(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式［Ｉ］：
【化１】
0005485138.tif 000029
で示される２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液と２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒とを接触させ、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩の結晶を晶析させ、ジアステレオマーを除去することを特徴する精製された２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩の製造方法であって、
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩である製造方法。
【請求項２】
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒の存在下に、下記式［Ｉ］：
【化２】
0005485138.tif 000030
で示される２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液と塩基とを接触させ、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩の結晶を晶析させ、ジアステレオマーを除去することを特徴とする精製された２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩の製造方法であって、
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩である製造方法。
【請求項３】
下記式[ＩＩＩ]：
【化３】
0005485138.tif 000031
（式中、ＴＢＤＰＳはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を意味する。）
で示される５’−Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）−２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのＴＢＤＰＳ基を脱保護し、得られる溶液と吸着剤と接触させたのち、必要に応じて塩析して、再結晶を行うことによって、下記式［Ｉ］：
【化４】
0005485138.tif 000032
で示される２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物を得、次いで、前記２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物と塩基とを接触させて、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液を得て、さらに前記２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液と２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒とを接触させ、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩の結晶を晶析させ、ジアステレオマーを除去することを特徴とする精製された２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩の製造方法であって、
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩である製造方法。
【請求項４】
下記式[ＩＩＩ]：
【化５】
0005485138.tif 000033
（式中、ＴＢＤＰＳはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を意味する。）
で示される５’−Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）−２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのＴＢＤＰＳ基を脱保護し、得られる溶液と吸着剤と接触させたのち、必要に応じて塩析して、再結晶を行うことによって、下記式［Ｉ］：
【化６】
0005485138.tif 000034
で示される２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物を得、次いで、前記２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物を２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒に溶解させて、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液を得て、さらに、前記２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液と塩基とを接触させ、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩の結晶を晶析させ、ジアステレオマーを除去することを特徴とする精製された２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩の製造方法であって、
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩である製造方法。
【請求項５】
アルカリ金属塩が、ナトリウム塩、カリウム塩またはセシウム塩である請求項１〜４のいずれかに記載の製造方法。
【請求項６】
アルカリ土類金属塩が、カルシウム塩またはマグネシウム塩である請求項１〜４のいずれかに記載の製造方法。
【請求項７】
塩基が、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムまたは水酸化セシウムである請求項２〜４のいずれかに記載の製造方法。
【請求項８】
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒が、メタノールを除くアルコール溶媒、ケトン溶媒、エーテル溶媒またはニトリル化合物である請求項１〜７のいずれかに記載の製造方法。
【請求項９】
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒が、エタノールまたはアセトニトリルである請求項１〜８のいずれかに記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬品として有用なエチニルチミジン化合物の精製方法に関し、さらに詳しくは２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩の精製方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジン（２’，３’−Didehydro−３’−Deoxy−４’−Ethynylthymidine）は、下記式［Ｉ］：
【化１】
0005485138.tif 000002
で示される化合物（以下、化合物［Ｉ］ともいう。）であり、ヌクレオシド系逆転写酵素阻害薬（Nucleoside Analogue Reverse Transcriptase Inhibitor；ＮＲＴＩ）のひとつである。前記化合物［Ｉ］は、エイズ発症の予防薬として期待されている医薬化合物であり、現在市販されている類似医薬品stavudine（２’，３’−Didehydro−３’−Deoxythymidine；ｄ４Ｔともいう）より優れた活性を示すことが知られている。【０００３】
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンを化学合成法で製造する場合、不純物が含まれているので、純度を高める為には精製が必要であり、その精製方法としてシリカゲルカラムを用いたものが知られている（特許文献１）。
しかしながら、特許文献１記載の方法では、ジアステレオマーが残留する、精製分離に大量のシリカゲルを必要とし、コスト面から工業化が困難である等の問題が生じていた。
【特許文献１】米国特許第２００４／０１６７０９６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、化学合成された２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩を効率的にかつ工業的有利に精製する方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、（１）２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液と２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒とを接触させ、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩の結晶を晶析させる、または（２）２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒の存在下に、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液と塩基とを接触させ、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩の結晶を晶析させることにより、極めて簡便に精製された２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩の結晶が製造されることを見出し、この知見に基づいてさらに研究を進め、本発明を完成するに至った。【０００６】
すなわち、本発明は、
［１］  下記式［Ｉ］：
【化２】
0005485138.tif 000003
で示される２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液と２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒とを接触させ、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩の結晶を晶析させることを特徴とする２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩の精製方法、
［２］  ２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒の存在下に、下記式［Ｉ］：
【化３】
0005485138.tif 000004
で示される２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液と塩基とを接触させ、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩の結晶を晶析させることを特徴とする２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩の精製方法、
［３］  下記式[ＩＩＩ]：
【化４】
0005485138.tif 000005
（式中、ＴＢＤＰＳはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を意味する。）
で示される５’−Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）−２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのＴＢＤＰＳ基を脱保護し、得られる溶液と吸着剤と接触させたのち、必要に応じて塩析して、再結晶を行うことによって、下記式［Ｉ］：
【化５】
0005485138.tif 000006
で示される２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物を得、次いで、前記２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物と塩基とを接触させて、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液を得て、さらに前記２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液と２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒とを接触させ、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩の結晶を晶析させることを特徴とする２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩の精製方法、
［４］  下記式[ＩＩＩ]：
【化６】
0005485138.tif 000007
（式中、ＴＢＤＰＳはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を意味する。）
で示される５’−Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）−２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのＴＢＤＰＳ基を脱保護し、得られる溶液と吸着剤と接触させたのち、必要に応じて塩析して、再結晶を行うことによって、下記式［Ｉ］：
【化７】
0005485138.tif 000008
で示される２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物を得、次いで、前記２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物を２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒に溶解させて、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液を得て、さらに、前記２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液と塩基とを接触させ、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩の結晶を晶析させることを特徴とする２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩の精製方法、
［５］  塩基塩が、アルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩である前記［１］〜［４］のいずれかに記載の精製方法、
［６］  アルカリ金属塩が、ナトリウム塩、カリウム塩またはセシウム塩である前記［５］に記載の精製方法、
［７］  アルカリ土類金属塩が、カルシウム塩またはマグネシウム塩である前記［５］に記載の精製方法、
［８］  塩基が、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムまたは水酸化セシウムである前記［２］〜［４］のいずれかに記載の精製方法、
［９］  ２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒が、メタノールを除くアルコール溶媒、ケトン溶媒、エーテル溶媒またはニトリル化合物である前記［１］〜［８］のいずれかに記載の精製方法、
［１０］  ２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒が、エタノールまたはアセトニトリルである前記［１］〜［８］のいずれかに記載の精製方法、
［１１］  下記式［Ｉ］：
【化８】
0005485138.tif 000009
で示される２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩、および
［１２］  下記式［Ｉ］：
【化９】
0005485138.tif 000010
で示される２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのナトリウム塩、
に関する。
【発明の効果】
【０００７】
本発明の方法によれば、化学合成された２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩を効率的にかつ工業的有利に精製することができる。特に、Ｒｆ（Rate of flow value）値が近いジアステレオマー等の不純物も効率的に除去することができるという特長を有する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
以下、本発明を説明する。
本発明の精製方法の第一の態様としては、下記式［Ｉ］：
【化１０】
0005485138.tif 000011
で示される２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液と２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒とを接触させ、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩の結晶を晶析させる方法が挙げられる。なお、本明細書における塩基塩としては、薬理学的に許容しうる塩基塩であるのが好ましい。【０００９】
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液は、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物と塩基とを接触させることにより得ることができる。また、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液は、前記ジアステレオマー塩基塩以外の不純物を含んでいてもよい。本発明に用いる２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩としては、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩等が挙げられる。前記アルカリ金属塩としては、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、ルビジウム塩、セシウム塩等が挙げられ、ナトリウム塩、カリウム塩またはセシウム塩が好ましい。前記アルカリ土類金属塩としては、カルシウム塩、マグネシウム塩、ストロンチウム塩、バリウム塩等が挙げられ、カルシウム塩またはマグネシウム塩が好ましい。【００１０】
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物の製造方法を説明する。
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物の製造では、まず、前記特許文献１に記載に基づいて、下記式[ＩＩ]：
【化１１】
0005485138.tif 000012
（式中、Ｍｓはメシル基（メタンスルホニル基）を意味し、ＴＢＤＰＳはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を意味する。）
で示される５’−Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）−３’−Ｏ−メシル−４’−エチニルチミジン（以下、化合物[ＩＩ]という。）を製造する。次いで、得られた化合物[ＩＩ]を溶媒に溶解させて溶液とし、該溶液に塩基を添加して化合物[ＩＩ]を脱メシル化反応させることにより、下記式[ＩＩＩ]：
【化１２】
0005485138.tif 000013
（式中、ＴＢＤＰＳは上記と同一意味を有する。）
で示される５’−Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）−２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジン（以下、化合物[ＩＩＩ]という。）を得たのち、得られた化合物[ＩＩＩ]のＴＢＤＰＳ基を脱保護する。ＴＢＤＰＳ基の脱保護は、得られた化合物[ＩＩＩ]と塩基とを反応させることにより行うことができる。化合物[ＩＩＩ]と塩基との反応によって得られた溶液と吸着剤と接触させ、次いで、必要に応じて塩析したのち、再結晶を行うことによって２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物を製造できる。【００１１】
化合物[ＩＩ]との反応に用いる塩基としては、アルカリ金属アルコキシド（例えば、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（＝ｔｅｒｔ−ブトキシナトリウム）等）、アルカリ金属水素化物（例えば、水素化ナトリウム、水素化カリウム等）、アルキル金属リチウム（例えばｎ−ブチルリチウム）等が挙げられ、好ましくは、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドまたはカリウムｔｅｒｔ−ブトキシドである。化合物[ＩＩＩ]との接触に用いる塩基としては、アルカリ金属水酸化物（例えば、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化セシウム、水酸化ルビジウム等）、アルカリ土類金属水酸化物（例えば、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化ストロンチウム、水酸化バリウム等）、アルカリ金属炭酸塩（例えば、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム等）、アルカリ土類金属炭酸塩（例えば、炭酸マグネシウム、炭酸カルシウム、炭酸バリウム等）、アルカリ金属炭酸水素塩（例えば、炭酸水素リチウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素セシウム等）、アルカリ土類金属炭酸水素塩（例えば、炭酸水素マグネシウム、炭酸水素カルシウム、炭酸水素バリウム等）、アルカリ金属アルコキシド（例えば、リチウムエトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムエトキシド、ナトリウムメトキシド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（ｔｅｒｔ−ブトキシナトリウム）等）等が挙げられ、好ましくは、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウムである。前記塩基は、単独で用いてもよいし、２種以上を混合して用いてもよい。化合物[ＩＩ]と塩基との反応に用いる塩基の使用量は、化合物[ＩＩ]１モルに対して、通常１〜１０モル程度、好ましくは２〜５モル程度である。化合物[ＩＩＩ]と塩基との反応に用いる塩基の使用量は、化合物[ＩＩＩ]１モルに対して、通常１〜５０モル程度、好ましくは５〜１５モル程度である。【００１２】
化合物[ＩＩ]と塩基との反応に用いる溶媒は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）単独、もしくはＤＭＳＯおよびその他の溶媒との混合溶媒である。混合溶媒としてＤＭＳＯの使用量を減らすことにより、後処理における分液操作の回数を減らすことができる。その他の溶媒としては、アルコール溶媒（例えば、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等）、ケトン溶媒（例えば、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、シクロヘキサノン、シクロペンタノン等）、エーテル溶媒（例えば、１，２−ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジエチレングリコールジメチルエーテル、ジエチレングリコールジブチルエーテル、ジエチレングリコールジエチルエーテル等）、ニトリル化合物（例えば、アセトニトリル、グルタロジニトリル、メトキシアセトニトリル、プロピオニトリル、ベンゾニトリル等）等が挙げられる。化合物[ＩＩ]と塩基との反応に用いる前記溶媒の使用量は、化合物[ＩＩ]に対して、通常１〜１００重量倍程度、好ましくは３〜１０重量倍程度、さらに好ましくは５〜６重量倍程度である。化合物[ＩＩ]と塩基との反応時間は、通常０．５〜２４時間程度、好ましくは２〜１２時間程度である。化合物[ＩＩ]と塩基との反応時の温度は、通常０〜４５℃程度、好ましくは５〜２５℃程度である。
化合物[ＩＩ]と塩基とを反応させる方法としては、特に限定されないが、例えば化合物[ＩＩ]の溶液に塩基を添加または滴下する方法が挙げられる。【００１３】
化合物[ＩＩＩ]と塩基との反応に用いる溶媒としては、水、アルコール溶媒（例えば、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等）、ケトン溶媒（例えば、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、シクロヘキサノン、シクロペンタノン等）、エーテル溶媒（例えば、１，２−ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジエチレングリコールジメチルエーテル、ジエチレングリコールジブチルエーテル、ジエチレングリコールジエチルエーテル等）、ニトリル化合物（例えば、アセトニトリル、グルタロジニトリル、メトキシアセトニトリル、プロピオニトリル、ベンゾニトリル等）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）等が挙げられ、好ましくは水またはメタノールである。前記溶媒は、単独で用いてもよいし、２種以上を混合して用いてもよい。化合物[ＩＩＩ]と塩基との反応に用いる前記溶媒の使用量は、化合物[ＩＩＩ]に対して、通常２〜１００重量倍程度、好ましくは５〜３０重量倍程度、さらに好ましくは１０〜１５重量倍程度である。化合物[ＩＩＩ]と塩基との反応時間は、通常０．５〜２４時間程度、好ましくは５〜１４時間程度である。化合物[ＩＩＩ]と塩基との反応時の温度は、通常０〜４０℃程度、好ましくは２０〜３０℃程度である。化合物[ＩＩＩ]と塩基との反応時のｐＨは、通常７〜１４程度、好ましくは１１〜１３程度である。
化合物[ＩＩＩ]と塩基とを反応させる方法としては、特に限定されないが、例えば化合物[ＩＩＩ]の溶液に上記した塩基を添加または滴下する方法が挙げられる。【００１４】
前記吸着剤としては、特に限定されず、公知の吸着剤を使用できるが、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジン溶液の溶媒として有機溶媒ではなく水を使用することができるものが好ましい。このような吸着剤としては、例えば、多孔性ポリスチレンおよびその誘導体、多孔性ポリエステルおよびその誘導体、多孔性ポリビニルアルコールおよびその誘導体などの高分子系吸着剤等が挙げられるが、特に好ましくは多孔性ポリスチレンおよびその誘導体の高分子系吸着剤である。多孔性ポリスチレンおよびその誘導体の高分子系吸着剤としては、セパビーズＳＰ２０７（三菱化学（株））、ダイヤイオンＨＰ２０ＳＳ（三菱化学（株））等の市販品が挙げられる。前記の吸着剤を採用することにより、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの溶媒として有機溶媒ではなく水を使用することができ、これにより操作の途中で溶媒中の化合物が結晶化するおそれがない。吸着剤の使用量は、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンに対して、通常２〜２００重量倍程度、好ましくは２０〜５０重量倍程度である。【００１５】
化合物[ＩＩＩ]と塩基との反応により得られた溶液と吸着剤とを接触させる方法（以下、吸着処理という）としては、特に限定されないが、例えば化合物[ＩＩＩ]と塩基との接触により得られた溶液中に吸着剤を添加する方法、または、前記溶液を、吸着剤を充填したカラム中あるいは吸着剤を担持させた塔の中を通過させる方法等の吸着処理が採用される。化合物[ＩＩＩ]と塩基との接触により得られた溶液は、化合物[ＩＩＩ]と塩基の反応生成物を水で抽出することによって得てもよく、また、化合物[ＩＩＩ]と塩基との反応を水中で行うことによって得られた溶液であってもよい。吸着処理により、非極性不純物を除くことができる。前記吸着処理後、溶媒を用いて溶出し、続いて必要に応じて塩析を行ったのち、再結晶を行う。溶媒としては、水、アルカリ水溶液、極性有機溶媒等が挙げられ、好ましくは水と極性有機溶媒の混合溶媒である。前記アルカリ水溶液としては、水酸化ナトリウムまたは水酸化カリウム等の水溶液等を挙げることができる。前記極性有機溶媒としては、アルコール溶媒（例えば、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等）、ケトン溶媒（例えば、アセトン、２−ブタノン、２−ペンタノン等）、エステル溶媒（例えば、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブチル等）、ニトリル化合物（例えば、アセトニトリル等）、アミド類化合物（例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）、エーテル溶媒（テトラヒドロフラン、ジイソプロピルエーテル等）、ジメチルスルホキシド等を挙げることができる。
吸着処理時間は、通常１〜２４時間程度、好ましくは５〜１５時間程度である。吸着処理時の温度は、通常０〜４５℃程度、好ましくは５〜２５℃程度である。吸着処理時のｐＨは、通常１〜１４程度、好ましくは３〜９程度である。【００１６】
前記塩析を行う場合、塩析は、吸着剤から溶出して得た溶液に、無機塩を加えることにより、実施できる。無機塩としては、水溶性の塩であれば特に限定されず、例えばアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩またはアンモニウム塩等が挙げられ、アルカリ金属塩としては、例えば塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化セシウム、炭酸カリウム、酢酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、硫酸カリウム等が挙げられ、アルカリ土類金属塩としては、塩化カルシウム、塩化ストロンチウム、硫酸マグネシウム、リン酸カルシウム等が挙げられ、アンモニウム塩としては、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム等が挙げられ、これらを１種または２種以上用いる。塩析により極性不純物を除くことができる。塩析は任意に行うことができ、塩析を行う場合、添加する無機塩の使用量は、反応溶液に対して、通常０．０１〜１重量倍程度、好ましくは０．２５〜０．３５重量倍程度である。塩析時のｐＨは、通常１〜９程度、好ましくは２〜４程度である。塩析時の温度は、通常−１０〜５０℃程度、好ましくは０〜３５℃程度である。【００１７】
再結晶は公知の方法を用いて行うことができ、特に限定はされないが、再結晶に用いる溶媒としては、アルコール溶媒（例えば、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール等）、ケトン溶媒（例えば、アセトン、２−ブタノン、２−ペンタノン等）、エステル溶媒（例えば、酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブチル等）、ニトリル化合物（例えば、アセトニトリル等）、アミド類化合物（例えば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等）、エーテル溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、ジイソプロピルエーテル等）、炭化水素系溶媒（例えば、ｎ−ペンタン、ｎ−ヘキサン、ｎ−ヘプタン、ｎ−オクタン、ベンゼン、トルエン、キシレン等）、ジメチルスルホキシド等を挙げることができる。
上記のようにして、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物を得る。【００１８】
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物と塩基との接触に用いる塩基としては、アルカリ金属水酸化物（例えば、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化セシウム、水酸化ルビジウム等）、アルカリ土類金属水酸化物（例えば、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化ストロンチウム、水酸化バリウム等）、アルカリ金属炭酸塩（例えば、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム等）、アルカリ土類金属炭酸塩（例えば、炭酸マグネシウム、炭酸カルシウム、炭酸バリウム等）、アルカリ金属炭酸水素塩（例えば、炭酸水素リチウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素セシウム等）、アルカリ土類金属炭酸水素塩（例えば、炭酸水素マグネシウム、炭酸水素カルシウム、炭酸水素バリウム等）、アルカリ金属アルコキシド（例えば、リチウムエトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムエトキシド、ナトリウムメトキシド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（ｔｅｒｔ−ブトキシナトリウム）等）等が挙げられ、好ましくは、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムまたは水酸化セシウムである。前記塩基は、単独で用いてもよいし、２種以上を混合して用いてもよい。２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物と塩基との接触に用いる塩基の使用量は、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物１モルに対して、通常０．３〜１．５モル程度、好ましくは０．８〜１．１モル程度である。【００１９】
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物と塩基との接触に用いる溶媒は、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が易溶性である溶媒（以下、易溶性の溶媒と略称する。）であり、例えば、水、メタノール等が挙げられる。前記溶媒は、単独で用いてもよいし、後述する２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒を含む２種以上を混合して用いてもよい。２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物と塩基との接触に用いる前記溶媒の使用量は、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物に対して、通常０．３〜３０重量倍程度、好ましくは０．５〜１０重量倍程度、さらに好ましくは１〜２重量倍程度である。２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物と塩基との接触時間は、通常１０秒〜１０分間程度、好ましくは１〜２分間程度である。２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物と塩基との接触時の温度は、通常１０〜６０℃程度（溶解しずらい場合は、少し加熱する）、好ましくは２０〜３０℃程度である。２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物と塩基との接触時のｐＨは、７〜１３程度、好ましくは１０〜１２程度である。
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物と塩基とを接触させる方法としては、特に限定されないが、例えば塩基の溶液に２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物を添加する方法が挙げられる。
上記のようにして、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液を得る。【００２０】
本発明に用いる２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒（以下、難溶性の溶媒と略称する。）としては、例えばメタノールを除くアルコール溶媒（例えば、エタノール、イソプロピルアルコール等）ケトン溶媒（例えば、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、シクロヘキサノン、シクロペンタノン等）、エーテル溶媒（例えば、１，２−ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジエチレングリコールジメチルエーテル、ジエチレングリコールジブチルエーテル、ジエチレングリコールジエチルエーテル等）、ニトリル化合物（例えば、アセトニトリル、グルタロジニトリル、メトキシアセトニトリル、プロピオニトリル、ベンゾニトリル等）等が挙げられ、好ましくはエタノールまたはアセトニトリルである。これらを１種または２種以上用いる。精製の効果は難溶性の溶媒と易溶性の溶媒の比率に大きく左右される。すなわち難溶性溶媒の比率が大きくなると、収率は向上するが純度は低下する。逆に難溶性溶媒の比率が小さくなると、収率は低下するが純度は向上する。また同比率の場合、溶媒量が少なくなると結晶を熟成させるときに攪拌が困難となり、収率が若干向上するものの純度が低下するため、前記難溶性の溶媒の使用量は、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンに対して、通常５〜２００重量倍程度、好ましくは２０〜１００重量倍程度、さらに好ましくは４０〜８０重量倍程度である。【００２１】
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液と前記難溶性の溶媒とを接触させる方法としては、特に限定されないが、例えば前記難溶性の溶媒に２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液を滴下し、懸濁する方法が挙げられる。【００２２】
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液に用いる水の使用量は、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩と水との重量比が、通常１：１〜１：５程度、好ましくは１：２〜１：４程度である。
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液と前記難溶性の溶媒との接触時間は、通常１分〜９０分間程度、好ましくは１０分〜４０分間程度である。接触処理は、２段階に分けることが好ましく、例えば前記難溶性の溶媒に２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液を滴下する場合、最初に、接触に用いる前記難溶性の溶媒の全量の約１／３量に、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液を滴下、懸濁して、得られた懸濁液を通常０．５〜１．５時間程度攪拌するのが好ましい。次に、残りの約２／３量の前記難溶性の溶媒を前記懸濁液に滴下して、さらに１〜２４時間程度攪拌するのが好ましい。懸濁液の攪拌状態が良くなり、純度もさらに向上するため、接触処理は２段階に分けて行うのが好ましい。２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液と前記難溶性の溶媒の接触時の温度は、通常−２０〜１００℃程度、好ましくは０〜３０℃程度である。２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩およびそのジアステレオマー塩基塩を含有する溶液と前記難溶性の溶媒の接触時のｐＨは、７〜１４程度、好ましくは１０〜１２程度である。【００２３】
上記の接触処理により２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩の結晶化は起こるが、該塩基塩結晶を熟成させるために、上記の接触処理により得られた懸濁液を冷却してもよい。また、必要に応じて、上記の接触処理に続いて、前記塩基塩を公知の方法（例えば、濾過等）により回収したのち、得られた該塩基塩と酸とを接触させてフリー体（塩を形成していない化合物）として結晶化させてもよく、カラム精製、再結晶等を行ってもよい。前記した酸としては、特に限定されず、例えば塩酸等を用いることができる。
結晶の熟成時間は特に限定されず、１〜２４時間程度が好ましい。懸濁液の冷却温度は−１０〜４０℃程度、好ましくは０〜３０℃程度まで冷却したほうがよい。上記冷却時または冷却後には、溶液を撹拌してもよい。冷却後に溶液を撹拌する場合には、撹拌時間は特に限定されず、例えば、１〜１００時間程度である。
結晶の取出し方法については、それ自体公知の方法（例えば、濾過、洗浄、乾燥等）を行なうことで得ることができる。これら一連の操作は、常圧、減圧、加圧あるいは空気中、不活性ガス中いずれの場合においても実施可能である。【００２４】
本発明の精製方法の第二の態様としては、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒の存在下に、下記式［Ｉ］：
【化１３】
0005485138.tif 000014
で示される２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液と塩基とを接触させ、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩の結晶を晶析させる方法が挙げられる。【００２５】
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液は、前記の２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩が難溶性である溶媒（以下、難溶性の溶媒と略称する。）または前記易溶性溶媒（例えば、水、エタノール等）に２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物を加えることにより得ることができる。前記難溶性あるいは易溶性溶媒は、単独で用いてもよいし、２種以上を混合して用いてもよい。また、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液は、前記ジアステレオマー以外の不純物を含んでいてもよい。【００２６】
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液と接触させる塩基としては、アルカリ金属水酸化物（例えば、水酸化リチウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化セシウム、水酸化ルビジウム等）、アルカリ土類金属水酸化物（例えば、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化ストロンチウム、水酸化バリウム等）、アルカリ金属炭酸塩（例えば、炭酸リチウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム等）、アルカリ土類金属炭酸塩（例えば、炭酸マグネシウム、炭酸カルシウム、炭酸バリウム等）、アルカリ金属炭酸水素塩（例えば、炭酸水素リチウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸水素セシウム等）、アルカリ土類金属炭酸水素塩（例えば、炭酸水素マグネシウム、炭酸水素カルシウム、炭酸水素バリウム等）、アルカリ金属アルコキシド（例えば、リチウムエトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムエトキシド、ナトリウムメトキシド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド、ナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシド等）等が挙げられ、好ましくは、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムまたは水酸化セシウムである。前記塩基は、単独で用いてもよいし、２種以上を混合して用いてもよい。塩基の使用量は、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジン１モルに対して、通常０．５〜２モル程度、好ましくは０．８〜１．２モル程度である。【００２７】
前記難溶性の溶媒の存在下に、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液と塩基とを接触させる方法としては、特に限定されないが、例えば前記難溶性の溶媒の存在下に、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液中に、塩基を添加または滴下する方法が挙げられる。具体的には、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液中に、塩基をそのままもしくは塩基が溶解する溶媒（例えば水、易溶性または前記難溶性の溶媒等）に溶解して、添加もしくは滴下する方法が挙げられる。【００２８】
水および前記難溶性あるいは易溶性溶媒に、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物を溶解して２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液を得た場合、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液に用いる２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物と水との重量比は、通常１：１〜１：５程度、好ましくは１：２〜１：４程度である。
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液と塩基の接触時間は、通常１〜１２０分間程度、好ましくは５〜３０分間程度である。２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液と塩基の接触時の温度は、通常−１０〜１００℃程度、好ましくは０〜３０℃程度である。２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンおよびそのジアステレオマーを含有する溶液と塩基の接触時のｐＨは、通常７〜１４程度、好ましくは１０〜１２程度である。【００２９】
上記の接触処理により、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの塩基塩の結晶化は起こるが、該塩基塩結晶を熟成させるために、上記の接触処理により得られた懸濁液を冷却してもよい。また、必要に応じて、上記の接触処理に続いて、前記塩基塩を公知の方法（例えば、濾過等）により回収したのち、得られた該塩基塩と酸とを接触させてフリー体として結晶化させてもよく、カラム精製、再結晶等を行ってもよい。前記した酸としては、特に限定されず、例えば塩酸等を用いることができる。
結晶の熟成時間は特に限定されず、１〜２４時間程度が好ましい。懸濁液の冷却温度は−１０〜４０℃程度、好ましくは０〜３０℃程度まで冷却したほうがよい。上記冷却時または冷却後には、溶液を撹拌してもよい。冷却後に溶液を撹拌する場合には、撹拌時間は特に限定されず、例えば、１〜１００時間程度である。
【実施例】
【００３０】
以下に実施例を用いて本発明を説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。なお、％は特に指定しない限り、重量％を意味する。【００３１】
［製造例］
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの製造
特許文献１の記載に基づいて、下記式[ＩＩ]：
【化１４】
0005485138.tif 000015
（式中、Ｍｓはメシル基（メタンスルホニル基）を意味し、ＴＢＤＰＳはｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基を意味する。）
で示される５’−Ｏ−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル）−３’−Ｏ−メシル−４’−エチニルチミジン（以下、化合物[ＩＩ]という。）を製造した。得られた該化合物[ＩＩ]（１７．３ｋｇ，４１．２ｍｏｌ）をアセトニトリル（ＣＨ３ＣＮ）８７Ｌおよびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）８．７Ｌに溶解させたのち、室温にて、ｔｅｒｔ−ブトキシナトリウム７．９ｋｇ（８２．２ｍｏｌ，２．００ｅｑ）を添加した。次いで、攪拌し、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）にて反応の進行を確認しながらｔｅｒｔ−ブトキシナトリウム２．０ｋｇ（２０．８ｍｏｌ、０．５００ｅｑ）を６回追加した。ｔｅｒｔ−ブトキシナトリウムの６回目の追加から３０分間攪拌した後、得られた溶液にメタノール５４Ｌおよび水酸化ナトリウム（粒状）１４．０ｋｇを蒸留水３５Ｌに溶解した溶液を添加し、反応１時間後から適宜サンプリングし、１３時間後に反応の終了をＨＰＬＣにて確認したのち、６Ｎ塩酸を適量加え、ｐＨ７とした。次いで、減圧濃縮し、水酸化ナトリウム（粒状）１．０３ｋｇを蒸留水２６Ｌに溶解した１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液およびトルエン７６Ｌを添加し、攪拌後同温にて分液した。目的物は水層（水層Ａとする）に存在するため有機層は廃棄した。
＜カラム精製＞
セパビーズＳＰ２０７（製品名；三菱化学（株）製；以下、ＳＰ２０７という。）１０３．８ｋｇを蒸留水１０４Ｌに懸濁させてカラムに充填した。続いてメタノール６５７ＬをＳＶ（Space Velocity：空間速度）＝１〜２で通液し、蒸留水６５７Ｌでカラム中のメタノールを洗い流した。室温にて前記水層Ａにカラムより取り出したＳＰ２０７  １７．３ｋｇを添加した。攪拌しながら白塩酸１１．２ｋｇを蒸留水１０Ｌに溶解した６ｍｏｌ／Ｌ塩酸水溶液を適量加えてｐＨ７とした。得られた溶液およびＳＰ２０７をカラムに供し、ＳＶ＝１〜２で通液した。蒸留水３６３ＬをＳＶ＝１〜２で通液後、蒸留水５９５Ｌとアセトニトリル１４９Ｌを混合した２０％アセトニトリル水溶液７４４ＬをＳＶ＝１〜２で通液し、１フラクション４２Ｌずつ計１８フラクション採取した。フラクション１０〜１４を合わせ、フラクションの混合液を約１５０Ｌまで減圧濃縮し、濃縮液を得た。【００３２】
＜塩析＞
前記濃縮液に室温にて１Ｎ塩酸を適量加え、ｐＨ２．５〜３．５とした。食塩４３．６ｋｇ（０．３３ｗ／ｖ  ｖｓ液量）を加え、同温にて２時間攪拌した。析出した湿晶をろ過し、食塩７．９ｋｇを蒸留水２４Ｌに溶解した食塩水で洗浄し湿晶を得た。
＜再結晶＞
得られた湿晶を酢酸エチル１００Ｌに懸濁させ、さらに蒸留水１００Ｌを添加し撹拌して結晶を溶解した。室温にて、食塩３３．３ｋｇを添加し撹拌して溶解した。得られた溶液を分液し、水層をさらに酢酸エチル１００Ｌで２回抽出した。有機層を合わせて硫酸マグネシウム（無水）５．８ｋｇを添加し、同温で１時間以上攪拌した。硫酸マグネシウムをろ過し、酢酸エチル５０Ｌで洗浄した後、１００Ｌ以下まで減圧濃縮し、エタノール１００Ｌを加えた。さらに、１００Ｌ以下まで減圧濃縮し、エタノール１００Ｌを加えた（２回繰り返した）。減圧濃縮し、液量を５０Ｌとした。室温まで冷却し、１時間攪拌した。窒素雰囲気下でヘプタン５００Ｌを３０分かけて滴下した。６５℃程度まで加温し、１時間攪拌した。室温まで冷却し、９０分撹拌した。結晶を遠心分離し、ｎ−ヘプタン２５Ｌで洗浄した。湿晶を取り出し、外温５０℃で２０時間減圧乾燥して２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物３．１６ｋｇを得た（収率４２．９％  ｖｓ  化合物[ＩＩ]重量）。【００３３】
［実施例１］
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのナトリウム塩の精製
製造例で得た２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの粗生成物（以下、精製前ＴＫＤとも略称する。）２．５０ｇを１．５Ｎ  ＮａＯＨ６．７ｍｌに溶解し（ｐＨ＝１１．６８）、アセトニトリル（ＣＨ３ＣＮ）５０ｍｌ中に１０分間かけて滴下した。得られた懸濁液を３０分間攪拌後、前記懸濁液にアセトニトリル７５ｍｌを１０分間かけて滴下した。続いて、得られた懸濁液を４時間攪拌後、アセトニトリル２５ｍｌを１０分間かけて滴下した。さらに１８時間攪拌後、懸濁液を１０℃以下まで冷却し、４時間攪拌したのち、ろ過して（２．３℃）、アセトニトリル２０ｍｌで洗浄した。２日間自然乾燥して淡褐色粉末結晶２．６９ｇを得た（母洗液の定量値は０．１１６ｇ）。融点２００−２０７℃（ｄｅｃｏｍｐ．）。得られた表題化合物の純度は９９．１２％であった。結果を表１に示す。
表１中、ＲＲＴ（Ratio of retention time）はＨＰＬＣ上での相対保持時間（単位：分）を意味し、ukは、構造未知の不純物を意味する。【００３４】
（物性データ）
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのナトリウム塩：
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．６４（ｄ，３Ｈ），３．５５（ｓ，１Ｈ），３．５６  ａｎｄ  ３．６４（ＡＢｑ，  ２Ｈ），５．４８（ｂｒ，１Ｈ），５．９５（ｄｄ，１Ｈ），６．２３（ｄｄ，１Ｈ），７．０２（ｄｄ，１Ｈ），７．２０（ｄ，１Ｈ）
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１  ３２７６，  ２９１９，  １７０１，  １６６３，  １６０７，  １５３３，  １４６９，  １３７８，  １３５４，  １３０６，  １２４０，  １１１５，  １０６８，  ９７８，  ８８８，  ８３５，  ７８６，  ７３０，  ６６８，  ５９９，  ５５１，  ５２０，  ４９２，  ４８４，  ４５５，  ４４９，  ４１８．【００３５】
【表１】
0005485138.tif 000016
【００３６】
［実施例２］
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンの精製
製造例で得た精製前ＴＫＤ５．００ｇを１．５Ｎ  ＮａＯＨ  １３．４ｍｌに溶解し（ｐＨ＝１１．７３）、アセトニトリル（ＣＨ３ＣＮ）１００ｍｌ中に１０分間かけて滴下した。３時間攪拌後、アセトニトリル２００ｍｌを２０分間かけて滴下した。１６時間攪拌後、結晶をろ過してアセトニトリル１５ｍｌで洗浄した。湿晶５．６５ｇを得たのち、該湿晶に蒸留水を加えて全量５０ｍｌとした。この溶液をＨＰＬＣで定量したところ、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジン４．３９ｇであった（母洗液の定量値は０．２７９ｇ）。
＜カラム精製＞
得られた２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンナトリウム水溶液２５ｍｌに適当量の６Ｎ  ＨＣｌを加えてｐＨ６．５とした（結晶が析出した）。得られた溶液の上澄みを、ダイヤイオンＨＰ２０ＳＳ（製品名；三菱化学（株）製；以下、ＨＰ２０ＳＳという。）５０ｇ（蒸留水に懸濁させ、カラムに詰めてメタノール３００ｍｌ、蒸留水３００ｍｌの順に流した）を詰めたカラムに供した。上澄みを使用して残った結晶に蒸留水５０ｍｌを加えて加熱溶解し、カラムに供した。蒸留水１５０ｍｌをカラムに通液し、次に１０％アセトニトリル６５０ｍｌをカラムに通液し、１フラクション５０ｍｌずつ採取した。フラクション３〜１３を混合し、３５５ｍｌまで濃縮し、濃縮液を得た。
＜再結晶＞
前記濃縮液に食塩１１７ｇを加えて溶解した。得られた懸濁液に酢酸エチル１５０ｍｌを添加して抽出を行い、有機層を分取した（４回繰り返した）。得られた有機層を合わせて、硫酸マグネシウム１０ｇを添加し、攪拌した。硫酸マグネシウムをろ過し、酢酸エチル２０ｍｌで洗浄した。５０ｍｌ以下まで濃縮し、エタノール５０ｍｌを添加した（３回繰り返した）。濃縮して２５ｍｌにし、１時間攪拌した。ヘプタン２５０ｍｌを２０分間かけて滴下し、６５℃程度まで加熱した。１時間攪拌後、室温まで冷却し、１時間攪拌した。結晶をろ過してヘプタン１２．５ｍｌで洗浄し、４時間真空乾燥して表題化合物の白色粉末結晶２．０４５ｇ（回収率８１．８％  ｖｓ  精製前ＴＫＤ重量）を得た。再結晶後の表題化合物の純度は９９．８５％であった。結果を表２に示す。【００３７】
【表２】
0005485138.tif 000017
表中、ＲＲＴおよびｕｋは前記と同一意味を有する。
上記の結果から、ジアステレオマーが高効率に除去されていることが確認された。【００３８】
［実施例３］
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのナトリウム塩の精製
製造例で得た精製前ＴＫＤ１．００ｇを３．０Ｎ  ＮａＯＨ１．３４ｍｌおよびアセトニトリル１ｍｌの混合液に溶解した。得られた溶液を１分間かけてアセトニトリル９ｍｌ中に滴下した。室温で１０分間攪拌後、蒸留水０．３ｍｌを添加した。３５分間攪拌後、４分間かけてアセトニトリル２０ｍｌを添加した。１７時間攪拌後、結晶をろ過して、アセトニトリル５ｍｌで洗浄した。得られた湿晶に蒸留水を加えて全量５０ｍｌとした（不溶物が少しあり）。この水溶液の２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジン含量を定量したところ７４４ｍｇであった（母洗液の定量値は１１１ｍｇ）。得られた表題化合物の純度は９９．１８％であった。結果を表３に示す。【００３９】
【表３】
0005485138.tif 000018
表中、ＲＲＴおよびｕｋは前記と同一意味を有する。【００４０】
［実施例４］
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのナトリウム塩の精製
製造例で得た精製前ＴＫＤ  １．００ｇを３．０Ｎ  ＮａＯＨ１．３４ｍｌおよびアセトニトリル１ｍｌの混合液に溶解した。得られた溶液を６分間かけて、６０℃程度に加熱したアセトニトリル９ｍｌ中に滴下した。得られた懸濁液を同温にて１時間攪拌した後、前記溶液に６０℃程度にて３０分間かけてアセトニトリル２０ｍｌを添加した。さらに、同温にて前記溶液を７０分間攪拌後、３０℃以下まで冷却して１６時間攪拌した。結晶をろ過して、アセトニトリル５ｍｌで洗浄した。得られた湿晶に蒸留水を加えて全量５０ｍｌとした（不溶物が少しあり）。この水溶液の２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジン含量を定量したところ８３５ｍｇであった（母洗液の定量値は８４．５ｍｇ）。得られた表題化合物の純度は９８．８９％であった。結果を表４に示す。【００４１】
【表４】
0005485138.tif 000019
表中、ＲＲＴおよびｕｋは前記と同一意味を有する。【００４２】
［実施例５］
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのナトリウム塩の精製
前記実施例の手法に従って得られる母洗液にはジアステレオマーが多く含まれるため、該母洗液を回収し、晶析を繰り返してジアステレオマー比の高い精製前ＴＫＤを得た。得られたジアステレオマー比の高い精製前ＴＫＤ１．８０ｇを３．０Ｎ  ＮａＯＨ２．４ｍｌおよび蒸留水２．４ｍｌの溶液に溶解した。得られた溶液をアセトニトリル３６ｍｌ中に滴下し、加熱して溶解し、さらにアセトニトリル３６ｍｌを加えて結晶を析出させた後、７５℃付近にて２０分間加熱し、放冷した。得られた懸濁液を室温で１時間攪拌後、結晶をろ過してアセトニトリル１０ｍｌで洗浄した。４日間自然乾燥して白色粉末結晶１．７４ｇを得た。上記精製操作をさらにもういちど繰り返した。この２回の精製を行った後に得られた表題化合物の純度は９９．７４％であった。結果を表５に示す。【００４３】
【表５】
0005485138.tif 000020
表中、ＲＲＴおよびｕｋは前記と同一意味を有し、Ｎ．Ｄ．は検出不可を意味する。【００４４】
［実施例６］
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのナトリウム塩の精製
製造例で得た精製前ＴＫＤ１．０５ｇを３．０Ｎ  ＮａＯＨ１．４ｍｌおよび蒸留水１．４ｍｌの溶液に溶解した。得られた溶液を室温にてアセトニトリル２１ｍｌ中に滴下し、１．５時間攪拌後、さらにアセトニトリル２１ｍｌを加えた。結晶の析出した懸濁液を５時間攪拌後、ろ過してアセトニトリル１０ｍｌで洗浄した。４日間自然乾燥して白色粉末結晶９６９ｍｇを得た。得られた表題化合物の純度は９９．８８％であった。結果を表６に示す。【００４５】
【表６】
0005485138.tif 000021
表中、ＲＲＴ、ｕｋおよびＮ．Ｄ．は前記と同一意味を有する。【００４６】
［実施例７］
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのカリウム塩の精製
エタノール５０ｍｌに製造例で得た精製前ＴＫＤ２．４８ｇを添加し、約７０℃まで加熱して溶解した。得られた溶液に５０．８℃にて１Ｍ  水酸化カリウム／エタノール１０ｍｌを添加し、室温まで冷却した（４５℃くらいで結晶が析出）。結晶の析出した懸濁液を３０℃以下まで冷却してから約１時間攪拌した。ろ過して適量のエタノールで洗浄し、自然乾燥して白色粉末結晶１．４９ｇを得た。融点  １９２−１９８℃（ｄｅｃｏｍｐ．）。得られた表題化合物の純度は９８．０９％であった。結果を表７に示す。【００４７】
（物性データ）
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのカリウム塩：
１Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．６３（ｄ，３Ｈ），３．５５（ｓ，１Ｈ），３．５６  ａｎｄ  ３．６５（ＡＢｑ，  ２Ｈ），５．９４（ｄｄ，１Ｈ），６．２４（ｄｄ，１Ｈ），６．９８（ｄｄ，１Ｈ），７．２２（ｄ，１Ｈ）
ＩＲ（ＫＢｒ）ｃｍ−１  ３２７８，  ２９１９，  ２８５４，  １６６３，  １６０８，  １５０９，  １４６８，  １３７８，  １３５２，  １３０１，  １２３７，  １１１２，  １０６９，  １０１５，  ９７６，  ８８８，  ８３５，  ７８７，  ７５９，  ７２９，  ６６８，  ５９６，  ５０１，  ４６２，  ４５７，  ４１６．【００４８】
【表７】
0005485138.tif 000022
表中、ＲＲＴおよびｕｋは前記と同一意味を有する。【００４９】
［実施例８］
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのカリウム塩の精製
アセトニトリル２５ｍｌに製造例で得た精製前ＴＫＤ１．２４ｇを添加し、約７０℃まで加熱して溶解した。得られた溶液に約４５℃にて１Ｍ  水酸化カリウム／エタノール５ｍｌを添加し（滴下してすぐに結晶が析出）、室温まで冷却した。この懸濁液を室温まで冷却してから約３０分間攪拌し、ろ過して適量のアセトニトリルで洗浄し、自然乾燥して白色粉末結晶１．３５ｇを得た。得られた表題化合物の純度は９８．５６％であった。結果を表８に示す。【００５０】
【表８】
0005485138.tif 000023
表中、ＲＲＴおよびｕｋは前記と同一意味を有する。【００５１】
［実施例９］
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのカリウム塩の精製
製造例で得た精製前ＴＫＤ２．５０ｇをアセトニトリル２５０ｍｌに添加し、約７０℃まで加熱して溶解させたのち、水酸化カリウム５３５ｍｇ／メタノール１５ｍｌを６分間かけて滴下した。結晶の析出した懸濁液を約６５℃で約１時間攪拌したのち、２５℃程度まで冷却し、約１時間攪拌した。前記懸濁液をろ過して、アセトニトリル２０ｍｌで洗浄し、１５時間自然乾燥して淡褐色粉末結晶２．４４ｇを得た。結果を表９に示す。【００５２】
【表９】
0005485138.tif 000024
表中、ＲＲＴおよびｕｋは前記と同一意味を有する。【００５３】
［実施例１０］
２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンのセシウム塩の精製
製造例で得た精製前ＴＫＤ１．００ｇをアセトニトリル３０ｍｌに溶解し、得られた溶液にＣｓＯＨ６０４ｍｇ／メタノール３ｍｌを滴下した。１時間攪拌後、結晶をろ過し、適量のアセトニトリルで洗浄し、自然乾燥して淡褐色粉末結晶９１５ｍｇを得た。得られた表題化合物の純度は９９．６７％であった。結果を表１０に示す。【００５４】
【表１０】
0005485138.tif 000025
表中、ＲＲＴ、ｕｋおよびＮ．Ｄ．は前記と同一意味を有する。【００５５】
［参考例１］
製造例で得た精製前ＴＫＤ１．００ｇに蒸留水２５ｍｌを加えて加熱溶解し、食塩８．２５ｇを加えた（すぐに結晶が析出）。室温まで放冷し、３時間攪拌した。結晶をろ過して食塩１．６５ｇ／蒸留水５ｍｌで洗浄した。１８時間自然乾燥して淡褐色粉末結晶９２０ｍｇを得た。結果を表１１に示す。【００５６】
【表１１】
0005485138.tif 000026
【００５７】
表中、ＲＲＴおよびｕｋは前記と同一意味を有する。
上記の結果から、本発明の精製方法を用いずに、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンを塩を形成させることなく通常の再結晶法で精製した場合にはジアステレオマーの除去効果はほとんどないことがわかった。【００５８】
［参考例２］
製造例で得た精製前ＴＫＤ１．００ｇに酢酸エチル３０ｍｌを加えて５６．２℃まで加熱し（完全に溶解せず、ごく少量の溶け残りがある）、３３分間かけてトルエン１２０ｍｌを滴下した。滴下終了後、３０℃以下まで冷却し、結晶をろ過した。ヘプタン１０ｍｌで洗浄し、５０℃で１０時間真空乾燥して淡褐色粉末結晶７９４ｍｇを得た。結果を表１２に示す。【００５９】
【表１２】
0005485138.tif 000027
【００６０】
［参考例３］
製造例で得た精製前ＴＫＤ２．００ｇにエタノール２０ｍｌを加え、６７℃まで加熱して結晶を溶解し、成り行き室温で冷却した（約４０℃で結晶が析出）。２２℃で４５分間かけてヘプタン２００ｍｌを滴下し、６０〜７０℃まで加熱して１時間攪拌した。３０℃以下まで冷却し、９０分間攪拌し、結晶をろ過した。ヘプタン１０ｍｌで洗浄し、４５℃で１４時間真空乾燥して淡褐色粉末結晶１．８４８ｇを得た。結果を表１３に示す。【００６１】
【表１３】
0005485138.tif 000028
【００６２】
上記結果より、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンは塩基塩とせず、通常の再結晶法で結晶化させた場合にはジアステレオマーの除去効果はほとんどないことが確認された。【００６３】
以上の結果から、本発明の精製方法によれば、２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩を効率的に精製できることが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００６４】
本発明によれば、医薬として有用な２’，３’−ジデヒドロ−３’−デオキシ−４’−エチニルチミジンまたはその塩基塩を効率的にかつ工業的有利に精製する方法を提供することができる。