(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
インスリンと胃腸管からのインスリンの吸収を容易にする治療的に許容しうる送達物質を含む医薬の製造における前記インスリンの使用であって、
前記医薬が、グルコース耐性損傷又は初期真性糖尿病をもつ患者の治療方法において使用され、
前記方法が、治療的に有効な投与量のインスリン及び前記送達物質の4-[(4-クロロ-2-ヒドロキシベンゾイル)アミノ]ブタン酸又はその薬学的に許容しうる塩を含む医薬を、就寝時又はその直前であってその日の最後の食事の少なくとも１時間後に前記患者に経口的に投与することを含む、前記使用。
【請求項２】
前記方法が、β細胞死滅又は機能異常の発生を低下させることを含む、請求項１記載の使用。
【請求項３】
前記方法が、顕性糖尿病の発症を長期間低下させることを含む、請求項１記載の使用。
【請求項４】
前記方法が、顕性又はインスリン依存性糖尿病の発病を遅延させることを含む、請求項１記載の使用。
【請求項５】
患者が、齧歯動物、イヌ、ネコ、ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ又はヒトである、先の請求項１ないし４のいずれか１項記載の使用。
【請求項６】
患者がヒトである、先の請求項１ないし５のいずれか１項記載の使用。
【請求項７】
医薬が長期にわたって経口的に投与される、先の請求項１ないし６のいずれか１項記載の使用。
【請求項８】
医薬が少なくとも2週間毎晩経口的に投与される、先の請求項１ないし７のいずれか１項記載の使用。
【請求項９】
医薬が少なくとも約20%の早朝時又は空腹時インスリンレベルの低下を与える、先の請求項１ないし８のいずれか１項記載の方法。
【請求項１０】
医薬が患者に経口投与された後に血糖の治療的に有効な低下を達成し、約2.5:1〜約6:1の門脈と末梢血インスリン濃度の比を与える、先の請求項１ないし９のいずれか１項記載の使用。
【請求項１１】
医薬が固形の剤形にある、先の請求項１ないし１０のいずれか１項記載の使用。
【請求項１２】
医薬に含有されるインスリンの投与量が、約50単位〜約600単位である、先の請求項1〜11のいずれか1項に記載の使用。
【請求項１３】
医薬に含有されるインスリンの投与量が、約100単位〜約400単位である、先の請求項1〜12のいずれか1項に記載の使用。
【請求項１４】
医薬に含有されるインスリンの投与量が、約150単位〜約300単位である、請求項1〜13のいずれか1項に記載の使用。
【請求項１５】
医薬が、門脈循環(胃腸管の粘膜による吸収によって)にインスリンを送達し始めて約30分以内にピークレベルに達成する、請求項1〜14のいずれか1項に記載の使用。
【請求項１６】
C-ペプチドレベルがインスリンの経口投与の約8時間後に測定された場合に、患者において平均ベースラインレベルから前記C-ペプチドレベルの統計学的に有意な低下が達成される、請求項1〜15のいずれか1項に記載の使用。
【請求項１７】
測定時の前記C-ペプチドレベルが平均約24%だけ低下する、請求項16記載の使用。
【請求項１８】
インスリンの前記経口投与の約8時間後に測定した場合に、血漿インスリンレベルがベースラインから統計学的に有意な程度だけ低下する、請求項16又は17記載の使用。
【請求項１９】
インスリンの前記経口投与の約8時間後に測定した場合に、前記血漿インスリンレベルがベースラインから平均約33%だけ低下する、請求項18記載の使用。
【請求項２０】
インスリンの前記経口投与の約8時間後に測定した場合に、血糖値がベースラインから統計学的に有意な程度だけ低下する、請求項16、18又は19記載の使用。
【請求項２１】
インスリンの前記経口投与の約8時間後に測定した場合に、前記血糖値がベースラインから平均約6%だけ低下する、請求項20記載の使用。
【請求項２２】
前記医薬がインスリンの約200〜約400単位の投与量を含む、請求項16〜21のいずれか1項に記載の使用。
【請求項２３】
前記薬学的に許容しうる送達物質が4-[(4-クロロ-2-ヒドロキシベンゾイル)アミノ]ブタン酸ナトリウムを含んでいる、請求項22記載の使用。
【請求項２４】
前記薬学的に許容しうる送達物質が約300mgの4-[(4-クロロ-2-ヒドロキシベンゾイル)アミノ]ブタン酸ナトリウムを含んでいる、請求項22記載の使用。
【請求項２５】
前記インスリンが修飾されていないインスリンである、先の請求項１ないし２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
インスリンと胃腸管からのインスリンの吸収を容易にする治療的に許容しうる送達物質を含む医薬の製造における前記インスリンの使用であって、
前記医薬が、糖尿病患者又はグルコース耐性損傷をもつ患者における修飾されていないインスリンの経口投与の作用を延長させる方法において使用され、
前記方法が、経口投与の約0.1〜約1.5時間後の時点でインスリンtmaxを得る、治療的に有効な投与量のインスリン及び前記送達物質の4-[(4-クロロ-2-ヒドロキシベンゾイル)アミノ]ブタン酸又はその薬学的に許容しうる塩を含む医薬を患者に経口投与することを含み、
患者への投与が就寝時又はその直前であってその日の最後の食事の少なくとも１時間後に行われ、
インスリンの前記経口投与の約8時間後にC-ペプチドレベルを測定した場合に、前記患者においてベースラインから前記C-ペプチドレベルの統計学的に有意な低下が達成され、又は
インスリンの前記経口投与の約8時間後に測定した場合に、血漿インスリンレベルがベースラインから統計学的に有意な程度だけ低下する、前記使用。
【請求項２７】
前記剤形が約200〜約400単位のインスリンを含む、請求項２６に記載の使用。
【請求項２８】
前記薬学的に許容しうる送達物質が4-[(4-クロロ-2-ヒドロキシベンゾイル)アミノ]ブタン酸ナトリウムを含んでいる、請求項２７記載の使用。
【請求項２９】
前記薬学的に許容しうる送達物質が約300mgの4-[(4-クロロ-2-ヒドロキシベンゾイル)アミノ]ブタン酸ナトリウムを含んでいる、請求項２７記載の使用。
【請求項３０】
インスリンの前記経口投与の約8時間後の測定時に前記C-ペプチドレベルが平均約24%だけ低下する、請求項２６に記載の使用。
【請求項３１】
インスリンの前記経口投与の約8時間後の測定時に前記血漿インスリンレベルが平均約33%だけ低下する、請求項２６に記載の使用。
【請求項３２】
インスリンの前記経口投与の約8時間後の測定時に前記血糖値が平均約6%だけ低下する、請求項２６記載の使用。
【請求項３３】
前記患者がヒトである、請求項２６に記載の使用。
【請求項３４】
前記インスリンが修飾されていないインスリンである、請求項２６ないし３３のいずれか１項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、糖尿病の治療のための治療法の一部として血流に治療的に有効な量でインスリンを経口送達することに関する。本発明は、さらに、糖尿病の治療のために血流に治療的に有効な量でインスリンを輸送するのを容易にする経口投与のための送達物質とインスリンの組成物に関する。本発明は、さらに、糖尿病の治療のために就寝時に又はその直前にインスリンと送達物質の剤形を経口投与することに関する。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質、ペプチド、他の生体分子(“生体高分子"、即ち、タンパク質やポリペプチドのような生物重合体)が科学や技術の多くの多様な領域においてますます用いられている。例えば、タンパク質は、医薬、ワクチン、動物薬の分野における活性薬剤として使われている。都合の悪いことに、医薬組成物における活性薬剤としての生体高分子の使用は、活性薬剤が必要とされる場所への移行の天然バリヤの存在によってしばしば厳しく制限される。このようなバリヤとしては、皮膚、脂質二重層、粘膜、厳しいpH条件、消化酵素が含まれる。
【０００３】
生体高分子の経口送達を成功させることに対して多くの妨害がある。例えば、生体高分子は、大きく、本来は両親媒性である。さらに重要なことに、多くの生体高分子の活性コンホメーションは、種々の環境要因、例えば、温度、酸化剤、pH、凍結、振盪、剪断応力に感受性があることである。薬物開発のために活性薬剤として生体高分子を含む経口送達系を計画する際に、これらの複雑な構造的要因や安定性要因を考慮しなければならない。さらに、一般に、生体高分子が患者に投与され、その天然の生物学的機能を行うと思われる医療や治療の適用の場合、送達賦形剤は、胃腸管による吸収を容易にするために使用し得る。これらの送達賦形剤は、具体的な患者又は疾患過程の要求と一致している速度で活性分子を放出することができなければならない。
【０００４】
一つの特定の生体高分子、ホルモンインスリンは、膵臓によって、さらに詳しくは膵臓組織(ランゲルハンス島)の主要型のβ細胞によってその放出による血糖値の通常の調節に関与するので、グルコースがエネルギー源として使用し得る。インスリン分泌は、健常人において、空腹時と摂食時双方において、血液におけるグルコースの安定な濃度を与える調節された過程である。健常なヒトにおいては、インスリンは、門脈に膵臓から分泌され、インスリンを肝臓へ運ぶ。肝臓は、門脈循環から受けるインスリンの大部分を利用及び/又は代謝させる。
【０００５】
血糖濃度は、健常なヒトにおけるインスリン分泌への主要な刺激である。グルコースは、促進輸送によって膵臓β細胞に入り、次に、グルコキナーゼによってリン酸化する。グルコキナーゼの発現は、主に、糖代謝の調節に関係している細胞と組織、例えば、肝臓や膵臓β細胞に制限される。リン酸化及びその後の解糖を受ける糖の能力は、密接に、インスリン放出を刺激するそれらの能力と相関している。全ての組織がグルコース取込みのためのインスリンに依存していないことは指摘される。例えば、脳、腎、赤血球はインスリン独立組織であるが、肝臓、脂肪、筋肉はインスリン依存性組織である。
【０００６】
真性糖尿病(“糖尿病")は、膵臓が血糖値を制御することができるレベルでインスリンを放出せず及び/又はインスリン抵抗性があることから筋肉、脂肪、肝細胞が正常なインスリンレベルに十分に応答しない疾病状態である。糖尿病は、2つの種類:１型と2型に分類される。約5〜10%の診断された糖尿病の症例が１型糖尿病によるものであり、約90%〜95%が２型糖尿病によるものである。
【０００７】
１型糖尿病は、インスリン依存性であり、通常はまず若年に生じる糖尿病である。１型糖尿病においては、膵臓の膵島細胞が主に自己免疫の破壊のためにインスリンを生産することを停止し、患者は、患者自身に欠損するホルモンを注射しなければならない。
【０００８】
２型糖尿病は、インスリン抵抗性(又はインスリン感受性低下)と、後期での不十分なインスリン分泌との組合わせに起因するものであるインスリン非依存性糖尿病である。これは、西側世界において最も一般的な種類の糖尿病である。米国を含む世界中の種々の国の成年人口の8%近くが2型糖尿病であり、二次的膵臓疲労とインスリン産生の最終的な停止のために、これらの患者の約30%が寿命の間のある時点で外因のインスリンを用いることが必要である。
【０００９】
インスリン抵抗性(又はインスリン感受性低下)は、また、集団において、特に太りすぎの個人において、糖尿病のリスクを有する個人において(即ち、血糖値が正常であるが、糖尿病と診断されるのにまだ十分高くない糖尿病前期患者)、十分なインスリンを生産するが、組織が、インスリンの作用に十分に応答する能力が減弱した２型糖尿病をもつ個人において一般的である。インスリン抵抗性を補償し克服するために、膵臓β細胞は、まず最初にそれらのインスリン産生を増強し、インスリン抵抗性の個人は高血漿インスリンレベルが高い。しかしながら、高い要求の期間がこれらの細胞にかかった後、細胞は代償不全と疲労が始まり、インスリン分泌が糖尿病の後期で低下する。個人が２型糖尿病と診断される頃には、インスリン産生の要求が増大したためにおよそ50%のβ細胞が死滅した。
【００１０】
糖尿病は、米国において6番目の主要な死因であり、1997には死亡が193,000を超えるとみなされている。しかしながら、これは、糖尿病から結果として生じる合併症が集団における罹患率の主因であることから過小評価である。糖尿病は、心臓血管疾患、脳卒中、消化器系疾患、感染症、代謝合併症、眼障害、神経障害、腎疾患と腎不全、末梢血管疾患、潰瘍形成と切断術、経口合併症、うつ病の形でかなりの罹患率と死亡率と関連している。従って、糖尿病は、最終的に他の原因のものとされるかなり多くの死亡に関与している。
【００１１】
糖尿病による死亡率の主な原因は、長期微小血管性疾患や大血管性疾患である。心臓血管疾患は、２型糖尿病患者の死亡の最高80%の原因となり、糖尿病患者は、脳卒中又は心筋梗塞を生き残った患者の等しいリスク、冠状動脈疾患のリスクが2〜4倍増加する。言い換えれば、心疾患、高血圧、心臓発作、脳卒中は、成人の非糖尿病患者より成人の糖尿病患者においてしばしば2〜4倍生じる。冠状動脈疾患のこの増加したリスクは、高血圧性心筋症の増加と相まってうっ血性心不全のリスクの増加に現れる。これらの血管合併症によって、神経障害、網膜症、末梢血管疾患となる。
【００１２】
糖尿病性網膜症(目の後ろの内層の損傷)は20〜74歳の成人における盲目の主要な原因であり、糖尿病性腎疾患、例えば、腎症(体毒素を適切にろ過する腎の不能)は末期腎臟病(腎不全)の全ての新規な症例の40%を占めている。さらにまた、糖尿病は、また、米国において肢体の切断の主要な理由である。糖尿病は妊娠中に特別な問題を生じ、先天性奇形の割合は糖尿病をもつ女性の子供において5倍高くなり得る。
【００１３】
インスリン抵抗性は、２型糖尿病における高血糖症の病因に重要な役割を果たし、最終的には糖尿病合併症の発症を誘発する。さらにまた、インスリン抵抗性は、表面的には大血管性疾患、心臓血管疾患及び微小血管性疾患の病因に役割を果たす。
【００１４】
不十分な血糖コントロールは、これらの合併症の高発生率に関与し、糖尿病の慢性合併症に対する厳しい血糖コントロールの有益効果が臨床診療において広く受け入れられている。しかしながら、高血糖値が糖尿病の長期の合併症の直接的な原因であることがしっかりと確立されたのは最近にすぎない。糖尿病の制御と合併症の試験と英国糖尿病前向き研究のどちらによってもできるだけ正常に近いレベルで血糖値を制御することが糖尿病性網膜症、腎症、神経障害及び微小血管性疾患の発症を防止し遅延させることが示された。
【００１５】
１型糖尿病においては、インスリン治療は、不可欠であり、不在の内在性インスリンを外因のインスリン供給に置き換えることを意図するものである。２型糖尿病においては、治療は、インスリン感受性及び/又はインスリン分泌を増強する経口抗糖尿病薬と、その経口薬が機能しない場合や機能しないときのインスリンからなるものであった。
【００１６】
糖尿病患者の絶えず増大する集団に、有効な形で、生体利用可能な修飾されていないヒトインスリンを供給する問題はほぼ100年間医師や科学者を占領してきた。このペプチドの安定性と生物学的送達の一部の問題を解決するために多くの試みがなされてきた。インスリンが胃腸管に吸収されないペプチド薬剤(MW約6000 Da)であることから、普通は、皮下注射のような非経口投与を必要とする。従って、ほとんどの糖尿病患者は皮下注射によりインスリンをしばしば１日数回自己投与する。しかしながら、複数の毎日の注射の限界、例えば、不便、不十分な患者の許容性、コンプライアンス、食後の要求に対して食後のインスリン有効性を適合させることの難しさは、インスリン治療のより周知の欠点の一部である。
【００１７】
糖尿病の慢性合併症に対する厳しい血糖コントロールの有益効果を示している研究にもかかわらず、臨床医は、特に疾患の初期段階においては、特に積極的なインスリン治療を切望せず、このことは臨床診療において広く受け入れられている。厳しい血糖コントロールを達成することの果たされていない挑戦は、部分的には、インスリン投与の用いうる皮下経路や低血糖症の恐れの欠点のためである。上で述べた複数の毎日の注射の実際的な限界に加えて、インスリン投与の一般に用いうる皮下経路の欠点により、糖尿病に伴う慢性合併症(共存症)の多くと関連していると考えられるたいていは不十分な血糖コントロールの結果となった。
【００１８】
高インスリン血症(インスリンの高血中濃度)は、正常な生理的送達経路と一致しない場所(と方法)におけるインスリンの投与によって起こり得る。インスリンは遊離したモノマーとして血液中に循環し、その分布容量は細胞外液の容量に近い。絶食条件下で、門脈血液中のインスリンの濃度は、例えば、約2-4ng/mlであるが、インスリンの全身系(末梢)濃度は、例えば、健常なヒトにおいては、約0.5ng/mlであり、例えば、5:1比になる。皮下注射によってインスリンを受けるヒト糖尿病患者においては、比は約0.75:1に変わる。従って、このような糖尿病患者においては、肝臓は、十分に血糖を制御するのに必要なインスリンの濃度を受けない。インスリンの高全身系レベルにより、グルコース取込み、グリコーゲン合成、解糖、脂肪酸合成、コルチゾル合成、トリアシルグリセロール合成が増強され、グルコースの利用が結果として多くなるキー遺伝子の発現に至る。
【００１９】
インスリン送達の分野においては、複数の反復投与が患者の寿命全体にわたって毎日必要とされる場合、生理的臨床的活性を変えず且つ注射を必要としないインスリンの組成物を作成することが望ましい。インスリンの経口送達は、反復皮下注射をしばしば伴う不快を最小限又は除外することができることから、安全性や便利さを考慮した場合、特に望ましい投与経路である。インスリンの経口投与による門脈全身系循環において正常なインスリンレベルを模倣することは当該技術において果たされていない有意な目標であった。
【００２０】
インスリンの経口送達は、便利さ、承認、コンプライアンスの問題を越えて有利なものである。胃腸管に吸収されるインスリンは、膵臓によって分泌されるインスリンの生理学を模倣する。これは、どちらも門脈に放出され、末梢循環に送達される前に直接肝臓に運ばれるからである。門脈循環への吸収は、インスリン分泌を調節する末梢門脈インスリン勾配を維持する。肝臓を通るその第一通路においては、インスリンのおよそ60%が保持され代謝され、それによって要因が糖尿病における合併症と関連づけられる末梢高インスリン血症の発生率が低下する。インスリン治療や他の経口抗糖尿病薬のまれで重い合併症は、低血糖症である。
【００２１】
しかしながら、インスリンは、生体高分子の有効な経口ドラッグデリバリーシステムを設計する際に従来技術において直面した問題を例証している。胃腸管におけるインスリン吸収は、おそらくその分子の大きさや酵素分解のその影響されやすさによって妨げられる。インスリンの物理化学的性質や酵素消化のその影響されやすさによって、商業的に実行可能な経口又は代替のデリバリー系の設計が排除された。
【００２２】
Emisphere Technologies, Inc.は、経口投与後にインスリンが生体利用可能であり、生体活性であり、且つ十分な吸収と薬物動態学的/薬力学的性質を示して所望の治療効果を与えるように、即ち、血糖の減少を引き起こすように、経口投与可能である、例えば、胃腸管から十分な濃度で吸収されるインスリン組成物を開発した。これは、米国特許出願第10/237,138号、同第60/346,746号、同第60/347,312号、同第60/368,617号、同第60/374,979号、同第60/389,364号、同第60/438,195号、同第60/438,451号、同第60/438,444号、同第60/452,660号、同第60/488,465号、国際特許出願第WO 03/057170号、同第WO 03/057650号、同第WO02/02509号に開示され、全てEmisphere Technologies, Inc.に譲渡され、全て本願明細書に含まれるものとする。
【００２３】
Emisphere Technologies, Inc.の新規なドラッグデリバリー技術は、“送達物質"と呼ばれる低分子量化合物の設計及び合成に基づいている。インスリンと処方される場合、好ましい実施態様においては4-CNAB(ナトリウムN-[4-(4-クロロ-2-ヒドロキシベンゾイル)アミノ]ブチレート)である送達物質がインスリンの胃腸の吸収を可能にする。この過程のメカニズムは4-CNABが非共有結合的にインスリンと相互作用し、吸収のためにさらに有利な物理化学的性質を生じることであると考えられる。胃腸の壁全体に、インスリンは、4-CNABから急速に分離し、その正常な薬理学的に活性な状態に戻る。4-CNABは、あらゆる固有の薬理活性を有することを意図せず、胃腸壁全体にインスリンの運搬を容易にすることによってインスリンの経口バイオアベイラビリティを増強する働きをするだけである。インスリンの薬理学は、所望の治療効果であり、十分に特徴づけられるものである。
【００２４】
従来の皮下インスリン投薬はインスリンの入る点を自然の部位(門脈)から体循環までの循環へ移動させるが、Emisphere Technologies, Inc.によって開発された経口服用法は、自然の生理学を模倣するものである。即ち、門脈循環における修飾されていないインスリンと体循環におけるそれとの濃度比は、正常な生理的比、例えば、約2:1〜約6:1に近い。この投薬経路の効果は2倍である。最初に、直接肝臓を標的にすることによって、グルコースのより大きな制御を達成することができる。インスリンの門脈内送達が末梢の投与によって必要とされるより遅い注射速度でグルコースの匹敵する制御を得ることができる種々の研究が示されている。体循環に入る前にインスリンが実質的な(〜50%)初回通過代謝を受けることから、低い血清濃度と全体曝露が達成される。このことは、対象外の組織に対するインスリンのあらゆる有害作用を軽減することである。
【００２５】
インスリン/4-CNABカプセルを、Emisphere Technologies, Inc.により、ラットとサルにおいて薬理学的スクリーニング、薬物動態学的プロファイルと代謝プロファイル、毒性評価を含む非臨床的プログラムで評価した。ラットとサルにおけるこれらの研究から、経口投与後に4-CNABが急速に吸収されることが示された。
【００２６】
インスリン/4-CNABカプセルを、また、Emisphere Technologies, Inc.により、安全性、薬物動力学、薬力学、インスリンの吸収に対する食品の作用の臨床的研究において評価した。これらの研究においては、4-CNABは、糖尿病患者及び健康者における経口投与後にインスリンの胃腸の吸収を強化することが示された。インスリン/4-CNABカプセルの経口投与によってインスリンと4-CNAB双方の迅速な吸収が得られ、4-CNABと組合わせて経口的に吸収されたインスリンは、健康者と糖尿病患者における血糖の低下によって、また、糖尿病患者における食後のグルコース可動域の鈍化によって証明されるように、薬理学的に活性であった。これらの研究は、インスリン/4-CNABの製剤の経口投与が十分に許容され、健康者と糖尿病患者双方の血糖濃度を低下させることを示している。
【００２７】
正常な生理学においては、第一相インスリン分泌が食事の開始の5〜20分後に起こり、この作用は食事のグルコースホメオスタシスに対して周知の影響を有する。第一相インスリン分泌の消失は疾患の初期段階において2型糖尿病患者の固有の特徴であり、糖尿病前期患者状態で、即ち、グルコース耐性が損傷した個人にも観察される。第一相インスリン分泌が存在しないとき、糖新生に対するグルカゴンの刺激作用が抑制されず、食事の高血糖症の発症に関与することができる。基礎状態と食事相においては、血漿グルコース濃度は肝臓グルコース排出量と相関している。それ故、食事摂取時の第一相インスリン分泌の回復は、食事の肝臓グルコース排出量を抑制しなければならず、続いて、血糖プロファイルを改善しなければならない。
【００２８】
この仮説を証明するためにいくつかの方法が着手された。しかしながら、治療法は、あまりに長期間治療に危険である(例えば、規則的なヒトインスリンの静脈内投与)か又は薬理学的に不適当であった(速効性のインスリン類似体)。さらにまた、第一相インスリン応答の回復は、内在性インスリン分泌能力のほとんど又は全てを失った糖尿病の長期の病歴をもつ患者において難しいと考えられる。
【００２９】
現在では、規則的な皮下に注射されるインスリンは、食事時間の30〜45分前に服用されることが推奨される。結果として、糖尿病患者や他のインスリン使用者は、食事と、食事と相対するインスリン投与の相当の計画を立てることに係わらなければならない。都合の悪いことに、インスリンの投与と食事の摂取との間に起こることができる介在する事象は、予想されたグルコース可動域に影響を及ぼすことがある。さらにまた、投与されたインスリンが一度にあまりに多く治療効果を与える場合には、例えば、食事の摂取の結果として起こる血糖値の上昇がすでに下降した後に、低血糖症の可能性がある。
【００３０】
さらに、ある種の短時間作用型インスリン製剤は、インスリンが血糖低下作用を与える速度であることから、インスリンの投与時間と食事の摂取の時間の間で、準臨床的な低血糖症からよりさらに望ましくない作用まで変動することができるレベルに血糖を下げることに関与する。
【００３１】
初期及び後期糖尿病患者に、また、第一相インスリン分泌が損なわれたグルコース耐性が損傷した個人に、治療が食事時間に又はそのすぐ前に経口投与され得るものであり且つ短時間の作用を有する、経口インスリン治療を施すことが望ましい。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００３２】
本発明の目的は、就寝時に又はその直前に経口投与するためのインスリンと送達物質を含む医薬組成物を提供することである。
【００３３】
本発明の目的は、さらに、治療的に急速に有効である経口投与のためのインスリンの有効な医薬製剤を提供することである。
【００３４】
本発明の目的は、就寝時に又はその直前に経口投与するためのインスリンと送達物質を含む組成物を提供することである。
【００３５】
本発明の目的は、糖尿病の治療のために、損なわれたグルコース耐性の治療のために、グルコースホメオスタシスを達成するために、初期糖尿病の治療のために、後期糖尿病の治療のために、及び/又はI型糖尿病患者のための置換療法として役立つために、就寝時に又はその直前に経口投与するためのインスリンと、血流へ治療的に有効な量でインスリン運搬を容易にする送達物質の組成物を提供することである。
【００３６】
本発明の目的は、さらに、グルコース耐性又は初期糖尿病が損なわれた哺乳動物において、膵臓のβ細胞機能を予防的に保全する方法及びβ細胞の死滅又は機能異常を防止する方法を提供することである。
【００３７】
本発明の目的は、さらに、グルコース耐性損傷又は初期糖尿病をもつ哺乳動物において顕性糖尿病又はインスリン依存性糖尿病を発症することから哺乳動物を長期間保護する方法又は顕性糖尿病又はインスリン依存性糖尿病の発病を遅延させる方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００３８】
上記と他の目的によれば、本発明は、部分的には、就寝時に又はその直前に上記と本明細書のその他の部分に記載される剤形の１種以上の単位投与量を経口投与することを含む哺乳動物における糖尿病の治療方法に関する。
【００３９】
哺乳動物は、齧歯動物、水生哺乳動物、家畜、例えば、イヌやネコ、農場の動物、例えば、ヒツジ、ブタ、ウシ、ウマ、及びヒトを含むが、これらに限定されるものではない。哺乳動物はヒトであることが望ましい。
【００４０】
本発明は、部分的にはさらに、哺乳動物におけるグルコース耐性損傷、初期糖尿病、後期糖尿病を治療する方法、また、グルコースホメオスタシスを達成する方法であって、就寝時に又はその直前に本明細書に記載される剤形の１種以上の単位投与量を投与することを含む、前記方法に関する。好ましくは、経口インスリン製剤は、このような患者に長期にわたって、例えば、少なくとも約2週間投与され、患者の寿命の間投与することができる。
【００４１】
本発明は、また、部分的には、糖尿病を治療し、インスリンの長期投与と関連している全身系高インスリン血症の罹患率を低下させる方法であって、糖尿病患者の集団において等価な低下及び/又は制御を達成するのに有効な量でインスリンを皮下注射することによって得られる平均全身系血液インスリン濃度に相対して低下する糖尿病患者の血糖と平均全身系血液インスリン濃度の治療的に有効な低下及び/又は制御を与えるためにインスリンの用量と胃腸管からインスリンの用量の吸収を容易にする送達薬剤を就寝時に又はその直前に糖尿病患者に経口投与することを含む、前記方法に関する。好ましくは、経口インスリン製剤は、このような患者に長期にわたって、例えば、少なくとも約2週間投与され、患者の寿命の間投与し得る。皮下インスリンを投与された患者において得られるインスリン濃度定量の平均値は、当業者に周知である。
【００４２】
本発明は、さらに、グルコース耐性の損傷又は初期糖尿病をもつ哺乳動物においてβ細胞機能を予防的に保全する方法であって、インスリンを含む医薬製剤(本明細書に記載される)の経口的に有効な用量を夜間に、例えば、就寝時に又はその直前に投与することを含む、前記方法に関する。好ましくは、経口インスリン製剤は、このような患者に長期にわたって、例えば、少なくとも約2週間投与され、患者の寿命の間投与し得る。
【００４３】
本発明は、さらに、グルコース耐性損傷又は初期糖尿病をもつ哺乳動物においてβ細胞死滅又は機能異常を防止する方法であって、インスリンを含む医薬製剤の経口的に有効な用量を夜間に投与することを含む、前記方法に関する。好ましくは、経口インスリン製剤はこのような患者に就寝時に又はその直前に長期にわたって、例えば、少なくとも約2週間投与される。
【００４４】
本発明は、さらに、顕性糖尿病又はインスリン依存性糖尿病を発症することからグルコース耐性損傷又は初期糖尿病をもつ哺乳動物を長期保護するための方法であって、インスリンを含む医薬製剤の経口的に有効な用量を夜間に投与することを含む、前記方法に関する。好ましくは、経口インスリン製剤は、このような患者に就寝時に又はその直前に長期にわたって、例えば、少なくとも約2週間投与される。
【００４５】
本発明は、さらに、グルコース耐性損傷又は初期糖尿病をもつ哺乳動物において顕性糖尿病又はインスリン依存性糖尿病の発病を遅延させるための方法であって、インスリンを含む医薬製剤の経口的に有効な用量を夜間に投与することを含む、前記方法に関する。好ましくは、経口インスリン製剤このような患者に就寝時に又はその直前に長期にわたって、例えば、少なくとも約2週間投与される。
【００４６】
本発明は、さらに、修飾されていないインスリンの治療的に有効な経口投与可能な単位投与量を供給する方法であって、約2〜約23mgの修飾されていないインスリンと胃腸管から前記インスリンの吸収を容易にする約100〜約600mgの薬学的に許容しうる送達物質とを組合わせること、及び前記単位投与量を就寝時又はその直前に糖尿病患者に経口投与して治療効果を得ることを含む、前記方法に関する。好ましい実施態様においては、単位投与量の全質量は約102mg〜約800mgである。
【００４７】
ある実施態様においては、本方法は、次の段階: インスリンと前記送達物質とを接触させる段階、及びその後、医薬組成物を患者に就寝時に又はその直前に経口投与する段階を含んでいる。或はまた、本方法は、インスリンと送達物質を送達物質が正常な生理学的経路の胃腸の粘膜を通って門脈へのインスリンの吸収を容易にするために用いうるように、インスリンと送達物質が生体内で(例えば、胃において)相互に接触する方法で投与すること含んでいる。
【００４８】
本明細書のために、“夜間に"又は“就寝時に又は直前に"投与したという語句は、長時間の睡眠、又は相対的な物理的及び/又は精神的不活動で、間断ない、例えば、一晩の約3時間前までに、好ましくは約2時間前まで、さらに好ましくは約1時間前までに投与されることを意味する。一晩は、典型的には、午後(p.m.)の時間から午前(a.m.)時間までを意味するが、人が彼/彼女の必要な睡眠時間を得る睡眠覚醒サイクルのあらゆる時間を意味することができる。本明細書のために、投与は、また、その日の最後の食事の少なくとも約1時間後、好ましくは少なくとも約1.5時間後、さらに好ましくは少なくとも約2時間後、なおさらに好ましくは少なくとも約2〜約3時間後でなければならない。
【００４９】
上記目的などによれば、本発明は、部分的には、就寝時に又は直前に投与される場合、投与後1時間内に糖尿病患者の食事後の血糖濃度の最大制御を達成する修飾されていないインスリンの投与量を含む経口固体剤形に関する。
【００５０】
上記目的などによれば、本発明は、部分的には、皮下注射によって得られた末梢血インスリン濃度と比較して急性、亜急性、慢性の条件で末梢血液循環におけるインスリンの低い(例えば、20%以上)全体投与量を与えつつ、患者における皮下インスリン注射に匹敵する糖尿病患者における血糖濃度の低下を達成する修飾されていないインスリンの投与量を含む経口固体剤形に関する。
【００５１】
本発明は、また、部分的には、糖尿病患者に経口投与した後に血糖の治療的に有効な低下を達成し、生理的(門脈/末梢)勾配を維持する修飾されていないインスリンの投与量を含む経口固体剤形に関し、ある種の実施態様においては、門脈インスリン濃度と末梢血インスリン濃度の比約2.5:1〜約6:1、好ましくは約4:1〜5:1が得られる。
【００５２】
本発明は、さらに、部分的には、糖尿病患者に経口投与した後に血糖の治療的に有効な低下を達成する修飾されないインスリンの投与量を含む経口剤形に関し、経口固体剤形は前記患者に経口投与した約0.25〜1.5時間後の時点でインスリンtmaxを示し、インスリンの前記投与量によって引き起こされる少なくとも約80%の血糖濃度低下が前記剤形を経口投与した約2時間以内に起こる。
【００５３】
上記本発明の経口剤形の好ましい実施態様においては、経口剤形は、ゼラチンカプセル又は錠剤のような固体である。
【００５４】
ある種の好ましい実施態様においては、剤形中に含有する修飾されないインスリンの投与量は、1mgにつき26.11単位の力価の容認された変換に基づいて約50単位〜600単位(約2〜約23mg)、好ましくは約100単位(3.8mg)〜約450単位(15.3mg)インスリン、さらに好ましくは約200単位(7.66mg)〜約350単位(13.4mg)、なおさらに好ましくは約300単位(11.5mg)である。
【００５５】
ある種の好ましい実施態様においては、本発明の剤形は、経口投与後、約0.1〜約1.5時間で、さらに好ましくは約0.25〜約0.5時間までにインスリンのtmaxを示す。ある種の好ましい実施態様においては、インスリンのtmaxは、組成物を経口投与した約100分未満で、好ましくは約45分未満で、さらに好ましくは約40分未満で、なおさらに好ましくは組成物を経口投与した約22分後に現れる。
【００５６】
ある種の好ましい実施態様においては、組成物は、経口投与の約0.25〜約1.5時間後、さらに好ましくは0.75〜約1.25時間後にグルコース可動域の最大制御のtmaxを示す。ある種の好ましい実施態様においては、グルコース制御のtmaxは、組成物を経口投与した好ましくは約120分未満で、さらに好ましくは約80分未満で、なおさらに好ましくは約45分〜約60分で現れる。
【００５７】
本発明のある種の好ましい実施態様においては、剤形が門脈循環にインスリンを送達し始めて(胃の粘膜による吸収を経て)約30分間以内にピークのレベルを達成する。
【００５８】
上記剤形のある種の実施態様においては、送達物質がない場合の修飾されていないインスリンの投与量は、所望効果にするために経口投与された場合に胃腸管から十分に吸収されない。ある種の好ましい実施態様においては、送達物質がない場合のインスリンの投与量は、所望の治療効果を得るために患者に経口投与した場合に十分に吸収されないが、前記投与量は、他の投与経路によって前記患者に投与された場合に望ましい治療効果を得る。このような実施態様における本発明は、さらに、インスリンの前記投与量の治療的有効量が糖尿病患者の胃腸管から吸収されるように、修飾されていないインスリンの投与量を薬学的に許容しうる送達物質を前記インスリンの吸収を容易にするために有効な量で共に含む経口剤形に関する。
【００５９】
ある種の好ましい実施態様においては、医薬組成物は、約1mg〜約800mgの前記送達物質、好ましくは約50〜約600、さらに好ましくは約100〜約400、最も好ましくは約200を含んでいる。ある種の実施態様においては、組成物は、ピーク血漿送達物質濃度Cmax約1,000〜約150,000ng/ml、経口投与の約0.25〜約1.5時間後に、さらに好ましくは約0.25〜約0.75時間後、最も好ましくは0.5時間後にtmaxを示している。
【００６０】
本発明のために好ましい送達物質は、化学命名法によって4-[(4-クロロ,2-ヒドロキシベンゾイル)アミノ]ブタン酸として同定される)。ある種の好ましい実施態様においては、送達物質は、ナトリウム塩、好ましくは一ナトリウム塩である。或はまた、同じ化合物が代替命名法一ナトリウムN-(4-クロロサリチロイル)-4-アミノ酪酸塩によって、又は短い名前“4-CNAB"によって同定される。
【００６１】
下記用語は、以下で定義される適用全体で用いられる。
【００６２】
糖尿病患者は、糖尿病の様態をもつ哺乳動物を意味する。
【００６３】
IGTは、手段グルコース耐性損傷を意味する。
【００６４】
糖尿病又は真性糖尿病は、特にことわらない限り、１型及び２型の糖尿病を包含すると考えられる。
【００６５】
送達物質は、治療剤の経口送達に有効である担体化合物又はキャリア分子を意味し、“キャリヤ"と同じ意味で用いることができる。
【００６６】
インスリンの治療的に有効な量は、投薬間隔の間に絶食の状態で又は有効な給食状態で、ヒト糖尿病患者における血糖濃度の臨床的に関連した制御を達成するために十分である本発明の剤形に含まれるインスリンの量を意味する。
【００６７】
送達物質の有効な量は、胃腸管から薬剤の治療的に有効な量の吸収を促進させる送達物質の量を意味する。
【００６８】
有機溶媒は、液状ポリマーとその混合液を含む、非水由来のあらゆる溶媒を意味する。本発明に適している有機溶媒は、セトン、メチルアルコール、メチルイソブチルケトン、クロロホルム、1-プロパノール、イソプロパノール、2-プロパノール、アセトニトリル、1-ブタノール、2‐ブタノール、エチルアルコール、シクロヘキサン、ジオキサン、酢酸エチル、ジメチルホルムアミド、ジクロロエタン、ヘキサン、イソオクタン、塩化メチレン、tert-ブチルアルコール、トルエン、四塩化炭素、又はその組合わせを含んでいる。
【００６９】
ペプチドは、低〜中分子量のポリペプチド、通常は2以上のアミノ酸残基を意味し、しばしばであるが、必ずでなくさらに大きいタンパク質の断片である。
【００７０】
タンパク質は、炭素、水素、酸素、窒素及び通常はイオウを含有する複雑な高重合体を意味し、ペプチド結合によって結合したアミノ酸の鎖から構成される。本出願におけるタンパク質は、糖蛋白質、抗体、非酵素タンパク質、酵素、ホルモン、タンパク質のサブユニット、例えば、ペプチドを意味する。タンパク質の分子量範囲は、1000ダルトンのペプチドから600〜1000キロダルトンの糖蛋白質までを含んでいる。
【００７１】
再構成は、組成物の溶解又は適切な緩衝液中の組成物又は医薬組成物を意味する。
【００７２】
単位投与形態は、ヒトや動物の被検者に適し、当該技術において既知である個々に包装された、物理的に分離した単位を意味する。インスリンの治療的に有効な量を含む本発明の剤形が、治療効果を達成する１種以上の単位投与量(例えば、錠剤、カプセル、粉末、半固体(例えば、ゲルカップ又はフィルム)、経口投与のための液体、注射用アンプル又はバイアル、充填した注射器を含むことができることが本発明のために企図される。剤形の好ましい一例が経口剤形であることが本発明のためにさらに企図される。
【００７３】
修飾されていないインスリンは、あらゆる薬学的に許容しうる方法で又は米国特許第6,309,633号に記載されるようなオリゴマーと結合されていない及び/又は米国特許第5,359,030号; 同第5,438,040号; 及び/又は同第5,681,811号に記載されるような両親媒性修飾に供されていないあらゆる薬学的に許容しうる原料から調製されるインスリンを意味し、これらの特許は全体として本願明細書に含まれるものとする。
【００７４】
“食事"という用語は、標準ADA及び/又は混合食事を意味する。
【００７５】
“平均"という用語は、薬物動態学的値に先行する場合(例えば、平均tmax)、特に明記しない限り薬物動態値の算術平均値を示す。
【００７６】
“平均ベースラインレベル"は、例えば、単一臨床実験又は1を超える臨床実験の組合わせ全体で統計学的に有意な数の被検者の平均値である比較の根拠として用いられるある種の値の測定、計算又はレベルを意味する。
【００７７】
本明細書に用いられる“Cmax"という用語は、投薬間隔内で観察される薬剤の最高血漿濃度である。
【００７８】
本明細書に用いられる“tmax"という用語は、Cmaxが観察される投与後の時間である。
【００７９】
本明細書に用いられる“AUC"という用語は、完了する試料収集間隔に対する台形規則によって算出される血漿濃度-時間曲線の下での領域を意味する。
【００８０】
“多回投与"という用語は、その組成物の投薬間隔に従ってヒト患者が薬剤組成物を少なくとも2回投与を受けたことを意味する。
【００８１】
用語“一回量"という用語は、ヒト患者が薬剤組成物の一回量を受け、薬剤血漿濃度が定常状態を達成しなかったことを意味する。“一回量"又は“定常状態"が特に示されないならば、本明細書に開示され主張された薬物動態パラメータは一回量と定常状態双方を包含する。
【００８２】
本明細書に用いられる“生体利用性"という用語は、薬剤又は物質は、体内の治療部位に吸収されるか或いは利用できる程度又は比率(%)を意味する。これは、下記式によって算出される。
相対生体利用性(%)= (SC投与量/経口投与量)×(経口AUC/SC AUC)×100
【００８３】
本明細書に用いられる“生物作用能"という用語は、薬剤又は物質は、体内の治療部位に有効である程度又は比率(%)を意味する。これは下記式によって算出される。
相対生物作用能(%)= (SC投与量/経口投与量)×(経口AUC/SC AUC)×100
【００８４】
本明細書に用いられ、添えられた特許請求の範囲における、名詞の単数形は、文脈が明らかに示されない限り、複数の対象を含んでいる。従って、例えば、“分子"に対する指示はそのような分子の１種以上を含み、“試薬"はそのような異なる試薬の１種以上を含み、“抗体"に対する指示はそのような異なる抗体の１種以上を含み、“方法"に対する指示は本明細書に記載される方法を修飾又は置換することができる当業者に既知の等価ステップや方法に対する指示を含んでいる。
【００８５】
特に定義されない限り、本明細書に用いられる全ての専門用語や科学用語は本発明が属する当業者によって一般に理解されるのと同様の意味を有する。本明細書に記載される類似の又は等価ないかなる方法、組成物、試薬、細胞も本発明の実施又は試験において使用し得るが、好ましい方法及び材料が本明細書に記載されている。文献が共に引用しているた個々の情報を記載し開示している、全ての図、グラフ、式、具体例、及び図面を含む本明細書に言及された全ての参考文献の記載は、本願明細書に含まれるものとする。
【００８６】
上記参考文献は、本出願の出願日前の開示だけが示されている。本発明が従来の発明によってこのような開示に先だつ権利を与えられないことを容認するものとして解釈すべきものはその中にはなにもない。本説明の全体にわたって、示される好ましい実施態様と例は本発明に対する制限でなく典型としてみなされるべきである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００８７】
本発明は、さらに、動物、好ましくはヒトにおいて糖尿病、グルコース耐性損傷、初期糖尿病、後期糖尿病を治療する方法、及び就寝時に又はその直前に、好ましくは長期にわたって本明細書に記載される剤形の１つ以上の単位投与量を投与することを含むグルコースホメオスタシスを達成する方法を提供する。
【００８８】
本発明は、さらに、インスリン又はその薬学的に許容しうる塩と、経口的に吸収されるインスリンにする(即ち、生体利用可能性)送達物質の有効な量又はその薬学的に許容しうる塩を含む医薬組成物の経口剤形で動物、好ましくはヒトを、前記動物、好ましくはヒトに前記組成物を就寝時に又はその直前に長期にわたって投与することによって治療するための方法を提供する。
【００８９】
本発明は、さらに、糖尿病を治療する及び/又はインスリンの長期投与と関連している全身系高インスリン血症の発生率を低下させる方法を提供する方法であって、インスリンと胃腸管からインスリンの投与量の吸収を容易にする送達物質の投与量を就寝時に又はその直前に、好ましくは長期にわたって糖尿病患者に経口投与することを含む、前記方法を提供する。
【００９０】
本発明は、さらに、グルコース耐性損傷又は初期糖尿病を有する哺乳動物においてβ細胞機能を予防的に保全する方法であって、インスリンを含む医薬製剤(本明細書に記載される)の経口的に有効な投与量を就寝時に又はその直前に長期にわたって、例えば、少なくとも約2週間、又は患者の寿命の間投与することを含む、前記方法に関する。
【００９１】
本発明は、さらに、グルコース耐性損傷又は初期糖尿病を有する哺乳動物においてβ細胞死滅又は機能異常を防止するための方法であって、インスリンを含む医薬製剤の経口的に有効な投与量を就寝時に又はその直前に長期にわたって、例えば、少なくとも約2週間投与することを含む、前記方法に関する。
【００９２】
本発明は、さらに、顕性又はインスリン依存性糖尿病を発症することからグルコース耐性損傷又は初期糖尿病を有する哺乳動物を長期保護するための方法であって、インスリンを含む医薬製剤の経口的に有効な投与量を就寝時に又はその直前に、長期にわたって、例えば、少なくとも約2週間投与することを含む、前記方法に関する。
【００９３】
本発明は、さらに、グルコース耐性損傷又は初期糖尿病を有する哺乳動物において顕性又はインスリン依存性糖尿病の発病を遅延させるための方法であって、インスリンを含む医薬製剤の経口的に有効な投与量を就寝時に又はその直前に長期にわたって、例えば、少なくとも約2週間投与することを含む、前記方法に関する。
【００９４】
一般に、本発明は、インスリンと、及びインスリンが生体利用性且つ生物作用能であるようにインスリンを投与するために有効な医薬組成物を投与する方法を提供する。送達物質は、インスリンが胃の粘膜で経口的に吸収されることを可能にし、それとともに(同じ剤形でか又は、同時にそれとともに)、又は、順次(送達物質とインスリンが同時に同じ場所、例えば、胃に共に供給する時間内で投与される限り、いずれの順序でも)投与されるインスリンの吸収を容易にする。本発明の医薬組成物の経口投与後、送達物質が胃腸管の粘膜バリヤを通過し、被検者の血漿及び/又は血液において検出され得る血流に吸収される。血漿及び/又は血液において測定される血流中の送達物質のレベルは用量依存である。
【００９５】
本発明の一好ましい医薬組成物は、当該技術において開業医によって理解されるように適切な薬剤担体又は賦形剤においてインスリンと送達物質の組合わせを含んでいる。本発明の医薬組成物の剤形が、例えば、ゼラチンカプセル又は錠剤の固体剤形であることが好ましい。
【００９６】
本発明によって、ヒト糖尿病患者に近い門脈(修飾されていない)インスリン濃度と全身系(修飾されていない)インスリン濃度との比は、健常なヒトにおいて得られる比に近い。本発明の経口投与形態の長期投与によって、皮下投与されるインスリンの等効果的投与量で得られる(即ち、血糖値の類似した制御を与える)ものより時間が経つにつれて門脈インスリン濃度が高くなり、全身系インスリン濃度が低くなる。本発明のインスリンの経口投与によって起こることができるインスリンレベルにおける一時的なピークは、血管疾患と関連していると考えられない。
【００９７】
本明細書に用いられる“インスリン"は、種々の原料からのインスリンを意味する。天然に存在するインスリンや構造的に類似した生物活性等価物(短い作用を含むインスリン類似体や長引いた作用を有する類似体)が使用し得る。本発明で有効なインスリンは、天然源、例えば、哺乳動物の異なる種から単離することによって得ることができる。例えば、ウシ又はブタの膵臓から抽出される動物インスリン製剤が使用し得る。インスリン類似体、断片、ミメティクスこれらの化合物、誘導体及びその生物学的等価性のポリエチレングリコール(PEG)修飾誘導体もまた、本発明において使用し得る。
【００９８】
本発明に用いられるインスリンは、ペプチド合成のようなタンパク質化学法を用いて化学合成することにより又は細菌細胞又は真核細胞において組換えインスリンを生産するために分子生物学の手法を用いることにより得ることができる。インスリンの物理的形態は、結晶性及び/又はアモルファス固体形態を含むことができる。さらに、溶解されたインスリンは用いることができる。インスリンの合成形態を含むがこれに限定されないインスリンの他の適切な形態は、米国特許第4,421,685号、同第5,474,978号、及び同第5,534,488号に記載され、それぞれの開示は、本願明細書に全体で含まれるものとする。
【００９９】
本発明の医薬組成物及び方法に有効な最も好ましいインスリンは、亜鉛、ナトリウム、カルシウム、アンモニウム又はそのあらゆる組合わせを含む対イオンを任意に有するヒト組換えインスリンである。ヒト組換えインスリンは、当該技術において周知である遺伝子工学技術を用いて調製することができる。組換えインスリンは、細菌又は真核細胞で生産することができる。ヒト組換えインスリンの機能的等価物もまた、本発明に有効である。組換えヒトインスリンは、種々の商業的原料から得ることができる。例えば、インスリン(亜鉛、ヒト組換え体)は、Calbiochem(サンディエゴ、カリフォルニア州)から購入することができる。或はまた、ヒト組換え亜鉛インスリン結晶: Proinsulin Derived(組み換えDNA由来)USP Qualityは、Eli Lilly & Company(インディアナポリス、インディアナ州)から入手することができる。インスリン類似体を含むインスリンの全てのこのような形態(Insulin Lispro、Insulin Aspart、Insulin Glargine、Insulin Detemirを含むがこれらに限定されない)は本明細書のために考えられ、添付の特許請求の範囲は“インスリン"という用語によって包含されるとみなされる。本発明は、また、ヒトにおけるインスリンの経口投与用薬剤として組換えヒト亜鉛インスリンと送達物質の組成物を提供する。
【０１００】
本発明の他の好ましい実施態様においては、インスリンは、修飾インスリン、例えば、米国特許第6,309,633号に記載されるようなオリゴマーと結合したもの及び/又は米国特許第5,359,030号; 同第5,438,040号;及び/又は同第5,681,811号に記載されるような両親媒性修飾に供されないものである。結合(修飾)インスリンは、上記インスリンのあらゆる種類に加えて又は存在しないときに、また、他のインスリン類似体とともに本発明の経口製剤に取り込むことができる。このような実施態様においては、経口製剤は、胃腸管から前記インスリンの吸収を容易にする薬学的に許容しうる送達物質を含む又は含まない修飾インスリンを含んでいる。
【０１０１】
経口剤形は、修飾されていないインスリンの治療的に有効な量、即ち、薬理学的又は生物学的に有効な量、又はインスリンの用途を達成するために有効な量を含むことが好ましい。投与されるインスリンの投与量は、好ましくは、経口投与時に、健常な被検者において血糖値における測定できる統計学的に有意な低下を生じる量でなければならない。
【０１０２】
しかしながら、投薬単位形が多数の送達物質/生物学的又は化学的に活性な薬剤の組成物を含有することができ、又は分割された薬理学的又は生物学的に有効な量を含有することもできることから、組成物が投薬単位形、例えば、錠剤に用いられる場合、薬理学的又は生物学的に有効な量未満の量があり得る。そのとき、全有効量は、全体として、生物学的又は薬理学的に活性な薬剤の薬理学的、生物学的又は化学的に活性な薬剤を含有する累積した単位で投与することができる。
【０１０３】
用いるべきインスリンの合計量は、当業者によって決定することができる。インスリンの量は、具体的な活性薬剤の用途を達成するのに有効な量である。組成物における量は、治療的に有効な投与量、即ち、薬理学的又は生物学的に有効な量である。しかしながら、投薬単位形が多数の送達物質/生物学的又は化学的に活性な薬剤の組成物を含有することができ、分割された薬理学的又は生物学的に有効な量を含有することもできることから、組成物が投薬単位形、例えば、カプセル、錠剤又は液体に用いられる場合の量は、薬理学的又は生物学的に有効な量未満であり得る。そのとき、全有効量は、全体として、生物学的又は薬理学的に活性な薬剤の薬理学的、生物学的又は化学的に活性な薬剤を含有する累積した単位で投与することができる。
【０１０４】
しかしながら、驚くべきことに、ここで開示された送達物質の使用がインスリンの極めて効率的な送達を与えることがわかった。本明細書に記載される送達物質と組み合わせて服用される場合に好ましいインスリン投与量は、1mgにつき26.11単位の倍率の容認された変換に基づいて、約50〜約600のインスリン単位USP(約2〜約23mg)、好ましくは約100単位(3.8mg)〜約450単位(15.3mg)、さらに好ましくは約200単位(7.66mg)〜約350単位(13.4mg)、なおさらに好ましくは約300単位(11.5mg)である。
【０１０５】
血流にインスリンが入ると、血漿血糖値の低下が生じる。それ故、インスリンの経口吸収は、組成物の経口投与後の被検者の血糖に対する作用を観察することによって証明することができる。本発明の好ましい実施態様においては、本発明の経口投与形態は、インスリンの経口送達を容易にし、インスリンが血流に吸収された後、組成物は経口投与の約20〜約60分後の治療された患者において血糖の最大低下を生じる。本発明の他の実施態様においては、医薬組成物は経口投与の約30〜約50分後の治療された患者において血糖の最大低下を生じる。特に、医薬組成物は経口投与の約40分後の治療された患者において血糖の最大低下を生じる。
【０１０６】
胃腸管に入った後に血流に吸収されるインスリンによって生じる血糖の低下の大きさは、インスリンの投与量によって変動する。本発明のある種の実施態様においては、ヒト糖尿病患者は、経口投与後1時間以内に少なくとも10%だけ血糖の最大減少を示す。他の実施態様においては、ヒト糖尿病患者は、経口投与後1時間以内に少なくとも20%、或いは、経口投与後1時間以内に少なくとも30%だけ血糖の最大減少を示す。
【０１０７】
血糖の正常なレベルは、その日全体にわたって、また、最後の食事からの時間に関して幾分変動する。本発明の1つの目標は、24時間の毎日のサイクル全体にわたって血糖の正常なレベル近くに達成することを促進するインスリンの経口組成物を提供することである。本発明の好ましい実施態様においては、医薬組成物は活性薬剤としてのインスリン又はインスリン類似体と送達物質を約90〜約110mg/dlの空腹時血糖濃度を達成するのに有効な量で含んでいる。他の本発明の好ましい実施態様においては、医薬組成物は、活性薬剤としてインスリン又はインスリン類似体と送達物質を約95〜約105mg/dlの空腹時血糖濃度を達成するのに有効な量で含み、さらに好ましくは、被検者は、約100mg/dlの空腹時血糖濃度を示している。
【０１０８】
食事が摂取された後の時間に、血糖濃度は、消化と、食べた食品から得られる炭水化物の血流への吸収に応答して上昇する。本発明は、血糖の非常に高いレベルを到達及び/又は持続することから防止又は制御するインスリンの経口組成物を提供する。特に、本発明は、食事が摂取された後に、即ち、ポスト食事に、血糖の正常レベルを達成するのを容易にする組成物を提供する。本発明の好ましい実施態様においては、医薬組成物は、活性薬剤としてのインスリンと送達物質を約130〜約170mg/dlの食後血糖濃度を達成するために有効な量で含んでいる。本発明の他の好ましい実施態様においては、医薬組成物は、活性薬剤としてのインスリン又はインスリン類似体と送達物質を約140〜約160mg/dlの食後血糖濃度を達成するのに有効な量で含み、さらに好ましくは、被検者は、約160mg/dl未満で空腹時血糖濃度を示している。
【０１０９】
本発明は、活性薬剤としてのインスリン又はインスリン類似体と送達物質を約95〜約125mg/dlの食前(食事が摂取される前の)血糖濃度を達成するのに有効な量で含む経口投与のための医薬組成物を提供する。好適実施態様においては、本発明は、活性薬剤としてのインスリン又はインスリン類似体と送達物質を約100〜約120mg/dlの食前血糖濃度を達成するのに有効な量で含む経口投与用医薬組成物を提供する。
【０１１０】
本発明は、活性薬剤としてインスリンと送達物質を約70〜約120mg/dlの夕方の間の正常範囲内の血糖濃度を達成するのに有効な量で含む経口投与のための医薬組成物を提供する。好適実施態様においては、本発明は、活性薬剤としてインスリン又はインスリン類似体と送達物質を約80〜約120mg/dlの午前3時の血糖濃度を達成するのに有効な量で含む経口投与用医薬組成物を提供する。
【０１１１】
ある種の好ましい実施態様においては、方法及び医薬組成物は米国仮出願第60/346,746号、同第60/347,312号に示される薬物動態パラメータを提供し、それぞれの開示は本願明細書に含まれるものとする。
【０１１２】
インスリンの治療効果を必要としている被検者の血流にインスリンを十分に送達するのに必要な送達物質の量は、次の１種以上; 具体的な送達物質の化学構造; インスリンと送達物質の相互作用の種類と程度; 単位投与量の種類、即ち、固体、液体、錠剤、カプセル、懸濁液; 胃腸管における送達物質の濃度、被検者の摂食状態、被検者の食事、被検者の健康、送達物質とインスリンとの比によって変動させることができる。
【０１１３】
好ましい実施態様においては、本発明の経口投与形態は、インスリンと送達物質、例えば、N-(4-クロロサリチロイル)-4-アミノ酪酸一ナトリウム(4-CNAB)、Emisphere Technologies, Inc.によって発見された新規な化合物の混合物を、又は別個にインスリンと送達物質を含有して含んでいる。
【０１１４】
本発明の実施態様においては、さらに、本明細書に記載される経口投与形態は、糖尿病、グルコース耐性損傷を治療するために又はグルコースホメオスタシスを達成するために追加治療と組み合わせて本明細書に記載されるように経口投与され、前記追加治療は、例えば、追加薬剤(例えばスルホニル尿素誘導体)、ビグアニド、α-グルコシダーゼ、異なる経路を経て送達されるインスリン(例えば、非経口インスリン)、及び/又はインスリン増感剤を含んでいる。
【０１１５】
本発明の別の例においては、本明細書に記載される経口投与形態は、主に2つの理由から、低血糖事象の可能性を減少させる。第一に、高インスリン血症の下でさえグルコースの肝臓取込みが不変であることから、肝臓をインスリン過剰になることができない。末梢組織と異なり、肝臓は膵臓を刺激して内在性インスリンを生産することををやめるだけであり、肝臓は追加グルコースを没収しない。さらに、(b)インスリンの短いピーク(例えば、添えられた例に示されるように)は、インスリンが高末梢レベルに達したとしてもピークは急激に低下することを示している。
【０１１６】
インスリンの吸収作用は、経口治療後のC-ペプチド濃度の低下を観察することによって本発明の医薬組成物で治療したヒト患者において現れる。例えば、本発明の一例においては、インスリンの経口送達を容易にするために
医薬組成物は活性薬剤としてのインスリンと送達物質としての化合物4-CNABを含み、インスリンが血流に吸収された後、組成物は経口投与の約80〜約120分後に治療された患者においてC-ペプチド濃度の最大の低下を生じる。特に、組成物は、経口投与の約90〜約110分後に治療された患者におけるC-ペプチド濃度の最大低下を生じる。
【０１１７】
本発明の医薬組成物で治療された被検者において治療後のインスリンの血漿レベルをモニタすることによってインスリンの吸収を検出することができる。活性薬剤が血流のピーク(tmax)に達するのにかかる時間は、以下のような多くの要因: 単位投与量、即ち、固体、液体、錠剤、カプセル、懸濁液の種類; 胃腸管における活性薬剤と送達物質の濃度; 被検者の摂食状態; 被検者の食事; 被検者の健康、活性薬剤と送達物質との比に左右される。本発明の好ましい実施態様においては、医薬組成物は送達物質としての化合物4-CNABと活性薬剤としてのインスリンを含み、組成物は経口投与の約0.1〜約1時間後に、からピーク血漿インスリン濃度を示す。他の実施態様においては、組成物は経口投与の約0.2〜約0.6時間後にピーク血漿インスリン濃度を示す。好適実施態様においては、組成物は経口投与の約0.3〜約0.4時間後にピーク血漿インスリン濃度を示す。他の実施態様においては、組成物は経口投与後の約1時間以内にピーク血漿インスリン濃度を示す。本発明のある種の好ましい実施態様においては、医薬組成物は活性薬剤としてのインスリンとインスリンの経口送達を容易にする送達物質としての化合物4-CNABを含み、インスリンが血流に吸収された後、治療された患者における血漿インスリンレベルは経口投与後約20分でピークに達し、約105分間で第２ピークに達する。
【０１１８】
他の好ましい実施態様においては、本発明に用いられる送達物質は、次の構造を有する。
【化１】
0005452843.tif 000002
(式中、Xは水素、ハロゲン、ヒドロキシル又はC1-C3アルコキシの1種以上であり、Rは置換又は無置換C1-C3アルキレン、置換又は無置換C1-C3アルケニレンである。)
【０１１９】
ある種の好ましい例においては、本発明の送達物質は、好ましくは次の構造を有する。
【化２】
0005452843.tif 000003
(式中、Xはハロゲンであり、Rは置換又は無置換C1-C3アルキレン、置換又は無置換C1-C3アルケニレンである。)
【０１２０】
本発明の好ましい実施態様においては、医薬組成物は、Xが塩素であり、RがC3アルキレンである、送達物質を含んでいる。本発明の他の好ましい実施態様においては、医薬組成物はインスリンの経口送達のための送達物質として化合物4-[(4-クロロ、2-ヒドロキシベンゾイル)アミノ]ブタン酸、好ましくはその一ナトリウム塩を含んでいる。
【０１２１】
送達物質は、カルボン酸又はその塩の形にあることができる。適切な塩としては、有機塩や無機塩、例えば、ナトリウム、カリウム、リチウムのようなアルカリ金属塩; マグネシウム、カルシウム又はバリウムのようなアルカリ土類金属塩; アンモニウム塩; リシン又はアルギニンのような塩基性アミノ酸; ジメチルアミン又はピリジンのような有機アミンを含むが、これらに限定されない。好ましくは、塩はナトリウム塩である。塩は、一価又は多価塩、例えば、一ナトリウム塩、二ナトリウム塩であることができる。塩は、また、エタノール溶媒和物、水和物を含む溶媒和物であることができる。
【０１２２】
本発明に使用し得る他の適切な送達物質としては、米国特許第5,650,386号、同第5,773,647号、同第5,776,888号、同第5,804,688号、同第5,866,536号、同第5,876,710号、同第5,879,681号、同第5,939,381号、同第5,955,503号、同第5,965,121号、同第5,989,539号、同第5,990,166号、同第6,001,347号、同第6,051,561号、同第6,060,513号、同第6,090,958号、同第6,100,298号、同第5,766,633号、同第5,643,957号、同第5,863,944号、同第6,071,510号、同第6,358,504号に記載されるそれらの送達物質が含まれ、それぞれの開示は本願明細書に含まれるものとする。追加の適切な送達物質は、また、国際公開第WO 94/23767号、同第WO 95/11690号、同第WO 95/28920号、同第WO 95/28838号、同第WO 96/10396号、同第WO96/09813号、同第WO 96/12473号、同第WO 96/12475号、同第WO 96/30036号、同第WO 96/33699号、同第WO 97/31938号、同第WO 97/36480号、同第WO 98/25589号、同第WO 98/34632号、同第WO 98/49135号、同第WO 98/25589号、同第WO 99/16427号、同第WO 00/47188号、同第WO 00/07979号、同第WO 00/59863号、同第WO 00/06534号、同第WO 00/40203号、同第WO 00/46182号、同第WO 00/48589号、同第WO 00/50386号、同第WO 00/59480号、同第WO 01/34114号、同第WO 01/21073、同第WO 01/41985、同第WO 01/32130号、同第WO 01/32596号、同第WO 01/44199号、同第WO 01/51454号、同第WO 01/25704号、同第WO 01/25679号、同第WO 01/70219号、同第WO 01/92206号、同第WO 02/02509号、同第WO 02/15959号、同第WO 02/16309号、同第WO 02/070438号、同第WO 02/02509号、同第WO 02/20466号、同第WO02/100338号、同第WO 02/19969号、同第WO 03/026582号、国際特許出願第PCT/US02/06610号、同第PCT/US02/06295号、同第PCT/US02/36552号に記載され、それぞれの開示は本願明細書に含まれるものとする。
【０１２３】
本発明の送達物質化合物の塩は、当該技術において既知の方法によって調製することができる。例えば、ナトリウム塩は、送達物質化合物をエタノールに溶解するとともに水酸化ナトリウム水溶液を加えることによって調製することができる。
【０１２４】
本明細書に記載される化合物は、アミノ酸から得ることができ、本開示及び国際公開第WO 96/30036号、同第WO 97/36480号、同第WO 98/34632号、同第WO 00/07979号、米国特許第5,643,957号、同第5,650,386号に記載される方法に基づき当業者に既知の方法でアミノ酸から容易に調製することができ、それぞれの開示は本願明細書に含まれるものとする。例えば、化合物は、単一アミノ酸と、アミノ酸内に有する遊離アミノ部分と反応してアミドを形成する適切なアシル化剤又はアミン修飾剤とを反応させることによって調製することができる。保護基は、当業者に既知である望まれていない副作用を避けるために用いることができる。
【０１２５】
送達物質は、また、国際公開第WO 02/02509号や同第WO 03/057650号の方法によって調製することができ、その開示は本願明細書に含まれるものとする。送達物質は、また、国際公開第WO 00/46182の方法に従って適切なサリチルアミドのアルキル化によって調製することができ、その開示は本願明細書に含まれるものとする。サリチルアミドは、サリチル酸から硫酸とアンモニアとの反応によってエステルを経て調製することができる。
【０１２６】
さらに、これらの化合物の１種以上を含むポリアミノ酸やペプチドを用いることができる。アミノ酸は、少なくとも１つの遊離アミン基を有するあらゆるカルボン酸であり、天然に存在するアミノ酸、合成アミノ酸を含んでいる。ポリアミノ酸は、ペプチド(ペプチド結合で結合した2つ以上のアミノ酸である)であり、例えば、エステル又は無水物結合によって結合し得る、他の基によって形成された結合によって結合される2つ以上のアミノ酸でもある。ペプチドは、長さが2つのアミノ酸を有するジペプチドから数百のアミノ酸を有するポリペプチドまで変動させることができる。
【０１２７】
送達物質化合物は、再結晶又は単独で又は相前後して結合された１種以上の固体クロマトグラフ保持体による分画によって精製することができる。適切な再結晶溶媒系は、エタノール、水、ヘプタン、酢酸エチル、アセトニトリル、メタノール、テトラヒドロフラン、その混合物を含むが、これらに限定されない。分画は、移動層としてメタノール/n-プロパノール混合液を用いた、アルミナのような適切なクロマトグラフ保持体; 移動層としてトリフルオロ酢酸/アセトニトリル混合液を用いた逆相クロマトグラフィ; 移動層として水又は適切な緩衝液を用いたイオン交換クロマトグラフィで行うことができる。陰イオン交換クロマトグラフィが行われる場合、好ましくは、0-500mM塩化ナトリウム勾配が用いられる。
【０１２８】
本発明の医薬組成物の経口投与後、送達物質は胃腸管の粘膜バリヤを通過し、血流に吸収され、そこで被検者の血漿において検出することができる。血漿中で測定される血流における送達物質のレベルは用量依存性である。送達物質は、それとともに(同じ剤形で、又は同時にそれとともに)、又は順次(送達物質と薬剤が、同時に、同じ場所、例えば、胃に双方を供給する時間内に投与される限り、いずれの順序でも)投与された薬剤(活性薬剤)の吸収を容易にする。
【０１２９】
本発明のある種の好ましい実施態様においては、経口投与後に達成された送達物質のピーク血漿濃度(Cmax)は、経口投与後、好ましくは約10〜約250,000ng/ml、好ましくは約100〜約125,000であり、好ましくは、送達物質のピーク血漿濃度は、経口投与後、約1,000〜約50,000ng/mlである。さらに好ましくは、本発明の送達物質のピーク血漿濃度は、経口投与後、約5,000〜約15,000ng/mlである。
【０１３０】
送達物質が血流(tmax)においてピークに達するのにかかる時間は、次のような多くの要因: 単位投与量の種類、即ち、固体、液体、錠剤、カプセル、懸濁液; 胃腸管における送達物質の濃度; 被検者の摂食状態; 被検者の食事; 被検者の健康; 送達物質と活性薬剤との比に左右されることがある。本発明の送達物質は、経口的に直接の放出剤形で投与された場合に胃腸管から急速に吸収され、好ましくは、経口投与後の約0.1〜約8時間以内に、好ましくは経口投与の約0.1〜約３時間後にピークの血漿濃度を示す。
【０１３１】
好ましい実施態様においては、送達物質のtmaxは経口投与の約0.3〜約1.5時間後に現れる。ある種の実施態様においては、送達物質は、経口投与後の約2時間以内に、最も好ましくは、経口投与後の約1時間以内にtmaxを達成する。
【０１３２】
本組成物における送達物質の量は、送達有効量であり、当業者に既知の方法で求めることができる。その活性薬剤の治療効果を必要としている被検者の血流に活性薬剤を十分に送達するのに必要な送達物質の量は、次の１種以上; 活性薬剤の化学的性質; 具体的な送達物質の化学構造; 活性薬剤と送達物質の相互作用の種類と程度; 単位投与量、即ち、固体、液体、錠剤、カプセル、懸濁液の種類; 胃腸管における送達物質の濃度; 被検者の摂食状態; 被検者の食事; 被検者の健康; 送達物質と活性薬剤との比によって変動させることができる。本発明のある種の好ましい実施態様においては、医薬組成物に好ましい送達物質の量は、約1mg〜約2,000mgの送達物質、さらに好ましくは約1mg〜約800mgの前記送達物質、さらに好ましくは約50mg〜約700mgの前記送達物質、さらに好ましくは約70mg〜約700mgの前記送達物質、なおさらに好ましくは約100〜約600mgである。
【０１３３】
好ましくは、送達物質は4-CNABである。具体的な活性薬剤を送達するのに必要とされる送達物質の量が可変であり、所望の治療効果を生じるのに必要とされる活性薬剤の量も可変であるので、異なる活性薬剤/送達物質の組合わせの活性薬剤と送達物質との比は変動してもよい。経口医薬組成物が活性薬剤としてインスリンを含み、送達物質が化合物4-CNABである、本発明のある種の好ましい実施態様においては、医薬組成物に含まれる送達物質の量は約100mg〜約600mgの前記送達物質であってもよい。
【０１３４】
医薬組成物が活性薬剤としてインスリンを含み、送達物質が4-CNABの一ナトリウム塩である、本発明のある種の好ましい実施態様においては、インスリン[単位]と送達物質[mg]との比は10:1[単位/mg]〜1:10[単位/mg]の範囲にあり、好ましくは、インスリン[単位]と送達物質[mg]との比は5:1[単位/mg]〜0.5:1[単位/mg]の範囲にある。
【０１３５】
単独投与における好ましいインスリン投与量は、約5〜約1000のインスリン単位USP、好ましくは約50〜約400、さらに好ましくは約150〜約400、なおさらに好ましくは約150〜約300単位である。
【０１３６】
インスリンと送達物質との最適比は、送達物質によって変動させることができる。インスリンと送達物質との比を最適化することは当業者の知識の範囲内である。
【０１３７】
医薬組成物が送達物質として化合物4-CNABと活性薬剤としてインスリンを含む本発明の好ましい実施態様においては、組成物は、経口投与後の約0.1〜約３時間以内にピーク血漿送達物質濃度を示す。医薬組成物が送達物質として化合物4-CNABと活性薬剤としてインスリンを含むある種の好ましい実施態様においては、達成した送達物質のピーク血漿濃度は約8,000〜約37,000ng/mlである。
【０１３８】
4-CNABがインスリンの胃腸の吸収を容易にする機序は、完全にはまだ解明されていない。現在の作業仮説は、4-CNABが非共有結合でインスリンと相互作用し、吸収のためにさらに有利な物理化学的性質を生じることである。本作業仮説は、説明のためだけに示され、決して本発明又は添付の特許請求の範囲を制限するするものではない。
【０１３９】
本願明細書に含まれている上で列挙したような以前の特許出願においては、Emisphere Technologies, Inc.が種々の送達物質の構造、吸収の有効性と送達の有効性の比較、好ましい送達物質4-CNABの調製、ヒト研究のためのその調製、送達物質4-CNABを含む以前の非臨床的研究と臨床的研究に関するデータを開示した。
【０１４０】
送達物質は、乾燥粉末形態で又は共に湿潤粒状化して、投与前に修飾されていないインスリンと混合することによって直接用いることができる。この混合物に、他の薬学的に許容しうる賦形剤を添加することができる。次に、混合物を錠剤にするか又は活性薬剤と送達物質の単位投与量を含有するゼラチンカプセルに入れることもできる。或はまた、送達物質/インスリン混合物は経口溶液又は懸濁液として調製することができる。送達物質とインスリンは、投与前に共に混合される必要がなく、ある種の実施態様においては、インスリンの単位投与量(他の薬学的に許容しうる賦形剤の有無にかかわらず)が本発明の送達物質を含めずに経口投与され、送達物質がインスリンの前に、後に、又は同時に別個に経口投与される(他の薬学的に許容しうる賦形剤の有無にかかわらず)。
【０１４１】
ある種の好ましい例においては、本発明の経口投与形態は固体である。乾燥粉末形態での修飾されていないインスリンが安定であり、ある種の好ましい実施態様においては、送達物質と望ましい比で簡単に混合される。次に、任意の医薬賦形剤の有無にかかわらず、乾燥粉末混合物はゼラチンカプセルに充填することができる。或はまた、乾燥粉末形態での修飾されていないインスリンは送達物質と任意の医薬賦形剤と共に混合することができ、混合物を当業者に既知の標準打錠手順に従って錠剤にすることができる。
【０１４２】
本発明の剤形は、まずインスリンと送達物質を1つの溶液又は別個の溶液に溶解することにより製造することができる。溶媒は、好ましくは水溶液であるが、送達物質を可溶化するのに必要な場合に有機溶媒又は水性有機溶媒混合物を用いることができる。2つの溶液が用いられる場合、インスリン或いは送達物質の適正量を与えるのに必要な各々の割合を組合わせ、得られた溶液は凍結乾燥法又は等価手段によって乾燥することができる。本発明の一実施形態においては、経口剤形は、乾燥することができ、経口投与前に再水和することができる。
【０１４３】
投与混合液は、例えば、投与の直前に送達物質の水溶液とインスリンの水溶液とを混合することによって調製することができる。或はまた、送達物質とインスリンは製造プロセスの間に混合することもできる。溶液は、リン酸緩衝塩、クエン酸、酢酸、ゼラチン、アラビアゴムのような添加剤を任意に含有することができる。
【０１４４】
安定化添加剤は、送達物質溶液に取込むことができる。ある薬剤においては、このような添加剤を存在させると、溶液中の物質の安定性と分散性が促進する。安定化添加剤は、約0.1〜5%(W/V)の範囲にある濃度、好ましくは約0.5%(W/V)で使うことができる。安定化添加剤の適切であるが限定されない例としては、アラビアゴム、ゼラチン、メチルセルロース、ポリエチレングリコール、カルボン酸、その塩、及びポリリジンが含まれる。好ましい安定化添加剤は、アラビアゴム、ゼラチン、メチルセルロースである。
【０１４５】
本組成物における送達物質の量は、送達有効量であり、当業者に既知の方法によってあらゆる具体的な送達物質/活性薬剤の組合わせについて求めることができる。
【０１４６】
インスリンと送達物質、例えば、4-CNABの混合液を含有するか又は別個にインスリンと送達物質を含有する本発明の経口投与形態は、医薬賦形剤として当業者に既知の追加材料を含むことができる。医薬成分又は賦形剤を含むあらゆる賦形剤又は成分。このような医薬賦形剤としては、例えば、以下の化合物が含まれる。酸性化剤(酢酸、氷酢酸、クエン酸、フマル酸、塩酸、希塩酸、リンゴ酸、硝酸、リン酸、希釈されたリン酸、硫酸、酒石酸); エアロゾル噴射剤(ブタン、ジクロロジフルオロ-メタン、ジクロロテトラフルオロエタン、イソブタン、プロパン、トリクロロモノフッ化メタン); 空気置換剤(二酸化炭素、窒素); アルコール変性剤(安息香酸デナトニウム、メチルイソブチルケトン、スクロースオクタアセテート); アルカリ化剤(強アンモニア溶液、炭酸アンモニウム、ジエタノールアミン、ジイソプロパノールアミン、水酸化カリウム、重炭酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム、トロールアミン); 固化防止剤(流動促進剤を参照のこと); 消泡剤(ジメチコーン、シメチコン); 抗菌防腐剤(塩化ベンザルコニウム、塩化ベンザルコニウム液、塩化ベンゼルトニウム、安息香酸、ベンジルアルコール、ブチルパラベン、塩化セチルピリジニウム、クロロブタノール、クロロクレゾール、クレゾール、デヒドロ酢酸、エチルパラベン、メチルパラベン、メチルパラベンナトリウム、フェノール、フェニルエチルアルコール、酢酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、安息香酸カリウム、ソルビン酸カリウム、プロピルパラベン、プロピルパラベンナトリウム、安息香酸ナトリウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、ソルビン酸、チメロサール、チモール); 抗酸化剤(アスコルビン酸、アスコルビン酸パルミテート、ブチル化ヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、次亜リン酸、モノチオグリセロール、没食子酸プロピル、ホルムアルデヒドスルホキシル酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、二酸化イオウ、トコフェロール、トコフェロール賦形剤); 緩衝剤(酢酸、炭酸アンモニウム、リン酸アンモニウム、ホウ酸、クエン酸、乳酸、リン酸、クエン酸カリウム、メタリン酸カリウム、一塩基性リン酸カリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム溶液、二塩基性リン酸ナトリウム、一塩基性リン酸ナトリウム); カプセル滑沢剤(錠剤及びカプセルの滑沢剤を参照のこと); キレート剤(エデト酸二ナトリウム、エチレンジアミン四酢酸及び塩、エデト酸); コーティング剤(カルボキシメチルセルロースナトリウム、酢酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、エチルセルロース、ゼラチン、医薬用釉薬、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタル酸塩、メタクリル酸コポリマー、メチルセルロース、ポリエチレングリコール、ポリ酢酸フタル酸ビニル、シェラック、スクロース、二酸化チタン、カルナウバ蝋、ミクロクリスタリンワックス、ゼイン); 着色剤(キャラメル、赤、黄、黒又はブレンド、酸化第二鉄); 錯化剤(エチレンジアミン四酢酸及び塩(EDTA)、エデト酸、ゲンチジン酸エタノールアミド、オキシキノリン硫酸塩); 乾燥剤(塩化カルシウム、硫酸カ���シウム、二酸化ケイ素); 乳化剤及び/又は可溶化剤(アカシア、コレステロール、ジエタノールアミン(補助剤)、モノステアリン酸グリセリン、ラノリンアルコール、レシチン、モノグリセリド、ジグリセリド、モノエタノールアミン(補助剤)、オレイン酸(補助剤)、オレイルアルコール(安定剤)、ポロキシマー、ポリオキシエチレン50ステアレート、ポリオキシル35ヒマシ油、ポリオキシル40水素化ヒマシ油、ポリオキシル10オレイルエーテル、ポリオキシル20 セトステアリルエーテル、ステアリン酸ポリオキシル40、ポリソルベート20、ポリソルベート40、ポリソルベート80、プロピレン二酢酸エチレングリコール、プロピレングリコールモノステアレート、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸ナトリウム、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノステアレート、ステアリン酸、トロラミン、乳化蝋); ろ過助剤(粉末セルロース、精製ケイ藻土); 香味剤及び香料(アネトール、ベンズアルデヒド、エチルバニリン、メントール、サリチル酸メチル、グルタミン酸一ナトリウム、オレンジ花精油、ハッカ、ハッカ油、ハッカ精、ローズ油、強いローズ水、チモール、トルーバルサムチンキ、バニラ、バニラチンキ、バニリン); 流動促進剤及び/又は固化防止剤(ケイ酸カルシウム、ケイ酸マグネシウム、コロイド状二酸化ケイ素、タルク); 湿潤剤(グリセリン、ヘキシレングリコール、プロピレングリコール、ソルビトール); 可塑剤(ヒマシ油、ジアセチル化モノグリセリド、フタル酸ジエチル、グリセリン、モノアセチル化モノグリセリド、ジアセチル化モノグリセリド、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、トリアセチン、トリエチルシトレート); ポリマー(例えば、酢酸セルロース、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、アクリルポリマー、アクリルコポリマー); 溶媒(アセトン、アルコール、希アルコール、抱水アミレン、安息香酸ベンジル、ブチルアルコール、四塩化炭素、クロロホルム、トウモロコシ油、綿実油、酢酸エチル、グリセリン、ヘキシレングリコール、イソプロピルアルコール、メチルアルコール、塩化メチレン、メチルイソブチルケトン、鉱油、落花生油、ポリエチレングリコール、炭酸プロピレン、プロピレングリコール、ゴマ油、注射用水、滅菌注射用水、洗浄用滅菌水、純水); 吸収剤(粉末セルロース、木炭、精製ケイ藻土); 二酸化炭素吸収剤(水酸化バリウムライム、ソーダライム); 硬化剤(硬化ヒマシ油、セトステアリルアルコール、セチルアルコール、セチルエステルワックス、硬質脂肪、パラフィン、ポリエチレン賦形剤、ステアリルアルコール、乳化蝋、白蝋、黄蝋); 沈殿防止剤及び/又は粘度増強剤(アカシア、寒天、アルギン酸、モノステアリン酸アルミニウム、ベントナイト、精製ベントナイト、マグマベントナイト、934pカルボマー、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム12、カラゲナン、ミクロクリスタリンセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムセルロース、デキストリン、ゼラチン、グアガム、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ケ���酸アルミニウムマグネシウム、メチルセルロース、ペクチン、ポリエチレンオキシド、ポリビニルアルコール、ポビドン、アルギン酸プロピレングリコール、二酸化ケイ素、コロイド状二酸化ケイ素、アルギン酸ナトリウム、トラガカントゴム、キサンタンガム); 甘味剤(アスパルテーム、デキストレート、デキストロース、賦形剤ブドウ糖、フルクトース、マンニトール、サッカリン、カルシウムサッカリン、ナトリウムサッカリン、ソルビトール、溶液ソルビトール、スクロース、圧縮糖、粉砂糖、シロップ); 錠剤結合剤(アカシア、アルギン酸、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ミクロクリスタリンセルロース、デキストリン、エチルセルロース、ゼラチン、液状グルコース、グアガム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース、ポリエチレンオキシド、ポビドン、糊化前デンプン、シロップ); 錠剤及び/又はカプセル希釈剤(炭酸カルシウム、二塩基性リン酸カルシウム、三塩基性リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、ミクロクリスタリンセルロース、粉末セルロース、デキストレート、デキストリン、デキストロース賦形剤、フルクトース、カオリン、ラクトース、マンニトール、ソルビトール、デンプン、糊化前デンプン、スクロース、圧縮糖、粉砂糖); 錠剤崩壊剤(アルギン酸、ミクロクリスタリンセルロース、クロスカルメロースナトリウム、コルスポビドン、ポラクリリンカリウム、ナトリウムデンプングリコレート、デンプン、糊化前デンプン); 錠剤及び/又はカプセル滑沢剤(ステアリン酸カルシウム、グリセリルベヘネート、ステアリン酸マグネシウム、軽油、ポリエチレングリコール、ナトリウムステアリルフマレート、ステアリン酸、精製ステアリン酸、タルク、水素化植物油、ステアリン酸亜鉛); 等張化剤(デキストロース、グリセリン、マンニトール、塩化カリウム、塩化ナトリウム); 賦形剤: 香味及び/又は甘味(芳香エリキシル、化合物ベンズアルデヒドエリキシル、イソアルコールエリキシル、ハッカ水、ソルビトール溶液、シロップ、トルーバルサムシロップ); 賦形剤: 油性(扁桃油、トウモロコシ油、綿実油、エチルオレエート、イソプロピルミリステート、イソプロピルパルミテート、鉱油、軽油、ミリスチルアルコール、オクチルドデカノール、オリーブ油、落花生油、杏仁油、ゴマ油、ダイズ油、スクアラン); 賦形剤: 固体担体(糖球); 賦形剤: 滅菌(制菌性注射用水、制菌性塩化ナトリウム注射); 粘度増強;(沈殿防止剤を参照のこと); 撥水剤(シクロメチコーン、ジメチコーン、シメチコン); 湿潤剤及び/又は可溶化剤(塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化セチルピリジニウム、ドキュセートナトリウム、ノノキシノール9、ノノキシノール10、オクトキシノール9、ポロキサマー、ポリオキシル35ヒマシ油、ポリオキシル40、硬化ヒマシ油、ポリオキシル50ステアレート、オレイルポリオキシル10エーテル、ポリオキシル20、セトステアリルエーテル、ステアリン酸ポリオキシル40、ポリソルベート20、ポリソルベート40、ポリソルベート60、ポリソルベート80、ラウリル硫酸ナトリウム、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノステアレート、チロキサポール)。このリストは、排他的であることを意味せ���、その代わりに本発明の経口投与形態において用いることができる賦形剤の種類と具体的な賦形剤の代表例であるにすぎない。
【０１４７】
投与後、投薬単位形に本存在するインスリンは循環に吸収される。インスリンの生体利用性は、血液における既知の薬理活性(例えば、血糖低下)を測定することによって容易に評価される。インスリンの生理学的作用は、さらに、試験、例えば、血漿C-ペプチド濃度の測定を用いて測定することができる。或いは、インスリン自体の循環レベルを直接測定することができる。同様に、血液中の4-CNAB又は他の送達物質のレベルを測定することができる。
【０１４８】
本発明をよりよく理解することができるように、以下に例を示す。これらの例は、例示のためだけにあり、いかなる方法でも本発明の範囲を制限するものとして解釈すべきでない。
【０１４９】
本発明をよりよく理解することができるように、以下に例を示す。これらの例は、例示のためだけにあり、いかなる方法でも本発明の範囲を制限するものとして解釈すべきでない。
【０１５０】
例1
送達物質4-CNABの調製
下記構造に対応する化合物を、後述するように調製することができる。
【化３】
0005452843.tif 000004
【０１５１】
約50mlの塩化メチレンを含有する250mlの一つ口丸底フラスコに4-クロロサリチル酸(10.0g、0.0579モル)を加えた。撹拌を開始し、反応の残りの間続けた。カップリング剤1,1-カルボニルジイミダゾール(9.39g、0.0579モル)を固体としてフラスコに分けて加えた。カップリング剤の全てを添加した後に反応液を約20分間室温で撹拌し、次に、エチル-4-アミノブチレート塩酸塩(9.7g、0.0579モル)を撹拌しながらフラスコに添加した。次に、トリエチルアミン(10.49ml、0.0752モルを滴下漏斗から滴下した。滴下漏斗を塩化メチレンですすいだ。反応液を、室温で一晩撹拌した。
【０１５２】
反応液を分液漏斗に注入し、2N HClで洗浄し、エマルジョンを形成した。エマルジョンを2日間放置し、次にガラス漏斗におけるセライトでろ過した。ろ液を分液漏斗に戻して層を分離した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、次にろ別し、ろ液を回転蒸発によって濃縮した。得られた固体物質を2N NaOHで加水分解し、冷蔵によって一晩貯蔵し、次に加水分解を続行した。溶液を2N HClで酸性にし、形成した固形分を分離し、減圧下で乾燥し、メタノール/水を用いて2回再結晶した。固形分を一晩沈殿し、分離、乾燥した。固形分を2N NaOHに溶解し、試料のpHを2N HClでpH 5にした。固形分を収集し、HPLCは単一ピークを示した。次に、これらの固形分をメタノール/水で再結晶し、分離し、次に減圧下で乾燥し、4.96g(33.0%)の4-(4クロロ-2-ヒドロキシベンゾイル)アミノ酪酸を得た(C11H12ClNO4; 分子量257.67)。融点は、131-133℃であった。燃焼分析は、以下の含量を示した: %C: 51.27(計算値), 51.27 (実測値); %H: 4.69 (計算値), 4.55 (測定値); %N: 5.44 (計算値), 5.30 (実測値)。プロトンH NMR分析は、以下を示した: (d6-DMSO): d 13.0, s, 1H (COOH); d 12.1, s, 1H (OH); d 8.9, t, 1H (NH); d 7.86, d, 1H (Hアミドに対してオルト); d 6.98, d, 1H (HフェノールOHに対してオルト); d 6.96, d, 1H, (Hアミドに対してメタ); d 3.33, m, 2H (CH2 NHに隣接); d 2.28, t, 2H (CH2 COOHに隣接); d 1.80, m, 2H (脂肪族CH2 NHに対してβ、CH2 COOHに対してβ)。
【０１５３】
ヒト研究のための4-CNAB調製
出発物質4-クロロサリチル酸(Ihara Chemical Industry Co. Inc, Ltd.、東京、日本、Aapin Chemicals Ltd.オックスフォードシャー、英国から購入した)を用い、メタノール中0.14当量の硫酸、次にメタノール中約4当量のアンモニアを用いてメチルエステルを経てアミドに変換した以外は、ヒト投薬用4-CNAB(一ナトリウムN-(4-クロロサリチロイル)-4-アミノブチレート)を国際公開第WO 00/46182号の方法に従ってRegis Technologies, Inc.(モートングローヴ、イリノイ州)による医薬品製造品質管理基準(GMP)条件で製造した。アルキル化剤は、エチル-4-ブロモブチレートを用いた。
【０１５４】
4-CNABの一ナトリウム塩を、40キログラム規模の以下の方法に従って製造した。4-CNAB遊離酸(500g、1.94モル、FW = 257.67)を22リットルの5つ口丸底フラスコに充填した。フラスコは、オーバーヘッドスターラ、熱電対温度読み出し、還流冷却器、加熱マントルを備え、窒素下に置いた。試薬用アセトン(13リットル)を反応器に加え、混合液を攪拌した。4-CNAB/アセトン混合液を50℃まで加熱してあらゆる固形分を溶解した。曇った褐色溶液を得た。
【０１５５】
50℃溶液を、暖かい圧力フィルタ(Whatman #1ろ紙、〜5マイクロメートル(ミクロン)、18.5平方インチ面積で着装した)で22リットルの清浄な反応器にポンプで送りこみ塩化ナトリウムと他の不溶分を除去した。圧力は、ろ過の終わりに約1.4bar(約20psig)までフィルタ全体に低下した。透明な黄色ろ液を含有する反応器を攪拌し加熱した。50℃で、反応器を熱から除去した。
【０１５６】
透明なろ液を激しく撹拌を維持しつつできるだけ速やかに50%水酸化ナトリウム溶液(155g、1.94モル)を充填した。(過剰充填により、望ましくない形成不溶性ジナトリウム塩が生じる。最終ろ過段階の間に遊離酸が除去されることからわずかに不十分な充填が好ましい。)反応混合液が約52℃に発熱した。沈殿が生じ、生成物がさらにまた透明になる前にゲル化した。
【０１５７】
塩基添加が完了し温度が安定した後に、溶液が曇り、粘度が増加した。反応液を激しく攪拌しつつ60℃で2時間還流した。反応混合液を粘稠になるまで続け、固体の大きなかたまりを形成した。スラリーが淡いピンク色になり、発泡した。反応内容物を3〜4時間かけて周囲温度に冷却した。周囲温度を30分間保持した。沈殿した固形分をフィルタ漏斗で分離した。分離した生成物は洗浄しなかった。得られた4-CNAB一ナトリウム塩を40〜50℃で16〜24時間減圧乾燥して490グラム(1.75モル、収率90%、FW = 279.65)を得た。
【０１５８】
皮下注射のためのインスリンは、Eli Lilly and Company(インディアナポリス、インディアナ州)製HUMULIN7 R注射用インスリンであった。
【０１５９】
200mgの4-CNABと150インスリン単位USPを含有する全てのカプセルを、以下のように調製した。まず、送達物質単独カプセルと送達物質＋インスリン組成物カプセルを充填するのに必要な送達物質材料の合計量を3160gの4-CNABを量ることによって調製した。3160gの4-CNABを、Quadro comil、モデル197Sミル、スクリーンNo.2A 050 G 037 19 136(1270ミクロン))ですりつぶした。次に、1029gの粉にした4-CNABを#35メッシュスクリーンでろ過した。次に、ろ過スクリーンした材料を4クォートシェルに変え、例えば、Vブレンダを用いて25rpmで10.2分間混合した。得られたブレンド材料をカプセルを充填するために用いた。この場合、Fast Cap Capsule Fillerをサイズ3 Fast Cap Encapsulationトレイで用いた。空のカプセルは、それぞれ約48mgの重さがあり、205.6mgの4-CNAB単独の平均充填重量を充填した。従って、送達物質単独カプセルの投与量は205.6mgであった。
【０１６０】
まず31.8gの組換えヒト亜鉛結晶性インスリン(力価26.18単位/mg)Eli Lilly and Company(インディアナポリス、インディアナ州)から得たプロインスリン(組み換えDNA由来)USP品質)を適切な大きさのプラスチックバッグに分配することによりインスリン組成物を調製した。次に、粉にしスクリーンした4-CNABの30gの連続添加物を、約510gが添加されるまでバッグに加えた。4-CNABを各々30g添加した後に振盪と反転によってバッグを十分に混合した。次の532.5gの4-CNABを添加し混合するために、インスリンと4-CNABの541.8gの混合液をVブレンダへ移し、25rpmで10.2分間さらにまた混合した。次に、残っている4-CNABをブレンダに加え、全ての混合液を25のrpmで10.2分間、ブレンダで混合した。最後に、得られた組成物を空のカプセルに上記のように分配した。最終のカプセルは、平均5.7mgのインスリン(150単位インスリンに等価)と200.5mgの4-CNAB又は1:57.3、インスリン: 4-CNABの比を含有した。最終ブレンドの複数の試料をHPLCで処理して均一性を証明し、均一であることがわかった。
【０１６１】
例2
4-CNABとインスリン/4-CNABによる非臨床的研究
インスリン及び送達物質4-CNABの組成物を含む本発明についてラットとサルにおいて薬理学的スクリーニング、薬物動態プロファイリング、毒性評価を含む非臨床的プログラムにおける安全性と毒性を評価した。一般に、4-CNAB単独と、インスリン/4-CNABに対する動物の生理反応は匹敵した。マウス、ラット、サルにおける薬物動態研究から、4-CNABが、経口投与後に急速に吸収され、続いて体から消去されることが示された。4-CNABは、受容体結合スクリーニング分析で評価した主要な分子標的のいずれにおいても潜在的な活性を示さなかった。4つの遺伝子毒性研究を4-CNABで行ない、正の知見はなかった。14日の経口再投与毒性研究に基づいて、NOAEL(無毒性量)がスプラーグ-ドーリーラットで500mg/kg、アカゲザルで400mg/kgであると推定された。
【０１６２】
毒物学研究において、400mg〜2000mgの4-CNAB投与量を評価した。ラットとサルにおける14日間経口再投与毒性研究後、4-CNABの推定無毒性量(NOAEL)はスプラーグ-ドーリーラットで500mg/kg、アカゲザルで400mg/kgであった。それ故、サルは、最も感受性のある種であることがわかった。人における2000mgの4-CNABの最も高く提案された投与量(<30mg/kg)は、サルにおけるNOAELの1/12-1/16である(即ち、NOAEL = 400mg/kg 4-CNAB単独と15U/kgインスリンとの組合わせ)。サルにおけるインスリンの絶対生体利用性は約1%の以下であった。毒物学研究において、ラットにおいて2000mg/kgと同じ程度の4-CNAB投与量と組合わせた15U/kgの経口服用レベルでのインスリンによるものと考えられる知見はなかった。サルにおいて、15U/kgのインスリン投与量を1匹のサルにおける1200mg/kgの4-CNAB投与量と組合わせた単一低血糖エピソードと関連付けた。低用量と組合わせた15U/kgインスリンで効果がなかった。
【０１６３】
ラットとサルにおける非臨床的研究から、試験した範囲にわたって、インスリンの吸収が4-CNABの投与量の増加と共に増強することが示された。同様に、4-CNABの一定の経口投与量の場合、インスリンの吸収がインスリンの投与量の増加と共に増強する。経口インスリン吸収を、ラットにおいてインスリンと4-CNABの異なる投与量で評価した。一定の4-CNAB投与量(200mg/kg)の存在下で4.55、6.5、9.75、13単位/kgの投与量でインスリンを投与した後、血清インスリン濃度の著しい増加が観察された。平均ピーク血清インスリンレベルは、それぞれ31、44、85、132U/mLであった。インスリン吸収は、投与量依存性であり、インスリンの投与量が増加するにつれて増強される。インスリン単独(13単位/kg)又は4-CNAB単独(200mg/kg)の水溶液を経口投与することにより、血清インスリンレベルのいかなる有意な増加も生じなかった。一定のインスリン投与量(13単位/kg)の存在下で4-CNABを50、100、200、300mg/kgの投与量で投与した後、血清インスリン濃度の著しい増加も観察された。平均ピーク血清インスリンレベルは、それぞれ9、39、103、157U/mLであった。インスリン吸収は、投与量依存性であり、4-CNABの投与量が増加するにつれて増強した。
【０１６４】
上記の非臨床的情報に基づいて、150インスリン単位USPの開始インスリン投与量(サルにおける15U/kgの効果なし投与量の約1/7である)が選ばれた。
【０１６５】
例3
本例は、インスリン/4-CNABカプセルを調製する手順を記載するものである。上で調製した4-CNABを、まず35メッシュスクリーンで篩過した。篩過した4-CNABの必要量を量り、おおわれた秤量ボートに保持した。インスリンの必要量を量り、おおわれた秤量ボートに保持した。
【０１６６】
上からのインスリンを同じモルタルに35メッシュスクリーンで篩過し、約2.0グラムの上からの4-CNABを同じ35メッシュスクリーンを用いてインスリンの最上部で篩過した。モルタルの内容物をガラスモルタルと約3分間軽く摩砕して混合し、必要に応じて、こするためにヘラを用いた。上からの4-CNABをモルタルにおける材料の容量に等価な少しずつで同じ35メッシュスクリーンで篩過を続けた。各添加の後に、モルタルの内容物を約3分間混合した。
【０１６７】
最終の添加後、モルタルの内容物をガラスモルタルと軽い摩砕によって約2分間混合し、必要に応じて、ヘラをこするために用いた。最終ブレンドをカプセル充填のための秤量ボートへ移し、カプセルに手で充填した。
【０１６８】
例4
本例においては、本明細書に記載される経口インスリンカプセルを眠りに入る晩に糖尿病をもつ20人のヒト被検者に経口投与した。
【０１６９】
夜間投与のための論理的根拠は、以下の通りである。２型糖尿病患者における経口インスリンによる本明細書に報告される臨床的研究によって、短い持続期間の血糖低下作用が示された。このことは、おそらく、末梢グルコース処理に影響するために経口インスリンによって供給された全身系循環インスリンの半減期が短いことを示すものである。しかしながら、経口投与されたインスリンは、経口インスリンの門脈送達のために、空腹時血糖レベルに起因する、肝臓グルコース産生に対してさらに著しい作用を有することができると仮定した。従って、本研究は、経口投与されたインスリンの代謝作用が血漿においてインスリンの実際の半減期よりさらに長期にわたるかを求めることであった。
【０１７０】
２型糖尿病患者においては、おそらく、疾患の特質である、インスリン抵抗性と不十分なインスリン分泌の組合わせの結果として肝臓によるグルコース産生が抑制されないことから、一晩絶食した後、血糖値がしばしば上昇する。血糖値の上昇により、血糖が長時間上昇する場合には、血糖値を調節するためにインスリンを分泌する膵臓において細胞上の対応する“損耗”が可能であることから、糖尿病患者の症状の重さを永続させる悪循環を生じることがある。治療がインスリン生産細胞機能を保全することである場合には、細胞に対するこの“静止"は、顕性糖尿病の発症又はインスリン非依存性糖尿病からインスリン依存性糖尿病への進行に対して長期保護を与えることができる。それ故、肝臓グルコース産生、つまり、絶食の血糖に対する就寝時経口インスリンの作用を研究することが提案された。
【０１７１】
上記に従って、本例は、２型糖尿病をもつ被検者の2つのグループ、一方が絶食状態で一方が標準の食事のグループにおいて経口投与されたインスリン/4-CNAB製剤の安全性を比較する非盲検、単一投与量、交差研究の結果を報告する。目的は、(1)絶食の２型糖尿病被検者における経口投与されたインスリン/4-CNABの安全性、薬物動態学及び薬力学を比較すること、及び(2)食事又は定期的な薬剤投与による標準の食事の後の血糖、インスリン、C-ペプチドレベルをインスリン/4-CNABによる標準の食事の後の血糖、インスリン、C-ペプチドレベルと比較することであった。
【０１７２】
本例の焦点は、２型糖尿病被検者に就寝時に経口投与したインスリン/4-CNABの安全性、薬物動態学、薬力学の評価である。研究の目的は、経口インスリンの就寝時の投与が一晩絶食のグルコースホメオスタシスやインスリン分泌時の効果を示すことができるかを求めることであった。仮定された作用機序(例えば、グルコースの肝臓生産を抑制するので、β細胞損傷又は死滅さえ防止し、インスリン産生の機能異常が再燃する)が研究の設計の根拠であった。
【０１７３】
研究の第一部分においては、空腹時血糖レベルが高いが、既往、理学的検査、臨床的検査に基づいて健康状態が良好な年齢35-70歳の24人のヒト糖尿病被検者(患者)が研究に関与し、少なくとも7日の間隔で分けた2つの場合に一晩中絶食した状態において研究した。抗糖尿病薬、例えば、アカルボース又はメトホルミンに基づく被検者は、試験の開始24時間前にそれらの薬剤をとらなかった。次の治療条件を検討した。
- グループ1: 十二(12)人の２型糖尿病患者被検者: (a)経口インスリン/4-CNAB−絶食した被検者、及び(b)空のカプセル−絶食した被検者。
- グループ2: 十二(12)人の２型糖尿病患者被検者: (a)定期的に薬剤投与した標準の食事、及び(b)標準の食事の前に経口ヒトインスリン/4-CNAB。
【０１７４】
就寝時に経口投与したインスリン/4-CNABの安全性に関する研究の第2部においては、24人の被検者の20人だけが関与し、追加の4人の被検者は実際業務を考慮したために含まれていない。これらの20人の被検者は眠りに入る前の夜に経口インスリンカプセルをとった。試験は、被検者の自宅で行われ、患者の自身の環境で試験を行う論理的根拠は、よく知られた環境で行われた場合、グルコースホメオスタシスが最良に反映されるとともにグルコースホメオスタシスが入院でかなり変化するという事実に基づいたものである。
【０１７５】
空腹時血糖、インスリンとC-ペプチドのレベルを7:00 a.m.に3日間測定してベースラインレベルを設定した。カプセルをとる前に2日間連続して夜と朝に、被検者はグルコメーター(支給される)で血糖値を測定した。被検者の絶食の血糖値が最初の2日間の朝に>120mg/dlであった場合、被検者は、3日目の夜にインスリンカプセルをとった。最初の2日連続した朝に、患者の空腹時血糖が120mg/dl以下である場合には、患者は研究から放免され、全ての最終の研究手順をプロトコールに従って行った。
【０１７６】
被検者は、7:00と8:00 P.M.の間に毎晩在宅で規則正しい夕食を取った。被検者が、通常、晩に糖尿病用薬剤(例えば、メトホルミン又はアカルボース)をとった場合には、常用量がとられた。11:00 p.m.(少なくとも食後2時間)に、被検者は、以下の成分: 被検者が試験の第一相の間に受ける投与量(200-400U)に従って300mgの4-CNABとインスリンを含有した1回の経口インスリン投与量をとった。被検者が試験の第一相に200Uのインスリンを受け、血糖値の低下がなかった(<15%の低下)場合には、その被検者は、その時300Uのインスリンを受けた。被検者が試験の第一相に300Uのインスリンを受け、血糖値の低下がなかった(<15%の低下)場合には、その被検者は、その時400Uのインスリンを受けた。被検者のいずれも、400Uを超えるインスリンを受けなかった。カプセルは、AAIによって調製され、安定性を示した。
【０１７７】
被検者の血糖値は、被検者が薬剤をとる前にグルコメータで検査した。さらに、血糖値、インスリン、C-ペプチドについて血液を採取した。低血糖症の場合には治療のためにオレンジジュースが容易に利用できた。睡眠中に、被検者は、血糖値が調査者又は患者によって求められる所定の血糖値(低血糖レベル)に達する場合に引き金となるアラームを備えているGlucowatch(一定の間隔で、血糖をモニタし、測定し、血糖値を記録する)を着用した。朝に(例えば、7:00 a.m.に)、被検者の血糖値をグルコメーターで検査し、さらに血糖値、インスリン、C-ペプチドについての追加血液試料を採取した。前の晩からの血液試料を家の冷蔵庫で貯蔵し、朝にナースが血液試料(夜と朝の)を分析のための研究室に運んだ。
【０１７８】
本明細書に例として報告した夜間経口インスリン研究の結果(空腹時血糖、インスリン、C-ペプチドは7:00 a.m.頃に測定し、患者の自身のベースラインレベルと比較した)を図1-図5に示す。結果は、図1と図2(μU/ml)においては数値をもつ患者で報告され、図3-図5においてはグラフで示されている。図1は、各被検者についてインスリン/4-CNABの夜間投薬後の朝に収集した血糖、インスリン、C-ペプチドのデータをその被検者自身のベースラインレベルと比較して示し、図2は、各被検者についてインスリンと4-CNABの夜間投薬の前夜に収集したインスリン、C-ペプチドのデータを示す。図3-図5は、それぞれ、血糖濃度、血液Cペプチド濃度、血液インスリン濃度に対するインスリン/4-CNABの夜間投薬の作用を示す棒グラフである。
【０１７９】
インスリンレベルの増加はカプセルを摂取した10-30分後に現れ、血糖値の低下に先行した。4-CNABは、急速な吸収を示し、その濃度は投与後約30分でピークに達した。深刻な逆効果が研究の間になく、4-CNABは十分に許容された。
【０１８０】
一晩の研究から、経口インスリンの一回量の代謝作用が朝に、即ち、投与の約8時間後なお明らかであることが示された。晩の投与量の結果として、肝臓からの血糖排出量が減少した。図2(血糖に対する作用)に示されるように、夜間経口インスリンカプセルの投与後の患者においてベースライン血糖値と血糖値に統計学的に有意な差はなかった。投与後の朝に測定した血糖は、ベースラインレベルから6%だけ、即ち、133.78±40.53mg/dlから125.78±42.99(p=0.017)に減少した。標準の食事と共にインスリン/4-CNABカプセルを受けた被検者は、アカルボース又はメトホルミンのような定期的な薬剤投与と同様に、標準の食事後に同じ血糖値を示した。
【０１８１】
一方では、全ての患者においては、C-ペプチドとインスリンの統計学的に有意な低下が朝に検出された(血糖値は統計学的に有意に変わらなかった)。平均24%だけ、即ち、2.69 ± 0.88 ng/mlから2.04 ± 0.71 (p<0.001)にベースラインからC-ペプチドレベルの一貫した代償的低下は、内因的に生産されたインスリンを分泌するβ細胞の活性が低下したことを示した。血漿インスリンレベルは、平均33%だけ、即ち、13.90 ± 6.44μU/mlから9.35 ± 4.52 (p<0.001)に低下した。これらの結果は、それぞれ、図3と図4にグラフで示されている。従って、インスリンの吸収がC-ペプチドレベルの統計学的に有意な低下を引き起こし、肝臓グルコース排出量の減少から生じるインスリン要求が減少したことによる内在性インスリン分泌低下を示した。
【０１８２】
従って、インスリン/4-CNABカプセルの摂取後の朝に血漿インスリンレベルの低下を引き起こした就寝時インスリンの投与は、被検者が試験の第一段階にクリニックに来た場合に2回朝に測定したものに匹敵した。経口インスリンの就寝時投薬によって絶食のインスリン要求が一晩抑制され、インスリン感受性を改善することができる(絶食時糖血症が変化せず、全身系インスリン過剰血症が減少した)。
【０１８３】
これらの結果の解釈は、夜間の外因性インスリンの“ブースト"が患者のβ細胞を静止しインスリンを少なく生産して同じ血糖レベルを達成することを可能にすることである。提案された臨床的な意味は、このような治療が単独で示された(就寝時経口インスリン)場合には、これらの細胞が機能不全になる(最終的には疲労及び/又はグルコース毒性から死滅する)につれてβ細胞の機能を保全させるらしいことである。この意味は、2週間のような短い時間さえインスリンを投与することにより、疾患(例えば、IGT又は“グルコース耐性"段階)の初期にインスリンによって“積極的に"介入することによって、細胞に対するこの“静止"が顕性糖尿病を発症する長期間保護を与えることができることを示したいくつかの報告された研究によって支持されている。
【０１８４】
さらに、この研究で絶食の状態において、また、継続した絶食においてインスリンが患者に投与されたという事実にもかかわらず、患者の誰も臨床的に有意な低血糖エピソードを有しないことがわかった。この結果は、本明細書に記載される経口インスリン製剤の投与が非経口(門脈)経路によるインスリン投与より低血糖症に関して安全であるという結論を支持している。
【０１８５】
前の明細書においては、本発明を個々の例示的実施形態とその例に関して記載してきた。しかしながら、次の特許請求の範囲に示される本発明の広い真意と範囲から逸脱することなく種々の修正や変更がなされてもよいことは明らかである。明細書および図面は、従って制限する意味よりむしろ例示としてみなされるものである。
【０１８６】
我々は本発明の多くの実施態様を先に記載してきたが、我々の基本的な構成が本発明の方法及び組成物を用いる他の実施態様を提供するために変えることができることは明らかである。それ故、本発明の範囲は、一例として上文に示された個々の実施態様ではなく本明細書に添えられた特許請求の範囲によって定義されることが理解される。
【図面の簡単な説明】
【０１８７】
【図１】図１はその被検者のベースラインレベルと比較して各被検者のインスリンと4-CNABの夜間投薬後の朝に収集されたデータ(血糖、インスリン、C-ペプチド)の表である。
【図２】図２は各被検者のインスリンと4-CNABの夜間投薬の前の夜に収集されたデータ(インスリン、C-ペプチド)の表である。
【図３】図３は血糖濃度に対するインスリンと4-CNABの夜間投薬の作用を示す棒グラフである。
【図４】図４は血液C-ペプチド濃度に対するインスリンと4-CNABの夜間投薬の作用を示す棒グラフである。
【図５】図５は血液インスリン濃度に対するインスリンと4-CNABの夜間投薬作用を示す棒グラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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