(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ：
【化１】
0005550907.tif 000019
［式中、
Ｒ１は炭水化物部分であり；
Ｒ２はＨまたはＣ（Ｏ）Ｒ４であり；
Ｒ３はＨ、炭水化物部分、または置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ２０基であり；および
Ｒ４は置換または非置換のＣ１−Ｃ２０基である］に対応する化合物、または式Ｉの医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ混合物、鏡像異性体が富化された混合物もしくは溶媒和物の治療有効量を、医薬的に有効な担体中に含む、哺乳類において炎症を減らすための医薬組成物であって、式Ｉに対応する化合物が、当該組成物中に、当該組成物を哺乳類に投与した際に哺乳類において炎症を減らすために治療的に有効な量で存在する医薬組成物。
【請求項２】
医薬組成物が局所医薬組成物であり、医薬的に有効な担体が局所医薬組成物を哺乳類に局所投与するのに有効である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
Ｒ１とＲ３の各々が、グルコース部分、ガラクトース部分、ラムノース部分、キシロース部分およびアラビノース部分からなる群から独立して選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
Ｒ２、Ｒ３およびＲ４の各々が、一つ以上の芳香環を独立して含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
式Ｉに記載の前記化合物が、式ＩＩ：
【化２】
0005550907.tif 000020
の化合物である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
式ＩＩＩ：
【化３】
0005550907.tif 000021
［式中、Ｒ５は加水分解性糖である］
に対応する化合物を含む、哺乳類において炎症を減らすための医薬組成物であって、式ＩＩＩに対応する化合物が、当該組成物中に、当該組成物を哺乳類に投与した際に哺乳類において炎症を減らすために治療的に有効な量で存在する医薬組成物。
【請求項７】
前記加水分解性糖がグルコースである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
式ＩＶ：
【化４】
0005550907.tif 000022
の化合物を含む、哺乳類において炎症を減らすための医薬組成物であって、式ＩＶに対応する化合物が、当該組成物中に、当該組成物を哺乳類に投与した際に哺乳類において炎症を減らすために治療的に有効な量で存在する医薬組成物。
【請求項９】
式ＩＩ：
【化５】
0005550907.tif 000023
に対応する化合物、または
式ＩＶ：
【化６】
0005550907.tif 000024
に対応する化合物からなる有効成分の治療有効量を、医薬的に有効な担体中に含む、哺乳類において炎症を減らすための医薬組成物であって、式ＩＩまたは式ＩＶに対応する化合物が、哺乳類において炎症を減らすために治療的に有効な量で存在する医薬組成物。
【請求項１０】
医薬組成物が局所医薬組成物であり、医薬的に有効な担体が局所医薬組成物を哺乳類に局所投与するのに有効である、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記組成物が、即時放出型組成物、制御放出型組成物、徐放型の経口投与可能な組成物、局所投与可能な組成物、液体溶液剤、液体スプレー剤、ロゼンジ剤、のどスプレー剤、軟膏剤、溶液剤、泡剤、咳止めドロップ剤、溶解性ストリップ剤、ゼリー剤、口内洗浄剤；うがい薬、ロリポップ剤、ガム剤、水性または油性懸濁剤、分散性の散剤または顆粒剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤、クリーム剤、ペースト剤、ゲル剤、ローション剤、含浸包帯、眼内投与可能な組成物、吸入性粒子、吸入性溶液、液滴剤およびエアゾール剤からなる群から選択される形態である、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
式ＩＩまたはＩＶに対応する前記化合物が、天然に存在する有機体から合成的に、半合成的に製造される、または単離および精製される、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
一つ以上の治療剤を、式ＩＩまたはＩＶに対応する前記化合物と組み合わせてさらに含む請求項９に記載の医薬組成物であって、前記治療剤が、鎮痛剤、ＮＳＡＩＤ、サリチレート、アセトアミノフェン、イブプロフェンおよびＣＯＸ−２阻害剤からなる群から選択される医薬組成物。
【請求項１４】
局所医薬組成物中に、０．１ｍｇ〜５０ｍｇの式ＩＩまたはＩＶに対応する化合物が存在する、請求項１０に記載の局所医薬組成物。
【請求項１５】
局所医薬組成物中に、３００ｍｇ〜５０００ｍｇの式ＩＩまたはＩＶに対応する化合物が存在する、請求項１０に記載の局所医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、カプシアノシドおよび関連化合物として知られている化合物を用いる鎮痛剤組成物および方法に関する。化合物は合成されてもよく、またはカプシクム（Ｃａｐｓｉｃｕｍ）属、特にカプシクムアンヌウム（Ｃａｐｓｉｃｕｍ  ａｎｎｕｕｍ）の実から単離されてもよい。本発明は、鎮痛剤および抗炎症剤としてのこのような化合物の治療用途にさらに関する。
【背景技術】
【０００２】
関連技術の背景
薬物研究の主要な焦点は、疼痛管理のための鎮痛剤の開発である。鎮痛剤は痛みに対して感覚経路を無感覚にする、またはより感じないようにするが、一方、麻酔薬はすべての感覚経路に作用して、これらを痛み、温度、接触、固有感覚および骨格筋緊張に対して無感覚にする。従って、麻酔薬は、疼痛管理のために使用することができるが、麻酔薬の有用性は、これらの他の感覚経路に対する阻害によって制限される。例えば接触、固有感覚（舌を噛むことを避けるために）または味覚（食欲を妨げないように）の感覚を妨げることなく、口腔粘膜病変と関連した患者の疼痛を制御することが求められ得るが、これは疼痛を選択的に抑制することができない局所用の麻酔薬（例えばベンゾカイン）では通常可能ではない。従って、このような状況での疼痛を制御する鎮痛剤の使用が望まれる。
【０００３】
通常、鎮痛剤は、麻薬（オピオイド）または非麻薬のどちらかに分類される。麻薬性鎮痛剤は、主に中枢神経系に作用して、耽溺性、損なわれた高次皮質機能、および低下した呼吸などの潜在的に生命に脅威を与える副作用を有する。その結果、これらの使用は規制され、免許を与えられた医者によって処方されるのみである。非麻薬性鎮痛剤は、サリチラート（例えばアスピリンなど）；アセトアミノフェン；および非ステロイド性の抗炎症剤（「ＮＳＡＩＤＳ」）（例えばシクロオキシゲナーゼ−２（「ＣＯＸ−２」）阻害剤など）を含む。このような非麻薬性鎮痛剤は、痛みを抑える能力に限界があり、化学的刺激、抗凝固、心筋梗塞および脳卒中の副作用を有する可能性がある。従って、新しい鎮痛剤、特に望ましくない副作用プロファイルのない、痛みの局所的管理に役立つ非麻薬性鎮痛剤の発見および開発が絶えず必要とされている。
【０００４】
この点に関して、様々な植物由来の化合物が、これらの鎮痛特性に関して研究されてきている。例えばカプサイシン（トウガラシ中の刺激源であるバニリルアルカロイド）は、関節炎、骨関節炎および種々の末梢性神経障害の痛みを治療するために使われてきた。例えばＣｏｒｄｅｌｌ  ａｎｄ  Ａｒａｕｊｏ，Ｔｈｅ  Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ，（１９９３）２７：３３０；Ｌｅｖｉｎｓｏｎ，（Ｊａｎ／Ｆｅｂ  １９９５）Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ｐｐ．１３−１５を参照。しかし、カプサイシンの治療的な有用性は、灼熱感や紅斑を含む不利な副作用プロファイルのために制限され、このような副作用は何時間にも渡って継続する可能性がある。さらなる例として、ピーマン（Ｃａｐｓｉｃｕｍ  ａｎｎｕｕｍ）の抽出物は、鎮痛特性を示すことが証明されたが（例えばＵ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．６，０６０，０６０およびＵ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．６，０８６，８８８を参照）、このような鎮痛効果を担う特定の化合物は、同定されていない。さらにまた、このような抽出物は、天然に存在する実に由来しなければならないので、これらの製造および実際の使用は制限される。
【０００５】
さらに、ピーマン中に天然に存在する特定のカプシアノシド（ジテルペン配糖体）は、例えばＩｚｕｍｉｔａｎｉら、（「Ｎｏｖｅｌ  Ａｃｙｃｌｉｃ  Ｄｉｔｅｒｐｅｎｅ  Ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ，Ｃａｐｓｉａｎｏｓｉｄｅｓ  Ａ−Ｆ  ａｎｄ  Ｉ−Ｖ  ｆｒｏｍ  Ｃａｐｓｉｃｕｍ  Ｐｌａｎｔｓ」（Ｓｏｌａｎａｃｅｏｕｓ  Ｓｔｕｄｉｅｓ．ＸＶＩ）Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．（１９９０），３８（５）：１２９９−１３０７）およびＩｏｒｉｚｚｉら、（「Ｎｅｗ  Ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  Ｃａｐｓｉｃｕｍ  ａｎｎｕｕｍ  Ｌ．Ｖａｒ．ａｃｕｍｉｎａｔｕｍ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ」Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．（２００１），４９：２０２２−２０２９の両方で報告されたカプシアノシドＡ−ＦおよびＩ−Ｖとして同定され、これらの幾つかは、アンジオテンシン変換酵素の活性をインビトロで阻害することが示され、従って、抗高血圧薬剤（例えばＪａｐａｎｅｓｅ  Ｐａｔｅｎｔ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏ．０２−１３８２８９（１９９０）を参照）として有用である可能性がある。しかし、このような化合物の治療的な有用性を確立する実験的または臨床的データが報告されたことはない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許第６，０６０，０６０号明細書
【特許文献２】米国特許第６，０８６，８８８号明細書
【特許文献３】特開平０２−１３８２８９（１９９０）号公報
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｃｏｒｄｅｌｌ  ａｎｄ  Ａｒａｕｊｏ，Ｔｈｅ  Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ，（１９９３）２７：３３０；
【非特許文献２】Ｌｅｖｉｎｓｏｎ，（Ｊａｎ／Ｆｅｂ  １９９５）Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，ｐｐ．１３−１５
【非特許文献３】Ｉｚｕｍｉｔａｎｉら、（「Ｎｏｖｅｌ  Ａｃｙｃｌｉｃ  Ｄｉｔｅｒｐｅｎｅ  Ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ，Ｃａｐｓｉａｎｏｓｉｄｅｓ  Ａ−Ｆ  ａｎｄ  Ｉ−Ｖ  ｆｒｏｍ  Ｃａｐｓｉｃｕｍ  Ｐｌａｎｔｓ」（Ｓｏｌａｎａｃｅｏｕｓ  Ｓｔｕｄｉｅｓ．ＸＶＩ）Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．（１９９０），３８（５）：１２９９−１３０７）
【非特許文献４】Ｉｏｒｉｚｚｉら、（「Ｎｅｗ  Ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ  ｆｒｏｍ  Ｃａｐｓｉｃｕｍ  ａｎｎｕｕｍ  Ｌ．Ｖａｒ．ａｃｕｍｉｎａｔｕｍ．Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ」Ｊ．Ａｇｒｉｃ．Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．（２００１），４９：２０２２−２０２９
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明は、特定の化合物および治療剤として、特に鎮痛剤および抗炎症剤としての使用に関する。このような化合物は、例えば様々なジテルペンモノグリコシドおよびジテルペンジグリコシドを含み、これらは、合成的または半合成的に製造され得る、またはカプシクム（Ｃａｐｓｉｃｕｍ）属、特にピ−マン（Ｃ．ａｎｎｕｕｍ）の実から単離することができる。このような化合物の医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ混合物、鏡像異性体が富化された混合物、溶媒和物およびプロドラッグも本発明に含まれる。医薬組成物、本発明の化合物と他の治療成分（例えば鎮痛剤および抗炎症剤など）との併用、同様にこのような医薬組成物、化合物および併用の使用方法が本発明により提供される。本発明の目的は、疼痛、不快および炎症の治療のために安全で有効な方法により、医薬組成物、化合物および併用を提供することを含む。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
一つの態様において、本発明は、式Ｉ、
【００１０】
【化１】
0005550907.tif 000002
に対応する化合物または式Ｉの医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ混合物、鏡像異性体が富化された混合物、溶媒和物もしくはプロドラッグの治療有効量を医薬的に有効な担体中に含む医薬組成物に関し、式中、Ｒ１は炭水化物部分であり；Ｒ２はＨまたはＣ（Ｏ）Ｒ４であり；Ｒ３はＨ、炭水化物部分、または置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ２０基であり；およびＲ４は置換または非置換のＣ１−Ｃ２０基である。特定の実施形態において、Ｒ１およびＲ３は、グルコース、ガラクトース、ラムノース、キシロース、およびアラビノースからなる群から独立して選択され；Ｒ１はグルコースであり、Ｒ２とＲ３はそれぞれＨであり；およびＲ２、Ｒ３およびＲ４の各々は、１個以上の芳香環を独立して含む。化合物は、哺乳類において無痛覚を処置するために、または炎症を減らすために治療的に有効な量で存在することができる。
【００１１】
特定の実施形態において、式Ｉに対応する化合物は、式ＩＩ、
【００１２】
【化２】
0005550907.tif 000003
の化合物である。
【００１３】
特定の実施形態において、式Ｉに対応する化合物のプロドラッグは、式ＩＩＩ、
【００１４】
【化３】
0005550907.tif 000004
（式中、Ｒ５はグルコースなどの加水分解性糖である。）に対応する化合物である。
【００１５】
特定の実施形態において、式Ｉに対応する化合物のプロドラッグは、式ＩＶ、
【００１６】
【化４】
0005550907.tif 000005
の化合物である。
【００１７】
さらに、本発明の医薬組成物は、即時放出型、放出制御型または徐放型の経口投与可能な組成物（例えば丸剤、錠剤、カプセル剤、ゲルキャップ剤、ロゼンジ剤、のどスプレー剤、溶液剤、乳剤、クリーム剤、ペースト剤、ゲル剤、咳止めドロップ剤、溶解性ストリップ剤、ロリポップ剤またはガム剤など）の形態；局所投与可能な組成物（例えば液体溶液剤、液体スプレー剤、乳剤、クリーム剤、ペースト剤、ゲル剤、ローション剤、泡剤または含浸包帯など）の形態；眼内投与可能な組成物（例えば点眼剤など）の形態とすることができ；および例えば吸入性粒子、吸入性溶液、液滴またはエアゾールの形態で鼻腔、咽頭または肺に投与することができる。
【００１８】
本発明の化合物は、合成的または半合成的に製造される；または天然に存在する有機体、例えばカプシクムアンヌウム（Ｃ．ａｎｎｕｕｍ）などのカプシクム（Ｃａｐｓｉｃｕｍ）属の実から単離および精製することができ、その場合、これらは、天然に存在する有機体の細胞片からの単離および精製をすることができる。
【００１９】
特定の実施形態において、本発明は、本発明の化合物と一つ以上の治療剤（例えば鎮痛剤および／または抗炎症剤など、例えばサリチラート、アセトアミノフェン、イブプロフェンおよびＣＯＸ−２阻害剤からなる群から選択されるＮＳＡＩＤ）との併用を含む医薬組成物に関する。
【００２０】
別の態様において、本発明は、医薬的に有効な担体中、式ＩＩに対応する化合物の治療有効量を含む医薬組成物に関する。式ＩＩの化合物は、鎮痛剤として有効な量で提供され、上記したものなどの一つ以上の治療剤と組み合わせて提供することが可能である。
【００２１】
別の態様において、本発明は、上で定義された式Ｉに対応する化合物、または式Ｉの医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ混合物、鏡像異性体が富化された混合物、溶媒和物もしくはプロドラッグの治療有効量を、医薬的に有効な担体中に含む医薬組成物に関し、これは鎮痛剤として有効な量で存在する。式Ｉの置換基および化合物は、上記したものであってよい。該化合物は、単位用量あたり約．０１ｍｇから約５００ｍｇの間、および単位用量あたり約１ｍｇから約１００ｍｇの間の鎮痛剤として有効な量で存在し得る。このような医薬組成物は、上記したように投与することができる。
【００２２】
別の態様において、本発明は、上で定義した式Ｉに対応する化合物、または式Ｉの医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、溶媒和物もしくはプロドラッグの治療有効量（鎮痛剤的に有効な量であり得る。）を医薬的に許容される担体中に含む医薬組成物を、無痛覚をもたらす、または炎症を減らすことを必要とする患者に投与することを含む哺乳類において無痛覚をもたらす、または炎症を減らす方法に関する。式Ｉの置換基および化合物は、上記したものであってよい。該方法は、本発明の化合物を上記した方法の単独で、または他の記述した治療剤と併用して、単位用量あたり約．０１ｍｇから約５００ｍｇの間、および単位用量あたり約１ｍｇから約１００ｍｇの間の治療有効量で投与することを含んでもよい。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】フラクションＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉのＨＰＬＣクロマトグラムおよびＵＶスペクトルを示す。
【図２】フラクションＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉのピークのＴＩＣ、ＵＶ（２２１ｎｍ）およびネガティブＥＳＩＭＳスペクトルを示す。
【図３】フラクションＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ−５のＥＳＩＭＳの結果を示す。
【図４】フラクションＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ−Ａからのｍ／ｚ  ６５９．４５（Ａ）、ｍ／ｚ  ７４５．１９（Ｂ）およびｍ／ｚ  １３１９．１７（Ｃ）を有するイオンのＴＩＣおよびネガティブＥＳＩ  ＭＳ／ＭＳスペクトルを示す。
【図５】フラクションＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ−５からのｍ／ｚ  ４９７．４３を有するイオンのネガティブＥＳＩ  ＭＳ／ＭＳスペクトルを示す。
【図６】化合物−６６０の１Ｄ  １Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【図７】化合物−６６０の１Ｄ  １３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを示す。
【図８】化合物−４９８の１Ｄ  １Ｈ−ＮＭＲスペクトルを示す。
【図９】化合物−４９８の１Ｄ  １３Ｃ  ＮＭＲスペクトルを示す。
【図１０】化合物−６６０（式ＩＶ）の構造を示す。
【図１１】化合物−４９８（式ＩＩ）の構造を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２４】
本発明は、治療剤として、特に疼痛の予防、治療および管理のための鎮痛剤として、および抗炎症剤としての特定のジテルペンモノグリコシドおよびジテルペンジグリコシドを含む特定の化合物の発見に関する。
【００２５】
本明細書に記述されるように、該化合物は、単離、同定されて、治療的な有用性を有することが示された。該化合物、該化合物を含む医薬組成物、および本発明のこのような化合物と医薬組成物を製造し、使用する方法の同定および特性化は、本明細書に記述される研究努力の結果であり、これは、カプサイシンまたは辛味を示すコショウのピューレまたはジュースの使用に伴う灼熱感または刺激なしに、ピーマンのピューレまたはジュースが炎症を起こした咽頭粘膜に対して鎮痛性効果を示すという予想外の発見に由来する。
【００２６】
この点に関して、本発明は、特定の実施形態において、式Ｉ、
【００２７】
【化５】
0005550907.tif 000006
に対応する化合物または式Ｉの医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、溶媒和物もしくはプロドラッグの治療有効量を医薬的に許容される担体中に含む医薬組成物（式中、Ｒ１は炭水化物部分であり；Ｒ２はＨまたはＣ（Ｏ）Ｒ４であり；Ｒ３はＨ、炭水化物部分、または置換もしくは非置換のＣ１−Ｃ２０基であり；およびＲ４は置換または非置換のＣ１−Ｃ２０基である。）に関する。Ｒ１の炭水化物部分は、限定されることなく、例えばグルコース、ガラクトース、ラムノース、キシロースまたはアラビノースであり得る。特定の実施形態において、Ｒ２、Ｒ３またはＲ４は、それぞれ１個以上の芳香環を独立して含むことができる。
【００２８】
特定の実施形態において、本発明は、式ＩＩ、
【００２９】
【化６】
0005550907.tif 000007
の化合物の治療有効量を含む医薬組成物に関する。
【００３０】
特定の実施形態において、本発明は、式Ｉに対応する化合物のプロドラッグ、例えば式ＩＩＩ、
【００３１】
【化７】
0005550907.tif 000008
（式中、Ｒ５はＧｌｃなどの加水分解性糖である。）の化合物を含む医薬組成物に関する。式ＩＩＩに対応する化合物は、膵臓または唾液のジサッカリダーゼなどの酵素による、または胃もしくは生体内の他の場所での条件による加水分解を受けて、式ＩＩの化合物などの１個のＧｌｃ単位を有する化合物を生成することができる。
【００３２】
特定の実施形態において、該プロドラッグは、式ＩＶ、
【００３３】
【化８】
0005550907.tif 000009
の化合物である。
【００３４】
制限されることなく本発明において使われる場合、「プロドラッグ」という用語は、一般に不活性な形態で（または実質的に低下した活性を有する形態で）患者に提供される化合物として、慣用的な、および通常当分野で認められている定義が与えられ、これは生体内で例えば酵素分解などにより活性な、またはより活性な薬物に変換される。得られた活性な薬物は、通常、プロドラッグの「代謝物質」と呼ばれる。あらゆる特定の理論にも縛られることなく、本発明において、式ＩＩＩに対応する特定化合物は、式Ｉに対応する特定化合物のプロドラッグであると考えられ、式ＩＩＩに対応する化合物が、ヒトの体内にまたはヒト上に導入される場合は、これは通常の代謝条件下で反応して式Ｉに対応する化合物を産生するものである。例えば式ＩＶの化合物は、式ＩＩの化合物のプロドラッグであると考えられる。さらに、本発明の範囲内であるさらなるプロドラッグは、カルボン酸における遊離ヒドロキシル基上での加水分解性基またはエステル基を有する化合物を含むが、これに限定されない。特定のプロドラッグは、例えば式Ｉの限定を独立して満たすが、一方、他のプロドラックは、これらの活性型への変換の後にだけ式Ｉの限定を満たす。
【００３５】
本発明において使用される場合、組成物が「特定の式に対応する（または特定の式の）化合物、またはこのような式の医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ混合物、鏡像異性体が富化された混合物、溶媒和物およびプロドラッグの化合物を含む」ことを記述することは、該組成物がこのような定義内に入る単一化合物を含んでもよく、またはこのような定義内に入る一つ以上の化合物を含んでもよいことを具体的に意味する。例えば「式Ｉに対応する化合物、または式Ｉの医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ混合物、鏡像異性体が富化された混合物、溶媒和物またはプロドラッグの治療有効量」を含む本発明の医薬組成物は、式Ｉによる単一化合物（例えば式ＩＩの化合物など）、または、例えば式ＩＩの化合物と上記定義を満たす別の化合物、例えば式ＩＶの化合物との組み合わせを含むことが可能である。同様に、本発明の医薬組成物は、他の化合物をさらに含むことができ、例えば式ＩＩの化合物と式ＩＶの化合物を式Ｉなどによる塩と組み合わせて含むことが可能である。当業者に理解されるように、本発明の医薬組成物は、任意の数の化合物を提供された定義に入る組み合わせで含んでもよいが、但し、これらが治療的にまたはその他、意図したように有用である限りにおいてである。
【００３６】
本発明において使用されるように、化合物が「治療有効量」で存在すると述べることは、この用語が慣習的に使用され、当業者に理解されているように、哺乳類の所望の生理的変化をもたらすのに十分である量を指す。例えば化合物が「無痛覚をもたらすために治療的に有効な量で」存在すると述べることは、限定されずに、定性的にまたは定量的に決定されて、化合物が哺乳類での疼痛および／または不快および／または炎症の軽減または除去をもたらす量で存在することを意味する。同様に、定性的にまたは定量的に決定されて、化合物が「炎症を減らすために治療的に有効である量で」存在すると述べることは、限定されずに、化合物が炎症病態に罹患している哺乳類での炎症の軽減または除去をもたらす量で存在することを意味する。本発明の化合物および組成物によって軽減または除去され得るこのような病態は、慢性または急性であってもよい。
【００３７】
本発明の医薬組成物は、一般に、式Ｉに対応する化合物、または式Ｉの医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、溶媒和物またはプロドラッグの治療有効量を医薬的に有効な担体中に含む。本発明において使用されるように、用語「医薬的に許容される塩」は、例えば限定されずに、無機塩基および有機塩基を含む医薬的に許容される非毒性塩基から調製される塩を指す。無機塩基に由来する塩は、例えばアルミニウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、銅塩、第２鉄塩、第１鉄塩、リチウム塩、マグネシウム塩、第２マンガン塩、第１マンガン塩、カリウム塩、ナトリウム塩、亜鉛塩などを含む。医薬的に許容される有機の非毒性塩基に由来する塩は、例えば１級、２級および３級アミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、および塩基イオン交換樹脂、例えばアルギニン、ベタイン、カフェイン、コリン、Ｎ，Ｎ−ジベンジルエチレンジアミン、ジエチルアミン、２−ジエチルアミノエタノール、２−ジメチルアミノエタノール、エタノールアミン、エチレンジアミン、Ｎ−エチルモルホリン、Ｎ−エチルピペリジン、グルカミン、グルコサミン、ヒスチジン、ヒドラバミン、イソプロピルアミン、リジン、メチルグルカミン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ポリアミン樹脂、プロカイン、プリン、テオブロミン、トリエチルアミン、トリメチルアミン、トリプロピルアミン、トロメタミンなどの塩を含む。
【００３８】
式Ｉに対応する化合物、または式Ｉの医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、溶媒和物もしくはプロドラッグを医薬的に有効な担体中に含む医薬組成物は、本発明の実施例により説明され、示唆されるように、例えば種々の病態（リウマチ熱；インフルエンザまたは他のウイルス感染と関連した徴候；風邪；腰と首の痛み；月経困難症；頭痛；歯痛；捻挫および筋挫傷；筋炎；神経痛；滑膜炎；関節リウマチと変形性関節症（例えば骨関節炎）を含む関節炎；痛風や強直性脊椎炎；滑液包炎；火傷；傷害；および外科手術や歯の処置後の疼痛と炎症を含む。）の疼痛、発熱、および炎症の軽減に有用である。さらに、本発明の組成物および化合物は、細胞腫瘍性形質転換と転移腫瘍の増殖を抑制することが可能であり、従って、癌の治療に役立ち得る。
【００３９】
さらに、式Ｉに対応する化合物、または式Ｉの医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、溶媒和物もしくはプロドラッグを含む医薬組成物は、既知の治療化合物（例えば鎮痛剤や抗炎症剤）との治療的な併用に役立つことが期待される。例えば本発明の化合物と併用して治療的な有用性を有すると期待される鎮痛剤には、ＮＳＡＩＤＳ（例えばサリチラートなど）；アセトアミノフェン；イブプロフェン；およびＣＯＸ−２阻害剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【００４０】
式Ｉに対応する化合物、または式Ｉの医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、溶媒和物もしくはプロドラッグを含む医薬組成物は、本発明のこのような組成物がこれらの所望の治療効果を有することを可能にする従来の非毒性の医薬的に許容される担体、アジュバントおよびビークルを使用する用量単位製剤での任意の許容される形態で、これを必要とする患者に投与することができる。例えばこのような組成物は、経口投与可能な形態；局所用形態であり得、鼻腔、咽喉、肺、目、耳、膣および／または直腸に投与することができ；または非経口的に投与され得る。
【００４１】
経口的および／または局所的な使用を目的とする本発明の医薬組成物は、丸剤、錠剤、ゲルキャップ剤または硬カプセル剤もしくは軟カプセル剤（これらの各々は、即時放出性、徐放性または時限放出性の製剤であってよい。）；ロゼンジ剤；のどスプレー剤；溶液剤；乳剤；クリーム剤；軟膏剤；含浸包帯；泡剤；ペースト剤；ゲル剤；咳止めドロップ剤；溶解性ストリップ剤；ゼリー剤；口内洗浄剤；うがい薬；ロリポップ剤；ガム剤；水性または油性懸濁剤；分散性の散剤／顆粒剤；シロップ剤；および／またはエリキシル剤の形態であってよく、医薬組成物の製造のための当分野で既知の任意の方法で調製することが可能である。このような組成物は、医薬的に上品で口当たりがいい製剤を提供するために、甘味剤、風味剤、着色剤および保存剤からなる群から選択される一つ以上の薬剤をさらに含有してもよい。溶解性ストリップ剤とは、口内に置かれて活性成分を溶解および放出することができる１枚の材質を意味する。このような溶解性ストリップ剤は、フレーバーストリップまたは口腔ケアストリップとしても知られている。溶解性ストリップ剤は、しばしば炭水化物を主成分としている。錠剤は、一般的に、このような錠剤の製造に適した非毒性の医薬的に許容される賦形剤と混合した活性成分を含有する。これらの賦形剤は、例えば不活性な希釈剤（例えば炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウムまたはリン酸ナトリウムなど）；顆粒剤および崩壊剤（例えばトウモロコシ澱粉またはアルギン酸など）；結合剤（例えば澱粉、ゼラチンまたはアラビアゴムなど）；ならびに滑沢剤（例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸またはタルクなど）であり得る。錠剤は被覆されていなくてもよく、または公知の技術によって被覆されてもよく、胃腸管での放出および吸収を遅らせ、それにより長時間にわたって徐放性作用を提供することが可能である。例えば時間遅延物質（例えばグリセリルモノステアレートまたはグリセリルジステアレートなど）を用いることができる。
【００４２】
カプセル剤に関して、硬質ゼラチンカプセル製剤では、活性成分（複数を含む。）は、不活性な固体の希釈剤（例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウムまたはカオリン）と混合されてもよく；軟質ゼラチンカプセル製剤においては、活性成分（複数を含む。）は、水または油性媒体（例えば落花生油、流動パラフィンまたはオリーブ油）と混合されてもよい。
【００４３】
水性懸濁剤は、一般に、活性物質をこのような水性懸濁剤の製造に適した賦形剤と混合されて含有する。このような賦形剤は、懸濁化剤（例えばナトリウムカルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニル−ピロリドン、トラガカントガムおよびアラビアゴム）；および分散剤もしくは湿潤剤、例えば天然に存在するホスファチド（例えばレシチン）、アルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えばポリオキシエチレンステアレート）、エチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物（例えばヘプタデカエチレン−オキシセタノール）、エチレンオキシドと、脂肪酸およびヘキシトールに由来する部分エステルとの縮合生成物（例えばポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート）、またはエチレンオキシドと、脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来する部分エステルとの縮合生成物（例えばポリエチレンソルビタンモノオレエート）であってよい。水性懸濁剤はまた、一つ以上の保存剤、例えばエチル、ｎ−プロピルまたはｐ−ヒドロキシベンゾエート；一つ以上の着色剤；一つ以上の風味剤；および／または一つ以上の甘味剤（例えばスクロース、サッカリンまたはアスパルテーム）も含有することができる。
【００４４】
油性懸濁剤は、有効成分を植物油（例えば落花生油、オリーブ油、ゴマ油またはヤシ油など）；または鉱油（例えば流動パラフィンなど）中に懸濁させることによって処方することができる。このような油性懸濁剤は、例えば蜜蝋、固形パラフィンまたはセチルアルコールなどの増粘剤も含有することができる。また、口当たりのよい経口製剤を得るために、例えば上記したような甘味剤および風味剤を加えることもできる。このような組成物は、アスコルビン酸などの酸化防止剤を添加することによって保存することができる。
【００４５】
水の添加による水性懸濁剤の調製のために適した分散性散剤および顆粒剤は、有効成分を分散剤もしくは湿潤剤、懸濁化剤およびまたは一つ以上の保存剤との混合物として一般的に提供する。適切な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤とは、既に上記したものによって例示される。その他の賦形剤、例えば甘味剤、風味剤および着色剤なども存在してよい。
【００４６】
本発明の医薬組成物は、水中油型乳剤の形態であってもよい。このような製剤において、油相は植物油（例えばオリーブ油もしくは落花生油）、鉱油（例えば流動パラフィン）、またはこのような植物油と鉱油の混合物であり得る。適切な乳化剤は、天然に存在するホスファチド、例えば大豆、レシチン、脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来するエステルもしくは部分エステル（例えばソルビタンモノオレエート）、およびこのような部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物（例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート）であり得る。また、このような乳剤は、甘味剤および風味剤を含有し得る。
【００４７】
シロップ剤およびエリキシル剤は、例えばグリセロール、プロピレングリコール、ソルビトールまたはスクロースなどの甘味剤と共に処方することができる。このような製剤は、鎮痛剤、保存剤および風味剤および／または着色剤を含有することもできる。本発明の医薬組成物は、無菌の注射可能な水性または油性懸濁液の形態であってもよく、これは、例えば上記した適切な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を用いて当分野で公知の方法に従って処方することができる。このような無菌の注射用製剤は、非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の無菌の注射用溶液または懸濁液（例えば１，３−ブタンジオールの溶液）とすることもできる。使用可能な許容されるビヒクルと溶媒には、例えば水、リンゲル液および等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、無菌の不揮発性油は、例えば合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む無刺激性の不揮発性油は、溶媒または懸濁化媒体として用いることができる。また、オレイン酸などの脂肪酸は、注射剤の調製に用いることができる。
【００４８】
上記したように、本発明の化合物と医薬組成物は、制御放出システムまたは徐放システムで投与することが可能である。このようなシステムは、例えばポンプの使用（例えばＬａｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｓｅｆｔｏｎ，（１９８７）ＣＲＣ  Ｃｒｉｔ．Ｒｅｆ．Ｂｉｏｍｅｄ．１４：２０１；Ｂｕｃｈｗａｌｄら（１９８０），Ｓｕｒｇｅｒｙ  ８８：５０７；Ｓａｕｄｅｋら（１９８９），Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３２１：５７４を参照）を含み、およびより典型的には（丸剤、錠剤などの経口製剤に関して）、高分子材料の使用（例えばＭｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，Ｌａｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｗｉｓｅ（ｅｄｓ．）（１９７４），ＣＲＣ  Ｐｒｅｓ．，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ，Ｆｌｏｒｉｄａ；Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｂｉｏａｖａｉｌａｂｉｌｉｔｙ，Ｄｒｕｇ  Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ，Ｓｍｏｌｅｎ  ａｎｄ  Ｂａｌｌ（ｅｄｓ．）（１９８４），Ｗｉｌｅｙ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ；Ｒａｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ｐｅｐｐａｓ，Ｊ．（１９８３），Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｓｃｉ．Ｒｅｖ．Ｍａｃｒｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．  ２３：６１；Ｌｅｖｙら（１９８５），Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２２８：１９０；Ｄｕｒｉｎｇら（１９８９），Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．２５：３５１；Ｈｏｗａｒｄら（１９８９），Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．７１：１０５を参照）を含む。
【００４９】
徐放をもたらす他の手段は、例えば治療標的の近くに治療組成物を置くことを含み、従って全身的な用量のうちのごく少量を必要とする（例えばＧｏｏｄｓｏｎ，Ｍｅｄｉｃａｌ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｏｆ  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌｅａｓｅ，（１９８４）ｖｏｌ．２，ｐｐ．１１５−１３８を参照）。使用可能な他の制御放出システムは、Ｌａｎｇｅｒ（Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９９０）２４９：１５２７−１５３３）により総説されているものを含む。
【００５０】
式Ｉの化合物、または式Ｉの医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ混合物、鏡像異性体が富化された混合物、溶媒和物もしくはプロドラッグを含む医薬組成物は、直腸坐薬の形態で投与することもできる。このような組成物は、活性化合物と常温で固体であるが、直腸温度で液体である適切な非刺激性賦形剤を混ぜ合わせることによって調製され得、従って、直腸内で溶けて活性化合物を放出する。適切な直腸坐薬材料は、カカオバターおよびポリエチレングリコールを含む。
【００５１】
本発明の組成物と化合物の局所投与のために、ロゼンジ剤；のどスプレー剤；溶液剤；乳剤；クリーム剤；軟膏剤；含浸包帯；泡剤；ペースト剤；ゲル剤；咳止めドロップ剤；溶解性ストリップ剤；ゼリー剤；口内洗浄剤；うがい薬；ロリポップ剤；ガム剤；水性または油性懸濁剤、分散性の散剤／顆粒剤；シロップ剤、および／またはエリキシル剤を使用することができる。
【００５２】
本発明の医薬組成物と化合物は、例えば点眼薬、軟膏剤、スプレー剤または結膜徐放性の挿入物の形態で、眼内に投与することもできる。本発明の医薬組成物の鼻腔、咽喉または肺への投与は、吸入性粒子、吸入性溶液、液滴、吸入性スプレーまたはエアゾールの形態ですることができる。さらに、該組成物は、非経口的に、例えば皮下注射、静注内、筋肉内、胸骨内または、種々の注入方法などにより投与することが可能である。
【００５３】
本発明の医薬組成物は、例えば式Ｉに対応する化合物、または式Ｉの医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ混合物、鏡像異性体が富化された混合物、溶媒和物もしくはプロドラッグの鎮痛剤としての有効量および／または炎症を減らす有効量を含み、該化合物の単位用量あたり約．０１ｍｇから約５００ｍｇを含有することができる。一つの実施形態において、この量は、単位用量あたり約１ｍｇから約１００ｍｇである。
【００５４】
本発明の医薬組成物のための投与計画は、当然のことながら、既知の要因（例えば特定の薬剤の薬力学的特徴およびこの投与様式と経路；患者の種、年齢、性別、一般的な健康状態、医学的病態、食餌、および体重；徴候の性質と程度；併用療法の種類；治療の頻度；投与の時間；投与経路、患者の腎臓および肝臓機能、および所望する効果など）によって変動する。医者（または本発明の組成物がヒト以外の動物の治療で使用するような場合の獣医）は、病的状態の進行を予防、対処または停止するために必要な薬物の有効量を決定し、処方することができる。
【００５５】
さらに、担体物質と併用されて単一用量形態を生成し得る有効成分の量は、治療される宿主および投与の特定様式に依存して変動する。例えばヒトへの経口投与を目的とする製剤は、全組成物の約５％から約９５％に変動し得る担体物質の適切で都合の良い量と混合した活性薬剤の０．５ｍｇから約５ｇを含有することができる。用量単位の形態は、活性成分を通常、約１ｍｇから約５００ｍｇ、一般的に２５ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、２００ｍｇ、３００ｍｇ、４００ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、８００ｍｇまたは１０００ｍｇを含有する。
【００５６】
一旦製剤化したら、本発明の医薬組成物は、様々な治療的な用途のために限定されずに使用することができ、これは無痛化と炎症の減少を含む。例えばこのような組成物は、痛みまたは不快を経験している個体への投与により痛みおよび／または不快を処置するのに使用することができ、炎症性病態を示す個体への投与により炎症性病態を処置するのに使用することができる。一つの実施形態においては、本発明による組成物は、風邪またはインフエンザの一つ以上の徴候を治療するために投与される。このような徴候は、咽喉、目、耳または副鼻洞の痛みを含む。または、このような組成物は、擦過傷、発疹、または小さな切り傷または火傷を治療するために使用することができる。例えば一つの実施形態において、本発明の組成物は、粘着性包帯に含浸され、疼痛部位または水膨れの不快感の軽減を提供する。別の実施形態において、本発明の組成物は、局所的にまたは筋肉内に適用されて筋内痛または関節痛の軽減、または神経障害の軽減を提供する。投与経路は、時限放出型製剤も含み、延長された、または長期の治療を提供する。
【００５７】
さらに、式Ｉに対応する化合物、または式Ｉの医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ混合物、鏡像異性体が富化された混合物、溶媒和物もしくはプロドラッグは、完全に天然物起源であってもよく、または完全に合成されたものであってもよく、または天然に存在する化合物から修飾（即ち半合成）されたものであってもよい。
【００５８】
式Ｉの化合物、または式Ｉの医薬的に許容される塩、鏡像異性体、ジアステレオマー、ラセミ混合物、鏡像異性体が富化された混合物、溶媒和物もしくはプロドラッグが、天然物起源である場合は、これは、一般に、化合物を生成する有機体の細胞片からこのような化合物を実質的に精製して、単離することが必要である。この点に関して、一つの実施形態において、青ピーマン（Ｃａｐｓｉｃｕｍ  ａｎｕｕｍ  ｓｓｐ．ｇｒｏｓｓｕｍ）は、スライスされて、手動または機械的手段でピューレが作られる。茎および／または種は、ピューレを作る前に取り除いてよい。ピューレは、従来の方法によって、ジュースに濾過（減圧濾過を含むがこれに限定されない。）できる。葉緑素およびワックス類（これらに限定されない。）を含む非常に非極性の化合物は、親水性水相と非極性溶媒（ジエチルエーテルを含むがこれに限定されない。）間にジュースを分配することによって、ジュースから除去することができる。水相はさらなる分離のためにそのまま利用される、または短鎖アルコール（メタノールまたはエタノールを含むがこれらに限定されない。）での粉末化に付されて、化合物（ポリペプチドおよび長鎖炭水化物を含むがこれに限定されない。）を析出させることができる。
【００５９】
ジュースおよび／または粉末にされた上澄みは、従来の方法（例えば回転蒸発または凍結乾燥など）により濃縮される、またはＣ−１８を含む吸着剤（固定相）（これに限定されない。）を使用して、水：メタノール（これに限定されない。）を含む勾配溶媒系（移動相）で溶出されるフラクションのカラムクロマトグラフィおよび／または純粋メタノール（これに限定されない。）を含む短鎖アルコールで溶出されるＳｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０でのカラムクロマトグラフィにより直接に分離することができる。活性鎮痛性化合物を含有するサブフラクションは、ＨＰＬＣまたはＨＰＬＣ／質量分析を含む方法（これらに限定されない。）により精製されて活性化合物の純粋な分離物を生成することができる。
【００６０】
ここで、以下の非限定的な実施例にうつり、本発明の組成物と化合物の単離、同定および治療効果を示す。
【実施例】
【００６１】
（実施例１）
鎮痛剤バイオアッセイプロトコル
ラット後肢におけるアッセイが、本発明での鎮痛剤としての様々な抽出物／化合物の治療有効性を決定するのに使用された。
【００６２】
Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット（２２５から２５０ｇ、雌）をウレタンで麻酔し、使い捨てのＣｈｕｘパッド上に横向けに置いた。各ラットの後肢の両方は、墨で黒くし、１０分間乾燥した。標準的なｍＷ／ｃｍ２に調整されたＥＬＨプロジェクターランプが、疼痛刺激として使用され、各々の後肢上の５×１５ｍｍの面積に集光して、各々の後肢に対して垂直に、および各後肢から７２ｍｍに置いた。
【００６３】
複数のベースラインの後肢退避潜時は、各々の後肢の各中間面と各側面に対して記録（秒）された。次いで、１マイクロモルのカプサイシン１００μｌをピペットで適用して各動物の一つの後肢を覆い、１０分間乾燥させて、カプサイシン未処置の後肢と比較して、カプサイシン処置の後肢を疼痛刺激に対して過敏にした（これによって未処置の後肢と比較してカプサイシン処置の後肢に対する後肢退避潜時が減少した。）。
【００６４】
次いで、後肢の両方を再び墨で黒く塗り、１０分間乾燥し、両方の後肢の各中間面と各側面で後肢退避潜時をカプサイシン処置の後肢とカプサイシン未処置の後肢に対して２０分、２５分および３０分目に記録した。退避潜時の有意な低下が、カプサイシン処置の後肢で見られ、このバイオアッセイにおいて使われた一般的な濃度と用量において、疼痛過敏性薬剤としてのカプサイシンの報告された効果と一致した。対照的に、カプサイシン未処置の後肢退避潜時では、わずかな低下が見られ、観察された効果は、もう片方の後肢上でのカプサイシン処置の中枢性メカニズム効果によると思われる。
【００６５】
各々のフラクションの鎮痛特性を測定するために、各フラクション１００μｌをピペットでカプサイシン処置された後肢に適用して、乾燥させた（未処置の後肢は、フラクションで処置されなかった。）。次いで、後肢退避潜時を、カプサイシン／フラクションで処置された後肢と未処置の後肢の両方に対して５分、２０分および３０分目に記録した。後肢退避潜時の増加は、適用されたフラクションによる鎮痛効果を示唆した。
【００６６】
（実施例２）
鎮痛化合物の単離
茎、種および隔壁を除いた１２個の青ピーマン（Ｃａｐｓｉｃｕｍ  ａｎｕｕｍ  ｓｓｐ．ｇｒｏｓｓｕｍ）をジュース抽出器（Ｐａｎａｓｏｎｉｃモデル＃  ＭＪ６６ＰＲ）にかけて未濾過ジュース１２００ｍｌを生成した。ジュースは、粗い濾紙を用いブフナー漏斗を通して吸引濾過して濾過ピーマンジュース１．０リットルを生成した。
【００６７】
濾過されたジュース５００ｍｌは、ジエチルエーテル５００ｍｌで分配し、ワックスと葉緑素を除去した。この分配は、合計３回行われた。３層は、水層、エーテル層および中間の羊毛状の層に分離された。各々の層の一定量は、鎮痛剤バイオアッセイ（実施例１）により試験された。水層だけが、鎮痛活性を示した。
【００６８】
水層は、室温で淡褐色ゲル１０ｍｌに回転蒸発により濃縮され、これを室温でメタノール１００ｍｌの２回の連続した量で粉末化し、長鎖炭水化物およびポリペプチドを析出させた。メタノール性懸濁液は、ブフナー漏斗を用いて吸引濾過された。透明な濾過液は、４０℃で回転蒸発中、琥珀色した粘性の液体１ｍｌに乾燥した。
【００６９】
濃縮メタノール性抽出物１．０ｇは、Ｃ−１８逆相シリカゲル（Ｓｅｐ−Ｐａｋ  ３５ｃｃ  Ｃ−１８  １０ｇ、Ｗａｔｅｒｓ、Ｃｈｉｃａｇｏ、ＩＬ）の固定相を用いるカラムクロマトグラフィによって分画された。２０ｍｌのフラクションは、０：１から１：０のメタノール／水（移動相）の重力フィードされた勾配溶媒系で、１ステップあたり２０％メタノール増分で溶出された。
【００７０】
鎮痛剤バイオアッセイ（実施例１）により試験された各フラクションの一定量は、フラクションＥ（８０％のメタノール：水のフラクション）に集中した鎮痛活性を示した。バイオアッセイ試験は、さらに、活性サンプルを４５℃に加熱し、同じサンプルをｐＨ４．４に酸性化することにより生物活性が保持されることを証明した。鎮痛活性は、ｐＨ８．４のアルカリにすると失われた。鎮痛フラクションの鎮痛効果は、試験動物にナロキソン（麻薬アンタゴニスト）の投与により失われなかったが、これは、誘発された無痛覚が麻薬実体（表１）からではなかったことを示唆した。フラクションＥは、ナロキソン投与の後でも、何時間にもわたる鎮痛効果の増加を示した。
【００７１】
【表１】
0005550907.tif 000010
【００７２】
（実施例３）
フラクションＥのサブフラクション
最初の濃縮メタノール性抽出物１．０ｇを、Ｃ−１８逆相シリカゲル（Ｓｅｐ−Ｐａｋ  ３５ｃｃ  Ｃ−１８  １０ｇ、Ｗａｔｅｒｓ、Ｃｈｉｃａｇｏ、ＩＬ）の固定相を用いるカラムクロマトグラフィによって分画した。２０ｍｌのフラクションは、０：１から１：０のメタノール／水（移動相）の重力フィードされた勾配溶媒系で、１ステップあたり２０％メタノール増分で溶出された。
【００７３】
濃縮８０％メタノールフラクション１．０ｇを、Ｃ−１８逆相シリカゲル（Ｓｅｐ−Ｐａｋ  ３５ｃｃ  Ｃ−１８  １０ｇ、Ｗａｔｅｒｓ、Ｃｈｉｃａｇｏ、ＩＬ）の固定相を用いるカラムクロマトグラフィによって再分画した。２０ｍｌのフラクションは、０：１から１：０のメタノール／水（移動相）の重力フィードされた勾配溶媒系で、１ステップあたり２０％メタノール増分で溶出された。８０％のメタノールフラクションは、ＥＥａ、ＥＥｂ、ＥＥｃおよびＥＥｄと名前を付けられ、５ｍｌの一定量で回収された。これらのサブフラクションの全ては、フラクションＥＥａで最も大きな鎮痛活性を有する鎮痛活性を示した。
【００７４】
（実施例４）
サブフラクションＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉの同定
鎮痛剤バイオアッセイ（実施例１）により強い鎮痛活性を示す青ピーマン（Ｃａｐｓｉｃｕｍ  ａｎｕｕｍ  ｓｓｐ．ｇｒｏｓｓｕｍ）のジュース３０００ｍＬを、ジエチルエーテル１０００ｍｌで分配した。この分配は、合計３回行われた。水層を濾過し、濃縮し、減圧下３５．８℃で凍結乾燥して褐色の抽出物１３５．２ｇを生成した。
【００７５】
凍結乾燥された抽出物２１．０ｇは、Ｃ−１８逆相シリカゲル（４０μｍ；Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ，Ｐｈｉｌｌｉｐｓｂｕｒｇ，ＮＪ）の固定相を用いるカラムクロマトグラフィによって分画された。フラクションが、０：１から１：０のメタノール／水（移動相）の勾配溶媒系で、１ステップあたり１０％メタノール増分で溶出された。１３のフラクションが得られ、薄層クロマトグラフィにより既知の生物活性フラクションＥＥａと比較された（実施例３を参照）。
【００７６】
バイオアッセイは、薄層クロマトグラムを標準ＥＥａに適合させることに基づいて３０％から８０％のメタノールで溶出されたフラクションに関して、先に述べたように実行された。これらの適合フラクションに隣接したフラクションも、バイオアッセイされた。バイオアッセイ試験の結果（秒での退避潜時と平均の対応する標準誤差（ＳＥＭ）は、記述された分離と精製手順を通して得られるフラクションに対して記録された。サブ−フラクションは、１）上記したようなバイオアッセイ試験、および２）本明細書に記載の得られたフラクションとサブフラクションの薄層クロマトグラムをフラクションＥＥａと比較することの両方によって導かれた（実施例３を参照）。バイオアッセイされた鎮痛活性に基づいて、４０％フラクション（ＢＭＢＷ−Ｍ４０、総重量９９．８ｍｇ）と６０％フラクション（ＢＭＢＷ−Ｍ６０、総重量１０２．１ｍｇ）の一定量は、さらにサブ分画された。
【００７７】
ＢＭＢＷ−Ｍ４０  ６６．０ｍｇは、セファデックスＬＨ−２０（１０．０ｇ、２５から１００μｍ、Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｆｉｎｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）の固定相を用いるカラムクロマトグラフィによりサブ分画された。サブ−フラクションは、純粋なメタノールの溶媒系で溶出された。サブ−フラクションは、ＨＰＬＣ分析に基づき合わせて、１２のサブ−フラクションを生成した。
【００７８】
バイオアッセイは、全１２のフラクションについて上記したように行われた。このアッセイされた生物活性に基づいて、フラクションＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ（総重量３．６ｍｇ）は、さらにサブ分画された。
【００７９】
ＢＭＢＷ−Ｍ６０  ７０．５ｍｇは、セファデックスＬＨ−２０（１０．０ｇ、２５から１００μｍ、Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｆｉｎｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ、ＮＪ）の固定相を用いるカラムクロマトグラフィによりサブ分画された。サブ−フラクションは、純粋なメタノールの溶媒系で溶出された。サブ−フラクションは、ＨＰＬＣ分析に基づき合わせて、１６のサブ−フラクションを生成した。上記したように行われたバイオアッセイにおいて、ＢＭＢＷ−Ｍ６０サブ−フラクションの全ては、鎮痛活性の有意な保持を示すことができなかった。
【００８０】
サブ−フラクションＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉは、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ａｑｕａ  Ｃ１８カラム（４．６×２５０ｍｍ、５μｍ）とＨＰＬＣ勾配プログラム（表２）、室温でのカラム、６５分のランタイムを用いるＷａｔｅｒｓ９９６フォトダイオードアレイ検出器およびＥｍｐｏｗｅｒソフトウェアを備えたＷａｔｅｒｓ２６９０分離モジュールでのＨＰＬＣ分析により分析された。
【００８１】
【表２】
0005550907.tif 000011
【００８２】
９つのピークが同定され、これらはＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ  １、２、３、４、Ａ、５、Ｂ、６、７と名付け、および４５分と５５分の間の幅広い２峰性ピークは、８および９と名付けた（図１を参照、これはＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉピークのＨＰＬＣクロマトグラムおよびＵＶスペクトルを示す。）。ピーク１、２、３、４および７は、芳香環を有している可能性が高いことを、およびピークＡ、Ｂ、５および６は、芳香環を有していない可能性が高いことを図１のＵＶスペクトルは示した。
【００８３】
サブ−フラクションＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉを、ＨＰＬＣ−ＭＳ分析に付した。ＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ１．８ｍｇを、メタノールの１．０ｍｌに溶解した。この溶液２０μＬをメタノール１００μＬで希釈し、Ｘｃａｌｉｂｕｒソフトウェアを備えたＴｈｅｒｍｏＦｉｎｎｉｇａｎ  ＬＣＱ装置（Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ、ＣＡ）を用いるネガティブエレクトロスプレーイオン化質量分析（ＥＳＩＭＳ）で分析した。サンプルは、Ｗａｔｅｒｓ２４８７デュアルλ吸光度検出器を備えたＷａｔｅｒｓ２６９０分離モジュールにより導入された。キャピラリー電圧は、４．５ｋＶのスプレー電圧、０Ｖのチューブレンズオフセットおよび２３０℃のキャピラリー温度とともに１０Ｖに設定された。シースガスと補助ガスはともに、それぞれ８０および３０の流量を有する窒素であった。このネガティブＥＳＩＭＳの結果は、図２に示される。
【００８４】
ポジティブＥＳＩＭＳによるＨＰＬＣ／ＭＳは、エレクトロスプレーイオン化を用いて、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  １１００  Ｓｅｒｉｅｓ  ＬＣ／ＭＳＤモデルＧ１９４６Ｄ上でＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉについて行われた。イオン化は、２００℃の乾燥ガス温度、４０ｐｓｉの噴霧圧力および１３Ｌ／分の流速で行われた。スキャンされた質量範囲は、ポジティブモードとネガティブモードの両方で７０ボルトのフラグメンター値を有する１４０から１５００の原子質量単位（ａｍｕ）の間であった。キャピラリーは、４０００ボルトに設定された。質量スペクトル分析の前に、サンプルは、３６℃の温度で操作されるＺｏｒｂａｘ  Ｅｃｌｉｐｓｅ  ＸＤＢ−Ｃ１８の２．１ｍｍ×１５０ｍｍの５−ミクロンカラム（部品番号９９３７００−９０２）を用いて、Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  １１００分析用ＨＰＬＣ上で分析された。移動相は、表３の勾配に従い、０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸と水中５０ｕＭの酢酸アンモニウム（溶離剤Ａ）、および０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸とアセトニトリル中５０ｕＭ酢酸アンモニウム（溶離剤Ｂ）からなるものであった。
【００８５】
【表３】
0005550907.tif 000012
【００８６】
注入容量は２５μＬであった。同時監視が、２３０ｎｍと２６０ｎｍで行われた。スペクトルは、２００から９００ｎｍで記録された。データは、ＡｇｉｌｅｎｔのＣｈｅｍｓｔａｔｉｏｎソフトウェアを使用して処理された。
【００８７】
ポジティブＥＳＩＭＳによる質量スペクトルデータは、ＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉの主要な構成成分が、ｍ／ｚ  ６９８（Ｍ＋ＮＨ４＋）、ｍ／ｚ  ７６４（Ｍ＋ＮＨ４＋）、ｍ／ｚ  ５１６（Ｍ＋ＮＨ４＋）を有するとともにこれに対応するｍ／ｚ  １０１４（２Ｍ＋ＮＨ４＋）およびｍ／ｚ  ６０２（Ｍ＋ＮＨ４＋）に対する小さいピークを有することを明らかにした。
【００８８】
ＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ１．６ｍｇを、２５０×４．６ｍｍのｉ．ｄ．、５μｍ、Ａｑｕａ  Ｃ１８カラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、Ｔｏｒｒａｎｃｅ、ＣＡ）を使用して、Ｗａｔｅｒｓ９９６フォトダイオードアレイ検出器とＥｍｐｏｗｅｒソフトウェアを備えたＷａｔｅｒｓ６９０分離モジュール上での分析用ＨＰＬＣによってサブサブ分画された。ＨＰＬＣ勾配プログラム（表１を参照）は、１０個のサブ−サブ−フラクション（ＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ−１、２、３、４、Ａ、５、Ｂ、６、７および８）をもたらし、これらは全て鎮痛剤バイオアッセイに付された（実施例１）。種々のフラクションからの結果：ＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ−５（「フラクションｉ５」）および不活性フラクション：ＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ−Ａ（「フラクションｉＡ」）は、表４に集約される。潜時は、平均の対応する標準誤差（ＳＥＭ）とともに秒で記録されている。
【００８９】
【表４】
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【００９０】
５匹の動物が、各々のフラクションの鎮痛効果に対して試験された。ベースラインの後肢退避潜時が測定され（即ち、あらゆる処置の前にも）、その後、カプサイシンが各々の動物の２つの後肢のうちの一つに投与され（実施例１で記載されたプロトコルに従って）、それから、フラクションは各々の動物のカプサイシン処置の後肢に投与した。表４で示されるように、フラクションｉ５に関して、平均のベースライン退避潜時は、１５．７８秒であり、カプサイシン処置後２０分、２５分および３０分では、それぞれ１０．６２秒、７．９５秒および７．９９秒に減少し；投与された用量における疼痛に対するカプサイシンの既知の過敏性効果と一致した。次いで、フラクションｉ５をカプサイシン処置された後肢に加えて、フラクション処置後それぞれ、５分、２０分および３０分での退避潜時は、１８．０１秒、１５．２４秒および１２．２１秒に増加した；これはフラクションｉ５による強い鎮痛効果を証明した。未処置の対照群の後肢は、同時間にわたる退避潜時において何ら有意な変化を示さなかった。
【００９１】
３０分でのカプサイシン退避潜時と比較したフラクションｉ５の適用後２０分の退避潜時は、０．００１２３５０３５のＰ値で非常に統計学的に有意であった（一因子分散分析による。）。フラクションｉＡによる結果は、０．５３９２３６４１１のＰ値で統計学的に有意ではなかった。
【００９２】
サブ−サブ−フラクションＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ−５（図５）は、直接注入によるネガティブモードおよびポジティブモードの両方でのＥＳＩＭＳによって試験された。サンプルは、ＭｅＯＨに溶解され、５０：５０のＭｅＣＮ：Ｈ２Ｏ、流速０．３ｍｌ／分の等張性混合溶媒系を用いるＷａｔｅｒｓ２６９０分離モジュールにより導入された。キャピラリー電圧は１０Ｖであり、スプレー電圧は、４．５ｋＶであり、チューブレンズオフセットは０Ｖであった。キャピラリー温度は２３０℃であった。シースガスと補助ガスは両方とも、それぞれ８０と３０の流量を有する窒素であった。結果は、図３に示される。
【００９３】
サブ−サブ−フラクションＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ−５は、主にネガティブＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ  ４９７．４３および７４５．１４からなるものであった。ネガティブＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ  ７４５．１４は、ＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ−Ｂの主要な成分であり、これは鎮痛剤バイオアッセイ（実施例１）でのバイオアッセイにより鎮痛活性を有さないことが示された。
【００９４】
ネガティブＥＳＩＭＳによるｍ／ｚ  ６５９．４５（Ａ）、７４５．１９（Ｂ）および１３１９．１７（Ｃ）を有するイオンは、ＭＳ／ＭＳ実験に対する親イオンとして選択され、この結果が図４に示された。ＭＳ／ＭＳは、サブ−サブ−フラクションＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ−５からのｍ／ｚ  ４９７．４３を有するネガティブＥＳＩＭＳ親イオンについても行われ、この結果は、図５に示された。このＭＳ／ＭＳ分析から、親イオンｍ／ｚ  ６５９．４５が、ｍ／ｚ  ４９７．４、３１９．３および３０１．３のフラグメントを生成したことは明らかであるのに対して、親イオンｍ／ｚ  ４７９．２１も、ｍ／ｚ  ３１９．１８および３０１．２４のフラグメントを生成した。ネガティブＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ  ６５９．４５のこの主要成分を有するＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ−Ａは、鎮痛活性を示さないのに対して、ＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ−５は、強い鎮痛活性を示した。ネガティブＥＳＩＭＳ  ｍ／ｚ  ６５９．４５とｍ／ｚ  ４９７．４３との差は１６２．０２であり、これは、ヘキソースグリコシド部分の違いを示唆している。
【００９５】
フラクションＥ、ＥＥＡ、ＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉおよびＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ−５に対するポジティブＥＳＩＭＳデータは、フラクションＢＭＢＷ−Ｍ４０ｉ中に存在するイオンｍ／ｚ（Ｍ＋ＮＨ４＋）６７８、７６４、５１６および６０２に関して探索された。これらのそれぞれのイオンに対するピーク下面積は積分された。有意の生物活性は、ｍ／ｚ  ６７８（ジテルペンジグリコシドに対応する。）と比較して、ｍ／ｚ  ５１６（ジテルペンモノグリコシドに対応する。）の高濃度と相関した。
【００９６】
高解像度ＭＳは、ｍ／ｚ  ６８３．３２５６（分子量＝６６０）とｍ／ｚ  ５２１．２８２５（分子量＝４９８）を生成するイオン上でのＭ＋（Ｎａ＋）によるエレクトロスプレーイオン化モードを使用してＭｉｃｒｏｍａｓｓ  ＡｕｔｏＳｐｅｃ装置でのポジティブＥＳＩによって行われた。これらのイオンに対する平均同位体質量強度分布は、表５に集約される。
【００９７】
【表５】
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【００９８】
ヘテロイオン：Ｃ、Ｈ、Ｎ、ＯおよびＮａに関しての高解像度ＭＳデータに対して生じる可能な分子式の表から算出された同位体質量強度分布に対する最適適合が、表６に集約される。
【００９９】
【表６】
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【０１００】
Ｃ２６Ｈ４２Ｏ９およびＣ３２Ｈ５２Ｏ１４のみが、測定された高解像度分子量および計算された高解像度分子量の間の小さい差の制約に適合し、測定された同位体質量強度分布に最適に適合し、互いに１６２（ヘキソースグリコシド部分）だけ異なっていた。
【０１０１】
（実施例５）
化合物の同定
１Ｄおよび２Ｄ  ＮＭＲの実験は、実施例４で同定された２つの化合物、即ち、ｍ／ｚ  ６８３．３２５６（分子量＝６６０）の第１化合物（以下、「化合物−６６０」）とｍ／ｚ  ５２１．２８２５（分子量＝４９８）の第２化合物（以下、「化合物−４９８」）について行われた。
【０１０２】
１Ｄ  １Ｈ、１３Ｃ  ＮＭＲおよび２Ｄ  ＮＭＲの実験は、３００ＭＨｚ（１Ｈ）および７５ＭＨｚ（１３Ｃ）でＢｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ＡＶ−３００分光計で操作した。２Ｄ実験編集−ＨＳＱＣ、１Ｈ−１Ｈ  ＣＯＳＹ、ＮＯＥＳＹ、ＴＯＣＳＹおよびＨＭＢＣは、標準的なＢｒｕｋｅｒパルスシークエンスを使って得られた。化合物−６６０および化合物−４９８は、メタノール−ｄ４中で測定された。図６および図７は、化合物−６６０の１Ｄ  １Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルをそれぞれ示す。図８および図９は、化合物−４９８の１Ｄ  １Ｈ−ＮＭＲおよび１３Ｃ  ＮＭＲスペクトルをそれぞれ示す。
【０１０３】
化合物−６６０および化合物−４９８のＬＣ−ＭＳおよびＮＭＲ分析は、これらが非常に高純度であることを示した。従って、各々の純粋な化合物の少量にもかかわらず、これらの２つの化合物の優れたＮＭＲスペクトルが得られた。高純度は、バイオアッセイ特異性にとっても重要であった。
【０１０４】
２つの化合物の構造解析は、分光法に基づいて実行された。これらの２つの化合物の１Ｄと２Ｄ  ＮＭＲスペクトルの解釈とこれらのＮＭＲデータと文献データ（Ｉｚｕｍｉｔａｎｉ，Ｙ．；Ｙａｈａｒａ，Ｓ．；Ｎｏｈａｒａ，Ｔ．；Ｎｏｖｅｌ  ａｃｙｃｌｉｃ  ｄｉｔｅｒｐｅｎｅ  ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ，ｃａｐｓｉａｎｏｓｉｄｅ  Ａ−Ｆ  ａｎｄ  Ｉ−Ｖ  ｆｒｏｍ  Ｃａｐｓｉｃｕｍ  Ｐｌａｎｔ（Ｓｏｌａｎａｃｅｏｕｓ  ｓｔｕｄｉｅｓ．ＸＶＩ）．Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．１９９０，３８：１２９９−１３０７）との比較により、化合物−６６０および化合物−４９８をカプサイアノシドＩおよび１４−（β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−４−ヒドロキシ−２，６，１０，１４−テトラメチル−２，６，１０，１５−ヘキサデカテトラエン酸［４Ｒ−（２Ｅ，４Ｒ＊，６Ｅ，１０Ｅ，１４Ｓ＊）］としてそれぞれ同定した。これらの構造は、図１０および図１１にそれぞれ示される。これらの構造から分かるように、化合物４９８も化合物６６０もカプサイシノイドではない。
【０１０５】
純粋な化合物−４９８と純粋な化合物−６６０のバイオアッセイは、鎮痛剤バイオアッセイ（実施例１）に従って行われ、表７に集約される。
【０１０６】
【表７】
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【０１０７】
５匹の動物が、各々の化合物の鎮痛効果に関して試験された。ベースライン後肢退避潜時が測定され（即ち、あらゆる処置前にも）、その後、カプサイシンが各々の動物の２つの後肢のうちの一つに投与され（実施例１で説明されたプロトコルに従って）、それから、化合物を各々の動物のカプサイシン処置の後肢に投与した。表７で示されるように、化合物４９８に関して、平均のベースライン後肢退避潜時は１０．７６６６７秒であり、これはカプサイシン処置後２０分、２５分および３０分では、７．４秒、７．９５５５５５６秒および５．４秒にそれぞれ減少した；これは投与された用量で疼痛に対するカプサイシンの既知の過敏性効果と一致した。次いで、化合物４９８をカプサイシン処置された後肢に加え、化合物処置後の５分、２０分および３０分での退避潜時は、１３．６秒、９．４秒および８．１秒にそれぞれ増加し；化合物４９８による強い鎮痛性効果を証明した。未処置の対照群の後肢は、同時間にわたる退避時間において何ら有意な変化を示さなかった。
【０１０８】
３０分でのカプサイシン退避潜時と比較した２０分での純粋な化合物−４９８処置後の退避潜時は、０．００１７８８２９３のＰ値において統計学的に非常に有意であった（一因子分散分析による。）。純粋な化合物−６６０による結果は、０．０４２３６９１５７のＰ値の低い有意さであった。
【０１０９】
この鎮痛剤バイオアッセイ疼痛モデルにおいて、本発明の化合物に由来する無痛覚は、全身性モルヒネの０．１ｍｇ／ｋｇに匹敵した。
【０１１０】
実施例５
炎症バイオアッセイプロトコル
マウス空気嚢アッセイは、本発明の抗炎症剤として様々な抽出物／化合物の治療有効性を決定するのに用いられた。
【０１１１】
空気嚢を誘発するために、１０週から１５週のネズミの背中に、空気３ｍｌを皮下注射した。
【０１１２】
２日目に、この気嚢を空気１．５ｍｌで再び膨張させた。
【０１１３】
６日目に、炎症が、カラギーナン懸濁液１ｍｌ（カルシウムを含まない、およびマグネシウムを含まないリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）溶液での２％重量／容量）を空気嚢に注入することによって引き起こされた。
【０１１４】
試験化合物を含む溶液１００μＬが、カラギーナンとともに注射された（ＰＢＳの追加１００μＬが、対照群に注射された。）。
【０１１５】
４時間後に、マウスはＣＯ２で昏睡させて殺し、空気嚢はＰＢＳの２ｍｌで洗浄し、滲出液を回収した。
【０１１６】
滲出液は、ＰＢＳ中０．０１５％のメチレンブルーで１：１に希釈された。
【０１１７】
白血球は、標準的な血球計数室（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｏｐｔｉｃａｌ，Ｂｕｆｆａｌｏ，ＮＹ）で計数された。
【０１１８】
（実施例６）
炎症バイオアッセイ結果
化合物６６０（式ＩＶ）は、炎症バイオアッセイプロトコル（実施例５）に従って、抗炎症活性に関してアッセイされた。カラギーナン注射で、５匹のマウスは、化合物６６０を含有する試験溶液１００μＬの注射を受け、１１匹の対照群のマウスは、ＰＢＳの１００μＬの注射を受けた。滲出液を空気嚢から回収し、白血球を計数し、この結果が表８（対照）と表９（化合物６６０）に示される。
【０１１９】
【表８】
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【０１２０】
【表９】
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【０１２１】
示されているように、試験化合物６６０で処置されたマウスからの一定量中の平均白血球容積（１０６細胞／ｍｌ）は、対照マウスの２．６７と比較して１．５４であり、化合物６６０の抗炎症剤としての有効性を確立する（０．０５２５５４８５のＰ値）。化合物６６０の抗炎症性効果は、慢性用のメトトレキサート０．５から１．０ｍｇ／ｋｇ／週に、またはデキサメタゾン１．５ｍｇ／ｋｇの急性用量に匹敵する。
【０１２２】
（実施例７）
併用の同定
上で議論したように、本発明の化合物は、既知の治療剤（例えば鎮痛剤および／または抗炎症剤）と医薬組成物の形態で併用することが可能である。このような鎮痛剤としては、ＮＳＡＩＤＳ（例えばサリチレート、アセトアミノフェン、イブプロフェンおよびＣＯＸ−２阻害剤など）が挙げられるが、これらに限定されない。実施例１の鎮痛剤バイオアッセイを用いて、当業者は、鎮痛剤としてのこのような併用の有効性を決定することができることが期待され、従って、このような併用は、本発明の範囲内でもある。
【０１２３】
命名法
当業者には容易に理解されるように、本発明化合物のすべての立体異性体は、本発明に含まれる。例えば式ＩＩとＩＶの化合物については少なくとも３２の可能な異性体があると考えられる。
【０１２４】
例えば式ＩＩの化合物は、１４−（β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−４−ヒドロキシ−２，６，１０，１４−テトラメチル−２，６，１０，１５−ヘキサデカテトラエン酸と呼ぶことができ；特定の異性体に関して、１４−（β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−４−ヒドロキシ−２，６，１０，１４−テトラメチル−２，６，１０，１５−ヘキサデカテトラエン酸［４Ｒ／Ｓ−（２Ｅ，４Ｒ／Ｓ，６Ｅ，１０Ｅ，１４Ｒ／Ｓ）］と呼ぶこともできる。さらに、Ｃ−１４の配置が、式ＩＩの化合物に対して決定されて、１４−（β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ）−４−ヒドロキシ−２，６，１０，１４−テトラメチル−２，６，１０，１５−ヘキサデカテトラエン酸［４Ｒ／Ｓ−（２Ｅ，４Ｒ／Ｓ，６Ｅ，１０Ｅ，１４Ｓ）］と呼ぶこともできる。
【０１２５】
同様に、式ＩＶの化合物は、１４−［（２−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−β−Ｄ−グルコピラノシル）オキシ］−４−ヒドロキシ−２，６，１０，１４−テトラメチル−２，６，あ１０，１５−ヘキサデカテトラエン酸と呼ぶことができ；特定の異性体に関して、１４−［（２−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−β−Ｄ−グルコピラノシル）オキシ］−４−ヒドロキシ−２，６，１０，１４−テトラメチル−２，６，１０，１５−ヘキサデカテトラエン酸［４Ｒ／Ｓ（２Ｅ，４Ｒ／Ｓ，６Ｅ，１０Ｅ，１４Ｒ／Ｓ）］と呼ぶこともできる。さらに、Ｃ−１４の配置が、式ＩＶの化合物に対して決定されて、１４−［（２−Ｏ−β−Ｄ−グルコピラノシル−β−Ｄ−グルコピラノシル）オキシ］−４−ヒドロキシ−２，６，１０，１４−テトラメチル−２，６，１０，１５−ヘキサデカテトラエン酸［４Ｒ／Ｓ（２Ｅ，４Ｒ／Ｓ，６Ｅ，１０Ｅ，１４Ｓ）］と呼ぶこともできる。
【０１２６】
本発明は、様々な特定の実施形態および技術を参照して、上記の本明細書に記述されてきた。しかし、このような実施形態と技術の合理的な修正が、以下の特許請求の範囲によって定義される発明の精神と範囲から実質的に逸脱することなくなされることが理解される。本明細書で引用されたすべての参照は、これらの全部が組み入れられる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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