(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）：
【化１】
0005571168.tif 000038
（式中、
Ｒは、Ｈ、ＣＨ３およびＣＨ２ＯＨから選択され、
Ｒ１は、Ｈ、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）２、Ｎ＝Ｎ−ＮＨＣＨ３、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ４、ＣＯＮＲ４Ｒ５、ＣＯＮＨＮＨ２、ＣＯＮＨＮＨＲ４、ＣＯＮＨＮＲ４Ｒ５、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＳＨ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＲ４、ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＣｌ３、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＳＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、Ｎ（ＣＨ３）２、アルキル、およびアルケニルからなる群より選択され、
ここで、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アルケニル、アルキロール、アルコキシおよびアルキルアミンから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、
ａ）独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）２、Ｎ＝Ｎ−ＮＨＣＨ３、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ４、ＣＯＮＲ４Ｒ５、ＣＯＮＨＮＨ２、ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、ＳＯＮＨＮＨＲ４、ＳＯ２ＮＨ２、ＣＯＮＨＮＲ４Ｒ５、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＳＨ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＣｌ３、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＳＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、およびＮ（ＣＨ３）２からなる群より選択される、
ここで、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アルケニル、アルキロール、アルコキシおよびアルキルアミンから選択される、あるいは
ｂ）結合して、脂環式、芳香族または複素環式の環系を形成している、あるいは
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３のうち、いずれか２つが結合して、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニルおよびピリジルを含む脂環式、芳香族、複素環式系を形成していてもよい）
の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項２】
前記化合物が、
ａ）  ４−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−メチルセレノフェン−２−カルボキサミド、
ｂ）  ３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェン−２，５−ジカルボキサミド、
ｃ）  ３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−フェニルセレノフェン−２−カルボキサミド、
ｄ）  ３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボキサミド、
ｅ）  ３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボキサミド、
ｆ）  ３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキサミド、
ｇ）  ３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−フェニルセレノフェン−２−カルボン酸、
ｈ）  ３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボン酸、
ｉ）  ３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボン酸、
ｊ）  ３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸、および
ｋ）  ３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボニトリル
からなる群より選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
一般式（ＩＩ）：
【化２】
0005571168.tif 000039
（式中、Ｘ、ＹおよびＺは、独立して、得られる二環式系が非置換型および置換型セレノフェンの５員芳香族複素環式部分を伴うものとなるように、二重結合がＸとＹの間またはＹとＺの間のいずれかに存在するように、ＣおよびＳｅから選択され、
Ｒ６およびＲ７は、
ａ）独立して、Ｈ、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）２Ｎ＝Ｎ−ＮＨＣＨ３、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ８、ＣＯＮＲ８Ｒ９、ＣＯＮＨＮＨ２、ＣＯＮＨＮＨＲ８、ＣＯＮＨＮＲ８Ｒ９、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＳＨ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＲ８、ＳＯ２ＮＲ８Ｒ９、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＣｌ３、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＳＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、Ｎ（ＣＨ３）２、アルキル、およびアルケニルから選択されるか、または
ｂ）結合して、脂環式、芳香族もしくは複素環式の環系を形成しているかのいずれかであり、
Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アルケニル、アルキロール、アルコキシ、およびアルキルアミンから選択される）
の化合物またはその医薬的に許容され得る塩。
【請求項４】
前記化合物が、
ａ）３−メチル−６−フェニルセレノフェノ［３，２−ｄ］１，２，３−トリアジン−４−オン、
ｂ）６−（ｔｅｒｔ−ブチル）−３−メチルセレノフェノ［３，２−ｄ］１，２，３−トリアジン−４−オン、
ｃ）３−メチル−６，７，８，９−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］１，２，３−トリアジノ［４，５−ｄ］セレノフェン−４−オン、
ｄ）３−メチル−１，２，３−トリアジノ［４’，５’−５，４］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オン、および
ｅ）３−メチルベンゾ［ｂ］１，２，３−トリアジノ［４，５−ｄ］セレノフェン−４−オン
からなる群より選択される、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
少なくとも１種類の請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を、医薬的に許容され得る賦形剤、医薬的に許容され得る希釈剤、および医薬的に許容され得る担体から選択される少なくとも１種類との組み合わせにより含む医薬組成物。
【請求項６】
少なくとも１種類の請求項３に記載の化合物またはその医薬的に許容され得る塩、医薬的に許容され得る賦形剤、医薬的に許容され得る希釈剤、および医薬的に許容され得る担体から選択される少なくとも１種類との組み合わせにより含む医薬組成物。
【請求項７】
さらに、一般式（ＩＩ）：
【化３】
0005571168.tif 000040
（式中、Ｘ、ＹおよびＺは、独立して、得られる二環式系が非置換型および置換型セレノフェンの５員芳香族複素環式部分を伴うものとなるように、二重結合がＸとＹの間またはＹとＺの間のいずれかに存在するように、ＣおよびＳｅから選択され、
Ｒ６およびＲ７は、
ａ）独立して、Ｈ、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）２、Ｎ＝Ｎ−ＮＨＣＨ３、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ８、ＣＯＮＲ８Ｒ９、ＣＯＮＨＮＨ２、ＣＯＮＨＮＨＲ８、ＣＯＮＨＮＲ８Ｒ９、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＳＨ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＲ８、ＳＯ２ＮＲ８Ｒ９、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＣｌ３、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＳＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、Ｎ（ＣＨ３）２、アルキル、およびアルケニルから選択されるか、または
ｂ）結合して、脂環式、芳香族、複素環式の環系（ｒｉｎｇ  ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  ｓｙｓｔｅｍ）を形成しているか
のいずれかであり、
Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アルケニル、アルキロール、アルコキシ、アルキルアミンから選択される）の少なくとも１種類の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を含む、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項８】
さらに、少なくとも１種類の化学療法剤を、医薬的に許容され得る賦形剤、医薬的に許容され得る希釈剤、および医薬的に許容され得る担体から選択される少なくとも１種類との組み合わせにより含む、少なくとも１種類の請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を含む医薬組成物。
【請求項９】
任意選択で、さらに、少なくとも１種類の化学療法剤を含む、請求項６又は７に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
前記化学療法剤が、５−フルオロウラシル、６−メルカプトプリン、アクチノマイシン、ドキソルビシン、アミノグルテチミド、アナストロゾール、ベバシズマブ、ブレオマイシン、カルボプラチン、カクチノマイシン、カペシタビン、シスプラチン、クロドロン酸、シクロホスファミド、ダクチノマイシン、ドセタキセル、ドキソルビシン、エピルビシン、エトポシド、エキセメスタン、フルオロウラシル、フルオキシメステロン、レトロゾール、ロイコボリンカルシウム、メゲストロール、酢酸メゲストロール、メトトレキサート、マイトマイシン、ミトキサントロン、パクリタキセル、パミドロネート、プレドニゾン、タモキシフェン、トラスツズマブ、チオテパ、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビノレルビン、その医薬的に許容され得る塩、およびその混合物からなる群より選択される、請求項８又は９に記載の組成物。
【請求項１１】
さらに、少なくとも１種類の生物学的応答修飾剤を、医薬的に許容され得る賦形剤、医薬的に許容され得る希釈剤、および医薬的に許容され得る担体から選択される少なくとも１種類との組み合わせにより含む、少なくとも１種類の請求項１に記載の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を含む医薬組成物。
【請求項１２】
さらに、任意選択で、少なくとも１種類の生物学的応答修飾剤を含む、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記生物学的応答修飾剤が、モノクローナル抗体、インターフェロン、インターロイキン、コロニー刺激因子、およびＴＮＦ−α受容体遮断薬からなる群より選択される、請求項１１又は１２に記載の組成物。
【請求項１４】
治療有効量の少なくとも１種類の請求項１に記載の化合物を含む、癌、癌関連および他の血管系疾患の治療用医薬組成物。
【請求項１５】
治療有効量の少なくとも１種類の請求項３に記載の化合物を、単独で、または式（Ｉ）：
【化４】
0005571168.tif 000041
（式中、
Ｒは、Ｈ、ＣＨ３およびＣＨ２ＯＨから選択され、
Ｒ１が、Ｈ、アルキル、アルケニル、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）２、Ｎ＝Ｎ−ＮＨＣＨ３、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ４、ＣＯＮＲ４Ｒ５、ＣＯＮＨＮＨ２、ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、ＳＯＮＨＮＨＲ４、ＳＯ２ＮＨ２、ＣＯＮＨＮＲ４Ｒ５、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＳＨ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ，ＮＯ２、ＣＦ３、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＣｌ３、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＳＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、およびＮ（ＣＨ３）２からなる群より選択され、
ここで、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アルケニル、アルキロール、アルコキシおよびアルキルアミンから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、
ａ）独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）２、Ｎ＝Ｎ−ＮＨＣＨ３、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ４、ＣＯＮＲ４Ｒ５、ＣＯＮＨＮＨ２、ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、ＳＯＮＨＮＨＲ４、ＳＯ２ＮＨ２、ＣＯＮＨＮＲ４Ｒ５、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＳＨ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＣｌ３、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＳＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、およびＮ（ＣＨ３）２からなる群より選択され、
ここで、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アルケニル、アルキロール、アルコキシおよびアルキルアミンから選択される、あるいは
ｂ）結合して、脂環式、芳香族または複素環式の環系を形成している、あるいは
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３のうち、いずれか２つが結合して、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニルおよびピリジルを含む脂環式、芳香族、複素環式系を形成していてもよい）
の化合物と併用して含む、癌、癌関連および他の血管系疾患の治療用医薬組成物。
【請求項１６】
少なくとも１種類の一般式（Ｉ）：
【化５】
0005571168.tif 000042
（式中、
Ｒは、Ｈ、ＣＨ３およびＣＨ３ＯＨから選択され、
Ｒ１が、Ｈ、アルキル、アルケニル、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）２、Ｎ＝Ｎ−ＮＨＣＨ３、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ４、ＣＯＮＲ４Ｒ５、ＣＯＮＨＮＨ２、ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、ＳＯＮＨＮＨＲ４、ＳＯ２ＮＨ２、ＣＯＮＨＮＲ４Ｒ５、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＳＨ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＣｌ３、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＳＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、およびＮ（ＣＨ３）２からなる群より選択され、
ここで、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アルケニル、アルキロール、アルコキシおよびアルキルアミンから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、
ａ）独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）２、Ｎ＝Ｎ−ＮＨＣＨ３、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ４、ＣＯＮＲ４Ｒ５、ＣＯＮＨＮＨ２、ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、ＳＯＮＨＮＨＲ４、ＳＯ２ＮＨ２、ＣＯＮＨＮＲ４Ｒ５、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＳＨ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＣｌ３、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＳＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、およびＮ（ＣＨ３）２からなる群より選択され、
ここで、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アルケニル、アルキロール、アルコキシおよびアルキルアミンから選択されている、あるいは
ｂ）結合して、脂環式、芳香族または複素環式の環系を形成している、あるいは
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３のうち、いずれか２つが結合して、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニルおよびピリジルを含む脂環式、芳香族、複素環式系を形成していてもよい）
の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を、医薬的に許容され得る賦形剤、医薬的に許容され得る希釈剤、および医薬的に許容され得る担体から選択される少なくとも１種類との組み合わせにより含む、癌、癌関連および他の血管系疾患の治療用医薬組成物。
【請求項１７】
少なくとも１種類の一般式（ＩＩ）：
【化６】
0005571168.tif 000043
（式中、Ｘ、ＹおよびＺは、独立して、得られる二環式系が非置換型および置換型セレノフェンの５員芳香族複素環式部分を伴うものとなるように、二重結合がＸとＹの間またはＹとＺの間のいずれかに存在するように、ＣおよびＳｅから選択され、
Ｒ６およびＲ７は、
ａ）独立して、Ｈ、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）２、Ｎ＝Ｎ−ＮＨＣＨ３、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ８、ＣＯＮＲ８Ｒ９、ＣＯＮＨＮＨ２、ＣＯＮＨＮＨＲ８、ＣＯＮＨＮＲ８Ｒ９、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＳＨ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＲ８、ＳＯ２ＮＲ８Ｒ９、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＣｌ３、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＳＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、Ｎ（ＣＨ３）２、アルキル、およびアルケニルから選択されるか、または
ｂ）結合して、脂環式、芳香族、複素環式の環系を形成しているか
のいずれかであり、
Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アルケニル、アルキロール、アルコキシ、アルキルアミンから選択される）
の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を、医薬的に許容され得る賦形剤、医薬的に許容され得る希釈剤、および医薬的に許容され得る担体から選択される少なくとも１種類との組み合わせにより含む、癌、癌関連および他の血管系疾患の治療用医薬組成物。
【請求項１８】
更に、請求項１に記載の一般式（Ｉ）の化合物およびその医薬的に許容され得る塩の少なくとも１種類を含む、請求項１７記載の癌、癌関連および他の血管系疾患の治療用医薬組成物。
【請求項１９】
更に、化学療法剤の少なくとも１種類を含む、請求項１６〜１８のいずれかに記載の癌、癌関連および他の血管系疾患の治療用医薬組成物。
【請求項２０】
更に、生物学的応答修飾剤の少なくとも１種類を含む、請求項１６〜１９のいずれかに記載の癌、癌関連および他の血管系疾患の治療用医薬組成物。
【請求項２１】
転移性悪性黒色腫、リンパ腫（ホジキンおよび非ホジキン）、肉腫、脳腫瘍、中枢神経系（ＣＮＳ）転移、神経膠腫、癌腫、乳癌、前立腺癌、肺癌（小細胞および非小細胞）、結腸癌、膵臓癌、頭頚部癌および口腔咽頭扁平上皮癌からなる群より選択される癌疾患である、請求項１４〜２０のいずれかに記載の癌、癌関連および他の血管系疾患の治療用医薬組成物。
【請求項２２】
癌細胞が、脳、肺、副腎、下垂体、乳房、前立腺、膵臓、卵巣、胃腸管、腎臓、肝臓、脾臓、精巣、頚部、および食道上部、下部もしくは中部からなる群より選択される組織または身体の一部が起源である、請求項１４〜２０のいずれかに記載の癌、癌関連および他の血管系疾患の治療用医薬組成物。
【請求項２３】
ａ）４−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−メチルセレノフェン−２−カルボキサミド、
ｂ）３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェン−２，５−ジカルボキサミド、
ｃ）３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−フェニルセレノフェン−２−カルボキサミド、
ｄ）３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボキサミド、
ｅ）３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボキサミド、
ｆ）３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキサミド、
ｇ）３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−フェニルセレノフェン−２−カルボン酸、
ｈ）３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボン酸、
ｉ）３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボン酸、
ｊ）３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸、
ｋ）３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボニトリル、
１）３−メチル−６−フェニルセレノフェノ［３，２−ｄ］１，２，３−トリアジン−４−オン、
ｍ）６−（ｔｅｒｔ−ブチル）−３−メチルセレノフェノ［３，２−ｄ］１，２，３−トリアジン−４−オン、
ｎ）３−メチル−６，７，８，９−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］１，２，３−トリアジノ［４，５−ｄ］セレノフェン−４−オン、
ｏ）３−メチル−１，２，３−トリアジノ［４’，５’−５，４］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オン、および
ｐ）３−メチルベンゾ［ｂ］１，２，３−トリアジノ［４，５−ｄ］セレノフェン−４−オン
からなる群より選択される少なくとも１種類の化合物の治療有効量を含む、癌および他の血管系疾患の治療用医薬組成物。
【請求項２４】
治療有効量の請求項２３に記載の少なくとも１種類の化合物またはその医薬的に許容され得る塩を、医薬的に許容され得る賦形剤、医薬的に許容され得る希釈剤、および医薬的
に許容され得る担体から選択される少なくとも１種類との組み合わせにより含む、癌および他の血管系疾患の治療用医薬組成物。
【請求項２５】
更に、化学療法剤の少なくとも１種類を含む、請求項２４に記載の癌、癌関連および他の血管系疾患の治療用医薬組成物。
【請求項２６】
更に、生物学的応答修飾剤の少なくとも１種類を含む、請求項２４または２５に記載の癌、癌関連および他の血管系疾患の治療用医薬組成物。
【請求項２７】
医薬品を必要とする温血動物における使用のための医薬品の調製のための、請求項１に記載の化合物（１種類もしくは複数種）の使用方法。
【請求項２８】
医薬品を必要とする温血動物における使用のための医薬品の調製のための、請求項３に記載の化合物（１種類もしくは複数種）の使用方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、セレノフェン化合物およびセレノフェントリアゼン化合物、その幾何異性形態、立体異性体、立体配置異性体、多形、水和物、溶媒和物ならびにその医薬的に許容され得る塩に関する。
【０００２】
さらに、本発明は、上記の該セレノフェン化合物およびセレノフェントリアゼン化合物ならびにその医薬的に許容され得る組成物の調製方法に関する。
【０００３】
本発明の目的は、癌および他の血管系疾患の予防または治療のための、単独または他の医薬的に許容され得る薬剤との併用のいずれかで活性成分（１種類もしくは複数種）となるセレノフェノトリアゼン化合物を提供することである。
【０００４】
また、本発明の化合物は、強力な血管新生阻害物質であり、血管新生関連疾患、例えば、癌および他の血管系疾患を予防する医薬組成物に有効に使用され得る。
【０００５】
この新規な化合物および組成物は、転移性悪性黒色腫、ならびに固形腫瘍である癌腫および他のあらゆる癌（例えば、限定されないが、リンパ腫、肉腫および神経膠腫）の予防、コントロールおよび治療に、単独、または他の医薬的に許容され得る薬剤もしくは賦形剤との組み合わせのいずれかで有用である。
【背景技術】
【０００６】
（発明の背景）
悪性新生物である黒色腫は、メラニン形成能を有する細胞に由来し、最も一般的には、任意の身体の一部の皮膚および目において生じるが、稀に、生殖器、肛門、口腔もしくは他の部位の粘膜において生じる。これは、多くの場合は成人において発生し、新規に、または色素性母斑もしくは悪性黒子から生じたものであり得る。初期では、皮膚の形態は、真皮と上皮の接合部における細胞の増殖を特徴とし、これは、これは、すぐに隣接組織に浸潤する。細胞は、細胞質の量および色素沈着において異なり、核は、比較的大きく、多くの場合、変形しており、顕著な好酸性の核小体を伴い、有糸核分裂像は無数である傾向にある。黒色腫は、多くの場合、広く転移し、局所リンパ節、皮膚、肝臓、肺および脳が関与し易い。
【０００７】
１９８５年１月、米国環境保護庁（ＥＰＡ）は、宇宙空間からの紫外（ＵＶ）線を防御する地球のオゾン層の枯渇（人間の活動によって、およそ１０％減少したと推定されている）により、世界的に黒色腫などの皮膚癌の症例数の増大が引き起こされるであろうと予測した（２０５０年までに、年間推定２００万例の増加）。また、高レベルの紫外線への曝露によっても、白内障および免疫機構の機能不全が促進され得る。
【０００８】
公衆衛生の取り組みは、人々に対する日焼け止め剤の使用の推奨、日照時間のピーク時での野外活動の回避、皮膚の頻繁なセルフチェックの実施、および異常が認められた場合は、皮膚科に行くことが中心となっている。
【０００９】
紫外線放射線は、特に、曝露の発生が特定の原因遺伝形質（赤毛および色白肌など）と組み合わされた場合、皮膚癌の確定的なリスクファクターを提示する。皮膚の色素沈着は、色素生成細胞であるメラノサイトでのメラニンの合成、その後の色素顆粒の隣接ケラチノサイトへの分布および輸送によって生じる。一般に、メラニンは、紫外線によって細胞質内に生成したフリーラジカルの吸収に重要であり、紫外線および可視光放射線を直接遮蔽する機能を果たすと考えられている。
【００１０】
紫外線誘導性色素沈着（日焼け）には、ケラチノサイトによるα−メラノサイト刺激ホルモン（α−ＭＳＨ）の分泌の誘導が必要とされる。α−ＭＳＨおよび他の生体活性ペプチドは、プロオピオメラノコルチン（ＰＯＭＣ）の分解産物である。ｐ５３腫瘍抑制遺伝子は、癌における最も多くの場合で改変される遺伝子標的の１つである。ｐ５３は、ＰＯＭＣ遺伝子の転写調節因子であり、これは、タンパク質に翻訳されるとメラノサイトにメラニンを生成させ、紫外線放射線の吸収による皮膚癌を回避する。全ヒト腫瘍のほぼ半数近くで、ｐ５３の変異による直接的な不活化が観察されている。悪性黒色腫は、今日、治療が最も困難な癌の一つである皮膚癌である。
【００１１】
ダカルバジン（ＤＴＩＣ）は、転移性悪性黒色腫を治療するために使用される唯一の薬剤である。また、ダカルバジンは、ホジキンリンパ腫に対しても、他の有効な薬剤と併用して用いる場合、セカンドライン治療として指示される。化学的には、ＤＴＩＣは、下記の構造式：
【化１】
0005571168.tif 000002
を有する５−（３，３−ジメチル−１−トリゼノ）−イミダゾール−４−カルボキサミドである。
【００１２】
しかしながら、ダカルバジンは、肝臓によるインビボでの生体内活性化が必要とされる。ジメチルトリアゼノ官能性のメチル基のうちの１つは、肝臓ミクロソーム内の酵素によって、特に、シトクロムＰ４５０によって活性化されて酸化され、ヒドロキシメチル基が生成する。したがって、ジメチルトリアゼノ官能性の酸化的モノ脱メチル化により、モノ−メチルトリアゼンが得られる。モノメチルトリアゼン代謝産物である３−メチル−（トリアゼン−１−イル）−イミダゾール−４−カルボキサミド（ＭＴＩＣ）をさらに加水分解すると、プリンおよび核酸の生合成の中間体である５−アミノ−イミダゾール−４−カルボキサミド（ＡＩＣ）と、活性アルキル化種であると考えられているメチルヒドラジンになることが知られている。シトクロムＰ４５０酵素は、ＭＴＩＣの代謝において、わずかな役割を果たしているにすぎない。
【００１３】
また、テモゾロミドも、ＤＮＡの求核部位をメチル化する類似のイミダゾテトラジンアルキル化剤である。二環式化合物であるテモゾロミドは経口で生物学的利用能を有し、より親油性であり、自然にＭＴＩＣに変換され、また、悪心の発生が少ないようである。Ｏ６−メチルグアニン付加体は、ＤＮＡ複製中にミスマッチを引き起こし、新たに形成されたＤＮＡ鎖にシトシンではなくチミジンを付加させる。優れたＣＮＳ生体内分布のため、テモゾロミドは、原発性脳腫瘍とＣＮＳ転移の両方において放射線増感剤として有用である。テモゾロミドを放射線とともに使用した場合、脳転移を有する患者において生活の質が改善される。ダカルバジンとは異なり、テモゾロミドは肉腫に対して活性を有する。したがって、セレンを有する類似の二環式テモゾロミド誘導体は、肉腫での放射線増感作用において、原発巣制御ならびに転移の治療のため有用であり得る。テモゾロミドは、忍容性は良好で、副作用が軽度の放射線増感剤である。テモゾロミドとイリノテカンは併用すると、一部の癌に対して相加的作用がより大きくなる。Ｐａｔｅｌ，Ｖ．Ｊ．ら、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２０００，６，４１５４−４１５７の著者（ら）によって、彼らの経験により、再発ユーイング肉腫およびＤＳＲＣＴにおいて速い応答速度（これは、おそらく、文献に報告されているものよりさらに速い）が確認されていることが報告されている。テモゾロミド＋イリノテカンの併用は、標準的なシクロホスファミドを含むレジメンよりも免疫抑制性が低い。このことはユーイング肉腫に特に重要であり得る。それは、Ｄｅ  Ａｎｇｕｌｏ，Ｇ．ら、Ｊ．Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｈｅｍａｔｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．，２００７，２９，４８−５２の著者（ら）によって、リンパ球の回復（すなわち、化学療法の最初のサイクル後、１５日目の絶対リンパ球数＞５００）が、ユーイング肉腫における有意に高い生存率と関連していることが示されているからである。また、テモゾロミドまたはダカルバジンは、他の薬剤（例えば、ゲムシタビンおよびドキソルビシンリポソーム）とも併用されている。血漿からのＤＴＩＣの消失は、１９分間の初期半減期と５時間の最終排泄相半減期の二相性である。腎機能不全および肝機能不全を有する患者では、半減期は、それぞれ、５５分間および７．２時間と長時間になった。尿中の未変化ＤＴＩＣの平均累積排出は、６時間で注射用量の４０％である。ＤＴＩＣは、糸球体濾過ではなく腎尿細管分泌に供される。治療濃度では、ＤＴＩＣは、ヒト血漿タンパク質に感知可能に結合されない。
【００１４】
ヒトでは、ＤＴＩＣは広範に分解される。未変化ＤＴＩＣに加え、ＡＩＣは、尿中に排出されるＤＴＩＣの主要代謝産物である。ＤＴＩＣの厳密な作用機序は不明であるが、３つの仮説が提示されている：
１．プリン類似体として作用することによるＤＮＡ合成の阻害
２．アルキル化剤としての作用
３．スルフヒドリル（ＳＨ）基との相互作用
【００１５】
したがって、細胞傷害性がインビボでのメチルカルボニウムイオンの生成に関与している生成ＭＴＩＣ反応性種の生化学的作用機序は、主に、ＤＮＡのアルキル化によるものと考えられている。アルキル化（メチル化）は、主に、グアニンのＯ６位およびＮ７位で起こる。
【００１６】
あるいはまた、ＤＴＩＣは、モノメチルトリアゼンに代謝される前に、最初にモノヒドロキシメチルに、最後にアルデヒドに酸化される。モノメチルトリアゼンは、酸化的モノ脱メチル化前のアルデヒド形態において、環化されて環状化合物になり（スキーム１に示すとおり）、これが二重らせんＤＮＡ構造に干渉し、癌細胞の複製をブロックする。
【化２】
0005571168.tif 000003
スキーム１：ダカルバジンの生化学的作用機序
【００１７】
ダカルバジンのイミダゾール環系は、本質的に親水性である。したがって、当該技術分野において、細胞傷害機能性が１００％有効となるようなメラニンに対して有効な結合性を有する可能性がある分子の必要性が存在している。したがって、本発明者らは、増大した親油性を有し、それにより、より大きな標的特異性がもたらされる新規な化合物を提供することを目的とした。したがって、５員芳香族複素環式の環系を有するセレノフェンは、該環内のセレンが本質的に親油性であり、メラニンに対する増大したアビディティにより有効な結合性を有するものであり得る。その結果、有意に低い用量で同じ治療有効性が得られ得、したがって毒性が最小限になる。このことにより、さらに、より大きな治療指数（ＴＩ）範囲で高い特異性がもたらされ得る。一般に、癌患者の治療では、大きい治療指数ほど好ましい。これは、癌細胞が最初の化学療法自体で撃退され得るように、治療レジメンを非常に高い許容投与量（ＭＴＤ）から開始することが希望されるためである。そうしない場合、生存癌細胞はＤＮＡ損傷を修復し、その後、他の器官に転移することがあり得る。また、最初の治療の後に生き残った癌細胞は、再度の第２の化学療法（必要な場合）に対して耐性となり得る。さらに、最初の化学療法による免疫機構の弱体化のため、第２の治療において最適以下の用量を投与しても、毒性の一因となることがあり得る。
【００１８】
スキーム−１に示すように、ＤＴＩＣとは異なり、セレノフェン環系と腫瘍抗原表面上のＳＨ基との相互作用により、有効性が増大する。これは、セレン（Ｓｅ）が大きな原子であり、したがって、５員複素環式芳香族セレノフェン環系が空間的にフェニル環に類似していることが、孤立電子対が環の残部に対して、腫瘍部位でのスルフヒドリルとのより良好な相互作用に寄与するためである。また、その電子配置のため、複素環式芳香族セレノフェン環系は、プリン類似体として作用するとともに、アルキル化剤として作用することにより、ＤＮＡ合成を阻害することで、ＤＴＩＣよりも優れたものであり得る。また、ＤＴＩＣとは異なり、アミノイミダゾールカルボキサミド（ＡＩＣ）は、それ自体は不活性であるが、対応するアミノセレノフェンカルボキサミド（ＡＳＣ）は、環内セレンの電子の非局在化によってインビボで非常に充分に活性となり得、有効性が増大し得る。ＡＩＣおよびＡＳＣは、いずれもＤＮＡに組み込まれる。したがって、この新規なトリアゼノセレノフェン類似体は、ダカルバジンと比べて、構造に内在的に組み込まれた活性増大のためのいくつかのさらなる利点を有する。
【００１９】
したがって、用量レジメンを有効にするため、メラニンへの結合性が高い可能性のある部分（セレノフェン系など）によって、３つのすべての生化学的作用機序を有し、ＤＴＩＣ（ダカルバジン）より優れ、かつ完全応答をもたらすプラスの成果の可能性を有する治療的処置が提示され得る。したがって、本発明の目的は、標的黒色腫細胞に選択的に結合するが正常細胞には結合せず、それにより、非標的細胞に対する標的細胞比が増大し、さらに、本明細書に記載の他の関連する利点がもたらされるという、満たされていないこの医学的必要性を満たすことである。
【００２０】
血管新生または新生血管形成は、既に存在している脈管構造からの伸長部として派生する新たな血管が生成するプロセスである。血管新生は、癌の増殖および拡延に重要な役割を果たす。新たな血管は、癌細胞に酸素と栄養分を「供給」し、癌細胞が増殖し、近隣組織に浸潤し、他の身体部分に拡延し、新たな癌細胞コロニーを形成するのを可能にする。したがって、抗血管新生または血管新生の阻害は、腫瘍の増殖および癌細胞の転移性拡延を防御するための潜在的治療ストラテジーと考えられている。
【００２１】
本発明の発明者らは、新規な化合物（１種類もしくは複数種）の発明に対する取り組みの進行中において、驚くべきことに、一般式（Ｉ）および（ＩＩ）のセレノフェノトリアゼン化合物が強力な抗黒色腫剤、血管新生阻害物質であり、黒色腫、癌および他の血管系疾患の予防、コントロールおよび治療に有効であることを見出した。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００２２】
【非特許文献１】Ｐａｔｅｌ，Ｖ．Ｊ．ら、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．，２０００，６，４１５４−４１５７
【非特許文献２】Ｄｅ  Ａｎｇｕｌｏ，Ｇ．ら、Ｊ．Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｈｅｍａｔｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．，２００７，２９，４８−５２
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００２３】
（発明の概要）
本発明は、それぞれ一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の新規なセレノフェンおよびセレノフェノトリアゼン化合物を提供する。
【００２４】
また、好ましい態様において、本発明は、一般式（Ｉ）：
【化３】
0005571168.tif 000004
（式中、
Ｒは、Ｈ、ＣＨ３およびＣＨ２ＯＨから選択され、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立して、Ｈ、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）２、Ｎ＝Ｎ−ＮＨＣＨ３、Ｎ＝ＮＮ（ＣＨ３）ＣＨ２ＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ４、ＣＯＮＲ４Ｒ５、ＣＯＮＨＮＨ２、ＣＯＮＨＮＨＲ４、ＣＯＮＨＮＲ４Ｒ５、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＳＨ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＲ４、ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＣｌ３、ＣＨ３、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＳＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、Ｎ（ＣＨ３）２、アルキル、アルケニルなど、電子求引性官能基および電子供与性官能基から選択される（ここで、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、ＣＨ３、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アルケニル、アルキロール、アルコキシ、アルキルアミンなどから選択される）か、あるいはまた、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３のうち、いずれか２つが結合して、シクロヘキシル、シクロペンチル、フェニルおよびピリジルを含む脂環式、芳香族、複素環式系を形成していてもよい）
のセレノフェノトリアゼン化合物を提供する。
【００２５】
別の態様では、本発明は、一般式（ＩＩ）
【化４】
0005571168.tif 000005
（式中、
Ｘ、ＹおよびＺは、独立して、得られる二環式系含有５員芳香族複素環式部分が非置換型および置換型セレノフェンとなるように、二重結合がＸとＹの間またはＹとＺの間のいずれかに存在するように、ＣおよびＳｅから選択され、
Ｒ６およびＲ７は、独立して、Ｈ、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）２、Ｎ＝Ｎ−ＮＨＣＨ３、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ８、ＣＯＮＲ８Ｒ９、ＣＯＮＨＮＨ２、ＣＯＮＨＮＨＲ８、ＣＯＮＨＮＲ８Ｒ９、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＳＨ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＲ８、ＳＯ２ＮＲ８Ｒ９、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＣｌ３、ＣＨ３、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＳＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、Ｎ（ＣＨ３）２、アルキル、アルケニル、電子求引性官能基、電子供与性官能基などから選択され、
Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、ＣＨ３、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アルケニル、アルキロール、アルコキシ、アルキルアミンなどから選択される、あるいはまたＲ６とＲ７が結合して、シクロヘキシル、シクロペンチル、フェニルおよびピリジルを含む脂環式、芳香族、複素環式系を形成していてもよい）
のセレノフェノトリアゼン化合物を提供する。
【００２６】
別の態様では、本発明は、一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物の医薬的に許容され得る塩、例えば、有機塩または無機塩を提供する。
【００２７】
別の態様では、本発明は、一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の光学活性化合物の光学的エナンチオマーまたはジアステレオマーを提供する。
【００２８】
別の態様では、本発明は、
ａ）上記の一般式（Ｉ）から選択される少なくとも１種類のセレノフェノトリアゼン化合物およびその誘導体、
ｂ）上記の一般式（ＩＩ）から選択される少なくとも１種類のセレノフェノトリアゼン化合物およびその誘導体、または
ｃ）上記の一般式（Ｉ）から選択される少なくとも１種類のセレノフェノトリアゼン化合物と、上記の一般式（ＩＩ）から選択される少なくとも１種類のセレノフェノトリアゼン化合物の混合物
を含む医薬組成物を提供する。
【００２９】
上記の一般式（Ｉ）から選択される化合物および／または上記の一般式（ＩＩ）から選択される化合物を含む医薬組成物は、任意選択で、さらに、少なくとも１種類の医薬的に許容され得る賦形剤、担体または希釈剤を含む。医薬組成物は、任意選択で、上記の一般式（Ｉ）から選択される化合物および／または上記の一般式（ＩＩ）から選択される化合物に加えて、１種類以上の医薬用薬剤を含んでいてもよい。
【００３０】
別の態様では、本発明は、治療目的で、セレノフェノトリアゼン化合物（１種類もしくは複数種）をメラニンに結合させる方法、または癌細胞を死滅させる方法を提供する。該方法は、治療有効量の一般式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）の該化合物（１種類もしくは複数種）またはその医薬組成物（１種類もしくは複数種）を、それを必要とする被検体に投与する工程を含む。
【００３１】
別の態様では、本発明の化合物（１種類もしくは複数種）は、転移性悪性黒色腫、ならびに固形腫瘍である癌腫および他のあらゆる癌のマネージメントにおいて有用である。
【００３２】
別の態様では、本発明は、さらに、血管新生の阻害、ならびに血管新生調節因子（限定されないが、ＶＥＧＦ、ＰＤＧＦ、ＴＧＦ−βおよびＦＧＦが挙げられる）の改善を必要とする温血動物における該阻害方法ならびに該改善のための方法であって、それぞれ一般式（Ｉ）および（ＩＩ）のセレノフェンおよび／またはセレノフェノトリアゼン化合物またはその医薬組成物（１種類もしくは複数種）の治療有効量を投与することを含む方法を提供する。
【００３３】
別の態様では、本発明は、内皮細胞および血管平滑筋細胞の増殖、遊走、浸潤を修飾することによる脈管構造のリモデリングを必要とする温血動物における、該リモデリングのための方法を提供する。
【００３４】
さらに、本発明は、転移性腫瘍の増殖およびその拡延の阻害を必要とする温血動物における、該阻害のための方法を提供する。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】図１：棒グラフは、グラフに表示した種々の濃度のＤＴＩＣおよび化合物１で処理したＢ１６  Ｆ０マウス黒色腫細胞（Ａ）、およびＡ３７５ヒト黒色腫細胞（Ｂ）での漏出乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）の増加パーセントを示す。各バーは、４連のウェルの平均から（ｆｏｒｍ）計算した、ビヒクル対照培養（０．５％ＤＭＳＯ）を基準とした漏出ＬＤＨの増加パーセントを示す。
【図２】図２：棒グラフは、２５μｇ／ｍｌおよび５０μｇ／ｍｌでの、化合物１およびＤＴＩＣによるＨｓ．５３１．ｓｋ正常ヒト皮膚細胞の増殖阻害割合を示す。
【図３】図３：パネルＡは、化合物１およびＤＴＩＣの存在下におけるインビトロでの、Ｂ１６Ｆ０コロニー形成の阻害を示す画像を示す。Ｂ１６Ｆ０細胞は、０．１％ＤＭＳＯ（１）、または１、５、１０、２０μｇ／ｍｌの化合物１（それぞれ、２〜５）もしくは１００μｇ／ｍｌのＤＴＩＣ（６）で処理した。平均コロニー数および平均コロニーサイズを、それぞれ、パネルＢおよびＣに示す。
【図４】図４：顕微鏡写真は、ビヒクル対照（Ａ）、１００μｇ／ｍｌのＤＴＩＣ（Ｂ）、および２０μｇ／ｍｌの化合物１（Ｃ）で処理した培養物中の浸潤Ｂ１６Ｆ０細胞を示す。棒グラフは、２０倍対物レンズで観察した２０個の独立した視野で計数した、それぞれの培養物中の浸潤細胞数の平均±ＳＤを示す。＊は、ビヒクル対照に対する有意性（ｐ＜０．０５）を示す（スチューデントＴ−検定）。
【図５】図５：図は、ヒト内皮細胞の遊走に対する化合物１の阻害作用を示す。顕微鏡写真は、それぞれ、１００μｇ／ｍｌのＤＴＩＣ（Ｂ）または５μｇ／ｍｌの化合物１（Ｃ）または１０μｇ／ｍｌの化合物１（Ｄ）のいずれかの存在下でのＨＵＶＥＣの遊走を示す。パネルＡは、０．１％ＤＭＳＯ処理ビヒクル対照ウェルでの細胞遊走を示す。棒グラフは、各バーの下に表示した異なる培養条件下での平均遊走細胞数を示す。各バーは、２０倍対物レンズ下の少なくとも２０個の視野で計算した平均遊走細胞数を示す。
【図６】図６：図は、化合物１による毛細管様血管の形成の阻害を示す。ヒト臍静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）を、ＤＴＩＣ（１００μｇ／ｍｌ）または化合物１（５μｇ／ｍｌおよび１０μｇ／ｍｌ）（Ｃ，Ｄ）のいずれかの存在下のＣｕｌｔｒｅｘコートプレート上に置き、３７℃で１６時間、内皮毛細血管を形成させた。パネル図Ａ〜Ｄは、それぞれ、０．１％ＤＭＳＯ処理ビヒクル対照ウェル、ＤＴＩＣで処理した培養物、ならびに５μｇ／ｍｌおよび１０μｇ／ｍｌの化合物１で処理した培養物における毛細管様血管の形成を示す。棒グラフのバー（Ａ〜Ｄ）は、パネル図に表示したそれぞれの異なる培養条件下での分岐点の数の平均を示す。
【図７】図７：棒グラフは、Ｃ５７Ｂ６Ｊマウスでの、Ｂ１６Ｆ０腫瘍の増殖に対する化合物１とＤＴＩＣの有効性の比較を示す。各バーは、腫瘍の平均重量（単位：グラム）±ＳＤを示す（ｎ＝８）。バーＡは１０％ＤＭＳＯ処理ビヒクル対照群を示し、バーＢは２５ｍｇ／ｋｇの化合物１投与群を示し、バーＣは７５ｍｇ／ｋｇのＤＴＩＣ投与群を示す。＊は、対照に対する統計学的有意性（ｐ＜０．０５）を示す（スチューデントｔ−検定）。
【図８】図８：棒グラフは、ｎｕ／ｎｕ  ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスのＡ３７５ヒト黒色腫異種移植片モデルにおける化合物１の抗黒色腫作用を示す。各バーは、腫瘍体積（単位：立方ミリメートル）の平均±ＳＤを示す（ｎ＝５）。バーは、それぞれ、１０％ＤＭＳＯ処理ビヒクル対照群および２５ｍｇ／ｋｇの化合物１投与群の平均腫瘍体積を示す。＊は、対照に対する統計学的有意性（ｐ＜０．０５）を示す（スチューデントｔ−検定）。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
（発明の詳細な説明）
本発明の解釈上、以下の語句または単語を用いて一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物に言及する。
【００３７】
表現「セレノフェノトリアゼン化合物」、「セレノフェノトリアゼン類似体（１種類もしくは複数種）」、「トリアゼン類似体（１種類もしくは複数種）」、「トリアゼンセレノフェン類似体（１種類もしくは複数種）」、「セレノフェン類似体（１種類もしくは複数種）」、「セレノフェノ類似体（１種類もしくは複数種）」、「本発明の類似体（１種類もしくは複数種）」、「標的化類似体（１種類もしくは複数種）または「その誘導体（１種類もしくは複数種）」は、以下の本文中において互換的に用いる。
【００３８】
表現「類似体（１種類または複数種）」および「誘導体（１種類または複数種）」は、以下の本文中において互換的に用いる。
【００３９】
語句「本発明の組成物」は、少なくとも１種類の医薬用担体／賦形剤を伴う式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物を意味し、該化合物を含む。
【００４０】
表現「医薬的に許容され得る」は、賦形剤（１種類または複数種）、担体（１種類もしくは複数種）、希釈剤（１種類または複数種）、および／または塩（１種類もしくは複数種）が、製剤のその他の成分と適合性であり、そのレシピエントに有害でないことを意図する。
【００４１】
次に、本発明を、その種々の態様がより充分に理解され、認識され得るように、一部の特定の好ましい任意選択の実施形態に関して詳細に説明する。
【００４２】
黒色腫の発生率および死亡率は、米国を含む全世界中で、いずれの他の癌よりも速く上昇し続けている（Ｈｏｗｅ，Ｈ．Ｌ．ら、Ｊ．Ｎａｔｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ．（Ｂｅｔｈｅｓｄａ）、９３：８２４−８４２，２００１）。該して、黒色腫は全悪性腫瘍の１〜３％を占め、発生率は、毎年６〜７％増加している。進行疾患を有する患者では、５年生存率は１０％未満であり、生存期間中央値は６〜８．５ヶ月である。転移黒色腫は、皮膚、リンパ節、肺、肝臓、脳、骨、および場合によっては、他の器官（膵臓など）を侵す。転移性黒色腫に対する種々の治療アプローチ、例えば、化学療法および生物学的療法が、単剤治療として、および併用においての両方で評価されている。しかしながら、悪性黒色腫の治療には、ダカルバジン（ＤＴＩＣ）が、化学療法の主な選択肢として広く使用されており、この目的に関して米国食品医薬品局によって承認されている（Ｃｈａｐｍａｎ，Ｐ．Ｂ．ら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，１７：２７４５−２７５１，１９９９）。しかしながら、ＤＴＩＣ単剤での応答速度は期待はずれ（わずか１０〜２５％の範囲）であり、完全応答が見られるのは患者の５％未満である（Ｍｉｄｄｌｅｔｏｎ，Ｍ．Ｒ．ら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．，１８：１５８−１６６，２０００、Ｍｉｄｄｌｅｔｏｎ，Ｍ．Ｒ．ら、Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，８２：１１５８−１１６２，２０００）。以前の試験で、ダカルバジンは、インターロイキン−８（ＩＬ−８）および血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）などの血管新生因子の過剰発現をもたらすことがあり得ることが示された（Ｌｅｖ  ＤＣら、Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ、２：７５３−７６３，２００３、Ｌｅｖ  ＤＣら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２２：２０９２−２１００，２００４）。したがって、このダカルバジンの血管新生促進特性は、黒色腫に対するダカルバジンの化学療法的有効性が低いことの根拠を示すものであり得る。
【００４３】
したがって、このような問題に対処する新たな治療薬を開発する、満たされていない医学的必要性が存在している。
【００４４】
本発明は、早期診断で治癒する可能性に対する活性を有意に増大させるため、および末期の悪性腫瘍の治療における有効性を有意に増大させるために、ＤＴＩＣの主鎖として、イミダゾールの代わりにセレノフェンを使用する。
【００４５】
新規な抗腫瘍化合物の開発の一部として、一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の一部のセレノフェン類似体を調製し、一部の腫瘍細胞株に対するその有効性について試験した。非常に驚くべきことに、一般式（Ｉ）のトリアゼンセレノフェン類似体（化合物１）は、Ａ３７５ヒト黒色腫細胞株の阻害において、ＤＴＩＣと比べてインビトロで９倍高い効能を示すことがわかった。セレノフェン類似体（化合物１）では９．８１μｇ／ｍｌのＩＣ５０値が示されたのに対し、ＤＴＩＣでは７０．１μｇ／ｍｌが示された。その有効性を、インビボ実験によってさらに確認した［図７および８］。Ｃ５７Ｂ６Ｊマウスのマウス黒色腫異種移植片モデルにおいて、セレノフェン類似体（化合物１）では、腫瘍の増殖の３１．２％阻害が示されたのに対し、ＤＴＩＣでは１７％阻害が示された（図７）。また、ＤＴＩＣとの比較において、化合物１で示されたヒト正常皮膚上皮細胞における細胞傷害作用は有意に小さかった（図２）。この観察結果は、化合物１が、ヒト正常細胞に影響を及ぼすことなく、または影響を最小限に抑えて、黒色腫腫瘍細胞の増殖を効率的に阻害し得ることを示す。したがって、この新規な類似体（化合物１）は、市販薬のＤＴＩＣよりも有効性および安全性の点で有意に良好である。
【００４６】
化合物１では、インビトロでの内皮毛細血管形成アッセイにおいて抗血管新生特性が示されたが、ＤＴＩＣでは内皮毛細血管形成は阻害され得なかった（図６）。また、化合物１では内皮細胞遊走が示され、これは、この新規な類似体によって、腫瘍の増殖に必要とされる血管新生プロセス中、組織リモデリングの阻害が補助され得ることを示す。さらに、化合物１では悪性黒色腫腫瘍細胞の浸潤も有意に阻害された（図４）が、ＤＴＩＣでは腫瘍細胞の浸潤は阻害されなかった。総合すると、これらの所見は、悪性黒色腫の治療において、市販薬のＤＴＩＣよりも化合物１が優れていることをさらに示す。
【００４７】
また、他の類似体（化合物２〜１６）でも、表１にまとめたように、Ｂ１６Ｆ０マウス黒色腫細胞株において、ＤＴＩＣと比べて有意に高い有効性が示された。
【００４８】
選択した化合物を用いて本発明を実証したが、本発明は、一般式（Ｉ）および（ＩＩ）のあらゆる化合物ならびにその誘導体を包含する。
【００４９】
好ましい一実施形態において、本発明は、下記の一般式（Ｉ）および（ＩＩ）：
【化５】
0005571168.tif 000006
（式中、
Ｒは、Ｈ、ＣＨ３およびＣＨ２ＯＨから選択され、
Ｒ１、Ｒ２およびＲ３は、独立して、Ｈ、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）２、Ｎ＝Ｎ−ＮＨＣＨ３、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ４、ＣＯＮＨＲ４Ｒ５、ＣＯＮＨＮＨ２、ＣＯＮＨＮＨＲ４、ＣＯＮＨＮＲ４Ｒ５、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＳＨ、ＣＮ、Ｃ＝ＣＨ、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＲ４、ＳＯ２ＮＲ４Ｒ５、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＣｌ３、ＣＨ３、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＳＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、Ｎ（ＣＨ３）２、アルキル、アルケニル基など、電子求引性官能基および電子供与性官能基から選択され、ここで、Ｒ４およびＲ５は、独立して、Ｈ、ＣＨ３、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アルケニル、アルキロール、アルコキシ、アルキルアミンなどから選択される）
【化６】
0005571168.tif 000007
（式中、
Ｘ、ＹおよびＺは、独立して、得られる二環式系が非置換型および置換型セレノフェンの５員芳香族複素環式部分を伴うものとなるように、二重結合がＸとＹの間またはＹとＺの間のいずれかに存在するように、ＣおよびＳｅから選択され、
Ｒ６およびＲ７は、
ａ）独立して、Ｈ、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）２、Ｎ＝Ｎ−ＮＨＣＨ３、Ｎ＝Ｎ−Ｎ（ＣＨ３）ＣＨ２ＯＨ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ８、ＣＯＮＲ８Ｒ９、ＣＯＮＨＮＨ２、ＣＯＮＨＮＨＲ８、ＣＯＮＨＮＲ８Ｒ９、ＣＯＯＣＨ３、ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３、ＣＯＯＨ、ＣＯＳＨ、ＣＮ、Ｃ≡ＣＨ、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＲ８、ＳＯ２ＮＲ８Ｒ９、ＮＯ２、ＣＦ３、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｆ、ＣＣｌ３、ＣＨ３、ＯＨ、ＯＣＨ３、ＳＨ、ＳＣＨ３、ＮＨ２、ＮＨＣＨ３、Ｎ（ＣＨ３）２、アルキル、アルケニル、電子求引性官能基、および電子供与性官能基から選択されるか、または
ｂ）結合して、脂環式、芳香族、複素環式の環系（ｒｉｎｇ  ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ  ｓｙｓｔｅｍ）を形成しているか
のいずれかであり、
Ｒ８およびＲ９は、独立して、Ｈ、ＣＨ３、Ｃ１〜Ｃ１０アルキル、アルケニル、アルキロール、アルコキシ、アルキルアミンから選択される）
で表されるセレノフェノトリアゼン化合物を提供する。
【００５０】
一般式（Ｉ）および（ＩＩ）におけるアルキル基には、限定されないが、メチル、エチル、プロピル、ブチル、イソプロピル、イソブチル、ターシャリーブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチルおよび他のＣ１〜Ｃ３０アルキル基が包含され、アルケニル基は、一般に、エテン、プロペン、ブテン、ペンテンおよび高級アルケニル基（例えば、１つ以上の二重結合を有するＣ６〜Ｃ３０アルケニル基）をいい、アルキロール基は、一般に、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、ヒドロキシプロピルおよび他のヒドロキシアルキル基をいい、アルコキシ基は、一般に、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペントキシおよび他の高級アルコキシ基（例えば（ｉｎｃｌｕｄｅ）、Ｃ６〜Ｃ３０炭素原子）をいい、アルキルアミン基は、アミノメチル、アミノエチル、アミノプロピルおよびＣ４〜Ｃ３０の炭素原子を有する他の高級アルキルアミンをいう。
【００５１】
あるいはまた、一般式（Ｉ）のＲ１、Ｒ２およびＲ３のうち、いずれか２つが結合して、脂環式、芳香族、複素環式系、例えば限定されないが、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニルおよびピリジルを形成していてもよい。
【００５２】
あるいはまた、一般式（ＩＩ）のＲ６とＲ７が結合して、脂環式、芳香族または複素環式系、例えば限定されないが、シクロペンチル、シクロヘキシル、フェニルおよびピリジルを形成していてもよい。
【００５３】
本発明は、新規な一般式（Ｉ）および（ＩＩ）のセレノフェノトリアゼン化合物に関する。一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物は、その代謝面での関連性のため、一緒に開示する。例えば、一般式（Ｉ）の化合物は、肝臓のミクロソーム内酵素（シトクロムＰ４５０）によってインビボで活性化された後、酸化的脱メチル化されると、そのモノメチルトリアゼン誘導体がもたらされる。同様に一般式（ＩＩ）の類似化合物は、インビボで加水分解されると、類似したモノメチルトリアゼン誘導体がもたらされる。したがって、インビボでの代謝面での関連性のため、一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物は単一の発明を構成する。しかしながら、一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物を、便宜上、別々に開示する。
【００５４】
別の実施形態では、本発明は、一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の幾何異性形態、立体異性体、立体配置異性体、多形、水和物、溶媒和物ならびにその医薬的に許容され得る塩に関する。
【００５５】
別の好ましい実施形態では、本発明は、一般式（Ｉ）または（ＩＩ）の以下のセレノフェノトリアゼン化合物の合成を提供し、その調製を実施例１〜１６に記載する。
【００５６】
１．４−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−メチルセレノフェン−２−カルボキサミド（化合物１）
２．３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェン−２，５−ジカルボキサミド（化合物２）
３．３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−フェニルセレノフェン−２−カルボキサミド（化合物３）
４．３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボキサミド（化合物４）
５．３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボキサミド（化合物５）
６．３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキサミド（化合物６）
７．３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−フェニルセレノフェン−２−カルボン酸（化合物７）
８．３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボン酸（化合物８）
９．３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボン酸（化合物９）
１０．３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸（化合物１０）
１１．３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボニトリル（化合物１１）
１２．３−メチル−６−フェニルセレノフェノ［３，２−ｄ］１，２，３−トリアジン−４−オン（化合物１２）
１３．６−（ｔｅｒｔ−ブチル）−３−メチルセレノフェノ［３，２−ｄ］１，２，３−トリアジン−４−オン（化合物１３）
１４．３−メチル−６，７，８，９−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］１，２，３−トリアジノ［４，５−ｄ］セレノフェン−４−オン（化合物１４）
１５．３−メチル−１，２，３−トリアジノ［４’，５’−５，４］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オン（化合物１５）
１６．３−メチルベンゾ［ｂ］１，２，３−トリアジノ［４，５−ｄ］セレノフェン−４−オン（化合物１６）
【００５７】
別の態様では、本発明は、好ましい化合物の合成、ならびに実施例１〜１６に記載した該合成プロセス中に得られるその中間体を提供する。
【００５８】
別の態様では、一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物の医薬的に許容され得る酸（１種類または複数種）および塩基付加塩は、多種多様な有機系および無機系の酸および塩基を含むものであり、限定されないが、製薬業界で多くの場合で使用される生理学的に許容され得る塩が挙げられる。このような塩もまた、本発明の一部である。このような塩を形成するために使用される典型的な無機酸としては、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、次亜リン酸などが挙げられる。また、脂肪族モノおよびジカルボン酸、フェニル置換アルカン酸、ヒドロキシアルカン酸およびヒドロキシアルカンジオン（ａｌａｎｄｉｏｉｃ）酸、芳香族の酸、脂肪族および芳香族スルホン酸などの有機酸から誘導される塩も使用され得る。したがって、このような医薬的に許容され得る塩としては、酢酸塩、フェニル酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、アクリル酸塩、アスコルビン酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、桂皮酸塩、クエン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グリコール酸塩、ヘプタン酸塩、馬尿酸塩、乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、ニコチン酸塩、イソニコチン酸塩、硝酸塩、シュウ酸塩、フタル酸塩、テレフタル酸塩、リン酸塩、リン酸一水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、プロピオール酸塩、プロピオン酸塩、フェニルプロピオン酸塩、サリチル酸塩、セバシン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、ピロ硫酸塩、亜硫酸塩、重硫酸塩、スルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、クロロベンゼンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、酒石酸塩などが挙げられる。
【００５９】
医薬的に許容され得る塩は、一般的に、該塩が誘導される化合物の天然形態と比べて水への溶解特性が向上しており、したがって、多くの場合、液体または乳剤としてより製剤化され易く、生態学的利用能が向上したものであり得る。
【００６０】
別の態様では、本発明は、さらに、一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の上記の該セレノフェン化合物および類似体ならびにその医薬的に許容され得る組成物の調製方法を提供する。
【００６１】
式（Ｉ）のセレノフェノトリアゼン類似体の合成、具体的には、４−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−メチルセレノフェン−２−カルボキサミド（化合物１）の合成は、スキームＡに示す工程によってなされる。
【化７】
0005571168.tif 000008
スキーム−Ａ
【００６２】
試薬および条件：（ｉ）ＨＮＯ３、Ａｃ２Ｏ、室温（ｒｔ）（ｉｉ）Ｆｅ、ＨＣｌ、ＭｅＯＨ、還流、１時間（ｉｉｉ）ＨＣｌ、ＮａＮＯ２、Ｋ２ＣＯ３／ジメチルアミン、０℃（ｉｖ）ＮＨ３水、室温、４０時間
【００６３】
５−メチルセレノフェン−１−カルボン酸メチルのニトロ化によって、５−メチル−４−ニトロセレノフェン−２−カルボン酸メチルを得た。ニトロ官能性は、適当な還元剤、例えば、鉄粉末または任意の他のニトロ還元剤を用いて良好な収率でアミンに還元される。亜硝酸ナトリウムでの４−アミノ−５−メチルセレノフェン−２−カルボン酸メチルのジアゾ化後、炭酸カリウム／ジメチルアミンで処理し、４−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−メチルセレノフェン−２−カルボン酸メチルを得る。このエステルをアンモニアで処理し、所要の４−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−メチルセレノフェン−２−カルボキサミド（化合物１）を得た。
【００６４】
式（１）のセレノフェノトリアゼン類似体の合成、具体的には、３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェン−２，５−ジカルボキサミド（化合物２）の合成は、スキームＢに示す工程によってなされる。
【化８】
0005571168.tif 000009
スキーム−Ｂ
【００６５】
試薬および条件：（ｉ）ＳｅＯ２、ＡｃＯＨ、還流、８時間（ｉｉ）ＡｇＮＯ３、ＮａＯＨ、室温、１時間（ｉｉｉ）ＨＮＯ３、Ｈ２ＳＯ４、０℃〜室温、２時間（ｉｖ）ＭｅＯＨ、ＳＯＣｌ２、還流、２時間（ｖ）Ｆｅ、ＨＣｌ、ＭｅＯＨ、還流、３時間（ｖｉ）ＨＣｌ、ＮａＮＯ２、Ｋ２ＣＯ３／ジメチルアミン、０℃、２時間（ｖｉｉ）ＮＨ３水、室温、２４時間
【００６６】
二酸化セレンでの５−メチルセレノフェン−２−カルボン酸メチルの酸化により、５−ホルミルセレノフェン−２−カルボン酸メチルを得、これを硝酸銀でさらに酸化し、セレノフェン−２，５−ジカルボン酸を得た。セレノフェン−２，５−ジカルボン酸のニトロ化およびエステル化により、５−（メトキシカルボニル）−３−ニトロセレノフェン−２−カルボン酸メチルを良好な収率で得た。ニトロ官能性は、適当な還元剤、例えば、鉄粉末または任意の他のニトロ還元剤を用いて良好な収率でアミンに還元される。亜硝酸ナトリウムでの３−アミノ−５−（メトキシカルボニル）セレノフェン−２−カルボン酸メチルのジアゾ化後、炭酸カリウム／ジメチルアミンで処理し、３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（メトキシカルボニル）セレノフェン−２−カルボン酸メチルを得る。このエステルをアンモニアで処理し、所要の３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェン−２，５−ジカルボキサミド（化合物２）を得た。
【００６７】
式（Ｉ）のセレノフェノトリアゼン類似体の合成は、具体的には、化合物３と化合物４では、スキームＣに示す工程によってなされる。
【化９】
0005571168.tif 000010
スキーム−Ｃ
【００６８】
試薬および条件：（ｉ）ＰＯＣｌ３、ＤＭＦ、０℃、ＮＨ２ＯＨ．ＨＣｌ、１４５〜１５５℃、３０分間（ｉｉ）Ｎａ２Ｓｅ、ＤＭＦ、ＣｌＣＨ２ＣＯＯＥｔ、ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ、６０〜７０℃、５時間（ｉｉｉ）ＨＣｌ、ＮａＮＯ２、Ｋ２ＣＯ３／ジメチルアミン、０℃、２時間（ｉｖ）ＮＨ３水、ＰＥＧ−４００、室温、４８時間
【００６９】
３−クロロ−３−置換プロプ−２−エンニトリルを、対応するケトンを出発物質として、ＤＭＦ−オキシ塩化リンを用い、続いて塩酸ヒドロキシルアミンを用いて調製する。得られた生成物をセレン化ナトリウム、クロロ酢酸エチルと、塩基の存在下で反応させると、３−アミノ−セレノフェン−２−カルボン酸３−置換エチルが良好な収率で得られる。このアミノ化合物の亜硝酸ナトリウムでのジアゾ化後、炭酸カリウム／ジメチルアミンで処理し、トリアジン化合物を得る。このエステルを、ＰＥＧ−４００の存在下にてアンモニアで処理し、所要の３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−フェニルセレノフェン−２−カルボキサミド（化合物３）と、３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボキサミド（化合物４）を得た。
【００７０】
式（Ｉ）のセレノフェノトリアゼン類似体の合成、具体的には、３−［（ジメチルアミノ）−ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボキサミド（化合物５）の合成は、スキームＤに示す工程によってなされる。
【化１０】
0005571168.tif 000011
スキーム−Ｄ
【００７１】
試薬および条件：（ｉ）ＰＯＣｌ３、ＤＭＦ、０℃、ＮＨ２ＯＨ．ＨＣ１、１４５〜１５５℃、３０分間（ｉｉ）Ｎａ２Ｓｅ、ＤＭＦ、ＣｌＣＨ２ＣＯＯＥｔ、ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ、６０〜７０℃、５時間（ｉｉｉ）ＨＣｌ、ＮａＮＯ２、Ｋ２ＣＯ３／ジメチルアミン、０℃、１時間（ｉｖ）ＮＨ３水、ＰＥＧ−４００、室温、６６時間
【００７２】
シクロヘキサンを出発物質とし、ＤＭＦ−オキシ塩化リンと塩酸ヒドロキシルアミンを用いて３−クロロシクロヘキソ−１−エンカルボニトリルを調製し、これをセレン化ナトリウムと反応させると、３−アミノ−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［２，１−ｄ］セレノフェン−２−カルボン酸エチルが良好な収率で得られる。亜硝酸ナトリウムでの３−アミノ−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［２，１−ｄ］セレノフェン−２−カルボン酸エチルのジアゾ化後、炭酸カリウム／ジメチルアミンで処理し、３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６７−テトラヒドロベンゾ［２，１−ｄ］セレノフェン−２−カルボン酸メチルを得る。このエステルをアンモニアで処理し、所要の３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボキサミド（化合物５）を得た。
【００７３】
式（Ｉ）のセレノフェノトリアゼン類似体の合成、具体的には、３−［（ジメチルアミノ）−ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキサミド（化合物６）の合成は、スキームＥに示す工程によってなされる。
【化１１】
0005571168.tif 000012
スキーム−Ｅ
【００７４】
試薬および条件：（ｉ）Ｎａ２Ｓｅ、ＤＭＦ、ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ、６０〜７０℃、５時間（ｉｉ）ＨＣｌ、ＮａＮＯ２、Ｋ２ＣＯ３／ジメチルアミン、０℃、１時間（ｉｉｉ）ＮＨ３水、室温、１６時間
【００７５】
２−クロロピリジン、セレン化ナトリウムおよびクロロ酢酸エチルを出発物質として３−アミノセレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸エチルを調製し、これを亜硝酸ナトリウムでジアゾ化後、ジメチルアミンで処理すると、３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸エチルが得られる。このエステルをアンモニアで処理し、所要の３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキサミド（化合物６）を得た。
【００７６】
式（Ｉ）のセレノフェノトリアゼン類似体の合成、具体的には、化合物７と化合物８の合成は、スキームＦに示す工程によってなされる。
【化１２】
0005571168.tif 000013
スキーム−Ｆ
【００７７】
試薬および条件：（ｉ）ＭｅＯＨ、ＮａＯＨ、室温、１６時間
【００７８】
対応する（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェンエステルを水酸化ナトリウムで加水分解し、所要の３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−フェニルセレノフェン−２−カルボン酸（化合物７）と、３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボン酸（化合物８）を得た。
【００７９】
式（Ｉ）のセレノフェノトリアゼン類似体の合成、具体的には、３−［（ジメチルアミノ）−ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボン酸（化合物９）の合成は、スキームＧに示す工程によってなされる。
【化１３】
0005571168.tif 000014
スキーム−Ｇ
【００８０】
試薬および条件：（ｉ）ＭｅＯＨ、ＮａＯＨ、室温、５時間
【００８１】
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［２，１−ｄ］セレノフェン−２−カルボン酸メチルを水酸化ナトリウムで加水分解し、所要の３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボン酸（化合物９）を得た。
【００８２】
式（Ｉ）のセレノフェノトリアゼン類似体の合成、具体的には、３−［（ジメチルアミノ）−ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸（化合物１０）の合成は、スキームＨに示す工程によってなされる。
【化１４】
0005571168.tif 000015
スキーム−Ｈ
【００８３】
試薬および条件：（ｉ）ＭｅＯＨ、ＮａＯＨ、室温、２時間
【００８４】
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸エチルを水酸化ナトリウムで加水分解し、所要の３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸（化合物１０）を得た。
【００８５】
式（Ｉ）のセレノフェノトリアゼン類似体の合成、具体的には、化合物１１の合成はスキームＩに示す工程によってなされる。
【化１５】
0005571168.tif 000016
スキーム−Ｉ
【００８６】
試薬および条件：（ｉ）Ｎａ２Ｓｅ、ＤＭＦ、ＣｌＣＨ２ＣＮ、ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ、６０〜７０℃、５時間（ｉｉ）ＨＢＦ４、ＮａＮＯ２、Ｋ２Ｃ０３／ジメチルアミン、０℃、２時間
【００８７】
３−クロロ−４，４−ジメチルペント−２−エンニトリル、セレン化ナトリウムおよびクロロアセトニトリルを出発物質として、３−アミノ−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボニトリルを調製し、これを亜硝酸ナトリウムでジアゾ化後、ジメチルアミンで処理し、所要の３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボニトリル（化合物１１）を得た。
【００８８】
式（ＩＩ）のセレノフェノトリアゼン類似体の合成、具体的には、化合物１２と化合物１３の合成は、スキームＪに示す工程によってなされる。
【化１６】
0005571168.tif 000017
スキーム−Ｊ
【００８９】
試薬および条件：（ｉ）Ｎａ２Ｓｅ、ＤＭＦ、ＣｌＣＨ２ＣＮ、ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ、６０〜７０℃、５時間（ｉｉ）ＮａＯＨ水溶液、ＥｔＯＨ、還流、４５分間（ｉｉｉ）ＮａＮＯ２、Ｈ２ＳＯ４、０℃、１時間、室温、１時間（ｉｖ）ＣＨ３Ｉ、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、室温、１６時間
【００９０】
対応する３−置換３−クロロ−プロプ−２−エンニトリル、セレン化ナトリウムおよびクロロアセトニトリルを出発物質として、対応する５−置換３−アミノ−セレノフェン−２−カルボニトリルを調製し、これを水酸化ナトリウム水溶液で処理すると、対応するアミドが良好な収率で得られる。このアミンを亜硝酸ナトリウムでジアゾ化後、塩基の存在下にてヨードメタンで処理し、所要の３−メチル−６−フェニルセレノフェノ［３，２−ｄ］１，２，３−トリアジン−４−オン（化合物１２）と、６−（ｔｅｒｔ−ブチル）−３−メチルセレノフェノ［３，２−ｄ］１，２，３−トリアジン−４−オン（化合物１３）を得た。
【００９１】
式（ＩＩ）のセレノフェノトリアゼン類似体の合成、具体的には、化合物１４の合成は、スキームＫに示す工程によってなされる。
【化１７】
0005571168.tif 000018
スキーム−Ｋ
【００９２】
試薬および条件：（ｉ）Ｎａ２Ｓｅ、ＤＭＦ、ＣｌＣＨ２ＣＮ、ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ、６０℃、３時間（ｉｉ）ＮａＯＨ水溶液、ＥｔＯＨ、還流、１時間（ｉｉｉ）ＮａＮＯ２、Ｈ２ＳＯ４、０℃、２時間（ｉｖ）ＣＨ３Ｉ、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、ＰＥＧ−４００、室温、１６時間
【００９３】
２−クロロシクロヘキソ−１−エンカルボニトリル、セレン化ナトリウムおよびクロロアセトニトリルを出発物質として、３−アミノ−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボニトリルを調製し、これを水酸化ナトリウム水溶液で処理すると、対応するアミドが良好な収率で得られた。このアミンを亜硝酸ナトリウムでジアゾ化後、塩基の存在下にてヨードメタンで処理し、所要の３−メチル−６，７，８，９−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］１，２，３−トリアジノ−［４，５−ｄ］−セレノフェン−４−オン（化合物１４）を得た。
【００９４】
式（ＩＩ）のセレノフェノトリアゼン類似体の合成、具体的には、化合物１５と化合物１６の合成は、スキームＬに示す工程によってなされる。
【化１８】
0005571168.tif 000019
スキーム−Ｌ
【００９５】
試薬および条件：（ｉ）Ｎａ２Ｓｅ、ＤＭＦ、ＮａＯＭｅ、ＭｅＯＨ、６０〜７０℃、３時間（ｉｉ）ＮａＯＨ水溶液、ＥｔＯＨ、還流、４５分間（ｉｉｉ）ＮａＮＯ２、Ｈ２ＳＯ４、０℃、２時間（ｉｖ）ＣＨ３Ｉ、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、ＰＥＧ−４００、室温、１６時間
【００９６】
２−クロロピリジン−３−カルボニトリルまたは２−クロロベンゾニトリル、セレン化ナトリウムおよびクロロアセトニトリルを出発物質として、対応する３−アミノ−セレノフェノカルボニトリルを調製し、これを水酸化ナトリウム水溶液で処理すると、対応するアミドが良好な収率で得られた。このアミンを亜硝酸ナトリウムでジアゾ化後、塩基の存在下にてヨードメタンで処理し、所要の３−メチル−１，２，３−トリアジノ［４’，５’−５，４］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オン（化合物１５）と、３−メチルベンゾ［ｂ］１，２，３−トリアジノ［４，５−ｄ］セレノフェン−４−オン（化合物１６）を得た。
【００９７】
別の態様では、本発明は、セレノフェノトリアゼン類似体を、医薬的に許容され得る賦形剤（１種類または複数種）または担体（１種類もしくは複数種）または希釈剤（１種類または複数種）との組み合わせにより含む医薬用または獣医用組成物（以下、本明細書において医薬組成物と称する）を提供する。
【００９８】
別の態様では、本発明は、セレノフェノトリアゼン類似体を、医薬的に許容され得る賦形剤（１種類または複数種）／担体（１種類もしくは複数種）／希釈剤（１種類または複数種）との組み合わせにより含み、任意選択で、さらに、１種類以上の医薬的に許容され得る抗癌剤を含む医薬用または獣医用組成物を提供する。
【００９９】
別の態様では、本発明は、セレノフェノトリアゼン類似体を、医薬的に許容され得る賦形剤（１種類または複数種）／担体（１種類もしくは複数種）／希釈剤（１種類または複数種）との組み合わせにより含み、任意選択で、さらに、１種類以上の医薬的に許容され得る抗血管新生薬を含む医薬用または獣医用組成物を提供する。
【０１００】
別の態様では、本発明は、上記のメラニン標的化類似体を含むセレノフェノトリアゼン類似体を、医薬的に許容され得る賦形剤（１種類または複数種）／担体（１種類もしくは複数種）／希釈剤（１種類または複数種）との組み合わせにより含む医薬用または獣医用組成物（以下、本明細書において医薬組成物と称する）を提供する。
【０１０１】
別の態様では、本発明は、セレノフェノトリアゼン類似体を、医薬的に許容され得る賦形剤（１種類または複数種）／担体（１種類もしくは複数種）／希釈剤（１種類または複数種）との組み合わせにより含み、任意選択で、さらに、１種類以上の医薬的に許容され得る薬剤を含む、医薬用または獣医用組成物としての使用のための新規な組成物を提供する。
【０１０２】
別の態様では、医薬的に許容され得る薬剤は、抗癌剤、抗黒色腫薬、抗転移性黒色腫薬、抗血管新生薬、抗炎症薬、抗肥満薬、抗糖尿病薬、抗代謝病薬、生物学的応答修飾剤および他の化学療法薬を含むリストから選択される１種類以上の薬剤であり得る。
【０１０３】
別の態様では、本明細書に記載の方法の組成物は、補助剤または抗腫瘍剤などのさらなる薬剤を含んでいてもよい。抗腫瘍剤としては、限定されないが、ＲＮＡｉ試薬、腫瘍細胞および抗体が挙げられる。種々の実施形態において、抗腫瘍剤は、限定されないが：
５−フルオロウラシルまたは５−フルオロウラシルの医薬的に許容され得る組成物、例えば限定されないが、Ａｄｒｕｃｉｌ（登録商標）、Ｃａｒａｃ（登録商標）、Ｅｆｕｄｅｘ（登録商標）およびＦｌｕｏｒｏｐｌｅｘ（登録商標）、
６−メルカプトプリンまたは医薬的に許容され得る６−メルカプトプリン組成物、例えば限定されないが、Ｐｕｒｉｎｅｔｈｏｌ（登録商標）、
アクチノマイシン、
アミノグルテチミドまたは医薬的に許容され得るアミノグルテチミド組成物、例えば限定されないが、Ｃｙｔａｄｒｅｎ（登録商標）、
アナストロゾールまたは医薬的に許容され得るアナストロゾール組成物、例えば限定されないが、Ａｒｉｍｉｄｅｘ（登録商標）、
ベバシズマブまたは医薬的に許容され得るベバシズマブ組成物、例えば限定されないが、Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標）、
ブレオマイシン、
カルボプラチン、
カクチノマイシン、
カペシタビンまたは医薬的に許容され得るカペシタビン組成物、例えば限定されないが、Ｘｅｌｏｄａ（登録商標）、
シスプラチンまたは医薬的に許容され得るシスプラチン組成物、例えば限定されないが、Ｐｌａｔｉｎｏｌ（登録商標）、
クロドロン酸またはクロドロン酸の医薬的に許容され得る塩または医薬的に許容され得るクロドロン酸組成物、例えば限定されないが、Ｂｏｎｅｆｏｓ（登録商標）またはＯｓｔａｃ（登録商標）、
シクロホスファミドまたは医薬的に許容され得るシクロホスファミド組成物、例えば限定されないが、Ｅｎｄｏｘａｎ、Ｃｙｔｏｘａｎ（登録商標）、Ｎｅｏｓａｒ（登録商標）、Ｐｒｏｃｙｔｏｘ（登録商標）、およびＲｅｖｉｍｍｕｎｅ（登録商標）、
アクチノマイシンＤ、
ドセタキセルまたは医薬的に許容され得るドセタキセル組成物、例えば限定されないが、Ｔａｘｏｔｅｒｅ（登録商標）、
ドキソルビシンまたは医薬的に許容され得るドキソルビシン組成物、例えば限定されないが、Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ（登録商標）、
エピルビシンまたは医薬的に許容され得るエピルビシン組成物、例えば限定されないが、Ｅｌｌｅｎｃｅ（登録商標）およびＰｈａｒｍｏｒｕｂｉｃｉｎ（登録商標））、
エトポシドまたは医薬的に許容され得るエトポシド組成物、例えば限定されないが、Ｅｐｏｓｉｎ（登録商標）、Ｅｔｏｐｏｐｈｏｓ（登録商標）、Ｖｅｐｅｓｉｄ（登録商標）、およびＶＰ−１６（登録商標）、
エキセメスタンまたは医薬的に許容され得るエキセメスタン組成物、例えば限定されないが、Ａｒｏｍａｓｉｎ（登録商標）、
フルオキシメステロンまたは医薬的に許容され得るフルオキシメステロン組成物、例えば限定されないが、Ｈａｌｏｔｅｓｔｉｎ（登録商標）、
レトロゾールまたは医薬的に許容され得るレトロゾール組成物、例えば限定されないが、Ｆｅｍａｒａ（登録商標）、
ロイコボリンカルシウム、
メゲストロールまたは酢酸メゲストロールまたは医薬的に許容され得る酢酸メゲストロール組成物、例えば限定されないが、Ｍｅｇａｃｅ（登録商標）、
メトトレキサート、
マイトマイシンまたは医薬的に許容され得るマイトマイシン組成物、例えば限定されないが、Ｍｕｔａｍｙｃｉｎ（登録商標）、
ミトキサントロンまたは医薬的に許容され得るミトキサントロン組成物、例えば限定されないが、Ｎｏｖａｎｔｒｏｎｅ（登録商標）、
パクリタキセルまたは医薬的に許容され得るパクリタキセル組成物、例えば限定されないが、Ｔａｘｏｌ（登録商標）、
パミドロネートまたは医薬的に許容され得るパミドロネート組成物、例えば限定されないが、Ａｒｅｄｉａ（登録商標）、
プレドニゾン、
タモキシフェンまたは医薬的に許容され得るタモキシフェン組成物、例えば限定されないが、Ｎｏｌｖａｄｅｘ（登録商標）、Ｉｓｔｕｂａｌ（登録商標）、Ｔａｍｏｆｅｎ（登録商標）、Ｔａｍｏｎｅ（登録商標）、Ｔａｍｏｐｌｅｘ（登録商標）、およびＶａｌｏｄｅｘ（登録商標）、
トラスツズマブまたは医薬的に許容され得るトラスツズマブ組成物、例えば限定されないが、Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）、
チオテパ、
ビンブラスチンまたは医薬的に許容され得るビンブラスチン組成物、例えば限定されないが、Ｖｅｌｂｅ（登録商標）、
ビンクリスチンまたは医薬的に許容され得るビンクリスチン組成物、例えば限定されないが、Ｏｎｃｏｖｉｎ（登録商標）、あるいは
ビノレルビンまたは医薬的に許容され得るビノレルビン組成物、例えば限定されないが、Ｎａｖｅｌｂｉｎｅ（登録商標）
から選択される。
【０１０４】
別の態様では、本発明の組成物の調製に使用され得る医薬的に許容され得る、または植物系の血管新生抑制薬としては、限定されないが、アンギオスタチン、エンドスタチン、サリドマイド、オステオポンチン、マスピン、カンスタチン（ｃａｎｓｔａｔｉｎ）、プロリフェリン関連タンパク質、レスチン（ｒｅｓｔｉｎ）および他の関連分子から選択される１種類以上の医薬用薬剤が挙げられる。
【０１０５】
別の態様では、該組成物（１種類もしくは複数種）は、サイトカインなどの免疫調節因子を含むものである。サイトカインとしては、限定されないが、ＩＦＮ−α、インターロイキン（ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−９、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２）、モノクローナル抗体、インターフェロン（インターフェロン−γ）、種々の型のコロニー刺激因子（ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ）、ＴＮＦ−α受容体遮断薬などが挙げられる。別の実施形態では、該組成物（１種類もしくは複数種）は、さらに、シクロホスファミドなどの免疫調節薬を含むものである。他の実施形態において、該組成物（１種類もしくは複数種）は、補助剤を含むものである。
【０１０６】
別の態様では、本発明の化合物（１種類もしくは複数種）または組成物（１種類もしくは複数種）は、１種類以上の治療法、例えば限定されないが、抗血管形成療法、化学療法、サイトカイン療法、放射線療法、遺伝子療法、ホルモン療法、外科治療、生物学的療法またはその組み合わせによりの癌の治療に有用である。
【０１０７】
別の態様では、本発明の化合物（１種類もしくは複数種）または組成物（１種類もしくは複数種）は、癌細胞の起源が任意の身体の一部、および限定されないが、脳、肺、副腎、下垂体、乳房、前立腺、膵臓、卵巣、胃腸管、腎臓、肝臓、脾臓、精巣、頚部、食道上部、下部または中部などのヒトの身体の任意の器官であり得、原発性、続発性または第三次（ｔｅｒｔｉａｒｙ）腫瘍のいずれかであるあらゆる型の癌の治療に有用である。
【０１０８】
別の態様では、本発明の化合物（１種類もしくは複数種）または組成物（１種類もしくは複数種）は、潜在的に有用なアポトーシスマーカー、例えば限定されないが、切断サイトケラチン−１８（ｃ−ＣＫ１８）、切断カスパーゼ−３（ｃ−ｃａｓ−３）、切断ラミンＡ（ｃ−ｌａｍ−Ａ）、リン酸化ヒストンＨ２ＡＸ（ＴＨ２ＡＸ）、切断ポリ（ＡＤＰリボース）ポリメラーゼ（ｃ−ＰＡＲＰ）の改善、ならびにアポトーシス誘導因子（ＡＩＦ）、Ｂｃｌ−２会合Ｘタンパク質（Ｂａｘ）、Ｃｌａｕｄｉｎ−１８（ＣＬＤ−１８）、サイトケラチン−１８（ＣＫ  １８）、Ａｐｏ  ２．７およびＡｐｏ−２リガンド／（ＴＮＦ）関連アポトーシス誘導リガンドのトランスロケーションに有用である。
【０１０９】
別の態様では、本発明の新規な化合物および組成物はまた、強力な血管新生阻害物質であり、単独または医薬組成物（１種類もしくは複数種）として、疾患、例えば限定されないが、癌、癌関連、癌随伴、血管新生関連および他の血管系疾患の予防、治療および治癒に有効に使用され得る。
【０１１０】
別の態様では、本発明は、転移性悪性黒色腫ならびに固形腫瘍である癌腫および他のあらゆる癌、例えば限定されないが、リンパ腫、肉腫、白血病および神経膠腫に対する、単独、または他の承認された化学療法薬との組み合わせのいずれかでの、一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の新規なセレノフェノトリアゼン類似体、その幾何異性形態、立体異性体、立体配置異性体、多形、水和物、溶媒和物ならびにその医薬的に許容され得る塩の使用に関する。
【０１１１】
別の態様では、本発明は、さらに、血管新生の阻害、ならびに血管新生調節因子（限定されないが、ＶＥＧＦ、ＰＤＧＦ、ＴＧＦ−βおよびＦＧＦが挙げられる）の改善を必要とする温血動物における該阻害方法ならびに該改善のための方法であって、治療有効量の一般式（Ｉ）もしくは式（ＩＩ）のセレノフェノトリアゼン類似体またはその医薬組成物（１種類もしくは複数種）を投与することを含む方法を提供する。
【０１１２】
別の態様では、本発明は、内皮細胞および血管平滑筋細胞の増殖、遊走、浸潤を修飾することによる脈管構造のリモデリングを必要とする温血動物における、
該リモデリングのための方法を提供する。
【０１１３】
本発明は、ＴＧＦ−β欠損と関連している血管適応症を有する、または該血管適応症のリスクのある哺乳動物の治療方法を提供する。別の好ましい実施形態は、ＴＧＦ−β受容体に対する結合能を有するＴＧＦ−βのレベルを増大させる薬剤である。
【０１１４】
別の態様では、本発明の医薬組成物は、該組成物が被検体に投与されることを可能にする任意の形態であり得る。例えば、該組成物は、固体、液体または気体（エーロゾル）の形態であり得る。典型的な投与経路としては、限定されないが、局所、非経口、舌下、腹腔内（ＩＰ）、静脈内（ＩＶ）、経口（ＰＯ）、筋肉内（ＩＭ）、皮内（ＩＣ）、真皮内（ＩＤ）、子宮内および直腸内が挙げられる。非経口という用語は、本明細書で用いる場合、皮下注射、静脈内、筋肉内、胸骨内注射または注入手法が挙げられる。本発明の医薬組成物は、該組成物を被検体に投与すると、内包された活性成分が生物学的利用能を有し得るように製剤化される。投与される組成物には１種類以上の単位投与形態が採用され、ここで、例えば、錠剤は単独の用量単位であり得、局所形態のトリアゼン類似体の容器は複数の用量単位を保持したものであり得、乳剤状態の異なる大きさのナノ粒子が、それを必要とする温血動物に対して使用される。
【０１１５】
別の態様では、本発明の医薬組成物は、任意の形態の薬剤送達系で、例えば限定されないが、リポソーム系、ポリマー界面活性剤系、生分解性ブロックコポリマー、マイクロカプセル封入およびナノ粒子で送達され得る。さらに、ナノ粒子薬剤送達には、ポリマー−脂質ハイブリッドナノ粒子系、カーボンナノチューブ、液体充填ナノ粒子、キトサンナノ粒子封入リポソーム、有機修飾シリカナノ粒子、フルオロカーボンナノ粒子およびデンドリマーナノテクノロジーが包含され得る。
【０１１６】
別の態様では、本発明の医薬組成物は、医薬を必要とする温血動物における使用のための該医薬の調製に有用であり得る。
【０１１７】
医薬組成物（１種類もしくは複数種）中の活性成分（１種類または複数種）の至適用量がさまざまな要素に依存することは、当業者には明らかであろう。関連する要素としては、限定されないが、被検体の型（例えば、ヒト）、活性成分の具体的な形態、投与様式および使用される組成物（１種類もしくは複数種）が挙げられる。
【０１１８】
別の態様では、本発明の医薬組成物（１種類もしくは複数種）は、本明細書に記載の一般式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物を、１種類以上の担体と混合された状態で含むものであり得る。担体（１種類もしくは複数種）は、該組成物が、例えば、錠剤または散剤の形態となるように粒状であり得る。担体（１種類もしくは複数種）は液体であってもよく、該組成物は、例えば、経口シロップ剤または注射用液体となる。また、担体（１種類もしくは複数種）は、例えば、吸入による投与に有用なエーロゾル組成物が得られるように気体であってもよい。
【０１１９】
別の態様では、本発明は、本発明の化合物の任意の適当な形態での投与を提供する。経口投与が意図される場合、該組成物は、好ましくは、固形形態または液状形態のいずれかであり、ここで、半固体、半液体、懸濁液およびゲルの形態は、本明細書において固体または液体のいずれかとみなされる形態に包含される。
【０１２０】
別の態様では、経口投与のための固形組成物は、散剤、顆粒剤、圧縮錠剤、丸剤、カプセル剤、チューインガム、カシェ剤などの形態に製剤化され得る。このような固形組成物には、典型的に、１種類以上の不活性な希釈剤または食用担体が含まれる。また、以下の補助剤：結合剤（カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、微晶質セルロース、またはゼラチンなど）、賦形剤（デンプン、ラクトースまたはデキストリンなど）、崩壊剤（アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、プリモゲル、コーンスターチなど）など、滑沢剤（ステアリン酸マグネシウムまたはステロテックスなど）、流動促進剤（コロイド状二酸化ケイ素など）、甘味剤（スクロースまたはサッカリンなど）、香味剤（ペパーミント、サリチル酸メチルまたはオレンジフレーバーなど）、および着色剤のうちの１種類以上を存在させてもよい。
【０１２１】
別の態様では、該組成物は、カプセル剤、例えば、ゼラチンカプセル剤として製剤化され得、これには、上記の型の物質に加えて、ポリエチレングリコールまたは脂肪油などの液状担体が含有され得る。該組成物は、液体の形態、例えば、エリキシル剤、シロップ剤、液剤、乳剤または懸濁剤であり得る。該液体は、２つの例として、経口投与用、または注射による送達用のものであり得る。経口投与が意図される場合、好ましい組成物は、本発明の化合物に加えて、甘味剤、保存料、色素／着色料および風味相乗剤のうちの１種類以上を含むものである。注射による投与が意図される組成物では、界面活性剤、保存料、湿潤剤、分散化剤、懸濁化剤、バッファー、安定剤および等張剤のうちの１種類以上が含まれ得る。
【０１２２】
別の態様では、本発明の液状医薬組成物（液剤、懸濁剤などのいずれか形態であってもよい）には、以下の補助剤：滅菌希釈剤、例えば、注射用水、食塩水、好ましくは生理食塩水、リンゲル液、等張性塩化ナトリウム、溶媒もしくは懸濁媒体としての機能を果たし得る固定油（合成モノもしくはグリセリドなど）、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の溶媒、抗菌剤（ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなど）、酸化防止剤（アスコルビン酸または重硫酸ナトリウムなど）、キレート剤（エチレンジアミン四酢酸など）、バッファー（酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩など）および張度の調整のための薬剤（塩化ナトリウムまたはデキストロースなど）のうちの１種類以上が含まれ得る。非経口調製物は、ガラス製またはプラスチック製のアンプル、使い捨てシリンジまたは複数回投与バイアル内に封入され得る。生理食塩水は好ましい補助剤である。一般式（Ｉ）または（ＩＩ）の本発明の化合物を含む注射用医薬組成物は、好ましくは滅菌されている。
【０１２３】
別の態様では、該組成物には、固体または液体の用量単位の物理的形態を修飾する種々の物質が含有され得る。例えば、該組成物には、固体または液体の用量単位の物理的形態を修飾する種々の物質が含有され得る。例えば、該組成物には、活性成分の周囲にコーティングシェルを形成する物質が含有され得る。コーティングシェルを形成する物質は、典型的には不活性であり、例えば、糖、シェラックおよび他の腸溶コーティング剤から選択され得る。あるいはまた、活性成分をゼラチンカプセル内に封入してもよい。
【０１２４】
別の態様では、固体または液体の形態の該組成物には、活性メラニン標的化類似体成分（１種類もしくは複数種）またはその誘導体に結合し、それにより活性成分の送達を補助する薬剤が含有され得る。この能力において奏効し得る好適な薬剤は、主鎖部分として単環式、二環式、三環式、多環式芳香族、複素環式の疎水性環系を含むものである。
【０１２５】
別の態様では、本発明の医薬組成物は、気体の用量単位からなるものであってもよく、例えば、エーロゾルの形態であり得る。エーロゾルという用語は、コロイド状の性質のものから加圧パッケージからなる系に及ぶ、さまざまな系を表すために用いている。送達は、液化ガスもしくは圧縮ガスによるもの、または活性成分を施薬する適当なポンプ系によるものであり得る。本発明の化合物のエーロゾルは、活性成分（１種類または複数種）を送達するための任意の適当な形態（単相系、二相系または三相系など）で送達され得る。エーロゾルの送達は、ともにキットを構成し得る必要な容器、賦活体、弁、補助容器、スペーサーなどを含む。好ましいエーロゾルは、必要以上に実験を行うことなく当業者によって決定され得る。
【０１２６】
別の態様では、本発明は、有効量の本発明の化合物または組成物（１種類または複数種）を用いて黒色腫および他の癌を有する細胞疾患を治療する治療方法に関する。このような細胞は、典型的には哺乳動物細胞である。有効量の該類似体または誘導体を投与する方法は当該技術分野でよく知られており、吸入、経口または非経口形態での投与が挙げられる。このような投与形態としては、限定されないが、非経口液剤、錠剤、カプセル剤、徐放性埋入物および経皮送達系、または乾燥粉末吸入器または加圧式複数回投与吸入デバイスが使用される吸入投薬系が挙げられる。投薬の量および頻度は、有害作用を伴わずに薬剤の有効レベルがもたらされるように選択される。一般的に、有効性を示す用量範囲は、約０．１〜５００ｍｇ／ｋｇ／日、典型的には、経口または静脈内投与される場合は約２〜１００ｍｇ／ｋｇ／日、鼻腔内または吸入によって投与される場合は約０．１〜４ｍｇ／ｋｇ／日である。
【０１２７】
別の態様では、非経口投与または経口投与のいずれかが意図される液状組成物は、治療有効量の一般式（Ｉ）または（ＩＩ）の本発明の化合物を含むものであるのがよい。典型的には、この量は該組成物の少なくとも０．０１％である。経口投与が意図される場合、この量は、該組成物の重量の０．０１〜７０％の間で異なり得る。好ましい経口組成物は、４％〜約５０％の活性トリアゼン化合物を含むものである。本発明による好ましい組成物および調製物は、非経口用量単位に０．０１重量％〜１重量％の本発明の化合物が含まれるように調製される。
【０１２８】
別の態様では、本発明の医薬組成物は、局所投与（この場合、担体は、液剤、乳剤、軟膏またはゲル基剤を適当に構成するものであり得る）などの任意の適当な投与が意図され得る。基剤は、例えば、以下：ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール、蜜蝋、鉱物油、希釈剤（水およびアルコールなど）、ならびに乳化剤および安定剤の１種類以上を含むものであり得る。局所投与のための医薬組成物には、増粘剤を存在させてもよい。経皮投与が意図される場合、該組成物としては、経皮パッチまたはイオン導入デバイスが挙げられ得る。局所用製剤には、約０．１〜約１０％ｗ／ｖ（単位容積あたりの重量）の濃度の本発明の化合物が含有され得る。
【０１２９】
別の態様では、本発明の組成物は、例えば、坐剤（これは、直腸内で融解し、薬剤を放出する）の形態での経直腸投与が意図されるものであり得る。経直腸投与のための組成物には、適当な非刺激性賦形剤として油性基剤が含有され得る。このような基剤としては、限定されないが、ラノリン、ココアバターおよびポリエチレングリコールが挙げられる。
【０１３０】
別の態様において、本発明では、注射による投与が意図される組成物が、セレノフェノトリアゼン類似体またはその誘導体を水と、溶液を形成するように合わせることにより調製され得る投与方法を使用する。界面活性剤は、均一な溶液または懸濁液の形成を助長するために添加され得る。界面活性剤は、水性送達系中でのトリアゼン類似体または誘導体の溶解または均一な懸濁が助長されるように、該トリアゼン類似体または誘導体と非共有結合的に相互作用する化合物である。
【０１３１】
別の態様では、一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の本発明のセレノフェノトリアゼン類似体は、治療を必要とする温血動物における黒色腫、ホジキンリンパ腫、癌腫、肉腫、神経膠腫および他の癌の治療に使用される。
【０１３２】
別の実施形態では、本発明は、転移性悪性黒色腫ならびに固形腫瘍である癌腫および固形物質、血液系（ｌｉｑｕｉｄ）またはリンパ系起源の他のあらゆる癌（例えば、限定されないが、リンパ腫、肉腫および神経膠腫）の治療方法であって、該治療を必要とする温血動物に、一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の新規なセレノフェン化合物、その幾何異性形態、立体異性体、立体配置異性体、多形、水和物、溶媒和物ならびにその医薬的に許容され得る塩から選択される少なくとも１種類の化合物の治療有効用量を投与することを含む方法に関する。
【０１３３】
別の態様では、本発明は、転移性悪性黒色腫ならびに固形腫瘍である癌腫および他のあらゆる癌（例えば、限定されないが、リンパ腫、肉腫および神経膠腫）の治療方法であって、該治療を必要とする温血動物に、一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の新規なセレノフェン化合物、その幾何異性形態、立体異性体、立体配置異性体、多形、水和物、溶媒和物ならびにその医薬的に許容され得る塩をから選択される少なくとも１種類の化合物を、医薬的に許容され得る賦形剤（１種類または複数種）／希釈剤（１種類または複数種）／担体（１種類または複数種）との組み合わせにより含み、さらに、任意選択で１種類以上の薬剤を含む組成物の治療有効用量を投与することを含む方法に関する。
【０１３４】
本発明を、以下に示す実施例によって示す。実施例は、一例として示しているにすぎず、本発明の範囲を限定するものとみなされるべきでない。当業者に自明の変形および変更は、添付の特許請求の範囲に規定される本発明の範囲および性質に含まれることを意図する。
【実施例】
【０１３５】
【実施例１】
【０１３６】
４−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−メチルセレノフェン−２−カルボキサミド（化合物１）の合成：
【化１９】
0005571168.tif 000020
工程ａ：
５−メチル−４−ニトロセレノフェン−２−カルボン酸メチル：５−メチルセレノフェン−２−カルボン酸メチル（５．４ｇ，２６．６ｍｍｏｌ）の無水酢酸（１５ｍＬ）氷冷（０〜１０℃）溶液に、硝酸（５．５ｍＬ，６１．１ｍｍｏｌ，７０％）と無水酢酸（１０ｍＬ）の氷冷混合物を１０分間添加した。反応混合物を１時間、ゆっくりと室温まで冷却し、室温（ｒｔ）で１６時間攪拌した。混合物を氷冷水に注入し、１０分間攪拌した。この溶液をクロロホルム（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−酢酸エチル（９０：１０）を溶離液として使用）、生成物を薄黄色固形物として得た（２．３ｇ，３５％）、ｍｐ  ９０〜９２℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．５４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３）、３．９０（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ３）、２．９０（３Ｈ，ｓ，−ＣＨ３）。
【０１３７】
工程ｂ：
４−アミノ−５−メチルセレノフェン−２−カルボン酸メチル：５−メチル−４−ニトロセレノフェン−２−カルボン酸メチル（２．３ｇ，９．２８ｍｍｏｌ）の水（５ｍＬ）／メタノール（４０ｍＬ）混合物溶液に、濃塩酸（１．０ｍＬ）を添加した。上記の溶液に、鉄粉末（２．６ｇ，４６．４ｍｍｏｌ）を添加した後、塩化アンモニウム（２．５ｇ，４６．４ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応混合物を１時間還流し、次いで室温まで放冷した。この溶液を濾過し、飽和重炭酸ナトリウム溶液で塩基性化した。この溶液を酢酸エチル（４×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−酢酸エチル（８０：２０）を溶離液として使用）、４−アミノ−５−メチルセレノフェン−２−カルボン酸メチルを得た（１．６ｇ，７９％）、ｍｐ  ６６〜６８℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．５７（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３）、４．７２（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＮＨ２）、３．７３（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ３）、２．２４（３Ｈ，ｓ，−ＣＨ３）。
【０１３８】
工程ｃ：
４−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−メチルセレノフェン−２−カルボン酸メチル：４−アミノ−５−メチルセレノフェン−２−カルボン酸メチル（１．２ｇ，５．５ｍｍｏｌ）と濃ＨＣｌ（２．２ｍＬ，０．８０３ｇ，２２ｍｍｏｌ）の水（１２．５ｍＬ）溶液に、亜硝酸ナトリウム（０．４２ｇ，６．０５ｍｍｏｌ）を分割して、０℃で５分間添加した。０〜５℃で０．５時間攪拌後、反応混合物を、炭酸カリウム（２．９ｇ，２０．９ｍｍｏｌ）とジメチルアミン（２．２３ｍＬ，４０％，１９．８ｍｍｏｌ）の水（１５．６ｍＬ）溶液に０℃で添加した。混合物を０〜１０℃で１時間攪拌し、氷冷水に注入した。この溶液をクロロホルム（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせたクロロホルム層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ（９５：５）を溶離液として使用）、生成物を緑色固形物として得た（５５０ｍｇ，３６％）、ｍｐ  ８０〜８２℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ２９４９、１７０８、１２４２、１１７５、１１５０、１０７１、１０５４、９２０、８７６ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２１（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３）、３．８４（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ３）、３．２７（６Ｈ，ｂｒ  ｓ，−Ｎ（ＣＨ３）２）、２．６２（３Ｈ，ｓ，Ａｒ−ＣＨ３）、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２７６（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１３９】
工程ｄ：
４−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−メチルセレノフェン−２−カルボキサミド：水酸化アンモニウム（４０ｍＬ）の氷冷（０〜５℃）溶液に、４−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−メチルセレノフェン−２−カルボン酸メチル（５５０ｍｇ）のＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液を５分間添加し、室温で４０時間攪拌した。この溶液を氷冷水に注入し、クロロホルム（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（クロロホルム−メタノール（９６：４）を溶離液として使用）、生成物をオフホワイト色固形物として得た（２２０ｍｇ，４２％）、ｍｐ  １７０〜１７２℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ３３８５、３１８８、２９１４、１６４４、１６０４、１３２６、１１２０、１０６６ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．８７（１Ｈ，ｓ，Ｈ−３）、５．６７（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＣＯＮＨ２）、３．２８（６Ｈ，ｂｒ  ｓ，Ｎ（ＣＨ３）２）、２．６３（３Ｈ，ｓ，Ａｒ−ＣＨ３）、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２６１，２５９（Ｍ＋Ｈ）＋。
【実施例２】
【０１４０】
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェン−２，５−ジカルボキサミド（化合物２）の合成：
【化２０】
0005571168.tif 000021
工程ａ：
５−ホルミルセレノフェン−２−カルボン酸メチル：５−メチルセレノフェン−２−カルボン酸メチル（５．０ｇ，２４．６ｍｍｏｌ）の酢酸（３０ｍＬ）溶液に、二酸化セレン（１０．８４ｇ，９８．４ｍｍｏｌ）を室温で添加し、混合物を８時間還流した。冷却した反応混合物を氷冷水に注入し、１５分間攪拌した。この溶液をクロロホルム（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ（９：１）を溶離液として使用）、生成物を薄黄色固形物として得た（４．０ｇ，７５％）、ｍｐ  ６３〜６５℃、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ９．８４（１Ｈ，ｓ，−ＣＨＯ）、８．１１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，Ｈ−３）、７．９９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，Ｈ−４）、３．９２（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ３）。
【０１４１】
工程ｂ：
セレノフェン−２，５−ジカルボン酸：硝酸銀（６．２６ｇ，３６．８６ｍｍｏｌ）の水（１０ｍＬ）溶液を、５−ホルミルセレノフェン−２−カルボン酸メチル（４．０ｇ，１８．４３ｍｍｏｌ）に０℃で５分間添加した。次いで、この反応混合物に、水酸化ナトリウム（３．０５ｇ，７６．３４ｍｍｏｌ）の水（１０ｍＬ）溶液を同じ温度で５分間添加し、混合物を室温（ｒｔ）で１時間攪拌した。冷却した反応混合物を氷冷水に注入し、希ＨＣｌで酸性化した。この溶液を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させ、生成物をオフホワイト色固形物として得た（３．２ｇ，８０％）、ｍｐ  ２９３〜２９５℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １３．４８（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，２×−ＣＯＯＨ）、７．８２（２Ｈ，ｓ，Ｈ−３，４）、ＬＣ−ＭＳ（ネガティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２１９，２１７（Ｍ−Ｈ）−。
【０１４２】
工程ｃ：
３−ニトロセレノフェン−２，５−ジカルボン酸：硝酸（５．６５ｍＬ，１２５．５５ｍｍｏｌ，７０％）を、セレノフェン−２，５−ジカルボン酸（１１ｇ，５０．２ｍｍｏｌ）と硫酸（２１．８７ｍＬ，４０１．７７ｍｍｏｌ）の混合物に、０〜５℃で１５分間ゆっくり添加した。混合物をゆっくり攪拌しながら２時間で室温まで冷却し、氷冷水に注入し、３０分間攪拌した。この溶液を酢酸エチル（３×２００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させ、生成物を薄黄色固形物として得た（１０ｇ，７６％，これは２種類の化合物の混合物である）。
【０１４３】
工程ｄ：
５−（メトキシカルボニル）−３−ニトロセレノフェン−２−カルボン酸メチル：３−ニトロセレノフェン−２，５−ジカルボン酸（１０ｇ，３７．７３ｍｍｏｌ、２種類の化合物の混合物）のメタノール（１００ｍＬ）溶液に、塩化チオニル（１０．９ｍＬ，１５０．９２ｍｍｏｌ）を、攪拌下、氷冷温度で滴下した。反応混合物を２時間還流し、室温まで冷却した。混合物を氷冷水に注入し、１５分間攪拌した。この溶液をクロロホルム（３×２００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水、希重炭酸ナトリウム溶液、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−酢酸エチル（９５：５）を溶離液として使用）、生成物を薄黄色油状物として得た（８．５ｇ，２種類の化合物の密な混合物）。この油状生成物をヘキサン（１０ｍＬ）とともに攪拌し、ヘキサン層をデカンテーションした。このプロセスをさらに３回繰り返し、生成物を黄色固形物として得た（７．８５ｇ、７１％）。同定のため、少量の試料をヘキサン−クロロホルムから再結晶させた、ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ３４２６、１７２９、１５３７、１２４８、１０７９、１０２０ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．３３（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、３．９５（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ３）、３．９４（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ３）、１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６１．５、１６０．７、１４８．６、１４１．３、１４１．２、１３０．０、５３．７、５３．２。
【０１４４】
工程ｅ：
３−アミノ−５−（メトキシカルボニル）セレノフェン−２−カルボン酸メチル：５−（メトキシカルボニル）−３−ニトロセレノフェン−２−カルボン酸メチル（８．０ｇ，２７．３ｍｍｏｌ）の水（２０ｍＬ）／メタノール（１５０ｍＬ）混合物溶液に、濃塩酸（２．７５ｍＬ，２７．３ｍｍｏｌ）を添加した。上記の溶液に、鉄粉末（７．６４ｇ，１３６．５ｍｍｏｌ）を添加した後、塩化アンモニウム（７．３ｇ，１３６．５ｍｍｏｌ）を室温で添加した。反応混合物を３時間還流し、次いで室温まで放冷した。この溶液を濾過し、飽和重炭酸ナトリウム溶液で塩基性化した。この溶液を酢酸エチル（４×２００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層をブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過した。溶媒を蒸発させ、残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−酢酸エチル（９５：５）を溶離液として使用）、生成物を薄黄色固形物として得た（５．８ｇ，４１％）、ｍｐ  １４４〜１４６℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ３４４９、３３３９、１６７３、１６０４、１５５６、１２８５、１２１７、１１２５、１０２３ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．５５（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、５．５７（２Ｈ，ｓ，−ＮＨ２）、３．８６（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ３）、３．８２（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ３）、ＬＣ−ＭＳ（ネガティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２６４、２６２(Ｍ−Ｈ)−．
【０１４５】
工程ｆ：
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（メトキシカルボニル）セレノフェン−２−カルボン酸メチル：３−アミノ−５−（メトキシカルボニル）セレノフェン−２−カルボン酸メチル（０．６ｇ，２．２８ｍｍｏｌ）と濃ＨＣｌ（１．０ｍＬ，９．１２ｍｍｏｌ）の水（５．７ｍＬ）溶液に、亜硝酸ナトリウム（１７３ｍｇ，２．５１ｍｍｏｌ）を分割して、０℃で５分間添加した。０〜５℃で０．５時間攪拌後、反応混合物を、炭酸カリウム（１．１ｇ，８．６６ｍｍｏｌ）とジメチルアミン（１．０ｍＬ，４０％，８．２１ｍｍｏｌ）の水（６．８ｍＬ）溶液に０℃で添加した。混合物を０〜５℃で２時間攪拌し、氷冷水に注入した。この溶液をクロロホルム（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせたクロロホルム層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ（９０：１０）を溶離液として使用）、生成物を橙色固形物として得た（２５０ｇ，３４％）、ｍｐ  １２２〜１２４℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２９（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、３．８８（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ３）、３．８７（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ３）、３．５２（３Ｈ，ｓ，−Ｎ−ＣＨ３）、３．２８（３Ｈ，ｓ，−Ｎ−ＣＨ３）、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ３２０、３１８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１４６】
工程ｇ：
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−セレノフェン−２，５−ジカルボキサミド：水酸化アンモニウム（３６ｍＬ）の氷冷（０〜５℃）溶液に、３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（メトキシカルボニル）セレノフェン−２−カルボン酸メチル（６５０ｍｇ）のＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液を５分間添加し、室温で２４時間攪拌した。この溶液を氷冷水に注入し、クロロホルム（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（クロロホルム−メタノール（９２：８）を溶離液として使用）、生成物をオフホワイト色固形物として得、これを、クロロホルム−メタノールから再結晶させた（１８０ｍｇ，３０％）、ｍｐ  ２６６〜２６８℃．ＩＲ（ＫＢｒ）νｍａｘ  ３４３６、３３４７、３１７３、２９２０、１６４５、１６０９、１３３６、１１９８、１１０８、８７９、８０１ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．２８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、８．１３（１Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＣＯＮＨ２）、７．９０（１Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＣＯＮＨ２）、７．８０（１Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＣＯＮＨ２）、７．５０（１Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＣＯＮＨ２）、３．５７（３Ｈ，ｓ，−Ｎ−ＣＨ３）、３．１９（３Ｈ，ｓ，−Ｎ−ＣＨ３）、１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １６３．９、１６３．７、１５０．７、１４７．０、１３５．１、１２３．３、４３．５、３６．７、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２８８、２９０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【実施例３】
【０１４７】
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−フェニルセレノフェン−２−カルボキサミド（化合物３）の合成：
【化２１】
0005571168.tif 000022
工程ａ：
３−クロロ−３−フェニルプロプ−２−エンニトリル：氷冷（０〜５℃）ジメチルホルムアミド（２．５６ｍＬ，３３．３２ｍｍｏｌ）にオキシ塩化リン（１．５６ｍＬ，１６．６６ｍｍｏｌ）を、攪拌しながら１５分間滴下した。この冷混合物に、反応混合物の温度を４５〜５５℃に維持しながら、アセトフェノン（１．０ｇ，８．３ｍｍｏｌ）を１０分間滴下した。反応混合物をゆっくり室温まで冷却し、３０分間放置した。この反応混合物に、総量０．５ｍＬの塩酸ヒドロキシルアミン（２．３１ｇ，３３．３２ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（３．３ｍＬ）溶液を添加し、混合物を７０〜８０℃で５分間攪拌した。次いで、残りの塩酸ヒドロキシルアミンのＤＭＦ溶液を、その後に、反応混合物の温度が１４５〜１５５℃より上に上昇するような速度で添加した。添加終了後、反応混合物を３０分間で室温まで冷却し、冷水（１００ｍＬ）で希釈した。この溶液をクロロホルム（３×１００ｍＬ）で抽出し、クロロホルム層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−酢酸エチル（９８：２）を溶離液として使用）、生成物を油状物として得た（０．７２ｇ，５３％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．６４−７．６７（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、７．４３−７．５３（３Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、６．０２（１Ｈ，ｓ，＝ＣＨ）。
【０１４８】
工程ｂ：
セレン化ナトリウムの調製：セレン（０．８３ｇ）を、水酸化ナトリウム（２．３２ｇ）とホルムアルデヒドスルホキシル酸ナトリウム（３．８４ｇ）の水（１１ｍＬ）溶液に添加した。５０℃で１時間攪拌後、白色の析出物を窒素雰囲気下で濾過し、速やかに次の工程で使用した。
【０１４９】
３−アミノ−５−フェニルセレノフェン−２−カルボン酸エチル：セレン化ナトリウム（１．３１ｇ，１０．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０．５ｍＬ）懸濁液に、３−クロロ−３−フェニルプロプ−２−エンニトリル（１．７ｇ，１０．４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４ｍＬ）溶液を室温（ｒｔ）で５分間添加し、混合物を６０〜７０℃で２時間攪拌した。次いで、クロロ酢酸エチル（１．１ｍＬ，１０．４ｍｍｏｌ）を反応混合物に滴下し、再度、６０〜７０℃で２時間攪拌した。次いで、ナトリウムメトキシド（０．５６ｇ，１０．４ｍｍｏｌ）のメタノール（６．５ｍＬ）溶液を滴下し、攪拌を同じ温度で１時間継続した。混合物を室温まで冷却し、冷水に注入し、１５分間攪拌した。この溶液をクロロホルム（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせたクロロホルム層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−酢酸エチル（９０：１０）を溶離液として使用）、生成物を薄黄色固形物として得た（１．２ｇ，４０％）、ｍｐ  ８８〜９０℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ３４３９、３３６０、３３３７、２９２３、１６５６、１６０２、１２９５、１２１９、１１６８、１１２８、１０７２、７７１ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．５１−７．５４（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、７．３４−７．４０（３Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、７．０４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、５．６０（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＮＨ２）、４．２８（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，−ＣＯＯＣＨ２−）、１．３５（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，−ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３）、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ３１８，３１６（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０１５０】
工程ｃ：
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−フェニルセレノフェン−２−カルボン酸エチル：３−アミノ−５−フェニルセレノフェン−２−カルボン酸エチル（０．６ｇ，２．０３ｍｍｏｌ）と濃ＨＣｌ（０．７９ｍＬ，８．１２ｍｍｏｌ）の水（４．７ｍＬ）溶液に、亜硝酸ナトリウム（１５０ｍｇ，２．２３ｍｍｏｌ）を分割して、０℃で５分間添加した。０〜５℃で１時間攪拌後、反応混合物を、炭酸カリウム（１．０６ｇ，７．７ｍｍｏｌ）とジメチルアミン（０．８２ｍＬ，４０％，７．３ｍｍｏｌ）の水（５．７ｍＬ）溶液に０℃で添加した。混合物を０〜５℃で２時間攪拌し、氷冷水に注入した。この溶液をクロロホルム（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ（９０：１０）を溶離液として使用）、生成物を暗赤色固形物として得た（３１０ｇ，４４％）、ｍｐ  ８２〜８４℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．８０（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、７．５８−７．６０（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、７．３１−７．４０（３Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、４．３３（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，−ＣＯＯＣＨ２−）、３．５３（３Ｈ，ｓ，−Ｎ−ＣＨ３）、３．２９（３Ｈ，ｓ，−Ｎ−ＣＨ３）、１．３７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，−ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３）、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ３７２、３７４（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０１５１】
工程ｄ：
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−フェニルセレノフェン−２−カルボキサミド：水酸化アンモニウム（１６０ｍＬ）の氷冷（０〜５℃）溶液に、３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−フェニルセレノフェン−２−カルボン酸エチル（１．２ｇ）のＴＨＦ（２５ｍＬ）溶液を５分間添加し、触媒量のＰＥＧ−４００を添加し、室温で４８時間攪拌した。この溶液を氷冷水に注入し、クロロホルム（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（クロロホルム−メタノール（９４：６）を溶離液として使用）、生成物をオフホワイト色固形物として得、これを、クロロホルム−ヘキサンから再結晶させた（２７０ｍｇ，３１％）、ｍｐ  ２２２〜２２４℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ３３４６、２９２７、２８５０、１６４５、１５９４、１２２１、１１１３、１０１９、８７５、８５０ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２５（１Ｈ，ｓ，−ＣＯＮＨ２）、７．８７（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、７．５７−７．６０（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、７．３０−７．４０（３Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、６．１８（１Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＣＯＮＨ２）、３．５８（３Ｈ，ｓ，−Ｎ−ＣＨ３）、３．１９（３Ｈ，ｓ，−Ｎ−ＣＨ３）、１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １６５．６、１５２．１、１５１．９、１３６．１、１３１．１、１２８．９、１２８．５、１２６．２、１１８．１、４３．７、３６．６、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ３４３、３４５（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【実施例４】
【０１５２】
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボキサミド（化合物４）の合成：
【化２２】
0005571168.tif 000023
工程ａ：
３−クロロ−４，４−ジメチルペント−２−エンニトリル：氷冷（０〜５℃）ジメチルホルムアミド（６．２ｍＬ，８０ｍｍｏｌ）にオキシ塩化リン（３．７５ｍＬ，４０ｍｍｏｌ）を、攪拌しながら１５分間滴下した。この冷混合物に、反応混合物の温度を４５〜５５℃に維持しながら、ｔｅｒｔ−ブチル  メチルケトン（２．０ｇ，２０ｍｍｏｌ）を１０分間滴下した。反応混合物をゆっくり室温（ｒｔ）にし、３０分間放置した。この反応混合物に、総量１ｍＬの塩酸ヒドロキシルアミン（５．５６ｇ，８０ｍｍｏｌ）の乾燥ＤＭＦ（８ｍＬ）溶液を添加し、混合物を７０〜８０℃で５分間攪拌した。次いで、残りの塩酸ヒドロキシルアミンのＤＭＦ溶液を、その後に、反応混合物の温度が１４５〜１５５℃より上に上昇するような速度で添加した。添加終了後、反応混合物を３０分間で室温まで冷却し、冷水（２００ｍＬ）で希釈した。この溶液をクロロホルム（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせたクロロホルム層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−酢酸エチル（９８：２）を溶離液として使用）、生成物を淡緑色油状物として得た（１．０ｇ，３５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ５．５６（１Ｈ，ｓ，＝ＣＨ）、１．２４（９Ｈ，ｓ，ｔｅｒｔ−ブチル）。
【０１５３】
工程ｂ：
３−アミノ−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボン酸エチル：セレン化ナトリウム（４．４ｇ，３４．８４ｍｍｏｌ，２．７８ｇのセレンから上記のようにして調製）のＤＭＦ（３５ｍＬ）懸濁液に、３−クロロ−４，４−ジメチルペント−２−エンニトリル（５ｇ，３４．８４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液を室温で５分間添加し、混合物を６０〜７０℃で２時間攪拌した。次いで、クロロ酢酸エチル（３．７１ｍＬ，３４．８４ｍｍｏｌ）を反応混合物に滴下し、再度、６０〜７０℃で２時間攪拌した。次いで、ナトリウムメトキシド（１．８８ｇ，３４．８４ｍｍｏｌ）のメタノール（２５ｍＬ）溶液を滴下し、攪拌を同じ温度で１時間継続した。混合物を室温まで冷却し、氷冷水に注入し、１５分間攪拌した。析出した固形物を濾過し、水で洗浄し、乾燥させ、生成物を黄色固形物として得た（６．２ｇ，６５％）、ｍｐ  ６６〜６８℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ６．５９（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、５．５２（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＮＨ２）、４．２４（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，−ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３）、１．３３（９Ｈ，ｓ，ｔｅｒｔ−ブチル）、１．３１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，−ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３）。
【０１５４】
工程ｃ：
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボン酸エチル：３−アミノ−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボン酸エチル（６ｇ，２１．８ｍｍｏｌ）と濃ＨＣｌ（８．３８ｍＬ，８７．２ｍｍｏｌ）の水（５０ｍＬ）溶液に、亜硝酸ナトリウム（１．６５ｇ，２３．９ｍｍｏｌ）を分割して、０℃で５分間添加した。０〜５℃で１時間攪拌後、反応混合物を、炭酸カリウム（１１．４３ｇ，８２．８ｍｍｏｌ）とジメチルアミン（９ｍＬ，４０％，７８．４８ｍｍｏｌ）の水（６２ｍＬ）溶液に０℃で添加した。混合物を０〜５℃で２時間攪拌し、氷冷水に注入した。この溶液をクロロホルム（３×２００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ（９０：１０）を溶離液として使用）、生成物を得、これをエタノール−水から暗赤色固形物として再結晶させた（２．４ｇ，３５％）、ｍｐ  ５８〜６０℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．３１（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、４．２８（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，−ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３）、３．４８（３Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＮＣＨ３）、３．２５（３Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＮＣＨ３）、１．３７（９Ｈ，ｓ，ｔｅｒｔ−ブチル）、１．３４（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，−ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３）、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ３５２、３５４（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０１５５】
工程ｄ：
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボキサミド：水酸化アンモニウム（２００ｍＬ）の氷冷（０〜５℃）溶液に、３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボン酸エチル（１．２ｇ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を５分間添加し、触媒量のＰＥＧ−４００を添加し、室温で４８時間攪拌した。この溶液を氷冷水に注入し、クロロホルム（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（クロロホルム−メタノール（９４：６）を溶離液として使用）、生成物を薄褐色固形物として得、これをクロロホルム−ヘキサンから再結晶させた（３００ｍｇ，２８％）、ｍｐ  ２１８〜２２０℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ３３３７、３１５６、２９５８、１６３１、１６０２、１３２６、１２５０、１２１９、１１７７、１１１３、１００６ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２０（１Ｈ，ｓ，−ＣＯＮＨ２）、７．４１（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、６．０１（１Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＣＯＮＨ２）、３．５６（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、３．１６（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、１．３７（９Ｈ，ｓ，ｔ−ブチル）、１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−Ｃｌ６）：δ  １６８．０、１６６．１、１５１．１、１２９．０、１１６．９、３６．８、３２．４、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ３２３、３２５（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【実施例５】
【０１５６】
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボキサミド（化合物５）の合成：
【化２３】
0005571168.tif 000024
工程ａ：
２−クロロシクロヘキソ−１−エンカルボニトリル：乾燥ジメチルホルムアミド（６．６７ｍＬ，８６．５ｍｍｏｌ）の氷冷（０〜５℃）溶液にオキシ塩化リン（７．６６ｍＬ，８１．６ｍｍｏｌ）を、攪拌しながら１５分間滴下した。この冷混合物に、反応混合物の温度を４０℃より低温に維持しながら、シクロヘキサン（５ｇ，５１ｍｍｏｌ）を１時間滴下した。塩酸ヒドロキシルアミン（２０ｇ，２８８ｍｍｏｌ）を分割して２０分間添加した。塩酸ヒドロキシルアミンの添加は、反応混合物の温度が１４５〜１５５℃より上に上昇するような速度で維持した。添加終了後、反応混合物を３０分間で室温（ｒｔ）にし、冷水（０．５Ｌ）で希釈し、３０分間攪拌した。析出した固形物を濾過し、冷水で洗浄し、乾燥させ、生成物を褐色固形物として得た（２．８ｇ，３９％）、ｍｐ  ３８〜４０℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ２．４５−２．５０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−６）、２．３３−２．３７（２Ｈ，ｍ，Ｈ−３）、１．７５−１．８１（２Ｈ，ｍ，Ｈ−５）、１．６６−１．７２（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４）。
【０１５７】
工程ｂ：
３−アミノ−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［２，１−ｄ］セレノフェン−２−カルボン酸エチル：セレン化ナトリウム（４．７ｇ，３７．３ｍｍｏｌ，３．０ｇのセレンから上記のようにして調製）のＤＭＦ（３７ｍＬ）懸濁液に、２−クロロシクロヘキソ−１−エンカルボニトリル（５．２４ｇ，３７．３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１８ｍＬ）溶液を室温で５分間添加し、混合物を６０℃で４５分間攪拌した。反応混合物を室温まで冷却し、クロロ酢酸エチル（３．１６ｍＬ，３７．３ｍｍｏｌ）を５分間滴下した。反応混合物を６０℃で３時間攪拌した。次いで、ナトリウムメトキシド（２．０ｇ，３７．３ｍｍｏｌ）のメタノール（３７ｍＬ）溶液を滴下し、攪拌を同じ温度で２時間継続した。混合物を室温まで冷却し、氷冷水に注入し、１５分間攪拌した。この溶液をクロロホルム（３×２００ｍＬ）で抽出し、合わせたクロロホルム層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ（９０：１０）を溶離液として使用）、生成物を、エチルエステルとメチルエステルの混合物の黄色油状物として得た（２．４ｇ，２５％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ５．５４（２Ｈ，ｓ，−ＮＨ２）、４．２４（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，−ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３）、２．７４−２．７５（２Ｈ，ｍ，Ｈ−７）、２．２７−２．２８（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４）、１．８１−１．８４（４Ｈ，ｍ，Ｈ−５，６）、１．３１（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，−ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３）、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２９４，２９６（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０１５８】
工程ｃ：
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［２，１−ｄ］セレノフェン−２−カルボン酸メチル：３−アミノ−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［２，１−ｄ］セレノフェン−２−カルボン酸のエチルエステルとメチルエステル（４００ｍｇ，１．５４ｍｍｏｌ）、濃ＨＣｌ（０．６ｍＬ，６．１７ｍｍｏｌ）の水（３．５ｍＬ）／アセトン（３ｍＬ）溶液に、亜硝酸ナトリウム（１２０ｍｇ，１．６９ｍｍｏｌ）を分割して、０℃で５分間添加した。０〜５℃で１時間攪拌後、反応混合物を、炭酸カリウム（８００ｍｇ，５．８５ｍｍｏｌ）とジメチルアミン（０．６２ｍＬ，４０％，５．５４ｍｍｏｌ）の水（４．３ｍＬ）溶液に０℃で添加した。混合物を０〜５℃で１時間攪拌し、氷冷水に注入した。この溶液をクロロホルム（３×２００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ（９５：５）を溶離液として使用）、生成物を褐色油状物として得た（２００ｍｇ，５０％）。これは、エチル混合物とメチル混合物の混合物である。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ３．７４（３Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＣＨ３）、３．３４（６Ｈ，ｂｒ  ｓ，−Ｎ（ＣＨ３）２）、２．７９（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，Ｈ−４）、２．４１（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，Ｈ−７）、１．７４−１．８２（４Ｈ，ｍ，Ｈ−５，６）、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ３３６、３３８（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０１５９】
工程ｄ：
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［２，１−ｄ］セレノフェン−２−カルボキサミド：水酸化アンモニウム（６０ｍＬ）の氷冷（０〜５℃）溶液に、３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｄ］セレノフェン−２−カルボン酸のエチルエステルおよびメチルエステル（６００ｍｇ）とＴＨＦ（６ｍＬ）の混合物を５分間添加した。触媒量のＰＥＧ−４００を添加し、室温で６６時間攪拌した。この溶液を氷冷水に注入し、クロロホルム（３×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（クロロホルム−メタノール（９８：２）を溶離液として使用）、生成物を薄褐色固形物として得（１００ｍｇ，１８％）、これをクロロホルム−ヘキサンから再結晶させた（７０ｍｇ）、ｍｐ  １９８〜２０２℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ３３４７、３１６３、２９３２、２８６０、１６３１、１３４２、１３１３、１２２０、１１０３、１０２０、８７８ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．２１（１Ｈ，ｓ，−ＣＯＮＨ２）、６．０７（１Ｈ，ｓ，−ＣＯＮＨ２）、３．５１（３Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＮＣＨ３）、３．１４（３Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＮＣＨ３）、２．８０−２．８２（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４）、２．６４−２．６５（２Ｈ，ｍ，Ｈ−７）、１．７２−１．８０（４Ｈ，ｍ，Ｈ−５，６）、１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６５．９、１４９．５、１４５．９、１３２．６、１２９．５、２９．０、２８．６、２３．１、２２．７、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ３２１、３２３（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【実施例６】
【０１６０】
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキサミド（化合物６）の合成：
【化２４】
0005571168.tif 000025
工程ａ：
３−アミノセレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸エチル：セレン化ナトリウム（０．９ｇ，７．２ｍｍｏｌ，０．７５ｇのセレンから上記のようにして調製）のＤＭＦ（７ｍＬ）懸濁液に、２−クロロピリジン−３−カルボニトリル（１ｇ，７．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液を室温で５分間添加し、混合物を６０〜７０℃で２時間攪拌した。次いで、クロロ酢酸エチル（０．７８ｍＬ，７．２２ｍｍｏｌ）を反応混合物に滴下し、再度、６０〜７０℃で２時間攪拌した。次いで、ナトリウムメトキシド（０．３９ｇ，７．２ｍｍｏｌ）のメタノール（７ｍＬ）溶液を滴下し、攪拌を同じ温度で１時間継続した。混合物を室温（ｒｔ）にし、冷水に注入し、１５分間攪拌した。析出した固形物を濾過し、水で洗浄し、乾燥させ、生成物を黄色固形物として得た（１．５ｇ，７７％）、ｍｐ  １９４〜１９６℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．６５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．６，１．４Ｈｚ，Ｈ−６）、７．８６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，１．４Ｈｚ，Ｈ−４）、７．３３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，４．６Ｈｚ，Ｈ−５）、６．０４（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＮＨ２）、４．３４（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，−ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３）、１．３８（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，−ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３）、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２６９、２７１（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６１】
工程ｂ：
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸エチル：３−アミノセレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸エチル（１ｇ，３．７ｍｍｏｌ）とフルオロホウ酸水溶液（５．８ｍＬ，２９．６ｍｍｏｌ，４５％）の水（４０ｍＬ）懸濁液を加熱し、この化合物を溶解させた。混合物を再度０℃まで冷却し、亜硝酸ナトリウム（３００ｍｇ，４．４ｍｍｏｌ）を分割して、０℃で５分間添加した。０〜５℃で３０分攪拌後、反応混合物を、炭酸カリウム（３．８ｇ，２８ｍｍｏｌ）とジメチルアミン（３ｍＬ，４０％，２６．８ｍｍｏｌ）の水（６０ｍＬ）溶液に０℃で添加した。混合物を０〜５℃で１時間攪拌し、氷冷水に注入した。この溶液をクロロホルム（３×２００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ（９０：１０）を溶離液として使用）、生成物を橙色油状物として得た（１７０ｇ，１４％）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．６１（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，Ｈ−４）、８．３０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．０，Ｈ−６）、７．３１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，４．６Ｈｚ，Ｈ−５）、４．３３（２Ｈ，ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，−ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３）、３．５８（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、３．３３（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、１．３７（３Ｈ，ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，−ＣＯＯＣＨ２ＣＨ３）、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ３２５、３２７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６２】
工程ｃ：
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキサミド：水酸化アンモニウム（１５ｍＬ）の氷冷（０〜５℃）溶液に、３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸エチル（１５０ｍｇ）のＴＨＦ（５ｍＬ）溶液を５分間添加し、室温で１６時間攪拌した。この溶液を氷冷水に注入し、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせたＥｔＯＡｃ層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（クロロホルム−メタノール（９５：５）を溶離液として使用）、生成物を淡緑色固形物として得、これをクロロホルム−メタノール−ヘキサンから再結晶させた（２５ｍｇ，２０％）、ｍｐ  ２３０〜２３２℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ３３２７、３１５２、２９１３、１７０１、１６３４、１３６０、１３３０、１１０４、１０５８、１０１６、８７８、８０２ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．８０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−４）、８．５９（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ，Ｈ−６）、８．１８（１Ｈ，ｓ，−ＣＯＮＨ２）、７．９９（１Ｈ，ｓ，−ＣＯＮＨ２）、７．４６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，４．６Ｈｚ，Ｈ−５）、３．６６（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、３．２６（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １６４．４、１６１．１、１４８．３、１４２．５、１３６．２、１３１．５、１３０．４、１２０．６、４３．６、３６．５、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ３１８、３２０（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【実施例７】
【０１６３】
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−フェニルセレノフェン−２−カルボン酸（化合物７）の合成：
【化２５】
0005571168.tif 000026
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−フェニルセレノフェン−２−カルボン酸エチル（２００ｍｇ，０．５６ｍｍｏｌ）（調製は実施例３の工程ｃ）に記載）のメタノール（５ｍＬ）溶液に、水酸化ナトリウム（１１３ｍｇ，２．８４ｍｍｏｌ）の水（３ｍＬ）溶液を添加し、室温で１６時間攪拌した。混合物を氷冷水で希釈し、希ＨＣｌで酸性化した。混合物を３０分間攪拌し、析出した固形物を濾過し、水で洗浄し、乾燥させた。生成物をヘキサン−クロロホルムから再結晶させ、生成物を褐色固形物として得た（１００ｍｇ，５４％）、ｍｐ  ２１２〜２１４℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ３５６６、２９２４、１７００、１２５３、１１８０、１１１３、１０７０、１０１１、８３８、７６６ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １２．２７（１Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＨ）、７．７９（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、７．５５−７．５７（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、７．３４−７．３９（３Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、３．６５（３Ｈ，ｓ，−Ｎ−ＣＨ３）、３．２５（３Ｈ，ｓ，−Ｎ−ＣＨ３）、１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６３．９、１５５．２、１５４．６、１３５．５、１２９．２、１２９．１、１２６．３、１２４．９、１１６．６、４４．４、３７．１、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ３４６、３４４（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【実施例８】
【０１６４】
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボン酸（化合物８）の合成：
【化２６】
0005571168.tif 000027
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボン酸エチル（４００ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）（調製は実施例４の工程ｃ）に記載）のメタノール（１０ｍＬ）溶液に、水酸化ナトリウム（２４０ｍｇ，６．０４ｍｍｏｌ）の水（５ｍＬ）溶液を添加し、室温（ｒｔ）で１６時間攪拌した。混合物を氷冷水で希釈し、希ＨＣｌで酸性化した。混合物を３０分間攪拌し、析出した固形物を濾過し、水で洗浄し、乾燥させた。生成物をヘキサン−クロロホルムから再結晶させ、生成物を薄褐色固形物として得た（１６０ｍｇ，４５％）、ｍｐ  １２０〜１２２℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ２９６０、２９２７、１７１３、１２４８、１１８０、１１１０、１０６９、１０１０、８４４、７６７ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １２．２３（１Ｈ，ｓ，−ＣＯＯＨ）、７．３８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、３．６３（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、３．２３（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、１．３９（９Ｈ，ｓ，３  ｘ−ＣＨ３）、１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７１．７、１６４．１、１５３．７、１２３．２、１１５．６、４４．２、３７．２、３６．９、３２．４、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ３２４、３２６（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【実施例９】
【０１６５】
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｄ］セレノフェン−２−カルボン酸（化合物９）の合成：
【化２７】
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３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［２，１−ｄ］セレノフェン−２−カルボン酸のエチルエステルとメチルエステル（１．０ｇ，３．１ｍｍｏｌ）（調製は実施例５の工程ｃ）に記載）のメタノール（１０ｍＬ）溶液に、水酸化ナトリウム（５００ｍｇ，１２．６ｍｍｏｌ）の水（２ｍＬ）溶液を添加し、室温で５時間攪拌した。混合物を氷冷水で希釈し、クロロホルム（２×５０ｍＬ）で抽出し、不純物を除去した。水層を希ＨＣｌで酸性化し、３０分間攪拌した。この溶液をクロロホルム（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒（５５０ｍｇ，５７％）を蒸発させた。粗製生成物をクロロホルム−ジエチルエーテルから再結晶させ、生成物を暗褐色固形物として得た（３３０ｍｇ）、ｍｐ  １００〜１０２℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ３４２９、２９２７、２８５５、１７０１、１３５０、１１１０、１０５０、１０２３、８８０ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １２．７１（１Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＣＯＯＨ）、３．５９（３Ｈ，ｓ、−ＮＣＨ３）、３．２０（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、２．８３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，Ｈ−４）、２．７３（２Ｈ，ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，Ｈ−７）、１．７５−１．８１（４Ｈ，ｍ，Ｈ−５，６）、１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６４．５、１５１．３、１４８．９、１３１．５、１２４．０、４４．１、３６．５、２８．８（２Ｃ）、２２．８、２２．４、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ３００、３０２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【実施例１０】
【０１６６】
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸（化合物１０）の合成：
【化２８】
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３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボン酸エチル（１７０ｍｇ，０．５２ｍｍｏｌ）（調製は実施例６の工程ｂ）に記載）のメタノール（１０ｍＬ）溶液に、水酸化ナトリウム（８３ｍｇ，２．０８ｍｍｏｌ）の水（２ｍＬ）溶液を添加し、室温（ｒｔ）で２時間攪拌した。混合物を氷冷水で希釈し、希ＨＣｌで酸性化した。混合物を３０分間攪拌し、酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（クロロホルム−メタノール（９５：５）を溶離液として使用）、生成物を得、これをクロロホルム−メタノール−ヘキサンから淡褐色固形物として再結晶させた（３０ｍｇ，２０％）、ｍｐ  １７２〜１７４℃．ＩＲ（ＫＢｒ）νｍａｘ  ３４２７、３０２５、２９１９、１７０７、１２６５、１２１８、１０１３、８６３ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １３．０９（１Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＣＯＯＨ）、８．６５−８．６９（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４，６）、７．５３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．２，４．６Ｈｚ，Ｈ−５）、３．６７（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、３．２９（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ３１９、３２１（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【実施例１１】
【０１６７】
３−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボニトリル（化合物１１）の合成：
【化２９】
0005571168.tif 000030
３−アミノ−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボニトリル（１ｇ，４．３ｍｍｏｌ）（調製は実施例１３の工程ａ）に記載）、フルオロホウ酸（２．７ｍＬ，４５％水溶液、１７．５ｍｍｏｌ）、水（１０ｍＬ）およびアセトン（２５ｍＬ）の溶液に、亜硝酸ナトリウム（０．３３ｇ，４．８ｍｍｏｌ）を分割して、０℃で５分間添加した。０〜５℃で２．５時間攪拌後、反応混合物を、炭酸カリウム（２．３ｇ，１６．６４ｍｍｏｌ）とジメチルアミン（３．５ｍＬ，４０％，１５．７６ｍｍｏｌ）の水（２０ｍＬ）溶液に０℃で添加した。混合物を０〜５℃で２時間攪拌し、氷冷水に注入した。この溶液をクロロホルム（３×２００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−ＥｔＯＡｃ（９５：５）を溶離液として使用）、生成物を得、これをヘキサン−クロロホルムから赤色固形物として再結晶させた（１５ｍｇ，１２％）、ｍｐ  ５８〜６０℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ３４３７、２２００、１６３３、１３３９、１２１９、１１７８、１０９４ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．２６（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、３．５２（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、３．２２（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、１．３８（９Ｈ，ｓ，ｔｅｒｔ−ブチル）、１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７１．０、１６１．５、１１７．３、１１６．４、９５．２、４３．３、３７．３、３６．２、３２．４、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２８３、２８５（Ｍ＋Ｈ）＋。
【実施例１２】
【０１６８】
３−メチル−６−フェニルセレノフェノ［３．２−ｄ］１，２，３−トリアジン−４−オン（化合物１２）の合成：
【化３０】
0005571168.tif 000031
工程ａ：
３−アミノ−５−フェニルセレノフェン−Σ−カルボニトリル：セレン化ナトリウム（４．６２ｇ，３６．７ｍｍｏｌ，２．９ｇのセレンから上記のようにして調製）のＤＭＦ（３７ｍＬ）懸濁液に、３−クロロ−３−フェニルプロプ−２−エンニトリル（６．０ｇ，３６．７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１４ｍＬ）溶液を室温で５分間添加し、混合物を６０〜７０℃で２時間攪拌した。次いで、クロロアセトニトリル（２．３２ｍＬ，３６．７ｍｍｏｌ）を反応混合物に滴下し、再度、６０〜７０℃で２時間攪拌した。次いで、ナトリウムメトキシド（２．０ｇ，３６．７ｍｍｏｌ）の乾燥メタノール（２３ｍＬ）溶液を滴下し、攪拌を同じ温度で１時間継続した。混合物を室温（ｒｔ）にし、冷水に注入し、１５分間攪拌した。析出した固形物を濾過し、水で洗浄した。この固形物をクロロホルム−ヘキサンから再結晶させ、生成物を褐色固形物として得た（４．８ｇ，５３％）、ｍｐ  １６２〜１６４℃（分解）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．４６−７．４９（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、７．３７−７．３９（３Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、７．０１（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、４．５５（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＮＨ２）。
【０１６９】
工程ｂ：
３−アミノ−５−フェニルセレノフェン−２−カルボキサミド：３−アミノ−５−フェニルセレノフェン−２−カルボニトリル（４．０ｇ）の水酸化ナトリウム水溶液（１２０ｍＬ，１０％）中の懸濁液に、エタノール（５０ｍＬ）を添加し、混合物を４５分間還流した。混合物を室温まで冷却し、分離した結晶を濾別し、冷水で洗浄し、乾燥させ、生成物を鮮黄色固形物として得た（２．８ｇ，６７％）、ｍｐ  １８４〜１８６℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．５０−７．５３（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、７．３６−７．３８（３Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、７．０４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、５．８４（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＣＯＮＨ２）、５．１２（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＮＨ２）。
【０１７０】
工程ｃ：
６−フェニル−３Ｈ−セレノフェノ［３，２−ｃ］１，２，３−トリアジン−４−オン：３−アミノ−５−フェニルセレノフェン−２−カルボキサミド（０．２７ｇ，１．０１ｍｍｏｌ）の濃硫酸（７ｍＬ）氷冷溶液（０℃）に、亜硝酸ナトリウム（７７ｍｇ，１．１１ｍｍｏｌ）の濃硫酸（２．５ｍＬ）冷（０℃）溶液を１０分間添加した（添加中、温度は−５〜０℃に維持すべきである）。添加後、混合物を０℃で１時間および室温で１時間攪拌した。反応混合物を冷却し、粉砕氷中に、攪拌しながら１５分間ゆっくり注入し、同じ温度で１５分間攪拌した。この溶液を酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で抽出し、合わせた層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をクロロホルム−メタノールから再結晶させ、生成物を白色固形物として得た（１５０ｍｇ，５３％）、ｍｐ  １８２〜１８４℃（分解）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １５．１９（１Ｈ，ｓ，−ＮＨ）、８．４４（１Ｈ，ｓ，Ｈ−７）、７．８９−７．９１（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、７．５２−７．５４（３Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２７６、２７８（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１７１】
工程ｄ：
３−メチル−６−フェニルセレノフェノ［３，２−ｄ］１，２，３−トリアジン−４−オン：６−フェニル−３Ｈ−セレノフェノ［３，２−ｃ］１，２，３−トリアジン−４−オン（０．６ｇ，２．１６ｍｍｏｌ）のアセトン（２５ｍＬ）溶液に、逐次、炭酸カリウム（０．５９ｇ，４．３３ｍｍｏｌ）、ヨードメタン（０．１６ｍＬ，２．６ｍｍｏｌ）およびヨウ化カリウム（触媒量）を室温で添加し、混合物を室温で１６時間攪拌した。この溶液を濾過し、固形物をアセトンで洗浄した。アセトンを減圧下で蒸発させ、氷冷水で希釈し、１０分間攪拌した。この溶液をクロロホルム（４×７５ｍＬ）で抽出し、合わせた層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させた。残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（クロロホルム−メタノール（９５：０５）を溶離液として使用）、生成物をオフホワイト色固形物として得（４００ｍｇ，６４％）、これをクロロホルム−メタノールから再結晶させた（１８０ｍｇ）、ｍｐ  ２３２〜２３４℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ２９２３、２８５７、１６７２、１２２０、１０１９、９７２ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．９８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−７）、７．６３−７．６６（２Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、７．４５−７．５０（３Ｈ，ｍ，Ａｒ−Ｈ）、４．０６（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １５９．４、１５８．０、１５４．６、１３４．３、１３０．１、１２９．７、１２９．４、１２６．９、１２２．２、３７．５、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ３１２、３１４（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【実施例１３】
【０１７２】
６−（ｔｅｒｔ−ブチル）−３−メチルセレノフェノ［３，２−ｄ］１，２，３−トリアジン−４−オン（化合物１３）の合成：
【化３１】
0005571168.tif 000032
工程ａ：
３−アミノ−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボニトリル：セレン化ナトリウム（４．３９ｇ，３４．８４ｍｍｏｌ，２．７８ｇのセレンから上記のようにして調製）のＤＭＦ（３５ｍＬ）懸濁液に、３−クロロ−４，４−ジメチルペント−２−エンニトリル（５．０ｇ，３４．８４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１３ｍＬ）溶液を室温で５分間添加し、混合物を６０〜７０℃で２時間攪拌した。次いで、クロロアセトニトリル（２．２ｍＬ，３４．８４ｍｍｏｌ）を反応混合物に滴下し、再度、６０〜７０℃で２時間攪拌した。次いで、ナトリウムメトキシド（１．８８ｇ，３４．８４ｍｍｏｌ）の乾燥メタノール（２２ｍＬ）溶液を滴下し、攪拌を同じ温度で１時間継続した。混合物を室温（ｒｔ）にし、冷水に注入し、３０分間攪拌した。析出した固形物を濾過し、水で洗浄した。この固形物をクロロホルム−ヘキサンから再結晶させ、生成物を褐色固形物として得た（５．２ｇ，６５％）、ｍｐ  １１０〜１１２℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ６．５９（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、４．４６（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＮＨ２）、１．３３（９Ｈ，ｓ，ｔｅｒｔ−ブチル）、ＬＣ−ＭＳ（ネガティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２２５、２２７（Ｍ−Ｈ）−。
【０１７３】
工程ｂ：
３−アミノ−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボキサミド：３−アミノ−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボニトリル（５．０ｇ）の水酸化ナトリウム水溶液（８０ｍＬ，１０％）中の懸濁液に、エタノール（５０ｍＬ）を添加し、混合物を１時間還流した。エタノールを真空下で留去し（約２５ｍＬ）、混合物を５〜１０℃まで冷却した。分離した結晶を濾別し、冷水で洗浄し、乾燥させ、生成物をオフホワイト色固形物として得た（４．５ｇ，８４％）、ｍｐ  １６０〜１６２℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ６．５８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、５．７５（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＣＯＮＨ２）、５．１３（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＮＨ２）、１．３４（９Ｈ，ｓ，ｔｅｒｔ−ブチル）。
【０１７４】
工程ｃ：
６−（ｔｅｒｔ−ブチル）−３Ｈ−セレノフェノ［３，２−ｄ］１，２，３−トリアジン−４−オン：３−アミノ−５−（ｔｅｒｔ−ブチル）セレノフェン−２−カルボキサミド（３．０ｇ，１２．２ｍｍｏｌ）の濃硫酸（５０ｍＬ）氷冷溶液（０℃）に、亜硝酸ナトリウム（０．９２ｇ，１３．４ｍｍｏｌ）の濃硫酸（１０ｍＬ）冷（０℃）溶液を１０分間添加した（添加中、温度は−５〜０℃に維持すべきである）。添加後、混合物を０℃で１時間および室温で１時間攪拌した。反応混合物を冷却し、粉砕氷中に、攪拌しながら１５分間ゆっくり注入し、同じ温度で１５分間攪拌した。固形物を濾過し、氷冷水で洗浄し、乾燥させ、生成物をオフホワイト色固形物として得た（２．４ｇ，７７％）、ｍｐ  １５８〜１６０℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．６７（１Ｈ，ｓ，Ｈ−７）、１．５０（９Ｈ，ｓ，ｔｅｒｔ−ブチル）、ＬＣ−ＭＳ（ネガティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２５４、２５６（Ｍ−Ｈ）−。
【０１７５】
工程ｄ：
６−（ｔｅｒｔ−ブチル）−３−メチルセレノフェノ［３，２−ｄ］１，２，３−トリアジン−４−オン：６−（ｔｅｒｔ−ブチル）−３Ｈ−セレノフェノ［３，２−ｄ］１，２，３−トリアジン−４−オン（２．０ｇ，７．７８ｍｍｏｌ）のアセトン（７０ｍＬ）溶液に、逐次、炭酸カリウム（２．１４ｇ，１５．５６ｍｍｏｌ）、ヨードメタン（０．５８ｍＬ、９．３ｍｍｏｌ）およびヨウ化カリウム（触媒量）を室温で添加し、混合物を室温で１６時間攪拌した。この溶液を濾過し、固形物をアセトンで洗浄した。アセトンを減圧下で蒸発させ、残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（クロロホルム−メタノール（９５：０５）を溶離液として使用）、生成物をオフホワイト色固形物として得（１．０ｇ，４７％）、これをクロロホルム−メタノールから再結晶させた（７００ｍｇ，３４％）、ｍｐ  ９８〜１００℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ２９６１、１６７９、１２４２、１２２０、１００１、９６９ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．５８（１Ｈ，ｓ，Ｈ−７）、４．０４（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、１．４８（９Ｈ，ｓ，ｔｅｒｔ−ブチル）、１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １７６．０、１５７．５、１５４．７、１２８．８、１２１．５、３７．５、３７．３、３２．５、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２９２、２９４（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【実施例１４】
【０１７６】
３−メチル−６，７，８，９−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］１，２，３−トリアジノ［４，５−ｄ］セレノフェン−４−オン（化合物１４）の合成：
【化３２】
0005571168.tif 000033
工程ａ：
３−アミノ−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボニトリル：セレン化ナトリウム（２．３５ｇ，１８．６５ｍｍｏｌ，１．５ｇのセレンから上記のようにして調製）のＤＭＦ（１８ｍＬ）懸濁液に、２−クロロシクロヘキソ−１−エンカルボニトリル（２．６３ｇ，１８．６５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（９ｍＬ）溶液を室温で５分間添加し、混合物を６０℃で４５分間攪拌した。次いで、クロロアセトニトリル（１．１８ｍＬ，１８．６５ｍｍｏｌ）を反応混合物に滴下し、再度６０℃で３時間攪拌した。次いで、ナトリウムメトキシド（１．０ｇ，１８．６５ｍｍｏｌ）の乾燥メタノール（１８ｍＬ）溶液を滴下し、攪拌を同じ温度で２時間継続した。混合物を室温（ｒｔ）にし、冷水に注入し、３０分間攪拌した。析出した固形物を濾過し、水で洗浄し、生成物を暗褐色固形物として得た（２．４ｇ，５７％）、ｍｐ  ８６〜８８℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ４．３９（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＮＨ２）、２．７３−２．７４（２Ｈ，ｍ，Ｈ−７）、２．２８−２．２９（２Ｈ，ｍ，Ｈ−４）、１．８３−１．８４（４Ｈ，ｍ，Ｈ−５，６）。
【０１７７】
工程ｂ：
３−アミノ−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボキサミド：３−アミノ−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボニトリル（２．４ｇ）のエタノール（５０ｍＬ）懸濁液に、水酸化ナトリウム水溶液（５０ｍＬ，１０％）を室温で添加し、混合物を１時間還流した。冷却した反応混合物を氷冷水に注入し、１５分間攪拌した。析出した固形物を濾過し、冷水で洗浄し、乾燥させ、生成物を薄褐色固形物として得た（１．４ｇ，５４％）、ｍｐ  １５２〜１５４℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ６．５８（１Ｈ，ｓ，−ＣＯＮＨ２）、６．４５（１Ｈ，ｓ，−ＣＯＮＨ２）、２．６６（２Ｈ，ｓ，Ｈ−７）、２．２４（２Ｈ，ｓ，Ｈ−４）、１．７３（４Ｈ，ｓ，Ｈ−５，６）、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２６５、２６７（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０１７８】
工程ｃ：
６，７，８，９−テトラヒドロ−３Ｈ−ベンゾ［１，２−ｂ］１，２，３−トリアジノ［４．５−ｄ］セレノフェン−４−オン：３−アミノ−４，５，６，７−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］セレノフェン−２−カルボキサミド（１．４ｇ，５．７３ｍｍｏｌ）の濃硫酸（１０ｍＬ）氷冷（０℃）溶液に、亜硝酸ナトリウム（０．４３ｇ，６．３１ｍｍｏｌ）の濃硫酸（３ｍＬ）冷（０℃）溶液を１０分間添加した（添加中、温度は−５〜０℃に維持すべきである）。添加後、混合物を０℃で２時間攪拌した。反応混合物を粉砕氷中に、攪拌しながら１５分間ゆっくり注入し、同じ温度で１５分間攪拌した。この溶液を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせたＥｔＯＡｃ層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させ、生成物を薄褐色固形物として得た（４５０ｍｇ，３１％）、ｍｐ  １５０〜１５２℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １５．１３（１Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＮＨ）、３．０１−３．０４（２Ｈ，ｍ，Ｈ−９）、２．９０−２．９２（２Ｈ，ｍ，Ｈ−６）、１．８９−１．９６（４Ｈ，ｍ，Ｈ−７，８）、ＬＣ−ＭＳ（ネガティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２５２、２５４（Ｍ−Ｈ）−。
【０１７９】
工程ｄ：
３−メチル−６，７，８，９−テトラヒドロベンゾ［１，２−ｂ］１，２，３−トリアジノ［４，５−ｄ］セレノフェン−４−オン：６，７，８，９−テトラヒドロ−３Ｈ−ベンゾ［１，２−ｂ］１，２，３−トリアジノ［４，５−ｄ］セレノフェン−４−オン（４５０ｍｇ，１．７６ｍｍｏｌ）のアセトン（５０ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（４８０ｍｇ，３．５２ｍｍｏｌ）、ヨードメタン（０．１３ｍＬ，２．１１ｍｍｏｌ）および触媒量のＰＥＧ−４００を逐次添加し、室温で攪拌し、混合物を室温で１６時間攪拌した。この溶液を濾過し、固形物をアセトンで洗浄した。アセトンを減圧下で蒸発させ、残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−酢酸エチル（９０：１０）を溶離液として使用）、生成物を薄黄色固形物として得（３４０ｍｇ，７２％）、これをクロロホルム−ヘキサンから再結晶させた（１７０ｍｇ）、ｍｐ  １１０〜１１２℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ３４３８、１６６８、１２２０、１０１８ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ４．０５（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、２．９４−２．９６（４Ｈ，ｍ，Ｈ−６，９）、１．９１−１．９７（４Ｈ，ｍ，Ｈ−７，８）、１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １５６．１、１５５．１、１５２．５、１３３．９、１２８．５、３７．４、２８．４、２４．８、２３．６、２１．４、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２６８、２７０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【実施例１５】
【０１８０】
３−メチル−１，２，３−トリアジノ［４’，５’−５，４］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オン（化合物１５）の合成：
【化３３】
0005571168.tif 000034
工程ａ：
３−アミノセレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボニトリル：セレン化ナトリウム（０．９ｇ，７．２ｍｍｏｌ，０．７５ｇのセレンから上記のようにして調製）のＤＭＦ（７ｍＬ）懸濁液に、２−クロロピリジン−３−カルボニトリル（１ｇ，７．２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）溶液を室温で５分間添加し、混合物を６０〜７０℃で２時間攪拌した。次いで、クロロアセトニトリル（０．４６ｍＬ，７．２２ｍｍｏｌ）を反応混合物に滴下し、再度、６０〜７０℃で２時間攪拌した。次いで、ナトリウムメトキシド（０．３９ｇ，７．２ｍｍｏｌ）のメタノール（７ｍＬ）溶液を滴下し、攪拌を同じ温度で１時間継続した。混合物を室温（ｒｔ）にし、冷水に注入し、１５分間攪拌した。析出した固形物を濾過し、水で洗浄し、乾燥させ、生成物を黄色固形物として得た（１．３ｇ，８１％）、ｍｐ  ２０８〜２１０℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．６８（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，Ｈ−６）、８．４７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，Ｈ−４）、７．５５（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，４．８Ｈｚ，Ｈ−５）、７．２４（２Ｈ，ｓ，−ＮＨ２）。
【０１８１】
工程ｂ：
３−アミノセレノフェノ［２．３−ｂ］ピリジン−２−カルボキサミド：３−アミノセレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボニトリル（１．０ｇ）の水酸化ナトリウム水溶液（２０ｍＬ，１０％）中の懸濁液に、エタノール（２０ｍＬ）を添加し、混合物を４５分間還流した。エタノールを真空下で留去し（約２５ｍＬ）、混合物を５〜１０℃まで冷却した。分離した結晶と溶液を氷冷水に注入し、１５分間攪拌した。固形物を濾別し、冷水で洗浄し、乾燥させ、生成物を薄黄色固形物として得た（０．５３ｇ，５０％）、ｍｐ  ２５６〜２６０℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ．８．６０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，Ｈ−６）、８．３７（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，Ｈ−４）、７．４７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，４．８Ｈｚ，Ｈ−５）、７．３２（２Ｈ，ｓ，−ＣＯＮＨ２）、７．０９（２Ｈ，ｓ，−ＮＨ２）、ＬＣ−ＭＳ（ネガティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２３８，２４１（Ｍ−Ｈ）−。
【０１８２】
工程ｃ：
３Ｈ−１，２，３−トリアジノ［４’，５’−５，４］セレノフェノ［２．３−ｂ］ピリジン−４−オン：３−アミノセレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−２−カルボキサミド（０．５ｇ，２．０７ｍｍｏｌ）の濃硫酸（５ｍＬ）氷冷（０℃）溶液に、亜硝酸ナトリウム（１５７ｍｇ，２．２８ｍｍｏｌ）の濃硫酸（２ｍＬ）冷（０℃）溶液を１０分間添加した（添加中、温度は−５〜０℃に維持すべきである）。添加後、混合物を０℃で２時間攪拌した。反応混合物を粉砕氷中に、攪拌しながら１５分間ゆっくり注入し、同じ温度で１５分間攪拌した。この溶液を酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出し、合わせた有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させ、生成物を赤みがかった褐色固形物として得た（３５０ｍｇ，６７％）、ｍｐ  １８４〜１８６℃（分解）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １５．６１（１Ｈ，ｓ，−ＮＨ）、８．９０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．６，１．８Ｈｚ，Ｈ−９）、８．８３（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，１．６Ｈｚ，Ｈ−７）、７．８１（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，４．８Ｈｚ，Ｈ−８）、ＬＣ−ＭＳ（ネガティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２４９、２５１（Ｍ−Ｈ）−。
【０１８３】
工程ｄ：
３−メチル−１，２，３−トリアジノ［４’，５’−５，４］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オン：３Ｈ−１，２，３−トリアジノ［４’，５’−５，４］セレノフェノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オン（３００ｍｇ，１．１９ｍｍｏｌ）のアセトン（４０ｍＬ）溶液に、逐次、炭酸カリウム（３２８ｍｇ，２．３８ｍｍｏｌ）、ヨードメタン（０．０９ｍＬ，１．４２ｍｍｏｌ）および触媒量のＰＥＧ−４００を添加し、室温で攪拌し、混合物を室温で１６時間攪拌した。この溶液を濾過し、固形物をアセトンで洗浄した。アセトンを減圧下で蒸発させ、残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−酢酸エチル（８０：２０）を溶離液として使用）、生成物を得、これをクロロホルム−ヘキサンからオフホワイト色固形物として再結晶させた（２１６ｍｇ，６８％）、ｍｐ  ２０２〜２０４℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ３４０６、１６６５、１２４１、１１０５、１０５４、９６５、８５２、８１３、７５７ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．８０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝４．６，１．８Ｈｚ，Ｈ−９）、８．７６（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，２．０Ｈｚ，Ｈ−７）、７．６０（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝８．０，４．８Ｈｚ，Ｈ−８）、４．１５（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １６５．４、１５４．９、１５１．３、１５０．２、１３３．５、１３１．１、１３０．１、１２１．４、３８．０、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２６５、２６７（Ｍ＋Ｈ）＋。
【実施例１６】
【０１８４】
３−メチルベンゾ［ｂ］１，２，３−トリアジノ［４，５−ｄ］セレノフェン−４−オン（化合物１６）の合成：
【化３４】
0005571168.tif 000035
工程ａ：
３−アミノベンゾ［ｂ］セレノフェン−２−カルボニトリル：セレン化ナトリウム（９．１４ｇ，７２．６ｍｍｏｌ，５．８ｇのセレンから上記のようにして調製）のＤＭＦ（７２ｍＬ）懸濁液に、２−クロロベンゾニトリル（１０ｇ，７２．６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２５ｍＬ）溶液を室温で５分間添加し、混合物を１００〜１１０℃で２４時間攪拌した。次いで、クロロアセトニトリル（５．４８ｍＬ，７２．６ｍｍｏｌ）を反応混合物に滴下し、再度、６０〜７０℃で２時間攪拌した。次いで、ナトリウムメトキシド（３．９ｇ，７２．６ｍｍｏｌ）の乾燥メタノール（２４ｍＬ）溶液を滴下し、攪拌を同じ温度で２時間継続した。混合物を室温（ｒｔ）にし、冷水に注入し、３０分間攪拌した。析出した固形物を濾過し、水で洗浄し、乾燥させ、生成物をオフホワイト色固形物として得た（７ｇ，４４％）、ｍｐ  １５８〜１６０℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ７．７６−７．７９（１Ｈ，ｍ，Ｈ−７）、７．６０−７．６３（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４）、７．４１−７．５２（２Ｈ，ｍ，Ｈ−５，６）、４．９０（２Ｈ，ｂｒ  ｓ，−ＮＨ２）。
【０１８５】
工程ｂ：
３−アミノベンゾ［ｂ］セレノフェン−２−カルボキサミド：３−アミノベンゾ［ｂ］セレノフェン−２−カルボニトリル（５．０ｇ）の水酸化ナトリウム水溶液（１００ｍＬ，１０％）中の懸濁液に、エタノール（６０ｍＬ）を添加し、混合物を１時間還流した。エタノールを真空下で留去し（約２５ｍＬ）、混合物を５〜１０℃まで冷却した。分離した結晶を濾別し、冷水で洗浄し、乾燥させ、生成物をオフホワイト色固形物として得た（３ｇ，６０％）、ｍｐ  １８０〜１８２℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．９９−８．０１（１Ｈ，ｍ，Ｈ−７）、７．９２−７．９４（１Ｈ，ｍ，Ｈ−４）、７．４０−７．４２（２Ｈ，ｍ，Ｈ−５，６）、７．２１（２Ｈ，ｓ，−ＣＯＮＨ２）、６．９７（２Ｈ，ｓ，−ＮＨ２）、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２６１、２６３（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０１８６】
工程ｃ：
３Ｈ−ベンゾ［ｂ］１，２，３−トリアジノ［４，５−ｄ］セレノフェン−４−オン：３−アミノベンゾ［ｂ］セレノフェン−２−カルボキサミド（１．０ｇ，４．１６ｍｍｏｌ）の濃硫酸（２５ｍＬ）氷冷（０℃）溶液に、亜硝酸ナトリウム（０．３１６ｇ，４．５８ｍｍｏｌ）の濃硫酸（１０ｍＬ）冷（０℃）溶液を１０分間添加した（添加中、温度は−５〜０℃に維持すべきである）。添加後、混合物を０℃で１時間および室温で２時間攪拌した。反応混合物を冷却し、粉砕氷中に、攪拌しながら１５分間ゆっくり注入し、同じ温度で１５分間攪拌した。この溶液を酢酸エチル（３×２００ｍＬ）で抽出し、合わせたＥｔＯＡｃ層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を濾過し、溶媒を蒸発させ、生成物を黄色固形物として得た（２００ｍｇ，１９％）、ｍｐ  １７６〜１７８℃．１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １５．４８（１Ｈ，ｓ，−ＮＨ）、８．５３−８．５８（１Ｈ，ｍ，Ｈ−９）、８．４１−８．４６（１Ｈ，ｍ，Ｈ−６）、７．７４−７．８０（２Ｈ，ｍ，Ｈ−７，８）。
【０１８７】
工程ｄ：
３−メチルベンゾ［ｂ］１，２，３−トリアジノ［４，５−ｄ］セレノフェン−４−オン：３Ｈ−ベンゾ［ｂ］１，２，３−トリアジノ［４，５−ｄ］セレノフェン−４−オン（２００ｍｇ，０．８ｍｍｏｌ）のアセトン（５０ｍＬ）溶液に、逐次、炭酸カリウム（４００ｍｇ，１．６ｍｍｏｌ）、ヨードメタン（０．１ｍＬ，０．９ｍｍｏｌ）および触媒量のＰＥＧ−４００を室温で添加し、混合物を室温で１６時間攪拌した。この溶液を濾過し、固形物をアセトンで洗浄した。アセトンを減圧下で蒸発させ、残渣をシリカゲルカラムでクロマトグラフィー処理し（ヘキサン−クロロホルム（７０：３０）を溶離液として使用）、生成物をオフホワイト色固形物として得た（１２０ｍｇ，４７％）、ｍｐ  １９０〜１９２℃．ＩＲ（未希釈）νｍａｘ  ３４３１、１６７３、１２２０、１０２１ｃｍ−１、１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ８．５６−８．５８（１Ｈ，ｍ，Ｈ−９）、７．９８−８．０１（１Ｈ，ｍ，Ｈ−６）、７．５８−７．６６（２Ｈ，ｍ，Ｈ−７，８）、４．１３（３Ｈ，ｓ，−ＮＣＨ３）、１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １５５．５、１５２．８、１４２．３、１３５．３、１３０．４、１２９．８、１２６．４、１２６．２、１２６．０、３７．８、ＬＣ−ＭＳ（ポジティブイオンモード）：ｍ／ｚ  ２８６、２８８（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【実施例１７】
【０１８８】
ＭＴＴ系細胞増殖アッセイによる一般式（Ｉ）および（ＩＩ）のセレノフェノトリアゼン化合物の抗黒色腫活性の評価：
ＭＴＴ［３−（４，５−ジメチルチアゾル−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド］組込み系細胞増殖アッセイは、標準的な手順を用いて行なった。種々のセレノフェノトリアゼン化合物（化合物１〜１６）の細胞傷害作用を、ヒト悪性黒色腫Ａ３７５細胞とマウス悪性黒色腫Ｂ１６  Ｆ０細胞の両方において、ＭＴＴ細胞増殖アッセイキット（Ｒｏｃｈｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ）により評価した。アッセイは、販売元より提供された使用説明書に従って行なった。簡単には、同数の細胞を９６ウェル平底プレート内にプレーティングし、種々の濃度のＤＴＩＣおよび試験化合物（化合物１〜１６）の両方とともに、３日間インキュベートした。ビヒクル対照培養ウェルには、最高０．５％のＤＭＳＯのみを与えた。その後、０．５ｍｇ／ｍｌのＭＴＴ試薬を各ウェルに添加し、マイクロプレートを、５％ＣＯ２の存在下、３７℃で４時間さらにインキュベートした。最後に、可溶化液を添加することにより細胞を可溶化させ、３７℃で一晩インキュベートした。ホルマザン結晶が完全に可溶化した後、吸光度をマイクロプレートリーダー（ＢｉｏＲａｄ，ＵＳＡ）にて５４０ｎｍで読み取った。４連のウェルで得られた結果（平均ＯＤ±ＳＤ）を、試験化合物（化合物１〜１６）の細胞増殖阻害（５０％阻害濃度、ＩＣ５０）を測定するための計算に使用した（表１）。
【０１８９】
このＭＴＴ系細胞増殖アッセイは、試験化合物（化合物１〜１６）の中でも、４−［（ジメチルアミノ）ジアゼニル］−５−メチルセレノフェン−２−カルボキサミド（化合物１）が、インビトロでの黒色腫腫瘍細胞の増殖の阻害において最も良好な作用を示したことを示す（表１）。市販の標準的な薬剤であるダカルバジンと比較すると、化合物１では、マウス黒色腫Ｂ１６細胞およびヒト黒色腫Ａ３７５細胞において、それぞれ、５倍および８倍強力な阻害が示された。
【表１】
0005571168.tif 000036
表１：一般式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物の抗黒色腫増殖能
【実施例１８】
【０１９０】
異なる組織起源の他の一部の腫瘍細胞における化合物１の増殖阻害能：
化合物１およびＤＴＩＣの抗腫瘍増殖能を、Ａ５４９肺腫瘍細胞、ＤＵ１４５前立腺腫瘍細胞、ＨＴ２９結腸癌細胞およびＭＣＦ−７（ＥＲ＋）乳房腫瘍細胞などの種々のヒト腫瘍細胞においてインビトロで、前述（実施例１７）のＭＴＴ系細胞増殖アッセイを用いて評価した。４連のウェルで得られた結果（平均ＯＤ±ＳＤ）を、試験化合物の細胞増殖阻害（５０％阻害濃度、ＩＣ５０）を測定するための計算に使用した（表２）。
【表２】
0005571168.tif 000037
表２：異なる組織起源の他の一部のヒト癌細胞における化合物１の抗腫瘍増殖能の比較
【実施例１９】
【０１９１】
化合物１の細胞傷害能：
ＤＴＩＣおよび化合物１の細胞傷害能を、腫瘍細胞培養上清中への漏出乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）を測定することにより評価した（ＬＤＨ  Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  Ｋｉｔｐｌｕｓ，Ｒｏｃｈｅ  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｇｅｒｍａｎｙ）。漏出ＬＤＨは、細胞傷害性化合物によって受ける細胞損傷に正比例する。簡単には、同数のヒト悪性黒色腫Ａ３７５細胞またはマウス黒色腫細胞Ｂ１６  Ｆ０を、種々の濃度の試験化合物で処理し、４８時間インキュベートした。ビヒクル対照培養ウェルには、最高０．５％のＤＭＳＯのみを与えた。無細胞の培養上清を触媒および色素溶液と混合し、室温で１５分間インキュベートした。最後に、反応を停止させ、光学密度をマイクロプレートリーダー（ＢｉｏＲａｄ，ＵＳＡ）にて４９２ｎｍで測定した。４連のウェルで得られた結果（平均ＯＤ±ＳＤ）を、試験化合物の細胞傷害能（５０％阻害濃度、ＩＣ５０）を測定するための計算に使用した。それぞれ、図１Ａおよび１Ｂに示した棒グラフは、薬剤濃度に対するＤＴＩＣ処理および化合物１処理での漏出ＬＤＨの増加パーセントで表示した、Ｂ１６  Ｆ０細胞およびＡ３７５細胞の細胞バイアビリティの低下を示す。
【実施例２０】
【０１９２】
腫瘍選択性：
次に、
化合物１が、正常細胞に影響を及ぼすことなく、または影響を最小限に抑えて黒色腫細胞を選択的に死滅させることができるかどうかを確認するため、本発明者らは、ＨＳ．５３１．ｓｋヒト正常皮膚上皮細胞の細胞増殖阻害に対する化合物１とＤＴＩＣの有効性の比較を評価した。試験化合物およびＤＴＩＣの増殖阻害作用は、前述（実施例１７）のＭＴＴ増殖アッセイによって評価した。正常皮膚上皮細胞の増殖の阻害における化合物１とＤＴＩＣの有効性の比較を図２に示す。化合物１およびＤＴＩＣは、それぞれ、２５μｇ／ｍｌの濃度で、ＨＳ．５３１．ｓｋヒト正常皮膚上皮細胞の２．３３％および３４．５８％の増殖阻害を示し、５０μｇ／ｍｌの濃度では、これらの２つの抗黒色腫薬は、該正常皮膚上皮細胞において２３．８３％および４３．４６％の増殖阻害を示した。これらのデータは、総合すると、化合物１が、市販の抗黒色腫薬ＤＴＩＣと比べて、正常細胞の増殖への影響を最小限に抑えて、より選択的にヒト黒色腫腫瘍細胞の増殖を阻害することを明白に示す。
【実施例２１】
【０１９３】
Ｂ１６  Ｆ０マウス黒色腫細胞コロニー形成アッセイ：
クローン形成における化合物１およびＤＴＩＣの阻害作用を、一部修正を加えた前述の手順に従うことによって試験した。簡単には、Ｂ１６Ｆ０細胞を収穫し、６ウェルプレート内に播種した（１００細胞／ｍｌ）。細胞を４日間増殖させ、その後、細胞を、０．１％ＤＭＳＯまたは１００μｇ／ｍｌのＤＴＩＣまたは異なる濃度（１、５、１０もしくは２０μｇ／ｍｌ）の化合物１のいずれかを含有するＤＭＥＭとともに、さらに８日間インキュベートした。２４時間毎に、試験薬剤を含有する新鮮培地と交換した。最後に、ウェルをＰＢＳで３回洗浄し、メタノール中に１５分間固定した。細胞をギムザ染色液で染色し、顕微鏡下で観察した。染色ウェルの画像をデジタル化して読み取り（Ｋｏｄａｋ  Ｉｍａｇｅ  Ｓｔａｔｉｏｎ  ４０００ＭＭ，Ｃａｒｅｓｔｒｅａｍ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ  Ｈａｖｅｎ，ＣＴ）、コロニー数を計数し、ＮＩＨ  Ｉｍａｇｅ  Ｊソフトウェアを用いて解析した。図３は、ＤＴＩＣおよび化合物１で処理したウェルにおけるＢ１６コロニー増殖の阻害を示す。化合物１は、ＤＴＩＣと比べ、Ｂ１６腫瘍細胞コロニー増殖において有意な阻害を示した。ＤＴＩＣでは、１００μｇ／ｍｌの濃度でも３５．８％阻害しか示されなかったが、対照的に、１、５、１０または２０μｇ／ｍｌの化合物１では、それぞれ、１１％、３５％、５４％および９４％のコロニー数の減少が達成された。
【実施例２２】
【０１９４】
化合物１は、Ｂ１６Ｆ０マウス黒色腫細胞の浸潤を阻害する：
Ｂ１６Ｆ０の浸潤能に対するＤＴＩＣおよび化合物１の阻害作用を細胞浸潤アッセイにおいて試験し、該細胞浸潤アッセイは、Ｍａｔｒｉｇｅｌ（ＢＭＥ−Ｃｕｌｔｒｅｘ（登録商標）、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＵＳＡ）でコートされ、８μｍ穿孔膜を有する細胞培養インサート（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，ＵＳＡ）を用いて行なった。同数（５万個）のＢ１６Ｆ０細胞を各インサートウェルに適用し、５％ＣＯ２の存在下、３７℃で２時間付着させた。その後、試験化合物の存在下または非存在下で、マトリゲル層中への細胞浸潤を行なわせた。１００μｇ／ｍｌのＤＴＩＣまたは２０μｇ／ｍｌの化合物１のいずれかを、浸潤アセンブリの下側チャンバに適用した。ビヒクル対照培養チャンバには０．１％のＤＭＳＯを適用した。２４時間の処理後、細胞を含むマトリゲル層を綿栓を用いて取り出し、膜の反対側の浸潤細胞をメタノールで５分間固定し、次いでギムザで染色した。染色された膜をガラススライド上にマウントし、光学顕微鏡（Ｎｉｋｏｎ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＴＳ  １００）下で無作為に２０個の視野（２０倍対物レンズ）で浸潤細胞数を計数した。ビヒクル処理対照と比較すると、インビトロにおいて、化合物１では、Ｂ１６  Ｆ０悪性黒色腫腫瘍細胞の浸潤が有意に低減された（ｐ＝０．００１７）が、ＤＴＩＣでは、Ｂ１６黒色腫細胞の浸潤は有意には阻害され得なかった（図４）。
【実施例２３】
【０１９５】
化合物１はヒト内皮細胞の遊走を阻害する：
内皮細胞遊走アッセイの方法論は、一部修正を加えて、既報のものと本質的に同じとした（Ｓｅｎｇｕｐｔａ，Ｋら、Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２００４、２：１５０−１５８）。８μｍ細孔を有するＰＥＴ膜を備えたＦＡＬＣＯＮＴＭ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅインサート（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ，ＵＳＡ）を、０．１ｍｇ／ｍｌのコラーゲンでコートした。この細胞培養インサート（Ｂｅｃｔｏｎ  Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）に、ヒト臍静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）を５×１０４細胞／インサートの密度で添加した。インサート内で、異なる濃度のＤＴＩＣまたは化合物１のいずれかの存在下、細胞を１８時間遊走させた。対照培養物を含む遊走アセンブリには０．１％のＤＭＳＯのみを与えた。遊走しなかった細胞を綿栓で擦り取って除去し、遊走細胞をメタノールで５分間固定し、次いでギムザで染色した。次いで、インサートの膜をガラススライド上にマウントした。膜の細孔を通って遊走した細胞を、２０倍対物レンズでのＮｉｋｏｎ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＴＳ  １００顕微鏡下、無作為に２０個の視野で計数した。図５は、化合物１を投与した内皮細胞の遊走の有意な阻害を示す。
【実施例２４】
【０１９６】
化合物１はインビトロで内皮毛細血管形成を阻害する：
インビトロ毛細血管形成アッセイを、１０ｍｇ／ｍｌの基底膜抽出物（ＢＭＥ−Ｃｕｌｔｒｅｘ（登録商標）、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＵＳＡ）床で培養したヒト臍静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）を用いて行なった。インビトロ内皮血管形成アッセイのプロトコルは、一部修正を加えて既報のものと同じとした（Ｄｉａｎａ  Ｇら、Ｊ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１９９５、Ｖｏｌｕｍｅ  １３０：２０７−２１５）。簡単には、４００マイクロリットルのＣｕｌｔｒｅｘを２４ウェル培養プレートの各ウェルに４℃でコートし、３７℃で１時間ゲル化させた。１０％ウシ胎仔血清および４．５ｇ／ｌのＤ−グルコースを補給した４００μｌのＤＭＥＭを入れたウェル１つあたり７．５×１０４細胞の密度でＨＵＶＥＣをプレーティングした。次いで、所望の濃度のＤＴＩＣまたは化合物１のいずれかで、細胞を１６時間処理した。ビヒクル対照培養物には０．１％のＤＭＳＯのみを与えた。Ｎｉｋｏｎ  Ｃｏｏｌｐｉｘカメラを取り付けたＮｉｋｏｎ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＴＳ  １００顕微鏡下で写真を撮影した。インビトロ培養条件において、化合物１では、用量依存的な毛細血管形成阻害が示されたが、対照的に、ＤＴＩＣでは、ヒト内皮細胞で毛細血管形成が促進された（図６）。
【実施例２５】
【０１９７】
Ｃ５７Ｂ６ＪマウスのＢ１６  Ｆ０黒色腫異種移植片モデルにおける化合物１の抗腫瘍増殖能：
黒色腫増殖に対する化合物１のインビボでの有効性を、Ｃ５７Ｂ６ＪマウスのＢ１６  Ｆ０黒色腫異種移植片モデルにおいて評価した。６週齢のＣ５７Ｂ６Ｊマウス（体重１８〜２２ｇ）を国立栄養研究所（ＮＩＮ）、ハイデラバード（インド）から購入した。動物試験プロトコルは機関内倫理委員会（ＩＡＥＣ）によって承認されたものであった。試験はすべて、動物実験の管理および監視の目的のための委員会（Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｐｕｒｐｏｓｅ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌ  ａｎｄ  Ｓｕｐｅｒｖｉｓｉｏｎ  ｏｆ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ  ｏｎ  Ａｎｉｍａｌｓ）（ＣＰＣＳＥＡ）ガイドラインおよびＯＥＣＤガイドラインに準じて行なった。動物は、標準的な飼料に自由にアクセス可能にし、活性炭濾過した紫外線曝露水を随意に摂取させた。動物は、制御された温度（２４〜２６℃）／湿度（４５〜７０％）および１２時間／１２時間の明／暗サイクル下に維持した。
【０１９８】
黒色腫腫瘍の形成を誘導するため、サブコンフルエントのＢ１６Ｆ０細胞を短時間のトリプシン処理によって収穫し、１×１０６個の細胞（０．２ｍｌのリン酸緩衝生理食塩水）を皮下注射した。薬剤での治療は、触知可能な腫瘍の発生後（細胞移植の３〜５日後）に開始した。薬剤はリン酸緩衝生理食塩水（１０％ＤＭＳＯ，ｖ／ｖ）中で調製し、７５ｍｇ／ｋｇのＤＴＩＣまたは２５ｍｇ／ｋｇの化合物１のいずれかを、腹腔内経路によって毎日投与した。ビヒクル投与対照動物には、１０％ＤＭＳＯ含有リン酸緩衝生理食塩水のみを与えた。１４日間の投与の後、動物をＣＯ２吸入によって致死させ、腫瘍を切除し、重量計測した。図７は、Ｃ５７Ｂ６ＪマウスのＢ１６  Ｆ０黒色腫異種移植片モデルにおける種々の濃度のＤＴＩＣおよび化合物１による腫瘍の増殖阻害作用の比較を示す。
【実施例２６】
【０１９９】
ｎｕ／ｎｕ  ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスのＡ３７５ヒト黒色腫異種移植片モデルにおける化合物１の抗黒色腫作用：
化合物１の抗黒色腫作用をさらに実証するため、この化合物を、その抗黒色腫作用について、ｎｕ／ｎｕ  ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスのＡ３７５ヒト黒色腫異種移植片モデルにおいて試験した。この試験では、６〜８週齢の動物（体重１８〜２２ｇ）を使用した。動物試験プロトコルは、機関内倫理委員会（ＬＡＥＣ）によって承認されたものであった。試験はすべて、動物実験の管理および監視の目的のための委員会（ＣＰＣＳＥＡ）ガイドラインおよびＯＥＣＤガイドラインに準じて行なった。動物は、滅菌した標準的な齧歯類用飼料に自由にアクセス可能にし、活性炭濾過した紫外線曝露水を随意に摂取させた。動物を滅菌室に収容し、個別に換気ケージに入れた。室内は、制御された温度（２４〜２６℃）／湿度（４５〜７０％）および１２時間／１２時間の明／暗サイクルに維持した。
黒色腫腫瘍を誘導するため、サブコンフルエントのＡ３７５ヒト黒色腫細胞を短時間のトリプシン処理によって収穫し、１×１０６個の細胞（０．２ｍｌのリン酸緩衝生理食塩水）を皮下注射した。薬剤での治療は、触知可能な腫瘍の発生後（細胞移植の６〜７日後）に開始した。この時点の腫瘍生着率は１００％であった。化合物１は、１０％のＤＭＳＯ（ｖ／ｖ）を含有するリン酸緩衝生理食塩水中で調製し、２５ｍｇ／ｋｇの化合物１を腹腔内経路によって毎日投与した。ビヒクル投与対照動物には１０％ＤＭＳＯ含有リン酸緩衝生理食塩水のみを与えた。２１日間の投与後、動物をＣＯ２吸入によって致死させ、腫瘍の増殖を下記の式によって測定した（Ｆｒｉｅｄｍａｎ  ＨＳら、Ｍｏｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ  ２００２、１：９４３−９４８）。
［（長さ）×（幅）２］／２
【０２００】
化合物１は、ビヒクル投与群と比べて有意に黒色腫腫瘍の増殖を阻害する（ｐ＝０．０４３２２）（図８）。化合物１は、ヌードマウスのヒト黒色腫異種移植片モデルにおいて、黒色腫腫瘍の増殖を４６．５２％阻害し得る。この観察結果は、該化合物の抗黒色腫作用を実証し、化合物１がヒト悪性黒色腫を治療するための潜在的治療用薬剤として使用され得るという本発明者らの所見を強く裏付けている。
【図１】
0005571168.tif 000044
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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