(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
糖転移ナリンジン、糖転移ヘスペリジン及び糖転移ルチンから選ばれるいずれか２種以上を含有すると共に、藍草抽出物、シクロニゲロシルニゲロース、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド及び感光素１０１号から選ばれるいずれか１種又は２種以上を含有する抗しわ剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はエラスターゼ活性阻害剤に関し、詳細には、ビタミンＰを有効成分として含有するエラスターゼ活性阻害剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
紫外線、過酸化物、湿度や温度などの外界からの刺激、精神的ストレス、加齢などにより、皮膚では、水分保持機能、体温維持機能や免疫機能などの基礎機能の低下、シワやコジワ（以下、本明細書ではシワとコジワを併せて「シワ」という。）の形成、くすみの形成、柔軟性又は弾力性の低下などの美容上の種々の問題が生じる。【０００３】
なかでも、シワは、皮膚の美的外観に影響を与える代表的な変化であり、老化に伴い発生するので高年齢層や女性にとっては肌の大きな悩みの一つとなっている。高齢化社会を迎え老化を抑制するための様々な研究が行われるようになってきているものの、シワの効果的な改善法はほとんど見当たらないのが現状である。【０００４】
シワの形成は、皮膚の弾力低下が原因とされており、コラーゲン、グリコサミノグリカンなどの細胞外マトリックス成分の減少や構造の変化、特にエラスチンの減少やその構造の変化が主因の一つといわれている。【０００５】
シワの形成過程で起きるエラスチンの減少や構造の変化は、真皮線維芽細胞より産生分泌されるエラスターゼによって引き起こされると考えられている。このエラスターゼの活性を阻害し、エラスチンの減少や構造の変性を抑制して、皮膚の弾力や張りを維持することで、シワの形成阻止、乃至、シワの形成を予防乃至改善するとの観点から、エラスターゼ活性阻害剤やそれを含む化粧用組成物が提案されている（例えば、特開２００６−２１９４４７号公報を参照）。しかしながら、既存のエラスターゼ活性阻害剤では充分な抗シワ効果が得られない場合があるだけでなく、刺激性などの点で問題になるものもある。【０００６】
一方、現代では、シワの形成以外にも、食事の洋風化、飽食、過食、運動不足、ストレスなどにより、加齢に伴って、皮下への脂肪の蓄積が過度に進行し、皮膚の美的外観を損なう要因となっている。【０００７】
このような加齢に伴う、皮膚のシワや脂肪蓄積などに起因する美的外観の問題の予防及び改善には、単に、エラスターゼ活性を阻害するだけでなく、脂肪の蓄積の抑制、炎症の抑制、さらには、皮膚及びその近傍の血行の促進、代謝を活性化することも大変有益である（例えば、特開平０８−２９１０３８号公報及び特開２００５−３３６１１６号公報を参照）。すなわち、皮膚及びその近傍の血行を促進することにより、身体の新陳代謝が促進され、身体全体にとって大変有益である。また、美容上も、血色がよくなり、肌のくすみを防止することも可能であるばかりか、皮膚における新陳代謝の向上等により、余分な皮下脂肪が分解され、皮膚組織に栄養と水分が十分に供給されることで、うるおいのある若々しい肌を維持することも可能になり、これにより皮膚の老化を防止し得るなど、その効用は計り知れない。【０００８】
また、皮膚の美的外観を損なう特定の要因のみを抑制乃至改善したとしても、真に満足できる皮膚の老化防止効果は得られないので、シワの形成を抑制乃至シワを改善するだけでなく、脂肪の蓄積などの、皮膚の美的外観の問題を総合的に解決することのできる安全な成分の開発が望まれている。【０００９】
一方、ヘスペリジン、ルチンやその酵素分解物であるイソケルシトリン、ヘスペレチン、ケルセチンなどは、ビタミンＰ、すなわち、毛細血管の浸透性の増大を抑制するビタミン様作用物質として知られている（例えば、『岩波  生物学辞典  第４版』、株式会社岩波書店、第１１５６頁（１９９６年）を参照）ものの、これらの成分がエラスターゼ活性に影響を及ぼすことについての記載はない。また、これらの成分は、水への溶解性が低く、皮膚外用剤などに配合する場合などには支障をきたすことがあったので、これを解決するための手段として、その水溶性が格段に改善されたヘスペリジン、ナリンジン、ルチンやその酵素分解物の糖転移物、及び、それを配合した組成物が提案されている（例えば特開平０８−２９１０３８号公報、特開２００５−３３６１１６号公報、特開平０４−１３６９１号公報、特開平０３−７５９３号公報、特開平０３−５８７９０号公報、及び、特開昭５６−１５６２９９号公報を参照）ものの、これらの糖転移物が、エラスターゼ活性に影響を及ぼすことについても何ら記載はない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、シワをはじめとする皮膚の外観の問題の予防乃至改善に有効で、且つ、皮膚に使用しても安全なエラスターゼ活性阻害剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、上記の課題に鑑み、エラスターゼ活性阻害作用を有する成分について検討を行った結果、ビタミンＰに優れた作用があることを見出した。さらに、ビタミンＰには、痩身作用、血行促進作用などが認められ、皮膚外用剤の形態で使用すると、顔面や手などのシワなどの皮膚の美的外観の問題を予防乃至改善する優れた作用があることを見出した。また、ビタミンＰには、リパーゼ活性阻害作用、活性酸素除去作用、抗炎症作用、ラジカル除去作用、生体内過酸化脂質低減作用及び／又は生体内のアスコルビン酸低減抑制作用をはじめとする皮膚の老化の抑制に関与する生理活性を有するという知見を見出して、本発明を完成した。【００１２】
すなわち、本発明は、ビタミンＰを有効成分として含有するエラスターゼ活性阻害剤を提供することにより、上記課題を解決するものである。
【発明の効果】
【００１３】
ビタミンＰは安全性が高い物質である。しかも、このビタミンＰの１種又は２種以上を有効成分として、合計で、総質量の０．００１質量％（以下、特にことわらない限り質量％を「％」と表記する。）以上配合したエラスターゼ活性阻害剤は、エラスターゼ活性阻害作用や脂肪の分解促進作用などによりシワの発生を抑制し皮膚の張り・弾力を回復・維持することで、皮膚の老化を防止し、若々しい肌の状態を維持する優れた効果を示す。さらに、ビタミンＰの１種又は２種以上を配合したエラスターゼ活性阻害剤は、その痩身作用、血行促進作用、リパーゼ活性阻害作用、ラジカル除去作用、抗炎症作用、美白作用、生体内の過酸化脂質低減作用、生体内のアスコルビン酸低減抑制作用などにより、使用部位の皮膚及びその近傍の血行や代謝を改善し、肌のくすみを防止し、皮膚の柔軟性又は弾力性の低下などの美容上の不具合の改善効果にも優れている。なかでも、糖転移ナリンジンや糖転移ヘスペリジンは、エラスターゼ活性阻害作用に優れ、しかも、淡色で刺激や臭いがないので、黄色の糖転移ルチンと比べて、皮膚外用剤に配合する場合の制約も少ない。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１４】
本発明で使用するビタミンＰは、毛細血管の浸透性の増大を抑制する作用を有するビタミン様作用物質（以下、「ビタミンＰ様作用物質」という場合がある。）であって、エラスターゼ活性阻害活性を有する物質であれば特に制限はない。具体的には、ナリンジン、ヘスペリジン、ルチン、エスクリン、及び、その酵素分解物であるプルニン、β−グルコシルヘスペレチン、イソケルシトリン、ナリンゲニン、ヘスペレチン、ケルセチン、エスクレチン（以下、プルニン、β−グルコシルヘスペレチン、イソケルシトリン、ナリンゲニン、ヘスペレチン、ケルセチン、エスクレチンをまとめて「酵素分解ビタミンＰ」という場合がある。）、並びに、これらのα−グリコシル配糖体をいう。このα−グリコシル配糖体とは、グルコースが１分子以上α−結合していることを意味し、その結合部位は、これらの物質のアグリコンの部分であってもよく、そのアグリコンに結合した糖部分であってもよく、その両方でもよい。具体的には、糖転移ナリンジン、糖転移ヘスペリジン、糖転移ルチン、糖転移エスクリン、糖転移プルニン、糖転移β−グルコシルヘスペレチン、糖転移イソケルシトリン、糖転移ナリンゲニン、糖転移ヘスペレチン、糖転移ケルセチン、糖転移エスクレチン、などを例示することができる（以下、このα−グリコシル配糖体を総称して「糖転移ビタミンＰ」という場合がある。）。【００１５】
この糖転移ビタミンＰとしては、例えば、α−モノグルコシルナリンジン、α−ジグルコシルナリンジン、α−トリグルコシルナリンジン、α−テトラグルコシルナリンジン、α−ペンタグルコシルナリンジン、α−モノグルコシルプルニン、α−ジグルコシルプルニン、α−トリグルコシルプルニン、α−テトラグルコシルプルニン、α−ペンタグルコシルプルニン、α−モノグルコシルナリンゲニン、α−ジグルコシルナリンゲニン、α−トリグルコシルナリンゲニン、α−テトラグルコシルナリンゲニン、α−ペンタグルコシルナリンゲニン、α−モノグルコシルヘスペリジン、α−ジグルコシルヘスペリジン、α−トリグルコシルヘスペリジン、α−テトラグルコシルヘスペリジン、α−ペンタグルコシルヘスペリジン、α−モノグルコシルβ−グルコシルヘスペレチン、α−ジグルコシルβ−グルコシルヘスペレチン、α−トリグルコシルβ−グルコシルヘスペレチン、α−テトラグルコシルβ−グルコシルヘスペレチン、α−ペンタグルコシルβ−グルコシルヘスペレチン、α−モノグルコシルヘスペレチン、α−ジグルコシルヘスペレチン、α−トリグルコシルヘスペレチン、α−テトラグルコシルヘスペレチン、α−ペンタグルコシルヘスペレチン、α−モノグルコシルルチン、α−ジグルコシルルチン、α−トリグルコシルルチン、α−テトラグルコシルルチン、α−ペンタグルコシルルチン、α−モノグルコシルイソケルシトリン、α−ジグルコシルイソケルシトリン、α−トリグルコシルイソケルシトリン、α−テトラグルコシルイソケルシトリン、α−ペンタグルコシルイソケルシトリン、α−モノグルコシルケルセチン、α−ジグルコシルケルセチン、α−トリグルコシルケルセチン、α−テトラグルコシルケルセチン、α−ペンタグルコシルケルセチン、α−モノグルコシルエスクリン、α−ジグルコシルエスクリン、α−トリグルコシルエスクリン、α−テトラグルコシルエスクリン、α−ペンタグルコシルエスクリン、α−モノグルコシルエスクレチン、α−ジグルコシルエスクレチン、α−トリグルコシルエスクレチン、α−テトラグルコシルエスクレチン及びα−ペンタグルコシルエスクレチンなどを挙げることができる。【００１６】
これらの糖転移ビタミンＰは酵素法で調製することができる。また、必要に応じて、発酵法や合成法を利用することもできる。糖転移ビタミンＰを製造する場合、経済性を問題にするのであれば、糖転移酵素を用いる酵素法が有利であり、例えば、特開平０４−１３６９１号公報、特開平０３−７５９３号公報、特開平０３−５８７９０号公報、特開昭５６−１５６２９９号公報、特開２００７−２８４３９３号公報、特開２００７−３９３４９号公報などに開示された、澱粉部分加水分解物やマルトオリゴ糖などのα−グルコシル糖化合物の存在下で、ナリンジン、ヘスペリジン、ルチン、エスクリンや、酵素分解ビタミンＰにα−グルコシダーゼ、シクロマルトデキストリン・グルカノトランスフェラーゼやα−アミラーゼをはじめとする糖転移酵素を作用させる方法によれば、糖転移ビタミンＰが高収量で得られる。斯くして得られる反応物は、主たる成分として、通常、転移部分のグルコース重合度が１乃至５の範囲に分布する一連の糖転移ビタミンＰを含有する。この一連の糖転移ビタミンＰに、グルコアミラーゼを作用させることにより、α−モノグルコシルビタミンＰを調製することも有利に実施できる。本発明においては、糖転移ビタミンＰは、その生理機能が発揮できるのであれば、必ずしも高度に精製されておらずともよく、その作用効果や安全性に影響しない限り、酵素反応液そのものであっても、ビタミンＰをはじめとするその調製方法に特有の他の物質との未分離組成物の形態であってもよく、部分精製したもの、或いは、高度に精製したものであってもよい。特に、糖転移ビタミンＰと未反応のナリンジン、ヘスペリジン、ルチン、エスクリン及び酵素分解ビタミンＰが共存する場合には、これらのビタミンＰが、一体となってエラスターゼ活性阻害作用などの生理活性を発揮し、且つ、糖転移ビタミンＰの存在下では、それ以外のビタミンＰの水への溶解性も向上するので、本発明のエラスターゼ活性阻害剤の生理作用の増強に効果的である。【００１７】
また、プルニン、β−グルコシルヘスペレチンやイソケルシトリンは、例えば、特開２００７−２８４３９３号公報や特開２００７−３９３４９号公報に開示されているように、ナリンジン、ヘスペリジン或いはルチンにラムノシダーゼを作用させることにより調製することができる。さらに、ナリンゲニン、ヘスペレチン、ケルセチン、エスクレチンなどのアグリコンは、ナリンジン、ヘスペリジン、ルチン、エスクリンに、ラムノシダーゼとβ−グルコシダーゼを作用させることにより調製することができる。また、これらの酵素分解ビタミンＰは、必要に応じて、発酵法、化学的な分解法や合成法を利用して調製することも随意である。【００１８】
本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、ビタミンＰを単独で使用してもよいが、その２種以上を併用すればエラスターゼ活性阻害作用をはじめとする、ビタミンＰの持つ前記生理作用を相乗的に増強することができる。エラスターゼ活性阻害作用の強さや水への溶解性の高さの点からは、糖転移ビタミンＰが望ましく、糖転移ナリンジンや糖転移ヘスペリジンが特に望ましい。糖転移ナリンジンの中では、とりわけ、α−モノグルコシルナリンジンが望ましく、糖転移ヘスペリジンの中では、とりわけ、α−モノグルコシルヘスペリジンが望ましい。【００１９】
本発明のエラスターゼ活性阻害剤におけるビタミンＰの配合量は、本発明の所期の効果が得られるのであれば、該阻害剤の具体的な形態や他の配合成分との兼ね合いに応じて適宜選択するべきものであり、特に限定されるものではない。本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、通常、皮膚外用剤の形態で提供され、経口摂取物の形態を含む。本発明で使用するビタミンＰはいずれも、エラスターゼ活性阻害作用に加えて、痩身作用、血行促進作用、リパーゼ活性阻害作用、ラジカル除去作用、抗炎症作用、美白作用、生体内の過酸化脂質低減作用、生体内のアスコルビン酸低減抑制作用、活性酸素除去作用などを発揮するので、この発明の皮膚外用剤においては、上記に例示したごとき作用を有するビタミンＰの１種又は２種以上が全体として有効量含まれていればよい。【００２０】
通常、本発明のエラスターゼ活性阻害剤が、皮膚外用剤の形態の場合、ビタミンＰの配合割合は、一般に、エラスターゼ活性阻害剤の総質量に対して、ビタミンＰを合計で、０．００１〜１０．０％であり、望ましくは０．０１〜１０．０％、特に望ましくは０．０５〜５．０％である。この配合量がエラスターゼ活性阻害剤の全質量に対して、０．００１％未満では、上記有効成分によるエラスターゼ活性阻害作用や他の生理機能が十分に発揮されず好ましくない場合がある。逆に、１０．０％を超えると、製剤の物性などに支障をきたす傾向が顕著となり好ましくない場合がある。【００２１】
本発明のエラスターゼ活性阻害剤には、その具体的な形態に応じて公知の成分を配合することが可能である。すなわち、皮膚外用剤の形態の場合には、通常、皮膚外用剤に用いられ得る成分の１種又は２種以上を、本発明の所期の効果を損なわない範囲で配合することができる。例えば、油成分、界面活性剤、防腐剤（抗菌剤）、香料、美白剤、保湿剤、増粘剤、抗酸化剤、キレート剤、紫外線吸収・散乱剤、ビタミン類、アミノ酸類、抗炎症剤、血行促進剤、海藻抽出物、収斂剤、抗シワ剤、細胞賦活剤、抗老化防止剤、育毛・発毛剤、経皮吸収促進剤、水、アルコール類、水溶性高分子、ｐＨ調整剤、発泡剤、粉体、医薬品・医薬部外品・化粧品・食品用の添加剤、医薬用・医薬部外品用の有効成分などを適宜配合して、目的とする剤型に応じて常法により製造すればよい。【００２２】
具体的には、油成分としては、マカデミアナッツ油、ヒマシ油、オリーブ油、カカオ油、椿油、ヤシ油、木ロウ、ホホバ油、グレープシード油、アボガド油などの植物油脂類、ミンク油、卵黄油などの動物油脂類、蜜ロウ、鯨ロウ、ラノリン、カルナウバロウ、キャンデリラロウなどのロウ類、流動パラフィン、スクワラン、マイクロクリスタリンワックス、セレシンワックス、パラフィンワックス、ワセリンなどの炭化水素類、カプリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘニン酸、ラノリン脂肪酸、リノール酸、リノレン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、オレイン酸、イソステアリン酸などの天然及び合成脂肪酸類、セタノール、ステアリルアルコール、ヘキシルデカノール、オクチルドデカノール、ラウリルアルコール、カプリルアルコール、ミリスチルアルコール、セチルアルコール、コレステロール、フィトステロールなどの天然及び合成高級アルコール類、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ミリスチン酸オクチルドデシル、オレイン酸オクチルドデシル、コレステロールオレートなどのエステル類などを例示することができる。【００２３】
界面活性剤としては、モノラウリン酸ソルビタン、モノパルミチン酸ソルビタン、セスキオレイン酸ソルビタン、トリオレイン酸ソルビタン、モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン、モノステアリン酸ポリオキセチレンソルビタン、ポリエチレングリコールモノオレート、ポリエチレングリコールアルキレート、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリグリコールジエーテル、ラウロイルジエタノールアマイド、脂肪酸イソプロパノールアマイド、マルチトールヒドロキシ脂肪酸エーテル、アルキル化多糖、アルキルグルコシド、シュガーエステルなどの非イオン性界面活性剤、親油型グリセリンモノステアレート、自己乳化型グリセリンモノステアレート、ポリグリセリンモノステアレート、ポリグリセリンアルキレート、ソルビタンモノオレート、ポリエチレングリコールモノステアレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレート、ポリオキシエチレンセチルエーテル、ポリオキシエチレン化ステロール、ポリオキシエチレン化ラノリン、ポリオキシエチレン化蜜ロウ、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油などのノニオン界面活性剤、ステアリン酸ナトリウム、パルミチン酸カリウム、セチル硫酸ナトリウム、ラウリルリン酸ナトリウム、パルミチン酸トリエタノールアミン、ポリオキシエチレンラウリルリン酸ナトリウム、Ｎ−アシルグルタミン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム、ラウリン酸ナトリウム、ラウリル酸ナトリウム、ラウリル硫酸カリウム、アルキル硫酸トリエタノールアミンエーテル、ロート油、リニアドデシルベンゼン硫酸、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油マレイン酸、アシルメチルタウリンなどのアニオン界面活性剤、塩化ステアリルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、ステアリルトリメチルアンモニウムクロライド、塩化ベンザルコニウム、ラウリルアミンオキサイドなどのカチオン界面活性剤、塩酸アルキルアミノエチルグリシン液、レシチンなどの両性界面活性剤などを例示することができる。【００２４】
防腐剤（抗菌剤）としては、安息香酸及びその塩類、サリチル酸及びその塩類、ソルビン酸及びその塩類、デヒドロ酢酸及びその塩類、パラオキシ安息香酸アルキルエステルをはじめとするパラオキシ安息香酸エステル、２，４，４´−トリクロロ−２´−ヒドロキシジフェニルエーテル、３，４，４´−トリクロロカルバニリド、ヘキサクロロフェン、塩化ベンザルコニウム、フェノキシエタノール、ヒノキチオール、レゾルシン、エタノール、１，３−ブチレングリコール、感光素２０１号などを例示することができる。【００２５】
香料としては、ベンズアルデヒド、ベンジルベンゾエート、フェニル酢酸、サンダロール、オイゲノール、リリアール、リラール、リナロール、２−メチル−３−（４−メチルフェニル）−プロパナール、ムスクケトン、シンナミックアルデヒド、ベルトフィックス、メチルイオノン、ゲラニルホーメート、イソＥスーパー、γ−ウンデカラクトン、ヘキシルサリシレート、シス−３−ヘキセニルサリシレート、メチルジヒドロジャスモネート、テトラヒドロフルフリル３−メルカプトプロピオネート、コバノール、バニリン、バニラール、ゼラニウムオイル、ペニロイヤルオイル、バーチオイル、アルモイゼオイルなどを例示することができる。【００２６】
美白剤としては、Ｌ−アスコルビン酸やその誘導体及びそれらの塩類、アルコキシサリチル酸類及びその塩類、ハイドロキノンやその配糖体などのハイドロキノンの誘導体、トラネキサム酸やその誘導体及びそれらの塩類、レゾルシンの誘導体、コウジ酸やその誘導体及びそれらの塩類、エラグ酸やリノール酸及びそれらの塩類、カミツレ抽出物、テトラヒドロクルクミノイド、藍草抽出物などを挙げることができる。【００２７】
保湿剤としては、エリスリトール、キシリトール、ソルビトール、マルチトール、グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ポリグリセリン、ポリエチレングリコール、ジプロピレングリコール、１，２−ペンタンジオール、イソプレングリコールなどの多価アルコール類、グルコース、マルトース、トレハロース、トレハロースの糖質誘導体、デキストリン、サイクロデキストリン、国際公開ＷＯ  ０２／１０３６１号明細書で開示したサイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝の構造を有する環状四糖（シクロニゲロシルニゲロース：Ｃｙｃｌｏｎｉｇｅｒｏｓｙｌｎｉｇｅｒｏｓｅ）、特開平２００５−９５１４８号公報に記載したサイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝の構造を有する環状四糖（シクロマルトシルマルトース：Ｃｙｃｌｏｍａｌｔｏｓｙｌｍａｌｔｏｓｅ）などの糖類、アミノ酸、乳酸ナトリウム、ピロリドンカルボン酸ナトリウムなどのＮＭＦ成分（天然保湿成分）、グリコーゲン、ローカストビーンガム、キシログルカン、クインスシード、カラギーナン、ペクチン、マンナン、カードラン、サクシノグルカン、ガラクタン、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、コンドロイチン、コンドロイチン硫酸、ムコイチン硫酸、ケラト硫酸、キチン、ヘパラン硫酸、ヒアルロン酸などのムコ多糖類やこれらムコ多糖類の加水分解物、シルクやコラーゲンなどの蛋白質・ペプチドやこれらの加水分解物などの水溶性高分子物質、これらの塩類、ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルシロキサンなどのシリコン類、乳酸菌・ビフィズス菌などの培養上清などを例示することができる。なかでも、保湿効果などの強い、トレハロース、トレハロースの糖質誘導体、環状四糖、ヒアルロン酸やコンドロイチン硫酸、その塩類や加水分解物から選ばれる１種又は２種以上を組み合わせて使用するのが望ましい。【００２８】
増粘剤としては、アルギン酸ナトリウム、キサンタンガム、ケイ酸アルミニウム、マルメロ種子抽出物、アラビアガム、ヒドロキシエチルグアガム、カルボキシメチルグアガム、グアガム、デキストラン、トラガントガム、デンプン、プルラン、キチン、キトサン、寒天、セルロース、などの天然高分子物質、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、可溶性デンプン、カチオン化セルロース、カルボキシメチルキチンなどの半合成高分子物質、カルボキシビニルポリマー、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ビニルアルコール・酢酸ビニル共重合体などの合成高分子物質などを例示することができる。【００２９】
抗酸化剤としては、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、没食子酸プロピル、Ｌ−アスコルビン酸、ビタミンＥ、カテキン類、フラボノイド類やこれらの誘導体などを例示することができる。【００３０】
キレート剤としては、エデト酸二ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸塩、ピロリン酸塩、ヘキサメタリン酸塩、クエン酸、酒石酸、グルコン酸などを例示することができる。【００３１】
ｐＨ調整剤としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、トリエタノールアミン、ニトリロトリエタノール、クエン酸、クエン酸ナトリウム、ホウ酸、ホウ砂、リン酸水素カリウムなどを例示することができる。【００３２】
紫外線吸収・散乱剤としては、パラアミノ安息香酸系紫外線吸収剤、アントラニル酸系紫外線吸収剤、サリチル酸系紫外線吸収剤、ケイ皮酸系紫外線吸収剤、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤、糖系紫外線吸収剤、３−（４´−メチルベンジリデン）−ｄ−カンファー、３−ベンジリデン−ｄ，１−カンファー、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチルエステル、２−フェニル−５−メチルベンゾキサゾール、２，２´−ヒドロキシ−５−メチルフェニルベンゾトリアゾール、２−（２´−ヒドロキシ−５´−ｔ−オクチルフェニル）ベンゾトリアゾール、２−（２´−ヒドロキシ−５´−メチルフェニルベンゾトリアゾール、ジベンザラジン、ジアニソイルメタン、４−メトキシ−４´−ｔ−ブチルジベンゾイルメタン、５−（３，３−ジメチル−２−ノルボルニリデン）−３−ペンタン−２−オン、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン、オクチルジメチルパラアミノベンゾエート、エチルヘキシルパラメトキシサイナメート、酸化チタン、カオリン、タルクなどを例示することができる。【００３３】
ビタミン類としては、ビタミンＡ及びその誘導体、ビタミンＢ１及びその誘導体、ビタミンＢ２及びその誘導体、ビタミンＢ６塩酸塩、ビタミンＢ６トリパルミテート、ビタミンＢ６ジオクタノエート、ビタミンＢ１２、ビタミンＢ１５及びその誘導体などのビタミンＢ類、Ｌ−アスコルビン酸及びその誘導体、α−トコフェロール、β−トコフェロール、γ−トコフェロール、ビタミンＥアセテートなどのビタミンＥ類、ビタミンＤ類、ビタミンＨ、パントテン酸、パンテチン、ビタミンＦ、ビタミンＫ、ビタミンＰ以外のフラボノイド類やその誘導体、ビタミンＵ、フェルラ酸、γ−オリザノール、α−リポ酸、オロット酸、コエンザイムＱ１０などやそれらの誘導体などを例示することができ、それらの塩類であってもよい。なかでも、Ｌ−アスコルビン酸やその誘導体は、ビタミンＰの生理作用を増強する作用や、皮膚のシワの発生の抑制に強く関与するコラーゲン産生を増強する作用が強いので望ましく、効果の強さの点ではＬ−アスコルビン酸の配糖体が望ましく、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシドが特に望ましい。本発明のエラスターゼ活性阻害剤へのアスコルビン酸類の配合量は、ビタミンＰの生理活性を増強できる量であれば特に制限はなく、通常、糖転移ビタミンＰに対して、０．０１〜１００％、望ましくは０．０５〜２０％、特に望ましくは０．１〜１０％配合すればよい。【００３４】
アミノ酸類としては、グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、フェニルアラニン、チロシン、アスパラギン、グルタミン、タウリン、トリプトファン、シスチン、システイン、メチオニン、プロリン、ヒドロキシプロリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、アルギニン、ヒスチジン、リジン、カルニチン、シトルリン及びそれらの誘導体などを例示することができ、それらの塩類であってもよい。【００３５】
抗炎症剤としては、アラントイン又はその誘導体であるアラントインアセチル−ｄｌ−メチオニン、アラントインクロルヒドロキシアルミニウム、アラントインジヒドロキシアルミニウム、アラントインポリガラクツロン酸など、グリチルレチン又はその誘導体であるグリチルレチン酸、グリチルリチン酸、グリチルレチン酸アラントイン、グリチルレチン酸グリセリン、グリチルレチン酸ステアリル、ステアリン酸グリチルレチニル、３−サクシニルオキシグリチルレチン酸二ナトリウム、グリチルリチン酸ジカリウム、グリチルリチン酸モノアンモニウムなど、パントテン酸、パントテニルアルコール、パントテニルエチルエーテル、アセチルパントテニルエチルエーテル、ベンゾイルパントテニルエチルエーテル、パントテン酸カルシウム、パントテン酸ナトリウム、アセチルパントテニルエチルエーテル、安息香酸パントテニルエチルエーテルエステル、パンテチンなどのパントテン酸の誘導体、ビタミンＥ、ｄ−δ−トコフェロール、ｄｌ−α−トコフェロール、酢酸ｄｌ−α−トコフェロール、リノール酸ｄｌ−α−トコフェロール、ニコチン酸ｄｌ−α−トコフェロール、コハク酸ｄｌ−α−トコフェロールなどのビタミンＥ誘導体、Ｌ−アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシドなどのＬ−アスコルビン酸グリコシド、テトラヘキシルデカン酸アスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸とトコフェロールがリン酸基を介して結合したアスコルビン酸−トコフェロールリン酸ジエステル、Ｌ−アスコルビン酸硫酸エステル、ジパルミチン酸アスコルビル、パルミチン酸アスコルビル、Ｌ−アスコルビン酸ステアリル、リン酸Ｌ−アスコルビル、Ｌ−アスコルビン酸エチル、Ｌ−アスコルビン酸誘導体のアシル化誘導体などのＬ−アスコルビン酸の誘導体及び／又はそれらのアルカリ金属或いはアルカリ土類金属の塩、塩酸ピリドキシン、メントール、ビオチン、カンフル、テレピン油、酸化亜鉛、アズレン、グアイアズレン及びその誘導体、メフェナム酸及びその誘導体、フェニルブタゾン及びその誘導体、インドメタシン及びその誘導体、イブプロフェン及びその誘導体、ケトプロフェン及びその誘導体、ε−アミノカプロン酸、ジクロフェナクナトリウム、ジフェンヒドラミン、トラネキサム酸及びその誘導体、デキサメタゾン、コルチゾン及びそのエステル、ヒドロコルチゾン及びそのエステル、プレドニゾン、プレドニゾロンなどの副腎皮質ホルモン、抗ヒスタミン剤、アセンヤク、アマチャ、アルテア、アルニカ、アロエ、イブトラノオ、イラクサ、エイジツ、エチナシ、エンメイソウ、ウコン、オウゴン、オウバク、オオムギ、オトギリソウ、オレンジ、カノコソウ、カミツレ、カロット、カワラヨモギ、カンゾウ、キュウリ、キンギンカ、クチナシ、クマザサ、クレソン、ゲンチアナ、ゲンノショウコウ、ゴボウ、コンフリー、ゴカヒ、サルビア、サンショウ、シアントロ、シコン、シソ、シャクヤク、シラカバ、セージ、セイヨウオトギリソウ、セイヨウキズタ、セイヨウネズ、セイヨウノコギリソウ、セイヨウハッカ、センキュウ、センブリ、ソハクヒ、タイソウ、タイム、チャイニーズパセリ、トウガシ、トウキ、トウキンセンカ、トウニン、ドクダミ、トルメンチラ、タデアイ、チャ、トウ���、トウキンセンカ、ニワトコ、ニンジン、パセリ、ハッカ、ビャクダン、ビワ、ブッチャーブルーム、ブドウ、ブロッコリー、ベニバナ、ホオウ、ボダイジュ、ボタン、マロニエ、ムクロジ、モモ、ヤグルマソウ、ユーカリ、ヨモギ、ヨウバイヒ、ラベンダー、ローマカミツレ、ローズマリーなどの植物又は植物に由来する抽出物などの成分を例示することができる。【００３６】
海藻抽出物としては、褐藻、紅藻、緑藻、藍藻などからの抽出液があり、具体的にはコンブ、マコンブ、ワカメ、ヒジキ、テングサ、サンゴモ、パルマリア、ツノマタ、ノリ、アオサ、アナアオサ、アスコフィラム、ヒバマタ、モズク、オキナワモズク、ヒマンタリアなどからの抽出物を例示することができる。アマモなどの水性植物からの抽出物もこれに含まれる。【００３７】
上記以外にも、プロポリス、ハーブ類、ローヤルゼリーなどの植物や動物の成分や、それらに由来する抽出物などの成分、海洋深層水、苦汁、苦汁成分などのミネラル類、抗生物質、リン酸水素カルシウム、有機変性モンモリロナイト、ケイ酸、無水ケイ酸、ケイ酸マグネシウム、雲母、ベントナイト、チタン被覆雲母、オキシ塩化ビスマス、酸化ジルコニウム、酸化マグネシウム、酸化亜鉛、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、酸化鉄、群青、紺青、酸化クロム、カラミン、ゼオライト及びカーボンブラックなどの無機粉末、ポリアミド、ポリエステル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリウレタン、ビニル樹脂、尿素樹脂、フェノール樹脂、フッソ樹脂、ケイ素樹脂、アクリル酸樹脂、メラミン樹脂、エポキシ樹脂、ポリカーボネイト樹脂、ジビニルベンゼン・スチレン共重合体、上記化合物の単量体の二種以上からなる共重合体、セルロースなどの有機粉末、ベニバナ色素、クチナシ色素、シコン色素、コチニール色素をはじめとする、アントラキノン系、アントシアニン系、カルコン系、カロテノイド系の色素などの天然着色料、感光素１０１号、感光素２０１号、感光素３０１号、感光素４０１号などの感光素、赤色２０１号、赤色２０２号、赤色２０４号、赤色２０５号、赤色２２０号、赤色２２６号、赤色２２８号、赤色４０５号、橙色２０３号、橙色２０４号、黄色２０４号、黄色４０１号及び青色４０４号などの有機顔料粉末、赤色３号、赤色１０４号、赤色１０６号、赤色２２７号、赤色２３０号、赤色４０１号、赤色５０５号、橙色２０５号、黄色４号、黄色５号、黄色２０２号、黄色２０３号、緑色３号及び青色１号、ジルコニウム、バリウム又はアルミニウムレーキなどの有機顔料粉末、上記有機粉末に、シコン色素、ベニバナ色素などの天然着色料や有機合成色素などの着色料、糖転移グリチルリチン、グリチルリチンなどの機能性成分を担持せしめた粉体などを挙げることができる。【００３８】
上記の配合可能成分のなかでも、藍草抽出物、シクロニゲロシルニゲロース、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド及び感光素１０１号は、本発明のエラスターゼ活性阻害剤の生理活性を増強する作用が強いので特に望ましい。これらの成分の、本発明のエラスターゼ活性阻害剤への配合量は、これらの成分が、ビタミンＰの生理機能をすることができる量であれば、特に制限はない。通常、藍草抽出物（藍草由来の固形分を１．５％含有の場合）、シクロニゲロシルニゲロース及びＬ−アスコルビン酸−２−グルコシドは、本発明のエラスターゼ活性阻害剤の総質量に対して、０．００１〜１０％配合すればよく、０．０５〜５％が望ましく、０．１〜５％が特に望ましい。また、感光素１０１号は、本発明のエラスターゼ活性阻害剤の総質量に対して、０．０００００１〜２％配合すればよく、０．００００１〜０．１％が望ましく、０．０００５〜０．５％が特に望ましい。【００３９】
本発明のエラスターゼ活性阻害剤を皮膚外用剤の形態で使用する場合の剤型に特に限定はなく、例えば水溶液系、可溶化系、乳化系、粉末分散系、固形スティック系、水−油２層系、水−油−粉末３層系など、種々の剤型で本発明を適用することが可能である。また、その具体的な形態にも、特に限定はなく、化粧品、医薬品、医薬部外品などの薬事法上の区別に拘束されるものでもない。当該皮膚外用剤は、化粧品、医薬品、医薬部外品として、皮膚、口唇や頭皮などの外皮及び口腔内に適用されるものをいい、具体的には、軟膏、クリーム、乳液、ローション、エッセンス、ゼリー、ジェル、パック、シャンプー、リンス、ヘアトリートメント、マスク、マスカラ、アイライナー、育毛剤、リップスティック（口紅）、リップグロス、ファンデーション、頬紅、アイシャドウ、パウダー、マニキュア、石鹸、ボディーソープ、浴用剤、粉歯磨、潤性歯磨、練歯磨、水歯磨、薬用歯磨、口中清涼剤、口中清涼フィルム、マウスウオッシュ、うがい薬などを例示することができる。また、美白、美肌、痩身、血行促進、抗炎症、歯茎の張りや弾性を保つ、生体内過酸化脂質低減、生体内アスコルビン酸低減抑制、体脂肪低減剤、疲労回復、ストレス低減、睡眠の質の向上などの目的で使用されるガム、キャンディ、サプリメント、ドリンク剤などの経口摂取用組成物も含む。【００４０】
また、本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、抗シワ用皮膚外用剤、痩身促進用皮膚外用剤、血行促進用皮膚外用剤、リパーゼ活性阻害用皮膚外用剤、抗炎症用皮膚外用剤、ラジカル除去用皮膚外用剤、美白用皮膚外用剤、生体内の過酸化脂質低減用皮膚外用剤、生体内のアスコルビン酸低減抑制用皮膚外用剤、老化防止用皮膚外用剤、皮膚や口唇のくすみ防止用皮膚外用剤、頭髪用皮膚外用剤、抗炎症用皮膚外用剤、メーキャップ化粧料、マッサージ用皮膚外用剤などとしても使用することができる。【００４１】
本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、経口摂取用の組成物として利用しても、皮膚外用剤として利用した場合と同様の作用効果を得ることができる。その場合の剤形に特に制限はなく、固状、粉末、顆粒、錠剤、液状、シラップ、ペースト、乳液、カプセル等の形態で摂取してもよく、通常の飲食品に混合して摂取することも随意である。また、経口摂取用のエラスターゼ活性阻害剤の場合には、ビタミンＰの１種又は２種以上の配合割合は、一般に、当該エラスターゼ活性阻害剤の全質量に対して、ビタミンＰを合計で、０．１％以上、望ましくは０．５％以上、特に望ましくは１％以上含有せしめればよい。この配合量がエラスターゼ活性阻害剤の全質量に対して、０．１％未満では、上記有効成分によるエラスターゼ活性阻害作用や他の生理機能が十分に発揮されず好ましくない場合がある。配合割合の上限は、対象とする経口摂取用組成物の物性に影響を与えない限り特に制限はなく、ビタミンＰを、上記のごとき種々の生理活性を期待して、強化目的で配合する場合であれば、ビタミンＰをそのままの形態で使用することも有利に実施できる。本発明のエラスターゼ活性阻害剤を経口摂取する場合、一日の摂取量は、エラスターゼ活性阻害作用が発揮される量であれば特に制限はなく、通常、ビタミンＰを合計で、０．０５乃至５０ｇ、望ましくは、０．１乃至１０ｇ、特に望ましくは０．２５乃至５ｇである。一日あたり０．０５ｇ未満の摂取では所期の効果が得られない場合があり、５０ｇを越えて摂取しても、摂取量に見合う効果が得られない場合がある。【００４２】
以下、実験により本発明をさらに具体的に説明する。【００４３】
＜実験１：エラスターゼ活性に及ぼすビタミンＰの影響＞
エラスターゼ活性に及ぼすビタミンＰの影響を調べる実験を以下のように行った。すなわち、糖転移ビタミンＰとして、表１に示すように糖転移ナリンジン、糖転移ヘスペリジン、糖転移ルチン（いずれも、株式会社林原生物化学研究所調製、α−モノグルコシルビタミンＰとしての純度９５％以上）を使用した。また、表１に示すナリンジン、プルニン、ヘスペリジン、β−モノグルコシルヘスペレチン、ルチン及びイソケルシトリンは、水に対する溶解性が極めて低いため、その溶解性を上げるために、糖転移ビタミンＰを加えて、ナリンジン又はプルニンと糖転移ナリンジンとを、ヘスペリジン又はβ−モノグルコシルヘスペレチンと糖転移ヘスペリジンとを、或いは、ルチン又はイソケルシトリンと糖転移ルチンとを配合したビタミンＰをそれぞれ調製して使用した（いずれも、株式会社林原生物化学研究所調製、ビタミンＰとしての純度９５％以上）。さらに、糖転移ナリンジンと、糖転移ヘスペリジン又は糖転移ルチンとを配合したビタミンＰ（いずれも、株式会社林原生物化学研究所調製、ビタミンＰとしての純度９５％以上）を調製して使用した。２種類のビタミンＰを含む標品は、それぞれを、ほぼ等モルずつ配合した標品を使用した。これらの、ビタミンＰを１種、又は、２種のビタミンＰをほぼ等モルの割合で含む粉末標品を、各々、精製水でビタミンＰとして６．７５ｎＭとなるように希釈し、これをさらに、３倍に連続希釈し、表１に示すモル濃度の試験試料を調製した（固形物として、ビタミンＰ濃度は約０．０１乃至約５ｍｇ／ｍｌ）。この試験試料のいずれか５０μｌに、２０μＭ合成基質Ｎ−Ｍｅｔｈｏｘｙｓｕｃｃｉｎｙｌ−Ｌ−Ａｌａｎｙｌ−Ｌ−Ｐｒｏｌｙｌ−Ｌ−Ｖａｌｉｎｅ−４−Ｍｅｔｈｙｌ−Ｃｏｕｍａｒｙｌ−７−Ａｍｉｄｅ（ペプチド  インスティチュート  インク（ＰＥＰＴＩＤＥ  ＩＮＳＴＩＴＵＴＥ、ＩＮＣ）社販売）含有０．２Ｍトリス塩酸緩衝液（ｐＨ８．５、１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）及び１Ｍ  ＮａＣｌ含有）２５μｌを加え、これに０．０４８単位／ｍｌのヒト好中球由来エラスターゼ含有０．２Ｍトリス塩酸緩衝液２５μｌを加えて攪拌し、３７℃で６０分間反応させた。その後、エラスターゼによる酵素反応の分解生成物である４−ニトロアニリン（ｎｉｔｒｏａｎｉｌｉｎｅ）の生成量を測定する、蛍光マイクロプレートリーダー（ＢＩＯ−ＴＥＫ  ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴ社販売、商品名「フルオロスキャンＩＩ」）にて蛍光強度（Ｅｘ３５５ｎｍ、Ｅｍ４６０ｎｍ）を測定した。この測定値に基づき、エラスターゼ活性の阻害率（％）を以下の式に従って算出した結果を表１に併せて示す。なお、ナリンゲニン又はプルニンと糖転移ナリンジン、ヘスペレチン又はβ−モノグルコシルヘスペレチンと糖転移ヘスペリジン、及び、ケルセチン又はイソケルシトリンと糖転移ルチンとをほぼ等モル含む組成物は、それぞれ、特開２００７−２８４３９３号公報、特開２００７−３９３４９号公報及び特許第３１５５４６６号公報などに記載の方法を利用して調製した。
＜エラスターゼ活性阻害率の計算方法＞
エラスターゼ活性阻害率（％）＝１００−［｛（Ｂ−Ａ）÷Ｃ｝×１００］
Ａ：エラスターゼ未添加のときの蛍光強度
Ｂ：エラスターゼと試験試料とを添加のときの蛍光強度
Ｃ：エラスターゼのみを添加したときの蛍光強度
＜エラスターゼ活性を５０％阻害するビタミンＰ濃度＞
測定に使用したビタミンＰ濃度のうち、エラスターゼ活性を５０％阻害する濃度を挟む、２点間における濃度と阻害率の関係を示す直線式を求め、５０％阻害するビタミンＰの濃度を計算により求めた。【００４４】
【表１】
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【００４５】
表１から明らかなように、いずれのビタミンＰを添加し酵素反応をおこなった場合にも、ビタミンＰ濃度依存的なエラスターゼ活性の阻害が認められた。また、ナリンジン又はプルニンと糖転移ナリンジンとを添加した場合と、糖転移ナリンジンのみを添加した場合、ヘスペリジン又はβモノグルコシルヘスペレチンと糖転移ヘスペリジンを添加した場合と糖転移ヘスペリジンのみを添加した場合、或いは、ルチン又はイソケルシトリンと糖転移ルチンとを添加した場合と、糖転移ルチンのみを添加した場合について、エラスターゼ活性を５０％抑制する濃度を比較すると、いずれの場合も、ビタミンＰとしては等モル添加しているにもかかわらず、糖転移物のみを添加した場合の方が、その濃度が低くても、強いエラスターゼ活性の阻害が認められた。また、糖転移ナリンジンと、糖転移ヘスペリジン又は糖転移ルチンとを、ほぼ等モル混合して添加した場合には、その各々を単独で使用した場合よりもさらに低い濃度で強いエラスターゼ活性の阻害が認められた。さらに、試験した糖転移ビタミンＰの中では、糖転移ナリンジン又は糖転移ヘスペリジン、或いは、この２種類のビタミンＰを混合した試験試料を添加した場合に、最も強いエラスターゼ活性阻害作用が認められた。エラスターゼはエラスチンを分解して、真皮のエラスチン量を減少させて、シワの発生の原因となることから（例えば、特開２００６−２１９４４７号公報参照）、この結果は、ビタミンＰは、シワの形成を抑制するためのエラスターゼ活性阻害剤の有効成分として有用であることを物語っている。また、糖転移していないビタミンＰよりも糖転移ビタミンＰの方が、優れた抗シワ作用を有し、中でも糖転移ナリンジン及び糖転移ヘスペリジンが特に強い、抗シワ作用を有していることを物語っている。【００４６】
＜実験２：シワの形成に及ぼす糖転移ビタミンＰの影響＞
実験１において、糖転移ビタミンＰに強いエラスターゼ活性阻害作用が見出されたので、エラスターゼ活性が関与するシワの形成に及ぼす糖転移ビタミンＰの影響を調べる試験を以下のように行った。すなわち、表２に示す配合処方のように、糖転移ナリンジン、糖転移ヘスペリジン又は糖転移ルチンを配合した糖転移ビタミンＰ配合クリーム（試験試料１乃至３）、糖転移ナリンジンと、糖転移ヘスペリジン又は糖転移ルチンを配合した糖転移ビタミンＰ配合クリーム（試験試料４乃至５）及び糖転移ビタミンＰを含まないクリーム（対照）を調製した。なお、ビタミンＰの配合量は、その合計が各試験試料でほぼ等モルとなる割合で配合し、２種のビタミンＰを配合した試験試料では、２種類のビタミンＰがほぼ等モルとなる配合とした。ボランティアの女性９０名（３５乃至５５歳）を、被験者として無作為に１５名ずつ６群に分け、５群各群１５名の被験者には、それぞれ、試験試料のいずれかを、残り１群１５名には対照のクリームを、朝晩２回、９０日間、毎日顔面に均一に塗布させた。塗布前、塗布４５日目及び塗布９０日目に、目尻と耳の位置から特定した部位に、円形のカップをおいて、医療用のシリコンを塗布し、直径２０ｍｍの範囲の皮膚のレプリカを調製した。各被験者の試験試料又は対照の、塗布前、塗布４５日目及び塗布９０日目のレプリカの凹凸の程度をオプティカルプロフィルメーターで測定して、以下の式に従って算出したシワの低減率（％）を表２に併せて示す。なお、被験者は、試験開始４日前から試験終了まで、直射日光には過度に、顔面をさらさないように指導した。
＜シワの低減率の計算方法＞
シワの低減率（％）＝｛（Ａ−Ｂ）÷Ａ｝×１００
Ａ：塗布前のレプリカのオプティカルプロフィルメーターの測定値
Ｂ：塗布４５日目又は９０日目のレプリカのオプティカルプロフィルメーターの測定値【００４７】
【表２】
0005551582.tif 000003
【００４８】
表２から明らかなように、対照塗布群のシワの低減率は、塗布４５日目及び９０日目で、上昇はわずかしかないのに対して、試験試料塗布群は、いずれの場合も、塗布前に比してシワの低減率が有意に上昇し、塗布９０日目でより顕著となった。試験試料を塗布した群間で比較すると、試験試料４又は５（糖転移ナリンジンと糖転移ヘスペリジン又は糖転移ルチンとを等モル量配合）を塗布した群のシワの低減率が最も高くなった。また、試験期間中及び試験終了後も、皮膚の違和感、発赤、刺激などの不具合を訴える被験者はいなかった。この結果は、糖転移ビタミンＰを配合した皮膚外用剤は、安全で、且つ、皮膚のシワの形成抑制効果及びシワの改善効果を有することを物語っている。また、その効果は、糖転移ビタミンＰを単独で使用した場合には糖転移ナリンジンが最も強く、糖転移ビタミンＰを２種以上配合することにより、さらに、増強されることを物語っている。【００４９】
＜実験３：シワの形成に及ぼす糖転移ビタミンＰの濃度の影響＞
実験２において、糖転移ビタミンＰにシワ形成抑制及びシワの改善効果が認められたので、シワに及ぼす糖転移ビタミンＰの濃度の影響を調べる試験を以下のように行った。すなわち、糖転移ビタミンＰとして、糖転移ナリンジンを使用して表３に示す配合処方の、糖転移ビタミンＰ配合クリーム（試験試料１乃至８）及び糖転移ナリンジンを含まないクリーム（対照）を調製した。ボランティアの女性１３５名（３５乃至５５歳）を、被験者として無作為に１５名ずつ９群に分け、試験試料のいずれか又は対照を、各群１５名の被験者に、それぞれ、実験２と同様に、朝晩２回、９０日間、毎日顔面に均一に塗布させた。塗布前、塗布４５日目及び塗布９０日目に、目尻と耳の位置から特定した部位に、円形のカップをおいて、医療用のシリコンを塗布し、直径２０ｍｍの範囲の皮膚のレプリカを調製した。各被験者の試験試料又は対照の、塗布前、塗布４５日目及び塗布９０日目のレプリカのシワの凹凸の程度を、実験２と同様にオプティカルプロフィルメーターで測定して、シワ低減率（％）を算出して表３に併せて示す。なお、被験者は、試験開始４日前から試験終了まで、直射日光には過度に、顔面をさらさないように指導した。【００５０】
【表３】
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【００５１】
表３から明らかなように、糖転移ナリンジンをクリームの総質量に対して０．０００１％配合したクリームを塗布した場合には、対照を塗布した場合とシワの低減率に差は認められなかった。これに対して、糖転移ナリンジンをクリームの総質量に対して０．００１％以上配合したクリームを塗布した場合には、対照を塗布した場合に比して、濃度依存的にシワの低減率が有意に上昇し、０．１％以上配合した場合にはその効果が顕著となった。また、配合量が５％を超えるとシワの低減率に大きな差は認められなかった。また、糖転移ナリンジンを１５％配合した場合には、糖転移ナリンジンによるクリームの着色（黄色）が顕著となった。また、試験期間中及び試験終了後も、皮膚の違和感、発赤、刺激などの不具合を訴える被験者はいなかった。この結果は、ビタミンＰを総質量に対して、０．００１％以上、望ましくは０．１％以上、特に望ましくは０．１乃至１０％配合した皮膚外用組成物は、安全で、且つ、効果的にシワを低減乃至予防できることを物語っている。【００５２】
＜実験４：痩身効果に及ぼす糖転移ビタミンＰの影響＞
本発明のエラスターゼ活性阻害剤の有効成分である糖転移ビタミンＰの痩身に及ぼす影響を調べる試験を以下のように行った。すなわち、実験１で使用した糖転移ビタミンＰを使用して、表４に示す配合処方に基づき、常法により、Ａ、Ｂ各成分を個別に混合溶解し、混合したＢ成分を、混合したＡ成分に添加して攪拌することにより、試験用のジェル（試験試料１乃至３及び対照）を調製した。なお、ビタミンＰの配合量は、各試験試料でほぼ等モルとなるように配合した。ボランティアの女性８０名（２５乃至５５歳）を、被験者として無作為に２０名ずつ４群に分け、３群各群２０名の被験者には試験試料のいずれかを、残り１群２０名には対照のジェルを、被験者の腹部及び大腿部に、それぞれ、約２ｇずつ１日２回、３週間連用塗布させた。ジェルを塗布した腹部、大腿部の引き締め効果（痩身効果）が認められたかどうかを、アンケートにより確認して、「効果あり」と回答した被験者の人数を表４に併せて示す。【００５３】
【表４】
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【００５４】
表４から明らかなように、試験試料を塗布することにより、腹部、大腿部の引き締め効果があったと回答した被験者の人数は、糖転移ビタミンＰ無添加のジェル（対照）を使用した場合の３名に対して、糖転移ビタミンＰを配合したジェルを使用し場合１１乃至１７名となった。さらに、３種類の試験試料の中では、糖転移ナリンジン（試験試料１）又は糖転移ヘスペリジン（試験試料２）を配合したジェルで効果ありと回答した被験者の人数が多かった。また、試験試料１乃至３使用した際の使用感や、試験期間中或いは試験終了後においても、皮膚の違和感、発赤、刺激などに関しても何ら問題は認められなかった。この結果は、糖転移ビタミンＰを配合した組成物が、局所における優れた痩身効果を有し、効果の点では糖転移ナリンジン及び糖転移ヘスペリジンが強いことを物語っている。また、これら糖転移ビタミンＰを配合した組成物は、安全性にも優れていることを物語っている。【００５５】
＜実験５：血行に及ぼす糖転移ビタミンＰの影響＞
本発明のエラスターゼ活性阻害剤の血行に及ぼす影響を調べる試験を以下のように行った。すなわち、実験１で使用した糖転移ビタミンＰを使用して、表５に示す配合処方に基づき、常法により、Ａ成分を混合し、８０℃に加熱して均一にし、これにＢ成分を混合して８０℃にしたものを添加して乳化し、攪拌しながら室温まで冷却して、Ｏ／Ｗ乳化型保湿クリーム（試験試料１乃至３及び対照）を調製した。なお、ビタミンＰの配合量は、各試験試料で等モルとなるように配合した。ボランティア８０名（２０乃至４０歳の男女各４０名）を、被験者として無作為に２０名（男女各１０名）ずつ４群に分け、単純盲検法にて、３群各群２０名の被験者には試験試料１乃至３のいずれかを、残り１群２０名の被験者には対照のクリームを、それぞれ、被験者の右手の甲側に、１日２回、約０．２ｇ、４週間連用塗布させ、左手の甲にはクリームの塗布は行わなかった。クリームの塗布開始前、及び、いずれかのクリームを４週間連用後、被験者を、恒温・恒湿室（室温２５±１℃、相対湿度５５±２％）内で、２０分間安静にさせた。その後、サーモグラフィー測定器（ＮＥＣ三栄株式会社販売、商品名「サーモトレーサーＴＨ  ５１０４」）で、左右の手の甲側の熱画像をそれぞれ撮影した。【００５６】
上記の測定後、得られた熱画像から左右の手の甲の平均皮膚表面温度をそれぞれ算出した。この左右の手の甲の平均皮膚表面温度の差を被験者ごとに求めて、クリーム塗布開始前と４週間塗布後で、各被験者のクリーム使用前及び使用後で、左右の手の甲の平均皮膚温度差を求めた。なお、使用前の皮膚表面温度差は、クリーム塗布前の被験者の右手の甲の平均皮膚表面温度から左手の甲の平均皮膚表面温度（℃）を減じて求めた。また、使用後のそれは、試験試料１乃至３のいずれか又は対照のクリームを４週間塗布した後の、被験者の右手の甲の平均皮膚表面温度（℃）からクリームを塗布していない左手の甲の平均皮膚表面温度（℃）を減じて求めて、各試験試料或いは対照塗布群の平均値を計算して表５に併せて示す。【００５７】
【表５】
0005551582.tif 000006
【００５８】
表５から明らかなように、いずれの群においても、クリーム塗布前には、左右の手の甲の皮膚表面温度差（使用前の皮膚表面温度差）に差は認められなかった。また、対照を４週間塗布した群ではクリーム未塗布の場合と差がほとんど認められなかったのに対して、糖転移ビタミンＰを配合したクリーム（試験試料１乃至３）を４週間塗布することにより、クリームを塗布した右手の甲の平均皮膚表面温度は、塗布していない左手の甲に比べて平均で１．２℃以上上昇した。さらに、試験試料の中では、糖転移ナリンジン（試験試料１）又は糖転移ヘスペリジン（試験試料２）を配合したクリームで、左右の手の甲の平均皮膚表面温度差が特に顕著であった。また、試験期間中及び試験終了後も、皮膚の違和感、発赤、刺激などの不具合を訴える被験者はいなかった。この結果は、糖転移ビタミンＰに優れた血行促進作用があり、作用の強さの点から見ると転移ナリンジン及び糖転移ヘスペリジンが優れていることを物語っている。また、これら糖転移ビタミンＰを配合した皮膚外用剤は、安全性に優れていることを物語っている。【００５９】
＜実験６：リパーゼ活性に及ぼす糖転移ビタミンＰの影響＞
リパーゼ活性に及ぼす糖転移ビタミンＰの影響を調べる実験を以下のように行った。すなわち、実験１で使用した糖転移ビタミンＰを、表６に示す濃度となるように希釈して試験試料を調製した。これら試験試料のいずれか２５μｌと、基質として０．１Ｍ  ４−Ｍｅｔｈｙｌｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒｙｌ  ｏｌｅａｔｅを含有するＭｃｌｌｖａｉｎｅ緩衝液（ｐＨ７．４、０．１Ｍクエン酸を９．１５％と０．２Ｍ  Ｎａ２ＨＰＯ４を９０．８５％の割合で含有）５０μｌとを混合し、これに１単位／ｍｌのリパーゼ含有Ｍｃｌｌｖａｉｎｅ緩衝液２５μｌを加えて攪拌し、３７℃で２０分間反応させた。その後、リパーゼの酵素反応の分解生成物である４−Ｍｅｔｈｙｌｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒｏｎ生成量の指標として、蛍光マイクロプレートリーダー：フルオロスキャンＩＩ（ＢＩＯ−ＴＥＫ  ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴ）にて蛍光強度（Ｅｘ３５５ｎｍ、Ｅｍ４６０ｎｍ）を測定した。この測定値に基づき、リパーゼ活性の阻害率（％）を以下の式に従って求めた結果を表６に併せて示す。さらに、使用したリパーゼ活性を５０％抑制するために必要な糖転移ビタミンＰの濃度を計算して表６に併せて示す。
＜リパーゼ活性の阻害率（％）＞
阻害率（％）＝１００−［｛（Ａ−Ｂ）÷（Ｃ−Ｂ）｝×１００］
Ａ：試験試料添加のときの蛍光強度
Ｂ：Ｍｃｌｌｖａｉｎｅ緩衝液のみの蛍光強度
Ｃ：試験試料未添加のときの蛍光強度【００６０】
【表６】
0005551582.tif 000007
【００６１】
表６から明らかなように、糖転移ビタミンＰに、濃度依存的なリパーゼ活性阻害作用が認められた。また、試験に使用した糖転移ビタミンＰ間で、使用したリパーゼ活性を５０％抑制する濃度を比較すると、糖転移ナリンジンが最もリパーゼ活性阻害作用が強いことが判明した。リパーゼはアクネの発生の原因とされているので（例えば、特開２００４−４３３７３号公報参照）、この結果は、糖転移ビタミンＰが優れた抗アクネ作用を有し、中でも糖転移ナリンジンが特に強い、抗アクネ作用を有していることを物語っている。【００６２】
＜実験７：１−ｄｉｐｈｅｎｙｌ−２−ｐｉｃｒｙｌ  ｈｙｄｒａｚｙｌラジカルに及ぼす糖転移ビタミンＰの影響＞
１−ｄｉｐｈｅｎｙｌ−２−ｐｉｃｒｙｌ  ｈｙｄｒａｚｙｌ（以下、「ＤＰＰＨ」と略記する。）ラジカルに及ぼす糖転移ビタミンＰの影響を調べる実験を以下のように行った。すなわち、実験１で使用した糖転移ビタミンＰ粉末を、５ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ５．５）に溶解し、同じ緩衝液で３倍に連続希釈して、表７に示す濃度の試験試料を調製した。これらの試験試料のいずれか５０μｌを、１ｍＭ  ＤＰＰＨエタノール溶液１００μｌと混合、攪拌し、室温で２０分間反応させ、マイクロプレートリーダー（ＢＩＯ−ＴＥＫ  ＩＮＳＴＲＵＭＥＮＴ社販売、型番「ＥＬ−３４０」）で５１５ｎｍの吸光度を測定した。この測定値に基づき、以下の式よりＤＰＰＨラジカル除去率（％）を計算して表７に示す。また、使用したＤＰＰＨラジカルを５０％除去する濃度を計算して表７に併せて示す。
＜ＤＰＰＨラジカル除去率（％）の計算方法＞
ＤＰＰＨラジカル除去率（％）＝１００−［｛（Ａ−Ｂ）÷（Ｃ−Ｂ）｝×１００］
Ａ：試験試料添加のときの蛍光強度
Ｂ：酢酸緩衝液のみの蛍光強度
Ｃ：試験試料未添加のときの蛍光強度【００６３】
【表７】
0005551582.tif 000008
【００６４】
表７から明らかなよう、糖転移ビタミンＰに、濃度依存的なＤＰＰＨラジカル除去活性が認められた。また、ＤＰＰＨラジカルを５０％除去するために必要な糖転移ビタミンＰの濃度を比較したところ、糖転移ナリンジン、糖転移ヘスペリジン、糖転移ルチンの場合、各々３．５２ｍｇ／ｍｌ、１．０３ｍｇ／ｍｌ、０．４４ｍｇ／ｍｌと計算され、糖転移ルチンが最も強くＤＰＰＨラジカルを除去することが判明した。この結果は、糖転移ビタミンＰはラジカル除去効果を有しているので、皮膚の老化防止乃至抑制効果に優れていることを物語っている。また、ラジカル除去効果の強さの点では糖転移ヘスペリジンや糖転移ルチンが優れていることを物語っている。【００６５】
＜実験８：一酸化窒素産生に及ぼす糖転移ビタミンＰの影響＞
炎症を誘発することが知られている一酸化窒素（以下、「ＮＯ」と略記する。）産生に及ぼす糖転移ビタミンＰの影響を調べる実験を以下のように行った。すなわち、マウスマクロファージ細胞株（ＲＡＷ２６４．７細胞）を、ダルベコのＭＥＭ培地（Ｄ−ＭＥＭ）に懸濁し、９６穴マイクロプレートに播種し、ＬＰＳを８μｇ／ｍｌとなるように培地に添加して、最終的に細胞量が５×１０４細胞／２００μｌ／穴とした。実験１で使用した糖転移ビタミンＰの粉末を、ダルベコのリン酸緩衝液（Ｄ−ＰＢＳ）で希釈して、ＲＡＷ２６４．７細胞を播種した穴に、培地中の濃度が表８に示す濃度となるように調整した試験試料を添加して４８時間培養した。培養上清中のＮＯ量を測定（Ｇｒｉｅｓｓ法）した。この測定値に基づき、下記の計算方法によりＮＯ産生抑制率（％）を求めて表８に示す。また、ＮＯ産生量を５０％抑制する、糖転移ビタミンＰの濃度を計算して表８に併せて示す。なお、陽性対照として、抗炎症作用があることが知られているグリチルリチン酸二カリウムを同様に希釈して使用した。
＜ＮＯ産生抑制率（％）の計算方法＞
ＮＯ産生抑制率（％）＝１００−［｛（Ａ−Ｂ）÷Ｂ｝×１００］
Ａ：試験試料添加のときＮＯ量
Ｂ：Ｄ−ＰＢＳのみの添加したときのＮＯ量【００６６】
【表８】
0005551582.tif 000009
【００６７】
表８から明らかなよう、糖転移ビタミンＰ及びグリチルリチン酸二カリウムに、濃度依存的なＮＯ産生抑制活性が認められた。また、当該実験系においてＮＯ産生を５０％抑制するために必要な濃度を比較したところ、グリチルリチン酸二カリウム（陽性対照）、糖転移ナリンジン、糖転移ヘスペリジン及び糖転移ルチンは、各々０．４７ｍｇ／ｍｌ、０．５６ｍｇ／ｍｌ、１．２３ｍｇ／ｍｌ及び１．７６ｍｇ／ｍｌと計算された。この結果は、糖転移ビタミンＰは、ＮＯ産生を抑制する作用に優れているので、抗炎症効果に優れていることを物語っている。また、ＮＯ産生抑制作用の強さから見ると、抗炎症効果は、糖転移ビタミンＰの中では糖転移ナリンジンが最も優れ、陽性対照として使用したグリチルリチン酸二カリウムとほぼ同等の抗炎症効果を有していることを物語っている。【００６８】
＜実験９：しみ・そばかすに及ぼす糖転移ビタミンＰの影響＞
糖転移ヘスペリジンには美白作用があることが知られている。また、実験８で、糖転移ナリンジンにも糖転移ヘスペリジンと同様に抗炎症作用が見出されたので、糖転移ナリンジンにも、美白作用があることを確認する試験を以下のように行った。すなわち、表９に示す配合処方により、糖転移ビタミンＰ配合クリーム（試験試料１乃至３）及び糖転移ビタミンＰを含まないクリーム（対照）を調製した。ボランティアの女性６０名（２９乃至５８歳）を被験者として無作為に１５名ずつ４群に分けて、３群各群１５名の被験者には、試験試料のいずれかを、残りの１群１５名には対照のクリームを、それぞれ、朝晩２回、１８０日間、毎日顔面に均一に塗布させた。塗布前、塗布９０日目及び塗布１８０日目に、アンケートを実施し、その結果を表９に併せて示す。なお、しみ・そばかすの状態は、目視と写真により、塗布前と比して、顕著に改善（◎）、改善（○）、無変化（△）、増加（×）の４段階で評価し、各群で最も人数の多い評価をその試験試料又は対照のしみ・そばかすに対する効果の評価とした。この評価結果はいずれの群においても、１５名中１１名以上が同じ評価となった。また、被験者は、試験開始４日前から試験終了まで、直射日光には過度に、顔面をさらさないように指導した。【００６９】
【表９】
0005551582.tif 000010
【００７０】
表９から明らかなように、対照塗布群では、塗布前と比べて、しみ・そばかすに変化は認められなかった。これに対して、糖転移ビタミンＰを配合した試験試料を塗布した場合には、いずれの場合にも、塗布９０日目から塗布前と比べて、しみ・そばかすの改善が認められ、糖転移ナリンジン（試験試料１）及び糖転移ヘスペリジン（試験試料２）を配合したクリームでは、塗布１８０日目でその効果が顕著となった。また、試験期間中及び試験終了後も、皮膚の違和感、発赤、刺激などの不具合を訴える被験者はいなかった。この結果は、糖転移ビタミンＰを配合した皮膚外用剤は、安全で、且つ、皮膚に対して優れた美白効果を有することを物語っている。また、その改善効果は、糖転移ナリンジン及び糖転移ヘスペリジンが強いことを物語っている。【００７１】
＜実験１０：過酸化脂質及び生体内のアスコルビン酸に及ぼす糖転移ビタミンＰの影響＞
実験４、６或いは７において糖転移ビタミンＰが、生体内の脂質の代謝やラジカルに対して影響を及ぼしていることが確認されたので、皮膚に悪影響を及ぼすことが知られている生体内の過酸化脂質、及び、過酸化脂質の消去に関与する生体内のアスコルビン酸に及ぼす糖転移ビタミンＰの影響を調べる実験を以下のようにおこなった。すなわち、健康診断で比較的血中のコレステロール値が高いと判定されたボランティアの６０名（２９乃至５８歳、コレステロール値２００乃至２８０ｍｇ／ｄｌ）を被験者として無作為に１５名ずつ４群に分けて、３群各群１５名の被験者には、それぞれ、実験１で使用した糖転移ビタミンＰの粉末のいずれか０．５ｇを試験試料として、１日１回、毎日２５週間にわたって経口摂取させた。残りの１群１５名は対照として、糖転移ビタミンＰの摂取はおこなわなかった。試験期間中、食事制限はおこなわなかった。摂取１２週間及び２５週間で採血を行い、血清中の過酸化脂質量を、市販の過酸化脂質測定キット（Ｃａｙｍａｎ  ＣＨＥＭＩＫＡＬ社販売）を用いて測定した。また、血中アスコルビン酸量の測定は、臨床検査会社に依頼した。その測定結果に基づき、各群毎に、血清中の過酸化脂質量とアスコルビン酸量の平均を計算して、下記の式により、過酸化脂質低減率（％）及びアスコルビン酸低減抑制率（％）を求めて表１０に示す。
＜過酸化脂質抑制率（％）の計算方法＞
過酸化脂質低減率（％）＝１００−｛（Ａ÷Ｂ）×１００｝
Ａ：試験試料摂取のとき血中過酸化脂質量
Ｂ：試験試料無摂取のときの血中過酸化脂質量
＜アスコルビン酸低減抑制率（％）の計算方法＞
アスコルビン酸低減抑制率（％）＝｛（Ａ÷Ｂ）×１００｝−１００
Ａ：試験試料摂取のとき血中アスコルビン酸量
Ｂ：試験試料無摂取のときの血中アスコルビン酸量【００７２】
【表１０】
0005551582.tif 000011
【００７３】
表１０から明らかなように、糖転移ビタミンＰを摂取すると、血中の過酸化脂質低減率が、無摂取の場合に比べて、経時的に上昇した。また、血中のアスコルビン酸低減抑制率も、無摂取の場合に比べて経時的に増加した。また、試験期間中及び試験終了後も、違和感、発赤、刺激、下痢、発熱、悪心・嘔吐などの不具合を訴える被験者はいなかった。これらの効果の強さの点では、糖転移ナリンジン及び糖転移ヘスペリジンが特に優れている。この結果は、糖転移ビタミンＰを経口摂取することにより、効果的に体内の過酸化脂質を低減することができるだけでなく、ストレスなどに伴う生体内のアスコルビン酸の低減も抑制できることを物語っている。【００７４】
＜実験１１：シワの形成に及ぼす糖転移ビタミンＰと他の成分との併用の影響＞
実験２において、糖転移ビタミンＰに強いシワの改善効果がみとめられたので、糖転移ビタミンＰと他の成分との併用によるシワに及ぼす影響を調べる試験を以下のように行った。すなわち、表１１に示す配合処方のように、ビタミンＰとして糖転移ナリンジンを配合したクリーム（試験試料１）。糖転移ナリンジンと共に藍草水抽出物（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名「藍ルーロス」、１，３−ブチレングリコールを３０％含有する藍草の水抽出物、藍草由来の固形分を１．５％含有）、シクロニゲロシルニゲロース（株式会社林原生物化学研究所製造）、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名「ＡＡ２Ｇ」）又は感光素１０１号（株式会社林原生物化学研究所販売）のいずれかを配合したクリーム（各々、試験試料２、試験試料４、試験試料６、試験試料８）、糖転移ナリンジンを含まず、藍草水抽出物、シクロニゲロシルニゲロース、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド又は感光素１０１号のいずれかを配合したクリーム（各々、試験試料３、試験試料５、試験試料７、試験試料９）、及び、糖転移ナリンジンも藍草抽出物、シクロニゲロシルニゲロース、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド又は感光素１０１号のいずれをも含まないクリーム（対照）を調製した。ボランティアの女性１００名（３４乃至５８歳）を、被験者として無作為に１０名ずつ１０群に分け、９群各群１０名の被験者には、それぞれ、試験試料のいずれかを、残り１群１０名には対照のクリームを、朝晩２回、９０日間、毎日顔面に均一に塗布させた。塗布前、塗布４５日目及び塗布９０日目に、目尻と耳の位置から特定した部位に、円形のカップをおいて、医療用のシリコンを塗布し、直径２０ｍｍの範囲の皮膚のレプリカを調製した。各被験者の試験試料又は対照の、塗布前、塗布４５日目及び塗布９０日目のレプリカの凹凸の程度をオプティカルプロフィルメーターで測定して、実験２と同じ計算方法で算出したシワの低減率（％）を表１１に併せて示す。なお、被験者は、試験開始４日前から試験終了まで、直射日光には過度に、顔面をさらさないように指導した。【００７５】
【表１１】
0005551582.tif 000012
【００７６】
表１１から明らかなように、対照塗布群のシワの低減率は、塗布４５日目及び９０日目で、上昇はわずかしかないのに対して、糖転移ナリンジンのみを配合した試験試料（試験試料１）塗布群、糖転移ナリンジンと共に藍草抽出物、シクロニゲロシルニゲロース、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド又は感光素１０１号のいずれかを配合した試験試料（試験試料２、試験試料４、試験試料６及び試験試料８）塗布群は、いずれの場合も、塗布前に比してシワの低減率が有意に上昇し、塗布９０日目でより顕著となった。また、糖転移ナリンジンを含まず藍草水抽出物、シクロニゲロシルニゲロース、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド又は感光素１０１号のいずれかを配合した試験試料（試験試料３、試験試料５、試験試料７及び試験試料９）塗布群では、シクロニゲロシルニゲロースを配合した試験試料（試験試料５）塗布群以外は、いずれの場合も、塗布前に比してシワの低減率が有意に上昇し、塗布９０日目でより顕著となった。対照に比して有意のシワの改善がみとめられた群間で比較すると、糖転移ナリンジンと共に藍草水抽出物、シクロニゲロシルニゲロース、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド又は感光素１０１号のいずれかを配合した試験試料（試験試料２、試験試料４、試験試料６及び試験試料８）塗布群でその効果が顕著に認められ、なかでも、糖転移ナリンジンと共に藍草水抽出物又はＬ−アスコルビン酸−２−グルコシドを配合した試験試料（試験試料２及び試験試料６）塗布群のシワの低減率の上昇が特に顕著であった。また、試験期間中及び試験終了後も、皮膚の違和感、発赤、刺激などの不具合を訴える被験者はいなかった。この結果は、糖転移ビタミンＰによるシワの低減効果は、藍草抽出物、シクロニゲロシルニゲロース、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド又は感光素１０１号併用することで増強され、その増強効果は、藍草抽出物及び／又はＬ−アスコルビン酸−２−グルコシドと併用した場合に特に効果的であることを物語っている。【００７７】
実験１乃至１１の結果は、ビタミンＰは、エラスターゼ活性阻害作用に加えて、痩身効果、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減及び生体内のアスコルビン酸低減抑制などの各種作用を併せ持つことから、有効成分としてビタミンＰを１種又は２種以上配合したエラスターゼ活性阻害剤は、抗シワ効果を有し、顔面などの皮膚色をくすみがなく明るい生き生きとしたものに改善するとともに、日焼けなどに伴うしみ、そばかすなどの発生も抑制することができ、皮膚の老化防止に有効であることを物語っている。また、効果の点からは糖転移ビタミンＰを有効成分として配合したものが望ましいことを物語っている。しかも、ボランティアを被験者とした試験において、いずれの場合にも、試験期間中及び試験終了後も、違和感、発赤、刺激などの不具合を訴える被験者はいなかったことから、ビタミンＰを配合した皮膚外用或いは経口摂取用のエラスターゼ活性阻害剤は、安全性にも優れていることを物語っている。【００７８】
以下、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明の技術範囲は、これらの実施例により何ら限定的に解釈されるべきものではない。
【実施例１】
【００７９】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、液状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
グリセリン                                                  ５
１，３−ブチレングリコール                              ６．５
ポリオキシエチレン（２０Ｅ．Ｏ．）ソルビタン
モノラウリル酸エステル                            １．２
エチルアルコール                                            ８
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（株式会社
林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」、
無水物換算でα−マルトシルα，α−トレハロー
スを主成分とするグリコシルトレハロース約６０
％と水添水飴約４０％とを含有）                        ５
藍草水抽出物（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名
「藍ルーロス」、１，３−ブチレングリコールを
３０％含有する藍草の水抽出物）                        １
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                    １
クエン酸                                                ０．１
クエン酸ナトリウム                                      ０．３
パラメトキシケイ皮酸−２−エチルヘキシル                ０．１
ヒアルロン酸（平均分子量約１万）                        ０．１
感光素２０１号                                      ０．００２
香料                                                      適量
精製水                                                    残量【００８０】
本品は、抗シワ効果に優れ、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制及び／又は老化防止用の化粧水の形態の皮膚外用剤としても有用である。
【実施例２】
【００８１】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
実施例１の処方のうち、糖転移ナリンジン１％を、糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名「アルファグルコシルヘスペリジン」）１％、糖転移ルチン（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名「アルファグルコシルルチン」）１％或いは糖転移エスクリン（株式会社林原生物化学研究所製造、グリコシルエスクリンを無水物換算で約６０％含有）１％に変更した以外は、実施例１と同じ処方で液状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。【００８２】
本品は、抗シワ効果に優れ、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制及び／又は老化防止用の化粧水の形態の皮膚外用剤としても有用である。
【実施例３】
【００８３】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、乳液状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
ポリオキシエチレン（２０Ｅ．Ｏ．）ポリオキシプロピ
レン（２Ｅ．Ｏ．）セチルアルコール                    １
シリコンＫＦ９６（２０ｃｓ）（信越化学工業株式会社販売）    ２
流動パラフィン（中粘度）                                    ３
１，３−ブチレングリコール                                  ５
４−ｎ−ブチルレゾルシノール                            ０．３
グリセリン                                                  ２
エチルアルコール                                          １５
カルボキシビニルポリマー                                ０．３
ヒドロキシプロピルセルロース                            ０．１
２−アミノメチルプロパノール                            ０．１
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度９６％）                ０．５
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド（株式会社林原生
物化学研究所販売、商品名「ＡＡ２Ｇ」）                １
感光素１０１号                                      ０．００５
防腐剤                                                    適量
ｐＨ調整剤                                                適量
精製水を加えて全量を１００％とする。【００８４】
本品は、抗シワ効果に優れ、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制及び／又は老化防止用の乳液形態の皮膚外用剤としても有用である。また、本品は、皮膚の浸透性と延展性に優れている。
【実施例４】
【００８５】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
実施例３の処方のうち、糖転移ナリンジン０．５％を、糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名「アルファグルコシルヘスペリジン」）０．５％、糖転移ルチン（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名「アルファグルコシルルチン」）０．５％或いは糖転移エスクリン（株式会社林原生物化学研究所製造、グリコシルエスクリンを無水物換算で約６０％含有）０．５％に変更した以外は、実施例３と同じ処方で乳液状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。【００８６】
本品は、抗シワ効果に加え、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制及び／又は老化防止用の乳液形態の皮膚外用剤としても有用である。また、本品は、皮膚の浸透性と延展性に優れている。
【実施例５】
【００８７】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、乳液状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
エチルアルコール                                          １５
ポリオキシエチレン（２０Ｅ．Ｏ．）ポリオキシプロピ
レン（２Ｅ．Ｏ．）セチルアルコール                    １
シリコンＫＦ９６（２０ｃｓ）（信越化学工業株式会社販売）    ２
流動パラフィン（中粘度）                                    ３
１，３−ブチレングリコール                                  ５
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド                          ２
グリセリン                                                  ２
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（株式会社
林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」）        １
カルボキシビニルポリマー                                ０．３
ヒドロキシプロピルセルロース                            ０．１
２−アミノメチルプロパノール                            ０．１
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                １．５
糖転移エスクリン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グリコシルエスクリンの純度６０％）                ０．５
ヒアルロン酸ナトリウム                                ０．０２
感光素１０１号                                      ０．００５
防腐剤                                                    適量
精製水を加えて全量を１００％とする。【００８８】
本品は、抗シワ効果に優れ、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制及び／又は老化防止用の乳液形態の皮膚外用剤としても有用である。また、本品は、皮膚の浸透性と延展性に優れている。
【実施例６】
【００８９】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
実施例５の処方のうち、糖転移ナリンジン２％を、糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名「アルファグルコシルヘスペリジン」）２％或いは糖転移ルチン（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名「アルファグルコシルルチン」）２％に変更した以外は、実施例５と同じ処方で乳液状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。【００９０】
本品は、抗シワ効果に優れ、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制及び／又は老化防止用の乳液形態の皮膚外用剤としても有用である。また、本品は、皮膚の浸透性と延展性に優れている。
【実施例７】
【００９１】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、液状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
感光素３０１号                                      ０．００５
グリセリン                                                  ２
含水結晶α，α−トレハロース                          ０．０３
糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「アルファグルコシルヘスペリジン」）    ０．００１
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）            ０．００１
糖転移ルチン（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「アルファグルコシルルチン」）          ０．００１
藍草水抽出物（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「藍ルーロス」、１，３−ブチレング
リコールを３０％含有する藍草の水抽出物）          ０．５
海藻エキス                                              ０．１
ボタンエキス                                            ０．１
センブリエキス                                          ０．１
エタノール                                                ４３
精製水を加えて全量を１００％とする。
本品は、育毛効果に優れ、発毛を促進し、髪密度をアップして髪に張りを与えることができる。また、本品は、頭皮の炎症や老化防止効果を有し、抗菌性も強いので、ふけの発生、かゆみや脱毛を抑制し、頭皮を清潔に保つことのできるヘアトニック形態の皮膚外用剤として有用である。また、本品は毛根を植毛した頭皮に使用すると毛乳頭細胞の増殖を促進し、頭皮の血行を促進し、移植した毛根の頭皮への着生率の向上にも優れた効果を示す。
【実施例８】
【００９２】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、クリーム状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
ミリスチン酸ポリグリセリル−１０                            ３
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造）    ０．０５
糖転移ルチン（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「アルファグルコシルルチン」）            ０．０５
糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「アルファグルコシルヘスペリジン」）      ０．０１
ラノリン                                                ０．５
オクチルドデカノール                                        ２
オクタン酸セチル                                            ３
スクワラン                                                  ５
ジメチコン                                              ０．３
ベヘニルアルコール                                          ３
セチルアルコール                                            ２
バチルアルコール                                            １
パルミチン酸セチル                                      １．５
ステアリン酸グリセリル                                  ２．３
水添レシチン                                            ０．１
ブチレングリコール                                          ５
ペンチレングリコール                                    ３．５
セラミド                                                ０．５
ステアリン酸                                            ０．５
グリセリン                                                  ５
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（株式会社
林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」）        ２
α，α−トレハロース（株式会社林原生物化学研究所
販売、化粧品用）                                ０．０５
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド                          ２
藍草水抽出物（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「藍ルーロス」、１，３−ブチレング
リコールを３０％含有する藍草の水抽出物）              １
プルラン                                                ０．１
グレープフルーツ果皮油                              ０．００１
ラベンダー油                                        ０．００１
ザクロエキス                                        ０．００１
オオバクエキス                                      ０．００１
エーデルワイスエキス                                ０．００１
加水分解コラーゲン                                  ０．００１
感光素２０１号                                      ０．００１
ヒアルロン酸ナトリウム                              ０．００１
加水分解ヒアルロン酸（平均分子量約１万）            ０．００２
アルブチン                                          ０．００５
トコフェロール                                      ０．００５
ユビキノン                                          ０．００１
キサンタンガム                                      ０．００１
カルボマー                                          ０．００１
水酸化カリウム                                            適量
精製水を加えて全量を１００％とする。【００９３】
本品は、抗シワ効果に優れ、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制及び／又は老化防止用のクリーム形態の皮膚外用剤としても有用である。また、本品は、皮膚の浸透性と延展性に優れている。
【実施例９】
【００９４】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、軟固状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
精製水                                                  １．５
グリセリン                                              ０．２
プルラン                                                ０．５
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                ０．１
糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研究所販売、商
品名、「アルファグルコシルヘスペリジン」）        ０．１
マカデミアナッツ油脂肪酸コレステリル                        ３
ＰＯＥ（２５）ＰＯＰ（２０）２−テトラデシルエーテル        １
スクワラン                                                １０
カルナバロウ                                                ２
キャンデリラロウ                                            ８
セレシン                                                  １４
イソステアリン酸ジグリセライド                            ３３
シクロニゲロシルニゲロース（株式会社林原生物化学
研究所製造）                                          ２
ヒマシ油                                              １７．２
二酸化チタン                                            ４．５
赤色２０１号                                                １
赤色２０２号                                                ２【００９５】
本品は、抗シワ効果に優れ、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制及び／又は老化防止用の口紅形態の皮膚外用剤としても有用である。また、本品は、口唇での浸透性と延展性に優れている。
【実施例１０】
【００９６】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、軟固状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
精製水                                                  １．５
エデト酸三ナトリウム                                  ０．０１
グリセリン                                              ０．２
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                ０．１
糖転移ルチン（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「アルファグルコシルルチン」）              ０．７
マカデミアナッツ油脂肪酸コレステリル                        ３
ジメチコーンポリオール                                  ０．５
メチルフェニルポリシロキサン                              １０
マイクロクリスタリンワックス                                １
セレシン                                                  １４
トリイソオクタン酸グリセリル                              ３５
水添ポリブテン                                            １０
メトキシケイヒ酸オクチル                                    ５
ジブチルヒドロキシトルエン                              ０．１
酢酸トコフェロール                                      ０．１
トリオクタン酸トリメチロールプロパン                      適量
感光素１０１号                                      ０．００５
ベンガラ                                                    ２
二酸化チタン                                                ４【００９７】
本品は、抗シワ効果に優れ、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制及び／又は老化防止用の口紅形態の皮膚外用剤としても有用である。また、本品は、口唇での浸透性と延展性に優れている。
【実施例１１】
【００９８】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、液状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
ピロクトンオラミン                                      ０．５
β−グリチルレチン酸                                  ０．０２
エデト酸二ナトリウム                                    ０．３
感光素２０１号                                      ０．００２
クエン酸                                                ０．３
Ｎ−ヤシ油脂肪酸アシル−ＤＬ−アラニン
トリエタノールアミン液                              ２０
Ｎ−ヤシ油脂肪酸アシル−ＤＬ−グルタミン酸
トリエタノールアミン液                                ２
ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン液                      １５
ラウリルジメチルアミノ酢酸ベタイン                          ３
ヤシ油脂肪酸時エタノールアミド                              ２
ポリ塩化ジメチルメチレンピペリジウム液                  ０．２
藍草水抽出物（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「藍ルーロス」、１，３−ブチレング
リコールを３０％含有する藍草の水抽出物）          ０．１
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                ０．５
糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「アルファグルコシルヘスペリジン」）        ０．５
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（株式会社
林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」）        １
センブリエキス                                        ０．０２
フェノキシエタノール                                    ０．５
プルラン                                            ０．００１
香料                                                    ０．２
感光素１０１号                                      ０．００５
精製水を加えて全量を１００％とする。
本品は、頭皮の炎症や老化防止効果を有し、抗菌性も強いので、育毛効果に優れ、ふけや脱毛を抑制し、頭皮を清潔に保つことのできるシャンプー形態の皮膚外用剤として有用である。
【実施例１２】
【００９９】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、液状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
ピロクトンオラミン                                      ０．２
エデト酸二ナトリウム                                    ０．３
グリチルレチン酸ステアリル                            ０．０５
感光素２０１号                                      ０．００２
感光素３０１号                                      ０．００１
クエン酸                                                ０．３
センブリエキス                                        ０．０２
１，３−ブチレングリコール                                  ３
ステアリン酸ジメチルアミノプロピルアミド                    １
塩化ｏ−［２−ヒドロキシ−３−（トリメチルアンモニオ）
プロピル］ヒドロキシエチルセルロース              ０．５
硬化油                                                      ４
濃グリセリン                                                ３
ワセリン                                                    ５
ホホバ油                                                ０．１
パルミチン酸イソプロピル                                １．５
アミノエチルアミノプロピルシロキサン・ジメチル
シロキサン共重合体エマルジョン                        １
パルミチン酸イソプロピル                                    １
ヒドロキシエチルセルロース                              ０．５
プルラン                                              ０．０１
ヒアルロン酸ナトリウム（平均分子量約９０万）          ０．０１
ヒアルロン酸（平均分子量約１万）                      ０．０２
ポリオキシエチレンラウリルエーテル                    ０．０１
藍草水抽出物（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「藍ルーロス」、１，３−ブチレング
リコールを３０％含有する藍草の水抽出物）          ０．５
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                ０．５
糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「アルファグルコシルヘスペリジ              ０．５
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（株式会社
林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」）    １．５
香料                                                    ０．２
感光素１０１号                                      ０．００５
精製水を加えて全量を１００％とする。
本品は、頭皮の炎症や老化防止効果を有し、血行促進作用もあり、抗菌性も強いので、育毛効果に優れ、脱毛を抑制し、頭皮を清潔に保つことのできるヘアコンディショナー形態の皮膚外用剤として有用である。
【実施例１３】
【０１００】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、固状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。すなわち、質量比４対１の牛脂及びヤシ油を通常のけん化・塩析法に供して得られるニートソープ９６．５質量部に、藍草水抽出物粉末１質量部、α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」）１．５質量部、Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名「ＡＡ２Ｇ」）、白糖０．５質量部、糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、α−グリコシルナリンジン純度６５％）０．５質量部、糖転移イソケルシトリン（株式会社林原生物化学研究所製造、α−イソケルシトリン純度６５％）０．５質量部、マルチトール１質量部、感光素３０１号０．０００１質量部と、適量の香料を加え、均一に混合した後、枠に流し込み、冷却・固化させて固状のエラスターゼ活性阻害剤を製造した。本品は、糖転移ナリンジン及び糖転移イソケルシトリンによる、エラスターゼ活性阻害、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制などの効果に優れ、使用後も肌がかさつくこともなく、使用感に優れた石けん形態の皮膚外用剤として有用である。また、本品は老化防止効果にも優れている。
【実施例１４】
【０１０１】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、ペースト状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
第２リン酸カルシウム                                      ４５
プルラン                                                ２．９
ラウリル硫酸ナトリウム                                  １．５
グリセリン                                                ２０
ポリオキシエチレンソルビタンラウレート                  ０．５
ソルビトール                                              １０
マルチトール                                                ６
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                ０．５
藍草水抽出物（株式会社林原生物化学研究所販売、
１，３−ブチレングリコール無含有）                    １
テトラヒドロクルクミン                                  ０．５
防腐剤                                                    適量
精製水を加えて全量を１００％とする。【０１０２】
本品は、歯肉の血行促進、歯茎のはりや弾性を保つとともに、消炎効果に優れ、口腔の健康を維持・増進する練歯磨形態の皮膚外用剤として有用である。
【実施例１５】
【０１０３】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
実施例１４の処方のうち、糖転移ナリンジン２％を、糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名「アルファグルコシルヘスペリジン」）２％或いは糖転移ルチン（株式会社林原生物化学研究所販売、商品名「アルファグルコシルルチン」）２％に変更した以外は、実施例１４と同じ処方でペースト状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。【０１０４】
本品は、歯肉の血行促進、歯茎のはりや弾性を保つとともに、消炎効果に優れ、口腔の健康を維持・増進する練歯磨形態の皮膚外用剤として有用である。
【実施例１６】
【０１０５】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、ペースト状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
β−グリチルリチン酸                                  ０．０５
塩化セチルピリジウム                                  ０．０５
リン酸水素カルシウム                                      ２９
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                ０．１
糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「アルファグルコシルヘスペリジン」）        ０．９
濃グリセリン                                              ２０
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（株式会社
林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」）        ９
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド                          １
無水ケイ酸                                                  ５
酸化チタン                                                  ２
ラウリル硫酸ナトリウム                                  １．２
カルボキシメチルセルロースナトリウム                    １．２
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油                              １
エタノール                                              ０．５
プロポリスエキス（株式会社林原生物化学研究所販売）      ０．５
リン酸マグネシウム                                      ０．３
ラウロイルサルコシンナトリウム                          ０．２
マルチトール                                            ０．１
パラオキシ安息香酸エステル                              ０．１
香料                                                      適量
精製水を加えて全量を１００％とする。【０１０６】
本品は、糖転移ナリンジンを含有しているので、歯肉の血行促進、歯茎のはりや弾性を保つとともに、消炎効果に優れ、口腔の健康を維持・増進する練歯磨形態の皮膚外用剤として有用である。
【実施例１７】
【０１０７】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法によりジェル状エラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
β−グリチルリチン酸                                  ０．０５
塩化セチルピリジウム                                  ０．０５
ソルビトール液                                            ３０
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                ０．１
糖転移ルチン（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「αＧルチン」）                            ０．９
糖転移イソケルシトリン（株式会社林原生物化学研究所
製造、グルコシルイソケルシトリンの純度６５％）    ０．２
藍草水抽出物（株式会社林原生物化学研究所製造、
１，３−ブチレングリコール無含有）                  ２０
濃グリセリン                                              １０
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（株式会社
林原生物化学研究所販売、商品名「トルナーレ」）        ８
含水ケイ酸                                                  ９
無水ケイ酸                                                  ７
シクロニゲロシルニゲロース（株式会社林原生物化学
研究所製造）                                          ２
キシリトール                                                ３
カルボキシメチルセルロースナトリウム                    １．２
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油                          ０．５
エタノール                                              ０．５
プロポリスエキス（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「林原プロポリス」）                        ０．５
マルチトール                                            ０．１
パラオキシ安息香酸エステル                              ０．１
香料                                                      適量
精製水を加えて全量を１００％とする。【０１０８】
本品は、歯肉の血行促進、歯茎のはりや弾性を保つとともに、消炎効果に優れ、口腔の健康を維持・増進する歯磨形態の皮膚外用剤として有用である。
【実施例１８】
【０１０９】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により液状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
エタノール                                                １５
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有シラップ（株式
会社林原商事販売、商品名「ハローデックス」）          ８
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                ０．１
糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「アルファグルコシルヘスペリジン」）        ０．５
実験１で使用した糖転移ルチンとイソケルシトリンとを
等モル混合した標品                                ０．５
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド                          １
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油                              ２
サッカリンナトリウム                                  ０．０２
安息香酸ナトリウム                                    ０．０５
リン酸二水素ナトリウム                                  ０．１
着色料                                                    適量
香料                                                      適量
水                                                    ７２．７【０１１０】
本品は、歯茎のはりや弾性を保つとともに、シェーグレン症候群などによるドライマウスの改善、口腔内の炎症や味覚障害などの予防や治療に好適であり、しかも、使用感も良好なマウスウオッシュ形態の皮膚外用剤として有用である。
【実施例１９】
【０１１１】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、ペースト状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
酢酸ナトリウム                                              １
乳酸ナトリウム                                              ４
グリセリン                                                １０
ハッカ油                                                ０．５
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                    ３
Ｌ―アスコルビン酸―２−グルコシド                          ２
ワセリン                                                  ４８
木ロウ                                                    １０
ラノリン                                                  １０
ゴマ油                                                １０．５
シクロニゲロシルニゲロース（株式会社林原生物化学
研究所製造）                                          １【０１１２】
本品は、皮膚のシワの発生の抑制効果に優れ、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制及び／又は老化防止用の軟膏形態の皮膚外用剤としても有用である。また、本品は、皮膚の浸透性と延展性に優れ、皮膚の健康を維持・増進する目的でも使用することができる。
【実施例２０】
【０１１３】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、ペースト状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
藍草水抽出物（株式会社林原生物化学研究所販売、
１，３−ブチレングリコール無含有）                  ３５
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
α−グルコシルナリンジンの純度６５％）            ０．２
感光素２０１号（０．１％エタノール溶液）                    ３
ポリエチレングリコール１５００                            ６２【０１１４】
本品は、皮膚のシワの発生の抑制効果に優れ、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制及び／又は老化防止用の軟膏形態の皮膚外用剤として有用である。また、本品は、皮膚の浸透性と延展性に優れ、皮膚の健康を維持・増進する目的や、乾皮症、かゆみ止め、抗炎症、褥瘡（とこずれ）改善などの目的でも使用することができる。
【実施例２１】
【０１１５】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、ゼリー状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
グリセリン                                                １５
エタノール                                                １２
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                    ７
シクロニゲロシルニゲロース（株式会社林原生物化学
研究所製造）                                      ０．５
ハッカ油                                                ０．５
苦汁水溶液（硬度５４，０００ｍｇ／ｍｌ）                １．５
ゲル化基剤（ハイビスワコー１０４）                    ０．６５
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオリエート      ０．５
感光素２０１号                                      ０．００５
２，２´，２´´−ニトリロトリエタノール                    １【０１１６】
本品は、皮膚のシワの抑制効果に優れ、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制及び／又は老化防止用のゼリー軟膏形態の皮膚外用剤としても有用である。また、本品は、皮膚の浸透性と延展性に優れ、皮膚の健康を維持・増進する目的でも使用できる。
【実施例２２】
【０１１７】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、粉末状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原生物化学
研究所販売、化粧用）                            ７０．５
炭酸水素ナトリウム                                    １２．５
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                ７．５
国際公開ＷＯ２００３／０１６３２５号明細書の実施
例９に記載の方法により調製したα，α−トレ
ハロースと苦汁とを質量比で１４４：２０２の
割合で含有する粉末                                ５．５
シクロニゲロシルニゲロース（株式会社林原生物化学
研究所製造）                                          ２
感光素２０１号                                    ０．００１５【０１１８】
本品は、皮膚のシワの抑制、改善効果に優れ、且つ、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制及び／又は老化防止などの効果も有することから、皮膚の代謝を改善し、抗老化効果に優れた浴用剤形態の皮膚外用剤として有用である。
【実施例２３】
【０１１９】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、フィルム状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
プルラン（株式会社林原商事販売、食品添加物用）          ２２
カラギーナン                                              １
キサンタンガム                                      ０．１５
ローカストビーンガム                                ０．１５
マルチトール                                          ０．８
脱イオン水                                        ６９．２５
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                １．５
糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「アルファグルコシルヘスペリジン」）        １．５
乳化ミントオイル                                      ２．６
プロポリスエキス                                      ０．５
スクラロース                                          ０．３
クエン酸                                            ０．２５【０１２０】
本品は、糖転移ナリンジン及び糖転移ヘスペリジンを含有しているので、皮膚のシワの抑制効果に優れ、皮膚や歯茎のはりや弾力を保持し、皮膚の代謝を改善し、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制、抗老化、疲労回復、ストレス低減、睡眠の質の向上などの効果に優れた口中清涼フィルム形態の経口摂取物として有用である。
【実施例２４】
【０１２１】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、チューインガム形態のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
ガムベース                                                ３０
ショ糖                                                ３９．７
含水結晶α，α−トレハロース（株式会社林原商事販売、
商品名「トレハ」）                                  ３０
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                ０．５
糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「アルファグルコシルヘスペリジン」）        ２．５
香料                                                      適量
色素                                                      適量
全量を１００％とする。【０１２２】
本品は、糖転移ナリンジン及び糖転移ヘスペリジンを含有しているので、皮膚のシワの抑制効果に優れ、皮膚や歯茎のはりや弾力を保持し、皮膚の代謝を改善し、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制、抗老化などの効果に優れたチューインガム形態の経口摂取用組成物として有用である。また、本品はこれらの作用効果を標榜して販売することもできる。また、本品は長期間摂取しても、副作用がなく、安心して利用できる。
【実施例２５】
【０１２３】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
以下の配合処方に基づき、常法により、固状のエラスターゼ活性阻害剤を調製した。
（処方）                                                （％）
イチョウ葉エキス粉末                                      ３０
大麦若葉                                                  ２０
ラクトスクロース含有糖質粉末（株式会社林原商事販売、
商品名「乳果オリゴ  ＬＳ−９０Ｐ」）            １３．５
還元麦芽糖（株式会社林原商事販売、
商品名「粉末マビット」）                        １３．５
糖転移ナリンジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）              １．２５
糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「アルファグルコシルヘスペリジン」）          １５
糖転移アスコルビン酸（株式会社林原商事販売、
商品名「アスコフレッシュ」）                          ２
ニガウリ抽出物                                          ３．５
Ｌ−シトルリン                                              １
香料                                                      適量
色素                                                      適量
全量を１００％とする。【０１２４】
本品は、糖転移ナリンジン及び糖転移ヘスペリジンを含有しているので、皮膚のシワの抑制効果に優れ、皮膚や歯茎のはりや弾力を保持し、皮膚の代謝を改善し、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制、抗老化などの効果に優れた粉末形態の経口摂取用組成物として有用である。また、本品はこれらの作用効果を標榜して販売することもできる。また、本品は長期間摂取しても、副作用がなく、安心して利用できる。
【実施例２６】
【０１２５】
＜エラスターゼ活性阻害剤＞
下記の成分を配合し、経口流動食形態のエラスターゼ活性阻害剤を得た。
（処方）                                                （％）
ラクトスクロース                                            ５
糖転移ナリジン（株式会社林原生物化学研究所製造、
グルコシルナリンジンの純度６５％）                    ５
糖転移ヘスペリジン（株式会社林原生物化学研究所販売、
商品名「林原ヘスペリジンＳ」）                        ５
脱脂粉乳                                                  ３７
全粉乳                                                    １２
マルトテトラオース高含有水飴                              ４０
難消化性デキストリン（松谷化学工業株式会社販売、
商品名「ファイバーソル２」）                      ０．５
α，α−トレハロース                                        ３
糖転移アスコルビン酸（株式会社林原商事販売、
商品名「アスコフレッシュ」）                          １
Ｌ−シトルリン                                              １
ビタミンＡ                                                適量
ビタミンＤ                                                適量
塩酸チアミン                                              適量
リボフラビン                                              適量
塩酸ピリドキシン                                          適量
シアノコバラミン                                          適量
酒石酸水素コリン                                          適量
ニコチン酸アミド                                          適量
パントテン酸カルシウム                                    適量
酢酸トコフェロール                                        適量
硫酸鉄                                                    適量
リン酸水素カルシウム                                      適量
本品を適量の水に溶解し、経口摂取すれば、通常の食事の摂取ができない患者の栄養補給が可能な上に、本品は、糖転移ナリンジン及び糖転移ヘスペリジンを含有しているので、皮膚のシワの抑制効果に優れ、皮膚や歯茎のはりや弾力を保持し、皮膚の代謝を改善し、痩身、血行促進、リパーゼ活性阻害、ラジカル除去、抗炎症、美白、生体内の過酸化脂質低減、生体内のアスコルビン酸低減抑制、抗老化などの効果に優れた経口摂取用組成物として有用である。また、本品はこれらの作用効果を標榜して販売することもできる。また、本品は長期間摂取しても、副作用がなく、安心して利用できる。
【産業上の利用可能性】
【０１２６】
以上のように、有効成分としてビタミンＰの１種又は２種以上を含有する本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、エラスターゼ活性の阻害作用はもとより、痩身作用、血行促進作用、リパーゼ活性阻害活性、ラジカル除去作用、抗炎症作用、美白作用などの多彩な生理活性を有し、皮膚に対して使用すると、シワの発生を抑制し、皮膚の張り・弾力を回復・維持することができる。また、本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、使用部位の皮膚及びその近傍の炎症の抑制、血行を改善して、肌のくすみを防止し、余分な脂肪の分解にも効果を発揮するので、皮膚の老化を防止し、若々しい肌の状態を維持する優れた効果を奏する。さらに、本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、痩身作用、血行促進作用、リパーゼ活性阻害作用、ラジカル除去作用、抗炎症作用、生生体内過酸化脂質低減作用、体内アスコルビン酸低減抑制作用などの数々の生理作用を有しており、皮膚の皮脂成分の酸化防止や皮膚の酸化障害、皮膚の保護、アクネ治療、歯周病治療などにも利用することができる。また、有効成分としてビタミンＰの１種又は２種以上を含有する本発明のエラスターゼ活性阻害剤は、副作用の懸念がなく、安全で、使用感にも優れているので、快適に長期連用することができる。本発明は、斯くも顕著な作用効果を奏する発明であり、斯界に多大の貢献をする、誠に意義のある発明である。