(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
中皮腫の治療で使用するためのターゲッティングペプチドとサイトカインとを含むコンジュゲートであって、該ターゲッティングペプチドが、直鎖状もしくは環状のCNGRCVSGCAGRC、NGRAHA、GNGRG、CVLNGRMEC、CNGRC、CNGRCG、LNGRE、YNGRT、LQCICTGNGRGEWKCE、LQCISTGNGRGEWKCE、CICTGNGRGEWKC、CISTGNGRGEWKC、MRCTCVGNGRGEWTCY、MRCTSVGNGRGEWTCY、CTCVGNGRGEWTC及びCTSVGNGRGEWTCからなる群より選択される、NGRモチーフを含むペプチドであり、該サイトカインがTNFαである、該コンジュゲート。
【請求項２】
前記サイトカインTNFαが、スペーサG(グリシン)を介して前記ターゲッティングペプチドCNGRCに連結されていることを特徴とする、請求項1記載のコンジュゲート。
【請求項３】
製薬上許容される担体および希釈剤と共に、ターゲッティングペプチドとサイトカインとを含むコンジュゲートを有効量含む医薬組成物であって、該ターゲッティングペプチドが、直鎖状もしくは環状のCNGRCVSGCAGRC、NGRAHA、GNGRG、CVLNGRMEC、CNGRC、CNGRCG、LNGRE、YNGRT、LQCICTGNGRGEWKCE、LQCISTGNGRGEWKCE、CICTGNGRGEWKC、CISTGNGRGEWKC、MRCTCVGNGRGEWTCY、MRCTSVGNGRGEWTCY、CTCVGNGRGEWTC及びCTSVGNGRGEWTCからなる群より選択される、NGRモチーフを含むペプチドであり、該サイトカインがTNFαである、中皮腫の治療で使用するための該組成物。
【請求項４】
前記コンジュゲートが、スペーサGを介してターゲッティングペプチドCNGRCに連結されたTNFαを含むことを特徴とする、請求項3記載の医薬組成物。
【請求項５】
製薬上許容される担体及び希釈剤と共に、スペーサGを介してターゲッティングペプチドCNGRCに連結されたTNFを含むコンジュゲートを0.01〜10mg/mlの範囲の濃度で含む、中皮腫の治療で使用するための医薬製剤。
【請求項６】
スペーサGを介してターゲッティングペプチドCNGRCに連結されたTNFを含むコンジュゲート0.150mg/mlを50mM Na2HPO4、150mM NaClの溶液に溶解させたものからなる、中皮腫の治療で使用するための医薬製剤。
【請求項７】
ターゲッティングペプチドとサイトカインとを含むコンジュゲートを含有する中皮腫治療剤であって、該ターゲッティングペプチドが、直鎖状もしくは環状のCNGRCVSGCAGRC、NGRAHA、GNGRG、CVLNGRMEC、CNGRC、CNGRCG、LNGRE、YNGRT、LQCICTGNGRGEWKCE、LQCISTGNGRGEWKCE、CICTGNGRGEWKC、CISTGNGRGEWKC、MRCTCVGNGRGEWTCY、MRCTSVGNGRGEWTCY、CTCVGNGRGEWTC及びCTSVGNGRGEWTCからなる群より選択される、NGRモチーフを含むペプチドであり、該サイトカインがTNFαである、中皮腫治療剤。
【請求項８】
前記サイトカインが、スペーサG(グリシン)を介して前記ターゲッティングペプチドCNGRCに連結されているTNFαである、請求項7記載の中皮腫治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、癌治療、特に悪性胸膜中皮腫(MPM)の治療のための、サイトカインとターゲッティングペプチドとのコンジュゲートの使用に関する。より詳細には、本発明は、MPMの治療のための、NGRモチーフを含むペプチドとTNFとを含むコンジュゲート(NGR-TNF)の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
悪性胸膜中皮腫（MPM）は、胸膜腔の表面漿膜細胞から主に生ずる侵襲性の強い希少新生物であり、一般的には予後がよくない。MPMの罹患率は世界中で増加しており、ここ数年の間にアスベストへの暴露が拡大したことから、今後10〜20年でさらに上昇すると予測される。
【０００３】
MPMの治療のためのケアの基準はなく、病気に効く可能性のある治療法に適格であるのは、患者のうちの少数のみである。細胞傷害性を有する化学療法の合併症は、高齢者（65歳以上）及び/又は一般状態（performance status）の良くない(PS≧2)患者の治療において、治療を複雑化し得る頻繁かつ重大な共存症が発生するため、医師の決定に大きな影響を及ぼす(Repetto, J. Support Oncol. 2003, 1(4 Suppl.2):18-24)。東部癌治療共同研究グループ(Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG, Robert Comis M.D., Group Chair))による「一般状態(PS)」は、患者の病気がどのように進行しているのかを評価したり、病気が患者の日常の生活能力にどのような影響を及ぼすのかを評価したり、また適切な治療及び予後を決定したりするために、医師及び研究者らにより使用されるスケールであり基準である(Okenら, 1982 Am J Clin Oncol 5:649-655)。一般状態2は、「歩行可能で自分の身の回りのことはすべて可能だが作業はできない患者。日中の50％以上はベッド外で過ごす(ambulatory patients capable of all selfcare but unable to carry out any work activities. Up and about more than 50％ of waking hours)」とされる。発症年齢の中央値(median)が74才であり、患者の50％超が診断時に一般状態2かそれより悪いことを考慮すると(Chapmanら, Thorax 2008, 63(5):435-439)、中皮腫患者の治療では上記のような人口統計学的見地も考慮に入れなければならない。
【０００４】
過去20年間にわたり、幾つかのアプローチが研究されており、プラチナ製剤を含むレジメンが非プラチナ製剤を含む併用法に比べて高い活性を示したものの、それらの効果は、無増悪生存期間(生存率の比較的強力な予測パラメータ)、生存率及び毒性の点では、あまり大きくはないようである(Fennellら, Nat. Clin. Pract. Oncol. 2008, 5(3): 136-147)。
【０００５】
MPM治療についての現在の進歩及び臨床データはCeresoliら, The Oncologist 2007, 12:850-863に概説されている。単一様式の治療(外科手術、放射線療法および化学療法)では患者の生存期間を延ばすことができなかった。
【０００６】
シスプラチンとの併用によるペメトレキセド二ナトリウムは、化学療法を受けていない切除不能な悪性胸膜中皮腫患者の治療のために販売承認された、初めて且つ唯一の化学療法剤である。しかし、この化学療法的アプローチは、シスプラチン単剤による化学療法と比較して無増悪期間(5.7対3.9ヶ月)及び全生存期間(12.1対9.3ヶ月)の点において、あまり大きくない伸びしか達成できなかった。さらに、この併用化学療法は、選ばれた患者集団(年齢中央値が60歳、カルノフスキーの一般状態が少なくとも70(自分の身の回りのことができ、且つ標準的な活動を続けること又は能動的な作業を行うことが不可能な患者をさす)またはそれより高い一般状態)において実施した場合であっても、予想外に毒性があり、数例の治療関連死をもたらした。毒性は、ホモシステイン代謝の妨げによるものであり、治療の補足として、ビタミンB12及び葉酸塩の予防的使用を追加することにより、プロトコールに変更を加えることになった。インテント・トゥ・トリート(the Intent to Treat; ITT)集団において、ペメトレキセド＋シスプラチンにビタミンを十分補給した場合の深刻な毒性の発生率は、シスプラチン単独で治療した集団に比べて高かった(Vogelzangら, J Clin Oncol 2003, 21 (14): 2636-2644)。
【０００７】
現時点において、幾つかの生物学的製剤が第2相臨床試験で評価されたが、第一選択治療及び併用療法でテストしても、どれも有効なものではなく、幾つかの状況においては、安全ではない毒性パターンを表した。臨床調査研究では、MPMにおいて高く発現される上皮増殖因子受容体(EGFR)(Destroら, Lung Cancer 2006; 51:207-215; Edwardsら, Lung cancer, 2006; 54:399-407)ならびにこの病気において重要な自己分泌増殖因子である血管内皮細胞増殖因子(VEGF)及び血小板由来増殖因子(PDGF)に焦点があてられてきた。中皮腫の第一選択治療のために、これらの受容体の阻害剤の使用が研究されてきた。
【０００８】
特に、第2相臨床試験において、EGFR阻害剤であるゲフィチニブ(イレッサ(Iressa:登録商標))(進行した非小細胞肺癌の治療のために認可されており、in vitroで中皮腫細胞に対して著しい抗増殖性作用を示す(Janneら, Cancer Res 2002, 62:5242-5247))は、中皮腫の患者の97％がEGFRを過剰発現しているにもかかわらず、無増悪生存期間の中央値が3ヶ月未満であり、第一選択療法としてはあまり効力がなかった(Govindanら, Clin Cancer Res, 2005; 11:2300-2304)。この試験において、ゲフィチニブは、下痢、発疹、及び疲労により表される最も一般的なグレード3の有害事象(グレード3：重度の副作用)を伴うクラス特異的毒性プロフィールを示した。
【０００９】
同様に、c-KitならびにPDGFα及びβ受容体の両方に作用することが知られている2-フェニルアミノピリミジンチロシンキナーゼ阻害剤であり、慢性骨髄性白血病の治療のために認可されているイマチニブ(グリベック: Glivec(登録商標))は、腫瘍増殖までの期間の点からみて第一選択単剤治療として有効なものではないことがわかった(3ヶ月未満)。さらに、患者の40％が副作用のため治療を中断した。主な副作用は、時に胸水又は腹水の悪化を引き起こす水腫(足首、顔、生殖器及び肺)、吐き気、及び嘔吐であった(Mathyら, Lung cancer 2005 50:83-86)。
【００１０】
血管新生阻害剤の使用が研究された(Ceresoliら, The Oncologist 2007, 12:850-863)。VEGF受容体Flt-1及びKDR/Flkを標的とする高選択的受容体チロシンキナーゼ阻害剤であるSU5416で活性が報告されたが、血栓症についての過度の危険性があるため阻止された。
【００１１】
VEGF及びPDGF受容体チロシンキナーゼ阻害剤であるバラタニブ(valatanib)(PTK787)は、化学療法を受けていない患者に第一選択治療として投与した場合に、無増悪生存期間の中央値が4ヶ月であることがわかった。グレード3/4毒性(グレード3：重度の副作用、グレード4：生命を脅かすもしくは不能にする(disabling)副作用)は、消化管出血、好中球減少症、リンパ球減少症、吐き気/嘔吐、ALT/AST値の上昇、高血圧であった(Jahanら, J. Clin. Oncol., 2006 ASCO Annual Meeting Proceedings Part I. Vol. 24, No 18S (June supplement), 2006:7081)。
【００１２】
VEGFがその受容体に結合するのを妨げる組換えヒト抗VEGFモノクローナル抗体であるベバシズマブは、二重盲目プラセボ対照無作為化第2相治験において化学療法と併用した第一選択治療として評価された。過去に治療を行っていない患者にベバシズマブ＋シスプラチンとゲムシタビン(BGC)を併用したところ、試験の主要エンドポイントに到達せず、無増悪生存期間の中央値(BGCが6.9ヶ月だったのに対して化学療法単独では6.0ヶ月:p=0.88)または全生存期間中央値(GCBで15.6ヶ月に対して化学療法単独では14.7ヶ月:p=0.91)において有意な改善が見られなかった。さらに、脱毛症、高血圧、鼻出血、蛋白尿、口内炎及び非好中球減少性感染症からなる他の毒性が、ベバシズマブアーム(bevacizumab arm)において統計的に有意な高い発生率で観察された(Karrisonら, J Clin Oncol. 25 (18S (June 20 Supplement)), 2007: 7526)。
【００１３】
これまでに行われた全ての臨床試験から、あるタイプの腫瘍の治療のために既に承認されているイマチニブやゲフィチニブなどの薬剤でさえ、中皮腫においては効力がないことが示されている。さらに、中皮腫の前臨床モデルにおいて有効と結論づけられた薬剤はヒトにおいて活性がない。これらのデータから、ある型の腫瘍に対する薬剤の抗腫瘍活性は、他の型の癌においても抗腫瘍活性を示すことを予測するものではないことが裏付けられる。異なる器官を冒す異なるタイプの癌は、異なる病因、異なる内在分子変化の範囲、及び異なる成長の仕方を有する。当業者は、ある腫瘍の治療に有効であるとされた薬剤が他の型の腫瘍に対して効力があるかどうかを予測することができない。
【００１４】
現在、MPMにおいて、第一選択化学療法の後に病気が進行している患者に利用できる標準的な治療はない。この患者集団は、最善の支持療法（best supportive care）のみを用いて報告された無増悪生存期間の中央値が1.5ヶ月という、非常に悪性の疾患を有している(Jassemら, J Clin Oncol. 2008; 26(10):1698-704)。この再発性腫瘍は、最初の症状(presentation)及び治療のときに比べ、二次的治療に対してほぼ例外なくより耐性がある(Broxtermanら, Drug Resist Updat. 2003; 6(3):111-27)。さらに、治療のさらなるラインに対する患者の忍容性(tolerability)は、第一選択化学療法の後に比べて一般的に悪い(Bertholdら, J Clin Oncol. 2005;23(32):8247-8252)。
【００１５】
二次的治療の目的は、癌治療における有効性だけでなく、患者にとって比較的安全且つ低い毒性プロフィールでもある。
【００１６】
中皮腫の二次的治療において幾つかの薬剤が試験されたが、効能及び毒性の改善は観察されなかった。
【００１７】
近年、過去に治療を受けた中皮腫患者においてペメトレキセド＋最善の支持療法と最善の支持療法単独とを比較する、無作為化多施設第3相治験が報告された。病気が進行するまでの期間が、最善の支持療法アーム(1.5ヶ月、95％ CI: 1.4〜1.7)に比べ、化学療法を受けているアーム(3.7ヶ月、95％ 2Cl:3.0〜4.4)において統計的に有意に長い期間であることが示されたが、全生存期間における改善は見られなかった(それぞれ9.7ヶ月と8.4ヶ月)。最も頻度の高いグレード3/4の毒性は主に、発熱性好中球減少症や疲労等の血液学的毒性及び非血液学的毒性であった(Jassemら, J Clin Oncol 2008; 26(10):1698-704)。
【００１８】
シングルアームの多施設第2相治験において、過去に従来の化学療法レジメンを１回受けたことがある切除不能な中皮腫を持つ患者において、ベバシズマブ＋エルロチニブの併用が研究された。残念ながら、この臨床試験では臨床反応はなく、腫瘍進行までの期間は2.7ヶ月であった。毒性プロフィールは、発疹、下痢、血栓症を含む幾つかのグレード3の毒性によって特徴付けられた(Jackmanら, J Thorac Oncol 2007; 2 (8):S602)。他のシングルアーム多施設第2相治験では、治療を受けたことがないか、または過去に化学療法を受けたことのある患者に、多標的(multi-targeted)チロシンキナーゼ阻害剤であるソラフェニブを用いて治療を行った。以前治療した(pre-treated)患者の間で、治療奏功維持生存期間の中央値(median failure-free survival)は3.6ヶ月であった。グレード3/4の毒性は、手足反応(hand-foot reaction)及び疲労であった(Janne P.ら, J Clin Oncol 2007; 25 (18S): Abstract 7707)。
【００１９】
したがって、好ましい毒性プロフィールを有する中皮腫の治療のための有効な薬剤が必要である。本発明はこのニーズに焦点を当てる。本発明者らは、驚くべきことに、ターゲッティングペプチドとサイトカインとを含むコンジュゲートが悪性胸膜中皮腫の治療に有効であること、及びこのようなコンジュゲートが良好な忍容性を示す毒性プロフィールを有することを見出した。
【００２０】
WO 01/61017号は、TNFもしくはIFNγとCD13受容体のリガンド(特にNGRモチーフを含むペプチド)とのコンジュゲーション生成物を開示している。当該特許に開示されているデータは、リンパ腫及び黒色腫のマウスモデルの治療においてTNFコンジュゲートが有効であることを示している。さらに、IFNγとNGRモチーフを含むペプチドとのコンジュゲートは、リンパ腫及び線維肉腫のマウスモデルにおいて強力な抗腫瘍効果を有する(Curnisら, Cancer Res. 2005;65(7):2906-2913)。種々のサイトカインと腫瘍ターゲッティング成分とのコンジュゲートが開示されており(WO 03/092737号)、このようなコンジュゲートを含む医薬組成物が、負のフィードバック機構の賦活を誘発しない非常に低い用量で有効であることが証明された(WO 03/093478号)。WO 2006/067633号は、αvβ3 インテグリンを標的とすることができる、NGRモチーフの分解産物を含むペプチド、ならびにこれらのペプチドとサイトカインとを含むコンジュゲートを開示している。これらの文献はいずれも、悪性胸膜中皮腫の治療のためのサイトカインコンジュゲートの有効性を開示していない。
【発明の概要】
【００２１】
本発明は、癌治療の分野、特に悪性胸膜中皮腫の治療に関する。
【００２２】
現在、第一選択療法(front-line therapy)としての参考的レジメン(reference regimen)は、シスプラチン＋ペメトレキセドの併用であり、これは無増悪生存期間及び生存期間の中央値の点において大した拡大がなく、且つ深刻な毒性結果のある、アグレッシブな化学療法的アプローチである。さらに重要なことに、多くの患者が診断後1年以内に死亡するという病気の自然経過を考えると、二次的使用としての新しい薬剤の利用は非常に重要である。残念ながら、MPMにおいて第一選択化学療法の後に病気が進行している患者が利用できる標準的な治療はなく、依然として最善の支持療法がこれらの患者に対する参考的アプローチである。
【００２３】
幾つかの新しい薬剤が、単剤としてまたは併用薬として研究されてきたが、それらはいずれも効果的なものではなかった。特に、無増悪生存期間及び全生存期間の拡大はこれまでに報告されておらず、むしろ第2相及び第3相臨床治験においてグレード3(重度の副作用)又は4(生命を脅かすもしくは不能にする副作用)の毒性の発生率が高いことが観察された。
【００２４】
驚くべきことに本発明者らは、ターゲッティングペプチドとサイトカインとを含むコンジュゲートの投与が、特に無増悪生存期間の拡大及び当該コンジュゲートの忍容性の良い毒性プロフィールの観点において、中皮腫の治療に有効であることを見出した。
【００２５】
特に、アミノ酸G(グリシン)を介してヒトTNFに連結されたターゲッティングペプチドCNGRCを含むコンジュゲートの投与が、標準的な第一選択化学療法レジメンに対して不応性であるか、又は耐性のある患者において、臨床的有用性をもたらすことが分かった。治験の第一段階に参加している患者に対して予備分析を行ったところ、7名の患者(44％;95％信頼区間(CI)20〜68％)は、最良の反応(best response)として病状が安定しており(stable disease, SD)、その期間の中央値は4.4ヶ月(範囲、1.6〜7.1ヶ月＋)であった。4.5ヶ月の時点での推定無増悪生存率は37％(95％ CI 10〜65％)であり、3名の患者(19％)は6ヶ月の時点で無増悪であった。
【００２６】
試験終了後、57名の患者を治療して得られた全体的結果から、NGR-hTNFが、標準的な治療法を持たないこの患者集団のための参考的治療である最善の支持療法を用いて観察された無増悪生存期間を2倍にすることが示された。さらに、NGR-hTNFを用いて得られた結果は、無増悪生存期間の観点から見て、ゲムシタビン＋ビノレルビンまたはベバシズマブ＋エルロチニブなどの併用療法を用いて得られた結果に匹敵するものであり、これらの薬剤に関連する毒性をもたらさない1種の薬剤のみの投与を行うという利点がある。
【００２７】
このようなデータは、サイトカインとターゲッティングペプチドとのコンジュゲートが、化学療法レジメンに対して不応性であるか、又は耐性のある患者の二次的治療としてであっても、中皮腫の治療に首尾よく用いることができることを表しており、このことは、最初の症状及び治療のときに比べて耐性の強くなった腫瘍においても効力があることを意味している。
【００２８】
さらに、3週間毎又は1週間毎のスケジュールのいずれにおいても、低用量の投与(0.8μg/m2)は、管理可能且つ好ましい毒性プロフィールと関連しており、1名の患者(2％)のみがグレード3の毒性を生じ、グレード4の有害事象や治療関連死はこれまでのところ報告されていない。患者あたりの主なグレード１(軽度の副作用)またはグレード2(中程度の副作用)の毒性は、悪寒(およそ15〜30分続く)を含む静注に伴う一過性の全身症状であった。この観察された低い毒性プロフィールは、特に発症年齢の中央値が74歳であることを考慮すると、中皮腫の治療において重要な利点である。
【００２９】
したがって、二次的治療の目的(すなわち無増悪生存期間の観点における有効性及び患者に対する低い毒性プロフィール)は、中皮腫の治療のための本発明のコンジュゲートの使用により完璧に達成されるのであり、第一選択治療におけるこれらの使用の有効性がはっきりと示されている。
【００３０】
発明の説明
本発明の1つの態様によれば、中皮腫の治療で使用するための、ターゲッティングペプチドとサイトカインとを含むコンジュゲートが提供される。
【００３１】
好ましくは当該サイトカインはTNFα、TNFβ、IFNγ、IL12である。
【００３２】
本発明の好適な態様によれば、当該ターゲッティングペプチドが、NGRまたはイソDGRまたはRGDモチーフを含むペプチドであるコンジュゲートが提供される。
【００３３】
好ましくは当該ターゲッティングペプチドはNGRモチーフを含むペプチドである。
【００３４】
より好ましくは、当該ターゲッティングペプチドは、直鎖状又は環状CNGRCVSGCAGRC、NGRAHA、GNGRG、CVLNGRMEC、CNGRC、CNGRCG、LNGRE、YNGRT LQCICTGNGRGEWKCE、LQCISTGNGRGEWKCE、CICTGNGRGEWKC、CISTGNGRGEWKC、MRCTCVGNGRGEWTCY、MRCTSVGNGRGEWTCY、CTCVGNGRGEWTC及びCTSVGNGRGEWTCからなる群より選択される。
【００３５】
本発明の好適な態様によれば、当該サイトカインがスペーサを介してターゲッティングペプチドCNGRCに連結したTNFであるコンジュゲートが提供される。好ましくは当該スペーサはG(グリシン)である。
【００３６】
本発明のさらなる態様によれば、中皮腫の治療のためにターゲッティングペプチドとサイトカインとを含むコンジュゲートを投与することを含む、中皮腫の治療法が提供される。
【００３７】
本発明の他の態様によれば、製薬上許容される担体及び希釈剤と共に、ターゲッティングペプチドとサイトカインとを含むコンジュゲートを有効量含む医薬組成物が提供される。
【００３８】
本発明の好適な態様によれば、製薬上許容される担体及び希釈剤と共に、スペーサGを介してターゲッティングペプチドCNGRCに連結したTNFを含むコンジュゲートを有効量含む医薬組成物が提供される。
【００３９】
より好ましくは、当該医薬組成物は、中皮腫の治療のためのものである。
【００４０】
本発明のさらなる態様によれば、製薬上許容可能な担体及び希釈剤ともに、スペーサGを介してターゲッティングペプチドCNGRCに連結したTNFを含むコンジュゲートを0.01〜10mg/mlの範囲の濃度で含有する医薬製剤が提供される。
【００４１】
好ましくは、当該医薬製剤は、スペーサGを介してターゲッティングペプチドCNGRCに連結したTNFを含むコンジュゲート0.150mg/mlを、50mM Na2HPO4, 150 mM NaClの溶液中に溶解したものからなる。
【発明を実施するための形態】
【００４２】
本発明の好適な特徴及び実施形態の詳細な説明を、非限定的実施例を用いて以下に記載する。
【００４３】
本発明は、特に指示がない限り、化学、分子生物学、微生物学、組換えDNA及び免疫学の従来技法を用いて、当分野において通常の知識を有する者により実施されることができるものである。このような技法の全ては、公開された文献に開示及び説明されている。例えばJ. Sambrook, E. F. Fritsch及び T. Maniatis, 1989, 「分子クローニング：実験室マニュアル(Molecular Cloning: A Laboratory Manual)」 第2版, 第1-3巻, Cold Spring Harbor Laboratory Press; Ausubel, F.M.ら (1995 and periodic supplements; 「分子生物学における最新プロトコル(Current Protocols in Molecular Biology)」 第9, 13, 及び16章, John Wiley & Sons, New York, N.Y.); B. Roe, J. Crabtree, 及びA. Kahn, 1996, 「DNAの単離と配列決定：基本的技術(DNA Isolation and Sequencing: Essential Techniques)」 John Wiley & Sons; J . M. Polak及びJames O'D. McGee, 1990, 「in situハイブリダイゼーション：原理と実践(In Situ Hybridization: Principles and Practice)」 Oxford University Press; M. J . Gait (編), 1984, 「オリゴヌクレオチド合成：実践的アプローチ(Oligonucleotide Synthesis: A Practical Approach)」 IrI Press; 及びD. M. J. Lilley及び J. E. Dahlberg, 1992, Methods of Enzymology: DNA Structure Part A: 「DNAの合成および物理分析(Synthesis and Physical Analysis of DNA)」 Methods in Enzymology, Academic Pressを参照されたい。これらの出版物は全て、参照により組み込まれる。
【００４４】
ターゲッティングペプチド
本明細書において使用される「ペプチド」という用語は、ポリペプチド及びタンパク質を含む。「ポリペプチド」という用語は、単鎖ポリペプチド分子だけでなく、個々の構成ポリペプチドが共有結合もしくは非共有結合的手段により連結している多価ポリペプチド複合体(multiple polypeptide complex)も含む。「ポリペプチド」という用語は、2アミノ酸長以上、典型的には5、10、20、30、40、50又は100を超えるアミノ酸を有するペプチドを含む。
【００４５】
本発明で使用することができるペプチドは、立体配置がD型もしくはL型のアミノ酸を含み得る。さらに、例えば免疫原性を低下させるため、患者の体内での循環半減期を長くするため、バイオアベイラビリティを強化するため、ならびに/または、効率及び/もしくは特異性を強化するために修飾されたペプチドを使用することができる。
【００４６】
治療的用途のためにペプチドを修飾するための沢山のアプローチがこれまでに開示されている。ペプチドは、ポリエチレングリコール(PEG)及びポリプロピレングリコール(PPG)などの種々のポリマー(例えば米国特許第5,091,176号、第5,214,131号及び第5,264,209号を参照されたい)、またはN-スクシンイミジル3-(2ピリジルジチオ)プロピオネート、スクシンイミジル6-[3-(2ピリジルチオ)プロピオンアミド]ヘキサノエート、およびスルホスクシンイミジル6-[3-(2ピリジルジチオ)プロピオンアミド]ヘキサノエートなどの二官能性架橋剤(米国特許第5,580,853号を参照されたい)に連結させることができる。
【００４７】
本明細書で使用されるターゲッティングペプチドという用語は、腫瘍関連血管上に発現される受容体、又は腫瘍血管に関連する細胞外マトリックスの成分に結合することができる、先に定義されているようなペプチドを意味する。
【００４８】
コンジュゲートのターゲッティングペプチドは、以下の受容体を標的とするものであってよい：CD13アミノぺプチダーゼN又はインテグリン。
【００４９】
アミノぺプチダーゼは、タンパク質及びポリペプチドの成熟、調節及び分解等の多くの生物学的プロセスに関与する酵素の大きな群である。特に、in vitro及びin vivoでの研究により、アミノ酸配列NGRの受容体であるアミノぺプチダーゼN(CD13/APN)が、血管新生において複数の役割を果たすこと、ならびに病理学的状態では既存の血管から新しい血管が発生するのに非常に重要である一方で、胚-胎児の発生におけるde novoでの血管形成及び健常な成人機能には必要でないことが近年証明された(Pasqualini, Koivunenら, 2000; Arap, Koloninら, 2002 Bhagwat, Lahdenrantaら, 2001; Bhagwat, Petrovicら, 2003; Fukasawa, Fujiiら, 2006; Rangel, Sunら, 2007)。
【００５０】
したがって、好適な実施形態において、ターゲッティングペプチドは、NGRモチーフを含むペプチドである。NGRモチーフを含むペプチド、及びこのようなペプチドを同定するための方法は、WO98/10795号及びWO99/13329号に開示されており、これらは本明細書中に参照により組み込まれる。
【００５１】
特に好適な実施形態において、ターゲッティングペプチドは、直鎖状もしくは環状のCNGRCVSGCAGRC、NGRAHA、GNGRG、CVLNGRMEC、CNGRC、CNGRCG、LNGRE、YNGRT LQCICTGNGRGEWKCE、LQCISTGNGRGEWKCE、CICTGNGRGEWKC、CISTGNGRGEWKC、MRCTCVGNGRGEWTCY、MRCTSVGNGRGEWTCY、CTCVGNGRGEWTC及びCTSVGNGRGEWTCからなる群より選択される。
【００５２】
インテグリン分子は、非共有結合により結合したα及びβと呼ばれる2つの膜貫通型糖タンパク質のサブユニットで構成されている。同じインテグリン分子が異なる細胞型において異なるリガンド結合特異性を有することがあるので、他の細胞型特異的因子がインテグリンと相互作用してそれらの結合活性をモジュレートすることができるようである。α及びβサブユニットは、異なる形で結合してインテグリン受容体を形成することができる。インテグリンの天然のリガンドは、細胞外マトリックスタンパク質の接着性タンパク質(例えばフィブロネクチン、ビトロネクチン、コラーゲン、ラミニン等)である。
【００５３】
多くのインテグリン、特にαvβ3インテグリンは、アミノ酸配列RGD(アルギニン-グリシン-アスパラギン酸)を認識する。さらなる実施形態において、ターゲッティングペプチドは、αvβ3インテグリンに結合することができるペプチド、特にRDGモチーフを含むペプチドである。
【００５４】
αvβ3インテグリンの他のリガンドは、NGRモチーフの分解生成物を含むペプチドである。これらのペプチドの詳細は、WO2006/067633号(参照により本明細書中に組み込まれる)に開示されている。さらなる実施形態において、ターゲッティングペプチドは、NGRモチーフの分解生成物を含むペプチド、特にイソDGRモチーフを含むペプチドである。
【００５５】
特に好適な実施形態において、ターゲッティングペプチドは、直鎖状もしくは環状のCイソDGRCVSGCAGRC、イソDGRAHA、GイソDGRG、CVLイソDGRMEC、CイソDGRC、CイソDGRCG、LイソDGRE、YイソDGRT、LQCICTGイソDGRGEWKCE、LQCISTGイソDGRGEWKCE、CICTGイソDGRGEWKC、CISTGイソDGRGEWKC、MRCTCVGイソDGRGEWTCY、MRCTSVGイソDGRGEWTCY、CTCVGイソDGRGEWTCまたはCTSVGイソDGRGEWTCからなる群より選択される。
【００５６】
コンジュゲート
本発明は、中皮腫の治療のための、サイトカインに連結したターゲッティングペプチドを含むコンジュゲートの使用に関する。本発明のコンジュゲートで使用することができるサイトカインの非限定的なリストとしては、TNFα、TNFβ、IFNα、IFNβ、IFNγ、IL-1、2、4、6、7、12、15、EMAP II、血管内皮増殖因子(VEGF)、PDGF、PD-ECGF又はケモカインが挙げられる。
【００５７】
好ましくは、サイトカインはTNFα、TNFβ、IFNγ、IL12である。
【００５８】
本明細書中で使用される「連結した」という用語は、ターゲッティングペプチドが化学的結合を介してサイトカインに結合し、第1の配列(ターゲッティングペプチド)が第2の配列を標的細胞まで輸送することができるような融合タンパク質を形成していることを意味する。したがって、当該コンジュゲートのターゲッティングペプチドは、そのポリペプチド骨格を介してサイトカインに連結しており、このような融合タンパク質は、これらのタンパク質をコードするDNA配列の宿主細胞内での遺伝子的発現により得られるか、またはタンパク質の直接的な合成もしくは予め形成された関連配列の架橋剤によるカップリングにより得られる。
【００５９】
ターゲッティングペプチドは、サイトカインに直接連結させてもよいし、スペーサを介して間接的に連結させてもよい。スペーサは、単一のアミノ酸、またはアミノ酸配列、または有機残基(organic residue)、例えば6-アミノカプリル-N-ヒドロキシスクシンイミドであってもよい。
【００６０】
１つの実施形態において、ターゲッティングペプチドは、サイトカインがその受容体に結合する際に障害とならないように、好ましくはサイトカインのN-末端またはC-末端に連結される。あるいは、ペプチドは、アミド-もしくはカルボキシル-結合受容部位(acceptor)であるアミノ酸残基(分子上で天然に生じるものまたは遺伝子工学技法を用いて人工的に挿入されたもの)に連結されていてもよい。コンジュゲートは、ペプチドをコードする5’-隣接配列又は3’-隣接配列を含むcDNAを用いて調製される。
【００６１】
TNF-α
TNF-α：ヒトTNF-αは、膜貫通型もしくは可溶性タンパク質として存在する233aa残基の非グリコシル化ポリペプチドである。TNF-αは、26kDaの膜結合性タンパク質として発現されるとき、29aa残基の細胞質ドメイン、28aa残基の膜貫通セグメント、および176aa残基の細胞外領域からなる。可溶性タンパク質は、85kDaのTNF-α変換酵素(TACE)を介したタンパク質分解的切断(76aa(233aa配列の１番目〜76番目の残基)のフラグメントを切断して、通常はホモ三量体として循環する17kDaの157aa残基の分子を生成する)によって生成する。TNF-αの膜貫通型及び可溶性タンパク質の配列は、スイスバイオインフォマティックス研究所(Swiss Institute of Bioinformatics)のExPASy(Expert Protein Analysis System)プロテオミクスサーバ(www.expasy.com, UniProtKB/Swiss-Protデータベース、エントリーP01375)で見つけることができる。
【００６２】
TNF-αは、増殖の促進から腫瘍細胞に対する直接的な細胞毒性、自然免疫応答及び適応免疫応答の活性化、ならびに内皮に及ぼす影響にいたるまで、広範囲の細胞及び組織の生物学的活性を有する多機能性膜貫通型タンパク質である(Watanabe, Niitsuら, 1988; Fajardo, Kwanら, 1992)。
【００６３】
本発明の好適な態様によれば、TNFとCNGRCペプチドのコンジュゲーション生成物であって、好ましくはTNFのアミノ末端が好ましくはスペーサを介して当該ペプチドに連結されている、中皮腫の治療で使用するためのコンジュゲーション生成物が提供される。好ましくはスペーサはG(グリシン)である。
【００６４】
IFNγ
インターフェロンγ(IFN-γ)は、T-リンパ球及びナチュラルキラー細胞により主に生成される多機能性サイトカインであり、抗腫瘍応答を促進する(Farrarら, 1993; Boehmら, 1997)。INF-γは、非共有結合により結合した２つのポリペプチドサブユニットからなるホモ二量体として存在する。ヒトIFN-γの配列は、NCBI(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)ウェブサイトのタンパク質データベース(アクセション番号AAB59534)で見つけることができる。
【００６５】
IFN-γは、腫瘍の血管新生を阻害して腫瘍細胞に対するナチュラルキラー細胞及びマクロファージを活性化することにより、多くの腫瘍細胞型に対する抗増殖及びアポトーシス促進効果を誘発することにより、抗腫瘍応答を促進することができる。
【００６６】
本発明の好適な態様によれば、IFNγとCNGRCペプチドとのコンジュゲーション生成物であって、好ましくはIFNγのアミノ末端が好ましくはスペーサ(好ましくはスペーサはG(グリシン)である)を介して当該ペプチドに連結されている、中皮腫の治療のためのコンジュゲーション生成物の使用が提供される。
【００６７】
IL12
IL12(p70)は、2つの別個の遺伝子によりコードされるp40及びp35のサブユニットがジスルフィド結合により連結されたもので構成されるグリコシル化ヘテロ二量体である。正しいヘテロ二量体アセンブリは、その産生細胞の内部で生じる。IL12は、IFNγ及び他の下流タンパク質(IFNγ誘導性タンパク質-10(IP10)及びIFNγにより誘導されるモノカイン(Mig)を含む)を誘発し、免疫応答を活性化し、血管新生を阻害する。抗腫瘍活性は、IL12の腫瘍周辺投与後に、又はIL12を産生するように遺伝的に改変された腫瘍細胞を用いることにより観察された。ヒトIL12の配列は、NCBI(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)ウェブサイト、タンパク質データベース、アクセション番号M65271 (ヒトp35サブユニット)及びM65272(ヒトp40サブユニット)から得ることができる。
【００６８】
医薬製剤
本発明のさらなる目的は、ターゲッティングペプチドとサイトカインとを含むコンジュゲートを治療的有効量で含むことを特徴とする、個体を治療するための医薬製剤である。好適な態様において、医薬製剤は、スペーサG(グリシン)を介してターゲッティングペプチドCNGRCに連結したサイトカインTNFのコンジュゲートを含み、特に好適な態様において、当該製剤は、中皮腫の治療のためのものである。
【００６９】
任意で、製剤は、製薬上許容される担体、希釈剤、賦形剤、又はアジュバントを含んでも良い。医薬用の担体、賦形剤もしくは希釈剤は、意図する投与経路及び標準的な製薬実務に基づいて選択することができる。医薬製剤は、担体、賦形剤もしくは希釈剤として、またはこれらに加えて、任意の好適な結合剤、潤滑剤、懸濁剤、コーティング剤、可溶化剤、及び標的部位へのウイルスの侵入を助け得るもしくは促進し得る他の担体(carrier agent)(例えば脂質送達系(lipid delivery system))を含んでも良い。好適な担体及び希釈剤としては、例えばリン酸緩衝生理食塩水などの等張生理食塩水が挙げられる。本発明で使用することができる賦形剤の説明は、「医薬品賦形剤のハンドブック(The Handbook of Pharmaceutical Excipients)」 第2版, Wade & Weller編, American Pharmaceutical Associationに記載されている。本発明の製剤は、非経口、筋肉内、静脈内、皮下、眼内、経口または経皮投与用であってもよい。本発明の好適な態様において、製剤は、非経口投与用であり、血液に対して等張な溶液にするために例えば十分な塩または単糖等の他の物質を含み得る無菌水溶液の形態である。非経口投与用の製剤は、注射可能な溶液もしくは懸濁液および点滴用の液体を含む。非経口形態に調製するためには、有効量の有効成分を無菌担体中に溶解もしくは懸濁し、場合により、可溶化剤、等張化剤、保存料、安定剤、乳化剤、もしくは分散剤などの賦形剤を加えた後、密閉したバイアルまたはアンプルに分配する。
【００７０】
医薬製剤は、所望の投薬量を得るために、毎日、毎週、または毎月、投与用に調製される。当該製剤は、2、4、6、8、10または12時間毎に投与するために調製することができる。
【００７１】
記載された投与経路及び投薬レジメンは、指針として意図されるだけであって、当業者であれば、個々の患者に最も適切な実際の投薬量を、その特定の個人の年齢、体重、及び応答に基づいて決定することができる。
【００７２】
治療
本発明のコンジュゲート、組成物、及び製剤は、中皮腫の治療的治療(therapeutic treatment)において使用される。本明細書中で使用される「治療(treatment)」という用語は、治療的治療、苦痛緩和的治療、および予防的治療を含む。
【実施例】
【００７３】
実施例1
NGR-hTNFの調製
ターゲッティングペプチドCNGRCGのC-末端に連結したヒト可溶性TNFα1-157からなるヒト組換えNGR-TNFを、WO01/61017号(本明細書中に参照により組み込まれる)に記載されているように、組換えDNA技法により調製し、精製した。
【００７４】
NGR-TNFの製剤化
患者に投与する医薬品を得るため、精製したヒト組換えNGR-TNFを製剤化した。医薬製剤は、3mlのI型ガラスバイアル中で、リン酸緩衝生理食塩水中に0.01〜10mg/mlの濃度範囲で溶解した組換えヒトNGR-TNF(1ml/バイアル)である。
【００７５】
点滴用の溶液のための濃縮物の好適な製剤を表１に示す。
【表１】
0005559772.tif 000002
【００７６】
この医薬品を-80℃で保存する。
【００７７】
患者に点滴する前に、リン酸緩衝生理食塩水(PBS)中のNGR-hTNFを、1mg/mlヒト血清アルブミン(HSA)を含む0.9％ NaClで適切な濃度に希釈する。HSAの存在は、NGR-hTNFが非常に低濃度で存在する場合に、容器やチューブに吸着することによるその損失を避けるために必要である。
【００７８】
実施例2
中皮腫の治療のためのNGR-hTNF
患者の選択
悪性中皮腫のための修正されたRECIST基準に従って、コンピュータ断層撮影(CT)スキャンまたは磁気共鳴映像法(MRI)により測定可能な病巣を有する、上皮性、肉腫様、及び混合型悪性胸膜中皮腫(MPM)が組織学的または細胞学的に確認された場合、告知に基づく合意が得られた患者(informed, consenting, patients(pts))を試験に含めた。
【表２】
0005559772.tif 000003
【００７９】
患者は、過去に1回までの全身治療レジメン(過去の胸膜内への細胞毒性薬(ブレオマイシンを含む)治療は全身治療とみなさない)を受けた18歳以上の患者であることを要件とし、試験に入る前の28日以内には化学療法や放射線療法を、また14日以内には手術を受けておらず、ECOG一般状態が0〜2(一般状態の定義については表2を参照されたい)であり、骨髄、肝臓、及び腎臓機能のベースラインが適切であり(好中球＞1.5x109/L及び血小板＞100x109/L、ビリルビン＜1.5x基準値上限(ULN)、肝転移の不在下にてアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ(AST)及び/又はアラニンアミノトランスフェラーゼ(ALT)＜2.5xULN、肝転移の存在下にてAST及び/又は(ALT)＜5xULN、血清クレアチニン値＜1.5xULNとして定義)であり、血液過多及びその結果起こる症状(例えば一回拍出量の増加、血圧上昇)又は血液希釈がその患者のリスクを表し得るような条件がなく、心機能が正常であり、且つ管理不良高血圧がない者とした。
【００８０】
患者は、並行して抗癌治療を受けている場合、試験中に他の治験薬を投与された場合、中枢神経系が関与する臨床徴候がある場合、プロトコールに適合しない活性な、もしくは管理不良の全身疾患/感染、重度の病気もしくは体調不良がある場合、ヒトアルブミン調製物または賦形剤のいずれかに対して過敏症もしくはアレルギー反応があることが分かっている場合、試験プロトコールの順守を妨げる可能性のある心理的、家族的、社会学的、もしくは地理的条件がある場合は除外した。妊娠・授乳中の女性は試験に含めず(妊娠の可能性のある女性は登録前14日以内に陰性の妊娠検査結果を提示しなければならないこととした)、また試験期間を通して有効な避妊手段を実行していない患者も除外する。
【００８１】
試験デザイン及び統計法
試験は、第１段階及び第２段階にそれぞれ参加する16名及び27名の患者に対し、サイモンの二段階デザイン法(Simon’s two-stage design method)を用いて行われた多施設の第2相シングルアーム非盲検・非無作為化試験として計画した。
【００８２】
この試験の第1エンドポイントは、無増悪生存(PFS)として定義される抗腫瘍活性であった。第2エンドポイントには、腫瘍増殖制御率(TGCR)、全生存(OS)、及び安全性を含めた。実験的画像化(DCE-MRI)及び薬物動態学的研究も含めた。
【００８３】
毒性は、NCI共通毒性規準v.3.0のグレーディングシステム(the NCI Common Toxicity Criteria version 3.0 grading system)に従って記録した。
【００８４】
好適な毒性プロフィールを考慮して、このプロトコールをその後修正し、一週間毎のベースで同じ用量0.8μg/m2で投与する、NGR-hTNFのより過密な投薬スケジュールを探求した。プロトコールの修正に従って、最初の3週間の間に最初の6名の患者のうち、何らかのグレード4の血液毒性またはグレード3〜4の非血液毒性を生じたのが1名以下であった場合(適切な手段ですぐに管理することができる吐き気、嘔吐、及び発熱は除く)、より大きな集団についてこの一週間毎のスケジュールで実行できるかテストするために、更に6名の患者を参加させるものとした。全体的に見て、このスケジュールは、患者12名中、何らかのグレード4の血液毒性またはグレード3〜4の非血液毒性を生じたのが2名以下であった場合、安全なものとみなした。さらに、治療終了後、毒性のため早期に治療を中止した患者がいる場合、さらなる関連毒性が解決するまで、または臨床的判断に基づいて、試験が完了するまでフォローアップを続けるものとする。妥当な場合には、毒性以外の何らかの他の理由で文献に記載された病気の進行前に治療を中止した患者がいた場合、最初の進行の徴候があるまで、又は新しい抗癌治療の開始まで、臨床的評価及び疾患の評価のために8週間毎にフォローアップを計画した。
【００８５】
治療計画
3週間毎(q3w)又は毎週60分間の静注により、0.8μg/m2の用量でNGR-hTNFを患者に投与した。悪寒があった場合、試験者の判断により、後続サイクルのための予防としてパラセタモールでの治療を行った。正式な用量の変更は必要なかった。治療の継続期間は、臨床結果(RECIST基準により書面化)に応じて変更した。病気または他覚症状(objective response)が落ち着いている場合、病気の進行、容認できない毒性、患者の拒否、または医師の判断があるまで、治療を続けた。
【００８６】
患者の評価
患者のベースライン評価には、最初の医学的評価、並びに化学分析及び機器分析による検査を含めた。全ての調査は、治療開始前の14日以内に行わなければならず、病歴、身体検査(血圧、体温等のバイタルサインを含む)の全項目の評価、及び全ての臨床症状だけでなくECOG一般状態、心電図(ECG)の評価に基づくものであった。全血球算定は、赤血球、ヘモグロビン、ヘマトクリット、総白血球、好中球、リンパ球、単球、好酸球、好塩基球等、及び血小板を含めて行った。血清化学評価は、プロトロンビン時間(PT、INR)、部分トロンボプラスチン時間(PTT)、クレアチニン、尿素、総ビリルビン、アルブミン、グルコース、アルカリホスファターゼ(ALP)、尿酸、乳酸脱水素酵素(LDH)、γ-グルタミル-トランスペプチダーゼ(γGT)、ALT、AST、電解質(Na+、K+、Ca++)を含めて行った。
【００８７】
悪性中皮腫のための修正したRECIST基準に従って腫瘍の評価を確実なものとした。ローカルガイドラインにより適用可能である場合は、ベースラインでのみHIV、HBV、HCVスクリーニングテストを行った。妊娠の可能性のある女性において、血清妊娠検査を必要とした。
【００８８】
治療期間中、身体検査、並びにECOGの一般状態、ECG(臨床的に意味のある場合)、全血球算定及び血清化学検査(各サイクルの前に行ったベースラインについて記載したのと同じパラメータを含む)により、患者を評価した。
【００８９】
腫瘍評価は6週間毎に行った。最初の評価で関与が判明した全ての部位を同じ方法で再調査し、最初の評価の際に標的として選ばれた全ての病変を、同じ方法で、且つ可能であれば同じ人物が測定した。
【００９０】
結果
第一段階分析
第一段階分析は、最初に参加し、治療を行った16名の患者を含め、最初の一年間に試験対象となった総勢42名の患者に対して行われた。患者に、3週間毎(q3w)に60分の静注により0.8μg/m2の用量でNGR-hTNFを投与した。患者の約75％は男性であり、年齢の中央値は64歳であった(48歳〜80歳まで)。ECOG一般状態はそれぞれ0(7pts)、1(6pts)、及び2(3pts)であった。肉腫様(12.5％)、混合型(6％)及び未知の(12.5％)組織学的に確認されたMPMに対し、患者のほとんど(69％)は上皮性MPMを有していた。全部で58サイクル(中央値2、範囲は1〜9)が完了した。7名の患者(44％、95％ Cl 20〜68％)は、中央値4.4ヶ月の病状安定(SD)期間があった(範囲は1.6〜7.1＋)。SD患者における標的病変の最大変化の範囲は、17％縮小〜6％増大であった。4.5ヶ月での推定PFS率は37％(95％ Cl 10〜65％)であり、3名の患者(19％)は、6ヶ月の時点で無増悪であった。
【００９１】
患者あたりの主な毒性グレード1〜2は、悪寒(56％)や疲労(31％)を含む静注に伴う全身症状であった。グレード3〜4の治療関連有害事象や毒性関連死は観察されなかった。
【００９２】
第二段階分析
第一段階に関わる16名及び第二段階に関わる27名を含む総勢43名の患者が試験対象となった。これらの患者に、3週間毎(q3w)に60分の静注により0.8μg/m2の用量でNGR-hTNFを投与した。患者の63％は男性であり、年齢の中央値は64歳であった(54歳〜80歳まで)。ECOG一般状態はそれぞれ0(24pts)、1(10pts)、及び2(9pts)であった。非上皮性組織学(21％)に対し、患者のほとんど(79％)は上皮性MPMを有していた。全部で170サイクル(中央値2、範囲は1〜18サイクル)が完了した。1名の患者(2％)は部分寛解(partial response)を示し(この患者は14.3ヶ月たった現在も無増悪である)、18名の患者(42％)は、中央値4.4ヶ月の病状安定(SD)期間があった(範囲は2.2〜13.7＋)。SD患者における標的病変の最大変化の範囲は、17％縮小〜6％増大であった。推定PFS率は2.8ヶ月(95％ Cl、1.9〜3.7ヶ月)であった。一般状態2の高齢者1名、及び以前の治療に対して完全に不応性であった患者1名はそれぞれ、無増悪期間が10.9ヶ月及び10.5ヶ月という長期間であった。9ヶ月の追跡期間中央値の後、生存期間中央値にはまだ達していない。
【００９３】
プロトコール修正に従って治療した患者
さらに、研究の第二段階の完了時にプロトコールの修正に沿って、追加で14名の患者を後続の集団に参加させ、毎週ベースで同じ用量0.8μg/m2でNGR-hTNFを投与して検討した。毎週という投薬スケジュールはNGR-hTNF毒性のパターンに変化をもたらすことはなかった。さらに、有害事象の重症度や頻度が増すことはなかった。さらに、グレード3〜4の薬物関連毒性や毒性関連死は報告されなかった。全ての患者が応答について評価可能であり、７名(50％)が中央値8.1ヶ月のSD期間を有していた。無増悪生存期間の中央値は3.0ヶ月であった。毎週の集団についてこれらの追加データは、NGR-hTNFの安全な毒性プロフィール及び効能を確認するものであった。
【００９４】
結論
まとめると、患者57名(43名は３週間毎のスケジュールで治療し、14名は毎週のスケジュールで治療)についてNGR-hTNFにより得られた全ての結果から、進行したMPMの治療における二次的療法としてのその重要な役割が確認された。この状況において、無増悪生存期間の点では、最善の支持療法単独の場合(1.5ヶ月)と比較してペメトレキセドのみが臨床的利点を示した(3.6ヶ月)。しかし、ペメトレキセドをベースとした併用レジメンが最適な第一選択治療であることを考慮すると、第一選択療法の後に病状が進行しているMPM患者(すなわち患者全体)に対して利用可能な標準的な二次的療法は現在のところない。特に、NGR-hTNFは、標準的な療法を持たないこの患者集団に対する参考的アプローチとなっている最善支持療法単独の場合で観察された無増悪生存期間を2倍に延長した。さらに、NGR-hTNF単剤により得られたこれらの有効性についての結果は、2種の化学療法剤(ゲムシタビン＋ビノレルビン)と2種の標的剤(ベバシズマブ＋エルロチニブ)との併用により、または単剤(スニチニブ)により得られた最良の結果に匹敵するものでもあり、且つこれらの薬剤に関連する深刻な毒性がない。最後に、中央値9ヶ月の追跡期間の後、生存期間中央値にまだ達していない。従って、NGR-hTNF療法で得られた全生存期間中央値は、この設定において最善支持療法単独または積極的治療で記録された生存期間中央値、すなわちおよそ8〜9ヶ月よりも確実に長いであろう。
【００９５】
患者あたりの主なグレード1〜2の毒性は、悪寒(71％)及び疲労(36％)を含む、静注に伴う全身症状であった。グレード3の治療関連毒性を示したのは1名の患者のみであり、グレード4の治療関連有害事象や毒性関連死は観察されなかった。
【００９６】
結論として、NGR-hTNFは、好ましく且つ管理可能な毒性プロフィールを示し、化学療法歴のあるMPM患者において長期間疾患が管理できる証拠を有している。
【配列表】
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