(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）
【化１】
0005392089.tif 000015
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は水素原子を表す。）で表される化合物、またはその塩を有効成分として含有する皮膚の乾癬予防または改善剤。
【請求項２】
一般式（Ｉ）
【化２】
0005392089.tif 000016
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は水素原子を表す。）で表される化合物、またはその塩の治療学的に有効な量をヒト以外の動物に投与することを含む、皮膚の乾癬を予防または改善する方法。
【請求項３】
皮膚の乾癬予防または改善剤を製造するための、一般式（Ｉ）
【化３】
0005392089.tif 000017
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は水素原子を表す。）で表される化合物、またはその塩の使用。
【請求項４】
一般式（Ｉ）で表される化合物またはその塩が、唯一の有効成分である、請求項１に記載の皮膚の乾癬予防または改善剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ピロロキノリンキノンもしくはそのエステル、またはその塩を有効成分として含有する皮膚の乾癬予防または改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は生命活動を維持するための防御器官としてバリア機能を有していると同時に、表面を見ると、なめらかである、かさかさしている、シワが刻まれているなど、美容的な役割も担っている器官と言える。皮膚のバリア機能発現には主に角層における角層細胞間脂質や天然保湿因子によって水分が保持されることが重要であり、角層の水分含量と皮膚表面の性状、例えば、なめらかである、かさかさしている、といったこととは相関していることが知られている（非特許文献１参照）。【０００３】
これまで、皮膚の保湿性を維持または改善する手段として、ワセリン軟膏や油中水型乳化製剤などの閉塞剤により角層バリア機能を補う方法、ソルビトールやグリセリンなどの保湿剤により角層水分量を補う方法、グリチルリチン酸などの抗炎症剤により皮膚炎症を鎮める方法、ビタミン、ホルモンなどにより皮膚細胞を活性化する方法等が用いられている（非特許文献２参照）。【０００４】
乾癬は、鱗屑を伴った慢性の炎症性角化症であり、表皮細胞の過増殖・分化異常、血管新生、活性化Ｔ細胞（ＣＤ３陽性細胞）の表皮／真皮への浸潤を特徴とする疾患である。乾癬の治療には、上述のような各種の抗炎症剤が用いられ、また保湿剤等が併用されているが、いずれも対症療法であり、現在のところ根治療法は知られていない。【０００５】
ピロロキノリンキノン（以下、ＰＱＱという）は１９７９年メタノール資化性菌のメタノール脱水素酵素の補酵素として見出され（非特許文献３、４参照）、細菌類以外にも、大豆、空豆、ピーマン、ジャガイモ、パセリ、ホウレンソウなどの食用植物や、酢、茶、ココア、納豆、豆腐等の加工食品からも検出されている（非特許文献５参照）。また、ヒトやラットの生体内にも存在すること（非特許文献６参照）が報告されており、安全性の高い物質である。【０００６】
ＰＱＱの作用としては、細胞の増殖促進作用（特許文献１参照）、活性酸素除去作用（特許文献２参照）、メラニン産生抑制及び美白作用（特許文献３参照）、紫外線吸収作用（特許文献４参照）、抗アレルギー作用（特許文献５参照）などが知られている。【０００７】
しかしながら、ＰＱＱもしくはそのエステル、またはそれらの塩により皮膚の乾癬予防または改善効果が得られることは知られていない。
【非特許文献１】「アチーブ  オブ  ダーマトロジー（Archives of Dermatology）」、１９８５年、第１２１巻、ｐ．６４２−６４５
【非特許文献２】「フレグランスジャーナル（Fragrance Journal）」１９９９年、第１０巻、ｐ．２９
【非特許文献３】「ネイチャー（Nature）」、１９７９年、第２３０巻、ｐ．８４３−８４４
【非特許文献４】「フェブス  レター（FEBS Letters）」、１９７９年、第１０８巻、ｐ．４４３−４４６
【非特許文献５】「バイオケミカル  ジャーナル（Biochemical Journal）」、１９９５年、第３０７巻、ｐ．３３１−３３３
【非特許文献６】「バイオケミカ  エト  バイオフィジカ  アクタ（Biochimica et Biophysica Acta）」、１９９２年、第１１５６巻、ｐ．６２−６６
【特許文献１】特開昭６１−５８５８４号公報
【特許文献２】特開平５−０７８２４７号公報
【特許文献３】特開平８−０２０５１２号公報
【特許文献４】特許第３６２５４９３号公報
【特許文献５】特開昭６３−１７４９３１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明の目的は、皮膚の乾癬予防または改善剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明は、下記の（１）に示すような皮膚の乾癬予防または改善剤を提供するものである。また、下記（２）に示すような乾癬の予防または改善方法、および下記（３）の使用方法を提供する。【００１０】
（１）一般式（Ｉ）
【化１】
0005392089.tif 000002
【００１１】
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は同一または異なって、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、アラルキル、アラアリール、フェニル、水素原子を表す。）で表される化合物［以下、化合物（Ｉ）という］、またはその塩を有効成分として含有する皮膚の乾癬予防または改善剤。【００１２】
（２）  一般式（Ｉ）
【化２】
0005392089.tif 000003
【００１３】
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は同一または異なって、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、アラルキル、アラアリール、フェニル、水素原子を表す。）で表される化合物、またはその塩の治療学的に有効な量を患者に投与することを含む、皮膚の乾癬を予防または改善する方法。【００１４】
（３）  皮膚の乾癬予防または改善剤を製造するための、一般式（Ｉ）
【化３】
0005392089.tif 000004
【００１５】
（式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は同一または異なって、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、アラルキル、アラアリール、フェニル、水素原子を表す。）で表される化合物、またはその塩の使用。
【発明の効果】
【００１６】
本発明により、皮膚の乾癬予防または改善剤を提供することができる。【００１７】
本明細書は本願の優先権の基礎である日本国特許出願2007-296022号の明細書および／または図面に記載される内容を包含する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
化合物（Ｉ）の定義において、式中、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は同一または異なって、低級アルキル、低級アルケニル、低級アルキニル、アラルキル、アラアリール（アルキルアリール）、フェニル、水素原子を表すが、これらの低級アルキルおよびアラルキル、アラアリールのアルキル部分としては、例えば直鎖または分岐状の炭素数１〜６のアルキルがあげられ、より具体的には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ヘキシル等があげられ、中でも、メチルまたはエチルが好ましい。【００１９】
低級アルケニルとしては、例えば直鎖または分岐状の炭素数２〜６のアルケニルがあげられ、より具体的にはビニル、アリル、１−プロペニルメタクリル、クロチル、１−ブテニル、３−ブテニル、２−ペンテニル、４−ペンテニル、２−ヘキセニル、５−ヘキセニル等があげられる。【００２０】
低級アルキニルとしては、例えば直鎖または分岐状の炭素数２〜６のアルキニルがあげられ、より具体的にはエチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル等があげられる。【００２１】
アラルキルとしては、例えば炭素数７〜１５のアラルキルがあげられ、より具体的にはベンジル、フェネチル、ベンズヒドリル、ナフチルメチル等があげられる。【００２２】
アラアリールのアリール部分としては、例えば炭素数６〜１４のアリールがあげられ、より具体的にはフェニル、ナフチル、アントリル等があげられる。したがって、アラアリールとしては、メチルフェニル、エチルフェニル等があげられる。【００２３】
ＰＱＱ、すなわち上述の一般式（Ｉ）においてＲ１、Ｒ２およびＲ３がいずれも水素原子である化合物は、有機化学的方法（例えば、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１０３，５５９９−５６００（１９８１））および発酵法、例えば、メタノール資化性を有し、かつピロロキノリンキノンを生産する能力を有する細菌を、炭素源としてメタノールを含有し鉄化合物の濃度を制御した培養液中で培養することによりピロロキノリンキノンを生産する方法（特開平１−２１８５９７号公報）などにより製造することが可能である。【００２４】
化合物（Ｉ）で示されるＰＱＱのエステル体の製造法は、ＰＱＱより常法のエステル化反応に従って合成することができる。【００２５】
ＰＱＱのトリエステル体は、例えば、ＰＱＱまたはその塩を酸性条件下でアルコール類と反応させる方法（例えば、特開平３−１２３７８１号公報、特開平３−１４５４９２号公報）や、ＰＱＱまたはその塩を塩基の存在下でハロゲン化アルキル、ハロゲン化アルケニル、ハロゲン化アルキニル、ハロゲン化アラルキル、ハロゲン化アラアリール等と反応させる方法などにより容易に合成することができる。また、上記方法によって得られるＰＱＱのトリエステル体を酸性あるいは塩基性条件下で部分加水分解することで、モノエステル体、ジエステル体を得ることができる。【００２６】
このようにして得られる化合物（Ｉ）は、カラムクロマトグラフィー、再結晶法、および溶媒抽出法などの通常の方法により、反応液中から分離・精製することができる。また、化合物（Ｉ）の同定には、元素分析、ＮＭＲスペクトル、ＩＲスペクトル、質量分析などの各種手段が用いられる。【００２７】
化合物（Ｉ）の塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム、トリエタノールアミン、トリエチルアミン等の有機アミン塩、リジン、アルギニン等の塩基性アミノ酸塩等があげられる。【００２８】
本発明の剤により、表皮の肥厚とＴ細胞の浸潤を特徴とする乾癬を予防または改善することができる。【００２９】
本発明の皮膚の乾癬予防または改善剤としては、化合物（Ｉ）またはその塩をそのまま投与することも可能であるが、通常各種の製剤として提供するのが望ましい。【００３０】
製剤は、有効成分として化合物（Ｉ）またはその塩を含有するが、さらに任意の他の治療のための有効成分を含有していてもよい。また、それら製剤は、有効成分を薬理学的に許容される一種またはそれ以上の担体と一緒に混合し、製剤学の技術分野においてよく知られている任意の方法により製造される。【００３１】
製剤の投与形態は、治療に際し最も効果的なものを使用するのが望ましく、経口投与または、例えば静脈内、腹膜内もしくは皮下投与等の非経口投与をあげることができるが、経口投与が好ましい。【００３２】
投与する剤形としては、例えば錠剤、散剤、顆粒剤、丸剤、懸濁剤、乳剤、浸剤・煎剤、カプセル剤、シロップ剤、液剤、エリキシル剤、エキス剤、チンキ剤、流エキス剤等の経口剤、注射剤、点滴剤、クリーム剤、坐剤等の非経口剤のいずれでもよいが、経口剤として好適に用いられる。【００３３】
経口剤として製剤化する際には、賦形剤、結合剤、崩壊剤、潤沢剤、分散剤、懸濁剤、乳化剤、希釈剤、緩衝剤、抗酸化剤、細菌抑制剤等の添加剤を用いることができる。【００３４】
経口投与に適当な、例えばシロップ剤のような液体調製物である場合は、水、蔗糖、ソルビトール、果糖等の糖類、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール等のグリコール類、ごま油、オリーブ油、大豆油等の油類、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル類等の防腐剤、パラオキシ安息香酸メチル等のパラオキシ安息香酸誘導体、安息香酸ナトリウム等の保存剤、ストロベリーフレーバー、ペパーミント等のフレーバー類などを添加して製剤化することができる。【００３５】
また、経口投与に適当な、例えば錠剤、散剤および顆粒剤等の場合には、乳糖、ブドウ糖、蔗糖、マンニトール、ソルビトール等の糖類、バレイショ、コムギ、トウモロコシ等の澱粉、炭酸カルシウム、硫酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、塩化ナトリウム等の無機物、結晶セルロース、カンゾウ末、ゲンチアナ末等の植物末等の賦形剤、澱粉、寒天、ゼラチン末、結晶セルロース、カルメロースナトリウム、カルメロースカルシウム、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、アルギン酸ナトリウム等の崩壊剤、ステアリン酸マグネシウム、タルク、水素添加植物油、マクロゴール、シリコーン油等の滑沢剤、ポリビニールアルコール、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、カルメロース、ゼラチン、澱粉のり液等の結合剤、脂肪酸エステル等の界面活性剤、グリセリン等の可塑剤などを添加して製剤化することができる。【００３６】
また、経口投与に適当な製剤には、一般に飲食品に用いられる添加剤、例えば食甘味料、着色料、保存料、増粘安定剤、酸化防止剤、発色剤、漂白剤、防かび剤、ガムベース、苦味料、酵素、光沢剤、酸味料、調味料、乳化剤、強化剤、製造用剤、香料、香辛料抽出物等が添加されてもよい。【００３７】
経口投与に適当な製剤は、そのまま、または例えば粉末食品、シート状食品、瓶詰め食品、缶詰食品、レトルト食品、カプセル食品、タブレット状食品、流動食品、ドリンク剤等の形態のものであってもよい。また、皮膚の乾癬予防または改善用の健康食品、機能性食品、栄養補助食品、特定保健用食品等の飲食品として用いてもよい。【００３８】
非経口投与に適当な、例えば注射剤は、好ましくは受容者の血液と等張である化合物（Ｉ）またはその塩を含む滅菌水性剤からなる。例えば、注射剤の場合は、塩溶液、ブドウ糖溶液または塩溶液とブドウ糖溶液の混合物からなる担体等を用いて注射用の溶液を調製する。【００３９】
また、これら非経口剤においても、経口剤で例示した希釈剤、防腐剤、フレーバー類、賦形剤、崩壊剤、潤沢剤、結合剤、界面活性剤、可塑剤などから選択される１種またはそれ以上の補助成分を添加することができる。【００４０】
本発明の皮膚の乾癬予防または改善剤における化合物（Ｉ）またはその塩の濃度は、製剤の種類、該製剤の投与により期待する効果等に応じて適宜選択されるが、例えば経口剤の場合、化合物（Ｉ）またはその塩として、通常は０．１〜１００重量％、好ましくは０．５〜７０重量％、特に好ましくは１〜５０重量％である。【００４１】
本発明の皮膚の乾癬予防または改善剤の投与量および投与回数は、投与形態、患者の年齢、体重、治療すべき症状の性質もしくは重篤度により異なるが、通常、成人一日当り、化合物（Ｉ）またはその塩として、通常は０．５ｍｇ〜１００００ｍｇ、好ましくは０．５ｍｇ〜５０００ｍｇ、より好ましくは５ｍｇ〜１０００ｍｇとなるように、一日一回ないし数回投与する。【００４２】
投与期間は、特に限定されないが、通常は１日間〜１年間、好ましくは２週間〜３ヶ月間である。【００４３】
なお、本発明の製剤は、ヒトだけでなく、ヒト以外の動物（以下、非ヒト動物と略す）に対しても使用することができる。非ヒト動物としては、ほ乳類、鳥類、は虫類、両生類、魚類等、好ましくはほ乳類に属する非ヒト動物をあげることができる。【００４４】
本発明の皮膚の乾癬予防または改善剤を非ヒト動物に投与する場合の投与量および投与回数は、投与形態、動物の年齢、種類等により異なるが、体重１ｋｇ１日あたり、化合物（Ｉ）またはその塩として、通常は０．０１ｍｇ〜２００ｍｇ、好ましくは０．１ｍｇ〜１００ｍｇ、より好ましくは０．１ｍｇ〜２０ｍｇとなるように一日一回ないし数回投与する。投与期間は、特に限定されないが、通常は１日間〜１年間、好ましくは２週間〜３ヶ月間である。
【実施例】
【００４５】
以下に、化合物（Ｉ）による皮膚の乾癬予防または改善効果を調べた試験例を示す。【００４６】
（試験例）
試験には、ＨＯＳ：ＨＲ−１マウス（メス、４週齢、星野試験動物飼育所より購入）を用いた。飼育は、室温２２±３℃、湿度５０±２５％の条件下で行い、飼料および水は自由摂取とした。【００４７】
各試験群は８匹のマウスで構成し、第１群のマウスには市販粉末飼料ＣＥ−２を、第２群のマウスには特殊飼料(日本農産工業株式会社製)を、第３群のマウスには０.００８９重量％のピロロキノリンキノン二ナトリウム塩（以下、ＰＱＱ二ナトリウム塩という、三菱瓦斯化学社製）を含有する特殊飼料をそれぞれ給餌した。なお、上記特殊飼料を給餌することにより、ＨＯＳ：ＨＲ−１マウスに乾燥肌が誘発されることが知られている（The Journal of international medical  research pharmacology, ３２, ３９２−３９９（２００４））。【００４８】
各飼料の給餌開始時、２週間後、４週間後および６週間後に、各マウスの右臀部の経表皮水分損失量（transepidermal water loss：ＴＥＷＬ）をＴｅｗａｍｅｔｅｒ  ＴＭ２１０（Ｃｏｕｒａｇｅ＋Ｋｈａｚａｋａ  ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  ＧｍｂＨ，ドイツ）を用いて測定し、各群における平均値を算出した。試験開始０週間から６週間後の経表皮水分損失量（ＴＥＷＬ値）の測定結果を表１に示す。【００４９】
表１から明らかなように、乾燥肌が誘発された第２群では、第１群と比較して有意に経表皮水分損失量（ＴＥＷＬ値）が増加した。一方、ＰＱＱ二ナトリウム塩を添加した第３群では、ＰＱＱ二ナトリウム塩を添加していない第２群に比べて経表皮水分損失量（ＴＥＷＬ値）が抑制された。
【表１】
0005392089.tif 000005
【００５０】
また、皮表水分含量（コンダクタンス）をＳＫＩＣＯＮ−２００（ＩＢＳ社製）を用いて測定し、各群における平均値を算出した。試験開始０週間から６週間後の皮表水分含量の測定結果を表２に示す。【００５１】
表２から明らかなように、乾燥肌が誘発された第２群では、第１群と比較して有意に皮表水分含量（コンダクタンス）が減少した。一方、ＰＱＱ二ナトリウム塩を添加した第３群では、ＰＱＱ二ナトリウム塩を添加していない第２群に比べて皮表水分含量（コンダクタンス）が増加した。【００５２】
以上の結果より、乾燥肌モデルマウスを使った試験で、ＰＱＱ二ナトリウム塩は、経表皮水分損失量（ＴＥＷＬ値）を低下させ、皮表水分含量（コンダクタンス）を増加させるため、皮膚の乾燥を防止し、乾癬の予防または改善効果を示すことが明らかとなった。
【表２】
0005392089.tif 000006
【００５３】
中性緩衝１０ｖｏｌ％ホルマリンで固定したマウス背部皮膚のパラフィン切片を作製し、表皮厚を測定した。試験開始６週間後の表皮厚の測定結果を表３に示す。【００５４】
表３から明らかなように、乾燥肌が誘発された第２群では、第１群と比較して有意に表皮が肥厚した。一方、ＰＱＱ二ナトリウム塩を添加した第３群では、表皮の肥厚が抑制された。
【表３】
0005392089.tif 000007
【００５５】
真皮中の肥満細胞の計数をメイグリュンワルドギムザ染色標本で行った。計数範囲は、皮筋上部の真皮とした。基線１ｍｍあたりの真皮に存在する細胞数は、皮筋の両端を結ぶ直線（基線）の長さで除した。有意差検定はＢａｒｔｌｅｔｔ法により等分散性の検定を行い、等分散（ｐ＞０．０５）の場合は一元配置分散分析およびＴｕｋｅｙの検定を実施した。不等分散（ｐ≦０．０５）の場合はＫｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ検定およびＳｔｅｅｌ−Ｄｗａｓｓの検定を実施した。試験開始６週間後の基線１ｍｍあたりの真皮中の肥満細胞数の測定結果を表４に示す。【００５６】
表４から明らかなように、乾燥肌を誘発した第２群では、第１群と比較して有意に真皮中の肥満細胞数が増加した。一方、ＰＱＱ二ナトリウム塩を添加した第３群では、真皮中の肥満細胞数の増加が抑制された。
【表４】
0005392089.tif 000008
【００５７】
また、表皮中のＣＤ３陽性Ｔリンパ球の計数を抗ＣＤ３免疫染色標本で行なった。計測範囲は、皮筋上部の表皮とした。基線１ｍｍあたりの表皮に存在する細胞数は、皮筋の両端を結ぶ直線（基線）の長さで除した。有意差検定はＢａｒｔｌｅｔｔ法により等分散性の検定を行い、等分散（ｐ＞０．０５）の場合は一元配置分散分析およびＴｕｋｅｙの検定を実施した。不等分散（ｐ≦０．０５）の場合はＫｒｕｓｋａｌ−Ｗａｌｌｉｓ検定およびＳｔｅｅｌ−Ｄｗａｓｓの検定を実施した。測定試験開始６週間後の基線１ｍｍあたりの表皮中のＣＤ３陽性細胞数の測定結果を表５に示す。【００５８】
表５から明らかなように、乾燥肌を誘発する第２群では、第１群と比較して有意に表皮中のＣＤ３陽性細胞数が増加した。一方、ＰＱＱ二ナトリウム塩を添加した第３群では、表皮中のＣＤ３陽性細胞数の増加が抑制された。【００５９】
以上の結果から、ＰＱＱ二ナトリウム塩は、乾癬に特徴的な表皮肥厚や、肥満細胞およびＣＤ３陽性細胞の浸潤を抑制する効果を示すことが明らかとなった。
【表５】
0005392089.tif 000009
【００６０】
次に、本発明に係る皮膚の乾癬予防または改善剤の配合例を示す実施例により、本発明をさらに具体的に説明するが、これらに限定されるものではない。【００６１】
（実施例１）
表６記載の配合の組成物に水を加えて１０００ｍＬとし、皮膚の乾癬予防または改善用ドリンク剤（１０本分）を製造する。
【表６】
0005392089.tif 000010
【００６２】
（実施例２）
表７記載の処方で常法により皮膚の乾癬予防または改善用錠剤（１錠あたり１５５ｍｇ）を製造する。
【表７】
0005392089.tif 000011
【００６３】
（実施例３）
表８記載の処方で常法により皮膚の乾癬予防または改善剤（１包あたり５０５ｍｇ）を製造する。
【表８】
0005392089.tif 000012
【００６４】
（実施例４）
表９記載の処方で皮膚の乾癬予防または改善用ハードカプセル剤（１カプセルあたり１１５ｍｇ）を製造する。
【表９】
0005392089.tif 000013
【００６５】
５ｍｇのＰＱＱモノアリルエステルに乳糖６０ｍｇおよびコーンスターチ３０ｍｇを添加して混合し、これにヒドロキシプロピルセルロース２０ｍｇの水溶液を添加して練合する。次いで、押し出し造粒機を用いて、常法により顆粒を製造する。この顆粒をゼラチンハードカプセルに充填することにより、ハードカプセル剤を製造する。【００６６】
（実施例５）
表１０記載の処方で皮膚の乾癬予防または改善用ソフトカプセル剤（１カプセルあたり１２５ｍｇ）を製造する。
【表１０】
0005392089.tif 000014
【００６７】
大豆油１２０ｍｇにＰＱＱ二ナトリウム塩５ｍｇを添加して混合する。次いで、ロータリー・ダイズ式自動成型機を用いて、常法に従い、ソフトカプセルに充填することにより、ソフトカプセル剤を製造する。【００６８】
本明細書で引用した全ての刊行物、特許および特許出願をそのまま参考として本明細書にとり入れるものとする。