【誤訳訂正書】
【提出日】平成17年3月25日(2005.3.25)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＭＩＦのアゴニスト又はアンタゴニストに関して化合物をスクリーニングする方法であって、ＭＨＣクラスII不変鎖（Ｉｉ）ポリペプチドを候補化合物の存在下及び非存在下でＭＩＦと接触させること、及び該候補化合物の存在下でのＭＩＦと該Ｉｉポリペプチドとの相互作用を候補化合物の非存在下でのそれらの相互作用と比較し、これにより該ＭＩＦと該Ｉｉポリペプチドとの相互作用を増強する候補化合物をＭＩＦのアゴニストとして同定し、該ＭＩＦと該Ｉｉポリペプチドとの相互作用を阻害する候補化合物をＭＩＦのアンタゴニストとして同定することを含み、ここで該Ｉｉポリペプチドは図５（配列番号２）の完全Ｉｉアミノ酸配列又はそのＭＩＦ結合性断片を含む方法。
【請求項２】
請求項１記載の方法により同定されるＭＩＦのアゴニスト又はアンタゴニスト。
【請求項３】
抗体又はその抗原結合性断片である請求項２記載のアゴニスト又はアンタゴニスト。
【請求項４】
抗体が抗ＣＤ７４抗体である請求項３記載のアゴニスト又はアンタゴニスト。
【請求項５】
モノクロナール抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体及びキメラ抗体からなる群から選択される請求項４記載の抗ＣＤ７４抗体。
【請求項６】
ＭＩＦと結合しそれによりＭＩＦの効果を媒介するＭＨＣクラスII不変鎖（Ｉｉ）ポリペプチドを表面上に含む細胞へのＭＩＦの該効果を阻害する方法であって、該細胞を該ＩｉポリペプチドへのＭＩＦの結合を阻害するＭＩＦのアンタゴニストと接触させることを含む方法。
【請求項７】
アンタゴニストが該Ｉｉポリペプチドに結合する、抗体又はその断片である請求項６記載の方法。
【請求項８】
細胞が哺乳動物中に存在し、アンタゴニストが医薬組成物として哺乳動物に投与される請求項７記載の方法。
【請求項９】
哺乳動物が、患っていない哺乳動物の正常範囲より上昇した全身性又は局所性ＭＩＦレベルにより特徴付けられる状態を患っている請求項８記載の方法。
【請求項１０】
哺乳動物が炎症性疾患を患い、アンタゴニストが該疾患の処置に有効な量で投与される請求項９記載の方法。
【請求項１１】
疾患が、敗血性ショック又は関節炎である請求項９記載の方法。
【請求項１２】
哺乳動物がガンを患っており、アンタゴニストがガンの処置に有効な量で投与される請求項８記載の方法。
【請求項１３】
ＭＩＦを、ＭＩＦと結合するＭＨＣクラスII不変鎖（Ｉｉ）ポリペプチド又はその断片を含むＭＩＦのアンタゴニストと接触させることを含むＭＩＦの活性を阻害する方法。
【請求項１４】
ＭＩＦと結合するＭＨＣクラスII不変鎖（Ｉｉ）ポリペプチド又はその断片が該ポリペプチド又はその断片の可溶性形態である請求項１３記載の方法。
【請求項１５】
ポリペプチド又はその断片の可溶性形態が該ポリペプチド又はその部分の細胞外結合ドメインを含む請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
阻害されるＭＩＦが哺乳動物中にあり、ＭＩＦのアンタゴニストが医薬組成物として哺乳動物に投与される請求項１３記載の方法。
【請求項１７】
哺乳動物が、患っていない哺乳動物の正常範囲より上昇した全身性又は局所性ＭＩＦレベルにより特徴付けられる状態を患っている請求項１６記載の方法。
【請求項１８】
哺乳動物が炎症性疾患を患い、アンタゴニストが該疾患の処置に有効な量で投与される請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
疾患が、敗血性ショック又は関節炎である請求項１８記載の方法。
【請求項２０】
哺乳動物がガンを患っており、アンタゴニストがガンの処置に有効な量で投与される請求項１６記載の方法。
【請求項２１】
Ｉｉポリペプチド又はその断片へのＭＩＦの特異的結合を促進する条件下で、ＭＩＦと結合するＭＨＣクラスII不変鎖（Ｉｉ）ポリペプチド又はその断片とＭＩＦを含む試料とを接触させること、及び形成されたＭＩＦ：Ｉｉポリペプチド複合体又はＭＩＦ：Ｉｉポリペプチド断片複合体をＩｉポリペプチド又はその断片に結合しない材料から分離することを含むＭＩＦの精製方法。
【請求項２２】
Ｉｉポリペプチド又はその断片が、固体支持マトリックス上に固定化されている請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
Ｉｉポリペプチド又はその断片へのＭＩＦの特異的結合を促進する条件下で、ＭＩＦと結合するＭＨＣクラスII不変鎖（Ｉｉ）ポリペプチド又はその断片と試料とを接触させること、及びそれにより形成されたＭＩＦ：Ｉｉポリペプチド複合体又はＭＩＦ：Ｉｉポリペプチド断片複合体を検出することを含むＭＩＦの存在を検定する方法。
【請求項２４】
ＭＩＦと結合しそれによりＭＩＦの効果を媒介するＭＨＣクラスII不変鎖（Ｉｉ）ポリペプチドを表面上に含む細胞へのＭＩＦの該効果を減少させる方法であって、該細胞により生産される該Ｉｉポリペプチドの量を減少させるのに有効な量のアンチセンス核酸分子を該細胞へ提供することを含み、該アンチセンス核酸分子はＭＨＣクラスII不変鎖（Ｉｉ）ポリペプチドをコードする遺伝子から発現されるｍＲＮＡの部分に特異的に結合し、それによって該細胞の該ｍＲＮＡの翻訳を減少させることを特徴とする方法。
【請求項２５】
Ｉｉポリペプチドを含む細胞が哺乳動物中にあり、該アンチセンス核酸分子が医薬組成物として哺乳動物に投与される請求項２４記載の方法。
【請求項２６】
アンチセンス核酸分子がオリゴヌクレオチドの形態で哺乳動物に投与される請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
アンチセンス核酸分子が細胞において該アンチセンス核酸分子を発現する組換え構築物の形態で哺乳動物に投与される請求項２５記載の方法。
【請求項２８】
哺乳動物が、患っていない哺乳動物の正常範囲より上昇した全身性又は局所性ＭＩＦレベルにより特徴付けられる状態を患っている請求項２５記載の方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００６】
Ｈｕｍｐｈｒｅｙｓ等の米国特許Ｎｏ．  ５，５５９，０２８は、組換え細胞での野生型及び変異型Ｉｉの発現のための遺伝子構造を公開している。Ｈｕｍｐｈｒｅｙｓ等の米国特許Ｎｏ．  ５，７２６，０２０は、Ｉｉ  ｍＲＮＡ分子とハイブリダイズし、それによりＩｉ  ｍＲＮＡ分子の翻訳を阻害する発現可能な逆遺伝子構造及びオリゴヌクレオチドを公開及び特許請求している。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２０】
発現クローニング及び機能分析に使用するために、我々はＭＩＦの細胞レセプターとしてクラスII関連不変鎖、Ｉｉ（ＣＤ７４）１０を同定した。ＭＩＦはII型膜たんぱく質であるＩｉの細胞外ドメインと結合する、そしてＩｉは、たとえばＥＲＫ−１／２  ＭＡＰキナーゼカスケードや細胞増殖の活性化を含むＭＩＦ誘導性細胞効果に必要である。これらのデータが、サイトカインとしてのＭＩＦの活性に関する機構を提供しＩｉの天然のリガンドとしてそれを同定させた、これは以前に免疫細胞活性化のためのシグナルリング及びアクセサリー機能において示唆されていた１１−１３。我々は、標準的な方法で組換えＭＩＦに蛍光色素Ａｌｅｘａ４８８１４を結合させ、結合物の生物活性の保持を証明し（図．１Ａ、Ｂ）、ＭＩＦへの応答が知られている細胞タイプのパネルで結合実験を実施した。例証のために、フローサイトメトリーを使用して、我々はヒト単球細胞株、ＴＨＰ−１の表面へのＡｌｅｘａ−ＭＩＦの高親和性結合を観察した。この結合活性は、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）での単球の活性化により誘導され、過剰の未標識ＭＩＦの添加により競合される（図．１Ｃ）。４℃でのＩＦＮγ処理単球の共焦点顕微鏡及び直接的視覚化は、Ａｌｅｘａ−ＭＩＦの表面結合及び細胞結合Ａｌｅｘａ−ＭＩＦが３７℃への温度シフトで内部化することを示した（図．１Ｄ）。増加した濃度のＡｌｅｘａ−ＭＩＦでなされた定量結合研究は、２つの明白なクラスの細胞表面レセプターを示した（図．１Ｅ）。高親和性結合活性は、３．７×１０−８ＭのＫｄ及び細胞当り３．１×１０４結合部位、そして低親和性結合は、３．５×１０−７ＭのＫｄ及び細胞当り４．９×１０４部位を示した。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２１】
ＭＩＦレセプターの同定のために、我々はＩＦＮγ活性化ＴＨＰ−１単球からｃＤＮＡを調製しラムダＺＡＰ−ＣＭＶベクターで哺乳動物の発現ライブラリーを構築した１５。合計１．５×１０７の組換え体を示すライブラリーのアリコートが、ＭＩＦに対してはほとんど検出できない結合活性を示すことを以前に我々が証明したＣＯＳ−７にトランスフェクトされた、そしてトランスフェクタントがＡｌｅｘａ−ＭＩＦ結合に関してフローサイトメトリーで分析された。陽性染色細胞が、細胞採取操作により単離されそして集められたｃＤＮＡクローンは、増幅され、細胞採取のさらなるラウンド実施のためにＣＯＳ−７細胞に再度トランスフェクトされた（図．２Ａ）。４ラウンドの選択後、単一コロニー群が大腸菌で調製され、２５０コロニーが任意に分析のために拾い上げられた。≧１．６  ｋＢの挿入ｃＤＮＡを有する５０クローンをシークエンスし１０個が３１−４１ｋＤのII型膜貫通たんぱく質のＩｉ（ＣＤ７４）であるクラスII関連不変鎖をコードしていることを観察した１６。単離されたクローンは全長に関して異なっていたが、それぞれはセンス方向で完全な細胞外及び膜貫通ドメインをコードしていた（図２Ｂ）。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２５】
さらなるたんぱく質がＭＩＦ媒介活性には関与するらしいけれども、これらの発見は長く求められていたＭＩＦレセプターへの最初の洞察を提供する。たとえば、ＭＩＦのようにＩｉはホモ３量体で２３、Ｉｉの細胞内ドメインは３０−４６アミノ酸からなる、これは使用される２つの同位相の開始コドンに依存する１６。単球にコードされるＩｉは、Ｔ細胞増殖応答を増強することが示されておりＩｉのこのアクセサリー機能は、ＩｉとＣＤ４４間の特異的コンドロチン硫酸依存性相互作用と結びついている１１。我々は、Ｉｉ発現細胞でのＥＲＫ−１／２リン酸化への抗ＣＤ４４の阻害効果を観察したが、ＭＩＦ結合を観察しなかった。これは、ＭＩＦ結合ＩｉがＣＤ−４４媒介ＭＡＰキナーゼ活性化のための促進リガンドであるという推論と一致する。ＣＤ４４は高度に多型のＩ型膜貫通糖たんぱく質であり２４、ＣＤ４４はＩｉへのＭＩＦ結合の結果により下流のあるものを媒介するらしい。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２６】
たとえば、ＭＩＦ−Ｉｉ相互作用の阻害剤やアンタゴニストを供与することによるＭＩＦ−Ｉｉ相互作用で誘導されるシグナル伝達経路の干渉は、しばしばＭＩＦへの細胞性免疫や活性化応答の変調への新規なアプローチを提供する。これに関する活性試薬（アゴニスト及びアンタゴニスト並びに他の阻害剤）は、ＭＩＦレベルの局所的又は全身的変化で典型とされる状態及び疾患での治療利用を予測させる。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２７】
またＭＩＦとクラスII不変鎖ポリペプチドＩｉ間の特異的結合相互作用は、細胞表面Ｉｉを提示している細胞に希望の標識物又は毒物を濃縮するための“トロイの木馬型”ビークルとして標識化ＭＩＦ試薬の使用に都合よい。簡単には、希望の標識物又は毒物が、ＭＩＦリガンドと結合（たとえば、共有結合により）され、次にこの修飾ＭＩＦリガンドが、細胞表面局在化Ｉｉを提示している細胞に提供され、クラスII不変鎖ポリペプチドはこれに結合し、修飾ＭＩＦリガンドの内部化を引き起こし、ゆえに作用細胞に特異的標識化又は毒性化を引き起こす。Ｉｉ提示細胞は、インビトロ又はインビボで修飾ＭＩＦリガンドにさらされ、後者の場合にはＩｉ提示細胞は、患者内で特異的に特定化又は毒性化されるかもしれない。多種多様な診断用及び治療用試薬が、ＭＩＦリガンド（生物学的に活性なＭＩＦ全長又はそのＩｉ結合断片、又は前述のどちらかの突然変異体、及び特に生物学的に不活性に、及び/又は標識物又は毒性物へより都合よく結合するように適合させたような突然変異体）に有利的に結合され得、そして本発明の修飾ＭＩＦリガンドを提供する。ＭＩＦに結合させる典型的な望ましい試薬は、ドキソルビシン、メトトレキサート、タキソールなどのような化学治療薬；重金属又は放射性核種のような細胞毒性物又は蛍光分子のような検出可能標識物を錯体化できるＤＴＰＡのようなキレーター；シュードモナスの外毒素のような毒物などを含む。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００２９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００２９】
フローサイトメトリー、スキャッチャード分析、及び共焦点顕微鏡
ＴＨＰ−１細胞（２．５×１０５細胞／ml）がＩＦＮγ（１ng/ml、R&D Systems、Minneapolis、MN）を含む又は含まないＤＭＥＭ／１０％ＦＢＳ中で７２時間培養された。洗浄後、５×１０５細胞は、０．１mlの培地に再懸濁され、２００ngのＡｌｅｘａ−ＭＩＦとともに４℃で４５分間培養された。その後、細胞は氷冷ＰＢＳ（ｐＨ７．４）で洗浄されフローサイトメトリー分析（FACSalibur、Becton Dickinson、San Jose、CA）に供された。選択された実験では、ＴＨＰ−１単球又はＣＯＳ−７トランスフェクタントが、Ａｌｅｘａ−ＭＩＦと一緒に５０μg／mlの抗Ｉｉモノクロナール抗体又はアイソタイプのコントロールモノクロナール抗体とともに培養された。スキャッチャード分析では、３個のＩＦＮγ処理ＴＨＰ−１細胞（１×１０６）試料がＡｌｅｘａ−ＭＩＦ（ＭＩＦ３量体として計算して０−１．５μＭ）を伴うＰＢＳ／１％ＦＢＳ中で４℃、４５分間培養され、冷ＰＢＳ／１％ＦＢＳで３回洗浄され、そしてセルクエストソフトウェア−（CellQuest Software、Becton Dickinson、San Jose、CA）２９を使用してフローサイトメトリーで分析された。特異的結合曲線は、全結合から非特異的結合（過剰の未標識ＭＩＦの存在下で測定された）を差し引くことにより計算された。細胞へのＡｌｅｘａ−ＭＩＦ結合の共焦点蛍光顕微鏡は、ＬＳＭ  ５１０レーザースキャニング装置（Carl Zeiss、Jena Germany）で成された。ＴＨＰ−１細胞は、７２時間ＩＦＮγと共に培養され、ＰＢＳ／１％ＦＢＳで３回洗浄され、その後２ng／μlのＡｌｅｘａ−ＭＩＦ又は５０ng／μlの未標識ｒＭＩＦ＋Ａｌｅｘａ−ＭＩＦで３０分間染色された。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】図１Ａ
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図１Ａ】  図１は、ＴＨＰ−１単球へのＭＩＦ高親和性結合を例証する。
ａ、Ａｌｅｘａ−ＭＩＦは、リン酸化ｐ４４／ｐ４２又は全ｐ４４／ｐ４２に対する特異的抗体を使用した細胞溶解物のウェスタンブロットにより視覚化されたｐ４４／ｐ４２（ＥＲＫ−１／２）ＭＡＰキナーゼカスケードの活性化により評価した用量依存的ＭＩＦの生物活性の保持全体を示す。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】図１Ｂ
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図１Ｂ】  図１は、ＴＨＰ−１単球へのＭＩＦ高親和性結合を例証する。
ｂ、血清飢餓により誘導されたｐ５３依存性アポトーシスの抑制（ＣＭ：完全培地、ＳＦＭ：無血清培地）を示す。ＭＩＦ又はＡｌｅｘａ−ＭＩＦは、５０ng/mlで加えられる。データは、３つのウェルの平均±標準偏差を示し、３回の独立実験を代表する。さらなるＡｌｅｘａ−結合による天然の構造の保持の証拠が、基質としてＬ−ドーパクロムメチルエステルを使用したＭＩＦのトートメラーゼ活性の測定により与えられている２５。Ａｌｅｘａ−ＭＩＦ対未共役ＭＩＦのトートメラーゼ活性に違いはないことが観察された（Ａｌｅｘａ−ＭＩＦ：ΔＯＤ４７５＝０．２７５ｓｅｃ−１μg−１たんぱく質、対ｒＭＩＦ：ΔＯＤ４７５＝０．２９０ｓｅｃ−１μ−１；Ｐ＝ＮＳ）。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】図１Ｃ
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図１Ｃ】  図１は、ＴＨＰ−１単球へのＭＩＦ高親和性結合を例証する。
ｃ、フローサイトメトリーの分析は、ＴＨＰ−１単球へのＡｌｅｘａ−ＭＩＦの結合が、ＩＦＮ−δ処理により著しく増強されたことを示す。Ａｌｅｘａ−ＭＩＦ結合に対する競合が、１μg／mlの未標識ｒＭＩＦの存在下でなされた。
【誤訳訂正１２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】図１Ｄ
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図１Ｄ】  図１は、ＴＨＰ−１単球へのＭＩＦ高親和性結合を例証する。
ｄ、共焦点顕微鏡によるＴＨＰ−１単球へのＡｌｅｘａ−ＭＩＦ結合の直接的な視覚化。ＴＨＰ−１細胞は、カバースリップ上で増殖され、ＩＦＮγ（１ng／ml）で７２時間培養され、Ａｌｅｘａ−ＭＩＦ（左パネル）又はＡｌｅｘａ−ＭＩＦ＋過剰の未標識ｒＭＩＦ（右パネル）で染色された。細胞結合Ａｌｅｘａ−ＭＩＦは１５分間で４°から３７°へシフトした細胞では急速に内部化された（右パネル）。倍率：６３０×。
【誤訳訂正１３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】図２Ｃ
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図２Ｃ】  図２は、ＩｉがＭＩＦの細胞表面結合たんぱく質であることを
示す。ｃ、Ｉｉ−発現細胞へのＭＩＦ結合のフローサイトメトリー分析。Ｉｉトランスフェクト対コントロールベクタートランスフェクトＣＯＳ−７細胞へのＡｌｅｘａ−ＭＩＦの結合増強（左パネル）、抗Ｉｉモノクロナール抗体（クローンＬＮ２）対アイソタイプのモノクロナール抗体コントロール（ｃｏｎ  ｍＡｂ）と共に培養されたＩｉトランスフェクトＣＯＳ−７細胞へのＡｌｅｘａ−ＭＩＦの結合阻害（中央パネル）、抗Ｉｉモノクロナール抗体（クローンＬＮ２）対アイソタイプのモノクロナール抗体コントロールと共に培養されたＩＦＮγ刺激ＴＨＰ−１単球へのＡｌｅｘａ−ＭＩＦの結合増強（右パネル）。示されたデータは、少なくとも３回の独立実験を代表する。抗Ｉｉ  モノクロナール抗体、ＬＮ２（ファルミンゲン（PharMingen）は、蛋白質のＣ末端、細胞質外６０アミノ酸内にあるエピトープと反応する。
【誤訳訂正１４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】図３Ａ
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図３Ａ】  図３はＣＯＳ−７細胞でのＥＲＫ−１／２（ｐ４４／ｐ４２）
リン酸化のＭＩＦ刺激のＩｉ媒介を例証する。ａ、ＥＲＫ−１／２リン酸化は、Ｉｉベクター（ＣＯＳ−７／Ｉｉ）またはコントロールベクター（ＣＯＳ−７／Ｖ）でトランスフェクトされたＣＯＳ−７細胞においてＭＩＦにより誘導される。細胞は、２．５時間、未処理または様々な用量のｒＭＩＦで処理され、ウェスタンブロットによりリン酸化ｐ４４／ｐ４２及び全ｐ４４／ｐ４２に関して分析された。
【誤訳訂正１５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】図３Ｂ
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図３Ｂ】  図３はＣＯＳ−７細胞でのＥＲＫ−１／２（ｐ４４／ｐ４２）
リン酸化のＭＩＦ刺激のＩｉ媒介を例証する。ｂ、抗Ｉｉモノクロナール抗体によるＭＩＦ誘導性ＥＲＫ−１／２リン酸化の用量依存的阻害がある。ＣＯＳ−７細胞は、Ｉｉベクターでトランスフェクトされ、様々な用量の抗Ｉｉモノクロナール抗体（クローンＬＮ２）またはアイソタイプのコントロールモノクロナール抗体の存在下で２．５時間、５０ng／ml  ＭＩＦで刺激された。コントロール実験では、抗Ｉｉは、添加ＭＩＦの不在下ではＥＲＫ−１／２リン酸化に効果を示さなかった（データは示していない）。
【誤訳訂正１６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】図４Ａ
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図４Ａ】  図４は、ＭＩＦ誘導リン酸化のウェスタンブロットを例証する
。ａ、用量依存的にＭＩＦは、リン酸化ｐ４４／ｐ４２のウェスタンブロットで視覚化されるようにヒトＲａｊｉ  Ｂ細胞のＥＲＫ−１／２（ｐ４４／ｐ４２）リン酸化を刺激する。
【誤訳訂正１７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】図４Ｂ
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図４Ｂ】  図４は、ＭＩＦ誘導リン酸化のウェスタンブロットを例証する
。ｂ、また抗Ｉｉモノクロナール抗体によりＲａｊｉ細胞のＭＩＦ誘導性ＥＲＫ−１／２リン酸化の阻害がある。Ｒａｊｉ細胞は、各々５０μg／mlで加えられた２つの抗Ｉｉモノクロナール抗体、−Ｂ７４１又はＬＮ２、またはアイソタイプのコントロール抗体（Ｃｏｎ  Ａｂ）の存在下で２．５時間、５０ng／mlのＭＩＦで刺激された。