(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
温血動物における急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を処置するための、（ａ）（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドまたはその医薬的に許容される塩および（ｂ）ミドスタウリンまたはその医薬的に許容される塩を含む、組合せ剤。
【請求項２】
ＡＭＬが常套の化学療法に抵抗性である、請求項１に記載の組合せ剤。
【請求項３】
温血動物がヒトである、請求項１または２に記載の組合せ剤。
【請求項４】
ヒトが若年性である、請求項３に記載の組合せ剤。
【請求項５】
（ａ）（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドまたはその医薬的に許容される塩および（ｂ）ミドスタウリンまたはその医薬的に許容される塩を含む、組合せ剤。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれかに記載の組合せ剤を含む、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＩＡＰ阻害剤とＦＬＴ３阻害剤の組み合わせ、当該組み合わせを含む医薬組成物、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を含む血液学的悪性疾患を処置する方法であって、カスパーゼの第２ミトコンドリア由来アクチベーター（Ｓｍａｃ）タンパク質とアポトーシス阻害剤（ＩＡＰ阻害剤）と１種以上の薬学的に活性な薬剤の組み合わせを含む方法、および急性骨髄性白血病の処置のためのこれらの組み合わせの使用；ならびに当該組み合わせを含む商品パッケージに関する。
【０００２】
本発明はまた、ＡＭＬを含む血液学的悪性腫瘍の処置用医薬の製造のための、１種以上の薬学的に活性な薬剤との組み合わせにおけるＩＡＰ阻害剤の使用に関する。
【０００３】
１つの態様において、本発明はまた、ＡＭＬを含む血液学的悪性腫瘍の処置用医薬の製造のための、１種以上のＦＬＴ阻害剤との組み合わせにおけるＩＡＰ阻害剤の使用に関する。
【背景技術】
【０００４】
発明の背景
ＦＬＴ３は、白血病の有用な治療標的であり、ＡＭＬ患者の約１／３において変異している。しかし、急性白血病患者の処置に使用する標的チロシンキナーゼにおける点突然変異の出現によってもたらされる薬剤抵抗性の発生についての関心が高まっている。Shah et al. (2002)およびCools et al. (2003)参照。かかる抵抗性を克服する１つのアプローチは、構造的に関連しない複数の阻害剤および／または異なるシグナル伝達経路を有する複数の阻害剤を組み合わせることである。
【発明の概要】
【０００５】
発明の要約
本発明は、常套の化学療法に抵抗性である白血病、特にＡＭＬを有する温血動物、とりわけヒトを処置する方法であって、当該動物に治療上有効量のＩＡＰ阻害剤を投与することを含む、ＡＭＬ処置に有用な方法に関する。
【０００６】
他の態様において、本発明はＡＭＬを含む血液学的悪性腫瘍の処置用医薬の製造におけるＩＡＰ阻害剤の使用に関する。
【０００７】
１つの態様において、本発明はまた、ＡＭＬを含む血液学的悪性腫瘍の処置用医薬の製造のための、１種以上のＦＬＴ阻害剤と組み合わせたＩＡＰ阻害剤の使用に関する。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
図面の詳細な説明
【図１】図１はＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞をＰＫＣ４１２、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）またはＰＫＣ４１２とＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）の組み合わせでの３日間処理を示す増殖試験を示している。
【図２】図２はＧ６９７Ｒ−Ｂａ／Ｆ３細胞をＰＫＣ４１２、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）またはＰＫＣ４１２とＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）の組み合わせでの３日間処理を示す増殖試験を示している。
【図３】図３はＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞をＰＫＣ４１２、ドキソルビシンまたはＰＫＣ４１２とドキソルビシンの組み合わせでの３日間処理を示す増殖試験を示している。
【図４】図４はＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞をドキソルビシン、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）またはドキソルビシンとＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）の組み合わせでの３日間処理を示す増殖試験を示している（ｎ＝１）。
【図５】図５はＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞をＡｒａ−ｃ、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）またはＡｒａ−ｃとＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）の組み合わせでの３日間処理を示す増殖試験を示している（ｎ＝１）。
【図６】図６はＰＫＣ４１２とＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）の組み合わせ効果のインビボ試験を示している；生物発光イメージングは静脈注射の７日後の腫瘍組織量を示す。
【図７】図７は％ベースラインとしての図６のグラフ図を示す。
【図８】図８はＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）、ＰＫＣ４１２またはＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２の組み合わせで１０日間処置したマウスの％脾臓重量を示す。
【図９】図９はＭＯＬＭ１３−ｌｕｃ＋細胞を多様な濃度のＰＫＣ４１２での、ヒト間質細胞系ＨＳ−５の存在下または非存在下での処理を示す。
【図１０】図１０は変異ＦＬＴ３−Ｂａ／Ｆ３細胞対対照Ｂａ／Ｆ３細胞におけるＸＩＡＰ、ＣＩＡＰ、Ｂｃｌ−２およびＢｃｌ−ＸＬ発現を示す免疫ブロットを示している。免疫ブロットは、ベータアクチン抗体および／またはローディング対照としてのアルファチューブリン抗体でハイブリダイズした。
【図１１】図１１はＭＯＬＭ１３−ｌｕｃ＋細胞を（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）、ＰＫＣ４１２または（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）とＰＫＣ４１２の組み合わせでの３日間処理を示す増殖試験を示している。
【図１２】図１２はＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞を（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）、ＰＫＣ４１２または（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）とＰＫＣ４１２の組み合わせでの２日間処理を示す増殖試験を示している。
【図１３】図１３はＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞を（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）、Ａｒａ−ｃ、または（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）とＡｒａ−ｃの組み合わせでの２日間処理を示す増殖試験を示している。
【図１４】図１４はＭＯＬＭ１３−ｌｕｃ＋細胞を（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）、Ａｒａ−ｃまたは（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）とＡｒａ−ｃの組み合わせでの３日間処理を示す増殖試験を示している。
【図１５】図１５はＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞を（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１  −シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）、ドキソルビシンまたは（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）とドキソルビシンの組み合わせでの３日間処理を示す増殖試験を示している。
【図１６】図１６はマウス中のマウスＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞のインビボ腫瘍増殖を示している。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
発明の詳細な説明
プロテインキナーゼＣ（以後ＰＫＣと略す）は、細胞シグナル伝達経路における重要な酵素の１つであり、これは細胞増殖および細胞分化の制御において極めて重要な役割を有する。ＰＫＣはセリン／スレオニンキナーゼのファミリーである。
少なくとも１２個のＰＫＣアイソフォームが同定されており、これらは一般に、構造および基質要求に基づいて３つの群に分類される。ＦＬＴ３タンパク質に変異を有するＡＭＬ患者に対するプロテインチロシンキナーゼ阻害剤ＰＫＣ４１２の効果を研究した臨床試験において、近年有望な結果が得られている。
【００１０】
ミドスタウリンは、式（ＩＩ）
【化１】
0005394249.tif 000002
のＮ−［（９Ｓ，１０Ｒ，１１Ｒ，１３Ｒ）−２，３，１０，１１，１２，１３−ヘキサヒドロ−１０−メトキシ−９−メチル−１−オキソ−９，１３−エポキシ−１Ｈ，９Ｈ−ジインドロ［１，２，３−ｇｈ：３’，２’，１’−ｌｍ］ピロロ［３，４−ｊ］［１，７］ベンゾジアゾニン−１１−イル］−Ｎ−メチルベンズアミドまたはその塩であり、以後「式ＩＩの化合物またはミドスタウリン」と称する。
【００１１】
式（ＩＩ）の化合物またはミドスタウリン［国際一般的名称］は、ＰＫＣ４１２としても知られている。
ミドスタウリンは、天然に生じるアルカロイド、スタウロスポリンの誘導体であり、欧州特許第0 296 110号（１９８８年１２月２１日公開）および米国特許第5;093,330号（１９９２年３月３日公開）および日本国特許第2 708 047号に具体的に記載されている。
【００１２】
上記疾患および状態に使用するミドスタウリンの正確な投与量は、宿主、処置する状態の性質および重症度、投与形態を含む様々な要因に依存する。一般に、満足のいく結果が、ミドスタウリンを非経腸的に、例えば腹腔内、静脈内、筋肉内、皮下、腫瘍内もしくは直腸的に、または経腸的に、例えば経口的に、好ましくは静脈内または好ましくは経口的、静脈内に、１日用量０．１−１０ｍｇ／ｋｇ体重、好ましくは１−５ｍｇ／ｋｇ体重で投与したときに得られる。ヒト試験において、合計用量２２５ｍｇ／日が推定される最大耐用量（ＭＴＤ）であった。好ましい静脈内１日用量は０．１−１０ｍｇ／ｋｇ体重であるか、またはほとんどの大型霊長類において１日用量２００−３００ｍｇである。典型的な静脈内用量は３−５ｍｇ／ｋｇ、３〜５回／週である。
【００１３】
ミドスタウリンは経口的に、約３００ｍｇ／日まで、例えば１００−３００ｍｇ／日の投与量で投与される。ミドスタウリンは単回投与で投与されるか、または１日２または３回、好ましくは２回用量に分割する。とりわけ重要な用量は２００−２２５ｍｇ／日、特に１００ｍｇ２回／日（合計２００ｍｇ／日）である。投与量の上限は副作用によって生じ、そして処置する患者の試験によって決定することができる。
【００１４】
ＰＣＫ４１２は必須タンパク質がＤＮＡと結合するのを防止することによって異常ＦＬＴ機能を妨げるため、ＰＫＣ４１２はＦＬＴ阻害剤である。ＦＬＴ阻害剤は変異ＦＬＴ遺伝子の作用を阻止してこれを無力化する。他のＦＬＴ阻害剤は、Ｎ−ベンゾイル−スタウロスポリン、スタウロスポリン誘導体、ＳＵ１１２４８およびＭＬＮ５１８を含むが、これらの化合物に限定されない。
【００１５】
ＰＫＣ４１２はインビトロで変異ＦＬＴ３発現細胞の増殖および生存能を阻害し、また変異ＦＬＴ３で形質導入された骨髄を有するマウスの寿命を延長することができる。Weisberg et al. (2002)参照。患者におけるＦＬＴ３阻害に対する遺伝的抵抗性を克服するための潜在的な戦略は、構造的に関連しない複数の阻害剤および／または異なるシグナル伝達経路を有する複数の阻害剤を組み合わせることである。
【００１６】
アポトーシスシグナル伝達のメディエーターは、治療的介入のための魅力的な標的である。Ｓｍａｃは内因性アポトーシス経路を介して生じるアポトーシスを仲介し［Du et al. (2000)参照］、ＩＡＰファミリーのタンパク質と結合して阻害する。Liu et al. (2000)およびWu et al. (2000)参照。
【００１７】
ＡＭＬのアポトーシスに対する遺伝的抵抗性は、ＩＡＰがこの疾患環境における良好な治療標的であり得ること、そしてさらに、ＰＫＣ４１２とＩＡＰ阻害剤の組み合わせが治療的に有用であり得ることを示唆した。
【００１８】
本発明において使用するためのＩＡＰ阻害剤の例は、式（Ｉ）
【化２】
0005394249.tif 000003
〔式中、
Ｒ１はＨ；Ｃ１−Ｃ４アルキル；Ｃ１−Ｃ４アルケニル；Ｃ１−Ｃ４アルキニルまたはＣ３−Ｃ１０シクロアルキルであり、これは非置換であるか、または置換されており；
Ｒ２はＨ；Ｃ１−Ｃ４アルキル；Ｃ１−Ｃ４アルケニル；Ｃ１−Ｃ４アルキニルまたはＣ３−Ｃ１０シクロアルキルであり、これは非置換であるか、または置換されており；
Ｒ３はＨ；−ＣＦ３；−Ｃ２Ｆ５；Ｃ１−Ｃ４アルキル；Ｃ１−Ｃ４アルケニル；Ｃ１−Ｃ４アルキニル；−ＣＨ２−Ｚであるか、または
Ｒ２とＲ３は窒素と一体となって、ｈｅｔ環を形成し；
ＺはＨ；−ＯＨ；Ｆ；Ｃｌ；−ＣＨ３；−ＣＦ３；−ＣＨ２Ｃｌ；−ＣＨ２Ｆまたは−ＣＨ２ＯＨであり；
Ｒ４はＣ１−Ｃ１６直鎖もしくは分枝鎖アルキル；Ｃ１−Ｃ１６アルケニル；Ｃ１−Ｃ１６アルキニル；または−Ｃ３−Ｃ１０シクロアルキル；−（ＣＨ２）１−６−Ｚ１；−（ＣＨ２）０−６−アリールフェニル；および−（ＣＨ２）０−６−ｈｅｔであり、ここでアルキル、シクロアルキルおよびフェニルは非置換であるか、または置換されており；
【００１９】
Ｚ１は−Ｎ（Ｒ８）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−Ｎ（Ｒ８）−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｎ（Ｒ８）−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０−６−フェニル；−Ｎ（Ｒ８）−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ；−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ９）（Ｒ１０）；−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）０−６−フェニル；−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ；−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０−６−フェニル；−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔであり、ここでアルキル、シクロアルキルおよびフェニルは非置換であるか、または置換されており；
ｈｅｔはＮ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を含む５〜７員ヘテロ環式環、または少なくとも１個のＮ、ＯおよびＳから選択される１、２もしくは３個のヘテロ原子を含む５〜７員ヘテロ環式環を含む８〜１２員縮合環系であり、当該ヘテロ環式環または縮合環系は非置換であるか、または炭素原子もしくは窒素原子上で置換されており；
Ｒ８はＨ；−ＣＨ３；−ＣＦ３；−ＣＨ２ＯＨまたは−ＣＨ２Ｃｌであり；
Ｒ９およびＲ１０は各々独立して、Ｈ；Ｃ１−Ｃ４アルキル；Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−（ＣＨ２）０−６−フェニルであり、ここでアルキル、シクロアルキルおよびフェニルは非置換であるか、または置換されているか、または
Ｒ９とＲ１０は窒素と一体となって、ｈｅｔを形成し；
【００２０】
Ｒ５はＨ；Ｃ１−Ｃ１０アルキル；アリール；フェニル；Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｃ１−Ｃ１０アルキル−アリール；−（ＣＨ２）０−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル−（ＣＨ２）０−６−フェニル；−（ＣＨ２）０−４ＣＨ−（（ＣＨ２）１−４−フェニル）２；−（ＣＨ２）０−６−ＣＨ（フェニル）２；−インダニル；−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０−６−フェニル；−（ＣＨ２）０−６−Ｃ（Ｏ）−フェニル；−（ＣＨ２）０−６−ｈｅｔ；−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔであるか、または
Ｒ５はアミノ酸の残基であり、ここでアルキル、シクロアルキル、フェニルおよびアリール置換基は非置換であるか、または置換されており；
Ｕは構造（ＩＩＩ）
【化３】
0005394249.tif 000004
｛式中、
ｎ＝０−５；
Ｘは−ＣＨまたはＮであり；
ＲａおよびＲｂは独立して、Ｏ、ＳもしくはＮ原子、またはＣ０−Ｃ８アルキルであり、ここで当該アルキル鎖の１個以上の炭素原子がＯ、ＳまたはＮから選択されるヘテロ原子で置換されていてもよく、そして当該アルキルは非置換であるか、または置換されていてもよく；
【００２１】
Ｒｄは：
（ａ）  −Ｒｅ−Ｑ−（Ｒｆ）ｐ（Ｒｇ）ｑ；または
（ｂ）  Ａｒ１−Ｄ−Ａｒ２；または
（ｃ）  Ａｒ１−Ｄ−Ａｒ２であり；
ＲｃはＨであるか、またはＲｃとＲｄは一体となって、シクロアルキルまたはｈｅｔを形成してもよく；ここでＲｄとＲｃがシクロアルキルまたはｈｅｔを形成するとき、Ｒ５はＣまたはＮ原子で形成された環と結合しており；
ｐおよびｑは独立して０または１であり；
ＲｅはＣ１−Ｃ８アルキルまたはアルキリデンであり、そして当該Ｒｅは非置換であるか、または置換されていてもよく；
ＱはＮ、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）またはＳ（Ｏ）２であり；
Ａｒ１およびＡｒ２は置換または非置換アリールまたはｈｅｔであり；
ＲｆおよびＲｇは互いに独立して存在しないか、またはＨ；−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；Ｃ１−Ｃ１０アルキルアリール；−ＯＨ；−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−（ＣＨ２）０−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｏ−（ＣＨ２）０−６−アリール；フェニル；アリール；フェニル−フェニル；−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ；−Ｏ−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ；−ＯＲ１１；−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１１；−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）；Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）；−Ｓ−Ｒ１１；−Ｓ（Ｏ）−Ｒ１１；−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ１１；−Ｓ（Ｏ）２−ＮＲ１１Ｒ１２；−ＮＲ１１−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ１２；Ｓ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；アリール−Ｃ１−Ｃ４アルキル；ｈｅｔ−Ｃ１−Ｃ４アルキル（ここでアルキル、シクロアルキル、ｈｅｔおよびアリールは非置換であるか、または置換されている）；−ＳＯ２−Ｃ１−Ｃ２アルキル；−ＳＯ２−Ｃ１−Ｃ２アルキルフェニル；−Ｏ−Ｃ１−Ｃ４アルキルであるか、または
ＲｇとＲｆはｈｅｔまたはアリールから選択される環を形成し；そして
【００２２】
Ｄは−ＣＯ−；−Ｃ（Ｏ）−またはＣ１−Ｃ７アルキレンもしくはアリーレン；−ＣＦ２−；−Ｏ−；−またはＳ（Ｏ）ｎｒ（ここでｒｎは０−２である）；１，３ジオキソラン；またはＣ１−Ｃ７アルキル−ＯＨであり、ここでアルキル、アルキレンもしくはアリーレンは非置換であるか、またはハロゲン、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｓ−Ｃ１−Ｃ６アルキルもしくは−ＣＦ３の１個以上で置換されていてもよいか、または
Ｄは−Ｎ（Ｒｈ）であり、ここでＲｈはＨ；Ｃ１−Ｃ７アルキル（置換もしくは非置換）；アリール；−Ｏ（Ｃ１−Ｃ７シクロアルキル）（置換もしくは非置換）；Ｃ（Ｏ）−Ｃ１０−Ｃ１０アルキル；Ｃ（Ｏ）−Ｃ０−Ｃ１０アルキル−アリール；Ｃ−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；Ｃ−Ｏ−Ｃ０−Ｃ１０アルキル−アリールまたはＳＯ２−Ｃ１０−Ｃ１０−アルキル；ＳＯ２−（Ｃ０−Ｃ１０−アルキルアリール）であり；
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ’６およびＲ’７は各々独立して、Ｈ；−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ；アリール−Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ；−ＯＨ；−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−（ＣＨ２）０−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｏ−（ＣＨ２）０−６−アリール；フェニル；−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ；−Ｏ−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ；−ＯＲ１１；−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１１；−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）；−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）；−Ｓ−Ｒ１１；−Ｓ（Ｏ）−Ｒ１１；−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ１１；−Ｓ（Ｏ）２−ＮＲ１１Ｒ１２；−ＮＲ１１−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ１２であり、ここでアルキル、シクロアルキルおよびアリールは非置換であるか、または置換されており；そしてＲ６、Ｒ７、Ｒ’６とＲ’７は一体となって環系を形成してもよく；そして
Ｒ１１およびＲ１２は独立してＨ；Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−（ＣＨ２）０−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−（ＣＨ２）０−６−（ＣＨ）０−１（アリール）１−２；−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）０−６−アリール；−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０−６−Ｏ−フルオレニル；−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０−６−アリール；−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０−６−アリール；−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ；−Ｃ（Ｓ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｃ（Ｓ）−Ｏ−（ＣＨ２）０−６−アリール；−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０−６−Ｏ−フルオレニル；−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０−６−アリール；−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０−６−アリール；−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔであり、ここでアルキル、シクロアルキルおよびアリールは非置換であるか、または置換されているか、または
【００２３】
Ｒ１１およびＲ１２は当該分子の細胞膜の通過を促進する置換基であるか、または
Ｒ１１とＲ１２は窒素原子と一体となって、ｈｅｔを形成し、
ここでＲ１１およびＲ１２のアルキル置換基は非置換であるか、またはＣ１−Ｃ１０アルキル、ハロゲン、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｓ−Ｃ１−Ｃ６アルキルまたは−ＣＦ３から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ１１およびＲ１２の置換シクロアルキル置換基はＣ１−Ｃ１０アルケン；Ｃ１−Ｃ６アルキル；ハロゲン；ＯＨ；−Ｏ−Ｃ１−Ｃ６アルキル；−Ｓ−Ｃ１−Ｃ６アルキルまたは−ＣＦ３から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；そして
Ｒ１１およびＲ１２の置換フェニルまたはアリールはハロゲン；ヒドロキシ；Ｃ１−Ｃ４アルキル；Ｃ１−Ｃ４アルコキシ；ニトロ；−ＣＮ；−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ４アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１−Ｃ４アリールから選択される１個以上の置換基で置換されていてもよい｝
で示される〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００２４】
本発明において使用するためのさらなるＩＡＰ阻害剤の例は、PCT/US2007/074790に記載の式（Ｉａ）
【化４】
0005394249.tif 000005
〔式中、
Ｒ１はＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ２−Ｃ４アルキニルまたはＣ３−Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｒ１は非置換であるか、または置換されていてもよく；
Ｒ２はＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ２−Ｃ４アルキニルまたはＣ３−Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｒ２は非置換であるか、または置換されていてもよく；
Ｒ３はＨ、ＣＦ３、Ｃ２Ｆ５、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ２−Ｃ４アルキニル、ＣＨ２−Ｚであるか、または
Ｒ２とＲ３はそれらが結合している窒素と一体となって、ヘテロ環式環を形成し；当該アルキル、アルケニル、アルキニルまたはｈｅｔ環は非置換であるか、または置換されていてもよく；
ＺはＨ、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２ＦまたはＣＨ２ＯＨであり；
Ｒ４はＣ０−Ｃ１０アルキル、Ｃ０−Ｃ１０アルケニル、Ｃ０−Ｃ１０アルキニルまたはＣ３−Ｃ１０シクロアルキルであり、ここでＣ０−Ｃ１０アルキルまたはシクロアルキル基は非置換であるか、または置換されており；
【００２５】
Ａはｈｅｔであり、これは非置換であるか、または置換されていてもよく；
ＤはＣ１−Ｃ７アルキレンまたはＣ２−Ｃ９アルケニレン、Ｃ（Ｏ）、Ｏ、ＮＲ７、Ｓ（Ｏ）ｒ、Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｓ（Ｏ）ｒ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｃ０−Ｃ１０アリールアルキル、ＯＣ０−Ｃ１０アリールアルキルまたはＳ（Ｏ）ｒＣ０−Ｃ１０アリールアルキルであり、当該アルキルおよびアリール基は非置換であるか、または置換されていてもよく；
ｒは０、１または２であり；
Ａ１は置換もしくは非置換アリールまたは置換もしくは非置換ｈｅｔであり、当該アリールおよびｈｅｔ上の置換基はハロ、アルキル、低級アルコキシ、ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、ＮＯ２またはＳＲ５であり；
各Ｑは独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、アリールＣ１−Ｃ１０アルコキシ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル、（ＣＨ２）０−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、アリール、アリールＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｏ−（ＣＨ２）０−６アリール、（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ、ｈｅｔ、Ｏ−（ＣＨ２）１−６ｈｅｔ、−ＯＲ１１、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、ＳＲ１１、Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）またはＮＲ１１−Ｓ（Ｏ）２−（Ｒ１２）であり、ここでアルキル、シクロアルキルおよびアリールは非置換であるか、または置換されており；
ｎは０、１、２または３、４、５、６または７であり；
【００２６】
ｈｅｔはＮ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ環原子を含む５〜７員単環式ヘテロ環式環、または１個のＮ、ＯおよびＳから選択される１、２もしくは３個のヘテロ原子を含む５〜７員単環式ヘテロ環式環を含む８〜１２員縮合環系であり、ｈｅｔは非置換であるか、または置換されており；
Ｒ１１およびＲ１２は独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、（ＣＨ２）０−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、（ＣＨ２）０−６−（ＣＨ）０−１（アリール）１−２、Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）０−６−アリール、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０−６−Ｏ−フルオレニル、Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０−６−アリール、Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０−６−アリール、Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ、−Ｃ（Ｓ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、Ｃ（Ｓ）−Ｏ−（ＣＨ２）０−６−アリール、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０−６−Ｏ−フルオレニル、Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０−６−アリール、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０−６−アリールまたはＣ（Ｓ）−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、Ｓ（Ｏ）ｎＲ１１、Ｓ（Ｏ）ｍＮＲ１１Ｒ１２（ｍ＝１または２）、Ｃ（Ｓ）Ｒ１１、Ｃ（Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（Ｓ）ＯＲ１１であり、ここでアルキル、シクロアルキルおよびアリールは非置換であるか、または置換されているか；またはＲ１１とＲ１２は当該分子の細胞膜の通過を促進する置換基であるか；または
Ｒ１１とＲ１２は窒素原子と一体となって、ｈｅｔを形成し、
ここでＲ１１およびＲ１２のアルキル置換基は非置換であるか、またはＣ１−Ｃ１０アルキル、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｓ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、ＣＦ３またはＮＲ１１Ｒ１２から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ１１およびＲ１２の置換シクロアルキル置換基はＣ２−Ｃ１０アルケン；Ｃ１−Ｃ６アルキル；ハロゲン；ＯＨ；Ｏ−Ｃ１−Ｃ６アルキル；Ｓ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＣＦ３またはＮＲ１１Ｒ１２から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；そして
Ｒ１１およびＲ１２の置換ｈｅｔまたは置換アリールはハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、ニトロ、−ＣＮＯ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ４アルキルおよびＣ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；
【００２７】
Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は独立して、水素、低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、シクロアルキルまたはシクロアルキル低級アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒ５；Ｓ（Ｏ）Ｒ５、Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６であり、そして
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、ＱおよびＡならびにＡ１基上の置換基は、独立して、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルキニル、低級アルカノイル、低級アルコキシ、アリール、アリール低級アルキル、アミノ、アミノ低級アルキル、ジ低級アルキルミノ、低級アルカノイル、アミノ低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、シアノ低級アルキル、カルボキシ、低級カルボアルコキシ、低級アルカノイル、アリーロイル（aryloyl）、低級アリールアルカノイル、カルバモイル、Ｎ−モノもしくはＮ，Ｎ−ジ低級アルキルカルバモイル、低級アルキルカルバミン酸エステル、アミジノ、グアニジン、ウレイド、メルカプト、スルホ、低級アルキルチオ、スルホアミノ、スルホンアミド、ベンゾスルホンアミド、スルホネート、スルファニル、低級アルキル、アリールスルホンアミド、ハロゲン置換アリールスルホネート、低級アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル、アリール−低級アルキルスルフィニル、低級アルキルアリールスルフィニル、低級アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリール−低級アルキルスルホニル、低級アリールアルキル低級アルキルアリールスルホニル、ハロゲン−低級アルキルメルカプト、ハロゲン−低級アルキルスルホニル、ホスホノ（−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２）、ヒドロキシ−低級アルコキシホスホリルまたはジ−低級アルコキシホスホリル、（Ｒ９）ＮＣ（Ｏ）−ＮＲ１０Ｒ１３、低級アルキルカルバミン酸エステルまたはカルバメートまたは−ＮＲ８Ｒ１４であり、
ここで
Ｒ８およびＲ１４は同一または異なって、独立してＨまたは低級アルキルであるか、またはＲ８とＲ１４はＮ原子と一体となって、所望により窒素、酸素および硫黄から選択される１または２個のさらなるヘテロ環原子を含んでいてもよい窒素ヘテロ環原子含有３〜８員ヘテロ環式環を形成し、当該ヘテロ環式環は非置換であるか、または低級アルキル、ハロ、低級アルケニル、低級アルキニル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ニトロ、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ、シアノ、カルボキシ、低級カルボアルコキシ、ホルミル、低級アルカノイル、オキソ、カルバモイル、Ｎ−低級もしくはＮ，Ｎ−ジ低級アルキルカルバモイル、メルカプトまたは低級アルキルチオで置換されていてもよく；そして
Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１３は独立して水素、低級アルキル、ハロゲン置換低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、ハロゲン置換アリール、ハロゲン置換アリール低級アルキルである〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００２８】
好ましい化合物は：
・（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；
・（Ｓ）−Ｎ−［（Ｓ）−シクロヘキシル−（エチル−｛（Ｓ）−１−［５−（４−フルオロ−ベンゾイル）−ピリジン−３−イル］−プロピル｝カルバモイル）−メチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；
・（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［５−（４−フルオロ−フェノキシ）−ピリジン−３−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２−オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；および
・Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−（２−｛２−［（４−フルオロフェニル）−メチル−アミノ］−ピリジン−４−イル｝ピロリジン−１−イル）−２−オキソ−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド；
およびその薬学的に許容される塩から成る群から選択される。
【００２９】
他のＩＡＰ阻害剤の例は、WO 05/097791（２００５年１０月２０日公開、出典明示により本明細書の一部とする）に記載の化合物を含む。式（Ｉ）の範囲に含まれる好ましい化合物は、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドである。
【００３０】
さらなるＩＡＰ阻害剤は、WO 04/005284、PCT/US2006/013984およびPCT/US2006/021850に記載の化合物を含む。本発明において使用するための他のＩＡＰ阻害剤化合物は、WO 06/069063、WO 05/069888、US2006/0014700、WO 04/007529、US2006/0025347、WO 06/010118、WO 05/069894、WO 06/017295、WO 04/007529およびWO 05/094818に記載のものを含む。
【００３１】
好ましい化合物の１つは、化合物Ａ、（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドである。
【００３２】
化合物Ａは例えば、下記反応スキームに従って製造することができる：
【化５】
0005394249.tif 000006
【００３３】
本明細書において使用するとき、「アリール」なる用語は、６〜１４個の環炭素原子を有し、ヘテロ原子を有さない芳香族性基として定義される。該アリール基は単環式または縮合二環式もしくは三環式であってよい。これは非置換であるか、または１個以上、好ましくは１もしくは２個の置換基で置換されていてもよく、ここで当該置換基は本明細書に記載されている。本明細書に定義のとおり、該アリール基は単環式であるか二環式であるかに拘わらず、完全に芳香族性であってよい。しかし、これが本明細書に定義のとおり１個以上の環を含むとき、アリールなる用語は少なくとも１個の環が完全に芳香族性であるが、他の環（複数であってもよい）が部分的に不飽和または飽和、または完全に芳香族性であってよい。好ましい「アリール」は、フェニル、ナフチルまたはインダニルである。最も好ましいアリールはフェニルである。
【００３４】
「ｈｅｔ」は、本明細書において使用するとき、少なくとも１個のＳ、ＯまたはＮ環ヘテロ原子を含むヘテロアリールおよびヘテロ環式化合物を意味する。より具体的には、「ｈｅｔ」はＮ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を含む５〜７員ヘテロ環式環、または少なくとも１個のＮ、ＯおよびＳから選択される１、２もしくは３個のヘテロ原子を含む５〜７員ヘテロ環式環を含む８〜１２員縮合環系である。本明細書において使用するとき、ｈｅｔの例には置換もしくは非置換ピロリジル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロチオフリル、ピペリジル、ピペラジル、プリニル、テトラヒドロピラニル、モルホリノ、１，３−ジアザパニル、１，４−ジアザパニル、１，４−オキサゼパニル、１，４−オキサチアパニル、フリル、チエニル、ピリル、ピロリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、インダゾリル、オキサジアゾリル、イミダゾリル、ピロリジル、ピロリジニル、チアゾリル、オキサゾリル、ピリジル、ピラゾリル、ピラジニル、ピリミジニル、イソオキサゾリル、ピラジニル、キノリル、イソキノリル、ピリドピラジニル、ピロロピリジル、フロピリジル、インドリル、ベンゾフリル、ベンゾチオフリル、ベンゾインドリル、ベンゾチエニル、ピラゾリル、ピペリジル、ピペラジニル、インドリニル、モルホリニル、ベンゾオキサゾリル、ピロロキノリル等が含まれる。ヘテロアリールはｈｅｔの定義の範囲に含まれる。ヘテロアリールの例は、ピリジル、ピリミジニル、キノリル、チアゾリルおよびベンゾチアゾリルである。最も好ましいｈｅｔはピリジル、ピリミジニルおよびチアゾリルである。
【００３５】
ｈｅｔは非置換であるか、または本明細書に定義のとおりに置換されていてもよい。非置換であるか、または置換されているときこれは炭素原子上でハロゲン、とりわけフッ素または塩素、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、例えばメチルおよびエチル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、とりわけメトキシおよびエトキシ、ニトロ、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ４アルキルまたは−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１−Ｃ４アルキル、カルバモイル、Ｎ−モノ−もしくはＮ，Ｎ−ジ低級アルキルカルバモイル、低級アルキルカルバミン酸エステル、アミジノ、グアニジノ、ウレイド、メルカプト、スルホ、低級アルキルチオ、スルホアミノ、スルホンアミド、スルホネート、スルファニル、ＳＣＮまたはニトロで、または窒素原子上でＣ１−Ｃ４アルキル、とりわけメチルまたはエチル、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ４アルキルまたは−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１−Ｃ４アルキル、例えばカルボメトキシまたはカルボエトキシで置換されていることが好ましい。２個の置換基が共通して結合している窒素と一体となってｈｅｔであるとき、当該ヘテロ環式環は窒素含有環、例えばアジリジン、アゼチジン、アゾール、ピペリジン、ピペラジン、モルフィリン、ピロール、ピラゾール、チアゾール、オキサゾール、ピリジン、ピリミジン、イソキサゾール等であり、当該ｈｅｔは非置換であるか、または上記定義のとおりに置換されていてもよいと理解される。
【００３６】
ハロゲンはフッ素、塩素、臭素またはヨウ素、とりわけフッ素および塩素である。
異なることが記載されていない限り、「アルキル」は、上記または組み合わせのいずれかにおいて、直鎖または分枝鎖アルキル、例えばメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチルおよび分枝鎖ペンチル、ｎ−ヘキシルおよび分枝鎖ヘキシル等を含む。
【００３７】
「シクロアルキル」基は、３−１０個の環炭素原子を有するＣ３−Ｃ１０シクロアルキルを意味し、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルまたはシクロオクチル、シクロノニル等であってよい。シクロアルキル基は単環式または縮合二環式であってよい。単環式のものが好ましい。さらに、好ましいシクロアルキル基はシクロペンチルまたはシクロヘキシルである。最も好ましくは、シクロアルキルはシクロヘキシルである。シクロアルキル基は完全飽和または部分不飽和であり得るが、好ましくは完全飽和である。本明細書に定義のとおり、これはアリール基を除外する。シクロアルキル基は非置換であるか、下記定義の置換基、好ましくはハロ、ヒドロキシまたはＣ１−Ｃ６アルキル、例えばメチルのいずれかで置換されていてもよい。
【００３８】
分子の細胞膜の通過を容易にする置換基は、医薬品化学の分野における当業者に既知である［例えば、Gangewar S. et al., Drug Discov Today, Vol. 2, pp. 148-155 (1997); and Bundgaard H. and Moss J., Pharma Res, Vol. 7, p. 885 (1990)参照］。一般に、当該置換基は親油性置換基である。かかる親油性置換基は、飽和、モノ不飽和、ポリ不飽和であるＣ６−Ｃ３０アルキル、例えばメチレン中断ポリエン、フェニル、１または２個のＣ１−Ｃ８アルキル基で置換されたフェニル、Ｃ５−Ｃ９シクロアルキル、１または２個のＣ１−Ｃ８アルキル基で置換されたＣ５−Ｃ９シクロアルキル、−Ｘ１フェニル、フェニル環において１または２個のＣ１−Ｃ８アルキル基で置換された−Ｘ１フェニル、Ｘ１−Ｃ５−Ｃ９シクロアルキルまたは１または２個のＣ１−Ｃ８アルキル基で置換されたＸ１−Ｃ５−Ｃ９シクロアルキルを含み；ここでＸ１は飽和、モノ不飽和またはポリ不飽和であり、直鎖または分枝鎖Ｃ１−Ｃ２４アルキルである。
非置換は、水素のみが置換基であることを意味している。
【００３９】
本明細書に記載されているものを除き、上記定義のアリール、ｈｅｔ、アルキル、アルケニル、アルキニルまたはシクロアルキルのいずれかは非置換であるか、またはハロ、例えばＣｌまたはＢｒ；ヒドロキシ；低級アルキル、例えばＣ１−Ｃ３アルキル；本明細書に定義のいずれかの置換基で置換されていてもよい低級アルキル；低級アルケニル；低級アルキニル；低級アルカノイル；低級アルコキシ、例えばメトキシ；アリール、例えばフェニルまたはナフチル；置換アリール、例えばフルオロフェニルまたはメトキシフェニル；アリール低級アルキル、例えばベンジル、アミノ、モノもしくはジ−低級アルキル、例えばジメチルアミノ；低級アルカノイルアミノ、アセチルアミノ；アミノ低級アルコキシ、例えばエトキシアミン；ニトロ；シアノ；シアノ低級アルキル；カルボキシ；低級カルボアルコキシ、例えばメトキシカルボニル；ｎ−プロポキシカルボニルまたはイソプロポキシカルボニル、低級アリーロイル、例えばベンゾイル；カルバモイル；Ｎ−モノ−もしくはＮ、Ｎジ−低級アルキルカルバモイル；低級アルキルカルバミン酸エステル；アミジノ；グアニジン；ウレイド；メルカプト；スルホ；低級アルキルチオ；スルホアミノ；スルホンアミド；ベンゾスルホンアミド；スルホネート；スルファニル低級アルキル、例えばメチルスルファニル；スルホアミノ；アリールスルホンアミド；ハロゲン置換もしくは非置換アリールスルホネート、例えばクロロフェニルスルホネート；低級アルキルスルフィニル；アリールスルフィニル；アリール低級アルキルスルフィニル；低級アルキルアリールスルフィニル；低級アルカンスルホニル；アリールスルホニル；アリール低級アルキルスルホニル；低級アリールアルキル；低級アルキルアリールスルホニル；ハロゲン低級アルキルメルカプト；ハロゲン低級アルキルスルホニル；例えばトリフルオロメタン  アルコキシホスホリル；ウレアおよび式（Ｒ９）ＮＣ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１０），（Ｒ１３）の置換ウレア（式中、Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１３は本明細書に定義のとおりである）、例えば３−トリフルオロ−メチル−フェニルウレア；アルキルカルバミン酸エステルまたはカルバメート、例えばエチル−Ｎ−フェニル−カルバメート；または−ＮＲ８Ｒ１４（ここで、Ｒ８およびＲ１４は同一または異なっていてよく、独立してＨ；低級アルキル、例えばメチル、エチルまたはプロピルであるか；またはＲ８とＲ１４はＮ原子と一体となって、１個の窒素ヘテロ環原子と所望により窒素、酸素および硫黄から成る群から選択される１または２個のさらなるヘテロ環原子を含む３〜８員ヘテロ環式環を形成する）（例えばピペラジニル、ピラジニル、低級アルキル−ピペラジニル、ピリジル、インドリル、チオフェニル、チアゾリル、ベンゾチオフェニル、ピロリジニル、ピペリジノまたはイミダゾリニル）（当該ヘテロ環式環は上記定義のいずれかの置換基で置換されていてもよい）から成る群から選択される、独立して４個まで、好ましくは１、２または３個の置換基で置換されていてもよい。
【００４０】
好ましくは上記アルキル、シクロアルキルおよびアリール基は独立して、非置換であるか、または低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、カルボキシ、低級カルボアルコキシおよびとりわけハロゲン、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＯＣＨ３、−ＳＣＨ３、−ＣＮ、−ＳＣＮまたはニトロで置換される。
本明細書に定義のとおり、「低級アルキル」なる用語は、単独でまたは組み合わせて使用するとき、１〜６個の炭素原子を含むアルキルを意味する。当該アルキル基は分枝鎖または直鎖であってよく、上記定義のとおりである。
【００４１】
「低級アルケニル」なる用語は、２〜６個の炭素原子を含むアルケニル基を意味する。アルケニル基は少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含むヒドロカルビル基である。本明細書に定義のとおり、これは非置換であるか、または本明細書に記載の置換基で置換されていてもよい。炭素−炭素二重結合はアルケニル基のいずれかの２個の炭素原子間に存在していてよい。これは１または２個の炭素−炭素二重結合、より好ましくは１個の炭素−炭素二重結合を含むことが好ましい。アルケニル基は直鎖または分枝鎖であってよい。例は、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、２−メチル−１−プロペニル、１，３−ブタジエニル等を含む。好ましいアルケニル基はエテニルである。
【００４２】
「低級アルキニル」なる用語は、本明細書において使用するとき、２〜６個の炭素原子を含むアルキニル基を意味する。アルキニル基は少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を含むヒドロカルビル基である。炭素−炭素三重結合はアルキニル基のいずれかの２個の炭素原子間に存在していてよい。アルキニル基は１または２個の炭素−炭素三重結合、より好ましくは１個の炭素−炭素三重結合を含むことが好ましい。アルキニル基は直鎖または分枝鎖であってよい。例はエチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニル等を含む。好ましいアルキニルはエチニルである。
【００４３】
本明細書において使用するとき、「アリールアルキル」なる用語は、主鎖と架橋アルキレン基で結合したアリール基を意味する。例は、ベンジル、フェネチル、ナフチルメチル等を含む。好ましいアリールアルキルはベンジルである。同様に、シアノアルキル基は主鎖と架橋アルキレン基で結合したシアノ基を意味する。
【００４４】
他方、「アルキルアリール」なる用語は、主鎖とフェニレン基を介して架橋しているアルキル基を意味する。例は、メチルフェニル、エチルフェニル等を含む。
【００４５】
本明細書において使用するとき、「低級アルカノイル」なる用語は、１個の炭素原子がＣ＝Ｏ基で置換されている低級アルキル鎖を意味する。Ｃ＝Ｏ基は該置換基の一方の末端に存在するか、または該基の中に存在し得る。例は、ホルミル、アセチル２−プロパノイル、１−プロパノイル等を含む。
【００４６】
「アルコキシ」なる用語は、主鎖と酸素原子によって結合している本明細書に定義のアルキル基を意味する。例は、メトキシ、エトキシ等を含む。
【００４７】
「低級チオアルキル」なる用語は、主鎖と硫黄原子によって結合している本明細書に定義のアルキル基を意味する。例は、チオメチル（またはメルカプトメチル）、チオエチル（メルカプトエチル）等を含む。
【００４８】
「低級カルボアルコキシ」なる用語またはその同義語は、主鎖との結合がアリール基を介しているアルコキシカルボニル基（Ｃ（Ｏ））を意味する。例は、メトキシカルボニル、エトキシカルボニル等を含む。
【００４９】
用語Ｃ（Ｏ）は、ケトン、アルデヒドまたは酸もしくは酸誘導体であれ−Ｃ＝Ｏ基を意味していると理解される。同様に、Ｓ（Ｏ）は−Ｓ＝Ｏ基を意味する。
【００５０】
本明細書において使用するとき、用語Ｓ（Ｏ）ｒは硫黄原子と結合した数個の酸素原子を意味する。ｒ＝２であるとき、Ｓ（Ｏ）ｒ＝ＳＯ２であり；ｒが１であるとき、Ｓ（Ｏ）ｒはＳＯであり；ｒ＝０であるとき、Ｓ（Ｏ）ｒはＳである。
【００５１】
「Ｃ０」なる用語は、本明細書においてアルキルの定義の一部として、例えばＣ０−１０として使用するとき、０個の炭素原子を意味する。したがって、「Ｃ０−Ｃ１０アリールアルキル」は、アリール基が主鎖と直接結合しているか（Ｃ０）、または主鎖とアリール基を架橋するＣ１−Ｃ１０アルキレンが存在することを意味する。
【００５２】
より大きな基、例えば（ＣＨ２）０−６Ｃ３−Ｃ７シクロアルキルの定義の一部としての（ＣＨ２）０−６なる用語は、存在しない基（ＣＨ２）０または１〜６個の炭素原子を含む基（ＣＨ２）１−６を意味する。
【００５３】
Ｒ１１およびＲ１２の定義における「（ＣＨ２）０−６−（ＣＨ）０−１（アリール）１−２」なる用語は、（ＣＨ２）１−６−アリール、アリール、−ＣＨ（アリール）２、または（ＣＨ２）１−６（ＣＨ）（アリール）２の１個の意味することを意図する。
【００５４】
本明細書において使用するとき、変数「ｎ」はピロリジニル（テトラヒドロピロリル）環上の置換基の数を意味する。「ｎ」なる用語は０〜７と定義され、これはピロリジニル（テトラヒドロピロリル）環上のＱ置換基の数を決定する。Ｑはピロリジニル環の２、３、４または５位、すなわちピロリジニル環の炭素原子にのみ存在し得る。１個の置換基を許容する炭素番号２を除き、他の炭素原子は各々飽和であり、これらは各々２個の置換基を有していてもよい。ｎが７であるとき、各炭素原子は本明細書に定義のＱと結合する。各Ｑは同一または異なっていてよい。しかし、ｎが６であるとき、７個の可能な置換基の１個がＨであり、他の５個が同一または異なっていてよいＱである。さらに、ｎが５であるとき、可能な置換基の２個がＨであり、他の５個が独立して本明細書に定義のＱである。ｎが４であるとき、７個の可能な置換基の３個がＨであり、残りが独立して本明細書に定義のＱである。ｎが３であるとき、７個の可能な置換基の４個がＨであり、他の３個が本明細書に定義のＱである。ｎが２であるとき、７個の可能な置換基の２個がＱであり、残りがＨである。ｎが１であるとき、７個の可能な置換基の１個のみがＱであり、残りがＨである。最後に、ｎが０であるとき、７個の置換基全てがＨである。
【００５５】
各Ｑ置換基が同一であってもよく、またはそれらが異なっていてもよいことが理解される。
【００５６】
化合物、塩、医薬組成物について複数形を用いるとき、これは１個の化合物、１個の医薬組成物、塩等を意味することをも意図している。
【００５７】
同様に含まれるものは、上記化合物の薬学的に許容される塩、対応するラセミ体、ジアステレオマー、エナンチオマー、互変異性体ならびに対応する結晶修飾物、存在するとき、例えば溶媒和物、水和物および多型であり、これらは本明細書において開示される。
【００５８】
上記疾患および状態に使用するＩＡＰ阻害剤化合物の正確な投与量は、宿主、処置する状態の性質および重症度、投与形態を含む様々な要因に依存する。ＩＡＰ阻害剤化合物は経口、非経腸、例えば腹腔内、静脈内、筋肉内、皮下、腫瘍内もしくは直腸、または経腸を含む何れかの投与経路で投与することができる。好ましくは、ＩＡＰ阻害剤化合物を経口的に、好ましくは１日用量１−３００ｍｇ／ｋｇ体重、またはほとんどの大型霊長類において１日用量５０−５，０００、好ましくは５００−３，０００ｍｇで投与することができる。好ましい経口１日用量は、１−７５ｍｇ／ｋｇ体重またはほとんどの大型霊長類において１日用量１０−２，０００ｍｇであり、単回投与または複数回投与、例えば１日２回投与に分割して投与する。
【００５９】
通常、小用量を最初に投与し、処置下で宿主に最適な投与量が決定されるまで投与量を漸増する。投与量の上限は副作用によって生じ、そして処置する宿主の試験によって決定することができる。
【００６０】
投与レジメンは具体的な適応症、患者の年齢、体重および一般的な健康状態ならびに望まれる応答に漸増されるべきであるが、一般に、用量は単回または複数回１日投与に必要なものとして、約１０ｍｇ／日〜約５００ｍｇ／日である。
【００６１】
１つの局面において、本発明は（ａ）式（Ｉ）：
【化６】
0005394249.tif 000007
〔式中、
Ｒ１はＨ；Ｃ１−Ｃ４アルキル；Ｃ１−Ｃ４アルケニル；Ｃ１−Ｃ４アルキニルまたはＣ３−Ｃ１０シクロアルキルであり、これは非置換であるか、または置換されており；
Ｒ２はＨ；Ｃ１−Ｃ４アルキル；Ｃ１−Ｃ４アルケニル；Ｃ１−Ｃ４アルキニルまたはＣ３−Ｃ１０シクロアルキルであり、これは非置換であるか、または置換されており；
Ｒ３はＨ；−ＣＦ３；−Ｃ２Ｆ５；Ｃ１−Ｃ４アルキル；Ｃ１−Ｃ４アルケニル；Ｃ１−Ｃ４アルキニル；−ＣＨ２−Ｚであるか、または
Ｒ２とＲ３は窒素と一体となって、ｈｅｔ環を形成し；
ＺはＨ；−ＯＨ；Ｆ；Ｃｌ；−ＣＨ３；−ＣＦ３；−ＣＨ２Ｃｌ；−ＣＨ２Ｆまたは−ＣＨ２ＯＨであり；
Ｒ４はＣ１−Ｃ１６直鎖もしくは分枝鎖アルキル；Ｃ１−Ｃ１６アルケニル；Ｃ１−Ｃ１６アルキニル；または−Ｃ３−Ｃ１０シクロアルキル；−（ＣＨ２）１−６−Ｚ１；−（ＣＨ２）０−６−アリールフェニル；および−（ＣＨ２）０−６−ｈｅｔであり、ここでアルキル、シクロアルキルおよびフェニルは非置換であるか、または置換されており；
Ｚ１は−Ｎ（Ｒ８）−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−Ｎ（Ｒ８）−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｎ（Ｒ８）−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０−６−フェニル；−Ｎ（Ｒ８）−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ；−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ９）（Ｒ１０）；−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）０−６−フェニル；−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ；−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０−６−フェニル；−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔであり、ここでアルキル、シクロアルキルおよびフェニルは非置換であるか、または置換されており；
【００６２】
ｈｅｔはＮ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ原子を含む５〜７員ヘテロ環式環、または少なくとも１個のＮ、ＯおよびＳから選択される１、２もしくは３個のヘテロ原子を含む５〜７員ヘテロ環式環を含む８〜１２員縮合環系であり、当該ヘテロ環式環または縮合環系は非置換であるか、または炭素原子もしくは窒素原子上で置換されており；
Ｒ８はＨ；−ＣＨ３；−ＣＦ３；−ＣＨ２ＯＨまたは−ＣＨ２Ｃｌであり；
Ｒ９およびＲ１０は各々独立して、Ｈ；Ｃ１−Ｃ４アルキル；Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−（ＣＨ２）０−６−フェニルであり、ここでアルキル、シクロアルキルおよびフェニルは非置換であるか、または置換されているか、または
Ｒ９とＲ１０は窒素と一体となって、ｈｅｔを形成し；
Ｒ５はＨ；Ｃ１−Ｃ１０アルキル；アリール；フェニル；Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｃ１−Ｃ１０アルキル−アリール；−（ＣＨ２）０−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル−（ＣＨ２）０−６−フェニル；−（ＣＨ２）０−４ＣＨ−（（ＣＨ２）１−４−フェニル）２；−（ＣＨ２）０−６−ＣＨ（フェニル）２；−インダニル；−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０−６−フェニル；−（ＣＨ２）０−６−Ｃ（Ｏ）−フェニル；−（ＣＨ２）０−６−ｈｅｔ；−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔであるか、または
Ｒ５はアミノ酸の残基であり、ここでアルキル、シクロアルキル、フェニルおよびアリール置換基は非置換であるか、または置換されており；
【００６３】
Ｕは構造（ＩＩＩ）
【化７】
0005394249.tif 000008
｛式中、
ｎ＝０−５；
Ｘは−ＣＨまたはＮであり；
ＲａおよびＲｂは独立して、Ｏ、ＳもしくはＮ原子、またはＣ０−Ｃ８アルキルであり、ここで当該アルキル鎖の１個以上の炭素原子がＯ、ＳまたはＮから選択されるヘテロ原子で置換されていてもよく、そして当該アルキルは非置換であるか、または置換されていてもよく；
Ｒｄは：
（ａ）  −Ｒｅ−Ｑ−（Ｒｆ）ｐ（Ｒｇ）ｑ；または
（ｂ）  Ａｒ１−Ｄ−Ａｒ２；または
（ｃ）  Ａｒ１−Ｄ−Ａｒ２であり；
ＲｃはＨであるか、またはＲｃとＲｄは一体となって、シクロアルキルまたはｈｅｔを形成してもよく；ここでＲｄとＲｃがシクロアルキルまたはｈｅｔを形成するとき、Ｒ５はＣまたはＮ原子で形成された環と結合しており；
ｐおよびｑは独立して０または１であり；
ＲｅはＣ１−Ｃ８アルキルまたはアルキリデンであり、そして当該Ｒｅは非置換であるか、または置換されていてもよく；
ＱはＮ、Ｏ、Ｓ、Ｓ（Ｏ）またはＳ（Ｏ）２であり；
Ａｒ１およびＡｒ２は置換または非置換アリールまたはｈｅｔであり；
【００６４】
ＲｆおよびＲｇは互いに独立して存在しないか、またはＨ；−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；Ｃ１−Ｃ１０アルキルアリール；−ＯＨ；−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−（ＣＨ２）０−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｏ−（ＣＨ２）０−６−アリール；フェニル；アリール；フェニル−フェニル；−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ；−Ｏ−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ；−ＯＲ１１；−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１１；−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）；Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）；−Ｓ−Ｒ１１；−Ｓ（Ｏ）−Ｒ１１；−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ１１；−Ｓ（Ｏ）２−ＮＲ１１Ｒ１２；−ＮＲ１１−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ１２；Ｓ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；アリール−Ｃ１−Ｃ４アルキル；ｈｅｔ−Ｃ１−Ｃ４アルキル（ここでアルキル、シクロアルキル、ｈｅｔおよびアリールは非置換であるか、または置換されている）；−ＳＯ２−Ｃ１−Ｃ２アルキル；−ＳＯ２−Ｃ１−Ｃ２アルキルフェニル；−Ｏ−Ｃ１−Ｃ４アルキルであるか、または
ＲｇとＲｆはｈｅｔまたはアリールから選択される環を形成し；そして
Ｄは−ＣＯ−；−Ｃ（Ｏ）−またはＣ１−Ｃ７アルキレンもしくはアリーレン；−ＣＦ２−；−Ｏ−；−またはＳ（Ｏ）ｎｒ（ここでｒｎは０−２である）；１，３ジオキソラン；またはＣ１−Ｃ７アルキル−ＯＨであり、ここでアルキル、アルキレンもしくはアリーレンは非置換であるか、またはハロゲン、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｓ−Ｃ１−Ｃ６アルキルもしくは−ＣＦ３の１個以上で置換されていてもよいか、または
Ｄは−Ｎ（Ｒｈ）であり、ここでＲｈはＨ；Ｃ１−Ｃ７アルキル（置換もしくは非置換）；アリール；−Ｏ（Ｃ１−Ｃ７シクロアルキル）（置換もしくは非置換）；Ｃ（Ｏ）−Ｃ１０−Ｃ１０アルキル；Ｃ（Ｏ）−Ｃ０−Ｃ１０アルキル−アリール；Ｃ−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；Ｃ−Ｏ−Ｃ０−Ｃ１０アルキル−アリールまたはＳＯ２−Ｃ１０−Ｃ１０−アルキル；ＳＯ２−（Ｃ０−Ｃ１０−アルキルアリール）であり；
Ｒ６、Ｒ７、Ｒ’６およびＲ’７は各々独立して、Ｈ；−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ；アリール−Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ；−ＯＨ；−Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−（ＣＨ２）０−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｏ−（ＣＨ２）０−６−アリール；フェニル；−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ；−Ｏ−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ；−ＯＲ１１；−Ｃ（Ｏ）−Ｒ１１；−Ｃ（Ｏ）−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）；−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）；−Ｓ−Ｒ１１；−Ｓ（Ｏ）−Ｒ１１；−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ１１；−Ｓ（Ｏ）２−ＮＲ１１Ｒ１２；−ＮＲ１１−Ｓ（Ｏ）２−Ｒ１２であり、ここでアルキル、シクロアルキルおよびアリールは非置換であるか、または置換されており；そしてＲ６、Ｒ７、Ｒ’６とＲ’７は一体となって環系を形成してもよく；そして
【００６５】
Ｒ１１およびＲ１２は独立してＨ；Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−（ＣＨ２）０−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−（ＣＨ２）０−６−（ＣＨ）０−１（アリール）１−２；−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）０−６−アリール；−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０−６−Ｏ−フルオレニル；−Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０−６−アリール；−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０−６−アリール；−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ；−Ｃ（Ｓ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル；−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル；−Ｃ（Ｓ）−Ｏ−（ＣＨ２）０−６−アリール；−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０−６−Ｏ−フルオレニル；−Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０−６−アリール；−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０−６−アリール；−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔであり、ここでアルキル、シクロアルキルおよびアリールは非置換であるか、または置換されているか、または
Ｒ１１およびＲ１２は当該分子の細胞膜の通過を促進する置換基であるか、または
Ｒ１１とＲ１２は窒素原子と一体となって、ｈｅｔを形成し、
ここでＲ１１およびＲ１２のアルキル置換基は非置換であるか、またはＣ１−Ｃ１０アルキル、ハロゲン、ＯＨ、−Ｏ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｓ−Ｃ１−Ｃ６アルキルまたは−ＣＦ３から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ１１およびＲ１２の置換シクロアルキル置換基はＣ１−Ｃ１０アルケン；Ｃ１−Ｃ６アルキル；ハロゲン；ＯＨ；−Ｏ−Ｃ１−Ｃ６アルキル；−Ｓ−Ｃ１−Ｃ６アルキルまたは−ＣＦ３から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；そして
Ｒ１１およびＲ１２の置換フェニルまたはアリールはハロゲン；ヒドロキシ；Ｃ１−Ｃ４アルキル；Ｃ１−Ｃ４アルコキシ；ニトロ；−ＣＮ；−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ４アルキルおよび−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１−Ｃ４アリールから選択される１個以上の置換基で置換されていてもよい｝
で示される〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩、または
【００６６】
式（Ｉａ）
【化８】
0005394249.tif 000009
〔式中、
Ｒ１はＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ２−Ｃ４アルキニルまたはＣ３−Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｒ１は非置換であるか、または置換されていてもよく；
Ｒ２はＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ２−Ｃ４アルキニルまたはＣ３−Ｃ１０シクロアルキルであり、Ｒ２は非置換であるか、または置換されていてもよく；
Ｒ３はＨ、ＣＦ３、Ｃ２Ｆ５、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ２−Ｃ４アルケニル、Ｃ２−Ｃ４アルキニル、ＣＨ２−Ｚであるか、または
Ｒ２とＲ３はそれらが結合している窒素と一体となって、ヘテロ環式環を形成し；当該アルキル、アルケニル、アルキニルまたはｈｅｔ環は非置換であるか、または置換されていてもよく；
ＺはＨ、ＯＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＨ３、ＣＨ２Ｃｌ、ＣＨ２ＦまたはＣＨ２ＯＨであり；
Ｒ４はＣ０−Ｃ１０アルキル；Ｃ０−Ｃ１０アルケニル；Ｃ０−Ｃ１０アルキニル；またはＣ３−Ｃ１０シクロアルキルであり、ここでＣ０−Ｃ１０アルキルまたはシクロアルキル基は非置換であるか、または置換されており；
Ａはｈｅｔであり、これは非置換であるか、または置換されていてもよく；
【００６７】
ＤはＣ１−Ｃ７アルキレンまたはＣ２−Ｃ９アルケニレン、Ｃ（Ｏ）、Ｏ、ＮＲ７、Ｓ（Ｏ）ｒ、Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｓ（Ｏ）ｒ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｃ０−Ｃ１０アリールアルキル、ＯＣ０−Ｃ１０アリールアルキルまたはＳ（Ｏ）ｒＣ０−Ｃ１０アリールアルキルであり、当該アルキルおよびアリール基は非置換であるか、または置換されていてもよく；
ｒは０、１または２であり；
Ａ１は置換もしくは非置換アリールまたは置換もしくは非置換ｈｅｔであり、当該アリールおよびｈｅｔ上の置換基はハロ、アルキル、低級アルコキシ、ＮＲ５Ｒ６、ＣＮ、ＮＯ２またはＳＲ５であり；
各Ｑは独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルコキシ、アリールＣ１−Ｃ１０アルコキシ、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１−Ｃ１０アルキル、（ＣＨ２）０−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、アリール、アリールＣ１−Ｃ１０アルキル、Ｏ−（ＣＨ２）０−６アリール、（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ、ｈｅｔ、Ｏ−（ＣＨ２）１−６ｈｅｔ、−ＯＲ１１、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）、ＳＲ１１、Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、Ｓ（Ｏ）２−Ｎ（Ｒ１１）（Ｒ１２）またはＮＲ１１−Ｓ（Ｏ）２−（Ｒ１２）であり、ここでアルキル、シクロアルキルおよびアリールは非置換であるか、または置換されており；
ｎは０、１、２または３、４、５、６または７であり；
ｈｅｔはＮ、ＯおよびＳから選択される１〜４個のヘテロ環原子を含む５〜７員単環式ヘテロ環式環、または１個のＮ、ＯおよびＳから選択される１、２もしくは３個のヘテロ原子を含む５〜７員単環式ヘテロ環式環を含む８〜１２員縮合環系であり、ｈｅｔは非置換であるか、または置換されており；
【００６８】
Ｒ１１およびＲ１２は独立して、Ｈ、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、（ＣＨ２）０−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、（ＣＨ２）０−６−（ＣＨ）０−１（アリール）１−２、Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−（ＣＨ２）０−６−アリール、−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０−６−Ｏ−フルオレニル、Ｃ（Ｏ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０−６−アリール、Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）０−６−アリール、Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ、−Ｃ（Ｓ）−Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）１−６−Ｃ３−Ｃ７シクロアルキル、Ｃ（Ｓ）−Ｏ−（ＣＨ２）０−６−アリール、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０−６−Ｏ−フルオレニル、Ｃ（Ｓ）−ＮＨ−（ＣＨ２）０−６−アリール、−Ｃ（Ｓ）−（ＣＨ２）０−６−アリールまたはＣ（Ｓ）−（ＣＨ２）１−６−ｈｅｔ、Ｃ（Ｏ）Ｒ１１、Ｃ（Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（Ｏ）ＯＲ１１、Ｓ（Ｏ）ｎＲ１１、Ｓ（Ｏ）ｍＮＲ１１Ｒ１２（ｍ＝１または２）、Ｃ（Ｓ）Ｒ１１、Ｃ（Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ（Ｓ）ＯＲ１１であり、ここでアルキル、シクロアルキルおよびアリールは非置換であるか、または置換されているか；またはＲ１１とＲ１２は当該分子の細胞膜の通過を促進する置換基であるか；または
Ｒ１１とＲ１２は窒素原子と一体となって、ｈｅｔを形成し、
ここでＲ１１およびＲ１２のアルキル置換基は非置換であるか、またはＣ１−Ｃ１０アルキル、ハロゲン、ＯＨ、Ｏ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−Ｓ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、ＣＦ３またはＮＲ１１Ｒ１２から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ１１およびＲ１２の置換シクロアルキル置換基はＣ２−Ｃ１０アルケン；Ｃ１−Ｃ６アルキル；ハロゲン；ＯＨ；Ｏ−Ｃ１−Ｃ６アルキル；Ｓ−Ｃ１−Ｃ６アルキル、−ＣＦ３またはＮＲ１１Ｒ１２から選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；そして
Ｒ１１およびＲ１２の置換ｈｅｔまたは置換アリールはハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、ニトロ、−ＣＮＯ−Ｃ（Ｏ）−Ｃ１−Ｃ４アルキルおよびＣ（Ｏ）−Ｏ−Ｃ１−Ｃ４アルキルから選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は独立して、水素、低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、シクロアルキルまたはシクロアルキル低級アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｒ５；Ｓ（Ｏ）Ｒ５、Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ６であり、そして
【００６９】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、ＱおよびＡならびにＡ１基上の置換基は、独立して、ハロ、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルキニル、低級アルカノイル、低級アルコキシ、アリール、アリール低級アルキル、アミノ、アミノ低級アルキル、ジ低級アルキルミノ、低級アルカノイル、アミノ低級アルコキシ、ニトロ、シアノ、シアノ低級アルキル、カルボキシ、低級カルボアルコキシ、低級アルカノイル、アリーロイル（aryloyl）、低級アリールアルカノイル、カルバモイル、Ｎ−モノもしくはＮ，Ｎ−ジ低級アルキルカルバモイル、低級アルキルカルバミン酸エステル、アミジノ、グアニジン、ウレイド、メルカプト、スルホ、低級アルキルチオ、スルホアミノ、スルホンアミド、ベンゾスルホンアミド、スルホネート、スルファニル、低級アルキル、アリールスルホンアミド、ハロゲン置換アリールスルホネート、低級アルキルスルフィニル、アリールスルフィニル、アリール−低級アルキルスルフィニル、低級アルキルアリールスルフィニル、低級アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アリール−低級アルキルスルホニル、低級アリールアルキル低級アルキルアリールスルホニル、ハロゲン−低級アルキルメルカプト、ハロゲン−低級アルキルスルホニル、ホスホノ（−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２）、ヒドロキシ−低級アルコキシホスホリルまたはジ−低級アルコキシホスホリル、（Ｒ９）ＮＣ（Ｏ）−ＮＲ１０Ｒ１３、低級アルキルカルバミン酸エステルまたはカルバメートまたは−ＮＲ８Ｒ１４であり、
【００７０】
ここで
Ｒ８およびＲ１４は同一または異なって、独立してＨまたは低級アルキルであるか、またはＲ８とＲ１４はＮ原子と一体となって、所望により窒素、酸素および硫黄から選択される１または２個のさらなるヘテロ環原子を含んでいてもよい窒素ヘテロ環原子含有３〜８員ヘテロ環式環を形成し、当該ヘテロ環式環は非置換であるか、または低級アルキル、ハロ、低級アルケニル、低級アルキニル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ニトロ、アミノ、低級アルキルアミノ、ジ低級アルキルアミノ、シアノ、カルボキシ、低級カルボアルコキシ、ホルミル、低級アルカノイル、オキソ、カルバモイル、Ｎ−低級もしくはＮ，Ｎ−ジ低級アルキルカルバモイル、メルカプトまたは低級アルキルチオで置換されていてもよく；そして
Ｒ９、Ｒ１０およびＲ１３は独立して水素、低級アルキル、ハロゲン置換低級アルキル、アリール、アリール低級アルキル、ハロゲン置換アリール、ハロゲン置換アリール低級アルキルである〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩と、
【００７１】
（ｂ）  式（ＩＩ）：
【化９】
0005394249.tif 000010
の化合物またはその塩；
（ｃ）  ドキソルビシン；および
（ｄ）  シタラビン；
の１種以上を含む、組合せ剤を提供する。
【００７２】
他の局面において、本発明は化合物（Ｉ）と化合物（ＩＩ）、ドキソルビシンまたはシタラビンを含む組合せ剤を提供する。化合物（Ｉ）はＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドであり得る。
【００７３】
さらなる局面において、本発明は化合物（Ｉａ）と化合物（ＩＩ）、ドキソルビシンまたはシタラビンを含む組合せ剤を提供する。化合物（Ｉａ）は（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドであり得る。
【００７４】
さらなる局面において、本発明は化合物（Ｉ）または（Ｉａ）と化合物（ＩＩ）、ドキソルビシンまたはシタラビンを含む医薬組成物を提供する。化合物（Ｉ）はＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドであり得て、化合物（Ｉａ）は（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドであり得る。
【００７５】
他の局面において、本発明は化合物（ＩＩ）、ドキソルビシンまたはシタラビンを含む医薬組成物と組み合わせる化合物（Ｉ）または（Ｉａ）を含む医薬組成物を提供する。化合物（Ｉ）はＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドであり得て、化合物（Ｉａ）は（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドであり得る。
【００７６】
プロアポトーシス性ＩＡＰ阻害剤、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドは、ＰＫＣ４１２または標準的な細胞毒性剤（ドキソルビシンおよびＡｒａ−ｃ）と組み合わせたとき変異ＦＬＴ３を発現するＰＫＣ４１２感受性細胞系および抵抗性細胞系の死滅をインビトロおよびインビボで増加させる。
【００７７】
さらに、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドとＰＫＣ４１２の組み合わせは、ＰＫＣ４１２に対する耐性を与える間質介在生存シグナル伝達を阻害する。
【００７８】
Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドはまた、標準的な化学療法剤、例えばドキソルビシンを含むトポイソメラーゼ阻害剤、およびシタラビン（Ａｒａ−ｃとも知られる）を含む代謝拮抗剤の抗増殖性効果を増強する。
【００７９】
Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドはＰＫＣ４１２感受性細胞および抵抗性細胞におけるドキソルビシンまたはＡｒａ−ｃの抗増殖性効果を増強する。
【００８０】
「トポイソメラーゼ阻害剤」なる用語は、トポイソメラーゼＩ阻害剤とトポイソメラーゼＩＩ阻害剤を含む。トポイソメラーゼＩ阻害剤の例は、トポテカン、ギマテカン、イリノテカン、カンプトテシンおよびそのアナログ、９−ニトロカンプトテシンおよび巨大分子カンプトテシン複合体ＰＮＵ−１６６１４８；１０−ヒドロキシカンプトテシン酢酸塩；エトポシド；塩酸イダルビシン；塩酸イリノテカン；テニポシド；塩酸トポテカン；ドキソルビシン；塩酸エピルビシン；塩酸ミトキサントロン；および塩酸ダウノルビシンを含むが、これらに限定されない。イリノテカンは、例えばＣＡＭＰＴＯＳＡＲの商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。トポテカンは、例えばＨＹＣＡＭＴＩＮ、例えばＣＡＭＰＴＯＳＡＲの商品名で、例えば市販されている形態で投与することができる。「トポイソメラーゼＩＩ阻害剤」なる用語は、本明細書において使用するとき、アントラサイクリン、例えばリポソーム製剤を含むドキソルビシン、例えばＣＡＥＬＹＸ、リポソーム製剤を含むダウノルビシン、例えばＤＡＵＮＯＳＯＭＥ、エピルビシン、イダルビシンおよびネモルビシン；アントラキノン類であるミトキサントロンおよびロソキサントロン；およびポドフィロトキシン類であるエトポシドおよびテニポシドを含むが、これらに限定されない。エトポシドはＥＴＯＰＯＰＨＯＳとして；テニポシドはＶＭ  ２６−ＢＲＩＳＴＯＬとして；ドキソルビシンはＡＤＲＩＢＬＡＳＴＩＮまたはＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮとして；エピルビシンはＦＡＲＭＯＲＵＢＩＣＩＮとして；イダルビシンはＺＡＶＥＤＯＳとして；そしてミトキサントロンはＮＯＶＡＮＴＲＯＮとして市販されている。
【００８１】
「代謝拮抗剤」なる用語は、本明細書において使用するとき、ＤＮＡの合成を阻害または阻止して細胞死を惹起する化合物に関する。代謝拮抗剤の例は、６−メルカプトプリン；シタラビン；フルダラビン；フレキシウリジン；フルオロウラシル；カペシタビン；ラルチトレキセド；メトトレキセート；クラドリビン；ゲムシタビン；塩酸ゲムシタビン；チオグアニン；ヒドロキシウレア；ＤＮＡ脱メチル化剤、例えば５−アザシチジンおよびデシタビン；エダトレキセート；および葉酸アンタゴニスト、例えば限定されないがペメトレキセドを含むが、これらに限定されない。カペシタビンは例えばＸＥＬＯＤＡの商品名で；そしてゲムシタビンはＧＥＭＺＡＲとして、例えば市販されている形態で投与することができる。シタラビンはシトシンアラビノシドの短縮形であり、一般に化学療法剤として使用され、主として白血病および非ホジキンリンパ腫の処置に使用される。これはＡｒａ−Ｃ、Ｃｙｔｏｓａｒ（登録商標）−Ｕ、Ｔａｒａｂｉｎｅ（登録商標）ＰＦＳまたは他の現地の商品名としても知られる。
【００８２】
「処置」または「治療」なる用語は、緩和、治癒、症状軽減、症状減少、制御および／または阻害、疾患、とりわけ下記疾患の処置を含むが、これらに限定されない予防または好ましくは治療に関する。
【００８３】
「ＡＭＬ」なる用語は、本明細書において使用するとき、骨髄性細胞、例えば顆粒球、ならびに赤血球および巨核球性細胞および幹細胞の制御されていない、速やかに進行する増殖に関する。ＡＭＬを有する患者において、未熟骨髄細胞、赤血球または巨核球性細胞が赤血球の数を大幅に超えて、疲労感および出血、また感染受容性の上昇を招く。小児および成人において、ＡＭＬは積極的化学療法プロトコルの使用にも拘わらず、不良な予後を示す。全体的な生存率は４０−６０％である。骨髄機能廃絶化学療法が先行する自己骨髄移植は生存率を変化させないが、積極的化学療法が先行する異種骨髄移植は生存率を７０％まで上昇させ得る。残念ながら、マッチする同胞ドナーの入手可能性は限られている。したがって、ＡＭＬ処置における新たな治療戦略が必要である。
【００８４】
温血動物（または患者）は、好ましくは哺乳類、とりわけヒトである。
【００８５】
Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドまたは（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドは、変異ＦＬＴ３発現細胞に対するＰＫＣ４１２の抗増殖性効果を相乗的に増強する。Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドまたは（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドとＰＫＣ４１２を含む組み合わせ実験において、２種の化合物間で相加乃至相乗効果が、組み合わせにおいて、多様なＰＫＣ４１２感受性細胞系および抵抗性細胞系に対してインビトロで観察される。マウスをＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドまたは（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドとＰＫＣ４１２の組合せ剤で処置したとき、正の共同的効果が急性白血病のインビボイメージングモデルにおいて観察され；ＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３−ｌｕｃ＋発現細胞を静脈注射し、薬剤の組合せ剤、比較としてビークルまたは各薬剤単独で処置したＮＣｒヌードマウスにおいて、腫瘍組織量の減少が観察される。
【００８６】
少数の白血病性ＣＤ３４＋細胞が、イマチニブで数年治療後のＣＭＬ患者の髄微小環境において残存し得る。同様に、ＦＬＴ３キナーゼ阻害剤を投与されている進行性ＡＭＬを有する患者での臨床試験で、応答の共通パターンが、保護的環境を示唆する骨髄芽球の最小の、もしくは遅延した減少と共に、循環芽球数の劇的な減少であることが判明した。これらの観察結果は、間質細胞と白血球細胞の相互作用のより深い理解が必須であることを示している。変異ＦＬＴ３発現細胞のＰＫＣ４１２に対する間質介在化学抵抗性は細胞をＩＡＰ阻害剤で処理することによって克服することができ、これはＰＫＣ４１２耐性を導く増殖因子介在シグナル伝達におけるＩＡＰの可能な役割を示す。
【００８７】
Ｂｃｌ−２、Ｂｃｌ−ＸＬおよび強いＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドまたは（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドＩＡＰ基質、ＸＩＡＰおよびＣＩＡＰ１を含むアポトーシスシグナル伝達タンパク質のパネルのＦＬＴ３制御を試験する。ＦＬＴ３形質転換細胞のＸＩＡＰ、Ｂｃｌ−２およびＢｃｌ−ＸＬにおいて、親細胞と比較して、わずかのみ変化する。これらのタンパク質発現におけるわずかな変化は、ＦＬＴ３形質転換細胞の、プロテインチロシンキナーゼ、例えばＰＫＣ４１２またはＩＡＰ阻害剤、例えばＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドまたは（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドの細胞毒性効果の受容性、ならびに２種の薬剤の組み合わせによる細胞毒性効果の上昇にいくらかの意味を有し得る。
【００８８】
すなわち、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドまたは（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドは、生理的に達成可能であり十分に耐容性である用量で、変異ＦＬＴ３に対してインビボで有効である。Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドまたは（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドはまた、ＰＫＣ４１２ならびに標準的な化学療法剤、例えばドキソルビシンおよびＡｒａ−ｃの変異ＦＬＴ３発現細胞に対する阻害効果をインビトロで、相加−相乗様式で作用して上昇させる。ＰＫＣ４１２抵抗性変異ＦＬＴ３発現細胞において相加的または相乗的に組み合わせるＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドまたは（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドとＰＫＣ４１２（またはドキソルビシンもしくはＡｒａ−ｃ）の能力は、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドまたは（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドのようなＩＡＰ阻害剤が潜在的に、他の薬剤と組み合わせて用いることによって薬剤抵抗性ＦＬＴ３変異の出現を抑制してより高い程度の患者応答性を得ることができると示している。
【００８９】
したがって、他の局面において、本発明は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）または常套の化学療法に抵抗性である急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を有する温血動物を処置する方法であって、当該動物に治療上有効量の化合物（Ｉ）または（Ｉａ）と化合物（ＩＩ）、ドキソルビシンまたはシタラビンの組合せ剤を投与することを含む方法を提供する。化合物（Ｉ）はＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドであってよく、化合物（Ｉａ）は（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドであってよい。
【００９０】
さらなる局面において、本発明は、化合物（Ｉ）または（Ｉａ）と化合物（ＩＩ）、ドキソルビシンまたはシタラビンを含む、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）または常套の化学療法に抵抗性である急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の処置用組合せ剤または医薬組成物を提供する。化合物（Ｉ）はＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドであってよく、化合物（Ｉａ）は（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドであってよい。
【００９１】
さらなる局面において、本発明は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）または常套の化学療法に抵抗性である急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）の処置用医薬の製造のための、化合物（Ｉ）または（Ｉａ）と化合物（ＩＩ）、ドキソルビシンまたはシタラビンを含む組合せ剤または医薬組成物の使用を提供する。化合物（Ｉ）はＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドであってよく、化合物（Ｉａ）は（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドであってよい。
【００９２】
他の局面において、化合物（Ｉ）または（Ｉａ）と化合物（ＩＩ）、ドキソルビシンまたはシタラビン、そしてＡＭＬの処置におけるその同時、個別または逐次的使用のための指示書を含む商品パッケージ。化合物（Ｉ）はＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドであってよく、化合物（Ｉａ）は（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドであってよい。
【００９３】
下記実施例において、ＰＫＣ４１２およびＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミドまたは（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドをNovartis Pharma AG, Basel, Switzerlandによって合成し、ＤＭＳＯ中に溶解させて１０ｍＭ原液とする。連続希釈をＤＭＳＯで行って、細胞アッセイのための最終希釈物を得る。
【実施例】
【００９４】
実施例１：細胞系および細胞培養物の製造
ＩＬ−３−依存性マウス造血細胞系Ｂａ／Ｆ３を、ＦＬＴ３−ＩＴＤまたはＦＬＴ３−Ｄ８３５Ｙ含有、ネオマイシン選択マーカーを含むＭＳＣＶレトロウイルスで形質導入し、ネオマイシン抵抗性について選択した。Kelly et al. (2002)参照。ＦＬＴ３−ＩＴＤ形質導入細胞をＧ４１８（１ｍｇ／ｍＬ）中での増殖について選択した。ＡＴＰ結合ポケットの変異（Ｆ６９１Ｌ、Ａ６２７Ｔ、Ｇ６９７Ｒ、Ｎ６７６Ｄ）を含むＦＬＴ３−ＩＴＤを発現するＰＫＣ４１２−抵抗性Ｂａ／Ｆ３細胞型を既報の通りに作成した。Cools et al. (2004)参照。ヒトＡＭＬ由来ＦＬＴ３−ＩＴＤ発現細胞系、ＭＶ４；１１［Quentmeier et al. (2003)参照］をDr. Scott Armstrong（Dana Farber Cancer Institute, Boston, MA）から入手した。ヒトＡＭＬ由来ＦＬＴ３−ＩＴＤ発現細胞系ＭＯＬＭ−１３を修飾してルシフェラーゼを発現させ、ＭＯＬＭ１３−ｌｕｃ＋として、Dr. Andrew Kung（Dana Farber Cancer Institute, Boston, MA）から入手した。全細胞系を５％ＣＯ２、３７℃で、濃度２×１０５〜５×１０５で１０％胎児ウシ血清を含む１％グルタミンを補ったＲＰＭＩ（Mediatech, Inc., Herndon, VA）中で培養した。野生型ＦＬＴ３を発現する親Ｂａ／Ｆ３細胞をＩＬ−３源として１５％ＷＥＨＩ調節培地で同様に培養した。全トランスフェクト細胞系を１ｍｇ／ｍｌのＧ４１８を補った培地中で培養した。
【００９５】
実施例２：抗体および免疫ブロッティング
ＸＩＡＰ（クローン２８？）抗体（BD Sciences, Franklin Lakes, NJ）、ＣＩＡＰ１抗体（Cell Signaling Technology, Danvers, MA）、Ｂｃｌ−２（ｃ−２）抗体（Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA）、およびＢｃｌ−ＸＬ（Ｈ−５）抗体（Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA）を各々１：２００の希釈で用いた。モノクローナル抗βアクチン抗体（クローンＡＣ−１５）をSigma-Aldrich（St. Louis, MO）から購入し、１：２０００の希釈で用いた。αチューブリン（クローンＤＭ１Ａ）抗体をSigma Aldrich（St. Louis, MO）から購入し、１：２０００の希釈で用いた。タンパク質溶解前処理および免疫ブロッティングを既報の通り行った。Weisberg et al. (2002)参照。
【００９６】
実施例３：細胞生存率およびアポトーシス分析
トリパンブルー排除アッセイは既に記載されており［Weisberg et al. (2002)参照］、これを用いてＰＫＣ４１２とＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）の存在下および非存在下で培養した細胞の増殖を測定した。細胞生存率は対照（未処理）細胞の％として表す。エラーバーは各データポイントについての平均の標準誤差を示す。薬剤処理細胞のアポトーシスを、Annexin-V-Fluos Staining Kit（Boehringer Mannheim, Indianapolis, IN）を用いて既報の通りに測定した。Weisberg et al. (2002)参照。
【００９７】
実施例４：ヒト間質試験
ＨＳ−５ヒト間質細胞（１０，０００／ウェル）を２４時間播種し、その後ＭＯＬＭ１３−ｌｕｃ＋細胞（４０，０００／ウェル）を播種し、そして多様な濃度のＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ単独または組み合わせで処理した。細胞をルシフェラーゼ発現について、Xenogen造影剤を用いて分析した。
【００９８】
実施例５：薬剤組み合わせ試験
薬剤組み合わせ試験のために、ＰＫＣ４１２とＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）を固定された比でＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞およびＰＫＣ４１２抵抗性変異ＦＬＴ３発現細胞に同時に加える。細胞生存率をトリパンブルー排除アッセイを用いて測定し、薬剤処理細胞対対照細胞の増殖効果の関数（ＦＡ）として表す；データをCalcusynソフトウェア（Biosoft, Ferguson, MO and Cambridge, UK）で、Chou-Talalay法を用いて分析する。Chou and Talalay et al. (1984)参照。組み合わせ指数＝［Ｄ］１［Ｄｘ］１＋［Ｄ］２／［Ｄｘ］２（ここで、［Ｄ］１および［Ｄ］２は各薬剤単独の濃度［Ｄｘ］１および［Ｄｘ］２と同じ効果を得るために組み合わせでの各薬剤が要求する濃度である）。１未満の値は相乗効果を示し、１より大きい値は拮抗作用を示す。
【００９９】
実施例６：マウス試験およびインビボイメージング
ＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞をホタルルシフェラーゼ（ＭＳＣＶ−Ｌｕｃ）をコード化したレトロウイルスでトランスフェクトし、ネオマイシンで選択してＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３−ルシフェラーゼ（ｌｕｃ＋）細胞系を製造した。マイコプラズマおよびウイルス汚染のない細胞を、Hank’s Balanced Salt Solution（ＨＢＳＳ；Mediatech, Inc., VA）に再懸濁させて、マウスに静脈内投与した。Gelucire（登録商標）４４／１４（Gattefosse, France）中６％  ｗ／ｗ  ＰＫＣ４１２を１×ＰＢＳで希釈し、４２℃水浴中で液体になるまで温めた。該溶液をマウスの胃管栄養処置に用いるまで４℃で貯蔵した。まず１０ｍｇ粉末原薬を３０μＬ水で濡らし、２当量（化合物の０．７３μＬ／ｍｇ）の６．０Ｎ  ＨＣｌに溶解させて、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）を前処理した。得られた（透明）溶液をｐＨ４．６  酢酸バッファーで１ｍＬにして、得られた源液をマウスの胃管栄養処置に用いるまで−２０℃で凍結貯蔵した。
【０１００】
オスＮＣｒヌードマウス（５−６週齢； Taconic, NY）に合計８００，０００個のＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３−ｌｕｃ＋細胞を尾静脈注射によって投与した。マウスを造影し、総体蛍光を既報の通り定量した。Armstrong et al. (2003)参照。腫瘍細胞接種後１日目のベースラインイメージングを用いて対応腫瘍組織量の処置コホートを確立した。マウスのコホートをビークル、４０ｍｇ／ｋｇ／日  Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）（上記のとおり製剤）、５０ｍｇ／ｋｇ  Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）（上記のとおり製剤）、またはＰＫＣ４１２とＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）の組み合わせを経口投与して処置した。多様な間隔で反復造影を行った。試験の予定終点（ＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３−ｌｕｃ＋細胞の当初静脈注射後約１週間）で、マウスを殺し、体重および脾臓重量を記録し、組織病理学的分析のために組織を１０％ホルマリンで保存した。
【０１０１】
実施例７：ＰＫＣ４１２感受性細胞および抵抗性細胞に対するＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２の組み合わせ効果
Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）をＰＫＣ４１２と組み合わせて、ＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞について試験する。正の上昇効果が２種薬剤間に観察され（図１、ならびに図１および２に示す用量応答曲線について計算した組み合わせ指数を示す下記表１参照）。Calcusynソフトウェアを用いて行ったＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２の組み合わせ効果の分析は、表１に示すとおり、用量範囲で（ＥＤ５０−ＥＤ９０）相乗効果を示す。Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２を組み合わせにおいて、ヒト急性白血病、ＦＬＴ３−ＩＴＤ発現細胞系、ＭＶ４；１１細胞系についても試験したところ、表１に示すとおり、各薬剤単独と比較して、比較的高用量でのみ、両薬剤が細胞増殖の阻害を上昇させることを見出した。Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２の組み合わせ効果のCalcusyn分析は、表Ｉに示すとおり、比較的高用量（ＥＤ７５−ＥＤ９０）でわずかに相乗効果乃至相乗効果を示すが、低用量（ＥＤ５０）では拮抗作用が観察される。Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２の組み合わせ効果を、ＰＫＣ４１２抵抗性、変異ＦＬＴ３発現細胞系Ａ６２７Ｔ−ＦＬＴ３−Ｂａ／Ｆ３、Ｆ６９１Ｉ−ＦＬＴ３−Ｂａ／Ｆ３、Ｇ６９７Ｒ−ＦＬＴ３−Ｂａ／Ｆ３、およびＮ６７６Ｄ−ＦＬＴ３−Ｂａ／Ｆ３についても試験する。相乗的効果がＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２について、Ａ６２７Ｔ−ＦＬＴ３−Ｂａ／Ｆ３およびＦ６９１Ｉ−ＦＬＴ３−Ｂａ／Ｆ３系に対して観察され（ＥＤ５０−ＥＤ９０）、相乗効果がＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２について、Ｇ６９７Ｒ−ＦＬＴ３−Ｂａ／Ｆ３系に対して観察される（ＥＤ５０−ＥＤ９０）（図２および表１を参照されたい）。Ｎ６７６Ｄ−ＦＬＴ３−Ｂａ／Ｆ３細胞系について、組み合わせ結果は、表Ｉに示すとおりＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミ��−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２間の相加効果を示す（ＥＤ５０−ＥＤ９０）。
【表１】
0005394249.tif 000011
【０１０２】
実施例８：Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とドキソルビシンまたはＡｒａ−ｃのＰＫＣ４１２感受性および抵抗性ＦＬＴ３発現細胞それぞれに対する組み合わせ効果を示す増殖試験
ＰＫＣ４１２と標準的な化学療法剤、例えばドキソルビシンおよびＡｒａ−ｃ間のＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞に対する組み合わせ効果は、ＰＫＣ４１２とドキソルビシンの組み合わせについて用量範囲（ＥＤ５０−ＥＤ９０）で相乗効果を示す（図３、ならびに図３と４に示す用量応答曲線について計算した組み合わせ指数を示す表ＩＩ参照）。Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とドキソルビシンのＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞に対する組み合わせ効果のCalcusyn分析は、用量範囲（ＥＤ５０−ＥＤ９０）で相乗的効果を示す（図４および表ＩＩ参照）。Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とドキソルビシンのＦ６９１Ｉ−ＦＬＴ３−Ｂａ／Ｆ３細胞に対する組み合わせ効果のCalcusyn分析の結果は、比較的高用量（ＥＤ７５−ＥＤ９０）でのみ相加乃至相乗効果を示す（表ＩＩ参照）。Ａ６２７Ｔ−ＦＬＴ３−Ｂａ／Ｆ３細胞について、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とドキソルビシンが相乗的に作用することが見出された（ＥＤ５０−ＥＤ９０）（表ＩＩ参照）。相乗効果は、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＡｒａ−ｃ間で、ＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞について（ＥＤ５０−ＥＤ９０）（図５および表ＩＩ参照）、そしてＦ６９１Ｉ−ＦＬＴ３−Ｂａ／Ｆ３細胞およびＡ６２７Ｔ−ＦＬＴ３−Ｂａ／Ｆ３細胞について（ＥＤ５０−ＥＤ９０）（表ＩＩ参照）観察される。
【表２】
0005394249.tif 000012
【０１０３】
実施例９：Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２単独および組み合わせの効果のインビボ試験
Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）単独、ＰＫＣ４１２単独、およびＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２の組み合わせのインビボでの抗腫瘍効果を直接評価するために、急性白血病のマウスモデルを試験して、腫瘍組織量を発光腫瘍細胞の非侵襲的イメージングによって定量する（図６）。
【０１０４】
マウスＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞をホタルルシフェラーゼを安定的に発現するように操作し、ＮＣｒヌードマウスにこの細胞を接種する。非侵襲的イメージングを用いて腫瘍組織量を連続的に評価し、白血病が確立したマウスを類似の腫瘍組織量を有するコホートに分ける。
【０１０５】
ＰＫＣ４１２、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）またはＰＫＣ４１２とＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）の組み合わせを経口胃管栄養法（それ自体はビークルである）によって投与する。両薬剤一体の投与は、一方の薬剤の胃管栄養法の約２０−３０分後に他の薬剤の胃管栄養法により投与して行う。
【０１０６】
マウスは、ビークルのみ、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）（５０ｍｇ／ｋｇ）、ＰＫＣ４１２（４０ｍｇ／ｋｇ）またはＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２の組み合わせを投与される（図６参照）。
【０１０７】
生物発光によって評価した最も低い腫瘍組織量が、ＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３−ｌｕｃ＋細胞の静脈注射後５〜７日目（それぞれ薬剤処置の４〜６日目に対応する）の薬剤組み合わせ群において観察される（図６および７参照）。静脈注射後７日目に観察した生物発光結果の統計的評価のために、スチューデントｔ検定を用いる：ｐ＜０．０５６２４７（ビークル対Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）単独）；ｐ＜０．０４８２５（ビークル対ＰＫＣ４１２単独）；ｐ＜０．０４３２９（ビークル対Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２の組み合わせ）。静脈注射後５日目の統計的評価（スチューデントｔ検定による）を得た：ｐ＜０．０７７２９９（ビークル対Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）単独）；ｐ＜０．０７５８５２（ビークル対ＰＫＣ４１２単独）；ｐ＜０．０６８２６（ビークル対Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２の組み合わせ）。最も低い％脾臓重量が、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２の組み合わせで処置した、最後のイメージング日の８日後に殺したマウスにおいて観察される（図８）。
【０１０８】
実施例１０：Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）変異ＦＬＴ３発現細胞のＰＫＣ４１２に対する間質介在抵抗性に対する効果
ＷＥＨＩ（ＩＬ−３源として用いた）の存在下および非存在下で培養したＢａ／Ｆ３−ＦＬＴ３−ＩＴＤ細胞をＰＫＣ４１２の細胞毒性効果について試験して、ＩＬ−３の存在が細胞をＰＫＣ４１２細胞増殖阻害から完全に保護することを見出した（補助的データ）。
【０１０９】
ＰＫＣ４１２とは対照的に、ＩＡＰ阻害剤であるＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）はＩＬ−３の存在下および非存在下の両方でＢａ／Ｆ３−ＦＬＴ３−ＩＴＤ細胞の増殖を阻害する。興味深いことに、Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）とＰＫＣ４１２の同時投与によって、ＩＬ−３の存在下で培養したＢａ／Ｆ３−ＦＬＴ３−ＩＴＤ細胞の増殖が相乗的に阻害され；この阻害はＩＬ−３の非存在下で両薬剤の共投与によって得られるものと同程度である。このことはＩＡＰ阻害剤がＦＬＴ３阻害剤の効果を増強し、生存シグナルの供給による化学抵抗性を克服することができることを示している。
【０１１０】
ヒト間質細胞系、ＨＳ−５は、変異ＦＬＴ３  ＡＭＬ系、ＭＯＬＭ−１３において使用される。白血球成分のみを測定するため、ルシフェラーゼを白血球細胞に導入して、発光を用いて生存細胞数を具体的に定量する。図９に示す試験において、ＭＯＬＭ−１３−ｌｕｃ＋細胞（４０，０００／ウェル）を、ＨＳ−５間質細胞のほぼコンフルエントな単層の存在下または非存在下で、ＰＫＣ４１２に曝露する。間質細胞系は増殖を増進させ、ＰＫＣ４１２の阻害効果に対して部分的に保護している（図９参照）。Ｂａ／Ｆ３−ＦＬＴ３−ＩＴＤに見られるとおり、ＰＫＣ４１２とＮ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）間でのヒトＦＬＴ３−ＩＴＤ発現細胞系、ＭＯＬＭ１３−ｌｕｃ＋の死滅において正の連携が増殖因子の非存在下で観察される。Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）は同様に、ＭＯＬＭ１３−ｌｕｃ＋細胞に対するＨＳ−５ヒト間質細胞の非存在下および存在下で、ＰＫＣ４１２の細胞毒性効果を増進する（図６Ｂ参照）。これらの結果は、間質介在生存シグナルが髄で観察されるＦＬＴ３阻害剤（例えばＰＫＣ４１２）に対する化学抵抗性に関与しており、かかる抵抗性がＩＡＰ阻害剤処置の参加によって克服され得るという知見を支持する。
【０１１１】
実施例１１：ＩＡＰの変異ＦＬＴ３制御
Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（６−フェネチル−オクタヒドロ−ピロロ［２，３−ｃ］ピリジン−１−イル−エチル］−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（ＬＢＷ２４２）のＩＡＰ基質を含む抗アポトーシス性シグナル伝達因子のパネル、ならびにＢｃｌ−２およびＢｃｌｘＬの発現を、変異ＦＬＴ−３発現細胞において試験する。ＣＩＡＰ１発現において検出可能な変化を有さず、細胞を増殖因子に曝露した２日後にタンパク質レベルでＩＬ−３の効果が存在しない親Ｂａ／Ｆ３細胞と比較して、ＦＬＴ３−ＩＴＤ発現Ｂａ／Ｆ３細胞におけるＸＩＡＰ、Ｂｃｌ−２およびＢｃｌｘＬタンパク質発現のわずかな変動のみが観察される（図１０参照）。ＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞を０．１μＭ  ＰＫＣ４１２で２２時間処理すると、ＢｃｌｘＬおよびＸＩＡＰタンパク質発現における部分的減少が導かれ、これはＦＬＴ３がこれらのタンパク質の発現を制御していることを示唆している（図１０）。
【０１１２】
実施例１２：細胞生存およびアポトーシス分析
トリパンブルー排除アッセイは既に開示されており［Weisberg et al. (2002)参照］、これを用いてＰＫＣ４１２と（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−  ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドの存在下および非存在下で培養する細胞の増殖を測定した。細胞生存率は対照（未処理）細胞の％として表す。エラーバーは各データポイントについての平均の標準誤差を示す。薬剤処理細胞のアポトーシスを、Annexin-V-Fluos Staining Kit（Boehringer Mannheim, Indianapolis, IN）を用いて既報の通りに測定した。Weisberg et al. (2002)参照。
【０１１３】
実施例１３：ＰＫＣ４１２と（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）の薬剤組み合わせ試験
薬剤組み合わせ試験のために、ＰＫＣ４１２と（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）を固定された比率で、ＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞またはＡＭＬ由来ＭＯＬＭ１３−ｌｕｃ＋  ＦＬＴ３発現細胞に同時に加える。細胞生存率をトリパンブルー排除アッセイを用いて測定し、薬剤処理細胞対対照細胞の増殖効果の関数（ＦＡ）として表す（図１１参照）。
【０１１４】
実施例１４：（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）とＰＫＣ４１２のＰＫＣ４１２感受性細胞に対する組み合わせ効果
（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）をＰＫＣ４１２と組み合わせて、ＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞に対して試験する。正の上昇効果が２種の薬剤間で観察される（図１２参照）。
【０１１５】
（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）とＰＫＣ４１２を組み合わせて、ヒト急性白血病ＦＬＴ３−ＩＴＤ発現細胞系、ＭＯＬＭ１３−ｌｕｃ＋に対しても試験して（図１１参照）、各薬剤単独のものと比較して、両薬剤が細胞増殖の阻害を比較的高用量でのみ増進することを見出した。
【０１１６】
実施例１５：（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）とドキソルビシンまたはＡｒａ−ｃのＰＫＣ４１２感受性変異ＦＬＴ３発現細胞に対する組み合わせ効果を示す増殖試験
ＰＫＣ４１２と標準的な化学療法剤、例えばドキソルビシンおよびＡｒａ−ｃ間の、ＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞に対する組み合わせ効果は、ＰＫＣ４１２とドキソルビシンの組み合わせについて、用量範囲（ＥＤ５０−ＥＤ９０）で正の上昇効果を示す（図１３−１５参照）。
【０１１７】
実施例１６：インビボでの（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）とＰＫＣ４１２単独および組み合わせの効果の試験
（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）単独、ＰＫＣ４１２単独、および（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）とＰＫＣ４１２、の組み合わせのインビボでの抗腫瘍効果を直接評価するために、急性白血病のマウスモデルを試験して、腫瘍組織量を発光腫瘍細胞の非侵襲的イメージングによって定量する（図１６）。マウスＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３細胞をホタルルシフェラーゼを安定的に発現するように操作し、ＮＣｒヌードマウスにこの細胞を接種する。非侵襲的イメージングを用いて腫瘍組織量を連続的に評価し、白血病が確立したマウスを類似の腫瘍組織量を有するコホートに分ける。
【０１１８】
ＰＫＣ４１２、（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミドまたはＰＫＣ４１２と（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）の組み合わせを経口胃管栄養法（それ自体はビークルである）によって投与する。両薬剤一体の投与は、一方の薬剤の胃管栄養法の約２０−３０分後に他の薬剤の胃管栄養法により投与して行う。マウスにビークル単独、（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）（５０ｍｇ／ｋｇ）、ＰＫＣ４１２（４０ｍｇ／ｋｇ）または（Ｓ）−Ｎ−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−｛（Ｓ）−２−［４−（４−フルオロ−ベンゾイル）−チアゾール−２−イル］−ピロリジン−１−イル｝−２オキソ−エチル）−２−メチルアミノ−プロピオンアミド（化合物Ｙ）とＰＫＣ４１２の組み合わせを投与する（図１６参照）。生物発光（光子／秒）によって評価した最も低い腫瘍組織量が、ＦＬＴ３−ＩＴＤ−Ｂａ／Ｆ３−ｌｕｃ＋細胞の静脈注射後８日目（それぞれ薬剤処置の８日目に対応する）の薬剤組み合わせ群において観察される（図１６参照）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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