(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（Ｉ）で表される４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩。
【化１】
0005532138.tif 000030
【請求項２】
請求項１に記載の４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含む医薬組成物。
【請求項３】
請求項１に記載の４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含むナトリウム依存性グルコース共輸送体１（ＳＧＬＴ１）活性阻害剤。
【請求項４】
請求項１に記載の４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含む食後高血糖改善薬。
【請求項５】
請求項１に記載の４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含む糖尿病の予防又は治療薬。
【請求項６】
糖尿病の予防又は治療用の薬剤の製造における、請求項１に記載の４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、小腸でのグルコ−ス及びガラクトースの吸収に関わるナトリウム依存性グルコ−ス共輸送体１（以下、適宜に「ＳＧＬＴ１」と略記する。）に特異的な阻害活性を有する４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
血糖値はメタボリックシンドロームのバイオマーカーの一つとなっており、空腹時血糖が１２６ｍｇ／ｄＬ以上を示すと糖尿病と診断される。また、空腹時血糖が正常であっても、食後２時間血糖値が１４０〜２００ｍｇ／ｄＬの場合には、耐糖能異常（又は食後高血糖）と診断される。近年の疫学的研究によれば、耐糖能異常が心血管障害のリスクを高めると報告されている(非特許文献１及び２参照)。さらに、運動療法や薬物治療を施すことで耐糖能異常から２型糖尿病への移行を抑制し、高血圧の発症も有意に抑制することが報告されている(非特許文献３参照)。【０００３】
以上のことから、食後高血糖を抑制することが糖尿病やメタボリックシンドロームの発症抑制に重要であると考えられ、食後高血糖をコントロールする薬剤の需要が高まりつつある。【０００４】
従来、食後高血糖改善薬としては、糖類の加水分解酵素を阻害し、小腸からの糖の吸収を遅延させるα−グルコシダ−ゼ阻害剤が汎用されてきたが、新しい作用機序を有する食後高血糖改善薬の開発も行われている。【０００５】
哺乳動物の小腸上皮には高い頻度でナトリウム依存性グルコ−ス共輸送体１（ＳＧＬＴ１）が発現している。このＳＧＬＴ１は小腸において、ナトリウムに依存し、グルコ−ス及びガラクト−スの能動輸送を司ることが知られている。そこで、ＳＧＬＴ１活性を阻害することによって、食事由来のグルコ−ス吸収を抑制し、食後高血糖の予防又は治療に用いることができる、ピラゾ−ル誘導体が報告されている（特許文献１〜６参照）。一方で、腎臓には高頻度にナトリウム依存性グルコ−ス共輸送体２（ＳＧＬＴ２）が発現しており、糸球体で一旦濾過されたグルコ−スはＳＧＬＴ２を介して再吸収される（非特許文献４参照）。そして、ＳＧＬＴ２活性を阻害することによって、尿への糖排泄が促進され、血糖低下作用を示すことが報告されている（非特許文献５参照）。ＳＧＬＴ２阻害剤の特徴として、随時血糖を低下させる作用が優れているが、ＳＧＬＴ１阻害剤の様に食後高血糖を是正する作用は低い。また、ＳＧＬＴ１活性に加えて、ＳＧＬＴ２活性も同時に阻害するＣ−フェニル  グルシトール誘導体についての報告もある（特許文献７参照）。【０００６】
一方、食後高血糖改善薬のような持続投与が必要な薬剤にとっては、薬効量と、毒性、副作用の発現量との間の安全域が広いことが重要である。特に、体内残留性薬物の場合は、治療に必要な投与量をコントロールすることが難しく、体内に残留している薬物が加算されて過剰量の薬物の効果が発現されることになり、予期せぬ毒性及び副作用につながる。例えば、分子内に３級アミンの様な親水性基と芳香環の様な疎水性基をもつ、陽イオン性薬物は、リン脂質と疎水結合し、ライソゾーム内に取り込まれ全身の器官に蓄積されることがあることが知られている。代表例として、クロロキンでは網膜障害、パーヘキシリンでは肺や小脳に変化があり神経障害が問題となった（非特許文献６参照）。【０００７】
したがって、薬物は、薬効を示した後に体内から速やかに排泄されることが望ましく、特に、持続投与が必須の食後高血糖改善薬では、体内残留性の問題のない薬物が望まれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第ＷＯ２００２／０９８８９３号パンフレット
【特許文献２】国際公開第ＷＯ２００４／０１４９３２号パンフレット
【特許文献３】国際公開第ＷＯ２００４／０１８４９１号パンフレット
【特許文献４】国際公開第ＷＯ２００４／０１９９５８号パンフレット
【特許文献５】国際公開第ＷＯ２００５／１２１１６１号パンフレット
【特許文献６】国際公開第ＷＯ２００４／０５０１２２号パンフレット
【特許文献７】国際公開第ＷＯ２００７／１３６１１６号パンフレット
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Pan XR, et al. Diabetes Care, 第20巻, 537頁, 1997年
【非特許文献２】M Tominaga, et al. Diabetes Care, 第22巻, 920頁, 1999年
【非特許文献３】J.−L. Chiasson, et al. Lancent, 第359巻, 2072頁, 2002年
【非特許文献４】E. M. Wright, Am. J. Physiol. Renal. Physiol., 第280巻, F10頁, 2001年
【非特許文献５】G. Toggenburger, et al. Biochim. Biophys. Acta, 第688巻, 557頁, 1982年
【非特許文献６】日薬理誌  Folia Pharmacol. Jpn. 第113巻, 19頁, 1999年
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明の目的は、薬効量と毒性、副作用の発現量との間の安全域が広いＳＧＬＴ１阻害作用を示す４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物又はその塩、及びそれらを含む医薬を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
特許文献７に記載のＣ−フェニル  グルシトール誘導体は体内から排泄されず腎臓に残留する傾向が見られることがわかった。そこで本発明者らは体内残留性の問題がない化合物を探索し鋭意検討した。その結果、特に、糖部分に直接結合するベンゼン環にイソプロピル基およびメトキシ基を導入し、その他のベンゼン環に、アミノ基を有するブテノイル基を導入して得られる、下記式（Ｉ）で示される、４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物は、意外にも腎臓に残留しないことを見出し、本発明を完成した。【００１２】
以下に、本発明の４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物（以下、「本発明化合物」という）の態様を述べる。
（１）下記式（Ｉ）で表される４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩。【００１３】
【化１】
0005532138.tif 000002
（２）（１）に記載の４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含む医薬組成物。
（３）（１）に記載の４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含むナトリウム依存性グルコース共輸送体１（ＳＧＬＴ１）活性阻害剤。
（４）（１）に記載の４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含む食後高血糖改善薬。
（５）（１）に記載の４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含む糖尿病の予防又は治療薬。
（６）糖尿病の予防又は治療用の薬剤の製造における、（１）に記載の４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩の使用。
【発明の効果】
【００１４】
本発明により、体内残留性がない、ＳＧＬＴ１活性を阻害する４−イソプロピル−６−メトキシフェニル  グルシトール化合物を提供することが可能となった。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本発明において使用する用語を以下に定義する。
【００１６】
「製薬学的に許容される塩」とは、アルカリ金属類、アルカリ土類金属類、アンモニウム、アルキルアンモニウムなどとの塩、鉱酸又は有機酸との塩であり、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、アンモニウム塩、アルミニウム塩、トリエチルアンモニウム塩、ぎ酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、酪酸塩、ヘキサン酸塩、オクタン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、エチルコハク酸塩、ラクトビオン酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸、グルコヘプトン酸塩、グルタール酸塩、ピメリン酸塩、スベリン酸塩、アゼライン酸塩、セバシン酸塩、１，９−ノナンジカルボン酸塩、ドデカン二酸塩、トリデカン二酸塩、テトラデカン二酸塩、ペンタデカン二酸塩、ヘキサデカン二酸塩、ヘプタデカン二酸塩、安息香酸塩、２−ヒドロキシ安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、エタンジスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、１，５−ナフタレンジスルホン酸塩、ラウリル硫酸塩、乳酸塩、馬尿酸塩、フマル酸塩、マロン酸塩、トランスケイ皮酸塩、リンゴ酸塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩、アジピン酸塩、システインとの塩、Ｎ−アセチルシステインとの塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、よう化水素酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、ピクリン酸塩、チオシアン酸塩、ウンデカン酸塩、アクリル酸ポリマーとの塩、カルボキシビニルポリマーとの塩を挙げることができる。
【００１７】
「本発明化合物又はその塩」には、それらの製薬学的に許容される水和物も包含される。本発明化合物又はその塩は、大気にさらされ、あるいは製造過程で、水分を吸収し、吸着水がつく場合や、水和物となる場合がある。本発明における水和物には、そのような水和物も含まれる。
【００１８】
「食後高血糖改善薬」とは、食後高血糖を抑制することにより、食後高血糖に関連する疾患、例えば、糖尿病やメタボリックシンドロームの発症を抑制する、若しくは、それらの疾患を治療する薬物をいう。ここで、「食後高血糖」とは、食後に血糖値が異常に高くなる状態、具体的には、食後２時間の血糖値が１４０ｍｇ／ｄＬを上回る状態をいう。
【００１９】
本発明化合物の有用性について以下に説明する（詳細は以下の試験例参照）。
【００２０】
本発明化合物は、強いＳＧＬＴ１阻害活性を有し、また、ＳＧＬＴ２阻害活性もある程度の活性を有する。また、本発明化合物は、ＷＯ２００７／１３６１１６号に開示された化合物と同程度に強い血糖降下作用を有する。さらに、ＷＯ２００７／１３６１１６号に開示の化合物は、１ｍｇ／ｋｇ経口投与した７日後でも、化合物が排泄されず腎臓に残留する傾向が見られたのに対して、本発明化合物は、意外にも３ｍｇ／ｋｇの用量で３日間連続投与したにも関わらず、２日後に腎臓に残留しないという特徴を示した。
【００２１】
したがって、本発明化合物は、体内残留性がなく、連続投与による副作用及び毒性が少ない医薬品として実用性に優れた性質を有すると考えられる。
【００２２】
本発明化合物を医薬として提供する場合、固形剤、液剤等の種々の態様の製剤形態を適宜に採択することができる。その際、製薬学的に許容される担体を配合することも可能である。そのような担体の例としては、一般的な賦形剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、被覆剤、糖衣剤、ｐＨ調整剤、溶解剤又は水性若しくは非水性溶媒などが挙げられる。本発明の化合物とこれらの担体から、錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、粉剤、散剤、液剤、乳剤、懸濁剤等を調製することができる。
【００２３】
例えば、本発明化合物と固形製剤の製造等に用いられる一般的な賦形剤等を混合した後に打錠し、経口投与用の錠剤として提供することができる。
【００２４】
また、本発明化合物は、α、β若しくはγ−シクロデキストリン又はメチル化シクロデキストリン等に包接させて、その溶解性を改善することも可能である。
【００２５】
本発明化合物の投与量は、疾患、症状、体重、年齢、性別、投与経路等により異なってくるが、成人に対し、１日当たり０．１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重であり、０．１〜２００ｍｇ／ｋｇ体重が好ましく、０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重がより好ましい。これを１日１回から数回に分けて投与することができる。
【００２６】
製造法１
本発明化合物（Ｉ）は以下の方法で合成することができる。
【００２７】
【化２】
0005532138.tif 000003
【００２８】
（１）工程１（Ｈｅｃｋ反応）
化合物（ＩＩ）とオレフィンカルボン酸（ＩＩＩ）をパラジウム触媒とホスフィンリガンド、及び適当な塩基の存在下、Ｈｅｃｋ反応を行うことにより化合物（ＩＶ）を得ることができる。このとき用いるパラジウム触媒としては、酢酸パラジウム、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、ジベンジリデンアセトンパラジウム、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムクロリド、ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）パラジウムクロリド、パラジウム活性炭等が挙げられる。ホスフィンリガンドとしてはトリフェニルホスフィンやトリ−ｏ−トリルホスフィン等が挙げられる。また、塩基にはトリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、炭酸カリウム、炭酸カルシウム、炭酸セシウム、カリウムｔ−ブトキシド等が用いられる。反応に用いられる溶媒としては、アセトニトリル、トルエン、テトラヒドロフラン等が挙げられる。反応温度は０℃から還流温度であるが、マイクロウェ−ブを用いることもある。
（２）工程２（アミド基への変換）
化合物（ＩＶ）を２８％アンモニア水を用いアンモニアと脱水縮合し、化合物（Ｖ）を得ることができる。この反応に使用する溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等が挙げられ、脱水縮合剤としては、Ｎ，Ｎ´−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、Ｎ−エチル−Ｎ´−３−ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ−ＨＣｌ）、１、１´−カルボニルジイミダゾ−ル（ＣＤＩ）、ＥＤＣ−ＨＣｌ／１−ヒドロキシベンゾトリアゾ−ル一水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ２Ｏ）等が挙げられる。ここでの反応温度は０℃〜６０℃である。
（３）工程３（脱保護）
化合物（Ｖ）のアセチル（Ａｃ）基を塩基性条件下除去することで化合物（Ｉ）を得ることができる。アセチル基の脱保護には、ナトリウムメトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、トリエチルアミン等の塩基を用いることができる。溶媒としては、メタノール、エタノール、含水メタノール等が挙げられる。ここでの反応温度は０℃〜６０℃である。
【００２９】
製造法２
本発明化合物（Ｉ）は以下に示す別ルートによって合成することもできる。ただし、記号は前記と同義である。
【００３０】
【化３】
0005532138.tif 000004
（４）工程４（Ｈｅｃｋ反応）
化合物（ＩＩ）とオレフィンカルボン酸（ＶＩ）を用いて製造法１の工程１に記載したＨｅｃｋ反応を行うことにより、化合物（ＶＩＩ）を得ることができる。
（５）工程５（アミド基への変換）
化合物（ＶＩＩ）とアミン（ＶＩＩＩ）を用いて製造法１の工程２に記載した脱水縮合反応を行うことにより、化合物（Ｖ）を得ることができる。
（６）工程６（脱保護）
上記で得られた化合物（Ｖ）を製造法１の工程３に記載した脱保護反応によって化合物（Ｉ）へ導くことができる。
【００３１】
製造法３
中間体（ＩＩ）の製造法
本発明化合物（Ｉ）の製造に必要な中間体（ＩＩ）の製造法を以下に示す。
【００３２】
【化４】
0005532138.tif 000005
（７）工程７（カップリング）
化合物（ＩＸ）にｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム等の有機金属試薬を用いてアリ−ルリチウム試薬を調製することができる。これに、グルコノラクトン（Ｘ）を加えることで化合物（ＸＩ）を得ることができる。このとき反応に用いられる溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエ−テル、トルエン等が挙げられる。反応温度は−８０℃から室温であり、好ましくは−７８℃〜−２５℃である。
（８）工程８（酸加水分解及びメチルエーテル化）
化合物（ＸＩ）中のシリル基を酸性条件下メタノール中で除去すると共に、糖の１位をメチルエーテル化し化合物（ＸＩＩ）を得ることができる。このとき用いる酸としては、塩酸、硫酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物、ピリジニウム  ｐ−トルエンスルホン酸等を用いることができる。反応温度は用いる酸によって異なるが、０℃〜１００℃、好ましくは２５℃〜８０℃である。
（９）工程９（アセチル化）
化合物（ＸＩＩ）中の水酸基をアセチル基で保護することにより、化合物（ＸＩＩＩ）を得ることができる。化合物（ＸＩＩ）と、無水酢酸、またはアセチルクロリド等を溶媒中、適当な塩基存在下反応させ化合物（ＸＩＩＩ）を得ることができる。反応に用いる溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、ジオキサン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等である。塩基としてはトリエチルアミン、コリジン、ピリジン等を用いることができる。反応の触媒として４−ジメチルアミノピリジンを用いることもできる。また、ここでの反応温度は０℃〜室温である。
（１０）工程１０（還元）
化合物（ＸＩＩＩ）とＥｔ３ＳｉＨ、ｉ−Ｐｒ３ＳｉＨ、ｔ−ＢｕＭｅ２ＳｉＨ又はＰｈ２ＳｉＨＣｌを、酸の存在下で反応させ、化合物（ＸＩＶ）を得ることができる。この反応に使用する酸としては、ＢＦ３・ＯＥｔ２、ＣＦ３ＣＯＯＨ、ＩｎＣｌ３、ＴｉＣｌ４、ＴＭＳＯＴｆ、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸等が挙げられる。溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、トルエン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル又はそれらの混合溶媒が挙げられ、好ましい溶媒はアセトニトリル／クロロホルム、アセトニトリル／ジクロロメタン、アセトニトリル／テトラヒドロフラン、アセトニトリル／テトラヒドロフラン／トルエン等のアセトニトリルと他の溶媒との混合溶媒である。ここでの反応温度は−６０℃〜２５℃、好ましくは−３０℃〜２５℃である。
（１１）工程１１（臭素化）
化合物（ＸＩＶ）と、臭素、Ｎ−ブロモスクシンイミド、臭化水素等を溶液中反応させて、化合物（ＸＶ）を得ることができる。反応に用いる溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、酢酸、メタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等が挙げられる。ここでの反応温度は０℃〜室温である。
（１２）工程１２（脱保護）
化合物（ＸＶ）中のアセチル基を塩基性条件下除去することで化合物（ＸＶＩ）を得ることができる。塩基としては、ナトリウムメトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、トリエチルアミン等を用いることができる。溶媒としては、メタノール、エタノール、含水メタノール等を用いることができる。ここでの反応温度は０℃〜６０℃である。
（１３）工程１３（シリル化）
化合物（ＸＶＩ）中の水酸基をトリメチルシリル基等のシリル基で保護することにより、化合物（ＸＶＩＩ）を得ることができる。化合物（ＸＶＩ）と、トリメチルシリルクロリド、トリエチルシリルクロリド、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド等を溶媒中、適当な塩基存在下反応させ化合物（ＸＶＩＩ）を得ることができる。反応に用いる溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、ジオキサン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等が挙げられる。塩基としてはトリエチルアミン、コリジン、ピリジン等を用いることができる。また、ここでの反応温度は０℃〜室温である。
（１４）工程１４（カップリング）
化合物（ＸＶＩＩ）にｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム等の有機金属試薬を用いてアリ−ルリチウム試薬を調製することができる。これに、アルデヒド（ＸＶＩＩＩ）を加えることで化合物（ＸＩＸ）を得ることができる。このとき反応に用いられる溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエ−テル、トルエン等が挙げられる。反応温度は−８０℃から室温であり、好ましくは−７８℃〜−２５℃である。
（１５）工程１５（酸加水分解）
上記で得られた化合物（ＸＩＸ）を製造法３の工程８に記載した酸加水分解反応と同様の方法で化合物（ＸＸ）へ導くことができる。
（１６）工程１６（アセチル化）
上記で得られた化合物（ＸＸ）を製造法３の工程９に記載したアセチル化反応によって化合物（ＸＸＩ）へ導くことができる。
（１７）工程１７（還元）
上記で得られた化合物（ＸＸＩ）を製造法３の工程１０に記載した還元反応によって中間体（ＩＩ）へ導くことができる。
【００３３】
製造法４
中間体（ＩＩ）の製造法
中間体（ＩＩ）は以下に示す別ルートによって合成することもできる。ここでは、工程１８から２０までワンポットで行い工程数を短縮することができる。
【００３４】
ここで、記号は前記と同義である。
【００３５】
【化５】
0005532138.tif 000006
（１８）工程１８（カップリング）
化合物（ＸＸＩＩ）にｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム等の有機金属試薬を用いてアリ−ルリチウム試薬を調製することができる。これに、グルコノラクトン（Ｘ）を加えることで化合物（ＸＸＩＩＩ）を得ることができる。このとき反応に用いられる溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエ−テル、トルエン等が挙げられる。反応温度は−８０℃から室温であり、好ましくは−７８℃〜−２５℃である。
（１９）工程１９（シリル化）
上記工程１８に引き続いて、化合物（ＸＸＩＩＩ）の１位水酸基をトリメチルシリル基等のシリル基で保護することができる。工程１８の反応液に、トリメチルシリルクロリドを反応させ、化合物（ＸＸＩＶ）を得ることができる。反応に用いる溶媒および反応温度は、工程１８と同じである。
（２０）工程２０（カップリング）
上記工程１９に引き続いて、生成した化合物（ＸＸＩＶ）にｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム等の有機金属試薬を用いてアリ−ルリチウム試薬を調製することができる。これに、アルデヒド（ＸＶＩＩＩ）を加えることで化合物（ＸＸＶ）を得ることができる。このとき反応に用いられる溶媒および反応温度は、工程１８と同じである。
（２１）工程２１（酸加水分解）
上記で得られた化合物（ＸＸＶ）を製造法３の工程８に記載した酸加水分解反応によって化合物（ＸＸＶＩ）へ導くことができる。
（２２）工程２２（アセチル化）
上記で得られた化合物（ＸＸＶＩ）を製造法３の工程９に記載したアセチル化反応によって化合物（ＸＸＶＩＩ）へ導くことができる。
（２３）工程２３（還元）
上記で得られた化合物（ＸＸＶＩＩ）を製造法３の工程１０に記載した還元反応によって化合物（ＸＸＶＩＩＩ）へ導くことができる。
（２４）工程２４（アルキル化）
化合物（ＸＸＶＩＩＩ）の水酸基を、メチル化することで、中間体（ＩＩ）を製造することができる。化合物（ＸＸＶＩＩＩ）と、ヨウ化メチルを溶媒中、適当な塩基存在下反応させ、中間体（ＩＩ）を得ることができる。反応に用いる溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトン等が挙げられる。塩基としては炭酸カリウム、炭酸セシウム等を用いることができる。
【００３６】
参考例１  中間体（Ａ）の製造
【化６】
0005532138.tif 000007
【００３７】
（１）工程１  化合物（Ａ１）
【化７】
0005532138.tif 000008
【００３８】
３−イソプロピルフェノール（２５．０ｇ，０．１８４ｍｏｌ）の酢酸（２００ｍＬ）溶液にヨウ素酸カリウム（７．８８ｇ，０．０３６８ｍｏｌ）の水懸濁液（７５ｍＬ）とヨウ素（１８．７ｇ，０．０７３６ｍｏｌ）を加え、この反応溶液を室温で２０時間攪拌した。ジエチルエーテル（４００ｍＬ）と水（３００ｍＬ）を加えた後に有機層を分離した。その有機層を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−(ヘキサン：酢酸エチル＝９５：５)にて精製し、無色油状の２−ヨード−５−イソプロピルフェノール（２７．６ｇ，５７％）を得た。
1H NMR (200 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.16 - 1.25 (m, 6 H) 2.64 - 2.98 (m, 1 H) 5.21 (s, 1 H) 6.57 (dd, J=8.13, 2.20 Hz, 1 H) 6.88 (d, J=2.20 Hz, 1 H) 7.54 (d, J=8.13 Hz, 1 H).
【００３９】
２−ヨード−５−イソプロピルフェノール（２７．４ｇ，０．１０４ｍｏｌ）と炭酸カリウム（２１．７ｇ，０．１５６ｍｏｌ）のアセトニトリル懸濁液（２００ｍＬ）にヨウ化メチル（９．８ｍＬ，０．１５６ｍｏｌ）を加え４０℃で２．５時間攪拌した。ヨウ化メチル（３．５ｍＬ，０．０５２ｍｏｌ）を更に加え、同温で１時間攪拌した。不溶物をろ過し、ろ液を酢酸エチルで希釈した。有機層を水、１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−(ヘキサン→ヘキサン：酢酸エチル＝９５：５)にて精製し、淡黄色油状の化合物（Ａ１）（２４．５ｇ，８５％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.24 (d, J=6.84 Hz, 6 H) 2.87 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.88 (s, 3 H) 6.58 - 6.65 (m, 1 H) 6.70 (d, J=1.87 Hz, 1 H) 7.65 (d, J=8.08 Hz, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 277[M+H]+.
【００４０】
（２）工程２  化合物（Ａ２）
【化８】
0005532138.tif 000009
【００４１】
化合物（Ａ１）（２４．５ｇ，８８．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下、−７８℃にて２．６Ｍ  ｎ−ブチルリチウムへキサン溶液（３４ｍＬ，８８．６ｍｍｏｌ）を滴下し、同温にて５分間攪拌した。次いで２，３，４，６−テトラ−Ｏ−トリメチルシリル−Ｄ−グルコノ−１，５−ラクトン（３７．６ｇ，８０．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（６０ｍＬ）溶液を２５分かけて滴下し、同温にて１０分間攪拌した。反応液に氷と水を加え、混合物を室温まで温めた後に、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。
【００４２】
得られた残渣をメタンスルホン酸（１．５５ｇ，１６．１ｍｍｏｌ）を含むメタノール（３８０ｍＬ）溶液に溶解し、室温で２時間攪拌した。トリエチルアミン（１１．２ｍＬ，８０．５ｍｍｏｌ）で中和し、反応混合物を濃縮した。
【００４３】
得られた残渣（３０．２ｇ）をピリジン（１００ｍＬ）に溶解し、無水酢酸（１００ｍＬ）を加え、室温で１４時間攪拌した。氷水（４００ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を１Ｍ塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（ヘキサン→ヘキサン：酢酸エチル＝６：４）にて精製し、淡黄色油状の化合物（Ａ２）（３２．８ｇ，８０％；３工程）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.23 (d, J=6.92 Hz, 6 H) 1.84 (s, 3 H) 1.97 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.10 (s, 3 H) 2.87 (sept, J=6.92 Hz, 1 H) 3.32 (s, 3 H) 3.87 (s, 3 H) 4.04 (ddd, J=10.18, 4.74, 2.41 Hz, 1 H) 4.17 - 4.23 (m, 1 H) 4.28 - 4.36 (m, 1 H) 5.25 (dd, J=10.18, 9.40 Hz, 1 H) 5.36 (d, J=10.18 Hz, 1 H) 5.60 (dd, J=10.18, 9.40 Hz, 1 H) 6.74 (d, J=1.55 Hz, 1 H) 6.79 (dd, J=8.08, 1.55 Hz, 1 H) 7.26 - 7.33 (m, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 533[M+Na]+.
【００４４】
（３）工程３  化合物（Ａ３）
【化９】
0005532138.tif 000010
【００４５】
化合物（Ａ２）（３２．８ｇ，６４．０ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１５０ｍＬ）とアセトニトリル（１５０ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下、４℃にてＥｔ3ＳｉＨ（２１ｍＬ，１２８ｍｍｏｌ）とＢＦ3・ＯＥｔ2（４９ｍＬ，３８５ｍｍｏｌ）を加え、同温で１時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出後、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）にて精製し、淡黄色ガム状の化合物（Ａ３）（２２．９ｇ，７４％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.22 (d, J=6.96 Hz, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.07 (s, 3 H) 2.87 (sept, J=6.96 Hz, 1 H) 3.80 - 3.87 (m, 1 H) 3.84 (s, 3 H) 4.09 - 4.16 (m, 1 H) 4.22 - 4.29 (m, 1 H) 4.88 - 4.95 (m, 1 H) 5.18 - 5.27 (m, 1 H) 5.32 - 5.38 (m, 2 H) 6.71 (d, J=1.55 Hz, 1 H) 6.83 (dd, J=7.93, 1.55 Hz, 1 H) 7.23 - 7.30 (m, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 503[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 515[M+Cl]−.
【００４６】
（４）工程４  化合物（Ａ４）
【化１０】
0005532138.tif 000011
【００４７】
化合物（Ａ３）（２２．９ｇ，４７．６ｍｍｏｌ）の酢酸（９０ｍＬ）溶液に、臭素（２．４ｍＬ，４７．６ｍｍｏｌ）を室温にて滴下した。反応混合液を１時間攪拌し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（４００ｍＬ）に注いだ。この混合物を酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機層を１０％食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（ヘキサン：酢酸エチル＝３：２）にて精製し、化合物（Ａ４）（２５．５ｇ，９６％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.20 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.23 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.80 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.09 (s, 3 H) 3.31 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.77 - 3.82 (m, 1 H) 3.83 (s, 3 H) 4.10 - 4.17 (m, 1 H) 4.22 - 4.30 (m, 1 H) 4.83 (d, J=9.48 Hz, 1 H) 5.17 - 5.38 (m, 3 H) 6.75 (s, 1 H) 7.49 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 581[M+Na]+, 583[M+2+Na]+.
【００４８】
（５）工程５  化合物（Ａ５）
【化１１】
0005532138.tif 000012
【００４９】
化合物（Ａ４）（２５．５ｇ，４５．６ｍｍｏｌ）のメタノール（１００ｍＬ）溶液に、ナトリウムメトキシド（４．８８Ｍ / ＭｅＯＨ，０．４７ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で２時間攪拌し、ドライアイスを加えて中和した後に、溶媒を減圧下留去した。
【００５０】
得られた残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１３５ｍＬ）に溶解し、窒素雰囲気下４℃にてトリエチルアミン（４５ｍＬ，３１９ｍｍｏｌ）とクロロトリメチルシラン（３５ｍＬ，２７４ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温にて２時間攪拌し、氷水（３００ｍＬ）を加えた。この混合物をトルエンで３回抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、油状の化合物（Ａ５）（３２．２ｇ）を得た。これを精製せずに次の反応に用いた。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm -0.32 (s, 9 H) 0.09 (s, 9 H) 0.18 (s, 9 H) 0.20 (s, 9 H) 1.19 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.23 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 3.26 - 3.44 (m, 3 H) 3.52 - 3.58 (m, 2 H) 3.65 - 3.75 (m, 1 H) 3.76 - 3.83 (m, 1 H) 3.80 (s, 3 H) 4.60 (d, J=8.55 Hz, 1 H) 6.72 (s, 1 H) 7.51 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 701[M+Na]+, 703[M+2+Na]+.
【００５１】
（６）工程６  化合物（Ａ６）
【化１２】
0005532138.tif 000013
【００５２】
化合物（Ａ５）（３０．３ｇ，４４．５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下、−７８℃にて２．６Ｍ  ｎ−ブチルリチウムへキサン溶液（１６．９ｍＬ，４４．５ｍｍｏｌ）を３分かけて滴下し、同温にて１０分間攪拌した。次いで４−ブロモ−２−メチルベンズアルデヒド（９．７ｇ，４９．０ｍｍoｌ）のＴＨＦ溶液を１５分かけて滴下し、同温にて１５分間攪拌した。反応液に水（１００ｍＬ）を加えた。この混合物を室温まで温めた後に、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。
【００５３】
得られた残渣をメタンスルホン酸（０．８５５ｇ）を含むメタノール（２００ｍＬ）溶液に溶解し、室温で０．５時間攪拌した。トリエチルアミンで中和し、反応混合物を濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（クロロホルム：メタノール＝１０：１→８：１）で精製し、無色アモルファスの化合物（Ａ６）（１４．７ｇ，６０％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.23 and 1.25 (each d, J=6.84 Hz, 6 H) 1.80 (s, 2 H) 2.27 and 2.29 (each s, 3 H) 2.30 - 2.58 (m, 2 H) 2.82 - 3.06 (m, 2 H) 3.34 and 3.35 (each s, 3 H) 3.38 - 3.86 (m, 6 H) 4.56 - 4.73 (m, 1 H) 5.53 (d, J=3.11 Hz, 1 H) 6.75 - 7.35 (m, 5 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 493[M-OH]+, 495[M+2-OH]+
【００５４】
（７）工程７  中間体（Ａ）
【化１３】
0005532138.tif 000014
【００５５】
化合物（Ａ６）（１４．７ｇ，２８．７ｍｍｏｌ）をピリジン（９０ｍＬ）に溶解した。この溶液に無水酢酸（４５ｍＬ）を加え、室温で１５時間攪拌した。氷水（５００ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を２Ｍ  塩酸、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、粗生成物を得た。
【００５６】
この粗生成物（１７．５ｇ）のクロロホルム（１２５ｍＬ）とアセトニトリル（１２５ｍＬ）溶液に、窒素雰囲気下、４℃にてＥｔ3ＳｉＨ（５．８ｍＬ，３６．５ｍｍｏｌ）とＢＦ3・ＯＥｔ2（４．６ｍＬ，３６．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を０．５時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出後、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）にて精製し、無色アモルファスの中間体（Ａ）（１４．２ｇ，８８％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.11 (d, J=6.68 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.68 Hz, 3 H) 1.75 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.28 (s, 3 H) 2.90 (sept, J=6.68 Hz, 1 H) 3.71 - 3.90 (m, 3 H) 3.86 (s, 3H) 4.05 - 4.15 (m, 1 H) 4.19 - 4.28 (m, 1 H) 4.77 - 4.85 (m, 1 H) 5.11 - 5.23 (m, 1 H) 5.26 - 5.37 (m, 2 H) 6.54 (d, J=8.24 Hz, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.17 (dd, J=8.24, 2.64 Hz, 1 H) 7.32 (d, J=2.64 Hz, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 685[M+Na]+, 687[M+2+Na]+．
【００５７】
参考例２  中間体（Ａ）の製造
３−イソプロピルフェノール（１６０ｇ，１．１８ｍｏｌ）の酢酸（１．６Ｌ）溶液に、氷冷で内温１９℃を超えないように臭素（４６９ｇ，２．９４ｍｏｌ）の酢酸（３２０ｍＬ）溶液を３２分かけて滴下し、室温で１時間攪拌した。トルエン（１．６Ｌ）を加えた後に氷冷し、内温２０℃を超えないように１０％亜硫酸ナトリウム水溶液（１．０Ｌ）を滴下して有機層を分離した。その有機層を１０％亜硫酸ナトリウム水溶液（１．０Ｌ）、１０％食塩水（１．０Ｌ）で２回洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、淡黄色油状の２，４−ジブロモ−５−イソプロピルフェノール（３４２ｇ，９９％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.21 (d, J=6.84 Hz, 6 H) 3.25 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 5.40 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.61 (s, 1 H).
【００５８】
２，４−ジブロモ−５−イソプロピルフェノール（５１２ｇ，１．７４ｍｏｌ）のクロロホルム（１．７４Ｌ）溶液に、Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３６４ｍＬ，２．０９ｍｏｌ）を加えて氷冷した。クロロメチルメチルエーテル（１５９ｍＬ，２．０９ｍｏｌ）を６０分かけて滴下し、室温で１時間攪拌した。反応液を氷冷し、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１．５Ｌ）を滴下して有機層を分離した。その有機層を１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１．５Ｌ）、水（１．５Ｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣を減圧蒸留（０．９３〜１．５ｈｐａ，１２２℃〜１３７℃）にて精製し、淡黄色油状の１,５−ジブロモ−２−イソプロピル−４−（メトキシメトキシ）ベンゼン（５４８ｇ，９６％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.22 (d, J=6.84 Hz, 6 H) 3.28 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.52 (s, 3 H) 5.23 (s, 2 H) 7.06 (s, 1 H) 7.69 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 339[M+H]+, 341[M+2+H]+.
【００５９】
次に、１,５−ジブロモ−２−イソプロピル−４−（メトキシメトキシ）ベンゼン（２００ｇ，０．５９２ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２．８４Ｌ）溶液に、アルゴン雰囲気下−８０〜−７６℃にて２．６９Ｍ  ｎ−ブチルリチウムへキサン溶液（２３１ｍＬ，０．６２１ｍｏｌ）を２０分かけて滴下し、同温にて３５分間攪拌した。次いで２，３，４，６−テトラ−Ｏ−トリメチルシリル−Ｄ−グルコノ−１，５−ラクトン（２９０ｇ，０．６２１ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（８００ｍＬ）溶液を５５分かけて滴下し、同温にて５０分間攪拌した。さらにトリメチルクロロシラン（７５．７ｍＬ，０．６２１ｍｏｌ）を１５分かけて滴下し、同温にて２時間撹拌した。次いで２．６９Ｍ  ｎ−ブチルリチウムへキサン溶液（３１９ｍＬ，０．８５８ｍｏｌ）を２９分かけて滴下し、同温にて４０分間攪拌した。最後に４−ブロモ−２−メチルベンズアルデヒド（１３０ｇ，０．６５１ｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（８００ｍＬ）溶液を５４分かけて滴下し、同温にて３０分間撹拌した。反応液に水（２.８５Ｌ）を加えて室温まで温めた。トルエン（２．０Ｌ）を加えて有機層を分離し、溶媒を減圧下留去した。
【００６０】
得られた残渣（５４６ｇ）をメタノール（３．０Ｌ）に溶解し、メタンスルホン酸（３．８４ｍＬ，０．０５９２ｍｏｌ）を加えて１．５時間加熱還流を行った。反応液を室温まで冷却後、トリエチルアミン（２５ｍＬ，０．１７９ｍｏｌ）で中和し、反応混合物を濃縮した。濃縮物をトルエン（１．０Ｌ）に溶解し、水（０．５Ｌ、１．０Ｌ）で洗浄した。その有機層に１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（０．６Ｌ）とトルエン（１．０Ｌ）を加えて抽出操作を行い、水層を分離した。その水層をトルエン（０．５Ｌ）で洗浄した。水層に１０％塩酸（０．７Ｌ）を加えてトルエン（１．０Ｌ）にて抽出した。その有機層を１０％食塩水(１．０Ｌ)、水（０．５Ｌ）で洗浄し、溶媒を減圧下留去した。
【００６１】
得られた残渣（３１４ｇ）をピリジン（１．０Ｌ）に溶解し、無水酢酸（０．８Ｌ，８．５１ｍｏｌ）を加え、室温で１８時間攪拌した。反応液を氷冷して氷（１．５Ｌ）とトルエン（１．０Ｌ）を加え３時間攪拌した。有機層を分離後、水層をトルエン(１．０Ｌ)で抽出した。合わせた有機層を２Ｍ塩酸（１．５Ｌ）で２回、５％炭酸水素ナトリウム水溶液（１．０Ｌ）、１０％食塩水（１．０Ｌ）で洗浄し、溶媒を減圧下留去した。
【００６２】
得られた残渣（３５０ｇ）をアセトニトリル（３．４Ｌ）に溶解し、水（９．１ｍＬ，０．５０６ｍｏｌ）、Ｅｔ３ＳｉＨ（３２８ｍＬ，２．０５ｍｏｌ）を加え、氷冷下ＴＭＳＯＴｆ（４０３ｍＬ，２．２３ｍｏｌ）を８５分かけて滴下した。同温で２時間撹拌後、３％炭酸水素ナトリウム水溶液（１．９２Ｌ）を４０分かけて滴下し、反応溶液をトルエン（１．０Ｌ）で希釈し１５分攪拌した後、有機層を分離した。水層をトルエン（１．５Ｌ）で抽出した。合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１．５０Ｌ）、で洗浄し、溶媒を減圧下留去して無色液状の化合物（Ａ７）（３９２ｇ）を得た。
【００６３】
【化１４】
0005532138.tif 000015
【００６４】
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.09 - 1.19 (m, 6 H) 1.69 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.12 (s, 3 H) 2.25 (s, 3 H) 2.80 - 2.97 (m, 1 H) 3.66 - 3.96 (m, 3 H) 4.08 - 4.35 (m, 2 H) 4.42 - 4.57 (m, 1 H) 5.19 - 5.37 (m, 3 H) 6.52 (s, 1 H) 6.57 (d, J=8.1 Hz, 1 H) 6.87 (s, 1 H) 7.12 - 7.20 (m, 1 H) 7.30 - 7.33 (m, 1 H)．
【００６５】
化合物（Ａ７）（３９２ｇ，０．５０６ｍｏｌ）と炭酸カリウム（７３．４ｇ，０．５３１ｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．９５Ｌ）懸濁液にヨウ化メチル（３３ｍＬ，０．５３ｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）溶液を滴下した。反応を１時間攪拌した後、炭酸カリウム（７０．０ｇ，０．５０６ｍｏｌ）、ヨウ化メチル（３１．５ｍＬ，０．５０６ｍｏｌ）を加え１時間攪拌した。再び炭酸カリウム（７０．０ｇ，０．５０６ｍｏｌ）、ヨウ化メチル（３１．５ｍＬ，０．５０６ｍｏｌ）を加え１時間攪拌した。ヨウ化メチル（１５．８ｍＬ，０．２５４ｍｏｌ）を加え、室温で終夜攪拌した。５０℃で２時間攪拌した後、トルエン（１．２５Ｌ）で希釈、水（１．０Ｌ）を加えた。２層を分離し、有機層を水（１．０Ｌ）で２回、１０％食塩水（１．０Ｌ）で洗浄し、減圧下濃縮した。残渣にイソプロピルアルコール（３５０ｍＬ）を加え４０℃に加熱して溶解し、室温で攪拌した。得られた沈殿物を濾別、乾燥し中間体（Ａ）（１５５ｇ，４６％）を白色粉末として得た。
【００６６】
参考例３  中間体（Ｂ）の製造
【化１５】
0005532138.tif 000016
【００６７】
（１）工程１  化合物（Ｂ１）
【化１６】
0005532138.tif 000017
【００６８】
２，２−ジメチル−３−ブテノイックアシッド（J. Org. Chem., 第65巻, 8402頁，2000年）（５．４２ｇ，４７．５ｍｍｏｌ）のクロロホルム（２５０ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下、塩化オキサリル（４．４３ｍＬ，４９．９ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３滴）を加え、室温で１．５時間攪拌した。その後反応液を氷冷し、トリエチルアミン（１９．９ｍＬ，１４３ｍｍｏｌ）とα−アミノイソブチリックアシッドメチルエステル塩酸塩（１０．９ｇ，７１．２ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出後、有機層を３Ｍ塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（ヘキサン→ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）にて精製し、無色粉末の化合物（Ｂ１）（９．３８ｇ，９３％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.27 (s, 6 H) 1.51 (s, 6 H) 3.73 (s, 3 H) 5.17 - 5.32 (m, 2 H) 6.02 (dd, J=17.56, 10.57 Hz, 1 H) 6.25 (br. s., 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 214[M+H]+.
【００６９】
（２）工程２  中間体（Ｂ）
【化１７】
0005532138.tif 000018
【００７０】
化合物（Ｂ１）（９．３８ｇ，４３．９ｍｍｏｌ）のメタノール（２０ｍＬ）溶液に４Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１６．５ｍＬ，６６．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。その後、反応混合物を濃縮した。得られた残渣を水に溶解し、３Ｍ塩酸を加えて中和した。この混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、無色粉末の中間体（Ｂ）（８．１９ｇ，９４％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.29 (s, 6 H) 1.54 (s, 6 H) 5.16 - 5.36 (m, 2 H) 6.01 (dd, J=17.49, 10.65 Hz, 1 H) 6.14 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 200[M+H]+, 222[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 198[M-H]−.
【００７１】
参考例４  中間体（Ｃ）の製造
【化１８】
0005532138.tif 000019
【００７２】
２−（（ベンジルオキシカルボニル）アミノ）−２−メチルプロピオン酸（１０．０ｇ，４２．２ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２００ｍＬ）溶液に、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１２ｍＬ，５５．３ｍｍｏｌ）、炭酸アンモニウム（４．０ｍＬ，５０．６ｍｍｏｌ）およびピリジン（２．６ｍＬ，３２．１ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を室温で３時間攪拌し、これを濃縮した。得られた固体を水で洗浄、乾燥し無色の粉末（９．８ｇ）を得た。この粉末（５．０ｇ）をメタノール（１００ｍＬ）に溶解し、５％  Ｐｄ−Ｃ（０．５ｇ）を加えた。この混合物を水素雰囲気下で３．５時間攪拌した。反応液をセライト（登録商標）濾過後、溶媒を減圧下留去し、中間体（Ｃ）（１．７ｇ）を得た。
1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δppm 1.15 (s, 6 H) 1.64 - 1.95 (brs, 2 H) 6.68 - 6.93 (brs, 1 H) 7.11 - 7.40 (brs, 1 H)．
実施例１  化合物（Ｉ）の合成
【００７３】
（１）工程１  化合物（１−１）
【化１９】
0005532138.tif 000020
【００７４】
アルゴン雰囲気下、中間体（Ａ）（２．０ｇ，３．０ｍｍｏｌ）、中間体（Ｂ）（１．０８ｇ，５．４ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（１３６ｍｇ，０．６０ｍｍｏｌ）、トリ-ｏ-トリルホスフィン（３７０ｍｇ，１．２０ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．２６ｍＬ，９．００ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０ｍＬ）懸濁液を、マイクロウェーブ照射下１２０℃で２０分間攪拌した。反応液をセライト（登録商標）ろ過し、酢酸エチルで洗浄した。ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１→酢酸エチル）にて精製し、淡黄色粉末の化合物（１−１）（２．０３ｇ，８７％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.17, 1.14 (each d, J=6.99 Hz, 3 H) 1.38 (s, 6 H) 1.55 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.98 (s, 3 H) 2.04 (s, 6 H) 2.30 (s, 3 H) 2.94 - 3.03 (m, 1 H) 3.76 - 3.83 (m, 1 H) 3.84 - 3.95 (m, 4 H) 4.06 - 4.15 (m, 1 H) 4.16 - 4.25 (m, 1 H) 4.74 - 4.89 (m, 1 H) 5.12 - 5.20 (m, 1 H) 5.23 - 5.35 (m, 2 H) 6.29 (s, 1H) 6.31 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.52 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.67 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.94 (s, 1 H) 7.06 - 7.14 (m, 1 H) 7.24 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 782[M+H]+, 804[M+Na]+ .
MS ESI/APCI Dual nega : 780[M-H]−.
【００７５】
（２）工程２  化合物（１−２）
【化２０】
0005532138.tif 000021
【００７６】
中間体（１−１）（１００ｍｇ，０．１２８ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ・Ｈ２Ｏ（２９．４ｍｇ，０．１９２ｍｍｏｌ）、２８％アンモニア（２３．３ｍｇ，０．３８４ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．２ｍＬ）溶液にＥＤＣ−ＨＣｌ（３６．８ｍｇ，０．１９２ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５時間攪拌した。反応液を水（５０ｍＬ）にあけ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（クロロホルム→クロロホルム：メタノール＝９：１）で精製し、無色アモルファスの化合物（１−２）（５８ｍｇ，５８％）を得た。
1H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δppm 1.10 - 1.17 (m, 6 H) 1.38 (s, 6 H) 1.52 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.32 (s, 3 H) 2.95 (sept, J=6.9 Hz, 1 H) 3.76 - 3.95 (m, 6 H) 4.08 - 4.14 (m, 1 H) 4.18 - 4.26 (m, 1 H) 4.79 - 4.85 (m, 1 H) 5.13 - 5.22 (m, 1 H) 5.27 - 5.36 (m, 2 H) 6.29 (d, J=16.3 Hz, 1 H) 6.51 (d, J=16.3 Hz, 1 H) 6.66 (d, J=7.9 Hz, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.98 (s, 1 H) 7.09 (dd, J=7.9, 1.4 Hz, 1 H) 7.23 (d, J=1.4 Hz, 1 H)．
【００７７】
（３）工程３  化合物（Ｉ）
【化２１】
0005532138.tif 000022
【００７８】
化合物（１−２）（５２ｍｇ，０．０６６ｍｍｏｌ）のメタノール（０．５ｍＬ）溶液にナトリウムメトキシド（４．８８Ｍ / ＭｅＯＨ，１５μＬ）を加え、室温で０．５時間攪拌した。ドライアイスを少量加えて、反応液を中和し、溶媒を減圧下留去した。
【００７９】
得られた残渣をＮＨ型シリカゲルカラムクロマトグラフィ−（クロロホルム：メタノール＝８５：１５）で精製し、無色アモルファスの化合物（Ｉ）（４０ｍｇ，９８％）を得た。
1H NMR (600 MHz, METHANOL-d4) δppm 1.13 - 1.16 (m, 6 H) 1.35 (s, 6 H) 1.50 (s, 6 H) 2.32 (s, 3 H) 2.95 - 3.03 (m, 1 H) 3.32 - 3.38 (m, 2 H) 3.44 - 3.48 (m, 1 H) 3.49 - 3.54 (m, 1 H) 3.59 - 3.63 (m, 1 H) 3.80 - 3.86 (m, 4 H) 3.91 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.6 Hz, 1 H) 6.37 (d, J=16.0 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=16.0 Hz, 1 H) 6.74 (d, J=7.8 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.07 (s, 1 H) 7.11 (d, J=7.8 Hz, 1 H) 7.25 (s, 1 H) 7.29 (s, 1 H)．
MS ESI/APCI Dual posi : 613[M+H]+, 635[M+Na]+.
MS ESI/APCI Dual nega : 611[M-H]-, 647[M+Cl]-.
【００８０】
実施例２    化合物（Ｉ）の合成
工程１  化合物（２−１）
【化２２】
0005532138.tif 000023
【００８１】
アルゴン雰囲気下、中間体（Ａ）（１００ｇ，０．１５１ｍｏｌ）、２，２−ジメチル−３−ブテノイックアシッド（２５．８ｇ，０．２２６ｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（３．３９ｇ，１５．１ｍｍｏｌ）、トリ-ｏ-トリルホスフィン（９．１６ｇ，３０．１ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（６３ｍＬ）のアセトニトリル（３００ｍＬ）懸濁液を、３時間加熱還流した。反応液を室温まで冷却した後にクロロホルム（３００ｍＬ）とメタノール（１００ｍＬ）を加えて希釈し、セライト（登録商標）ろ過した。ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣を酢酸エチル（１．３２Ｌ）に溶解させた。１Ｍ塩酸（０．９６Ｌ）、１０％食塩水（１．２Ｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、ろ液にイソプロピルアミン（１３．０ｍＬ，０．１５１ｍｏｌ）を加え、室温から０℃にかけて１時間撹拌した。析出した沈殿をろ過して中間体（２−１）のイソプロピルアミン塩を得た。この塩を酢酸エチル（１．２Ｌ）、１Ｍ塩酸（５００ｍＬ）に溶解させて３０分間撹拌し、有機層を分離した。その有機層を１０％食塩水（５００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去して無色のアモルファスとして化合物（２−１）（１１３ｇ）を得た。
1H NMR (600 MHz, CHLOROFORM-d) δppm 1.12 (d, J=6.9 Hz, 3 H) 1.13 (d, J=6.9 Hz, 3 H) 1.43 (s, 6 H) 1.75 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.02 - 2.07 (m, J=1.8 Hz, 6 H) 2.29 (s, 3 H) 2.85 - 3.02 (m, 1 H) 3.77 - 3.81 (m, 1 H) 3.81 - 3.91 (m, 5 H) 4.08 - 4.13 (m, 1 H) 4.21 (dd, J=12.2, 4.4 Hz, 1 H) 4.79 (br. d, J=8.3 Hz, 1 H) 5.17 (t, J=9.6 Hz, 1 H) 5.27 - 5.36 (m, 2 H) 6.35 (d, J=16.3 Hz, 1 H) 6.43 (d, J=16.3 Hz, 1 H) 6.64 (d, J=8.3 Hz, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.95 (s, 1 H) 7.06 (dd, J=8.0, 1.6 Hz, 1 H) 7.21 (br. s, 1 H)．
【００８２】
（２）工程２  化合物（１−２）
【化２３】
0005532138.tif 000024
【００８３】
化合物（２−１）（１１３ｇ，０．１５１ｍｏｌ）、中間体（Ｃ）（２３．２ｇ，０．２２７ｍｏｌ）、ＨＯＢｔ・Ｈ２Ｏ（３４．７ｇ，０．２２７ｍｏｌ）、のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（０．７９Ｌ）溶液にＥＤＣ−ＨＣｌ（４３．４ｇ，０．２２６ｍｏｌ）を加え、室温で２４時間攪拌した。反応液にトルエン（１．０Ｌ）と１０％食塩水（２．０Ｌ）を加え、有機層を分離した。水層をトルエン（１．０Ｌ）から抽出し、合わせた有機層を５％食塩水（１．０Ｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−（クロロホルム：メタノール＝８０：２０）で精製し、淡黄色アモルファスの化合物（１−２）（１０８ｇ，９２％）を得た。
【００８４】
（３）工程３  化合物（Ｉ）の合成
【化２４】
0005532138.tif 000025
【００８５】
化合物（１−２）（１０７ｇ，０．１３７ｍｏｌ）をメタノール（０．５Ｌ）に溶解し、氷冷後トリエチルアミン（０．１Ｌ）、水（０．１Ｌ）を加えた。室温で２０時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、メタノールで共沸した。得られた残渣をメタノール（０．３Ｌ）に溶解し、水（０．４Ｌ）を加えて、攪拌した。得られた残渣をろ過し、水で洗浄、乾燥し無色粉末の化合物（Ｉ）（７０ｇ，８３％）を得た。
【００８６】
化合物（Ｉ）は粉末Ｘ線回折（Ｃｕ−Ｋα）において、２θ＝１１．５０度、１６．１０度及び２０．８４度にピークを有した。また、融点は１３５℃であった。
【００８７】
試験例１
（１）ヒトＳＧＬＴ１を安定に発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞の作製
ヒトＳＧＬＴ１蛋白質を発現するプラスミドベクターを、リポフェクトアミン２０００（インビトロジェン社）を用いてＣＨＯ−Ｋ１細胞にトランスフェクションした。ＳＧＬＴ１発現細胞は、５００μｇ／ｍＬの濃度のジェネティシンの存在下で培養し耐性株を選択し、下記に示す系により糖取り込み能を指標に取得した。
（２）ヒトＳＧＬＴ２を安定に発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞の作製
ヒトＳＧＬＴ２蛋白質を発現するプラスミドベクターを、リポフェクトアミンＬＴＸ（インビトロジェン社）を用いてＣＨＯ−Ｋ１細胞にトランスフェクションした。ＳＧＬＴ２発現細胞は、１０００μｇ／ｍＬの濃度のジェネティシンの存在下で培養し耐性株を選択し、下記に示す系により糖取り込み能を指標に取得した。
（３）安定発現細胞におけるナトリウム依存的糖取り込み阻害試験
上記で調製した安定発現細胞を用いて下記試験を行った。
【００８８】
前処理用緩衝液（１４０ｍＭ  塩化コリン、２ｍＭ  ＫＣｌ、１ｍＭ  ＣａＣｌ２、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／５ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ７．４）を安定発現細胞に加え、２０分間インキュベーションした。前処理用緩衝液を除去し、試験化合物を含む取り込み用緩衝液（［14Ｃ］メチル  α−Ｄ−グルコピラノシドを含むメチル  α−Ｄ−グルコピラノシド（１ｍＭ）、１４５ｍＭ  ＮａＣｌ、２ｍＭ  ＫＣｌ、１ｍＭ  ＣａＣｌ２、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／５ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ７．４）を加え、３７℃にて３０分（ＳＧＬＴ１）または６０分（ＳＧＬＴ２）取り込み反応を行った。反応後細胞を洗浄用緩衝液（１０ｍＭ  メチル  α−Ｄ−グルコピラノシド、１４０ｍＭ  塩化コリン２ｍＭ  ＫＣｌ、１ｍＭ  ＣａＣｌ２、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ／５ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ７．４）で２回洗浄し、０．２５Ｍ  ＮａＯＨ溶液に溶かした。液体シンチレーター（パーキンエルマー社）を加えよく混和した後、β線測定装置を用いて放射活性を測定した。対照群として試験化合物を含まない取り込み用緩衝液を調製した。また基礎取り込み用としてＮａＣｌに代えて塩化コリンを含む取り込み用緩衝液を調製した。
【００８９】
ＩＣ50値を求めるにあたり、適当な６濃度の試験化合物を用い、対照群の糖取り込み量（１００％）に対し、糖取り込み量が５０％阻害される試験化合物濃度（ＩＣ50値）を算出した。化合物（I）の試験結果を表１に示す。
【００９０】
【表１】
0005532138.tif 000026
【００９１】
試験例２
（１）国際特許公開ＷＯ２００７／１３６１１６号パンフレット記載の化合物４、１０、１１、３３経口投与後１週間までの腎臓中濃度推移
７週齢のＳＤ／ＩＧＳラット（日本チャールスリバー株式会社，雄性，非絶食）に、０．５％ＣＭＣ水溶液にて調製した化合物４、１０、３３（各１ｍｇ／ｋｇ）、および化合物１１（０．３ｍｇ／ｋｇ）を経口投与した。薬物投与後２４、７２、１６８時間にエーテル麻酔下、後大静脈より全採血し、安楽死確認後に腎臓を摘出した。生理食塩液で組織表面を洗浄後、重量を測定し４倍量の精製水を加え氷冷下ホモジナイズした。ホモジネートに内標準物質を含むアセトニトリル／メタノール溶液を加えて除タンパクした後、上清をＬＣ−ＭＳ／ＭＳ（アプライドバイオシステムズAPI3000）に供した。ポジティブイオンモードのエレクトロスプレーイオン化法にて生成した薬物由来のイオンを選択反応モニタリングにて検出した。得られた抽出イオンクロマトグラムのピーク面積から内標準法にてホモジネート中薬物濃度を算出した。
【００９２】
ここで、化合物１０および３３の内部標準物質には、（１Ｓ）−１，５−アンヒドロ−１−［５−（４−エトキシベンジル）−２−メトキシ−４−メチルフェニル］−１−チオ−Ｄ−グルシトール，エチル−Ｄ５を用い、化合物４および１１の内部標準物質には、化合物１１および化合物１１重水素標識体（トリスヒドロキシメチル−Ｄ６；−Ｃ（ＣＤ２ＯＨ）３）をそれぞれ用いた。
実験結果を表２に示す。
【００９３】
（２）本発明の化合物（Ｉ）の３日間反復経口投与後の腎臓中濃度
７週齢のＳＤ／ＩＧＳラット（日本チャールスリバー株式会社，雄性，非絶食）に、０．５％ＣＭＣ水溶液にて調製した本発明の化合物（Ｉ）（３ｍｇ／ｋｇ）を１日１回３日間連続経口投与した。最終日の薬物投与後４８時間にイソフルラン麻酔下、後大静脈より全採血し、安楽死確認後に腎臓を摘出した。生理食塩液で組織表面を洗浄後、重量を測定し４倍量の精製水を加え氷冷下ホモジナイズした。ホモジネート中薬物濃度の測定は、上記に示した試験例２の（１）と同じ方法で、内部標準物質に上記の化合物１１を用い、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより行った。
実験結果を表３に示す。
【００９４】
試験例３  ストレプトゾトシン糖尿病モデルラットにおける血糖値上昇抑制作用確認試験
（１）糖尿病モデルラットの作製
７週齢のＳＤ／ＩＧＳラット（日本チャールスリバー株式会社，雄性）について約１６時間の絶食後、エーテル麻酔下でストレプトゾトシン（ＳＴＺ）５０ｍｇ／ｋｇを尾静脈内投与し、糖尿病モデルラットを作製した。同様にエーテル麻酔下、１．２５ｍｍｏｌ／Ｌクエン酸生理食塩液１ｍＬ／ｋｇを尾静脈内投与し、正常対照ラットを作製した。ＳＴＺまたは１．２５ｍｍｏｌ／Ｌクエン酸生理食塩液投与１週後（８週齢）、経口グルコース負荷試験に供した。
（２）経口グルコース負荷試験
ラットを約１６時間の絶食後、薬物投与群には、０．５％カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ）水溶液に溶解した薬物（１ｍｇ／ｋｇ）を、対照群には０．５％ＣＭＣ水溶液のみ経口投与した。薬物投与５分後に、グルコース溶液（２ｇ／ｋｇ）を経口投与し、薬物投与前（０ｔｉｍｅ）、及び、経口投与０．２５、０．５、１、２時間後の計５点で採血した。
【００９５】
採血は、エーテル麻酔下でラット尾静脈よりヘパリンコート採血管を用いて行い、遠心分離後、血漿を分取した。血漿中グルコース濃度の定量は、グルコースＣIIテストワコー（和光純薬株式会社）を用いて測定した。血糖値上昇抑制作用強度は、各薬物投与群の０から1時間までの血糖値より台形法を用いて血糖値-時間曲線下面積（ＡＵＣ）を算出し、basalを差し引いた血糖増加面積（ΔＡＵＣ）として表記し、対照群のそれに対する降下の割合で表記した。
結果を表２及び表３に示す。
【００９６】
【表２】
0005532138.tif 000027
【００９７】
国際特許公開ＷＯ２００７／１３６１１６号パンフレットに開示の化合物４、１０、１１および３３の構造を、下記に示す。
【００９８】
【化２５】
0005532138.tif 000028
【００９９】
【表３】
0005532138.tif 000029
【０１００】
ＷＯ２００７／１３６１１６号に開示の化合物は１ｍｇ／ｋｇ経口投与後の糖負荷試験において、強い血糖低下作用を示した。しかし、１ｍｇ／ｋｇ経口投与した後、腎臓中から化合物の消失速度が緩慢で、７日後でも化合物は排泄されず腎臓に残留する傾向が見られた（表２）。
【０１０１】
一方、本発明の化合物（Ｉ）は上記先行技術化合物と同様に強い血糖降下作用を有した。また、３ｍｇ／ｋｇの用量で３日間連続投与したにも関わらず、投与２日後に意外にも化合物は腎臓に残留しないという特徴を示した（表３）。
【０１０２】
この相違の原因として、本発明化合物は、体内に吸収された場合に腎臓に残留されずにすみやかに排泄されたと考えられる。
【０１０３】
したがって、本発明の化合物は、体内残留性がなく、連続投与による副作用及び毒性が少ない医薬品として実用性に優れた性質を有する。
【産業上の利用可能性】
【０１０４】
本発明により、ＳＧＬＴ１阻害活性が強く、かつ体内残留性のない食後高血糖改善薬を提供することができ、ＳＧＬＴ１活性を阻害することによって、食後高血糖に由来する疾患に対する有効な治療・予防の提供に貢献することを通じて、人類の健康の増進に寄与し、健全な医薬品産業の発達を図ることができる。