(57)【要約】  哺乳動物の足の肉球に貼付する粘着剤２２と、水分量により変色する試薬である塩化コバルト紙１８を有した試験シート１０を備える。試験シート１０は、粘着剤２２により肉球に貼着される透明フィルム１２から成り、透明フィルム１２の塩化コバルト紙１８の近傍には、塩化コバルト紙１８が呈色したときの色の色見本１８を備える。試験シート１０を肉球に貼付して、肉球から蒸散する水分量とその変化率を指標として動物のストレスを測定する。
2008108440.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
哺乳動物の足の肉球から蒸散する水分量とその変化率を指標としてストレスを測定することを特徴とする哺乳動物用ストレス測定方法。
【請求項２】
前記指標は、塩化コバルトの水分による呈色であることを特徴とする請求項１記載の哺乳動物用ストレス測定方法。
【請求項３】
哺乳動物の足の肉球に貼付する粘着剤と、水分量により変色する試薬を備え、前記肉球から蒸散する水分量とその変化率を指標としてストレスを測定することを特徴とする哺乳動物用ストレス測定具。
【請求項４】
哺乳動物の足の肉球に取り付ける試験シートを備え、前記試験シートには、粘着剤により肉球に貼着される透明フィルムと、前記透明フィルムの粘着剤側の面に設けられ前記試薬である塩化コバルトを吸着させた保持体と、前記透明フィルムの前記保持体近傍に印刷され前記塩化コバルトが吸湿により呈色した色の色見本が設けられ、前記保持体は、ストレスの度合いにより異なる水分蒸発量に対応して、塩化コバルトの呈色の度合いが変化するように調整されていることを特徴とする請求項３記載の哺乳動物用ストレス測定具。
【請求項５】
前記透明フィルムは円形状に切断され、前記色見本が円周に沿って複数区分設けられ、前記色見本の中心に前記保持体の色を確認する表示部が設けられ、前記色見本の一区分は塩化コバルトの無水塩に近い青色で水分蒸発量が低くストレスがない状態を示すものであり、他の一区分は塩化コバルトが吸湿したときのピンク色で水分蒸発量が高く大きなストレスを示すものであることを特徴とする請求項４記載の哺乳動物用ストレス測定具。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、哺乳動物のストレスを測定する哺乳動物用ストレス測定方法とその測定具に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、イヌやネコ等の哺乳動物は、家庭でペットとして多く飼われているが、どんなときにストレスを受けているかわかりにくかった。哺乳動物のストレスを測定する方法は、以下の引用文献に示されている。特許文献１に開示されている哺乳類動物におけるストレスを測定するための方法は、ストレス量の指示要素として遊離の唾液中の副腎皮質ホルモンの量を用いて、その視床下部−副腎の系における活性を測定することにより、一定の哺乳類動物におけるストレスの量を測定するものである。【０００３】
特許文献２に開示されているストレスの測定方法は、血中のキヌレニン（ＫＹＮ）濃度の変化率または血中のトリプトファン（ＴＲＰ）濃度の変化率を測定し、その値を指標とし、ストレスの度合いを測定するものである。【０００４】
特許文献３に開示されている哺乳動物におけるストレスまたはリラクゼーションのレベルの測定方法は、血中のデオキシヘモグロビンとオキシヘモグロビンの濃度の定量的測定により、哺乳動物におけるストレスおよびリラクゼーションのレベルを測定するものである。【０００５】
特許文献４に開示されている抗ストレス効果の簡易評価法は、血液中、およびメタロチオネインの生成量の少ない臓器におけるメタロチオネインのメッセンジャーリボ核酸（ｍ−ＲＮＡ）生成量を逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ−ＰＣＲ）でＤＮＡを増幅し、このＤＮＡをデンシトメーターで定量してｍＲＮＡ量を求めることにより抗ストレス効果を評価するものである。
【特許文献１】特表２００５−５０６５１６号公報
【特許文献２】特開２００４−１９８３２５号公報
【特許文献３】特開２００３−２６５４４５号公報
【特許文献４】特開平９−８９８９７号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上記の各特許文献の場合、ストレスを測定するために哺乳動物から血液や唾液を採取するものであり、この操作が哺乳動物にストレスを与えるばかりでなく、各成分の定量には専用の装置が必要であり、分析には長時間を要するものであった。また、測定装置は高価であり、その使用は病院や検査機関等に限定され、家庭では手軽に行うことはできなかった。【０００７】
一方、本願発明者は人の皮膚からの径表皮水分蒸発量（以下ＴＥＷＬ値）を測定する皮膚水分試験パッチを発明した。この製品は、結合する水分子の増加に伴って青色からピンク色に変化する塩化コバルトを含浸したろ紙を粘着テープに固定したものである。これを人の皮膚に貼着すると、蒸散する水分がろ紙に吸着し、塩化コバルトの結晶構造の変化により変色するので、ろ紙の変色の度合いからＴＥＷＬ値をほぼ定量できるものである。本願発明者は、ついで手のひらからの蒸発水分量を測定することによってストレスの度合いを調べることができるストレス試験パッチを発明した。これは臨床試験で被験者に暗算負荷し、その前後の血圧・脈拍・手のひらからの蒸発水分量などを測定し、解析した。その結果、人の心身のストレスと手のひらからの蒸発水分量が優位に相関性を有することを認めた。【０００８】
これに基づいて、イヌやネコなどペットとして飼われる哺乳動物のストレスと足の肉球からの発汗量の間に関連性があり、哺乳動物も肉球からの蒸発水分量の変化によりストレスを測定できるのではないかと考えた。そこで、成犬（ビーグル犬）と成ネコを実験動物とし、ストレス負荷による心電図や肉球からのＴＥＷＬ値を測定した。その結果、きらいな匂いを嗅がせたり、異種動物・同種動物の接近によるストレス、その他の刺激を与え、心電図・肉球からのＴＥＷＬ値などを測定したところ、ストレスとＴＥＷＬ値に有意な相関性のあることを確認した。【０００９】
しかし、ＴＥＷＬ値を測定するＴＥＷＬ測定機器は高価であり、また装置を哺乳動物の足にセットすると、動物は非常に嫌がりストレスを感じるため、ＴＥＷＬ測定機器をストレス測定に用いることは実用的では無い。【００１０】
この発明は、上記従来の技術の問題点に鑑みてなされたものであり、簡単な操作でかつ正確に哺乳動物のストレスを測定することができる哺乳動物用ストレス測定方法とその測定具を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、哺乳動物の足の肉球から蒸散する水分量とその変化率を指標としてストレスを測定する哺乳動物用ストレス測定方法である。前記指標は、塩化コバルトの水分による呈色である。【００１２】
またこの発明は、哺乳動物の足の肉球に貼付する粘着剤と、水分量により変色する試薬を備え、前記肉球から蒸散する水分量とその変化率を指標としてストレスを測定する哺乳動物用ストレス測定具である。この哺乳動物用ストレス測定具は、哺乳動物の足の肉球に取り付ける試験シートを備え、前記試験シートには、粘着剤により肉球に貼着される透明フィルムと、前記透明フィルムの粘着剤側の面に設けられ前記試薬である塩化コバルトを吸着させた保持体と、前記透明フィルムの前記保持体近傍に印刷され前記塩化コバルトが吸湿により呈色した色の判定のための色見本が設けられている。前記保持体は、ストレスの度合いにより異なる水分量に対応して、塩化コバルトの呈色の度合いが変化するように調整されている。塩化コバルトは、無水塩では青色であり、吸湿するとピンク色に変化する。また、前記保持体はろ紙等の吸湿性素材で作られている。【００１３】
また、前記透明フィルムは円形状に切断され、前記色見本が円周に沿って複数区分が設けられ、前記色見本の中心に前記保持体の色を確認する表示部が設けられている。前記色見本の一区分は塩化コバルトの無水塩に近い青色で水分量がストレスがないことを示す１００μg/ｃｍ２/分以下のものであり、他の一区分は塩化コバルトが吸湿したときのピンク色で水分量が大きなストレスを示す３００μg/ｃｍ２/分以上のものである。【００１４】
また、前記塩化コバルトの吸湿シートは、感度の異なるものを複数枚設けてもよい。
【発明の効果】
【００１５】
本発明の哺乳動物用ストレス測定方法とその測定具は、簡単な作業と短時間で、哺乳動物のストレスの種類や度合いを正確に調べることができる。しかも、哺乳動物に痛みなど、測定のためのストレスを与えず、測定する場所や環境を限定せず、安価であり手軽に試験することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】この発明の一実施形態の試験シートの正面図である。
【図２】図１のＡ−Ａ線断面図である。
【図３】この実施形態の試験シートの使用状態を示す正面図である。
【符号の説明】
【００１７】
１０  試験シート
１２  透明フィルム
１４  表示部
１６  色見本
１８  塩化コバルト紙
２２  粘着剤
２４  不織布
２６  剥離シート
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
以下、この発明の実施形態について、図面に基づいて説明する。この実施形態の哺乳動物用ストレス測定方法は、後述する動物用ストレス測定具である試験シート１０を哺乳動物の足の肉球に所定時間貼り、水分蒸発量とその変化率を指標として、ストレスを測定する測定方法である。【００１９】
図１〜図３は試験シート１０を示すもので、試験シート１０は、粘着フィルムとなる透明フィルム１２が設けられ、その素材は柔軟性を有し、透明な合成樹脂で作られている。例えば、ポリオレフィン、ポリプロピレン、ポリエステル、ポリ塩化ビニル、ポリ塩化ビニリデン、ポリエチレン、ナイロン、ウレタン等が使用される。厚さは、２０〜１００μｍであり、好ましくは５０〜７５μｍである。透明フィルム１２は、円形に切断されている。円形の直径は、例えば５〜２０ｍｍであり、対象とする哺乳動物の肉球の大きさにあわせて選ぶ。特にイヌでは大きさが異なっており、体重６０ｋｇ以上の超大型犬からチワワなど体重２〜３ｋｇの超小型犬の肉球の大きさはまちまちである。体重５ｋｇ以上のイヌやネコの肉球は１５ｍｍ以上であるが、チワワなどの小動物は１０ｍｍ以下の場合もあり、動物の肉球に合わせて大きさを選ぶ必要がある。【００２０】
透明フィルム１２の表面１２ａには、所定の絵柄が印刷されている。表面１２ａの中央には、無色透明な同心の円形の表示部１４が設けられている。表示部１４の周囲には、後述する塩化コバルト紙１８の色見本１６が印刷されている。色見本１６は、透明フィルム１２の円周に沿って４区分に等分されている。色見本１６は、図1の図面上で左に位置する第一区分１６ａが塩化コバルトの無水塩に近い青色であり、例えばＴＥＷＬ値が、ストレスのない状態を示す１００μg/ｃｍ２/分以下である。上に位置する第二区分１６ｂは、塩化コバルトの吸湿が進んだ空色であり、右に位置する第三区分１６ｃは、より吸湿が進んだ白色〜薄いピンク色である。下に位置する第四区分１６ｄは、塩化コバルトが完全に吸湿したときのピンク色であり、例えばＴＥＷＬ値が大きなストレスを示す３００μg/ｃｍ２/分以上である。【００２１】
そして、透明フィルム１２の裏面１２ｂには、粘着フィルムとするための粘着剤２２が塗布されている。粘着剤２２は、保形性と弾力性を有する素材で形成され、一定厚みに設けられている。粘着剤２２には、表示部１４に対向して塩化コバルト紙１８が貼付されている。塩化コバルト紙１８は、塩化コバルト水溶液をろ紙等の吸湿性シートに吸着させ乾燥させたものであり、塩化コバルトが無水塩では青色であり、吸湿するとピンク色に変化する。塩化コバルト紙１８は吸着水分量が３０〜５００μg/ｃｍ２/分の範囲で変色し、１００μg/ｃｍ２/hr以下で青色に、５００μg/ｃｍ２/分以上で淡赤色となるように調整されている。２００〜４５０μg/ｃｍ２/分の範囲では、空色から白色更に淡ピンク色へ徐々に変色する。これにより、貼付時間を１〜５分間とすれば、ＴＥＷＬ値は、３０〜２５ｍg/ｃｍ２/分の範囲で測定が可能となる。さらに、塩化コバルト紙１８には、目付３０〜１００ｇ／ｍ２のポリプロピレン等のオレフィン系樹脂の不織布２４が熱溶着又はその他の手段で貼付されている。不織布２４は疎水性であり、水分を吸着することなく、塩化コバルト紙１８の表面全面に広げる。【００２２】
試験シート１０は、透明フィルム１２と同形状またはそれよりも大きな剥離シート２６に貼り付けられている。試験シート１０の粘着剤２２の粘着力で剥離可能に取り付けられている。一枚の大きな剥離シート２６に、同形の試験シート１０が複数個貼り付けられてもよい。剥離シート２６が貼り付けられた試験シート１０は、樹脂フィルム等の袋に包装され、密封されている。【００２３】
次に、この実施形態の試験シート１０の使用方法について説明する。まず、試験シート１０から剥離シート２６を剥がし、粘着剤２２を露出させる、そして、試験を行う哺乳動物、ここでは猫の肉球２８に試験シート１０を貼り付ける。なお、試験シート１０を貼り付ける前に、肉球の汗等を拭き取る。足を洗うなどしてぬれている場合はよく乾かす。試験シート１０を貼り付けた後、その状態で所定時間、例えば３分間放置する。このとき、発生する肉球２８からの蒸発水分や汗を塩化コバルト紙１８が吸着して塩化コバルトの結晶構造が変化し、青色からピンク色に変化する。このとき、不織布２４は疎水性であり、肉球２８の個々の汗腺から出た水分は、不織布２４には吸着されず、塩化コバルト紙１８の表面全面に広がる。そして、塩化コバルト紙１８の色の変化を見て、塩化コバルト紙１８の色を色見本１６と比較し、第一区分１６ａから第四区分１６ｄまでのいずれに相当するかを判断し、ストレスの状態をチェックする。【００２４】
ストレスの判定は、塩化コバルト紙１８の色が第一区分１６ａに近い場合、ストレスがない状態を示し、第二区分１６ｂに近い場合、ストレスが少なく、心身がほぼ安定しリラックスしていることを示す。第三区分１６ｃに近い場合は、やや興奮性ストレスがあるが、問題ない程度であることを示す。第四区分１６ｄと近い場合、興奮性ストレスが高いことを示す。【００２５】
この実施形態の試験シート１０によれば、簡単な操作と短時間（例えば３分）で、哺乳動物のストレスの種類や度合いを調べることができ、場所や環境を選ばず、家庭で手軽に試験することができる。肉球２８に試験シート１０を貼付して、表示部１４の色の変化を色見本１６と比較して観察するだけなので、哺乳動物に苦痛やストレスを与えることが無い。表示部１４から塩化コバルトの色の変化を観察して、色見本１６と比較してＴＥＷＬ値からストレスの程度を判定するだけなので、再現性に優れ、判定も容易であり、外観からはわかりにくいストレスを比較的正確に測定することができる。また、表示部１４は色見本１６と隣接しているため、正確に色見本１６と比較することができる。また、試験シート１０は一回ごとに使い捨てであり、清潔で簡単である上、コストも安価であり、経済的に優れた方法である。粘着剤２２は、保形性と弾力性を有する素材で作られているため、肉球の凹凸にフィットして確実に取り付けることができる。また、哺乳動物は肉球に試験シート１０を貼付しても全く気にしないので、哺乳動物のストレスの度合いは正確に測定することができる。ペットのストレスの度合いを簡単に判定することにより、ストレスの種類や程度を知ることで過度のストレスや疲労をチェックし、必要があれば散歩や休養、または睡眠や栄養剤の摂取の参考にし、休憩のタイミングや栄養剤の摂取・治療など、健康管理の目安となりペットの健康の促進に利用することができる。【００２６】
なお、この発明の動物用ストレス測定方法とその測定具は、前記実施の形態に限定されるものではなく、試験シートの他、ＴＥＷＬ測定装置によっても、哺乳動物のストレスを測定することができるものである。また、試験シートの形状や素材等適宜変更可能であり、印刷された絵柄部のデザインも適宜変更可能である。色見本の区分の数も適宜変更可能である。また、表示部を複数個設け、各表示部に反応速度が異なるように調整された塩化コバルト紙を取り付けてもよく、これによると、より正確にＴＥＷＬ値を判定することができる。
【実施例１】
【００２７】
この発明の哺乳動物用ストレス測定具の試験シート１０の作り方の一例について説明する。試験シート１０の塩化コバルト紙１８は、塩化コバルト５ｇに精製水２０ｍｌ、エチルアルコール１５ｍｌを加えて溶解し、次いで市販の定量用ろ紙（東洋ろ紙Ｎｏ．５０）に吸着乾燥させ、１００℃の熱風で青色になるまで乾燥させ、塩化コバルト紙１８とする。得られた塩化コバルト紙１８を６ｍｍ×６ｍｍに裁断し、透明フィルム１２の裏面１２ｂに粘着剤２２で固定する。この後、透明フィルム１２を直径１５ｍｍの円形に打ち抜き、密封包装する。【００２８】
ここで作られた試験シート１０で、実際に哺乳動物でストレスと塩化コバルト紙１８の呈色の関連を確認する実験を行った。初めに動物舎で一定期間馴化したビーグル犬の後ろ足肉球に直径１５ｍｍに作成した試験シート１０を貼付してトレス負荷を行い、負荷前後におけるＴＥＷＬ値及び血圧値・脈拍数を指標に、ストレス負荷時のＴＥＷＬ値と自律神経反応との相関を検討した。まず、ビーグル犬を動物用ジャケットで固定し、リラックス状態と、慣れていない人の近接などの負荷時に、心電図、ＴＥＷＬ測定機器による肉球からのＴＥＷＬ値の測定、試験シート１０での色変化を調べた。その結果、ＴＥＷＬ値はリラックス状態では３０〜５０μg/ｃｍ２/分で試験パッチの色は青色のままであったのに対して、ストレス負荷（慣れていない人が接近）した場合は血圧と脈拍の上昇と共にＴＥＷＬ値は３〜４倍に増加した。またこのとき、試験パッチの色はピンク色に変色した。【００２９】
次に試験シート１０を日本猫に対して実験を行った。日本猫（雄、８歳、体重７．２ｋｇ）の後ろ足の肉球に貼付し、３分間後の色変化を調べた。その結果、ストレスを負荷しない場合は３分後の色変化は無く、試験フィルムは青色のままであったが、慣れていない人が近接したとき、３分後の色変化はピンク色を示した。【００３０】
以上の確認実験により、ストレス状態と、ＴＥＷＬ値、塩化コバルト紙１８の色との相関が確認された。先ず、ストレスが無いときは、ＴＥＷＬ値は３０μg/ｃｍ２/分で、塩化コバルト紙１８は３分間で青いままである。ストレスが少しあるとき、ＴＥＷＬ値は１２０μg/ｃｍ２/分で、塩化コバルト紙１８は３分間でピンク色になる。ストレスが大きいときは、ＴＥＷＬ値が２５０μg/ｃｍ２/分で、塩化コバルト紙１８は１〜２分間でピンク色になる。このことから、試験シート１０により正確に哺乳動物のストレスを測定することが確認された。
【図１】
2008108440.tif 000003
【図２】
2008108440.tif 000004
【図３】
2008108440.tif 000005
【国際調査報告】
2008108440.tif 000006
2008108440.tif 000007
2008108440.tif 000008
2008108440.tif 000009