【手続補正書】
【提出日】平成15年11月18日(2003.11.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｅ１において少なくとも部分的に欠失していてＥ１活性を欠き、
ａ）野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約１からと塩基対約４００から塩基対約４５８までとの間に対応するアデノウイルス・シス作用性パッケージング領域、および
ｂ）ＨＩＶ ｇａｇ、ｎｅｆ、ｐｏｌおよびそれらの免疫学的に関連する修飾体から成る群より選択されるＨＩＶタンパク質をコードする少なくとも１つの遺伝子、
を含んでなる、組換えアデノウイルスワクチンベクター。
【請求項２】
野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約１から塩基対約４５０までに対応するパッケージング領域を含む、請求項１記載のベクター。
【請求項３】
野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約３５１１から約３５２４までからと塩基対約５７９８までとの間に対応するヌクレオチドを更に含む、請求項１記載のベクター。
【請求項４】
野生型アデノウイルスゲノムの１〜４５０からと３５１１〜５７９８までとの間に対応する塩基対を含む、請求項３記載のベクター。
【請求項５】
塩基対４５１〜３５１０が欠失している、請求項４記載のベクター。
【請求項６】
Ｅ３において少なくとも部分的に欠失している、請求項１記載のベクター。
【請求項７】
該Ｅ３欠失領域が塩基対２８，１３３〜３０，８１８である、請求項６記載のベクター。
【請求項８】
該ＨＩＶタンパク質またはその修飾体をコードする遺伝子が、ヒトにおける発現に関して最適化されたコドンを含む、請求項１記載のベクター。
【請求項９】
該ベクターが、
ａ）タンパク質をコードする核酸と、
ｂ）該タンパク質をコードする核酸に作動的に結合した異種プロモーターと、
ｃ）転写終結配列と
を含む遺伝子発現カセットを含む、請求項１記載のベクター。
【請求項１０】
該遺伝子発現カセットが該Ｅ１領域内に挿入されている、請求項９記載のベクター。
【請求項１１】
該遺伝子発現カセットがＥ１に平行な配向で存在する、請求項９記載のアデノウイルスベクター。
【請求項１２】
該遺伝子発現カセットがＥ１に逆平行な配向で存在する、請求項９記載のアデノウイルスベクター。
【請求項１３】
該プロモーターが、イントロン配列を欠くサイトメガロウイルスプロモーターである、請求項９記載のアデノウイルスベクター。
【請求項１４】
該プロモーターが最初期ヒトサイトメガロウイルスプロモーターである、請求項１３記載のアデノウイルスベクター。
【請求項１５】
該プロモーターがマウスサイトメガロウイルスプロモーターである、請求項９記載のアデノウイルスベクター。
【請求項１６】
該転写終結配列がウシ成長ホルモンポリアデニル化および転写終結配列である、請求項９記載のアデノウイルスベクター。
【請求項１７】
該転写終結配列が合成ポリアデニル化シグナル（ＳＰＡ）である、請求項９記載のアデノウイルスベクター。
【請求項１８】
請求項１記載のアデノウイルスベクターを含んでなる細胞。
【請求項１９】
アデノウイルスＥ１タンパク質を相補的レベルで発現する細胞系内への請求項１記載のアデノウイルスベクターのトランスフェクションの後に回収され精製された組換え複製欠損型アデノウイルス粒子。
【請求項２０】
組換えアデノウイルスベクターでトランスフェクトされた細胞株から回収され精製された組換え複製欠損型アデノウイルス粒子を含むＨＩＶワクチン組成物であり、
該細胞株が相補的なレベルのアデノウイルスＥ１タンパク質を発現し、
該組換えアデノウイルスベクターがＥ１において少なくとも部分的に欠失していてＥ１活性を欠き、ａ）野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約１からと塩基対約４００から約４５８までの間に対応するアデノウイルス・シス作用性パッケージング領域、およびｂ）ＨＩＶ ｇａｇ、ｎｅｆ、ｐｏｌおよびそれらの免疫学的に関連する修飾体からなる群より選択されるＨＩＶタンパク質をコードする少なくとも１つの遺伝子を含む、前記ＨＩＶワクチン組成物。
【請求項２１】
生理的に許容される担体を含む、請求項２０記載のＨＩＶワクチン組成物。
【請求項２２】
アデノウイルスＥ１タンパク質を発現する宿主細胞内に該アデノウイルスベクターを導入し、得られた組換え複製欠損型アデノウイルスを回収することを含んでなる、請求項１記載のアデノウイルスベクターのアデノウイルスゲノムを含有する組換え複製欠損型アデノウイルス粒子の製造方法。
【請求項２３】
該細胞が血清型５のアデノウイルスのヌクレオチド４５９〜３５１０を含む導入遺伝子を発現する、請求項２２記載の製造方法。
【請求項２４】
請求項２１記載のワクチン組成物を該個体に投与することを含んでなる個体においてＨＩＶに対する細胞性免疫応答を生成させる方法。
【請求項２５】
ＤＮＡプラスミドワクチンを該個体に投与することを更に含み、この場合、それと共に、所望により、該免疫応答を増強しうる生物学的に有効なアジュバント、タンパク質または他の物質を投与しうる、請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
ワクチン組成物の投与の前に該ＤＮＡプラスミドワクチンを該個体に投与する、請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
異なった血清型の精製された組換え欠損型アデノウイルス粒子を含むワクチン組成物が該ワクチン組成物に先行する、請求項２４記載の方法。
【請求項２８】
該ワクチン組成物を該個体に投与および再投与することを含む、請求項２４記載の方法。
【請求項２９】
該ＨＩＶタンパク質がＨＩＶ  ｇａｇまたはその免疫学的に関連した修飾体である、請求項１記載のアデノウイルスベクター。
【請求項３０】
該遺伝子発現カセットが、ＨＩＶ  ｇａｇタンパク質またはその免疫学的に関連した修飾体をコードするオープンリーディングフレームを含む、請求項９記載のアデノウイルスベクター。
【請求項３１】
Ｅ１において少なくとも部分的に欠失していてＥ１活性を欠き、
ａ）野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約１から塩基対約４５０までに対応するアデノウイルス・シス作用性パッケージング領域、
ｂ）野生型アデノウイルスゲノムの約３５１１から約５７９８までに対応する領域、および
ｃ）ｉ）配列番号２７と、
ｉｉ）ｉ）に作動的に結合した異種プロモーターと、
ｉｉｉ）転写終結配列と、を含む遺伝子発現カセット、
を含んでなり、野生型アデノウイルスゲノムの塩基対４５１から塩基対３５１０までに対応する塩基対を欠失している組換えアデノウイルスベクター。
【請求項３２】
該遺伝子発現カセットがＥ１に平行な配向で存在する、請求項３１記載のアデノウイルスベクター。
【請求項３３】
該遺伝子発現カセットがＥ１に逆平行な配向で存在する、請求項３１記載のアデノウイルスベクター。
【請求項３４】
該プロモーターが、イントロン配列を欠くサイトメガロウイルスプロモーターである、請求項３１記載のアデノウイルスベクター。
【請求項３５】
該転写終結配列がウシ成長ホルモンポリアデニル化および転写終結配列である、請求項３１記載のアデノウイルスベクター。
【請求項３６】
Ｅ３において少なくとも部分的に欠失した、請求項３１記載のアデノウイルスベクター。
【請求項３７】
請求項３１記載のアデノウイルスベクターを含んでなる細胞。
【請求項３８】
アデノウイルスＥ１タンパク質を相補的レベルで発現する細胞系内への請求項３１記載のアデノウイルスベクターのトランスフェクションの後に回収され精製された組換え複製欠損型アデノウイルス粒子。
【請求項３９】
組換えアデノウイルスベクターでトランスフェクトされた細胞株から回収され精製された組換え複製欠損型アデノウイルス粒子を含むＨＩＶワクチン組成物であり、
該細胞株が相補的なレベルのアデノウイルスＥ１タンパク質を発現し、
該組換えアデノウイルスベクターがＥ１において少なくとも部分的に欠失していてＥ１活性を欠き
ａ）野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約１から塩基対約４５０に対応するアデノウイルス・シス作用性パッケージング領域、
ｂ）野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約３５１１から塩基対約５７９８に対応する領域、およびｃ）ｉ）配列番号２７と、
ｉｉ）ｉ）に作動的に結合した異種プロモーターと、
ｉｉｉ）転写終結配列と、を含む遺伝子発現カセット、
を含んでなり、野生型アデノウイルスゲノムの塩基対４５１から塩基対３５１０までに対応する塩基対を欠失していることを特徴とする、前記ＨＩＶワクチン組成物。
【請求項４０】
生理的に許容される担体を含む、請求項３９記載のＨＩＶワクチン組成物。
【請求項４１】
アデノウイルスＥ１タンパク質を発現する宿主細胞内に該アデノウイルスベクターを導入し、得られた組換え複製欠損型アデノウイルスを回収することを含んでなる、請求項３１記載のアデノウイルスベクターのアデノウイルスゲノムを含有する組換え複製欠損型アデノウイルス粒子の製造方法。
【請求項４２】
該細胞が血清型５のアデノウイルスのヌクレオチド４５９〜３５１０を含む導入遺伝子を発現する、請求項４１記載の製造方法。
【請求項４３】
請求項３９記載のワクチンを該個体に投与することを含んでなる、個体においてＨＩＶに対する細胞性免疫応答を生成させる方法。
【請求項４４】
ＤＮＡプラスミドワクチンを該個体に投与することを更に含み、この場合、それと共に、所望により、該免疫応答を増強しうる生物学的に有効なアジュバント、タンパク質または他の物質を投与しうる、請求項４３記載の方法。
【請求項４５】
ワクチン組成物の投与の前に該ＤＮＡプラスミドワクチンを該個体に投与する、請求項４４記載の方法。
【請求項４６】
異なる血清型の精製された組換え複製欠損アデノウイルス粒子を含むワクチン組成物が該アデノウイルスワクチンに先行する、請求項４３記載の方法。
【請求項４７】
該ワクチン組成物を該個体に投与および再投与することを含む、請求項４３記載の方法。
【請求項４８】
該ＨＩＶタンパク質がＨＩＶ  ｐｏｌまたはその免疫学的に関連した修飾体である、請求項１記載のアデノウイルスベクター。
【請求項４９】
該遺伝子発現カセットが、ＨＩＶ  ｐｏｌタンパク質またはその免疫学的に関連した修飾体をコードするオープンリーディングフレームを含む、請求項９記載のアデノウイルスベクター。
【請求項５０】
Ｅ１において少なくとも部分的に欠失していてＥ１活性を欠く組換えアデノウイルスベクターであって、
ａ）野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約１から塩基対約４５０に対応するアデノウイルス・シス作用性パッケージング領域、
ｂ）野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約３５１１から塩基対約５７９８に対応する領域、および
ｃ）ｉ）配列番号１、配列番号３、配列番号５および配列番号７からなる群より選択されるヌクレオチド配列、
ｉｉ）ｉ）に作動的に結合した異種プロモーターと、
ｉｉｉ）転写終結配列を含んでなり、野生型アデノウイルスゲノムの塩基対４５１から塩基対３５１０までに対応する塩基対を欠失していることを特徴とする、前記アデノウイルスベクター。
【請求項５１】
該遺伝子発現カセットがＥ１に平行な配向で存在する、請求項５０記載のアデノウイルスベクター。
【請求項５２】
該遺伝子発現カセットがＥ１に逆平行な配向で存在する、請求項５０記載のアデノウイルスベクター。
【請求項５３】
該プロモーターが、イントロン配列を欠くサイトメガロウイルスプロモーターである、請求項５０記載のアデノウイルスベクター。
【請求項５４】
該転写終結配列がウシ成長ホルモンポリアデニル化および転写終結配列である、請求項５０記載のアデノウイルスベクター。
【請求項５５】
Ｅ３において少なくとも部分的に欠失した、請求項５０記載のアデノウイルスベクター。
【請求項５６】
請求項５０記載のアデノウイルスベクターを含んでなる細胞。
【請求項５７】
アデノウイルスＥ１タンパク質を相補的レベルで発現する細胞系内への請求項５０記載のアデノウイルスベクターのトランスフェクションの後に回収され精製された組換え複製欠損型アデノウイルス粒子。
【請求項５８】
組換えアデノウイルスベクターでトランスフェクトされた細胞株から回収され精製された組換え複製欠損型アデノウイルス粒子を含むＨＩＶワクチン組成物であり、
該細胞株が相補的なレベルのアデノウイルスＥ１タンパク質を発現し、
該組換えアデノウイルスベクターがＥ１において少なくとも部分的に欠失していてＥ１活性を欠き
ａ）野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約１から塩基対約４５０に対応するアデノウイルス・シス作用性パッケージング領域、
ｂ）野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約３５１１から塩基対約５７９８に対応する領域、および
ｃ）ｉ）配列番号１、配列番号３、配列番号５および配列番号７と、
ｉｉ）ｉ）に作動的に結合した異種プロモーターと、
ｉｉｉ）転写終結配列と、を含む遺伝子発現カセット、
を含んでなり、該ベクターが野生型アデノウイルスゲノムの塩基対４５１から塩基対３５１０までに対応する塩基対を欠失していることを特徴とする、前記ＨＩＶワクチン組成物。
【請求項５９】
生理的に許容される担体を含む、請求項５８記載のＨＩＶワクチン組成物。
【請求項６０】
アデノウイルスＥ１タンパク質を発現する宿主細胞内に該アデノウイルスベクターを導入し、得られた組換え複製欠損型アデノウイルスを回収することを含んでなる、請求項５０記載のアデノウイルスベクターのアデノウイルスゲノムを含有する組換え複製欠損型アデノウイルス粒子の製造方法。
【請求項６１】
該細胞がＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞である、請求項６０記載の製造方法。
【請求項６２】
請求項５９記載のワクチンを該個体に投与することを含んでなる、個体においてＨＩＶに対する細胞性免疫応答を生成させる方法。
【請求項６３】
ＤＮＡプラスミドワクチンを該個体に投与することを更に含み、この場合、それと共に、所望により、該免疫応答を増強しうる生物学的に有効なアジュバント、タンパク質または他の物質を投与しうる、請求項６２記載の方法。
【請求項６４】
ワクチン組成物の投与の前に該ＤＮＡプラスミドワクチンを該個体に投与する、請求項６３記載の方法。
【請求項６５】
異なる血清型の精製された組換え複製欠損アデノウイルス粒子を含むワクチン組成物が該アデノウイルスワクチンに先行する、請求項６２記載の方法。
【請求項６６】
該アデノウイルスワクチンベクターを該個体に投与および再投与することを含む、請求項６２記載の方法。
【請求項６７】
該ＨＩＶタンパク質がＨＩＶ  ｎｅｆまたはその免疫学的に関連した修飾体である、請求項１記載のアデノウイルスベクター。
【請求項６８】
該遺伝子発現カセットが、ＨＩＶ  ｎｅｆタンパク質またはその免疫学的に関連した修飾体をコードするオープンリーディングフレームを含む、請求項９記載のアデノウイルスベクター。
【請求項６９】
Ｅ１において少なくとも部分的に欠失していてＥ１活性を欠き、
ａ）野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約１から塩基対約４５０までに対応するアデノウイルス・シス作用性パッケージング領域、
ｂ）野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約３５１１から約５７９８までに対応する領域、および
ｃ）ｉ）配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５よりなる群から選ばれるヌクレオチド配列と、
ｉｉ）ｉ）に作動的に結合した異種プロモーターと、
ｉｉｉ）転写終結配列と、を含む遺伝子発現カセット、
を含み、野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約４５１から塩基対約３５１０までに対応する塩基対を欠失している組換えアデノウイルスワクチンベクター。
【請求項７０】
該遺伝子発現カセットがＥ１に平行な配向で存在する、請求項６９記載のアデノウイルスベクター。
【請求項７１】
該遺伝子発現カセットがＥ１に逆平行な配向で存在する、請求項６９記載のアデノウイルスベクター。
【請求項７２】
該プロモーターが、イントロン配列を欠くサイトメガロウイルスプロモーターである、請求項６９記載のアデノウイルスベクター。
【請求項７３】
該転写終結配列がウシ成長ホルモンポリアデニル化および転写終結配列である、請求項６９記載のアデノウイルスベクター。
【請求項７４】
Ｅ３において少なくとも部分的に欠失した、請求項６９記載のアデノウイルスベクター。
【請求項７５】
請求項６９記載のアデノウイルスベクターを含んでなる細胞。
【請求項７６】
アデノウイルスＥ１タンパク質を相補的レベルで発現する細胞系内への請求項６９記載のアデノウイルスベクターのトランスフェクションの後に回収され精製された組換え複製欠損型アデノウイルス粒子。
【請求項７７】
組換えアデノウイルスベクターでトランスフェクトされた細胞株から回収され精製された組換え複製欠損型アデノウイルス粒子を含むＨＩＶワクチン組成物であり、
該細胞株が相補的なレベルのアデノウイルスＥ１タンパク質を発現し、
該組換えアデノウイルスベクターがＥ１において少なくとも部分的に欠失していてＥ１活性を欠き
ａ）野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約１から塩基対約４５０に対応するアデノウイルス・シス作用性パッケージング領域、
ｂ）野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約３５１１から塩基対約５７９８に対応する領域、および
ｃ）ｉ）配列番号９、配列番号１１、配列番号１３および配列番号１５と、
ｉｉ）ｉ）に作動的に結合した異種プロモーターと、
ｉｉｉ）転写終結配列と、を含む遺伝子発現カセット、
を含んでなり、該ベクターが野生型アデノウイルスゲノムの塩基対４５１から塩基対３５１０までに対応する塩基対を欠失していることを特徴とする、前記ＨＩＶワクチン組成物。
【請求項７８】
生理的に許容される担体を含む、請求項７７記載のＨＩＶワクチン組成物。
【請求項７９】
アデノウイルスＥ１タンパク質を発現する宿主細胞内に該アデノウイルスベクターを導入し、得られた組換え複製欠損型アデノウイルスを回収することを含んでなる、請求項６９記載のアデノウイルスベクターのアデノウイルスゲノムを含有する組換え複製欠損型アデノウイルス粒子の製造方法。
【請求項８０】
該細胞が血清型５のアデノウイルスのヌクレオチド４５９〜３５１０を含む導入遺伝子を発現する、請求項７９記載の製造方法。
【請求項８１】
請求項７７記載のワクチンを該個体に投与することを含んでなる、個体においてＨＩＶに対する細胞性免疫応答を生成させる方法。
【請求項８２】
ＤＮＡプラスミドワクチンを該個体に投与することを更に含み、この場合、それと共に、所望により、該免疫応答を増強しうる生物学的に有効なアジュバント、タンパク質または他の物質を投与しうる、請求項８１記載の方法。
【請求項８３】
アデノウイルスワクチンの投与の前に該ＤＮＡプラスミドワクチンを該個体に投与する、請求項８２記載の方法。
【請求項８４】
異なる血清型の精製された組換え複製欠損アデノウイルス粒子を含むワクチン組成物が該アデノウイルスワクチンに先行する、請求項８１記載の方法。
【請求項８５】
該ワクチン組成物を該個体に投与および再投与することを含む、請求項８１記載の方法。
【請求項８６】
１または複数の組換えアデノウイルスベクターでトランスフェクトされた１または複数の細胞株から回収され精製された組換え複製欠損型アデノウイルス粒子を含む多価アデノウイルスワクチン組成物であり、
該細胞株が相補的なレベルのアデノウイルスＥ１タンパク質を発現し、
該組換えアデノウイルスベクターがＥ１において少なくとも部分的に欠失していてＥ１活性を欠き
ａ）野生型アデノウイルスゲノムの塩基対約１からと塩基対約４００から約４５８の間に対応するアデノウイルス・シス作用性パッケージング領域、および
ｂ）ｉ）３つの個々のベクターから、独立して発現されるｇａｇ、ｐｏｌおよびｎｅｆ、
ｉｉ）１つのベクターから、独立して発現されるｇａｇ、ｐｏｌおよびｎｅｆ（これらのコード核酸配列は別個のプロモーターおよび転写終結配列に作動的に結合している）、
ｉｉｉ）２つのベクター（一方はｐｏｌ−ｎｅｆ融合体を発現し、もう一方はｇａｇを発現する）を介して発現されるｇａｇ、ｐｏｌおよびｎｅｆ、
ｉｖ）２つのベクター（一方はｇａｇ−ｐｏｌ融合体を発現し、もう一方はｎｅｆを発現する）を介して発現されるｇａｇ、ｐｏｌおよびｎｅｆ、
ｖ）２つのベクター（一方はｎｅｆ−ｇａｇ融合体を発現し、もう一方はｐｏｌを発現する）を介して発現されるｇａｇ、ｐｏｌおよびｎｅｆ、
ｖｉ）ｇａｇ−ｐｏｌ−ｎｅｆ融合体を発現する１つのベクターを介して発現されるｇａｇ、ｐｏｌおよびｎｅｆ、
ｖｉｉ）２つの個々のベクターから、独立して発現されるｇａｇおよびｐｏｌ、
ｖｉｉｉ）１つのベクターから、独立して発現されるｇａｇおよびｐｏｌ（これらのコード核酸配列は別個のプロモーターおよび転写終結配列に作動的に結合している）、
ｉｘ）２つの個々のベクターから、独立して発現されるｐｏｌおよびｎｅｆ、
ｘ）１つのベクターから、独立して発現されるｐｏｌおよびｎｅｆ（これらのコード核酸配列は別個のプロモーターおよび転写終結配列に作動的に結合している）、
ｘｉ）２つの個々のベクターから、独立して発現されるｎｅｆおよびｇａｇ、
ｘｉｉ）１つのベクターから、独立して発現されるｎｅｆおよびｇａｇ（これらのコード核酸配列は別個のプロモーターおよび転写終結配列に作動的に結合している）、
ｘｉｉｉ）ｇａｇ−ｐｏｌ融合体を発現する１つのベクターを介して発現されるｇａｇおよびｐｏｌ、
ｘｉｖ）ｐｏｌ−ｎｅｆ融合体を発現する１つのベクターを介して発現されるｐｏｌおよびｎｅｆ、ならびに
ｘｖ）ｎｅｆ−ｇａｇ融合体を発現する１つのベクターを介して発現されるｎｅｆおよびｇａｇ
よりなる群から選ばれるＨＩＶタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む遺伝子発現カセットを含む、多価アデノウイルスワクチン組成物。
【請求項８７】
該ｇａｇ−ｐｏｌ融合体が配列番号３５よりなる、請求項８６記載の多価アデノウイルスワクチン組成物。
【請求項８８】
該融合配列が、別個のプロモーターおよび転写終結配列に作動的に結合したコード核酸配列を有する、請求項８６記載の多価アデノウイルスワクチン組成物。
【請求項８９】
該融合配列が、単一のプロモーターに作動的に結合したコード核酸配列、およびＩＲＥＳ（ｉｎｔｅｒｎａｌ  ｒｉｂｏｓｏｍｅ  ｅｎｔｒｙ  ｓｅｑｕｅｎｃｅ）に作動的に結合したコード核酸配列を有する、請求項８６記載の多価アデノウイルスワクチン組成物。