(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)：
【化１】
0005492202.tif 000161
〔式中、
Ｒ１は
【化２】
0005492202.tif 000162
であり、これらは、非置換であるか、または１個以上のＣ１−８アルキル、Ｃ６−１４アリール基、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ１−８アルコキシ、ハロ、ＮＨ２、ＣＮ、ＯＣＦ３、ＯＨ、Ｃ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ８、Ｃ(Ｏ)Ｒ６、ＮＲ６Ｒ８、ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ６、ＳＯ２Ｒ６、ＳＯ２ＮＲ６Ｒ８で置換されていてよく；
Ｒ２およびＲ３は独立してＣ１−８アルキル、またはＣ１−８アルキルＯＨであるか、またはＲ２およびＲ３はＣ３−１４シクロアルキル基を形成し；
Ｌは結合、Ｃ１−８アルキレン、−Ｃ(Ｏ)Ｏ−、−ＣＯＮＲ９−、−Ｃ１−８アルキルＯＨ−、Ｃ１−８ハロアルキル、−Ｃ(Ｏ)−、−ＮＨ−または−Ｏ−であり；
ＸおよびＷは独立してＮ、またはＣＲ５であり、そして、ＸまたはＷの少なくとも１個がＮであり；
Ｒ７は
【化３】
0005492202.tif 000163
であり；
Ｒ４はＣ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ３−１４シクロアルキル、Ｃ６−１４アリール基、５−１４員ヘテロアリール基、３−１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ１−８アルコキシ、ハロ、ＮＲ６Ｒ８、Ｃ(Ｏ)ＯＲ６、Ｃ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ８、Ｃ１−８ハロアルキル、ホルミル、カルバルコキシ、Ｃ１−８アルキルＯＨ、Ｃ(Ｏ)Ｒ６、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ(Ｏ)ＮＨＣ１−８アルキルＲ６、ＮＲ６Ｒ８、ＳＯ２ＮＲ６Ｒ８、ＯＣＦ３、ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ６、ＣＨ２ＯＣ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ８、ＣＨ２ＮＲ６Ｒ８、ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ６、ＮＨＣ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ８、ＣＨ２ＮＨＳＯ２Ｒ６、ＣＨ２ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ６、ＯＣ(Ｏ)Ｒ６、またはＮＨＣ(Ｏ)Ｒ６であり、これは、置換されているかまたは非置換であってよく；
ＺはＣ１−８アルキル、ＣＮ、ＯＨ、またはハロゲンであり；
ｍは０−３であり；
ｐは１−３であり；
Ｙは結合、Ｃ１−８アルキレン、−Ｃ(Ｏ)−、−Ｃ(Ｏ)Ｏ−、−ＣＨ(ＯＨ)−、または−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ１０)−であり；
Ｒ５はＨ、ハロゲン、ＣＮ、低級アルキル、ＯＨ、ＯＣＨ３またはＯＣＦ３であり；
Ｒ９およびＲ１０は独立してＣ１−８アルキルまたはＨであり；
Ｒ６およびＲ８は独立してＨ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ３−１４シクロアルキル、Ｃ６−１４アリール基、５−１４員ヘテロアリール基、３−１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ１−８アルキルＯＨ、Ｃ１−８アルコキシであるか、または一原子上にあるＲ６およびＲ８はヘテロ原子含有環を形成でき；そして
ここで、Ｒ４、Ｒ６、およびＲ８は、非置換であるか、または１個以上のＣ１−８アルキル、Ｃ３−１４シクロアルキル、Ｃ６−１４アリール基、５−１４員ヘテロアリール基、３−１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ１−８アルキルＯＨ、ＯＨ、オキソ、Ｃ１−８ハロアルキル、カルボキシ(carbox)Ｃ１−８アルキル、またはＳＯ２Ｃ１−８アルキル、ハロ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２で置換されていてよい。〕
の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項２】
Ｒ７が
【化４】
0005492202.tif 000164
であり、そしてＲ１が
【化５】
0005492202.tif 000165
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ４がＣ(Ｏ)ＯＣ１−８アルキル、ＣＦ３、Ｃ(Ｏ)ＯＲ６、Ｃ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ８、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ１−８アルキルＯＨ、Ｃ(Ｏ)Ｒ６、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ(Ｏ)ＮＨＣ１−８アルキルＲ６、Ｃ(ＣＨ３)(ＣＨ３)(ＯＨ)、Ｃ(Ｏ)ＣＨ３、ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ３、またはＣ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＯＨ)ＯＨであり；そして
Ｒ６およびＲ８が独立してＨ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルケニル、Ｃ３−１４シクロアルキル、Ｃ６−１４アリール基、５−１４員ヘテロアリール基、または３−１４員シクロヘテロアルキル基である、
請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ１が置換されていなくても１個以上のメチル、エチル、イソプロピル、Ｃｌ、Ｆ、ＣＮ、メトキシ、またはＣＦ３で置換されていてもよく；
Ｒ４が、場合によりピペラジニル、モルホリニル、またはピリジニルで置換されていてよいＣ(Ｏ)ＣＨ３、Ｃ(Ｏ)ＮＨ−フェニル、Ｃ(Ｏ)ＯＨ、ＣＦ３、Ｃ(ＣＨ３)(ＣＨ３)ＯＨ、Ｃ(Ｏ)ＯＣＨ３、ＣＦ３、Ｃ(Ｏ)ＯＣＨ２ＣＨ３、またはＣ(Ｏ)ＮＣＨ２ＣＨ３であり；そして
ｐが１、または２である、
請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ４がメチル、フェニル、ピリジニル、メトキシ、Ｃｌ、Ｆ、Ｃ(Ｏ)ＯＣ１−８アルキル、Ｃ(Ｏ)ＯＨ、Ｃ(Ｏ)ＮＨＣ６−１４アリール、Ｃ(Ｏ)ＮＣ６−１４アリールＣ１−８アルキル、Ｃ(Ｏ)−５−１４員ヘテロアリール基、Ｃ(Ｏ)−３−１４員シクロヘテロアルキル基、ＣＦ３、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、Ｃ(ＣＨ３)(ＣＨ３)ＯＨ、Ｃ(Ｏ)ＣＨ３、Ｃ(Ｏ)ＣＨ２ＣＨ３、ＳＯ２Ｃ１−８アルキル、ＳＯ２ＣＦ３、Ｃ(Ｏ)ＮＨＣ１−８アルキルＯＨ、Ｃ(Ｏ)ＮＨＣ１−８アルキルＣＦ３、ＳＯ２ＮＨＣ１−８アルキル、ＯＣＦ３、ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ３、またはＣＨ２ＯＣ(Ｏ)ＮＨＣＨ３である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ４が、置換されていなくても置換されていてもよい
【化６】
0005492202.tif 000166
である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ２およびＲ３がＣ１−８アルキルである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ２およびＲ３がＣＨ３である、請求項１〜７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｌが−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｃ(Ｏ)−、−ＣＨ(ＯＨ)−、−ＣＨ２−、−ＣＦ２−、−ＣＨＦ−、−Ｃ(ＯＨ)−、または結合である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｌが−ＣＨ２−である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１１】
ＸおよびＷの両方ともＮであり、そしてＺがＣＨ３であり、そしてｍが１である、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ７が
【化７】
0005492202.tif 000167
であり、
Ｒ４がＣ(Ｏ)ＣＨ３、Ｃ(Ｏ)ＮＨ−フェニル、Ｃ(Ｏ)ＯＨ、ＣＦ３、Ｃ(ＣＨ３)(ＣＨ３)ＯＨ、Ｃ(Ｏ)ＯＣＨ３、ＣＦ３、またはＣ(Ｏ)ＯＣＨ２ＣＨ３である、
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１３】
式(Ｉａ)：
【化８】
0005492202.tif 000168
〔式中、
Ｒ１１はＣ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ３−１４シクロアルキル、Ｃ６−１４アリール基、５−１４員ヘテロアリール基、３−１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ１−８アルコキシ、ハロ、ＮＲ１３Ｒ１４、Ｃ(Ｏ)ＯＲ１３、Ｃ(Ｏ)ＮＲ１３Ｒ１４、Ｃ１−８ハロアルキル、ホルミル、カルバルコキシ、Ｃ１−８アルキルＯＨ、Ｃ(Ｏ)Ｒ１３、ＳＯ２Ｒ１３、Ｃ(Ｏ)ＮＨＣ１−８アルキルＲ１３、ＮＲ１３Ｒ１４、ＳＯ２ＮＲ１３Ｒ１４、ＯＣＦ３、ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ１３、ＣＨ２ＯＣ(Ｏ)ＮＲ１３Ｒ１４、ＣＨ２ＮＲ１３Ｒ１４、ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ１３、ＮＨＣ(Ｏ)ＮＲ１３Ｒ１４、ＣＨ２ＮＨＳＯ２Ｒ１３、ＣＨ２ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ１３、ＯＣ(Ｏ)Ｒ１３、またはＮＨＣ(Ｏ)Ｒ１３であり、これは、置換されているかまたは非置換であってよく；
Ｒ１２はＨ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ６−１４アリール基、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ１−８アルコキシ、ハロ、ＮＨ２、ＣＮ、ＯＣＦ３、ＯＨ、Ｃ(Ｏ)ＮＲ１３Ｒ１４、Ｃ(Ｏ)Ｒ１３、ＮＲ１３Ｒ１４、ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ１３、ＳＯ２Ｒ１３、またはＳＯ２ＮＲ１３Ｒ１４であり；
Ｒ１３およびＲ１４は独立してＨ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ３−１４シクロアルキル、Ｃ６−１４アリール基、５−１４員ヘテロアリール基、３−１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ１−８アルキルＯＨ、Ｃ１−８アルコキシであるか、または一原子上のＲ１３とＲ１４はヘテロ原子含有環を形成でき；そして
ここで、Ｒ１１、Ｒ１３、およびＲ１４は、非置換であるか、または１個以上のＣ１−８アルキル、Ｃ３−１４シクロアルキル、Ｃ６−１４アリール基、５−１４員ヘテロアリール基、３−１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ１−８アルキルＯＨ、ＯＨ、オキソ、Ｃ１−８ハロアルキル、カルボキシ(carbox)Ｃ１−８アルキル、またはＳＯ２Ｃ１−８アルキル、ハロ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２で置換されていてよい。〕
の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の式(Ｉ)または(Ｉａ)の化合物を有効成分とする、癌の処置剤。
【請求項１５】
腫瘍形成、癌、新生組織形成、悪性過増殖性障害、非悪性過増殖性障害、良性前立腺肥大、乾癬、滲出型黄斑変性症、大理石骨病および望まない発毛から選択されるヘッジホッグ(Ｈｈ)シグナル伝達関連疾患状態の予防または処置に使用するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項１６】
腫瘍形成、癌、新生組織形成、悪性過増殖性障害、非悪性過増殖性障害、良性前立腺肥大、乾癬、滲出型黄斑変性症、大理石骨病および望まない発毛から選択されるヘッジホッグ(Ｈｈ)シグナル伝達関連疾患状態の予防または処置使用のための医薬の製造のための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物の使用。
【請求項１７】
請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物および薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項１８】
経口投与に適する形態の、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の化合物および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項１９】
次のものから選択される、請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物：
２−[(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−フェノキシ−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラ−ヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−{(Ｒ)−４−[６−(ヒドロキシル(Hyrdoxyl)−フェニル−メチル０−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−ピリジン−４−イルメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−ピリジン−２−イルメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[(Ｓ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−エチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[４−(４−ベンジル−６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン−１−イル)−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[(Ｒ)−４−(４−ベンジル−６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン−１−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
１−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−エタノン；および
２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−１,２−ジオール。
【請求項２０】
化合物２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オールまたはその薬学的に許容される塩。
【請求項２１】
２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オールまたはその薬学的に許容される塩および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項２２】
２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オールまたはその薬学的に許容される塩を有効成分として含む、髄芽腫、基底細胞癌、膵臓癌または小細胞肺癌の処置剤。
【請求項２３】
化合物２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール。
【請求項２４】
２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オールおよび薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項２５】
２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オールを有効成分として含む、髄芽腫、基底細胞癌、膵臓癌または小細胞肺癌の処置剤。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
発明の背景
ヘッジホッグ(Ｈｈ)シグナル伝達は、最初にショウジョウバエにおいて、胚パターン形成、または胚細胞が分化した組織の秩序立てられた空間配置を形成する過程の重要な制御機構として同定された(Nusslein-Volhard et al. (1980) Nature 287, 795-801)。哺乳動物細胞では、３種のヘッジホッグ遺伝子、ソニックヘッジホッグ(Ｓｈｈ)、インディアンヘッジホッグ(Ｉｈｈ)およびデザートヘッジホッグ(Ｄｈｈ)が同定されている。ヘッジホッグ遺伝子は、Ｎ末端の自己触媒的開裂および脂質修飾(パルミトイル化)およびＣ末端のコレステロール修飾を含む翻訳後修飾を受ける、分泌型タンパク質をコードする。
【０００２】
Ｎ末端が脂質修飾されたヘッジホッグタンパク質は、タンパク質経路のシグナル伝達活性を作動させ、そして可溶性ヘッジホッグタンパク質のシグナル伝達細胞からの放出と応答細胞による受け取りによって細胞間連絡が生じる。応答細胞では、１２回通過膜貫通型受容体Patched(Ｐｔｃｈ)がＨｈシグナル伝達の負の制御因子として作用し、そして７回貫通型膜貫通型タンパク質Smoothened(Ｓｍｏ)がＨｈシグナル伝達の正の制御因子として作用する。休止状態では、遊離Ｐｔｃｈ(すなわち、Ｈｈにより結合されていない)が、Ｓｍｏにより誘発される経路活性を準化学量論的に抑制する(Taipale et al. (2002) Nature 418: 892)；しかしながら、リガンドＨｈタンパク質の結合により、Ｓｍｏによる抑制は解除され、形成されるシグナル伝達カスケードはＧｌｉ転写因子(Ｇｌｉ１、Ｇｌｉ２およびＧｌｉ３)の活性化および核移行を導く。
【０００３】
Ｈｈシグナル伝達転写の下流標的遺伝子はＷｎｔｓ、ＴＧＦβ、およびＰｔｃおよびＧｌｉ１を含み、これらは正および負の制御フィードバックループの構成因子である。ｃ−ｍｙｃ、サイクリンＤおよびＥのようないくつかの細胞サイクルおよび増殖制御遺伝子は、Ｈｈシグナル伝達の標的遺伝子に含まれる。
【０００４】
Ｈｈシグナル伝達は、組織特異的かつ用量依存的態様で細胞増殖、分化、および臓器形成のような広範な生物学的過程を制御することが知られている。神経管の発展において、Ｓｈｈは底板で発現され、運動およびドーパミン作動性ニューロンを含むニューロンの特異的サブタイプの分化を指示する。Ｈｈはまた、小脳顆粒細胞および神経幹細胞のような神経前駆細胞の増殖も制御することが知られている。腸管発達において、低レベルのＨｈシグナル伝達が膵臓発達に必要であるのに対し、高レベルのＨｈシグナル伝達は、膵臓器官形成を遮断する。Ｈｈはまた幹細胞増殖ならびに皮膚、前立腺、精巣および骨髄器官形成に重要な役割を有することも知られている。
【０００５】
通常、Ｈｈシグナル伝達は、細胞増殖、分化および胚パターン形成の間厳しく制御されている。しかしながら、ヘッジホッグシグナル伝達経路の、例えば、この経路を構成的に活性化する変異による異常活性は、病的結果と因果関係を有し得る。例として、Patchedの機能喪失型変異は、ゴーリン症候群(皮膚および脳の癌が高リスクである遺伝性症候群であり、基底細胞母斑症候群(ＢＣＮＳ)としても既知)で見られ；そしてＳｍｏおよびＧｌｉの機能獲得型変異は、基底細胞癌腫および神経膠芽腫に関係する。基底細胞癌腫(ＢＣＣ)は、皮膚癌の最も一般的な形であり、毎年９０,０００名を超える米国人が罹患している。Ｈｈの構成的活性化は、ＢＣＣ、髄芽腫(最も一般的な小児脳腫瘍)、横紋筋肉腫、膵臓癌、小細胞肺癌、前立腺癌および乳癌の腫瘍形成を促進することが判明している。腫瘍形成における役割以外に、Ｈｈシグナル伝達はまた前立腺癌の転移にも関与する。Ｈｈシグナル伝達は恐らく多くの他のタイプの腫瘍にも関係しており、このような関係の発見は今後も続くと予測される；これは、世界中の癌センターにおいて積極的に研究されている領域である。
【０００６】
これらの癌細胞の増殖にはＨｈ経路活性化が必要であり、Ｈｈシグナル伝達経路の遮断は、しばしば癌細胞増殖を阻害する。実際、異種移植モデルでＨｈアンタゴニストシクロパミンおよびＧｌｉ１  ｓｉＲＮＡはこれらの癌細胞を有効に遮断でき、腫瘍サイズを減少でき、新規Ｈｈアンタゴニストが、これらの癌の処置のための新規化学療法剤を提供できることを示唆する。Ｈｈアンタゴニストシクロパミンは、動物モデルで前立腺癌の転移を抑制することが示されている。
【０００７】
癌への関与に加えて、Ｈｈシグナル伝達は正常組織ホメオスタシスおよび再生に重要な役割を有する。Ｈｈ経路は、マウスモデルで網膜、胆管、肺、骨および前立腺の傷害後に活性化される。Ｈｈ経路はまた毛包、骨髄、および中枢神経系(ＣＮＳ)のある領域でも構成的に活性であり、良性前立腺肥大および滲出型黄斑変性症の血管形成はヘッジホッグ経路活性を必要とする。細胞再生過程は、抗Ｓｈｈ抗体およびシクロパミンで遮断できる。それ故に、神経増殖性疾患、良性前立腺肥大、滲出型黄斑変性症、乾癬、骨髄増殖性疾患および白血病、大理石骨病および脱毛の処置に、Ｈｈシグナル伝達経路の小分子アンタゴニストは有用であるはずである。
【０００８】
Ｓｍｏの構成的活性化が癌(例えば、ＢＣＣ)をもたらし、ＳｍｏがＰｔｃｈによる抑圧から開放されたとき発癌性であり得ることを示す証拠は、かかる障害の処置における治療剤としてのＳｍｏアンタゴニストの有用性を示唆する(Stone et al. (1996) Nature 384: 129)。従って、ヘッジホッグシグナル伝達経路の活性を調節し、例えば、Ｓｍｏ活性を調節する分子は、治療に有用である。
【発明の概要】
【０００９】
発明の概要
本発明は、一般に、腫瘍形成、癌、新生組織形成、および非悪性過増殖性障害を含み、これに限定されないヘッジホッグ経路に関する病因の診断および処置に関し、新規化合物に関する。本発明は、新規化合物、新規組成物、その使用方法およびその製造方法に関し、ここで、かかる化合物は一般に治療における薬剤として薬理学的に有用であり、その作用機序が、ヘッジホッグおよびＳｍｏシグナル伝達経路を阻害する薬剤を使用する、腫瘍形成、腫瘍増殖および腫瘍生存の阻害方法である場合を含む。本発明の化合物および方法(例えば、式(Ｉ)の化合物)は、例えば、Ｐｔｃ機能損失型、ヘッジホッグ機能獲得型、Smoothened機能獲得型またはＧｌｉ機能獲得型のような表現型に起因する異常増殖状態を阻止することによりヘッジホッグシグナル伝達経路の活性化を阻止することに関し、そして、細胞と本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)を、正常Ｐｔｃ活性を作動させ、正常ヘッジホッグ活性に拮抗し、またはSmoothened活性に拮抗するのに(例えば、異常増殖状態を回復または制御するために)十分な量で接触させることを含む。
【００１０】
本発明は、式(Ｉ)：
【化１】
0005492202.tif 000002
〔式中、
Ｒ１はＣ６−１４アリール基、または５−１４員ヘテロアリール基であり、これらは、非置換であるか、または１個以上のＣ１−８アルキル、Ｃ６−１４アリール基、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ１−８アルコキシ、ハロ、ＮＨ２、ＣＮ、ＯＣＦ３、ＯＨ、Ｃ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ８、Ｃ(Ｏ)Ｒ６、ＮＲ６Ｒ８、ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ６、ＳＯ２Ｒ６、またはＳＯ２ＮＲ６Ｒ８で置換されていてよく；
Ｒ２およびＲ３は独立してＣ１−８アルキル、またはＣ１−８アルキルＯＨであるか、またはＲ２およびＲ３は、縮合Ｃ３−１４シクロアルキル基を形成し；
Ｌは結合、Ｃ１−８アルキレン、−Ｃ(Ｏ)Ｏ−、−Ｃ(Ｏ)ＮＲ９−、−Ｃ１−８アルキルＯＨ−、−Ｃ１−８ハロアルキル−、−Ｃ(Ｏ)−、−ＮＨ−または−Ｏ−であり；
ＸおよびＷは独立してＮまたはＣＲ５であり、そして、ＸまたはＷの少なくとも１個がＮであり；
Ｒ７はＣ６−１４アリール基、５−１４員ヘテロアリール基、または３−１４員シクロヘテロアルキル基であり；
Ｒ４はＣ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ３−１４シクロアルキル、Ｃ６−１４アリール基、５−１４員ヘテロアリール基、３−１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ１−８アルコキシ、ハロ、ＮＲ６Ｒ８、Ｃ(Ｏ)ＯＲ６、Ｃ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ８、Ｃ１−８ハロアルキル、ホルミル、カルバルコキシ、Ｃ１−８アルキルＯＨ、Ｃ(Ｏ)Ｒ６、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ(Ｏ)ＮＨＣ１−８アルキルＲ６、ＮＲ６Ｒ８、ＳＯ２ＮＲ６Ｒ８、ＯＣＦ３、ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ６、ＣＨ２ＯＣ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ８、ＣＨ２ＮＲ６Ｒ８、ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ６、ＮＨＣ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ８、ＣＨ２ＮＨＳＯ２Ｒ６、ＣＨ２ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ６、ＯＣ(Ｏ)Ｒ６、またはＮＨＣ(Ｏ)Ｒ６であり、これは、置換されているかまたは非置換であってよく；
ＺはＣ１−８アルキル、ＣＮ、ＯＨ、またはハロゲンであり；
ｍおよびｐは独立して０−３であり；
Ｙは結合、Ｃ１−８アルキレン、−Ｃ(Ｏ)−、−Ｃ(Ｏ)Ｏ−、−ＣＨ(ＯＨ)−、または−Ｃ(Ｏ)ＮＲ１０であり；
Ｒ５はＨ、ハロゲン、ＣＮ、低級アルキル、ＯＨ、ＯＣＨ３またはＯＣＦ３であり；
Ｒ９およびＲ１０は独立してＣ１−８アルキルまたはＨであり；
Ｒ６およびＲ８は独立してＨ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ３−１４シクロアルキル、Ｃ６−１４アリール基、５−１４員ヘテロアリール基、３−１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ１−８アルキルＯＨ、Ｃ１−８アルコキシであるか、または一原子上にある２個のＲ６が、または１個のＲ６と１個のＲ８はヘテロ原子含有環を形成してよく；そして
ここで、Ｒ４、Ｒ６、およびＲ８は、非置換であるか、または１個以上のＣ１−８アルキル、Ｃ３−１４シクロアルキル、Ｃ６−１４アリール基、５−１４員ヘテロアリール基、３−１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ１−８アルキルＯＨ、ＯＨ、オキソ、Ｃ１−８ハロアルキル、カルボキシ(carbox)Ｃ１−８アルキル、またはＳＯ２Ｃ１−８アルキル、ハロ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２で置換されていてよい。〕
の化合物、またはその薬学的に許容される塩に関する。
【００１１】
一態様において、本発明は、Ｒ７が
【化２】
0005492202.tif 000003
である、式(Ｉ)の化合物を含む。
【００１２】
他の態様において、本発明は、Ｒ１が
【化３】
0005492202.tif 000004
である、上記の式(Ｉ)の化合物を含む。
【００１３】
他の態様において、本発明は、Ｒ７が
【化４】
0005492202.tif 000005
【化５】
0005492202.tif 000006
である、式(Ｉ)の化合物を含む。
【００１４】
さらに別の態様において、本発明は、Ｒ４がＣ(Ｏ)ＯＣ１−８アルキル、ＣＦ３、Ｃ(Ｏ)ＯＲ６、Ｃ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ８、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ１−８アルキルＯＨ、Ｃ(Ｏ)Ｒ６、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ(Ｏ)ＮＨＣ１−８アルキルＲ６、Ｃ(ＣＨ３)(ＣＨ３)(ＯＨ)、Ｃ(Ｏ)ＣＨ３、Ｃ(ＣＨ２)ＣＨ３、またはＣ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＯＨ)ＯＨであり；そしてＲ６およびＲ８が独立してＨ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ１−８アルケニル、Ｃ３−１４シクロアルキル、Ｃ６−１４アリール基、５−１４員ヘテロアリール基、または３−１４員シクロヘテロアルキル基である、式(Ｉ)の化合物を含む。
【００１５】
他の態様において、本発明は、Ｒ７が
【化６】
0005492202.tif 000007
であり、そしてＲ４がＣ１−８アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル(proply)、またはブチル；Ｃ２−８アルケニル、例えばエテニルまたはプロペニル；Ｃ３−１４シクロアルキル、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシル；Ｃ６−１４アリール基、例えばフェニル；５−１４員ヘテロアリール基、例えばピリジニルまたはイミダゾリル、３−１４員シクロヘテロアルキル基、例えばピペリジニル、モルホリニル、ピロリジニル、またはピペラジニル；Ｃ１−８アルコキシ、例えばメトキシ、エトキシ、またはプロポキシ；ハロ、例えばＣｌ、Ｆ、Ｂｒ、またはＩ；ＮＲ６Ｒ８、例えばＮＨＣ１−８アルキル；Ｃ(Ｏ)ＯＲ６、例えばＣ(Ｏ)ＯＣ１−８アルキル、またはＣ(Ｏ)ＯＨ；Ｃ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ８、例えばＣ(Ｏ)ＮＨＣ６−１４アリール、Ｃ(Ｏ)ＮＣ６−１４アリールＣ１−８アルキル、またはＣ(Ｏ)−５−１４員ヘテロアリール基、またはＣ(Ｏ)−３−１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ１−８ハロアルキル、例えばＣＦ３；ホルミル、カルバルコキシ、Ｃ１−８アルキルＯＨ、例えばＣＨ２ＯＨ、任意の位置をＯＨで置換されているエチル、任意の位置をＯＨで置換されているプロピル、または任意の位置をＯＨで置換されているブチル；Ｃ(Ｏ)Ｒ６、例えばＣ(Ｏ)Ｃ１−８アルキル；ＳＯ２Ｒ６、例えばＳＯ２Ｃ１−８アルキルまたはＳＯ２ＣＦ３；Ｃ(Ｏ)ＮＨＣ１−８アルキルＲ６、例えばＣ(Ｏ)ＮＨＣ１−８アルキルＯＨ、またはＣ(Ｏ)ＮＨＣ１−８アルキルＣＦ３；ＳＯ２ＮＲ６Ｒ８、例えばＳＯ２ＮＨＣ１−８アルキル；ＯＣＦ３、ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ６、例えばＮＨＣ(Ｏ)Ｃ１−８アルキル；ＣＨ２ＯＣ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ８、ＣＨ２ＮＲ６Ｒ８、ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ６、ＮＨＣ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ８、ＣＨ２ＮＨＳＯ２Ｒ６、ＣＨ２ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ６、ＯＣ(Ｏ)Ｒ６、またはＮＨＣ(Ｏ)Ｒ６であり、そして、Ｒ４は置換されていなくても置換されていてもよく；そしてｐが０、１、または２である、
式(Ｉ)の化合物を含む。
【００１６】
他の態様において、Ｒ６およびＲ８が独立してＨ、Ｃ１−８アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、またはブチル；Ｃ２−８アルケニル、例えばアルケニル、プロペニル；Ｃ３−１４シクロアルキル、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシル；Ｃ６−１４アリール基、例えばフェニル；５−１４員ヘテロアリール基、例えばピリジニルまたはピリミジニル；３−１４員シクロヘテロアルキル基、例えばモルホリニル、ピペリジニル、ピロリジニル、またはピペラジニル；Ｃ１−８ハロアルキル、例えばＣＦ３；Ｃ１−８アルキルＯＨ、Ｃ１−８アルコキシ、例えばメトキシまたはエトキシであるか；または１個の原子上の２個のＲ６、またはＲ６とＲ８がヘテロ原子含有環、例えば５−１４員ヘテロアリール基または３−１４員シクロヘテロアルキル基を形成できる。
【００１７】
本発明の他の態様において、Ｒ４は置換されていなくても１個以上のＣ１−８アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチル、またはペンチル；Ｃ３−１４シクロアルキル、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、またはシクロヘキシル；Ｃ６−１４アリール基、例えばフェニル；５−１４員ヘテロアリール基、例えばピリジニルまたはピリミジニル；３−１４員シクロヘテロアルキル基、例えばモルホリニル、ピペリジニル、ピロリジニル、またはピペラジニル；Ｃ１−８アルキルＯＨ、例えばＣＨ３ＯＨ；ＯＨ、オキソ、Ｃ１−８ハロアルキル、例えばＣＦ３；カルボキシＣ１−８アルキル、またはＳＯ２Ｃ１−８アルキル、ハロ、例えばＣｌ、Ｆ、Ｂｒ、またはＩ；−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、または−ＮＨ２で置換されていてもよい。
【００１８】
他の態様において、およびＲ４がメチル、フェニル、ピリジニル、メトキシ、Ｃｌ、Ｆ、Ｃ(Ｏ)ＯＣ１−８アルキル、Ｃ(Ｏ)ＯＨ、Ｃ(Ｏ)ＮＨＣ６−１４アリール、Ｃ(Ｏ)ＮＣ６−１４アリールＣ１−８アルキル、Ｃ(Ｏ)−５−１４員ヘテロアリール基、Ｃ(Ｏ)−３−１４員シクロヘテロアルキル基、ＣＦ３；ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、Ｃ(ＣＨ３)(ＣＨ３)ＯＨ、Ｃ(Ｏ)ＣＨ３、Ｃ(Ｏ)ＣＨ２ＣＨ３、ＳＯ２Ｃ１−８アルキル、ＳＯ２ＣＦ３、Ｃ(Ｏ)ＮＨＣ１−８アルキルＯＨ、Ｃ(Ｏ)ＮＨＣ１−８アルキルＣＦ３、ＳＯ２ＮＨＣ１−８アルキル、ＯＣＦ３、ＮＨＣ(Ｏ)ＣＨ３、またはＣＨ２ＯＣ(Ｏ)ＮＨＣＨ３であり；その各々は置換されていなくても置換されていてもよく；およびｐが０、１、または２である。
【００１９】
他の態様において、Ｒ４が、場合によりピペラジニル、モルホリニル、またはピリジニルで置換されていてよいＣ(Ｏ)ＣＨ３、Ｃ(Ｏ)ＮＨ−フェニル、Ｃ(Ｏ)ＯＨ、ＣＦ３、Ｃ(ＣＨ３)(ＣＨ３)ＯＨ、Ｃ(Ｏ)ＯＣＨ３、ＣＦ３、Ｃ(Ｏ)ＯＣＨ２ＣＨ３、またはＣ(Ｏ)ＮＣＨ２ＣＨ３である。
【００２０】
好ましい態様において、Ｒ７が
【化７】
0005492202.tif 000008
であり、そしてＲ４がＣ(Ｏ)ＣＨ３、Ｃ(Ｏ)ＮＨ−フェニル、Ｃ(Ｏ)ＯＨ、ＣＦ３、Ｃ(ＣＨ３)(ＣＨ３)ＯＨ、Ｃ(Ｏ)ＯＣＨ３、ＣＦ３、またはＣ(Ｏ)ＯＣＨ２ＣＨ３である。
【００２１】
他の態様において、本発明は、Ｒ１が
【化８】
0005492202.tif 000009
であり、その各々は、非置換であるか、または１個以上のＣ１−８アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル(例えば、イソプロピル)、ブチル、ペンチル、またはヘキシル；Ｃ６−１４アリール基、例えばフェニル；Ｃ１−８ハロアルキル、例えばＣＦ３；Ｃ１−８アルコキシ、例えばメトキシまたはエトキシ；ハロ、例えばＣｌ、Ｆ、Ｂｒ、またはＩ；ＮＨ２、ＣＮ、ＯＣＦ３、ＯＨ、Ｃ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ８、Ｃ(Ｏ)Ｒ６、ＮＲ６Ｒ８、ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ６、ＳＯ２Ｒ６、またはＳＯ２ＮＲ６Ｒ８で置換されていてよい、式(Ｉ)の化合物を含む。
【００２２】
さらなる態様において、Ｒ１が
【化９】
0005492202.tif 000010
であり、この各々は、非置換であるか、または１個以上のメチル、エチル、ＣＦ３、メトキシ、Ｃｌ、Ｆ、ＮＨ２、ＣＮ、ＯＣＦ３、またはＯＨで置換されていてよい。他の態様において、Ｒ１は置換されていなくてもＣＨ３、Ｃｌ、Ｆ、メトキシ、またはＣＨで置換されていてもよい。
【００２３】
他の態様において、本発明は、Ｒ７が
【化１０】
0005492202.tif 000011
であり、Ｒ１が、置換されていなくても１個以上のメチル、エチル、イソプロピル、Ｃｌ、Ｆ、ＣＮ、メトキシ、またはＣＦ３で置換されていてもよい
【化１１】
0005492202.tif 000012
である、式(Ｉ)の化合物を含む。
【００２４】
さらに別の態様において、本発明は、Ｒ４がＣ(Ｏ)ＯＣ１−８アルキル、ＣＦ３、Ｃ(Ｏ)ＯＲ６、Ｃ(Ｏ)ＮＲ６Ｒ８、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ１−８アルキルＯＨ、Ｃ(Ｏ)Ｒ６、ＳＯ２Ｒ６、Ｃ(Ｏ)ＮＨＣ１−８アルキルＲ６、Ｃ(ＣＨ３)(ＣＨ３)(ＯＨ)、Ｃ(Ｏ)ＣＨ３、ＣＨ２−ＣＨ２−ＣＨ３、またはＣ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＯＨ)ＯＨである、式(Ｉ)の化合物を含む。
【００２５】
一態様において、Ｒ６およびＲ８が独立してＨ、メチル、エチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニル、ピリジニル、モルホリニル、ピペリジニル、ピロリジニル、またはピペラジニル、ＣＦ３、メトキシであるか、１個の原子上の２個のＲ６、またはＲ６とＲ８がヘテロ原子含有環、例えば５−１４員ヘテロアリール基、例えばピリジニルまたはピリミジニル；または３−１４員シクロヘテロアルキル基、例えばピペリジニルまたはピペラジニルを形成できる。
【００２６】
他の態様において、本発明は、Ｒ４が置換されていなくても置換されていてもよい
【化１２】
0005492202.tif 000013
である、式(Ｉ)の化合物を含む。
【００２７】
他の態様において、本発明は、Ｒ２およびＲ３がＣ１−８アルキル、例えばメチル、エチルであるか、またはそれらが結合している炭素原子と一体となってＣ４−７シクロアルキル基を形成し、式(Ｉ)の化合物を含む。他の態様において、Ｒ２およびＲ３は各々メチルであるか、またはシクロペンチル基またはシクロヘキシル基を形成する。
【００２８】
さらに別の態様において、本発明は、Ｒ２およびＲ３がＣＨ３である、式(Ｉ)の化合物を含む。
【００２９】
他の態様において、本発明は、Ｌが−Ｏ−、−ＮＨ−、−Ｃ(Ｏ)−、−ＣＨ(ＯＨ)−、−ＣＨ２−、−ＣＦ２−、−ＣＨＦ−、−Ｃ(ＯＨ)−、または結合である、式(Ｉ)の化合物を含む。他の態様において、本発明は、Ｌが−ＣＨ２−である、式(Ｉ)の化合物を含む。他の態様において、本発明は、ＸおよびＷの両方がＮであり、そしてＺがＣＨ３であり、そしてｍが１である、式(Ｉ)の化合物を含む。
【００３０】
他の態様において、ｐが０、１、または２である。他の態様において、ｐが０または１である。さらに別の態様において、ｐが１である。
【００３１】
他の態様において、Ｙが結合、Ｃ１−８アルキレン、例えばメチレン、エチレン、プロピレン−Ｃ(Ｏ)−、−Ｃ(Ｏ)Ｏ−、−ＣＨ(ＯＨ)−、または−Ｃ(Ｏ)ＮＲ１０であり、ここで、Ｒ１０がＣ１−８アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、またはブチル、またはＨである。他の態様において、Ｙが結合、メチレン、−Ｃ(Ｏ)Ｏ−、またはＣ(Ｏ)ＮＨである。他の態様において、Ｙが結合である。
【００３２】
他の態様において、本発明は、式(Ｉａ)：
【化１３】
0005492202.tif 000014
〔式中、
Ｒ１１はＣ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ３−１４シクロアルキル、Ｃ６−１４アリール基、５−１４員ヘテロアリール基、３−１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ１−８アルコキシ、ハロ、ＮＲ１３Ｒ１４、Ｃ(Ｏ)ＯＲ１３、Ｃ(Ｏ)ＮＲ１３Ｒ１４、Ｃ１−８ハロアルキル、ホルミル、カルバルコキシ、Ｃ１−８アルキルＯＨ、Ｃ(Ｏ)Ｒ１３、ＳＯ２Ｒ１３、Ｃ(Ｏ)ＮＨＣ１−８アルキルＲ１３、ＮＲ１３Ｒ１４、ＳＯ２ＮＲ１３Ｒ１４、ＯＣＦ３、ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ１３、ＣＨ２ＯＣ(Ｏ)ＮＲ１３Ｒ１４、ＣＨ２ＮＲ１３Ｒ１４、ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ１３、ＮＨＣ(Ｏ)ＮＲ１３Ｒ１４、ＣＨ２ＮＨＳＯ２Ｒ１３、ＣＨ２ＮＨＣ(Ｏ)ＯＲ１３、ＯＣ(Ｏ)Ｒ１３、またはＮＨＣ(Ｏ)Ｒ１３であり、これは、置換されているかまたは非置換であってよく；
Ｒ１２はＨ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ６−１４アリール基、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ１−８アルコキシ、ハロ、ＮＨ２、ＣＮ、ＯＣＦ３、ＯＨ、Ｃ(Ｏ)ＮＲ１３Ｒ１４、Ｃ(Ｏ)Ｒ１３、ＮＲ１３Ｒ１４、ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ１３、ＳＯ２Ｒ１３、またはＳＯ２ＮＲ１３Ｒ１４であり；
Ｒ１３およびＲ１４は独立してＨ、Ｃ１−８アルキル、Ｃ２−８アルケニル、Ｃ３−１４シクロアルキル、Ｃ６−１４アリール基、５−１４員ヘテロアリール基、３−１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ１−８ハロアルキル、Ｃ１−８アルキルＯＨ、Ｃ１−８アルコキシであるか、または一原子上のＲ１３とＲ１４はヘテロ原子含有環を形成でき；そして
ここで、Ｒ１１、Ｒ１３、およびＲ１４は、非置換であるか、または１個以上のＣ１−８アルキル、Ｃ３−１４シクロアルキル、Ｃ６−１４アリール基、５−１４員ヘテロアリール基、３−１４員シクロヘテロアルキル基、Ｃ１−８アルキルＯＨ、ＯＨ、オキソ、Ｃ１−８ハロアルキル、カルボキシ(carbox)Ｃ１−８アルキル、またはＳＯ２Ｃ１−８アルキル、ハロ、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、−ＯＨ、−ＮＨ２で置換されていてよい。〕
の化合物、またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００３３】
他の態様において、本発明は、次のものから選択される化合物を含む：
２−[(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−フェノキシ−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラ−ヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−{(Ｒ)−４−[６−(ヒドロキシル(Hyrdoxyl)−フェニル−メチル０−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−ピリジン−４−イルメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−ピリジン−２−イルメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[(Ｓ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−エチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[４−(４−ベンジル−６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン−１−イル)−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
２−[(Ｒ)−４−(４−ベンジル−６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン−１−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール；
１−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−エタノン；および
２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−１,２−ジオール。
【００３４】
本発明の一面は、Ｓｍｏ依存的経路活性化の阻害のために化合物を用いる方法を利用可能とする。本発明の他の面は、ヘッジホッグ(リガンド)非依存的経路活性化の阻害のために化合物を用いる方法を利用可能とする。ある態様において、本方法は、ヘッジホッグ機能獲得型、Ｐｔｃ機能損失型またはSmoothened機能獲得型変異に起因するような、望まないヘッジホッグ経路の活性化の表現型効果を相殺するために使用できる。例えば、本方法は、細胞(インビトロまたはインビボ)とＳｍｏアンタゴニスト、例えば本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)または他の小分子を、Smoothened依存的および／またはヘッジホッグ非依存的活性化経路をアンタゴナイズするのに十分な量で接触させることを含み得る。
【００３５】
本発明の化合物および方法は、例えば、幹細胞からの組織形成における、または過増殖性細胞の増殖の阻止のための、インビトロおよび／またはインビボで細胞の増殖および／または分化の調節に使用できる。他の特定の態様において、細胞と本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)の接触  −  または本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)の細胞への挿入  −  は、細胞増殖の阻害、腫瘍細胞増殖および／または生存の阻害、および／または腫瘍形成の阻害をもたらす。それ故に、他の特定の態様は、本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)を用いることにより、腫瘍細胞でのＨｈ経路を阻止および／またはアンタゴナイズする方法を提供する。
【００３６】
本発明の方法は、薬学的に許容される賦形剤または担体を含む医薬製剤として製剤された本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)を用いてよく、そして該製剤を、癌および／または腫瘍(例えば髄芽腫(medullablastoma)、基底細胞癌腫など)、および非悪性過増殖性障害のような望まない細胞増殖を含む状態を処置するために患者に投与してよい。
【００３７】
本発明の一態様は、該細胞と本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)を接触させる、または該細胞に本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)を挿入することを含む、インビトロまたはインビボで細胞におけるＳｍｏタンパク質の合成、発現、製造、安定化、リン酸化、細胞内での再配置、および／または活性を阻止する方法に関する。
【００３８】
本発明の他の面は、式(Ｉ)の化合物および哺乳動物への治療有効量でのその投与を含む、Ｓｍｏ遺伝子または遺伝子産物(例えば、Ｓｍｏタンパク質)の存在および／または発現により特徴付けられる、哺乳動物の細胞衰弱、撹乱、および／または機能障害；過形成性、過増殖性および／または癌性疾患状態；および／または腫瘍細胞の転移を診断、予防および／または処置する方法を提供する。
【００３９】
発明の詳細な記載
他の態様において、本発明は、治療有効量の式(Ｉ)または(Ｉａ)の化合物を含む、医薬組成物を含む。他の態様において、本発明は、ヘッジホッグ経路に関連する病態を有する哺乳動物の処置方法であって、処置を必要とする該哺乳動物に治療有効量の式(Ｉ)または(Ｉａ)の化合物を投与することを含む、方法を含む。
【００４０】
本明細書で、用語“処置”は、本発明の障害のリスクがある患者(例えば、ヘッジホッグ関連障害(例えば、癌))ならびに病気の患者の処置を含み、予防または防止的処置ならびに治癒的または疾患抑制的処置の両方を含む。この用語はさらに疾患の進行遅延のための処置を含む。
【００４１】
例えば、ヘッジホッグ関連障害(例えば、癌)の“抑制および／または回復”により、出願人は該ヘッジホッグ関連障害(例えば、糖尿病)を抑制し、または該状態の重症度を処置前または未処置よりも低下させることを意味する。
【００４２】
ここで使用する“治癒”は、患者におけるヘッジホッグ関連障害(例えば、癌)、または、その進行中のエピソードが、処置を介して寛解に至ることを意味する。
【００４３】
用語“防止”または“予防”は、代謝障害、例えば、糖尿病の発症または再発を妨げることを意味する。
【００４４】
“処置”または“処置する”は、治療、予防および防止を意味し、そして特に、予防的(予防)にまたは治癒のために、または、患者が影響を受けているような虚弱質または病弊または状態または事象の発生の程度または可能性を減じるために、投薬するかまたは医療処置を行うことを意味する。
【００４５】
“診断”は、診断、予後診断、モニタリング、特徴付け、臨床試験への参加を含む患者選択、および特定の障害または臨床事象のリスクあるまたはそれを有する患者または特定の治療的処置の最も応答しそうな患者、または特定の治療的処置に対する患者の応答の評価またはモニタリングのための患者の同定を意味する。
【００４６】
“対象”または“患者”は、状態、障害または疾患の処置を必要とする哺乳動物、好ましくはヒトを意味する。
【００４７】
ここで使用する“本発明の化合物”は、式(Ｉ)の化合物(例えば、全ての異型を含む、式(Ｉ)の化合物)を含み、これに限定されない。本発明の化合物は、本明細書の実施例に記載されたものを含む、ここに具体的に記載された化合物を含む。
【００４８】
ここで使用する“進行遅延”は、ヘッジホッグ関連障害(例えば、癌)の前段階または初期段階にある患者への本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)の投与が、疾患がさらに進行することを阻止するか、または該活性化合物を投与していない疾患の進行と比較して、疾患の進行を減速させることを意味する。
【００４９】
“ヘッジホッグ機能獲得型”は、細胞とヘッジホッグタンパク質の接触を模した表現型、例えば、ヘッジホッグ経路の異常活性化に至るＰｔｃ遺伝子、ヘッジホッグ遺伝子、またはSmoothened遺伝子の異常修飾または変異、またはかかる遺伝子の発現レベルの変化(例えば、減少)を意味する。機能獲得型は、Ｐｔｃ遺伝子産物のＧｌｉ遺伝子、例えば、Ｇｌｉ１、Ｇｌｉ２、およびＧｌｉ３の発現レベルを制御する能力の損失、またはＧｌｉタンパク質、例えば、Ｇｌｉ１、Ｇｌｉ２、およびＧｌｉ３の処理、安定性、局在化または活性を制御する能力の損失を含み得る。用語“ヘッジホッグ機能獲得型”はまた、ヘッジホッグ自体の修飾または変異を含み、これに限定されないヘッジホッグシグナル伝達経路のどこかでの変更により起こる何らかの類似の細胞表現型(例えば、過剰増殖を示す)も言うために使用する。例えば、ヘッジホッグシグナル伝達経路の活性化により異常に高い増殖速度の腫瘍細胞は、ヘッジホッグがその細胞で変異していなくてさえ、“ヘッジホッグ機能獲得型”表現型を有する。
【００５０】
“Patched機能損失型”は、細胞とヘッジホッグタンパク質の接触を模した表現型、例えば、ヘッジホッグ経路の異常活性化に至る、Ｐｔｃ遺伝子の異常修飾または変異、または該遺伝子の発現レベル減少を意味する。機能損失型は、Ｐｔｃ遺伝子産物のＧｌｉ遺伝子およびタンパク質、例えば、Ｇｌｉ１、Ｇｌｉ２およびＧｌｉ３の発現レベル、処理、安定性、局在化、制御または活性を制御する能力の損失を含み得る。
【００５１】
“Ｇｌｉ機能獲得型”は、細胞とヘッジホッグタンパク質の接触を模した表現型、例えば、ヘッジホッグ経路の異常活性化に至る、Ｇｌｉ遺伝子の異常修飾または変異、または該遺伝子の発現レベルの上昇を言う。
【００５２】
“Smoothened機能獲得型”は、細胞とヘッジホッグタンパク質の接触を模した表現型、例えば、ヘッジホッグ経路の異常活性化に至る、Ｓｍｏ遺伝子の異常修飾または変異、または該遺伝子の発現レベルの上昇を意味する。
【００５３】
ここで使用する“小有機分子”は、３キロダルトン未満、および好ましくは１.５キロダルトン未満の分子量を有する有機化合物(または無機化合物(例えば、金属)と錯体化した有機化合物)である。
【００５４】
ここで使用する“レポーター”遺伝子は、用語“マーカー”と置き換え可能に使用され、容易に検出可能な核酸および／またはルシフェラーゼのような容易に検出可能な遺伝子産物をコードする核酸である。
【００５５】
転写および翻訳制御配列は、宿主細胞でのコード配列の発現を提供するＤＮＡ調節配列、例えばプロモーター、エンハンサー、ターミネーターなどである。真核細胞において、ポリアデニル化シグナルが制御配列である。
【００５６】
“プロモーター配列”は、細胞でＲＮＡポリメラーゼを結合でき、下流(３’方向)コード配列の転写を開始させるＤＮＡ調節領域である。本発明を明確化する目的で、プロモーター配列はその３’末端で転写開始部位により結合し、バックグラウンドを超える検出可能なレベルで転写を開始させるために必要な最小数の塩基または構成成分を含むために上流(５’方向)に伸びる。プロモーター配列内に、転写開始部位(例えば、ヌクレアーゼＳ１でのマッピングにより好都合に定義される)、ならびにＲＮＡポリメラーゼの結合を担うタンパク質結合ドメイン(コンセンサス配列)が見られる。
【００５７】
コード配列は、ＲＮＡポリメラーゼが該コード配列をｍＲＮＡに翻訳し、続いて該コード配列によりコードされるタンパク質にトランスＲＮＡスプライシングされ、そして翻訳されるとき、細胞内で転写および翻訳制御配列の“制御下”にある。
【００５８】
句“薬学的に許容される”は、ヒトに投与したときに生理学的に耐容性であり、典型的にアレルギーまたは類似の望ましくない反応、例えば急性胃蠕動、眩暈などを引き起こさない分子および組成物を意味する。好ましくは、ここで使用する用語“薬学的に許容される”は、連邦または州政府の監督官庁により承認されているか、または米国薬局方または他に動物、およびより具体的にヒトへの使用のための一般に認識されている薬局方に記載されている。
【００５９】
用語“担体”は、化合物と共に投与する希釈剤、アジュバント、賦形剤、または媒体を意味する。かかる医薬担体は、滅菌液体、例えば水および、石油、動物、植物または合成起源の油、例えばピーナッツ油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油などを含む油であり得る。水または水性溶液食塩溶液および水性デキストロースおよびグリセロール溶液が、特に注射可能溶液のための担体として、好ましくは用いられる。適当な医薬担体は、“Remington's Pharmaceutical Sciences”by E. W. Martinに記載されている。
【００６０】
句“治療有効量”は、ここでは、宿主の活性、機能および応答の臨床的に顕著な欠損を少なくとも約１５パーセント、好ましくは少なくとも５０パーセント、より好ましくは少なくとも９０パーセント減らす、および最も好ましくは防止するのに十分な量を意味する。あるいは、治療有効量は、宿主の臨床的に顕著な状態／症状の改善を引き起こすのに十分である。
【００６１】
“薬剤”は、医薬組成物および診断用組成物の製造に用い得る全ての物質を意味し、またはそれは化合物、核酸、ポリペプチド、フラグメント、アイソフォーム、変異体、またはかかる目的のために、全て本発明に従い、独立して使用し得る他の物質であり得る。
【００６２】
ここで使用する“類似体”は、本発明の所望の活性および治療効果を有する化合物、ヌクレオチド、タンパク質またはポリペプチドまたは化合物と類似のまたは同一の活性または機能(例えば、腫瘍増殖阻害)を有するが、必ずしも好ましい態様の配列または構造に類似するまたは同一の配列または構造を有していない小有機化合物、ヌクレオチド、タンパク質、またはポリペプチドを意味する。
【００６３】
“誘導体”は、化合物、タンパク質またはアミノ酸残基置換、欠損または付加の導入により変えられている親タンパク質またはポリペプチドのアミノ酸配列を含むポリペプチド、または核酸またはヌクレオチド置換または欠損、付加または変異のいずれかにより修飾されているヌクレオチドを意味する。誘導体である核酸、ヌクレオチド、タンパク質またはポリペプチドは、親ポリペプチドと類似のまたは同一の機能を有する。
【００６４】
“阻害剤”または“アンタゴニスト”は、Ｈｈ経路機能のためのインビトロおよびインビボアッセイを使用して同定された阻害分子、例えば、Ｓｍｏアンタゴニストを意味する。特に、阻害剤およびアンタゴニストは、Ｈｈ経路を介して起こるシグナル伝達を減少させる化合物または薬剤を意味する。阻害剤は、この経路を介するシグナル伝達を減少、遮断、または阻止する化合物であり得る。
【００６５】
ここで使用する“ヘッジホッグ関連障害”は、ヘッジホッグ経路の破壊または異常と関連する障害、ならびにヘッジホッグ経路の活性化と関連する正常ではあるが、望まない増殖状態と関連する障害を含む。“ヘッジホッグ関連障害”は、腫瘍形成、癌、新生組織形成、悪性過増殖性障害、および非悪性過増殖性障害を含み、これらに限定されない。“ヘッジホッグ関連障害”はまた良性前立腺肥大、乾癬、滲出型黄斑変性症、大理石骨病および望まない発毛も含む。
【００６６】
ここで使用する用語“癌”は、固形哺乳動物腫瘍ならびに血液悪性腫瘍を含む。“固形哺乳動物腫瘍”は、頭頚部、肺、中皮腫、縦隔、食道、胃、膵臓、肝胆道系、小腸、結腸、結腸直腸、直腸、肛門、腎臓、尿道、膀胱、前立腺、陰茎、精巣、婦人科臓器、卵巣、乳房、内分泌系、皮膚、脳を含む中枢神経系の癌；軟組織および骨の肉腫；および皮膚および眼内起源の黒色腫を含む。用語“血液悪性腫瘍”は、小児白血病およびリンパ腫、ホジキン病、リンパ球性および皮膚起源のリンパ腫、急性および慢性白血病、形質細胞腫瘍およびＡＩＤＳと関連する癌を含む。加えて、いかなる進行度の癌、例えば一次、転移、および再発癌でも処置できる。多数の種類の癌に関する情報は、例えば、米国癌協会から、または、例えば、Wilson et al. (1991) Harrison's Principles of Internal Medicine, 12th Edition, McGraw-Hill, Inc.から見ることができる。ヒトおよび獣医使用両方が意図される。
【００６７】
本発明の化合物および方法に特に感受性の癌は、神経膠腫、髄芽腫、原始神経外胚葉性腫瘍(ＰＮＥＴＳ)、基底細胞癌腫(ＢＣＣ)、小細胞肺癌、大細胞肺癌、胃腸管の腫瘍、横紋筋肉腫、軟組織肉腫、膵臓腫瘍、膀胱腫瘍および前立腺腫瘍を含み、これらに限定されない。
【００６８】
ここで使用する用語“悪性過増殖性障害”は、癌、神経増殖性障害、骨髄増殖性疾患および白血病を含み、これらに限定されない。
【００６９】
ここで使用する用語“非悪性過増殖性障害”は、非悪性および非新生物増殖性障害、例えば血管の平滑筋過形成、皮膚瘢痕、および肺線維症を含み、これらに限定されない。
【００７０】
ここで使用する“ハロ”または“ハロゲン”は、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを意味する。
【００７１】
ここで使用する“アルキル”は、直鎖または分枝鎖飽和炭化水素基を意味する。幾つかの態様では、アルキル基は１〜１０個の炭素原子(例えば、１〜８個の炭素原子)を有し得る。アルキル基の例は、メチル(Ｍｅ)、エチル(Ｅｔ)、プロピル(例えば、ｎ−プロピルおよびイソプロピル)、ブチル(例えば、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル)、ペンチル基(例えば、ｎ−ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル)などを含む。低級アルキル基は、典型的に最大４個までの炭素原子を有する。低級アルキル基の例は、メチル、エチル、プロピル(例えば、ｎ−プロピルおよびイソプロピル)、およびブチル基(例えば、ｎ−ブチル、イソブチル、ｓ−ブチル、ｔ−ブチル)を含む。
【００７２】
ここで使用する“アルケニル”は、１個以上の炭素−炭素二重結合を有し、直鎖または分枝鎖のアルキル基を意味する。幾つかの態様では、アルケニル基は、２〜１０個の炭素原子(例えば、２〜８個の炭素原子)を有し得る。アルケニル基の例は、エテニル、プロペニル、ブテニル、ペンテニル、ヘキセニル、ブタジエニル、ペンタジエニル、ヘキサジエニル基などを含む。１個以上の炭素−炭素二重結合は(２−ブテンにおけるように)内部でも(１−ブテンにおけるように)末端でもよい。
【００７３】
ここで使用する“アルキニル”は、１個以上の炭素−炭素三重結合を有する直鎖または分枝鎖のアルキル基を意味する。幾つかの態様では、アルキニル基は、２〜１０個の炭素原子(例えば、２〜８個の炭素原子)を有し得る。アルキニル基の例は、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニルなどを含む。１個以上の炭素−炭素三重結合は(２−ブチンにおけるように)内部でも(１−ブチンにおけるように)末端でもよい。
【００７４】
ここで使用する“アルコキシ”は、−Ｏ−アルキル基を意味する。アルコキシ基の例は、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基(例えば、ｎ−プロポキシおよびイソプロポキシ)、ｔ−ブトキシ基などを含む。
【００７５】
ここで使用する“アルキルチオ”は、−Ｓ−アルキル基を意味する。アルキルチオ基の例は、メチルチオ基、エチルチオ基、プロピルチオ基(例えば、ｎ−プロピルチオおよびイソプロピルチオ)、ｔ−ブチルチオ基などを含む。
【００７６】
用語“カルバルコキシ”は、主鎖への結合がカルボニル基(Ｃ(Ｏ))を介し、アルコキシカルボニル基を意味する。例は、メトキシカルボニル、エトキシカルボニルなどを含み、これらに限定されない。
【００７７】
ここで使用する“オキソ”は、二重結合した酸素(すなわち、＝Ｏ)を意味する。この用語Ｃ(Ｏ)はまた−Ｃ＝Ｏ基を意味し、それはケトン、アルデヒドまたは酸または酸誘導体であることも理解されるべきである。同様に、Ｓ(Ｏ)は、−Ｓ＝Ｏ基を意味する。
【００７８】
ここで使用する“ハロアルキル”は、１個以上のハロゲン置換基を有するアルキル基を意味する。幾つかの態様では、ハロアルキル基は、１〜１０個の炭素原子(例えば、１〜８個の炭素原子)を有し得る。ハロアルキル基の例は、ＣＦ３、Ｃ２Ｆ５、ＣＨＦ２、ＣＨ２Ｆ、ＣＣｌ３、ＣＨＣｌ２、ＣＨ２Ｃｌ、Ｃ２Ｃｌ５などを含む。過ハロアルキル基、すなわち、全ての水素原子がハロゲン原子で置換されているアルキル基(例えば、ＣＦ３およびＣ２Ｆ５)は、“ハロアルキル”の定義内に含まれる。例えば、Ｃ１−１０ハロアルキル基は、式−ＣｉＨ２ｉ＋１−ｊＸｊ(式中、ＸはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、またはＩであり、ｉは１〜１０の整数であり、そしてｊは０〜２１の整数である。ただし、ｊは２ｉ＋１以下でなければならない)を含み得る。
【００７９】
ここで使用し、アルキルＯＨにおけるようにアルキル基が官能基に続くとき、それは、該アルキル鎖のいずれの位置に位置してもよい１個以上の該官能基置換基を有するアルキル基を意味すると認識される。Ｃ１−８アルキルＯＨ基の例は、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、Ｃ(ＣＨ３)(ＣＨ３)ＯＨ、Ｃ(ＣＨ３)(ＣＨ２ＯＨ)ＯＨなどを含み、これらに限定されない。
【００８０】
ここで使用する“シクロアルキル”は、環化アルキル基、アルケニル基、およびアルキニル基を含む、非芳香族性炭素環式基を意味する。シクロアルキル基は単環式(例えば、シクロヘキシル)でも、炭素原子が環系の内側または外側に位置する多環式(例えば、縮合、架橋および／またはスピロ環系を含む)でもよい。シクロアルキル基は、全体として、３〜１４個の環原子(例えば、単環式シクロアルキル基については３〜８個の炭素原子および多環式シクロアルキル基については７〜１４個の炭素原子)を有し得る。シクロアルキル基の任意の適当な環位置は、定義した化学構造に共有結合的に結合できる。シクロアルキル基の例は、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基、シクロペンテニル基、シクロヘキセニル基、シクロヘキサジエニル基、シクロヘプタトリエニル基、ノルボロニル基、ノルピニル基、ノルカリル基、アダマンチル基、およびスピロ[４.５]デカニル基、ならびにそれらの相同体、異性体などを含む。
【００８１】
ここで使用する“ヘテロ原子”は、炭素または水素以外の何らかの多の元素の原子を意味し、例えば、窒素、酸素、硫黄、リン、およびセレンを含む。
【００８２】
ここで使用する“シクロヘテロアルキル”は、Ｏ、Ｎ、およびＳから選択される少なくとも１個(例えば、１個、２個、３個、４個または５個)の環ヘテロ原子を含み、場合により１個以上の(例えば、１個、２個または３個)の二重結合または三重結合を含んでよい非芳香族性シクロアルキル基を意味する。シクロヘテロアルキル基は、全体として、３〜１４個の環原子を有し、そして１〜５個の環ヘテロ原子(例えば、単環式シクロヘテロアルキル基については３〜６個の環原子および多環式シクロヘテロアルキル基については７〜１４個の環原子)を含んでよい。シクロヘテロアルキル基は、定義した化学構造に、安定な構造をもたらす任意のヘテロ原子または炭素原子で共有結合できる。シクロヘテロアルキル環内の１個以上のＮ原子またはＳ原子は参加されていてよい(例えば、モルホリンＮ−オキシド、チオモルホリン類−オキシド、チオモルホリン類,Ｓ−ジオキシド)。シクロヘテロアルキル基はまたフタルイミジル、ピペリドニル、オキサゾリジノニル、２,４(１Ｈ,３Ｈ)−ジオキソ−ピリミジニル、ピリジン−２(１Ｈ)−オニルなどのように１個以上のオキソ基を含み得る。シクロヘテロアルキル基の例は、とりわけ、モルホリニル、チオモルホリニル、ピラニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、オキサゾリジニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、ピロリジニル、ピロリニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、ピペリジニル、ピペラジニルなどを含む。
【００８３】
ここで使用する“アリール”は、芳香族性単環式炭化水素環系、または環系の環の少なくとも１個が芳香族性炭化水素環であり、そして環系の任意の他の芳香環が炭化水素のみを含む多環式環系を意味する。幾つかの態様では、単環式アリール基は６〜１４個の炭素原子を有してよく、そして多環式アリール基は８〜１４個の炭素原子を有してよい。アリール基は、定義した化学構造に、安定な構造をもたらす任意の炭素原子で結合できる。幾つかの態様では、アリール基は、芳香族性炭素環式環のみを有し、例えば、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、アントラセニル、フェナントレニル基などであり得る。他の態様で、アリール基は、少なくとも１個の芳香族性炭素環式環が、１個以上のシクロアルキルまたはシクロヘテロアルキル環に縮合している(すなわち、共通の結合を有する)多環式環系であり得る。かかるアリール基の例は、とりわけ、シクロペンタンのベンゾ誘導体(すなわち、５,６−二環式シクロアルキル／芳香環系であるインダニル基)、シクロヘキサン(すなわち、６,６−二環式シクロアルキル／芳香環系であるテトラヒドロナフチル基)、イミダゾリン(すなわち、５,６−二環式シクロヘテロアルキル／芳香環系であるベンズイミダゾリニル基)、およびピラン(すなわち、６,６−二環式シクロヘテロアルキル／芳香環系であるクロメニル基)を含む。アリール基の他の例は、ベンゾジオキサニル、ベンゾジオキソリル、クロマニル、インドリニル基などを含む。
【００８４】
ここで使用する“ヘテロアリール”は、Ｏ、Ｎ、およびＳから選択される少なくとも１個の環ヘテロ原子を含む芳香族性単環式環系、または環系の環の少なくとも１個が芳香族性であり、少なくとも１個の環ヘテロ原子を含む多環式環系を意味する。ヘテロアリール基は、全体として、５〜１４個の環原子を有し、１〜５個の環ヘテロ原子を含み得る。幾つかの態様では、ヘテロアリール基は、１個以上の芳香族性炭素環式環、非芳香族性炭素環式環、または非芳香族性シクロヘテロアルキル環に縮合した単環式ヘテロアリール環を含み得る。ヘテロアリール基は、定義した化学構造に、安定な構造をもたらす任意のヘテロ原子または炭素原子で結合できる。一般に、ヘテロアリール環はＯ−Ｏ結合、Ｓ−Ｓ結合、またはＳ−Ｏ結合を含まない。しかしながら、ヘテロアリール基の１個以上のＮ原子またはＳ原子は参加してよい(例えば、ピリジンＮ−オキシド、チオフェン類−オキシド、チオフェン類,Ｓ−ジオキシド)。かかるヘテロアリール環の例は、ピロリル、フリル、チエニル、ピリジル、ピリミジル、ピリダジニル、ピラジニル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、イミダゾリル、イソチアゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、インドリル、イソインドリル、ベンゾフリル、ベンゾチエニル、キノリル、２−メチルキノリル、イソキノリル、キノキサリル、キナゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンズイソチアゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾオキサゾリル、シンノリニル、１Ｈ−インダゾリル、２Ｈ−インダゾリル、インドーリジニル、イソベンゾフリル(fuyl)、ナフチリジニル、フタラジニル、プテリジニル、プリニル、オキサゾロピリジニル、チアゾロピリジニル、イミダゾピリジニル、フロピリジニル、チエノピリジニル、ピリドピリミジニル、ピリドピラジニル、ピリドピリダジニル、チエノチアゾリル、チエノキサゾリル、チエノイミダゾリル基などを含む。ヘテロアリール基のさらなる例は、４,５,６,７−テトラヒドロインドリル、テトラヒドロキノリニル、ベンゾチエノピリジニル、ベンゾフロピリジニル基などを含む。
【００８５】
ここで定義する用語“低級アルキル”は、単独でまたは組み合わせて使用されるとき、１〜６個の炭素原子を含むアルキルを意味する。アルキル基は分枝鎖でも直鎖でもよく、上で定義した通りである
【００８６】
用語“低級アルケニル”は、２〜６個の炭素原子を含むアルケニル基を意味する。アルケニル基は、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を含むヒドロカルビル基である。ここで定義する通り、それは、置換されていなくても、ここに記載する置換基で置換されていてもよい。炭素−炭素二重結合は、アルケニル基のいずれの２個の炭素原子の間にあってもよい。１個または２個の炭素−炭素二重結合を有するのが好ましく、より好ましくは１個の炭素−炭素二重結合を有する。アルケニル基は直鎖でも分枝鎖でもよい。例は、エテニル、１−プロペニル、２−プロペニル、１−ブテニル、２−ブテニル、２−メチル−１−プロペニル、１、３−ブタジエニルなどを含み、これらに限定されない。
【００８７】
ここで使用する用語“低級アルキニル”は、２〜６個の炭素原子を有するアルキニル基を意味する。アルキニル基は、少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を含むヒドロカルビル基である。炭素−炭素三重結合は、アルキニル基のいずれの２個の炭素原子の間にあってもよい。一態様において、アルキニル基は、１個または２個の炭素−炭素三重結合を含み、より好ましくは１個の炭素−炭素三重結合を含む。アルキニル基は直鎖でも分枝鎖でもよい。例は、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル、１−ブチニル、２−ブチニルなどを含み、これらに限定されない。
【００８８】
本発明は、１個以上の原子が、同じ原子番号を有するが、原子質量または質量数が通常天然で見られる原子質量または質量数と異なる原子で置き換えられている、全ての薬学的に許容される同位体標識された本発明の化合物、すなわち式(Ｉ)の化合物を含む。
【００８９】
本発明の化合物に包含するのに適当な同位体の例は、水素の同位体、例えば２Ｈおよび３Ｈ、炭素の同位体、例えば１１Ｃ、１３Ｃおよび１４Ｃ、塩素の同位体、例えば３６Ｃｌ、フッ素の同位体、例えば１８Ｆ、ヨウ素の同位体、例えば１２３Ｉおよび１２５Ｉ、窒素の同位体、例えば１３Ｎおよび１５Ｎ、酸素の同位体、例えば１５Ｏ、１７Ｏおよび１８Ｏ、リンの同位体、例えば３２Ｐ、および硫黄の同位体、例えば３５Ｓを含む。
【００９０】
ある種の同位体標識された式(Ｉ)の化合物、例えば、放射性同位体を含むものは、薬剤および／または基質組織分布試験に有用である。放射性同位体トリチウム、すなわち３Ｈ、および炭素−１４、すなわち１４Ｃが、その取り込みの容易さおよび検出手段の迅速さの点からこの目的で特に有用である。
【００９１】
重水素、すなわち２Ｈのような重い同位体への置換は、大きな代謝安定性に起因するある種の治療的利点、例えば、インビボ半減期の延長または必要投与量減少を提供する可能性があり、それ故に、ある状況では好ましいことがある。
【００９２】
陽電子放出同位体、例えば１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏおよび１３Ｎへの置換は、基質受容体占拠を試験するためのポジトロン放出断層撮影(Positron Emission Topography)(ＰＥＴ)試験に有用であり得る。
【００９３】
同位体標識された式(Ｉ)の化合物は、一般に当業者に既知の慣用法を使用して、または、以下の実施例および製造に記載する方法に準じた方法により、適当な同位体置換された薬品を先に用いた同位体標識していない薬品に代えて使用して、製造できる。
【００９４】
全ての酸性の本発明の化合物の薬学的に許容される塩は、塩基と形成される塩、すなわちカチオン性塩、例えばアルカリおよびアルカリ土類金属塩、例えばナトリウム塩、リチウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、ならびにアンモニウム塩、例えばアンモニウム塩、トリメチルアンモニウム塩、ジエチルアンモニウム塩、およびｔｒｉｓ−(ヒドロキシメチル)−メチルアンモニウム塩である。
【００９５】
同様に例えば鉱酸、有機カルボン酸、および有機スルホン酸、例えば、塩酸、メタンスルホン酸、マレイン酸の酸付加塩は、例えばアミノまたはピリジルのような塩基性基が構造の一部を較正する限り、可能である。
【００９６】
本発明は、Ｈｈおよび／またはＳｍｏにより制御されるシグナル伝達経路が、本発明の化合物により調節できるとの発見に関する。
【００９７】
一つの態様において、本発明の化合物および方法は、Ｓｍｏ依存的経路活性化阻害のための式(Ｉ)の化合物を含む。本発明の他の面は、ヘッジホッグ(リガンド)非依存的経路活性化を阻害するための化合物および方法を含む。ある態様において、本化合物および方法を、ヘッジホッグ機能獲得型、Ｐｔｃ機能損失型またはSmoothened機能獲得型変異によりもたらされるようなヘッジホッグ経路の望まない活性化の表現型効果を打ち消すために死由生できる。例えば、対象化合物および方法は、細胞(インビトロまたはインビボ)とＳｍｏアンタゴニスト、例えば式(Ｉ)の化合物の、Smoothened依存的および／またはヘッジホッグ非依存的活性化経路をアンタゴナイズするのに十分な量での接触を含む。
【００９８】
一つの態様において、本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)は、Ｓｍｏタンパク質の三次元構造を不活性配置に固定することにより、またはＳｍｏが活性形態を採ることを妨げることにより、Ｈｈシグナル伝達を阻害する。他の態様において、本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)は、Ｓｍｏの内因性活性化リガンドがＳｍｏに結合するまたはＳｍｏを活性化するのを妨げることにより、Ｈｈシグナル伝達を阻害する(すなわち、内因性アゴニストとの負の協同性を介して作用する)。他の態様において、本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)は、Ｓｍｏの内因性不活性化リガンドがＳｍｏに結合するまたはＳｍｏを不活化するのを増加させることにより、Ｈｈシグナル伝達を阻害する(すなわち、内因性アンタゴニストとの正の協同性を介して作用する)。
【００９９】
他の態様において、本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)は、Ｓｍｏが原形質膜に局在化するのを妨げることにより、Ｈｈシグナル伝達を阻害する。他の態様において、本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)は、Ｈｈリガンドの存在下または非存在下で、ＰｔｃｈからＳｍｏへのシグナル伝達を妨げることにより、Ｈｈシグナル伝達を阻止する。他の態様において、本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)は、Ｓｍｏの安定化を妨げることにより、Ｈｈシグナル伝達を阻害する。他の態様において、本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)は、活性化部位上でのＳｍｏのリン酸化を妨げることにより、Ｈｈシグナル伝達を阻害する。他の態様において、本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)は、阻害部位でのＳｍｏのリン酸化を増加させることにより、Ｈｈシグナル伝達を阻害する。
【０１００】
さらに別の態様において、本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)は、Ｓｍｏの下流標的、例えば転写因子Ｇｌｉの活性化を妨げることにより、Ｈｈシグナル伝達を阻害する。他の態様において、本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)は、Ｓｍｏの不活性化、金属イオン封鎖(sequestration)、および／または分解を行うことにより、Ｈｈシグナル伝達を阻害する。
【０１０１】
他の態様において、本発明の方法は、例えば、幹細胞からの組織形成における、または過増殖性細胞の増殖の阻止のための、インビトロおよび／またはインビボで細胞の増殖および／または分化の調節に使用できる。他の特定の態様において、細胞と本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)の接触  −  または細胞への本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)の挿入  −  は、細胞増殖の阻害、癌／腫瘍細胞増殖および／または生存の阻害、および／または腫瘍形成の阻害をもたらす。それ故に、他の特定の態様は、本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)を用いることにより、腫瘍細胞でのＨｈ経路を阻止および／またはアンタゴナイズする方法を提供する。
【０１０２】
さらに別の態様において、本発明の方法は、薬学的に許容される賦形剤または担体を含む医薬製剤として製剤された本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)を用いてよく、そして該製剤を、癌および／または腫瘍(例えば髄芽腫、基底細胞癌腫など)、および非悪性過増殖性障害のような望まない細胞増殖を含む状態を処置するために患者に投与してよい。
【０１０３】
本発明の一態様は、インビトロまたはインビボで細胞のＳｍｏタンパク質の合成、発現、製造、および／または活性を阻止する方法であって、該細胞と本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)を接触させる、または該細胞に本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)を挿入することを含む、方法を提供する。
【０１０４】
本発明の他の態様は、Ｓｍｏ遺伝子または遺伝子産物(例えば、Ｓｍｏタンパク質)の存在および／または発現により特徴付けられる哺乳動物における細胞衰弱、撹乱、および／または機能障害；過形成性、過増殖性および／または癌性疾患状態；および／または腫瘍細胞の転移を診断、予防および／または処置する方法であって、哺乳動物に治療有効量の本発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)の合成および／または発現および／または活性を阻害するまたはアンタゴナイズする薬剤を投与することを含む、方法を提供する。
【０１０５】
それ故に、Ｈｈ、Ｐｔｃ、またはSmoothenedシグナル伝達活性の側面を妨害する式(Ｉ)の化合物が、正常細胞および／またはPatched機能損失型表現型、ヘッジホッグ機能獲得型表現型、Smoothened機能獲得型表現型またはＧｌｉ機能獲得型表現型を有する細胞における増殖(または他の生物学的結果)を阻害する能力がある可能性があることが特に意図される。それ故に、ある態様において、これらの化合物が、正常細胞、例えばヘッジホッグ経路を活性化させる遺伝変異を有しない正常細胞におけるヘッジホッグ活性の阻害に有用であり得ることが意図される。好ましい態様において、この化合物は、ヘッジホッグタンパク質の生物学的活性の少なくともいくつかを、好ましくは標的細胞で特異的に阻害する能力を有する。
【０１０６】
それ故に、本発明の方法は、例えば、シグナル経路のSmoothenedまたは下流構成成分の活性化を阻害することにより、ヘッジホッグシグナル伝達のＰｔｃ阻害をアゴナイズする式(Ｉ)の化合物の、正常細胞、組織、および臓器ならびにＰｔｃ機能損失型、ヘッジホッグ機能獲得型、Smoothened機能獲得型またはＧｌｉ機能獲得型の表現型を有するものを含む広範囲の細胞、組織および臓器の修復および／または機能的遂行の制御における使用を含む。例えば、本方法は、神経組織、骨および軟骨形成および修復の制御、精子形成の制御、良性前立腺肥大の制御、滲出型黄斑変性症における血管形成の制御、乾癬、平滑筋の制御、原腸起源の肺、肝臓および他の臓器の制御、造血機能の制御、皮膚および発毛の制御などの範囲の治療的および美容的適用を有する。さらに、本方法は、培養で提供された細胞(インビトロ)、または全動物中の細胞(インビボ)で行うことができる。
【０１０７】
ある態様において、式(Ｉ)の化合物は、Smoothenedまたはその下流タンパク質に結合することにより、ヘッジホッグ経路の活性化を阻止できる。
【０１０８】
他の態様において、本発明は、インビボで、増殖またはＰｔｃ機能損失型、ヘッジホッグ機能獲得型、Smoothened機能獲得型またはＧｌｉ機能獲得型の他の生物学的結果を阻害するのに十分な量で製剤された、式(Ｉ)の化合物のようなヘッジホッグシグナル伝達モジュレーター、ここに記載するようなSmoothenedアンタゴニストを活性成分として含む、医薬製剤を提供する。
【０１０９】
発明の化合物(例えば、式(Ｉ)の化合物)を投与することによる対象の処置は、ヒトおよび動物対象の両方に有効であり得る。本発明が適用可能な動物は、愛玩用または商業目的のいずれかで飼育されている家庭用動物および家畜の両方に広がる。例は、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、およびラマである。
【０１１０】
本発明はまた、細胞と式(Ｉ)の化合物を、例えば、正常増殖状態を回復または制御するために、Smoothened活性をアンタゴナイズするための、またはＧｌｉ活性をアンタゴナイズするための十分な量を接触させることを含む、例えば、ヘッジホッグシグナル伝達経路の生理学的活性化に起因する正常ではあるが、望まない増殖状態、例えば良性前立腺肥大または滲出型黄斑変性症における血管形成を阻止するための、ヘッジホッグシグナル伝達経路の活性化を阻害するための方法および化合物を利用可能とする。
【０１１１】
本発明は、細胞と式(Ｉ)の化合物を、例えば、異常増殖状態を回復または制御するために、正常Ｐｔｃ活性をアゴナイズし、正常ヘッジホッグ活性をアンタゴナイズし、Smoothened活性をアンタゴナイズし、またはＧｌｉ活性をアンタゴナイズするのに十分な量で接触させることを含む、例えば、Ｐｔｃ機能損失型、ヘッジホッグ機能獲得型、Smoothened機能獲得型またはＧｌｉ機能獲得型のような表現型に起因する異常増殖状態を阻止するための、ヘッジホッグシグナル伝達経路を活性化するための方法および化合物を利用可能とする。
【０１１２】
ヘッジホッグファミリーメンバーのシグナル伝達分子は、脊椎動物の発育中の多くの重要な短および長距離パターニング工程を仲介する。パターン形成は、胚細胞が分化した組織の秩序立てられた空間配置を形成する活動である。高等生物の肉体的複雑さは、細胞−内因性系列と細胞−外因性シグナル伝達の相互作用を開始、胚形成の間に起こる。誘導性相互作用は、初期に確立したボディープランから発生した脊椎動物の胚性パターニングのために、臓器系のパターニングのために、組織分化中に種々の細胞型を作製するために重要である。発生的細胞相互作用は多様である：応答細胞は、応答細胞の誘導されていないまたは誘導された状態の両方で異なる細胞を誘発することにより、細胞分化の一経路から他の経路に逸脱する(誘導)。細胞は、近隣細胞をそれら自体のように分化させることがある(homeogenetic誘導)；他の例では、細胞はその近隣細胞がそれら自体と同様に分化することを阻止する。初期発生での細胞相互作用は、２種の細胞型の間の最初の誘導が多様性の進行性の増幅を導くように連続的であり得る。さらに、誘導性相互作用は胚だけでなく、成熟細胞でも同様に起こり、形態形成パターンの維持ならびに分化誘導に働き得る。
【０１１３】
ヘッジホッグ遺伝子の脊椎動物ファミリーは、デザート(Ｄｈｈ)、ソニック(Ｓｈｈ)およびインディアン(Ｉｈｈ)ヘッジホッグとして知られる哺乳動物に存在する三種のメンバーを含み、この全てが分泌型タンパク質をコードする。これらの種々のヘッジホッグタンパク質は、シグナルペプチド、高度に保存されたＮ末端領域、およびより多様性に富むＣ末端ドメインを含む。生化学的試験は、Ｈｈ前駆体タンパク質の自己タンパク分解性開裂が、内部チオエステル中間体を介して進行し、それがその後求核性置換により開裂されることを示している。求核分子が小親油性分子であり、それがＮ−ペプチドのＣ末端と共有結合的に結合し、それを細胞表面に拘束する可能性がある。生物学的意義は深い。拘束の結果、ヘッジホッグ産生細胞の表面上のＮ末端ヘッジホッグペプチドの局所濃度が高くなる。短および長距離ヘッジホッグシグナル伝達活動に必要かつ十分であるのが、このＮ末端ペプチドである。
【０１１４】
Smoothened(Ｓｍｏ)は、ヘッジホッグ(Ｈｈ)シグナルのトランスデューサーとして作用する１０２４アミノ酸膜貫通型タンパク質をコードする。Ｓｍｏタンパク質は、７個の疎水性膜貫通ドメイン、細胞外アミノ末端領域、および細胞内カルボキシ末端領域を含む。Ｓｍｏは、Ｇタンパク質共役受容体と幾分かの類似性を有し、セルペンチンタンパク質のFrizzled(Ｆｚ)ファミリーと最も相同である(Alcedo et al. (1996) Cell 86: 221)。
【０１１５】
不活性ヘッジホッグシグナル伝達経路は、膜貫通型タンパク質受容体Patched(Ｐｔｃ)が７回膜貫通型タンパク質であるSmoothened(Ｓｍｏ)の活性を阻害する場所である。Ｈｈシグナル伝達の下流構成成分である転写因子Ｇｌｉは、核が、融合および融合抑制因子(Ｓｕｆｕ)を含む細胞質タンパク質との相互作用を介して挿入するのを妨げる。その結果、ヘッジホッグ標的遺伝子の転写活性化が抑制される。この経路の活性化は、３種の哺乳動物リガンド(Ｄｈｈ、ＳｈｈまたはＩｈｈ)のいずれかのＰｔｃへの結合により開始される。リガンド結合はＳｍｏ抑制の逆転をもたらし、それにより活性形態の転写因子Ｇｌｉの核への転座に至るカスケードを活性化する。核Ｇｌｉは、ＰｔｃおよびＧｌｉ自体を含む標的遺伝子発現を活性化する。
【０１１６】
Ｈｈによるリガンド結合はＳｍｏとＰｔｃの相互作用を変え、Ｓｍｏの抑制を逆転させ、それによりＳｍｏは細胞内の内部構造から原形質膜に移動する。Ｓｍｏの原形質膜への局在化が、Ｈｈ非依存的方法でＨｈ経路標的遺伝子の活性化を作動させる(Zhu et al. (2003) Genes Dev. 17(10):1240)。Ｓｍｏにより活性化されたカスケードは、活性形態の転写因子Ｇｌｉの核への転座をもたらす。転座した核Ｇｌｉを介するＳｍｏの活性化は、Ｗｎｔｓ、ＴＧＦβ、およびＰｔｃおよびＧｌｉそれ自体を含むＨｈ経路標的遺伝子発現を活性化する。
【０１１７】
ヘッジホッグシグナル伝達のレベルの上昇は、癌形成を開始させ、かつ腫瘍生存に必要である。これらの癌は、前立腺(“Hedgehog signalling in prostate regeneration, neoplasia and metastasis”, Karhadkar SS, Bova GS, Abdallah N, Dhara S, Gardner D, Maitra A, Isaacs JT, Berman DM, Beachy PA., Nature. 2004 Oct 7;431(7009):707-12; “Inhibition of prostate cancer proliferation by interference with SONIC HEDGEHOG-GLI1 signaling”, Sanchez P, Hernandez AM, Stecca B, Kahler AJ, DeGueme AM, Barrett A, Beyna M, Datta MW, Datta S, Ruiz i Altaba A., Proc Natl Acad Sci U S A. 2004 Aug 24;101(34):12561-6), (“Cytotoxic effects induced by a combination of cyclopamine and gefitinib, the selective hedgehog and epidermal growth factor receptor signaling inhibitors, in prostate cancer cells,” Mimeault M, Moore E, Moniaux N, et al (2006), International Journal of Cancer; 118 (4):1022-31)、乳癌(“Hedgehog signaling pathway is a new therapeutic target for patients with breast cancer”, Kubo M, Nakamura M, Tasaki A, Yamanaka N, Nakashima H, Nomura M, Kuroki S, Katano M., Cancer Res. 2004 Sep 1;64(17):6071-4), (“Hedgehog signaling and Bmi-1 regulate self-renewal of normal and malignant human mammary stem cells,” Liu S, Dontu G, Mantle ID, et al (2006) Cancer Res; 66 (12):6063-71), (“Constitutive activation of smoothened (SMO) in mammary glands of transgenic mice leads to increased proliferation, altered differentiation and ductal dysplasia,” Moraes RC, Zhang XM, Harrington N, et al (2007), Development; 134 (6):1231-42)、髄芽腫(“Medulloblastoma growth inhibition by hedgehog pathway blockade”, Berman DM, Karhadkar SS, Hallahan AR, Pritchard JI, Eberhart CG, Watkins DN, Chen JK, Cooper MK, Taipale J, Olson JM, Beachy PA., Science. 2002 Aug 30;297(5586):1559-61)、非黒色腫皮膚癌、すなわち扁平細胞癌腫(ＳＣＣ)および基底細胞癌腫(ＢＣＣ)(“Identification of a small molecule inhibitor of the hedgehog signaling pathway: effects on basal cell carcinoma-like lesions”, Williams JA, Guicherit OM, Zaharian BI, Xu Y, Chai L, Wichterle H, Kon C, Gatchalian C, Porter JA, Rubin LL, Wang FY., Proc Natl Acad Sci U S A. 2003 Apr 15;100(8):4616-21; “Activating Smoothened mutations in sporadic basal-cell carcinoma”, Xie J, Murone M, Luoh SM, Ryan A, Gu Q, Zhang C, Bonifas JM, Lam CW, Hynes M, Goddard A, Rosenthal A, Epstein EH Jr, de Sauvage FJ., Nature. 1998 Jan 1;391(6662):90-2)、膵臓、食道、胃、および胆管(billary)癌(“Hedgehog is an early and late mediator of pancreatic cancer tumorigenesis”, Thayer SP, di Magliano MP, Heiser PW, Nielsen CM, Roberts DJ, Lauwers GY, Qi YP, Gysin S, Fernandez-del Castillo C, Yajnik V, Antoniu B, McMahon M, Warshaw AL, Hebrok M., Nature. 2003 Oct 23;425(6960):851-6; “Widespread requirement for Hedgehog ligand stimulation in growth of digestive tract tumours”, Berman DM, Karhadkar SS, Maitra A, Montes De Oca R, Gerstenblith MR, Briggs K, Parker AR, Shimada Y, Eshleman JR, Watkins DN, Beachy PA., Nature. 2003 Oct 23;425(6960):846-51), (“Nuclear factor-kappa B contributes to hedgehog signaling pathway activation through sonic hedgehog induction in pancreatic cancer,” Nakashima H, Nakamura M, Yamaguchi H, et al (2006), Cancer Research; 66 (14):7041-9), (“Blockade of hedgehog signaling inhibits pancreatic cancer invasion and metastases: A new paradigm for combination therapy in solid cancers,” Feldmann G, Dhara S, Fendrich V, et al (2007) Cancer Research; 67 (5):2187-96), (“Oncogenic KRAS suppresses Gli1 degradation and activates Hedgehog signaling pathway in pancreatic cancer cells,” Ji Z, Mei FC, Xie J, et al (2007), J Biol Chem; 282 (19):14048-55))、および小細胞肺癌(“Hedgehog signalling within airway epithelial progenitors and in small-cell lung cancer”, Watkins DN, Berman DM, Burkholder SG, Wang B, Beachy PA, Baylin SB., Nature. 2003 Mar 20;422(6929):313-7), (“Hedgehog signaling in small-cell lung cancer: Frequent in vivo but a rare event in vitro,” Vestergaard J, Pedersen MW, Pedersen N, et al (2006), Lung Cancer; 52 (3):281-90)を含み、これらに限定されない。
【０１１８】
ヘッジホッグシグナル伝達レベルの上昇が癌形成の開始に十分であり、かつ腫瘍生存に必要であるさらなる癌は、結腸癌(“Sonic Hedgehog-dependent proliferation in a series of patients with colorectal cancer,” Douard R, Moutereau S, Pernet P, et al (2006) Surgery; 139 (5):665-70), (“Hedgehog signalling in colorectal tumour cells: Induction of apoptosis with cyclopamine treatment,” Qualtrough D, Buda A, Gaffield W, et al (2004), International Journal of Cancer; 110 (6):831-7)、神経膠腫(“Cyclopamine-mediated Hedgehog pathway inhibition depletes stem-like cancer cells in glioblastoma,” Bar EE, Chaudhry A, Lin A, et al, Neuro-Oncology; 2007, 9 (4):594), (“HEDGEHOG-GLI1 signaling regulates human glioma growth, cancer stem cell self-renewal, and tumorigenicity,” Clement V, Sanchez P, de Tribolet N, et al, (2007) Current Biology 17 (2):165-72), (“Ligand-dependent activation of the hedgehog pathway in glioma progenitor cells,” Ehteshan M, Sarangi A, Valadez JG, et al (2007) Oncogene; March12, 2007, Epub ahead of print)、黒色腫(“Melanomas require HEDGEHOG-GLI signaling reaulated by interactions between GLI1 and the RAS-MEK/AKT pathways,” Stecca B, Mas C, Clement V, et al (2007), Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America; 104 (14):5895-900)、非小細胞肺癌(ＮＳＣＬＣ)(“Frequent requirement of hedgehog signaling in non-small cell lung carcinoma,” Yuan Z, Goetz JA, Singh S, et al (2007), Oncogene; 26 (7):1046-55)、卵巣(“Hedgehog signal pathway is activated in ovarian carcinomas, correlating with cell proliferation: It's inhibition leads to growth suppression and apoptosis,” Chen XJ, Horiuchi A, Kikuchi N, et al, Cancer Science; (2007) 98 (1):68-76)、肝臓(“Activation of the hedgehog pathway in human hepatocellular carcinomas,” Huang SH, He J, Zhang XL, et al (2006), Carcinogenesis; 27 (7):1334-40), (“Dysregulation of the Hedgehog pathway in human hepatocarcinogenesis,” Sicklick JK, Li YX, Jayaraman A, et al (2006), Carcinogenesis; 27 (4):748-57)、腎臓(“Clear cell sarcoma of the kidney: Up-regulation of neural markers with activation of the sonic hedgehog and Akt pathways,” Cutcliffe C, Kersey D, Huang CC, et al (2005), Clinical Cancer Research; 11 (22):7986-94)、横紋筋肉腫(“Rhabdomyosarcomas and radiation hypersensitivity in a mouse model of Gorlin syndrome,” Hahn H, Wojnowski L, Zimmer AM, et al (1998), Nature Medicine; 4 (5):619-22), (“Deregulation of the hedgehog signalling pathway: a possible role for the PTCH and SUFU genes in human rhabdomyoma and rhabdomyosarcoma development,” Tostar U, Malm CJ, Meis-Kindblom JM, et al (2006), Journal of Pathology; 208 (1):17-25)、および軟骨肉腫(“Constitutive hedgehog signaling in chondrosarcoma up-regulates tumor cell proliferation,” Tiet TD, Hopyan S, Nadesan P, et al (2006), American Journal of Pathology; 168 (1):321-30)を含み、これらに限定されない。
【０１１９】
ヘッジホッグ経路阻害剤(例えばシクロパミン)は乾癬の処置に有用であることが示されている(“Cyclopamine: inhibiting hedgehog in the treatment of psoriasis” Cutis, 2006, 78(3):185-8; Br. J. Dermatology, 2006 Apr;154(4):619-23, “Psoriatic skin expresses the transcription factor Gli1: possible contribution of decreased neurofibromin expression”, Endo H, Momota Y, Oikawa A, Shinkai H.)。
【０１２０】
悪性リンパ腫(ＭＬ)はリンパ系の細胞が関与し、米国で５番目に多い癌である。ＭＬは、ホジキン病、および非ホジキン病を含み、これらは、異種起源のリンパ系増殖性疾患群である。ホジキン病は、全悪性リンパ腫の約１４％を占める。非ホジキンリンパ腫は、主にＢ細胞起源の雑多な悪性腫瘍群である。作用製剤分類スキーム(Working Formulation classification scheme)において、これらのリンパ腫は、その自然経過の点から低、中、および高悪性度に分類されている(“The Non-Hodgkin's Lymphoma Pathologic Classification Project,” Cancer 49:2112-2135, 1982参照)。低悪性度リンパ腫は、無痛性であり、５〜１０年間の中央生存率である(Horning and Rosenberg, N. Engl. J. Med. 311:1471-1475, 1984)。無痛性リンパ腫の大部分で化学療法により寛解が誘発され得るが、治癒は希であり、ほとんどの患者が最終的に再発し、さらに治療が必要となる。中および高悪性度リンパ腫はより攻撃的な腫瘍であるが、化学療法で治癒する可能性が高い。しかしながら、これらの患者の相当な割合が再発し、さらなる処置が必要となる。
【０１２１】
多発性骨髄腫(ＭＭ)は、通常骨髄で見られる血漿細胞型から成る悪性腫瘍である。これらの悪性血漿細胞が骨髄で蓄積され、典型的にモノクローナルＩｇＧ分子またはＩｇＡ分子が産生される。悪性血漿細胞は骨髄に帰巣し、骨髄内で伸展し、正常な造血が失われるために貧血および免疫抑制を引き起こす。多発性骨髄腫を有する個体は、しばしば貧血、溶骨性病変、腎不全、高カルシウム血症、および細菌感染症の再発を経験する。ＭＭは、２番目に多い造血器腫瘍である。
【０１２２】
本発明は、一部、トランスジェニックＥμ−ＭｙｃマウスおよびＣｄｋｎ２ａノックアウトマウスから単離されたリンパ腫および形質細胞腫細胞を使用してリンパ腫および多発性骨髄腫疾患がヘッジホッグ(Ｈｈ)シグナル伝達経路に依存するとの本発明者等の発見、およびヘッジホッグリガンドが間質とリンパ腫細胞の間の相互作用を仲介するとの発見により予見される。骨(多発性骨髄腫)または非ホジキンリンパ腫(ＮＨＬ)患者のリンパ節、骨髄または脾臓から単離された患者サンプル由来のリンパ腫および多発性骨髄腫サンプルで、およびまた慢性リンパ球性白血病(ＣＬＬ)サンプルでも同様のことが発見された。加えて、インビトロでＨｈシグナル伝達経路の阻害が間質依存的リンパ腫細胞のアポトーシスを誘発し、ヘッジホッグ経路メンバーの過発現がリンパ腫細胞のシクロパミン誘発アポトーシスを阻害することが発見された。さらに、本発明者らは、インビボでヘッジホッグ経路阻害剤でマウスを処置すると、リンパ腫が拡大しなくなることを発見した。最後に、本発明者らは、脾臓Ｂ細胞および大部分のシクロパミン応答性リンパ腫でＧｌｉ３が発現されていないが、全シクロパミン耐性リンパ腫で優勢に発現されることを発見した。
【０１２３】
これらのデータは、Ｈｈシグナル伝達がｃ−Ｍｙｃによる形質転換の初期工程のための重要な抗アポトーシスシグナルを提供し、リンパ腫維持に重要な役割を有することを示す。それ故に、Ｈｈシグナル伝達経路の破壊が、リンパ腫(例えば、ＮＨＬ)、多発性骨髄腫、ＣＬＬおよび他の造血器腫瘍の新規な処置手段を提供する。加えて、リンパ腫でのＧｌｉ３発現は、Ｈｈ阻害に対する応答性の負の予測因子を提供し、患者層形成の重要な手段を提供する。
【０１２４】
これらの発見に従い、本発明は、腫瘍細胞、例えば、リンパ腫および骨髄腫細胞の増殖を阻害する方法を提供する。本発明は、腫瘍細胞の増殖を阻害することにより、対象のリンパ腫または骨髄腫を処置するための方法および組成物を提供する。本方法はまた対象における腫瘍形成の予防にも有用である。本方法の幾つかは、脾臓Ｂ細胞に比してＧｌｉ３の顕著な発現を有しないリンパ腫を処置する方法に関する。本方法は、処置を必要とする対象に、Ｈｈシグナル伝達をアンタゴナイズする薬剤(例えば、式(Ｉ)の化合物)を含む、医薬組成物を投与することを含む。本発明の化合物は、Ｈｈシグナル伝達経路メンバーの細胞レベルを減少させるか、または生物学的活性を阻害する。
【０１２５】
本発明は、リンパ腫、白血病、および骨髄腫を含む血液系およびリンパ系の癌の予防または治療的処置方法を提供する。本方法は、リンパ腫細胞、白血病細胞、または骨髄腫細胞の生育および増殖を阻害するためのヘッジホッグシグナル伝達経路のアンタゴニストを投与することを含む。リンパ腫は、Ｂリンパ球由来のリンパ芽球の悪性腫瘍である。骨髄腫は、通常骨髄で見られる血漿細胞型から成る悪性腫瘍である。白血病は、血液形成臓器が関与する急性または慢性疾患である。ＮＨＬは、身体組織中の白血球の異常な増加により特徴付けられ、循環血中の白血球の対応する増加を伴うかまたは伴わず、最も優勢に関与する白血球のタイプにより分類される。
【０１２６】
例として、リンパ腫(例えば、例えば、Ｂ細胞リンパ腫、形質芽球腫(plasmoblastoma)、形質細胞腫またはＣＬＬ)を有するまたはその発症のリスクがある対象を本発明の方法で処置できる。好ましくは、対象はヒトである。本方法は、対象に、ヘッジホッグシグナル伝達経路を阻害する有効量の式(Ｉ)の化合物を含む医薬組成物を投与することを含む。対象はリンパ腫と診断された、転移を伴うまたは伴わない、該疾患のいずれかのステージ(例えば、ステージＩ〜IV、Ann Arbor Staging System)の者であり得る。本発明の方法で処置するのに適当なリンパ腫は、ホジキン病および非ホジキン病を含み、これらに限定されない。ホジキン病は、特定のリンパ節に由来するように見え、後に脾臓、肝臓および骨髄に広がるリンパ組織(リンパ腫)のヒト悪性障害である。ほとんど１５〜３５歳のヒトに発症する。進行性の、無痛のリンパ節、脾臓および全身リンパ組織の腫脹により特徴付けられる。古典的ホジキン病は４亜種に分類される：(１)結節硬化型ホジキン病(ＮＳＨＤ)；(２)混合細胞型ホジキン病(ＭＣＨＤ)；(３)リンパ球減少型ホジキン病(ＬＤＨＤ)；および(４)リンパ球豊富型古典的ホジキン病(ｃＬＲＨＤ)。
【０１２７】
好ましい態様のいくつかにおいて、本方法は、非ホジキンリンパ腫(ＮＨＬ)の処置に使用される。非ホジキン病はまたリンパ肉腫とも呼ばれ、ホジキン病の重要ないくつかの点で異なるリンパ腫群を言い、癌細胞の顕微鏡上の見かけにより分類される。非ホジキンリンパ腫は、(１)成長が遅いリンパ腫およびリンパ系白血病(例えば、慢性リンパ球性白血病、小リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、濾胞中心リンパ腫、小切れ込み核細胞型濾胞性細胞、濾胞性混合細胞型細胞、辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、ヘアリー細胞白血病、形質細胞腫、骨髄腫、大顆粒リンパ球性白血病、菌状息肉腫、セザリー(szary)症候群)；(２)中程度に攻撃的なリンパ腫およびリンパ系白血病(例えば、前リンパ球性白血病、マントル細胞リンパ腫、濾胞中心リンパ腫、小切れ込み核細胞型濾胞性細胞、濾胞中心リンパ腫、慢性リンパ球性白血病／前リンパ球性白血病、血管中心性リンパ腫、血管免疫芽細胞性リンパ腫)；(３)攻撃的リンパ腫(例えば、大Ｂ細胞リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫、腸管Ｔ細胞リンパ腫、未分化大細胞リンパ腫)；および(４)極めて攻撃的なリンパ腫およびリンパ系白血病(例えば、Ｂ細胞前駆体Ｂ−リンパ芽球性白血病／リンパ腫、バーキットリンパ腫、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、バーキット様Ｔ細胞前駆体Ｔ−リンパ芽球性白血病／リンパ腫)を含み、これらに限定されない。本発明の方法は、成人および小児リンパ腫、ならびにいずれかのステージのリンパ腫、例えば、ステージＩ、II、III、またはIVに使用できる。ここに記載する方法は、他の形態の白血病、例えば、急性リンパ球性白血病(ＡＬＬ)の処置にも用いることができる。
【０１２８】
本発明の治療方法のいくつかは、特にＧｌｉ３を発現しないリンパ腫または骨髄腫の処置に関する。以下の実施例に記載する通り、Ｇｌｉ１およびＧｌｉ２は全リンパ腫で発現されるが、検出可能なＧｌｉ３発現は主にシクロパミンによるＨｈ経路阻害に耐性であるリンパ腫で発現されることが観察された。正常脾臓Ｂ細胞および大部分のシクロパミン応答性リンパ腫でＧｌｉ３の発現はない。それ故に、Ｈｈアンタゴニストでの処置前に、リンパ腫の対象を、該対象から得たリンパ腫細胞サンプルにおけるＧｌｉ３発現について最初に試験できる。サンプル中のＧｌｉ３発現レベルを、該対象から得た正常脾臓Ｂ細胞のＧｌｉ３発現レベルと比較できる。リンパ腫または骨髄腫サンプルおよび対照細胞のＧｌｉ３発現レベルを、例えば、以下の実施例に記載する通りの、当分野で既知の方法を使用して決定できる。ここに記載するＨｈアンタゴニストでの処置に対する応答性の可能性は、リンパ腫または骨髄腫サンプルで検出可能なＧｌｉ３発現がないか、またはその発現レベルが正常Ｂ細胞でのＧｌｉ３発現レベルより顕著に高くない(例えば、２５％、５０％、または１００％を超えて高くない)。本発明の治療方法の付加的工程以外に、Ｇｌｉ３発現欠失のプレスクリーニングを、患者層形成の方法として独立して使用できる。
【０１２９】
リンパ腫に加えて、上記の方法および組成物はまた骨髄腫の処置に適当である。多発性骨髄腫は、頻繁にＩｇ鎖の分泌が伴う、血漿細胞のクローンの増幅により特徴付けられる、致死的新生物である。腫瘍の骨髄侵襲は貧血、低ガンマグロブリン血症、および顆粒球減少症と付随する細菌感染症を伴う。主にＩＬ−６およびＩＬ−１βレベルが上昇した、異常サイトカイン環境は、しばしば、骨痛、骨折、および高カルシウム血症に至る砕骨(osteoclasis)を増加させる。接触的な化学療法および移植にもかかわらず、多発性骨髄腫は、例外なく致死的な血漿増殖性障害である。
【０１３０】
本発明の化合物は、希な常染色体優性癌遺伝症候群である基底細胞母斑症候群(別名ゴーリン症候群および／または母斑性基底細胞癌腫)のようなヘッジホッグ関連障害の処置に有用である。
【０１３１】
本発明の化合物は、副腎髄質の皮質または髄質部分に起因する副腎の腫瘍である基底細胞癌腫(ＢＣＣまたは蚕食性潰瘍)、および卵巣腫瘍の処置に有用である。
【０１３２】
本発明の化合物は、先端巨大症、大頭症、ソトス症候群、進行性骨幹異形成症(ＰＤＤまたはカムラチ・エンゲルマン病)、頭蓋骨・骨幹異形成症、およびヴァン・プッヘム病(Ｉ型およびII型)および骨硬化症を含む骨内性骨増殖症障害を含み、これらに限定されない骨過増殖障害の処置に有用である。
【０１３３】
本発明の化合物は、望まない発毛、例えば、有毛黒子の処置に、および脱毛後の毛再増殖の美容的予防に有用である。
本発明の化合物は、肝臓線維症の処置に有用である。
【０１３４】
それ故に、本発明の方法は、例えば、Smoothenedまたはシグナル経路の下流構成成分の活性化阻害により、ヘッジホッグシグナル伝達のＰｔｃ阻害をアゴナイズする本発明の化合物の、正常細胞、組織、および臓器、ならびにＰｔｃ機能損失型、ヘッジホッグ機能獲得型、Smoothened機能獲得型またはＧｌｉ機能獲得型の表現型を有するものを含む、広範囲の細胞、組織および臓器の修復および／または機能的遂行の制御における使用を含む。例えば、本方法は、神経組織、骨および軟骨形成および修復の制御、精子形成の制御、良性前立腺肥大の制御、滲出型黄斑変性症における血管形成の制御、乾癬、平滑筋の制御、原腸起源の肺、肝臓および他の臓器の制御、造血機能の制御、皮膚および発毛の制御などの範囲の治療的および美容的適用を有する。さらに、本方法は、培養で提供された細胞(インビトロ)、または全動物中の細胞(インビボ)で行うことができる。
【０１３５】
前記によって、本発は、さらに、処置を必要とする対象における上記のいずれかの疾患または障害の予防または処置方法を提供し、該方法は、治療有効量(下記“投与および医薬組成物”参照)の式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。上記の使用のいずれにおいても、必要投与量は投与方式、処置する特定の状態および望む効果により変わる。
【０１３６】
投与および医薬組成物：
本発明は、ヘッジホッグ関連障害の治療的(そして本発明の広い面では、予防的)処置における、式(Ｉ)の化合物を含む医薬組成物の使用に関する。
【０１３７】
一般に、本発明の化合物は、当分野で既知の一般的であり、許容される任意の方式を介して、単独でまたは１種以上の治療剤と組み合わせて治療有効量で投与される。治療有効量は、疾患の重症度、対象の年齢および相対的健康、使用する化合物の効力および他の因子により広範に変化し得る。一般に、満足のいく結果が、約０.０３〜２.５mg／体重kgの１日投与量で漸進的に得られることが示される。大型哺乳動物、例えばヒトでの指示される１日投与量は、約０.５mg〜約１００mgの範囲であり、好都合なことに、例えば１日４回までの分割量で、または遅延形態で投与する。経口投与用の適当な単位投与形態は、約１〜５０mgの活性成分を含む。
【０１３８】
本発明の化合物は、医薬組成物として、任意の慣用の経路で、特に経腸的に、例えば、経口的に、例えば、錠剤またはカプセル剤の形で、または非経腸的に、例えば、注射可能溶液または懸濁液の形で、局所的に、例えば、ローション剤、ゲル剤、軟膏剤またはクリーム剤の形で、または経鼻または坐薬形態で投与できる。遊離形または薬学的に許容される塩形態の本発明の化合物を少なくとも１個の薬学的に許容される担体または希釈剤と共に含む医薬組成物は、混合、造粒またはコーティング法による慣用法で製造できる。例えば、経口組成物は、活性成分をａ)希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよび／またはグリシン；ｂ)滑剤、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸、そのマグネシウム塩またはカルシウム塩および／またはポリエチレングリコール；錠剤についてはまたｃ)結合剤、例えば、ケイ酸アルミニウム・マグネシウム、デンプンペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロースおよびまたはポリビニルピロリドン；望むならばｄ)崩壊剤、例えば、デンプン類、寒天、アルギン酸またはそのナトリウム塩、または起沸性混合物；および／またはｅ)吸収剤、着色剤、香味剤および甘味剤と共に含む、錠剤またはゼラチンカプセル剤であり得る。注射可能組成物は、水性等張溶液または懸濁液であってよく、そして坐薬は脂肪エマルジョンまたは懸濁液から製造してよい。
【０１３９】
本組成物は滅菌してよくおよび／またはアジュバント、例えば防腐剤、安定化剤、湿潤剤または乳化剤、溶解促進剤、浸透圧調整用塩および／または緩衝剤を含んでよい。加えて、他の治療的に価値ある物質も含んでよい。経皮適用に適当な製剤は、有効量の本発明の化合物と担体を含む。担体は、宿主の皮膚の通過を助けるための吸収性の薬理学的に許容される溶媒を含む。例えば、経皮デバイスは、裏打ち部材、化合物を所望により担体と共に含む貯蔵部、場合により本化合物を宿主の皮膚に制御されかつ予定された速度で長時間にわたり送達するための速度制御バリア、および該デバイスを皮膚に固定するための手段を含む、バンデージの形である。マトリックス経皮製剤も使用し得る。例えば、皮膚および眼への局所適用に適当な製剤は、好ましくは当分野で周知の水性溶液、軟膏、クリームまたはゲルである。それらは可溶化剤、安定化剤、張性増加剤、緩衝剤および防腐剤を含んでよい。
【０１４０】
本発明の化合物は、１種以上の治療剤と組み合わせて治療有効量を投与し得る(医薬組合せ剤)。例えば、免疫調節剤、抗炎症物質、他の抗腫瘍治療剤、化学療法剤、アブーションまたはリンパ腫または骨髄腫に対して有用な他の治療用ホルモン剤、抗新生物剤および／またはモノクローナル抗体と相乗効果が起こり得る。いくつかの抗癌剤が、文献、例えば、Cancer Therapeutics: Experimental and Clinical Agents, Teicher (Ed.), Humana Press (1st ed., 1997); and Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, Hardman et al. (Eds.), McGraw-Hill Professional (10th ed., 2001)に記載されている。適当な抗癌剤の例は、５−フルオロウラシル、硫酸ビンブラスチン、リン酸エストラムスチン、スラミンおよびストロンチウム−８９を含む。適当な化学療法剤の例は、アスパラギナーゼ、硫酸ブレオマイシン、シスプラチン、シタラビン、リン酸フルダラビン、マイトマイシンおよびストレプトゾシンを含む。
【０１４１】
本発明の化合物を他の治療剤と組み合わせて投与するとき、併用化合物の投与量は、当然、用いる併用剤のタイプ、用いる具体的薬剤、処置する状態などにより変わる。
【０１４２】
本発明のＨｈ阻害剤は、特に癌の処置において、１種の他の薬理学的活性化合物と、または２種以上の薬理学的活性化合物と有用に組合せ得る。例えば、上で定義した式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に許容される塩は、化学療法剤、例えばタキサン、ビンカアルカロイド、パクリタキセル、ドセタキセル、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビンまたはビンフルニンのような有糸分裂阻害剤、および他の抗癌剤、例えばシスプラチン、５−フルオロウラシルまたは５−フルオロ−２−４(１Ｈ,３Ｈ)−ピリミジンジオン(５ＦＵ)、フルタミドまたはゲムシタビンから選択される、１個以上の薬剤と組み合わせて同時に、連続的に、または別々に、投与してよい。
【０１４３】
かかる組合せ剤は、治療において、相乗活性を含む、顕著な利点を提供し得る。式(Ｉ)の化合物はまた他の抗増殖性化合物と組み合わせても有利に使用し得る。かかる抗増殖性化合物は、アロマターゼ阻害剤；抗エストロゲン；トポイソメラーゼＩ阻害剤；トポイソメラーゼII阻害剤；微小管活性化合物；アルキル化化合物；細胞分化過程を誘発する化合物；シクロオキシゲナーゼ阻害剤；ＭＭＰ阻害剤；ｍＴＯＲ阻害剤；抗新生物代謝拮抗剤；プラチン化合物；タンパク質または脂質キナーゼ活性を標的化／減少させる化合物およびさらなる抗血管形成化合物；タンパク質または脂質ホスファターゼの活性を標的、減少または阻害する化合物；ゴナドレリンアゴニスト；抗アンドロゲン；メチオニンアミノペプチダーゼ阻害剤；ビスホスホネート類；生物学的応答修飾物質；抗増殖性抗体；ヘパラナーゼ阻害剤；Ｒａｓ発癌性アイソフォームの阻害剤；テロメラーゼ阻害剤；プロテアソーム阻害剤；血液系悪性腫瘍の処置に使用する化合物；Ｆｌｔ−３の活性を標的、減少または阻害する化合物；１７−ＡＡＧ(１７−アリルアミノ−ゲルダナマイシン、ＮＳＣ３３０５０７)、１７−ＤＭＡＧ(１７−ジメチルアミノエチルアミノ−１７−デメトキシ−ゲルダナマイシン、ＮＳＣ７０７５４５)、ＩＰＩ−５０４、ＣＮＦ１０１０、ＣＮＦ２０２４、ＣＮＦ１０１０(Conforma Therapeuticsから)のようなＨｓｐ９０阻害剤；テモゾロミド(ＴＥＭＯＤＡＬ)；キネシン紡錘タンパク質阻害剤、例えばＳＢ７１５９９２またはＳＢ７４３９２１(GlaxoSmithKlineから)、またはペンタミジン／クロルプロマジン(CombinatoRxから)；ＰＩ３Ｋ阻害剤；ＲＡＦ阻害剤；ＥＤＧ結合剤、抗白血病化合物、リボヌクレオチドレダクターゼ阻害剤、Ｓ−アデノシルメチオニンデカルボキシラーゼ阻害剤、抗増殖性抗体または他の化学療法化合物を含み、これらに限定されない。これらに加えて、またはこれらとは別に、外科的手術、電離放射線、光線力学的治療、例えばコルチコステロイド、ホルモン類を含むインプラントを含む多の腫瘍処置法と組み合わせて使用してよく、または放射線増感剤としても使用できる。また、抗炎症性および／または抗増殖性処置において、抗炎症剤との組合せ剤が含まれる。抗ヒスタミン剤、気管支拡張(bronchodilatatory)剤、ＮＳＡＩＤまたはケモカイン受容体アンタゴニストとの組合せも可能である。
【０１４４】
本発明はまた、ａ)ここに記載する遊離形または薬学的に許容される塩形態の本発明の化合物である第一剤、およびｂ)少なくとも１個の併用剤を含む、医薬組合せ剤、例えばキットも提供する。本キットはその投与の指示を含み得る。
【０１４５】
ここで使用する用語“併用投与”または“組合せ投与”などは、選択した複数治療剤の一患者への投与を包含することを意図し、複数薬剤をかならずしも同経路でまたは同時に投与しない処置レジメンを包含することを意図する。
【０１４６】
ここで使用する用語“医薬組合せ剤”は、１種を超える活性成分の混合または組合せに由来する製品を意味し、複数組合せの固定されたおよび固定されていない組合せ剤の両方を含む。用語“固定された組合せ剤”は、複数活性成分、例えば式(Ｉ)の化合物および併用剤を、両方とも、一患者に同時に一つの物または投与量として投与することを意味する。用語“固定されていない組合せ剤”は、複数活性成分、例えば式(Ｉ)の化合物および併用剤を、両方とも、一患者に、別々の物として同時に、一緒にまたは具体的時間制限なく連続的に投与し、かかる投与が、患者体内で２化合物の治療有効レベルを提供することを意味する。後者はまたカクテル療法、例えば３種以上の活性成分の投与にも適用される。
【０１４７】
本発明の化合物の製造方法
本発明の化合物、例えば、式(Ｉ)の化合物の代表的合成例は、本明細書の実施例部分に見ることができる。
【０１４８】
本発明の化合物は、遊離塩基形態の本化合物と薬学的に許容される無機または有機酸を反応させることにより、薬学的に許容される酸付加塩として製造できる。あるいは、薬学的に許容される塩基付加塩の本発明の化合物を、遊離酸形態の本化合物と薬学的に許容される無機または有機塩基の反応により製造できる。
【０１４９】
あるいは、塩形態の本発明の化合物を、出発物質または中間体の塩を使用して、製造できる。
【０１５０】
本発明の化合物の遊離酸または遊離塩基形態を、対応する塩基付加塩または酸付加塩形態の各々から製造できる。例えば酸付加塩形態の本発明の化合物を、適当な塩基(例えば、水酸化アンモニウム溶液、水酸化ナトリウムなど)での処理により対応する遊離塩基に変換できる。塩基付加塩形態の本発明の化合物を、適当な酸(例えば、塩酸など)での処理により、対応する遊離酸に変換できる。
【０１５１】
本発明の化合物のプロドラッグ誘導体は、当業者に既知の方法により製造できる(例えば、さらなる詳細についてはSaulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985参照)。
【０１５２】
本発明の化合物の保護された誘導体を、当業者に既知の手段により製造できる。保護基の創成およびその除去に適用可能な方法についての詳細な記載は、T. W. Greene, “Protecting Groups in Organic Chemistry”, 3rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999に見ることができる。
【０１５３】
本発明の化合物が、好都合なことに、溶媒和物(例えば、水和物)として製造でき、またはそれが本発明の方法の間に形成される。本発明の化合物の水和物は、好都合なことに、ジオキシン、テトラヒドロフランまたはメタノールのような有機溶媒を使用し、水性／有機溶媒混合物からの再結晶により製造できる。
【０１５４】
本発明の化合物は、本化合物のラセミ混合物を、光学活性分割剤と反応させてジアステレオ異性化合物を形成させ、ジアステレオマーを分離し、光学的に純粋な鏡像体を回収することにより、その個々の立体異性体として製造できる。鏡像体の分割を共有結合的に結合した本発明の化合物のジアステレオマー誘導体を使用して行うことができるが、分離可能な複合体が好ましい(例えば、結晶性ジアステレオマー塩)。ジアステレオマーは異なる物理特性(例えば、融点、沸点、溶解度、反応性など)を有し、これらの差異を利用して容易に分割できる。ジアステレオマーは、クロマトグラフィーにより、または好ましくは、溶解度の差異に基づく分離／分割法により分割できる。次いで、光学的に純粋な鏡像体を、分割剤と共に、ラセミ化をもたらさない何らかの実際的手段により回収する。化合物の立体異性体をそのラセミ混合物から分割する方法のさらに詳細な記載は、Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolutions,” John Wiley And Sons, Inc., 1981に見ることができる。
【実施例】
【０１５５】
実施例
本発明を、本発明を説明することを意図し、それに限定すると解釈してはならない以下の説明的実施例によりさらに例示する。最終生成物の構造は標準分析法、例えば、分光測定および分光法(例えばＭＳ、ＮＭＲ)により確認できる。使用する略語は当分野で一般的なものである。化合物は標準法、例えば結晶化、フラッシュクロマトグラフィーまたは逆相ＨＰＬＣにより精製する。
【０１５６】
実施例を通して以下の略語を使用する：
【表１】
0005492202.tif 000015
【０１５７】
化合物合成
ピリダジン−アリールエーテル類および−アニリン類
スキーム１に記載する通り、式Ｉａの化合物は、フェノールまたはアニリンのいずれかを、直接熱的求核性置換またはパラジウム触媒求核性置換のいずれかにより反応させ得る中間体IIIａ(スキーム６に製造を記載)から製造できる。化合物Ｉａを、Ｒ”の官能基操作により別の実施例化合物に変え得る。
【化１４】
0005492202.tif 000016
スキーム１
【０１５８】
実施例１−５の合成
実施例１：(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−フェノキシ−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル
【化１５】
0005492202.tif 000017
(Ｒ)−４−(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(化合物５４、４０mg、０.１０６mmol)の２mL  トルエン溶液に、２胴ネジ蓋付バイアル中、フェノール(４５mg、０.４８mmol)、リン酸カリウム(４０.６mg、０.１９mmol)およびジ−ｔｂｕ  Ｘ−Ｐｈｏｓ(５.３mg、０.０１４mmol)を入れる。バイアルを排気し、窒素でフラッシュし、酢酸パラジウム(II)(２mg、０.０１mmol)を添加する。反応混合物を再び窒素でフラッシュし、１００℃で１６時間加熱する。混合物をセライトを通して濾過し、濾液を濃縮して、褐色油状物を得る。粗生成物１５−９５％アセトニトリルの水溶液(両方の移動相とも３％ｎ−ＰｒＯＨで修飾)で溶出するＨＰＬＣで精製して、所望の生成物を白色固体として得る(９mg、２２％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.69 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.40 (t, J=7.5Hz, 2H) 7.19 (t, J=7.5Hz, 1H), 7.10 (d, J=7.5Hz, 2H), 4.84-4.82 (m, 1H), 4.42-4.38 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.45-3.25 (m, 3H), 3.02-2.99 (m, 1H), 2.93-2.86 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.26 (s, 3H), 1.36 (d, J=6.6Hz, 3H)。
HR MS (m/z, MH+)測定値435.2157, 計算値435.2145。
【０１５９】
実施例２：２−[(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−フェノキシ−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラ−ヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール
【化１６】
0005492202.tif 000018
(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−フェノキシ−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(９８mg、０.２２６mmol)の２mL  無水ＴＨＦ溶液に、２胴ネジ蓋付バイアル中、３Ｍ  臭化メチルマグネシウム(６００μL、１.８mmmol)を、−７８℃で窒素雰囲気下に添加する。反応混合物を−７８℃で１.５時間撹拌し、０℃に温め、さらに２時間撹拌する。反応混合物を飽和水性ＮＨ４Ｃｌで−７８℃でクエンチし、ＤＣＭで希釈する。有機溶液を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、粗物質を得る。得られた固体１０％−１００％アセトニトリルの水溶液(両方の移動相とも３％ｎ−ＰｒＯＨで修飾)で溶出する分取ＨＰＬＣで精製する。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥して、白色固体を得る(５８mg、５９％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.33 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.41 (t, J=7.6Hz, 2H) 7.20 (t, J=7.6Hz, 1H), 7.11 (d, J=7.6Hz, 2H), 5.09 (s, 1H), 4.64 (m, 1H), 4.16-4.13 (m, 1H), 3.44-3.41 (m, 2H), 3.02-2.99 (m, 1H), 2.89-2.85 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 1.41 (s, 6H), 1.28 (d, J=6.6Hz, 3H)。
HR MS (m/z, MH+)測定値435.2508, 計算値435.2508。
【０１６０】
実施例３：(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−フェニルアミノ−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラ−ヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル
【化１７】
0005492202.tif 000019
および
実施例４：(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−フェニルアミノ−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラ−ヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸フェニル(penyl)アミド
【化１８】
0005492202.tif 000020
(Ｒ)−４−(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(化合物５４、２５０mg、０.６６３mmol)に、アニリン(２.４mL、２６.５mmol)をマイクロ波管内で添加する。反応混合物を、１９０℃で３０分間、マイクロ波リアクターで加熱する。反応混合物をシリカゲルに載せ、５０％−１００％ＥｔＯＡｃ：ヘプタンで６カラム体積、続いて３％−１０％ＭｅＯＨのＤＣＭ溶液で溶出するフラッシュクロマトグラフィーで精製する。実施例３および４の両方とも回収し、濃縮して、白色固体を得る。
【０１６１】
実施例３：１３０mg、４５％。
1H NMR (400MHz, CDCl3) δ = 8.83 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.41-7.32 (m, 4H), 7.14-7.10 (m, 1H), 4.79-4.77 (m, 1H), 4.39-4.35 (m, 1H), 3.96 (s, 3H) 3.52-3.45 (m, 2H), 3.35-3.42 (m, 1H), 3.24-3.21 (m, 1H), 3.12-3.07 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.44 (d, J=6.7 Hz, 3H)。
MS (m/z, MH+)測定値434.4, 計算値434.2。
実施例４：３０mg、９％。
MS (m/z, MH+)測定値495.6, 計算値495.2。
【０１６２】
実施例５：２−[(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−フェニルアミノ−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール
【化１９】
0005492202.tif 000021
(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−フェニルアミノ−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラ−ヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(実施例３、３６０mg、０.１４mmol)の２mL  無水ＴＨＦ溶液に、２胴ネジ蓋付バイアル中、−７８℃で窒素雰囲気下に３Ｍ  臭化メチルマグネシウム(５５４μL、１.７mmmol)を添加する。反応混合物を−７８℃で１.５時間撹拌し、０℃に温め、さらに１時間撹拌する。反応混合物を飽和水性ＮＨ４Ｃｌで−７８℃でクエンチし、ＤＣＭで希釈する。有機溶液を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、粗物質を得る。得られた固体１０％−１００％アセトニトリルの水溶液(両方の移動相とも３％ｎ−ＰｒＯＨで修飾)で溶出する分取ＨＰＬＣで精製する。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥して、白色固体を得る(２５mg、４２％)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.25 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.49 (d, J=7.5Hz, 2H), 7.31 (t, J=7.5Hz, 2H), 7.02 (t, J=7.5 Hz, 1H), 6.59 (b, 1H), 4.63-4.61 (m, 1H), 4.16-4.12 (m, 1H), 3.44-3.09 (m, 5H), 2.36 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 1.56 (s, 6H), 1.39 (d, J=7.1 Hz, 3H)。
HR MS (m/z, MH+)測定値434.2667, 計算値434.2668。
【０１６３】
アリール−ピリダジン類
スキーム２に記載する通り、式Ｉｂの化合物を、例えば１,４−ジクロロピリダジンIIからピペラジンでのクロライド置換により中間体IIIを得て、それをボロン酸またはエステルと鈴木カップリングで反応させて、化合物IVを得ることにより製造できる。例えば塩基性条件下のアリールクロライドでの求核性芳香族性置換により、実施例Ｉｂを得る(経路Ａ)。あるいは、中間体IIを置換アミン類と反応させて化合物IIIａを得て、それを基質としてボロン酸またはエステル類と鈴木カップリング反応させて、実施例Ｉｂを得ることができる(経路Ｂ、Ｘ＝Ｎ、ＣＨ)。化合物Ｉｂを、Ｒ”の、例えばエステル加水分解およびアミド(amid)形成またはエステル官能基へのグリニャール付加の官能基操作により、別の実施例化合物に変換できる。
【化２０】
0005492202.tif 000022
スキーム２
【０１６４】
中間体の合成：
３−(４−フルオロ−フェニル)−４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン(化合物１)
【化２１】
0005492202.tif 000023
丸底フラスコに、３−クロロ−４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン(５００mg、２.０７mmol)、４−フルオロフェニルボロン酸(５８０mg、４.１５mmol)、炭酸ナトリウム(４４０mg、４.１５mmol)、トルエン(１６mL)および水(８mL)添加する。反応混合物を２０分間窒素でパージする。テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(５０mg、０.１０３mmol)を添加し、混合物を１１０℃で１８時間加熱する。反応混合物を濃縮し、酢酸エチルおよび水に分配する。酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮する。カラムクロマトグラフィー(０−２５％メタノール／塩化メチレン)で精製して、４８０mgの３−(４−フルオロ−フェニル)−４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン(８３％)を得る。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.34 - 7.49 (m, 2H) 7.07 (t, J=8.8Hz, 2H) 3.35 (m, 2H) 2.84 - 3.13 (m, 4H) 2.63 (dd, J=12.0Hz, 10.0Hz, 1H) 2.20 (s, 3H) 2.14 (s, 3 H) 1.67 (br s, 1H) 1.05 (d, J=6.5Hz, 3H)。
HR MS (m/z, MH+)測定値301.1824, 計算値301.1829。
【０１６５】
３−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン(化合物２)
【化２２】
0005492202.tif 000024
化合物２は、化合物１に準じて製造する。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.69 - 7.80 (m, 2H) 7.60 - 7.70 (m, 2H) 3.38 - 3.52 (m, 3 H) 2.98 - 3.22 (m, 4H) 2.69 - 2.83 (m, 1H) 2.30 (s, 3H) 2.23 (s, 3H) 1.15 (d, J=6.4Hz, 3H)。
HR MS (m/z, MH+)測定値351.1806, 計算値351.1797。
【０１６６】
３−クロロ−４,５−ジメチル−６−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン(化合物３)
【化２３】
0005492202.tif 000025
１−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン(１０ｇ、４３.３mmol)を、３,６−ジクロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン(１４.４ｇ、８４.３mmol)、トリエチルアミン(８.２５mL)、およびＮＭＰ(４０mL)と合わせる。反応混合物を１８０℃で２５分間加熱し、真空で濃縮する。残留物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(０−８％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２)で精製して、表題化合物を得る(１３.２ｇ、８２％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.48 - 8.41 (m, 1H) 7.84 (dd, J=9.1Hz, 2.4Hz, 1H) 7.03 (d, J=9.1Hz, 1H) 3.88 - 3.76 (m, 4H) 3.28 - 3.20 (m, 4H) 2.31 (s, 6H)。
【０１６７】
２−[４−(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペラジン−１−イル]−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル(化合物４)
【化２４】
0005492202.tif 000026
丸底フラスコに、３−クロロ−４,５−ジメチル−６−ピペラジン−１−イル−ピリダジン(１ｇ、４.４１mmol)、２−クロロ−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル(２.１２ｇ、８.８２mmol)およびジイソプロピルエチルアミン(２.３mL、１３.２３mmol)のジオキサン(９mL)溶液を添加し、１８時間、室温で撹拌する。反応混合物を濾過し、水および酢酸エチルで濯いで、１.３５ｇの２−[４−(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペラジン−１−イル]−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステルを得る(７1%)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.96 (s, 1H), 4.09 - 4.22 (m, 4H), 3.93 (s, 3H), 3.35 (m, 4H), 2.39 (s, 3H), 2.35 (s, 3H)。
HR MS (m/z, MH+)測定値431.1206, 計算値43１.１２１０。
【０１６８】
経路Ａによる実施例６−９の合成。
実施例６：(Ｒ)−４−[６−(４−フルオロ−フェニル)−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル]−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル
【化２５】
0005492202.tif 000027
３−(４−フルオロ−フェニル)−４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン(５２２mg、１.７３mmol)、５−クロロ−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル(３６０mg、２.０７mmol)、ジイソプロピルエチルアミン(９００μl、５.１９mmol)およびジオキサン(３mL)を丸底フラスコで合わせる。１１０℃で１８時間で加熱する。反応混合物を濃縮し、カラムクロマトグラフィー(０−１００％酢酸エチル／ヘプタン勾配)で精製する。生成物をアセトニトリルで摩砕して、４８０mgの(Ｒ)−４−[６−(４−フルオロ−フェニル)−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル]−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステルを得る(６３％)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.87 (s, 1H) 8.21 (s, 1H) 7.46 - 7.60 (m, 2H) 7.19 (t, J=8.5Hz, 2H) 4.84 (br s, 1H) 4.43 (d, J=13.0Hz, 1H) 3.99 (s, 3H) 3.68 (d, J=12.5Hz, 1H) 3.49 - 3.63 (m, 2H) 3.39 (dd, J=12.8Hz, 3.8Hz, 1H) 3.15 - 3.31 (m, 1H) 2.41 (s, 3H) 2.29 (s, 3H) 1.50 (d, J=6.5Hz, 3H)。
HR MS (m/z, MH+)測定値437.2097, 計算値437.2101。
【０１６９】
実施例７：(Ｒ)−４−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル]−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル
【化２６】
0005492202.tif 000028
実施例７を、実施例６に準じる方法で化合物２から製造する。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.87 (s, 1H), 8.21 (d, J=1.3Hz, 1H), 7.72 - 7.82 (m, 2H), 7.68 (d, J=8.1Hz, 2H), 4.85 (br s, 1H), 4.44 (d, J=13.3Hz, 1 H), 4.00 (s, 3H), 3.70 (d, J=14.1Hz, 1H), 3.50 - 3.64 (m, 2H), 3.41 (dd, J=12.6Hz, 3.6Hz, 1H), 3.18 - 3.31 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.50 (d, J=6.7Hz, 3H)。
HR MS (m/z, MH+)測定値487.2050, 計算値487.2069。
【０１７０】
実施例８：(Ｒ)−４−[６−(４−トリフルオロメチル−フェニル)−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル]−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸
【化２７】
0005492202.tif 000029
実施例７(０.２６ｇ、０.５３mmol)およびメタノール(１０mL)の溶液に、５０％水性ＬｉＯＨ水溶液(１０mL)を添加する。混合物を室温で一夜撹拌する。溶媒を除去する。残留物を水に溶解し、３Ｎ  ＨＣｌでｐＨ約７まで酸性化し、酢酸エチルで抽出する。酢酸エチル層を濃縮して、表題化合物(０.２５ｇ、９８％)を黄色固体として得る。
1H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ = 8.90 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.81 (d, J=8.0Hz, 2H), 7.69 (d, J=8.0Hz, 2H), 4.88 (m, 1H), 4.48 (d, J=13.0Hz, 1H), 3.66 (m, 3H), 3.40 (m, 1H), 3.23 (m, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.53 (d, J=6.5Hz, 3H)。
HR MS (m/z, MH+)測定値473.1900。
【０１７１】
実施例９：(Ｒ)−４−[６−(４−フルオロ−フェニル)−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル]−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸
【化２８】
0005492202.tif 000030
実施例６(０.７４ｇ、１.３１mmol)およびメタノール(１０mL)の溶液に、水酸化ナトリウム(１００mg)を添加する。混合物を室温で一夜撹拌する。溶媒を除去し、残留物を水に溶解し、３Ｎ  ＨＣｌでｐＨ約７まで酸性化し、酢酸エチルで抽出する。酢酸エチル層を濃縮して、表題化合物(０.６８ｇ、９６％)を黄色固体として得る。
1H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ = 8.90 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.52 (m, 2H), 7.22 (m, 2H), 4.67 (m, 1H), 4.48 (d, J=12.0Hz, 1H), 3.65 (m, 3H), 3.40 (m, 1H), 3.26 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 1.53 (d, J=6.5Hz, 3H)。
HR MS (m/z, MH+)測定値423.1941。
【０１７２】
経路Ｂによる実施例１０−４０の合成。
ボロン酸のピリダジニルクロライド類IIIａへの鈴木カップリングの一般的方法。
方法Ａ
丸底フラスコで、３−クロロ−ピリダジン(０.２６８mmol)、ボロン酸(０.５３７mmol)および炭酸ナトリウム(５７mg、０.５３７mmol)を１mLの水および１.８mLのＴＨＦ中で合わせる。反応混合物を２０分間窒素でパージし、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(１０mg)を添加し、１１０℃で１８時間加熱する。０％−７０％酢酸エチル／ヘプタン勾配のシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製する。生成物をメタノールおよびアセトニトリルで摩砕して、他の不純物を除去して、所望の生成物を得る。
【０１７３】
方法Ｂ
丸底フラスコで、３−クロロ−ピリダジン(０.２６８mmol)、ボロン酸(０.５３６mmol)および炭酸セシウム(１７５mg、０.５３６mmol)を２mLの１,４−ジオキサン中で合わせる。反応混合物を１分間窒素でパージし、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(３０mg、０.０２６mmol)を添加する。１１５℃で１８時間加熱する。反応物をセライトを通して濾過し、濃縮する。酢酸エチルおよび水に分配し、有機層を回収する。再び酢酸エチルで抽出し、有機物を合わせる。硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮する。物質をアセトニトリルで摩砕し、熱アセトニトリルから再結晶して、所望の生成物を得る。
【０１７４】
方法Ｃ
マイクロ波バイアル中、３−クロロ−ピリダジン(０.０８０mmol)、ボロン酸(０.０９６mmol)、リン酸カリウム(３４mg、０.１６１mmol)およびＸ−Ｐｈｏｓ(１.３mg)をｎ−ブタノール溶液(１.５mL)中で合わせる。１分間窒素でパージし、酢酸パラジウム(１mg)を添加し、マイクロ波リアクターで４５分間、１５０℃で加熱する。濾過し、反応混合物を濃縮し、分取ＨＰＬＣ(水／アセトニトリルと１％水酸化アンモニウム)で精製して、所望の生成物を得る。
【０１７５】
方法Ｄ
マイクロ波バイアル中、３−クロロ−ピリダジン(０.２６８mmol)、ボロン酸(０.３２２mmol)、リン酸カリウム(１１０mg、０.５３７mmol)およびＸ−Ｐｈｏｓ(５mg)をｎ−ブタノール溶液(２.５mL)中で合わせる。１分間窒素でパージし、酢酸パラジウム(３.５mg)を添加し、マイクロ波リアクターで４５分間、１５０℃で加熱する。濾過し、反応混合物を濃縮する。酢酸エチルおよび水に分配し、有機層を回収する。再び抽出し、有機物を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮する。０−１００％酢酸エチル／ヘプタン勾配のカラムクロマトグラフィーで精製して、所望の生成物を得る。
【０１７６】
実施例１０−３１：以下の表(表１)は、上記一般的方法Ａ−Ｄを使用して、経路Ｂにより製造した化合物の実施例である：
【表２】
0005492202.tif 000031
【表３】
0005492202.tif 000032
【０１７７】
エステル類へのグリニャール付加を介した実施例３２−３４の合成
グリニャール付加の一般的方法
エステル(１mmol)の無水ＴＨＦ(４mL)を含む−７８℃に冷却した丸底フラスコに、ジエチルエーテル３Ｍ溶液の臭化メチルマグネシウム(８mmol)を滴下する。０℃に温め、２０分間撹拌し、水性塩化アンモニウムの飽和溶液でクエンチする。酢酸エチルで２回抽出し、有機物を回収する。硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮する。０−１００％酢酸エチル／ヘプタン勾配のカラムクロマトグラフィーで精製する。生成物をアセトニトリルで摩砕し、濾過して、２−プロパン−オールを得る。
【０１７８】
実施例３２−３４：以下の表(表２)は、上記一般的方法により製造した化合物の実施例を記載する：
【表４】
0005492202.tif 000033
【０１７９】
アミド形成を介した実施例３５−４０の合成
アミド形成の一般的方法
実施例８(４０.０mg、０.０８mmol)、ＨＡＴＵ(６４.０mg、０.１７mmol)、ジイソプロピルエチルアミン(４４.０mg、０.３４mmol)、ジメチルアセトアミド(１.５mL)およびアミン(０.１３mmol)の混合物を室温で１０時間撹拌する。粗生成物をＨＰＬＣ(Ｃ１８カラム、アセトニトリル／水(３％プロパノール)、３０％〜１００％)で精製して、実施例３５〜４０を得る(７４％〜８２％)。
【０１８０】
実施例３５−４０：以下の表(表３)は、上記一般的方法により製造した化合物の実施例を記載する：
【表５】
0005492202.tif 000034
【０１８１】
ピペリジン−４−イル−ピリダジン類
スキーム３に記載する通り、式Ｉｃの化合物は、保護された１,２,３,６−テトラヒドロ−ピリジン−４−ボロン酸とピリダジンクロライド類Ｖを鈴木カップリングして中間体VIを製造し、保護基を除去し、求核性置換して、中間体VIIを得ることにより製造する。水素化により実施例Ｉｃを得る。
【化２９】
0005492202.tif 000035
スキーム３
【０１８２】
中間体の合成：
４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−３,６−ジヒドロ−２Ｈ−ピリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル(化合物５)
【化３０】
0005492202.tif 000036
丸底フラスコで３−ベンジル−６−クロロ−４,５−ジメチルピリダジン(８００mg、３.４４mmol)の２０mL  ＤＭＦ溶液に、ｔｅｒｔ−ブチル４−(４,４,５,５−テトラメチル−１,３,２−ジオキサボロラン−２−イル)−５,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−カルボキシレート(１.３ｇ、４.１mmol)、炭酸カリウム(１.４３ｇ、１０.３mmol)およびＰｄ(ＰＰｈ３)４(３９７mg、０.３４４mmol)を添加する。バイアルを排気し、窒素でフラッシュする。反応混合物を１００℃で１６時間加熱する。混合物をセライトを通して濾過し、濾液を濃縮して、粗物質を得る。混合物を、３％−１５％ＭｅＯＨ：ＤＣＭで溶出するシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製する。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、濃縮して、褐色固体を得る(１.０ｇ、７７％)。
1H NMR (400MHz, CD2Cl2) δ = 7.30-7.21 (m, 5H), 5.84-5.82 (s, 1H), 4.43 (s, 2H), 4.13-4.11 (m, 2H), 3.69 (t, J=5.5Hz, 1H), 2.56-2.54 (m, 2H), 2.26 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), 1.49 (s, 9H)。
MS (m/z, MH+)測定値380.7, 計算値380.23。
【０１８３】
メチル５−(４−(６−ベンジル−４,５−ジメチルピリダジン−３−イル)−５,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−イル)ピラジン−２−カルボキシレート(化合物６)
【化３１】
0005492202.tif 000037
４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−３,６−ジヒドロ−２Ｈ−ピリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル(１７０mg、０.３５８mmol)を、５０％ＴＦＡのＤＣＭ溶液に添加する。反応混合物を１０分間撹拌し、濃縮して、３−ベンジル−４,５−ジメチル−６−(１,２,３,６−テトラヒドロピリジン−４−イル)ピリダジンを黄色粘性固体として得る(１２５mg、１００％)。３−ベンジル−４,５−ジメチル−６−(１,２,３,６−テトラヒドロピリジン−４−イル)ピリダジン(１８０mg、０.６４４mmol)のジオキサン溶液に、メチル−５−クロロピラジン−２−カルボキシレート(２２２mg、１.２９mmol)およびＴＥＡ(０.４５mL、３.２２mmol)をマイクロ波管内で添加する。反応混合物を、１６０℃で４０分間、マイクロ波リアクターで加熱する。混合物を濃縮して、褐色油状物を得て、１０％−１００％アセトニトリル：水(両方の移動相とも３％ｎ−ＰｒＯＨで修飾)で溶出する分取ＨＰＬＣで精製する。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥して、白色固体を得る(８０mg、３０％)。
MS (m/z, MH+)測定値416.5, 計算値416.2。
【０１８４】
３−ベンジル−４,５−ジメチル−６−(１−(５−(トリフルオロメチル)ピリジン−２−イル)−１,２,３,６−テトラヒドロピリジン−４−イル)ピリダジン(化合物７)
【化３２】
0005492202.tif 000038
３−ベンジル−４,５−ジメチル−６−(１,２,３,６−テトラヒドロピリジン−４−イル)ピリダジン(７０mg、０.１７５mmol)の２mL  ジオキサン溶液に、２−クロロ−５−(トリフルオロメチル)ピリジン(６４mg、０.３５mmol)およびＴＥＡ(０.１２２mL、０.８８mmol)をマイクロ波管内で添加する。反応混合物を、１６０℃で４０分間、マイクロ波リアクターで加熱する。混合物を濃縮して、褐色油状物を得て、１０％−１００％アセトニトリル：水(両方の移動相とも３％ｎ−ＰｒＯＨで修飾)で溶出する分取ＨＰＬＣで精製する。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥して、白色固体を得る(３３mg、４２％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.44 (s, 1H), 7.83 (dd, J=2.5Hz, 9.1Hz, 2H), 7.30-7.26 (m, 2H), 7.20-7.16 (m, 3H), 6.99-6.97 (d, J=9.1Hz, 1H), 5.96-5.94 (m, 1H), 4.32 (s, 2H), 4.27-4.26 (m, 2H), 3.97 (t, J=5.6Hz, 2H), 2.60-2.58 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 2.16 (s, 3H)。
HR MS (m/z, MH+)測定値425.1958, 計算値425.1953。
【０１８５】
実施例４１−４４の合成
実施例４１：メチル５−(４−(６−ベンジル−４,５−ジメチルピリダジン−３−イル)ピペリジン−１−イル)ピラジン−２−カルボキシレート
【化３３】
0005492202.tif 000039
メチル５−(４−(６−ベンジル−４,５−ジメチルピリダジン−３−イル)−５,６−ジヒドロピリジン−１(２Ｈ)−イル)ピラジン−２−カルボキシレート(６０mg、０.１４４mmol)の２０mL  ＥｔＯＨ溶液に、１０％Ｐｄ−Ｃ(７７mg、７２mmol)を添加する。反応混合物を、水素雰囲気で１６時間撹拌する。混合物をセライトを通して濾過し、濾液を濃縮して、黄色固体を得る(６０mg、１００％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.66 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.28-7.26 (m, 2H), 7.19-7.15 (m, 3H), 4.67-4.64 (m, 2H), 4.27 (s, 2), 3.81 (s, 3H), 3.43-3.39 (m, 1H), 3.26-3.17 (m, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 1.92-1.86 (m, 4 H)。
HR MS (m/z, MH+)測定値418.2247, 計算値418.2243。
【０１８６】
実施例４２：２−{５−[４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−１−イル]−ピラジン−２−イル}−プロパン−２−オール
【化３４】
0005492202.tif 000040
および
実施例４３：３−ベンジル−６−{１−[５−(１−メトキシ−１−メチル−エチル)−ピラジン−２−イル]−ピペリジン−４−イル}−４,５−ジメチル−ピリダジン
【化３５】
0005492202.tif 000041
メチル５−(４−(６−ベンジル−４,５−ジメチルピリダジン−３−イル)ピペリジン−１−イル)ピラジン−２−カルボキシレート(３０mg、０.０７mmol)の２mL  無水ＴＨＦ溶液に、３Ｍ  ＣＨ３ＭｇＢｒ(２８７μL、０.８６２mmol)を−７８℃で窒素雰囲気下に添加する。反応混合物を−７８℃で１時間撹拌し、０℃でさらに１時間撹拌する。混合物を飽和水性塩化アンモニウムで−７８℃でクエンチし、混合物をＤＣＭおよび塩水に分配する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、褐色油状物。混合物を１０％−１００％アセトニトリル：水(両方の移動相とも３％ｎ−ＰｒＯＨで修飾)で溶出する分取ＨＰＬＣで精製する。実施例４２および４３の両方とも白色固体として回収する。
【０１８７】
実施例４２  (８mg、２７％)：1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 8.33 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 7.28-7.24 (m, 2H), 7.19-7.15 (m, 3H), 5.08 (s, 3H), 5.08 (s, 1H), 4.45-4.41 (m, 2H), 4.27 (s, 2H), 3.34-3.24 (m, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.15 (s, 3H), 1.92-1.83 (m, 4 H), 1.42 (s, 6H)。
HR MS (m/z, MH+)測定値418.2625, 計算値418.2607。
実施例４３  (６mg、２０％)：1H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ = 8.30 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.28-7.25 (m, 2H), 7.19-7.15 (m, 3H), 4.49-4.45 (m, 2H), 4.27 (s, 2H), 3.34-3.26 (m, 1H), 3.09-3.03 (m, 2H), 3.05 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 1.91-1.84 (m, 4 H), 1.45 (s, 6H)。
HR MS (m/z, 2M+H+)測定値863.5453, 計算値863.5448。
【０１８８】
実施例４４：：３−ベンジル−６−{１−[５−(トリフルオロメチル)ピリジン−２−イル]−ピペリジン−４−イル}−４,５−ジメチル−ピリダジン
【化３６】
0005492202.tif 000042
３−ベンジル−４,５−ジメチル−６−(１−(５−(トリフルオロメチル)ピリジン−２−イル)−１,２,３,６−テトラヒドロピリジン−４−イル)ピリダジン(２０mg、０.０４７mmol)の８mL  ＥｔＯＨ溶液に、１０％Ｐｄ−Ｃ(２５mg、１９mmol)を添加する。反応混合物を、水素雰囲気で１６時間撹拌する。混合物をセライトを通して濾過し、濾液を濃縮して、灰白色固体を得る。混合物を１０％−１００％アセトニトリル：水(両方の移動相とも３％ｎ−ＰｒＯＨで修飾)で溶出する分取ＨＰＬＣで精製する。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、凍結乾燥して、白色固体を得る(８mg、４０％)。
MS (m/z, MH+)測定値427.4, 計算値427.48。
【０１８９】
アリールアシル−、アリールヒドロキシメチル−およびアリールメチル−ピリダジン類
スキーム４に記載する通り、ジクロロ−ピリダジン類IIを、脱プロトン化および続く酸化(例えば空気)の後、アリール置換アセトニトリルと反応させて、アリールアシル化合物VIIIを得ることができる。塩素とアミン類の求核性置換により、実施例Ｉｄを得て、それをさらに例えばＮａＢＨ４で実施例Ｉｅの化合物に還元できる(経路Ａ)。中間体VIIIとピペラジン類の反応により化合物IXを得て、ウォルフ・キッシュナー還元により中間体Ｘを得て、求核性置換反応により実施例Ｉｆを得る(経路Ｂ)。さらに、Ｒ”での官能基変換により別の実施例化合物を得ることができる。実施例ＩｄおよびＩｅをまた、酸素−フルオロ交換によりＡｒとピリダジン部分の間に−ＣＦ２−および−ＣＨＦ−リンカーを有する実施例化合物に変換もできる。
【化３７】
0005492202.tif 000043
スキーム４
【０１９０】
中間体の合成：
(Ｒ)−２−メチル−４−ｂｏｃ−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(化合物８)
【化３８】
0005492202.tif 000044
(Ｒ)−１−ｂｏｃ−メチルピペラジン(１ｇ、５.０mmol)のＤＭＦ(２０mL)溶液に、５−クロロ−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル(８６２mg、５.０mmol)およびＮａ２ＣＯ３(２.１ｇ、２０.０mmol)添加する。反応混合物をマイクロ波リアクターで１４０℃で３時間撹拌する。混合物をｒｔに冷却し、有機溶媒を真空で除去して、生成物を褐色固体として得る(１.７ｇ、定量的)。
MS (m/z, MH+)測定値337。
【０１９１】
(Ｒ)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(化合物９)
【化３９】
0005492202.tif 000045
(Ｒ)−２−メチル−４−ｂｏｃ−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(２ｇ、５.９４mmol)のＭｅＯＨ(１７mL)溶液に、ＨＣｌ(ジオキサン中４Ｍ、４.５mL、１８mmol)添加する。反応混合物を７０℃で１時間撹拌する。反応溶液を濃縮し、ＤＣＭに溶解し、有機層をＮａ２ＣＯ３で洗浄して、ｐＨ値を８.０に調節する。溶媒を減圧下で除去して、褐色油状物を得る(１.２ｇ、７７％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.81 (s, 1H), 8.11(s, 1H), 4.58 (m, 1H), 4.22 (d, J=13.1Hz, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.21 (m, 2H), 3.17 (m, 1H), 3.07 (m, 1H), 2.18 (m, 1H), 1.35 (d, J=6.5Hz, 3H)。
MS (m/z, MH+)測定値237。
【０１９２】
２−((Ｒ)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル)−プロパン−２−オール(化合物１０)
【化４０】
0005492202.tif 000046
(Ｒ)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(６０mg、０.２４mmol)のＴＨＦ(３mL)溶液に、−７８℃で、ＭｅＭｇＢｒ(Ｅｔ２Ｏ  ６４０μl中３Ｍ溶液、１.９mmol)添加する。反応混合物を０℃で２時間撹拌する。反応混合物を飽和水性ＮＨ４Ｃｌ(３mL)でクエンチする。さらに水を添加し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出する；有機層をＮａＨＣＯ３で洗浄する。粗生成物をアセトニトリルの水溶液(５％〜８０％で３％１−プロパノール)を用いるＨＰＬＣで精製して、２２０nmの波長検出で、所望の生成物を黄色油状物として得る(２０mg、３５％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.30 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.40 (m, 1H), 3.91 (m, 1H), 3.98 (m, 2H), 2.85 (m, 2H), 2.65 (m, 1H), 1.40 (s, 6H), 1.13 (d, J=6.6Hz, 3H)。
MS (m/z, MH+)測定値237。
【０１９３】
(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−フェニル−メタノン(化合物１１)
【化４１】
0005492202.tif 000047
３,６−ジクロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン(１.００ｇ、５.６５mmol)およびフェニルアセトニトリル(６５２mL、５.６５mmol)をトルエン(１７.５mL)に冷却し、０℃に冷却し、ＮａＨＭＤＳ(５.６５mL、ＴＨＦ中２Ｍ、１１.３mmol)添加する。反応混合物を１６時間撹拌し、０℃からｒｔまでゆっくり温めた。混合物を開放空気で、さらに２４時間激しく撹拌した。混合物を水性ＮａＨＣＯ３溶液の添加によりクエンチし、層を分離し、水性相をＤＣＭで抽出する。合わせた有機相を濃縮して、表題化合物を褐色固体として得る(１.４ｇ、定量的)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.82 (m, 2H), 7.55 (m, 1H), 7.40 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.28 (s, 3H)。
MS(m/z, MH+)測定値247.4。
【０１９４】
(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピリジン−４−イル−メタノン(化合物１２)
【化４２】
0005492202.tif 000048
以下に記載する方法に従い、３,６−ジクロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン(１.００ｇ、５.６５mmol)および４−ピリジルアセトニトリルヒドロクロライド(１.０５ｇ、６.７９mmol)により表題化合物を白色固体として得る(８２２mg、５９％)。
【０１９５】
(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピリジン−３−イル−メタノン(化合物１３)
【化４３】
0005492202.tif 000049
３,６−ジクロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン(１.００ｇ、５.６５mmol)を、オーブン乾燥した、２５０mL  丸底フラスコにＮ２下で入れ、ＴＨＦ(５０mL)およびピリジン−３−イル−アセトニトリル(８００mg、７.６８mmol)を入れる。反応を３０分間Ｎ２流により脱気する。ＮａＨＭＤＳ(１４.１３mL、１.０Ｍ、１４.１３mmol)を添加し、反応を１６時間撹拌する。反応混合物をビーカーに移し、開放雰囲気下で数時間激しく撹拌する。反応を飽和重炭酸ナトリウム溶液でクエンチし、有機物をジクロロメタンで抽出する。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮する。粗物質をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(０−２０％メタノールのＣＨ２Ｃｌ２溶液)で精製して、表題化合物を得る(１.３ｇ、９３％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.97 (s, 1H), 8.80 (d, J=4.5Hz, 1H), 8.25 (d, J= 8.0Hz, 1H), 7.60-7.64 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.33 (s, 3H)。
【０１９６】
(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピリジン−２−イル−メタノン(化合物１４)
【化４４】
0005492202.tif 000050
３,６−ジクロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン(１.００ｇ、５.６５mmol)を、乾燥２５０ml  丸底フラスコに、Ｎ２下入れ、ＴＨＦ(５０mL)およびピリジン−２−イル−アセトニトリル(８００mg、７.６８mmol)を入れる。反応を３０分間脱気する。ＮａＨＭＤＳ(１.０Ｍ、１４.１３mL、１４.１３mmol)を添加し、反応を一夜撹拌する。反応混合物をビーカーに移し、数時間、空気下で激しく撹拌する。反応混合物を飽和重炭酸ナトリウム溶液でクエンチする。有機物をジクロロメタンで抽出する。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮する。粗物質をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(０−２０％メタノールのＣＨ２Ｃｌ２溶液)で精製して、表題化合物を得る(６１６mg、４４％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.68 (m, 1H), 8.26 (m, 1H), 8.16 (m, 1H), 7.76 (m, 1H), 2.45 ( s, 3H), 2.21( s, 3H)。
【０１９７】
[４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン−３−イル]−ピリジン−４−イル−メタノン(化合物１５)
【化４５】
0005492202.tif 000051
以下に記載する方法に従い、(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピリジン−４−イル−メタノン(７５０mg、３.０３mmol)および(Ｒ)−２−メチル−ピペラジン(３６４mg、３.６３mmol)から、表題化合物をベージュ色固体として得る(７７８mg、８３％)。
【０１９８】
[４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン−３−イル]−ピリジン−３−イル−メタノン(化合物１６)
【化４６】
0005492202.tif 000052
(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピリジン−３−イル−メタノン(１.２ｇ、４.８４mmol)および(Ｒ)−２−メチル−ピペラジン(４８５mg、４.８４mmol)を、マイクロ波バイアルに入れ、ＮＭＰ(１７mL)およびトリエチルアミン(２.０１mL、１４.４９mmol)を入れる。バイアルを密閉し、１７０℃で３０分間マイクロ波で照射する。粗物質を直接シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(０−２０％メタノールのＣＨ２Ｃｌ２溶液)で精製する。得られた油状物をＣＨ２Ｃｌ２およびヘプタンと共沸蒸留して、表題化合物を粉末として得る(１３５０mg、９０％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.56 (br s, 1H), 8.96 (s, 1H), 8.84-8.86 (m, 1H), 8.21-8.24 (m, 1H), 7.60-7.63 (m, 1H), 3.72 (s, 1H), 3.69 (s, 1H), 3.45-3.50 (m, 1H), 3.26-3.31 (m, 4H), 2.30 (s, 6H), 1.32 (d, J=6.5Hz, 3H)。
【０１９９】
[４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン−３−イル]−ピリジン−２−イル−メタノン(化合物１７)
【化４７】
0005492202.tif 000053
(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピリジン−２−イル−メタノン(５５０mg、２.２２mmol)、(Ｒ)−２−メチル−ピペラジン(３２０mg、３.２０mmol)をマイクロ波バイアルに入れ、ＮＭＰ(６mL)およびトリエチルアミン(０.９２mL、６.６６mmol)を入れる。バイアルを密閉し、１８０℃で１時間マイクロ波で照射する。粗物質を直接シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(２０−７０％メタノールのＣＨ２Ｃｌ２溶液)で精製して、表題化合物を得る(６７１mg、９７％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.57 (br s, 1H), 8.66 (d, J=5.0Hz, 1H), 8.10-8.17 (m, 2H), 7.69-7.73 (m, 1H), 3.65 (m, 1H), 3.62 (m, 1H), 3.45-3.50 (m, 1H), 3.12-3.33 (m, 4H), 2.29 (s, 3H), 2.15( s, 3H), 1.32 (d, J=6.5Hz, 3H)。
【０２００】
４,５−ジメチル−３−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−６−ピリジン−４−イルメチル−ピリダジン(化合物１８)
【化４８】
0005492202.tif 000054
以下に記載する方法に従い、４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン−３−イル]−ピリジン−４−イル−メタノン(５５０mg、１.７７mmol)、ヒドラジン一水和物(０.４３mL、８.８４mmol)、およびＫＯＨペレット(４９５mg、８.８２mmol)から、表題化合物を得る(３７２mg、７１％)。
【０２０１】
４,５−ジメチル−３−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−６−ピリジン−３−イルメチル−ピリダジン(化合物１９)
【化４９】
0005492202.tif 000055
４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン−３−イル]−ピリジン−３−イル−メタノン(１３００mg、４.１７mmol)、ヒドラジン一水和物(１０４５mg、２０.８８mmol)、ＫＯＨペレット(１１７１.４mg、２０.８８mmol)、およびジエチレングリコール(２６mL)を丸底フラスコに入れ、反応を１９０℃で４時間加熱する。反応混合物を室温に至らせ、水に注ぐ。有機物をジクロロメタンで抽出する。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮する。粗物質をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(５０／４０／１０  ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＮＨ４ＯＨ)で精製して、表題化合物を得る(１.１７ｇ、９４％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.47 (s, 1H), 8.41-8.42 (m, 1H), 7.54-7.56 (m, 1H), 7.29-7.32 (m, 1H), 4.25 (s, 2H), 4.12 (br s, 1H), 3.17-3.22 (m, 3H), 2.72-2.94 (m, 4H), 2.17 (s, 3H), 2.13( s, 3H), 0.99 (d, J=6.0Hz, 3H)。
【０２０２】
実施例４５−５５の合成。
実施例４５：(Ｒ)−４−(６−ベンゾイル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル
【化５０】
0005492202.tif 000056
(Ｒ)−２−メチル−３,４,５６−テトラヒドロ(hydo)−２Ｈ−[１,２]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(１００mg、０.４０３mmol)のＤＭＦ(５mL)溶液に、(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−フェニル−メタノン(１００mg、０.４０２mmol)および炭酸ナトリウム(１７０.７mg、１.６１mmol)を添加し、反応混合物をマイクロ波リアクターで４時間、１８０℃加熱する。反応混合物をＤＣＭ(２５mL)で希釈し、ＮａＨＣＯ３および水で洗浄する。有機溶媒を抽出し、減圧下除去する。粗生成物をアセトニトリルの水溶液(２０％〜１００％と３％１−プロパノール)を用いるＨＰＬＣで精製し、２２０nm波長検出で、所望の生成物を灰白色粉末として回収した(５８mg、３２％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.65 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.48-7.65 (m, 5H), 4.39 (d, J=13.1Hz, 1H), 3.54 (d, J=12.6Hz, 1H), 3.29 (m, 2H), 3.17 (m, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 1.30 (s, 3H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値446.5098, 計算値446.5104。
【０２０３】
実施例４６：(６−{(Ｒ)−４−[４−(１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル)−フェニル]−３−メチル−ピペラジン−１−イル}−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−フェニル−メタノン
【化５１】
0005492202.tif 000057
(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−フェニル−メタノン(５０mg、０.２０mmol)のＤＭＦ(３mL)溶液に、２−[４−(Ｒ)−２−メチル−ピペラジン−１−イル]−フェニル]−プロパン−２−オール(４７.４mg、０.２０mmol)および炭酸ナトリウム(８６.２mg、０.８１mmol)を添加し、反応混合物をマイクロ波リアクターで４時間、１８０℃加熱した。反応混合物をＤＣＭ(１５mL)で希釈し、ＮａＨＣＯ３および水で洗浄する。有機溶媒を抽出し、減圧下除去する。粗生成物をＡＣＮの水溶液(２０％〜１００％と３％１−プロパノール)で精製して、220nmのＵＶ検出により、所望の生成物を灰白色粉末として得る(２５mg、２８％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.42 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.61-7.89 (m, 5H), 4.77 (m, 1H), 4.25 (d, J=12.6Hz, 1H), 3.75 (d, J=12.6Hz, 1H), 3.65 (d, J=12.6Hz, 1H), 3.29 (m, 2H), 3.11 (m, 1H), 2.50 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 1.47 (s, 6H), 1.35 (d, J=6.6Hz, 3H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値444.2256, 計算値444.2651。
【０２０４】
実施例４７：(Ｒ)−４[６−(ヒドロキシル−フェニル−メチル)−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル]−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル
【化５２】
0005492202.tif 000058
(Ｒ)−４−(６−ベンゾイル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(８mg、０.０１７mmol)のＭｅＯＨ(２mL)溶液に、水素化ホウ素ナトリウム(１７０μg、０.００４mmol)を１５分間添加し、反応混合物を室温で１時間撹拌する。反応混合物をＤＣＭで希釈し、ＮａＨＣＯ３および水で洗浄する。有機溶媒を分離し、溶媒を減圧下除去する。粗生成物の、アセトニトリルの水溶液(１０％〜１００％と３％１−プロパノール)でのＨＰＬＣ精製により、２２０nm波長検出で所望の生成物を灰白色粉末として得る。(６mg、７９％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.77 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.29-7.38 (m, 5H), 6.15 (s,1H), 4.92 (m, 1H), 4.50 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.49-3.61 (m, 3H), 3.17-3.02 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 1.43 (d, J=6.6Hz, 3H)。
MS(m/z, MH+)測定値449。
【０２０５】
実施例４８：２−{(Ｒ)−４−[６−(ヒドロキシル(Hyrdoxyl)−フェニル−メチル０−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール
【化５３】
0005492202.tif 000059
(Ｒ)−４[６−(ヒドロキシル−フェニル−メチル)−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル]−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(１５mg、０.０３２mmol)のＴＨＦ(２mL)溶液に、臭化メチルマグネシウム(３２μl、０.０９５mmol)を−７８℃で添加し、反応混合物を０℃で２時間撹拌する。反応混合物をＤＣＭで希釈し、ＮＨ４Ｃｌおよび水で洗浄する。有機溶媒を抽出により分離し、減圧下濃縮する。粗生成物のアセトニトリルの水溶液(１０％〜１００％と３％１−プロパノール)を用いるＨＰＬＣでの精製によりｍ２２０nm波長検出で、所望の生成物を灰白色粉末として得る(１１mg、７７％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.27 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.29-7.34 (m, 5H), 5.88 (s,1H), 4.67 (m, 1H), 4.19 (m, 1H), 3.61 (m, 1H), 3.52-3.31 (m, 3H), 3.19 (tt, J=3.5Hz, 12.7Hz, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.57 (s, 6H), 1.40 (d, J=6.6 Hz, 3H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値449.2649, 計算値444.2665。
【０２０６】
実施例４９：(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−ピリジン−４−イルメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル
【化５４】
0005492202.tif 000060
上記実施例４６に従い、４,５−ジメチル−３−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−６−ピリジン−４−イルメチル−ピリダジン(１５５mg、０.５１mmol)および５−クロロ−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル(９９mg、０.５６mmolにより表題化合物をオレンジ色油状物として得る(１２３mg、５６％)。
【０２０７】
実施例５０：２−[(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−ピリジン−４−イルメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール
【化５５】
0005492202.tif 000061
以下に記載する方法に従い、(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−ピリジン−４−イルメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(１１０mg、０.２５mmol)およびＭｅＭｇＩ(０.６６０mL、１.９８mmol)により、表題化合物を黄色粉末として得る(４０mg、３７％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.47 (d, J=5.5Hz, 2H), 8.36 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.21 (d, J=5.5Hz, 2H), 5.15 (s, 1H), 4.68 (br s, 1H), 4.29 (s, 2H), 4.17 (d, J=12.5Hz, 1H), 3.21 - 3.59 (m, 3H), 3.07 (dd, J=12.5Hz, 3.5Hz, 1H), 2.89 - 3.00 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.42 (s, 6H), 1.28 (d, J=6.5Hz, 3H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値434.2650, 計算値434.2668。
【０２０８】
実施例５１：(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−ピリジン−３−イルメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル
【化５６】
0005492202.tif 000062
４,５−ジメチル−３−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−６−ピリジン−３−イルメチル−ピリダジン(３５０mg、１.１８mmol)および５−クロロ−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル(２４３.７mg、１.４１mmol)をマイクロ波バイアルに入れ、ＮＭＰ(７mL)およびトリエチルアミン(０.４９mL、３.５４mmol)を入れる。バイアルを密閉し、１４５℃で３０分間マイクロ波で照射する。粗物質を直接シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(０−２０％メタノールのＣＨ２Ｃｌ２溶液)で精製して、表題化合物を得る(３０mg、６％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.71 (s, 1H), 8.52 (d, J=6Hz, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.42 ( s, 1H), 7.57 (d, J= 8Hz, 1H), 7.30-7.33 (m, 1H), 4.85 (m, 1H), 4.45 (d, J = 12Hz, 1H), 4.29 ( s, 2H), 3.79 ( s, 3H), 3.41-3.55 ( m, 3H), 3.08 (m, 1H), 2.93-2.99 (m, 1H), 2.28 ( s, 3H), 2.17 ( s, 3H), 1.36 (d, J=7Hz, 3H)。
【０２０９】
実施例５２：２−[(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−ピリジン−３−イルメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール
【化５７】
0005492202.tif 000063
(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−ピリジン−３−イルメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(２５mg、０.０５８mmol)を、オーブン乾燥した、丸底フラスコに、Ｎ２下入れ、ＴＨＦ(０.６mL)を入れる。反応をドライアイス浴に１５分間入れる。ＭｅＭｇＩ(０.１５mL、３.０Ｍ、０.４６１mmol)を滴下し、反応を−７８℃で３０分間撹拌する。反応を０℃に温め、３０分間、または完全な変換が観察されるまで撹拌する。反応混合物を飽和塩化アンモニウム溶液でクエンチする。有機物を酢酸エチルで抽出する。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮する。粗物質をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(２％ＣＨ２Ｃｌ２、９８％(５０／３０／２０  酢酸エチル／ヘプタン／ＭｅＯＨ))で精製して、表題化合物を得る(３.５mg、１４％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.49 (s, 1H), 8.42 (d, J= 6.7Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.57 (d, J= 7.9Hz, 1H), 7.32 (m, 1H), 5.13 (s, 1H), 4.67 (s, br, 1H), 4.29 (s, 2H), 4.17 (d, J= 12.5Hz, 1H), 3.51 (d, J= 12.5Hz, 1H), 3.34-3.42 (m, 2 H), 3.07 (dd, J= 12.1Hz, 1H), 2.93-2.97 (dt, J=3.4 Hz, 12.5Hz, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 1.43 (s, 6H), 1.28 (d, J= 6.5Hz, 3H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値434.2663, 計算値434.2668。
【０２１０】
実施例５３：(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−ピリジン−２−イルメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル
【化５８】
0005492202.tif 000064
工程１：２,４−ジメチル−３−ピリジン−２−イルメチル−ペンタン−３−オール(化合物２０)の製造
【化５９】
0005492202.tif 000065
２−メチル−ピリジン(１.８６ｇ、２０mmol)をＴＨＦ(２０mL)に溶解し、−３０℃に冷却する。ｔｅｒｔ−ブチルリチウム(１１.８mL、ペンタン中１.７Ｍ、２０mmol)を溶液に滴下し、反応を３０分間、−３０℃で撹拌する。２,４−ジメチル−ペンタン−３−オン(３.４mL、２４mmol)を添加し、反応を室温に温め、２時間撹拌する。Ｈ２Ｏ(３０mL)を添加し、ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機物を塩水で洗浄し、真空で濃縮する。残留物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ＥｔＯＡｃ／ヘプタン)で精製して、２,４−ジメチル−３−ピリジン−２−イルメチル−ペンタン−３−オールを得る(４.１４ｇ、定量的)。
【０２１１】
工程２：(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−ピリジン−２−イルメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(実施例５３)
(Ｒ)−４−(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(２５０mg、０.６６３mmol)を２,４−ジメチル−３−ピリジン−２−イルメチル−ペンタン−３−オール(１１４.６mg、０.５５３mmol)、炭酸セシウム(２１６.２mg、０.６６４mmol)、パラジウムトリフレート(６.２mg、０.０２８mmol)、トリシクロヘキシルホスフィン(１５.５mg、０.０５５)、およびトルエン(２mL)と合わせる。反応混合物を１１０℃で６５時間加熱し、１０％変換に到達させる。Ｈ２Ｏを添加し、ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機物を真空で濃縮する。残留物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２)で精製して、表題化合物を得る(１３mg、５.４％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.71 (d, J=1.3Hz, 1H), 8.46 - 8.43 (m, 1H), 8.41 (d, J=1.3Hz, 1H), 7.71 (td, J=7.7Hz, 1.8Hz, 1H), 7.27 - 7.18 (m, 2H), 4.86 (br s, 1H), 4.41 (s, 2H), 4.48 - 4.38 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.59 - 3.38 (m, 3H), 3.08 (dd, J=12.6Hz, 3.7Hz, 1H), 2.95 (td, J=12.2Hz, 3.2Hz, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 1.36 (d, J=6.6Hz, 3 H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値434.2236, 計算値434.2304 。
【０２１２】
実施例５４：２−[(Ｒ)−４−(４,５−ジメチル−６−ピリジン−２−イルメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール
【化６０】
0005492202.tif 000066
実施例５４を、実施例５３から実施例５２に記載したＭｅＭｇＩにより製造する。
HR MS(m/z, MH+)測定値434.2666, 計算値434.2668。
【０２１３】
実施例５５：２−{(Ｒ)−４−[６−(ジフルオロ−フェニル−メチル)−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル]−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル}−プロパン−２−オール
【化６１】
0005492202.tif 000067
工程１：３−クロロ−４,５−ジメチル−６−(２−フェニル−[１,３]ジチオラン−２−イル)−ピリダジン(化合物２１)
【化６２】
0005492202.tif 000068
(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−フェニル−メタノン(３００mg、１.２２mmol)のＤＣＭ溶液に、１,２−エタンジチオール(０.４０８ml、４.８６mmol)およびＢＦ３・ＯＥｔ２(０.１５４ml、１.２１６mmol)を０℃で窒素雰囲気下に添加する。反応混合物を室温で１６時間撹拌する。反応にＢＦ３・ＯＥｔ２(０.１５４ml、１.２１６mmol)および１,２−エタンジチオール(０.４０８ml、４.８６mmol)を添加し、４０℃で６時間で加熱した。反応を飽和ＮａＨＣＯ３で０℃でクエンチし、有機相を塩水で洗浄する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、黄色固体を得る。残留物をシリカゲルに載せ、２０−８０％ＥｔＯＡｃ：ヘプタンで溶出するフラッシュクロマトグラフィーで精製する。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、濃縮して、白色固体を得る(280mg, 73%)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.54-7.53 (m, 2H), 7.28-7.22 (m, 3H), 3.46-3.34 (m, 4H), 2.30 (s, 3H), 1.94 (s, 3H)。
MS(m/z, MH+)測定値323.0, 計算値322.88。
【０２１４】
工程２：３−クロロ−６−(ジフルオロ−フェニル−メチル)−４,５−ジメチル−ピリダジン(化合物２２)
【化６３】
0005492202.tif 000069
ＮＢＳ(４９.６mg、０.２７９mmol)のＤＣＭ(１mL)溶液に、ＤＡＳＴ(０.１４７ml、１.１１５mmol)添加する。反応混合物を０℃に冷却し、３−クロロ−４,５−ジメチル−６−(２−フェニル−[１,３]ジチオラン−２−イル)−ピリダジン(９０mg、０.２７９mmol)を添加する。混合物を室温で３時間撹拌する。さらに２当量のＤＡＳＴ(７３.７μL、０.５５８mmol)を添加し、混合物をさらに２時間撹拌する。反応混合物を飽和ＮａＨＣＯ３で０℃でクエンチする。水性層をＤＣＭで洗浄し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮して、粗混合物を得る。残留物をシリカゲルに載せ、１５−４５％ＥｔＯＡｃ：ヘプタンで溶出するフラッシュクロマトグラフィーで精製する。所望の生成物を含むフラクションを合わせ、濃縮して、黄色油状物を得る(１５mg、２０％)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.54-7.52 (m, 2H), 7.47-7.43 (m, 3H), 2.42-2.41 (m, 6H)。
19F NMR (400 MHz, CDCl3) δ = -89.9。
MS(m/z, MH+)測定値269.2, 計算値269.06
【０２１５】
工程３：２−{(Ｒ)−４−[６−(ジフルオロ−フェニル−メチル)−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル]−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル}−プロパン−２−オール(実施例５５)
実施例５５を、実施例４６に記載の通りに化合物１０および２２から製造する。
【０２１６】
ピペリジン−１−イル−ピリダジン類
スキーム５に記載する通り、ピペリジン−１−イル−ピリダジン類は多数の経路により製造できる。経路Ａによると、官能化ピペリジン類を中間体Ｖと反応して、実施例Ｉｇを得ることができる。実施例ＩｈおよびＩｉを経路Ｂにより製造できる。Ｖと４−ピペリジニル−カルボン酸エステルの反応により、エステル加水分解後に、中間体XIａを得て、それをイミダゾール置換実施例Ｉｈと反応するか、またはオルト−ジアニリン類と縮合して、実施例Ｉｉを得てよい。経路Ｃは、中間体Ｖと４−シアノピペリジンを反応させ、XIｂとＲ”−ＢｒのＰｄ触媒反応により実施例Ｉｊをもたらす。さらにイミダゾール置換実施例Ｉｋを、中間体XIｃ(アンモニアおよびケト−アルデヒド前駆体存在下の縮合反応により)と反応させることにより製造でき、それを４−ヒドロキシメチル−ピペリジン類とＶの反応と続くアルコール官能基の酸化に利用できる(経路Ｄ)。経路Ｅは、ケトン類XIｄを提供し、それはＲ”−Ｌｉのようなメタロ−有機試薬の親電子物質として作用し、第三級アルコール実施例Ｉｌを提供できる。ヒドロキシル基のフッ素化試薬、例えばDeoxofluorでの変換により、別の実施例Ｉｎを得る。ケトン類XIｄは、アミン類および例えば還元剤としてのＮａＢＨ(ＯＡｃ)３を用いる還元的アミノ化反応に使用し、実施例Ｉｏを得ることができる。
【化６４】
0005492202.tif 000070
スキーム５
【０２１７】
経路Ａによる実施例５６の合成：
実施例５６：２−[１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−イル]−２,３ジヒドロ−１Ｈ−イソインドール
【化６５】
0005492202.tif 000071
工程１：８−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−１,４−ジオキサ−８−アザ−スピロ[４.５]デカン(化合物２３)
【化６６】
0005492202.tif 000072
化合物２３を、３−ベンジル−６−クロロ−４,５−ジメチルピリダジンおよび１,４−ジオキサ−８−アザ−スピロ[４.５]デカンから化合物３について記載した方法に準じて製造する。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 1.89 (4H, m), 2.08 (3H, s), 2.17 (3H, s), 3.33 (4H, m), 4.00 (4H, s), 4.29 (2H, s), 7.22 (5H, m)。
MS(m/z, MH+)測定値340.4。
【０２１８】
工程２：１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−オン(化合物２４)
【化６７】
0005492202.tif 000073
化合物２３(９１７mg、２.４６mmol)のアセトン(５０mL)溶液に、塩酸(１.２Ｎ、２０mL)を添加する。混合物を４６時間撹拌し、飽和重炭酸ナトリウムで処理してわずかに塩基性とし、酢酸エチル(３ｘ)で抽出する。有機抽出物を塩水で洗浄し、乾燥させて、油状物を得て、それをシリカゲルクロマトグラフィー(４０％酢酸エチルのヘプタン溶液)での精製により、純粋２４を粘性油状物として得る(５６５mg、７８％)。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 2.1 (3H, s), 2.2 (3H, s), 2.7 (4H, m), 3.6 (4H, m), 4.3 (2H, s), 7.3 (5H, m)。
HR MS(m/z, MH+)測定値296.1763。
【０２１９】
工程３：２−[１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−イル]−２,３ジヒドロ−１Ｈ−イソインドール(実施例５６)
ケトン２４(４３mg、０.１５mmol)の無水ＴＨＦ／ＣＨ２Ｃｌ２(１.５ml／１.５mL)に、イソインドリン(２５μL、０.２２mmol)および氷酢酸(acidic acid)(３μL)およびトリアセトキシル水素化ホウ素ナトリウム(９８mg、０.４４mmol)を添加する。混合物を２時間撹拌し、飽和重炭酸ナトリウムでクエンチし、ＣＨ２Ｃｌ２で抽出する。有機相を乾燥させ、回転蒸発させ、ＨＰＬＣ精製(アセト(aeto)ニトリル−水−０.１％ＴＦＡ)して、表題化合物をＴＦＡ塩として得た(６７mg、８９％)。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 2.2 (4H, m), 2.3 (3H, s), 2.4 (3H, s), 3.2 (2H, m), 3.6 (1H, m), 3.8 (2H, m), 4.5 (4H, bs), 5.1 (2H, bs), 7.3 (9H, m)。
HR MS(m/z, MH+)測定値399.2547。
【０２２０】
経路Ｂによる実施例５７−５９の合成：
実施例５７：３−ベンジル−６−[４−(５−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル)−ピペリジン−１−イル]−４,５−ジメチル−ピリダジン
【化６８】
0005492202.tif 000074
工程１：１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル(化合物２５)
３−ベンジル−６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン(１.０ｇ、４.３１mmol)のＮＭＰ(１０mL)溶液に、ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル(２.０ｇ、１２.９mmol)およびＤＩＰＥＡ(３.７mL、２１.６mmol)を添加する。混合物をマイクロ波で２１０℃で１.５時間加熱する。混合物を８０℃で回転蒸発により濃縮する。粗生成物をＨＰＬＣ(ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ：２２％〜４５％と０.１％ＴＦＡ)で精製して、１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステルを得る(０.９４ｇ、６１％)。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 1.28 (3H, t), 1.90 (2H, q), 2.07 (2H, d), 2.23 (3H, s), 2.33 (3H, s), 2.54 (1H, m), 3.03 (2H, t), 3.57 (2H, d), 4.17 (2H, q), 4.50 (2H, s), 7.19 (2H, d), 7.24 (1H, d), 7.29 (2H, t)。
HR MS(m/z, MH+)測定値354.2179。
【０２２１】
工程２：１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−カルボン酸(化合物２６)
１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル(０.８８ｇ、２.５mmol)のＥｔＯＨ(８mL)溶液に、水酸化ナトリウム(０.８ｇ、２０.１mmol)のＨ２Ｏ(８mL)溶液を添加する。２５℃で２時間撹拌後、混合物を濃縮し、ＣＨ２Ｃｌ２(２×１０mL)で抽出して、不純物を除去する。水性層を１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ〜５に酸性化し、ＣＨ２Ｃｌ２(６×２０mL)で抽出する。合わせた有機溶液をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−カルボン酸を得る(０.６８ｇ、８３％)。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 1.92 (2H, q), 2.08 (2H, d), 2.25 (3H, s), 2.35 (3H, s), 2.64 (1H, m), 3.11 (2H, t), 3.60 (2H, d), 4.49 (2H, s), 7.20 (2H, d), 7.26 (1H, t), 7.31 (2H, t)。
HR MS(m/z, MH+)測定値326.1870。
【０２２２】
工程３：１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−カルボン酸シアノメチル−アミド(化合物２７)
１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−カルボン酸(３５０mg、１.０８mmol)のＤＭＦ(１０mL)溶液に、ＤＩＰＥＡ(０.９４mL、５.４mmol)およびＨＡＴＵ(４９０mg、１.２９mmol)を添加する。２５℃で撹拌後、アミノアセトニトリルヒドロクロライド(１１９mg、１.２９mmol)を添加する。混合物を２時間撹拌し、ＥｔＯＡｃ(２０mL)で希釈し、Ｈ２Ｏ(３×１０mL)で洗浄する。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物をクロマトグラフィー(ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ：９７％／３％)で精製して、１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−カルボン酸シアノメチル−アミドを得る(２８０mg、７２％)。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 1.97 (4H, m), 2.25 (3H, s), 2.36 (3H, s), 2.58 (1H, m), 3.07 (2H, t), 3.67 (2H, d), 4.12 (2H, d), 4.44 (2H, s), 7.14 (2H, d), 7.31 (3H, m)。
MS(m/z, MH+)測定値364.3。
【０２２３】
工程４：３−ベンジル−６−[４−(５−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル)−ピペリジン−１−イル]−４,５−ジメチル−ピリダジン(実施例５７)
１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−カルボン酸シアノメチル−アミド(２０mg、０.０５５mmol)およびトリフェニルホスフィンのアセトニトリル(１mL)溶液に、２５℃で四塩化炭素(４２mg、０.２８mmol)を添加する。５０℃で３時間撹拌後、混合物を濃縮し、ＣＨ２Ｃｌ２(１０mL)で希釈し、水酸化ナトリウム(２mL、１Ｎ)およびＨ２Ｏ(２mL)で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物をＨＰＬＣ(ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ：２２％〜４５％と０.１％ＴＦＡ)で精製して、３−ベンジル−６−[４−(５−クロロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イル)−ピペリジン−１−イル]−４,５−ジメチル−ピリダジンを得る(１１.８mg、５６％)。
1H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ = 2.09 (2H, m), 2.20 (2H, d), 2.35 (3H, s), 2.50 (3H, s), 3.20 (3H, m), 3.87 (2H, d), 4.46 (2H, s), 7.25 (2H, d), 7.34 (1H, t), 7.35 (1H, s), 7.39 (2H, t)。
HR MS(m/z, MH+) 計算値382.1794。
【０２２４】
実施例５８：２−[１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−イル]−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジン
【化６９】
0005492202.tif 000075
１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−カルボン酸(化合物２６、５０mg、０.１５mmol)および２,３−ジアミノピリジン(３３mg、０.３０mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(０.５mL)溶液に、ポリリン酸(１mL)を添加する。混合物を濃縮して、ＣＨ２Ｃｌ２を除去する。１５０℃で１.５時間撹拌後、混合物を２５℃に冷却し、水(１０mL)で希釈し、水酸化ナトリウムの１０％水性溶液でｐＨ〜８に塩基性化する。水性溶液をＣＨ２Ｃｌ２(５×１５mL)で抽出する。合わせた有機層を濃縮し、ＨＰＬＣ(ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ：２２％〜４５％と０.１％ＴＦＡ)で精製して、２−[１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−イル]−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｂ]ピリジンを得る(３３.８mg、５５％)。
1H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ = 2.28 (2H, qd), 2.36 (3H, s), 2.38 (2H, dd), 2.53 (3H, s), 3.29 (2H, t), 3.56 (1H, m), 3.93 (2H, d), 4.48 (2H, s), 7.25 (2H, d), 7.32 (1H, t), 7.39 (2H, t), 7.70 (1H, dd), 8.46 (1H, d), 8.62 (1H, d)。
HR MS(m/z, MH+)測定値399.2294。
【０２２５】
実施例５９：２−[１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−４−メチル−ピペリジン−４−イル]−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]ピリジン
【化７０】
0005492202.tif 000076
工程１：１−(６−ベンジル(Nenzyl)−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−４−メチル−ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル(化合物２８)
３−ベンジル−６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン(１.０ｇ、４.３mmol)のＮＭＰ(１０mL)溶液に、４−メチル−ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル(２.０ｇ、８.６mmol)およびＤＩＰＥＡ(３.７mL、２１.６mmol)を添加する。混合物をマイクロ波で２１０℃で１.５時間加熱する。混合物を８０℃で回転蒸発により濃縮する。粗生成物をＨＰＬＣ(ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ：２２％〜４５％と０.１％ＴＦＡ)で精製して、１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−４−メチル−ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステルを得る(０.６４ｇ、４１％)。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 1.27 (3H, s), 1.29 (3H, t), 1.62 (2H, t), 2.24 (3H, s), 2.27 (2H, d), 2.34 (3H, s), 3.13 (2H, t), 3.47 (2H, d), 4.20 (2H, q), 4.42 (2H, s), 7.11 (2H, d), 7.28 (3H, m)。
HR MS(m/z, MH+)測定値368.2335。
【０２２６】
工程２：１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−４−メチル−ピペリジン−４−カルボン酸(化合物２９)
１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−４−メチル−ピペリジン−４−カルボン酸エチルエステル(０.６０ｇ、１.６mmol)のＥｔＯＨ(５mL)溶液に、水酸化ナトリウム(０.５ｇ、１３.２mmol)のＨ２Ｏ(５mL)溶液を添加する。２５℃で２時間撹拌後、混合物を濃縮し、ＣＨ２Ｃｌ２(２×１０mL)で抽出して、不純物を除去する。水性層を１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ〜５に酸性化し、ＣＨ２Ｃｌ２(６×２０mL)で抽出する。合わせた有機溶液をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−４−メチル−ピペリジン−４−カルボン酸を得る(０.４９ｇ、８９％)。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 1.33 (3H, s), 1.60 (2H, t), 2.13 (3H, s), 2.23 (3H, s), 2.31 (2H, d), 3.17 (2H, t), 3.38 (2H, d), 4.42 (2H, s), 7.21 (2H, d), 7.27 (3H, t)。
HR MS(m/z, MH+)測定値340.2028。
【０２２７】
工程３：２−[１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−４−メチル−ピペリジン−４−イル]−１Ｈ−イミダゾ[４,５−ｃ]ピリジン(実施例５９)
１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−４−メチル−ピペリジン−４−カルボン酸(５０mg、０.１５mmol)および２,３−ジアミノピリジン(３２mg、０.２９mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(０.５mL)溶液に、ポリリン酸(１mL)を添加する。混合物を濃縮して、ＣＨ２Ｃｌ２を除去する。１５０℃で３.５時間撹拌後、混合物を２５℃に冷却し、水(３mL)で希釈し、水酸化ナトリウムの１０％水性溶液でｐＨ〜８に塩基性化する。水性ｉｓ  ＣＨ２Ｃｌ２(３×１０mL)で抽出する。合わせた有機層を濃縮し、ＨＰＬＣ(ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ：１５％〜４０％と０.１％ＴＦＡ)で精製して、２−[１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−４−メチル−ピペリジン−４−イル]−１Ｈ−イミダゾ[４,５−c]ピリジンを得る(21mg, 27%)。
1H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ = 1.60 (3H, s), 2.15 (2H, t), 2.34 (3H, s), 2.49 (3H, s), 2.65 (2H, d), 3.35 (2H, d), 3.65 (2H, d), 4.43 (2H, s), 7.22 (2H, d), 7.31 (1H, t), 7.37 (2H, t), 8.12 (1H, d), 8.56 (1H, d), 9.23 (1H, s)。
HR MS(m/z, MH+)測定値413.2446。
【０２２８】
経路Ｃによる実施例６０の合成：
実施例６０：１’−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−５−(１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル)−２’,３’,５’,６’−テトラヒドロ−１’Ｈ−[２,４’]ビピリジニル−４’−カルボニトリル
【化７１】
0005492202.tif 000077
工程１：１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−カルボニトリル(化合物３０)
【化７２】
0005492202.tif 000078
化合物３０を、化合物３について記載した方法に準じて化合物１０およびピペリジン−４−カルボニトリルから製造する。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 2.0-2.2 (4H, m), 2.1 (3H,s), 2.2 (3H,s), 2.8 (1H, m), 3.1 (2H, m), 3.4 (2H, m), 4.3 (2H, s), 7.2 (5H, m)。
HR MS(m/z, MH+)測定値307.1930。
【０２２９】
工程２：２−(６−ブロモ−ピリジン−３−イル)−プロパン−２−オール(化合物３１)
【化７３】
0005492202.tif 000079
２−ブロモ−５−ヨード−ピリジン(２.９７４ｇ、１０.２mmol)のＴＨＦ(１５mL)およびエーテル(２０mL)の混合物中の溶液に、−７８℃でｎ−ブチルリチウム(ヘキサン中２.５Ｍ、４Ｌ、１０.２mmol)を滴下する。混合物を−７８℃で３０分間撹拌し、アセトン(無水、０.７４９μL、１０.２mmol)を滴下する。混合物を−５０℃まで１.５時間にわたりゆっくり温め、飽和塩化アンモニウムでクエンチし、酢酸エチルで抽出する。有機相を分離し、乾燥させ、回転蒸発させる。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー(１０−２０％酢酸エチルのヘプタン溶液)で精製して、表題化合物を白色固体として得る(１.４０ｇ、６４％)。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 1.60 (6H, s), 1.96 (1H, s), 7.45 (1H, d, J = 8 Hz), 7.70 (1H, dd, J = 4, 8 Hz), 8.47 (1H, s)。
HR MS(m/z, MH+)測定値216.0034。
【０２３０】
工程３：１’−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−５−(１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル)−２’,３’,５’,６’−テトラヒドロ−１’Ｈ−[２,４’]ビピリジニル−４’−カルボニトリル(実施例６０)
化合物３０(１２２mg、０.３９８mmol)および化合物３１(１０３mg、０.４７８mmol)の無水トルエン(３mL)中の混合物に、Ｐｄ２(ｄｂａ)３(１８mg、０.０２０mmol)を添加する。混合物を窒素で７分間泡立たせ、それにトリ−ｔ−ブチルホスフィン(トルエン中１.０Ｍ、４０μL、０.０４０mmol)およびリチウムヘキサメチルジシラジド(トルエン中１.０Ｍ、０.９９５μL、０.９９５mmol)を添加する。混合物をｒｔで１５分間、６０℃で３時間撹拌し、ｒｔに冷却する。さらにＰｄ２(ｄｂａ)３(１８mg)、トリ−ｔ−ブチルホスフィン(４０μL)およびリチウムヘキサメチルジシラジド(０.９９５μL)を反応混合物に添加する。１７時間撹拌後、混合物を飽和塩化アンモニウムでクエンチし、酢酸エチルで抽出する。有機相を塩水で洗浄し、乾燥させ、回転蒸発させ、分取ＨＰＬＣ(アセトニトリル−水−０.１％ＴＨＦ)で精製して、表題化合物をＴＦＡ塩として得た(２４mg、１１％)。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 1.63 (6H,s), 2.23 (2H, m), 2.27 (3H, s), 2.41 (3H, s), 2.58 (2H, m), 3.57 (2H, m), 3.81 (2H, m), 4.52 (2H, s), 7.30 (5H, m), 7.68 (1H, d, J = 12 Hz), 7.96 (1H, m), 8.79 (1H, s)。
HR MS(m/z, MH+)測定値442.2600。
【０２３１】
経路Ｄによる実施例６１の合成：
中間体の合成：
(５’−ベンジル−３’,４’−ジメチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２]ビピリジニル−４−イル)−メタノール(化合物３２)
【化７４】
0005492202.tif 000080
ピペリジン−４−イル−メタノール(１２５mg、１.０３mmol)のＮＭＰ(３mL)溶液に、３−ベンジル−６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン(６０mg、０.２５８mmol)およびＴＥＡを添加する。反応混合物を２１０℃でマイクロ波リアクター中、２時間加熱する。反応混合物をＤＣＭ(１５mL)で希釈し、ＮａＨＣＯ３および水で洗浄する。有機溶媒を分離し、減圧下除去する。粗生成物のアセトニトリルの水溶液(２０％〜１００％と３％１−プロパノール)を用いるＨＰＬＣでの精製により、２２０nm波長検出で、所望の生成物を灰白色粉末として得る(２００mg、６２％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.23-7.36 (m, 5H), 4.55 (t, J=5.3Hz, 1H), 4.29 (s, 2H), 3.45 (m, 2H), 2.85 (m, 2H), 2.57 (s, 1H), 2.21 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 1.84 (m, 2H), 1.62 (m, 1H), 1.40 (m, 2H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値312.2069, 計算値312.2076。
【０２３２】
１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−カルバルデヒド(化合物３３)
【化７５】
0005492202.tif 000081
５’−ベンジル−３’,４’−ジメチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２]ビピリジニル−４−イル)−メタノール(１５５mg、０.４７３mmol)のＤＣＭ(５mL)溶液に、Dess-Martin試薬(２５７mg、０.５９mmol)を添加し、反応混合物を室温で２時間撹拌する。反応混合物をＤＣＭで希釈し、ＮａＨＣＯ３および水で洗浄する。有機相を分離し、溶媒  減圧下除去する。粗生成物をアセトニトリルの水溶液(２０％〜９５％と３％１−プロパノール)を用いるＨＰＬＣで精製して、２２０nm波長検出により、所望の生成物を灰白色粉末として得る(１２０mg、７８％)。
MS(m/z, MH+)測定値310。
【０２３３】
実施例６１：３−ベンジル−４,５−ジメチル−６−[４−(４−トリフルオロメチル−１Ｈ−イミダゾール−２−イル)−ピペリジン−１−イル]−ピリダジン
【化７６】
0005492202.tif 000082
酢酸ナトリウム三水和物(５０mg、０.６１５mmol)の水(５mL)溶液に、１,１−ジブロモ−３,３,３−トリフルオロアセトン(８３.５mg、０.３０７mmol)を添加する。溶液を４５分間、１００℃浴温度で加熱し、冷却する。溶液を１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−カルバルデヒド(１００mg、０.３１mmol)のＭｅＯＨ(５mL)に添加し、ＭｅＯＨ中濃水性アンモニア(１.７mL、７Ｍ、１２mmol)を添加する。反応混合物を３.５時間、室温に静置し、反応混合物を減圧下濃縮して、半固体を得て、それをヘプタンから再結晶させて、粗生成物を得る。粗生成物のアセトニトリルの水溶液(１０％〜１００％と３％１−プロパノール)を用いるＨＰＬＣによる精製により、２２０nm波長検出により、所望の生成物を灰白色粉末として得る(２８mg、２２％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.72 (s, 1H), 7.23-7.36 (m, 5H), 4.29 (s, 2H), 3.52 (m, 1H), 3.37 (m, 2H), 2.97 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.20-1.97 (m, 4H), 2.14 (s, 3H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値416.2050, 計算値416.2062。
【０２３４】
経路Ｅによる実施例６２−６４の合成：
実施例６２：２−[１−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペリジン−４−イル]−１,２,３,４−テトラヒドロ−イソキノリン
【化７７】
0005492202.tif 000083
この化合物をＴＦＡ塩として、実施例５６で使用した方法に従い化合物２４および１,２,３,４−テトラヒドロ−イソキノリンから製造する。
1H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ = 2.1 (2H, m), 2.3 (3H, s), 2.3 (2H, m), 2.4 (3H, s), 3.1-3.9 (9H, m), 4.4 (2H, s), 4.6 (2H, s), 7.3 (9H, m)。
HR MS(m/z, MH+)測定値413.2689。
【０２３５】
実施例６３：１’−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−５−(１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル)−２’,３’,５’,６’−テトラヒドロ−１’Ｈ−[２,４’]ビピリジニル−４’−オール
【化７８】
0005492202.tif 000084
工程１：２−ブロモ−５−[１−メチル−１−(２−トリメチルシラニル−エトキシメトキシ)−エチル]−ピリジン(化合物３４)
【化７９】
0005492202.tif 000085
化合物３１(５３２mg、２.４６mmol)の無水ＤＭＦ(５mL)に、０℃で、水素化ナトリウム(鉱油中６０％、１３８mg、３.４５mmol)を添加する。混合物をｒｔで１時間撹拌し、０℃に冷却し、それにＳＥＭＣｌ(０.５６４μL、３.２mmol)を添加する。混合物をｒｔで１６時間、５０℃で１時間撹拌し、ｒｔに冷却し、水でクエンチし、酢酸エチルで抽出する。有機相を塩水で洗浄し、乾燥させ、回転蒸発させる。油性残留物をシリカゲルクロマトグラフィー(１０−１５％酢酸エチルのヘプタン溶液)で精製して、表題化合物を透明油状物として得る(４７４mg、５６％)。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 0.0 (9H, s), 0.84 (2H, m), 1.59 (6H, s), 3.60 (2H, m), 4.60 (2H, s), 7.43(1H, d, J = 8 Hz), 7.61 (1H, m), 8.42 (1H, s)。
HR MS(m/z, MH+)測定値346.0822。
【０２３６】
工程２：１’−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−５−[１−メチル−１−(２−トリメチルシラニル−エトキシメトキシ)−エチル]−２’,３’,５’,６’−テトラヒドロ−１’Ｈ−[２,４’]ビピリジニル−４’−オール(化合物３５)
【化８０】
0005492202.tif 000086
化合物３４(２７２mg、０.７８６mmol)のＴＨＦ(６mL)溶液に、−７８℃で、ｔ−ブチルリチウム(ペンタン中１.７Ｍ、１.０mL、１.７mmol)を添加する。混合物を−７８℃で３０分間撹拌し、それに化合物２４(２０９mg、０.７０７mmol)のＴＨＦ(２mL)溶液を−７８℃で添加する。混合物を１時間で撹拌し、ゆっくり−４０℃まで温め、−４０℃で飽和塩化アンモニウムでクエンチする。ＴＨＦを除去し、残留物を酢酸エチル(３ｘ)で抽出した。有機相を塩水で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮する。残留物をシリカゲルクロマトグラフィー(４０−６０％酢酸エチルのヘプタン溶液)で精製して、回収した化合物２４(１０３mg、４９％)および表題化合物３５(１０６mg、２７％)を白色固体として得る。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 0.0 (9H, s), 0.87 (2H, t, J = 8 Hz), 1.64 (6H, s), 1.74 (2H, m), 2.10 (3H, s), 2.22 (3H, s), 2.28 (2H, m), 3.57 (6H, m), 4.31 (2H, s), 4.66 (2H, s), 4.95 (1H, s), 7.27 (5H, m), 7.43 (1H, m), 7.80 (1H, m), 8.62 (1H, m)。
HR MS(m/z, MH+)測定値563.3392。
【０２３７】
工程３：１’−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−５−(１−ヒドロキシ−１−メチル−エチル)−２’,３’,５’,６’−テトラヒドロ−１’Ｈ−[２,４’]ビピリジニル−４’−オール(実施例６３)
化合物３５(４４mg、０.０７８mol)のＣＨ２Ｃｌ２(１.５mL)に、０℃で、ＴＦＡ(０.１５μL)を添加する。混合物を０℃で２時間撹拌し、２５％酢酸アンモニウムでクエンチし、酢酸エチルで抽出する。有機相を塩水で洗浄し、乾燥させ、濃縮して、黄色残留物を得て、それをシリカゲルクロマトグラフィー(０−５％メタノールのＣＨ２Ｃｌ２溶液)で精製して、所望の生成物を得る(１７mg、５０％)。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 1.62 (6H, s), 1.72 (2H, m), 2.09 (3H, s), 2.21 (3H, s), 2.25 (2H, m), 3.50 (4H, m), 4.30 (2H, s), 7.20 (5H, m), 7.42 (1H, m), 7.86 (1H, m), 8.66 (1H, b.s)。
HR MS(m/z, MH+)測定値433.2590。
【０２３８】
実施例６４：２−[１’−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−４’−フルオロ−１’,２’,３’,４’,５’,６’−ヘキサヒドロ−[２,４’]ビピリジニル−５−イル]−プロパン−２−オール
【化８１】
0005492202.tif 000087
工程１：１’−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−４’−フルオロ−５−[１−メチル−１−(２−トリメチルシラニル−エトキシメトキシ)−エチル]−１’,２’,３’,４’,５’,６’−ヘキサヒドロ−[２,４’]ビピリジニル(化合物３６)
【化８２】
0005492202.tif 000088
化合物３５(３９mg、０.０６９mmol)に、０℃で、冷Deoxofluor(ＴＨＦ中５０％、６６５μL、１.３８mmol)を添加する。混合物をｒｔで４時間撹拌し、飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、ＣＨ２Ｃｌ２(３ｘ)で抽出する。有機相を塩水で洗浄し、乾燥させ、濃縮して、褐色油状物。シリカゲルクロマトグラフィー精製により、表題化合物を得る(２１mg、４８％)。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 0.0 (9H, s), 0.9 (2H, t, J = 8 Hz), 1.6 (6H, s), 2.0 (2H, m), 2.1 (3H, s), 2.2 (3H, s), 2.6 (2H, m), 3.4 (4H, m), 3.6 (2H, t, J = 8 Hz), 4.3 (2H, s), 4.7 (2H, s), 7.2 (5H, m), 7.6 (1H, m), 7.8 (1H, m), 8.6 (1H, b.s)。
HR MS(m/z, MH+)測定値565.3369。
【０２３９】
工程２：２−[１’−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−４’−フルオロ−１’,２’,３’,４’,５’,６’−ヘキサヒドロ−[２,４’]ビピリジニル−５−イル]−プロパン−２−オール(実施例６４)
【化８３】
0005492202.tif 000089
この実施例化合物を、実施例６３に記載した方法に従い、化合物３６およびＴＦＡから製造した。
1H-NMR (600 MHz, CDCl3) δ = 1.63 (6H, s), 2.05 (2H, m), 2.19 (3H, s), 2.32 (3H, s), 2.55 (2H, m), 3.94 (4H, m), 4.53 (2H, b.s), 7.25 (5H, m), 7.59(1H, d, J = 6Hz), 7.90 (1H, m), 8.71 (1H, b.s)。
HR MS(m/z, MH+)測定値435.2554。
【０２４０】
ピペラジニル−ピリダジン類
スキーム６は、式Ｉｐの化合物の製造の一般的合成スキームを示す。置換１,４−ジクロロピリダジン類IIを有機−亜鉛試薬とパラジウム触媒下に反応させて、中間体XIIを得ることができる。残った塩素の、ピペラジンでの塩基存在下の置換により、化合物XIIIを得る。置換基Ｚの一に依存して、Ｎ保護基の使用が、ピペラジン窒素の一つの反応性を遮断ために必要であるはずである。中間体XIIIを、所望のリンカーＹに依存して、Ｒ３−Ｃｌと求核性置換反応塩基性条件下反応させるか、Ｒ−ＣＨＯと例えばＮａＢＨ(ＯＡｃ)３での還元的アミノ化により反応させるか、Ｒ３−ＯＣ(Ｏ)ＣｌまたはＲ３−ＮＣＯとのアシル化反応で反応させるか、Ｒ３−ＣＯＣｌと塩基性条件下反応させるか、またはＲ３−ＣＯ２Ｈとカップリング剤としての例えばＨＡＴＵアミドのアミドカップリングにより反応させて、実施例Ｉｐを得る。さらに、中間体XIIの残った塩素の官能化ピペラジンでの塩基存在下の置換により直接実施例Ｉｐを得ることができる(経路Ａ)。あるいは、実施例Ｉｐを、ピペラジン部分を最初に求核性置換反応により導入し、根岸カップリングを行う経路ＢおよびＣを使用して製造できる。
【化８４】
0005492202.tif 000090
スキーム６
【０２４１】
中間体IIおよびXIIの合成：
４,５−ジメチル−１,２−ジヒドロ−ピリダジン−３,６−ジオン(化合物３６)
【化８５】
0005492202.tif 000091
ヒドラジンヒドロクロライド(５８ｇ、５５２mmol)を熱水(３００mL)に溶解し、ジメチルマレイン無水物(５８ｇ、４６０mmol)を少しずつ添加し、懸濁液を還流で１６時間撹拌する。懸濁液を室温に冷却し、沈殿を濾過し、水で洗浄し、４０℃で真空で乾燥させて、４,５−ジメチル−１,２−ジヒドロ−ピリダジン−３,６−ジオン(３６)を得る(６４ｇ、９９％)。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 11 (br s, 2H), 2.01 (s, 6H)。
MS(m/z, MH+)測定値141.1。
【０２４２】
４,５−ジメチル−１,４−ジクロロ−ピリダジン(化合物３７)
【化８６】
0005492202.tif 000092
４,５−ジメチル−１,２−ジヒドロ−ピリダジン−３,６−ジオン(５０ｇ、３５７mmol)を、１Ｌ  フラスコに添加し、ＰＯＣｌ３(２５０mL)をゆっくり添加する。懸濁液を撹拌し、加熱還流し、全ての出発物質を溶解する。２時間後約１５０mL  ＰＯＣｌ３を真空下で除去する。粘性、褐色溶液を１.５Ｌ  ビーカーで撹拌下に氷に少しずつゆっくり注ぐ。オレンジ色懸濁液を外的に冷却しながら、２８％水性アンモニアで中和する。生成物をブフナー漏斗で濾過し、水で洗浄し、４０℃で真空で乾燥させて、灰白色粉末を得る(５９ｇ、９３％)。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 2.44 (s, 6H)。
MS(m/z, MH+)測定値177.1。
【０２４３】
２,３,６,７−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン−１,４−ジオン(化合物３８)
【化８７】
0005492202.tif 000093
ヒドラジンヒドロクロライド(２.４ｇ、２２.８mmol)および１−シクロペンテン−１,２−ジカルボン酸無水物(３.０ｇ、２１.７mmol)の水(１０mL)溶液を３時間加熱還流する。反応混合物を室温に冷却し、沈殿を濾過により回収する。黄色固体を１５mL  １Ｎ  ＮａＯＨと混合し、２時間撹拌し、濾過し、真空下で乾燥させて、２,３,６,７−テトラヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン−１,４−ジオン(３８)を得る(２.２ｇ、６７％)。
MS(m/z, MH+)測定値153.1
【０２４４】
１,４−ジクロロ−６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン(化合物３９)
【化８８】
0005492202.tif 000094
本化合物を化合物３７に準じて化合物３６から出発して製造する。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 2.74-2.61 (m, 4H), 2.00 (m, 1H), 1.85 (m, 1H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値188.9986。
【０２４５】
２,３,５,６,７,８−ヘキサヒドロ−フタラジン−１,４−ジオン(化合物４０)
【化８９】
0005492202.tif 000095
ヒドラジン(３９２μL、１３.１mmol)の水(６mL)およびＨＯＡｃ(２mL)中の溶液に、４,５,６,７−テトラヒドロ−イソベンゾフラン−１,３−ジオン(２ｇ、１３.１mmol)添加する。反応混合物を３時間還流し、室温に冷却し、沈殿を濾過により回収し、水で洗浄し、真空下で乾燥させて、２,３,５,６,７,８−ヘキサヒドロ−フタラジン−１,４−ジオン(４０)を得る(２.０９ｇ、９６％)。
MS(m/z, MH+)測定値167.05。
【０２４６】
１,４−ジクロロ−５,６,７,８−テトラヒドロ−フタラジン(化合物４１)
【化９０】
0005492202.tif 000096
化合物４０(２.０９ｇ、１２.６mmol)のＰＯＣｌ３(１０mL)懸濁液を１時間還流し、冷却し、氷に注ぐ。沈殿を濾過により回収し、真空オーブンで乾燥させて、１,４−ジクロロ−５,６,７,８−テトラヒドロ−フタラジン(４１)を得る(２.２３ｇ、８７％)。
HR MS(m/z, MH+)測定値203.0139。
【０２４７】
３−ベンジル−６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン(化合物４２)
【化９１】
0005492202.tif 000097
４,５−ジメチル−１,４−ジクロロ−ピリダジン(１０ｇ、５６.５mmol)、テトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(０)(３.３ｇ、２.８０mmol)およびＴＨＦ(２００mL)の混合物を脱気し、ベンジル亜鉛ブロマイド(１４７mL、ＴＨＦ中０.５Ｍ、７３.４０mmol)を添加する。反応溶液を６５℃で一夜加熱する。溶媒を除去する。水を添加し、水層をＥｔＯＡｃで抽出する。有機層を濃縮して、粗生成物を得て、それをシリカゲルクロマトグラフィー(ＥｔＯＡｃ／ヘプタン：０％〜５０％)で精製して、表題化合物を得る(９.５ｇ、６７％)。
1H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ = 7.27 (m, 5H), 4.38 (s, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.21 (s, 3H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値233.0839。
【０２４８】
３−クロロ−６−(４−フルオロ−ベンジル)−４,５−ジメチル−ピリダジン(化合物４３)
【化９２】
0005492202.tif 000098
上記化合物４２に準じて、３−クロロ−６−(４−フルオロ−ベンジル)−４,５−ジメチル−ピリダジンを４,５−ジメチル−１,４−ジクロロ−ピリダジンおよびパラ−フルオロベンジル亜鉛ブロマイドから製造する。
MS(m/z, MH+)測定値251.1。
【０２４９】
１−ベンジル−４−クロロ−６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン(化合物４４)
【化９３】
0005492202.tif 000099
１,４−ジクロロ−６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン(化合物３９、５００mg、２.６４mmol)のＴＨＦ(５mL)溶液に、Ｐｄ(ＰＰｈ３)４(３８３mg、０.３３mmol)を添加する。混合物を脱気し、ベンジル亜鉛ブロマイド(１１mL、ＴＨＦ中０.５Ｍ、５.６mmol)を添加する。混合物を６０℃で５時間加熱する。反応混合物をＲＴに冷却し、飽和水性ＮａＨＣＯ３溶液を添加し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を水、塩水で洗浄し、ＮａＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物フラッシュクロマトグラフィー(ＥｔＯＡｃ／ヘプタン１０％−３０％)で精製して、化合物４４を得る(４９０mg、７６％)。
1H-NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ = 7.30-7.21 (m, 5H), 4.28 (s, 2H), 2.97 (m, 2H), 2.84 (m, 2H), 2.09 (m, 2H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値245.0848。
【０２５０】
１−クロロ−４−(４−フルオロ−ベンジル)−６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン(化合物４５)
【化９４】
0005492202.tif 000100
化合物４５は、化合物４４に準じて、１,４−ジクロロ−６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン(化合物３９)およびパラ−フルオロベンジル亜鉛ブロマイドから出発して製造する。
1H-NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ = 7.23 (m, 2H), 6.99 (m, 2H), 4.27 (s, 2H), 2.98 (m, 2H), 2.84 (m, 2H), 2.11 (m, 2H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値263.0752。
【０２５１】
１−クロロ−４−(４−フルオロ−ベンジル)−５,６,７,８−テトラヒドロ−フタラジン(化合物４６)
【化９５】
0005492202.tif 000101
１,４−ジクロロ−５,６,７,８−テトラヒドロ−フタラジン(化合物４１、０.５０ｇ、２.４６mmol)のＴＨＦ(５mL)溶液に、４−フルオロ−ベンジル亜鉛クロライド(ＴＨＦ中０.５Ｍ)(６.４０mL、３.２０mmol)およびパラジウムテトラキストリフェニルホスフィン(０.３６ｇ、０.３１mmol)を添加する。混合物を脱気し、５０℃で一夜撹拌する。反応混合物を室温に冷却し、飽和ＮａＨＣＯ３および水を添加し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物をクロマトグラフィー(ＥｔＯＡｃ／ヘプタン：１０％〜４０％)で精製して、１−クロロ−４−(４−フルオロ−ベンジル)−５,６,７,８−テトラヒドロ−フタラジン(４６)を得る(０.５１ｇ、３０％)。
MS(m/z, MH+)測定値277.11。
【０２５２】
中間体XIIIの合成
化合物４８−５３を製造するためのクロライド類XIIのピペラジン類でのアミノ化の一般的方法(経路Ａ)
XII(０.４mmol)のＮＭＰまたはＤＭＦ／ジオキサン(２mL)溶液に、ピペラジン(０.６mmol)添加する。反応混合物を１９０℃で４時間、マイクロ波リアクターで加熱する。ｒｔに冷却し、ＤＣＭで希釈し、水性ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、有機層を除去して、粗生成物を得る。粗生成物のＥｔＯＡｃ／ヘプタン(２０％〜５０％)ＭｅＯＨ／ＤＣＭ(５％〜２０％)を用いるフラッシュクロマトグラフィーにより、溶媒除去後、生成物を黄色固体として得る(〜５０％−７０％)
【０２５３】
３−ベンジル−４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン(化合物４７)
【化９６】
0005492202.tif 000102
製造Ａ：
３−クロロ−４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン(４００mg、１.６６mmol、１当量)を、ベンジル亜鉛ブロマイド(１２.３mL  ＴＨＦ中０.５Ｍ、６.６４mmol、４当量)溶液およびテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(１００mg、０.０８mmol、０.０５当量)にマイクロ波バイアルで添加する。バイアルを密閉し、マイクロ波で１００℃(高吸収設定)で４０分間加熱する。反応混合物を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー(５−２０％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン)で精製して、所望の化合物を得る(３２４mg、６６％)。
【０２５４】
製造Ｂ：
３−ベンジル−６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン(１００mg、０.４１mmol)のＮＭＰ(２mL)溶液に、２−(Ｒ)−メチル−ピペラジン(６２mg、０.６１mmol)添加する。反応混合物を１９０℃で４時間、マイクロ波リアクターで加熱する。ｒｔに冷却し、ＤＣＭで希釈し、水性ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、有機層を除去して、粗生成物を得る。粗生成物のＥｔＯＡｃ／ヘプタン(２０％〜５０％)ＭｅＯＨ／ＤＣＭ(５％〜２０％)を用いるフラッシュクロマトグラフィーにより、溶媒除去後、生成物を黄色固体として得る(７４mg、６１％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.22 - 7.34 (m, 2 H), 7.11 - 7.22 (m, 3 H), 4.22 (s, 2 H), 3.13 - 3.26 (m, 2 H), 2.81 - 2.99 (m, 3 H), 2.70 - 2.80 (m, 1 H), 2.38 - 2.48 (m, 1 H), 2.15 (s, 3 H), 2.08 (s, 3 H), 1.00 (d, J=6.5Hz, 3 H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値297.2089。
【０２５５】
化合物４６−５３：以下の表(表４)は、上記アミノ化により製造した化合物を記載する：
【表６】
0005492202.tif 000103
【０２５６】
経路Ｂからの中間体：
３−クロロ−４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン(化合物５４)
【化９７】
0005492202.tif 000104
固体Ｋ２ＣＯ３(１０ｇ、７２.４mmol、１.８当量)を、(Ｒ)−２−メチル−ピペラジン(４.００ｇ、４０mmol、１当量)および３,６−ジクロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン(８ｇ、４５.２mml、１.１当量)のＤＭＦ(５０mL)に添加し、得られた溶液を６０℃で４８時間撹拌する。反応混合物を減圧下で１／２容積まで濃縮し、固体塩を溶解するのに必要な最少量の水(約１５mL)を添加し、ジクロロメタン(１００mL)を添加する。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(２％−２０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２)で精製して、所望の化合物を白色固体として得る(４.７ｇ、４９％)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 3.08-3.21 (m, 2H), 2.73-2.92 (m, 4H,) 2.47 (dd, J=12.4Hz, 10.2 Hz, 1H), 2.13 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 0.93 (d, J=6.3Hz, 3H)。
HR MS(m/z, MH+):測定値241.1218。
【０２５７】
３−クロロ−４,５−ジメチル−６−(ピペラジン−１−イル)−ピリダジン(化合物５５)
【化９８】
0005492202.tif 000105
化合物５５をピペラジンおよび３,６−ジクロロ−４,５−ジメチル−ピリダジンから上記の通り製造する。
MS(m/z, MH+)測定値227。
【０２５８】
(Ｒ)−４−(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(化合物５６)
【化９９】
0005492202.tif 000106
３−クロロ−４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン(１.２０ｇ、４.８８mmol)、５−クロロ−ピラジン−２−カルボン酸メチルエステル(９４６mg、５.３７mmol)、トリエチルアミン(３.４０mL、２４.４mmol)、および１,４−ジオキサン(１０mL)を、還流コンデンサーを備えた１００mL  丸底フラスコで合わせ、８０℃で２４時間加熱する。反応を室温に冷却し、４８時間撹拌する。ベージュ色固体がその間に沈殿し、それを濾過により単離し、Ｈ２Ｏで濯ぐ。沈殿を真空で乾燥させて、表題化合物を得る(１.３０ｇ、７１％)。
MS(m/z, MH+)測定値377.3。
【０２５９】
２−[(Ｒ)−４−(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール(化合物５７)
【化１００】
0005492202.tif 000107
(Ｒ)−４−(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(４００mg、１.０４mmol)をＴＨＦ(１２mL)に懸濁し、−７８℃に冷却する。メチルマグネシウムアイオダイド(２.８mL、ジエチルエーテル中３Ｍ、８.４mmol)を滴下する。反応を３０分間撹拌し、０℃に温め、さらに３０分間撹拌する。飽和水性ＮＨ４Ｃｌ(１０mL)を添加してクエンチし、さらにＨ２Ｏ(４０mL)を添加する。有機物をＥｔＯＡｃ(３×５０mL)で抽出し、乾燥させ、濃縮して、所望の生成物をベージュ色粉末として得る(４１５mg、定量的)。
MS(m/z, MH+)測定値359.3。
【０２６０】
２−[(Ｒ)−４−(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−ピペラジン−１−イル]−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル(化合物５８)
【化１０１】
0005492202.tif 000108
トリエチルアミン(２.０mL、１４.４mmol、２.９当量)を、２−クロロ−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル(１.２５ｇ、５.０mmol、１当量)、３−クロロ−４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン(１.２０ｇ、５.０mmol、１当量)のジクロロメタン(４０mL)溶液に添加し、得られた溶液をｒｔで２時間撹拌する。反応混合物をジクロロメタン(５０mL)で希釈し水(２５mL)、塩水(２５mL)で洗浄する。有機層を分離し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下濃縮して、白色残留物を得る。所望の化合物を、シリカゲルクロマトグラフィー(１０−７５％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン)により白色固体として単離する(１.８３ｇ、８２％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9.00 (s, 1H), 4.92 - 5.15 (m, 1H), 4.54 - 4.76 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.59 (d, J=14.0Hz, 1H), 3.50 (t, J=12.8Hz, 2H), 3.08 (dd, J=12.8Hz, 3.3Hz, 1H), 2.89 - 2.99 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 1.39 (d, J=7.0Hz, 3H)。
HR MS(m/z, MH+):測定値445.1373。
【０２６１】
２−[(Ｒ)−４−(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−ピペラジン−１−イル]−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボン酸エチルエステル(化合物５９)
【化１０２】
0005492202.tif 000109
上記のプロトコールに従い、２−クロロ−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボン酸エチルエステル(４００mg、１.５７mmol、１当量)および３−クロロ−４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン(４００mg、１.６６mmol、１当量)を用いて、７００mgの所望の生成物を白色固体として得る(９７％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.94 (s, 1 H), 5.12 - 5.18 (m, 1H), 4.70 - 4.85 (m, 1H), 4.35 (q, J=7.0Hz, 2H), 3.48 - 3.56 (m, 2H), 3.40 (d, J=12.5Hz, 1H), 3.21 (d, J=10.5Hz, 1H), 3.02 - 3.14 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 1.44 (d, J=7.0Hz, 3H), 1.37 (t, J=7.0Hz, 3H)。
【０２６２】
３−クロロ−４,５−ジメチル−６−[(Ｒ)−３−メチル−４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン(化合物６０)
【化１０３】
0005492202.tif 000110
３,６−ジクロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン(１００mg、０.５５４mmol)、(Ｒ)−２−メチルピペラジン(８５mg、０.８３１mmol)、炭酸カリウム(３８３mg、２.７７mmol)およびＤＭＦ(１mL)をバイアルで合わせる。マイクロ波で１２０℃で３.２５時間加熱する。２−クロロ−５−トリフルオロメチルピリジン(１８１mg、０.９９７mmol)を添加し、１８０℃で３０分間加熱する。粗反応を直接シリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(０−４０％ＥｔＯＡｃのヘプタン溶液)で精製して、表題化合物を明黄色固体として得る(７８mg、３７％)。
MS(m/z, MH+)測定値386.4
【０２６３】
経路Ｃからの中間体：
３−クロロ−４,５−ジメチル−６−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン(化合物６１)
【化１０４】
0005492202.tif 000111
１−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン(１０ｇ、４３.３mmol)を、３,６−ジクロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン(１４.４ｇ、８４.３mmol)、トリエチルアミン(８.２５mL)、およびＮＭＰ(４０mL)と合わせる。反応混合物を１８０℃で２５分間照射し、真空で濃縮する。残留物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(０−８％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２)で精製して、表題化合物を得る(１３.２ｇ、８２％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.48 - 8.41 (m, 1H), 7.84 (dd, J=9.1Hz, 2.4Hz, 1H), 7.03 (d, J=9.1Hz, 1H), 3.88 - 3.76 (m, 4H), 3.28 - 3.20 (m, 4H), 2.31 (s, 6H)。
【０２６４】
１−クロロ−４−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン(化合物６２)
【化１０５】
0005492202.tif 000112
４−ジクロロ−６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン(化合物３９、５００mg、２.６４mmol)のＮＭＰ(５mL)溶液に、１−[５−トリフルオロメチル)−ピリド−２−イル)−ピペラジン(５８１mg、２.５１mmol)、トリエチルアミン(１.１mL、７.９mmol)を添加する。混合物をマイクロ波リアクターで１７０℃で６０分間加熱した。水を反応混合物に添加し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を水、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物をメタノールで摩砕して、表題化合物を得た(４８３mg、４８％)。
1H NMR (CD2Cl2) δ = 8.41 (s, 1H), 7.68 (dd, J=8.9 Hz, 2.5 Hz, 1H), 6.73 (d, J=8.9 Hz, 1H), 3.80 (m, 4H), 3.60 (m, 4H), 3.04 (m, 2H), 2.95 (m, 2H), 2.16 (m, 2H)。
HR MS(m/z, MH+):測定値384.1190。
【０２６５】
１−クロロ−４−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−５,６,７,８−テトラヒドロ−フタラジン(化合物６３)
【化１０６】
0005492202.tif 000113
１,４−ジクロロ−５,６,７,８−テトラヒドロ−フタラジン(化合物２５、１００mg、０.４９２mmol)のＮＭＰ(３mL)溶液に、１−[５−トリフルオロメチル)−ピリド−２−イル)−ピペラジン(１１４mg、０.４９２mmol)、トリエチルアミン(２１８μL、１.５７mmol)を添加する。混合物をマイクロ波リアクターで１４０℃で６０分間加熱した。水を反応混合物に添加し、ＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物を水、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。粗生成物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ＥｔＯＡｃ／ヘプタン１０％〜７０％)で精製して、９６mg(４９％)の表題化合物を得た。
1H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ = 8.41 (s, 1H), 7.73 (dd, J=9.0 Hz, 2.5 Hz, 1H), 6.79 (d, J=9.0 Hz, 1H), 3.85 (m, 4H), 3.40 (m, 4H), 2.76-2.68 (m, 4H), 1.93 (m, 2H), 1.80 (m, 2H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値398.1359。
【０２６６】
６−[４−(４−クロロ−５,６,７,８−テトラヒドロ−フタラジン−１−イル)−ピペラジン−１−イル]−ニコチン酸エチルエステル(化合物６４)
【化１０７】
0005492202.tif 000114
本化合物を上記と類似の方法で製造する。
MS(m/z, MH+)測定値402.2
【０２６７】
６−[(Ｓ)−４−(４−クロロ−６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン−１−イル)−３−メチル−ピペラジン−１−イル]−ニコチン酸メチルエステル(化合物６５)
【化１０８】
0005492202.tif 000115
１,４−ジクロロ−６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン(１５０mg、０.７９mmol)のＮＭＰ(５mL)溶液に、(Ｓ)−３−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸エチルエステル(２９７mg、１.１９mmol)およびトリエチルアミン(３３２μL、２.３９mmol)添加する。反応混合物をマイクロ波リアクターで１９５℃で４時間加熱する。水およびＥｔＯＡｃを添加する。層を分離し、水性層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を水、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー(ＥｔＯＡｘ／ヘプタン１０％〜７０％)で精製して、５０mg(１６％)の表題化合物を得る。
【０２６８】
４−(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(化合物６６)
【化１０９】
0005492202.tif 000116
３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(２５０mg、１.０７mmol)のＮＭＰ(５mL)溶液に、３,６−ジクロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン(２３７mg、１.３３mmol)およびＴＥＡ(４４６μl、３.２１mmol)を添加し、反応混合物を１９０℃で６０分間撹拌する。水を混合物に添加し、ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を水、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物をＨＰＬＣ(アセトニトリル／水：１０％〜９５％と３％１−プロパノール)で精製して、白色粉末を得る(１６５mg、４３％)。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.69 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 3.92 (t, J=5.0Hz, 4H), 3.83 (s, 3H), 3.27 (m, 4H), 2.41 (s, 3H), 2.32 (s, 3H)。
MS(m/z, MH+)測定値363。
【０２６９】
実施例６５−７２の合成
実施例６５−６９を製造するためのピリダジンクロライド類IIIＡとアリール亜鉛ブロマイド類の根岸カップリングの一般的方法(経路Ｂ／Ｃ)
クロロピリダジンIIIａ(０.１５mmol、１当量)のＴＨＦ(５ml)溶液に、Ｐｄ(ＰＰｈ３)４(１２.５mol％)を添加する。混合物を脱気し、アリール亜鉛ブロマイド(０.２２５、１.５当量、例えばＴＨＦ中０.５Ｍ溶液として)を添加し、混合物をマイクロ波リアクターで８０℃で３０分間加熱する。反応混合物をｒｔに冷却し、水を添加し、混合物をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機抽出物を水、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物を溶離剤としてＥｔＯＡｃ／ヘプタンを用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製して、実施例Ｉｐを得る。
【０２７０】
以下の表(表５)は、上記根岸カップリングにより製造した化合物を記載する：
【表７】
0005492202.tif 000117
【０２７１】
実施例７０：２−(６−{(Ｓ)−４−[４−(２−クロロ−ベンジル)−６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン−１−イル]−３−メチル−ピペラジン−１−イル}−ピリジン−３−イル)−プロパン−２−オール
【化１１０】
0005492202.tif 000118
(Ｓ)−４−[４−(２−クロロ−ベンジル)−６,７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ[ｄ]ピリダジン−１−イル]−３−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸エチルエステル(３５mg、０.０７１mmol)のＴＨＦ(５mL)溶液に、メチルマグネシウムアイオダイド(エーテル中３Ｍ、０.１９mL、０.５７mmol)に０℃で添加し、混合物をｒｔで３０分間撹拌する。飽和ＮａＨＣＯ３溶液およびＥｔＯＡｃを添加する。層を分離し、水性層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を水、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物をＨＰＬＣ(アセトニトリル／水と０.１％ＴＦＡ、１０％〜５０％)で精製する。生成物を、この塩をＮａ２ＣＯ３溶液で処理後、遊離塩基として単離する(１１mg、３２％)
HR MS(m/z, MH+)測定値478.2367。
【０２７２】
実施例７１：２−{(Ｒ)−４−[６−(２,４−ジフルオロ−ベンジル)−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル]−２−メチル−ピペラジン−１−イル}−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボン酸エチルエステル
【化１１１】
0005492202.tif 000119
２−[(Ｒ)−４−(６−クロロ−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−ピペラジン−１−イル]−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボン酸エチルエステル(２２９mg、０.５０mmol、１当量)およびＴＨＦ(１.４mL)の溶液に、マイクロ波バイアル中、２,４−ジフルオロベンジル亜鉛ブロマイド(２.０mL  ＴＨＦ中０.５Ｍ溶液、２.０mmol、４当量)およびテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(２５mg、０.０３mmol、０.０５当量)を添加する。バイアルを密閉し、マイクロ波で６０℃(高吸収設定)で２５分間加熱する。さらに一定量の２,４−ジフルオロ(difloro)ベンジル亜鉛ブロマイド(１.０mL  ＴＨＦ中０.５Ｍ溶液、１.０mmol、２当量)を添加し、反応混合物をマイクロ波中、１００℃(高吸収設定)で５分間加熱する。反応混合物を水でクエンチし(１０mL)ＥｔＯＡｃ(２×２５mL)で抽出する。合わせた有機フラクションを硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィー(２５−７５％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン)で精製して、所望の化合物を得る(２２５mg、８１％)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.86 (s, 1H), 7.12 (t, J=7.3Hz, 1H), 6.76 - 6.83 (m, 2H), 4.99 - 5.07 (m, 1H), 4.64 - 4.73 (m, 1H), 4.28 (q, J=7.0Hz, 2H), 3.35 - 3.46 (m, 2H), 3.31 (d, J=12.5Hz, 1H), 3.10 (d, J=10.5Hz, 1H), 2.90 - 3.02 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 1.36 (d, J=7.0Hz, 3H), 1.29 (t, J=7.0Hz, 3H)。
【０２７３】
実施例７２：２−(２−{(Ｒ)−４−[６−(２,４−ジフルオロ−ベンジル)−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル]−２−メチル−ピペラジン−１−イル}−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−イル)−プロパン−２−オール
【化１１２】
0005492202.tif 000120
氷浴で冷却した２−{(Ｒ)−４−[６−(２,４−ジフルオロ−ベンジル)−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル]−２−メチル−ピペラジン−１−イル}−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボン酸エチルエステル(２２０mg、０.４０mmol、１当量)のＴＨＦ(１.０mL)溶液に、ＭｅＭｇＢｒ(２mL、エーテル中３Ｍ、６mmol、１５当量)溶液を添加する。溶液をｒｔで３０分間温める。反応を飽和ＮＨ４Ｃｌの注意深い添加によりクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮する。生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(２５−７５％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン)により単離して、所望の化合物を白色固体として得る(２７mg、１３％)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.74 (s, 1H), 7.21 (tt, J=8.3Hz, 6.5Hz, 1H), 6.85 - 6.94 (m, 1H), 4.95 - 5.05 (m, 1H), 4.64 (dd, J=12.5Hz, 3.3Hz, 1H), 4.26 (s, 2H), 3.49 (d, J=12.4 Hz, 1H), 3.36 - 3.44 (m, 2H), 3.19 (dd, J=12.5Hz, 3.8Hz, 1H), 3.05 (td, J=12.0Hz, 3.3Hz, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 1.70 (s, 6H), 1.42 (d, J=6.7Hz, 3 H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値537.2408。
【０２７４】
実施例７３−８７の合成
実施例７４−８６を製造するための、芳香族性クロライド類のアミン類XIIIでのアミノ化の一般的方法(経路Ａ)
アミンXIII(０.５mmol、１当量)および芳香族性ハライド(１mmol、２当量)のＮＭＰ(２.５ml)溶液に、トリエチルアミン(１.５mmol、３当量)を添加する。混合物をマイクロ波リアクターで１４０℃〜１９０℃(芳香族性ハライドの反応性による)の温度で３０分間加熱する。ＬＣ  ＭＳが反応の完了を示した後、水およびＥｔＯＡｃを添加し、層を分離し、水性層をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を水、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、濃縮する。生成物を溶離剤としてＥｔＯＡｃ／ヘプタンを用いるシリカゲルフラッシュクロマトグラフィーで精製して、実施例Ｉｐを得た。
【０２７５】
実施例７３：(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル
【化１１３】
0005492202.tif 000121
化合物４７(６.０ｇ、２０.２７mmol)、５−クロロピラジン−２−カルボン酸メチルエステル(５.３ｇ、３０.３０mmol)、Ｅｔ３Ｎ(６.２ｇ、６０.６０mmol)およびジオキサン(１００mL)の混合物を一夜加熱還流する。溶媒を除去する。飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を添加し、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機層を濃縮して、粗生成物を得て、それをシリカゲルクロマトグラフィー(ＥｔＯＡｃ／ヘプタン：５０％〜１００％)で精製して、表題化合物を得る(６.６ｇ、７６％)を黄色固体として得る。
1H NMR(400 MHz, CD2Cl2) δ = 8.81 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.29 (m, 5H), 4.83 (m, 1H), 4.43 (m, 1H), 4.33 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.52 (m, 3H), 3.27 (m, 1H), 3.14 (m, 1H), ), 2.31 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 1.49 (d, J=6.5Hz, 3H)。
HR MS(m/z. MH+)測定値433.2348。
【０２７６】
実施例７４−８６：以下の表(表６)は、一般的方法に記載したアミノ化により製造した化合物の実施例を記載する：
【表８】
0005492202.tif 000122
【０２７７】
実施例８７：３−ベンジル−４,５−ジメチル−６−[(Ｒ)−３−メチル−４−(４−トリフルオロ−メタンスルホニルフェニル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン
【化１１４】
0005492202.tif 000123
３−ベンジル−４,５−ジメチル−６−((Ｒ)−３−メチル−ピペラジン−１−イル)−ピリダジン(８０mg、０.２５７mmol)のジオキサン(５mL)溶液に、１−クロロ−４−トリフルオロメタンスルホニル−ベンゼン(９５.２mg、０.３８５mmol)、水酸化カリウムペレット(１０１mg、１.５５mmol)、ナフトキノンイミダゾリン−２−イリデン−Ｐｄ(０)(１７５mg、０.１２９mmol)を添加する。混合物をマイクロ波リアクターで１００℃で１２０分間加熱する。水を混合物に添加し、ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を水、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物をＨＰＬＣ(アセトニトリル／水：１０％〜９５％と３％１−プロパノール)で精製して、明黄色粉末を得る(５５mg、８９％)。
1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.81 (d, J=9.1Hz, 2H), 7.17-7.30 (m, 7H), 4.51 (m, 1H), 4.26 (s, 2H), 3.97 (d, J=12.6Hz, 1H), 3.55 (d, J=12.2Hz, 1H), 3.42 (m, 2H), 3.14 (m, 1H), 3.00 (m, 1H), 2.26 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.31(d, J=6.5 Hz, 3H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値505.1872 計算値505.1885。
【０２７８】
実施例８８−１１５の合成
エステル類とのグリニャール反応の一般的方法
エステル(０.５mmol、１当量)のＴＨＦ(３mL)溶液に、アルキルマグネシウムブロマイドまたはアイオダイド(４mmol、８当量、エーテル溶液)を−７８℃で添加する。反応混合物を０℃で２時間撹拌し、ＤＣＭで希釈し、ＮＨ４Ｃｌおよび水で洗浄する。合わせた有機層を水、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物のアセトニトリルの水を用いるＨＰＬＣでの精製により、少量の対応するメチルケトン類に続いて第三級アルコール類(主生成物)が得られる。溶媒を凍結乾燥により除去して、生成物を白色粉末として得る。
【０２７９】
実施例８８：２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール
【化１１５】
0005492202.tif 000124
(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(８４０mg、１.８５mmol)のＴＨＦ(１２mL)溶液に、臭化メチルマグネシウム(５mL、１５mmol、エーテル中３Ｍ)を−７８℃で添加する。反応混合物を０℃で２時間撹拌し、ＤＣＭで希釈し、ＮＨ４Ｃｌおよび水で洗浄する。合わせた有機層を水、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物のアセトニトリルの水溶液(１０％〜９５％と３％１−プロパノール)での精製により、２２０nm波長検出により、少量の対応するメチルケトン(実施例９５)に続いて、所望のアルコール(４００mg、５０％)を得る。溶媒を凍結乾燥により除去して、生成物を白色粉末として得る。
【０２８０】
実施例８９−１１１：以下の表(表７)は、上記のグリニャール付加により製造した化合物の実施例を記載する：
【表９】
0005492202.tif 000125
【表１０】
0005492202.tif 000126
【０２８１】
実施例１１２：２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−２,２−ジメトキシ−エタノール
【化１１６】
0005492202.tif 000127
ＫＯＨ(３３mg、０.３８mmol)およびメタノール(５mL)の溶液に、実施例９５(２０mg、０.０４８mmol)のメタノール(１mL)溶液、ヨードベンゼンジアセテート(２３mg、０.０７２mmol)を少しずつ０℃で添加する。混合物をｒｔで一夜撹拌する。溶媒を除去して、粗生成物を得て、それをＨＰＬＣ(アセトニトリル／水(１％ＮＨ４ＯＨ)、３０％〜１００％)で精製して、表題化合物を得る(１２mg、５２％)を黄色固体として得る。
1H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ = 8.42 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.29 (m, 5H), 4.72 (m, 1H), 4.32 (s, 2H), 4.30 (m, 1H), 3.94 (d, J=6.0Hz, 2H), 3.58 (m, 1H), 3.47 (m, 2H), 3.28 (m, 1H), 3.26 (s, 6H), 3.13 (m, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 1.44 (d, J=6.5Hz, 3H)。
【０２８２】
実施例１１３：１−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−エタノール
【化１１７】
0005492202.tif 000128
実施例９５(５０mg、０.１２mmol)およびＭｅＯＨ(３mL)の溶液に、ＮａＢＨ４(１０mg、０.２４mmol)を０℃で添加し、反応混合物をｒｔでさらに０.５時間撹拌する。溶媒を除去し、水を添加し、ＤＣＭで抽出する。有機層を濃縮して、表題化合物を得る(３８mg、７６％)を白色固体として得る。
1H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ = 8.04 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.15 (m, 5H), 4.73 (m, 1H), 4.57 (m, 1H), 4.21 (s, 2H), 4.07 (m, 1H), 3.46 (m, 1H), 3.33 (m, 2H), 3.15 (m, 1H), 3.01 (m, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.05 (s, 3H), 1.39 (d, J=6.5Hz, 3H), 1.30 (d, J=6.5Hz, 3H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値419.2543。
【０２８３】
実施例１１４：１−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル)−２−ヒドロキシ−エタノン
【化１１８】
0005492202.tif 000129
ＫＯＨ(２２４mg、４.０mmol)およびＣＨ３ＯＨ(１０mL)の溶液に、１−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル)−エタノン(４００mg、１.０mmol)のＣＨ３ＯＨ(１０mL)溶液、ヨードベンゼンジアセテート(４６４mg、１.５mmolｅ)を少しずつ０℃で添加する。混合物を室温で一夜撹拌する。溶媒を除去し、ＤＣＭで抽出する。有機層を水性ＮＨ４Ｃｌで洗浄し、濃縮して、粗実施例１１２を得る。この物質を水に溶解し、６Ｎ  ＨＣｌ(５mL)を添加する。混合物を室温で３時間撹拌する。その後それをＮａＨＣＯ３で塩基性化し、ＤＣＭで抽出する。有機層を濃縮して、粗生成物を得て、それをシリカゲルクロマトグラフィー(ＥｔＯＡｃ／ヘプタン：５０％〜１００％)で精製して、表題化合物を得る(２４０mg、５８％)を黄色固体として得る。
1H NMR(400 MHz, CD2Cl2) δ = 8.82 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.27 (m, 5H), 4.91 (s, 2H), 4.86 (m, 1H), 4.48 (m, 1H), 4.33 (s, 2H), 3.57 (m, 2H), 3.46 (m, 1H), 3.30 (m, 2H), 3.14 (m, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 1.50 (d, J=6.5Hz, 3H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値433.2340。
【０２８４】
実施例１１５：１−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル)−エタン−１,２−ジオール
【化１１９】
0005492202.tif 000130
１−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル)−２−ヒドロキシ−エタノン(実施例１１４、１１０mg、０.２５mmol)およびＥｔＯＨ(２０ml)の溶液に、ＮａＢＨ４(１４mg、０.３８mmol)を０℃で添加する。混合物を室温に温め、３時間撹拌する。反応溶液を３Ｎ  ＨＣｌでｐＨ〜７に酸性化し、有機溶媒を除去する。残留物を飽和ＮａＨＣＯ３溶液に溶解し、ＤＣＭで抽出する。有機層を濃縮して、表題化合物(９６mg、９１％)を白色固体として得る。
1H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ = 8.09 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.18 (m, 5H), 4.64 (m, 1H), 4.57 (m, 1H), 4.26 (s, 2H), 4.10 (m, 1H), 3.60 (m, 2H), 3.48 (m, 1H), 3.34 (m, 2H), 3.18 (m, 1H), 3.02 (m, 1H), 2.21 (s, 3H), 2.06 (s, 3H), 1.30 (d, J=6.5Hz, 3H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値435.2511。
【０２８５】
実施例１１６および１１７の合成
実施例１１６：(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸
【化１２０】
0005492202.tif 000131
(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メチルエステル(１.８ｇ、４.１６mmol)をＬｉＯＨ(９９８mg、４２mmol)、Ｈ２Ｏ(２０mL)、ＴＨＦ(２０mL)、およびＭｅＯＨ(１０mL)と合わせる。合わせた混合物を室温で１６時間撹拌する。真空で濃縮して、有機溶媒を除去する。さらに水を添加し、ＨＣｌまたはリン酸緩衝液でｐＨを４.０に調節する。溶液をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機抽出物を塩水で洗浄する。抽出物を硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過して、乾燥剤を除去する。濾液を濃縮して、表題化合物を得る(１.４６ｇ、８４％)。
1H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ = 8.89 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.27 (m, 5H), 4.84 (m, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.34 (s, 2H), 3.58 (m, 3H), 3.31 (m, 1H), 3.16 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 2.18 (s, 3H), 1.50 (d, J=6.5Hz, 3H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値419.2200。
【０２８６】
実施例１１７：２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−ピペラジン−１−イル]−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボン酸
【化１２１】
0005492202.tif 000132
メチル２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−ピペラジン−１−イル]−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボキシレート(５００mg、１.０mmol、１.０当量)のＴＨＦ(５mL)溶液に、ＬｉＯＨ水溶液(１Ｍ、２.０mL、２.０mmol、２.０当量)を添加し、得られた溶液を７５℃で４時間加熱する。反応混合物をＥｔＯＡｃ(５０mL)で希釈し、水(３×１５mL)で洗浄する。合わせた水性物を、水性ＨＣｌ(１Ｍ)でｐＨ６に合わせ、ジクロロメタン(３×５０mL)で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下濃縮して、所望の生成物を白色固体として得る(４７０mg、９６％)。
1H NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ = 8.97 (s, 1H), 7.23 - 7.30 (m, 2H), 7.10 - 7.22 (m, 3H), 5.11 - 5.23 (m, 1H), 4.77 - 4.86 (m, 1H), 4.31 (s, 2H), 3.52 - 3.64 (m, 2H), 3.50 (d, J=12.5Hz, 1H), 3.17 (dd, J=12.5Hz, 3.5Hz, 1H), 2.97 - 3.09 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.17 (s, 3H), 1.47 (d, J=6.5Hz, 3H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値487.2088。
【０２８７】
実施例１１８−１４４の合成
さらに実施例１１８−１４０を製造するための酸実施例１１６を用いたアミド形成の一般的方法
方法Ａ：
実施例１１６(４０mg、０.１０mmol)およびＳＯＣｌ２(１０mL)の混合物を１時間加熱還流し、溶媒を除去する。残留物をＤＣＭ(２mL)に溶解し、アミン(０.１４mmolｅ)およびＤＣＭ(３mL)の溶液に移す。反応混合物をｒｔで２時間撹拌する。水(１０mL)を添加し、混合物をＤＣＭ(３×２０mL)で抽出する。有機層を濃縮して、粗生成物を得て、それをＨＰＬＣ[アセトニトリル／水(１％ＮＨ４ＯＨ)、３０％〜１００％]で精製して、生成物を得る(実施例１１８〜１３２、２０％〜８４％)。
【０２８８】
方法Ｂ：
実施例１１６(４０mg、０.１０mmol)、ＨＡＴＵ(７３mg、０.１４mmolｅ)、ジイソプロピルエチルアミン(３７mg、０.２９mmol)、ジメチルアセトアミド(１.５ml)およびアミン(０.１４mmolｅ)の混合物をｒｔで１０時間撹拌する。粗生成物をＨＰＬＣ(アセトニトリル／水(３％プロパノール)、３０％〜１００％)で精製して、生成物を得る(実施例１３３−１４０、３７％〜５５％)。
【０２８９】
実施例１１８−１４０：以下の表(表８)は、上記の通りのアミド形成により製造した化合物の実施例を記載する：
【表１１】
0005492202.tif 000133
【表１２】
0005492202.tif 000134
【０２９０】
実施例１４１：２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−ピペラジン−１−イル]−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボン酸(２−ヒドロキシ−エチル)−メチル−アミド
【化１２２】
0005492202.tif 000135
２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−ピペラジン−１−イル]−４−トリフルオロメチル−ピリミジン−５−カルボン酸(４５mg、０.１mmol、１当量)のＴＨＦ(２mL)溶液に、過剰の塩化オキサリル(１００μL、１.２mmol、１２当量)および触媒量のＤＭＦを添加し、得られた溶液をｒｔで４５分間撹拌し、その時点でＮ−２−ヒドロキシエチル、Ｎ−メチルアミン(２００μL、２.５mmol、２５当量)を添加し、反応をさらに１時間撹拌する。反応混合物をＥｔＯＡｃ(５０mL)で希釈し、水(２×１０mL)、塩水(２×１０mL)で洗浄する。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下濃縮して、白色残留物を得る。所望の化合物をシリカゲルクロマトグラフィー(ＣＨ２Ｃｌ２−２０％ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２)により、白色固体として単離する(４３mg、７９％)。
1H NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ = 8.55 (d, J=2.6Hz, 1H), 7.22 - 7.29 (m, 2H), 7.11 - 7.20 (m, 3H), 5.05 - 5.15 (m, 1H), 4.69 - 4.79 (m, 1H), 4.30 (s, 2H), 3.80 (t, J=5.7Hz, 2H), 3.66 (t, J=5.6Hz, 2H), 3.50 - 3.60 (m, 2H), 3.43 - 3.50 (m, 2H), 3.15 (dt, J=12.6Hz, 4.2Hz, 1H), 2.97 - 3.07 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 1.45 (d, J=8.3Hz, 3H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値544.2647。
【０２９１】
実施例１４２：(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メトキシ−メチル−アミド
【化１２３】
0005492202.tif 000136
(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸(５０mg、０.１２０mmol)をＣＨ２Ｃｌ２(３００μL)に溶解する。混合物を０℃に冷却し、塩化オキサリル(３２μL、０.３５８mmol)、ＤＭＦ(３滴)を添加する。撹拌中、反応を室温で３時間維持する。ジイソプロピルエチルアミン(２０９μL、１.２mmol)を滴下し、Ｎ,Ｏ−ジメチルヒドロキシルアミンヒドロクロライド(１４mg、０.１４４mmol)を添加する。反応を１６時間撹拌する。粗混合物を真空で濃縮する。残留物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２)で精製して、表題化合物を得る(４２mg、７６％)。
【０２９２】
実施例９５の製造の別経路：
実施例９５：１−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−エタノン
【化１２４】
0005492202.tif 000137
(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−カルボン酸メトキシ−メチル−アミド(実施例１４２、４５０mg、０.９７５mmol)をＴＨＦ(１mL)に溶解し、０℃に冷却する。メチルマグネシウムアイオダイド(３２５μL、０.９７５mmol)を滴下する。反応を室温に温め、１６時間撹拌する。Ｈ２Ｏ(１滴)添加し、反応混合物を真空で濃縮する。残留物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(６０−１００％ＥｔＯＡｃ／ヘプタンおよび０−８％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ)で精製して、表題化合物を得る(３５０mg、８６％)。
【０２９３】
実施例１４３：(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−５’−イソプロペニル−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル
【化１２５】
0005492202.tif 000138
メチルトリフェニルホスホニウムアイオダイド(４１０mg、１.０１０mmol)をＴＨＦ(５.５mL)に添加し、５℃に冷却する。カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド(１.１mL、ＴＨＦ中１Ｍ、１.１mmol)を滴下する、反応を３０分間撹拌する。１−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−エタノン(３５０mg、０.８４１mmol)のＴＨＦ(１.５mL)溶液を反応に添加する。反応を１時間、５℃で撹拌し、氷浴を除去し、反応をさらに１６時間、室温で撹拌する。ＴＨＦを真空で除去する。残留物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(６０−９０％ＥｔＯＡｃ／ヘプタン)で精製して、表題化合物を得る(１３０mg、３７％)。
【０２９４】
実施例１４４：２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−１,２−ジオール
【化１２６】
0005492202.tif 000139
(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−５’−イソプロペニル−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル(実施例１４３、１２０mg、０.２９０mmol)をアセトン(２mL)、ｔｅｒｔ−ブタノール(１mL)、およびＨ２Ｏ(１mL)に懸濁する。この懸濁液にＫ２ＯｓＯ４(９.６mg、０.０２９mmol)およびＮＭＯ(３７.４mg、０.３１９mmol)を添加する。反応を室温で１６時間撹拌する。真空で濃縮する。Ｈ２Ｏを添加し、ＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機物を塩水で洗浄し、真空で濃縮する。残留物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２)で精製して、表題化合物を得る(４９.２mg、３８％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.32 (d, J=1.4Hz, 1H), 8.27 - 8.16 (m, 1H), 7.33 - 7.23 (m, 2H), 7.22 - 7.13 (m, 3H), 4.98 (d, J=1.0Hz, 1H), 4.74 - 4.62 (m, 1H), 4.58 (td, J=6.2Hz, 1.0Hz, 1H), 4.25 (s, 2H), 4.18 (dm, J=12.9Hz, 1H), 3.55 - 3.46 (m, 1H), 3.49 (d, J=5.8Hz, 2H), 3.40 (dm, J=12.4Hz, 1H), 3.29 (td, J=12.5Hz, 3.2Hz, 1H), 3.07 (dd, J=12.3Hz, 3.5Hz, 1H), 2.95 (td, J=12.3, 3.2Hz, 1H), 2.26 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 1.28 (d, J=6.4Hz, 3 H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値449.2667, 計算値449.2665。
【０２９５】
実施例１４５−１５８の合成
実施例１４５−１５４を製造するための、ピリダジンクロライド類XIIのアミン類でのアミノ化の一般的方法(経路Ａ)
ピリダジンクロライド類XII(０.３４mmol)のＮＭＰまたはジオキサン／ＤＭＦ(３mL)溶液に、置換ピペラジン(０.４９mmol)およびＴＥＡ(０.１５mL、１.０８mmol)を添加する。混合物をマイクロ波合成装置で２１０℃で６０分間加熱する。水を添加し、得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層を水、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮する。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー(ＥｔＯＡｃ／ヘキサン：１０％〜７０％)で精製して、実施例Ｉｐを得る。
【０２９６】
実施例１４５−１５４：以下の表(表９)は、上記アミノ化により製造した化合物の実施例を記載する：
【表１３】
0005492202.tif 000140
【表１４】
0005492202.tif 000141
【０２９７】
実施例１５５：４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペラジン−１−カルボン酸フェニルエステル
【化１２７】
0005492202.tif 000142
３−ベンジル−４,５−ジメチル−６−ピペラジン−１−イル−ピリダジン(６０mg、０.２１mmol)およびフェニルクロロホルメート(４０mg、０.２６mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(３mL)溶液に、２５℃でＮ−メチルモルホリン(０.０７mL、０.６０mmol)を添加する。２５℃で３時間撹拌後、混合物をＣＨ２Ｃｌ２(１０mL)で希釈し、飽和重炭酸ナトリウム(１mL)および水(２×５mL)で洗浄する。有機層を濃縮し、ＨＰＬＣ(ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ：２２％〜４５％と０.１％ＴＦＡ)で精製して、４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペラジン−１−カルボン酸フェニルエステル(６９mg、８１％)を得る。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 2.28 (3H, s), 2.41 (3H, s), 3.40 (4H, d), 3.81 (4H, d), 4.50 (2H, s), 7.13 (2H, d), 7.20 (2H, d), 7.27 (2H, m), 7.33 (2H, m), 7.38 (2H, m)。
HR MS(m/z, MH+)測定値403.2115。
【０２９８】
実施例１５６：４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペラジン−１−カルボン酸フェニルアミド
【化１２８】
0005492202.tif 000143
３−ベンジル−４,５−ジメチル−６−ピペラジン−１−イル−ピリダジン(６０mg、０.２１mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(５mL)溶液に、２５℃でフェニルイソシアネート(３３mg、０.２８mmol)を添加する。２５℃で２時間撹拌後、反応混合物を濃縮し、ＨＰＬＣ(ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ：２２％〜４５％と０.１％ＴＦＡ)で精製して、４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペラジン−１−カルボン酸フェニルアミド(４９mg、５８％)を得る。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 2.12 (2H, s), 2.21 (3H, s), 3.27 (4H, t), 3.67 (4H, t), 4.30 (2H, s), 7.01 (1H, t), 7.19 (3H, m), 7.25 (4H, m), 7.39 (2H, d)。
HR MS(m/z, MH+)測定値402.2279。
【０２９９】
実施例１５７：４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペラジン−１−カルボン酸ベンジルアミド
【化１２９】
0005492202.tif 000144
３−ベンジル−４,５−ジメチル−６−ピペラジン−１−イル−ピリダジン(６０mg、０.２１mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(５mL)溶液に、２５℃でベンジルイソシアネート(３７mg、０.２８mmol)を添加する。２５℃で２時間撹拌後、反応混合物を濃縮し、ＨＰＬＣ(ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ：２２％〜４５％と０.１％ＴＦＡ)で精製して、４−(６−ベンジル−４,５−ジメチル−ピリダジン−３−イル)−ピペラジン−１−カルボン酸ベンジルアミド(４６mg、６０％)を得る。
1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 2.24 (3H, s), 2.34 (3H, s), 3.33 (4H, t), 3.58 (4H, t), 4.44 (2H, s), 4.49 (2H, s), 7.19 (2H, d), 7.26 (2H, m), 7.30 (2H, m), 7.32 (4H, m)。
HR MS(m/z, MH+)測定値416.2437。
【０３００】
実施例１５８：３−ベンジル−６−(４−ベンジル−ピペラジン−１−イル)−４,５−ジメチル−ピリダジン
【化１３０】
0005492202.tif 000145
３−ベンジル−４,５−ジメチル−６−ピペラジン−１−イル−ピリダジン(４０mg、０.１４mmol)のＣＨ２Ｃｌ２(１.６mL)およびＴＨＦ(１.６mL)溶液に、２５℃でベンズアルデヒド(２３mg、０.２１mmol)、酢酸(２滴)およびナトリウムトリアセトキシボロハイドライド(９０mg、０.４３mmol)を添加する。２５℃で２時間撹拌後、混合物をＣＨ２Ｃｌ２(１０mL)で希釈し、飽和重炭酸ナトリウム(２mL)および水(５mL)で洗浄する。有機層を濃縮し、ＨＰＬＣ(ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ：２２％〜４５％と０.１％ＴＦＡ)で精製して、３−ベンジル−６−(４−ベンジル−ピペラジン−１−イル)−４,５−ジメチル−ピリダジン(２０mg、３７％)。
1H-NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ = 2.00 (3H, s), 2.11 (3H, s), 2.56 (4H, t), 3.12 (4H, t), 3.51 (2H, s), 4.16 (2H, s), 7.05 (3H, m), 7.15 (3H, m), 7.25 (4H, m)。
HR MS(m/z, MH+)測定値373.2378。
【０３０１】
５員アリールメチル−ピリダジン類
スキーム７は、式ＩｑからＩｓの化合物の製造のための一般的スキームを記載する。置換クロロピリダジン類IIIａをアセトニトリルと強塩基(例えばＬｉＨＭＤＳ)の処理下に反応させて、中間体XIVａを得ることができる。ニトリル官能基の加水分解により酸中間体XIVｂを得て、続く酸ヒドラジド類とのカップリングにより中間体XIVｃを得る。中間体XIVａをヒドロキシルアミンおよびＮ,Ｎ−ジメチルホルムアミド−ジメチルアセタールと反応させて実施例Ｉｑを得ることができ、またはナトリウムアジドとの反応と続くアルキル化(例えばブロマイド類またはアイオダイド類)によりテトラゾール実施例Ｉｒを得ることができる。中間体XIVｃを、例えばトリフェニルホスフィンと縮合して、実施例Ｉｓを得ることができる。
【化１３１】
0005492202.tif 000146
スキーム７
【０３０２】
中間体XIVの合成
４,５−ジメチル−６−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン−３−イル−アセトニトリル(化合物６７)
【化１３２】
0005492202.tif 000147
３−クロロ−４,５−ジメチル−６−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン(１.０ｇ、２.６４mmol)、アセトニトリル(０.２２５mL、４.２２mmol)、およびトルエン(５mL)を合わせ、０℃に冷却する。ＬｉＨＭＤＳ(８.４mL、１.０Ｍ、８.４mmol)を５分間にわたり滴下する。反応を０℃で１時間撹拌し、室温に温め、さらに１６時間撹拌する。反応を飽和水性ＮＨ４Ｃｌの添加によりクエンチし、有機物をＥｔＯＡｃで抽出する。合わせた有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濃縮する。残留物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(０−１００％ＥｔＯＡｃのヘプタン溶液)で精製して、表題化合物をオレンジ色固体として得る(５００mg、５０％)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.36 (s, 1H), 7.60 (dd, J=9.0Hz, 2.5 Hz, 1H), 6.65 (d, J=9.0Hz, 1H), 3.96 (s, 2H), 3.72 - 3.78 (m, 4H), 3.26 - 3.37 (m, 4H), 2.26 (d, J=13.1Hz, 6H)。
MS(m/z, MH+)測定値377.2。
【０３０３】
{４,５−ジメチル−６−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン−３−イル}−酢酸(化合物６８)
【化１３３】
0005492202.tif 000148
{４,５−ジメチル−６−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン−３−イル}−アセトニトリル(２１０mg、０.５６mmol)および６Ｍ  ＨＣｌ(１.０mL)を密閉管に入れ、１００℃で１６時間加熱する。有機物をＣＨ２Ｃｌ２で抽出する。水性部分を重炭酸ナトリウム溶液でｐＨ〜７に中和し、ＥｔＯＡｃで抽出する。標的化合物は水性層にある。この層を減圧下濃縮し、残留物をＭｅＯＨで数回摩砕し、真空で乾燥させて、表題化合物を得る(２８０mg、定量的)。
【０３０４】
酢酸Ｎ’−(２−{４,５−ジメチル−６−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン−３−イル}−アセチル)−ヒドラジド(化合物６９)
【化１３４】
0005492202.tif 000149
酢酸ヒドラジド(２０.６mg、０.２８mmol)を、丸底フラスコにＮ２下入れ、ＤＭＦ(５mL)を入れる。ジイソプロピルエチルアミン(０.２５mL)を添加し、反応を３０分間撹拌する。{４,５−ジメチル−６−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン−３−イル}−酢酸(１１０mg、０.２８mmol)を添加し、反応を１時間撹拌する。ＨＯＢＴ(４２mg、０.３１１mmol)およびＨＢＴＵ(１１６.８mg、０.３１mmol)を添加し、反応を１６時間撹拌する。粗反応混合物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(０−３０％メタノールのジクロロメタン溶液)で精製して、表題化合物を得る(１１４mg、９０％)。
【０３０５】
実施例１５９−１６２の合成
実施例１５９：４,５−ジメチル−３−(５−メチル−[１,２,４]オキサジアゾール−３−イル−メチル)−６−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン
【化１３５】
0005492202.tif 000150
４,５−ジメチル−６−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン−３−イル−アセトニトリル(１２０mg、０.３２mmol)をヒドロキシルアミン(６３mg、０.９６mmol)およびＴＨＦ(２mL)と合わせる。反応混合物を３時間加熱還流する。反応を濃縮し、残留物をジメチルアセトアミドジメチルアセタール(５００μL)に再溶解する。この溶液を１６時間、加熱還流する。得られた混合物を真空で濃縮する。残留物をシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー(ＭｅＯＨ／ＣＨ２Ｃｌ２)で精製して、表題化合物を得る(６２.３mg、４５％)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8.44 (d, J=1.6Hz, 1H), 7.83 (dd, J=9.1Hz, 2.5Hz, 1H), 7.03 (d, J=9.1Hz, 1H), 4.34 (s, 2H), 3.86 - 3.76 (m, 4H), 3.26 - 3.18 (m, 4H), 2.54 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.22 (s, 3H)。
HR MS(m/z, MH+):測定値434.1913 計算値434.1916。
【０３０６】
実施例１６０および１６１：４,５−ジメチル−３−(１−メチル−１Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル)−６−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジンおよび４,５−ジメチル−３−(２−メチル−２Ｈ−テトラゾール−５−イルメチル)−６−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン
【化１３６】
0005492202.tif 000151
４,５−ジメチル−６−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン−３−イル−アセトニトリル(１２０mg、０.３２mmol)を塩化亜鉛(II)(４３.５mg、０.３２mmol)およびナトリウムアジド(２５mg、０.３８mmol)とＨ２Ｏ(５mL)中で合わせる。混合物を４時間加熱還流し、室温に冷却する。遊離テトラゾールを濾過により単離し、ＤＭＦ(４.２mL)に溶解し、さらに精製せずに続ける。炭酸セシウム(１２８.５mg、０.３９５mmol)を添加し、反応混合物を０℃に冷却する。ヨウ化メチル(１６μL、０.２６３mmol)を滴下する、反応を撹拌し、１６時間にわたり室温に温める。０℃に再冷し、さらにヨウ化メチル(２４μL、０.３９５mmol)を添加する。反応を１６時間にわたり室温に温める。反応を真空で濃縮し、固体を濾取する。ＭｅＯＨで洗浄する。残った固体をＨ２ＯおよびＴＦＡに溶解し、ＨＰＬＣ(ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ)で精製して、表題化合物を位置異性体の５７：４３混合物として得る(２２.２mg、２０％)。
1H NMR (化合物の混合物, 600 MHz, DMSO-d6) δ = 8.44 (s, 1H), 7.83 (d, J=9.1Hz, 1H), 7.07 - 6.99 (m, 1H), 4.62 (s, 1.1H), 4.50 (s, 0.9H), 4.30 (s, 1.3H), 4.00 (s, 1.7H), 3.85 - 3.76 (m, 4 H), 3.24 - 3.16 (m, 4H), 2.29 (s, 1.7H), 2.26 (s, 3H), 2.21 (s, 1.3H)。
HR MS(m/z, MH+)測定値434.2035, 計算値434.2029。
【０３０７】
実施例１６２：４,５−ジメチル−３−(５−メチル−[１,３,４]オキサジアゾール−２−イルメチル)−６−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン
【化１３７】
0005492202.tif 000152
酢酸Ｎ’−(２−{４,５−ジメチル−６−[４−(５−トリフルオロメチル−ピリジン−２−イル)−ピペラジン−１−イル]−ピリダジン−３−イル}−アセチル)−ヒドラジド(１１４mg、０.２４８mmol)を、丸底フラスコに、Ｎ２下に入れ、アセトニトリル(３mL)、ジイソプロピルエチルアミン(０.２７mL、１.４３mmol)およびトリフェニルホスフィン(１１５.５mg、０.４４mmol)を入れ、反応を３０分間撹拌する。ヘキサクロロエタン(７７.５mg、０.３２９mmol)を添加し、反応を１６時間撹拌する。粗混合物をＨＰＬＣ(モディファイヤーとして水酸化アンモニウム)で精製して、表題化合物を得る(８mg、７％)。
HR MS(m/z, MH+)測定値434.1934, 計算値434.1916。
【０３０８】
実施例１６３および１６４の合成
実施例１６３および１６４は、２００mgの実施例８８を組み換えヒトＣｙｐ３Ａ４とインキュベーションすることにより製造し、単離および精製後、以下に記載する化合物を白色固体として得る。
【０３０９】
実施例１６３：２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−５−ヒドロキシメチル−４−メチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール
【化１３８】
0005492202.tif 000153
収量：６.５mg
【０３１０】
実施例１６４：２−[(Ｒ)−４−(６−ベンジル−４−ヒドロキシメチル−５−メチル−ピリダジン−３−イル)−２−メチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２Ｈ−[１,２’]ビピラジニル−５’−イル]−プロパン−２−オール
【化１３９】
0005492202.tif 000154
収量：８.２mg
【０３１１】
本発明の化合物は、仮特許出願６０／８９４９９に示す化合物の一群の中の一種である。以下の比較データは、本願の実施例を出願６０／８９４９９の最も近い実施例、例えば、化合物番号９２、９３、９３ａ、ｂ、ｃと比較することにより、効果および溶解度の改善を示す：
出願６０／８９４９９
【表１５】
0005492202.tif 000155
【０３１２】
本発明の実施例
【表１６】
0005492202.tif 000156
【０３１３】
生物学的活性
化合物の活性を、ＴＭＨｈ１２細胞でのレポーター遺伝子アッセイ(ＲＧＡ)を使用して評価した。Ｇｌｉ−ルシフェラーゼ活性のアンタゴニズムに対するＩＣ５０を、１nMの親和性でＳｍｏに結合し、Ｈｈ経路を活性化させる小分子アゴニストの漸増濃度の存在下で試験した(Frank-Kamenetsky et al 2002, Journal of Biology 1, 10.1-10.19)。アゴニスト投与量を増加させるにつれて増加するＧｌｉ−ｌｕｃに対するＩＣ５０を示すスクリーニングからのアンタゴニスト化合物は、直接Ｓｍｏと相互作用し得る(Ｓｍｏの同じ結合部位に対する競合を介して、またはアゴニストにより誘導されるＳｍｏの活性化立体配座状態と試験アンタゴニストにより誘発される不活性状態の間の競合を介して)。確認試験において、Ｓｍｏの種々の小分子アンタゴニストは、“ＩＣ５０シフト”行動を証明する。
【０３１４】
表１０は、Smoothenedの小アゴニストの種々の濃度(１nMおよび２５nM)の存在下で決定した、アンタゴニストのＩＣ５０を記載する(Frank-Kamenetsky et al 2002, Journal of Biology 1, 10.1-10.19)。
Ｓｍｏ結合アッセイは、化合物の競合のための放射標識Smoothenedアゴニストを使用して進展させた。表１０は、マウスおよびヒトSmoothened受容体に対して、フィルター結合形式で決定したSmoothenedの小分子アゴニストの置き換えに対するＩＣ５０を記載する。
【０３１５】
【表１７】
0005492202.tif 000157
【表１８】
0005492202.tif 000158
【表１９】
0005492202.tif 000159
【表２０】
0005492202.tif 000160
【０３１６】
以上、本発明の好ましい態様と現在考えられるものを記載しているが、当業者は本発明の精神から逸脱することなくそれに変化および修飾を成すことができることを認識し、全てのかかる変化および修飾は本発明の真の範囲内に入ることが意図される。