【手続補正書】
【提出日】平成17年3月24日(2005.3.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
炎症性疾患を治療又は予防するための方法であって、式I：
【化３】
2004525136.tif 000001
(式中、
R1はC2-C6アシル、SO3H又はP2O6H3であり；
R2、R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、かかる治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む方法。
【請求項２】
R1がC2-C6アシル、又はSO3Hである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
R1がSO3Hである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
R1がP2O6H3である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
R1がC2-C6アシルである、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
C2-C6アシルがアセチルである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記炎症性疾患が、関節炎、炎症性腸疾患、乾癬、挫瘡、歯肉炎、大腸炎、ブドウ膜炎、糖尿病、成人呼吸困難症候群、自己免疫疾患、エリテマトーデス、回腸炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、喘息、歯周炎、眼炎、眼内炎、ネフローゼ、AIDS関連性神経変性、卒中、神経外傷、アルツハイマー病、脳脊髄炎、心筋症、移植拒絶、又は癌である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
再灌流疾患を治療又は予防するための方法であって、式I：
【化４】
2004525136.tif 000002
(式中、
R1はC2-C6アシル、SO3H、P2O6H3又はP3O9H4であり；
R2、R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、かかる治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む方法。
【請求項９】
R1がC2-C6アシル、SO3H、P2O6H3又はP3O9H4であり；R2、R3及びR4がそれぞれHである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
R1がSO3Hである、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】
R1がP2O6H3である、請求項８に記載の方法。
【請求項１２】
R1がP3O9H4である、請求項８に記載の方法。
【請求項１３】
R1がC2-C6アシルである、請求項８に記載の方法。
【請求項１４】
C2-C6アシルがアセチルである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記再灌流疾患が、出血性ショック、敗血ショック、敗血症、固形器官移植、心肺バイパス手術に起因する疾患、仕切り症候群、挫傷、内臓虚血-再灌流、心筋梗塞又は卒中である、請求項８に記載の方法。
【請求項１６】
炎症性疾患を治療又は予防するための方法であって、式II：
【化５】
2004525136.tif 000003
(式中、
Aは-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；
R1及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、かかる治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む方法。
【請求項１７】
R4がHである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
R1及びR4がHである、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
R1がSO3Hであり；Aが-SO2-であり；R4がHである、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
R1がPO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；Aが-P(O)OHであり；R4がHである、請求項１６に記載の方法。
【請求項２１】
R1がPO3H2である、請求項１６に記載の方法。
【請求項２２】
R1がP2O6H3である、請求項１６に記載の方法。
【請求項２３】
R1がP3O9H4である、請求項１６に記載の方法。
【請求項２４】
前記炎症性疾患が、関節炎、炎症性腸疾患、乾癬、挫瘡、歯肉炎、大腸炎、ブドウ膜炎、糖尿病、成人呼吸困難症候群、自己免疫疾患、エリテマトーデス、回腸炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、喘息、歯周炎、眼炎、眼内炎、ネフローゼ、AIDS関連性神経変性、卒中、神経外傷、アルツハイマー病、脳脊髄炎、心筋症、移植拒絶、又は癌である、請求項１６に記載の方法。
【請求項２５】
再灌流疾患を治療又は予防するための方法であって、式II：
【化６】
2004525136.tif 000004
(式中、
Aは-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；
R1及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、かかる治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む方法。
【請求項２６】
R4がHである、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
R1及びR4がHである、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
R1がSO3Hであり；Aが-SO2-であり；R4がHである、請求項２５に記載の方法。
【請求項２９】
R1がPO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；Aが-P(O)OHであり；R4がHである、請求項２５に記載の方法。
【請求項３０】
R1がPO3H2である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３１】
R1がP2O6H3である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３２】
R1がP3O9H4である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３３】
前記再灌流疾患が、出血性ショック、敗血ショック、敗血症、固形器官移植、心肺バイパス手術に起因する疾患、仕切り症候群、挫傷、内臓虚血-再灌流、心筋梗塞又は卒中である、請求項２５に記載の方法。
【請求項３４】
炎症性疾患を治療又は予防するための方法であって、式III：
【化７】
2004525136.tif 000005
(式中、
Aは-P(O)OHであり；
R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；かつR3又はR4の少なくとも1つはHではない)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、かかる治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む方法。
【請求項３５】
R4がHである、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記炎症性疾患が、関節炎、炎症性腸疾患、乾癬、挫瘡、歯肉炎、大腸炎、ブドウ膜炎、糖尿病、成人呼吸困難症候群、自己免疫疾患、エリテマトーデス、回腸炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、喘息、歯周炎、眼炎、眼内炎、ネフローゼ、AIDS関連性神経変性、卒中、神経外傷、アルツハイマー病、脳脊髄炎、心筋症、移植拒絶、又は癌である、請求項３４に記載の方法。
【請求項３７】
再灌流疾患を治療又は予防するための方法であって、式III：
【化８】
2004525136.tif 000006
(式中、
Aは-P(O)OHであり；
R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、かかる治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む方法。
【請求項３８】
R4がHである、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
R3及びR4がHである、請求項３７に記載の方法。
【請求項４０】
前記再灌流疾患が、出血性ショック、敗血ショック、敗血症、固形器官移植、心肺バイパス手術に起因する疾患、仕切り症候群、挫傷、内臓虚血-再灌流、心筋梗塞又は卒中である、請求項３７に記載の方法。
【請求項４１】
炎症性腸疾患を治療又は予防するための方法であって、式I：
【化９】
2004525136.tif 000007
(式中、
R1はC2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；
R2、R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、かかる治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む方法。
【請求項４２】
R1がSO3Hであり；R2、R3及びR4がHである、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
R1がPO3H2であり；R2、R3及びR4がHである、請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
R1がP2O6H3であり；R2、R3及びR4がHである、請求項４１に記載の方法。
【請求項４５】
R1がP3O9H4であり；R2、R3及びR4がHである、請求項４１に記載の方法。
【請求項４６】
R1がC2-C6アシルであり；R2、R3及びR4がHである、請求項４１に記載の方法。
【請求項４７】
炎症性腸疾患を治療又は予防するための方法であって、本質的に式I：
【化１０】
2004525136.tif 000008
(式中、
R1、R2、R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩からなる組成物の有効量を、かかる治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む方法。
【請求項４８】
R1、R2、R3及びR4がHである、請求項４７に記載の方法。
【請求項４９】
R1がSO3Hであり；R2、R3及びR4がHである、請求項４７に記載の方法。
【請求項５０】
R1がPO3H2であり；R2、R3及びR4がHである、請求項４７に記載の方法。
【請求項５１】
R1がP2O6H3であり；R2、R3及びR4がHである、請求項４７に記載の方法。
【請求項５２】
R1がP3O9H4であり；R2、R3及びR4がHである、請求項４７に記載の方法。
【請求項５３】
R1がC2-C6アシルであり；R2、R3及びR4がHである、請求項４７に記載の方法。
【請求項５４】
炎症性腸疾患を治療又は予防するための方法であって、式I：
【化１３】
2004525136.tif 000009
(式中、
R1、R2、R3及びR4は各々独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、かかる治療又は予防を必要とする患者に経口的又は経腸的に投与することを含む方法。
【請求項５５】
R1、R2、R3及びR4がHである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
R1がSO3Hであり；R2、R3及びR4がHである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５７】
R1がPO3H2であり；R2、R3及びR4がHである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５８】
R1がP2O6H3であり；R2、R3及びR4がHである、請求項５４に記載の方法。
【請求項５９】
R1がP3O9H4であり；R2、R3及びR4がHである、請求項５４に記載の方法。
【請求項６０】
R1がC2-C6アシルであり；並びにR2、R3及びR4がHである、請求項５４に記載の方法。
【請求項６１】
式III：
【化１４】
2004525136.tif 000010
(式中、
Aは-P(O)OHであり；
R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；
R3又はR4の少なくとも1つはC2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩と、製薬上許容し得る担体とを含む組成物。
【請求項６２】
R2、R3及びR4が-Hであり、R1が-SO3-Na+である、請求項１に記載の方法。
【請求項６３】
R2、R3及びR4が-Hであり、R1が-SO3-Na+である、請求項８に記載の方法。
【請求項６４】
R4が-Hであり、R1が-SO3-Na+である、請求項１６に記載の方法。
【請求項６５】
R4が-Hであり、R1が-SO3-Na+である、請求項２５に記載の方法。
【請求項６６】
R2、R3及びR4が-Hであり、R1が-SO3-Na+である、請求項４１に記載の方法。
【請求項６７】
R2、R3及びR4が-Hであり、R1が-SO3-Na+である、請求項４７に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の詳細な説明】
【発明の名称】イノシン化合物及び炎症性疾患もしくは再灌流疾患の治療又は予防のためのその使用
【技術分野】
【０００１】
本出願は、(a) 1998年12月2日に出願された米国仮特許出願第60/110,562号の利益を請求する1999年12月1日に出願された米国特許出願第09/452,427号の一部継続出願である2000年1月24日に出願された米国特許出願第09/491,888号の一部継続出願である2000年7月27日に出願された米国特許出願第09/626,602号の一部継続出願である2001年3月26日に出願された米国特許出願第09/817,829号の一部継続出願；及び(b) 2000年7月27日に出願された米国特許出願第09/626,602号の分割出願であり、前記出願の各々の全開示は参照によりその全体が本明細書に組み入れられるものとする。
【０００２】
1.  発明の分野
本発明は、イノシン化合物、イノシン化合物を含む組成物及び炎症性疾患もしくは再灌流疾患を治療又は予防するための方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
2.  発明の背景
様々な形態の炎症は、マクロファージの活性化を特徴とする。マクロファージは、主に他の細胞に作用することにより、炎症の有害な結果をもたらす様々な産物を産生することによって、炎症プロセスを誘導及び維持すると考えられている。例えば、マクロファージはサイトカインを産生する。これらのタンパク質は、関節炎又は大腸炎に特徴的な局所性炎症プロセスなどの炎症プロセスにおける中心的なメディエーターである。マクロファージにより産生されたサイトカインはまた、内毒素ショックなどの全身性炎症プロセスにも関与すると考えられている。マクロファージ産物は、組織の損傷及び究極的には器官の不全をもたらし得る、血漿浸出、炎症細胞漏出、毒性フリーラジカルの放出、内皮損傷、及び組織分解酵素の放出などの病理生理学的機構により一般的に関与する。
【０００４】
腫瘍壊死因子(TNF)は、マクロファージの活性化に関連するサイトカインである。TNFはまた、炎症に特徴的な多くの病理生理学的事象の誘導に関与すると考えられている。例えば、TNFはエンドトキシン(LPS)の毒性作用に関連するとともに、LPSを動物もしくはヒトボランティア又は敗血症被験者に投与した後、TNFの血清血漿レベルが高くなることにより証明される通り、敗血ショックの病因に関連する重要なサイトカインである。抗TNF抗体の投与は、様々な動物モデルにおいてLPS及び生菌の致死的作用に対して保護する。さらに、TNFは慢性関節リウマチの治療における中心的な標的である。
【０００５】
インターロイキン-12(IL-12)は、いくつかの炎症性疾患における病理の誘導に関与することが示された別のマクロファージ産物である。これらの疾患は、多発性硬化症、炎症性腸疾患、インスリン依存性糖尿病、及び慢性関節リウマチなどの自己免疫疾患、並びに敗血ショック及び一般化されたSchwarzman反応などの炎症状態を誘導する。例えば、抗IL-12抗体の投与は、養子転移された実験的アレルギー性脳脊髄炎の発生率及び重篤度を実質的に低下させるが、これは内因性IL-12がその病因に関与することを示唆している。さらに、アジュバント誘導性関節炎における疾患の過程は、IL-12欠損マウス、又は抗mIL-12抗体で処理したマウスにおいて抑制される。
【０００６】
ケモカインマクロファージ炎症性タンパク質(MIP)-1a及びCXCケモカインMIP-2はマクロファージにより発現されるさらなる前炎症性タンパク質である。
【０００７】
IDDM(インスリン依存性糖尿病)、1型糖尿病は、膵臓のβ細胞の破壊の結果である。Rabinovitch, A.及びWilma L. Suarez-Pinzon, Cytokines and Their Roles in Pancreatic Islet β-Cell Destruction and Insulin-Dependent Diabetes Mellitus, Biochemical Pharmacology, Vol. 55, 1998, pp. 1139-1149。Th1細胞により産生される1型サイトカインは膵臓β細胞の破壊を引き起こす。Th2細胞により産生される2型サイトカインは1型サイトカインの活性を抑制する。Almawiら、T Helper Type 1 and 2 Cytokines Mediate the Onset and Progression of Type I(Insulin-Dependent) Diabetes, JCE & M, Vol. 84, No. 5, 1999, pp. 1497-1502は、Th1及びTh2細胞が共にI型糖尿病の開始及び進行に影響することを開示している。
【０００８】
Kulkarniらの米国特許第6,342,484号は、イノシンが糖尿病患者の治癒を促進することを開示している。
【０００９】
Kuninakaら、Flavor Activity of Sulfer-containing Compounds Related to Flavor Nucleotides, Agric. Biol. Chem, 44(6), 1980, pp. 1437-1439は、イノシン-5'-一リン酸、イノシン-5'-一硫酸、イノシン-2',(3'),5'-二リン酸及びイノシン-2'(3')5'-二硫酸が味覚に影響することを開示している。
【００１０】
Haddenらの米国特許第5,614,504号は、メチル5'-イノシン一リン酸(MIMP)の製造方法及び炎症及び肉体的外傷を逆行させるためのその使用を開示している。
【００１１】
Jurkowitzら、Adenosine, Inosine, and Guanosine Protect Gilian Cells During Glucose Deprivation and Mitochondrial Inhibition: Correlation Between Protection and STP Preservation, J. Neurochem., Vol. 71, No.2, 1998, pp. 535-548は、イノシンが、ATPの減少を遅延させることにより細胞死を遅延させることができることを開示している。
【００１２】
G. Haskoら、Abstracts, Blood, Vol. 94, No.10, 1999, p. 427a, Abstract No. 1893は、イノシンがマウス内毒素血症モデルにおいて前炎症性サイトカインの産生を抑制し、死亡率を低下させることができることを開示している。
【００１３】
Haskoら、Inosine Inhibits Inflammatory Cytokine Production by a Posttranscriptional Mechanism and Protects Against Endotoxin-Induced Shock, J. Immunol., 2000, pp. 1013-1019は、前炎症性サイトカインの産生を阻害するためのイノシンの使用を開示している。
【００１４】
K. Wadaら、Inosine Monophosphate and Aspirin-Triggered 15-Epi-lipoxin A4 Act in Concert to Regulate Neutrophil Trafficking: Additive Actions of Two New Endogeneous Anti-Inflammatory Mediators, J. Hematother. Stem Cell Res. 2001, Vol 10, pp. 75-79は、イノシン5'-一リン酸及びアスピリンは炎症応答の消散において付加的な効果を有することを開示している。
【００１５】
von Borstelらの米国特許第6,060,459号は、炎症性疾患を治療するための特定のアルキル又はアシル置換イノシン誘導体の使用を開示している。
【００１６】
国際公開第WO 96/33203号は、イノシン5'-メチルリン酸が炎症を逆行させることができることを開示している。
【００１７】
F.-H. Quiら、IMP and AMP Deaminase in Reperfusion Injury Down-Regulates Neutrophil Recruitment, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 2000, vol. 97, pp. 4267-4272は、イノシン一リン酸が好中球を調節し、炎症及び再灌流において役割を果たすことができることを開示している。
【００１８】
M.P. Veerabaguら、Intravenous Nucleosides and a Nucleotide Promote Healing of Small Bowel Ulcers in Experimental Enterocolitis, Digestive Diseases and Science 41, 1996, pp. 1452-1457は、腸の潰瘍を治療するためのイノシン、シチジン、5'-グアニル酸ナトリウム、ウリジン及びチミジンを含む組成物の非経口投与を開示している。
【００１９】
R. Nortonら、Use of Nucleotides in Weanling Rats with Diarrhea Induced by a Lactose Overload: Effect on the Evolution of Diarrhea and Weight and on the Histopathology of Intestine, Liver, and Spleen, Braz. J. Med. Biol. Res. 2001, vol. 34, pp. 195-202は、イノシン一リン酸、アデノシン一リン酸、シチジン一リン酸、及びウリジン一リン酸を含む組成物が小腸の炎症応答を改善したことを開示している。
【発明の開示】
【００２０】
しかしながら、炎症性疾患、特に炎症性腸疾患、又は再灌流疾患を治療もしくは予防するのに有用な化合物、組成物及び方法が、依然として必要とされていることは明らかである。
【００２１】
本出願の第2節における任意の参考文献の引用又は同定は、そのような参考文献が本出願に対して先行しているという本発明者らの容認として解釈されるものではない。
【００２２】
3.  発明の概要
本発明は、式I：
【化１】
2004525136.tif 000011
【００２３】
(式中、
R1はSO3Hであり；
R2、R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；
かつR2、R3及びR4の少なくとも1つはHではない)
の化合物及び製薬上許容し得るその塩に関する。
【００２４】
本発明はまた、式II：
【化２】
2004525136.tif 000012
【００２５】
(式中、
Aは-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；
R1はC2-C6アシル、SO3H、P2O6H3又はP3O9H4であり；
R4はH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物及び製薬上許容し得るその塩に関する。
【００２６】
式Iの化合物、式IIの化合物、及び製薬上許容し得るそれらの塩は、炎症性疾患もしくは再灌流疾患の治療又は予防に有用である。
【００２７】
本発明はまた、式Iの化合物又は製薬上許容し得るその塩；及び製薬上許容し得る担体を含む組成物にも関する。これらの組成物は、炎症性疾患もしくは再灌流疾患の治療又は予防に有用である。
【００２８】
本発明はまた、式IIの化合物又は製薬上許容し得るその塩；及び製薬上許容し得る担体を含む組成物にも関する。これらの組成物は、炎症性疾患もしくは再灌流疾患の治療又は予防に有用である。
【００２９】
本発明はさらに、有効量の式I：
【化３】
2004525136.tif 000013
【００３０】
(式中、
R1はC2-C6アシル、SO3H又はP2O6H3であり；
R2、R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性疾患の治療を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療する方法に関する。
【００３１】
本発明はさらに、有効量の式I：
【化４】
2004525136.tif 000014
【００３２】
(式中、
R1はC2-C6アシル、SO3H、P2O6H3又はP3O9H4であり；
R2、R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法に関する。
【００３３】
本発明はさらに、有効量の式II：
【化５】
2004525136.tif 000015
【００３４】
(式中、
Aは-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；
R1及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法に関する。
【００３５】
本発明はさらに、有効量の式II：
【化６】
2004525136.tif 000016
【００３６】
(式中、
Aは-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；
R1及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法に関する。
【００３７】
本発明はさらに、有効量の式III：
【化７】
2004525136.tif 000017
【００３８】
(式中、
Aは-P(O)OHであり；
R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；かつ
R3又はR4の少なくとも1つはC2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法に関する。
【００３９】
本発明はさらに、有効量の式III：
【化８】
2004525136.tif 000018
【００４０】
(式中、
Aは-P(O)OHであり；並びに
R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法に関する。
【００４１】
本発明はさらに、有効量の式I：
【化９】
2004525136.tif 000019
【００４２】
(式中、
R1はC2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；
R2、R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法に関する。
【００４３】
本発明はまた、実質的に式I：
【化１０】
2004525136.tif 000020
【００４４】
(式中、
R1、R2、R3及びR4は各々独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩からなる組成物の有効量を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法に関する。
【００４５】
本発明はさらに、有効量の式I：
【化１１】
2004525136.tif 000021
【００４６】
(式中、
R1、R2、R3及びR4は各々独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に経口的又は経腸的に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法に関する。
【００４７】
本発明はさらに、有効量の式II：
【化１２】
2004525136.tif 000022
【００４８】
(式中、
Aは-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；
R1及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法に関する。
【００４９】
本発明はさらに、有効量の式III：
【化１３】
2004525136.tif 000023
【００５０】
(式中、
Aは-P(O)OHであり；並びに
R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法に関する。
【００５１】
本発明は以下の詳細な説明、図面及び実施例を参照することにより、より完全に理解されるであろうが、これらは本発明の非限定的な実施形態を例示することを意図している。
【００５２】
4.  図面の説明
図面の簡単な説明については下記を参照されたい。
【００５３】
5.  発明の詳細な説明
5.1.  定義
「患者」の例は、哺乳動物、例えば、ラット、マウス、ウサギ、モルモット、ハムスター、ウシ、ブタ、ウマ、ヤギ、ヒツジ、イヌ、ネコ、非ヒト霊長類、又はヒトである。
【００５４】
本明細書で用いる用語「製薬上許容し得る塩」は、酸と、イノシン化合物の1つの塩基性窒素原子とから形成される塩である。好ましい塩としては、限定されるものではないが、硫酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、硫酸水素塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸塩、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、酒石酸水素塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩(gentisinate)、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルカロン酸塩(glucaronate)、サッカラート、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩、及びパモ酸塩(すなわち、1,1'-メチレン-ビス-(2-ヒドロキシ-3-ナフトエート))が挙げられる。用語「製薬上許容し得る塩」はまた、カルボン酸、硫酸もしくはリン酸官能基などの酸性官能基を有するイノシン化合物と、無機性もしくは有機性塩基とから調製された塩をも指す。好適な塩基としては、限定されるものではないが、ナトリウム、カリウム、及びリチウムなどのアルカリ金属の水酸化物；カルシウム及びマグネシウムなどのアルカリ土類金属の水酸化物；アルミニウム及び亜鉛などの他の金属の水酸化物；アンモニア、及び非置換又はヒドロキシ置換モノ-、ジ-、もしくはトリ-アルキルアミンなどの有機アミン；ジシクロヘキシルアミン；トリブチルアミン；ピリジン；N-メチル, N-エチルアミン；ジエチルアミン；トリエチルアミン；モノ-、ビス-、もしくはトリス-(2-ヒドロキシエチル)アミン、2-ヒドロキシ-tert-ブチルアミン、もしくはトリス-(ヒドロキシメチル)メチルアミンなどのモノ-、ビス-、もしくはトリス-(2-ヒドロキシ-低級アルキルアミン)、N,N-ジメチル-N-(2-ヒドロキシエチル)アミン、もしくはトリ-(2-ヒドロキシエチル)アミンなどのN,N-ジ-低級アルキル-N-(ヒドロキシ低級アルキル)-アミン；N-メチル-D-グルカミン；及びアルギニン、リジンなどのアミノ酸などが挙げられる。
【００５５】
「C1-C6」アルキルの例は、メチル、エチル、1-プロピル、2-プロピル、1-ブチル、2-ブチル、2-メチル-2-プロピル、2-メチル-1-プロピル、1-ペンチル、1-メチル-1-ブチル、2-メチル-1-ブチル、3-メチル-1-ブチル、3-ペンチル、2-ペンチル、2,2-ジメチル-1-プロピル、及び1-ヘキシルである。
【００５６】
「C2-C6」アシルの例は、アセチル、プロパノイル、n-ブタノイル、2-メチルプロパノイル、n-ペンタノイル、2-メチルプロパノイル、3-メチルブタノイル、2,2-ジメチルプロパノイル、n-ヘキサノイル、2-メチルペンタノイル、3-メチルペンタノイル、4-メチルペンタノイル、2-エチルブタノイル、3,3-ジメチルブタノイル及び2,2-ジメチルブタノイルである。
【００５７】
5.2.  式I及び式IIの化合物
上述のように、本発明は、式I：
【化１４】
2004525136.tif 000024
【００５８】
(式中、R1はSO3Hであり；R2、R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；かつR2、R3及びR4の少なくとも1つはHではない)の化合物及び製薬上許容し得るその塩を包含する。
【００５９】
一実施形態において、本発明は、R1がSO3Hであり；R2及びR3独立にH、C2-C6アシル、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がH又はC1-C6アルキルであり；R2、R3及びR4の少なくとも1つがHではない式Iの化合物及び製薬上許容し得るその塩を包含する。
【００６０】
本発明はまた、式II：
【化１５】
2004525136.tif 000025
【００６１】
(式中、Aは-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1はC2-C6アシル、SO3H、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)の化合物及び製薬上許容し得るその塩を包含する。
【００６２】
一実施形態において、本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1がC2-C6アシル、SO3H、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がH又はC1-C6アルキルである式IIの化合物及び製薬上許容し得るその塩を包含する。
【００６３】
式I及びIIの化合物は、当業者には公知の従来の有機合成法を用いて取得することができる。
【００６４】
例えば、硫酸エステルを、イノシンの水酸基をSO3でエステル化することにより調製することができる(例えば、SJ. March, Advanced Organic Chemistry, Reaction Mechanisms and Structure, 4th ed. John Wiley & Sons, 1992, p 404を参照)。
【００６５】
イノシン5'-一リン酸は、アセトニトリル中のイノシン及びピロホスホリルテトラクロリドから調製することができる(オランダ特許公開第NL6610578号)。
【００６６】
イノシン2',3'-環状リン酸は、2',3'-O-イソプロピリデンイノシンとH3PO4及びAc2Oとを反応させた後、アンバーライトIRA-401及び水性NaOHで処理することにより調製することができる(例えば、JP 53044471 Bを参照)。
【００６７】
イノシン、イノシン3'-一リン酸、イノシン5'-二リン酸、イノシン5'-三リン酸、イノシン3',5'-環状一リン酸のナトリウム塩は市販されている(Sigma-Aldrich Chemical Co., Milwaukee, WI)。
【００６８】
式I又はIIの化合物を調製する場合、イノシンの水酸基の1個以上を保護した後に、別の水酸基でリン酸基又は硫酸基を形成する必要がある。イノシンの水酸基の1つを選択的にエステル化することが可能である。水酸基の一方が他方よりも反応性が高い場合、反応性の高い方の水酸基を選択的にエステル化することができる。例えば、フェノール性水酸基の反応性は、脱プロトン化して反応性が高いフェノキシドイオンを提供することにより、増大させることができる。次いで、そのフェノキシドイオンを選択的にエステル化する。フェノール性水酸基は、例えばメタノール中でリチウムメトキシドなどの1当量の塩基と反応させることにより、又は水素化ナトリウムと反応させることにより、容易に脱保護することができる。
【００６９】
反応性の低い方の水酸基は、最初に反応性の高い方の水酸基と保護基とを反応させ、反応性の低い方の水酸基をエステル化し、次いで、保護基を除去することにより、選択的にエステル化することができる。当業者であれば、水酸基を選択的に保護する方法を容易に知ることができるであろう。例えば、フェノール性水酸基は、最初にフェノール性水酸基を脱保護して反応性の高いフェノキシドイオンを提供し；フェノキシドイオンと保護基とを反応させて保護されたイノシンを得、保護されたイノシンの反応性の低い方の水酸基をエステル化し、次いで、保護基を除去することにより、選択的にエステル化することができる。好適な水酸基保護基としては、限定されるものではないが、メチルエーテル、メトキシメチルエーテル、メトキシチオメチルエーテル、2-メトキシエトキシメチルエーテル、ビス(2-クロロエトキシ)エチルエーテル、テトラヒドロピラニルエーテル、テトラヒドロチオピラニルエーテル、4-メトキシテトラヒドロピラニルエーテル、メトキシテトラヒドロチオピラニルエーテル、テトラヒドロフラニルエーテル、テトラヒドロチオフラニルエーテル、1-エトキシエチルエーテル、1-メチル-1-メトキシエチルエーテル、2-(フェニルセレニルエーテル)、t-ブチルエーテル、アリルエーテル、ベンジルエーテル、o-ニトロベンジルエーテル、トリフェニルメチルエーテル、o-ナフチルジフェニルメチルエーテル、p-メトキシジフェニルメチルエーテル、9-(9-フェニル-10-オキソ)アントリルエーテル(トリチロン)、トリメチルシリルエーテル、イソプロピルジメチルシリルエーテル、t-ブチルジメチルシリルエーテル、t-ブチルジフェニルシリルエーテル、トリベンジルシリルエーテル、トリイソプロピルシリルエーテル、ギ酸エステル、酢酸エステル、トリクロロ酢酸エステル、フェノキシ酢酸エステル、イソ酪酸エステル、ピバロン酸エステル、アダマントエートエステル、安息香酸エステル、2,4,6-トリメチル(メシトエート)エステル、メチル炭酸エステル、2,2,2-トリクロロ炭酸エステル、アリール炭酸エステル、p-ニトロフェニル炭酸エステル、ベンジル炭酸エステル、p-ニトロベンジル炭酸エステル、S-ベンジルチオ炭酸エステル、N-フェニル炭酸エステル、硝酸エステル、及び2,4-ジニトロフェニルスルフェナートエステルが挙げられる(例えば、T.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley-Interscience Publication, New York, (1981)を参照)。
【００７０】
5.3.  組成物
本発明はまた、式I：
【化１６】
2004525136.tif 000026
【００７１】
(式中、
R1はSO3Hであり；
R2、R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；
かつR2、R3及びR4の少なくとも1つはHではない)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩、及び製薬上許容し得る担体を含む医薬組成物にも関する。
【００７２】
一実施形態において、本発明は、R1がSO3Hであり；R2及びR3が独立にH、C2-C6アシル、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がH又はC1-C6アルキルであり；R2、R3及びR4の少なくとも1つがHではない式Iの化合物と製薬上許容し得る担体とを含む医薬組成物に関する。
【００７３】
本発明はまた、式II：
【化１７】
2004525136.tif 000027
【００７４】
(式中、
Aは-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；
R1はC2-C6アシル、SO3H、P2O6H3又はP3O9H4であり；
R4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩、及び製薬上許容し得る担体を含む医薬組成物にも関する。
【００７５】
一実施形態において、本発明は、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1がC2-C6アシル、SO3H、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がH又はC1-C6アルキルである式IIの化合物又はその製薬上許容し得る塩と、製薬上許容し得る担体とを含む医薬組成物に関する。
【００７６】
一実施形態において、本発明は、式III：
【化１８】
2004525136.tif 000028
【００７７】
(式中、
Aは-P(O)OHであり；
R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；
R3又はR4の少なくとも1つはC2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩、及び製薬上許容し得る担体を含む医薬組成物にも関する。
【００７８】
一実施形態において、本発明は、Aが-P(O)OHであり；R3がH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がHもしくはC1-C6アルキルである式IIIの化合物又は製薬上許容し得るその塩、及び製薬上許容し得る担体を含む医薬組成物に関する。
【００７９】
5.4.  治療方法
本発明はさらに、マクロファージ炎症性タンパク質の望ましくない分泌に関連する障害を治療するための組成物及び方法を提供する。本発明は、部分的には、イノシン化合物が炎症性サイトカイン及びケモカインの分泌を阻害するという観察に基づくものである。
【００８０】
本発明は、部分的には、イノシン化合物がマクロファージ炎症性タンパク質の放出を阻害するという発見に基づくものである。従って、本発明は、マクロファージ炎症性タンパク質の望ましくない分泌に関連する症状を有するか、又はその危険のある患者を治療する方法を提供する。この方法は、イノシン化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む。
【００８１】
一態様において、本発明は、マクロファージ炎症性タンパク質(MIP)の望ましくない分泌に関連する症状を有するか、又はその危険がある患者を治療するための方法を含む。この方法は、前記症状を治療するか、又はその開始を遅延させるのに十分な量のイノシン化合物を患者に投与することを含む。
【００８２】
MIPの望ましくない分泌に関連する症状は、例えば、炎症、ショック、又はその両方であってよい。この炎症は、例えば、糖尿病(自己免疫型糖尿病を含む)、成人呼吸困難症候群、関節炎、脈管炎、自己免疫疾患、エリテマトーデス、回腸炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、喘息、歯肉炎、乾癬、挫瘡、歯周炎、眼炎、眼内炎、ネフローゼ、AIDS関連神経変性、卒中、神経外傷、アルツハイマー病、脳脊髄炎、心筋症、移植拒絶、及び癌などの症状と関連していてもよい。
【００８３】
ショックに関連する症状の例としては、グラム陽性細菌により媒介される循環器ショック、グラム陰性細菌により媒介される循環器ショック、出血性ショック、アナフィラキシーショック、全身性炎症、前炎症性サイトカイン、及び全身性炎症応答症候群(SIRS)により引き起こされるか、又はそれらに関連するショックが挙げられる。
【００８４】
免疫調節剤は、例えば、静脈内、筋肉内、皮下、局所、舌下、経口、直腸、又はエアロゾルによる送達を介して投与することができる。免疫調節剤の投与は予防的、治療的、又はその両方であってもよい。
【００８５】
さらなる態様において、本発明は、安全かつ治療上有効な量のイノシン、もしくはイノシン受容体リガンド、例えば、イノシン結合部位に結合する化合物を、自己免疫型糖尿病などの糖尿病の治療を必要とする患者に投与することにより、そのような疾患を治療又は予防するための方法を含む。
【００８６】
また、患者におけるインスリンレベルを上昇させるための方法も提供される。この方法は、患者におけるインスリンレベルを上昇させるのに十分な量のイノシン又はイノシン結合部位のためのリガンドを、それを必要とする該患者に投与することを含む。好ましい実施形態においては、イノシン又はイノシン受容体リガンドの患者への投与により、該患者における膵臓インスリンレベルが上昇する。
【００８７】
本明細書に記載された方法及び医薬組成物を用いて、TNF、IL-12、MIP-1α、及びMIP-2などの炎症性タンパク質の分泌を阻害又は妨害することができる。炎症性疾患の初発及び維持におけるこれらのタンパク質の中枢的な役割のため、これらのサイトカインはそのような疾患状態における抗炎症治療のための理想的な標的である。本明細書に記載される方法は、複数の炎症性タンパク質の放出を同時に阻害することができる。かくして、これらの炎症性タンパク質は異なる様式で作用するため、本明細書に記載の方法及び組成物を用いて、より高い治療的有効性を得ることができる。
【００８８】
従って、一態様において、本発明は、マクロファージ炎症性タンパク質の望ましくない分泌に関連する症状を有するか、又はその危険がある患者を治療するための方法を提供する。「その危険がある」とは、マクロファージ炎症性タンパク質の望ましくない分泌に関連する症状を示す可能性が増加するように、患者にマイナスに影響する状態を意味する。本明細書で用いる「望ましくない」とは、患者における望ましくない生理学的反応を引き起こすか、又はかかる反応に関連する炎症性タンパク質の分泌である。炎症性タンパク質としては、TNF、IL-12、MIP-1α、MIP-2、又はIFN-γなどのタンパク質が挙げられる。
【００８９】
一態様において、前記方法は、前記症状を治療するか、又はその発症を遅延させるのに十分な量の免疫調節剤を患者に投与することを含む。この免疫調節剤は、2種以上のマクロファージ炎症性タンパク質の分泌を阻害するのが好ましい。あるいは、又はさらに、この免疫調節剤は、1種以上のマクロファージ炎症性タンパク質の分泌を阻害する一方、1種以上の抗炎症タンパク質の発現を促進する。マクロファージ抗炎症タンパク質の例はIL-10である。
【００９０】
いくつかの実施形態においては、免疫調節剤を用いて患者における糖尿病を治療又は予防する。糖尿病状態は、例えば、I型又はII型糖尿病であってよい。治療する糖尿病状態は自己免疫型糖尿病であってもよい。自己免疫型糖尿病は強力な炎症成分、マクロファージの活性化、及び単核細胞の膵臓への浸潤に関連する。続いて起こる炎症プロセスが、小島の炎症、小島の細胞破壊、インスリン欠乏、及び高血糖症などの炎症性糖尿病の有害な結果をもたらす。Rabinovitchら、Biochem. Pharmacol. 55:1139-49, 1998; Almawiら、J Clin. Endocrinol. Metab. 84:1497-502, 1999。マクロファージにより産生されるサイトカインは、小島内の炎症プロセスにおける重要なメディエーターであり得る。従って、本明細書に開示される免疫調節剤を用いて、患者における糖尿病症状の発症を治療又は予防することができる。
【００９１】
また、本発明は炎症性腸疾患を有するか、又はその発症の危険性のある患者におけるイノシンレベルを上昇させる方法も提供する。この方法は、患者におけるイノシンレベルを上昇させるのに十分な量の本発明の化合物(例えば、イノシン、イノシン付加物、又はイノシン結合部位の類似体)を投与することを含む。
【００９２】
本発明はまた、有効量の式I：
【化１９】
2004525136.tif 000029
【００９３】
(式中、
R1はC2-C6アシル、SO3H、P2O6H3であり；
R2、R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物、もしくは製薬上許容し得るその塩を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【００９４】
一実施形態において、本発明は、R1及びR3が独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R1がC2-C6アシル又はSO3Hであり；R4がH又はC1-C6アルキルである、式Iの化合物もしくは製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【００９５】
本発明はまた、R2、R3及びR4が独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり、R1がC2-C6アシル又はSO3Hである、式Iの化合物もしくは製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【００９６】
本発明はまた、R2、R3及びR4が独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり、R1がP2O6H3である、式Iの化合物もしくは製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【００９７】
本発明はまた、R2、R3及びR4が独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり、R1がC2-C6アシルである、式Iの化合物もしくは製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【００９８】
本発明はまた、R2、R3及びR4が独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり、R1がアセチルである、式Iの化合物もしくは製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【００９９】
本発明はまた、有効量の式II：
【化２０】
2004525136.tif 000030
【０１００】
(式中、
Aは-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；
R1及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物、もしくは製薬上許容し得るその塩を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１０１】
一実施形態において、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1がH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がH又はC1-C6アルキルである、式IIの化合物、もしくは製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１０２】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R4がHである、式IIの化合物、もしくは製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１０３】
本発明はまた、Aが-SO2-であり；R1がSO3Hであり；R4がHである、式IIの化合物、もしくは製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１０４】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1及びR4がHである、式IIの化合物、もしくは製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１０５】
本発明はまた、Aが-P(O)OHであり；R1がPO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がHである、式IIの化合物、もしくは製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１０６】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1がPO3H2である、式IIの化合物、もしくは製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１０７】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1がP2O6H3である、式IIの化合物、もしくは製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１０８】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1がP3O9H4である、式IIの化合物、もしくは製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１０９】
本発明はさらに、有効量の式III：
【化２１】
2004525136.tif 000031
【０１１０】
(式中、
Aは-P(O)OHであり；
R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；
R3又はR4の少なくとも1つはC2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物、もしくは製薬上許容し得るその塩を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１１１】
一実施形態において、本発明は、Aが-P(O)OHであり；R3がH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がH又はC1-C6アルキルである、式IIIの化合物、もしくは製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１１２】
本発明はさらにAが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R3がC2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がHである、式IIIの化合物、もしくは製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１１３】
本発明の別の実施形態は、式I：
【化２２】
2004525136.tif 000032
【０１１４】
(式中、
R1はC2-C6アシル、SO3H、P2O6H3又はP3O9H4であり；
R2、R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法である。
【０１１５】
一実施形態において、本発明は、R1がC2-C6アシル、SO3H、P2O6H3又はP3O9H4であり；R2及びR3が独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がH又はC1-C6アルキルである、式Iの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１１６】
本発明はまた、R1がC2-C6アシル、SO3H、P2O6H3又はP3O9H4であり；R2、R3及びR4が独立にHである、式Iの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１１７】
本発明はまた、R2、R3及びR4が独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R1がSO3Hである、式Iの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１１８】
本発明はまた、R2、R3及びR4が独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R1がP2O6H3である、式Iの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１１９】
本発明はまた、R2、R3及びR4が独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R1がP3O9H4である、式Iの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１２０】
本発明はまた、R2、R3及びR4が独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R1がC2-C6アシルである、式Iの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１２１】
本発明はまた、R2、R3及びR4が独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R1がアセチルである、式Iの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１２２】
本発明の別の実施形態は、有効量の式II：
【化２３】
2004525136.tif 000033
【０１２３】
(式中、
Aは-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；
R1及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法である。
【０１２４】
一実施形態において、本発明は、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1がH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がH又はC1-C6アルキルである式IIの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１２５】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R4がHである式IIの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１２６】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1及びR4がHである式IIの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１２７】
本発明はまた、Aが-SO2-であり；R1がSO3Hであり；R4がHである式IIの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１２８】
本発明はまた、Aが-P(O)OHであり；R1がPO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がHである式IIの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１２９】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1がP2O6H3である式IIの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１３０】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1がP2O6H3である式IIの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１３１】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1がP3O9H4である式IIの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１３２】
本発明の別の実施形態は、有効量の式III：
【化２４】
2004525136.tif 000034
【０１３３】
(式中、
Aは-P(O)OHであり；並びに
R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法である。
【０１３４】
一実施形態において、本発明は、Aが-P(O)OHであり；R3が独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がH又はC1-C6アルキルである式IIIの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１３５】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R3がC2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3であり；R4がHである式IIIの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１３６】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R3及びR4がHである式IIIの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、再灌流疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、再灌流疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１３７】
本発明の別の実施形態は、式I：
【化２５】
2004525136.tif 000035
【０１３８】
(式中、
R1はC2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；
R2、R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法である。
【０１３９】
一実施形態において、本発明は、R1がC2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R2及びR3が独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がH又はC1-C6アルキルである式Iの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１４０】
本発明はまた、R1がSO3Hであり；R2、R3及びR4がHである式Iの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１４１】
本発明はまた、R1がPO3H2であり；R2、R3及びR4がHである式Iの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１４２】
本発明はまた、R1がP2O6H3であり；R2、R3及びR4がHである式Iの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１４３】
本発明はまた、R1がP3O9H4であり；R2、R3及びR4がHである式Iの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１４４】
本発明はまた、R1がC2-C6アシルであり；R2、R3及びR4がHである式Iの化合物又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１４５】
本発明はまた、実質的に有効量の式I：
【化２６】
2004525136.tif 000036
【０１４６】
(式中、
R1、R2、R3及びR4は各々独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物、又は製薬上許容し得るその塩からなる組成物の有効量を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１４７】
一実施形態において、本発明は、R1、R2及びR3が各々独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がH又はC1-C6アルキルである、実質的に有効量の式Iの化合物、又は製薬上許容し得るその塩からなる組成物を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１４８】
本発明はまた、R1、R2、R3及びR4がHである、実質的に有効量の式Iの化合物、又は製薬上許容し得るその塩からなる組成物を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１４９】
本発明はまた、R1がSO3Hであり；R2、R3及びR4がHである、実質的に有効量の式Iの化合物、又は製薬上許容し得るその塩からなる組成物を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１５０】
本発明はまた、R1がPO3H2であり；R2、R3及びR4がHである、実質的に有効量の式Iの化合物、又は製薬上許容し得るその塩からなる組成物を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１５１】
本発明はまた、R1がP2O6H3であり；R2、R3及びR4がHである、実質的に有効量の式Iの化合物、又は製薬上許容し得るその塩からなる組成物を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１５２】
本発明はまた、R1がP3O9H4であり；R2、R3及びR4がHである、実質的に有効量の式Iの化合物、又は製薬上許容し得るその塩からなる組成物を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１５３】
本発明はまた、R1がC2-C6アシルであり；R2、R3及びR4がHである、実質的に有効量の式Iの化合物、又は製薬上許容し得るその塩からなる組成物を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１５４】
本発明はまた、有効量の式I：
【化２７】
2004525136.tif 000037
【０１５５】
(式中、
R1、R2、R3及びR4は各々独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物、又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に経口的又は経腸的に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１５６】
一実施形態において、本発明は、R1、R2及びR3が各々独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がH又はC1-C6アルキルである、有効量の式Iの化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に経口的又は経腸的に投与することを含む、炎症性腸疾患を予防又は治療する方法を提供する。
【０１５７】
本発明はまた、R1、R2、R3及びR4がHである、有効量の式Iの化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に経口的又は経腸的に投与することを含む、炎症性腸疾患を予防又は治療する方法を提供する。
【０１５８】
本発明はまた、R1がSO3Hであり、R2、R3及びR4がHである、有効量の式Iの化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に経口的又は経腸的に投与することを含む、炎症性腸疾患を予防又は治療する方法を提供する。
【０１５９】
本発明はまた、R1がPO3H2であり、R2、R3及びR4がHである、有効量の式Iの化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に経口的又は経腸的に投与することを含む、炎症性腸疾患を予防又は治療する方法を提供する。
【０１６０】
本発明はまた、R1がP2O6H3であり、R2、R3及びR4がHである、有効量の式Iの化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に経口的又は経腸的に投与することを含む、炎症性腸疾患を予防又は治療する方法を提供する。
【０１６１】
本発明はまた、R1がP3O9H4であり、R2、R3及びR4がHである、有効量の式Iの化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に経口的又は経腸的に投与することを含む、炎症性腸疾患を予防又は治療する方法を提供する。
【０１６２】
本発明はまた、R1がC2-C6アシルであり、R2、R3及びR4がHである、有効量の式Iの化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に経口的又は経腸的に投与することを含む、炎症性腸疾患を予防又は治療する方法を提供する。
【０１６３】
本発明の別の実施形態は、有効量の式II：
【化２８】
2004525136.tif 000038
【０１６４】
(式中、
Aは-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；及び
R1及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法である。
【０１６５】
一実施形態において、本発明は、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1がH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がH又はC1-C6アルキルである、有効量の式IIの化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１６６】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1がH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり；R4がHである、有効量の式IIの化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１６７】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり；R1及びR4がHである、有効量の式IIの化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１６８】
本発明はまた、Aが-SO2-であり、R1がSO3Hであり、R4がHである、有効量の式IIの化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１６９】
本発明はまた、Aが-P(O)OHであり、R1がPO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり、R4がHである、有効量の式IIの化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１７０】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり、R1がPO3H2である、有効量の式IIの化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１７１】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり、R1がP2O6H3である、有効量の式IIの化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１７２】
本発明はまた、Aが-SO2-、-C(O)-又は-P(O)OHであり、R1がP3O9H4である、有効量の式IIの化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１７３】
本発明の別の実施形態は、有効量の式III：
【化２９】
2004525136.tif 000039
【０１７４】
(式中、
Aは-P(O)OHであり；及び
R3及びR4は独立にH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4である)
の化合物、又は製薬上許容し得るその塩を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法である。
【０１７５】
一実施形態において、本発明は、Aが-P(O)OHであり、R3がH、C2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり、R4がH、C1-C6アルキルである、式IIIの化合物、又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１７６】
本発明はまた、Aが-P(O)OHであり、R3がC2-C6アシル、SO3H、PO3H2、P2O6H3又はP3O9H4であり、R4がHである、式IIIの化合物、又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１７７】
本発明はまた、Aが-P(O)OHであり、R3及びR4がHである、式IIIの化合物、又は製薬上許容し得るその塩の有効量を、炎症性腸疾患の治療又は予防を必要とする患者に投与することを含む、炎症性腸疾患を治療又は予防する方法を提供する。
【０１７８】
式I〜IIIの化合物及び製薬上許容し得るその塩(集合的に、「イノシン化合物」)は、炎症性疾患又は再灌流疾患を治療又は予防するのに有用である。
【０１７９】
本発明の方法の好ましい化合物は、
R1、R2、R3及びR4がHである(イノシンとしても知られる)；
R1がSO3-であり、R2、R3及びR4がH(イノシン5'-一硫酸としても知られる)；
R1がPO32-であり、R2、R3及びR4がH(イノシン5'-一リン酸としても知られる)；
R1がP2O63-であり、R2、R3及びR4がH(イノシン5'-二リン酸としても知られる)；
R1がP3O94-であり、R2、R3及びR4がH(イノシン5'-三リン酸としても知られる)；
である、式Iの化合物及び製薬上許容し得るその塩である。
【０１８０】
炎症性疾患の例としては、関節炎、例えば、慢性関節リウマチ及び変形性関節症などの関節の慢性炎症障害；回腸炎、潰瘍性大腸炎及びクローン病などの炎症性腸疾患；並びに喘息及び慢性閉塞性気道疾患などの炎症性肺障害が挙げられる。炎症性疾患の他の例としては、角膜ジストロフィー、トラコーマ、オンコセルカ症、ブドウ膜炎、交感性眼炎、及び眼内炎などの眼の炎症性障害が挙げられる。また、炎症性疾患としては、例えば、歯周炎などの歯肉の慢性炎症性障害；結核；らい病；糸球体腎炎及びネフローゼなどの腎臓の炎症性疾患；挫瘡、硬化性皮膚炎、乾癬、湿疹、光加齢及びシワなどの皮膚の炎症性障害；AIDS関連神経変性、卒中、神経外傷及びアルツハイマー病、脳脊髄炎及びウイルス性もしくは自己免疫性脳炎などの中枢神経系の炎症性疾患；免疫複合体脈管炎、全身性狼瘡及びエリテマトーデス、全身性エリテマトーデス(SLE)などの自己免疫疾患；並びに心筋症などの心臓の炎症性疾患も挙げられる。さらなる例としては、成人呼吸困難症候群、歯肉炎、移植拒絶、及び癌などが挙げられる。
【０１８１】
再灌流疾患の例としては、ショック及び敗血症が挙げられる。患者におけるショックは、例えば、グラム陽性細菌により媒介される循環器ショック、グラム陰性細菌により媒介される循環器ショック、出血性ショック、アナフィラキシーショック、全身性炎症、前炎症性サイトカイン、及び全身性炎症応答症候群(SIRS)などの敗血ショックなどの基本的な症状と関連し得る。イノシン化合物を用いて、グラム陰性及び陽性敗血症、外傷、出血、熱傷損傷、アナフィラキシー、サイトカイン免疫療法、肝不全、腎不全もしくは全身性炎症応答症候群の結果として起こるショックなどの循環器ショックを予防又は治療することもできる。
【０１８２】
再灌流疾患の他の例は、固形器官の移植、心肺バイパス手術、仕切り症候群、挫傷損傷、内臓虚血再灌流、心筋梗塞及び卒中から起こる疾患である。
【０１８３】
別の態様において、本発明は1種以上の本明細書に記載の免疫調節剤を含む医薬組成物を提供する。この組成物を、マクロファージ炎症性タンパク質の望ましくない分泌に関連する症状を有するか、又はその危険性がある患者を治療するのに用いることができる。本明細書で用いる「免疫調節剤」とは、1種以上のマクロファージ炎症性タンパク質の発現又は活性を阻害することにより、免疫応答を調節する化合物である。例えば、前記炎症性タンパク質の分泌を阻害することにより、発現を阻害することができる。免疫調節剤の例としては、イノシン化合物が挙げられる。
【０１８４】
本発明の免疫調節剤を、イノシン化合物として提供することもできる。イノシン化合物としては、イノシン、イノシン類似体、イノシンプロドラッグ、及びイノシン付加物が挙げられる。
【０１８５】
イノシン類似体の例としては、例えば、8-ブロモ-イノシン、及び8-クロロイノシンが挙げられる。イノシン類似体としては、イノシン結合部位に結合するもの、又はイノシン受容体リガンドであるものが挙げられる。
【０１８６】
前記イノシン化合物を治療的又は予防的に投与することができ、当業界で認識される任意の経路で投与することができる。例えば、投与は静脈内、筋肉内、皮下、舌下、経口、経腸、直腸又はエアロゾル送達であってもよい。いくつかの実施形態においては、イノシン化合物を、蓄積物の形態で患者に投与する。好ましくは、該蓄積物は本発明の化合物の生物学的半減期を増加させる。
【０１８７】
投与は、患者に対して、約0.1〜約500 mg/kg/日のイノシン化合物の用量であってよい。種々の実施形態において、用量は、例えば約0.5〜250 mg/kg/日、1.0〜125 mg/kg/日、5〜75 mg/kg/日、10〜50 mg/kg/日、又は20〜40 mg/kg/日であってよい。
【０１８８】
必要に応じて、それ自身が炎症性疾患もしくは再灌流疾患と関連する症状を治療又は予防するのに有用である第2の薬剤と共に、イノシン化合物を投与してもよい。例えば、第2の薬剤は抗生物質、糖質コルチコイド、免疫抑制剤、アミノサリチル酸、及び非ステロイド系抗炎症剤であってよい。第2の薬剤の例としては、例えば、デキサメタゾン、5-アミノサリチル酸、スルファサラジン、4-アミノサリチル酸、スルファピリジン、6-メルカプトプリン、アザチオプリン、シクロスポリン、抗腫瘍壊死因子抗体、可溶性腫瘍壊死因子受容体、及び抗CS抗体が挙げられる。必要に応じて、前記イノシン化合物を、2種以上、例えば、3、4、又は5種の第2の薬剤と共に投与してもよい。
【０１８９】
別の態様において、本発明は有効量のイノシン化合物及び製薬上許容し得る担体を含む組成物を含む。好ましくは、前記組成物は患者における炎症性腸疾患を治療又は予防するのに有用である。例えば、前記組成物は、患者の腸へのイノシン化合物の送達に適合させた、1種以上の薬理学的及び腸適合性の担体を含んでもよい。当業界で認識される任意の担体を用いることができる。担体の例としては、(i) 直腸投与に好適な気泡；(ii) 本発明の化合物を取り囲む坐剤基剤；及び(iii) 胃の胃酸による分解に抵抗し、腸において前記化合物を放出する経口摂取可能な持効性(time-release)物質が挙げられる。前記組成物を浣腸として投与することができる。
【０１９０】
イノシン化合物は、約0.01〜約20グラムの範囲の量で前記組成物中に存在させることができる。
【０１９１】
前記組成物が気泡を含んでなる場合、この気泡はイノシン化合物、界面活性剤、アジュバント及び発泡剤を含むのが好ましい。例えば、前記気泡は0.5〜5グラムのイノシン化合物並びにプロピレングリコール、乳化ワックス、ポリオキシエチレン-10-ステアリルエーテル、セチルアルコール、メチルパラベン及びプロピルパラベン、トロラミン、精製水及び不活性推進剤、ジクロロジフルオロメタン、又はジクロロテトラフルオロエタンを含む20グラムの気泡を含んでもよい。
【０１９２】
組成物中の担体は、プロピレングリコール、乳化ワックス、ポリオキシエチレン-10-ステアリルエーテル、エトキシ化セチル及びステアリルアルコール、ステアラート-10 (stearath)、セチルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン、トロラミン、精製水、セチルアルコール、エトキシ化ステアリルアルコール、無水エタノールアミン、脱イオン水、好適な推進剤、又はそれらの混合物を含むのが好ましい。
【０１９３】
前記組成物が坐剤である場合、この組成物はカカオ脂、グリセリン化ゼラチン、水素化野菜油、ポリアルキルグリコール、ポリアルキレングリコールの脂肪酸エステル、ヤシ油基剤、水素化脂肪酸、モノグリセリド、ココアバター、石油系油分、蜜蝋、グリセリン、ポリエチレングリコール600ジラウラート、水素化ココアグリセリド、ポリエチレングリコール、又はそれらの混合物を含むのが好ましい。
【０１９４】
前記組成物が持効性物質を含む場合、この持効性物質は1種以上のアクリル系樹脂コーティング、メタクリル酸コポリマー、ラクトース、ステアリン酸マグネシウム、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、もしくはデンプングリコール酸ナトリウム、セルロースもしくはエチルセルロース、親水性ポリマー及び腸溶性ポリマーを含むマトリックス組成物、セルロース誘導体、ポリ酢酸ビニルフタル酸塩、又は可塑剤と混合した酢酸ビニルフタル酸塩、腸で分解されるポリサッカリド、ローカストビーンガムもしくはグアーガム、親水性基を有するフィルム形成ポリマー、アクリル酸の低級アルキルエステル及びメタクリル酸の低級アルキルエステルからなる群より選択される30〜100重量％の少なくとも1種のモノマーを含むポリサッカリドとの混合物中のフィルム形成アクリル酸ポリマー、高等植物から得られる親水コロイド、又は約4以下のpHでは不溶性であるが、約4〜約7.5の範囲のpHでは可溶性である陰イオン性カルボン酸ポリマーからなる群より選択される好適な非医学的担体と混合したアクリル酸基剤樹脂を含んでもよい。
【０１９５】
前記組成物をコーティングされたポリマーとして提供することができる。例えば、一実施形態において、前記組成物は、約5〜約29重量％の親水性ポリマー、及び約5.0〜約7.5の範囲のpHで溶解する約0.5〜約25重量％のアクリル酸ポリマーでコーティングされた約0.1〜約90重量％のイノシン化合物を含む。
【０１９６】
いくつかの実施形態においては、前記組成物はカプセル剤又は錠剤である。
【０１９７】
いくつかの実施形態においては、回腸及び大腸の末端部分で放出可能となるように、前記イノシン化合物を腸溶性コーティングする。
【０１９８】
いくつかの実施形態においては、前記イノシン化合物を、経口投与に適応可能な単位投与剤形中に存在させる。好ましくは、該単位投与剤形は用量を制限する全身毒性なしに炎症性疾患又は再灌流疾患の症状を軽減するのに有効である。
【０１９９】
また、本発明は炎症性腸疾患に関連する症状を治療又は予防するための浣腸製剤も提供する。この製剤は、用量を制限する全身毒性なしに炎症性腸疾患の症状を軽減するのに有効な量のイノシン化合物を含む。
【０２００】
いくつかの実施形態においては、前記製剤を、その量がより低位の腸管で放出される流動性担体と組み合わせて提供する。流動性担体は、例えば、水、アルコール、又は水性アルコール混合物であってよい。必要に応じて、前記流動性担体を1種以上のゴム、アクリレート、又は改変セルロースで増量してもよい。
【０２０１】
前記製剤はさらに、潤滑剤又は発泡剤を含んでもよい。いくつかの実施形態において、前記製剤を、予め充填されたバッグ又はシリンジからの送達に好適な形態で提供する。必要に応じて、浣腸製剤を、加圧した容器からの送達に好適な形態で提供することができる。
【０２０２】
本発明は、1種以上の本明細書に記載のイノシン化合物を含む組成物を含む。医薬組成物としては、経口、直腸、経鼻、局所(バッカル及び舌下を含む)、経膣もしくは非経口(筋肉内、皮下及び静脈内を含む)投与に好適なもの、又は吸引もしくは吸入による投与に好適なものが挙げられる。好適な場合、前記製剤を、別々の投与単位中に都合よく存在させることができ、製薬業界で公知の任意の方法により製造することができる。全てのそのような製薬方法は、イノシン化合物と、液体の担体もしくは細かく分割された固体担体又は必要に応じてその両方とを結合させた後、必要に応じて生成物を所望の製剤に形状化させる工程を含む。
【０２０３】
経口投与に好適な医薬製剤を、各々所定量の活性成分を含有するカプセル剤、カシェ剤もしくは錠剤などの別々の単位；粉末剤もしくは顆粒剤；又は溶液、懸濁液、又は乳液として都合よく提供することができる。また、イノシン化合物は、ボーラス舐剤又はペーストとして提供することもでき、純粋な形態で、すなわち、担体を含まない形態であってもよい。経口投与のための錠剤及びカプセル剤は、結合剤、充填剤、潤滑剤、崩壊剤又は湿潤剤などの従来の賦形剤を含んでもよい。錠剤を、必要に応じて1種以上の製剤成分と共に圧縮又は成型により製造することができる。圧縮錠剤を、好適な機械中で、必要に応じて結合剤、潤滑剤、不活性希釈剤、潤滑化剤、界面活性剤又は分散剤と混合した、粉末又は顆粒などの自由流動形態の活性成分を圧縮することにより製造することができる。成型錠剤を、好適な機械中で、不活性液体希釈剤で湿らせた粉末状化合物の混合物を成型することにより製造することができる。錠剤を、当業界で公知の方法に従ってコーティングすることができる。経口液体調製物は、例えば、水性もしくは油性懸濁液、溶液、乳液、シロップ剤もしくはエリキシル剤の形態であってよく、又は使用前に水もしくは他の好適なビヒクルを用いて構成させるための乾燥生成物として提供してもよい。そのような液体調製物は、懸濁化剤、乳化剤、非水性ビヒクル(食用油を含んでもよい)、又は保存剤などの従来の添加剤を含んでもよい。必要に応じて、錠剤を、そこに含まれるイノシン化合物の遅延放出又は制御放出を提供するように製剤化することができる。
【０２０４】
非経口投与のための製剤としては、該製剤と意図されたレシピエントの血液とを等張にする抗酸化剤、バッファー、静菌剤及び溶質を含んでもよい水性及び非水性滅菌注入溶液；並びに懸濁剤及び増量剤を含んでもよい水性及び非水性滅菌懸濁液が挙げられる。前記製剤を、例えば、密封されたアンプル及びバイアルなどの単回投与もしくは複数回投与の容器中に存在させることができ、使用直前に、例えば、生理食塩水、注入用水などの滅菌液体担体の添加のみを要する凍結乾燥状態で保存することができる。あるいは、前記製剤を、連続的注入用に存在させることができる。即席注入溶液及び懸濁液を、以前に記載された種類の滅菌された粉末剤、顆粒剤及び錠剤から製造することができる。
【０２０５】
経腸又は直腸投与のための製剤を、ココアバター又はポリエチレングリコールなどの通常の担体を含む坐剤として提供することができる。口中での局所投与、例えば、バッカル又は舌下投与のための製剤としては、スクロース及びアカシアもしくはトラガカントなどの香味基剤中に前記活性成分を含むロゼンジ剤、並びにゼラチン及びグリセリンもしくはスクロース及びアカシアなどの基剤中に前記活性成分を含む香錠が挙げられる。鼻腔内投与のためには、イノシン化合物を液体スプレーもしくは分散性粉末として、又は液滴の形態で用いることができる。液滴を、1種以上の分散剤、可溶化剤もしくは懸濁剤をも含む水性又は非水性基剤を用いて製剤化することができる。液体スプレーを、加圧パックから都合よく送達する。
【０２０６】
前記イノシン化合物を、局所薬物製剤の形態で患者に投与することもできる。局所薬物製剤は、有効量のイノシン化合物を含む。局所製剤において有用な製薬上許容し得る担体の例としては、軟膏、ゲル、乳液、クリーム、ローションが挙げられる。そのような製剤はさらに、油、水、ワックス及び界面活性剤を含んでもよい。局所薬物製剤を、経皮パッチを介して投与することができる。経皮パッチはイノシン化合物及び基剤層を含む。
【０２０７】
吸引による投与については、前記イノシン化合物を、注入器、ネブライザー、加圧パック又はエアロゾルスプレーを送達する他の都合のよい手段から都合よく送達する。加圧パックは、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロメタン、二酸化炭素又は他の好適なガスなどの好適な推進剤を含んでよい。加圧したエアロゾルの場合、投与単位を、定量を送達するためのバルブを提供することにより決定することができる。
【０２０８】
あるいは、吸引又は吸入による投与のために、イノシン化合物は乾燥粉末組成物、例えば、前記化合物と、ラクトース又はスターチなどの好適な粉末基剤との粉末混合物の形態を取ってもよい。この粉末組成物を、例えば、この粉末を吸入器もしくは注入器を援用して投与することができるカプセル、カートリッジ、ゼラチン又はブリスターパック中の単位投与剤形中に提供することができる。
【０２０９】
必要に応じて、前記活性成分の持続放出を与えるように適応させた上記製剤を用いることができる。前記医薬組成物はまた、抗菌剤、免疫抑制剤、又は保存剤などの他の活性成分を含んでもよい。
【０２１０】
上記で具体的に記載した成分に加えて、本発明の製剤は目的の製剤の型に関連する当業界で従来的な他の薬剤を含んでもよく、例えば、経口投与にとって好適な製剤は香料を含んでもよいことが理解されるべきである。
【０２１１】
好ましい単位投与製剤は、以下に記載されるような有効用量、又はその好適な画分の活性成分を含むものである。
【０２１２】
前記症状の各々のために、イノシン化合物を、1日あたり約0.1〜約250 mg/kgの用量で投与することができる。成人のヒトについての用量範囲は、一般的には約5 mg〜約17.5 g/日、好ましくは約5 mg〜約10 g/日、及び最も好ましくは約100 mg〜約3 g/日である。別々の単位で提供される錠剤又は他の単位投与剤形の提供物は、そのような用量で、又は複数の同じ物として有効である量、例えば、約5 mg〜約500 mg、通常、約100 mg〜約500 mgを含む単位を含むのが都合がよい。
【０２１３】
前記医薬組成物を経口又は経腸的に投与するのが好ましく、患者に投与される正確な量は主治医の責任であろう。しかしながら、用いる用量は、患者の年齢及び性別、治療しようとする正確な障害、並びにその重篤度などのいくつかの因子に依存するであろう。また、投与経路も症状及びその重篤度に依存して変化するであろう。
【０２１４】
患者に投与する場合、前記イノシン化合物を単離された形態で投与するのが好ましい。本明細書で用いる「単離された」とは、イノシン化合物が(a) 植物もしくは細胞などの天然の資源、又は(b) 合成有機化学反応混合物のいずれかの他の成分から分離されていることを意味する。好ましくは、従来の技術を介して、イノシン化合物を精製する。本明細書で用いる「精製された」とは、単離された場合、その単離物が、単離物の少なくとも95重量％、好ましくは少なくとも98重量％の単一のイノシン化合物を含むことを意味する。
【０２１５】
イノシン化合物が1個以上のSO3-、PO32-、P2O33-又はP3O94-基を含む場合、このイノシン化合物は1種以上の陽イオンと結合していると理解されるであろう。本発明において有用な陽イオンの例は、Na+、Li+、K+、Rb+、Cs+、Be2+、Mg2+、Ca2+、Sr2+、Ba2+、Al3+、Fe3+、Cu2+、Zn2+、NH4+；RNH3+、(R)2NH2+、(R)3NH+(各Rは独立にアルキルもしくはアリール基である)などのアルキルもしくはアシルアンモニウム塩である。
【０２１６】
前記イノシン化合物はまた、双性イオンであってもよい。これに関して、イノシン化合物は1個以上のSO3-、PO32-、P2O33-又はP3O94-基を含んでもよく、1個以上のイノシン化合物の窒素原子をプロトン化してもよい。
【実施例】
【０２１７】
実施例1-イノシンはin vivoでIL-12及びTNFのマクロファージによる放出を阻害する
炎症性サイトカイン産生に与えるイノシンの効果を測定するため、刺激したマクロファージを0〜1000μMのイノシンに曝露した後、サイトカインIL-12及びTNFの産生を測定した。その結果を表1に示す。イノシンはこれらのサイトカインの放出を阻害することが見出された。これらの結果は、イノシンが炎症性疾患もしくは再灌流疾患の治療又は予防に有用であることを示している。
表１
LPS/IFN-γで刺激した腹腔マクロファージによるIL-12及びTNFの産生に対するイノシンの効果
【０２１８】
【表１】
2004525136.tif 000040
【０２１９】
実施例2-イノシンはin vivoで炎症性サイトカインの応答を阻害するが、抗炎症性サイトカインの放出を増加させる
イノシンがin vivoで炎症性サイトカインの放出を阻害するかどうかを決定するため、雄のBALB/cマウスにイノシン(100 mg/kg; i.p.)を注入した後、30分後にLPSをi.p.注入した(70 mg/kg)。異なるサイトカインの血漿レベルを、LPSチャレンジ後の種々の時間(90分、2時間、4時間及び8時間)で測定した。
【０２２０】
その結果を図1A〜Eに示す。データはn = 8のマウスの平均±SEMである。図中の星印はp < 0.05を示す。イノシンはTNF-α(図1A)、IL-12(図1B)、IFN-γ(図1C)、及びMIP-1α(図1D)の産生を抑制することが観察された。また、イノシンは内毒素マウスにおいてIL-10(図1E)産生を増加させることも示された。これらの結果は、in vitroでのマクロファージによるサイトカイン放出に対するイノシンの効果と類似していた。注目すべきことに、イノシンは、LPSの前炎症作用に関与するIFN-γの産生を抑制した。総合すれば、これらのデータは、イノシンがin vivoでサイトカインの産生を選択的及び差示的に変化させることを示している。イノシンは前炎症性サイトカインの産生を阻害するが、抗炎症性IL-10の形成を助長もする。従って、イノシンは炎症性疾患もしくは再灌流疾患の治療又は予防に有用である。
【０２２１】
実施例3-イノシンはin vivoモデル系においてLPSの致死的チャレンジに対して防御する
イノシンはサイトカイン応答を抗炎症プロフィールに向かわせるので、マウスモデル系においてLPSにより誘導される致死性を減少させるイノシンの能力を調べた。BALB/cマウスを薬剤ビヒクル(生理食塩水)又は100 mg/kgのイノシンで予備処理した30分後、70 mg/kgのLPSを腹腔内注入した。その結果を図2に示す。生存数を、LPS注入後24、48、72及び96時間で記録した。2つの異なる実験のまとめから得られた結果を示す。各群の動物数はN＝16である。イノシンは24〜96時間で生存率を改善した(p < 0.05)。かくして、イノシンは炎症性疾患もしくは再灌流疾患の治療又は予防に有用である。
【０２２２】
実施例4-イノシンはin vivoモデル系において糖尿病に関連する症状の発症を阻害する
自己免疫型糖尿病は強力な炎症成分と共に、マクロファージの活性化及び単核細胞の膵臓への浸潤と関連している。それに続く炎症プロセスは、小島の炎症、小島細胞の破壊、インスリンの欠損、及び高血糖などの炎症性糖尿病の有害な結果をもたらす(Rabinovitchら、Biochem. Pharmacol. 15: 1139-49, 1998; Almawiら、J. Clin. Endocrinol. Meatab. 84: 1497-502, 1999)。主にマクロファージにより産生されるサイトカインは小島内の炎症プロセスにおける中心的なメディエーターであると報告されている。
【０２２３】
ストレプトゾトシンにより誘導された糖尿病のラットモデルにおけるイノシンの効果を試験した。マウスを、腹腔内注入によりストレプトゾトシン(クエン酸バッファー中で40 mg/kg)又はビヒクル(クエン酸バッファー)で続けて5日間処理して、糖尿病を誘導した。ワンタッチ血中グルコース測定器(Lifescan)を用いて、それに続く21日間、血中グルコースをモニターした。尾静脈から得た血液から、血中グルコースを1、7及び21日目に測定した。高血糖を、200 mg/dLより高い非断食血中グルコースレベルと定義した。マウスを、実験の21日間を通してストレプトゾトシン注入及びビヒクル又はイノシン(100 mg/kg経口摂取、1日2回)で同時に処理した。膵臓のサンプルを21日目に取り出し、質量計測した後、6 mlの酸エタノール(23:7:0.45エタノール:dH2O:HCl)中に入れ、ホモジェナイズした。この膵臓サンプルを72時間、4℃にてインキュベートした後、遠心分離した。次いで、上清のインスリン含量を、ELISAアッセイを用いて測定した。
【０２２４】
表2はグルコースレベルの平均及び中央値、並びにビヒクルもしくはイノシン処理を受けたストレプトゾトシン(STZ)糖尿病マウスにおける糖尿病の発生率を示す。「*」はビヒクル処理したストレプトゾトシンラットと比較した場合のイノシン処理したストレプトゾトシンラットにおける循環グルコース又は糖尿病発生率の有意な低下を示す(p＜0.05)。
表２
ビヒクル又はイノシン処理を受けたSTZ糖尿病マウスにおけるグルコースレベルの変化
【０２２５】
【表２】
2004525136.tif 000041
【０２２６】
STZ糖尿病マウスにおける膵臓インスリン含量に対するビヒクル及びイノシンの相対的効果を表3に示す。表3中の「*」は対照と比較した場合のストレプトゾトシンに応答するインスリン含量における有意な減少を示し、「#」はイノシン処理したストレプトゾトシンラットにおける膵臓インスリン含量の有意な保存を示す(p＜0.05)。ビヒクル又はイノシン処理を受けたストレプトゾトシン糖尿病マウスにおける21日目での膵臓インスリン含量を示す。
表３
ビヒクル又はイノシン処理を受けたSTZ糖尿病マウスにおける21日目での膵臓インスリン含量
【０２２７】
【表３】
2004525136.tif 000042
【０２２８】
進行性高血糖(表2)及び膵臓インスリン含量の抑制(表3)により示されるように、ビヒクル処理した動物は糖尿病を発症させた。対照的に、イノシンで処理した動物は糖尿病の発生率、並びに血漿グルコースレベルの平均値及び中央値の有意な低下を示した。それらはまた、膵臓インスリン含量の有意な保存を示した(表3)。これらのデータは、イノシンが糖尿病の治療又は予防に有用であることを示している。
【０２２９】
実施例5-イノシンはin vivoモデル系において炎症性腸疾患の症状の発症を阻害する
炎症性疾患のマウスモデルにおけるイノシンの効果を試験した。硫酸デキストラン溶液(DSS)により誘導された炎症性腸疾患のマウスモデルにおいて、イノシンを投与した(経口投与、100 mg/kg、1日2回)。この系はよく特性評価されており、炎症性腸疾患の信頼できるモデルであると考えられている。このモデルにおける医薬化合物の効力は、該化合物がヒトにおいて有効であると考えられる証拠として取られる(Sasakiら、Scand. J Immunol. 51: 23-8, 2000; Gaudioら、Dig. Dis. Sci. 44: 1458-75, 1999; Murthyら、Aliment Pharmacol. Ther. 13: 251-60, 1999; Kimuraら、Arzneimittelforschung 48: 1091-96, 1998; Dielemanら、Scand. J Gastroenterol. Suppl. 223: 99-104, 1997)。
【０２３０】
DSSモデルに関連する症状を、以下のように誘導した。マウスに、イノシン処理(200 mg/kg/日、経口)の存在下(n＝10)又は非存在下(n＝10)で、5％ DSSを含む水を10日間飲ませた。10日の最後に、出血性下痢の発生率、大腸の短縮、及び大腸の組織病理について、動物を評価した。大腸のミエロペルオキシダーゼ(MPO)及びマロンジアルデヒド(MDA)のレベルを測定した。これらのパラメーターは炎症性腸疾患の現在のモデルと関連する機能的及び炎症的変化の良好な横断面を提供する。
【０２３１】
結果を表4に示す。このデータは、大腸炎の機能的及び炎症的パラメーターに対するイノシンの防御効果を証明する。イノシンの非存在下でDSSのみを用いた値と比較した場合、DSSの存在下でのイノシンの有意な防御効果を*p＜0.05として示す。
表４
DSSマウスにおける大腸炎に関連するパラメーターに対するイノシンの効果
【０２３２】
【表４】
2004525136.tif 000043
【０２３３】
イノシン処理したマウスは、大腸の機能の改善、大腸の短縮の減少、及び腸における炎症性応答の低下と共に、DSSに応答した。かくして、イノシンは炎症性疾患、より具体的には、炎症性腸疾患、さらにより具体的には、大腸炎の治療又は予防に有用である。
【０２３４】
実施例6-イノシン付加物はin vivoモデル系における炎症性腸疾患の症状を調節する
DSSにより誘導された急性大腸炎症を有するマウスの大腸におけるミエロペルオキシダーゼ(MPO)及びマロンジアルデヒド(MDA)のレベルに対するイノシン5'-一リン酸(5'-IMP)の効果を試験した。マウスを任意に10日間DSSに曝露した。次いで、5'-IMPによる処理(25、50、又は100 mg/kg/日、BID)を1日目に開始した。10日目に、大腸を取り出し、MDA及びMPOレベルの測定のために生検を得た。
【０２３５】
その結果を図2に示す。このデータを、10匹の動物からの平均±SEMとして表し、p＜0.05が有意であると考えられるスチューデントの非対称t検定を用いて統計分析を行った。星印(*)はp＜0.05を示し、2個の星印(**)は未処理の動物と比較したp＜0.01を示し、剣標(†)はDSSで処理した動物と比較したp＜0.01を示す。50 mg/kg/日又は100 mg/kg/日の用量で投与した5'-IMPはマウスにおいてMPOのレベルを有意に低下させた。
【０２３６】
DSSにより誘導された急性大腸炎症を有するマウスの生存率に対する5'-IMPの効果も試験した。マウスを任意に20日間DSSに曝露した後、イノシン一リン酸による処理(50又は100 mg/kg/日、BID)を1日目に開始した。各日に生存しているマウスの数を記録した。データを10匹の動物から生存率(％)で表し、p＜0.05が有意であると考えられるχ2を用いて統計分析を行った。
【０２３７】
その結果を図4に示す。どちらの用量でも、5'-IMPの添加は5'-IMPで処理しなかった生存するマウスの数と比較して、10〜20日目で生存するマウスの数を有意に増加させた。
【０２３８】
体重、大腸の長さ、直腸の出血、及び大腸の組織病理に対する5'-IMPの防御効果も試験した。雄のBalb/cマウスを最初に体重計測し、それを記録した後、それらの飲用水中で任意にDSS溶液(5％ w/v)に曝露した。種々の濃度のイノシン一リン酸(5'-IMP)を経口BIDで投与し、1日目を開始した。10日目に実験を終了し、動物を再度体重計測し、殺した。大腸を切断して測定し、動物を明らかな直腸出血について評価し、大腸を全体的な組織学的変化についてスコア化した(0＝正常大腸、1＝糞便と混合して存在する少量の血液を有する大腸、2＝糞便と混合して存在する大量の血液を有する大腸、3＝糞便なしに血液で満たされた大腸)。サンプルを取得し、生化学的変化及び切片化のために分析した。
【０２３９】
その結果を表5に示す。データを平均±SEM、n＝10として表す。p＜0.05が有意であると考えられるスチューデントの非対称t検定又はフィッシャーの直接確率検定を用いて、統計分析を行った。(*)は未処理の動物に対するp＜0.01を示し、(†)はDSS処理した動物に対するp＜0.01を示す。
表９
DSSマウスにおける大腸に関連するパラメーターに対する5'-IMPの効果
【０２４０】
【表５】
2004525136.tif 000044
【０２４１】
5'-IMPによる処理は試験した全ての性質におけるDSS関連大腸炎の作用を低下させた。特に、5'-IMPは、DSS処理したマウスにおいて観察された体重の損失及び大腸の長さの減少を阻害した。より少ない5'-IMP処理したマウスは直腸の出血を示し、5'-IMP処理したマウスの全体的な組織学的スコアは未処理マウス(50 mg/kg/日もしくは100 mg/kg/日の5'-IMP)と同一であり、未処理マウス(25 mg/kg/日)と比較して小さい組織病理学的変化を示した。
【０２４２】
マウスにおけるDSS(デキストラン硫酸ナトリウム)大腸炎の結果に対する種々の用量(50、100及び300μモル/kg/日)のイノシン並びにIMSの効果。大腸の長さ、全体的な組織スコア、大腸のMDA含量及び大腸のMPO含量を測定した。実験群あたりN＝10の動物。*p＜0.05及び**p＜0.01は、ビヒクル処理したDSS動物と比較した場合の薬剤処理したDSS動物における有意な改善を示す。中央値として提供する組織スコアについてを除いて、平均±SEMを提供する。
【０２４３】
その結果を図5A〜5Dに示す。5'-IMS処理したDSS動物において、ビヒクル処理したDSS動物と比較して有意な改善が観察された。中央値として提供する組織スコアについてを除いて、平均±SEMを示す。これらの試験において、イノシンではなく、5'-IMSは大腸の短縮及び可視的な組織損傷に対する有意な防御を提供した。さらに、5'-IMSは、イノシンと比較して、より低い用量レベルで大腸のマロンジアルデヒド(MDA；脂質過酸化のマーカー)及びミエロペルオキシダーゼ(MPO;好中球浸潤の尺度)のDSSにより誘導される増加に対する有意な防御を提供した。例えば、5'-IMSは50μモル/kg/日でMDAレベルを実質的に低下させたが、イノシンは100μモル/kg/日でのみMDAレベルを低下させた。同様に、5'-IMSは50μモル/kg/日でMDAレベルを実質的に低下させたが、イノシンは300μモル/kg/日でのみMDAレベルを低下させた。
【０２４４】
従って、イノシン5'-一リン酸及びイノシン5'-非硫酸は、炎症性疾患、特に、炎症性腸疾患、より特には、大腸炎の治療又は予防に有用である。
【０２４５】
実施例7-イノシン5'-一リン酸は、マウスにおいてコラーゲンにより誘導された関節炎の重篤度及び発生率を実質的に低下させる
コラーゲンにより誘導される関節炎のマウスモデル系における5'-IMSの効果を試験した。雄のDBA/1Jマウスに、1日目に0.1 mLのウシII型コラーゲン＋Freund完全アジュバント(CFA)の懸濁液を皮内注入した。2回目の注入を21日目に投与した。胃管による栄養補給を介する5'-IMSによる処理(100又は200 mg/kg/日、BID)を、2回目のコラーゲン／CFA注入の日に開始し、試験期間を通して継続し、45日目に終了した(2回目の注入後24日目)。
【０２４６】
0〜4(0＝関節炎の兆候なし、1＝脚もしくは1本の指のむくみ又は赤み、2＝2つの関節が関与、3＝3つ以上の関節が関与、4＝脚全体の重篤な関節炎)の範囲の肉眼的なスコアリング系を用いて、マウスを関節炎について毎日評価した。個々の脚の4つのスコアを加えることにより、各マウスについての関節炎の指標を計算した。重篤度の指標、並びに関節炎の兆候を示す処理群の割合をマウスの全群について計算した(ビヒクル又は5'-IMS処理)(この計算から除外された動物はない)。試験の終わりに、各処理群の全動物から脚を除去し、MPO、MDA又はケモカイン／サイトカイン測定に無作為に割当てた。
【０２４７】
ウシII型コラーゲン(1 mg/mL)及びFreund完全アジュバント(1 mg/mL)の1:1混合物の100μLを21日間隔で2回皮下注入することにより、DBA/1Jマウスにおいて関節炎を誘導した。5'-IMS(100又は200 mg/kg/日、BID)による胃管補給処理を2回目の注入の日に開始した。両方の5'-IMS投与レジメにより、2回目のコラーゲン注入後の24日目に関節炎の罹患率が90％から25％まで有意に低下した。5'-IMSはまた、関節炎の重篤度を有意に低下させた。必要に応じてスチューデントのt検定又はフィッシャーの直接確率検定により統計分析を行った。その結果(図6A-B)は、5'-IMSが疾患の重篤度及び発生率を実質的に低下させることを証明している。従って、例示のイノシン化合物5'-IMSは、患者における関節炎の治療又は予防に有用である。
【０２４８】
実施例8-イノシン5'-一硫酸は関節におけるケモカイン及び前炎症性サイトカイン発現の重篤度及び発生率を用量依存的に低下させる
関節炎を誘導するためにコラーゲンの皮下注入により処理したDBA/1Jマウスの脚におけるケモカインMIP-1α並びにサイトカインIL-12及びTNF-αのレベルに対する5'-IMSの効果を試験した。5'-IMS(100又は200 mg/kg/日、BID)による胃管補給を2回目のコラーゲン注入の日に開始し、脚を24日後に取り、分析のためにホモジェナイズした。200 mg/kg/日の用量で、5'-IMSはMIP-1α及びTNF-αのレベルを有意に低下させ、IL-12のレベルを低下させる傾向があった(p＝0.09)。データをn＝10の動物からの平均±SEMとして表す。p＜0.05が有意であると考えられるスチューデントの非対称t検定を用いて統計分析を行った；p＜0.05対未処理マウス。結果(図7)は、5'-IMSが関節におけるケモカイン及び前炎症性サイトカインの発現の重篤度及び発生率を用量依存的に低下させることを証明している。従って、例示のイノシン化合物5'-IMSは、患者における炎症性疾患、特に関節炎の治療又は予防に有用である。
【０２４９】
実施例9-イノシン5'-一硫酸は関節における好中球の浸潤(MPO濃度により反映される)及び脂質過酸化(MDAにより反映される)を大いに低下させる
関節炎を誘導するためにコラーゲンの皮下注入により処理したDBA/1Jマウスの脚におけるMPO及びMDAのレベルに対する5'-IMSの効果を試験した。5'-IMS(100又は200 mg/kg/日、BID)による胃管補給を2回目のコラーゲン注入の日に開始し、脚を24日後に取り、MPO及びMDAの測定のためにホモジェナイズした。データをn＝10の動物からの平均±SEMとして表す。p＜0.05が有意であると考えられるスチューデントの非対称t検定を用いて統計分析を行った。*p＜0.05、**p＜0.01対対照マウス及び†p＜0.05対未処理マウス。結果(図8A〜B)は、5'-IMSが関節における好中球の浸潤(MPO濃度により反映される)及び脂質過酸化(MDAにより反映される)を大いに低下させたことを証明している。従って、例示のイノシン化合物5'-IMSは、患者における炎症性疾患、特に関節炎の治療又は予防に有用である。
【０２５０】
実施例10-イノシン5'一硫酸(5'-IMS)、ナトリウム塩の合成
方法A：
【化３０】
2004525136.tif 000045
【０２５１】
イノシン(化合物1)(5.00 g、18.7 mmol)を、100 mLの無水ベンゼン中、dean-stark蒸留により一晩乾燥させた。減圧下で1日間、ベンゼンを除去し、窒素雰囲気下でシリンジにより100 mLの無水ジメチルホルムアミドを添加した。追加の漏斗を付け、窒素でパージし、52 mLの無水ジメチルホルムアミド中で3.87 g(1.3当量)のSO3-ピリジン複合体を装填した。100℃に加温した後、室温まで急速に冷却することにより、イノシン懸濁液を溶媒和にした。
【０２５２】
SO3-ピリジン複合体を激しく攪拌しながら30分にわたって滴下した後、窒素下で4時間、室温にて攪拌した。炭酸水素ナトリウム(2.04 g、1.3当量)を添加した後、2.0 mLの脱イオン水を添加した。得られた懸濁液を、完全に可溶化されるまで攪拌し、気体の発生を停止させた。ジメチルホルムアミド及びピリジンを減圧下で2日間除去し、粗物質を凍結乾燥したところ、9.6 gの微細な白色粉末が得られた。この粗物質を3:1のメタノール：水から結晶化し、濾過し、濾液を減圧下で濃縮したところ、淡黄色の油が得られた。これを30 mLのメタノールで一晩摩砕し、濾過し、固体を120 gの微結晶セルロース上でのフラッシュクロマトグラフィーにより8倍の1.2 g容量中で精製した。勾配を500 mLの90:5:5のアセトニトリル：水：トリフルオロ酢酸、次いで、500 mLの75:20:5のアセトニトリル：水：トリフルオロ酢酸、最後に500 mLの75:25のアセトニトリル：水を用いて開始した。合わせた画分を減圧下で還元し、飽和水性炭酸水素ナトリウムを用いてpH 7.5に滴定し、凍結乾燥したところ、微細な白色粉末として回収される6.3 g(91％)のイノシン5'-一硫酸、ナトリウム塩(化合物2)が得られた。
【０２５３】
方法B：
2',3'-イソプロピリデンイノシン5'-一硫酸ピリジニウム塩
2',3'-イソプロピリデンイノシン(50.00 g, 162.2 mmol)を激しく攪拌しながら350 mLの無水ジメチルホルムアミドに溶解した。三酸化硫黄-ピリジン複合体(38.72 g, 1.5当量)を100 mLの無水ジメチルホルムアミドに穏やかに加熱し、攪拌しながら溶解した。三酸化硫黄-ピリジン溶液を、カニューレを介して激しく攪拌した2',3'-イソプロピリデンイノシン溶液に添加した。この添加の0.5時間後、白色の沈殿物が形成された。反応物を窒素雰囲気下で室温にて一晩攪拌した。次いで、反応混合物を減圧濾過し、固体を100 mLのジメチルホルムアミド中に2回懸濁し、濾過した。固体を150 mLの酢酸エチルで4回洗浄した後、減圧下で40℃にて一晩乾燥したところ、綿毛状の白色粉末として60.41 g (収率80％)の2',3'-イソプロピリデンイノシン5'-一硫酸ピリジニウム塩が得られた。
【０２５４】
2',3'-イソプロピリデンイノシン5'-一硫酸ナトリウム塩
2',3'-イソプロピリデンイノシン5'-一硫酸ピリジニウム塩(60.30 g、129.0 mmol)を、激しく攪拌しながら600 mLの脱イオン水に懸濁した。懸濁液を5.0 Nの水酸化ナトリウムを用いてpH 7.0に滴定し、この間に固体は溶解した。次いで、この溶液を凍結乾燥した。得られた白色の綿毛状粉末を穏やかに加熱することにより200 mLの脱イオン水に溶解した後、5.0 Nの水酸化ナトリウムを用いてpH 7.0に滴定した。次いで、この溶液を凍結乾燥したところ、白色の綿毛状粉末として52.07 g (98％)の2',3'-イソプロピリデンイノシン5'-一硫酸ナトリウム塩が得られた。
【０２５５】
イノシン5'-一硫酸ナトリウム塩
2',3'-イソプロピリデンイノシン5'-一硫酸ナトリウム塩(25.00 g、60.92 mmol)を、100 mLの脱イオン水に溶解し、400 mLのトリフルオロ酢酸の水流を3分間にわたって攪拌された溶液に室温にてゆっくりと添加した。得られた混合物を15分間攪拌し、40℃にて減圧下で回転式エバポレーター上で粘着性の油にまで濃縮した。この油を減圧下で一晩、室温にて乾燥させた。次いで、得られた物質をアセトン／水から結晶化させたところ、白色の粉末が得られた。この粉末を300 mLの脱イオン水に溶解し、0.45ミクロンのナイロンフィルターを通して減圧濾過し、凍結乾燥したところ、白色の粉末として18.43 g (82％)のイノシン5'-一硫酸ナトリウム塩が得られた。
【０２５６】
本発明は、本発明のいくつかの態様の例示物として意図される実施例に開示される特定の実施形態によって、その範囲を限定されるものではなく、機能的に等価である任意の実施形態が本発明の範囲内にある。実際、本明細書に示され、記載されるものに加えて、本発明の様々な改変が当業者にとって明らかであり、添付の特許請求の範囲内にあると意図される。
【０２５７】
いくつかの参考文献が記載されているが、その開示の全体が参照により本明細書に組み入れられるものとする。
【図面の簡単な説明】
【０２５８】
【図１】図１は、LPS又はLPS＋イノシンをマウスに投与した後の時間に対する種々のサイトカインの放出を示す図である。
【図２】図２は、薬剤ビヒクル(生理食塩水)又は100-mg/kgイノシンで前処理し、次いでLPSによるチャレンジ曝露後の、時間(x軸)に対する生存マウスの数(y軸)を示すグラフである。
【図３】図３は、DSSにより誘導された急性大腸炎を有するマウスの大腸中でのMPO及びMDAのレベルに対する種々の濃度のイノシン一リン酸(5'-IMP)の効果を示すグラフである。
【図４】図４は、急性大腸炎を有するマウスの生存率に対するイノシン一リン酸の効果を示すグラフである。
【図５】図5A-5Dは、マウスにおいてデキストラン硫酸ナトリウムにより誘導された大腸炎に対する種々の用量(50、100及び300μモル/kg/日)のイノシン及びイノシン5'-一硫酸(5'-IMS)の効果を示すグラフである。
【図６】図6A-Bは、マウスにおける関節炎の発生率に対する5'-IMSの効果を示すグラフである。
【図７】図7は、関節炎を誘導するためにコラーゲンの皮下注入により処理したDBA/1Jマウスの脚における、ケモカインMIP-1α、並びにサイトカインIL-12及びTNF-αのレベルに対する5'-IMSの効果を示すグラフである。
【図８】図8A-8Bは、関節炎を誘導するためにコラーゲンの皮下注入により処理したDBA/1Jマウスの脚における、(A)MPO及び(B)MDAのレベルに対する5'-IMSの効果を示すグラフである。