(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式（Ｉ）：
【化１】
0005584865.tif 000091
の化合物またはその薬学的に許容される塩。
（式中、Ｂは９−アデニンであり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびＣ１〜６ハロアルキル基からなる群から選択され、
Ｒ３は、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ３Ａ、構造−ＯＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ（ＣＨ３）２（「ＰＯＣ」基）を有するイソプロピルオキシメチルカルボニル遊離基、構造−ＯＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３（ピバロイルオキシメチルまたは「ＰＯＭ」基）を有する部分、構造−ＯＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３（ｔｅｒｔ−ブチル−Ｓ−アシル−２−チオエチルまたは「ｔＢｕ−ＳＡＴＥ」基）を有する部分、構造−ＯＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）ＣＨ３（メチル−Ｓ−アシル−２−チオエチルまたは「Ｍｅ−ＳＡＴＥ」基）を有する部分、構造−ＮＨＲ’（式中、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、またはＣ６〜１０アリール基であるか、あるいは−ＮＨＲ’はアミノ酸残基を表す）を有する部分、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、またはＣ２〜８ヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ”ＨＮからなる群から選択され、Ｒ３Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ”は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、またはアミノ酸残基であり、
（ａ）Ｘは硫黄原子であり、Ｒ２は、フッ素原子、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ２Ａ、構造−ＯＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ（ＣＨ３）２（「ＰＯＣ」基）を有するイソプロピルオキシメチルカルボニル遊離基、構造−ＯＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３（ピバロイルオキシメチルまたは「ＰＯＭ」基）を有する部分、構造−ＯＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３（ｔｅｒｔ−ブチル−Ｓ−アシル−２−チオエチルまたは「ｔＢｕ−ＳＡＴＥ」基）を有する部分、構造−ＯＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）ＣＨ３（メチル−Ｓ−アシル−２−チオエチルまたは「Ｍｅ−ＳＡＴＥ」基）を有する部分、構造−ＮＨＲ’（式中、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、またはＣ６〜１０アリール基であるか、あるいは−ＮＨＲ’はアミノ酸残基を表す）を有する部分、−ＢＨ３、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、またはＣ２〜８ヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ’ＨＮからなる群から選択され、Ｒ２Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、またはアミノ酸残基であるか、あるいは、
（ｂ）Ｘは酸素原子を表し、Ｒ２はフッ素原子およびＢＨ３基からなる群から選択される。）
【請求項２】
Ｒ１は、水素原子、メチル基、ヒドロキシメチル基、およびフルオロメチル基からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
以下の構造：
【化２】
0005584865.tif 000092
を有する、請求項１または２に記載の化合物。
（式中、Ｒ２ＡおよびＲ３Ａは、それぞれ別々に水素原子またはアルカリ金属カチオンである。）
【請求項４】
以下の構造：
【化３】
0005584865.tif 000093
を有する、請求項１または２に記載の化合物。
（式中、Ｒ２Ａ、Ｒ２ＢおよびＲ３Ｂは、それぞれ別々に水素原子またはアルカリ金属カチオンである。）
【請求項５】
以下の構造：
【化４】
0005584865.tif 000094
を有する、請求項１または２に記載の化合物。
（式中、Ｒ２Ａ、Ｒ２Ｂ、Ｒ２ＣおよびＲ３Ｃは、それぞれ別々に水素原子またはアルカリ金属カチオンである。）
【請求項６】
以下の構造：
【化５】
0005584865.tif 000095
のうちの一つを有する、請求項１または２に記載の化合物。
（式中、Ｒ２Ａは、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３、および−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）ＣＨ３からなる群から選択される酵素不安定基であり、
Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、またはＣ６〜１０アリール基であるか、あるいは、−ＮＨＲ’は、アラニン、アルギニン、アスパラ
ギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、およびバリンからなる群から選択されるアミノ酸残基を表し、
Ｒ３Ａは、水素原子またはアルカリ金属カチオンである。）
【請求項７】
以下の構造：
【化６】
0005584865.tif 000096
のうちの一つを有する、請求項１または２に記載の化合物。
（式中、Ｒ２は、−ＯＲ２Ａまたは−ＮＨＲ’であり、
Ｒ３は、−ＯＲ３Ａまたは−ＮＨＲ”であり、
Ｒ２ＡおよびＲ３Ａは、それぞれ別々に−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３、および−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）ＣＨ３からなる群から選択される酵素不安定基であり、
Ｒ’およびＲ”は、それぞれ別々に直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、またはＣ６〜１０アリール基であるか、あるいは、−ＮＨＲ’および−ＮＨＲ”は、それぞれ別々にアラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、およびバリンからなる群から選択されるアミノ酸残基を表す。）
【請求項８】
以下の構造：
【化７】
0005584865.tif 000097
を有する、請求項１または２に記載の化合物。
（式中、Ｒ２Ａは、水素原子、アルカリ金属カチオン、またはＣ１〜８アルキルであり、
Ｒｉは、水素原子またはアミノ酸側鎖であり、
Ｒｉｉは、水素原子、アルカリ金属カチオン、またはＣ１〜８アルキルである。）
【請求項９】
Ｒ１は水素である、請求項３乃至８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ１はメチルまたはエチルであり、Ｒ１を有する炭素原子はＲ立体配置を有する、請求項３乃至８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｒ１はヒドロキシメチルまたはヒドロキシエチルであり、Ｒ１を有する炭素原子はＳ立体配置を有する、請求項３乃至８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ１は−ＣＨ２Ｆであり、Ｒ１を有する炭素原子はＲ立体配置またはＳ立体配置を有する、請求項３乃至８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
以下の構造：
【化８】
0005584865.tif 000098
のうちの一つを有する、請求項１乃至１２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
請求項１乃至１３のいずれか一項に記載の化合物を含有する医薬組成物。
【請求項１５】
薬剤として使用するための請求項１乃至１３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１６】
患者におけるウイルス感染を治療および／または予防する薬剤の調製のための請求項１乃至１３のいずれか一項に記載の化合物の使用。
【請求項１７】
前記ウイルス感染は、ＤＮＡウイルスまたはＲＮＡウイルスによる感染に相当する、請求項１６に記載の使用。
【請求項１８】
前記ＤＮＡウイルスは、ヘパドナウイルス科、ヘルペス・ウイルス科、およびポックスウイルス科のウイルスからなる群から選択される、請求項１７に記載の使用。
【請求項１９】
前記ＲＮＡウイルスは、ブンヤウイルス、フラビウイルス科、オルソミクソウイルス科、パラミクソウイルス科、ピコルナウイルス科、レトロウイルス科、およびトガウイルス科のウイルスからなる群から選択される、請求項１７に記載の使用。
【請求項２０】
請求項１乃至１３のいずれか一項に記載の化合物の調製のための式（ＩＩ）のＨ−ホスフィネート前駆中間体の使用。
【化９】
0005584865.tif 000099
（式中、Ｂは、９−アデニンであり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびＣ１〜６ハロアルキル基からなる群から選択される。）
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
優先権
本出願は、２００６年１１月８日に出願された仏国特許出願第ＦＲ０６／０９７４９号に対する優先権を主張し、その全内容を本願明細書に援用する。
【０００２】
発明の属する技術分野
本発明は、新規なヌクレオチド類似体、共通な中間体化合物からのそれらの合成方法、および抗ウイルス薬前駆体としてのそれらの使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
ウイルスは、多くの生命を脅かすヒト疾患の病因である。特に重要なものは、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）およびＢ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）である。
【０００４】
ヒト免疫系をひどく悪化させてほぼ例外なく死に至る疾患として、１９８１年に後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）が確認された。１９８３年には、ＡＩＤＳの病因がヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）であることが突き止められた。国際連合エイズ合同計画によれば、２００６年末の時点で４０００万人がＨＩＶ／ＡＩＤＳとともに生きていると推定される。その同じ年の間にＡＩＤＳは推定３００万人の死をもたらし、４００万を超える人が２００６年にＡＩＤＳに感染したと推定されている。
【０００５】
深刻なヒトの健康問題を引き起こすもう１つのウイルスは、Ｂ型肝炎ウイルス（以下「ＨＢＶ」と呼ぶ）である。Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）は、肝硬変、癌、臓器不全および最終的に死を含む、重大な肝障害の原因となる慢性疾患を引き起こすウイルスである。ＨＢＶは、ヒト癌の原因としてタバコに次いで第２位である。ＨＢＶが癌を誘発する機構は知られていない。ＨＢＶは腫瘍発生の直接的なきっかけとなり得るか、あるいは慢性炎症、肝硬変、および感染に関連する細胞再生を介して腫瘍発生の間接的なきっかけとなり得ると仮定されている。宿主がその感染に気付かない２カ月から６カ月の潜伏期間の後に、ＨＢＶ感染は急性肝炎および肝障害に至る場合があり、これは腹痛、黄疸、およびある種の酵素の血液レベルの上昇を引き起こす。ＨＢＶは、急速に進行して肝臓の大部分を破壊するしばしば致命的な疾病の形態である劇症肝炎を引き起こすことがある。患者は通常、急性肝炎から回復する。しかし、一部の患者では、高レベルのウイルス抗原が、長期間または無期限に血液中にとどまり、慢性感染症を引き起こす。慢性感染症は、慢性の持続性肝炎に至り得る。慢性の持続性ＨＢＶに感染した患者は、開発途上国に最もよくみられる。１９９１年代半ばまでに、アジアだけで約２億２５００万人のＨＢＶの慢性保菌者が存在した。世界中で約３億人がＨＢＶに感染していると推定される。ＨＢＶの疫学は、後天性免疫不全症候群と極めて似ており、これはＨＢＶ感染がＡＩＤＳまたはＡＩＤＳ関連症候群の患者によくみられる理由を説明する。しかし、ＨＢＶはＨＩＶに比べてより接触感染性である。予防ワクチンの使用は、新たなＨＢＶ感染の発生率を減少させたが、有効な治療薬に対する必要性は引き続き存在する。ヌクレオシド類似体の様々な誘導体が抗ウイルス活性を示すことが見出されている。とりわけ、アシクロビル（ゾビラックス（Zovirax））およびそのプロドラッグのバラシクロビル（バルトレックス（Valtrex））は、ＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２により引き起こされた感染に対して承認された薬剤である。ヘルペスウイルス感染のアシクロビル治療（Acyclovir Therapy for Herpesvirus Infections）（ベーカー（Baker）編）)、エム．デッカー（M. Dekker）、ニューヨーク（１９９０）。ＨＣＭＶに対しては４つの薬剤、ガンシクロビル（サイトベン（Cytovene））、シドフォビル（ビスタイド（Vistide））、アンチセンスオリゴヌクレオチドフォミビルセン（ビトラベン（Vitravene））およびフォスカルネット（フォスカビル（Foscavir））が現在利用可能である。しかしながら、ガンシクロビルのみが経口で有効であるものの、大量を必要とし、骨髄抑制などの潜在的に重篤な副作用を生じる。サイトメガロウイルス感染のガンシクロビル治療（Ganciclovir Therapy for Cytomegalovirus Infection）（スペクター  エス．エス（Spector, S. S.）編）、エム．デッカー（M. Dekker）、ニューヨーク（１９９１）。新規な抗ウイルス薬の開発だけでなく、これらの薬剤の類似体の設計、合成および生物学的調査においても、相当な努力が傾けられた。ラルソン  エイ．（Larsson, A.）ら、抗菌薬および化学療法（Antimicrob. Agents & Chemother.）、３０：５９８−６０５（１９８６）。アシュトン  ダブリュ．ティ．（Ashton, W. T.）ら、J. Med. Chem. ３１：２３０４−２３１５（１９８８）。シドフォビルおよびフォミビルセンは、ＡＩＤＳ患者の網膜炎に対する局所適用についてのみ承認されており、フォスカルネットは静脈経路でのみ使用され、特徴的な毒性をもたらす。
【０００６】
ＡＩＤＳに対する現在の薬剤には、ＡＺＴ（ジドブジン、レトロビル（Retrovir））、ｄｄＩ（ジダノシン、ヴァイデックス（Videx））、ｄｄＣ（ザルシタビン、ハイビッド（Hivid））、およびｄ４Ｔ（スタブジン、ゼリット（Zerit））が含まれる。デ  クレルク  イー．（De Clercq, E.）、J. Med. Chem. ３８：２４９１−２５１７（１９９５）。アデナレンおよびシタレンなどのアレンヌクレオシド類似体は、不飽和アルキル基を含むＨＩＶ治療薬の例である。米国特許第４，９３５，４２７号。ゼムリカ  ジェイ．（Zemlicka, J.）、核酸塩基由来のアレノール類（Allenols Derived from Nucleic Acid Bases）−−新種の抗ＨＩＶ薬（a New Class of Anti-HIV Agents）：抗腫瘍薬および抗ウイルス薬としてのヌクレオシド類およびヌクレオチド類における化学及び生物活性（Chemistry and Biological Activity in Nucleosides and Nucleotides as Antitumor and Antiviral Agents）（チュー  シー．ケイ．（Chu, C. K.）；ベーカー  ディ．シー．（Baker, D. C.）編）、Plenum Press、ニューヨーク、７３−１００（１９９３）。ＨＢＶに対して、アルファインターフェロンおよび３ＴＣ（ラミブジン；エピビル（Epivir））は、慢性ＨＢＶ感染に罹った人の治療用に承認された２つの薬剤である。残念ながら、患者の約４０％しかこれらの薬剤に応答せず、また耐性はますます大きな問題である。
【０００７】
ギリード（ＧＩＬＥＡＤ）は現在、シドフォビル、すなわちサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）に対するＨＰＭＣ（ＶＩＳＴＩＤＥ（登録商標））、およびテノフォビル、すなわちプロドラッグ形態の（Ｒ）−ＰＭＰＡ（ＶＩＲＥＡＤ（登録商標））という２種類の非環式ヌクレオチドホスホネート抗ウイルス分子を市販している。付け加えると、テノフォビルはＨＩＶ−１に対する単剤療法について２００１年１０月にＦＤＡの承認を受け、２００２年２月に欧州で「ＡＭＭ」（医薬品販売承認）を得た。同社はまた、ＨＢＶの治療のためにアデフォビル、すなわちＰＭＥＡ（ＨＥＰＳＥＲＡ（登録商標））も開発した。
【０００８】
これらの化合物は、耐性の問題にも直面している。例えば、低頻度で直接選択されるテノフォビルに対する唯一の突然変異は、Ｋ６５Ｒ突然変異であることが認識されている（ワインベルグ  エム．エイ．（Wainberg, M.A.）、ミラー  エム．ディ．（Miller, M.D.）、クワン  ワイ．（Quan, Y.）、サロモン  エイチ（Salomon, H.）、ムラト  エイ．エス．（Mulato, A.S.）、ラミー  ピー．ディ．（Lamy, P.D.）、マルゴット  エヌ．エイ．（Margot, N.A.）、アントン  ケイ．イー．（Anton, K.E.）、シェリントン  ジェイ．エム．（Cherrington, J.M.）、ＰＭＰＡに対する感受性の減少したＨＩＶ−１のインビトロ選択および特性化（In vitro selection and characterization of HIV-1 with reduced susceptibility to PMPA）、抗ウイルス治療（Antiviral Therapy）  １９９９、４、８７）。しかし、（優先的にＭ４１ＬおよびＬ２１０Ｗでの）３つを超える突然変異が存在する場合、チミジン類似体耐性突然変異（ＴＡＭ）は、テノフォビルの有効性を顕著に減少させることが示されており、ＴＡＭがテノフォビルを切断することを示唆することが示されている。ＴＡＭによるＰＭＰＡの切断は、この化合物に関連するＨＩＶ−１の現在の耐性において主要な点である（ミラー  エム．（Miller, M.）、Ｋ６５Ｒ、ＴＡＭＳ及びテノフォビル（K65R、TAMS and tenofovir）、AIDS Rev  ２００４、６、２２）。
【０００９】
しかし、定量的収量でのこのような分子の合成するのは難しいことが分かる。したがって、今日用いられるレトロウイルス薬に対するウイルス耐性に関する問題がますます大きくなっていることを考慮すると、有効な新規な抗ウイルス薬を迅速に開発する必要性が依然として存在する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】米国特許第４，９３５，４２７号
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Acyclovir Therapy for Herpesvirus Infections (Baker, Ed.), M. Dekker, New York (1990)
【非特許文献２】Ganciclovir Therapy for Cytomegalovirus Infection (Spector, S. S., Ed.), M. Dekker, New York (1991)
【非特許文献３】Larsson, A., et al., Antimicrob. Agents & Chemother. 30:598-605 (1986)
【非特許文献４】Ashton, W. T., et al., J. Med. Chem. 31:2304-2315 (1988)
【非特許文献５】De Clercq, E., J. Med. Chem. 38:2491-2517 (1995)
【非特許文献６】Zemlicka, J., Allenols Derived from Nucleic Acid Bases--a New Class of Anti-HIV Agents: Chemistry and Biological Activity in Nucleosides and Nucleotides as Antitumor and Antiviral Agents (Chu, C. K.; Baker, D. C., Eds.), Plenum Press, New York, pp. 73-100 (1993)
【非特許文献７】Wainberg, M.A., Miller, M.D., Quan, Y., Salomon, H., Mulato, A.S., Lamy, P.D., Margot, N.A., Anton, K.E., Cherrington, J.M. In vitro selection and characterization of HIV-1 with reduced susceptibility to PMPA. Antiviral Therapy 1999, 4, 87
【非特許文献８】Miller, M. K65R, TAMS and tenofovir. AIDS Rev 2004, 6, 22
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】２１塩基長プライマーからの野生型ＲＴによる２２塩基長プライマーの伸長原理の図。４種類の伸長２２塩基長基質の生成のためのＰＭＥＡｐｐもしくはＰＭＰＡｐｐまたはＳ−ＰＭＥＡｐｐ１２もしくはＳ−ＰＭＰＡｐｐ１３の取込み。形成された生成物のＨＰＬＣによる精製。
【図２】反応生成物の可視化後の電気泳動ゲル、切断生成物の百分率の評価の図。ＷＴ：野生型ＲＴ、Ｒｅｓ：耐性ＲＴ（Ｄ６７Ｎ、Ｋ７０Ｒ、Ｔ２１５Ｆ、Ｋ２１９Ｑ）。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明は、特に、有効な新規な抗ウイルス化合物を提供することによってこの必要性に対処する。
ウイルスのポリメラーゼ酵素は、ウイルス複製過程に必須である。ウイルスによる標的細胞の感染後に、このポリメラーゼはウイルスゲノムの合成およびウイルスの複製を触媒し、持続感染をもたらす。結果として、この酵素は、ウイルス複製におけるその重要な役割のために、抗ウイルス治療にとって特権的な標的となる。
【００１４】
ヌクレオシド阻害剤は、その臨床上の有効性が証明された抗レトロウイルス薬の第１のクラスである。そのようなものとして、それらは現下の抗レトロウイルス治療において重要な役割を果たす。このクラスの医薬は、現在治療的に用いられるものより良好に機能する類似体、すなわち、より強力な抗ウイルス活性および／または薬理学的プロファイルを示す類似体を開発することを目的とする非常に活発な治療研究の対象である。
【００１５】
それらの作用機作に関して、これらのヌクレオシド類似体は、感染細胞中に侵入した後、細胞キナーゼにより５’−三リン酸にリン酸化される。これらのヌクレオシド類似体は、一般に細胞ポリメラーゼにとって不良な基質であるが、一方、逆転写酵素（ＲＴ）の作用を介在して成長ウイルスＤＮＡ鎖中に取り込まれる。これらの類似体は３’−ＯＨ基を有していないので、それらの取込みは、抗ウイルス効果の原因となるＤＮＡ合成停止を生じる。
【００１６】
このリン酸と等配電子かつ等電子である、α位置でリンに単結合した酸素原子の１個がＣＨ２基により置換されているホスホネートヌクレオチド類似体は、広範に研究されており、特にエイ．ホリー（A. HOLY）の研究は、この非環式ホスホネート類似体の合成分野で先駆けとなるものである。
【００１７】
このホスホネートの主な重要性は、それらが、ヌクレオシド類似体の有効性においてしばしば制限的である初期リン酸化段階を迂回することを可能にさせるモノホスホネート化合物であるという事実にある。それらは良好な化学的および酵素的安定性ならびに生体液および細胞における長寿命を示す。それらの細胞浸透の様式ならびにそれらの細胞内リン酸化が報告されている（ロビンス（ROBBINS）ら、Antimicrob. Agents Chemother., ４２（３）巻、６１２−６１７頁、１９９８年）。
【００１８】
残念ながら、耐性ウイルスの出現とともに、ヌクレオシド類似体を用いる治療は、時間経過とともにそれらの有効性を急速に失う。このウイルス耐性は、逆転写酵素のｐｏｌ遺伝子コーディングにおける突然変異の出現による。したがって、各ヌクレオチド類似体は、ＲＴ耐性機構の起点である突然変異を選ぶ。数種の抗ウイルス分子に耐性なＨＩＶ−１株が多いことは、現状を非常に厄介にさせる。このようなウイルス株は早くも患者の初回感染に獲得される恐れがあり、次いで、患者は自身が治療上の難局にあることに気付くことがますます頻繁になってきている。
【００１９】
したがって、いくつかの薬剤を組み合わせる抗ウイルス療法を最適化する努力の中で、より強力かつとりわけ耐性株に対してより活性である新規な抗ウイルス薬の開発がますます重要になっている。
【００２０】
本発明の化合物には、上記に一般的に述べられるものおよび本明細書に特に記載されるものが含まれ、本明細書に開示される様々なクラス、亜族および種によって一部は説明される。さらに、本発明は、本発明化合物の薬学的に許容される誘導体、およびこれらの化合物、それらの医薬組成物、または一種以上のさらなる治療薬と組み合わせたこれらのいずれかを使用して対象を治療する方法を提供する。
【００２１】
１）本発明の化合物の一般説明
本発明の第１の目的において、式（Ｉ）：
【００２２】
【化１】
0005584865.tif 000002
のプリンまたはピリミジンホスホネート誘導体、またはその薬学的に許容される塩が提供され、
式中、Ｂは、アデニン、キサンチン、ヒポキサンチン、グアニン、８−ブロモグアニン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒドラジノグアニン、８−ヒドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグアニン、２−アミノプリン、２，６−ジアミノプリン、チミン、シトシン、ウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、５−エチルウラシル、５−プロピルウラシル、５−ビニルウラシル、および５−ブロモビニルウラシルからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびハロアルキル基からなる群から選択され、
Ｒ２は、フッ素原子、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ２Ａ、プロドラッグ部分、−ＢＨ３、直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、またはヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ’ＨＮからなる群から選択され、Ｒ２Ａは、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、またはアリール基、あるいはアミノ酸残基であり、
Ｒ３は、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ３Ａ、プロドラッグ部分、およびアミン基Ｒ”ＨＮからなる群から選択され、Ｒ３Ａは、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ”は、直鎖または分枝鎖のアルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル、またはアリール基、あるいはアミノ酸残基であり、
Ｘは、酸素原子、セレニウム原子、および硫黄原子からなる群から選択される。
【００２３】
特定の実施形態において、式（Ｉ）の化合物は以下に定義されるとおりである。
Ｂは、アデニン、キサンチン、ヒポキサンチン、グアニン、８−ブロモグアニン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒドラジノグアニン、８−ヒドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグアニン、２−アミノプリン、２，６−ジアミノプリン、チミン、シトシン、ウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、５−エチルウラシル、５−プロピルウラシル、５−ビニルウラシル、および５−ブロモビニルウラシルからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびＣ１〜６ハロアルキル基からなる群から選択され、
Ｒ２は、フッ素原子、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ２Ａ、プロドラッグ部分、−ＢＨ３、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、またはＣ２〜８ヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ’ＨＮからなる群から選択され、Ｒ２Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基であり、
Ｒ３は、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ３Ａ、プロドラッグ部分、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、またはＣ２〜８ヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ”ＨＮからなる群から選択され、Ｒ３Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ”は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基であり、
Ｘは、酸素原子、セレニウム原子、および硫黄原子からなる群から選択される。
【００２４】
特定の実施形態において、本発明の化合物は次の通り定義される。
【００２５】
【化２】
0005584865.tif 000003
またはその薬学的に許容される塩であり、
式中、Ｒ３は、上記に定義された通りであり、
Ｂは、アデニン、キサンチン、ヒポキサンチン、グアニン、８−ブロモグアニン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒドラジノグアニン、８−ヒドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグアニン、２−アミノプリン、２，６−ジアミノプリン、チミン、シトシン、ウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、５−エチルウラシル、５−プロピルウラシル、５−ビニルウラシル、および５−ブロモビニルウラシルからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびＣ１〜６ハロアルキル基からなる群から選択され；
（ａ）Ｘは、セレニウム原子および硫黄原子からなる群から選択され、Ｒ２は、フッ素原子、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ２Ａ、プロドラッグ部分、−ＢＨ３、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、またはＣ２〜８ヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ’ＨＮからなる群から選択され、ここで、Ｒ２Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基であるか、あるいは、
（ｂ）Ｘは酸素原子を表し、Ｒ２はフッ素原子およびＢＨ３基からなる群から選択される。
【００２６】
特定の実施形態において、ホスホネート誘導体は以下の構造を有する。
【００２７】
【化３】
0005584865.tif 000004
またはその薬学的に許容される塩であり、
式中、Ｂは、アデニン、キサンチン、ヒポキサンチン、グアニン、８−ブロモグアニン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒドラジノグアニン、８−ヒドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグアニン、２−アミノプリン、２，６−ジアミノプリン、チミン、シトシン、ウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、５−エチルウラシル、５−プロピルウラシル、５−ビニルウラシル、および５−ブロモビニルウラシルからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびＣ１〜６ハロアルキル基からなる群から選択され、
Ｒ２は、フッ素原子、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ２Ａ、プロドラッグ部分、−ＢＨ３、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、またはＣ２〜８ヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ’ＨＮからなる群から選択され、Ｒ２Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基であり、
Ｘは、酸素原子、セレニウム原子および硫黄原子からなる群から選択される。
【００２８】
特定の実施形態において、ホスホネート誘導体は以下の構造を有する。
【００２９】
【化４】
0005584865.tif 000005
またはその薬学的に許容される塩であり、
式中、Ｂは、アデニン、キサンチン、ヒポキサンチン、グアニン、８−ブロモグアニン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒドラジノグアニン、８−ヒドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグアニン、２−アミノグアニン、２，６−ジアミノプリン、チミン、シトシン、ウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、５−エチルウラシル、５−プロピルウラシル、５−ビニルウラシル、および５−ブロモビニルウラシルからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびＣ１〜６ハロアルキル基からなる群から選択され、
（ａ）Ｘは、セレニウム原子および硫黄原子からなる群から選択され、Ｒ２は、フッ素原子、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ２Ａ、プロドラッグ部分、−ＢＨ３、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、またはＣ２〜８ヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ’ＨＮからなる群から選択され、Ｒ２Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基であるか、あるいは、
（ｂ）Ｘは酸素原子を表し、Ｒ２はフッ素原子およびＢＨ３基からなる群から選択される。
【００３０】
特定の実施形態において、ホスホネート誘導体は以下の構造を有する。
【００３１】
【化５】
0005584865.tif 000006
またはその薬学的に許容される塩であり、
式中、Ｂは、アデニン、キサンチン、ヒポキサンチン、グアニン、８−ブロモグアニン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒドラジノグアニン、８−ヒドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグアニン、２−アミノグアニン、２，６−ジアミノプリン、チミン、シトシン、ウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、５−エチルウラシル、５−プロピルウラシル、５−ビニルウラシル、および５−ブロモビニルウラシルからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、およびヒドロキシエチル基からなる群から選択され、
（ａ）Ｘは、セレニウム原子および硫黄原子からなる群から選択され、Ｒ２は、フッ素原子、ヒドロキシル基、−ＢＨ３、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル基、およびアミン基Ｒ’ＨＮからなる群から選択され、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル基であるか、あるいは、
（ｂ）Ｘは、酸素原子を表し、Ｒ２は、フッ素原子、ＢＨ３基、および直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル基からなる群から選択される。
【００３２】
特定の実施形態において、ホスホネート誘導体は以下の構造を有する。
【００３３】
【化６】
0005584865.tif 000007
またはその薬学的に許容される塩であり、
式中、Ｂは、アデニン、キサンチン、ヒポキサンチン、グアニン、８−ブロモグアニン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒドラジノグアニン、８−ヒドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグアニン、２−アミノプリン、２，６−ジアミノプリン、チミン、シトシン、ウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、５−エチルウラシル、５−プロピルウラシル、５−ビニルウラシル、および５−ブロモビニルウラシルからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、およびヒドロキシエチル基からなる群から選択され、
Ｒ２は、フッ素原子、ヒドロキシル基、−ＢＨ３、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、およびアミン基Ｒ’ＨＮからなる群から選択され、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル基であり、
Ｘは、酸素原子、セレニウム原子、および硫黄原子からなる群から選択される。
【００３４】
特定の実施形態において、本発明は、特に関心のある特定のクラスの化合物を定義する。例えば、特に対象となる１つのクラスの化合物には、式（ＩＢ）の化合物：
【００３５】
【化７】
0005584865.tif 000008
またはその薬学的に許容される塩が含まれ、
式中、Ｂは上記に定義されたとおりであり、
Ｘは、ＳまたはＳｅであり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびＣ１〜６ハロアルキル基からなる群から選択され、
Ｒ２は、フッ素原子、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ２Ａ、プロドラッグ部分、−ＢＨ３、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、またはＣ２〜８ヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ’ＨＮからなる群から選択され、Ｒ２Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基であり、
Ｒ３は、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ３Ａ、プロドラッグ部分、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、またはＣ２〜８ヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ”ＨＮからなる群から選択され、Ｒ３Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ”は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基である。
【００３６】
特に対象となるサブクラスの化合物には、ＸがＳである上記式（ＩＢ）の化合物が含まれる。
特に対象となる別のクラスの化合物には、式（ＩＣ）：
【００３７】
【化８】
0005584865.tif 000009
の化合物またはその薬学的に許容される塩が含まれ、
式中、Ｂは上記に定義されたとおりであり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびＣ１〜６ハロアルキル基からなる群から選択され、
Ｒ３は、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ３Ａ、プロドラッグ部分、およびアミン基Ｒ”ＨＮからなる群から選択され、Ｒ３Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ”は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基である。
【００３８】
特に対象となる別のクラスの化合物には、式（ＩＤ）：
【００３９】
【化９】
0005584865.tif 000010
の化合物またはその薬学的に許容される塩が含まれ、
式中、Ｂは上記に定義されたとおりであり、
Ｘは、Ｓ、Ｓｅ、またはＯであり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびＣ１〜６ハロアルキル基からなる群から選択され、
Ｒ３は、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ３Ａ、プロドラッグ部分、およびアミン基Ｒ”ＨＮからなる群から選択され、Ｒ３Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ”は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基である。
【００４０】
特に対象となる別のクラスの化合物には、式（ＩＥ）：
【００４１】
【化１０】
0005584865.tif 000011
の化合物またはその薬学的に許容される塩が含まれ、
式中、Ｂは上記に定義されたとおりであり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびＣ１〜６ハロアルキル基からなる群から選択され、
Ｒ２は、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ２Ａ、プロドラッグ部分、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、またはＣ２〜８ヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ’ＨＮからなる群から選択され、Ｒ２Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基であり、
Ｒ３は、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ３Ａ、プロドラッグ部分、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、またはＣ２〜８ヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ”ＨＮからなる群から選択され、Ｒ３Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ”は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基である。
【００４２】
特に対象となる別のクラスの化合物には、式（ＩＦ）：
【００４３】
【化１１】
0005584865.tif 000012
の化合物またはその薬学的に許容される塩が含まれ、
式中、Ｂは上記に定義されたとおりであり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびＣ１〜６ハロアルキル基からなる群から選択され；
Ｒ２は、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ２Ａ、プロドラッグ部分、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、またはＣ２〜８ヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ’ＨＮからなる群から選択され、Ｒ２Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基であり、
Ｒ３は、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ３Ａ、プロドラッグ部分、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、またはＣ２〜８ヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ”ＨＮからなる群から選択され、Ｒ３Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ”は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基である。
【００４４】
特に対象となる別のクラスの化合物には、式（ＩＧ）：
【００４５】
【化１２】
0005584865.tif 000013
の化合物またはその薬学的に許容される塩が含まれ、
式中、Ｘは、ＳまたはＳｅであり、
Ｂは上記に定義されたとおりであり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびＣ１〜６ハロアルキル基からなる群から選択され、
Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基であり、
Ｒ３は、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ３Ａ、プロドラッグ部分、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、またはＣ２〜８ヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ”ＨＮからなる群から選択され、Ｒ３Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ”は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基である。
【００４６】
特定の実施形態において、上記式（ＩＧ）の化合物について、Ｒ３は、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、および−ＯＲ３Ａからなる群から選択され、ここで、Ｒ３Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表す。
【００４７】
特定の実施形態において、上記式（Ｉ）および式（ＩＡ）から式（ＩＧ）の化合物について、Ｒ１を有する炭素原子はＲ立体配置：
【００４８】
【化１３】
0005584865.tif 000014
を有する。
【００４９】
特定の実施形態において、上記式（Ｉ）および式（ＩＡ）から式（ＩＧ）の化合物について、Ｒ１を有する炭素原子はＳ立体配置：
【００５０】
【化１４】
0005584865.tif 000015
を有する。
【００５１】
本明細書で用いられる「プロドラッグ」という用語は、活性化合物の生理学的活性を示さないか、または必ずしも示さないが、プロドラッグを投与すると、活性化合物を放出するようにインビボで加水分解などの酵素的切断を受け得る活性化合物の誘導体を示すことが意図される。「プロドラッグ部分」は、酵素が作用すると切断され、活性化合物を与える遊離基を指す。例えば、プロドラッグ部分は、プロドラッグに改善された溶解度特性を与えて、それにより、溶液の形態での非経口投与に対して、または改善された生体利用率を得るための経口投与に対してより好適にさせる、主として親水性特性を有する側鎖であってもよい。特定の例示的な実施形態において、プロドラッグ部分は、化合物のモノホスホリル基、ビホスホリル基、またはトリホスホリル基のリン原子に結合している。ビホスホリル基またはトリホスホリル基の場合、プロドラッグ部分は、α−リン原子、β−リン原子、またはγ−リン原子に結合していてもよい。特定の例示的な実施形態において、プロドラッグ部分は、構造−ＯＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ（ＣＨ３）２（「ＰＯＣ」基）を有するイソプロピルオキシメチルカルボニル遊離基、構造−ＯＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３（ピバロイルオキシメチルまたは「ＰＯＭ」基）を有する部分、構造−ＯＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３（ｔｅｒｔ−ブチル−Ｓ−アシル−２−チオエチルまたは「ｔＢｕ−ＳＡＴＥ」基）を有する部分、構造−ＯＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）ＣＨ３（メチル−Ｓ−アシル−２−チオエチルまたは「Ｍｅ−ＳＡＴＥ」基）を有する部分、または構造−ＮＨＲ’（式中、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、またはＣ６〜１０アリール基であるか、あるいは−ＮＨＲ’はアミノ酸残基を表す）を有する部分である。
【００５２】
酵素不安定基に関するより多くの情報について、読者は以下の参考文献を参照することができる。
１．  Calogeropoulou T. et al. Strategies in the design of prodrugs of Anti-HIV agents. Current Topics in Medicinal Chemistry. 2003, 3, 1467−1495.
２．  Starrett J. E. et al. Synthesis and in vitro evaluation of a phosphonate prodrug: bis(pivaloyloxymethyl) 9-(2-phosphonylmethoxyethyl)adenine. Antiviral Research 19, 267-273, 1992.
３．  Benzaria S. et al. Synthesis, in vitro antiviral evaluation and stability studies of Bis(S-acyl-2-thioethyl) ester derivatives of 9-(2-(phosphonomethoxy)ethyl)adenine (PMEA) as potential PMEA prodrugs with improved oral bioavailability. J. med. Chem. 1996, 39, 4958-4965．
４．  Arimilli MN. et al. Synthesis, in vitro biological evaluation and oral bioavailability of 9-(2-(phosphonomethoxy)propyl)adenine (PMPA) prodrugs. Antiviral Chemistry and Chemotherapy. 1997, 8(6), 557-564.
５．  Meier C., Synlett, 233-242, 1998.
６．  Perigaud C. et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry letters, 3(12), 2521-2526, 1993．
７．  Wagner C. R. et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 1995, 5, 1819-1824.
本発明は、本明細書に記載される化合物の任意のプロドラッグ形態を包含する。化合物ホスホリル基から生じる本発明の化合物の特定の例示的なプロドラッグ形態は、本明細書において詳細に述べられるが、本発明ではこれらのプロドラッグ部分に限定されることは意図されず、むしろ、様々なさらなるプロドラッグ部分は当業者によって容易に確認され得ることが理解されるであろう。
【００５３】
有利には、Ｂは、アデニン、ウラシル、チミン、グアニン、およびシトシンからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、好ましくは、Ｂはアデニンである。
したがって、特定の例示的な実施形態において、対象となる化合物は以下の構造：
【００５４】
【化１５】
0005584865.tif 000016
の一つを有し、式中、Ｘ、Ｒ’、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、上記の化合物クラス（ＩＢ）から（ＩＧ）について定義されたとおりである。
【００５５】
特定の実施形態において、上記式（ＩＢ１）から（ＩＧ１）の化合物について、Ｒ１を有する炭素原子はＲ立体配置：
【００５６】
【化１６】
0005584865.tif 000017
を有する。
【００５７】
特定の実施形態において、上記式（ＩＢ１）から（ＩＧ１）の化合物について、Ｒ１を有する炭素原子はＳ立体配置：
【００５８】
【化１７】
0005584865.tif 000018
を有する。
【００５９】
有利には、式（Ｉ）、（ＩＡ）〜（ＩＧ）および（ＩＢ１）〜（ＩＧ１）の化合物について、Ｒ１は、水素原子、メチル基、ヒドロキシメチルおよびＣ１〜６ハロアルキル基からなる群から選択される。特定の実施形態において、Ｒ１は、水素原子、メチル基、ヒドロキシメチルおよびＣ１〜４ハロアルキル基からなる群から選択される。特定の実施形態において、Ｒ１は、水素原子、メチル基、ヒドロキシメチルおよびハロメチル基からなる群から選択される。特定の実施形態において、Ｒ１は、水素原子、メチル基、ヒドロキシメチルおよびフルオロメチル基からなる群から選択される。有利には、Ｒ１は、水素原子、メチル基、およびヒドロキシメチル基からなる群から選択される。
【００６０】
有利には、式（Ｉ）、（ＩＡ）〜（ＩＧ）および（ＩＢ１）〜（ＩＧ１）の化合物について、Ｒ２は、フッ素原子、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ２Ａ、プロドラッグ部分、−ＢＨ３、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、またはＣ２〜８ヘテロアルキニル基、およびアミン基Ｒ’ＨＮからなる群から選択され、Ｒ２Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基である。有利には、Ｒ２は、フッ素原子、ヒドロキシル基、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル基、およびアミン基Ｒ’ＨＮからなる群から選択され、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル基である。
【００６１】
有利には、本明細書に記載される化合物について、Ｘは、硫黄またはセレニウム原子である。特定の好ましい実施形態において、Ｘは硫黄原子である。
好ましい実施形態によれば、Ｘは硫黄原子であり、Ｒ２はヒドロキシル基である。
【００６２】
別の好ましい実施形態によれば、Ｘは硫黄原子であり、Ｒ２は、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ２Ａ、プロドラッグ部分、またはアミン基Ｒ’ＨＮであり、Ｒ２Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基である。
【００６３】
別の好ましい実施形態によれば、Ｘは酸素原子であり、Ｒ２は、フッ素原子およびＢＨ３基からなる群から選択される。
特に対象となる他の例示的な実施形態は、以下のサブグループＩからＶＩの化合物によって説明される。
【００６４】
Ｉ．  以下の構造を有する化合物（およびその薬学的に許容される誘導体）
【００６５】
【化１８】
0005584865.tif 000019
式中、Ｂは、アデニン、キサンチン、ヒポキサンチン、グアニン、８−ブロモグアニン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒドラジノグアニン、８−ヒドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグアニン、２−アミノグアニン、２，６−ジアミノプリン、チミン、シトシン、ウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、５−エチルウラシル、５−プロピルウラシル、５−ビニルウラシル、および５−ブロモビニルウラシルからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびハロメチル基からなる群から選択され、
Ｒ２ＡおよびＲ３Ａは、それぞれ別々に水素原子またはアルカリ金属カチオンである。
【００６６】
特定の実施形態において、Ｂはアデニンであり、化合物は構造：
【００６７】
【化１９】
0005584865.tif 000020
を有する。
【００６８】
特定の実施形態において、Ｒ１は、水素、メチル、ヒドロキシメチル、または−ＣＨ２Ｆである。特定の実施形態において、Ｒ１はメチルであり、Ｒ１を有する炭素はＲ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ１はヒドロキシメチルであり、Ｒ１を有する炭素はＳ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ１は−ＣＨ２Ｆであり、Ｒ１を有する炭素はＲ立体配置またはＳ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ２ＡおよびＲ３Ａはそれぞれ、水素原子である。特定の他の例示的な実施形態において、Ｒ２ＡおよびＲ３Ａはそれぞれ、アルカリ金属カチオン、例えばＮａ＋である。
【００６９】
ＩＩ．  以下の構造を有する化合物（およびその薬学的に許容される誘導体）
【００７０】
【化２０】
0005584865.tif 000021
式中、Ｂは、アデニン、キサンチン、ヒポキサンチン、グアニン、８−ブロモグアニン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒドラジノグアニン、８−ヒドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグアニン、２−アミノグアニン、２，６−ジアミノプリン、チミン、シトシン、ウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、５−エチルウラシル、５−プロピルウラシル、５−ビニルウラシル、および５−ブロモビニルウラシルからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびハロメチル基からなる群から選択され、
Ｒ２Ａ、Ｒ２ＢおよびＲ３Ｂは、それぞれ別々に水素原子またはアルカリ金属カチオンである。
【００７１】
特定の実施形態において、Ｂはアデニンであり、化合物は構造：
【００７２】
【化２１】
0005584865.tif 000022
を有する。
【００７３】
特定の実施形態において、Ｒ１は、水素、メチル、ヒドロキシメチル、または−ＣＨ２Ｆである。特定の実施形態において、Ｒ１はメチルであり、Ｒ１を有する炭素はＲ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ１はヒドロキシメチルであり、Ｒ１を有する炭素はＳ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ１は−ＣＨ２Ｆであり、Ｒ１を有する炭素はＲ立体配置またはＳ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ２Ａ、Ｒ２ＢおよびＲ３Ｂはそれぞれ、水素原子である。特定の他の例示的な実施形態において、Ｒ２Ａ、Ｒ２ＢおよびＲ３Ｂはそれぞれ、アルカリ金属カチオン、例えばＮａ＋である。
【００７４】
ＩＩＩ．  以下の構造を有する化合物（およびその薬学的に許容される誘導体）
【００７５】
【化２２】
0005584865.tif 000023
式中、Ｂは、アデニン、キサンチン、ヒポキサンチン、グアニン、８−ブロモグアニン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒドラジノグアニン、８−ヒドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグアニン、２−アミノグアニン、２，６−ジアミノプリン、チミン、シトシン、ウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、５−エチルウラシル、５−プロピルウラシル、５−ビニルウラシル、および５−ブロモビニルウラシルからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびハロメチル基からなる群から選択され、
Ｒ２Ａ、Ｒ２Ｂ、Ｒ２ＣおよびＲ３Ｃは、それぞれ別々に水素原子またはアルカリ金属カチオンである。
【００７６】
特定の実施形態において、Ｂはアデニンであり、化合物は構造：
【００７７】
【化２３】
0005584865.tif 000024
を有する。
【００７８】
特定の実施形態において、Ｒ１は、水素、メチル、ヒドロキシメチル、または−ＣＨ２Ｆである。特定の実施形態において、Ｒ１はメチルであり、Ｒ１を有する炭素はＲ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ１はヒドロキシメチルであり、Ｒ１を有する炭素はＳ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ１は−ＣＨ２Ｆであり、Ｒ１を有する炭素はＲ立体配置またはＳ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ２Ａ、Ｒ２Ｂ、Ｒ２ＣおよびＲ３Ｃはそれぞれ、水素原子である。特定の他の例示的な実施形態において、Ｒ２Ａ、Ｒ２Ｂ、Ｒ２ＣおよびＲ３Ｃはそれぞれ、アルカリ金属カチオン、例えばＮａ＋である。
【００７９】
ＩＶ．以下の構造を有する化合物（およびその薬学的に許容される誘導体）
【００８０】
【化２４】
0005584865.tif 000025
式中、Ｂは、アデニン、キサンチン、ヒポキサンチン、グアニン、８−ブロモグアニン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒドラジノグアニン、８−ヒドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグアニン、２−アミノグアニン、２，６−ジアミノプリン、チミン、シトシン、ウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、５−エチルウラシル、５−プロピルウラシル、５−ビニルウラシル、および５−ブロモビニルウラシルからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびハロメチル基からなる群から選択され、
Ｒ２Ａは酵素不安定基であり、
Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、またはＣ６〜１０アリール基であるか、あるいは−ＮＨＲ’はアミノ酸残基を表し、
Ｒ３Ａは、水素原子またはアルカリ金属カチオン、例えばＮａ＋である。
【００８１】
特定の実施形態において、Ｂはアデニンであり、化合物は構造：
【００８２】
【化２５】
0005584865.tif 000026
を有する。
【００８３】
特定の実施形態において、Ｒ１は、水素、メチル、ヒドロキシメチル、または−ＣＨ２Ｆである。特定の実施形態において、Ｒ１はメチルであり、Ｒ１を有する炭素はＲ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ１はヒドロキシメチルであり、Ｒ１を有する炭素はＳ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ１は−ＣＨ２Ｆであり、Ｒ１を有する炭素はＲ立体配置またはＳ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ２Ａは、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３、または−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）ＣＨ３である。特定の実施形態において、−ＮＨＲ’は、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、およびバリンからなる群から選択されるα−アミノ酸残基を表す。特定の実施形態において、Ｒ３Ａは水素原子である。特定の他の例示的な実施形態において、Ｒ３ＡはＮａ＋である。
【００８４】
Ｖ．  以下の構造を有する化合物（およびその薬学的に許容される誘導体）
【００８５】
【化２６】
0005584865.tif 000027
式中、Ｂは、アデニン、キサンチン、ヒポキサンチン、グアニン、８−ブロモグアニン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒドラジノグアニン、８−ヒドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグアニン、２−アミノグアニン、２，６−ジアミノプリン、チミン、シトシン、ウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、５−エチルウラシル、５−プロピルウラシル、５−ビニルウラシル、および５−ブロモビニルウラシルからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびハロメチル基からなる群から選択され、
Ｒ２は、−ＯＲ２Ａまたは−ＮＨＲ’であり、
Ｒ３は、−ＯＲ３Ａまたは−ＮＨＲ”であり、
ここで、Ｒ２ＡおよびＲ３Ａは、それぞれ別々に酵素不安定基である。
【００８６】
特定の実施形態において、Ｂはアデニンであり、化合物は構造：
【００８７】
【化２７】
0005584865.tif 000028
を有する。
【００８８】
特定の実施形態において、Ｒ１は、水素、メチル、ヒドロキシメチル、または−ＣＨ２Ｆである。特定の実施形態において、Ｒ１はメチルであり、Ｒ１を有する炭素はＲ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ１はヒドロキシメチルであり、Ｒ１を有する炭素はＳ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ１は−ＣＨ２Ｆであり、Ｒ１を有する炭素はＲ立体配置またはＳ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ２ＡおよびＲ３Ａは、それぞれ別々に−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ（ＣＨ３）２（「ＰＯＣ」基）、構造−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣ（ＣＨ３）２、−ＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３、−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３、または−ＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）ＣＨ３を有する部分である。特定の実施形態において、−ＮＨＲ’および−ＮＨＲ”は、それぞれ別々にアラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、およびバリンからなる群から選択されるα−アミノ酸残基を表す。特定の実施形態において、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ、−ＯＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣ（ＣＨ３）２である。特定の実施形態において、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ、−ＯＣＨ２ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３である。特定の実施形態において、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ３）３である。特定の実施形態において、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＳＣ（＝Ｏ）ＣＨ３である。特定の実施形態において、Ｒ２およびＲ３はそれぞれ、アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、およびバリンからなる群から選択されるα−アミノ酸残基である。
【００８９】
ＶＩ．  以下の構造を有する化合物（およびその薬学的に許容される誘導体）
【００９０】
【化２８】
0005584865.tif 000029
式中、Ｂは、アデニン、キサンチン、ヒポキサンチン、グアニン、８−ブロモグアニン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒドラジノグアニン、８−ヒドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグアニン、２−アミノグアニン、２，６−ジアミノプリン、チミン、シトシン、ウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、５−エチルウラシル、５−プロピルウラシル、５−ビニルウラシル、および５−ブロモビニルウラシルからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、
Ｒ１は、水素原子、ならびにメチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびハロメチル基からなる群から選択され、
Ｒ２Ａは、水素原子、アルカリ金属カチオン、またはＣ１〜８アルキルであり、
Ｒｉは、水素原子またはアミノ酸側鎖であり、
Ｒｉｉは、水素原子、アルカリ金属カチオン、またはＣ１〜８アルキルである。
【００９１】
特定の実施形態において、Ｂはアデニンであり、化合物は構造：
【００９２】
【化２９】
0005584865.tif 000030
を有する。
【００９３】
特定の実施形態において、Ｒ１は、水素、メチル、ヒドロキシメチル、または−ＣＨ２Ｆである。特定の実施形態において、Ｒ１はメチルであり、Ｒ１を有する炭素はＲ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ１はヒドロキシメチルであり、Ｒ１を有する炭素はＳ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ１は−ＣＨ２Ｆであり、Ｒ１を有する炭素はＲ立体配置またはＳ立体配置からなる。特定の実施形態において、Ｒ２Ａは、水素原子、Ｎａ＋、またはＣ１〜８アルキルである。特定の実施形態において、Ｒｉは、以下のアミノ酸のうちの一つからなる側鎖である。アラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、グルタミン酸、グルタミン、グリシン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、プロリン、セリン、トレオニン、トリプトファン、チロシン、またはバリン。特定の実施形態において、Ｒｉは、水素原子、Ｎａ＋、またはメチルである。
【００９４】
特定の実施形態において、式（Ｉ）、（ＩＡ）〜（ＩＧ）および（ＩＢ１）〜（ＩＧ１）の化合物、および上記サブグループＩからＶＩの化合物について、Ｒ１は、メチルまたはエチルであり、Ｒ１を有する炭素原子はＲ立体配置を有する。
【００９５】
特定の実施形態において、式（Ｉ）、（ＩＡ）〜（ＩＧ）および（ＩＢ１）〜（ＩＧ１）の化合物、および上記サブグループＩからＶＩの化合物について、Ｒ１は、ヒドロキシメチルまたはヒドロキシエチルであり、Ｒ１を有する炭素原子はＳ立体配置を有する。
【００９６】
特定の実施形態において、式（Ｉ）、（ＩＡ）〜（ＩＧ）および（ＩＢ１）〜（ＩＧ１）の化合物、および上記サブグループＩからＶＩの化合物について、Ｒ１はＣ１〜６ハロアルキル基、好ましくはハロメチル基、より好ましくは−ＣＨ２Ｆであり、Ｒ１を有する炭素原子はＲ立体配置またはＳ立体配置を有する。
【００９７】
前述の化合物の一部は、一以上の不斉中心を含むことができ、したがって、様々な異性体形態、例えば、立体異性体および／またはジアステレオマーで存在できる。したがって、本発明の化合物およびその医薬組成物は、個々のエナンチオマー、ジアステレオマー、または幾何異性体の形態にあってもよく、あるいは立体異性体の混合物の形態にあってもよい。特定の実施形態において、本発明の化合物はエナンチオピュア（enantiopure）化合物である。特定の他の実施形態において、立体異性体の混合物またはジアステレオマーが提供される。
【００９８】
さらに、ここに記載されるような特定の化合物は、特に断らない限り、ＺまたはＥ異性体のいずれかとして存在し得る一以上の二重結合を有してもよい。本発明は、他の異性体を実質的に含まない個別の異性体としての、あるいは様々な異性体の混合物、例えば、立体異性体のラセミ混合物としての化合物をさらに包含する。上記の化合物それ自体に加えて、本発明はまた、これらの化合物の薬学的に許容される誘導体ならびに一以上の本発明の化合物および一以上の薬学的に許容される賦形剤または添加剤を含む組成物を包含する。
【００９９】
本発明の化合物は、異なる条件下で式（Ｉ）の化合物の結晶化によって調製することができ、本発明の一部を形成する一般式（Ｉ）の化合物の多形の一つまたは組合せとして存在し得る。例えば、異なる多形は、再結晶化のために異なる溶媒または異なる溶媒の混合物を用いて、あるいは異なる温度で結晶化を行うことによって、あるいは結晶化の間に極めて速い冷却から極めて遅い冷却の範囲にわたる様々な方式の冷却を用いることによって同定および／または調製することができる。多形は、化合物を加熱または溶融し、次いで段階的または急速に冷却をすることによっても得ることができる。多形の存在は、固体プローブＮＭＲ分光法、ＩＲ分光法、示差走査熱量測定、粉末Ｘ線回折、および／または他の技法によって測定され得る。したがって、本発明は、本発明の化合物、それらの誘導体、それらの互変異性体、それらの立体異性体、それらの多形、それらの薬学的に許容される塩、それらの薬学的に許容される溶媒和物、およびそれらを含む薬学的に許容される組成物を包含する。
【０１００】
本明細書で用いられる「アルキル」という用語は、直鎖および分枝鎖の基を含む飽和脂肪族炭化水素を指す。同様のことが、他の総称的な用語、例えば、「アルケニル」、「アルキニル」などに適用される。さらに、特に断らない限り、本明細書で用いられる「アルキル」、「アルケニル」、「アルキニル」などの用語は非置換基を包含する。
【０１０１】
特定の実施形態において、本発明に用いられるアルキル基は、約１〜２０個の脂肪族炭素原子を含む。特定の他の実施形態において、本発明に用いられるアルキル基は、約１〜１０個の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態において、本発明に用いられるアルキル基は、約１〜８個の脂肪族炭素原子を含む。なお他の実施形態において、本発明に用いられるアルキル基は、約１〜６個の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態において、本発明に用いられるアルキル基は、約１〜４個の炭素原子を含む。したがって、例示のアルキル基には、限定されないが、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、アリル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル、部分（moieties）などが含まれる。
【０１０２】
特定の実施形態において、本発明に用いられるアルケニル基およびアルキニル基は、約２〜２０個の脂肪族炭素原子を含む。特定の他の実施形態において、本発明に用いられるアルケニルおよびアルキニル基は、約２〜１０個の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態において、本発明に用いられるアルケニル基およびアルキニル基は、約２〜８個の脂肪族炭素原子を含む。なお他の実施形態において、本発明に用いられるアルケニル基およびアルキニル基は、約２〜６個の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態において、本発明に用いられるアルケニル基およびアルキニル基は、約２〜４個の炭素原子を含む。例示のアルケニル基には、限定されないが、例えば、エテニル、プロペニル、ブテニル、１−メチル−２−ブテン−１−イルなどが含まれる。例示のアルキニル基には、限定されないが、エチニル、２−プロピニル（プロパルギル）、１−プロピニルなどが含まれる。
【０１０３】
本明細書に用いられるヘテロアルキル基は、少なくとも１個の炭素原子が酸素、硫黄、窒素、またはケイ素原子などのヘテロ原子で置換されたアルキル基を指す。「ヘテロアルケニル」および「ヘテロアルキニル」という用語は同様に定義され、上記の定義の中の「アルキル」はそれぞれ、「アルケニル」および「アルキニル」で置き換えられる。
【０１０４】
一般に、「アリール」という用語は、上記のとおり芳香族部分を指し、脂肪族（例えば、アルキル）部分またはヘテロ脂肪族（例えば、ヘテロアルキル）部分を介して結合したものは除く。本発明の特定の実施形態において、「アリール」は、芳香族性についてのヒュッケル則を満たす１個または２個の環を有する単環式または二環式の炭素環式環系を指し、限定されないが、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、インデニルなどを含む。
【０１０５】
本明細書に用いられる「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素、およびヨウ素から選択される原子を指す。
「ハロアルキル」という用語は、それに結合した１個、２個、または３個のハロゲン原子を有する、上記に定義されたとおりのアルキル基を意味し、クロロメチル、フルオロメチル、ブロモエチル、トリフルオロメチルなどの基で例示される。
【０１０６】
２）合成の概要
専門家は、本発明の化合物の合成に有用な合成戦略の指針、保護基、ならびに他の材料および方法に関する指針について、本明細書に含まれる情報と組み合わせて参考にするべきヌクレオチドおよびリン化学の十分に確立した刊行物を有する。
【０１０７】
本明細書に引用される様々な参考文献では、本明細書に記載される本発明の化合物と同様の化合物または関連の中間体を調製することに関して助けとなる背景情報が与えられる。引用する特定の特許文献にも、対象となり得るような化合物の処方、使用、および投与に関する情報が含まれる。例えば、国際公開第２００６／１１４０６４号、国際公開第２００４／１１１０６４号、国際公開第０３／００２５８０号、欧州特許第０２５３４１２号、欧州特許第０２０６４５９号、および／または欧州特許第０２０５８２６号に指針を見出し得る。
【０１０８】
さらに、専門家は、様々な例示的な化合物およびその中間体に関する同文献で提供される特定の指針および例に注意を向ける。
上記のとおり、本発明は、新規な化合物、特に、以下の一般構造：
【０１０９】
【化３０】
0005584865.tif 000031
を有する化合物およびその薬学的に許容される塩を提供する。
【０１１０】
式中、Ｂ、ＸおよびＲ１〜Ｒ３は、本明細書中のクラスおよびサブクラスで定義したとおりである。
一般的に上記した化合物について、特定のクラスの化合物が特に対象となることが理解されるであろう。例えば、特に関心のある化合物の１つのクラスには、式（Ｉ’）：
【０１１１】
【化３１】
0005584865.tif 000032
を有するアデニン誘導体が含まれる。
【０１１２】
本発明の化合物は、構造：
【０１１３】
【化３２】
0005584865.tif 000033
を有するＨ−ホスフィネート中間体から出発して都合よく調製することができる。式中、ＢおよびＲ１は本明細書中のクラスおよびサブクラスで定義したとおりである。
【０１１４】
特定の実施形態において、Ｂはアデニンであり、中間体は構造：
【０１１５】
【化３３】
0005584865.tif 000034
を有する。
【０１１６】
ボラノホスホネート誘導体、セレノホスホネート誘導体、およびチオホスホネート誘導体を調製するための例示的な合成手法は、以下のスキームＡに示される。
【０１１７】
【化３４】
0005584865.tif 000035
フルオロホスホネート誘導体、アミノホスホネート誘導体、およびアリール／アルキルホスホネート誘導体を調製するための例示的な合成手法は、以下のスキームＢに示される。
【０１１８】
【化３５】
0005584865.tif 000036
式中のＢ、Ｒ’、Ｒ１およびＲ３は、本明細書中のクラスおよびサブクラスで定義したとおりであり、Ｒ”は、Ｃ１〜８アルキル部分またはＣ６〜１０アリール部分である。
【０１１９】
先に述べたように、本発明の化合物は、スキームＡおよびＢに示され、その実施例でさらに説明される例示的な合成経路によってＨ−ホスフィネート前駆中間体から調製することができる。実際、発明者らは、本発明の化合物をＨ−ホスフィネート前駆中間体から高収率で得られることを実証した。
【０１２０】
したがって、本発明の別の態様において、本発明の化合物を調製するために有用な式（ＩＩ）のＨ−ホスフィネート前駆中間体が提供される。
【０１２１】
【化３６】
0005584865.tif 000037
式中、Ｂは、アデニン、キサンチン、ヒポキサンチン、グアニン、８−ブロモグアニン、８−クロログアニン、８−アミノグアニン、８−ヒドラジノグアニン、８−ヒドロキシグアニン、８−メチルグアニン、８−チオグアニン、２−アミノプリン、２，６−ジアミノプリン、チミン、シトシン、ウラシル、５−ブロモウラシル、５−ヨードウラシル、５−エチルウラシル、５−プロピルウラシル、５−ビニルウラシル、および５−ブロモビニルウラシルからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、
Ｒ１は、水素原子、メチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびＣ１〜６ハロアルキル基からなる群から選択される。
【０１２２】
本発明はこの一つの特定の合成経路に限定されず、式（ＩＩ）の中間体を用いることなく本発明の化合物の調製に導く他の方法にまで及ぶことが理解される。
要約すれば、本発明者らは、新規なホスホネート類似体を得ることを可能にする合成方法を開発した。さらに、本発明者らは、一部のこれらの類似体がある種の知られている類似体に匹敵するか、あるいはより優れた有効性を示すにもかかわらず、細胞毒性がより低いことを実証した。最終的に、本発明者らは、突然変異体Ｋ６５Ｒ逆転写酵素（ＲＴ）が一部のこれらの類似体に対して耐性がないことも実証した。
【０１２３】
本発明の例示的な化合物は、以下の表に列挙される。
【０１２４】
【表１】
0005584865.tif 000038
0005584865.tif 000039
簡略化のために、化合物６ａ、６ｂおよび６〜１７は、上記表に与えられる略称を用いて本明細書で言及することもある。
【０１２５】
３）医薬組成物
先に述べたように、本発明は、抗ウイルス化合物を提供し、したがって、本化合物は、限定されないが、ＨＩＶ感染、Ｂ型肝炎、およびＨＳＶを含む疾患、障害、および状態の治療に有用である。したがって、本発明の別の態様において、薬学的に許容される組成物が提供され、これらの組成物は本明細書に記載されるような任意の化合物を含み、薬学的に許容される担体、アジュバントまたはビヒクルを場合によっては含む。特定の実施形態において、これらの組成物は、一以上のさらなる治療薬を場合によってはさらに含む。
【０１２６】
したがって、本発明の別の態様において、本明細書中のクラスおよびサブクラスで既に述べたとおりの式（Ｉ）のプリンもしくはピリミジンホスホネート誘導体またはそれらの薬学的に許容される塩を含む医薬組成物が提供される。
【０１２７】
有利には、Ｂは、アデニン、ウラシル、チミン、グアニン、およびシトシンからなる群から選択されるプリンまたはピリミジン塩基であり、Ｂは、好ましくはアデニンである。
有利には、Ｒ１は、水素原子、メチル基、ヒドロキシメチルおよびＣ１〜６ハロアルキル基からなる群から選択される。特定の実施形態において、Ｒ１は、水素原子、メチル基、ヒドロキシメチルおよびＣ１〜４ハロアルキル基からなる群から選択される。特定の実施形態において、Ｒ１は、水素原子、メチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびハロメチル基からなる群から選択される。特定の実施形態において、Ｒ１は、水素原子、メチル基、ヒドロキシメチルおよびフルオロメチル基からなる群から選択される。有利には、Ｒ１は、水素原子、メチル基、およびヒドロキシメチル基からなる群から選択される。
【０１２８】
有利には、Ｒ２は、フッ素原子、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ２Ａ、プロドラッグ部分、−ＢＨ３、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、またはＣ２〜８アルキニル基、およびアミン基Ｒ’ＨＮからなる群から選択され、Ｒ２Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表し、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、またはＣ６〜１０アリール基、あるいはアミノ酸残基である。有利には、Ｒ２は、フッ素原子、ヒドロキシル基、−ＢＨ３、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル基、およびアミン基Ｒ’ＨＮからなる群から選択され、Ｒ’は、直鎖または分枝鎖のＣ１〜８アルキル基である。
【０１２９】
有利には、Ｘは、硫黄またはセレニウム原子である。特定の好ましい実施形態において、Ｘは硫黄原子である。
好ましい実施形態によれば、Ｘは硫黄原子であり、Ｒ２はヒドロキシル基である。
【０１３０】
別の好ましい実施形態によれば、Ｘは硫黄原子であり、Ｒ２は、ヒドロキシル基またはそのアルカリ金属塩、−ＯＲ２Ａ、またはプロドラッグ部分であり、Ｒ２Ａは、Ｃ１〜８アルキル、Ｃ２〜８アルケニル、Ｃ２〜８アルキニル、Ｃ１〜８ヘテロアルキル、Ｃ２〜８ヘテロアルケニル、Ｃ２〜８ヘテロアルキニル、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩、または−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２もしくはそのアルカリ金属塩を表す。
【０１３１】
さらに別の好ましい実施形態によれば、Ｘは酸素原子であり、Ｒ２は、フッ素原子およびＢＨ３基からなる群から選択される。
本発明の特定の化合物は、治療のために自由な形態で、または、適切な場合には、その薬学的に許容される誘導体として存在し得ることもまた理解されるであろう。本発明によれば、薬学的に許容される誘導体には、限定されないが、薬学的に許容される塩、エステル、このようなエステルの塩、あるいは必要とする患者に投与すると、本明細書において他に記載されるような化合物、またはその代謝産物もしくは残基を直接または間接的に与えることができる任意の他の付加体もしくは誘導体が含まれる。
【０１３２】
本明細書で用いられる「薬学的に許容される塩」という用語は、健全な医学的判断の範囲内で、過度な毒性、刺激、アレルギー反応などなしにヒトおよび下等動物の組織と接触した状態で使用するのに好適であり、妥当な利益／リスク比に相応しているそれらの塩を指す。「薬学的に許容される塩」は、受容者に投与すると、本発明の化合物またはその活性代謝産物もしくは分解産物を、直接または間接的に与えることができる本発明の化合物の任意の非毒性の塩またはエステルの塩を意味する。本明細書で用いられる「その活性代謝産物または分解産物」という用語は、その代謝産物または分解産物もまた抗ウイルス特性を示すことを意味する。
【０１３３】
薬学的に許容される塩は、当該分野でよく知られている。例えば、エス．エム．ベルゲ（S. M. Berge）らは、本明細書に援用するJ. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19において、薬学的に許容される塩を詳細に記載する。本発明の化合物の薬学的に許容される塩には、好適な無機および有機の酸および塩基に由来するものが含まれる。薬学的に許容される非毒性の酸付加塩の例は、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、および過塩素酸などの無機酸、または酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、およびマロン酸などの有機酸と形成される、あるいはイオン交換などの当該分野で用いられる他の方法を用いることによって形成されるアミノ基の塩である。他の薬学的に許容される塩には、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、硫酸水素塩、ホウ酸塩、酪酸塩、ショウノウ酸塩、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、二グルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリル酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモン酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバリン酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが含まれる。適切な塩基由来の塩には、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、およびＮ＋（Ｃ１〜４アルキル）４塩が含まれる。本発明はまた、本明細書に開示される化合物の任意の塩基性窒素含有基の四級化を想定する。水溶性もしくは油溶性または分散性の生成物は、このような四級化によって得ることができる。代表的なアルカリ金属塩またはアルカリ土類金属塩には、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどが含まれる。さらなる薬学的に許容される塩には、適切な場合、ハロゲン化物イオン、水酸化物イオン、カルボン酸イオン、硫酸イオン、リン酸イオン、硝酸イオン、低級アルキルスルホン酸イオン、およびアリールスルホン酸イオンなどの対イオンを用いて形成される非毒性のアンモニウム、四級アンモニウム、およびアミンのカチオンが含まれる。
【０１３４】
上記したように、本発明の薬学的に許容される組成物は、薬学的に許容される担体、アジュバント、またはビヒクルをさらに含み、これらには、本明細書で用いられる所望とされる特定の剤形に合うように、任意および全ての溶媒、希釈剤、または他の液体ビヒクル、分散液もしくは懸濁液補助剤、表面活性剤、等張剤、増粘剤もしくは乳化剤、保存剤、固体結合剤、潤滑剤などが含まれる。Remington’s Pharmaceutical Sciences, Sixteenth Edition, E.W.Martin (Mack Publishing Co., Easton, Pa., 1980)には、薬学的に許容される組成物を処方するのに用いられる様々な担体およびその調製のための知られている技術が開示される。例えば、任意の望ましくない生物学的作用を生じることによって、あるいは、薬学的に許容される組成物の任意の他の成分（複数可）と有害な仕方で相互作用することによって、任意の従来の担体媒体が本発明の化合物と混合できない場合を除いて、その使用は本発明の範囲内にあることが企図される。薬学的に許容される担体としての機能を果たし得る材料の一部の例には、限定されないが、イオン交換樹脂、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質（ヒト血清アルブミンなど）、緩衝物質（リン酸塩など）、グリシン、ソルビン酸またはソルビン酸カリウム、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質（硫酸プロタミンなど）、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩、コロイダルシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、ポリアクリル酸塩、ワックス、ポリエチレン−ポリオキシプロピレン−ブロックポリマー、羊毛脂、糖（乳糖、ブドウ糖、およびショ糖など）、デンプン（トウモロコシデンプンおよびジャガイモデンプンなど）、セルロースおよびその誘導体（カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、および酢酸セルロースなど）、粉末トラガカント、麦芽、ゼラチン、タルク、賦形剤（ココアバターおよび坐薬ワックスなど）、油（ピーナッツ油、綿実油など）、サフラワー油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、大豆油、グリコール（プロピレングリコールまたはポリエチレングリコールなど）、エステル（オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルなど）、寒天、緩衝剤（水酸化マグネシウムおよび水酸化アルミニウムなど）、アルギン酸、発熱物質を含まない水、等張生理食塩水、リンガー液、エチルアルコール、リン酸塩緩衝溶液、および他の非毒性の混合可能な潤滑剤（ラウリル硫酸ナトリウムおよびステアリン酸マグネシウムなど）が含まれ、さらに、着色剤、解除剤（releasing agents）、コーティング剤、甘味剤、香味剤、芳香剤、保存剤、および酸化防止剤も調剤製造者の判断によっては組成物中に存在し得る。
【０１３５】
化合物および薬学的に許容される組成物の使用
研究使用
本発明によれば、本発明の化合物は、抗ウイルス活性を有する化合物を同定するために当該分野で知られている任意の利用可能なアッセイ法で測定を行うことができる。例えば、アッセイ法は、細胞または非細胞、インビボまたはインビトロ、高スループットフォーマットまたは低スループットフォーマットなどであってもよい。
【０１３６】
特定の例示的な実施形態において、本発明の化合物は、ＤＮＡまたはＲＮＡウイルスポリメラーゼ、とりわけ、ＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２、ＨＳＶ、またはＨＢＶ逆転写酵素を阻害するそれらの能力について測定を行った。
【０１３７】
したがって、一態様において、特に対象となる本発明の化合物には、以下のものが含まれる。
ＤＮＡまたはＲＮＡウイルスポリメラーゼを阻害する能力を示すもの、
ＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２逆転写酵素を阻害するもの、
ＨＳＶポリメラーゼを阻害するもの、
ＨＢＶ逆転写酵素を阻害するもの、
ウイルスポリメラーゼ介在疾患または状態を患っている哺乳動物（例えば、ヒト）または動物を治療するために、またこのような疾患／状態の発症を予防または遅延することを助けるために有用であるもの、
有利な治療プロファイル（例えば、安全性、有効性、および安定性）を示すもの。
【０１３８】
本発明のさらに別の態様において、患者におけるウイルス感染を治療および／または予防する薬剤の調製のための前述したような治療組成物の使用が提供される。
ウイルス感染は、ＤＮＡまたはＲＮＡウイルスによる感染を意味する。ＤＮＡウイルスの一例として、ヘパドナウイルス科（Hepadnaviridae）（ＨＢＶ）、ヘルペスウイルス科（Herpesviridae）（ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＶＺＶ、ＨＨＶ−６、ＨＰＶ、ＨＳＶ−１、およびＨＳＶ−２）、およびポックスウイルス科（Poxviridae）（vaccinia）のウイルスを挙げることができる。ＲＮＡウイルスの一例として、ブンヤウイルス（Bunyaviruses）（punto toro）、フラビウイルス科（Flaviviridae）（ＨＣＶ）、オルソミクソウイルス科（Orthomyxoviridae）、パラミクソウイルス科（Paramyxoviridae）（parainfluenza 3およびＲＳＶ）、ピコルナウイルス科（Picornaviridae）（Coxsackie Ｂ４）、レトロウイルス科（Retroviridae）（ＳＩＶ、ＦＩＶ、ＨＴＬＶ、ＦｅＬＶ、ＨＩＶ−１、およびＨＩＶ−２）、トガウイルス科（Togaviridae）（Sindbis）のウイルスを挙げることができる。他の科（ファミリー）には、アレナウイルス科、コロナウイルス科、アルテリウイルス科、レオウイルス科、およびボルナウイルス科が含まれる。
【０１３９】
特定の実施形態において、本発明の化合物はＨＩＶ−１逆転写酵素阻害剤である。特定の他の実施形態において、本発明の化合物はＨＢＶ逆転写酵素阻害剤である。
さらに別の態様において、有効量の化合物、または化合物を含む薬学的に許容される組成物を、それを必要とする対象に投与する工程を含む、ウイルス感染の治療のための、またはその重症度を緩和するための方法が提供される。本発明の特定の実施形態において、「有効量」の化合物または薬学的に許容される組成物は、ウイルス感染を治療する、またはその重症度を緩和するために有効なその量である。
【０１４０】
本発明による医薬組成物の処方は、製薬業界で一般的に用いられる種類のものからなる。
例として、これには医薬ベクター、例えば、塩または電解質、アスコルビン酸の塩、水または緩衝溶液、コロイド溶液、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、ポリアクリル酸塩、ワックス、タンパク質、または治療作用に利用できる活性化合物を溶解もしくは作ることができる任意の他の物質などが含まれ得る。
【０１４１】
本発明の組成物は、注射可能な形態で、または経口、非経口、スプレー形態における鼻腔、直腸もしくは膣経路によって、貯蔵器もしくは分注器の移植によって、あるいは製薬業界で使用されている任意の他の生薬形態で投与され得る。
【０１４２】
本発明の方法によって、化合物および組成物は、ウイルス感染を治療するために、またはその重症度を緩和するために有効な任意の投与量および任意の投与経路を用いて投与され得る。必要とされる正確な量は、対象の種、年齢、および一般状態、感染重症度、特定の薬剤、その投与方式などに依存して、対象ごとに変わる。本発明の化合物は、好ましくは、投与の容易さおよび投薬量の均一のために、投薬単位の形態で処方される。本明細書で用いられる「投薬単位の形態」という表現は、治療される患者に適切な薬剤の物理的に別個の単位を指す。ただし、本発明の化合物および組成物の一日の総使用は、健全な医学的判断の範囲内で担当医によって決定されることが理解されるであろう。任意の特定の患者または生物のための特定の有効用量のレベルは、治療される障害および障害の重症度、用いられる特定の化合物の活性、用いられる特定の組成物、患者の年齢、体重、一般健康、性別、および食事、投与時間、投与経路、および用いられる特定の化合物の排泄率、治療期間、用いられる特定の化合物と組み合わせてまたは同時に使用される薬剤、ならびに当該医学分野でよく知られている同様の因子などを含む様々な因子に依存する。本明細書で用いられる「患者」という用語は、動物、好ましくは哺乳動物、最も好ましくはヒトを意味する。
【０１４３】
本発明の薬学的に許容される組成物は、治療される感染の重症度に依存して、経口的に、直腸的に、非経口的に、嚢内的に、膣内的に、腹膜内的に、局所的に（粉末、軟膏、または点滴薬による）、口腔的に、口または鼻スプレーとしてなどの方法でヒトおよび他の動物に投与し得る。特定の実施形態において、本発明の化合物は、所望の治療効果を得るために、１日当たり１回以上で、１日当たり対象の体重の約０．０１ｍｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇ、好ましくは約１ｍｇ／ｋｇから約２５ｍｇ／ｋｇの投薬量レベルで経口的にまたは非経口的に投与し得る。
【０１４４】
経口投与のための液体剤形には、限定されないが、薬学的に許容される乳濁液、マイクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップ、およびエリキシル剤が含まれる。活性化合物に加えて、液体剤形は、当該分野で一般的に使用される不活性希釈剤、例えば、水または他の溶媒、可溶化剤、および乳化剤（エチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に、綿実油、ラッカセイ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、キャスター油、およびゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、およびソルビタンの脂肪酸エステルなど）、ならびにそれらの混合物を含み得る。不活性希釈剤の他に、経口組成物には、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味剤、香味剤、および芳香剤などのアジュバントも含まれ得る。
【０１４５】
注射製剤、例えば、滅菌注射用の水性または油性懸濁液は、好適な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を用いて、公知の技術によって処方され得る。滅菌注射製剤は、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒における滅菌注射用溶液、懸濁液、または乳濁液、例えば、１，３−ブタンジオール中の溶液としてであってもよい。用い得る許容されるビヒクルおよび溶媒には、水、リンガー液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．、および等張塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌した固定油が、溶媒または懸濁化媒体として従来用いられている。この目的のために、合成モノグリセリドまたは合成ジグリセリドを含む任意の無菌性の固定油が用いられ得る。さらに、オレイン酸などの脂肪酸が注射物質の調製に用いられる。
【０１４６】
注射可能な製剤は、例えば、細菌保持フィルターを通してろ過することによって、または使用前に滅菌水または他の滅菌注射用媒体に溶解または分散され得る滅菌固体組成物の形態で滅菌剤を取り込むことによって、滅菌され得る。
【０１４７】
本発明の化合物の効果を引き延ばすために、皮下または筋内注射からの化合物の吸収を遅延させることがしばしば望ましい。これは、水溶性の低い結晶質または非晶質材料の液体懸濁液の使用によって達成され得る。その際、化合物の吸収速度は、その溶解速度に依存し、また結晶サイズおよび結晶形態にも依存し得る。あるいは、非経口投与される化合物形態の吸収の遅延は、油ビヒクルに化合物を溶解または懸濁させることによって達成される。注射用のデポー（depot）形態は、ポリラクチド−ポリグリコリドなどの生分解性ポリマーにおいて化合物のマイクロカプセル化マトリックスを形成することによって作製される。ポリマーに対する化合物の比および用いられる特定のポリマーの性質に依存して、化合物放出速度は制御され得る。他の生分解性ポリマーの例には、ポリ（オルトエステル）およびポリ（酸無水物）が含まれる。デポー注射用製剤は、体内組織と適合するリポソームまたはマイクロエマルジョンに化合物を捕捉させることによっても調製される。
【０１４８】
直腸または膣投与のための組成物は、好ましくは、好適な非刺激性賦形剤または担体、例えば、ココアバター、ポリエチレングリコール、または周囲温度で固体であるが、体温で液体であり、したがって直腸もしくは膣腔において溶解して活性化合物を放出する坐薬ワックスと本発明の化合物を混合することによって調製し得る坐薬である。
【０１４９】
経口投与のための固体剤形には、カプセル、錠剤、丸薬、粉末、および顆粒が含まれる。このような固体剤形において、活性化合物は、少なくとも一種の不活性な薬学的に許容される賦形剤または担体（クエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムなど）、および／またはａ）充填剤もしくは増量剤（デンプン、乳糖、ショ糖、ブドウ糖、マンニトール、およびケイ酸など）、ｂ）結合剤（例えば、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、ショ糖、およびアカシアなど）、ｃ）保湿剤（グリセロールなど）、ｄ）崩壊剤（寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモデンプン、タピオカデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩、および炭酸ナトリウムなど）、ｅ）溶液緩染剤（パラフィンなど）、ｆ）吸収促進剤（四級アンモニウム化合物など）、ｇ）湿潤剤（例えば、セチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロールなど）、ｈ）吸収剤（カオリンおよびベントナイトクレーなど）、および、ｉ）潤滑剤（タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムなど）、ならびにそれらの混合物などと混合される。カプセル、錠剤および丸薬の場合、剤形は緩衝剤も含み得る。
【０１５０】
同様の種類の固体組成物はまた、乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどのような賦形剤を用いて、軟質および硬質充填ゼラチンカプセルにおける充填剤としても用いられ得る。錠剤、糖衣錠、カプセル、丸薬、および顆粒の固体剤形は、腸溶コーティングおよび薬学的製剤技術においてよく知られている他のコーティングなどのコーティングおよびシェルで調製され得る。それらは不透明剤を場合によっては含んでもよく、それらが腸管の特定の部分において、場合によっては遅延方式で、活性成分（複数可）のみを、またはそれを優先的に放出する組成物からもなり得る。使用され得る埋め込み組成物の例には、ポリマー物質およびワックスが含まれる。同様の種類の固体組成物はまた、乳糖ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどのような賦形剤を用いて、軟質および硬質充填ゼラチンカプセルにおける充填剤としても用いられ得る。
【０１５１】
活性化合物は、上記のような一種以上の賦形剤と一緒のマイクロカプセル形態であることもできる。錠剤、糖衣錠、カプセル、丸薬、および顆粒の固体剤形は、コーティングおよびシェル、例えば、腸溶コーティング、放出制御コーティング、および製薬製剤技術においてよく知られている他のコーティングと一緒に調製することができる。このような固体剤形において、活性化合物は、少なくとも一種の不活性希釈剤、例えば、ショ糖、乳糖、またはデンプンと混合され得る。このような剤形はまた、通常の慣行であるように、不活性希釈剤以外のさらなる物質、例えば、錠剤化潤滑剤および他の錠剤化補助剤（ステアリン酸マグネシウムおよび微結晶セルロースなど）を含み得る。カプセル、錠剤、および丸薬の場合には、剤形は緩衝剤も含み得る。それらは不透明剤を場合によっては含んでもよく、それらが腸管の特定の部分において、場合によっては遅延方式で、活性成分（複数可）のみを、またはそれを優先的に放出する組成物からもなり得る。使用され得る埋め込み組成物の例には、ポリマー物質およびワックスが含まれる。
【０１５２】
本発明の化合物の局所または経皮投与のための剤形には、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ゲル、粉末、溶液、スプレー、吸入剤、またはパッチが含まれる。活性成分は、滅菌条件下で、薬学的に許容される担体および任意の必要とされる保存剤または必要とされ得る緩衝剤と混合される。眼科製剤、点耳薬、および点眼薬も、本発明の範囲内にあることが企図される。さらに、本発明では、経皮パッチの使用が企図され、これは、身体への化合物の制御された送達を与える追加の利点を有する。このような剤形は、適当な媒体に化合物を溶解または分散させることによって作製され得る。吸収促進剤は、皮膚を越える化合物の流れを増加させるために用いることもできる。速度は、速度調節膜を備えることによってか、あるいはポリマーマトリックスもしくはゲル中に化合物を分散させることによってのいずれかで制御され得る。
【０１５３】
先に大まかに述べたように、本発明の化合物は、ＤＮＡまたはＲＮＡウイルスポリメラーゼの阻害剤として有用である。一実施形態において、本発明の化合物および組成物は、ＤＮＡまたはＲＮＡウイルスポリメラーゼ阻害剤（例えば、ＨＩＶ−１、ＨＩＶ−２、ＨＳＶ、および／またはＨＢＶの逆転写酵素阻害剤）であり、したがって、いずれかの特定の理論によって拘束されることを望むことなく、化合物および組成物は、ＤＮＡまたはＲＮＡウイルスポリメラーゼの活性化が関与している疾患、状態、または障害を治療する、またはその重症度を緩和するために特に有用である。ＤＮＡまたはＲＮＡウイルスポリメラーゼの活性化が特定の疾患、状態、または障害に関与している場合、その疾患、状態、または障害は「ウイルスポリメラーゼ介在疾患」または疾患症候群、あるいはより一般的には「ウイルス感染」と呼ばれ得る。したがって、別の態様において、本発明は、ＤＮＡまたはＲＮＡウイルスポリメラーゼの活性化が疾患状態に関与している疾患、状態、または障害を治療する、またはその重症度を緩和する方法を提供する。
【０１５４】
本明細書で用いられる「ウイルスポリメラーゼ介在疾患」、「ウイルスポリメラーゼ介在状態」、または「ウイルス感染」という用語は、ＤＮＡまたはＲＮＡウイルスポリメラーゼが役割を果たすことが知られている任意の疾患または他の有害な状態を意味する。「ウイルスポリメラーゼ介在疾患」、「ウイルスポリメラーゼ介在状態」、または「ウイルス感染」という用語は、ウイルスポリメラーゼ阻害剤での治療によって緩和されるそれらの疾患または状態も意味する。本明細書で用いられる「ウイルスポリメラーゼ介在疾患」という用語は、ＤＮＡまたはＲＮＡウイルスポリメラーゼが役割を果たすことが知られている任意の疾患または他の有害な状態もしくは疾患を意味する。このような疾患または状態には、限定されないが、ヘパドナウイルス科（Hepadnaviridae）（ＨＢＶ）、ヘルペスウイルス科（Herpesviridae）（ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＶＺＶ、ＨＨＶ−６、ＨＰＶ、ＨＳＶ−１、およびＨＳＶ−２）、ポックスウイルス科（Poxviridae）（vaccinia）、ブンヤウイルス（Bunyaviruses）（punto toro）、フラビウイルス科（Flaviviridae）（ＨＣＶ）、オルソミクソウイルス科（Orthomyxoviridae）、パラミクソウイルス科（Paramyxoviridae）（parainfluenza 3およびＲＳＶ）、ピコルナウイルス科（Picornaviridae）（Coxsackie Ｂ４）、レトロウイルス科（Retroviridae）（ＳＩＶ、ＦＩＶ、ＨＴＬＶ、ＦｅＬＶ、ＨＩＶ−１、およびＨＩＶ−２）、トガウイルス科（Togaviridae）（Sindbis）のウイルスが含まれる。他の科（ファミリー）には、アレナウイルス科（arenaviridae）、コロナウイルス科（coronaviridae）、アルテリウイルス科（arteriviridae）、レオウイルス科（reoviridae）、およびボルナウイルス科（bornaviridae）が含まれる。
【０１５５】
本発明の化合物および薬学的に許容される組成物は、併用療法で用いられ得る、すなわち、化合物および薬学的に許容される組成物が、一種以上の他の所望の治療法または医療処置と同時に、またはその前に、またはその後に投与され得ることも理解される。併用治療方式に用いるべき療法（治療法または処置）の特定の組合せでは、所望の治療法および／または処置と達成されるべき所望の治療効果との適合性が考慮される。用いられる療法が、同じ障害に対する所望の効果を達成し得る（例えば、発明化合物は、同じ障害を治療するために使用される別の薬剤と同時に投与され得る）か、またはそれらは、異なる効果（例えば、任意の副作用の制御）を達成し得ることも理解される。本明細書で用いられる特定の疾患、または状態を治療または予防するために通常投与されるさらなる治療薬は、「治療されている疾患、または状態に適切である」として知られている。
【０１５６】
例えば、他の療法、化学療法剤、または他の抗ウイルス薬は、本発明の化合物と組み合わせてウイルス感染を治療することができる。本発明の抗ウイルス薬と組み合わせて使用され得る療法または抗ウイルス薬の例には、外科手術、放射線療法、発熱療法、凍結療法、任意の副作用を減弱させる薬剤（例えば、制吐薬）、ならびに他の承認された抗ウイルス薬（限定されないが、ＮＲＴＩ、３’−アジド−３’−デオキシチミジン（ジドブジン、ＡＺＴ）、２’−デオキシ−３’−チアシチジン（３ＴＣ、ラミブジン）、２’，３’−ジデオキシ−２’，３’−ジデヒドロチミジン（ｄ４Ｔ、スタブジン）、カルボビル（炭素環式２’，３’−ジデオキシ−２’，３’−ジデヒドログアノシン）、アバカビル（ＡＢＣ）、２’，３’−ジデオキシイノシン（ｄｄＩ、ジダノシン）、２’，３’−ジデオキシシチジン（ｄｄＣ、ザルシタビン）、他の非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（ネビラピン、デラビリジン、エファビレンス、ダパリビンなど）、プロテアーゼ阻害剤（サキナビル、インジナビル、リトノビル、アンプレナビル、ネルフィナビル、ロピナビル、非環式ヌクレオシド（アシクロビル、バラシクロビル、ペンシクロビル、ファムシクロビル、ガンシクロビルなど））、他の抗ウイルス薬（リバビリン、２−チオ−６−アザウリジン、ツベルシジン、アウリントリカルボン酸、３−デアザネオプラノシン、ネオプラノシン、リマンチジン、アダマンチン、フォスカルネット、ブリブジン、トリフルリジンを含む）を含む）が含まれる。最新の抗ウイルス療法のより包括的な検討については、その全内容を本願明細書に援用するメルクマニュアル第１７版（１９９９年）を参照されたい。ＦＤＡ承認抗ウイルス薬のリストに関する米国食品医薬局（ＦＤＡ）ウェブサイトも参照されたい（www.fda.gov/cder/antivirals−補遺参照）。
【０１５７】
本発明の別の態様は、生物試料または患者におけるウイルス逆転写酵素活性を阻害することに関し、この方法は、式Ｉの化合物またはその化合物を含む組成物を用いて患者に投与する工程、または生物試料に接触させる工程を含む。本明細書で用いられる「生物試料」という用語には、限定されないが、細胞培養物またはその抽出物、哺乳動物から得られる生検材料またはその抽出物、および血液、唾液、尿、糞便、精液、涙液、または他の体液もしくはそれらの抽出物が含まれる。
【０１５８】
生物試料におけるウイルスポリメラーゼ活性の阻害は、当業者に知られている様々な目的に有用である。このような目的の例には、限定されないが、輸血、臓器移植、生物試料保存、および生物学的アッセイが含まれる。
【０１５９】
治療キット
他の実施形態において、本発明は、本発明による方法を都合よく、かつ有効に実施するためのキットに関する。一般に、製薬パックまたはキットは、本発明の医薬組成物の一以上の成分で充填された一以上の容器を含む。このようなキットは、錠剤またはカプセルなどの固体経口形態の送達に特に適する。このようなキットには、好ましくは、いくつかの単位投薬量が含まれ、それらの意図された使用の順に適応した投薬量を有するカードも含まれ得る。必要に応じて、記憶を助けるものが、例えば、数、文字、もしくは他の印の形態で、または投薬量が投与され得る治療計画の日を示すカレンダー挿入物と一緒に提供され得る。あるいは、投薬量が毎日取られるキットを提供するために、医薬組成物の同様のまたは異なる形態のいずれかにおけるプラセボ製剤またはカルシウム補助食品が含まれ得る。場合によって、製薬製品の製造、使用または販売を規制する政府機関によって規定された形態の通知が、このような容器（複数可）に付随され得、この通知は、ヒト投与のための製造、使用または販売の政府機関による承認を反映する。
【０１６０】
等価物
以下に続く代表的な実施例は、本発明を説明するのを助けることを意図し、本発明の範囲を限定することも意図しないし、限定すると解釈されるべきでもない。実際、本明細書に示された、および記載されたものに加えて、本発明の様々な変更およびその多くのさらなる実施形態は、以下に続く実施例および本明細書に引用される科学文献および特許文献についての参考文献を含むこの文書の全内容から当業者に明らかとなるであろう。それらの引用された参考文献の内容は、当該技術の現況を説明するのに助けとなるように本願明細書に援用することがさらに理解されるべきである。
【０１６１】
以下の実施例には、様々な実施形態およびその等価物において本発明の実施に適合され得る重要な追加の情報、例示および指針が含まれる。
例示
本発明の化合物およびそれらの調製は、これらの化合物が調製または使用される方法の一部を説明する実施例によってさらに理解され得る。しかし、これらの実施例は本発明を限定しないことが理解されるであろう。現在知られているか、またはさらに開発される本発明の変形は、本明細書に記載され、また請求されるとおりの本発明の範囲内に入ると考えられる。
【０１６２】
以下に続く実施例は、説明のために提供され、本発明の範囲を限定しない。
一般的な方法
融点は、９１００電熱装置（フィッシャーサイエンティフィック社）を備えた毛細管中で測定し、訂正していない。１Ｈ  ＮＭＲ、１３Ｃ  ＮＭＲ、および３１Ｐ  ＮＭＲスペクトルは、ＢＲＵＫＥＲ  ＡＭＸ  ２５０ＭＨｚで測定し、１１Ｂ  ＮＭＲスペクトルは、ＢＲＵＫＥＲ  ＡＭＸ  ４００ＭＨｚで測定した。化学シフトはｐｐｍで表し、結合定数（Ｊ）はヘルツ（ｓ＝シングレット、ｂｓ＝ブロードシングレット、ｄ＝ダブレット、ｄｄ＝ダブルダブレット、ｔ＝トリプレット、ｄｔ＝ダブルトリプレット、ｔｄ＝トリプルダブレット、ｑｄ＝クォドラプルダブレット、ｍ＝マルチプレット、ｄｍ＝ダブルマルチプレット、ｓｅｐｔ＝セプタプレット）で表す。
【０１６３】
ＦＡＢ質量スペクトルおよび高分解能質量スペクトル（ＨＲＭＳ）は、セシウムイオン源およびグリセロール／チオグリセロールマトリックスを用いるＪＥＯＬ  ＳＸ  １０２質量分析計で得た。分取フラッシュカラムクロマトグラフィーは、シリカゲル（メルク社）Ｇ６０  ２３０〜２４０メッシュを用いて行った。分析薄層クロマトグラフィーは、０．２ｍｍ厚さのシリカゲル６０Ｆ２５４  アルミニウムプレート（メルク社）上で行った。スポットは、ＵＶ光およびCericdip Srayで調べた。ＨＰＬＣは、９９１フォトダイオードアレー検出器（検出２６０ｎｍ）、自動注入器７１７、およびオンラインガス抜き器を備えたＷａｔｅｒｓ６００Ｅコントローラーシステム上で行った。試料は、線形勾配０〜１００％Ｂを用いて１ｍＬ／分の流量で６０分間溶出させた。安定性試験は、オンラインろ過システムを備えたカラムＮｏｖａ−ｐａｋ  Ｃ１８（４μＭ、３．９×１５０ｍｍ）＋プレカラムＮｏｖａ−ｐａｋ  Ｃ１８（４μＭ、３．９×１５０ｍｍ）上で行った。分析逆相（ＲＰ）クロマトグラフィーは、４．６×１００ｍｍ  Ｓｏｕｒｃｅ（登録商標）１５ＲＰＣカラム、またはカラムＸ−Ｔｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ１８（５μＭ、４．６×２５０ｍｍ）＋プレカラムＸ−Ｔｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ１８（３．５μＭ、３．９×２０ｍｍ）上で実施した。誘導体の大規模精製は、Ｓｏｕｒｃｅ（商標）３０ＲＰＣカラム（１８×３５０ｍｍ）および線形勾配０〜１００％Ｂ、またはＤＥＡＥ−Ｓｅｐｈａｄｅｘカラム（イオン交換）を用いて、ＡＫＴＡｐｒｉｍｅ  ＦＰＬＣ（アメルシャム社）上で達成した。誘導体の中規模精製は、線形勾配０〜１００％Ｂを用いて４．５ｍＬ／分の流量で、カラムＸ−ｔｅｒｒａ分取ＭＳ  Ｃ１８（１０μＭ、１０×２５０ｍｍ）＋プレカラムＸ−Ｔｅｒｒａ分取ＭＳ  Ｃ１８（１０μＭ、１０×１０ｍｍ）を用いてＨＰＬＣ上で４５分で達成した。溶離液Ａ：０．０５Ｍ重炭酸トリエチルアンモニウム緩衝液（ｐＨ７．５）、溶離液Ｂ：５０％のアセトニトリルを含む溶液Ａ。重炭酸トリエチルアンモニウム緩衝液ＴＥＡＢ（ｐＨ７．５）１Ｍの原液を、ｐＨ７．５に達するように水中１Ｍのトリエチルアミン溶液にドライアイスを添加して調製し、メンブレイン０．２２μＭ  ＧＶ−タイプ（ミリポア（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ））でろ過した。ＨＰＬＣおよびＭＰＬＣ緩衝液を毎日調製した。
【０１６４】
合成概要：
Ｈ−ホスフィネート前駆中間体分子を使用する初期合成方法を開発した。この中間体は、スキーム１に示されるように、本発明の様々なクラスの化合物の合成を可能にした。
【０１６５】
−α−ボラノホスホネート
−チオホスホネート
−セレノホスホネート
【０１６６】
【化３７】
0005584865.tif 000040
スキーム１に示されるように、ホウ素錯体による前駆中間体Ｈ−ホスフィネートの酸化は、ボラノホスホネートを生じる。セレニウムによるＨ−ホスフィネート前駆体の酸化は、セレノホスホネートを生じる。最終的に、硫黄によるＨ−ホスフィネート前駆体の酸化は、チオホスホネートを生じる。
【０１６７】
この方法は、スキーム２に記載されるようなフルオロホスホネート、アミノホスホネート、およびアリール／アルキルホスホネート誘導体の合成に適用され得る。
さらにこの方法は、Ｒ基および塩基の性質を調節することにより、治療効果を増大し、本明細書に記載されるもの以外のウイルス標的に対するこれらの化合物の作用を広げるために適用され得る。
【０１６８】
【化３８】
0005584865.tif 000041
【実施例１】
【０１６９】
９−［２−（ヒドロキシホスフィニルメトキシ）エチル］アデニン（５）および（Ｒ）−９−［２−（ヒドロキシホスフィニルメトキシ）プロピル］アデニン（１０）の合成
【０１７０】
【化３９】
0005584865.tif 000042
化合物５および１０は、以下のスキーム３に示される合成経路により調製し得る。
【０１７１】
【化４０】
0005584865.tif 000043
試薬および条件：  （ａ）２−ブロモエチルベンゾエート、ＮａＨ、ＤＭＦ、６０℃、１６時間、次いで飽和ＮＨ３／ＭｅＯＨ、１４時間、（ｂ）（Ｒ）−プロピレンカーボネート、ＮａＯＨ、ＤＭＦ、１４０℃、１６時間、（ｃ）ジエチル［［（ｐ−トルエンスルホニル）オキシ］メチル］−ホスホネート（Ａ）、ナトリウムｔ−ブタノレート、ＤＭＦ、周囲温度、７２時間、（ｄ）ＴＭＳＣｌ、ＬｉＡｌＨ４、ＴＨＦ、−７８℃、次いで周囲温度、２時間、（ｅ）Ｈ２Ｏ２、Ｈ２Ｏ／ＴＨＦ、周囲温度、１時間。
【０１７２】
６０℃、ＤＭＦ中のＮａＨの存在下で、アデニンおよび２−ブロモエチルベンゾエートを反応させ、次いでアンモニアで飽和したＭｅＯＨ中でベンゾエート保護基を切断することにより、８４％の収率で化合物２を得た。触媒量の水酸化ナトリウムの存在下、１４０℃で１６時間、ＤＭＦ中で（Ｒ）−プロピレンカーボネートとアデニンを縮合させ、反応混合物から結晶化させることにより直接単離された純粋なアルコール７を８１％の収率で得た。得られたアルコール２および７を、ＤＭＦ中のナトリウムｔ−ブタノレートの存在下で、ジエチル［［（ｐ−トルエンスルホニル）オキシ］メチル］−ホスホネートＡでアルキル化し、ジエチル−ホスホネート３および８を、それぞれ２７％および２９％の収率で得た。
【０１７３】
ＴＭＳＣｌの化学量論量を添加することによりＴＨＦ中の２つのホスホネートジエステル３および８を還元するためのＬｉＡｌＨ４工程は、それぞれ７８％および６５％の収率でホスフィン４および９の形成をもたらした。次いで、ホスフィン４および９を単離し、精製し、特徴付けした。
【０１７４】
次いで、水／ＴＨＦ混合物中でホスフィンを２当量の過酸化水素で酸化し、定量収率を伴うＨ−ホスフィネート５および１０を得た。反応の過程は、３１Ｐ  ＮＭＲ分光法で監視した。化合物４および９の酸化は急速に進み、反応は１時間後に完了した。３１Ｐ  ＮＭＲのスペクトルの検討は、４（ＴＭ：−１４４．６７ｐｐｍ、ｔｔ、１ＪＰＨ＝１９９．０Ｈｚおよび２ＪＰＨ＝７．８Ｈｚ）および９（ＴＭ：−１４４．８６ｐｐｍ、ｔｔ、１ＪＰＨ＝１９８．５Ｈｚおよび２ＪＰＨ＝７．３Ｈｚ）に対するシグナルが、５（ｄｍ、１ＪＰＨ＝５２８Ｈｚ）に対して２１．１５ｐｐｍ、および１０（ｄｍ、１ＪＰＨ＝５２８Ｈｚ）に対して２４．６４ｐｐｍで新たな共鳴により置換えられたことを明らかにした。
【０１７５】
化合物２：  ９−（２−ヒドロキシエチル）アデニン
【０１７６】
【化４１】
0005584865.tif 000044
無水ＤＭＦ（１２０ｍＬ）中の鉱油（１．７０ｇ、４２．５７ミリモル）中の６０％ＮａＨの懸濁液に、アデニン（５．２３ｇ、３８．７０ミリモル）をアルゴン下で添加し、混合物を６０℃で１時間加熱した。２−ブロモエチルベンゾエート（９．２ｍＬ、５８．０６ミリモル）を６０℃で滴下して添加し、反応物をこの温度で１６時間撹拌した。次いで、混合物を濾過して不溶解物質を除去し、濾液を減圧下で蒸発させ、トルエンと共に３回、共蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃで摩砕し、次いで、濾過して白色固体を得、これをＭｅＯＨ（４００ｍＬ）中の飽和アンモニア溶液に直ちに再懸濁した。反応混合物を室温で１４時間撹拌し、次いで、減圧下でメタノールを除去した。ＥｔＯＨからの再結晶化で化合物２（５．８７ｇ、８５％）を得た。融点２３６℃（Ｌｉｔ．２３８〜２３９℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：８．１３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２）、８．１０（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８）、７．２３（ｂｓ，２Ｈ，ＮＨ２）、５．０５（ｂｓ，１Ｈ，ＯＨ）、４．１９（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｏ）、３．７１（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｎ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１５５．７９、１５２．２３、１４９．４４、１４１．４６、１１８．５５、５９．１７、４５．６１。ＭＳ（ＧＴ，ＦＡＢ＋）：１３６（Ｂ＋１Ｈ）＋、１８０（Ｍ＋１Ｈ）＋、２０２（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０１７７】
化合物Ａ：ジエチル［［（ｐ−トルエンスルホニル）オキシ］メチル］−ホスホネート
トリエチルアミン（３．３８ｍＬ、２４．０４ミリモル）を、乾燥Ｅｔ２Ｏ（３０ｍＬ）中のジエチルヒドロキシメチルホスホネート（３．８５ｇ、２４．０４ミリモル）の撹拌溶液に滴下して添加した。混合物を−１０℃まで冷却した後、乾燥Ｅｔ２Ｏ（１０ｍＬ）中のトルエン−ｐ−スルホニル（４．５８ｇ、２４．０４ミリモル）の溶液を、−１０℃に維持した内部温度で滴下して添加した。０℃で１時間撹拌後、混合物を室温まで温め、次いで１６時間撹拌した。Ｅｔ２Ｏ（８０ｍＬ）を添加し、固体を濾過した。減圧下で溶媒を除去し、油をフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン／ＡｃＯＥｔ：９／１）で精製し、無色油として化合物Ａ（５．５７ｇ、７５％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：７．７６（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ，Ｔｓ）、７．３３（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈｚ，２Ｈ，Ｔｓ）、４．１５（ｍ，６Ｈ，ＣＨ２〜Ｐ（ＯＥｔ）２およびＣＨ２Ｐ）、２．４０（ｓ，３Ｈ，Ｔｓ）、１．２８（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ，ＣＨ３〜Ｐ（ＯＥｔ）２）。１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１４５．９１、１３２．０５、１３０．３８、１２８．５３、６３．７５（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）、６２．７６（ｄ，ＪＣＰ＝１６８．８Ｈｚ）、２１．９９、１６．６９（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ）。ＭＳ（ＧＴ，ＦＡＢ＋）：１５５（Ｔｓ）＋、２６７（Ｍ−２Ｅｔ）＋、２９５（Ｍ−Ｅｔ）＋、３２３（Ｍ＋１Ｈ）＋、６４５（２Ｍ＋１Ｈ）＋。
【０１７８】
化合物３：  ９−［２−（ジエチルホスホノメトキシ）エチル］アデニン
【０１７９】
【化４２】
0005584865.tif 000045
無水ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の化合物２（１．４８ｇ、８．２５ミリモル）の溶液に、室温でナトリウムｔ−ブトキシド（１．３８ｇ、８．２５ミリモル）を添加した。混合物を４０分撹拌し、次いで、乾燥ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のジエチルホスホネートＡ（２．６６ｇ、８．２５ミリモル）の溶液を添加した。７２時間後、混合物を濾過し、減圧下で濃縮した。水に溶解した残渣をＣＨＣｌ３で抽出した。有機抽出画分を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール：９／１）で精製し、白色固体として化合物３（７４０ｍｇ、２７％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：８．１０（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２）、８．０３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８）、４．３５（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｎ）、３．９３（ｄｑ，Ｊ＝８．０およびＪ＝７．０Ｈｚ，４Ｈ，ＣＨ２〜Ｐ（ＯＥｔ）２）、３．８６（ｔ，Ｊ＝５．０Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｏ）、３．７６（ｄ，ＪＰＨ＝８．５Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｐ）、１．１１（ｔｄ，Ｊ＝７．０ＨｚおよびＪ＝０．５Ｈｚ，６Ｈ，ＣＨ３〜Ｐ（ＯＥｔ）２）。１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：１５７．２９、１５３．７１、１５０．６７、１４３．３４、１１９．３４、７２．１５（ｄ，Ｊ＝１１．９Ｈｚ）、６６．６３（ｄ，ＪＣＰ＝１６６Ｈｚ）、６３．９９（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）、４４．５４、１６．６２（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ）。３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：２１．５６。ＭＳ（ＧＴ，ＦＡＢ＋）：１３６（Ｂ＋１Ｈ）＋、３３０（Ｍ＋１Ｈ）＋、３５２（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０１８０】
化合物４：  ９−［２−（ホスファニルメトキシ）エチル］アデニン
【０１８１】
【化４３】
0005584865.tif 000046
クロロトリメチルシラン（３．１５ｍＬ、２４．７８ミリモル）を、−７８℃で、無水ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のＬｉＡｌＨ４（９４０ｍｇ、２４．７８ミリモル）の撹拌溶液に滴下して添加した。得られた混合物を室温まで温め、２時間撹拌した。無水ＴＨＦ（２００ｍＬ）中の化合物３（２．０４ｇ、６．１９ミリモル）を、−５０℃で還元混合物に添加した。混合物を室温まで温め、２時間撹拌した。Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）およびＮａＯＨ（２０％、１０ｍＬ）を添加して反応を停止した。混合物をセライトで濾過した。有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール：９５／５）で精製し、白色粉末として化合物４（１．０８ｇ、７８％）を得た。ＨＰＬＣ純度＞９８％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：８．１０（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８）、７．９９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２）、４．３０（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｎ）、３．８７（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２Ｐ）、３．７１（ｔ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｏ）、３．０７および２．８１（ｄｍ，ＪＰＨ＝１９９．０Ｈｚ，２Ｈ，ＰＨ２）。１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：１５７．３１、１５３．６８、１５０．７１、１４３．３２、１１９．９４、７０．２３（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ）、６２．４９（ｄ，ＪＣＰ＝１２．６Ｈｚ）、４４．７０。３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：−１４４．６７（ｔｔ，ＪＰＨ＝１９９．０ＨｚおよびＪ＝７．８Ｈｚ）。ＭＳ（ＧＴ，ＦＡＢ＋）：１３６（Ｂ＋１Ｈ）＋、２２６（Ｍ＋１Ｈ）＋。
【０１８２】
化合物５：  ９−［２−（ヒドロキシホスフィニルメトキシ）エチル］アデニン
【０１８３】
【化４４】
0005584865.tif 000047
水（３０ｍＬ）およびＴＨＦ（３０ｍＬ）中の４（１．０８ｇ、４．７９ミリモル）の撹拌溶液に、２％過酸化水素水溶液（１０．８ｍＬ）を滴下して添加した。混合物を室温で１時間撹拌し、減圧下で濃縮し、凍結乾燥後に白色粉末として化合物５（１．２３ｇ、定量）を得た（Ｌｉｔ．２２９〜２３０℃）。ＨＰＬＣ純度＞９９％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：８．１７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８）、８．１５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２）、７．９６および５．８５（ｄｔ，ＪＰＨ＝５２８．０ＨｚおよびＪ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ，ＰＨ）、７．４０（ｂｓ，２Ｈ，ＮＨ２）、４．３６（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｎ）、３．９２（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｏ）、３．６９（ｄｄ，Ｊ＝７．２ＨｚおよびＪ＝２．１Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｐ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１５５．４４、１５１．６６、１４９．３５、１４１．３２、１１８．４６、７０．３３（ｄ，Ｊ＝１０．８Ｈｚ）、６９．０４（ｄ，ＪＣＰ＝１０９．０Ｈｚ）、４２．３９。３１Ｐ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２１．１５（ｄｍ，ＪＰＨ＝５２８．０Ｈｚ）。ＭＳ（ＧＴ，ＦＡＢ＋）：１３６（Ｂ＋１Ｈ）＋、２５８（Ｍ＋１Ｈ）＋、５１５（２Ｍ＋１Ｈ）＋。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）Ｃ８Ｈ１３Ｎ５Ｏ３Ｐ（Ｍ＋Ｈ）＋  ２５８．０７５６の計算値、実測値２５８．０７６５。
【０１８４】
化合物７：  （Ｒ）−９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン
【０１８５】
【化４５】
0005584865.tif 000048
無水ＤＭＦ（８０ｍＬ）中のアデニン（３．８５ｇ、２８．４９ミリモル）、（Ｒ）−プロピレンカーボネート（２．７ｍＬ、３１．３４ミリモル）および粉砕した水酸化ナトリウム（６０ｍｇ、１．４２ミリモル）の溶液を、撹拌しながら１４０℃で１６時間加熱した。冷却後、次いで、混合物を濾過して不溶解物質を除去し、濾液を減圧下で蒸発し、トルエンと共に３回、共蒸発させた。残渣をＥｔＯＡｃで摩砕し、次いで、濾過して白色固体を得、これをエタノール中で直ちに再結晶化して化合物７（４．５ｇ、８１％）を得た。融点１９３℃（Ｌｉｔ．１９２〜１９５℃）。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：８．１５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２）、８．０６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８）、７．２２（ｂｓ，２Ｈ，ＮＨ２）、５．０６（ｂｓ，１Ｈ，ＯＨ）、４．０６（ｍ，３Ｈ，ＣＨ２ＮおよびＣＨＯ）、１．１２（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ３）。１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１５５．８７、１５２．２１、１４９．６７、１４１．４４、１１８．５０、６４．５７、５０．０７、２０．８０。ＭＳ（ＧＴ，ＦＡＢ＋）：１３６（Ｂ＋１Ｈ）＋、１９４（Ｍ＋１Ｈ）＋、２１６（Ｍ＋Ｎａ）＋、２３２（Ｍ＋Ｋ）＋、３８７（２Ｍ＋１Ｈ）＋。
【０１８６】
化合物８：  （Ｒ）−９−［２−（ジエチルホスホノメトキシ）プロピル］アデニン
【０１８７】
【化４６】
0005584865.tif 000049
無水ＤＭＦ（３０ｍＬ）中の化合物７（１．４４ｇ、７．４４ミリモル）の溶液に、室温でナトリウムｔ−ブトキシド（１．２５ｇ、７．４４ミリモル）を添加した。混合物を１時間撹拌し、次いで、無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のジエチルホスホネート  Ａ（２．４０ｇ、７．４４ミリモル）の溶液を添加した。６４時間後、混合物を濾過し、減圧下で濃縮した。水に溶解した残渣をＣＨＣｌ３で抽出した。有機抽出画分を乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール：９／１）で精製し、白色固体として化合物８（７４０ｍｇ、２９％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：８．２３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２）、８．１５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８）、４．４１（ｄｄ，Ｊ＝１４．５ＨｚおよびＪ＝３．２Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨａＮ）、４．２２（ｄｄ，Ｊ＝１４．５ＨｚおよびＪ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨｂＮ）、４．１０（ｍ，１Ｈ，ＣＨＯ）、４．０３〜３．６９（ｍ，６Ｈ，ＣＨ２〜Ｐ（ＯＥｔ）２およびＣＨ２Ｐ）、１．３３（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，６Ｈ，ＣＨ３〜Ｐ（ＯＥｔ）２）、１．２７（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ３）。１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：１５７．３０、１５３．７０、１５０．８９、１４３．６３、１１９．７０、７７．６５（ｄ，Ｊ＝１２．３Ｈｚ）、６４．３２（ｄ，ＪＣＰ＝１６７Ｈｚ）、６４．０８（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）、６３．９５（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）、４９．１８、１６．７３（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ）、１６．７１、１６．７０（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ）。３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）：２２．１１。ＭＳ（ＧＴ，ＦＡＢ＋）：１３６（Ｂ＋１Ｈ）＋、３４４（Ｍ＋１Ｈ）＋、３６６（Ｍ＋Ｎａ）＋、６８７（２Ｍ＋１Ｈ）＋。
【０１８８】
化合物９：  （Ｒ）−９−［２−（ホスファニルメトキシ）プロピル］アデニン
【０１８９】
【化４７】
0005584865.tif 000050
クロロトリメチルシラン（２．６２ｍＬ、２０．６２ミリモル）を、−７８℃で無水ＴＨＦ（４０ｍＬ）中のＬｉＡｌＨ４（７８２ｍｇ、２０．６２ミリモル）の撹拌溶液に滴下して添加した。得られた混合物を室温まで温め、２時間撹拌した。無水ＴＨＦ（１５０ｍＬ）中の化合物８（１．７７ｇ、５．１５ミリモル）を、還元混合物へ−７８℃で添加した。混合物を室温まで温め、２時間撹拌した。Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）およびＮａＯＨ（２０％、１０ｍＬ）を添加して反応を停止した。混合物をセライトで濾過した。有機層を無水ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧下で濃縮した。フラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール：９５／５）で精製し、白色粉末として化合物９（７９５ｍｇ、６５％）を得た。ＨＰＬＣ純度＞９８％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：８．１１（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８）、７．９７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２）、４．２５〜３．６０（ｍ，５Ｈ，ＣＨ２Ｎ，ＣＨＯおよびＣＨ２Ｐ）、２．９０および２．１３（ｄｔ，ＪＰＨ＝１９８．５ＨｚおよびＪ＝６．３Ｈｚ，２Ｈ，ＰＨ２）、１．０８（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ３）。１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：１５７．３１、１５３．６８、１５０．８２、１４３．６７、１１９．７３、７５．９１（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ）、６０．２５（ｄ，ＪＣＰ＝１２．０Ｈｚ）、４９．４８、１７．１６。３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤ３ＯＤ）δ：−１４．８６（ｔｔ，ＪＰＨ＝１９８．５ＨｚおよびＪ＝７．３Ｈｚ）。ＭＳ（ＧＴ，ＦＡＢ＋）：１３６（Ｂ＋１Ｈ）＋、２４０（Ｍ＋１Ｈ）＋。
【０１９０】
化合物１０：  （Ｒ）−９−［２−（ヒドロキシホスフィニルメトキシ）プロピル］アデニン
【０１９１】
【化４８】
0005584865.tif 000051
水（２０ｍＬ）およびＴＨＦ（２０ｍＬ）中の化合物９（７９５ｍｇ、３．３２ミリモル）の撹拌溶液に、２％過酸化水素水溶液（７．５ｍＬ、２当量）を滴下して添加した。混合物を室温で１時間撹拌し、減圧下で濃縮し、凍結乾燥後に白色粉末として化合物１０（９００ｇ、定量）を得た。ＨＰＬＣ純度＞９９％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：８．２３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８）、８．２０（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２）、７．９５および５．８５（ｄｔ，ＪＰＨ＝５２８．０ＨｚおよびＪ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ，ＰＨ）、７．５９（ｂｓ，２Ｈ，ＮＨ２）、４．３８（ｄｄ，Ｊ＝１４．２ＨｚおよびＪ＝３．９Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨａＮ）、４．３１（ｄｄ，Ｊ＝１４．２ＨｚおよびＪ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨｂＮ）、４．１０（ｍ，１Ｈ，ＣＨＯ）、３．７５（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２Ｐ）、１．１３（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ３）。１３Ｃ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：１５５．２１、１５１．３５、１４９．５６、１４１．７９、１１８．１７、７５．４８（ｄ，Ｊ＝１１．０Ｈｚ）、６７．１９（ｄ，ＪＣＰ＝１１１．２Ｈｚ）、４６．６４、１６．９３。３１Ｐ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：２４．６４（ｄｍ，ＪＰＨ＝５２８．０Ｈｚ）。ＭＳ（ＧＴ，ＦＡＢ＋）：１３６（Ｂ＋１Ｈ）＋、２７２（Ｍ＋１Ｈ）＋、５４３（２Ｍ＋１Ｈ）＋。ＨＲＭＳ（ＦＡＢ）Ｃ９Ｈ１５Ｎ５Ｏ３Ｐ（Ｍ＋Ｈ）＋  ２７２．０９１３の計算値、実測値２７２．０９０５。
【実施例２】
【０１９２】
α−ボラノホスホネートヌクレオシド誘導体の合成
α−ボラノホスホネートヌクレオシドの調製のために使用される方法はスキーム４に記載される。ホスホルアミダイトまたはＨ−ホスホネート中間体を経由するα−ボラノホスフェートの調製のために記載されている方法はα−ボラノホスホネート誘導体の合成には適用できず、従って、特別の合成方法の開発を必要とした。特に、最終工程は、目標化合物の９−［２−（ボラノホスホノメトキシ）エチル］アデニン（６ａ）および（Ｒ）−９−［２−（ボラノホスホノメトキシ）プロピル］アデニン（６ｂ）を得るために活性化Ｈ−ホスフィネート中間体の硼素化反応を含む。
【０１９３】
【化４９】
0005584865.tif 000052
試薬および条件：  （ｆ）ＢＳＡ、ＴＨＦ、周囲温度、１時間、（ｇ）ＢＨ３、ＤＩＰＥＡ、ＴＨＦ、周囲温度、１時間、（ｈ）ＮＨ４ＯＨ：ＭｅＯＨ（１：１、ｖ／ｖ）。
【０１９４】
Ｈ−ホスフィネート中間体のリン原子は自由電子対を提供せず、ＢＨ３基の導入のための良好なドナーではないので、硼素化手順は、ジシリルホスホナイトを得るためにシリル化剤でＨ−ホスフィネートの中間体によるその場での活性化を必要とする。Ｈ−ホスフィネート５および１０を、無水ＴＨＦ中で、Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド（ＢＳＡ）で１時間、その場で活性化すると、これらの相当するジシリルホスホナイト中間体が生じる。硼素化条件を最適化するために、種々の硼素錯体を異なる溶媒中でテストした。急速且つ有効な硼素化は、最終的にボラン−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン錯体（ＢＨ３：ＤＩＰＥＡ）で得られた。ボラン−テトロヒドロフラン錯体（ＢＨ３：ＴＨＦ）、ボラン−ピリジン錯体（（ＢＨ３：ピリジン）およびボラン−ジメチルスルフィド錯体（（ＢＨ３：Ｍｅ２Ｓ）は、かなりの還元時間を必要とし、収率を改善しない。更に、ジボラン化生成物の形成を減少させるために、出発物質の消費と副生成物の発生との間の最良の妥協を得るために硼素錯体の量を最大２当量まで減少させた。ＢＨ３：ＤＩＰＥＡの２当量での５および１０のジシリルホスホナイトのin situでの硼素化は、−ボラノホスホネート中間体の形成をもたらした。単離せずに、得られた中間体をメタノール中の３０％濃縮水酸化アンモニウム（１：１、ｖ／ｖ）で処理してトリメチルシリル基を切断し、α−ボラノホスホネート６ａおよび６ｂを得ることができた。Ｐ−Ｂ結合の存在は、それぞれ８３ｐｐｍおよび９８ｐｐｍで代表的ピークを示す３１Ｐ  ＮＭＲで確認した。α−ボラノホスホネート６ａおよび６ｂを逆相クロマトグラフィーで精製し、それぞれ２８％および３２％の収率を得た。
【実施例３】
【０１９５】
チオホスホネートヌクレオシド誘導体６および１１の合成
ＰＭＥＡおよびＰＭＰＡ（以下の化合物６および１１）のチオホスホネート誘導体は非環式ヌクレオチド類似体であり、リンに二重結合している酸素原子が硫黄原子で置き換えられている。
【０１９６】
【化５０】
0005584865.tif 000053
【０１９７】
【化５１】
0005584865.tif 000054
スキーム５が示す通り、これらの２つの新規な化合物の調製での第１工程は、９−（２−ヒドロキシエチル）アデニン２（収率＝８５％）および（Ｒ）−９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン７（収率＝８１％）を得るためにアデニン１を特別に置換することを含む。
【０１９８】
これらの２つの分子は、次いで、予め調製されたジエチル［［（ｐ−トルエンスルホニル）オキシ］メチル］ホスホネートに対する求核置換で結合し、相当するジエチルホスホネート３および８をそれぞれ２７％および２９％の収率で生成する。
【０１９９】
以下の合成工程を実施した。
無水ＴＨＦ中、−７８℃で、水素化リチウムアルミニウムおよびトリメチルシリルクロリドによるジエチルホスホネートのホスフィンへの還元（化合物４および９、それぞれの収率：７８％および６５％）。
【０２００】
定量収率でＨ−ホスフィネート５および１０を生成するために、水−ＴＨＦ混合物中の過酸化水素の存在下でのホスフィンの酸化。
硫黄によるＨ−ホスフィネートの酸化。この最後の合成工程は、ホスフィネート形態（４価）の互変異性平衡をホスファイト形態（３価）に向けて移動させるために、シリル化剤によるＨ−ホスフィネート（ＰＶ）官能のホスファイト（ＰＩＩＩ）への活性化を含む（スキーム  ５ｂｉｓ）。ＰＭＥＡ６およびＰＭＰＡ１１のチオホスホネート誘導体は、無水ピリジン中のＢＳＡおよびＳ８／ＣＳ２／ピリジンの存在下でそれぞれ５２％および４７％の収率で得られる。逆相精製後、これらを水に溶解し、定量収率で、Ｄｏｗｅｘ  ５０ＷＸ２イオン交換カラム（Ｎａ＋形態）に通す。
【０２０１】
【化５２】
0005584865.tif 000055
化合物６：  ９−［２−（チオホスホノメトキシ）エチル］アデニン
【０２０２】
【化５３】
0005584865.tif 000056
化合物５（５０ｍｇ、０．１９４ミリモル）を真空下で５時間、五酸化リンで乾燥し、次いで、無水ピリジン（２ｍＬ）に溶解した。Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド（ＢＳＡ）（２４０μＬ、０．９７２ミリモル）をシリンジで添加し、溶液をアルゴン下で室温において約１時間撹拌した。ＣＳ２／ピリジン（１／１、１ｍＬ）中の硫黄元素（１３ｍｇ、０．３８８ミリモル）の新鮮な溶液を添加し、反応混合物を３０分間撹拌し、脱イオン水（５ｍＬ）で急冷した。溶媒を減圧下で蒸発させた後、残渣を逆相カラムクロマトグラフィー（線勾配０〜１００％  Ｂ）で精製した。生成物画分を集め、蒸発乾固し、凍結乾燥した。過剰のトリエチルアンモニウムビカーボネートを、脱イオン水で凍結乾燥を繰り返して除去した。残渣を水に溶解し、Ｄｏｗｅｘ  ５０ＷＸ２カラム（Ｎａ＋交換）で溶出し、凍結乾燥後に白色粉末として化合物６（３１ｍｇ、５２％）を得た。ＨＰＬＣ純度（＞９８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：８．０８（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８）、７．９３（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２）、４．２３（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｎ）、３．８７（ｔ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｏ）、３．６０（ｄ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｐ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：１５２．２３、１４９．１２、１４６．９８、１４１．９８、１１６．３８、７３．０１（ｄ，ＪＣＰ＝１２０．０Ｈｚ）、６８．５７（ｄ，ＪＣＰ＝１０．６Ｈｚ）、４２．２７。３１Ｐ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：６０．６７（ｔ，Ｊ＝５．２Ｈｚ）。ＨＲＭＳ（ＴＯＦ，ＥＳ−）Ｃ８Ｈ１１Ｎ５Ｏ３ＰＳ（Ｍ）−  ２８８．０３２０の計算値、実測値２８８．０３４７。
【０２０３】
化合物１１：  （Ｒ）−９−［２−（チオホスホノメトキシ）プロピル］アデニン
【０２０４】
【化５４】
0005584865.tif 000057
化合物１０（５０ｍｇ、０．１９４ミリモル）を真空下で５時間、五酸化リンで乾燥し、次いで無水ピリジン（２ｍＬ）に溶解した。Ｎ，Ｏ−ビス（トリメチルシリル）アセトアミド（ＢＳＡ）（２４０μＬ、０．９７２ミリモル）をシリンジで添加し、溶液をアルゴン下で室温において約１時間撹拌した。ＣＳ２／ピリジン（１／１、１ｍＬ）中の硫黄元素（１３ｍｇ、０．３８８ミリモル）の新鮮な溶液を添加し、反応混合物を３０分間撹拌し、脱イオン水（５ｍＬ）で急冷した。溶媒を減圧下で蒸発させた後、残渣を逆相カラムクロマトグラフィー（線勾配０〜１００％  Ｂ）で精製した。生成物画分を集め、蒸発乾固し、凍結乾燥した。過剰のトリエチルアンモニウムビカーボネートを、脱イオン水で凍結乾燥を繰り返して除去した。残渣を水に溶解し、Ｄｏｗｅｘ  ５０ＷＸ２カラム（Ｎａ＋交換）で溶出し、白色粉末として化合物１１（３１ｍｇ、４７％）を得た。ＨＰＬＣ純度（＞９８％）。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：８．１６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８）、８．０７（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２）、４．２９（ｄｄ，Ｊ＝２．４ＨｚおよびＪ＝１４．５Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨａＮ）、３．１０（ｄｄｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，Ｊ＝６．６ＨｚおよびＪ＝１４．６Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨｂＮ）、３．９５（ｍ，１Ｈ，ＣＨＯ）、３．６３（ｄｄｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，Ｊ＝６．５ＨｚおよびＪ＝１２．８Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨａＰ）、３．４９（ｄｄｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，Ｊ＝６．１ＨｚおよびＪ＝１２．８Ｈｚ，１Ｈ，ＣＨｂＰ）、１．０５（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ３）。１３Ｃ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ；１５２．６５、１４９．１２、１４７．２５、１４２．２５、１１６．２６、７４．４６（ｄ，ＪＣＰ＝１０．７Ｈｚ）、７０．８９（ｄ，ＪＣＰ＝１２１．１Ｈｚ）、４６．３９、１４．７３。３１Ｐ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：６１．６０（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ）。ＨＲＭＳ（ＴＯＦ，ＥＳ−）Ｃ９Ｈ１３Ｎ５Ｏ３ＰＳ（Ｍ）−  ３０２．０４７７の計算値、実測値３０２．０４６５。
【実施例４】
【０２０５】
チオホスホネートジホスフェート誘導体１２および１３の合成
ＨＩＶ−１逆転写酵素（ＲＴ）の阻害検討を実施するために、チオホスホネートジホスフェート化合物１２（Ｓ−ＰＭＥＡｐｐ）および１３（Ｓ−ＰＭＰＡｐｐ）を、以下のスキーム６に記載されている方法により合成した。
【０２０６】
【化５５】
0005584865.tif 000058
チオホスホネート６および１１を、ＤＭＦ中のカルボニルジイミダゾールで、周囲温度において活性化した。得られた中間体を、トリブチルアミンの存在下で、ＤＭＦ中の０．５Ｍトリブチルアンモニウムピロホスフェートの溶液と反応させ、精製し、Ｄｏｗｅｘイオン交換（Ｎａ＋）に通した後に、チオホスホネートジホスフェート誘導体１２（Ｓ−ＰＭＥＡｐｐ）および１３（Ｓ−ＰＭＰＡｐｐ）をそれぞれ１４％および２２％の収率で得た。
【０２０７】
化合物１２：  ９−［２−（ジホスホリルチオホスホノメトキシ）エチル］アデニン
【０２０８】
【化５６】
0005584865.tif 000059
チオホスホネート６（２０ｍｇ、０．０６９ミリモル）をＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、１，１’−カルボニルジイミダゾール（３０ｍｇ、０．２７８ミリモル）で処理した。得られた混合物を室温で２４時間撹拌した。過剰のＣＤＩを無水メタノール（８μＬ）の添加により分解し、撹拌を３０分間続けた。無水トリ−ｎ−ブチルアミン（５０μＬ）およびトリブチルアンモニウムピロホスフェート（ＤＭＦ中の０．５Ｍ溶液の７００μＬ）を添加し、混合物を室温で３日間撹拌した。５ｍＬの冷水を添加して反応を停止した。溶媒を真空下で除去し、残渣を水に溶解し、溶液を、ＤＥＡＥ−Ｓｅｐｈａｄｅｘカラム（線勾配０〜１００％  Ｂ）に供給した。適当な画分を集め、蒸発乾固し、凍結乾燥した。残渣を水に溶解し、Ｄｏｗｅｘ  ５０ＷＸ２（Ｎａ＋形態）カラムに通し、トリナトリウム塩として化合物１２（６．３ｍｇ、１４％）を得た。ＨＰＬＣ純度（＞９９％）。３１Ｐ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：６１．９６、−１０．８０、−２２．９８。ＨＲＭＳ（ＴＯＦ，ＥＳ−）Ｃ８Ｈ１３Ｎ５Ｏ９Ｐ３Ｓ（Ｍ）−  ４４７．９６４７の計算値、実測値４４７．９６５６。
【０２０９】
化合物１３：  （Ｒ）−９−［２−（ピロホスホルオキシチオホスホノメトキシ）プロピル］アデニン
【０２１０】
【化５７】
0005584865.tif 000060
チオホスホネート１１（１５ｍｇ、０．０５ミリモル）を、ＤＭＦ（２ｍＬ）に溶解し、１，１’−カルボニルジイミダゾール（２０ｍｇ、０．２ミリモル）で処理した。得られた混合物を室温で２４時間撹拌した。過剰のＣＤＩを無水メタノール（６μＬ）の添加により分解し、撹拌を３０分間続けた。無水トリ−ｎ−ブチルアミン（３６μＬ）およびトリブチルアンモニウムピロホスフェート（ＤＭＦ中の０．５Ｍ溶液の５００μＬ）を添加し、混合物を室温で３日間撹拌した。５ｍＬの冷水を添加して反応を停止した。溶媒を真空下で除去し、残渣を水に溶解し、溶液をＤＥＡＥ−Ｓｅｐｈａｄｅｘカラム（線勾配０〜１００％  Ｂ）に供給した。適当な画分を集め、蒸発乾固し、凍結乾燥した。残渣を水に溶解し、Ｄｏｗｅｘ  ５０ＷＸ２（Ｎａ＋形態）カラムに通し、トリナトリウム塩として化合物１３（５．２ｍｇ、２２％）を得た。ＨＰＬＣ純度（＞９９％）。３１Ｐ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）δ：６０．８９、−５．７７、−２１．７６。ＨＲＭＳ（ＴＯＦ，ＥＳ−）Ｃ９Ｈ１５Ｎ５Ｏ９Ｐ３Ｓ（Ｍ）−  ４６１．９８０３の計算値、実測値４６１．９８０２。
【実施例５】
【０２１１】
Ｒ１が、−ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、−ＣＨ２Ｆまたはハロメチルであるチオホスホネートヌクレオシド誘導体の合成
本発明のその他のチオホスホネート誘導体は、次の合成スキームにより調製し得る。
【０２１２】
【化５８】
0005584865.tif 000061
読者は十分に理解すると思うが、Ｒ１を持つ炭素原子は、Ｒ−またはＳ−配置、あるいはラセミ体であり得る。
【実施例６】
【０２１３】
フルオロホスホネート誘導体の合成
フルオロホスホネート誘導体は、次の合成スキームにより調製し得る：
【０２１４】
【化５９】
0005584865.tif 000062
読者は十分に理解すると思うが、上記方法は、Ｒ１が水素、メチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチルおよびＣ１〜６ハロアルキルである化合物で実施し得るものであり、Ｒ１を持つ炭素原子は、Ｒ−またはＳ−配置、あるいはラセミ体であり得る。
【実施例７】
【０２１５】
アミノチオホスホネート誘導体の合成
アミノチオホスホネート誘導体は、次の合成スキームにより調製し得る。
【０２１６】
【化６０】
0005584865.tif 000063
この方法は、次の構造を有するチオホスホンアミデートプロドラッグの合成に適用し得る。
【０２１７】
【化６１】
0005584865.tif 000064
読者は、更なる手引きのために、Wagner C. R. et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 1995, 5, 1819-1824を参照することができる。
【０２１８】
読者は十分に理解すると思うが、上記の方法は、Ｒ１が水素、メチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびＣ１〜６ハロアルキルである化合物で実施され得るもので、Ｒ１を持つ炭素原子はＲ−またはＳ−配置、あるいはラセミ体であり得る。
【実施例８】
【０２１９】
アルキルチオホスホネート誘導体の合成
アルキルチオホスホネート誘導体は、次の合成スキームにより調製し得る。
【０２２０】
【化６２】
0005584865.tif 000065
読者は十分に理解すると思うが、上記の方法は、Ｒ１が水素、メチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、およびＣ１〜６ハロアルキルである化合物で実施され得るもので、Ｒ１を持つ炭素原子はＲ−またはＳ−配置、あるいはラセミ体であり得る。
【実施例９】
【０２２１】
チオホスホネート誘導体からのモノおよびビス−ＰＯＣプロドラッグの合成
プロドラッグは生物学的活性を欠く物質であり、細胞機構の作用下で活性物質（薬剤）へ変換される。プロドラッグは、生物学的活性体から合成し得、生物学的活性に関わる化学的機能が酵素不安定基で暫定的に保護されている。酵素（エステラーゼ、レダクターゼ）の作用下で、これらの基は切断されて活性分子を再生する。したがって、これらの酵素不安定基を賢明に選択して、細胞内媒質と細胞外媒質の間の酵素含有量の差を利用することにより、脱マスキング工程で使用される酵素活性が最大である場所で薬剤を特異的に放出することを可能とする。一般的にプロドラッグは、インビボで、薬剤の薬理学的特性（安定性、溶解性、吸収性、分散性、標的性、代謝性）を改善するために使用される。
【０２２２】
ヌクレオチド類似体の薬理学的特性を改善するために、種々のプロドラッグが開発されている。特に、アデホビル（adefovir）（ＰＭＥＡ）およびテノフォビル（tenofovir）（ＰＭＰＡ）は、プロドラッグの形態での治療で使用されており（, Antimicrob. Agents Chemother., vol. 42(3), p: 612-617, 1998）、モノホスホリル化体を酵素切断により細胞内に遊離する。
【０２２３】
チオホスホネート誘導体６および１１の薬理学的特性を改善するために、細胞エステラーゼのためのエステル官能基質を有する、ＰＯＣ基またはイソプロピルオキシメチルカルボニルを持つ、スキーム７および８に記載される方法によるＰＭＥＡ  ６およびＰＭＰＡ  １１のチオホスホネート誘導体のモノおよびビスプロドラッグの合成を実施することが可能である（上で引用したRobins et al., 1998）。
【０２２４】
イソプロピルオキシメチルカルボニルクロリドは、文献（J.D. Thomas et al. Tetrahedron Letters, 2007, 48, 109-112）に記載されたプロトコルにより予め調製される。
モノ−ＰＯＣ化合物１４および１６ならびにビス−ＰＯＣ化合物１５および１７を別々のプロトコルにより得た。
【０２２５】
【化６３】
0005584865.tif 000066
１−メチル−２−ピロリジノンおよびトリエチルアミン中のＳ−ＰＭＥＡ６またはＳ−ＰＭＰＡ１１の溶液を、６０℃で３０分間加熱した。次いで、予め合成されたイソプロピルクロロメチルカーボネートを添加し、反応混合物を６０℃で３時間撹拌した。精製し、Ｄｏｗｅｘ  ５０ＷＸ２イオン交換カラム（Ｎａ＋形態）に通した後、モノ−ＰＯＣ化合物１４および１６を、それぞれ３８％および１４％の収率で得た。
【０２２６】
【化６４】
0005584865.tif 000067
Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシル−４−モルホリンカルボキシアミジン、および予め合成されたイソプロピルクロロメチルカーボネートを、ＤＭＦ中のＳ−ＰＭＥＡ  ６またはＳ−ＰＭＰＡ  １１の溶液に添加した。反応混合物を周囲温度で３６時間撹拌した。精製後、期待通りのビス−ＰＯＣ化合物１５および１７を、それぞれ１５％および１０％の収率で得た。
【０２２７】
化合物：  クロロメチルイソプロピルカーボネート
【０２２８】
【化６５】
0005584865.tif 000068
プロパン−２−オール（７８５ｍｇ、１３．１９ミリモル）を、乾燥エチルエーテル中のクロロメチルクロロホルメート（１．７ｇ、１３．１９ミリモル）の溶液に添加した。反応混合物を０℃まで冷却した。ピリジン（１．０４３ｇ、１３．１９ミリモル）を、撹拌しながら滴下して添加した。その後、反応混合物を室温で２０時間撹拌した。この異種混合物を濾過し、濾液をクエン酸１％（２ｘ２０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ３１％（２ｘ２０ｍＬ）およびブライン（brine）（２０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、蒸発させて、所望の化合物（１．７１ｇ、８５％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：５．６９（ｓ，２Ｈ，ＣｌＣＨ２Ｏ）、４．９２（セプタプレット，Ｊ＝６．２６Ｈｚ，１Ｈ，ＯＣＨ（ＣＨ３）２）、１．３０（ｄ，Ｊ＝６．２７Ｈｚ，６Ｈ，ＯＣＨ（ＣＨ３）２）。１３Ｃ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：１５２．６８、７３．６０、７１．９５、２１．５２（２Ｃ）。
【０２２９】
化合物１４：  ９−［２−（チオホスホノメトキシ）エチル］アデニン、モノイソプロピルオキシカルボニルオキシメチルエステル
【０２３０】
【化６６】
0005584865.tif 000069
無水の脱気した１−メチル−２−ピロリジノン（２ｍＬ）の２ｍＬ中の９−［２−（チオホスホノメトキシ）エチル］アデニン  ６（１５ｍｇ、０．０５１８ミリモル）およびトリエチルアミン（ＴＥＡ）（２６ｍｇ、０．２５９ミリモル）の混合物を６０℃で３０分間加熱した。次いで、イソプロピルクロロメチルカーボネート（ＰＯＣＣｌ）（３９ｍｇ、０．２５９ミリモル）を添加した。反応混合物を６０℃で３時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、粗物質を逆相分離用ＨＰＬＣ（Ｘ−ｔｅｒｒａカラム）で精製した。イオン交換（Ｄｏｗｅｘ  ５０ＷＸ２、Ｎａ＋形態）および凍結乾燥で、白色固体の所望の化合物１４（８ｍｇ、３８％）を得た。ＨＰＬＣ純度＞９７％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：８．３０（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８）、８．２１（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２）、５．９３（ｓ  大きい，２Ｈ，ＮＨ２）、５．４５（ｄ，Ｊ＝１３．５７Ｈｚ，２Ｈ，ＯＣＨ２Ｏ）、４．８５（七重線，Ｊ＝６．２５Ｈｚ，１Ｈ，ＯＣＨ（ＣＨ３）２）、４．４２（ｔ，Ｊ＝４．９０Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｎ）、３．９６（ｄ，Ｊ＝４．９０Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｏ）、３．７９（ｄ，Ｊ＝５．８４Ｈｚ，２Ｈ，ＯＣＨ２Ｐ）、１．２４（ｄ，Ｊ＝６．２９Ｈｚ，６Ｈ，ＯＣＨ（ＣＨ３）２）。３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：３１．０５。ＭＳ：（ＴＯＦ  ＭＳ  ＥＳ−）：４０４．３（Ｍ−１Ｈ）＋、８０９．６（２Ｍ−１Ｈ）＋。
【０２３１】
化合物１５：  ９−［２−（チオホスホノメトキシ）エチル］アデニン、ビスイソプロピルオキシカルボニルオキシメチルエステル
【０２３２】
【化６７】
0005584865.tif 000070
無水の脱気したＤＭＦの２ｍＬ中の９−［２−（チオホスホノメトキシ）エチル］アデニン  ６（１５ｍｇ、０．０５１８ミリモル）の撹拌溶液に、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシル−４−モルホリンカルボキシアミジン（３０ｍｇ、０．１０３ミリモル）およびイソプロピルクロロメチルカーボネート（ＰＯＣＣｌ）（３９ｍｇ、０．２５９ミリモル）を添加した。反応混合物を室温で３６時間撹拌した。不溶解物を濾過し、濾液を真空中で濃縮した。次いで、残渣をトルエン（１ｍＬ）および水（１ｍＬ）に分配して分離し、次いで、水相をトルエンで抽出した（２×１ｍＬ）。有機層を一緒にして真空中で濃縮した。残渣を、５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、所望の化合物１５（４ｍｇ、１５％）を得た。ＨＰＬＣ純度＞９８％。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：８．３０（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８）、８．２１（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２）、５．９３（ｓ  大きい，２Ｈ，ＮＨ２）、５．４５（ｍ，４Ｈ，ＯＣＨ２Ｏ）、４．８８（ｍ，２Ｈ，ＯＣＨ（ＣＨ３）２）、４．４０（ｔ，Ｊ＝４．９０Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｎ）、３．９４（ｄ，Ｊ＝４．９０Ｈｚ，２Ｈ，ＣＨ２Ｏ）、３．７９（ｄ，Ｊ＝５．８４Ｈｚ，２Ｈ，ＯＣＨ２Ｐ）、１．２９（ｍ，１２Ｈ，ＯＣＨ（ＣＨ３）２）。３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：４２．１０。ＭＳ：（ＴＯＦ  ＭＳ  ＥＳ＋）：５２２．３（Ｍ＋１Ｈ）＋。
【０２３３】
化合物１６：  （Ｒ）−９−［２−（チオホスホノメトキシ）プロピル］アデニン、モノイソプロピルオキシカルボニルオキシメチルエステル
【０２３４】
【化６８】
0005584865.tif 000071
無水の脱気した１−メチル−２−ピロリジノン（２ｍＬ）の２ｍＬ中の（Ｒ）−９−［２−（チオホスホノメトキシ）プロピル］アデニン  １１（１５ｍｇ、０．０４９４ミリモル）およびトリエチルアミン（ＴＥＡ）（２５ｍｇ、０．２４７ミリモル）の混合物を６０℃で３０分間加熱した。次いで、イソプロピルクロロメチルカーボネート（ＰＯＣＣｌ）（３７ｍｇ、０．２４７ミリモル）を添加した。反応混合物を６０℃で３時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去し、粗物質を逆相分離用ＨＰＬＣ（Ｘ−ｔｅｒｒａカラム）で精製した。イオン交換（Ｄｏｗｅｘ  ５０ＷＸ２、Ｎａ＋形態）および凍結乾燥で、白色固体の所望の化合物１６（３ｍｇ、１５％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：８．３５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８）、８．２５（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２）、６．４５（ｓ  大きい，２Ｈ，ＮＨ２）、５．４３（ｄ，Ｊ＝１３．６２Ｈｚ，２Ｈ，ＯＣＨ２Ｏ）、４．８１（七重線，Ｊ＝６．２５Ｈｚ，，１Ｈ，ＯＣＨ（ＣＨ３）２）、４．４０（ｄｄ，Ｊ１＝１４．０６  Ｊ２＝２．５２，１Ｈ，ＣＨａＮ）、４．１７（ｄｄ，Ｊ１＝１４．１３  Ｊ２＝７．１８，１Ｈ，ＣＨｂＮ）、４．１３（ｍ，１Ｈ，ＣＨ（Ｍｅ）Ｏ）、３．７６（ｍ，２Ｈ，ＯＣＨ２Ｐ）、１．２８（ｄ，Ｊ＝６．２８Ｈｚ，６Ｈ，ＯＣＨ（ＣＨ３）２）、１．２１（ｄ，Ｊ＝６．２０Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）。３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：３１．８２。ＭＳ：（ＴＯＦ  ＭＳ  ＥＳ−）：４１８．２（Ｍ−１Ｈ）＋、８３７．４（２Ｍ−１Ｈ）＋。
【０２３５】
化合物１７：  （Ｒ）−９−［２−（チオホスホノメトキシ）プロピル］アデニン、ビスイソプロピルオキシカルボニルオキシメチルエステル
【０２３６】
【化６９】
0005584865.tif 000072
無水の脱気したＤＭＦの２ｍＬ中の（Ｒ）−９−［２−（チオホスホノメトキシ）プロピル］アデニン  １１（１５ｍｇ、０．０４９５ミリモル）の撹拌溶液に、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシル−４−モルホリンカルボキシアミジン（２９ｍｇ、０．０９８９ミリモル）およびイソプロピルクロロメチルカーボネート（ＰＯＣＣｌ）（３７．７ｍｇ、０．２４７ミリモル）を添加した。反応混合物を室温で３６時間撹拌した。不溶解物を濾過し、濾液を真空中で濃縮した。次いで、残渣をトルエン（１ｍＬ）および水（１ｍＬ）に分割して分離し、次いで水性層をトルエンで抽出した（２×１ｍＬ）。有機層を一緒にして真空中で濃縮した。残渣を、５％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出するシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、所望の化合物１７（３ｍｇ、１１％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：８．３２（ｓ，１Ｈ，Ｈ−８）、８．２６（ｓ，１Ｈ，Ｈ−２）、６．３９（ｓ  大きい，２Ｈ，ＮＨ２）、５．４６（ｍ，４Ｈ，ＯＣＨ２Ｏ）、４．９０（ｍ，２Ｈ，ＯＣＨ（ＣＨ３）２）、４．４０（ｄｄ，Ｊ１＝１４．０６  Ｊ２＝２．５２，１Ｈ，ＣＨａＮ）、４．１７（ｄｄ，Ｊ１＝１４．１３  Ｊ２＝７．１８，１Ｈ，ＣＨｂＮ）、４．１３（ｍ，１Ｈ，ＣＨ（Ｍｅ）Ｏ）、３．７６（ｍ，２Ｈ，ＯＣＨ２Ｐ）、１．３１（ｍ，１２Ｈ，ＯＣＨ（ＣＨ３）２）、１．２０（ｄ，６．２０Ｈｚ，３Ｈ，ＣＨ（ＣＨ３）Ｏ）。３１Ｐ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ：４２．２５。ＭＳ：（ＴＯＦ  ＭＳ  ＥＳ＋）：５３６．４（Ｍ＋１Ｈ）＋。
【実施例１０】
【０２３７】
チオホスホネート誘導体からのビス−ＳＡＴＥプロドラッグの合成
ＳＡＴＥチオホスホネートプロドラッグ誘導体は、次の合成スキームにより調製し得る。
【０２３８】
【化７０】
0005584865.tif 000073
読者は、更なる手引きのために、Perigaud C. et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters. 3(12), 2521-2526, 1993を参照することができる。
【０２３９】
読者は十分に理解すると思うが、上記の方法は、Ｒ１が水素、メチル、エチル、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチルおよびＣ１〜６ハロアルキルである化合物で実施され得るもので、Ｒ１を持つ炭素原子はＲ−またはＳ−配置、あるいはラセミ体であり得る。
【実施例１１】
【０２４０】
抗ウイルス活性
１）抗ＨＢＶ検査
ａ）感染ＨｅｐＡＤ３８細胞での検査
テトラサイクリン反応細胞系ＨｅｐＡＤ３８を使用した（Ladner et al., Antimicrob. Agents Chemother. 41:1715-1720, 1997）。これらは、野生型ウイルスのプレゲノムＲＮＡのｃＤＮＡコピーで安定にトランスフェクトされた肝癌細胞である。培地からテトラサイクリンを除去すると、ウイルスの複製開始をもたらす。これは、通常使用されるＨｅｐ  Ｇ２．２．１５細胞系とは対照的に、バックグラウンドのウイルス性ＤＮＡの合成が無い、または非常に限定的であるという利点を提供する。細胞を３７℃で、加湿した５％ＣＯ２／大気中において播種培地、１０％（ｖ／ｖ）熱不活化ウシ胎児血清、ペニシリン１００ＩＵ／ｍｌ、ストレプトマイシン５０μｇ／ｍｌ、カナマイシン１００μｇ／ｍｌ、Ｇ４１８  ４００μｇ／ｍｌ、およびテトラサイクリン０．３μｇ／ｍｌを補充したＤＭＥＭ／ハムＦ１２（５０／５０）で培養した。アッセイを開始した際、細胞は、４８穴プレートに１ウェル当たり５×１０５個の密度で播種した。２〜３日後、培養物を、予め温めたＰＢＳで洗浄することによってウイルス生成について誘導し、抗ウイルス化合物を含むまたは含まないアッセイ培地（テトラサイクリンおよびＧ４１８を含まない播種培地）２００μｌを与えた。培地は３日後に交換した。抗ウイルス効果を、誘導後６日目に細胞内ウイルス性ＤＮＡのレベルをリアル・タイム定量的ＰＣＲ（Ｑ−ＰＣＲ）法で測定することによって定量した。全細胞性ＤＮＡは、市販のキットを用いて細胞から抽出した。Ｑ−ＰＣＲは、２５μｌの反応容量中で、順方向プライマー（５’−ＣＣＧ  ＴＣＴ  ＧＴＧ  ＣＣＴ  ＴＣＴ  ＣＡＴ  ＣＴＧ−３’（配列番号１）、最終濃度６００ｎＭ）、逆方向プライマー（５’−ＡＧＴ  ＣＣＡ  ＡＧＡ  ＧＴＹ  ＣＴＣ  ＴＴＡ  ＴＲＹ  ＡＡＧ  ＡＣＣ  ＴＴ−３’（配列番号２）、最終濃度６００ｎＭ）、およびＴａｑｍａｎプローブ（６−ＦＡＭ−ＣＣＧ  ＴＧＴ  ＧＣＡ  ＣＴＴ  ＣＧＣ  ＴＴＣ  ＡＣＣ  ＴＣＴ  ＧＣ−ＴＡＭＲＡ（配列番号３）、最終濃度１５０ｎＭ）で、ＴａｑＭａｎ  Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ  ＰＣＲ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘを使用して実施した。反応は、ＳＤＳ  ７０００を使用して分析した。ＨＢＶゲノムの全長挿入断片を含有するプラスミドを、標準曲線を作成するために使用した。処理した培養物中に生成されたウイルス性ＤＮＡの量は、偽処理試料の百分率として表した。最初のアッセイで選択的抗ウイルス活性を示した化合物を、活性を確認するために再検査した。種々の化合物の細胞分裂阻害効果を、親肝癌細胞系ＨｅｐＧ２を使用して評価した。指数関数的に増殖しているＨｅｐＧ２細胞での化合物の効果を、ＭＴＳ法を用いて評価した。簡潔には、細胞を１ウェル当たり３０００個の密度で播種し（９６穴プレート）、化合物の存在下または非存在下で３日間増殖させ、その後９６穴プレートリーダーで光学密度を測定し、細胞密度を決定した。
【０２４１】
結果を以下の表ＩおよびＩＩに示す。
【０２４２】
【表２】
0005584865.tif 000074
結果は、Ｓ−ＰＭＥＡ６誘導体がＰＭＥＡと同等の有効性を示すことを表している。
【０２４３】
【表３】
0005584865.tif 000075
結果は、Ｓ−ＰＭＰＡ誘導体１１は、ＰＭＰＡと同等の有効性を示すが、細胞毒性の低さによって６倍大きい選択指数を有することを示している。
【０２４４】
ｂ）感染Ｈｕｈ７細胞での検査
結果を以下の表ＩＩＩおよび表ＩＶに示す。
【０２４５】
【表４】
0005584865.tif 000076
結果は、Ｓ−ＰＭＥＡ誘導体６がＰＭＥＡより優れた有効性を示すことを表している。
【０２４６】
【表５】
0005584865.tif 000077
結果は、Ｓ−ＰＭＰＡ誘導体１１がＰＭＰＡと同等の有効性を示すことを表している。
【０２４７】
２）野生型ウイルスでの抗ＨＩＶ検査
ａ）ＨＩＶ−１（ＩＩＩＢ）およびＨＩＶ−２（ＲＯＤ）での検査
化合物６および１１をＣＥＭ細胞培養物においてＨＩＶ−１（ＩＩＩＢ）およびＨＩＶ−２（ＲＯＤ）に対して評価した。簡潔には、ＣＥＭ細胞（１ｍｌ当たり細胞４．５×１０５個）を新鮮培地に懸濁し、細胞懸濁物１ｍｌ当たり１００ＣＣＩＤ５０でＨＩＶ−１を感染させた。次いで、感染細胞懸濁物１００μｌをマイクロプレート・ウェルに移し、検査化合物の適切な希釈物１００μｌと混合し、さらに３７℃でインキュベートした。４〜５日後、巨細胞形成をＣＥＭ細胞培養物中で顕微鏡的に記録した。５０％有効濃度（ＥＤ５０）は、ウイルス感染ＣＥＭ細胞培養物中での合胞体形成を５０％妨げるために必要な化合物濃度に相当する。
【０２４８】
結果を以下の表Ｖに示す。
【０２４９】
【表６】
0005584865.tif 000078
結果は、Ｓ−ＰＭＥＡ６およびＳ−ＰＭＰＡ１１について細胞毒性が無くかつ良好な選択指数で、感染細胞培養物中におけるＨＩＶ−１およびＨＩＶ−２に対して良好な有効性を示している。さらにそれらは、同ウイルスにおいてＰＭＥＡおよびＰＭＰＡについて見出されたものと同等の濃度範囲内で活性である（国際出願公開公報ＷＯ０３００２５８０、２００３年１月９日公開）。
【０２５０】
ｂ）ＨＩＶ−１  ＬＡＩでの検査
Ｓ−ＰＭＥＡ６およびＳ−ＰＭＰＡ１１ならびに参照化合物ＰＭＥＡおよびＰＭＰＡの抗ＨＩＶ活性を、ＨＩＶ−１−ＬＡＩを感染させた（１００  「組織培養感染量５０％」、ＴＣＩＤ５０）ＣＭＳＰ培養物において評価した。ＣＭＳＰは、フィコール−ハイパック密度勾配によってヒト末梢血の他の有形成分から分離し、ＰＨＡ−Ｐ  １μｇ／ｍｌで、４８時間で活性化し、次いで１０％ＳＶＦ、２ｍＭ  Ｌ−グルタミン、１％ＰＳＮおよび２０ＩＵ／ｍｌ組換えヒト・インターロイキン−２を補充したＲＰＭＩ１６４０培地で培養した。活性化したＣＭＳＰを、６種の異なる濃度の化合物で処理し、リンパ球指向性参照株ＨＩＶ−１−ＬＡＩを感染させた（Barre-Sinoussi, F et al. (AIDS). Science 1983, 220, 868）。７日間の培養後、ウイルス複製をＲｅｔｒｏｓｙｓ（登録商標）ｋｉｔ  （イノバゲン社）を用いて細胞培養上清中のＲＴの酵素活性を測定することによって定量した。分子の細胞毒性を並行して未感染細胞の培養物でのＭＴＴ検査によって評価した。５０％有効濃度（ＥＣ５０）および５０％細胞毒性濃度（ＴＣ５０）をＳｏｆｔＭａｘ  Ｐｒｏ  ６．６  ｓｏｆｔｗａｒｅ（モレキュラー・デバイス社）を用いて算出した。
【０２５１】
結果を以下の表ＶＩおよび表ＶＩＩに示す：
【０２５２】
【表７】
0005584865.tif 000079
結果は、Ｓ−ＰＭＥＡ誘導体６は、ＰＭＥＡよりわずかに低い抗ウイルス活性を示すが、細胞毒性が低いことからより良い選択指数を有することを表す。
【０２５３】
【表８】
0005584865.tif 000080
Ｓ−ＰＭＰＡ１１は活性であり、その活性はＰＭＰＡのそれに匹敵する。Ｓ−ＰＭＰＡは細胞毒性でない（検査した最高濃度：２００μＭ）。選択指数は同等である（Ｓ−ＰＭＰＡ対ＰＭＰＡ）。
【０２５４】
３）耐性ウイルスでの抗ＨＩＶ検査
化合物６および１１の有効性は、培養物中でＣＥＭ細胞（ヒト・リンパ球）において耐性ウイルスに対しても評価し得る。例えば、以下の手順を使用できる。ＣＥＭ細胞（１ｍｌ当たり細胞２〜３×１０３個）を９６穴マイクロプレート（２００μｌ）で、培地中のさまざまな濃度の化合物６，１１ならびに参照化合物ＰＭＥＡおよびＰＭＰＡの存在下で培養し、１００ＣＣＩＤ５０のＨＩＶ−１を感染させ、３７℃でインキュベートする。４日後、巨細胞の形成をそれぞれの細胞培養物中において顕微鏡で測定する。ＥＣ５０値は、感染ＣＥＭ細胞の培養物での合胞体形成を５０％低減するために必要な有効濃度に相当する。
【０２５５】
逆転写酵素（ＲＴ）のいくつかの阻害剤への耐性についての変異を含有するＨＩＶ−１のいくつかの臨床分離株（クリステル  バン  ラエテム（Kristel Van Laethem）、レガ医学研究所より提供、Schmit J-C, et al． Antiviral Therapy 1998; 3: 81-8、Van Laethem K, et al. AIDS 2000; 14: 469-71）を、ＣＥＭ培養物において標的化合物に対するそれらの感受性を研究するために既に記載の通り検査する。分離されたウイルスのＲＴ中に以下の変異が存在する。ＨＩＶ−１／Ｃ１９：  Ｍ４１Ｌ＋Ｖ１１８Ｉ＋Ｌ２１０Ｗ＋Ｔ２１５Ｙ、ＨＩＶ−１／Ｃ２０：  Ｍ４１Ｌ＋Ｄ６７Ｎ＋Ｖ１１８Ｉ＋Ｍ１８４Ｖ＋Ｌ２１０Ｗ＋Ｔ２１５Ｙ、ＨＩＶ−１／Ｌ６．５：  Ｓ６８Ｇ＋Ｋ７０Ｔ＋Ｖ７５Ｉ＋Ｆ７７Ｌ＋Ｋ１０３Ｎ＋Ｆ１１６Ｙ＋Ｑ１５１Ｍ＋Ｋ２１９Ｒ、ＨＩＶ−１／ＤＥ４３４．４：  Ｋ６５Ｒ＋Ｓ６８Ｇ＋Ｔ６９Ｉ＋Ｖ７５Ｔ＋Ｑ１５１Ｍ、ＨＩＶ−１／ＨＡ２０．１７：  Ａ６２Ｖ＋Ｖ７５Ｉ＋Ｆ７７Ｌ＋Ｑ１５１Ｍ＋Ｍ１８４Ｖ。
【０２５６】
４）ウイルスのパネルに対する検査
以下を含むウイルスのパネルに対する抗ウイルス活性についても化合物６および１１を評価した。
−  ＨＥＬ細胞における、単純ヘルペス・ウイルス１型（herpes simplex virus type 1）（ＨＳＶ−１、ＫＯＳ、およびＫＯＳ  ＡＣＶ  ＴＫ−）ならびに２型（ＨＳＶ−２、Ｇ）、ワクシニア・ウイルス（vaccinia virus）、水疱性口内炎ウイルス（vesicular stomatitis virus）、
−  Ｈｅｌａ細胞における、コクサッキーＢ４・ウイルス（Coxsackie B4 virus）および呼吸器多核体ウイルス（respiratory syncytial virus）、
−  Ｖｅｒｏ細胞における、パラインフルエンザ−３−ウイルス（Parainfluenza-3-virus）、レオウイルス−１（Reovirus-1）、シンドビス・ウイルス（Sindbis virus）、コクサッキーＢ４、およびプンタ・トロ・ウイルス（Punta Toro virus）、
−  ＭＤＣＫ細胞における、インフルエンザＡ（Ｈ１Ｎ１）、インフルエンザＡ（Ｈ３Ｎ２）、インフルエンザＢ、
−  ＣＲＦＫ細胞における、ネコ・コロナ・ウイルス（Feline Corona virus）およびネコ・ヘルペス・ウイルス（Feline Herpes virus）。
【０２５７】
ＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２、ワクシニア・ウイルスならびに水疱性口内炎ウイルスに対してＨＥＬ細胞においてアッセイする。コクサッキー・ウイルスＢ４および呼吸器多核体ウイルスに対してＨｅＬａ細胞においてアッセイする。パラインフルエンザ−３−ウイルス、レオウイルス−１、シンドビス・ウイルスおよびプンタ・トロ・ウイルスに対してＶｅｒｏ細胞においてアッセイする。ヒト胎児肺（ＨＥＬ）（ＡＴＣＣ−ＣＣＬ  １３７）、サル腎臓（Ｖｅｒｏ）およびヒト子宮頸癌（ＨｅＬａ）細胞を、１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ）、２ｍＭ  Ｌ−グルタミンおよび０．０７５％炭酸水素塩を補充した基礎培地（ＭＥＭ）で増殖させた。単純ヘルペス・ウイルス１型（ＨＳＶ−１）（ＫＯＳおよびＫＯＳ  ＡＣＶ  ＴＫ−）、ＨＳＶ−２（Ｇ）、ワクシニア・ウイルス、および水疱性口内炎ウイルスをＨＥＬ細胞培養物において、コクサッキー・ウイルスＢ４および呼吸器多核体ウイルスをＨｅＬａ細胞培養物において、ならびにパラインフルエンザ−３ウイルス、レオウイルス−１、シンドビス・ウイルス、およびプンタ・トロ・ウイルスをＶｅｒｏ細胞培養物においてアッセイした。細胞は、コンフルエンスまでマイクロタイター・トレーで増殖させ、５０％細胞培養感染量の１００倍を接種した。単独または組合せのいずれかでの化合物を１〜２時間のウイルス吸収期の後に添加した。ウイルスが誘導する細胞変性効果（ＣＰＥ）を顕微鏡的に感染後約３日で記録し、未処理対照の百分率として表した。５０％有効濃度（ＥＣ５０）をグラフ描画から導いた。最小毒性濃度（ＭＴＣ）を、顕微鏡的に検出可能な細胞形態の変化を生じる最小濃度として定義した。ＭＴＣは、抗ウイルスアッセイについて使用した培養物と同種で、同時期に化合物の系列希釈物と共にインキュベートした未感染のコンフルエント細胞培養物において決定した。培養物は、細胞形態の変化について顕微鏡的に検査した。
【０２５８】
２００μＭまでの化合物６および１１のいずれについても顕著な細胞毒性は報告されなかった。化合物６および１１は、水疱性口内炎ウイルスコクサッキーＢ４、呼吸器多核体ウイルス、インフルエンザＡ（Ｈ１Ｎ１）、インフルエンザＡ（Ｈ３Ｎ２）、インフルエンザＢ、パラインフルエンザ−３−ウイルス、レオウイルス−１、シンドビス・ウイルス、およびプンタ・トロ・ウイルスに対して２００μＭまでインビトロ抗ウイルス活性を示さなかった。化合物６は、ネコ・ヘルペス・ウイルス（ＥＣ５０＝３８μＭ）および単純ヘルペス・ウイルス−２（Ｇ）（ＥＣ５０＝５８μＭ）に対して中程度の活性を示した。
【実施例１２】
【０２５９】
ホスホネート−ジホスフェート誘導体１２および１３の逆転写酵素（ＲＴ）の阻害における評価
チオホスホネートジホスフェート類似体１２および１３の取込みの触媒機構を、前定常速度論の技術を用いて実験で、ＲＴに対するチオホスホネートジホスフェート類似体の解離定数（Ｋｄ）、およびホスホジエステル結合の形成についての触媒定数（Ｋｐｏｌ）を決定するために調べた。これらの研究は、チオホスホネートジホスフェート誘導体の、対応する未修飾誘導体に対する識別の算出を可能にする。
【０２６０】
類似体は、野生型ＲＴおよびＫ６５Ｒ変異体において検査した。
野生型ＲＴの遺伝子を発現している細菌構築物ｐ６６ＲＴＢを、ＲＴ  Ｋ６５Ｒを得るために、Boretto et al. Anal. Biochem., 2001, 292(1), 139-47に記載の通り使用した。全ての構築物は、ＤＮＡ配列決定によって確認した。組換えＲＴを、ＨＩＶ−１プロテアーゼと大腸菌で共発現させて、ヘテロ二量体ｐ６６／ｐ５１を得て、続いてアフィニティー・クロマトグラフィーによって精製した。全ての酵素は、全ての生化学的研究の前に活性部位の滴定によって定量した。
【０２６１】
速度論研究は、ｄＡＴＰ、ＰＭＥＡｐｐ、ＰＭＰＡｐｐ、Ｓ−ＰＭＥＡｐｐ（１２）、およびＳ−ＰＭＰＡｐｐ（１３）を使用して、野生型ＲＴおよびＫ６５Ｒ変異体ＲＴにおいて実施した。前定常速度論実験は、ＫＩＮＴＥＫ  ｍｏｄｅｌ  ＲＱＦ−３装置を用いて１０ミリ秒から３０秒の反応時間について実施した。記載する全ての濃度は、最終濃度に相当する。
【０２６２】
反応に使用したＤＮＡ／ＲＮＡオリゴヌクレオチドは、３１塩基の鋳型（３１Ａ−ＲＴ、５’−ＡＡＡ  ＡＡＡ  ＡＡＡ  ＴＧＧ  ＡＴＡ  ＣＡＴ  ＡＴＧ  ＧＴＴ  ＡＡＡ  ＧＴＡ  Ｔ−３’（配列番号５））とハイブリダイズした２１塩基の５’−標識プライマー（５’−ＡＴＡ  ＣＴＴ  ＴＡＡ  ＣＣＡ  ＴＡＴ  ＧＴＡ  ＴＣＣ−３’（配列番号４））に相当する。天然ヌクレオチドについて、反応は、ＲＴ緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．０、５０ｍＭ  ＫＣｌ、０．０５％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００）中の１００ｎＭプライマー／マトリックス複合体に結合した５０ｎＭ（活性部位で）ＨＩＶ−１  ＲＴを含む溶液を、６ｍＭ  ＭｇＣｌ２を含む様々な濃度のＮＴＰと混合することによって実施した。非環式ヌクレオチドを含む反応は、プライマー／鋳型複合体（１００ｎＭ）に関して過剰量の酵素（２００ｎＭ）で実施した。これらの条件は、低いレベルでの取込みの測定を干渉する酵素の代謝回転率（Ｋｓｓ）の影響を排除するために選択した。反応生成物は、電気泳動ゲル（ＴＢＥ緩衝液中、１４％アクリルアミド、８Ｍ尿素）で分析し、可視化後にＦＵＪＩＩＭＡＧＥＲ（登録商標）で定量した。
【０２６３】
速度定数をｄＡＴＰ（天然ヌクレオチド）、ＰＭＥＡジホスフェート（ＰＭＥＡｐｐ）、ＰＭＰＡジホスフェート（ＰＭＰＡｐｐ）、ならびにチオホスホネートジホスフェート類似体（１２）および（１３）について、ＨＩＶ−１の野生型ＲＴおよびそのＰＭＰＡに対する耐性体、Ｋ６５Ｒ変異体において測定した。
【０２６４】
経時的な生成物の形成（Ｐ）は、以下の方程式で定められた：
（Ｐ）＝Ａ．（１−ｅｘｐ（−（ｋａｐｐ・ｔ））＋ｋｓｓ・ｔ  （式１）
式中、Ａはピークの振幅、ｋａｐｐはリン酸ジエステル結合形成の見かけの速度定数、およびｋｓｓは酵素の代謝回転レベル（定常状態の直線相の速度定数）である。ｋａｐｐのｄＮＴＰ濃度依存性は、以下の双曲方程式で記載される： 
ｋａｐｐ＝ｋｐｏｌ  ｄＮＴＰ／（Ｋｄ＋ｄＮＴＰ）  （式２）
式中、Ｋｄおよびｋｐｏｌはそれぞれ、ＲＴについてのｄＮＴＰの平衡定数および触媒定数である。Ｋｄおよびｋｐｏｌは、ＫＡＬＥＩＤＡＧＲＡＰＨ  ｓｏｆｔｗａｒｅ（シナジー・ソフトウェア社）を使用してカーブフィティングによって定めた。
【０２６５】
得られた結果を以下の表ＶＩＩＩにまとめる：
【０２６６】
【表９】
0005584865.tif 000081
ｄＡＴＰは、参照の天然ヌクレオチドであり、それにより選択性を算出できる。検査した全てのヌクレオチド類似体は、野生型ＨＩＶ−１およびＫ６５Ｒ変異体のＲＴの基質および阻害剤である。それらは取り込まれて連鎖停止剤になる。
【０２６７】
野生型ＲＴは、ＰＭＥＡＤＰとＰＭＰＡＤＰを７．８倍および２２倍で識別する。この識別は、チオホスホネート−ジホスフェート類似体１２および１３についてそれが、それぞれ１４．５倍および５９．８倍であることから、さらに顕著である。この著しい識別は、ＲＴによるＳ−ＰＭＥＡｐｐ（１２）およびＳ−ＰＭＰＡｐｐ（１３）の取込み速度が、天然ヌクレオチドｄＡＴＰのそれより１／９０と低いことによって説明される。この減少は、ＲＴのこれらの類似体に対する親和性によって代償されないが、Ｓ−ＰＭＥＡｐｐ（１２）について１．２対７．５、およびＳ−ＰＭＰＡｐｐ（１３）について５．５対７．５で改善する。
【０２６８】
Ｋ６５Ｒ変異体は、ＰＭＥＡｐｐおよびＰＭＰＡｐｐに対してそれぞれ２．１６倍および４．４５倍の耐性がある。この耐性は、主にヌクレオチドの取込み速度の低減による（１／９および１／２２）。Ｋ６５Ｒ変異体もＳ−ＰＭＥＡｐｐ（１２）に耐性があり（Ｒ＝２．８）、これは同じ理由、つまり取込み速度の１／１８の低減による。この耐性係数は、硫黄を含まない類似体ＰＭＥＡｐｐ（Ｒ＝２．２）について観察されたのと同じである。
【０２６９】
一方、Ｋ６５Ｒ変異体は、もはやＳ−ＰＭＰＡｐｐ（１３）に耐性ではなく（Ｒ＝１）、ホスホネートに硫黄原子を有さないＰＭＰＡｐｐ類似体と比較して、耐性（Ｒ＝４．４）が低減しており、耐性に対する戦いにおけるチオホスホネート化合物の利益を証明する。
【０２７０】
２）野生型ＲＴおよび変異体ＲＴ（Ｄ６７Ｎ、Ｋ７０Ｒ、Ｔ２１５Ｆ、Ｋ２１９Ｑ）によってＤＮＡプライマーに取り込まれたＳ−ＰＭＥＡ（６）およびＳ−ＰＭＰＡ（１１）誘導体の切断に対する耐性の評価、ＡＴＰ分解による研究
ａ）ＰＭＥＡ、ＰＭＰＡ、Ｓ−ＰＭＥＡおよびＳ−ＰＭＰＡを取り込んでいるＤＮＡプライマーの生成および精製（図１を参照されたい。）
全ての構築物は、ＤＮＡ配列決定によって確認した。組換えＲＴを、大腸菌でＨＩＶ−１プロテアーゼと共発現させて、ｐ６６／ｐ５１ヘテロ二量体を得て、続いてアフィニティー・クロマトグラフフィーによって精製した。全ての酵素は、全ての生化学的研究の前に活性部位の滴定によって定量した。
【０２７１】
反応に使用したＤＮＡ／ＤＮＡオリゴヌクレオチドは、３１塩基の鋳型（５’−ＡＡＡ  ＡＡＡ  ＡＡＡ  ＴＧＧ  ＡＴＡ  ＣＡＴ  ＡＴＧ  ＧＴＴ  ＡＡＡ  ＧＴＡ  Ｔ−３’（配列番号５））と５μＭでハイブリダイズした２１塩基のプライマー（５’−ＡＴＡ  ＣＴＴ  ＴＡＡ  ＣＣＡ  ＴＡＴ  ＧＴＡ  ＴＣＣ−３’（配列番号４））に相当する。反応は、ＲＴ緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．０、５０ｍＭ  ＫＣｌ、０．０５％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００、１００μＭ  ＭｇＣｌ２）中の２０μＭ  ＨＩＶ−１  ＲＴを含む溶液を、１０ｍＭ  ＰＭＥＡｐｐもしくはＰＭＰＡｐｐまたはＳ−ＰＭＥＡｐｐ  １２もしくはＳ−ＰＭＰＡｐｐ  １３と混合することによって実施した。反応物を３７℃で５０分間インキュベートした。各反応は、７０℃で５分間加熱することによって停止させた。ＲＴ伸長反応由来の２２塩基長生成物を、次いで逆相ＨＰＬＣによって精製した。使用した装置は、前ろ過無しで分析カラムへのタンパク質に富む混合物の注入を可能にするイン・ラインろ過系（プレカラム＋スイッチ）を有する。精製後、２２塩基長の回収画分をそれぞれ合わせ、凍結乾燥し、質量分析（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）によって特徴付けた。それらの濃度は、ＯＤ２６０の測定によって決定した。
【０２７２】
【表１０】
0005584865.tif 000082
ｂ）実験結果
反応に使用したＤＮＡ／ＤＮＡオリゴヌクレオチドは、３１塩基のマトリクス（５’−ＡＡＡ  ＡＡＡ  ＡＡＡ  ＴＧＧ  ＡＴＡ  ＣＡＴ  ＡＴＧ  ＧＴＴ  ＡＡＡ  ＧＴＡ  Ｔ−３’（配列番号５））とハイブリダイズした５’に３２Ｐで標識した２２塩基のプライマー（５’−ＡＴＡ  ＣＴＴ  ＴＡＡ  ＣＣＡ  ＴＡＴ  ＧＴＡ  ＴＣＣ−３’（配列番号４）、ＰＭＥＡ−２２塩基長もしくはＰＭＰＡ−２２塩基長またはＳ−ＰＭＥＡ−２２塩基長もしくはＳ−ＰＭＰＡ−２２塩基長）に相当する。反応は、ＲＴ緩衝液（５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．０、５０ｍＭ  ＫＣｌ、０．０５％Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ−１００）中の５０ｎＭプライマー／マトリックス複合体に結合した、野生型ＨＩＶ−１または変異体ＨＩＶ−１（Ｄ６７Ｎ、Ｋ７０Ｒ、Ｔ２１５Ｆ、Ｋ２１９Ｑ）の１００ｎＭ  ＲＴを含む溶液を、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２を含む濃度３．２ｍＭのＡＴＰと混合することによって実施した。反応物を、３７℃で２時間インキュベートし、試料を分析のために１時間および２時間で採取した。反応生成物は、電気泳動ゲル（ＴＢＥ緩衝液中、１４％アクリルアミド、８Ｍ尿素）で分析し、可視化後にＦＵＪＩＩＭＡＧＥＲ（登録商標）で定量した。
【０２７３】
チオホスホネート誘導体Ｓ−ＰＭＥＡおよびＳ−ＰＭＰＡは、野生型ＲＴまたは耐性ＲＴ（Ｄ６７Ｎ、Ｋ７０Ｒ、Ｔ２１５Ｆ、Ｋ２１９Ｑ）のいずれにおいても誘導体ＰＭＥＡおよびＰＭＰＡよりも切断されていなかった。図２を参照されたい。
【０２７４】
２時間の反応後、野生型ＲＴでは、Ｓ−ＰＭＥＡ−２２塩基長の４％だけが２１塩基長に変化しており、Ｓ−ＰＭＰＡ−２２塩基長の場合は１０％であった。ＰＭＥＡ−２２塩基長およびＰＭＰＡ−２２塩基長の２２塩基長物の場合は、それぞれ４１％および３４％が２１塩基長に変化した。
【０２７５】
耐性ＲＴ（Ｄ６７Ｎ、Ｋ７０Ｒ、Ｔ２１５Ｆ、Ｋ２１９Ｑ）では、２時間の反応後、Ｓ−ＰＭＥＡ−２２塩基長の１９％だけが２１塩基長に変化しており、Ｓ−ＰＭＰＡ−２２塩基長の場合は２０％であった。ＰＭＥＡ−２２塩基長およびＰＭＰＡ−２２塩基長の２２塩基長物の場合は、それぞれ５５％および５７％が２１塩基長に変化した。
【０２７６】
したがって、チオホスホネート修飾は、大きく低減される切断について、好ましい効果を提供し、ＨＩＶ耐性に対して戦うためのチオホスホネート化合物における全ての利益を証明する。
【実施例１３】
【０２７７】
生体液を模倣する条件下でのチオホスホネート誘導体６および１１の安定性試験
Ｓ−ＰＭＥＡ（６）およびＳ−ＰＭＥＡ（１１）誘導体の安定性試験を、生体液を模倣する条件下、つまり完全培地（細胞外媒体の模倣）および全細胞抽出物（細胞内媒体の模倣）において実施した。
【０２７８】
媒体および細胞抽出物の調製  培地は１０％（ｖ／ｖ）熱不活性化ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ１６４０から成り、−８０℃で保存した。ＣＥＭ−ＳＳ細胞抽出物を公表されている手順（Puech, F. et al. Antiv. Res. 1993, 22, 155-174）に従って調製した。指数関数的に増殖しているＣＥＭ−ＳＳ細胞を遠心分離（５００ｇ、４℃、４分間）で回収し、ＰＢＳで２回洗浄し、１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、１４０ｍＭ  ＫＣｌ（ｐＨ７．４）に、１ｍＬ当たり細胞３０×１０６個の濃度で再懸濁した。細胞を超音波処理で溶解し、細胞の破片を遠心分離（１００００ｇ、４℃、２０分間）で除去した。可溶性タンパク質（３ｍｇ／ｍＬ）を含有する上清を−８０℃で保存した。
【０２７９】
ＨＰＬＣ分析  分解速度を分析的ＨＰＬＣで求めた。使用した装置は、特定のオンラインろ過系を有する。
化合物６および１１についての速度論データおよび分解経路を３７℃で、（ａ）完全培地（１０％熱不活性化ウシ胎児血清を含有するＲＰＭＩ１６４０）、（ｂ）全細胞抽出物（ＣＥＭ−ＳＳ）において試験した。各速度論研究について、化合物溶液を検討する培地の新鮮解凍一定分量で初濃度０．１ｍＭとなるように希釈した。混合物は、３７℃で必要時間インキュベートし、一定分量（１０％溶液）を採取し、さらなるＨＰＬＣ分析のために、直ちに−８０℃で凍結した。粗試料をプレカラムに注入し、緩衝液Ａで５分間溶出した。次いで、プレカラムからカラムへ繋ぐための切替え弁を作動させ、緩衝液Ｂを０分、０％から４０分、２０％に増大させる、緩衝液Ａから緩衝液Ｂへの直線勾配を適用する。保持時間は、化合物６は２６分間、化合物１１は２９．５分間、ＰＭＥＡは２４．３分間、および（Ｒ）−ＰＭＰＡは２７．８分間であった。
【０２８０】
全ての化合物を同じ条件下で分析した。各時点での残存親化合物の量を、化合物の半減期を決定するために使用した。親化合物由来の分解生成物は、対応する参照物との比較によって決定した。
【０２８１】
半減期を算出し、以下の表ＩＸにまとめた。
【０２８２】
【表１１】
0005584865.tif 000083
化合物６および１１は、試験した条件下（培地および細胞抽出物）で同様に挙動した。化合物６は、ＨＰＬＣでの共注入によってホスホネートＰＭＥＡであると同定された単一の生成物にゆっくりと分解した。化合物１１は、ＨＰＬＣでの共注入によってホスホネートＰＭＰＡであると同定された単一の生成物にゆっくりと分解した。この転換は、Ｐ−Ｓ結合のＰ−Ｏ結合への脱硫化による。培地（２０％分解）および細胞抽出物（分解１％未満）において観察された挙動の差異は、２種の媒体の間の酵素含有量における差異、つまり培地が１０％ウシ胎児血清を含有していることによって説明できる。
【０２８３】
本発明の多数の実施形態を記載しているが、基本的な実施例を本発明の化合物および方法を利用する他の実施形態を提供するために変更できることは明らかである。したがって、本発明の範囲は、例示の方法によって表されている具体的な実施形態ではなく、添付の請求項の範囲によって定義されることが理解される。
【０２８４】
【表１２】
0005584865.tif 000084
0005584865.tif 000085
0005584865.tif 000086
【０２８５】
【表１３】
0005584865.tif 000087
0005584865.tif 000088
0005584865.tif 000089
0005584865.tif 000090
【図１】
0005584865.tif 000100
【図２】
0005584865.tif 000101