(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
持続及び制御放出性半固体製剤であって、
（ａ）５００〜５０００ダルトンの重量平均分子量を有する、５〜１８個の炭素原子を含有するアルキル基で末端キャップされた、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）及びそれらの混合物から選択される超低分子量生分解性重合体若しくは超低分子量生分解性共重合体又はそれらの混合物と、
（ｂ）少なくとも１種の活性物質又はそれらの混合物と
を含み、その製造が追加の希釈剤、可塑剤、溶媒及び賦形剤を添加することなく実施された、持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項２】
前記アルキル基が５〜１２個の炭素原子を含有する、請求項１に記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項３】
前記アルキル基が５個の炭素原子を含有する、請求項１又は２に記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項４】
前記半固体製剤の適用／注射温度が１５℃〜５０℃である、請求項１〜３のいずれかに記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項５】
前記半固体製の適用／注射温度が２５℃〜４０℃である、請求項４に記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項６】
前記分子量が７００〜３，０００ダルトンである、請求項１に記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項７】
前記分子量が８００〜２，０００ダルトンである、請求項６に記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項８】
前記生分解性超低分子量重合体がポリ（ラクチド−コ−グリコリド）又はポリ（乳酸）である、請求項１に記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項９】
前記持続及び制御放出性半固体製剤の活性物質が蛋白質、酵素、ホルモン、ポリヌクレオチド、核蛋白質、多糖類、糖蛋白質、リポ蛋白質、ペプチド、ポリペプチド、ステロイド、鎮痛薬、局所麻酔薬、抗生物質製剤、化学療法剤、免疫抑制剤、抗炎症薬、抗増殖剤、抗有糸分裂剤、血管形成剤、抗精神病薬、中枢神経系（ＣＮＳ）剤、抗凝血剤、線維素溶解薬、成長因子、抗体、抗原、眼薬、ヒト成長ホルモン、メチオニン−ヒト成長ホルモン；Ｄ−フェニルアラニンヒト成長ホルモン、グルカゴン、カルシトニン、ヘパリン、インターロイキン−１、インターロイキン−２、Ｖｉｏｌ因子、第ＩＸ因子、黄体形成ホルモン、リラキシン、グレリン、卵胞刺激ホルモン、心房性ナトリウム利尿因子、フィルグラスチム上皮成長因子（ＥＧＦ）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ）、線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、形質転換成長因子（ＴＧＦ）、インターロイキン（ＩＬ）、コロニー刺激因子（ＣＳＦ、ＭＣＦ、ＧＣＳＦ、ＧＭＣＳＦ）、インターフェロン（ＩＦＮ）、上皮成長因子（ＶＥＧＦ，ＥＧＦ）、エリトロポエチン（ＥＰＯ）、アンギオポエチン（ＡＮＧ）、胎盤由来成長因子（ＰＩＧＦ）、毒素及び低酸素誘導転写調節因子（ＨＩＦ）並びにこれらの化合物の製薬上許容される塩又はそれらのアナログ、断片若しくは誘導体よりなる群から選択される、請求項１〜８のいずれかに記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項１０】
前記持続及び制御放出性半固体製剤の活性物質が、黄体形成ホルモン（ＬＨＲＨ）又はＬＨＲＨアナログ、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、インスリン、ソマトスタチンのアナログ及び誘導体、成長ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン（ＧＨＲＨ）、成長ホルモン放出ペプチド、カルシトニン及びこれらの化合物の製薬上許容される塩又はそれらのアナログ、断片若しくは誘導体から選択されるペプチド、ポリペプチド、蛋白質よりなる群から選択される、請求項９に記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項１１】
前記持続及び制御放出性半固体製剤の活性物質が組換えヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）又は成長ホルモン放出ホルモン（ＧＨＲＨ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ）、ＧＬＰ−１アナログ、黄体形成ホルモン（ＬＨＲＨ）又はＬＨＲＨアナログ或いはソマトスタチンアナログである、請求項１０に記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項１２】
前記持続及び制御放出性半固体製剤の活性物質が組換えヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）又は成長ホルモン放出ホルモン（ＧＨＲＨ）である、請求項１１に記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項１３】
前記持続及び制御放出性半固体製剤の活性物質がＩＧＦ−１及びその製薬上許容される塩である、請求項１１に記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項１４】
前記持続及び制御放出性半固体製剤の活性物質がＧＬＰ−１アナログ及びその製薬上許容される塩である、請求項１１に記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項１５】
前記持続及び制御放出性半固体製剤の活性物質が黄体形成ホルモン（ＬＨＲＨ）又はＬＨＲＨアナログ及びその製薬上許容される塩である、請求項１１に記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項１６】
前記持続及び制御放出性半固体製剤の活性物質がソマトスタチンアナログ及びその製薬上許容される塩である、請求項１１に記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項１７】
前記持続及び制御放出性半固体製剤が０．００１％〜７０％（ｗ／ｗ）の範囲の量の前記活性物質を含む、請求項１〜１６のいずれかに記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項１８】
前記持続及び制御放出性半固体製剤が０．１％〜３０％（ｗ／ｗ）の範囲の量の前記活性物質を含む、請求項１７に記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項１９】
前記持続及び制御放出性半固体製剤が２〜３０％（ｗ／ｗ）の範囲の量の前記活性物質を含む、請求項１８に記載の持続及び制御放出性半固体製剤。
【請求項２０】
次の工程：
（ａ）前記活性物質及び前記超低分子量生分解性重合体若しくは超低分子量生分解性共重合体又はそれらの混合物を２個の異なるシリンジに導入し、そしてピストンを装着し、
（ｂ）これら２個の充填シリンジと、３個の円錐体を備えるステンレスコネクターとを連結し、
（ｃ）該活性物質が充填されたシリンジから真空下で空気を除去し、
（ｄ）これら２個のシリンジ間での混練プロセスにより該２種成分を混合させること
を含む、請求項１に記載の持続及び制御放出性半固体製剤の製造方法。
【請求項２１】
５℃〜６０℃の制御温度下で実施することを特徴とする、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
次の工程：
（ａ）前記超低分子量生分解性重合体若しくは超低分子量生分解性共重合体又はそれらの混合物をブレンダー内で混合させ、
（ｂ）前記活性物質を添加し、
（ｃ）これらの成分を室温で混合させること
を含む、請求項１に記載の持続及び制御放出性半固体製剤の製造方法。
【請求項２３】
前記活性物質が粉末状であることを特徴とする、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
請求項２２又は２３に記載の方法によって得られた医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、末端キャップされたオリゴマーと活性物質とを含む非経口持続及び制御放出性半固体製剤であって、いかなる追加の粘度低下剤又は賦形剤も有しないものに関するものである。
【０００２】
本発明は、当該半固体を水性の生理学的環境に置いたときに少なくとも１週間にわたって当該活性物質を連続的に放出することを提供する。
【０００３】
さらに特定すると、本発明は、少なくとも１種の末端キャップされた超低分子量生分解性重合体と少なくとも１種の活性物質とを含む半固体状の医薬組成物に関するものである。この医薬組成物は、皮下注射や筋肉内注射といった非経口的方法により使用され、水性の生理学的環境で投与されたときに移植／デポー組成物を形成するであろう。
【背景技術】
【０００４】
活性物質を持続放出性組成物の形態で投与することに意義があることは、長い間知られていた。
【０００５】
活性物質の放出速度を制御するために様々な手法が検討されてきた。このような戦略のうち、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）のような生分解性重合体を含む移植又は微粒子製剤であって、その中に活性物質を取り込んだものを開発するために、２つの異なる手法が見出されている。
【０００６】
さらなる手法は、生分解性重合体と、水性の体液に非常に可溶又は比較的可溶な溶媒／可塑剤とを含む注射用デポー組成物を開発することであった。溶媒／可塑剤の拡散により、当該重合体が移植部位で急速に凝固するのが促進され、それによって当該薬剤の緩やかな放出が誘導される場合がある。
【０００７】
欧州特許第１１２６８２２号には、熱可塑性重合体又は熱可塑性共重合体と、有機溶媒と、活性物質と、高分子制御放出性添加剤、例えばポリ（ラクチド−コ−グリコリド）／ポリエチレングリコール（ＰＬＧＡ／ＰＥＧ）ブロック共重合体とを組み合わせて、当該活性物質の放出速度を制御することができたことが示されている。当該有機溶媒は、体液又は組織液といった水性環境と接触したときに、体液に散逸又は分散することが想定され、そして、実質的に不溶性の熱可塑性ベース重合体は、沈殿して固体マトリックス又は移植物を形成する。
【０００８】
たとえ国際公開第２００４／０１２７０３号パンフレットに記載されたようなデポー組成物を患者の体内の所望の部位に注射して移植物を形成できるにしても、このような注射用デポー組成物は、薬剤及び重合体の他に、ベンジルアルコール又は安息香酸ベンジルのような有機溶媒と、エタノールのようなチキソトロープ剤とを使用することが必要である。それでも、デポー組成物に取り込まれたこれらの添加剤は、それによって当該物質の生体適合性を低下させたり、又は活性剤の取り込み能力を低下させたりする可能性がある。
【０００９】
さらに、重合体の製造中に通常使用される又は移植物自体の操作態様において伴う有機溶媒残留物が検出されるのは望ましくない。
【００１０】
しかしながら、有機溶媒のような粘度低下剤を添加しなければ、組成物は、注射できる程度には十分に流動しないか、又は注射をするのを困難なものにし、非常に太い針のシリンジ装置が必要となるため、かなりの痛みを伴うことになる。
【００１１】
別の手法は、注射によって投与され、そして持続放出性ゲル製剤を自動的に形成する医薬組成物により達成され得る。このような製剤は、国際公開第９６／０７３９８号パンフレットで報告されている。当該パンフレットに開示されているように、これらの化合物は、生分解性重合体やペプチドの放出特性を制御するための他の担体マトリックスを添加することなく、非経口持続放出性ゲル製剤として処方された。
【００１２】
ＶＬＭＷ（超低分子量）重合体を使用するという枠組みの中では、５０／５０の比を有するＰＬＧＡ（すなわち、乳酸とグリコール酸との共重合体であって、５０％の乳酸と５０％のグリコール酸の単位とを含むもの）であって、約２，３００ダルトンの分子量を有し、カルボン酸基を末端基とするものを使用する従来のアッセイは、この予期される結果を開示していない。図３及び例１２に示されるように、水性の生理学的環境で投与されたときに当該重合体の迅速な分解が観察された。さらに、このような製剤が遭遇する大きな困難さの一つには、粘度の問題がある。つまり、製造プロセスの間で、なおかつ注射の前に、成分を約５０〜６０℃で加熱することが必要である。
【００１３】
驚くべきことに、様々な方法によって製造され、かつ、カルボン酸末端にキャッピング部分を有する変性超低分子量重合体、すなわち、ポリラクチド又はＰＬＡ、ＰＬＧＡ若しくはそれらの混合物といった共重合体から作られた半固体移植物は、注射前又は注射後にいかなる添加剤も追加することなく、水性の生理学的環境に置かれたときに皮下／筋肉内デポー移植物を形成することができることが分かった。水性の生理学的環境で投与されたときに、活性物質が少なくとも１週間、さらには１ヶ月にわたって放出されることが観察された。さらに、このような重合体／製剤のそれらの乾燥状態での予期せぬ流動性により、非経口投与用のシリンジ型のような慣用の装置を使用することが可能になる。本発明の別の有益な利点は、薬剤充填済みのもの（例えば、薬剤充填済み注射器）又は製剤を使用する準備ができているものとして使用できる組成物を提供することである。
【００１４】
重合体鎖の末端キャップにより、それらの流動性が増大するため、半固体製剤の製造が容易になると共に、シリンジ型のような従来の装置により当該製剤を注射することが可能になる。投与装置は、１６ゲージを有する針及びそれよりも細い針や１９ゲージ以上の針の付いた０．３〜１ｍｌのプラスチック注射器であることができるであろう。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１５】
【特許文献１】欧州特許第１１２６８２２号明細書
【特許文献２】国際公開第２００４／０１２７０３号パンフレット
【特許文献３】国際公開第９６／０７３９８号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
本発明の目的は、特に、持続放出性製剤として使用できる半固体医薬組成物であって、該半固体製剤が水性の生理学的環境に投与されたときに、その活性成分を少なくとも１週間にわたって、さらには１ヶ月を超えて放出するものを提供することである。
【００１７】
また、本発明は、超低分子量の連続マトリックス中における固体活性物質（粉末）の特定の安定な懸濁物であるとみなすこともできる。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明の目的は、生体内試験及び試験管内試験の手段により本発明において特許請求した方法を用いて達成された。
【００１９】
特に示さない限り、次の定義は、本明細書において本発明を説明するために用いた様々な用語の意味及び範囲を示しかつ定義するために説明するものである。
【００２０】
用語「超低分子量」及び「変性超低分子量」とは、５００〜５，０００ダルトン、好ましくは７００〜３，０００ダルトン、さらに好ましくは８００〜２，０００ダルトンの重量平均分子量を有する末端キャップされた重合体又は共重合体をいう。
【００２１】
用語「末端キャップされた又はキャップ部分」とは、重合体鎖の末端部に非反応性化学基をグラフトし、それによって当該重合体に分解剤に対する良好な安定性を付与すること（もの）をいう。
【００２２】
本明細書において、単独で使用する又は他の基と組み合わせて使用する用語である「アルキル」とは、直鎖状、分岐状、環状、非置換又は置換のアルキルなどの飽和炭化水素基をいう。
【００２３】
用語「ヘテロアルキル」とは、少なくとも１個の炭素がヘテロ原子で置換されたアルキルをいう。
【００２４】
用語「アルコキシ」とは、アルキル基に酸素が結合したものをいう。
【００２５】
用語「アリール」とは、１個の芳香族環、又は、互いに縮合した、共有結合した若しくはエチレン部分やメチレン部分などの共有の基に結合した複数の芳香族環を含有する芳香族置換基をいう。
【００２６】
用語「置換アリール」とは、１個以上の置換基で置換されたアリール部分をいう。
【００２７】
用語「ヘテロアリール」とは、少なくとも１個の炭素がヘテロ原子で置換されたアリール基をいう。
【００２８】
用語「アラルキル」とは、アルキル基がアリール基で置換されたものをいう。
【００２９】
用語「ヘテロアラルキル」とは、アルキル基がヘテロアリール基で置換されたものをいう。
【００３０】
好ましい末端基は、直鎖状、分岐状、環状、非置換及び置換誘導体を含むアルキル基である。
【００３１】
２成分半固体医薬組成物とは、好ましくは乾燥した状態の少なくとも１種の活性物質又はそれらの混合物の他に、製薬上許容される生分解性重合体又はそれらの混合物であると解される。
【００３２】
この有用な生分解性でかつ製薬上許容される重合体は、通常、ヒドロキシカルボン酸誘導体オリゴマーである。特に、乳酸及び／又はグリコール酸、ラクチド−グリコリド誘導体又はそれらの混合物である。
【００３３】
本明細書において、用語「製薬上許容される」とは、哺乳動物又はヒトによって生理学的に十分に許容されることを意味する。
【００３４】
用語「重量平均分子量（ＭＷ）」及び「多分散度（ｌｐ）」などの重合体の「分子量分布（ＭＷ）」とは、当業者に周知の任意の基準法により、例えばゲル透過クロマトグラフィー（ＧＰＣ）とも呼ばれるサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）により実施された測定値をいう。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】図１は、例９で得られるような末端キャップされたＰＬＡで調製されたＶＬＭＷ処方物からのＧＬＰ−１アナログ（ＢＩＭ５１０７７）の試験管内放出特性を示している。
【図２】図２は、例１０で得られるような末端キャップされたＰＬＧＡ８０／２０で調製されたＶＬＭＷ処方物からのトリプトレリン（ＢＩＭ２１００３）の試験管内放出特性を示している。
【図３】図３は、例１２で得られるような末端キャップされていないＰＬＧＡ５０／５０で調製されたＶＬＭＷ処方物からのトリプトレリン（ＢＩＭ２１００３）の生体内放出特性を示している。
【図４】図４は、例１３で得られるような末端キャップされたＰＬＡで調製されたＶＬＭＷ処方物からのソマトスタチンアナログ（ＢＩＭ２３１９０）の生体内放出特性を示している。
【図５】図５は、例１３で得られるような末端キャップされたＰＬＡで調製されたＶＬＭＷ処方物からのＧＬＰ−１アナログ（ＢＩＭ５１０７７）の生体内放出特性を示している。
【図６】図６は、例１３で得られるような末端キャップされたＰＬＡで調製された複数のＶＬＭＷ処方物からのトリプトレリン（ＢＩＭ２１００３）の生体内放出特性を示している。
【図７】図７は、例１４で得られるようなスプラーグドーリーラットに投与されたＶＬＭＷ処方物からの組換えヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）の生体内放出特性を示している。
【図８】図８は、例１５で得られるような無胸腺ラットに投与されたＶＬＭＷ処方物からの組換えヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）の生体内放出特性を示している。
【図９】図９は、例１６で得られるようなｒｈＧＨ／ＶＬＭＷ処方物で処理された低酸素ラットの体重増加を示している。
【図１０】図１０は、例１６で得られるようなｒｈＧＨ／ＶＬＭＷ処方物の投与後８日目における低酸素ラットのＩＧＦ−１レベルを示している。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
したがって、本発明は、次のものを包含する持続及び制御放出性半固体製剤／デポー移植物である：
持続及び制御放出半固体製剤であって、
ａ）５００〜５０００ダルトンの重量平均分子量を有する、末端キャップされた変性超低分子量生分解性末端キャップ重合体若しくは共重合体又はそれらの混合物と、
ｂ）少なくとも１種の活性物質又はそれらの混合物と
を含み、その製造が追加の希釈剤、可塑剤、溶媒又は賦形剤を添加することなく実施された、持続及び制御放出性半固体製剤／デポー移植物に関するものである。
【００３７】
この組成物は、本発明において開示される処方物に使用でき、かつ、次の物質：ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）、ポリカプロラクトン、ポリ無水物、ポリアミン、ポリアミド、ポリエステルアミド、ポリエーテル、ポリエーテルエステル、ポリオルトエステル、ポリジオキサノン、ポリアセタール、ポリケタール、ポリカーボネート、ポリイミノカーボネート、ポリホスホエステル、ポリオルトカーボネート、ポリホスファゼン、ポリ（アルキレンアルキレート）、ポリウレタン、スクシネート、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（アミノ酸）、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシセルロース、多糖類、ポリ（プロピレンフマレート）並びにそれらの共重合体、三元共重合体及び混合物（ただし、これらに限定されない）から選択される、適当な生分解性の製薬上許容される低分子量重合体をさらに含むことができる。
【００３８】
当該組成物の好ましい形態は、適当な生分解性の製薬上許容される低分子量重合体、例えば、ポリラクチド、ポリグリコリド、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）、ポリ（乳酸）、ポリ（グリコール酸）又はそれらの混合物を含む。
【００３９】
本発明において開示される処方物に添加できる好適な活性物質は、次のもの：蛋白質、酵素、ホルモン、ポリヌクレオチド、核蛋白質、多糖類、糖蛋白質、リポ蛋白質、ペプチド、ポリペプチド、ステロイド、鎮痛薬、局所麻酔薬、抗生物質製剤、化学療法剤、免疫抑制剤、抗炎症薬、抗増殖剤、抗有糸分裂剤、血管形成剤、抗精神病薬、中枢神経系（ＣＮＳ）薬、抗凝血剤、線維素溶解薬、成長因子、抗体、抗原、眼薬、ヒト成長ホルモン、メチオニン−ヒト成長ホルモン、Ｄ−フェニルアラニンヒト成長ホルモン、グルカゴン、カルシトニン、インスリン、ヘパリン、インターロイキン−１、インターロイキン−２、Ｖｉｏｌ因子、第ＩＸ因子、黄体形成ホルモン、リラキシン、グレリン、卵胞刺激ホルモン、心房性ナトリウム利尿因子、フィルグラスチム上皮成長因子（ＥＧＦ）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ）、線線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）、形質転換成長因子（ＴＧＦ）、インターロイキン（ＩＬ）、コロニー刺激因子（ＣＳＦ、ＭＣＦ、ＧＣＳＦ、ＧＭＣＳＦ）、インターフェロン（ＩＦＮ）、上皮成長因子（ＶＥＧＦ、ＥＧＦ）、エリトロポエチン（ＥＰＯ）、アンギオポエチン（ＡＮＧ）、胎盤由来成長因子（ＰＩＧＦ）、ボツリヌス毒素のような毒素及び低酸素誘導転写調節因子（ＨＩＦ）並びにこれらの化合物の製薬上許容される塩又はそれらのアナログ、断片若しくは誘導体から選択されるが、これらに限定されない。
【００４０】
好ましくは、当該組成物の活性物質は、ペプチド、ポリペプチド、蛋白質、例えば、黄体形成ホルモン（ＬＨＲＨ）若しくはＬＨＲＨアナログ、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、卵胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、インスリン、ソマトスタチンのアナログ及び誘導体、成長ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン（ＧＨＲＨ）、成長ホルモン放出ペプチド、カルシトニン並びにこれらの化合物の製薬上許容される塩又はそれらのアナログ、断片若しくは誘導体であることができる。
【００４１】
本発明によれば、当該組成物のさらに好ましい活性物質は、ペプチド、ペプチド誘導体、ポリペプチド又は蛋白質、例えば、組換えヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）、成長ホルモン放出ホルモン（ＧＨＲＨ）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ）、例えばＩＧＦ−１、ＧＬＰ−１アナログ、黄体形成ホルモン（ＬＨＲＨ）又はＬＨＲＨアナログ及びソマトスタチンアナログである。
【００４２】
本発明に従う組成物のために使用できる活性物質の製薬上の塩は、有機酸及び無機酸との酸付加塩により製造される。化合物の酸付加塩の例は、無機酸との塩、例えば、塩酸、臭化水素及び沃化水素のようなハロゲン化水素酸、硫酸、硝酸、燐酸などとの塩、有機スルホン酸との塩、例えば、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸などのようなアルキルスルホン酸及びアリールスルホン酸との塩、並びに有機カルボン酸との塩、例えば、酢酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、安息香酸、フマル酸、蓚酸、ステアリン酸、サリチル酸、アスコルビン酸との塩又はパモイン酸などのような不溶性塩である。
【００４３】
また、活性物質がカルボキシル基を有するかどうかで、塩基により製薬上許容される塩が形成される。このような塩の例は、アルカリ金属塩、例えばナトリウム及びカリウム塩、アンモニウム塩、有機塩基との塩、例えば、ジイソプロピルアミン、ベンジルアミン、ジベンジルアミン、トリエタノールアミン、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン、Ｎ−メチルモルホリン、ピリジン、ピペラジン、Ｎ−エチルピペリジン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン及びプロカインのようなアミンとの塩又はアルギニン及びリシンなどのアミノ酸との塩である。
【００４４】
好ましいペプチド塩は、有機酸により形成された塩である。
【００４５】
好ましい形態では、本発明は、５００〜５０００ダルトンの分子量を有する乳酸及び／又はグリコール酸の単位を含む変性超低分子量重合体又は共重合体に関するものである。
【００４６】
超低分子量重合体の好ましい分子量は、７００〜３０００ダルトンであり、特に好ましくは、８００〜２０００ダルトンである。
【００４７】
本発明によれば、当該重合体は、１００／０〜５０／５０、好ましくは１００／０〜８０／２０の乳酸／グリコール酸又はラクチド／グリコリド単量体比を有することができる。
【００４８】
好ましくは、本発明において開示する超低分子量重合体は、分解剤に対する安定性を良好にするために、また物理的流動性を増加させることで製造方法及び注入方法を容易にするために、末端キャップされる。好適な末端基の例は、アルキル、置換アルキル、ヘテロアルキル、アルコキシ、アリール、置換アリール、ヘテロアリール、アラルキル、ヘテロアラルキルその他の置換基である。好ましい末端基は、アルキル基（直鎖状、分岐状、環状、非置換及び置換誘導体を含む）である。
【００４９】
さらに好ましい末端基は、直鎖状アルキル基である。
【００５０】
本発明は、カルボン酸末端の代わりにＣ5〜Ｃ18アルキル部分で末端キャップされた超低分子量生分解性重合体と活性物質とを少なくとも含む半固体医薬組成物／デポー移植物をさらに包含し、当該医薬組成物は、当該医薬組成物が水性の生理学的環境中に投与されたときに少なくとも１週間にわたり活性物質を連続的に放出する１５〜５０℃の温度でのデポー／移植物の形成に好適である。
【００５１】
本発明によれば、好ましい重合体末端基はアルキル基であり、これらのうち、特に、５〜１８個の炭素原子を有するアルキル基、さらに好ましくは５〜１２個の炭素原子を有するアルキル基を挙げることができる。
【００５２】
さらに、ここで説明する半固体医薬組成物／デポー移植物の非経口的適用に好ましい温度は、２５〜４０℃である。本願発明によれば、低分子量重合体処方物に配合される活性物質の量は、生物学的効果を発揮するのに必要な活性物質の濃度と、当該物質が放出されるべき時間の長さとに関連する所望の放出特性に依存する。
【００５３】
さらに、本発明は、少なくとも１種の活性物質と混合された超低分子量生分解性重合体を含む、非経口適用のための２成分半固体医薬組成物／デポー移植物の製造方法に関するものである。
【００５４】
本発明に従う半固体製剤／デポー移植物混合物の第１の製造方法は、次のとおりに実施できる：
（ａ）活性物質及び重合体を２個の異なるシリンジに導入し、ピストンを装着し、
（ｂ）これら２個の充填シリンジと、３個の円錐体を備えるステンレスコネクターとを連結し、
（ｃ）該活性物質が充填されたシリンジから真空下で空気を除去し、
（ｄ）これら２個のシリンジ間での混練プロセスにより該２種成分を随意に５℃〜６０℃の制御温度下、好ましくは室温で混合させる。
【００５５】
本発明によれば、医薬処方物は、以下のように好適に製造される：
・適切な量の変性超低分子量重合体と、１種の活性物質又は活性物質の混合物（その生理学的に安全な塩を含む）とを混合させ、ここで、該混合物は、複数のシリンジの手段により作製することができることを特徴とし、
・該活性物質は、随意に乾燥粉末（液体であることもできる）として選択されるが、ここで、乾燥粉末又は粉末形態が好ましく、
・その後、これらの充填シリンジをピストンで閉じ、
・その後、これらの充填シリンジをコネクターにより連結し、
・当業者に周知の好適な方法、例えば真空、超音波処理又はマイクロ波処理によって当該装置から空気を除去し、この方法は、適宜、好ましくは真空下で実施され、
・その後、これら２種の成分をコネクターを介して混合させることによってブレンドし、
・随意に、シリンジをそれ自体周知の態様で加熱することによって該混合物を流動化させる。
【００５６】
さらに、本発明は、ここで説明した半固体製剤／デポー移植物を提供するための第２方法に関するものでもある。
【００５７】
半固体製剤／デポー移植物の製造に好適な本発明の第２方法は、次の工程を含む：
（ａ）重合体をブレンダー内で混合させる工程、
（ｂ）活性物質を添加する工程、
（ｃ）これらの成分を室温で、随意に５℃〜６０℃の制御温度下で混合させる工程、
（ｄ）該方法の最後の工程を真空下で実施して気泡を除去することができる。
【００５８】
本発明に従って、医薬処方物が好適に製造される：
・成分のブレンドを特定の装置により制御された速度で開始し、ここで、この例示方法においてブレンドに使用される代表的な装置は、例えばシリンダー型の装置を備えることを特徴とする。
・活性物質は、随意に乾燥粉末として選択されるが、ただし、液体であってもよい。乾燥粉末の形態又は粉末の形態が好ましい。
・該医薬処方物の成分の混合は、制御された温度下で実施することができ、該ブレンドは、好ましくは室温で実施される。
【００５９】
さらに、本発明は、ここで説明した半固体製剤／デポー移植物を好適に製造するための第３方法に関するものでもある。
【００６０】
半固体製剤／デポー移植物の製造に好適な第３方法は、次のとおりに実施できる：
（ａ）超低分子量重合体を少量の塩化メチレンに溶解させる。
（ｂ）該重合体溶液に活性物質を添加する。
（ｃ）重合体及び活性物質の溶液／懸濁液を撹拌しながら、適当量のヘプタンを添加する。
（ｄ）該方法の最後の工程は、バルクから溶媒を除去するために所定温度及び真空下で実施されるであろう。
【００６１】
本発明に従って、医薬処方物は、好適に製造される：
・変性超低分子量重合体を好適な溶媒に溶解させ、或いは合成及び／又は精製のために使用される溶媒に溶解された該重合体を維持する。
・該重合体溶液に適切な量の１種の活性物質又活性物質の混合物を添加する（その生理学的に安全な塩を含む）。
・活性物質は、随意に乾燥粉末として選択されるが、ただし、液体であってもよい。乾燥粉末の形態又は粉末の形態が好ましい。
・その後、該混合物に該超低分子量重合体の非溶剤を添加し、その沈殿及び活性物質の部分的な取り込みを誘導する。
・該医薬処方物の成分のブレンドは、制御された温度で実施でき、このブレンドは、好ましくは室温で実施される。
・バルクから溶媒を当業者に周知の好適な方法、例えば真空下での加熱によって直接除去する又は沈殿後に除去する。
【００６２】
さらに、この製造法全体は、温度、圧力、加熱時間及び冷却時間に関して当業者には一般的な器具により制御できる。
【００６３】
活性物質は、０．００１〜７０％（ｗ／ｗ）の量、好ましくは０．１〜３０％（ｗ／ｗ）の量、より好ましくは２〜３０％（ｗ／ｗ）の量で含有できる。
【００６４】
当該活性物質は、半固体製剤内に懸濁、分散又溶解できる。
【００６５】
本発明のさらなる実施形態では、活性物質は、凍結乾燥、乾燥、磨砕、顆粒化、押出、マイクロカプセル化、錯化又は当業者に知られている任意の好適な方法により、組成物の製造前に予め処理できる。
【００６６】
さらに、組成物の粘度を減少させる又は組成物の注射性を改善させるためには使用されず、かつ、重合体には作用しない任意の賦形剤を随意に使用することができる。例えば、安定剤及び界面活性剤のような、注射用組成物に使用される伝統的なあらゆる賦形剤を添加することができる。
【００６７】
放射線滅菌、オートクレーブ滅菌又は滅菌ろ過といった、当業者に知られている任意の技術を本発明において開示した半固体製剤／デポー移植物に使用して滅菌製剤を得ることができる。
【００６８】
また、本発明には、当該半固体製剤の製造が無菌条件下で実行できることも包含される。
【００６９】
半固体製剤の製造は、予備充填した２個のシリンジ間での混練方法によって即席で、すなわち注射前に実行できる。
【００７０】
さらなる実施形態として、本発明の半固体製剤は、すぐに使用できるように準備されたものとして予備充填シリンジ中で状態調整できる。
【００７１】
本発明の特定の実施形態として、半固体製剤は、慢性的な疾患又は病気の治療及び／又は予防のためのものであることができる。
【００７２】
本発明の特定の実施形態では、持続及び制御放出性製剤は注射用である。
【実施例】
【００７３】
次の実施例は、本発明の例示として役立つものであり、本発明を限定するものではない。
例１
ゲル透過クロマトグラフィーによる重合体の重量平均分子量の決定
４０℃のＳｔｙｒａｇｅｌ ＨＲ１カラム（Ｗａｔｅｒｓ）を用い、溶離剤としてテトラヒドロフラン（ＨＰＬＣ等級）を０．２ｍＬ／分の流れで使用したゲル透過クロマトグラフィーにより測定を実行した。３８２〜４，９２０ｇ／ｍｏｌの分子量範囲を有する様々なポリスチレン基準物（ポリマー・ラボラトリーズ社）を検量線作成のために使用した。これらの重合体溶液をテトラヒドロフラン中０．４ｍｇ／ｍＬで調製した。これらの分析を蒸発光散乱検出器（ＰＬ−ＥＬＳ  １０００，ポリマー・ラボラトリーズ社）を備えたＷａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ２６９５クロマトグラフィーシステムにより実施した。
結果を表１にまとめる。
【００７４】
【表１】
0005410980.tif 000002
【００７５】
例２
示差走査熱量測定法による重合体のガラス転移温度の測定
ガラス転移温度を、熱分析調節器（ＴＡＣ７／ＤＸ，パーキン・エルマー・インストルメンツ社）及び冷却付属品（インタークーラー２，パーキン・エルマー・インストルメンツ社）を備えた示差走査熱量測定装置（ＤＳＣ７，パーキン・エルマー・インストルメンツ社）を使用して測定した。計器温度及びエンタルピーを、基準物として使用したインジウム及びｎ−オクタンで検量した。５〜１０ｍｇの重合体をアルミニウム皿に導入し、その後、孔の開いたカバーで封止した。全ての場合において、空の皿を基準として使用し、窒素をパージガスとして使用した。
試料を周囲温度から−７０℃までの冷却−加熱プログラムに付し、１０分間にわたり−７０℃で保持し、その後、５℃／分の速度で２０℃にまで加熱した。冷却−加熱プログラムを繰り返した。ガラス転移温度を、第１加熱工程及び第２加熱工程から測定された転移の開始温度として得た。
結果を表１にまとめる。
【００７６】
例３
ＢＩＭ２３１９０Ｃ ／ＶＬＭＷ処方物（バッチＮ１７４０５５）の製造
ソマトスタチンアナログＢＩＭ２３１９０Ｃ（酢酸塩）０．６ｇをシリンジに導入し、６ｇの半固体ＰＬＡ（ＦＢ３４１バッチ，表１参照）を第２シリンジに導入した。これら２個のシリンジを３円錐体ステンレスコネクターと連結させた。第１シリンジに真空を適用して活性物質から空気を除去した。ＢＩＭ２３１９０Ｃと重合体賦形剤との混合を２個のシリンジ間での押し−引き混練方法によって達成した。この系を５０〜６０℃まで暖めて混合プロセスを容易にした。
この混合物（バルク生成物）を１個のシリンジに集め、その後１９×０．８ｍｍ針付き０．３ｍＬの単回投与シリンジに分配し、そして個々のアルミニウム密閉バッグに詰めた。充填された生成物の滅菌をドライアイス中において２５ｋＧｙのγ線照射により実行した。最終生成物を−２２℃で保存した。
活性物質の含有量及び純度を逆相液体クロマトグラフィーによって管理した。これらの処方物をアセトニトリル及び酢酸溶液０．１％（２０／８０ｖ／ｖ）中に共に溶解させた。測定を、アセトニトリル／トリフルオル酢酸溶液（０．１％）による溶離勾配を使用して対称Ｃ18カラム（ウォーターズ社）により４０℃で実行した。これらの分析を、ウォーターズポンプコントロールモジュールと、ウォーターズ７１７プラスオートサンプラーと、スパークミストラルオーブンと、ウォーターズ４８６チューナブルアブソーバンスデテクターとを備えたＨＰＬＣポンプ（ウォーターズ５１５）により２８０ｎｍで実施した。
この最終生成物中におけるＢＩＭ２３１９０の含有量は約７.７％（ｗ／ｗ）であると決定され、ＢＩＭ２３１９０ピークの面積は、全面積の９７．１％に相当した。
結果を表２にまとめる。
【００７７】
【表２】
0005410980.tif 000003
【００７８】
例４ 
ＢＩＭ５１０７７Ｃ ／ＶＬＭＷ処方物（バッチＮ１８２０５４）の製造
７．０ｇの半固体ＰＬＡ（ＭＧ０２．０１３バッチ，表１参照）をブレンダー（ＡＲ４００，エルウェカ）の２個のシリンダー間に設置した。この重合体をこの装置でゆっくりと混合すると同時に、０．７０ｍｇのＧＬＰ−１アナログＢＩＭ５１０７７Ｃ（酢酸塩）を漏斗を介してゆっくりと導入した。この装置でゆっくりと２時間混合した後に室温で均質な組成物を得た。この混合物（バルク生成物）を１０ｍＬプラスチックシリンジに集めた後に、このバルクを真空下に３０分間置いて当該混合プロセス中に導入された気泡を除去した。
その後、バルク生成物を１９×１．２ｍｍ針付きの０．３ｍＬ単回投与シリンジに分配し、そして個々のアルミニウム密閉バッグに詰めた。充填生成物の滅菌をドライアイス中において２５ｋＧｙのγ線照射により実行した。最終生成物を−２２℃で保存した。
活性物質の含有量と純度を逆相液体クロマトグラフィーによって管理した。これらの処方物をアセトニトリル及び酢酸溶液０．１Ｍ（２０／８０ｖ／ｖ）中に共に溶解させた。これらの測定を、トリエチルアミンホスフェート緩衝液（ｐＨ２．３）／アセトニトリルによる溶離勾配を使用して対称Ｃ18カラム（ウォーターズ）により５０℃で実行した。分析を、ウォーターズ２４８７デュアルλアブソーバンスデテクターを備えたウォーターズアライアンス２６９５クロマトグラフィーシステムにより２２０ｎｍで実施した。
最終生成物中におけるＢＩＭ５１０７７の含有量は約８．９％（ｗ／ｗ）であると決定され、ＢＩＭ５１０７７のピーク面積は、全面積の９５．１％に相当した。
また、別の１０％ＢＩＭ５１０７７半固体製剤（Ｎ１７４０８８バッチ）もＶＬＭＷＰＬＡ（ＦＢ３４１バッチ）により上記のとおりに製造した。
結果を表２にまとめる。
【００７９】
例５
ＢＩＭ２１００３Ｃ ／ＶＬＭＷ処方物（バッチＮ１８２０４５）の製造
３．８ｇの半固体ＰＬＧＡ８０／２０（ＦＢ３４２バッチ，表１参照）をブレンダー（ＡＲ４００，エルウェカ）の２個のシリンダー間に設置した。この重合体をこの装置でゆっくりと混合すると同時に、０．４２ｍｇのトリプトレリンＢＩＭ２１００３Ｃ（酢酸塩）を漏斗を介してゆっくりと導入した。この装置でゆっくりと２時間混合した後に室温で均質な組成物を得た。この混合物（バルク生成物）を１０ｍＬプラスチック注射器に集め、その後、１９×１．２ｍｍ針付きの０．３ｍＬ単回投与シリンジに分配し、そして個々のアルミニウム密閉バッグに詰めた。充填された生成物の滅菌をドライアイス中において２５ｋＧｙのγ線照射により実行した。最終生成物を−２２℃で保存した。
活性物質の含有量と純度を逆相液体クロマトグラフィーによって管理した。これらの処方物をアセトニトリル及び酢酸溶液０．１％（２０／８０ｖ／ｖ）中に共に溶解させた。これらの測定をアセトニトリル／トリフルオル酢酸溶液（０．１％）による溶離勾配を使用して対称Ｃ18カラム（ウォーターズ）により４０℃で実行した。分析を、ウォーターズポンプコントロールモジュールと、ウォーターズ７１７プラスオートサンプラーと、スパークミストラルオーブンと、ウォーターズ４８６チューナブルアブソーバンスデテクターとを備えたＨＰＬＣポンプ（ウォーターズ５１５）により２８０ｎｍで実施した。
最終生成物中におけるＢＩＭ２１００３は、約９．１％（ｗ／ｗ）であると決定され、ＢＩＭ２１００３のピーク面積は、全面積の９８．８％に相当した。
結果を表２にまとめる。
【００８０】
例６
ＢＩＭ２１００３Ｃ ／ＶＬＭＷ処方物（バッチＮ１９３０７５）の製造
０．５５ｇのトリプトレリンＢＩＭ２１００３Ｃ（酢酸塩）をシリンジに導入し、５．０ｇの半固体ＰＬＡ（ＭＧ０３．０３５バッチ，表１参照）を第２シリンジに導入した。これらのシリンジを連結した後に、ＢＩＭ２１００３Ｃと重合体賦形剤との混合を、これら２個のシリンジ間での押し−引き混練方法により約５５℃で達成した。
この混合物（バルク生成物）を１個のシリンジに集め、その後１９×１．２ｍｍ針付きの０．３ｍＬ単回投与シリンジに分配し、そして個々のアルミニウム密閉バッグに詰めた。充填された生成物の滅菌をドライアイス中において２５ｋＧｙのγ線照射により実行した。最終生成物を−２２℃で保存した。
活性物質の含有量と純度を例５で説明したとおりに逆相液体クロマトグラフィーにより管理した。
最終生成物中におけるＢＩＭ２１００３の含有量は、約１０．７％（ｗ／ｗ）であると決定され、ＢＩＭ２１００３のピーク面積は、全面積の９８．７％に相当した。
結果を表２にまとめる。
【００８１】
例７
ＢＩＭ２１００３Ｃ ／ＶＬＭＷ処方物の製造
０.１９ｇのトリプトレリンＢＩＭ２１００３Ｃ（酢酸塩）をシリンジに導入し、７.８ｇの半固体ＰＬＡ（ＭＧ０４．１１０バッチ，表１参照）を第２シリンジに導入した。これらのシリンジを連結した後に、ＢＩＭ２１００３Ｃと重合体賦形剤との混合を２個のシリンジ間での押し−引き混練方法により室温で達成した。
この混合物（バルク生成物）を１個のシリンジに集め、その後１９×１．２ｍｍ針付きの０．３ｍＬ単回投与シリンジに分配し、そして個々のアルミニウム密閉バッグに詰めた。充填された生成物の滅菌をドライアイス中において２５ｋＧｙのγ線照射により実行した。最終生成物を−２２℃で保存した。
活性物質の含有量と純度を例５で説明したとおりに逆相液体クロマトグラフィーにより管理した。
最終生成物中におけるＢＩＭ２１００３の含有量は、約２．０％（ｗ／ｗ）であると決定され、ＢＩＭ２１００３のピーク面積は、全面積の９８．７％に相当した。
結果を表２にまとめる。
【００８２】
例８
粘度の間接推定法による注射性の評価
処方物の注射可能相対粘度を、セルフォース（ＮＬＣ １００Ｎ，リオイド・インストルメンツ）を備えたＤｉｎａｍｏｍｅｔｅｒ（Ｌ１０００Ｒ，リオイド・インストルメンツ）により決定した。１９×１．２ｍｍ針付きの０．３ｍＬ単回投与シリンジに充填された最終組成物を測定前に室温で２時間保持した。
予備充填されたシリンジに１００ｍｍ／分のピストン圧縮を施すと同時に、注入力を記録した。この注入力の最大値を、ニュートンで表す最大シリンジ注入力（ＳＩＦmax）として記録した。
結果を表２にまとめる。
【００８３】
例９
ＢＩＭ５１０７７Ｃ ／ＶＬＭＷ処方物（バッチＮ１７４０８８）での試験管内放出アッセイ
試験管内アッセイをＣ5アルキル基を末端基とするＰＬＡを使用した１０％ＢＩＭ５１０７７の半固体製剤により実行した。この組成物の製造、その状態調整、滅菌及び分析管理については、例４に記載している。
試験管内静的放出アッセイをリン酸緩衝溶液ｐＨ７．４（欧州薬局方）中３７℃で透析装置により実行した。およそ１４０ｍｇの最終生成物を円筒形の透析膜（直径３．５ｍｍ，Ｍ．Ｗ．Ｃ．Ｏ ２５ｋＤ，Ｓｐｅｃｔｒａ  Ｐｏｒ）に導入し、その後、この透析装置を３７℃でリン酸緩衝液２０ｍＬ中に置いた。インキュベーション媒体をこのアッセイ中に分析のために集め、そして３７℃の緩衝液２０ｍＬで置き換えた。その後、このインキュベーション媒体をＲＰ−ＨＰＬＣで分析して（例４で説明したとおり）活性物質の放出量を決定した。各実験は、独立に３回行った。
ＢＩＭ５１０７７の試験管内放出特性を図１に示している。
【００８４】
例１０
ＢＩＭ２１００３Ｃ ／ＶＬＭＷ処方物（バッチＮ１８２０４５）での試験管内放出アッセイ
試験管内アッセイを、Ｃ5アルキル基を末端基とするＰＬＧＡ８０／２０を使用して９％ＢＩＭ２１００３の半固体製剤により実行した。この組成物の製造、その状態調整、滅菌及び分析管理については、例５に記載している。
試験管内静的放出アッセイをリン酸緩衝液ｐＨ７．４（欧州薬局方）中３７℃で透析装置により実行した。およそ１３０ｍｇの最終生成物を円筒形の透析膜（直径３．５ｍｍ，Ｍ．Ｗ．Ｃ．Ｏ ２５ｋＤ，Ｓｐｅｃｔｒａ Ｐｏｒ）に導入し、そして透析装置を３７℃の緩衝液２０ｍＬ中に置いた。インキュベーション媒体をこのアッセイ中に分析のために集め、そして３７℃の緩衝液２０ｍＬで置き換えた。その後、インキュベーション媒体をＵＶ−可視分光光度法により２８０ｎｍで分析して活性物質の放出量を決定した。各実験は、独立に３回行った。
ＢＩＭ２１００３の試験管内放出特性を図２に示している。
【００８５】
例１１
沈殿により製造されたＢＩＭ２１００３Ｃ／ＶＬＭＷ処方物
この組成物において使用したＶＬＭＷ重合体は、Ｃ5アルキル末端基及び約１，１４０ダルトンの重量平均分子量Ｍｗを有する変性ＰＬＡであった。およそ１８０ｍｇのトリプトレリンＢＩＭ２１００３Ｃ（酢酸塩）を、０．５ｍＬの塩化メチレン中に溶解された１．０ｇのＶＬＭＷ重合体に添加した。ＢＩＭ２１００３Ｃの懸濁液を撹拌すると同時に、７．５ｍＬのヘプタンを添加してこの重合体を沈殿させた。その後、この懸濁液を濾過し、そして沈殿した混合物を真空下５０℃で乾燥させた。
【００８６】
活性物質の含有量と純度を例５で説明したとおりに逆相液体クロマトグラフィーにより管理した。バルク生成物中におけるＢＩＭ２１００３の含有量は、約７．２％（ｗ／ｗ）であると決定され、ＢＩＭ２１００３のピーク面積は、全面積の９８．７％に相当した。
試験管内静的アッセイを例１０で説明したとおりに２回実行した。
【００８７】
例１２
末端キャップされていないＶＬＭＷ重合体によるビーグル犬での生体内放出アッセイ
生体内アッセイを、カルボン酸基を末端基とするＰＬＧＡ５０／５０を使用した１０％ＢＩＭ２１００３の半固体製剤により実行した（Ｊ００１／３００００１３バッチ，表１参照）。この処方物の製造は、例６で説明したとおりに２個のシリンジによる約５０℃での押し−引き混練方法により行った。この混合物（バルク生成物）を２０×１．４ｍｍ針付きの０．３ｍＬ単回投与シリンジ内で状態調整し、その後、個々のアルミニウム密封バッグに詰め、そしてドライアイス中で２５ｋＧｙでのガンマ線照射により滅菌した。
活性物質の含有量及び純度を例５で説明したとおりに逆相液体クロマトグラフィーにより管理した。最終生成物中におけるＢＩＭ２１００３の含有量は、約１１．２％（ｗ／ｗ）であると決定され、ＢＩＭ２１００３のピーク面積は、全面積の９５.９％に相当した。
６匹の雄のビーグル犬に、その流動性を改善しかつその注射を容易にするために予め５０℃で３分間加熱した単回投与シリンジにより筋肉内に投与した。投与の前後にシリンジを秤量し、ＢＩＭ２１００３の注射量は、動物１頭あたり約３．６ｍｇであったと算出した。
４ｍＬの血液試料を投与後特定の時間間隔で橈側皮静脈から得た。これらの血液試料を抗凝血剤（１５％ＥＤＴＡ・Ｋ3水溶液）及び保存料（Ｔｒａｓｙｌｏｌ（商標））を含有する管中に置いた。遠心分離後に、血漿を除去し、そして試料をＲＩＡ分析まで−２０℃未満で保存した。得られたＢＩＭ２１００３の血漿レベルを図３に示している。
投与３日後に、ＢＩＭ−２１００３の血漿レベルは、定量限界未満であった。すなわち、相対的に迅速な薬剤吸収が観察された。これらの結果は、生理学的水性媒体中において３７℃で実行された試験管内実験で観察されたように、重合体が迅速に分解したためであると考えられる。
【００８８】
例１３
数種のペプチドの処方物によるスプラーグドーリーラットでの生体内放出アッセイ
数種の生体内アッセイを、次のペプチド：ＢＩＭ２３１９０Ｃ、ＢＩＭ５１０７７Ｃ又はＢＩＭ２１００３Ｃ（酢酸塩）を含有する半固体製剤で実行した。これらの組成物の製造、それらの状態調整、滅菌、分析管理及び試験管内アッセイについては、先の例で説明している。それらの特徴を表２にまとめる。
１２匹の雄のスプラーグドーリーラットに単回投与シリンジで皮下投与した。これらのシリンジを投与の前後で秤量して半固体製剤の全投与量をチェックした。１．５ｍＬの血液試料を、イソフルラン麻酔動物（ラット１匹当たり４サンプリング時間）から、投与後特定の時間間隔でパスツールマイクロピペットにより後方眼窩洞から得た。血液試料を、抗凝血剤（１５％ＥＤＴＡ・Ｋ3水溶液）及び保存料（Ｔｒａｓｙｌｏｌ（商標））を含有する管中に置いた。遠心分離後に、血漿を除去し、そして試料をＲＩＡ又はＳＰＥ−ＨＰＬＣ−ＭＳ／ＭＳ分析（治療剤に応じた分析方法）まで−２０℃未満で保存した。
Ｎ１７４０５５処方物から放出されたＢＩＭ２３１９０により得られた血漿レベルを図４に示している。３．３ｍｇ量の投与後に、少なくとも２１日まで持続放出性が観察された。
Ｎ１８２０５４処方物から放出されたＢＩＭ５１０７７により得られた血漿レベルを図５に示している。４．６ｍｇのＢＩＭ５１０７７を投与した場合には、少なくとも２８日まで持続放出性が観察された。
Ｎ１９３０７５及びＤ００９０９９処方物から放出されたＢＩＭ２１００３により得られた血漿レベルを図６に示している。Ｎ１９３０７５処方物の場合には、ＢＩＭ２１００３の含有量は、当該処方物中で約１０．７％（ｗ／ｗ）であり、３．１ｍｇ量の放出が投与後１４日にわたり観察された。Ｄ００９０９９処方物の場合には、ＢＩＭ２１００３の含有量は、当該処方物中で約２．０％（ｗ／ｗ）であり、２．８ｍｇ量の放出が投与後２１日にわたり観察された。
【００８９】
例１４
成長ホルモン処方物によるスプラーグドーリーラットでの生体内放出アッセイ
数種の半固体組成物をｒｈＧＨ（組換えヒト成長ホルモン）で製造した。使用した成長ホルモンは、これを安定にするために炭酸水素ナトリウム、スクロース及びポリソルベート２０を含有した。高、中及び低の異なる粘度を有する超低分子量ＰＬＡの３バッチを使用した。これらの重合体の特徴を表１にまとめる。
半固体重合体をドライアイス中で２５ｋＧｙでのガンマ線照射により予め滅菌した。無菌条件下で、適当量のｒｈＧＨ（凍結乾燥）及び半固体ＰＬＡを２個の異なるシリンジに導入した。これらのシリンジを連結した後に、均質な混合物を２個のシリンジ間での押し−引き混練方法によって達成した。この混合物（バルク生成物）を１個のシリンジに集め、その後針付きの０．３ｍＬ単回投与シリンジに分配した。最終生成物を５℃で保存した。
これらの処方物の組成、それらの状態調整及び投与量を表３にまとめる。
【００９０】
【表３】
0005410980.tif 000004
【００９１】
６匹の雄のスプラーグドーリーラットに単回投与シリンジで皮下投与した。これらのシリンジを投与の前後で秤量して半固体製剤の全投与量をチェックした。０．４ｍＬの血液試料を、イソフルラン麻酔動物から投与後７日まで特定の時間間隔でパスツールマイクロピペットにより後方眼窩洞から得た。血液試料を管中に置き、そして遠心分離した。その後、この血清試料をデカントし、それらをＥＬＩＳＡ法により分析するまで−８０℃の冷凍庫で即座に保持した。
成長ホルモンで得られた血清濃度を図７に示している。
少なくとも７日まで持続放出性が観察されたが、その際に、ｒｈＧＨ血清濃度は、投与後２から７日までほぼ一定であった。
【００９２】
例１５
成長ホルモン処方物による無胸腺ラットでの生体内放出アッセイ
ＶＬＭＷ処方物投与７日後の成長ホルモンの放出特性を評価するために、生体内アッセイを、先天的に胸腺を欠く無胸腺ラットで実行した。
別の成長ホルモン組成物を例１４で説明したとおり（Ｎ２０３０６９バッチ）中粘度のＰＬＡで製造した。その組成、状態調整及び投与量を表３にまとめる。
１０匹の雌の無胸腺ラットに単回投与シリンジで皮下投与した。これらのシリンジを投与の前後で秤量して半固体製剤の全投与量をチェックした（表３参照）。
成長ホルモンで得られた血清濃度を図８に示している。
投与後２１日まで持続放出性が観察された。
【００９３】
例１６
成長ホルモン処方物による低酸素ラットでの生体内放出アッセイ
ＶＬＭＷ処方物から放出された成長ホルモンの有効性を評価するために、Ｎ２０３０６９組成物（表３及び例１５参照）を下垂体を切除した（低酸素）スプラーグドーリーラットにも投与した。
５匹の雌の低酸素ラットに単回投与シリンジで皮下投与した。これらのシリンジを投与の前後で秤量して半固体製剤の全投与量をチェックした（表３参照）。
体重増加を図９に示しており、また、ＩＧＦ−１濃度を図１０に示している。結果を偽薬の投与後に得られた値「コントロール（−）」及び２ｍｇ／ｋｇ／日のｒｈＧＨ水溶液を毎日投与した後に得られた値「コントロール（＋）」と比較する。
投与後８日目では、体重プロフィール及びＶＬＭＷ処方物から放出された成長ホルモンで得られたＩＧＦ−１レベルは、コントロール（＋）値に近い。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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