(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体の体表表面から生理活性物質を取得するために溶媒を前記体表表面に接触させる開口が設けられた採取部と、
前記採取部に前記溶媒を送液する送液手段と、
前記開口において前記体表表面に接触した前記溶媒を容器へ注入する回収手段と、を備え、
前記回収手段は中空ニードルを含んでなり、中空ニードル端部の孔から前記溶媒を排液する生理活性物質採取装置。
【請求項２】
前記中空ニードルは、弾性と弾性変形による自己封止性とを備える封止部材により閉蓋された容器の前記封止部材を穿通して前記容器内部に前記溶媒を注入するものである請求項１記載の生理活性物質採取装置。
【請求項３】
前記中空ニードルを、下方に移動させて中空ニードル端部を前記封止部材を穿通させて前記容器内に到達させ、あるいは、上方に移動させて容器内に到達した中空ニードル端部を封止部材を再度挿通させて容器外に抜去する駆動手段と、
中空ニードルの下方に複数の容器を一つずつ位置させる送り手段と、を備える請求項２記載の生理活性物質採取装置。
【請求項４】
前記中空ニードル端部が前記容器外に存在するときに、中空ニードルと前記容器との間に位置して、前記孔から排液される前記溶媒を受容する廃液受容部を有し、
前記中空ニードルが下方に移動するときに、廃液受容部を中空ニードルと容器との間から退避させる駆動手段を備える請求項３記載の生理活性物質採取装置。
【請求項５】
前記採取部に空気を送気する送気手段を備え、採取部に前記溶媒及び空気を選択的に導入する請求項１〜４のいずれか一項に記載の生理活性物質採取装置。
【請求項６】
前記採取部は、前記溶媒が通流される流路と、流路への溶媒の導入口と、流路からの溶媒の排出口と、流路の導入口と排出口との間に位置する前記開口と、が形成された基板を含んでなり、
基板は、採取部において交換可能に配されている請求項１〜５のいずれか一項に記載の生理活性物質採取装置。
【請求項７】
前記生理活性物質を定量する定量部と、
生理活性物質の定量値に基づいて前記生体に関する情報を自動判定により取得する判定部と、を有する請求項１〜６のいずれか一項に記載の生理活性物質採取装置。
【請求項８】
前記生理活性物質をコルチゾール類とし、前記情報として前記生体のストレスに関する情報を取得する請求項７記載の生理活性物質採取装置。
【請求項９】
前記生理活性物質をモノアミン類とし、前記情報として前記生体の情動に関する情報を取得する請求項７記載の生理活性物質採取装置。
【請求項１０】
前記生理活性物質をエストロゲン類とし、前記情報として前記生体の月経周期に関する情報を取得する請求項７記載の生理活性物質採取装置。
【請求項１１】
前記生理活性物質を成長ホルモンとし、前記情報として前記生体における運動の効果に関する情報を取得する請求項７記載の生理活性物質採取装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生理活性物質採取装置に関する。より詳しくは、生体の体表表面から生理活性物質を取得するための生理活性物質採取装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
生体のストレスや情動、月経周期等に関する情報（以下、「生体に関する情報」もしくは「生体情報」という）を取得するための方法として、従来、問診や官能アンケート等による心理学的評価や、脳波や筋電等による生理学的検査、作業成績等による行動計測などに基づく生体情報取得方法が知られている。例えば、特許文献１には、心拍数に基づいて月経周期を判定するための技術が開示されている。また、特許文献２には、体温変動や心拍数をモニターする生活活性度モニターシステムが開示されている。
【０００３】
さらに、近年では、より簡便な手法として、血液や尿、唾液中に含まれる生理活性物質を指標として、生体に関する情報を取得する技術が開発されてきている。例えば、特許文献３には、唾液における副腎皮質ステロイド及び／又はその代謝産物の濃度を指標とするストレスの定量方法が開示されている。また、特許文献４には、血液等に含まれるβ−エンドルフィンやドーパミン、免疫グロブリンA、プラスタグランジンD2などを指標として、ストレスを快と不快の両面で把握する方法が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００６−９４９６９号公報
【特許文献２】特許第２５８２９５７号公報
【特許文献３】特開平１１−３８００４号公報
【特許文献４】特開２０００−１３１３１８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
血液や尿、唾液中に含まれる生理活性物質を指標とした生体情報取得方法は、心理学的評価や生理学的検査、行動計測等による方法に比べ、簡便であり、大型の装置を必要としないという利点がある。
【０００６】
一方で、これらの方法では、生理活性物質の定量のため、採血や尿及び唾液を採取する作業が必須となる。このため、例えば、血液を用いる場合には、採血によって被験者に精神的・肉体的負荷が生じるという問題がある。加えて、採血に伴う精神的・肉体的負荷そのものがストレスとなって、被験者のストレスや情動等に変化が生じ、正確な生体情報を取得できない可能性があった。
【０００７】
また、尿や唾液を用いる場合には、採血において問題となる医療行為性を回避して、被験者に対する精神的・肉体的負荷についても軽減を図ることが可能である。しかしながら、経時的な採取もしくは常時採取が難しく、また尿や唾液の採取時とこれらに含まれる生理活性物質の生体内代謝時とにずれが存在するため、生体情報をリアルタイムに取得することが難しいという問題がある。また、尿や唾液の採取は、精神的・肉体的負荷は低いものの、被験者に採取作業を強く意識させるため、やはり正確な生体情報を取得できないおそれがあった。
【０００８】
そこで、本発明は、簡便かつ低侵襲に、常時、生体から生理活性物質を採取することが可能な生理活性物質取得装置を提供することを主な目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上記課題解決のため、本発明は、生体の体表表面から生理活性物質を取得するために溶媒を前記体表表面に接触させる開口が設けられた採取部と、前記採取部に前記溶媒を送液する送液手段と、前記開口において前記体表表面に接触した前記溶媒を注入する回収手段と、を備え、前記回収手段は中空ニードルを含んでなり、中空ニードル端部の孔から前記溶媒を排液する生理活性物質採取装置を提供する。この生理活性物質採取装置では、採取部において生体の体表表面に溶媒を接触させることにより、該溶媒中に生理活性物質を採取できる。
前記中空ニードルは、弾性と弾性変形による自己封止性とを備える封止部材により閉蓋された容器の前記封止部材を穿通して前記容器内部に前記溶媒を注入するものであってもよい。
また、この生理活性物質採取装置は、前記中空ニードルを、下方に移動させて中空ニードル端部を前記封止部材を穿通させて前記容器内に到達させ、あるいは、上方に移動させて容器内に到達した中空ニードル端部を封止部材を再度挿通させて容器外に抜去する駆動手段と、中空ニードルの下方に複数の容器を一つずつ位置させる送り手段と、を備えることが好ましい。
さらに、この生理活性物質採取装置は、前記中空ニードル端部が前記容器外に存在するときに、中空ニードルと前記容器との間に位置して、前記孔から排液される前記溶媒を受容する廃液受容部を有し、前記中空ニードルが下方に移動するときに、廃液受容部を中空ニードルと容器との間から退避させる駆動手段を備えることが好ましい。
この生理活性物質採取装置は、前記採取部に空気を送気する送気手段を備え、採取部に前記溶媒及び空気を選択的に導入するものとできる。採取部に溶媒及び空気を選択的に導入することで、採取部において生体の体表表面に接触する溶媒を所定容量毎に空気により分断して送液し、回収することができる。
この生理活性物質採取装置において、前記採取部は、前記溶媒が通流される流路と、流路への溶媒の導入口と、流路からの溶媒の排出口と、流路の導入口と排出口との間に位置する前記開口と、が形成された基板を含んでなり、基板は、採取部において交換可能に配されていることが望ましい。
また、この生理活性物質採取装置には、前記生理活性物質を定量する定量部と、生理活性物質の定量値に基づいて前記生体に関する情報を自動判定により取得する判定部と、を設けてもよい。この場合、前記生理活性物質は、例えばコルチゾール類、モノアミン類、エストロゲン類あるいは成長ホルモンとすることで、前記情報としてそれぞれ前記生体のストレス、情動、月経周期、運動の効果に関する情報を取得することが可能である。
【００１０】
本発明において、「生体に関する情報」には、ストレスや情動、月経周期、運動の効果等に関する情報の他、例えば、眠気（覚醒レベル）や健康状態、概日リズム（生体リズム）などが含まれる。また、「情動」には、興奮や恐怖、怒り、攻撃性、快感、不安などが含まれる。
【００１１】
また、「生理活性物質」には、生体内に存在する物質であって、生体に対して生理作用ないしは薬理作用を有することにより、生体のストレスや情動、月経周期、代謝等の変化に関与する物質が広く包含されるものとする。具体的には、コルチゾールやエストラジオールなどのステロイドホルモンや、アドレナリンやドーパミンなどのカテコールアミン、オキシトシンやエンドルフィンなどの生理活性ペプチド等が含まれる（後掲「表1」参照）。
【発明の効果】
【００１２】
本発明により、簡便かつ低侵襲に、常時、生体から生理活性物質を採取することが可能な生理活性物質取得装置が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】本発明の第一実施形態に係る生理活性物質採取装置の概略構成を説明する斜視図である。
【図２】生理活性物質採取装置における溶媒の流れを説明するブロック図である。
【図３】採取部の構成を説明する模式図である。
【図４】生体表面から生理活性物質を取得するための操作を説明する模式図である。
【図５−１】ホルダーの構成を説明する模式図である。
【図５−２】ホルダーの動作を説明する模式図である。
【図６】中空ニードルを含む回収手段の構成を説明する模式図である。
【図７】中空ニードルを含む回収手段の動作を説明する模式図である。
【図８】採取部の変形例の構成を説明する模式図である。
【図９】採取部の他の変形例の構成を説明する模式図である。
【図１０】採取部の他の変形例の構成を説明する模式図である。
【図１１】指の皮膚表面から生理活性物質を取得するための方法を説明する模式図である（実施例１）。
【図１２】高速液体クロマトグラフィー（HPLC）を用い、1名の被験者についてコルチゾール量を測定した結果（実施例１）を示す図である。
【図１３】高速液体クロマトグラフィー（HPLC）を用い、6名の被験者についてコルチゾール量を測定した結果（実施例１）を示す図である。
【図１４】標準品コルチゾール溶液について得られたSPRカーブを示す図である（実施例１）。
【図１５】標準品コルチゾール溶液について得られたSPRシフトのプロットと検量線を示す図である（実施例１）。
【図１６】高速液体クロマトグラフィー（HPLC）を用い、ノルエピネフリン量及びL−ドーパ量を測定した結果（実施例２）を示す図である。
【図１７】高速液体クロマトグラフィー（HPLC）を用い、セロトニン量を測定した結果（実施例３）を示す図である。
【図１８】酵素免疫測定法（ELISA）を用い、エストラジオール量を測定した結果（実施例４）を示す図である。
【図１９】酵素免疫測定法（ELISA）を用い、成長ホルモン量を測定した結果（実施例５）を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明を実施するための好適な形態について図面を参照しながら説明する。なお、以下に説明する実施形態は、本発明の代表的な実施形態の一例を示したものであり、これにより本発明の範囲が狭く解釈されることはない。説明は以下の順序で行う。
１．本発明の第一実施形態に係る生理活性物質採取装置
（１）概要
（２）全体構成
（３）採取部
（４）回収手段
（５）定量部・判定部
２．第一実施形態の変形例に係る生理活性物質採取装置
（１）第一変形例
（２）第二変形例
（３）第三変形例
３．生理活性物質と生体情報
【００１５】
１．本発明の第一実施形態に係る生理活性物質採取装置
（１）概要
本発明者らは、生体情報を精度良くセンシングすることを目的とし、生体からの生理活性物質の採取手法について鋭意検討を行った。その結果、実施例において詳説するように、指や掌などの体表表面から生理活性物質を取得し得ることを初めて見出した。
【００１６】
従来、生理活性物質については、血液や尿、唾液等からの取得が技術常識となっている。本発明者らの知る限り、生体の体表表面から生理活性物質を取得できたとの報告はこれまでなされていない。
【００１７】
体表表面から生理活性物質が取得される機序について、その詳細は不明であるが、例えば、汗や皮脂中に分泌された生理活性物質が体表表面に存在している可能性が考えられる。もしくは、血中の生理活性物質が体表表面の細胞を透過して体表表面に存在している可能性も考えられる。生理活性物質の多くは、脂溶性及び細胞膜透過性を有していることから、皮脂中への分泌又は細胞透過によって体表表面に存在する生理活性物質が取得されている可能性が高いと考えられる。
【００１８】
本発明は、以上のような新規知見に基づきなされたものであり、生体の体表表面から生理活性物質を取得することが可能な生理活性物質採取装置を提供するものである。
【００１９】
（２）全体構成
図１は、本発明の第一実施形態に係る生理活性物質採取装置の概略構成を説明する斜視図である。
【００２０】
図中、符号Ａで示す生理活性物質採取装置は、生体の体表表面（以下、「生体表面」という）から生理活性物質を取得するために生体表面に当接される採取部１と、採取部１に溶媒を送液する送液手段と、採取部１に空気を送気する送気手段と、採取部１で生体表面に接触した溶媒を容器５内に注入する回収手段と、を含んで構成されている。使用される溶媒は、水や各種有機溶媒であってよく、例えば、エタノール水を用いることができる。
【００２１】
図中、符号２は、送液手段を構成する溶媒タンク２を示す。送液手段は、溶媒タンク２に加えて、溶媒タンク２内の溶媒を採取部１に送液するためのポンプやチューブ、バルブ等から構成される。また、符号３は、送気手段を構成する空気タンクを示す。送気手段は、空気タンク３に加えて、空気タンク３内の空気を採取部１に送液するためのポンプやチューブ、バルブ等から構成される。空気タンク３は、ごみやちりがチューブ内やバルブ内に吸引されるのを防止するためのフィルターの役割を果たす。
【００２２】
図中、符号６は、回収手段を構成する中空ニードルを示す。回収手段は、中空ニードル６に加えて、採取部１で生体表面に接触した溶媒を中空ニードル６に送液するためのポンプやチューブ、バルブ等から構成される。中空ニードル６は、採取部１から送液される、生体表面に接触後の溶媒をニードル端部の孔から排液できるように構成されており、溶媒を下方に位置する容器５内に注入するために機能する。
【００２３】
図２に、生理活性物質採取装置Ａにおける溶媒の流れをブロック図により示す。
【００２４】
採取部１には、溶媒タンク２から、送液のための流路が接続されている。また、採取部１には、空気タンク３から、送気のための流路が接続されている。さらに、採取部１には、生体表面に接触後の溶媒と空気を中空ニードル６に送るための流路が接続されている。これらの流路には、汎用のチューブを採用できる。各流路にはそれぞれ送液あるいは送気のための汎用のポンプ（符号２１，３１，６１参照）が配設される。
【００２５】
溶媒タンク２と採取部１を接続するチューブと、空気タンク３と採取部１を接続するチューブは、採取部１の上流において合流している。図中、符号２２，３２は、この合流部と溶媒タンク２あるいは空気タンク３との間にそれぞれ設けられるバルブを示す。生理活性物質採取装置Ａは、バルブ２２，３２の開閉を図示しない全体制御部によって制御することによって、採取部１に溶媒及び空気を選択的に導入する。なお、図中、符号６２は、採取部１と中空ニードル６とを接続するチューブに設けられるバルブを示す。バルブ６２は、全体制御部によって開閉を制御され、中空ニードル６からの溶媒の排液を開始あるいは停止させるために機能する。なお、全体制御部は、図１中、符号８で示したコントロールボックス内に設けられている。
【００２６】
生理活性物質採取装置Ａにおいて、溶媒が通流するチューブやバルブ、ポンプには、生理活性物質が付着し難い材質のもの、あるいは生理活性物質を吸着し難くする表面処理が施されたものを用いることが好ましい。
【００２７】
再度、図１を参照して説明する。中空ニードル６は、上下に移動可能な構成とされている。中空ニードル６は、採取部１から送液される、生体表面に接触後の溶媒を容器５内に注入する際には、下方に移動される。中空ニードル６が下降した状態では、ニードル端部が下方に位置する容器５内に挿入され、ニードル端部の孔から排液される溶媒が容器５内に導入される。
【００２８】
一方、中空ニードル６が上方に移動され、ニードル端部が容器５外に存在するときには、ニードル端部の孔から排液される溶媒は、中空ニードル６とその下方の容器５との間に位置する廃液受容部７（以下、「廃液トレイ７」と称する）に受容される。廃液トレイ７によって集められた溶媒は、廃液タンク４に送液されて貯留される。廃液トレイ７は、中空ニードル６の上下移動を妨げないように、中空ニードル６の下降時には、中空ニードル６とその下方の容器５との間から退避するように構成されている（詳しくは、図６・７を参照して後述する）。
【００２９】
生理活性物質採取装置Ａにおいて、容器５は複数を搭載可能とされていることが好適である。容器５を複数搭載することで、サンプルの回収容量が増し、また各容器に異なる生体や生体表面の異なる部位から採取されたサンプルや、同一の生体や生体表面から異なる時刻あるいは経時的に採取されたサンプルを回収することが可能となる。なお、ここでいう「サンプル」は、生体表面に接触後の生体内物質を含む溶媒を意味し、加えて比較のために採取された生体表面に接触させていない溶媒も含み得るものとする
【００３０】
本実施形態では、複数の容器５を一つずつ中空ニードル６の下方に位置させる送り手段としてコンベアチェーンを設けている。コンベアチェーンによって中空ニードル６の下方に順次容器５を送り込み、中空ニードル６を上下動させることで、各容器５内に順次サンプルを注入していく（詳しくは、図６を参照して後述する）。なお、送り手段は、コンベアチェーンに限定されず、中空ニードル６の下方に容器５を一つずつ送り込むことが可能な手段であれば広く採用できる。
【００３１】
図中、符号１０は、生理活性物質採取装置Ａの上部を被う上部カバーである。上部カバー１０は、コンベアチェーンに容器５を搭載するため、あるいは容器５をコンベアチェーンから取り外すための開閉部を有している。符号９は、溶媒タンク２、空気タンク３及び廃液タンク４を交換するために開閉される下部カバーを示す。
【００３２】
（３）採取部
次に、図３及び図４を参照して、採取部１の構成を説明する。図３は、採取部１の構成を説明する模式図であり、（Ａ）は上面図を、（Ｂ）は（Ａ）中Ｐ−Ｐ断面における断面図を示す。また、図４は、生体表面から生理活性物質を取得するための操作を説明する断面模式図である。
【００３３】
採取部１は、大略、固定基板１１と採取基板１２とからなっている。固定基板１１は、生理活性物質採取装置Ａの装置本体に固定して設けられており、採取基板１２は、固定基板１１上に取り外して交換できるように配されている。
【００３４】
採取基板１２には、溶媒が送液されて通流する流路１２１と、流路１２１への溶媒の導入口１２２と、流路１２１からの溶媒の排出口１２３とが形成されている。固定基板１１には、溶媒タンク２からの送液される溶媒が流れる流路１１１と、中空ニードル６に送液される溶媒が流れる流路１１２とが形成されている。図中、矢印Ｆ１及びＦ２は、固定基板１１のこれらの流路に送液される溶媒の流れ、あるいは流路から排液される溶媒の流れを示す。
【００３５】
採取基板１２には、流路１２１の導入口１２２と排出口１２３との間において上部に開放された開口１２４が形成されている。開口１２４は、流路１２１内を通流する溶媒を生体表面に接触させるために機能する。すなわち、図４に示すように、溶媒が通流する流路１２１の開口１２４に生体表面Ｓを密着させると、流路１２１内に充満した溶媒が生体表面Ｓに接触し、生体表面Ｓに存在する生理活性物質が溶媒中に採取される。生体表面Ｓに接触した溶媒は、矢印Ｆ２に従って中空ニードル６に送液される。
【００３６】
この際、図２で説明したバルブ２２，３２の開閉を制御して溶媒タンク２及び空気タンク３から採取部１に溶媒及び空気を選択的に導入することによって、生体表面Ｓに接触する溶媒を、所定容量毎に空気により分断して、中空ニードル６に送液することができる。具体的には、開口１２４に生体表面Ｓを密着させた状態で、所定容量の溶媒を流路１２１に送液後、流路１２１に空気を送ることにより、流路１２１内における溶媒の流れを空気によって分断する。その後、再度、所定容量の溶媒を流路１２１に送液する。このように、空気の導入と溶媒の導入とを繰り返すことで、生体表面Ｓに接触後の溶媒を所定容量ごとに空気により分断された状態で中空ニードル６へ送り出すことができる。これにより、回収されるサンプルにおける生理活性物質の希釈を抑制でき、異なる生体や生体表面の異なる部位から採取されたサンプルを区分して異なる容器内に回収できる。
【００３７】
ここでは、生体表面Ｓとして指先を例示した。生理活性物質の取得部位である体表表面Ｓは、指や掌などの皮膚表面が簡便であるが、特に限定はされない。開口１２４は、生理活性物質の取得部位に応じて、該部位の皮膚表面を密着させ易いような形状に形成されることが望ましい。開口１２４と体表表面Ｓを密着させるため、粘着テープやバンドル等を用いて生体表面Ｓを採取基板１２に固定してもよい。
【００３８】
採取基板１２は、上述したように、固定基板１１上に交換可能に配されている。これにより、例えば、生理活性物質の取得部位の形や大きさに応じて開口１２４の形状を異ならせた複数種類の採取基板１２を適宜交換して取り付けることが可能となる。また、異なる生体や生体表面の異なる部位からサンプル採取する場合や同一の生体や生体表面から異なる時刻にサンプルを採取する場合に、その都度新しい採取基板１２を取り付けられ、サンプル間のクロスコンタミネーションを防止することが可能となる。なお、採取基板１２を交換しない場合には、サンプル間のクロスコンタミネーションを防止するため、採取部１に溶媒あるいは洗浄液を所定時間通流して洗浄操作を行うことが望ましい。
【００３９】
固定基板１１の溶媒タンク２からの送液される溶媒が流れる流路１１１と、採取基板１２の導入口１２２は、接続管１１３によって連通されている（図３参照）。また、固定基板１１の中空ニードル６に送液される溶媒が流れる流路１１２と、採取基板１２の排出口１２３も、接続管１１３によって連通される。接続管１１３は、好ましくは、流路１１１及び流路１１２の一部に圧入して固定され、硬質な材料（例えば金属）製とされる。接続管１１３は、採取基板１２を固定基板１１に取り付ける際に、それぞれが導入口１２２と排出口１２３に嵌入されることにより、溶媒の流路となるとともに、固定基板１１上における採取基板１２の位置決め手段としても機能する。
【００４０】
固定基板１１に採取基板１２を取り付ける際、両者の連結部位である接続管１１３周辺から溶媒の漏れが生じることを防止するため、固定基板１１に採取基板１２との間には、密封部材１３を挟みこむことが望ましい。密封部材１３には、シリコンゴム等の弾性を有する材料が好適に用いられる。密封部材１３は、採取基板１２と同程度の大きさのシート状に形成することが好ましい。
【００４１】
固定基板１１及び採取基板１２の材質としては、石英又はホウ珪酸ガラス等のガラス材料やポリジメチルシロキサン（PDMS）等のシリコンゴムあるいはポリメチルメタクリレート（PMMA）等のアクリル樹脂、シクロオレフィンコポリマー（COC）、ポリエーテルエーテルケトン（PEEK）などが使用可能である。基板に配設される流路等の成形は、ガラス製基板層のウェットエッチングやドライエッチングによって、またプラスチック製基板層のナノインプリントや射出成型、機械加工によって行うことができる。流路等の表面には、生理活性物質を吸着し難くする処理を施すことが好ましい。表面処理としては、例えば、2-methacryloyoxyethyl phosphorylcholine（MPC）やpolyethylene glycol（PEG）による処理が挙げられる。なお、採取基板１２については、ディスポーザブルとすることが好ましい。
【００４２】
図５-１、図５-２は、固定基板１１に取り付けられた採取基板１２を保持するためのホルダーの構成と動作を説明する模式図であり、（Ａ）は上面図を、（Ｂ）、（Ｃ）は断面図を示す。
【００４３】
図中、符号１４で示すホルダーは、上板１４１と下板１４２とこれらを連結するヒンジ１４３とを含んでなる。上板１４１には、保持される採取基板１２の開口１２４に対応する位置に窓１４４が設けられている。採取基板１２を交換する際、上板１４１は、ヒンジ１４３を支点として図中矢印方向に開閉が可能な構成とされている（（Ｃ）参照）。
【００４４】
固定基板１１は、ホルダー１４の下板１４２によって予め装置本体に固定される。ホルダー１４は、上板１４１と下板１４２との間に固定基板１１と採取基板１２とを挟持して、固定基板１１に取り付けられた採取基板１２を上板１４１によって押圧する。これにより、ホルダー１４は、固定基板１１と採取基板１２を、両基板間に挟み込まれた密封部材１３（図４参照）を介して密着させて保持し、接続管１１３周辺からの溶媒の漏れを防止する。
【００４５】
（４）回収手段
続いて、図６及び図７を参照して、中空ニードル６を含む回収手段の動作を説明する。
【００４６】
中空ニードル６はニードルプレート６３によって支持され、ニードルプレート６３は送りねじやガイド、モータ等によって構成される駆動手段によって図中Ｚ軸正負方向（上下方向）に移動可能な構成とされている。
【００４７】
図６に示す、中空ニードル６が上方に移動され、ニードル端部が容器５外に存在するときには、ニードル端部の孔から排液される溶媒は、廃液トレイ７によって集められ、廃液タンク４に送液され貯留される。
【００４８】
図７に示すように、採取部１から送液される生体表面に接触後の溶媒を容器５内に注入するときには、中空ニードル６は下方に移動される。このとき、廃液トレイ７は、中空ニードル６の下降を妨げないように、送りねじやガイド、モータ等によって構成される駆動手段によってＸ軸正方向に移動され、中空ニードル６とその下方の容器５との間から退避する。
【００４９】
廃液トレイ７には、Ｘ軸正方向に移動する際に、中空ニードル６を通過させるための切欠７１が設けられている。切欠７１は、廃液トレイ７の中空ニードル６側の側壁に、中空ニードル６の太さよりも幅広く側壁の一部を切り欠くことによって設けられる。切欠７１を設けることによって、中空ニードル６の下降時に、Ｘ軸方向（水平方向）のみの移動によって、廃液トレイ７を中空ニードル６とその下方の容器５との間から退避させることができる。
【００５０】
中空ニードル６が下降した状態では、ニードル端部が下方に位置する容器５内に挿入され、ニードル端部の孔から排液される溶媒が容器５内に導入される。容器５は、弾性と弾性変形による自己封止性とを備える封止部材５１により閉蓋されている。一方、中空ニードル６の端部は、封止部材５１を穿通可能な鋭利構成とされている。従って、中空ニードル６が下降すると、ニードル端部は封止部材５１を穿通し、容器５内に到達できる。容器５内への溶媒の注入時に、容器内の空気を排気するため、中空ニードル６の側面に空気の排気路となり得る溝を形成しておくことが好適である。
【００５１】
容器５内への溶媒の注入後、中空ニードル６は上方に移動される。このとき、廃液トレイ７は、中空ニードル６の上昇を妨げないように、上記の通り退避した状態とされている。中空ニードル６を上方に移動させて、容器５内に到達した中空ニードル端部を、封止部材５１を再度挿通させて容器外に抜去すると、封止部材５１の弾性変形による復元力で、ニードルによる穿刺箇所が自然に封止される。本発明においては、封止部材５１の弾性変形による穿刺箇所の自然封止を「自己封止性」と定義するものとする。封止部材５１には、例えば合成ゴムや天然ゴム等を用いることができる。封止部材５１の表面には、生理活性物質を吸着し難くする処理を施すことが好ましい。
【００５２】
中空ニードル６は以上のような上下動作を繰り返すことにより、コンベアチェーンによって順次その下方に送り込まれてくる容器５内に順次サンプルを注入していく。なお、ニードル端部の孔からの溶媒の排液は、図２で説明したバルブ６２と全体制御部により適切なタイミングで制御される。
【００５３】
（５）定量部・判定部
生理活性物質取得装置Ａは、上述したように、採取部１において生体表面に溶媒を接触させて溶媒中に生理活性物質を採取し、容器５内に回収する機能を有する。生理活性物質取得装置Ａには、この生理活性物質の取得機能に加えて、生理活性物質を定量する機能及び／又は定量値に基づいて生体に関する情報（生体情報）を自動判定により取得する機能を付与してもよい。
【００５４】
生理活性物質の定量部は、採取部１において採取された生理活性物質の一部あるいは全部を定量する液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、表面プラズモンセンサー（ＳＰＲ）や水晶発振子マイクロバランスセンサー（ＱＣＭ）等により構成できる。この他、定量部は、酵素免疫測定法、放射免疫測定法等の公知手法に基づいて生理活性物質の測定を行う構成とすることもできる。
【００５５】
ＨＰＬＣやＳＰＲ、ＱＣＭによれば、酵素免疫測定法や放射免疫測定法で必要とされる標識化（ラベリング）の工程を省くことができるため、定量部の構成を簡略化できる。加えて、測定精度の観点から、ＳＰＲ又はＱＣＭを採用することがさらに望ましい。ＨＰＬＣでは、クロマトグラフ上のピークとして生理活性物質を検出しているため、ピーク強度に夾雑物のシグナルやノイズが入ると、測定精度が低下する場合がある。これに対して、ＳＰＲ又はＱＣＭでは、センサ表面に固相化した抗体により生理活性物質を検出するため、抗体の特異性に基づいて高い測定精度を得ることができる。また、ＳＰＲ及びＱＣＭでは、ＨＰＬＣに比して、スループットが高く、定量部を小型化できるという利点もある。
【００５６】
生体情報の判定部は、通常のＨＰＬＣやＳＰＲ、ＱＣＭに用いられる解析処理装置や表示装置により構成できる。判定部では、定量部による定量値を指標として、生体情報の取得を行う。具体的には、例えば、多数の健常者の一日の所定時間範囲にわたる生理活性物質量を測定し、測定結果より標準的な生理活性物質量濃度の変化範囲を規定する標準変化曲線を算出する。そして、被験者の生理活性物質量をこの標準変化曲線と比較し、生体情報の判定を行う。得られた判定結果は、ディスプレイ等に表示される。
【００５７】
以上に説明した生理活性物質取得装置Ａによれば、指や掌などの体表表面から生理活性物質を取得することにより、従来の血液や尿、唾液中から生理活性物質を採取する方法に比べ、より簡便かつ低侵襲に生理活性物質を採取できる。また、体表表面に存在する生理活性物質を取得することで、血液や尿、唾液等とは異なり、被験者に採取作業を強く意識させることなく、生理活性物質を取得できる。従って、生理活性物質取得装置Ａによれば、被験者においてストレスや情動等の変化を引き起こすことなく、生理活性物質を採取して、採取された生理活性物質の定量値から正確な生体情報を取得することが可能となる。
【００５８】
さらに、生理活性物質取得装置Ａでは、体表表面に分泌又は透過される生理活性物質を取得するため、生理活性物質を経時的にもしくは常時採取することができる。また、体表表面に分泌又は透過される生理活性物質を採取することで、生理活性物質の採取時と、生理活性物質の生体内代謝時と、を一致させることができる。従って、生理活性物質取得装置Ａによれば、生理活性物質を被験者から経時的にもしくは常時取得し、その定量値から生体情報をリアルタイムにセンシングすることが可能となる。
【００５９】
２．第一実施形態の変形例に係る生理活性物質採取装置
第一実施形態に係る生理活性物質採取装置Ａでは、採取部１を、装置本体に固定された固定基板１１に、ホルダー１４によって採取基板１２を取り付けて構成する例を説明した。この他、採取部１の構成は、以下に説明する変形例を採用することもできる。
【００６０】
（１）第一変形例
図８は、本発明に係る生理活性物質採取装置が備える採取部の変形例の構成を説明する模式図である。図は、採取部において、生体表面から生理活性物質を取得するための操作を示している。本変形例に係る採取部は、採取基板１２を固定基板１１及び装置本体から分離させた状態で、生体表面Ｓからの生理活性物質の採取を行い得る構成とされている。
【００６１】
採取基板１２は、図示しない固定基板１１とチューブ１１４，１１５によって接続されている。固定基板１１側から送液される溶媒（及び空気）は、チューブ１１４を通って流路１２１に導入され、開口１２４において生体表面Ｓに接触した後、チューブ１１５を通って固定基板１１側に送液される。図中、符号１２３は、流路１２１の導入口１２２及び排出口１２３に嵌入されて設けられ、チューブ１１４，１１５が接続される差込口を示す。差込口１２５は、金属製あるいはプラスチック製の管であってよい。
【００６２】
本変形例に係る採取部は、採取基板１２を装置本体から分離できる構成であるため、チューブ１１４，１１５の長さを適宜設定することにより、例えば、手元にて指先を採取基板１２に押し付ける操作を行うことがができる。あるいは、採取基板１２を体幹皮膚表面などに貼り付けて生理活性物質を採取することもできる。体幹皮膚表面から生理活性物質を採取する場合には、採取基板１２は、粘着テープを用いて皮膚に貼り付けたり、バンドル等を用いて体幹に巻き付ければよい。
【００６３】
（２）第二変形例
図９は、本発明に係る生理活性物質採取装置が備える採取部の他の変形例の構成を説明する模式図あり、（Ａ）は上面図を、（Ｂ）は（Ａ）中Ｐ−Ｐ断面における断面図を示す。本変形例に係る採取部は、採取基板１２内に、開口１２４において生体表面に接触した溶媒を貯留するための回収領域１２６を形成している。
【００６４】
採取基板１２の導入口１２２には差込口１２５が設けられており、差込口１２５には固定基板１１から送液される溶媒を流路１２１に導入するためのチューブ１１４が接続されている。流路１２１に導入され、開口１２４において生体表面に接触した溶媒は、回収領域１２６内に導入されて貯留される。図中、符号１２７は、回収領域１２６の内部に存在する空気が、導入されてくる溶媒によって押し出されて排気される空気抜き穴を示す。
【００６５】
本変形例に係る採取部は、サンプルを採取基板１２の内部構成として設けた回収領域１２６に貯留する構成であるため、サンプルを単回あるいは少数回採取する際の使用に適する。サンプルの採取毎に採取基板１２を交換するようにすることで、サンプル間のクロスコンタミネーションを排除できる。また、中空ニードル６を含む回収手段を使用する必要がなくなるため、サンプル採取をより簡便に行うことができる。
【００６６】
採取基板１２への回収領域１２６や空気抜き穴１２７の成形は、ガラス製基板層のウェットエッチングやドライエッチングによって、またプラスチック製基板層のナノインプリントや射出成型、機械加工によって行えばよい。回収領域１２６は複数設けてもよく、この場合には開口１２４下流の流路１２１を分岐させて各回収領域１２６に接続する。流路１２１の各回収領域１２６への分岐部には、溶媒をいずれかひとつの回収領域１２６に送流するための切換バルブを設けてもよい。
【００６７】
（３）第三変形例
図１０は、本発明に係る生理活性物質採取装置が備える採取部の他の変形例の構成を説明する模式図あり、（Ａ）は上面図を、（Ｂ）は（Ａ）中Ｐ−Ｐ断面における断面図を示す。本変形例に係る採取部は、採取基板１２内に溶媒を予め収容可能な溶媒収容領域１２８を形成している。
【００６８】
溶媒収容領域１２８には、１回あるいは少数回のサンプルの採取に必要な溶媒を予め注入して貯留させておくことができる。採取基板１２の導入口１２２には差込口１２５が設けられており、差込口１２５には固定基板１１から送気される空気を流路１２１に導入するためのチューブ１１４が接続されている。流路１２１に空気が導入されてくると、溶媒収容領域１２８内に予め収容されている溶媒が空気によって押し出され、開口１２４において生体表面に接触し、さらに回収領域１２６内に導入されて貯留される。
【００６９】
本変形例に係る採取部は、サンプルの採取を採取基板１２の内部構成として設けた溶媒収容領域１２８に予め貯留させた溶媒により行うことができるため、サンプル毎に溶媒の種類を変更して採取を行う場合に好適である。
【００７０】
採取基板１２への溶媒収容領域１２８の成形も、ガラス製基板層のウェットエッチングやドライエッチングによって、またプラスチック製基板層のナノインプリントや射出成型、機械加工によって行い得る。
【００７１】
３．生理活性物質と生体情報
本発明に係る生理活性物質取得装置を用いて取得される生体情報には、ストレスや情動、月経周期、運動の効果等に関する情報の他、例えば、眠気（覚醒レベル）や健康状態、概日リズム（生体リズム）などが挙げられる。
【００７２】
このうち、ストレスに関しては、生体へのストレス負荷量と、コルチゾール、コルチコステロン及びコルチゾン（以下、これらを総称して「コルチゾール類」という）の分泌量との間に相関があることが良く知られている（上記特許文献３及び特許文献４参照）。なお、ここで「分泌量」は、血中への分泌量、すなわち「血中濃度」と同義に用いるものとする。
【００７３】
興奮や恐怖、怒り、攻撃性、快感、不安、悲哀などの情動については、ノルエピネフリンやエピネフリン、ドーパミン及びこれらの前駆物質となるL−ドーパ（以下、これらを総称して「カテコールアミン類」という）の分泌量との相関が知られている。また、カテコールアミン類とともにモノアミン類として分類されるセロトニンの分泌量についても、情動との相関が明らかにされている。
【００７４】
例えば、被験者に不安や恐怖を抱かせるような心理社会的テストを行わせた場合、その前後において唾液中ノルアドレナリン量が変化することが報告されている（”Study of salivary catecholamines using fμLly automated colμMn-switching high-performance liquid chromatography.” Journal of Chromatography. B, Biomedical Sciences and Applications,. 1997 JμL 4;694(2):305-16参照）。
【００７５】
さらに、良く知られているように、エステロン（E1）、エストラジオール（E2）及びエストリオール（E3）（以下、これらを総称して「エストロゲン類」という）は生体の月経周期を制御し、月経周期と相関して分泌量が変化する。
【００７６】
また、効果的な運動を行うことで成長ホルモンの分泌が促進されることが知られている。成長ホルモンの分泌は筋肉や骨の成長を促進し、体脂肪動員を促して脂肪燃焼効率を高めるため、筋肉増強やダイエット等の運動による効果は成長ホルモンの分泌量に相関すると考えられる。
【００７７】
従って、例えば、コルチゾール類の定量値に基づけば、生体に負荷されるストレスに関する情報を得ることができる。具体的には、例えば、多数の健常者のコルチゾール類分泌量を測定し、測定結果から標準的なコルチゾール類濃度の変化範囲を規定する標準変化曲線を算出する。そして、被験者のコルチゾール類分泌量を測定し、この標準変化曲線と比較する。比較の結果、例えば標準変化曲線を逸脱している場合には、当該被験者が慢性ストレスを有していると判定できる。
【００７８】
また、例えば、被験者の平常時のコルチゾール類分泌量を測定し、この測定結果から標準変化曲線を算出して、ある時点における当該被検者のコルチゾール類分泌量と比較することにより、その時点における当該被験者のストレス状態もしくはリラックス状態を判定できる。
【００７９】
コルチゾール類、モノアミン類、エストロゲン類及び成長ホルモンの他、指標とされる生理活性物質及び生体情報の組合せとしては、「表１」に示す組合せが公知である。本発明においても、これらの組合せを採用し、生理活性物質の定量値と生体情報との正又は負の相関に基づいて、生体情報に関する情報を得ることができる。
【００８０】
【表１】
0005482564.tif 000002
【００８１】
なお、「表１」に示す生理活性物質は例示であって、この他にも、カテコールアミン類では、例えば、メタネフリンやノルメタネフリン、３−メトキシ−４ヒドロキシマンデル酸、３−メトキシ−４ヒドロキシフェニルグリコール、３，４−ジヒドキシマンデル酸、３，４−ジヒドキシフェニルグリコール、３，４−ジヒドキシフェニル酢酸、３−メトキシチラミン、ホモバニリン酸、５−ヒドロキシインドール酢酸、バニリルマンデル酸などが生体情報の指標となり得る。また、ステロイドホルモンでは、例えば、アルドステロンやデオキシコルチステロン、アンドロステンジオン、プロゲステロン、１１−デオキシコルチコステロン、プレグネノロン、１１−デオキシコルチゾール、１７−ヒドロキシプロゲステロン、１７−ヒドロキシプレグネノロン、コレカルシフェロール（ビタミンD）などが生体情報の指標となり得る。
【００８２】
さらに、生体情報の指標となり得る生理活性物質として以下が挙げられる。向下垂体ホルモンとして、コルチコトロピン放出ホルモン（CRH）や成長ホルモン放出ホルモン（GRH）、ソマトスタチン（成長ホルモン分泌抑制ホルモン）、ゴナドトロピン放出ホルモン（GnRH）、プロラクチン放出ホルモン（PRH）、プロラクチン抑制ホルモン（PIH）、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン（TRH）、甲状腺刺激ホルモン（TSH）など。甲状腺ホルモンとして、サイロキシンやトリヨードサイロキシンなど。クロモグラニンAや副腎皮質刺激ホルモン（ACTH）、黄体形成ホルモン（LH）、インスリン様成長因子Ｉ（IGF-Ｉ）、プロラクチン、プロオピオメラノコルチン（POMC）、オキシトシン、α-メラニン細胞刺激ホルモン（α-MSH）、グルカゴン、グレリン、ガラニン、モチリン、レプチン、ガストリン、コレシストキニン、セレクチン、アクチビン、インヒビン、ニューロテンシン、ボンベシン、サブスタンスＰ、アンギオテンシンＩ，ＩＩ、エンケファリン、オレキシンＡ，Ｂ、アナンダミド、アセチルコリン、ヒスタミン、グルタミン酸、グリシン、アスパラギン酸、ピリミジン、アデノシン、アデノシン３リン酸（ATP）、ＧＡＢＡ、ＦＭＲＦアミド、ペプチドＹＹ、アグーチ関連ペプチド（AGRP）、コカイン-アンフェタミン調節性転写産物（CART）、カルシトニン遺伝子関連ペプチド（CGRP）、グルカゴン様ペプチド１，２（GLP-1, 2）、血管作動性小腸ペプチド（VIP）、ガストリン放出ペプチド（GRP）、メラニン凝集ホルモン（MCH）などの各種ホルモン及び神経伝達物質。
【００８３】
また、これらの生理活性物質と生体情報の対応もここに示すものに限られず、例えば、セロトニンは情動の他に、統合失調症や不眠症の指標ともなり得るし、エストロゲン類は月経周期の他に、不妊症や更年期症状、躁鬱状態の指標ともなり得る。この他にも、生理活性物質と対応生体情報の組み合わせは、現在までに明らかにされている全ての組み合わせが適用され得る。
【００８４】
本発明に係る生理活性物質取得装置は、例えば「表１」に示したような生理活性物質を指標として生体の健康状態を知り、各種疾患の診断や予防、予後観察を行うために活用できる。具体的には、例えば、コルチゾール類の測定を行うことにより、慢性ストレスの有無を診断して、慢性ストレスの予防や予後観察に役立てることができる。また、例えば、カテコールアミン類の測定によりカルチノイド腫瘍の有無を診断等したり、セロトニンの測定により統合失調や不眠症、内因性欝、ダンピング症候群、偏頭痛の診断等を行ったりすることも考えられる。さらに、エストロゲン類の測定を行えば、月経周期を簡便に診断できる他、不妊症や、乳癌・子宮筋腫・子宮内膜症等のエストロゲン依存性疾患、更年期症状などの診断等に役立てることもできる。
【００８５】
また、成長ホルモンは、加齢に伴って分泌量が低下することが知られており、炭水化物、タンパク質及び脂質の代謝に機能して糖尿病や高血圧症、高脂血症等の生活習慣病の発症にも関与することが知られている。この他、成長ホルモン関連疾患として、成長ホルモンの分泌量減少を伴う成長ホルモン分泌不全性低身長症や下垂体機能低下症、甲状腺機能低下症、肥満症、成長ホルモンの分泌量増加を伴う巨人症や末端肥大症、異所性成長ホルモン生産腫瘍、神経性食欲不振症等の極度の低栄養、慢性腎不全などの疾患がある。従って、本発明に係る生理活性物質測定方法を用いて成長ホルモンの測定を行うことにより、老化の程度の判定や、生活習慣病や成長ホルモン関連疾患の診断等を行うことができる。
【実施例】
【００８６】
＜実施例１：コルチゾール類の定量＞
１．皮膚表面からのコルチゾールの取得
6名の被験者について、1日3回（10時、14時、18時）、4日間、以下の２通りの方法により、指の皮膚表面からコルチゾールを取得した。
【００８７】
（１）マイクロチューブによる採取
エタノールを含ませたペーパータオルで人差し指の指先を軽く拭いた。1%エタノール水50μLが入ったマイクロチューブの上部開口を人差し指の指先に当て、マイクロチューブの下端を親指で保持した（図１１（Ａ）参照）。人差し指と親指でマイクロチューブを挟持した状態で、マイクロチューブを逆さにして、人差し指の皮膚表面に1%エタノール水を1分間接触させた。ここで、始めにペーパータオルで指先を拭く目的は、皮膚表面に存在する夾雑物を取り除くことの他、皮膚表面にコルチゾールが蓄積している可能性を想定し、これを取り除くことを目的としている。
（２）シリンジによる採取
エタノールを含ませたペーパータオルで人差し指の指先を軽く拭いた。シリンジの先端に1%エタノール水50μLを充填し、シリンジを人差し指の指先に当てた状態で、シリンジを親指と中指で保持した（図１１（Ｂ）参照）。右手でシリンジのピストンを引っ張ってシリンジ内を陰圧とし、皮膚表面にシリンジを吸い付け、人差し指の皮膚表面に1%エタノール水を1分間接触させた。この方法によれば、（１）のマイクロチューブによる採取に比べ、皮膚表面に接触させた1%エタノール水を、シリンジ内の陰圧に基づいて高収率に回収することが可能である。
【００８８】
２．高速液体クロマトグラフィー（HPLC）を用いた定量
皮膚表面に接触させた1%エタノール水（以下、単に「サンプル」という）40μLをバイアルに回収した。このサンプル30μLを、高速液体クロマトグラフィー（NANOSPACE SI-2、SHISEIDO）を用いた分析に供した。
【００８９】
前処理カラムにはCAPCELLPAK MF Ph-1（カラムサイズ1.5mmID×35mm、カラム温度35℃、SHISEIDO）を用い、2.5%アセトニトリル水を流速100μL/minで送液した。また、分析カラムにはCAPCELLPAK C18 UG120（カラムサイズ1.5mmID×250mm、カラム温度35℃、SHISEIDO）を用い、10mM Phosphate buffer（pH 6.8）/CH3CN = 78/22を流速100μL/minで送液した。検出は紫外線吸光度検出器（波長242nmUV）にて行い、測定時間は50minとした。
【００９０】
始めに、標準品コルチゾール(和光純薬)を0.5μMコルチゾール／コルチゾン水溶液として調製し、予備検討を行った。この予備検討により、前処理カラムから分析カラムへのバルブ切換え時間（測定開始後2.7-4.4分）及びコルチゾールの流出時間（同36-38分）を確認した。
【００９１】
図１２に、1名の被験者において1日3回（10時、14時、18時）採取を行ったサンプルについて、コルチゾール量を測定した結果を示す。図中、符号pで示す標準品のピークに一致して、各時刻のサンプル（符号s10, s14, s18参照）でコルチゾールのピークが確認できる（ブロック矢印参照）。なお、図中、符号nは、皮膚に接触させていない1％エタノール水の測定結果を示している。
【００９２】
ベースラインに基づきピーク面積を算出し、検量線を用いて算出されたコルチゾール量（pg）を、図１３に示す。図は、6名の被験者（被験者A〜F）について、4日間測定を行った結果を示している。個人差及び測定時刻間での差は見られるものの、少ない場合で数pg、多い場合には300pgのコルチゾールが皮膚表面から採取できることが確認された。
【００９３】
３．表面プラズモンセンサー（SPR）を用いた定量
実施例1で説明した方法（シリンジによる採取）により調製したサンプルについて、表面プラズモンセンサー（BiacoreX、ビアコア株式会社）を用いた間接競合SPRにより分析を行った。分析は以下の手順に従った。
【００９４】
（１）SPRセンサ表面へのコルチゾールの固相化
SPRセンサには、予め表面にストレプトアビジンが固相化されたSA Chip (ビアコア株式会社)を用いた。標準品コルチゾールをビオチン化した。得られたビオチン化コルチゾールをAcetate 4.0 （ビアコア株式会社）に溶解し、流速10 μL/minで100 μLインジェクションを行い、アビジンビオチン反応によってSPRセンサ表面にコルチゾールを固相化した。固相化するコルチゾールは、約150 RUとした。
【００９５】
（２）検量線の作成
始めに、10 mM DMSO（Dimethyl sμLfoxide）溶液とした標準品コルチゾールを、1%エタノール水を用いて段階希釈し、コルチゾール濃度100, 50, 25, 12.5, 6.25, 3.13, 1.56, 0.78 nMの標準溶液を作製した。各濃度の標準溶液40 μLを、5 ng/mL抗コルチゾール抗体溶液40 μLと十分混合し、結合反応を行なわせた。結合反応後の標準サンプル溶液25 μLを、10 μL/min、25℃でインジェクションした。なお、抗コルチゾール抗体にはAbcam社マウスモノクローナル抗体（XM210）を、ランニングバッファーにはHBS-EPバッファー（ビアコア株式会社）を用いた。
【００９６】
各濃度のコルチゾール溶液について得られたSPRカーブを、図１４に示す。図中、0secで生じている約850 RU（Resonace Unit）のピークシフトは、ランニングバッファーから標準サンプル溶液への切換えに伴うバルク効果である。このバルク効果は、標準サンプル溶液からランニングバッファーへの切換えにより、150 secで消失している。
【００９７】
0〜150secでは、センサ基板表面に固相化されたコルチゾールへの抗コルチゾール抗体の結合により、RUの経時的な増加が観察されている。RUの増加量は、高濃度の標準品コルチゾール溶液ほど小さく、低濃度の標準品コルチゾール溶液ほど大きくなっていることが確認される。これは、間接競合SPRの測定原理が機能していることを示している。
【００９８】
図１５（Ａ）は、インジェクション終了後60secのRUを、ベースラインとの比較により算出して得たプロットを示す。
【００９９】
（３）サンプルの測定
実施例1調製したサンプル40 μLを、抗コルチゾール抗体溶液40 μLと十分混合し、結合反応を行なわせた。結合反応後の標準サンプル溶液40 μLを、20μL/min、25℃でインジェクションした。同様の条件で作成した検量線を、図１５（Ｂ）に示す。
【０１００】
8名の被験者（被験者a〜h）について、検量線を用いて算出されたコルチゾール量（pg）を、「表２」に示す。各被験者において、数十pgのコルチゾールを検出することができた。
【０１０１】
【表２】
0005482564.tif 000003
【０１０２】
＜実施例２：カテコールアミン類の定量＞
１．皮膚表面からのノルエピネフリン及びL−ドーパの取得
実施例１の「１．皮膚表面からのコルチゾールの取得」中、「（１）マイクロチューブによる採取」に記載の方法に従って、皮膚表面からノルエピネフリン及びL−ドーパを採取した。ただし、本実施例では、溶媒には水を使用し、皮膚表面に対する接触時間を3分間とした。
【０１０３】
２．高速液体クロマトグラフィー（HPLC）を用いた定量
皮膚表面に接触させた水（以下、単に「サンプル」という）40μLをバイアルに回収した。このサンプル30μLを、高速液体クロマトグラフィー（NANOSPACE SI-2、SHISEIDO）を用いた分析に供した。
【０１０４】
前処理カラムにはCAPCELLPAK MF Ph-1（カラムサイズ1.5mmID×35mm、カラム温度35℃、SHISEIDO）を用い、2.5%アセトニトリル水を流速100μL/minで送液した。また、分析カラムにはCAPCELLPAK C18 MGII S5（カラムサイズ2.0mmI.D.×250mm、カラム温度40℃、SHISEIDO）を用いた。また、移動相は、A/B=90/10（（A）1.0mM オクタンスルホン酸ナトリウム、0.02mM EDTA-2Na、10mM KH2PO4、0.05vol% H3PO4、（B）CH3CN）とし、流速200μL/minで送液した。検出は電気化学検出器（ECD OX 800mV）にて行い、測定時間は30minとした。インジェクション量は2μL又は5μLとした。
【０１０５】
測定結果を、図１６に示す。「Sample-1」は、上記サンプルの濃縮液で得られたクロマトグラムを、「Sample-2」及び「Sample-3」は濃縮しないサンプルで得られたクロマトグラムを示す。また「STD」は、標準品溶液（ノルエピネフリン、エピネフリン、L−ドーパ、ドーパミン、セロトニンを含む溶液）で得られたクロマトグラムを示す。
【０１０６】
Sample-1〜3のクロマトグラムにおいて、ノルエピネフリン及びL−ドーパに対応するピークが検出されている。一方、エピネフリン、ドーパミン及びセロトニンに対応するピークは検出されなかった。
【０１０７】
ベースラインに基づきピーク面積を算出し、検量線を用いて算出されたノルエピネフリン量及びL−ドーパ量（pg）を、「表３」に示す。
【０１０８】
【表３】
0005482564.tif 000004
【０１０９】
ノルエピネフリンは、サンプルの濃縮を行っていないSample-2及びSample-3では、検出限界未満（N.D.）となったが、濃縮したSample-1では数〜数十pg程度であった。また、L−ドーパは、Sample-1〜3の全てで数〜数十pg程度と定量された。この結果から、皮膚表面から数〜数十pg程度のノルエピネフリン及びL−ドーパの採取が可能であることが確認できた。
【０１１０】
＜実施例３：セロトニンの定量＞
１．皮膚表面からのセロトニンの取得
実施例２と同様の方法に従って、皮膚表面からセロトニンを採取した。
【０１１１】
２．高速液体クロマトグラフィー（HPLC）を用いた定量
皮膚表面に接触させた水（以下、単に「サンプル」という）100 μLをバイアルに回収した。このサンプル100 μLを、高速液体クロマトグラフィー（NANOSPACE SI-2、SHISEIDO）を用いた分析に供した。
【０１１２】
前処理カラムにはCAPCELL PAK C18 MGII S5（カラムサイズ2.0mmID×35mm、カラム温度40℃、SHISEIDO）を用いた。また、分析カラムにはCAPCELLPAK C18 UG120 S3（カラムサイズ1.5mmID×250mm、カラム温度40℃、SHISEIDO）を用いた。また、移動相は、A/B=87/13（（A）4mM SodiμM 1-OctanesμLfonate、0.02mM EDTA-2Na、5mM KH2PO4（pH3.4）、（B）CH3CN）とし、流速100μL/minで送液した。検出は電気化学検出器（ECD OX 750mV（Ag/AgCl））にて行い、測定時間は40minとした。インジェクション量は1μLとした。
【０１１３】
測定結果を、図１７に示す。「Sample」は、上記サンプルの100 倍濃縮液で得られたクロマトグラムを、「Standard」は、標準品セロトニン（和光純薬）の0.1μＭ溶液で得られたクロマトグラムを示す。
【０１１４】
サンプル及び標準品セロトニンのクロマトグラムにおいて、溶出時間36〜38分にピークが検出されている。クロマトグラムの面積からセロトニン濃度を算出したところ、サンプルの100 倍濃縮液のセロトニン濃度は約4.4ng/mLであり、人差し指の皮膚表面から約0.044 ng/mLのセロトニンが採取できた。
【０１１５】
＜実施例４：エストラジオールの定量＞
１．皮膚表面からのエストラジオールの取得
実施例２と同様の方法に従って、皮膚表面からエストラジオールを採取した。エストラジオールの採取は、８名の被験者から行った。
【０１１６】
２．酵素免疫測定法（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay：ELIZA）を用いた定量
皮膚表面に接触させた水（以下、単に「サンプル」という）100 μLをバイアルに回収した。このサンプル100 μLを、市販のELISAキット（High Sensitivity SALIVARY 17β-ESTRADIOL ENZYME IMMNOASSAY KIT、SALIMETRICS社）を用いた分析に供した。
【０１１７】
キット添付の標準品エストラジオールの測定により検量線を作成し、サンプル中のエストラジオール濃度を算出した結果を図１８に示す。各サンプル中のエストラジオール濃度は、2〜23pg/ml程度であった。この結果から、人差し指の皮膚表面から数〜数十pg程度のエストラジオールの採取が可能であることが確認できた。
【０１１８】
＜実施例５：成長ホルモンの定量＞
１．皮膚表面からの成長ホルモンの取得
実施例２と同様の方法に従って、皮膚表面から成長ホルモンを採取した。ただし、ここでの採取は、親指の皮膚表面から行った。成長ホルモンの採取は、３名の被験者から行った。
【０１１９】
２．酵素免疫測定法（ELIZA）を用いた定量
サンプル100μLをバイアルに回収し、市販のELISAキット（hGH ELISA、Roche社）を用いた分析に供した。
【０１２０】
キット添付の標準品成長ホルモンの測定により検量線を作成し、サンプル中の成長ホルモン濃度を算出した結果を図１９に示す。図中、ｓ１はサンプルの10倍濃縮液、ｓ２は25倍濃縮液である。親指の皮膚表面から0.29〜0.51pg/mＬの成長ホルモンを採取することができた。
【産業上の利用可能性】
【０１２１】
本発明に係る生理活性物質取得装置によれば、生体から簡便かつ低侵襲に、常時、生理活性物質を採取することができる。この装置を用いれば、取得された生理活性物質の定量値に基づいて正確な生体情報を取得できるため、本発明は、例えば、家庭におけるヘルスケア分野やゲームなどのエンタテイメント分野における生体情報センシングに応用され得る。
【符号の説明】
【０１２２】
Ａ：生理活性物質採取装置、Ｓ：生体表面、１：採取部、１１：固定基板、１１１，１１２，１２１：流路、１１３：接続管、１１４，１１５：チューブ、１２：採取基板、１２２：導入口、１２３：排出口、１２４：開口、１２５：差込口、１２６：回収領域、１２７：空気抜き穴、１２８：溶媒収容領域、１３：密封部材、１４：ホルダー、１４１：上板、１４２：下板、１４３：ヒンジ、１４４：窓、２：溶媒タンク、２１，３１，６１：ポンプ、２２，３２，６２：バルブ、３：空気タンク、４：排液タンク、５：容器、５１：封止部材、６：中空ニードル、６３：ニードルプレート、７：廃液トレイ、７１：切欠、８：コントロールボックス、９：下部カバー、１０：上部カバー
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５−１】
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【図５−２】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１５】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１６】
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