(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
４−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコン酸の一般式で表されるマルトビオン酸、その塩又はマルトビオノデルタラクトンを有効成分として含有することを特徴とするミネラル可溶化安定剤。
【請求項２】
マルトビオン酸塩が、マルトビオン酸ナトリウム、マルトビオン酸カルシウム、マルトビオン酸マグネシウム、マルトビオン酸カリウム、マルトビオン酸銅、マルトビオン酸鉄及びマルトビオン酸亜鉛から選択される少なくとも１つ以上である、請求項１に記載のミネラル可溶化安定剤。
【請求項３】
ミネラルが、カルシウムであることを特徴とする、請求項１又は２に記載のミネラル可溶化安定剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、グルコースとグルコン酸からなる４−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコン酸の一般式で表されるマルトビオン酸、その塩或いはマルトビオノデルタラクトンを有効成分とする組成物の機能および用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
グルコン酸は、単糖で有りながらビフィズ菌増殖選択性を持つ機能性等を有しており、ハチミツや醸造酢に０．３％程度含まれ、クエン酸の約１／３とまろやかな酸味を有している。また、グルコン酸或いはその塩類は、塩味代替やマスキング効果、ｐＨ調節、日持向上用途などに幅広く利用されている。しかしながら、溶液安定性が悪く、高濃度下で保存すると析出してしまう欠点があった。
【０００３】
また、アルドン酸二糖類であるラクトビオン酸は、ガラクトースとグルコン酸が結合した二糖類であり、特許第３５５９０６３号公報（特許文献１）ではビフィズス菌増殖効果を、特許第３５０１２３７号公報（特許文献２）ではミネラル吸収促進効果を有することが報告されており、ラクトースを原料に化学合成或いは酸化酵素等により製造可能である。
【０００４】
しかしながら、原料となるラクトースを、乳製品の生産時に排出されるホエイから精製する必要があり、近年、中国及び東南アジア、旧東欧圏、中南米、中近東など、先進国と言われていた国々のみならず、それ以外の地域からの乳製品の引き合いが急増しているため、これまで安価に入手可能であった副産物であるホエイまで需要が極めて旺盛となった。このため輸入に頼る日本では乳糖の確保は容易でなく、一般消費者へ安定に安価に供給することは困難であると考えられる。
【０００５】
一方、カルシウムは人体で五番目に豊富な元素であり、体内において歯や骨の形成、血液凝固、神経筋興奮、酵素活性などの生理的に重要な作用を営んでおり、これらが不足することで骨粗鬆症、高血圧、大腸癌等の重大な疾患の原因となることが広く知られている。厚生労働省の日本人の栄養調査に関する報告によれば、カルシムは所要量に満たない唯一の必須栄養素である。そのため種々のカルシウム剤が開発されてきた。
【０００６】
カルシウム強化目的に用いるカルシウム剤としては、卵殻粉末、サンゴ粉末、骨粉末、貝殻粉末等の天然素材や炭酸カルシウム、塩化カルシウム等化学合成品等が知られているが、これらカルシウム剤は、水に対する溶解性が低いこと、呈味性に悪影響を与えること等が問題となっている。これらの問題点を部分的に解決するための技術としてグルコン酸カルシウムや乳酸カルシウム等の有機酸カルシウム塩が溶解性の高いカルシウム素材として用いられているが、水に対する溶解度は満足ゆくほど高くない。また水に対する溶解速度も遅く作業性が悪い点が問題視されていた。これらカルシウム塩の溶解度や溶解速度を改善する代表的な例として、特開昭５６−９７２４８号公報（特許文献３）に記載されたクエン酸カルシウムとリンゴ酸カルシウムの複合体や、特許第２９０６２１５号公報（特許文献４）に記載された乳酸カルシウムとグルコン酸カルシウムの複合体とする手法があり、これにより溶解度は３〜５倍程度向上した。しかしながら溶液中での安定性は満足ゆくものではなく、冷蔵保存すると析出してしまうため、低濃度溶液でしか使用できない問題があった。
【０００７】
また、溶解度が高いカルシウム素材としてアスコルビン酸カルシウムがあるが、アスコルビン酸カルシウムはアスコルビン酸部分が吸収されるため、過剰摂取により尿路結石を誘発するという問題がある。
【０００８】
このような課題を解決するために、食品中に含まれているカルシウム成分の溶解性が高く、かつ安全性が高い素材が望まれていた。
【０００９】
マルトビオン酸に関しては、製造方法では、微生物変換や触媒を用いた方法などの幾つかの報告はあるが、用途に関しては、特開昭４７−２０３７２号公報（特許文献５）に記載された呈味改善についてのみであり、マルトビオン酸やその塩類のその他の用途や生理機能については全く報告がない。
【００１０】
さらに、近年、食生活の多様化により高血圧、動脈硬化、糖尿等の生活習慣病が国民的な問題となっており、これらの原因の１つとして考えられている肥満を防止することが大きな課題となっている。この肥満には脂質が大きく関与しているため、血中の脂質の上昇を抑制する食素材が求められている。
【００１１】
従来、ペクチンなどの食物繊維に脂質代謝改善効果があることが知られていたが、高分子のため溶解性が悪く粘性も高いため作業性が悪かったり、また、食感や風味が変わってしまったりと欠点を多く抱えていた。この改善策として、特開平６−２５６１９８号公報（特許文献６）に開示された、ペクチンの低分子化により粘度低下させる方法があるが、より低分子で食品加工時の作業性が良く、食感への影響も少ない安価な素材が望まれていた。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明の目的は、腸内の有用菌の増殖を促進すると共に、有害菌の増殖を抑制することができる素材を提供することにある。
【００１３】
また、本発明の目的は、カルシウムなどのミネラルの吸収を促進することができる素材を提供することにある。
【００１４】
また、本発明は、従来のカルシウム剤よりも溶解性（溶解速度、保存安定性）に優れ、体内への吸収性の向上が期待される、飲み易い新規なカルシウム剤及びカルシウム液剤又は該物質を含むカルシウム補給剤、及びカルシウム強化剤、カルシウム飲料を提供することを目的とする。
【００１５】
さらに、本発明は、食品加工時の作業性が良く、食感への影響も少なく、血中の脂質の上昇を抑制することができる素材を提供することも目的としている。
【００１６】
一方、本発明は、これらの目的を達成するために、入手容易で、一般消費者へ安定して安価に供給することができる素材を提供することも目的とする。
【００１７】
具体的には、本発明は、マルトビオン酸、その塩或いはマルトビオノデルタラクトンを含有する組成物を有効成分とし、ヒトやその他動物類等の腸内環境の改善作用、カルシウム吸収促進性作用、カルシウム昜吸収作用、脂質代謝改善作用といった機能を有する、飲食品、医薬品、医薬部外品、健康食品、飼料、餌料等を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１８】
本発明者らは、腸内環境改善促進活性を有する物質を求めて、鋭意研究を重ねた結果、４−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコン酸の一般式で表されるマルトビオン酸、その塩或いはマルトビオノデルタラクトンが、腸内のビフィズス菌や乳酸菌等の有用菌の増殖を促進すると共に、クロストリジウム菌等の有害菌の増殖を抑制することによって、腸内環境の改善を促進することを見出した。また、マルトビオン酸カルシウムなどの塩類の溶解性が高く、ミネラル吸収を促進すると共に、脂質代謝改善作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１９】
さらに、本発明者らは、マルトビオン酸カルシウムが、即溶解性で、溶解度にも優れており、高濃度溶液で冷蔵保存しても析出せず安定であり、しかも飲みやすいカルシウム剤又は液剤が得られることを見出し本発明を完成した。
【００２０】
一方、ラクトビオン酸と同様にアルドン酸二糖類であり、４−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコン酸の一般式で表されるマルトビオン酸は、日本で非常に多く生産されているマルトースを原料にするため、安価で非常に入手しやすいことから、一般消費者へ安定的に安価に提供することができる。
【００２１】
すなわち、本発明の課題を解決するための手段は、以下のとおりである。
【００２２】
第一に、４−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコン酸の一般式で表されるマルトビオン酸、その塩或いはマルトビオノデルタラクトンを有効成分として含有することを特徴とする腸内環境改善剤である。
【００２３】
第二に、マルトビオン酸塩が、マルトビオン酸ナトリウム、マルトビオン酸カルシウム、マルトビオン酸マグネシウム、マルトビオン酸カリウム、マルトビオン酸銅、マルトビオン酸鉄及びマルトビオン酸亜鉛から選択される少なくとも１つ以上である、上記第一に記載の腸内環境改善剤である。
【００２４】
第三に、４−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコン酸の一般式で表されるマルトビオン酸、その塩或いはマルトビオノデルタラクトンを有効成分として含有することを特徴とするミネラル吸収促進剤である。
【００２５】
第四に、マルトビオン酸塩が、マルトビオン酸ナトリウム、マルトビオン酸カルシウム、マルトビオン酸マグネシウム、マルトビオン酸カリウム、マルトビオン酸銅、マルトビオン酸鉄及びマルトビオン酸亜鉛から選択される少なくとも１つ以上である、上記第三に記載のミネラル吸収促進剤である。
【００２６】
第五に、４−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコン酸の一般式で表されるマルトビオン酸、その塩或いはマルトビオノデルタラクトンを有効成分として含有することを特徴とするカルシウム吸収促進剤である。
【００２７】
第六に、マルトビオン酸塩が、マルトビオン酸ナトリウム、マルトビオン酸カルシウム、マルトビオン酸マグネシウム、マルトビオン酸カリウム、マルトビオン酸銅、マルトビオン酸鉄及びマルトビオン酸亜鉛から選択される少なくとも１つ以上である、上記第五に記載のカルシウム吸収促進剤である。
【００２８】
第七に、上記第五又は第六に記載の組成物と、無機カルシウム或いは有機カルシウム塩の一種類以上とを併用することを特徴とするカルシウム吸収促進剤である。
【００２９】
第八に、マルトビオン酸カルシウムを有効成分とする易吸収性カルシウム剤である。
【００３０】
第九に、マルトビオン酸カルシウムと、糖又は糖アルコールとを含有する、易吸収性カルシウム剤である。
【００３１】
第十に、４−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコン酸の一般式で表されるマルトビオン酸、その塩又はマルトビオノデルタラクトンを有効成分として含有することを特徴とする脂質代謝改善剤である。
【００３２】
第十一に、マルトビオン酸塩が、マルトビオン酸ナトリウム、マルトビオン酸カルシウム、マルトビオン酸マグネシウム、マルトビオン酸カリウム、マルトビオン酸銅、マルトビオン酸鉄及びマルトビオン酸亜鉛から選択される少なくとも１つ以上である、上記第十に記載の脂質代謝改善剤である。
【００３３】
本発明の有効成分であるマルトビオン酸或いはその塩またはそのラクトンの製造方法としては、化学的な酸化反応によるマルトース酸化方法やマルトース酸化能を有する微生物或いは酸化酵素を作用させる方法や、可溶性澱粉或いはマルトオリゴ糖とグルコン酸からなる基質に転移能の高いα−グルコシダーゼやシクロデキストリン合成酵素による転移反応により製造することができる。
【００３４】
化学的な酸化反応としては、パラジウムや白金、ビスマスを活性炭に担持させた酸化触媒の存在下、マルトースと酸素をアルカリ雰囲気下で接触酸化させることにより得る方法が知られている。
【００３５】
また、アルドース酸化能を有する微生物を用いた方法としては、アシネトバクター属やブルクホルデリア属、アセトバクター属、グルコノバクター属などの微生物変換・発酵法により得る方法が知られている。
【００３６】
酵素反応による製造方法としては、前記酸化能を有する微生物から酸化酵素を抽出する方法や、バチラス・ステアロサーモフィラスやテルモアナエロバクター属由来の転移能の高いシクロデキストリン合成酵素を用い、可溶性澱粉或いはマルトオリゴ糖とグルコン酸からなる基質から転移反応で製造することが可能である。
【００３７】
マルトビオン酸の塩としては、ナトリウム塩、カルシウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩、銅塩、鉄塩、亜鉛塩などの金属塩が挙げられる。
【００３８】
化学的な酸化反応による製造方法の一例を挙げれば、まず、５０℃に保持した２０％マルトース溶液１００ｍｌに５％白金炭素触媒３ｇを加え、１００ｍＬ／ｍｉｎで酸素を吹き込みながら６００ｒｐｍで攪拌する。反応ｐＨは１０Ｎ水酸化ナトリウム溶液を滴下することでｐＨ９．０を維持させる。酸化反応終了後、遠心分離とメンブレンフィルターろ過により触媒を取り除き、マルトビオン酸ナトリウム溶液を得ることができる。
【００３９】
上記のように得たマルトビオン酸ナトリウム溶液をカチオン交換樹脂または電気透析により脱塩することで、マルトビオン酸を得ることができる。
【００４０】
マルトビオン酸に各種塩類を添加することで、マルトビオン酸塩を調製可能であり、脱水操作によりマルトビオノデルタラクトンの調製も可能である。また、マルトビオノデルタラクトンは水に溶かすと速やかにマルトビオン酸となる。
【００４１】
マルトビオン酸カルシウムの製造法については、上記方法で得られたマルトビオン酸溶液に炭酸カルシウムなどのカルシウム源を２：１のモル比となるように添加し溶解させることで、マルトビオン酸カルシウムの調製が可能である。また、本発明に用いるカルシウム源としては可食性のカルシウムであれば良く、例えば、卵殻粉末、サンゴ粉末、骨粉末、貝殻粉末等の天然素材や炭酸カルシウム、塩化カルシウム等の化学合成品などがある。
【００４２】
マルトビオン酸カルシウムは溶液状態でも析出することなく安定で、凍結乾燥やスプレードライなどにより容易に粉末品を調製することも可能である。必要であれば結晶化粉末を調製することも可能である。
【００４３】
上記のように調製した４−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコン酸の一般式で表されるマルトビオン酸、その塩或いはマルトビオノデルタラクトンは、以下のような性質を有する。
【００４４】
（１）マルトビオン酸カルシウムは、グルコン酸カルシウムの３０倍以上の常温溶解安定性を持つ。
【００４５】
（２）マルトビオン酸、その塩或いはマルトビオノデルタラクトンは、難溶性の無機塩又は有機塩の溶解安定性を高める能力を持つ。
【００４６】
（３）マルトビオン酸、その塩或いはマルトビオノデルタラクトンは、生体内酵素では消化され難くい難消化性である。
【００４７】
（４）マルトビオン酸、その塩或いはマルトビオノデルタラクトンは、腸内細菌増殖選択能を持ち、腸内環境改善促進活性を有する。
【００４８】
（５）マルトビオン酸、その塩或いはマルトビオノデルタラクトンは、脂質代謝改善効果を有する。
【００４９】
（６）マルトビオン酸カルシウム溶液は、濃度７０％で冷蔵保存しても析出することなく、安定な溶液状態を保つ。
【００５０】
（７）マルトビオン酸カルシウムは、グルコン酸カルシウムに比べて溶解速度が著しく速い。
【００５１】
（８）マルトビオン酸カルシウムは、グルコン酸カルシウムよりも苦味が弱い。
【００５２】
（９）マルトビオン酸カルシウムは、加熱安定性、ｐＨ安定性が高い。
【００５３】
本発明の４−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコン酸の一般式で表されるマルトビオン酸、その塩或いはマルトビオノデルタラクトンは、経口摂取により消化管で吸収され難く、その大部分は大腸に到達し、腸内細菌相中のビフィズス菌や乳酸菌等の有用菌を増殖させ、有害菌であるクロストリジウム等を選択的に抑制する。
【００５４】
また、腸内細菌の選択的な増殖により酢酸や酪酸、プロピオン酸等の有機酸を生成して大腸内のｐＨを下げ、クロストリジウム等の有害菌を選択的に抑制する。
【００５５】
さらに、本発明のマルトビオン酸その塩或いはマルトビオノデルタラクトンは、難消化性であるため、フラクトオリゴ糖などの難消化性オリゴ糖のように大腸まで達したのち、腸内細菌糞の作用を受けて大腸のｐＨを酸性側に傾けることにより、大腸部位におけるカルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛など欠乏しやすいミネラルの溶解性を高め、それらの吸収を促進することから、ミネラル吸収促進剤としても有効である。
【００５６】
また、マルトビオン酸塩はグルコン酸塩に比べ水に対する溶解度が高い。例えば、マルトビオン酸カルシウムはグルコン酸カルシウムの３０倍以上の常温溶解度であるため、カルシウムの主要な吸収部位である小腸においてカルシウム吸収率が上がる。そのため、カルシウム易吸収剤としてより有利に利用でき、骨粗鬆症、高血圧、大腸癌等の重大な疾患予防、改善にも寄与することが期待される。
【００５７】
同様に鉄、マグネシウム、亜鉛等のマルトビオン酸塩類もグルコン酸塩等に比べ水に対する溶解度が高いことから、易吸収剤としてより有利に利用でき、ホルモン調節、循環器疾患予防、貧血予防にも寄与することが期待される。
【００５８】
また、マルトビオン酸カルシウムのこのような常温溶解度により、７０％濃度で冷蔵保存しても析出することはないため、従来では出来なかったカルシウム高濃度溶液として流通可能である。
【００５９】
一方、粉末状態であっても、グルコン酸カルシウムなどのカルシウム素材に比べ、溶解度が高く溶解速度が早いことから、粉立ちや溶液温度を気にすることなく溶液へ投入できる。
【００６０】
マルトビオン酸やマルトビオン酸カルシウムを、他の溶解性が低く保存安定性が悪い炭酸カルシウムや塩化カルシウム、乳清カルシウム、乳酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、クエン酸カルシウム、酢酸カルシウム、フッ化カルシウム、第一リン酸カルシウム、第二リン酸カルシウム、第三リン酸カルシウム、ピロリン酸カルシウム等と併用することで、これらの溶解安定性が保たれる。
【００６１】
また、上記カルシウムは、例えば牛骨、豚骨、鶏骨等の家畜、家禽類の骨粉、卵殻、貝殻、珊瑚、乳清等を含有する天然物の形で添加してもよい。
【００６２】
本発明の４−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコン酸の一般式で表されるマルトビオン酸、その塩或いはマルトビオノデルタラクトンは、血中の善玉であるＨＤＬコレステロールへは影響せず、悪玉であるＬＤＬコレステロールおよびＶＬＤＬコレステロール濃度を下げる脂質代謝改善剤効果があり、高脂血症、肥満症等の予防、治療或いは改善効果を奏することが期待される。また、これらに伴う合併症、例えば動脈硬化症、高血圧症等の循環器系、乳がん、大腸がん等の生活習慣病の予防、改善等にも寄与することが期待される。
【００６３】
従って、本発明の４−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコン酸の一般式で表されるマルトビオン酸、その塩或いはマルトビオノデルタラクトンは、老若男女を問わず、美容、健康の維持増進、成人病予防、病中、病後の回復促進、骨粗鬆症などの治療、予防などに有効に利用可能である。
【００６４】
また、ブタ、牛などの家畜、ニワトリ、ダチョウなどの鳥、うなぎ、タイなどの魚においても、その効果は発揮し、感染防止、肥育促進、糞便の悪臭抑制、ミネラル吸収促進などの目的で利用可能である。
【００６５】
本発明の４−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコン酸の一般式で表されるマルトビオン酸、その塩或いはマルトビオノデルタラクトンの諸性質は、飲食物、嗜好物、医薬品、医薬部外品、健康食品、飼料、餌料などの各種組成物に有利に使用できる。とりわけ、これらを水あめ、糖アルコール、ミネラルおよび蔗糖から選ばれる１種類以上の成分とともに含有せしめて各種組成物を製造することも可能である。
【００６６】
例えば、本発明のマルトビオン酸カルシウムの諸性質は、飲食物、嗜好物、医薬品、医薬部外品、健康食品、飼料、餌料などの各種組成物に有利に使用できる。これらをブドウ糖、マルトース、トレハロース、果糖、異性化糖、粉飴、蜂蜜、メイプルシュガー、ソルビトール、マルチトール、ラクチトール、ステビオシド、スクラロース、アセスルファムＫなどのような甘味料やミネラルから選ばれる１種類以上の成分とともに含有せしめて各種組成物を製造することも可能である。必要ならば、デキストリン、澱粉、乳糖などのような増量剤と混合して使用することも出来る。
【００６７】
本発明の４−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｄ−グルコン酸の一般式で表されるマルトビオン酸は、グルコン酸の約半分の酸味を呈することから、酸味料としても有効に用いることが出来る。また、甘味、塩味、渋味、旨味、苦味などの他の呈味を有する各種物質とよく調和し、耐熱性や耐酸性も大きいので、一般の飲食物の酸味付け、呈味改良や品質改良などへ利用することが可能である。
【００６８】
また、本発明のマルトビオン酸カルシウムは、他のカルシウム素材に比べ苦味が小さく、熱安定性やｐＨ安定性も高く低メイラード性であることから、味質や色調等を悪くすることなく飲食物へ利用することが可能である。
【００６９】
本発明の飲食用組成物としては、ヒトの食品、動物あるいは養魚用の飼料、ペットフードを総称する。すなわち、日本茶、ウーロン茶、紅茶、コーヒー、紅茶、ジュース、加工乳、スポーツドリンクなどの飲料類、パン、ピザ、パイなどのベーカリー類、クッキー、クラッカー、ビスケット、ケーキ、カステラなどの洋菓子類、うどん、そば、ラーメンなどの麺類、スパゲティー、マカロニなどのパスタ類、おかき、ポテトチップス、スナックなどのスナック菓子類、ハードキャンデー、ソフトキャンディー、キャラメル、ガム、チョコレートなどの菓子類、アイスクリーム、シャーベットなどの冷菓、クリーム、チーズ、ムース、粉乳、練乳、乳飲料などの乳製品、ゼリー、プリン、ムース、ヨーグルト、バタークリーム、カスタードクリームなどの洋生菓子類、求肥、ういろう、もち、おはぎ、どら焼きなどの和菓子類、ジャム、マーマレード、シロップ漬け、糖果などの果実・野菜の加工食品類、フラワーペースト、フルーツペースト、ピーナッツペーストなどのペースト類、らっきょ漬け、福神漬け、キムチなどの漬物類、醤油、ソース、たれ、麺つゆ、だしの素、スープの素などの複合調味料、シチューの素、スープの素、カレーの素、マヨネーズ、ケチャップなどの調味料類、カレー、シチュー、スープなどのレトルトもしくは缶詰食品、ハム、ソーセージ、ベーコン、ハンバーグ、ミートボール、コロッケ、餃子、ピラフ、おにぎりなどの冷凍食品および冷蔵食品、ちくわ、かまぼこなどの水産加工食品、リゾット、寿司などの米飯類が含まれる。さらに乳児用ミルク、離乳食、ベビーフード、ペットフード、ペット用ガム、動物用飼料、スポーツ食品、栄養補助食品、健康食品なども含まれる。
【００７０】
本発明の組成物を適切な剤型に製剤化して用いてもよい。例えば、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、トローチ剤、チュワブル剤、液剤、シロップ剤、経腸栄養剤、嚥下剤等の製剤で用いることができる。
【００７１】
より具体的には、本発明のマルトビオン酸、その塩又はマルトビオノデルタラクトンを、増量剤、賦形剤、結合剤などと混合して、顆粒、球状、短棒状、板状、立法体、錠剤、カプセル剤、トローチ剤、チュワブル剤など各種形状に成型して使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００７２】
【図１】血中カルシウム濃度の経時変化を表す図。
【発明を実施するための形態】
【００７３】
以下に、具体的な実施例を挙げて本発明について詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に制限されるものではない。
【００７４】
［調製例１］
マルトビオン酸の調製
【００７５】
３０％マルトース溶液（サンエイ糖化株式会社製）１０００ｍｌに、５％パラジウム炭素（川研ファインケミカル株式会社製）を９ｇ添加した。この溶液を４０℃に保持した後、空気１．０Ｌ／ｍｉｎ、回転数６００ｒｐｍで反応を開始させた。反応ｐＨは９．０に維持するように２０％水酸化ナトリウム溶液を連続的に添加した。反応６時間後、触媒を含む反応液を遠心分離と０．２μｍのメンブレンフィルターでろ過し、マルトビオン酸ナトリウム溶液を得た。この溶液を強酸性カチオン交換樹脂（ダウケミカル社製、商品名「ＤＯＷＥＸ−８８」）２Ｌをつめたカラムへ通液することで脱塩処理を行った。次に、弱塩基性アニオン交換樹脂（三菱化学社製、商品名「ＷＡ３０」）２００ｍｌと強酸性カチオン交換樹脂（ダウケミカル社製、商品名「ＤＯＷＥＸ−８８」）２００ｍｌの混合樹脂をつめたカラム、次いで粒状活性炭（武田薬品工業製、粒状白鷺）２００ｍｌをつめたカラムに順次通液し脱色を行った後、減圧濃縮と凍結乾燥によりマルトビオン酸粉末２８５ｇを得た。
【００７６】
［調製例２］
マルトビオン酸カルシウム、マルトビオン酸亜鉛、マルトビオン酸マグネシウム、マルトビオン酸銅の調製
【００７７】
調製例１で得たマルトビオン酸粉末３０ｇを蒸留水１００ｍｌへ溶解後、炭酸カルシウム、酸化亜鉛、酸化マグネシウム及び炭酸銅をマルトビオン酸に対して２：１のモル重量比となるようにそれぞれ添加し、５０℃で２時間攪拌した。反応終了後の溶液を０．２μｍフィルターで濾過し、凍結乾燥することで、マルトビオン酸カルシウム、マルトビオン酸亜鉛、マルトビオン酸マグネシウム、マルトビオン酸銅粉末サンプルを得た。
【００７８】
［調製例３］
マルトビオン酸ナトリウム、マルトビオン酸カリウムの調製
【００７９】
調製例１で得たマルトビオン酸粉末３０ｇを蒸留水１００ｍｌへ溶解後、水酸化ナトリウム及び水酸化カリウムをマルトビオン酸に対して１：１のモル重量比となるようにそれぞれ添加し、５０℃で２時間攪拌した。反応終了後の溶液を０．２μｍフィルターで濾過し、凍結乾燥することで、マルトビオン酸ナトリウムおよびマルトビオン酸カリウム粉末サンプルを得た。
【００８０】
［調製例４］
マルトビオノデルタラクトンの調製
【００８１】
調製例１で得たマルトビオン酸粉末５ｇにアセトン１００ｍｌを加え、エバボレーターにて濃縮操作を行った。この操作を数回繰る繰り返すことで脱水しマルトビオノデルタラクトン約４ｇを得た。
【実施例１】
【００８２】
消化試験
【００８３】
岡田らが「日本栄養・食糧学会誌」、第４３巻、第１号、２３−２９ページ（１９９０年）で報告している方法を一部改変して、下記に示したインビトロでの試験を行い、調製例２及び３で調製したマルトビオン酸カルシウム、マルトビオン酸ナトリウムの消化の程度を、ＨＰＬＣ分析により残存するマルトビオン酸塩量を測定することで評価した。また、比較例としてマルトース及びマルチトール、調製例１及び３と同様の方法で調製したマルトトリオン酸ナトリウム、マルトテトラオン酸ナトリウム、マルトペンタオン酸ナトリウムを用いて同様に試験した。
【００８４】
（１）ヒト唾液α−アミラーゼによる消化性
【００８５】
５ｍｌの１０％試料（１ｍＭ塩化カルシウムを含んだ５０ｍＭマレイン酸緩衝液、ｐＨ６．０）に１ｍｌのヒト唾液α−アミラーゼ（４０ｕｎｉｔｓ／ｍｌ）を加え、３７℃で３０分間反応させた。
【００８６】
（２）人口胃液による消化性
【００８７】
４ｍｌの２．２％試料に２ｍｌの５０ｍＭ  ＨＣｌ−ＫＣｌ緩衝液（ｐＨ２．０）を加え、３７℃で１００分間反応させた。
【００８８】
（３）豚膵臓α−アミラーゼによる消化性
【００８９】
５ｍｌの１％試料（１ｍＭ塩化カルシウムを含んだ５０ｍＭマレイン酸緩衝液、ｐＨ６．６）に０．５ｍｌの豚膵臓α−アミラーゼ（２０ｕｎｉｔｓ／ｍｌ）を加え、３７℃で６時間反応させた。
【００９０】
（４）ラット小腸粘膜酵素による消化性
【００９１】
５ｍｌの１％試料（５０ｍＭマレイン酸緩衝液、ｐＨ６．６）に１ｍｌのラット小腸粘膜酵素（３．８ｕｎｉｔｓ／ｍｌ）（シグマ社製）を加え、３７℃で３時間反応させた。
【００９２】
【表１】
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【００９３】
表１の結果から明らかなように、マルトトリオン酸ナトリウムやマルトテトラオン酸ナトリウムなどは、小腸粘膜酵素により良く分解され、その分解物はグルコースとマルトビオン酸となった。一方、本発明のマルトビオン酸は、難消化性糖質であるマルチトールと同様に小腸粘膜酵素により僅かしか分解を受けないことから、経口摂取した場合、その大部分は大腸に到達するものと考えられる。
【実施例２】
【００９４】
腸内細菌による資化性試験
【００９５】
調製例１〜３で得たマルトビオン酸、マルトビオン酸カルシウム及びマルトビオン酸ナトリウムを用い、腸内細菌の資化性について評価した。前培養は表２に示したそれぞれの菌をＧＡＭブイヨン（日水製薬製）で一夜前培養した。本培養は、各糖試料０．５％を含む培地（１．０％ポリペプトン（日本製薬製）、０．５％肉ブイヨン（極東製薬製）、０．５％酵母エキス（アサヒビール製）、０．３％リン酸水素二カリウム（関東化学製）、０．１％Ｔｗｅｅｎ８０（関東化学製））を１２１℃で２０分間オートクレーブした後、還元剤として１％アスコルビン酸ナトリウム（関東化学製）、０．０５％Ｌ−システイン塩酸塩溶液（和光純薬製）を加えた培地２ｍｌに、前培養液を１０μｌ植菌し３７℃で３日間嫌気培養を行った。この培養後液の濁度を６６０ｎｍにおける吸光度から、糖試料無添加で培養した時の培養液の濁度を差し引いた値で腸内細菌の生育度を求め、その資化性の良否は判定した。
【００９６】
また、比較例としてグルコース、マルトース、マルチトール、グルコン酸、グルコン酸ナトリウム、グルコン酸カルシウムを用いた。
【００９７】
【表２】
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【００９８】
表２の結果から明らかなように、マルトビオン酸およびその塩類は、他の糖類に対して高い増殖選択性を示した。すなわちビフィズス菌や乳酸菌等の有用菌の増殖を促進するとともに、成人腸内の最優勢菌群であるバクテロイデスやユーバクテリウム、有害菌であるクロストリジウムには全く或いは殆ど資化しないことが分かった。
【実施例３】
【００９９】
マウス腸内糞及び盲腸内容物に及ぼす影響
【０１００】
調製例２で得たマルトビオン酸カルシウムを用い、マウスの腸内糞および盲腸内容物へ及ぼす影響について評価した。ＡＩＮ９３Ｇ飼料組成に基づく精製飼料をコントロールとし、この飼料組成のα化コーンスターチをマルトビオン酸カルシウム（飼料固形分当たり５％ｗ／ｗ）へ置換し添加した飼料をマウス（ＢＡＬＢ／ｃ、５週齢、♀、日本ＳＬＣ）２群６匹に自由摂取させた。投与開始２週間後、放血致死させた後、内容物を含む盲腸を採取した。盲腸内容物からＤＮＡを抽出し、乳酸菌およびビフィズス菌数をリアルタイムＰＣＲにより計数した。さらに、盲腸内容物中の有機酸組成をＨＰＬＣを用いて分析した。
【０１０１】
【表３】
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【０１０２】
その結果、表３より明らかなように、マルトビオン酸カルシウムの投与は、マルトビオン酸カルシウム無投与と比べて盲腸内容物及び盲腸壁重量が増加し、生体調節機能に影響を及ぼす酢酸、酪酸およびプロピオン酸の増加が観察された。また糞中のビフィズ菌および乳酸菌も有意な増加が観察された。
【０１０３】
以上の結果より、マルトビオン酸カルシウム投与により腸内環境が有意に改善されたことが分かった。
【実施例４】
【０１０４】
マウス体内脂質代謝に及ぼす影響
【０１０５】
調製例１で得たマルトビオン酸と、調製例２で得たマルトビオン酸カルシウムを用い、マウスの脂質代謝に及ぼす影響について評価した。
【０１０６】
実施例３と同様にＡＩＮ９３Ｇ飼料組成に基づく精製飼料をコントロールとし、この飼料組成のα化コーンスターチをマルトビオン酸及び、マルトビオン酸カルシウム（飼料固形分当たり５％ｗ／ｗ）へ置換し添加した飼料をマウス（ＢＡＬＢ／ｃ、５週齢、♀、日本ＳＬＣ）２群６匹に自由摂取させた。投与開始２週間後、エーテル麻酔下頸静脈より採血を行い、血清中の総コレステロールをコレステロール  Ｅ−テストワコー（和光純薬製）で、ＨＤＬコレステロールはＨＤＬ−コレステロール  Ｅ−テストワコー（和光純薬製）を用いて測定し、ＨＤＬとＬＤＬ＋ＶＬＤＬ量を算出した。
【０１０７】
【表４】
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【０１０８】
その結果、表４より明らかなように、マルトビオン酸及びマルトビオン酸カルシウム添加区において善玉コレステロールであるＨＤＬはコントロール区と殆ど変化無いのに対し、悪玉コレステロールであるＬＤＬ＋ＶＬＤＬでは有意に抑制されていることが明らかになった。
【実施例５】
【０１０９】
マルトビオン酸カルシウムの溶解性試験
【０１１０】
調製例２で得たマルトビオン酸カルシウムを用い水溶解性について評価した。
【０１１１】
２０℃に維持した蒸留水１００ｍｌへマルトビオン酸カルシウムを添加しマグネティックスターラーにて攪拌し限界溶解度を求めた。また、比較として炭酸カルシウム（和光純薬製）、クエン酸カルシウム（扶桑薬品工業製）、グルコン酸カルシウム１水和物（扶桑薬品工業製）、乳酸カルシウム５水和物（扶桑薬品工業製）を用いた。
【０１１２】
【表５】
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【０１１３】
その結果、マルトビオン酸カルシウムでは１３０ｇ／１００ｍｌ以上と、グルコン酸カルシウムの３４倍以上、クエン酸カルシウムの３００倍以上、溶解性が高い結果が得られた。
【実施例６】
【０１１４】
マルトビオン酸カルシウム溶解速度試験
【０１１５】
調製例２で得たマルトビオン酸カルシウムを用い溶解速度について評価した。
【０１１６】
２５℃の蒸留水１００ｍｌへマルトビオン酸カルシウムを１ｇ添加しマグネティックスターラーにて攪拌し溶解速度を求めた。また、比較として乳酸カルシウム５水和物（扶桑薬品工業製）、グルコン酸カルシウム１水和物（扶桑薬品工業製）を用いた。
【０１１７】
【表６】
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【０１１８】
その結果、マルトビオン酸カルシウムは、グルコン酸カルシウムに比べ約１３０倍早く完全に溶解した。
【実施例７】
【０１１９】
マルトビオン酸カルシウム溶液冷蔵保存安定性試験
【０１２０】
調製例２で得たマルトビオン酸カルシウムを用い溶液の冷蔵保存安定性について評価した。
【０１２１】
各濃度に調製したマルトビオン酸カルシウム溶液を冷蔵保存した時の溶液の状態を観察した。また、比較として乳酸カルシウム５水和物（扶桑薬品工業製）、グルコン酸カルシウム１水和物（扶桑薬品工業製）を用いた。
【０１２２】
【表７】
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【０１２３】
その結果、比較として用いたグルコン酸カルシウムや乳酸カルシウムは析出してしまったのに対し、マルトビオン酸カルシウムでは、濃度７０％でも析出することなく溶液状態を維持した。
【実施例８】
【０１２４】
マルトビオン酸カルシウム溶液安定性試験
【０１２５】
調製例２で得たマルトビオン酸カルシウムを用い溶液安定性について評価した。
【０１２６】
２．０ｍｌ用マイクロチユーブへ表８に示した配合にて各種試料を秤量した後、２５℃の蒸留水を加え１ｍｌとし、ＶＯＲＴＥＸミキサーにて５分間攪拌した。このときの溶解性を確認した後、沸騰液中で１０分間加熱溶解処理を行った。これら４℃で保存したときの溶解安定性について目視にて評価した。また、比較として乳酸カルシウム５水和物（扶桑薬品工業製）、グルコン酸カルシウム１水和物（扶桑薬品工業製）を用いた。
【０１２７】
【表８】
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【０１２８】
その結果、常温溶解性については、グルコン酸カルシウムでは５０ｍｇ／ｍｌで、乳酸カルシウムでは１００ｍｇ／ｍｌで溶解しなかったのに対し、マルトビオン酸カルシウムでは、５００ｍｇ／ｍｌでも速やかに溶解した。
【０１２９】
また、乳酸カルシウムとグルコン酸カルシウム混合品に比べ、マルトビオン酸と乳酸カルシウム又はグルコン酸カルシウム混合品の方が溶解速度及び溶解度共に高い結果が得られた。
【０１３０】
加熱溶解後の冷蔵保存安定性については、マルトビオン酸カルシウム単独及び、乳酸カルシウム又はグルコン酸カルシウム混合共に、析出することなく透明な溶液状態を維持した。一方、グルコン酸カルシウムや乳酸カルシウムでは１００ｍｇ／ｍｌ程度より析出が観察され、これらの混合品においても析出が観察された。
【０１３１】
以上結果から、マルトビオン酸カルシウムは他のカルシウム素材に比べ非常に溶液安定性優れた素材であるといえる。
【実施例９】
【０１３２】
マルトビオン酸、マルトビオノデルタラクトンのカルシウム溶解性試験
【０１３３】
調製例１と４で得たマルトビオン酸とマルトビオノデルタラクトンを用いカルシウム溶解性について評価した。
【０１３４】
２．０ｍｌマイクロチューブへ５％（ｗ／ｗ）試料溶液（マルトビオン酸、マルトビオノデルタラクトン、マルトース）５００μlに、１０ｍＭ炭酸カルシウム溶液５００μｌを加え、３７℃で１時間、１３０ｒｐｍで振騰した。これを０．２μｍフィルターにて濾過した後、溶液中に可溶化したカルシウム量をカルシウムＣ−テストワコー（和光純薬製）にて測定した。また、比較としてマルトースを用いた。
【０１３５】
【表９】
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【０１３６】
その結果、炭酸カルシウムはマルトース溶液中では、カルシウムの可溶量は９．５％だったのに対し、マルトビオン酸及びマルトビオノデルタラクトンでは１００％可溶化した。
【実施例１０】
【０１３７】
マルトビオン酸塩類のカルシウム溶解性試験
【０１３８】
調製例２及び３で得たマルトビオン酸カルシウム、マルトビオン酸亜鉛、マルトビオン酸マグネシウム、マルトビオン酸銅、マルトビオン酸ナトリウム、マルトビオン酸カリウムを用いてカルシウム素材の溶解性について評価した。
【０１３９】
２００ｍｌ用ビーカーへ表１０に示した配合比で１００ｍｌの溶液を調製後、３７℃で３０分間、マグネティックスターラーで攪拌した。これを遠心分離により上清液を除去し、沈殿物を凍結乾燥することで可溶化率を求めた。
【０１４０】
【表１０】
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【０１４１】
その結果、グルコン酸カルシウムのみに比べ、マルトビオン酸塩類を配合することで、カルシウムの可溶化量が２０％程度増加した。
【０１４２】
これらの結果よりマルトビオン酸塩類には他のカルシウム素材の溶解度を上げる効果があることが分かった。
【実施例１１】
【０１４３】
マウスのカルシウム吸収へ及ぼす影響
【０１４４】
調製例１および２で得たマルトビオン酸とマルトビオン酸カルシウムについて、マウスのカルシウム吸収に及ぼす影響について評価した。
【０１４５】
実験には６週齢のｄｄＹ系雌性マウス（日本ＳＬＣ）を終夜絶食して使用した。試験期間中は脱イオン水のみを与えた。マウスを１群５匹の３群に分け、Ｉ群には５ｍｍｏｌ／ｋｇ体重のマルトビオン酸カルシウムを、ＩＩ群には５ｍｍｏｌ／ｋｇ体重のマルトビオン酸と５ｍｍｏｌ／ｋｇ体重の炭酸カルシウムの同時投与、ＩＩＩ群には５ｍｍｏｌ／ｋｇ体重の炭酸カルシウムをそれぞれ経口投与した。投与前、および投与後１５，３０，６０，１２０分に尾静脈より採血した。血中のカルシウム濃度はカルシウムＣ−テストワコー（和光純薬製）を用いて測定した。２群間の平均値の比較にはｔ−検定を用い、ｐ＜０．０５の場合を有意差ありと判定した。
【０１４６】
図１に両群の血中カルシウム濃度の経時変化を示した。血中カルシウム濃度は、マルトビオン酸カルシウム投与群及び、マルトビオン酸と炭酸カルシウムを同時投与群では、炭酸カルシウム投与に比べ、投与後３０分で高い傾向を示し、６０分後では有意な高値を示した。さらに、表１１に示した時間曲線下面積では、マルトビオン酸カルシウム投与群及びマルトビオン酸と炭酸カルシウムを同時投与群で炭酸カルシウム投与群と比較して有意に高い値を示した。
【０１４７】
【表１１】
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【実施例１２】
【０１４８】
マルトビオン酸カルシウムの溶解安定性と味質試験
【０１４９】
表１２に示した配合比にてカルシウム強化飲料を調製し、室温下での溶解性を確認すると共に、加熱溶解後４℃にて一週間保存後に試料溶液の析出状況について評価した。また、味質については、パネラー１０名による官能検査により４段階評価を行った。
【０１５０】
その結果、本発明１〜５のマルトビオン酸カルシウム添加区ではいずれも室温で速やかに溶解し、冷蔵保存後も透明な溶液状態を維持した。一方、グルコン酸カルシウムと乳酸カルシウムを用いた比較例６〜１０ではいずれも室温下では溶解しなかった。また、グルコン酸カルシウムでは、カルシウム含量が１％となるように添加すると冷蔵保存中に析出が観察され、乳酸カルシウムとの複合化によりカルシウム含量１．５％までは、冷蔵保存も安定であったが２％では析出が観察された。
【０１５１】
味質については、乳酸カルシウムとグルコン酸カルシウムを配合した比較例６〜１０の飲料では、いずれも強い苦味を感じたが、マルトビオン酸カルシウム添加飲料では、苦味は殆ど感じられなかった。
【０１５２】
以上の結果から、マルトビオン酸カルシウムは既存の有機酸カルシウム素材に比べ、味質に影響を与えずカルシウム高含有させることが可能であることが分かった。
【０１５３】
【表１２】
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【先行技術文献】
【特許文献】
【０１５４】
【特許文献１】特許第３５５９０６３号公報
【特許文献２】特許第３５０１２３７号公報
【特許文献３】特開昭５６−９７２４８号公報
【特許文献４】特許第２９０６２１５号公報
【特許文献５】特開昭４７−２０３７２号公報
【特許文献６】特開平６−２５６１９８号公報
【図１】
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