(57)【要約】  本発明は、コンフォーメーション病の早期診断に有用なフッ素およびヒドロキシ基で置換されたアルコキシ基を有するＰＥＴプローブ化合物、該化合物を含有するコンフォーメーション病治療及び／又は予防用医薬組成物などを提供する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2009004914.tif 000107
［式中、Ｒ１１、Ｒ１２又はＲ１３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化２】
2009004914.tif 000108
（式中、Ｘは、ヒドロキシ基で１乃至３置換された、炭素数３乃至１０のアルキル基を示す）で表される基であり、かつ、
Ｒ１１、Ｒ１２又はＲ１３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ１３が前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、Ｒ１１、Ｒ１２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｍは１であるか、或いは、Ｒ１１又はＲ１２のいずれかが、前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、ｍは０でもよく、
Ｚは酸素原子又は硫黄原子を示し、
Ｒ２１、Ｒ２２又はＲ２３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化３】
2009004914.tif 000109
（式中、Ｘは前記の意味を有する）で表される基であり、かつ、
Ｒ２１、Ｒ２２又はＲ２３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ２３が前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、Ｒ２１、Ｒ２２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｐは１であるか、或いは、Ｒ２１又はＲ２２のいずれかが、前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、ｐは０でもよく、
【化４】
2009004914.tif 000110
は、
【化５】
2009004914.tif 000111
又は
【化６】
2009004914.tif 000112
を示し、
Ｒ３１、Ｒ３２又はＲ３３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化７】
2009004914.tif 000113
（式中、Ｘは、前記の意味を有する）で表される基であり、かつ、
Ｒ３１、Ｒ３２又はＲ３３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ３３が前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、Ｒ３１、Ｒ３２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｎは１であるか、或いは、Ｒ３１又はＲ３２のいずれかが、前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、ｎは０でもよく、
Ａ１乃至Ａ５のうちの１又は２が窒素原子であり、残りの３又は４がＣＨである］からなる群より選択される化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項２】
Ｘがヒドロキシ基で１又は２置換された炭素数３乃至７の直鎖又は分岐のアルキル基である請求項１記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項３】
式（ＩＩ）が、式（ＩＩＩ）：
【化８】
2009004914.tif 000114
（式中、
【化９】
2009004914.tif 000115
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す）からなる群より選択される基である請求項１記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項４】
式Ｉで表される化合物が、式（Ｉ−１）
【化１０】
2009004914.tif 000116
［式中、Ｒ１１、Ｒ１２又はＲ１３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化１１】
2009004914.tif 000117
（式中、Ｘは、ヒドロキシ基で１乃至３置換された、炭素数３乃至１０のアルキル基を示す）で表される基であって、式（ＩＩＩ）：
【化１２】
2009004914.tif 000118
（式中、
【化１３】
2009004914.tif 000119
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す）からなる群より選択される基であり、かつ、
Ｒ１１、Ｒ１２又はＲ１３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、或いは、
Ｒ１３が前記式ＩＩで表される基である場合には、Ｒ１１、Ｒ１２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｍは１であるか、或いは、Ｒ１１又はＲ１２のいずれかが、前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、ｍは０でもよく、
Ｚは酸素原子又は硫黄原子を示す］で表される化合物であることを特徴とする、請求項１記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項５】
Ｒ１３が、式（ＩＩＩ）：
【化１４】
2009004914.tif 000120
（式中、
【化１５】
2009004914.tif 000121
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す）からなる群より選択される基であり、
Ｒ１１及びＲ１２が、それぞれ独立して、水素原子又は低級アルキル基であるか、  或いは、Ｒ１１、Ｒ１２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、ｍが１であり、Ｚが硫黄原子である請求項４記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項６】
Ｒ１３が、式（ＩＩＩ−１）：
【化１６】
2009004914.tif 000122
（式中、
【化１７】
2009004914.tif 000123
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す）で表される基である請求項５記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項７】
式（Ｉ）が、式（Ｉ−２）：
【化１８】
2009004914.tif 000124
［式中、Ｒ２２又はＲ２３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化１９】
2009004914.tif 000125
（式中、Ｘは、ヒドロキシ基で１乃至３置換された、炭素数３乃至１０のアルキル基を示す）で表される基であり、かつ、Ｒ２１、Ｒ２２又はＲ２３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ２３が式（ＩＩ）：
【化２０】
2009004914.tif 000126
（式中、Ｘは前記の意味を有する）
で表される基である場合には、Ｒ２１、Ｒ２２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｐは１であるか、或いは、Ｒ２１又はＲ２２のいずれかが、前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、ｐは０でもよく、
Ａ１乃至Ａ５のうちの１又は２が窒素原子であり、残りの３又は４がＣＨである］で表される化合物であることを特徴とする、請求項１記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項８】
Ｒ２３が、式（ＩＩＩ）：
【化２１】
2009004914.tif 000127
（式中、
【化２２】
2009004914.tif 000128
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す）からなる群より選択される基であり、
Ｒ２１及びＲ２２は、それぞれ独立して、水素原子又は低級アルキル基であるか、或いは、
Ｒ２１、Ｒ２２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、ｐが１である請求項７記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項９】
Ｒ２３が、式（ＩＩＩ−１）：
【化２３】
2009004914.tif 000129
で表される基である請求項８記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項１０】
式（Ｉ）で表される化合物が、
【化２４】
2009004914.tif 000130
又は
【化２５】
2009004914.tif 000131
である請求項１記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項１１】
標識された請求項１乃至１０のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項１２】
標識が放射性核種によるものである請求項１１記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項１３】
放射性核種がγ線放出核種である請求項１２記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項１４】
標識が陽電子放出核種である請求項１１記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項１５】
陽電子放出核が、１１Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ、１８Ｆ、３５ｍＣｌ、７６Ｂｒ、４５Ｔｉ、４８Ｖ、６０Ｃｕ、６１Ｃｕ、６２Ｃｕ、６６Ｇａ、８９Ｚｒ、９４ｍＴｃ及び１２４Ｉからなる群より選択されるものである、請求項１４記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項１６】
陽電子放出核が、１１Ｃ又は１８Ｆである請求項１４記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物。
【請求項１７】
請求項１乃至１６のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含有する医薬組成物。
【請求項１８】
請求項１乃至１６のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物と溶解補助剤とを含む医薬組成物。
【請求項１９】
溶解補助剤がポリソルベート８０、ポリエチレングリコール、エタノール及びプロピレングリコールからなる群より選択されるものである、請求項１８記載の医薬組成物。
【請求項２０】
注射剤である請求項１７乃至１９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
請求項１乃至１６のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含有する、コンフォーメーション病診断用組成物。
【請求項２２】
請求項１乃至１６のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含有する、コンフォーメーション病を治療及び／又は予防するための医薬組成物。
【請求項２３】
請求項１乃至１６のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を必須の構成要素として含む、コンフォーメーション病診断用キット。
【請求項２４】
請求項１乃至１６のいずれか1項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を必須の構成要素として含む、βシート構造をとった蛋白又は神経原線維変化を検出又は染色するための組成物又はキット。
【請求項２５】
画像診断用である、請求項２３又は２４記載のキット。
【請求項２６】
請求項１乃至１６のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を対象に投与することを特徴とする、対象におけるコンフォーメーション病の治療及び／又は予防方法。
【請求項２７】
請求項１乃至１６のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を対象に投与することを特徴とする、対象におけるコンフォーメーション病の診断方法。
【請求項２８】
対象におけるコンフォーメーション病の診断用組成物又はキットを製造するための、請求項１乃至１６のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用。
【請求項２９】
対象におけるコンフォーメーション病の治療及び／又は予防のための医薬組成物を製造するための、請求項１乃至１６のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用。
【請求項３０】
請求項１乃至１６のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を用いて試料を染色することを特徴とする、試料中のβシート構造をとった蛋白又は神経原線維変化を検出又は染色する方法。
【請求項３１】
試料中のβシート構造をとった蛋白又は神経原線維変化を検出又は染色するための組成物又はキットを製造するための、請求項１乃至１６のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用。
【請求項３２】
式（Ｉ’）：
【化２６】
2009004914.tif 000132
［式中、Ｒ１１１、Ｒ１２１又はＲ１３１のいずれか一つが、式（ＩＩ’）：
【化２７】
2009004914.tif 000133
（式中、Ｘは、ヒドロキシ基で１乃至３置換された、炭素数３乃至１０のアルキル基を示す）で表される基であり、かつ、
Ｒ１１１、Ｒ１２１又はＲ１３１の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ１３１が前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、Ｒ１１１、Ｒ１２１及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｍは１であるか、或いは、Ｒ１１又はＲ１２のいずれかが、前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、ｍは０でもよく、
Ｚは酸素原子又は硫黄原子を示し、
Ｒ２１、Ｒ２２又はＲ２３のいずれか一つが、式（ＩＩ’）：
【化２８】
2009004914.tif 000134
（式中、Ｘは前記の意味を有する）で表される基であり、かつ、
Ｒ２１１、Ｒ２２１又はＲ２３１の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ２３１が前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、Ｒ２１１、Ｒ２２１及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｎは１であるか、或いは、Ｒ２１１又はＲ２２１のいずれかが、前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、ｎは０でもよく、
【化２９】
2009004914.tif 000135
は、
【化３０】
2009004914.tif 000136
又は
【化３１】
2009004914.tif 000137
を示し、
Ｒ３１１、Ｒ３２１又はＲ３３１のいずれか一つが、式（ＩＩ’）：
【化３２】
2009004914.tif 000138
（式中、Ｘは、前記の意味を有する）で表される基であり、かつ、
Ｒ３１１、Ｒ３２１又はＲ３３１の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ３３１が前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、Ｒ３１１、Ｒ３２１及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｐは１であるか、或いは、Ｒ３１１又はＲ３２１のいずれかが、前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、ｐは０でもよく、
Ａ１乃至Ａ５のうちの１又は２が窒素原子であり、残りの３又は４がＣＨである］からなる群より選択される化合物。
【請求項３３】
式（ＩＩ’）で表される基が、式（ＩＩＩ’）：
【化３３】
2009004914.tif 000139
（式中、
【化３４】
2009004914.tif 000140
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す）からなる群より選択される基である請求項３２記載の化合物。
【請求項３４】
式（Ｉ’）で表される化合物が、
【化３５】
2009004914.tif 000141
又は
【化３６】
2009004914.tif 000142
である請求項３２記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、コンフォーメーション病の診断プローブ、特に画像診断プローブ、詳細には、陽電子放出核種により標識されたプローブ、ならびに該プローブを含む画像診断用組成物に関する。さらに、本発明は、例えば、脳材料中のアミロイドβ蛋白および神経原線維変化の検出・染色、例えば、アルツハイマー病患者脳における老人斑の検出・染色、ならびにコンフォーメーション病の予防および／または治療用の医薬組成物にも関する。また、本発明は、上記プローブを含むコンフォーメーション病診断組成物などにも関する。
【背景技術】
【０００２】
コンフォーメーション病特有のβシート構造をとった蛋白が蓄積する疾患には、体内の種々の器官や組織への不溶性原線維性蛋白の沈着を特徴とする種々の疾病がある。これらの疾病には、アルツハイマー病、プリオン病、レビー小体病、パーキンソン病、ハンチントン病、球脊髄性筋萎縮症、歯状核・淡蒼球ルイ体萎縮症、脊髄・小脳変性症、Ｍａｃｈａｄｏ−Ｊｏｓｅｐｈ  Ｄｉｓｅａｓｅ、Ａｍｙｏｐｈｉｃ  Ｌａｔｅｒａｌ  Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ（ＡＬＳ），  ダウン症候群、ピック病、ＦＴＤＰ−１７（Ｆｒｏｎｔｏｔｅｍｐｏｒａｌ  Ｄｅｍｅｎｔｉａ  ａｎｄ  Ｐａｒｋｉｎｓｏｎｉｓｍ  ｌｉｎｋｅｄ  ｔｏ  Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ  １７）、ＬＮＴＤ（Ｌｉｍｂｉｃ  Ｎｅｕｒｏｆｉｂｒｉｌｌａｒｙ  Ｔａｎｇｌｅ  Ｄｅｍｅｔｉａ）、Ｓｕｄａｎｏｐｈｉｌｏｃ  Ｌｅｕｋｏｄｙｓｔｒｏｐｈｙ、アミロイドーシス等が含まれる。 【０００３】
このうち、アルツハイマー病（ＡＤ）は、現在最も治療の困難な疾病の１つとされており、正確な早期診断が望まれている疾患である。アルツハイマー病は、主として、初老期から老年期にかけて起こる進行性の認知症を特徴とする疾患である。病理学的には、大脳の全体的な萎縮、神経細胞の著しい変性と脱落、神経原線維変化と老人斑の出現を特徴とする。アルツハイマー病に代表される認知症の最大のリスクファクターは、加齢であることが知られている。したがって、老齢人口の増加に伴う患者の増加は、特に、高齢化社会となっている日本、アメリカ、ヨーロッパ諸国において顕著であり、それに対する医療コストは、これらの国の医療システムを危機におとしめている。
なお、我が国においては、アルツハイマー病患者数は、約１００万人と推定され、今後人口の高齢化に伴い、その患者数は増大することが確実視されている。アルツハイマー病患者にかかわる費用は、介護費用を含めると年間患者１人あたり１００万円から３００万円を考えられていることから、すでに我が国では１兆円から３兆円の社会経済コストを払っていることになる。アルツハイマー病において症状が、顕在化する以前ないしは、できるだけ早期に治療を加えることは、大きな医療経済効果をもたらすことはいまや世界の常識となっている。【０００４】
現在のアルツハイマー病診断方法は、各種あるが、我が国においては、長谷川式、ＡＤＡＳ、ＭＭＳＥ等の、アルツハイマー病が疑われる個体の認知機能の低下を定量的に評価する方法が一般的であり、まれに画像診断法（ＭＲＩ、ＣＴ等）が補助的に用いられている。しかし、これらの診断法では、病気を確定するには不十分であり、確定診断には生前における脳の生検（バイオプシー）、死後脳の病理組織学的検査が必要である。このように、アルツハイマー病の診断法についても精力的な研究が行われているにもかかわらず、それほどの進歩がみられないでいる。多くの研究の結果、最初の臨床症状が現れるかなり以前（長い場合は約４０年前）にはすでにアルツハイマー病特徴的な神経変性が始まっていることが判ってきた。また、同病においては、患者を取り巻く家族または臨床家が最初の臨床症状に気づいた時には、すでに脳内病理像は取り返しのつかない状態まで進行していることが知られている。上述のような病状の進行特性および患者数の激増を考え合わせると、アルツハイマー病の正確な早期診断の必要性ならびに意義は極めて大きい。【０００５】
アルツハイマー病の病理組織像は、２つの主徴に代表される。すなわち、老人斑および
神経原線維変化である。前者の主構成成分は、βシート構造をとったアミロイドβ（Ａβ）蛋白であり、後者のそれは、過剰リン酸化されたアミロイドβ蛋白である。アルツハイマー病の確定診断は、これらの病理学的特徴が患者脳内に出現することをよりどころとしている。【０００６】
アミロイドβ蛋白はアルツハイマー病を包含するコンフォーメーション病に特徴的であり、密接な関連性を有している。したがって、体内、特に、脳内にβシート構造をとったアミロイドβ蛋白をマーカーとして検出することが、コンフォーメーション病、特に、アルツハイマー病の重要な診断方法の１つになる。アルツハイマー病をはじめとするアミロイドが蓄積する疾患の診断を目的として、体内、特に脳内アミロイドβ蛋白に特異的に結合し、これを染色する物質の検索が従来から行われている。かかる物質としては、コンゴーレッド（非特許文献１参照）およびチオフラビンＳ（非特許文献２参照）、チオフラビンＴ（非特許文献３参照）ならびにクリサミンＧおよびその誘導体（特許文献１および特許文献２参照）等が知られているが、アミドロイドβ蛋白に対する結合特異性、血液−脳関門透過性、溶解度、毒性等の面から問題が少なくない。本発明者らは、アミロイドβ蛋白に対して特異性が高く、血液−脳関門透過性、溶解度が大きく、毒性が小さい等の特徴を有する種々の化合物を見出している（特許文献３、特許文献４、特許文献５、特許文献６および特許文献７参照）。【０００７】
脳内蛋白がβシート構造をとることによって、その蛋白自身が病因となる疾患が知られている。アルツハイマー病においては、アミロイドβ蛋白およびタウ蛋白がβシート構造をとることによって、蛋白自身が病因または病因の一部となっていると考えられている。Yankerらはアミロイドβ蛋白にβシート構造をとらせることにより神経細胞毒性を発揮することを初めて報告した（非特許文献４参照）。その後、多くの追試が行われ、βシート構造をとったアミロイドβ蛋白が、神経細胞毒性を有することが確認された。このようにβシート構造をとったアミロイドβ蛋白、タウ蛋白に神経細胞毒性が見られることから、その細胞毒性を抑制する化合物は蛋白自身がβシート構造をとることによって病因、または病因の一部となる疾患、すなわちコンフォーメーション病、例えば、アルツハイマー病の治療薬になりうることが示唆される。しかしながら、かかる治療薬の開発も十分な成果が得られていないのが現状である。【０００８】
したがって、アルツハイマー病をはじめとするコンフォーメーション病の診断、アミロイドβ蛋白の特異的染色剤、ならびにコンフォーメーション病の治療および予防のための、アミロイドβ蛋白に対する特異性の高い化合物に対する必要性が高まっている。【０００９】
アルツハイマー病のもう１つの病理組織学主徴は神経原線維変化およびその主構成成分である過剰リン酸化されたタウ蛋白であるが、一般的にこれらはアミロイドβ蛋白よりは遅れて実現すると考えられている。しかし、神経原線維変化はアミロイドβ蛋白に比し痴呆の程度とよく相関すると考えられている（非特許文献５および非特許文献６参照）。
また、アルツハイマー病以外にタウ蛋白の脳内蓄積を主徴とする疾病（タウオパチイ）には、ピック病、進行性核上性麻痺（ＰＳＰ）などがあげられる。これらの疾病もコンフォーメーション病に含まれる。【００１０】
このようにタウ蛋白はアルツハイマー病を包含するタウ蛋白が蓄積する疾患に特徴的であり、密接な関連を有している。従って体内、特に脳内でβシート構造をとったタウ蛋白をマーカーとして検出することが、タウ蛋白が蓄積する疾患、特にアルツハイマー病の重要な診断法の１つとなる。【００１１】
アルツハイマー病をはじめとするタウが蓄積する疾患の診断を目的として、体内、特に脳脊髄液中のタウを定量する方法が２、３のグループから報告されている（非特許文献７および非特許文献８参照）。しかし、非侵襲的にインビボでのタウを定量することを目的としたプローブは世界的にみても全く見当たらない。【００１２】
したがって、アルツハイマー病をはじめとする神経原線維変化が病因または病因の一部となる疾患の診断や治療のための、あるいは神経原線維変化を染色するための、神経原線維変化に対する特異性の高い化合物に対する必要性が高まっている。【００１３】
これまでアミロイドβ蛋白および神経原線維変化に対する特異性の高い化合物が報告されてきた（特許文献８、特許文献９、特許文献１０、特許文献１１参照）。これらの化合物をインビボにおいて、特にヒト患者の体内において使用する場合、骨集積が極めて少ないか、ほとんどないことが望ましい。したがって、骨集積が極めて低いか、あるいはない、コンフォーメーション病診断プローブとして使用できる化合物の検索が必要である。
【特許文献１】国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ９６／０５９１８明細書
【特許文献２】国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ９８／０７８８９明細書
【特許文献３】特願平第２０００−０８００８２号明細書
【特許文献４】特願平第２００１−０８００８３号明細書
【特許文献５】特願平第２００１−７６０７５号明細書
【特許文献６】国際特許出願ＰＣＴ／ＪＰ０１／０２２０４明細書
【特許文献７】国際特許出願ＰＣＴ／ＪＰ０１／０２２０５明細書
【特許文献８】国際特許出願ＰＣＴ／ＪＰ０３／０１７８３明細書
【特許文献９】国際特許出願ＰＣＴ／ＪＰ０３／１５２６９明細書
【特許文献１０】国際特許出願ＰＣＴ／ＪＰ０３／１５２２９明細書
【特許文献１１】国際特許出願ＰＣＴ／ＪＰ０３／０１５４６明細書
【非特許文献１】Ｐｕｃｈｔｌｅｒら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第１０巻、３５頁、１９６２年
【非特許文献２】Ｐｕｃｈｔｌｅｒら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、第７７巻、４３１頁、１９８３年
【非特許文献３】ＬｅＶｉｎｅ、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ、２巻、４０４−４１０ページ
【非特許文献４】Ｙａｎｋｎｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４５巻、４１７−４２０ページ、１９８９年
【非特許文献５】Ｂｒａａｋ  Ｈ  ａｎｄ  Ｂｒａａｋ  Ｅ、Ａｃｔａ  Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ、８２巻、２３９−２５９ページ、１９９１年
【非特許文献６】Ｗｉｓｃｈｉｋら、Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ  Ｄｉｓｅａｓｅ、１０３−２０６ページ、Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ、  Ｏｘｆｏｒｄ、２００１年
【非特許文献７】Ｉｓｈｉｇｕｒｏら、Ｎｅｕｆｏｓｃｉ．Ｌｅｔｔ．、２７０巻、８１−８４ページ、１９９９年
【非特許文献８】Ｉｔｏｈら、Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．、５０巻、１５０−１５６ページ、２００１年
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１４】
本発明は上記事情に鑑み、アミロイドβ蛋白および／または神経原線維変化に対する特異性が高く、脳移行性が高く、しかも骨集積が極めて少ない、あるいはない、コンフォーメーション病の診断プローブとして使用できる物質を提供するものである。また、本発明は、コンフォーメーション病の画像診断プローブとして用いられる標識されたかかる物質、ならびにかかるプローブを含む画像診断用組成物およびキットをも提供する。さらに、本発明は、脳材料中のアミロイドβ蛋白および神経原線維変化の検出および／または染色方法、そのためのキット、ならびにコンフォーメーション病の予防および／または治療用の医薬組成物も提供する。また、本発明は、コンフォーメーション病の早期診断に有用な化合物、それを含む画像診断用組成物なども提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、式（Ｉ）：
【化１】
2009004914.tif 000002
［式中、Ｒ１１、Ｒ１２又はＲ１３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化２】
2009004914.tif 000003
（式中、Ｘは、ヒドロキシ基で１乃至３置換された、炭素数３乃至１０のアルキル基を示す）で表される基であり、かつ、
Ｒ１１、Ｒ１２又はＲ１３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ１３が前記式ＩＩで表される基である場合には、Ｒ１１、Ｒ１２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｍは１であるか、或いは、Ｒ１１又はＲ１２のいずれかが、前記式ＩＩで表される基である場合には、ｍは０でもよく、
Ｚは酸素原子又は硫黄原子を示し、
Ｒ２１、Ｒ２２又はＲ２３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化３】
2009004914.tif 000004
（式中、Ｘは前記の意味を有する）で表される基であり、かつ、
Ｒ２１、Ｒ２２又はＲ２３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ２３が前記式ＩＩで表される基である場合には、Ｒ２１、Ｒ２２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｎは１であるか、或いは、Ｒ２１又はＲ２２のいずれかが、前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、ｎは０でもよく、
【化４】
2009004914.tif 000005
は、
【化５】
2009004914.tif 000006
又は
【化６】
2009004914.tif 000007
を示し、
Ｒ３１、Ｒ３２又はＲ３３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化７】
2009004914.tif 000008
（式中、Ｘは、前記の意味を有する）で表される基であり、かつ、
Ｒ３１、Ｒ３２又はＲ３３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ３３が前記式ＩＩで表される基である場合には、Ｒ３１、Ｒ３２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｐは１であるか、或いは、Ｒ３１又はＲ３２のいずれかが、前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、ｐは０でもよく、
Ａ１乃至Ａ５のうちの１又は２が窒素原子であり、残りの３又は４がＣＨである］からなる群より選択される化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物が、アミロイドβ蛋白および／または神経原線維変化に対する特異性が高く、脳移行性が高く、しかも骨集積が極めて少ないか、あるいはない、コンフォーメーション病の診断プローブとして使用できることを見出し、本発明を完成するに至った。【００１６】
末端に、−Ｏ−アルキル基又は−Ｎ−アルキル基（該アルキル基は、ハロゲン原子およびヒドロキシ基で置換されており、さらに、フッ素原子で置換されている）を有する化合物は、骨集積が低い、あるいは極めて低いものである。かかる骨集積の低い、あるいは極めて低い化合物を包含することは、本発明の１つの特徴である。
本発明は、式（Ｉ）で表される化合物のうち、末端に−Ｏ−アルキル基又は−Ｎ−アルキル基（該アルキル基は、ハロゲン原子およびヒドロキシ基で置換されており、さらに、フッ素原子で置換されている）を有することにより、従来のアミロイドＰＥＴプローブと比較して、より安全性の高い化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を提供するものである。
それゆえ、本発明の化合物はきわめて安全性の高いものである。また、本発明の化合物は、アミロイドβ蛋白を特異的かつ鮮明に染色することから、特に、アルツハイマー病、ダウン症候群などの正確な早期診断を可能にするものといえる。さらに本発明の化合物は、脳移行性、すなわち、血液−脳関門透過性も高い。これらの特徴から、本発明の化合物を用いて、インビボにおける、特に、ヒト患者における非侵襲性の早期診断が可能となる。【００１７】
アミロイドＰＥＴプローブ診断用薬剤として、例えば、ＷＯ２００７／００２５４０には、末端に標識されたエチレングリコール又はポリエチレングリコールが開示されている。しかしながら、この明細書には、骨集積の低い、或いは、ほとんど認められない末端基として、どのようなものが優れているかについては、具体的な開示はなく、末端基を標識化されたポリエチレングリコールにすることにより、脂溶性を下げることができることが開示されている。
【発明の効果】
【００１８】
本発明は、アミロイドβ蛋白および／または神経原線維変化に対する特異性が極めて高く、血液−脳関門透過性が高く、極めて安全性の高い化合物を提供する。また、本発明は、アミロイドβ蛋白および／または神経原線維変化に対する特異性が極めて高く、血液−脳関門透過性が高く、しかも、骨への集積が低い、或いは、ほとんどない、極めて安全性の高い化合物を提供する。したがって、本発明の化合物を用いて、コンフォーメーション病の診断、治療および／または予防を行うことができる。また、本発明によれば、コンフォーメーション病の画像診断、特にＰＥＴを用いた画像診断も可能となる。したがって、本発明により、コンフォーメーション病の早期における正確な診断、効果的な治療および予防が可能となる。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】図１はアルツハイマー病患者脳切片におけるＴＨＫ−８３７染色像である。白抜き矢印はアミロイドβ蛋白を示す。
【図２】図２はアルツハイマー病患者脳切片におけるＴＨＫ−８５３染色像である。白抜き矢印はアミロイドβ蛋白を示す。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
本発明の化合物は以下に説明する式（Ｉ）で示される化合物、またはその塩もしくは溶媒和物である。本明細書において、「発明の化合物」という場合には、特に断らないかぎり、式（Ｉ）の化合物、ならびにそれらの塩および溶媒和物を包含するものとする。【００２１】
本明細書において、「低級アルキル基」とは、炭素数１乃至６の直鎖又は分岐を有するアルキル基を意味し、具体的には、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基、イソアミル基、ネオペンチル基、イソペンチル基、１，１−ジメチルプロピル基、１−メチルブチル基、２−メチルブチル基、１，２−ジメチルプロピル基、ヘキシル基、イソヘキシル基、１−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、３−メチルペンチル基、１，１−ジメチルブチル基、１，２−ジメチルブチル基、２，２−ジメチルブチル基、１，３−ジメチルブチル基、２，３−ジメチルブチル基、３，３−ジメチルブチル基、１−エチルブチル基、２−エチルブチル基、１，２，２−トリメチルプロピル基、１−エチル−２−メチルプロピル基等が挙げられる。【００２２】
本明細書において、「アミロイドベータ蛋白」、「アミロイドβ蛋白」、「Ａβ蛋白」、「アミロイドベータ」、「アミロイドβ」、「Ａβ」は同義である。【００２３】
本発明の化合物中の２つの環の間に二重結合が存在する場合には、シス、トランス双方の異性体が存在しうる。【００２４】
また、本発明の化合物中に、不斉炭素原子が存在する場合には、異性体の混合物、それらの個々の異性体も本発明の化合物に包含される。
例えば、本発明の化合物に不斉炭素が１つ存在する場合には、光学的に活性な化合物は、それぞれを別個に合成するか、或いは、カラムクロマトグラフィーによって、各々の光学異性体を分離することができる。
カラムクロマトグラフィーによって、光学異性体を分離する場合、用いられるカラムとしては、例えば、キラルパックＡＤ（ダイセル社製）等が挙げられる。
また、用いられる溶媒としては、通常異性体を分離するのに用いられる溶媒であればよく、例えば、クロロホルム、アセトニトリル、酢酸エチル、メタノール、エタノール、アセトン、ヘキサン、水等を単独で用いるか、或いは、これらの溶媒を２又はそれ以上組み合わせて用いることもできる。【００２５】
本発明に係る式（Ｉ）：
【化８】
2009004914.tif 000009
［式中、各記号は前記に同じ］で表される化合物について、さらに、具体的に開示するために、式（Ｉ）において用いられる各種記号について、具体例を挙げて説明する。【００２６】
まず、式（Ｉ）中の式（Ｉ−１）：
【化９】
2009004914.tif 000010
で表される化合物について説明する。【００２７】
Ｒ１１、Ｒ１２及びＲ１３については、Ｒ１１、Ｒ１２又はＲ１３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化１０】
2009004914.tif 000011
で表される基であり、かつ、Ｒ１１、Ｒ１２又はＲ１３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ１３が前記式ＩＩで表される基である場合には、Ｒ１１、Ｒ１２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基を示す。【００２８】
前記式ＩＩ中のＸは、ヒドロキシ基で１乃至３置換された、炭素数３乃至１０のアルキル基を示す。
該炭素数３乃至１０のアルキル基は、直鎖又は分岐のいずれであってもよいが、炭素数３乃至７のアルキル基が好ましく、フッ素原子が結合している炭素原子の隣の炭素原子が２級炭素原子であり、かつ、ヒドロキシ基が該２級炭素原子に結合している場合が好ましい。
【００２９】
式ＩＩで表される基としては、具体的には、例えば、式（ＩＩＩ）：
【化１１】
2009004914.tif 000012
［式中、
【化１２】
2009004914.tif 000013
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す］からなる群より選択される基が挙げられ、これらのうち、式（ＩＩＩ−１）：
【化１３】
2009004914.tif 000014
［式中、
【化１４】
2009004914.tif 000015
は、前記に同じ］で表される基であるか、或いは、式（ＩＩＩ−２）：
【化１５】
2009004914.tif 000016
［式中、
【化１６】
2009004914.tif 000017
は、前記に同じ］で表される基が好ましい。【００３０】
Ｒ１３が前記式ＩＩで表される基である場合には、Ｒ１１、Ｒ１２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって３乃至８員の含窒素脂肪族環を形成していてもよく、さらに、該含窒素脂肪族環を構成する炭素原子の１つが、窒素原子、硫黄原子又は酸素原子に置き換わっていてもよく、該含窒素脂肪族環としては、具体的には、例えば、
【化１７】
2009004914.tif 000018
［式中、Ｚは、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２又はＮＲｅであり、Ｒｅは、水素又はＣ１−４アルキル基を示す］で表される基等が挙げられ、これらのうち、モルホリノ基が好ましい。【００３１】
ｍは、１であるか、或いは、Ｒ１１又はＲ１２のいずれかが、前記式ＩＩで表される基である場合には、ｍは０でもよい。【００３２】
Ｚは酸素原子又は硫黄原子を示すが、Ｚが硫黄原子であることが好ましい。【００３３】
次に、式（Ｉ）中の式（Ｉ−２）：
【化１８】
2009004914.tif 000019
で表される化合物について説明する。【００３４】
Ｒ２１、Ｒ２２及びＲ２３については、Ｒ２１、Ｒ２２又はＲ２３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化１９】
2009004914.tif 000020
で表される基であり、かつ、Ｒ２１、Ｒ２２又はＲ２３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ２３が前記式ＩＩで表される基である場合には、Ｒ２１、Ｒ２２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基を示す。【００３５】
前記式ＩＩ中のＸは、ヒドロキシ基で１乃至３置換された、炭素数３乃至１０のアルキル基を示す。
該炭素数３乃至１０のアルキル基は、直鎖又は分岐のいずれであってもよいが、炭素数３乃至７のアルキル基が好ましく、フッ素原子が結合している炭素原子の隣の炭素原子が２級炭素原子であり、かつ、ヒドロキシ基が該２級炭素原子に結合している場合が好ましい。【００３６】
式ＩＩで表される基としては、具体的には、例えば、式（ＩＩＩ）：
【化２０】
2009004914.tif 000021
［式中、
【化２１】
2009004914.tif 000022
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す］からなる群より選択される基が挙げられ、これらのうち、式（ＩＩＩ−１）：
【化２２】
2009004914.tif 000023
［式中、
【化２３】
2009004914.tif 000024
は、前記に同じ］で表される基であるか、或いは、式（ＩＩＩ−２）：
【化２４】
2009004914.tif 000025
［式中、
【化２５】
2009004914.tif 000026
は、前記に同じ］で表される基が好ましい。【００３７】
Ｒ２３が前記式ＩＩで表される基である場合には、Ｒ２１、Ｒ２２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって３乃至８員の含窒素脂肪族環を形成していてもよく、さらに、該含窒素脂肪族環を構成する炭素原子の１つが、窒素原子、硫黄原子又は酸素原子に置き換わっていてもよく、該含窒素脂肪族環としては、具体的には、例えば、
【化２６】
2009004914.tif 000027
［式中、Ｚは、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２又はＮＲｅであり、Ｒｅは、水素又はＣ１−４アルキル基を示す］で表される基等が挙げられ、これらのうち、モルホリノ基が好ましい。【００３８】
ｐは、１であるか、或いは、Ｒ２１又はＲ２２のいずれかが、前記式ＩＩで表される基である場合には、ｐは０でもよい。【００３９】
Ａ１乃至Ａ５は、全てが炭素原子であるか、或いは、Ａ１乃至Ａ５のうちの１又は２が窒素原子であってもよい。これらのうち、Ａ１乃至Ａ５の全てが炭素原子であるか、或いは、Ａ１乃至Ａ５のうちの１つが窒素原子であることが好ましい。【００４０】
【化２７】
2009004914.tif 000028
は、二重結合を示すか、或いは、三重結合を示す。【００４１】
次に、式（Ｉ）中の式（Ｉ−３）：
【化２８】
2009004914.tif 000029
で表される化合物について説明する。【００４２】
Ｒ３１、Ｒ３２及びＲ３３については、Ｒ３１、Ｒ３２又はＲ３３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化２９】
2009004914.tif 000030
で表される基であり、かつ、Ｒ３１、Ｒ３２又はＲ３３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ３３が前記式ＩＩで表される基である場合には、Ｒ３１、Ｒ３２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基を示す。【００４３】
前記式ＩＩ中のＸは、ヒドロキシ基で１乃至３置換された、炭素数３乃至１０のアルキル基を示す。
該炭素数３乃至１０のアルキル基は、直鎖又は分岐のいずれであってもよいが、炭素数３乃至７のアルキル基が好ましく、フッ素原子が結合している炭素原子の隣の炭素原子が２級炭素原子であり、かつ、ヒドロキシ基が該２級炭素原子に結合している場合が好ましい。【００４４】
式（ＩＩ）で表される基としては、具体的には、例えば、式（ＩＩＩ）：
【化３０】
2009004914.tif 000031
［式中、
【化３１】
2009004914.tif 000032
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す］からなる群より選択される基が挙げられ、これらのうち、式（ＩＩＩ−１）：
【化３２】
2009004914.tif 000033
［式中、
【化３３】
2009004914.tif 000034
は、前記に同じ］で表される基であるか、或いは、式（ＩＩＩ−２）：
【化３４】
2009004914.tif 000035
［式中、
【化３５】
2009004914.tif 000036
は、前記に同じ］で表される基が好ましい。【００４５】
Ｒ３３が前記式ＩＩで表される基である場合には、Ｒ３１、Ｒ３２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって３乃至８員の含窒素脂肪族環を形成していてもよく、さらに、該含窒素脂肪族環を構成する炭素原子の１つが、窒素原子、硫黄原子又は酸素原子に置き換わっていてもよく、該含窒素脂肪族環としては、具体的には、例えば、
【化３６】
2009004914.tif 000037
［式中、Ｚは、Ｏ、Ｓ、ＣＨ２又はＮＲｅであり、Ｒｅは、水素又はＣ１−４アルキル基を示す］で表される基等が挙げられ、これらのうち、モルホリノ基が好ましい。【００４６】
ｎは、１であるか、或いは、Ｒ３１又はＲ３２のいずれかが、前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、ｎは０であってもよい。【００４７】
これらの化合物、その薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物は、Ａβに対する特異性が高く、そのうえ、毒性が低く、また、脳内移行性が高く、一定時間経過後、速やかに脳から大部分の薬剤が消失する。【００４８】
したがって、本発明の化合物は、コンフォーメーション病の画像診断のための、安全なプローブとして使用することができる。【００４９】
また、本発明は、式（Ｉ）で表される化合物の合成のための前駆体として使用される化合物も提供する。当業者は、かかる前駆体を目的とする本発明の化合物から容易に設計することができ、その合成をすることができる。あるいは、かかる前駆体は市販されているものを修飾することによっても得ることができる。【００５０】
該前駆体としては、例えば、式（Ｉ’）
【化３７】
2009004914.tif 000038
［式中、Ｒ１１１、Ｒ１２１又はＲ１３１のいずれか一つが、式（ＩＩ’）：
【化３８】
2009004914.tif 000039
（式中、Ｘは、ヒドロキシ基で１乃至３置換された、炭素数３乃至１０のアルキル基を示す）で表される基であり、かつ、
Ｒ１１１、Ｒ１２１又はＲ１３１の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ１３１が前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、Ｒ１１１、Ｒ１２１及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｍは１であるか、或いは、Ｒ１１又はＲ１２のいずれかが、前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、ｍは０でもよく、
Ｚは酸素原子又は硫黄原子を示し、
Ｒ２１、Ｒ２２又はＲ２３のいずれか一つが、式（ＩＩ’）：
【化３９】
2009004914.tif 000040
（式中、Ｘは前記の意味を有する）で表される基であり、かつ、
Ｒ２１１、Ｒ２２１又はＲ２３１の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ２３１が前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、Ｒ２１１、Ｒ２２１及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｎは１であるか、或いは、Ｒ２１１又はＲ２２１のいずれかが、前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、ｎは０でもよく、
【化４０】
2009004914.tif 000041
は、
【化４１】
2009004914.tif 000042
又は
【化４２】
2009004914.tif 000043
を示し、
Ｒ３１１、Ｒ３２１又はＲ３３１のいずれか一つが、式（ＩＩ’）：
【化４３】
2009004914.tif 000044
（式中、Ｘは、前記の意味を有する）で表される基であり、かつ、
Ｒ３１１、Ｒ３２１又はＲ３３１の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ３３１が前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、Ｒ３１１、Ｒ３２１及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｐは１であるか、或いは、Ｒ３１１又はＲ３２１のいずれかが、前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、ｐは０でもよく、
Ａ１乃至Ａ５のうちの１又は２が窒素原子であり、残りの３又は４がＣＨである］からなる群より選択される化合物が挙げられる。【００５１】
式（Ｉ’）中のＲ１１１、Ｒ１２１もしくはＲ１３１のうちの１つ、Ｒ２１１、Ｒ２２１もしくはＲ２３１のうちの一つ、又はＲ３１１、Ｒ３２１もしくはＲ３３１のうちの一つが、式（ＩＩ’）で表される基を示す以外は、各記号は式（Ｉ）のものと同様である。【００５２】
式（ＩＩ’）で表される基としては、具体的には、例えば、式（ＩＩＩ’）：
【化４４】
2009004914.tif 000045
［式中、
【化４５】
2009004914.tif 000046
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す］からなる群より選択される基が挙げられ、これらのうち、式（ＩＩＩ’−１）：
【化４６】
2009004914.tif 000047
［式中、
【化４７】
2009004914.tif 000048
は、前記に同じ］で表される基であるか、或いは、式（ＩＩＩ’−２）：
【化４８】
2009004914.tif 000049
［式中、
【化４９】
2009004914.tif 000050
は、前記に同じ］で表される基が好ましい。【００５３】
コンフォーメーション病の診断においては、本発明の化合物を標識せずにプローブとして用いることができる。例えば、生検試料に本発明の化合物を接触させて、染色される部分の有無を調べてもよい。しかしながら、標識した本発明の化合物をコンフォーメーション病の診断用プローブとして使用するのが一般的である。標識には、蛍光物質、アフィニ
ティー物質、酵素基質、放射性核種等があろう。コンフォーメーション病の画像診断には通常、放射性核種で標識したプローブを使用する。当該分野においてよく知られた方法により種々の放射性核種で本発明の化合物を標識することができる。例えば、３Ｈ、１４Ｃ，３５Ｓ、１３１Ｉ等は以前から使用されている放射性核種であり、インビトロでの利用が多い。画像診断プローブおよびその検出手段に求められる一般的要件としては、インビボで画像診断できること、患者へのダメージが少ないこと（特に、非侵襲的であること）、検出感度が高いこと、半減期が適当な長さであること（標識プローブ調製時間、診断時間が適当であること）等が挙げられる。そこで最近では、高い検出感度と物質透過性を示すγ線を利用した陽電子断層撮影法（ＰＥＴ）またはγ線放出核種によるコンピューター断層撮影法（ＳＰＥＣＴ）が用いられるようになってきた。このうち、ＰＥＴは、陽電子放出核種から正反対の方向に放射される２本のγ線を１対の検出器により同時計数法により検出するので、解像力や定量性に優れた情報が得られるので好ましい。ＳＰＥＣＴ用には、９９ｍＴｃ、１１１Ｉｎ、６７Ｇａ、２０１Ｔｌ、１２３Ｉ、１３３Ｘｅ等のγ線放出核種で本発明の化合物を標識することができる。９９ｍＴｃおよび１２３ＩがＳＰＥＣＴ用によく用いられている。ＰＥＴ用には１１Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ、１８Ｆ，６２Ｃｕ、６８Ｇａ、７６Ｂｒ等の陽電子放出核種で本発明の化合物を標識することができる。陽電子放出核種のなかでも、半減期が適当であること、標識しやすさ等の点から、１１Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ、１８Ｆが好ましく、１１Ｃ又は１８Ｆがより好ましく、１８Ｆが特に好ましい。放射性核種、例えば、陽電子放出核種、γ線放出核種等の放射線放出核種での本発明の化合物の標識位置はいずれの位置であってもよいが、好ましい標識位置は化合物中のアルキル基および／フェニル環上である。このような標識された本発明の化合物も本発明に包含される。例えば、本発明の化合物を１８Ｆで標識する場合、側鎖のいずれかが１８Ｆで標識されていてもよく、あるいは環上の水素が１８Ｆで置換されていてもよい。また、例えば、アルキル置換基のいずれかに含まれる水素を１８Ｆで置換してもよい。なお、当業者には自明であるが、ｍとは核異性体を示す。【００５４】
式（Ｉ）で表される具体的化合物の例を下表１に示す。【００５５】
【表１−１】
2009004914.tif 000051
【００５６】
【表１−２】
2009004914.tif 000052
【００５７】
【表１−３】
2009004914.tif 000053
【００５８】
【表１−４】
2009004914.tif 000054
【００５９】
【表１−５】
2009004914.tif 000055
【００６０】
また、本発明に係る式（Ｉ’）で表される具体的化合物の例としては、上記表１のフッ素原子をＴｓＯに置き換えた化合物が挙げられる。ここで、Ｔｓとは、ｐ−トルエンスルホニル基を意味する。【００６１】
したがって、本発明は：
（１）式（Ｉ）：
【化５０】
2009004914.tif 000056
［式中、Ｒ１１、Ｒ１２又はＲ１３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化５１】
2009004914.tif 000057
（式中、Ｘは、ヒドロキシ基で１乃至３置換された、炭素数３乃至１０のアルキル基を示す）で表される基であり、かつ、
Ｒ１１、Ｒ１２又はＲ１３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ１３が前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、Ｒ１１、Ｒ１２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｍは１であるか、或いは、Ｒ１１又はＲ１２のいずれかが、前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、ｍは０でもよく、
Ｚは酸素原子又は硫黄原子を示し、
Ｒ２１、Ｒ２２又はＲ２３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化５２】
2009004914.tif 000058
（式中、Ｘは前記の意味を有する）で表される基であり、かつ、
Ｒ２１、Ｒ２２又はＲ２３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ２３が前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、Ｒ２１、Ｒ２２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｐは１であるか、或いは、Ｒ２１又はＲ２２のいずれかが、前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、ｐは０でもよく、
式
【化５３】
2009004914.tif 000059
は、
【化５４】
2009004914.tif 000060
又は
【化５５】
2009004914.tif 000061
を示し、
Ｒ３１、Ｒ３２又はＲ３３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化５６】
2009004914.tif 000062
（式中、Ｘは、前記の意味を有する）で表される基であり、かつ、
Ｒ３１、Ｒ３２又はＲ３３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ３３が前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、Ｒ３１、Ｒ３２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｎは１であるか、或いは、Ｒ３１又はＲ３２のいずれかが、前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、ｎは０でもよく、
Ａ１乃至Ａ５のうちの１又は２が窒素原子であり、残りの３又は４がＣＨである］からなる群より選択される化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（２）Ｘがヒドロキシ基で１又は２置換された炭素数３乃至７の直鎖又は分岐のアルキル基である（１）記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（３）式（ＩＩ）が、式（ＩＩＩ）：
【化５７】
2009004914.tif 000063
（式中、
【化５８】
2009004914.tif 000064
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す）からなる群より選択される基である（１）記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（４）式Ｉで表される化合物が、式（Ｉ−１）
【化５９】
2009004914.tif 000065
［式中、Ｒ１１、Ｒ１２又はＲ１３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化６０】
2009004914.tif 000066
（式中、Ｘは、ヒドロキシ基で１乃至３置換された、炭素数３乃至１０のアルキル基を示す）で表される基であって、式（ＩＩＩ）：
【化６１】
2009004914.tif 000067
（式中、
【化６２】
2009004914.tif 000068
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す）からなる群より選択される基であり、かつ、
Ｒ１１、Ｒ１２又はＲ１３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、或いは、
Ｒ１３が前記式ＩＩで表される基である場合には、Ｒ１１、Ｒ１２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｍは１であるか、或いは、Ｒ１１又はＲ１２のいずれかが、前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、ｍは０でもよく、
Ｚは酸素原子又は硫黄原子を示す］で表される化合物であることを特徴とする、（１）記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（５）Ｒ１３が、式（ＩＩＩ）：
【化６３】
2009004914.tif 000069
（式中、
【化６４】
2009004914.tif 000070
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す）からなる群より選択される基であり、
Ｒ１１及びＲ１２が、それぞれ独立して、水素原子又は低級アルキル基であるか、或いは、
Ｒ１１、Ｒ１２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、ｍが１であり、Ｚが硫黄原子である（４）記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（６）Ｒ１３が、式（ＩＩＩ−１）：
【化６５】
2009004914.tif 000071
（式中、
【化６６】
2009004914.tif 000072
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す）で表される基である（５）記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（７）式（Ｉ）が、式（Ｉ−２）：
【化６７】
2009004914.tif 000073
［式中、Ｒ２２又はＲ２３のいずれか一つが、式（ＩＩ）：
【化６８】
2009004914.tif 000074
（式中、Ｘは、ヒドロキシ基で１乃至３置換された、炭素数３乃至１０のアルキル基を示す）で表される基であり、かつ、Ｒ２１、Ｒ２２又はＲ２３の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ２３が式（ＩＩ）：
【化６９】
2009004914.tif 000075
（式中、Ｘは前記の意味を有する）
で表される基である場合には、Ｒ２１、Ｒ２２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｐは１であるか、或いは、Ｒ２１又はＲ２２のいずれかが、前記式（ＩＩ）で表される基である場合には、ｐは０でもよく、
Ａ１乃至Ａ５のうちの１又は２が窒素原子であり、残りの３又は４がＣＨである］で表される化合物であることを特徴とする、（１）記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（８）Ｒ２３が、式（ＩＩＩ）：
【化７０】
2009004914.tif 000076
（式中、
【化７１】
2009004914.tif 000077
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す）からなる群より選択される基であり、
Ｒ２１及びＲ２２は、それぞれ独立して、水素原子又は低級アルキル基であるか、或いは、
Ｒ２１、Ｒ２２及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、ｐが１である（７）記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（９）Ｒ２３が、式（ＩＩＩ−１）：
【化７２】
2009004914.tif 000078
で表される基である（８）記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（１０）式（Ｉ）で表される化合物が、
【化７３】
2009004914.tif 000079
又は
【化７４】
2009004914.tif 000080
である（１）記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（１１）標識された（１）乃至（１０）のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（１２）標識が放射性核種によるものである（１１）記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（１３）放射性核種がγ線放出核種である（１２）記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（１４）標識が陽電子放出核種である（１１）記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（１５）陽電子放出核が、１１Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ、１８Ｆ、３５ｍＣｌ、７６Ｂｒ、４５Ｔｉ、４８Ｖ、６０Ｃｕ、６１Ｃｕ、６２Ｃｕ、６６Ｇａ、８９Ｚｒ、９４ｍＴｃ及び１２４Ｉからなる群より選択されるものである、（１４）記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（１６）陽電子放出核が、１１Ｃ又は１８Ｆである（１４）記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物；
（１７）（１）乃至（１６）のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含有する医薬組成物；
（１８）（１）乃至（１６）のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物と溶解補助剤とを含む医薬組成物；
（１９）溶解補助剤がポリソルベート８０、ポリエチレングリコール、エタノール及びプロピレングリコールからなる群より選択されるものである、（１８）記載の医薬組成物；
（２０）注射剤である（１７）乃至（１９）のいずれか１項に記載の医薬組成物；
（２１）（１）乃至（１６）のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含有する、コンフォーメーション病診断用組成物；
（２２）（１）乃至（１６）のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を含有する、コンフォーメーション病を治療及び／又は予防するための医薬組成物；
（２３）（１）乃至（１６）のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を必須の構成要素として含む、コンフォーメーション病診断用キット；
（２４）（１）乃至（１６）のいずれか1項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を必須の構成要素として含む、βシート構造をとった蛋白又は神経原線維変化を検出又は染色するための組成物又はキット；
（２５）画像診断用である、（２３）又は（２４）記載のキット；
（２６）（１）乃至（１６）のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を対象に投与することを特徴とする、対象におけるコンフォーメーション病の治療及び／又は予防方法；
（２７）（１）乃至（１６）のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を対象に投与することを特徴とする、対象におけるコンフォーメーション病の診断方法；
（２８）対象におけるコンフォーメーション病の診断用組成物又はキットを製造するための、（１）乃至（１６）のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用；
（２９）対象におけるコンフォーメーション病の治療及び／又は予防のための医薬組成物を製造するための、（１）乃至（１６）のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用；
（３０）（１）乃至（１６）のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物を用いて試料を染色することを特徴とする、試料中のβシート構造をとった蛋白又は神経原線維変化を検出又は染色する方法；
（３１）試料中のβシート構造をとった蛋白又は神経原線維変化を検出又は染色するための組成物又はキットを製造するための、（１）乃至（１６）のいずれか１項に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物の使用；
（３２）式（Ｉ’）：
【化７５】
2009004914.tif 000081
［式中、Ｒ１１１、Ｒ１２１又はＲ１３１のいずれか一つが、式（ＩＩ’）：
【化７６】
2009004914.tif 000082
（式中、Ｘは、ヒドロキシ基で１乃至３置換された、炭素数３乃至１０のアルキル基を示す）で表される基であり、かつ、
Ｒ１１１、Ｒ１２１又はＲ１３１の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ１３１が前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、Ｒ１１１、Ｒ１２１及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｍは１であるか、或いは、Ｒ１１又はＲ１２のいずれかが、前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、ｍは０でもよく、
Ｚは酸素原子又は硫黄原子を示し、
Ｒ２１、Ｒ２２又はＲ２３のいずれか一つが、式（ＩＩ’）：
【化７７】
2009004914.tif 000083
（式中、Ｘは前記の意味を有する）で表される基であり、かつ、
Ｒ２１１、Ｒ２２１又はＲ２３１の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ２３１が前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、Ｒ２１１、Ｒ２２１及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｎは１であるか、或いは、Ｒ２１１又はＲ２２１のいずれかが、前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、ｎは０でもよく、
式
【化７８】
2009004914.tif 000084
は、
【化７９】
2009004914.tif 000085
又は
【化８０】
2009004914.tif 000086
を示し、
Ｒ３１１、Ｒ３２１又はＲ３３１のいずれか一つが、式（ＩＩ’）：
【化８１】
2009004914.tif 000087
（式中、Ｘは、前記の意味を有する）で表される基であり、かつ、
Ｒ３１１、Ｒ３２１又はＲ３３１の残りの二つが、水素原子又は低級アルキル基であるか、
或いは、Ｒ３３１が前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、Ｒ３１１、Ｒ３２１及びこれらに結合する窒素原子が一緒になって形成する３乃至８員の含窒素脂肪族環基であり、
ｐは１であるか、或いは、Ｒ３１１又はＲ３２１のいずれかが、前記式（ＩＩ’）で表される基である場合には、ｐは０でもよく、
Ａ１乃至Ａ５のうちの１又は２が窒素原子であり、残りの３又は４がＣＨである］からなる群より選択される化合物；
（３３）式（ＩＩ’）で表される基が、式（ＩＩＩ’）：
【化８２】
2009004914.tif 000088
（式中、
【化８３】
2009004914.tif 000089
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す）からなる群より選択される基である（３２）記載の化合物；
（３４）式（Ｉ’）で表される化合物が、
【化８４】
2009004914.tif 000090
又は
【化８５】
2009004914.tif 000091
である（３２）の化合物；
を提供するものである。【００６２】
次に、本発明に係る化合物の製造方法について説明する。式（Ｉ）で表される化合物は、例えば、以下の方法によって製造することができる。
【化８６】
2009004914.tif 000092
［式中、Ｒ１３’、Ｒ２３’又はＲ３３’は、それぞれ、Ｒ１３、Ｒ２３又はＲ３３の有するヒドロキシ基の保護基を示し、他の記号は前記の意味を有する］
（工程１）
本工程は、化合物（Ａ）と化合物Ｒ１３’OH、Ｒ２３’OH又はＲ３３’OHとを反応させることにより、化合物（Ａ−１）を製造する方法である。本工程における反応は、いわゆる光延（Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ）反応であり、ホスフィン化合物及びアゾ化合物の存在下、文献記載の方法（例えば、ミツノブ（Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ．Ｏ）著、「ユース  オブ  ジエチル  アゾジカルボキシレート  アンド  トリフェニルホスフィン  イン  シンセシス  アンド  トランスフォーメーション  オブ  ナチュラル  プロダクツ（Ｔｈｅ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｄｉｅｔｈｙｌａｚｏｄｉｃａｒｂｏｘｙｌａｔｅ  ａｎｄ  ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｐｈｏｓｐｈｉｎｅ  ｉｎ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ａｎｄ  ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｎａｔｕｒａｌ  ｐｒｏｄｕｃｔｓ）」、シンセシス（ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）、第１巻、１９８１年、ｐ１−２８）、それに準じた方法又はこれらと常法とを組み合わせることにより行うことができる。【００６３】
用いられる化合物（Ａ）は、公知化合物を用いるか、或いは、公知化合物を原料として、有機化学の分野で通常用いられる方法又はこれに準じた方法により製造したものを用いてもよい。【００６４】
用いられる化合物Ｒ１３’OH、Ｒ２３OH又はＲ３３’OHの量は、化合物（Ａ）１当量に対し、通常０．５乃至１０当量、好ましくは１乃至５当量である。【００６５】
本工程において用いられるホスフィン化合物としては、例えば、トリフェニルホスフィン、トリエチルホスフィン等が挙げられる。【００６６】
用いられるホスフィン化合物の量は、化合物（Ａ）１当量に対して、通常１乃至１０当量、好ましくは１乃至５当量である。【００６７】
用いられるアゾ化合物としては、例えば、ジエチルアゾジカルボキシレート、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート等が挙げられる。【００６８】
用いられるアゾ化合物の量は、化合物（Ａ）１当量に対して、通常０．５乃至１０当量、好ましくは１乃至５当量である。【００６９】
反応時間は、通常１乃至４８時間、好ましくは１乃至２４時間である。【００７０】
反応温度は、通常０℃乃至反応溶媒の還流温度、好ましくは、１０乃至５０℃である。【００７１】
本工程において用いられる反応溶媒としては、反応に支障のないものであれば、特に限定されないが、例えば、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トルエン等が挙げられる。【００７２】
このようにして得られる化合物（Ａ−１）は、公知の分離精製手段、例えば、濃縮、減圧濃縮、結晶化、溶媒抽出、再沈殿、クロマトグラフィー等により単離精製するか、又は単離精製することなく、次工程に付すことができる。【００７３】
（工程２）
本工程は、Ｒ１３’、Ｒ２３’又はＲ３３’の有するヒドロキシ基の保護基を除去することにより、本発明に係る化合物（Ｉ）を製造する方法である。本工程におけるヒドロキシ基の保護基の除去は、文献記載の方法（例えば、プロテクティブ  グル−プス  イン  オ−ガニック  シンセシス（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ）、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎ著、第２版、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ社、１９９１年、等）、それに準じた方法又はこれらと常法とを組み合わせることにより行うことができる。【００７４】
このようにして得られる本発明に係る化合物（Ｉ）は、公知の分離精製手段、例えば、濃縮、減圧濃縮、結晶化、溶媒抽出、再沈殿、クロマトグラフィー等により単離精製することができる。【００７５】
なお、式（Ａ）、（Ａ−１）又は（Ｉ）中のＲ１１、Ｒ１２、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ３１又はＲ３２に、必要に応じて、アミノ基の保護基を導入して、適宜該アミノ基の保護基を除去してもよい。
また、式（Ａ）中の
【化８７】
2009004914.tif 000093
［式中、各記号は前記の意味を有する］で表される基、或いは、これらのアミノ基に保護基を導入した基は、ニトロ基から誘導化することができる。【００７６】
該アミノ基の保護基の導入は、前記プロテクティブ  グル−プス  イン  オ−ガニック  シンセシスに記載の方法、これに準じた方法又はこれらと常法とを組み合わせることにより行うことができる。【００７７】
また、本発明に係る化合物（Ｉ’）は、例えば、以下の方法により製造することができる。
【化８８】
2009004914.tif 000094
［式中、Ｒ１３１’、Ｒ２３１’又はＲ３３１’は、それぞれ、式（ＩＩ’−１）
【化８９】
2009004914.tif 000095
（式中、Ｘ’は、前記Ｘの有するヒドロキシ基が保護されたＸを示し、Ｐｒｏはヒドロキシ基の保護基を示す）で表される基を示し、Ｒ１３１’’、Ｒ２３１’’又はＲ３３１’’は、それぞれ、式（ＩＩ’−２）
【化９０】
2009004914.tif 000096
（式中、Ｘは前記の意味を有する）で表される基を示す］【００７８】
（工程３）
本工程は、化合物（Ａ−２）と化合物Ｒ１３１’OH、Ｒ２３１’OH又はＲ３３１’OHとを反応させることにより、化合物（Ａ−３）を製造する方法である。本工程における反応は、いわゆる光延（Ｍｉｔｓｕｎｏｂｕ）反応であり、前記工程１と同様の方法、これに準じた方法又はこれらと常法とを組み合わせることにより行うことができる。【００７９】
このようにして得られる化合物（Ａ−３）は、公知の分離精製手段、例えば、濃縮、減圧濃縮、結晶化、溶媒抽出、再沈殿、クロマトグラフィー等により単離精製するか、又は単離精製することなく、次工程に付すことができる。【００８０】
（工程４）
本工程は、化合物（Ａ−３）の有するヒドロキシ基の保護基を除去することにより、化合物（Ａ−４）を製造する方法である。
ヒドロキシ基の保護基の除去は、前記プロテクティブ  グル−プス  イン  オ−ガニック  シンセシスに記載の方法、これに準じた方法又はこれらと常法とを組み合わせることにより行うことできる。【００８１】
このようにして得られる化合物（Ａ−４）は、公知の分離精製手段、例えば、濃縮、減圧濃縮、結晶化、溶媒抽出、再沈殿、クロマトグラフィー等により単離精製するか、又は単離精製することなく、次工程に付すことができる。【００８２】
（工程５）
本工程は、塩基の存在下、化合物（Ａ−４）とｐ−トルエンスルホン酸無水物とを反応させることにより、本発明に係る化合物（Ｉ’）を製造する方法である。【００８３】
用いられる塩基としては、例えば、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン等が挙げられる。
また、反応系中に、ジメチルアミノピリジン等を触媒量加えてもよい。【００８４】
用いられる塩基の量は、化合物（Ａ−４）１当量に対して、通常１乃至１０当量、好ましくは、１乃至５当量である。【００８５】
用いられるｐ−トルエンスルホン酸の量は、化合物（Ａ−４）１当量に対して、通常０．５乃至１当量である。【００８６】
反応温度は、通常室温乃至溶媒の沸点温度、好ましくは、５０℃乃至８０℃である。【００８７】
反応時間は、通常１乃至４８時間、好ましくは、１乃至２４時間である。【００８８】
反応溶媒は、反応に支障のないものであれば、特に限定されないが、例えば、ジメトキシエタン、ジメチルホルムアミド等が挙げられる。【００８９】
このようにして得られる化合物（Ｉ’）は、公知の分離精製手段、例えば、濃縮、減圧濃縮、結晶化、溶媒抽出、再沈殿、クロマトグラフィー等により単離精製することができる。【００９０】
なお、式（Ａ−２）、（Ａ−３）、（Ａ−４）又は（Ｉ’）中のＲ１１、Ｒ１２、Ｒ２１、Ｒ２２、Ｒ３１又はＲ３２に、必要に応じて、アミノ基の保護基を導入して、適宜該アミノ基の保護基を除去してもよい。
また、式（Ａ−２）中の
【化９１】
2009004914.tif 000097
［式中、各記号は前記の意味を有する］で表される基、或いは、これらのアミノ基に保護基を導入した基は、ニトロ基から誘導化することができる。【００９１】
本発明の化合物の塩も本発明に包含される。当該塩は、本発明によって提供される式（Ｉ）で示される化合物を用いて、常法にしたがって製造することができる。【００９２】
具体的には、上記式（Ｉ）の化合物が、当該分子内に例えば、アミノ基、ピリジル基等に由来する塩基性基を有している場合には、当該化合物を酸で処理することにより、相当する塩に変換することができる。【００９３】
当該酸付加塩としては、例えば塩酸塩、フッ化水素酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩等のハロゲン化水素酸塩；硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、燐酸塩、炭酸塩等の無機酸塩；メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩等の低級アルキルスルホン酸塩；ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩等のアリ−ルスルホン酸塩；フマル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩等の有機酸塩；及びグルタミン酸塩、アスパラギン酸塩等のアミノ酸等の有機酸であ
る酸付加塩を挙げることができる。【００９４】
また、本発明の化合物が酸性基を当該基内に有している場合、例えばカルボキシル基等を有している場合には、当該化合物を塩基で処理することによっても、相当する薬学的に許容される塩に変換することができる。当該塩基付加塩としては、例えばナトリウム、カリウム等のアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウム等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、グアニジン、トリエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン等の有機塩基による塩が挙げられる。【００９５】
さらに本発明の化合物は、遊離化合物又はその塩の任意の水和物又は溶媒和物として存在してもよい。【００９６】
本発明に係る化合物に用いられる放射性核種はサイクロトロンまたはジェネレーターと呼ばれる装置により産生される。当業者は、産生核種に応じた産生方法および装置が選択可能である。そのようにして産生された核種を用いて本発明の化合物を標識することができる。【００９７】
これらの放射性核種で標識された標識化合物の製造方法は当該分野においてよく知られている。代表的な方法としては、化学合成法、同位体交換法および生合成法がある。化学合成法は従来から広く用いられており、放射性の出発物質を用いること以外は通常の化学合成法と本質的に変わらない。この方法により種々の核種が化合物に導入されている。同位体交換法は、簡単な構造の化合物中の３Ｈ、３５Ｓ、１２５Ｉ等を複雑な構造の化合物中に移して、これらの核種で標識された複雑な構造の化合物を得る方法である。生合成法は、１４Ｃ、３５Ｓ等で標識した化合物を微生物等の細胞に与えてこれらの核種が導入された代謝産物を得る方法である。【００９８】
標識位置については、通常の合成と同様に合成スキームを目的に応じて設計することにより、所望位置に標識を導入することができる。かかる設計は当業者によく知られている。【００９９】
また、例えば、比較的半減期の短い１１Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ、１８Ｆ等の陽電子放出核種を用いる場合、病院等の施設内の設置された（超）小型サイクロトロンから所望核種を得て、上記の方法により所望化合物を所定位置で標識して、即座に診断、検査、治療等に使用することも可能となっている。【０１００】
これらの当業者に公知の方法により、本発明の化合物の所望位置に所望核種を導入して標識することができる。【０１０１】
本発明標識化合物の対象への投与は局所的であってもよく、あるいは全身的であってもよい。投与経路としては、皮内、腹腔内、静脈、動脈、もしくは脊髄液への注射または輸液等があるが、疾病の種類、使用核種、使用化合物、対象の状態、検査部位の要因により選択できる。本発明プローブを投与して、アミロイドβ蛋白への結合および崩壊のための十分な時間経過後、ＰＥＴ、ＳＰＥＣＴ等の手段で検査部位を調べることができる。こららの手段は、疾病の種類、使用核種、使用化合物、対象の状態、検査部位等の要因に応じて適宜選択できる。【０１０２】
放射性核種で標識された本発明の化合物の用量は、疾病の種類、使用核種、使用化合物、対象の年齢、身体的状態、性別、疾病の程度、検査部位等により様々である。特に、対象の被爆量については十分注意する必要がある。例えば、１１Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ、１８Ｆのごとき陽電子放出核種により標識された本発明の化合物の放射能量は、通常には、３．７メガベクレル乃至３．７ギガベクレル、好ましくは１８メガベクレル乃至７４０メガベクレルの範囲である。【０１０３】
本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物には、以下に述べるコンフォーメーション病の治療方法、診断方法、治療用組成物、診断用組成物、診断用キット、これらの組成物およびキットを製造するための使用、ならびにその他の使用に適している。
また、本発明化合物のうち、式（Ｉ）中のＲ１１、Ｒ１２もしくはＲ１３のいずれか一つ、Ｒ２１、Ｒ２２もしくはＲ３３のいずれか一つ、又はＲ２１、Ｒ２２もしくはＲ３３のいずれか一つが、式（ＩＩＩ）：
【化９２】
2009004914.tif 000098
［式中、
【化９３】
2009004914.tif 000099
は、酸素原子又は窒素原子との結合部位を示す］からなる群より選択される基を有するものは、骨への集積が極めて低いか、ほとんどないので人体への投与に適している。【０１０４】
本発明は、本発明の化合物を含む、コンフォーメーション病の画像診断用組成物を提供する。本発明組成物は、本発明の化合物および医薬上許容される担体を含む。組成物中の本発明の化合物は標識されていることが好ましい。上記のごとき標識法は様々であるが、インビボでの画像診断用途には放射性核種（特にＰＥＴ用には１１Ｃ、１３Ｎ、１５Ｏ、１８Ｆのごとき陽電子放出核種）で標識されていることが望ましい。本発明組成物の携帯は、その目的からすれば注射あるいは輸液可能な形態であることが好ましい。したがって、医薬上許容される担体は液体であるものが好ましく、リン酸カリウム緩衝液、生理食塩水、リンゲル液、蒸留水等のごとき水性溶媒、あるいはポリエチレングリコール、植物性油脂、エタノール、グリセリン、ジメチルスルホキシド、プロピレングリコール等のごとき非水性溶媒があるが、これらに限らない。担体と本発明の化合物の配合比率は、適用部位、検出手段等に応じて適宜選択できるが、通常には１０万対１乃至２対１の比率であり、好ましくは１万対１乃至１０対１の比率である。また本発明組成物はさらに公知の抗菌剤（例えば、抗生剤等）、局所麻酔剤（例えば、塩酸プロカイン等）、バッファー（例えば、トリス−塩酸バッファー、ヘペスバッファー等）、浸透圧調節剤（例えば、グルコース、ソルビトール、塩化ナトリウム等）等を含有していてもよい。
さらに本発明は、本発明の化合物を必須の構成成分として含む、コンフォーメーション病の画像診断用キットを提供する。通常には、キットは、本発明の化合物、それを溶解する溶剤、バッファー、浸透圧調節剤、抗菌剤、局所麻酔剤等の各成分を別個に、あるいはいくつかを一緒にしてそれぞれの容器に入れたものをひとまとめにしたものである。本発明の化合物は未標識であっても、標識されていてもよい。未標識の場合、上記で説明したような通常の方法により、使用前に本発明の化合物を標識することができる。また、本発明の化合物は凍結乾燥粉末等の固形として提供してもよく、あるいは適当な溶媒中に溶解して提供してもよい。溶剤としては上述の本発明組成物に用いる担体と同様のものであってよい。また、バッファー、浸透圧調節剤、抗菌剤、局所麻酔剤等の各成分も上述の本発明組成物に使用するものと同様のものであってよい。容器は種々のものを適宜選択できるが、本発明の化合物への標識導入操作に適した形状とすることもでき、化合物の性質に応じて遮光性の材質のものとしてもよく、あるいは、患者への投与に便利なようにバイアル、または注射器等の形状とすることもできる。また、キットは診断に必要な器具類、例えば、注射器、輸液セット、あるいはＰＥＴ装置やＳＰＥＣＴ装置に使用する器具等を適宜含んでいてもよい。通常、キットには説明書を添付する。【０１０５】
さらに、本発明の化合物がアミロイドβ蛋白に特異的に結合することから、本発明の化合物を未標識のまま、あるいは標識して、インビトロにて試料標本と接触させることにより、標本中のアミロイドβ蛋白の検出、定量等に使用することもできる。例えば、顕微鏡標本のアミロイドβ蛋白染色、試料中のアミロイドβ蛋白の比色定量、あるいはシンチレーションカウンターを用いたアミロイドβ蛋白の定量等に本発明の化合物を使用してもよい。顕微鏡標本の調製ならびに本発明の化合物を用いた染色は、当業者に知られた通常の方法により行うことができる。【０１０６】
先にも述べたように、本発明の化合物はアミロイドβ蛋白に特異性が高い。したがって、本発明の化合物は、例えば、アミロイドβ蛋白蓄積性疾患の研究あるいは生前または死後における診断等に有用であり、例えば、アルツハイマー病患者脳の老人斑の染色剤として有用と考えられる。本発明の化合物を用いた標本、例えば脳切片の染色は、当業者に知られた通常の方法で行うことができる。【０１０７】
上述のごとく、本発明化合物のうち、とりわけ末端基として式（ＩＩＩ）：
【化９４】
2009004914.tif 000100
［式中、
【化９５】
2009004914.tif 000101
は前記に同じ］からなる群より選択される基を有するものは、骨への集積が極めて低いか、ほとんどない。
したがって、これらの本発明の化合物は極めて安全なコンフォーメーション病診断プローブであるばかりでなく、後述のような治療薬または予防薬として用いた場合にも安全性が高い。【０１０８】
しがたって、本発明は、本発明の化合物またはその医薬上許容される塩もしくは溶媒和物を含む試料中のアミロイドβ蛋白の染色用組成物、ならびに本発明の化合物またはその医薬上許容される塩もしくは溶媒和物を必須の構成成分として含む、試料中のアミロイドβ蛋白の染色用キットに関する。さらに、本発明は、本発明の化合物又はその医薬上許容される塩もしくは溶媒和物を用いることを特徴とする試料中のアミロイドβ蛋白の染色方法にも関する。これらの染色に適した試料は、脳切片である。【０１０９】
上述のごとく、βシート構造をとったアミロイドβ蛋白に神経細胞毒性がみられることが判明している。本発明の化合物は、βシート構造をとったアミロイドβ蛋白に特異的に結合するので、その神経細胞毒性を抑制すると考えられる。したがって、本発明の化合物は、蛋白自身がβシート構造をとることによって病因、または病因の一部となるコンフォーメーション病、例えばアルツハイマー病の治療薬または予防薬になると考えられる。【０１１０】
したがって、本発明は、
式（Ｉ）の化合物またはその塩もしくは溶媒和物を投与することを特徴とするアミロイドβ蛋白蓄積性疾患の治療および／または予防方法；
式（Ｉ）の化合物またはその塩もしくは溶媒和物を用いることを特徴とするアミロイドβ蛋白蓄積性疾患の診断方法；ならびに
アミロイドβ蛋白蓄積性疾患の治療、予防または診断するための組成物またはキットを製造するための式（Ｉ）の化合物またはその塩もしくは溶媒和物の使用
を提供する。【０１１１】
かかる医薬組成物の形態は特に限定されないが、液体処方が好ましく、特に注射用処方が好ましい。かかる注射用処方を脳内に直接注入することもでき、あるいは、実施例に示すように本発明の化合物は血液／脳関門透過性が高いので、上記医薬組成物を静脈注射または静脈点滴用に処方して投与することもできる。かかる液体処方の調製は当該分野にて、公知の方法で行うことができる。溶液の調製は、例えば、本発明の化合物を適当な担体、注射用水、生理食塩水、リンゲル液等に溶解し、フィルター等で滅菌し、その後、適当な容器、例えば、バイアルまたはアンプルに充填する。また、溶液を凍結乾燥させ、使用時に適当な担体で再度溶液に復元することも可能である。懸濁液の調製は、例えば、本発明の化合物を例えばエチレンオキサイドにさらすことにより滅菌し、次いで、滅菌済み液体担体に懸濁することにより行うことができる。【０１１２】
かかる医薬組成物を液体処方、特に注射用処方として用いる場合、本発明に係る化合物に溶解補助剤を加えて、注射剤とすることができる。
該溶解補助剤としては、当該技術分野で用いられる非イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤、両性界面活性剤等を用いることができる。これらのうち、溶解補助剤としては、ポリソルベート８０、ポリエチレングリコール、エタノール又はプロピレングリコールが好ましく、ポリソルベート８０がより好ましい。【０１１３】
上記治療方法、予防方法、および使用における本発明の化合物のヒト対象への投与量は、患者の病状、性別、年齢、体重等に左右されるが、一般的には、体重７０ｋｇの成人の場合、１日あたり０．１ｍｇ乃至１ｇ、好ましくは１ｍｇ乃至１００ｍｇ、より好ましくは５ｍｇ乃至５０ｍｇである。一定期間かかる投与量で処置を行い、結果により投与量を増減することができる。【０１１４】
さらに、本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物は、コンフォーメーション病の診断プローブとして、好ましくは放射線核種にて標識された画像診断プローブとしても使用できる。さらに、本発明の化合物はコンフォーメーション病の治療および／または予防にも効果を有する。【０１１５】
したがって、本発明は、
コンフォーメーション病の画像診断プローブとして使用される本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物；
本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物を含むコンフォーメーション病の画像診断用組成物またはキット；
本発明の化合物またはその医薬上許容される塩もしくは溶媒和物および医薬上許容される担体を含有する、コンフォーメーション病の予防および／または治療用医薬組成物；
本発明の化合物またはその医薬上許容される塩もしくは溶媒和物を用いることを特徴とする、コンフォーメーション病の診断方法；
コンフォーメーション病を診断するための、本発明の化合物またはその医薬上許容される塩もしくは溶媒和物の使用；
本発明の化合物またはその医薬上許容される塩もしくは溶媒和物を対象に投与することを特徴とする、コンフォーメーション病の予防および／または治療方法；
コンフォーメーション病を予防および／または治療するための、本発明の化合物またはその医薬上許容される塩もしくは溶媒和物の使用；ならびに
コンフォーメーション病を予防および／または治療するための医薬組成物の製造における、本発明の化合物の使用
にも関する。【０１１６】
上記治療方法および予防方法における本発明の化合物のヒト対象への投与量は、上述のとおりである。【０１１７】
本発明の化合物のうち、ある種のものは神経原線維変化を認識するので、神経原線維変化の検出用プローブ、あるいは神経原線維変化の染色剤として使用することができる。したがって、本発明は、神経原線維変化の診断プローブ、特に画像診断プローブとしての、本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物の用途にも関する。神経原線維変化の染色剤として好ましい本発明の化合物は、ＴＨＫ−８３７、ＴＨＫ−８５３などどである。【０１１８】
したがって、本発明は：
本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物を含む、神経原線維変化を検出あるいは染色するための組成物；
本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物を含む、神経原線維変化を検出あるいは染色するためのキット；
本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物を用いることを特徴とする神経原線維変化を検出あるいは染色する方法；ならびに
神経原線維変化を検出あるいは染色するための組成物を製造するための本発明の化合物またはその塩もしくは溶媒和物の使用
を提供する。【０１１９】
上述の神経原線維変化を検出あるいは染色における試料標本の調製、染色などの方法は当業者に公知の方法を適用することができる。【０１２０】
以下に実施例を示して、本発明をより詳細かつ具体的に説明するが、実施例によって、本発明は何ら限定されるものではない。
【実施例１】
【０１２１】
本発明の化合物の合成
以下に、本発明の化合物の合成例を示す。
実施例のシリカゲルカラムクロマトグラフィーには、富士シリシア化学社製のシリカゲルＢＷ３００を用いた。アミノ基結合型シリカゲルを用いる塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィーは富士シリシア化学社製クロマトレックスＮＨ−ＤＭ１０２０を用いた。
１Ｈ−ＮＭＲはＶＡＲＩＡＮ社製ＵＮＩＴＹ  ＩＮＯＶＡ５００（５００ＭＨｚ）、日本電子社製ＪＮＭ−ＬＡ４００（４００ＭＨｚ）、ＶＡＲＩＡＮ社製Ｇｅｍｉｎｉ  ２０００（３００ＭＨｚ）テトラメチルシランを標準物質として用いて測定し、全δ値をｐｐｍで測定した。
またマススペクトルはＴｈｅｒｍｏＱｕｅｓｔ社製ＬＣＱ−Ａｄｖａｎｔａｇｅ、またはＦｉｎｎｉｇａｎＭＡＴ社製ＳＳＱ−７０００Ｃを使用し、大気圧化学イオン化法（ＡＰＣＩ）で測定した。
赤外線スペクトルについてはＰｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ社製Ｐａｒａｇｏｎ１０００  ＦＴ−ＩＲを用い、融点測定にはＢＵＣＨＩ社製Ｂ−５４５を用いた。【０１２２】
ＮＭＲ測定における略号の意味を以下に示す。
ｓ：シングレット
ｄ：ダブレット
ｄｄ：ダブルダブレット
ｄｄｄ：ダブルダブルダブレット
ｔ：トリプレット
ｄｔ：ダブルトリプレット
ｑ：カルテット
ｍ：マルチプレット
ｂｒ：ブロード
Ｊ：カップリン定数
Ｈｚ：ヘルツ
ＣＤＣｌ３：重クロロホルム
ＤＭＳＯ−ｄ６：重ジメチルスルホキシド【０１２３】
ＴＨＫ−８３７（１５９）の合成
【化９６】
2009004914.tif 000102
１５３の合成
１３２（１．００ｇ、６.４４ｍｍｏｌ）及び４−ニトロベンズアルデヒド（0.９７ｇ、６.４４ｍｍｏｌ）のジメチルスルホキシド（３６ｍｌ）溶液をアルゴン雰囲気下１８０℃で３０分攪拌した。反応液を放冷、酢酸エチルで希釈、水洗、乾燥、減圧溶媒留去、残渣を酢酸エチルで再結晶し１５３（１.５７ｇ、８５％）を橙色結晶として得た。
ｍｐ  ２１７〜２１８℃、ＡＰＣＩ−ＭＳ   ｍ／ｚ  ２８７[Ｍ＋Ｈ]＋
１５４の合成
１５３（１．４８ｇ、５.１７ｍｍｏｌ）及びビリジン塩酸塩（２０ｇ）の混合物を２００℃で４時間攪拌した。
反応液を放冷（固化）、水及び酢酸エチルで溶解、１０％塩酸でｐＨ1とし、分液後、有機層を水洗、乾燥、減圧溶媒留去し１５４（１.４０ｇ、９９％）を橙色固体として得た。
ｍｐ  ２６２〜２６４℃、ＡＰＣＩ−ＭＳ   ｍ／ｚ  ２７３[Ｍ＋Ｈ]＋
１５５の合成
１５４（１.４０ｇ、５.１４ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（６０ｍｌ）溶液に１２６（１.１４ｇ、６.１７ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（１.６２ｇ、６.１７ｍｍｏｌ）を加え、氷冷攪拌下ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（１.２２ｍｌ、６.１７ｍｍｏｌ）を滴下し室温で１６時間撹拌した。反応液を減圧溶媒留去、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ−ヘキサン／酢酸エチル＝４／１）で精製、酢酸エチル／ｎ−ヘキサンで再結晶し１５５（１.８７ｇ、８３％）を淡黄色結晶として得た。
ｍｐ  ９６〜９７℃、ＡＰＣＩ−ＭＳ   ｍ／ｚ  ４３９[Ｍ＋Ｈ]＋
１５６の合成
１５５（１.８７ｇ、４.２６ｍｍｏｌ）のメタノール／酢酸エチル／酢酸（３０／３０／１０ｍｌ）溶液にアルゴン雰囲気下１０％パラジウムー炭素（０.３８ｇ）を加え、水素雰囲気下、常圧、室温で１６時間攪拌した。
反応液のパラジウムー炭素をろ別、ろ液を減圧溶媒留去、残渣を酢酸エチルで希釈し、炭酸カリウム水溶液洗、水洗、乾燥、減圧溶媒留去、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝３：１）で精製し１５６（１.７０ｇ、９８％）を淡黄色油状物として得た。
ＡＰＣＩ−ＭＳ   ｍ／ｚ  ４０９[Ｍ＋Ｈ]＋
１５７の合成
１５６（１.４６ｇ、３.５７ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２０ｍｌ）溶液にビリジン(０.８７ｍｌ、１０.７２ｍｍｏｌ)を加え、氷冷撹拌下トリフロロ酢酸無水物 (０.７６ｍｌ、５.３６ｍｍｏｌ)を滴下し、同温で２０分撹拌した。反応液に冷水を加え酢酸エチルで抽出した。抽出液を水洗、乾燥、減圧溶媒留去、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：ｎ−ヘキサン/酢酸エチル＝３／１）で精製し１５７（１.６５ｇ、９２％）を淡黄色固体として得た。
ｍｐ  １２１〜１２２℃、ＡＰＣＩ−ＭＳ   ｍ／ｚ  ５０５[Ｍ＋Ｈ]＋
１５８の合成
１５７（１.６５ｇ、３.２７ｍｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（２０ｍｌ）溶液に氷冷攪拌下、６０％水素化ナトリウム（０.２０ｇ、４.９１ｍｍｏｌ）を加え、同温で５分攪拌、ヨードメタン(０.６７ｍｌ、９.８１ｍｍｏｌ)を加え、室温で１時間撹拌した。反応液を氷冷攪拌下、飽和塩化アンモニウム溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。抽出液を水洗、乾燥、減圧溶媒留去、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ｎ−ヘキサン／アセトン＝９／１)で精製し１５８（１.２２ｇ、７２％）を淡黄色油状物として得た。
ＡＰＣＩ−ＭＳ   ｍ／ｚ  ５１９[Ｍ＋Ｈ]＋
１５９の合成
１５８（１．２２ｇ、２.３５ｍｍｏｌ）及びビリジン塩酸塩（１５ｇ）の混合物を１８０℃で２時間攪拌した。
反応液を放冷（固化）、水及び酢酸エチルで溶解、分液後、有機層を水洗、乾燥、減圧溶媒留去し１５９（０.３４ｇ、４４％）を淡黄色結晶として得た。
ｍｐ  １６２〜１６３℃、１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  １.９０（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝６.４Ｈｚ、Ｄ２Ｏ消去）、２.９１（３Ｈ、ｓ）、３.９０〜４.０２（２Ｈ、ｍ）、４.１１（１Ｈ、ｓ、Ｄ２Ｏ消去）、４.５４〜４.８０（３Ｈ、ｍ）、６.６５（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８.３Ｈｚ）、７.１１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８.８、２.０Ｈｚ）、７.４５（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝２.０Ｈｚ）、７.８８ (３Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．８Ｈｚ)
ＩＲ  (Ｎｕｊｏｌ) ３３８０、１６１５ｃｍ−1、ＡＰＣＩ−ＭＳ   ｍ／ｚ  ３３３[Ｍ＋Ｈ]＋【０１２４】
ＴＨＫ８５２の合成
【化９７】
2009004914.tif 000103
１８４の合成
１８２（１．００ｇ、４．１５ｍｍｏｌ）、１８３（１．６０ｇ、４．９７ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（１．３１ｇ、４．９７ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（４０ｍｌ）の混合物に、アルゴン雰囲気氷冷攪拌下ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．９９ｍｌ、４．９７ｍｍｏｌ）を滴下し同温で１時間、室温で3日撹拌した。反応液の溶媒を減圧留去して残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル/ｎ−ヘキサン＝１/２０）で精製して粗製の１８４（２．５３ｇ）を黄色油状物質として得た。本品は、さらに精製することなく次の工程に使用した。
ＡＰＣＩ−ＭＳ   ｍ／ｚ５４４[Ｍ＋Ｈ]＋
１８５の合成
１８４（２．５３ｇ）のテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）溶液に１Ｍテトラブチルアンモニウムフロリド／テトラヒドロフラン溶液（８．２９ｍｌ、８．２９ｍｍｏｌ）を滴下し、室温で１時間攪拌した。反応液を水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機層を水洗、乾燥後、溶媒を減圧留去して残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル/ｎ−ヘキサン＝１/１および酢酸エチル）で精製した後、酢酸エチルから再結晶して１８５（１．０８ｇ、８２％ from １８２）を黄色結晶として得た。
ｍｐ  １２９〜１２９．５℃、ＩＲ  (Ｎｕｊｏｌ)３３３４ｃｍ−1、ＡＰＣＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ３１６[Ｍ＋Ｈ]＋
１８６の合成
１８５（１.０８ｇ、３．４３ｍｍｏｌ）、エタノール（４１ｍｌ）、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ（４．０２ｇ）および濃塩酸（１．６１ｍｌ）の混合物を１時間加熱還流した。放冷後、反応液に水−酢酸エチルを加えて、炭酸カリウム水溶液でｐＨ８として分液した。有機層を水洗、乾燥後、溶媒を減圧留去して残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル/ｎ−ヘキサン＝１/１および２/２）で精製して１８６（８４０ｍｇ、８５％）を淡黄色固体として得た。
ｍｐ  ２１７〜２１８℃、ＡＰＣＩ−ＭＳ   ｍ／ｚ２８６[Ｍ＋Ｈ]＋
１８７の合成 
１８６（８４０ｍｇ、２．８４ｍｍｏｌ）、パラホルムアルデヒド（４４０ｍｇ、１４．７ｍｍｏｌ）ナトリウムメトキシド（２８％メタノール溶液：２．８４ｇ、１４．７ｍｍｏｌ）、メタノール（５６ｍｌ）の混合物をアルゴン雰囲気下、２時間加熱還流した。反応液を氷冷し、水素化ほう素ナトリウム（５６０ｍｇ、１４．７ｍｍｏｌ）を加え、同温で５分攪拌後１時間加熱還流した。反応液を室温とし、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、水を加えて酢酸エチルで抽出した。抽出液を水洗後乾燥して、溶媒を減圧留去して、１８７（８８０ｍｇ、定量的）を淡黄色固体として得た。
ｍｐ  １６４〜１６５℃、ＡＰＣＩ−ＭＳ   ｍ／ｚ３００[Ｍ＋Ｈ]＋
１８８の合成
１８７（８８０ｍｇ、２．６６ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）溶液に（Ｂｏｃ）２Ｏ（０．７３ｍｌ、３．１９ｍｍｏｌ）を加え、室温で３時間、５０℃で１４時間撹拌した。反応液の溶媒を減圧留去し、残渣をｎ−ヘキサンで洗浄後乾燥して、１８８（１．０３ｇ、９６％）を淡黄色固体として得た。
ｍｐ１４２〜１４３℃、ＡＰＣＩ−ＭＳ   ｍ／ｚ４００[Ｍ＋Ｈ]＋
１８９の合成
１８８（１．０３ｇ、２．５８ｍｍｏｌ）のエチレングリコールジメチルエーテル（３０ｍｌ）溶液にトリエチルアミン（０．５４ｍｌ、３．８７ｍｍｏｌ）、トルエンスルホン酸無水物（８４０ｍｇ、２．５８ｍｍｏｌ）を加え１時間加熱還流した。反応液の溶媒を減圧留去して、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝１／３〜２／１）で精製し１８９（５４０ｍｇ、３７％）を淡黄色泡状物として得た。
ＡＰＣＩ−ＭＳ   ｍ／ｚ  ５５４[Ｍ＋Ｈ]＋
ＴＨＫ−８５２の合成
１８９（８８０ｍｇ、１．５９ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１２ｍｌ）溶液に氷冷攪拌下トリフロロ酢酸（８ｍｌ）を滴下し室温で１時間攪拌した。反応液に冷水を加え酢酸エチルで希釈して、炭酸カリウム水溶液でｐＨ８とし分液した。有機層を水洗後乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝１／２）で精製後、酢酸エチルから再結晶してＴＨＫ−８５２（４３６ｍｇ、６０％）を淡黄色結晶として得た。
ｍｐ１２２〜１２３．５℃、１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  ２．４３(３Ｈ、ｓ)、 ２．８７（３Ｈ、ｓ）、３．８１（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１２、４．９Ｈｚ）、３．８９（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１２、４．３Ｈｚ）、４．２３〜４．２９（２Ｈ、ｍ）、４．４８〜４．５４（１Ｈ、ｍ）、６．６０（２Ｈ、ｄ、J＝８．６Ｈｚ）、６．８１（２Ｈ、ｄ、J＝８．６Ｈｚ）、６．８２（１Ｈ、ｄ、J＝１６Ｈｚ）、６．９０（１Ｈ、ｄ、J＝１６Ｈｚ）、７．３０〜７．３８（６Ｈ、ｍ）、７．７６（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝７．８Ｈｚ）
ＩＲ  (Ｎｕｊｏｌ)３４３５、１６１２ｃｍ−1、ＡＰＣＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ４５４[Ｍ＋Ｈ]＋【０１２５】
ＴＨＫ−８５３の合成
【化９８】
2009004914.tif 000104
１９０の合成 
１８２（１．００ｇ、４．１５ｍｍｏｌ）、１２６（０．９２ｇ、４．９７ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（１．３１ｇ、４．９７ｍｍｏｌ）、テトラヒドロフラン（４０ｍｌ）の混合物に、アルゴン雰囲気氷冷攪拌下ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．９９ｍｌ、４．９７ｍｍｏｌ）を滴下し同温で１時間、室温で３日撹拌した。反応液の溶媒を減圧留去して残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル/ｎ−ヘキサン＝１/４）で精製して１９０（１．７８ｇ、定量的）を黄色油状物質として得た。
ＡＰＣＩ−ＭＳ   ｍ／ｚ４０８[Ｍ＋Ｈ]＋
１９１の合成
１９０（１．６０ｇ、３．９３ｍｍｏｌ）及びビリジン塩酸塩（１０ｇ）の混合物を１８０℃で４０分攪拌した。反応液を放冷後、水及び酢酸エチルで溶解し、１０％塩酸でｐＨ1として分液した。有機層を水洗、乾燥後、溶媒を減圧留去して残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル/ｎ−ヘキサン＝１/４〜１/１）で精製して１９１（１．０３ｇ、８２％）を黄色固体として得た。
ｍｐ１１３〜１１４℃、ＡＰＣＩ−ＭＳ   ｍ／ｚ３１８[Ｍ＋Ｈ]＋
１９２の合成
１９１（１.０３ｇ、３．２５ｍｍｏｌ）、エタノール（４０ｍｌ）、ＳｎＣｌ２・２Ｈ２Ｏ（３．８１ｇ）および濃塩酸（１．５３ｍｌ）の混合物を１．５時間加熱還流した。放冷後、反応液に水−酢酸エチルを加えて、炭酸カリウム水溶液でｐＨ８として分液した。有機層を水洗、乾燥後、溶媒を減圧留去して残渣を酢酸エチルから再結晶して１９２（８２０ｍｇ、８７％）を淡黄色結晶として得た。
ｍｐ  １９４〜１９５℃、ＡＰＣＩ−ＭＳ   ｍ／ｚ２８８[Ｍ＋Ｈ]＋
ＴＨＫ−８５３の合成
１９２（８２０ｍｇ、２．８５ｍｍｏｌ）、パラホルムアルデヒド（４３０ｍｇ、１４．２ｍｍｏｌ）ナトリウムメトキシド（２８％メタノール溶液：２．７４ｇ、１４．２ｍｍｏｌ）、メタノール（５５ｍｌ）の混合物をアルゴン雰囲気下、２時間加熱還流した。反応液を氷冷し、水素化ほう素ナトリウム（５４０ｍｇ、１４．２ｍｍｏｌ）を加えて同温で５分攪拌後、１時間加熱還流した。反応液を室温とし、飽和塩化アンモニウム水溶液および水を加えて酢酸エチルで抽出した。抽出液を水洗後乾燥して、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル/ｎ−ヘキサン＝１/１）で精製後、酢酸エチルから再結晶して、ＴＨＫ−８５３（６９２ｍｇ、８０％）を無色結晶として得た。
ｍｐ  １５６〜１５６．５℃、
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ  １．９１（１Ｈ、ｂｒ、Ｄ２Ｏ消去）２．８６(３Ｈ、ｓ)、 ３.８７〜３．９７（２Ｈ、ｍ）、４．５１〜４．７４（３Ｈ、ｍ）、６．５９（２Ｈ、ｄ、J＝８．５Ｈｚ）、６．８４（１Ｈ、ｄ、J＝１６Ｈｚ）、６．９０〜６．９７（３Ｈ、ｍ）、７．３４（２Ｈ、ｄ、J＝８．８Ｈｚ）、７．４０（２Ｈ、ｄ、J＝８．８Ｈｚ）
ＩＲ  (Ｎｕｊｏｌ)３５８８、３３８７、１６０５ｃｍ−1、ＡＰＣＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ３０２[Ｍ＋Ｈ]＋
【０１２６】
ＴＨＫ８５７の合成
【化９９】
2009004914.tif 000105
１７６の合成
１５４（１．５０ｇ、５．５１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（６０ｍｌ）懸濁液に１，３−ジベンジルオキシ−２−プロパノール（１．８０ｇ、６．６１ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（１．７３ｇ、６．６１ｍｍｏｌ）を加え、アルゴン雰囲気氷冷攪拌下ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（１．３１ｍｌ、６．６１ｍｍｏｌ）を滴下し室温で１６時間撹拌した。１，３−ジベンジルオキシ−２−プロパノール（０．４５ｇ、１．６５ｍｍｏｌ）、トリフェニルホスフィン（０．４３ｇ、１．６５ｍｍｏｌ）を追加し、氷冷攪拌下ジイソプロピルアゾジカルボキシレート（０．３３ｍｌ、１．６５ｍｍｏｌ）を滴下し室温で３日撹拌した。反応液の溶媒を減圧留去して残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝１／９）で精製後、酢酸エチル−ｎ−ヘキサンより再結晶して１７６（１．９９ｇ、６８％）を黄色結晶として得た。
ｍｐ  ９４〜９５℃、ＡＰＣＩ−ＭＳ    ｍ／ｚ５２７［Ｍ＋Ｈ］＋
１７７の合成
１７６（１．９９ｇ、３．７８ｍｍｏｌ）及びビリジン塩酸塩（２０ｇ）の混合物を１８０℃で２．５時間攪拌した。反応液を放冷（固化）し、水及び酢酸エチルで溶解、１０％塩酸でｐＨ１とし、分液後、有機層を水洗、乾燥、減圧溶媒留去して１７７（１．００ｇ、９９％）を橙色固体として得た。
ｍｐ  ２０２〜２０３℃、ＡＰＣＩ−ＭＳ    ｍ／ｚ３４７［Ｍ＋Ｈ］＋
１７８の合成
１７７（１．００ｇ、２．８９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン／水（４０／４ｍｌ）溶液にアルゴン雰囲気下１０％パラジウム−炭素（水分約５０％：４００ｍｇ）を加え、水素雰囲気下、常圧、室温で３時間攪拌した。反応液のパラジウム−炭素をろ別、ろ液を減圧溶媒留去、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝１／１〜酢酸エチル）で精製し１７８（０．９０ｇ、９８％）を黄色固体として得た。
ｍｐ  １８１〜１８２℃、ＡＰＣＩ−ＭＳ    ｍ／ｚ  ３４７［Ｍ＋Ｈ］＋
１７９の合成
１７８（９００ｍｇ、２．８５ｍｍｏｌ）、パラホルムアルデヒド（４３０ｍｇ、１４．２ｍｍｏｌ）ナトリウムメトキシド（２８％メタノール溶液：２．７４ｇ、１４．２ｍｍｏｌ）、メタノール（６０ｍｌ）およびテトラヒドロフラン（２０ｍｌ）の混合物をアルゴン雰囲気下、２．５時間加熱還流した。反応液を氷冷し、水素化ほう素ナトリウム（５４０ｍｇ、１４．２ｍｍｏｌ）を加え、１０分加熱還流した。反応液を室温とし、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え１０分室温で攪拌後、水を加えて酢酸エチルで抽出した。抽出液を水洗後乾燥して、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル）で精製し１７９（８９０ｍｇ、９４％）を橙色固体として得た。
ｍｐ  １７９〜１８１℃、ＡＰＣＩ−ＭＳ    ｍ／ｚ３３１［Ｍ＋Ｈ］＋
１８０の合成
１７９（８９０ｍｇ、２．６９ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（５０ｍｌ）溶液に（Ｂｏｃ）２Ｏ（０．７４ｍｌ、３．２３ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間、加熱還流で２時間撹拌した。（Ｂｏｃ）２Ｏ（３．７２ｍｌ、１６．１ｍｍｏｌ）を追加し、１６時間加熱還流した。反応液を室温とし、炭酸カリウム水溶液およびメタノールを加えて、２時間加熱還流した。反応液を室温として酢酸エチルで抽出し、抽出液を水洗，乾燥後、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝１／９〜酢酸エチル）で精製し１８０（９１０ｍｇ、７８％）を淡黄色固体として得た。
ｍｐ１５０〜１５１℃、ＡＰＣＩ−ＭＳ    ｍ／ｚ４３１［Ｍ＋Ｈ］＋
１８１の合成
１８０（９１０ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ）のエチレングリコールジメチルエーテル（４０ｍｌ）懸濁液にトリエチルアミン（０．４４ｍｌ、３．１７ｍｍｏｌ）、トルエンスルホン酸無水物（６９０ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ）を加え１時間加熱還流した。反応液の溶媒を減圧留去して、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝１／２〜酢酸エチル）で精製し１８１（６５０ｍｇ、５２％）を淡黄色泡状物として得た。
ＡＰＣＩ−ＭＳ    ｍ／ｚ  ５８５［Ｍ＋Ｈ］＋
ＴＨＫ−８５７の合成
１８１（９１０ｍｇ、１．５６ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１２ｍｌ）溶液に氷冷攪拌下トリフルオロ酢酸（８ｍｌ）を滴下し室温で１時間攪拌した。反応液に冷水を加え酢酸エチルで希釈して、炭酸カリウム水溶液でｐＨ９とし分液した。有機層を水洗後乾燥し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒：酢酸エチル／ｎ−ヘキサン＝１／１）で精製後、酢酸エチルで再結晶してＴＨＫ−８５７（５０８ｍｇ、６７％）を淡黄色結晶として得た。
ｍｐ１６３．５〜１６４．５℃、１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）δ  ２．３５（３Ｈ、ｓ）、  ２．７５（３Ｈ、ｄ、Ｊ＝５．０Ｈｚ）、３．５４〜３．６３（２Ｈ、ｍ）、４．２４（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１１、５．８Ｈｚ）、４．３２（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝１１、２．７Ｈｚ）、５．０６（１Ｈ、ｔ、Ｊ＝５．６Ｈｚ、Ｄ２Ｏ消去）、６．４３（１Ｈ、ｑ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、Ｄ２Ｏ消去）、６．６４（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ）、６．９５（１Ｈ、ｄｄ、Ｊ＝８．９、２．４Ｈｚ）、７．３９（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．５０（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ）、７．７４（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ）、７．７５（１Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．９Ｈｚ）、７．７８（２Ｈ、ｄ、Ｊ＝８．６Ｈｚ）
ＩＲ  （Ｎｕｊｏｌ）３３８７、３１９７、１６１０ｃｍ−１、ＡＰＣＩ−ＭＳ  ｍ／ｚ４８５［Ｍ＋Ｈ］＋
【実施例２】
【０１２７】
本発明の化合物のアルツハイマー病患者脳切片上での染色性試験【０１２８】
本発明の化合物のアルツハイマー病患者脳切片上での染色性試験の手順について、以下に説明する。
（１）病理学的にアルツハイマー病と確定診断された患者および正常高齢者の、側頭葉または海馬における脳標本を使用した。標本は共同研究先である福祉村病院長寿医学研究所から提供を受け、患者遺族から研究目的での使用に対する承諾を得ている（福祉村病院倫理委員会許可Ｎｏ．２０）。
（２）パラフィン包埋された脳組織は厚さ６μｍあるいは８μｍで薄切し、スライドグラス上に伸展、乾燥させた。パラフィン脳切片はキシレン１０分×２、１００％エタノール５分×２、９０％エタノール５分、流水洗１０分の順で脱パラフィン化した。
（３）本発明に化合物による染色の前処理として、リポフスチンによる自己蛍光を除去する処置を行った。はじめに、脳パラフィン化した切片を０．２５％、ＫＭｎＯ４溶液に２０分間浸漬した。ＰＢＳにて２分間×２回洗浄した後、０．１％Ｋ２Ｓ２Ｏ５／シュウ酸溶液中に約５秒間浸し、さらにＰＢＳにて２分間×３回洗浄を行った。
（４）５０％エタノールに溶解した１００μＭ本発明化合物溶液を約１５０μｌ滴下し、１０分間反応させた。水道水中に５回つけた後、Ｆｌｏｕｒ  Ｓａｖｅ  Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ）で封入し、蛍光顕微鏡（ニコン、エクリプス８０ｉ）を用いて鏡検した。画像はデジタルカメラ（ニコンＤｘｉｎ１２００ＦまたはＰｈｏｔｏｍｅｔｒｉｃｓ社Ｃｏｏｌ  ＳＮＡＰ  ＥＳ）にて撮影した。【０１２９】
本発明の化合物についての上記染色試験の結果を図１及び図２に示す。ＴＨＫ−８３７は、アルツハイマー病患者脳切片においてアミロイドβ蛋白に結合した（図１）。ＴＨＫ−８５３は、アルツハイマー病患者脳切片においてアミロイドβ蛋白に結合した（図２）。このように、本発明の化合物は、アルツハイマー病患者脳切片においてアミロイドβ蛋白および神経原線維変化を特異的に認識することがわかった。
【実施例３】
【０１３０】
本発明の化合物の特性試験
以下に、本発明の化合物の特性に関する試験方法を説明する。【０１３１】
［１８Ｆ］標識体を用いた検討
本発明の化合物は、当業者に公知の方法を用いて標識体とすることができる。以下に、いくつかの本発明の化合物の［１８Ｆ］標識体の合成例を示す。【０１３２】
［１８Ｆ］ＴＨＫ−８３７の標識合成
サイクロトロンＨＭ１２（住友重機械社製）で加速した１２ＭｅＶの陽子ビームを同位体純度９５％以上の［１８Ｏ］Ｈ２Ｏに照射して１８Ｆ−を合成した。続いてその溶液を陰イオン交換樹脂（ＡＧ１−Ｘ８）に通して１８Ｆ−を樹脂上に捕捉し、３３ｍＭ  Ｋ２ＣＯ３溶液で溶出させた。この１８Ｆ−含有Ｋ２ＣＯ３水溶液３００μＬ（３．５７  ＧＢｑ）を褐色バイアル（容量１０ｍＬ）にとり、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ２２２（１６ｍｇ）、アセトニトリル（２．０  ｍＬ）を加えてオイルバス（１１０℃）で加熱しながらＨｅガスを吹き付け、水を共沸させながらアセトニトリルを完全に除去した。さらにアセトニトリルを加え同様に加熱条件下でアセトニトリルを除去する操作を３回繰り返して、バイアル内を無水の状態にした。そこに、標識前駆体のＴＨＫ−８５７（３．５  ｍｇ）を溶解したＤＭＳＯ溶液（０．７ｍＬ）を加え、オイルバス（１１０℃）で１０分間加熱攪拌した。その後、反応溶液を蒸留水（７  ｍＬ）で希釈してＳｅｐ−Ｐａｋ  ｔＣ１８カートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ社製）にロードし、蒸留水でカートリッジを洗浄後、ＥｔＯＨで溶出した溶液をセミ分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ（登録商標）  ＯＤＳ−３  （１０×２５０  ｍｍ）、移動相：  ＭｅＣＮ／２０ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４  ＝４０／６０、流速：  ７．０ｍＬ／ｍｉｎ）にかけて、約２１分に溶出する［１８Ｆ］ＴＨＫ−８３７由来の放射性ピークを分取した。このフラクションの放射能から求めた減衰補正後の放射化学的収率は２６％であった。【０１３３】
［１８Ｆ］ＴＨＫ−８５３の標識合成
サイクロトロンＨＭ１２（住友重機械社製）で加速した１２ＭｅＶの陽子ビームを同位体純度９５％以上の［１８Ｏ］Ｈ２Ｏに照射して１８Ｆ−を合成した。続いてその溶液を陰イオン交換樹脂（ＡＧ１−Ｘ８）に通して１８Ｆ−を樹脂上に捕捉し、３３ｍＭ  Ｋ２ＣＯ３溶液で溶出させた。この１８Ｆ−含有Ｋ２ＣＯ３水溶液３００μＬ（３．８５  ＧＢｑ）を褐色バイアル（容量１０ｍＬ）にとり、Ｋｒｙｐｔｏｆｉｘ２２２（１６ｍｇ）、アセトニトリル（２．０  ｍＬ）を加えてオイルバス（１１０℃）で加熱しながらＨｅガスを吹き付け、水を共沸させながらアセトニトリルを完全に除去した。さらにアセトニトリルを加え同様に加熱条件下でアセトニトリルを除去する操作を３回繰り返して、バイアル内を無水の状態にした。そこに、標識前駆体のＴＨＫ−８５２（３．５  ｍｇ）を溶解したＤＭＳＯ溶液（０．７ｍＬ）を加え、オイルバス（１１０℃）で１０分間加熱攪拌した。その後、反応溶液を蒸留水（７  ｍＬ）で希釈してＳｅｐ−Ｐａｋ  ｔＣ１８カートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ社製）にロードし、蒸留水でカートリッジを洗浄後、ＥｔＯＨで溶出した溶液をセミ分取ＨＰＬＣ（カラム：  Ｉｎｅｒｔｓｉｌ（登録商標）  ＯＤＳ−３  （１０×２５０  ｍｍ）、移動相：  ＭｅＣＮ／２０ｍＭ  ＮａＨ２ＰＯ４  ＝４５／５５、流速：  ７．０ｍＬ／ｍｉｎ）にかけて、約２２分に溶出する［１８Ｆ］ＴＨＫ−８５３由来の放射性ピークを分取した。このフラクションの放射能から求めた減衰補正後の放射化学的収率は２９％であった。【０１３４】
標識化合物含有生理食塩液の調製
標識合成により得られた［１８Ｆ］ＴＨＫ−８３７または［１８Ｆ］ＴＨＫ−８５３を含有する分取ＨＰＬＣフラクションを蒸留水（約２０ｍＬ）で希釈してＳｅｐ−Ｐａｋ  ｔＣ１８カートリッジ（Ｗａｔｅｒｓ社製）にロードし、蒸留水（１０ｍＬ）でカートリッジを洗浄後、ＥｔＯＨ（４〜５ｍＬ）で標識化合物を溶出した。このＥｔＯＨ溶出液に５％ポリソルベート８０エタノール溶液を適量加えて８０℃で加熱しながらロータリーエバポレーターで溶媒を留去し、得られた標識化合物とポリソルベート８０の混合物を生理食塩液に溶解させることで標識化合物含有生理食塩液を調製した。調製後の薬液の放射化学的純度は９５％以上であった。【０１３５】
標識化合物のマウス脳移行性及び骨集積性の評価
［１８Ｆ］ＢＦ−８３７又は［１８Ｆ］ＴＨＫ−８５３を含有する生理食塩液を雄性ＩＣＲマウス（６〜７週齢）に尾静脈内投与し、２、３０、及び６０分後における脳組織及び骨組織における放射能の集積性から各標識化合物の脳移行性及び骨集積性を評価した。
なお、ＢＦ−２２７（２−［２−（２−ジメチルアミノチアゾール−５−イル）エテニル］−６−（２−フルオロエトキシ）ベンゾキサゾール）はその化学構造が本発明化合物のそれらと比較的類似していること、また、ＢＦ−２２７は［１１Ｃ］標識体として用いられてきたが、その化学構造の中にＦを有している（Ｋｕｄｏら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、４８巻、５５３−５６１ページ、２００７年）ことから、実験において、アルツハイマー病診断用ＰＥＴプローブとしての［１８Ｆ］ＢＦ−２２７と本発明の［１８Ｆ］標識化合物の特性の相違を検討した。
使用した標識化合物含有生理食塩液の放射化学的純度は９５％以上、比放射能は１８．５〜１４８ＧＢｑ／μｍｏｌであり、マウス１匹あたり１．１１〜２．２２ＭＢｑの標識化合物を投与した。放射集積性の評価では、全投与放射能に対する評価組織の単位重量あたりの放射能の割合（％  Ｉｎｊｅｃｔｅｄ  Ｄｏｓｅ／ｇ  ｏｆ  ｔｉｓｓｕｅ；％ＩＤ／ｇ）を指標とした。放射能の計測には、ガンマーカウンター（１４８０  ＷＩＺＡＲＤ、パーキンエルマー社製）を使用した。実験手順としては、標識化合物を尾静脈内投与して２、３０、及び６０分後にエーテル麻酔下でマウスの頚椎脱臼を行い、速やかに心臓から血液を採取したのち、全脳（小脳、脳幹含む）及び大腿部骨を摘出した。そして各サンプルの放射能及び組織重量の計測を行い、そのデータを用いて％ＩＤ／ｇを算出した。
表２にこの評価実験の結果をまとめて示す。【０１３６】
【表２】
2009004914.tif 000106
【０１３７】
中枢神経系を対象としたＰＥＴまたはＳＰＥＣＴ用標識化合物の脳移行性は、０．５％ＩＤ／ｇ以上あれば十分と考えられている。その意味で本発明の［１８Ｆ］標識化合物は、極めて脳移行性の高い［１８Ｆ］標識化合物である。
［１８Ｆ］標識化合物においてしばしば問題となるのはインビボにおける脱フッ素（ｄｅｆｌｕｏｒｉｎａｔｉｏｎ）に基づく１８Ｆイオンの骨集積である（Ｔｉｐｒｅら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、４７巻、３４５−３５３ページ、２００６年）。１８Ｆイオンは骨集積性が高いことから、もし脱フッ素を受けやすい［１８Ｆ］標識化合物をアルツハイマー病等の診断プローブとして用いるならば、得られるＰＥＴ画像はあたかも骨（頭蓋骨）画像となるであろう。しかしながら、現状では、満足のいく程度に脱フッ素を受けにくい標識化合物が得られているとはいえない（Ｃａｉら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、４７巻、２２０８−２２１８ページ、２００４年、Ｚｈａｎｇら、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、４８巻、５９８０−５９８８ページ、２００５年、Ｃｈａｎｇら、Ｎｕｃｌｅａｒ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ、３３巻、８１１−８２０ページ、２００６年、およびＳｔｅｐｈｅｎｓｏｎら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１８巻、２３８−２４６ページ、２００７年参照）。
脳移行性評価時に同時に測定した［１８Ｆ］ＴＨＫ−８３７および［１８Ｆ］ＴＨＫ−８５３の骨集積性の結果を示すと表２の通りであった。［１８Ｆ］ＴＨＫ−８３７および［１８Ｆ］ＴＨＫ−８５３には骨集積は認められなかったが、一方、［１８Ｆ］ＢＦ−２２７には投与後時間依存性の著明な骨集積性が認められた。以上より、インビボにおいて［１８Ｆ］ＴＨＫ−８３７および［１８Ｆ］ＴＨＫ−８５３は脱フッ素を受けないが、［１８Ｆ］ＢＦ−２２７は容易に脱フッ素を受け１８Ｆイオンが骨に集積することが示唆された。【０１３８】
以上の実験結果をまとめると、本発明の［１８Ｆ］標識化合物、特に［１８Ｆ］ＴＨＫ−８３７および［１８Ｆ］ＴＨＫ−８５３は明らかに脳からのウォッシュアウトにおいて［１８Ｆ］ＢＦ−２２７よりも優れ（表２）、また［１８Ｆ］ＢＦ−２２７において観察される脱フッ素に基づく１８Ｆイオンの骨集積は、本発明の［１８Ｆ］標識化合物、特に［１８Ｆ］ＴＨＫ−８３７および［１８Ｆ］ＴＨＫ−８５３においてはほとんど認められず、満足のいく程度にまで脱フッ素が抑えられていることがわかった（表２）。
以上より、アルツハイマー病診断用ＰＥＴプローブとして見た場合、本発明の［１８Ｆ］標識化合物、特に［１８Ｆ］ＴＨＫ−８３７および［１８Ｆ］ＴＨＫ−８５３は、本発明の化合物の構造を有していないＢＦ−２２７と比較して極めて有用性が高い。
【産業上の利用可能性】
【０１３９】
本発明のコンフォーメーション病診断プローブ用化合物、特に画像診断用プローブ化合物、ならびにそれを含有するコンフォーメーション病治療および／または予防用医薬組成物等は、現在最も難病とされているコンフォーメーション病、例えば、アルツハイマー病の早期発見、治療および予防において極めて有用であり、コンフォーメーション病の診断薬や診断キットの製造分野、コンフォーメーション病の治療薬および予防薬の製造分野、コンフォーメーション病の研究等に利用可能である。
【図１】
2009004914.tif 000143
【図２】
2009004914.tif 000144
【国際調査報告】
2009004914.tif 000145
2009004914.tif 000146
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