(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化３０】
0005456676.tif 000036
［式中、
Ｒ１は、−ＯＨ、Ｏ−連結アミノ酸、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２又は−ＯＣ（Ｏ）−Ｒ２であり；
Ｒ２は、Ｃ１−６アルキル、アルコキシ、アルキルカルボン酸、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、又は−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールであり、ここで、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロシクロアルキルは、Ｃ１−６アルキルで置換されていてもよく；そして
ｎは、０又は１である］
で示される化合物、又は薬学的に許容しうるその塩。
【請求項２】
Ｒ１が、−ＯＣ（Ｏ）−Ｒ２であり、そしてＲ２が、請求項１と同義である、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ［ＣＨ（ＣＨ３）２］ＮＨ２、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ［ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）］ＮＨ２又は−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ３）ＮＨ２である、請求項１又は２記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ２が、Ｃ１−６アルキルである、請求項１又は２記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ２が、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又は−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールであり、そしてｎが、請求項１と同義である、請求項１又は２記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ２が、シクロペンタニルである、請求項１、２又は５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項７】
シクロアルキルが、Ｃ１−６アルキルで置換されている、請求項１、２又は５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ２が、モルホリニル、−ＣＨ２−モルホリニル又は−ＣＨ２−Ｎ−メチルピペラジニルである、請求項１、２又は５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項９】
ヘテロシクロアルキル又は−ＣＨ２−ヘテロシクロアルキルが、Ｃ１−６アルキルで置換されている、請求項１、２又は５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ２がフェニルである、請求項１、２又は５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ２が、ピラジニル、ピリミジニル又はピリジニルである、請求項１、２又は５のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１２】
下記より選択される請求項１〜１１のいずれか一項記載の化合物：
２−［３，５−ジクロロ−４−（１−ヒドロキシメチル−５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル；
酢酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
２，２−ジメチル−プロピオン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
酪酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
イソ酪酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
モルホリン−４−カルボン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
安息香酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
ピラジン−２−カルボン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
ピリミジン−５−カルボン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
プロピオン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−酢酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
モルホリン−４−イル−酢酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
コハク酸モノ−｛３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチル｝エステル；
ピリジン−３−イル−酢酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
イソニコチン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
（Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−酪酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−ペンタン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
シクロペンタンカルボン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
（Ｓ）−２−アミノ−プロピオン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
炭酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルエチルエステル；及び
リン酸モノ−｛３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチル｝エステル。
【請求項１３】
下記より選択される請求項１〜１２のいずれか一項記載の化合物：
酢酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
イソ酪酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
モルホリン−４−カルボン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
ピラジン−２−カルボン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
モルホリン−４−イル−酢酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；及び
コハク酸モノ−｛３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチル｝エステル。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか一項記載の式（Ｉ）の化合物の製造方法であって、下記工程：
ａ）式（II）：
【化３１】
0005456676.tif 000037
で示される化合物を、メタノールの存在下で反応させて、式（Ｉ）：
【化３２】
0005456676.tif 000038
［式中、Ｒ１は、ヒドロキシルである］で示される化合物を得る工程；
を含む方法。
【請求項１５】
請求項１〜１３のいずれか一項記載の式（Ｉ）の化合物の製造方法であって、下記工程：
ｂ）式（III）：
【化３３】
0005456676.tif 000039
で示される化合物を、ジヒドロ−フラン−２，５−ジオン、Ｒ２Ｃ（Ｏ）Ｃｌ及びＲ２Ｃ（Ｏ）ＯＨから選択される反応物の存在下で反応させて、式（Ｉ）：
【化３４】
0005456676.tif 000040
［式中、
Ｒ１は、−ＯＣ（Ｏ）−Ｒ２であり；
Ｒ２は、Ｃ１−６アルキル、アルコキシ、アルキル酸、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、又は−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールであり；
ｎは、０又は１であり；
及び前記式中、
Ｒ３は、ハロゲン又はヒドロキシルである］
で示される化合物を得る工程；
を含む方法。
【請求項１６】
請求項１〜１３のいずれか一項記載の式（Ｉ）の化合物の製造方法であって、下記工程：
ｃ）式（IV）：
【化３５】
0005456676.tif 000041
で示される化合物を、酸の存在下で反応させて、式（Ｉ）：
【化３６】
0005456676.tif 000042
［式中、Ｒ１は、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、及び前記式中、Ｒ４は、Ｃ１−６アルキルである］で示される化合物を得る工程；
を含む方法。
【請求項１７】
請求項１〜１３のいずれか一項記載の式（Ｉ）の化合物の製造方法であって、下記工程：
ｄ）式（Ｖ）：
【化３７】
0005456676.tif 000043
で示される化合物を、酸の存在下で反応させて、式（Ｉ）：
【化３８】
0005456676.tif 000044
［式中、Ｒ１は、Ｏ−連結アミノ酸であり、及び前記式中、Ｒ５は、Ｎ−保護Ｏ−連結アミノ酸である］で示される化合物を得る工程を含む方法。
【請求項１８】
請求項１４〜１７のいずれか一項記載の方法により製造される場合の、請求項１〜１３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項１９】
請求項１〜１３のいずれか一項記載の化合物ならびに薬学的に許容しうる担体及び／又は佐剤を含む、医薬組成物。
【請求項２０】
治療上活性な物質として使用するための、請求項１〜１３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２１】
甲状腺ホルモン受容体アゴニストによって調節される疾患の治療及び／又は予防のための治療上活性な物質として使用するための、請求項１〜１３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２２】
肥満症、高脂血症、高コレステロール血症、糖尿病、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、脂肪肝、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、甲状腺機能低下症又は甲状腺癌の治療的及び／又は予防的処置のための治療上活性な物質として使用するための、請求項１〜１３のいずれか一項記載の化合物。
【請求項２３】
肥満症、高脂血症、高コレステロール血症、糖尿病、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、脂肪肝、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、甲状腺機能低下症又は甲状腺癌の治療的及び／又は予防的処置のための、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
肥満症、高脂血症、高コレステロール血症、糖尿病、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、脂肪肝、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、甲状腺機能低下症又は甲状腺癌の治療的及び／又は予防的処置用の医薬の製造のための、請求項１〜１３のいずれか一項記載の化合物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、肥満症、高脂血症、高コレステロール血症、糖尿病、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、脂肪肝、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、甲状腺機能低下症、甲状腺癌ならびに関連障害及び疾患の処置において有用な甲状腺ホルモン受容体アゴニストに関し、そして特に、式（Ｉ）：
【０００２】
【化１】
0005456676.tif 000002
［式中、
Ｒ１は、−ＯＨ、Ｏ−連結アミノ酸、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２又は−ＯＣ（Ｏ）−Ｒ２であり；
Ｒ２は、低級アルキル、アルコキシ、アルキル酸、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、又は−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールであり；そして
ｎは、０又は１である］
で示される化合物、又は薬学的に許容しうるその塩及びエステル類に関する。
【０００３】
式（Ｉ）の化合物は、新規な甲状腺ホルモン受容体アゴニストの、特にピリダジノンアナログのプロドラッグである。本発明はまた、肥満症、高脂血症、高コレステロール血症及び糖尿病などの代謝疾患の処置のための、これらのプロドラッグを含む医薬組成物及びそれらの使用方法に関する。
【０００４】
そのような化合物はまた、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、脂肪肝、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、甲状腺機能低下症、甲状腺癌ならびに関連障害及び疾患の処置のために有用であり得る。
【背景技術】
【０００５】
甲状腺ホルモンは、正常な成長及び発育のためならびに代謝恒常性の維持のために重要である（Paul M. Yen Physiological Review, Vol. 81(3): pp. 1097-1126 (2001)）。甲状腺ホルモンの血中濃度は、視床下部／下垂体／甲状腺（ＨＰＴ）軸のフィードバック機構によって厳しく制御されている。甲状腺機能低下症又は甲状腺機能亢進症を引き起こす甲状腺機能異常は、甲状腺ホルモンが、心機能、体重、代謝、代謝率、体温、コレステロール、骨、筋肉及び挙動に重大な影響を及ぼすことを明確に実証している。
【０００６】
甲状腺ホルモンは甲状腺によって産生され、そして２つの異なる形態、３，５，３’，５’−テトラ−ヨード−Ｌ−チロニン（Ｔ４）及び３，５，３’−トリ−ヨード−Ｌ−チロニン（Ｔ３）として血中に分泌される。Ｔ４は、甲状腺によって分泌される優勢型であり、一方、Ｔ３は、より生理活性型である。Ｔ４は、全ての組織で、しかし主に肝臓および腎臓で組織特異的脱ヨード酵素によってＴ３に変換される。甲状腺ホルモンの生理活性は、甲状腺ホルモン受容体（ＴＲ）によって仲介される（M.A. Lazar Endocrine Reviews, Vol. 14: pp. 348-399 (1993)）。ＴＲは、核内受容体として公知のスーパーファミリーに属する。ＴＲは、リガンド−誘導型転写因子として作用するレチノイド受容体と共にヘテロ二量体を形成する。ＴＲは、リガンド結合ドメイン、ＤＮＡ結合ドメイン、及びアミノ末端ドメインを有し、そしてＤＮＡ応答エレメントとのならびに様々な核コアクチベーター及びコリプレッサーとの相互作用を介して遺伝子発現を調節する。甲状腺ホルモン受容体は、２つの別々の遺伝子、α及びβに由来する。これらの異なる遺伝子産物は、ディファレンシャルＲＮＡプロセシングを介してそれぞれの受容体の複数の形態を産生する。主要な甲状腺受容体アイソフォームは、α１、α２、β１及びβ２である。甲状腺ホルモン受容体α１、β１及びβ２は、甲状腺ホルモンに結合する。甲状腺ホルモン受容体サブタイプは、特定の生物学的応答へのそれらの寄与において異なり得るということが示されている。最近の研究は、ＴＲβ１がＴＲＨ（チロトロピン放出ホルモン）の調節において、及び肝臓における甲状腺ホルモン作用の調節において重要な役割を果たすことを示唆している。ＴＲβ２は、ＴＳＨ（甲状腺刺激ホルモン）の調節において重要な役割を果たす（Abel et. al. J. Clin. Invest., Vol 104: pp. 291-300 (1999)）。ＴＲβ１は、心拍調節において重要な役割を果たす（B. Gloss et. al. Endocrinology, Vol. 142: pp. 544-550 (2001); C. Johansson et. al. Am. J. Physiol., Vol. 275: pp. R640-R646 (1998)）。
【０００７】
甲状腺ホルモンの幾つかの効果は、有害作用を最小限に留めるか又は排除することができれば、治療上有益であり得る（Paul M. Yen Physiological Reviews, Vol. 81(3): pp. 1097-1126 (2001); Paul Webb Expert Opin. Investig. Drugs, Vol. 13(5): pp. 489-500 (2004)）。例えば、甲状腺ホルモンは、代謝率、酸素消費量及び熱産生を増加させ、それにより体重を減少させる。体重減少は、肥満に関連する併存疾患を寛解させることにより肥満患者において有益な効果をもたらし、そしてまた２型糖尿病の肥満患者における血糖コントロールに有益な効果を有し得る。
【０００８】
甲状腺ホルモンのもう一つの治療上有益な効果は、血清低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）を低下させることである（Eugene Morkin et. al. Journal of Molecular and Cellular Cardiology, Vol. 37: pp. 1137-1146 (2004)）。甲状腺機能亢進症は、低い血清総コレステロールと関連していることが見出されており、これは肝臓ＬＤＬ受容体発現を増加させ、かつ胆汁酸へのコレステロールの代謝を促進する甲状腺ホルモンに起因している（J.J. Abrams et. al. J. Lipid Res., Vol. 22: pp. 323-38 (1981)）。同様に、甲状腺機能低下症は、高コレステロール血症に関連しており、そして甲状腺ホルモン補充療法は、総コレステロールを低下させることが公知である（M. Aviram et. al. Clin. Biochem., Vol. 15: pp. 62-66 (1982); J.J. Abrams et. al. J. Lipid Res., Vol. 22: pp. 323-38 (1981)）。動物モデルにおいて、ａｐｏ Ａ−１（ＨＤＬの主要なアポリポタンパク質の一つ）の発現を増大させることにより、甲状腺ホルモンは、ＨＤＬコレステロールを増加させ、そしてＬＤＬのＨＤＬに対する割合を向上させるという有益な効果を有していることを示している（Gene C. Ness et. al. Biochemical Pharmacology, Vol. 56: pp. 121-129 (1998); G.J. Grover et. al. Endocrinology, Vol. 145: pp. 1656-1661 (2004); G.J. Grover et. al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 100: pp. 10067-10072 (2003)）。ＬＤＬ及びＨＤＬコレステロールに及ぼす甲状腺ホルモンの効果により、甲状腺ホルモンはまた、アテローム性動脈硬化症及び他の心血管疾患のリスクを低くし得る。アテローム動脈硬化性血管疾患の徴候は、ＬＤＬコレステロールの濃度に直接関係している。更に、甲状腺ホルモンが、アテローム性動脈硬化症の患者において上昇している重要な危険因子であるリポタンパク質を低下させる証拠がある（Paul Webb Expert Opin. Investig. Drugs, Vol. 13(5): pp. 489-500 (2004); de Bruin et. al. J. Clin. Endo. Metab., Vol. 76: pp. 121-126 (1993)）。
【０００９】
肥満症及びその併存疾患、糖尿病、メタボリックシンドローム、及びアテローム動脈硬化性血管疾患の徴候が異常な速さで増加しているので、これらの疾患を処置することが可能な化合物の有用性が、非常に望ましい。今日まで、自然発生する甲状腺ホルモンは、甲状腺機能亢進症に関連する副作用、特に心血管系毒性によって制限されてきた。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
したがって、甲状腺ホルモン受容体β選択性及び／又は組織選択作用が増大した、甲状腺ホルモンアナログを合成する努力が行われてきた。そのような甲状腺ホルモン模倣物は、心血管機能又は視床下部／脳下垂体／甲状腺軸の正常な機能への影響の低減と共に、体重、脂質、コレステロール、及びリポタンパク質において望ましい低下をもたらし得る（A.H. Underwood et al. Nature, Vol. 324: pp. 425-429 (1986), G. J. Grover et. al. PNAS, Vol. 100: pp. 10067-10072 (2003); G.J. Grover Endocrinology, Vol. 145: pp. 1656-1661(2004); Yi-lin Li et. al. PCT Int. Appl. WO 9900353 (1999); Thomas S. Scanlan et. al. PCT Int. Appl. WO 9857919 (1998); Keith A. Walker et. al. U.S. Patent Number 5,284,971 (1994); Mark D. Erion et. al. PCT Int. Appl. WO 2005051298 (2005); Malm Johan Current Pharmaceutical Design, Vol. 10(28): pp. 3525-3532 (2004); Expert Opin. Ther. Patents, Vol. 14: pp. 1169-1183 (2004); Thomas S. Scalan Current Opinion in Drug Discovery & Development, Vol. 4 (5): pp. 614-622 (2001); Paul Webb Expert Opinion on Investigational Drugs, Vol. 13 (5): pp. 489-500 (2004)）。
【００１１】
甲状腺ホルモンの有益な効果を維持しながら、甲状腺機能亢進症及び甲状腺機能低下症の望ましくない影響を回避する甲状腺ホルモンアナログの開発は、肥満症、高脂血症、高コレステロール血症、糖尿病、ならびに脂肪肝及びＮＡＳＨなどの他の障害及び疾患、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、甲状腺機能低下症、甲状腺癌、甲状腺疾患、ならびに関連障害及び疾患などの代謝疾患を有する患者のための処置に新たな道を開くであろう。
【００１２】
本発明の化合物とは構造的に異なるピリダジノン化合物が、以前に開示されている（Teruomi et. al. Agricultural and Biological Chemistry, Vol. 38(6): pp. 1169-76 (1974); P.D. Leeson et. al. J. Med. Chem. Vol. 32: pp. 320-326 (1989); Eur. Pat. Appl. EP 188351 (1986); Damien John Dunnington PCT Int. Appl. WO 9702023 (1997); and Eur. Pat. Appl. EP 728482 (1996)）。
【００１３】
しかしながら、例えば新規なピリダジノンプロドラッグなど、望ましくない影響を回避しながら甲状腺ホルモンの有益な効果を有する、新規な甲状腺ホルモンプロドラッグに対する必要性が依然としてある。
【００１４】
特に、本発明は、式（Ｉ）：
【００１５】
【化２】
0005456676.tif 000003
［式中、
Ｒ１は、−ＯＨ、Ｏ−連結アミノ酸、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２又は−ＯＣ（Ｏ）−Ｒ２であり；
Ｒ２は、低級アルキル、アルコキシ、アルキル酸、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、又は−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールであり；そして
ｎは、０又は１である］
で示される化合物、又は薬学的に許容しうるその塩及びエステル類に関する。
【００１６】
本発明のもう一つの実施態様において、式（Ｉ）による化合物の治療有効量、又は薬学的に許容しうるその塩、及び薬学的に許容しうる担体を含む医薬組成物を提供する。
【００１７】
本発明は、式（Ｉ）の化合物、特に式（Ｉａ）：
【００１８】
【化３】
0005456676.tif 000004
で示される化合物のプロドラッグである化合物を提供する。
【００１９】
本明細書において用いられる用語は、特定の実施態様を記載する目的のためであって、制限することを意図しないことが理解される。更に、本明細書に記載されたものと類似しているか又は同等である任意の方法、装置及び材料を、本発明の実施又は試験に使用することができるが、ここでは好ましい方法、装置及び材料を記載する。
【００２０】
「プロドラッグ」という用語は、それらの薬理学的効果を発揮する前に変換を受ける化合物を指す。医薬的問題を克服するための薬剤の化学的修飾はまた、「薬剤ラテンシエーション（drug latentiation）」と称されている。薬剤ラテンシエーションは、新たな化合物を形成するための生理活性化合物の化学的修飾であり、それはインビボで酵素の攻撃を受けると親化合物を遊離する。親化合物の化学的な変化は、物理化学的特性における変化が、吸収、分布、及び／又は酵素代謝に影響するというものである。薬剤ラテンシエーションの定義はまた、親化合物の非酵素的再生を含むまでに及んでいる。再生は、酵素が仲介する必要のない加水分解性、解離性及び他の反応の結果として起こる。プロドラッグ、ラテンシエーションドラッグ、及びバイオ可逆性誘導体という用語は、互換的に使用される。推測では、ラテンシエーションとは、インビボで生理活性な親分子の再生に関わる時間差要素又は時間構成要素を暗に意味している。用語プロドラッグは、プロドラッグがラテンシエーションドラッグ誘導体及びそれらの物質を含むという点で一般的であり、それらは、受容体と結合する実際の物質に投与された後で変換される。用語プロドラッグは、剤の総称であり、薬理作用を発揮する前に生体内変換を受ける。有用な参考文献は、Prodrugs; Challenges and Rewards, Volumes 1 and 2, V. Stella, R. T. Borchardt, M. J. Hageman, R. Oziyai, H. Maag, and J. W. Tilley, editors, Springer, 2007である。
【００２１】
本明細書で使用される場合、「アルキル」という用語は、単独で又は他の基との組合せで、１〜２０個の炭素原子、好ましくは１〜１６個の炭素原子、より好ましくは１〜１０個の炭素原子の分岐又は直鎖の一価飽和脂肪族炭化水素基のことを指す。
【００２２】
「シクロアルキル」という用語は、３〜７個、好ましくは３〜６個炭素原子の一価炭素環式基のことを指す。この用語は更に、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルなどの基により例示される。好ましい実施態様において、「シクロアルキル」部分は、場合により、１、２、３又は４個の置換基で置換されていることができ、ここで、各置換基は独立に、特に断りない限り、例えばヒドロキシ、アルキル、アルコキシ、ハロゲン又はアミノである。シクロアルキル部分の例には、場合により置換されているシクロプロピル、場合により置換されているシクロブチル、場合により置換されているシクロペンチル、場合により置換されているシクロペンテニル、場合により置換されているシクロヘキシル、場合により置換されているシクロヘキシレン、場合により置換されているシクロペプチル等または本明細書で具体的に例示されたものが挙げられるが、これらに限定されない。シクロアルキルの好ましい置換基の例は、低級アルキルである。
【００２３】
用語「ヘテロシクロアルキル」とは、１、２又は３個の炭素環原子が、Ｎ、Ｏ又はＳなどのヘテロ原子によって置き換えられている環式アルキル環を意味する。ヘテロシクロアルキル基の例には、モルホリン、チオモルホリン、ピペラジン、ピペリジン等が挙げられるが、これらに限定されない。ヘテロシクロアルキル基は、非置換であるか、又は一、二もしくは三置換されていても、特に低級アルキル基で置換されていてもよい。
【００２４】
用語「低級アルキル」とは、単独で又は他の基との組合せで、１〜６個の炭素原子、好ましくは１〜４個の炭素原子の分岐鎖状又は直鎖状一価アルキル基を指す。この用語は更に、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、イソブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、３−メチルブチル、ｎ−ヘキシル、２−エチルブチル等の基によって例示される。
【００２５】
用語「アリール」とは、フェニル又はナフチル、好ましくはフェニルなどの芳香族一価モノ−又はポリ−炭素環式基を指す。
【００２６】
アルキル基及びアリール基は、置換されているか又は非置換でよい。置換されている場合、一般的に例えば１〜３個の置換基、好ましくは１個の置換基が存在する。置換基には、例えば下記を挙げることができる：炭素含有基、例えばアルキル、アリール、アリールアルキル（例えば、置換フェニル、置換及び非置換ベンジル）；ハロゲン原子及びハロゲン含有基、例えばハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）；酸素含有基、例えばアルコール類（例えば、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、アリール（ヒドロキシル）アルキル）、エーテル類（例えば、アルコキシ、アリールオキシ、アルコキシアルキル、アリールオキシアルキル）、アルデヒド類（例えば、カルボキシアルデヒド）、ケトン類（例えば、アルキルカルボニル、アルキルカルボニルアルキル、アリールカルボニル、アリールアルキルカルボニル、アリールカルボニルアルキル）、酸（例えば酸置換基がアルキル基上にある場合の「アルキル酸」、好ましくは酢酸、プロピオン酸、及びブタン酸）、酸誘導体、例えばエステル類（例えば、アルコキシカルボニル、アルコキシカルボニルアルキル、アルキルカルボニルオキシ、アルキルカルボニルオキシアルキル）、アミド類（例えば、アミノカルボニル、モノ−又はジ−アルキルアミノカルボニル、アミノカルボニルアルキル、モノ−又はジ−アルキルアミノカルボニルアルキル、アリールアミノカルボニル）、カルバマート類（例えば、アルコキシカルボニルアミノ、アリールオキシカルボニルアミノ、アミノカルボニルオキシ、モノ−又はジ−アルキルアミノカルボニルオキシ、アリールアミノカルボニルオキシ）及び尿素類（例えば、モノ−又はジ−アルキルアミノカルボニルアミノ又はアリールアミノカルボニルアミノ）；窒素含有基、例えばアミン類（例えば、アミノ、モノ−又はジ−アルキルアミノ、アミノアルキル、モノ−又はジ−アルキルアミノアルキル）、アジド類、ニトリル類（例えば、シアノ、シアノアルキル）、ニトロ；硫黄含有基、例えばチオール類、チオエーテル類、スルホキシド類及びスルホン類（例えば、アルキルチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アルキルチオアルキル、アルキルスルフィニルアルキル、アルキルスルホニルアルキル、アリールチオ、アリールスルフィニル、アリールスルホニル、アリールチオアルキル、アリールスルフィニルアルキル、アリールスルホニルアルキル）；及び複素環基。アルキル基の特に好ましい任意置換基は、アミノである。本明細書で使用される場合、用語「アルキル」と組み合わせて、用語「酸」は、「カルボキシ」を意味する。
【００２７】
用語「ヘテロアリール」とは、単独で又は他の基との組合せで、Ｎ、Ｏ、又はＳから選択される１、２、又は３個の環ヘテロ原子を含有し、残りの環原子がＣである、少なくとも１個の芳香環を有する、５〜１２個の環原子の単環又は二環基を意味する。ヘテロアリールの例は、ピリジニル、ピラジニル及びピリミジニルである。ヘテロアリール基の１又は２個の環炭素原子は、カルボニル基により置き換えられていてもよい。上記のヘテロアリール基は、１、２、又は３個の置換基、好ましくは１、又は２個の置換基で、例えば、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、ハロＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルスルホニル、Ｃ１−６アルキルスルフィニル、Ｃ１−６アルキルチオ、アミノ、アミノＣ１−６アルキル、モノ−又はジ−置換アミノ−Ｃ１−６アルキル、ニトロ、シアノ、アシル、カルバモイル、モノ−又はジ−置換アミノ、アミノカルボニル、モノ−又はジ−置換アミノ−カルボニル、アミノカルボニルＣ１−６アルコキシ、モノ−又はジ−置換アミノ−カルボニル−Ｃ１−６アルコキシ、ヒドロキシ−Ｃ１−６アルキル、カルボキシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、アリールＣ１−６アルコキシ、ヘテロアリールＣ１−６アルコキシ、ヘテロシクリルＣ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルコキシカルボニルＣ１−６アルコキシ、カルバモイルＣ１−６アルコキシ及びカルボキシルＣ１−６アルコキシ、好ましくはハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、ハロＣ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６アルキルスルホニル、Ｃ１−６アルキルスルフィニル、Ｃ１−６アルキルチオ、アミノ、モノ−Ｃ１−６アルキル置換アミノ、ジ−Ｃ１−６アルキル置換アミノ、アミノＣ１−６アルキル、モノ−Ｃ１−６アルキル置換アミノ−Ｃ１−６アルキル、ジ−Ｃ１−６アルキル置換アミノ−Ｃ１−６アルキル、ニトロ、カルバモイル、モノ−又はジ−置換アミノ−カルボニル、ヒドロキシ−Ｃ１−６アルキル、カルボキシル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル及びシアノで、独立に置換されていてもよい。
【００２８】
低級アルキル基は、置換されていても又は非置換でもよく、好ましくは非置換である。置換されている場合、一般的には、例えば１〜３個の置換基、好ましくは1個の置換基が存在する。
【００２９】
本明細書で使用される場合、「アルコキシ」という用語は、アルキル−Ｏ−を意味し；そして「アルコイル」とは、アルキル−ＣＯ−を意味する。アルコキシ置換基又はアルコキシ含有置換基は、例えば、１個以上のアルキル基で置換されていてもよい。
【００３０】
本明細書で使用される場合、「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素又はヨウ素基、好ましくはフッ素、塩素又は臭素基、そしてより好ましくはフッ素又は塩素基を意味する。
【００３１】
本明細書で使用される場合、「Ｏ−連結アミノ酸」という用語は、該アミノ酸のカルボキシル基の酸素を介して、好ましくは該アミノ酸のカルボキシ終端のカルボキシル基を介して、分子に連結している、天然に存在する又は合成の任意のアミノ酸を意味する。アミノ酸の好ましい例は、（Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−酪酸、（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−ペンタン酸及び（Ｓ）−２−アミノ−プロピオン酸である。
【００３２】
「薬学的に許容しうる塩」は、式（Ｉ）の化合物の生物学的効果及び特性を保持し、適切な有機酸若しくは無機酸又は有機塩基若しくは無機塩基から形成される、従来の酸付加塩又は塩基付加塩を意味する。酸付加塩の例には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、スルファミン酸、リン酸及び硝酸のような無機酸から誘導されるもの、ならびにｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、シュウ酸、コハク酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸等などの有機酸から誘導されるものが挙げられる。塩基付加塩の例には、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、及び例えば水酸化テトラメチルアンモニウムのような第四級水酸化アンモニウムから誘導されるものが挙げられる。医薬化合物（すなわち、薬剤）の塩への化学的修飾は、物理的及び化学的安定性、例えば化合物の吸湿性、流動性、又は可溶性を含む特性を改善する試みで使用される、周知の技術である。例えば、H. Ansel et. al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (6th Ed. 1995) at pp. 196 and 1456-1457を参照されたし。好ましくは塩酸塩類である。
【００３３】
「薬学的に許容されうるエステル」は、従来の、カルボキシル基を有する式（Ｉ）の化合物のエステル化された化合物を指し、ここで、エステルは、式（Ｉ）の化合物の生物学的有効性及び特性を保持し、そしてインビボで開裂して対応する活性カルボン酸となる。インビボで開裂（この場合、加水分解）して対応するカルボン酸となるエステル基の例は、該水素が、場合により例えばヘテロシクル、シクロアルキル等で置換されている低級アルキルで置き換えられているものである。置換低級アルキルエステルの例は、低級アルキルがピロリジン、ピペリジン、モルホリン、Ｎ−メチルピペラジン等で置換されているものである。インビボで開裂される基は、例えばエチル、モルホリノエチル、及びジエチルアミノエチルであり得る。本発明に関連して、−ＮＨ２をインビボで開裂しそしてヒドロキシ基で置き換えて、対応するカルボン酸を形成し得るので、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ２はエステルと同類である。
【００３４】
本発明の方法の実施において、本発明の化合物のいずれか一つの、又は本発明の化合物のいくつかの組み合わせ、又はその薬学的に許容しうる塩もしくはエステルの有効量を、当該技術分野で公知の通常及び許容されうる任意の方法により、単独か又は組み合わせのいずれかで投与される。したがって化合物又は組成物は、経口的（例えば、頬側口腔）、舌下に、非経口的（例えば、筋肉内、静脈内、又は皮下）、直腸的（例えば、坐剤又は洗液により）、経皮的（例えば、皮膚電気穿孔）或いは吸引により（例えば、エアロゾルにより）、ならびに錠剤及び懸濁液を含む固体、液体もしくは気体投与の形態で投与することができる。投与は、持続治療を伴う単回単位投薬形態又は適宜な単一用量で行うことができる。治療組成物はまた、パモン酸などの親油性塩と併用して油状エマルション又は分散液の形態で、或いは皮下又は筋肉内投与用の生分解性徐放性組成物の形態であることができる。
【００３５】
これに関する組成物の調製のために有用な医薬担体は、固体、液体、気体であることができる；したがって、組成物は、錠剤、丸剤、カプセル剤、坐剤、粉末剤、経腸的コーティング又は他の保護製剤（例えば、イオン交換樹脂上の結合、又は脂質−タンパク質ベシクルに包装）、徐放性製剤、液剤、懸濁剤、エリキシル剤、エアロゾル等の形態をとることができる。担体は、石油、動物、植物又は合成起源の油、例えば、ピーナッツオイル、大豆油、鉱油、ゴマ油等を含む様々な油から選択することができる。水、生理食塩水、水性デキストロース、及びグリコール類は、特に（血液と等張させる場合）注射剤液用に好ましい液体担体である。例えば、静脈投与のための製剤は、活性成分の滅菌水溶液を含み、これは、水中で固体活性成分を溶解して水溶液を生成し、滅菌溶液を得ることによって調製する。適切な医薬賦形剤には、デンプン、セルロース、グルコース、乳糖、タルク、ゼラチン、麦芽、米、小麦粉、白亜、シリカ、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸ナトリウム、グリセロールモノステアレート、塩化ナトリウム、乾燥スキムミルク、グリセロール、プロピレングリコール、水、エタノール等が挙げられる。組成物には、防腐剤、安定化剤、湿潤剤又は乳化剤、浸透圧を調整するための塩、緩衝剤等などの従来の医薬添加剤を付加してよい。適切な医薬担体及びそれらの製剤は、Remington's Pharmaceutical Sciences by E. W. Martin中に記載されている。そのような組成物は、どのような場合も、レシピエントにとって適切な投与のための適切な用量を調製するように、有効量の活性化合物を適切な担体と共に含有する。
【００３６】
医薬製剤は、また、防腐剤、可溶化剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、甘味剤、着色剤、風味剤、浸透圧を変化させる塩、緩衝剤、コーティング剤又は酸化防止剤を含有することもできる。これらは、また、式（Ｉ）の化合物以外に、追加の活性成分を含む他の治療上貴重な物質を含有することもできる。
【００３７】
本発明による化合物の「治療有効量」又は「用量」は、広い範囲内で変更することができ、そして当該技術分野において公知の方法で決定し得る。そのような投与量は、投与される特定の化合物、投与経路、治療される状態、ならびに治療される患者の状態などのそれぞれ特定の事例における個別の要件に適合される。一般に、体重約７０ｋｇの成人に経口又は非経口投与する場合は、約０．０１mg/kg〜約５０mg/kgの１日投与量が適切であるが、指示されたときは上限を超えてもよい。用量は、好ましくは１日当たり約０．３mg/kg〜１０mg/kgである。好ましい用量は、１日当たり約０．７０mg/kg〜３．５mg/kgである。１日投与量は、単回用量としてか、又は分割した用量で投与することができるか、或いは非経口投与では、連続注入として与えてもよい。
【００３８】
Ｒ１が、−ＯＣ（Ｏ）−Ｒ２である、式（Ｉ）の化合物は好ましい。
【００３９】
Ｒ１が、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ［ＣＨ（ＣＨ３）２］ＮＨ２、−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ［ＣＨ（ＣＨ３）（ＣＨ２ＣＨ３）］ＮＨ２又は−ＯＣ（Ｏ）ＣＨ（ＣＨ３）ＮＨ２である、式（Ｉ）の化合物も好ましい。
【００４０】
好ましいのは、Ｒ２が、低級アルキルである、式（Ｉ）の化合物である。
【００４１】
また好ましいのは、Ｒ２が、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール又は−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールである、式（Ｉ）の化合物である。
【００４２】
Ｒ２が、シクロペンタニルである、式（Ｉ）の化合物は、更に好ましい。
【００４３】
より更に、シクロアルキルが低級アルキルで置換されている式（Ｉ）の化合物は、好ましい。
【００４４】
好ましいのは、Ｒ２が、メチル、エチル、tert−ブチル、プロピル、イソプロピル、メトキシ、モルホリニル、フェニル、ピラジニル、ピリミジニル、メチル−ピペラジニル、−ＣＨ２−モルホリニル、カルボキシエチル、ピリジニル−メチル、ピリジニル、シクロペンタニル、アミノ−エチル、アミノ−メチル−プロピル又はアミノ−メチル−ブチルである、式（Ｉ）の化合物である。
【００４５】
また好ましいのは、Ｒ２が、モルホリニル、−ＣＨ２−モルホリニル又は−ＣＨ２−Ｎ−メチルピペラジニルである、式（Ｉ）の化合物である。
【００４６】
ヘテロシクロアルキル又は−ＣＨ２−ヘテロシクロアルキルが、低級アルキルで置換されている式（Ｉ）の化合物は、好ましい。
【００４７】
加えて、Ｒ２が、フェニルである、式（Ｉ）の化合物は好ましい。
【００４８】
より更に、Ｒ２が、ピラジニル、ピリミジニル又はピリジニルである、式（Ｉ）の化合物は、好ましい。
【００４９】
本発明の特に好ましい実施態様において、式（Ｉ）の化合物は、下記より選択される：
２−［３，５−ジクロロ−４−（１−ヒドロキシメチル−５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル；
酢酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
２，２−ジメチル−プロピオン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
酪酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
イソ酪酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
モルホリン−４−カルボン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
安息香酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
ピラジン−２−カルボン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
ピリミジン−５−カルボン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
プロピオン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−酢酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
モルホリン−４−イル−酢酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
コハク酸モノ−｛３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチル｝エステル；
ピリジン−３−イル−酢酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
イソニコチン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
（Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−酪酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
（Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−酪酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル塩酸塩；
（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−ペンタン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−ペンタン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル塩酸塩；
シクロペンタンカルボン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
（Ｓ）−２−アミノ−プロピオン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
（Ｓ）−２−アミノ−プロピオン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル塩酸塩；
炭酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルエチルエステル；及び
リン酸モノ−｛３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチル｝エステル。
【００５０】
本発明の別の好ましい実施態様において、式（Ｉ）の化合物は下記より選択される：
酢酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
イソ酪酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
モルホリン−４−カルボン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
ピラジン−２−カルボン酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；
モルホリン−４−イル−酢酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル；及び
コハク酸モノ−｛３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチル｝エステル。
【００５１】
特に好ましいのは、化合物：イソ酪酸３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルである。
【００５２】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物、ならびに薬学的に許容しうる担体及び／又は佐剤を含む医薬組成物に関する。
【００５３】
更に本発明は、治療上活性な物質として使用するための式（Ｉ）の化合物に関する。
【００５４】
甲状腺ホルモン受容体アゴニストによって調節される疾患の治療及び／又は予防のための治療上活性な物質として使用するための式（Ｉ）による化合物もまた、本発明の目的である。
【００５５】
本発明はまた、肥満症、高脂血症、高コレステロール血症、糖尿病、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、脂肪肝、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、甲状腺機能低下症又は甲状腺癌の治療的及び／又は予防的処置のための治療上活性な物質として使用するための式（Ｉ）の化合物に関する。
【００５６】
また本発明の一部は、甲状腺ホルモン受容体アゴニストによって調節される疾患の治療的及び／又は予防的処置のための、特に肥満症、高脂血症、高コレステロール血症、糖尿病、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、脂肪肝、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、甲状腺機能低下症又は甲状腺癌の治療的及び／又は予防的処置のための方法であって、有効量の式（Ｉ）の化合物を投与することを含む方法である。
【００５７】
甲状腺ホルモン受容体アゴニストによって調節される疾患の治療的及び／又は予防的処置のための式（Ｉ）の化合物の使用は、本発明の目的である。
【００５８】
より更に、肥満症、高脂血症、高コレステロール血症、糖尿病、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、脂肪肝、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、甲状腺機能低下症又は甲状腺癌の治療的及び／又は予防的処置のための式（Ｉ）の化合物の使用は、本発明の目的である。
【００５９】
本発明はまた、甲状腺ホルモン受容体アゴニストによって調節される疾患の治療的及び／又は予防的処置用の医薬の製造のための式（Ｉ）の化合物の使用に関する。
【００６０】
加えて、本発明は、肥満症、高脂血症、高コレステロール血症、糖尿病、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、脂肪肝、アテローム性動脈硬化症、心血管疾患、甲状腺機能低下症又は甲状腺癌の治療的及び／又は予防的処置用の医薬の製造のための式（Ｉ）の化合物の使用に関する。
【００６１】
本発明の化合物は、市販の出発物質を用いて開始し、そして当業者に公知の一般合成技術及び手順を利用して調製することができる。クロマトグラフィー用品及び機器は、例えば下記などの業者から購入してもよい：AnaLogix, Inc, Burlington, WI; Biotage AB, Charlottesville, VA; Analytical Sales and Services, Inc., Pompton Plains, NJ; Teledyne Isco, Lincoln, NE; VWR International, Bridgeport, NJ; 及びMultigram II Mettler Toledo Instrument Newark, DE 。Biotage及びISCOカラムは、標準クロマトグラフィーで使用されるシリカゲル充填済みカラムである。化学薬品は、例えばAldrich、Argonaut Technologies、VWR及びLancasterなどの業者から購入してもよい。下記に記載のものは、このような化合物を調製するための適切な反応スキームである。更なる例証は、下記の具体的な実施例において見られる。
【００６２】
【化４】
0005456676.tif 000005
【００６３】
化合物１に関する合成を、Haynes, N-E., et.al. ＰＣＴ国際出願（２００７）ＷＯ００９９１３Ａ１に記載のように調製した。化合物２に関する合成は、スキーム１に概説されている。化合物１を、メタノール中のホルムアルデヒド水溶液で高温にて処理して、化合物２を得た（スキーム１）（例えば、Dunn, J. P., et.al. ＰＣＴ国際出願（２００５）ＷＯ０９０３１７Ａ１を参照）。
【００６４】
【化５】
0005456676.tif 000006
【００６５】
化合物３ａ〜ｋを、スキーム２に概説した反応に従って合成した。化合物２を、塩基及び４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンで、続いて様々な酸塩化物で処理して、化合物３ａ〜ｋを得た（例えば、Dunn, J. P., et.al. ＰＣＴ国際出願（２００５）ＷＯ０９０３１７Ａ１を参照）。
【００６６】
【化６】
0005456676.tif 000007
【００６７】
化合物４を、スキーム３に概説した反応に従って合成した。化合物２を、塩基及び４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンで、続いて無水コハク酸で処理して、化合物４を得た（例えば、Dunn, J. P., et.al. ＰＣＴ国際出願（２００６）ＵＳ００２５４６２Ａ１を参照）。
【００６８】
【化７】
0005456676.tif 000008
【００６９】
化合物５ａ及び５ｂを、スキーム４に概説した反応に従って合成した。酸を、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（Ｎ−スクシンイミジル）ウロニウムテトラフルオロボラート及び塩基で活性化し、続いてピリジン−３−イル−酢酸及びイソニコチン酸で処理して、それぞれの化合物５ａ及び５ｂを得た（例えば、Bannwarth, W., et. al., Tet. Lett., 1991, 32(9), 1157-1160を参照）。
【００７０】
【化８】
0005456676.tif 000009
【００７１】
化合物８ａ及び８ｂを、スキーム５に概説した反応に従って合成した。化合物２のヒドロキシル基を、クロロ誘導体に変換した（例えば、Pesquet, A., et. al., Org. and Biomol. Chem., 2005, 3(21), 3937-3947を参照）。化合物６の塩素基を、酸化銀（Ｉ）の存在下、それぞれＮ−tert−ブトキシカルボニル保護アミノ酸で置換した（例えば、Ermolenko, L., et. al., J. Org. Chem, 2006, 71(2), 693-703を参照）。酸性条件下でtert−ブチルオキシ保護基の除去により、化合物８ａ及び８ｂを得た（例えば、Dunn, J. P., et.al. ＰＣＴ国際出願（２００５）ＷＯ０９０３１７Ａ１を参照）。
【００７２】
【化９】
0005456676.tif 000010
【００７３】
化合物９を、スキーム６に概説した反応に従って合成した。化合物６の塩素基を、酸化銀（Ｉ）の存在下、シクロペンタンカルボン酸で置換した（例えば、Ｅrmolenko, L., et. al., J. Org. Chem, 2006, 71(2), 693-703を参照）。
【００７４】
【化１０】
0005456676.tif 000011
【００７５】
化合物１２を、スキーム７に概説した一連の反応に従って合成した。まず、出発物質である、（Ｓ）−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロピオン酸からセシウム塩を生成し、続いてGomes, P., et. al., Syn. Comm., 2003, 33(10), 1683-1693に記載されている手順を使用してブロモ−クロロ−メタンの臭素基を置換して、クロロ−メチルエーテル（化合物１１）を調製した。次に化合物１１の塩素基を、塩基性条件下、化合物１のピリダジノンアミンで置換して、化合物１２を得た（例えば、Gomes, P., et. al., Syn. Comm., 2003, 33(10), 1683-1693を参照）。酸性条件下でtert−ブチルオキシ保護基の除去により、化合物１２を得た（例えば、Dunn, J. P., et.al. ＰＣＴ国際出願（２００５）ＷＯ０９０３１７Ａ１を参照）。
【００７６】
【化１１】
0005456676.tif 000012
【００７７】
化合物１４を、スキーム８に概説した反応に従って合成した。化合物２を、塩基及び４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジンで、続いてクロロギ酸エチルで処理して、化合物１４を得た（例えば、Dunn, J. P., et.al. ＰＣＴ国際出願（２００５）ＷＯ０９０３１７Ａ１を参照）。
【００７８】
【化１２】
0005456676.tif 000013
【００７９】
化合物１６を、スキーム９に概説した反応に従って合成した。化合物６の塩素基を、酸化銀（Ｉ）の存在下、リン酸ジ−tert−ブチルエステルで置換した（例えば、Ermolenko, L., et. al., J. Org. Chem, 2006, 71(2), 693-703を参照）。リン酸ジ−tert−ブチルエステルを、文献の手順に従って合成した（例えば、Zwierzak, A., et. al., Tetrahedron, 1971, 27, 3163-3170を参照）。次にtert−ブチル保護基を、標準酸性条件を使用して除去し、化合物１６を得た（例えば、Theodora W. Greene and Peter G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis (2nd Ed. 1991), John Wiley and Sons, Inc. を参照）。
【００８０】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物の製造方法であって、下記工程：
ａ）式（II）：
【００８１】
【化１３】
0005456676.tif 000014
で示される化合物を、メタノールの存在下で反応させて、式（Ｉ）：
【００８２】
【化１４】
0005456676.tif 000015
［式中、Ｒ１は、ヒドロキシルである］で示される化合物を得る工程；
ｂ）式（III）：
【００８３】
【化１５】
0005456676.tif 000016
で示される化合物を、ジヒドロ−フラン−２，５−ジオン、Ｒ２Ｃ（Ｏ）Ｃｌ及びＲ２Ｃ（Ｏ）ＯＨから選択される反応物の存在下で反応させて、式（Ｉ）：
【００８４】
【化１６】
0005456676.tif 000017
［式中、
Ｒ１は、−ＯＣ（Ｏ）−Ｒ２であり；
Ｒ２は、低級アルキル、アルコキシ、アルキル酸、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロシクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、又は−（ＣＨ２）ｎ−ヘテロアリールであり；
ｎは、０又は１であり；
及び上記式中、
Ｒ３は、ハロゲン又はヒドロキシルである］
で示される化合物を得る工程；
ｃ）式（IV）：
【００８５】
【化１７】
0005456676.tif 000018
で示される化合物を、酸、好ましくはトリフルオロ酢酸の存在下で反応させて、式（Ｉ）：
【００８６】
【化１８】
0005456676.tif 000019
［式中、Ｒ１は、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、及び上記式中、Ｒ４は、低級アルキルである］で示される化合物を得る工程；
ｄ）式（Ｖ）：
【００８７】
【化１９】
0005456676.tif 000020
で示される化合物を、酸、好ましくは塩酸の存在下で反応させて、式（Ｉ）：
【００８８】
【化２０】
0005456676.tif 000021
［式中、Ｒ１は、Ｏ−連結アミノ酸であり、及び上記式中、Ｒ５は、Ｎ−保護Ｏ−連結アミノ酸である］で示される化合物を得る工程
のうち一つを含む方法に関する。
【００８９】
本明細書で使用される場合、「Ｎ−保護Ｏ−連結アミノ酸」は、そのαアミノ基が、ウレタン−型保護基、例えばアリルオキシカルボニル（allyloxycarbony）、ベンジルオキシカルボニル（Ｚ）及び置換ベンジルオキシカルボニル、例えばｐ−クロロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル、ｐ−ビフェニル−イソプロピルオキシカルボニル、９−フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）及びｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル（Ｍｏｚ）；脂肪族ウレタン−型保護基、例えばｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ジイソプロピルメチルオキシカルボニル、イソプロピルオキシカルボニル、及びアリルオキシカルボニルから選択される適切な保護基で保護されている、上記と同義のＯ−連結アミノ酸を指す。
【００９０】
本発明の方法の好ましい実施態様において、Ｒ４は、tert−ブチルである。
【００９１】
本発明はまた、本発明の方法により製造される場合、式（Ｉ）の化合物に関する。
【００９２】
式（Ｉ）の化合物は、甲状腺ホルモンプロドラッグである。ＴＲ／ＲＸＲ／ＧＲＩＰアッセイを使用して、下記実施例に示すように式（Ｉ）の化合物を試験した。したがって、試験されたプロドラッグ化合物は、＞５０μMのＥＣ５０を有する甲状腺ホルモン受容体アゴニストではない。しかし、インビトロ又はインビボのいずれかで、式（Ｉａ）の化合物へ変換されると、式（Ｉ）の化合物は、同様の、及びある場合には向上した、インビボ特性を呈した。
【００９３】
本発明を、ここで下記実施例において更に記載するが、それは、説明を意図しているのであって本発明の範囲を制限するものではない。
【実施例】
【００９４】
実施例
実施例１
２−［３，５−ジクロロ−４−（１−ヒドロキシメチル−５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル
【００９５】
【化２１】
0005456676.tif 000022
【００９６】
メタノール（３０mL）中の２−［３，５−ジクロロ−４−（５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル（２．０ｇ、４．６０mmol）の溶液を、３７％ホルムアルデヒドの水溶液（７．５mL、１００．７２mmol）で処理した。得られた混合物を、１００℃に１８時間加熱した。この時点で、反応混合物を２５℃に冷却し、水で希釈した。得られた沈殿物を濾過により回収し、水で洗浄し、減圧下で乾燥させて、２−［３，５−ジクロロ−４−（１−ヒドロキシメチル−５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル（１．９７ｇ、９２％）を明黄色の固体として得た。ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ１８Ｈ１４Ｎ６Ｏ５Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）４６５．０４７６、実測値４６５．０４７５。
【００９７】
実施例２
酢酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル
【００９８】
【化２２】
0005456676.tif 000023
【００９９】
塩化メチレン（３．０mL）中の２−［３，５−ジクロロ−４−（１−ヒドロキシメチル−５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル（２００mg、０．４３mmol）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２３mL、１．２９mmol）及び４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（２５．８mg、０．２１mmol）の０℃に冷却した溶液を、アセチルクロリド（３３．５μL、０．４７mmol）で処理した。反応混合物を、２５℃に３．５時間かけて温めた。次に、反応混合物を４０℃に温め、一晩撹拌した。この時点で、反応混合物を２５℃に冷却し、次に塩化メチレン（１００mL）と水（１００mL）に分配した。次に有機物を、１N塩酸水溶液（３×１００mL）、水（１×１００mL）及び飽和塩化ナトリウム水溶液（１×１００mL）で洗浄した。有機物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、すすいで、減圧下で濃縮した。ISCO CombiFlashクロマトグラフィー（４０ｇ、０．５〜４．０％ メタノール／塩化メチレン）に付して、酢酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル（４５．９mg、２１％）を黄色の固体として得た。ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２０Ｈ１６Ｎ６Ｏ６Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５０７．０５８１、実測値５０７．０５８２。
【０１００】
実施例３
２，２−ジメチル−プロピオン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル
実施例２に記載の方法を使用して、２，２−ジメチル−塩化プロピオニルから、２，２−ジメチル−プロピオン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルを黄色の固体（５８．５mg、２５％）として得た；ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２３Ｈ２２Ｎ６Ｏ６Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５４９．１０５１、実測値５４９．１０４９。
【０１０１】
実施例４
酪酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル
実施例２に記載の方法を使用して、ブチリルクロリドから、酪酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルを黄色の固体（５５mg、２４％）として得た；ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２２Ｈ２０Ｎ６Ｏ６Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５３５．０８９４、実測値５３５．０８９１。
【０１０２】
実施例５
イソ酪酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル
実施例２に記載の方法を使用して、イソブチリルクロリドから、イソ酪酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルを黄色の固体（９１．７mg、４０％）として得た；ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２２Ｈ２０Ｎ６Ｏ６Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５３５．０８９４、実測値５３５．０８９１。
【０１０３】
実施例６
モルホリン−４−カルボン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル
実施例２に記載の方法を使用して、モルホリン−４−カルボニルクロリドから、モルホリン−４−カルボン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルをオフホワイト色の固体（３４．２mg、１４％）として得た；ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２３Ｈ２１Ｎ７Ｏ７Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５７８．０９５３、実測値 ５７８．０９５２。
【０１０４】
実施例７
安息香酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル
実施例２に記載の方法を使用して、ベンゾイルクロリドから、安息香酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルを黄色の固体（１０９．１mg、４５％）として得た；ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２５Ｈ１８Ｎ６Ｏ６Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５６９．０７３８、実測値５６９．０７３６。
【０１０５】
実施例８
ピラジン−２−カルボン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル
実施例２に記載の方法を使用し、J. Med. Chem., 1995, 38(20), 3902-3907に記載のようにピラジン−２−カルボニルクロリドから調製して、ピラジン−２−カルボン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルを明黄色の固体（１４１．２mg、５７％）として得た；ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２３Ｈ１６Ｎ８Ｏ６Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５７１．０６４３、実測値５７１．０６４１．
【０１０６】
実施例９
ピリミジン−５−カルボン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル
実施例２に記載の方法を使用し、J. Heterocyclic Chem., 1985, 22, 437-439に記載のようにピリミジン−５−カルボニルクロリドから調製して、ピリミジン−５−カルボン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルを白色の固体（５４．２mg、２１％）として得た；ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２３Ｈ１６Ｎ８Ｏ６Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５７１．０６４３、実測値５７１．０６４２。
【０１０７】
実施例１０
プロピオン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル
実施例２に記載の方法を使用して、塩化プロピオニルから、プロピオン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルを黄色の固体（２０１．３mg、６０％）として得た；ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２１Ｈ１８Ｎ６Ｏ６Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５２１．０７３８、実測値５２１．０７３５。
【０１０８】
実施例１１
（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−酢酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル
実施例２に記載の方法を使用して、（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−アセチルクロリドの二塩酸塩から、（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−酢酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルを黄色の固体（３７．４mg、１４．４％）として得た；ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２５Ｈ２６Ｎ８Ｏ６Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）６０５．１４２５、実測値６９５．１４２７。
【０１０９】
実施例１２
モルホリン−４−イル−酢酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル
実施例２に記載の方法を使用して、モルホリン−４−イル−アセチルクロリドから、モルホリン−４−イル−酢酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルをオフホワイト色の固体（６６．８mg、２６％）として得た；ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２４Ｈ２３Ｎ７Ｏ７Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５９２．１１０９、実測値５９２．１１１０。
【０１１０】
実施例１３
コハク酸 モノ−｛３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチル｝エステル
【０１１１】
【化２３】
0005456676.tif 000024
【０１１２】
塩化メチレン（２．５３mL）中の２−［３，５−ジクロロ−４−（１−ヒドロキシメチル−５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル（２００mg、０．４２mmol）、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（dimethyaminopyridine）（２．６mg、０．０２mmol）及び無水コハク酸（４７mg、０．４７mmol）の溶液を、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１７mL、０．９８mmol）を用いて２５℃で処理した。反応混合物を２５℃で３．５時間撹拌した。この時点で、反応混合物を飽和塩化アンモニウム水溶液（１００mL）に注ぎ、次に９０／１０  塩化メチレン／メタノール溶液（３×１００mL）で抽出した。水層のｐＨを、数滴の２N塩酸水溶液でｐＨ＝２にし、次に９０／１０  塩化メチレン／メタノール溶液（１×１００mL）で抽出した。合わせた有機物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、すすいで、減圧下で濃縮した。ISCO CombiFlash クロマトグラフィー（１２ｇ、０．５〜４％  メタノール／塩化メチレン）に付し、続いて超臨界液体クロマトグラフィー（Daicel OJカラム、３０％  メタノール）に付して、コハク酸 モノ−｛３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチル｝エステル（５７mg、２４％）を明褐色の固体として得た。ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２２Ｈ１８Ｎ６Ｏ８Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５６５．０６３６、実測値５６５．０６３３。
【０１１３】
実施例１４
ピリジン−３−イル−酢酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル
【０１１４】
【化２４】
0005456676.tif 000025
【０１１５】
塩化メチレン（１．８４mL）中のピリジン−３−イル−酢酸 塩酸塩（５７．３mg、０．３３mmol）の溶液を、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチル−Ｏ−（Ｎ−スクシンイミジル）ウロニウムテトラフルオロボラート（１１９mg、０．３９mmol）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．１７mL、０．９９mmol）で処理した。得られた溶液を２５℃で２．５時間撹拌した。この時点で、２−［３，５−ジクロロ−４−（１−ヒドロキシメチル−５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル（２００mg、０．４２mmol）を、反応物に加えた。反応混合物を２５℃で１８時間撹拌した。この時点で、反応混合物を塩化メチレン（５０mL）で希釈し、水（３×１５０mL）で洗浄した。有機物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、塩化メチレンですすいで、減圧下で濃縮した。Biotageフラッシュクロマトグラフィー（４０Ｓ、１〜４％  メタノール／塩化メチレン）に付し、続いて超臨界液体クロマトグラフィー（Daicel ODカラム、６０％メタノール）に付して、ピリジン−３−イル−酢酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル（４３．２mg、２２％）を黄色の固体として得た。ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２５Ｈ１９Ｎ７Ｏ６Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５８４．０８４７、実測値５８４．０８４８。
【０１１６】
実施例１５
イソニコチン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル
実施例１４に記載の方法を使用して、２−［３，５−ジクロロ−４−（１−ヒドロキシメチル−５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル及びイソニコチン酸から、イソニコチン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルを明黄色の固体（４３．６mg、２３％）として得た；ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２４Ｈ１７Ｎ７Ｏ６Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５７０．０６９０、実測値５７０．０６８６。
【０１１７】
実施例１６
（Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−酪酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル塩酸塩
【０１１８】
【化２５】
0005456676.tif 000026
【０１１９】
ａ．  テトラヒドロフラン（９．０mL、０．１４M）中の２−［３，５−ジクロロ−４−（１−ヒドロキシメチル−５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル（６００mg、１．２９mmol）の０℃に冷却した溶液を、塩化チオニル（０．２８mL、３．８４mmol）で処理した。反応混合物を２５℃にゆっくりと温めた。反応混合物を２５℃で一晩撹拌した。この時点で、反応混合物を減圧下で濃縮した。残留物をベンゼンに取り、２回再濃縮して、２−［３，５−ジクロロ−４−（１−クロロメチル−５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリルを黄色の固体として得た。この物質を更に精製しないで使用した。
【０１２０】
ｂ．  アセトニトリル中の２−［３，５−ジクロロ−４−（１−クロロメチル−５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル（０．６４mmol）の溶液を、Ｌ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−メチル−酪酸（１４７mg、０．６７mmol）を用いて２５℃で処理し、続いて酸化銀（Ｉ）（１５５．４mg、０．６７mmol）で処理した。反応混合物を２５℃で暗所にて２日間撹拌した。この時点で、反応混合物を、セライト（登録商標）のパッドを通して濾過し、９０／１０  塩化メチレン／メタノール（１×１００mL）の溶液ですすいだ。次に、濾液を減圧下で濃縮した。ISCO CombiFlashクロマトグラフィー（４０ｇ、０．５〜４％  メタノール／塩化メチレン）に付して、Ｌ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−メチル−酪酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル（２４６．１mg、５７．５％）を褐色の固体として得た。この物質を更に精製しないで使用した。
【０１２１】
ｃ．  酢酸エチル（５７０μL）中のＬ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−メチル−酪酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル（７５．８mg、０．１１４mmol）の溶液を、１，４−ジオキサン（０．１８mL、０．７５mmol）中の４Ｍ塩酸の溶液で２５℃にて処理した。反応溶液を２５℃で４時間撹拌した。この時点で、濁っている反応混合物を、濾紙を通して濾過し、それを酢酸エチル（０．５mL）で洗浄した。濾液をジエチルエーテル（２．０mL）で滴下処理した。得られた白色の沈殿物をジエチルエーテル（３×２mL）でトリチュレートし、次に減圧下で乾燥させた。次に、得られた固体をエタノール（３×１．５mL）でスラリーにし、濃縮し、減圧下で乾燥させて、（Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−酪酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル塩酸塩（４９．８mg、７２．６％）をオフホワイト色の固体として得た。ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２３Ｈ２３Ｎ７Ｏ６Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５６４．１１６０、実測値５６４．１１６４。
【０１２２】
実施例１７
（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−ペンタン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル塩酸塩
実施例１６ｂ及びｃに記載の方法を使用して、２−［３，５−ジクロロ−４−（１−クロロメチル−５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル及びＬ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−３−メチル−ペンタン酸から、（２Ｓ，３Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−ペンタン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル塩酸塩をオフホワイト色の固体（３５．８mg、５０．９％）として得た；ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２４Ｈ２５Ｎ７Ｏ６Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５７８．１３１６、実測値５７８．１３１５。
【０１２３】
実施例１８
シクロペンタンカルボン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル
【０１２４】
【化２６】
0005456676.tif 000027
【０１２５】
アセトニトリル（１８mL）中の２−［３，５−ジクロロ−４−（１−クロロメチル−５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル（０．６４mmol）の溶液を、シクロペンタンカルボン酸（７３．４μL、０．６７mmol）を用いて２５℃で処理し、続いて酸化銀（Ｉ）（１５５．４mg、０．６７mmol）で処理した。反応混合物を２５℃で暗所にて３日間撹拌した。この時点で、反応物を、セライト（登録商標）のパッドを通して濾過し、９０／１０  塩化メチレン／メタノール（１×１００mL）の溶液ですすいだ。次に、濾液を減圧下で濃縮した。Biotageフラッシュクロマトグラフィー（４０Ｓ、０．５〜１．２５％  メタノール／塩化メチレン）に付し、続いて逆相クロマトグラフィー（Pursuit C-18カラム、トリフルオロ酢酸を用いるアセトニトリルの勾配）に付し、続いて凍結乾燥させて、シクロペンタンカルボン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル（７５．７mg、２１％）をオフホワイト色の固体として得た。ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２４Ｈ２２Ｎ６Ｏ６Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｎａ＋）５８３．０８７０、実測値５８３．０８７１。
【０１２６】
実施例１９
（Ｓ）−２−アミノ−プロピオン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル塩酸塩
【０１２７】
【化２７】
0005456676.tif 000028
【０１２８】
７：３  エタノール／水の溶液（７５mL）中のＬ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロピオン酸（２．８３ｇ、１５．０mmol）の溶液を、溶液のｐＨが６．４〜６．７の間になるまで、１M炭酸セシウム水溶液を滴下して２５℃で処理した。この時点で、反応溶液を減圧下で濃縮し、高真空下で乾燥させて、Ｌ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロピオン酸セシウム塩を白色の固体（３．３６ｇ、６９％）として得た。この物質を更に精製しないで使用した。
【０１２９】
ｂ．  暗くしたドラフト中で２５℃のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１４mL）中のＬ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロピオン酸セシウム塩（１．５０ｇ、４．６７mmol）の溶液を、４５分間かけて添加漏斗を介してブロモクロロメタン（３１mL、４６４．５６mmol）で滴下処理した。次に、反応混合物をアルミ箔で包み、２５℃で１８時間撹拌した。この時点で、反応物を濾過して白色の沈殿物を除去した。沈殿物を塩化メチレンで洗浄した。濾液を減圧下で濃縮し、次に高真空下で乾燥させて、Ｌ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロピオン酸クロロメチルエステル（１．０ｇ、９０％）を黄色の油状物として得た。この物質を更に精製しないで使用した。
【０１３０】
ｃ．  Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．４mL）中の２−［３，５−ジクロロ−４−（５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル（０．６３ｇ、１．４５mmol）、Ｌ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロピオン酸クロロメチルエステル（０．３８ｇ、１．６０mmol）の溶液を、トリエチルアミン（０．４１mL、２．９１mmol）を用いて２５℃で処理した。反応混合物を、密閉反応容器中で５０℃に８時間加熱した。この時点で、反応混合物を塩化メチレン（１５０mL）で希釈し、水（３×２５０mL）で洗浄した。合わせた有機物を硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、すすいで、減圧下で濃縮した。ISCO CombiFlashクロマトグラフィー（４０ｇ、０．５〜５．０％  メタノール／塩化メチレン）に付して、Ｌ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロピオン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル（１５３．３mg、１７％）を褐色の固体として得た。
【０１３１】
ｄ．  酢酸エチル（１．２mL）中のＬ−２−tert−ブトキシカルボニルアミノ−プロピオン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル（１５３．３mg、０．２４mmol）の溶液を、１，４−ジオキサン（０．４mL、１．６０mmol）中の４M塩酸の溶液を用いて２５℃で処理した。反応混合物を２５℃で４．３時間撹拌した。この時点で、１，４−ジオキサン（０．４mL、１．６０mmol）中の４M塩酸の溶液をまた別に加えた。反応混合物を２５℃で１８時間撹拌した。この時点で、反応混合物をジエチルエーテル（３mL）で希釈し、次に２分間撹拌した。得られた固体を濾過により回収して、褐色の固体（１１６mg）を得た。固体を超臨界液体クロマトグラフィー（Ｗｈｅｌｋ−Ｏ１ Ｒ，Ｒカラム３０％メタノール）により精製して、（Ｓ）−２−アミノ−プロピオン酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル塩酸塩（２８．３mg、２１％）を明黄色の固体として得た。ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２１Ｈ１９Ｎ７Ｏ６Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５３６．０８４７、実測値５３６．０８４３。
【０１３２】
実施例２０
炭酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルエチルエステル
【０１３３】
【化２８】
0005456676.tif 000029
【０１３４】
塩化メチレン（３mL）中の２−［３，５−ジクロロ−４−（１−ヒドロキシメチル−５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル（２００mg、０．４３mmol）、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（dimethyaminopyridine）（２５．３mg、０．２１mmol）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．２３mL、１．２９mmol）の溶液を、クロロギ酸エチル（４５μL、０．４７mmol）を用いて０℃で処理した。反応物を撹拌して２５℃に徐々に温まるにまかせ、そして２５℃で４８時間撹拌した。この時点で、反応混合物を塩化メチレン（１００mL）で希釈し、水（３×１００mL）で洗浄した。合わせた有機物を飽和塩化ナトリウム水溶液（１×１００mL）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、すすいで、減圧下で濃縮した。ISCO CombiFlashクロマトグラフィー（４０ｇ、１〜１０％  メタノール／塩化メチレン）に付し、続いて逆相クロマトグラフィー（Pursuit C-18カラム、酢酸アンモニウムを用いるアセトニトリルの勾配）に付して、炭酸 ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステルエチルエステル（８９．９mg、３９％）を白色の固体として得た。ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ２１Ｈ１８Ｎ６Ｏ７Ｃｌ２の計算値（Ｍ＋Ｈ＋）５３７．０６８７、実測値５３７．０６８６。
【０１３５】
実施例２１
リン酸 モノ−｛３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチル｝エステル
【０１３６】
【化２９】
0005456676.tif 000030
【０１３７】
アセトニトリル（１８mL）中の２−［３，５−ジクロロ−４−（１−クロロメチル−５−イソプロピル−６−オキソ−１，６−ジヒドロ−ピリダジン−３−イルオキシ）−フェニル］−３，５−ジオキソ−２，３，４，５−テトラヒドロ−［１，２，４］トリアジン−６−カルボニトリル（０．６４mmol）の溶液を、メチル−ホスホン酸 ジ−tert−ブチル  エステル（２７１．８mg、１．２９mmol）を用いて２５℃で処理し、続いて酸化銀（Ｉ）（１５５．９mg、０．６７mmol）で処理した。反応混合物を２５℃で暗所にて１８時間撹拌した。この時点で、反応物を、セライト（登録商標）のパッドを通して濾過し、９０／１０  塩化メチレン／メタノール（１×１００mL）の溶液ですすいだ。次に、濾液を減圧下で濃縮した。Biotageクロマトグラフィー（４０Ｓ、１．０〜３．５％  メタノール／塩化メチレン）に付し、続いて超臨界液体クロマトグラフィーに付して、リン酸 ジ−tert−ブチルエステル ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル（４８mg、２１％）を不純な、明黄色の固体として得た。この物質を更に精製しないで使用した。
【０１３８】
ｂ．  塩化メチレン（１．０mL、０．０６７M）中のリン酸 ジ−tert−ブチルエステル ３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチルエステル（４４．０mg、０．０６７mmol）の溶液を、トリフルオロ酢酸（０．２mL）を用いて２５℃で処理した。反応混合物を２５℃で２０分間撹拌した。この時点で、反応混合物を減圧下で濃縮し、ベンゼンで共沸的に乾燥させ、無水エタノールから濃縮し、続いてアセトニトリル及び水から凍結乾燥させて、リン酸 モノ−｛３−［２，６−ジクロロ−４−（６−シアノ−３，５−ジオキソ−４，５−ジヒドロ−３Ｈ−［１，２，４］トリアジン−２−イル）−フェノキシ］−５−イソプロピル−６−オキソ−６Ｈ−ピリダジン−１−イルメチル｝エステル（３１．４mg、８６％）をオフホワイトの固体として得た。前駆体の超臨界液体精製において使用した酢酸アンモニウムからの残留アンモニウム０．９５モルが、生成物中に存在した。ＥＳ＋−ＨＲＭＳ ｍ／ｅ Ｃ１８Ｈ１５Ｎ６Ｏ８ＰＣｌ２の計算値（Ｍ＋Ｎａ＋）５６６．９９５８、実測値５６６．９９６２。
【０１３９】
実施例２２
ＴＲ／ＲＸＲ／ＧＲＩＰアッセイ
この実施例において、ＴＲ／ＲＸＲ／ＧＲＩＰアッセイを使用して、式（Ｉ）の代表的な化合物を試験した。使用する略語：Ｈ６−ＴＲβ、ｈｅｘａ Ｈｉｓ（ヘキサヒスチジン）タグを有する甲状腺ホルモン受容体βのリガンド結合ドメイン；Ｈ６−ＴＲα、ｈｅｘａ Ｈｉｓタグを有する甲状腺ホルモン受容体αのリガンド結合ドメイン；ＥＥ−ＲｘＲα、ＥＥ−タグを有するレチノイドＸ受容体のリガンド結合ドメイン；ＡＰＣ、アロフィコシアニン；ＢＳＡ、ウシ血清アルブミン；ＤＭＳＯ、ジメチルスルホキシド。
【０１４０】
材料
甲状腺ホルモン受容体βのリガンド結合ドメイン（アミノ酸１４８−４１０）（Ｈ６−ＴＲβ）及び甲状腺ホルモン受容体αのリガンド結合ドメイン（アミノ酸２０２−４６１）（Ｈ６−ＴＲα）を、Ｎ−末端ｈｅｘａＨｉｓ配列を有する大腸菌（E.Coli）発現ベクターｐＥＴ２８ａ（Novagen, Milwaukee, WI）中にクローン化した。得られた組換えｈｅｘａＨｉｓタグ付タンパク質を、大腸菌ＢＬ２１（ＤＥ３）細胞中で生成した。細胞を、Terrific Broth（Bactoトリプトン（３．３％、w/v）、Difico 酵母エキス（２．０％、w/v）及びＮａＣｌ（０．５％、w/v）の自家調製培地）中で、振盪フラスコを使用し、０．２mM ＩＰＴＧ中２５℃にて２４時間の発現誘導により増殖し、収穫し、そして５容量の緩衝液Ａ（０．０５Mトリス、０．３M ＮａＣｌ、１％ w/v Betaine、０．０１Mイミダゾール、０．０２M β−メルカプトエタノール、ｐＨ８．０）で溶解した。リゾチーム（１．０mg/ml、Sigma）及びComplete Protease Inhibitor Cocktail（Roche Diagnostics Gmbh）をスラリーに加え、溶液の超音波処理を１分間、５回、４℃で行った。懸濁液を、Ti45 Beckmann rotorで２時間、１２７，３００ ＲＣＦ（相対遠心加速度）で遠心分離し、上清みを、NiNTAアガロース（Qiagen 30210）カラムに添加した。緩衝液Ａで洗浄した後、Ｈ６−ＴＲβ又はＨ６−ＴＲαを、０．２５Mイミダゾールを含有する緩衝液Ａで溶離した。
【０１４１】
ヒトレチノイドＸ受容体のリガンド結合ドメイン（アミノ酸２２５−４６２）（ＲｘＲα）を、Ｎ−末端Ｈｉｓ６及びＥＥ（EFMPME）タグ、Ｈｉｓ６とＥＥ配列の間のトロンビン開裂部位で操作し、そしてｐＡＣＹＣベクター中にクローン化した。得られたＨｉｓ６−ＥＥ−タグ付タンパク質を、大腸菌細胞中で産生した。細胞を、振盪フラスコを使用し、０．１mM ＩＰＴＧ中１８℃で１８時間発現誘導して増殖させ、収穫し、５容量の緩衝液Ｂ（０．０２５Mトリス、０．３M ＮａＣｌ、０．０２M イミダゾール、０．０１M β−メルカプトエタノール、ｐＨ８．０）で懸濁した。リゾチーム（０．２mg/ml、Sigma）及びComplete Protease Inhibitor Cocktail（Roche Diagnostics Gmbh）を加え、４℃で３０分間撹拌した。懸濁液を４℃で３０秒間、５回超音波処理した。懸濁液を１２，０００ ＲＣＦで２０分間遠心分離した。上清みを、０．４５μm孔径メンブランにより濾過し、０．５％ ＮＰ−４０を加えた。Ｈｉｓ６−タグ付タンパク質をＮｉＮＴＡ金属親和性樹脂（Qiagen, Valencia, CA）に結合させ、それから溶離した。タンパク質を濃縮し、透析した。
【０１４２】
Ｈｉｓ６タグをＥＥ−ＲｘＲαから、タンパク質１mg当たり１０単位のトロンビン（Pharmacia, Piscataway, NJ）を使用し、かつ２５℃で２時間インキュベートしてトロンビン分解により除去した。トロンビンの除去を、ベンズアミジン-Sepharose 6B（Pharmacia, Piscataway, NJ）を使用してバッチ式に行った。タンパク質を濃縮し、透析した。このタンパク質をコアクチベーターペプチド動員アッセイで使用した。
【０１４３】
ユーロピウム−結合型 抗−ｈｅｘａ Ｈｉｓ抗体及びＡＰＣ−結合型ストレプトアビジンを、PerkinElmer Life and Analytical Sciencesから購入した。
【０１４４】
ＴＲβ／ＲＸＲ／ＧＲＩＰコアクチベーターペプチド動員アッセイ
５０mM Ｈｅｐｅｓ、ｐＨ７．０、１mM ＤＴＴ、０．０５％ＮＰ４０及び０．２mg/ml ＢＳＡ（結合緩衝液）中のＨ６−ＴＲβ（５０nM）３０μＬを、結合緩衝液中の等容量のＥＥ−ＲｘＲα（５０nM）と混合した。次にＤＭＳＯ中のＴ３（０〜１４．８uM）６μL又は試験化合物（０〜１．２mM）を加え、溶液を３７℃で３０分間インキュベートした。次に結合緩衝液３０μL＋５％ＤＭＳＯ中のビオチン−ＧＲＩＰペプチド（ビオチン−Ａｃａ−ＨＧＴＳＬＫＥＫＨＫＩＬＨＲＬＬＱＤＳＳＳＰＶＤＬ−ＣＯＮＨ２）（１００nM）３０μＬを加え、溶液を３７℃で３０分間インキュベートした。５０mM トリス、ｐＨ７．４、１００mM ＮａＣｌ及び０．２mg/ml ＢＳＡ中の１２nM ユーロピウム−結合型 抗−ｈｅｘａ Ｈｉｓ抗体及び１６０nM ＡＰＣ−結合型ストレプトアビジン含有溶液３０μLを加え、溶液を４℃で一晩インキュベートした。アリコート（３５ul／試料）を、３８４−穴の黒色マイクロタイタープレートに移した。ＨＴＲＦシグナルを、Victor ５読み取り装置（PerkinElmer Life and Analytical Sciences）で読み取った。
【０１４５】
ＴＲα／ＲＸＲ／ＧＲＩＰコアクチベーターペプチド動員アッセイ
本アッセイプロトコルは、１２５nM Ｈ６−ＴＲα、１２５nM ＥＥ−ＲｘＲα及び２５０nM ビオチン−ＧＲＩＰを使用する以外は、上記のようにＴＲβ／ＲＸＲ／ＧＲＩＰコアクチベーターペプチド動員アッセイのプロトコルと基本的に同じである。
【０１４６】
下記の表で示すように、試験した化合物は、ＴＨＲ−β／ＲＸＲ／ＧＲＩＰ動員アッセイからのＥＣ５０値を有する甲状腺ホルモン受容体アゴニストである：
【０１４７】
【表１】
0005456676.tif 000031
【０１４８】
実施例２３
細胞培養
Ｃａｃｏ−２細胞を、１０％ウシ胎仔血清、１％非必須アミノ酸、ペニシリン１００単位/mL及びストレプトマイシン１００μg/mLを含有するMinimum Essential Medium（ＭＥＭ）で培養した。それらを、５％ ＣＯ２の加湿雰囲気中３７℃でインキュベートした。培地を一日おきに交換した。Ｃａｃｏ−２細胞を週に１回トリプシン処理を行った。
【０１４９】
排出輸送アッセイ
Ｃａｃｏ−２細胞を、４．５５×１０５細胞/cm2の密度で播種した。Ｃａｃｏ−２細胞を３７℃で７日間インキュベートした。培地を、Ｃａｃｏ−２細胞のために２〜３日おきに交換した。実験の前に、細胞を輸送培地［１０mM ＨＥＰＥＳ含有のＨＢＳＳ（ｐＨ７．４）］で３７℃にて３０分間平衡化した。細胞単層の経上皮電気抵抗（ＴＥＥＲ）を、「箸型」電極（World Precision Instruments, Sarasota, FL）を使用して測定した。ＴＥＥＲ値＞５００を有するＣａｃｏ−２細胞単層をアッセイのために使用した。
【０１５０】
試料を、１％ ＤＭＳＯを含有する輸送培地で調製した。試験化合物を、ドナーチャンバーに１０μMで塗布した。プレートを、９０rpmで振盪しながら３７℃でインキュベートした。試料をレシーバチャンバーから、６０分及び１２０分時点で取り出した。ＴＥＥＲ値を最終サンプリング時点の５分前時点で測定した。試料を、２容量のアセトニトリルと混合し、３，５００rpmで４℃にて１０分間遠心分離した。上清みを１％酢酸を含む１容量の水で希釈した。試料をＬＣ／ＭＳにより分析した。標準段階希釈を手作業で１０、５０、２５０、１，２５０及び２，５００nMに調製した。
【０１５１】
データ分析及び計算値
見かけの透過率（Ｐａｐｐ）を、下記の方程式を用いて算出した：
【０１５２】
【数１】
0005456676.tif 000032
式中、Ｃは、レシーバチャンバー薬剤濃度であり；ｔは、秒単位時間であり；Ｖは、レシーバーチャンバーの容積であり；Ｃｏは、ドナーチャンバー中の薬剤初濃度であり；そしてＡは、フィルターの表面積である。
【０１５３】
【表２】
0005456676.tif 000033
* 質量平衡は、プロドラッグのみから算出し、変換した薬剤は含んでいない。
【０１５４】
実施例２４
ラット（３動物）において単回用量（１０mg/kg）ＰＯ（経口）（挿管）ＰＫ（薬物動態）を、水製剤中の２％ Klucel、０．１％ Tween 80を使用して、実施例５の化合物で実施した。
【０１５５】
分析法：
ラット血漿のアリコート（０．０５mL）を、アセトニトリルを用いてタンパク質沈殿を行った。抽出物を同量の水で希釈し、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳシステムに注入した。式（Ｉａ）の化合物に関する方法の線形範囲は１．０〜１０００ng/mLであった。試料と共に分析したＱＣ（品質管理）サンプルの分析によりモニターしたアッセイ成績を、表３に示した。
【０１５６】
【表３】
0005456676.tif 000034
【０１５７】
実施例５の化合物、つまり化合物（Ｉａ）のプロドラッグを、１０mg/kgでラットに経口投与した。プロドラッグ及び親化合物（化合物（Ｉａ））の両方をモニターした。しかし、親化合物のみ検出した。プロドラッグを投与した後の親化合物の生物学的利用率は、親化合物を投与した後で得られたそれよりおよそ２倍高かった。プロドラッグの吸収は、親化合物よりも速かった。プロドラッグを投与した後の親化合物の曝露の変動性は、親化合物を投与した後に得られたそれに比べて向上した。
【０１５８】
実施例２５
イヌ（３動物）において単回用量（１０mg/kg）ＰＯ（挿管）ＰＫを、水処方物中の２％ Klucel、０．１％ Tween 80を使用して、実施例５の化合物で実施した。
【０１５９】
分析法：
イヌ血漿のアリコート（０．０５mL）を、リン酸緩衝食塩水（ｐＨ７．４）０．０５０mL及び安定的標識内部標準使用液のアリコート０．０１０mLと混合した。次に試料の各々を酢酸エチル０．５００mLで抽出した。試料抽出上清みの各々のアリコート０．３５０mLを、注入ブロックに移し、Turbovapエバポレーターを使用して蒸発乾固した。次に試料を水：アセトニトリル（０．１％酢酸を含む）の１：１の混合物０．２００mLで再構成した。各穴からの試料０．０２０mLを、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳシステムに注入した。式（Ｉａ）の化合物に関する方法の線形範囲は、５．０〜５０００ng/mLであった。試料と共に分析したＱＣ（品質管理）サンプルの分析によりモニターしたアッセイ成績を、表４に示した。
【０１６０】
【表４】
0005456676.tif 000035
【０１６１】
実施例５の化合物を、イヌに１０mg/kgで経口投与した。プロドラッグ及び親化合物（化合物（Ｉａ））の両方をモニターした。しかし、親化合物のみ検出した。イヌの、実施例５の化合物を投与した後の親化合物の生物学的利用率は、親化合物を投与した場合に得られたそれと同程度であった。しかし、経口曝露における変動性は、親化合物を投与した場合に比べて、実施例５の化合物を投与した場合に減少した。
【０１６２】
特定の実施態様の変形がなされ得、そしてその変形はそれでもなお添付の特許請求の範囲の範囲内であるので、本発明は、上記の本発明の特定の実施態様に制限されるものではないことが理解される。
【配列表】
0005456676000001.app