(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化３１】
0005529049.tif 000039
（式中、
Ｒは、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、又はＲ４であり；
Ｒ１は、１個以上のＲ１ａで場合により置換されている、Ｃ１−６アルキル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はシクロアルキルアルキルであり；
Ｒ１ａは、Ｒ１ｂ又はＲ１ｃであり；
Ｒ１ｂは、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、又は−ＣＮであり；
Ｒ１ｃは、１個以上のＲ１ｄで場合により置換されている、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｒ１ｆ）、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２（Ｒ１ｅ）、−Ｓ（Ｒ１ｆ）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｒ１ｆ）、又は−Ｓ（＝Ｏ）（Ｒ１ｆ）、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、アミノ、Ｃ１−６ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルオキシ、又はヘテロシクロアルキルオキシであり；
Ｒ１ｄは、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、又はＣ１−６ハロアルキルであり；
Ｒ１ｅは、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、−ＣＮ、Ｃ１−６ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１ｆは、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ２は、Ｎ（Ｒ２ａ）２であり；
各Ｒ２ａは、独立して、Ｈ又はＲ２ｂであり；
各Ｒ２ｂは、独立して、１個以上のＲ２ｃで場合により置換されている、Ｃ１−６アルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルアルキレンであり；
Ｒ２ｃは、Ｒ２ｄ又はＲ２ｅであり；
Ｒ２ｄは、ハロゲン、オキソ、又はヒドロキシであり；
Ｒ２ｅは、１個以上のＲ２ｆで場合により置換されている、−Ｎ（Ｒ２ｇ）２、−Ｃ（＝Ｏ）（Ｒ２ｇ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｒ２ｇ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ２ｇ）２、−Ｎ（Ｒ２ｇ）Ｃ（＝Ｏ）（Ｒ２ｇ）、−Ｓ（＝Ｏ）２（Ｒ２ｇ）、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ２ｇ）２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
各Ｒ２ｆは、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルキルであり；
各Ｒ２ｇは、独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルキル、又はフェニルであり；
Ｒ３は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３ａであり；
Ｒ３ａは、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、フェニル、又はＮ（Ｒ３ｂ）２であり；
各Ｒ３ｂは、独立して、Ｈ又はＣ１−６アルキルであり；
Ｒ４は、−Ｏ（Ｒ４ａ）であり；
Ｒ４ａは、Ｈ又はＲ４ｂであり；
Ｒ４ｂは、１個以上のＲ４ｃで場合により置換されている、Ｃ１−６アルキル、フェニル、ベンジル、Ｃ１−６ハロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアリールであり；
Ｒ４ｃは、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、又はＣ１−６アルコキシであり；
Ｑ３は、−Ｏ−Ｑ３ａ、−Ｏ（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）（Ｑ３ａ）、−Ｓ（＝Ｏ）２（Ｑ３ａ）、−Ｎ（Ｑ３ａ）２、−Ｎ（Ｑ３ａ）Ｓ（＝Ｏ）２（Ｑ３ａ）、−Ｎ（Ｑ３ａ）Ｃ（＝Ｏ）（Ｑ３ａ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｑ３ａ）２、又は−Ｎ（Ｑ３ａ）Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｑ３ａ）２であり；
各Ｑ３ａは、独立して、Ｈ、１個以上のＱ３ｄで場合により置換されている、Ｃ１−６アルキル、フェニル、又はシクロアルキルであり；
ｍは、０、１、又は２であり；
各Ｑ３ｄは、独立して、Ｑ３ｅ又はＱ３ｆであり；
Ｑ３ｅは、ハロゲン又はヒドロキシであり；
Ｑ３ｆは、１個以上のＱ３ｇで場合により置換されている、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルキル、フェニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はヘテロアリールであり；そして
各Ｑ３ｇは、独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ヒドロキシアルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、又はＣ１−６アルコキシである）
で示される化合物、又は薬学的に許容されうるその塩。
【請求項２】
Ｒが、Ｒ１である、請求項１記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ１が、Ｃ１−６アルキルである、請求項２記載の化合物。
【請求項４】
Ｒが、Ｒ２であり、Ｒ２が、ＮＨ（Ｒ２ａ）であり、そしてＲ２ａが、Ｒ２ｂである、請求項１記載の化合物。
【請求項５】
式II：
【化３２】
0005529049.tif 000040
（式中、
Ｒ１は、１個以上のＲ１ａで場合により置換されている、Ｃ１−６アルキル、フェニル、ベンジル、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はシクロアルキルアルキルであり；
Ｒ１ａは、Ｒ１ｂ又はＲ１ｃであり；
Ｒ１ｂは、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、又は−ＣＮであり；
Ｒ１ｃは、１個以上のＲ１ｄで場合により置換されている、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｒ１ｆ）、−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ（Ｒ１ｅ）、−Ｓ（Ｒ１ｆ）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｒ１ｆ）、又は−Ｓ（＝Ｏ）（Ｒ１ｆ）、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、アミノ、Ｃ１−６ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルオキシ、又はヘテロシクロアルキルオキシであり；
Ｒ１ｄは、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、又はＣ１−６ハロアルキルであり；
Ｒ１ｅは、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、シアノ、Ｃ１−６ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１ｆは、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
ｍは、０、１、又は２であり；そして
Ｑ３は、請求項１に定義されたとおりである）
で示される請求項１記載の化合物。
【請求項６】
式III：
【化３３】
0005529049.tif 000041
（式中、
Ｒ２ｂは、独立して、１個以上のＲ２ｃで場合により置換されている、Ｃ１−６アルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルアルキレンであり；
Ｒ２ｃは、Ｒ２ｄ又はＲ２ｅであり；
Ｒ２ｄは、ハロゲン、オキソ、又はヒドロキシであり；
Ｒ２ｅは、１個以上のＲ２ｆで場合により置換されている、−Ｎ（Ｒ２ｇ）２、−Ｃ（＝Ｏ）（Ｒ２ｇ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｒ２ｇ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ２ｇ）２、−Ｎ（Ｒ２ｇ）Ｃ（＝Ｏ）（Ｒ２ｇ）、−Ｓ（＝Ｏ）２（Ｒ２ｇ）、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ２ｇ）２、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
各Ｒ２ｆは、独立して、Ｈ、ハロゲン、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルキルであり；
各Ｒ２ｇは、独立して、Ｈ、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシ、Ｃ１−６ハロアルキル、又はフェニルであり；そして
Ｑ３は、請求項１に定義されたとおりである）
で示される請求項１記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ１が、tert−ブチルである、請求項１又は５記載の化合物。
【請求項８】
Ｑ３ａが、１個以上のＱ３ｄで場合により置換されている、Ｃ１−６アルキル、フェニル又はシクロアルキルであり、ここで、Ｑ３ｄが、請求項１に定義されたとおりである、請求項１〜７のいずれか１項記載の化合物。
【請求項９】
２−（シクロペンチル−メチル−アミノ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−カルボン酸イソプロピルアミド；
１−（２−シクロペンチルオキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
Ｎ−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ベンズアミド；
シクロヘキサンカルボン酸［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−アミド；
Ｎ−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−Ｎ−メチル−ベンズアミド；
Ｎ−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ベンゼンスルホンアミド；
Ｎ−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−Ｎ−メチル−ベンゼンスルホンアミド；
７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−カルボン酸ジメチルアミド；
７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−カルボン酸イソプロピルアミド；
７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−カルボン酸シクロペンチルアミド；
１−（２−シクロヘプチルオキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
１−（２−シクロへキシルオキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
１−（２−イソプロポキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
１−（２−エトキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
２，２−ジメチル−１−［２−（２−モルホリン−４−イル−２−オキソ−エトキシ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン；
１−［２−（１，２−ジメチル−プロポキシ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
１−（２−イソブトキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
１−シクロヘキシル−３−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ウレア；
１−シクロヘプチル−３−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ウレア；
２，２−ジメチル−１−［２−（メチル−フェニル−アミノ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン；
１−（２−ｓｅｃ−ブトキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
２，２−ジメチル−１−（２−フェニルアミノ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−プロパン−１−オン；
１−（２−シクロペンチルオキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
１−［２−（シクロペンチル−メチル−アミノ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
２，２−ジメチル−１−（２−フェノキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−プロパン−１−オン；
２，２−ジメチル−１−｛２−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル｝−プロパン−１−オン；
１−シクロヘキシル−３−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ウレア；
１−シクロヘプチル−３−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ウレア；及び
１−［２−（６−メトキシ−ピリジン−２−イルアミノ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン
からなる群から選択される請求項１記載の化合物。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれか１項記載の化合物を含む、炎症又は自己免疫状態の処置用の医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１〜９のいずれか１項記載の化合物を含む、炎症状態の処置用の医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１〜９のいずれか１項記載の化合物を含む、癌の処置用の医薬組成物。
【請求項１３】
炎症障害又は自己免疫障害の処置用の医薬の製造における、請求項１記載の化合物の使用。
【請求項１４】
炎症障害又は自己免疫障害の処置における使用のための、請求項１〜９のいずれか１項記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ＪＡＫ及びＳＹＫ阻害剤であり、ＪＡＫ３を選択的に阻害し、自己免疫疾患及び炎症疾患の処置に有用な新規なピロロピラジン誘導体の使用に関する。
【０００２】
プロテインキナーゼは、ヒト酵素の最大ファミリーの一種であり、リン酸基をタンパク質（特に、チロシン残基のアルコール部分にあるチロシンキナーゼリン酸化タンパク質）に付加することにより、多くの異なるシグナル伝達過程を調節する。そのチロシンキナーゼファミリーは、細胞増殖、遊走、及び分化を制御するメンバーを含む。異常なキナーゼ活性は、癌、自己免疫疾患及び炎症疾患をはじめとする様々なヒト疾患に関係している。プロテインキナーゼは、細胞シグナル伝達の重要な調節物質の一種であるため、それらは、キナーゼ活性の小分子阻害剤を用いて細胞機能を調整する手段を提供し、こうして良好な薬物設計ターゲットを創り出す。キナーゼ活性の選択的で有効な阻害剤は、キナーゼによる疾患過程を処置することに加え、細胞シグナル伝達過程の研究及び治療的関心のある他の細胞標的の同定にも有用である。
【０００３】
ＪＡＫ（ヤヌスキナーゼ）は、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３及びＴＹＫ２をはじめとする細胞質タンパク質チロシンキナーゼのファミリーである。ＪＡＫのそれぞれが、別個のサイトカイン受容体の細胞質内の部分と優先的に結合する（Annu. Rev. Immunol. 16(1998), pp.293-322）。ＪＡＫは、リガンド結合により活性化して、それ自体は内在性キナーゼ活性を欠くサイトカイン受容体をリン酸化することにより、シグナル伝達を開始する。このリン酸化は、ＳＴＡＴタンパク質（シグナル伝達性転写因子）として知られる他の分子の受容体に連結部位を生成し、リン酸化されたＪＡＫは、様々なＳＴＡＴタンパク質に結合する。ＳＴＡＴタンパク質、又はＳＴＡＴは、チロシン残基のリン酸化により活性化されるＤＮＡ結合タンパク質であり、シグナル伝達分子及び転写因子の両方として作用して、最終的にサイトカイン応答性遺伝子のプロモータ中に存在する特異的ＤＮＡ配列に結合する（Leonard et al.,(2000), J. Allergy Clin. Immunol. 105:877-888）。
【０００４】
ＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達は、多くの異常な免疫反応（例えば、アレルギー、喘息、自己免疫疾患、例えば移植片（同種移植片）拒絶、関節リウマチ、筋委縮性側索硬化症及び多発性硬化症）の媒介、並びに固体及び血液悪性腫瘍（例えば、白血病及びリンパ腫）に関係している。
【０００５】
つまりＪＡＫ及びＳＴＡＴは、複数の潜在的に絡み合ったシグナル伝達経路の構成要素であることから（Oncogene 19(2000),pp.5662-5679）、他のシグナル伝達経路を妨害せずにＪＡＫ−ＳＴＡＴ経路の一要素を特異的に標的とするのが困難であることが示される。
【０００６】
ＪＡＫ３をはじめとするＪＡＫキナーゼは、急性リンパ芽球白血病（小児癌の最も一般的な形態）の小児から得た初代白血病細胞中に多量に発現されており、複数の研究で、アポトーシスを調節するシグナルによる特定細胞でのＳＴＡＴ活性化が修正された（Demoulin et al.,(1996), Mol. Cell. Biol. 16:4710-6; Jurlander et al., (1997), Blood. 89:4146-52; Kaneko et al., (1997), Clin. Exp. Immun. 109:185-193;及びNakamura et al.,(1996), J. Biol. Chem. 271: 19483-8）。それらは、リンパ球の分化、機能及び生存に重要であることも知られている。特にＪＡＫ３は、リンパ球、マクロファージ、及び肥満細胞の機能において不可欠な役割を果たす。このＪＡＫキナーゼの重要性を考慮すると、ＪＡＫ経路を調整する化合物（ＪＡＫキナーゼ３に選択的なものを含む）は、リンパ球、マクロファージ、又は肥満細胞の機能が関与する疾患及び病状を処置するのに有用となりうる（Kudlacz et al.,(2004) Am. J. Transplant 4:51-57；Changelian（2003） Science 302: 875-878）。ＪＡＫ経路の標的化又はＪＡＫキナーゼ（特に、ＪＡＫ３）の調整が治療上有用と予測される病状としては、白血病、リンパ腫、移植片拒絶（例えば、膵島移植片拒絶、骨髄移植片の適用（例えば、移植片対宿主病）、自己免疫疾患（例えば、糖尿病）、及び炎症（例えば、喘息、アレルギー反応）が挙げられる。ＪＡＫ３の阻害に有利となりうる条件を、以下により詳細に議論する。
【０００７】
しかし、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２及びＴｙｋ２が比較的遍在的に発現しているのに対して、ＪＡＫ３は、より限定的で調節された発現を有する。一部のＪＡＫ（ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、Ｔｙｋ２）は、様々なサイトカイン受容体により用いられるが、ＪＡＫ３は、受容体中にγｃを含むサイトカインのみにより用いられる。それゆえＪＡＫ３は、受容体が共通のγ鎖を使用することが今日までに示されたサイトカイン：ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１５及びＩＬ−２１のサイトカインシグナル伝達において役割を担う。ＪＡＫ１は、とりわけサイトカインＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−７，ＩＬ−９及びＩＬ−２１の受容体と相互作用するが、ＪＡＫ２は、とりわけＩＬ−９及びＴＮＦ−αの受容体と相互作用する。特定のサイトカイン（例えば、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−７、ＩＬ−９、ＩＬ−１５及びＩＬ−２１）がそれらの受容体に結合すると、受容体のオリゴマー化が起こり、その結果、結合したＪＡＫキナーゼの細胞質側末端が近づき、ＪＡＫキナーゼ上のチロシン残基のトランスリン酸化が促進される。このトランスリン酸化により、ＪＡＫキナーゼが活性化される。
【０００８】
動物試験から、ＪＡＫ３が、Ｂ及びＴリンパ球の成熟において極めて重要な役割を担うだけでなく、ＪＡＫ３が、Ｔ細胞機能の維持に構造的に必要であることが示唆された。この新規なメカニズムを通した免疫活性の調整が、Ｔ細胞増殖障害（例えば、移植片拒絶及び自己免疫疾患）の処置に有用であることを立証することができた。
【０００９】
特にＪＡＫ３は、様々な生物学的過程に関係している。例えば、ＩＬ−４及びＩＬ−９に誘導されるマウス肥満細胞の増殖及び生存は、ＪＡＫ３−及びγ鎖−シグナル伝達に依存することが示された（Suzuki et al.,(2000), Blood 96:2172-2180）。ＪＡＫ３は、ＩｇＥ受容体を介した肥満細胞脱顆粒反応においても極めて重要な役割を担い（Malaviya et al.,(1999), Biochem. Biophys. Res. Commun. 257:807-813）、ＪＡＫ３キナーゼの阻害が、アナフィラキシーをはじめとするＩ型過敏反応を予防することが示された（Malaviya et al.,(1999), J. Biol. Chem. 274:27028-27038）。ＪＡＫ３阻害により、同種移植片拒絶での免疫抑制が得られることが示された（Kirken,(2000), Transpl. Proc. 33:3268-3270）。ＪＡＫ３キナーゼは、関節リウマチ（Muller-Ladner et al.,(2000), J. Immunal. 164:3894-3901）；家族性筋委縮性側索硬化症（Trieu et al.,(2000), Biochem Biophys. Res. Commun. 267:22-25）;白血病（Sudbeck et al.,(1999), Clin. Cancer Res. 5:1569-1582）；菌状息肉症（Ｔ細胞リンパ腫の一形態）（Nielsen et al., (1997), Prac. Natl. Acad. Sci. USA 94:6764-6769 ）；及び異常な細胞増殖(Yu et al., (1997), J. Immunol. 159:5206-5210; Catlett-Falcone et al., (1999), Immunity 10:105-115)の初期及び後期段階に関わるメカニズムにも関係した。
【００１０】
ＪＡＫ３阻害剤は、臓器移植、異種移植、狼瘡、多発性硬化症、関節リウマチ、乾癬、Ｉ型糖尿病及び糖尿病の合併症、癌、喘息、アトピー性皮膚炎、自己免疫性甲状腺障害、潰瘍性大腸炎、クローン病、アルツハイマー病、白血病及び免疫抑制が望ましい他の適応症のための免疫抑制剤として有用な治療である。
【００１１】
ＪＡＫ３の非造血系発現も報告されたが、その機能的意義もやがて分類されるはずである（J. Immunol 168(2002), pp2475-2482）。ＳＣＩＤでの骨髄移植片は、治癒力があるが（Blood 103(2004), pp2009-2018）、ＪＡＫ３が、他の組織又は器官で肝要な非重複的機能を有することは考えにくい。このため、免疫抑制剤の他の標的とは異なり、ＪＡＫ３が限定的に分布することは、興味深い。免疫系に限定して発現される分子標的で作用する薬剤により、最適な効能（毒性比）が得られる。それゆえ、ＪＡＫ３を標的にすれば、理論的には、これらの細胞集団の外部で作用せず、必要とされる部位（即ち、免疫反応に積極的に関与する細胞）で免疫抑制が提供される。欠陥のある免疫反応が、様々なＳＴＡＴ−／−株において記載されたが（J. Investig. Med. 44(1996), pp.304-311; Cur. Opin. Cell Biol. 9(1997), pp.233-239）、ＳＴＡＴが遍在的に分布すること、及びそれらの分子が小分子阻害剤に標的とされうる酵素活性を有さないという事実が、免疫抑制の重要な標的としての非選択性の一因となった。
【００１２】
ＳＹＫ（脾臓チロシンキナーゼ）は、ＢＣＲシグナル伝達を介したＢ細胞活性化に不可欠な非受容体チロシンキナーゼである。ＳＹＫは、リン酸化ＢＣＲに結合すると活性化されるようになり、こうしてＢＣＲ活性化に続く初期シグナル伝達イベントを開始する。ＳＹＫが欠如したマウスは、Ｂ細胞発生を早期に阻害する（Cheng et al. Nature 378:303, 1995; Turner  et al. Nature 378: 298, 1995）。それゆえ、細胞内でのＳＹＫ酵素活性の阻害が、自己抗体産生への影響による自己免疫疾患の処置として提案された。
【００１３】
ＳＹＫは、ＢＣＲシグナル伝達及びＢ細胞活性化における役割に加え、ＦｃεＲＩを介した肥満細胞脱顆粒及び好酸球活性化においても重要な役割を担う。つまりＳＹＫは、喘息をはじめとするアレルギー障害に関係する（Wong et al. Expert Opin Investig Drugs 13:743, 2004にレビューされた）。ＳＹＫは、そのＳＨ２ドメインを介してＦｃεＲＩのリン酸化γ鎖に結合し、下流でのシグナル伝達に不可欠である（Taylor et al. Mol. Cell. Biol. 15:4149, 1995）。ＳＹＫが欠如した肥満細胞は、脱顆粒、アラキドン酸及びサイトカインの分泌が欠損することが実証されている（Costello et al. Oncogene 13: 2595, 1996）。これは、肥満細胞においてＳＹＫ活性を阻害する薬理学的薬剤に関しても示された（Yamamoto et al. J Pharmacol Exp Ther 306: 1174, 2003）。ＳＹＫアンチセンスオリゴヌクレオチドでの処置は、喘息の動物モデルにおいて好酸球及び好中球の抗原誘発浸潤を阻害する（Stenton et al. J Immunol 169: 1028, 2002）。ＳＹＫが欠如した好酸球でも、ＦｃεＲ刺激に応答した活性化の障害が示される（Lach-Trifilieffe et al. Blood 96:2506, 2000）。それゆえ、ＳＹＫの小分子阻害剤は、喘息をはじめとするアレルギー誘発性炎症疾患の処置に有用となろう。
【００１４】
ＪＡＫ及び／又はＳＹＫ経路の調整を含む処置により利益が予測される数多くの病状を考慮すると、ＪＡＫ及び／又はＳＹＫ経路を調整する新規な化合物並びにこれらの化合物の使用方法が、非常に広範囲の患者に実質的な治療利益を提供するはずであることは、直ちに明白である。本明細書で提供されるのは、ＪＡＫ及び／もしくはＳＹＫ経路を標的とする病状の処置、又はＪＡＫもしくはＳＹＫキナーゼ、特にＪＡＫ３の阻害に使用される新規なピロロピラジン誘導体である新規なピロロピラジン誘導体であり、それは、自己免疫疾患及び炎症疾患の処置に治療的に有用となる。
【００１５】
本明細書で提供される新規なピロロピラジン誘導体は、ＪＡＫ３を選択的に阻害し、自己免疫疾患及び炎症疾患の処置に有用となる。本発明の化合物は、ＪＡＫ及び／又はＳＹＫ経路を調整し、自己免疫疾患及び炎症疾患の処置に有用な新規ピロロピラジン誘導体であり、ここでの好ましい化合物は、ＪＡＫ３を選択的に阻害する。例えば、本発明の化合物は、ＪＡＫ３及びＳＹＫを阻害してもよく、ここでの好ましい化合物は、ＪＡＫキナーゼのうちＪＡＫ３に選択的であり、自己免疫疾患及び炎症疾患の処置に有用な新規ピロロピラジン誘導体である。その上、本発明の化合物は、ＪＡＫ３及びＪＡＫ２を阻害してもよく、ここでの好ましい化合物は、ＪＡＫキナーゼのうちＪＡＫ３に選択的であり、自己免疫疾患及び炎症疾患の処置に有用な新規ピロロピラジン誘導体である。同様に本発明の化合物は、ＪＡＫ３及びＪＡＫ１を阻害してもよく、ここでの好ましい化合物は、ＪＡＫキナーゼのうちＪＡＫ３に選択的であり、自己免疫疾患及び炎症疾患の処置に有用な新規ピロロピラジン誘導体である。
【００１６】
本願は、式Ｉ：
【００１７】
【化１】
0005529049.tif 000002
【００１８】
（式中、
Ｒは、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、又はＲ４であり；
Ｒ１は、１個以上のＲ１ａで場合により置換されている、低級アルキル、低級アルコキシ、フェニル、ベンジル、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はシクロアルキルアルキルであり；
Ｒ１ａは、Ｒ１ｂ又はＲ１ｃであり；
Ｒ１ｂは、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、又は−ＣＮであり；
Ｒ１ｃは、１個以上のＲ１ｄで場合により置換されている、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｒ１ｆ）、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２（Ｒ１ｅ）、−Ｓ（Ｒ１ｆ）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｒ１ｆ）、又は−Ｓ（＝Ｏ）（Ｒ１ｆ）、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、アミド、低級ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルオキシ、又はヘテロシクロアルキルオキシであり；
Ｒ１ｄは、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、又は低級ハロアルキルであり；
Ｒ１ｅは、Ｈ、低級アルキル、低級アルコキシ、−ＣＮ、低級ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１ｆは、Ｈ、低級アルキル、低級ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ２は、Ｎ（Ｒ２ａ）２であり；
各Ｒ２ａは、独立して、Ｈ又はＲ２ｂであり；
各Ｒ２ｂは、独立して、１個以上のＲ２ｃで場合により置換されている、低級アルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルアルキレンであり；
Ｒ２ｃは、Ｒ２ｄ又はＲ２ｅであり；
Ｒ２ｄは、ハロゲン、オキソ、又はヒドロキシであり；
Ｒ２ｅは、１個以上のＲ２ｆで場合により置換されている、−Ｎ（Ｒ２ｇ）２、−Ｃ（＝Ｏ）（Ｒ２ｇ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｒ２ｇ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ２ｇ）２、−Ｎ（Ｒ２ｇ）Ｃ（＝Ｏ）（Ｒ２ｇ）、−Ｓ（＝Ｏ）２（Ｒ２ｇ）、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ２ｇ）２、低級アルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
各Ｒ２ｆは、独立して、Ｈ、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルキルであり；
各Ｒ２ｇは、独立して、Ｈ、低級アルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルキル、又はフェニルであり；
Ｒ３は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３ａであり；
Ｒ３ａは、低級アルキル、低級アルコキシ、フェニル、又はＮ（Ｒ３ｂ）２であり；
各Ｒ３ｂは、独立して、Ｈ又は低級アルキルであり；
Ｒ４は、−Ｏ（Ｒ４ａ）であり；
Ｒ４ａは、Ｈ又はＲ４ｂであり；
Ｒ４ｂは、１個以上のＲ４ｃで場合により置換されている、低級アルキル、フェニル、ベンジル、低級ハロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアリールであり；
Ｒ４ｃは、ハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキル、低級ハロアルキル、又は低級アルコキシであり；
Ｑ３は、−Ｏ−Ｑ３ａ、−Ｓ−Ｑ３ａ、−Ｃ（＝Ｏ）（Ｑ３ａ）、−Ｏ（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）（Ｑ３ａ）、−Ｓ（＝Ｏ）（Ｑ３ａ）、−Ｓ（＝Ｏ）２（Ｑ３ａ）、−Ｎ（Ｑ３ａ）２、−Ｎ（Ｑ３ａ）Ｓ（＝Ｏ）２（Ｑ３ａ）、−Ｎ（Ｑ３ａ）Ｃ（＝Ｏ）（Ｑ３ａ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｑ３ａ）２、又は−Ｎ（Ｑ３ａ）Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｑ３ａ）２であり；
各Ｑ３ａは、独立して、Ｑ３ｂ又はＱ３ｃであり；
ｍは、０、１、又は２であり；
Ｑ３ｂは、Ｈであり；
Ｑ３ｃは、１個以上のＱ３ｄで場合により置換されている、低級アルキル、低級ハロアルキル、フェニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はヘテロアリールであり；
各Ｑ３ｄは、独立して、Ｑ３ｅ又はＱ３ｆであり；
Ｑ３ｅは、ハロゲン又はヒドロキシであり；
Ｑ３ｆは、１個以上のＱ３ｇで場合により置換されている、低級アルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルキル、フェニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はヘテロアリールであり；そして
各Ｑ３ｇは、独立して、ハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキル、低級ヒドロキシアルキル、低級ハロアルキル、又は低級アルコキシである）
で示される化合物、又は薬学的に許容されうるその塩を提供する。
【００１９】
上記実施態様の一変形形態において、Ｒは、Ｒ１である。
【００２０】
上記実施態様の一変形形態において、Ｒ１は、低級アルキルである。
【００２１】
上記実施態様の一変形形態において、低級アルキルは、tert−ブチルである。
【００２２】
上記実施態様の別の変形形態において、低級アルキルは、tert−ブチルであり、Ｑは、Ｑ１であり、Ｑ１ａは、Ｑ１ｃであり、Ｑ１ｃは、Ｑ１ｅであり、Ｑ１ｅは、Ｑ１ｅ’であり、そしてＱ１ｅ’は、ピロリジンである。
【００２３】
上記実施態様の別の変形形態において、低級アルキルは、−ＣＨＣ（ＣＨ３）３である。
【００２４】
上記実施態様の別の変形形態において、低級アルキルは、イソブチルである。
【００２５】
上記実施態様の別の変形形態において、低級アルキルは、イソプロピルである。
【００２６】
式Ｉで示される化合物の一実施態様において、Ｒ１は、−ＣＨＣ（ＣＨ３）３である。
【００２７】
式Ｉで示される化合物の一実施態様において、Ｒ１は、イソブチルである。
【００２８】
式Ｉで示される化合物の一実施態様において、Ｒ１は、イソプロピルである。
【００２９】
式Ｉで示される化合物の一実施態様において、Ｒ１は、シクロアルキルである。
【００３０】
式Ｉで示される化合物の一実施態様において、Ｒ１は、ヘテロシクロアルキルである。
【００３１】
式Ｉで示される化合物の一実施態様において、Ｒ１は、ベンジルである。
【００３２】
式Ｉで示される化合物の一実施態様において、Ｒ１は、フェニルである。
【００３３】
式Ｉで示される化合物の一実施態様において、Ｒは、Ｒ２である。
【００３４】
式Ｉで示される化合物の一実施態様において、Ｒは、Ｒ２であり、そしてＲ２は、ＮＨ（Ｒ２ａ）である。
【００３５】
上記実施態様の一変形形態において、Ｒ２ａは、Ｒ２ｂである。
【００３６】
上記実施態様の一変形形態において、Ｒ２ｂは、低級アルキルである。
【００３７】
上記実施態様の一変形形態において、低級アルキルは、イソプロピルである。
【００３８】
式Ｉで示される化合物の一実施態様において、Ｒ２ｂは、ヘテロシクロアルキルである。
【００３９】
式Ｉで示される化合物の一実施態様において、Ｒ２ｂは、シクロアルキルである。
【００４０】
式Ｉで示される化合物の一実施態様において、Ｒ２ｂは、ヘテロシクロアルキルアルキレンである。
【００４１】
上記実施態様の一変形形態において、ヘテロシクロアルキルは、ピロリジンである。
【００４２】
上記実施態様の一変形形態において、アルキレンは、メチレンである。
【００４３】
式Ｉで示される化合物の一実施態様において、Ｒ２ｂは、ピロリジンメチレンである。
【００４４】
式Ｉの特定の実施態様において、表題化合物は、より具体的には式II：
【００４５】
【化２】
0005529049.tif 000003
【００４６】
（式中、
Ｒ１は、１個以上のＲ１ａで場合により置換されている、低級アルキル、低級アルコキシ、フェニル、ベンジル、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はシクロアルキルアルキルであり；
Ｒ１ａは、Ｒ１ｂ又はＲ１ｃであり；
Ｒ１ｂは、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、又は−ＣＮであり；
Ｒ１ｃは、１個以上のＲ１ｄで場合により置換されている、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｒ１ｆ）、−Ｃ（＝Ｏ）（ＣＨ２）ｍ（Ｒ１ｅ）、−Ｏ（ＣＨ２）ｍ（Ｒ１ｅ）、−Ｓ（Ｒ１ｆ）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｒ１ｆ）、又は−Ｓ（＝Ｏ）（Ｒ１ｆ）、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、アミド、低級ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルオキシ、又はヘテロシクロアルキルオキシであり；
Ｒ１ｄは、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキル、アミノ、低級アルコキシ、又は低級ハロアルキルであり；
Ｒ１ｅは、Ｈ、低級アルキル、低級アルコキシ、シアノ、低級ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１ｆは、Ｈ、低級アルキル、低級ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
ｍは、０、１、又は２であり；そして
Ｑ３は、本明細書に定義されたとおりである）
で示される。
【００４７】
式IIの特定の実施態様において、Ｒ１は、低級アルキル、好ましくはtert−ブチルである。
【００４８】
式Ｉの特定の実施態様において、表題化合物は、より具体的には式III：
【００４９】
【化３】
0005529049.tif 000004
【００５０】
（式中、
Ｒ２ｂは、独立して、１個以上のＲ２ｃで場合により置換されている、低級アルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルアルキレンであり；
Ｒ２ｃは、Ｒ２ｄ又はＲ２ｅであり；
Ｒ２ｄは、ハロゲン、オキソ、又はヒドロキシであり；
Ｒ２ｅは、１個以上のＲ２ｆで場合により置換されている、−Ｎ（Ｒ２ｇ）２、−Ｃ（＝Ｏ）（Ｒ２ｇ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｒ２ｇ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ２ｇ）２、−Ｎ（Ｒ２ｇ）Ｃ（＝Ｏ）（Ｒ２ｇ）、−Ｓ（＝Ｏ）２（Ｒ２ｇ）、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ２ｇ）２、低級アルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
各Ｒ２ｆは、独立して、Ｈ、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルキルであり；
各Ｒ２ｇは、独立して、Ｈ、低級アルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルキル、又はフェニルであり；そして
Ｑ３は、本明細書に定義されたとおりである）
で示される。
【００５１】
式IIIの特定の実施態様において、Ｒ２ｂは、低級アルキルである。
【００５２】
式Ｉ、II又はIIIのいずれかの特定の実施態様において、Ｑ３は、−Ｏ−Ｑ３ａ、−Ｃ（＝Ｏ）（Ｑ３ａ）、−Ｏ（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）（Ｑ３ａ）、−Ｓ（＝Ｏ）２（Ｑ３ａ）、−Ｎ（Ｑ３ａ）２、−Ｎ（Ｑ３ａ）Ｓ（＝Ｏ）２（Ｑ３ａ）、−Ｎ（Ｑ３ａ）Ｃ（＝Ｏ）（Ｑ３ａ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｑ３ａ）２、又は−Ｎ（Ｑ３ａ）Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｑ３ａ）２であり、ここで、ｍ及びＱ３ａは、本明細書に定義されたとおりである。
【００５３】
式Ｉ、II又はIIIのいずれかの特定の実施態様において、Ｑ３ａは、１個以上のＱ３ｄで場合により置換されている、低級アルキル、フェニル又はシクロアルキルである。
【００５４】
式Ｉ、II又はIIIのいずれかの特定の実施態様において、Ｑ３は、−Ｏ−Ｑ３ａ、−Ｃ（＝Ｏ）（Ｑ３ａ）、−Ｏ（ＣＨ２）ｍＣ（＝Ｏ）（Ｑ３ａ）、−Ｓ（＝Ｏ）２（Ｑ３ａ）、−Ｎ（Ｑ３ａ）２、−Ｎ（Ｑ３ａ）Ｓ（＝Ｏ）２（Ｑ３ａ）、−Ｎ（Ｑ３ａ）Ｃ（＝Ｏ）（Ｑ３ａ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｑ３ａ）２、又は−Ｎ（Ｑ３ａ）Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｑ３ａ）２であり、ここで、ｍは、本明細書に定義されたとおりであり、そしてＱ３ａは、１個以上のＱ３ｄで場合により置換されている、Ｈ、低級アルキル、フェニル又はシクロアルキルである。
【００５５】
本願は、
２−（シクロペンチル−メチル−アミノ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−カルボン酸イソプロピルアミド；
１−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
１−（２−シクロペンチルオキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
Ｎ−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ベンズアミド；
シクロヘキサンカルボン酸［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−アミド；
Ｎ−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−Ｎ−メチル−ベンズアミド；
Ｎ−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ベンゼンスルホンアミド；
Ｎ−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−Ｎ−メチル−ベンゼンスルホンアミド；
７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−カルボン酸ジメチルアミド；
７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−カルボン酸イソプロピルアミド；
１−（２−アセチル−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
１−（２−イソブチリル−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
２，２−ジメチル−１−［２−（２−メチル−ベンゾイル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン；
１−（２−ベンゾイル−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−カルボン酸シクロペンチルアミド；
２，２−ジメチル−１−［２−（ピリジン−４−カルボニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン；
２，２−ジメチル−１−［２−（ピリジン−３−カルボニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン；
１−（２−シクロヘプチルオキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
１−（２−シクロへキシルオキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
１−（２−イソプロポキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
１−（２−エトキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
２，２−ジメチル−１−［２−（２−モルホリン−４−イル−２−オキソ−エトキシ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン；
１−［２−（１，２−ジメチル−プロポキシ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
１−（２−イソブトキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
１−［２−（１−ベンジル−１Ｈ−［１，２，３］トリアゾール−４−イル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
１−シクロヘキシル−３−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ウレア；
１−シクロヘプチル−３−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ウレア；
２，２−ジメチル−１−［２−（メチル−フェニル−アミノ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン；
１−（２−ｓｅｃ−ブトキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
２，２−ジメチル−１−（２−フェニルアミノ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−プロパン−１−オン；
１−（２−シクロペンチルオキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
１−［２−（シクロペンチル−メチル−アミノ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；
２，２−ジメチル−１−（２−フェノキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−プロパン−１−オン；
２，２−ジメチル−１−｛２−［４−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニルアミノ］−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル｝−プロパン−１−オン；
１−シクロヘキシル−３−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ウレア；
１−シクロヘプチル−３−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ウレア；
１−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン；及び
１−［２−（６−メトキシ−ピリジン−２−イルアミノ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン
からなる群から選択される式Ｉで示される化合物を提供する。
【００５６】
一態様において、本願は、治療上効果的な量の式Ｉで示される化合物を、必要とする患者に投与することを含む、炎症及び／又は自己免疫状態を処置する方法を提供する。
【００５７】
上記方法の一変形形態において、上記方法は、化学療法もしくは抗増殖剤、抗炎症剤、免疫調節もしくは免疫抑制剤、神経栄養因子、心臓血管疾患を処置する薬剤、糖尿病を処置する薬剤、又は免疫欠損障害を処置する薬剤から選択される追加的治療薬を投与することを更に含む。
【００５８】
一態様において、本願は、治療上効果的な量の式Ｉ（式中、Ｒは、Ｒ１である）で示される化合物を、必要とする患者に投与することを含む、炎症状態を処置する方法を提供する。
【００５９】
一態様において、本願は、治療上効果的な量の式Ｉで示される化合物を、必要とする患者に投与することを含む、Ｔ細胞増殖障害を阻害する方法を提供する。
【００６０】
一態様において、本願は、治療上効果的な量の式Ｉ（式中、Ｒは、Ｒ２である）で示される化合物を、必要とする患者に投与することを含む、Ｔ細胞増殖障害を阻害する方法を提供する。
【００６１】
上記方法の一変形形態において、増殖障害は、癌である。
【００６２】
一態様において、本願は、治療上効果的な量の式Ｉで示される化合物を、必要とする患者に投与することを含む、Ｂ細胞増殖障害を処置する方法を提供する。
【００６３】
一態様において、本願は、治療上効果的な量の式Ｉで示される化合物を、必要とする患者に投与することを含む、狼瘡、多発性硬化症、関節リウマチ、乾癬、Ｉ型糖尿病、臓器移植の合併症、異種移植、糖尿病、癌、喘息、アトピー性皮膚炎、自己免疫性甲状腺障害、潰瘍性大腸炎、クローン病、アルツハイマー病、及び白血病をはじめとする免疫障害を処置する方法を提供する。
【００６４】
一態様において、本願は、治療上効果的な量の式Ｉで示される化合物を、必要とする患者に投与することを含む、血管柄付き又は非血管柄付き移植片の、急性同種移植片又は異種移植片拒絶、及び慢性同種移植片又は異種移植片拒絶をはじめとする全ての形態の臓器拒絶を予防又は治療する方法を提供する。
【００６５】
一態様において、本願は、式Ｉで示される化合物を、必要とする患者に投与することを含む、血管柄付き又は非血管柄付き移植片の、急性同種移植片又は異種移植片拒絶、及び慢性同種移植片又は異種移植片拒絶をはじめとする全ての形態の臓器拒絶を予防又は治療する方法を提供する。
【００６６】
一態様において、本願は、ＪＡＫ３活性のインビトロ生化学的アッセイにおいて５０マイクロモル以下のＩＣ５０を示す式Ｉで示される化合物を投与することを含む、ＪＡＫ３活性を阻害する方法を提供する。
【００６７】
上記方法の一変形形態において、該化合物は、ＪＡＫ３活性のインビトロ生化学的アッセイにおいて１００ナノモル以下のＩＣ５０を示す。
【００６８】
上記方法の一変形形態において、該化合物は、ＪＡＫ３活性のインビトロ生化学的アッセイにおいて１０ナノモル以下のＩＣ５０を示す。
【００６９】
一態様において、本願は、ＳＹＫ活性のインビトロ生化学的アッセイにおいて５０マイクロモル以下のＩＣ５０を示す式Ｉで示される化合物を投与することを含む、ＳＹＫ活性を阻害する方法を提供する。
【００７０】
上記方法の一変形形態において、該化合物は、ＳＹＫ活性のインビトロ生化学的アッセイにおいて１００ナノモル以下のＩＣ５０を示す。
【００７１】
上記方法の一変形形態において、該化合物は、ＳＹＫ活性のインビトロ生化学的アッセイにおいて１０ナノモル以下のＩＣ５０を示す。
【００７２】
一態様において、本願は、抗炎症化合物を、治療上効果的な量の式Ｉで示される化合物と共に、必要とする患者に併用投与することを含む、炎症状態を処置する方法を提供する。
【００７３】
一態様において、本願は、治療上効果的な量の抗炎症化合物を、式Ｉで示される化合物と共に、必要とする患者に併用投与することを含む、炎症状態を処置する方法を提供する。
【００７４】
一態様において、本願は、免疫抑制化合物を、治療上効果的な量の式Ｉで示される化合物と共に、必要とする患者に併用投与することを含む、免疫障害を処置する方法を提供する。
【００７５】
一態様において、本願は、治療上効果的な量の免疫抑制化合物を、式Ｉで示される化合物と共に、必要とする患者に併用投与することを含む、免疫障害を処置する方法を提供する。
【００７６】
本願は、少なくとも１種の薬学的に許容しうる担体、賦形剤又は希釈剤と混和された式Ｉで示される化合物を含む医薬組成物を提供する。
【００７７】
一変形形態において、上記医薬組成物は、化学療法又は抗増殖剤、抗炎症剤、免疫調節又は免疫抑制剤、神経栄養因子、心臓血管疾患を処置する薬剤、糖尿病を処置する薬剤、及び免疫欠損障害を処置する薬剤から選択される追加的治療薬を更に含む。
【００７８】
一態様において、本願は、炎症障害の処置用の医薬を製造する際の、式Ｉ、II又はIIIで示される化合物の使用を提供する。
【００７９】
一態様において、本願は、炎症障害の処置用の医薬を製造する際の、式Ｉで示される化合物の使用を提供する。
【００８０】
一態様において、本願は、自己免疫障害の処置用の医薬を製造する際の、式Ｉ、II又はIIIで示される化合物の使用を提供する。
【００８１】
一態様において、本願は、自己免疫障害の処置用の医薬を製造する際の、式Ｉで示される化合物の使用を提供する。
【００８２】
一態様において、本願は、炎症障害又は自己免疫障害の処置に使用される、式Ｉ、II又はIIIで示される化合物を提供する。
【００８３】
本願は、式IV：
【００８４】
【化４】
0005529049.tif 000005
【００８５】
（式中、
Ｒは、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、又はＲ４であり；
Ｒ１は、１個以上のＲ１ａで場合により置換されている、低級アルキル、低級アルコキシ、フェニル、ベンジル、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はシクロアルキルアルキルであり；
Ｒ１ａは、Ｒ１ｂ又はＲ１ｃであり；
Ｒ１ｂは、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、又は−ＣＮであり；
Ｒ１ｃは、１個以上のＲ１ｄで場合により置換されている、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｒ１ｆ）、−Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ２（Ｒ１ｅ）、−Ｓ（Ｒ１ｆ）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｒ１ｆ）、又は−Ｓ（＝Ｏ）（Ｒ１ｆ）、低級アルキル、低級アルコキシ、アミノ、アミド、低級ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、シクロアルキルオキシ、又はヘテロシクロアルキルオキシであり；
Ｒ１ｄは、Ｈ、ハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキル、低級アルコキシ、又は低級ハロアルキルであり；
Ｒ１ｅは、Ｈ、低級アルキル、低級アルコキシ、−ＣＮ、低級ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ１ｆは、Ｈ、低級アルキル、低級ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
Ｒ２は、Ｎ（Ｒ２ａ）２であり；
各Ｒ２ａは、独立して、Ｈ又はＲ２ｂであり；
各Ｒ２ｂは、独立して、１個以上のＲ２ｃで場合により置換されている、低級アルキル、フェニル、ヘテロアリール、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルアルキレンであり；
Ｒ２ｃは、Ｒ２ｄ又はＲ２ｅであり；
Ｒ２ｄは、ハロゲン、オキソ、又はヒドロキシであり；
Ｒ２ｅは、１個以上のＲ２ｆで場合により置換されている、−Ｎ（Ｒ２ｇ）２、−Ｃ（＝Ｏ）（Ｒ２ｇ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｒ２ｇ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ２ｇ）２、−Ｎ（Ｒ２ｇ）Ｃ（＝Ｏ）（Ｒ２ｇ）、−Ｓ（＝Ｏ）２（Ｒ２ｇ）、−Ｓ（Ｏ）２Ｎ（Ｒ２ｇ）２、低級アルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルキル、フェニル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、シクロアルキル、又はヘテロシクロアルキルであり；
各Ｒ２ｆは、独立して、Ｈ、ハロゲン、低級アルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルキルであり；
各Ｒ２ｇは、独立して、Ｈ、低級アルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルキル、又はフェニルであり；
Ｒ３は、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３ａであり；
Ｒ３ａは、低級アルキル、低級アルコキシ、フェニル、又はＮ（Ｒ３ｂ）２であり；
各Ｒ３ｂは、独立して、Ｈ又は低級アルキルであり；
Ｒ４は、−Ｏ（Ｒ４ａ）であり；
Ｒ４ａは、Ｈ又はＲ４ｂであり；
Ｒ４ｂは、１個以上のＲ４ｃで場合により置換されている、低級アルキル、フェニル、ベンジル、低級ハロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアリールであり；
Ｒ４ｃは、ハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキル、低級ハロアルキル、又は低級アルコキシであり；
Ｑは、Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３、又はＱ４であり；
Ｑ１は、１個以上のＱ１ａで場合により置換されているフェニルであり；
Ｑ１ａは、Ｑ１ｂもしくはＱ１ｃであり；
Ｑ１ｂは、ハロゲン、ヒドロキシ、−ＣＮ、−Ｓ（Ｑ１ｅ）、−Ｓ（Ｏ）２（Ｑ１ｅ）、もしくは−Ｓ（＝Ｏ）（Ｑ１ｅ）であり；
Ｑ１ｃは、Ｑ１ｄもしくはＱ１ｅであるか；
又は２個のＱ１ａが、一緒になって、１個以上のＱ１ｂもしくはＱ１ｃで場合により置換されている二環系を形成しており；
Ｑ１ｄは、−Ｏ（Ｑ１ｅ）、−Ｓ（＝Ｏ）２（Ｑ１ｅ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｑ１ｅ）２、−Ｓ（＝Ｏ）２（Ｑ１ｅ）、−Ｃ（＝Ｏ）（Ｑ１ｅ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｑ１ｅ）、−Ｎ（Ｑ１ｅ）２、−Ｎ（Ｑ１ｅ）Ｃ（＝Ｏ）（Ｑ１ｅ）、−Ｎ（Ｑ１ｅ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｑ１ｅ）、又は−Ｎ（Ｑ１ｅ）Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｑ１ｅ）２であり；
各Ｑ１ｅは、独立して、Ｈ又はＱ１ｅ’であり；
各Ｑ１ｅ’は、独立して、１個以上のＱ１ｆで場合により置換されている、低級アルキル、フェニル、ベンジル、低級ハロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はヘテロアリールであり；
Ｑ１ｆは、Ｑ１ｇ又はＱ１ｈであり；
Ｑ１ｇは、ハロゲン、ヒドロキシ、オキソ、又は−Ｃ（＝Ｏ）（Ｑ１ｈ）であり；
Ｑ１ｈは、１個以上のＱ１ｉで場合により置換されている、低級アルキル、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、フェニル、ベンジル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はヘテロアリールであり；
Ｑ１ｉは、ハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキル、低級ハロアルキル、又は低級アルコキシであり；
Ｑ２は、１個以上のＱ２ａで場合により置換されている、シクロアルキル、シクロアルケニル、ヘテロシクロアルキル、又はヘテロアリールであり；
Ｑ２ａは、Ｑ２ｂもしくはＱ２ｃであり；
Ｑ２ｂは、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、−ＣＮ、−ＳＣＨ３、−Ｓ（Ｏ）２ＣＨ３、もしくは−Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ３であり；
Ｑ２ｃは、Ｑ２ｄもしくはＱ２ｅであるか；
又は２個のＱ２ａが、一緒になって、１個以上のＱ２ｂもしくはＱ２ｃで場合により置換されている二環系を形成しており；
Ｑ２ｄは、−Ｏ（Ｑ２ｅ）、−Ｓ（＝Ｏ）２（Ｑ２ｅ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｑ２ｅ）２、−Ｓ（Ｏ）２（Ｑ２ｅ）、−Ｃ（＝Ｏ）（Ｑ２ｅ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｑ２ｅ）、−Ｎ（Ｑ２ｅ）２、−Ｎ（Ｑ２ｅ）Ｃ（＝Ｏ）（Ｑ２ｅ）、−Ｎ（Ｑ２ｅ）Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（Ｑ２ｅ）、又は−Ｎ（Ｑ２ｅ）Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｑ２ｅ）２であり；
各Ｑ２ｅは、独立して、Ｈ又はＱ２ｅ’であり；
各Ｑ２ｅ’は、独立して、１個以上のＱ２ｆで場合により置換されている、低級アルキル、フェニル、ベンジル、低級ハロアルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はヘテロアリールであり；
Ｑ２ｆは、Ｑ２ｇ又はＱ２ｈであり；
Ｑ２ｇは、ハロゲン、ヒドロキシ、オキソ、又は−Ｃ（＝Ｏ）（Ｑ２ｈ）であり；
Ｑ２ｈは、１個以上のＱ２ｉで場合により置換されている、低級アルキル、低級ハロアルキル、低級アルコキシ、フェニル、ベンジル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はヘテロアリールであり；
Ｑ２ｉは、ハロゲン、ヒドロキシ、低級アルキル、低級ハロアルキル、又は低級アルコキシであり；
Ｑ３は、−Ｏ−Ｑ３ａ、−Ｓ−Ｑ３ａ、−Ｃ（＝Ｏ）（Ｑ３ａ）、−Ｓ（＝Ｏ）（Ｑ３ａ）、−Ｓ（＝Ｏ）２（Ｑ３ａ）、−Ｎ（Ｑ３ａ）２、−ＮＨＣ（＝Ｏ）（Ｑ３ａ）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｑ３ａ）２、又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｑ３ａ）２であり；
各Ｑ３ａは、独立して、Ｑ３ｂ又はＱ３ｃであり；
Ｑ３ｂは、Ｈであり；
Ｑ３ｃは、１個以上のＱ３ｄで場合により置換されている、低級アルキル、低級ハロアルキル、フェニル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、又はヘテロアリールであり；
Ｑ３ｄは、ハロゲン、ヒドロキシル、低級アルキル、低級アルコキシ、又は低級ハロアルキルであり；
Ｑ４は、Ｑ４ａ又はＱ４ｂであり；
Ｑ４ａは、Ｈ又はハロゲンであり；そして
Ｑ４ｂは、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、又は低級ハロアルキルであるが；
但し、Ｒが、Ｒ４であり、Ｒ４が、−Ｏ（Ｒ４ａ）であり、Ｒ４ａが、Ｈであり、そしてＱ４が、Ｑ４ａである場合、Ｑ４ａは、Ｈではない）
で示される化合物、又は薬学的に許容しうるその塩を提供する。
【００８６】
本明細書で用いられる語句「a」又は「an」の物体は、その物体の一つ以上を指し、例えば、化合物は、一つ以上の化合物又は少なくとも一つの化合物を指す。そのため、用語「一つ」、「一つ以上」、及び「少なくとも一つ」は、本明細書では互換可能に用いることができる。
【００８７】
語句「本明細書の先に定義されたとおりである」は、発明の概要又は最も広範囲の特許請求の範囲に示され各基の最も広範囲の定義を指す。以下に示される他の全ての実施態様において、各実施態様で表すことができるが明確に定義されない置換基は、発明の概要に示された最も広範囲の定義を有する。
【００８８】
本明細書では、特許請求の範囲の移行句又は本文でも、用いられる用語「含む」及び「含んでいる」は、非限定的意義を有するものと解釈すべきである。すなわちその用語は、語句「少なくとも有する」又は「少なくとも含む」と同義に解釈すべきである。用語「含んでいる」が、方法に関連して用いられる場合、それは、その方法が少なくとも引用された工程を包含するが、更なる工程を含んでいてもよいことを意味する。化合物又は組成物に関連して用いられる場合、用語「含んでいる」は、その化合物又は組成物が、少なくとも引用された特徴又は成分を含むが、更なる特徴又は成分も含んでいてよいことを意味する。
【００８９】
他に断りがなければ、本明細書で用いられる言語「又は」は、「及び／又は」の「包括的」意味で用いられており、「いずれか一方／又は」の「排他的」意味で用いられているのではない。
【００９０】
用語「独立して」は、ある変数が、同一化合物内に同一又は異なる定義を有する変数の有無にかかわらず、任意の一例で用いられることを示す。つまりＲ”が２回出現し、「独立して炭素又は窒素」と定義されている化合物では、両方のＲ”が、炭素であってもよく、両方のＲ”が、窒素であってもよく、又は一方のＲ”が、炭素であり、そして他方が窒素であってもよい。
【００９１】
任意の変数（例えば、Ｒ２ａ又はＱ３ｇ）が、本発明中で使用又は請求された化合物を図示及び記載する任意の部分又は式に１回以上出現する場合、各出現ごとのその定義は、他の各出現での定義と独立している。同じく、置換基及び／又は変数の組合せは、そのような化合物から安定した化合物を生成する場合に限り許容される。
【００９２】
結合の端部にある記号「＊」又は結合の間に引かれた「−−−−−−」は、それぞれ、官能基又は他の化学部分と、それを一部とする分子の残り部分との結合点を指す。つまり例えば、ＭｅＣ（＝Ｏ）ＯＲ４（式中、
【００９３】
【化５】
0005529049.tif 000006
である）。
【００９４】
環系の内部へ引かれた結合（離れた頂点で結ばれているのではない）は、結合が、任意の適切な環原子につながっていてもよいことを示す。
【００９５】
本明細書で用いられる用語「選択的な」又は「場合により」は、引き続き記載された事象又は状況が起こる必要がないこと、及びその説明がその事象又は状況が起こる例と起こらない例とを含むことを意味する。例えば、「場合により置換されている」は、場合により置換されている部分が、水素又は置換基を組み込んでいてもよいことを意味する。
【００９６】
本明細書で用いられる語句「一緒になって二環系を形成している」は、連結して二環系を形成していることを意味し、各環は、炭素原子４〜７個又は炭素原子及びヘテロ原子４〜７個のいずれか一方で構成されていてもよく、そして飽和又は不飽和であってもよい。
【００９７】
本明細書で用いられる用語「約」は、およそ、ほぼ、概して、又は前後を意味する。用語「約」が、数値範囲と共に用いられる場合、それは、示される数値より上及び下の境界を超えるようにその範囲を変更している。一般に、本明細書で用いられる用語「約」は、数値を示された値より上及び下に２０％の変動で変更していることである。
【００９８】
本明細書に記載された定義を、化学的に関連する組合せ、例えば、「ヘテロアルキルアリール」、「ハロアルキルヘテロアリール」、「アリールアルキルヘテロシクリル」、「アルキルカルボニル」、「アルコキシアルキル」、「シクロアルキルアルキル」などを形成するために追加してもよい。用語「アルキル」が、「フェニルアルキル」又は「ヒドロキシアルキル」のように別の用語に続く接尾語として用いられている場合、これは、他の具体的に特定された基から選択される置換基１〜２個で置換されている、先に定義されたアルキル基を指すものとする。つまり例えば、「フェニルアルキル」は、フェニル置換基を１〜２個有するアルキル基を指し、つまりベンジル、フェニルエチル及びビフェニルが挙げられる。「アルキルアミノアルキル」は、アルキルアミノ置換基を１〜２個有するアルキル基である。「ヒドロキシアルキル」としては、２−ヒドロキシエチル、２−ヒドロキシプロピル、１−（ヒドロキシメチル）−２−メチルプロピル、２−ヒドロキシブチル、２，３−ジヒドロキシブチル、２−（ヒドロキシメチル）、３−ヒドロキシプロピルなどが挙げられる。したがって本明細書で用いられる用語「ヒドロキシアルキル」は、以下に定義されるヘテロアルキル基の部分集合を定義するために用いられる。用語−（アラ）アルキルは、非置換アルキル又はアラルキル基のいずれか一方を指す。用語（ヘテロ）アリール又は（ヘタ）アリールは、アリール又はヘテロアリール基のいずれか一方を指す。
【００９９】
式Ｉで示される化合物は、互変異性を示していてもよい。互変異性化合物は、２種以上の互換可能な化合種として存在することができる。プロトトロピック互変異性体は、２種の原子間で共有結合した水素原子の移動により得られる。互変異性体は、一般に、平衡状態で存在し、各互変異性体を単離しようと試みると、通常は、化学的及び物理的性質が化合物の混合物と一致した混合物が生成する。平衡の位置は、分子内の化学的特徴に依存する。例えば、多くの脂肪族アルデヒド及びケトン（例えば、アセトアルデヒド）では、ケト型が多くを占めるが、フェノールでは、エノール型が多くを占める。一般的なプロトトロピック互変異性体としては、ケト／エノール（−Ｃ（＝Ｏ）−ＣＨ−  ⇔  −Ｃ（−ＯＨ）＝ＣＨ−）、アミド／イミド酸（−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−  ⇔  −Ｃ（−ＯＨ）＝Ｎ−）及びアミジン（−Ｃ（＝ＮＲ）−ＮＨ−  ⇔  −Ｃ（−ＮＨＲ）＝Ｎ−）互変異性体が挙げられる。後者の２種は、ヘテロアリール及び複素環では特に一般的であり、本発明は、該化合物の互変異性体形態の全てを包含する。
【０１００】
本明細書で用いられる技術的及び科学的用語は、他に定義がなければ、本発明が属する技術分野の当業者に一般に理解される意義を有する。本明細書では、当業者に公知の様々な方法論及び材料が参照される。薬理学の一般原理を示す標準的参考資料としては、Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10th Ed., McGraw Hill Companies Inc., New York (2001)が挙げられる。当業者に公知の任意の適切な材料及び／又は方法を、本発明を実施する際に用いることができる。しかし、好ましい材料及び方法を、記載している。以下の記載及び実施例で参照される材料及び試薬などは、他に断りがなければ、商業的供給元から得ることができる。
【０１０１】
本明細書で用いられる用語「アシル」は、式−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ（式中、Ｒは、水素又は本明細書に定義された低級アルキルである）で示される基を意味する。本明細書で用いられる用語「アルキルカルボニル」は、Ｒが、本明細書に定義されたアルキルである、式Ｃ（＝Ｏ）Ｒで示される基を意味する。用語Ｃ１〜６アシルは、炭素原子を６個含む基−Ｃ（＝Ｏ）Ｒを指す。本明細書で用いられる用語「アリールカルボニル」は、Ｒが、アリール基である式Ｃ（＝Ｏ）Ｒで示される基を意味し、本明細書で用いられる用語「ベンゾイル」は、Ｒが、フェニルである、「アリールカルボニル」基を意味する。
【０１０２】
本明細書で用いられる用語「アルキル」は、炭素原子を１〜１０個含む非分枝鎖又は分枝鎖飽和一価炭化水素残基を意味する。用語「低級アルキル」は、炭素原子を１〜６個含む直鎖又は分枝鎖炭化水素残基を意味する。本明細書で用いられる「Ｃ１〜１０アルキル」は、炭素１〜１０個で構成されたアルキルを指す。アルキル基の例としては、非限定的に、メチル、エチル、プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチル又はペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル、ヘプチル及びオクチルをはじめとする低級アルキル基が挙げられる。
【０１０３】
用語「アルキル」が、「フェニルアルキル」又は「ヒドロキシアルキル」のように別の用語に続く接尾語として用いられている場合、これは、他の具体的に特定された基から選択される置換基１〜２個で置換されている、先に定義されたアルキル基を指すものとする。つまり例えば、「フェニルアルキル」は、基Ｒ’Ｒ”（ここで、Ｒ’は、フェニル基であり、そしてＲ”は、本明細書で定義されたアルキレン基である）を意味し、フェニルアルキル部分の結合点が、アルキレン基上にあると理解する。アリールアルキル基の例としては、非限定的に、ベンジル、フェニルエチル、３−フェニルプロピルが挙げられる。用語「アリールアルキル」、「アリール  アルキル」、又は「アラルキル」は、Ｒ’が、アリール基であること以外は同様に解釈される。用語「ヘテロアリール  アルキル」又は「ヘテロアリールアルキル」は、Ｒ’が、場合によりアリール又はヘテロアリール基であること以外は同様に解釈される。
【０１０４】
本明細書で用いられる用語「ハロアルキル」は、水素原子１、２、３個以上がハロゲンにより置換されている、先に定義された非分枝鎖又は分枝鎖アルキル基を意味する。用語「低級ハロアルキル」は、炭素原子を１〜６個含み、水素原子１、２、３個以上がハロゲンにより置換されている、直鎖又は分枝鎖炭化水素残基を意味する。例は、１−フルオロメチル、１−クロロメチル、１−ブロモメチル、１−ヨードメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、トリクロロメチル、トリブロモメチル、トリヨードメチル、１−フルオロエチル、１−クロロエチル、１−ブロモエチル、１−ヨードエチル、２−フルオロエチル、２−クロロエチル、２−ブロモエチル、２−ヨードエチル、２，２−ジクロロエチル、３−ブロモプロピル又は２，２，２−トリフルオロエチルである。
【０１０５】
本明細書で用いられる用語「アルキレン」は、他に断りがなければ、炭素原子１〜１０個の二価飽和直鎖状炭化水素基（例えば、（ＣＨ２）ｎ）又は炭素原子２〜１０個の二価飽和分枝状炭化水素基（例えば、−ＣＨＭｅ−又は−ＣＨ２ＣＨ（ｉ−Ｐｒ）ＣＨ２−）を意味する。アルキレン基の結合可能な原子価（open valences）は、メチレンの場合以外は、同じ原子に結合していない。アルキレン基の例としては、非限定的に、メチレン、エチレン、プロピレン、２−メチルプロピレン、１，１−ジメチルエチレン、ブチレン、２−エチルブチレンが挙げられる。
【０１０６】
本明細書で用いられる用語「アルコキシ」は、アルキルが先に定義されたとおりである−Ｏ−アルキル基、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロピルオキシ、ｉ−プロピルオキシ、ｎ−ブチルオキシ、ｉ−ブチルオキシ、ｔ−ブチルオキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ（異性体を含む）を意味する。本明細書で用いられる「低級アルコキシ」は、これまで定義された「低級アルキル」を含むアルコキシ基を意味する。本明細書で用いられる「Ｃ１〜１０アルコキシ」は、アルキルがＣ１〜１０である、−Ｏ−アルキルを指す。
【０１０７】
本明細書で用いられる用語「ヒドロキシアルキル」は、異なる炭素原子上の水素原子１〜３個が、ヒドロキシル基により置換されている、本明細書に定義されたアルキル基を意味する。
【０１０８】
本明細書で用いられる用語「シクロアルキル」は、炭素原子を３〜８個含む飽和炭素環、即ち、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル又はシクロオクチルを指す。本明細書で用いられる「Ｃ３〜７シクロアルキル」は、炭素環が炭素３〜７個で構成されたシクロアルキルを指す。
【０１０９】
本明細書で用いられる用語「ハロゲン」又は「ハロ」は、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素を意味する。
【０１１０】
本明細書で用いられる用語「ヘテロアリール」又は「芳香族複素環」は、環あたりに原子を４〜８個含む芳香族環を少なくとも１個有し、Ｎ、Ｏ又はＳヘテロ原子を１個以上組み込み、残りの環原子が炭素原子である、環原子５〜１８個の単環又は二環又は三環基を意味し、ヘテロアリール基の結合点が、芳香族環上にあると理解する。当業者に周知のとおり、ヘテロアリール環は、全てが炭素の同等物よりも芳香性が小さい。つまり、本発明の目的では、ヘテロアリール基は、若干の芳香性のみを有する必要がある。ヘテロアリール部分の例としては、環原子を５又は６個、そしてヘテロ原子を１〜３個有する単環式芳香族複素環が挙げられ、非限定的に、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、オキサゾール、イソキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、トリアゾリン、チアジアゾール及びオキサジアキソリンが挙げられ、場合により、ヒドロキシ、シアノ、アルキル、アルコキシ、チオ、低級ハロアルコキシ、アルキルチオ、ハロ、ハロアルキル、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、ハロゲン、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アミノアルキル、アルキルアミノアルキル、ジアルキルアミノアルキル、ニトロ、アルコキシカルボニル、カルバモイル、アルキルカルバモイル、ジアルキルカルバモイル、アリールカルバモイル、アルキルカルボニルアミノ及びアリールカルボニルアミノから選択される置換基１個以上、好ましくは１又は２個で置換されていてもよい。二環部分の例としては、非限定的に、キノリニル、イソキノリニル、ベンゾフリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾキサゾール、ベンゾイソキサゾール、ベンゾチアゾール、及びベンゾイソチアゾールが挙げられる。
【０１１１】
本明細書で用いられる用語「ヘテロシクロアルキル」、「ヘテロシクリル」又は「複素環」は、他に断りがなければ、環あたりの原子が３〜８個の環１個以上、好ましくは環１〜２個、又は環３個からなり、環炭素原子を１個以上、そして環ヘテロ原子（Ｎ、Ｏ又はＳ（＝Ｏ）0〜2から選択される）を１個以上組み込む一価飽和環状基を意味し、結合点は、炭素原子又はヘテロ原子のいずれか一方を介していてもよく、場合により、ヒドロキシ、オキソ、シアノ、低級アルキル、低級アルコキシ、低級ハロアルコキシ、アルキルチオ、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、ニトロ、アルコキシカルボニル、アミノ、アルキルアミノ、アルキルスルホニル、アリールスルホニル、アルキルアミノスルホニル、アリールアミノスルホニル、アルキルスルホニルアミノ、アリールスルホニルアミノ、アルキルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、アルキルカルボニルアミノ及びアリールカルボニルアミノから選択される置換基１個以上、好ましくは１又は２又は３個で独立して置換されていてもよい。複素環基の例としては、非限定的に、アゼチジニル、ピロリジニル、ヘキサヒドロアゼピニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチオフェニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、イソキサゾリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、テトラヒドロピラニル、チオモルホリニル、キヌクリジニル及びイミダゾリニルが挙げられる。
【０１１２】
語句「臓器拒絶」には、血管柄付き及び／又は非血管柄付き（例えば、骨髄、膵島細胞）移植片の設置における急性同種移植片又は異種移植片拒絶、及び慢性同種移植片又は異種移植片拒絶が含まれる。
【０１１３】
共通して使用された略語としては、アセチル（Ａｃ）、アゾビスイソブチリロニトリル（ＡＩＢＮ）、大気（Ａｔｍ）、９−ボラビシクロ［３．３．１］ノナン（９−ＢＢＮ又はＢＢＮ）、tert−ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）、ジ−tert−ブチルピロカルボナート又はｂｏｃ無水物（ＢＯＣ２Ｏ）、ベンジル（Ｂｎ）、ブチル（Ｂｕ）、Chemical Abstracts Registration Number（ＣＡＳＲＮ）、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢＺ又はＺ）、カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）、１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（ＤＡＢＣＯ）、三フッ化ジエチルアミノ硫黄（ＤＡＳＴ）、ジベンジリデンアセトン（ｄｂａ）、１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノン−５−エン（ＤＢＮ）、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、Ｎ，Ｎ'−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１，２−ジクロロエタン（ＤＣＥ）、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、ジエチルアゾジカルボキシラート（ＤＥＡＤ）、ジイソプロピルアゾジカルボキシラート（ＤＩＡＤ）、ジイソブチルアルミニウム水和物（ＤＩＢＡＬ又はＤＩＢＡＬ−Ｈ）、ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＰＥＡ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、４−Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）エタン（ｄｐｐｅ）、１，１’−ビス−（ジフェニルホスフィノ）フェロセン（ｄｐｐｆ）、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣＩ）、エチル（Ｅｔ）、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）、エタノール（ＥｔＯＨ）、２−エトキシ−２Ｈ−キノリン−１−カルボン酸エチルエステル（ＥＥＤＱ）、ジエチルエーテル（Ｅｔ２Ｏ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート（ＨＡＴＵ）、酢酸（ＨＯＡｃ）、１−Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、イソプロパノール（ＩＰＡ）、リチウムヘキサメチルジシラザン（ＬｉＨＭＤＳ）、メタノール（ＭｅＯＨ）、融点（ｍｐ）、ＭｅＳＯ２−（メシル又はＭｓ）、メチル（Ｍｅ）、アセトニトリル（ＭｅＣＮ）、ｍ−クロロ過安息香酸（ＭＣＰＢＡ）、質量分析スペクトル（ｍｓ）、メチルｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）、Ｎ−ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）、Ｎ−カルボキシ無水物（ＮＣＡ）、Ｎ−クロロスクシンイミド（ＮＣＳ）、Ｎ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、ピリジニウムクロロクロマート（ＰＣＣ）、ピリジニウムジクロマート（ＰＤＣ）、フェニル（Ｐｈ）、プロピル（Ｐｒ）、イソプロピル（ｉ−Ｐｒ）、ポンド毎平方インチ（ｐｓｉ）、ピリジン（ｐｙｒ）、室温（ｒｔ又はＲＴ）、tert−ブチルジメチルシリル又はｔ−ＢｕＭｅ２Ｓｉ（ＴＢＤＭＳ）、トリエチルアミン（ＴＥＡ又はＥｔ３Ｎ）、２，２，６，６−テトラメチルピペリジン１−オキシル（ＴＥＭＰＯ）、トリフラート又はＣＦ３ＳＯ２−（Ｔｆ）、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、１，１’−ビス−２，２，６，６−テトラメチルヘプタン−２，６−ジオン（ＴＭＨＤ）、Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフロオロボラート（ＴＢＴＵ）、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トリメチルシリル又はＭｅ３Ｓｉ（ＴＭＳ）、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物（ＴｓＯＨ又はｐＴｓＯＨ）、４−Ｍｅ−Ｃ６Ｈ４ＳＯ２−又はトシル（Ｔｓ）、Ｎ−ウレタン−Ｎ−カルボキシ無水物（ＵＮＣＡ）が挙げられる。接頭語ノルマル（ｎ）、イソ（ｉ−）、第二級（sec−）、第三級（tert−）、及びネオなどの従来の命名法は、アルキル部分と共に用いられる場合には慣用的意義を有する（J. Rigaudy and D. P. Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford）。
【０１１４】
本発明に包含され、本発明の範囲に含まれる代表的化合物の例を、以下の表に提示する。これらの実施例及び次の製造は、当業者が本発明をより明白に理解及び実践できるよう提供されている。それらは、本発明の範囲を限定するものととらえるべきではなく、単にその例示及び代表ととらえるべきである。
【０１１５】
一般に、本願で用いられる命名法は、IUPAC体系的命名法の作成のためのAUTONOMTM v.4.0、Beilstein Instituteコンピュータシステムに基づいている。図示された構造とその構造を示す名称とが矛盾する場合、図示された構造をより重視すべきである。加えて、構造又は構造の一部の立体化学が、例えば、太字又は点線で示されていない場合、その構造又は構造の一部は、その立体異性体の全てを包含すると解釈すべきである。
【０１１６】
表１は、式Ｉで示される例示的化合物を示す。
【０１１７】
【表１】
0005529049.tif 000007
0005529049.tif 000008
0005529049.tif 000009
0005529049.tif 000010
0005529049.tif 000011
0005529049.tif 000012
【０１１８】
投与量及び投与
本発明の化合物は、様々な経口投与形態及び担体に配合させてもよい。経口投与は、錠剤、コート錠、糖剤、ハード及びソフトゼラチンカプセル、溶液、エマルジョン、シロップ、又は懸濁液の形態であってもよい。本発明の化合物は、他の投与経路のうち、連続（静脈点滴）、局所、非経口、筋肉内、静脈内、皮下、経皮（透過性増強剤（penetration enhancement agent）を含んでいてもよい）、口腔、経鼻、吸入、及び坐剤投与をはじめとする他の投与経路で投与される場合に有効である。好ましい投与の手法は、一般に、簡便な日用量レジメンを利用する経口であり、それは病気の程度及び有効成分への患者の応答により調整することができる。
【０１１９】
本発明の化合物、及び薬学的に使用しうるその塩を、１種以上の従来の賦形剤、担体、又は希釈剤と共に、医薬組成物及び単位用量の形態にしてもよい。医薬組成物及び単位用量形態は、追加の活性化合物又は有効成分を含み、又は含まず、従来の割合の従来の成分で構成されていてもよく、そして単位用量形態は、任意の適切な効果的量の有効成分を、用いられる所定の日用量範囲に合わせて含んでいてもよい。該医薬組成物は、経口用では、固形（例えば、錠剤又は充填カプセル）、半固形、粉末、徐放性配合剤もしくは液体（例えば、溶液、懸濁液、エマルジョン、エリキシル、又は充填カプセル）として；又は経直腸もしくは経膣投与用では坐剤の形態で；又は非経口用では滅菌注射可能溶液の形態で使用してもよい。典型的な調製剤は、活性化合物を約５％〜約９５％（w/w）含む。用語「調製剤」又は「用量形態」は、活性化合物の固体及び液体配合物の両方を包含するものとし、有効成分が標的器官又は組織、並びに所望の用量及び薬物動態パラメータに応じて異なる調製剤中に存在しうることは、当業者に認識されよう。
【０１２０】
本明細書で用いられる用語「賦形剤」は、医薬組成物を製造するのに有用で、一般に安全で非毒性であり、そして生物学的又は他の面でも不適切ではない化合物を指し、獣医学的使用及びヒトの薬学的使用に許容しうる賦形剤を包含する。本発明の化合物は、単独で投与することができるが、一般には、所定の投与経路及び標準的薬務に関連して選択される１種以上の適切な医薬賦形剤、希釈剤又は担体と混和して投与される。
【０１２１】
「薬学的に許容しうる」は、それが、医薬組成物を製造するのに有用で、一般に安全で非毒性であり、そして生物学的又は他の面でも不適切でないことを意味し、獣医学的使用及びヒトの薬学的使用に許容しうることを包含する。
【０１２２】
有効成分の「薬学的に許容しうる塩」形態により、最初に、非塩形態では存在しなかった所望の薬物動態的性質を有効成分に付与してもよく、そして身体での治療活性に関して、有効成分の薬物力学に正の影響を与えてもよい。化合物の「薬学的に許容しうる塩」という語句は、薬学的に許容できて、親化合物の望ましい薬理学的活性を有する塩を意味する。そのような塩としては、（１）無機酸（例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸など）で形成された酸付加塩；もしくは有機酸（例えば、酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、コハク酸、リンゴ酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、３−（４−ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２−エタンジスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、４−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンスルホン酸、４−トルエンスルホン酸、ショウノウスルホン酸、４−メチルビシクロ［２．２．２］−オクタ−２−エン−１−カルボン酸、グルコヘプトン酸、３−フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、tert−ブチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、ヒドロキシナフトエ酸、サリチル酸、ステアリン酸、ムコン酸など）で形成された酸付加塩；又は（２）親化合物中に存在する酸性プロトンが、金属イオン（例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオン、又はアルミニウムイオン）により置換されている場合、もしくは有機塩基（例えば、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、Ｎ−メチルグルカミンなど）と配位している場合に形成される塩が挙げられる。
【０１２３】
固形調製剤としては、粉末、錠剤、ピル、カプセル、カシェ、坐剤、及び分散性顆粒が挙げられる。固体担体は、希釈剤、着香剤、可溶化剤、滑剤、懸濁剤、結合剤、防腐剤、錠剤崩壊剤、又は封入材としても作用しうる物質１種以上であってもよい。粉末では、担体は一般に、微細有効成分との混合物である微細固体である。錠剤では、有効成分は一般に、必要な結合能を有する担体と適切な割合で混合され、所望の形状及び寸法に圧縮されている。適切な担体としては、非限定的に、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、砂糖、ラクトース、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融点ワックス、ココアバターなどが挙げられる。固形調製剤は、有効成分に加え、着色剤、香料、安定化剤、緩衝液、人工及び天然甘味料、分散剤、増粘剤、可溶化剤などを含んでいてもよい。
【０１２４】
同じく経口投与に適した液体配合剤としては、エマルジョン、シロップ、エリキシル、水溶液、及び水性懸濁液をはじめとする液体配合剤が挙げられる。これらには、使用前に短時間で液状調製剤に変換させる固形調製剤が含まれる。エマルジョンは、溶液（例えば、プロピレングリコール水溶液）中で調製してもよく、又は乳化剤（例えば、レシチン、モノオレイン酸ソルビタン、又はアカシア）を含んでいてもよい。水溶液は、有効成分を水に溶解して、適切な着色剤、香料、安定化剤、及び増粘剤を添加することにより調製することができる。水性懸濁液は、微細有効成分を粘性材料（例えば、天然又は合成ゴム、樹脂、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、及び他の周知の懸濁剤）を含む水に分散させることにより調製することができる。
【０１２５】
本発明の化合物を、非経口投与（例えば、注射、例えば、ボーラス注射又は持続注入）用に配合させてもよく、そして追加の保存剤を含む、アンプル、充填済み注射器、少量注入容器又は多数回投与用容器内に単位用量形態で存在してもよい。該組成物は、油性又は水性賦形剤中の懸濁液、溶液又はエマルジョン、例えば水性ポリエチレングリコール中の溶液のような形態をとっていてもよい。油性もしくは非水性担体、希釈剤、溶媒又は賦形剤の例としては、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油（例えば、オリーブ油）及び注射可能な有機エステル（例えば、オレイン酸エチル）が挙げられ、配合薬（formulatory agents）、例えば、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、安定化剤及び／又は分散剤を含んでいてもよい。あるいは、使用前に適切な賦形剤、例えば滅菌パイロジェンフリー水で再生されるよう、有効成分が、滅菌固形物の無菌分離により、又は溶液の凍結乾燥により得られる粉末形態であってもよい。
【０１２６】
本発明の化合物を、軟膏、クリーム、ローション又は経皮パッチとして上皮への局所投与用に配合させてもよい。軟膏及びクリームを、例えば、適切な増粘剤及び／又はゲル化剤を加えた水性又は油性基剤と配合させてもよい。ローションを、水性又は油性基剤と配合させてもよく、一般に１種以上の乳化剤、安定化剤、分散剤、懸濁剤、増粘剤、又は着色剤も含む。口内での局所投与に適した配合剤としては、香料基剤（通常、スクロース及びアカシア又はトラガカント）中に有効成分を含むロゼンジ；不活性基剤（例えば、ゼラチン及びグリセリン、又はスクロース及びアカシア）中に有効成分を含む香錠；及び適切な液体担体中に有効成分を含む洗口剤が挙げられる。
【０１２７】
本発明の化合物を、坐剤としての投与用に配合させてもよい。低融点ワックス（例えば、脂肪酸グリセリド又はココアバターの混合物）を最初に溶融して、有効成分を、例えば撹拌することにより、均質に分散させる。その後、溶融された均質な混合物を簡便な一定寸法の鋳型に注入し、放冷して固化させる。
【０１２８】
本発明の化合物を、経膣投与用に配合させてもよい。有効成分に加えてそのような担体を含むペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォーム又はスプレーが適切であることは、当該技術分野で公知である。
【０１２９】
本発明の化合物を、経鼻投与用に配合させてもよい。溶液又は懸濁剤を、従来の手法、例えば点滴注入器、ピペット又はスプレーにより鼻腔に直接適用する。配合剤を、単回又は多数回投与形態で提供してもよい。点滴注入器又はピペットの後者の例では、これは、患者が溶液又は懸濁液を適切な所定の容量で投与することにより実行してもよい。スプレーの場合、これは、例えば調量噴霧スプレーポンプを用いることにより実行してもよい。
【０１３０】
本発明の化合物を、特に鼻腔内投与をはじめとする呼吸管へのエアロゾル投与用に配合させてもよい。該化合物は、一般に小さな粒度、例えば約５ミクロン以下程度の粒度を有する。そのような粒度は、当該技術分野で公知の手段、例えば微粉化により得てもよい。有効成分は、クロロフルオロカーボン（ＣＦＣ）（例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、又はジクロロテトラフルオロエタン）、もしくは二酸化炭素、又は他の適切な気体などの適切な噴射剤と一緒に加圧パック内で提供される。エアロゾルは、簡便にはレシチンなどの界面活性剤を含んでいてもよい。薬物の用量を、調量弁により制御してもよい。あるいは有効成分を、乾燥粉末、例えば適切な粉末基剤（例えば、ラクトース、デンプン、デンプン誘導体、例えばヒドロキシプロピルメチルセルロース及びポリビニルピロリドン（ＰＶＰ））中の該化合物の粉末混合物の形態で提供してもよい。粉末担体は、鼻腔内でゲルを形成する。粉末組成物は、単位用量形態で、例えばゼラチン又はブリスタパックのカプセル又はカートリッジ中に存在してもよく、そこから粉末を吸入器により投与してもよい。
【０１３１】
所望なら、有効成分の持効性投与又は徐放性投与に適応する腸溶性コーティングを加えて、配合剤を製造してもよい。例えば、本発明の化合物を、経皮又は皮下薬物送達装置中に配合させることができる。これらの送達システムは、化合物の持続放出が必要な場合、そして処置レジメンでの患者の服薬遵守が極めて重要となる場合に有利である。経皮送達システム中の化合物は、多くの場合、皮膚接着固体支持体に付着させている。該当する化合物を、透過性増強剤、例えば、Azone（１−ドデシルアザシクロヘプタン−２−オン）と混和することもできる。持効性送達システムを、手術又は注射により皮下層に挿入する。皮下インプラントでは、液体可溶性膜（例えば、シリコーンゴム、又は生体分解ポリマー、例えばポリアクト酸（polyactic acid））中に該化合物が封入されている。
【０１３２】
医薬担体、希釈剤及び賦形剤を共に含む適切な配合剤は、E. W. Martin, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pennsylvaniaにより編集されたRemington: The Science and Practice of Pharmacy 1995に記載されている。熟練の配合技術者は、本発明の組成物を不安定にせず又は治療活性を損なわずに、本明細書の技術の範囲内で配合を改良して、特定の投与経路のための数多くの配合を提供してもよい。
【０１３３】
本発明の化合物が水又は他の賦形剤により可溶性になるような該化合物の改良を、例えば、当該技術分野に十分含まれるわずかな改良（塩配合、エステル化など）により容易に実行してもよい。患者の最大の有利な効果に合わせて本発明の化合物の薬物動態を管理するために、特定の化合物の投与経路及び用量レジメンを改良することも、当該技術分野に十分に含まれる。
【０１３４】
本明細書で用いられる用語「治療上効果的な量」は、患者の疾患の症状を軽減するのに必要な量を意味する。用量は、各症例の各要件に適応させる。その投与量は、多数の因子、例えば処置される疾患の重症度、患者の年齢及び一般的健康条件、患者を処置する他の医薬、投与の経路及び形態、並びに関与する医療従事者の選択及び経験に応じて広い限界内で変動してもよい。経口投与では、１日あたり約０．０１〜約１０００mg/kg体重の日用量が、単独療法及び／又は併用療法で適切となるはずである。好ましい日用量は、１日あたり約０．１〜約５００mg/kg体重、より好ましくは０．１〜約１００mg/kg体重、最も好ましくは１．０〜約１０mg/kg体重である。つまり７０ｋｇのヒトに投与する場合、用量範囲は、１日あたり約７mg〜０．７ｇになる。日用量を、単回投与又は分割投与で、典型的には１日あたり１〜５回投与してもよい。一般に処置は、化合物の最適用量よりも少ない、少なめの投与量で開始する。その後、各患者の最適効果に達するまで、投与量を少量ずつ増加させる。本明細書に記載された疾患を処置する当業者は、過度の実験を行わなくても、個人の知識、経験、及び本願の開示を頼りに、所定の疾患及び患者のために本発明の化合物の治療上効果的な量を確定することができよう。
【０１３５】
該医薬調製剤は、好ましくは単位用量形態である。そのような形態では、該調製剤は、適量の有効成分を含む単位用量に分割されている。単位用量形態は、異なる量の調製剤を含む包装調製剤、例えば、包装錠、カプセル、及びバイアル又はアンプル中の粉末であってもよい。同じく単位用量形態は、カプセル、錠剤、カシェ、もしくはロゼンジそのものであってもよく、又はこれらのいずれかの適切な数の包装形態であってもよい。
【０１３６】
以下の実施例は、本発明の範囲内の化合物の製造及び生物学的評価を例示している。これらの実施例及び以下の製造は、当業者が本発明をより明白に理解及び実践できるよう提供されている。それらは、本発明の範囲を限定するものととらえるべきではなく、単にその例示及び代表ととらえるべきである。
【０１３７】
実施例
実施例１
【０１３８】
【化６】
0005529049.tif 000013
【０１３９】
１−［２−ブロモ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン
水素化ナトリウム（鉱油中６０％、０．０１９ｇ、０．４８mmol）を、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド１．５mL中の１−（２−ブロモ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン（０．０９４ｇ、０．３３mmol）の撹拌溶液に０〜５℃で加えた。泡立っている黄色の混合物を０〜５℃で１５分間撹拌した。次に２−（トリメチルシリル）エトキシメチルクロリド（０．０７５mL、０．４２mmol）を加えた。得られた濁った黄色の混合物を室温で３時間撹拌し、次に水１０mLと酢酸エチル１０mLに分配した。有機層を水１０mL及び飽和ＮａＣｌ水溶液１０mLで順次２回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、橙色の油状物とした。シリカゲルクロマトグラフィー（１０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、僅かに不純な１−［２−ブロモ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン０．１２９ｇ（９３％）を黄色の油状物として得て、それを更に精製しないで使用した。
【０１４０】
実施例２
【０１４１】
【化７】
0005529049.tif 000014
【０１４２】
７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−１，５−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−オン
１−［２−ブロモ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン（０．０６７ｇ、０．１６mmol）、ジオキサン０．４mL、水０．４mL、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（０．００９ｇ、０．０１mmol）、２−ジ−ｔ−ブチルホスフィノ−２’，４’，６’−トリイソプロピル−１，１’−ビフェニル（０．００８ｇ、０．０２mmol）、及び新たに粉砕したＫＯＨ（０．０３８ｇ、０．６７mmol）の混合物をＮ２下、密閉管中で１００℃にて１５時間撹拌した。得られた橙−黒色の混合物を酢酸エチル５mLと水５mLに分配し、エタノール数滴を加えて、乳濁液を減少させた。水層を酢酸エチル５mLで抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、橙色の油状物とした。シリカゲルクロマトグラフィー（２０→４０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−１，５−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−オン０．０２９ｇ（５１％）を淡黄色の固体として得た。
【０１４３】
実施例３
【０１４４】
【化８】
0005529049.tif 000015
【０１４５】
１−［２−シクロペンチルオキシ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン
７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−１，５−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−オン（０．０２９ｇ、０．０８２mmol）、テトラヒドロフラン１mL、シクロペンタノール（０．０１０mL、０．１１mmol）、トリブチルホスフィン（０．０２５mL、０．１mmol）、及びジイソプロピルアゾジカルボキシラート（０．０２０mL、０．１０mmol）の溶液を、窒素下で６５℃にて１７．５時間撹拌し、次に放冷した。更なるシクロペンタノール（０．０２０mL、０．２２mmol）、トリブチルホスフィン（０．０５０mL、０．２０mmol）、及びジイソプロピルアゾジカルボキシラート（０．０４０mL、０．２１mmol）を加え、溶液を６５℃で２．５時間撹拌した。黄色の溶液を水５mLと酢酸エチル５mLに分配した。有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液５mLで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄色の油状物とした。シリカゲルクロマトグラフィー（１０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、１−［２−シクロペンチルオキシ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン０．０１７ｇ（５１％）を無色の油状物として得た。
【０１４６】
実施例４
【０１４７】
【化９】
0005529049.tif 000016
【０１４８】
１−（２−シクロペンチルオキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン
ジクロロメタン１mL及びトリフルオロ酢酸１mL中の１−［２−シクロペンチルオキシ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン（０．０１７ｇ、０．０４１mmol）の溶液を、５時間撹拌し、次に濃縮して、黄色の油状物とした。シリカゲルクロマトグラフィー（０→４０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、白色の固体０．０１２ｇを得た。１Ｈ ＮＭＲ分光法は、この中間体が所望の生成物のホルムアルデヒド付加物であることを示した。固体をエタノール１mLに溶解し、溶液を酢酸ナトリウム三水和物（０．０６４ｇ、０．４７mmol）で処理した。無色の混合物を５時間撹拌し、次に濃縮した。残留物を酢酸エチル５mLと水５mLに分配した。有機層を水５mL及び飽和ＮａＣｌ水溶液５mLで順次洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、１−（２−シクロペンチルオキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン０．００７ｇ（５７％）を僅かに不純な白色の固体として得た。
【０１４９】
以下の化合物を上記一般手順にしたがって調製した：
１−（２−シクロヘプチルオキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン
１−（２−シクロへキシルオキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン
１−（２−イソプロポキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン
１−［２−（１，２−ジメチル−プロポキシ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン
１−（２−イソブトキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン
１−（２−sec−ブトキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン
【０１５０】
実施例５
【０１５１】
【化１０】
0005529049.tif 000017
【０１５２】
２−（シクロペンチル−メチル−アミノ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−カルボン酸イソプロピルアミド
工程１  ピロロピラジンＣ（３４０mg、１．７mmol）及びＮ−メチル−シクロペンチルアミンを、ＮＭＰ（２mL）に溶解し、密閉管中に置いた。溶液を高強度マイクロ波で摂氏２４０度にて１．５時間照射した。冷ましている時、混合物を水と酢酸エチルに分配した。抽出物を無水硫酸ナトリウムで熟成させ、揮発物を除去した。所望の付加物（Ａ、１０２mg）を、ヘキサン類中の１０〜６０％ 酢酸エチルで溶離するＳＧＣにより単離し、分光学的特性が推定構造と一致することを示した。
【０１５３】
工程２  ピロロピラジンＡ（１００mg、０．４６mmol）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５mL）に溶解し、摂氏０度に冷却した。粉末の水酸化カリウム（６７mg、１．２mmol）及びヨウ素（１２７mg、０．５mmol）を順に加え、それにより３０分間後に摂氏０度で褐色の溶液を得た。溶液を水で処理し、１０％ チオ硫酸ナトリウム（水溶液）で脱色し、得られた沈殿物を濾過した。フィルターケーキを新鮮な水で洗浄し、減圧下で摂氏５０度にて一晩貯蔵した。褐色の粉末（Ｂ、１２０mg）は、分光学的特性が推定構造と一致することを示した。
【０１５４】
工程３  所望のアミド（Ｉ）を、工程２にしたがって、Ｂ（１１０mg、０．３２mmol）及びＫ２ＣＯ３（１３５mg、１．０mmol）を用いて、アミンをイソ−プロピルアミン（０．０８mL、１．０mmol）に代えることにより調製した。アミド（Ｉ）を固体（３５mg）として得た：融点  ２７７〜２７８℃；  ＭＷ：３０１；ＥＳＭＳ  ｍ／ｚ  ３０２（Ｍ＋１）。
【０１５５】
２−（３−メチルアミノ−ピペリジン−１−イル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−カルボン酸イソプロピルアミドを、工程１でＮ−メチルシクロペンチルアミンを３−メチルアミノピペリジンに代え、反応を４時間行うことにより得た。粗反応混合物を、還流しているテトラヒドロフラン中の二炭酸ジ−tert−ブチル及び４−ジメチルアミノピリジンで処理し、シリカゲルクロマトグラフィー（溶離剤：ヘキサン類中の２０〜８０％酢酸エチル）に付した。標記化合物を、工程２のＢを［１−（７−ヨード−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル）−ピペリジン−３−イル］−メチル−カルバミン酸tert−ブチルエステルに代えることにより得て、次にカルボニル化の生成物を還流している１，２−ジクロロエタン中のトリフルオロ酢酸で処理して、標記化合物をトリフルオロ酢酸塩として得た：  融点  ５４〜６４℃；ＭＳ  ｍ／ｚ  ３１７（遊離塩基：Ｍ＋Ｈ）。
【０１５６】
実施例６
【０１５７】
【化１１】
0005529049.tif 000018
【０１５８】
７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−カルボン酸ジメチルアミド：１−（２−ブロモ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン（５０mg、０．１７７mmol）を、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解し、フラスコを一酸化炭素でパージした。ジメチルアミン（５．５Mエタノール溶液０．３２ml）を、続いてパラジウムビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセンジクロリド、ジクロロメタン錯体（１４mg、０．０１７７mmol）を加えた。一酸化炭素を充填したバルーンを取り付け、フラスコを１００Ｃ浴で４８時間撹拌した。反応物を水及び酢酸エチルの添加により処理した。層を分離し、水層を酢酸エチルで更に２回抽出した。合わせた酢酸エチル層を水で、次に飽和塩化ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、残留物とした。残留物を、シリカゲルクロマトグラフィー（メタノール／ジクロロメタン）により精製して、生成物１６mg（３２％）を得た。融点＝９８〜１０１Ｃ、（Ｍ＋Ｈ）＋＝２７５。
【０１５９】
７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−カルボン酸シクロペンチルアミド。
ジメチルアミンの代わりにシクロペンチルアミンを使用した。融点＝２３７．９〜２４１．５Ｃ、（Ｍ＋Ｈ）＋＝３１５。
【０１６０】
実施例７
【０１６１】
【化１２】
0005529049.tif 000019
【０１６２】
Ｎ−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−Ｎ−メチル−ベンズアミド
工程１：  トルエン中の１−［２−ブロモ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン（０．２５ｇ、０．６１mmol）、Ｎ−メチル−ベンズアミド（０．２４３ｇ、１．８mmol）、Ｋ２ＣＯ３（０．１８５ｇ、１．３４mmol）、ＣｕＩ（０．０１７５ｇ、０．０９２mmol）及びＮ，Ｎ’−ジメチル−エタン−１，２−ジアミン（０．０２mL、０．１８４mmol）の混合物をアルゴン雰囲気下、マイクロ波レンジで１１０℃にて一晩加熱した。室温に冷ました後、反応混合物を、ヘキサン中のＥｔＯＡｃ（１０％〜４０％ 勾配  ３０分間かけて)を用いるシリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、所望の生成物（６０mg、収率２１％）を黄色の油状物として得た。1H NMR (CDCl3, 300MHz): δ 8.43 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.45-7.24 (m, 5H), 5.65 (s, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.62-3.59 (m, 2H), 1.51 (s, 9H), 0.99-0.94 (m, 2H), 0 (s, 9H)；ＭＳ[Ｍ＋Ｈ]＋：４６７。工程２：これらの実施例に記載されている一般手順にしたがった。1H NMR (CDCl3):  δ 9.50 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.39-7.21 (m, 5H), 3.69 (s, 3H), 1.45 (s, 9H)；ＭＳ[Ｍ＋Ｈ]＋：３３７。
【０１６３】
実施例８
【０１６４】
【化１３】
0005529049.tif 000020
【０１６５】
シクロヘキサンカルボン酸［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３ｂ］ピラジン−２−イル］−アミド。これらの実施例に記載されている一般手順にしたがった。1H NMR (DMSO-d6):  δ 12.7 (s, 1H), 10.4 (s, 1H), 9.05 (s, 1H), 8.43 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 2.68-2.55 (m, 1H), 1.90-1.20 (m, 11H), 1.39 (s, 9H)；ＭＳ[Ｍ＋Ｈ]＋：３２９。
【０１６６】
実施例９
【０１６７】
【化１４】
0005529049.tif 000021
【０１６８】
Ｎ−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ベンズアミド。
これらの実施例に記載されている一般手順にしたがった。1H NMR (DMSO):  δ 12.85 (br s, 1H), 10.9 (s, 1H), 8.96 (S, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.14-8.12 (m, 2H), 1.62 (s) ppm, 7.765-7.53 (m, 3H), 1.40 (s, 9H)；ＭＳ[Ｍ＋Ｈ]＋：３２３。
【０１６９】
実施例１０
【０１７０】
【化１５】
0005529049.tif 000022
【０１７１】
Ｎ−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ベンゼンスルホンアミド
工程１：  ＤＭＦ（２mL）中の１−［２−ブロモ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン（０．２５ｇ、０．６１mmol）、ベンゼンスルホンアミド（０．１４３ｇ、０．９１mmol、１．５当量）、ＣｕＩ（０．０２３ｇ、０．１２mmol、２０mol％）、Ｎ，Ｎ−ジメチルグリシン（０．０１３ｇ、０．１２mmol、２０mol％）及びＫ３ＰＯ４（０．３２３ｇ、１．５３mmol、２．５当量）の混合物をアルゴン雰囲気下、マイクロ波レンジで１５３℃にて一晩加熱した。室温に冷ました後、反応混合物をＨ２Ｏで希釈し、ＤＣＭで抽出した。合わせた有機抽出物をＨ２Ｏで洗浄し、濃縮した。残留物を、ヘキサン中のＥｔＯＡｃ（１５％〜５０％ 勾配  ２０分間かけて）を用いるシリカゲルのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、生成物０．２１５ｇを淡黄色の泡状物として得た。1H NMR (CDCl3):  δ 8.50 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.99-7.96 (m, 2H), 7.61-7.47 (m, 3H), 5.67 (s, 2H), 2.64-3.58 (m, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.00-0.94 (m, 2H), 0 (s, 9H)；ＭＳ[Ｍ＋Ｈ]＋：４８９。
【０１７２】
工程２：  これらの実施例に記載されている一般手順にしたがった。1H NMR (DMSO-d6):  δ 8.23 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.54-7.47 (m, 5H), 1.17 (s, 9H)；ＭＳ[Ｍ＋Ｈ]＋：３５９。
【０１７３】
実施例１１
【０１７４】
【化１６】
0005529049.tif 000023
【０１７５】
Ｎ−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−Ｎ−メチル−ベンゼンスルホンアミド
これらの実施例に記載されている一般手順にしたがったが、但し、工程１でベンゼンスルホンアミドをＮ−メチルベンゼンスルホンアミドに代えた。1H NMR (CDCl3): δ 8.75 (s, 1H), 8.49 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.56-7.53 (m, 3H), 7.44-7.40 (m, 2H), 3.36 (s, 3H), 1.23 (s, 9H)；[Ｍ＋Ｈ]＋：３７３。
【０１７６】
実施例１２
【０１７７】
【化１７】
0005529049.tif 000024
【０１７８】
２，２−ジメチル−１−（２−フェノキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−プロパン−１−オン
トルエン１mL中の１−［２−ブロモ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン（０．０５１ｇ、０．１２mmol）、フェノール（０．０１７ｇ、０．１８mmol）、リン酸カリウム（０．０５６ｇ、０．２６mmol）、２−ジ−tert−ブチルホスフィノ−２’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）ビフェニル（０．００４１ｇ、０．０１２mmol）及びＰｄ（ＯＡｃ）２（０．００２ｇ、０．００９mmol）の混合物を、１００℃で１３時間、次に１５０℃で４時間撹拌した。得られた暗橙色の混合物を酢酸エチル１０mLと水１０mLに分配した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、橙色の油状物とした。カラムクロマトグラフィー（０〜２０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、不純な２，２−ジメチル−１−［２−フェノキシ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン０．０３２ｇ（６２％）を黄色の油状物として得て、それを更に精製しないで使用した。
【０１７９】
実施例１３
【０１８０】
【化１８】
0005529049.tif 000025
【０１８１】
ジクロロメタン１mL及びトリフルオロ酢酸１mL中のこれらの実施例に記載されている一般手順にしたがって調製した、不純な２，２−ジメチル−１−［２−フェノキシ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン（０．０３２ｇ、“０．０７５mmol”）の溶液を、１３時間撹拌し、次に濃縮して、黄緑色の油状物とし、それを飽和ＮａＨＣＯ３水溶液５mLとジクロロメタン５mLに分配した。水層をジクロロメタン５mLで抽出し、合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、淡黄色の油状物とした。油状物をエタノール１mLに溶解し、酢酸ナトリウム三水和物（０．１０３ｇ、０．７５６mmol）で処理した。混合物を２時間撹拌し、次に濃縮した。残留物を水５mLとジクロロメタン５mLに分配した。水層をジクロロメタン５mLで抽出し、合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、淡黄色の油状物とした。油状物をエタノール１mLに再び溶解し、酢酸ナトリウム三水和物（０．１０１ｇ、０．７４５mmol）で処理した。混合物を４時間撹拌し、次に濃縮した。残留物を水５mLとジクロロメタン５mLに分配した。水層をジクロロメタン５mLで抽出し、合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、オフホワイトの固体とした。カラムクロマトグラフィー（０→３３％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、２，２−ジメチル−１−（２−フェノキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−プロパン−１−オン０．０１４ｇ（不純物から６５％；２−工程により４０％）をオフホワイトの固体として得た。
【０１８２】
実施例１４
【０１８３】
【化１９】
0005529049.tif 000026
【０１８４】
１−［２−（シクロペンチル−メチル−アミノ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン
Ｎ−メチルピロリジノン１mL中の１−［２−ブロモ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン（０．０５１ｇ、０．１２３mmol）及びメチルシクロペンチルアミン（０．０５０mL、０．４４mmol）の溶液を、密閉管中で２００℃にて２０時間撹拌した。更なるメチルシクロペンチルアミン（０．１００mL、０．８８mmol）を加え、溶液を２００℃で３日間撹拌した。冷ました後、暗橙色の溶液を酢酸エチル１０mLと１０％ クエン酸溶液１０mLに分配した。有機層を水１０mL及び飽和ＮａＣｌ水溶液１０mLで順次３回洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、橙色の油状物とした。カラムクロマトグラフィー（０〜２０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、不純な１−［２−（シクロペンチル−メチル−アミノ）−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン０．０３０ｇ（５８％）を得て、それを更に精製しないで使用した。
【０１８５】
実施例１５
【０１８６】
【化２０】
0005529049.tif 000027
【０１８７】
これらの実施例に記載されている一般手順にしたがって調製した、ジクロロメタン１mL及びトリフルオロ酢酸１mL中の不純な１−［２−（シクロペンチル−メチル−アミノ）−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン（０．０３０ｇ、０．０７１mmol）の溶液を、３時間撹拌し、次に濃縮し、トルエンを除去して、黄色の油状物とした。油状物をエタノール１mLに溶解し、酢酸ナトリウム三水和物（０．１０３ｇ、０．７６０mmol）で処理した。黄色の混合物を１６時間撹拌し、次に濃縮して、黄色の固体とした。カラムクロマトグラフィー（２つのカラム：１回目：０→４０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類；２回目：６６％ エーテル／ヘキサン類）により、１−［２−（シクロペンチル−メチル−アミノ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン０．００４５ｇ（不純物から２１％、２−工程により１２％）を白色の固体として得た。
【０１８８】
実施例１６
１−（２−エトキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン
【０１８９】
【化２１】
0005529049.tif 000028
【０１９０】
アセトン３mL中の７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−１，５−ジヒドロ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−オン（０．０８０ｇ、０．２３mmol）、ヨードエタン（０．０１８mL、０．２４mmol）及び炭酸カリウム（０．０３８ｇ、０．２８mmol）の混合物を、還流で一晩撹拌し、次に濃縮した。残留物を酢酸エチル３０mLと水３０mLに分配した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、粗１−［２−エトキシ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン０．０７５ｇ（８６％）を黄色の油状物として得て、それを更に精製しないで使用した。
【０１９１】
実施例１７
【０１９２】
【化２２】
0005529049.tif 000029
【０１９３】
ジクロロメタン２mL及びトリフルオロ酢酸２mL中の粗１−［２−エトキシ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン（０．０７５ｇ、０．２０mmol）の溶液を、３時間撹拌し、次に濃縮し、トルエンを除去した。得られた残留物をエタノール３mLに溶解し、酢酸ナトリウム三水和物（０．２７０ｇ、１．９８mmol）で処理した。混合物を一晩撹拌し、次に濃縮して、残留物とした。カラムクロマトグラフィー（０→３０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、１−（２−エトキシ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン０．０３９ｇ（８０％）を白色の固体として得た。
【０１９４】
実施例１８
【０１９５】
【化２３】
0005529049.tif 000030
【０１９６】
２，２−ジメチル−１−（２−フェニルアミノ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−プロパン−１−オン
ジメチルスルホキシド１mL中の１−［２−ブロモ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン（０．２０６ｇ、０．５０mmol）、炭酸カリウム（０．１５２ｇ、１．１０mmol）、ヨウ化銅（Ｉ）（０．０１４ｇ、０．０７５mmol）、プロリン（０．０１７ｇ、０．１５mmol）及びアニリン（０．４６mL、５mmol）の混合物を、９０℃で５時間撹拌し、次に放冷した。混合物を酢酸エチル５０mLと水３０mLに分配し、有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液３０mLで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、残留物とした。カラムクロマトグラフィー（０→４５％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、２，２−ジメチル−１−［２−フェニルアミノ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン０．１０２ｇ（４８％）を淡橙色の固体として得た。
【０１９７】
実施例１９
【０１９８】
【化２４】
0005529049.tif 000031
【０１９９】
ジクロロメタン２mL及びトリフルオロ酢酸１mL中の２，２−ジメチル−１−［２−フェニルアミノ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン（０．１０２ｇ、０．２４０mmol）の溶液を、１４時間撹拌し、次に濃縮した。カラムクロマトグラフィー（２０→７０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、所望の生成物のホルムアルデヒド付加物０．０５５ｇを得た。この中間体をエタノール１mLに溶解し、酢酸ナトリウム三水和物（０．３２７ｇ、２．４０mmol）で処理した。混合物を２４時間撹拌し、固体を濾過し、水及びエタノールですすぐことにより単離し、乾燥させて、２，２−ジメチル−１−（２−フェニルアミノ−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル）−プロパン−１−オン０．０１０ｇ（１４％）を黄色の固体として得た。
【０２００】
実施例２０
２，２−ジメチル−１−［２−（メチル−フェニル−アミノ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン
【０２０１】
【化２５】
0005529049.tif 000032
【０２０２】
２，２−ジメチル−１−［２−（メチル−フェニル−アミノ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン
トルエン２mL中の１−［２−ブロモ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン（０．０５３ｇ、０．１２９mmol）、Ｎ−メチルアニリン（０．０２１mL、０．１９mmol）、Ｐｄ２（ｄｂａ）３（０．０１２ｇ、０．０１３mmol）、ＢＩＮＡＰ（０．０１２ｇ、０．０１９mmol）及び炭酸セシウム（０．０８４ｇ、０．２５８mmol）の混合物を、マイクロ波中で１２０℃にて１時間、次にマイクロ波中で１５０℃にて１時間、次にマイクロ波中で１８０℃にて１時間撹拌し、次に濃縮して、残留物とした。カラムクロマトグラフィー（０→３０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、２，２−ジメチル−１−［２−（メチル−フェニル−アミノ）−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン０．０２１ｇ（３７％）を黄色の油状物として得た。
【０２０３】
実施例２１
【０２０４】
【化２６】
0005529049.tif 000033
【０２０５】
ジクロロメタン１mL及びトリフルオロ酢酸１mL中の２，２−ジメチル−１−［２−（メチル−フェニル−アミノ）−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン（０．０２１ｇ、０．０４８mmol）の溶液を、１時間撹拌し、次に濃縮した。残留物をエタノール０．５mLに溶解し、酢酸ナトリウム三水和物（０．０６５ｇ、０．４８mmol）で処理した。混合物を１５時間撹拌し、次に濃縮して、残留物とした。カラムクロマトグラフィー（５０→１００％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、２，２−ジメチル−１−［２−（メチル−フェニル−アミノ）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−プロパン−１−オン０．００９ｇ（６１％）を黄色の固体として得た。
【０２０６】
実施例２２
【０２０７】
【化２７】
0005529049.tif 000034
【０２０８】
シクロヘキシル−３−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ウレア
テトラヒドロフラン１４mL中の１−［２−ブロモ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン（０．５７６ｇ、１．４０mmol）、ベンゾフェノンイミン（０．２６mL、１．５４mmol）、炭酸セシウム（０．９１２ｇ、２．８０mmol）、パラジウムアセタート（０．０３１ｇ、０．１４mmol）及びＢＩＮＡＰ（０．０８７ｇ、０．１４mmol）の混合物を、密閉管中で９０℃にて６４時間撹拌し、次に濃縮した。得られた残留物を酢酸エチル３０mLに取り、水３０mL及び飽和ＮａＣｌ水溶液３０mLで順次洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、残留物とした。カラムクロマトグラフィー（１０→２５％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、１−［２−（ベンズヒドリリデン−アミノ）−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン０．６７０ｇ（９３％）を黄色の油状物として得た。
【０２０９】
実施例２３
【０２１０】
【化２８】
0005529049.tif 000035
【０２１１】
メタノール１３mL中の１−［２−（ベンズヒドリリデン−アミノ）−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン（０．６７０ｇ、１．３１mmol）、酢酸ナトリウム（０．２５８ｇ、３．１４mmol）及びヒドロキシルアミン塩酸塩（０．１６４ｇ、２．３６mmol）の混合物を、１時間撹拌し、次に濃縮して、残留物とした。カラムクロマトグラフィー（１０→５０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、１−［２−アミノ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン０．３５９ｇ（７９％）を白色の固体として得た。
【０２１２】
実施例２４
【０２１３】
【化２９】
0005529049.tif 000036
【０２１４】
ジクロロエタン３mL中の１−［２−アミノ−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−７−イル］−２，２−ジメチル−プロパン−１−オン（０．１００ｇ、０．２８７mmol）及びシクロヘキシルイソシアナート（０．３７mL、２．９mmol）の溶液を、還流で１９時間撹拌し、次に濃縮して、残留物とした。カラムクロマトグラフィー（１０→５０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、１−シクロヘキシル−３−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ウレア０．１０３ｇ（７６％）を褐色の固体として得た。
【０２１５】
実施例２５
【０２１６】
【化３０】
0005529049.tif 000037
【０２１７】
ジクロロメタン２mL及びトリフルオロ酢酸２mL中の１−シクロヘキシル−３−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５−（２−トリメチルシラニル−エトキシメチル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ウレア（０．１０２ｇ、０．２１５mmol）の溶液を、１時間撹拌し、次に濃縮し、トルエンで２回除去した。残留物をエタノール２mLで溶解し、酢酸ナトリウム三水和物（０．２９３ｇ、２．１５mmol）で処理した。混合物を１６時間撹拌し、次に濃縮して、残留物とした。カラムクロマトグラフィー（５０→８０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン類）により、１−シクロヘキシル−３−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ウレア０．０５０ｇ（６８％）を白色の固体として得た。
【０２１８】
１−シクロヘキシル−３−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ウレアと同様の方法で調製した化合物：
シクロヘプチル−３−［７−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−５Ｈ−ピロロ［２，３−ｂ］ピラジン−２−イル］−ウレア
【０２１９】
ＪＡＫアッセイ情報
ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）阻害のＩＣ５０の測定
用いられた酵素及びペプチド基質を、以下に記載する。
【０２２０】
ＪＡＫ１：Invitrogenの組換えヒトキナーゼドメイン（カタログ番号ＰＶ４７７４）
ＪＡＫ３：Milliporeの（カタログ番号１４−６２９）又は調製した組換えヒトキナーゼドメイン
ＪＡＫ２：Milliporeの組換えヒトキナーゼドメイン（カタログ番号１４−６４０）
基質：ペプチド基質の配列を有するＪＡＫ１の活性化ループから得たＮ−末端ビオチン化１４量体ペプチド：ビオチン−ＫＡＩＥＴＤＫＥＹＹＴＶＫＤ
【０２２１】
用いたアッセイの条件を、以下に記載する。
【０２２２】
アッセイ緩衝液：ＪＡＫキナーゼ緩衝液：５０mMＨｅｐｅｓ［pH７．２］、１０mM  ＭｇＣｌ２、１mM  ＤＤＴ、１mg/ml  ＢＳＡ。アッセイをこの緩衝液中で実施した。
アッセイフォーマット：３種のＪＡＫキナーゼ全てのキナーゼ活性を、放射性エンドポイントアッセイを利用し、微量の３３Ｐ−ＡＴＰを用いて測定した。アッセイは、９６穴ポリプロピレンプレートで実施した。
【０２２３】
実験方法：
濃度は全て、反応混合物中の最終濃度であり、インキュベーションは全て、室温で実施した。アッセイステップを、以下に記載する。
【０２２４】
化合物を、１００％ＤＭＳＯで、典型的には出発濃度１mMの１０倍に系列希釈した。反応物中のＤＭＳＯの最終濃度は、１０％であった。
【０２２５】
化合物を酵素（０．５nM  ＪＡＫ３（市販）、０．２nM  ＪＡＫ３（調製物）、１nM  ＪＡＫ２、５nM  ＪＡＫ１）と共に１０分間プレインキュベートした。
【０２２６】
化合物を酵素（０．５nM  ＪＡＫ３、１nM  ＪＡＫ２、５nM  ＪＡＫ１）と共に１０分間プレインキュベートした。
【０２２７】
２種の基質（ＪＡＫキナーゼ緩衝液中で予め混合したＡＴＰ及びペプチド）のカクテルを添加することにより、反応を開始させた。ＪＡＫ２／ＪＡＫ３アッセイにおいて、ＡＴＰ及びペプチドをそれぞれ、１．５μM及び５０μMの濃度で用いた。ＪＡＫ１アッセイを、ＡＴＰ濃度１０μM及びペプチド濃度５０μMで実施した。ＪＡＫ２及びＪＡＫ３でのアッセイの時間は、２０分間であった。ＪＡＫ１アッセイは、４０分間実施した。３種の全ての酵素で、０．５Ｍ  ＥＤＴＡを最終濃度１００mMになるように添加することにより、反応を停止させた。
【０２２８】
停止させた反応物２５μlを、９６穴の１．２μm  MultiScreen-BVフィルタープレート中の、５０mM  ＥＤＴＡを含むＭｇＣｌ２−及びＣａＣｌ２−不含１×リン酸緩衝生理食塩水中のストレプトアビジンコートセファロースビーズの７．５％（v/v）スラリー１５０μlに移した。３０分間インキュベートした後、ビーズを以下の緩衝液で真空下、洗浄した。
２Ｍ  ＮａＣｌ  ２００μlで３〜４回洗浄
２Ｍ  ＮａＣｌ＋１％（v/v）リン酸  ２００μlで３〜４回洗浄
水で１回洗浄
【０２２９】
洗浄したプレートを６０℃のオーブンで１〜２時間乾燥させた。Microscint 20シンチレーション液７０μlを、フィルタープレートの各ウェルに添加し、少なくとも３０分間インキュベートした後、放射性カウントをPerkinElmerマイクロプレートシンチレーションカウンタで測定した。
【０２３０】
代表的なＩＣ５０の結果を、以下の表IIに示す。
【０２３１】
【表２】
0005529049.tif 000038
【０２３２】
ＳＹＫアッセイ情報
脾臓チロシンキナーゼ（ＳＹＫ）阻害のＩＣ５０の測定
ＳＹＫキナーゼアッセイは、９６穴プレートフォーマットに適合させた標準的キナーゼアッセイであった。このアッセイは、９６穴フォーマットで、１０種のハーフログ希釈を行った反応容量４０μLの試料８本で、ＩＣ５０測定を実施した。アッセイでは、天然由来ホスホアクセプターコンセンサス配列由来のＮ末端ビオチン化ペプチド基質（ビオチン−１１ａａＤＹ＊Ｅ）への放射線標識３３ＰγＡＴＰの取込みを測定した。ＥＤＴＡで反応を停止させて、ストレプトアビジンコートビーズを添加して、リン酸化生成物を検出した。代表的な結果を、先の表IIに示した。
【０２３３】
アッセイプレート：９６穴MultiScreen  ０．６５μmフィルタープレート（Millipore、カタログ番号：ＭＡＤＶＮＯＢ１０）
ストレプトアビジンコートビーズ：５０mM  ＥＤＴＡ／希釈ＰＢＳ（１：１００）中のStreptavidin Sepharose TM懸濁液５．０mL（Amersham、カタログ番号：１７−５１１３−０１）
化合物：１００％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中の１０mM、最終濃度：１０％ＤＭＳＯ中の化合物０．００３〜１００μM
酵素：精製ＳＹＫ  ＲＰＡ、脾臓チロシンキナーゼの先端切除型（truncated）構築物ａａ３６０〜６３５、貯蔵液１mg/mL、ＭＷ：３１．２KDa、最終濃度：０．０００５μM
ペプチド１：ビオチン化ペプチドを、天然由来ホスホアクセプターコンセンサス配列から得た（ビオチン−ＥＰＥＧＤＹＥＥＶＬＥ）（QCBからの特別注文）、貯蔵液２０mM、最終濃度：５．０μM
ＡＴＰ：アデノシン−５’−三リン酸  ２０mM（Roche、カタログ番号：９３２０２７２０）、最終濃度：２０μM
緩衝液：ＨＥＰＥＳ：２−ヒドロキシエチルピぺラジン−２−エタンスルホン酸（Sigma、カタログ番号：Ｈ−３３７５）、最終濃度：５０mM  ＨＥＰＥＳ  pH７．５
ＢＳＡ：最終濃度０．１％に希釈したウシ血清アルブミン第Ｖ分画（脂肪酸不含）（Roche Diagnostics GmbH、カタログ番号：９１００２２１）
ＥＤＴＡ：ＥＤＴＡ貯蔵液５００mM（Gibco、カタログ番号：１５５７５−０３８）、最終濃度：０．１mM
ＤＴＴ：１，４−ジチオトレイトール（Roche Diagnostics GmbH、カタログ番号：１９７７７７）、最終濃度：１mM
ＭｇＣｌ２・６Ｈ２Ｏ：Merck、カタログ番号：１０５８３３．１０００、最終濃度：１０mM
アッセイ希釈用緩衝液（ＡＤＢ）：５０mM  ＨＥＰＥＳ、０．１mM  ＥＧＴＡ、０．１mMバナジン酸ナトリウム、０．１mM  β−グリセロリン酸塩、１０mM  ＭｇＣｌ２、１mM  ＤＴＴ、０．１％ＢＳＡ、pH７．５
ビーズ洗浄緩衝液：２Ｍ  ＮａＣｌ＋１％リン酸を含む１０g/L  ＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）
【０２３４】
実験方法：
容量４０μL中に、ＡＤＢで希釈された精製組換えヒトＳＹＫ３６０−６３５［０．５nM］２６μLを、［１０％］ＤＭＳＯ中の１０倍濃度の試験化合物［通常は１００μM〜０．００３μM］４μLと混合し、混合物をＲＴで１０分間インキュベートした。
【０２３５】
ＤＹＥペプチド基質［０又は５μM］、ＡＴＰ［２０μM］及び３３ＰγＡＴＰ［２μCi/rxn］を含む４倍基質カクテル１０μLを添加することにより、キナーゼ反応を開始させた。３０℃で１５分間インキュベートした後、ＰＢＳ中の５mM ＥＤＴＡ  ２００μL及び２０％ストレプトアビジンコートビーズを含む９６穴０．６５μm Millipore MADVNOB膜／プレートに、反応試料２５μLを移すことにより、反応を停止させた。
【０２３６】
非結合放射性ヌクレオチドを、真空下、２Ｍ  ＮａＣl  ２５０μLで３回、２Ｍ  ＮａＣl＋１％リン酸  ２５０μLで２回、Ｈ２Ｏ  ２５０μLで１回洗浄した。最後に洗浄した後、膜／プレートをアダプタープレートに移し、６０℃で１５分間加熱乾燥させた後、シンチレーションカクテル５０μLを各ウェルに添加し、４時間後に放射能の量をトップカウンタでカウントした。
【０２３７】
％阻害率を、非阻害酵素率を基にして計算した。
【０２３８】
％阻害率＝１００／（１＋（ＩＣ５０／阻害剤濃度）ｎ）
XLfitソフトウエア（ID Business Solution Ltd., Guilford, Surrey,英国）による非線形曲線フィットを利用して、ＩＣ５０を計算した。
【０２３９】
前述の発明は、明瞭さ及び理解のために、例示及び実施例として幾分詳細に記載した。添付の特許請求の範囲内で変更及び改良を実施しうることは、当業者には明白であろう。それゆえ、上記記載が例示であり限定ではないことが理解されるはずである。本発明の範囲は、それゆえ、上記記載を参照して決定すべきではなく、代わりに以下の添付の特許請求の範囲を、そのような特許請求の範囲に権利を与えた均等物の全範囲と共に参照して決定すべきである。
【０２４０】
本願に引用された全ての特許、特許出願及び刊行物は、各特許、特許出願又は刊行物がそのように個別に示されたのと同程度に、全ての目的のためにその全体が本明細書に参考として援用される。