(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
分離バッグ（１）に含まれる一定量の全血を、少なくとも血漿成分、単核球成分および赤血球成分に分離する方法であり、前記分離バッグ（１）は少なくとも血漿成分バッグ（２）および単核球成分バッグ（３ａ、２４）に流体的に接続されている方法であって、
血漿を備える第１の内側層と、血小板を備える第２の中間層と、リンパ球、単球および顆粒球を備える第３の中間層と、赤血球を備える第４の外側層と、に分離するように第１の回転スピードで回転軸（３１）のまわりに前記分離バッグ（１）をスピンすることであって、少なくとも前記第３および第４の層は部分的に重なり合うことと、
前記分離バッグ（１）と前記単核球成分バッグ（３ａ、２４）との間の流体連通を阻止することと、
前記分離バッグ（１）と前記血漿成分バッグ（２）との間の流体連通を可能にすることと、
前記血漿成分バッグ（２）内に、前記第１の層の第１の一部分を備える血漿成分を移送するように、前記回転軸（３１）から第１の距離で赤血球が検出されるまで前記分離バッグ（１）を圧搾することと、
前記分離バッグ（１）と前記血漿成分バッグ（２）との間の流体連通を阻止することと、
前記分離バッグ（１）と前記単核球成分バッグ（３ａ、２４）との間の流体連通を可能にすることと、
前記単核球成分バッグ（３ａ、２４）内に、リンパ球および単球を備える前記第３の層の少なくとも一部分を備える単核球成分を移送するように、前記分離バッグ（１）を圧搾することと、
前記第１の層の第２の一部分と前記第２の層と前記第３の層と前記第４の層の一部分とを混合するように、回転スピードを前記第１の回転スピードから第２の回転スピードへ減少することと、前記血小板成分を前記第３の層および前記第４の層から分離するように、回転スピードを前記第２の回転スピードから第３の回転スピードへ増加することであって、前記第３の回転スピードは前記第１の回転スピードよりも低いこととによって、前記第１の層の第２の一部分に懸濁した第２の層の血小板を備える血小板成分を用意するように、前記分離バッグ（１）に残っている前記第２の層と前記第１の層の第２の一部分とを混合することと、
前記分離バッグ（１）と前記血漿成分バッグ（２）との間の流体連通および前記分離バッグ（１）と単核球成分バッグ（３ａ、２４）との間の流体連通を阻止することと、
前記分離バッグ（１）と前記分離バッグ（１）に接続されている血小板成分バッグ（３ｂ）との間の流体連通を可能にすることと、
前記血小板成分を前記血小板成分バッグ（３ｂ）内に移送するように、前記回転軸（３１）から第２の距離で赤血球が検出されるまで前記分離バッグ（１）を圧搾することであって、前記第２の距離は前記第１の距離よりも短いことと、
前記第１の層の前記第２の一部分と前記第２の層と前記第３の層と前記第４の層の一部分とを混合するように、回転スピードを前記第１の回転スピードから第２の回転スピードへ減少することと、
前記血小板成分を前記第３の層および前記第４の層から分離するように、回転スピードを前記第２の回転スピードから第３の回転スピードへ増加することであって、前記第３の回転スピードは前記第１の回転スピードよりも低いことと、
を備える方法。
【請求項２】
前記単核球成分は、前記第１の層の第２の一部分、前記第２の層、および、前記第４の層の一部分をさらに備える、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記単核球成分バッグ（３ａ、２４）内に移送された前記単核球成分は、所定の容量を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
全血の容量は４５０ｍｌであり、前記単核球成分の容量は、１０ｍｌから１５ｍｌまでの間で構成される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
全血の容量は４５０ｍｌであり、前記単核球成分の容量は、５０ｍｌから６０ｍｌまでの間で構成される、請求項３に記載の方法。
【請求項６】
前記単核球成分を前記単核球成分バッグ（３ａ、２４）内に移送した後に、前記分離バッグ（１）をスピンするのを停止することをさらに備える、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記血小板成分を前記血小板成分バッグ（３ｂ）内に移送するように前記分離バッグ（１）を圧搾することは、
前記回転軸から第２の距離で赤血球が検出されるまで第１の流量で前記血小板成分を移送するように、前記分離バッグ（１）を圧搾することであって、前記第２の距離は前記第１の距離よりも短いことと、
前記回転軸から前記第２の距離で赤血球を検出するのに続いて、少なくとも、前記第１の流量よりも低い第２の流量で、前記血小板成分を移送するように、前記分離バッグ（１）を圧搾することと、
前記回転軸から第３の距離で赤血球を検出するのに続いて前記分離バッグ（１）を圧搾するのを停止することであって、前記第３の距離は前記第２の距離よりも短いことと、
を備える、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記単核球成分を前記単核球成分バッグ（３ａ、２４）内に移送した後に、前記分離バッグ（１）に接続されている赤血球成分バッグ（４）内に、前記第４の層と顆粒球を備える前記第３の層の一部分とを備える赤血球成分を移送することをさらに備える、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
顆粒球、および、残余の単球およびリンパ球を実質的に除去するように、前記赤血球成分バッグ（４）内に移送する間に、前記赤血球成分を濾過することをさらに備える、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記赤血球成分を前記分離バッグ（１）から前記赤血球成分バッグ（４）内に移送することは、前記分離バッグ（１）を遠心分離するのを停止した後に発生する、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
前記赤血球成分は、重力によって前記分離バッグ（１）から前記赤血球成分バッグ（４）内に移送される、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
分離バッグ（１）に含まれる一定量の全血を、少なくとも血漿成分、単核球成分および赤血球成分とに分離する装置であり、前記分離バッグ（１）は少なくとも血漿成分バッグ（２）および単核球成分バッグ（３ａ、２４）に流体的に接続されている装置であって、
ロータの回転軸（３１）のまわりに分離容器（１１）をスピンするロータ（３２、３３、３４、３５）と、
分離バッグ（１）を前記血漿成分バッグ（２）に接続するチューブ（１４）と相互作用し、それを通る流体成分の流れを選択的に可能にするかまたは阻止するために前記ロータ（３２、３３、３４、３５）に装着されている第１の弁部材（４２）と、
前記分離バッグ（１）を前記単核球成分バッグ（３ａ、２４）に接続するチューブ（１６ａ、２２）と相互作用し、それを通る流体成分の流れを選択的に可能にするかまたは阻止するために前記ロータ（３２、３３、３４、３５）に装着されている第２の弁部材（４３）と、
前記ロータ（３２、３３、３４、３５）の前記回転軸（３１）から一定の距離で前記分離バッグ（１）の赤血球を検出する少なくとも１つのセンサ（５６、５７）と、
前記血漿成分を前記分離バッグ（１）から前記血漿成分バッグ（２）内に移送させ、前記単核球成分を前記分離バッグ（１）から前記単核球成分バッグ（３ａ、２４）内に移送させる流体移送システム（５４、５５、３７、３８、６０）と、
血漿を備える第１の内側層と、血小板を備える第２の中間層と、リンパ球、単球および顆粒球を備える第３の中間層と、赤血球を備える第４の外側層と、に一定量の全血が沈降するのを可能にする少なくとも１つの遠心分離スピードを記憶するメモリであって、少なくとも前記第３および第４の層は部分的に重なり合う遠心分離スピードを記憶するメモリと、
制御ユニット（７０）であって、
前記少なくとも１つのセンサ（５６、５７）から情報を受け取り、前記メモリから前記少なくとも１つの遠心分離スピードを受け取るために、
前記少なくとも１つの遠心分離スピードで前記ロータ（３２、３３、３４、３５）を回転させるために、
前記一定量の全血が前記分離バッグ（１）に沈降したときに、前記第１の弁部材（４２）に、前記血漿成分バッグ（２）に接続されている前記チューブ（１４）を開かせ、前記第２の弁部材（４３）に、前記単核球成分バッグ（３ａ、２４）に接続されている前記チューブ（１６ａ、２２）を閉じさせるために、
前記流体移送システム（５４、５５、３７、３８、６０）に、前記第１の層の第１の一部分を備える血漿成分を前記血漿成分バッグ（２）内に移送させるために、
赤血球が前記少なくとも１つのセンサ（５６、５７）によって検出されたときに、前記流体移送システム（５４、５５、３７、３８、６０）に、前記分離バッグ（１）の内容物の移送を停止させ、前記第１の弁部材（４２）に、前記血漿成分バッグ（２）に接続されている前記チューブ（１４）を閉じさせ、前記第２の弁部材（４３）に、前記単核球成分バッグ（３ａ、２４）に接続されている前記チューブ（１６ａ、２２）を開かせるために、
前記流体移送システム（５４、５５、３７、３８、６０）に、所定容量を有し且つリンパ球および単球を備える前記第３の層の少なくとも一部分を備える単核球成分を前記単核球成分バッグ（３ａ、２４）内に移送させるために、
プログラムされた制御ユニット（７０）と、
前記分離バッグ（１）を血小板成分バッグ（３ｂ）に接続するチューブ（１６ｂ）と相互作用し、それを通る流体成分の流れを選択的に可能にするかまたは阻止するために前記ロータ（３２、３３、３４、３５）に装着されている第３の弁部材（４４）と、
前記少なくとも１つのセンサ（５６、５７）が位置する距離よりも短い前記ロータ（３２、３３、３４、３５）の前記回転軸（３１）からの距離で、前記分離バッグ（１）の赤血球を検出する１つの追加センサ（５８）と、
を備え、
前記制御ユニットは、
前記血漿成分を前記血漿成分バッグ（２）内に移送した後に、前記分離バッグ（１）に残っている前記第１の層の第２の一部分を、前記第２の層、前記第３の層、および、前記第４の層の内側層と混合するように、前記ロータ（３２、３３、３４、３５）の回転スピードを第１の回転スピードから第２の回転スピードへ減少させるために、
前記第１の層の前記第２の一部分を、前記第２の層、前記第３の層、および、前記第４の層の前記内側層と混合することが完了した後に、血小板成分は第４の層の第２の一部分に懸濁した血小板を備え、前記血小板成分を前記第３および第４の層から分離するように、前記ロータ（３２、３３、３４、３５）の回転スピードを前記第２の回転スピードから第３の回転スピードへ増加させるために、
前記血小板成分が分離されるときに、前記第１の弁部材（４２）に、前記血漿成分バッグ（２）に接続されている前記チューブ（１４）を閉じさせ、前記第２の弁部材（４３）に、前記単核球成分バッグ（２４）に接続されている前記チューブを閉じさせ、前記第３の弁部材（４４）に、前記血小板成分バッグ（３ｂ）に接続されている前記チューブ（１６ｂ）を開かせるために、
前記流体移送システム（５４、５５、３７、３８、６０）に、少なくとも前記追加センサ（５８）が赤血球を検出するまで、前記血小板成分を前記分離バッグ（１）から前記血小板成分バッグ（３ｂ）内に移送させるために、
さらにプログラムされる装置。
【請求項１３】
前記流体移送システム（５４、５５、３７、３８、６０）は、前記分離バッグ（１）を圧搾し、前記分離バッグ（１）の内容物を、前記血漿成分バッグ（２）および前記単核球成分バッグ（３ａ、２４）の少なくとも一方内に移送させる圧搾システム（５４、５５）を備える、請求項１２に記載の装置。
【請求項１４】
前記流体移送システム（５４、５５、３７、３８、６０）は、前記分離バッグ（１）の内容物を、前記血漿成分バッグ（２）および前記単核球成分バッグ（３ａ、２４）の少なくとも一方内に移送させるポンプシステム（６０）を備える、請求項１２に記載の装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、一定量の全血を少なくとも３つの成分に分離する装置および方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
全血は、細胞成分、すなわち、赤血球、白血球および血小板を備え、これらは、水および溶質（特に、タンパク質、電解質および代謝産物）からなる液体成分すなわち血漿に懸濁している。白血球は、単核球（リンパ球、単球、幹細胞）、および、多核白血球（好中球、好酸球および好塩基球を備える顆粒球）を備える。
【０００３】
血液細胞の各種類は、特定の機能を実行する。すなわち、赤血球は酸素を肺から体細胞へ輸送し、二酸化炭素を体細胞から肺へ輸送する。白血球は、免疫系の一部であり、微生物および異物に対して体を保護する。血小板は、血管損傷の部位でプラグを形成することによって血液の損失を防止するのを助ける。
【０００４】
血漿タンパクもまた、特定の機能を実行する。すなわち、凝固タンパク（凝固因子）は、血小板プラグを適所に保持することによって血栓形成を補助し、グロブリン（抗体）は、免疫応答の一部として異物を中和し、アルブミンは血漿の含水量および粘度を維持する助けをし、これらは両方とも、正常血圧を保つために必要である。
【０００５】
血液細胞によって且つ血漿タンパクによって果たされる機能の特異性のため、今日では、特定の外科的状態または病状に対処するために患者に必要な血液成分またはこの一部分（例えば凝固因子）のみを患者内に注入または投入することが慣例である。全血は依然として外傷または手術中に失われた血液に取って代わるために注入されてもよいが、大半の場合には、疾病または化学療法によって失っているかまたは破壊された血液成分のみが投与される。
【０００６】
患者に注入されるか投入される全血または血液成分またはこのいずれの一部分は、健常なドナー（自己血提供の場合には、血液生成物の将来の受容者であり得る）からもたらされる。血液提供は一般に、全血の約４５０ｍｌ（１パイント）または約５００ｍｌのいずれかからなる。
【０００７】
上述の現在の注入慣例にしたがって、提供された全血は、通常、２つまたは３つの血液成分、すなわち、血漿および赤血球、または、血漿、赤血球および血小板に分離される。
【０００８】
全血を２つの血液成分に分離することは、血漿および濃厚赤血球に血液が分離される遠心分離フェーズと、血小板および白血球が濃厚赤血球から除去される任意の濾過フェーズとを含む。
【０００９】
全血を３つの血液成分に分離することは、主に血漿を備える第１の成分と、主に血小板を備える第２の成分と、主に赤血球を備える第３の成分と、に血液が分離される遠心分離フェーズを含む。任意であるさらなる濾過段階において、白血球が濃厚赤血球から除去される。４〜６の血液提供から分離された血小板がプールされて、輸血投与量を形成し、濾過によって白血球がそれから除去される。
【００１０】
下記の理由のため、白血球を全血および血液成分（血小板、濃厚赤血球）から除去することが重要である。特に、保管中に、白血球がサイトカインを放出し、これは、患者内に輸血されるときに、発熱性非溶血輸血反応を引き起こす可能性がある。また、複数回輸血後に、ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）に対する抗体を生み出す患者もあり、それはドナーの白血球の膜上でＨＬＡに反応する。ＨＬＡ抗体はまた、複数回輸血を受ける患者に輸血反応を引き起こす可能性もある。白血球はまた、疾病の感染に関与する。
【００１１】
国際特許出願公開公報ＷＯ２００４／０１８０２１号には、一定量の全血を、血漿成分および赤血球成分か、または、血漿成分、赤血球成分および血小板成分か、のいずれかに分離する方法および装置が記載されている。この装置は、全血用の環状分離バッグと協働するように適合された遠心分離機を備え、それは、血漿成分バッグおよび赤血球成分バッグか、または、血漿成分バッグ、赤血球成分バッグおよび血小板成分バッグか、のいずれかに接続されている。遠心分離機は、下記を含む。すなわち、
−分離バッグをスピンし、この中に含まれる全血を遠心分離するロータであって、分離バッグを支持するターンテーブルと、分離バッグに接続された成分バッグを含む中心コンパートメントとを有するロータと、
−分離バッグを圧搾し、血漿成分を分離バッグから血漿成分バッグ内に移送させ、赤血球成分を赤血球成分バッグ内に移送させ、場合に応じて、血小板成分を血小板成分バッグ内に移送させる圧搾システムとである。
【００１２】
国際特許出願公開公報ＷＯ２００４／０１８０２１号に記載された方法にしたがって、様々な血液成分から白血球を除去すること（いわゆる「白血球除去（ｌｅｕｋｏｒｅｄｕｃｔｉｏｎ）」）は、全血の遠心分離の前か、または、全血を２つまたは３つの成分に分離した後か、のいずれかに行うことができる。遠心分離前除去プロセスにおいて、白血球（および、場合に応じて、血小板）は、収集バッグから分離バッグ内に移送される間に全血から濾過によって除去される。分離後プロセスでは、白血球（および、場合に応じて、血小板）は、移送バッグから赤血球生成物バッグ内に移送される間に赤血球成分から濾過によって除去される。
【００１３】
本発明に導いた研究活動中に、赤血球成分から白血球をおよび場合に応じて血小板を除去するために、赤血球を従来のフィルタによって濾過することは、結果として、フィルタの目詰まりになることもあり、且つ／または、濾過された赤血球生成物に残余白血球が存在することもあり、特に、血液提供が、収集後数時間以内に処理されるのではなく、処理される前に２４時間まで室温で保存されるときにはそうであることが観察された。
【特許文献１】ＷＯ２００４／０１８０２１号
【発明の概要】
【００１４】
本発明の１つの目的は、所定の量未満の残余白血球を含む輸血可能生成物の用意を可能にする全血を分離する方法および装置を設計することである。
【００１５】
本発明の一実施形態にしたがって、分離バッグに含まれる一定量の全血を少なくとも３つの成分に分離する方法は、
−血漿を備える第１の内側層と、血小板を備える第２の中間層と、リンパ球、単球および顆粒球を備える第３の中間層と、赤血球を備える第４の外側層と、に分離するように分離バッグを遠心分離することであって、少なくとも第３および第４の層は部分的に重なり合うことと、
−分離バッグに接続された血漿成分バッグ内に、第１の層の第１の一部分を実質的に備える血漿成分を移送することと、
−分離バッグに接続された単核球成分バッグ内に、リンパ球および単球を備える第３の層の少なくとも一部分を備える単核球成分を移送することと、
を備える。
【００１６】
本発明にしたがった方法の他の特徴は下記の通りである。
【００１７】
−単核球成分は、第１の層の第２の一部分および第２の層をさらに備える。
【００１８】
−方法は、単核球成分を単核球成分バッグ内に移送した後に、分離バッグに接続された赤血球成分バッグ内に、第４の層と顆粒球を備える第３の層の一部分とを備える赤血球成分を移送することをさらに備える。
【００１９】
−方法は、顆粒球、および、残余の単球およびリンパ球を実質的に除去するように、赤血球成分バッグ内に移送する間に、赤血球成分を濾過することをさらに備える。
【００２０】
−方法は、赤血球成分を分離バッグから赤血球成分バッグ内に移送する前に、一定量の保存溶液を赤血球成分バッグから分離バッグ内に移送することをさらに備える。
【００２１】
−赤血球成分を分離バッグから赤血球成分バッグ内に移送することは、分離バッグを遠心分離するのを停止した後に発生する。
【００２２】
−赤血球成分は、重力によって分離バッグから赤血球成分バッグ内に移送される。
【００２３】
−方法は、血漿成分を血漿成分バッグ内に移送した後に、分離バッグに接続された血小板成分バッグ内に、第２の層の一部分と、血漿成分を血漿成分バッグ内に移送した後に分離バッグに残っている第１の層の一部分とを備える血小板成分を移送することをさらに備える。
【００２４】
−方法は、血小板成分を血小板成分バッグ内に移送する前に、血漿に血小板を懸濁させるように、第１の層の一部分と、血小板成分が備えられる第２の層の一部分とを混合することをさらに備える。
【００２５】
−血小板成分は、血小板成分バッグ内に少なくとも２つの連続流量で移送され、第１の流量は第２の流量よりも速い。
【００２６】
−方法は、単核球成分を単核球成分バッグ内に移送した後に、分離バッグを遠心分離するのを停止することをさらに備える。
【００２７】
本発明は、少なくとも下記の利点を呈する。
【００２８】
−従来の白血球除去フィルタ（白血球を除去するためのフィルタ）によって、単核球および場合に応じて血小板が実質的にない赤血球成分を濾過することは、フィルタが目詰まりすることなく発生し、結果として、残余白血球がＡＡＢＢ（米国血液銀行協会（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｂｌｏｏｄ  Ｂａｎｋｓ））によって設定された基準未満である赤血球生成物になる。
【００２９】
−この結果は、室温に保たれた一定量の全血が、ドナーからの収集後１日で、様々な成分に分離されるときでさえ、達成される。
【００３０】
−従来の白血球除去フィルタによって、単核球および場合に応じて血小板が実質的にない赤血球成分を濾過するために必要な時間は、赤血球、白血球および場合に応じて血小板を備える赤血球成分を濾過するために現在必要な時間よりも、実質的に短い。
【００３１】
−本発明にしたがって遠心分離によって分離させられた単核球成分は、貴重な生成物を構成し、それから、例えば、インターフェロン等の治療上関心のある物質を抽出することができる（インターフェロンは、ウイルスに感染した細胞を攻撃するサイトカインである）。
【００３２】
−上述のように、現在用意された濃厚赤血球は、患者に注入される前に必ずしも濾過されるわけではない。これは、血液を濾過するには必然的にコストがかかるため、経済的な理由のためである。この点で、本発明にしたがった方法によって得られた赤血球成分は、実質的に単核球がなく、従来のプロセスによって分離された濃厚赤血球よりも、濾過せずに注入されるはるかに良好な生成物である。
【００３３】
−本発明の一実施形態にしたがって、分離バッグに含まれる一定量の全血を、少なくとも血漿成分、単核球成分および赤血球成分に分離する方法であって、分離バッグは少なくとも血漿成分バッグおよび単核球成分バッグに流体的に接続されている方法は、
−血漿を備える第１の内側層と、血小板を備える第２の中間層と、リンパ球、単球および顆粒球を備える第３の中間層と、赤血球を備える第４の外側層と、に分離するように第１の回転スピードで回転軸のまわりに分離バッグをスピンすることであって、少なくとも第３および第４の層は部分的に重なり合うことと、
−分離バッグと単核球バッグとの間の流体連通を阻止することと、
−分離バッグと血漿成分バッグとの間の流体連通を可能にすることと、
−血漿成分バッグ内に、第１の層の第１の一部分を備える血漿成分を移送するように、回転の軸から第１の距離で赤血球が検出されるまで分離バッグを圧搾することと、
−分離バッグと血漿成分バッグとの間の流体連通を阻止することと、
−分離バッグと単核球成分バッグとの間の流体連通を可能にすることと、
−単核球成分バッグ内に、リンパ球および単球を備える第３の層の少なくとも一部分を備える単核球成分を移送するように、分離バッグを圧搾することと、
を備える。
【００３４】
この方法の他の特徴は下記の通りである。
【００３５】
−単核球成分は、第１の層の第２の一部分、第２の層、および、第４の層の一部分をさらに備える。
【００３６】
−単核球成分バッグ内に移送された単核球成分は、所定の容量を有する。
【００３７】
−全血の容量は約４５０ｍｌであり、単核球成分の容量は、約１０ｍｌから約１５ｍｌまでの間で構成される。
【００３８】
−全血の容量は約４５０ｍｌであり、単核球成分の容量は、約５０ｍｌから約６０ｍｌまでの間で構成される。
【００３９】
−方法は、単核球成分を単核球成分バッグ内に移送した後に、分離バッグをスピンするのを停止することをさらに備える。
【００４０】
−方法は、血漿成分を血漿成分バッグ内に移送するように分離バッグを圧搾した後に、
−第１の層の第２の一部分に懸濁した第２の層の血小板を備える血小板成分を用意するように、第２の層と分離バッグに残っている第１の層の第２の一部分とを混合することと、
−分離バッグと血漿成分バッグとの間の流体連通および分離バッグと単核球成分バッグとの間の流体連通を阻止することと、
−分離バッグと分離バッグに接続された血小板成分バッグとの間の流体連通を可能にすることと、
−血小板成分を血小板成分バッグ内に移送するように、回転の軸から第２の距離で赤血球が検出されるまで分離バッグを圧搾することであって、第２の距離は第１の距離よりも短いことと、
をさらに備える。
【００４１】
−血小板成分を用意するように第２の層と分離バッグに残っている第１の層の第２の一部分とを混合することは、
−第１の層の第２の一部分と第２の層と第３の層と第４の層の一部分とを混合するように、回転スピードを第１の回転スピードから第２の回転スピードへ減少することと、
−血小板成分を第３の層および第４の層から分離するように、回転スピードを第２の回転スピードから第３の回転スピードへ増加することであって、第３の回転スピードは第１の回転スピードよりも低いことと、
を備える。
【００４２】
−血小板成分を血小板成分バッグ内に移送するように分離バッグを圧搾することは、
−回転の軸から第２の距離で赤血球が検出されるまで第１の流量で血小板成分を移送するように、分離バッグを圧搾することであって、第２の距離は第１の距離よりも短いことと、
−回転の軸から第２の距離で赤血球を検出するのに続いて、少なくとも、第１の流量よりも低い第２の流量で、血小板成分を移送するように、分離バッグを圧搾することと、
−回転の軸から第３の距離で赤血球を検出するのに続いて分離バッグを圧搾するのを停止することであって、第３の距離は第２の距離よりも短いことと、
を備える。
【００４３】
−方法は、単核球成分を単核球成分バッグ内に移送した後に、分離バッグに接続された赤血球成分バッグ内に、第４の層と顆粒球を備える第３の層の一部分とを備える赤血球成分を移送することをさらに備える。
【００４４】
−方法は、顆粒球、および、残余の単球およびリンパ球を実質的に除去するように、赤血球成分バッグ内に移送する間に、赤血球成分を濾過することをさらに備える。
【００４５】
−本発明の一実施形態にしたがって、赤血球成分は、
−血漿を備える第１の内側層と、血小板を備える第２の中間層と、リンパ球、単球および顆粒球を備える第３の中間層と、赤血球を備える第４の外側層と、に分離するように、分離バッグ内の一定量の全血を遠心分離することであって、少なくとも第３および第４の層は部分的に重なり合うことと、
−分離バッグから、第１の層と、第２の層と、リンパ球および単球の大半を含む第３の層の一部分とを除去することと、
の各ステップによって、一定量の全血から抽出される。
【００４６】
−赤血球成分は、顆粒球、および、残余の単球およびリンパ球を実質的に除去するように、第４の層と第３の層の残っている部分とを濾過する追加ステップによって抽出されてもよい。
【００４７】
−赤血球成分は、第４の層と第３の層の残っている部分とを濾過するステップの前に、赤血球用の一定量の保存溶液を分離バッグ内に移送する追加ステップによって抽出されてもよい。
【００４８】
本発明の一実施形態にしたがって、単核球成分は、
−血漿を備える第１の内側層と、血小板を備える第２の中間層と、リンパ球、単球および顆粒球を備える第３の中間層と、赤血球を備える第４の外側層と、に分離するように、分離バッグ内の一定量の全血を遠心分離することであって、少なくとも第３および第４の層は部分的に重なり合うことと、
−分離バッグから、第１の層の少なくとも第１の一部分を除去することと、
−分離バッグから、リンパ球および単球を備える第３の層の少なくとも一部分を備える単核球成分を除去することと、
の各ステップによって、一定量の全血から抽出される。
【００４９】
−単核球成分は、第１の成分の第２の一部分と第２の成分とをさらに備えてもよい。
【００５０】
−単核球成分は、第１の層の第１の一部分を除去するステップの後に、分離バッグから、第２の層と分離バッグに残っている第１の層の第２の一部分とを除去する追加ステップによって抽出されてもよい。
【００５１】
本発明の一実施形態にしたがって、分離バッグに含まれる一定量の全血を少なくとも血漿成分と単核球成分と赤血球成分とに分離する装置は、
−ロータであって、この回転軸のまわりに分離容器をスピンするロータと、
−分離バッグを血漿成分バッグに接続するチューブと相互作用し、それを通る流体流れを選択的に可能にするかまたは阻止するためにロータに装着された第１の弁部材と、
−分離バッグを単核球成分バッグに接続するチューブと相互作用し、それを通る流体流れ成分を選択的に可能にするかまたは阻止するためにロータに装着された第２の弁部材と、
−ロータの回転軸から一定の距離で分離バッグの赤血球を検出する少なくとも１つのセンサと、
−血漿成分を分離バッグから血漿成分バッグ内に移送させ、単核球成分を分離バッグから単核球成分バッグ内に移送させる流体移送システムと、
−血漿を備える第１の内側層と、血小板を備える第２の中間層と、リンパ球、単球および顆粒球を備える第３の中間層と、赤血球を備える第４の外側層と、に一定量の全血が沈降するのを可能にする少なくとも１つの遠心分離スピードを記憶するメモリであって、少なくとも第３および第４の層は部分的に重なり合うメモリと、
−制御ユニットであって、
−少なくとも１つのセンサから情報を受け取り、メモリから少なくとも１つの遠心分離スピードを受け取るために、
−少なくとも１つの遠心分離スピードでロータを回転させるために、
−一定量の全血が分離バッグに沈降したときに、第１の弁部材に、血漿成分バッグに接続されたチューブを開かせ、第２の弁部材に、単核球成分バッグに接続されたチューブを閉じさせるために、
−流体移送システムに、第４の層の第１の一部分を備える血漿成分を血漿成分バッグ内に移送させるために、
−赤血球が少なくとも１つのセンサによって検出されたときに、流体移送システムに、分離バッグの内容物の移送を停止させ、第１の弁部材に、血漿成分バッグに接続されたチューブを閉じさせ、第２の弁部材に、単核球成分バッグに接続されたチューブを開かせるために、
−流体移送システムに、所定容量を有し且つリンパ球および単球を備える第３の層の少なくとも一部分を備える単核球成分を単核球成分バッグ内に移送させるために、
プログラムされた制御ユニットと、
を備える。
【００５２】
−装置は、
−分離バッグを血小板成分バッグに接続するチューブと相互作用し、それを通る流体流れ成分を選択的に可能にするかまたは阻止するためにロータに装着された第３の弁部材と、
−少なくとも１つのセンサが位置する距離よりも短いロータの回転軸からの距離で、分離バッグの赤血球を検出する１つの追加センサと、
をさらに備え、
制御ユニットは、
−血漿成分を血漿成分バッグ内に移送した後に、分離バッグに残っている第１の層の第２の一部分を、第２の層、第３の層、および、第４の層の内側層と混合するように、ロータの回転スピードを第１の回転スピードから第２の回転スピードへ減少させるために、
−第１の層の第２の一部分を、第２の層、第３の層、および、第４の層の内側層と混合することが完了した後に、血小板成分を第３および第４の層から分離するように、ロータの回転スピードを第２の回転スピードから第３の回転スピードへ増加させるために、血小板成分は第４の層の第２の一部分に懸濁した血小板を備え、第３のスピードは第１のスピードよりも遅いように、
−血小板成分が分離されるときに、第１の弁部材に、血漿成分バッグに接続されたチューブを閉じさせ、第２の弁部材に、単核球成分バッグに接続されたチューブを閉じさせ、第３の弁部材に、血小板成分バッグに接続されたチューブを開かせるために、
−流体移送システムに、少なくとも追加センサが赤血球を検出するまで、血小板成分を分離バッグから血小板成分バッグ内に移送させるために、
さらにプログラムされる。
【００５３】
−流体移送システムは、分離バッグを圧搾し、分離バッグの内容物を、血漿成分バッグおよび単核球成分バッグの少なくとも一方内に移送させる圧搾システムを備えてもよい。
【００５４】
−流体移送システムは、分離バッグの内容物を、血漿成分バッグおよび単核球成分バッグの少なくとも一方内に移送させるポンプシステムを備えてもよい。
【００５５】
本発明の他の特徴および利点は、下記の説明および図面から明らかであり、これらは模範のみとみなされるべきである。
【図面の簡単な説明】
【００５６】
【図１】本発明にしたがった分離装置と協働するために設計された分離バッグの第１のセットの概略図である。
【図２】本発明にしたがった分離装置と協働するために設計された分離バッグの第２のセットの概略図である。
【図３】本発明にしたがった分離装置の部分断面概略図である。
【図４】本発明にしたがった分離装置のロータの断面図である。
【図５】図４の分離装置のロータの上部部分の斜視図である。
【発明を実施するための形態】
【００５７】
図１は、全血を、血漿成分（本質的に血漿を備える）、赤血球成分（本質的に赤血球および顆粒球を備える）および単核球成分（単球およびリンパ球を備え、さらに血漿、血小板および赤血球を備える）に分離するように適合された１セットのバッグの例を示す。このバッグセットは、可撓性のある分離バッグ１と、それに接続された３つの可撓性のあるサテライトバッグ２、３ａ、４とを備える。分離バッグ１は、部分的に環状の分離チャンバ５を備え、これは、チャンバ５が断続輪の形状を有するように、実質的に円形の外側縁６と内側円形縁７と内側縁７から延出する半径方向壁８を有する。分離チャンバ５の外側円形縁６および内側円形縁７は、実質的に同心である。分離チャンバ５はまた、分離チャンバ５の内容物を第３のサテライトバッグ４内に排出するのを助けるために、外側縁６から外向きに突出する漏斗状拡張部９を備える。分離バッグ１は、環状チャンバ５の内側縁７に接続された半可撓性のあるディスク形状の接続要素１０をさらに備える。ディスク形状の接続要素１０は、この中に包埋された実質的に半円形分配チャネル１１を備え、それは、通路１２を通って環状チャンバ５と連通する。ディスク形状の接続要素１０は、分離バッグ１を遠心分離機のロータに接続する一連の穴１３を備える。
【００５８】
第１のサテライトバッグ２は、血漿成分を受け取るように意図される。これは、平らで実質的に矩形である。これは、第１のチューブ１４によって分離バッグ１に接続されている。第１のチューブ１４は、クランプ１５が嵌合され、第１のサテライトバッグ２の上部縁に接続された第１の端と、分配チャネル１１の第１の端に接続された第２の端とを有する。
【００５９】
第２のサテライトバッグ３ａは、単核球成分を受け取るように意図される。第２のサテライトバッグ３ａは、平らで実質的に矩形である。これは、第２のチューブ１６ａによって分離バッグ１に接続されている。第２のチューブ１６ａは、クランプ１７が嵌合され、第２のサテライトバッグ３ａの上部縁に接続された第１の端と、分配チャネル１１の第２の端に接続された第２の端とを有する。
【００６０】
第３のサテライトバッグ４は、赤血球成分を受け取るように意図される。これは、平らで実質的に矩形である。これは、第３のチューブ１８によって分離バッグ１に接続されている。第３のチューブ１８は、第３のサテライトバッグ４の上部縁に接続された第１の端と、分離チャンバ５の漏斗状拡張部９の先端に接続された第２の端とを有する。これは、それぞれ、白血球除去フィルタ２０の入口および出口に接続された２つのセグメントを備える。分離バッグ１に接続されたチューブセグメントは、クランプ１９が嵌合されている。フィルタは、例えば、ポールコーポレーション（Ｐａｌｌ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）によって製造されたタイプＲＣ２Ｄのフィルタであってもよい。このようなフィルタは、ディスク形状のケーシングを備え、それに対して、半径方向入口ポートおよび出口ポートが、直径対向で接続されている。ケーシングは、ポリカーボネート（ＧＥ  Ｌｅｘａｎ  ＨＦ  １１４０）から作られ、約３３ｍｌの内部体積を有する。これは、ポリエステル繊維（約２ミクロン直径）の不織ウェブの複数層から構成された濾過材で満たされている。第３のサテライトバッグ４は、赤血球用に一定量の保存溶液を含む。第３のサテライトバッグ４内から取り外すことができるプラグ２１（例えば、いわゆる「フランジブルピン（ｆｒａｎｇｉｂｌｅ  ｐｉｎ）」）が、生成物チューブ１８を通る液体の流れを阻止し、保存溶液が第３のサテライトバッグ４から分離バッグ１内に流れるのを防止する。
【００６１】
バッグセットは、一方の端で分離バッグ１の内側縁７に接続され他方の端で閉じられる移送チューブ２２をさらに備える。移送チューブ２２を使用して、収集バッグを分離バッグに接続し、この中に収集バッグの内容物（抗凝固処理全血提供）を移送する。
【００６２】
分離バッグ１の変形例は、下記を含んでもよい。すなわち、
−同心である外側円形縁６および／または内側円形縁７を有する分離チャンバ５；
−内側円形縁７から外側円形縁６へ延出する半径方向壁を備えず、このため、チャンバ５は、Ｃ字形ではなく環状である分離チャンバ５。
【００６３】
−内側縁および外側縁を含むいずれの形状を有する分離チャンバ５（分離バッグが遠心分離機のロータに装着されるときに、内側縁は外側縁よりも遠心分離機のロータの軸に近い）、例えば、２つの側方向縁によって境界を定められた環形の一部の形状、または、矩形形状である。この変形例では、サテライトバッグは、分離バッグの内側縁に接続されてもよい。
【００６４】
また、分離バッグ１は、遠心分離機のロータの平らな支持表面または円錐台支持表面のいずれかに嵌合するように形状づけることができる。
【００６５】
図２は、全血を、血漿成分（本質的に血漿を備える）、血小板成分本質的に血小板を備える）、赤血球成分（本質的に赤血球および顆粒球を備える）および単核球成分（単球およびリンパ球を備え、さらに赤血球および血小板を備える）に分離するように適合された１セットのバッグの例を示す。このバッグセットは、分離バッグ１と、それに接続された４つのサテライトバッグ２、３ｂ、４、２４とを備える。
【００６６】
分離バッグ１および３つのサテライトバッグ２、３ｂ、４は、図１に示されたものと同一であるが、サテライトバッグ３ｂが、単核球成分の代わりに、血小板成分を受け取るように意図されることが異なる。
【００６７】
図２のバッグセットの特異性は第４のサテライトバッグ２４にあり、これは、２つの目的を有し、収集バッグとして且つ単核球成分バッグとして連続して使用される。第４のサテライトバッグは、当初、分離プロセス前にドナーから一定量の全血（通常、約４５０ｍｌ）を受け取るように、且つ、分離プロセス中に単核球成分を受け取るように意図される。第４のサテライトバッグ２４は、平らで実質的に矩形である。これは、第４のサテライトバッグ２４の上部縁に接続された第１の端と環状チャンバ５の内側縁７に接続された第２の端とを有する移送チューブ２２によって分離バッグ１に接続されている。第４のサテライトバッグ２４は、一定量の抗凝血溶液（約４５０ｍｌの血液提供用に典型的に約６３ｍｌのクエン酸リン酸ブドウ糖の溶液）を含む。第４のサテライトバッグ２４内から取り外すことができるプラグ２５（例えば、いわゆる「フランジブルピン」）が、移送チューブ２２を通る液体の流れを阻止し、抗凝血溶液が第４のサテライトバッグ２４から分離バッグ１内に流れるのを防止する。
【００６８】
図２のバッグセットは、収集チューブ２６をさらに備え、これは、一方の端で、第４のサテライトバッグ２４の上部縁に接続され、他方の端で、シース２７によって保護された針を備える。第４のサテライトバッグ２４内から取り外すことができるフランジブルピン２８は、収集チューブ２６の下流端をふさぎ、抗凝血溶液が第４のサテライトバッグ２４から収集チューブ２６を通って流れるのを防止する。
【００６９】
図２のバッグセットの変形例は、特に単核球成分用に意図された分配チャネルに接続された第５のサテライトバッグを備えてもよい。
【００７０】
図１および２に示された第１および第２のバッグセットのバッグおよびチューブは、すべて、血液および血液成分に接触するのに適切な可撓性のあるプラスチック材料から作られる。
【００７１】
図３、４、５は、遠心分離によって一定量の全血を分離する装置を示す。装置は、図１および２に示された分離バッグのいずれかのセットを受け取るように適合された遠心分離機と、分離された成分をサテライトバッグ内に移送させる流体移送システムとを備える。
【００７２】
遠心分離機は、軸受アセンブリ３０によって支持されたロータを備え、ロータが垂直中心軸３１を中心にして回転するのを可能にする。ロータは、円筒形ロータシャフト３２、３３と、サテライトバッグバッグ（成分バッグおよび場合によって収集バッグ）を含む円筒形容器３４であって、この上端でロータシャフト３２、３３に接続され、このため、ロータシャフト３２、３３の長手方向軸および容器３４の長手方向軸がロータの中心軸３１と整列配置された円筒形容器３４と、分離バッグを支持する円形ターンテーブル３５であって、この上端で容器３４に接続され、このため、ターンテーブル３５の中心軸がロータの中心軸３１と整列配置されたターンテーブル３５とを備える。ロータシャフトは、第１の上部部分３２と第２の下部部分３３とを備える。シャフトの上部部分３２は、軸受アセンブリ３０を通って部分的に延出する。プーリー３６が、シャフトの上部部分３２の下部端に接続されている。
【００７３】
遠心分離機は、垂直中心軸３１を中心にしてロータを回転するように、プーリー３６の溝に係合したベルト４１によってロータに連結されたモータ４０をさらに備える。
【００７４】
分離装置は、可撓性のあるプラスチックチューブを通って液体が流れるのを選択的に阻止するかまたは可能にするために且つプラスチックチューブを選択的に封止し切断するために、ロータに装着された第１、第２および第３のピンチ弁部材４２、４３、４４をさらに備える。各ピンチ弁部材４２、４３、４４は、細長い円筒形本体と、静止上部ジョーおよび開口位置と閉鎖位置との間を動くことができる下部ジョーによって画成された溝を有するヘッドとを備え、溝は、下部ジョーが開口位置にあるときに、図１および２に示されたバッグセットのチューブ１４、１６ａ、１６ｂ、２２の１つが中に滑り係合することができるように、寸法づけられる。細長い円筒形本体は、下部ジョーを動かす機構を含み、プラスチックチューブを封止し切断するのに必要なエネルギを供給する無線周波発生器に接続されている。ピンチ弁部材４２、４３、４４は、円筒形容器３４内部に装着され、この内部表面に隣接し、このため、この長手方向軸はロータの中心軸３１に平行であり、このヘッドは容器３４のリム上に突出する。分離バッグ１がターンテーブル３５に装着されるときに分離バッグ１およびそれに接続されたチューブ１４、１６ａ、１６ｂ、２２に対するピンチ弁部材４２、４３、４４の位置は、図１および２では点線で示されている。電力は、ロータシャフトの下部部分３３のまわりに装着されたスリップリング４５を通ってピンチ弁部材４２、４３、４４に供給される。
【００７５】
ターンテーブル３５は、上部のより小さい縁が容器３４のリムに接続された中心円錐台部分４６と、中心円錐台部分４６の下部のより大きい縁に接続された環状の平らな部分４７と、環状部分４７の外側周辺から上方へ延出する外側円筒形フランジ４８とを備える。ターンテーブル３５は、開口位置と閉鎖位置との間を旋回するようにヒンジ５０によってフランジ４８に固定されているアーチ型円形蓋４９をさらに備える。蓋４９にはロック５１が嵌合され、それによって閉鎖位置にブロックされることができる。蓋４９は、ロータの円筒形容器３４へアクセスを提供する大きなカットアウト５２を上部部分に備える。蓋４９は、環状内部表面を有し、これは、蓋４９が閉鎖位置にあるときに、ターンテーブル３８の中心円錐台部分４６および環状の平らな部分４７とともに、実質的に平行四辺形の形状を有する半径方向断面を有する円錐台環状コンパートメント５３を画成するように、形状づけられる。円錐台環状コンパートメント５３、後に「分離コンパートメント」は、図１および２に示された分離バッグ１を含むように意図される。
【００７６】
分離バッグ１の内容物（例えば分離された成分）をサテライトバッグ内に移送させる流体移送システムは、分離コンパートメント５３内に分離バッグを圧搾する圧搾システムを備える。圧搾システムは、可撓性のある環状ダイヤフラム５４を備え、これは、ターンテーブル３５の円錐台部分４６と環状の平らな部分４７とを１列に並べるように形状づけられ、それに対して、より大きなおよびより小さな円形縁に沿って固定される。流体移送システムは、ロータを通ってロータシャフトの下部部分３３の下部端からターンテーブル３５へ延出するダクト３７を経由して、可撓性のあるダイヤフラム５４とターンテーブル３５との間に画成された膨張可能な水圧チャンバ５５内に且つそれから、水圧液体をポンプ注入する水圧ポンプシステム６０をさらに備える。ポンプシステム６０は、回転式流体カップリング３８を経由してロータダクト３７に流体式に接続された水圧シリンダ６２内を動くことができるピストン６１を有するピストンポンプを備える。ピストン６１は、ピストンロッドに連接された主ネジ６４を動かすステッパモータ６３によって作動される。水圧シリンダ６２はまた、水圧シリンダ６２、ロータダクト３７および膨張可能な水圧チャンバ５５を含む水圧回路内におよびそれから水圧液体を導入し且つ回収するのを選択的に可能にするために弁６６によって制御されたアクセスを有する水圧液体溜６５にも接続されている。圧力ゲージ６７が、中の水圧圧力を測定するために水圧回路に接続されている。
【００７７】
流体移送システムの変形例は、ロータに装着された１つまたは数個の蠕動ポンプを備えてもよく、分離バッグをサテライトバッグに接続するチューブと協働するように設計され、それを通って液体を流れさせる。
【００７８】
分離装置は、装置が作動するときに、分離バッグ内に発生する分離プロセスの特徴を検出するために、３つのセンサ５６、５７、５８をさらに備える。３つのセンサ５６、５７、５８は、蓋４９内にロータの回転軸から異なる距離で包埋され、第１のセンサ５６は回転軸に対して最も遠く、第３のセンサ５８は回転軸にもっとも近く、第２のセンサ５７は中間位置を占める。蓋４９が閉じられているときには、３つのセンサ５６、５７、５８は、図１および２に示されたように、分離バッグ１に面する。第１および第２のセンサ５６、５７は一般に、分離チャンバ５から第１および第２のサテライトバッグ２および３ｂへ流れるいずれの成分の経路にあり、第３のセンサ５８は、分離チャンバ５から第２のサテライトバッグ３ｂへ流れるいずれの成分の経路にある。第１のセンサ５６（後に「バッグセンサ」）は、分離チャンバ５上に、この内側縁６から分離チャンバの幅のおよそ３分の１あたりに、分離チャンバ５と分配チャネル１１との間の通路１２のわずかに外側に位置決めされるように、蓋４９に包埋されている。バッグセンサ５６は、液体中の赤血球を検出することができる。第２のセンサ５７（後に「ベイセンサ」）は、通路１２上に、分離チャンバ５と分配チャネル１１との間に位置決めされるように、蓋４９に包埋されている。ベイセンサ５７は、分配チャネル１１内に液体が存在することまたは存在しないことを検出することができ、且つ、液体中の赤血球を検出することができる。第３のセンサ５８（後に「チャネルセンサ」）は、分配チャネル１１上に位置決めされるように、蓋４９に包埋されている。チャネルセンサ５８は、分配チャネル１１内に液体が存在することまたは存在しないことを検出することができ、且つ、液体中の赤血球を検出することができる。各センサ５６、５７、５８は、赤外線ＬＥＤおよび光検出器を含むフォトセルを備えることができる。
【００７９】
分離装置は、制御ユニット（マイクロプロセッサ）を含むコントローラ７０と、様々な分離プロトコルおよびこのような分離プロトコルにしたがった装置の操作に関する情報およびプログラムされた指令をマイクロプロセッサに提供するメモリとをさらに備える。特に、マイクロプロセッサは、分離プロセスの様々な段階中にロータが回転されるべき遠心分離スピード（単／複）に関する情報、および、分離された成分が分離バッグ１からサテライトバッグ２、３ａ、３ｂ、２４内に移送されるべき様々な移送流量に関する情報を受け取るようにプログラムされている。様々な移送流量に関する情報は、例えば、水圧回路の水圧流量として、または、水圧ポンプシステム６０のステッパモータ６３の回転スピードとして、表現することができる。マイクロプロセッサは、直接またはメモリを通して、圧力ゲージ６７から且つフォトセル５６、５７、５８から情報を受け取るために、且つ、選択された分離プロトコルに沿って分離装置を作動させるように遠心分離モータ４０、ステッパモータ６３およびピンチ弁部材４２、４３、４４を制御するために、さらにプログラムされている。
【００８０】
全血提供から３つの血液成分すなわち血漿、単核球および赤血球を分離することを目的とする第１の分離プロトコルの例が、下記に説明される。この第１の分離プロトコルは、第３のピンチ弁部材４４またはチャネルセンサ５８の使用を必要としない。第１の分離プロトコルに沿った分離装置の操作は、下記の通りである。
【００８１】
第１段階（第１のプロトコル）：分離されるべき一定量の抗凝固処理血液が、図１のバッグセットの分離バッグ１内に移送される。
【００８２】
クランプ１５、１７、１９が分離バッグ１に接続されたチューブ１４、１６ａ、１８上で閉じられた後に、収集バッグに含まれる一定量の抗凝固処理全血（一般に約５００ｍｌ）が、重力によって分離バッグ１内にそれに接続された移送チューブ２２を通って移送される。移送チューブ２２は、封止され切断される。分離バッグ１は、ターンテーブル３５上に装着され、生成物チューブ１４、１６ａが、それぞれ、第１および第２のピンチ弁部材４２、４３に係合され、サテライトバッグ２、３ａ、４およびフィルタ２０が、容器３４内に置かれる。ピンチ弁部材４２、４３は閉じられ、チューブ１４および１６ａ上のクランプ１５および１７が開けられる。第３のサテライトバッグ４に接続されたチューブ１８のクランプ１９は、閉じられたままである。ロータの蓋４９が閉じられる。
【００８３】
この第１段階の変形例として、図１のバッグセットが分離装置のロータに装着された後に、一定量の抗凝固処理全血が分離バッグ１内に移送される。
【００８４】
第２段階（第１のプロトコル）：分離バッグ１に存在する空気が第２のサテライトバッグ３ａ内に一掃され、この中に単核球成分が後に移送される。
【００８５】
第２段階の開始時に、第１および第２のピンチ弁部材４２、４３は閉じられる。ロータは、遠心分離モータ４０によって発動され、この回転スピードは、高遠心分離スピード（例えば約３２００ＲＰＭ）に達するまで徐々に増加し、このスピードで、全分離プロセス中回転する。遠心分離スピードが所定の中間値（例えば約１０００ＲＰＭ）に達したときに、第２のピンチ弁部材４３が開けられ（分離バッグ１と単核球成分用に意図された第２のサテライトバッグ３ａとの間の連通を制御する）、ポンプシステム６０は、一定の流量（例えば約２４０ｍｌ／分）で水圧液体を水圧チャンバ５５内にポンプ注入し結果として分離バッグ１を圧搾するように、作動される。分離バッグ１に存在する空気は、単核球成分用の第２のサテライトバッグ３ａ内に追い出される。ベイセンサ５７による液体検出に続く所定の時間期間後に、ポンプシステム６０は停止され、ピンチ弁部材４３は閉じられる。
【００８６】
あるいは、分離バッグ１に含まれる空気は、血漿成分用のサテライトバッグ２内に追い出されることができる。
【００８７】
第３段階（第１のプロトコル）：分離チャンバ内の血液は、所望のレベルに沈降される。
【００８８】
この段階の開始時に、第１および第２のピンチ弁部材４２、４３は閉じられる。ロータは、高遠心分離スピード（例えば約３２００ＲＰＭ）で、所定の時間期間の間（例えば約２２０秒）回転され、それは、分離バッグ１に当初移送された全血のヘマトクリット値が何であれ、血液は、この中に所定の期間の最後に、外側環状赤血球層のヘマトクリット値が約９０であり内側環状血漿層血漿が実質的に細胞がない点へ沈降するように、選択される。より詳細には、この沈降段階の結果で、分離バッグ１は４つの層を呈する。すなわち、主に血漿を備える第１の内側層と、主に血小板を備える第２の中間層と、主に白血球（リンパ球、単球および顆粒球）を備える第３の中間層と、主に赤血球を備える第４の外側層とであり、第１および第２の層は部分的に重なり合う（顆粒球は第４の層に部分的に包埋されている）。
【００８９】
第４段階（第１のプロトコル）：血漿成分が、第１のサテライトバッグ２内に移送される。
【００９０】
この段階の開始時に、第１および第２のピンチ弁部材４２、４３は閉じられる。ロータは、沈降段階と同一の高遠心分離スピードで回転される。バッグセンサ５６が赤血球を検出するのを停止した後の所定の時間期間後に、これは、所定の沈降期間の終了前に発生する可能性もあり、第１のサテライトバッグ２へのアクセスを制御する第１のピンチ弁部材４２は開けられ、ポンプシステム６０は、一定の流量（例えば約２２０ｍｌ／分）で水圧液体を水圧チャンバ５５内にポンプ注入するように、作動される。膨張水圧チャンバ５５は分離バッグ１を圧搾し、血漿を第１のサテライトバッグ２内に移送させる。ベイセンサ５７による赤血球の検出に続いて所定の時間期間が経過した後に、ポンプシステム６０は停止され、第１のピンチ弁部材４２は閉じられる。少量の血漿（例えば約５ｍｌ）が、分離バッグ１に残っている。
【００９１】
血漿成分の移送流量（これは直接、水圧流体の流量に関する）は、血漿成分を血小板で汚染するのを避けるように血小板層を乱すことなく、できるだけ高く選択される。
【００９２】
第４段階の変形例として、バッグセンサ５６による赤血球の検出に続いて所定の時間期間が経過した後に、ポンプシステム６０が停止される。結果として、ベイセンサ５７が使用されるときよりも、より多くの量の血漿（例えば約３０ｍｌ）が、分離バッグ１に残っている。
【００９３】
第５段階（第１のプロトコル）：単核球成分が、第２のサテライトバッグ３ａ内に移送される。
【００９４】
第５段階は、第１のピンチ弁部材４２が第４段階の最後で閉じられるとすぐに開始することができる。この第５段階の開始時に、第１および第２のピンチ弁部材４２、４３は閉じられる。ロータは、先と同一の高遠心分離スピードで回転される。第２のサテライトバッグ３ａへのアクセスを制御する第２のピンチ弁部材４３は開けられ、ポンプシステム６０は、一定の流量で（例えば約１４０ｍｌ／分）で水圧液体を水圧チャンバ５５内にポンプ注入するように作動される。膨張水圧チャンバ５５は分離バッグ１を圧搾し、血漿の残余容量、血小板、リンパ球、単球および少量の赤血球を備える単核球成分を第２のサテライトバッグ３ａ内に移送させる。所定容量が第２のサテライトバッグ３ａ内に移送された後に、すなわち、所与の水圧液体流量用に所定の時間期間が経過した後に、ポンプシステム６０が停止され、第２のピンチ弁部材４３は閉じられる。単核球成分のこの所定容量は、部分的に、第４段階の最後における分離バッグ１内の血漿の残余量に依存する。例えば、分離バッグ１内の血漿の残余量がベイセンサ５７によって決定されるときには、単核球成分の所定容量は、約１０〜１５ｍｌの間で設定することができ、約５ｍｌの血漿および約５ｍｌの赤血球を含む。次に、分離バッグ１内の血漿の残余量がバッグセンサ５６によって決定されるときには、単核球成分の所定容量は、約５０〜６０ｍｌの間で設定することができ、約３０ｍｌの血漿および約２０ｍｌの赤血球を含む。
【００９５】
第６段階（第１のプロトコル）：遠心分離プロセスが終了する。
【００９６】
ロータの回転スピードは、ロータが停止するように減少し、ポンプシステム６０は、水圧チャンバ５５が空になるまで高流量（例えば約８００ｍｌ／分）で水圧液体を水圧チャンバ５５からポンプ注入するように作動され、第１および第２のピンチ弁部材４２、４３は、チューブ１４および１６ａを封止し切断するように作動される。赤血球、顆粒球および残余の単球およびリンパ球は、分離バッグ１内に残っているままである。
【００９７】
第７段階（第１のプロトコル）：赤血球成分が、第３のサテライトバッグ４内に移送される。
【００９８】
ロータの蓋４９が開けられ、第３のサテライトバッグ４に接続された分離バッグ１が、それから取り外される。生成物チューブ１８上のクランプ１９は開けられる。第３のサテライトバッグ４とそれに接続された生成物チューブ１８との間の連通を阻止するフランジブルピン２１は破られる。第３のサテライトバッグ４に含まれる保存溶液は、重力によってフィルタ２０を通って分離バッグ１内に流れることができ、そこで、粘度を下げるように赤血球と混合される。分離バッグ１の内容物は、次いで、重力によってフィルタ２０を通って第３のサテライトバッグ４内に流れることができる。白血球（顆粒球および残余の単球およびリンパ球）がフィルタ２０によって捉えられ、このため、第３のサテライトバッグ４内の究極濃厚赤血球成分は、実質的に白血球がなく、ＡＡＢＢ（米国血液銀行協会）の基準に合致し、これは、１濃厚赤血球成分あたり５×１０６未満の白血球である。
【００９９】
全血提供から４つの血液成分すなわち血漿、血小板、単核球および赤血球を用意することを目的とする第２の分離プロトコルの例が、下記に説明される。この第２の分離プロトコルに沿った分離装置の操作は、下記の通りである。
【０１００】
第１段階（第２のプロトコル）：分離されるべき一定量の抗凝固処理血液が、図２のバッグセットの分離バッグ１内に移送される。
【０１０１】
本来の第１段階の前に、１パイントの全血がドナーから第４のサテライト（収集）バッグ２４内に受け取られており、この中に含まれる抗凝固溶液と混合されている。収集チューブ２６は封止され切断されている。
【０１０２】
分離バッグ１に接続されたチューブ１４、１６ｂ、１８上のクランプ１５、１７、１９が閉じられた後に、移送チューブ２２をふさいでいるフランジブルピン２５が壊され、収集バッグ２４に含まれる抗凝固処理全血が、重力によって分離バッグ１内に移送チューブ２２を通って移送される。分離バッグ１はターンテーブル３５に装着され、チューブ１４、２２、１６ｂは、それぞれ、第１、第２および第３のピンチ弁部材４２、４３、４４に係合され、サテライトバッグ２、３ｂ、４、２４およびフィルタ２０は、容器３４内に置かれる。ピンチ弁部材４２、４３、４４は閉じられ、チューブ１４および１６ｂのクランプ１５および１７は開けられる。赤血球用の第３のサテライトバッグ４に接続されたチューブ１８上のクランプ１９は、閉じられたままである。ロータの蓋４９は閉じられる。
【０１０３】
この第１段階の変形例として、図２のバッグセットが分離装置のロータに装着された後に、一定量の抗凝固処理全血が分離バッグ１内に移送される。
【０１０４】
第２段階（第２のプロトコル）：分離バッグ１に存在する空気が収集バッグ２４内に一掃され、この中に単核球成分が後に移送される。
【０１０５】
第２段階の開始時に、３つのピンチ弁部材４２、４３、４４は閉じられる。ロータは、遠心分離モータ４０によって発動され、この回転スピードは、第１の高遠心分離スピード（例えば約３２００ＲＰＭ）に達するまで徐々に増加する。遠心分離スピードが所定の中間値（例えば約１０００ＲＰＭ）に達するときには、第２のピンチ弁部材４３が開けられ（分離バッグ１と単核球成分用に意図された第４のサテライトバッグ２４との間の連通を制御する）、ポンプシステム６０は、一定の流量（例えば約２４０ｍｌ／分）で水圧液体を水圧チャンバ５５内にポンプ注入し結果として分離バッグ１を圧搾するように、作動される。分離バッグ１に存在する空気は、第４のサテライトバッグ２４内に追い出される。ベイセンサ５７による液体の検出に続く所定の時間期間後に、ポンプシステム６０は停止され、ピンチ弁部材４３は閉じられる。
【０１０６】
あるいは、分離バッグ１に含まれる空気は、血漿成分用の第１のサテライトバッグ２内かまたは血小板成分用の第２のサテライトバッグ３ｂ内のいずれかに追い出されることができる。
【０１０７】
第３段階（第２のプロトコル）：分離チャンバ内の血液は、所望のレベルに沈降される。
【０１０８】
この段階の開始時に、３つのピンチ弁部材４２、４３、４４は閉じられる。ロータは、第１の高遠心分離スピード（例えば約３２００ＲＰＭ）で、所定の時間期間の間（例えば約２２０秒）回転され、それは、分離バッグ１に当初移送された全血のヘマトクリット値が何であれ、血液は、この中に所定の期間の最後に、外側環状赤血球層のヘマトクリット値が約９０であり内側環状血漿層血漿が実質的に細胞がない点へ沈降するように、選択される。より詳細には、この沈降段階の結果で、分離バッグ１は４つの層を呈する。すなわち、主に血漿を備える第１の内側層と、主に血小板を備える第２の中間層と、主に白血球（リンパ球、単球および顆粒球）を備える第３の中間層と、主に赤血球を備える第４の外側層と、であり、第１および第２の層は部分的に重なり合う（顆粒球は第４の層に部分的に包埋されている）。
【０１０９】
第４段階（第２のプロトコル）：血漿成分が、第１のサテライトバッグ２内に移送される。
【０１１０】
この段階の開始時に、３つのピンチ弁部材４２、４３、４４は閉じられる。第４段階全体にわたって、ロータは、第１の高遠心分離スピード（例えば約３２００ＲＰＭ）で回転される。バッグセンサ５６が赤血球を検出するのを停止した後の所定の時間期間後に、これは、所定の沈降期間の終了前に発生する可能性もあり、第１のサテライトバッグ２へのアクセスを制御する第１のピンチ弁部材４２は開けられ、ポンプシステム６０は、一定の流量（例えば約２２０ｍｌ／分）で水圧液体を水圧チャンバ５５内にポンプ注入するように作動される。膨張水圧チャンバ５５は分離バッグ１を圧搾し、血漿を第１のサテライトバッグ２内に移送させる。バッグセンサ５６による赤血球の検出に続いて所定の時間期間が経過した後に、ポンプシステム６０は停止され、第１のピンチ弁部材４２は閉じられる。少量の血漿（例えば約３０ｍｌ〜８０ｍｌの間）が、分離バッグ１に残っている。
【０１１１】
血漿成分の移送流量（これは直接、水圧流体の流量に関する）は、血漿成分を血小板で汚染するのを避けるように血小板層を乱すことなく、できるだけ高く選択される。
【０１１２】
第５段階（第２のプロトコル）：血小板成分が、分離バッグ１で用意される。
【０１１３】
３つのピンチ弁部材４２、４３、４４は閉じられる。ロータの回転スピードは、赤血球の内側層、白血球、血小板、および、血漿の残余容量を混合するように、第１の遠心分離スピードから第２の遠心分離スピードへ（例えば、約３２００ＲＰＭから約１５００ＲＰＭへ）急速に減少する。次いで、ロータの回転スピードは、血漿内に血小板の懸濁を備える血小板を他の血液細胞（赤血球および白血球）から分離するように、第２の遠心分離スピードから、第１の遠心分離スピードよりも低い第３の遠心分離スピード（例えば、約１５００ＲＰＭから約２５００ＲＰＭ）へ増加する。
【０１１４】
第６段階（第２のプロトコル）：血小板成分は、第２のサテライトバッグ３ｂ内に移送される。
【０１１５】
第２のサテライトバッグ３ｂへのアクセスを制御する第３のピンチ弁部材４４は開けられ、第１および第２のピンチ弁部材４２、４３は閉じられる。ロータは、第３の回転スピード（例えば約２５００ＲＰＭ）で回転される。ポンプシステム６０は、第１の流量で水圧液体を水圧チャンバ５５内にポンプ注入するように作動され、その後、血小板成分を第２のサテライトバッグ３ｂ内に移送させるように、分離バッグ１を圧搾する。第１の流量（例えば約１４０ｍｌ／分）は、第４段階で血漿成分が第１のサテライトバッグ２内に移送される流量（例えば約２２０ｍｌ／分）よりも実質的に低い。血小板成分の第１の移送流量（これは直接、水圧流体の第１の流量に関する）は、懸濁血小板が沈降するのを防止するために同時にこの作動をトリガすることなく、十分に高いように選択される。
【０１１６】
ベイセンサ５７が赤血球を検出するときに、ポンプシステム６０は、赤血球によって血小板成分を汚染するのを防止するために、第１の流量よりも実質的に低い第２の流量（例えば約４０ｍｌ／分）で水圧液体を水圧チャンバ５５内にポンプ注入するように作動される。
【０１１７】
水圧液体が、第２の流量で所定の時間期間（例えば約４秒）の間、水圧チャンバ５５内にポンプ注入されたときに、ポンプシステム６０は、チャネルセンサ５８が赤血球を検出した後に所定の時間期間（例えば約１２秒）が経過するまで、第２の流量よりも低い第３の流量（例えば約２０ｍｌ／分）で水圧液体をポンプ注入するように作動される。次いで、ポンプシステム６０は停止される。
【０１１８】
第７段階（第２のプロトコル）：単核球成分が第４のサテライト（収集）バッグ２４内に移送される。
【０１１９】
第７段階は、第３のピンチ弁部材４４が第６段階の最後で閉じられるとすぐに開始することができる。この第７段階の開始時に、３つのピンチ弁部材４２、４３、４４は閉じられる。ロータは、第３の高遠心分離スピード（例えば約２５００ＲＰＭ）で回転される。収集バッグ２４へのアクセスを制御する第２のピンチ弁部材４３は開けられ、ポンプシステム６０は、一定の流量（例えば約４０ｍｌ／分）で水圧液体を水圧チャンバ５５内にポンプ注入するように作動される。膨張水圧チャンバ５５は分離バッグ１を圧搾し、残余の血小板、リンパ球、顆粒球および少量の赤血球を備える単核球成分を収集バッグ２４内に移送させる。所定の時間期間（例えば約１５秒）が経過した後に、ポンプシステム６０は停止され、第２のピンチ弁部材４３は閉じられる。
【０１２０】
第８段階（第２のプロトコル）：遠心分離プロセスが終了する。
【０１２１】
ロータの回転スピードは、ロータが停止するまで減少し、ポンプシステム６０は、水圧チャンバ５５が空になるまで、高流量（例えば約８００ｍｌ／分）で水圧液体を水圧チャンバ５５からポンプ注入するように作動され、３つのピンチ弁部材４２、４３、４４は、チューブ１４、１６ｂおよび２２を封止し切断するように作動される。赤血球、顆粒球および残余の単球およびリンパ球は、分離バッグ１内に残っているままである。
【０１２２】
第９段階（第２のプロトコル）：赤血球成分が、第３のサテライトバッグ４内に移送される。
【０１２３】
ロータの蓋４９は開けられ、第３のサテライトバッグ４に接続された分離バッグ１は、それから取り外される。生成物チューブ１８上のクランプ１９は開けられる。第３のサテライトバッグ４とそれに接続されたチューブ１８との間の連通を阻止するフランジブルピン２１は破られる。第３のサテライトバッグ４に含まれる保存溶液は、重力によってフィルタ２０を通って分離バッグ内に流れることができ、そこで、粘度を下げるように赤血球および顆粒球と混合される。分離バッグの内容物は、次いで、重力によってフィルタ２０を通って第３のサテライトバッグ４内に流れることができる。白血球（顆粒球および残余の単球およびリンパ球）がフィルタ２０によって捉えられ、このため、第３のサテライトバッグ内の究極濃厚赤血球成分は、実質的に白血球がなく、ＡＡＢＢ（米国血液銀行協会）の基準に合致し、これは、１濃厚赤血球成分あたり５×１０６未満の白血球である。
【０１２４】
血漿成分用の移送流量および血小板成分用の移送流量は、上述の例のように、実質的に一定であってもよく、または、変動してもよく、例えば、ランプまたは一連の小さなステップを備えてもよい。
【０１２５】
本明細書に記載された装置および方法に対して様々な修正を行うことができることは、当業者には明らかである。したがって、本発明は、明細書に検討された主題に限定されないことを理解すべきである。むしろ、本発明は、修正例および変形例をカバーするように意図される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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