(57)【要約】  優れた抗菌活性を有する１−アルキルピロリジン構造を有するカルバペネム化合物である（１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−２−［（２Ｓ，４Ｓ）−２−［（３Ｓ）−３−（２−グアニジノアセチルアミノ）ピロリジン−１−イルカルボニル］−１−メチルピロリジン−４−イルチオ］−１−カルバペン−２−エム−３−カルボン酸又はその薬理上許容される塩、及び、塩化ナトリウムを含有する凍結乾燥製剤を製造すること。【特許請求の範囲】
【請求項１】
カルバペネム化合物として（１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−２−［（２Ｓ，４Ｓ）−２−［（３Ｓ）−３−（２−グアニジノアセチルアミノ）ピロリジン−１−イルカルボニル］−１−メチルピロリジン−４−イルチオ］−１−カルバペン−２−エム−３−カルボン酸又はその薬理上許容される塩、及び、塩化ナトリウムを含有する凍結乾燥製剤。
【請求項２】
塩化ナトリウムの添加量が、カルバペネム化合物に対し０．１〜２．５等量（モル）である請求項１に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項３】
塩化ナトリウムの添加量が、カルバペネム化合物に対し０．５〜２．０等量（モル）である請求項１に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項４】
塩化ナトリウムの添加量が、カルバペネム化合物に対し０．７〜１．８等量（モル）である請求項１に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項５】
（１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−２−［（２Ｓ，４Ｓ）−２−［（３Ｓ）−３−（２−グアニジノアセチルアミノ）ピロリジン−１−イルカルボニル］−１−メチルピロリジン−４−イルチオ］−１−カルバペン−２−エム−３−カルボン酸又はその薬理上許容される塩及び塩化ナトリウムを水性溶媒に溶解してバルク溶液を製造し、このバルク溶液を凍結乾燥することを特徴とする請求項１乃至４のいずれか１項に記載の凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項６】
（１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−２−［（２Ｓ，４Ｓ）−２−［（３Ｓ）−３−（２−グアニジノアセチルアミノ）ピロリジン−１−イルカルボニル］−１−メチルピロリジン−４−イルチオ］−１−カルバペン−２−エム−３−カルボン酸、塩化ナトリウム及び必要であれば他の添加物を、水性溶媒に溶解してバルク溶液を製造し、このバルク溶液を無菌濾過して容器へ充填後、凍結乾燥することを特徴とする請求項１乃至４のいずれか１項に記載の凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項７】
（１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−２−［（２Ｓ，４Ｓ）−２−［（３Ｓ）−３−（２−グアニジノアセチルアミノ）ピロリジン−１−イルカルボニル］−１−メチルピロリジン−４−イルチオ］−１−カルバペン−２−エム−３−カルボン酸、塩化ナトリウム及び必要であれば他の添加物を、水性溶媒に溶解してバルク溶液を製造し、このバルク溶液を無菌濾過した後そのまま凍結乾燥し、凍結乾燥粉末を得た後、容器へ充填することを特徴とする請求項１乃至４のいずれか１項に記載の凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項８】
（１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−２−［（２Ｓ，４Ｓ）−２−［（３Ｓ）−３−（２−グアニジノアセチルアミノ）ピロリジン−１−イルカルボニル］−１−メチルピロリジン−４−イルチオ］−１−カルバペン−２−エム−３−カルボン酸、塩化ナトリウム及び必要であれば他の添加物を、水性溶媒に溶解してバルク溶液を製造し、このバルク溶液を無菌濾過した後そのまま凍結乾燥し、凍結乾燥粉末を得た後、キット製剤として粉末充填することを特徴とする請求項１乃至４のいずれか１項に記載の凍結乾燥製剤の製造方法。
【請求項９】
バルク溶液がｐＨ調節剤を含有する請求項５乃至８のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項１０】
ｐＨ調節剤が０．４乃至２０規定塩酸及び０．４乃至１０規定水酸化ナトリウム水溶液から選ばれることを特徴とする請求項９に記載の製造方法。
【請求項１１】
ｐＨ調節剤が０．７５乃至５規定塩酸及び０．７５乃至５規定水酸化ナトリウム水溶液から選ばれることを特徴とする請求項９に記載の製造方法。
【請求項１２】
バルク溶液のｐＨが５．５〜７．０である請求項５乃至１１のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項１３】
バルク溶液のｐＨが６．０〜６．６である請求項５乃至１１のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項１４】
バルク溶液のｐＨが６．１〜６．５である請求項５乃至１１のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項１５】
凍結乾燥が、１０Ｐａ以下の高真空条件下で棚温度が３５℃〜５５℃である一次乾燥のみであることを特徴とする請求項５乃至１４のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項１６】
高真空条件が５Ｐａ以下である請求項１５に記載の製造方法。
【請求項１７】
棚温度が４０℃〜５０℃である請求項１５又は１６に記載の製造方法。
【請求項１８】
凍結乾燥が、真空度が５Ｐａ〜２０Ｐａであり棚温度が−２０℃〜２５℃である一次乾燥と、１０Ｐａ以下の高真空条件下で棚温度が３５℃〜５５℃である二次乾燥の組み合わせであることを特徴とする請求項５乃至１４のいずれか１項に記載の製造方法。
【請求項１９】
二次乾燥の高真空条件が５Ｐａ以下である請求項１８に記載の製造方法。
【請求項２０】
二次乾燥の棚温度が４０℃〜５０℃である請求項１８又は１９に記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、優れた抗菌活性を有する１−アルキルピロリジン構造を有するカルバペネム化合物及び塩化ナトリウムを含有する凍結乾燥製剤、及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
医薬製剤の分野において、凍結乾燥による製剤化の方法は広く用いられている。しかしながら、カルバペネム化合物は保存中に化学的な分解を起こしやすい物質であり、十分安定な製剤を提供するために、何らかの手段を講じることが必要とされることが多い。【０００３】
非特許文献１には式【０００４】
【化１】
2008026556.tif 000002
【０００５】
で表される１−アセトイミドイルピロリジン構造を有するカルバペネム系抗生物質パニペネムと有機アニオン輸送系阻害剤ベタミプロンを１：１（重量比）に配合した凍結乾燥製剤が記載されており、塩化ナトリウムの配合が凍結乾燥製剤中のパニペネムの安定性を向上させることが記載されている。【０００６】
一方、特許文献１には式【０００７】
【化２】
2008026556.tif 000003
【０００８】
で表される１−メチルカルバペネム系抗生物質及び無機塩類（塩化ナトリウム）を混合した凍結乾燥製剤が記載されており、実施例の表１には、糖類を配合しない場合、塩化ナトリウムの配合が凍結乾燥製剤の安定性を低下させることが記載されている。【０００９】
このように、カルバペネム化合物の凍結乾燥製剤の安定性が、塩化ナトリウムなどの無機塩類の配合により向上するか、低下するか、又は、安定性に殆ど影響しないかは、有効成分であるカルバペネム化合物の種類やその他の製造上の条件により異なり、当業者に予測できるものではなく、試験をしてみて初めてわかるものである。
【非特許文献１】化学療法の領域Vol.10, No.7, (1333-1341) 89-97, 1994
【特許文献１】特開平８−２３１３９８号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明者らは、特定の１−アルキルピロリジン構造を有する特定のカルバペネム化合物又はその塩を有効成分として含む安定な凍結乾燥製剤を提供するという課題を解決するため種々の検討を行った結果、塩化ナトリウムを含有させることにより安定性が向上し、当該カルバペネム化合物又はその塩が長期間の保存において顕著に改善されることを見出し、本発明を完成した。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、カルバペネム化合物として（１Ｒ，５Ｓ，６Ｓ）−６−［（１Ｒ）−１−ヒドロキシエチル］−１−メチル−２−［（２Ｓ，４Ｓ）−２−［（３Ｓ）−３−（２−グアニジノアセチルアミノ）ピロリジン−１−イルカルボニル］−１−メチルピロリジン−４−イルチオ］−１−カルバペン−２−エム−３−カルボン酸（以下、化合物（Ｉ））又はその薬理上許容される塩、及び、塩化ナトリウムを含有する凍結乾燥製剤である。【００１２】
また、本発明は塩化ナトリウムの存在下で化合物（Ｉ）又はその薬理上許容される塩の水溶液を凍結乾燥することを特徴とする凍結乾燥製剤の製造方法である。【００１３】
本発明の化合物（Ｉ）は必要に応じて、薬理上許容される塩にすることができる。【００１４】
カルバペネム化合物（Ｉ）が、酸性化合物と塩を形成することができる場合、そのような酸性化合物は、例えば、フッ化水素酸、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、りん酸、炭酸のような無機酸類；ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、シュウ酸、フタル酸のような有機カルボン酸類；又は、メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸のような有機スルホン酸類であり得、好適には、無機酸類であり、より好適には、塩酸、硫酸又は炭酸である。【００１５】
また、本発明の化合物（Ｉ）は、カルボキシル基を有しており、塩基性物質との塩を形成することができる。そのような塩は、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩のようなアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩；又は、アンモニウム塩であり得、好適には、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩又はマグネシウム塩である。【００１６】
また、本発明の化合物（Ｉ）は、大気中に放置したり、水溶液から凍結乾燥したり、又は、再結晶をすることにより、水分を吸収し、吸着水がついたり、水和物となる場合があり、そのような水和物も本発明に包含される。【００１７】
さらに、本発明の化合物（Ｉ）は、他のある種の溶媒を吸収し、溶媒和物となる場合があるが、そのような溶媒和物も本発明に包含される。【００１８】
本発明の化合物（Ｉ）は特開平１０−２０４０８６号及び特開平１１−０７１２７７号公報に開示された化合物であり、グラム陽性菌からグラム陰性菌まで広範囲の細菌に対して強力な抗菌活性を有する化合物である。【００１９】
本発明化合物（Ｉ）はｐＨが低いほど（酸性が強くなるほど）水に対する溶解度が高くなり、逆に水溶液が中性に近づくほど溶解度が低くなる。化合物（Ｉ）の溶解度の測定方法は下記の通りである。化合物（Ｉ）はｐＨ７以下で製剤製造に十分な溶解度を有し、ｐＨが小さくなるに従い溶解度が大きくなった。【００２０】
化合物（Ｉ）の溶解度測定方法： 
化合物（Ｉ）（水溶液中の化合物（Ｉ）の濃度が３００ｍｇ/ｇに相当する量）をビーカーに秤量する。５℃に冷却した注射用水１５ｍLを加え、スターラーを用いて攪拌しながら氷冷条件下で３０分間攪拌する。撹拌の間、１規定の塩酸又は１規定水酸化ナトリウム水溶液を滴下することにより、所定のｐＨに調整し、ｐＨを一定に保つ。攪拌終了後、濾過フィルター（例えば、Ｅｋｉｃｒｏｄｉｓｃ  ０．４５μｍ  ＨＴ−Ｔｕｆｆｒｙｎ，Ｇｅｌｍａｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｊａｐａｎ，Ｌｔｄ．）を用いて濾過し、後述の試験例１と同様のHPLC定量法により濾液中の化合物（Ｉ）の量を測定し、化合物（Ｉ）の溶解度を求める。【００２１】
本発明において、塩化ナトリウムの添加量は特に限定されないが、化合物（Ｉ）に対し、下限は０．１等量（モル）であり得、好適には０．５等量（モル）であり、より好適には０．７等量（モル）であり、上限は２．５等量（モル）であり得、好適には２．０等量（モル）であり、より好適には１．８等量（モル）である。なお、塩化ナトリウムの添加量が多すぎると、凍結乾燥品（凍乾ケーキ）にひびが入るなどの凍結乾燥製剤の品質の低下（外観不良）が懸念される。
【発明の効果】
【００２２】
本発明の凍結乾燥製剤は、塩化ナトリウムを含有しない凍結乾燥製剤に比べて保存安定性が高く、長期保存によっても有効成分の残存率が高い。また、使用時には注射溶解液を加えることにより速やかに溶解するので有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
本発明の有効成分である化合物（Ｉ）は特開平１０−２０４０８６号、特開平１１−０７１２７７号、特開平１１−３１５０２１号及び特開２００２−２１２１８３号公報に開示された方法又はそれに準ずる方法に従って製造することができる。【００２４】
本発明の凍結乾燥製剤は、化合物（Ｉ）又はその薬理上許容される塩及び塩化ナトリウムを、注射用水など適宜の水性溶媒に溶解して水溶液（バルク溶液）を製造し、このバルク溶液を常法により凍結乾燥することにより製造することができる。具体的には、本発明の凍結乾燥製剤は、化合物（Ｉ）、塩化ナトリウム及び必要であれば他の添加物を、注射用水など適宜の水性溶媒に溶解して水溶液（バルク溶液）を製造し、このバルク溶液を無菌濾過してバイアル、アンプルなどの容器へ充填後、凍結乾燥することにより製造することができる。また、バルク溶液を無菌濾過した後そのまま凍結乾燥し、凍結乾燥粉末を得た後、バイアル、アンプルなどの容器へ充填、あるいは、キット製剤として粉末充填することにより、本製剤を製造することも可能である。【００２５】
上記の製造方法では、化合物（Ｉ）の溶解度を考慮し、バルク溶液のｐＨを後述のｐＨ調節剤を使用して、下限はｐＨ５．５、好適には６．０、より好適には６．１に調節することが好ましく、上限はｐＨ７．０、好適には６．６、より好適には６．５に調整することが好ましい。【００２６】
また、必要に応じて、賦形剤、安定剤、抗酸化剤、溶解補助剤、緩衝剤、ｐＨ調節剤、等張化剤及び／又は溶解剤などの当業者に利用可能な製剤添加物を添加して凍結乾燥してもよい。【００２７】
本発明の賦形剤は、例えば、精製白糖、乳糖、マルトース、トレハロース、マンニトールのような糖類；デキストラン；プルラン；リン酸カルシウムのようなリン酸塩誘導体；炭酸カルシウムのような炭酸塩誘導体；又は、硫酸カルシウムのような硫酸塩誘導体であり得、好適には糖類であり、より好適には乳糖である。【００２８】
本発明の安定剤は、例えば、ブドウ糖、精製白糖などの糖類；エデト酸ナトリウム、エデト酸四ナトリウムなどのエデト酸類；メチルパラベン、プロピルバラベンのようなパラオキシ安息香酸エステル類；クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコールのようなアルコール類；塩化ベンザルコニウム；フェノール、クレゾールのようなフェノール類；チメロサール；無水酢酸；又は、ソルビン酸であり得、好適にはエデト酸類であり、より好適にはエデト酸ナトリウムである。【００２９】
本発明の抗酸化剤は、例えば、Ｌ−アルコスビン酸、酢酸トコフェロール、ビタミンＥのようなビタミン類；亜硝酸ナトリウム；亜硫酸水素ナトリウム；硫酸ナトリウム；エデト酸ナトリウム、エデト酸四ナトリウムなどのエデト酸類であり得、好適にはエデト酸類であり、より好適にはエデト酸ナトリウムである。【００３０】
本発明の溶解補助剤は、例えば、プロピレングリコール、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリソルベート８０のような非イオン性界面活性剤であり得、好適にはポリソルベート８０である。【００３１】
本発明の緩衝剤は、例えば、酢酸；リン酸、リン酸水素ナトリウム、リン酸二水素カリウムのようなリン酸塩類；クエン酸であり得、好適にはリン酸類であり、より好適にはリン酸水素ナトリウムである。【００３２】
本発明のｐＨ調節剤は、例えば、クエン酸；酢酸；水酸化ナトリウム；塩酸；炭酸水素ナトリウム；リン酸、リン酸水素ナトリウム、リン酸二水素カリウムのようなリン酸塩類であり得、好適には水酸化ナトリウム又は塩酸であり、より好適には塩酸である。【００３３】
本発明の等張化剤は、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウムなどの塩類、ブドウ糖、ショ糖などの糖類、又は、グリセリンであり得、好適には糖類であり、より好適にはショ糖である。【００３４】
本発明の溶解剤は、例えば、注射用水、生理食塩水、ブドウ糖溶液などの注射用溶解液であり得、好適には注射用水である。【００３５】
凍結乾燥製剤は例えば次の手順で製造することができる。本発明の凍結乾燥製剤の製造はこの手順に限られない。
（１）  バルク溶液（全量が１００ｍＬの場合）
化合物（Ｉ）及び塩化ナトリウムを容器に秤量する。当該容器を氷冷し、予め５℃に冷却した注射用水３０ｍＬを添加し、攪拌することにより、化合物（Ｉ）を分散させ、塩化ナトリウムを溶解させる。氷冷下攪拌しながら、当該混合物に予め冷却した塩酸を滴下することにより化合物（Ｉ）を完全に溶解させ、更に予め冷却した塩酸及び必要であれば予め冷却した水酸化ナトリウム水溶液を用いてｐＨを調整する。当該溶液に予め冷却した注射用水を氷冷下加え、全量を１００ｍＬにする。得られた溶液を無菌濾過することにより、バルク溶液を得る。【００３６】
上記において、塩酸の濃度は、通常０．４乃至２０規定であり、好適には０．７５乃至５規定である。【００３７】
上記において、水酸化ナトリウム水溶液の濃度は、通常０．４乃至１０規定であり、好適には０．７５乃至５規定である。【００３８】
本発明のバルク溶液のｐＨは、通常５．５〜７．０であり、好適には６．０〜６．６であり、より好適には６．１〜６．５である。
（２）  凍結乾燥品
（１）で得られたバルク溶液をバイアルに充填し、水分を昇華させることにより凍結乾燥品を調製する。一般的に凍結乾燥は、一次乾燥のみの場合と、自由水を除去する目的で行われる一次乾燥、及び一次乾燥で取り除けない水分や結合水を除去する目的で行われる、二次乾燥に分けられる場合がある。なお、本バルク溶液を凍結乾燥させる場合は、品質、製造時間を考慮し、最適化された条件にて実施される。本バルク溶液は、−５０℃〜ー４０℃で凍結後、一次乾燥条件として、高真空条件下（１０Pa以下、好適には５Pa以下）で棚温度が３５℃〜５５℃（好適には４０℃〜５０℃）にて乾燥可能である。ただしより好ましくは、生産機での品質均一性を考慮し、適切な温度及び真空制御を行うことが好ましい。例えば、本製剤は一次乾燥条件として、真空度が５Pa〜２０Paであり、棚温度が−２０℃〜２５℃である条件で乾燥し、二次乾燥は、高真空条件下（１０Pa以下、好適には５Pa以下）、棚温度が３５℃〜５５℃（好適には４０℃〜５０℃）で維持することにより行われる。【００３９】
上記において、乾燥時間は特に制限はなく、バイアルの大きさやバルク溶液の充填量により異なるが、品質及び製造時間を考慮し最適化されるものであり、通常５時間乃至１週間である。【００４０】
本発明の凍結乾燥製剤の製造において、一次乾燥のみ及び一次乾燥と二次乾燥の組み合わせのどちらも可能であるが、品質均一性を考慮すれば、一次乾燥と二次乾燥の組み合わせが好ましい。
【実施例】
【００４１】
以下、本発明を試験例を挙げて更に詳細に説明するが、本発明はこれらに制限されるものではない。【００４２】
試験例１  処方１〜３の凍結乾燥品
有効成分として化合物（Ｉ）（１１．５ｇ）及び塩化ナトリウム（なし、５４５ｍｇ及び１．０９ｇ）をガラスビーカーに秤量した。当該ビーカーを氷冷し、予め５℃に冷却した注射用水３０ｍＬを添加し、スターラーを用いて攪拌することにより、化合物（Ｉ）を分散させ、塩化ナトリウムを溶解させた。氷冷下攪拌しながら、当該混合物に１規定塩酸を滴下することにより化合物（Ｉ）を完全に溶解させ、更に１規定塩酸を用いてｐＨ６．０に調整した。ｐＨはｐＨ計（型式：Ｆ−２２、株式会社堀場製作所製）にて測定した（以下、同様）。当該溶液に注射用水を氷冷下加え、全量を１００ｇにした。得られた溶液を０．２２μｍミリポアフィルター（Ｍｉｌｌｉｄｉｓｋ  １０カートリッジフィルター、型番：ＭＣＧＬ１０Ｓ０３、日本ミリポア株式会社製）を用いて濾過することにより、バルク溶液を得た。【００４３】
得られたバルク溶液を２０ｍL（大きさ）バイアルにそれぞれ５ｇずつ充填し、ゴム栓を半打栓し凍結乾燥機に搬入した。凍結温度：−４５℃、乾燥温度：４５℃の条件にて凍結乾燥を行った。凍結乾燥後、バイアル空間部を窒素ガスで置換した後に打栓を行った上で、凍結乾燥機よりバイアルの搬出を行った。上記凍結乾燥により、処方１〜３の凍結乾燥品を調製した（処方１は比較例）。【００４４】
得られた凍結乾燥品を５０℃で８週間保存した場合と、４０℃で２ヶ月保存した場合の有効成分の残存率を下記の条件で求め、保存前の有効成分の量との比率で表した。その結果を表２に示す。表中、「−」は塩化ナトリウムを含有しないことを示す。表２から明らかなように、塩化ナトリウムを含有する本発明の製剤（処方２及び３）は、塩化ナトリウムを含有しない比較例の製剤（処方１）に比べて高い残存率を示す。【００４５】
有効成分の残存率の分析方法
ＨＰＬＣを使用して以下の条件で測定した。
ＨＰＬＣシステム：ＳＣＬ−１０Ａ（株式会社島津製作所製）
検出器：ＳＰＤ−１０ＡＣ（ＵＶ  ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ、株式会社島津製作所製）
カラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＲＰＡＱＵＥＯＵＳ（４．６ｍｍ  Ｉ．Ｄ．×１５０ｍｍ  ｌｅｎｇｔｈ、野村化学株式会社製）
カラム温度：６０℃
試料の注入量：１０μＬ
移動相の流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
移動相：０．０２ｍｏｌ／Ｌリン酸バッファー（ｐＨ  ７．０）／アセトニトリル（１９：１）
測定波長：２５５ｎｍ。【００４６】
表２  処方１〜３の凍結乾燥品の安定性試験
――――――――――――――――――――――――――――――――――
試験処方          処方１    処方２      処方３
――――――――――――――――――――――――――――――――――
化合物(I)(mg)    ５００    ５００      ５００
ＮａＣｌ(mg)     −        ２７．２５  ５４．５
ｐＨ              ６．０    ６．０      ６．０
全量（ｇ）        ５        ５          ５
――――――――――――――――――――――――――――――――――
安定性（残存率、％）
５０℃、８週      ９１．９  ９３．３    ９６．５
４０℃、２月      ９８．６  ９９．５    １０１．４
――――――――――――――――――――――――――――――――――。【００４７】
試験例２  処方４〜８の凍結乾燥品
有効成分として化合物（Ｉ）（６０．０５ｇ）及び塩化ナトリウム（２．８３ｇ、５．６７ｇ、８．５０ｇ、１１．３０ｇ及び１４．２０ｇ）をガラスビーカーに秤量した。当該ビーカーを氷冷し、予め５℃に冷却した注射用水１５６ｍＬを添加し、スターラーを用いて攪拌することにより、化合物（Ｉ）を分散させ、塩化ナトリウムを溶解させた。氷冷下攪拌しながら、当該混合物に１規定塩酸を滴下することにより化合物（Ｉ）を完全に溶解させ、更に１規定塩酸を用いてｐＨ６．０に調整した。当該溶液に注射用水を氷冷下加え、全量を５２０ｇにした。得られた溶液を０．２２μｍミリポアフィルターを用いて濾過することにより、バルク溶液を得た。【００４８】
得られたバルク溶液を２０ｍＬバイアルにそれぞれ７．５ｇずつ充填し、試験例１と同様に凍結乾燥し、処方４〜８の凍結乾燥品を調製した。【００４９】
得られた凍結乾燥品を６０℃で８週間保存した場合の有効成分の残存率及び類縁物（例えば、下記ＨＰＬＣ条件でメインピークの保持時間に対する相対保持時間が０．５、１．６、１．８及び１．９の類縁物）の総量を下記の条件で求め、保存前の有効成分の量との比率で表した。その結果を表３に示す。表３から明らかなように、塩化ナトリウムを含有する本発明の製剤（処方４〜８）は、６０℃で８週間という過酷な条件でも、高い有効成分の残存率及び低い類縁物の総量を示す。【００５０】
有効成分の残存率の分析方法：試験例１と同様。【００５１】
類縁物の総量の分析方法
ＨＰＬＣを使用して以下の条件で測定した。
ＨＰＬＣシステム：ＳＣＬ−１０Ａ（株式会社島津製作所製）
検出器：ＳＰＤ−１０ＡＣ（ＵＶ  ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｅｒ、株式会社島津製作所製）
カラム：Ｄｅｖｅｌｏｓｉｌ  ＲＰＡＱＵＥＯＵＳ（４．６ｍｍ  Ｉ．Ｄ．×１５０ｍｍ  ｌｅｎｇｔｈ、野村化学株式会社製）
カラム温度：６０℃
試料の注入量：１０μＬ
移動相の流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
移動相Ａ：０．０２ｍｏｌ／Ｌリン酸バッファー（ｐＨ  ７．０）／アセトニトリル（１９：１）
移動相Ｂ：０．０２ｍｏｌ／Ｌリン酸バッファー（ｐＨ  ７．０）／アセトニトリル（１：１）
測定波長：２１０ｎｍ。【００５２】
表３  処方４〜８の凍結乾燥品の安定性試験
――――――――――――――――――――――――――――――――――
試験処方          処方４      処方５      処方６      処方７      処方８
――――――――――――――――――――――――――――――――――
化合物(I)(mg)    ７５０      ７５０      ７５０      ７５０      ７５０
ＮａＣｌ(mg)   ４０．８８  ８１．７５  １２２．６  １６３．５  ２０４．４
ｐＨ            ６．０      ６．０      ６．０      ６．０      ６．０
全量（ｇ）      ７．５      ７．５      ７．５      ７．５      ７．５
――――――――――――――――――――――――――――――――――
安定性（６０℃、８週、％）
残存率          ８４．７    ８９．５    ８９．５    ９０．３    ８８．６
類縁物の総量    １４．８    ９．２      ８．５      ８．０      １０．０
――――――――――――――――――――――――――――――――――。【００５３】
試験例３  バルク溶液の安定性試験
有効成分として化合物（Ｉ）（５．９６ｇ）及び塩化ナトリウム（０．５５ｇ）をガラスビーカーに秤量した。当該ビーカーを氷冷し、予め５℃に冷却した注射用水１５ｍＬを添加し、スターラーを用いて攪拌することにより、化合物（Ｉ）を分散させ、塩化ナトリウムを溶解させた。氷冷下攪拌しながら、当該混合物に１規定塩酸を滴下することにより化合物（Ｉ）を完全に溶解させ、更に１規定塩酸を用いてｐＨ６．０、６．２５、６．５、６．７及び６．９に調整した。当該溶液に注射用水を氷冷下加え、全量を５０ｇにした。得られた溶液を０．２２μｍミリポアフィルターを用いて濾過することにより、バルク溶液を得た。  【００５４】
得られたバルク溶液を２５℃で２日間保存した場合の有効成分の残存率及び類縁物の総量を下記の条件で求め、保存前の有効成分の量との比率で表した。その結果を表４に示す。表４から明らかなように、ｐＨが高いほど有効成分の残存率は高くなることが分かった。【００５５】
有効成分の残存率の分析方法：試験例１及び２と同様。【００５６】
類縁物の総量の分析方法：試験例２と同様。【００５７】
表４  バルク溶液の安定性試験
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試験処方          処方９      処方１０    処方１１    処方１２    処方１３
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化合物(I)(mg)    ７５０      ７５０      ７５０      ７５０      ７５０
ＮａＣｌ(mg)     ８１．７５  ８１．７５  ８１．７５  ８１．７５  ８１．７５
ｐＨ              ６．０      ６．２５    ６．５      ６．７      ６．９
全量（ｇ）        ７．５      ７．５      ７．５      ７．５      ７．５
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安定性（２５℃、２日、％）
残存率          ８０．９    ８４．９    ８６．７    ８８．３    ８８．７
類縁物の総量    １７．５    １４．３    １２．７    １１．９    １１．７
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【産業上の利用可能性】
【００５８】
本発明の凍結乾燥製剤は、保存安定性が優れるため、カルバペネム化合物の凍結乾燥製剤として実用的に極めて有用である。
【国際調査報告】
2008026556.tif 000004
2008026556.tif 000005
2008026556.tif 000006
2008026556.tif 000007