(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
化粧品として許容できる媒材中に、全組成物の重量の０．０００１％〜９０％のＬ−４−チアゾリルアラニンを含むことを特徴とする化粧品組成物。
【請求項２】
前記Ｌ−４−チアゾリルアラニンは、全組成物の重量の０．００１％〜１０％の量で存在する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
皮膚中のエラスチン線維の減少に由来する皮膚状態を処置するための請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
ＬＯＸＬ−１活性の刺激、カルシニューリン阻害、β１インテグリンの発現増加、フィブロネクチンの発現増加、β−エンドルフィン刺激及びＣＧＲＰ発現増加からなる群から選択される少なくとも一つの活性のために用いられる、請求項１から３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
（ａ）小じわ又はしわの処置、軽減及び／又は予防、
（ｂ）皮膚の毛穴のサイズの低下
（ｃ）皮膚の厚み、ふくらみ及び／又は張りの改善、
（ｄ）皮膚の柔らかさ及び／又は柔軟性の改善
（ｅ）皮膚のトーン、輝き及び又は透明度の改善
（ｆ）プロコラーゲン及び／又はコラーゲン生成の改善、
（ｇ）エラスチンの保持及び再構築の改善、
（ｈ）皮膚のきめの改善及び／又は再組織化の促進、
（ｉ）皮膚のバリア修復及び／又は機能の改善、
（ｊ）皮膚の凹凸の改善、
（ｋ）皮膚の艶及び／又は明るさの回復、
（ｌ）皮膚の必須栄養素及び／又は構成要素の補充、
（ｍ）閉経によって後退した皮膚の外観の改善、
（ｎ）皮膚の潤いの改善、
（ｏ）皮膚の弾力性及び／又は復元力の向上、及び
（ｐ）皮膚のたるみの処置、軽減及び／又は予防、
からなる群から選択される皮膚への効果のために用いられる、請求項１から４のいずれか１項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、広く、非タンパク質性アミノ酸を含む、皮膚への局所適用のための組成物、及び、皮膚に有効な効果をもたらす該組成物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
弾性線維は、フィブリリンに富んだ微細線維（ｍｉｃｒｏｆｉｂｒｉｌ）の被膜（ｍａｎｔｌｅ）によって囲まれたエラスチンコアから構成される必須の細胞外マトリクス巨大分子である（非特許文献１）。弾性線維は、皮膚や肺といった組織に弾力性及び復元力を与える。成熟型の機能性弾性線維の生成は、多数の構成要素を含み、厳密に制御された堆積と多数工程を要する階層的な組立（アセンブリ）を必要とするため、その生成工程は複雑なプロセスである。エラスチン（トロポエラスチン）モノマーは、リシルオキシダーゼファミリーの少なくとの一つのメンバーによって、細胞外空間で架橋されて、エラスチンポリマーを形成する。このエラスチンポリマーは、機能型の成熟タンパク質である。フィビリリン含有微細線維は、トロポエラスチン内の架橋ドメインを整列させるための足場として機能することによって、アセンブリ工程において重要な役割を果たすと考えられる。
【０００３】
リシルオキシダーゼ様１（ＬＯＸＬ１）は、リジン又はヒドロキシリジン側鎖の酸化的脱アミノ化によってコラーゲンとエラスチンとの架橋形成を促進する、リシルオキシダーゼファミリーのメンバーである。その生成物であるアリシン残基は、隣接ペプチドのアルデヒドと、又はペプチドリジンのε−アミノ基と自然に凝集して、共有結合による架橋を生じ得る（非特許文献２）。ＬＯＸＬ１は、弾性線維と関連する細胞外酵素である（非特許文献３）。ＬＯＸＬ１は、皮膚等価物（ｓｋｉｎ  ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ）の表皮及び真皮並びにヒトの皮膚中で発現する。ＬＯＸＬ１は弾性線維の形成及び弾性線維の恒常性維持に必要不可欠である。ＬＯＸＬ１ノックアウトマウスは、エラスチン量減少の結果としてもたらされる、メスの動物における骨盤の弛緩及び肺の拡大した空隙によって特徴づけられる結合組織の表現型を有する（非特許文献４）。微細構造的解析によって、肺及び細胞において、未発達で断片化した不連続性の弾性線維が示された。加えて、ＬＯＸＬ１欠損マウスでは、分娩後子宮において正常な弾性線維を堆積せず、皮膚弛緩及び血管異常をもたらし、同時にトロポエラスチンの蓄積を伴う。最近の研究において、小児由来の皮膚繊維芽細胞と比較して成人の皮膚繊維芽細胞では、ＬＯＸＬ１のｍＲＮＡレベルが低下することが示されている（非特許文献５）。
【０００４】
特許文献１において開示された事項が、参照により本明細書に含まれ、特許文献１は、治療に有効な量のＬＯＸＬ１エンハンサー（亢進剤）を対象（被検者）に投与することを含む、弛緩性皮膚又は老人皮膚といった弾性線維の減少に関連する状態の被検者を処置する方法を開示する。ＬＯＸＬ１エンハンサーは、ＬＯＸＬ１ポリペプチド若しくはその活性断片、又はＬＯＸＬ１ポリペプチドをコードする核酸若しくはその活性断片のことを言う。特許文献１では、ＬＯＸＬ１の発現を増加させるために、ペプチド型以外のアミノ酸を使用することについては開示されていない。
【０００５】
化粧品の構成成分として、アミノ酸の重要性が増してきている。例えば、様々な天然アミノ酸が、保湿、皮膚保護、脂腺活性の低減及び他の機能特性のために、コラーゲン及びエラスチン合成用の構成成分として化粧品に組み込まれている。しかしながら、非タンパク質性非天然アミノ酸の使用は、化粧品業界ではほとんど注目されていない。これまで、非天然アミノ酸の使用は、その大部分が、機能性ペプチドに加水分解安定性を与えることを目的とするものに限られていた。非タンパク質性アミノ酸は、その定義によれば、新規タンパク質の合成時にタンパク質に組み込まれない。そのため、非タンパク質性アミノ酸の局所適用によって、皮膚での新規タンパク質合成及び皮膚再生がもたらされるとは予測されないであろう。非タンパク質性非天然アミノ酸の特有の機能性は、ほとんど無視されてきた。また、ＬＯＸＬ−１を強化し、皮膚老化に関与する他の経路を調節するという非タンパク質性非天然アミノ酸の能力は、これまで知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許出願公開第２００５／０１８８４２７号明細書
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｋｉｅｔｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｓｃｉ．，２００２  Ｊｕｌ  １５；１１５（Ｐｔ１４）：２８１７−２８）
【非特許文献２】Ｌｕｃｅｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｍｏｌ．Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．，２００６  Ｏｃｔ；６３（１９−２０）：２３０４−１６
【非特許文献３】Ｎｏｂｌｅｓｓｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，２００４  Ｍａｒ；１２２（３）：６２１−３０．
【非特許文献４】Ｌｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．，２００４  Ｆｅｂ；３６（２）：１７８−８２
【非特許文献５】Ｇｅｎｉｚｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，２００６  Ａｕｇ；１５（８）：５７４−８１．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
そのため、本願発明の目的は、非タンパク質性非天然アミノ酸を用いて皮膚でのＬＯＸＬ−１生成を増加させるための新規化粧品組成物及び方法を提供することである。本願発明のさらなる目的は、非タンパク質性非天然アミノ酸を用いて、皮膚のしわといった老化のサインを処置し、改善し、及び／又は予防することを含む、皮膚外観を改善するための化粧品組成物及び方法を提供することである。
【０００９】
先の議論は、単に、この技術分野が直面する問題の本質をよりよく理解できるように示されるのであって、先行技術であることを自白するものと解釈されるべきではなく、本明細書における何れの引用文献の引用も、そのような引用文献が本願に対する「先行技術」となることを自白するものとして解釈されるべきではない。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
先の目的などに基づき、驚くべきことに、ある非タンパク質性アミノ酸が、ＬＯＸＬ−１の潜在的な刺激因子であり、従って、皮膚中のエラスチン線維を再構築し維持するＬＯＸＬ−１の能力によって、皮膚に対する複数の効果がもたらされることが期待される。ＬＯＸＬ−１の活性化に加えて、非タンパク質性アミノ酸は、本明細書でより詳細に説明するように、皮膚老化に関与する少なくとも一つの追加の生物学的経路において有益な役割を果たすことが期待される。なお、そのような有益性は必ずしも必要ではない。
【００１１】
本発明の一つの態様において、化粧品組成物は、エラスチン減少に由来する皮膚状態を処置するために提供され、この化粧品組成物は、化粧品として許容できる媒材中において、ＬＯＸＬ−１を強化する有効量の非タンパク質性アミノ酸又はその誘導体を含有する。好ましい実施形態において、非タンパク質性アミノ酸は、ヘテロ環基、好ましくはヘテロ環式芳香族基を有する側鎖を含むだろう。好ましいアミノ酸は、窒素含有ヘテロ環又は芳香族ヘテロ環基を含むだろう。本発明に係る、現在のところ好ましい非タンパク質性アミノ酸は、以下の構造を有するＬ４−チアゾリルアラニンである。
【化１】
0005554720.tif 000002
【００１２】
他の態様において、皮膚におけるＬＯＸＬ−１を強化するのに十分な量のチアゾリルアラニン又はその誘導体を、化粧品として許容できる媒材中に含む化粧品組成物が提供される。チアゾリルアラニンは、典型的にはＬ−チアゾリルアラニン又はその誘導体であり、好ましくはＬ−４−チアゾリルアラニン又はその誘導体である。
【００１３】
また、ＬＯＸＬ−１を強化する非タンパク質性アミノ酸又はその誘導体を、ＬＯＸＬ−１を強化するのに有効な量で、皮膚に局所的に適用することからなる、皮膚中のエラスチン線維の減少に由来する皮膚状態を処置する方法が提供される。非タンパク質性アミノ酸は、さらに、カルシニュ−リン阻害、β１インテグリンの発現増加、フィブロネクチンの発現増加、β−エンドルフィン刺激、及びＣＧＲＰの発現増加からなる群から選択される少なくとも一つの追加の活性を有し得る。
【００１４】
本発明の他の態様において、ヒトの皮膚における小じわ（ｆｉｎｅ  ｌｉｎｅｓ）若しくはしわ、又はたるみを処置し、改善し、及び／又は防ぐ方法が提供される。この方法は、ＬＯＸＬ−１を強化する非タンパク質性アミノ酸を含む組成物を皮膚に局所的に適用することからなる。ある実施形態において、非タンパク質性アミノ酸は、チアゾリルアラニン又はその誘導体であり、より典型的には、Ｌ−チアゾリルアラニン又はその誘導体であり、好ましくはＬ−４−チアゾリルアラニン又はその誘導体である。従って、本発明の本観点に係る小じわ又はしわを処置する方法は、Ｌ−４−チアゾリルアラニンを含む組成物を小じわ又はしわに局所的に適用することからなる。
【００１５】
本発明のこれらの態様及び他の態様は、以下の詳細な説明及び添付の図面を参照することによってより良く理解されるだろう。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１Ａ】本発明に係る様々な非タンパク質性アミノ酸を例示する。
【図１Ｂ】本発明に係る様々な非タンパク質性アミノ酸を例示する。
【図１Ｃ】本発明に係る様々な非タンパク質性アミノ酸を例示する。
【図１Ｄ】本発明に係る様々な非タンパク質性アミノ酸を例示する。  図１Ａ〜図１Ｄに示されるアミノ酸は、単なる例示であって、これに限定されるものではない。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本明細書において使用される全ての用語は、特に断らない限り、それらの本来の意味を有する。
【００１８】
「アミノ酸」という用語は、概して、同一分子の中にアミノ基及びカルボキシル基を包含する有機分子をいう。「α−アミノ酸」という用語は、アミノ基とカルボキシル基が同一の炭素原子に結合しているアミノ酸をいう。「β−アミノ酸」という用語は、アミノ基及びカルボキシル基が隣接する炭素原子に結合しているアミノ酸をいう。
【００１９】
「天然アミノ酸」は、天然において生物によって合成される任意のアミノ酸を言い、標準アミノ酸であるＬ−アラニン、Ｌ−バリン、Ｌ−ロイシン、Ｌ−イソロイシン、Ｌ−プロリン、Ｌ−トリプトファン、Ｌ−フェニルアラニン、Ｌ−メチオニン、グリシン、Ｌ−セリン、Ｌ−チロシン、Ｌ−スレオニン、Ｌ−システイン、Ｌ−アスパラギン、Ｌ−グルタミン、Ｌ−アスパラギン酸、Ｌ−グルタミン酸、Ｌ−リジン、Ｌ−アルギニン及びＬ−ヒスチジン、Ｌ−オルニチンといった他の非標準アミノ酸、並びにＬ−４−ヒドロキシプロリンといった誘導体を含むが、これに限定されるものではない。
【００２０】
「非天然アミノ酸」は、広く、「天然アミノ酸」以外のあらゆるアミノ酸のことを言い、β−アミノ酸と同様に天然アミノ酸には見られない側鎖を有するα−アミノ酸を含むが、これに限定されるものではない。「非天然アミノ酸」はまた、天然アミノ酸と同一の構造を有するが、異なる立体化学的配置であるアミノ酸を言う。
【００２１】
「非タンパク質性アミノ酸（ｎｏｎ−ｐｒｏｔｅｏｇｅｎｉｃ）」は、広く、生物によってペプチド又はタンパク質に組み込まれることができないあらゆるアミノ酸のことを言い、非天然アミノ酸を含む。
【００２２】
本発明は、皮膚老化のサインを処置し、逆行させ、改善し、及び／又は予防するために、少なくとも一つの有効量の非タンパク質性アミノ酸を含む局所適用組成物を提供する。そのような皮膚老化のサインに関して、
（ａ）小じわ又はしわの処置、軽減及び／又は予防、
（ｂ）皮膚の毛穴のサイズの低減、
（ｃ）皮膚の厚み、ふくらみ及び／又は張り、
（ｄ）皮膚の柔らかさ及び／又は柔軟性の改善
（ｅ）皮膚のトーン、輝き及び／又は透明度の改善
（ｆ）プロコラーゲン及び／又はコラーゲン生成の改善、
（ｇ）エラスチンの保持及び再構築、
（ｈ）皮膚のきめの改善及び／又は再組織化の促進、
（ｉ）皮膚のバリア修復及び／又は機能の改善、
（ｊ）皮膚の凹凸の改善、
（ｋ）皮膚の艶及び／又は明るさの回復、
（ｌ）皮膚の必須栄養素及び／又は構成要素の補充、
（ｍ）老化及び／又は更年期による影響の軽減、
（ｎ）皮膚の潤いの改善、及び／又は
（ｌ）皮膚の弾力性（ｅｌａｓｔｉｃｉｔｙ）及び／又は復元力（ｒｅｓｉｌｉｅｎｃｙ）の向上
を含むが、これに限定されるものではない。
【００２３】
実際に、本発明の組成物は処置の必要な皮膚に適用される。つまり、前述の特性の何れかが欠如若しくは低下している皮膚、又はその他に前述の特性の何れかにおける改善によって有利な効果を得る皮膚である。
【００２４】
ある好ましい実施形態において、本発明の組成物及び方法は、皮膚における小じわ及び／又はしわの予防、処置及び／又は改善に向けられる。この場合、組成物は、処置の必要な皮膚、つまり小じわ及び／又はしわを有する皮膚に適用される。好ましくは、組成物は、直接小じわ及び／又はしわに適用される。この組成物及び方法は、これに限定されないが、顔、首及び／又は手の皮膚を含む、任意の皮膚表面の小じわ及び／又はしわを処置するのに適している。
【００２５】
概して、この組成物及び方法は、弾性線維の減少に由来する任意の皮膚状態を処置するのに有用である。これらの効果は、ＬＯＸＬ−１の生成を促進することができる組成物によって、少なくとも部分的に向上すると考えられる。言い換えると、本発明の非タンパク質性アミノ酸は、ＬＯＸＬ−１エンハンサー（亢進剤）である。
【００２６】
本発明に係るアミノ酸は、「遊離」型又は単量体型であり、これは、それらのアミノ酸が他のアミノ酸と共有結合していないが、その代わりに、本明細書で説明されるようにプロドラッグなどとして官能性を有してもよいことを意味する。
【００２７】
本発明の実施に有用なアミノ酸は、一つ又は複数の老化のサインを低減し、処置し又は予防する、任意のタンパク質性アミノ酸であってよい。典型的には、本発明の非タンパク質性アミノ酸は、ＬＯＸＬ−１を刺激することができるだろう。一つの実施形態において、非タンパク質性アミノ酸は、化学式Ｉの構造を有するだろう。
【化２】
0005554720.tif 000003
【００２８】
ここで、ｎが０から４の整数であり、典型的には０から２の整数であり、好ましくは、０又は１の何れかであるので、ｎが０である場合、アミノ酸は、α−アミノ酸であり、ｎが１である場合、アミノ酸は、β−アミノ酸である。
【００２９】
Ｒは、任意の有機置換基からなる側鎖であり、ｎが０（即ち、α−アミノ酸）という条件で、化学式Ｉのアミノ酸がＬ（左旋光性）構造である場合、その側鎖は、タンパク質性の、天然発生アミノ酸に存在する側鎖ではない。
【００３０】
Ｒは、典型的に１〜２０の炭素原子からなる炭化水素ラジカルであり、選択的に、酸素、硫黄及び窒素原子といった少なくとも一つのヘテロ原子を含む。好ましくは、Ｒは、置換又は未置換の分岐した、直鎖又は環状Ｃ１〜Ｃ２０アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ベンジル、ヘテロアリール、アルキル−アリール、アルキル−ヘテロアリール、ヘテロアリール−アルキル、ヘテロアリール−アリール、二環式アルキル、アリール、又はヘテロアリールラジカル、及びこれらの組合せからなる群から選択され、ここで、前述のラジカルは、例えば、ヒドロキシル、アミノ、シアノ、ハロゲン、オキソ、カルボキシ、カルボキサミド、ニトロ、アゾ、アルコキシル、アルキル、アルキルイミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオアルコキシ又はこれらの組合せを含む任意の部分で置換されてもよい。
【００３１】
好ましい実施形態において、Ｒはヘテロ環を含むだろう。ヘテロ環は、単環式又は二環式の何れでもよく、芳香族であってもよく、部分的に飽和し、又は完全に飽和していてもよい。好ましいヘテロ環は窒素原子を含むだろう。代表的なヘテロ環は、アゼチジニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾキサゾリル、フリル、イミダゾリル、イミダソリニル、イソキノリニル、イソオキサゾリル、イソオキサゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、インドリル、オキサゾリル、オキサゾリジニル、ピリル、ピロリニル、ピロリジニル、ピラゾリル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、ピリジル、ピペリジニル、ピラジニル、ピペラジニル、Ｎ−メチルピペラジニル、Ｎ−メチルアゼチジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、モルフォリニル、キノリニル、チアゾリル、チアゾリジニル、チエニル及びトリアゾリルなどを含むが、これに限定されるものではない。
【００３２】
点線は、このような構造はあまり好ましくはないが、Ｒが、例えばプロリン及びヒドロキシプロリンの場合のような窒素原子を有する環を形成する２価のラジカルであってもよいことを示す。
【００３３】
一つの実施形態において、アミノ酸は、式Ｉａで示される、ヘテロ環基を含むα−アミノ酸又はβ−アミノ酸である。
【化３】
0005554720.tif 000004
【００３４】
ここで、ｎは、０（α−アミノ酸）又は１（β−アミノ酸）のいずれかである。
【００３５】
Ｚは、結合を表してもよく（つまり、Ｚは省略され）、又は置換基Ｙを介して続いてヘテロ環Ｑと結合されるα−炭素で結合されるリンカー部分を表してもよい。ここで、Ｚは、典型的には、１〜１０の炭素原子からなり、任意に酸素、硫黄及び窒素といった少なくとも一つのヘテロ原子の置換基を含む。典型的には、Ｚは、酸素、硫黄、ＮＲＮ、Ｃ１〜Ｃ１０のアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０のアルケニル、Ｃ１〜Ｃ１０のアルキニル、Ｃ１〜Ｃ１０のアリール、Ｃ１〜Ｃ１０のカルボニル、Ｃ１〜Ｃ１０のカルボキシル及びＣ１〜Ｃ１０のカルバミルからなる群から選択されるだろう。ここでＲＮは水素、Ｃ１〜Ｃ１０のアルキル、Ｃ１〜Ｃ１０のアルケニル、Ｃ１〜Ｃ１０のアルキニル又はＣ１〜Ｃ１０のアリール等である。
【００３６】
Ｚは、好ましくは、結合若しくは置換又は未置換の、分岐又は直鎖のＣ１〜Ｃ６アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、又はアルキル−アリール基からなる群から選択される部分であり、これに限定されないが、ａが１〜６の整数である式−（ＣＨ２）ａ−の直鎖アルキル部、例えば、−ＣＨ２−（メチレン）、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−若しくは−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、ａが１〜６の整数である式−（ＣＨ２）ａＯ−若しくは−Ｏ（ＣＨ２）ａ−の直鎖アルコキシ部、例えば−ＣＨ２Ｏ−若しくは−ＯＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−若しくは−ＯＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｏ−若しくは−ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、ａが上記のとおり定義される−Ｏ（ＣＨ２）ａＯ−、又は「ｂ」及び「ｃ」は独立して０〜６の整数であり、ＲＮは上記のとおり定義される、式−（ＣＨ２）ｂＯ（ＣＨ２）ｃ−、−（ＣＨ２）ｂＳ（ＣＨ２）ｃ−若しくは−（ＣＨ２）ｂＮＲＮ（ＣＨ２）ｃ−部を含む。好ましくは、Ｚは、Ｙとα−炭素との間の単結合を表し、又はＺは、−ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｏ−、−ＣＨ２Ｓ−、−ＣＨ２ＮＲＮ−又は−（Ｃ＝Ｏ）基である。一つの実施形態において、Ｚは（−ＣＨ２−）１〜３であり、より好ましくは、−ＣＨ２−である。
【００３７】
Ｙは、環Ｑのリンカー又は結合Ｚへの結合部であり、典型的には炭素又はヘテロ原子であり、より典型的にはＣ、ＣＨ、Ｎ又はＮＲＮから選択される。ここで、ＲＮは上記のとおり定義される。
【００３８】
Ｑは、Ｙを含む三〜十四員のヘテロ環基であり、典型的には酸素、窒素又は硫黄から選択される少なくとも一つのヘテロ原子を環内に有し、選択的に、任意の適切な結合部（例えば、任意の炭素又は窒素原子上）で環系に結合された少なくとも一つのグループＲ１で置換された縮合環系を含む、単環、二環又は三環系であってもよい。
【００３９】
ここで、Ｒ１は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、−ＯＨ、−ＮＲＮＲＮ、−ＳＨ、−ＣＮ、オキソ、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈ、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｈ、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ａｒ、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−（Ｃ＝Ｏ）−Ｏ−Ａｒ、−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＲＮＲＮ、−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｏ−Ａｒ、−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｓ−アリール−、Ａｒ、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−ＮＲＮ−ＣＨＯ、−ＮＲＮ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、パーフルオロアルキル、エポキシ、アジド、チオシアネート、−ＳＯ２−ＲＮ又は窒素などから選択される。ここで、Ａｒは、任意に置換されたアリール基であり、ＲＮは上記のとおり定義され、置換基が２つのグループＲＮを含む場合、それらは環を形成してもよく、ｎ＝０という条件でα−アミノ酸の場合、式Ｉａの化合物はＬ−ヒスチジン又はＬ−トリプトファンではない。
【００４０】
ある実施形態において、Ｙに加えて、少なくとも一つのヘテロ原子を含み、Ｙもまたヘテロ原子である場合、少なくとも一つのヘテロ原子は、Ｎ、Ｏ、Ｓ、Ｂ、Ｓｉ、Ａｓ又はＰなどから選択され、より典型的にはＮ、Ｏ又はＳから選択されるだろう。
【００４１】
三員のヘテロ環の非限定的な例は、アジリジン、オキシラン、チイラン、ジアジリジン及びオキサジリジンを含むが、これに限定されるものではない。４員のヘテロ環の非限定的な例は、アゼチジン、オキセタン、チエタン、ジアゼチジン、オキサゼチジン及び１，２−オキサチエタンを含むが、これに限定されるものではない。
【００４２】
五員のヘテロ環は、置換基Ｑに関する、本発明の一般的に好ましい実施形態である。五員のヘテロ環の非限定的な例は、ピロリジン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、オキサゾリジン、チアゾリジン、１，３−ジオキソラン（１，３−ｄｉｏｉａｎｅ）、１，３−オキサチオラン（ｏｘｚｔｈｉｏｌａｎｅ）、１，３−ジチオラン、イミダゾリジン、ピラゾリジン、ピロール、フラン、チオフェン、オキサゾール、イソオキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、イミダゾール、ピラゾール、１，３，４−オキサジアゾール、１，２，４−オキサジアゾール、１，３，４−チアジアゾール、１，２，４−チアジアゾール、１，３，４−トリアゾール及び１，２，３−トリアゾールなどを含むが、これに限定されるものではない。Ｑは、例えば芳香族であり、完全に飽和し、又は一つ若しくは二つの二重結合を有する、以下の五員のヘテロ環から選択されてもよい。
【００４３】
【化４】
0005554720.tif 000005
【化５】
0005554720.tif 000006
【化６】
0005554720.tif 000007
【化７】
0005554720.tif 000008
【００４４】
Ｏ及び／又はＳの環状置換基を含む前述の五員環の各々において、その環との結合部は硫黄又は酸素原子以外であり、これによって、ＹがＯ又はＳというよりはむしろ、Ｃ、ＣＨ又はＮのいずれかであることを意味すると理解されるだろう。これらの五員環は、任意に、上記のとおり定義された少なくとも一つのＲ１、特に好ましくは、ハロ、ヒドロキシ、オキソ、チオール、Ｃ１〜Ｃ４アルキル（例えば、メチル、エチル、イソプロピルなど）、アミノ又はジアルキルアミノからなるグループＲ１で官能性を有してもよい。さらに、何れの窒素原子が任意に酸化されてＮ−オキシドとなってもよく、何れの硫黄原子が任意に酸化されてスルホキシドになってもよい。
【００４５】
Ｑとして適切に選択される六員環の非限定的な例は、２Ｈ−ピラン、テトラヒドロピラン、ピペリジン、１，４−ジオキサン、モルフォリン、ピペラジン、１，４−ジチアン、チオモルフォリン、ピリジン、ピラジン、ピリダジン、ピリミジン、１，２，３−トリアジン、１，２，４−トリアジン、１，３，５−トリアジン、１，２，３，４−テトラジン及びペンタジンなどを含むが、これに限定されるものではない。Ｑは、例えば芳香族であり、完全に飽和し、又は一つ、二つ又は三つの二重結合を含む、以下の六員のヘテロ環から選択されてもよい。
【００４６】
【化８】
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【化９】
0005554720.tif 000010
【００４７】
Ｏ及び／又はＳの環状置換基を含む前述の六員環の各々において、環への結合部は、硫黄又は酸素原子以外であり、これによって、ＹがＯ又はＳというよりむしろ、Ｃ、ＣＨ又はＮのいずれかであることを意味するということが理解されるであろう。これらの六員環は、任意に上記のとおり定義された少なくとも一つのグループＲ１、特に好ましくは、ハロ、ヒドロキシル、オキソ、チオール、Ｃ１〜Ｃ４アルキル（例えば、メチル、エチル、イソプロピルなど）、アミノ又はジアルキルアミノからなるＲ１で官能性を有してもよい。さらに、何れの窒素原子が任意に酸化されてＮーオキシドとなってもよく、何れの硫黄原子が任意に酸化されてスルホキシドとなってもよい。
【００４８】
七員のヘテロ環は、１Ｈ−アゼピン、オキセピン、チエピン、１，４−ジアゼピン、１，３−ジオキセピン、１，３−ジチエピン、１Ｈ−１，３，５−トリアゼピン、１，２−オキサゼピン、１，３−チアゼピン、１，３，６−チアジアゼピン、テトラゼピン及び１，２，４，７−チアトリアゼピンなどを含むが、これに限定されるものではない。八員のヘテロ環は、アゾシン、２Ｈ−オキソシン、２Ｈ−チオシン、１，２−ジアゾシン、２Ｈ−１，４−オキサゾシン及び１，３，４−トリアゾシンなどを含むが、これに限定されるものではない。
【００４９】
Ｑはまた、例えば、インドール、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、インドリジン、イソインドール、インドリン、ベンゾキサゾール、ベンズイソキサゾール、ベンズチアゾール、ベンズイソチアゾール、ベンズイミダゾール、１Ｈ−インダゾール、キノリン、イソキノリン、キノリジナム、キナゾリン、シンノリン、キノキサリン、フタラジン、１，５−ナフチリジン、プテリジン、９Ｈ−プリン、アデニン、グアニン及びナフチリジンなどといった縮合ヘテロ環系を表してもよい。置換基Ｑに適した縮合ヘテロ環系の非限定的な例は、これに限定されないが、
【００５０】
（ｉ）以下の８個の原子からなる縮合ヘテロ環、
【化１０】
0005554720.tif 000011
【化１１】
0005554720.tif 000012
【００５１】
（ｉｉ）以下の９個の原子からなる縮合ヘテロ環、
【化１２】
0005554720.tif 000013
【化１３】
0005554720.tif 000014
【化１４】
0005554720.tif 000015
【００５２】
及び（ｉｉｉ）以下の１０個の原子からなる縮合ヘテロ環を含むが、これに限定されるものではない。
【化１５】
0005554720.tif 000016
【化１６】
0005554720.tif 000017
【００５３】
これらの全ては、本発明の範囲内にある様々なヘテロ環の単なる例示である。
【００５４】
Ｏ及び／又はＳの環状置換基を含む前述のヘテロ環系の各々において、その環への結合部は硫黄又は酸素原子以外であり、このことによって、ＹがＯ又はＳというよりもむしろ、Ｃ、ＣＨ又はＮのいずれかであることを意味すると理解されるだろう。縮合系において、結合部は、任意の環上の任意の適切な部位であってもよい。これらの環は、任意には、上記のとおり定義された少なくとも一つのグループＲ１、特に好ましくは、ハロ、ヒドロキシル、オキソ、チオール、Ｃ１〜Ｃ４アルキル（例えば、メチル、エチル、イソプロピルなど）、アミノ又はジアルキルアミノからなるグループＲ１で官能性を有してもよい。さらに、何れの窒素原子が任意に酸化されてＮ−オキシドになってもよく、何れの硫黄原子が任意に酸化されてスルホキシドになってもよい。
【００５５】
好ましい実施形態において、Ｑは環内にＹ以外の少なくとも一つのヘテロ原子を含む五又は六員環であり、このヘテロ原子は酸素、硫黄又は窒素から選択される。他の好ましい実施形態において、Ｑは芳香族環であるだろう。様々な実施形態において、Ｑはピラニル、ピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、２Ｈ−ピラニル、ピペリジル、ピペラジニル、モルフォリニル、６Ｈ−１，２，５−チアジアジニル、２Ｈ，６Ｈ−１，５，２−ジチアジニル、チアジニル、１，２−ジチアニル、１，３−ジチアニル及び１，４−ジチアニル、１，２−ジオキサニル、１，３−ジオキサニル及び１，４−ジオキサニル、１，３，５−トリアジニル又は任意に六員のヘテロ環上にグループＲ１の置換基を含む、上記にて挙げられた任意の六員のヘテロ環から選択される六員環である。グループＱが後述するような五員環を含むことがより好ましい。
【００５６】
一つの実施形態において、本発明の非タンパク質性アミノ酸は、五員のヘテロ環基、好ましくは式Ｉｂに係るヘテロアリール基を含むだろう。
【化１７】
0005554720.tif 000018
【００５７】
ここで、環Ｑはさらに置換基Ｙ、Ｔ、Ｕ、Ｖ及びＷによって定義される。
【００５８】
ｎは上記の通り定義され、好ましくはα−アミノ酸又はβ−アミノ酸をそれぞれ定義するように、０又は１である。
【００５９】
Ｚは上記のとおり定義され、好ましくは単結合又は（ＣＨ２）ｋユニットを表し、ここで、ｋは１〜３の整数であり、好ましくは１又は２であり、より好ましくはｋは１であり、好ましくは、Ｚはメチレン基−ＣＨ２−である。
【００６０】
ＹはＣ、ＣＨ又はＮである。
【００６１】
Ｔ、Ｕ、Ｖ及びＷは、独立して、ＣＨ、ＣＲ１、Ｎ、ＮＲＮ、Ｏ又はＳから選択される。ここで、Ｒ１及びＲＮは上記のとおり定義され、環内部の点線は、その環が任意に芳香族であり、又は０（ゼロ）、一つ又は二つの二重結合を有してもよく、Ｔ、Ｕ、Ｖ及び／又はＷがＮ（窒素原子）を表す場合、その窒素原子が任意に酸化されてＮ−オキシドとなってもよく、Ｔ、Ｕ、Ｖ及び／又はＷがＳ（硫黄原子）を表す場合、その硫黄原子が任意に酸化されてスルホキシドとなってもよい。ここで、Ｒ１は好ましくはＣ１〜Ｃ４アルキル（例えば、メチル、エチルなど）、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオール、ヒドロキシル、オキソ又はハロゲンである。
【００６２】
一つの実施形態において、ＹはＣ（炭素原子）又はＮであり、Ｔ、Ｕ、Ｖ及びＷの少なくとも一つは、Ｎ（窒素原子）である。好ましい実施形態において、Ｔ、Ｕ、Ｖ又はＷから選択される、一組の隣接する又は隣接しない置換基は、ＣＨ又はＣＲ１を表し、他の組は独立してＯ（酸素原子）、Ｎ（窒素原子）、ＮＲＮ又はＳ（硫黄原子）を表し、ここで、Ｒ１及びＲＮは上記のとおり定義される。
【００６３】
ある実施形態において、置換基Ｔ、Ｕ、Ｖ及びＷは、まとめて、以下から選択される五員環からなるであろう：チエニル（２−チエニル又は３−チエニル）；フリル（２−フリル又は３−フリル）；２−又は３−オキサシクロペンチル；２−又は３−テトラヒドロチオフェニル；１，２−ジチオラニル（ｄｉｔｈｉｏｌａｎｙｌ）；１，３−ジチオラニル；２Ｈ−ピロリル（２Ｈ−ピロール−３−イル、２Ｈ−ピロール−４−イル又は２Ｈ−ピロール−５−イル）；ピロリル（１−ピロリル、２−ピロリル又は３−ピロリル）；イミダゾリル（２−イミダゾリル、４−イミダゾリル又は５−イミダゾリル）；ピラゾリル（１−ピラゾリル、３−ピラゾリル、４−ピラゾリル又は５−ピラゾリル）；イソチアゾリル（３−イソチアゾリル、４−イソチアゾリル又は５−イソチアゾリル）；イソオキサゾリル（３ーイソオキサゾリル、４−イソオキサゾリル又は５−オキサゾリル）；３−フラザニル；ピロリジニル（１−ピロリジニル、２−ピロリジニル又は３−ピロリジニル）；ピロリニル（１−ピロリン−２−イル、２−ピロリン−２−イル、２−ピロリン−３−イル、２−ピロリン−４−イル、２−ピロリン−５−イル）；イミダゾリジニル（１−イミダゾリジニル、２−イミダゾリジニル又は４−イミダゾリジニル）；イミダゾリニル（２−イミダゾリン−２−イル、２−イミダゾリン−４−イル又は２−イミダゾリン−５−イル）；ピラゾリジニル（２−ピラゾリジニル、３−ピラゾリジニル又は４−ピラゾリジニル）；ピラゾリニル（３−ピラゾリン−１−イル、３−ピラゾリン−２−イル、３−ピラゾリン−３−イル、３−ピラゾリン−４−イル、３−ピラゾリン−５−イル）；チアゾリル（チアゾール−２−イル、チアゾール−４−イル又はチアゾール−５−イル）；オキサゾリル（オキサゾール−２−イル、オキサゾール−４−イル、オキサゾール−５−イル）；１，２，３−トリアゾリル（１，２，３−トリアゾール−１−イル、１，２，３−トリアゾール−４−イル又は１，２，３−トリアゾール−５−イル）；１，２，４−トリアゾリル（１，２，４−トリアゾール−１−イル、１，２，４−トリアゾール−３−イル又は１，２，４−トリアゾール−５−イル）；イソチアゾリル（イソチアゾール−３−イル、イソチアゾール−４−イル又はイソチアゾール−５−イル）；１Ｈ−テトラゾール（１Ｈ−テトラゾール−１−イル又は１Ｈ−テトラゾール−５−イル）；及びイミジゾリル又は１，３−ジアゾリル（１，３−ジアゾール−１−イル、１，３−ジアゾール−２−イル、１，３−ジアゾール−４−イル、１，３−ジアゾール−５−イル）；など、括弧中に記載されたものは、これらの基の様々な可能な結合の代表例であって、結合部に関してこれに限定するものではない。前記の各々は、本発明の個々の実施形態を表すと理解されるだろう。
【００６４】
ある実施形態において、本発明に係るアミノ酸は、式Ｉｃの構造を有するだろう。
【化１８】
0005554720.tif 000019
【００６５】
ここで、Ωはヘテロ環であり、好ましくは五員のヘテロ環であり、好ましくは次の任意の芳香環群から選択される。
【化１９】
0005554720.tif 000020
【００６６】
ここで、ε１、ε２およびε３は独立して、Ｎ、ＮＨ、ＮＲＮ、Ｓ又はＯから選択される。結合部がε１、ε２又はε３である場合はその部位がＮを表し、好ましくは、結合部ではないε１、ε２およびε３の少なくとも一つがＮを表し、ここで、結合部ではない炭素原子は、上記のとおり定義されたグループＲ１で任意に置換されてもよく、ＲＮ及びＲ１は上記のとおり定義され、Ｒ１は好ましくは、Ｃ１〜Ｃ４アルキル（メチル、エチル、プロピル、イソプロピルなど）、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオール、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ（メトキシ、エトキシなど）、チオアルキル、ヒドロキシアルキル（例えば、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチルなど）、パーフルオロメチル又はハロゲン（フルオリン、クロリン、ブロミン、イオジン）である。破線の円は、各環が任意に芳香族であり、その代わりに０（ゼロ）、一つ又は二つの二重結合を有してもよいことを示す。
【００６７】
式Ｉｃに係る好ましい実施形態において、Ωは以下から選択される。
【化２０】
0005554720.tif 000021
【００６８】
ここで、Ｘは、酸素原子、ＮＲＮ又は硫黄原子の何れかである。
【００６９】
Ｒ２及びＲ３は独立して選択され、Ｒ１について上記のとおり定義された任意の基であってもよく、好ましくは水素、ヒドロキシル、ハロゲン（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、ＮＲＮＲＮ、チオール又はＣ１〜Ｃ４アルキル（好ましくはメチル）を表し、ここでＲＮは上記のとおり定義され、好ましくはそれぞれがハロゲンであり、ここで、アミノ酸はＲ又はＳエナンチオマーの何れから構成されてもよい。好ましい実施形態において、Ｘは硫黄であり、Ｒ２及びＲ３はそれぞれハロゲンである。
【００７０】
より好ましくは、アミノ酸はα−アミノ酸（ｎ＝０）であり、Ωは上記されたラジカル（ｉ）であり、Ｘは硫黄であり、Ｒ２及びＲ３はそれぞれ水素を表し、これによって、次の構造を有する４−チアゾリルアラニン（チアゾール−４−イルアラニン）を定義する。
【化２１】
0005554720.tif 000022
【００７１】
一つの実施形態において、４−チアゾリルアラニンは、４−Ｄ−チアゾリルアラニン又は４−Ｌ−チアゾリルアラニン（ＣＡＳ番号１１９４３３−８０−６）の何れかであり、４−Ｌ−チアゾリルアラニンであることが好ましいだろう。４−Ｌ−チアゾリルアラニンの構造を以下に示す。
【化２２】
0005554720.tif 000023
【００７２】
４−Ｌ−チアゾリルアラニンは、ＰｅｐＴｅｃｈ（Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ，ＭＡ）及びＳｙｎｔｈｅｔｅｃｈ（Ａｌｂａｎｙ，ＯＲ）から市販で入手可能である。４−Ｌ−チアゾリルアラニンの合成は、Ｄｉｃｋｍａｎらの米国特許第５，２７５，９５０号公報に記載されており、その開示の内容は、参照により本明細書に含まれる。
【００７３】
本発明の実施に適しているとされるアミノ酸の他の非限定的な例は、式ＩＩａ又はＩＩｂのプロリンアナログ（Ｌ又はＤ）を含む。
【化２３】
0005554720.tif 000024
【化２４】
0005554720.tif 000025
【００７４】
ここで、Ｒは上記のとおり定義され、アミノ酸はα−炭素でＲ又はＳ構造の何れかを有してよい。
【００７５】
本発明に係る非天然アミノ酸はまた、α−炭素での反転したキラリティーを有する自然発生アミノ酸の改変型を包含し、Ｄ−アラニン、Ｄ−バリン、Ｄ−ロイシン、Ｄ−イソロイシン、Ｄ−プロリン、Ｄ−トリプトファン、Ｄ−フェニルアラニン、Ｄ−メチオニン、Ｄ−セリン、Ｄ−チロシン、Ｄ−スレオニン、Ｄ−システイン、Ｄ−アスパラギン、Ｄ−グルタミン、Ｄ−アスパラギン酸、Ｄ−グルタミン酸、Ｄ−リジン、Ｄ−アルギニン及びＤ−ヒスチジンを含み、又はイソロイシン及びスレオニンの場合は、目的の非天然アミノ酸は［Ｒ，Ｒ］、［Ｓ，Ｓ］、［Ｓ，Ｒ］及び［Ｒ，Ｓ］ジアステレオマーである。非天然アミノ酸はまた、例えば、Ｄ．Ｓｅｅｂａｃｈ，ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ  １９９８，８１，９３２，Ｄ．Ｓｅｅｂａｃｈ，ｅｔ  ａｌ．，Ｈｅｌｖ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ  １９９６，７９，９１３に記載されているように天然アミノ酸のβアナログに基づいてもよく、その開示の内容は参照により本明細書に含まれる。
【００７６】
当該分野における当業者に明らかであるように、本発明のアミノ酸は両性イオン型で存在してもよい。さらに、本発明は化粧品として又は製薬的に許容できる（例えば無毒性及び／又は非刺激性）アミノ酸塩の使用を包含する。その塩は、無機若しくは有機酸又は塩基付加塩の何れであってもよい。適した酸塩は、アセテート、アジペート、アルギネート、シトレート、アスパルテート、ベンゾエート、ベンゼンスルホネート、ビスルフェート、ブチレート、カンホレート（ｃａｍｐｈｏｒａｔｅ）、カンファースルホネート、ジグルコネート、シクロペンタンプロピオネート、ドデシルスルホネート、エタンスルホネート、グルコヘプトネート、グリセロホスフェート、ヘミスルフェート、ヘプトネート、ヘキサノエート、フマレート、ハイドロクロライド、ハイドロブロマイド、ハイドロイオダイド、２−ヒドロキシ−エタンスルフェート、ラクテート、マレエート、メタンスルホネート、ニコチネート、２−ナフタレンスルホネート、オキサレート、パモエート、ペクチネート、パースルフェート、３−フェニルプロピオネート、ピクレート、ピバレート、プロピオネート、スクシネート、タートレート、チオシアネート、トシレート及びウンデカノエート（ｕｎｄｅｃａｎｏａｔｅ）を含むが、これに限定されるものではない。特に好ましくは、ヒドロキシクロライド塩からなってもよい。塩基付加塩類は、亜鉛、カルシウム、ビスマス、バリウム、マグネシウム、アルミニウム、銅、コバルト、ニッケル、カドミウム、ナトリウム、カルシウムなどの金属カチオン、又はアンモニア、Ｎ，Ｎ−ベンジルエチレンジアミン、ｄ−グルコサミン、テトラエチルアンモニウム又はエチレンジアミンなどからなるカチオンと共に形成されたものを含む。アミノ官能基及び窒素含有側鎖（例えば縮合環）を含む窒素含有基は、塩化メチル、塩化エチル、塩化プロピル、塩化ブチル、臭化メチル臭化、臭化エチル、臭化プロピル、臭化ブチル、ヨウ化メチル、ヨウ化エチル、ヨウ化プロピル及びヨウ化ブチルといったハロゲン化低級アルキル基類、硫酸ジメチル、硫酸ジエチル、硫酸ジブチル及び硫酸ジアミルといったジアルキル硫酸塩類、塩化デシル、塩化ラウリル、塩化ミリスチル、塩化ステアリル、臭化デシル、臭化ラウリル、臭化ミリスチル、臭化ステアリル、ヨウ化デシル、ヨウ化ラウリル、ヨウ化ミリスチル及びヨウ化ステアリルヨといった長鎖ハロゲン化合物類、臭化ベンジル及び臭化フェネチルといったアラルキルハロゲン化合物類などで四級化され得る。
【００７７】
本発明は、皮膚透過などを改善するため、プロドラッグ型アミノ酸の使用も含む。本明細書において、プロドラッグは、本発明のアミノ酸へとｉｎ  ｖｉｖｏで変換される化合物を意味する。プロドラッグは、アミノ基、カルボキシル基又はその両方から得られてもよい。これらの官能基を修飾するために適したプロドラッグ誘導体は、当業者によく知られており、例えば、Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，Ｔｈｉｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００２），Ｃｈａｐｔｅｒ１４，ｐｐ．４１１−４５８に記載されており、この内容は、参照により本明細書に含まれる。
【００７８】
本発明に係る非タンパク質性アミノ酸は、結果として生じる化合物がｉｎ  ｖｉｖｏで遊離アミノ酸に加水分解されるかどうかに関わらず、Ｃ１〜Ｃ１６アシル誘導体を含むＮ−アシル誘導体類、又はこれに限定されないが、Ｃ１〜Ｃ１０アルキルエステル誘導体を含むエステル誘導体類で官能性を有してもよい。一つの実施形態において、非タンパク質性アミノ酸は、その脂溶性を向上させるためにＣ１〜Ｃ１６Ｎ−アシル誘導体を与えられる。
【００７９】
塩、プロドラッグ、Ｎ−アシル誘導体及びエステルは、本明細書では、まとめて遊離アミノ酸の「誘導体」と呼ばれる。
【００８０】
本発明に係る化粧品組成物は、局所適用のための様々な形状に調合され得、重量で約０．０００１％〜約９０％、好ましくは重量で約０．０００１％〜約２０％、より好ましくは重量で約０．００１％〜約１０％、最も好ましくは重量で約０．００１％〜約１％の前述の少なくとも一つの非タンパク質性アミノ酸を含むであろう。
【００８１】
その組成物は、油中水滴型エマルション又は水中油滴型エマルジョン、化粧水、クリーム、美容液、スプレー、スティック又は局所適用に適した他の形態として調合され得る。
【００８２】
その組成物は、増量剤、乳化剤、抗酸化剤、界面活性剤、膜形成剤、キレート剤、ゲル化剤、増粘剤、皮膚軟化剤、保湿剤、湿潤剤、ビタミン類、ミネラル類、粘度及び／又レオロジー改変剤、日焼け防止剤、角質溶解剤、脱色素剤、レチノイド、ホルモン化合物、α−ヒドロキシ酸、α−ケト酸、抗抗酸菌剤、抗真菌剤、抗菌剤、抗ウイルス剤、鎮痛薬、脂質組成物、抗アレルギー剤、Ｈ１ブロッカー又はＨ２ブロッカーである抗ヒスタミン剤、抗炎症剤、抗刺激剤、抗癌剤、免疫賦活剤、免疫抑制剤、抗ニキビ剤、麻酔薬、消毒剤、防虫剤、皮膚冷化化合物、皮膚保護剤、皮膚浸透促進剤、剥離剤（ｅｘｆｏｌｌｉｅｎｔ）、潤滑剤、香料、着色剤、脱色剤、色素沈着抑制剤、保存料、安定剤、医薬品、光安定化剤、日焼け止め剤又はこれらの組合せを含む、当業者にとって明らかな他の化粧料及び媒材（賦形剤）を任意に含んでもよい。前述に加えて、本発明の化粧品組成物は、皮膚疾患を処置するための任意の他の組成物を含んでもよい。
【００８３】
本発明はまたは、老化の皮膚科的サインを低減し、改善するのに十分な期間、本発明に係る組成物を含む組成物を、影響を受けた領域を被うように局所的に適用することによって老化皮膚を処置するための方法を提供する。この組成物は、所望の抗老化効果が得られるのに必要な期間、２４時間あたり１〜３回、皮膚に局所的に適用されるだろう。処置計画は、少なくとも１週間、少なくとも２週間、少なくとも４週間、少なくとも８週間又は少なくとも１２週間、毎日塗布することを含んでもよい。
【００８４】
この方法は、年齢による皮膚老化及び内因性の皮膚老化の両方と関連する皮膚変化の処置を含む。この方法は、ＵＶによるダメージを受けた皮膚の処置に特に有用であると考えられる。
【００８５】
本発明の組成物及び方法は、概して、乾癬の処理に向けられるものではない。そのため、一つの実施形態において、本発明は、４−Ｌ−チアゾリルアラニンといった本明細書に記載された少なくとも一つのアミノ酸の、乾癬に冒されていない皮膚への局所適用に向けられる。しかしながら、ある皮膚が、しわ、たるみといった皮膚老化のサインによって影響を受けている場合、その皮膚領域を処置するために、乾癬にも冒された同一領域の皮膚にアミノ酸組成物を局所的に適用することは、本発明の範囲内である。
【実施例】
【００８６】
１．１  実施例１：Ｌ−４チアゾリルアラニンによるＬＯＸＬ１活性の刺激
リシルオキシダーゼ様１（ｌｙｓｙｌ  ｏｘｉｄａｓｅ−ｌｉｋｅ１「ＬＯＸＬ１」）酵素は、エラスチンポリマーの再生の鍵となる制御因子であることが明らかとなった。エラスチンポリマーは、弾性特性を有し、皮膚に含まれ、結合組織をもたらす細胞外マトリクス組成物である。エラスチンは、思春期を過ぎると生成されないと考えられ、その後、抗エラスターゼ−エラスターゼ活性のバランスの結果として、エラスチン線維が維持される。加齢に伴い、その競合活性のバランスが崩れ、エラスチン含有組織において弾力性が失われる。皮膚に関しては、弾力性の喪失は、通常、しわとして現れる。
【００８７】
再生／分解（即ち、抗エステラーゼ／エステラーゼ活性）の正確な機構は、分かっていないが、ＬＯＸＬ−１が「抗エステラーゼ」因子として同定されており、トロポエラスチンモノマーの重合化によってエラスチン線維の再生が図られる（例えば、Ｋａｇａｎｅｔ  ａｌ．，２００３，Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，８８：６６０−６７２及びＬｉ  ｅｔ  ａｌ．，２００４，Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．３６：１７８−１８２を参照、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に含まれる。）従って、ＬＯＸＬ−１の転写及び／又は翻訳又はＬＯＸＬ−１活性を強化するように働く薬剤は、「抗エステラーゼ」活性を増加させてエラスチン繊維の再生を促進し、エラスチン含有組織の弾力性を改善すると考えられる。Ｌ−４−チアゾリルアラニンのＬＯＸＬ１発現誘導能は、ルシフェラーゼレポータシステムを用いて分析された。ＬＯＸＬ１制御因子を含む培養細胞へのＬ−４チアゾリルアラニンの添加により、コントロールに比べて、レポーター遺伝子の発現が有意に誘導されることが明らかとなった。
【００８８】
１．１．１  材料及び方法
ベクターの構築、トランスフェクション及び発現：当業者に知られている標準的な方法を用いて、使用説明書に従って、ＬＯＸＬ−１遺伝子のプロモーター領域を単離し、ｐＧＬ３ルシフェラーゼレポータープラスミド（Ｐｒｏｍｅｇａ）にクローニングした。ＬｉｐｏｆｅｃｔＡＭＩＮＥ（登録商標）ＬＴＸ試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を用いて使用説明書に従い、ＬＯＸＬ−１／ｐＧＬ３ベクター及び制御因子を含まないコントロールベクターｐＲＬ−ＮＵＬＬ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を、ヒト線維肉腫細胞株ＨＴＩ０８０へと共遺伝子導入した。
【００８９】
遺伝子導入された細胞を、２４時間、回復させた。その後、培地を様々な濃度のＬ−チアゾリルアラニンを含む新鮮な培地に置き換え、遺伝子導入された細胞を２４時間培養した。
【００９０】
続いて、培養細胞をＰＢＳで洗浄し、２５ｃｍ２培養領域あたり１００μｌ細胞溶解緩衝液に曝し、３０分間室温でゆっくり振とうした。その後、細胞溶解物を含む培養フラスコを、すぐに−８０℃に置いた。
【００９１】
レポーター活性の決定
【００９２】
レポーター遺伝子である蛍ルシフェラーゼの活性を、使用説明書（Ｄｕａｌ−Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ（登録商標）Ｒｅｐｏｒｔｅｒ  Ａｓｓａｙ  Ｓｙｓｔｅｍ，Ｐｒｏｍｅｇａ）に従って決定した。簡単に言うと、ウミシイタケ（Ｒｅｎｉｌｌａ  ｒｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来の第２のルシフェラーゼ遺伝子をコードするコントロールベクターの活性と比較して、レポーター遺伝子の活性を決定した。制御配列活性の変化率を決定するために、試験及びコントロール培養からのそれら遺伝子の相対活性を比較する。
【００９３】
１．１．２  結果
ｐＧＬ３ベクターは、ルシフェラーゼ遺伝子を制御するための必須のプロモーター領域を欠いているので、この遺伝子の発現は、クローニングされた制御因子によって制御される。この場合、この制御因子はＬＯＸＬ１遺伝子の制御因子である。３重試験において、１μｇ／ｍｌのＬ−４チアゾリルアラニンの添加によって、レポーター遺伝子の発現が５７％増加することが分かった（ｐ＜０．０５）。従って、Ｌ−４チアゾリルアラニンは、ＬＯＸＬ１の発現の正の制御因子として示され、エラスチン再生に対する二次的な効果が示唆される。
【００９４】
１．２  実施例２：炎症経路のＬ−４チアゾリルアラニンによる阻害
老化皮膚の共通の症状は、赤みを帯びた領域及び乾燥した領域、鱗状の皮膚として現れる、湿疹様損傷の出現である。その因果関係は分からないが、これらの領域は、慢性炎症と関連することが知られている。従来、そのような損傷は、しばしば、局所用コルチコステロイドで処置された。しかしながら、ステロイドの長期使用は、当該分野においてよく特徴付けられている多くの副作用（例えば、皮膚萎縮症、皮膚線条、脱色素症及び毛細血管拡張症）と関連することが分かっている。２０００年に、湿疹の局所適用のための２つの新規薬剤、ＰＲＯＴＯＰＩＣ（登録商標）（タクロリムス（ｔａｃｒｏｌｉｍｕｓ））及びＥＬＩＤＥＬ（登録商標）（ピメクロリムス（ｐｉｍｅｃｒｏｌｉｍｕｓ））が承認された。これらの薬剤は、それ以来、複数の炎症性皮膚疾患の治療に有効であることが示されている。
【００９５】
タクロリムス及びピメクロリムスは、タンパク質ホスファターゼ２Ｂ（「ＰＰ２Ｂ」）としても知られるセリン／スレオニンプロテアーゼカルシニューリン阻害剤である。カルシニューリン阻害剤は、ＮＦＡＴ（活性型Ｔ細胞の核因子）の脱リン酸化を遮断して、炎症性サイトカイン群の生成を抑制する（例えば、Ｂｅｋｅｒｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ，２００１，Ｊ．Ａｍ．Ａｃａｄ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．４４１：Ｓ１７−Ｓ２７を参照し、その全体が参照により本明細書に含まれる）。局所的に使用される際、カルシニューリン阻害剤は、局所的な皮膚の刺激を正に制御し得る。
【００９６】
体外でのホスファターゼアッセイが、Ｌー４チアゾリルアラニンのカルシニューリン活性を調節する能力を評価するために使用された。Ｌ−４チアゾリルアラニンは、量依存的にカルシニューリン活性を制御することが明らかとなった。
【００９７】
１．２．１  材料及び方法
体外でのホスファターゼアッセイ：カルシニューリン活性の調節は、当該分野においてよく特徴付けられたＤｉＦＭＵＰ（（６，８−ジフルオロ−７−ヒドロキシ−４−メチルクマリンホスフェート）ホスファターゼアッセイを用いて測定される（例えば、Ｗｅｇｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３６５：６１−６９を参照し、その全体が、参照により本明細書に含まれる）。ＤｉＦＭＵＰの脱リン酸化は、高い蛍光を有する、安定な生成物Ｄｉ４ＭＵの形成をもたらす。
【００９８】
Ｌ−４−チアゾリルアラニンの濃度を変えて、５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣＬ（ｐＨ７．４）、０．０１２５％のＢＳＡ、０．１ｍＭのＣａＣｌ、４００Ｕ／ｍｌのカルモジュリン及び１ｍＭのＮｉＣｌからなる反応緩衝液に添加した。Ｌ−４チアゾリルアラニン／反応緩衝液混合物を、３０分間３７℃でインキュベートした。その後、ＤｉＦＭＵ基質を１０μＭの濃度になるように添加して、その混合物を３７℃に戻し、更に１５分間インキュベートした。蛍光強度を、蛍光光度計にて決定した。
【００９９】
１．２．２  結果
試験された最も低い濃度では、Ｌ−４チアゾリルアラニンは、わずかにカルシニューリン活性を増加させ、０．０００１％重量／容量の濃度では活性を６％増加させることが分かった。しかしながら、Ｌ−４チアゾリルアラニンの濃度を増加させると、カルシニューリン活性が量依存的に阻害され、０．００１％及び０．０１％の濃度では活性がそれぞれ１１％及び６３％低減されるという結果となった。その組成物のＩＣ−５０は、０．０６４％と見積もられた。これらの結果により、Ｌ−４チアゾリルアラニンを含む組成物の局所適用が、炎症性皮膚の状態と関連する症状の改善をもたらすであろうことが示唆される。
【０１００】
１．３  実施例３：β１インテグリン発現のＬ−４チアゾリルアラニンによる調節
β１インテグリンは、膜貫通インテグリンのヘテロ２量体複合体の一つの構成因子であり、この複合体は細胞外マトリクスタンパク質及び他の細胞との細胞の接着を仲介する。インテグリンは、コラーゲン、ラミニン及びフィブロネクチンを含む細胞外マトリクスの様々な構成因子に結合し得、皮膚の構造的な完全性を維持するように機能する。β１インテグリンの発現の低下により、例えば、老化した及び／又は日焼けで痛んだ皮膚において皮膚の弾力性が低下することが分かっている。
【０１０１】
Ｌ−４チアゾリルアラニンに曝されることによるβ１インテグリン発現への効果を評価するために、全細胞ＥＬＩＳＡアッセイを使用した。Ｌ−４チアゾリルアラニンに曝されることにより、ヒト繊維芽細胞におけるβ１インテグリンの発現が増加することが明らかとなった。
【０１０２】
１．３．１  材料及び方法
細胞培養：ヒト皮膚線維芽細胞（Ｃａｓｃａｄｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ）を、３．５ｘ１０５細胞／ｍｌで６０ｍｍディッシュにおいて一晩、増殖用培地（ＤＭＥＭ、５％ＦＢＳ、１％Ｌ−Ｇｌｕｔ及び１％抗生物質）中で培養した。細胞を増殖用培地で希釈した試験用活性物質又は溶媒コントロールで処理し、３７℃で２４時間インキュベートした。
【０１０３】
全細胞ＥＬＩＳＡ：Ｌ−４−チアゾリルアラニンで以下のように処理した細胞表面上のＢ１インテグリンの発現を分析するために、Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌからのＢ１インテグリンキットを使用した。培地を吸引し、プレートをＣｅｌｌ  Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｂｕｆｆｅｒ（キットに添付される）で２０〜２５分間３７℃にてインキュベートし、細胞を遠心分離して、補填剤を有さないＤＭＥＭで再懸濁した。非特異的結合が遮断された、抗−ヒトβ１抗体（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）でプレコートされたマイクロタイタープレートに１００μｌの細胞懸濁液を添加し、そのプレートを２時間３７℃にてインキュベートした。細胞染色キット（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）によって、使用説明書に従い、接着細胞を定量した。簡単に言うと、プレートをＰＢＳで洗浄し、キットの染色溶液中で、室温にて５分間インキュベートして接着細胞を染色した。染色された細胞をＰＢＳで洗浄し、１０分間、空気乾燥した。その後、抽出緩衝液を各ウェルに添加し、そのプレートを分光光度計にて５７０ｎｍで読み取った。
【０１０４】
１．３．２  結果
β１インテグリンの発現変化率を以下の式に従って計算した。
【数１】
0005554720.tif 000026
【０１０５】
０．０１％（ｗ／ｖ）のＬ−４−チアゾリルアラニンの濃度では、β１インテグリンの発現が２２５％増加した。この結果により、Ｌ−４−チアゾリルアラニンを含む組成物の局所適用が、β１インテグリンの発現増加をもたらし、それによって、皮膚の完全性及び／又は弾力性の向上につながることが示唆される。
【０１０６】
１．４  実施例４：フィブロネクチン発現のＬ−４チアゾリルアラニンによる調節
フィブロネクチンは、皮膚を含む結合組織の構造及び性質を制御する細胞外マトリクスを形成するのを助ける分泌タンパク質である。フィブロネクチンは、（インテグリンを介した、例えば実施例３の）他の細胞及び細胞外マトリクス組成物、例えばコラーゲン、フィブリン及びヘパリン、の両方との細胞の接着を仲介する。このように、フィブロネクチンは皮膚の完全性の維持に必要不可欠であり、特に損傷が治癒する過程において重要である。ＵＶ被爆は皮膚中のフィブロネクチンを損傷し、その結果として日光に曝された及び／又はＵＶ被爆した皮膚領域におけるそのタンパク質発現が低下することが知られている。加えて、フィブロネクチンの発現は、老化皮膚の真皮乳頭層において低下することが明らかとなっている。
【０１０７】
正常ヒト成人繊維芽細胞からのフィブロネクチンの発現に対する、Ｌ−４チアゾリルアラニンの影響を評価するために、競合阻害ＥＬＩＳＡアッセイを使用した。Ｌ−４チアゾリルアラニンは、量依存的に繊維芽細胞からのフィブロネクチンの発現を増加することが明らかとなった。
【０１０８】
１．４．１  材料及び方法
細胞培養：ヒト真皮繊維芽細胞（Ｃａｓｃａｄｅ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ）を増殖用培地（ＤＭＥＭ，５％ＦＢＳ，１％Ｌ−Ｇｌｕｔ，及び１％抗生物質）中で、１２ウェル組織培養プレートにて培養し、３７℃で２４時間インキュベートした。増殖用培地で希釈された試験用の活性物質で細胞を処理し、３７℃で７２時間インキュベートした。その後、馴化培地を回収し、フィブロネクチンの存在について分析した。繊維芽細胞培養は、その後さらに７２時間インキュベートされた。
【０１０９】
競合阻害ＥＬＩＳＡ：競合的ＥＬＩＳＡキット（Ｃｈｅｍｉｃｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）によって、試験試料におけるフィブロネクチンの存在を測定した。簡単に言うと、試験試料及びコントロール試料の馴化培地を、室温で約１０分間、ＨＲＰ−共役ウサギポリクローナル抗−ヒトフィブロネクチン抗体とインキュベートした。その後、試料／抗体混合物を、非特異的結合を遮断された、標準量のヒトフィブロネクチンでプレコートされたマクロタイタープレートに移した。このプレートを室温で１時間インキュベートし、その後、ＰＢＳ洗浄して、当業者に公知の標準的な方法によって、結合抗体を検出した（つまり、結合ＨＲＰを検出した）。結合抗体の量は、試料中のフィブロネクチン量に反比例する。
【０１１０】
１．４．２  結果
Ｌ−４−チアゾリルアラニン処理によるフィブロネクチンの発現変化率は、次の式に従って計算された。
【数２】
0005554720.tif 000027
【０１１１】
Ｌ−４−チアゾリルアラニンの濃度を増加すると、結果としてフィブロネクチンの発現及び／又は生成が増加した（表１）。
【表１】
0005554720.tif 000028
【０１１２】
この結果から、Ｌ−４チアゾリルアラニンを含む組成物の局所適用することにより結果としてフィブロネクチンの発現が向上し、皮膚の完全性の向上及び／又は皮膚構造の改善をもたらすであろうことが示唆される。
【０１１３】
１．５  実施例５：Ｌ−４チアゾリルアラニンがｉｎ  ｖｉｖｏで皮膚マトリクス分子を増加させる
Ｉｎ  ｖｉｖｏでのヒトの皮膚におけるコラーゲンレベルに対するＬ−４チアゾリルアラニンの影響を確かめるため、３５〜６５歳の約２５人の女性に対して試験を行った。このヒトの臨床試験は、施設内治験審査委員会によって承認され、被検者からのインフォームドコンセントを、その試験の開始に先だって得た。この試験は、連邦行政規則集のタイトル２１（Ｔｉｔｌｅ  ２１  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｏｄｅ  ｏｆ  Ｆｅｄｅｒａｌ  Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｓ）の第５０章および第５６章に従って行われた。
【０１１４】
０．０１％のＬ−４−チアゾリルアラニン溶液を７０：２０：１０の割合のプロピレングリコール：エタノール：水を媒材として作成した。この試験の実験方法は以下のとおりであった。チアゾリルアラニン溶液又はチアゾリルアラニンを含まない媒材溶液を、２４時間、半密閉パッチ下で、皮膚の２×２領域上に（２ｍｇ／ｃｍ２で）、前腕に塗布した。その後、そのパッチを取り除き、新しいパッチを適用した。これを５日間（月曜から金曜まで）繰り返した。その後、被験者には、週末、休みを与えた。パッチの適用は、次の２週間、同様の方法で実施され、全部で１５回適用された。この試験の最後に、そのパッチ適用領域から３ｍｍの皮膚試料を、有資格の皮膚科医によって採取し、ホルマリンに固定し、パラフィンに埋没し、組織学的に処理した。皮膚試料を分割しトリクローム染色で染色して、コラーゲン線維を可視化し、アルシアンブルー染色で染色することによってグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）を可視化した。コラーゲン及びＧＡＧ染色の強度を顕微鏡下で視覚的に評価した。チアゾリルアラニン処理部位からの試料を媒材処理部位と比較することによって、１８／２１（８６％）の被検者において、Ｌ−４チアゾリルアラニン処理部位におけるコラーゲン染色の増加が観察されることが示された。Ｌ−４チアゾリルアラニンで処理された、１３／２１（６２％）の被検者はまた、媒材で処理した皮膚と比較して、ＧＡＧ染色が増加することが示された。皮膚におけるコラーゲン及びＧＡＧの増加は、次に、線、しわ、堅さ及びたるみといった老化のサインの出現を改善し得る。
【０１１５】
１．６  実施例６：カルシトニン遺伝子関連ペプチド（ＣＧＲＰ）のＬ−４チアゾリルアラニンによる誘導
ＣＧＲＰは、近年知られた最も強力な血管拡張剤であり、傷の治癒を助けるのに使用可能であること、及び／又は、局所的に使用されると特定の組織への血液循環が増加することは、特に興味深い。
【０１１６】
神経細胞からのＣＧＲＰの発現に対するＬ−４−チアゾリルアラニンの効果を評価するために、市販で入手できるＣＧＲＰ酵素免疫測定法を使用した。Ｌ−４−チアゾリルアラニンによって、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの培養細胞におけるＣＧＲＰの発現増加が誘導されることが明らかとなった。
【０１１７】
１．６．１  材料及び方法
細胞培養：当該分野で知られている所定の方法に従って、神経増殖因子を添加したＦＫ１２培地中でＰＣ−１２細胞を培養した。ＰＣ１２細胞は、ラットの褐色細胞腫に由来し、神経増殖因子に曝されることによって最終的に分化する。細胞が一旦分化し始めると、それらはＣＧＲＰを発現する。さらに２４時間Ｌ−４チアゾリルアラニンを含む培地中で、培養物をインキュベートし、その後、馴化培地を回収して、ＣＧＲＰの存在に関して分析した。
【０１１８】
ＣＧＲＰ免疫測定法：サンドイッチＥＬＩＳＡ免疫測定キットによって、試験試料中のＣＧＲＰの存在を測定した。簡単に言うと、試験試料及びコントロール試料の馴化培地を、アセチルコリンエステラーゼ共役抗−ＣＧＲＰ抗体（「トレーサー抗体」）と混合して、その混合物を、非特異的結合を遮断された、モノクローナル抗−ＣＧＲＰ抗体（トレーサー抗体とは異なる、ＣＧＲＰのエピトープに結合する）でプレコートされたプレートに添加した。その試料をプレート中でインキュベートし、そのプレートを洗浄し、当該分野において知られている所定の方法に従って、エルマン試薬を用いて結合したアセチルコリンエステラーゼ活性を決定した。その試薬の吸光度を、試料中のＣＧＲＰの濃度と比例する。
【０１１９】
１．６．２  結果
Ｌ−４チアゾリルアラニン処理によるＣＧＲＰ発現の変化率を、次の式に従って計算した。
【数３】
0005554720.tif 000029
【０１２０】
０．０１％のＬ−４チアゾリルアラニンの濃度で、ＣＧＲＰの発現が６９．９３％増加した（ｐ＜０．０５）。この結果により、Ｌ−４チアゾリルアラニンを含む組成物の局所適用が、ＣＧＲＰの発現増加をもたらし、皮膚の修復の改善及び全般的な皮膚状態の改善につながることが示唆された。
【０１２１】
本明細書において引用された、特許出願及び刊行物を含む全ての文献は、それぞれ個々の文献の記載全体が本明細書に記載されているものとみなされる。
以下に本発明とその実施態様をまとめて記載する。
１．化粧品として許容できる媒材中に、有効量の、ＬＯＸＬ−１を強化する非タンパク質性アミノ酸又は該非タンパク質性アミノ酸誘導体を含む、エラスチン減少に由来する皮膚状態を処置するための化粧品組成物。
２．上記非タンパク質性アミノ酸が、式Ｉａ：
【化２５】
0005554720.tif 000030
（式中、ｎは０又は１の何れかであり、
Ｚは、単結合、酸素、硫黄、ＮＲＮ、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、カルボニル、カルボキシル及びカルバミルからなる群から選択され、ここで、ＲＮは水素、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル、アルケニル、アルキニル又はアリールであり；
Ｙは、Ｃ、ＣＨ、Ｎ及びＮＲＮからなる群から選択され、ここでＲＮは水素、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル、アルケニル、アルキニル又はアリールであり；及び
Ｑは、Ｙを含む３〜１０員のヘテロ環又は環系であり、前記環又は環系中に少なくとも一つのヘテロ原子を含み、該環系に結合した少なくとも一つのＲ１で任意に置換され、ここで、前記ヘテロ原子は酸素、窒素又は硫黄から選択され、Ｒ１はそれぞれ独立して、水素、ハロゲン；−ＯＨ；−ＮＨ２；−ＮＲＮＲＮ；−ＳＨ；−ＣＮ；オキソ；−ＣＨＯ；
−ＣＯ２Ｈ；−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｈ；−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ａｒ；−（Ｃ＝Ｏ）−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−（Ｃ＝Ｏ）−Ｏ−Ａｒ；−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＲＮＲＮ；−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−Ｏ−Ａｒ；−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−Ｓ−Ａｒ；−Ａｒ；−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−ＮＲＮ−ＣＨＯ；−ＮＲＮ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；パーフルオロアルキル；エポキシ；アジド；チオシアネート；−ＳＯ２−ＲＮ；及びニトロ；からなる群から選択され、ＲＮは水素、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル、アルケニル、アルキニル又はアリールであり、置換基が２つのＲＮを含む場合、それらが共同して環を形成してもよい；）
で表されるヘテロ環基を含むα−アミノ酸又はβ−アミノ酸であり、
但し、式Ｉａの化合物がＬ−ヒスチジン又はＬ−トリプトファンではない、
上記１に記載の組成物。
３．Ｑが芳香環を含む上記２に記載の組成物。
４．Ｑが５又は六員環である、上記２又は３に記載の組成物。
５．Ｑが五員環である、上記２又は３に記載の組成物。
６．ＹがＣである、上記２乃至５の何れか１項に記載の組成物。
７．Ｑが、上記環内に窒素原子を含む上記２乃至６の何れかに記載の組成物。
８．任意の置換基Ｒ１が、独立して、ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＳＨ及び−ＣＨ３からなる群から選択される、上記２乃至７の何れかに記載の組成物。
９．Ｚが単結合を示す、上記２乃至８の何れかに記載の組成物。
１０．ｎが０（ゼロ）である、上記２乃至９の何れかに記載の組成物。
１１．ｎが１である、上記２乃至９の何れかに記載の組成物。
１２．式Ｉａの上記非タンパク質性アミノ酸がＬ構造である、上記１乃至１１の何れかに記載の組成物。
１３．式Ｉａの上記非タンパク質性アミノ酸がＤ構造である上記１乃至１１の何れかに記載の組成物。
１４．上記非タンパク質性アミノ酸が、式Ｉｂ：
【化２６】
0005554720.tif 000031
（式中、
ｎは０（ゼロ）又は１であり；
Ｚは単結合又は（ＣＨ２）ｋユニットであり、ここで、ｋは１〜３の整数であり；
Ｙは、Ｃ、ＣＨ又はＮであり；及び
Ｔ、Ｕ、Ｖ及びＷは、独立して、ＣＨ、ＣＲ１、Ｎ、ＮＨ、ＮＲＮ、Ｏ又はＳから選択され、ここでＲ１は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン；−ＯＨ；−ＮＨ２；−ＮＲＮＲＮ；−ＳＨ；−ＣＮ；オキソ；−ＣＨＯ；−ＣＯ２Ｈ；−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｈ；−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ａｒ；−（Ｃ＝Ｏ）−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−（Ｃ＝Ｏ）−Ｏ−Ａｒ；−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＲＮＲＮ；−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−Ｏ−Ａｒ；−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−Ｓ−Ａｒ；−Ａｒ；−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−ＮＲＮ−ＣＨＯ；−ＮＲＮ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル
；−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；パーフルオロアルキル；エポキシ；アジド；チオシアネート；−ＳＯ２−ＲＮ；及びニトロ；からなる群から選択され、ここで、ＲＮは水素、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル、アルケニル、アルキニル又はアリールであり；
上記環が任意に芳香族であり、又は０、１若しくは２個の二重結合を有してもよい；）
で表される五員のヘテロ環基を含み、
但し、式Ｉｂの化合物がＬ−ヒスチジンではない、
上記１に記載の組成物。
１５．Ｚが単結合を表す、上記１４に記載の組成物。
１６．ＹがＣである、上記１４又は１５に記載の組成物。
１７．Ｔ、Ｕ、Ｖ及びＷの少なくとも一つがＮ（窒素原子）であり、
但し、Ｔ、Ｕ、Ｖ及びＷの全てがＮ（窒素原子）であることはない、
上記１４乃至１６の何れかに記載の組成物。
１８．Ｎ（窒素原子）ではないＴ、Ｕ、Ｖ及びＷの少なくとも一つが、Ｏ、Ｓ、ＮＨ又はＮＲＮを表す、上記１７に記載の組成物。
１９．ｎが０（ゼロ）である、上記１４乃至１８の何れかに記載の組成物。
２０．ｎが１である、上記１４乃至１８の何れかに記載の組成物。
２１．式Ｉａの上記非タンパク質性アミノ酸がＬ構造である上記１４乃至２０の何れかに記載の組成物。
２２．式Ｉａの上記非タンパク質性アミノ酸がＤ構造である、上記１４乃至２０の何れかに記載の組成物。
２３．次式：
【化２７】
0005554720.tif 000032
（式中、ε１、ε２及びε３は、独立して、Ｎ、ＮＨ、ＮＲＮ、Ｓ及びＯからなる群から
選択され、
結合部Ｙがε１、ε２又はε３である場合は、ＹはＮを示し；
ここで該結合部ではない炭素原子群が、任意にＲ１で置換されてもよく；
ここでＲ１は、それぞれ独立して、水素、ハロゲン；−ＯＨ；−ＮＨ２；−ＮＲＮＲＮ；−ＳＨ；−ＣＮ；オキソ；−ＣＨＯ；−ＣＯ２Ｈ；−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｈ；−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−Ｏ−（Ｃ＝Ｏ）−Ａｒ；−（Ｃ＝Ｏ）−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−（Ｃ＝Ｏ）−Ｏ−Ａｒ；−（Ｃ＝Ｏ）−ＮＲＮＲＮ；−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−Ｏ−Ａｒ；−Ｓ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−Ｓ−Ａｒ；−Ａｒ；−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−ＮＲＮ−ＣＨＯ；−ＮＲＮ−（Ｃ＝Ｏ）−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル−Ｏ−Ｃ１〜Ｃ１０アルキル；パーフルオロアルキル；エポキシ；アジド；チオシアネート；−ＳＯ２−ＲＮ；及びニトロ；からなる群から選択され、ここで、ＲＮは水素、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル、アルケニル、アルキニル又はアリールであり；
ここで、点線は、各環が０、１又は２個の二重結合を有してもよいことを示す）
から選択される五員のヘテロ環を示す、上記１に記載の組成物。
２４．存在するなら、Ｒ１は、独立して、Ｃ１〜Ｃ４アルキル、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオール、ヒドロキシル、Ｃ１〜Ｃ４アルコキシ、チオアルコキシ、ヒドロキシアルキル、パーフルオロメチル又はハロゲンを示す、上記２３に記載の組成物。
２５．ε１、ε２及びε３の少なくとも一つが窒素原子を示す、上記２３に記載の組成物。
２６．上記五員のヘテロ環が芳香族である、上記２３に記載の組成物。
２７．Ｑが、
【化２８】
0005554720.tif 000033
（式中、Ｘは酸素原子、ＮＲＮ又は硫黄原子の何れかであり；
Ｒ２及びＲ３は、独立して、水素、ヒドロキシル、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＮＲＮＲＮ、チオール及びＣ１〜Ｃ４アルキルからなる群から選択され；ここでＲＮは水素、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル、アルケニル、アルキニル又はアリールであり；及び
ここで上記アミノ酸が、Ｒ又はＳのエナンチオマーの何れかを含んでもよい）
からなる群から選択される五員のヘテロ環を示す、上記１に記載の組成物。
２８．Ｘが硫黄である、上記２７に記載の組成物。
２９．Ｒ２及びＲ３がそれぞれ水素である、上記２７又は２８に記載の組成物。
３０．上記非タンパク質性アミノ酸が以下の構造：
【化２９】
0005554720.tif 000034
を有する、上記１に記載の方法。
３１．上記非タンパク質性アミノ酸が、以下の構造：
【化３０】
0005554720.tif 000035
を有する、上記３０に記載の組成物。
３２．上記有効量が、全組成物の重量の約０．０００１％〜約９０％の間である、上記１に記載の組成物。
３３．上記有効量が、全組成物の重量の約０．０００１％〜約２０％の間である、上記１に記載の組成物。
３４．上記有効量が、全組成物の重量の約０．００１％〜約１０％の間である、上記１に記載の組成物。
３５．化粧品として許容できる媒材中に、皮膚におけるＬＯＸＬ−１を強化するのに有効な量のチアゾリルアラニン又はその誘導体を含む化粧組成物。
３６．上記チアゾリルアラニンが、Ｌ−チアゾリルアラニン又はその誘導体である、上記３５に記載の化粧組成物。
３７．上記Ｌ−チアゾリルアラニンが、Ｌ−４−チアゾリルアラニン又はその誘導体である、上記３６に記載の化粧組成物。
３８．上記Ｌ−チアゾリルアラニンが、Ｌ−４−チアゾリルアラニンである、上記３６に記載の化粧組成物。
３９．上記化粧品として許容できる媒材が、油中水滴型エマルションからなる、上記３５に記載の化粧組成物。
４０．上記化粧品として許容できる媒材が、水中油滴型エマルジョンからなる、上記３５に記載の化粧組成物。
４１．皮膚中のエラスチン線維の減少に由来する皮膚状態を処置する方法であって、
非タンパク質性アミノ酸又はその誘導体を、ＬＯＸＬ−１を強化するのに有効な量で、
皮膚に局所的に適用することをからなる方法。
４２．上記非タンパク質性アミノ酸が、カルシニューリン阻害、β１インテグリンの発現増加、フィブロネクチンの発現増加、β−エンドルフィン刺激及びＣＧＲＰ発現増加からなる群から選択される少なくとも一つの付加的な活性をさらに有する、上記４１に記載の方法。
４３．上記非タンパク質性アミノ酸が、カルシニューリンを阻害することができる、上記４２に記載の方法。
４４．上記非タンパク質性アミノ酸が、β１インテグリンの発現を増加させ得る、上記４２に記載の方法。
４５．上記非タンパク質性アミノ酸が、フィブロネクチンの発現を増加させ得る、上記４２に記載の方法。
４６．上記非タンパク質性アミノ酸が、β−エンドルフィンを刺激することができる、上記４２に記載の方法。
４７．上記非タンパク質性アミノ酸が、ＣＧＲＰの発現を増加させ得る、上記１５に記載の方法。
４８．上記１乃至４０の何れかに記載の上記組成物を皮膚に適用することからなる、該皮膚への効果を証明するための方法であって、
該皮膚への効果が、
（ａ）小じわ又はしわの処置、軽減及び／又は予防、
（ｂ）皮膚の毛穴のサイズの低下
（ｃ）皮膚の厚み、ふくらみ及び／又は張りの改善、
（ｄ）皮膚の柔らかさ及び／又は柔軟性の改善
（ｅ）皮膚のトーン、輝き及び又は透明度の改善
（ｆ）プロコラーゲン及び／又はコラーゲン生成の改善、
（ｇ）エラスチンの保持及び再構築の改善、
（ｈ）皮膚のきめの改善及び／又は再組織化の促進、
（ｉ）皮膚のバリア修復及び／又は機能の改善、
（ｊ）皮膚の凹凸の改善、
（ｋ）皮膚の艶及び／又は明るさの回復、
（ｌ）皮膚の必須栄養素及び／又は構成要素の補充、
（ｍ）閉経によって後退した皮膚の外観の改善、
（ｎ）皮膚の潤いの改善、及び
（ｏ）皮膚の弾力性及び／又は復元力の向上、
からなる群から選択される、方法。
４９．上記１乃至４０の何れかに記載の上記組成物を皮膚に局所適用することをからなる、ヒトの皮膚における小じわ又はしわ若しくはたるみを処置し、改善し、及び／又は予防する方法。
５０．Ｌ−４−チアゾリルアラニンを含む組成物を小じわ又はしわに局所適用することからなる、小じわ又はしわを処置する方法。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図１Ｄ】
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