(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
外表面を、銅からなる第１の膜（内膜）と、ニッケルからなる第２の膜（外膜）とからなる金属膜で被覆した、樹脂製の液体クロマトグラフ用カラム管。
【請求項２】
前記金属膜は、第１の膜の厚さが１００μｍから５００μｍであり、第２の膜の厚さが３００μｍから７００μｍであることを特徴とする請求項１に記載のカラム管。
【請求項３】
前記カラム管は、ポリエーテルエーテルケトンの外表面を金属膜で被覆したものである、請求項１または２のカラム管。
【請求項４】
請求項１から３いずれかのカラム管に分離材（ゲル）を充填してなる、液体クロマトグラフ用カラム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、外表面を金属膜で被覆した、樹脂製の液体クロマトグラフ用カラム管に関する。本発明は、詳しくは、外表面を金属膜で被覆することにより、その機械的強度と熱伝導性改良した樹脂製の液体クロマトグラフ用カラム管に関する。
【背景技術】
【０００２】
分離材（ゲル）をカラム管に充填したカラムを用いる液体クロマトグラフは、分離・分析の態様等に応じた分離材を選択することで多種多様な対象物に適用可能な、汎用性の高い分離・分析の手法である。液体クロマトグラフ用のカラム管には、一般的に、送液圧力に抗する機械的強度（耐圧性）、種々の溶離液に対する耐食性を含む安定性、任意の寸法形状のカラム管への加工容易性が求められる。
【０００３】
また近年では、分離材の高性能化等によって液体クロマトグラフにおける分離・分析を高速化することが要求されている。例えば分離材を微小化しカラム段数を上げることによって分離・分析を高速化することが可能であるが、この場合はカラムにかかる圧力が高くなるため、より高い圧力に耐えうる機械的強度を有するカラム管が必要になる。
【０００４】
更に、液体クロマトグラフでは、カラム温度が不安定であると対象物の溶出時間が安定せず、再現性が悪くなる、充填された分離材本来の性能が十分に発揮されず、ピークがブロードとなったり、１つのピークが２つ以上に割れる、という現象が発生する場合がある。ところが試料（対象物を含有する液体）や溶離液は、その安定性を保つために、比較的低温で保存されることが多く、試料が血液や血液に由来する生体試料であり、かつ、液体クロマトグラフによる分離・分析の対象がタンパク質等の生体物質である場合にはなおさらである。このように低温の試料や溶離液がカラムに流入するとカラム温度が不安定となり、上記のような現象が発生する原因となる。そこで従来は、図１、図２又は図３に示したように、カラムを一定の温度に保つことが提案されている。
【０００５】
図１の装置は、カラム（４）をカラム恒温槽（５）の内に設置することで、カラム（４）の温度を一定に保とうとするものである。そして図２の装置は、熱交換用コイル（８）をカラム恒温槽（５）内のカラム（４）の手前の配管に設置することで、試料注入装置（３）で注入された試料等を、一定温度に保たれた熱交換用コイル（８）を通過する間にカラム温度にまで昇温させ、試料や溶離液の温度をカラム（４）の温度と同一にして、カラム温度を安定に維持するものである（特許文献１参照）。そして図３の装置は、図２の装置における温度調節をより効率的に行うための改良であって、熱交換用コイル（８）をカラム恒温槽（６）とは別の加熱器（９）に収納し、カラム温度よりも高い温度に保つものである（たとえば特許文献２参照）。
【０００６】
以上の通り、今日の液体クロマトグラフ用のカラムは、高圧に耐えうる機械強度を有するという特徴の他に、少なくとも熱伝導性に優れ、カラム恒温槽内に設置することでカラム温度を一定に維持し得る特徴を有している必要がある。
【０００７】
従来から液体クロマトグラフィで使用されているカラム管には、ステンレス鋼（ＳＵＳ３１６等）に代表される金属製、ガラス製、ＰＥＥＫ（ポリエーテルエーテルケトン）に代表されるエンジニアリングプラスティック等の樹脂製など、多種多様なものが知られている。ステンレス鋼は、機械強度が高く、熱伝導性も良好であることに加え、原料の安価さから多用されているが、安定性については後述するガラス製又は樹脂製のカラム管に及ばない。
【０００８】
ガラスは高い安定性を有し、熱による伸延性が良好で微細管が作製し易いことに加えて、透明であるために内部の分離材の充填状況を観測しやすいという特徴を有する。しかしガラスは、ステンレス鋼等の金属と比較すると機械的強度が低く、かつ、熱伝導性が大きく劣り、また任意の寸法形状のカラム管への加工性という点では樹脂製カラム管に及ばない。ガラス製カラム管の機械的強度については、例えば特許文献３、５又は６に開示されたように、その外表面を金属膜で被覆することで向上することが可能である。例えば特許文献４は、内径４ｍｍ程度のガラス管カラムの外表面に低融点の接合金属(ハンダ等)を巻き付けて鋼管に挿入し、加熱することで当該接合金属を融解後冷却することにより、ガラス管と鋼管とを強固に接合して機械的強度を向上するものである。
【０００９】
【特許文献１】特許第３５０３３３１号公報
【特許文献２】実開平３−６５９６４号公報
【特許文献３】特開昭６２−１５３７５６号公報
【特許文献４】特開昭６４−８８３６３号公報
【特許文献５】特公平２−５４５０８号公報
【特許文献６】特開平３−１３５７６１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
樹脂製のカラム管は、ガラス製と比較しても遜色ないほどの高い安定性を有し、任意の寸法形状のカラム管への加工性という点でも優れている反面、機械的強度及び熱伝導性については金属製のカラム管におとる。例えば、樹脂材であるＰＥＥＫ（ポリエーテルエーテルケトン）の引張強度についてはステンレス鋼の１／７程度であり、熱伝導性についてはステンレス鋼に比べて５０倍以上、熱を伝えにくい。
【００１１】
そこで本発明が解決しようとする課題は、樹脂製のカラム管の機械強度及び熱伝導性を向上することによって、金属製、ガラス製に続く第３のカラム管を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らは、安定性及び加工性において他のカラム管を凌駕する特性を有する樹脂製のカラム管を素材として、その機械的強度及び熱伝導性の向上について鋭意検討を行った。その結果、金属イオンの混入を嫌うクロマトグラフや蛋白質の吸着を嫌う生体高分子のクロマトグラフの場面で多用されるＰＥＥＫに代表されるエンジニアリングプラスティック等の樹脂製カラム管について、その外表面を金属膜で被覆することにより、機械的強度及び熱伝導性を向上できることを見いだし、本発明を完成するに至った。すなわち本発明は、外表面を金属膜で被覆した、樹脂製の液体クロマトグラフ用カラム管である。ここで、前記金属膜は、好ましくは厚さが５０〜３０００μｍであることが好ましい。また、前記金属膜は、銅からなる第１の膜（内膜、すなわち樹脂製カラム管を直接被覆している膜）とニッケルからなる第２の膜（外膜、すなわち前記内膜である第１の銅の膜を被覆している膜）とからなることが好ましい。この場合、ニッケル膜の厚さが３００〜１０００μｍであるものが特に好ましい。また、ＰＥＥＫの外表面を金属膜で被覆したものであることが好ましい。更に本発明は、これらのいずれかのカラム管に分離材（ゲル）を充填してなる、液体クロマトグラフ用カラムである。以下、本発明を詳細に説明する。
【００１３】
表１は、従来の液体クロマトグラフ用カラム管のうち、ステンレス鋼製、ＰＥＥＫ製及びポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）製のカラム管の一般的な特徴を示した表であり、表２はカラム管の素材となる金属（ステンレス鋼、ニッケル又は銅）又は樹脂（ＰＥＥＫ又はＰＴＦＥ）の一般的な特徴を示した表である。
【００１４】
【表１】
0005482124.tif 000002
【００１５】
【表２】
0005482124.tif 000003
表から明らかなように、従来は、一般的には安価で機械的強度の高い（耐圧の高い）ステンレス製のカラム管が使用されているが、カラム管からの異物の溶出を排除したり、カラム管への試料の吸着を排除する必要がある場合にはＰＥＥＫやＰＴＦＥ等の樹脂製のカラム管が使用されている。しかし、樹脂製カラム管は機械的強度が弱く（耐圧が低く）、ＰＴＦＥとの比較では機械的強度の高いＰＥＥＫでさえ、その値（耐圧）はステンレス鋼の４倍の肉厚でも１５ＭＰａ程度である。
【００１６】
本発明のカラム管は、樹脂製の管を素材とするものである。ここで本発明における樹脂製の管としては、分離・分析対象とする試料や分離・分析の際に使用する溶離液等に対して安定な樹脂製の管であれば制限はなく、例えばＰＥＥＫ、ポリアミドイミド、ポリイミド、液晶ポリエステル、ポリアリレート、ポリスルホン、ポリエーテルイミド又はポリフェニレンスルフィド等のエンジニアリングプラスティックで製造された管を例示することができる。中でも、入手の容易さや価格の観点からはＰＥＥＫが特に好ましい。なお本発明では、管の肉厚、径、長さ等の寸法や形状（例えば断面が円形であるとか、三角形であるとかいう形状等）に特に制限はないが、最終的には分離材（ゲル）を充填して液体クロマトグラフ用カラムとすることを考慮すれば、その寸法・形状は自ずと定まり、例えば断面が円形で、寸法が表１に示された程度のものを例示することができる。
【００１７】
上記のような樹脂性の管の外表面を金属膜で被覆するには、従来公知の種々の金属膜を形成する方法を採用することができる。その一例を例示すれば、金属イオンを含む電解質溶液と酸化剤とを含む溶液中に樹脂製の管を配置し、管の表面に大きなエネルギーを有する光ビームを照射してその外表面に金属酸化物を析出させる方法、液相成長法、物理的気相成長法（ＰＶＤ）又は化学的気相成長法（ＣＶＤ）を例示することができる。本発明では、特に、電解メッキや無電解メッキにより樹脂性の管の外表面に金属膜を形成して、金属膜で被覆することが好ましい。通常、メッキは、被メッキ物の表面を保護したり、表面に光沢を与えることが主目的で、数μｍから数１０μｍ程度の薄い膜を形成するものであるが、本発明では、機械的強度と熱伝導性の向上を目的として、数１０〜数１０００μm程度、好ましくは５０〜３０００μmの膜を形成する。なお、メッキにより金属膜で被覆する際の具体的な方法については、実施例にて詳説する。
【００１８】
樹脂製の管の外表面を被覆する金属膜は、銅やニッケルを例示することができるが、他の金属種でも当該金属種の特性に応じた効果が期待できる。また金属膜は、一種類の金属種で形成された膜でも良いが、目的に応じて複数種の金属種で形成された金属膜であっても良い。例えば、主として熱伝導性を向上させる目的で銅の膜を、主として機械的強度を向上させる目的でニッケルの膜を、それぞれ形成し、内側から順番に樹脂製の管、樹脂製の管の外表面を被覆する銅からなる第１の膜（内膜、すなわち樹脂製カラム管を直接被覆している膜）、そしてニッケルからなる第２の膜（外膜、すなわち前記内膜である第１の銅の膜を被覆している膜）を形成することで、熱伝導性及び機械的強度の両方を、より効率的に向上することができる。なお、ＰＥＥＫを一例として説明すると、銅はＰＥＥＫより熱伝導性が１５００倍高く、ニッケルはＰＥＥＫより引張強度が４倍高い。従って、この２つの膜でＰＥＥＫ製の管を被覆することで、熱伝導性と機械的強度を大幅に向上し、ステンレス鋼製の管に近い熱伝導性と機械的強度を有するカラム管を提供することが可能になる。
【００１９】
銅とニッケルの膜で樹脂製の管を被覆する場合、銅と比較してニッケルは安定性（耐食性）が強く、しかもメッキによって被覆する場合にはニッケルの方が表面が綺麗に仕上がることから、ＰＥＥＫ製の管、銅メッキ、ニッケルメッキの順で処理を行うことが特に好ましい。またこの場合ニッケル膜の厚さを３００〜１０００μｍとすることが好ましく例示できる。
【００２０】
これまで説明してきた樹脂性のカラム管は、その内部に分離材（ゲル）を充填することにより、液体クロマトグラフ用カラムとして利用することができる。分離材としては従来公知の種々のものを特に制限なく充填することができるが、一例を示せば、ＧＰＣ用、イオンクロマト用、アフィニティ-クロマト用、疎水クロマト用、逆相クロマト用の分離材が例示でき、また分離材の材質としても合成高分子系のほか、アガロース等の天然高分子系のものを例示できる。
【発明の効果】
【００２１】
本発明によれば、他のカラム管の素材として知られるガラスや金属と比較して加工性に優れる樹脂製のカラム管を素材として用いていることから、カラム管の寸法や形状のデザインを極めて容易に、かつ、自由に決定することが可能となる。これは例えば、種々の寸法・形状のカラム管又はカラムを常に準備しておき、分離・分析の対象に合わせて選択等して液体クロマトグラフを実施することを可能とするものである。
【００２２】
更に、樹脂性のカラム管は高い安定性を有しているが、本発明ではその外表面に金属で被覆するのみで、液体クロマトグラフにおいて試料や溶離液が接液する内表面は、安定性の高い樹脂そのものである。これにより、金属イオンの混入を嫌うクロマトグラフや蛋白質の吸着を嫌う生体高分子のクロマトグラフの場面において、特に有効なカラム管及びカラムを提供することが可能である。
【００２３】
そして本発明によれば、樹脂製カラム管の課題であった機械的強度（耐圧性）及び熱伝導性を大きく向上することが可能である。機械的強度を向上できたことにより、例えばカラム圧力を高くする必要のある、粒子径の小さな分離材を充填して使用することが可能となるため、液体クロマトグラフにおける分離・分析の高速化が可能となる。また熱伝導性を向上できたことにより、特にかかる高速分離・分析においてもカラム温度を常に一定に維持することが可能となり、ゲルの性能を十分に発揮できるようになる。
【００２４】
以上の通り、本発明は、樹脂性カラム管本来の特徴に加えて、その課題であった機械強度及び熱伝導性を向上することによって、金属製、ガラス製に続く第３のカラム管を提供するものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２５】
以下、実施例等に基づいて本発明を更に詳細に説明する。
【００２６】
図４は、従来のカラムの一般的な構造を模式的に示した断面図である。（ａ）はステンレス鋼（ＳＵＳ）のカラム管で肉厚が０．９ｍｍ程度であり、（ｂ）はＰＥＥＫ材のカラム管で肉厚が３．７ｍｍ程度である。このＰＥＥＫ製のカラム管の熱伝導性を向上するには、熱伝導性の低い材料、すなわちＰＥＥＫの割合を減らし、熱伝導性の高い材料の割合を増やす必要がある。
【００２７】
図５は、ＰＥＥＫ製のカラム管について本発明を適用した例を示すものであり、その構造を模式的に示した断面図である。この例では、ＰＥＥＫ材の厚みを薄くし、熱伝導性の良い金属等をメッキ処理によりＰＥＥＫ材表面に付加して熱伝導性及び機械的強度を向上している。
【実施例１】
【００２８】
図６に示す工程で外表面が金属膜で被覆されたＰＥＥＫ製カラム管の作製を行った。なお本実施例ではＰＥＥＫ製の管を素材としたが、他の樹脂材であれば何でも使用できる。また、メッキ層に銅およびニッケルを使用したが、他の金属種でも金属の特性に応じた効果が期待できる。
【００２９】
工程１：ＰＥＥＫ製の管（内径４．６ｍｍ×外径８ｍｍ）の両端をマスキング（メッキ液の浸入防止）。
【００３０】
工程２：無電解メッキにより、ＰＥＥＫ製の管の外表面を、順に第１の金属膜（銅）、第２の金属膜（ニッケル）で被覆。それぞれの膜は下記の厚さとなるようにした。
【００３１】
条件１  銅の膜１００μm、ニッケルの膜７００μm
条件２  銅の膜３００μm、ニッケルの膜５００μm
条件３  銅の膜５００μm、ニッケルの膜３００μm
工程３：マスキングの除去
工程４：表面を１５０〜３００μm程度旋盤により仕上研磨（完全な円筒形に仕上げ）
工程５：管の両端をカット
以上のようにして製造したカラム管の断面を図７に示す。図７ａは素材であるＰＥＥＫ製管の断面、図７ｂは上記の条件１に従って工程２（メッキ）を終えた段階での断面、そして図７ｃは表面研磨後の断面をそれぞれ示す。図７ｂに示すように、ＰＥＥＫ製の管の外表面は、順に、ほぼ均一な約１００μmの銅の膜、ほぼ均一な約７００μmのニッケルの膜により被覆されていることが分かる。
【実施例２】
【００３２】
実施例１にて条件１〜３に従って製造した３種類のＰＥＥＫ製カラム管について、それ  
【００３３】
らの熱伝導性及び機械的強度の試験を行った。なお上記条件１〜３に従って製造したカラム管の最終的な寸法は、内径４．６ｍｍ×外径約９ｍｍ、長さ４０ｍｍである。本実施例では、比較のために、同じ寸法のＰＥＥＫ製の管について、同様の操作を行った。
【００３４】
熱伝導性の試験の概要を図８に示す。カラム管（２０）の内部に温度センサ（２３）を挿入し、両端をＰＥＥＫ製のキャップ（２１）で塞ぎ、両端からの熱伝導を抑えた状態で当該管を温度調節可能な恒温槽（２５）に配置した。次に恒温槽（２５）の設定温度を４０℃とし、カラム管の温度が一定となるまで放置した後、設定温度を８０℃に変えて恒温槽内の温度を昇温し、管内の温度変化を測定した。
【００３５】
図９に熱伝導性試験の結果を示す。図９の横軸は時間（昇温開始後２０分から６０分）、縦軸は温度を示す。昇温開始後３０〜６０分の時間範囲で、金属膜で外表面を被覆したＰＥＥＫ製の管は、金属膜で外表面を被覆していない単なるＰＥＥＫ製の管と比較して、その内部の温度が０．４〜０．５℃高くなっている。メッキの条件、すなわち銅の膜とニッケルの膜の厚さの違いによる内部温度の変化に有意な違いは見られなかったが、外表面を金属膜で皮膜することによって熱伝導性が向上したことが分かる。
【実施例３】
【００３６】
機械的強度を試験するために、市販の曲げ強度試験機（島津製作所（株）製、オートグラフＡＧ−２０００Ｂ）を使用して３点曲げ試験を行い、強度を測定した。曲げ強度の測定条件は以下の通りである。
【００３７】
試験速度      １ｍｍ／ｍｉｎ
圧子の半径    １／８インチ
支持台の半径  １／８インチ
支点間距離    ３０ｍｍ
ロードセル    ５ｋＮ
曲げ強度試験の結果を表３に示す。表３は、実施例１にて条件１〜３に従って製造した３種類のＰＥＥＫ製カラム管と実施例２で述べた比較用のＰＥＥＫ製の管についての、試験力の最大値を示す表である。外表面を金属膜で被覆していないＰＥＥＫ製の管の当該値が１．８８ｋＮであるのに対し、金属膜で被覆したＰＥＥＫ製のカラム管では、ニッケル膜の厚さが増加するに従って試験力の最大値（すなわち曲げ強度）が２．９９ｋＮから３．０５ｋＮを経て３．４０ｋＮへと増加していることが分かる。この値はそれぞれ、外表面を金属膜で被覆していないＰＥＥＫ製の１．５９倍、１．６２倍、１．８１倍に該当し、外表面を金属膜で被覆することによってカラム管の機械的強度を大幅に向上できることが分かる。
【００３８】
【表３】
0005482124.tif 000004
【図面の簡単な説明】
【００３９】
【図１】一般的に使用される液体クロマトグラフの構成を示す図である。
【図２】熱交換用コイルを試料注入バルブと分析カラムの間に挿入し、1つのオーブンで温調し分離を改善する場合の液体クロマトグラフの構成を示す図である。
【図３】熱交換用コイルを試料注入バルブと分析カラムの間に挿入し、独立した温調器で温調し分離を改善する場合の液体クロマトグラフの構成を示す図である。
【図４】一般的に使用されているカラム管の断面を模式的に示した図である。図４ａはステンレス鋼を材料にしたカラム、図４ｂはＰＥＥＫを材料にしたカラムを示す。
【図５】本発明のカラム管の断面を模式的に示した図である。
【図６】本発明カラム管を製造する工程を例示した図である。
【図７】本発明のカラム管の断面を示す図である。図７ａはメッキ前の断面、図７ｂはメッキ後の断面、図７ｃはメッキ後の表面を１００μｍ程度研磨した後の断面写真である。
【図８】本発明のカラム管の熱伝導試験の概要を示す図である。
【図９】本発明のカラム管の熱伝導性を示す図である。
【符号の説明】
【００４０】
１．送液ポンプ
２．溶離液
３．試料注入装置
４．分析カラム
５．検出器
６．カラム恒温槽
７．廃液
８．熱交換用のコイル
９．熱交換コイル用加熱器
１０．温調器１
１１．温調器２
１２．空洞
１３．金属パイプ
１４．樹脂パイプ
１５．第一の金属層
１６．第二の金属層
１７．ＰＥＥＫパイプ
１８．Ｃｕのメッキ層
１９．Ｎｉのメッキ層
２０：試験材料
２１：キャップ
２２：保護管（シリコーン）
２３：温度センサ
２５：恒温槽
２６：温度測定器
２７：試験片ユニット
【図１】
0005482124.tif 000005
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
0005482124.tif 000013