(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
アクネ菌（Propionibacterium acnes）に対する抗菌作用のための、局所皮膚外用剤におけるネコノヒゲ（Orthosiphon stamineus）の抽出物の使用。
【請求項２】
上記抽出物が水、低級アルコール及び液状多価アルコールの1種、2種または3種以上から選択される溶媒を使用して抽出されることを特徴とする、請求項1記載の使用。
【請求項３】
上記ネコノヒゲの抽出物が0.001〜10重量％の量で使用されることを特徴とする、請求項1または2記載の使用。
【請求項４】
局所皮膚外用剤がビンロウ（Areca catechu）の抽出物も含有することを特徴とする、請求項1〜3のいずれか1項記載の使用。
【請求項５】
局所皮膚外用剤が化粧品であることを特徴とする、請求項1〜4のいずれか1項記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、特定の植物の抽出物を配合することにより、皮膚の老化防止、肌荒れ及びニキビ改善作用に優れた皮膚外用剤に関する。
【背景技術】
【０００２】  近年、生体成分を酸化させる要因として、フリーラジカルや活性酸素がとりあげられ、その悪影響が問題となっている。フリーラジカルや活性酸素は生体内で生じ、コラーゲン等の生体組織を分解あるいは架橋し、また、油脂類を酸化して、細胞に障害を与える過酸化脂質をつくると言われている。この様な障害は肌のしわやハリが低下する等の老化の原因になると考えられており、老化を防ぐ方法の一つにフリーラジカルや活性酸素を除去する抗酸化剤を配合する方法が知られている。従来、老化防止を目的として用いられるフリーラジカル消去剤にはアスコルビン酸（ビタミンＣ）、トコフェロール（ビタミンＥ）や3,5-tert-ブチル-4-ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、スーパーオキシドジスムターゼ（ＳＯＤ）等が用いられてきた。【０００３】  また、ヒアルロニダーゼは、炎症時に活性化され、高分子のヒアルロン酸を低分子化することにより、皮膚のハリが低下してしわ等の老化を引き起こすことが知られている。【０００４】  肌荒れの一因として紫外線等による皮膚炎症があり、その炎症を沈め、肌荒れを改善する皮膚外用剤が望まれている。その治療法の一つとして、炎症時に生じる起炎物質であるヒスタミンの遊離を抑制する方法がある。従来、肌荒れの治療にはステロイド剤やインドメタシンなどを外用する処置が行われてきた。【０００５】  ニキビ、吹き出物は、皮脂腺内の微生物代謝産物が炎症や皮膚の硬化を誘導することが一因とされ、その治療には、抗菌剤としてサリチル酸等を含む皮膚外用剤が用いられる。
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】  皮膚の老化防止又は抗酸化を目的として用いられるビタミンＣやＳＯＤは不安定であり、製剤化が難しく、ビタミンＥも効果が充分であるとは言えない。また、合成化合物であるＢＨＴ等は安全性に問題があり、配合量に制限があることから、化学合成品ではなく、安定でかつ副作用の少ない天然原料が望まれている。同様に、従来よりヒスタミン遊離抑制剤として用いられるステロイド等は、副作用の危険性があるため、安全性が高く、効果の優れた天然物由来の皮膚外用剤が望まれている。また併せて、安全で安定なヒアルロニダーゼ阻害作用及び抗菌作用を有することが好ましい。以上のことから、安全で安定性に優れた皮膚の老化防止、肌荒れ及びニキビ改善作用に優れた多機能な皮膚外用剤が望まれている。
【課題を解決するための手段】
【０００７】  この様な事情により、本発明者らは鋭意研究を重ねた結果、ネコノヒゲとビンロウの抽出物が、活性酸素消去作用、ヒスタミン遊離抑制作用、ヒアルロニダーゼ阻害作用及び抗菌作用に優れ、安定性においても優れていることを見出した。さらに、ネコノヒゲとビンロウから一種又は二種選ばれる抽出物を含有する皮膚外用剤が、安全であり、皮膚の老化防止、肌荒れ及びニキビ改善作用に優れていることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００８】  すなわち、本発明は、ネコノヒゲ及び／又はビンロウの抽出物を含有することを特徴とする皮膚外用剤である。
【０００９】  本発明で用いるネコノヒゲ（学名：Orthosiphon staminium Benth）は、シソ科の植物である。ビンロウ（学名：Areca catebu L.）は、ヤシ科の植物である。これらは主に東南アジアに分布し、生薬として広く使用されている。
【００１０】  本発明で用いるネコノヒゲの抽出物は、上記の葉、茎、花、根等の植物体の一部又は全草から抽出したものであるが、特に限定されるものではなく、目的に応じて適宜選択すれば良い。抽出方法は特に限定されず、例えば、加熱して抽出したものであっても良いし、常温で抽出したものであっても良い。
【００１１】  本発明で用いるビンロウの抽出物は、上記の葉、茎、樹皮、果実等の植物体の一部又は二つ以上の部位を併せて抽出したものであるが、特に限定されるものではなく、目的に応じて適宜選択すれば良い。抽出方法は特に限定されず、例えば、加熱して抽出したものであっても良いし、常温で抽出したものであっても良い。
【００１２】  抽出する溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、1-プロパノール、2-プロパノール、1-ブタノール、2-ブタノール、1-ヘプタノール、2-ヘプタノール等）、液状多価アルコール（プロピレングリコール、グリセリン、1,3-ブチレングリコール等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル類（エチルエーテル、プロピルエーテル、テトラヒドロフラン等）が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール及び液状多価アルコール等の極性溶媒が良く、特に好ましくは、水、エタノール、プロピレングリコール及び1,3-ブチレングリコールが良い。これらの溶媒は一種でも二種以上を混合して用いても良い。
【００１３】  上記抽出物は、抽出した溶液のまま用いても良く、必要に応じて、濃縮、希釈、濾過等の処理をして用いても良い。更には、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いても良い。
【００１４】  本発明の皮膚外用剤には、上記抽出物をそのまま使用しても良く、抽出物の効果を損なわない範囲内で、通常の外用剤に用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、pH調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、キレート剤等の成分を配合することもできる。
【００１５】  本発明の皮膚外用剤は、化粧品、医薬部外品及び医薬品のいずれにも用いることができ、その剤型としては、例えば、化粧水、クリーム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、軟膏、パップ剤、エッセンス、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデーション、打粉、口紅等の皮膚に適用されるものが挙げられる。
【００１６】  本発明に用いる上記抽出物の配合量は、本発明の皮膚外用剤全量に対し、固形物に換算して0.0001重量％以上、好ましくは0.001〜10重量％が良い。0.0001重量％未満では十分な効果は望みにくい。10重量％を越えて配合した場合、効果の増強はみられにくく不経済である。また、添加の方法については、予め加えておいても、製造途中で添加しても良く、作業性を考えて適宜選択すれば良い。
【実施例】
【００１７】  次に本発明を詳細に説明するため、実施例として本発明に用いる抽出物の製造例、本発明の処方例及び実験例を挙げるが、本発明はこれに限定されるものではない。実施例に示す配合量の部とは重量部を示し、％は重量％を示す。【００１８】  製造例１  ネコノヒゲの熱水抽出物
ネコノヒゲ全章の乾燥物20gに精製水400mLを加え、95〜100℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してネコノヒゲの熱水抽出物を2.4g得た。【００１９】  製造例２  ネコノヒゲの50％エタノール抽出物
ネコノヒゲ全草の乾燥物100gに精製水1kg及びエタノール1kgを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、ネコノヒゲの50％エタノール抽出物を6.4g得た。【００２０】  製造例３  ネコノヒゲの1,3-ブチレングリコール抽出物
ネコノヒゲ全草の乾燥物100gに1,3-ブチレングリコール1kgを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、ネコノヒゲの1,3-ブチレングリコール抽出物を900g得た。【００２１】  製造例４  ビンロウの熱水抽出物
ビンロウの種子の乾燥物20gを製造例１と同様に抽出してビンロウの熱水抽出物を1.8g得た。【００２２】  製造例５  ビンロウの50％エタノール抽出物
ビンロウの種子の乾燥物100gを製造例２と同様に抽出してピンロウの50％エタノール抽出物を8.1g得た。【００２３】  製造例６  ビンロウの1,3-ブチレングリコール抽出物
ビンロウの種子の乾燥物100gを製造例３と同様に抽出してビンロウの1,3-ブチレングリコール抽出物を900g得た。【００２４】  実施例１  クリーム１
処方                                                              配合量
1. ネコノヒゲの熱水抽出物（製造例１）                            1.0部
2. スクワラン                                                    5.5
3. オリーブ油                                                    3.0
4. ステアリン酸                                                  2.0
5. ミツロウ                                                      2.0
6. ミリスチン酸オクチルドデシル                                  3.5
7. ポリオキシエチレンセチルエーテル（20E.O.）                    3.0
8. ベヘニルアルコール                                            1.5
9. モノステアリン酸グリセリン                                    2.5
10. 香料                                                          0.1
11. 1,3-ブチレングリコール                                        8.5
12. パラオキシ安息香酸エチル                                      0.05
13. パラオキシ安息香酸メチル                                      0.2
14. 精製水にて全量を100とする
［製造方法］成分2〜9を加熱溶解して混合し、70℃に保ち油相とする。成分 1及び11〜14を加熱溶解して混合し、75℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、45℃で成分10を加え、更に30℃まで冷却して製品とする。【００２５】  実施例２  クリーム２
実施例１において、ネコノヒゲの熱水抽出物をビンロウの熱水抽出物（製造例４）に置き換えたものをクリーム２とした。【００２６】  比較例１  従来のクリーム
実施例１において、ネコノヒゲの熱水抽出物を精製水に置き換えたものを従来のクリームとした。【００２７】  実施例３  化粧水
処方                                                              配合量
1. ネコノヒゲの50％エタノール抽出物（製造例２）                  0.1部
2. ビンロウの50％エタノール抽出物（製造例５）                    0.1
3. 1,3-ブチレングリコール                                        8.0
4. グリセリン                                                    2.0
5. キサンタンガム                                                0.02
6. クエン酸                                                      0.01
7. クエン酸ナトリウム                                            0.1
8. エタノール                                                    5.0
9. パラオキシ安息香酸メチル                                      0.1
10. ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（40E.O.）                      0.1
11. 香料                                                          適量
12. 精製水にて全量を100とする
［製造方法］成分1〜7及び12と、成分8〜11をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合し濾過して製品とする。【００２８】  実施例４  乳液
処方                                                              配合量
1. ネコノヒゲの1,3-ブチレングリコール抽出物（製造例３）          0.5部
2. スクワラン                                                    5.0
3. オリーブ油                                                    5.0
4. ホホバ油                                                      5.0
5. セタノール                                                    1.5
6. モノステアリン酸グリセリン                                    2.0
7. ポリオキシエチレンセチルエーテル（20E.O.）                    3.0
8. ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（20E.O.）          2.0
9. 香料                                                          0.1
10. プロピレングリコール                                          1.0
11. グリセリン                                                    2.0
12. パラオキシ安息香酸メチル                                      0.2
13. 精製水にて全量を100とする
［製造方法］成分2〜7を加熱溶解して混合し、70℃に保ち油相とする。成分 1及び10〜13を加熱溶解して混合し、75℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、45℃で成分9を加え、更に30℃まで冷却して製品とする。【００２９】  実施例５  ゲル剤
処方                                                              配合量
1. ビンロウの熱水抽出物（製造例４）                              0.05部
2. エタノール                                                    5.0
3. パラオキシ安息香酸メチル                                      0.1
4. ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（60E.O.）                      0.1
5. 香料                                                          適量
6. 1,3-ブチレングリコール                                        5.0
7. グリセリン                                                    5.0
8. キサンタンガム                                                0.1
9. カルボキシビニルポリマー                                      0.2
10. 水酸化カリウム                                                0.2
11. 精製水にて全量を100とする
［製造方法］成分2〜5と、成分1及び6〜11をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合して製品とする。【００３０】  実施例６  軟膏
処方                                                              配合量
1. ネコノヒゲの熱水抽出物（製造例１）                            1.0部
2. ネコノヒゲの1,3-ブチレングリコール抽出物（製造例３）          1.0
3. ポリオキシエチレンセチルエーテル（30E.O.）                    2.0
4. モノステアリン酸グリセリン                                    10.0
5. 流動パラフィン                                                5.0
6. セタノール                                                    6.0
7. パラオキシ安息香酸メチル                                      0.1
8. プロピレングリコール                                          10.0
9.精製水にて全量を100とする
［製造方法］成分3〜6を加熱溶解して混合し、70℃に保ち油相とする。成分1、2及び7〜9を加熱溶解して混合し、75℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら30℃まで冷却して製品とする。【００３１】  実施例７  パック
処方                                                              配合量
1. ビンロウの50％エタノール抽出物（製造例５）                    0.1部
2. ビンロウの熱水抽出物（製造例４）                              0.1
3. ポリビニルアルコール                                          12.0
4. エタノール                                                    5.0
5. 1,3-ブチレングリコール                                        8.0
6. パラオキシ安息香酸メチル                                      0.2
7. ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（20E.O.）                      0.5
8. クエン酸                                                      0.1
9. クエン酸ナトリウム                                            0.3
10. 香料                                                          適量
11. 精製水にて全量を100とする
［製造方法］成分1〜11を均一に溶解し製品とする。【００３２】  実施例８  ファンデーション
処方                                                              配合量
1. ビンロウの1,3-ブチレングリコール抽出物（製造例６）            1.0部
2. ステアリン酸                                                    2.4
3. ポリオキシエチレンソルビタンモノステアレート（20E.0.）          1.0
4. ポリオキシエチレンセチルエーテル（20E.0.）                      2.0
5. セタノール                                                      1.0
6. 液状ラノリン                                                    2.0
7. 流動パラフィン                                                  3.0
8. ミリスチン酸イソプロピル                                        6.5
9. パラオキシ安息香酸ブチル                                        0.1
10. カルボキシメチルセルロースナトリウム                            0.1
11. ベントナイト                                                    0.5
12. プロピレングリコール                                            4.0
13. トリエタノールアミン                                            1.1
14. パラオキシ安息香酸メチル                                        0.2
15. 二酸化チタン                                                    8.0
16. タルク                                                          4.0
17. ベンガラ                                                        1.0
18. 黄酸化鉄                                                        2.0
19. 香料                                                            適量
20. 精製水にて全量を100とする
［製造方法］成分2〜9を加熱溶解し、80℃に保ち油相とする。成分20に成分10をよく膨潤させ、続いて、成分1及び11〜14を加えて均一に混合する。これに粉砕機で粉砕混合した成分15〜18を加え、ホモミキサーで撹拌し75℃に保ち水相とする。この水相に油相をかき混ぜながら加え、冷却し、45℃で成分19を加え、かき混ぜながら30℃まで冷却して製品とする。【００３３】  実施例９  浴用剤
処方                                                                  配合量
1. ネコノヒゲの50％エタノール抽出物（製造例２）                    5.0部
2. 炭酸水素ナトリウム                                              50.0
3. 黄色202号(1)                                               適量
4. 香料                                                        適量
5. 無水硫酸ナトリウムにて全量を100とする
［製造方法］成分1〜5を均一に混合し製品とする。【００３４】  次に、本発明の効果を詳細に説明するため、実験例を挙げる。【００３５】  実験例１  活性酸素消去作用（抗酸化作用）
製造例１、２、４及び５の抽出物を試料として用い、活性酸素の一種であるスーパーオキシドの消去作用を測定した。陽性対照として、ＳＯＤを用いた。また、試料の安定性を確認するために、試料の水溶液を95℃で１時間加熱した液を使用して同様に測定を行った。【００３６】  活性酸素消去率の測定方法
各濃度の試料水溶液0.1mLに0.45mLの発色試薬（0.24mMニトロブルーテトラゾリウム、0.4mMキサンチンを含む0.1Mリン酸緩衝液；pH 8.0）と0.45mLの酵素液（0.1U/mLキサンチンオキシダーゼ）を加え、37℃で20分間反応させジホルマザンを生じさせた。この溶液に反応停止液（69mMドデシル硫酸ナトリウム水溶液）1.0mLを加えた後、波長560nmにおける吸光度（Ａt）を測定した。同様に酵素液の代わりにブランク液（0.1Mリン酸緩衝液；pH 8.0）を加えて反応させ、吸光度（Ａs）を測定した。一方、コントロールとして試料溶液の代わりに精製水を用いて同様に操作し、吸光度（Ｂｔ）及び（Ｂｓ）を測定した。各試料の活性酸素消去率は次式より算出した。
活性酸素消去率（％）＝〔１−（Ａｓ−Ａｔ）÷（Ｂｓ−Ｂｔ）〕×１００【００３７】  これらの試験結果を表１に示した。また、ＳＯＤは95℃で１時間加熱すると、活性酸素消作用が激減したが、製造例１、２に示すネコノヒゲの抽出物及び製造例４、５に示すビンロウの抽出物は、消去作用にほとんど変化はなかった。以上のことから、ネコノヒゲ及びビンロウの抽出物は、95℃の加熱にも安定で優れた活性酸素消去作用を示した。【００３８】
【表１】
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【００３９】  実験例２  ヒスタミン遊離抑制作用（抗炎症作用）
製造例１、２、４及び５の抽出物を試料として用い、雄性Spraque-Dawley系ラットの腹腔内から採取した肥満細胞を用いてヒスタミンの遊離を抑制する作用を測定した。すなわち、1μg/mLのコンパウンド48/80による肥満細胞からヒスタミンの遊離を抑制する作用を遊離抑制率として求めた。肥満細胞はSullivanらの方法〔J.Immunology,114,1473（1975）〕で採取し、ヒスタミンの定量はMayらの方法〔J.Allergy,46,12（1970)〕で行った。【００４０】  これらの試験結果を表２に示した。製造例１、２に示すネコノヒゲの抽出物及び製造例４、５に示すビンロウの抽出物には優れたヒスタミン遊離抑制作用が認められた。【００４１】
【表２】
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【００４２】実験例３  ヒアルロニダーゼ阻害作用（老化防止作用）
製造例１、２、４及び５の抽出物について、ヒアルロニダーゼ阻害作用をMorgan-Elson法を応用した方法〔食品衛生学雑誌,31,3（1990)〕に準じて測定した。すなわち、試料液に0.1M酢酸バッファ（ｐH 4.0）175mLを加え、さらにヒアルロニダーゼの酵素活性を400U/mL、ヒアルロン酸の濃度を0.4mg/mL、活性化剤のコンパウンド48/80を0.06mg/mLになるようにして全量を500mLに調整した後、ヒアルロニダーゼ反応を37℃で40分間実施した。反応後にp−ジメチルアミノベンズアルデヒド試薬を加えて発色させ、585nmの吸光度を測定した。また、各試料の阻害作用は、次の式から求められる阻害率で算出した。なお、対照には試料の代わりに精製水を用い、ブランクとしてヒアルロニダーゼの代わりに精製水を用いた。
阻害率（％）＝〔１−（Ｃ−Ｄ）／（Ａ−Ｂ）〕×１００
Ａ：対照の585nmにおける吸光度（O.D.585）
Ｂ：対照ブランクのO.D.585
Ｃ：試料のO.D.585
Ｄ：試料ブランクのO.D.585【００４３】  これらの試験結果を表３に示した。製造例１、２に示すネコノヒゲの抽出物及び製造例４、５に示すビンロウの抽出物には、優れたヒアルロニダーゼ阻害作用が認められた。【００４４】
【表３】
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【００４５】実験例４  抗菌試験
製造例１、２、４及び５の抽出物について、最小発育阻止濃度を、日本化学療法学会の改定法〔Chemotheraphy,29,76(1981)〕に準じて測定した。すなわち、各濃度の試料を含む試験培地に菌液を１白金耳塗沫した後、培養して菌生育の有無を確認した。試験菌は、ニキビ、吹き出物の原因となる黄色ブドウ球菌（Staphylococus aureus FDA209P）とアクネ菌（Propionibacterium acnes GA15419）を用いた。菌液の調製は、黄色ブドウ球菌についてはMueller-Hinton(ＭＨ)ブイヨンで、アクネ菌についてはＧＡＭブイヨンで、37℃、24時間増殖したものを用い、使用前に106個/mLになるように希釈調製した。また、試験培地及び培養条件は、黄色ブドウ球菌についてはＭＨ寒天を用いて、37℃、24時間とし、アクネ菌については嫌気下でＧＡＭ寒天を用いて37℃、48時間とした。【００４６】  これらの試験結果を表４に示した。製造例１、２に示すネコノヒゲの抽出物及び製造例４、５に示すビンロウの抽出物には、いずれも黄色ブドウ球菌及びアクネ菌に対して抗菌作用が認められた。【００４７】
【表４】
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【００４８】  実験例５  使用試験１
実施例１のクリーム１、実施例２のクリーム２及び比較例１の従来のクリームを用いて、各々女性30人（30〜45才）を対象に１ヶ月間の使用試験を行った。使用後、肌のうるおい、ハリ及びしわの改善作用を総合的に判断するアンケート調査を行った。【００４９】  その結果、本発明の皮膚外用剤は、肌のうるおい、ハリ及びしわの改善に関して優れた効果用を示した（表５）。なお、試験期間中、皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問題なかった。また、処方成分の劣化についても問題なかった。【００５０】
【表５】
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【００５１】  実施例３の化粧水、実施例４の乳液、実施例５のゲル剤、実施例６の軟膏、実施例７のパック、実施例８のファンデーション及び実施例９の浴用剤についても使用試験を行ったところ、安全であり、肌のうるおい、ハリ及びしわの改善作用に優れていた。【００５２】  実験例６  使用試験２
実施例１のクリーム１、実施例２のクリーム２及び比較例１の従来のクリームを用いて、ニキビ、吹き出物に悩む女性30人（20〜40才）を対象に１ヶ月間の使用試験を行った。使用後、ニキビ、吹き出物の改善作用を総合的に判断するアンケート調査を行った。【００５３】  その結果、本発明の皮膚外用剤は、ニキビ、吹き出物の改善に関して優れた作用を示した（表６）。なお、試験期間中、皮膚トラブルは一人もなく、安全性においても問題なかった。また、処方成分の劣化についても問題なかった。【００５４】
【表６】
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【００５５】  実施例３の化粧水、実施例４の乳液、実施例５のゲル剤、実施例６の軟膏、実施例７のパック、実施例８のファンデーション及び実施例９の浴用剤についても使用試験を行ったところ、安全であり、ニキビ、吹き出物の改善作用に優れていた。
【発明の効果】
【００５６】  以上のことから、本発明のネコノヒゲ及びビンロウの抽出物は、優れた活性酸素消去作用、ヒスタミン遊離抑制作用、ヒアルロニダーゼ阻害作用及び抗菌作用があり、安定性に優れていた。さらに、これらの抽出物を含有する皮膚外用剤は、安全であり、皮膚の老化防止、肌荒れ及びニキビ改善作用に優れていた。