(57)【要約】  本発明は、耐老化性を有する新規分岐澱粉の誘導体及びその製造方法並びに新規分岐澱粉の誘導体を含有する成形物を提供することを課題とするものである。顕著な老化耐性を有する、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉の誘導体及びその製造方法並びに新規分岐澱粉の誘導体を含有する成形物を提供することにより上記課題を解決する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉の誘導体。
【請求項２】
分岐澱粉の１つ以上の水酸基が、水酸基以外の任意の置換基で置換されていることを特徴とする請求項１記載の分岐澱粉の誘導体。
【請求項３】
任意の置換基が、炭化水素基、水酸基以外の酸素を有する置換基、窒素を有する置換基、硫黄を有する置換基及びハロゲンを有する置換基から選ばれる何れか１種以上であることを特徴とする請求項２に記載の分岐澱粉の誘導体。
【請求項４】
エステル化、エーテル化、酸化、グラフト化又は架橋反応により化学修飾されていることを特徴とする請求項１乃至３記載の分岐澱粉誘導体。
【請求項５】
分岐澱粉が、プルラナーゼ（ＥＣ  ３．２．１．４１）消化により、固形物当たりマルトースを１．８質量％以上及び／又はマルトテトラオースを０．７質量％以上生成することを特徴とする請求項１乃至４の何れかに記載の分岐澱粉の誘導体。
【請求項６】
分岐澱粉が、メチル化分析において、部分メチル化物が、固形物当たり２，３，４−トリメチル−１，５，６−トリアセチルグルシトールを０．４質量％以上含有することを特徴とする請求項１乃至５の何れかに記載の分岐澱粉の誘導体。
【請求項７】
分岐澱粉が、その濃度２５質量％の水溶液を５℃で１０日間保持した場合においても、澱粉の老化による白濁を実質的に示さない、耐老化性を有することを特徴とする請求項１乃至６の何れかに記載の分岐澱粉の誘導体。
【請求項８】
分岐澱粉が、液化澱粉及び／又は澱粉部分分解物に環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させて６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉を生成せしめる工程と、生成する６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉を採取する工程とを含んでなる６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉の製造方法により製造されたものであることを特徴とする請求項１乃至７の何れかに記載の分岐澱粉の誘導体。
【請求項９】
６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉に、酵素及びその基質、或いは、反応性試薬を反応させて、その１つ以上の水酸基を水酸基以外の置換基で置換することを特徴とする分岐澱粉の誘導体の製造方法。
【請求項１０】
反応性試薬が、酸、塩基、糖質、アルコール、アルデヒド、ケトン、ハロゲン、シアン、ニトリル、オキシラン、イソシアネート、イソチオシアネート、チオール、スルホン及び／又はそれらの反応性誘導体の１又は２以上であることを特徴とする請求項９に記載の分岐澱粉の誘導体の製造方法。
【請求項１１】
請求項１乃至８の何れかに記載の分岐澱粉の誘導体を含有する成形物。
【請求項１２】
さらに、化成品、工業品、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、粉末品、雑貨、医薬品、医薬部外品、化粧品、飼料、餌料及び飲食品に配合することのできる成分を１種以上含有することを特徴とする請求項１１に記載の成形物。
【請求項１３】
化成品、工業品、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、粉末品、医薬品、医薬部外品、化粧品、飼料、餌料及び飲食品から選ばれる何れかであることを特徴とする請求項１１又は１２に記載の成形物。
【請求項１４】
化成品、工業品、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、粉末品、医薬部外品、化粧品、医薬品及び飲食品に配合することのできる成分が、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉の誘導体以外の高分子材料及び／又は可塑剤であることを特徴とする請求項１２又は１３に記載の成形物。
【請求項１５】
化成品又は工業品が生分解性であることを特徴とする請求項１２乃至１４の何れかに記載の成形物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、新規な分岐澱粉の誘導体及びその製造方法並びにその分岐澱粉の誘導体を含有する成形物、詳細には、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉の誘導体及びその製造方法並びにその分岐澱粉の誘導体を含有する成形物に関する。
【背景技術】
【０００２】
澱粉は、主として高等植物の種子や地下茎の細胞内に貯蔵されている高分子グルカンであり、一般に、アミロースとアミロペクチンの混合物である。アミロースは、グルコースがα−１，４結合で直鎖状に結合した構造を有するα−１，４グルカンである。一方、アミロペクチンは、α−１，４グルカンの直鎖のところどころで、通常、グルコース重合度６以上のα−１，４グルカンがα−１，６結合で分岐した構造を有している。澱粉は、その水分散液を加熱すると膨潤して粘稠な糊化澱粉となるものの、冷却して放置すると老化してゲル化を起こし易い性質を持っている。澱粉は、古くより糊化されて食用に供され、また、優れた加工性と安価であること、貯蔵性があることから、食品の主原料として利用され、さらに、増粘剤、保水剤、コロイド安定剤などとしても、食品の物性改良と品質保持の目的で広く利用されている。また、澱粉は液化されて、グルコース、異性化糖、マルトオリゴ糖、水飴などの原料として工業的に利用されている。しかしながら、糊化澱粉や液化澱粉は保存中に老化し、ゲル化を起こし易く、保水性が失われ硬くなって、加工適正が低下するなどの欠点がある。【０００３】
これらの欠点を改良すべく、澱粉を酵素的に改変し、老化抑制を図ろうとする提案も行われている。特開平８−１３４１０４号公報には、澱粉液化液に、澱粉のα−１，４結合を切断し、転移反応によりα−１，６結合を合成する枝作り酵素（ブランチング酵素；ＥＣ  ２．４．１．１８）、４−α−グルカノトランスフェラーゼ（Ｄ−酵素；ＥＣ  ２．４．１．２５）又はＣＧＴａｓｅ（ＥＣ  ２．４．１．１９）を作用させることにより、水溶性の大環状構造グルカンを形成させる方法が提案されている。しかしながら、この大環状構造グルカンは、環状構造の形成と共に分子量が大幅に低下し、粘度が低下することから、原料液化澱粉の持つ物性が失われるという問題がある。また、特開２００１−２９４６０１号公報には、ニューロスポラ・クラッサ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ  ｃｒａｓｓａ）由来の枝作り酵素を利用して、糊化澱粉からほとんど分子量を低下させることなく、原料の澱粉と比較して分岐構造が密で、グルコース重合度４乃至７を中心とする分岐構造を有する高度分岐澱粉を形成させる方法が提案されている。しかしながら、ニューロスポラ・クラッサは特殊なカビであり、飲食品を製造する上で安全性が確認されていないことから工業的製造、産業上の使用には至っていない。さらに、特開２００２−７８４９７号公報には大麦由来の枝作り酵素（ＳＢＥ−ＩＩ）とホスホリラーゼを利用し、グルコース−１−リン酸とマルトオリゴ糖を反応基質として、グルコース重合度６又は７を中心とする分岐構造を有する分岐澱粉を形成させる方法が提案されている。しかしながら、大麦由来の枝作り酵素（ＳＢＥ−ＩＩ）やホスホリラーゼ、基質であるグルコース−１−リン酸を工業的製造に利用するのは極めて困難である。このような状況下、澱粉質をほとんど低分子化することなく、老化性などの物性の改善された澱粉質の提供が望まれていた。近年、同じ出願人は、特願２００５−２９８２５３号明細書において、微生物由来の酵素を利用して、耐老化性の向上した新規な分岐澱粉を製造する方法を提案し、その用途開発が進められている。当該分岐澱粉は、耐老化性が高く、水溶性に優れている反面、用途によっては、機械的強度の点や、親水性の点で問題が生じる場合もあるので、その用途拡大を図るためには、その物性を改変する必要があった。
【発明の開示】
【０００４】
本発明は、新規分岐澱粉の用途拡大を図るべく、その物性を改変した誘導体及びその製造方法並びにその分岐澱粉の誘導体を含有する成形物を提供することを課題とするものである。
【０００５】
本発明者等は、上記課題を解決するために、各種糖転移酵素の利用に着目し、鋭意研究を重ねる過程において、本発明と同じ出願人による特開２００５−９５１４８号公報（特願２００４−１７４８８０号明細書）に開示した、サイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝の構造を有する環状マルトシルマルトース（以下、本明細書では「環状マルトシルマルトース」と略記する。）を、α−１，４グルカンから生成する環状マルトシルマルトース生成酵素を高濃度の液化澱粉又は澱粉部分分解物に作用させたところ、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する新規分岐澱粉（以下、本明細書では、単に、「分岐澱粉」いう場合がある。）を生成することを見出した。そして、この分岐澱粉に、従来知られている各種酵素、例えば、サイクロマルトデキストリングルカノトランスフェラーゼ、α−ガラクトシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ、リゾチームやその他の糖転移酵素、糖加水分解酵素、糖加リン酸分解酵素などの糖質関連酵素などによる酵素反応系を用いることにより、その水酸基をＯ−グリコシル基若しくは、このＯ−グリコシル基にさらにグリコシル基が結合した修飾Ｏ−グリコシル基で置換した分岐澱粉の糖質誘導体が調製できることを新規に見いだした。さらに、これらの酵素反応系とは別に、反応性試薬を分岐澱粉に反応させることにより、分岐澱粉の水酸基を、水酸基及びグリコシル基以外の他の置換基で置換した、分岐澱粉の誘導体が得られることを新規に見い出した。これらの反応方法によれば、グリコシル基以外の多様な置換基についても選択的に導入することが可能となり、分岐澱粉の物性を任意に改変できることを見い出し、本発明を完成するに至った。本発明によれば、浸透圧調節性、賦形性、照り付与性、保湿性、粘性、離水防止性、固結防止性、包接性、保香性、安定性、他の糖の晶出防止性、澱粉老化防止性、蛋白質変性防止性、脂質劣化防止性、耐酸性、アミノカルボニル反応性、誘電性、分極性、電気伝導性などの分岐澱粉の有する物性を任意に改変できる。例えば、疎水性の強い置換基を有する誘導体は、分岐澱粉に脂溶性を賦与することを可能とし、反応性の高い置換基を有する誘導体は、分岐澱粉自体又は他の化合物との結合性に優れることから、分岐澱粉の架橋化、グラフト化などの目的で、他の有機化合物との結合に有利に用いることができる。また、この性質を利用して、他の有機化合物に結合させることによりその有機化合物の物性を改変することも可能である。
【０００６】
すなわち、本発明は、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉の誘導体（以下、本明細書では、単に、「分岐澱粉誘導体」という場合がある。）及びその製造方法並びに分岐澱粉誘導体を含有せしめた成形物を提供することにより上記課題を解決するものである。
【０００７】
本発明によれば、新規分岐澱粉の機械的強度や疎水性などの物性を改変することができるので、この分岐澱粉の用途を拡大することができる。また、分岐澱粉同士や他の化合物と結合することにより、新規な有機化合物を得ることができる。さらに、他の化合物と結合することにより、その化合物にこの分枝澱粉の物性を賦与することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）に環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させて得られた各種分岐澱粉のゲル濾過クロマトグラフィーにおける溶出パターンを示す図である。
【図２】液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）に環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させて得られた各種分岐澱粉のプルラナーゼ消化物中におけるグルコース重合度７以下のマルトオリゴ糖の含量を重合度別に比較した図である。
【図３】液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）に環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させて得られた各種分岐澱粉のヨウ素−澱粉複合体の吸収スペクトルを示す図である。
【図４】原料液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）と本発明で使用する分岐澱粉の構造を模式的に示した図である。
【図５】本発明で使用する分岐澱粉及び原料液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）を濃度２５％の溶液とし、ガラス製試験管に分注して温度５℃で１０日間冷蔵保存したものの写真である。
【符号の説明】
【０００９】
ａ：対照の液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）
ｂ：分岐澱粉１（環状マルトシルマルトース生成酵素作用量０．０１２５単位）
ｃ：分岐澱粉２（環状マルトシルマルトース生成酵素作用量０．０２５単位）
ｄ：分岐澱粉３（環状マルトシルマルトース生成酵素作用量０．０５単位）
ｅ：分岐澱粉４（環状マルトシルマルトース生成酵素作用量０．１単位）
図４における
Ａ：液化澱粉の模式図
Ｂ：本発明で使用する分岐澱粉の模式図
１：グルコースがα−１，４結合で連なった鎖状構造（アミロース構造）
２：α−１，６結合による鎖状構造の分岐部位
３：還元末端グルコース
４：６−α−マルトシル分岐構造
５：６−α−マルトテトラオシル分岐構造
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明でいう分岐澱粉誘導体とは、酵素及びその基質、或いは、反応性試薬を、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉に反応させることにより、分岐澱粉の水酸基のうち少なくとも一つ以上を、水酸基以外の他の置換基に置換したものをいう。本発明の分枝澱粉誘導体を得るために利用される反応系は、酵素反応系或いは反応性試薬を用いる化学反応系を意味し、化学反応系の場合には、通常の酵素反応系では導入が困難な修飾Ｏ−グリコシル基であっても導入することが可能である。化学反応系としては、澱粉などの糖質の誘導体製造において通常用いられるエステル化、エーテル化、スルホニル化、アミノ化反応、酸化反応などが採用でき、通常使用される糖質への化学的修飾方法を幅広く採用することができる。【００１１】
本発明で使用する６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉とは、分子内に、マルトース単位及び／又はマルトテトラオース単位でα−１，６結合により分岐した構造を有する澱粉質全般を意味し、澱粉質におけるα−１，４グルカン鎖の内部のみならず、その非還元末端グルコースの６位にマルトース及び／又はマルトテトラオースがα−１，６結合した構造を有するものをも包含する。この分岐澱粉の製法や由来には特に限定はない。また、この分岐澱粉の分子量は特に限定されないものの、１．０×１０４ダルトン以上のものが好ましい。また、この分岐澱粉は、α−１，６結合を特異的に加水分解する澱粉枝切酵素の１種であるプルラナーゼで消化すると固形物当たりマルトースを１．８質量％以上及び／又はマルトテトラオースを０．７質量％（以下、特に断らない限り本明細書では、質量％を「％」と表記する。）以上生成することを特徴とする。通常の澱粉の分岐構造の鎖長（グルコース重合度）は、一般に９乃至１０にピークを有していることから、この分岐澱粉は、極端に短く、特定の鎖長を有する分岐構造を有しており、原料として用いる既存の澱粉と明瞭に区別することができる。また、この分岐澱粉は、通常の澱粉と比較して分岐の箇所が増加し、直鎖部分が短いものとなっているにもかかわらず、分子量はほとんど低下していない。【００１２】
また、本発明で使用する６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉において、既存の澱粉に比べα−１，６結合による分岐した箇所が増加していることは、公知のメチル化分析を行い、部分メチル化物中に１位及び６位水酸基がグルコシド結合に関与しているグルコースの存在を示す、２，３，４−トリメチル−１，５，６−トリアセチルグルシトール（以下、「２，３，４−トリメチル化物」と略記する。）の含量が、原料澱粉のそれよりも増加しており、通常、部分メチル化物の固形物当たり０．４％以上を示すことから判定することができる。また、β−アミラーゼによる分解試験（β−アミロリシス）を行い、この分岐澱粉のβ−アミラーゼ分解限度が、原料澱粉のそれよりも小さいことから判定することができる。【００１３】
さらに、本発明で使用する６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉は、具体的には実験の項で後述するものの、この分岐澱粉を濃度２５％の水溶液とし、これを５℃で１０日間保持した場合においても、澱粉の老化による白濁を実質的に示さず、原料液化澱粉に比べ、著しい耐老化性を示すという特徴を有している。【００１４】
本発明で使用する６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉を製造する方法としては、本発明の目的を損なわない限り、その由来、製法などを問わず、特に制限はなく、酵素法、発酵法、合成法などの方法で製造すればよい。具体的には、例えば、液化澱粉を原料とし、これに作用して澱粉分子内に６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を生成する酵素を用いる方法が好適である。このような酵素としては、液化澱粉に作用し、非還元末端に存在するマルトース構造を認識し、このマルトースを澱粉分子の他の非還元末端グルコース残基若しくは澱粉分子内部のグルコース残基の６位水酸基にα−マルトシル転移するか、又は、このマルトースを澱粉分子の他の非還元末端グルコース残基の４位水酸基にα−マルトシル転移する反応を触媒するかぎり、いずれの酵素も用いることができる。例えば、本出願人と同一の出願人により特開２００５−９５１４８号公報に開示された環状マルトシルマルトース生成酵素を好適に用いることができる。【００１５】
本発明で使用する分岐澱粉の製造に使用できる環状マルトシルマルトース生成酵素の環状マルトシルマルトース生成機構は以下のようなものである。
１）基質としてグルコース重合度が３以上のα−１，４グルカンに作用し、その非還元性末端のマルトシル残基を他のα−１，４グルカン分子の非還元性末端グルコース残基の６位水酸基に転移する分子間の６−α−マルトシル転移を触媒することにより、非還元末端に６−α−マルトシル基を有するグルコース重合度が２増加した６−α−マルトシル−マルトオリゴ糖と、グルコース重合度が２減じたマルトオリゴ糖とを生成する。
２）さらに、６−α−マルトシル−マルトオリゴ糖に作用し、分子内α−マルトシル転移することにより環状化し、サイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝の構造を有する環状マルトシルマルトースと、グルコース重合度が４減じたマルトオリゴ糖を生成する。
３）本酵素は、僅かながら分子間の４−α−マルトシル転移も触媒し、マルトオリゴ糖から、グルコース重合度が２増加したマルトオリゴ糖と、グルコース重合度が２減じたマルトオリゴ糖とを僅かに生成する。
上記の反応を触媒する酵素はその給源、形態、粗酵素又は精製酵素の区別なく、本発明で使用する分岐デンプンの調製に利用できる環状マルトシルマルトース生成酵素に包含される。【００１６】
本発明に用いる環状マルトシルマルトース生成酵素はその給源によって制限されないものの、好ましい給源として、微生物が挙げられ、アルスロバクター・グロビホルミス（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ  ｇｌｏｂｉｆｏｒｍｉｓ）  Ｍ６（独立行政法人産業技術総合研究所  特許生物寄託センター、受託番号  ＦＥＲＭ  ＢＰ−８４４８）が産生する環状マルトシルマルトース生成酵素が好適に用いられる。環状マルトシルマルトース生成酵素産生能を有する微生物には、上記菌はもとより、その変異株、更には、環状マルトシルマルトース生成酵素産生能を有する組換え体微生物を含む他の微生物、及び、それらの変異株なども包含される。【００１７】
本発明で使用する分岐澱粉の製造に用いる環状マルトシルマルトース生成酵素は、当該分岐澱粉の調製に使用できるかぎり精製酵素であっても粗酵素であっても良く、また、遊離の酵素であっても、固定化された酵素であっても使用することができる。固定化酵素の場合、反応の形式は、バッチ式、半連続式及び連続式のいずれでもよい。固定化方法としては、担体結合法、（例えば、共有結合法、イオン結合法、あるいは物理的吸着法）、架橋法あるいは包括法（格子型あるいはマイクロカプセル型）など、公知の方法を使用することができる。【００１８】
本発明で使用する分岐澱粉を製造するための原料となる澱粉は、例えば、コーンスターチ、ワキシーコーンスターチ、米澱粉、餅米澱粉などの地上澱粉、馬鈴薯澱粉、甘藷澱粉、タピオカ澱粉、くず澱粉などの地下澱粉などを工業的に有利に用いることができる。さらに、澱粉から得られたアミロース、アミロペクチン、澱粉部分分解物などを原料とすることもできる。澱粉からこの分岐澱粉を製造するに際しては、上記のような原料澱粉を、通常、糊化及び／又は液化して用いるのが好適である。澱粉の糊化・液化の方法自体は、公知の方法を採用することができる。【００１９】
例えば、液化澱粉へ環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させる方法は、次のような条件下で好ましく実施できる。まず、液化澱粉の濃度は、通常、１０％乃至４５％が好ましい。液化澱粉の濃度が１０％未満であると環状マルトシルマルトース生成酵素が分子内マルトシル転移反応を触媒し易くなり、分岐澱粉よりも環状マルトシルマルトースを生成し、分岐澱粉の収率が低下する。一方、４５％を超えると澱粉の水への溶解が困難となるため好ましくない。【００２０】
本発明で使用する分岐澱粉を製造するに際し、環状マルトシルマルトース生成酵素は、液化澱粉固形物１グラム当たり、０．０１単位乃至１０単位、好ましくは０．０２単位乃至１単位となるように使用される。ここでいう酵素１単位とは、後述する環状マルトシルマルトース生成酵素の活性測定法の条件下において、１分間に１μｍｏｌの環状マルトシルマルトースを生成する酵素量を１単位としたものである。環状マルトシルマルトース生成酵素の使用量が０．０１単位未満であると反応が不十分で酵素添加の意味がなく、一方、１０単位を超えると効果が頭打ちとなる上、製造コストが増大するため、いずれも好ましくない。【００２１】
酵素反応における反応温度は、反応が進行する温度、即ち６０℃付近までで行えばよい。好ましくは３０℃乃至５０℃付近の温度を用いる。反応ｐＨは、通常、５乃至９の範囲、好ましくは５乃至７の範囲に調整するのがよい。酵素の使用量と反応時間とは密接に関係しており、目的とする酵素反応の進行により適宜選択すればよい。【００２２】
反応により得られた反応物を、そのまま分岐澱粉誘導体の製造原料とすることもできる。必要に応じて、反応により得られた生成物を遠心分離、濾過等により不溶物を除去し、水溶性画分を濃縮することで、目的とする本発明の分岐澱粉誘導体の調製用の溶液を得ることもできる。得られた分岐澱粉の溶液は、そのまま分岐澱粉誘導体調製に利用できるものの、保存や取り扱いに有利で、かつ、その用途によっては利用しやすいように、乾燥し、粉末として得ることが望ましい。乾燥は、通常、凍結乾燥、或いは噴霧乾燥やドラム乾燥などの方法が利用できる。乾燥物は、必要により粉砕することが望ましい。【００２３】
環状マルトシルマルトース生成酵素を液化澱粉に作用させて得られる反応物は、通常、分岐澱粉とともに少量の環状マルトシルマルトースを含有しているものの、この反応物はそのまま分岐澱粉誘導体調製に用いることができる。また、必要に応じて、このようなオリゴ糖を除去し、精製して分岐澱粉誘導体調製に用いることも有利に実施できる。精製の方法としては、ゲル濾過クロマトグラフィーなど常法の多糖類の精製方法を適宜、必要に応じて選択すればよい。【００２４】
このようにして得られる分岐澱粉は、その溶液を低温下で放置しても通常の澱粉と比較して、老化による白濁が観察されず、顕著な耐老化性を有するという特徴を有している。一般に、澱粉は冷水に不溶であるが、本発明で使用する分岐澱粉は、少なくとも２０％までは冷水に対して溶解する。また、この分岐澱粉は、原料澱粉液化液に比べて、その水溶液が低粘度のものであり、分岐澱粉誘導体調製の際にも取扱い性に優れている。【００２５】
本発明の分澱粉誘導体を得るために利用される酵素反応系とは、分岐澱粉の水酸基をＯ−グリコシル基で置換できる反応系をいい、この反応により置換されたＯ−グリコシル基の水酸基を、さらにＯ−グリコシル基で置換する反応系を含む。具体的には、例えば、分岐澱粉に、サイクロマルトデキストリングルカノトランスフェラーゼ、β−ガラクトシダーゼ、α−ガラクトシダーゼ、リゾチームなどの糖転移能を有する酵素の１種又は２種以上を、該酵素の基質となる単糖、オリゴ糖及び／又は多糖の存在下で作用させて、分岐分子の１又は２個以上の任意の水酸基に、１又は２個以上のα−Ｄ−グルコピラノシル基、β−Ｄ−ガラクトピラノシル基、β−Ｄ−キトサミニル基などのグリコシル基の１又は２種以上を転移させて得られる糖質、さらには、これらの環状四糖の糖質誘導体に転移した、α−Ｄ−グルコピラノシル基、β−Ｄ−ガラクトピラノシル基及び／又はβ−Ｄ−キトサミニル基などのグリコシル基に、さらに、α−Ｄ−グルコピラノシル基、β−Ｄ−ガラクトピラノシル基、β−Ｄ−キトサミニル基などのグリコシル基の１種又は２種以上を１又は２個以上転移させる反応系をいう。【００２６】
本発明でいう炭化水素基とは、１以上の炭素原子及び水素原子からなる基であって、飽和又は不飽和の炭化水素基を包含する。例えば、メチル基、エチル基、エチニル基、プロピル基、シクロプロピル基、イソプロペニル基、１−プロペニル基、１−プロピニル基、２−プロペニル基、ブチル基、イソブチル基、ｓ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ビニル基、１，３−ブタジエニル基、２−ブテニル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、ｔ−ペンチル基、１−メチルペンチル基、２−メチルペンチル基、２−ペンテニル基、２−ペンテン−４−イニル基、ヘキシル基、イソヘキシル基、５−メチルヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基などの炭素数１乃至１８の脂肪族炭化水素基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘキセニル基などの脂環式炭化水素基、ベンゼン環を基本骨格とする、例えば、フェニル基、ナフチル基などの単環式若しくは多環式の芳香族炭化水素基を列挙できる。【００２７】
本発明でいう水酸基を除く酸素を有する置換基とは、水酸基を除く酸素原子を有する置換基全般を意味し、一般的には、酸素原子と他の原子、例えば、水素、炭素、窒素、硫黄、ハロゲンなどからなる置換基を意味する。例えば、グルコース、フラクトースやその多量体、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキン酸、ヘベン酸、リグノセリン酸、ゾーマリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、カドレン酸、エルカ酸、セラコレイン酸などの飽和若しくは不飽和、又は、分岐状若しくは直鎖状の脂肪酸との脂肪酸エステル、酢酸、プロピオン酸、安息香酸などとのカルボン酸エステル、硫酸エステル、リン酸エステル、また、メチルアルコール、エチルアルコール、プロピルアルコールなどの炭素数１乃至１８のアルキルアルコールとのアルキルエーテル、ベンジルアルコール、フェノールなどの芳香族アルコールなどとの芳香族エーテルなどの各種エステル又はエーテル類、カルボキシル基、アルデヒド基、ケトン基などの酸素原子を有する水酸基以外の官能基、カルボキシル基、アルデヒド基、ケトン基、水酸基などの官能基を有する炭化水素基、及び各種酸化物などを列挙できる。【００２８】
本発明でいう窒素を有する置換基とは、窒素原子を１以上有する置換基全般を意味し、一般的には窒素原子と他の原子からなる置換基を意味する。例えば、アミノ基、ヒドロキシルアミノ基、オキシム基、カルバミド酸基、カルバミド酸エステル基、チオカルバミド酸Ｏ−エステル基、チオカルバミル酸Ｓ−エステル基、イミン基、アジリン基、ニトロ基、ニトロソ基、アジド基、ジアゾ基、ニトリル基、イソニトリル基、シアノ基、イソシアナート基、イソチオシアナート基、塩化シアヌル基などの官能基又はそれらを有する置換基、及び各種窒素化物などが列挙できる。【００２９】
本発明でいう硫黄を有する置換基とは、硫黄原子を１以上有する置換基全般を意味し、一般的には硫黄原子と他の原子からなる置換基を意味する。例えば、メルカプト基、スルホン基、スルホン酸基、スルフィド基、ジスルフィド基、スルホキシド基、スルホニウムイリド基、スルフェン酸基、スルフィン酸基、チオールスルフィナート基、チオールスルホナート基、スルフィルイミン基、スルホキシイミン基、ｐ−トルエンスルホニル基などの官能基又はそれらを有する置換基、及び各種硫黄化物などが列挙できる。【００３０】
本発明でいうハロゲンを有する置換基とは、ハロゲン原子を１以上有する置換基全般を意味し、一般的にはハロゲン原子と他の原子からなる置換基を意味する。例えば、弗素基、クロロ基、ブロモ基、ヨード基などの官能基又はそれらを有する置換基、及び各種ハロゲン化物などが列挙できる。【００３１】
本発明の分岐澱粉誘導体の製造方法としては、分岐澱粉を、後述する溶媒に溶解、懸濁又は浸漬し、必要ならば触媒（酵素を含む）とともに置換基の供与体となる基質或いは反応性試薬を添加して、適宜の方法で混合、撹拌を行いつつ、適宜の反応条件（温度、時間、ｐＨ、圧力など）で行えばよい。さらに、生成した分岐澱粉誘導体は、適宜の分離精製方法によって、未反応の、基質、反応性試薬、溶媒及び／又は触媒を除去し、精製することができる。【００３２】
本発明で用いられる溶媒としては、例えば、プロパン、ブタン、ペンタン、ヘキサン、イソヘキサン、ヘプタン、イソヘプタン、イソオクタン、ベンジン、ゴム揮発油、大豆揮発油、ミネラルスピリット、クリーニングソルベント、石油エーテル、石油ベンジン、リグロイン、灯油、シクロヘキサン、メチルシクロヘキサン、ベンゼン、ベンゾール、トルエン、トルオール、キシレン、キシロール、エチルベンゼン、クメン、メシチレン、軽ソルベントナフサ、重ソルベントナフサ、テトラリン、デカリン、クレオソート油、テレビン油などの炭化水素系溶媒、塩化メチル、塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭素、ジクロロジフルオロメタン、塩化エチル、１，２−ジクロロエタン、１，２−ジブロモエタン、テトラクロロエタン、ジクロロエチレン、トリクロロエチレン、パークロロエチレン、ジクロロプロパン、塩化アミル、ジクロロペンタン、モノクロロベンゼン、ｏ−ジクロロベンゼン、トリクロロベンゼン、ブロモベンゼンなどのハロゲン系溶媒、メタノール、エタノール、ｎ−プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、ｎ−ブチルアルコール、イソブチルアルコール、ｓ−ブチルアルコール、ｔ−ブチルアルコール、イソアミルアルコール、合成アミルアルコール、フーゼル油、メチルイソブチルカルビノール、ｎ−ヘキシアルコール、２−エチルブタノール、ｎ−オクチルアルコール、２−エチルヘキサノール、シクロヘキサノール、フルフリルアルコール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ベンジルアルコール、フェノール、クレゾールなどのアルコール若しくはフェノール系溶媒、エチルエーテル、イソプロピルエーテル、ｎ−ブチルエーテル、ジクロロエチルエーテル、アニソール、ジオキサン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロピラン、ベンジルエチルエーテルなどのエーテル系溶媒、ギ酸、酢酸、無水酢酸、酪酸、ギ酸メチル、ギ酸エチル、ギ酸ブチル、ギ酸アミル、酢酸メチル、酢酸エチル、酢酸イソプロピル、酢酸ブチル、酢酸ｓ−ブチル、酢酸アミル、酢酸イソアミル、酢酸２−エチルヘキシル、酢酸シクロヘキシル、プロピオン酸エチル、プロピオン酸ブチル、プロピオン酸アミル、酪酸ブチル、炭酸ジエチル、シュウ酸ジエチル、乳酸メチル、乳酸エチル、リン酸トリエチル、γ−ブチロラクトン、トリフルオロ酪酸などの酸又はそれらのエステル系溶媒、エチレングリコール、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールモノブチルエーテル、エチレングリコールモノアセテート、エチレングリコールモノメチルエーテルアセテート、エチレングリコールモノエチルエーテルアセテート、エチレングリコールジメチルエーテル、ジエチレングリコール、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジエチレングリコールジメチルエーテル、トリエチレングリコール、プロピレングリコール、ヘキシレングリコール、グリセリンなどの多価アルコール又はそれらのエーテル若しくはエステル系溶媒、フルフラール、メチラール、アセタール、アセトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、ジイソブチルケトン、メシチルオキシド、アセチルアセトン、ジアセトン���ルコール、シクロヘキサノン、メチルシクロヘキサノン、イソホロンなどのアルデヒド、アセタール又はケトン系溶媒、ニトロメタン、ニトロエタン、１−ニトロプロパン、２−ニトロプロパン、ニトロベンゼン、アセトニトリル、ジエチルアミン、トリエチルアミン、シクロヘキシルアミン、エチレンジアミン、アニリン、ピリジン、ピコリン、キノリン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、モルホリン、ジメチルホルムアミド、ジメチルアセトアミド、ヘキサメチルホスホルトリアミド、Ｎ−メチルピロリドンなどの含窒素化合物系溶媒、無水亜硫酸、二硫化炭素、チオフェン、スルホラン、ジメチルスルホキシドなどの硫黄化合物系溶媒などが挙げられ、これらのうち、分岐澱粉若しくは本発明の分岐澱粉誘導体の少なくとも何れか一方を溶解可能な溶媒を用いるのが合成効率を高めるので好ましい。また、無水条件下での反応が好ましい場合は、必要に応じて適宜の脱水剤を用いて、溶媒から水分を除去するのがよい。反応系に水が含まれていてもよい場合には、溶媒として水やその他の親水性のものを用いることができる。これらの溶媒は単独若しくは２種以上混合して用いることができる。１個以上の水酸基以外の置換基で置換したものをいう。【００３３】
また、分岐澱粉を使用して分岐澱粉誘導体を調製する際に、分岐澱粉を溶解する溶媒として分岐澱粉に対して難溶解性若しくは非溶解性の溶媒を用いる故に、原料の分岐澱粉を十分に溶解できない場合、粉末状の分岐澱粉を用いることが、効率を高めるうえで望ましい。分岐澱粉粉末の粒径は懸濁する溶媒、反応条件に適した大きさとすればよく、通常、粒径は小さければ小さいほど反応速度を高めるので、適宜の粒径を選択することによって反応速度を調節することができる。本発明で用いられる分岐澱粉粉末の粒径としては、目的とする分岐澱粉誘導体又は反応系に応じて適宜決定すればよく、通常、５００μｍ以下、好ましくは０．１μｍ乃至２５０μｍ、より好ましくは、１μｍ乃至１００μｍとする。【００３４】
本発明で用いられる触媒としては、塩化アルミニウム、臭化アルミニウム、塩化亜鉛、塩化アンチモン、フッ化ホウ素、塩化銅、塩化スズ、塩化リンなどのルイス酸、フッ化水素、リン酸などのブレンステッド酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化マグネシウム、水酸化カルシウム、酸化マグネシウム、酸化カリウムなどのアルカリ又はアルカリ土類金属の水酸化物又は酸化物、アミン類などの塩基性有機化合物などの塩基、白金、パラジウム、ニッケル、コバルト、銅、クロム、モリブデン、銀、亜鉛などの重金属、又はそれらの酸化物、硫化物、ラネー触媒などが挙げられ、１種又は２種以上を組み合わせて用いることができる。これら触媒は、目的とする分岐澱粉誘導体又は反応系によって適宜選択すればよく、通常、分岐澱粉に対して、通常、その重量は、０．０００１％以上、好ましくは、０．００１％乃至１０，０００％、より好ましくは、０．０１％乃至１，０００％である。【００３５】
本発明で用いられる反応性試薬とは、分岐澱粉に炭化水素基、酸素を有する置換基、窒素を有する置換基、硫黄を有する置換基、ハロゲンを有する置換基などを分岐澱粉に付与する酸、塩基、アルコール、アルデヒド、ケトン、ハロゲン、アミン、シアン、ニトリル、オキシラン、イソシアネート、イソチオシアネート、チオール、スルホン及びそれらの反応性誘導体の一種若しくは二種以上を意味する。分岐澱粉に対する反応性試薬のモル比は、目的とする分岐澱粉誘導体及び反応系に応じて適宜決定すればよく、通常、０．０１乃至１０，０００モル％、好ましくは０．１乃至１，０００モル％の範囲から選ばれる。【００３６】
斯くして得られる本発明の分岐澱粉誘導体を含む反応物は、通常、例えば、濾過、抽出、分液、分別沈澱、透析、蒸留などにより未反応の反応性試薬及び／又は溶媒などを除去した後、そのまま使用される。さらに高純度の分岐澱粉誘導体が必要な場合には、例えば、薄層クロマトグラフィー、カラムクロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー、蒸留、結晶化などの糖又は分岐澱粉誘導体を精製するための斯界における慣用の方法を適用すればよく、これらの精製方法は、必要に応じて適宜組合わせて適用される。【００３７】
以下、代表的な本発明の分岐澱粉誘導体の製造方法について、さらに具体的に説明する。【００３８】
分岐澱粉誘導体のエステル・エーテル化反応による製造方法は、アルキル基、アシル基や芳香族炭化水素基などの疎水性基を導入する際に適用される。例えば、酢酸、プロピオン酸や安息香酸などとのカルボン酸エステルは、ピリジンなどの塩基性有機溶媒中、対応する酸無水物又は酸ハロゲン化物を分岐澱粉に反応させて得ることができる。硫酸エステルは、不活性ガス又は希ガス気流中、三酸化硫黄とジメチルスルホキシド又はピリジンとの錯体を分岐澱粉に反応させて得ることができる。カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキン酸、ヘベン酸、リグノセリン酸、ゾーマリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、カドレン酸、エルカ酸、セラコレイン酸などの脂肪酸エステルは、塩基性触媒下で縮合反応させるか、対応する脂肪酸ハロゲン化物と反応させることにより得ることができる。メチルエーテル、ベンジルエーテル、トリチルエーテル、メチルシリルエーテル、ドデシルエーテルなどのエーテルは、酸触媒下で分岐澱粉に過剰量の対応するアルコールを反応させるか、塩基性触媒下で対応するハロゲン化アルキルや硫酸ジアルキルと反応させることにより得ることができる。【００３９】
スルホニル化反応による製造方法は、各種誘導体を得るための反応中間体を製造する場合に有用である。トシル基（４−メチルベンゼンスルホニル）、メシル基（メタンスルホニル）、他の関連するアリルスルホニル基を分岐澱粉に付加したのち、さらに、アミノ基、アジド基、ハロゲン基などの置換基を求核反応によって導入することができる。また、反応条件を選択することによって、置換基を導入する部位を限定することも可能である。例えば、ピリジン中でトシルクロリドを反応させると、一級水酸基がトシル化されたトシル化分岐澱粉が得られる。さらに、フェロセンカルボン酸化分岐澱粉を製造するには、フェロセンカルボン酸ナトリウム塩をジメチルスルホキシド中、加熱し反応させて分岐澱粉にフェロセンカルボン酸基を導入すればよい。また、アミノ化分岐澱粉を製造するためには、上記トシル化分岐澱粉をアジ化ナトリウムでジアゾ化した後、還元してアミノ基に変換するＳ結合型のアルキル化分岐澱粉を製造するためには、トシル化分岐澱粉をアルカリ条件下でエポキシ化し、硫化アルキルなどを反応させて、スルフィド結合を介してアルキル基を導入することができる【００４０】
２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ化反応による製造は、カルボキシル化分岐澱粉を製造する場合に適用することができる。分岐澱粉を２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ−過塩素酸ナトリウム、臭化ナトリウム、亜塩素酸ナトリウムと混合し、ｐＨ９乃至１１で反応させると、分岐澱粉の一級水酸基はカルボキシル基に酸化され、カルボキシル化分岐澱粉を得ることができる。カルボキシル基はアミノ基を有する化合物とアミド結合によって結合する能力を有する。例えば、アミノヘキシル基などのアミノ基を有するスペーサーを導入した化合物を１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミドヒドロクロリドをリン酸緩衝液中で室温にて反応させ、アミド結合を介して結合させることができる。【００４１】
酸化反応による製造は、酸化分岐澱粉の製造する場合に利用される。一般的には水溶液または水懸濁液中での低温酸化が好ましいが、酸化剤を含浸した粉体を加熱する方法が挙げられる。この場合の、酸化に使用される好適な酸化剤は、例えば、次亜塩素酸ソーダ、過酸化水素などである。【００４２】
グラフト化反応による製造は、通常の澱粉のグラフト化反応と同様に、酵素合成アミロースに、鉄またはセリウムイオンの存在下で、アクリル酸やメタクリル酸などのビニルモノマーを付加するか、または乳酸のような水酸基を持ったカルボン酸を重縮合で枝状に付加する方法が挙げられる。なお、生分解性を高く維持するには、乳酸やカプロラクトンなどのようにそれ自身も生分解性を持つモノマーを選択することがのぞましい。この場合の架橋反応は、例えば、通常の澱粉の架橋反応と同様に分岐澱粉をホルマリン、エピクロロヒドリン、グルタルアルデヒド、各種ジグリシジルエーテル及びエステルを用いて架橋反応を行うことも随意である。【００４３】
また、分岐澱粉の水酸基を他の官能基で置換した本発明の分岐澱粉誘導体は、他の有機化合物と結合体を形成するために利用することができる。その具体的な製造例としては、例えば、分岐澱粉にアルデヒド基を導入する方法として、分岐澱粉にハロゲン化メチル基を付加した後、ジメチルスルホキシド、ヘキサミンなどで酸化反応させる方法が挙げられる。分岐澱粉にハロゲン基を導入する方法として、例えば、クロロ基を導入するには、分岐澱粉に濃塩酸及び塩化亜鉛添加し、加熱又は乾燥塩化水素ガス気流中で反応させる方法が挙げられる。分岐澱粉にアミノ基を導入する方法として、分岐澱粉にハロゲノカルボン酸ハロゲン化物又はエピクロロヒドリンを反応させ、ハロゲン化物とした後、それにアンモニアを反応させる方法が挙げられる。メルカプト基を導入する方法として、上記ハロゲン化分岐澱粉に、チオ硫酸ナトリウムなどの硫黄化剤を反応させ、リチウムアルミニウムヒドリドなどで還元させる方法が挙げられる。【００４４】
これらの官能基を導入した本発明の分岐澱粉誘導体と結合体を形成することのできる他の物質としては、例えば、生物学的、生理学的に活性を有する物質、を挙げることができる。より具体的には、例えば、インターフェロン、ツモアネクロシスファクター、エリスロポエチン、インターロイキン２などのサイトカイン類、インスリン、ステロンドなどのホルモン類などの生理活性物質、アミノ酸、オリゴペプチド、ポリペプチド、タンパク質、核酸、糖質、脂質、ビタミン類、抗生物質、抗体誘導用のハプテン分子などを挙げることができる。また、本発明の分岐澱粉誘導体は、ダンシルグリシン、Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノベンゾイル基、メチルレッド、パラメチルレッド、アントラセン−９−カルボニル基、ピレン、アゾベンゼンなどの色素又は蛍光物質と結合することができ、これらは検出用試薬としても利用できる。さらには、本発明の分岐澱粉誘導体は、２−ヒドロキシプロピル基、ピリドキサミン残基、ｐ−メトキシフェノール、ｐ−ニトロフェノール、ベンゾフロキサン、メタホルボールなどを結合することができ、これらは他の物質の反応触媒にとして利用することができる。また、本発明の分岐澱粉誘導体は、ポリビニルアルコール、ポリアクリルアミド、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリメチルビニルエーテル、セルロース、又はこれらの誘導体などの高分子担体とも結合することができ、これらは他の物質の分析・精製用途に用いることができる。【００４５】
また、これらの製造方法により得られる分岐澱粉誘導体は、食品工業、化粧品工業、医薬品工業などの分野だけでなく、触媒、繊維、包装、建築、塗料、分析、電気、通信などの諸分野に広範な用途を有する。フェニル基、アルキル基及びアセチル基などの疎水性基を導入した本発明の分岐澱粉誘導体は、脂溶性であり、また、界面活性剤として飲食物、化粧品、医薬品などに有用である。硫酸エステルを導入した本発明の分岐澱粉誘導体は優秀な保湿剤、美肌剤として化粧品に有利に配合できる。さらに、ビニル基、アミノ基、カルボキシル基、メルカプト基、ハロゲン基などの結合性を有する官能基又はこれらを有する置換基を導入した本発明の分岐澱粉誘導体は、他の有機化合物及び／又は分岐澱粉自身と結合させることができるので、ホモ又はヘテロの２量体をはじめとする多量体を形成することによる新たな有機化合物の作製、他の高分子担体に結合させることによる分析、検出、精製用担体の作製、タンパク質をはじめとする他の化合物の物性改変、他の化合物の触媒反応に用いることができ、シアノ基、ニトロ基、ニトロソ基など官能基又はこれらを有する置換基を導入した本発明の分岐澱粉誘導体は、抗菌剤、免疫賦活剤、抗ガン剤などとして、医薬品、繊維材料、包装材料、建築材料として用いることができる。解離性の官能基、例えば、カルボキシル基、ハロゲン基などを有する本発明の分岐澱粉誘導体、及び、分極性の官能基、例えば水酸基、アミノ基などを有する本発明分岐澱粉誘導体は誘電性を有しており、燃料電池の添加剤などに利用できる。また、ヒドロキシメチル基、ヒドロキシエチル基、ヒドロキシプロピル基などのアルキルアルコール基を有する本発明の誘導体は、さらに水溶性が高められる。【００４６】
また、これらの誘導体は、生体組織との親和性も変化することから、医用材料などの用途における細胞接着性などの制御にも有効である。また、導入される置換基の増加に伴って熱可塑性も増大する。例えば、グラフト化反応によって導入される大きな置換基は、熱流動温度を大幅に低下する。そのため、通常のプラスチック成形機での成形加工が、化学修飾されていないものに比べてより容易になる。さらには、耐水性を要求されるフィルムやシート、成形品分野で汎用プラスチックと同様に使用することもできる。また、前記化学修飾体は、水溶液、ペーストまたはクリームの形態への加工も容易であり、ビンまたはチューブなどに充填して長期間安定に保存することができる。さらに、分岐澱粉はグラフト化反応によって高吸水性ゲルを調製でき、架橋反応に付されることにより、水及びその他の溶剤に対して不溶性化できるので、グラフト化または架橋反応に付することによって、広い範囲の膨潤度のゲルに調製することも随意である。【００４７】
本発明の分岐澱粉誘導体は、その基本骨格が分岐澱粉と共通していることから、通常、分岐澱粉の特性・機能を部分的に保持している。したがって、当該誘導体は、分岐澱粉と同様の目的で利用することができる。以下、本発明の分岐澱粉誘導体の用途についてさらに詳しく説明する。【００４８】
本発明の分岐澱粉誘導体は、置換基の種類や置換率にもよるが、通常、分岐澱粉が有する特性、機能を部分的に保持しており、分岐澱粉と同様に、飲食物、化粧品、医薬部外品、医薬品、飼料、餌料、化成品、工業品、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、粉末品、雑貨などの諸種の分野で、素材、基材などとして利用することができる。【００４９】
具体的には、例えば、本発明の分岐澱粉誘導体は、澱粉を含有する飲食物における通常の澱粉の代替品として用いると、それ自体が耐老化性を有するため、澱粉の老化が抑制された飲食物が得られる。従って、本発明の分岐澱粉誘導体を含有する飲食物は、澱粉の老化に起因する保水性、保形性、冷凍耐性、消化性などの低下が抑制されたものである。なお、澱粉を含有する飲食物としては、もち、だんご、クッキー、パン、麺類、澱粉含有スポーツドリンク、澱粉含有栄養補助食品などが挙げられる。【００５０】
以上述べたような本発明の分岐澱粉誘導体を、各種組成形物に含有させる方法としては、その製品が完成するまでの工程で含有せしめればよく、例えば、混和、混捏、溶解、浸漬、浸透、散布、塗布、被覆、噴霧、注入、固化など公知の方法が適宜選ばれる。その量は、通常０．１％以上、望ましくは１％以上、さらに望ましくは２％以上含有せしめるのが好適であり、その目的に応じて、適宜選択することができる。【００５１】
本発明の分岐澱粉誘導体は、賦形性、照り付与性、保湿性、粘性、冷凍耐性、乾燥耐性、耐熱性、保形成性などの性質を具備している。従って、当該分岐澱粉誘導体は、呈味改良剤、品質改良剤、離水防止剤、安定剤、変色防止剤、賦形剤、包接剤、結合剤、接着剤、成形剤、整型剤、増粘剤、安定化剤、賦形剤、粉末化基剤などとして、飲食物、嗜好物、飼料、餌料、ペットフード、化粧品、医薬部外品、医薬品、農薬、生体適合性医用材料、雑貨、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、粉末品、工業品、化成品などの各種成形物の製造に有利に利用できる。【００５２】
また、本発明の分岐澱粉誘導体を含有する成形物は、とりわけ、生分解性が要求される成形物としても好適である。具体的には、紙、不織布、織物、編物、糸、スリット繊維をはじめとする繊維、ロープ、チューブ、綱、発泡成形容器、ハンバーガー、アイスクリーム、ラーメン、ジュース、コーヒー、ビール、牛乳などの食品用容器やアイスクリームのコーンカップなどの容器、食器、トレイ、ディッシュ、カップ、カートン、ゴミ袋容器、包装箱、農園芸ポット、人工木材、発泡シート、フィルム、カプセル、バラ状緩衝材、接着用成形物、農業用ハウスシートや建設・土木用シートなどのシート類、農業用フィルムをはじめとする各種包装用フィルム類など、さらには、塗料などのコーティング用成形物、セメント、コンクリート、プラスチックをはじめとする化成品、工業品などに有利に利用できる。また、これら成形物の形態に特に制限はなく、溶液、半固形、固状、ペースト状、発泡体でもよく、或いは、フィルム状、シート状、チューブ状、カプセル状、短棒状、板状、チップなどに成形したものでもよい。【００５３】
これらの成形物について、さらに、具体的に説明すると、その用途としては、従来プラスチック発泡体が用いられた分野での使用が可能である。特に、低発泡体は電気製品のキャビネットなどに、自動車のハンドル、バンパー、内装品などに、包装用資材に適する。その他、家庭用内装品、ホテルの歯ブラシ、航空機内食用のスプーン、フォーク、食器及びトレイ、玩具類、エアーガンの玉、文具、事務用品など、その軽量性と安全性を要求される用途が含まれる。【００５４】
また、高発泡体としては、特に現在廃棄処分に問題がある発泡スチロールの代替材料として有効である。例えば、食品トレイ、インスタント麺類の容器などの食器包装容器類、水産物・農産物用箱、包装用箱などの輸送用箱類、電気製品・精密機器の緩衝材などの緩衝材、建築用・道路用の防音・断熱材が好適である。【００５５】
さらに、本発明の分岐澱粉誘導体を含有した成形物としては上記以外にも、帽子、ポンチョ、ウィンドブレーカーなどの衣類、ゴミ袋、土産袋などの包装資材、スキーのポールなどの運動具等を挙げることができる。又、テレフォンカード、オレンジカード、パチンコカード、図書カードなどの各種プリペイドカード、各種クレジットカード、図書館利用カード、各種会員カードなど、大量に消費されたり、期限があるため定期的に廃棄されるカード類とてして利用することも随意である。【００５６】
さらに、疎水性の置換基で置換して疎水性を高めた本発明の分岐澱粉誘導体は、生体適合材料として、医療用の糸、ガーゼなどとして使用することも有利に実施できる。【００５７】
また、これらの成形物の耐水性、耐薬品性、耐熱性、機械的強度などを更に高めたい時には、当該成形物の表面を各種材料で処理することも随意である。例えば、アルミニウムなどの金属類、非プラスチック類、より高融点のポリ乳酸などの他の生分解性プラスチック類で、コーティング、ラミネート、ディピィング、又は蒸着等の処理が有効である。又、金属類や非生分解性プラスチック類で表面を処理する場合は、使用後の生分解性が低下することを防止するため、耐水性等を必要とする部分にのみ表面処理したり、非処理部分を部分的に残すなどの手段を講じることも随意である。【００５８】
さらに、本発明の分岐澱粉誘導体を含有する成形物としては、杭、パイル類、ゴルフティ、農業用フィルム、苗ポット、農園芸用ポット等の土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品には、予めチッソ、燐、カリ等の公知の肥料、有効菌類、及び／又は、農薬を混練しておくと、生分解後に肥料分としてさらに有効となるので好ましい。またその添加割合は０％〜８０％、好ましくは５％〜３０％の割合である。【００５９】
これら本発明の分岐澱粉誘導体を含有する成形物は、例えば、通常のプラスチック成形機を利用することにより、フィルム、シート、チューブ、カプセルなどの所望の形態に成形することができる。その成形方法は特に限定されず、例えば、押出成形、射出成形、加圧成形、型物成形、注型成形、ブロー成形、スタンピング成形、カッティング成形、熱成型及びフィルム成形法など適宜の方法を用いることができる。得られる成型物は生分解性成形物としても使用することができる。本発明の分岐澱粉誘導体を含有してなる成形物には、必要に応じて、高分子材料として、分岐澱粉誘導体以外の水溶性多糖類、例えば、澱粉、澱粉部分分解物、アミロース、アミロペクチンなどの澱粉質、エステル化、エーテル化、酸化及び／又は架橋化された澱粉誘導体、プルラン、アルギン酸ナトリウム、寒天、ペクチン、キサンタンガム、デキストラン、カラギーナン、ネイティブジェランガム、ガラクトマンナン、コンドロイチン硫酸などのムコ多糖類、ポリ乳酸やその誘導体、ポリアルギン酸などを併用することもできる。また、その際、成型物の可塑性を調節するために可塑剤やゲル化剤を添加することも有利に実施できる。可塑剤としては、水や各種ポリオール類、例えば、グリセリン、ポリビニルアルコールなどの多価アルコール、エリスリトール、キシリトール、ソルビトール、マルチトールなどの糖アルコール、α，α−トレハロース、サイクロデキストリン、国際公開ＷＯ  ０２／１０３６１号明細書などに開示されたサイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝の構造を有する環状四糖（環状ニゲロシルニゲロース：Ｃｙｃｌｏｎｉｇｅｒｏｓｙｌｎｉｇｅｌｏｓｅ）、環状マルトシルマルトース、国際特許願ＰＣＴ／ＪＰ２００５／１７６４２号明細書に開示されたサイクロ｛→６）−［α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）］ｎ−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝（ｎは４又は５を意味する）の構造を有する環状五糖や環状六糖やこれらの環状オリゴ糖の糖質誘導体などの非還元性糖質、尿素、大豆油やひまし油などの天然油脂、有機酸のアルキルエステルなどが挙げられる。さらには、フェノール樹脂、尿素樹脂、メラミン樹脂、エポキシ樹脂などの熱硬化性樹脂、天然ゴム、シェラック樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリスチレン樹脂、ポリ塩化ビニール樹脂、ポリプロピレン樹脂、アクリル系樹脂、ポリエステル樹脂をはじめとする熱可塑性高分子材料の粉末或いはペレットと混合して、これに、乳化剤、熱安定化剤、品質改良剤、保存剤などを加えて、１５０℃乃至２５０℃に加温し、加圧成形して、生分解性の澱粉系プラスチック成型品とすることも有利に実施できる。【００６０】
また、この分岐澱粉誘導体含有成型物には、上記の成分に加えて、無機及び有機の他の成分を適宜含有させることができる。無機成分としては、タルク、二酸化チタン、炭酸カルシウム、砂、クレー、石灰石、珪藻土、雲母、ガラス、石英、アルミナ、シリカ、ガラス、カオリン、セラミックスなどが挙げられる。有機成分としてはキチン、キトサン、コラーゲン、フィブロイン、ケラチン、ロジン、ダンマー、コーパル、澱粉、セルロース、木材粉、繊維、パルプ、リグニン、蛋白質及びその分解物、ロウ、油脂、脂質類、糖脂肪酸エステル類、エタノールなどのアルコール類、本発明の分岐澱粉誘導体以外の糖類、環状糖類、糖アルコール類、着色料、顔料、保存料、着香料、矯味剤、結合剤、鮮度保持剤、界面活性剤、ビルダー、コビルダー、酸化防止剤、漂白剤、増白剤、分散剤、消泡剤、水軟化剤、紫外線反射剤、紫外線吸収剤などが挙げられる。さらには、栄養成分、生理活性物質、動・植物エキス、酵素、除草剤、カビ防止剤、殺菌剤、抗生剤、防虫剤、忌避剤などの生物活性物質を配合することも随意である。【００６１】
以下、実験により本発明で使用する分岐澱粉についてさらに具体的に説明する。【００６２】
＜実験１：環状マルトシルマルトース生成酵素の調製＞
実験に先立ち、アルスロバクター・グロビホルミス  Ｍ６（ＦＥＲＭ  ＢＰ−８４４８）を培養し、培養上清中の環状マルトシルマルトース生成酵素を精製して酵素標品を調製した。【００６３】
＜実験１−１：アルスロバクター・グロビホルミス  Ｍ６の培養＞
澱粉部分分解物（商品名『パインデックス＃４』、松谷化学工業株式会社製造）１．５ｗ／ｖ（質量／容量）％、酵母抽出物（商品名『ポリペプトン』、日本製薬株式会社製造）０．５ｗ／ｖ％、酵母抽出物（商品名『酵母エキスＳ』、日本製薬株式会社製造）０．１ｗ／ｖ％、リン酸二カリウム０．１ｗ／ｖ％、リン酸一ナトリウム・２水和物０．０６ｗ／ｖ％、硫酸マグネシウム・７水和物０．０５ｗ／ｖ％、炭酸カルシウム０．３ｗ／ｖ％、及び水からなる液体培地を、５００ｍｌ容三角フラスコ２本に１００ｍｌずつ入れ、オートクレーブで１２１℃、２０分間滅菌し、冷却して、アルスロバクター・グロビホルミス  Ｍ６（ＦＥＲＭ  ＢＰ−８４４８）を接種し、２７℃、２３０ｒｐｍで４８時間回転振盪培養したものを種培養とした。容量３０Ｌのファーメンターに種培養と同じ組成の液体培地を約２０Ｌ入れて、加熱滅菌、冷却して温度２７℃とした後、種培養液約２００ｍｌを接種し、温度２７℃、ｐＨ５．５乃至８．０に保ちつつ、９６時間通気攪拌培養した。培養後、ファーメンターから培養液を抜き出し、遠心分離（８，０００ｒｐｍ、２０分間）して菌体を除き、培養上清約１８Ｌを得た。【００６４】
環状マルトシルマルトース生成酵素の酵素活性は、以下の方法で測定した。可溶性澱粉を濃度２ｗ／ｖ％となるよう２ｍＭ塩化カルシウムを含む５０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６．０）に溶解させ基質液とし、その基質液０．５ｍｌに酵素液０．５ｍｌを加えて、４０℃で３０分間酵素反応し、その反応液を１０分間、約１００℃で加熱して反応を停止させた後、残存可溶性澱粉や夾雑オリゴ糖を分解するためにα−グルコシダーゼ（『トランスグルコシダーゼＬ「アマノ」』、天野エンザイム株式会社製造）を固形物１グラム当り４０００単位とグルコアミラーゼ（『グルコチーム』、ナガセ生化学工業株式会社販売）を固形物１グラム当り２５０単位添加して５０℃、１時間処理し、その処理液中の環状マルトシルマルトース量を、高速液体クロマトグラフィー（以下、「ＨＰＬＣ」と略記する）法で定量する。環状マルトシルマルトース生成酵素の活性１単位は、上記の条件下で１分間に１μモルの環状マルトシルマルトースを生成する酵素量と定義する。なお、ＨＰＬＣは、カラムに『Ｓｈｏｄｅｘ  ＳＵＧＡＲ  ＫＳ−８０１』（昭和電工株式会社製造）を用い、溶離液に水を用いて、カラム温度６０℃、流速０．５ｍｌ／分の条件で行い、検出は示差屈折計ＲＩ−８０１２（東ソー株式会社製造）を用いて行った。【００６５】
＜実験１−２：環状マルトシルマルトース生成酵素の精製＞
培養上清のうち、約９．２Ｌに、最終濃度６０％飽和となるように硫安を添加し、４℃、２４時間放置することにより塩析した。生成した塩析沈殿物を遠心分離（１１，０００ｒｐｍ、３０分間）にて回収し、これを１０ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解後、同緩衝液に対して透析し、粗酵素液として約２４０ｍｌを得た。この粗酵素液を東ソー株式会社製『ＤＥＡＥ−トヨパール（Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ）  ６５０Ｓ』ゲルを用いた陰イオン交換クロマトグラフィー（ゲル容量１００ｍｌ）に供した。環状マルトシルマルトース生成酵素活性は、１０ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）で平衡化した『ＤＥＡＥ−トヨパール（Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ）  ６５０Ｓ』ゲルに吸着し、食塩濃度０Ｍから０．４Ｍのリニアグラジエントで溶出させたところ、食塩濃度約０．２２Ｍ付近に溶出した。この活性画分を回収し、終濃度１Ｍとなるように硫安を添加して４℃、２４時間放置した後、遠心分離して不溶物を除き、東ソー株式会社製『フェニル−トヨパール（Ｐｈｅｎｙｌ−Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ）  ６５０Ｍ』ゲルを用いた疎水クロマトグラフィー（ゲル容量１０ｍｌ）に供した。環状マルトシルマルトース生成酵素活性は、１Ｍ硫安を含む２０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６．０）で平衡化した『フェニル−トヨパール（Ｐｈｅｎｙｌ−Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ）  ６５０Ｍ』ゲルに吸着し、硫安濃度１Ｍから０Ｍのリニアグラジエントで溶出させたところ、硫安濃度約０．１Ｍ付近に溶出した。この精製の各ステップにおける環状マルトシルマルトース生成酵素活性、環状マルトシルマルトース生成酵素比活性及び収率を表１に示す。【００６６】
【表１】
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【００６７】
疎水クロマトグラフィー後の環状マルトシルマルトース生成酵素精製標品を５乃至２０ｗ／ｖ％濃度勾配ポリアクリルアミドゲル電気泳動に供し、酵素標品の純度を検定したところ、蛋白バンドは単一であり、純度の高い標品であった。【００６８】
＜実験２：分岐澱粉の調製＞
液化澱粉に環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させた際に生成する反応生成物の構造と物性を調べるため、以下の実験を行った。【００６９】
＜実験２−１：酵素反応＞
市販のワキシーコーンスターチ（三和澱粉工業株式会社販売）２，５００ｇを１ｍＭの塩化カルシウムを含む水道水２５Ｌに懸濁し、２Ｎ塩酸にてｐＨ６．０に調整して濃度１０％の澱粉乳を調製した。この澱粉乳にα−アミラーゼ（商品名『ネオスピターゼＰＫ２』、ナガセ生化学工業株式会社製）を２０，０００単位添加し、３０分間攪拌した後、連続液化装置に流速１Ｌ／分で通液した。澱粉乳を連続液化装置にて１００℃で２５分間、次いで、１４０℃で５分間加熱することにより液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）を調製した。得られた液化液は、活性炭により脱色し、珪藻土濾過した後、減圧下で濃度２５％まで濃縮した。この濃縮液化液を５等分し、内、４つの液化液に実験１で得た環状マルトシルマルトース生成酵素精製標品を、ワキシーコーンスター液化液固形物１グラム当たり０．０１２５、０．０２５、０．０５又は０．１単位の割合で加え、５０℃、ｐＨ６．０で２４時間作用させた。１００℃で１０分加熱することにより酵素反応を停止した後、それぞれの反応液中の環状マルトシルマルトース含量をＨＰＬＣにて測定した。なお、環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させていない原料液化澱粉を対照とした。【００７０】
なお、ＨＰＬＣは、『ＭＣＩｇｅｌ  ＣＫ０４ＳＳ』（三菱化学株式会社製造）カラムを２本直列に連結して用い、溶離液に水を用いて、カラム温度８０℃、流速０．４ｍｌ／分の条件で行い、検出は示差屈折計ＲＩ−８０１２（東ソー株式会社製造）を用いて行った。【００７１】
【表２】
2008044588.tif 000003
【００７２】
表２から明らかなように、各反応液において環状マルトシルマルトース生成酵素の作用量が多いほど環状マルトシルマルトース含量が増加する傾向が認められた。しかしながら、その含量は、今回検討した最大の酵素作用量、ワキシーコーンスターチ液化液の固形分１グラム当たり０．１単位を作用させた場合においても約５％と僅かであった。【００７３】
＜実験２−２：分岐澱粉の精製＞
実験２−１で得た各種反応液をそれぞれ濾過し、常法に従って、活性炭で脱色し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂により脱塩して精製後、エバポレーターで固形分濃度２０％まで濃縮した。続いて、副生成物として混在する環状マルトシルマルトースを除去するため、強酸性カチオン交換樹脂（『アンバーライトＣＲ−１３１０』、Ｎａ型、オルガノ株式会社製造）を用いたカラム分画を行なった。樹脂を内径５．４ｃｍのジャケット付きステンレス製カラム４本に充填し、直列につなぎ樹脂層全長２４０ｃｍとした。カラム内温度６０℃に維持しつつ、ワキシーコーンスターチ液化液を樹脂に対して５ｖ／ｖ％加え、これに６０℃の温水をＳＶ０．１３で流して分画し、溶出液の糖組成をＨＰＬＣ法でモニターし、環状マルトシルマルトースを含まない高分子画分を採取した。得られた高分子画分は、２５％まで濃縮した後、真空乾燥し、いずれも固形物当たりの収率９０％以上で各分岐澱粉粉末を得た。これらの分岐澱粉は実験２−１と同じＨＰＬＣ分析に供し、環状マルトシルマルトースを含まないことを確認した。【００７４】
＜実験３：分岐澱粉の構造分析＞
実験２の方法で得た分岐澱粉につき、以下の試験を行い、分岐澱粉の構造を調べた。【００７５】
＜実験３−１：分岐澱粉の分子量分布０＞
実験２の方法で得た分岐澱粉の分子量分布を、ゲル濾過分析により検討した。ゲル濾過分析は、『ＴＳＫ−ＧＥＬ  ＡＬＰＨＡ−Ｍ』カラム（東ソー株式会社製）２本を直列に連結し、溶離液に１０ｍＭ酸緩衝液（ｐＨ７．０）を用いて、カラム温度４０℃、流速０．３ｍｌ／分の条件で行い、検出は示差屈折計『ＲＩ−８０１２』（東ソー株式会社製）を用いて行った。分岐澱粉は、１０ｍＭ酸緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解し、メンブラン濾過したものをゲル濾過分析の試料とした。対照として、環状マルトシルマルトース生成酵素処理前のワキシーコーンスターチ液化液を同様に分析した。なお、試料中のグルカンの分子量は、分子量測定用プルラン標準品（株式会社林原生物化学研究所販売）を同様にゲル濾過分析して作成した分子量の検量線に基づき算出した。ゲル濾過クロマトグラフィーにおける溶出パターンを図１に示した。なお、以下の図中、ａは対照（ワキシーコーンスターチ液化液）であり、ｂ、ｃ、ｄ及びｅは、それぞれ液化液の固形物１グラム当たり環状マルトシルマルトース生成酵素を０．０１２５単位、０．０２５単位、０．０５単位及び０．１単位作用させて得られた分岐澱粉である。以下、ワキシーコーンスターチ液化液固形物当たり環状マルトシルマルトース生成酵素を０．０１２５単位、０．０２５単位、０．０５単位及び０．１単位作用させて得られた分岐澱粉を、それぞれ分岐澱粉１、２、３及び４と呼称する。また、分岐澱粉１、２、３及び４のゲル濾過分析の溶出パターンは、４種類の何れの酵素単位で処理した場合も、ほぼ同一のパターンを示したので、図１には、対照（図１中のａ）及び最大の酵素作用量（０．１単位）で処理した分岐澱粉４（図１中のｅ）の溶出パターンのみを示す。【００７６】
図１から明らかなように、対照（ａ）のワキシーコーンスターチ液化液は、ゲル濾過クロマトグラフィーにおいて、１つのピークを示した。このピークに含まれるグルカンの重量平均分子量は検量線のデータから１．１×１０６ダルトンと算出された。ワキシーコーンスターチ液化液に環状マルトシルマルトース生成酵素をワキシーコーンスターチ液化液の固形分１グラム当たり０．１単位作用させて得られた分岐澱粉４（図１中のｅ）のゲル濾過クロマトグラフィーにおける溶出パターンは、対照（ａ）のそれと大差なく、環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させても、その分子量分布に大きな変化が生じていないことが判明した。【００７７】
＜実験３−２：分岐澱粉の加水分解率＞
実験２−２で得た上記４種の分岐澱粉１、２、３及び４、又は、対照のワキシーコーンスターチ液化液の還元力を測定した。各試料の全糖量をアンスロン−硫酸法により、また、還元糖量を改良パーク・ジョンソン法（檜作ら、『カーボハイドレート  リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）』、第９４巻、２０５頁乃至２１３頁（１９８１年）を参照）により定量し、全糖量中に占める還元糖量の割合（％）を意味する加水分解率を、次式  加水分解率（％）＝（還元糖量／全糖量）×１００  にて算出した。結果を表３に示す。【００７８】
【表３】
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【００７９】
表３から明らかなように、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用量がワキシーコーンスターチ液化液固形物１グラム当たり０．１単位と最も多い分岐澱粉においても、対照のワキシーコーンスターチ液化液と比較して加水分解率の増加は僅か約０．５％であり、環状マルトシルマルトース生成酵素の反応によって起こる加水分解は、ほとんど無視できる程度であった。【００８０】
＜実験３−３：分岐澱粉のメチル化分析＞
実験２−２で得た上記４種の分岐澱粉１、２、３及び４、又は対照のワキシーコーンスターチ液化液について、構成糖であるグルコースの結合様式を調べるため、常法に従いメチル化した後、酸により加水分解し、続いて還元、アセチル化し、得られた部分メチル−アセチルグルシトール（以下、「部分メチル化物」と略称することがある。）をガスクロマトグラフィー法（以下、「ＧＬＣ」と略称する。）にて分析し、部分メチル化物の組成を調べた。結果を表４に示す。【００８１】
【表４】
2008044588.tif 000005
【００８２】
表４の結果から明らかなように、対照のワキシーコーンスターチ液化液では、２，３，４−トリメチル化物が全く検出されないことから、他のグルコースと１位及び６位で結合しているグルコース残基が存在しないと考えられる。一方、環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させて得られた分岐澱粉では、２，３，４−トリメチル化物が検出され、酵素の作用量が多くなるにつれて、その割合が増加した。この結果は、酵素の作用量が多くなるにつれて、グルコース残基の６位に他のグルコースが１位で結合した構造、すなわち、分岐構造が増加することを物語っている。加えて、２，３−ジメチル化物の割合も増加傾向にあることから、１位、４位及び６位で他のグルコースと結合しているグルコース残基も僅かに増加していると考えられた。このことは、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用による６−α−マルトシル転移が、基質澱粉の非還元末端グルコース残基の６位だけでなく、澱粉を構成するグルコース鎖の内部に位置するグルコース残基の６位に対しても起こることを示唆している。【００８３】
＜実験３−４：分岐澱粉のプルラナーゼ消化における生成物＞
実験２−２の方法で得た上記４種の分岐澱粉１、２、３及び４、又は、対照のワキシーコーンスターチ液化液について分岐構造を調べる目的で、澱粉のα−１，６結合を特異的に加水分解するプルラナーゼ（ＥＣ  ３．２．１．４１）を作用させ、それぞれのプルラナーゼ消化物の糖組成を調べた。【００８４】
実験２−２の方法で得た４種の分岐澱粉又は対照のワキシーコーンスターチ液化液を、終濃度１ｗ／ｖ％になるよう脱イオン水に溶解し、酢酸緩衝液（ｐＨ６．０）を終濃度２０ｍＭになるよう加えた後、基質固形分１グラム当たり２０単位のプルラナーゼ（試薬結晶品、株式会社林原生物化学研究所製造）を加え、４０℃で２４時間反応させた。反応後、１００℃、１０分間の加熱処理を行い、プルラナーゼを失活させた後、反応液の糖組成を実験２と同じＨＰＬＣ法にて測定した。結果を表５に示す。また、表５における対照のワキシーコーンスターチ液化液と分岐澱粉３（環状マルトシルマルトース生成酵素の作用量：０．０５単位／ｇ−ワキシーコーンスターチ液化液）の結果を、グルコースの重合度を横軸とし、プルラナーゼ消化物中の含量（％）を縦軸とした図に表したものを図２に示す。なお、図２中の符号ａ及びｄは、それぞれ対照のワキシーコーンスターチ液化液及び分岐澱粉３を意味する。【００８５】
【表５】
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【００８６】
表５及び図２の結果から明らかなように、対照のワキシーコーンスターチ液化液の場合、ＤＰ６以上のマルトオリゴ糖が生成し、ＤＰ５以下のマルトオリゴ糖は認められないのに対して、環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させて調製した本発明で使用する分岐澱粉では、プルラナーゼ消化物中のＤＰ５以下のマルトオリゴ糖、とりわけ、マルトース（ＤＰ２）及びマルトテトラオース（ＤＰ４）が顕著に増加していた。この結果から、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用によって、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する新たな分岐澱粉が生成していることが判明した。【００８７】
＜実験３−５：分岐澱粉のβ−アミラーゼ分解限度（β−アミロリシス）＞
実験２−２で得た上記４種の分岐澱粉１、２、３及び４、又は、対照のワキシーコーンスターチ液化液をそれぞれ終濃度１ｗ／ｖ％、酢酸緩衝液（ｐＨ５．５）を終濃度２０ｍＭになるよう調製した基質溶液に、固形物１ｇ当たり１００単位のβ−アミラーゼ（大豆由来、ナガセ生化学工業製造）を加え、５０℃で２４時間作用させ、１００℃で１０分間熱処理して酵素反応を停止した。なお、β−アミラーゼの活性１単位は、濃度１％の可溶性澱粉を基質とし、ｐＨ５．５、４０℃の条件下で１分間に１μｍｏｌのマルトースに相当する還元力を生成する酵素量と定義した。各分岐澱粉及び対照のワキシーコーンスターチ液化液のβ−アミラーゼ消化物中のマルトースとβ−アミラーゼで分解されないβ−リミットデキストリンの含量を実験１と同じＨＰＬＣ条件にて測定した。結果を表６に示す。【００８８】
【表６】
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【００８９】
表６の結果から明らかなように、分岐澱粉は、作用させた環状マルトシルマルトース生成酵素の量が多いほど、β−アミラーゼ消化により生成するマルトースの含量が低い値を示し、逆にβ−リミットデキストリンの含量は高い値を示した。β−アミラーゼは澱粉を非還元末端からマルトース単位で加水分解し、α−１，６結合による分岐点の手前で加水分解反応を停止する酵素であることから、上記結果は、環状マルトシルマルトース生成酵素がワキシーコーンスターチ液化液に作用し、そのα−１，６マルトシル転移により分岐構造が形成され、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用量が多いほど分岐澱粉における分岐構造の割合も増加する（分岐が密になる）ことを物語っている。【００９０】
＜実験３−６：分岐澱粉のヨウ素呈色＞
実験２−２で得た上記４種の分岐澱粉１、２、３及び４、又は、対照のワキシーコーンスターチ液化液を、脱イオン水にそれぞれ濃度０．１５％になるよう溶解し、この溶液０．５ｍｌに０．０２Ｎ硫酸を１０ｍｌ、０．１Ｎヨウ素−ヨウ化カリウム溶液を０．５ｍｌ添加し、２５℃で２５分間放置した後、４５０乃至７００ｎｍの範囲でヨウ素−澱粉複合体の吸収スペクトルを測定した。結果を図３に示す。なお、図３中の符号ａ、ｂ、ｃ、ｄ及びｅは、実験３−１、図１で述べたものと同様である。図３の結果から明らかなように、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用量が多い分岐澱粉ほど全体として吸光度が低かった。最大吸収波長はおよそ５２０ｎｍで各試料間に差は認められなかった。実験３−２の結果から、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用による加水分解はほとんど認められなかったにもかかわらず、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用量が多い分岐澱粉ほど吸光度が低い理由として、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用量が多い分岐澱粉ほどヨウ素と複合体を形成する澱粉の直鎖構造の存在比が低下し、澱粉へのヨウ素の結合量が低下したものと考えられた。【００９１】
実験３の結果から、液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）に環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させて得られる分岐澱粉は、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する新規な分岐澱粉であることが判明した。本発明で使用する分岐澱粉の構造を示す模式図を液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）のそれとともに図４に示す。図４中、Ａ及びＢは、それぞれ液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）及び本発明で使用する分岐澱粉の模式図である。なお、図４に示す模式図において、符号１、２及び３はそれぞれ、液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）における、グルコースがα−１，４結合で連なった直鎖状構造（アミロース構造）、α−１，６結合により前記直鎖状構造が分岐した部位、及び還元末端グルコースを意味し、また、符号４及び５は、本発明で使用する分岐澱粉における６−α−マルトシル分岐構造及び６−α−マルトテトラオシル分岐構造を意味している。【００９２】
＜実験４：分岐澱粉の耐老化性＞
実験２の方法で得た上記４種類の分岐澱粉１、２、３及び４、又は、対照のワキシーコーンスターチ液化液について、耐老化性を検討した。濃度２５％になるよう水に加熱・溶解した各試料をガラス製試験管に分注し、密閉状態で、温度５℃で１０日間冷蔵保存した後、澱粉の老化の程度を観察した。結果を図５に示す。なお、図５中の符号ａ、ｂ、ｃ、ｄ及びｅは、実験３−１及び図１で述べたものと同様である。図５の結果から明らかなように、対照のワキシーコーンスターチ液化液（ａ）は上記保存条件下において白濁し、さらに一部固化も生じており、澱粉の老化が顕著であった。一方、環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させて調製した分岐澱粉（ｂ〜ｅ）は、いずれも透明な溶液状態を維持しており、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する本発明で使用する分岐澱粉は、顕著な耐老化性を有していることが判明した。【００９３】
＜分岐澱粉の製造例１＞
ワキシーコーンスターチ（三和澱粉工業株式会社製造）を水道水に懸濁し、これに最終濃度１ｍＭとなるように塩化カルシウムを加え、ｐＨ６．０に調整して濃度約１０％の澱粉乳を調製した。この澱粉乳に耐熱性α−アミラーゼ（商品名『スピターゼＨＳ』、ナガセ生化学工業株式会社販売）を澱粉固形物１グラム当たり０．０５ｍｇ添加し、３０分間攪拌した後、連続液化装置に流速１Ｌ／分で通液した。澱粉乳を連続液化装置にて１００℃で２５分間、次いで、１４０℃で５分間加熱して液化澱粉を調製した。次いで、この液化澱粉溶液減圧下で濃縮し、濃度約２５％の液化澱粉溶液とした後、実験１の方法で得た環状マルトシルマルトース生成酵素精製標品を澱粉固形物１グラム当り０．１単位になるように加え、ｐＨ６．０、温度５０℃で２０時間反応させた。１００℃、２０分間の熱処理により酵素反応を停止させた後、冷却し、濾過して得られる濾液を、常法に従って、活性炭で脱色し、珪藻土濾過し、濃度約２５％の分岐澱粉溶液を固形物当たり収率約９０％で得た。この分岐澱粉含有溶液を、パルス燃焼式乾燥システムＰＵＬＣＯ（パルテック株式会社販売）にて脱水、乾燥し粉末化した。なお、得られた分岐澱粉のプルラナーゼ消化物は、マルトースを３．７％、マルトテトラオースを１．７％含有していた。また、得られた分岐澱粉の部分メチル化物は、２，３，４−トリメチル化物を８．２％含有していた。本品は、固形物当たり、９６．７％の分岐澱粉及び３．３％の環状マルトシルマルトースを含有していた。本品は、分岐澱粉誘導体の製造に利用できる。【００９４】
＜分岐澱粉の製造例２＞
分岐澱粉の製造例１で得た溶液状の分岐澱粉を濾過し、常法に従って、活性炭で脱色し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂により脱塩して精製後、エバポレーターで固形分濃度２０％まで濃縮した。続いて、強酸性カチオン交換樹脂（『アンバーライトＣＲ−１３１０』、Ｎａ型、オルガノ株式会社製造）を用いたカラム分画に供し、副生成物として混在する環状マルトシルマルトースを除去した。分画は、樹脂を内径５．４ｃｍのジャケット付きステンレス製カラム４本に充填し、直列につなぎ樹脂層全長２４０ｃｍとしたカラムを用い、カラム内温度６０℃に維持しつつ、澱粉溶液を樹脂に対して５ｖ／ｖ％加え、これに６０℃の温水をＳＶ０．１３で流す条件にて行った。環状マルトシルマルトースを含まない高分子画分を採取し、２５％まで濃縮した後、パルス燃焼式乾燥システムＰＵＬＣＯ（パルテック株式会社販売）にて脱水、乾燥し粉末化した。この操作により、水分約を１０％含有し、吸湿性が少なく、粒度特性の優れた分岐澱粉粉末が得られた。本品は、分岐澱粉誘導体の製造に有利に利用できる。【００９５】
＜分岐澱粉の製造例３＞
市販の澱粉部分分解物（商品名『パインデックス＃１００』、松谷化学工業株式会社販売）を濃度約３０％（ｗ／ｖ）水溶液とし、終濃度１ｍＭとなるように塩化カルシウムを加え、ｐＨ６．０に調整した。これに実験１の方法で得た環状マルトシルマルトース生成酵素精製標品を基質固形物１グラム当り１単位加え、４０℃で４８時間反応させた後、１００℃に加熱し１０分保持して反応を停止させた。反応液を、常法に従って、活性炭で脱色し、珪藻土濾過して精製し、更に、濃縮して濃度３０％の分岐澱粉部分分解物溶液を固形物当たり収率約９０％で得た。この分岐澱粉部分分解物含有溶液をパルス燃焼式乾燥システムＰＵＬＣＯ（パルテック株式会社販売）にて脱水、乾燥し粉末化した。本品は、固形物当たり、グルコース重合度７以上の分岐澱粉部分分解物９０．８％、グルコース重合度１乃至６のマルトオリゴ糖６．７％、及び環状マルトシルマルトースを２．５％含有していた。本品は、分岐澱粉誘導体の製造に利用できる。【００９６】
なお、原料の澱粉部分分解物をプルラナーゼ消化したところ、生成するアミロースの老化により不溶化したのに対し、本品のプルラナーゼ消化物は、耐老化性を示し清澄な溶液を維持しており、マルトースを２６．３％、マルトテトラオースを１５．４％含有していた。【００９７】
＜分岐澱粉の製造例４＞
環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させるに際し、基質固形物１グラム当たり２，５００単位のイソアミラーゼを作用させた以外は実施例３と同様に反応し、常法に従って、活性炭で脱色し、珪藻土濾過して精製し、更に、濃縮して濃度３０％の分岐澱粉部分分解物溶液を固形物当たり収率約９０％で得た。この分岐澱粉部分加水分解物含有溶液を、パルス燃焼式乾燥システムＰＵＬＣＯ（パルテック株式会社販売）にて脱水、乾燥し粉末化した。本品は、固形物当たり、グルコース重合度７以上の分岐澱粉部分分解物６９．６％、グルコース重合度１乃至６のマルトオリゴ糖２７．３％、及び環状マルトシルマルトースを３．１％含有していた。本品は、分岐澱粉誘導体の製造に利用できる。【００９８】
なお、本品のプルラナーゼ消化物はマルトースを４１．５％、マルトテトラオースを２６．２％含有する清澄な溶液であった。本品のプルラナーゼ消化物におけるマルトース及びマルトテトラオース含量を実施例３で得た分岐澱粉部分分解物のプルラナーゼ消化物のそれと比較すると、約１．５倍程度高い値を示した。このことは、イソアミラーゼによりグルコース重合度の大きい分岐を加水分解しつつ、環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させると、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造の数を増加させることができることを示唆している。【００９９】
＜分岐澱粉の製造例５＞
分岐澱粉の製造例４で得た溶液状の分岐澱粉部分分解物を濾過し、常法に従って、活性炭で脱色し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂により脱塩して精製後、エバポレーターで固形分濃度２０％まで濃縮した。続いて、強酸性カチオン交換樹脂（『アンバーライトＣＲ−１３１０』、Ｎａ型、オルガノ株式会社製造）を用いたカラム分画に供し、混在する環状マルトシルマルトースを含むオリゴ糖を除去した。分画は、樹脂を内径５．４ｃｍのジャケット付きステンレス製カラム４本に充填し、直列につなぎ樹脂層全長２４０ｃｍとしたカラムを用い、カラム内温度６０℃に維持しつつ、澱粉溶液を樹脂に対して５ｖ／ｖ％加え、これに６０℃の温水をＳＶ０．１３で流す条件にて行った。オリゴ糖を含まない高分子画分を採取し、２５％まで濃縮した後、パルス燃焼式乾燥システムＰＵＬＣＯ（パルテック株式会社販売）にて脱水、乾燥し粉末化した。この操作により、吸湿性が少なく、粒度特性の優れた分岐澱粉粉末が得られた。本品は、分岐澱粉誘導体の製造に有利に利用できる。【０１００】
以下、実施例により、さらに具体的に本発明を説明する。本発明で使用する分岐澱粉誘導体の製造例を実施例１乃至１３で示し、本発明の分岐澱粉誘導体を含有せしめた成形物を実施例１４乃至３８で示す。しかしながら、本発明はこれら実施例によって限定されるものではない。
【実施例１】
【０１０１】
＜ベンジル化分岐澱粉＞
分岐澱粉の製造例２の方法により得た分岐澱粉粉末５質量部及び水酸化カリウム３７質量部を塩化ベンジル６４質量部に溶解した後、１４０℃で３時間加熱した。室温まで冷却した後、蒸留水２００質量部及び酢酸エチル４００質量部を添加し混合し、水層と酢酸エチル層が分離するまで静置した後、酢酸エチル層を回収した。常法にしたがって適量の無水硫酸マグネシウムにより脱水した後、減圧乾燥し、ベンジル化分岐澱粉を得た。本品は、脂溶性であることから、油性の化粧品一般などに有利に配合使用できる。
【実施例２】
【０１０２】
＜メチル化分岐澱粉＞
分岐澱粉の製造例４の方法により得た分岐澱粉５質量部を無水ジメチルスルホキシド１２５質量部に溶解した後、水素化ナトリウム１２．５質量部添加混合後、１０分間氷中で冷却した後、６０℃で２時間加熱した。氷冷下でヨウ化メチル２２．５質量部を徐々に添加し、室温１８時間混合した。さらに、メタノール４０質量部を添加し、氷冷した蒸留水２００質量部と混合した。これにクロロホルム５００質量部を添加混合し、水層とクロロホルム層が分離するまで静置し、クロロホルム層を採取した。これに蒸留水５０質量部を添加混合し、静置した後、再びクロロホルム層を採取した。この操作を１０回繰返し、常法にしたがって適量の無水硫酸マグネシウムで脱水し、濃縮し、飽和食塩水１００質量部を添加し、６０℃３０分間攪拌し、氷冷後、上清を除去した。この操作をもう一度繰返した。これをクロロホルム３００質量部に再溶解し、６０℃３０分攪拌し、常法にしたがって適量の無水硫酸マグネシウムにて脱水後、濃縮し、水飴状のメチル化分岐澱粉を得た。本品は、脂溶性であることから、油性の化粧品一般に有利に配合使用できる。
【実施例３】
【０１０３】
＜分岐澱粉のリノール酸エステル＞
分岐澱粉の製造例２の方法により得た分岐澱粉粉末１０質量部と無水ピリジン２００質量部を反応容器にとり、アルゴン気流下、無水ピリジン５質量部に溶解したチアゾリチオン−リノール酸アミドを４質量部加えた。６０％（ｗ／ｗ）油性水素化ナトリウムを０．０８５質量部加え、室温下で２時間反応させ、反応物に飽和塩化アンモニウム水溶液を１．５質量部加えた後、ピリジンを減圧留去し、残渣１１．２質量部を得た。これをシリカゲルクロマトグラフィーにより精製し、分岐澱粉のリノール酸エステルを調製した。本品は、無味、無臭で、飲食物、化粧品、医薬品などに有利に配合使用できる。
【実施例４】
【０１０４】
＜分岐澱粉のミリスチン酸エステル＞
分岐澱粉の製造例５の方法により得た分岐澱粉粉末２００質量部をＮ，Ｎ´−ジメチルホルムアミド８００質量部に溶解し、ミリスチン酸メチルエステル６０質量部と炭酸カルシウムを４質量部加え、１００ｍｍＨｇ乃至２００ｍｍＨｇの減圧下、攪拌しながら８５℃乃至９５℃で２４時間反応させた。その後、反応物から溶媒を減圧留去し、残渣をアセトン３００質量部に２回浸漬し、浸出液を濃縮し、ベンゼン及び石油エーテルで洗浄して得られる粘性の油状物を再度アセトン３００質量部に浸漬した。浸出液を氷冷し、沈澱部を採取し、乾燥し、分岐澱粉のミリスチン酸エステルを得た。本品は、無味、無臭で、飲食物、化粧品、医薬品などに有利に配合使用できる。
【実施例５】
【０１０５】
＜分岐澱粉のドデシルエーテル＞
ｎ−ドデカノール３９０質量部を反応容器にとり、１２５℃に加熱後、触媒としてｐ−トルエンスルホン酸を１質量部加え、容器内を５ｍｍＨｇ乃至１０ｍｍＨｇに減圧した。別途、分岐澱粉の製造例２の方法により得た分岐澱粉粉末１００質量部をｎ−ドデカノール１３０質量部に懸濁し、２．３質量部／分の割合で１００分間かけて反応容器内に、滴々加えて反応させた。その後、反応物を飽和炭酸ナトリウム水溶液で中和し、未反応のアルコールを留去し、分岐澱粉のドデシルエーテルを得た。本品は、洗剤や乳液などに有利に配合使用できる。
【実施例６】
【０１０６】
＜分岐澱粉の硫酸エステル＞
製造例５の方法で得た分岐澱粉粉末１質量部を反応容器にとり、窒素気流下、常法にしたがって別途調製した三酸化硫黄−ジメチルホルムアミド錯体５質量部を、滴々加え、室温下で４時間、その後、７０℃でさらに１時間反応させた。５Ｎ水酸化ナトリウムを適量加えて中和し、メチルアルコールを５倍容加え、暫時静置した後、沈澱部を吸引濾過により採取し、分岐澱粉の硫酸エステルを得た。本品は、保湿剤、美肌剤として化粧品一般に有利に配合使用できる。
【実施例７】
【０１０７】
＜分岐澱粉の硫酸エステル＞
分岐澱粉の製造例２の方法により得た分岐澱粉粉末を１００質量部とり、実施例６と同一の方法により硫酸化し、分岐澱粉の硫酸エステルを含む成形物を得た。本品は、保湿剤、美肌剤として化粧品一般に有利に配合使用できる。
【実施例８】
【０１０８】
＜分岐澱粉の塩化シアヌル誘導体＞
分岐澱粉の製造例２の方法により得た分岐澱粉粉末２質量部を触媒量のピリジン、塩化シアヌル５ｗ／ｖ％を含むＮ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド溶液２０質量部に懸濁し、室温下で３時間反応させた。反応混合物を濾過し、残渣をアセトン洗浄した後、乾燥させ、分岐澱粉の塩化シアヌル誘導体を得た。本品は、ペプチド、タンパク質、核酸などの有機化合物と結合させることができる。
【実施例９】
【０１０９】
＜分岐澱粉のトシル化誘導体＞
分岐澱粉の製造例５の方法により得た分岐澱粉粉末１５質量部をピリジン５０質量部に懸濁し、ｐ−トルエンスルホニルクロライド１２質量部を０℃で加え、１８時間撹拌した。酢酸エチルで抽出し、希塩酸、ブラインで洗浄し、乾燥後濃縮して分岐澱粉のトシル化誘導体を得た。本品は、各種誘導体の中間体として有用である。
【実施例１０】
【０１１０】
＜分岐澱粉のフェニルスルフィド誘導体＞
カリウムｔ−ブトキシド７質量部をジメチルホルムアミド２０重量部に溶解し、０℃でチオフェノール７質量部を滴下し、さらに０℃で１０分間撹拌した。実施例９で調製したトシル化誘導体１４重量部をジメチルホルムアミドに溶解したのちに加え、室温で１時間撹拌した。酢酸エチルで抽出、ブラインで洗浄し、濃縮した。残留物をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、フェニルスルフィド誘導体を得た。本品は、脂溶性を有しており、化粧品、医薬品などに適用できる。
【実施例１１】
【０１１１】
＜分岐澱粉のアミノ化誘導体＞
実施例９で調製したトシル化誘導体１０質量部を無水ジメチルホルムアミド２０質量部に窒素ガス存在下で溶解し、１質量部の無水アジ化ナトリウムを添加して、窒素ガス存在下で６５℃、１８時間撹拌した後、室温まで冷却し、氷冷した水１５０質量部を加えた。沈殿物を濾過して採取し、１５０質量部の水で再び懸濁した。沈殿物を採取し、乾燥してジアゾ化誘導体を得た。さらにこのジアゾ化誘導体１質量部を１００質量部の精製ジオキサンと２０質量部の蒸留されたメタノールの混合溶液に懸濁し、窒素ガス存在下で、精製されたトリフェニルフォスフィン４質量部を撹拌しつつ加え、１時間撹拌した。５質量部の濃アンモニア水を滴下し、窒素ガス存在下で１２時間撹拌した。溶媒を除去し、生成物を２５０質量部の水に懸濁し、１Ｎ塩酸でｐＨ４に調整した。この懸濁液を、５００質量部ベンゼンで３回洗浄し、トリフェニルフォスフィンオキシドを除去し、凍結乾燥し、アミノ化誘導体を得た。本品は、カルボキシル基を有する有機化合物と結合能を有しており、他の置換基を導入する中間体として有用である。
【実施例１２】
【０１１２】
＜アセチル化分岐澱粉＞
分岐澱粉の製造例２の方法で調製した分岐澱粉粉末１０ｇを、ジメチルスルホキシド８０ｇに溶解し、炭酸ナトリウム２ｇを添加後、酢酸ビニル１６ｇを加えて、８０℃において１２０分間反応させた。反応後、水を添加して生成物を析出させ、ろ過後、数回水で洗浄し、精製し、乾燥した。収率９０％で、水分含量約１０％、置換度（ＤＳ）２．１、熱流動化温度２７５℃のアセチル化分岐澱粉の粉末を得た。【０１１３】
このアセチル化分岐澱粉１０ｇ、ε−カプロラクトン６０ｇを加え、オクチル酸スズ（ＩＩ）の存在下で、１２０℃で約１０２分間グラフト重合をおこなった。本品は、グラフト率約６０％で、熱流動化温度は、原料として使用した分岐澱粉に比して２００℃以上低下していた。【０１１４】
このアセチル化分岐澱粉誘導体を使用して、通常のプラスチック成形機により、厚さ３０μｍの熱圧成形シートを調製し、１ｃｍ×３ｃｍの小片を切りだし、その引張強度を測定したところ、同じ厚みの汎用ポリオレフィンに相当する強度特性を示した。
【実施例１３】
【０１１５】
＜分岐澱粉の架橋物＞
分岐澱粉の製造例５の方法で調製した分岐澱粉粉末の２．５％水溶液３２ｇを、水酸化ナトリウム溶液でｐＨ１２．８に調製した後、１．５ｇのノナエチレングリコールジグリシジルエーテル（ナガセ社販売、商品名「デナコールＥＸ−８３０」、分子量５２６．６）と反応させて、分岐澱粉の架橋物の水溶液を調製した。この水溶液を、常法により乾燥して、水分含量約５％の分岐澱粉の架橋物の粉末を調製した。【０１１６】
上記分岐澱粉の架橋物の水溶液をポリスチレン板上で３７℃、１時間、さらに４０℃、２４時間キャストしてフィルムを作成した。フィルムに含まれるデナコールＥＸ−８３０、水酸化ナトリウムおよび非架橋分岐澱粉を、純水で洗浄することにより除去した。このフィルムは、透明で、１３０℃に加熱しても溶解することもなく、優れた強度特性を示した。
【実施例１４】
【０１１７】
＜ニンジンチップ＞
洗浄後、約１０ｍｍ×約１０ｍｍ×厚さ約２ｍｍ程度の薄片にスライスしたニンジン１５０ｇを、α，α−トレハロース（商品名『トレハ』、株式会社林原商事販売）１０％、実施例４の方法で調製した分岐澱粉誘導体のリノール酸エステル０．５％を含有する約１００℃の溶液に浸漬し、液温を保持しながら１５分間浸漬処理した。浸漬処理後のスライスニンジンを水切りし、温風乾燥機に入れ、６０℃に加温した雰囲気下６時間、乾燥して乾燥スライスニンジンを製造した。本品は、長期間保存しても、色鮮やかで、水戻りもよく、ニンジンの風味がよく保持されたニンジンチップである。【０１１８】
本品を、常法により粉砕して、ニンジンの粉末を調製した。この粉末は、長期間保存しても、色鮮やかで、固結することもなく、水への溶解性も高い、ニンジンの風味がよく保持されたニンジン粉末である。
【実施例１５】
【０１１９】
＜藍草抽出物粉末＞
藍草の水抽出物（株式会社林原生物化学研究所製造、固形分１．４％）９８質量部、粉末化基剤として実施例３の方法で調製した分岐澱粉誘導体０．５質量部、α−サイクロデキストリン１．５質量部を加えて撹拌・溶解し、これを、常法により噴霧乾燥して、藍草抽出物粉末を調製した。本品は、長期間保存しても、吸湿や褐変もなく、藍草の水抽出物中に含まれるトリプタンスリンやフラボノイドをはじめとする有用成分の保存安定性にも優れている。本品は飲食品、化粧品、医薬部外品などの製造原料として利用することができる。【０１２０】
常法により、この藍草抽出物の粉末を０．５％含有するチョコレートを調製した。本品は、藍草抽出物を含有し、長期間保存してもその有用成分が保持されていることから、歯周病予防、高脂血症の予防、治療や脂質代謝改善の目的で使用することもできる。
【実施例１６】
【０１２１】
＜ローヤルゼリー粉末＞
ローヤルゼリーエキス１０質量部に対して、粉末化基剤として、実施例３の方法で調製した分岐澱粉誘導体０．５質量部、α，α−トレハロース１質量部を加えて撹拌・溶解し、これを、常法により凍結乾燥して、粉末を調製した。本品は、長期間保存しても、吸湿や褐変もなく、ローヤルゼリーに含まれる有用成分の保存安定性にも優れている。【０１２２】
このローヤルゼリー粉末２７質量部、コエンザイムＱ１０５質量部、ショ糖５質量部、エリスリトール５５質量部、アスコルビン酸６．５質量部、ビタミンＢ１０．１質量部、ビタミンＢ２０．１質量部、ビタミンＢ６０．１質量部、フルーツ香料１．２質量部を混合し、１ｇずつラミネート容器に小分けした。本品は、長期間保存してもその有用成分が保持されるので、健康補助食品として好適である。
【実施例１７】
【０１２３】
＜粉末ペパーミントオイル＞
水１５０ｇにアラビアガム７０質量部、ショ糖脂肪酸エステル４質量部、粉末化基剤として実施例３の方法で得た粉末状の分岐澱粉誘導体２質量部、含水結晶α，α−トレハロース２０質量部を加えて溶解し、殺菌のために８５℃に加温して、１５分間維持した。これを４０℃に冷却後、ペパーミントオイル１０ｇを添加して、ホモミキサーにより乳化した。これを、常法により噴霧乾燥して、粉末ペパーミントオイルを調製した。本品は、吸湿もなく、粉末成形物は充分な粉体流動性を維持していた。また、ペパーミントオイルの酸化や分解が抑制されるので、劣化臭の発生が抑制され、また、劣化臭が発生しても、その劣化臭がマスクされることから、良好なペパーミントオイルの香りが安定に長期間保持された。また、本品は、飲食品、化粧品、医薬部外品、医薬品用の香料として有利に利用できる。【０１２４】
対照として、粉末化基剤として、含水結晶α，α−トレハロース２０質量部のみを使用した以外は、実施例１７と同じ方法で調製したペパーミント粉末と、実施例１７で調製したペパーミント粉末とを、各々密封した容器に入れて、５０℃の恒温器で６ヶ月間保存した。保存後のペパーミント粉末を、等質量部使用して、常法により、ガムをそれぞれ調製し、そのペパーミントの風味について、１０名のパネラーによる官能検査を行ったところ、実施例１７で調製したペパーミント粉末を使用したガムの方が、対照に比して、ペパーミントの香りが強く、その持続性も高いと、１０名中８名のパネラーが評価した。この結果は、粉末化基剤として使用した分岐澱粉誘導体が、香料の保存安定性の向上に寄与していることを物語っている。
【実施例１８】
【０１２５】
＜粉末オレンジオイル＞
粉末化基剤としてα，α−トレハロース３００ｇ、国際公開ＷＯ  ０２／１０３６１号明細書に開示されたサイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝の構造を有する環状四糖（株式会社林原生物化学研究所製造）３００ｇ、α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（商品名『ハローデックス』、株式会社林原商事販売）６０質量部、および、実施例４の方法で調製した分岐澱粉誘導体１０ｇを、２００ｇのイオン交換水に溶解し、煮詰め温度１３５℃までスリーワンモータにより１００ｒｐｍで攪拌しつつ加熱して溶融物を得た。該溶融物にオレンジオイル７５ｇを高速攪拌機で攪拌しながら添加し、２０分間乳化を行った。前記乳化物を押出し釜に移し、−２５℃のイソプロピルアルコールを入れた冷却槽中に加圧して射出口から押し出し、攪拌しながら粉砕した。得られた粉砕物を、ロータリーエバポレーターを用いて４０℃で減圧乾燥することにより、粒子表面のイソプロピルアルコールを除去した。乾燥後の粉末成形物を、２０メッシュ（目開き８４０μｍ）の篩を通過し、６０メッシュ（目開き２５０μｍ）の篩上に残るよう篩分けを行い、６０メッシュ篩上に残った粉末成形物８０ｇを得た。本品は、長期保存後も、香料の劣化もなく、粉末成形物は充分な粉体流動性を維持していた。また、本品は、飲食品、化粧品、医薬部外品、医薬品用の香料として有利に利用できる。
【実施例１９】
【０１２６】
＜紡糸＞
平均重合度１１５０、ケン化度９９．９５％のポリビニールアルコール８％と、実施例２の方法で調製した分岐澱粉誘導体２％を含む水溶液１．５リットルと反応性染料Ｋａｙａｃｉｏｎ
Ｒｅｄ Ｅ−ＳＮ７Ｂ（日本化薬株式会社製）の１％水溶液１．５リットルを混合し苛性ソーダでｐＨを８に調整した後加熱反応させた。さらに、この着色水溶液に平均重合度１１５０、ケン化度９９．９５％のポリビニールアルコールと実施例２の方法で調製した分岐澱粉誘導体と水を加え、ポリビニールアルコール２６％、実施例２の方法で調製した分岐澱粉誘導体６％、染料０．３％を含有する紡糸原液を調製した。この紡糸原液を孔数５０のノズルを使用して乾式紡糸を行ない、４．５倍に延伸し、２２０℃で熱処理を施して溶解温度９３℃の赤色着色糸を得た。本品は、十分な引張り強度を有し、耐久性に優れた糸である。
【実施例２０】
【０１２７】
＜分岐澱粉誘導体を用いたポリ乳酸フィルムのラミネート＞
実施例２の方法で調製した分岐澱粉誘導体の５％水溶液を、２．５μｍ厚のポリ乳酸フィルム上にアプリケーターを用いて塗布した後、乾燥させ、３μｍ厚の分岐澱粉・キャストフィルムを作成した。得られたラミネートフィルムの分岐澱粉面に、湿らせた洋紙を重ね合わせ、プレスしながら乾燥させた。その結果、分岐澱粉を接着層とした、洋紙とポリ乳酸フィルムの３層ラミネートが得られた。接着強度を測定するために、９０度剥離試験を行なったところ、その接着強度は極めて優れており、洋紙層内で破壊が生じたが、分岐澱粉層内の破壊や、分岐澱粉層と洋紙またはポリ乳酸フィルムとの間での界面剥離はどちらも生じなかった。本品は、生分解性なので、環境にも優しいフィルムである。
【実施例２１】
【０１２８】
＜印刷用塗工層成形物＞
重質炭酸カルシウム５０質量部、カオリン５０質量部からなる顔料をコーレス分散機を用いて分散し顔料スラリーを得た。このスラリーにスチレン−ブタジエン共重合体ラテックス１０質量部（固形分）、実施例１２の方法で調製した分岐澱粉誘導体３質量部（固形分）、耐水化剤０．２質量部、滑剤０．２質量部、その他助剤を添加、分散して固形分５８％の塗料を調製した。【０１２９】
上記の塗料を用いて、原紙、片面当たり乾燥重量で２０ｇ／ｍ2になるようにブレードコーターで両面塗工を行った。この紙を乾燥後、水をロールアップリケーターで供給して水塗工し、乾燥した。その後、スーパーキャレンダー掛けして表面光沢仕上げを行い、印刷用塗工紙を得た。本品は、印刷インキや顔料のにじみが少なく、また、機械的強度や耐久性等も十分であった。
【実施例２２】
【０１３０】
＜紙＞
広葉樹晒クラフトパルプをナイヤガラビーターにて叩解し、適量を水に加えて４００ｍｌの懸濁液を調製した。該パルプに、実施例２の方法で調製した分岐澱粉誘導体を粉末として混ぜ込み、常法に従い坪量１００ｇ／ｍ２の紙シートマシンで手抄きした。形成された湿紙を９０℃で１分間ロータリードライヤーにて乾燥後、温度２０℃、湿度６５％で２４時間調湿してクラフト紙を得た。本品は、機械的強度等も十分であった。
【実施例２３】
【０１３１】
＜不織布＞
実施例１２の方法で調製した水分約１０％の分岐澱粉誘導体含６０質量部と、エチレン３０モル％と酢酸ビニル７０モル％からなる共重合体をケン化したケン化度が９２％の加水分解共重合体４０質量部とからなる生分解性樹脂成形物のペレットを調製した。このペレットを、０．８ｍｍ、孔数３５０の口金、圧縮比２．０のフルフライトスクリューを使用し、紡糸温度１４０℃で溶融紡糸を行い、レギュラー糸を得た。この糸に、表面仕上剤としてラウリルホスフェートカリウムをこの糸に対して、糸質量の０．３％付着させた。この未延伸糸を延伸比１．２倍で冷延伸後、カッターで切断し、単糸繊度６ｄ／ｆ、繊維長３８ｍｍの生分解性繊維を得た。この生分解性繊維をカード機で梳綿し、カードウェブを得た。このウェブを更に温度１３０℃のエンボスロールで不織布加工をして、不織布を得た。本品は、耐水性、機械的強度や耐久性等も十分であった。
【実施例２４】
【０１３２】
＜園芸用シート＞
水分約５％を含む実施例１３の方法で調製した分岐澱粉誘導体（分岐澱粉の架橋物）３５質量部、エチレン３０モル％と酢酸ビニール７０モル％の共重合体（ケン化度が９８％の部分加水分解共重合体）６０質量部、ポリカプロラクトン５質量部とをブレンドし、生分解性樹脂成形物を得た。これを用いて繊維化を行った。この繊維をウェブとした後、ニードルパンチ不織布法／スルーエアー加工により、シートを得た。本品は園芸用シートなどとして利用することができる。本品は、耐水性も高く、機械的強度や耐久性等も十分であった。本品は、生分解性なので、使用後、田畑等に放置しても自然に分解が進行するので、環境にも優しいシートである。
【実施例２５】
【０１３３】
＜抗菌用シート＞
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（商品名『ハローデックス』、株式会社林原商事販売）４５質量部、乳酸ナトリウム５質量部、水３０質量部、実施例１の方法で調製した分岐澱粉誘導体２０質量部を加えて塗工液を調製した。この塗工液をキッチンペーパーに、紙の質量に対して、固形物換算で０．５％となるように塗布した。本品は、抗菌用のシートとして生鮮食料品などの包装に使用することができる。この塗工液は、分岐澱粉誘導体を含有しているので、キッチンペーパーへの塗布性が向上し、塗布液を均一にペーパー上に塗布することができる。
【実施例２６】
【０１３４】
＜シート＞
実施例１３の方法で調製した分岐澱粉誘導体の粉末（分岐澱粉の架橋物）１００質量部にエチレングリコール４０質量部、メタブレンＰ５３０Ａ  １．４質量部を加え、ヘンシェルミキサーで１０００ｒｐｍ、１０分間混合した後、試験用押し出し機にて１５０℃でペレット化した。この可塑化成形物１００質量部、ビオノーレ（＃１００１）１００質量部をタンブラー混合した後、１５０℃で再度押出機にかけ可塑化澱粉・ビオノーレ複合体成形物を得た。この成形物を用いて加熱温度１７０℃の条件下Tダイ押し出し機で肉圧１mmのシートを形成した。【０１３５】
このシートを用いて、真空成形により、苗ポットを調製したところ、奇麗な成形品(苗ポット)を得ることが出来た。本品は、耐水性も高く、機械的強度等も十分であった。
【実施例２７】
【０１３６】
＜発泡材＞
実施例１２の方法で調製した分岐澱粉誘導体１００質量部、メタクリル酸メチルとアクリル酸アルキルの共重合物、（分子量３１０万）１質量部、水３０質量部をヘンシェルミキサーで１０００ｒｐｍ、１０分間混合した後、試験用押出機（東洋精機株式会社販売、『ラボプラストミル』）にて１００℃でペレット化した。これを水分１３．５％まで乾燥し、このペレットを使ってバラ状緩衝材製造設備にて１９０℃で発泡体を形成した。本品は、上記配合の発泡材で使用した分岐澱粉に代えて、澱粉を使用して調製した発泡材に比して、均一な発泡が得られるとともに、復元力、発泡性、吸湿性、耐水性、保形性、耐久性等の物性面でも優れており、緩衝材として有利に使用することができる。本品は、生分解性なので、環境にも優しい発泡材である。
【実施例２８】
【０１３７】
＜トレイ＞
実施例２の方法で調製した分岐澱粉誘導体（固形分）１００質量部、水２０質量部、ポリエチレングリコール１５質量部、過硫酸カリウム０．０４質量部をヘンシェルミキサー（三井三池化工機販売）にとり、６００ｒｐｍ  ５分間攪拌し混合した。これを、ラボプラストミル型式２軸押出機及びペレッタイザー（何れも東洋精機株式会社販売）にてペレット化した。このペレットを、射出成形機（日精樹脂工学株株式会社販売）を用いて、成形金型を用いて射出成形し、トレイを得た。本品は、機械的強度等も十分で保形性、耐水性に優れており、植物栽培用などのトレイとして利用することができる。また、本品は、生分解性なので、環境にも優しいトレイである。
【実施例２９】
【０１３８】
＜トレイ及び杭＞
脂肪族ポリエステル４７質量部（昭和高分子製ビオノーレ１０２０）、実施例１２の方法により調製した分岐澱粉４７質量部、ショ糖（砂糖）６質量部の混合物を射出成形機に供給し成形した。トレイ及び杭の金型を用いて成形品を得た。【０１３９】
得られたトレイ及び杭の外観は良く、添加したショ糖によるコゲ、変色等の発生は全くなかった。また、トレイ及び杭としての機械的強度等も十分であり、水による洗浄も可能であった。これら成形物は、生分解性を有し、土壌に埋めて、室温下で３カ月間放置した所、ほぼ完全に分解された。
【実施例３０】
【０１４０】
＜錠剤＞
アスピリン５０質量部にトレハロース含水結晶粉末１４質量部、実施例３の方法で調製した分岐澱粉誘導体４質量部を充分に混合した後、常法に従って打錠機により打錠して厚さ５．２５ｍｍ、１錠６８０ｍｇの錠剤を製造した。本品は、分岐澱粉とトレハロースの賦形性を利用したもので、吸湿性がなく、物理的強度も充分にあり、しかも水中での崩壊は、分岐澱粉誘導体を使用しない場合に比して、良好である。
【実施例３１】
【０１４１】
＜外傷治療用膏薬＞
マルトース４００質量部に、ヨウ素３質量部を溶解したメタノール５０質量部を加え混合し、更に実施例４の方法で調製した分岐澱粉誘導体含有粉末の１０ｗ／ｖ％水溶液２００質量部を加えて混合し、適度の延び、付着性を示す外傷治療用膏薬を得た。本品は、分岐澱粉誘導体により適度な粘度、保湿性がを賦与にされており、経時変化が少ない商品価値の高い膏薬である。また、本品は、使用時のベタ付き感やざらつき感がない、使用感に優れた膏薬で、ヨウ素による殺菌作用のみならず、マルトースによる細胞へのエネルギー補給剤としても作用することから治癒期間が短縮され、創面もきれいに治る。
【実施例３２】
【０１４２】
＜フィルム＞
実施例２の方法で調製した分岐澱誘導体粉溶液を濃度２５質量％に調整し、平板上に固定したポリエチレンテレフタレートフィルム上に適当量滴下し、ＹＢＡ型ベーカリーアプリケーター（ヨシミツ精機社製６型）にて薄く延ばした後、室温で４時間程度乾燥し、厚さ１９μｍ、水分含量１０．５質量％のフィルムを調製した。乾燥した分岐澱粉誘導体フィルムはポリエチレンテレフタレートフィルムから剥離し、ＲＨ５２．８％に調湿したデシケーター内で一夜以上保存し、製品とした。本品は、プルランフィルムと同様に、透明度が高く、光沢があり、柔軟性、機械的強度に優れた良質なフィルムであった。本品の引っ張り強度は１．７６０ｋｇｆであり、水溶性は良好であった。本品は、可食性フィルムとして有利に利用できる。
【実施例３３】
【０１４３】
＜フィルム＞
実施例２の方法で調製した分岐澱粉８質量部、カラギーナン（商品名「ＮＥＷＧＥＬＩＮ  ＮＣ−４００」、中央フーズマテリアル株式会社販売）２質量部、ショ糖ステアリン酸エステル（商品名「シュガーエステルＳ１６７０」、三菱化学フーズ株式会社販売）０．０１質量部、グリセリン２５質量部、及び脱イオン水６５質量部を混合し加熱溶解した後、これをアプリケーター（商品名「ベーカーアプリケーターＹＢＡ型」ヨシミツ精機株式会社販売）を使用して、ガラス平板上にポリエチレンテレフタレートを密着させたものの上に適量滴下し、展延し、ゲル化させた後、５０℃で６時間乾燥して、水分含量約１８％、厚さ０．５ｍｍの分岐澱粉誘導体フィルムを調製した。本品はヒートシール性、透明性、機械的強度に優れており、また、崩壊性、水溶性に優れており、可食性フィルムやカプセル皮膜として好適である。
【実施例３４】
【０１４４】
＜カプセル＞
実施例４の方法で得た分岐澱粉誘導体２５０質量部、カラギーナン（商品名「ＮＥＷＧＥＬＩＮ  ＮＣ−４００」、中央フーズマテリアル株式会社販売）２０質量部、グリセリン４０質量部、及び脱イオン水７００質量部を混合し、加熱溶解して原料水溶液を調製し、減圧脱泡した。この溶液を５０℃に保温し、カプセル形成用ピンの先端を溶液中に入れた後、取り出し、乾燥してハードカプセルを調製した。本カプセルは、表面に光沢を持ち、透明性に優れ、酸素透過性を示さず、湿度変化に対する安定性に優れていた。また、水系で適度な徐崩性を有していることから、食品、医薬品の充填容器として好適である。
【実施例３５】
【０１４５】
＜カプセル＞
市販のプルラン（商品名「プルランＰＦ−２０」、株式会社林原商事販売）２００質量部、実施例３の方法で得た分岐澱粉５０質量部、ネイティブジェランガム０．５質量部、アルギン酸ナトリウム０．５質量部、シュガーエステル０．０５質量部及び脱イオン水７５０質量部を混合し、加熱溶解して原料水溶液を調製し、減圧脱泡した。この溶液を５０℃に保温し、カプセル形成用ピンの先端を溶液中に入れた後、取り出し、乾燥してハードカプセルを調製した。本カプセルは、表面に光沢を持ち、透明性に優れ、酸素透過性を示さず、湿度変化に対する安定性に優れていた。また、水系で適度な徐崩性を有していることから、食品、医薬品の充填容器として好適である。
【実施例３６】
【０１４６】
＜乳液＞
以下の配合処方に基づき、常法により、乳液を調製した。
（処方）                                                            （％）
ポリオキシエチレン（２０Ｅ．Ｏ．）ポリオキシプロピレン
（２Ｅ．Ｏ．）セチアルコール                                        １
シリコンＫＦ９６（２０ｃｓ）（信越化学工業株式会社販売）              ２
流動パラフィン（中粘度）                                              ３
１，３−ブチレングリコール（１，３−ＢＧ）                            ５
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド                                    ２
グリセリン                                                            ２
実施例５の方法で調製した分岐澱粉誘導体                            ０．６
エチルアルコール                                                    １５
カルボキシビニルポリマー                                          ０．３
ヒドロキシプロピルセルロース                                      ０．１
２−アミノメチルプロパノール                                      ０．１
藍草抽出物（商品名『藍ルーロス』、株式会社林原生物化学研究所
販売、１，３−ＢＧを３０％含有する藍草の水抽出物）                  ２
防腐剤                                                              適量
精製水を加えて全量を１００％とする。【０１４７】
本品は、美白及び／又は美肌用の皮膚外用剤として有用である。また、本品は、保湿性、浸透性、延展性、使用感に優れている。
【実施例３７】
【０１４８】
＜シャンプー＞
以下の配合処方に基づき、常法により、シャンプーを調製した。
（処方）                                                          （％）
ピロクトンオラミン                                                ０．５
エデト酸二ナトリウム                                              ０．３
感光素２０１号                                                ０．００２
クエン酸                                                          ０．３
サリチル酸ナトリウム                                              ０．２
１，３−ＢＧ                                                          ３
ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナトリウム                ６．７５
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド                                        ２
ラウリル硫酸トリエタノールアミン                                    １０
ポリオキシエチレンラノリン酸（８０Ｅ．Ｏ．）                      ０．５
２−アルキル−Ｎ−カルボキシメチル−Ｎ−ヒドロキシエチル
イミダゾリニウムベタイン                                          １０
ヒドロキシエチルセルロースヒドロキシプロピルトリメチル
アンモニウムクロリドエーテル                                    ０．８
実施例６の方法で調製した分岐澱粉誘導体                            ０．５
実施例１５の方法で調製した藍草抽出物粉末                              １
香料                                                              ０．２
精製水を加えて全量を１００％とする。
本品は、頭皮の炎症や老化防止効果を有し、抗菌性も強いので、育毛効果に優れ、脱毛を抑制し、頭皮を清潔に保つことができる。また、使用後も適度の水分を保持し、毛髪の滑りを良くする、使用感に優れたシャンプーである。
【実施例３８】
【０１４９】
＜育毛剤＞
実施例１５の方法で調製した藍草抽出物の粉末                            ２ｇ
感光素３０１号                                                ０．００５ｇ
センブリエキス                                                  ３．０ｍｌ
グリチルリチン酸ジカリウム                                        ０．１ｇ
α，α−トレハロース                                            ０．０１ｇ
海藻エキス                                                      ０．７５ｇ
グリセリン                                                            ２ｇ
実施例７の方法で調製した分岐澱粉誘導体                            ０．１ｇ
精製水を加えて撹拌・溶解して全量を１００ｍｌとする。
本品は、育毛効果、保湿性に優れ、ふけ、痒み、脱毛を抑制し、毛髪の滑りもよい使用感に優れた育毛剤である。
【産業上の利用可能性】
【０１５０】
本発明の分岐澱粉誘導体は、分岐構造が密で、耐老化性を有し、分岐澱粉の持つ物性を適宜変更することができるので、これを澱粉代替品として澱粉質含有成形物に添加したり、粉末化基剤として使用した成形物は、澱粉の老化に起因する様々な品質劣化が低減される。さらに、当該成形物は、飲食品、化粧品、医薬部外品、医薬品、飼料、餌料のみでなく、シート、繊維、発泡成形物、接着剤をはじめとする化成品、工業品、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、粉末品、雑貨、生分解性及び／又は徐崩性の成形物などとして利用することができるので、本発明の分岐澱粉誘導体を含有する成形物の各産業分野における意義は極めて高い。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【国際調査報告】
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