(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）を有する化合物またはその薬学上許容される塩：
Ｒ１−ＮＨ−ＣＨ（Ｒ２）−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ３）−ＣＨ２−Ｃ（Ｒ４）（Ｒ５）−ＣＯＮＨ−ＣＨ（Ｒ６）−ＣＯＯＲ７（Ｉ）
［式中、
−Ｒ１は、基−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｃ（Ｒ８）（Ｒ９）−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ１０を表し、ここで、
−−Ｒ８およびＲ９は互いに独立に、水素原子またはＣ１−６アルキル基を表し；
−−Ｒ１０は、Ｃ１−６アルキル基を表し；
−Ｒ２は、
−−１〜６個の炭素原子を含んでなる、直鎖もしくは分枝の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖；または
−−アリールまたはヘテロアリール基；
を表し；
−Ｒ３は、水素原子または式−Ｃ（Ｒ１２）（Ｒ１３）−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｒ１４を有する基を表し、ここで、
−−Ｒ１２およびＲ１３は互いに独立に、水素原子またはＣ１−６アルキル基を表し；
−−Ｒ１４はＣ１−６アルキル基を表し；
−Ｒ５は水素原子を表し、Ｒ４は、
−−フェニル核において、
−−−１〜５個のハロゲン原子；
−−−フェニル基；または
−−−５つまたは６つの結合を有する複素芳香環；
で置換されていてもよいフェニルまたはベンジル；
を表し；
あるいは、Ｒ４およびＲ５は一緒に、それらを担持する炭素とともに、
−５員または６員の飽和炭化水素環、または
−ピペリジン環（４位において窒素が飽和され、
−−Ｃ１〜Ｃ４アシル基；
で置換されていてもよい）を形成し：
−Ｒ６は、
−−１〜６個の炭素原子を含んでなり、
−−−基ＯＲ１６、（式中、Ｒ１６は水素原子を表す）；
で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖を表し；
−Ｒ７は、水素原子、ベンジル、Ｃ２〜Ｃ４アルキル、および−ＣＨＲ１８−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ１９（ここで、Ｒ１８およびＲ１９は互いに独立に、Ｃ１−６アルキル基を表す）からなる群から選択される基を表す］。
【請求項２】
Ｒ１が基−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−ＣＨＭｅ−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨＭｅ２を表す、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ２が、Ｃ１−６アルキルまたはアリール基を表す、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ３が水素原子または−ＣＨＭｅ−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨＭｅ２基を表す、請求項１に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ３が水素原子を表す、請求項４に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ６がメチル基を表す、請求項１に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ７が水素原子、エチル、ベンジルもしくは−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｅｔ基を表す、請求項１に記載の化合物。
【請求項８】
下記の化合物：
２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸ベンジルエステル、
２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸、
２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸エチルエステル、
２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸エトキシカルボニルオキシ酸エステル、
２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛（１−イソブチリルオキシ−エトキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸、
２−（２−（４−ブロモ−ベンジル）−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸ベンジルエステル、
２−（２−（４−ブロモ−ベンジル）−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸、
２−［２−ヒドロキシ−［（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−フェニル−メチル］−ホスフィノイルメチル｝−３−（４−チオフェン−３−イル−フェニル）−プロピオニルアミノ］−プロピオン酸、
２−［２−ヒドロキシ−［（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−フェニル−メチル］−ホスフィノイルメチル｝−３−（４−チオフェン−３−イル−フェニル）−プロピオニルアミノ］−３−ヒドロキシプロピオン酸、
２−（３−ビフェニル−４−イル−２−｛ヒドロキシ［（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−チオフェン−３−イル−メチル］−ホスフィノイルメチル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸、
２−｛３−ビフェニル−４−イル−２−［ヒドロキシ−［（１−イソブチリルオキシ−メトキシカルボニルアミノ−エチル）−ホスフィノイルメチル］−プロピオニルアミノ｝−プロピオン酸、
２−ジメチル−プロピオン酸の１−（１−｛［３−ビフェニル−４−イル−２−（１−カルボキシ−エチルカルバモイル）−プロピル］−ヒドロキシ−ホスフィノイル｝−エチルカルバモイルオキシ）−エチル酸、
２−［（１−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイルメチル｝−シクロペンタンカルボニル）−アミノ］−プロピオン酸、
２−［（１−アセチル−４−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイルメチル｝−ピペリジン−４−カルボノイル）−アミノ］−プロピオン酸
から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物を含んでなる、疼痛の処置のための医薬組成物。
【請求項１０】
疼痛が、鋭痛ならびに神経因性および神経炎症性疼痛から選択される、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の式（Ｉ）を有する少なくとも１つの化合物と、少なくとも１つの薬学上許容されるビヒクルとを含んでなる、医薬組成物。
【請求項１２】
前記ビヒクルが経口投与に適したものである、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
少なくとも１つのさらなる鎮痛剤をさらに含んでなる、請求項１１または１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記さらなる鎮痛剤が、モルヒネおよびその誘導体、テトラヒドロカンナビノールおよびその誘導体、ギャバ誘導体、Ｐ２Ｘ３プリン受容体アンタゴニストまたはボツリヌス菌毒素からなる群から選択される、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
ギャバ誘導体がガバペンチンまたはプレガバリンである、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
ボツリヌス菌毒素がボツリヌス菌毒素Ａである、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
（ｉ）請求項１〜８のいずれか一項に記載の式（Ｉ）を有する少なくとも１つの化合物と、
（ｉｉ）モルヒネおよびその誘導体、テトラヒドロカンナビノールおよびその誘導体、ギャバ誘導体、Ｐ２Ｘ３プリン受容体アンタゴニストまたはボツリヌス菌毒素からなる群から選択される少なくとも１つのさらなる鎮痛剤と
を、同時、個別または交互使用のための組合せ製品として含んでなる、医薬組成物。
【請求項１８】
Ｉ型またはＩＩ型真性糖尿病、ウイルスまたはレトロウイルス感染、癌化学療法、放射線療法、外科手術（切断患者の幻覚および乳房切除の後遺症を含む）、アルコール依存症、顔面神経痛、外傷、神経根障害、脊髄根痛(radiculagia)、下腿痛、胸郭出口症候群、繊維筋痛症、レストレスレッグ症候群(restless leg syndrome)、炎症性関節痛、変形性関節痛または腰痛により引き起こされる神経因性または炎症性疼痛の処置を目的とした医薬品として用いるための、請求項１１〜１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記ビヒクルが、舌下、非経口、皮下、肺、鼻腔、筋肉内、静脈内、くも膜下腔内、関節内または経皮的経路による投与に適したものである、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
少なくとも１つのさらなる鎮痛剤を含んでなる、請求項１９に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記さらなる鎮痛剤が、モルヒネおよびその誘導体、テトラヒドロカンナビノールおよびその誘導体、ならびにその混合物からなる群から選択される、請求項２０に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
鋭痛の処置を目的とした医薬品として用いるための、請求項１９または２０に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【発明の背景】
【０００１】
本発明は、アミノホスフィン酸化合物、その製造方法および過度の痛覚により引き起こされる神経因性痛、神経炎症性痛、術後痛または鋭痛などの疼痛の処置におけるその使用に関する。
【０００２】
侵害受容流入の知覚、伝達および調節は、複数の神経伝達物質、特にエンケファリンに依存する。
【０００３】
エンケファリン（Ｍｅｔ−エンケファリンおよびＬｅｕ−エンケファリン）は、哺乳類の脳で初めて検出されたペンタペプチドである(Hugues Nature 1975, 258, 577)。エンケファリンは本質的に、機能と部位の異なる(Waksman et al. Proc. Natl. Acad. Sci. 1986, 83, 152)２つの受容体種μおよびδ受容体と結合する(Lord et al. Nature 1977, 267, 495)。
【０００４】
エンケファリンの抗侵害受容特性は外因性エンケファリンの脳室内投与の後に実証された(Belluzi Nature 1976, 260, 625)。しかしながら、この応答は、これらのペプチドが酵素活性によって極めて急速に代謝されるために非常に一時的なものである。酵素分解耐性となるように改変された合成エンケファリン類似体はモルヒネと同等の抗侵害受容特性を示したが、モルヒネと同じ有害な副作用も示した。
【０００５】
さらに、エンケファリン（Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−ＭｅｔおよびＴｙｒ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ）は、これらのペプチドのＧｌｙ３−Ｐｈｅ４結合を切断するネプリライシン（ＥＰ３．４．２４．１１、ＮＥＰ）(Malfroy et al. Nature 1978, 276, 523)およびＴｙｒ１−Ｇｌｙ２結合を切断するアミノペプチダーゼＮ（ＥＣ３．４．１１．２、ＡＰＮ）(Waksman et al. Eur. J. Pharmacol. 1985, 117, 233; Roques et al. Pharmacological Reviews 1993, 45, 87-146)の２つの亜鉛メタロペプチダーゼにより生理学的に不活性化されることが知られている。
【０００６】
内因性エンケファリンをその酵素分解から完全に保護することによるこれら２つの酵素活性の阻害(Bourgoin et al. J. Pharm. Exp. Ther. 1986, 238, 360)は、これらのニューロペプチドの薬理活性、特に、鎮痛活性および抗鬱活性を示す(Roques Trends Pharmacol. Sci. 2000, 21, 475; Jutkiewicz CNS Drugs Reviews 2007, 13, 192-206)。
【０００７】
細菌の研究では、エンケファリン、ＮＥＰおよびＡＰＮ不活性化酵素ならびにオピオイド受容体からなるエンケファリン作動系は、侵害受容器(nocioceptors)に、すなわち、疼痛流入を伝達する知覚神経の最末端に存在することが実証された(M.J. Millan Prog. in Neurobiology, 57, 1999, 1-164)。この経路では、
ｉ）プレプロエンケファリン遺伝子は脊髄神経の背中腺で発現され、侵害受容器の末梢に輸送され(Antunes-Bras J et al. Neuroscience 2001, 103, 1073-1083)、
ｉｉ）エンケファリンは損傷組織に誘引された免疫細胞で多量に発現され(Przewlocki R et al. Neuroscience, 1992, 48(2), 491-500)、これらの細胞から傷害部位に放出され(Rittner HL et al. FASEB J. 2006, 20, 2627-2629)、
ｉｉｉ）オピオイド受容体は末梢端に存在し(Hassan AHS et al. Neuroscience 1993, 55, 185-195)、
ｉｖ）最後に、２つのＮＥＰおよびＡＰＮペプチダーゼは活性炎症により動員される白血球で増強される(Salzet M et al. Trends in Neuroscience 2000, 23, 550-555)。
【０００８】
先行技術に記載されている両酵素活性の混成阻害剤は、２つの主要なファミリーに分類することができるプロドラッグである。
【０００９】
第一のファミリーは、ジスルフィド橋を介して強力なＮＥＰ阻害剤と強力なＡＰＮ阻害剤を結びつけているアミノ酸誘導体からなる（ＦＲ２６５１２２９、J. Med. Chem. 1992, 35, 2473）。これらの分子は優れた静脈内（ｉｖ）抗侵害受容活性を示す。より溶解度の高い分子の新たな生成は、満足のいく経口活性を有する化合物の獲得を可能にする（ＦＲ２８９２４１３、ＦＲ２８９２４１４およびＦＲ０８／５３０９２）。
【００１０】
第二のファミリーは、ＡＰＮおよびＮＥＰを一緒に阻害する化合物を含んでなる。それらはヒドロキシム酸官能化合物（ＦＲ２５１８０８８およびＦＲ２６０５００４）またはアミノホスフィン酸化合物（ＦＲ２７５５１３５およびＦＲ２７７７７８０）のいずれかである。
【００１１】
これらの文献に記載されているヒドロキシム酸化合物は、優れたin vitroおよび脳室内投与後のin vivo活性を示す。これは特に以下の刊行物(Eur. J. Pharmacol. 1984, 102, 525-528; Eur. J. Pharmacol. 1989, 165, 199-207; Eur. J. Pharmacol. 1991, 192, 253-262)で実証されている。関節炎ラットモデルにおけるｉｖ投与後にも有意な活性が見られた(Brain Research 1989, 497, 94-101)。
【００１２】
出願ＦＲ２７５５１３５およびＦＲ２７７７７８０に記載されているアミノホスフィン酸化合物は、末端の窒素原子に遊離アミン官能基かイミン官能基のいずれかを有する。しかしながら、発明者らによれば、生理学的条件下で、このようなイミン官能基を有する化合物は２つのペプチダーゼＮＥＰおよびＡＰＮの活性を阻害しないことが認められた。本発明者らは、活性を確保するためにはプロドラッグが遊離アミン官能基を再生することが重要であり、これは生理学的条件下、イミンの存在下では可能でないということを発見した。
【００１３】
出願ＦＲ２７５５１３５に記載されている化合物では、ホスフィン酸官能基は遊離のままであるか、またはアルキルまたはベンジルである保護基により保護される。しかしながら、ホスフィン酸官能基が保護されていない場合には活性は低下することが記載されている(Hecker S. J. and Erion M. D. J. Med. Chem. 2008, 51, 2328-2345)。
【００１４】
出願ＦＲ２７７７７８０に記載されている化合物では、ホスフィン酸官能基は、
−ＣＨ（Ｘ）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｙ基（ここで、Ｘ，Ｙ＝アルキルまたはフェニルか、
式−ＣＨ２−ＣＨ２−Ｓ−ＣＯ−Ｗ（ここで、Ｗ＝アルキルまたはフェニル）を有するＳ−アシルチオエチル（ＳＡＴＥ）エステル基
のいずれかである保護基により保護されている。
【００１５】
しかしながら、このＳＡＴＥ基は、ヒト身体におけるチオエステルの加水分解により生じる環状生成物（エチレンスルフィド）の毒性のためにヒト療法には使用できない(Hecker S. J. and Erion M. D. J. Med. Chem. 2008, 51, 2328-2345)。
【００１６】
さらに、本発明者らは、ホスフィン酸官能基を保護する−ＣＨ（Ｘ）−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｙ基および遊離アミン官能基が一緒に存在することで不活性な転位生成物の形成（加水分解に適さないアミド−Ｎ−Ｃ（Ｏ）−Ｙの形成；実施例１３参照）が起こることを初めて見出した。  
【００１７】
しかしながら、出願ＦＲ２７７７７８０に記載されているアミノホスフィン酸誘導体の場合、長時間作用を有する満足のいく抗侵害受容活性が、動物痛覚モデルにおいて、検討分子をオイル、エタノールおよび水の混合物で溶解させた際のｉｖまたはｉｐ（腹腔内）投与後に示された(J. Med. Chem. 2000, 43, 1398-1408; J. Med. Chem. 2001, 44, 3523-3530; Pain 2003, 104, 139-148)。しかしながら、これらの分子に、ヒトにおける投与に好適な溶質に十分溶解するものは無く、経口投与後に有意な抗侵害受容活性が検出されたものも無かった。
【発明の開示】
【００１８】
よって、本発明の目的の１つは、エンケファリン分解を担う両酵素活性（ネプリライシンおよびアミノペプチダーゼＮ）を長時間作用で（すなわち、少なくとも２時間）一緒に阻害することができ、従って、経口投与の後またはヒトへの投与に適合した溶質の溶液とした後に該ペプチドの薬理学的特性を有意に増幅することができる、安定な新規アミノホスフィン酸化合物を提供することである。
【００１９】
この目的で、アミノホスフィン酸阻害剤の第一級アミン官能基は生理学上許容される一時的保護基で置換され、カルボン酸官能基はエステル化されてもよく、ホスフィン酸官能基は遊離のままであるか、または生理学上許容される一時的保護基で置換された。これらの保護により、極めて満足のいくバイオアベイラビリティを有する非常に安定な分子が得られる。
【００２０】
本発明のさらなる目的は、その主要な欠点（耐性、身体的および心的依存、呼吸抑制、便秘、悪心、嘔吐、鎮静など）を持たずに、モルヒネ物質の特性、特に、種々のタイプの疼痛（急性、炎症性、神経因性など）に対する強い鎮痛作用、末梢効果（下痢止め、鎮咳など）とともに挙動に対する有益な効果（疼痛の感情成分の軽減）を有する新規な化合物を提供することである。
【００２１】
本発明のさらなる目的は、本発明の化合物と、高用量で有害な副作用を示すことなくその抗侵害受容特性が知られている化合物の間の関連を提供することである。これらの関連はより具体的には、ガバペンチンまたはプレガルビンなどのギャバ誘導体とともに、モルヒネおよびその誘導体、ＴＨＣ（テトラヒドロカンナビノール）およびその誘導体に関する。実際、本願で請求した化合物の１つと上述の鎮痛薬（モルヒネ、ＴＨＣ、ガバペンチン）の１つの活性に満たない用量を組み合わせることにより得られる抗侵害受容反応の高い増強が見られた。
【００２２】
同様に、本発明の化合物は有利には、神経因性疼痛の処置の範囲内で、ボツリヌス菌毒素の１つの局所注射と組み合わせることができる(Ranoux D. et al, 2008, Anal. Neurol., 64, 274-283)。本発明の化合物はまた、プリン受容体アンタゴニスト、特に、Ｐ２Ｘ３受容体（その選択的アンタゴニストの１つが化合物Ａ−３１７４９１である）と組み合わせることもできる(Wu et al., 2004, Eur. J. Pharm., 504, 45-53)。
【００２３】
よって、本発明はより具体的には、下記一般式（Ｉ）：
Ｒ１−ＮＨ−ＣＨ（Ｒ２）−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ３）−ＣＨ２−Ｃ（Ｒ４）（Ｒ５）−ＣＯＮＨ−ＣＨ（Ｒ６）−ＣＯＯＲ７（Ｉ）
［式中、
−Ｒ１は、基−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｃ（Ｒ８）（Ｒ９）−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ１０を表し、ここで、
−−Ｒ８およびＲ９は互いに独立に、水素原子またはアルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基を表し；あるいは
−−（Ｒ８およびＲ９）は一緒に、それらを担持する炭素とともに、５つまたは６つの結合を有する飽和炭化水素環を形成し；
−−Ｒ１０は、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキル基を表し；
−Ｒ２は、
−−１〜６個の炭素原子を含んでなり、
−−−基ＯＲ１１、ＳＲ１１もしくはＳＯＲ１１（ここで、Ｒ１１は水素原子、ベンジル基または１〜４個の炭素原子を含んでなる直鎖もしくは分枝の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖を表す）；
−−−アミノ基；または
−−−フッ素などの１または複数のハロゲン原子で置換されていてもよいフェニル
で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖；
−−フッ素などの１または複数のハロゲン原子で置換されていてもよい、アリールまたはヘテロアリール基、有利にはフェニル；
−−Ｎ−オキシド型またはＳ−オキシド型で酸化されていてもよい硫黄および窒素から選択される１または複数のヘテロ原子を含んでなる、５つまたは６つの結合を有する飽和または芳香族複素環で置換されたメチレン基
を表し；
−Ｒ３は、水素原子または式−Ｃ（Ｒ１２）（Ｒ１３）−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｒ１４を有する基を表し、ここで、
−−Ｒ１２およびＲ１３は互いに独立に、水素原子またはアルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリールもしくはヘテロアリールアルキル基を表し；あるいは
（Ｒ１２およびＲ１３）は一緒に、それらを担持する炭素とともに、５つまたは６つの結合を有する飽和炭化水素環を形成し；
−−Ｒ１４は、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキル基を表し；
−Ｒ５は水素原子を表し、Ｒ４は、
−−フェニル核において
−−−フッ素もしくは臭素などの１〜５個のハロゲン原子；
−−−基ＯＲ１５もしくはＳＲ１５（ここで、Ｒ１５は水素原子、ベンジル基または１〜４個の炭素原子を含んでなる直鎖もしくは分枝の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖を表す）；
−−−アミノ基；
−−−ＣＦ３基；
−−−フェニル基；または
−−−５つまたは６つの結合を有する複素芳香環；
で置換されていてもよいフェニルまたはベンジル；
−−酸素、窒素、硫黄（窒素原子はＮ−オキシド型で酸化されていてもよい）から選択される１または２個のヘテロ原子を含んでなる５つまたは６つの結合を有する複素芳香環；
−−Ｎ−オキシド型またはＳ−オキシド型で酸化されていてもよい硫黄および窒素から選択される１または複数のヘテロ原子を含んでなる、５つまたは６つの結合を有する飽和もしくは芳香族複素環で置換されたメチレン基
を表し；
Ｒ４およびＲ５は一緒に、それらを担持する炭素とともに、
−５つまたは６つの結合を有する飽和炭化水素環、または
−ピペリジン環（４位において窒素が飽和され、
−−ＳＯ２−Ｐｈ基；
−−ＣＦ３基；
−−Ｃ１〜Ｃ４アルキル基；
−−Ｃ１〜Ｃ４アシル基；
−−１または複数のハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基もしくはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基で置換されていてもよいフェニルもしくはベンジル；または
−−Ｃ１〜Ｃ４アルキル基もしくはＣ１〜Ｃ４アルコキシ基で置換されていてもよい、ピリジンもしくはピリミジンなどの芳香族複素環
で置換されていてもよい）を形成し；
−Ｒ６は、
−−１〜６個の炭素原子を含んでなり、
−−−基ＯＲ１６、ＳＲ１６、ＳＯＲ１６（式中、Ｒ１６は水素原子、ベンジル基または１〜４個の炭素原子を含んでなる直鎖もしくは分枝の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖を表す）；
−−−ＣＯＯ−ＢｎもしくはＣＯＯＨ基；
−−−ＳＯ３Ｈ基；または
−−−アミノ基
で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖；
−−フッ素もしくは臭素などの１または複数のハロゲン原子、または基：
−−−ＣＦ３；
−−−ＯＲ１７（ここで、Ｒ１７は水素原子、ベンジル基または１〜４個の炭素原子を含んでなる直鎖もしくは分枝の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖を表す）；または
−−−ベンジル
で置換されていてもよいフェニル；または
−−フェニル核において
−−−フッ素もしくは臭素などの１または複数のハロゲン原子；
−−−ＣＦ３基；
−−−基ＯＲ１７（ここで、Ｒ１７は水素原子、ベンジル基または１〜４個の炭素原子を含んでなる直鎖もしくは分枝の飽和もしくは不飽和炭化水素鎖を表す）；または
−−−フェニル基
で置換されていてもよいベンジルを表し；
−Ｒ７は、
水素原子、ベンジル、Ｃ２〜Ｃ４アルキル、−ＣＨＲ１８−ＣＯＯＲ１９、−ＣＨＲ１８−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ１９および−ＣＨＲ１８−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ１９（ここで、Ｒ１８およびＲ１９は互いに独立に、アルキル、アリール、アリールアルキル、シクロアルキル、シクロヘテロアルキル、ヘテロアルキル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキル基を表す）からなる群から選択される基を表す］
に従う化合物またはその薬学上許容される塩に関する。
【００２４】
本発明において「薬学上許容される」とは、一般に、生物学的にまたはその他の点でも、安全で無毒かつ望ましくないものではなく、かつ、獣医学およびヒト医薬使用に許容される医薬組成物の製造において使用可能なものを意味する。
【００２５】
本発明において化合物の「薬学上許容される塩」とは、本明細書で定義されているように薬学上許容され、かつ、親化合物の所望の薬理活性を有する塩を意味する。本発明の範囲内で、それらは無機または有機塩基を伴って得られる塩からなる。従って、形成される塩は、
【００２６】
酸プロトンを、金属イオン、例えば、アルカリ金属イオン（例えば、Ｎａ＋、Ｋ＋またはＬｉ＋）、アルカリ土類金属（例えば、Ｃａ２＋またはＭｇ２＋）またはアルミニウムイオンで置換するか、または
該プロトンを有機または無機塩基とともに配位させるか
のいずれかからなる。
【００２７】
許容される有機塩基としては、アンモニア、ジエタノールアミン、エタノールアミン、Ｎ−メチルグルカミン、トリエタノールアミン、トリエチルアミン、トロメタミンおよび類似のものが挙げられる。許容される無機塩基としては、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化リチウム、水酸化カリウム（ポタッシュ(potash)）、炭酸ナトリウムおよび水酸化ナトリウム（ソーダ）が挙げられる。
【００２８】
有利には、本発明による化合物の薬学上許容される塩は、水酸化リチウム、ソーダ、ポタッシュ、アンモニア、式ＮＲａＲｂＲｃ（ここで、Ｒａ、ＲｂおよびＲｃは互いに独立に、トリエチルアミンなどの以下に定義されるアルキル基、またはリシンもしくはアルギニンおよびその誘導体などの塩基性アミノ酸を表す）の第三級アミンといった薬学上許容される無機または有機塩基を伴って得られる塩である。
【００２９】
「不飽和」とは、本発明によれば、炭化水素鎖が１または複数の不飽和を含んでなることを意味する。「不飽和」とは、本発明によれば、二重結合または三重結合を意味する。
【００３０】
「ハロゲン原子」とは、本発明によれば、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素原子を意味する。有利には、それはフッ素、収差または塩素原子からなる。より有利には、それはフッ素または臭素原子、好ましくはフッ素からなる。
【００３１】
「アミノ」基とは、本発明によれば、式−ＮＲ’Ｒ’’を有する基を意味し、ここで、Ｒ’およびＲ’’は互いに独立に水素原子または１から６個、好ましくは１〜４個の炭素原子を含んでなる飽和もしくは不飽和、直鎖、分枝もしくは環状炭化水素基を表し、Ｒ’およびＲ’’は同時に水素原子を表すことはできず、Ｒ’およびＲ’’は一緒に、それらを担持する窒素原子とともに、２つの基Ｒ’およびＲ’’を担持する窒素以外のヘテロ原子を含まず、５つまたは６つの結合を有する飽和されていてもよい複素環を形成する。特に、アミノ基は、−ＮＨＭｅ、−ＮＨＥｔ、−ＮＨＰｒ、−ＮＨｉＰｒ、−ＮＨＢｕ、−ＮＨｉＢｕ、−ＮＨｔＢｕ、ピペリジニルまたはピロリジニル基であり得る。
【００３２】
「アリール」基とは、本発明によれば、特に断りのない限り、好ましくは５〜１０個の炭素原子を含んでなり、かつ、フェニルまたはナフチル基などの１または複数の結合環を含んでなる芳香族化合物を意味する。有利には、それはフェニルからなる。
【００３３】
「ヘテロアリール」とは、本発明によれば、１または複数の炭素原子が、例えば硫黄、窒素または酸素原子（窒素原子はＮ−オキシド型で酸化されていてもよい）などの１または複数の、有利には１〜４個の、より有利には１〜２個のヘテロ原子で置換されている、上記で定義されたアリール基を意味する。ヘテロアリール基の例は、フリル、チエニル、ピロリル、ピリジニル、ピリミジル、ピラゾリル、イミダゾリル、テトラゾリルまたはインジル基である。
【００３４】
「５つまたは６つの結合を有する複素芳香環」とは、本発明によれば、単に５つまたは６つの結合を有する単環を含んでなる上記で定義されたヘテロアリール基を意味する。それは特にチエニル、ピロリル、ピリジニル、ピリミジル、ピロゾロリル、イミダゾリルまたはテトラゾリル基からなる。
【００３５】
「複素環」とは、本発明によれば、１または複数の炭素原子が、例えば硫黄、窒素または酸素原子（硫黄および窒素原子はＮ−オキシド型およびＳ−オキシド型で酸化されていてもよい）などの１または複数の、有利には１〜４個の、より有利には１〜２個のヘテロ原子で置換されている、有利には５つまたは６つの結合を有する炭化水素環を意味する。特に断りのない限り、この環は飽和または芳香族であり得る。
【００３６】
ヘテロ原子が窒素および硫黄から選択される場合、複素環は以下の群：ピペリジニル、ピロリジニル、ピロリル、チエニル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピペラジニル、チアジオゾリル、テトラヒドロチエニルまたはチアゾリルの１つであり得る。
【００３７】
「アルキル」とは、本発明によれば、特に断りのない限り、１〜６個の炭素原子を含んでなる直鎖もしくは分枝の飽和炭化水素鎖を意味する。それは特に、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル基からなる。
【００３８】
「ヘテロアルキル」とは、本発明によれば、１〜５個の炭素原子または硫黄、窒素もしくは酸素原子などの１もしくは２個のヘテロ原子を含んでなる直鎖もしくは分枝の飽和炭化水素鎖を意味する。
【００３９】
「Ｃ１〜Ｃ４アシル」とは、本発明によれば、ＣＯ基を介して分子と結合された、１〜４個の炭素原子を含んでなる上記で定義されたアルキル基を意味する。それは特に、アセチル、ホルミルまたはプロピオニル基からなり得る。
【００４０】
「シクロアルキル」とは、本発明によれば、３〜７個の、有利には５〜７個の炭素原子を含んでなる飽和炭化水素環、特に、シクロヘキシル、シクロペンチルまたはシクロヘプチル基を意味する。
【００４１】
「シクロヘテロアルキル」とは、本発明によれば、１または複数の炭素原子が、例えば硫黄、窒素または酸素原子（硫黄および窒素原子はＮ−オキシド型およびＳ−オキシド型で酸化されていてもよい）などの１または複数の、有利には１〜４個の、より有利には１〜２個のヘテロ原子で置換されている、上記で定義されたシクロアルキル基を意味する。それは特に、ピペリジニル、ピロリジニル、テトラヒドロフリル、テトラヒドロテニル(tetrahydrothenyl)、モルホリニルまたはピペラジニル基からなり得る。
【００４２】
「アルコキシ」とは、本発明によれば、酸素原子を介して分子と結合された、上記で定義されたアルキル基を意味する。それは特に、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシまたはｔｅｒｔ−ブトキシ基からなり得る。
【００４３】
「アリールアルキル」とは、本発明によれば、上記で定義されたアルキル基を介して分子と結合された上記で定義されたアリール基を意味する。それは特に、ベンジル（Ｂｎ）基からなる。
【００４４】
「ヘテロアリールアルキル」とは、本発明によれば、上記で定義されたアルキル基を介して分子と結合された、定義されたヘテロアリール基を意味する。それは特に、テニルメチル(thenylmethyl)またはフリルメチル基からなる。
【００４５】
有利には、基Ｒ１は、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｃ（Ｒ８）（Ｒ９）−ＯＣ（＝Ｏ）−Ｒ１０基を表し、ここで、
Ｒ８およびＲ９は互いに独立に、水素原子またはアルキル基を表し；かつ
Ｒ１０はアルキル基を表す。
【００４６】
特に、基Ｒ１は、基−（Ｃ＝Ｏ）Ｏ−ＣＨＭｅ−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨＭｅ２を表す。
【００４７】
また有利には、基Ｒ２は、
１または複数のハロゲン原子で置換されていてもよいアリール基、または
１〜６個の炭素原子を含んでなり、基ＯＲ１１、ＳＲ１１もしくはＳＯＲ１１（Ｒ１１は上記で定義された通り）またはフッ素原子などの１または複数のハロゲン原子で置換されていてもよいフェニルで置換されていてもよい直鎖もしくは分枝の飽和もしくは不飽和、好ましくは飽和、炭化水素鎖
を表す。
【００４８】
好ましくは、基Ｒ２は、アルキル、アリールまたはアリールアルキルまたはヘテロアリールアルキル基、特に、メチル、フェニルまたは−ＣＨ２ＣＨ２Ｐｈ基を表す。
【００４９】
好ましい実施形態でもある第一の実施形態によれば、基Ｒ３は水素原子を表す。
【００５０】
実際、本発明者らは驚くべきことに、ホスフィン酸官能基が保護されてないければ活性が低下することを具体的に示している先行技術の教示(Hecker S.J. and Erion M.D.J. Med. Chem. 2008, 51, 2328-2345)に反して、本発明による化合物は、ホスフィン酸官能基が遊離のままであっても満足のいく活性を有することを見出した。
【００５１】
第二の実施形態によれば、基Ｒ３は、式−Ｃ（Ｒ１２）（Ｒ１３）ＯＣ（＝Ｏ）−Ｒ１４（ここで、Ｒ１２、Ｒ１３およびＲ１４は上記で定義された通りである）を有する基を表す。特に、基Ｒ１２およびＲ１３は互いに独立に水素原子またはアルキル基を表し、Ｒ１４はアルキル基を表す。それは有利にはＲ１２＝Ｒ８、Ｒ１３＝Ｒ９およびＲ１４＝Ｒ１０であり得る。
【００５２】
よって、基Ｒ３は有利には水素原子または−ＣＨＭｅ−ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨＭｅ２基を表し、好ましくは、水素原子を表す。
【００５３】
本発明の１つの有利な別の実施形態によれば、Ｒ５は水素原子を表し、Ｒ４はフッ素もしくは臭素などの１〜５個のハロゲン原子で置換されていてもよいベンジル基、フェニルまたは５つもしくは６つの結合を有する複素芳香環を表す。特に、Ｒ５は水素原子を表し、Ｒ４は、パラ位において、臭素原子などのハロゲン原子で、またはフェニルで置換されたベンジル基を表す。
【００５４】
本発明の１つの有利な別の実施形態によれば、Ｒ４およびＲ５は一緒に、それらを担持する炭素とともに、その窒素が４位において置換され、かつ、これらの基に関して上記で定義されたように、置換されていてもよい（特に、置換基は−ＳＯ２−Ｐｈ基、Ｃ１〜Ｃ４アシル基、フェニル基であり得る）シクロヘキサンまたはピペリジン環を形成する。
【００５５】
好ましくは、基Ｒ６は、１〜６個の炭素原子を含んでなり、ＳＯ３ＨまたはＣＯＯＲ１６基で置換されていてもよい直鎖もしくは分枝の飽和または不飽和、好ましくは飽和、炭化水素鎖を表す。有利には、それはメチル基などのアルキル基からなる。
【００５６】
また有利には、基Ｒ７は、水素原子、またはエチルなどのアルキル基、またはベンジルもしくは−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｅｔ基を表す。好ましくは、これは水素原子またはベンジル基からなる。
【００５７】
本発明の１つの有利な別の実施形態によれば、これらの基は以下の意味を有する：
Ｒ１は基−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｃ（Ｒ８）（Ｒ９）−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ１０を表し、ここで、Ｒ８は水素原子を表し、Ｒ９およびＲ１０はアルキル基を表し；
Ｒ２はアルキル、フェニルまたは−ＣＨ２ＣＨ２Ｐｈ基を表し；
Ｒ３は水素原子を表し；
Ｒ５は水素原子を表し、Ｒ４は、パラ位においてハロゲン原子（臭素）で、またはフェニルで置換されているベンジル基を表すか；あるいはＲ４およびＲ５は一緒に、それらを担持する炭素とともに、シクロヘキサンまたはピペリジン環（窒素が４位において置換され、かつ、−ＳＯ２−Ｐｈ基、Ｃ１〜Ｃ４アシル基またはフェニル基で置換されていてもよい）を形成し；
Ｒ６はアルキル基を表し；
Ｒ７は水素原子またはアルキル基（エチルなど）またはベンジルもしくは−ＣＨ（ＣＨ３）−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｅｔ基を表す。
【００５８】
１つの特定の実施形態によれば、該実施形態による化合物は下記の化合物：
２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸ベンジルエステル、
２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸、
２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸エチルエステル、
２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸エトキシカルボニルオキシ酸エステル、
２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛（１−イソブチリルオキシ−エトキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸、
２−（２−（４−ブロモ−ベンジル）−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸ベンジルエステル、
２−（２−（４−ブロモ−ベンジル）−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸、
２−［２−ヒドロキシ−［（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−フェニル−メチル］−ホスフィノイルメチル｝−３−（４−チオフェン−３−イル−フェニル）−プロピオニルアミノ］−プロピオン酸、
２−［２−ヒドロキシ−［（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−フェニル−メチル］−ホスフィノイルメチル｝−３−（４−チオフェン−３−イル−フェニル）−プロピオニルアミノ］−３−ヒドロキシプロピオン酸、
２−（３−ビフェニル−４−イル−２−｛ヒドロキシ［（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−チオフェン−３−イル−メチル］−ホスフィノイルメチル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸、
２−｛３−ビフェニル−４−イル−２−［ヒドロキシ−［（１−イソブチリルオキシ−メトキシカルボニルアミノ−エチル）−ホスフィノイルメチル］−プロピオニルアミノ｝−プロピオン酸、
２−ジメチル−プロピオン酸の１−（１−｛［３−ビフェニル−４−イル−２−（１−カルボキシ−エチルカルバモイル）−プロピル］−ヒドロキシ−ホスフィノイル｝−エチルカルバモイルオキシ）−エチル酸、
２−［（１−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイルメチル｝−シクロペンタンカルボニル）−アミノ］−プロピオン酸、
２−［（１−アセチル−４−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイルメチル｝−ピペリジン−４−カルボノイル）−アミノ］−プロピオン酸、
２−［（４−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイルメチル｝−１−フェニル−ピペリジン−４−カルボニル）−アミノ］−プロピオン酸、
２−［（１−ベンゼンスルホニル−４−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイルメチル｝−ピペリジン−４−カルボニル）−アミノ］−プロピオン酸
から選択される。
【００５９】
本発明による式（Ｉ）を有する化合物は３つの不斉中心、すなわち、両酵素の活性部位と相互作用する個々のＲ２、Ｒ５およびＲ６基を担持する炭素を持つ可能性がある。有利には、これら３つの不斉中心が分離され、本発明による化合物の特性を至適化する絶対立体配置を有する、すなわち、
基Ｒ２を担持する炭素原子はＲ型立体配置を有し（鏡像体過剰率＞９０％）；
適用可能であれば、基Ｒ５を担持する炭素原子はＳ型立体配置を有し（ｅｅ＞９０％）；
基Ｒ６を担持する炭素原子はＳ型立体配置を有する（ｅｅ＞９０％）。
適用可能であれば、ホスフィン酸立体配置は遊離のままである（一方の鏡像異性体、他方の鏡像異性体またはラセミ混合物を有する可能性がある）。
【００６０】
以下、本発明者らは、３つの不斉炭素原子の立体配置が分離され、分子の特性を至適化する個々の絶対立体配置を有する（ｅｅ＞９０％）、本発明による化合物の合成を記載する。所望であれば、当業者には、所望の立体配置を得るために、記載の方法をどのように適合すればよいかが分かる。
【００６１】
Ｒ５＝Ｈ、Ｒ３＝ＨおよびＲ７≠Ｈである式（Ｉａ）を有する化合物は、下記のスキーム：
【化１】
0005607045.tif 000002
に従い、化合物ＶＩとα−アミノエステルを縮合させることにより得られる。
【００６２】
この反応は、特にジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）などの第三級アミンの存在下で、１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド（ＥＤＣ）または２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＢＴＵ）などのカップリング剤の作用を介して行われる。有利には、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）がこの工程の溶媒として用いられる。
【００６３】
Ｒ５＝Ｈ、Ｒ３＝ＨおよびＲ７＝Ｈである化合物は、水素雰囲気中、特にパラジウム／炭素などの触媒の存在下で、当業者に公知の技術を用いてＲ７＝Ｂｎである式（Ｉａ）を有する化合物を水素化分解することにより製造することができる。
【００６４】
アミノホスフィン酸化合物（ＶＩ）は、化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）：
【化２】
0005607045.tif 000003
から得られる。
【００６５】
Ｚはベンジルオキシカルボニル基を表す。
【００６６】
【化３】
0005607045.tif 000004
【００６７】
第一の工程は、ビストリメチルシリルアセトアミドの存在下で化合物（ＩＩ）と（ＩＩＩ）を縮合させて化合物（ＩＶ）を得ることからなる。この反応は有利には、溶媒を用いずに７０〜１２０℃の間の温度で行う。
【００６８】
化合物（ＩＶ）はおよそ６５：３５の割合のジアステレオ異性体（２Ｒ，４Ｓ）／（２Ｒ，４Ｒ）混合物の形で得られる。その後、酢酸エチル、ジエチルエーテル、イソプロパノール、アセトニトリルまたはその混合物などの有機溶媒、好ましくは酢酸エチル中で沈殿させた後、場合により再結晶の手段によってさらなる精製を行うことにより、主要立体異性体（２Ｒ，４Ｓ）を立体異性体（２Ｒ，４Ｒ）から分離する。
【００６９】
そして、得られた化合物（ＩＶ）を、Ｃ末端位は鹸化（ＮａＯＨ）により、Ｎ末端位はＨＢｒ／ＣＨ３ＣＯ２Ｈを作用させることにより順次脱保護して化合物（Ｖ）を得る。その後、化合物（Ｖ）をAlexander et al., 1988, J. Med. Chem., 31,318の通りに製造したアシルオキシアルキル（ｐ−ＮＯ２−フェニル）カーボネートと、またはSun et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2001, 11, 1875の通りに製造したアシルオキシアルキルスクシニルカーボネートと、ジオキサン中、ＮａＨＣＯ３の存在下で縮合させる。
【００７０】
あるいは、化合物（Ｉａ）は、上記のカップリング条件（ＤＭＦ中、ＤＩＥＡの存在下、ＥＤＣＩまたはＴＢＴＵ）下で、（ＩＶ）のベンジルエステルのアルカリ加水分解によって得られた中間体（ＸＩ）（Ｚ−ＮＨ−ＣＨ（Ｒ２）Ｐ（Ｏ）ＯＨ−ＣＨ２ＣＨ（Ｒ４）ＣＯＯＨ）上へ（ＶＩＩ）を縮合することにより合成することもできる。化合物（ＸＩＩ）はこのようにして得られ、その後、Ｚ基を脱保護すると化合物（ＸＩＩＩ）が得られる。これにより、（Ｖ）から（ＶＩ）への変換に関して上記した方法を用い、（Ｉａ）が得られる。
【化４】
0005607045.tif 000005
【００７１】
（Ｒ）型立体配置を有する光学的に純粋な化合物（ＩＩ）は、Baylis et al. J. Chem. Soc. Perkin Trans I（1984）, 2845に記載されている合成プロトコールおよび分離法に従い、アルデヒド（ＶＩＩＩ）から製造される。
【化５】
0005607045.tif 000006
【００７２】
Ｚはベンジルオキシカルボニル基を表す。
【００７３】
アクリレート（ＩＩＩ）のベンジルエステルは、対応するアクリル酸（Ｘ）から、８０℃にて、アセトニトリル中、Ｋ２ＣＯ３の存在下で、臭化ベンジルの作用を介して製造される。酸（Ｘ）は、以下の工程：マロン酸ジエチル上へのアルデヒド（ＩＸ）の縮合（工程１）、二重結合の還元とエステル官能基の鹸化（工程２：１）ＮａＢＨ４、２）ＯＨ−、３）Ｈ＋）およびマンニッヒ(Mannich)反応（工程３）を含んでなる、当業者に周知の慣例のプロトコールにより得られる。
【化６】
0005607045.tif 000007
【００７４】
Ｒ５≠ＨおよびＲ３＝Ｈである式（Ｉｂ）を有する化合物は、中間体（ＶＩ）をその類似体（ＶＩｂｉｓ）に置き換え、化合物ｓ（Ｉａ）に関して記載したものと同じカップリングによって得られる。
【００７５】
これは、リチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）の存在下、保護されたアミノホスフィン酸（ＩＩｂｉｓ）とメシラートまたはトリフラート（ＸＩＶ）の形の活性化アルコールを縮合させることにより得られる(McKittrick et al. Bioorg. Med. Chem. Lett. (1996), 1629)。
【化７】
0005607045.tif 000008
【００７６】
Ｚはベンジルオキシカルボニル基を表す。
【００７７】
化合物（ＸＩＶ）は式ＣＨ（Ｒ４）（Ｒ５）−ＣＯ２Ｈを有する対応するカルボン酸から得られる。ｔ−ブチルエステル型でエステル化してＣＨ（Ｒ４）（Ｒ５）−ＣＯ２ｔＢｕ（ＸＶ）を生成した後、リチウムジイソプロピルアミド（ｉＰｒ２ＮＬｉ）の存在下、パラホルムアルデヒドで処理すると、アルコールエステルＨＯＣＨ２−Ｃ（Ｒ４）（Ｒ５）−ＣＯＯｔＢｕが得られる。その後、アルコール官能基をメシラートまたはトリフラートの形で活性化して化合物（ＸＩＶ）を得る。
【化８】
0005607045.tif 000009
【００７８】
カルボン酸ｔブチルと化合物（ＶＩｂｉｓ）のホスフィン酸メチルエステルを、塩化メチレン中ＴＦＡで脱保護すると、化合物（ＸＩｂｉｓ）が得られる。合成の終了は上記のように行う。
【００７９】
Ｒ３≠ＨおよびＲ７≠Ｈである式（Ｉｃ）を有する化合物は、Ｒ３＝Ｈである対応する化合物（Ｉａ）および（Ｉｂ）から製造される。ホスフィン酸官能基のアルキル化は、ハラゲノ(halageno)（アシルオキシ）アルキル（ハロゲンは塩素または臭素である）の作用により得られる。このアルキル化は、トルエンまたはクロロホルムなどの溶媒、好ましくはトルエン中、硫酸テトラブチルアンモニウム、ＤＩＥＡ、ＮａＩの存在下で行われる。カルボン酸官能基（Ｒ７＝Ｈ）の任意の脱保護は上記のように、ベンジルエステル（Ｒ７＝ＣＨ２Ｐｈ）の水素化分解により得られる。
【００８０】
より一般には、本発明は、下記の工程：
下式（Ａ）：
Ｒ１−ＮＨ−ＣＨ（Ｒ２）−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）−ＣＨ２−Ｃ（Ｒ４）（Ｒ５）−ＣＯＯＨ（Ａ）
を有する化合物と下式（Ｂ）：
Ｈ２Ｎ−ＣＨ（Ｒ６）−ＣＯＯＲ７（Ｂ）
の間のペプチドカップリングによる、Ｒ３＝Ｈであり、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７が上記で定義された通りであるが、Ｒ７は水素原子を表さない化合物（Ｉ）の生成；
所望による、ホスフィン酸官能基のＲ３≠Ｈ基による置換；
所望による、−ＣＯＯＲ７官能基の加水分解工程（鹸化または水素化分解）；
上記工程のいずれかで得られた化合物（Ｉ）の反応媒体の分離
に従う、上記で定義された式（Ｉ）を有する化合物の製造方法に関する。
【００８１】
この方法の後に、当業者に周知の任意のさらなる置換および／または保護／脱保護反応を行ってもよい。反応媒体分離工程は、抽出、溶媒の蒸発または沈殿および濾過などの当業者に周知の方法を用いて行うことができる。次に必要であれば、得られた化合物を、化合物が結晶性の場合には再結晶、蒸留、シリカゲルカラムクロマトグラフィーまたは高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）などの当業者に周知の技術を用いて精製することができる。
【００８２】
本発明はまた、特に、疼痛、特に、（１）神経因性もしくは神経炎症性疼痛、または２）鋭痛（特に急性疼痛）の処置を目的とした医薬品としてのその使用のための上記で定義された式（Ｉ）を有する化合物に関する。
【００８３】
「神経因性もしくは神経炎症性疼痛」とは、排他的ではないがより具体的には、Ｉ型またはＩＩ型真性糖尿病、ウイルスまたはレトロウイルス感染、癌化学療法、放射線療法、外科手術（切断患者の幻覚および乳房切除の後遺症を含む）、アルコール依存症、顔面神経痛、外傷（腕神経叢症候群、神経根障害または脊髄根痛(radiculagia)、例えば、坐骨神経痛、下腿痛もしくは胸郭出口症候群など）、繊維筋痛症、レストレスレッグ症候群(restless leg syndrome)、特に関節炎もしくは関節症の急性期により引き起こされる炎症性関節痛、特に関節症により引き起こされる変形性関節痛または腰痛により引き起こされる疼痛を意味する。
【００８４】
この神経因性および神経炎症性疼痛は、ｉ）Ｐｌａｎｔａｒ試験またはホットプレートなどの、推定動物モデルに対する好適な試験を用いて評価される「痛覚過敏(hyperalgia)」と呼ばれる過度な痛覚；ｉｉ）本来侵害受容刺激が関係しない領域からの有痛感覚からなる異痛（その軽減は特にＶｏｎ  Ｆｒｅｙ試験を用いて測定される）を特徴とする。
【００８５】
鋭痛は、急性疼痛として解釈されるメッセージを脳に伝達する受容体、チャネルまたはその他の標的の刺激により引き起こされる。「鋭痛」とは、特に、術後痛、癌罹患者の疼痛、神経系に過度な有痛流入を誘導する末梢組織傷害により引き起こされる疼痛を意味する。これは特に、急性疼痛（術後、外傷性、感染性、変性性症状）または慢性疼痛（様々な進行性持続性障害の状態）のいずれかを生じる火傷、外傷、術後の影響および多数の疾患に当てはまる。
【００８６】
本発明はまた、疼痛、特に（１）神経因性もしくは神経炎症性疼痛、または（２）鋭痛の処置を目的とした医薬品の製造のための本発明による化合物の使用に関する。本発明はまた、疼痛、特に（１）神経因性もしくは神経炎症性疼痛、または（２）鋭痛を処置するための方法であって、本発明による少なくとも１つの有効量の化合物を、それを必要とするの患者に投与することを含んでなる方法に関する。
【００８７】
本発明はまた、上記で定義された式（Ｉ）を有する少なくとも１つの化合物と少なくとも１つの薬学上許容されるビヒクルを含んでなる医薬組成物に関する。本発明による化合物は、経口、舌下、非経口、皮下、肺、鼻腔、筋肉内、静脈内、くも膜下腔内、関節内または経皮的経路によって投与することができる。有効成分は慣例の製薬媒体と混合した単位投与形で動物またはヒトに投与することができる。この組成物は、少なくとも１つのさらなる有効物質、特に、モルヒネおよびその誘導体、テトラヒドロカンナビノールおよびその誘導体、ギャバ誘導体（ガバペンチンもしくはプレガバリン）、ボツリヌス菌毒素（ボツリヌス菌毒素Ａ）またはプリン受容体アンタゴニスト（Ｐ２Ｘ３受容体）からなる群から選択される鎮痛剤を、同じ処方物中に、または異なる形で組み合わせて含んでなり得る。
【００８８】
本発明はまた、
（ｉ）上記で定義された式（Ｉ）を有する少なくとも１つの化合物と、
（ｉｉ）モルヒネおよびその誘導体、テトラヒドロカンナビノールおよびその誘導体、ギャバ誘導体（ガバペンチンもしくはプレガバリン）、ボツリヌス菌毒素（ボツリヌス菌毒素Ａ）およびプリン受容体アンタゴニスト（Ｐ２Ｘ３受容体）からなる群から選択される少なくとも１つのさらなる有効物質
とを、同時、個別または交互使用のための組合せ製品として含んでなる医薬組成物に関する。
【００８９】
これらの組成物および式（Ｉ）を有する化合物は医薬品として使用可能である。
【００９０】
本発明の１つの有利な別の実施形態によれば、これらの化合物は神経因性または神経炎症性疼痛の処置を意図したものであり、経口投与される。
【００９１】
よって、該医薬組成物は好ましくは経口投与向けに処方される。好適な単位投与形としては、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤および経口懸濁液用の溶液が含まれ、主要有効成分が好適な製薬ビヒクルと混合される。処方物は持続的または遅延型の活性を有する、また、所定量の有効物質を連続的に放出するようなものであってもよい。
【００９２】
本発明者らは、経口投与されたこれらの化合物が血液脳関門（ＢＢＢ）を通過せず、従って、脳に入らないことを確認した。これらの条件下で、本発明による化合物による不活性化によって保護されたこれらのエンケファリンにより生じやすい、わずかであったとしても、脳内オピオイド（エンケファリン）の望ましくない副作用(F. Noble and B.P. Roques, Exp. Op. Ther. Targets, 2007, 11, 145-159)を完全に除外する。
【００９３】
この組成物は少なくとも１つのさらなる有効物質を含んでなってもよい。特に、この医薬組成物はガバペンチンもしくはプレガバリンなどのギャバ誘導体、またはＰ２Ｘ３プリン受容体アンタゴニスト、およびボツリヌス菌毒素Ａなどのボツリヌス菌毒素からなる群から選択される鎮痛剤を含んでなってもよい。例えば、経口投与向けに処方された式（Ｉ）を有する化合物は局所注射されるボツリヌス菌毒素と併用してもよい。
【００９４】
本発明の第二の有利な別の実施形態によれば、該化合物は侵害受容性疼痛の処置を意図したものであり、例えば舌下などの経口経路、非経口、皮下、肺、鼻腔、筋肉内、静脈内、くも膜下腔内、関節内または経皮経路、特に静脈内経路により投与される。有効成分は慣例の製薬媒体と混合した単位投与形で動物またはヒトに投与することができる。よって、該医薬組成物は静脈内投与向けに処方される。
【００９５】
モルヒネもしくはその誘導体、テトラヒドロカンナビノールもしくはその誘導体、またはＰ２Ｘ３プリン受容体アンタゴニストなどのさらなる鎮痛剤を併用してもよい（同時、個別または交互使用のための組合せ製品として）。
【００９６】
考えられる別の実施形態によれば、本発明による化合物は１日当たり０．０１ｍｇ〜１０００ｍｇの間の用量で使用することができ、１日１回単回用量で投与されるか、または１日に複数回の用量で、例えば１日２回等用量で投与される。投与する１日用量は有利には０．０１ｍｇ〜１００ｍｇの間、またはより有利には０．１ｍｇ〜１０ｍｇの間である。
【実施例】
【００９７】
本発明を例示するために以下の例を用いるが、これに限定されるものではない。下記の略号を用いた。
ＴＬＣ  薄層クロマトグラフィー
ＨＰＬＣ  高速液体クロマトグラフィー
ＤＭＳＯ  ジメチルスルホキシド
ｅｑ．  当量
ＥＳＩ  エレクトロスプレーイオン化
ｍｉｎ  分
ＮＭＲ  核磁気共鳴
ＴＦＡ  トリフルオロ酢酸
【００９８】
実施例１：（Ｒ）（１−ベンジルオキシカルボニルアミノ−エチル）ホスフィン酸
工程１：（１−（（ジフェニルメチル）アミノ−エチル）ホスフィン酸
６００ｍｌの水および１３２ｍｌ（１．０モル）のホスフィン酸（水中５０％）中、２００ｇ（０．９１モル）の塩酸ジフェニルメチルアミン(diphenylamethylamine)の混合物を攪拌しながら還流下で沸騰させる。３５０ｍｌの水中、５６ｍｌ（１．０モル）のアセトアルデヒド溶液を３０分で滴下する。
【００９９】
反応をＨＰＬＣにより追跡する。２時間後、反応を周囲温度に戻す。得られた白色沈殿を濾過し、水（２×３００ｍｌ）およびアセトン（２×３００ｍｌ）で洗浄し、乾燥させる。白色固体、２２５ｇ（９０％）。
【０１００】
工程２：（１−アミノエチル）−ホスフィン酸
２２５ｇの工程１から得られた化合物と２ｌの６Ｎ  ＨＣｌの混合物を還流下で５時間沸騰させる。冷却後、反応媒体を半分濃縮し、３×１．５ｌのエチルエーテルで抽出する。溶液を蒸発乾固させ、油性残渣（１３０ｇ）を１．３ｌのエタノールで処理する。この溶液を０℃まで冷却し、４５０ｍｌの酸化プロピレンを加える。白色固体が沈殿する。この沈殿を脱水し、エタノール（２×１００ｍｌ）、エチルエーテル（２×１００ｍｌ）で洗浄し、乾燥させる。白色固体、６５ｇ（７３％）。
【０１０１】
(1H) NMR DMSO d6 δ (ppm): 1.26 (3H d,d); 3.32 (1H m); 6.98 (1H d); 8.23 (3H s).
【０１０２】
工程３：（Ｒ）（１−ベンジルオキシカルボニルアミノ−エチル−ホスフィン酸
３００ｍｌの水中、６５ｇ（０．５９モル）の工程２から得られた化合物を溶解させ、水酸化ナトリウムを加えることによりｐＨを９３．５に調整する。攪拌下で８５ｍｌのクロロギ酸ベンジルを加える。０℃にて１時間後、この混合物を周囲温度に戻し、氷（１１）と濃ＨＣｌ（３００ｍｌ）の混合物に注ぐ。生じた白色沈殿を脱水し、水（２×１００ｍｌ）で洗浄し、乾燥させる。白色固体、１３１ｇ（９１％）。
【０１０３】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 30/70, Kromasil C18カラム), Rt=4.6分。
【０１０４】
ラセミホスフィン酸の分離は、酢酸エチル／イソプロパノール混合物＝３．５：１中、Baylis et al.(J. Chem. Soc. Perkin Trans I 1984, 2845)に記載されているように、得られた塩を（Ｒ）（＋）α−メチルベンジルアミンで再結晶させることにより行う。白色固体、４８ｇ（８６％）。
【０１０５】
(1H) NMR DMSO d6 δ (ppm): 1.19 (d.3H); 3.66(m,1H); 5.03 (s.2H); 6.78 (d, 1H); 7.35 (s, 5H); 7.62 (d,1H)
【０１０６】
実施例２：２−ビフェニル−４−イルメチル−アクリル酸ベンジルエステル
工程１：２−ビフェニル−４−イルメチル−マロン酸
用いるプロトコールは、Organic Synthesis Coll. Vol. 3 p. 337に記載されているものである。４８．４ｇのマロン酸ジエチルと５０ｇのジフェニル−４−カルボキシアルデヒドを用いると、８８．２ｇのジエチル２−ビフェニル−４−イルメチレン−マロン酸エステルが得られる。
【０１０７】
この化合物（８８ｇ）をエタノール（５００ｍｌ）中の溶液とし、水素化ホウ素ナトリウム（１０．３ｇ）の作用により二重結合を還元する。１時間後、還元が完了し、この反応混合物をエタノール（５００ｍｌ）で希釈し、０℃にて、１．３６ｌの１Ｎ  ＮａＯＨを加える。
【０１０８】
エタノールを蒸発させ、水相を酸性化した後、２−ビフェニル−４−イルメチル−マロン酸が白色固体の形態で得られる。６４．８ｇ（８８％）。
【０１０９】
HPLC(CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 70:30, Kromasil Cl8カラム), Rt=3.5分。
【０１１０】
工程２：２−ビフェニル−４−イルメチル−アクリル酸
工程１（６０ｇ）で得られた二酸を３００ｍｌのＴＨＦに溶解させ、２３．５ｍｌ（２当量）のジエチルアミンと１９．５ｍｌ（４当量）のホルムアルデヒドを加える。この反応媒体を還流下で攪拌しながら２０時間沸騰させる。冷却後、ＴＨＦを蒸発させ、残渣を酢酸エチル（５００ｍｌ）で処理し、１００ｍｌの６Ｎ  ＨＣｌで酸性化する。有機相を回収し、２×３５０ｍｌの水、１×３００ｍｌの飽和ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。白色粉末が得られる。５１ｇ（９７％）。
【０１１１】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/ H2O (0.1% TFA) 70/30, Kromasil C18カラム), Rt = 6.2分。
【０１１２】
工程３；２−ビフェニル−４−イルメチル−アクリル酸ベンジルエステル
２−ビフェニル−４−イルメチル−アクリル酸（３０ｇ）を３００ｍｌのアセトニトリルに懸濁させる。２１ｇのＫ２ＣＯ３、次いで１６．５ｇの臭化ベンジルを加え、１５時間８０℃まで加熱する。この反応媒体を蒸発させ、残渣を酢酸エチルで処理する。有機相をＮａ２ＣＯ３溶液、水および飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。濾過した後、有機相を蒸発乾固させる。油性生成物、４０ｇ（９６％）。
【０１１３】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/ H2O (0.1% TFA) 80:20, Kromasil C18カラム), Rt =12.7 分. 
NMR DMSO d6 δ (ppm):3.6 (2H s); 5.1 (2H S); 5.5 (1H d); 6.2 (1H d); 7.1-7.5 14H m).
【０１１４】
実施例３：２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸ベンジルエステル
【化９】
0005607045.tif 000010
【０１１５】
工程１：３−［（２−ベンジルオキシカルボニル−３−ビフェニル−４−イルプロピル）−ヒドロキシ−ホスフィノイル］−酪酸ベンジルエステル
実施例１から得られたアミノホスフィン酸合成素子（９．６ｇ）と実施例２工程３から得られた２−ビフェニル−４−イルメチル−アクリル酸ベンジルエステル（１４．３ｇ）を２１ｍｌのビス−トリスメチルシリルアセトアミド（ＢＳＡ）に加え、この反応混合物を７０℃で５時間攪拌する。冷却後、この混合物を酢酸エチルで希釈する。数滴の水を沈殿が生じるまで加える。この懸濁固体を周囲温度で１時間攪拌し、脱水し、酢酸エチルで洗浄し、真空乾燥させる。１１．６ｇ（７９％）の（Ｒ）（Ｓ）型立体配置のジアステレオ異性体が得られる。
【０１１６】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/ H2O (0.1% TFA) 55:45, Kromasil C18カラム) Rt= 17.8分. 
1H NMR (DMSO) d6 δ (ppm) 1.26 (3H dd); 1.81-2.16 (2H m); 2.78-3.12 (3H m); 3.78 (1H qt); 4.94-5.08 (2x2H 2q); 7.12-7.68 (19H arom.) +NH (m).
【０１１７】
工程２：臭化水素酸１−［（３−ビフェニル−４−イル−２−カルボキシ−プロピル）ヒドロキシ−ホスフィノイル］−エチルアンモニウム
工程１から得られた化合物（１０．６ｇ）をＴＨＦ（１００ｍｌ）に懸濁させ、５０ｍｌの水中、７．４ｇの水酸化ナトリウム溶液を０℃で攪拌しながら加える。この混合物を周囲温度で一晩攪拌する。ＴＨＦを蒸発させ、水相を１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ１まで酸性化し、酢酸エチルで抽出する。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させる。白色固体、７．４ｇ（８３％）。
【０１１８】
得られた酸（６ｇ）を６０ｍｌの臭化水素酸（ＣＨ３ＣＯ２Ｈ中４５％）中の溶液とし、この溶液を周囲温度で１時間攪拌する。
【０１１９】
次に、この反応混合物を蒸発乾固させ、真空乾燥させて橙色のガム状生成物を得る。６．９ｇ（９９％）。
【０１２０】
工程３：２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシエトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル(phospinoyl)｝−プロピオン酸
工程２から得られた化合物（６．２３ｇ）をアセトニトリル（７０ｍｌ）に懸濁させる。７０ｍｌの水中、９．８ｇ（８当量）のＮａＨＣＯ３溶液および４．７６ｇ（１．１当量）のイソ酪酸１−［２−（４−ニトロ−フェニル）−アセトキシ］−エチルエステルを順次加える。この混合物を周囲温度で一晩攪拌する。
【０１２１】
アセトニトリルを蒸発させた後、水相を酢酸エチルで抽出する。有機相を１０％クエン酸、飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させる。未処理の生成物を、溶出剤として９：１ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ混合物、次いで７：３を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付す。白色固体、４．４２ｇ（６０％）。
【０１２２】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/ H2O (0.1% TFA) 50:50, Kromasil C18カラム), Rt=3.7分. 
NMR (DMSO d6) δ ppm: 0.95-1.45 (12H m); 1.63-2.15 (2H m); 2.45 (1H m); 2.81-3.03 (3H m); 3.68 (1H m); 6.63 (1H m); 7.20-7.82 (1OH m). 
【０１２３】
工程４：２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスホノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸ベンジルエステル
工程３から得られた化合物（５００ｍｇ）をジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（１０ｍｌ）中の溶液とし、９４５ｍｇ（３当量）のＴＢＴＵ、１ｍｌのＤＩＥＡ（６当量）および２５７ｍｇ（１．２当量）のアラニンベンジルエステル塩酸塩を順次加える。この混合物を周囲温度で１５分間攪拌し、ＤＭＦを蒸発させる。残渣を酢酸エチルで処理し、１０％クエン酸溶液、水、１０％ＮａＨＣＯ３溶液、飽和ＮａＣｌ水溶液で順次洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。濾過した後、溶液を真空蒸発させる。白色固体、１ｇ（９５％）。
【０１２４】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/ H2O (0.1% TFA) 50:50, Kromasil C18カラム) Rt= 8.2 分. 
1H NMR (DMSOd6) δ (ppm): 0.98-1.42 (15H m); 1.48-1.82 (2H m); 2.45 (1H m); 2.69-3.05 (3H m); 3.68 (1H m); 4.33 (1H m); 5.06 (2H s); 6.62 (1H m); 7.21-7.67 (15H m); 8.45 (1H t).
【０１２５】
実施例４：２−（２−ビフェニル−４−イルメチル(ylmetyl)−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ(ethyoxycarbonylamino)）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸
【化１０】
0005607045.tif 000011
【０１２６】
実施例３から得られた２５０ｍｇの化合物を１０ｍｌのＭｅＯＨに溶解させ、１２５ｍｇの１０％Ｐｄ／Ｃを加える。この混合物を水素雰囲気中、標準的な温度および圧力で水素化分解する。１時間後、２０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２を加え、全体をセライトで濾過する。これを蒸発乾固させ、真空乾燥させる。白色固体１８４ｍｇ（８９％）。
【０１２７】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/ H2O (0.1% TFA) 60:40, Kromasil C18カラム) Rt= 4.l分. 
ESI(+) [M+H]+質量=577. 
(1H) NMR DMSO d6, δ (ppm): 1-1.5 (15 H m); 1.5-2.0 (2H m); 2.5 (1H, m); 3.0 (3H m); 3.7 (1H m); 4.2 (1H m); 6.2 (1H m); 7.3-7.7 (9H+1H m); 8.4 (1H dd).
【０１２８】
実施例５：２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ(isobutyrloxy)−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸ナトリウム塩
実施例４から得られた８７ｍｇの化合物を１ｍｌの水と１ｍｌのアセトニトリルの混合物に溶解させる。１２．６ｍｇのＮａＨＣＯ３を加える。得られた溶液を凍結乾燥させ、８７ｍｇの予測化合物を得る。
【０１２９】
実施例６：２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸エチルエステル
【化１１】
0005607045.tif 000012
【０１３０】
実施例３から得られた化合物（５００ｍｇ）を実施例３工程４の条件下でアラニンエチルエステル塩酸塩（１５２ｍｇ）とカップリングさせる。得られた粗生成物を、７：３：０．２  ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＡｃＯＨ混合物を用いてシリカゲルクロマトグラフィーに付す。白色固体、５３０ｍｇ（８８％）。
【０１３１】
ESI(+) [M+H]+質量＝６０５
1H NMR (DMSO d6) δ (ppm): 1.0-1.5 (18H m); 1.6-1.9 (2H m); 2.5 (1H m); 2.7-3.0 (3H m); 3.7 (1H m); 4.0 (2H q); 4.2 (1H qt); 6.6 (1H m); 7.2-7.7 (9H+1H m); 8.4 (1H dd).
【０１３２】
実施例７：１−エトキシカルボニルオキシエチルエステルトリフルオロ酢酸アラニン
工程１：Ｎ−ｔｅｒブチルオキシカルボニル(terbutyloxycaronyl)−１−アラニン１−エトキシカルボニルオキシエチルエステル
不活性雰囲気中、トリエチルアミン（６．４ｇ、１．２当量）の存在下、Ｎ−ｂｏｃ−１−アラニン（ｂｏｃ＝ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル）（１０ｇ）を１００ｍｌの酢酸エチル中の溶液とし、この混合を周囲温度で１５分間攪拌する。次に、ＮａＩ（１．９ｇ、０．２当量）を加え、炭酸１−クロロエチルエチル（９．３８ｇ、１．１当量）を加える。この混合物を還流下で１５時間沸騰させる。反応が完了したところで、この混合物を１０％ＮａＨＣＯ３水溶液（２回）、Ｈ２Ｏおよび飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄する。やや黄色い油状物。１２．９ｇ（８０％）。
【０１３３】
ＴＬＣ（シクロヘキサン／ＥｔＯＡｃ：  ６：４）  Ｒｆ＝０．７３。
【０１３４】
工程２：１−エトキシカルボニルオキシエチルエステルトリフルオロ酢酸Ｌ−アラニン
工程１から得られた化合物（１２．９ｇ）を２５ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２に溶解させ、０℃にて２５ｍｌのトリフルオロ酢酸を加える。この混合物を周囲温度で３時間攪拌する。反応が完了したところで、反応混合物を蒸発乾固させる。残渣をシクロヘキサンで３回処理し、この混合物を再蒸発させて余分なＴＦＡを除去する。やや褐色の油状物、１３．４ｇ（９９％）。
【０１３５】
1H NMR (DMSOd6) δ (ppm):1.2 (3H t); 1.35 (3H dd); 1.45 (3H d); 4.1 (2H q); 6.7 (1H m); 8.3 (3H s).
【０１３６】
実施例８：２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸１−エトキシカルボニルオキシエチルエステル
【化１２】
0005607045.tif 000013
【０１３７】
実施例３から得られた化合物（５００ｍｇ）を、実施例３工程の条件下で実施例７から得られた化合物（５００ｍｇ、１．２当量）とカップリングさせる。粗生成物をシリカゲルクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ／ＡｃＯＨ：  ７：３：０．２）に付す。
【０１３８】
白色固体、３３０ｍｇ（５５％）。
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/ H2O (0.1% TFA) 70:30, Kromasil C18カラム) Rt=5.4 分. 
ESI(+) [M+H]+質量=693 
1H NMR (DMSOd6) δ (ppm) : 1.0-1.4 21Hm); 1.5-2.0 (2H m); 2.5 (1Hm); 2.7-3.0 (3H m); 3.65 (1H m), 4.15 (2H q); 4.25 (2H m); 6.6 (2H m); 7.2-7.7 (9H+1H m); 8.5 (1H dd).
【０１３９】
実施例９：２−（２−ビフェニル−４−イルメチル−３−｛（１−イソブチリルオキシ−エトキシ）−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸
【化１３】
0005607045.tif 000014
【０１４０】
工程１：イソ酪酸１−｛１−［［２−（１−ベンジルオキシカルボニル−エチルカルバモイル）−３−ビフェニル−４−イル−プロピル］−（１−イソブチリルオキシ−エトキシ）−ホスフィノイル］−エチルカルバモイルオキシ｝−エチルエステル
実施例３から得られた最終化合物（３５０ｍｇ）をトルエン中の溶液とする。不活性雰囲気中、９０ｍｇの硫酸テトラブチルアンモニウム、（ｎＢｕ）４Ｎ＋ＳＯ４Ｈ−（０．５当量）、ＮａＩ（８０ｍｇ、１当量）、イソ酪酸１−クロロエチルエステル（１６０ｍｇ、４当量）および０．９ｍｌのＤＩＥＡを加える。この混合物を３時間１２０℃まで加熱する。この反応混合物を周囲温度に戻し、５０ｍｌの酢酸エチルで希釈し、得られた溶液を水、１０％ＮａＨＣＯ３水溶液、飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させる。濾過した後、溶媒を蒸発させ、残渣（４００ｍｇ）を、溶出剤として９０：１０  ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ混合物を用いてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製する。黄色油状物、２００ｍｇ。
【０１４１】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/ H2O (0.1% TFA) 80/20, Kromasil C18カラム) Rt=8.8 分. 
Masse ESI(+) [M+H]+質量=781.
【０１４２】
工程２：２−（２−ビフェニルｋ−４−イルメチル−３−｛（イソブチリルオキシ−エトキシ）−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸
工程１から得られた化合物（２００ｍｇ）をＭｅＯＨ（１０ｍｌ）に溶解させる。４０ｍｇの１０％を加え、この混合物を水素雰囲気中、標準的な温度および圧力で１時間水素化分化する。この混合物をＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、セライトで濾過する。溶媒を蒸発乾固させ、残渣を凍結乾燥させる。白色固体、１０６ｍｇ（６０％）。
【０１４３】
ESI (+) [M+H]+質量 = 691. 
1H NMR (DMSOd6) δ (ppm) :l.0-l.5 (24H m); 1.5-1.7 (2H m); 2.5 (2H m); 2.7-3.0 (3H m); 3.9 (1H m); 4.2 (1H m); 6.4 (1H m); 6.65 (1H m); 7.2-7.7 (9H+1H m); 8.3 (1H m).
【０１４４】
実施例１０：２−（４−ブロモ−ベンジル）−アクリル酸ベンジルエステル
工程１：２−（４−ブロモ−ベンジル）−アクリル酸
この化合物は、２−ビフェニル−４−イルメチル−アクリル酸（実施例２）の合成に関して記載されたプロトコールに従い、ビフェニル−４−イル−アセトアルデヒドを４−ブロモベンズアルデヒドに置き換えて合成される。白色固体。
【０１４５】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/ H2O (0.1% TFA) 70/30, Kromasil C18カラム) Rt= 4.9 分.
【０１４６】
工程２：２−（４−ブロモ−フェニル−４−イルメチル−アクリル）酸ベンジルエステル
エステル化は、実施例２工程３に記載されたプロトコールに従って行われる。無色の油状物。
【０１４７】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/ H2O (0.1% TFA) 70:30, Kromasil C18カラム) Rt= 22.0 分. 
NMR (CDC13) δ (ppm): 3.6 (2Hs); 5.2 (2H s); 5.6 (1H d); 6.4 (1H d); 7.1 (2H d); 
7.4 (7H m).
【０１４８】
実施例１１：２−（２−（４−ブロモ−ベンジル）−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸ベンジルエステル
【化１４】
0005607045.tif 000015
【０１４９】
この化合物は、２−ビフェニル−４−イルメチル−アクリル酸ベンジルエステルの合成に関して記載されたプロトコールに従い、２−（４−ブロモ−ベンジル）−アクリル酸ベンジルエステルを用いて合成される。
【０１５０】
工程１：３−［（１−ベンジルオキシカルボニルアミノ−エチル）−ヒドロキシ−ホスフィノイル］−２−（４−ブロモ−ベンジル）−プロピオン酸ベンジルエステル
実施例１から得られたＲ型立体配置化合物（５．１５ｇ）と実施例１０から得られた化合物（７．２１ｇ）をＢＳＡ（１８ｍｌ）中の溶液とし、この混合物を７５℃で３０時間加熱する。この反応混合物を周囲温度に戻し、酢酸エチルで希釈する。有機相を水で洗浄し、蒸発乾固させる。１Ｒ，２Ｓおよび１Ｒ／２Ｒ型の２つのジアステレオ異性体の、相対比率６５：３５の混合物に相当する白色固体生成物が得られる。アセトニトリルからの再結晶により、１Ｒ，２Ｓ異性体が鏡像体過剰率ｅｅ＞９７％で得られる。白色固体、３．３５ｇ（４２％）。
【０１５１】
NMR (DMSOd6) δ (ppm): 1.2 (3H dd); 1.7-2.2 (2H m); 2.7-3.1 (3H m); 3.8 (1H p); 4.95 (2H dd); 5.05 (2H s); 7.0-7.4 14H m); 7.55 (1H m).
【０１５２】
工程２：３−（（１−アミノエチル）−ヒドロキシ−ホスフィノイル）−２−（４−ブロモ−ベンジル）−プロピオン酸
工程１から得られた３．３ｇの化合物を用い、実施例３工程２に記載されたプロトコールに従って、予測化合物２．５ｇ（９８％）を白色固体の形で得る。
【０１５３】
工程３：２−（４−ブロモ−ベンジル）−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオン酸
工程２から得られた２．５ｇの化合物を用い、実施例３工程３に記載されたプロトコールに従って、予測化合物を得る。白色固体、２．６ｇ。
【０１５４】
(M+H)+質量=508-510 
NMR (DMSOd6) δ (ppm): 1.0-1.5 (12 Hm); 1.7 (2H m); 2.5 (1H m); 2.9 (3H m); 3.8 (1H)m; 6.6 (1H m); 7.1 (2H d); 7.4 (2H d); 7.75 (1H m).
【０１５５】
工程４：２−（２−（４−ブロモ−ベンジル）−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸ベンジルエステル
工程３から得られた１ｇの化合物と３８８ｍｇのアラニンベンジルエステルを用い、実施例３工程４のプロトコールに従って、予測化合物を得る。白色固体。
【０１５６】
(M+H)+質量=669-671 
NMR(DMSOd6) δ (ppm): 1.0-1.3 (6H d); 1.25 (6H m); 1.45 (3H d); 1.6-1.9 (2H m) ; 2.5 (1H m); 2.7-3.0 (3H m); 3.7 (1H m); 4.3 (1H m); 5.0 2H dd)); 6.6 (1H m); 7.10 (2H d); 7.3 (4H s, +2H d); 7.5 (1H m), 8.4 (1H dd).
【０１５７】
実施例１２：２−（２−（４−ブロモ−ベンジル）−３−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸
【化１５】
0005607045.tif 000016
【０１５８】
工程１：３−（（１−ベンゾイルカルボニルアミノ−エチル）−ヒドロキシ−ホスフィノイル）−２−（４−ブロモ−ベンジル）−プロピオン酸
実施例１１工程１から得られた化合物（１．２ｇ）をＴＨＦ（１０ｍｌ）に溶解させ、５ｍｌの水中０．７ｇのＮａＯＨの溶液を加える。この混合物を周囲温度で３時間攪拌する。ＴＨＦを蒸発させ、水相を１Ｎ  ＨＣｌ溶液でｐＨ＝１まで酸性化し、酢酸エチルで抽出する。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させる。白色固体、０．９ｇ（９０％）。
【０１５９】
工程２：２−（３−（（１−ベンジルオキシカルボニルアミノ−エチル）−ヒドロキシ−ホスフィノイル）−２−（４−ブロモ−ベンジル）−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸ｔ−ブチルエステル
工程１から得られた化合物（０．９ｇ）を窒素中、１０ｍｌのＤＭＦに溶解させ、ｔ−ブチルアラニナート塩酸塩（４５０ｍｇ）、２．５ｍｌのＤＩＥＡ（６当量）および１．９８ｇのＴＢＴＵ（３当量）を順次加える。この混合物を周囲温度で１５分間攪拌し、実施例３の工程４のように反応物を処理する。１．１０ｇの予測生成物（９７％）が得られる。
【０１６０】
工程３：２−（３−（（１−アミノ−エチル）−ヒドロキシ−ホスフィノイル）−２−（４−ブロモ−ベンジル）−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸
工程２で得られた化合物を５０：５０  ＣＨ２Ｃｌ２／ＴＦＡ混合物（４０ｍｌ）に溶解させ、この混合物を周囲温度で１時間攪拌する。残渣を蒸発乾固させ、水で処理し、凍結乾燥させる。１．０ｇの予測化合物が得られる。
【０１６１】
この化合物をＨＢＲ／ＡｃＯＨ混合物（１０ｍｌ）に溶解させ、この溶液を周囲温度で１時間攪拌する。次に、この混合物を減圧下で蒸発させる。残渣を水で処理し、凍結乾燥させる。９３０ｍｇの予測生成物が得られる。
【０１６２】
工程４：２−（２−（４−ブロモ−ベンジル）−３−｛ヒドロキシ−［１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸
上記の化合物を１５ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２に溶解させる。０．７６ｇの炭酸イソブチルオキシエチルスクシンイミジルと１．８７ｍｌのＤＩＥＡを加え、この混合物を周囲温度で１時間攪拌する。次に、この混合物をＨ２Ｏおよび飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固させる。粗生成物をＨＰＬＣにより精製する。
【０１６３】
HPLC (ACE C18カラム, 40:60 CH3CN(0, 1% TFA) /H2O (O.1%TFA) ) Rt=8.66 分.
ESI: (M+H)+= 578-580 
NMR (DMSO d6) δ (ppm): 1.0 (6H d); 1.1 (3H m); 1.2 (3H d); 1.35 (3H d); 1.6-1.9 (2H m); 2.5 (1H m); 2.7-2.9 (3H m); 3.7 (1H m); 4.1 (1H m); 6.6 (1H m); 7.1 (2H d); 7.4 (2H,d); 7.6 (1H dd); 8.2 (1H dd).
【０１６４】
実施例１３：（Ｒ）−ベンジルオキシカルボニルアミノ((R)-benzyloxycarbonylamin))（チオフェン−３−イル）メチル−ホスフィン酸
【化１６】
0005607045.tif 000017
【０１６５】
工程１：（ベンズヒドリルアミノ）（チオフェン−３−イル）メチル−ホスフィン酸
６０ｍｌの無水エタノール中、２０．０ｇ（８０ミリモル）のオルトリン酸ジフェニルメチルアミンの混合物を還流下で攪拌しながら沸騰させる。１９ｍｌのエタノール中、１６０．０ミリモルの３−チオフェンカルボキシアルデヒドの溶液を３０分で滴下する。
【０１６６】
反応をＨＰＬＣにより追跡する。２．５時間後、反応を周囲温度に戻す。この混合物にＥｔ２Ｏ／アセトン混合物（６０ｍｌ）を加える。得られた白色沈殿を濾過し、水（２×５０ｍｌ）およびアセトン（２×５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させる。白色固体、１５．４ｇ（５６％）。
【０１６７】
工程２：アミノ（チオフェン−３−イル）メチルホスフィン酸
工程１から得られた１５ｇの化合物と１２２ｍｌの６Ｎ  ＨＣｌの混合物を還流下で２時間沸騰させる。冷却後、反応媒体を半分濃縮し、３×１．５ｌのエチルエーテルで抽出する。溶液を蒸発乾固させ、油性残渣を１２０ｍｌのエタノールで処理する。溶液を０℃まで冷却し、３０ｍｌの酸化プロピレンを加える。白色固体が沈殿する。この沈殿を脱水し、エタノール（２×２０ｍｌ）、エチルエーテル（２×１０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させる。白色固体、７．３２ｇ（９５．１％）。
【０１６８】
(1H) NMR DMSO d6, δ (ppm): 4.92 (1H dd); 6.77 (1H, d); 7.10-7.50 (3H, m); 8.23 (3H m).
【０１６９】
工程３：（ベンジルオキシカルボニルアミノ）（チオフェン−３−イル）メチル−ホスフィン酸
工程２から得られた化合物を２５ｍｌのジアキサン(diaxane)に懸濁させる。水酸化ナトリウム（２３ｍｌ）を加えることにより、ｐＨを９．５に調整する。６．４６ｍｌのクロロギ酸ベンジルを攪拌しながら加える。０℃で３時間後、この混合物を周囲温度に戻し、氷（１Ｌ）と濃ＨＣｌ（３０ｍｌ）の混合物に注ぐ。生じた白色沈殿を脱水し、水（２×２０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させる。白色固体、７．０９ｇ（４７％）。
【０１７０】
HPLC (CH3CN (0.1% TFA)/H2O (0.1% TFA) 70:30, Kromasil C18カラム), Rt: 12.19分.
【０１７１】
ラセミホスフィン酸の分離は、酢酸エチル／イソプロパノール混合物＝３．５：１中、Baylis et al.(J. Chem. Soc. Perkin Trans I 1984, 2845)に記載されているように、得られた塩を（Ｒ）（＋）α−メチルベンジルアミンで再結晶させることにより行う。白色固体、１．４２ｇ（２７％）。
【０１７２】
(1H) NMR DMSO d6 δ (ppm): 4.92 (1H dd); 5.05 (2H, s); 6.77 (1H, d); 7.10-7.50 (8H, m); 8.20 (1H, d).
【０１７３】
実施例１４：（Ｒ）−（ベンゾイルカルボニルアミノ）（フェニル）メチル−ホスフィン酸
【化１７】
0005607045.tif 000018
【０１７４】
工程１：（ベンズヒドリルアミノ）（フェニル）メチルホスフィン酸
７５ｍｌの無水エタノール中、２４．９５ｇ（１００ミリモル）のオルトリン酸ジフェニルメチルアミンの混合物を還流下で攪拌しながら沸騰させる。２４ｍｌのエタノール中、２００ミリモルのベンズアルデヒドの溶液を３０分で滴下する。反応をＨＰＬＣにより追跡する。２．５時間後、反応を周囲温度に戻す。この混合物にＥｔ２Ｏ／アセトン混合物（７５ｍｌ）を加える。得られた白色沈殿を濾過し、水（２×６０ｍｌ）およびアセトン（２×６０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させる。白色固体、２０．２ｇ（６０．１％）。
【０１７５】
工程２：アミノ（フェニル）メチルホスフィン酸
工程１から得られた２０ｇの化合物と１６０ｍｌの６Ｎ  ＨＣｌの混合物を還流下で２時間沸騰させる。
【０１７６】
冷却後、反応媒体を半分濃縮し、３×１．５ｌのエチルエーテルで抽出する。溶液を蒸発乾固させ、油性残渣を１６０ｍｌのエタノールで処理する。溶液を０℃まで冷却し、４０ｍｌの酸化プロピレンを加える。白色固体が沈殿する。この沈殿を脱水し、エタノール（２×２０ｍｌ）、エチルエーテル（２×１０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させる。白色固体、７．２５ｇ（９５．３％）。
【０１７７】
(1H) NMR DMSO d6 δ (ppm): 4.92 (1H dd); 6.77 (1H, d); 7.10-7.50 (5H, m); 8.23 (3H, m).
【０１７８】
工程３：（ベンジルオキシカルボニルアミノ）（フェニル）メチル−ホスフィン酸
工程２から得られた化合物を２５ｍｌのジアキサン(diaxane)に懸濁させる。水酸化ナトリウム（２３ｍｌ）を加えることにより、ｐＨを９．５に調整する。６．４６ｍｌのクロロギ酸ベンジルを攪拌しながら加える。０℃で３時間後、この混合物を周囲温度に戻し、氷（１Ｌ）と濃ＨＣｌ（３０ｍｌ）の混合物に注ぐ。生じた白色沈殿を脱水し、水（２×２０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させる。白色固体、１１．４４ｇ（８８．５％）。
【０１７９】
HPLC (CH3CN (0.1% TFA)/H2O (0.1% TFA) 40:60, Kromasil C18カラム), Rt: 3.90分。
【０１８０】
ラセミホスフィン酸の分離は、酢酸エチル／イソプロパノール混合物＝３．５：１中、Baylis et al.(J. Chem. Soc. Perkin Trans I 1984, 2845)に記載されているように、得られた塩を（Ｒ）（＋）α−メチルベンジルアミンで再結晶させることにより行う。白色固体、３．９ｇ（３４．０％）。
【０１８１】
(1H) NMR DMSO d6 δ (ppm) : 4.92 (1H dd); 5.0 (2H, s); 6.77 (1H, d); 7.10-7.50 (10H, m); 8.31 (1H, d).
【０１８２】
実施例１５：２−（４−チオフェン−３−イル−ベンジル）−アクリル酸メチルエステル
この化合物は、２−ビフェニル−４−イルメチル−アクリル酸（実施例２）の合成に関して記載されたプロトコールに従い、ビフェニル−４−イル−アセトアルデヒドを４−ブロモベンズアルデヒドに置き換えて合成される。白色固体（４８．０％）。
【０１８３】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 70:30, Kromasil C18カラム) Rt= 11.28 min.
【０１８４】
実施例１６：２−［２−｛ヒドロキシ−［（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−フェニル−メチル］−ホスフィノイルメチル｝−３−（４−チオフェン−３−イル−フェニル）−プロピオニルアミノ］−プロピオン酸
【化１８】
0005607045.tif 000019
【０１８５】
この化合物は、実施例３に記載されたプロトコールに従い、２−ビフェニル−４−イルメチル−アクリル酸ベンジルエステルを２−（４−チオフェン−３−イル−ベンジル）−アクリル酸メチルエステル（実施例１５）に置き換えて合成される。
【０１８６】
工程１：３−［（１−ベンジルオキシカルボニルアミノ−エチル）−ヒドロキシ−ホスフィノイル］−２−（４−チオフェン−３−イル−ベンジル）−プロピオン酸エチルエステル
実施例１４から得られたＲ型立体配置の化合物（１５．４２ｇ；１．２当量）と実施例１５から得られた化合物（１３．８２ｇ；１．０当量）をＢＳＡ（５０ｍｌ）中の溶液とし、この混合物を１５時間７５℃で加熱する。この反応混合物を周囲温度に戻し、酢酸エチルで希釈する。有機相を水で洗浄し、蒸発乾固させる。１Ｒ，２Ｓと１Ｒ，２Ｒの２つのジアステレオ異性体の、相対比率６５：３５の混合物に相当する白色固体生成物が得られる。白色固体、１７．２６ｇ（６８％）。
【０１８７】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 70:30, Kromasil C18カラム) Rt= 6.51 min. 
NMR (DMSOd6) δ (ppm) 1.50 (3H, t), 1.81-2.16 (2H, m); 2.78-3.12; (2H, m), 3.68 (3H, s); 3.78 (1H, qt); 4.50 (2H, q); 4.90 (1H, m); 5.20 (2H, s); 7.12-8.15 (17 芳香族+NH , m).
【０１８８】
工程２：（Ｒ）−アミノ（フェニル）メチル−３−エトキシ−３−オキソ−２−（４−チオフェン−３−イル）ベンジル）プロピル）ホスフィン酸エチルエステルヒドロブロミド
工程１から得られた１７．８６ｇの化合物をＡｃＯＨ中４８％のＨＢｒ１８０ｍｌに溶解させる。この混合物を周囲温度で１時間攪拌し、この混合物を減圧下で蒸発させて粗生成物を油状物の形で得る（１００％）。
【０１８９】
NMR (DMSOd6) δ (ppm) 1.50 (3H, t); 1.81-2.16 (2H, m); 2.78-3.12, (2H, m); 3.68 (3H, s); 3.78 (1H, qt); 4.50 (2H, q); 4.90 (1H, m); 5.20 (2H, s); 7.12-8.0 (12 H, m); 8.15 (3H, m).
【０１９０】
工程３：（Ｒ）−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）（フェニル）メチル（（Ｓ）−３−エトキシ−３−オキソ−２−（４−（チオフェン−３−イル）ベンジル）プロピル）ホスフィン酸エチルエステル
工程２から得られた化合物（３０．９ｍｍｏｌ）を３００ｍｌのＤＭＦに溶解させる。この溶液に、５０ｍｌのＤＭＦ中、Ｅｔ３Ｎ（３５ｍｌ、２５０ｍｍｏｌ、８当量）およびＢｏｃ２Ｏ（６．７５ｇ、１当量）を加える。この混合物を周囲温度で一晩攪拌する。ＤＭＦを減圧下で蒸発させ、この混合物をＥｔｏＡｃで処理する。有機相を１０％クエン酸溶液、１０％ＮａＨＣＯ３溶液、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮し、１５．１６ｇの生成物（９０．２％）を得る。
【０１９１】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 70:30, Kromasil C18カラム) Rt= 5.42分. 
NMR (DMSOd6) δ (ppm) 1.50 (3H, t); 1.45 (9H, s); 1.81-2.16 (2H, m); 2.78-3.12, (2H, m); 3.78 (1H, qt); 4.50 (2H, q); 4.90 (1H, m); 7.12-8.0 (12H 芳香族 + NH, m).
【０１９２】
工程４：３−（（（Ｒ）−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）（フェニル）メチル）（ヒドロキシ）ホスホリル）−２−（４−（チオフェン−３−イル）ベンジル）プロパン酸
工程３から得られた化合物（１５．１６ｇ；２７．８８ｍｍｏｌ）を２８０ｍｌのアセトンに溶解させ、１Ｎ  ＮａＯＨ（２７８．８ｍｌ、１０当量）を滴下する。この混合物を周囲温度で一晩攪拌し、アセトンを減圧下で蒸発させる。この混合物をＥｔｏＡｃで処理する。水相を抽出し、１Ｎ  ＨＣｌで酸性化する。次に、水相をＥｔｏＡｃで抽出する。その後、有機相をＨ２Ｏ、飽和ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で蒸発させ、１３．７３ｇの油状物（９５％）を得る。
【０１９３】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 50:50, Kromasil C18カラム) Rt= 11.40分. 
NMR (DMSOd6) δ (ppm) 1.45 (9H, s); 1.81-2.16 (2H, m); 2.78-3.12, (2H, m); 3.78 (1H, qt); 4.90 (1H, m); 7.12-8.0 (12H 芳香族 + NH, m).
【０１９４】
工程５：（Ｒ）−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）（フェニル）（メチル（（Ｓ）−３−（（Ｓ）−１−メトキシ−１−オキソプロパン−２−イルアミノ）−３−オキソ−２−（４−（チオフェン−３−イル）ベンジル）プロピル）ホスフィン酸メチルエステル
工程４から得られた１５０ｍｇの化合物と５２ｍｇのアラニンメチルエステルを用い、実施例３工程４のプロトコールに従って、予測化合物が得られる。
【０１９５】
予測されるジアステレオ異性体が、溶出系として５０：５０  ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）を用いるＫｒｏｍａｓｉｌ  Ｃ１８カラムでの半分取ＨＰＬＣにより得られる。白色固体：５０ｍｇ（３０．０％）。
【０１９６】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 70:30, Kromasil C18カラム) Rt= 6.0分. 
NMR (DMSOd6) δ (ppm): 1.10-1.50 (12H, m); 1.81-2.16 (2H, m); 2.78-3.12, (3H, m); 3.48 (3H, s); 3.78 (1H, qt); 4.25 (1H, d); 4.90 (1H, m); 7.12-7.81 (12 H + NH, m); 8.5 (1H, d).
【０１９７】
工程６：（Ｒ）−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）（フェニル）メチル（（Ｓ）−３−（（Ｓ）−１−メトキシ−１−オキシプロパン−２−イルアミノ）−３−オキソ−２−（４−（チオフェン−３−イル）ベンジル）プロピル）ホスフィン酸
工程５から得られた５０ｍｇの化合物を２ｍｌのアセトン中の溶液とする。８００μｌの１Ｎ  ＮａＯＨ（１０当量）を加え、この混合物を周囲温度で２．５時間攪拌し、アセトンを減圧下で蒸発させる。この混合物をＥｔｏＡｃで処理する。水相を抽出し、１Ｎ  ＨＣｌで酸性化する。その後、水相をＥｔｏＡｃで抽出する。次に、有機相をＨ２Ｏ、飽和ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で蒸発させ、４８ｍｇ（９８％）を得る。
【０１９８】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 50:50, Kromasil C18カラム) Rt= 7.91分. 
NMR (DMSOd6) δ (ppm) : 1.10-1.50 (12H, m); 1.81-2.16 (2H, m); 2.78-3.12, (3H, m); 3.78 (1H, qt); 4.25 (1H, d); 4.90 (1H, m); 7.12-7.81 (12 H + NH, m); 8.5 (1H, d).
【０１９９】
工程７：（２Ｓ）−２−（（２Ｓ）−３−（（（Ｒ）−アミノ（フェニル）メチル）（ヒドロキシ）ホスホリル）−２−（４−（チオフェン−３−イル）ベンジル）プロパンアミド）プロパン酸トリフルオロアセテート
工程６から得られた４８ｍｇの化合物を４ｍｌのＤＣＭ中の溶液とする。６０μｌのトリフルオロ酢酸を加え、この混合物を０℃で４５分間攪拌する。この混合物を減圧下で蒸発させ、４９ｍｇ（１００％）を得る。
【０２００】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 50:50, Kromasil C18カラム) Rt= 2.60分. 
NMR (DMSOd6) δ (ppm): 1.20 (3H, d); 1.81-2.16 (2H, m); 2.78-3.12, (3H, m); 3.78 1H (qt.); 4.25 (1H, d); 4.90 (1H, m); 7.12-7.81 (12H, m); 8.4 (1H, d); 8.7 (3H, m).
【０２０１】
工程８：２−［２−｛ヒドロキシ−［（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニル−アミノ）−フェニル−メチル］−ホスフィノイルメチル｝−３−（４−チオフェン−３−イル−フェニル）−プロピオニルアミノ］−プロピオン酸
上記の化合物を１ｍｌのＣＨ３ＣＮと３４０μｌの２Ｎ  ＮａＨＣＯ３に溶解させ、３４ｍｇの炭酸イソブチルオキシエチルスクシンイミド（１．２当量）を加え、この混合物を６０℃で１時間攪拌する。この混合物を酢酸エチルで処理し、Ｈ２Ｏおよび飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固させる。未処理の生成物をＨＰＬＣで精製する。
【０２０２】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 38:62, Atlantis T3カラム) Rt=10.52分. 
NMR (DMSOd6) δ (ppm): 1.0-1.3 (6H d); 1.20 (3H, d); 1.25 (3H, d); 1.81-2.16 (2H, m); 2.78-3.12, (3H, m); 3.78 1H (qt.); 4.25 (1H, d); 4.90 (1H, m); 6.64 (1H m); 7.12-7.81 (13H, m); 8.28 (1H, d).
【０２０３】
実施例１７：２−［２−｛ヒドロキシ−［（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−フェニル−メチル］−ホスフィノイルメチル｝−３−（４−チオフェン−３−イル−フェニル）−プロピオニルアミノ］−３−ヒドロキシプロピオン酸
【化１９】
0005607045.tif 000020
【０２０４】
この化合物は、実施例１６に記載されたプロトコールに従い、アラニンメチルエステルをセリンメチルエステル（Ｏ−ｔＢｕ）に置き換えて合成される。
【０２０５】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 38:62, Atlantis T3カラム) Rt= 10.02分. 
NMR (DMSOd6) δ (ppm) : 1.0-1.3 (6H, d); 1.20 (3H, d); 1.81-2.16 (2H, m); 2.78- 3.12, (3H, m); 3.40-3.60 (2H, m); 3.78 (1H, qt); 4.25 (1H, d); 4.90 (1H, m); 6.64 (1H m); 7.12-7.81 (13H, m); 8.28 (1H, d).
【０２０６】
実施例１８：２−（３−ビフェニル−４−イル−２−｛ヒドロキシ−［（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−チオフェン−３−イル−メチル］−ホスフィノイルメチル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸
【化２０】
0005607045.tif 000021
【０２０７】
工程１：３−（（（Ｒ）−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）（チオフェン−３−イル）メチル）（ヒドロキシ）ホスホリル）−２−（ビフェニル−４−イルメチル）プロパン酸
実施例１３から得られたＲ型立体配置の化合物（６６０ｍｇ；１．０当量）と実施例２から得られた化合物（６４２ｍｇ；１．２当量）をＢＳＡ（５ｍｌ）中の溶液とし、この混合物を１５時間７５℃で加熱する。この反応混合物を周囲温度に戻し、酢酸エチルで希釈する。有機相を水で洗浄し、蒸発乾固させる。１Ｒ，２Ｓと１Ｒ，２Ｒの２つのジアステレオ異性体の、相対比率６５：３５の混合物に相当する白色固体生成物が得られる。白色固体、１．４ｇ（１００％）。
【０２０８】
NMR (DMSOd6) δ (ppm): 1.60-2.00 (2H, m); 2.78-3.12, (2H, m); 3.78 (1H, qt); 4.90 (1H, m); 5.20 (2H, s); 7.12-8.15 (17H 芳香族+NH , m).
【０２０９】
工程２：（Ｒ）−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）（チオフェン−３−イル）メチル（２−（ビフェニル−４−イルメチル）−３−（（Ｓ）−１−メトキシ−１−オキソプロパン−２−イルアミノ）−３−オキソプロピル）ホスフィン酸
工程１から得られた２．１２ｍｍｏｌの化合物と２．７５ｍｍｏｌのアラニンメチルエステルを用い、実施例３工程４のプロトコールに従って予測化合物を得る。白色固体：１．４０ｇ（９０．０％）。
【０２１０】
NMR (DMSOd6) δ (ppm): 1.25-1.40 (3H, m); 1.60-2.00 (2H, m); 2.78-3.12, (2H, m); 3.40 (3H, s); 3.78 (1H, qt); 4.25 (1H, m); 4.90 (1H, m); 5.20 (2H, s); 7.12-8.15 (17H 芳香族 +NH , m).
【０２１１】
工程３：２−｛２−［（ベンジルオキシカルボニルアミノ−チオフェン−３−イル−メチル）−ヒドロキシ−ホスフィノイルメチル］−３−ビフェニル−４−イル−プロピオニルアミノ｝−プロピオン酸
工程２から得られた１００ｍｇの化合物を４ｍｌのアセトン中の溶液とする。１．６ｍｌの１Ｎ  ＮａＯＨ（１０当量）を加え、この混合物を周囲温度で２．５時間攪拌し、アセトンを減圧下で蒸発させる。この混合物をＥｔｏＡｃで処理する。水相を抽出し、１Ｎ  ＨＣｌで酸性化する。次に、水相をＥｔｏＡｃで抽出する。その後、有機相をＨ２Ｏ、飽和ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で蒸発させ、９８ｍｇ（９８％）を得る。
【０２１２】
NMR (DMSOd6) δ (ppm): 1.25-1.40 (3H, m); 1.60-2.00 (2H, m); 2.78-3.12, (2H, m); 3.78 (1H, qt); 4.25 (1H, m); 4.90 (1H, m); 5.20 (2H, s); 7.12-8.15 (17 H 芳香族 +NH , m).
【０２１３】
工程４：（２Ｓ）−２−（（２Ｓ）−３−（（（Ｒ）−アミノ（チオフェン−３−イル）メチル）（ヒドロキシ）ホスホリル）−２−（ビフェニル−４−イルメチル）プロパンアミド）プロパン酸トリフルオロアセテート
工程３から得られた化合物を、酢酸中４８％ＨＢｒ溶液４ｍｌ中の溶液とする。この混合物を周囲温度で２時間攪拌する。この混合物を減圧下で蒸発させ、残渣を、溶出系として５０：５０  ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）を用いるＫｒｏｍａｓｉｌ  Ｃ１８カラムでの半分取ＨＰＬＣにより精製する。白色固体：２８ｍｇ（５７．１％）。
【０２１４】
NMR (DMSOd6) δ (ppm): 1.25-1.40 (3H, m); 1.60-2.00 (2H, m); 2.78-3.12, (2H, m); 3.78 (1H, qt); 4.25 (1H, m); 4.90 (1H, m); 7.12-8.15 (12 H, m); 8.50 (3H, m).
【０２１５】
工程５：２−（３−ビフェニル−４−イル−２−｛ヒドロキシ−｛（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−チオフェン−３−イル−メチル］−ホスフィノイルメチル｝−プロピオニルアミノ）−プロピオン酸
上記の化合物を１ｍｌのＣＨ３ＣＮと１９５μｌの２Ｎ  ＮａＨＣＯ３に溶解させ、２０ｍｇの炭酸イソブチルオキシエチルスクシンイミド（１．２当量）を加える。この混合物を６０℃で１時間攪拌する。この混合物を酢酸エチルで処理し、Ｈ２Ｏおよび飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固させる。粗生成物をＨＰＬＣで精製する。
【０２１６】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 38:62, Atlantis T3カラム) Rt= 10.42分. 
NMR (DMSOd6) δ (ppm) : 1.0-1.3 (6H d); 1.20 (3H, d); 1.25 (3H, d); 1.80-2.20 (2H, m); 2.80-3.20, (3H, m); 3.75 1H (qt.); 4.25 (1H, d); 4.90 (1H, m); 6.65 (1H m), 7.10-7.80 (13H, m); 8.28 (1H, d).
【０２１７】
実施例１９：２−｛３−ビフェニル−４−イル−２−［ヒドロキシ−（１−イソブチリルオキシメトキシカルボニルアミノ−エチル）−ホスフィノイルメチル］−プロピオニルアミン｝−プロピオン酸
【化２１】
0005607045.tif 000022
【０２１８】
工程１：２−［（１−ベンジルオキシカルボニルアミノ−エチル）−ヒドロキシ−ホスフィノイルメチル］−３−ビフェニル−４−イル−プロピオン酸
実施例３の工程１から得られた化合物（１．２ｇ）をＴＨＦ（１０ｍｌ）に溶解させ、５ｍｌの水中０．７ｇのＮａＯＨの溶液を加える。この混合物を周囲温度で３時間攪拌する。ＴＨＦを蒸発させ、水相を１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ１まで酸性化し、酢酸エチルで抽出する。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させる。白色固体、０．９ｇ（９０％）。
【０２１９】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 38:62, ACE C18カラム) Rt= 17.16分. 
1H NMR (DMSOd6): δ (ppm) 1.26 (3H, dd); 1.81-2.16 (2H, m); 2.78-3, 12(3H, m); 3.78 (1H, qt); 5.20 (2H, q); 7.12-7.68 (14H 芳香族 +NH (m). )
【０２２０】
工程２：２−｛２−［（１−ベンジルオキシカルボニルアミノ−エチル）−ヒドロキシ−ホスフィノイルメチル］−３−ビフェニル−４−イル−プロピオニルアミノ｝−プロピオン酸ｔ−ブチルエステル
窒素中、工程１から得られた化合物（０．９ｇ）を１０ｍｌのＤＭＦに溶解させ、ｔ−ブチルアラニナート塩酸塩（４５０ｍｇ）、２．５ｍｌのＤＩＥＡ（６当量）および１．９８ｇのＴＢＴＵ（３当量）を順次加える。この混合物を周囲温度で１５分間攪拌し、この反応物を実施例３の工程４のように処理する。１．１０ｇの予測生成物（９７％）が得られる。
【０２２１】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 50:50, ACE C18カラム) Rt= 11.93分. 
1H NMR (DMSOd6): δ (ppm) 1.15-1.35 (6H, m); 1.42 (9H, s);l.81-2.16 (2H, m); 2.78-3, 12(3H, m); 3.78 (1H, qt); 4.22 (1H, q); 5.20 (2H, q); 7.12-7.68 (14H 芳香族 +NH (m).
【０２２２】
工程３：２（２Ｓ）−２−（（２Ｓ）−３−（（（Ｒ）−１−アミノエチル）（ヒドロキシ）ホスホリル）−２−（ビフェニル−４−イルメチル）プロパンアミド）プロパン酸
工程２で得られた化合物をＨＢｒ／ＡｃＯＨ混合物（１０ｍｌ）に溶解させ、溶液を周囲温度で１時間攪拌する。次に、この混合物を減圧下で蒸発させる。残渣を水で処理し、凍結乾燥させる。９３０ｍｇの予測化合物が得られる（１００％）。
【０２２３】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 50:50, ACE C18カラム) Rt= 11.93分. 
1H NMR (DMSOd6): δ (ppm) 1.15-1.35 (6H, m), 1.42 (9H, s),l.81-2.16 (2H, m), 2.78-3, 12(3H, m), 3.78 (1H, qt), 4.22 (1H, q), 5.20 (2H , q), 7.12-7.68 (14H 芳香族 +NH (m).
【０２２４】
工程４：２−｛３−ビフェニル−４−イル−２−［ヒドロキシ−（１−イソブチリルオキシ−メトキシカルボニルアミノ−エチル）−ホスフィノイルメチル］−プロピオニルアミノ｝−プロピオン酸
工程３から得られた３００ｍｇの化合物を２ｍｌのＣＨ３ＣＮと２ｍｌの２Ｎ  ＮａＨＣＯ３に溶解させ、１８６ｍｇの炭酸イソブチルオキシエチルスクシンイミド（１．２当量）を加える。この混合物を６０℃で１時間攪拌する。この混合物を酢酸エチルで処理し、Ｈ２Ｏおよび飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固させる。粗生成物をＨＰＬＣにより精製し、１７０ｍｇの目的生成物を得る（５０．５％）。
【０２２５】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 38:62, Atlantis T3カラム) Rt= 8.15分. NMR(DMSOd6) δ (ppm) : 1.0-1.3 (6H, d); 1.25 (3H, dd); 1.45 (3H, d); 1.6-1.9 (2H, m); 2.5 (1H, m); 2.7-3.0 (3H, m); 3.7 (1H, m); 4.3 (1H, m); 5.65 (2H, s); 7.10-7.80 (9H, m); 8.4 (1H dd).
【０２２６】
実施例２０：２−ジメチル−プロピオン酸１−（１−｛［３−ビフェニル−４−イル−４−イル−２−（１−カルボキシ−エチルカルバモイル）−プロピル］−ヒドロキシ−ホスフィノイル｝−エチルカルバモイルオキシ）−エチル酸
【化２２】
0005607045.tif 000023
【０２２７】
実施例１９工程３から得られた３９４ｍｇの化合物を２ｍｌのＣＨ３ＣＮと２ｍｌの２Ｎ  ＮａＨＣＯ３に溶解させ、２７２ｍｇの炭酸イソブチルオキシエチルスクシンイミド（１．２当量）を加え、この混合物を６０℃で１時間攪拌する。この混合物を酢酸エチルで処理し、Ｈ２Ｏおよび飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固させる。粗生成物をＨＰＬＣにより精製し、３３０ｍｇの目的生成物（７１．６％）を得る。
【０２２８】
HPLC (CH3CN (0.1 % TFA)/H2O (0.1% TFA) 38:62, Atlantis T3カラム) Rt= 16.93および 18.41分. 
NMR (DMSOd6) δ (ppm) : 1.20 (9H, d); 1.25 (3H, dd); 1.45 (3H, d); 1.6-1.9 (2H, m); 2.5 (1H, m); 2.7-3.0 (3H m); 3.7 (1H, m); 4.3 (1H, m); 6.6 (1H m); 7.10-7.80 
(9H, m); 8.4 (1H dd).
【０２２９】
実施例２１：２−［（１−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイルメチル｝−シクロペンタンカルボニル）−アミノ］−プロピオン酸
【化２３】
0005607045.tif 000024
【０２３０】
工程１：シクロペンタン酸ｔ−ブチルエステル
シクロペンタン酸（１５ｇ、０．１３１ｍｏｌ）、ｔＢｕＯＨ（２．１ｍｌ）およびＨ２ＳＯ４（７５０μｌ）を厚壁フラスコに入れる。次に、−７８℃で、およそ１５０ｍｌの濃イソブチレンを加える。このフラスコを密閉し、周囲温度に戻し、周囲温度で４晩攪拌する。
【０２３１】
余分なイソブチレンを蒸発させた後、この混合物をＥｔ２Ｏで処理し、１０％ＮａＨＣＯ３で洗浄する。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮し、１２．０３ｇの予測生成物（収率：８０．６％）を得る。
【０２３２】
NMR (CDCl3) δ (ppm): 1.40 (9H, d); 1.45-1.90 (8H, m); 2.55 (1H, m).
【０２３３】
工程２：１−（ヒドロキシメチル）シクロペンタンカルボン酸ｔ−ブチルエステル
ＴＨＦ（１９０ｍｌ）中、ｉＰＲ２ＮＨ（７．９１ｍｌ、５６．１１ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に、ヘキサン中ｎＢｕＬｉ（２．５Ｍ、２３．３ｍｌ、５８．１７ｍｍｏｌ、１．０４当量）を加える。３０分後、この混合物を−７８℃まで冷却し、窒素中３０分で、２５ｍｌのＴＨＦ中、工程１から得られた化合物（９．５４ｇ、５６．１１ｍｍｏｌ）の溶液を加える。この混合物を−７８℃で１時間攪拌し、パラホルムアルデヒド（５当量、８．３７ｇ）を加え、この混合物を−７８℃で１時間、そして周囲温度で１２時間攪拌する。
【０２３４】
１９０ｍｌの飽和ＮＨ４Ｃｌ溶液を加え、この混合物をＥｔｏＡｃ（２×２００ｍｌ）で抽出する。有機相を１Ｎ  ＨＣｌ、飽和ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮し、目的生成物（収率：６０％）を得る。
【０２３５】
NMR (CDCl3) δ (ppm): 1.40 (9H, d); 1.45-1.90 (8H, m); 3.50 (2H, s). 
HPLC Atlantis T3 4.6 x 100mm, 3μm、 勾配：３０分で、CH3CN (0.1% TFA)/H2O (0.1% TFA)１０〜９０％ CH3CN Rt: 12.43分.
【０２３６】
工程３：（１Ｒ）−１−（メトキシヒドロホスホリル）エチルカルバミン酸ベンジル
窒素下、実施例３工程２から得られた化合物（６ｇ、２４．６７ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ／トルエン混合物に溶解させる。トリメチルシリルジアゾメタン溶液を、色が変わらなくなるまで（ガス発生の終了に相当する）滴下する。この混合物を周囲温度で１時間攪拌し、トルエンを減圧下で蒸発させる。この混合物をＥｔｏＡｃで抽出する。有機相を１０％ＮａＨＣＯ３、飽和ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮し、５．７５ｇの目的生成物（収率９０．７％）を得る。
【０２３７】
NMR (DMSO d6) δ ppm: 1.20-1.35 (3H, m); 3.60 (2H, m); 3.70-4.10 (1H, m); 5.05 (2H, d); 6.90 (1H, m); 7.20-7.50 (5H, m); 7.75 (1H, m). 
HPLC Atlantis T3 4.6 x 100mm、3μm, ３０分でCH3CN (0.1% TFA)/H2O (0.1% TFA)３０〜CH3CN Rt: 4.30および 4.48分.
【０２３８】
工程４：１−（（トリフルオロメチルスルホニルオキシ）メチル）シクロペンタン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
６．８０ｍｌ（８４．２ｍｍｏｌ）のピリジンと５０ｍｌのジクロロメタンの混合物を窒素中、−７８℃まで冷却する。無水トリフリック(triflic anhydride)溶液、７ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２中、６．８０ｇ（２４．１４ｍｍｏｌ）を、臭素バイアルを用いて加える。１０分後、１４ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２中、工程２から得られた３．４ｇの化合物（１７ｍｍｏｌ）の溶液を滴下する。この混合物を−７８℃で３０分間攪拌し、周囲温度に戻す。３００ｍｌのヘキサンを加える。有機相を１Ｎ  ＮａＯＨ、Ｈ２Ｏ、飽和ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮し、５．６７ｇの目的生成物（収率：１００％）を得、そのまま次の工程に用いる。
【０２３９】
NMR (CDCl3) δ (ppm): 1.40 (9H, d); 1.45-1.90 (8H, m); 4.65 (2H, s).
【０２４０】
工程５：１（（（（Ｒ）−１−ベンジルオキシカルボニルアミノ）エチル）（ヒドロキシ）ホスホリル）メチル）シクロペンタンカルボン酸
ｉＰｒ２ＮＨ（２．１９ｍｌ、１５．６４ｍｍｏｌ）中、ＡＴＨＦ（１７ｍｌ）の溶液を０℃まで冷却し、ヘキサン中２．５ＭのｎＢｕＬｉ  ６．２３ｍｌ（１５．６４ｍｍｏｌ、１．０４当量）を加える。１５分後、この混合物を−７８℃まで冷却し、窒素下で、温度を−６０℃未満に保ちながら、２８ｍｌのＴＨＦ中、工程３から得られた化合物（３．６４ｇ、１４．１６ｍｍｏｌ）の溶液を加える。この混合物を−７８℃で１０分間攪拌し、１５ｍｌのＴＨＦ中、工程４から得られた化合物（１７ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を−７８℃で１５分間、そして周囲温度で４時間攪拌する。
この混合物をＥｔｏＡｃで希釈する。有機相を１Ｎ  ＨＣｌ、１０％ＮａＨＣＯ３、飽和ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮する。
【０２４１】
得られた粗生成物を１０ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２中の溶液とし、３．２ｍｌのＴＦＡを加える。この混合物を０℃で２時間攪拌する。蒸発乾固させた後、予測生成物を、ＡＣＥ  Ｃ１８カラム、ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）４０：６０での半分取ＨＰＬＣにより精製し、１２０ｍｇの純粋な生成物（収率：２９．４％）を得る。
【０２４２】
NMR (DMSO d6) δ (ppm): 1.20-1.35 (3H, m); 1.50-2.20 (10H, m); 3.75 (1H, q); 5.05 (2H, d); 5.05 (2H, d); 7.20-7.60 (6H, m). 
HPLC ACE C18 4.6x250mm, 5μm, CH3CN (0.1% TFA)/H2O (0.1% TFA) 40:60, Rt :5.57分.
【０２４３】
工程６：（Ｒ）−１−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）エチル（（１−（Ｓ）−１−ｔｅｒｔ−ブトキシ−１−オキシプロパン−２−イルカルバモイル）シクロペンチル）メチル）ホスフィン酸
工程５から得られた化合物（０．１１８ｇ、０．３１９ｍｍｏｌ）を窒素下で２ｍｌのＤＭＦに溶解させ、ｔ−ブチルアラニナート塩酸塩（７０ｍｇ）、２７９μｌのＤＩＥＡ（５当量）および３０８ｇのＴＢＴＵ（３当量）を順次加える。この混合物を周囲温度で１５分間攪拌し、この反応物を実施例３の工程４のように処理する。１１１ｍｇの予測生成物が得られる（７０．３％）。
【０２４４】
1H NMR (DMSOd6) δ (ppm): 1.15-1.35 (6H, m); 1.42 (9H, s); 1.40- 2.20 (1OH, m); 3.85 (1H, q); 4.15 (1H, q); 5.05 (2H , s); 7.1-7.45 (5H, m); 7.90 (1H, d).
【０２４５】
工程７：（２Ｓ）−２−（１−（（（（Ｒ）−１−アミノエチル）（ヒドロキシ）ホスホリルメチル）シクロペンタンカルボキサミド）プロパン酸トリフルオロアセテート
工程６で得られた化合物をＨＢｒ／ＡｃＯＨ混合物（２ｍｌ）に溶解させ、この溶液を周囲温度で１時間攪拌する。次に、この混合物を減圧下で蒸発させる。生成物を、３０分で、ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）混合物の０〜６０％ＣＨ３ＣＮ勾配を用いて、ＡＣＥ  Ｃ１８カラムでの半分取ＨＰＬＣにより精製し、５７．２ｍｇの予測生成物（収率：６１．９％）を得る。
【０２４６】
HPCL ACE C18 勾配：３０分で、ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）混合物の０〜６０％ＣＨ３ＣＮ  Ｒｔ：９．９７分。
1H NMR (DMSOd6) δ (ppm): 1.15-1.35 (6H, m); 1.50-2.20 (10H, m); 3.40 (1H, q); 4.25 (1H, q); 7.85 (1H, d); 8.10 (3H, m).
【０２４７】
工程８：２−［−（１−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイルメチル｝−シクロペンタンカルボニル）−アミノ］−プロピオン酸
工程７から得られた５５ｍｇの化合物を１ｍｌのＣＨ３ＣＮと３６６μｌの２Ｎ  ＮａＨＣＯ３に溶解させる。３５ｍｇの炭酸イソブチルオキシスクシンイミド（１．２当量）を加える。この混合物を６０℃１時間攪拌する。この混合物を酢酸エチルで処理し、Ｈ２Ｏおよび飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固させる。未処理の生成物をＨＰＬＣにより精製し、４５ｍｇの目的生成物（７１．４％）を得る。
【０２４８】
HPLC ACE C18 CH3CN (0.1%)/ H2O (0.1% TFA) 70:30 Rt: 4.53分. 
1H NMR (DMSOd6) δ (ppm): 1.10-2.20 (19H, m); 3.40 (1H, q); 3.7 (1H, m); 4.25 (1H, q); 6.20 (m, 1H); 7.85 (1H, d); 8.4 (1H, dd).
【０２４９】
実施例２２：２−［（１−アセチル−４−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイル−メチル｝−ピペリジン−４−カルボニル）−アミノ］−プロピオン酸
【化２４】
0005607045.tif 000025
【０２５０】
工程１：１−アセチル−ピペリジン−４−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
１−アセチルピペリジン−４−カルボン酸（２．９７ｇ）を２５ｍｌのＴＨＦ／トルエン混合物に懸濁させ、窒素流下で８５℃まで加熱する。Ｎ，Ｎジメチルホルムアミドジｔ−ブチルアセタール（２５ｍｌ、６当量）を滴下し、３０分間加熱を維持する。この混合物を蒸発乾固させ、残渣を酢酸エチルで処理する。有機相を水、飽和ＮａＣｌ溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、蒸発乾固させる。黄色油状物  ｐ＝３．４５ｇ（収率８８％）。
【０２５１】
１５分で、ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）のHPCL Atlantis T3１０〜９０勾配  Ｒｔ：１０．３分。
ESI (+) (M+H)+=228 
NMR (DMSO d6) δ (ppm): 1.20-1.80 (13H, m), 2.10 (3H, s), 2.40 (1H, m), 2.60- 3.20 (4H, m), 3.60-4.30 (4H, m).
【０２５２】
工程２：１−アセチル−４−ヒドロキシメチル−ピペリジン−４−カルボン酸ｔ−ブチルエステル
ＴＨＦ（１６ｍｌ）中、ｉＰＲ２ＮＨ（２．１０ｍｌ、１４．８９ｍｍｏｌ）の０℃の溶液に、ヘキサン中ｎＢｕＬｉ（２．５Ｍ）（６．８ｍｌ、１６．９２ｍｍｏｌ、２．５当量）を加える。３０分後、この混合物を−７８℃まで冷却し、９ｍｌのＴＨＦ中、工程１から得られた化合物（１．５４ｇ、６．７７ｍｍｏｌ）の溶液を窒素下、３０分で加える。この混合物を−７８℃で１時間攪拌し、パラホルムアルデヒド（５当量、１．０１ｇ）を加え、この反応混合物を攪拌しながら周囲温度に戻す。ＡＴで３０分後、この混合物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（１２０ｍｌ）とＥｔｏＡｃ（６０ｍｌ）溶液とで分液する。水相をＥｔｏＡｃ（２×４０ｍｌ）で抽出する。有機相を１Ｎ  ＨＣｌ、飽和ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮し、黄色油状物  Ｐ＝１．２０ｇを得る。
【０２５３】
粗生成物を、３０×１００ｍｍ  Ａｔｌａｎｔｉｓカラム、ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）１５：８５溶出剤での半分取ＨＰＬＣにより精製する。収率：２７％。
【０２５４】
ＨＰＬＣ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｔ３  １０分間２０％ＣＨ３ＣＮ（０．０１％  ＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．０１％  ＴＦＡ）、その後、１５分で２０〜９０勾配。Ｒｔ＝８．８５分。
ESI (+) (M+H)+=258.2 
NMR (DMSO d6) δ (ppm): 1.20-1.80 (13H, m), 2.10 (3H, s), 2.60-3.20 (4H, m), 3.40 (2H, s), 3.60-4.30 (4H, m).
【０２５５】
工程３：１−アセチル−４−トリフルオロメタンスルホニルオキシメチルピペリジン−４−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
２．０ｍｌ（２５０ｍｍｏｌ）のピリジンと２０ｍｌのジクロロメタンの混合物を、窒素下、−７８℃で冷却する。無水トリフリック(triflic anhydride)（２．１０ｍｌ、１２．５ｍｍｏｌ）を滴下する。１０分後、１５ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２中、工程２から得られた１．２９ｇの化合物（５．０ｍｍｏｌ）の溶液を滴下する。この混合物を−７８℃で２時間攪拌する。有機相を１Ｎ  ＨＣｌ、Ｈ２Ｏ、飽和ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮し、１．６８ｇの予測生成物（収率：８６％）を得、そのまま次の工程に用いる。
【０２５６】
ＨＰＬＣ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｔ３（４．６＊１００ｍｍ、３μｍ）  １０分間ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）２０％、その後、１５分で２０〜９０％勾配  Ｒｔ＝２２．７分。
ESI (+) (M+H)+=390.2 
NMR (CDCl3) δ (ppm): 1.40-1.60 (HH, m), 1.90-2.30 (5H, m), 2.90 (2H, m), 3.40- 3.80 (2H,m), 4.30-4.60 (2H, m).
【０２５７】
工程４：１−アセチル−４−（（（（Ｒ）−１−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）エチル）（ヒドロキシ）ホスホリル）メチル）ピペリジン−４−カルボン酸
ＴＨＦ（５ｍｌ）中、ｉＰｒ２ＮＨ（０．６１ｍｌ、４．３１ｍｍｏｌ）の溶液を０℃まで冷却し、ヘキサン中１．５ＭのｎＢｕＬｉ  ３．１ｍｌ（４．６７ｍｍｏｌ、３．０当量）を加える。１５分後、この混合物を−７８℃まで冷却し、８ｍｌのＴＨＦ中、工程３から得られた化合物（９２５ｍｇ、３．５９ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素下で、温度を６０℃未満に保つように加える。この混合物を−７８℃で１０分間攪拌し、１０ｍｌのＴＨＦ中、工程４から得られた化合物（４．３１ｍｍｏｌ）を加え、この混合物を−７８℃で１０分間、そして周囲温度で５時間攪拌する。
【０２５８】
この混合物をＥｔｏＡｃで希釈する。有機相を１Ｎ  ＨＣｌ、１０％ＮａＨＣＯ３、飽和ＮａＣｌで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、減圧下で濃縮する。
【０２５９】
得られた粗生成物を３１ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２中の溶液とし、１２ｍｌのＴＦＡを加える。この混合物を周囲温度で２時間攪拌する。蒸発乾固させた後、予測生成物を、Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｔ３カラム、ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）１５：８５にて半分取ＨＰＬＣにより精製し、３６７ｍｇの純粋な生成物を得る（収率：２３％）。
【０２６０】
NMR (DMSO d6) δ (ppm): 1.17 (3H, m), 1.40-1.95 (9H, m), 3.00 (1H, m), 3.23 (1H, m), 3.55-3.81 (2H, m), 5.03 (dd, 2H), 7.33 (5H, m), 7.46 (1H, d) 
HPLC Atlantis T3 4.6xl00mm, 3μm, CH3CN (0.1% TFA)/H2O (0.1% TFA) 20:80, Rt: 7.67分.
【０２６１】
工程５：（２Ｓ）−２−（１−アセチル−４−（（（（Ｒ）−１−アミノエチル）（ヒドロキシ）ホスホリル）メチル）ピペリジン−４−カルボキサミド）プロパン酸トリフルオロアセテート
工程４から得られた化合物（０．１７５ｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を窒素下で２ｍｌのＤＭＦに溶解させ、ｔ−ブチルアラニナート塩酸塩（８９ｍｇ、１．２当量）、３６０μｌのＤＩＥＡ（５当量）および３９５ｍｇのＴＢＴＵ（３当量）を順次加える。この混合物を周囲温度で１５分間攪拌し、この反応混合物を蒸発乾固させる。得られた粗残渣をＨＢｒ／ＡｃＯＨ混合物（４ｍｌ）に溶解させた後、この溶液を周囲温度で１時間攪拌する。その後、この混合物を減圧下で蒸発させる。生成物を、３０分で、ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）／Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ）混合物の０〜３０％勾配のＣＨ３ＣＮを用い、Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｔ３カラムでの半分取ＨＰＬＣにより精製し、８０．８ｍｇの予測生成物（収率：４０．９％）を得る。
【０２６２】
３０分で、ＣＨ３ＣＮの０〜３０％勾配を用いるＨＰＬＣ  Ａｔｌａｎｔｉｓ  Ｔ３
【０２６３】
1H NMR (DMSOd6) δ (ppm): 1.15-1.35 (9H, m), 1.50-2.20 (10H, m), 3.23 (1H, m), 3.40 (1H, q), 4.25 (1H, q), 7.85 (1H, d), 8.10 (3H, m).
【０２６４】
工程６：２−［（１−アセチル−４−｛ヒドロキシ−［１−（１−イソブチリルオキシ−エトキシカルボニルアミノ）−エチル］−ホスフィノイルメチル｝−ピペリジン−４−カルボニル）−アミノ］−プロピオン酸
工程５から得られた８０ｍｇ（０．１６６ｍｍｏｌ）の化合物を２ｍｌのＣＨ３ＣＮと５６０μｌの２Ｎ  ＮａＨＣＯ３に溶解させる。５２ｍｇの炭酸イソブチルオキシスクシンイミド（１．２当量）を加え、この混合物を６０℃で１時間攪拌する。この混合物を酢酸エチルで処理し、Ｈ２Ｏおよび飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、蒸発乾固させる。粗生成物をＨＰＬＣで精製し、７０ｍｇの予測生成物（８１．４％）を得る。
HPLC ACE C18 CH3CN (0.1%)/ H2O (0.1% TFA) 50:50 Rt : 5.37分.
1H NMR (DMSOd6) δ (ppm): 1.10-2.20 (29H, m), 3.20 (1H, m), 3.40 (1H, q), 3.7 (1H, m), 4.25 (1H, q), 6.20 (m, 1H), 7.85 (1H, d), 8.10 (3H, m).
【０２６５】
記載の分子の概要
この一覧は網羅的なものではない。
【化２５】
0005607045.tif 000026
【０２６６】
【表１】
0005607045.tif 000027
【０２６７】
実施例２３：ホスフィン酸官能基がアシルオキシアルキル基で保護され、アミン官能基が遊離しているホスフィン酸誘導体の安定性に関する試験
エンケファリンをその異化作用から完全に保護するのに必要とされるネプリライシン（ＮＥＰ）およびアミノペプチダーゼＮ（ＡＰＮ）の阻害は、本発明における同じ分子による、両亜鉛メタロペプチダーゼの活性部位の認識を必要とする。このことは、先行技術において、特に特許出願ＦＲ２７５５１３５に記載されているホスフィン酸誘導体で得られたものである。しかしながら、非経口経路のバイオアベイラビリティのために、ホスフィン酸官能基をアシルアルキル基で一時的に保護し（プロドラッグ）、場合によっては先行技術に記載されている阻害剤のカルボキシル官能基も保護する必要がある。
【０２６８】
さらに、ＡＰＮの認識およびその阻害には必ず遊離アミン官能基の存在が必要であることを述べておくことが不可欠である。
【０２６９】
しかしながら、先行技術に記載されているプロドラッグの溶液中での研究は、ホスフィン酸基のアシルオキシアルキル残基の保護は、この基の一部をアミン官能基に転位させ、ＡＰＮ親和性に必要な遊離アミンの代わりにアミド官能基を有する分子をもたらすことを示している。
【０２７０】
このため、生じる化合物は加水分解に適さず、この酵素に関して全く不活性となる。従って、これらの化合物は、ヒトの臨床実践で用いる製剤としては、その不安定性のために使用に適さない。
【０２７１】
先行技術のよる化合物の溶液中での研究は次のようにして行われた。
【０２７２】
先行技術による化合物を、非経口投与に用いられる種々の混合物中の溶液とし、次に、この溶液をＨＰＬＣ（Ｋｒｏｍａｓｉｌ  Ｃ１８  ４．５＊２５０ｍｍカラム、５０％ＣＨ３ＣＮ（０．１％ＴＦＡ）／５０％Ｈ２Ｏ（０．１％ＴＦＡ））に付し、溶液の組成を決定する。いずれの場合にも、遊離ホスホン酸（活性化合物）と転位生成物の両生成物の形成が、以下の図に示されるように経時的に見られる。
【０２７３】
【化２６】
0005607045.tif 000028
【０２７４】
このように、エタノール／クレモフォール／Ｈ２Ｏ混合物（１：１：８）中の先行技術の化合物の溶液では、ビヒクル中の最初の生成物含量は以下の表１に示されているように経時的に低くなる。
【０２７５】
【表２】
0005607045.tif 000029
【０２７６】
実施例２５：薬理学的結果
本発明による分子を、ヒトにおける応答を最も良く推定できる動物モデルでその鎮痛作用に関して研究した。好ましい試験は、ラットおよびマウスにおける神経炎症性（ＮＩ）および神経因性（ＮＰ）疼痛を標的とするものである。
【０２７７】
本発明による分子は、マウスでの以下の試験で活性があることが分かった。
ｉ）足にホルマリンを投与することによる疼痛の誘発と、侵害受容器に対する末梢作用を反映すると考えられる第一相における鎮痛応答の研究、および
ｉｉ）坐骨神経の部分的、同側圧迫による痛覚過敏および異痛の誘発（Ｓｅｌｔｚｅｒモデル）(Bennett G.J. and Xie Y.K., Pain (1998) 33, 87-107)。
【０２７８】
これらの試験で用いた技術は、M.J. Millan. The induction of pain: an integrative review, in Progress in Neurobiology (1999), 52, 1-164などの総説に詳細に記載され、列挙されている。
【０２７９】
オピオイドとガバペンチンの間の関連および相乗作用は、特に、参照文献：Menendez et al, (2008), Eur. J. Pharmacol, 596, 50-55で報告されている。
【０２８０】
よって、下記の試験を行った。
【０２８１】
Ａ／ホルマリン試験（第Ｉ相）
これらの分子を、比較試験では１時点（９０分）で、その作用期間を観測するためには９０分と１５０分の２時点で試験した。
【０２８２】
試験の説明：
動物（ＯＦ１雄マウス）をチャールズ・リバー・ブリーディングセンター（フランス）から入手し、実験の開始時には体重２５．３５ｇであった。生成物の投与には各マウスの体重を考慮する。
【０２８３】
この試験は、S. HUNSKAAR et al., Formalin test in mice, a useful technique for evaluating mild analgesics, J. Neurosci. Methods (1995), 14, 69-75により記載されているプロトコールに基づく。
【０２８４】
試験の初期（ホルマリン注射後５〜１０分）は、検討下にある神経因性疼痛を反映すると考えられる。
【０２８５】
マウス（ｎ＝８）を個々に透明な容器（５０×２５ｃｍ２）に入れ、２０分間この環境に順化させる。この期間の後、生理食塩水（Ｈ２Ｏ、０．９％ＮａＣｌ）中のホルマリン（５％ＨＣＨＯ）溶液２０μｌを動物の右足の足底面に皮下注射する。マイクロシリンジにつないだ２６シリンジを用いる。その後、各マウスをすぐに試験容器に戻し、疼痛（侵害受容）応答を５分間測定する（初期相）。足をなめた回数のみを数える。
ビヒクル単独（エタノール、水中０．５％メチルセルロース）
ビヒクルと本発明による化合物（５０ｍｇ／ｋｇ）
とともにホルマリンを注射した後、種々の時点で（一般に２０分、９０分および１５０分）動物に強制的に給餌した後に鎮痛活性を試験する。
【０２８６】
生成物の鎮痛作用は、ビヒクルだけを受容した動物が足をなめる回数に比べて、注射された足がなめられる回数の減少により評価する。マウスごとに秒で表した足をなめる総時間（不連続）を４分間計測する。その後、ｎ匹の累積値を供試マウスの数ｎで割る。
【０２８７】
結果を実施例３、４および８から得られた３つの化合物に関して図１に示す。
【０２８８】
これら３つの化合物は、ビヒクル（対照）に比べて足をなめる回数の極めて有意な減少を特徴とする有力な鎮痛作用（４０〜６０％）を示し、これらの効果は試験期間で比較的一定である。このように、本発明による化合物の鎮痛活性は１５０分まで見られ、本発明による化合物の長期作用を示唆する。
【０２８９】
この鎮痛作用は、用いた濃度（２ｍｇ／ｋｇ）では血液脳関門を通過できないアンタゴニスト、メチル−ナロキソニウムを予め投与することにより遮断され(Milne R.J. et al., Neurosci. Lett. (1990), 114, 25-32)、このことは、これらの分子の活動が注射部位から放出されたエンケファリンを増す末梢領域（侵害受容器）で起こることを示している。これらの結果は明白に、本発明による化合物が血液脳関門を通過しないことを示す。
【０２９０】
Ｂ／実施例８から得られた化合物と先行技術による参照分子の鎮痛作用の比較試験
本試験に用いた先行技術による参照分子は以下の構造を有する。
【化２７】
0005607045.tif 000030
【０２９１】
ホルマリンを注射して９０分後のその作用を経時的に比較するため、実施例８から得られた化合物（５０ｍｇ／ｋｇ；図２Ａ）および先行技術による参照分子（１００ｍｇ／ｋｇ；図２Ｂ）を用いて上記の試験Ａを繰り返した。
【０２９２】
そして、参照分子には１００ｍｇ／ｋｇ用量（経口）の９０分で活性は無かったが、他方、実施例８から得られた化合物は、２倍低い５０ｍｇ／ｋｇ用量（経口）で９０分において極めて有意な鎮痛活性を生じる（図２参照）。
【０２９３】
よって、本発明は、作用期間中、経口経路で鎮痛特性を有する分子の開発を特徴とする。
【０２９４】
Ｃ／マウスにおける経口投与後の実施例３から得られた化合物の抗異痛および抗痛覚過敏作用
この試験は、A.B. Malmberg and A.I. Basbaum, Partial Sciatic injury in the mouse as a model of neuropathic pain: behavioural and neuroanatomical correlates. Pain, (1998) 76, 215-222に詳細に記載されている。
【０２９５】
これを、同側坐骨神経の部分的結紮により、体重１８〜２０ｇのＯＦ１雄マウス（Charles River、ｎ＝３９）で行った。これらの動物を手術後３〜２６日の期間試験する。
【０２９６】
痛覚過敏は、K. Hargreaves et al., A new sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia, Psain (1988), 32, 77-88に記載されている方法に従い、熱源として「Ｐｌａｎｔａｒ試験」装置（Ｂｉｏｓｅｂ、フランス）を用いて測定した。侵害受容刺激の強度は、自動カットオフ時間２０秒で８〜１０秒較正する。熱により誘発される足の払いのけの平均値を、同側（神経損傷）および対側（健全な神経）の足で測定した。
【０２９７】
機械的異痛を、S.R. Chaplan et al., Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw, J. Neurosci. Meth. (1994), 53, 55-63に記載されているように測定する。同側（傷害）および対側（対照）の足を上記のように試験し、機械的抗異痛作用は、大きさを増すとともに圧力を増す微細線維を用いるＶｏｎ  Ｆｒｅｙ法(Malmerg A.B. and Basbaum A.I., 1998, Pain, 76, 215-222)を用いて測定する。
【０２９８】
抗痛覚過敏作用：
図３に示す、得られた結果は、５０ｍｇ／ｋｇで経口投与した場合、実施例３から得られた化合物は、４５〜１２０分の期間（９０分に最大作用を有する）、坐骨神経の部分結紮により誘発された熱性の痛覚過敏に、極めて有意な軽減（６５〜１００％）を生じることを示す。
【０２９９】
抗異痛作用：
機械的異痛に対する実施例３から得られた化合物の作用を、Ｖｏｎ  Ｆｒｅｙ試験を用いて測定する。図４に示す、得られた結果は、６０分に、最大応答（非処置対照）の７５％に相当するピークを有する、有意な長時間（４５〜１２０分）抗異痛作用を示す。
【０３００】
Ｄ／ガバペンチンと組み合わせることによる実施例４から得られた化合物の抗異痛作用の増強
実施例４から得られた化合物とガバペンチンの組合せの作用（両生成物とも経口投与）を、Ｖｏｎ  Ｆｒｅｙ試験を用いて測定する。図５に示し、６０分後に得られた結果は、実施例から得られた化合物またはガバペンチンを単独で用いた場合（同じ用量で不活性であることが分かっている）に比べて、組合せの極めて高い増強（＞３００％）を示す。注射をしていない対側の足に対しての作用は無い。
【図面の簡単な説明】
【０３０１】
総ての図面において、統計分析（ｐ、スチューデントの検定）は継ぎのように示す。
★対照に対してｐ＜０．１
★★対照に対してｐ＜０．０１
★★★対照に対してｐ＜０．００１
【図１】ビヒクル（白四角）または本発明による化合物（黒四角）の経口投与後の、時間（分）の関数としての、ホルマリン受容マウスによる足をなめる総時間（５分の試験時間中の秒数で表す）を表す。なお、グラフ（Ａ）、（Ｂ）および（Ｃ）はそれぞれ実施例８、３および４から得られた化合物に相当する。
【図２】経口投与９０分後の、時間（分）の関数としての、ホルマリン受容マウスによる足をなめる総時間（５分の試験時間中の秒数で表す）を表す：（Ａ）ビヒクル（白四角）もしくは本発明による化合物８（５０ｍｇ／ｋｇ）（黒四角）または（Ｂ）ビヒクル（白四角）もしくは参照分子（１００ｍｇ／ｋｇ）（黒四角）。
【図３】熱痛覚過敏(hyperalgia)を評価するための、マウス坐骨神経の部分的な同側結紮により誘発される神経因性疼痛モデルで得られた応答を表す（Ｐｌａｎｔａｒ試験）。外科術１４日後での、ビヒクル（白四角）または実施例３から得られた化合物（５０ｍｇ／ｋｇ）（黒四角）の経口投与後における足の払いのけを時間（分）の関数として測定する（秒）。グラフ（Ａ）は同側の足で見られた応答を表し、グラフ（Ｂ）は対側の足で得られた応答を表す。（９０時点での対側の足の平均値：ビヒクル（７．８５）、化合物３＝９．４秒）。
【図４】外科術１４日後での、ビヒクル（白四角）または実施例３から得られた化合物（５０ｍｇ／ｋｇ）（黒四角）の経口投与後における、堅さを増した微細線維を用いる、マウス足のある圧力（ｇ）でのＶｏｎ  Ｆｒｅｙ試験（異痛評価）で得られた応答を時間（分）の関数として表す。グラフ（Ａ）は同側の足で見られた応答を表し、グラフ（Ｂ）は対側の足で得られた応答を表す。
【図５】図４の凡例に記載されているようなＶｏｎ  Ｆｒｅｙ試験において６０分時点で得られた応答を表す。実施例４から得られた化合物を１０ｍｇ／ｋｇの用量で単独経口投与し（斜線）、ガバペンチンも３０ｍｇ／ｋｇの用量で経口投与する（ドット）。これら２つの化合物を上記の要領で組み合わせて経口投与する（黒）。対照（白）はビヒクルの経口投与に相当する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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