(57)【要約】  本発明は、耐老化性を有する新規澱粉質を含有する、保存安定性の向上した成形物を提供することを課題とするものである。顕著な老化耐性を有する、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉を含有する成形物を提供することにより上記課題を解決する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉を少なくとも０．１質量％含有すると共に、化成品、工業品、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、雑貨、粉末品、化粧品、医薬部外品、医薬品、飼料、餌料或いは飲食品に配合することのできる成分を１種以上含有することを特徴とする成形物。
【請求項２】
分岐澱粉を、結合剤、接着剤、成形剤、整型剤、増量剤、安定剤、及び／又は、粉末化基剤として使用していることを特徴とする請求項１に記載の成形物。
【請求項３】
化成品、工業品、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、粉末品、医薬部外品、化粧品、医薬品、飼料、餌料或いは飲食品に配合することのできる成分が、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉以外の高分子材料又は可塑剤であることを特徴とする請求項１又は２に記載の成形物。
【請求項４】
生分解性、及び／又は、水に対して徐崩性を有していることを特徴とする請求項１乃至３の何れかに記載の成形物。
【請求項５】
化成品、工業品、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、粉末品、化粧品、医薬部外品、医薬品、飼料、餌料及び飲食品の何れかであることを特徴とする請求項１乃至５に記載の成形物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、分岐澱粉を含有する成形物、詳細には、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉を含有する成形物に関する。
【背景技術】
【０００２】
澱粉は、主として高等植物の種子や地下茎の細胞内に貯蔵されている高分子グルカンであり、一般に、アミロースとアミロペクチンの混合物である。アミロースは、グルコースがα−１，４結合で直鎖状に結合した構造を有するα−１，４グルカンである。一方、アミロペクチンは、α−１，４グルカンの直鎖のところどころで、通常、グルコース重合度６以上のα−１，４グルカンがα−１，６結合で分岐した構造を有している。澱粉は、その水分散液を加熱すると膨潤して粘稠な糊化澱粉となるものの、冷却して放置すると老化してゲル化を起こし易い性質を持っている。澱粉は、古くより糊化されて食用に供され、また、優れた加工性と安価であること、貯蔵性があることから、食品の主原料として利用され、さらに、増粘剤、保水剤、コロイド安定剤などとしても、食品の物性改良と品質保持の目的で広く利用されている。また、澱粉は液化されて、グルコース、異性化糖、マルトオリゴ糖、水飴などの原料として工業的に利用されている。しかしながら、糊化澱粉や液化澱粉は保存中に老化し、ゲル化を起こし易く、保水性が失われ硬くなって、加工適正が低下するなどの欠点がある。【０００３】
このような状況下、澱粉の構造を化学的に修飾し、その糊化澱粉に耐老化性を賦与する試みが多く行なわれており、具体的には、エステル化澱粉、エーテル化澱粉、酸化澱粉などの種々の修飾澱粉が挙げられる。しかしながら、修飾澱粉は、特殊な官能基等を付与することにより本来のグルコース構造が失われ、長期的使用において安全性が懸念されることから、好んで利用される状況にない。【０００４】
また、澱粉を酵素的に改変し、老化抑制を図ろうとする提案も行われている。特開平８−１３４１０４号公報には、澱粉液化液に、澱粉のα−１，４結合を切断し、転移反応によりα−１，６結合を合成する枝作り酵素（ブランチング酵素；ＥＣ  ２．４．１．１８）、４−α−グルカノトランスフェラーゼ（Ｄ−酵素；ＥＣ  ２．４．１．２５）又はＣＧＴａｓｅ（ＥＣ  ２．４．１．１９）を作用させることにより形成した、水溶性の大環状構造グルカンを配合した組成物が提案されている。しかしながら、この大環状構造グルカンは、環状構造の形成と共に分子量が大幅に低下し、粘度が低下することから、原料液化澱粉の持つ物性が失われるという問題がある。また、特開２００１−２９４６０１号公報には、ニューロスポラ・クラッサ（Ｎｅｕｒｏｓｐｏｒａ  ｃｒａｓｓａ）由来の枝作り酵素を利用して、糊化澱粉からほとんど分子量を低下させることなく、原料の澱粉と比較して分岐構造が密で、グルコース重合度４乃至７を中心とする分岐構造を有する高度分岐澱粉を配合した組成物が提案されている。しかしながら、ニューロスポラ・クラッサは特殊なカビであり、飲食品を製造する上で安全性が確認されていないことから工業的製造、産業上の使用には至っていない。さらに、特開２００２−７８４９７号公報には大麦由来の枝作り酵素（ＳＢＥ−ＩＩ）とホスホリラーゼを利用し、グルコース−１−リン酸とマルトオリゴ糖を反応基質として、グルコース重合度６又は７を中心とする分岐構造を有する分岐澱粉を形成させる方法が提案されている。しかしながら、大麦由来の枝作り酵素（ＳＢＥ−ＩＩ）やホスホリラーゼ、基質であるグルコース−１−リン酸を工業的製造に利用するのは極めて困難であり、当該分岐澱粉を配合した成形物の実用化はなされていない。このような状況下、澱粉質をほとんど低分子化することなく、澱粉質を配合した場合の成形物のテクスチャー、食感、機能などの特性を保持しながら、老化性などの物性が改善された、保存安定性に優れる成形物の提供が望まれている。
【発明の開示】
【０００５】
本発明は、耐老化性を有する新規澱粉質を含有する、保存安定性の向上した成形物を提供することを課題とするものである。
【０００６】
本発明者等は、上記課題を解決するために、各種糖転移酵素の利用に着目し、鋭意研究を重ねる過程において、本発明と同じ出願人による特開２００５−９５１４８号公報（特願２００４−１７４８８０号明細書）に開示した、サイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝の構造を有する環状マルトシルマルトース（以下、本明細書では「環状マルトシルマルトース」と略記する。）を、α−１，４グルカンから生成する環状マルトシルマルトース生成酵素を高濃度の液化澱粉又は澱粉部分分解物に作用させたところ、意外にも、環状マルトシルマルトースの生成は僅かであり、分子間及び／又は分子内の６−α−マルトシル転移作用により、酵素的に改変された澱粉が生成することを見出した。この改変澱粉の構造及び物性を調べたところ、環状マルトシルマルトース生成酵素は、原料の澱粉質に対して分子量の低下や還元力の増加をほとんど起こすことなく、液化澱粉又は澱粉部分分解物から６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する新規分岐澱粉を生成することを見出した。さらに、この６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉が、顕著な耐老化性を有することを見出した（特願２００５−２９８２５３号明細書）。そして、当該分岐澱粉を含有せしめた成形物が、通常の澱粉を添加した場合に比して、そのテクスチャー、食感、機能などを、長期間安定に保持できることを見出し、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち、本発明は、顕著な老化耐性を有する、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉を含有せしめた成形物を提供することにより上記課題を解決するものである。
【０００８】
本発明によれば、耐老化性を有する新規分岐澱粉を使用することにより、化成品・工業品をはじめとする様々な成形物の、澱粉の老化によりもたらされる品質低下を抑制し、その保存安定性を向上させることができる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）に環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させて得られた各種分岐澱粉のゲル濾過クロマトグラフィーにおける溶出パターンを示す図である。
【図２】液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）に環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させて得られた各種分岐澱粉のプルラナーゼ消化物中におけるグルコース重合度７以下のマルトオリゴ糖の含量を重合度別に比較した図である。
【図３】液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）に環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させて得られた各種分岐澱粉のヨウ素−澱粉複合体の吸収スペクトルを示す図である。
【図４】原料液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）と本発明で使用する分岐澱粉の構造を模式的に示した図である。
【図５】本発明で使用する分岐澱粉及び原料液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）を濃度２５％の溶液とし、ガラス製試験管に分注して温度５℃で１０日間冷蔵保存したものの写真である。
【符号の説明】
【００１０】
ａ：対照の液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）
ｂ：分岐澱粉１（環状マルトシルマルトース生成酵素作用量０．０１２５単位）
ｃ：分岐澱粉２（環状マルトシルマルトース生成酵素作用量０．０２５単位）
ｄ：分岐澱粉３（環状マルトシルマルトース生成酵素作用量０．０５単位）
ｅ：分岐澱粉４（環状マルトシルマルトース生成酵素作用量０．１単位）
図４における
Ａ：液化澱粉の模式図
Ｂ：本発明で使用する分岐澱粉の模式図
１：グルコースがα−１，４結合で連なった鎖状構造（アミロース構造）
２：α−１，６結合による鎖状構造の分岐部位
３：還元末端グルコース
４：６−α−マルトシル分岐構造
５：６−α−マルトテトラオシル分岐構造
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明で使用する６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉（以下、本明細書では、単に「分岐澱粉」という場合がある。）とは、分子内に、マルトース単位及び／又はマルトテトラオース単位でα−１，６結合により分岐した構造を有する澱粉質全般を意味し、澱粉質におけるα−１，４グルカン鎖の内部のみならず、その非還元末端グルコースの６位にマルトース及び／又はマルトテトラオースがα−１，６結合した構造を有するものをも包含する。本発明で使用する分岐澱粉の分子量は特に限定されないものの、１．０×１０４ダルトン以上のものが好ましい。本発明の６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉は、α−１，６結合を特異的に加水分解する澱粉枝切酵素の１種であるプルラナーゼで消化すると固形物当たりマルトースを１．８質量％以上及び／又はマルトテトラオースを０．７質量％（以下、特に断らない限り本明細書では、質量％を「％」と表記する。）以上生成することを特徴とする。通常の澱粉の分岐構造の鎖長（グルコース重合度）は、一般に９乃至１０にピークを有していることから、本発明で使用する分岐澱粉のそれは、極端に短く、特定の鎖長を有する分岐構造を有しており、原料として用いる既存の澱粉と明瞭に区別することができる。また、この分岐澱粉は、通常の澱粉と比較して分岐の箇所が増加し、直鎖部分が短いものとなっているにもかかわらず、分子量はほとんど低下していない。【００１２】
また、本発明で使用する６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉において、既存の澱粉に比べα−１，６結合による分岐した箇所が増加していることは、公知のメチル化分析を行い、部分メチル化物中に１位及び６位水酸基がグルコシド結合に関与しているグルコースの存在を示す、２，３，４−トリメチル−１，５，６−トリアセチルグルシトール（以下、「２，３，４−トリメチル化物」と略記する。）の含量が、原料澱粉のそれよりも増加しており、通常、部分メチル化物の固形物当たり０．４％以上を示すことから判定することができる。また、β−アミラーゼによる分解試験（β−アミロリシス）を行い、本発明で使用する分岐澱粉のβ−アミラーゼ分解限度が、原料澱粉のそれよりも小さいことから判定することができる。【００１３】
さらに、本発明で使用する６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉は、具体的には実験の項で後述するものの、当該分岐澱粉を濃度２５％の水溶液とし、これを５℃で１０日間保持した場合においても、澱粉の老化による白濁を実質的に示さず、原料液化澱粉に比べ、著しい耐老化性を示すという特徴を有している。【００１４】
本発明で使用する６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉を製造する方法としては、例えば、液化澱粉を原料とし、これに作用して澱粉分子内に６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を生成する酵素を用いる方法が好適である。このような酵素としては、液化澱粉に作用し、非還元末端に存在するマルトース構造を認識し、このマルトースを澱粉分子の他の非還元末端グルコース残基若しくは澱粉分子内部のグルコース残基の６位水酸基にα−マルトシル転移するか、又は、このマルトースを澱粉分子の他の非還元末端グルコース残基の４位水酸基にα−マルトシル転移する反応を触媒するかぎり、いずれの酵素も用いることができる。例えば、本出願人と同一の出願人により特開２００５−９５１４８号公報に開示された環状マルトシルマルトース生成酵素を好適に用いることができる。【００１５】
本発明で使用する分岐澱粉の製造に使用できる環状マルトシルマルトース生成酵素の環状マルトシルマルトース生成機構は以下のようなものである。
１）基質としてグルコース重合度が３以上のα−１，４グルカンに作用し、その非還元性末端のマルトシル残基を他のα−１，４グルカン分子の非還元性末端グルコース残基の６位水酸基に転移する分子間の６−α−マルトシル転移を触媒することにより、非還元末端に６−α−マルトシル基を有するグルコース重合度が２増加した６−α−マルトシル−マルトオリゴ糖と、グルコース重合度が２減じたマルトオリゴ糖とを生成する。
２）さらに、６−α−マルトシル−マルトオリゴ糖に作用し、分子内α−マルトシル転移することにより環状化し、サイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝の構造を有する環状マルトシルマルトースと、グルコース重合度が４減じたマルトオリゴ糖を生成する。
３）本酵素は、僅かながら分子間の４−α−マルトシル転移も触媒し、マルトオリゴ糖から、グルコース重合度が２増加したマルトオリゴ糖と、グルコース重合度が２減じたマルトオリゴ糖とを僅かに生成する。
上記の反応を触媒する酵素はその給源、形態、粗酵素又は精製酵素の区別なく本発明で使用する分岐澱粉の製造に利用できる環状マルトシルマルトース生成酵素に包含される。【００１６】
本発明に用いる環状マルトシルマルトース生成酵素はその給源によって制限されないものの、好ましい給源として、微生物が挙げられ、例えば、アルスロバクター・グロビホルミス（Ａｒｔｈｒｏｂａｃｔｅｒ  ｇｌｏｂｉｆｏｒｍｉｓ）  Ｍ６（独立行政法人産業技術総合研究所  特許微生物寄託センター、寄託番号  ＦＥＲＭ  ＢＰ−８４４８）が産生する環状マルトシルマルトース生成酵素が好適に用いられる。環状マルトシルマルトース生成酵素産生能を有する微生物には、上記菌はもとより、その変異株、更には、環状マルトシルマルトース生成酵素産生能を有する組換え体微生物を含む他の微生物、及び、それらの変異株なども包含される。【００１７】
本発明で使用する分岐澱粉の製造に用いる環状マルトシルマルトース生成酵素は、当該分岐澱粉の調製に使用できるかぎり精製酵素であっても粗酵素であっても良く、また、遊離の酵素であっても、固定化された酵素であっても使用することができる。固定化酵素の場合、反応の形式は、バッチ式、半連続式及び連続式のいずれでもよい。固定化方法としては、担体結合法、（例えば、共有結合法、イオン結合法、あるいは物理的吸着法）、架橋法あるいは包括法（格子型あるいはマイクロカプセル型）など、公知の方法を使用することができる。【００１８】
本発明で使用する分岐澱粉を製造するための原料となる澱粉は、例えば、コーンスターチ、ワキシーコーンスターチ、米澱粉、餅米澱粉などの地上澱粉、馬鈴薯澱粉、甘藷澱粉、タピオカ澱粉、くず澱粉などの地下澱粉などを工業的に有利に用いることができる。さらに、澱粉から得られたアミロース、アミロペクチン、澱粉部分分解物などを原料とすることもできる。澱粉からこの分岐澱粉を製造するに際しては、上記のような原料澱粉を、通常、糊化及び／又は液化して用いるのが好適である。澱粉の糊化・液化の方法自体は、公知の方法を採用することができる。【００１９】
例えば、液化澱粉へ環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させる方法は、次のような条件下で好ましく実施できる。まず、液化澱粉の濃度は、通常、１０％乃至４５％が好ましい。液化澱粉の濃度が１０％未満であると環状マルトシルマルトース生成酵素が分子内マルトシル転移反応を触媒し易くなり、分岐澱粉よりも環状マルトシルマルトースを生成し、分岐澱粉の収率が低下する。一方、４５％を超えると澱粉の水への溶解が困難となるため好ましくない。【００２０】
本発明で使用する分岐澱粉を製造するに際し、環状マルトシルマルトース生成酵素は、液化澱粉固形物１グラム当たり、０．０１単位乃至１０単位、好ましくは０．０２単位乃至１単位となるように使用される。ここでいう酵素１単位とは、後述する環状マルトシルマルトース生成酵素の活性測定法の条件下において、１分間に１μｍｏｌの環状マルトシルマルトースを生成する酵素量を１単位としたものである。環状マルトシルマルトース生成酵素の使用量が０．０１単位未満であると反応が不十分で酵素添加の意味がなく、一方、１０単位を超えると効果が頭打ちとなる上、製造コストが増大するため、いずれも好ましくない。【００２１】
酵素反応における反応温度は、反応が進行する温度、即ち６０℃付近までで行えばよい。好ましくは３０℃乃至５０℃付近の温度を用いる。反応ｐＨは、通常、５乃至９の範囲、好ましくは５乃至７の範囲に調整するのがよい。酵素の使用量と反応時間とは密接に関係しており、目的とする酵素反応の進行により適宜選択すればよい。【００２２】
反応により得られた反応物を、そのまま分岐澱粉製品として成形物に配合することができる。必要に応じて、反応により得られた生成物を遠心分離、濾過等により不溶物を除去し、水溶性画分を濃縮することで、目的とする分岐澱粉の溶液を得ることもできる。得られた分岐澱粉の溶液は、そのまま利用できるものの、保存に有利で、かつ用途によっては利用しやすいように、乾燥し、粉末として使用することも随意である。乾燥は、通常、凍結乾燥、或いは噴霧乾燥やドラム乾燥などの方法が利用できる。乾燥物は、必要により粉砕することが望ましい。【００２３】
環状マルトシルマルトース生成酵素を液化澱粉に作用させて得られる反応物は、通常、分岐澱粉とともに少量の環状マルトシルマルトースを含有しているものの、この反応物はそのまま分岐澱粉として成形物の調製に用いることができる。また、必要に応じて、このようなオリゴ糖を除去し、精製した分岐澱粉として成形物の調製に用いることも有利に実施できる。精製の方法としては、ゲル濾過クロマトグラフィーなど常法の多糖類の精製方法を適宜、必要に応じて選択すればよい。【００２４】
このようにして得られる分岐澱粉は、その溶液を低温下で放置しても通常の澱粉と比較して、老化による白濁が観察されず、顕著な耐老化性を有するという特徴を有している。一般に、澱粉は冷水に不溶であるが、本発明で使用する分岐澱粉は、少なくとも２０％までは冷水に対して溶解する。また、この分岐澱粉は、原料澱粉液化液に比べて、その水溶液が低粘度のものであり、取扱い性に優れている。【００２５】
本発明で使用する分岐澱粉は、澱粉を含有する成形物における通常の澱粉の代替品として用いると、それ自体が耐老化性を有するため、澱粉の老化が抑制された成形物が得られる。従って、本発明の分岐澱粉を含有する成形物は、澱粉の老化に起因する保水性、保形性、冷凍耐性、消化性などの低下が抑制されたものである。また、この分岐澱粉を、呈味改良剤、品質改良剤、離水防止剤、安定剤、変色防止剤、賦形剤、包接剤、結合剤、接着剤、成形剤、整型剤、増粘剤、安定化剤などとして配合した、本発明の成形物は、適度の粘度、照り、保湿性、耐老化性、冷凍耐性、乾燥耐性、耐熱性、保形成などが賦与されるので、その保存安定性が向上する。【００２６】
本発明でいう成形物とは、飲食物、嗜好物、飼料、餌料、ペットフード、化粧品、医薬部外品、医薬品、農薬、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、生体適合性医用材料、雑貨などをいう。【００２７】
本発明の分岐澱粉を含有する成形物は、とりわけ、生分解性、及び／又は、熱水を含む水に対する徐崩性が要求される成形物としても好適である。具体的には、例えば、紙、不織布、織物、編物、糸、スリット繊維をはじめとする繊維、ロープ、チューブ、綱、発泡成形容器、ハンバーガー、アイスクリーム、ラーメン、ジュース、コーヒー、ビール、牛乳などの食品用容器やアイスクリームのコーンカップなどの容器、食器、トレイ、ディッシュ、カップ、カートン、ゴミ袋容器、包装箱、農園芸ポット、人工木材、発泡シート、フィルム、カプセル、バラ状緩衝材、接着用成形物、農業用ハウスシートや建設・土木用シートなどのシート類、農業用フィルムをはじめとする各種包装用フィルム類など、さらには、塗料などのコーティング用成形物、セメント、コンクリート、プラスチックをはじめとする化成品、工業品などに有利に利用できる。また、これら成形物の形態に特に制限はなく、溶液、半固形、固状、ペースト状、発泡体でもよく、或いは、フィルム状、シート状、チューブ状、カプセル状、短棒状、板状、チップなどに成形したものでもよい。【００２８】
これらの成形物について、さらに、具体的に説明すると、その用途としては、従来プラスチック発泡体が用いられた分野での使用が可能である。特に、低発泡体は電気製品のキャビネットなどに、自動車のハンドル、バンパー、内装品などに、包装用資材に適する。その他、家庭用内装品、ホテルの歯ブラシ、航空機内食用のスプーン、フォーク、食器及びトレイ、玩具類、エアーガンの玉、文具、事務用品など、その軽量性と安全性を要求される用途が含まれる。【００２９】
また、高発泡体としては、特に現在廃棄処分に問題がある発泡スチロールの代替材料として有効である。例えば、食品トレイ、インスタント麺類の容器などの食器包装容器類、水産物・農産物用箱、包装用箱などの輸送用箱類、電気製品・精密機器の緩衝材などの緩衝材、建築用・道路用の防音・断熱材が好適である。【００３０】
さらに、本発明の分岐澱粉を含有する成形物としては上記以外にも、帽子、ポンチョ、ウィンドブレーカーなどの衣類、ゴミ袋、土産袋などの包装資材、スキーのポールなどの運動具等を挙げることができる。又、テレフォンカード、オレンジカード、パチンコカード、図書カードなどの各種プリペイドカード、各種クレジットカード、図書館利用カード、各種会員カードなど、大量に消費されたり、期限があるため定期的に廃棄されるカード類とてして利用することも随意である。【００３１】
なお、これらの成形物の耐水性、耐薬品性、耐熱性、機械的強度などを更に高めたい時には、本発明の成形物の表面を各種材料で処理することも随意である。例えば、アルミニウムなどの金属類、非プラスチック類、より高融点のポリ乳酸などの他の生分解性プラスチック類で、コーティング、ラミネート、ディピィング、又は蒸着等の処理が有効である。又、金属類や非生分解性プラスチック類で表面を処理する場合は、使用後の生分解性が低下することを防止するため、耐水性等を必要とする部分にのみ表面処理したり、非処理部分を部分的に残すなどの手段を講じることも随意である。【００３２】
また、本発明の分岐澱粉を含有する成形物としては、杭、パイル類、ゴルフティ、農業用フィルム、苗ポット、農園芸用ポット等の土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品などには、予めチッソ、燐、カリ等の公知の肥料、有効菌類、及び／又は、農薬を混練しておくと、生分解後に肥料分としてさらに有効となるので好ましい。またその添加割合は０％〜８０％、好ましくは５％〜３０％の割合である。【００３３】
以上述べたような分岐澱粉を各種成形物に含有させる方法としては、その製品が完成するまでの工程で含有せしめればよく、例えば、混和、混捏、溶解、浸漬、浸透、散布、塗布、被覆、噴霧、注入、固化など公知の方法が適宜選ばれる。その量は、通常０．１％以上、望ましくは１％以上、さらに望ましくは２％以上含有せしめるのが好適であり、その目的に応じて、適宜選択することができる。【００３４】
これら本発明の分岐澱粉を含有する成形物の製造方法をさらに具体的に説明すると、例えば、通常のプラスチック成形機を利用することにより、フィルム、シート、チューブ、カプセルなどの所望の形態に成形することができる。その成形方法は特に限定されず、例えば、押出成形、射出成形、加圧成形、型物成形、注型成形、ブロー成形、スタンピング成形、カッティング成形、熱成形及びフィルム成形法など適宜の方法を用いることができる。得られる成形物は生分解性成形物として使用することができる。【００３５】
本発明の分岐澱粉を含有する成形物には、必要に応じて、高分子材料として、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉以外の水溶性多糖類、例えば、澱粉、澱粉部分分解物、アミロース、アミロペクチンなどの澱粉質、エステル化、エーテル化、酸化及び／又は架橋化された澱粉誘導体、プルラン、アルギン酸ナトリウム、寒天、ペクチン、キサンタンガム、デキストラン、カラギーナン、ネイティブジェランガム、ガラクトマンナン、コンドロイチン硫酸などのムコ多糖類、ポリ乳酸やその誘導体、ポリアルギン酸などを併用することもできる。また、成形物の可塑性を調節するために可塑剤やゲル化剤を添加することも有利に実施できる。可塑剤としては、水や各種ポリオール類、例えば、グリセリン、ポリビニルアルコールなどの多価アルコール、エリスリトール、キシリトール、ソルビトール、マルチトールなどの糖アルコール、α，α−トレハロース、サイクロデキストリン、国際公開ＷＯ  ０２／１０３６１号明細書などに開示されたサイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝の構造を有する環状四糖（環状ニゲロシルニゲロース：Ｃｙｃｌｏｎｉｇｅｒｏｓｙｌｎｉｇｅｌｏｓｅ）、環状マルトシルマルトース、国際特許願ＰＣＴ／ＪＰ２００５／１７６４２号明細書に開示されたサイクロ｛→６）−［α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→４）］ｎ−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝（ｎは４又は５を意味する）の構造を有する環状五糖や環状六糖やこれらの環状オリゴ糖の糖質誘導体などの非還元性糖質、尿素、大豆油やひまし油などの天然油脂、有機酸のアルキルエステルなどが挙げられる。さらには、フェノール樹脂、尿素樹脂、メラミン樹脂、エポキシ樹脂などの熱硬化性樹脂、天然ゴム、シェラック樹脂、ポリエチレン樹脂、ポリスチレン樹脂、ポリ塩化ビニール樹脂、ポリプロピレン樹脂、アクリル系樹脂、ポリエステル樹脂をはじめとする熱可塑性高分子材料の粉末或いはペレットと混合して、これに、乳化剤、熱安定化剤、品質改良剤、保存剤などを加えて、１５０℃乃至２５０℃に加温し、加圧成形して、生分解性の澱粉系プラスチック成形物とすることも有利に実施できる。【００３６】
また、この分岐澱粉含有成形物には、上記の成分に加えて、無機及び有機の他の成分を適宜含有させることができる。無機成分としては、タルク、二酸化チタン、炭酸カルシウム、砂、クレー、石灰石、珪藻土、雲母、ガラス、石英、アルミナ、シリカ、ガラス、カオリン、セラミックスなどが挙げられる。有機成分としてはキチン、キトサン、コラーゲン、フィブロイン、ケラチン、ロジン、ダンマー、コーパル、澱粉、セルロース、木材粉、繊維、パルプ、リグニン、蛋白質及びその分解物、ロウ、油脂、脂質類、糖脂肪酸エステル類、エタノールなどのアルコール類、分岐澱粉以外の糖類、環状糖類、糖アルコール類、着色料、顔料、保存料、着香料、矯味剤、結合剤、鮮度保持剤、界面活性剤、ビルダー、コビルダー、酸化防止剤、漂白剤、増白剤、分散剤、消泡剤、水軟化剤、紫外線反射剤、紫外線吸収剤などが挙げられる。さらには、栄養成分、生理活性物質、動・植物エキス、酵素、除草剤、カビ防止剤、殺菌剤、抗生剤、防虫剤、忌避剤などの生物活性物質を配合することも随意である。【００３７】
以下、実験により本発明で使用する分岐澱粉についてさらに具体的に説明する。【００３８】
＜実験１：環状マルトシルマルトース生成酵素の調製＞
実験に先立ち、アルスロバクター・グロビホルミス  Ｍ６（ＦＥＲＭ  ＢＰ−８４４８）を培養し、培養上清中の環状マルトシルマルトース生成酵素を精製して酵素標品を調製した。【００３９】
＜実験１−１：アルスロバクター・グロビホルミス  Ｍ６の培養＞
澱粉部分分解物（商品名『パインデックス＃４』、松谷化学工業株式会社製造）１．５ｗ／ｖ（質量／容量）％、酵母抽出物（商品名『ポリペプトン』、日本製薬株式会社製造）０．５ｗ／ｖ％、酵母抽出物（商品名『酵母エキスＳ』、日本製薬株式会社製造）０．１ｗ／ｖ％、リン酸二カリウム０．１ｗ／ｖ％、リン酸一ナトリウム・２水和物０．０６ｗ／ｖ％、硫酸マグネシウム・７水和物０．０５ｗ／ｖ％、炭酸カルシウム０．３ｗ／ｖ％、及び水からなる液体培地を、５００ｍｌ容三角フラスコ２本に１００ｍｌずつ入れ、オートクレーブで１２１℃、２０分間滅菌し、冷却して、アルスロバクター・グロビホルミス  Ｍ６（ＦＥＲＭ  ＢＰ−８４４８）を接種し、２７℃、２３０ｒｐｍで４８時間回転振盪培養したものを種培養とした。容量３０Ｌのファーメンターに種培養と同じ組成の液体培地を約２０Ｌ入れて、加熱滅菌、冷却して温度２７℃とした後、種培養液約２００ｍｌを接種し、温度２７℃、ｐＨ５．５乃至８．０に保ちつつ、９６時間通気攪拌培養した。培養後、ファーメンターから培養液を抜き出し、遠心分離（８，０００ｒｐｍ、２０分間）して菌体を除き、培養上清約１８Ｌを得た。【００４０】
環状マルトシルマルトース生成酵素の酵素活性は、以下の方法で測定した。可溶性澱粉を濃度２ｗ／ｖ％となるよう２ｍＭ塩化カルシウムを含む５０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６．０）に溶解させ基質液とし、その基質液０．５ｍｌに酵素液０．５ｍｌを加えて、４０℃で３０分間酵素反応し、その反応液を１０分間、約１００℃で加熱して反応を停止させた後、残存可溶性澱粉や夾雑オリゴ糖を分解するためにα−グルコシダーゼ（『トランスグルコシダーゼＬ「アマノ」』、天野エンザイム株式会社製造）を固形物１グラム当り４０００単位とグルコアミラーゼ（『グルコチーム』、ナガセ生化学工業株式会社販売）を固形物１グラム当り２５０単位添加して５０℃、１時間処理し、その処理液中の環状マルトシルマルトース量を、高速液体クロマトグラフィー（以下、「ＨＰＬＣ」と略記する）法で定量する。環状マルトシルマルトース生成酵素の活性１単位は、上記の条件下で１分間に１μモルの環状マルトシルマルトースを生成する酵素量と定義する。なお、ＨＰＬＣは、カラムに『Ｓｈｏｄｅｘ  ＳＵＧＡＲ  ＫＳ−８０１』（昭和電工株式会社製造）を用い、溶離液に水を用いて、カラム温度６０℃、流速０．５ｍｌ／分の条件で行い、検出は示差屈折計ＲＩ−８０１２（東ソー株式会社製造）を用いて行った。【００４１】
＜実験１−２：環状マルトシルマルトース生成酵素の精製＞
培養上清のうち、約９．２Ｌに、最終濃度６０％飽和となるように硫安を添加し、４℃、２４時間放置することにより塩析した。生成した塩析沈殿物を遠心分離（１１，０００ｒｐｍ、３０分間）にて回収し、これを１０ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）に溶解後、同緩衝液に対して透析し、粗酵素液として約２４０ｍｌを得た。この粗酵素液を東ソー株式会社製『ＤＥＡＥ−トヨパール（Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ）  ６５０Ｓ』ゲルを用いた陰イオン交換クロマトグラフィー（ゲル容量１００ｍｌ）に供した。環状マルトシルマルトース生成酵素活性は、１０ｍＭトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）で平衡化した『ＤＥＡＥ−トヨパール（Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ）  ６５０Ｓ』ゲルに吸着し、食塩濃度０Ｍから０．４Ｍのリニアグラジエントで溶出させたところ、食塩濃度約０．２２Ｍ付近に溶出した。この活性画分を回収し、終濃度１Ｍとなるように硫安を添加して４℃、２４時間放置した後、遠心分離して不溶物を除き、東ソー株式会社製『フェニル−トヨパール（Ｐｈｅｎｙｌ−Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ）  ６５０Ｍ』ゲルを用いた疎水クロマトグラフィー（ゲル容量１０ｍｌ）に供した。環状マルトシルマルトース生成酵素活性は、１Ｍ硫安を含む２０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ６．０）で平衡化した『フェニル−トヨパール（Ｐｈｅｎｙｌ−Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ）  ６５０Ｍ』ゲルに吸着し、硫安濃度１Ｍから０Ｍのリニアグラジエントで溶出させたところ、硫安濃度約０．１Ｍ付近に溶出した。この精製の各ステップにおける環状マルトシルマルトース生成酵素活性、環状マルトシルマルトース生成酵素比活性及び収率を表１に示す。【００４２】
【表１】
2008044586.tif 000002
【００４３】
疎水クロマトグラフィー後の環状マルトシルマルトース生成酵素精製標品を５乃至２０ｗ／ｖ％濃度勾配ポリアクリルアミドゲル電気泳動に供し、酵素標品の純度を検定したところ、蛋白バンドは単一であり、純度の高い標品であった。【００４４】
＜実験２：分岐澱粉の調製＞
液化澱粉に環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させた際に生成する反応生成物の構造と物性を調べるため、以下の実験を行った。【００４５】
＜実験２−１：酵素反応＞
市販のワキシーコーンスターチ（三和澱粉工業株式会社販売）２，５００ｇを１ｍＭの塩化カルシウムを含む水道水２５Ｌに懸濁し、２Ｎ塩酸にてｐＨ６．０に調整して濃度１０％の澱粉乳を調製した。この澱粉乳にα−アミラーゼ（商品名『ネオスピターゼＰＫ２』、ナガセ生化学工業株式会社製）を２０，０００単位添加し、３０分間攪拌した後、連続液化装置に流速１Ｌ／分で通液した。澱粉乳を連続液化装置にて１００℃で２５分間、次いで、１４０℃で５分間加熱することにより液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）を調製した。得られた液化液は、活性炭により脱色し、珪藻土濾過した後、減圧下で濃度２５％まで濃縮した。この濃縮液化液を５等分し、内、４つの液化液に実験１で得た環状マルトシルマルトース生成酵素精製標品を、ワキシーコーンスターチ液化液固形物１グラム当たり０．０１２５、０．０２５、０．０５又は０．１単位の割合で加え、５０℃、ｐＨ６．０で２４時間作用させた。１００℃で１０分加熱することにより酵素反応を停止した後、それぞれの反応液中の環状マルトシルマルトース含量をＨＰＬＣにて測定した。なお、環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させていない原料液化澱粉を対照とした。【００４６】
なお、ＨＰＬＣは、『ＭＣＩｇｅｌ  ＣＫ０４ＳＳ』（三菱化学株式会社製造）カラムを２本直列に連結して用い、溶離液に水を用いて、カラム温度８０℃、流速０．４ｍｌ／分の条件で行い、検出は示差屈折計ＲＩ−８０１２（東ソー株式会社製造）を用いて行った。【００４７】
【表２】
2008044586.tif 000003
【００４８】
表２から明らかなように、各反応液において環状マルトシルマルトース生成酵素の作用量が多いほど環状マルトシルマルトース含量が増加する傾向が認められた。しかしながら、その含量は、今回検討した最大の酵素作用量、ワキシーコーンスターチ液化液の固形分１グラム当たり０．１単位を作用させた場合においても約５％と僅かであった。【００４９】
＜実験２−２：分岐澱粉の精製＞
実験２−１で得た各種反応液をそれぞれ濾過し、常法に従って、活性炭で脱色し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂により脱塩して精製後、エバポレーターで固形分濃度２０％まで濃縮した。続いて、副生成物として混在する環状マルトシルマルトースを除去するため、強酸性カチオン交換樹脂（『アンバーライトＣＲ−１３１０』、Ｎａ型、オルガノ株式会社製造）を用いたカラム分画を行なった。樹脂を内径５．４ｃｍのジャケット付きステンレス製カラム４本に充填し、直列につなぎ樹脂層全長２４０ｃｍとした。カラム内温度６０℃に維持しつつ、ワキシーコーンスターチ液化液を樹脂に対して５ｖ／ｖ％加え、これに６０℃の温水をＳＶ０．１３で流して分画し、溶出液の糖組成をＨＰＬＣ法でモニターし、環状マルトシルマルトースを含まない高分子画分を採取した。得られた高分子画分は、２５％まで濃縮した後、真空乾燥し、いずれも固形物当たりの収率９０％以上で各分岐澱粉粉末を得た。これらの分岐澱粉は実験２−１と同じＨＰＬＣ分析に供し、環状マルトシルマルトースを含まないことを確認した。【００５０】
＜実験３：分岐澱粉の構造分析＞
実験２の方法で得た分岐澱粉につき、以下の試験を行い、分岐澱粉の構造を調べた。【００５１】
＜実験３−１：分岐澱粉の分子量分布＞
実験２の方法で得た分岐澱粉の分子量分布を、ゲル濾過分析により検討した。ゲル濾過分析は、『ＴＳＫ−ＧＥＬ  ＡＬＰＨＡ−Ｍ』カラム（東ソー株式会社製）２本を直列に連結し、溶離液に１０ｍＭ酸緩衝液（ｐＨ７．０）を用いて、カラム温度４０℃、流速０．３ｍｌ／分の条件で行い、検出は示差屈折計『ＲＩ−８０１２』（東ソー株式会社製）を用いて行った。分岐澱粉は、１０ｍＭ酸緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解しメンブラン濾過したものをゲル濾過分析の試料とした。対照として、環状マルトシルマルトース生成酵素処理前のワキシーコーンスターチ液化液（液化澱粉）を同様に分析した。なお、試料中のグルカンの分子量は、分子量測定用プルラン標準品（株式会社林原生物化学研究所販売）を同様にゲル濾過分析して作成した分子量の検量線に基づき算出した。ゲル濾過クロマトグラフィーにおける溶出パターンを図１に示した。なお、以下の図中、ａは対照（ワキシーコーンスターチ液化液）であり、ｂ、ｃ、ｄ及びｅは、それぞれ液化液の固形分当たり環状マルトシルマルトース生成酵素を０．０１２５単位、０．０２５単位、０．０５単位及び０．１単位作用させて得られた分岐澱粉である。以下、液化液の固形物当たり環状マルトシルマルトース生成酵素を０．０１２５単位、０．０２５単位、０．０５単位及び０．１単位作用させて得られた分岐澱粉を、それぞれ分岐澱粉１、２、３及び４と呼称する。また、分岐澱粉１、２、３及び４のゲル濾過分析の溶出パターンは、４種類の何れの酵素単位で処理した場合も、ほぼ同一のパターンを示したので、図１には、対照（図１中のａ）及び最大の酵素作用量（０．１単位）で処理した分岐澱粉４（図１中のｅ）の溶出パターンのみを示す。【００５２】
図１から明らかなように、対照（ａ）のワキシーコーンスターチ液化液は、ゲル濾過クロマトグラフィーにおいて、１つのピークを示した。このピークに含まれるグルカンの重量平均分子量は検量線のデータから１．１×１０６ダルトンと算出された。ワキシーコーンスターチ液化液に環状マルトシルマルトース生成酵素を、ワキシーコーンスターチ液化液の固形分１グラム当たり０．１単位作用させて得られた分岐澱粉４（図１中のｅ）のゲル濾過クロマトグラフィーにおける溶出パターンは、対照（ａ）のそれと大差なく、環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させても、その分子量分布に大きな変化が生じていないことが判明した。【００５３】
＜実験３−２：分岐澱粉の加水分解率＞
実験２−２で得た上記４種の分岐澱粉１、２、３及び４、又は、対照のワキシーコーンスターチ液化液の還元力を測定した。各試料の全糖量をアンスロン−硫酸法により、また、還元糖量を改良パーク・ジョンソン法（檜作ら、『カーボハイドレート  リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ）』、第９４巻、２０５頁乃至２１３頁（１９８１年）を参照）により定量し、全糖量中に占める還元糖量の割合（％）を意味する加水分解率を、次式  加水分解率（％）＝（還元糖量／全糖量）×１００  にて算出した。結果を表３に示す。【００５４】
【表３】
2008044586.tif 000004
【００５５】
表３から明らかなように、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用量がワキシーコーンスターチ液化液固形物１グラム当たり０．１単位と最も多い分岐澱粉４においても、対照のワキシーコーンスターチ液化液と比較して加水分解率の増加は僅か約０．１％であり、環状マルトシルマルトース生成酵素の反応によって起こる加水分解は、ほとんど無視できる程度であった。【００５６】
＜実験３−３：分岐澱粉のメチル化分析＞
実験２−２で得た上記４種の分岐澱粉１、２、３及び４、又は、対照のワキシーコーンスターチ液化液について、構成糖であるグルコースの結合様式を調べるため、常法に従いメチル化した後、酸により加水分解し、続いて還元、アセチル化し、得られた部分メチル−アセチルグルシトール（以下、「部分メチル化物」と略称することがある。）をガスクロマトグラフィー法（以下、「ＧＬＣ」と略称する。）にて分析し、部分メチル化物の組成を調べた。結果を表４に示す。【００５７】
【表４】
2008044586.tif 000005
【００５８】
表４の結果から明らかなように、対照のワキシーコーンスターチ液化液では、２，３，４−トリメチル化物が全く検出されないことから、他のグルコースと１位及び６位で結合しているグルコース残基が存在しないと考えられる。一方、環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させて得られた分岐澱粉では、２，３，４−トリメチル化物が検出され、酵素の作用量が多くなるにつれて、その割合が増加した。この結果は、酵素の作用量が多くなるにつれて、グルコース残基の６位に他のグルコースが１位で結合した構造、すなわち、分岐構造が増加することを物語っている。加えて、２，３−ジメチル化物の割合も増加傾向にあることから、１位、４位及び６位で他のグルコースと結合しているグルコース残基も僅かに増加していると考えられた。このことは、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用による６−α−マルトシル転移が、基質澱粉の非還元末端グルコース残基の６位だけでなく、澱粉を構成するグルコース鎖の内部に位置するグルコース残基の６位に対しても起こることを示唆している。【００５９】
＜実験３−４：分岐澱粉のプルラナーゼ消化における生成物＞
実験２−２の方法で得た上記４種の分岐澱粉１、２、３及び４、又は、対照のワキシーコーンスターチ液化液について分岐構造を調べる目的で、澱粉のα−１，６結合を特異的に加水分解するプルラナーゼ（ＥＣ  ３．２．１．４１）を作用させ、それぞれのプルラナーゼ消化物の糖組成を調べた。【００６０】
実験２−２の方法で得た上記４種の分岐澱粉１、２、３及び４、又は、対照のワキシーコーンスターチ液化液を、終濃度１ｗ／ｖ％になるよう脱イオン水に溶解し、酢酸緩衝液（ｐＨ６．０）を終濃度２０ｍＭになるよう加えた後、基質固形分１グラム当たり２０単位のプルラナーゼ（試薬結晶品、株式会社林原生物化学研究所製造）を加え、４０℃で２４時間反応させた。反応後、１００℃、１０分間の加熱処理を行い、プルラナーゼを失活させた後、反応液の糖組成を実験２と同じＨＰＬＣ法にて測定した。結果を表５に示す。また、表５における対照のワキシーコーンスターチ液化液と分岐澱粉３（環状マルトシルマルトース生成酵素の作用量：０．０５単位／ｇ−ワキシーコーンスターチ液化液）の結果を、グルコースの重合度を横軸とし、プルラナーゼ消化物中の含量（％）を縦軸とした図に表したものを図２に示す。なお、図２中の符号ａ及びｄは、それぞれ対照のワキシーコーンスターチ液化液及び分岐澱粉３を意味する。【００６１】
【表５】
2008044586.tif 000006
【００６２】
表５及び図２の結果から明らかなように、対照のワキシーコーンスターチ液化液の場合、ＤＰ６以上のマルトオリゴ糖が生成し、ＤＰ５以下のマルトオリゴ糖は認められないのに対して、環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させて調製した分岐澱粉では、プルラナーゼ消化物中のＤＰ５以下のマルトオリゴ糖、とりわけ、マルトース（ＤＰ２）及びマルトテトラオース（ＤＰ４）が顕著に増加していた。この結果から、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用によって、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する新たな分岐澱粉が生成していることが判明した。【００６３】
＜実験３−５：分岐澱粉のβ−アミラーゼ分解限度（β−アミロリシス）＞
実験２−２で得た上記４種の分岐澱粉１、２、３及び４、又は、対照のワキシーコーンスターチ液化液をそれぞれ終濃度１ｗ／ｖ％、酢酸緩衝液（ｐＨ５．５）を終濃度２０ｍＭになるよう調製した基質溶液に、固形物１ｇ当たり１００単位のβ−アミラーゼ（大豆由来、ナガセ生化学工業製造）を加え、５０℃で２４時間作用させ、１００℃で１０分間熱処理して酵素反応を停止した。なお、β−アミラーゼの活性１単位は、濃度１％の可溶性澱粉を基質とし、ｐＨ５．５、４０℃の条件下で１分間に１μｍｏｌのマルトースに相当する還元力を生成する酵素量と定義した。各分岐澱粉及び対照のワキシーコーンスターチ液化液のβ−アミラーゼ消化物中のマルトースとβ−アミラーゼで分解されないβ−リミットデキストリンの含量を実験１と同じＨＰＬＣ条件にて測定した。結果を表６に示す。【００６４】
【表６】
2008044586.tif 000007
【００６５】
表６の結果から明らかなように、分岐澱粉は、作用させた環状マルトシルマルトース生成酵素の量が多いほど、β−アミラーゼ消化により生成するマルトースの含量が低い値を示し、逆にβ−リミットデキストリンの含量は高い値を示した。β−アミラーゼは澱粉を非還元末端からマルトース単位で加水分解し、α−１，６結合による分岐点の手前で加水分解反応を停止する酵素であることから、上記結果は、環状マルトシルマルトース生成酵素がワキシーコーンスターチ液化液に作用し、そのα−１，６マルトシル転移により分岐構造が形成され、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用量が多いほど分岐澱粉における分岐構造の割合も増加する（分岐が密になる）ことを物語っている。【００６６】
＜実験３−６：分岐澱粉のヨウ素呈色＞
実験２−２で得た上記４種の分岐澱粉１、２、３及び４、又は、対照のワキシーコーンスターチ液化液を、脱イオン水にそれぞれ濃度０．１５％になるよう溶解し、この溶液０．５ｍｌに０．０２Ｎ硫酸を１０ｍｌ、０．１Ｎヨウ素−ヨウ化カリウム溶液を０．５ｍｌ添加し、２５℃で２５分間放置した後、４５０乃至７００ｎｍの範囲でヨウ素−澱粉複合体の吸収スペクトルを測定した。結果を図３に示す。なお、図３中の符号ａ、ｂ、ｃ、ｄ及びｅは、実験３−１、図１で述べたものと同様である。図３の結果から明らかなように、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用量が多い分岐澱粉ほど全体として吸光度が低かった。最大吸収波長はおよそ５２０ｎｍで各試料間に差は認められなかった。実験３−２の結果から、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用による加水分解はほとんど認められなかったにもかかわらず、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用量が多い分岐澱粉ほど吸光度が低い理由として、環状マルトシルマルトース生成酵素の作用量が多い分岐澱粉ほどヨウ素と複合体を形成する澱粉の直鎖構造の存在比が低下し、澱粉へのヨウ素の結合量が低下したものと考えられた。【００６７】
実験３の結果から、液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）に環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させて得られる分岐澱粉は、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する新規な分岐澱粉であることが判明した。この分岐澱粉の構造を示す模式図を液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）のそれとともに図４に示す。図４中、Ａ及びＢは、それぞれ液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）及び本発明で使用する分岐澱粉の模式図である。なお、図４に示す模式図において、符号１、２及び３はそれぞれ、液化澱粉（ワキシーコーンスターチ液化液）における、グルコースがα−１，４結合で連なった直鎖状構造（アミロース構造）、α−１，６結合により前記直鎖状構造が分岐した部位、及び還元末端グルコースを意味し、また、符号４及び５は、分岐澱粉における６−α−マルトシル分岐構造及び６−α−マルトテトラオシル分岐構造を意味している。【００６８】
＜実験４：分岐澱粉の耐老化性＞
実験２の方法で得た上記４種類の分岐澱粉１、２、３及び４、又は、対照のワキシーコーンスターチ液化液について、耐老化性を検討した。濃度２５％になるよう水に加熱・溶解した各試料をガラス製試験管に分注し、密閉状態で、温度５℃で１０日間冷蔵保存した後、澱粉の老化の程度を観察した。結果を図５に示す。なお、図５中の符号ａ、ｂ、ｃ、ｄ及びｅは、実験３−１及び図１で述べたものと同様である。図５の結果から明らかなように、対照のワキシーコーンスターチ液化液（ａ）は上記保存条件下において白濁し、さらに一部固化も生じており、澱粉の老化が顕著であった。一方、環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させて調製した分岐澱粉（ｂ〜ｅ）は、いずれも透明な溶液状態を維持しており、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造を有する分岐澱粉は、顕著な耐老化性を有していることが判明した。【００６９】
以下、実施例により、さらに具体的に本発明を説明する。本発明で使用する分岐澱粉の製造例を実施例１乃至５で示し、本発明の分岐澱粉を含有せしめた成形物を実施例６乃至２４で示す。しかしながら、本発明はこれら実施例によって、なんら限定されるものではない。
【実施例１】
【００７０】
ワキシーコーンスターチ（三和澱粉工業株式会社製造）を水道水に懸濁し、これに最終濃度１ｍＭとなるように塩化カルシウムを加え、ｐＨ６．０に調整して濃度約１０％の澱粉乳を調製した。この澱粉乳に耐熱性α−アミラーゼ（商品名『スピターゼＨＳ』、ナガセ生化学工業株式会社販売）を澱粉固形物１グラム当たり０．０５ｍｇ添加し、３０分間攪拌した後、連続液化装置に流速１Ｌ／分で通液した。澱粉乳を連続液化装置にて１００℃で２５分間、次いで、１４０℃で５分間加熱して液化澱粉を調製した。次いで、この液化澱粉溶液減圧下で濃縮し、濃度約２５％の液化澱粉溶液とした後、実験１の方法で得た環状マルトシルマルトース生成酵素精製標品を澱粉固形物１グラム当り０．１単位になるように加え、ｐＨ６．０、温度５０℃で２０時間反応させた。１００℃、２０分間の熱処理により酵素反応を停止させた後、冷却し、濾過して得られる濾液を、常法に従って、活性炭で脱色し、珪藻土濾過し、濃度約２５％の分岐澱粉溶液を固形物当たり収率約９０％で得た。なお、得られた分岐澱粉のプルラナーゼ消化物は、マルトースを３．７％、マルトテトラオースを１．７％含有していた。また、得られた分岐澱粉の部分メチル化物は、２，３，４−トリメチル化物を８．２％含有していた。本品は、固形物当たり、９６．７％の分岐澱粉及び３．３％の環状マルトシルマルトースを含有していた。本品は、適度の粘度、保湿性、耐老化性、包接性を有し、呈味改良剤、品質改良剤、離水防止剤、安定剤、変色防止剤、賦形剤、包接剤、結合剤、接着剤、成形剤、整型剤、増粘剤、安定化剤、粉末化基材などとして、各種化成品、工業品、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、飲食物、化粧品、医薬部外品、医薬品、飼料、餌料、雑貨など各種成形物の製造に有利に利用できる。
【実施例２】
【００７１】
実施例１で得た溶液状の分岐澱粉を濾過し、常法に従って、活性炭で脱色し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂により脱塩して精製後、エバポレーターで固形分濃度２０％まで濃縮した。続いて、強酸性カチオン交換樹脂（『アンバーライトＣＲ−１３１０』、Ｎａ型、オルガノ株式会社製造）を用いたカラム分画に供し、副生成物として混在する環状マルトシルマルトースを除去した。分画は、樹脂を内径５．４ｃｍのジャケット付きステンレス製カラム４本に充填し、直列につなぎ樹脂層全長２４０ｃｍとしたカラムを用い、カラム内温度６０℃に維持しつつ、澱粉溶液を樹脂に対して５ｖ／ｖ％加え、これに６０℃の温水をＳＶ０．１３で流す条件にて行った。環状マルトシルマルトースを含まない高分子画分を採取し、２５％まで濃縮した後、パルス燃焼式乾燥システムＰＵＬＣＯ（パルテック株式会社販売）にて脱水、乾燥し粉末化した。この操作により、吸湿性が少なく、粒度特性の優れた分岐澱粉粉末が得られた。本品は、水分含量約１０％粉末で、固形分濃度３０％までは水に容易に溶解し、水溶性は良好であった。本品は呈味改良剤、品質改良剤、離水防止剤、安定剤、変色防止剤、賦形剤、包接剤、結合剤、接着剤、成形剤、整型剤、増粘剤、安定化剤、粉末化基材などとして、各種化成品、工業品、飲食物、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、化粧品、医薬部外品、医薬品、飼料、餌料、雑貨など各種成形物の製造に有利に利用できる。
【実施例３】
【００７２】
市販の澱粉部分分解物（商品名『パインデックス＃１００』、松谷化学工業株式会社販売）を濃度約３０％（ｗ／ｖ）水溶液とし、終濃度１ｍＭとなるように塩化カルシウムを加え、ｐＨ６．０に調整した。これに実験１の方法で得た環状マルトシルマルトース生成酵素精製標品を基質固形物１グラム当り１単位加え、４０℃で４８時間反応させた後、１００℃に加熱し１０分保持して反応を停止させた。反応液を、常法に従って、活性炭で脱色し、珪藻土濾過して精製し、更に、濃縮して濃度３０％の分岐澱粉部分分解物溶液を固形物当たり収率約９０％で得た。本品は、固形物当たり、グルコース重合度７以上の分岐澱粉部分分解物９０．８％、グルコース重合度１乃至６のマルトオリゴ糖６．７％、及び環状マルトシルマルトースを２．５％含有していた。本品は、適度の粘度、保湿性、耐老化、包接性を有し、呈味改良剤、品質改良剤、離水防止剤、安定剤、変色防止剤、賦形剤、包接剤、粉末化基材などとして、各種化成品、工業品、飲食物、化粧品、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、医薬部外品、医薬品、飼料、餌料、雑貨など各種成形物の製造に有利に利用できる。【００７３】
なお、原料の澱粉部分分解物をプルラナーゼ消化したところ、生成するアミロースの老化により不溶化したのに対し、本品のプルラナーゼ消化物は、耐老化性を示し清澄な溶液を維持しており、固形分換算で、マルトースを２６．３％、マルトテトラオースを１５．４％含有していた。
【実施例４】
【００７４】
環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させるに際し、基質固形物１グラム当たり２，５００単位のイソアミラーゼを作用させた以外は実施例３と同様に反応させ、常法に従って、活性炭で脱色し、珪藻土濾過して精製し、更に、濃縮して濃度３０％の分岐澱粉部分分解物溶液を固形物当たり収率約９０％で得た。本品は、固形物当たり、グルコース重合度７以上の分岐澱粉部分分解物６９．６％、グルコース重合度１乃至６のマルトオリゴ糖２７．３％、及び環状マルトシルマルトースを３．１％含有していた。本品は、適度の粘度、保湿性、耐老化、包接性を有し、呈味改良剤、品質改良剤、離水防止剤、安定剤、変色防止剤、賦形剤、包接剤、結合剤、接着剤、成形剤、整型剤、増粘剤、安定化剤、粉末化基材などとして、各種化成品、工業品、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、飲食物、化粧品、医薬部外品、医薬品、飼料、餌料、雑貨など各種成形物の製造に有利に利用できる。【００７５】
なお、本品のプルラナーゼ消化物はマルトースを４１．５％、マルトテトラオースを２６．２％含有する清澄な溶液であった。本品のプルラナーゼ消化物におけるマルトース及びマルトテトラオース含量を実施例３で得た分岐澱粉部分分解物のプルラナーゼ消化物のそれと比較すると、約１．５倍程度高い値を示した。このことは、イソアミラーゼによりグルコース重合度の大きい分岐を加水分解しつつ、環状マルトシルマルトース生成酵素を作用させると、６−α−マルトシル分岐構造及び／又は６−α−マルトテトラオシル分岐構造の数を増加させることができることを示唆している。
【実施例５】
【００７６】
実施例４で得た溶液状の分岐澱粉部分分解物を濾過し、常法に従って、活性炭で脱色し、Ｈ型及びＯＨ型イオン交換樹脂により脱塩して精製後、エバポレーターで固形分濃度２０％まで濃縮した。続いて、強酸性カチオン交換樹脂（『アンバーライトＣＲ−１３１０』、Ｎａ型、オルガノ株式会社製造）を用いたカラム分画に供し、混在する環状マルトシルマルトースを含むオリゴ糖を除去した。分画は、樹脂を内径５．４ｃｍのジャケット付きステンレス製カラム４本に充填し、直列につなぎ樹脂層全長２４０ｃｍとしたカラムを用い、カラム内温度６０℃に維持しつつ、澱粉溶液を樹脂に対して５ｖ／ｖ％加え、これに６０℃の温水をＳＶ０．１３で流す条件にて行った。オリゴ糖を含まない高分子画分を採取し、２５％まで濃縮した後、パルス燃焼式乾燥システムＰＵＬＣＯ（パルテック株式会社販売）にて脱水、乾燥し粉末化した。この操作により、吸湿性が少なく、粒度特性の優れた分岐澱粉粉末が得られた。本品は、固形分濃度３０％までは水に容易に溶解し、水溶性は良好であった。本品は呈味改良剤、品質改良剤、離水防止剤、安定剤、変色防止剤、賦形剤、包接剤、結合剤、接着剤、成形剤、整型剤、増粘剤、安定化剤、粉末化基材などとして、各種化成品、工業品、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、飲食物、化粧品、医薬部外品、医薬品、飼料、餌料、雑貨など各種成形物の製造に有利に利用できる。
【実施例６】
【００７７】
＜ニンジンチップ＞
洗浄後、約１０ｍｍ×約１０ｍｍ×厚さ約２ｍｍ程度の薄片にスライスしたニンジン１５０ｇを、α，α−トレハロース（商品名『トレハ』、株式会社林原商事販売）１０％、及び、実施例１の方法で調製した分岐澱粉０．５％を含有する約１００℃の溶液に浸漬し、液温を保持しながら１５分間浸漬処理した。浸漬処理後のスライスニンジンを水切りし、温風乾燥機に入れ、６０℃に加温した雰囲気下６時間、乾燥して乾燥スライスニンジンを製造した。本品は、長期間保存しても、色鮮やかで、水戻りもよく、ニンジンの風味がよく保持されたニンジンチップである。【００７８】
本品を、常法により粉砕して、ニンジンの粉末を調製した。この粉末は、長期間保存しても、色鮮やかで、固結することもなく、水への溶解性も高い、ニンジンの風味がよく保持されたニンジン粉末である。
【実施例７】
【００７９】
＜藍草抽出物粉末＞
藍草の水抽出物（林原生物化学研究所製造、固形分１．４％）９８質量部に、粉末化基剤として、実施例１で調製した分岐澱粉０．５質量部及びα−サイクロデキストリン１．５質量部を加えて撹拌・溶解し、これを、常法により噴霧乾燥して、藍草抽出物粉末を調製した。本品は、長期間保存しても、吸湿や褐変もなく、藍草の水抽出物中に含まれるトリプタンスリンやフラボノイドをはじめとする有用成分の保存安定性にも優れている。本品は飲食品、化粧品、医薬部外品などの製造原料として利用することができる。【００８０】
常法により、この藍抽出物の粉末を０．５％含有するチョコレートを調製した。本品は、藍抽出物を含有し、長期間保存してもその有用成分が保持されていることから、歯周病予防、高脂血症の予防、治療や脂質代謝改善の目的で使用することもできる。
【実施例８】
【００８１】
＜ローヤルゼリー粉末＞
ローヤルゼリーエキス１０質量部に対して、粉末化基剤として、実施例１の方法で調製した分岐澱粉０．５質量部及びα，α−トレハロース１質量部を加えて撹拌・溶解し、これを、常法により凍結乾燥して、粉末を調製した。本品は、長期間保存しても、吸湿や褐変もなく、ローヤルゼリーに含まれる有用成分の保存安定性にも優れている。【００８２】
このローヤルゼリー粉末２７質量部、コエンザイムＱ１０５質量部、ショ糖５質量部、エリスリトール５５質量部、アスコルビン酸６．５質量部、ビタミンＢ１０．１質量部、ビタミンＢ２０．１質量部、ビタミンＢ６０．１質量部、フルーツ香料１．２質量部を混合し、１ｇずつラミネート容器に小分けした。本品は、長期間保存してもその有用成分が保持されるので、健康補助食品として好適である。
【実施例９】
【００８３】
＜粉末ペパーミントオイル＞
水１５０ｇにアラビアガム７０質量部、ショ糖脂肪酸エステル４質量部に、粉末化基剤として実施例２の方法で調製した粉末状の分岐澱粉２質量部及び含水結晶α，α−トレハロース２０質量部を加えて溶解し、殺菌のために８５℃に加温して、１５分間維持した。これを４０℃に冷却後、ペパーミントオイル１０ｇを添加して、ホモミキサーにより乳化した。これを、常法により噴霧乾燥して、粉末ペパーミントオイルを調製した。本品は、吸湿もなく、粉末成形物は充分な粉体流動性を維持していた。また、ペパーミントオイルの酸化や分解が抑制されて、劣化臭の発生が抑制されるだけでなく、劣化臭が発生しても、劣化臭がマスクされることから、良好なペパーミントオイルの香りが安定に長期間保持された。本品は、飲食品、化粧品、医薬部外品、医薬品用の香料として有利に利用できる。【００８４】
対照として、粉末化基剤として、含水結晶α，α−トレハロース２０質量部のみを使用した以外は、実施例９と同じ方法で調製したペパーミント粉末と、実施例９で調製したペパーミント粉末とを、各々密封した容器に入れて、５０℃の恒温器で６ヶ月間保存した。保存後のペパーミント粉末を、等質量部使用して、常法により、ガムをそれぞれ調製し、そのペパーミントの風味について、１０名のパネラーによる官能検査を行ったところ、実施例９で調製したペパーミント粉末を使用したガムの方が、対照に比して、ペパーミントの香りが強く、その持続性も高いと、１０名中８名のパネラーが評価した。この結果は、粉末化基剤として使用した分岐澱粉が、香料の保存安定性の向上に寄与していることを物語っている。
【実施例１０】
【００８５】
＜粉末オレンジオイル＞
粉末化基剤として、α，α−トレハロース３００ｇ、国際公開ＷＯ  ０２／１０３６１号明細書に開示されたサイクロ｛→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→６）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→３）−α−Ｄ−グルコピラノシル−（１→｝の構造を有する環状四糖（株式会社林原生物化学研究所製造）３００ｇ、α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（商品名『ハローデックス』、株式会社林原商事販売）４０質量部、及び、実施例１の方法で調製した分岐澱粉３０ｇを、２００ｇのイオン交換水に溶解し、煮詰め温度１３５℃までスリーワンモータにより１００ｒｐｍで攪拌しつつ加熱して溶融物を得た。該溶融物にオレンジオイル７５ｇを高速攪拌機で攪拌しながら添加し、２０分間乳化を行った。前記乳化物を押出し釜に移し、−２５℃のイソプロピルアルコールを入れた冷却槽中に加圧して射出口から押し出し、攪拌しながら粉砕した。得られた粉砕物を、ロータリーエバポレーターを用いて４０℃で減圧乾燥することにより、粒子表面のイソプロピルアルコールを除去した。乾燥後の粉末成形物を、２０メッシュ（目開き８４０μｍ）の篩を通過し、６０メッシュ（目開き２５０μｍ）の篩上に残るよう篩分けを行い、６０メッシュ篩上に残った粉末成形物４８０ｇを得た。本品は、長期保存後も、香料の劣化もなく、粉末成形物は充分な粉体流動性を維持していた。本品は、飲食品、化粧品、医薬部外品、医薬品用の香料として有利に利用できる。
【実施例１１】
【００８６】
＜紡糸＞
平均重合度１１５０、ケン化度９９．９５％のポリビニールアルコール８％と、実施例２の方法で調製した分岐澱粉２％を含む水溶液１．５リットルと反応性染料Ｋａｙａｃｉｏｎ
Ｒｅｄ Ｅ−ＳＮ７Ｂ（日本化薬株式会社製）の１％水溶液１．５リットルを混合し苛性ソーダでｐＨを８に調整した後加熱反応させた。さらに、この着色水溶液に平均重合度１１５０、ケン化度９９．９５％のポリビニールアルコールと実施例２の方法で調製した分岐澱粉と水を加え、ポリビニールアルコール２６％、実施例２の方法で調製した分岐澱粉６％、染料０．３％を含有する紡糸原液を調製した。この紡糸原液を孔数５０のノズルを使用して乾式紡糸を行ない、４．５倍に延伸し、２２０℃で熱処理を施して溶解温度９３℃の赤色着色糸を得た。本品は、十分な引張り強度を有し、耐久性に優れた糸である。
【実施例１２】
【００８７】
＜分岐澱粉を用いたポリ乳酸フィルムのラミネート＞
実施例２の方法で調製した分岐澱粉の５％水溶液を、２．５μｍ厚のポリ乳酸フィルム上にアプリケーターを用いて塗布した後、乾燥させ、３μｍ厚の分岐澱粉・キャストフィルムを作成した。得られたラミネートフィルムの分岐澱粉面に、湿らせた洋紙を重ね合わせ、プレスしながら乾燥させた。その結果、分岐澱粉を接着層とした、洋紙とポリ乳酸フィルムの３層ラミネートが得られた。接着強度を測定するために、９０度剥離試験を行なったところ、その接着強度は極めて優れており、洋紙層内で破壊が生じたが、分岐澱粉層内の破壊や、分岐澱粉層と洋紙またはポリ乳酸フィルムとの間での界面剥離はどちらも生じなかった。また、本品は生分解性なので、環境にも優しいフィルムである。
【実施例１３】
【００８８】
＜印刷用塗工層成形物＞
重質炭酸カルシウム５０質量部、カオリン５０質量部からなる顔料をコーレス分散機を用いて分散し顔料スラリーを得た。このスラリーにスチレン−ブタジエン共重合体ラテックス１０質量部（固形分）、実施例１で調製した分岐澱粉液３質量部（固形分）、耐水化剤０．２質量部、滑剤０．２質量部、その他助剤を添加、分散して固形分５８％の塗料を調製した。【００８９】
上記の塗料を用いて、原紙、片面当たり乾燥重量で２０ｇ／ｍ2になるようにブレードコーターで両面塗工を行った。この紙を乾燥後、水をロールアップリケーターで供給して水塗工し、乾燥した。その後、スーパーキャレンダー掛けして表面光沢仕上げを行い、印刷用塗工紙を得た。本品は、印刷インキや顔料のにじみが少なく、また、機械的強度や耐久性等も十分であった。
【実施例１４】
【００９０】
＜紙＞
広葉樹晒クラフトパルプをナイヤガラビーターにて叩解し、適量を水に加えて４００ｍｌの懸濁液を調製した。該パルプに、実施例１の方法で調製した分岐澱粉を粉末として混ぜ込み、常法に従い坪量１００ｇ／ｍ２の紙シートマシンで手抄きした。形成された湿紙を９０℃で１分間ロータリードライヤーにて乾燥後、温度２０℃、湿度６５％で２４時間調湿してクラフト紙を得た。本品は、機械的強度や耐久性等も十分であった。
【実施例１５】
【００９１】
＜不織布＞
実施例２の方法で調製した水分約１０％の分岐澱粉粉末６０質量部と、エチレン３０モル％と酢酸ビニール７０モル％からなる共重合体をケン化したケン化度が９２％の加水分解共重合体４０質量部とからなる生分解性樹脂成形物のペレットを調製した。このペレットを、０．８ｍｍ、孔数３５０の口金、圧縮比２．０のフルフライトスクリューを使用し、紡糸温度１４０℃で溶融紡糸を行い、レギュラー糸を得た。この糸に、表面仕上剤としてラウリルホスフェートカリウムをこの糸に対して、糸質量の０．３％付着させた。この未延伸糸を延伸比１．２倍で冷延伸後、カッターで切断し、単糸繊度６ｄ／ｆ、繊維長３８ｍｍの生分解性繊維を得た。この生分解性繊維をカード機で梳綿し、カードウェブを得た。このウェブを更に温度１３０℃のエンボスロールで不織布加工をして、不織布を得た。本品は、耐水性、機械的強度や耐久性等も十分であった。
【実施例１６】
【００９２】
＜園芸用シート＞
水分約１０％を含む実施例２の方法で調製した分岐澱粉３５質量部、エチレン３０モル％と酢酸ビニール７０モル％の共重合体（ケン化度が９８％の部分加水分解共重合体）６０質量部、ポリカプロラクトン５質量部とをブレンドし、生分解性樹脂成形物を得た。これを用いて繊維化を行った。この繊維をウェブとした後、ニードルパンチ不織布法／スルーエアー加工により、シートを得た。本品は園芸用シートなどとして利用することができる。本品は、耐水性も高く、機械的強度や耐久性等も十分であった。また、本品は生分解性なので、使用後、田畑等に放置しても自然に分解が進行する、環境にも優しいシートである。
【実施例１７】
【００９３】
＜抗菌用シート＞
α，α−トレハロースの糖質誘導体含有糖質（商品名『ハローデックス』、株式会社林原商事販売）４５質量部、乳酸ナトリウム５質量部、水３０質量部、実施例１の方法で調製した分岐澱粉２０質量部を加えて塗工液を調製した。この塗工液をキッチンペーパーに、紙の質量に対して、固形物換算で０．８％となるように塗布した。本品は、抗菌用のシートとして生鮮食料品などの包装に使用することができる。この塗工液は分岐澱粉を含んでいるので、キッチンペーパーへの塗布性が向上し、塗布液を均一にペーパー上に塗布することができる。
【実施例１８】
【００９４】
＜シート＞
実施例１の方法で調製した分岐澱粉１００質量部にエチレングリコール４０質量部、メタブレンＰ５３０Ａ  １．４質量部を加え、ヘンシェルミキサーで１０００ｒｐｍ、１０分間混合した後、試験用押し出し機にて１５０℃でペレット化した。このペレット化した可塑化成形物１００質量部、ビオノーレ（＃１００１）１００質量部をタンブラー混合した後、１５０℃で再度押出機にかけ可塑化澱粉・ビオノーレ複合体成形物を得た。この成形物を用いて加熱温度１７０℃の条件下Tダイ押し出し機で肉圧１mmのシートを形成した。【００９５】
このシートを用いて、真空成形により、苗ポットを調製したところ、奇麗な成形品(苗ポット)を得ることが出来た。本品は、耐水性も高く、機械的強度、耐久性等も十分であった。また、本品は生分解性なので、環境にも優しいシートである。
【実施例１９】
【００９６】
＜発泡材＞
実施例４の方法で調製した分岐澱粉１００質量部、メタクリル酸メチルとアクリル酸アルキルの共重合物、（分子量３１０万）１質量部、水３０質量部をヘンシェルミキサーで１０００ｒｐｍ、１０分間混合した後、試験用押出機（東洋精機株式会社販売、『ラボプラストミル』）にて１００℃でペレット化した。これを水分１３．５％まで乾燥し、このペレットを使ってバラ状緩衝材製造設備にて１９０℃で発泡体を形成した。本品は、上記配合の発泡材で使用した分岐澱粉に代えて、澱粉を使用して調製した発泡材に比して、均一な発泡が得られるとともに、復元力、発泡性、吸湿性、耐水性、保形性、耐久性等の物性に面でも優れており、緩衝材として有利に使用することができる。また、本品は生分解性なので、環境にも優しい発泡材である。
【実施例２０】
【００９７】
＜トレイ＞
実施例１の方法で調製した分岐澱粉（固形分）１００質量部、水２０質量部、ポリエチレングリコール１５質量部、過硫酸カリウム０．０４質量部をヘンシェルミキサー（三井三池化工機販売）にとり、６００ｒｐｍ  ５分間攪拌し混合した。これを、ラボプラストミル型式２軸押出機及びペレッタイザー（何れも東洋精機株式会社販売）にてペレット化した。このペレットを射出成形機（日精樹脂工学株株式会社販売）を用いて、成形金型を用いて射出成形し、トレイを得た。本品は、機械的強度等も十分で保形性、耐水性に優れており、植物栽培用などのトレイとして利用することができる。また、本品は生分解性なので、環境にも優しいトレイである。
【実施例２１】
【００９８】
＜トレイ及び杭＞
脂肪族ポリエステル４７質量部（昭和高分子製ビオノーレ１０２０）、実施例１の方法により調製した分岐澱粉４７質量部、ショ糖（砂糖）６質量部の混合物を射出成形機に供給し成形した。トレイ及び杭の金型を用いて成形品を得た。【００９９】
得られたトレイ及び杭の外観は良く、添加したショ糖によるコゲ、変色等の発生は全くなかった。また、トレイ及び杭としての機械的強度等も十分であり、水による洗浄も可能であった。これら成形物は、生分解性を有し、土壌に埋めて、室温下で３カ月間放置した所、ほぼ完全に分解された。
【実施例２２】
【０１００】
＜乳液＞
以下の配合処方に基づき、常法により、乳液を調製した。
（処方）                                                            （％）
ポリオキシエチレン（２０Ｅ．Ｏ．）ポリオキシプロピレン
（２Ｅ．Ｏ．）セチアルコール                                        １
シリコンＫＦ９６（２０ｃｓ）（信越化学工業株式会社販売）              ２
流動パラフィン（中粘度）                                              ３
１，３−ブチレングリコール（１，３−ＢＧ）                            ５
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド                                    ２
グリセリン                                                            ２
実施例５の方法で調製した分岐澱粉                                  ０．６
エチルアルコール                                                    １５
カルボキシビニルポリマー                                          ０．３
ヒドロキシプロピルセルロース                                      ０．１
２−アミノメチルプロパノール                                      ０．１
藍草抽出物（商品名『藍ルーロス』、株式会社林原生物化学研究所
販売、１，３−ＢＧを３０％含有する藍草の水抽出物）                  ２
防腐剤                                                              適量
精製水を加えて全量を１００％とする。【０１０１】
本品は、美白及び／又は美肌用の皮膚外用剤として有用である。また、本品は、保湿性、浸透性、延展性、使用感に優れている。
【実施例２３】
【０１０２】
＜シャンプー＞
以下の配合処方に基づき、常法により、シャンプーを調製した。
（処方）                                                          （％）
ピロクトンオラミン                                                ０．５
エデト酸二ナトリウム                                              ０．３
感光素２０１号                                                ０．００２
クエン酸                                                          ０．３
サリチル酸ナトリウム                                              ０．２
１，３−ＢＧ                                                          ３
ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナトリウム                ６．７５
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド                                        ２
ラウリル硫酸トリエタノールアミン                                    １０
ポリオキシエチレンラノリン酸（８０Ｅ．Ｏ．）                      ０．５
２−アルキル−Ｎ−カルボキシメチル−Ｎ−ヒドロキシエチル
イミダゾリニウムベタイン                                          １０
ヒドロキシエチルセルロースヒドロキシプロピルトリメチル
アンモニウムクロリドエーテル                                    ０．８
実施例２の方法で調製した分岐澱粉                                  ０．５
実施例７の方法で調製した藍草抽出物粉末                                １
香料                                                              ０．２
精製水を加えて全量を１００％とする。
本品は、頭皮の炎症や老化防止効果を有し、抗菌性も強いので、育毛効果に優れ、脱毛を抑制し、頭皮を清潔に保つことができる。また、使用後も適度の水分を保持し、毛髪の滑りを良くする、使用感に優れたシャンプーである。
【実施例２４】
【０１０３】
＜育毛剤＞
実施例７の方法で調製した藍草抽出物の粉末                              ２ｇ
感光素３０１号                                                ０．００５ｇ
センブリエキス                                                  ３．０ｍｌ
グリチルリチン酸ジカリウム                                        ０．１ｇ
α，α−トレハロース                                            ０．０１ｇ
海藻エキス                                                      ０．７５ｇ
グリセリン                                                            ２ｇ
精製水を加えて撹拌・溶解して全量を１００ｍｌとする。
本品は、育毛効果、保湿性に優れ、ふけ、痒み、脱毛を抑制し、毛髪の滑りもよい使用感に優れた育毛剤である。
【産業上の利用可能性】
【０１０４】
本発明で使用する分岐澱粉は、分岐構造が密で、耐老化性を有しているので、これを澱粉代替品として澱粉質含有成形物に添加したり、粉末化基剤として使用した成形物は、澱粉の老化に起因する様々な品質劣化が低減される。さらに、当該成形物は、飲食品、化粧品、医薬部外品、飼料、餌料のみでなく、シート、繊維、発泡成形物、接着剤をはじめとする化成品、工業品、土木緑化用品、農林業用品、園芸用資材用品、粉末品、雑貨、生分解性及び／又は徐崩性の成形物などとして利用することができるので、本発明の分岐澱粉を含有する成形物の各産業分野における意義は極めて高い。
【図１】
2008044586.tif 000008
【図２】
2008044586.tif 000009
【図３】
2008044586.tif 000010
【図４】
2008044586.tif 000011
【図５】
2008044586.tif 000012
【国際調査報告】
2008044586.tif 000013
2008044586.tif 000014
2008044586.tif 000015
2008044586.tif 000016