メタノール抽出物のＰＰＡＲリガンド活性の用量反応性を示す。
【図２】図２は、トカドヘチマの根、茎、葉（９月収穫）メタノール抽出物のＰＰＡＲリガンド活性の用量反応性を示す。
【図３】図３は、トカドヘチマの根、茎、葉（１０月下旬収穫）メタノール抽出物のＰＰＡＲリガンド活性の用量反応性を示す。
【図４】図４は、トカドヘチマの熱水抽出物のＰＰＡＲリガンド活性の用量反応性を示す。
【図５】図５は、トカドヘチマのメタノール抽出物のＰＰＡＲリガンド活性の用量反応性を示す。
【図６】図６は、トカドヘチマの７０容量％  エタノール抽出物のＰＰＡＲリガンド活性の用量反応性を示す。
【図７】図７は、トカドヘチマエキスのクロマトグラムを示す。縦軸：２８０  ｎｍの吸光度、横軸：時間、マーカー：分画したフラクションを示す。
【図８】図８は、分画物のＰＰＡＲリガンド活性を示す。縦軸：活性化率、横軸：フラクションＮｏ．、α：ＰＰＡＲα、δ：ＰＰＡＲδ、γ：ＰＰＡＲγに対する作用、を示す。
【図９】図９は、フラクション９３のＰＰＡＲリガンド活性を示す。
【図１０】図１０は、フラクション９４のＰＰＡＲリガンド活性を示す。
【図１１】図１１は、フラクション１２４のＰＰＡＲリガンド活性を示す。
【図１２】図１２は、フラクション１２５のＰＰＡＲリガンド活性を示す。
【図１３】図１３は、式（１）においてＲがＨである化合物のＨＰＬＣクロマトグラムと吸収スペクトルを示す。
【図１４】図１４は、式（１）においてＲがＧｌｃである化合物のＨＰＬＣクロマトグラムと吸収スペクトルを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
以下、本発明の実施の形態について、詳細に説明する。
＜ＰＰＡＲリガンド剤＞
本発明のＰＰＡＲリガンド剤は、トカドヘチマ抽出物または該抽出物中の特定の化合物を有効成分として含有する。
【００２５】
トカドヘチマ抽出物
原料となるトカドヘチマ（Ｌｕｆｆａ ａｃｕｔａｎｇｕｌａ  Ｒｏｘｂ．）はウリ科の植物である。トカドヘチマはインドから東南アジア、中国南部にかけて広く栽培され、未熟果実を野菜として利用している（世界有用植物事典  平凡社  p. 637、熱帯の野菜  農林水産省熱帯農業研究センター p. 37-39）。  
【００２６】
トカドヘチマ抽出物の原料は、未熟果実を用いるのが好ましいが、これら以外の部位、果皮、葉、花、地上部、全草などのいずれかを、またはいずれも用いることができる。
抽出に用いる溶媒としては、炭素数１〜４の低級アルコール類（たとえばメタノール、エタノール、プロパノール、ブタノールなど）、液状多価アルコール（例えば、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリンなど）、ケトン類（たとえば、アセトン、メチルエチルケトンなど）、エステル類（例えば、酢酸エチル、酢酸ブチルなど）などが挙げられる。これらは、単独または２種以上を混合して用いることもできる。本発明においては、含水アルコール類またはアルコール類を用いるのが好ましく、特に含水低級アルコール類または低級アルコール類が好ましい。
【００２７】
溶媒抽出する場合、トカドヘチマは生のまま、または乾燥させたもののいずれを用いても良く、抽出する際の植物体は原型のまま、切断したもの、粉砕したもの、粉末化したものなどいずれを用いても良い。抽出温度は５〜８０℃の範囲で適宜に、更に加圧、減圧などの条件も適宜に設定することが可能であるが、抽出溶媒の安全性、抽出成分の安定性の点から、温度としては室温が好ましい。抽出時間は０．１時間〜１ヶ月の範囲で適宜に設定することが可能であるが、好ましくは０．５時間〜７日である。植物体と抽出溶媒の比率は１〜1０００倍（Ｗ/Ｖ）の範囲で任意に設定することが可能であるが、好ましくは１〜１００倍（Ｗ/Ｖ）である。
【００２８】
２−アリルベンゾフラン類縁体
本発明のリガンド剤は、式（１）
【００２９】
【化４】
0005546807.tif 000005
【００３０】
（ＲはＨまたは糖である）
で表される２−アリルベンゾフラン類縁体を含む。    
Ｒ部分の糖は、３炭糖〜７炭糖のいずれであってもよく、また単糖に限らず複数個結合した糖であってもよい。好ましい例としては、構成糖としてはグルコース、ラムノース、アラビノース、キシロース、またはガラクトースであり、それらが１〜８個結合したものが挙げられる。特に好ましくは、糖はグルコースである。
【００３１】
Ｒが糖の場合、糖中のいずれのＯＨ基が結合した化合物であってもよいが、Ｃ−１位のＯＨ基が結合したものが好ましい。
上記化合物は、トカドヘチマから抽出・精製することにより得ることができる。抽出・精製方法は、当業者の知識に基づいて適宜実施することができる。例示としては、抽出物を実施例８〜１２に示す方法で精製することにより得ることができる。
【００３２】
上記化合物は、強いＰＰＡＲα、δおよびγリガンド作用を有する。
なお、ＷＯ  ２００３０５１８６０には、本発明に用いられる２−アリルベンゾフラン類縁体と構造類似のＣＡＳ  ５５１００２−３３−６が開示されている。しかし、該物質のエストロジェン作用を標榜しており、ＰＰＡＲリガンド作用や抗肥満効果に関しては開示されていない。また、ＷＯ  ２００９０６４２５１には、２−アリルベンゾフラン類縁体（ＲがＨ）が開示されている。しかし、該物質を部分構造とするプロスタグランジンＥ合成酵素阻害作用を標榜しており、ＰＰＡＲリガンド作用や抗肥満効果に関しては開示されていない。
【００３３】
ＰＰＡＲリガンド活性の評価
ＰＰＡＲリガンド活性は、当業者が通常用いる方法で測定することができる。たとえば、培養細胞にＰＰＡＲα、δまたはγを発現させると同時に、ＰＰＡＲの活性化に反応して蛍光シグナル等の測定用シグナルを発する系を発現させ、試験物を投与して、測定用シグナルの強度を測定することにより、ＰＰＡＲリガンド活性を定量化することができる。具体的には、実施例１〜３に示す方法で評価することができる。
【００３４】
ＰＰＡＲリガンド剤
本発明のＰＰＡＲリガンド剤は、ＰＰＡＲの生体内分布や生理活性に応じて、ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体が関連する疾患の予防および／または改善のために用いることができる。具体的には、本発明のＰＰＡＲリガンド剤は、肥満、肥満に伴い発症するインスリン抵抗性、高脂血症、高血圧または糖尿病の予防および／または改善に有効である。
【００３５】
本発明において、肥満の予防とは、肥満または肥満症であるとされる状態になるのを防ぐ又は遅らせることをいう。また、肥満の改善とは、肥満または肥満症であるとされる状態を改善することをいう。
【００３６】
本発明において、インスリン抵抗性とは、肝臓・脂肪細胞・骨格筋で、インスリンの主な作用である糖の吸収促進作用が弱っている状態をいう。インスリン抵抗性の予防とは、ＳＳＰＧ（Steady-state plasma glucose）法などによるインスリン抵抗性の指標となる値がより悪化するのを防ぐ又は遅らせることを指す。インスリン抵抗性の改善とは、上記のインスリン抵抗性の指標となる値をより改善することをいう。
【００３７】
本発明において、高脂血症の予防とは、高脂血症の状態又は境界域の状態になるのを防ぐ又は遅らせることをいう。また、高脂血症の改善とは、上記に示す高脂血症の状態または境界域の状態から、正常域と定義している状態に近づけることをいう。
【００３８】
本発明において、高血圧の予防とは、高血圧とされる状態または境界域の状態になるのを防ぐ又は遅らせることをいう。また、高血圧の改善とは、高血圧とされる状態または境界域の状態から、正常域と定義している状態に近づけることをいう。
【００３９】
本発明において、糖尿病の予防とは、糖尿病の状態または境界域の状態になるのを防ぐ又は遅らせることをいう。また、糖尿病の改善とは、糖尿病の状態または境界域の状態から、正常域と定義している状態に近づけることをいう。
【００４０】
本発明のＰＰＡＲリガンド剤は、ＰＰＡＲα、δ、γのいずれをも活性化する効果を有する。本発明のＰＰＡＲリガンド剤は、ＰＰＡＲγに対してもリガンド作用を有することから、トカドヘチマ抽出物の作用はタワシヘチマの作用と明確に区別される。
【００４１】
本発明のＰＰＡＲリガンド剤は、飲食品および医薬品として利用することができるが、その形態は限定されず、健康食品、栄養補助食品、栄養機能食品、特定保健用食品などの飲食品および医薬品として用いることができる。
【００４２】
飲食品としては、チューインガム、チョコレート、キャンディー、ゼリー、ビスケット、クラッカーなどの菓子類、アイスクリーム、氷菓などの冷菓類、 茶、清涼飲料、栄養ドリンク、美容ドリンクなどの飲料、うどん、中華麺、スパゲティー、即席麺などの麺類、蒲鉾、竹輪、はんぺんなどの練り製品、ドレッシング、マヨネーズ、ソースなどの調味料、マーガリン、バター、サラダ油などの油脂類、パン、ハム、スープ、レトルト食品、冷凍食品など、すべての飲食品に使用することができる。これら肥満、肥満に伴い発症するインスリン抵抗性、高脂血症、高血圧、糖尿病を予防および／または改善する組成物を摂取する場合、その摂取量は当該抽出物として成人一人一日当たり、好ましくは０．０１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは１〜３００ｍｇ／ｋｇ体重である。
【００４３】
医薬品として用いる場合は、その剤形は特に限定されず、例えば、カプセル剤、錠剤、顆粒剤、注射剤、座薬、貼付剤などが挙げられる。製剤化においては、薬剤学的に許容される他の製剤素材、例えば、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、酸化防止剤、着色剤、凝集防止剤、吸収促進剤、溶解補助剤、安定化剤などを適宜添加して調製することができる。これら製剤を当該抽出物換算で成人一人一日当たり、好ましくは０．０１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重、より好ましくは１〜３００ｍｇ／ｋｇ体重を１回ないし数回に分けて投与する。
【００４４】
＜新規化合物＞
本発明は、トカドヘチマから得られる新規化合物に関する。具体的には、  
式（１）：
【００４５】
【化５】
0005546807.tif 000006
【００４６】
（Ｒは糖である）
で表される化合物である。  
Ｒ部分の糖は、３炭糖〜７炭糖のいずれであってもよく、また単糖に限らず複数個結合した糖であってもよい。好ましい例としては、構成糖としてはグルコース、ラムノース、アラビノース、キシロース、またはガラクトースであり、それらが１〜８個結合したものが挙げられる。特に好ましくは、糖はグルコースである。
【００４７】
Ｒ部分が糖である化合物は、化学的に合成することができる。たとえば、Ｎ，Ｎ‘−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）中、２、３、４、６−テトラ−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルコピラノースをＲ部分がＨの化合物とカップリングさせたのち、通常の水素化分解によってベンジル基を除去する。例えば、酢酸やアルコールなどのプロトン性極性溶媒中で、あるいはベンゼン、トルエン、酢酸エチルなどの非極性溶媒中で、パラジウム炭素やパラジウム黒、あるいはプラチナ炭素やプラチナ黒などを触媒として水素の存在で脱ベンジル化し、Ｒ部分がグルコースの化合物に導くことができる。
【００４８】
Ｒ部分の糖は、糖中のいずれのＯＨ基が結合した化合物であってもよいが、Ｃ−１位のＯＨ基が結合したものが好ましい。
上記化合物は、トカドヘチマから抽出・精製することにより得ることができる。抽出・精製方法は、当業者の知識に基づいて適宜実施することができる。例示としては、抽出物を実施例８〜１２に示す方法で精製することにより得ることができる。また、化学合成によっても得ることができる。
【００４９】
上記化合物は、強いＰＰＡＲα、δおよびγリガンド作用を有する。
以下に本発明を実施例により詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００５０】
実施例１  ＰＰＡＲγリガンド活性の測定方法
ＰＰＡＲγリガンド活性測定用ＣＨＯ細胞を以下の方法で取得した。
ＰＰＡＲレポータープラスミド（ｐＰＰＲＥ-Ｌｕｃ）は、ＳＶ４０プロモーター遺伝子、蛍ルシフェラーゼ遺伝子を含むレポータープラスミド ｐＧＬ３（Ｐｒｏｍｅｇａ社）のＳＶ４０プロモーター遺伝子の上流にＰＰＡＲ応答配列(ＰＰＲＥ)を３回組み込んだレポータープラスミドである。ＰＰＡＲγ発現プラスミド（ｐＫＤ-ｒＰＰＡＲγ）はＳＶ４０プロモーターによる哺乳類細胞用発現プラスミドにラットＰＰＡＲγ遺伝子を組み込んだプラスミドである。  ｐＰＰＲＥ-ＬｕｃとｐＫＤ-ｒＰＰＡＲγを、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ（Ｉｎｖｉｔｏｒｇｅｎ社）を用いてＣＨＯ（ｄｈｆｒ-）細胞（チャイニーズハムスター卵巣由来細胞ジヒドロ葉酸還元酵素欠損株）にコトランスフェクションした。チミジンをほとんど含有しない透析ウシ胎児血清（Ｇｉｂｃｏ社）を含むＤＭＥＭ培地（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ‘ｓ  Ｍｏｄｉｆｉｅｄ  Ｅａｇｌｅ  Ｍｅｄｉｕｍ、Ｇｉｂｃｏ社）で細胞を培養することにより、ｐＰＰＲＥ-Ｌｕｃ と ｐＫＤ-ｒＰＰＡＲγを保持する安定形質転換株(ＣＨＯ/ＰＰＡＲγ/ＰＰＲＥ)を取得した。
【００５１】
上記細胞を９６穴培養プレートに１ｘ１０４  Ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ となるように播種し、３７℃、５％ ＣＯ2条件下で２４時間培養した。培地には、１０％ ＦＢＳ（ウシ胎仔血清；Ｅｑｕｉｔｅｃｈ−Ｂｉｏ社）、０．３ｇ／ｌ−Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ（日水製薬）、１０ｍｌ/ｌ  ＭＥＭ用非必須アミノ酸溶液（大日本住友製薬）を含むＤＭＥＭ（日水製薬）を用いた。２４時間培養後、試験物を含む培地に交換し、２４時間培養した。溶媒対照にはジメチルスルホキシドを用い、培地に１／１００量添加した。細胞をリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ−）で洗浄した後、細胞溶解液（Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｌｙｓｉｓ  Ｒｅａｇｅｎｔ:Ｐｒｏｍｅｇａ社）で細胞を溶解させ、Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ  Ａｓｓａｙ  Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を添加してマルチラベルカウンター（Ｗａｌｌａｃ社）にてルシフェラーゼの発光強度を測定した。また、ＰＰＡＲγの合成アゴニストであるシグリチゾン（Ｃｉｇｌｉｔｉｚｏｎｅ）（Ｓｉｇｍａ社、濃度２５μＭ）をポジティブコントロールとして用いた。リガンド活性の評価は、コントロール（溶媒対照）の発光強度に対する試験物の発光強度の比を試験物のＰＰＡＲγリガンド活性発光度比とし、１．３以上を示したものについて、ＰＰＡＲγのリガンド活性があると判断した。
【００５２】
実施例２  ＰＰＡＲδリガンド活性の測定方法
ＨｅｐＧ２細胞（ヒト肝臓癌由来の培養細胞）を９６穴培養プレートに１ｘ１０４  ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌとなるように播種し、３７℃、５％ ＣＯ２条件下で２４時間培養した。培地には、１０％ ＦＢＳ（ウシ胎仔血清；Ｅｑｕｉｔｅｃｈ−Ｂｉｏ社）、０．３ｇ／ｌ  Ｌ−Ｇｌｕｔａｍｉｎｅ（日水製薬）を含むＲＰＭＩ１６４０（日水製薬）を用いた。その細胞をＯＰＴＩ−ＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ社）で洗浄した後、ｐＢＩＮＤ／ＧＡＬ４：：ｍＰＰＡＲδとｐＧ５ｌｕｃ（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を用いてトランスフェクションした。なお、ｐＢＩＮＤ／ＧＡＬ４：：ｍＰＰＡＲδは、酵母由来転写因子ＧＡＬ４融合タンパク発現プラズミドであるｐＢＩＮＤ（Ｐｒｏｍｅｇａ社）にマウスＰＰＡＲδ遺伝子を挿入したプラスミドであり、ｐＧ５ｌｕｃはルシフェラーゼ遺伝子の上流にＧＡＬ４の応答配列（ＵＡＳ）を５回組み込んだレポーター・プラスミドである（Ｃｅｌｌ，１９９５年，８３巻，８０３〜８１２頁などに記載の方法で作成可能）。トランスフェクションの約２４時間後、試験物を含む培地に交換し、２４時間培養した。溶媒対照にはジメチルスルホキシドを用い、培地に１／１００量添加した。細胞をリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ−）で洗浄した後、細胞溶解液（Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｌｙｓｉｓ  Ｒｅａｇｅｎｔ：Ｐｒｏｍｅｇａ社）で細胞を溶解させ、Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ  Ａｓｓａｙ  Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ社）を添加してマルチラベルカウンター（Ｗａｌｌａｃ社）にてルシフェラーゼの発光強度を測定した。また、ＰＰＡＲδの合成アゴニストであるＬ−１６５０４１（Ｓｉｇｍａ社、濃度２５μＭ）をポジティブコントロールとして用いた。リガンド活性の評価は、コントロール（溶媒対照）の発光強度に対する試験物の発光強度の比を試験物のＰＰＡＲδリガンド活性発光度比とし、１．３以上を示したものについて、ＰＰＡＲδのリガンド活性があると判断した。
【００５３】
実施例３  ＰＰＡＲαリガンド活性の測定方法
実施例２に記載の方法のうち、融合タンパク発現プラスミドとして、ｐＢＩＮＤ／ＧＡＬ４：：ｍＰＰＡＲδの代わりに、ｐＢＩＮＤ／ＧＡＬ４：：ｍＰＰＡＲαを用いる以外は、実施例２と同様に実施し、ＰＰＡＲαリガンド活性の測定を行った。なお、ｐＢＩＮＤ／ＧＡＬ４：：ｍＰＰＡＲαとは、ｐＢＩＮＤ（Ｐｒｏｍｅｇａ社）にマウスＰＰＡＲα遺伝子を挿入したプラスミドである。また、ＰＰＡＲαの合成アゴニストであるＷＹ−１４６４３（Ｓｉｇｍａ社、濃度２５μＭ）をポジティブコントロールとして用いた。リガンド活性の評価は、コントロール（溶媒対照）の発光強度に対する試験物の発光強度の比を試験物のＰＰＡＲαリガンド活性発光度比とし、１．３以上を示したものについて、ＰＰＡＲαのリガンド活性があると判断した。
【００５４】
実施例４  試験物のＰＰＡＲリガンド活性
植物４２０種の乾燥物をそれぞれ破砕し、破砕物１gに対して１０倍量の７０容量％エタノールに浸し、室温下、１日１回撹拌操作を加えて７日間抽出した。遠心分離後の上澄みを減圧濃縮後、凍結乾燥し、抽出物を得た。抽出物をジメチルスルホキシドに溶かして１０ｍｇ／ｍｌとし、実施例１−３の方法に従ってＰＰＡＲリガンド活性を測定した。セイヨウニワトコ（Ｓａｍｂｕｃｕｓ ｎｉｇｒａ  Ｌ．（花））、アギタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ ｆｅｒｕｌａｅ（子実体））、アシュワガンダ（Ｗｉｔｈａｎｉａ ｓｏｍｎｉｆｅｒａ  Ｄｕｎａｌ（根））、アニス（Ｐｉｍｐｉｎｅｌｌａ ａｎｉｓｕｍ  Ｌ．（種子））、ギョリュウモドキ（Ｃａｌｌｕｎａ ｖｕｌｇａｒｉｓ（Ｌ．）Ｈｕｌｌ．（花））、サクナ（Ｐｅｕｃｅｄａｎｕｍ ｊａｐｏｎｉｃｕｍ  Ｔｈｕｎｂ．（地上部））、セイヨウサンザシ（Ｃｒａｔａｅｇｕｓ ｍｏｎｏｇｙｎａ  Ｊａｑｕｉｎ  ｅｍｅｎｄ．Ｌｉｎｄｍａｎ（果実））、セキガイチャ（Ａｄｉｎａｎｄｒａ ｎｉｔｉｄａ（葉））、タワシヘチマ（Ｌｕｆｆａ ｃｙｌｉｎｄｒｉｃａ  Ｌ．（果実））、チャボトケイソウ（Ｐａｓｓｉｆｌｏｒａ ｉｎｃａｒｎａｔｅ  Ｌ．（地上部））、トカドヘチマ（Ｌｕｆｆａ ａｃｕｔａｎｇｕｌａ  Ｒｏｘｂ．（果実））、ハリエンジュ（Ｒｏｂｉｎｉａ ｐｓｅｕｄｏａｃａｃｉａ  Ｌ．（花））、マンシュウウコギ（Ａｃａｎｔｈｏｐａｎａｘ ｓｅｓｓｉｌｉｆｌｏｒｕｓ（Ｒｕｐｒ．ｅｔ  Ｍａｘｉｍ．）Ｓｅｅｍ．（葉））に活性が認められた。中でも、トカドヘチマ抽出物が活性スペクトル上、とくに優れていた。結果を表１に示す。
【００５５】
【表１】
0005546807.tif 000007
【００５６】
実施例５  トカドヘチマ抽出物の部位の違いによるＰＰＡＲリガンド活性
２３６（ＩＤ２３８０）未熟果実（９月収穫）、４２１（ＩＤ２３７９）根、茎、葉（９月収穫）、４３３（ＩＤ４７１５）根、茎、葉（１０月下旬収穫）の乾燥物をブレンダー（ラボミルサーＬＭ−ＰＬＵＳ，大阪ケミカル株式会社製）で粉砕後、１５ｇに５倍量のメタノールを添加し、室温で一週間浸漬した。東洋ろ紙Ｎｏ．２で吸引ろ過し、ろ液を減圧乾固し、抽出物を得た。固形分回収率は、それぞれ６．２％、４．１％、３．１％であった。抽出物をジメチルスルホキシドに溶かして１０ｍｇ／ｍｌとし、実施例１−３の方法に従ってＰＰＡＲリガンド活性を測定した。結果を表２〜４及び図１〜３に示す。
【００５７】
【表２】
0005546807.tif 000008
【００５８】
【表３】
0005546807.tif 000009
【００５９】
【表４】
0005546807.tif 000010
【００６０】
最大用量の１００μｇ/ｍｌでは細胞障害性を示したが、根・茎・葉および未熟果実にほぼ同等の活性が観察された。
実施例６  トカドヘチマ抽出物の抽出溶媒の違いによるＰＰＡＲリガンド活性
トカドヘチマ乾燥物をブレンダーで粉砕後、熱水、７０容量％エタノール、メタノールの３種類の溶媒で抽出した。抽出条件（固形分収率）は、熱水：１０倍量、８０℃、３０分（２８％）、７０容量％エタノール：１０倍量、室温一週間（２１％）、メタノール：５倍量、室温一週間（６％）である。得られた乾燥抽出物をジメチルスルホキシドに溶かして１０ｍｇ／ｍｌとし、実施例１−３の方法に従ってＰＰＡＲリガンド活性を測定した。結果を表５〜７及び図４〜６に示す。
【００６１】
【表５】
0005546807.tif 000011
【００６２】
【表６】
0005546807.tif 000012
【００６３】
【表７】
0005546807.tif 000013
【００６４】
実施例７  トカドヘチマ抽出物の抽出条件の違いによるＰＰＡＲリガンド活性
トカドヘチマ乾燥物をブレンダーで粉砕後、２gに対して１０倍量の含水量の異なるエタノール（１０容量％、３０容量％、５０容量％、７０容量％、９０容量％エタノール）を添加し、室温で抽出した。１日後、３日後、５日後、７日後に遠心分離し、抽出液を得た。それぞれの抽出液を減圧濃縮、凍結乾燥し、固形分を得た。７０容量％エタノール、７日間浸漬条件の固形分抽出効率（１７．６％）を１．００とした相対抽出効率を求めた。結果を表８に示す。また、得られた乾燥抽出物をジメチルスルホキシドに溶かして５０ｍｇ／ｍｌとし、実施例１−３の方法に従ってＰＰＡＲリガンド活性を測定した。結果を表９〜１１に示す。
【００６５】
【表８】
0005546807.tif 000014
【００６６】
【表９】
0005546807.tif 000015
【００６７】
【表１０】
0005546807.tif 000016
【００６８】
【表１１】
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【００６９】
実施例８
成分の分画
トカドヘチマのメタノールエキス３１０ｍｇにメタノール４ｍｌを添加した試料をＢｏｎｄ−Ｅｌｕｔ−Ｃ８  １ｍｌ（Ｖａｒｉａｎｓ社）５本に分けて負荷し、それぞれメタノール２ｍｌ、アセトニトリル１ｍｌで溶出し、湿重量２９０ｍｇを得た。この前処理ののち、ジメチルスルホキシド２００μｌ、メタノール１００μｌを添加した試料をパックドカラムに付し、５ｍｌ/０．５分ずつ採取した。結果を図７に示す。
【００７０】
分取条件
システム：Ｇｉｌｓｏｎ（登録商標）３０５型および３０３型
カラム：ＤｅｖｅｌｏｓｉｌＴＭ  Ｃ３０−ＵＧ−５（２０＊２５０ｍｍ＋２０＊５０ｍｍ、野村化学株式会社製）
移動相：Ａ：蒸留水、Ｂ：アセトニトリル
プログラム：０分（０％  Ｂ）、７６分（１００％  Ｂ）、１１４分（１００％  Ｂ）
流速：１０ｍｌ/分
検出波長：２８０ｎｍ
フラクションコレクター：Ｇｉｌｓｏｎ（登録商標）  ＦＣ２０４型
実施例９  分画物のＰＰＡＲリガンド活性測定
実施例８で得られたフラクション８１−１３０から各々２００μｌ採取し、減圧濃縮してジメチルスルホキシド１００μｌに再溶解した。実施例１−３の方法にしたがって測定した結果、フラクション９３、９４、１２４―１２７に活性が認められた（図８）。
【００７１】
実施例１０  成分のＰＰＡＲリガンド活性
実施例８で得られた活性画分のうち、フラクション９３、９４、および１２４、１２５の用量反応性を実施例１−３の方法にしたがって測定した。結果を表１２および図９〜１２に示す。活性を示す最大有効希釈倍率はフラクション９３、９４では１３００倍、１２４、１２５では１２０００倍であった。アッセイ時に用いた試料はフラクションを２倍濃縮したものなので、もとの試料ではそれぞれ６５０倍、６０００倍希釈となる。該当フラクションを減圧濃縮、凍結乾燥し、得られた重量が０．２ｍｇであることを考慮すると、有効濃度は、
フラクション９３、９４：０．２ｍｇ/１０ｍｌ/６５０＝０．００００３ｍｇ/ｍｌ＝０．０３μｇ/ｍｌ
フラクション１２４、１２５：０．２ｍｇ/１０ｍｌ/６０００＝０．０００００３ｍｇ/ｍｌ＝０．００３μｇ/ｍｌ
【００７２】
【表１２】
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【００７３】
実施例１１  精製物の活性
実施例８で得られたフラクョン１２４，１２５をＤｅｖｅｌｏｓｉｌＴＭ  Ｃ３０−ＵＧ−５に付し、５０Ｖ/Ｖ％アセトニトリル−０．１％ギ酸で溶出し、化合物Ａ（ＲはＨ）を得た（図１５）。また、実施例８で得られたフラクョン９３，９４をＤｅｖｅｌｏｓｉｌＴＭ  Ｃ３０−ＵＧ−５に付し、３０Ｖ/Ｖ％アセトニトリル−０．１％ギ酸で溶出し、化合物Ｂ（ＲはＧｌｃ）を得た（図１６）。化合物Ａ（ＲはＨ）の極大吸収は２５１ｎｍおよび３０４ｎｍ、化合物Ｂ（ＲはＧｌｃ）の極大吸収は２５６ｎｍおよび３０４ｎｍであった（図１３，１４）。ＰＰＡＲリガンド活性を測定した結果を表１３に示す。
【００７４】
【表１３】
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【００７５】
糖部分の無い物質（アグリコン）よりも配糖体の方が吸収されやすいことが知られている。例えば、ケルセチン配糖体の方が糖部分のないケルセチンよりも生物学的利用率が高いことが知られている（Ｆｒｅｅ  Ｒａｄｉｃ．  Ｒｅｓ．  ３１（６）：５６９−５７３；  １９９９）。また、糖部分の無い物質（アグリコン）よりも配糖体の方が極性が高く、より水に溶けやすいという性質を有する。これらの性質からも、化合物Ｂは優れたＰＰＡＲリガンド剤であるといえる。
【００７６】
実施例１２  精製物の質量分析
Ｑ−ＴＯＦ  Ｐｒｅｍｉｅｒ（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ社製、ＵＫ）を用いて、以下の条件で精密質量分析(ＬＣ−ＭＳおよびＬＣ−ＭＳ／ＭＳ)を行った；
カラム：ＤｅｖｅｌｏｓｉｌＴＭ  Ｃ３０−ＵＧ−５（３ｍｍ＊１５０ｍｍ、野村化学株式会社製）、カラム温度：４０℃
移動相：５０Ｖ/Ｖ％アセトニトリル−０．１％ギ酸、流速：０．２５ｍｌ/分
イオン化法：ＥＳＩ、イオンソース；Ｚ−スプレー
Ｃａｐｉｌｌａｒｙ  ｖｏｌｔａｇｅ：２．７ｋＶ（ネガティブ、Ｖモード）、３．０ｋＶ（ポジティブ、Ｖモード、）
Ｃｏｎｅ  ｖｏｌｔａｇｅ：
３８Ｖ｛ネガティブモード、化合物Ａ（ＲはＨ）のＭＳおよび化合物Ａ（ＲはＨ）のｍ／ｚ  ２６７．０７のＭＳ／ＭＳ測定時｝
４０Ｖ｛ポジティブモード、化合物Ａ（ＲはＨ）のＭＳおよび化合物Ａ（ＲはＨ）のｍ／ｚ  ２６９．０８のＭＳ／ＭＳ測定時｝
２４Ｖ｛ネガティブモード、化合物Ｂ（ＲはＧｌｃ）のＭＳ測定時｝
２０Ｖ｛ネガティブモード、化合物Ｂ（ＲはＧｌｃ）のｍ／ｚ  ４２９．１２のＭＳ／ＭＳ測定時｝
Ｃｏｌｌｉｓｉｏｎ  ｅｎｅｒｇｙ：
２０−３０ｅＶ｛ネガティブモード、化合物Ａ（ＲはＨ）  の  ｍ／ｚ  ２６７．０７のＭＳ／ＭＳ測定時｝
２５−３０ｅＶ｛ポジティブモード、化合物Ａ（ＲはＨ）  の  ｍ／ｚ  ２６９．０８のＭＳ／ＭＳ測定時｝
２０  ｅＶ｛ネガティブモード、化合物Ｂ（ＲはＧｌｃ）  の  ｍ／ｚ  ４２９．１２のＭＳ／ＭＳ測定時｝
Ｓｏｕｒｃｅ  Ｔｅｍｐ：１００℃（ネガティブモード、ポジティブモード）
Ｄｅｓｏｌｖａｔｉｏｎ  Ｔｅｍｐ：３００℃（ネガティブモード、ポジティブモード）
ロックスプレーによる質量補正を行い、リファレンスにはロイシンエンケファリン（ｍ／ｚ  ５５４．２６１５（ネガティブモード）、ｍ／ｚ  ５５６．２７７１（ポジティブモード））を用いた。
＜化合物Ａ＞（ＲはＨ）
ネガティブモード：
ＭＳ：ｍ／ｚ  ２６７．０６５０［Ｍ−Ｈ］−、Ｃ１６Ｈ１１Ｏ４（理論ｍ／ｚ  ２６７．０６５７、誤差―２．６ｐｐｍ）
ＭＳ／ＭＳ（プレカーサーイオン  ｍ／ｚ  ２６７．０７）：
フラグメントイオン  ｍ／ｚ  ２０８．０５２６、ｍ／ｚ  ２２３．０７５６
ポジティブモード：
ＭＳ：ｍ／ｚ  ２６９．０８０８［Ｍ＋Ｈ］＋、Ｃ１６Ｈ１３Ｏ４（理論ｍ／ｚ  ２６９．０８１４、誤差−２．２ｐｐｍ）
ＭＳ／ＭＳ（プレカーサーイオンｍ／ｚ  ２６９．０８）：
フラグメントイオンｍ／ｚ  １６５．０７０３、ｍ／ｚ  １８１．０６５６、
ｍ／ｚ  １９５．０８００、ｍ／ｚ  ２０９．０６０６、ｍ／ｚ  ２２３．０７６０、ｍ／ｚ  ２４１．０８５８
＜化合物Ｂ＞（ＲはＧｌｃ）
ネガティブモード：
ＭＳ：ｍ／ｚ  ４２９．１１８５［Ｍ−Ｈ］−、Ｃ２２Ｈ２１Ｏ９（理論ｍ／ｚ  ４２９．１１８６、誤差−０．２ｐｐｍ）
ＭＳ／ＭＳ（プレカーサーイオン  ｍ／ｚ  ４２９．１２）：
フラグメントイオン  ｍ／ｚ  ２２３．０７５６、ｍ／ｚ  ２６７．０６４０
ポジティブモードの精密質量のＭＳとＭＳ／ＭＳは分析せず。
【００７７】
実施例１３  構造解析
実施例１１で得られた化合物Ａ，化合物Ｂの試料をメタノール−Ｄ４に溶解し、溶媒を内部標準として、ＤＭＸ−７５０  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ（ＢＲＵＫＥＲ  ＢＩＯＳＰＩＮ，  Ｇｅｒｍａｎｙ)を用いて測定した。測定項目は１Ｈ  ＮＭＲ、１Ｈ｛１３Ｃ｝−ＨＳＱＣ、１Ｈ｛１３Ｃ｝−ＨＭＢＣ、ＴＯＣＳＹ、ＤＱＦ−ＣＯＳＹ、ＮＯＥＳＹおよびＲＯＥＳＹである。
化合物Ａ（ＲはＨ）：  ２−（４−ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）ｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ−５−ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ  ａｃｉｄ
δＨ（Ｈｚ）：８．１８（Ｃ−４Ｈ，１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１．４）、７．９２（Ｃ−６Ｈ，１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．５，１．４）、７．８３（Ｃ−２‘Ｈ，Ｃ−６’Ｈ、２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．８）、７．４３（Ｃ−７Ｈ，１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．５）、７．０６（Ｃ−３Ｈ，１Ｈ、ｓ）、７．０２（Ｃ−３‘Ｈ，Ｃ−５’Ｈ，２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．８）、３．８６（Ｃ−４’−ＯＣＨ３、３Ｈ、ｓ）  
δＣ：  １５７．６（Ｃ２）、１０１.１（Ｃ３）、１３４．４（Ｃ３ａ）、１２３．４（Ｃ４），１３０．４（Ｃ５）、１２６．７（Ｃ６）、１１０．５（Ｃ７）、１５７．４（Ｃ７ａ）、１６７．９（Ｃ８）、１２４.５（Ｃ１‘）、１２７.４（Ｃ２’,Ｃ６‘）、１１５（Ｃ３’,Ｃ５‘）、１６１．７（Ｃ４’）、５６（Ｃ４‘−ＯＣＨ３）
化合物Ｂ（ＲはＧｌｃ）：  ５−［（β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｙｌｏｘｙ）ｃａｒｂｏｎｙｌ］−２−（４−ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙｌ）ｂｅｎｚｏｆｕｒａｎ
ＧｌｃのＣ−１位の水素（Ｃ−１”Ｈ、δH５．７５）とカルボキシル基の炭素（Ｃ−８、δｃ１６７）とのつながりを示す１Ｈ｛１３Ｃ｝−ＨＭＢＣスペクトルデータから、ＧｌｃのＣ−１位のＯＨが結合していると結論した。また、グルコース  Ｃ−１位の水素（Ｃ−１”Ｈ、δH５．７５）の結合定数、Ｊ＝８．１  Ｈｚであることから、β結合であることが分かった。
δＨ（Ｈｚ）：８．３７（Ｃ−４Ｈ，１Ｈ、ｄ、Ｊ＝１．７）、８．０４（Ｃ−，１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．６，１．７）、７．８６（Ｃ−２‘Ｈ，Ｃ−６’Ｈ，２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．８）、７．６０（Ｃ−７Ｈ，１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．６）、７．１４（Ｃ−３Ｈ，１Ｈ、ｓ）、７．０４（Ｃ−３‘Ｈ，Ｃ−５’Ｈ，２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．８）、３．５６（Ｃ４’−ＯＣＨ３，３Ｈ、ｓ）；  ５．７５（Ｃ−１“Ｈ，１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．１）、３．８７（Ｃ−６”Ｈ，１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１２．３、２．０）、３．７２（Ｃ−６“Ｈ，１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１２．３、５．２）、３．５５（Ｃ−２”Ｈ，１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝９．１、８．１）、３．５１（Ｃ−３“Ｈ、１Ｈ、Ｊ＝９．１、８．７）、３．４７（Ｃ−５”Ｈ、１Ｈ、ｍ）、３．４３（Ｃ−４“Ｈ、１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝９．６、８．７）
δＣ：１５９．５（Ｃ２）、１０１（Ｃ３）、１３１（Ｃ３ａ）、１２４．５（Ｃ４），１２６（Ｃ５）、１２７（Ｃ６）、１１２（Ｃ７）、１５９（Ｃ７ａ）、１６７（Ｃ８）、１２４（Ｃ１‘）、１２８（Ｃ２’,Ｃ６‘）、１１６（Ｃ３’,Ｃ５‘）、１６２（Ｃ４’）、５６（Ｃ４‘−ＯＣＨ３）；９６（Ｃ１“）、７４（Ｃ２”）、７８（Ｃ３“）、７１（Ｃ４”）、７９（Ｃ５“）、６２．４（Ｃ６”）
【００７８】
【化６】
0005546807.tif 000020
【産業上の利用可能性】
【００７９】
本発明により、優れたＰＰＡＲリガンド剤が提供され、肥満、肥満に伴うインスリン抵抗性、高脂血症、高血圧、糖尿病などの予防および/または改善に有効な飲食物、医薬品の形態であるＰＰＡＲリガンド剤が提供される。
【図１】
0005546807.tif 000023
【図２】
0005546807.tif 000024
【図３】
0005546807.tif 000025
【図４】
0005546807.tif 000026
【図５】
0005546807.tif 000027
【図６】
0005546807.tif 000028
【図７】
0005546807.tif 000029
【図８】
0005546807.tif 000030
【図９】
0005546807.tif 000031
【図１０】
0005546807.tif 000032
【図１１】
0005546807.tif 000033
【図１２】
0005546807.tif 000034
【図１３】
0005546807.tif 000035
【図１４】
0005546807.tif 000036