(57)【要約】  γ線滅菌された少数の器具で実施できる多血小板血漿分離装置及び多血小板血漿分離方法を提供する。  多血小板血漿分離装置は、第１シリンジ１０と第２シリンジ１１とを具備する。第１シリンジ１０は、採血針が取付可能な第１ポート１２を有する第１シリンジ筒１３と、第１ポート１２に着脱可能な第１キャップ１４と、第１シリンジ筒１３を液密に封止して第１シリンジ筒１３内を往復動される第１ガスケット１５と、第１ガスケット１５に着脱可能に設けられた第１プランジャ１６とを具備する。第２シリンジ１１は、第１ガスケット１５を貫通可能な第１中空針３０と、第１中空針３０が取付可能な第２ポート３１を有する第２シリンジ筒３２と、第２ポート３２に着脱可能な第２キャップ３３と、第２シリンジ筒３２を液密に封止して第２シリンジ筒３２内を往復動される第２ガスケット３４と、第２ガスケット３４に着脱可能に設けられた第２プランジャ３５とを具備する。
2008050688.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血液を吸引するために用いられる第１シリンジと、該第１シリンジから血小板及び血漿を含む遠心分離区分を吸引するために用いられる第２シリンジと、を具備し、
上記第１シリンジは、
採血針が取付可能な第１ポートを有する第１シリンジ筒と、
上記第１ポートに着脱可能な第１キャップと、
上記第１シリンジ筒を液密に封止して第１シリンジ筒内を往復動される第１ガスケットと、
上記第１ガスケットに着脱可能に設けられた第１プランジャと、を具備し、
上記第２シリンジは、
上記第１ガスケットを貫通可能な第１中空針と、
上記第１中空針が取付可能な第２ポートを有する第２シリンジ筒と、
上記第２ポートに着脱可能な第２キャップと、
上記第２シリンジ筒を液密に封止して第２シリンジ筒内を往復動される第２ガスケットと、
上記第２ガスケットに着脱可能に設けられた第２プランジャと、を具備する多血小板血漿分離装置。
【請求項２】
上記第１プランジャは、ねじ込み式により上記第１ガスケットに対して着脱可能であり、上記第２プランジャは、ねじ込み式により上記第２ガスケットに対して着脱可能である請求項１に記載の多血小板血漿分離装置。
【請求項３】
上記第１ガスケットは、上記第１プランジャが着脱される側にガイド孔を有し、
上記第２シリンジ筒は、第２ポートの周囲に上記ガイド孔に嵌入されるガイド片を有する請求項１又は２に記載の多血小板血漿分離装置。
【請求項４】
上記第１シリンジ及び上記第２シリンジが滅菌袋に密封されたものである請求項１から３のいずれかに記載の多血小板血漿分離装置。
【請求項５】
血液を吸引するために用いられる第３シリンジと、該第３シリンジから血小板及び血漿を含む遠心分離区分を吸引するために用いられる第４シリンジと、を具備し、
上記第３シリンジは、
採血針が取付可能な第３ポートを有する第３シリンジ筒と、
上記第３ポートに着脱可能な第３キャップと、
上記第３シリンジ筒を液密に封止して第３シリンジ筒内を往復動される第３ガスケットと、
上記第３ガスケットに設けられ、該第３ガスケットに通ずる挿通孔を有する第１分割プランジャと、
上記第１分割プランジャに着脱可能に接続された第２分割プランジャと、を具備し、
上記第４シリンジは、
上記第１分割プランジャの挿通孔を通じて上記第３ガスケットを貫通可能な第２中空針と、
上記第２中空針が取付可能な第４ポートを有する第４シリンジ筒と、
上記第４ポートに着脱可能な第４キャップと、
上記第４シリンジ筒を液密に封止して第４シリンジ筒内を往復動される第４ガスケットと、
上記第４ガスケットに着脱可能に設けられた第４プランジャと、を具備する多血小板血漿分離装置。
【請求項６】
上記第２分割プランジャは、ねじ込み式により上記第１分割プランジャに対して着脱可能であり、上記第４プランジャは、ねじ込み式により上記第４ガスケットに対して着脱可能である請求項５に記載の多血小板血漿分離装置。
【請求項７】
上記第１分割プランジャは、上記挿通孔を封止し且つ上記第２中空針が貫通可能な栓を有する請求項５又は６に記載の多血小板血漿分離装置。
【請求項８】
上記第３シリンジ及び上記第４シリンジが滅菌袋に密封されたものである請求項５から７のいずれかに記載の多血小板血漿分離装置。
【請求項９】
第１ポートを有する第１シリンジ筒、該第１シリンジ筒を液密に封止して第１シリンジ筒内を往復動される第１ガスケット、及び該第１ガスケットに設けられた第１プランジャを具備する第１シリンジと、第１中空針、該第１中空針を取付可能な第２ポートを有する第２シリンジ筒、該第２シリンジ筒を液密に封止して第２シリンジ筒内を往復動される第２ガスケット、及び該第２ガスケットに設けられた第２プランジャを具備する第２シリンジと、を用いた多血小板血漿分離方法であって、
採血された血液が満たされた上記第１シリンジ筒の第１ポートを封止する第１ステップと、
上記第１シリンジ筒の第１ポート側を遠心移動方向として、上記第１シリンジ筒内の血液を、赤血球を含む第１区分と血小板及び血漿を含む第２区分とに遠心分離する第２ステップと、
上記第１シリンジ筒内の第１ガスケットに第１中空針を貫通し、上記第２区分を上記第２シリンジ筒に吸引する第３ステップと、
上記第２区分が満たされた上記第２シリンジ筒の第２ポートを封止する第４ステップと、
上記第２シリンジ筒の第２ポート側を遠心移動方向として、上記第２シリンジ筒内の第２区分に対して遠心分離を行う第５ステップと、
上記第２シリンジ筒内の第２ガスケットを移動させて、遠心分離された上記第２区分から多血小板血漿を上記第２ポートから排出する第６ステップと、を含む多血小板血漿分離方法。
【請求項１０】
上記第６ステップは、遠心分離された上記第２区分から上記第２ポート側の所定量を多血小板血漿として排出する請求項９に記載の多血小板血漿分離方法。
【請求項１１】
上記第２ステップにおける遠心分離は弱遠心であり、上記第５ステップにおける遠心分離は強遠心である請求項９又は１０に記載の多血小板血漿分離方法。
【請求項１２】
請求項９から１１のいずれかに記載の多血小板血漿分離方法により得られた多血小板血漿。
【請求項１３】
第３ポートを有する第３シリンジ筒、該第３シリンジ筒を液密に封止して第３シリンジ筒内を往復動される第３ガスケット、及び該第３ガスケットに設けられた第３プランジャを具備する第３シリンジと、第２中空針、該第２中空針を取付可能な第４ポートを有する第４シリンジ筒、該第４シリンジ筒を液密に封止して第４シリンジ筒内を往復動される第４ガスケット、及び該第４ガスケットに設けられた第４プランジャを具備する第４シリンジと、を用いた多血小板血漿分離方法であって、
採血された血液が満たされた上記第３シリンジ筒の第３ポートを封止する第７ステップと、
上記第３シリンジ筒の第３ポート側を遠心移動方向として、上記第３シリンジ筒内の血液を、赤血球を含む第１区分と血小板及び血漿を含む第２区分とに遠心分離する第８ステップと、
上記第３シリンジ筒内の第３ガスケットに第２中空針を貫通し、上記第２区分を上記第４シリンジ筒に吸引する第９ステップと、
上記第２区分が満たされた上記第４シリンジ筒の第４ポートを封止する第１０ステップと、
上記第４シリンジ筒の第４ポート側を遠心移動方向として、上記第４シリンジ筒内の第２区分に対して遠心分離を行う第１１ステップと、
上記第４シリンジ筒内の第４ガスケットを移動させて、遠心分離された上記第２区分から多血小板血漿を上記第４ポートから排出する第１２ステップと、を含む多血小板血漿分離方法。
【請求項１４】
上記第１２ステップは、遠心分離された上記第２区分から上記第４ポート側の所定量を多血小板血漿として排出する請求項１３に記載の多血小板血漿分離方法。
【請求項１５】
上記第８ステップにおける遠心分離は弱遠心であり、上記第１１ステップにおける遠心分離は強遠心である請求項１３又は１４に記載の多血小板血漿分離方法。
【請求項１６】
請求項１３から１５のいずれかに記載の多血小板血漿分離方法により得られた多血小板血漿。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液を吸引するために用いられるシリンジと、そのシリンジから血小板及び血漿を含む遠心分離区分を吸引するために用いられるシリンジと、を有する多血小板血漿分離装置、及び多血小板血漿分離方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
多血小板血漿（以下、「ＰＲＰ」とも称される。）とは、血小板を多く含む血漿である。血球成分を含む全血においては、赤血球が約９５％、白血球が３％、血小板が約１％の割合で含まれる。これに対し、多血小板血漿においては、血小板が高い割合で含まれる。ＰＲＰにおける血小板の割合は特に定義がない。一般に、全血における血漿の割合が約５５％であることを考慮すると、血球成分が除去された血漿に含まれる血小板の割合は約２％程度と考えられる。この約２％程度より明らかに高い割合の血小板が、ＰＲＰに含まれる。【０００３】
ＰＲＰは、全血を遠心分離することにより得られる。詳細に説明すると、まず、全血を弱遠心して赤血球を分離して血漿を得る。この血漿には白血球及び血小板が含まれる。さらに、得られた血漿を強遠心する。これにより、血小板は遠心力が加わる方向（以下、本明細書において遠心分離方向とも称する。）に集中し、上清には血小板がほぼ含まれない。強遠心された血漿から上清を取り除き、或いは遠心分離方向（下側）の所定量のみを取り出して、ＰＲＰを得る（特許文献１参照）。【０００４】
血小板のα顆粒中には、ＰＤＧＦ、ＴＧＦ−β、ＩＬＧＦなどの成長因子が存在することが知られている。これら成長因子が創傷治癒や組織再生に効果的な役割を果たすことが着目されている。例えば、歯周組織再生法などの再生医療において、ＰＲＰの利用が期待されている（特許文献２、特許文献３及び非特許文献１参照）。【０００５】
【特許文献１】特開２００６−７８４２８号公報
【特許文献２】特開２００６−２３２８３４号公報
【特許文献３】特開２００５−２７８９１０号公報
【非特許文献１】多血小板血漿の口腔への応用、ロバート・Ｅ・マルクス著、クィーン・テッセンス出版社出版
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ＰＲＰを再生医療に用いる場合には、安全性の観点から、ＰＲＰを調整する器具はすべてγ線滅菌を施すことが要求される。しかしながら、例えば特許文献１に記載されている真空採血管のように、ゴム栓を使用した容器に対してγ線滅菌を施すと、ゴム栓が劣化するという問題がある。ゴム栓の劣化は、ゴム栓に含まれる添加物の滲出、破断片や砕片の発生を惹起し、これら添加物や破断片などが血液やＰＲＰに混入するおそれがある。【０００７】
本発明は、これらの事情に問題に鑑みてなされたものであり、γ線滅菌がされた少数の器具で実施できる多血小板血漿分離方法及び多血小板血漿分離装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
(1)  本発明に係る多血小板血漿分離装置は、血液を吸引するために用いられる第１シリンジと、該第１シリンジから血小板及び血漿を含む遠心分離区分を吸引するために用いられる第２シリンジと、を具備する。上記第１シリンジは、採血針が取付可能な第１ポートを有する第１シリンジ筒と、上記第１ポートに着脱可能な第１キャップと、上記第１シリンジ筒を液密に封止して第１シリンジ筒内を往復動される第１ガスケットと、上記第１ガスケットに着脱可能に設けられた第１プランジャと、を具備する。上記第２シリンジは、上記第１ガスケットを貫通可能な第１中空針と、上記第１中空針が取付可能な第２ポートを有する第２シリンジ筒と、上記第２ポートに着脱可能な第２キャップと、上記第２シリンジ筒を液密に封止して第２シリンジ筒内を往復動される第２ガスケットと、上記第２ガスケットに着脱可能に設けられた第２プランジャと、を具備する。【０００９】
第１シリンジは、採血針が取り付けられて採血に使用される。第１ポートへ採血針が取付可能であるとは、採血針が直接に第１ポートに取り付けられる態様や、採血針がエクステンションチューブなどの他の部材を介して第１ポートに取り付けられる態様が含まれる。採血により第１シリンジ筒には血液（全血）が満たされる。第１シリンジ筒から採血針が取り外され、第１ポートが第１キャップにより封止される。これにより、第１シリンジ筒内に血液が密封される。さらに、第１ガスケットから第１プランジャが取り外される。第１シリンジ筒は、この状態で遠心分離が行われる。遠心分離により、血液が赤血球画分（第１区分）と、白血球及び血小板を含む血漿画分（第２区分）に分離される。この遠心分離では、赤血球画分が第１シリンジ筒内の第１ポート側に、血漿画分が第１ガスケット側に分離される。【００１０】
第２シリンジは、遠心分離された第１シリンジ筒から血漿画分を吸引するために用いられる。第２ポートへ第１中空針が取付可能であるとは、第１中空針が直接に第２ポートに取り付けられる態様や、第１中空針がエクステンションチューブなどの他の部材を介して第２ポートに取り付けられる態様が含まれる。仮に、第１中空針が直接に第２ポートに取り付けられている場合には、第２シリンジが第１シリンジ筒に進入されて、第１中空針が第１ガスケットに貫通される。また、第１中空針がエクステンションチューブを介して第２ポートに取り付けられている場合には、第１中空針及びエクステンションチューブが第１シリンジ筒に進入されて、第１中空針が第１ガスケットに貫通される。第１中空針の先端は、第１ガスケット側の血漿画分中に到達する。第２シリンジの第２プランジャが引き出されると、第２ガスケットが第２シリンジ筒を移動し、これにより、第１中空針を通じて血漿画分が第２シリンジ筒内に吸引される。【００１１】
血漿画分を吸引した後、第２シリンジと共に第１中空針が、又は第１中空針とエクステンションチューブが、第１シリンジ筒から引き出される。第２シリンジ筒から第１中空針が取り外され、第２ポートが第２キャップにより封止される。これにより、第２シリンジ筒内に血漿画分が密封される。さらに、第２ガスケットから第２プランジャが取り外される。第２シリンジ筒は、この状態で遠心分離が行われる。遠心分離により、血漿画分は、上側（第２ガスケット側）がほぼ血漿成分のみの上清となり、下側（第２ポート側）が血小板が多い多血小板血漿となる。第２シリンジ筒から第２キャップが外され、第２ガスケットに第２プランジャが取り付けられて、多血小板血漿が、第２シリンジ筒の第２ポートから排出される。【００１２】
(2)  上記第１プランジャは、ねじ込み式により上記第１ガスケットに対して着脱可能であることが好ましい。上記第２プランジャは、ねじ込み式により上記第２ガスケットに対して着脱可能であることが好ましい。これにより、第１ガスケット又は第２ガスケットに着脱可能な第１プランジャ又は第２プランジャが簡易に実現される。また、第１プランジャ又は第１プランジャを第１ガスケット又は第２ガスケットへ着脱することを繰り返すことができる。【００１３】
(3)  上記第１ガスケットは、上記第１プランジャが着脱される側にガイド孔を有するものであってもよい。上記第２シリンジ筒は、第２ポートの周囲に上記ガイド孔に嵌入されるガイド片を有するものであってもよい。【００１４】
第１シリンジ筒に第２シリンジを進入させると、第２シリンジ筒のガイド片が第１ガスケットのガイド孔に嵌入される。これにより、第２シリンジ筒と第１ガスケットとが嵌合状態になる。前述されたように、第２シリンジ筒から第２プランジャを引き出すと、第１シリンジ筒内の血漿画分が第２シリンジ筒へ吸引される。これに伴い、第１ガスケットが、第１シリンジ筒内を第１ポート側へ移動する。第１ガスケットの移動に伴って、第２シリンジ筒が、第１シリンジ筒にさらに進入する。これにより、第１シリンジ筒から第２シリンジ筒への血漿画分の吸引が円滑に行われる。【００１５】
(4)  上記第１シリンジ及び上記第２シリンジが滅菌袋に密封されたものであることが好ましい。これらがキットとして１つの滅菌袋に密封されることにより、使い勝手が向上する。【００１６】
(5)  本発明に係る多血小板血漿分離装置は、血液を吸引するために用いられる第３シリンジと、該第３シリンジから血小板及び血漿を含む遠心分離区分を吸引するために用いられる第４シリンジと、を具備する。上記第３シリンジは、採血針が取付可能な第３ポートを有する第３シリンジ筒と、上記第３ポートに着脱可能な第３キャップと、上記第３シリンジ筒を液密に封止して第３シリンジ筒内を往復動される第３ガスケットと、上記第３ガスケットに設けられ、該第３ガスケットに通ずる挿通孔を有する第１分割プランジャと、上記第１分割プランジャに着脱可能に接続された第２分割プランジャと、を具備する。上記第４シリンジは、上記第１分割プランジャの挿通孔を通じて上記第３ガスケットを貫通可能な第２中空針と、上記第２中空針が取付可能な第４ポートを有する第４シリンジ筒と、上記第４ポートに着脱可能な第４キャップと、上記第４シリンジ筒を液密に封止して第４シリンジ筒内を往復動される第４ガスケットと、上記第４ガスケットに着脱可能に設けられた第４プランジャと、を具備する。【００１７】
第３シリンジは、採血針が取り付けられて採血に使用される。第３ポートへ採血針が取付可能であるとは、採血針が直接に第３ポートに取り付けられる態様や、採血針がエクステンションチューブなどの他の部材を介して第３ポートに取り付けられる態様が含まれる。採血により第３シリンジ筒には血液（全血）が満たされる。第３シリンジ筒から採血針が取り外され、第３ポートが第３キャップにより封止される。これにより、第３シリンジ筒内に血液が密封される。さらに、第１分割プランジャから第２分割プランジャが取り外される。第３シリンジ筒は、この状態で遠心分離が行われる。遠心分離により、血液が赤血球画分（第１区分）と白血球及び血小板を含む血漿画分（第２区分）に分離される。この遠心分離では、赤血球画分が第３シリンジ筒内の第３ポート側に、血漿画分が第３ガスケット側に分離される。【００１８】
第４シリンジは、遠心分離された第３シリンジ筒から血漿画分を吸引するために用いられる。第４ポートへ第２中空針が取付可能であるとは、第２中空針が直接に第４ポートに取り付けられる態様や、第２中空針がエクステンションチューブなどの他の部材を介して第４ポートに取り付けられる態様が含まれる。仮に、第２中空針が直接に第４ポートに取り付けられている場合には、第４シリンジが第３シリンジ筒に進入されて、第２中空針が第１分割プランジャの挿通孔に到達し、さらに第３ガスケットを貫通する。また、第２中空針がエクステンションチューブを介して第４ポートに取り付けられている場合には、第２中空針及びエクステンションチューブが第３シリンジ筒に進入されて、第２中空針が第１分割プランジャの挿通孔に到達し、さらに第３ガスケットを貫通する。これにより、第２中空針の先端は、第３シリンジ筒内の第３ガスケット側の血漿画分中に到達する。第４シリンジの第４プランジャが引き出されると、第４ガスケットが第４シリンジ筒を移動し、これにより、第２中空針を通じて血漿画分が第４シリンジ筒内に吸引される。【００１９】
血漿画分を吸引した後、第４シリンジと共に第２中空針が、又は第２中空針とエクステンションチューブが、第３シリンジ筒から引き出される。第４シリンジ筒から第２中空針が取り外され、第４ポートが第４キャップにより封止される。これにより、第４シリンジ筒内に血漿画分が密封される。さらに、第４ガスケットから第４プランジャが取り外される。第４シリンジ筒は、この状態で遠心分離が行われる。遠心分離により、血漿画分は、上側（第４ガスケット側）がほぼ血漿成分のみの上清となり、下側（第４ポート側）が血小板が多い多血小板血漿となる。第４シリンジ筒から第４キャップが外され、第４ガスケットに第４プランジャが取り付けられて、多血小板血漿が、第４シリンジ筒の第４ポートから排出される。【００２０】
(6)  上記第２分割プランジャは、ねじ込み式により上記第１分割プランジャに対して着脱可能であることが好ましい。上記第４プランジャは、ねじ込み式により上記第４ガスケットに対して着脱可能であることが好ましい。これにより、第１分割プランジャに着脱可能な第２分割プランジャ、及び第４ガスケットに着脱可能な第４プランジャが簡易に実現される。また、第１分割プランジャへ第２分割プランジャを着脱すること、第４ガスケットに第４プランジャを着脱することを繰り返すことができる。【００２１】
(7)  上記第１分割プランジャは、上記挿通孔を封止し且つ上記第２中空針が貫通可能な栓を有するものが好ましい。これにより、第２分割プランジャが取り外された状態においても、第１分割プランジャの挿通孔を封止して、第３シリンジ筒の密封状態を維持することができる。【００２２】
(8)  上記第３シリンジ及び上記第４シリンジが滅菌袋に密封されたものであることが好ましい。これらがキットとして１つの滅菌袋に密封されることにより、使い勝手が向上する。【００２３】
(9)  本発明に係る多血小板血漿分離方法は、第１ポートを有する第１シリンジ筒、該第１シリンジ筒を液密に封止して第１シリンジ筒内を往復動される第１ガスケット、及び該第１ガスケットに設けられた第１プランジャを具備する第１シリンジと、第１中空針、該第１中空針を取付可能な第２ポートを有する第２シリンジ筒、該第２シリンジ筒を液密に封止して第２シリンジ筒内を往復動される第２ガスケット、及び該第２ガスケットに設けられた第２プランジャを具備する第２シリンジと、を用いる。本多血小板血漿分離方法は、採血された血液が満たされた上記第１シリンジ筒の第１ポートを封止する第１ステップと、上記第１シリンジ筒の第１ポート側を遠心移動方向として、上記第１シリンジ筒内の血液を、赤血球を含む第１区分と血小板及び血漿を含む第２区分とに遠心分離する第２ステップと、上記第１シリンジ筒内の第１ガスケットに第１中空針を貫通し、上記第２区分を上記第２シリンジ筒に吸引する第３ステップと、上記第２区分が満たされた上記第２シリンジ筒の第２ポートを封止する第４ステップと、上記第２シリンジ筒の第２ポート側を遠心移動方向として、上記第２シリンジ筒内の第２区分に対して遠心分離を行う第５ステップと、上記第２シリンジ筒内の第２ガスケットを移動させて、遠心分離された上記第２区分から多血小板血漿を上記第２ポートから排出する第６ステップと、を含む。【００２４】
第１シリンジは、採血に使用される。第１シリンジ筒の第１ポートには採血針が取り付け可能である。採血針は、直接に第１ポートに取り付けても、エクステンションチューブなどの他の部材を介して第１ポートに取り付けてもよい。採血針を取り付けた第１シリンジを用いて、通常の方法で採血が行われる。この採血により、第１シリンジ筒は血液（全血）で満たされる。第１ステップでは、第１シリンジの第１ポートを封止して第１シリンジ筒を密封状態にする。つまり、採血を行った後、第１シリンジ筒から採血針を取り外す。そして、第１シリンジ筒の第１ポートをキャップで封止する。【００２５】
第２ステップでは、密封した第１シリンジを用いて１回目の遠心分離を行う。この遠心分離において、第１シリンジ筒の第１ポート側を遠心移動方向とする。ここで、「遠心移動方向」とは、遠心分離において遠心力が作用する方向であり、通常は下側である。この遠心分離により、第１シリンジ筒に密封された血液は、第１区分と第２区分とに分離される。第１区分は、赤血球を含む画分である。第２区分は血小板及び血漿を含む。第１区分は、遠心分離により遠心移動方向、つまり下側に分離される。【００２６】
第３ステップでは、第１シリンジ筒内の第２区分を第２シリンジ筒に吸引する。遠心分離を行った後、第１シリンジ筒に第２シリンジを進入させる。そして、第２シリンジの第２ポートに取り付けられた第１中空針を第１ガスケットに貫通させる。なお、第１中空針は、直接に第２ポートに取り付けても、エクステンションチューブなどの他の部材を介して第２ポートに取り付けてもよい。仮に、第１中空針をエクステンションチューブを介して第２ポートに取り付けた場合には、第１中空針及びエクステンションチューブを第１シリンジ筒に進入させて、第１中空針を第１ガスケットに貫通させる。その状態で、第２プランジャを第２シリンジ筒から引き出して、第１シリンジ筒内の第２区分を第２シリンジ筒内へ吸引する。【００２７】
第４ステップでは、第２区分が満たされた第２シリンジ筒の第２ポートを封止して、第２シリンジ筒を密封状態にする。第２シリンジ筒には第２区分のみが満たされている。この第２シリンジ筒の第２ポートをキャップで封止する。【００２８】
第５ステップでは、密封した第２シリンジを用いて２回目の遠心分離を行う。この遠心分離において、第２シリンジ筒の第２ポート側を遠心移動方向とする。この遠心分離により、第２区分が遠心分離され、血小板が遠心移動方向、つまり下側に移動する。【００２９】
第６ステップでは、第２シリンジ筒から多血小板血漿を排出する。遠心分離を行った後、第２シリンジ筒からキャップを外して第２ポートを開封する。その状態で、第２プランジャを操作して第２ガスケットを第２ポート側へ移動させる。２回目の遠心分離により第２区分中の血小板が遠心移動して、第２区分は、上側がほぼ血漿成分のみの上清となり、下側（第２ポート側）が血小板が多い多血小板血漿となる。したがって、第２ガスケットの移動により第２ポートから多血小板血漿が排出される。これにより、採血された血液から多血小板血漿が分離される。【００３０】
(10)  上記第６ステップにおいて、遠心分離された上記第２区分から上記第２ポート側の所定量を多血小板血漿として排出することが考えられる。【００３１】
(11)  上記第２ステップにおける遠心分離は弱遠心であり、上記第５ステップにおける遠心分離は強遠心であることが考えられる。【００３２】
第２ステップを弱遠心とすることにより、血液（全血）を第１区分及び第２区分に分離することができる。また、第１区分と第２区分との境界付近に血小板が集中することがなく、第２区分の吸引に伴う血小板のロスを少なくすることができる。第５ステップを強遠心とすることにより、第２区分から高濃度の多血小板血漿を分離することができる。【００３３】
(12)  本発明は、上記多血小板血漿分離方法により得られた多血小板血漿として捉えることができる。【００３４】
(13)  本発明に係る多血小板血漿分離方法は、第３ポートを有する第３シリンジ筒、該第３シリンジ筒を液密に封止して第３シリンジ筒内を往復動される第３ガスケット、及び該第３ガスケットに設けられた第３プランジャを具備する第３シリンジと、第２中空針、該第２中空針を取付可能な第４ポートを有する第４シリンジ筒、該第４シリンジ筒を液密に封止して第４シリンジ筒内を往復動される第４ガスケット、及び該第４ガスケットに設けられた第４プランジャを具備する第４シリンジと、を用いる。本多血小板血漿分離方法は、採血された血液が満たされた上記第３シリンジ筒の第３ポートを封止する第７ステップと、上記第３シリンジ筒の第３ポート側を遠心移動方向として、上記第３シリンジ筒内の血液を、赤血球を含む第１区分と血小板及び血漿を含む第２区分とに遠心分離する第８ステップと、上記第３シリンジ筒内の第３ガスケットに第２中空針を貫通し、上記第２区分を上記第４シリンジ筒に吸引する第９ステップと、上記第２区分が満たされた上記第４シリンジ筒の第４ポートを封止する第１０ステップと、上記第４シリンジ筒の第４ポート側を遠心移動方向として、上記第４シリンジ筒内の第２区分に対して遠心分離を行う第１１ステップと、上記第４シリンジ筒内の第４ガスケットを移動させて、遠心分離された上記第２区分から多血小板血漿を上記第４ポートから排出する第１２ステップと、を含む。【００３５】
第３シリンジは、採血に使用される。第３シリンジ筒の第３ポートには採血針が取り付け可能である。採血針は、直接に第３ポートに取り付けても、エクステンションチューブなどの他の部材を介して第３ポートに取り付けてもよい。採血針を取り付けた第３シリンジを用いて、通常の方法で採血が行われる。この採血により、第３シリンジ筒は血液（全血）で満たされる。第７ステップでは、第３シリンジの第３ポートを封止して第３シリンジ筒を密封状態にする。つまり、採血を行った後、第３シリンジ筒から採血針を取り外す。そして、第３シリンジ筒の第３ポートをキャップで封止する。【００３６】
第８ステップでは、密封した第３シリンジを用いて１回目の遠心分離を行う。この遠心分離において、第３シリンジ筒の第３ポート側を遠心移動方向とする。ここで、「遠心移動方向」とは、遠心分離において遠心力が作用する方向であり、通常は下側である。この遠心分離により、第３シリンジ筒に密封された血液は、第１区分と第２区分とに分離される。第１区分は、赤血球を含む。第２区分は血小板及び血漿を含む。第１区分は、遠心分離により遠心移動方向、つまり下側に分離される。【００３７】
第９ステップでは、第３シリンジ筒内の第２区分を第４シリンジ筒に吸引する。遠心分離を行った後、第３シリンジ筒に第４シリンジを進入させる。そして、第４シリンジの第４ポートに取り付けられた第２中空針を第３ガスケットに貫通させる。なお、第２中空針は、直接に第４ポートに取り付けても、エクステンションチューブなどの他の部材を介して第４ポートに取り付けてもよい。仮に、第３中空針をエクステンションチューブを介して第４ポートに取り付けた場合には、第２中空針及びエクステンションチューブを第３シリンジ筒に進入させて、第２中空針を第３ガスケットに貫通させる。その状態で、第４プランジャを第４シリンジ筒から引き出して、第３シリンジ筒内の第２区分を第４シリンジ筒内へ吸引する。【００３８】
第１０ステップでは、第２区分が満たされた第４シリンジ筒の第４ポートを封止して、第４シリンジ筒を密封状態にする。第４シリンジ筒には第２区分のみが満たされている。この第４シリンジ筒の第４ポートをキャップで封止する。【００３９】
第１１ステップでは、密封した第４シリンジを用いて２回目の遠心分離を行う。この遠心分離において、第４シリンジ筒の第４ポート側を遠心移動方向とする。この遠心分離により、第２区分が遠心分離され、血小板が遠心移動方向、つまり下側に移動する。【００４０】
第１２ステップでは、第４シリンジ筒から多血小板血漿を排出する。遠心分離を行った後、第４シリンジ筒からキャップを外して第４ポートを開封する。その状態で、第４プランジャを操作して第４ガスケットを第４ポート側へ移動させる。２回目の遠心分離により第２区分中の血小板が遠心移動して、第２区分は、上側がほぼ血漿成分のみの上清となり、下側（第４ポート側）が血小板が多い多血小板血漿となる。したがって、第４ガスケットの移動により第４ポートから多血小板血漿が排出される。これにより、採血された血液から多血小板血漿が分離される。【００４１】
(14)  上記第１２ステップにおいて、遠心分離された上記第２区分から上記第４ポート側の所定量を多血小板血漿として排出することが考えられる。【００４２】
(15)  上記第８ステップにおける遠心分離は弱遠心であり、上記第１１ステップにおける遠心分離は強遠心であることが考えられる。【００４３】
(16)  本発明は、上記多血小板血漿分離方法により得られた多血小板血漿として捉えることができる。
【発明の効果】
【００４４】
本発明に係る多血小板血漿分離装置及び多血小板血漿分離方法によれば、採血に使用したシリンジを用いて遠心分離を行って、多血小板血漿を得ることができる。これにより、γ線滅菌がされた少数の器具で多血小板血漿の分離を実現できる。また、２つのシリンジを用いることにより、第１区分と第２区分とを確実に分離して、高濃度の多血小板血漿を得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１】図１は、本発明の第１実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第１シリンジ１０の外観構成を示す分解斜視図である。
【図２】図２は、第１シリンジ１０の内部構成を示す縦断面図である。
【図３】図３は、本発明の第１実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第２シリンジ１１の外観構成を示す分解斜視図である。
【図４】図４は、第２シリンジ１１の内部構成を示す縦断面図である。
【図５】図５は、第１実施形態による多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多血小板血漿分離装置の状態を示す断面図である。
【図６】図６は、第１実施形態による多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多血小板血漿分離装置の状態を示す断面図である。
【図７】図７は、第１実施形態による多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多血小板血漿分離装置の状態を示す断面図である。である。
【図８】図８は、本発明の第２実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第３シリンジ６０の外観構成を示す分解斜視図である。
【図９】図９は、第３シリンジ６０の内部構成を示す縦断面図である。
【図１０】図１０は、本発明の第２実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第４シリンジ６１の外観構成を示す分解斜視図である。
【図１１】図１１は、第４シリンジ６１の内部構成を示す縦断面図である。
【図１２】図１２は、第２実施形態による多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多血小板血漿分離装置の状態を示す断面図である。
【図１３】図１３は、第２実施形態による多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多血小板血漿分離装置の状態を示す断面図である。
【図１４】図１４は、第２実施形態による多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多血小板血漿分離装置の状態を示す断面図である。である。
【符号の説明】
【００４６】
１０・・・第１シリンジ
１１・・・第２シリンジ
１２・・・第１ポート
１３・・・第１シリンジ筒
１４・・・第１キャップ
１５・・・第１ガスケット
１６・・・第１プランジャ
３０・・・第１中空針
３１・・・第２ポート
３２・・・第２シリンジ筒
３３・・・第２キャップ
３４・・・第２ガスケット
３５・・・第２プランジャ
４３・・・ガイド片
４８・・・取付孔（ガイド孔）
６０・・・第３シリンジ
６１・・・第４シリンジ
６２・・・第３ポート
６３・・・第３シリンジ筒
６４・・・第３キャップ
６５・・・第３ガスケット
６６・・・第１分割プランジャ
６７・・・第２分割プランジャ
８０・・・孔（挿通孔）
８３・・・栓
９０・・・第２中空針
９１・・・第４ポート
９２・・・第４シリンジ筒
９３・・・第４キャップ
９４・・・第４ガスケット
９５・・・第４プランジャ
【発明を実施するための最良の形態】
【００４７】
以下、本発明の好ましい実施形態を説明する。なお、本実施形態は本発明の一実施態様にすぎず、本発明の要旨を変更しない範囲で実施態様を変更できることは言うまでもない。【００４８】
［第１実施形態］
図１は、本発明の第１実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第１シリンジ１０の外観構成を示す分解斜視図である。図２は、第１シリンジ１０の内部構成を示す縦断面図である。図３は、本発明の第１実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第２シリンジ１１の外観構成を示す分解斜視図である。図４は、第２シリンジ１１の内部構成を示す縦断面図である。【００４９】
本発明に係る多血小板血漿分離装置は、第１シリンジ１０と第２シリンジ１１とを具備する。第１シリンジ１０は、血液を吸引するために用いられる。血液の吸引とは、具体的には採血が挙げられるが、必ずしも採血である必要はなく、既に採血された血液を吸引する場合も含まれる。第２シリンジ１１は、遠心分離により第１シリンジ１０に形成された白血球、血小板、及び血漿を含む画分（本発明の第２区分に相当する。）を吸引するために用いられる。【００５０】
図１及び図２に示されるように、第１シリンジ１０は、採血針が取付可能な第１ポート１２を有する第１シリンジ筒１３と、第１ポート１２に着脱可能な第１キャップ１４と、第１シリンジ筒１３内を往復動される第１ガスケット１５と、第１ガスケット１５に着脱可能に設けられた第１プランジャ１６とを具備する。【００５１】
第１シリンジ筒１３は、ほぼ円筒形状であり、一方の端部が縮径されて針取付部２０が形成されている。針取付部２０の内部空間は、第１シリンジ筒１３の内部空間と連続している。針取付部２０により本発明に係る第１ポート１２が形成されている。針取付部２０には、採血針が取り付け可能である。第１シリンジ筒１３の他方の端部は、縮径されることなく開口されている。この他方の端部から第１シリンジ筒１３の内部空間へ第１プランジャ１６が進退される。第１シリンジ筒１３の他方の端部には、第１シリンジ筒１３の外周側へ突出する鍔２１が形成されている。鍔２１はハンドリングを向上させるためのものであり、第１シリンジ筒１３及び第１プランジャ１６の操作の際に鍔２１に指が掛けられる。【００５２】
第１シリンジ筒１３のγ線滅菌が可能なものであれば素材は特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第１シリンジ筒１３をポリプロピレンの成形品とすることが一般的である。第１シリンジ筒１３の内部空間に満たされた血液や血漿などを目視確認するために、第１シリンジ筒１３は、透明ないし半透明であることが好ましい。第１シリンジ筒１３の容量は特に限定されない。第１シリンジ筒１３に容量を示す目盛りが付されていると、内部空間に満たされた液体の量などが容易に把握できるので好ましい。【００５３】
第１キャップ１４は、第１シリンジ筒１３の第１ポート１２を封止する。図１及び図２に示されるように、第１キャップ１４は、大径部２２及び小径部２３を有する。小径部２３は、大径部２２の内側の空間に配置されている。小径部２３は、第１シリンジ筒１３の針取付部２０に外嵌可能な管形状である。小径部２３の内部には、第１シリンジ筒１３の第１ポート１２に嵌入可能な栓部２４が配設されている。大径部２２は、第１キャップ１４を第１シリンジ筒１３に着脱する際の持ち手として機能する。第１キャップ１４が第１シリンジ筒１３に取り付けられると、図２に示されるように、小径部２３が針取付部２０の外周面に密着し、栓部２４が第１ポート１２に嵌入して、第１ポート１２が液密に封止される。【００５４】
第１キャップ１４の素材はγ線滅菌が可能ものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第１キャップ１４としてポリプロピレンやエラストマーの成形品が採用されうる。【００５５】
第１ガスケット１５は、第１シリンジ筒１３の内部に挿入されて第１シリンジ筒１３を液密に封止する。第１ガスケット１５は、液密状態を維持したまま、第１シリンジ筒１３内を往復動可能である。第１ガスケット１５の往復動により、第１シリンジ筒１３の内部に密封可能な液体の容量が変化する。図１に示されるように、第１ガスケット１５は、第１シリンジ筒１３の内径に対応した径の円柱形状である。図２に示されるように、第１ガスケット１５の一方の端面は円錐形状に突出されている。この端面の形状は、第１シリンジ筒１３の奥部の形状に対応している。第１プランジャ１６と接続される第１ガスケット１５の他方の端面には、取付孔２５が形成されている。取付孔２５は第１ガスケット１５の円形の端面の中心に形成されている。取付孔２５は円孔である。この取付孔２５が、本発明に係るガイド孔に相当する。取付孔２５の内周面には、雌ネジ２６が形成されている。【００５６】
第１ガスケット１５の素材はγ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第１ガスケット１５としてエラストマーの成形品が採用されうる。【００５７】
第１プランジャ１６は、ねじ込み式により第１ガスケット１５に対して着脱可能なものである。第１プランジャ１６の全体形状は、第１シリンジ筒１３の内部空間に挿入可能な外形であって、第１シリンジ筒１３の軸方向（図１の１点鎖線方向、図２における上下方向）の長さより十分に長い。したがって、第１ガスケット１５を第１シリンジ筒１３の奥部（第１ポート１２側）に押し込んだ状態で、第１プランジャ１６の一部が第１シリンジ筒１３の反対側の端部から突出する。【００５８】
第１プランジャ１６は、雄ネジ部２７と軸部２８と端板２９とを有する。雄ネジ部２７は、第１ガスケット１５の取付孔２５にねじ込まれる。取付孔２５の雌ネジ２６と雄ネジ部２７とは噛合する。これにより、第１プランジャ１６が第１ガスケット１５に対してねじ込み式により着脱される。この着脱は繰り返し行うことができる。【００５９】
軸部２８は、横断面（軸方向と直交する方向）が十字形状である。軸部２８の断面形状は成形加工の容易性や強度などを考慮して適宜選択されうる。軸部２８の一方端に雄ネジ部２７が配置され、他方端に端板２９が配置されている。端板２９は、円板形状の平板であり、軸部２８の軸方向に対して垂直に接続されている。端板２９は第１プランジャ１６のハンドリングを向上させるためのものであり、第１プランジャ１６が第１シリンジ筒１３に対して押し込まれる際に指が押し当てられ、第１プランジャ１６が第１シリンジ筒１３から引き出される際に持ち手となる。【００６０】
第１プランジャ１６の素材はγ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第１プランジャ１６をポリプロピレンの成形品とすることが一般的である。【００６１】
図３及び図４に示されるように、第２シリンジ１１は、第１中空針３０と、第１中空針３０が取付可能な第２ポート３１を有する第２シリンジ筒３２と、第２ポート３１に着脱可能な第２キャップ３３と、第２シリンジ筒３２内を往復動される第２ガスケット３４と、第２ガスケット３４に着脱可能に設けられた第２プランジャ３５とを具備する。【００６２】
第１中空針３０は、中空管の先端側に刃面が形成されたカヌラ４０と、カヌラ４０の基端と接続されたハブ４１とを有する。カヌラ４０の軸方向の長さは、第１シリンジ１０の第１ガスケット１５を貫通するに必要な長さに設定される。ハブ４１は、ほぼ円筒形状であり、第２シリンジ筒３２の針取付部４２に外嵌されるに必要な内径及び軸方向の長さに設定される。ハブ４１において、カヌラ４０の基端が接続される側の端部は、カヌラ４０の接続により閉止されている。カヌラ４０とハブ４１とは接着剤等により固定されている。ハブ４１において、針取付部４２と接続される側の端部は開口されている。カヌラ４０の基端側の開口は、ハブ４１の内部空間と通じている。したがって、カヌラ４０の先端側の開口からカヌラ４０内に進入した液体等は、カヌラ４０の基端側の開口からハブ４１の内部空間へ流入する。この内部空間は、ハブ４１が針取付部４２に外嵌されることにより、第２ポート３１と連続する。【００６３】
第２シリンジ筒３２は、ほぼ円筒形状であり、第１シリンジ筒１３の内部空間に浸入可能な大きさである。第２シリンジ筒３２の一方の端部は縮径されて、針取付部４２が形成されている。針取付部４２の内部空間は、第２シリンジ筒３２の内部空間と連続している。針取付部４２により本発明に係る第２ポート３１が形成されている。針取付部４２には、第１中空針３０が取り付け可能である。第２シリンジ筒３２には、針取付部４２の周囲にガイド片４３が形成されている。ガイド片４３は円筒形状であり、一端側が第２シリンジ３２に接続されており、他端側が第２ポート３１と同方向に開口している。ガイド片４３の内面と針取付部４２の外面との間に間隙が形成されている。この間隙は、第１中空針３０のハブ４１並びに第２キャップ３３の小径部４６が挿入可能に設定される。ガイド片４３の軸方向の長さは、針取付部４２の軸方向の長さより十分に長く、具体的には、針取付部４２に取り付けられた第１中空針３０のハブ４１を完全に覆う程度の長さに設定される。ガイド片４３の外径は、第１ガスケット１５の取付孔２５の内径に対応しており、ガイド片４３は取付孔２５に嵌入可能である。なお、本実施形態ではガイド片４３が第２シリンジ筒３２と一体に成形されているが、針取付部４２への第１中空針３０の取り付けの容易のために、ガイド片４３は第２シリンジ筒３２に対して着脱可能であってもよい。【００６４】
第２シリンジ筒３２の他方の端部は、縮径されることなく開口されている。この他方の端部から第２シリンジ筒３２の内部空間へ第２プランジャ３５が進退される。第２シリンジ筒３２の他方の端部には、第２シリンジ筒３２の外周側へ突出する鍔４４が形成されている。鍔４４はハンドリングを向上させるためのものであり、第２シリンジ筒３２及び第２プランジャ３５の操作の際に鍔４４に指が掛けられる。【００６５】
第２シリンジ筒３２の素材はγ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第２シリンジ筒３２をポリプロピレンの成形品とすることが一般的である。第２シリンジ筒３２の内部空間に満たされた血漿などを目視確認するために、第２シリンジ筒３２は、透明ないし半透明であることが好ましい。第２シリンジ筒３２の容量は特に限定されない。第２シリンジ筒３２に容量を示す目盛りが付されていると、内部空間に満たされた液体の量などが容易に把握できるので好ましい。【００６６】
第２キャップ３３は、第２シリンジ筒３２の第２ポート３１を封止する。図３及び図４に示されるように、第２キャップ３３は、大径部４５及び小径部４６を有する。小径部４６は、大径部４５の内側の空間に配置されている。小径部４６は、第２シリンジ筒３２の針取付部４２に外嵌可能な管形状である。小径部４６の軸方向の長さは、ガイド片４３の軸方向の長さより十分に長く、第２キャップ３３を針取付部４２に取り付けた状態において、大径部４５とガイド片４３とが干渉しない。小径部４６の内部には、第２シリンジ筒３２の第２ポート３１に嵌入可能な栓部４７が配設されている。大径部４５は、第２キャップ３３を第２シリンジ筒３２に着脱する際の持ち手として機能する。第２キャップ３３が第２シリンジ筒３２に取り付けられると、図４に示されるように、小径部４６が針取付部４２の外周面に密着し、栓部４７が第２ポート３１に嵌入して、第２ポート３１が液密に封止される。【００６７】
第２キャップ３３の素材はγ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第２キャップ３３としてポリプロピレンやエラストマーの成形品が採用されうる。【００６８】
第２ガスケット３４は、第２シリンジ筒３２の内部に挿入されて第２シリンジ筒３２を液密に封止する。第２ガスケット３４は、液密状態を維持したまま、第２シリンジ筒３２内を往復動可能である。第２ガスケット３４の往復動により、第２シリンジ筒３２の内部に密封可能な液体の容量が変化する。図３に示されるように、第２ガスケット３４は、第２シリンジ筒３２の内径に対応した径の円柱形状である。図４に示されるように、第２ガスケット３４の一方の端面は円錐形状に突出されている。この端面の形状は、第２シリンジ筒３２の奥部の形状に対応している。第２プランジャ３５と接続される第２ガスケット３４の他方の端面には、取付孔４８が形成されている。取付孔４８は第２ガスケット３４の円形の端面の中心に形成されている。取付孔４８は円孔である。取付孔４８の内周面には、雌ネジ４９が形成されている。【００６９】
第２ガスケット３４の素材はγ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第２ガスケット３４としてエラストマーの成形品が採用されうる。【００７０】
第２プランジャ３５は、ねじ込み式により第２ガスケット３４に対して着脱可能なものである。第２プランジャ３５の全体形状は、第２シリンジ筒３２の内部空間に挿入可能な外形であって、第２シリンジ筒３２の軸方向（図３の１点鎖線方向、図４における上下方向）の長さより十分に長い。したがって、第２ガスケット３４を第２シリンジ筒３２の奥部（第２ポート３１側）に押し込んだ状態で、第２プランジャ３５の一部が第２シリンジ筒３２の反対側の端部から突出する。【００７１】
第２プランジャ３５は、雄ネジ部５０と軸部５１と端板５２とを有する。雄ネジ部５０は、第２ガスケット３４の取付孔４８にねじ込まれる。取付孔４８の雌ネジ４９と雄ネジ部５０とは噛合する。これにより、第２プランジャ３５が第２ガスケット３４に対してねじ込み式により着脱される。この着脱は繰り返し行うことができる。【００７２】
軸部５１は、横断面（軸方向と直交する方向）が十字形状である。軸部５１の断面形状は成形加工の容易性や強度などを考慮して適宜選択されうる。軸部５１の一方端に雄ネジ部５０が配置され、他方端に端板５２が配置されている。端板５２は、円板形状の平板であり、軸部５１の軸方向に対して垂直に接続されている。端板５２は第２プランジャ３５のハンドリングを向上させるためのものであり、第２プランジャ３５が第２シリンジ筒３２に対して押し込まれる際に指が押し当てられ、第２プランジャ３５が第２シリンジ筒３２から引き出される際に持ち手となる。【００７３】
第２プランジャ３５の素材はγ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第２プランジャ３５をポリプロピレンの成形品とすることが一般的である。【００７４】
再生医療に適した多血小板血漿が得ることを考慮すると、多血小板血漿分離装置を構成する各部材のうち、採血された血液と接触する少なくとも第１シリンジ筒１３、第１キャップ１４、第１ガスケット１５、第１中空針３０、第２シリンジ筒３２、第２キャップ３３、及び第２ガスケット３４は、γ線滅菌される。また、第１シリンジ１０及び第２シリンジ１１を滅菌袋に密封してキットとすることにより、多血小板血漿分離装置の使い勝手が向上する。【００７５】
また、本実施形態に係る第１シリンジ１０及び第２シリンジ１１の各部材の構成は一例であり、本発明の要旨を変更しない範囲において、各部材の構成の一部を他の公知の部材の構成に変更しうる。例えば、採血針は、第１シリンジ１０の針取付部２０に直接に取り付けられても、エクステンションチューブなどを介して針取付部２０に取り付けられてもよい。同様に、第１中空針３０は、第２シリンジ１１の針取付部４２に直接に取り付けられても、エクステンションチューブなどを介して針取付部４２に取り付けられてもよい。【００７６】
以下に、本発明に係る多血小板血漿分離方法が説明される。本実施形態に係る多血小板血漿分離方法は、上記多血小板血漿分離装置を用いて行われ、６つの主要なステップからなる。第１ステップでは、採血された血液１２０が満たされた第１シリンジ筒１３の第１ポート１２を封止する。第２ステップでは、第１シリンジ筒１３の第１ポート１２側を遠心移動方向として、第１シリンジ筒１３内の血液１２０を、赤血球を含む第１区分１２１と、白血球、血小板、及び血漿を含む第２区分１２２とに遠心分離する。第３ステップでは、第１シリンジ筒１３内の第１ガスケット１５に第１中空針３０を貫通し、第２区分１２２を第２シリンジ筒３２に吸引する。第４ステップでは、第２区分１２２が満たされた第２シリンジ筒３２の第２ポート３１を封止する。第５ステップでは、第２シリンジ筒３２の第２ポート３１側を遠心移動方向として、第２シリンジ筒３２内の第２区分１２２に対して遠心分離を行う。第６ステップでは、第２シリンジ筒３２内の第２ガスケット３４を移動させて、遠心分離された第２区分１２２から多血小板血漿１２３を第２ポート３１から排出する。これら各ステップが、図５から図７を用いて以下に詳細に説明される。図５から図７は、多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多血小板血漿分離装置の状態を示す断面図である。【００７７】
第１ステップでは、図５（ａ）に示されるように、第１シリンジ筒１３の第１ポート１２を第１キャップ１４で封止して第１シリンジ筒１３を密封状態にする。第１シリンジ１０は、採血に使用される。採血する際には、第１シリンジ筒１３の第１ポート１２に採血針が取り付けられる。もちろん、エクステンションチューブなどを介して採血針が第１ポート１２に取り付けられてもよい。また、第１プランジャ１６は第１ガスケット１５に取り付けられる。採血は通常の方法であり、詳細な説明は省略される。この採血により、第１シリンジ筒１３は血液１２０で満たされる。血液１２０は全血であり、赤血球、白血球、血小板、血漿などを含む。採血後に、第１シリンジ筒１３の第１ポート１２から採血針を取り外して、第１キャップ１４を用いて第１ポート１２を封止する。これにより、図５（ａ）に示されるように、第１シリンジ筒１３が密封状態となる。【００７８】
第２ステップでは、密封したシリンジを用いて１回目の遠心分離を行う。この遠心分離に先だって、図５（ｂ）に示されるように、第１プランジャ１６を第１ガスケット１５から取り外す。これにより、第１シリンジ筒１３から第１プランジャ１６が突出しないので、遠心分離において第１シリンジ筒１３の取り扱いが容易である。また、遠心分離において、第１プランジャ１６が不用意に操作されることがない。さらに、遠心分離において第１プランジャ１６の重量が第１ガスケット１５に作用しないので、第１シリンジ筒１３から第１キャップ１４が外れるおそれを軽減できる。【００７９】
この遠心分離において、第１シリンジ筒１３の第１ポート１２側を遠心移動方向とする。ここで、「遠心移動方向」とは、遠心分離において遠心力が作用する方向であり、通常は下側である。また、第２ステップにおける遠心分離は、弱遠心である。弱遠心とは、血液の遠心分離において慣用されており、一般に、「全血を赤血球とその他（白血球、血小板、血漿）に分離する遠心分離」（非特許文献１参照）と定義される。具体的には、遠心分離条件が約５００〜２５００ｒｐｍの範囲における遠心分離が弱遠心とされる。遠心分離に用いられる遠心分離装置は一般的なものなので、詳細な説明は省略される。【００８０】
この遠心分離により、第１シリンジ筒１３に密封された血液１２０は、第１区分１２１と第２区分１２２とに分離される。第１区分１２１は、赤血球画分である。第２区分１２２は白血球、血小板、及び血漿を含む画分である。図５（ｃ）に示されるように、第１区分１２１は、遠心分離により遠心移動方向、つまり第１シリンジ筒１３の下側に分離される。【００８１】
第３ステップでは、第１シリンジ筒１３内の第２区分１２２を第２シリンジ筒３２に吸引する。１回目の遠心分離を行った後、図６（ａ）に示されるように、第１シリンジ筒１３の上側から第２シリンジ１１を第１シリンジ筒１３内に進入させる。そして、第２シリンジ筒３２のガイド片４３を第１ガスケット１５の取付孔２５に嵌入する。これにより、第２シリンジ筒３２と第１ガスケット１５とが嵌合状態になる。同時に、第２シリンジ３２の第２ポート３１に取り付けられた第１中空針３０を第１ガスケット１５に貫通させる。これにより、第１中空針３０の先端は第１シリンジ筒１３内の第２区分１２２に到達する。この状態で、第２シリンジ１１の第２プランジャ３５を第２シリンジ筒３２から引き出して、第１シリンジ筒１３内の第２区分１２２を第２シリンジ筒３２内へ吸引する。なお、第１中空針３０がエクステンションチューブなどを介して第２ポート３１に取り付けられている場合には、第２シリンジ１１を第１シリンジ筒１３内に進入させることなく、第１中空針３０及びエクステンションチューブのみを第１シリンジ筒１３内に進入させて、第１中空針３０を第１ガスケット１５に貫通させればよい。【００８２】
図６（ｂ）に示されるように、第２シリンジ筒３２から第２プランジャ３５を引き出すと、第１シリンジ筒１３内の第２区分１２２が第２シリンジ筒３２へ吸引されるとともに、第１ガスケット１５が、第１シリンジ筒１３内を第１ポート１２側へ移動する。第１ガスケット１５と第２シリンジ筒３２とは嵌合状態にあるので、第１ガスケット１５の移動に伴って、第２シリンジ筒３２が、第１シリンジ筒１３にさらに進入する。これにより、第１シリンジ筒１３から第２シリンジ筒３２への第２区分１２２の吸引が連続的かつ円滑に行われる。なお、第１シリンジ筒１３には、第１区分１２１及び若干量の第２区分１２２が残るが、これらは廃棄するか、別目的に使用する。【００８３】
第２ステップにおける遠心分離を弱遠心とすることにより、血液１２０を第１区分１２１と第２区分１２２とに分離するとともに、第２区分１２２においては血小板をほぼ均等に分散させることができる。つまり、第１区分１２１との境界付近に血小板が集中することがない。これにより、第２区分１２２を第１シリンジ筒１３から第２シリンジ筒３２へ吸引する際に生ずる第２区分１２２の若干のロスにより失われる血小板の量を少なくすることができる。【００８４】
第４ステップでは、第２シリンジ筒３２の第２ポート３１を第２キャップ３３で封止して第２シリンジ筒３２を密封状態にする。図６（ｂ）に示されるように、第２シリンジ筒３２には、第１シリンジ筒１３から吸引された第２区分１２２のみで満たされている。第２プランジャ３５が移動しないように固定しながら、第２シリンジ１１を第１シリンジ筒１３から引き出すと、密閉状態の第１シリンジ筒１３内の第１ガスケット１５は、第１シリンジ筒１３を移動せずに静止状態を維持する。したがって、第１ガスケット１５の取付孔２５から第２シリンジ筒３２のガイド片４３が抜けて、第１ガスケット１５と第２シリンジ筒３２の嵌合状態が解除される。これとともに、第１中空針３０が第１ガスケット１５から抜け出る。第２シリンジ１１を第１シリンジ筒１３から完全に引き出した後、第２シリンジ筒３２から第１中空針３０を外して、図６（ｃ）に示されるように、第２ポート３１を第２キャップ３３で封止する。これにより、第２シリンジ筒３２は第２区分１２２が満たされた状態で密封状態になる。【００８５】
第５ステップでは、密封した第２シリンジ筒３２を用いて２回目の遠心分離を行う。この遠心分離に先だって、図７（ａ）に示されるように、第２プランジャ３５を第２ガスケット３４から取り外す。これにより、第２シリンジ筒３２から第２プランジャ３５が突出しないので、遠心分離において第２シリンジ筒３２の取り扱いが容易である。また、遠心分離において、第２プランジャ３５が不用意に操作されることがない。さらに、遠心分離において第２プランジャ３５の重量が第２ガスケット３４に作用しないので、第２シリンジ筒３２から第２キャップ３３が外れるおそれを軽減できる。【００８６】
この遠心分離において、第２シリンジ筒３２の第２ポート３１側を遠心移動方向とする。また、第５ステップにおける遠心分離は、強遠心である。強遠心とは、血液の遠心分離において慣用されており、一般に、「血小板、白血球と残留赤血球を血漿から分離する遠心分離」（非特許文献１参照）と定義される。本発明では、第２区分の下方に血小板を濃縮する遠心分離を強遠心という。具体的には、遠心分離条件が約３０００〜４０００ｒｐｍの範囲における遠心分離が強遠心とされる。この遠心分離により、図７（ｂ）に示されるように、第２区分１２２が遠心分離され、血小板が遠心移動方向、つまり第２シリンジ筒３２の下側に移動する。また、この遠心分離を強遠心とすることにより、第２区分１２２から高濃度のＰＲＰ１２３を分離することができる。なお、図７（ｂ）において、第２区分１２２中に示された横線の密度が高いほど、血小板濃度が高いことが示されている。実際には、遠心分離された第２区分１２２において、上側から下側へ向けて形成されるほぼ透明から濃い黄色へのグラデーションにより、血小板が下側に移動したことが目視により確認できる。【００８７】
第６ステップでは、第２シリンジ筒３２からＰＲＰ１２３を排出する。遠心分離を終了した後、図７（ｃ）に示されるように、第２プランジャ３５を第２ガスケット３４に取り付ける。これにより、第２ガスケット３４が容易に移動できる。そして、第２シリンジ筒３２から第２キャップ３３を外して第２ポート３１を開封する。その状態で、第２プランジャ３５を操作して第２ガスケット３４を第２ポート３１側へ移動させる。２回目の遠心分離により第２区分１２２中の血小板が遠心移動して、第２区分１２２は、上側がほぼ血漿成分のみの上清となり、下側（第２ポート３１側）が血小板が多いＰＲＰ１２３となる。したがって、第２ガスケット３４の移動により第２ポート３１からＰＲＰ１２３が排出される。排出されたＰＲＰ１２３は、滅菌された容器１９で受け取る。これにより、採血された血液１２０からＰＲＰ１２３が分離される。【００８８】
ＰＲＰ１２３における血小板の濃度は必ずしも明確に定義されていないが、例えば、１ｍＬにおける血小板数を血小板の濃度とした場合、採取された全血における血小板の濃度に対して３〜７倍に濃縮されたものがＰＲＰ６３とされる。また、本発明に係る多血小板血漿分離方法においては、第６ステップにおいて遠心分離された第２区分１２２のうちの第２ポート３１側の所定量をＰＲＰ１２３とすることが考えられる。本実施形態に係る多血小板血漿分離方法によれば、例えば、約１０ｍＬの血液６０から約１ｍＬのＰＲＰ６３を得ることができる。【００８９】
なお、本実施形態では、第６ステップにおけるＰＲＰ１２３の排出を、第２シリンジ筒３２の第２ポート３１から容器１９などに直接排出することとしたが、感染防止などを考慮して、第２シリンジ筒３２の第２ポート３１にチューブ及び三方活栓などを接続して、排出されるＰＲＰ１２３を別のシリンジ内に吸引してもよい。【００９０】
このように、本発明に係る多血小板血漿分離装置及び多血小板血漿分離方法によれば、採血に使用した第１シリンジ１０を用いて遠心分離を行って、血液１２０からＰＲＰ１２３を得ることができる。これにより、γ線滅菌がされた少数の器具でＰＲＰ１２３の分離を実現できる。また、２つのシリンジ１０，１１を用いることにより、第１区分１２１と第２区分１２２とを確実に分離して、高濃度のＰＲＰ１２３を得ることができる。【００９１】
［第２実施形態］
図８は、本発明の第２実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第１シリンジ６０の外観構成を示す分解斜視図である。図９は、第３シリンジ６０の内部構成を示す縦断面図である。図１０は、本発明の第２実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第４シリンジ６１の外観構成を示す分解斜視図である。図１１は、第４シリンジ６１の内部構成を示す縦断面図である。【００９２】
本発明に係る多血小板血漿分離装置は、第３シリンジ６０と第４シリンジ６１とを具備する。第３シリンジ６０は、血液を吸引するために用いられる。血液の吸引とは、具体的には採血が挙げられるが、必ずしも採血である必要はなく、既に採血された血液を吸引する場合も含まれる。第４シリンジ６１は、遠心分離により第３シリンジ６０に形成された白血球、血小板、及び血漿を含む画分（本発明の第２区分に相当する。）を吸引するために用いられる。【００９３】
図８及び図９に示されるように、第３シリンジ６０は、採血針が取付可能な第３ポート６３を有する第３シリンジ筒６３と、第３ポート６３に着脱可能な第３キャップ６４と、第３シリンジ筒６３内を往復動される第３ガスケット６５と、第３ガスケット６５に設けられた第１分割プランジャ６６と、第１分割プランジャ６６に着脱可能に接続された第２分割プランジャ６７とを具備する。【００９４】
第３シリンジ筒６３は、ほぼ円筒形状であり、一方の端部が縮径されて針取付部７０が形成されている。針取付部７０の内部空間は、第３シリンジ筒６３の内部空間と連続している。針取付部７０により本発明に係る第３ポート６２が形成されている。針取付部７０には、採血針が取り付け可能である。第３シリンジ筒６３の他方の端部は、縮径されることなく開口されている。この他方の端部から第３シリンジ筒６３の内部空間へ第１分割プランジャ６６及び第２分割プランジャ６７が進退される。第３シリンジ筒６３の他方の端部には、第３シリンジ筒６３の外周側へ突出する鍔７１が形成されている。鍔７１はハンドリングを向上させるためのものであり、第３シリンジ筒６３、第１分割プランジャ６６及び第２分割プランジャ６７の操作の際に鍔７１に指が掛けられる。【００９５】
第３シリンジ筒６３の素材はγ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第３シリンジ筒６３をポリプロピレンの成形品とすることが一般的である。第３シリンジ筒６３の内部空間に満たされた血液や血漿などを目視確認するために、第３シリンジ筒６３は、透明ないし半透明であることが好ましい。第３シリンジ筒６３の容量は特に限定されない。第３シリンジ筒６３に容量を示す目盛りが付されていると、内部空間に満たされた液体の量などが容易に把握できるので好ましい。【００９６】
第３キャップ６４は、第３シリンジ筒６３の第３ポート６２を封止する。図８及び図９に示されるように、第３キャップ６４は、大径部７２及び小径部７３を有する。小径部７３は、大径部７２の内側の空間に配置されている。小径部７３は、第３シリンジ筒６３の針取付部７０に外嵌可能な管形状である。小径部７３の内部には、第３シリンジ筒６３の第３ポート６２に嵌入可能な栓部７４が配設されている。大径部７２は、第３キャップ６４を第３シリンジ筒３３に着脱する際の持ち手として機能する。第３キャップ６４が第３シリンジ筒６３に取り付けられると、図９に示されるように、小径部７３が針取付部７０の外周面に密着し、栓部７４が第３ポート６２に嵌入して、第３ポート６２が液密に封止される。【００９７】
第３キャップ６４の素材はγ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第３キャップ６４としてポリプロピレンやエラストマーの成形品が採用されうる。【００９８】
第３ガスケット６５は、第３シリンジ筒６３の内部に挿入されて第３シリンジ筒６３を液密に封止する。第３ガスケット６５は、液密状態を維持したまま、第３シリンジ筒６３内を往復動可能である。第３ガスケット６５の往復動により、第３シリンジ筒６３の内部に密封可能な液体の容量が変化する。図８に示されるように、第３ガスケット６５は、第３シリンジ筒６３の内径に対応した径の円柱形状である。図９に示されるように、第３ガスケット６５の一方の端面は円錐形状に突出されている。この端面の形状は、第３シリンジ筒６３の奥部の形状に対応している。第１分割プランジャ６６と接続される第３ガスケット６５の他方の端面には、取付孔７５が形成されている。取付孔７５は第３ガスケット６５の円形の端面の中心に形成されている。取付孔７５は円孔であり、その奥部が拡径されている。換言すれば、取付孔２５の開口は縮径されている。【００９９】
第３ガスケット６５の素材はγ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第３ガスケット６５としてエラストマーの成形品が採用されうる。【０１００】
第１分割プランジャ６６は、はめ込み式により第３ガスケット６５に取り付けられている。第１分割プランジャ６６の全体形状は、第３シリンジ筒６３の内部空間に挿入可能な外形であって、第３シリンジ筒６３の軸方向（図８の１点鎖線方向、図９における上下方向）に長い略円筒形状である。第１分割プランジャ６６の軸方向の長さは、第３シリンジ筒６３の軸方向の長さより十分に短い。したがって、第３ガスケット６５に取り付けられた状態で、第３ガスケット６５が第３シリンジ筒６３内を往復動する範囲の大部分において、第１分割プランジャ６６は第３シリンジ筒６３の内部空間に埋没している。【０１０１】
第１分割プランジャ６６は、軸部７９の先端側（第３ガスケット６５側）に嵌入部７６を有する。嵌入部７６は、軸部７９の先端から軸方向に突出されており、首部７７と鍔部７８とを有する。首部７７及び鍔部７８は、首部７７から軸方向に順次配置されている。首部７７は、鍔部７８及び軸部７９の外形より小さい。つまり、首部７７は、鍔部７８と軸部７９との間の縮径された部分である。鍔部７８は、円盤形状であり、軸方向と直交する方向を円形の端面として配設されている。この首部７７及び鍔部７８の形状と、第３ガスケット６５の取付孔７５の形状とが対応して、取付孔７５と嵌入部７６とが嵌合されている。【０１０２】
軸部７９は、ほぼ円筒形状である。軸部７９により形成される孔８０が本発明に係る挿通孔に相当する。孔８０は、軸部７９を軸方向にわたって形成されており、嵌入部７６の鍔部７８に至る。したがって、第３ガスケット６５と第１分割プランジャ６６とが嵌合された状態において、孔８０は、軸部７９の基端側（第２分割プランジャ６７側）から第３ガスケット６５に通ずる経路となる。孔８０は、第２中空針９０のカヌラ１００が挿通されるに十分な径である。【０１０３】
軸部７９の基端側には、接続部８１が形成されている。接続部８１は、軸部７９より縮径されて軸方向へ突出されている。接続部８１の外周面には雄ネジ８２が形成されている。軸部７９の孔８０は、接続部８１に到達して基端側に開口している。この開口には、栓８３が嵌入されている。栓８３は、ゴムやエラストマーなどの弾性部材であり、第２中空針９０のカヌラ１００が貫通可能である。この栓８３により、孔８０の基端側が封止されている。また、軸部７９の基端側には栓８３を覆うようにカバー８４が装着されている。カバー８４は、栓８３の脱落を防止するためのものである。カバー８４には、栓８３の一部を露出するための孔８５が形成されている。孔８５は、軸部７９の孔８０とほぼ同軸上に配置されている。したがって、カバー８４の孔８５に挿通された第２中空針９０のカヌラ１００は、栓８３を貫通して軸部７９の孔８０へ進入する【０１０４】
第１分割プランジャ６６の素材はγ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第１分割プランジャ６６をポリプロピレンの成形品とすることが一般的である。【０１０５】
第２分割プランジャ６７は、ねじ込み式により第１分割プランジャ６６に対して着脱可能なものである。第２分割プランジャ６７の全体形状は、第３シリンジ筒６３の内部空間に挿入可能な外形であって、第３シリンジ筒６３の軸方向に長い。第１分割プランジャ６６と第２分割プランジャ６７とを接続した状態において、これらの軸方向の長さの合計は第３シリンジ６３の軸方向の長さより長い。したがって、第３ガスケット６５を第３シリンジ筒６３の奥部（第３ポート６２側）に押し込んだ状態で、第２分割プランジャ６７の一部が第３シリンジ筒６３の反対側の端部から突出する。【０１０６】
第２分割プランジャ６７は、雌ネジ部８６と軸部８７と端板８８とを有する。雌ネジ部８６は、第１分割プランジャ６６の接続部８１を覆う孔８９の内周面に雌ネジが形成されたものである。雌ネジ部８６が接続部８１の雄ネジ８２と噛合することにより、第１分割プランジャ６６と第２分割プランジャ６７とが同軸に接続され１つのプランジャをなす。この状態で、第１分割プランジャ６６の接続部８１は、第２分割プランジャ６７の雌ネジ部８６により完全に覆われる。第１分割プランジャ６６と第２分割プランジャ６６との着脱は繰り返し行うことができる。第１分割プランジャ６６と第２分割プランが６７とが接続された状態における１個のプランジャが、本発明に係る第３プランジャに相当する。【０１０７】
軸部８７は、横断面（軸方向と直交する方向）が十字形状である。軸部８７の断面形状は成形加工の容易性や強度などを考慮して適宜選択されうる。軸部８７の一方端に雌ネジ部８６が配置され、他方端に端板８８が配置されている。端板８８は、円板形状の平板であり、軸部８７の軸方向に対して垂直に接続されている。端板８８は、第１分割プランジャ６６及び第２分割プランジャ６７で構成されるプランジャ（第３プランジャ）のハンドリングを向上させるためのものであり、このプランジャが第３シリンジ筒６３に対して押し込まれる際に指が押し当てられ、このプランジャが第３シリンジ筒６３から引き出される際に持ち手となる。【０１０８】
第２分割プランジャ６７の素材はγ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第２分割プランジャ６７をポリプロピレンの成形品とすることが一般的である。【０１０９】
図１０及び図１１に示されるように、第４シリンジ６１は、第２中空針９０と、第２中空針３０が取付可能な第４ポート９１を有する第４シリンジ筒９２と、第４ポート９１に着脱可能な第４キャップ９３と、第４シリンジ筒９２内を往復動される第４ガスケット９４と、第４ガスケット９４に着脱可能に設けられた第４プランジャ９５とを具備する。【０１１０】
第２中空針３０は、中空管の先端側に刃面が形成されたカヌラ１００と、カヌラ１００の基端と接続されたハブ１０１とを有する。カヌラ１００の軸方向の長さは、第３シリンジ６０の第１分割プランジャ６６の孔８０を挿通して第３ガスケット６５を貫通するに必要な長さに設定される。ハブ１０１は、ほぼ円筒形状であり、第４シリンジ筒９２の針取付部１０２に外嵌されるに必要な内径及び軸方向の長さに設定される。ハブ１０１において、カヌラ１００の基端が接続される側の端部は、カヌラ１００の接続により閉止されている。カヌラ１００とハブ１０１とは接着剤等により固定されている。ハブ１０１において、針取付部１０２と接続される側の端部は開口されている。カヌラ１００の基端側の開口は、ハブ１０１の内部空間と通じている。したがって、カヌラ１００の先端側の開口からカヌラ１００内に進入した液体等は、カヌラ１００の基端側の開口からハブ１０１の内部空間へ流入する。この内部空間は、ハブ１０１が針取付部１０２に外嵌されることにより、第４ポート９１と連続する。【０１１１】
第４シリンジ筒９２は、ほぼ円筒形状であり、第３シリンジ筒６３の内部空間に浸入可能な大きさである。第４シリンジ筒９２の一方の端部は縮径されて、針取付部１０２が形成されている。針取付部１０２の内部空間は、第４シリンジ筒９２の内部空間と連続している。針取付部１０２により本発明に係る第４ポート９１が形成されている。針取付部１０２には、第２中空針９０が取り付け可能である。第４シリンジ筒９２の他方の端部は、縮径されることなく開口されている。この他方の端部から第４シリンジ筒３２の内部空間へ第４プランジャ９５が進退される。第４シリンジ筒９２の他方の端部には、第４シリンジ筒９２の外周側へ突出する鍔１０３が形成されている。鍔１０３はハンドリングを向上させるためのものであり、第４シリンジ筒９２及び第４プランジャ９５の操作の際に鍔１０３に指が掛けられる。【０１１２】
第４シリンジ筒９２の素材はγ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第４シリンジ筒９２をポリプロピレンの成形品とすることが一般的である。第４シリンジ筒９２の内部空間に満たされた血漿などを目視確認するために、第４シリンジ筒９２は、透明ないし半透明であることが好ましい。第４シリンジ筒９２の容量は特に限定されない。第４シリンジ筒９２に容量を示す目盛りが付されていると、内部空間に満たされた液体の量などが容易に把握できるので好ましい。【０１１３】
第４キャップ９３は、第４シリンジ筒９２の第４ポート９１を封止する。図１０及び図１１に示されるように、第４キャップ９３は、大径部１０４及び小径部１０５を有する。小径部１０５は、大径部１０４の内側の空間に配置されている。小径部１０５は、第４シリンジ筒９２の針取付部１０２に外嵌可能な管形状である。小径部１０５の内部には、第４シリンジ筒９２の第４ポート９１に嵌入可能な栓部１０６が配設されている。大径部１０４は、第４キャップ９３を第４シリンジ筒９２に着脱する際の持ち手として機能する。第４キャップ９３が第４シリンジ筒９２に取り付けられると、図１１に示されるように、小径部１０５が針取付部１０２の外周面に密着し、栓部１０６が第４ポート９１に嵌入して、第４ポート９１が液密に封止される。【０１１４】
第４キャップ９３の素材はγ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第４キャップ９３としてポリプロピレンやエラストマーの成形品が採用されうる。【０１１５】
第４ガスケット９４は、第４シリンジ筒９２の内部に挿入されて第４シリンジ筒９２を液密に封止する。第４ガスケット９４は、液密状態を維持したまま、第４シリンジ筒４２内を往復動可能である。第４ガスケット４４の往復動により、第４シリンジ筒４２の内部に密封可能な液体の容量が変化する。図１０に示されるように、第４ガスケット９４は、第４シリンジ筒９２の内径に対応した径の円柱形状である。図１１に示されるように、第４ガスケット９４の一方の端面は円錐形状に突出されている。この端面の形状は、第４シリンジ筒９２の奥部の形状に対応している。第４プランジャ９５と接続される第４ガスケット９４の他方の端面には、取付孔１０７が形成されている。取付孔１０７は第４ガスケット９４の円形の端面の中心に形成されている。取付孔１０７は円孔である。取付孔１０７の内周面には、雌ネジ１０８が形成されている。【０１１６】
第４ガスケット９４の素材はγ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第４ガスケット９４としてエラストマーの成形品が採用されうる。【０１１７】
第４プランジャ９５は、ねじ込み式により第４ガスケット９４に対して着脱可能なものである。第４プランジャ９５の全体形状は、第４シリンジ筒９２の内部空間に挿入可能な外形であって、第４シリンジ筒９２の軸方向（図１０の１点鎖線方向、図１１における上下方向）の長さより十分に長い。したがって、第４ガスケット９４を第４シリンジ筒９２の奥部（第４ポート９１側）に押し込んだ状態で、第４プランジャ９５の一部が第４シリンジ筒９２の反対側の端部から突出する。【０１１８】
第４プランジャ９５は、雄ネジ部１０９と軸部１１０と端板１１１とを有する。雄ネジ部１０９は、第４ガスケット９４の取付孔１０７にねじ込まれる。取付孔１０７の雌ネジ１０８と雄ネジ部１０９とは噛合する。これにより、第４プランジャ９５が第４ガスケット９４に対してねじ込み式により着脱される。この着脱は繰り返し行うことができる。【０１１９】
軸部１１０は、横断面（軸方向と直交する方向）が十字形状である。軸部１１０の断面形状は成形加工の容易性や強度などを考慮して適宜選択されうる。軸部１１０の一方端に雄ネジ部１０９が配置され、他方端に端板１１０が配置されている。端板１０９は、円板形状の平板であり、軸部１１０の軸方向に対して垂直に接続されている。端板１１１は第４プランジャ９５のハンドリングを向上させるためのものであり、第４プランジャ９５が第４シリンジ筒９２に対して押し込まれる際に指が押し当てられ、第４プランジャ９５が第４シリンジ筒９２から引き出される際に持ち手となる。【０１２０】
第４プランジャ９５の素材はγ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がディスポーザル品とされることや、γ線滅菌が施されることを考慮すると、第４プランジャ９５をポリプロピレンの成形品とすることが一般的である。【０１２１】
再生医療に適した多血小板血漿が得ることを考慮すると、多血小板血漿分離装置を構成する各部材のうち、採血された血液と接触する少なくとも第３シリンジ筒６３、第３キャップ６４、第３ガスケット６５、第２中空針９０、第４シリンジ筒９２、第４キャップ９３、及び第４ガスケット９４は、γ線滅菌される。また、第３シリンジ６０及び第４シリンジ６１を滅菌袋に密封してキットとすることにより、多血小板血漿分離装置の使い勝手が向上する。【０１２２】
なお、本実施形態に係る第３シリンジ６０及び第４シリンジ６１の各部材の構成は一例であり、本発明の要旨を変更しない範囲において、各部材の構成の一部を他の公知の部材の構成に変更しうる。例えば、採血針は、第３シリンジ６０の針取付部７０に直接に取り付けられても、エクステンションチューブなどを介して針取付部７０に取り付けられてもよい。同様に、第２中空針９０は、第４シリンジ６１の針取付部１０２に直接に取り付けられても、エクステンションチューブなどを介して針取付部１０２に取り付けられてもよい。【０１２３】
以下に、本発明に係る多血小板血漿分離方法が説明される。本実施形態に係る多血小板血漿分離方法は、上記多血小板血漿分離装置を用いて行われ、６つの主要なステップからなる。第７ステップでは、採血された血液１２０が満たされた第３シリンジ筒６３の第３ポート６２を封止する。第８ステップでは、第３シリンジ筒６３の第１ポート６２側を遠心移動方向として、第３シリンジ筒６３内の血液１２０を、赤血球を含む第１区分１２１と、白血球、血小板、及び血漿を含む第２区分１２２とに遠心分離する。第９ステップでは、第３シリンジ筒６３内の第３ガスケット６５に第２中空針９０を貫通し、第２区分１２２を第４シリンジ筒９２に吸引する。第１０ステップでは、第２区分１２２が満たされた第４シリンジ筒９２の第４ポート９１を封止する。第１１ステップでは、第４シリンジ筒９２の第４ポート９１側を遠心移動方向として、第４シリンジ筒９２内の第２区分１２２に対して遠心分離を行う。第１２ステップでは、第４シリンジ筒９２内の第４ガスケット９４を移動させて、遠心分離された第２区分１２２から多血小板血漿１２３を第４ポート９１から排出する。これら各ステップが、図１２から図１４を用いて以下に詳細に説明される。図１２から図１４は、多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多血小板血漿分離装置の状態を示す断面図である。【０１２４】
第７ステップでは、図１２（ａ）に示されるように、第３シリンジ筒６３の第３ポート６２を第３キャップ６４で封止して第３シリンジ筒６３を密封状態にする。第３シリンジ６０は、採血に使用される。採血する際には、第３シリンジ筒６３の第３ポート６２に採血針が取り付けられる。もちろん、エクステンションチューブなどを介して採血針が第３ポート６２に取り付けられてもよい。また、第１分割プランジャ６６と第２分割プランジャ６７とは接続されている。採血は通常の方法であり、詳細な説明は省略される。この採血により、第３シリンジ筒６３は血液１２０で満たされる。血液１２０は全血であり、赤血球、白血球、血小板、血漿などを含む。採血後に、第３シリンジ筒６３の第３ポート６２から採血針を取り外して、第３キャップ６４を用いて第３ポート６２を封止する。これにより、図１２（ａ）に示されるように、第３シリンジ筒６３が密封状態となる。【０１２５】
第８ステップでは、密封したシリンジを用いて１回目の遠心分離を行う。この遠心分離に先だって、図１２（ｂ）に示されるように、第２分割プランジャ６７を第１分割プランジャ６６から取り外す。これにより、第３シリンジ筒６３から第２分割プランジャ６７が突出しないので、遠心分離において第３シリンジ筒６３の取り扱いが容易である。また、遠心分離において、第２分割プランジャ６７が不用意に操作されることがない。さらに、遠心分離において第２分割プランジャ６７の重量が第３ガスケット６５に作用しないので、第３シリンジ筒６３から第３キャップ６４が外れるおそれを軽減できる。【０１２６】
この遠心分離において、第３シリンジ筒６３の第３ポート６２側を遠心移動方向とする。ここで、「遠心移動方向」とは、遠心分離において遠心力が作用する方向であり、通常は下側である。また、第２ステップにおける遠心分離は、弱遠心である。弱遠心とは、血液の遠心分離において慣用されており、一般に、「全血を赤血球とその他（白血球、血小板、血漿）に分離する遠心分離」（非特許文献１参照）と定義される。具体的には、遠心分離条件が約５００〜２５００ｒｐｍの範囲における遠心分離が弱遠心とされる。遠心分離に用いられる遠心分離装置は一般的なものなので、詳細な説明は省略される。【０１２７】
この遠心分離により、第３シリンジ筒６３に密封された血液１２０は、第１区分１２１と第２区分１２２とに分離される。第１区分１２１は、赤血球画分である。第２区分１２２は、白血球、血小板、及び血漿を含む区分である。図１２（ｃ）に示されるように、第１区分１２１は、遠心分離により遠心移動方向、つまり第３シリンジ筒６３の下側に分離される。【０１２８】
第９ステップでは、第３シリンジ筒６３内の第２区分１２２を第４シリンジ筒９２に吸引する。１回目の遠心分離を行った後、図１３（ａ）に示されるように、第４シリンジ９２の第４ポート９１に取り付けられた第２中空針９０を、第１分割プランジャ６６の孔８０に挿通させる。孔８０の基端側は栓８３で封止されているので、栓８３に対して第２中空針９０のカヌラ１００を貫通させることにより、カヌラ１００を孔８０に進入させる。さらにカヌラ１００を孔８０に対して進入させると、カヌラ１００の先端が孔８０を抜け出て第３ガスケット６５に到達する。さらにカヌラ１００を進めて、第３ガスケット６５を貫通させる。これにより、第２中空針９０のカヌラ１００の先端は第３シリンジ筒６３内の第２区分１２２に到達する。この状態で、第４シリンジ６１の第４プランジャ９５を第２シリンジ筒６２から引き出して、第３シリンジ筒６３内の第２区分１２２を第４シリンジ筒９２内へ吸引する。なお、第２中空針９０がエクステンションチューブなどを介して第４ポート９１に取り付けられている場合にも、前述と同様にして、第２中空針９０を第１分割プランジャ６６の孔８０に挿通させて、第３ガスケット６５を貫通させればよい。【０１２９】
図１３（ｂ）に示されるように、第４シリンジ筒９２から第４プランジャ９５を引き出すと、第３シリンジ筒６３内の第２区分１２２が第４シリンジ筒９２へ吸引されるとともに、第３ガスケット６５が、第３シリンジ筒６３内を第３ポート６２側へ移動する。第２中空針９０のカヌラ１００が第３ガスケット６５及び栓８３を貫通した状態にあるので、これらの摩擦力により、第３ガスケット６５の移動に伴って、第４シリンジ筒９２が、第３シリンジ筒６３内へ進入する。これにより、第３シリンジ筒６３から第４シリンジ筒９２への第２区分１２２の吸引が連続的かつ円滑に行われる。なお、第３シリンジ筒６３には、第１区分１２１及び若干量の第２区分１２２が残るが、これらは廃棄するか、別目的に使用する。【０１３０】
第８ステップにおける遠心分離を弱遠心とすることにより、血液１２０を第１区分１２１と第２区分１２２とに分離するとともに、第２区分１２２においては血小板をほぼ均等に分散させることができる。つまり、第１区分１２１との境界付近に血小板が集中することがない。これにより、第２区分１２２を第３シリンジ筒６３から第４シリンジ筒９２へ吸引する際に生ずる第２区分１２２の若干のロスにより失われる血小板の量を少なくすることができる。【０１３１】
第１０ステップでは、第４シリンジ筒９２の第４ポート９１を第４キャップ９３で封止して第４シリンジ筒９２を密封状態にする。図１３（ｂ）に示されるように、第４シリンジ筒９２には、第３シリンジ筒６３から吸引された第２区分１２２のみで満たされている。第４プランジャ９５が移動しないように固定しながら、第４シリンジ６１に取り付けられた第２中空針９０を第１分割プランジャ６６から引き抜くと、密閉状態の第３シリンジ筒６３内の第３ガスケット６５は、第３シリンジ筒６３を移動せずに静止状態を維持する。その後、第４シリンジ筒９２から第２中空針９０を外して、図１３（ｃ）に示されるように、第４ポート９１を第４キャップ９３で封止する。これにより、第４シリンジ筒９２は第２区分１２２が満たされた状態で密封状態になる。【０１３２】
第１１ステップでは、密封した第４シリンジ筒９２を用いて２回目の遠心分離を行う。この遠心分離に先だって、図１４（ａ）に示されるように、第４プランジャ９５を第４ガスケット９４から取り外す。これにより、第４シリンジ筒９２から第４プランジャ９５が突出しないので、遠心分離において第４シリンジ筒９２の取り扱いが容易である。また、遠心分離において、第４プランジャ９５が不用意に操作されることがない。さらに、遠心分離において第４プランジャ９５の重量が第４ガスケット９４に作用しないので、第４シリンジ筒９２から第４キャップ９３が外れるおそれを軽減できる。【０１３３】
この遠心分離において、第４シリンジ筒９２の第４ポート９１側を遠心移動方向とする。また、第１１ステップにおける遠心分離は、強遠心である。強遠心とは、血液の遠心分離において慣用されており、一般に、「血小板、白血球と残留赤血球を血漿から分離する遠心分離」（非特許文献１参照）と定義される。本発明では、第２区分の下方に血小板を濃縮する遠心分離を強遠心という。具体的には、遠心分離条件が約３０００〜４０００ｒｐｍの範囲における遠心分離が強遠心とされる。この遠心分離により、図１４（ｂ）に示されるように、第２区分１２２が遠心分離され、血小板が遠心移動方向、つまり第４シリンジ筒９２の下側に移動する。また、この遠心分離を強遠心とすることにより、第２区分１２２から高濃度のＰＲＰ１２３を分離することができる。なお、図１４（ｂ）において、第２区分１２２中に示された横線の密度が高いほど、血小板濃度が高いことが示されている。実際には、遠心分離された第２区分１２２において、上側から下側へ向けて形成されるほぼ透明から濃い黄色へのグラデーションにより、血小板が下側に移動したことが目視により確認できる。【０１３４】
第１２ステップでは、第４シリンジ筒９２からＰＲＰ１２３を排出する。遠心分離を終了した後、図１４（ｃ）に示されるように、第４プランジャ９５を第４ガスケット９４に取り付ける。これにより、第４ガスケット９４が容易に移動できる。そして、第４シリンジ筒９２から第４キャップ９３を外して第４ポート９１を開封する。その状態で、第４プランジャ９５を操作して第４ガスケット９４を第４ポート９１側へ移動させる。２回目の遠心分離により第２区分１２２中の血小板が遠心移動して、第２区分１２２は、上側がほぼ血漿成分のみの上清となり、下側（第４ポート９１側）が血小板が多いＰＲＰ１２３となる。したがって、第４ガスケット９４の移動により第４ポート９１からＰＲＰ１２３が排出される。排出されたＰＲＰ１２３は、滅菌された容器１９で受け取る。これにより、採血された血液１２０からＰＲＰ１２３が分離される。【０１３５】
ＰＲＰ１２３における血小板の濃度は必ずしも明確に定義されていないが、例えば、１ｍＬにおける血小板数を血小板の濃度とした場合、採取された全血における血小板の濃度に対して３〜７倍に濃縮されたものがＰＲＰ６３とされる。また、本発明に係る多血小板血漿分離方法においては、第６ステップにおいて遠心分離された第２区分１２２のうちの第４ポート９１側の所定量をＰＲＰ１２３とすることが考えられる。本実施形態に係る多血小板血漿分離方法によれば、例えば、約１０ｍＬの血液６０から約１ｍＬのＰＲＰ６３を得ることができる。【０１３６】
なお、本実施形態では、第１２ステップにおけるＰＲＰ１２３の排出を、第４シリンジ筒９２の第４ポート９１から容器１９などに直接排出することとしたが、感染防止などを考慮して、第４シリンジ筒９２の第４ポート９１にチューブ及び三方活栓などを接続して、排出されるＰＲＰ１２３を別のシリンジ内に吸引してもよい。【０１３７】
このように、本発明に係る多血小板血漿分離装置及び多血小板血漿分離方法によれば、採血に使用した第３シリンジ６０を用いて遠心分離を行って、血液１２０からＰＲＰ１２３を得ることができる。これにより、γ線滅菌された少数の器具でＰＲＰ１２３の分離を実現できる。また、２つのシリンジ６０，６１を用いることにより、第１区分１２１と第２区分１２２とを確実に分離して、高濃度のＰＲＰ１２３を得ることができる。
【産業上の利用可能性】
【０１３８】
本発明は、全血を遠心分離することによりＰＲＰを得るための多血小板血漿分離装置及び多血小板血漿分離方法に適用できる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【国際調査報告】
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