(57)【要約】【課題】アミロイドを標的とした画像診断プローブとして有効な化合物並びに該化合物を配合したアルツハイマー病診断剤を得る。【解決手段】下記式2008059714.tif 000023（式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４はそれぞれ独立に炭素又は窒素、Ｒ１は水素、水酸基、カルボキシル基、硫酸基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、非放射性ハロゲン置換基、炭素数１〜４のアルキル置換基及び炭素数１〜４のアルコキシ置換基からなる群より選ばれる基、Ｒ２は放射性ハロゲン置換基である。ただし、Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４のうちの少なくとも一つは炭素であって、Ｒ１は、炭素であるＡ１、Ａ２、Ａ３又はＡ４に結合する。）で表される化合物又はその塩、並びに前記式で表される化合物又はその塩を含有してなるアルツハイマー病診断剤。【選択図】図１０
2008059714.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記式（１）：
【化１】
2008059714.tif 000017
（式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４はそれぞれ独立に炭素又は窒素、
Ｒ１は水素、水酸基、カルボキシル基、硫酸基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、非放射性ハロゲン置換基、炭素数１〜４のアルキル置換基及び炭素数１〜４のアルコキシ置換基からなる群より選ばれる基、
Ｒ２は放射性ハロゲン置換基である。
ただし、Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４のうちの少なくとも一つは炭素であって、Ｒ１は、炭素であるＡ１、Ａ２、Ａ３又はＡ４に結合する。）で表される化合物又はその塩。
【請求項２】
Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４のうち、少なくとも３つが炭素である、請求項１に記載の化合物又はその塩。
【請求項３】
Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４が全て炭素である、請求項２に記載の化合物又はその塩。
【請求項４】
Ｒ２が、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ及び１３１Ｉからなる群より選択される放射性ハロゲン置換基である、請求項１〜３の何れか１項に記載の化合物又はその塩。
【請求項５】
下記式（２）：
【化２】
2008059714.tif 000018
（式中、Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８はそれぞれ独立に炭素又は窒素、
Ｒ３は放射性ハロゲン置換基、
Ｒ４は水素、カルボキシル基、硫酸基、ニトロ基、シアノ基、非放射性ハロゲン置換基、炭素数１〜４のアルキル置換基及びメトキシ置換基からなる群より選ばれる基である。
ただし、Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８のうちの少なくとも一つは炭素であって、Ｒ３は、炭素であるＡ５、Ａ６、Ａ７又はＡ８に結合する。）で表される化合物又はその塩。
【請求項６】
Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８のうち、少なくとも３つが炭素である、請求項５に記載の化合物又はその塩。
【請求項７】
Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８が全て炭素である、請求項６に記載の化合物又はその塩。
【請求項８】
Ｒ３が、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ及び１３１Ｉからなる群より選択される放射性ハロゲン置換基である、請求項５〜７の何れか１項に記載の化合物又はその塩。
【請求項９】
下記式（３）：
【化３】
2008059714.tif 000019
（式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４はそれぞれ独立に炭素又は窒素、
Ｒ５は水素、水酸基、カルボキシル基、硫酸基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、非放射性ハロゲン置換基、炭素数１〜４のアルキル置換基及び炭素数１〜４のアルコキシ置換基からなる群より選ばれる基、
Ｒ６は非放射性ハロゲン置換基、ニトロ基、炭素数１〜４のアルキル鎖を有するトリアルキルスタニル置換基、トリフェニルスタニル基及び炭素数１〜４のアルキル鎖を有するトリアルキルアンモニウム基からなる群より選ばれる基である。
ただし、Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４のうちの少なくとも一つは炭素であって、Ｒ５は、炭素であるＡ１、Ａ２、Ａ３又はＡ４に結合する。）で表される化合物又はその塩。
【請求項１０】
Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４のうち、少なくとも３つが炭素である、請求項９に記載の化合物又はその塩。
【請求項１１】
Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４が全て炭素である、請求項１０に記載の化合物又はその塩。
【請求項１２】
下記式（４）：
【化４】
2008059714.tif 000020
（式中、Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８はそれぞれ独立に炭素又は窒素、
Ｒ７は非放射性ハロゲン置換基、ニトロ基、炭素数１〜４のアルキル鎖を有するトリアルキルスタニル置換基、トリフェニルスタニル基及び炭素数１〜４のアルキル鎖を有するトリアルキルアンモニウム基からなる群より選ばれる基、
Ｒ８は水素、カルボキシル基、硫酸基、ニトロ基、シアノ基、非放射性ハロゲン置換基、炭素数１〜４のアルキル置換基及びメトキシ置換基からなる群より選ばれる基である。
ただし、Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８のうちの少なくとも一つは炭素であって、Ｒ７は、炭素であるＡ５、Ａ６、Ａ７又はＡ８に結合する。）で表される化合物又はその塩。
【請求項１３】
Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８のうち、少なくとも３つが炭素である、請求項１２に記載の化合物又はその塩。
【請求項１４】
Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８が全て炭素である、請求項１３に記載の化合物又はその塩。
【請求項１５】
下記式（１）：
【化５】
2008059714.tif 000021
（式中、Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４はそれぞれ独立に炭素又は窒素、
Ｒ１は水素、水酸基、カルボキシル基、硫酸基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、非放射性ハロゲン置換基、炭素数１〜４のアルキル置換基及び炭素数１〜４のアルコキシ置換基からなる群より選ばれる基、
Ｒ２は放射性ハロゲン置換基である。
ただし、Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４のうちの少なくとも一つは炭素であって、Ｒ１は、炭素であるＡ１、Ａ２、Ａ３又はＡ４に結合する。）で表される化合物又はその塩を含有してなる、アルツハイマー病診断剤。
【請求項１６】
Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４のうち、少なくとも３つが炭素である、請求項１５に記載のアルツハイマー病診断剤。
【請求項１７】
Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４が全て炭素である、請求項１６に記載のアルツハイマー病診断剤。
【請求項１８】
Ｒ２が、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ及び１３１Ｉからなる群より選択される放射性ハロゲン置換基である、請求項１５〜１７の何れか１項に記載のアルツハイマー病診断剤。
【請求項１９】
下記式（２）：
【化６】
2008059714.tif 000022
（式中、Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８はそれぞれ独立に炭素又は窒素、
Ｒ３は放射性ハロゲン置換基、
Ｒ４は水素、カルボキシル基、硫酸基、ニトロ基、シアノ基、非放射性ハロゲン置換基、炭素数１〜４のアルキル置換基及び炭素数１〜４のアルコキシ置換基からなる群より選ばれる基である。
ただし、Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８のうちの少なくとも一つは炭素であって、Ｒ３は、炭素であるＡ５、Ａ６、Ａ７又はＡ８に結合する。）で表される化合物又はその塩を含有してなる、アルツハイマー病診断剤。
【請求項２０】
Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８のうち、少なくとも３つが炭素である、請求項１９に記載のアルツハイマー病診断剤。
【請求項２１】
Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８が全て炭素である、請求項２０に記載のアルツハイマー病診断剤。
【請求項２２】
Ｒ３が、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ及び１３１Ｉからなる群より選択される放射性ハロゲン置換基である、請求項１９〜２１の何れか１項に記載のアルツハイマー病診断剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は頭部変性疾患の診断に用いる化合物に関する。より詳しくは、アルツハイマー病を初めとするアミロイドが蓄積する疾患の診断において、病巣部位におけるアミロイドの検出に有用な化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
アミロイドと呼ばれる繊維状蛋白質が体内の種々の器官あるいは組織に沈着することにより発症する疾患は、アミロイドーシスと総称されている。アミロイドーシスに共通しているのはアミロイドと呼ばれるβシート構造に富んだ繊維状蛋白質が全身の諸臓器あるいは局所に沈着し、その臓器や組織における機能異常を生じる点である。【０００３】
アミロイドーシスの代表的疾患であるアルツハイマー病（以下、ＡＤという）は、認知症の原因となる疾患として知られている。この病気は、漸次進行性にアミロイドが脳に沈着して死に至る疾患であるため、他のアミロイドーシスと比較しても社会的関心の高い疾患であるといえる。近年、先進各国では社会の高齢化に伴いＡＤ患者数が急激に増加しており、社会的な問題となっている。【０００４】
病理組織学的見地によると、ＡＤは、老人斑（senile plaques）の出現、神経原繊維変化（neurofibrillary tangles）及び広範な神経脱落の３つの脳内病理所見によって特徴付けられる。老人斑はアミロイドを主要構成成分とする構造物であり、ＡＤ発症における最初期、すなわち臨床症状が出現する１０年以上前に出現する脳内の病理所見とされる。【０００５】
ＡＤの診断は、ＣＴ及びＭＲＩ等の画像診断を補助的に組み合わせた上で、種々の認知機能評価（例えば、長谷川式スケール、ADAS-JCog、MMSE等）を行うことにより実施されている。しかし、このような認知機能評価に基づく方法は、発症初期における診断感度が低く、さらに、各個人が生来有する認識機能により診断結果が影響を受けやすいという欠点がある。また、確定診断には疾患部の生検が不可欠であるため、患者の存命中にＡＤの確定診断を行うことは、現状では事実上不可能である（非特許文献１）。【０００６】
一方、老人斑を構成するアミロイドはアミロイドβ蛋白質（以下、Ａβという）の凝集体であることが報告されており、さらにＡβの凝集体がβシート構造をとることで神経細胞毒性を示すことが多くの研究より報告されている。これらの知見に基づき、Ａβの脳内への沈着が引き金となり、その下流の現象として神経原繊維変化の形成及び神経脱落が起こるとする、いわゆる「アミロイドカスケード仮説」が提唱されている（非特許文献２）。【０００７】
このような事実に基づき、近年、アミロイドに高い親和性を有する化合物をマーカーとして用い、ＡＤをインビボ（ｉｎ  ｖｉｖｏ）で検出する試みがなされている。
このような脳内アミロイド画像診断用プローブの多くは、アミロイドに対する親和性が高く、かつ脳移行性の高い疎水性の低分子化合物を、種々の放射性核種、例えば１１Ｃ、１８Ｆ及び１２３Ｉ等で標識した化合物である。具体例として、６−ヨード−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］ベンゾチアゾール（以下、ＴＺＤＭという）や６−ヒドロキシ−２−［４’−（Ｎ−メチルアミノ）フェニル］ベンゾチアゾール（以下、６−ＯＨ−ＢＴＡ−１という）を始めとする種々のチオフラビン誘導体（特許文献１、非特許文献３）、（Ｅ）−４−メチルアミノ−４’―ヒドロキシスチルベン（以下、ＳＢ−１３という）や（Ｅ）−４−ジメチルアミノ−４’―ヨードスチルベン（以下、ｍ−Ｉ−ＳＢという）を初めとするスチルベン化合物（特許文献２、非特許文献４，非特許文献５）、６−ヨード−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］ベンゾオキサゾール（以下、ＩＢＯＸという）、６−［２−（フルオロ）エトキシ］−２−［２−（２−ジメチルアミノチアゾール−５−イル）エテニル］ベンゾオキサゾールを初めとするベンゾオキサゾール誘導体（非特許文献６，非特許文献７）、２−（１−｛６−［（２−フルオロエチル）（メチル）アミノ］−２−ナフチル｝エチリデン）マロノニトリル（以下、ＦＤＤＮＰという）を初めとするＤＤＮＰ誘導体（特許文献４、非特許文献８）及び６−ヨード−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（以下、ＩＭＰＹという）を初めとするイミダゾピリジン誘導体（特許文献３、非特許文献９）等を１１Ｃや放射性ハロゲンで標識した化合物が報告されている。さらに、これらの画像診断用プローブの一部については、ヒトイメージング研究が実施され、ＡＤ患者において健常例とは明らかに異なる脳への放射能集積を示すことが報告されている（非特許文献１０、非特許文献１１、非特許文献１２、非特許文献１３）。
また、国際公開第２００７／００２５４０号パンフレットには、アミロイド親和性基にエチレングリコール又はポリエチレングリコールを介して放射性同位体標識部位を結合させた一連の化合物が、開示されている（特許文献５）。
さらに、国際公開第２００７／０６３９４６号パンフレットには、脳内での代謝を抑える目的で、５員の芳香族複素環式基を結合させた一連の化合物が、開示されている（特許文献６）。【０００８】
【特許文献１】特表２００４−５０６７２３号公報
【特許文献２】特表２００５−５０４０５５号公報
【特許文献３】特表２００５−５１２９４５号公報
【特許文献４】特表２００２−５２３３８３号公報
【特許文献５】国際公開第２００７／００２５４０号パンフレット
【特許文献６】国際公開第２００７／０６３９４６号パンフレット
【非特許文献１】J. A. Hardy & G. A. Higgins, “Alzheimer’s Disease: The Amyloid Cascade Hypohesis.”, Science, 1992, 256, p.184-185
【非特許文献２】G. McKhann et al., “Clinical diagnosis of Alzheimer’s disease: Report of the NINCDS-ADRDA Work Group under the auspices of Department of Health and Human Services Task Force on Alzheimer’s Disease.”, Neurology, 1984, 34, p.939-944
【非特許文献３】Z.-P. Zhuang et al., “Radioiodinated Styrylbenzenes and Thioflavins as Probes for Amyloid Aggregates.”, J. Med. Chem., 2001, 44, p.1905-1914
【非特許文献４】Masahiro Ono et al., “11C-labeled stilbene derivatives as Aβ-aggregate-specific PET imaging agents for Alzheimer’s disease.”, Nuclear Medicine and Biology, 2003, 30, p.565-571
【非特許文献５】H. F. Kung et al., “Novel Stilbenes as Probes for amyloid plaques .”, J. American Chemical Society, 2001, 123, p.12740-12741
【非特許文献６】Zhi-Ping Zhuang et al., “IBOX(2-(4’-dimethylaminophenyl)-6- iodobensoxazole): a ligand for imaging amyloid plaques in the brain.”, Nuclear Medicine and Biology, 2001, 28, p.887-894
【非特許文献７】Furumoto Y et al., “[11C]BF-227: A New 11C-Labeled 2-Ethenylbenzoxazole Derivative for Amyloid-β Plaques Imaging.”, European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging, 2005, 32, Sup.1, P759
【非特許文献８】Eric D. Agdeppa et al., “2-Dialkylamino-6-Acylmalononitrile Substituted Naphthalenes (DDNP Analogs): Novel Diagnostic and Therapeutic Tools in Alzheimer’s Disease.”, Molecular Imaging and Biology, 2003, 5, p.404-417
【非特許文献９】Zhi-Ping Zhuang et al., “Structure-Activity Relationship of Imidazo[1,2-a]pyridines as Ligands for Detectingβ-Amyloid Plaques in the Brain.”, J. Med. Chem, 2003, 46, p.237-243
【非特許文献１０】W. E. Klunk et al., “Imaging brain amyloid in Alzheumer’s disease with Pittsburgh Compound-B.”, Ann. Neurol., 2004, 55, p.306-319
【非特許文献１１】Nicolaas P. L. G. Verhoeff et al., “In-Vivo Imaging of Alzheimer Disease β-Amyloid With [11C]SB-13 PET.”, American Journal of Geriatric Psychiatry, 2004, 12, p.584-595
【非特許文献１２】Hiroyuki Arai et al., “[11C]-BF-227 AND PET to Visualize Amyloid in Alzheimer’s Disease Patients”, Alzheimer’s & Dementia: The Journal of the Alzheimer’s Association, 2006, 2, Sup.1, S312
【非特許文献１３】Christopher M. Clark et al., “Imaging Amyloid with I123 IMPY SPECT”, Alzheimer’s & Dementia: The Journal of the Alzheimer’s Association, 2006, 2, Sup.1, S342
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
上記の様に、アミロイドを対象とした画像診断プローブとして、種々の化合物が開示され、臨床応用に向けて検討が進められている。
ＴＺＤＭ、ＩＢＯＸ及びｍ−Ｉ−ＳＢのヨードを［１２５Ｉ］で標識した化合物は、正常マウスを用いた実験の結果、投与後２分点において、いずれも脳内への移行が認められている。しかしこれらの化合物は、正常組織からのクリアランスが十分ではなく、投与後の時間経過に伴い、徐々に脳内に集積する傾向を示している（特表２００５−５１２９４５号公報、Zhi-Ping Zhuang et al.,Nuclear Medicine and Biology, 2001, 28, p.887-894、H. F. Kung et al.,J. Am. Chem. Soc., 2001, 123, p.12740-12741）。正常組織からのクリアランスが十分でないと、アミロイド集積部位において十分なコントラストが得られないといった問題がある。ＳＢ−１３を［１１Ｃ］で標識した化合物については、ラットを用いた実験より正常組織からのクリアランスを有することが示されているが、そのクリアランス速度は十分に速いとはいえない（Masahiro Ono et al., Nuclear Medicine and Biology, 2003, 30, p.565-571）。【００１０】
一方、ＩＭＰＹを初めとするイミダゾピリジン骨格を有する化合物は、投与後脳内へ移行してアミロイドに集積するといった性質を有すると共に、上述した化合物とは異なり正常組織からのクリアランスが速いといった優れた性質を有することが、［１２５Ｉ］標識化合物を用いた実験の結果明らかとされている。しかし、ＩＭＰＹは、復帰突然変異試験にて陽性を示す化合物であり、この化合物を画像診断プローブとして用いるには、その投与量や投与形態につき十分な注意が必要となる。（国際公開第０３／１０６４３９号パンフレット）
ＦＤＤＮＰについても、復帰突然変異試験にて陽性を示すことが、報告されている。（国際公開第０３／１０６４３９号パンフレット）【００１１】
上記のように、アミロイドを標的とした画像診断プローブとして種々の化合物が開示されているものの、臨床使用に耐え得る性能を有することが確認された化合物は、未だ存在していない。【００１２】
本発明は上記事情に鑑みてなされたものであり、アミロイドを標的とした画像診断プローブとして有効な化合物並びに該化合物を配合したアルツハイマー病診断剤を得ることを目的とした。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
発明者はイミダゾピリジン−フェニル骨格を有する化合物を直接放射性ハロゲン標識することにより、アミロイドを標的とした画像診断プローブとして使用し得る化合物群が得られることを見出し、本発明を完成した。【００１４】
すなわち、本発明の一側面によれば、下記式（１）：【００１５】
【化７】
2008059714.tif 000003
【００１６】
で表される化合物又はその塩、及び、前記式（１）で表される化合物又はその塩を配合してなるアルツハイマー病診断剤が提供される。【００１７】
式（１）において、Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４はそれぞれ独立に炭素又は窒素であるが、少なくとも一つは炭素である必要がある。Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４のうちの３以上を炭素とすることが好ましく、全てを炭素とすることがより好ましい。なお、式（１）において、Ｒ１は、炭素であるＡ１、Ａ２、Ａ３又はＡ４に結合する。また、Ｒ１の結合部位は、炭素であるＡ３、すなわち、６位の炭素であることが好ましい。【００１８】
式（１）中、Ｒ１は水素、水酸基、カルボキシル基、硫酸基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、非放射性ハロゲン置換基、炭素数１〜４のアルキル置換基及び炭素数１〜４のアルコキシ置換基からなる群より選択された任意の基であってよい。Ｒ１は、水酸基、炭素数１〜４のアルキル置換基、又は炭素数１〜４のアルコキシ置換基であることが好ましく、水酸基、メチル置換基、又はメトキシ置換基であることがより好ましい。【００１９】
Ｒ２は、任意の放射性ハロゲン置換基であってよく、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ及び１３１Ｉからなる群より選択される放射性ハロゲン置換基であることが好ましく、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ及び１２５Ｉからなる群より選択される放射性ハロゲン置換基であることがより好ましい。【００２０】
好ましい態様において、本発明は、下記式（１´）：【００２１】
【化８】
2008059714.tif 000004
【００２２】
で表される化合物又はその塩、及び前記式（１´）で表される化合物又はその塩を含有してなるアルツハイマー病診断剤を提供する。
式（１´）中、Ｒ１及びＲ２はそれぞれ上記式（１）と同様である。【００２３】
本発明の別の一側面によると、下記式（２）：【００２４】
【化９】
2008059714.tif 000005
【００２５】
で表される化合物又はその塩、及び、前記式（２）で表される化合物又はその塩を配合してなるアルツハイマー病診断剤が提供される。【００２６】
式（２）において、Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８はそれぞれ独立に炭素又は窒素であるが、少なくとも一つは炭素である必要がある。Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８のうちの３以上を炭素とすることが好ましく、全てを炭素とすることがより好ましい。なお、式（２）において、Ｒ３は、炭素であるＡ５、Ａ６、Ａ７又はＡ８に結合する。また、Ｒ３の結合部位は、炭素であるＡ７、すなわち、６位の炭素であることが好ましい。【００２７】
式（２）中、Ｒ３は任意の放射性ハロゲン置換基であってよく、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ、１２４Ｉ、１２５Ｉ及び１３１Ｉからなる群より選択される放射性ハロゲン置換基であることが好ましく、１８Ｆ、７６Ｂｒ、１２３Ｉ及び１２５Ｉからなる群より選択される放射性ハロゲン置換基であることがより好ましい。【００２８】
Ｒ4は水素、カルボキシル基、硫酸基、ニトロ基、シアノ基、非放射性ハロゲン置換基、炭素数１〜４のアルキル置換基及びメトキシ置換基からなる群より選択された任意の基であってよい。Ｒ４は、炭素数１〜４のアルキル置換基、又は炭素数１〜４のアルコキシ置換基であることが好ましく、メチル置換基、又はメトキシ置換基であることがより好ましい。【００２９】
好ましい態様において、本発明は、下記式（２´）：【００３０】
【化１０】
2008059714.tif 000006
【００３１】
で表される化合物又はその塩、及び前記式（２´）で表される化合物又はその塩を含有してなるアルツハイマー病診断剤を提供する。
式（２´）中、Ｒ３及びＲ４はそれぞれ上記式（２）と同様である。【００３２】
本発明のさらに別の一側面によると、下記式（３）：【００３３】
【化１１】
2008059714.tif 000007
【００３４】
で表される化合物又はその塩が提供される。【００３５】
式（３）において、Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４はそれぞれ独立に炭素又は窒素であるが、少なくとも一つは炭素である必要がある。Ａ１、Ａ２、Ａ３及びＡ４のうちの３以上を炭素とすることが好ましく、全てを炭素とすることがより好ましい。なお、式（３）において、Ｒ１は、炭素であるＡ１、Ａ２、Ａ３又はＡ４に結合する。また、Ｒ１の結合部位は、炭素であるＡ３、すなわち、６位の炭素であることが好ましい。【００３６】
式（３）中、Ｒ５は水素、水酸基、カルボキシル基、硫酸基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、非放射性ハロゲン置換基、炭素数１〜４のアルキル置換基及び炭素数１〜４のアルコキシ置換基からなる群より選択された任意の基であってよい。Ｒ５は、水酸基、炭素数１〜４のアルキル置換基、又は炭素数１〜４のアルコキシ置換基であることが好ましく、水酸基、メチル置換基、又はメトキシ置換基であることがより好ましい。【００３７】
Ｒ６は非放射性ハロゲン置換基、ニトロ基、炭素数１〜４のアルキル鎖を有するトリアルキルスタニル置換基、トリフェニルスタニル基及び炭素数１〜４のアルキル鎖を有するトリアルキルアンモニウム基からなる群より選択された任意の基であってよい。
非放射性ハロゲン置換基としては、放射性フッ素又は放射性ヨウ素を用いた求核置換反応における標的となりうるハロゲンを用いることができ、好ましくは塩素、ヨウ素又は臭素を用いることができる。【００３８】
好ましい態様において、本発明は、下記式（３´）：【００３９】
【化１２】
2008059714.tif 000008
【００４０】
で表される化合物又はその塩を提供する。
式（３´）中、Ｒ５及びＲ６はそれぞれ上記式（３）と同様である。【００４１】
本発明のさらに別の一側面によると、下記式（４）：【００４２】
【化１３】
2008059714.tif 000009
【００４３】
で表される化合物又はその塩が提供される。【００４４】
式（４）において、Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８はそれぞれ独立に炭素又は窒素であるが、少なくとも一つは炭素である必要がある。Ａ５、Ａ６、Ａ７及びＡ８のうちの３以上を炭素とすることが好ましく、全てを炭素とすることがより好ましい。なお、式（４）において、Ｒ７は、炭素であるＡ５、Ａ６、Ａ７又はＡ８に結合する。また、Ｒ８の結合部位は、炭素であるＡ７、すなわち、６位の炭素であることが好ましい。【００４５】
式（４）中、Ｒ７は、非放射性ハロゲン置換基、ニトロ基、炭素数１〜４のアルキル鎖を有するトリアルキルスタニル置換基、トリフェニルスタニル基及び炭素数１〜４のアルキル鎖を有するトリアルキルアンモニウム基からなる群より選ばれる任意の基であってよい。
非放射性ハロゲン置換基としては、放射性フッ素又は放射性ヨウ素を用いた求核置換反応における標的となりうるハロゲンを用いることができ、好ましくは塩素、ヨウ素又は臭素を用いることができる。【００４６】
Ｒ８は水素、カルボキシル基、硫酸基、ニトロ基、シアノ基、非放射性ハロゲン置換基、炭素数１〜４のアルキル置換基又はメトキシ置換基からなる群より選択された任意の基であってよい。Ｒ８は、炭素数１〜４のアルキル置換基、又は炭素数１〜４のアルコキシ置換基であることが好ましく、メチル置換基、又はメトキシ置換基であることがより好ましい。【００４７】
好ましい態様において、本発明は、下記式（４´）：【００４８】
【化１４】
2008059714.tif 000010
【００４９】
で表される化合物又はその塩を提供する。
式（４´）中、Ｒ７及びＲ８はそれぞれ上記式（４）と同様である。
【発明の効果】
【００５０】
本発明により、アミロイドへの親和性を有する新規な化合物が得られたので、該化合物を用いたアルツハイマー病診断剤を得ることが可能となった。
【発明を実施するための最良の形態】
【００５１】
（放射性ハロゲン標識化合物の前駆体化合物の合成方法）
以下、２−（４’−トリブチルスタニルフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを例にとり、本発明の一つの実施形態に係る、放射性ハロゲン標識化合物の前駆体化合物の合成方法を説明する。【００５２】
まず、２−ブロモ−３−ヒドロキシピリジンをナトリウムメトキシドの存在下、ヨウ化メチルと反応させ、２−ブロモ−３−メトキシピリジンを合成する。次に、濃硫酸−濃硝酸の混酸によるニトロ化を行い、２−ブロモ−３−メトキシ−６−ニトロピリジンへと変換した後、パラジウム炭素によるブロモ基の還元的脱離とニトロ基の還元を行って、２−アミノ−５−メトキシピリジンを合成する（図１、工程１〜３）。これら一連の反応において、反応条件は定法、例えば文献（Joseph G. Lombardino, Journal of Medicinal Chemistry, 1981, 24, p. 39-42）記載の方法に従って設定することができる。【００５３】
得られた２−アミノ−５−メトキシピリジンを２−ブロモ−４’―ブロモアセトフェノンと反応させて４’位をブロム化し、２−（４’−ブロモフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを合成する（図１、工程４）。この工程は、下記の要領にて行うことができる。【００５４】
まず、２−ブロモ−４’−ブロモアセトフェノンと２−アミノ−５−メトキシピリジンをアセトニトリル等の不活性溶媒に溶解し、還流温度にて２〜６時間反応させると、２−（４’−ブロモフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの臭化水素塩が生成し、白色沈殿を生じる。このときの不活性溶媒としては、アセトニトリルの他、メタノールやアセトンといった、同様の反応にて通常用いられる溶媒を用いることができる。また、反応温度は還流することができる温度であればよく、例えばアセトニトリルを溶媒とした場合は９０℃とすることができる。なお、用いる溶媒の量は、反応に十分な量であればよいが、多過ぎると反応物の沈殿を得ることができないため、注意が必要である。例えば、１０ｍｍｏｌ相当の２−ブロモ−４’−ブロモアセトフェノンを用いて反応させる場合は、４０〜５０ｍL程度の溶媒を用いればよい。【００５５】
次に、反応液をろ過して沈殿物をろ別後、この白色沈殿をメタノール／水混液（１：１）に懸濁し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を、上記懸濁させた沈殿物に対して大過剰となるように加えると、２−（４’−ブロモフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンが遊離して沈殿が生じる。この新たに生じた沈殿をろ取することによって、本工程の目的物である２−（４’−ブロモフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを結晶として得ることができる。水／メタノール混液の量は、反応させるために十分な量であれば特に限定する必要はないが、多すぎると結晶の析出の妨げとなるため注意が必要である。例えば、１０ｍｍｏｌ相当の２−ブロモ−４’−ブロモアセトフェノンを用いた場合であれば、４０〜１００ｍL程度の水／メタノール混液を用いればよい。また、炭酸水素ナトリウムの量は、反応基質である前記沈殿物に対して大過剰であれば特に限定する必要はなく、例えば、前記条件にて反応させる場合であれば、２５ｍL程度の飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を反応液に添加すればよい。【００５６】
得られた２−（４’−ブロモフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンをジオキサンに溶解し、トリエチルアミンを加えた後、ビストリブチルスズ及び触媒量のテトラキストリフェニルホスフィンパラジウムを添加する。この反応液を約９０℃に加熱して反応させた後、溶媒を留去し、クロマトグラム精製を行って、目的物である２−（４’−トリブチルスタニルフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを得ることができる（図１、工程５）。このとき、ビストリブチルスズの量は、反応基質に対して過剰量となる条件を満たす量であればよく、具体的には反応基質である２−（４’−ブロモフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンに対してモル比にして１．５倍程度であれば良い。【００５７】
なお、４’位の置換基をトリブチルスタニル置換基以外のトリアルキルスタニル置換基とした化合物を得る場合は、工程５でビストリブチルスズを用いる代わりに、目的に応じた種々のビストリアルキルスズを用いればよい。例えば、４’位の置換基をトリメチルスタニル置換基とした化合物を合成する場合は、工程４においてビストリメチルスズを用いて上記と同様の反応を行えばよい。【００５８】
また、イミダゾピリジン環と結合する置換基がヒドロキシ置換基である化合物は、例えば前記工程４で得られた２−（４’−ブロモフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンに三臭化ほう素などを作用させて脱メチル化反応を行った後、前記工程５の反応を行うことによって得ることができる。また、イミダゾピリジン環と結合する置換基がメチル置換基やエトキシ置換基である化合物は、前記工程４における２−アミノ−５−メトキシピリジンの代わりに、それぞれ２−アミノ−５−メチルピリジン及び２−アミノ−５−エトキシピリジンを用いればよい。【００５９】
イミダゾピリジン環における官能基の結合部位を、６位の炭素以外の炭素とした化合物は、工程４で用いた２−アミノ−５−メトキシピリジン等の代わりに、ピリジン環におけるアルコキシ置換基等の結合部位が種々異なる化合物を用いることによって得ることができる。例えば、上記例において、官能基の結合部位をイミダゾピリジン環の８位の炭素とする場合は、工程４において、２−アミノ−５−メトキシピリジンの代わりに、２−アミノ−３−メトキシピリジンを用いればよい。【００６０】
また、放射性ハロゲンによる標識部位をイミダゾピリジン環とするための標識前駆体化合物、例えば、６−トリブチルスタニル−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを合成する場合は、下記の要領にて行うことができる。【００６１】
まず、４’−ヒドロキシアセトフェノンと臭化第二銅とを定法（例えばKing L. Carroll & Ostrum G. Kenneth, Journal of Organic Chemistry, 1964, 29(12), p.3459-3461記載の方法）に従って反応させ、２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノンを合成する（図３、工程１）。これを、アセトニトリル等の不活性溶媒中にて２−アミノ−５−ヨードピリジンと反応させ、得られた沈殿を精製することによって、２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを得る（図３、工程２）。この工程における条件は、上記図１の工程４にて説明した条件と同様とすればよい。【００６２】
次いで、得られた２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンをメタノールとジオキサンの混液に溶解し、トリメチルシリルジアゾメタンを添加して反応させ、溶媒を留去して残渣を精製することにより、６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを合成する（図３、工程３）。この工程において、トリメチルシリルジアゾメタンの量は、２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンに対して等量以上であればよい。【００６３】
得られた６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンをジオキサンに溶解し、トリエチルアミンを加えた後、ビストリブチルスズと触媒量のテトラキストリフェニルホスフィンパラジウムとを加えて反応させ、目的物である６−トリブチルスタニル−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを得る（図４、工程１）。この工程における条件は、上記図１の工程５にて説明した条件と同様とすればよい。【００６４】
（放射性ハロゲン標識化合物の合成方法）
以下、放射性ヨード標識体化合物を例にとり、本発明の別の一側面に係る、放射性ハロゲン標識化合物の製造方法について説明する。【００６５】
放射性ヨード標識体化合物の合成は、上記の要領にて合成した標識前駆体化合物を不活性有機溶媒に溶解し、これに公知の方法にて得られた［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム溶液等を加え、酸及び酸化剤を加えて反応させることによって行うことができる。標識前駆体化合物を溶解させる不活性有機溶媒としては標識前駆体及び［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム等との間で反応性を有さない種々の溶媒を用いることができ、好ましくはメタノールを用いることができる。【００６６】
酸は種々のものを用いることができ、好ましくは塩酸を用いることができる。
酸化剤は、反応液中のヨウ素を酸化させることができるものであれば特に限定する必要はなく、好ましくは過酸化水素又は過酢酸を用いることができる。酸化剤の添加量は、反応溶液中のヨウ素を酸化させるのに十分な量であれば良い。【００６７】
ヨウ素以外の放射性ハロゲン標識体は、合成目的に応じた標識前駆体を、目的に応じた放射性ハロゲンで標識することによって合成することができる。例えば、２−（４’−［１８Ｆ］フルオロフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを合成する場合は、標識前駆体である２−［４’−ニトロフェニル］−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを、相間移動触媒と炭酸カリウムの存在下で［１８Ｆ］フッ化物イオンと反応させれば良い。【００６８】
（本発明に係る診断剤の調製方法及び使用方法）
本発明に係る診断剤は、他の一般に知られている放射性診断剤と同様、本発明に係る放射性ハロゲン標識化合物を所望により適当なｐＨに調整された水又は生理食塩水、あるいはリンゲル液等に配合させた液として調製することができる。この場合における本化合物の濃度は、配合された本化合物の安定性が得られる濃度以下とする必要がある。本化合物の投与量は、投与された薬剤の分布を画像化するために十分な濃度であれば特に限定する必要はない。例えば、ヨウ素−１２３標識化合物及びフッ素−１８標識化合物の場合は、体重６０ｋｇの成人一人当り５０〜６００ＭＢｑ程度、静脈投与又は局所投与して使用することができる。投与された薬剤の分布は、公知の方法にて画像化することができ、例えばヨウ素−１２３標識化合物の場合はＳＰＥＣＴ装置、フッ素−１８標識化合物の場合はＰＥＴ装置を用いて画像化することができる。【００６９】
以下、実施例、比較例及び参考例を記載して本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらの内容に限定されるものではない。【００７０】
（実施例１）２−（４’−トリブチルスタニルフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【００７１】
２−ブロモ−３−ヒドロキシピリジン１００．０ｇ（０．５７５ｍｏｌ相当）をジメチルスルホキシド３１０ｍＬに溶解し、これに１ｍｏｌ／Ｌナトリウムメトキシド−メタノール溶液５７５ｍＬ（０．５７５ｍｏｌ相当）を加えた後、反応液を９０℃に加温しメタノールを留去した。反応液を１０℃以下まで冷却後、ヨウ化メチル９３．９ｇ（０．６６２ｍｏｌ相当）を加え、室温で２０．５時間攪拌した。反応終了後、反応液を氷水に注ぎクロロホルムで２回抽出した。合わせたクロロホルム層を１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウムで洗浄したのち、飽和食塩水で２回洗浄した。これを無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下留去することにより、２−ブロモ−３−メトキシピリジン６５．４ｇ（０．３４８ｍｏｌ相当）を得た（図１、工程１）。【００７２】
濃硫酸２６２ｍＬを−２℃まで冷却し、これに９０％硝酸２６２ｍＬを注意深く加えた後、２−ブロモ−３−メトキシピリジン６５．３ｇ（０．３４７ｍｍｏｌ相当）を注意深く加えた。得られた混合物を氷浴下１０分攪拌後、室温で３０分攪拌し、さらに５５℃まで昇温して１．５時間攪拌した。反応液を冷却後、徐々に氷中に注いで沈殿物を生成させ、これをろ取し水で洗浄した。得られた沈殿物につき五酸化二リンの存在下で減圧乾燥を行い、２−ブロモ−３−メトキシ−６−ニトロピリジン５５．７ｇ（０．２３９ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程２）。【００７３】
２−ブロモ−３−メトキシ−６−ニトロピリジン５５．６ｇ（０．２３９ｍｏｌ相当）をエタノール１７００ｍＬに溶解し、アルゴン気流下１０％パラジウム炭素（５０％ｗｅｔ）３７．３ｇを添加後、ヒドラジン１水和物２８３ｍＬを滴下した。反応混合物を７０分間加熱還流後、反応液を室温まで冷却してパラジウム炭素をろ過し、さらにろ過物をエタノールで洗浄して洗浄液をろ液と合わせた。この液を減圧濃縮後、水１３００ｍＬと濃アンモニア水１３０ｍLを加え、クロロホルムで８回抽出した。合わせたクロロホルム層を、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮し、得られた粗生成物を減圧蒸留して、２−アミノ−５−メトキシピリジン２６．２ｇ（０．２１１ｍｏｌ相当）を得た（図１、工程３）。【００７４】
２−ブロモ−４’−ブロモアセトフェノン８４４ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−メトキシピリジン３７８ｍｇ（３．０ｍｍｏｌ相当）とをアセトニトリル２５ｍＬに溶解し、１０５℃の油浴にて３．５時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別した。ろ別した沈殿物をアセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させて粗結晶を得た。得られた粗結晶を、水７ｍＬ−メタノール７ｍＬ混液に懸濁させ、これに飽和炭酸水素ナトリウム溶液を約７ｍＬ加え、超音波洗浄器で５分間振とうした。沈殿物をろ別して水でよく洗浄し、減圧下乾燥して、２−（４’−ブロモフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン６４０ｍｇ（２．１１ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程４）。【００７５】
２−（４’−ブロモフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン４６３ｍｇ（１．５ｍｍｏｌ相当）をジオキサン２５ｍＬに溶解し、トリエチルアミン２ｍＬを加えた後、ビストリブチルスズ１．１５ｍＬ（２．２５ｍｍｏｌ相当）とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム１９ｍｇ（触媒量）を加えた。反応混合物を９０℃で１５時間攪拌した後、溶媒を減圧下留去し、残渣をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィ（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１→４／１）にて精製した。さらに得られた粗生成物をリサイクル分取ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ装置：ＬＣ−９０８（製品名、日本分析工業社製）、カラム：ＪＡＩＧＥＬ  ２Ｈ（製品名、日本分析工業社製）を２本連結、移動相：クロロホルム）を用いて精製し、２−（４’−トリブチルスタニルフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン４１９ｍｇ（０．８２ｍｍｏｌ相当）を得た（図１、工程５）。【００７６】
得られた２−（４’−トリブチルスタニルフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【００７７】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ7.89-7.84 ( m, 2H ), 7.81 ( s, 1H ), 7.66-7.63 ( m, 1H ), 7.57-7.46 ( m, 3H ), 6.96 ( dd, J = 9.7, 2.4 Hz, 1H ), 3.83 ( s, 3H ), 1.64-1.47 ( m, 6H ), 1.34 ( sextet, J = 7.3 Hz, 6H ), 1.15-1.00 ( m, 6H ), 0.89 ( t, J = 7.3 Hz, 9H )。【００７８】
１３Ｃ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：１２５ＭＨｚ）：δ149.29, 146.02, 142.90, 141.71, 136.84, 133.52, 125.23, 119.66, 117.73, 109.16, 107.47, 56.20, 29.12, 27.38, 13.69, 9.62。【００７９】
（実施例２）［１２３Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【００８０】
２−（４’−トリブチルスタニルフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのメタノール溶液（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）７５μＬに、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸  １００μＬ、１ｍｍｏｌ／Ｌ ヨウ化ナトリウム １０μＬ、１６０ＭＢｑの［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム溶液（容量として８０μＬ）、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素２０μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、下記の条件のＨＰＬＣに付して［１２３Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン画分を分取した。【００８１】
ＨＰＬＣ条件：
カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（商品名、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社製、サイズ：４．６×１５０ｍｍ）
移動相：０．１％トリフルオロ酢酸／アセトニトリル＝２０／８０→０／１００（１７分、直線グラジエント）
流速：１．０  ｍＬ／分
検出器：紫外可視吸光光度計（検出波長：２８２ｎｍ）及び放射線検出器    （形式：ＳＴＥＦＦＩ型、ｒａｙｔｅｓｔ社製）【００８２】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ（登録商標）Ｌｉｇｈｔ Ｃ８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量：１３０ｍｇ）に通液し、［１２３Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、ジエチルエーテル１ｍＬを通液して［１２３Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを溶出させた。得られた化合物の放射能量は２７ＭＢｑ（製造直後）であった。また、下記の条件によるＴＬＣ分析にて測定したところ、その放射化学的純度は９７％であった。【００８３】
ＴＬＣ分析条件：
ＴＬＣプレート：ＲＰ−１８Ｆ２５４（製品名、メルク社製）
展開相：クロロホルム／メタノール／トリエチルアミン＝１００／１／２
検出器：バイオイメージングアナライザー，ＢＡＳ−２５００（形式：ＢＡＳ−２５００、富士写真フィルム株式会社製）【００８４】
（実施例３）［１２５Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【００８５】
２−（４’−トリブチルスタニルフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのメタノール溶液（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）７５μＬに、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸  １００μＬ、１ｍｍｏｌ／Ｌ ヨウ化ナトリウム １０μＬ、３２ＭＢｑの［１２５Ｉ］ヨウ化ナトリウム溶液（容量として２０μＬ）、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素２０μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、実施例２と同一の条件によるＨＰＬＣに付して［１２５Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン画分を分取した。【００８６】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ （登録商標）Ｌｉｇｈｔ Ｃ８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量：１３０ｍｇ）に通液し、［１２５Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、エタノール１ｍＬを通液して［１２５Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを溶出させた。得られた化合物の放射能量は１５ＭＢｑ（製造直後）であった。また、実施例２と同一の条件によるＴＬＣ分析にて測定したところ、その放射化学的純度は９２％であった。【００８７】
（実施例４）２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成【００８８】
実施例１で得られた、２−（４’−トリブチルスタニルフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１００ｍｇ（０．２０ｍｍｏｌ相当）をジクロロメタン２．０ｍＬに溶解し、ヨウ素３７ｍｇ（０．２９ｍｍｏｌ相当）を加えた。反応混合物を０℃で３０分攪拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液及び飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液を加え、ジクロロメタンで3回抽出を行った。合わせたジクロロメタン層を、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮し、得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝２／１）にて精製を行い、２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン４４．５ｍｇ（０．１３ｍｍｏｌ相当）を得た（図２、工程１）。【００８９】
得られた２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【００９０】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ7.75-7.71 ( m, 3H ), 7.64-7.62 ( m, 2H ), 7.59 ( d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.49 ( d, J = 10.1 Hz, 1H ), 6.96 ( dd, J = 10.1 , 1.8 Hz, 1H), 3.81 ( s, 3H)。【００９１】
１３Ｃ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：１２５ＭＨｚ）：δ149.80, 144.94, 143.27, 138.12, 133.91, 127.88, 120.56, 118.05, 109.72, 107.79, 93.45, 56.57。【００９２】
（実施例５）６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成【００９３】
臭化第二銅２８．１７ｇ（１２６ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル５０ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−ヒドロキシアセトフェノン８．１８ｇ（６０．０ｍｍｏｌ相当）を酢酸エチル５０ｍＬ−クロロホルム５０ｍＬ混液に溶解した液を加え、加熱還流した。５時間後、反応液を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、活性炭を加えて脱色操作を行った後、溶液をろ過、濃縮した。得られた粗生成物を、フラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：クロロホルム／メタノール＝２０／１）で精製し、さらに酢酸エチル−石油エーテルから再結晶を行い、２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン７．２５ｇ（３３．７ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程１）。【００９４】
２−ブロモ−４’−ヒドロキシアセトフェノン４４１mｇ（２．０ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−ヨードピリジン４４９ｍｇ（２．０ｍｍｏｌ相当）をアセトニトリル１５ｍＬに溶解し、１１０℃の油浴にて５時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別したのち、アセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させた。得られた粗結晶を、水１０ｍＬ−メタノール１０ｍＬ混液に懸濁させた後、これに飽和炭酸水素ナトリウム溶液を約１０ｍＬ加え、超音波洗浄器で５分間振とうした。得られた混合物から、沈殿物をろ別して水でよく洗浄し、減圧下乾燥して、２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン０．５３ｇ（１．５６ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程２）。【００９５】
２−（４’−ヒドロキシフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン０．４０ｇ（１．２ｍｍｏｌ相当）をメタノール３０ｍＬとジオキサン５０ｍＬの混液に溶解し、トリメチルシリルジアゾメタン（２Ｍヘキサン溶液）１．２ｍＬ（２．４ｍｍｏｌ相当）を加えた。反応混合物を室温で２４．５時間攪拌したのち、溶媒を減圧下留去し、残渣を酢酸エチルから再結晶して、６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン２２３ｍｇ（０．６４ｍｍｏｌ相当）を得た（図３、工程３）。【００９６】
得られた６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【００９７】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ8.37-8.34 ( m, 1H ), 7.88-7.84 ( m, 2H ), 7.72 ( s, 1H ), 7.40 ( d, J = 9.4 Hz, 1H ), 7.31 ( dd, J = 9.4, 1.6 Hz, 1H ), 6.99-6.95 ( m, 2H ), 3.86 ( s, 3H )。【００９８】
１３Ｃ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：１２５ＭＨｚ）：δ159.86, 146.32, 144.18, 132.32, 130.28, 127.41, 125.90, 118.32, 114.22, 106.88, 74.76, 55.33。【００９９】
（実施例６）６−トリブチルスタニル−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【０１００】
実施例５で得られた、６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン８７．６ｍｇ（０．２５ｍｍｏｌ相当）をジオキサン１０ｍＬに溶解し、トリエチルアミン２ｍＬを加えた後、ビストリブチルスズ１９０μＬ（０．３７５ｍｍｏｌ相当）とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム２０ｍｇ（触媒量）を加えた。反応混合物を９０℃で２１．５時間攪拌した後、溶媒を減圧下留去し、残渣をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィ（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝３／１）にて精製した。さらに得られた粗生成物をリサイクル分取ＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ装置：ＬＣ−９０８（製品名、日本分析工業社製）、カラム：ＪＡＩＧＥＬ  ２Ｈ（製品名、日本分析工業社製）を２本連結、移動相：クロロホルム）を用いて精製し、６−トリブチルスタニル−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン５３ｍｇ（０．１０ｍｍｏｌ相当）を得た（図４、工程１）。【０１０１】
得られた６−トリブチルスタニル−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【０１０２】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ8.01-7.93 ( m, 1H ), 7.92-7.87 ( m, 2H ), 7.74 ( s, 1H ), 7.60-7.56 ( m, 1H ), 7.18-7.09 ( m, 1H ), 6.99-6.94 ( m, 2H ), 3.84 ( s, 3H ), 1.66-1.46 ( m, 6H ), 1.35 ( sextet, J = 7.3 Hz, 6H ), 1.19-1.02 ( m, 6H ), 0.91 ( t, J = 7.3 Hz, 9H )。【０１０３】
１３Ｃ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：１２５ＭＨｚ）：δ159.45, 145.56, 145.01, 131.00, 129.95, 127.22, 126.70, 121.69, 116.80, 114.06, 106.24, 55.23, 28.94, 27.24, 13.59, 9.74。【０１０４】
（実施例７）［１２３Ｉ］−６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【０１０５】
６−トリブチルスタニル−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのメタノール溶液（濃度：１ｍｇ／ｍＬ） ５０μＬに、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸  ５０μＬ、１ｍｍｏｌ／Ｌ ヨウ化ナトリウム １０μＬ、３１８ＭＢｑの［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム溶液（容量として５０μＬ）、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素１０μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、実施例２と同一の条件によるＨＰＬＣに付して［１２３Ｉ］−６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン画分を分取した。【０１０６】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ （登録商標）Ｌｉｇｈｔ Ｃ１８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量：１３０ｍｇ）に通液し、［１２３Ｉ］−６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、ジエチルエーテル１ｍＬを通液して［１２３Ｉ］−６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを溶出させた。得られた化合物の放射能量は８６ＭＢｑ（製造直後）であった。また、実施例２と同一の条件によるＴＬＣ分析にて測定したところ、その放射化学的純度は９８％であった。【０１０７】
（実施例８）２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）の合成【０１０８】
臭化第二銅３．７０ｇ（１６．６ｍｍｏｌ相当）に酢酸エチル４０ｍＬを加えて懸濁させ、これに４’−フルオロアセトフェノン１．０ｍＬ（８．２７ｍｍｏｌ相当）を加え、加熱還流した。３時間後、反応混合物を室温まで冷却してろ過を行い、ろ液を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチルに溶解し、濃縮した。得られた粗生成物を、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝１０／１）で精製し、２−ブロモ−４’−フルオロアセトフェノン１．８２ｇ（８．３９ｍｍｏｌ相当）を得た（図５、工程１）。【０１０９】
２−ブロモ−４’−フルオロアセトフェノン１．８２ｇ（８．３９ｍｍｏｌ相当）と２−アミノ−５−ヨードピリジン１．２９ｇ（５．８７ｍｍｏｌ相当）をアセトニトリル４０ｍＬに溶解し、１１０℃の油浴にて１．５時間加熱還流した。反応終了後、反応液を室温まで冷却し、沈殿物をろ別したのち、アセトニトリルで洗浄し、減圧下乾燥させた。得られた粗結晶は、水２０ｍＬ−メタノール１０ｍＬ混液に懸濁させた後、これに飽和炭酸水素ナトリウム溶液を約３０ｍＬ加え、超音波洗浄器で５分間振とうした。得られた混合物から、沈殿物をろ別して水でよく洗浄し、減圧下乾燥して、２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン１．２８ｇ（３．７９ｍｍｏｌ相当）を得た（図５、工程２）。【０１１０】
得られた２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【０１１１】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重ジメチルホルムアミド、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ9.06 ( s, 1H ), 8.44 ( s, 1H ), 8.01-7.98 ( m, 2H ), 7.72 ( d, J = 9.6 Hz, 1H ), 7.57 ( d, J = 9.6 Hz, 1H ), 7.38-7.34 ( m, 2H )。【０１１２】
（実施例９）６−トリブチルスタニル−２−（４’−フルオロフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【０１１３】
実施例８で得られた、２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン３３８ｍｇ（１．００ｍｍｏｌ相当）をジオキサン４．０ｍＬに溶解し、トリエチルアミン２ｍＬを加えた後、ビストリブチルスズ０．７６ｍＬ（１．５ｍｍｏｌ相当）とテトラキストリフェニルホスフィンパラジウム７６．３ｍｇ（触媒量）を加えた。反応混合物を９０℃で１８時間攪拌した後、溶媒を減圧下留去し、残渣をフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル＝５／１）にて精製を行い，６−トリブチルスタニル−２−（４’−フルオロフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン３１０ｍｇ（０．６１８ｍｍｏｌ相当）を得た（図６、工程１）。【０１１４】
得られた６−トリブチルスタニル−２−（４’−フルオロフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのＮＭＲ測定結果（内部標準物質：テトラメチルシラン）は、以下の通りであった。【０１１５】
使用ＮＭＲ装置：ＪＮＭ−ＥＣＰ−５００（日本電子株式会社製）
１Ｈ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：５００ＭＨｚ）：δ7.98 ( s, 1H ), 7.94-7.90 ( m, 2H ), 7.77 ( s, 1H ), 7.60-7.58 ( m, 1H ), 7.17-7.10 ( m, 3H ), 1.64-1.48 ( m, 6H ), 1.35 ( sextet, J = 7.3 Hz, 6H ), 1.19-1.05 ( m, 6H ), 0.91( t, J = 7.3 Hz, 9H )。【０１１６】
１３Ｃ−ＮＭＲ（溶媒：重クロロホルム、共鳴周波数：１２５ＭＨｚ）：δ162.7 ( d, 1JCF = 246.7 Hz ), 145.7, 144.3, 131.4, 130.3 ( d, 4JCF = 2.9 Hz ), 130.1, 127.7 ( d, 3JCF = 8.6 Hz ), 122.2, 117.1, 115.6 ( d, 2JCF = 21.1 Hz ), 106.9, 29.0, 27.3, 13.7, 9.8。【０１１７】
（実施例１０）［１２３Ｉ］−２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成【０１１８】
６−トリブチルスタニル−２−（４’−フルオロフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのメタノール／ジメチルスルホキシド＝９／１混合溶液（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）６０μＬに、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸  ４０μＬ、１ｍｍｏｌ／ｍLヨウ化ナトリウム１５μL、１５０．１ＭＢｑの［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム１２μＬ、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素１５μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、下記の条件のＨＰＬＣに付して２−（４’−フルオロフェニル）−６−［１２３Ｉ］ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン画分を分取した。【０１１９】
ＨＰＬＣ条件：
カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ１８（商品名、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ社製、サイズ：４．６×１５０ｍｍ）
移動相：０．１％トリフルオロ酢酸／アセトニトリル＝２０／８０→０／１００（１７分）
流速：１．０  ｍＬ／分
検出器：紫外可視吸光光度計（検出波長：２８２ｎｍ）及び放射線検出器（ｒａｙｔｅｓｔ社 ＳＴＥＦＦＩ型）【０１２０】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液をＳｅｐ−Ｐａｋ Ｃ８カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ （登録商標）Ｌｉｇｈｔ Ｃ８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量１３０ｍｇ）に通液し、［１２３Ｉ］−２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、ジエチルエーテル１ｍＬを通液して２−（４’−フルオロフェニル）−６−［１２３Ｉ］ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを溶出させた。得られた放射能量は合成直後において２８．８ＭＢｑであった。【０１２１】
（参考例１）［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹの合成【０１２２】
ｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌの測定並びに脳集積性に関する検討における比較例に用いるため、下記の工程に従い、［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹを合成した。【０１２３】
文献（Zhi-Ping Zhuang et al., J. Med. Chem, 2003, 46, p.237-243）記載の方法に従い、６−トリブチルスタニル−２−［４’−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）フェニル］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを合成し、メタノールに溶解した（濃度：１ｍｇ／ｍＬ）。当該溶液５３μＬに、１ｍｏｌ／Ｌ塩酸  ７５μＬ、２２４〜２５３ＭＢｑの［１２３Ｉ］ヨウ化ナトリウム６０〜７０μＬ、１ｍｍｏｌ／Ｌ ヨウ化ナトリウム溶液 １０μＬ、１０％（Ｗ／Ｖ）過酸化水素１５μＬを添加した。当該混合液を５０℃にて１０分間静置した後、実施例２と同様の条件によるＨＰＬＣに付して［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹ画分を分取した。【０１２４】
当該画分に水１０ｍＬを添加した液を逆相カラム（商品名：Ｓｅｐ−Ｐａｋ （登録商標）Ｌｉｇｈｔ Ｃ１８ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅｓ、Ｗａｔｅｒｓ社製、充填剤の充填量：１３０ｍｇ）に通液し、［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹを当該カラムに吸着捕集した。このカラムを水１ｍＬで洗浄した後、ジエチルエーテル１ｍＬを通液して［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹを溶出させた。得られた放射能量は合成直後において４１〜５７ＭＢｑであった。また、実施例２と同様の条件にてＴＬＣ分析を行ったところ、その放射化学的純度は９３％であった。【０１２５】
（実施例１１）アミロイド結合性の測定【０１２６】
本発明化合物のアミロイド親和性を、以下のｉｎ ｖｉｔｒｏ結合試験により評価した。【０１２７】
（方法）
（１）Ａβ１−４２（和光純薬工業）をリン酸緩衝液（ｐＨ ７．４）で溶解して３７℃で７２時間振盪することで、１ｍｇ／ｍＬの凝集した  Ａβ（以下本実施例において、アミロイドとする）懸濁液（以下、本実施例において、アミロイド懸濁液という）を得た。【０１２８】
（２）上記アミロイド懸濁液につき、文献（Naiki, H.ら、Laboratory Investigation.74、p.374-383(1996)）記載の方法に従ってチオフラビンＴ（Ｆｌｕｋａ社製）を用いた蛍光光度測定による定性実験を行い、（１）で得た凝集化Ａβがアミロイドであることを確認した（測定条件：励起波長４４６ｎｍ、蛍光波長４９０ｎｍ）。【０１２９】
（３）上記実施例３の方法にて合成した［１２５Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのエタノール溶液（放射能濃度２７ＭＢｑ／ｍＬ）を１％牛血清アルブミン含有リン酸緩衝液（ｐＨ ７．４）で希釈して２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン総量として２ｎｍｏｌ／Ｌ相当の溶液を調製した。【０１３０】
（４）９６穴マイクロプレートの各ウェルに、上記（３）で調製した溶液 ５０μＬ、アミロイド懸濁液を１％牛血清アルブミン含有リン酸緩衝液（ｐＨ ７．４）に溶解した液（アミロイドの濃度は、試料溶液中のアミロイド濃度に応じて調整）５０μＬを添加した後、１％牛血清アルブミン含有リン酸緩衝液（ｐＨ ７．４）１５０μＬを添加し、アミロイドを最終濃度２５、６２．５、２５０、６２５、１０００ｎｍｏｌ／Ｌの割合で含有する液（２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン総量として４００ｐｍｏｌ／Ｌ相当）を調製した。【０１３１】
（５）上記マイクロプレートを２２℃で３時間、一定速度（４００回転／分）で振盪した後、各ウェル内の液をグラスファイバーフィルター（商品名：ＭｕｌｕｔｉｓｃｒｅｅｎＴＭ−ＦＣ、ミリポア社製）にて濾過することによりアミロイドに結合した［１２５Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンと、結合していない［１２５Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンとを分離した。【０１３２】
（６）試料溶液濾過後のグラスファイバーフィルターについて、１％牛血清アルブミン含有リン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で洗浄（０．５ｍＬ×５回）した後、グラスファイバーフィルターの放射能カウントをオートウェル・ガンマシステム（形式：ＡＲＣ−３０１Ｂ、Ａｌｏｋａ社製）で測定した（以下、Ａとする）。【０１３３】
（７）別に、実施例４にて調製した２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（非放射性ヨード体）のメタノール溶液を用い、上記（３）と同様の操作を行って、２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン濃度１５μｍｏｌ／Ｌの液を調製した。この液５０μＬを、上記（３）にて調製した溶液５０μＬを入れた９６穴マイクロプレートの各ウェルに添加し、さらにアミロイド懸濁液を１％牛血清アルブミン含有リン酸緩衝液（ｐＨ ７．４）に溶解した液（アミロイドの濃度は、試料溶液中のアミロイド濃度に応じて調整）５０μＬ及び１％牛血清アルブミン含有リン酸緩衝液（ｐＨ ７．４）１００μＬを添加して、アミロイドを最終濃度２５、６２．５、２５０、６２５、１０００ｎｍｏｌ／Ｌの割合で含有する液を調製した。このマイクロプレートにつき上記（５）及び（６）と同様の操作を行ってグラスファイバーフィルターに残存した放射能カウントを測定した（以下、Ｂとする）。【０１３４】
（８）上記（６）及び（７）にて求めた放射能カウントの値を用い、下記式（１）を用いてアミロイドに特異的に結合した［１２５Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの放射能カウントを算出し、添加したアミロイド量との関係を評価した。【０１３５】
【数１】
2008059714.tif 000011
【０１３６】
（結果）
上記（８）にて算出した放射能カウントと、試料溶液中のアミロイド濃度との関係を図５に示す。この図に示すように、上記（８）にて算出した放射能カウントの値は、アミロイド濃度の増加に従って増加する傾向を示してしていた。本実験における条件では、アミロイド及びそれに結合した化合物は、グラスファイバーに保持される。また、上記（８）にて算出した放射能カウントの値からは、アミロイドとの結合と無関係にグラスファイバー上に残存した放射能は、実質的に除去されている。従って、本実施例にて測定されたグラスファイバー上の放射能カウントは、アミロイドに特異的に結合した化合物量を反映した値であるといえる。従って、上記（８）にて求めた放射能カウントの値が、アミロイド濃度の増加に伴って増加していたということは、［１２５Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンがアミロイドに結合する性質を有する化合物であることを強く示唆する結果である。
以上の結果より、［１２５Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンはアミロイド結合性を有することが示された。【０１３７】
（実施例１２〜１４、比較例１）オクタノール抽出法を用いた分配係数の測定【０１３８】
化合物の血液脳関門（以下、ＢＢＢという）透過性の指標として一般に知られている、オクタノール抽出法を用いた分配係数（以下、ｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌという）を測定した。【０１３９】
（方法）
実施例７にて調製した［１２３Ｉ］−６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのジエチルエーテル溶液（実施例１２）、実施例２にて調製した［１２３Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのジエチルエーテル溶液（実施例１３）、実施例１０にて調製した［１２３Ｉ］−２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンのジエチルエーテル溶液（実施例１４）、及び参考例１にて調製した［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹのジエチルエーテル溶液（比較例１）を、それぞれ１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液にて希釈し、放射能濃度２０〜３０ＭＢｑ／ｍＬに調整した。これらの液各１０μＬを、それぞれオクタノール２ｍＬに添加し、さらに１０ｍｍｏｌ／Ｌリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）２ｍＬを加えて３０秒間攪拌した。それぞれの混合液を低速遠心機で遠心分離（２０００ 回転／分×６０分間）した後、オクタノール層及び水層を各１ｍＬ分取し、それぞれの放射能カウントをオートウェル・ガンマシステム（形式：ＡＲＣ−３０１Ｂ、Ａｌｏｋａ社製）にて計測した。得られた放射能カウントを用い、式（２）よりｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌ値を算出した。【０１４０】
【数２】
2008059714.tif 000012
【０１４１】
（結果）
結果を表１に示す。この表に示すように、ｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌの値は、いずれの化合物においても、１〜３の間の値を示していた。ＢＢＢを透過可能な化合物においては、ｌｏｇＰｏｃｔａｎｏｌ値は１〜３の間の値の値であることが知られている（Douglas D. Dischino et al., J.Nucl.Med., (1983), 24, p.1030-1038）。以上の結果より、いずれの化合物も、ＩＭＰＹ同様にＢＢＢ透過性を有することが示唆された。【０１４２】
【表１】
2008059714.tif 000013
【０１４３】
（実施例１５〜１６、比較例２）脳内移行性及びクリアランスの測定【０１４４】
［１２３Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン及び［１２３Ｉ］−２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを用い、雄性のＷｉｓｔaｒ系ラット（７週齢）における脳への放射能集積の経時的変化を測定した。【０１４５】
（方法）
上記実施例２で調製した［１２３Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（実施例１５）、上記実施例１０にて調製した［１２３Ｉ］−２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（実施例１６）を、１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度２０〜３０ＭＢｑ／ｍＬ）０．０５ｍＬを、チオペンタール麻酔下で尾静脈より雄性のＷｉｓｔaｒ系ラット（７週齢）に投与した。投与後２分、５分、３０分、６０分に腹部大動脈より脱血した上で脳を採取し、脳の質量を測定し、さらに脳の放射能をシングルチャネルアナライザー（検出器型番：ＳＰ−２０、応用光研工業株式会社製）を用いて計測した（以下、本実施例にてＡとする）。また、残り全身の放射能量を同様に測定した（以下、本実施例にてＢとする）。これらの測定結果を用い、下記式（３）より、各解剖時間点における、脳への単位重量当たりの放射能集積量（％ＩＤ／ｇ）を算出した（実施例１５及び実施例１６）。
別に、上記参考例１にて調製した［１２３Ｉ］−ＩＭＰＹを１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度２０〜３０ＭＢｑ／ｍＬ）を調製し、上記と同様の操作を行って、各解剖時間点における、脳への単位重量当たりの放射能集積量（％ＩＤ／ｇ）を算出した（比較例２）。
なお、実施例１５、実施例１６及び比較例２共に、各時間点において、それぞれ３匹の動物を用いて実験を行った。【０１４６】
【数３】
2008059714.tif 000014
【０１４７】
（結果）
結果を表２に示す。表２に示すように、［１２３Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（実施例１５）及び［１２３Ｉ］−２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン（実施例１６）は、投与後２分点において、１２３Ｉ−ＩＭＰＹ（比較例２）と同等の集積が認められ、その後６０分にかけて速やかに消失する傾向を示していた。この結果より、［１２３Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン及び［１２３Ｉ］−２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンは、１２３Ｉ−ＩＭＰＹと同様、高い脳移行性及び速やかな脳からのクリアランスを有することが示唆された。【０１４８】
【表２】
2008059714.tif 000015
【０１４９】
（実施例１７）［１２３Ｉ］−６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンによる脳内アミロイドの描出の確認【０１５０】
本発明に係る化合物が脳内アミロイドを描出し得るかを評価するため、下記の実験を行った。【０１５１】
（方法）
（１）Ａβ１−４2（和光純薬工業）をリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）で溶解して３７℃で７２時間振盪させ、１ｍｇ／ｍＬの凝集Ａβ懸濁液（以下、本実施例にてアミロイド懸濁液という）を得た。【０１５２】
（２）チオペンタール麻酔下、雄性Ｗｉｓｔａｒ系ラット（７週齢）の片側扁桃核へ上記アミロイド懸濁液を２．５μＬ（２５μｇ相当）注入し、対照として、反対側の扁桃核にリン酸緩衝生理食塩液（ｐＨ７．４）を２．５μＬ注入した。アミロイド懸濁液及びリン酸緩衝生理食塩液（ｐＨ７．４）注入１日後のラットを、検体とした。【０１５３】
（３）［１２３Ｉ］−６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解し、試料溶液とした（放射能濃度３２ＭＢｑ／ｍＬ）。この試料溶液を、チオペンタール麻酔下、上記ラットに尾静脈より投与した（投与量：０．５ｍＬ、投与した放射能：１６ＭＢｑ相当）。【０１５４】
（４）投与６０分後に脳を摘出して、ミクロトーム（形式：ＣＭ３０５０Ｓ、ＬＥＩＣＡ社製）を用いて厚さ１０μｍの脳切片を作製した。当該脳切片をイメージングプレート上で２０時間露光させた後、バイオイメージングアナライザー（形式：ＢＡＳ−２５００、富士写真フィルム株式会社製）を用いて画像解析を行った。【０１５５】
（５）バイオイメージングアナライザーを用いた上記画像解析の終了後、チオフラビンＴによる病理染色を行って蛍光顕微鏡（株式会社ニコン製、形式：ＴＥ２０００−Ｕ型、励起波長：４００〜４４０ｎｍ、検出波長：４７０ｎｍ）を用いたイメージングを行い、当該切片上にアミロイドが沈着していることを確認した（図８ｂ）。【０１５６】
（結果）
アミロイド脳内注入ラットの脳切片におけるオートラジオグラム及びチオフラビンＴ染色のイメージを図８に示す。この図に示すように、アミロイド懸濁液を注入した側の扁桃核において、明らかな放射能集積が認められた。また、放射能集積部位におけるチオフラビンＴ染色の結果より、当該部位においてアミロイドが存在していることが確認された。一方、生理食塩液を注入した側の扁桃核においては、他の部位と比較した有意な放射能集積は確認されなかった。
この結果より、［１２３Ｉ］−６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンは、脳内アミロイドに集積する性能を有し、脳内アミロイドの描出能を有することが示唆された。【０１５７】
（実施例１８）［１２３Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンによる脳内アミロイドの描出の確認【０１５８】
本発明に係る化合物が脳内アミロイドを描出し得るかを評価するため、下記の実験を行った。【０１５９】
（方法）
［１２３Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液を試料溶液とした（放射能濃度２０ＭＢｑ／ｍＬ）以外は実施例１７と同様の操作を行い、［１２３Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンにおける脳内アミロイドの描出能を確認した。（投与量：０．５ｍＬ、投与した放射能：１０ＭＢｑ相当）。【０１６０】
（結果）
アミロイド脳内注入ラットの脳切片におけるオートラジオグラム及びチオフラビンＴ染色のイメージを図９に示す。この図に示すように、アミロイド懸濁液を注入した側の扁桃核において、明らかな放射能集積が認められた。また、放射能集積部位におけるチオフラビンＴ染色の結果より、当該部位においてアミロイドが存在していることが確認された。一方、生理食塩液を注入した側の扁桃核においては、他の部位と比較した有意な放射能集積は確認されなかった。
この結果より、［１２３Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンは、脳内アミロイドに集積する性能を有し、脳内アミロイドの描出能を有することが示唆された。【０１６１】
（実施例１９）［１２３Ｉ］−２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンによる脳内アミロイドの描出の確認【０１６２】
本発明に係る化合物が脳内アミロイドを描出し得るかを評価するため、下記の実験を行った。【０１６３】
（方法）
［１２３Ｉ］−２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液を試料溶液とした（放射能濃度２４ＭＢｑ／ｍＬ）以外は実施例１７と同様の操作を行い、［１２３Ｉ］−２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンにおける脳内アミロイドの描出能を確認した。（投与量：０．５ｍＬ、投与した放射能：１２ＭＢｑ相当）。【０１６４】
（結果）
アミロイド脳内注入ラットの脳切片におけるオートラジオグラム及びチオフラビンＴ染色のイメージを図１０に示す。この図に示すように、アミロイド懸濁液を注入した側の扁桃核において、明らかな放射能集積が認められた。また、放射能集積部位におけるチオフラビンＴ染色の結果より、当該部位においてアミロイドが存在していることが確認された。一方、生理食塩液を注入した側の扁桃核においては、他の部位と比較した有意な放射能集積は確認されなかった。
この結果より、［１２３Ｉ］−２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンは、脳内アミロイドに集積する性能を有し、脳内アミロイドの描出能を有することが示唆された。【０１６５】
（実施例２０）脳内移行性及びクリアランスの測定【０１６６】
［１２３Ｉ］−６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを用い、雄性のＷｉｓｔａｒ系ラット（７週齢）における脳への放射能集積の経時的変化を測定した。【０１６７】
（方法）
試料として上記実施例７で調製した［１２３Ｉ］−６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンを１０ｍｇ／ｍＬアスコルビン酸含有生理食塩液に溶解した液（放射能濃度２０〜３０ＭＢｑ／ｍＬ）を用いた以外は、実施例１５〜１６と同様の操作を行い、上記ラットにおける脳への放射能集積の経時的変化を測定した。【０１６８】
（結果）
結果を表３に示す。表３に示すように、［１２３Ｉ］−６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンは、投与後２分点において、１２３Ｉ−ＩＭＰＹ（上記比較例２参照）と同等の集積が認められ、その後６０分にかけて速やかに消失する傾向を示していた。この結果より、［１２３Ｉ］−６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンは、１２３Ｉ−ＩＭＰＹと同様、高い脳移行性及び速やかな脳からのクリアランスを有することが示唆された。【０１６９】
【表３】
2008059714.tif 000016
【産業上の利用可能性】
【０１７０】
本発明に係る化合物は、診断薬分野において利用することができる。
【図面の簡単な説明】
【０１７１】
【図１】２−（４’−トリブチルスタニルフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム。
【図２】２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム。
【図３】６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム。
【図４】６−トリブチルスタニル−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム。
【図５】２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム。
【図６】６−トリブチルスタニル−２−（４’−フルオロフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジンの合成スキーム。
【図７】試料溶液中のアミロイド濃度と放射能濃度との関係。
【図８】（ａ）［１２３Ｉ］−６−ヨード−２−（４’−メトキシフェニル）イミダゾ［１，２−ａ］ピリジン投与後の脳切片におけるオートラジオグラム及び（ｂ）チオフラビンＴ染色試料の蛍光顕微鏡像（アミロイド懸濁液投与部位の拡大表示）。
【図９】（ａ）［１２３Ｉ］−２−（４’−ヨードフェニル）−６−メトキシイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン投与後の脳切片におけるオートラジオグラム及び（ｂ）チオフラビンＴ染色試料の蛍光顕微鏡像（アミロイド懸濁液投与部位の拡大表示）。
【図１０】（ａ）［１２３Ｉ］−２−（４’−フルオロフェニル）−６−ヨードイミダゾ［１，２−ａ］ピリジン投与後の脳切片におけるオートラジオグラム及び（ｂ）チオフラビンＴ染色試料の蛍光顕微鏡像（アミロイド懸濁液投与部位の拡大表示）。
【図１】
2008059714.tif 000024
【図２】
2008059714.tif 000025
【図３】
2008059714.tif 000026
【図４】
2008059714.tif 000027
【図５】
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【図６】
2008059714.tif 000029
【図７】
2008059714.tif 000030
【図８】
2008059714.tif 000031
【図９】
2008059714.tif 000032
【図１０】
2008059714.tif 000033
【国際調査報告】
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