(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
過酢酸、酢酸、過酸化水素、カタラーゼ酵素を含有する過酢酸系殺菌組成液であって、前記殺菌液はｐＨが２．６〜５．０の範囲であり、前記カタラーゼ酵素が０．１〜１０μｇ／ｍｌの量で含有されており、前記過酢酸の濃度が５００〜１００００ｐｐｍであり、前記過酸化水素の濃度が５００ｐｐｍ未満であることを特徴とする過酢酸系殺菌組成液。
【請求項２】
塩化物イオン濃度が１０μｇ／ｍｌ以下である請求項１記載の過酢酸系殺菌組成液。
【請求項３】
前記塩化物イオンが塩化ナトリウム由来である請求項２に記載の過酢酸系殺菌組成液。
【請求項４】
前記カタラーゼ酵素が、菌類由来であることを特徴とする請求項１〜３の何れかに記載の過酢酸系殺菌組成液。
【請求項５】
前記カタラーゼ酵素が、前記殺菌組成液の調製時において、前記過酸化水素を１０分未満で３５％以上分解可能である請求項１〜４の何れかに記載の過酢酸系殺菌組成液。
【請求項６】
過酢酸、酢酸、過酸化水素を含有する過酢酸系殺菌液のｐＨを調整した後、カタラーゼ酵素の全含有量を分割して添加することを特徴とする請求項１〜５の何れかに記載の過酢酸系殺菌組成液の製造方法。
【請求項７】
請求項１〜５の何れかに記載の過酢酸系殺菌組成液を、４０〜７５℃の温度に調整して容器表面に施すことを特徴とする容器の殺菌方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、食品容器等の殺菌に用いられるカタラーゼ酵素を含有する過酢酸系殺菌組成液に関するものであり、より詳細には、カタラーゼ酵素による泡立ちを抑制し、効率よく殺菌性能を発現可能な過酢酸系殺菌組成液及びこれを用いてなる容器の殺菌方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来より、食品容器等の殺菌乃至滅菌に過酢酸系殺菌剤は用いられており、特に飲料等の無菌充填（アセプティック充填）においては、容器、内容物及び充填環境の全てを無菌とすることが重要であり、ボトルやキャップ等の容器の殺菌乃至滅菌に過酢酸系殺菌剤が使用されている（特許文献１等）。
このような過酢酸系殺菌剤は、過酢酸、酢酸、及び過酸化水素を主成分とし、これらは平衡状態で存在するが、過酸化水素の濃度が高いと、過酸化水素が容器に残留しやすくなり、殺菌後の無菌水による洗浄を十分行う必要が生じてくる。また、従来の方法よりも過酢酸の濃度を低く抑えたいという要望もある。【０００３】
このような問題を解決するために、過酸化水素、ペルカルボン酸、及びカルボン酸から成る殺菌組成物中に、過酸化水素を分解可能なカタラーゼ酵素が２０〜２５０ｐｐｍの量で存在する殺菌組成物を用いた滅菌方法が提案されている（特許文献２）。
上記カタラーゼ酵素を配合して成る、過酸化水素、ペルカルボン酸、及びカルボン酸から成る殺菌組成物を使用してなる滅菌方法においては、カタラーゼ酵素により過酸化水素が分解され、殺菌組成物中の過酸化水素濃度が低下することから、効率よく殺菌できると共に、過酸化水素濃度を管理することによって長期にわたって安定した殺菌能力を維持できるという利点がある。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平８−５８７４４号公報
【特許文献２】特表２０１１−５１７９４６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、上記カタラーゼ酵素を配合してなる過酸系殺菌組成物において、過酸化水素の分解をするためには、２０〜２５０ｐｐｍと比較的多量のカタラーゼ酵素が必要である。このため過酸化水素を分解する際に多量の泡が発生したり、或いはカタラーゼ酵素に起因する凝集物が発生するという新たな問題が生じた。すなわち、カタラーゼ酵素の濃度が高いと、過酸化水素分解により発生した表面を蛋白質の膜で覆われた容易に消失しない泡や、カタラーゼ酵素に起因する蛋白質の凝集物が発生することから、殺菌工程後に行う無菌水を用いた洗浄工程における洗浄性が低下したり、或いは貯蔵タンク等への付着による装置の汚れが生じると共に、凝集物がノズルに詰まったりすることから頻繁な清掃が必要になり、殺菌工程における効率が低下するという問題が生じた。
またカタラーゼ酵素製剤は、カタラーゼ産生微生物の培養の培地に含まれる塩化ナトリウム等の無機塩が含有されていることがあり、また、粉末或いはビーズ等の形態では不要だが、カタラーゼ酵素含有溶液として用いられる場合は、安定的に長期間保管可能とするための保存料や緩衝剤として塩化ナトリウム等が添加されている。かかるカタラーゼ酵素製剤を前記過酢酸系殺菌剤にそのまま添加した過酢酸系殺菌組成液を使用すると、カタラーゼ酵素製剤中の塩化物イオンに起因して、殺菌装置における配管等に腐食を生じるという問題が生じた。【０００６】
従って本発明の目的は、カタラーゼ酵素を含有する過酢酸系殺菌組成液において、少量のカタラーゼ酵素によって効率よく過酸化水素を低減することができ、カタラーゼ酵素配合に起因する泡立ち及び凝集物の発生を抑制し、且つ、従来の方法と比較して過酢酸濃度を同等乃至低減することが可能な過酢酸系殺菌組成液及びその製造方法を提供することである。
本発明の他の目的は、カタラーゼ酵素を含有する過酢酸系殺菌組成液を用い、効率よく容器を殺菌可能な殺菌方法を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明によれば、過酢酸、酢酸、過酸化水素、カタラーゼ酵素を含有する過酢酸系殺菌組成液であって、前記殺菌液はｐＨが２．６〜５．０の範囲であり、前記カタラーゼ酵素が０．１〜１０μｇ／ｍｌの量で含有されており、前記過酢酸の濃度が５００〜１００００ｐｐｍであり、前記過酸化水素の濃度が５００ｐｐｍ未満であることを特徴とする過酢酸系殺菌組成液が提供される。
本発明の過酢酸系殺菌組成液においては、
１．塩化物イオン濃度が１０μｇ／ｍｌ以下であること、
２．塩化物イオンが、塩化ナトリウム由来であること、
３．カタラーゼ酵素が、菌類由来であること、
４．カタラーゼ酵素が、前記殺菌組成液の調製時において、前記過酸化水素を１０分未満で３５％以上分解可能であること、
が好適である。【０００８】
本発明によればまた、過酢酸、酢酸、過酸化水素を含有する過酢酸系殺菌液のｐＨを調整した後、カタラーゼ酵素の全含有量を分割して添加することを特徴とする上記過酢酸系殺菌組成液の製造方法が提供される。【０００９】
本発明によれば更に、上記過酢酸系殺菌組成液を、４０〜７５℃の温度に調整して容器表面に施すことを特徴とする容器の殺菌方法が提供される。
【発明の効果】
【００１０】
本発明の過酢酸系殺菌組成液においては、カタラーゼ酵素が過酸化水素を効率よく分解可能な高い活性を有し、ｐＨ２．６〜５．０の範囲に殺菌組成液が調製されていることにより、カタラーゼ酵素の含有量が０．１〜１０μｇ／ｍｌと極めて少量であっても、殺菌組成液中の過酸化水素を１０分未満で３５％以上分解可能な性能を有することが可能になる。これにより、殺菌組成液中の過酸化水素を効率よく分解することができ、過酢酸の濃度が５００〜１００００ｐｐｍ、過酸化水素の濃度が５００ｐｐｍ未満に維持できるため、後述する実施例の結果からも明らかなように、殺菌レベル５Ｄ以上の優れた殺菌能力を有するようになる。【００１１】
またカタラーゼ酵素配合に起因する泡立ちや凝集物の発生を消泡剤等を用いることなく抑制できることから、消泡剤が容器へ残留することによる内容物の衛生性への影響を抑え、且つ、殺菌工程後に行う殺菌組成液の除去のための洗浄工程における洗浄性が向上する。また、凝集物がノズル等に付着して詰まってしまうおそれもなく、泡立ちの発生及び付着に伴う清掃回数を著しく低減できることから、容器の殺菌を効率よく連続して行うことが可能になると共に、上述した殺菌能力が安定維持できることと相俟って殺菌組成液の循環使用も容易になる。
更に、カタラーゼ酵素の使用量が少なく、また過酢酸系殺菌組成液の殺菌能力を長期にわたって安定して維持することができることから、経済性にも優れている。
更にまた、過酸化水素の濃度が５００ｐｐｍ未満と低いことから、短時間の洗浄でも過酸化水素が容器表面に残留することがなく、殺菌後の容器の衛生性にも優れている。
また過酢酸系殺菌組成液中の塩化物イオン濃度が１０μｇ／ｍｌ以下に調整されていることにより、殺菌装置における配管等の腐食の問題も解消されている。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
本発明の過酢酸系殺菌組成液は、過酢酸、酢酸、及び過酸化水素を主成分とし、これらが平衡状態で存在して成る過酢酸系殺菌剤に、ｐＨ調整剤及びカタラーゼ酵素を配合することにより調製される。
【００１３】
（過酢酸系殺菌剤）
従来より、過酢酸、酢酸、及び過酸化水素を主成分とし、これらが平衡状態で存在して成る過酢酸系殺菌剤は公知であり、本発明の過酢酸系殺菌組成液においては、カタラーゼ酵素を配合する前の過酢酸系殺菌剤として、種々の濃度のものを原料として採用することができるが、好適には、過酢酸１０〜２５重量％、酢酸２０〜４０重量％、過酸化水素１５〜２５重量％、残余の成分が水及び必要により配合される安定剤から成る過酢酸系殺菌剤を用いることができる。このような過酢酸系殺菌剤としてはオキシペール１００（日本パーオキサイド株式会社製：過酢酸１０．２重量％、酢酸２０．６重量％、過酸化水素１７．２重量％、）等があげられ、水で希釈して濃度調整した後に使用する。
【００１４】
(カタラーゼ酵素)
カタラーゼ酵素は、従来より過酸化水素の分解酵素として知られており、本発明においては、上記過酢酸系殺菌剤における酸性域で耐性を有するカタラーゼ酵素であることが重要であり、菌類由来のカタラーゼ酵素或いは細菌由来のカタラーゼ酵素から成るカタラーゼ酵素を使用することができるが、特に菌類由来のカタラーゼ酵素、その中でも、Aspergillus  niger由来のカタラーゼ酵素を好適に使用することができる。カタラーゼ酵素は、一種のみを用いてもよいし、複数種のカタラーゼ酵素を混合して使用することもできる。
本発明においては用いるカタラーゼ酵素の形態は特に限定されず、溶液、粉末、或いはビーズ等の水不溶性基質に固定させた形態のもの等、種々の形態のカタラーゼ酵素を使用することができる。
また本発明で用いるカタラーゼ酵素は、ｐＨ２．６〜６．０の範囲でその活性を有するものを選択することが好ましく、これにより、過酢酸系殺菌組成液のｐＨを２．６〜５．０の範囲に調整することにより、０．１〜１０μｇ／ｍｌと極めて少量であっても、殺菌組成液の調製時において、カタラーゼ酵素を添加することによって過酸化水素を１０分未満で３５％以上分解可能な性能を発現することが可能になる。
このようなカタラーゼ酵素として、これに限定されないが、レオネットＦ−３５、レオネットＦプラス（ナガセケムテック株式会社製）等の商業的に入手可能なカタラーゼ酵素製剤を用いることができる。
【００１５】
前述した通り、カタラーゼ酵素製剤には塩化ナトリウムが含有されていることから、配管の腐食を防止するために、カタラーゼ酵素製剤中の塩化物イオン濃度を低減させて使用することが望ましい。
カタラーゼ酵素含有溶液からの脱塩方法は、従来公知の脱塩方法によって行うことができ、例えば、これに限定されないが、透析法、限外濾過法（Ultrafiltration Membrane，ＵＦ膜処理）、ゲル濾過法等を利用することができるが、操作性や生産性等の点から限外濾過法によって脱塩を行うことが特に望ましい。
【００１６】
カタラーゼ酵素含有溶液の保存性を確保する場合には、脱塩処理後、特定の保存料を添加すること、加熱殺菌処理及び／又は濾過処理を行うこと、或いはこれらの両方を行い、保存性を低下させる原因となる一般細菌或いは黴等の増殖を抑制或いは除去することが望ましい。
好適に用いることができる保存料としては、塩分を含有しないことは勿論、食品添加物として認可され、更にカタラーゼ酵素の活性を低下させることなく、一般細菌及び黴の増殖を抑制し得るものであることが重要である。
このような保存料としては、これに限定されないが、ソルビン酸系保存料、安息香酸系保存料、パラオキシ安息香酸系保存料、プロピオン酸系保存料、デヒドロ酢酸系保存料、酒精系保存料、ビタミンＢ１系保存料等を挙げることができ、中でもデヒドロ酢酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸エステル、安息香酸ナトリウム、ポリリジンを好適に用いることができ、これらの少なくとも１種を、カタラーゼ酵素含有溶液に対して０．００５〜０．５重量％となるように添加することが望ましい。
【００１７】
また保存性を向上するために行う加熱殺菌処理は、脱塩処理後のカタラーゼ酵素含有溶液を５０〜７０℃の温度で１０〜６００秒間に加熱殺菌処理を行うことが好適である。上記範囲よりも加熱温度が低い場合には、十分に滅菌することができず、その一方上記温度より加熱温度が高い場合には、カタラーゼ酵素の活性を保持できない。
また濾過処理は、カタラーゼ酵素含有溶液の保存性を低下させる原因となる細菌等を分離し、カタラーゼ酵素を分離しないものであることが重要であり、フィルター孔径が０．１〜１．０μｍの範囲にある濾過装置を使用することが好適である。
【００１８】
保存料添加と、加熱殺菌処理及び／又は濾過処理は、少なくとも一方を行えばよいが、両方行うことが保存性をより向上できるので好ましい。保存料添加と加熱殺菌処理及び／又は濾過処理の両方行う場合、何れを先に行ってもよいが、好適には加熱殺菌処理及び／又は濾過処理を先に行い、保存性を低下させる原因となる細菌等を除去した後、保存料を添加することが望ましい。
【００１９】
（ｐＨ調整剤）
上述したように、本発明で使用するカタラーゼ酵素は、ｐＨ２．６〜６．０の範囲でその活性を有するものを選択することが好ましいが、過酢酸系殺菌剤においては、ｐＨが５．０以上になると過酢酸が分解して濃度が低下して殺菌力が劣るようになってしまう。
更に、カタラーゼ酵素が過酸化水素の分解作用を最も効果的に発揮するためにはｐＨ３．０〜６．０の活性を有するものを選択することが好ましいが、過酢酸の殺菌効果を最も効果的に発揮するためには、特に過酢酸系殺菌剤のｐＨはｐＨ４．０以下とすることが好ましい。
このような観点から、本発明においては、過酢酸系殺菌組成液のｐＨを２．６〜５．０、特に３．０〜４．０の範囲に維持することにより、過酢酸系殺菌剤の殺菌剤としての安定性を損なうことなく、カタラーゼ酵素の活性を保持し、少量の配合でも充分な過酸化水素分解作用を得ることとができることを見出した。
本発明において過酢酸系殺菌組成液のｐＨを上記範囲にするために用いるｐＨ調整剤としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム等の従来公知のアルカリ性組成物を挙げることができる。
【００２０】
（過酢酸系殺菌組成液）
本発明の過酢酸系殺菌組成液は、過酢酸、酢酸、及び過酸化水素が平衡状態で存在してなる原料の過酢酸系殺菌剤に、ｐＨ調整剤、水、及びカタラーゼ酵素を加えることによって調製する。
調製方法は、水で希釈後に過酢酸の濃度が下記範囲になることを前提に、所望の過酢酸濃度を有する過酢酸系殺菌剤にｐＨ調整剤を加えて混合し、ｐＨを２．６〜５．０の範囲に調整した後、カタラーゼ酵素が０．１〜１０μｇ／ｍｌ、特に０．１〜３．０μｇ／ｍｌの濃度になるように配合することによって調製することが好ましい。ｐＨ調整剤及びカタラーゼ酵素の配合順序は、必ずしも上記順序に限定されないが、上記順序にすることによって、カタラーゼ酵素の活性を最大限保持することが可能になる。
またカタラーゼ酵素は、殺菌剤に全量を一括で添加してもよいが、より好適には全量を複数回に分割して配合することが特に好ましい。これにより、カタラーゼ酵素による過酸化水素の分解を緩やかに行うことが可能となり、カタラーゼ酵素に起因する泡立ちをより確実に抑制することができる。
【００２１】
本発明の過酢酸系殺菌組成液は、カタラーゼ酵素が過酸化水素の分解を促進して、過酸化水素の濃度が前記殺菌組成液の調製乃至殺菌工程の全てにおいて５００ｐｐｍ未満に維持されていると共に、過酢酸の濃度が５００〜１００００ｐｐｍ、特に１０００〜３５００ｐｐｍの範囲に維持され、優れた殺菌性能を確保することが可能になる。
尚、本発明の過酢酸系殺菌組成液中には、酢酸も存在しており、過酢酸が上記範囲にある場合には、酢酸は１０００〜２５０００ｐｐｍの範囲にあることが好適である。
またカタラーゼ酵素として塩化物イオン濃度の低減処理が行われているカタラーゼ酵素製剤を使用することにより、殺菌装置などの配管の腐食を防止することができるが、この場合に、過酢酸系殺菌組成液中の塩化物イオンは１０μｇ／ｍｌ以下に低減されていることが好ましい。
【００２２】
（容器の殺菌方法）
本発明の容器の殺菌方法においては、上述した過酢酸系殺菌組成液を、４０〜７５℃、特に５０〜６５℃の温度に調整して容器表面に施すことにより行う。容器としては、缶、瓶、プラスチック容器など、様々な公知の容器を用いることができる。
すなわち、上記範囲よりも過酢酸系殺菌組成液の温度が高い場合には、過酢酸の分解が促進されやすくなると共に、カタラーゼ酵素に起因する蛋白質の凝集が起こってノズルに詰まったり、また、公知の容器の中でも特にポリエステルボトルの場合は、耐熱性の観点からも望ましくない。一方上記範囲よりも過酢酸系殺菌組成液の温度が低い場合には、殺菌性能が低下し、殺菌に要する時間が長くなるため、殺菌効率に劣るようになる。
【００２３】
本発明の過酢酸系殺菌組成液を容器表面へ施す方法としては、従来より過酢酸系殺菌剤を用いた殺菌方法に用いられていた方法により行うことができ、これに限定されないが、正立状態の容器の上方から殺菌組成液を容器内に注ぎ込み、所定の時間後に容器を倒立状態にして殺菌組成液を排出する満注方法や、倒立状態の容器の下方から噴射した殺菌組成液が容器内面の底部に直接当たり容器壁を伝わって下方に流下するようにされる直進棒流方法、或いは倒立状態の容器の下方から、エアーを混合した殺菌組成液を容器内に噴射する方法等を採用することができる。
【００２４】
本発明においては、上記温度に調整された本発明の過酢酸系殺菌組成液を５乃至１０秒間接触させることにより、殺菌レベル５Ｄ以上の殺菌性能を得ることができる。
尚、本発明の殺菌方法においては、過酢酸系殺菌組成液が、過酢酸の濃度が５００〜１００００ｐｐｍ、過酸化水素の濃度が５００ｐｐｍ未満である限り、継続使用することが可能である。また過酸化水素濃度が５００ｐｐｍ以上になった場合には、カタラーゼ酵素及び必要により過酢酸系殺菌剤を追加することによって循環使用することもできる。
殺菌工程において、本発明の過酢酸系殺菌組成液によって殺菌された容器は、次いで洗浄工程において、無菌水での洗浄に賦されることにより、容器表面に残留する過酢酸系殺菌組成液が除去される。本発明の過酢酸系殺菌組成液は過酸化水素の濃度が５００ｐｐｍ未満と低いことから、短時間の洗浄でも過酸化水素がボトル表面に残留することもなく、殺菌された衛生性を損なうことがない。
【実施例】
【００２５】
（過酢酸系殺菌組成液の調製）
過酢酸系殺菌組成液の調製方法は、過酢酸系殺菌剤として、オキシペール１００（日本パーオキサイド株式会社製：過酢酸１０．２重量％、酢酸２０．６重量％、過酸化水素１７．２重量％、）を使用し、表１〜４に示す過酢酸濃度となるよう水で希釈した後、５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を配合してｐＨ２．０〜５．５に調整した。この後、カタラーゼ酵素として、レオネットＦプラス(ナガセケムテック株式会社製・Aspergillus niger由来)を使用し、過酢酸系殺菌組成液全体量に対してのカタラーゼ酵素の最終濃度が０．１〜１０μｇ／ｍｌとなるよう配合した。【００２６】
（過酢酸系殺菌組成液成分の測定方法）
１．過酢酸量
カタラーゼ酵素反応終了後、過マンガン酸カリウム−ヨウ素法によって測定した。すなわち、試料を硫酸酸性下で過マンガン酸カリウム滴定を行い、過酸化水素濃度を測定した後、ヨウ化カリウム及びデンプン指示薬を加えて、チオ硫酸ナトリウム滴定を行い、過酢酸の濃度を測定した。
上述したカタラーゼ酵素反応終了時間については、過酢酸系殺菌組成液のカタラーゼ酵素配合後５分以降から５分おきに測定し、経時測定における過酸化水素濃度の減少が見られなくなった時を反応終了として、各成分の濃度とした。
２．過酸化水素量
過酸化水素量は、過酢酸系殺菌剤を水で希釈したカタラーゼ酵素配合前（過酢酸系殺菌剤の原液濃度からの希釈計算値）と、上述したカタラーゼ酵素反応終了後の濃度測定値の２つの濃度について記した。測定方法は、上述した１．過酢酸量の通りである。
３．カタラーゼ酵素量
カタラーゼ酵素の量の測定は、Nano  Orange（登録商標）Protein  Quantitation  Kit（Invitrogen社製）を用いExperimental  Protocolに従い測定を行い、表１〜４に示した。【００２７】
（評価方法）
１．過酸化水素分解能力
過酢酸系殺菌組成液を調製した直後の過酸化水素濃度（Ｉ０）、及び調製開始から１０分経過した時点の過酸化水素濃度（Ｉ）を測定し、減少割合［（Ｉ０−Ｉ）／Ｉ０］×１００（％／１０分）を計算し、１０分あたりの過酸化水素分解能力として３５％以上のものを○、３５％未満のものを×とした。
２．過酢酸分解率
過酢酸系殺菌組成液を調製した直後の過酢酸濃度（Ｉ０）、及び調製後２５℃で１時間経過した時点での過酢酸濃度（Ｉ）を測定し、減少割合［（Ｉ０−Ｉ）／Ｉ０］×１００（％／時間）を計算し、１時間あたりの過酢酸分解率が１％以下のものを○、１〜３％のものを△、３％を越えるものを×とした。
３．タンク内の殺菌組成液表面状態
過酢酸系殺菌組成液を調製開始後、５分経過した時点での過酢酸系殺菌組成液の表面を目視により確認した。泡立ちや凝集物の発生がなかった場合は○、発生があった場合を×とした。
４．容器殺菌効果
容器として５００ｍｌポリエチレンテレフタレートボトル（以下、ボトルと記す）を使用し、供試菌としてBacillus  cereus  ＡＴＣＣ  ９１３９を用いて菌液を作成し、ボトル内面に１０6ｃｆｕ／ボトルとなるよう噴霧器から均一に吹き付けた後、ボトルを乾燥させて評価用ボトルを作製した。次いで、カタラーゼ酵素反応終了直後の過酢酸系殺菌組成液を６５℃に温度調節し、評価用ボトル内に噴霧し、８秒接触させた後、滅菌水を用いてボトル内面を洗浄し、洗浄に用いた滅菌水を標準寒天培地を用いてメンブレンフィルター法により生存菌数を計測した。初菌数及び生残菌数より、下記式より殺菌効果（Ｄ）を求めた。尚、試験回数はｎ＝３で実施し、平均生残菌数を生残菌数として殺菌効果を評価した。
Ｄ＝ＬＯＧ（Ｎ０／Ｎ）
式中、Ｎ０は初菌数であり、Ｎは生残菌数である。
Ｄ値が  ６Ｄ以上の場合は殺菌効果が高く○、５Ｄ以上６Ｄ未満の場合は殺菌効果ありで△、５Ｄ未満の場合は殺菌効果が低く×とした。【００２８】
(実施例１〜３及び比較例１〜２)
ｐＨの違いによる過酸化水素分解能力と過酢酸分解率を調べた。ｐＨ以外の組成はほぼ同一となるよう、過酢酸量を３０００〜３３００ｐｐｍ程度、過酸化水素量の初期値を４５００〜５０００ｐｐｍ程度になるよう過酢酸系殺菌剤を希釈し、表１に示すｐＨになるよう５Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を配合した後、カタラーゼ酵素０．４μｇ／ｍｌ配合し、評価を行った。結果を表１に示す。【００２９】
【表１】
0005413545.tif 000002
【００３０】
(実施例４〜７及び比較例３〜６)
カタラーゼ酵素量、配合方法の違いによる、調合タンク内での殺菌組成液の表面状態と過酸化水素分解能力の比較のため、過酢酸量を３０００〜３３００ｐｐｍ程度、過酸化水素量の初期値を４５００〜５０００ｐｐｍ程度になるよう過酢酸系殺菌剤を希釈してｐＨ２．０〜４．０になるよう配合した後、カタラーゼ酵素量を表２に示す０．１２〜２０μｇ／ｍｌに配合し、評価を行った。
尚、実施例４〜６及び比較例３〜６ではカタラーゼ酵素を一括で配合したが、実施例７では全量の半分ずつ、ｐＨ調整直後及びその５分後の２回にわけて配合すると共に、過酢酸及び過酸化水素の濃度測定を２回目のカタラーゼ酵素配合直前に行った（表２中の*値）以外は、実施例４と同様にして評価を行った。結果を表２に示す。【００３１】
【表２】
0005413545.tif 000003
【００３２】
（実施例８〜１１及び比較例７〜８）
容器殺菌効果に対する過酢酸量及び過酸化水素量の影響を調べた。表３に示すように過酢酸量を３００〜１５０００ｐｐｍ程度、過酸化水素量の初期値を４００〜２４０００ｐｐｍ程度の過酢酸系殺菌剤を希釈してｐＨ４．０になるよう調製した後、カタラーゼ酵素量を表３に示す０．４〜１０μｇ／ｍｌに配合し、評価を行った。
尚、前述の通りカタラーゼ酵素量を変化させているため、調合タンク内の殺菌組成液表面状態も合わせて評価した。結果を表３に示す。【００３３】
【表３】
0005413545.tif 000004
【００３４】
（実施例１２〜１３及び比較例９）
過酢酸量が低濃度域にある過酢酸系殺菌組成液中の過酸化水素濃度が容器殺菌効果に及ぼす影響を確認した。表４に示すように、過酢酸量が１０００ｐｐｍ程度、過酸化水素量の初期値が１６００ｐｐｍ程度になるように過酢酸系殺菌剤を希釈し、次いでｐＨが４．０になるよう調製した後、カタラーゼ酵素量を０．４μｇ／ｍｌ配合して過酸化水素量を０ｐｐｍに低減した。その後、８５℃で５分間加熱しカタラーゼ酵素を失活させた後、過酸化水素を追加して表４に示すように２００〜７００ｐｐｍ程度に調整して、評価した。結果を表４に示す。【００３５】
【表４】
0005413545.tif 000005
【００３６】
実施例１４〜１７及び比較例１０〜１１）
過酢酸系殺菌組成液中の塩化物イオン濃度の違いによる殺菌ライン配管への影響を調べた。
過酢酸系殺菌組成液の塩化物イオン濃度以外の組成はほぼ同一となるよう、過酢酸量を３０００ｐｐｍ、過酸化水素量の初期値を４８００ｐｐｍになるよう過酢酸系殺菌剤を希釈し、次いでｐＨが４．０になるよう調製した。この過酢酸系殺菌組成液に、ＵＦ膜（旭化成株式会社製：マイクローザＵＦモジュール、ＡＣＶ−３０１０）にて脱塩処理を行ったカタラーゼ酵素含有溶液を、カタラーゼ酵素濃度が０．４μｇ／ｍｌとなるよう配合して過酸化水素量を０ｐｐｍに低減した。次いで、塩化ナトリウムを、過酢酸系殺菌組成液中の塩化物イオン濃度が０〜２０μｇ／ｍｌとなるよう添加し、評価用の初期の過酢酸系殺菌組成液とした。
また塩化物イオン濃度の測定方法は以下の通りであり、各過酢酸系殺菌組成液中の塩化物イオン濃度を表５に示す。【００３７】
（塩化物イオン濃度の測定）
塩化物イオン濃度は、ＤＩＯＮＥＸ社製イオンクロマトグラフ：ＤＸ−３２０を用い、次の条件で測定した。
カラム  ：  ＡＳ１１−ＨＣ（４×２５０ｍｍ）
ガードカラム  ：  ＡＧ１１−ＨＣ（４×５０ｍｍ）
温度  ：  ３５℃
溶離液  ：  ＫＯＨ水溶液（グラジエント）
０−８分（１ｍｍｏｌ／Ｌ）、
８−１０分（１−７ｍｍｏｌ／Ｌ）、
１０−１９分（７−１４ｍｍｏｌ／Ｌ）、
１９−２３分（１４−２３ｍｍｏｌ／Ｌ）、
２３−２８分（２３−４５ｍｍｏｌ／Ｌ）、
２８−３５分（４５ｍｍｏｌ／Ｌ）
流速 ： １．１ｍＬ／分
注入量 ： ２５μＬ
検出器 ： 電気伝導度（サプレッサー使用）
サプレッサー ： エクスターナルモード、１７０ｍＡ【００３８】
この過酢酸系殺菌組成液中に、殺菌ライン配管として用いるＳＵＳステンレスパイプ（直径４ｃｍ、長さ１０ｃｍ）を浸漬し、４０℃で６ヶ月保存した後、評価を行った。尚、過酢酸量は経時で変化するため、過酢酸量が２８００ｐｐｍ以下になった時点で前述の初期の過酢酸系殺菌組成液に取り替えて浸漬し直すことで、過酢酸量を２８００〜３０００ｐｐｍに維持した。
評価は、当該ステンレスパイプの内外面を目視で観察し、錆や孔食などの腐食がないものを○、錆や孔食などの腐食はないが変色があるものを△、腐食があるものを×とした。結果を表５に示す。【００３９】
【表５】
0005413545.tif 000006
【産業上の利用可能性】
【００４０】
本発明の過酢酸系殺菌組成液は、カタラーゼ酵素の含有量が０．１〜１０μｇ／ｍｌと極めて少量であっても、殺菌組成液中の過酸化水素を効率よく分解することができるため、経済性に優れていると共に、カタラーゼ酵素配合に起因する泡立ちや凝集物の発生を抑制でき、タンクや噴射殺菌装置の頻繁な清掃等の必要がなく、効率よく殺菌することができるため大量生産品の殺菌方法として有用である。
また、過酸化水素濃度が５００ｐｐｍ未満に低減されており、消泡剤等も使用しないことから、殺菌後の短時間の洗浄でも過酸化水素が残留することがなく、内容物の衛生性への影響を抑えることができる。
更に塩化物イオン濃度が低減されたカタラーゼ酵素製剤を用いることにより、配管等の腐食発生を抑制することもでき、大量生産品の殺菌方法として特に有用である。
【要約】
本発明は、過酢酸、酢酸、過酸化水素、カタラーゼ酵素を含有する過酢酸系殺菌組成液であって、前記殺菌液はｐＨが２．６〜５．０の範囲であり、前記カタラーゼ酵素が０．１〜１０μｇ／ｍｌの量で含有されており、前記過酢酸の濃度が５００〜１００００ｐｐｍであり、前記過酸化水素の濃度が５００ｐｐｍ未満であることにより、少量のカタラーゼ酵素によって効率よく過酸化水素を低減することができ、カタラーゼ酵素配合に起因する泡立ちを抑制することが可能になる。