(57)【特許請求の範囲】
【請求項１】
（Ａ）少なくともヒドロキシアルキルキトサン、および／または生理学的に許容されるそれらの塩、および
（Ｂ）少なくとも以下の式：
ＲＯＣ−（ＣＨ2）n−ＣＯＲ、
を有するジカルボン酸アミド
（式中、
ｎは、４から１０であり、
Ｒは、−Ｎ（Ｒ’）（Ｒ”）基であり、但し
Ｒ’は、ＨまたはＣ1〜Ｃ4アルキル基であり、
Ｒ”は、Ｈ、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基、またはＣ1〜Ｃ4カルボキシ基である）、および／または生理学的に許容されるその塩を、
含有することを特徴とする組成物。
【請求項２】
前記ｎが、６から８であることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記ｎが、７であることを特徴とする請求項１に記載の組成物。
【請求項４】
前記ヒドロキシアルキルキトサンは、水溶性であることを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記ヒドロキシアルキルキトサンは、ヒドロキシプロピルキトサンであることを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記ヒドロキシアルキルキトサン、および／またはジカルボン酸アミドの生理学的に許容される塩は、ナトリウムおよび／またはカリウム塩であることを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記ジカルボン酸は、アゼライン酸であることを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記Ｃ1〜Ｃ4アルキル基は、メチルおよび／またはエチルであり、前記Ｃ1〜Ｃ4カルボキシ基は、カルボキシメチルであることを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記ジカルボン酸アミドは、アゼロイルジグリシンであることを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記ジカルボン酸アミド塩は、カリウムアゼロイルジグリシネートであることを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
成分（Ａ）は、組成物全体の重量に対して０．１から１０％の量で存在することを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
成分（Ａ）は、組成物全体の重量に対して０．２から５％の量で存在することを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
成分（Ａ）は、組成物全体の重量に対して０．２５から２．０％の量で存在することを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
成分（Ｂ）は、組成物の全体の重量に対して０．１から３０％の量で存在することを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
成分（Ｂ）は、組成物の全体の重量に対して０．２５から２５％の量で存在することを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１６】
成分（Ｂ）は、組成物の全体の重量に対して０．５から２０重量％の量で存在することを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１７】
溶液、懸濁液、ローション、エマルジョン、コロイド、クリーム、またはゲルを含めた、液体、半液体、または半個体の形態をとることを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１８】
医薬品としておよび／または化粧品として許容される、活性成分、添加物、アジュバント、および／または担体を含有することを特徴とする請求項１から３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１９】
酒さの治療および／または予防用であることを特徴とする請求項１〜１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２０】
毛細血管拡張症症の治療および／または予防用であることを特徴とする請求項１〜１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２１】
下肢毛細血管拡張症の治療および／または予防用であることを特徴とする請求項１〜１８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２２】
クーペローゼの治療および／または予防用であることを特徴とする請求項１〜１８のいずれか一項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、酒さ疾患（Rosacea）、皮膚の慢性炎症状態、およびクーペローゼ（ｃｏｕｐｅｒｏｓｅ）や下肢毛細血管拡張症のような毛細血管拡張症によって特徴付けられるその他の皮膚状態を保護するのに有用な、顔およびその他の患部の皮膚に塗布した後に被膜を形成する薬剤、または医療デバイス、または衛生用品、または化粧品を作製するための、キトサン、キトサン誘導体、または生理学的に許容されるそれらの塩と、短〜中鎖ジカルボン酸アミド、または生理学的に許容されるその塩とを含有する組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
酒さ疾患は、世界中で１３００万人以上が罹患していると推定される、一般的ではあるがしばしば誤解される状態である（非特許文献１参照）。酒さ疾患は、ケルトまたは北欧系の白色人種に影響を及ぼし、「ケルトの呪い（ｃｕｒｓｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｃｅｌｔｓ）」と命名されている。アメリカ系およびアフリカ系の黒人のような浅黒い皮膚の人種では、非常にまれである。
【０００３】
酒さ疾患は、顔の中心で、および頬、鼻、または額の全体にわたって紅斑（フラッシングおよび発赤、「クーペローゼ」とも呼ばれる）として始まるが、首および胸にはごくまれにしか影響を及ぼさない。酒さ疾患が進行するにつれて、半永久的紅斑、毛細血管拡張症（顔面の表在血管の拡張）、赤色ドーム丘疹（ｒｅｄ  ｄｏｍｅｄ  ｐａｐｕｌｅｓ）（小疱）および膿疱、眼の充血およびゴロゴロ感（ｒｅｄ  ｇｒｉｔｔｙ  ｅｙｅｓ）、灼熱感および刺すような感覚などのその他の症状と、いくらか進行した症例では赤く分葉した鼻（ｒｅｄ  ｌｏｂｕｌａｔｅｄ  ｎｏｓｅ）（鼻瘤）が生ずる可能性がある。この疾患は、尋常性座そうおよび／または脂漏性皮膚炎と混同されまた共存する可能性がある。酒さ疾患は、男女両方に影響を及ぼすが、女性のほうがほぼ３倍も一般的であり、３０代および４０代で一般的になり、４０歳から５０歳の間でピークに達する。頭皮または耳に発疹が存在することは、酒さ疾患が主に顔面に関して診断されるので、これとは異なるかまたは共存する診断があることを示唆している。
【０００４】
酒さ疾患の病因はわかっておらず、様々な要因がこの状態の一因となることが疑われている。様々な要因の中で、下記のものが、ある役割を演じていると主張されている：フラッシング、毛細血管拡張症、紅斑をもたらす小血管拡張を引き起こす、血管周囲／血管コラーゲンの変性変化；潜在的に炎症性の物質の、血管周囲漏出；サイトカインおよびその他のメディエーターに対する異常組織応答；局所薬物の使用（コルチコステロイド）。両極端の温度に曝されると、激しい運動、日光からの熱、深刻な日焼け、冷風、低温環境から高温環境への移動と同様に、顔面が紅潮する可能性がある。フラッシングを誘発する可能性があるいくつかの食物および飲料も存在し、それらには、アルコール、カフェイン（熱い紅茶およびコーヒー）、および香辛料入りの食物が含まれる。ニキビダニ（Ｄｅｍｏｄｅｘ  ｆｏｌｌｉｃｕｌｏｒｕｍ）、ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ）、または座そう菌（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｃｎｅｓ）のような微生物も、酒さ疾患の発症の一因となり、または酒さ疾患を悪化させることが主張されている。
【０００５】
酒さ疾患の治療は確定していない。全身または局所治療薬には、抗生剤、メトロニダゾール、および抗真菌剤、レチノイド、いくつかのβ遮断薬、スピロノラクトンが含まれる。簡略な治療はまだ提示されておらず、ごくわずかな症例でしか症状の永久的な寛解には至らないので、生涯にわたる対症療法がしばしば必要となる。酒さ疾患の長期治療は、薬物固有の毒性によって制限される。
【０００６】
下肢毛細血管拡張症は、内径が０、１、および１ｍｍの非常に細い静脈瘤性毛管にあり、これらは以下のように分類される：
１）静脈不全のその他の臨床的徴候を伴う、静脈不全に起因した毛細血管拡張症。この症状は、足の後方、果後部、下肢、および大腿内表面に局在化する。
２）大腿内表面および前外側大腿表面に局在化する、ホルモンの異常に起因した毛細血管拡張症。これらの症状は、初経、更年期、妊娠、または避妊治療の下で自然に起こる。
３）主に下肢の遠位部分での、毛細血管系の体質的な虚弱性に起因した、非常に細い毛細血管拡張症。この症状は、ＵＶ放射線と、高温および低温によって誘発される。
４）マッティング（ｍａｔｔｉｎｇ）型毛細血管拡張症
５）網状の静脈瘤性血管：この血管は、ほとんどの場合、毛細血管拡張症に関連ある領域に向けた栄養血管である。
【０００７】
下肢毛細血管拡張症のための満足のいく治療は存在せず、唯一可能な治療は美容整形手術である。
【０００８】
したがって、化学的および物理的傷害を著しく受け易い皮膚を保護するための、安全で有効な医療ツールに対する、満たされない要求がある。
【０００９】
キトサンおよびその誘導体は、異なる製剤でのその使用が当技術分野で知られている、甲殻類の外骨格から抽出されたキチン由来のアミノ−多糖である。特許文献１には、タンパク質またはペプチドを分離するための担体として有用な小球体の成分として、キトサンを開示しており、特許文献２においては、有効成分としてパラフィン蝋を含む、皮膚マッサージ用のパック組成物の成分として、キトサンを報告しており、特許文献３には、ボツリヌス毒素のゲル様またはスポンジ状製剤の成分として、しわの治療薬を得るための、キトサンの使用について教示している。特許文献４においては、空洞充填創傷ドレッシングに有用なヒドロゲルの成分として、キトサン誘導体について報告している。特許文献５には、多孔質のスポンジ状の質感を有する担体シートの成分として、高い脱アセチル化度を有するキトサンの組成物について教示している。特許文献６には、ナノサイズ繊維の網状構造の形態でキトサンを含む組成物を開示する。特許文献７には、長期化にわたり薬物を保持する規則的なラメラ構造を有する、キトサンの多層化空隙シートを開示しており、特許文献８には、皮膚に塗布する薬物中の分散安定剤または乳化剤として使用することができる、両親媒性キトサン誘導体について教示している。最後に、特許文献９には、少なくとも１種の抗真菌剤およびヒドロキシアルキルまたはカルボキシアルキルキトサンを含有するマニキュア液組成物を開示しており、一方、特許文献１０には、ヒドロキシプロピルキトサンと組み合わせたトクサ属（ｇｅｎｕｓ  Ｅｑｕｉｓｅｔｕｍ）からの１種のハーブエキスをベースにした、爪再構成組成物を開示している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】韓国特許公開第２００２００８４６７２号
【特許文献２】韓国特許公開第２００２００４８５３４号
【特許文献３】特開２００５−３０６７４６号公報
【特許文献４】国際公開第２００５／０５５９２４号
【特許文献５】特開２００４−２３１６０４号公報
【特許文献６】国際公開第０３／０４２２５１号
【特許文献７】国際公開第０２／０５７９８３号
【特許文献８】特開平１１−０６０６０５号公報
【特許文献９】欧州特許第１３０３２４９号明細書
【特許文献１０】国際公開第２００４／１１２８１４号
【非特許文献】
【００１１】
【非特許文献１】Plewig & Jansen: Fitzpatrick's Dermatology in General Medicine. Freedberg et al. Eds., 6thed., McGRAW-HILL pub., NY 2003, p.688
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１２】
本発明は、クーペローゼ、酒さ疾患、および下肢毛細血管拡張症における、顔およびその他の患部の皮膚を保護するのに有用な、皮膚に塗布した後に被膜を形成する組成物を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
驚くべきことに、キトサンまたはその誘導体と、少なくとも短〜中鎖（６から１２個の炭素原子）脂肪族ジカルボン酸のアミドとを含有する製剤は、塗布し乾燥した後に、化学的または物理的傷害から皮膚を保護するのに適した弾性被膜を皮膚表面に形成することができることを、ついに見出した。被膜の２成分、糖質性および脂質性の成分は、相乗的な方法で作用し、２成分のみの場合よりも優れた保護活性を有する。
【００１４】
本発明による被膜形成組成物は、皮膚表面に容易に噴霧することができ、弾性被膜を素早く乾燥し容易に形成することによって、油っぽい皮膚の煩わしい感覚が回避される。本発明による被膜形成組成物は、穏やかにマッサージすることによって皮膚に塗布してもよい。乾燥後に形成された被膜は、高温および低温による傷害から皮膚を保護し、紫外線に起因した炎症を低減し、それをコーティングしその生体機能を阻害することによって微生物の成長を防止する。
【００１５】
したがって本発明の目的は、
（Ａ）少なくともキトサン、キトサン誘導体、および／または生理学的に許容されるそれらの塩、および
（Ｂ）少なくともＣ6〜Ｃ12ジカルボン酸アミド、および／または生理学的に許容されるその塩を、
含有する医薬品および／または化粧品組成物によって表される。
【００１６】
前記組成物は、皮膚表面に塗布し乾燥した後に被膜を形成するのに有用であり、酒さ疾患、並びに毛細血管拡張症によって特徴付けられるその他の皮膚状態の影響を受ける、顔面およびその他の領域の皮膚を保護する。
【００１７】
キトサン誘導体の中でも、水溶性キトサンが好ましく、ヒドロキシプロピルキトサンなどのヒドロキシアルキルキトサンが、最も好ましい水溶性キトサン誘導体である。
【００１８】
Ｃ6〜Ｃ12ジカルボン酸の中で、Ｃ8〜Ｃ10ジカルボン酸が特に好ましく、Ｃ9ジカルボン酸が最も好ましく、追加の好ましい実施形態によれば、そのようなジカルボン酸は直鎖状および／またはアルキル酸である。
【００１９】
本発明の目的で使用されるＣ6〜Ｃ12ジカルボン酸アミドは、好ましくは下式：
ＲＯＣ−（ＣＨ2）n−ＣＯＲ
によって表され、式中、
「ｎ」は、４から１０までの間を含み、好ましくは６から８までの間、より好ましくは、ｎは７であり、
Ｒは、−Ｎ（Ｒ’）（Ｒ”）基であり、但し
Ｒ’はＨまたはＣ1〜Ｃ4アルキル基であり、
Ｒ”はＨ、Ｃ1〜Ｃ4アルキル基、またはＣ1〜Ｃ4カルボキシ基である。
【００２０】
好ましい実施形態によれば、前記Ｃ1〜Ｃ4アルキル基がメチルまたはエチルであるのに対し、前記Ｃ1〜Ｃ4カルボキシ基はカルボキシメチルである。
【００２１】
好ましいＣ6〜Ｃ12ジカルボン酸は、アゼライン酸である。したがって、Ｃ6〜Ｃ12ジカルボン酸の中では、アゼロイルジグリシンなどのアゼライン酸アミドが好ましく、これらは塩、好ましくは、カリウムアゼロイルジグリシネートなどのナトリウムまたはカリウムの塩の形態をとってもよい。
【００２２】
本発明による組成物は、皮膚表面で穏やかなマッサージによって塗布してもよく、または、乾燥後に弾性被膜を形成させることによって、噴霧してもよい。本発明による組成物は、塗布後何時間にもわたる、皮膚の長続きする密接な接触と皮膚の連続保護とを可能にする。
【００２３】
本発明による組成物は、その含量が成分Ａにおいて０．１から１０重量％（重量％は全製剤に対して与えられる）、好ましくは０．２から５重量％、より好ましくは０．２５から２．０重量％であり、またその含量が成分Ｂにおいて０．１から３０重量％（重量％は全製剤に対して与えられる）、好ましくは０．２５から２５重量％、より好ましくは０．５から２０重量％である溶液、懸濁液、ローション、エマルジョン、コロイド、クリーム、ゲルを含む、液体、半液体、または半固体製剤の形態をとる。
【００２４】
本発明による組成物は、均一で目に見えない被膜を残すことから、従来の製剤よりも優れている。さらに、本発明による組成物は、汚れず、ゲルおよびローションがそうであるように乾燥せず、その他の硬質被膜製剤がそうであるような塗布したときの煩わしい感覚が生じない。
【００２５】
医薬品組成物は、適合性ある添加物、アジュバント、および／または医薬品としてもしくは化粧品として許容される担体を使用して、従来の技法によって調製され、相補的なまたはどんな場合でも有用な活性を有するその他の活性成分と組み合わせて含有していてもよい。
【００２６】
本発明により調製されたこれらの組成物の例には、罹患した皮膚に塗布するための、溶液、エマルジョン、懸濁液、コロイド、クリーム、ゲルが含まれる。
【００２７】
本発明による組成物は、溶媒、日焼け止め、スキンコンディショナー、皮膚軟化剤、保湿剤、乳化剤、増粘剤、ＵＶ−Ａフィルタ、植物エキス、抗酸化剤から選択された１種または複数の追加の成分を含有してもよい。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
次に、本発明の医薬品組成物および使用について、以下の実施例によってより十分に記述する。しかし、そのような実施例は、例として示されており、限定するものではないことに留意すべきである。
【実施例１】
【００２９】
下記のｗ／ｗ％組成を有する水中油クリームを調製した。
１．カリウムパルミトイル加水分解小麦タンパク質    １．００％
２．ステアリン酸グリセリル                        ２．００％
３．セテアリルアルコール                          ２．００％
４．ステアリン酸グリセリルＳＥ                    １．００％
５．ジカプリリルエーテル                          ４．００％
６．メトキシケイ皮酸エチルヘキシル                ４．００％
７．ブチルメトキシジベンゾイルメタン              １．００％
８．レシチン                                      ０．０２％
９．トコフェロール                              ０．００１％
１０．パルミチン酸アスコルビル                  ０．００１％
１１．クエン酸                                  ０．００１％
１２．酢酸トコフェリル                            ０．５０％
１３．精製水                                    ８１．００％
１４．ヒドロキシプロピルキトサン                  ０．５０％
１５．キサンタンガム                              ０．５０％
１６．変性エチルアルコール                        １．００％
１７．フェネチルアルコール                        ０．５０％
１８．カプリリルグリコール                        ０．５０％
１９．カリウムアゼロイルジグリシネート            ０．５０％
【００３０】
調製
相Ａ：ヒドロキシプロピルキトサンを、透明な溶液が得られるまで、水全体に対して約５０重量％、分散させた。溶液を６５℃±２℃で加熱し、キサンタンガムを添加し、均質な溶液が得られるまで撹拌した。
【００３１】
相Ｂ：カリウムパルミトイル、ステアリン酸グリセリル、セテアリルアルコール、ステアリン酸グリセリルＳＥ、ジカプリリルエーテル、メトキシケイ皮酸エチルヘキシル、ブチルメトキシジベンゾイルメタン、レシチン、トコフェロール、パルミチン酸アスコルビル、クエン酸、および酢酸トコフェリルを一緒に混合し、６５℃±２℃で加熱した。
【００３２】
相Ｂを、撹拌（ターボ）しながら相Ａに添加して乳化させた。得られたエマルジョンを、連続的に混合しながら３５℃±２℃に冷却した。
【００３３】
カプリリルグリコールをフェネチルアルコールに溶解したもの、カリウムアゼロイルジグリシネートを残りの精製水に溶解したもの（５０重量％）、およびエチルアルコールを、調製の終わりにエマルジョンに混合した。生成物を、均質な水中油クリームが得られるまで、穏やかな撹拌状態に保った。
【実施例２】
【００３４】
下記のｗ／ｗ％組成を有する水中油クリームを調製した。
１．カリウムパルミトイル加水分解小麦タンパク質    ３．００％
２．ステアリン酸グリセリル                        ５．００％
３．セテアリルアルコール                          ５．００％
４．ステアリン酸グリセリルＳＥ                    ３．００％
５．ジカプリリルエーテル                          ６．００％
６．メトキシケイ皮酸エチルヘキシル                ６．００％
７．ブチルメトキシジベンゾイルメタン              ３．００％
８．レシチン                                      ０．０４％
９．トコフェロール                                ０．０１％
１０．パルミチン酸アスコルビル                    ０．０１％
１１．クエン酸                                    ０．０１％
１２．酢酸トコフェリル                            １．００％
１３．精製水                                    ５９．９３％
１４．ヒドロキシプロピルキトサン                  １．００％
１５．キサンタンガム                              １．００％
１６．変性エチルアルコール                        ３．００％
１７．フェネチルアルコール                        １．００％
１８．カプリリルグリコール                        １．００％
１９．カリウムアゼロイルジグリシネート            １．００％
【００３５】
調製
製剤を、実施例１に関して述べたものと同じ方法を使用することにより、調製した。
【実施例３】
【００３６】
下記のｗ／ｗ％組成を有する水中油クリームを調製した。
１．カリウムパルミトイル加水分解小麦タンパク質    ２．００％
２．セテアリルアルコール                          ５．００％
３．ステアリン酸グリセリルＳＥ                    ３．００％
４．ジカプリリルエーテル                          ５．００％
５．メトキシケイ皮酸エチルヘキシル                ４．００％
６．レシチン                                      ０．０４％
７．パルミチン酸アスコルビル                      ０．０１％
８．クエン酸                                      ０．０１％
９．酢酸トコフェリル                              １．００％
１０．精製水                                    ７２．９４％
１１．ヒドロキシプロピルキトサン                  １．００％
１２．キサンタンガム                              １．００％
１３．変性エチルアルコール                        ３．００％
１４．フェネチルアルコール                        １．００％
１５．カリウムアゼロイルジグリシネート            １．００％
【００３７】
調製
相Ａ：ヒドロキシプロピルキトサンを、透明な溶液が得られるまで、水全体に対して約５０重量％、分散させた。溶液を６５℃±２℃で加熱し、キサンタンガムを添加し、均質な溶液が得られるまで撹拌した。
【００３８】
相Ｂ：カリウムパルミトイル、セテアリルアルコール、ステアリン酸グリセリルＳＥ、ジカプリリルエーテル、メトキシケイ皮酸エチルヘキシル、レシチン、パルミチン酸アスコルビル、クエン酸、および酢酸トコフェリルを一緒に混合し、６５℃±２℃で加熱した。
【００３９】
相Ｂを、撹拌（ターボ）しながら相Ａに添加して乳化させた。得られたエマルジョンを、連続的に混合しながら３５℃±２℃に冷却した。
【００４０】
フェネチルアルコール、カリウムアゼロイルジグリシネートを残りの精製水に溶解したもの（５０重量％）、およびエチルアルコールを、調製の終わりにエマルジョンに混合した。生成物を、均質な水中油クリームが得られるまで穏やかな撹拌状態に保った。
【実施例４】
【００４１】
下記のｗ／ｗ％組成を有する水中油クリームを調製した。
１．カリウムパルミトイル加水分解小麦タンパク質                        ２．００％
２．ステアリン酸グリセリル                                            ４．００％
３．セテアリルアルコール                                              ４．００％
４．ステアリン酸グリセリルＳＥ                                        ２．００％
５．ジカプリリルエーテル                                              ５．００％
６．メトキシケイ皮酸エチルヘキシル                                    ８．００％
７．ブチルメトキシジベンゾイルメタン                                  ２．００％
８．ビス−エチルヘキシルオキシフェノールメトキシフェニルトリアジン    ３．００％
９．レシチン                                                        ０．０４０％
１０．トコフェロール                                                ０．００２％
１１．パルミチン酸アスコルビル                                      ０．００２％
１２．クエン酸                                                      ０．００２％
１３．酢酸トコフェリル                                                ０．２０％
１４．ヒドロキシプロピルキトサン                                      １．００％
１５．キサンタンガム                                                  ０．３０％
１６．変性エチルアルコール                                            ２．００％
１７．フェネチルアルコール                                            ０．５０％
１８．カプリリルグリコール                                            ０．５０％
１９．カリウムアゼロイルジグリシネート                                ０．５０％
２０．精製水                                      １００．００％になるまでの適量
【００４２】
調製
製剤を、実施例１の場合と同様に作製した。均質な水中油クリームが得られた。
【実施例５】
【００４３】
ヒト３Ｄ人工皮膚上に放出されたＶＥＧＦ（血管内皮成長因子）の阻害に関する比較評価を、実施例４による製剤によって試験をし、２種の異なる製剤、即ちそれぞれＬＰＯＬ２８９９Ａ（実施例４の場合と同じであるが、カリウムアゼロイルジグリシネートを含有しない）、ＬＰＯＬ２８９９Ｂ（実施例４の場合と同じであるが、ヒドロキシプロピルキトサンを含有しない）、およびＬＰＯＬ２８９９Ｃ（実施例４の場合と同じであるが、カリウムアゼロイルジグリシネートまたはヒドロキシプロピルキトサンを含有しない）という名称の製剤と比較した。
【００４４】
４種の製剤の作用を、３Ｄヒト表皮に対する炎症促進性刺激によって誘発された血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）生成の阻害に関して試験をした。ＶＥＧＦは、血管透過性に著しい影響を及ぼす強力な血管新生タンパク質であり、ケラチノサイト、即ち皮膚の細胞で構成的に発現される。ＩＬ−１αのような可溶性の炎症性メディエーターへの曝露など、ストレスの多い条件下では、表皮ケラチノサイトによって、ＶＥＧＦの合成および放出が増大する。表皮単位を、ＶＥＧＦの合成が増大するように細胞培地中でＩＬ−１αにより処理し、それと同時に、表皮角質層に未希釈の調査済みサンプルを塗布して処理した。２４時間の処理後、表皮単位の下の細胞培地を収集し、ＥＬＩＳＡアッセイによりＶＥＧＦ含量に関して分析を行った。
【００４５】
試験がなされたサンプルは、実施例４による製剤と、２種の比較製剤ＬＰＯＬ２８９９ＡおよびＬＰＯＬ２８９９Ｂであった。ＩＬ−１αで処理された皮膚単位は、陽性対照として使用した。実験は、３回繰り返し行った。用いたｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験系は、ヒト表皮の３次元人工系（Ｍａｔｔｅｋ、ＵＳＡ）からなり、即ち、正常なヒト表皮ケラチノサイトを含む、再構成された人口ヒト皮膚モデルであり、一体型３次元細胞培養モデルとして成長させ、ヒト皮膚をｉｎ  ｖｉｔｒｏで完全に模倣したものである。このモデルは、通常の障壁機能を示す（分化した角質層の存在）。
【００４６】
各未希釈サンプル約２０ｍｇを、表皮単位に３回同様に塗布し、生成物の塗布に３０秒間曝した後、対照を除く表皮単位を、５００ｐｇ／ｍｌのＩＬ−１α（Ｐｒｏｓｐｅｃ）で、細胞培地中で２時間処理することにより、ＶＥＧＦ合成が改善された。
【００４７】
２時間後、細胞培地を除去し、交換した。サンプルのインキュベーションを、５％ＣＯ2中、３７℃で最長２４時間実施した。
【００４８】
陽性対照として、ＩＬ−１αでのみ処理した表皮単位を使用した。曝露時間の終わりに、生成物を除去し、組織をリン酸緩衝液（ＰＢＳ）で穏やかに洗浄して、さらなるＭＴＴおよび生死判別試験を行い、培地をＶＥＧＦアッセイ用に収集した。
【００４９】
サンプルでの処理があるものおよびないものの、ＩＬ−１α処理、５００ｐｇ／ｍｌ後のＶＥＧＦ放出アッセイを、以下の表に報告する。
【００５０】
【表１】
0005646477.tif 000002
【００５１】
ビヒクルを含有するが、２種の成分、即ちカリウムアゼロイルジグリシネートおよびヒドロキシプロピルキトサンを含有しない製剤は、ＩＬ−１α誘発性ＶＥＧＦ放出を、１８％だけ阻害した。ヒドロキシプロピルキトサンを含有する製剤の効果は、阻害率が２５．７％であり、カリウムアゼロイルジグリシネートを含有する製剤の阻害率は、３３．９％であった。実施例４による製剤は、最強の阻害効果（阻害率４６．４％）を発揮し、ＩＬ−１αの傷害に対する皮膚保護に関して、これら２成分の相乗活性が確認された。