(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラクト−Ｎ−ビオースを溶媒に溶解してＬＮＢ溶液を調製する工程と、該ＬＮＢ溶液を６５℃以上の温度で加熱処理する工程を有する、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース溶液の製造方法であって、
前記ＬＮＢ溶液を調製する工程が、
ラクト−Ｎ−ビオースを溶解させる前の溶媒に酸を添加して２５℃におけるｐＨを２．０以上５．５以下に調整した後に、該溶媒にラクト−Ｎ−ビオースを溶解してＬＮＢ溶液を調製する工程、又は、
溶媒にラクト−Ｎ−ビオースを溶解させた後の溶液に、該溶液の２５℃におけるｐＨが２．０以上５．５以下となるように酸を添加してＬＮＢ溶液を調製する工程である、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース溶液の製造方法。
【請求項２】
請求項１に記載の製造方法で、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース溶液を製造する工程と、
該工程により得られた溶液と、食品、医薬品、化粧品及び飼料からなる群から選択されるいずれかの製品とを配合する工程を有する、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース含有製品の製造方法。
【請求項３】
請求項１に記載の製造方法で、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース溶液を製造する工程と、
該工程により得られた溶液を乾燥する工程を有する、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオースを含有する乾燥物の製造方法。
【請求項４】
請求項３に記載の製造方法で、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオースを含有する乾燥物を製造する工程と、
該工程により得られた乾燥物と、食品、医薬品、化粧品及び飼料からなる群から選択されるいずれかの製品とを配合する工程を有する、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース含有製品の製造方法。
【請求項５】
液状の食品、液状の医薬品、液状の化粧品及び液状の飼料からなる群から選択されるいずれかの液状製品に、ラクト−Ｎ−ビオースを含有させてＬＮＢ添加液状製品を調製する工程と、該ＬＮＢ添加液状製品を６５℃以上の温度で加熱処理する工程を有する、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース含有製品の製造方法であって、
前記ＬＮＢ添加液状製品を調製する工程が、
ラクト−Ｎ−ビオースを含有させる前の液状製品に酸を添加して２５℃におけるｐＨを２．０以上５．５以下に調整した後に、該液状製品にラクト−Ｎ−ビオースを含有させてＬＮＢ添加液状製品を調製する工程、又は、
ラクト−Ｎ−ビオースを含有させた後の液状製品に、該液状製品の２５℃におけるｐＨが２．０以上５．５以下となるように酸を添加してＬＮＢ添加液状製品を調製する工程である、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース含有製品の製造方法。
【請求項６】
液状の食品、液状の医薬品、液状の化粧品及び液状の飼料からなる群から選択されるいずれかの液状製品であって、ラクト−Ｎ−ビオースを含有する天然ＬＮＢ含有液状製品に、酸を添加して該天然ＬＮＢ含有液状製品の２５℃におけるｐＨを２．０以上５．５以下に調整した後に、６５℃以上の温度で加熱処理する工程を有する、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース含有製品の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ラクト−Ｎ−ビオース含有液の処理方法、前記処理方法にて処理されたラクト−Ｎ−ビオース含有液およびその乾燥物、ならびにラクト−Ｎ−ビオース含有製品の製造方法に関する。
本願は、２０１０年２月５日に日本に出願された、特願２０１０−０２４４３６号に基づき優先権を主張し、その内容をここに援用する。
【背景技術】
【０００２】
ラクト−Ｎ−ビオースは、ガラクトースとＮ−アセチルグルコサミンとがβ１，３−結合した二糖（Ｇａｌβ１，３ＧｌｃＮＡｃ、以下ＬＮＢと略す。）であり、母乳に含まれるオリゴ糖（ミルクオリゴ糖）を構成する二糖の１つとして知られている。
これまで、ＬＮＢの製造方法としては、微生物や酵素を用いる方法が提案されている（たとえば特許文献１〜３）。
最近、ＬＮＢについて、ビフィズス菌増殖促進作用などの機能性を有することが報告されている（たとえば特許文献４）。また、整腸作用や免疫調節作用など、健康増進と維持に有効な種々の働きが期待されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開平６−２５３８７８号公報
【特許文献２】特開２００３−１８９８９１号公報
【特許文献３】特開２００８−１５４４９５号公報
【特許文献４】特開２００８−２９０９７２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
そこで、今後、ＬＮＢを食品、医薬品、化粧品、および飼料等の種々の製品に配合することが考えられる。
それらの製品にＬＮＢを配合する場合、配合前のＬＮＢ、またはＬＮＢを配合した製品に対し、殺菌等の目的で、６５℃以上の温度で加熱処理を行うことが必要となる。
しかしながら、本発明者らの検討によれば、ＬＮＢを含有する液体に対してそのような加熱処理を行うと、前記液体中のＬＮＢが分解し、変性、および生理活性の失活等の問題が生じることがある。そのため、製造工程中に加熱処理を含む製品の場合、製造時に充分な加熱処理を実施できないことが予想される。
本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであって、ＬＮＢ含有液を６５℃以上の温度で加熱処理する際のＬＮＢの熱分解を抑制できる処理方法、前記処理方法にて処理されたＬＮＢ含有液およびその乾燥物、ならびにＬＮＢ含有製品の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者は、鋭意検討を行った結果、ＬＮＢ含有液を６５℃以上の温度で加熱すると、Ｎ−アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）の脱水物とガラクトース（Ｇａｌ）とが分解変性産物として生成することを見出した。かかる知見に基づき、これら分解変性産物を指標として前記熱分解反応についてさらなる検討を行った結果、ＬＮＢ含有液中のＬＮＢは、中性ないしアルカリ条件下において熱安定性が低く、熱分解反応が大きく進行すること、一方、ｐＨ５．５以下２．０以上の範囲内であれば前記熱分解反応の進行が抑制されることを見出し、本発明を完成させた。
上記課題を解決する本発明は以下の態様を有する。
［１］ラクト−Ｎ−ビオースを溶媒に溶解してＬＮＢ溶液を調製する工程と、該ＬＮＢ溶液を６５℃以上の温度で加熱処理する工程を有する、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース溶液の製造方法であって、前記ＬＮＢ溶液を調製する工程が、ラクト−Ｎ−ビオースを溶解させる前の溶媒に酸を添加して２５℃におけるｐＨを２．０以上５．５以下に調整した後に、該溶媒にラクト−Ｎ−ビオースを溶解してＬＮＢ溶液を調製する工程、又は、
溶媒にラクト−Ｎ−ビオースを溶解させた後の溶液に、該溶液の２５℃におけるｐＨが２．０以上５．５以下となるように酸を添加してＬＮＢ溶液を調製する工程である、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース溶液の製造方法。
［２］  ［１］に記載の製造方法で、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース溶液を製造する工程と、該工程により得られた溶液と、食品、医薬品、化粧品及び飼料からなる群から選択されるいずれかの製品とを配合する工程を有する、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース含有製品の製造方法。
［３］  ［１］に記載の製造方法で、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース溶液を製造する工程と、該工程により得られた溶液を乾燥する工程を有する、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオースを含有する乾燥物の製造方法。
［４］  ［３］に記載の製造方法で、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオースを含有する乾燥物を製造する工程と、該工程により得られた乾燥物と、食品、医薬品、化粧品及び飼料からなる群から選択されるいずれかの製品とを配合する工程を有する、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース含有製品の製造方法。
［５］  液状の食品、液状の医薬品、液状の化粧品及び液状の飼料からなる群から選択されるいずれかの液状製品に、ラクト−Ｎ−ビオースを含有させてＬＮＢ添加液状製品を調製する工程と、該ＬＮＢ添加液状製品を６５℃以上の温度で加熱処理する工程を有する、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース含有製品の製造方法であって、前記ＬＮＢ添加液状製品を調製する工程が、ラクト−Ｎ−ビオースを含有させる前の液状製品に酸を添加して２５℃におけるｐＨを２．０以上５．５以下に調整した後に、該液状製品にラクト−Ｎ−ビオースを含有させてＬＮＢ添加液状製品を調製する工程、又は、ラクト−Ｎ−ビオースを含有させた後の液状製品に、該液状製品の２５℃におけるｐＨが２．０以上５．５以下となるように酸を添加してＬＮＢ添加液状製品を調製する工程である、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース含有製品の製造方法。
［６］  液状の食品、液状の医薬品、液状の化粧品及び液状の飼料からなる群から選択されるいずれかの液状製品であって、ラクト−Ｎ−ビオースを含有する天然ＬＮＢ含有液状製品に、酸を添加して該天然ＬＮＢ含有液状製品の２５℃におけるｐＨを２．０以上５．５以下に調整した後に、６５℃以上の温度で加熱処理する工程を有する、加熱処理されたラクト−Ｎ−ビオース含有製品の製造方法。
以下は参考の態様である。
＜１＞２５℃におけるｐＨが２．０以上５．５以下のＬＮＢ含有液を調製すること、および、前記含有液を６５℃以上の温度で加熱処理を行うことを含む、ＬＮＢ含有液の処理方法。
＜２＞前記ＬＮＢ含有液が、液状の食品、医薬品、化粧品または飼料である、＜１＞に記載の処理方法。
＜３＞＜１＞または＜２＞に記載の処理方法にて処理されたＬＮＢ含有液。
＜４＞＜１＞または＜２＞に記載の処理方法にて処理されたＬＮＢ含有液の乾燥物。
＜５＞＜１＞または＜２＞に記載の処理方法にて処理されたＬＮＢ含有液またはその乾燥物を、食品、医薬品、化粧品または飼料に配合することを含む、ＬＮＢ含有製品の製造方法。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によれば、ＬＮＢ含有液を６５℃以上の温度で加熱処理する際のＬＮＢの熱分解を抑制できる処理方法、前記処理方法にて処理されたＬＮＢ含有液およびその乾燥物、ならびにＬＮＢ含有製品の製造方法を提供できる。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】試験例１の結果（異なったｐＨのＬＮＢ含有液において、９０℃で６０分間加熱処理した後のＴＬＣ検出パターン）を示す写真である。
【図２】試験例２の結果（ｐＨ７．０のＬＮＢ含有液において、異なった温度及び時間による加熱処理した後のＴＬＣ検出パターン）を示す写真である。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
本発明の処理方法では、まず、２５℃におけるｐＨが２．０以上５．５以下のＬＮＢ含有液を調製する。前記ｐＨは、２．０以上５．０以下が好ましく、２．０以上４．５以下がより好ましい。ＬＮＢ含有液のｐＨが５．５超２．０未満の範囲であると、次工程にて６５℃以上の温度で加熱処理した際、ＬＮＢの分解が生じやすく、特にｐＨ７．０を超える範囲ではＬＮＢが完全に分解する傾向がある。ｐＨ２．０未満の領域では、熱による分解のほか、酸による分解も生じていると考えられる。ＬＮＢ含有液のｐＨが２．０以上５．０以下の範囲であると、次工程にて６５℃以上の温度で加熱処理した際、ＬＮＢの分解が生じにくい。
【０００９】
本発明における「２５℃におけるｐＨが２．０以上５．５以下のＬＮＢ含有液」とは、２５℃の温度を基準とした時の、ＬＮＢ含有液のｐＨが前記範囲内であることを意味する。すなわち、前記ＬＮＢ含有液が２５℃以外の温度に調製される場合は、かかる温度に応じて前記ｐＨの範囲は補正される。このように補正されたｐＨの範囲のＬＮＢ含有液を調製することも、本発明の範囲に含まれる。
換言すれば、仮にある温度におけるｐＨが２．０以上５．５以下の範囲でなくとも、２５℃を基準としたときに、ｐＨが２．０以上５．５以下の範囲に補正されるＬＮＢ含有液を調製することは、本発明の範囲に含まれる。
例えば、６５℃におけるｐＨが１．９０のＬＮＢ含有液は、２５℃を基準として補正するとｐＨ２．０１であるので、かかるＬＮＢ含有液を調製した後、次工程にて６５℃以上の温度で加熱処理することは、本発明の範囲に含まれる。
ＬＮＢ含有液としては、ＬＮＢを水等の溶媒に溶解した溶液（以下、ＬＮＢ溶液という。）、ＬＮＢまたはＬＮＢ溶液を液状製品（液状の食品、医薬品、化粧品又は飼料等）に加えたもの（以下、ＬＮＢ添加液状製品という。）、および本来の成分としてＬＮＢを含む液状製品（液状の食品、医薬品、化粧品又は飼料等。以下、天然ＬＮＢ含有液状製品という。）等が挙げられ、いずれを用いてもよい。
【００１０】
ｐＨ２．０以上５．５以下のＬＮＢ含有液の調製方法としては、特に限定されないが、たとえば下記の方法（１）〜（２）等が挙げられる。
（１）ｐＨが５．５超のＬＮＢ含有液（以下、高ｐＨ−ＬＮＢ含有液という。）のｐＨを２．０以上５．５以下に調整する方法。
（２）ＬＮＢを、ｐＨ２．０以上５．５以下の液体中に溶解する方法。
方法（１）において、高ｐＨ−ＬＮＢ含有液は、前述したＬＮＢ溶液、ＬＮＢ添加液状製品、および天然ＬＮＢ含有液状製品のいずれであってもよい。
高ｐＨ−ＬＮＢ含有液のｐＨは、酸を添加することにより調製できる。酸としては、従来ｐＨ調整に用いられている酸のなかから適宜選択でき、塩酸、燐酸等の無機酸、および、クエン酸、酢酸等の有機酸のいずれか一種を単独で用いてもよく、２種以上を組み合わせてもよい。
方法（２）に用いられるｐＨ２．０以上５．５以下の液体としては、ｐＨが５．５超の液体（たとえば水、緩衝液等）のｐＨを前記方法（１）と同様にして調整したもの、およびｐＨ２．０以上５．５以下の液状製品（たとえばオレンジ等の柑橘類の果汁等）が挙げられる。
【００１１】
ＬＮＢの製造方法は特に限定はされず、公知の方法のなかから適宜選択できる。具体的には、例えば、ラクトースとＮ−アセチルグルコサミンとを含有する基質を出発原料として、ブタ睾丸起源のβ−ガラクトシダーゼとバチルス・サーキュランス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｉｒｃｕｌａｎｓ）の生産するβ−ガラクトシダーゼとを順次的に反応させる方法（特開平６−２５３８７８号公報参照）、糖ヌクレオチドと複合糖質前駆物質から複合糖質を生産する能力を有する微生物、動物細胞、または昆虫細胞を利用する方法（特開２００３−１８９８９１号公報参照）、および酵素法によるＬＮＢ製造方法（特開２００８−１５４４９５号公報参照）等が挙げられる。これらの中でも、簡便性に優れることから、特開２００８−１５４４９５号公報記載の下記の方法が好ましい。
Ｎ−アセチルグルコサミン、リン酸、ＬＮＢホスホリラーゼ（ＥＣ  ２．４．１．２１１）及びＵＤＰ−グルコース−４−エピメラーゼ（ＥＣ  ５．１．３．２）の存在下で、
（ｉ）糖質原料と、前記糖質原料を加リン酸分解しα−グルコース−１−リン酸を生じる酵素との組合せ；並びに
（ｉｉ）α−グルコース−１−リン酸をＵＤＰ−グルコースに変換する酵素及びＵＤＰ−ガラクトースをガラクトース−１−リン酸に変換する酵素とそれらの補因子との組合せ、及び／又はα−グルコース−１−リン酸及びＵＤＰ−ガラクトースをそれぞれＵＤＰ−グルコース及びα−ガラクトース−１−リン酸に変換する酵素（ＵＤＰ−Ｇｌｙ生成酵素）とその補因子との組合せ；
を作用させる方法。
上記のような微生物や酵素を用いたＬＮＢの合成反応は、通常、ｐＨ７．０〜７．５程度の液体中で行われ、その反応温度は３７℃程度である。得られた反応液に含まれるＬＮＢは、カラムクロマトグラフィー等の公知の方法により回収できる。
【００１２】
ｐＨが２．０以上５．５以下のＬＮＢ含有液の加熱処理は、６５℃以上の温度で行う。
前記加熱温度の上限は、ＬＮＢの熱分解を充分に抑制できることから、通常、１４０℃以下である。
好ましい加熱処理温度は、上記の範囲内において、当該加熱処理の目的に応じて適宜設定できる。たとえば加熱殺菌を目的とする場合、前記加熱処理温度は６５〜１４０℃が好ましく、８０〜１４０℃がより好ましい。
また、食品加工等における、加熱殺菌を目的としない加熱処理（たとえば蛋白質の変性等を目的とした加熱処理）の場合、前記加熱処理温度は７０〜１２０℃が好ましく、８０〜１００℃がより好ましい。
加熱時間は、加熱温度によっても異なるが、通常、２秒〜６０分間であり、２秒〜１０分間が好ましい。
加熱処理されたＬＮＢ含有液は、常法により冷却後、必要に応じて容器に充填し、密封して容器入りＬＮＢ含有液製品としてもよい。
加熱処理されたＬＮＢ含有液は、乾燥して乾燥物とすることもできる。たとえばＬＮＢのみを含むＬＮＢ溶液を本発明の処理方法によって加熱処理した、ＬＮＢ含有液を乾燥することでＬＮＢ粉末が得られる。ＬＮＢ含有液の乾燥方法としては、ＬＮＢの安定性に優れることから、凍結乾燥が好ましい。
上記のようにして加熱処理されたＬＮＢ含有液またはその乾燥物は、ＬＮＢの分解変性産物を含有しないか、または含んでいてもその含有量はわずかである。
【００１３】
本発明の処理方法によれば、種々の生理活性を有することが期待されるＬＮＢを含むＬＮＢ含有液を、その活性を損なうことなく加熱殺菌、またはその他の加工目的で加熱処理することができる。
そのため、本発明の処理方法は、食品、医薬品、化粧品または飼料等の製品の製造において加熱処理工程を包含する加工、および処理に応用できる。たとえば加熱処理対象のＬＮＢ含有液として液状製品（液状の食品、医薬品、化粧品または飼料）を用いることで、ＬＮＢの活性を損なうことなく、加熱処理されたＬＮＢ含有製品（ＬＮＢ含有食品、ＬＮＢ含有医薬品、ＬＮＢ含有化粧品またはＬＮＢ含有飼料）が得られる。また、上記のようにして加熱処理されたＬＮＢ含有液またはその乾燥物を各種製品（食品、医薬品、化粧品または飼料等）に配合することで、ＬＮＢ含有製品を製造できる。
さらに、本発明の処理方法によって得られるＬＮＢ含有液またはその乾燥物中のＬＮＢは、母乳に天然に含まれるオリゴ糖（ミルクオリゴ糖）を構成する二糖であることから、食品、医薬品、および化粧品等に添加しても安全である。
【実施例】
【００１４】
次に、試験例および実施例を示して本発明を更に詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
以下の各例において、ｐＨはすべて２５℃におけるｐＨであり、Ｈｏｒｉｂａ  Ｎａｖｉ  Ｆ−２５（ＨＯＲＩＢＡ社製）を用いて測定した。【００１５】
＜製造例１：ＬＮＢ粉末の調製＞
特開２００８−１５４４９５号公報記述の酵素法によるＬＮＢの製造方法に従って、以下の手順でＬＮＢ粉末を調製した。
特開２００８−１５４４９５号公報の実施例８の記載に準じて反応を行い、ＬＮＢ濃度が５０ｍＭの反応液を得た。
得られた反応液を脱塩後、トヨパールＨＷ４０Ｆ（東ソー社製）を充填剤として用いたカラムクロマトグラフィーに供して二糖画分を分取後、凍結乾燥を行い、純度９５％のＬＮＢ粉末１ｋｇを得た。【００１６】
＜試験例１＞
この試験の目的は、ＬＮＢ含有液のｐＨと、その加熱によってもたらされる、ＬＮＢの安定性への影響を調べることである。
１）試験方法：
上記製造例１で調製したＬＮＢ粉末を、２％の濃度（質量％。以下同じ）で、それぞれのｐＨ領域の範囲内にてｐＨを０．５刻みで変化させた、０．１Ｍのクエン酸緩衝液（ｐＨ３．０〜６．０）、０．１Ｍのリン酸緩衝液（ｐＨ６．０〜８．０）、または０．１Ｍのグリシン緩衝液（ｐＨ８．５〜１０．５）に溶解し、試料（ＬＮＢ含有液）１〜１６を調製した。
調製した試料１〜１６をそれぞれ５ｍＬずつ試験管に分注し、９０℃で６０分間加熱した。
加熱された各試料を１５℃に冷却し、シリカゲル薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）に１μＬをスポットし、８０％のアセトニトリル溶媒で展開し、５％硫酸水溶液に浸漬した後オーブンで加熱発色させ、分解変性産物（Ｎ−アセチルグルコサミンの脱水物およびガラクトース）の生成の有無およびその生成量を目視にて確認し、分解の有無およびその分解度合いを確認した。【００１７】
２）試験結果：
試験結果を図１に示す。図１は、９０℃で６０分間加熱処理した後の、ｐＨの異なる各試料のＴＬＣ検出パターンを撮影したものである。図１中、Ｇａｌはガラクトース、ＧｌｃＮＡｃはＮ−アセチルグルコサミンを示す。
図１から明らかなように、上記加熱条件下において、ＬＮＢは、ｐＨ５．５以下、特にｐＨ５．０以下であると、ほとんど分解することがなく安定であることが判明した。しかし、ｐＨが６．０以上、特にｐＨ７．０以上であると、分解変性産物が多く、ＬＮＢが不安定であることが判明した。【００１８】
＜試験例２＞
この試験の目的は、中性領域にあるＬＮＢ含有液に対する加熱温度及び時間によってもたらされる、ＬＮＢの安定性への影響を調べることである。
１）試験方法：
上記製造例１で調製したＬＮＢ粉末を、２％の濃度で、ｐＨ７．０の０．１Ｍのリン酸バッファーに溶解し、試料（ＬＮＢ含有液）を調製した。
前記試料を５ｍＬずつ試験管に分注し、９０℃で０、１０、２０、３０、４０、５０もしくは６０分間の加熱処理、または６５、６７、７０、７５、８０、８５もしくは８８℃で６０分間の加熱処理を行った。
加熱された各試料を１５℃に冷却し、試験例１に記述の方法で分解の有無およびその分解度合いを確認した。【００１９】
２）試験結果：
試験結果を図２に示す。図２は、温度および時間を変えて加熱処理した後の、ｐＨ７．０のＬＮＢ含有液のＴＬＣ検出パターンを撮影したものである。
図２から明らかなように、いずれの加熱処理条件下でも分解変性産物が検出され、その量は、加熱時間が長いほど、または加熱温度が高いほど、多くなっていた。この結果から、ＬＮＢは、中性領域ではいずれの加熱処理条件下でも分解し、その分解の度合いは加熱時間および温度に正比例することが判明した。【００２０】
＜試験例３＞
この試験の目的は、ｐＨ５．５以下の領域にあるＬＮＢ含有液に対する加熱温度及び時間によってもたらされる、ＬＮＢの安定性への影響を調べることである。
１）試験方法：
上記製造例１で調製したＬＮＢ粉末を、２％の濃度で０．１Ｍのクエン酸緩衝液（ｐＨ５．５、５．０、４．０、３．０）に溶解し、ＬＮＢ含有液を調製した。また、ｐＨ３．０のＬＮＢ溶液の一部を、１Ｍの塩酸を用いてｐＨを２．０または１．０に調整した。
別途、ｐＨ７．０の０．１Ｍリン酸バッファーにＬＮＢを２％の濃度で溶解したＬＮＢ含有液を調製した。
各ｐＨに調整されたＬＮＢ含有液のセットを、それぞれ所定の温度（６５、７０、８０、９０、１００または１２０℃）で所定時間（５、１０、２０、３０または６０分間）加熱した。
加熱された各ＬＮＢ含有液を冷却し、試験例１に記述の方法で分解の有無およびその分解度合いを確認した。その結果から、下記の基準で分解度合いを評価した。
（評価基準）
−：分解なし。
±：わずかに分解した。
＋：一部分解した。
＋＋：大部分が分解した。
＋＋＋：ほぼ完全に分解した。【００２１】
２）試験結果：
試験結果を表１に示す。
表１から明らかなように、ＬＮＢは、ｐＨ２．０以上５．５以下の領域において、ほとんど分解されることがなく安定であることが判明した。前記効果は、特に、ｐＨ２．０以上５．０以下、中でもｐＨ２．０以上４．０以下の場合に優れていた。一方、ｐＨが７．０または１．０のＬＮＢ含有液では、５分間の加熱でも分解が起き、その分解の度合いは加熱時間および温度に正比例することが判明した。【００２２】
【表１】
0005630753.tif 000002
【００２３】
＜実施例１＞
上記製造例１で調製したＬＮＢ粉末１００ｇを、精製水９．９ｋｇに溶解し、０．１Ｍの塩酸を添加してｐＨ４．５に調製した。この水溶液をＵＨＴ滅菌装置（森永エンジニアリング社製）により７０℃で３分間予熱した後、１３０℃で２秒間滅菌し、しかる後１５℃に冷却し、ＬＮＢ含有液１０ｋｇを得た。
このＬＮＢ含有液について、試験例１と同一のＴＬＣ法により分析した結果、ＬＮＢが分解していないことを確認した。【００２４】
＜実施例２＞
市販のオレンジ・ジュース９．９ｋｇ（森永乳業社製）に、上記製造例１で調製したＬＮＢ粉末１００ｇを添加し、８０℃で１５分間加熱し、１５℃に冷却し、１００ｍＬずつガラスビンに充填し、密栓して、ＬＮＢを含有するオレンジ・ジュース１００本を得た。
得られたオレンジ・ジュースのｐＨは４．５１であり、試験例１と同一のＴＬＣ法により分析した結果、ＬＮＢが分解していないことを確認した。【００２５】
＜実施例３＞
上記製造例１で調製したＬＮＢ粉末１００ｇを精製水９．９ｋｇに溶解し、０．１Ｍのクエン酸を添加してｐＨ５．０に調整した。この水溶液を９０℃で３０分間加熱した後、１５℃に冷却し、ＬＮＢ含有液１０ｋｇを得た。
このＬＮＢ含有液（加熱処理液）について、試験例１と同一のＴＬＣ法により分析した結果、ＬＮＢが分解していないことを確認した。
前記加熱処理液を凍結乾燥し、１００ｇの粉末を得た。【００２６】
＜実施例４＞
下記成分からなる組成に、実施例３で得た粉末（加熱処理したＬＮＢ粉末）１０ｇを加え、さらにイオン交換水を加えて全量を３００ｍＬとし、ラクト−Ｎ−ビオースを含有する内服液剤を調製した。表２中、クエン酸緩衝液の「適量」は、ｐＨが５．０となる量である。【００２７】
【表２】
0005630753.tif 000003
【産業上の利用可能性】
【００２８】
本発明によれば、ＬＮＢ含有液を６５℃以上の温度で加熱処理する際のＬＮＢの熱分解を抑制できる処理方法、前記処理方法にて処理されたＬＮＢ含有液およびその乾燥物、ならびにＬＮＢ含有製品の製造方法を提供できるため、食品、医薬品、化粧品および飼料等の製造において利用可能性がある。
【図１】
0005630753.tif 000004
【図２】
0005630753.tif 000005