(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体試料と所定の試薬とから、前記生体試料に含まれる上皮細胞のうち癌化した細胞を検出するための測定試料を調製する試料調製部と、
生体試料に含まれる上皮細胞を検出する検出部と、
前記検出部の検出結果に基づいて、生体試料中の上皮細胞の濃度を反映した濃度情報を生成する生成手段と、
前記生成手段で生成された前記濃度情報に基づいて、前記試料調製部に供給する生体試料の量を制御する制御手段と、
を備えた試料調製装置。
【請求項２】
前記制御手段は、一定の動作により測定試料を調製するよう前記試料調製部を制御する請求項１に記載の試料調製装置。
【請求項３】
前記制御手段は、前記測定試料中の上皮細胞の数が所定範囲内となるように、前記試料調製部に供給する生体試料の量を決定する請求項１又は２に記載の試料調製装置。
【請求項４】
前記制御手段は、生体試料中の上皮細胞の濃度が低いほど、前記試料調製部に供給する生体試料の量を多くし、生体試料中の上皮細胞の濃度が高いほど、前記試料調製部に供給する生体試料の量を少なくする、請求項１〜３のいずれかに記載の試料調製装置。
【請求項５】
前記制御手段は、前記生成手段で生成された前記濃度情報に基づいて、前記試料調製部に供給する試薬の量を制御する請求項１〜４のいずれかに記載の試料調製装置。
【請求項６】
前記制御手段は、生体試料中の上皮細胞の数と前記試薬の量との比率が所定範囲内となるように、前記試料調製部に供給する生体試料及び試薬のうちの少なくとも一方の量を制御する請求項１〜４のいずれかに記載の試料調製装置。
【請求項７】
前記検出部は、生体試料を通過させるフローセルと、前記フローセルを流れる生体試料にレーザ光を照射する光源部と、前記光源部が生体試料にレーザ光を照射することによって生じる光を受光する受光部とを備えている請求項１〜６のいずれかに記載の試料調製装置。
【請求項８】
生体試料中の上皮細胞以外の細胞の少なくとも一部を除去する細胞除去部を更に備えており、
前記検出部は、前記細胞除去部により上皮細胞以外の細胞の少なくとも一部が除去された生体試料に含まれる上皮細胞を検出する請求項１〜７のいずれかに記載の試料調製装置。
【請求項９】
生体試料中の細胞を分散させる細胞分散部を更に備えており、
前記検出部は、前記細胞分散部により前記細胞が分散された生体試料に含まれる上皮細胞を検出する請求項１〜８のいずれかに記載の試料調製装置。
【請求項１０】
前記上皮細胞が子宮頸部の上皮細胞である請求項１〜９のいずれかに記載の試料調製装置。
【請求項１１】
生体試料に含まれる上皮細胞のうち癌化した細胞を検出するための測定試料を調製する方法であって、
前記生体試料に含まれる上皮細胞を検出する検出工程と、
前記検出工程における検出結果から生体試料中の上皮細胞の濃度を反映した濃度情報を生成する生成工程と、
生成された濃度情報に基づいて、測定試料の調整のための生体試料の量を制御する制御工程と、
制御された量の生体試料と所定の試薬とから測定試料を調製する調製工程と、
を含む試料調製方法。
【請求項１２】
生体試料と所定の試薬とから、前記生体試料に含まれる上皮細胞のうち癌化した細胞を検出するための測定試料を調製する試料調製部と、
生体試料に含まれる上皮細胞を検出する第１検出部と、
前記第１検出部の検出結果に基づいて、生体試料中の上皮細胞の濃度を反映した濃度情報を生成する生成手段と、
前記生成手段で生成された前記濃度情報に基づいて、前記試料調製部に供給する生体試料の量を制御する制御手段と、
前記制御手段により制御された量の生体試料から前記試料調製部が調製した前記測定試料から、上皮細胞を検出する第２検出部と、
前記第２検出部の検出結果に基づいて、上皮細胞の分析を行う分析手段と、
を備えた細胞分析装置。
【請求項１３】
生体試料に含まれる上皮細胞のうち癌化した細胞の分析を行う方法であって、
生体試料に含まれる上皮細胞を検出する第１の検出工程と、
前記第１の検出工程における検出結果から生体試料中の上皮細胞の濃度を反映した濃度情報を生成する生成工程と、
生成された濃度情報に基づいて、測定試料の調製のための生体試料の量を制御する制御工程と、
制御された量の生体試料と所定の試薬とから測定試料を調製する調製工程と、
前記調製工程において調製された前記測定試料から上皮細胞を検出する第２の検出工程と、
前記第２の検出工程における検出結果から前記生体試料に含まれる上皮細胞のうち癌化した細胞の分析を行う分析工程と、
を含む細胞分析方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、試料調製装置及び試料調製方法、並びに、細胞分析装置及び細胞分析方法に関する。
具体的には、生体試料から測定試料を調製するための、細胞の濃度調整を含む前処理工程の改良に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、生体から採取された生体試料に含まれる細胞を分析する細胞分析装置として、被検者の子宮頸部から採取された試料に含まれる子宮頸部の上皮細胞をフローサイトメータで測定して、癌・異型細胞のスクリーニングを行う細胞分析装置が知られている（例えば、国際公開第２００６／１０３９２０号パンフレット参照）。【０００３】
上記パンフレットに記載の細胞分析装置では、子宮頸部から採取された試料と各種の試薬とを混合させて測定試料を調製し、調製された測定試料をシース液で包んでシースフローセル内で細く絞り込み、測定試料中の細胞を一列に整列させて通過させている。
そして、測定試料にレーザ光を照射し、当該測定試料からの散乱光や蛍光を利用して、各細胞の大きさや形状を測定している。【０００４】
しかしながら、生体試料によっては、測定対象細胞の濃度に試料ごとに大きなばらつきがあり、特に、子宮頸部から採取された生体試料に含まれる上皮細胞の濃度には、試料ごとに大きなばらつきがある。
このような濃度のばらつきがある場合には、生体試料に含まれる細胞を精度よく分析することが困難になる。【０００５】
例えば、生体試料中の測定対象細胞の濃度が薄すぎる場合には、有意な解析を行うのに必要な細胞数の確保ができず、測定対象細胞に含まれる癌・異型細胞の検出が困難になる。また、測定対象細胞以外の細胞やゴミなどによるノイズの影響が大きくなる。一方、生体試料中の測定対象細胞の濃度が濃すぎる場合には、生体試料中のすべての測定対象細胞を検出することが困難である。【０００６】
また、例えば、所定量の染色液を用いて測定対象細胞の染色を行うに当たって、生体試料中の測定対象の濃度が薄すぎる場合には、測定対象細胞を過度に染色してしまうことがあり、逆に、生体試料中の測定対象細胞の濃度が濃すぎる場合には、測定対象細胞への染色が不十分なってしまうことがある。
【発明の開示】
【０００７】
このような事情に鑑み、本発明の課題は、生体試料ごとに測定対象細胞の濃度に大きなばらつきがあっても、測定対象細胞の分析に適した測定試料を良好に調製することができる試料調製装置及び試料調製方法、並びに、生体試料ごとに測定対象細胞の濃度に大きなばらつきがあっても、測定対象細胞を精度よく分析することができる細胞分析装置及び細胞分析方法を提供する点にある。
【０００８】
本発明の第１の局面による試料調製装置は、生体試料と所定の試薬とから、前記生体試料に含まれる上皮細胞のうち癌化した細胞を検出するための測定試料を調製する試料調製部と、
生体試料に含まれる上皮細胞を検出する検出部と、
前記検出部の検出結果に基づいて、生体試料中の上皮細胞の濃度を反映した濃度情報を生成する生成手段と、
前記生成手段で生成された前記濃度情報に基づいて、前記試料調製部に供給する生体試料の量を制御する制御手段と、
を備えていることを特徴とする。
【０００９】
前記制御手段は、一定の動作により測定試料を調製するよう前記試料調製部を制御することができる。
前記制御手段は、前記測定試料中の上皮細胞の数が所定範囲内となるように、前記試料調製部に供給する生体試料の量を決定することができる。
【００１０】
前記制御手段は、生体試料中の上皮細胞の濃度が低いほど、前記試料調製部に供給する生体試料の量を多くし、生体試料中の上皮細胞の濃度が高いほど、前記試料調製部に供給する生体試料の量を少なくすることができる。
【００１１】
前記制御手段は、前記生成手段で生成された前記濃度情報に基づいて、前記試料調製部に供給する試薬の量を制御することができる。
前記制御手段は、生体試料中の所定の細胞の数と前記試薬の量との比率が所定範囲内となるように、前記試料調製部に供給する生体試料及び試薬のうちの少なくとも一方の量を制御することができる。
【００１２】
前記検出部は、生体試料を通過させるフローセルと、前記フローセルを流れる生体試料にレーザ光を照射する光源部と、前記光源部が生体試料にレーザ光を照射することによって生じる光を受光する受光部とを備えたものとすることができる。
【００１３】
前記試料調製装置は、生体試料中の上皮細胞以外の細胞の少なくとも一部を除去する細胞除去部を更に備えることができ、
前記検出部は、前記細胞除去部により上皮細胞以外の細胞の少なくとも一部が除去された生体試料に含まれる上皮細胞を検出することができる。
【００１４】
前記試料調製装置は、生体試料中の細胞を分散させる細胞分散部を更に備えることができ、
前記検出部は、前記細胞分散部により前記細胞が分散された生体試料に含まれる上皮細胞を検出することができる。
【００１５】
前記上皮細胞を、子宮頸部の上皮細胞とすることができる。
【００１６】
本発明の第２の局面による試料調製方法は、生体試料に含まれる上皮細胞のうち癌化した細胞を検出するための測定試料を調製する方法であって、
前記生体試料に含まれる上皮細胞を検出する検出工程と、
前記検出工程における検出結果から生体試料中の上皮細胞の濃度を反映した濃度情報を生成する生成工程と、
生成された濃度情報に基づいて、測定試料の調整のための生体試料の量を制御する制御工程と、
制御された量の生体試料と所定の試薬とから測定試料を調製する調製工程と、
を含むことを特徴としている。
【００１７】
本発明の第３の局面による細胞分析装置は、生体試料と所定の試薬とから、前記生体試料に含まれる上皮細胞のうち癌化した細胞を検出するための測定試料を調製する試料調製部と、
生体試料に含まれる上皮細胞を検出する第１検出部と、
前記第１検出部の検出結果に基づいて、生体試料中の上皮細胞の濃度を反映した濃度情報を生成する生成手段と、
前記生成手段で生成された前記濃度情報に基づいて、前記試料調製部に供給する生体試料の量を制御する制御手段と、
前記制御手段により制御された量の生体試料から前記試料調製部が調製した前記測定試料から、上皮細胞を検出する第２検出部と、
前記第２検出部の検出結果に基づいて、上皮細胞の分析を行う分析手段と、
を備えていることを特徴としている。
【００１８】
本発明の第４の局面による細胞分析方法は、生体試料に含まれる上皮細胞のうち癌化した細胞の分析を行う方法であって、
生体試料に含まれる上皮細胞を検出する第１の検出工程と、
前記第１の検出工程における検出結果から生体試料中の上皮細胞の濃度を反映した濃度情報を生成する生成工程と、
生成された濃度情報に基づいて、測定試料の調製のための生体試料の量を制御する制御工程と、
制御された量の生体試料と所定の試薬とから測定試料を調製する調製工程と、
前記調製工程において調製された前記測定試料から上皮細胞を検出する第２の検出工程と、
前記第２の検出工程における検出結果から前記生体試料に含まれる上皮細胞のうち癌化した細胞の分析を行う分析工程と、
を含むことを特徴としている。
【図面の簡単な説明】
【００２０】
【図１】第１実施形態に係る細胞分析装置の斜視図である。
【図２】測定装置の内部構成を示すブロック図である。
【図３】試料調製装置の内部構成を示すブロック図である。
【図４】データ処理装置の内部構成を示すブロック図である。
【図５】主検出部を構成するフローサイトメータの機能ブロック図である。
【図６】フローサイトメータの光学系を示す側面図である。
【図７】調製デバイス部の流体回路図である。
【図８】弁別・置換部のより具体的な構成を示す拡大断面図である。
【図９】弁別・置換部の濾過作用を示すための説明図である。
【図１０】細胞分析装置の各制御部が行う処理を示すフローチャートである。
【図１１】細胞分析装置の各制御部が行う処理を示すフローチャートである。
【図１２】弁別・置換処理を示すフローチャートである。
【図１３】第２実施形態に係る細胞分析装置の内部構成を示すブロック図である。
【図１４】第２実施形態に係る細胞分析装置の各制御部が行う処理を示すフローチャートの前半部分である。
【図１５】第２実施形態に係る細胞分析装置の各制御部が行う処理を示すフローチャートの後半部分である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２１】
以下、添付図面を参照しつつ、本発明の実施の形態を詳細に説明する。
[第１実施形態]
〔細胞分析装置の全体構成〕
図１は、本発明の第１実施形態に係る細胞分析装置１の斜視図である。
この細胞分析装置１は、患者から採取した細胞を含む測定試料をフローセルに流し、このフローセルを流れる測定試料にレーザ光を照射し、測定試料からの光（前方散乱光、側方蛍光など）を検出してその光信号を分析することで、細胞に癌細胞が含まれているか否かを判断するのに用いられる。
より具体的には、本実施形態の細胞分析装置１は、子宮頸部の上皮細胞を分析対象としており、子宮頸癌をスクリーニングするのに用いられるものである。【００２２】
図１に示すように、上記細胞分析装置１は、測定試料に対してレーザ光による光学的な測定を行う測定装置２と、被検者から採取された生体試料に洗浄や染色等の前処理を行って、測定装置２に供給する測定試料を作製する試料調製装置３と、測定装置２での測定結果の分析等を行うデータ処理装置４とを備えている。【００２３】
〔測定装置の内部構成〕
図２は、測定装置２の内部構成を示すブロック図である。
図２に示すように、この測定装置２は、主検出部６と、信号処理部７と、測定制御部８と、Ｉ／Ｏインタフェース９とを備えている。【００２４】
このうち、主検出部６は、測定試料から測定対象細胞やその核の数及びサイズ等を検出するものであり、本実施形態では、図５及び図６に示すフローサイトメータ１０が採用されている。
信号処理部７は、主検出部６からの出力信号に必要な信号処理を行う信号処理回路よりなる。また、測定制御部８は、マイクロプロセッサ１１と記憶部１２とを含んでおり、記憶部１２は、ＲＯＭ及びＲＡＭ等よりなる。【００２５】
記憶部１２のＲＯＭには、主検出部６や信号処理部７の動作制御を行う制御プログラムと、この制御プログラムの実行に必要なデータとが格納され、マイクロプロセッサ１１は、その制御プログラムをＲＡＭにロードして、或いは、ＲＯＭから直接実行することが可能である。【００２６】
測定制御部８のマイクロプロセッサ１１は、Ｉ／Ｏインタフェース９を介して、データ処理装置４と後述する調製制御部１６のマイクロプロセッサ１９に繋がっており、これにより、自身が処理したデータや自身の処理に必要なデータを、データ処理装置４及び調製制御部１６のマイクロプロセッサ１９との間で送受信できるようになっている。【００２７】
〔試料調製装置の内部構成〕
図３は、試料調製装置３の内部構成を示すブロック図である。
図３に示すように、この試料調製装置３は、副検出部１４と、信号処理部１５と、調製制御部１６と、Ｉ／Ｏインタフェース１７と、生体試料に対する成分調整を自動的に行うための調製デバイス部１８とを備えている。【００２８】
このうち、副検出部１４は、生体試料に含まれる測定対象細胞の細胞数を検出するものであり、本実施形態では、この副検出部１４についても、図５及び図６に示すものとほぼ同様のフローサイトメータ１０を採用している。
信号処理部１５は、副検出部１４からの出力信号に必要な信号処理を行う信号処理回路よりなる。調製制御部１６は、マイクロプロセッサ１９と、記憶部２０と、センサドライバ２１と、駆動部ドライバ２２とを含んでおり、記憶部２０は、ＲＯＭ及びＲＡＭ等よりなる。【００２９】
本実施の形態の調製デバイス部１８は、検体セット部２４と、細胞分散部２５と、検体ピペット部２６と、検体定量部２７と、試薬定量部２８と、弁別・置換部２９とから構成されている。
このうち、検体セット部２４は、患者から採取された生体試料とメタノール主成分の保存液とを収容する複数の生体容器５３や生成物容器５４（図７参照）をセットするためのものであり、細胞分散部２５は、生体容器５３内の生体試料と保存液との混合液を攪拌して試料に含まれる細胞を強制的に分散させるものである。【００３０】
また、検体ピペット部２６は、細胞が分散された生体試料と保存液との混合液を生体容器５３から取り出して調製デバイス部１８の流体回路に導入したり、調製された生成物を生成物容器５４に戻したり同生成物容器５４から取り出したりするものであり、検体定量部２７は、流体回路に供給される生体試料と保存液との混合液を定量するものである。【００３１】
更に、試薬定量部２８は、生体試料に加える染色液等の試薬を定量するものであり、弁別・置換部２９は、生体試料と保存液と希釈液とを混合して、保存液と希釈液とを置換するとともに、測定対象細胞とそれ以外の細胞（赤血球、白血球等）や細菌等とを弁別するためのものである。なお、上記各部２４〜２９を有する調製デバイス部１８の流体回路の構成（図７）については、後述する。【００３２】
記憶部２０のＲＯＭには、副検出部１４、信号処理部１５、センサドライバ２１及び駆動部ドライバ２２の動作制御を行う制御プログラムと、この制御プログラムの実行に必要なデータとが格納され、マイクロプロセッサ１９は、その制御プログラムをＲＡＭにロードして、或いは、ＲＯＭから直接実行することが可能である。【００３３】
調製制御部１６のマイクロプロセッサ１９は、Ｉ／Ｏインタフェース１７を介して前記測定制御部８のマイクロプロセッサ１１に繋がっており、これにより、自身が処理したデータや自身の処理に必要なデータを、測定処理部８のマイクロプロセッサ１１との間で送受信できるようになっている。【００３４】
また、調製制御部１６のマイクロプロセッサ１９は、センサドライバ２１と駆動部ドライバ２２を介して、調製デバイス部１８の各部２４〜２９のセンサ類や駆動部を構成する駆動モータと繋がっており、センサからの検知信号に基づいて制御プログラムを実行し、駆動部の動作を制御する。【００３５】
〔データ処理部の内部構成〕
図４は、データ処理装置４の内部構成を示すブロック図である。
図４に示すように、本実施形態のデータ処理装置４は、例えばノートＰＣ（デスクトップ型でもよい。）等のパーソナルコンピュータよりなり、処理本体３１と、表示部３２と、入力部３３とから主構成されている。【００３６】
処理本体３１は、ＣＰＵ３４と、ＲＯＭ３５と、ＲＡＭ３６と、ハードディスク３７と、読出装置３８と、入出力インタフェース３９と、画像出力インタフェース４０とを備えており、これらの各部は内部バスによって通信可能に接続されている。【００３７】
ＣＰＵ３４は、ＲＯＭ３５に記憶されているコンピュータプログラムやＲＡＭ３６にロードされたコンピュータプログラムを実行することが可能である。
ＲＯＭ３５は、マスクＲＯＭ、ＰＲＯＭ、ＥＰＲＯＭ、ＥＥＰＲＯＭなどによって構成され、ＣＰＵ３４に実行されるコンピュータプログラム及びこれに用いるデータなどが格納されている。【００３８】
ＲＡＭ３６は、ＳＲＡＭ又はＤＲＡＭなどで構成され、ＲＯＭ３５及びハードディスク３７に記録されている各種のコンピュータプログラムの読み出しや、それらのコンピュータプログラムを実行するときのＣＰＵ３４の作業領域として利用される。
上記ハードディスク３７には、オペレーティングシステム及びアプリケーションプログラムなど、ＣＰＵ３４に実行させるための種々のコンピュータプログラム及びそのプログラムの実行に用いるデータがインストールされている。【００３９】
また、ハードディスク３７には、例えば、米マイクロソフト社が製造販売するWindows（登録商標）等のグラフィカルユーザインターフェース環境を提供する、オペレーティングシステムがインストールされている。【００４０】
更に、ハードディスク３７には、測定制御部８及び調製制御部１６への動作命令の送信、測定装置２で行った測定結果の受信及び分析処理、及び、処理した分析結果の表示などを行う操作プログラム４１がインストールされている。この操作プログラム４１は、当該オペレーティングシステム上で動作する。【００４１】
読出装置３８は、フレキシブルディスクドライブ、ＣＤ−ＲＯＭドライブ、又はＤＶＤ−ＲＯＭドライブなどで構成され、可搬型記録媒体に記録されたコンピュータプログラム又はデータを読み出すことができる。【００４２】
入出力インタフェース３９は、例えば、ＵＳＢ、ＩＥＥＥ１３９４、ＲＳ−２３２Ｃなどのシリアルインタフェース、ＳＣＳＩ、ＩＤＥ、ＩＥＥＥ１２８４などのパラレルインタフェース、及びＤ／Ａ変換器、Ａ／Ｄ変換器などからなるアナログインタフェースなどから構成されている。【００４３】
入出力インタフェース３９には、キーボード及びマウスからなる入力部３３が接続され、これをユーザが操作することでコンピュータへのデータ入力が可能となっている。
また、入出力インタフェース３９は、測定装置２のＩ／Ｏインタフェース９とも接続されており、これにより、測定装置２とデータ処理装置４との間でデータの送受信を行うことができる。【００４４】
画像出力インタフェース４０は、ＬＣＤ又はＣＲＴ等よりなる前記表示部３２に接続されており、ＣＰＵ３４からの画像データに応じた映像信号を当該表示部３２に出力させるものである。【００４５】
〔主検出部（フローサイトメータ）の構成〕
図５は、前記主検出部６を構成するフローサイトメータ１０の機能ブロック図であり、図６は、そのフローサイトメータ１０の光学系を示す側面図である。
図５に示すように、このフローサイトメータ１０のレンズ系４３は、光源である半導体レーザ４４からのレーザ光を、フローセル４５を流れる測定試料に集光するものであり、集光レンズ４６は、測定試料中の細胞の前方散乱光をフォトダイオード４７よりなる散乱光検出器に集光するものである。【００４６】
図５では、レンズ系４３を単一レンズで図示してあるが、具体的には、例えば図６に示すような構成になっている。
すなわち、本実施形態のレンズ系４３は、半導体レーザ４４側（図６の左側）から順に、コリメータレンズ４３ａ、シリンダレンズ系（平凸シリンダレンズ４３ｂ＋両凹シリンダレンズ４３ｃ）及びコンデンサレンズ系（コンデンサレンズ４３ｄ＋コンデンサレンズ４３ｅ）とから構成されている。【００４７】
図５に戻り、側方用の集光レンズ４８は、測定対象細胞又はこの細胞中の核の側方散乱光と側方蛍光をダイクロイックミラー４９に集光する。このミラー４９は、側方散乱光を散乱光検出器であるフォトマルチプライヤ５０へ反射させ、側方蛍光を蛍光検出器であるフォトマルチプライヤ５１の方へ透過させる。これらの光は、測定試料中の細胞や核の特徴を反映したものとなっている。【００４８】
そして、フォトダイオード４７及び各フォトマルチプライヤ５０，５１は、受光した光信号を電気信号に変換して、それぞれ、前方散乱光信号（ＦＳＣ）、側方散乱光信号（ＳＳＣ）及び側方蛍光信号（ＳＦＬ）を出力する。これらの出力信号は図示しないプリアンプにより増幅され、測定装置２の信号処理部７（図２）に送られる。【００４９】
測定装置２の信号処理部７で処理された各信号ＦＳＣ，ＳＳＣ，ＳＦＬは、それぞれ、マイクロプロセッサ１１によってＩ／Ｏインタフェース９からデータ処理装置４に送信される。
データ処理装置４のＣＰＵ３４は、前記操作プログラム４１を実行することにより、各信号ＦＳＣ，ＳＳＣ，ＳＦＬから細胞や核を分析するためのスキャッタグラムを作成し、このスキャッタグラムに基づいて、測定試料中の細胞が異常であるか否か、具体的には癌化した細胞であるか否かを判定する。【００５０】
なお、フローサイトメータ１０の光源としては、半導体レーザ４４の代わりにガスレーザを用いることもできるが、低コスト、小型、且つ低消費電力である点より半導体レーザ４４を採用するのが好ましく、かかる半導体レーザ４４の採用によって製品コストを低減させるとともに、装置の小型化及び省電力化を図ることができる。【００５１】
また、本実施の形態では、ビームを狭く絞ることに有利な波長の短い青色半導体レーザを用いている。青色半導体レーザは、ＰＩ等の蛍光励起波長に対しても有効である。なお、半導体レーザのうち、低コスト且つ長寿命であり、メーカーからの供給が安定している赤色半導体レーザを用いてもよい。【００５２】
ところで、子宮頸部の上皮細胞の大きさは平均で約６０μｍであり、また核の大きさは５〜７μｍである。この細胞が癌化すると細胞分裂の頻度が異常に多くなり、核は１０〜１５μｍの大きさとなる。これにより、Ｎ／Ｃ比（核の大きさ／細胞の大きさ）が正常な細胞に比べて大きくなる。【００５３】
従って、細胞と核の大きさを検出することによって、細胞が癌化したか否かの判断指標とすることができる。
そこで、本実施の形態では、フローセル４５を流れる測定試料からの散乱光をフォトダイオード４７で検出するとともに、フローセル４５を流れる測定試料からの蛍光をフォトマルチプライヤ５１で検出する。【００５４】
測定装置２の信号処理部７は、フォトダイオード４７から出力された散乱光信号から、測定対象細胞の大きさを反映した値である散乱光信号のパルス幅を取得するとともに、フォトマルチプライヤ５１から出力された蛍光信号から、測定対象細胞の核の大きさを反映した値である蛍光信号のパルス幅を取得する。【００５５】
そして、上記信号処理部７で得た測定対象細胞の大きさを反映した値と、測定対象細胞の核の大きさを反映した値に基づいて、当該測定対象細胞が異常であるか否かを、分析部を構成するデータ処理装置４のＣＰＵ３４が判定するようになっている。
具体的には、データ処理装置４のＣＰＵ３４は、は、蛍光信号のパルス幅を散乱光信号のパルス幅で除した値が所定の閾値より大きい場合に、測定対象細胞が異常であると判定する。【００５６】
〔副検出部の構成〕
試料調製装置３の副検出部１４は、試料調製を行う前処理工程において、生体試料から測定対象細胞の数を検出するものであり、本実施の形態では、図５及び図６に例示したものとほぼ同じ構成のフローサイトメータ１０を採用している。【００５７】
もっとも、本実施の形態の試料調製装置３は、測定装置２による本測定の前に測定対象細胞の濃度測定を予備的に行うものであるから、副検出部１４では、その細胞数を計数するための信号を出力できれば足りる。
このため、副検出部１４を構成するフローサイトメータ１０の場合には、前方散乱光信号（ＦＳＣ）を取得できれば足りるので、側方散乱光信号（ＳＳＣ）や側方蛍光信号（ＳＦＬ）を取得するためのフォトマルチプライヤ５０，５１がなく、ＦＳＣを取得するためのフォトダイオード４７のみを有している。【００５８】
そして、かかる副検出部１４のフォトダイオード４７が受光した光信号は、電気信号に変換されて増幅され、試料調製装置３の信号処理部１５（図３）に送られる。
試料調製装置３の信号処理部１５で処理された信号ＦＳＣは、調製制御部１６に送られる。この調製制御部１６のマイクロプロセッサ１９は、信号ＦＳＣに基づいて測定対象細胞の数をカウントする。【００５９】
また、このマイクロプロセッサ１９は、濃度測定のために検体ピペット部２６で予備的に採取した生体試料の容積を、当該ピペット部２６に設けられた流量センサ（図示せず）から取得しており、信号ＦＳＣから得た細胞数をその容積で割ることにより、生体試料の濃度を算出する。【００６０】
もっとも、必ずしも生体試料の濃度自体を算出する必要はなく、生体試料の採取量を常に一定に保持する場合には、細胞数自体が当該濃度を反映した情報になる。すなわち、調製制御部１６のマイクロプロセッサ１９が生成する濃度情報は、生体試料の濃度が含まれるのは勿論、この濃度と実質的に等価の他の情報であってもよい。【００６１】
そして、調製制御部１６のマイクロプロセッサ１９は、自身が生成した上記濃度情報に基づいて、前記調製デバイス部１８が生体試料に対して行う調製動作（生体試料や試薬の定量等の動作）を制御するための制御指令を発する。なお、この制御の具体的な内容については後述する。【００６２】
〔調製デバイス部の流体回路〕
図７は、前記調製デバイス部１８の流体回路図である。
図７に示すように、検体セット部２４は、円形の回転テーブル２４Ａと、これを回転駆動する駆動部２４Ｂとを備え、回転テーブル２４Ａの外周縁部には、生体試料と保存液との混合液を収容する生体容器５３と、弁別・置換部２９による弁別・置換処理により生成された生成物を収容する生成物容器（マイクロチューブ）５４とをセット可能な保持部が設けられている。【００６３】
細胞分散部２５は、生体容器５３内の試料を攪拌する攪拌棒２５Ａと、これを回転駆動する駆動部２５Ｂとを備えており、駆動部２５Ｂは、攪拌棒２５Ａを生体容器５３内に挿入して回転させる。
これにより、生体容器５３内の生体試料が攪拌され、生体試料に含まれる細胞を分散することができる。【００６４】
検体ピペット部２６は、生体容器５３内の生体試料を吸引して、その試料を検体定量部２７に供給するとともに、弁別・置換部２９で生成された生成物を生成物容器５４に戻すための第１ピペット２６Ａと、試薬定量部２８で定量された染色液等の試薬を生成物容器５４に供給するための第２ピペット２６Ｂとを備えている。【００６５】
第１ピペット２６Ａは、後述する弁別・置換部２９の収容容器５７と管路で繋がっており、弁別・置換部２９で測定対象細胞が弁別された液体を、当該第１ピペット２６Ａによって生成物容器５４に戻すことができる。
検体定量部２７は、定量シリンダ２７Ａと、このシリンダ２７Ａに挿通された定量ピストンを上下動させる駆動部２７Ｂとを備えている。定量シリンダ２７Ａは、方向切替バルブＶ１を介して第１ピペット２６Ａと管路で繋がっている。【００６６】
第１ピペット２６Ａで生体容器５３から吸引された生体試料と保存液との混合液は、方向切替バルブＶ１を通じて定量シリンダ２７Ａに導入される。この導入された生体試料と保存液との混合液は、駆動部２７Ｂによる定量ピストンの移動によって方向切替バルブＶ１を通じて次の弁別・置換部２９に送られる。
なお、本実施の形態では、検体定量部２７の定量シリンダ２７Ａは、生体試料に対する希釈液を調製する希釈液ユニット５５とも管路で繋がっている。【００６７】
試薬定量部２８は、一対の定量シリンダ２８Ａ，２８Ｂと、この各シリンダ２８Ａ，２８Ｂにそれぞれ挿通された定量ピストンを上下動させる駆動部２８Ｃとを備えている。各定量シリンダ２８Ａ，２８Ｂは、それぞれ供給切替バルブＶ２，Ｖ３を介して第２ピペット２６Ｂと管路で繋がっている。【００６８】
試薬容器内の試薬は、各定量シリンダ２８Ａ，２８Ｂに供給される。供給された試薬は、駆動部２８Ｃによる定量ピストンの移動によって所定分量だけ定量され、定量された試薬は、供給切替バルブＶ２，Ｖ３を通じて第２ピペット２６Ｂに送られる。
このため、検体セット部２４の生成物容器５４に戻される弁別済みの試料に対して、試薬定量部２８が定量した複数種類の所定分量の試薬を、それぞれ混合できるようになっている。【００６９】
本実施の形態では、試薬定量部２８の各定量シリンダ２８Ａ，２８Ｂで定量される試薬は２種類ある。このうち、一方の定量シリンダ２８Ａで計量して生体試料に加える試薬は、ＰＩ染色を行うための染料液であり、他方の定量シリンダ２８Ｂで計量して生体試料に加える試薬は、細胞にＲＮＡ処理を行うためのＲＮａｓｅである。ＰＩ染色は、色素を含んでいる蛍光染色液であるヨウ化プロピジウム（ＰＩ）により行われる。ＰＩ染色では核に選択的に染色が施されるため、核からの蛍光が検出可能となる。また、ＲＮＡ処理とは、細胞中のＲＮＡを溶かすための処理である。染料液は、上皮細胞のＲＮＡとＤＮＡの両方を染色してしまうので、上記のＲＮＡ処理を行うことでＲＮＡが溶け染料液によって染まらなくなるので、細胞核のＤＮＡを正確に測定することが可能となる。【００７０】
弁別・置換部２９は、上方開口状の収容容器５７と、この収容容器５７に上下動自在に挿通された濾過シリンダ５８と、この濾過シリンダ５８を収容容器５７内で上下動させる駆動部５９とを備えている。
収容容器５７は、方向切替バルブＶ１，Ｖ７，Ｖ４を介して検体定量部２７の定量シリンダ２７Ａと管路で繋がっている。このため、検体定量部２７で定量された生体試料と保存液との混合液は、方向切替バルブＶ１，Ｖ７，Ｖ４を通じて収容容器５７に供給され、この容器５７の内部にいったん保持することができる。また、弁別済みの収容容器５７内の生体試料は、同一の経路で、第１ピペット２６Ａに送られる。【００７１】
更に、方向切替バルブＶ４と廃棄部６１までの管路部分には、前記副検出部１４のフローセル４５が介在されている。このため、副検出部１４は、収容容器５７から排出される弁別済みの生体試料に対して、細胞数の計数を行うことができる。【００７２】
濾過シリンダ５８は、測定対象細胞（上皮細胞）は通過させず、かつ、それより小径の細胞（赤血球、白血球等）は通過させるフィルタ６０を下部に備えた中空筒体よりなり、この濾過シリンダ５８は、切替バルブＶ５を介して希釈液ユニット５５に管路で繋がっている。
このため、希釈液ユニット５５の希釈液は、切替バルブＶ５を開放することで濾過シリンダ５８の内部に供給することができる。【００７３】
弁別・置換部２９の駆動部５９は、生体試料と保存液と希釈液の混合液が入った収容容器５７に対して、上記濾過シリンダ５８を下方に移動させ、濾過シリンダ５８のフィルタ６０が収容容器５７内の混合液体中を下方に移動する。これにより、測定対象細胞を主に含む液体が残液としてフィルタ６０の下方に残るとともに、その他の細胞や夾雑物を主に含む液体が濾液としてフィルタ６０の上方（濾過シリンダ５８の内部）に残る。【００７４】
また、濾過シリンダ５８は、切替バルブＶ６を介して濾液の廃棄部６１に管路で繋がっている。このため、濾過シリンダ５８の下降で濾過された濾液は、切替バルブＶ６を通じて外部に廃棄される。
一方、上記濾過後の残液が生体試料の濃度測定用のものである場合は、濾過シリンダ５８内の残液は、上記濾液の廃棄が済んだ後で、方向切替バルブＶ４を通じて副検出部１４のフローセル４５に送られ、その後、廃棄部６１に廃棄される。また、同残液が測定試料の調製用のものである場合は、第１ピペット２６Ａから生成物容器５４に戻される。【００７５】
図７に示すように、検体定量部２７の定量シリンダ２７Ａは、方向切替バルブＶ１，Ｖ７を介して測定装置２の主検出部６にも管路で繋がっている。
そして、生成物容器５４内の測定試料については、第１ピペット２６Ａを介して検体定量部２７で定量され、上記バルブＶ１，Ｖ７を通じて測定装置２の主検出部６に供給されるようになっている。【００７６】
なお、図７に示す各部の駆動部や切替弁（電磁弁）Ｖ１〜Ｖ７に対する動作制御は、前記調製制御部１６（マイクロプロセッサ１９）からの制御指令に基づいて行われる。また、この調製制御部１６が行う前処理工程については後述する。【００７７】
〔弁別・置換部の具体的構成〕
図８は、弁別・置換部２９のより具体的な構成を示す拡大断面図であり、図９は、その濾過作用を示すための説明図である。
図８に示すように、本実施の形態の弁別・置換部２９は、生体試料を含む液体Ｌを収容可能な収容容器５７と、生体試料中の第１細胞Ｃ１を通過させずかつ第１細胞Ｃ１よりも小径の第２細胞Ｃ２を通過させるフィルタ６０とを備えている。【００７８】
また、弁別・置換部２９は、上記フィルタ６０に液体Ｌを通過させることにより、第１細胞Ｃ１を主に含む第１液体Ｌ１と、第２細胞Ｃ２を主に含む第２液体Ｌ２とに液体Ｌを分離する液体分離部として機能する、前記濾過シリンダ５８を備えている。
収容容器５７は、上下方向に向く軸心を有する中空の胴体部５７Ａと、この胴体部５７Ａの下部に連結され、かつ、中央部が下方に凹んだ内面を有する底部５７Ｂとを一体に有している。【００７９】
一方、濾過シリンダ５８は、収容容器５７内にシール部材６２を介して上下動自在に挿通された中空筒状のシリンダ６３と、このシリンダ６３の下端開口を閉塞するように設けられた前記フィルタ６０とを備えている。【００８０】
本実施の形態では、第１細胞Ｃ１として子宮頸部の上皮細胞を想定しており、この上皮細胞の大きさは概ね２０〜８０μｍ（平均は６０μｍ程度）である。また、上記第１細胞Ｃ１より小さい第２細胞Ｃ２である赤血球の大きさは、概ね７〜１０μｍであり、同じ第２細胞Ｃ２である白血球の大きさは、概ね８〜１５μｍである。更に、第２細胞Ｃ２である細菌等の夾雑物の大きさは、概ね１〜数μｍ程度である。【００８１】
そこで、本実施の形態では、収容容器５７内の液体に圧力がかかった状態でも上皮細胞が上記フィルタ６０の通孔を通過しないように、上記フィルタ６０として、２０μｍより小さい８〜２０μｍの径の通孔を有する金属製のＣＶＤ（Ｃｈｅｍｉｃａｌ
Ｖａｐｏｒ Ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ：化学気相成長法）フィルタを採用している。かかる金属製のＣＶＤフィルタは、その他の樹脂製のフィルタや、金属製であってもメッシュ製のものに比べて通孔の変形が少なく、開口率を高められるという利点がある。【００８２】
また、フィルタ６０の孔径を８〜２０μｍに設定したのは、８μｍ未満であれば、細胞や夾雑物が通孔に早期に詰まる現象が多く見られ、２０μｍを超えると、収容容器５７内の液体に圧力がかかっている状態では上皮細胞が通孔を通過してしまうことが多くなるからである。なお、フィルタ６０の孔径は、１５μ前後がより好ましい。【００８３】
収容容器５７の底部５７Ｂには、定量済みの生体試料の導入と濾過後の残液Ｌ１を外部に排出して取得するための残液管路６４が接続され、この管路６４の中途部に前記方向切替バルブＶ４が設けられている。従って、この残液管路６４と方向切替バルブＶ４は、液体分離部である濾過シリンダ５８によって分離された第１液体Ｌ１を取得するための液体取得部を構成している。【００８４】
また、シリンダ６３の上壁部には、希釈液ユニット５５に通じる希釈液管路６５が接続され、この管路６５の中途部に前記切替バルブＶ５が設けられている。
更に、シリンダ６３の上壁部には、濾過後の濾液Ｌ２を外部に廃棄するための、廃棄部６１に通じる濾液管路６６が接続され、この管路６６の中途部に前記切替バルブＶ６が設けられている。従って、この濾液管路６６と切替バルブＶ６は、液体分離部である濾過シリンダ５８によって分離された第２液体Ｌ２を外部に排出するための液体排出部を構成している。【００８５】
シリンダ６３の上端部には、モータ等よりなる前記駆動部５９の回転運動を当該シリンダ６３の上下方向移動に変換する移動機構部６７が接続されている。
この移動機構部６７の駆動部５９は、調製制御部１６（マイクロプロセッサ１９）からの制御指令に従って濾過シリンダ５８を駆動する。【００８６】
例えば、調製制御部１６は、図９（ａ）に示すように、フィルタ６０が収容容器５７内の液体Ｌ（生体試料と保存液と希釈液の混合液）の液面上方からその液中に向かって下方に移動するように、濾過シリンダ５８を下降させる。
すると、図９（ｂ）に示すように、内部に含まれる細胞の殆どが第１細胞（上皮細胞）Ｃ１である液体が、残液Ｌ１として収容容器５７内のフィルタ６０の下方に残り、その他の第２細胞Ｃ２（赤血球、白血球及び細菌等の夾雑物）を含む液体が、濾液Ｌ２としてフィルタ６０の上方（濾過シリンダ５８の内部）に残る。【００８７】
その後、調製制御部１６は、液体Ｌ内に向かって移動済みのフィルタ６０が所定距離だけ上方に戻るように移動機構部６５の駆動部５９を制御する。
具体的には、調製制御部１６は、フィルタ６０が底部５７Ｂ又はその近傍に設定された下降限度に至るまで濾過シリンダ５８を下降させてから、フィルタ６０が所定距離だけ上方に戻るように移動機構部６７を制御する。この上方への戻りにより、フィルタ６０の下面に付着した第１細胞Ｃ１をフィルタ６０から離脱させることができる。【００８８】
そして、調製制御部１６は、先に切替バルブＶ６を開放することで、図９（ｃ）に示すように、残液Ｌ１より先に濾液Ｌ２を外部に排出させ、その後に、残液Ｌ１を取得するために方向切替バルブＶ４を開放させる。【００８９】
〔分析処理の内容〕
図１０及び図１１は、細胞分析装置１の各制御部８，１６，３１が行う処理を示すフローチャートである。
なお、図１０では、データ処理装置４の制御部（処理本体）３１が行う処理フローを右列に示し、測定装置２の制御部８が行う処理フローを左列に示している。また、図１１では、試料調製装置３の制御部１６が行う処理フローを一列に示しているが、この処理フローは、図示のＡ、Ｂ及びＣ点において図１０の処理フローと繋がっている。以下、この図１０及び図１１を参照しつつ、細胞分析装置１が行う処理内容を説明する。【００９０】
まず、最初に、データ処理装置４の制御部３１は、前記表示部３２にメニュー画面を表示させる（ステップＳ１）。その後、このメニュー画面に従った測定開始指示を入力部３３から受け付けると（ステップＳ２）、データ処理装置４の制御部３１は、測定開始信号を測定装置２に送信する（ステップＳ３）。
測定装置２の制御部８は、上記測定開始信号を受信すると（ステップＳ４）、調製開始信号を試料調製装置３に送信する（ステップＳ５及びＡ点）。【００９１】
試料調製装置３の制御部１６は、上記調製開始信号を受信すると（ステップＳ６）、測定試料の調製に用いられる試薬（染色液、ＲＮａｓｅ）を装置内の流路に吸引するとともに、生体容器５３内に収容された生体試料とメタノール主成分の保存液との混合液中の細胞を細胞分散部２５で分散させる（ステップＳ７，Ｓ８）。
その後、試料調製装置３の制御部１６は、分散済みの混合液を生体容器５３から装置内の流路に所定量だけ吸引させて（ステップＳ９）、弁別・置換部２９の収容容器５７に送り、その弁別・置換部２９に、生体試料と保存液との混合液に対する弁別・置換処理を行わせる（ステップＳ１０）。【００９２】
〔弁別・置換処理の内容〕
図１２は、上記弁別・置換処理を示すフローチャートである。
図１２に示すように、まず、試料調製装置３の制御部１６は、生体試料と保存液との混合液が入っている収容容器５７に希釈液を混合させ（ステップＴ１）、シリンダ６３をその下限位置まで下降させる（ステップＴ２）。【００９３】
このシリンダ６３の下降により、前記した通り、収容容器５７内の液体Ｌが、測定対象である第１細胞Ｃ１を主に含む所定量の残液Ｌ１と、これ以外の細胞Ｃ２を主に含む濾液Ｌ２とに弁別される。
その後、試料調製装置３の制御部１６は、シリンダ６３の下限位置の到達時点に、当該シリンダ６３を所定距離だけ上昇させる（ステップＴ３）。これによってフィルタ６０の下面に付着している第１細胞（上皮細胞）Ｃ１を、フィルタ６０の下方の濃縮液Ｌ１に浮遊させることができる。【００９４】
従って、この処理（ステップＴ３）におけるシリンダ６３の上昇移動は、第１細胞Ｃ１をフィルタ６０から物理的に離脱できる程度の速度及びストロークであればよく、その移動回数は複数回であってもよい。
上記処理の後、試料調製装置３の制御部１６は、フィルタ６０の上方にある濾液Ｌ２を外部に排出させてから（ステップＴ４）、シリンダ６３を初期位置まで上昇させ（ステップＴ５）、シリンダ６３の下降が２回目か否かを判定する（ステップＴ６）。【００９５】
試料調製装置３の制御部１６は、シリンダ６３の下降が２回目でない場合には、希釈液の混合から再度濾過を繰り返し、２回目である場合には、当該弁別・置換処理の処理ルーチンを終了する。なお、この弁別・置換動作は２回に限られず、２回より多い回数行われてもよい。
この弁別・置換処理により、測定対象細胞である第１細胞（上皮細胞）Ｃ１を主に含み測定対象細胞以外の第２細胞Ｃ２の数が低減された液体を取得することができる。また、上記弁別・置換処理により、生体容器５３から収容容器５７に供給された液体（生体試料と保存液との混合液）における保存液の濃度を希釈液により薄めることができる。そのため、後述のＤＮＡ染色処理において、保存液の影響を低減させ、良好に測定対象細胞のＤＮＡを染色することができる。【００９６】
図１１に戻り、上記弁別・置換処理（ステップＳ１０）が終了すると、試料調製装置３の制御部１６は、副検出部１４のフローセル４５に濃縮液（殆どが上皮細胞である残液Ｌ１）を送液し（ステップＳ１１）、この副検出部１４を用いて、フローサイトメトリー法によって濃縮液Ｌ１のプレ測定を行う（ステップＳ１２）。【００９７】
このプレ測定は、癌判定ために測定装置２が行う本測定の前に、生体試料に含まれる測定対象細胞（上皮細胞）Ｃ１の濃度を反映した濃度情報を得るためのものであり、例えば、濃縮液Ｌ１に含まれる細胞Ｃ１の細胞数を検出することによって行われる。【００９８】
〔濃度情報の利用〕
次に、試料調製装置３の制御部１６は、濃縮液Ｌ１を廃棄部６１に排出して（ステップＳ１３）、生体試料の濃度を算出するとともに（ステップＳ１４）、この濃度情報に基づいて、本測定のための測定試料を調製するための、生体試料の試料吸引量を決定する（ステップＳ１５）。
例えば、プレ測定に用いた生体試料の吸引量が２００μｌであり、プレ測定の結果で判明した細胞Ｃ１の個数が１万個であるとすると、生体試料の濃度は、１００００個／２００μｌ＝５０（個／μｌ）＝５００００（個／ｍｌ）となる。【００９９】
一方、本測定における癌細胞検出のために必要な有意細胞数が、例えば、１０万個であるとすると、この有意細胞数が確保される程度に本測定を行うために必要な生体試料の採取料は、１０万個・５００００（個／ｍｌ）＝２ｍｌとして演算することができる。
そこで、試料調製装置３の制御部１６は、上記の必要量だけ生体容器５３から生体試料を吸引し（ステップＳ１６）、この生体試料に対して、前記した弁別・置換処理を再度実施する（ステップＳ１７）。【０１００】
このように、試料調製装置３の制御部１６は、自身が生成した細胞Ｃ１の濃度情報に基づいて、本測定に使用する測定試料の調製のための生体試料の量を決定し、決定された量の生体試料を取得するように試料調製装置３の調製デバイス部１８を制御する。
この場合、試料調製装置３の制御部１６は、生体試料中の細胞Ｃ１の濃度が低いほど、測定試料の調製に用いられる生体試料の量を多めに決定し、生体試料中の細胞Ｃ１の濃度が高いほど、測定試料の調製に用いられる生体試料の量を少なめに決定することになる。【０１０１】
なお、試料調製装置３の制御部１６において、主検出部３４により検出される細胞Ｃ１の数は、癌検出のための有意細胞数である上記１０万個に限定されるものではなく、例えば、１０万個〜１５万個といった所定範囲内に収まるように、測定試料の調製に用いる生体試料の量を決定することにしてもよい。【０１０２】
更に、試料調製装置３の制御部１６において、自身で生成した細胞Ｃ１の濃度情報に基づいて、生体試料の量だけでなく、測定試料の調製のための試薬の量も決定し、その決定された量の試薬を取得するように試料調製装置３の調製デバイス部１８を制御することもできる。
また、試料調製装置３の制御部１６において、自身で生成した細胞Ｃ１の濃度情報に基づいて、生体試料中の細胞Ｃ１の数と試薬（例えば、染色液）の量との比率が所定範囲内となるように、生体試料及び試薬のうちの少なくとも一方の量を決定し、その決定された量の生体試料又は試薬を取得するように試料調製装置３の調製デバイス部１８を制御することもできる。【０１０３】
〔測定試料の調製〕
次に、試料調製装置３の制御部１６は、上記２回目の弁別・置換処理で得られた濃縮液Ｌ１を生成物容器（マイクロチューブ）５４に供給するとともに（ステップＳ１８）、装置内に貯留されていた染色液とＲＮａｓｅとを、試薬定量部２８から生成物容器５４に供給し（ステップＳ１９）、この生成物容器５４内においてＤＮＡ染色とＲＮＡ処理を行わせて測定試料を作製する（ステップＳ２０）。【０１０４】
上記処理が終わると、試料調製装置３の制御部１６は、得られた測定試料を測定装置２の主検出部６に送液する（ステップＳ２１及びＢ点）。
なお、試料調製装置３の制御部１６は、測定装置２からのシャットダウン信号を受信したか否かを常時判定しており（ステップＳ２２及びＣ点）、その信号を受信していない場合には、調製開始信号の受信如何を判定するステップＳ６に戻り、その信号を受信した場合には、シャットダウンを実行して試料調製処理を終了する（ステップＳ２３）。【０１０５】
〔測定装置による本測定とそのデータ分析〕
図１０に戻り、測定装置２の制御部８は、調製開始信号を送信したあと、試料調製装置３から測定試料の供給があるか否かを常時判定している（ステップＳ２４）。【０１０６】
そこで、試料調製装置３から測定試料が送液されると（Ｂ点）、測定装置２の制御部８は、その測定試料を本測定部１４のフローセル４５に送り、測定試料の細胞Ｃ１に対する前記本測定を行い（ステップＳ２５）、その測定データをデータ処理装置４に送信する（ステップＳ２６）。
一方、データ処理装置４の制御部３１は、測定開始信号を送信したあと、測定装置２から測定データを受信したか否かを常時判定している（ステップＳ２７）。【０１０７】
測定装置２から上記測定データを受信すると、データ処理装置４の制御部３１は、その測定データを用いて細胞や核を分析し、測定試料中の細胞が癌化しているか否か等を判定する（ステップＳ２８）。
また、データ処理装置４の制御部３１は、上記分析結果を表示部３２に表示させ（ステップＳ２９）、ユーザ入力によるシャットダウン指示があるか否かを判定する（ステップＳ３０）。【０１０８】
上記シャットダウン指示がある場合には、データ処理装置４の制御部３１は、測定装置２にシャットダウン信号を送信する（ステップＳ３１）。
測定装置２の制御部８は、データ処理装置４からの上記シャットダウン信号を受信したか否かを常時判定しており（ステップＳ３２）、その信号を受信していない場合には、測定開始信号の受信如何を判定するステップＳ４に戻り、その信号を受信した場合には、試料調製装置３に上記シャットダウン信号を転送するとともに（ステップＳ３３）、シャットダウンを実行して測定処理を終了する（ステップＳ３４）。【０１０９】
以上の通り、本実施の形態に係る細胞分析装置１によれば、試料調製装置３で生体試料に対してプレ測定を実施して、この測定結果に基づいて測定対象細胞Ｃ１の濃度調整を含む前処理工程を行っているので、生体試料ごとに測定対象細胞Ｃ１の濃度に大きなばらつきがあっても、測定対象細胞Ｃ１の分析に適した測定試料を良好に調製することができる。また、その濃度調整によって得られた測定対象細胞Ｃ１の濃度調整済みの測定試料を用いて当該測定対象細胞Ｃ１の本測定を行うようにしたので、生体試料ごとに測定対象細胞Ｃ１の濃度に大きなばらつきがあっても、生体試料中の当該測定対象細胞Ｃ１を精度よく分析することができる。【０１１０】
〔第２実施形態〕
図１３は、本発明の第２実施形態に係る細胞分析装置１の内部構成を示すブロック図である。
この第２実施形態の細胞分析装置１が第１実施形態のそれと異なる点は、前記試料調製装置３が行うプレ測定に必要なデバイスを、測定装置２の内部にすべて一体に組み込んだ点にあり、その各要素の構成及び機能は第１実施形態の場合と同様である。【０１１１】
従って、測定装置２の各部の構成及び機能については、第１実施形態に使用した参照符号を図１３の各部にも付することにより、詳細な説明を省略する。【０１１２】
図１４及び図１５は、それぞれ第２実施形態に係る細胞分析装置１の各制御部８，３１が行う処理を示すフローチャートの前半部分及び後半部分である。なお、図１４のＤ〜Ｉは、それぞれ図１５のＤ〜Ｉとつながっている。
図１４に示すように、最初に、データ処理装置４の制御部３１は、前記表示部３２にメニュー画面を表示させる（ステップＳ１）。その後、このメニュー画面に従った測定開始指示を入力部３３から受け付けると（ステップＳ２）、データ処理装置４の制御部３１は、測定開始信号を測定装置２に送信する（ステップＳ３）。【０１１３】
そして、本実施の形態では、測定装置２の制御部８が、第１実施形態において試料調製装置３の制御部１６が行っていた処理も行うようになっている。
すなわち、測定装置２の制御部８は、測定開始信号を受信すると（ステップＳ４）、測定試料の調製に用いられる試薬（染色液、ＲＮａｓｅ）を装置内の流路に吸引するとともに、生体容器５３内に収容された生体試料とメタノール主成分の保存液との混合液中の細胞を細胞分散部２５で分散させる（ステップＳ７，Ｓ８）。【０１１４】
その後、測定装置２の制御部８は、測定試料を主検出部６に送液するまで、第１実施形態における試料調製装置３の制御部１６の場合と同様の処理を行う（ステップＳ７〜Ｓ２１）。
そして、測定装置２の制御部８は、その測定試料を主検出部６のフローセル４５に送ると、測定試料の細胞Ｃ１に対する前記本測定を行い（ステップＳ２５）、その測定データをデータ処理装置４に送信する（ステップＳ２６）。【０１１５】
一方、データ処理装置４の制御部３１は、測定開始信号を送信したあと、測定装置２から測定データを受信したか否かを常時判定している（ステップＳ２７）。
そこで、測定装置２から上記測定データを受信すると、データ処理装置４の制御部３１は、その測定データを用いて細胞や核を分析し、測定試料中の細胞が癌化しているか否か等を判定する（ステップＳ２８）。【０１１６】
また、データ処理装置４の制御部３１は、上記分析結果を表示部３２に表示させ（ステップＳ２９）、ユーザ入力によるシャットダウン指示があるか否かを判定する（ステップＳ３０）。
上記シャットダウン指示がある場合には、データ処理装置４の制御部３１は、測定装置２にシャットダウン信号を送信する（ステップＳ３１）。
測定装置２の制御部８は、データ処理装置４からの上記シャットダウン信号を受信したか否かを常時判定しており（ステップＳ３２）、その信号を受信していない場合には、測定開始信号の受信如何を判定するステップＳ４に戻り、その信号を受信した場合には、シャットダウンを実行して測定処理を終了する（ステップＳ３４）。【０１１７】
〔その他の変形例〕
なお、上記で開示した実施の形態は、本発明の例示であって制限的なものではない。本発明の範囲は、上記実施の形態ではなく特許請求の範囲によって示され、さらに特許請求の範囲の構成と均等なすべての変更が含まれる。
例えば、試薬の貯留部は、図７に示すように装置内の流体回路に含まれている必要はなく、装置外の貯留部にある試薬を、試薬定量部２８を通じて流体回路に導入することにしてもよい。【０１１８】
また、上記実施の形態では、子宮頸部の上皮細胞Ｃ１の濃度を測定した後に、新たに生体試料を生体容器５３から吸引して弁別・置換部２９に供給し、再度弁別された濃縮液Ｃ１を用いて測定試料を作製しているが、上皮細胞Ｃ１の濃度測定に使用した濃縮液Ｃ１をそのまま測定試料の原料とすることもできる。【０１１９】
更に、上記実施の形態では、子宮頸部の上皮細胞Ｃ１を測定対象細胞としているが、口腔細胞、膀胱や咽頭など他の上皮細胞、さらには臓器の上皮細胞についても、癌化判定を行うことができる。
上記実施の形態では、子宮頸部の上皮細胞Ｃ１と他の細胞Ｃ２の弁別手段として、フィルタ６０を用いた弁別を行っているが、この他に、例えば、上皮細胞Ｃ１と他の細胞Ｃ２との比重差を利用した遠心分離法を採用することもできる。【０１２０】
また、上記実施の形態では、主検出部６と副検出部１４とを個別に設置しているが、こられの検出部６，１４を１つのフローサイトメータ１０で兼用した装置構成にすることもできる。
更に、生体試料中の細胞Ｃ１の数を計数する副検出部１４の場合には、フローサイトメータ１０のような光学式のものに限らず、電気抵抗式の細胞検出器を採用することにしてもよい。【０１２１】
また、上記実施の形態では、生体容器５３内の液体（生体試料と保存液との混合液）をピペット２６Ａで吸引し、吸引した液体を管路を介して弁別・置換部２９の収容容器５７に供給しているが、ピペット２６Ａを可動式に構成し、生体容器５３内の液体をピペット２６Ａで吸引した後、ピペット２６Ａを弁別・置換部２９の収容容器５７まで移動させ、その後、ピペット２６Ａから収容容器５７に液体を吐出してもよい。【０１２２】
また、上記実施の形態では、フィルタ６０を収容容器５７内の液体Ｌ（生体試料と希釈液の混合液）の液面上方からその液中に向かって下方に移動させることにより、液体Ｌを液体Ｌ１と液体Ｌ２とに分離しているが、収容容器５７内の所定位置にフィルタ６０を固定し、そのフィルタ６０に液体Ｌを通過させることにより、液体Ｌを液体Ｌ１と液体Ｌ２とに分離してもよい。例えば、収容容器５７内の下方の所定位置にフィルタ６０を固定し、そのフィルタ６０の上方まで液面が上昇する量の液体Ｌをフィルタ６０の下方から収容容器５７内に導入することによって、フィルタ６０に液体Ｌを通過させ、その後に収容容器５７内のフィルタ６０の下方に存在する液体を取得してもよい。この場合、検体定量部２７、バルブＶ１，Ｖ７，Ｖ４が液体Ｌをフィルタ６０に通過させて液体Ｌを液体Ｌ１と液体Ｌ２とに分離する液体分離部を構成する。これによっても、測定対象細胞である上皮細胞以外の赤血球や白血球等の細胞のみがフィルタ６０を通過し、測定対象細胞である上皮細胞はフィルタ６０を通過せずに、収容容器５７内のフィルタ６０の下方の液体に残るため、測定対象細胞以外の細胞の数が低減された液体を取得することができる。【０１２３】
また、上記実施の形態では、試料調製装置３で調製された測定試料をフローサイトメータで測定しているが、試料調製装置３で調製された測定試料をスライドガラスに塗抹して塗抹標本を作製する塗抹標本作製装置と、作製された塗抹標本を撮像して撮像画像中の上皮細胞を分析する細胞画像処理装置とを設けてもよい。試料調製装置３により、測定対象細胞の濃度が均一な測定試料を調製できるので、分析に適した塗抹標本を容易に作製することができる。【０１２４】
また、上記実施の形態では、生体容器５３内の液体（生体試料とメタノール主成分の保存液との混合液）を弁別・置換部２９の収容容器５７に導入した後、希釈液を収容容器５７内に供給して弁別・置換処理を行うことにより、メタノール主成分の保存液と希釈液とを置換しているが、測定試料を調製する際のＰＩ染色に適した溶媒とメタノール主成分の保存液とを置換してもよい。これにより、より良好に測定試料を調製することが可能となる。【０１２５】
また、上記実施の形態では、弁別・置換処理により得られた濃縮液（ほとんどが測定対象細胞Ｃ１である残液Ｌ１）中の測定対象細胞Ｃ１を計数して、生体試料における測定対象細胞Ｃ１の濃度情報を算出しているが、本発明はこれに限られない。弁別・置換処理を行う前の生体試料中の測定対象細胞Ｃ１を計数して生体試料における測定対象細胞Ｃ１の濃度情報を算出してもよい。【０１２６】
また、上記第１実施形態では、生体試料中の測定対象細胞Ｃ１の濃度情報の算出処理、および、得られた濃度情報に基づく測定試料の調製処理（試料吸引量の決定処理を含む）を試料調製装置３の調製制御部１６が実行し、上記第２実施形態では、これらの処理を測定装置２の制御部１６が実行しているが、これらの処理をデータ処理装置４の処理本体３１が実行してもよい。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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