(57)【要約】  本発明によれば、HIVのHR2領域に対応するアミノ酸配列に改変を加えることによって得られる優れた抗HIV活性を有するポリペプチド、該ポリペプチドを有効成分とする抗HIV剤、該抗HIV剤を含有する医薬組成物、該抗HIV剤を用いたHIVの治療方法等を提供することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記表Iで表される順序でアミノ酸を含有するポリペプチド（配列番号１）。
【表１】
2008050830.tif 000013
（表I中、X1は、セリン、アラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、スレオニン及びバリンからなる群より選択されるいずれか１種のアミノ酸を表す；
R1は、配列番号４に表されるアミノ酸配列、その改変体及びアシル基からなる群から選択されるいずれか１種を表す；
R2は、配列番号６に表されるアミノ酸配列、その改変体、アミノ基及び置換基を有するアミノ基からなる群から選択される少なくともいずれか１種を表す；
XTyrはチロシン、
XThrはスレオニン、
XSerはセリン、
XLeuはロイシン、
XIleはイソロイシン、
XHisはヒスチジン、
XGluはグルタミン酸、
XGlnはグルタミン、
XAsnはアスパラギン、
XLysはリジン、
XAspはアスパラギン酸、
XTrp1及びXTrp2はトリプトファン、
XAlaはアラニン、
XPheはフェニルアラニンである；
また、表I中の１〜３個のアミノ酸が下記の(i)〜(xv)の法則に従って置換されていてもよい。
(i) XTyrは、同一又は異なって、チロシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(ii) XThrは、同一又は異なって、スレオニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(iii) XSerは、同一又は異なって、セリンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(iv) XLeuは、同一又は異なって、ロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(v) XIleは、同一又は異なって、イソロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(vi) XHisは、同一又は異なって、ヒスチジンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(vii) XGluは、同一又は異なって、グルタミン酸をコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(viii) XGlnは、同一又は異なって、グルタミンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(ix) XAsnは、同一又は異なって、アスパラギンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(x) XLysは、同一又は異なって、リジンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xi) XAspは、同一又は異なって、アスパラギン酸をコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xii) XTrp1は、同一又は異なって、トリプトファンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xiii) XTrp2は、同一又は異なって、トリプトファンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸及びアラニンからなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xiv) XAlaは、同一又は異なって、アラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xv) XPheは、同一又は異なって、フェニルアラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸及びアラニンからなる群より選択される少なくともいずれか１種であり；
さらに、下記(xvi)の法則によってB列、C列、F列及びG列のアミノ酸が置換されていてもよい。
(xvi) 表Iの第１〜６行において、同一の行のB列及びC列の２個のアミノ酸、ならびにF列及びG列の２個のアミノ酸が、それぞれ、
同一又は異なって、グルタミン酸、アスパラギン酸及びシステイン酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種の酸性アミノ酸、あるいは、
同一又は異なって、リジン、アルギニン、オルニチン及びヒスチジンからなる群より選択される少なくともいずれか１種の塩基性アミノ酸である。
ここで、同一の行において、B列及びC列の２個のアミノ酸が酸性アミノ酸であるとき、F列及びG列の２個のアミノ酸は塩基性アミノ酸であり、
B列及びC列の２個のアミノ酸が塩基性アミノ酸であるとき、F列及びG列の２個のアミノ酸は酸性アミノ酸である；
また、表Iに示されるアミノ酸は、R1をN末端として、以下の順序で結合している。
R1-1D-1E-1F-1G-2A-2B-2C-2D-2E-2F-2G-3A-3B-3C-3D-3E-3F-3G-4A-4B-4C-4D-4E-4F-4G-5A-5B-5C-5D-5E-5F-5G-6A-6B-6C-6D-R2
但し、1D-1E-1F-1GはN末端側から順に欠損していてもよい；
また、X1以外のアミノ酸が置換されていない場合、X1はセリンではない）。
【請求項２】
前記表Iにおいて
XTyrがチロシン、
XThrがスレオニン、
XSerがセリン、
XLeuがロイシン、
XIleがイソロイシン、
XHisがヒスチジン、
XGluがグルタミン酸、
XGlnがグルタミン、
XAsnがアスパラギン、
XLysがリジン、
XAspがアスパラギン酸、
XTrp1及びXTrp2がトリプトファン、
XAlaがアラニン、
XPheがフェニルアラニンである、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
前記表Iにおいて、X1が、アラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、スレオニン又はバリンのいずれかである、請求項１又は２に記載のポリペプチド。
【請求項４】
前記表Iにおいて、B列及びC列のアミノ酸がグルタミン酸であり、F列及びG列のアミノ酸がリジンであって、
かつX1がアラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、スレオニン又はバリンのいずれかであり、
R1がアセチル基、R2が-NH2である、請求項１〜３のいずれかに記載にポリペプチド。
【請求項５】
下記表IIで表される順序でアミノ酸を含有するポリペプチド（配列番号２）。
【表２】
2008050830.tif 000014
（表II中、R3は、配列番号１３に表されるアミノ酸配列、その改変体及びアシル基からなる群から選択されるいずれか１種を表す；
R4は、配列番号１５に表されるアミノ酸配列、その改変体、アミノ基及び置換基を有するアミノ基からなる群から選択される少なくともいずれか１種を表す；
XLeuはロイシン、
XAspはアスパラギン酸、
XAlaはアラニン、
XAsnはアスパラギン、
XIleはイソロイシン、
XThrはスレオニン、
XLysはリジン、
XGluはグルタミン酸、
XGlnはグルタミン、
XMetはメチオニン、
XTyrはチロシン、
XTrpはトリプトファン、
XSerはセリン、
XPheはフェニルアラニンである；
また、表II中の１〜３個のアミノ酸が下記の(i)〜(xiv)の法則に従って置換されていてもよい。
(i) XLeuは、同一又は異なって、ロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(ii) XAspは、同一又は異なって、アスパラギン酸をコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(iii) XAlaは、同一又は異なって、アラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(iv) XAsnは、同一又は異なって、アスパラギンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(v) XIleは、同一又は異なって、イソロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(vi) XThrは、同一又は異なって、スレオニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(vii) XLysは、同一又は異なって、リジンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(viii) XGluは、同一又は異なって、グルタミン酸をコードするコドンからの一塩基の
変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(ix) XGlnは、同一又は異なって、グルタミンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(x) XMetは、同一又は異なって、メチオニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xi) XTyrは、同一又は異なって、チロシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xii) XTrpは、同一又は異なって、トリプトファンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xiii) XSerは、同一又は異なって、セリンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xiv) XPheは、同一又は異なって、フェニルアラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種であり；
さらに、下記(xv)の法則によってB列、C列、F列及びG列のアミノ酸が置換されていてもよい。
(xv) 表IIの第１〜６行において、同一の行のB列及びC列の２個のアミノ酸、ならびにF列及びG列の２個のアミノ酸が、それぞれ、
同一又は異なって、グルタミン酸、アスパラギン酸及びシステイン酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種の酸性アミノ酸、あるいは、
同一又は異なって、リジン、アルギニン、オルニチン及びヒスチジンからなる群より選択される少なくともいずれか１種の塩基性アミノ酸である。
ここで、同一の行において、B列及びC列の２個のアミノ酸が酸性アミノ酸であるとき、F列及びG列の２個のアミノ酸は塩基性アミノ酸であり、
B列及びC列の２個のアミノ酸が塩基性アミノ酸であるとき、F列及びG列の２個のアミノ酸は酸性アミノ酸である；
また、表IIに示されるアミノ酸は、R3をN末端として、以下の順序で結合している。
R3-1D-1E-1F-1G-2A-2B-2C-2D-2E-2F-2G-3A-3B-3C-3D-3E-3F-3G-4A-4B-4C-4D-4E-4F-4G-5A-5B-5C-5D-5E-5F-5G-6A-6B-6C-6D-R4
但し、1D-1E-1F-1GはN末端側から順に欠損していてもよい）。
【請求項６】
前記表IIにおいて
XLeuはロイシン、
XAspはアスパラギン酸、
XAlaはアラニン、
XAsnはアスパラギン、
XIleはイソロイシン、
XThrはスレオニン、
XLysはリジン、
XGluはグルタミン酸、
XGlnはグルタミン、
XMetはメチオニン、
XTyrはチロシン、
XTrpはトリプトファン、
XSerはセリン、
XPheはフェニルアラニンである、請求項５に記載のポリペプチド。
【請求項７】
前記表IIにおいて、B列及びC列のアミノ酸がグルタミン酸であり、F列及びG列のアミノ酸がリジンであって、
R3がアセチル基、R4が-NH2である、請求項５又は６に記載にポリペプチド。
【請求項８】
下記(a)〜(f)のいずれかのアミノ酸配列を有する請求項１〜４のいずれかに記載のポリペプチド。
(a)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Ala-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号１７）
(b)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Ile-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号１８）
(c)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号１９）
(d)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Met-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２０）
(e)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Thr-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２１）
(f)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Val-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２２）
【請求項９】
下記(g)〜(v)のいずれかのアミノ酸配列を有する請求項１〜４のいずれかに記載のポリペプチド。
(g)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２３）
(h)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ala-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２４）
(i)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Gly-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２５）
(j)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ile-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２６）(k)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２７）
(l)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Met-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２８）
(m)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Thr-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２９）
(n)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Val-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３０）
(o)Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３１）
(p)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Ala-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３２）
(q)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Ala-Phe（配列番号３３）
(r)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Ala（配列番号３４）
(s)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Lys-Lys-Leu-Ile-Glu-Glu-Ser-Lys-Lys-Gln-Gln-Glu-Glu-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３５）
(t)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Lys-Gln-Gln-Glu-Glu-Asn-Lys-Lys-Glu-Leu-Glu-Glu-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３６）
(u)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Lys-Gln-Gln-Glu-Glu-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Lys-Lys-Trp-Ala-Glu-Glu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３７）
(v)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Lys-Lys-Leu-Ile-Glu-Glu-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Lys-Lys-Trp-Ala-Glu-Glu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３８）
【請求項１０】
下記(w)又は(x)のいずれかのアミノ酸配列を有する請求項５〜７のいずれかに記載のポリペプチド。
(w)Leu-Asp-Ala-Asn-Ile-Thr-Lys-Leu-Leu-Glu-Glu-Ala-Gln-Ile-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Met-Tyr-Glu-Leu-Gln-Lys-Leu-Asn-Gln-Trp-Asp-Ile-Phe-Ser-Asn-Trp-Phe（配列番号３９）
(x)Leu-Asp-Ala-Asn-Ile-Glu-Glu-Leu-Leu-Lys-Lys-Ala-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Asp-Lys-Lys-Ser-Asn-Trp-Phe（配列番号４０）
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれかに記載のポリペプチド又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する抗HIV剤。
【請求項１２】
請求項１１に記載の抗HIV剤を、薬学的に許容される担体又は添加剤と共に含有する医薬組成物。
【請求項１３】
前記ポリペプチド又はその薬学的に許容される塩が、成人に対して1日体重1kg当り0.01 μg〜10 mgとなるように含有されてなる請求項１１に記載の抗HIV剤。
【請求項１４】
請求項１〜１０のいずれかに記載のポリペプチドの有効量をHIV患者に投与することを含む、HIVの治療方法。
【請求項１５】
HIV治療用組成物を製造するための請求項１〜１０に記載されるポリペプチドの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、HIVに対して優れた膜融合阻害作用を有するペプチド及び該ペプチドのエイズウイルス関連疾患の予防又は治療への利用に関する。
【背景技術】
【０００２】
エイズ（AIDS）とは後天性免疫不全症候群（Acquired Immuno Deficiency Syndrome）の略称であり、免疫不全を引き起こすレトロウイルス（例えばHIV、SIV）に感染することにより病原体に対する免疫力が正常に働かなくなって発症する様々な病気の総称を意味する。【０００３】
免疫不全を引き起こすレトロウイルス、例えばHIVが宿主細胞へ侵入するメカニズムの１つとして、HIVのgp41タンパク質中のα-へリックス構造を有するC34の3量体が、α−へリックス構造を有するHR1の3量体を包み込むようにして6量体を形成し、HIVの細胞膜と宿主細胞の細胞膜との融合が起こるというメカニズムが知られている（例えば、非特許文献１を参照）。HR1をターゲットにして上記6量体形成を防ぐための薬剤、例えばT20（商品名Fuzeon：配列番号３に示されるポリペプチド）は、米国FDAにより認可されているが、T20耐性能を有するHIV-1株の存在がすでに確認されており（例えば、非特許文献２を参照）、さらなる抗HIV活性を有する薬剤が必要とされている。
【非特許文献１】Reviw: D.M.Eckert, P.S.Kim, Annu. Rev. Biochem. 2001, 70, 777-810
【非特許文献２】L. Xu, et. al., ANTIMICROBIAL AGENT AND CHEMOTHERAPY, Mar, 2005, 49, 1113-1119
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、HIVのgp41 HR1に結合してHIVの細胞膜と宿主細胞の細胞膜の融合を阻害し得るポリペプチド、該ポリペプチドを有効成分とする抗HIV剤、該抗HIV剤を含有する医薬組成物、及び該抗HIV剤を用いたHIVの治療方法を提供することを主な目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
非特許文献２により明らかにされているように、T20に対する耐性は、gp41のHR1領域のアミノ酸変異およびHR2領域のアミノ酸変異によって生じているものと考えられる。HR1領域のアミノ酸変異は、HR2領域の部分ペプチドとして阻害活性を有するT20に対する親和性を下げる効果があると考えられる。一方、HR2領域のアミノ酸変異は、T20よりも親和性が高いHR2領域を形成するとともに、変異後のHR1領域の配列に対しても高い親和性を保持することを可能にしていると考えられる。この様なHR1領域及びHR2領域のへ変異は、ウイルスの耐性獲得のために合目的であるといえる。【０００６】
本発明者らは、このウイルスの耐性獲得のメカニズムに着目して、T20耐性株のHR2領域のアミノ酸配列にあわせて、膜融合阻害ペプチドをデザインすれば、耐性株に対する高い活性を有するペプチドが得られると共に、野生株のウイルスに対する高い活性を有するペプチドが見出されるものと期待した。【０００７】
ところで、ウイルスのアミノ酸変異は、アミノ酸をコードするDNA塩基の変異によって生じることから、特定のアミノ酸からの変異は数種類の天然型アミノ酸に限定される。しかしながら、合成化学的にはウイルスにおける変異に限定されず、化学試薬として市販されているあらゆるアミノ酸を導入したペプチドを調製することが可能である。こうしたことから、本発明者らは、HR2領域のHR1領域との接触部位に生じるアミノ酸置換位置をさまざまなアミノ酸に変換したHR2ペプチドの誘導体を網羅的に合成して、それらの抗ウイルス活性の評価を実施したところ、野生株およびT20耐性株をはじめとするHIV薬剤耐性株と宿主細胞の膜融合阻害効果が飛躍的に高められることを見出した。【０００８】
また、HR1をはじめとするN36に対して結合するペプチドとしては、例えば特開2003-176298に記載されるような、6個又は7個のアミノ酸からなる複数のモジュール構造を有し、i位、i+4位のアミノ酸がそれぞれ酸性アミノ酸、塩基性アミノ酸という組み合わせ（又はその逆の組み合わせでも良い）にすることにより、両者間にsalt bridgeが形成され、α−へリックスが形成されやすくしたものが挙げられる。【０００９】
本発明者らは、このような知見を参考に、T20のアミノ酸を酸性アミノ酸（XA）、塩基性アミノ酸（XB）で規則的に置換するためのモジュール（X-XAXA-XX-XBXBもしくはX-XBXB-XX-XAXA：ここでXはT20の置換されていないアミノ酸を表す）を用い、T20の改変体を得た。【００１０】
本発明の限定的解釈を望むものではないが、このようにして得られた本発明のペプチドの１個、２個又は３個が、３個のHIVのgp41のHR1領域と複合体を形成し、HIVと宿主細の膜融合を阻害し、HIV感染を阻止すると考えられる。【００１１】
本発明は、以下のポリペプチド、抗HIV剤及び該抗HIV剤を含有する医薬組成物を提供する。
項１．下記表Iで表される順序でアミノ酸を含有するポリペプチド（配列番号１）。【００１２】
【表１】
2008050830.tif 000002
【００１３】
（表I中、X1は、セリン、アラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、スレオニン及びバリンからなる群より選択されるいずれか１種のアミノ酸を表す；
R1は、配列番号４に表されるアミノ酸配列、その改変体及びアシル基からなる群から選択されるいずれか１種を表す；
R2は、配列番号６に表されるアミノ酸配列、その改変体、アミノ基及び置換基を有するアミノ基からなる群から選択される少なくともいずれか１種を表す；
XTyrはチロシン、
XThrはスレオニン、
XSerはセリン、
XLeuはロイシン、
XIleはイソロイシン、
XHisはヒスチジン、
XGluはグルタミン酸、
XGlnはグルタミン、
XAsnはアスパラギン、
XLysはリジン、
XAspはアスパラギン酸、
XTrp1及びXTrp2はトリプトファン、
XAlaはアラニン、
XPheはフェニルアラニンである；
また、表I中の１〜３個のアミノ酸が下記の(i)〜(xv)の法則に従って置換されていてもよい。
(i) XTyrは、同一又は異なって、チロシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(ii) XThrは、同一又は異なって、スレオニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(iii) XSerは、同一又は異なって、セリンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(iv) XLeuは、同一又は異なって、ロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(v) XIleは、同一又は異なって、イソロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(vi) XHisは、同一又は異なって、ヒスチジンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(vii) XGluは、同一又は異なって、グルタミン酸をコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(viii) XGlnは、同一又は異なって、グルタミンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(ix) XAsnは、同一又は異なって、アスパラギンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(x) XLysは、同一又は異なって、リジンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xi) XAspは、同一又は異なって、アスパラギン酸をコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xii) XTrp1は、同一又は異なって、トリプトファンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xiii) XTrp2は、同一又は異なって、トリプトファンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸及びアラニンからなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xiv) XAlaは、同一又は異なって、アラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xv) XPheは、同一又は異なって、フェニルアラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸及びアラニンからなる群より選択される少なくともいずれか１種であり；
さらに、下記(xvi)の法則によってB列、C列、F列及びG列のアミノ酸が置換されていてもよい。
(xvi) 表Iの第１〜６行において、同一の行のB列及びC列の２個のアミノ酸、ならびにF列及びG列の２個のアミノ酸が、それぞれ、
同一又は異なって、グルタミン酸、アスパラギン酸及びシステイン酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種の酸性アミノ酸、あるいは、
同一又は異なって、リジン、アルギニン、オルニチン及びヒスチジンからなる群より選択される少なくともいずれか１種の塩基性アミノ酸である。
ここで、同一の行において、B列及びC列の２個のアミノ酸が酸性アミノ酸であるとき、F列及びG列の２個のアミノ酸は塩基性アミノ酸であり、
B列及びC列の２個のアミノ酸が塩基性アミノ酸であるとき、F列及びG列の２個のアミノ酸は酸性アミノ酸である；
また、表Iに示されるアミノ酸は、R1をN末端として、以下の順序で結合している。
R1-1D-1E-1F-1G-2A-2B-2C-2D-2E-2F-2G-3A-3B-3C-3D-3E-3F-3G-4A-4B-4C-4D-4E-4F-4G-5A-5B-5C-5D-5E-5F-5G-6A-6B-6C-6D-R2
但し、1D-1E-1F-1GはN末端側から順に欠損していてもよい；
また、X1以外のアミノ酸が置換されていない場合、X1はセリンではない）。
項２．前記表Iにおいて
XTyrがチロシン、
XThrがスレオニン、
XSerがセリン、
XLeuがロイシン、
XIleがイソロイシン、
XHisがヒスチジン、
XGluがグルタミン酸、
XGlnがグルタミン、
XAsnがアスパラギン、
XLysがリジン、
XAspがアスパラギン酸、
XTrp1及びXTrp2がトリプトファン、
XAlaがアラニン、
XPheがフェニルアラニンである、項１に記載のポリペプチド。
項３．前記表Iにおいて、X1が、アラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、スレオニン又はバリンのいずれかである、項１又は２に記載のポリペプチド。
項４．前記表Iにおいて、B列及びC列のアミノ酸がグルタミン酸であり、F列及びG列のアミノ酸がリジンであって、
かつX1がアラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、スレオニン又はバリンのいずれかであり、
R1がアセチル基、R2が-NH2である、項１〜３のいずれかに記載にポリペプチド。
項５．下記表IIで表される順序でアミノ酸を含有するポリペプチド（配列番号２）。【００１４】
【表２】
2008050830.tif 000003
【００１５】
（表II中、R3は、配列番号１３に表されるアミノ酸配列、その改変体及びアシル基からなる群から選択されるいずれか１種を表す；
R4は、配列番号１５に表されるアミノ酸配列、その改変体、アミノ基及び置換基を有するアミノ基からなる群から選択される少なくともいずれか１種を表す；
XLeuはロイシン、
XAspはアスパラギン酸、
XAlaはアラニン、
XAsnはアスパラギン、
XIleはイソロイシン、
XThrはスレオニン、
XLysはリジン、
XGluはグルタミン酸、
XGlnはグルタミン、
XMetはメチオニン、
XTyrはチロシン、
XTrpはトリプトファン、
XSerはセリン、
XPheはフェニルアラニンである；
また、表II中の１〜３個のアミノ酸が下記の(i)〜(xiv)の法則に従って置換されていてもよい。
(i) XLeuは、同一又は異なって、ロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(ii) XAspは、同一又は異なって、アスパラギン酸をコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(iii) XAlaは、同一又は異なって、アラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(iv) XAsnは、同一又は異なって、アスパラギンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(v) XIleは、同一又は異なって、イソロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(vi) XThrは、同一又は異なって、スレオニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(vii) XLysは、同一又は異なって、リジンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(viii) XGluは、同一又は異なって、グルタミン酸をコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(ix) XGlnは、同一又は異なって、グルタミンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(x) XMetは、同一又は異なって、メチオニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xi) XTyrは、同一又は異なって、チロシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xii) XTrpは、同一又は異なって、トリプトファンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xiii) XSerは、同一又は異なって、セリンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
(xiv) XPheは、同一又は異なって、フェニルアラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種であり；
さらに、下記(xv)の法則によってB列、C列、F列及びG列のアミノ酸が置換されていてもよい。
(xv) 表IIの第１〜６行において、同一の行のB列及びC列の２個のアミノ酸、ならびにF列及びG列の２個のアミノ酸が、それぞれ、
同一又は異なって、グルタミン酸、アスパラギン酸及びシステイン酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種の酸性アミノ酸、あるいは、
同一又は異なって、リジン、アルギニン、オルニチン及びヒスチジンからなる群より選択される少なくともいずれか１種の塩基性アミノ酸である。
ここで、同一の行において、B列及びC列の２個のアミノ酸が酸性アミノ酸であるとき、F列及びG列の２個のアミノ酸は塩基性アミノ酸であり、
B列及びC列の２個のアミノ酸が塩基性アミノ酸であるとき、F列及びG列の２個のアミノ酸は酸性アミノ酸である；
また、表IIに示されるアミノ酸は、R3をN末端として、以下の順序で結合している。
R3-1D-1E-1F-1G-2A-2B-2C-2D-2E-2F-2G-3A-3B-3C-3D-3E-3F-3G-4A-4B-4C-4D-4E-4F-4G-5A-5B-5C-5D-5E-5F-5G-6A-6B-6C-6D-R4
但し、1D-1E-1F-1GはN末端側から順に欠損していてもよい）。
項６．  前記表IIにおいて
XLeuはロイシン、
XAspはアスパラギン酸、
XAlaはアラニン、
XAsnはアスパラギン、
XIleはイソロイシン、
XThrはスレオニン、
XLysはリジン、
XGluはグルタミン酸、
XGlnはグルタミン、
XMetはメチオニン、
XTyrはチロシン、
XTrpはトリプトファン、
XSerはセリン、
XPheはフェニルアラニンである、項５に記載のポリペプチド。
項７．前記表IIにおいて、B列及びC列のアミノ酸がグルタミン酸であり、F列及びG列のアミノ酸がリジンであって、
R3がアセチル基、R4が-NH2である、項５又は６に記載にポリペプチド。
項８．下記(a)〜(f)のいずれかのアミノ酸配列を有する項１〜４のいずれかに記載のポリペプチド。
(a)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Ala-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号１７）
(b)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Ile-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号１８）
(c)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号１９）
(d)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Met-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２０）
(e)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Thr-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２１）
(f)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Val-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２２）
項９．下記(g)〜(v)のいずれかのアミノ酸配列を有する項１〜４のいずれかに記載のポリペプチド。
(g)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２３）
(h)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ala-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２４）
(i)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Gly-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２５）
(j)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ile-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２６）
(k)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２７）
(l)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Met-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２８）
(m)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Thr-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２９）
(n)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Val-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３０）
(o)Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３１）
(p)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Ala-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３２）
(q)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Ala-Phe（配列番号３３）
(r)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Ala（配列番号３４）
(s)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Lys-Lys-Leu-Ile-Glu-Glu-Ser-Lys-Lys-Gln-Gln-Glu-Glu-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３５）
(t)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Lys-Gln-Gln-Glu-Glu-Asn-Lys-Lys-Glu-Leu-Glu-Glu-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３６）
(u)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Lys-Gln-Gln-Glu-Glu-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Lys-Lys-Trp-Ala-Glu-Glu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３７）
(v)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Lys-Lys-Leu-Ile-Glu-Glu-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Lys-Lys-Trp-Ala-Glu-Glu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３８）
項１０．下記(w)又は(x)のいずれかのアミノ酸配列を有する項５〜７のいずれかに記載のポリペプチド。
(w)Leu-Asp-Ala-Asn-Ile-Thr-Lys-Leu-Leu-Glu-Glu-Ala-Gln-Ile-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Met-Tyr-Glu-Leu-Gln-Lys-Leu-Asn-Gln-Trp-Asp-Ile-Phe-Ser-Asn-Trp-Phe（配列番号３９）
(x)Leu-Asp-Ala-Asn-Ile-Glu-Glu-Leu-Leu-Lys-Lys-Ala-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Asp-Lys-Lys-Ser-Asn-Trp-Phe（配列番号４０）
項１１．項１〜１０のいずれかに記載のポリペプチド又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する抗HIV剤。
項１２．項１１に記載の抗HIV剤を、薬学的に許容される担体又は添加剤と共に含有する医薬組成物。
項１３．前記ポリペプチド又はその薬学的に許容される塩が、成人に対して1日体重1kg当り0.01 μg〜10 mgとなるように含有されてなる項１１に記載の抗HIV剤。
項１４．項１〜１０のいずれかに記載のポリペプチドの有効量をHIV患者に投与することを含む、HIVの治療方法。
項１５．HIV治療用組成物を製造するための請求〜１０に記載されるポリペプチドの使用。
【発明の効果】
【００１６】
本発明のポリペプチドは、HIVのgp41 HR1と相互作用して、HIVの細胞膜と宿主細胞の細胞膜の融合を阻害し、HIV感染を阻害することができる。本発明のポリペプチドは、従来抗HIV剤として用いられていたT20よりもさらにHR1への親和性が高く、優れた抗HIV活性を発揮し得るものである。また、本発明のポリペプチドは、T20の耐性株のHIVに対しても有効に作用し得るものである。【００１７】
T20は、HIV-1株に対する抗HIV活性を有することが知られているが、本発明のポリペプチドは、例えばHIV-2株に対しても有効に作用し得るものである。従って、本発明のポリペプチドによれば、幅広い種類のHIVに対して、HIVの感染予防又は治療を目的として使用することが可能である。【００１８】
さらに、本発明によれば、このようなポリペプチドを有効成分とし、HIVの感染予防又は治療に有効な抗HIV剤、及び該抗HIV剤を含有する医薬組成物をも提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
以下、本発明のポリペプチド、ならびに該ポリペプチドを有効成分とする抗HIV剤及び該HIV剤を含有する医薬組成物について説明する。【００２０】
１．抗HIV作用を有するポリペプチド
本発明は、以下の改変体Ｉ及び改変体ＩＩとして示されるポリペプチドを提供する。【００２１】
［改変体Ｉ］
本発明は、改変体Ｉとして、HIV-1 NL4-3株のHR2領域のアミノ酸配列（配列番号３）に基づいて改変を加えたポリペプチドを提供する。本発明において改変体Iは、下記表Iに表される順序でアミノ酸を含むポリペプチドである。【００２２】
【表３】
2008050830.tif 000004
【００２３】
表I中、X1は、セリン、アラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、スレオニン及びバリンからなる群より選択されるいずれか１種のアミノ酸を表し、好ましくはセリン、アラニン、イソロイシン、ロイシン又はメチオニンであり、より好ましくはアラニン、イソロイシン又はメチオニンである。ただし、X1以外のアミノ酸が下記(i)〜(xvi)の法則に従って置換されていない場合、X1はセリンではない。【００２４】
R1は、HIV-1のgp41 HR2領域の117〜126に位置するアミノ酸配列（Trp-Met-Glu-Trp-Asp-Arg-Glu-Ile-Asn-Asn：配列番号４）、その改変体及びアシル基からなる群から選択される少なくともいずれか１種を表す。【００２５】
配列番号４に表されるアミノ酸配列の改変体は、XTrp-XMet-XGlu-XTrp-XAsp-XArg-XGlu-XIle-XAsn-XAsnのように表され、対応する下記(i)〜(xvi)の法則に従ってアミノ酸が置換された改変体が挙げられる。好ましくは、B列及びC列に相当するアミノ酸がグルタミン酸であり、F列及びG列に相当するアミノ酸がリジンである。すなわち、XTrp-Glu-Glu-XTrp-XAsp-Lys-Lys-XIle-Glu-Glu（配列番号５）のように表される。【００２６】
また、R1のMet（メチオニン）は、メチオニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちロイシン、バリン、イソロイシン、スレオニン、リジン及びアルギニンからなる群より選択される少なくともいずれか１種で置換されていてもよい。【００２７】
R1のArg（アルギニン）は、アルギニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちロイシン、プロリン、ヒスチジン、グルタミン、システイントリプトファン、セリン、グリシン、イソロイシン、メチオニン、スレオニン及びリジンからなる群より選択される少なくともいずれか１種で置換されていてもよい。【００２８】
R1がアシル基である場合、上記表Iに表される1D（D列第1行）位、1E位、1F位、1G位又は2A位のアミノ酸のN末端のアミノ基には、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、ベンゾイル基、ベンジルオキシカルボニル基、フタリル基、ホルミル基、トリフルオロアセチル基、ベンジル基等のアシル基が結合していてもよく、好ましくはアセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、ベンゾイル基、フタリル基、ホルミル基、トリフルオロアセチル基が結合し、より好ましくはアセチル基が結合する。【００２９】
R2はHIV gp41の163〜172に位置するアミノ酸配列（Asn-Ile-Thr-Asn-Trp-Leu-Trp-Tyr-Ile-Lys：配列番号６）、その改変体、アミノ基及び置換基を有するアミノ基からなる群から選択される少なくともいずれか１種を表す。【００３０】
配列番号６に表されるアミノ酸配列の改変体は、XAsn-XIle-XThr-XAsn-XTrp-XLeu-XTrp-XTyr-XIle-XLysのように表され、対応する下記(i)〜(xvi)の法則に従ってアミノ酸が置換された改変体が挙げられる。好ましくは、B列及びC列に相当するアミノ酸がグルタミン酸であり、F列及びG列に相当するアミノ酸がリジンである。すなわち、XAsn-Lys-Lys-XAsn-Glu-Glu-XTrp-XTyr-Lys-Lys（配列番号７）のように表される。【００３１】
R2がアミノ基又は置換基を有するアミノ基である場合、上記表Iに表される6D位のXPheのC末端のカルボニル基には、-NH2、メチルアミノ基、ジメチルアミノ基、エチルアミノ基、ジエチルアミノ基、ベンジルアミノ基等のアミノ基が結合していてもよく、好ましくは-NH2、メチルアミノ基、ジメチルアミノ基、エチルアミノ基、ジエチルアミノ基が結合し、より好ましくは-NH2が結合する。【００３２】
本発明においては、R1がアセチル基であり、かつR2が-NH2であることがより好ましい。【００３３】
表Iにおいて、アミノ酸は、それぞれ以下のように定義される。【００３４】
XTyrはチロシン、
XThrはスレオニン、
XSerはセリン、
XLeuはロイシン、
XIleはイソロイシン、
XHisはヒスチジン、
XGluはグルタミン酸、
XGlnはグルタミン、
XAsnはアスパラギン、
XLysはリジン、
XAspはアスパラギン酸、
XTrp1及びXTrp2はトリプトファン、
XAlaはアラニン、
XPheはフェニルアラニンである。【００３５】
本発明においては、表Iに示されるアミノ酸のうち１〜３個のアミノ酸が下記の(i)〜(xv)の法則に従って置換されていてもよい。【００３６】
(i) XTyrは、同一又は異なって、チロシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちフェニルアラニン、セリン、システイン、ヒスチジン、アスパラギン及びアスパラギン酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種ある。【００３７】
(ii) XThrは、同一又は異なって、スレオニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちイソロイシン、メチオニン、アスパラギン、リジン、セリン、アルギニン、プロリン及びアラニンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００３８】
(iii) XSerは、同一又は異なって、セリンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちフェニルアラニン、ロイシン、チロシン、システイン、トリプトファン、プロリン、スレオニン、アラニン、イソロイシン、アスパラギン、アルギニン、グリシン及びシステインからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００３９】
(iv) XLeuは、同一又は異なって、ロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちプロリン、ヒスチジン、グルタミン、アルギニン、フェニルアラニン、イソロイシン、メチオニン、バリン、セリン及びトリプトファンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００４０】
(v) XIleは、同一又は異なって、イソロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちスレオニン、アスパラギン、リジン、セリン、アルギニン、フェニルアラニン、ロイシン、メチオニン及びバリンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００４１】
(vi) XHisは、同一又は異なって、ヒスチジンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちロイシン、プロリン、アルギニン、チロシン、アスパラギン、グルタミン及びアスパラギン酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種ある。【００４２】
(vii) XGluは、同一又は異なって、グルタミン酸をコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちバリン、アラニン、グリシン、リジン、アスパラギン酸及びグルタミンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００４３】
(viii) XGlnは、同一又は異なって、グルタミンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちロイシン、プロリン、アルギニン、リジン、ヒスチジン及びグルタミン酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００４４】
(ix) XAsnは、同一又は異なって、アスパラギンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちイソロイシン、スレオニン、セリン、チロシン、ヒスチジン、リジン及びアスパラギン酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００４５】
(x) XLysは、同一又は異なって、リジンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちイソロイシン、メチオニン、スレオニン、アルギニン、グルタミン、アスパラギン及びグルタミン酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００４６】
(xi) XAspは、同一又は異なって、アスパラギン酸をコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちバリン、アラニン、グリシン、チロシン、ヒスチジン、グルタミン酸及びアスパラギンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００４７】
(xii) XTrp1は、同一又は異なって、トリプトファンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちロイシン、セリン、アルギニン、システイン及びグリシンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００４８】
(xiii) XTrp2は、同一又は異なって、アラニン、トリプトファンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちロイシン、セリン、アルギニン、システイン及びグリシンからなる群より選択される少なくともいずれか１種であり、好ましくはアラニンである。【００４９】
(xiv) XAlaは、同一又は異なって、アラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちバリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グリシン、セリン、プロリン及びスレオニンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００５０】
(xv) XPheは、同一又は異なって、アラニン、フェニルアラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちセリン、チロシン、システイン、ロイシン、イソロイシン及びバリンからなる群より選択される少なくともいずれか１種であり、好ましくはアラニンである。【００５１】
さらに、下記(xvi)の法則に従って、B列、C列、F列及びG列のアミノ酸が置換されていてもよい。【００５２】
(xvi) 表Iの第１〜６行において、同一の行のB列及びC列の２個のアミノ酸、ならびにF列及びG列の２個のアミノ酸が、それぞれ、
同一又は異なる酸性アミノ酸、あるいは、
同一又は異なる塩基性アミノ酸であり、
ここで、同一の行において、
B列及びC列の２個のアミノ酸が酸性アミノ酸であるとき、F列及びG列の２個のアミノ酸は塩基性アミノ酸であり、
B列及びC列の２個のアミノ酸が塩基性アミノ酸であるとき、F列及びG列の２個のアミノ酸は酸性アミノ酸である。【００５３】
すなわち、酸性アミノ酸をXAとし、塩基性をXBとすると、例えば、第2行の７個のアミノ酸配列としては、2A-2B-2C-2D-2E-2F-2Gの順で、(α)X−XA−XA−X−X−XB−XB（配列番号８）又は(β)X−XB−XB−X−X−XA−XA（配列番号９）（ここで、Xは、それぞれA列、D列及びE列のアミノ酸を表す）のように表される。本発明においては、(α)及び(β)に示される順で結合されるアミノ酸配列を組み合わせて第2〜4行に位置するアミノ酸配列とすることができる。また、本発明の効果を損なわない限り、(α)と(β)を任意に組み合わせて用いることができ、例えば、(α)−(α)−(α)−(α)；(β)−(β)−(α)−(α)；(α)−(β)−(β)−(α)；(α)−(β)−(α)−(β)；(β)−(α)−(α)−(β)等が挙げられる。本発明においてより好ましい組み合わせとしては、(α)−(α)−(α)−(α)；(β)−(β)−(α)−(α)；(α)−(β)−(α)−(β)等が挙げられる。なお、1F-1G及び6B-6Cのアミノ酸についても、XA−XA又はXB−XBのように同様の法則に従って改変されていてもよい。【００５４】
ここで、酸性アミノ酸としては、好ましくはグルタミン酸、アスパラギン酸又はシステイン酸等であり、より好ましくはグルタミン酸又はアスパラギン酸であり、さらに好ましくはグルタミン酸である。【００５５】
塩基性アミノ酸としては、好ましくはリジン、アルギニン、オルニチン又はヒスチジン等であり、より好ましくはリジン、アルギニン又はオルニチンであり、さらに好ましくはリジン又はアルギニンであり、さらに好ましくはリジンである。【００５６】
上記酸性アミノ酸及び塩基性アミノ酸の組み合わせの中でも、グルタミン酸−リジンの組み合わせがより好ましい。【００５７】
表Iに示されるアミノ酸は、R1をN末端として、以下の順序で結合している。
R1-1D-1E-1F-1G-2A-2B-2C-2D-2E-2F-2G-3A-3B-3C-3D-3E-3F-3G-4A-4B-4C-4D-4E-4F-4G-5A-5B-5C-5D-5E-5F-5G-6A-6B-6C-6D-R2
ただし、1D-1E-1F-1GはN末端側から順に欠損していてもよい。すなわち、XTyr-XThr-XSer-XLeu（配列番号１０）、XThr-XSer-XLeu（配列番号１１）、XSer-XLeu、XLeuのいずれかである。ここで、XTyr-XThr-XSer-XLeu（配列番号１０）として表されるアミノ酸は、それぞれ前記と同様の法則によって置換されていても良い。【００５８】
本発明のポリペプチドは、表Iに表されるアミノ酸配列において、下記（ア）〜（ウ）に示されるアミノ酸配列を有するものが好ましい。【００５９】
（ア）表Iにおいて、
XTyrがチロシン、
XThrがスレオニン、
XSerがセリン、
XLeuがロイシン、
XIleがイソロイシン、
XHisがヒスチジン、
XGluがグルタミン酸、
XGlnがグルタミン、
XAsnがアスパラギン、
XLysがリジン、
XAspがアスパラギン酸、
XTrp1及びXTrp2がトリプトファン、
XAlaがアラニン、
XPheがフェニルアラニンである。【００６０】
（イ）表Iにおいて、
XTyrがチロシン、
XThrがスレオニン、
XSerがセリン、
XLeuがロイシン、
XIleがイソロイシン、
XHisがヒスチジン、
XGluがグルタミン酸、
XGlnがグルタミン、
XAsnがアスパラギン、
XLysがリジン、
XAspがアスパラギン酸、
XTrp1及びXTrp2がトリプトファン、
XAlaがアラニン、
XPheがフェニルアラニンであって、
X1が、アラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、スレオニン及びバリンからなる群より選択されるいずれか１種のアミノ酸を表し、
R1がアセチル基であり、かつR2が-NH2である。【００６１】
（ウ）表Iにおいて、
XTyrがチロシン、
XThrがスレオニン、
XSerがセリン、
XLeuがロイシン、
XIleがイソロイシン、
XHisがヒスチジン、
XGluがグルタミン酸、
XGlnがグルタミン、
XAsnがアスパラギン、
XLysがリジン、
XAspがアスパラギン酸、
XTrp1及びXTrp2がトリプトファン、
XAlaがアラニン、
XPheがフェニルアラニンであって、
X1は、セリン、アラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、スレオニン及びバリンからなる群より選択されるいずれか１種のアミノ酸を表し、
R1がアセチル基であり、かつR2が-NH2であり、
表Iの第１〜６行において、同一の行のB列及びC列の２個のアミノ酸、ならびにF列及びG列の２個のアミノ酸が、それぞれ、酸性アミノ酸又は塩基性アミノ酸であり、
ここで、同一の行において、B列及びC列の２個のアミノ酸が酸性アミノ酸であるとき、F列及びG列の２個のアミノ酸は塩基性アミノ酸であり、
B列及びC列の２個のアミノ酸が塩基性アミノ酸であるとき、F列及びG列の２個のアミノ酸は酸性アミノ酸である。【００６２】
［改変体ＩＩ］
本発明は、HIV-2 EHO株のHR2領域のアミノ酸配列（配列番号１２）に基づいて改変を加えた、改変体ＩＩとして以下のポリペプチドをも提供するものである。すなわち、改変体ＩＩは、下記表IIで表される順序でアミノ酸を含有するポリペプチドである（配列番号２）。【００６３】
【表４】
2008050830.tif 000005
【００６４】
表II中、R3及びR4は、下記のように定義される。【００６５】
R3は、HIV-2のgp41 HR2領域中のアミノ酸配列Trp-Gln-Gln-Trp-Glu-Arg-Gln-Val-Arg-Phe（配列番号１３）、その改変体及びアシル基からなる群から選択される少なくともいずれか１種を表す。【００６６】
配列番号１３に表されるアミノ酸配列の改変体は、XTrp-XGln-XGln-XTrp-XGlu-XArg-XGln-XVal-XArg-XPheのように表され、対応する下記(i)〜(xv)の法則に従ってアミノ酸が置換された改変体が挙げられる。好ましくは、B列及びC列に相当するアミノ酸がグルタミン酸であり、F列及びG列に相当するアミノ酸がリジンである。すなわち、XTrp-Glu-Glu-XTrp-XGlu-Lys-Lys-XVal-Glu-Glu（配列番号１４）のように表される。【００６７】
また、R3のArg（アルギニン）は、アルギニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちロイシン、プロリン、ヒスチジン、グルタミン、システイン、トリプトファン、セリン、グリシン、イソロイシン、メチオニン、スレオニン及びリジンからなる群より選択される少なくともいずれか１種で置換されていてもよい。【００６８】
R3がアシル基である場合、上記表Iに表される1D（D列第1行）位、1E位、1F位、1G位又は2A位のアミノ酸のN末端のアミノ基には、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、ベンゾイル基、ベンジルオキシカルボニル基、フタリル基、ホルミル基、トリフルオロアセチル基、ベンジル基等のアシル基が結合していてもよく、好ましくはアセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、ベンゾイル基、フタリル基、ホルミル基、トリフルオロアセチル基が結合し、より好ましくはアセチル基が結合する。【００６９】
R4はHIV-2のgp41 中のアミノ酸配列Asp-Phe-Thr-Ser-Trp-Met-Ala-Tyr-Ile-Arg（配列番号１５）、その改変体、アミノ基及び置換基を有するアミノ基からなる群から選択される少なくともいずれか１種を表す。【００７０】
配列番号１５に表されるアミノ酸配列の改変体は、XAsp-XPhe-XThr-XSer-XTrp-XMet-XAla-XTyr-XIle-XArgのように表され、対応する下記(i)〜(xv)の法則に従ってアミノ酸が置換された改変体が挙げられる。好ましくは、B列及びC列に相当するアミノ酸がグルタミン酸であり、F列及びG列に相当するアミノ酸がリジンである。すなわち、XAsp-Lys-Lys-XSer-Glu-Glu-XAla-XTyr-Lys-Lys（配列番号１６）のように表される。【００７１】
R4がアミノ基又は置換基を有するアミノ基である場合、上記表IIに表される6D位のXPheのC末端のアミノ酸のC末端カルボニル基には、-NH2、メチルアミノ基、ジメチルアミノ基、エチルアミノ基、ジエチルアミノ基、ベンジルアミノ基等のアミノ基が結合していてもよく、好ましくは-NH2、メチルアミノ基、ジメチルアミノ基、エチルアミノ基、ジエチルアミノ基が結合し、より好ましくは-NH2が結合する。【００７２】
本発明においては、R3がアセチル基であり、かつR4が-NH2であることがより好ましい。【００７３】
また、表II中、
XLeuはロイシン、
XAspはアスパラギン酸、
XAlaはアラニン、
XAsnはアスパラギン、
XIleはイソロイシン、
XThrはスレオニン、
XLysはリジン、
XGluはグルタミン酸、
XGlnはグルタミン、
XMetはメチオニン、
XTyrはチロシン、
XTrpはトリプトファン、
XSerはセリン、
XPheはフェニルアラニンである。【００７４】
また、表I中の１〜３個のアミノ酸が下記の(i)〜(xv)の法則に従って置換されていてもよい。【００７５】
(i) XLeuは、同一又は異なって、ロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちプロリン、ヒスチジン、グルタミン、アルギニン、フェニルアラニン、イソロイシン、メチオニン、バリン、セリン及びトリプトファンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００７６】
(ii) XAspは、同一又は異なって、アスパラギン酸をコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちバリン、アラニン、グリシン、チロシン、ヒスチジン、グルタミン酸及びアスパラギンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００７７】
(iii) XAlaは、同一又は異なって、アラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちバリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、グリシン、セリン、プロリン及びスレオニンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００７８】
(iv) XAsnは、同一又は異なって、アスパラギンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちイソロイシン、スレオニン、セリン、チロシン、ヒスチジン、リジン及びアスパラギン酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００７９】
(v) XIleは、同一又は異なって、イソロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちスレオニン、アスパラギン、リジン、セリン、アルギニン、フェニルアラニン、ロイシン、メチオニン及びバリンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００８０】
(vi) XThrは、同一又は異なって、スレオニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちイソロイシン、メチオニン、アスパラギン、リジン、セリン、アルギニン、プロリン及びアラニンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００８１】
(vii) XLysは、同一又は異なって、リジンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちイソロイシン、メチオニン、スレオニン、アルギニン、グルタミン、アスパラギン及びグルタミン酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００８２】
(viii) XGluは、同一又は異なって、グルタミン酸をコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちバリン、アラニン、グリシン、リジン、アスパラギン酸及びグルタミンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００８３】
(ix) XGlnは、同一又は異なって、グルタミンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちロイシン、プロリン、アルギニン、リジン、ヒスチジン及びグルタミン酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００８４】
(x) XMetは、同一又は異なって、メチオニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちロイシン、バリン、イソロイシン、スレオニン、リジン及びアルギニンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００８５】
(xi) XTyrは、同一又は異なって、チロシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちフェニルアラニン、セリン、システイン、ヒスチジン、アスパラギン及びアスパラギン酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００８６】
(xii) XTrpは、同一又は異なって、トリプトファンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちロイシン、セリン、アルギニン、システイン及びグリシンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００８７】
(xiii) XSerは、同一又は異なって、セリンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちフェニルアラニン、ロイシン、チロシン、システイン、トリプトファン、プロリン、スレオニン、アラニン、イソロイシン、アスパラギン、アルギニン、グリシン及びシステインからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００８８】
(xiv) XPheは、同一又は異なって、フェニルアラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸、すなわちセリン、チロシン、システイン、ロイシン、イソロイシン及びバリンからなる群より選択される少なくともいずれか１種である。【００８９】
さらに、(xv)の法則によってB列、C列、F列及びG列のアミノ酸が置換されていてもよい。(xv)は、前記表Iの(xvi)と同様に定義される。【００９０】
表IIに示されるアミノ酸は、R3をN末端、R4をC末端として、上記表Iと同様の順序で結合している。また、1D-1E-1F-1Gについても表Iの場合と同様に定義される。【００９１】
以上の本発明の改変体Ｉ及び改変体ＩＩにおいて使用されるアミノ酸は、L体（Lアミノ酸）が好ましいが、D体を用いても良い。D体を用いる場合には、全ての光学活性アミノ酸をD体にすることが好ましい。【００９２】
本発明のポリペプチドは、好ましくは下記(a)〜(x)のいずれかのアミノ酸配列を有する。ここで、(a)〜(v)は改変体Iに相当し、(w)及び(x)は改変体IIに相当する。本発明のポリペプチドとして、より好ましくは下記の(g)〜(n)のアミノ酸配列を有する。
(a)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Ala-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号１７）
(b)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Ile-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号１８）
(c)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号１９）
(d)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Met-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２０）
(e)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Thr-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２１）
(f)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Val-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２２）
(g)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２３）
(h)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ala-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２４）
(i)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Gly-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２５）
(j)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ile-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２６）
(k)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２７）
(l)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Met-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２８）
(m)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Thr-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２９）
(n)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Val-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３０）
(o)Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３１）
(p)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Ala-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３２）
(q)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Ala-Phe（配列番号３３）
(r)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Ala（配列番号３４）
(s)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Lys-Lys-Leu-Ile-Glu-Glu-Ser-Lys-Lys-Gln-Gln-Glu-Glu-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３５）
(t)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Lys-Gln-Gln-Glu-Glu-Asn-Lys-Lys-Glu-Leu-Glu-Glu-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３６）
(u)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Lys-Gln-Gln-Glu-Glu-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Lys-Lys-Trp-Ala-Glu-Glu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３７）
(v)Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Lys-Lys-Leu-Ile-Glu-Glu-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Lys-Lys-Trp-Ala-Glu-Glu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３８）
(w)Leu-Asp-Ala-Asn-Ile-Thr-Lys-Leu-Leu-Glu-Glu-Ala-Gln-Ile-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Met-Tyr-Glu-Leu-Gln-Lys-Leu-Asn-Gln-Trp-Asp-Ile-Phe-Ser-Asn-Trp-Phe（配列番号３９）
(x)Leu-Asp-Ala-Asn-Ile-Glu-Glu-Leu-Leu-Lys-Lys-Ala-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Asp-Lys-Lys-Ser-Asn-Trp-Phe（配列番号４０）
本発明のポリペプチドは、N末端がアセチル化され、且つC末端がアミド化されていた方が、安定なα-へリックス構造を形成することができる。また、本発明のペプチド改変体は、N末端とC末端は互いに結合しておらず、非環状であることが好ましい。【００９３】
本発明のポリペプチドは、公知のポリペプチド合成法、特に液相合成法あるいは固相合成法によって製造することができる。また、本発明のポリペプチドをコードするDNAを遺伝子組換え技術により宿主細胞に導入し、発現させる方法によっても合成することができる。【００９４】
例えば、固相合成法では、最もC末端に対応するアミノ酸のアミノ基を９-フルオレニルメチルオキシカルボニル（Fmoc）基などのウレタン型保護基で保護したN-保護アミノ酸のカルボキシル基を、アミノ基を有する不溶性樹脂に結合させた後、アミノ基の保護基を除去し、N末端方向に順次保護アミノ酸を縮合させ、次いで不溶性樹脂およびアミノ酸の保護基を脱保護させて、本発明のポリペプチドを得ることができる。【００９５】
前記のアミノ基を有する不溶性樹脂としては、特に限定されないが、Fmoc-NH-SAL樹脂(4-(2',4'-ジメトキシフェニル-Fmoc-アミノエチル)フェノキシリンカー樹脂)が好ましく、開裂によって直接目的物を与えることができる。【００９６】
本発明のポリペプチドの合成に用いる保護アミノ酸は、官能基を公知の方法により公知の保護基で保護することにより得ることができるし、市販の保護アミノ酸を使用することもできる。保護基としては公知のものが使用できる。【００９７】
保護アミノ酸を調製する場合には、例えば、DIPCDI(ジイソプロピルカルボジイミド)-HOBt(1-ヒドロキシベンゾトリアゾール)法等のような公知の方法を用いることができる。本縮合反応は公知の溶媒中で行うことができ、例えば、ジメチルホルムアミド等の有機溶媒が例示される。アミノ基の保護基の脱離試薬としては限定されず、ピペリジン／ジメチルホルムアミド等の公知の試薬によって、Fmoc基等の保護基を切断することができる。【００９８】
また、合成の各段階における縮合反応の進行の程度は、例えばニンヒドリン反応法のような公知の方法によって確認することができる。【００９９】
上記のようにして、所望のアミノ酸配列を有する保護ポリペプチドを得ることができる。【０１００】
不溶性樹脂としてFmoc-NH-SAL樹脂を用いた場合、TMSBr(トリメチルシリルブロミド)やTFA(トリフルオロ酢酸)等で処理することにより、樹脂及び保護基を同時に脱離させることができる。【０１０１】
このようにして得られた本発明のポリペプチドは、例えば、抽出、再結晶、各種クロマトグラフィー（ゲルろ過、イオン交換、分配、吸着）、電気泳動、向流分配等、公知の手段により単離精製することができ、逆相高速液体クロマトグラフィーによる方法が好ましい。【０１０２】
本発明のポリペプチドは、HIVが生体内の宿主細胞（例えば、T細胞等）に侵入（感染）することを防ぐことができ、または感染したHIVが宿主細胞内で増殖し更なる感染を引き起こすことを防ぐことができるので、HIVの感染予防、HIV感染細胞の拡大の予防、AIDSの発症予防、更にはAIDSの治療等にも使用することができる。【０１０３】
２．抗HIV剤及び該抗HIV剤を含む医薬組成物
本発明のポリペプチドには、その薬学的に許容される塩も包含される。かかる塩には、当業界で周知の方法により調製される、例えばナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウムなどの無毒性アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩等が包含される。更に上記塩には、本発明ポリペプチドと適当な有機酸乃至無機酸との反応による無毒性酸付加塩も包含される。代表的酸付加塩としては、例えば塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、酢酸塩、吉草酸塩、ラウリン酸塩、乳酸塩、リン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩（トシレート）、クエン酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、グリコール酸塩、ベンゼンスルホン酸塩及びメタンスルホン酸塩などを例示できる。これらの塩を１種単独で、または２種以上を組み合わせて用いることができる。【０１０４】
また、本発明のポリペプチド又はその薬学的に許容される塩をそれぞれ単独で有効成分とし、又は本発明のポリペプチドとその塩の１種もしくは２種以上を組み合わせて有効成分とし、抗HIV剤として使用することもできる。また、上記ポリペプチドに等張化剤、無機塩類、緩衝剤、可溶化剤、キレート剤、抗酸化剤、香料、防腐剤、ｐＨ調整剤等の従来公知の添加剤を、本発明の効果を損なわない範囲で組み合わせて、本発明の抗HIV剤とすることもできる。【０１０５】
さらに、本発明は、前記抗HIV剤を有効成分とし、従来公知の薬学的に許容される担体又は種々の添加剤（賦形剤、希釈剤、結合剤、崩壊剤等）を共に含有する抗HIV活性を有する医薬組成物をも提供するものである。【０１０６】
前記医薬組成物の製剤形態としては各種のものが治療目的に応じて選択でき、その代表的なものとしては錠剤、丸剤、散剤、液剤、懸濁剤、カプセル剤、徐放性ミクロカプセル剤等の固形製剤、注射剤（液剤、懸濁剤など）等の経口又は非経口投与用の液状製剤が挙げられる。【０１０７】
例えば、錠剤の形態に成形するに際しては、上記製剤担体として乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、尿素、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、結晶セルロース、ケイ酸、リン酸カリウムなどの賦形剤；水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン溶液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどの結合剤；カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、ラミナラン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウムなどの崩壊剤；ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル類、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリドなどの界面活性剤；白糖、ステアリン、カカオバター、水素添加油などの崩壊抑制剤；第４級アンモニウム塩基、ラウリル硫酸ナトリウムなどの吸収促進剤；グリセリン、デンプンなどの保湿剤；デンプン、乳糖、カオリン、ベントナイト、コロイド状ケイ酸などの吸着剤；精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ酸末、ポリエチレングリコールなどの滑沢剤等を使用できる。【０１０８】
更に錠剤は必要に応じ通常の剤皮を施した錠剤、例えば糖衣錠、ゼラチン被包錠、フィルムコーティング錠、二重錠乃至多層錠等とすることができる。【０１０９】
丸剤の形態に成形するに際しては、製剤担体として例えばブドウ糖、乳糖、デンプン、カカオ脂、硬化植物油、カオリン、タルクなどの賦形剤；アラビアゴム末、トラガント末、ゼラチン、エタノールなどの結合剤；ラミナラン、カンテンなどの崩壊剤などを使用できる。【０１１０】
カプセル剤は、常法に従い通常本発明の有効成分を上記で例示した各種の製剤担体と混合して硬質ゼラチンカプセル、軟質カプセルなどに充填して調整される。【０１１１】
本発明の医薬組成物を経口投与用の液状製剤として調製する場合は、慣用される不活性希釈剤、例えば水、を含む医薬的に許容される溶液、エマルジョン、懸濁液、シロップ、エリキシルなどを包含し、更に湿潤剤、乳剤、懸濁剤などの助剤を含ませることができ、これらは常法に従い調製される。【０１１２】
本発明の医薬組成物を非経口投与用の液状製剤として調製する場合、希釈剤として例えば水、エチルアルコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル及びオリーブ油などの植物油などを使用でき、また注入可能な有機エステル類、例えばオレイン酸エチルなどを配合できる。これらには更に通常の溶解補助剤、緩衝剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、保存剤、分散剤などを添加することもできる。滅菌は、例えばバクテリア保留フィルターを通過させる濾過操作、殺菌剤の配合、照射処理及び加熱処理などにより実施できる。また、これらは使用直前に滅菌水や適当な滅菌可能媒体に溶解することのできる滅菌固体組成物形態に調製することもできる。【０１１３】
本発明の医薬組成物は、液状製剤の形態で調製する場合、凍結乾燥化し保存し得る状態にした後、用時水、生埋的食塩水などを含む緩衝液などで溶解して適当な濃度に調製した後に使用することも可能である。【０１１４】
また、本発明の医薬組成物には、通常の蛋白製剤などに使用され得る各種の成分、例えば安定化剤、殺菌剤、緩衝剤、等張化剤、キレート剤、ｐＨ調整剤、界面活性剤、リン脂質などを適宜使用して調製され得る。【０１１５】
尚、本発明の医薬組成物中には、必要に応じて着色剤、保存剤、香料、風味剤、甘味剤などや他の医薬品などを含有させることもできる。【０１１６】
本発明の抗HIV剤又は抗HIV活性を有する医薬組成物の投与方法は、特に制限がなく、各種製剤形態、疾患の程度などに応じて決定される。例えば錠剤、丸剤、液剤、懸濁剤、乳剤、顆粒剤及びカプセル剤は経口投与され、注射剤は単独で又はブドウ糖やアミノ酸などの通常の補液と混合して静脈内投与され、更に必要に応じ単独で筋肉内、皮内、皮下もしくは腹腔内投与される。【０１１７】
上記医薬組成物の投与量は、特に限定されず、所望の治療効果、投与法、治療期間、患畜の年齢などに応じて適宜選択されるが、一般的には、通常成人に対して有効成分量が、1日体重1kg当り、0.01 μg〜10 mg程度、好ましくは0.1 μg〜1 mg程度、より好ましくは0.01 mg〜1 mg程度、より好ましくは0.1 mg〜1 mg程度とするのがよく、該製剤は1日に1回又は数回に分けて投与することができる。前記用量の有効成分を投与することによってHIVの感染を予防若しくは治療することができ、加えて、ヒトAIDSの治療を行うことができる。【０１１８】
また、HIVの感染予防もしくは治療、又はヒトAIDSの治療において、本発明のポリペプチド、抗HIV剤又は抗HIV剤を含有する医薬組成物は、例えば、現在臨床の現場で行われている多剤療法（HAART：Highly Active Anti-retroviral Therapy）等の公知の療法と併用することも可能である。
【実施例】
【０１１９】
以下、実施例を用いて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されない。
（１）ペプチド合成
NovaSyn TGR resin (Novabiochem社)上、通常のFmoc型固相合成法により保護ペプチド樹脂を構築した。N末端は無水酢酸 (10 eq.), pyridine (10 eq.) を加えDMF溶媒中2 hr攪拌することで、アセチル化を行った。この樹脂 (200 mg)を、m-cresol : ethanedithiol : thioanisole : H2O : TFA = 5 : 5 : 5 : 5 : 80 (v/v, 10 mL)で室温、2.5 hr処理した。樹脂を濾去した後、窒素気流で溶媒を留去し、氷冷下で残渣にエーテルを加えてペプチドを析出させた。ペプチドは遠心分離器で沈殿させエーテルを除去し、この洗浄操作を３回繰り返した。粗ペプチドを0.1 % TFA in H2O-MeCN (1 : 2 v/v, 5 mL)に溶かし、HPLCにて分取精製し、目的とするペプチド(a)〜(x)を得た。各アミノ酸配列の下に、イオンスプレーマススペクトル(IS-MS)(トリプルステージ四重極型質量分析装置APIII (Perkin-Elmer ScieX)を使用) によって得られた、質量分析の結果を示す。【０１２０】
(a)T20/S138A
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Ala-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号１７）
（理論値：4476.9    ；実測値：4476.0   ）
(b)T20/S138I
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Ile-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号１８）
（理論値：4519.0    ；実測値：4518.4   ）
(c)T20/S138L
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号１９）
（理論値：4519.0    ；実測値：4518.7   ）
(d)T20/S138M
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Met-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２０）
（理論値：4537.0    ；実測値：4536.1  ）
(e)T20/S138T
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Thr-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２１）
（理論値：4506.9      ；実測値：4506.4  ）
(f)T20/S138V
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-His-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Val-Gln-Asn-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Glu-Gln-Glu-Leu-Leu-Glu-Leu-Asp-Lys-Trp-Ala-Ser-Leu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２２）
（理論値：4504.9      ；実測値：4504.8  ）
(g) T20EK
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２３）
（理論値：4626.2    ；実測値：4625.5    ）
(h)T20EK/S138A
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ala-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２４）
（理論値：4610.2    ；実測値：4610.0    ）
(i) T20EK/S138G
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Gly-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２５）
（理論値：4696.2    ；実測値：4696.0    ）
(j) T20EK/S138I
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ile-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２６）
（理論値：4652.3    ；実測値：4652.0    ）
(k) T20EK/S138L
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２７）
（理論値：4652.3    ；実測値：4652.0    ）
(l) T20EK/S138M
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Met-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２８）
（理論値：4670.3    ；実測値：4669.2    ）
(m)T20EK/S138T
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Thr-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号２９）
（理論値：4640.2    ；実測値：4640.0    ）
(n)T20EK/S138V
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Val-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３０）
（理論値：4638.2    ；実測値：4638.0    ）
(o)T20EK32
Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３１）
（理論値：4161.7    ；実測値：4162.0    ）
(p)T20EK/W155A
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Ala-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３２）
（理論値：4511.1    ；実測値：4511.2    ）
(q)T20EK/W161A
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Ala-Phe（配列番号３３）
（理論値：4511.1    ；実測値：4511.0    ）
(r)T20EK/F162A
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Ala（配列番号３４）
（理論値：4550.1     ；実測値：4550.0    ）
(s)T20EK-b
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Lys-Lys-Leu-Ile-Glu-Glu-Ser-Lys-Lys-Gln-Gln-Glu-Glu-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３５）
（理論値：4626.2    ；実測値：4626.0    ）
(t) T20EK-d
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Lys-Gln-Gln-Glu-Glu-Asn-Lys-Lys-Glu-Leu-Glu-Glu-Leu-Glu-Glu-Trp-Ala-Lys-Lys-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３６）
（理論値：4626.2    ；実測値：4626.0    ）
(u) T20EK-g
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Glu-Glu-Leu-Ile-Lys-Lys-Ser-Lys-Lys-Gln-Gln-Glu-Glu-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Lys-Lys-Trp-Ala-Glu-Glu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３７）
（理論値：4626.2    ；実測値：4626.0    ）
(v) T20EK-h
Tyr-Thr-Ser-Leu-Ile-Lys-Lys-Leu-Ile-Glu-Glu-Ser-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Lys-Lys-Trp-Ala-Glu-Glu-Trp-Asn-Trp-Phe（配列番号３８）
（理論値：4626.2    ；実測値：4626.0    ）
(w)T20/HIV-2
Leu-Asp-Ala-Asn-Ile-Thr-Lys-Leu-Leu-Glu-Glu-Ala-Gln-Ile-Gln-Gln-Glu-Lys-Asn-Met-Tyr-Glu-Leu-Gln-Lys-Leu-Asn-Gln-Trp-Asp-Ile-Phe-Ser-Asn-Trp-Phe（配列番号３９）
（理論値：4485.0    ；実測値：4485.0    ）
(x)T20EK/HIV-2
Leu-Asp-Ala-Asn-Ile-Glu-Glu-Leu-Leu-Lys-Lys-Ala-Glu-Glu-Gln-Gln-Lys-Lys-Asn-Glu-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Glu-Glu-Trp-Asp-Lys-Lys-Ser-Asn-Trp-Phe（配列番号４０）
（理論値：4504.0    ；実測値：4503.5    ）【０１２１】
（２）MAGI（Maltinuclear activation of galactosidase indicator）アッセイによる抗HIV活性の測定
Hela細胞にCD4-LTR/βgalを発現させたMAGI細胞を使用し、MAGIアッセイにより上記(a)〜(o)の配列を含むポリペプチドについて抗HIV活性を測定した。【０１２２】
MAGI 細胞をトリプシン５分処理後、等量以上のDMEM（Dulbecco's Modified Eagle's Medium）を添加し、カウント後、96wellに1×104cells/wellとなるようにした。ウイルスHIV-1株クローンNL4-3をDMEMで希釈し、100μlずつウェルに添加した。上記(a)〜(o)の配列を含むポリペプチドを10倍ごとの段階希釈し、ウェルに添加した。48時間培養後、X-Galを添加して青色に染色される細胞数をカウントした。この細胞はHIVが感染するとX-GALで青色に染色されることから50％染色率を示す濃度をEC50（Effective concentration）として表記する。結果を下記表A〜Dに示す。【０１２３】
【表Ａ】
2008050830.tif 000006
【０１２４】
【表Ｂ】
2008050830.tif 000007
【０１２５】
【表Ｃ】
2008050830.tif 000008
【０１２６】
【表Ｄ】
2008050830.tif 000009
【０１２７】
表A〜Dに示される結果より、本発明のポリペプチドは、T20よりも優れた抗HIV活性を有していることが示された。【０１２８】
（３）T20耐性ウイルスに対する抗HIV活性
T20と、前記ポリペプチド(a)〜(d)及び(g)〜(n)を用い、T20耐性ウイルスに対する抗HIV活性を評価した。【０１２９】
ウイルスHIV-1株クローンNL4-3の代わりに前記T20耐性株ウイルスを用いる以外は上記（２）と同じ試験方法によって抗HIV活性を評価した。【０１３０】
T20耐性を示す臨床株では、gp41のV38A及びN43Dといった変異が見られる。しかしながら、これらのT20耐性株ウイルスは増殖能が乏しいため、一部の配列に変異を導入し（36位のアスパラギン酸をグリシンに置換した）、アッセイに適用可能なウイルスとして調製した（これをDGと記載する）。すなわち、本試験では、DGに対する活性値を野性株HIVに対する活性値とし、変異株（T20耐性株）に相当するウイルスとしてDG/V38A及びDG/N43Dを用いて抗HIV活性の傾向を評価した。ここで、DG/V38Aは、T20耐性HIVのgp41のHR1領域における38位のバリンがアラニンに変異している耐性株である。また、DG/N43Dは、T20耐性HIVのgp41のHR1領域における43位のアスパラギンがアスパラギン酸に変異している耐性株である。【０１３１】
前述のように、T20に対する耐性は、gp41のHR1領域のアミノ酸変異およびHR2領域のアミノ酸変異によって生じているものと考えられている。ここで、HR1領域のアミノ酸変異は、HR2領域の部分ペプチドとして阻害活性を有するT20に対する親和性を下げると考えられる。一方、HR2領域のアミノ酸変異は、T20よりも親和性が高く、変異後のHR1領域の配列により高い親和性を保持すると考えられる。従って、本試験においては、DGのgp41のHR1領域に相当する箇所（すなわち38位のバリン及び43位のアスパラギン）に変異のあるT20耐性株を用いて、これらに対する本発明のペプチドの抗HIV活性を評価した。【０１３２】
結果を下記表E及び表Fに示す。【０１３３】
【表Ｅ】
2008050830.tif 000010
【０１３４】
【表Ｆ】
2008050830.tif 000011
【０１３５】
表E及び表Fに示されるように、本発明のポリペプチドは、T20耐性株のHIVに対しても優れた抗ウイルス活性を示した。【０１３６】
（４）HIV-2ウイルスに対する抗HIV活性
T20と、前記ポリペプチド(g)、(w)及び(x)を用い、HIV-2ウイルスに対する抗HIV活性を評価した。【０１３７】
ウイルスHIV-1株クローンNL4-3の代わりに、HIV-2 EHO株ウイルスを用いる以外は上記（２）と同じ試験方法によって抗HIV活性を評価した。結果を下記表Ｇに示す。【０１３８】
【表Ｇ】
2008050830.tif 000012
【０１３９】
表Gに示されるように、本発明のポリペプチドは、HIV-2(EHO)に対して優れた抗ウイルス活性を示した。特にポリペプチド(g)及び(w)は、HIV-1に対して優れた抗ウイルス活性を示すとともに、HIV-2に対しても優れた抗ウイルス活性を示した。
【配列表フリーテキスト】
【０１４０】
配列番号１は、表Iに示されるアミノ酸配列を表す。
配列番号２は、表IIに示されるアミノ酸配列を表す。
配列番号５は、HIV-1 (NL4-3) gp41 HR2領域117-126の改変体のアミノ酸配列を表す。
配列番号７は、HIV-1 (NL4-3) gp41 HR2領域163-173の改変体のアミノ酸配列を表す。
配列番号８は、（α）のアミノ酸配列を表す。
配列番号９は、（β）のアミノ酸配列を表す。
配列番号１０は、表Iの1D-1E-1F-1Gのアミノ酸配列を表す。
配列番号１１は、表Iの1E-1F-1Gのアミノ酸配列を表す。
配列番号１４は、HIV-2 (EHO) gp41 HR2領域の部分配列の改変体のアミノ酸配列を表す。配列番号１６は、HIV-2 (EHO) gp41の部分配列の改変体のアミノ酸配列を表す。
配列番号１７は、(a)T20/S138Aのアミノ酸配列を表す。
配列番号１８は、(b)T20/S138Iのアミノ酸配列を表す。
配列番号１９は、(c)T20/S138Lのアミノ酸配列を表す。
配列番号２０は、(d)T20/S138Mのアミノ酸配列を表す。
配列番号２１は、(e)T20/S138Tのアミノ酸配列を表す。
配列番号２２は、(f)T20/S138Vのアミノ酸配列を表す。
配列番号２３は、(g)T20EKのアミノ酸配列を表す。
配列番号２４は、(h)T20EK/S138Aのアミノ酸配列を表す。
配列番号２５は、(i)T20EK/S138Gのアミノ酸配列を表す。
配列番号２６は、(j)T20EK/S138Iのアミノ酸配列を表す。
配列番号２７は、(k)T20EK/S138Lのアミノ酸配列を表す。
配列番号２８は、(l)T20EK/S138Mのアミノ酸配列を表す。
配列番号２９は、(m)T20EK/S138Tのアミノ酸配列を表す。
配列番号３０は、(n)T20EK/S138Vのアミノ酸配列を表す。
配列番号３１は、(o)T20EK32のアミノ酸配列を表す。
配列番号３２は、(p)T20EK/W155Aのアミノ酸配列を表す。
配列番号３３は、(q)T20EK/W161Aのアミノ酸配列を表す。
配列番号３４は、(r)T20EK/F162Aのアミノ酸配列を表す。
配列番号３５は、(s)T20EK-bのアミノ酸配列を表す。
配列番号３６は、(t)T20EK-dのアミノ酸配列を表す。
配列番号３７は、(u)T20EK-gのアミノ酸配列を表す。
配列番号３８は、(v)T20EK-hのアミノ酸配列を表す。
配列番号３９は、(w)T20/HIV-2のアミノ酸配列を表す。
配列番号４０は、(x)T20EK/HIV-2のアミノ酸配列を表す。
【配列表】
2008050830000001.app
【手続補正書】
【提出日】平成20年8月25日(2008.8.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記表Ｉで表される順序でアミノ酸を含有するポリペプチド（配列番号１）。
【表１】
2008050830.tif 000015
（表Ｉ中、Ｘ１は、セリン、アラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、スレオニン及びバリンからなる群より選択されるいずれか１種のアミノ酸を表す；
Ｒ１は、配列番号４に表されるアミノ酸配列、その改変体及びアシル基からなる群から選択されるいずれか１種を表す；
Ｒ２は、配列番号６に表されるアミノ酸配列、その改変体、アミノ基及び置換基を有するアミノ基からなる群から選択される少なくともいずれか１種を表す；
ＸＴｙｒはチロシン、
ＸＴｈｒはスレオニン、
ＸＳｅｒはセリン、
ＸＬｅｕはロイシン、
ＸＩｌｅはイソロイシン、
ＸＨｉｓはヒスチジン、
ＸＧｌｕはグルタミン酸、
ＸＧｌｎはグルタミン、
ＸＡｓｎはアスパラギン、
ＸＬｙｓはリジン、
ＸＡｓｐはアスパラギン酸、
ＸＴｒｐ１及びＸＴｒｐ２はトリプトファン、
ＸＡｌａはアラニン、
ＸＰｈｅはフェニルアラニンである；
また、表Ｉ中の１〜３個のアミノ酸が下記の（ｉ）〜（ｘｖ）の法則に従って置換されていてもよい。
（ｉ）ＸＴｙｒは、同一又は異なって、チロシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｉｉ）ＸＴｈｒは、同一又は異なって、スレオニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｉｉｉ）ＸＳｅｒは、同一又は異なって、セリンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｉｖ）ＸＬｅｕは、同一又は異なって、ロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｖ）ＸＩｌｅは、同一又は異なって、イソロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｖｉ）ＸＨｉｓは、同一又は異なって、ヒスチジンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｖｉｉ）ＸＧｌｕは、同一又は異なって、グルタミン酸をコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｖｉｉｉ）ＸＧｌｎは、同一又は異なって、グルタミンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｉｘ）ＸＡｓｎは、同一又は異なって、アスパラギンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｘ）ＸＬｙｓは、同一又は異なって、リジンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｘｉ）ＸＡｓｐは、同一又は異なって、アスパラギン酸をコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｘｉｉ）ＸＴｒｐ１は、同一又は異なって、トリプトファンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｘｉｉｉ）ＸＴｒｐ２は、同一又は異なって、トリプトファンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸及びアラニンからなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｘｉｖ）ＸＡｌａは、同一又は異なって、アラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｘｖ）ＸＰｈｅは、同一又は異なって、フェニルアラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸及びアラニンからなる群より選択される少なくともいずれか１種であり；
さらに、下記（ｘｖｉ）の法則によってＢ列、Ｃ列、Ｆ列及びＧ列のアミノ酸が置換されていてもよい。
（ｘｖｉ）表Ｉの第１〜６行において、同一の行のＢ列及びＣ列の２個のアミノ酸、ならびにＦ列及びＧ列の２個のアミノ酸が、それぞれ、
同一又は異なって、グルタミン酸、アスパラギン酸及びシステイン酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種の酸性アミノ酸、あるいは、
同一又は異なって、リジン、アルギニン、オルニチン及びヒスチジンからなる群より選択される少なくともいずれか１種の塩基性アミノ酸である。
ここで、同一の行において、Ｂ列及びＣ列の２個のアミノ酸が酸性アミノ酸であるとき、Ｆ列及びＧ列の２個のアミノ酸は塩基性アミノ酸であり、
Ｂ列及びＣ列の２個のアミノ酸が塩基性アミノ酸であるとき、Ｆ列及びＧ列の２個のアミノ酸は酸性アミノ酸である；
また、表Ｉに示されるアミノ酸は、Ｒ１をＮ末端として、以下の順序で結合している。
Ｒ１−１Ｄ−１Ｅ−１Ｆ−１Ｇ−２Ａ−２Ｂ−２Ｃ−２Ｄ−２Ｅ−２Ｆ−２Ｇ−３Ａ−３Ｂ−３Ｃ−３Ｄ−３Ｅ−３Ｆ−３Ｇ−４Ａ−４Ｂ−４Ｃ−４Ｄ−４Ｅ−４Ｆ−４Ｇ−５Ａ−５Ｂ−５Ｃ−５Ｄ−５Ｅ−５Ｆ−５Ｇ−６Ａ−６Ｂ−６Ｃ−６Ｄ−Ｒ２
但し、１Ｄ−１Ｅ−１Ｆ−１ＧはＮ末端側から順に欠損していてもよい；
また、Ｘ１以外のアミノ酸が置換されていない場合、Ｘ１はセリンではない）。
【請求項２】
前記表Ｉにおいて
ＸＴｙｒがチロシン、
ＸＴｈｒがスレオニン、
ＸＳｅｒがセリン、
ＸＬｅｕがロイシン、
ＸＩｌｅがイソロイシン、
ＸＨｉｓがヒスチジン、
ＸＧｌｕがグルタミン酸、
ＸＧｌｎがグルタミン、
ＸＡｓｎがアスパラギン、
ＸＬｙｓがリジン、
ＸＡｓｐがアスパラギン酸、
ＸＴｒｐ１及びＸＴｒｐ２がトリプトファン、
ＸＡｌａがアラニン、
ＸＰｈｅがフェニルアラニンである、請求項１に記載のポリペプチド。
【請求項３】
前記表Ｉにおいて、Ｘ１が、アラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、スレオニン又はバリンのいずれかである、請求項１又は２に記載のポリペプチド。
【請求項４】
前記表Ｉにおいて、Ｂ列及びＣ列のアミノ酸がグルタミン酸であり、Ｆ列及びＧ列のアミノ酸がリジンであって、
かつＸ１がアラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、スレオニン又はバリンのいずれかであり、
Ｒ１がアセチル基、Ｒ２が−ＮＨ２である、請求項１〜３のいずれかに記載にポリペプチド。
【請求項５】
下記に表される順序でアミノ酸を含有するポリペプチド。
Ｔｙｒ−Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｉｌｅ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｘ１−Ｇｌｎ−Ａｓｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ａｓｎ−Ｇｌｕ−Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｓｅｒ−Ｌｅｕ−Ｔｒｐ−Ａｓｎ−Ｔｒｐ−Ｐｈｅ
（ここで、Ｘ１は、アラニン、グリシン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、スレオニン及びバリンからなる群より選択されるいずれか１種のアミノ酸を表す）。
【請求項６】
下記表ＩＩで表される順序でアミノ酸を含有するポリペプチド（配列番号２）。
【表２】
2008050830.tif 000016
（表ＩＩ中、Ｒ３は、配列番号１３に表されるアミノ酸配列、その改変体及びアシル基からなる群から選択されるいずれか１種を表す；
Ｒ４は、配列番号１５に表されるアミノ酸配列、その改変体、アミノ基及び置換基を有するアミノ基からなる群から選択される少なくともいずれか１種を表す；
ＸＬｅｕはロイシン、
ＸＡｓｐはアスパラギン酸、
ＸＡｌａはアラニン、
ＸＡｓｎはアスパラギン、
ＸＩｌｅはイソロイシン、
ＸＴｈｒはスレオニン、
ＸＬｙｓはリジン、
ＸＧｌｕはグルタミン酸、
ＸＧｌｎはグルタミン、
ＸＭｅｔはメチオニン、
ＸＴｙｒはチロシン、
ＸＴｒｐはトリプトファン、
ＸＳｅｒはセリン、
ＸＰｈｅはフェニルアラニンである；
また、表ＩＩ中の１〜３個のアミノ酸が下記の（ｉ）〜（ｘｉｖ）の法則に従って置換されていてもよい。
（ｉ）ＸＬｅｕは、同一又は異なって、ロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｉｉ）ＸＡｓｐは、同一又は異なって、アスパラギン酸をコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｉｉｉ）ＸＡｌａは、同一又は異なって、アラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｉｖ）ＸＡｓｎは、同一又は異なって、アスパラギンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｖ）ＸＩｌｅは、同一又は異なって、イソロイシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｖｉ）ＸＴｈｒは、同一又は異なって、スレオニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｖｉｉ）ＸＬｙｓは、同一又は異なって、リジンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｖｉｉｉ）ＸＧｌｕは、同一又は異なって、グルタミン酸をコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｉｘ）ＸＧｌｎは、同一又は異なって、グルタミンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｘ）ＸＭｅｔは、同一又は異なって、メチオニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｘｉ）ＸＴｙｒは、同一又は異なって、チロシンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｘｉｉ）ＸＴｒｐは、同一又は異なって、トリプトファンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｘｉｉｉ）ＸＳｅｒは、同一又は異なって、セリンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種；
（ｘｉｖ）ＸＰｈｅは、同一又は異なって、フェニルアラニンをコードするコドンからの一塩基の変異によって生じるアミノ酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種であり；
さらに、下記（ｘｖ）の法則によってＢ列、Ｃ列、Ｆ列及びＧ列のアミノ酸が置換されていてもよい。
（ｘｖ）表ＩＩの第１〜６行において、同一の行のＢ列及びＣ列の２個のアミノ酸、ならびにＦ列及びＧ列の２個のアミノ酸が、それぞれ、
同一又は異なって、グルタミン酸、アスパラギン酸及びシステイン酸からなる群より選択される少なくともいずれか１種の酸性アミノ酸、あるいは、
同一又は異なって、リジン、アルギニン、オルニチン及びヒスチジンからなる群より選択される少なくともいずれか１種の塩基性アミノ酸である。
ここで、同一の行において、Ｂ列及びＣ列の２個のアミノ酸が酸性アミノ酸であるとき、Ｆ列及びＧ列の２個のアミノ酸は塩基性アミノ酸であり、
Ｂ列及びＣ列の２個のアミノ酸が塩基性アミノ酸であるとき、Ｆ列及びＧ列の２個のアミノ酸は酸性アミノ酸である；
また、表ＩＩに示されるアミノ酸は、Ｒ３をＮ末端として、以下の順序で結合している。
Ｒ３−１Ｄ−１Ｅ−１Ｆ−１Ｇ−２Ａ−２Ｂ−２Ｃ−２Ｄ−２Ｅ−２Ｆ−２Ｇ−３Ａ−３Ｂ−３Ｃ−３Ｄ−３Ｅ−３Ｆ−３Ｇ−４Ａ−４Ｂ−４Ｃ−４Ｄ−４Ｅ−４Ｆ−４Ｇ−５Ａ−５Ｂ−５Ｃ−５Ｄ−５Ｅ−５Ｆ−５Ｇ−６Ａ−６Ｂ−６Ｃ−６Ｄ−Ｒ４
但し、１Ｄ−１Ｅ−１Ｆ−１ＧはＮ末端側から順に欠損していてもよい）。
【請求項７】
前記表ＩＩにおいて
ＸＬｅｕはロイシン、
ＸＡｓｐはアスパラギン酸、
ＸＡｌａはアラニン、
ＸＡｓｎはアスパラギン、
ＸＩｌｅはイソロイシン、
ＸＴｈｒはスレオニン、
ＸＬｙｓはリジン、
ＸＧｌｕはグルタミン酸、
ＸＧｌｎはグルタミン、
ＸＭｅｔはメチオニン、
ＸＴｙｒはチロシン、
ＸＴｒｐはトリプトファン、
ＸＳｅｒはセリン、
ＸＰｈｅはフェニルアラニンである、請求項６に記載のポリペプチド。
【請求項８】
前記表ＩＩにおいて、Ｂ列及びＣ列のアミノ酸がグルタミン酸であり、Ｆ列及びＧ列のアミノ酸がリジンであって、
Ｒ３がアセチル基、Ｒ４が−ＮＨ２である、請求項６又は７に記載のポリペプチド。
【請求項９】
下記（ａ）〜（ｆ）のいずれかのアミノ酸配列を有する請求項５に記載のポリペプチド。
2008050830.tif 000017
【請求項１０】
下記（ｇ）〜（ｖ）のいずれかのアミノ酸配列を有する請求項１〜４のいずれかに記載のポリペプチド。
2008050830.tif 000018
2008050830.tif 000019
【請求項１１】
下記（ｗ）又は（ｘ）のいずれかのアミノ酸配列を有する請求項６〜８のいずれかに記載のポリペプチド。
2008050830.tif 000020
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれかに記載のポリペプチド又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する抗ＨＩＶ剤。
【請求項１３】
請求項１２に記載の抗ＨＩＶ剤を、薬学的に許容される担体又は添加剤と共に含有する医薬組成物。
【請求項１４】
前記ポリペプチド又はその薬学的に許容される塩が、成人に対して１日体重１ｋｇ当り０．０１μｇ〜１０ｍｇとなるように含有されてなる請求項１２に記載の抗ＨＩＶ剤。
【請求項１５】
請求項１〜１１のいずれかに記載のポリペプチドの有効量をＨＩＶ患者に投与することを含む、ＨＩＶの治療方法。
【請求項１６】
ＨＩＶ治療用組成物を製造するための請求項１〜１１に記載されるポリペプチドの使用。
【国際調査報告】
2008050830.tif 000021
2008050830.tif 000022
2008050830.tif 000023
2008050830.tif 000024
2008050830.tif 000025
2008050830.tif 000026
2008050830.tif 000027
2008050830.tif 000028