(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
グリコーゲンと、少なくとも一つの他の可食成分とを含むグルコースの放出制御用人工食品製剤で、前記グリコーゲンが２,０００,０００ダルトンを超える分子量と、全結合数に対し５％から１５％のα−１−６グルコシド結合の割合を有することを特徴とする人工食品製剤。
【請求項２】
前記グリコーゲンが、２,０００,０００から５,０００,０００ダルトンの分子量を有することを特徴とする請求項１に記載の食品製剤。
【請求項３】
前記グリコーゲンが、全結合数に対し８％から１２％のα−１−６グルコシド結合の割合を有することを特徴とする請求項１又は２に記載の食品製剤。
【請求項４】
前記グリコーゲンが、１重量％未満の還元糖を含むことを特徴とする請求項１〜３のいずれか一項に記載の食品製剤。
【請求項５】
前記グリコーゲンが、３，０００ｐｐｍ未満の窒素を含むことを特徴とする請求項１〜４のいずれか一項に記載の食品製剤。
【請求項６】
前記グルコースの放出制御が、５０％のグルコースを１時間以上で放出するようなものであることを特徴とする請求項１〜５のいずれか一項に記載の食品製剤。
【請求項７】
前記グルコースの放出制御が、８０％のグルコースを６時間以上で放出するようなものであることを特徴とする請求項６に記載の食品製剤。
【請求項８】
前記可食成分が、栄養素であることを特徴とする請求項１〜７のいずれか一項に記載の食品製剤。
【請求項９】
前記栄養素が、炭水化物、蛋白質、アミノ酸およびその誘導体、脂質、リン脂質、ビタミンおよび無機塩を含む群から選択されることを特徴とする請求項８に記載の食品製剤。
【請求項１０】
前記製剤が、３０重量％から７０重量％のグリコーゲン含む炭水化物と、１０重量％から３０重量％の蛋白質と、２０重量％から４０重量％の脂質とを含むことを特徴とする請求項８に記載の食品製剤。
【請求項１１】
前記製剤が、固体形状又は水性溶液であることを特徴とする請求項１〜１０のいずれか一項に記載の食品製剤。
【請求項１２】
前記食品製剤が、完全食品、サプリメント食品、胃腸投与用栄養溶液、非経口投与用栄養溶液、又は糖尿病個人用食品若しくはサプリメントを含む群から選択されることを特徴とする請求項１〜１１のいずれか一項に記載の食品製剤。
【請求項１３】
グルコースの放出制御用人工食品製剤の製造におけるグリコーゲンの使用であって、前記グリコーゲンが２,０００,０００ダルトンを超える分子量と、全結合数に対し５％から１５％のα−１−６グルコシド結合の割合を有することを特徴とする、使用。
【請求項１４】
前記グリコーゲンが、請求項２から７のいずれか一つの特性を有することを特徴とする請求項１３に記載のグリコーゲンの使用。
【請求項１５】
前記食品製剤が、固体形状又は水性溶液であることを特徴とする請求項１３又は１４に記載のグリコーゲンの使用。
【請求項１６】
前記食品製剤が、完全食品、サプリメント食品、胃腸投与用栄養溶液、非経口投与用栄養溶液、又は糖尿病個人用食品若しくはサプリメントを含む群から選択されることを特徴とする請求項１３から１５のいずれか一項に記載のグリコーゲンの使用。
【請求項１７】
前記グリコーゲンが、０．２５重量％未満の還元糖を含むことを特徴とする請求項４に記載の食品製剤。
【請求項１８】
前記グリコーゲンが、１，０００ｐｐｍ未満の窒素を含むことを特徴とする請求項５に記載の食品製剤。
【請求項１９】
前記グルコースの放出制御が、５０％のグルコースを３時間以上で放出するようなものであることを特徴とする請求項６に記載の食品製剤。
【請求項２０】
前記グルコースの放出制御が、５０％のグルコースを５時間以上で放出するようなものであることを特徴とする請求項６に記載の食品製剤。
【請求項２１】
前記グルコースの放出制御が、８０％のグルコースを９時間以上で放出するようなものであることを特徴とする請求項７に記載の食品製剤。
【請求項２２】
前記グルコースの放出制御が、８０％のグルコースを１２時間以上で放出するようなものであることを特徴とする請求項７に記載の食品製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、グルコースの放出制御用食品製剤の製造におけるグリコーゲンの使用に関する。
【０００２】
特に本発明は、グルコースの放出制御用人工食品製剤の製造における２，０００，０００ダルトンを超える平均分子量を有するグリコーゲンの使用に関する。
【背景技術】
【０００３】
グルコース源を含む人工食品製剤は、当業界で周知である。
【０００４】
これらの製剤は、様々な適用分野を有する。
【０００５】
第一の適用分野は、プロ又はアマチュアアスリート用栄養補助食品としての使用に関する。
【０００６】
第二の適用分野は、治療を必要とする個人が通常の胃腸管を通して食べ物を摂取できない場合の非経口投与への使用に関する。
【０００７】
第三の適用分野は、カニューレを通して直接胃又は腸に投与される液体形式の腸内供給への使用に関する。
【０００８】
第四の適用分野は、高いカロリー摂取量を付与することなく満腹感を誘発し得る試薬（膨張性薬剤）としての使用に関する。
【０００９】
当業界で既知の人工食品製剤は、一般に澱粉又はその誘導体の加水分解により得られる。澱粉は、植物界において最も広く知られた多糖であり、グルコースのポリマー鎖を含む。澱粉は、主にアミロース（おおよそ２０重量％）とアミロペクチン（おおよそ８０質量％）の２種類のポリマーを含む。アミロースは、グルコース単位を共にα（１→４）グリコシド結合により結合する直鎖状のポリマーである。アミロペクチンは、アミロースに類似する構造の主鎖を有し、該主鎖上に２４−３０のグルコース単位毎にα（１→６）結合で分岐している側鎖を有する分岐状のポリマーである。
【００１０】
欧州特許出願公開第１，５４８，０３３号又は米国特許出願公開第２００５／０１５９３２９号には、９０，０００から１５０，０００ダルトンの平均分子量を有する澱粉の酵素加水分解により得た高分岐多糖が記載されている。また、欧州特許出願公開第１，３６９，４３２号には、３，５００から２０，０００ダルトンの平均分子量を有する類似の多糖が記載されている。
【００１１】
欧州特許出願公開第４８７，１８７号には、１００ｇ当たり１６０から２４０ｋｃａｌの低カロリー含量であるマルトデキストリンを含む食品製剤が記載されている。欧州特許出願公開第５１４，５２８号には、マルトデキストリンと、ベータ−グルカン及び／又はペントサンを含む可溶性栄養製品が記載されている。
【００１２】
マルトデキストリンは、α（１→４）グリコシド結合により共に結合したグルコース分子の十分のいくつかを含む澱粉の加水分解に由来した物質の類である。澱粉を化学的／物理的又は酵素を用いた手段又はそれらの組み合わせによって行った加水分解度に応じて様々なタイプのマルトデキストリンが得られ、これらを構成するグルコース分子の数、通常２から２０単位によって区別される。最小４−６から最大３６−３９まで及び得るデキストロース当量（ＤＥ）は、その長さに基づいて決定される。ＤＥ値が高いほど、加水分解度が大きくなり、鎖長は短くなる。その人体による消化の最終結果は常にグルコースであるが、そのプロセスが生起する速度と、結果として生ずるエネルギー生産は、ＤＥ値に依存する。
【００１３】
グルコース源を含む人工食品製剤は、例えば身体的努力又は活発なスポーツ活動に付随して大量の発汗をもたらす状況で、例えば水分／塩分のバランスを復元するための他の重要な栄養素を含有する。
【００１４】
オスモル濃度が、胃排出速度と、特に水と溶解分子の腸吸収に影響を与えることを考えれば、これら製剤の理想的なオスモル濃度は、血漿のもの（２８０−３００ｍＯｓｍｌ／ｋｇ）と同等かそれより僅かに低い値であるべきであり、即ちエネルギー溶液が血液と低張性であるべきである。マルトデキストリンの場合、グルコース源に加えて他の栄養素を含む等張性製剤を製造することが可能である。
【００１５】
当業界で既知のα（１→４）結合の低分子多糖を含む人工食品製剤は、急速に吸収され代謝されるグルコースの迅速な供給を付与する。
【００１６】
これは、二つの主なタイプの不利な点を有する。
【００１７】
第一の不利な点は、これら食品製剤が血糖値の急速な上昇（血糖症）をもたらすため、糖尿病の個人に投与できないことである。
【００１８】
第二の不利な点は、大量の物質を摂取しなければエネルギー効果が長続きせず、これら物質の過剰なオスモル濃度の結果として腸で回収される水による下痢の現象をもたらすことである。
【００１９】
これら不利な点を克服するための試みとして、より高い分子量と、より加水分解を困難にする結合とを有する組成物が研究されている。
【００２０】
国際特許出願公開００／３２０６４号には、澱粉又は澱粉誘導体のような炭水化物と、セルロース、増粘剤、ペクチンおよびアルギン酸塩の誘導体のような架橋多糖との混合物を含む組成物が記載されている。
【００２１】
国際特許出願公開第２００４／０２３８９１号には、３００，０００から１，０００，０００ダルトンの分子量を有し、典型的にはデキストラン、プルランおよびアルテルナンであるα（１→６）結合の多糖を含む食品製剤が記載されている。
【００２２】
欧州特許出願公開第１５３，０１３号には、ほとんど又は全く腸内で吸収されず、満腹感を誘発し得る試薬（膨張性薬剤）として作用することができる５０，０００から１，０００，０００ダルトンの分子量を有するデキストランであるα（１→６）結合の多糖に基づく製剤が記載されている。
【００２３】
それゆえ、当業界で既知のα（１→６）結合の多糖を含む人工食品製剤は、鎖長が長すぎないという条件で、グルコースの逐次放出を付与することが知られており、この場合吸収が大幅に減少する。
【００２４】
グリコーゲンは、５〜１０個のグルコース単位毎にα−１−６グルコシド結合により形成した分岐を有し、α−１−４グルコシド結合により結合したＤ−グルコースの分子を大部分含む、主として動物由来の多糖である。グリコーゲンの分岐の数と程度は、それを得る動物種により異なる。天然のグリコーゲンの分子量は、ほぼ１０６−１０７ダルトン程度である。実際、グリコーゲンは常に蛋白質、グリコゲニン、細胞グリコーゲン合成の方法に関連する酵素に結合している。
【００２５】
商業的なグリコーゲン誘導体の品質は、多量又は少量の蛋白質残渣（ｐｐｍで示した窒素の量に関して測定）及び還元糖の存在に由来する。欧州特許第６５４，０４８号には、低い窒素および還元糖含量で、約２，５００，０００ダルトンの分子量である高品質グリコーゲン誘導体が記載されている。
【００２６】
グリコーゲンは、化粧品分野で皮膚軟化剤（特開昭６２−１７８  ５０５に記載）と水和剤（特開昭６３−２９０  ８０９に記載）として、食品分野で添加物として、また点眼薬中の湿潤剤や潤滑剤（ＷＯ９９／４７１２０に記載）として使用される。
【発明の概要】
【００２７】
驚くべき事に、出願人は、グリコーゲン、特に欧州特許６５４，０４８号に記載されたグリコーゲンが胃腸管を模倣した生体外の系においてマルトデキストリンタイプのより低分子量の他の多糖から得たものに類似したグルコースの段階的な放出を提供し得ることを見出した。
【００２８】
従って、本発明は、グルコースの放出制御用人工食品製剤の製造におけるグリコーゲンの使用に関する。
【００２９】
出願人は、２，０００，０００ダルトンを超える高分子量にも関らず、上述のグリコーゲンが胃腸管を模倣した生体外の系において胃腸管中に存在する酵素により酵素分解を受け、グルコースを２０−２４時間かけて徐々に放出し得ることを見出した。
【００３０】
これに加えて、出願人は、グリコーゲンが２，０００，０００ダルトンを超える高分子量を有するために、摂取された同量のグルコースに関するオスモル濃度がマルトデキストリンの投与と比較して非常に小さく、当業界で既知の下痢作用を有する水の回収の問題を回避することを見出した。
【００３１】
出願人はまた、胃腸管中のグリコーゲンの輸送の間に観測されるグルコースの段階的かつ一定な放出が、適度に投与したグリコーゲンを糖尿病の個人用の食べ物又は飲み物として使用する可能性を有利に提供できることに気が付いた。
【００３２】
他の態様において、本発明はまた、グリコーゲンと、少なくとも一つの他の可食成分、好ましくは少なくとも一つの栄養素とを含むグルコースの放出制御用人工食品製剤に関する。
【００３３】
出願人は、本発明に係る人工食品製剤が当業界で既知のマルトデキストリン含有製剤よりも優れたおいしさを有することを見出した。
【００３４】
特に、出願人は、本発明に係る人工食品製剤は甘味が控えめであり、より味わい深く、味覚によく許容されることを見出した。
【００３５】
本発明に係る人工食品製剤は、炭水化物、蛋白質、アミノ酸と誘導体、脂質、リン脂質、ビタミンおよび無機塩を含む群から選択した少なくとも一つの栄養素を含むことが有利である。
【００３６】
さらなる態様において、本発明はまた、グリコーゲンと、少なくとも一つのさらなる医薬的に許容し得る賦形剤とを含むグルコースの腸内又は非経口投与用水性製剤に関する。
【００３７】
出願人は、グリコーゲン溶液の低オスモル濃度が糖や低分子量の多糖を含有する既知溶液のグルコース含量よりも高いグルコース含量を有する等張性水性製剤（３００ｍＯｓｍ／ｋｇ）を製造するのを可能とすることを見出した。
【００３８】
出願人はまた、グルコース放出が遅い他の多糖と異なり、上述したグリコーゲン溶液が高い多糖濃度でさえ生理値に近いｐＨの値を有していることを見出した。
【００３９】
[発明の詳細な説明]
本発明は特に、グルコースの放出制御用人工食品製剤の製造におけるグリコーゲンの使用に関する。
【００４０】
本発明で用いるグリコーゲンは、動物や菌類から抽出し得る天然グリコーゲンから得られる。軟体動物、特にイガイ（Ｍｙｔｉｌｕｓ  ｅｄｕｌｉｓおよびＭｙｔｉｌｕｓ  ｇａｌｌｕｓ  ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌｉｓ）は、低コストで大量に入手でき、一定量のグリコーゲン（平均で２．５重量％から３．９重量％の間）を含有するため、グリコーゲンの特に有用な給源である。グリコーゲンの他の天然の給源は、ハマグリ、カキのような他の二枚貝軟体動物、フナガイ（Ｃｒｅｐｉｄｕｌａ  ｆｏｒｎｉｃａｔａ）のような数種の腹足類動物又は海カタツムリ、並びに肝臓および筋肉のようなグリコーゲンの豊富な脊椎動物の器官を含む。
【００４１】
本発明で使用するグリコーゲンは、２，０００，０００ダルトンを超える分子量、好ましくは２，０００，０００から５，０００，０００ダルトンの分子量を有するのが有利である。
【００４２】
本発明で使用するグリコーゲンは、全結合数に関して、５％から１５％、好ましくは８％から１２％の割合のα−１−６グルコシド結合を有するのが好ましい。
【００４３】
本発明で使用するグリコーゲンは、抽出処理で得たものとして使用してもよいし、その後の精製工程で処理してもよい。
【００４４】
既に記載した通り、市販のグリコーゲン誘導体の品質は、多量又は少量のタンパク質残渣（ｐｐｍで示した窒素の量に関して測定）及び還元糖の存在に由来する。
【００４５】
本発明の目的のために、還元糖及び窒素の含有量が低いグリコーゲン誘導体を使用するのが好ましい。本発明で好適に用いる市販品の例として、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社により製造および流通しているグリコーゲン誘導体が挙げられる。
【００４６】
本発明で使用するグリコーゲン誘導体は、Ｆ．Ｄ．Ｓｎｅｌｌ ａｎｄ Ｓｎｅｌｌ， “Ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｉｃ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ａｎａｌｙｓｉｓ”， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９５４，ｖｏｌ．III，ｐ．２０４による方法で測定して、好ましくは１重量％未満、さらに好ましくは０．２５重量％未満の還元糖を含む。
【００４７】
本発明で使用するグリコーゲン誘導体は、Ｋｊｅｌｄａｈｌの方法に従って測定して、好ましくは３，０００ｐｐｍ未満、より好ましくは１，０００ｐｐｍ未満、さらに好ましくは１００ｐｐｍ未満の窒素を含む。
【００４８】
本発明で使用するグリコーゲンは、Ｐｏｌｇｌｕｍｙｔ（商標）グリコーゲンであるのが好ましく、これはＡ．Ｃ．Ｒ．Ａ．Ｆ．Ｓ．ｐ．Ａ．Ｒｏｍｅ，Ｉｔａｌｙによって製造及び流通している低還元糖含量を有する脱蛋白化グリコーゲンの商品名であり、欧州特許第６５４，０４８号に記載された精製処理によって得られる。
【００４９】
本発明で使用するグリコーゲン誘導体は、２，０００，０００ダルトンを超える分子量、好ましくは２，０００，０００から５，０００，０００ダルトンの分子量と、全結合数に対し５％から１５％、好ましくは８％から１２％の割合のα−１−６グルコシド結合とを有するのが有利である。
【００５０】
本発明に係るグルコースの放出制御用食品製剤は、グリコーゲンと、少なくとも一つの他の可食成分、好ましくは少なくとも一つの栄養素とを含む。
【００５１】
本発明に係る食品製剤は、炭水化物、蛋白質、アミノ酸と誘導体、脂質、リン脂質、ビタミンおよび無機塩を含む群から選択した少なくとも一つの栄養素を含むことが有利である。
【００５２】
本発明に係る食品製剤における炭水化物の摂取量は、グリコーゲンの存在によって満たされるのが好ましい。それにもかかわらず、本発明に係る食品製剤は、グリコーゲンに加えて他のタイプの炭水化物を任意に含むことができる。
【００５３】
本発明に係る食品製剤に使用する蛋白質は、例えば乳蛋白質、卵蛋白質または血液蛋白質のような異なる天然給源から得ることができる。該蛋白質はまた、ペプチド又は個々のアミノ酸の加水分解形態で存在する場合がある。少なくとも蛋白質含量の半分は、無傷の蛋白質で表されることが好ましい。
【００５４】
本発明に係る食品製剤に使用する脂質は、１２から１８個の炭素原子を有する飽和及び不飽和脂肪酸のトリグリセリドであってもよい。例えば、ω−３、ω−６およびω−９脂肪酸のような長鎖ポリ不飽和脂肪酸のトリグリセリドを使用するのが好ましい。オレイン酸、リノール酸（ＬＡ）、α−リノレン酸（ＡＬＡ）、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）およびドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）のトリグリセリドが特に好ましい。リン脂質は、レシチン又はその等価物が好ましい。レシチンは動物又は植物由来であってもよく、主にリン酸、コリン、脂肪酸、グリセロール、糖脂質、トリグリセリド、そして例えばホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミンおよびホスファチジルイノシトールのようなリン脂質を含む。
【００５５】
本発明に係る食品製剤に使用するビタミンは、特に制限されず、例えばグループＢ（Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｂ５、Ｂ６、Ｂ８、Ｂ９そしてＢ１２）およびＣの水溶性ビタミン、又はグループＡ、Ｄ、ＥおよびＫの脂溶性ビタミンのような既知のビタミンのいずれであってもよい。コリン、アンスラニル酸、リポ酸、バイオフラボノイド、ユビキノンおよびメチルメチオニンのようなプソイドビタミンを使用してもよい。製剤のビタミン含量は、一般に1日あたりの推奨摂取量の割合又はＲＤＡ％として表わされる。
【００５６】
無機塩は、一般に一日の所要量に基づきマクロ元素（１００ｍｇ超）、微量元素（１から１００ｍｇ）および少数元素（１ｍｇ未満）として分類される。マクロ元素は、カルシウム、塩素、リン、マグネシウム、カリウム、ナトリウム及び／又は硫黄を含む塩である。微量元素は、銅、亜鉛、フッ素、ヨウ素、セレン、クロム、コバルト、マンガン、モリブデン、ケイ素、ニッケル、バナジウムを含む塩である。少数元素は、スズ、ニッケル、ゲルマニウム、バナジウムおよびタングステンを含む塩である。
【００５７】
食品製剤は、完全食品、サプリメント食品、胃腸投与、例えば経鼻胃、経鼻腸の管を通して投与する腸内投与用栄養溶液、非経口投与用栄養溶液又は糖尿病個人用食品又はサプリメントの形態であってよい。
【００５８】
完全食品は、物質とエネルギーの摂取量の観点から、利用者の一日の所要量を満たすのに必要な全ての栄養物質を含む。それ故、製剤は３０重量％から７０重量％のグリコーゲンを含む炭水化物、１０重量％から３０重量％の蛋白質および２０重量％から４０重量％の脂質を含まなければならない。
【００５９】
これに加えて、製剤は一日当たり２０００ｋｃａｌから２９００ｋｃａｌを供給することが可能でなければならず、水又は他の飲料への溶解又は分散用の固体若しくは液体の形状、使用する準備ができている形状、または濃縮物でもよい。少量又は多量のエネルギー摂取量を特定の状況（食事やスポーツ療法）に付与することができる。
【００６０】
サプリメント食品は、蛋白質とエネルギー摂取量の観点から、利用者の一日の所要量を満たすのに必要とされるいくつかの栄養物質のみを含有する。それ故、製剤は一日当たり１５００ｋｃａｌ未満、好ましくは１００から１０００ｋｃａｌを供給することが可能である。この事例では再び、製剤が固形状でも液体状でもよく、通常の食事に付け足すために又は通常の食事の一成分として上述したような固体又は液体の形状としてもよい。
【００６１】
本発明に係る食品製剤は、外観、味わい深さおよび保存性を改良するための従来の食品添加物、例えば、着色剤、保存料、抗酸化剤、酸味調整剤、増粘剤、安定剤、乳化剤、調味料、香味料、保湿剤および甘味料をさらに含有してもよい。
【実施例】
【００６２】
以下の実施例は、本発明を例示するものであって、それに限定するものではない。
【００６３】
実施例１
唾液のアルファ−アミラーゼを用いる培養の第一段階、ペプシンを用いる培養の第二段階、約７のｐＨでパンクレアチン、アミノグルコシダーゼおよび牛の胆液を用いる培養の第三段階からなる消化システムを模倣したモデルを実験室にて調製した。
【００６４】
６ｇの基質を、ねじぶた付きの２５０ｍｌのパイレックス(登録商標）ボトル中で１００ｍｌリン酸塩緩衝液に溶解した。
【００６５】
溶液の温度を３７℃まで上げ、ヒトアルファアミラーゼ溶液（溶液Ａ）０．１ｍｌを添加した。生成した溶液を、磁気攪拌しながら３７℃の恒温槽で１５分間培養した。
【００６６】
該溶液をＨＣｌの１Ｍ溶液２．５０ｍｌでｐＨ＝２に調整し、ＮａＣｌ溶液中のＳｉｇｍａ  Ｐ７０１２の懸濁液（溶液Ｂ）０．２５ｍｌを添加した。生成した溶液を、再度磁気攪拌しながら３７℃の恒温槽で３０分間培養した。
【００６７】
かかる溶液をＮａＨＣＯ３の１Ｍ溶液８．６７ｍｌでｐＨ＝６．９に調整し、パンクレアチンおよびアミノグルコシダーゼの２５ｍＭのＣａＣｌ２溶液（溶液Ｃ）２ｍｌと、２．４ｇの牛−羊の胆液（Ｓｉｇｍａ  Ｂ８３８１）とを添加した。生成した溶液を、攪拌しながら３７℃で５分間培養した。
【００６８】
該溶液を、以下のように調製した約９００ｍｌの緩衝液を３７℃の温度で含有するＵＳＰ  ＸIII溶出装置の１０００ｍｌの容器に設置した透析管（混合セルロースエステル、分画分子量３，５００）に移した。
【００６９】
８００ｍｌのリン酸塩緩衝液と、ＣａＣｌ２＊２Ｈ２Ｏの１ｍＭ溶液０．８ｍｌを一緒に混合した。次いで、これをＨＣｌの１Ｍ溶液２０ｍｌでｐＨ＝２に調整し、ＮａＣｌ溶液（９ｇ／Ｌ）２ｍｌを添加し、ｐＨをＮａＨＣＯ３の１Ｍ溶液７０ｍｌで６．９に調整し、２５ｍＭのＣａＣｌ２＊２Ｈ２Ｏ溶液１６ｍｌを添加した。
【００７０】
２４時間の期間にわたって、１ｍｌのサンプルを緩衝液から表２−５に示した時間で採取した。
【００７１】
Ｐｏｌｇｌｕｍｙｔ（商標）グリコーゲンとマルトデキストリンＤＥ１６．５−１９．５を基質として用いた二通りでテストを実施した。Ｐｏｌｇｌｕｍｙｔ（商標）グリコーゲンの６ｇサンプルは、グルコース５．２２０ｇに相当し、一方マルトデキストリンＤＥ１６．５−１９．５の６ｇサンプルは、グルコース５．７４８ｇに相当する。
【００７２】
リン酸塩緩衝液と溶液Ａ、Ｂ、Ｃは以下の表１の組成を有する。
【００７３】
【表１】
0005639649.tif 000002
【００７４】
グルコースの放出量を求めるために二つの市販キット、Ｓｉｇｍａ  ＧＡＧＯ２０グルコース（ＧＯ）分析キットおよびＳｉｇｍａ  ＧＡＨＫ２０  グルコース（ＨＫ）分析キット（共にＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから提供）を用いてサンプルを分析した。
【００７５】
第一のテストは、グルコース−オキシダーゼによるＤ−グルコースのＤ−グルコン酸と過酸化水素への酸化に基づく。放出された過酸化水素がｏ−ジアニシジンとペルオキシダーゼの存在下で反応して茶色の酸化生成物を形成し、硫酸の存在下でピンク色の酸化生成物を産出する。５４０ｎｍで測定した色の強度は、グルコース濃度と比例した。
【００７６】
得られた結果を以下の表２−５にまとめた。
【００７７】
【表２】
0005639649.tif 000003
【００７８】
【表３】
0005639649.tif 000004
【００７９】
【表４】
0005639649.tif 000005
【００８０】
【表５】
0005639649.tif 000006
【００８１】
第二のテストは、ヘキソキナーゼによるＡＴＰの存在下でのグルコースのリン酸化に基づく。グルコース−６−リン酸塩を、グルコース−６−リン酸塩脱水素酵素により触媒した反応で、ＮＡＤ（ニコチンアミド  アデニン  ジヌクレオチド）の存在下６−ホスホグルコン酸塩に酸化する。酸化の過程で、等モル量のＮＡＤをＮＡＤＨに還元する。結果として生じる３４０ｎｍでの吸収の上昇は、グルコース濃度に正比例する。
【００８２】
得られた結果を以下の表６−９にまとめる。
【００８３】
【表６】
0005639649.tif 000007
【００８４】
【表７】
0005639649.tif 000008
【００８５】
【表８】
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【００８６】
【表９】
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【００８７】
実施例２
Ｐｏｌｇｌｕｍｙｔ（商標）グリコーゲンとマルトデキストリンＤＥ１６．５−１９．５の６つの溶液を、濃度を増加（１０、１４、１８、２２．２６そして３０重量％）させて蒸留水中で調製した。
【００８８】
生成した溶液を分析して、粘度、ｐＨ、導電率およびオスモル濃度を求めた。結果を、溶解時間と共に以下の表１０と１１に示す。粘度測定は、２°／５５ｍｍコーンプレート形状を備えるＢｏｈｌｉｎ  Ｇｅｍｉｎｉ  １５０Ｒｈｅｏｍｅｔｅｒを用いて行った。オスモル濃度測定は、Ｋｎａｕｅｒ  ｏｓｏｍｏｍｅｔｅｒを用いて行った。分析前に、０．２μｍのＭｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｆｉｌｔｅｒを用いて溶液をろ過した。
【００８９】
【表１０】
0005639649.tif 000011
【００９０】
【表１１】
0005639649.tif 000012
【００９１】
実施例３
以下の表１２、１３、１４に本発明に係るグリコーゲンを含む人工食品組成物の例を示す。表１２は健常者用、表１３は糖尿病の個人用、表１４は胃腸管経由投与用の食品製剤を示す。
【００９２】
【表１２】
0005639649.tif 000013
【００９３】
ＲＤＡ：                      1日あたりの推奨摂取量
Ｐｏｌｇｌｕｍｙｔ（商標）：  Ａ．Ｃ．Ｒ．Ａ．Ｆ．Ｓ．ｐ．Ａ．，Ｒｏｍｅ，Ｉｔａｌｙによって製造及び流通している減少した還元糖含量を有する脱蛋白化グリコーゲン
【００９４】
【表１３】
0005639649.tif 000014
【００９５】
【表１４】
0005639649.tif 000015
【００９６】
実施例４
以下の表１５に、本発明に係るグリコーゲンを含む非経口投与用組成物の一例を示す。
【００９７】
【表１５】
0005639649.tif 000016
【００９８】
実施例５
以下の表１６に、本発明に係るグリコーゲンを含む注射用製剤用の水１００ｍｌに溶解するための粉末状組成物の一例を示す。
【００９９】
【表１６】
0005639649.tif 000017
【０１００】
実施例６
以下の表１７にグルコース、マルトデキストリン（ＤＥ１６．５−１９．５）およびＰｏｌｇｌｕｍｙｔ（商標）グリコーゲンの５％溶液のオスモル濃度の値を示す。
【０１０１】
【表１７】
0005639649.tif 000018
【０１０２】
表１７に示した結果は、約５％のＤ−グルコースを含有する製剤が既に等浸透圧の溶液であり、マルトデキストリン（ＤＥ１６．５−１９．５）の５％溶液が５５ｍＯｓｍ／ｋｇのオスモル濃度（グルコースと比較して約１／５）を有し、一方Ｐｏｌｇｌｕｍｙｔ（商標）グリコーゲンの５％溶液が１ｍＯｓｍ／ｋｇ未満のオスモル濃度（グルコースの約３００分の１）を有することを明らかに示す。
【０１０３】
従って、表１７に示すように、Ｐｏｌｇｌｕｍｙｔ（商標）グリコーゲン含有製剤は、より高いグルコース含量及び／又はより高い重要な栄養素（例えば、ビタミン、アミノ酸、無機塩、等）の含量を有する製剤を調製することを可能とする。