(57)【要約】  本発明は新規なCOX-1選択的阻害剤を提供することを目的とする。  本発明は下記一般式で表される新規化合物又はその塩に関する。本発明はまた、この化合物又はその塩を有効成分として含有する鎮痛剤、抗炎症剤、抗がん剤、血小板凝集抑制剤及びシクロオキシゲナーゼ1の選択的阻害剤に関する。【化１】2008029912.tif 000016
2008029912.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式:
【化１】
2008029912.tif 000015
（式中、X及びYの一方はCOであり、かつ他方はNHであり；W1、W2、W3及びW4はそれぞれ独立にCH又はNであり；Z1、Z2、Z3及びZ4はそれぞれ独立にCH又はNであり（ただしアミノ基が結合するZ2、Z3又はZ4はCHである）；アミノ基は3位、4位、5位又は6位に位置する）
で表される化合物又はその塩。
【請求項２】
XがCOであり、YがNHであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項３】
XがCOであり、YがNHであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が6位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項４】
XがCOであり、YがNHであり、Z1、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項５】
XがCOであり、YがNHであり、Z1、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が5位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項６】
XがNHであり、YがCOであり、Z1、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項７】
XがNHであり、YがCOであり、Z1、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が5位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項８】
XがCOであり、YがNHであり、Z1 及びZ4がNであり、Z2及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項９】
XがCOであり、YがNHであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1がNであり、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項１０】
XがCOであり、YがNHであり、Z1がNであり、Z1、Z3及びZ4がCHであり、W1及びW2がNであり、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項１１】
XがNHであり、YがCOであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項１２】
XがNHであり、YがCOであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1がNであり、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項１３】
XがNHであり、YがCOであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W2がNであり、W1、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項１４】
XがCOであり、YがNHであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が5位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項１５】
XがNHであり、YがCOであり、Z1、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W2がNであり、W1、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項１６】
請求項1〜15のいずれか1項記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する鎮痛剤。
【請求項１７】
請求項1〜15のいずれか1項記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する抗炎症剤。
【請求項１８】
請求項1〜15のいずれか1項記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する抗がん剤。
【請求項１９】
請求項1〜15のいずれか1項記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する血小板凝集抑制剤。
【請求項２０】
請求項1〜15のいずれか1項記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有するシクロオキシゲナーゼ1の選択的阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は鎮痛剤、抗炎症剤、抗がん剤、血小板凝集抑制剤及びシクロオキシゲナーゼ1（COX-1）選択的阻害剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
シクロオキシゲナーゼ１（COX-1）選択的阻害剤は、胃腸障害なく鎮痛作用や血管新生抑制作用がみられること、また低阻害活性ではあるもののCOX-1阻害作用を有するアスピリンに、血小板凝集抑制作用、大腸がんの死亡率低下作用がみられることが知られる。COX-1選択的阻害剤の研究は、COX-1阻害がインドメタシンなどの非ステロイド系抗炎症薬（NSAIDs）の胃腸障害の原因と考えられていたことから殆ど為されていなかった。しかしながら、この胃腸障害はCOXのサブタイプのうちCOX-1、COX-2の両方を阻害するときに見られるものであり、いずれかのみを阻害する場合においては胃腸障害が見られないことが報告されている。2003年頃、COX-2選択的阻害剤のいくつかに（ロフェコキシブなど）心臓発作に関係することが報告されて以来、COX-1阻害剤の研究は少しずつ再開されている。【０００３】
その鎮痛作用を期待したCOX-1選択的阻害剤としては、3,4-ジアリールイソオキサゾール-5-酢酸（商品名：モフェゾラック）が臨床応用されている（特許文献1参照）。
【特許文献１】特開昭56-59764号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は新規なCOX-1選択的阻害剤を提供することを目的とする。【０００５】
また、モフェゾラックは酸性化合物である。COX-1選択的阻害剤の有効成分が中性ないし塩基性の化合物であれば、当該化合物の代謝経路はモフェゾラックと異なるものと期待できることから、モフェゾラックなどの酸性COX-1阻害剤に対する薬物過敏症が見られた場合における代替薬として期待できる。そこで本発明は中性ないし塩基性の化合物を有効成分として含むCOX-1選択的阻害剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者らは、強力なシクロオキシゲナーゼ阻害剤で知られるインドメタシンのシクロオキシゲナーゼ１(COX-1)内における立体構造を模倣し、種々のベンズアニリド誘導体を合成し、シクロオキシゲナーゼ阻害活性を調べたところ、アミノ基を有する化合物群にCOX-1選択的な阻害活性を見出した。更にその化合物をピリジン環及びピリミジン環含有化合物と誘導体化したところ、水に対する溶解性が高く、かつマウスにおいて鎮痛作用を示す化合物を発見するに至った。【０００７】
本発明は以下の発明を包含する。【０００８】
(1) 式:
【化１】
2008029912.tif 000003
【０００９】
（式中、X及びYの一方はCOであり、かつ他方はNHであり；W1、W2、W3及びW4はそれぞれ独立にCH又はNであり；Z1、Z2、Z3及びZ4はそれぞれ独立にCH又はNであり（ただしアミノ基が結合するZ2、Z3又はZ4はCHである）；アミノ基は3位、4位、5位又は6位に位置する）
で表される化合物又はその塩。【００１０】
(2) XがCOであり、YがNHであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、(1) 記載の化合物 (本明細書では「化合物1」と称する) 又はその塩。【００１１】
(3) XがCOであり、YがNHであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、アミノ基が6位に位置する、(1)記載の化合物(本明細書では「化合物2」と称する)又はその塩。【００１２】
(4) XがCOであり、YがNHであり、Z1、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、(1)記載の化合物(本明細書では「化合物3」と称する)又はその塩。【００１３】
(5) XがCOであり、YがNHであり、Z1、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が5位に位置する、(1)記載の化合物(本明細書では「化合物4」と称する)又はその塩。【００１４】
(6) XがNHであり、YがCOであり、Z1、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、(1)記載の化合物(本明細書では「化合物5」と称する)又はその塩。【００１５】
(7) XがNHであり、YがCOであり、Z1、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が5位に位置する、(1)記載の化合物(本明細書では「化合物6」と称する)又はその塩。【００１６】
(8) XがCOであり、YがNHであり、Z1 及びZ4がNであり、Z2及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、(1) 記載の化合物 (本明細書では「化合物7」と称する) 又はその塩。【００１７】
(9) XがCOであり、YがNHであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1がNであり、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、(1) 記載の化合物 (本明細書では「化合物8」と称する) 又はその塩。【００１８】
(10) XがCOであり、YがNHであり、Z1がNであり、Z1、Z3及びZ4がCHであり、W1及びW2がNであり、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、(1) 記載の化合物 (本明細書では「化合物9」と称する) 又はその塩。【００１９】
(11) XがNHであり、YがCOであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、(1) 記載の化合物 (本明細書では「化合物10」と称する) 又はその塩。【００２０】
(12) XがNHであり、YがCOであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1がNであり、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、(1) 記載の化合物 (本明細書では「化合物11」と称する) 又はその塩。【００２１】
(13) XがNHであり、YがCOであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W2がNであり、W1、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物 (本明細書では「化合物12」と称する) 又はその塩。【００２２】
(14) XがCOであり、YがNHであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が5位に位置する、請求項1記載の化合物 (本明細書では「化合物13」と称する) 又はその塩。【００２３】
(15) XがNHであり、YがCOであり、Z1、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W2がNであり、W1、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物 (本明細書では「化合物14」と称する) 又はその塩。【００２４】
(16) (1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する鎮痛剤。【００２５】
(17) (1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する抗炎症剤。【００２６】
(18) (1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する抗がん剤。【００２７】
(19) (1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する血小板凝集抑制剤。【００２８】
(20) (1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有するシクロオキシゲナーゼ1の選択的阻害剤。【００２９】
(21) 鎮痛を必要とする対象に、有効量の(1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む、対象における痛みを鎮める方法。【００３０】
(22) 炎症性疾患を予防又は治療する必要のある対象に、有効量の(1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む、対象における炎症性疾患の予防又は治療方法。【００３１】
(23) がんを予防又は治療する必要のある対象に、有効量の(1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む、対象におけるがんの予防又は治療方法。【００３２】
(24) 血小板が存在するin vitro 又はin vivoの環境中に、有効量の(1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を添加することを含む、in vitro 又はin vivoにおいて血小板の凝集を抑制する方法。【００３３】
(25) シクロオキシゲナーゼ1が存在するin vitro 又はin vivoの環境中に、有効量の(1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を添加することを含む、in vitro 又はin vivoにおいてシクロオキシゲナーゼ1を選択的に阻害する方法。【００３４】
(26) シクロオキシゲナーゼ1の選択的阻害により改善され得る疾患又は症状の治療、予防又は改善を必要とする対象に、有効量の(1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む、対象における前記疾患又は症状の治療、予防又は改善方法。【００３５】
(27) 有効量の(1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する、鎮痛のための医薬組成物。【００３６】
(28) 有効量の(1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する、炎症性疾患の予防又は治療のための医薬組成物。【００３７】
(29) 有効量の(1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する、がんの予防又は治療のための医薬組成物。【００３８】
(30) 有効量の(1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する、in vitro 又はin vivoにおいて血小板の凝集を抑制するための組成物又は医薬組成物。【００３９】
(31) 有効量の(1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する、in vitro 又はin vivoにおいてシクロオキシゲナーゼ1を選択的に阻害するための組成物又は医薬組成物。【００４０】
(32) 有効量の(1)〜(15)のいずれかに記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を含有する、シクロオキシゲナーゼ1の選択的阻害により改善され得る疾患又は症状の治療、予防又は改善のための医薬組成物。
【発明の効果】
【００４１】
本発明の化合物は、化学的に安定な新規骨格からなるシクロオキシゲナーゼ１(COX-1)選択的阻害剤である。単純構造であるが故、工程数少なく、高収率で大量合成ができる。マウスを用いた試験により、高い鎮痛効果が示されている。また胃腸障害作用及び毒性がないことも確認された。既知のシクロオキシゲナーゼ1選択的阻害剤であるモフェゾラックと異なり、塩基性の化合物である。本発明の化合物は、研究用試薬としても有用である。【００４２】
本明細書は本願の優先権の基礎である日本国特許出願2006-242861号の明細書および／または図面に記載される内容を包含する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４３】
本発明の化合物は、上記一般式で表される化合物である限りいずれであってもよい。【００４４】
なかでも一般式中、W1、W2、W3及びW4の組み合わせは、それらが属する芳香族環がベンゼン環、ピリジン環又はピリミジン環である組み合わせであることが好ましく、Z1、Z2、Z3及びZ4の組み合わせは、それらが属する芳香族環がベンゼン環、ピリジン環又はピリミジン環である組み合わせであることが好ましい。【００４５】
本発明の化合物又は塩のなかでもより好ましいものは、上記の一般式中、X及びYの一方はCOであり、かつ他方はNHであり；W1及びW2はCH又はNであり（ただしW1及びW2が同時にNであることはなく）、W3及びW4がCHであり；Z1がCH又はNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり；アミノ基は4位、5位又は6位に位置する化合物又はその塩である。【００４６】
本発明の化合物又は塩のなかでも特に好ましいものは、上記の一般式中、X及びYの一方はCOであり、かつ他方はNHであり；W2がCH又はNであり、W1、W3及びW4がCHであり；Z1がCH又はNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり；アミノ基は4位、5位又は6位に位置する化合物又はその塩であり、アミノ基が4位に位置する化合物又はその塩が最も好ましい。【００４７】
本発明の化合物又は塩のなかでも特に好ましいものは、上記の一般式中、XがCOであり、YがNHであり；W1、W2、W3及びW4がCHであり；Z1がCH又はNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり；アミノ基は4位、5位又は6位に位置する化合物又はその塩である。【００４８】
本発明の化合物又は塩のなかでも特に好ましいものは、上記の一般式中、XがNHであり、YがCOであり；W1及びW2はCH又はNであり（ただしW1及びW2が同時にNであることはなく）、W3及びW4がCHであり；Z1がCH又はNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり；アミノ基は4位、5位又は6位に位置する化合物又はその塩である。【００４９】
本発明の化合物の好ましい具体例としては上記化合物1〜14が挙げられる。【００５０】
本発明の一般式で表される化合物に包含される全ての化合物がCOX-1選択的阻害作用を有することは本願明細書に開示された実験結果及び技術常識に基づき合理的に説明できる。その根拠は以下の通りである。(i) 本発明の化合物に含まれる芳香環（ベンゼン環、ピリジン環、ピリミジン環等）は立体構造的に類似しており、互換性があることが知られている。また本明細書記載の実施例においても芳香環の種類に関わらずCOX-1選択的阻害作用が確認されている。(ii) -X-Y-が-CO-NH-であっても-NH-CO-であっても、同様のCOX-1選択的阻害作用を有することが実施例において確認されている。(iii) アミノ基をオルト位、メタ位、パラ位のいずれの位置に有する化合物についてもCOX-1選択的阻害作用が確認されている。【００５１】
なおin vitro アッセイにおいて、各々の化合物におけるCOX-1阻害作用が確認されたことから、上記一般式で表される化合物はCOX-1に対する分子生物学試薬としても有用と考えられる。【００５２】
本発明の化合物は薬理学的に許容される塩の形態で使用することもできる。薬学的に許容される塩としては、たとえば塩酸塩、硫酸塩、臭素酸塩、ヨウ素酸塩、リン酸塩、硝酸塩、硫酸塩などの無機酸塩や、酢酸塩、クエン酸塩など有機酸塩が挙げられる。【００５３】
本発明に係る化合物又はその塩は、水との水和物や、低級アルコール等との溶媒和物の形態であってよい。本発明に係る化合物又はその塩の範囲内には、それらの水和物又は溶媒和物の形態も包含される。【００５４】
次に本発明の化合物の合成方法を、-X-Y-が-CO-NH-である場合と-X-Y-が-NH-CO-である場合とに分けて説明する。【００５５】
-X-Y-が-CO-NH-である化合物は以下のスキームにより合成することができる。下記スキーム中、W1、W2、W3、W4、Z1、Z2、Z3及びZ4の定義及びアミノ基の結合位置については上記の通りである。
【化２】
2008029912.tif 000004
【００５６】
以下に上記スキームに沿った合成の手順の一例を以下に示す。原料1及び2は市販の試薬を使用することができる。【００５７】
原料1にアンモニア水を室温撹拌しながら加え、3時間程度反応させる。次いで反応混合物を水中に移したのち、酢酸エチルで抽出する。酢酸エチル層を水及び飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥する。次いでろ過し、減圧下溶媒留去により粗生成物を得る。粗生成物を酢酸エチル/ヘキサンの混合溶媒で再結晶して中間体Aを得る。【００５８】
中間体Aに原料2、炭酸セシウム、4,5-ビス(ジフェニルフォスフィノ)-9,9-ジメチルキサンチン、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム、ジオキサンを加え、アルゴン置換した後、一晩加熱還流する。反応混合物をセライト濾過し、水中に移したのち、酢酸エチルで抽出する。酢酸エチル層を水及び飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥する。次いでろ過し、減圧下溶媒留去により、粗生成物を得る。次に、フラッシュカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル:ヘキサン=1:2)により分離し、目的フラクションを減圧下溶媒留去により処理して粗生成物を得る。これを酢酸エチル/ヘキサンの混合溶媒で再結晶し、中間体A’を得る。【００５９】
中間体A’を酢酸エチルに溶かしパラジウム炭素を触媒量加え、水素風船下で室温撹拌し一晩程度反応させる。反応混合物をセライト濾過し、減圧下溶媒留去により粗生成物を得る。これを酢酸エチル/ヘキサンの混合溶媒で再結晶し、目的化合物を得る。【００６０】
-X-Y-が-NH-CO-である化合物は以下のスキームにより合成することができる。下記スキーム中、W1、W2、W3、W4、Z1、Z2、Z3及びZ4の定義及びアミノ基の結合位置については上記の通りである。
【化３】
2008029912.tif 000005
【００６１】
以下に上記スキームに沿った合成の手順の一例を示す。原料3及び4は市販の試薬を使用することができる。【００６２】
原料3に室温下、撹拌しながらアンモニア水を加え、3時間程度反応させる。次いで反応混合物を水中に移したのち、酢酸エチルで抽出する。酢酸エチル層を水及び飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥する。次いでろ過し、減圧下溶媒留去により粗生成物を得る。粗生成物を酢酸エチル/ヘキサンの混合溶媒で再結晶して中間体Bを得る。【００６３】
中間体Bに原料4、炭酸セシウム、4,5-ビス(ジフェニルフォスフィノ)-9,9-ジメチルキサンチン、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム、ジオキサンを加え、アルゴン置換した後、一晩加熱還流する。反応混合物をセライト濾過し、水中に移したのち、酢酸エチルで抽出する。酢酸エチル層を水及び飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥する。次いでろ過し、減圧下溶媒留去により、粗生成物を得る。次に、フラッシュカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル:ヘキサン=1:2)により分離し、目的フラクションを減圧下溶媒留去により処理して粗生成物を得る。これを酢酸エチル/ヘキサンの混合溶媒で再結晶し、中間体B’を得る。【００６４】
中間体B’を酢酸エチルに溶かしパラジウム炭素を触媒量加え、水素風船下で室温撹拌し一晩程度反応させる。反応混合物をセライト濾過し、減圧下溶媒留去により粗生成物を得る。これを酢酸エチル/ヘキサンの混合溶媒で再結晶し、目的化合物を得る。【００６５】
本発明の化合物を対象、具体的にはヒト、マウス、ラット、ウシなどの哺乳動物、特にヒトに投与することにより、これらの哺乳動物にいてCOX-1を選択的に阻害することができる。従って本発明の化合物を対象に有効量投与することにより、COX-1選択的阻害により治療、予防又は改善され得る疾患又は症状を治療、予防又は改善することができる。このような疾患又は症状としては、がん（特に大腸がん）、疼痛、炎症、血栓発生に起因する心疾患、脳血栓などが挙げられるがこれらには限定されない。【００６６】
本発明の化合物は、薬学的に許容される担体又は添加物を共に含む医薬組成物の形態で哺乳動物に投与され得る。このような担体及び添加物の例としては、水、薬学的に許容される有機溶剤、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、カルボキシメチルスターチナトリウム、ペクチン、キサンタンガム、アラビアゴム、カゼイン、ゼラチン、寒天、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ワセリン、パラフィン、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ヒト血清アルブミン、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、薬学的に許容される界面活性剤などの他、リポゾームなどの人工細胞構造物などが挙げられる。使用される添加物は、医薬組成物の剤形に応じて上記の中から適宜又は組み合わせて選択される。【００６７】
本発明の化合物は、経口経路又は非経口経路のいずれでも投与することができる。【００６８】
本発明の化合物を経口的に投与する場合、錠剤、顆粒剤、散剤、丸剤などの固形製剤、あるいは液剤、シロップ剤などの液体製剤等として製剤化して使用することができる。特に顆粒剤及び散剤は、カプセル剤として単位投与剤形とすることができる。液体製剤の場合は、使用する際に再溶解させる乾燥生成物の形態であってもよい。【００６９】
固形製剤は製剤上一般に使用される結合剤、賦形剤、滑沢剤、崩壊剤、湿潤剤などの添加剤を含有することができる。また液体製剤は製剤上一般に使用される安定剤、緩衝剤、矯味剤、保存剤、芳香剤、着色剤などの添加剤を含有することができる。【００７０】
また非経口的に投与する場合は、注射剤、坐剤、皮膚外用剤などの剤形とすることができる。例えば注射剤は、本発明の化合物を溶液、懸濁液、乳液などに溶解又は懸濁して調製されるものであり、通常単位投与量アンプル又は多投与量容器の形態で提供される。また注射剤は、使用する際に適当な担体、例えば発熱物質不含の滅菌水に再溶解させる粉剤であってもよい。注射手法としては、例えば点滴静脈内注射、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射、皮下注射、皮内注射が挙げられる。これらの非経口投与剤形は、通常それらの組成物中に薬学上一般的に使用される乳化剤、懸濁剤などの添加剤を含有する。【００７１】
医薬組成物中における本発明の化合物の量、並びに患者に対する本発明の化合物の投与量は、対象とする疾患又は症状を治療、予防又は改善することができる量であれば特に限定されず、用途、剤形、投与経路などに応じて適宜決定することできる。投与量の一例を挙げれば、例えば、１日につき患者体重１ｋｇ当たり1〜50 mgである。【００７２】
本発明の化合物は、治療対象を特に限定しないCOX-1選択的阻害剤の有効成分としても用いることができる。本発明のCOX-1選択的阻害剤は、上記の医薬組成物と同様にして製剤化することが可能である。本発明のCOX-1選択的阻害剤は生物学的研究試薬としても利用できる。【００７３】
以下、本発明を実施例によりさらに詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【実施例】
【００７４】
[実施例１]
化合物1の合成
以下の合成スキームに従って、4-(トリフルオロメチル)-ベンゾイルクロライドから化合物C及びC’を経て化合物1を調製した。
【化４】
2008029912.tif 000006
【００７５】
化合物Cの合成
4-(トリフルオロメチル)-ベンゾイルクロライド(417 mg, 2 mmol)に、アンモニア水(2 mL)を室温撹拌しながら加え、3時間反応させた。TLCプレート (酢酸エチル:ヘキサン=1:2)で反応終了を確認後、水 (10 mL)にあけ、酢酸エチル (10 mL×3)で抽出した。酢酸エチル層を水 (10 mL×2)、飽和食塩水 (10 mL)で洗浄、硫酸マグネシウムにより乾燥した後、ろ過し、減圧下溶媒留去により粗生成物 (355 mg, 2.0 mmol) を得た。これを酢酸エチル/ヘキサンの混合溶媒で再結晶し、化合物Cを得た（白色針状結晶、359 mg）。収率95%。融点186.5-187.5℃。1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7.63, 8.19 (共にbr s, 共に1H, NH又はOH), 8.06 (d, 2H, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.84 (d, 2H, J = 8.0 Hz, Ar-H)
化合物C’の合成
化合物C (352 mg, 1.9 mmol)に、2-クロロ-5-ニトロピリジン (295 mg, 1.9 mmol)、炭酸セシウム(668 ml, 2.1 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルフォスフィノ)-9,9-ジメチルキサンチン(214 mg, 0.4 mmol), トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム (82 mg, 0.1 mmol), ジオキサン (15 ml)を加え、アルゴン置換した後、一晩加熱還流した。TLCプレート(酢酸エチル:ヘキサン=1:2)で反応終了を確認後、セライト濾過し、水 (70 mL)にあけ、酢酸エチル (70 mL×3)で抽出した。酢酸エチル層を水 (70 mL×2)、飽和食塩水 (70 mL)で洗浄、硫酸マグネシウムにより乾燥した後、ろ過し、減圧下溶媒留去により、粗生成物 (852 mg, 2.7 mmol) を得た。次に、フラッシュカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル:ヘキサン=1:2)により分離、目的フラクションを減圧下溶媒留去により粗生成物 (495 mg)を得た。これを酢酸エチル/ヘキサンの混合溶媒で再結晶し、化合物C’を得た（白色針状結晶、530 mg）。収率92%。融点115-116℃。1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 11.82 (s, 1H, NH), 8.69 (dd, 1H, J = 9.0, 3.0 Hz, Ar-H), 8.45 (dd, 1H, J = 9.0, 1.0 Hz, Ar-H), 8.22 (d, 2H, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.91 (m, 3H, Ar-H)
目的化合物1の合成
化合物C’ (500 mg, 1.6 mmol)を酢酸エチル(4 mL)に溶かしパラジウム炭素 (1杯)を加え、水素風船下で室温撹拌し一晩反応させた。TLC (酢酸エチル:ヘキサン=1:2)で反応終了を確認後、セライト濾過し、減圧下溶媒留去により粗生成物 (413 mg, 1.5 mmol) を得た。これを酢酸エチル/ヘキサンの混合溶媒で再結晶し、目的化合物1を得た（白色板状結晶、314 mg）。収率70%。融点140.5-141.5℃。1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10.62 (s, 1H, NH), 8.16 (d, 2H, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.84 (d, 2H, J = 9.0 Hz, Ar-H), 7.75 (dd, 2H, J = 3.0, 1.0 Hz, Ar-H), 7.03 (dd, 1H, J = 9.0, 3.0 Hz, Ar-H), 5.22 (s, 2H, NH2)
化合物2の合成
化合物2は、2-クロロ-5-ニトロピリジンに代えて2-クロロ-3-ニトロピリジンを使用した以外は化合物1と同一の手順で調整した。【００７６】
収率78%。融点207-208℃。１H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10.57 (s, 1H, NH), 8.20 (d, 2H, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.89 (d, 2H, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.72 (m, 1H, Ar-H), 7.16 (dd, 1H, J = 8.0, 1.5 Hz, Ar-H), 7.08 (m, 1H, Ar-H), 5.10 (s, 2H, NH2) 
化合物3の合成
以下の合成スキームに従って、4-ニトロアニリンから化合物Dを経て化合物3を調製した。
【化５】
2008029912.tif 000007
【００７７】
化合物Dの合成
4-ニトロアニリン(276 mg, 2 mmol)に、ドライジクロロメタン(20 ml)、トリエチルアミン(0.3 ml 2 mmol)、4-(トリフルオロメチル)-ベンゾイルクロライド(0.3 ml, 2 mmol)を順次室温撹拌しながら加え、1.5時間反応させた。TLC (酢酸エチル:ヘキサン=1:4)で反応終了を確認後、水(50 mL)にあけ、ジクロロメタン (50 mL×3)で抽出した。ジクロロメタン層を水(50 mL×2)で洗浄、硫酸マグネシウムにより乾燥した後、ろ過し、減圧下溶媒留去により、粗生成物 (700 mg, 2 mmol) を得た。次に、フラッシュカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル:ヘキサン=1:6)により分離、目的フラクションを減圧下溶媒留去により、粗生成物(410 mg)を得た。これを酢酸エチル/ヘキサンの混合溶媒で再結晶し、目的化合物Dを得た（白色針状結晶、404 mg）。収率65%。融点196-198℃。１H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 11.10 (s, 1H, NH), 8.29 (d, 2H, J = 9.5 Hz, Ar-H), 8.18 (d, 2H, J = 8.0 Hz, Ar-H), 8.07 (d, 2H, J = 9.5 Hz, Ar-H), 7.95 (d, 2H, J = 8.0 Hz, Ar-H)
目的化合物3の合成
化合物D (345 mg, 1.1 mmol)を酢酸エチル(20 mL)に溶かしパラジウム炭素 (1杯)を加え、水素風船下で室温撹拌し2時間反応させた。TLC (酢酸エチル:ヘキサン=1:2)で反応終了を確認後、セライト濾過し、減圧下溶媒留去により粗生成物 (303 mg, 1.0 mmol) を得た。これを酢酸エチル/ヘキサンの混合溶媒で再結晶し、目的化合物3を得た（白色粉状結晶、279 mg）。収率89%。融点223-224℃。【００７８】
１H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10.09 (s, 1H, NH), 8.11 (d, 2H, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.87 (d, 2H, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.38 (s, 2H, J = 9.0 Hz, Ar-H), 6.55 (d, 2H, J = 9.0 Hz, Ar-H), 4.96 (s, 2H, NH2)
化合物4の合成
化合物4は、4-ニトロアニリンに代えて3-ニトロアニリンを使用した以外は化合物3と同一の手順で調整した。【００７９】
収率74%。融点159-162℃。１H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10.16 (s, 1H, NH), 8.10 (d, 2H, J = 8.5 Hz, Ar-H), 7.89 (d, 2H, J = 8.5 Hz, Ar-H), 7.09 (dd, 1H, J = 2.2, 1.8 Hz, Ar-H), 6.97 (t, 1H, J = 8.0 Hz, Ar-H), 6.86 (d, 1H, J = 8.0 Hz, Ar-H), 6.33 (ddd, 1H, J = 8.0, 2.2, 1.8 Hz, Ar-H), 5.12 (s, 2H, NH2) 
化合物5の合成
化合物5は、4-ニトロアニリンに代えて4-アミノベンゾトリフルオロライドを、４-(トリフルオロメチル)-ベンゾイルクロライドに代えて4-ニトロベンゾイルクロライドを使用した以外は化合物3と同一の手順で調整した。【００８０】
収率75%。融点232-233℃。１H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10.10 (s, 1H, NH), 7.98 (d, 2H, J = 8.5 Hz, Ar-H), 7.73 (dd, 2H, J = 7.0, 2.0 Hz, Ar-H), 7.66 (d, 2H, J = 8.5 Hz, Ar-H), 6.63 (dd, 2H, J = 7.0, 2.0 Hz, Ar-H), 5.80 (s, 2H, NH2)
化合物6の合成
化合物6は、4-ニトロアニリンに代えて4-アミノベンゾトリフルオロライドを、４-(トリフルオロメチル)-ベンゾイルクロライドに代えて3-ニトロベンゾイルクロライドを使用した以外は化合物3と同一の手順で調整した。【００８１】
収率89%。融点213-216℃。１H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10.20 (s, 1H, NH), 8.00 (d, 2H, J = 8.5 Hz, Ar-H), 7.70 (d, 2H, J = 8.5 Hz, Ar-H), 7.17 (t, 1H, J = 7.5 Hz, Ar-H), 7.05 (m, 2H, Ar-H), 6.77 (m, 1H, Ar-H), 5.40 (s, 2H, NH2)
化合物10の合成
以下の合成スキームに従って、2-ブロモ-5-ニトロピリジンから化合物E及びE’を経て化合物10を調整した。
【化６】
2008029912.tif 000008
【００８２】
化合物Eの合成
シアン化銅(I) (662 mg, 7.34 mmol)およびシアン化ナトリウム(I) (242 mg, 4.93 mmol)をN,N-ジメチルホルムアミド (7.5 mL)に溶解し、150℃で25分間撹拌した。この溶液に100℃で完全に溶解させた2-ブロモ-5-ニトロピリジン (113 mg, 0.700 mmol)のN,N-ジメチルホルムアミド (2.5 mL)溶液を加え、150℃で100分間加熱撹拌した。TLC (酢酸エチル:ヘキサン=1:3)により反応の終了を確認後、1 Mのリン酸一カリウム水溶液 (10 mL)で反応を停止し、酢酸エチル (50 mL×3)で抽出した。酢酸エチル層を水 (100 mL)、飽和食塩水 (100 mL)で洗浄した。硫酸マグネシウムにより乾燥した後、ろ過し、減圧下溶媒留去した。フラッシュカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル:ヘキサン=1:7 →1:3)により分離し、黄色オイル状目的化合物E (624 mg, 4.19 mmol)を得た。収率85%。1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 9.54 (dd, 1H, J = 2.5, 0.7 Hz, Py-H), 8.68 (dd, 1H, J = 8.4, 2.5 Hz, Py-H), 7.98 (dd, 1H, J = 8.4, 0.7 Hz, Py-H)
化合物E’の合成
化合物E (247 mg, 1.66 mmol)に、10 N HCl (3 mL)を加え、アルゴン置換した後、19 時間加熱還流した。TLC (酢酸エチル:ヘキサン=1:3)により反応の終了を確認後、減圧下溶媒留去により、粗生成物 (351 mg)を得た。粗生成物 (100 mg, 0.595 mmol)に、4-アミノベンゾトリフルオライド (113 mg, 0.700 mmol)、1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 (134 mg, 0.700 mmol)、1-ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物 (95 mg, 0.700 mmol)を加え、N,N-ジメチルホルムアミド (3 mL)で溶解させた後、1日室温で撹拌した。TLCプレート (酢酸エチル:ヘキサン=1:1)で反応終了を確認後、水 (20 mL)により反応を停止後、酢酸エチル (20 mL×2)にて抽出した。酢酸エチル層を水 (20 mL)、飽和食塩水 (20 mL)で洗浄し、硫酸マグネシウムにより乾燥した後、ろ過し、減圧下溶媒留去した。フラッシュカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル:ヘキサン=1:5)により分離し、白色粉末状目的化合物E’ (39 mg, 0.125 mmol)を得た。収率21%。1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 10.04 (s, 1H, NH), 9.46 (dd, 1H, J = 2.5, 0.7 Hz, Py-H), 8.74 (dd, 1H, J = 8.6, 2.5 Hz, Py-H), 8.54 (dd, 1H, J = 8.6, 0.7 Hz, Py-H), 7.92 (d, 2H, J = 8.4 Hz, Ar-H), 7.68 (d, 2H, J = 8.4 Hz, Ar-H)
目的化合物10の合成
化合物E’ (6 mg, 0.019 mmol)を酢酸エチル (0.5 mL)に溶解し、パラジウム炭素 ( 1杯)を加え、水素雰囲気下、室温で2時間撹拌した。TLC (酢酸エチル:ヘキサン=1:2)にて反応の終了を確認後、セライトろ過し、減圧下溶媒留去により粗生成物 (6 mg)を得た。これをフラッシュカラムクロマトグラフィー (酢酸エチル:ヘキサン=1:1 →3:1)により分離し、白色粉末状目的化合物10 (3 mg, 0.012 mmol)を得た。収率64%, 融点155-156℃。1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 9.94 (s, 1H, NH), 8.09 (d, 1H, J = 8.5 Hz, Py-H), 8.01 (dd, 1H, J = 2.8, 0.7 Hz, Py-H), 7.88 (d, 2H, J = 8.5 Hz, Ar-H), 7.62 (d, 2H, J = 8.5 Hz, Ar-H), 7.09 (dd, 1H, J = 8.5, 2.8 Hz, Py-H), 4.13 (s, 2H, NH2)
化合物E’’の合成
化合物E’’は4-アミノベンゾトリフルオリドに代えて5-アミノ-2-トリフルオロメチルピリジンを使用した以外は化合物E’と同一の手順で調整した。【００８３】
収率40%。1H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ: 10.25 (s, 1H, NH), 9.48 (dd, 1H, J = 2.4, 0.7 Hz, Py-H), 8.93 (d, 1H, J = 2.4 Hz, Py-H), 8.76 (dd, 1H, J = 8.5, 2.4 Hz, Py-H), 8.63 (dd, 1H, J = 8.2, 2.4 Hz, Py-H), 8.55 (dd, 1H, J = 8.5, 0.7 Hz, Py-H), 7.77 (d, 1H, J = 8.2, Py-H)
化合物11の合成
化合物11はE’に代えてE’’を使用した以外は化合物10と同一の手順で調整した。【００８４】
収率67%。融点212.5-213℃。1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 10.84 (s, 1H, NH), 9.21 (d, 1H, J = 2.0 Hz, Py-H), 8.60 (dd, 1H, J = 8.4, 2.0 Hz, Py-H), 8.04 (d, 1H, J = 2.6 Hz, Py-H), 7.87 (dd, 2H, J = 8.4, 1.5 Hz, Py-H), 7.05 (dd, 1H, J = 8.4, 2.6 Hz, Py-H), 6.23 (s, 2H, NH2)
化合物E’’’の合成
化合物E’’’は4-アミノベンゾトリフルオリドに代えて2-アミノ-5-トリフルオロメチルピリジンを使用した以外は化合物E’と同一の手順で調整した。【００８５】
収率4%。1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ: 10.55 (br s, 1H, NH), 9.48 (dd, 1H, J = 2.4, 0.6 Hz, Py-H), 8.73 (dd, 1H, J = 8.6, 2.4 Hz, Py-H), 8.66 (dd, 1H, J = 1.5, 0.9 Hz, Py-H), 8.54 (m, 2H, Py-H), 8.03 (dd, 1H, J = 8.6, 2.4 Hz, Py-H)
化合物12の合成
化合物12はE’に代えてE’’’を使用した以外は化合物10と同一の手順で調整した。【００８６】
収率52%。融点214.5-216.5℃。1H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ: 10.51 (s, 1H, NH), 8.59 (m, 1H, Py-H), 8.54 (d, 1H, J = 8.9 Hz, Py-H), 8.08 (d, 1H, J = 8.6 Hz, Py-H), 8.04 (d, 2H, J = 2.7 Hz, Py-H), 7.95 (d, 1H, J = 8.9 Hz, Py-H), 7.08 (dd, 1H, J = 8.2, 2.7 Hz, Py-H), 4.16 (s, 2H, NH2)
化合物13の合成
以下の合成スキームに従って、4-(トリフルオロメチル)-ベンゾイルクロライドから化合物F及びF’を経て化合物13を調整した。
【化７】
2008029912.tif 000009
【００８７】
化合物Fの合成
4-(トリフルオロメチル)-ベンゾイルクロライド (417 mg, 2 mmol)に、アンモニア水 (2 mL)を加え、室温下3時間反応させた。TLC (酢酸エチル:ヘキサン=1:2)にて反応の終了を確認後、水 (10 mL)により反応を停止後、酢酸エチル (10 mL×3)で抽出した。酢酸エチル層を水 (10 mL×2)、飽和食塩水 (10 mL)で洗浄、硫酸マグネシウムにより乾燥した後、ろ過し、減圧下溶媒留去により粗生成物 (355 mg, 2.0 mmol)を得た。これを酢酸エチル/ヘキサンの混合溶媒で再結晶し、化合物Fを得た (白色針状結晶、359 mg)。収率95%。融点186.5-187.5℃。1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7.63, 8.19 (共にbr s, 共に1H, NH又はOH), 8.06 (d, 2H, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.84 (d, 2H, J = 8.0 Hz, Ar-H)
化合物F’の合成
化合物F (392 mg, 2.07 mmol)に、2-クロロ-4-ニトロピリジン (328 mg, 2.07 mmol)、炭酸セシウム (237 mg, 0.41 mmol)、4,5-ビス(ジフェニルフォスフィノ)-9,9-ジメチルキサンチン(92 mg, 0.10 mmol)、トリス(ジベンジリデンアセトン)ジパラジウム(743 mg, 2.28 mmol)、ジオキサン(15 mL)を加え、アルゴン雰囲気下、一晩加熱還流した。TLC (酢酸エチル:ヘキサン=1:2)により反応の終了を確認後、セライトろ過し、水 (150 mL)に加え反応を停止した後、酢酸エチル (70 mL×3)で抽出した。酢酸エチル層を水 (70 mL×2)、飽和食塩水 (70 mL)で洗浄、硫酸マグネシウムにより乾燥した後、ろ過し、減圧下溶媒留去により粗生成物 (1.024 g) を得た。これをフラッシュカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル:ヘキサン= 1:3)により分離、白色粒状目的化合物F’を得た（310 mg, 1.00 mmol）。収率48%。融点207.0-208.0℃。１H-NMR (DMSO-d6) δ: 11.71 (s, 1H, NH), 8.94 (dd, 1H, J = 2.0, 1.0 Hz, Ar-H), 8.77 (dd, 1H, J = 5.5, 1.0 Hz, Ar-H), 8.23 (d, 2H, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.92 (dd, 3H, J = 5.5, 2.0 Hz, Ar-H)
目的化合物13の合成
化合物F’ (310 mg, 1.00 mmol)を酢酸エチル(10 mL)に溶解しパラジウム炭素 ( 1杯)を加え、水素雰囲気下、室温にて3時間反応させた。TLC (酢酸エチル:ヘキサン=1:2)で反応終了を確認した後、セライト濾過し、減圧下溶媒留去により粗生成物 (255 mg) を得た。これを酢酸エチル/ヘキサンの混合溶媒で再結晶し、目的化合物13を得た（白色粒状結晶、191 mg）。収率91%。融点221.0-223.0℃。１H-NMR (DMSO-d6) δ: 10.53 (s, 1H, NH), 8.15 (d, 2H, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.85 (d, 2H, J = 8.0 Hz, Ar-H), 7.80 (d, 1H, J = 6.0 Hz, Py-H), 7.43 (d, 1H, J = 2.0 Hz, Py-H), 6.30 (dd, 1H, J = 6.0, 2.0 Hz, Py-H), 6.17 (s, 2H, NH2)
目的化合物14の合成
化合物14は、4-(トリフルオロメチル)-ベンゾイルクロライドに代えて4-ニトロベンゾイルクロライドを、2-クロロ-4-ニトロピリジンに代えて2-クロロ-5-(トリフルオロメチル)-ピリジンを使用した以外は化合物13と同一の手順で調整した。収率94%。融点167.5-169.0℃。1H NMR (300MHz, DMSO-d6) d： 10.68 (s, 1H, NH), 8.71 (s, 1H, Py-H), 8.38 (d, 1H, J = 8.8Hz, Py-H), 8.17 (d, 1H, J = 8.8 Hz, Py-H), 7.81 (d, 2H, J = 8.7 Hz, Ar-H), 6.58 (d, 2H, J = 8.7 Hz, Ar-H), 5.91 (s, 1H, NH2)
[実施例２]
活性評価
In vitro試験(1)
Cayman社製シクロオキシゲナーゼ阻害剤スクリーニングアッセイキット(760111)を用いて、化合物1〜6, 10, 11, 14を対象に100μMにおけるシクロオキシゲナーゼ1 (COX-1)およびシクロオキシゲナーゼ2 (COX-2)に対する阻害率(%)を算出した。【００８８】
その結果、中でも化合物1はCOX-1に対する阻害率が98%と高活性であった。
【表１】
2008029912.tif 000010
【００８９】
In vitro試験(2)
表1で特にCOX-1選択的阻害率が高かった化合物1と14を対象に、同じくCayman社製シクロオキシゲナーゼ阻害剤スクリーニングアッセイキット(760111)を用いて、シクロオキシゲナーゼ1 (COX-1)およびシクロオキシゲナーゼ2 (COX-2)に対する阻害活性値IC50を算出した。化合物1の各COXに対するIC50は、1 μM (COX-1)、>100 μM (COX-2)であった。化合物14の各COXに対するIC50は、30 μM (COX-1)、>100 μM (COX-2)であった。なおアスピリンの各COXに対するIC50は、100 μM (COX-1)、>100 μM (COX-2)であった。
【表２】
2008029912.tif 000011
【００９０】
In vivo試験
1) 酢酸ライジング法
鎮痛試験には、一般的な試験法であるマウスを用いた酢酸ライジング試験を用いた。マウス一群10-11匹に対し、経口投与により化合物を30 mg/kg投与し、その30分後に痛み刺激を与える物質として0.7%酢酸溶液を腹腔内投与した（0.1mL/10g）。酢酸溶液を投与後、10分後から10分間に渡りマウス特有のライジング行動の回数をカウントした。なおこれは、マウスに酢酸溶液のような刺激物質を投与すると、独特な苦悶症状であるライジング行動が発現することを利用した試験である。その結果、ライジング回数は、化合物1を非投与の場合、平均22回であったのに対し、化合物1を30 mg/kg投与の場合、平均5回であった。さらに、化合物1を10 mg/kg投与の場合では、平均10回であった。同様に、化合物14を30 mg/kg投与の場合、平均6回であった。すなわち、化合物1、14の投与によりライジング回数は有意に抑制されたことから、化合物1、14の鎮痛効果が示された。
【表３】
2008029912.tif 000012
【００９１】
2) 抗炎症作用（カラゲニン浮腫試験）
抗炎症試験法には、ラットを用いたカラゲニン浮腫試験を用いた。ラット一群5-8匹に対し30 mg/kgの化合物を経口投与し、その1時間後に浮腫を発生させる物質である1%カラゲニン溶液を後肢足蹠に皮下投与した(0.1mL/匹)。その後、1、2、3時間後に後肢足蹠の浮腫の厚さを測定した。その結果、カラゲニン投与3時間後の浮腫に対する抑制率は、アスピリンにおいて16％であったのに対し、化合物1を投与した場合には31%の抑制率が認められた。
【表４】
2008029912.tif 000013
【００９２】
3) 胃潰瘍形成
ラット一群3-5匹に対し30 mg/kgの化合物1を経口投与し、5時間後にエーテルを用いて死亡させ胃を摘出した。摘出した胃を開いた後、実体顕微鏡を用いて胃全体の撮影を行った後、胃潰瘍の長さを算出した。その結果、アスピリンが有意な胃潰瘍形成を認めたのに対し、化合物1、14を投与した場合には胃潰瘍形成が認められなかった。
【表５】
2008029912.tif 000014
【００９３】
4) 毒性試験
マウス一群3匹に対し、1 g/kgの化合物1を腹腔内投与し、10日間観察した。【００９４】
化合物を非投与の場合のマウス群と比較すると、化合物1を投与しても死亡しなかったとともに、急激な体重減少、毛並みの変化、尾部の壊死などは見られなかった。【００９５】
マウス一群5匹に対し、300 mg/kgの化合物14を腹腔内投与し、14日間観察した。化合物を非投与の場合のマウス群と比較すると、化合物14を投与しても死亡しなかったとともに、急激な体重減少、毛並みの変化、尾部の壊死などは見られなかった。【００９６】
本明細書で引用した全ての刊行物、特許および特許出願をそのまま参考として本明細書にとり入れるものとする。
【手続補正書】
【提出日】平成21年3月11日(2009.3.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式:
【化１】
2008029912.tif 000017
（式中、X及びYの一方はCOであり、かつ他方はNHであり；W1、W2、W3及びW4はそれぞれ独立にCH又はNであり；Z1、Z2、Z3及びZ4はそれぞれ独立にCH又はNであり（ただしアミノ基が結合するZ2、Z3又はZ4はCHである）；アミノ基は3位、4位、5位又は6位に位置する）
で表される化合物又はその塩。
【請求項２】
XがCOであり、YがNHであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項３】
XがCOであり、YがNHであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が6位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項４】
XがCOであり、YがNHであり、Z1、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項５】
XがCOであり、YがNHであり、Z1、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が5位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項６】
XがNHであり、YがCOであり、Z1、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項７】
XがNHであり、YがCOであり、Z1、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が5位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項８】
XがCOであり、YがNHであり、Z1 及びZ4がNであり、Z2及びZ3がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項９】
XがCOであり、YがNHであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1がNであり、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項１０】
XがCOであり、YがNHであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1及びW2がNであり、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項１１】
XがNHであり、YがCOであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項１２】
XがNHであり、YがCOであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1がNであり、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項１３】
XがNHであり、YがCOであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W2がNであり、W1、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項１４】
XがCOであり、YがNHであり、Z1がNであり、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W1、W2、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が5位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項１５】
XがNHであり、YがCOであり、Z1、Z2、Z3及びZ4がCHであり、W2がNであり、W1、W3及びW4がCHであり、かつアミノ基が4位に位置する、請求項1記載の化合物又はその塩。
【請求項１６】
請求項1〜15のいずれか1項記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する鎮痛剤。
【請求項１７】
請求項1〜15のいずれか1項記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する抗炎症剤。
【請求項１８】
請求項1〜15のいずれか1項記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する抗がん剤。
【請求項１９】
請求項1〜15のいずれか1項記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する血小板凝集抑制剤。
【請求項２０】
請求項1〜15のいずれか1項記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有するシクロオキシゲナーゼ1の選択的阻害剤。
【国際調査報告】
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