【誤訳訂正書】
【提出日】平成15年9月11日(2003.9.11)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４７】
実施例１：トランスジーンのクローニング
ＧαｑのＧ１８８ＳトランスジーンのＰＣＲ（ポリメラーゼ連鎖反応）増幅およびクローニング
プラスミドｐｃＤＮＡａｍｐＧｑｓｓｔ（ＤｉＢｅｌｌｏ他、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．１９９８、２７３：５７８０〜５７８４）をテンプレートとして使用して、マウスＧαｑのｃＤＮＡの１．１ｋｂフラグメントをＰＣＲ増幅した。Ｇｑｓｓｔは、アミノ酸残基１８８におけるグリシン残基をセリンへの変換させる（Ｇ１８８Ｓ）ヌクレオチド位５７３におけるＧからＡへの変換と、ヌクレオチド位５７５におけるＧからＣへの変換とを含有する（図１Ａ〜１Ｃを参照のこと）。さらに、数個のヌクレオチド変化がこの変異の５'側に組み込まれ、内因性のＧαｑアミノ酸配列部分を、抗ＥＥ抗血清を使用して変異型Ｇαｑタンパク質の検出を可能にするＥＥエピトープ標識のアミノ酸配列部分に変換させた（図１Ａ〜１Ｃ）。「ＥＥ」は、市販のマウスモノクローナル抗体Ｇｌｕ−Ｇｌｕ（Ｂａｂｃｏ、Ｂｅｒｋｌｅｙ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｒｉｃｈｍｏｎｄ、ＣＡ）によって認識されるエピトープの一部分である２つのグルタミン酸からなる配列をいう。この抗体は、配列ＣＥＥＥＥＹＭＰＥに対して惹起された（ｗａｓ  ｒａｉｓｅｄ）が、６アミノ酸の配列ＥＹＭＰＭＥまたは配列ＥＦＭＰＭＥのどちらに対しても特異的である。ＥＥエピトープは、機能を変化させることなく多くのＧタンパク質内に挿入可能であることが知られている。プライマー（表１にまとめられている）のＤＨ１、ＤＨ２、ＤＨ３およびＤＨ４を、１．１ｋｂの変異型ＧαｑのＤＮＡをＰＣＲ増幅するために、エロンガーゼポリメラーゼ（ＢＲＬ）を用いた重複ＰＣＲにおいて使用した。プライマーＤＨ１は、ＧαｑのｃＤＮＡの５'末端内に組み込まれたコンセンサスＫｏｚａｋ配列（ＣＣＡＣＣＡＴＧ）のすぐ上流にＸｈｏＩ制限エンドヌクレアーゼ配列を含有する。プライマーＤＨ４は、ＴＡＡ停止コドンと重なり、またＸｈｏＩ制限部位を含有し、１．１ｋｂのＰＣＲ生成物をＸｈｏＩ制限フラグメントとしてクローン化することができる。最初のＰＣＲにおいて、ＤＨ１およびＤＨ２のプライマーを使用して、９２６ｂｐの位置におけるＴがＣに変換され、内因性のＸｈｏＩ制限部位が破壊されたヌクレオチド０．９ｋｂのＤＮＡフラグメントを作製した。ＤＨ３およびＤＨ４のプライマーを使用して、破壊されたＸｈｏＩ部位においてＤＨ１／ＤＨ２生成物と部分的な重なりを有するＧαｑ  ＤＮＡの３'末端の０．２ｋｂを作製した。第２のＰＣＲ工程を、ＤＨ１／ＤＨ２生成物およびＤＨ３／ＤＨ４生成物ならびに外側プライマーのＤＨ１およびＤＨ４を使用して行い、ＸｈｏＩ制限部位が両側に位置する最終的な１．１ｋｂの変異型ＧαｑのｃＤＮＡを作製した。この１．１ｋｂのＸｈｏＩフラグメントを、１％アガロースゲルを使用して電気泳動し、Ｇｅｎｅ−Ｃｌｅａｎ（Ｂｉｏ−１０１）によって溶出して、ベクターｐＧｅｍＴ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）にサブクローン化した。ＤＮＡ配列分析により、１．１ｋｂのＧαｑのｃＤＮＡが本物であり、１８８位におけるグリシンからセリンへの変化（Ｇ１８８Ｓ）変異について予想されたヌクレオチド変化、ならびに組み込まれたＥＥエピトープ標識および修飾されたＫｏｚａｋコンセンサス配列を含有することが確認された。


【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】図面の簡単な説明
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図面の簡単な説明】
【図１Ａ】
図１Ａは、マウスのＧ１８８Ｓ型Ｇαｑのヌクレオチド配列（配列番号１）およびアミノ酸配列（配列番号２）を示す図である。
【図１Ｂ】
図１Ｂは、マウスのＧ１８８Ｓ型Ｇαｑのヌクレオチド配列（配列番号１）およびアミノ酸配列（配列番号２）を示す図である。
【図１Ｃ】
図１Ｃは、マウスのＧ１８８Ｓ型Ｇαｑのヌクレオチド配列（配列番号１）およびアミノ酸配列（配列番号２）を示す図である。
【図２】
図２は、変異型マウスＧαｑトランスジーンの概略図である。
【図３】
図３（ＡおよびＢ）は、オス（Ａ）およびメス（Ｂ）のＧｑトランスジェニックラットにおける全般的な行動評価を示す図である。
【図４】
図４（ＡおよびＢ）は、オス（Ａ）およびメス（Ｂ）のＧｑトランスジェニックラットにおける体重の影響を示す図である。
【図５】
図５は、ＬｉＣｌ餌で処置されたラットにおける体重に対する影響の結果を示す図である。
【図６】
図６（ＡおよびＢ）は、ビヒクルで処置されたオス（Ａ）およびメス（Ｂ）のＧｑトランスジェニックラットにおける食物摂取に対する影響を示す図である。
【図７】
図７（ＡおよびＢ）は、５−ＨＴ２Ｃアゴニストで処置されたオス（Ａ）およびメス（Ｂ）のＧｑトランスジェニックラットにおける食物摂取に対する影響を示す図である。
【図８】
図８（ＡおよびＢ）は、グラム（Ａ）またはパーセントコントロール（Ｂ）の量に基づく、ビヒクルおよび５−ＨＴ２Ｃアゴニストで処置されたラットにおける食物摂取に対する短期リチウムの影響を示す図である。
【図９】
図９は、ＬｉＣｌ餌で処置されたラットにおける食物摂取に対するビヒクルまたは５−ＨＴ２Ｃアゴニストの影響を示す図である。
【図１０】
図１０（ＡおよびＢ）は、オス（Ａ）およびメス（Ｂ）のＧｑトランスジェニックラットにおけるプレパルス阻害および音響驚愕研究を示す図である。
【図１１】
図１１（ＡおよびＢ）は、短期リチウムで処置されたラットにおけるプレパルス阻害研究（Ａ）および音響驚愕研究（Ｂ）を示す図である。
【図１２】
図１２（ＡおよびＢ）は、ＬｉＣｌ餌で飼育されたラットにおけるプレパルス阻害研究（Ａ）および音響驚愕研究（Ｂ）を示す図である。
【図１３Ａ】
図１３Ａは、オスのＧｑトランスジェニックラットにおける状況的恐怖条件付けおよび聴覚刺激条件付けを示す図である。
【図１３Ｂ】
図１３Ｂは、メスのＧｑトランスジェニックラットにおける状況的恐怖条件付けおよび聴覚刺激条件付けを示す図である。
【図１３Ｃ】
図１３Ｃは、オスのＧｑトランスジェニックラットにおける状況的恐怖条件付けおよび聴覚刺激条件付けを示す図である。
【図１３Ｄ】
図１３Ｄは、メスのＧｑトランスジェニックラットにおける状況的恐怖条件付けおよび聴覚刺激条件付けを示す図である。
【図１３Ｅ】
図１３Ｅは、オスのＧｑトランスジェニックラットにおける状況的恐怖条件付けおよび聴覚刺激条件付けを示す図である。
【図１３Ｆ】
図１３Ｆは、メスのＧｑトランスジェニックラットにおける状況的恐怖条件付けおよび聴覚刺激条件付けを示す図である。
【図１４Ａ】
図１４ＡはＧｑトランスジェニックラットにおけるショック回避行動を示す図である。
【図１４Ｂ】
図１４ＢはＧｑトランスジェニックラットにおけるショック回避行動を示す図である。
【図１４Ｃ】
図１４ＣはＧｑトランスジェニックラットにおけるショック回避行動を示す図である。
【図１４Ｄ】
図１４ＤはＧｑトランスジェニックラットにおけるショック回避行動を示す図である。
【図１４Ｅ】
図１４ＥはＧｑトランスジェニックラットにおけるショック回避行動を示す図である。
【図１５Ａ】
図１５Ａは、オスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するｄ−アンフェタミンの影響を示す図である。
【図１５Ｂ】
図１５Ｂは、オスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するｄ−アンフェタミンの影響を示す図である。
【図１５Ｃ】
図１５Ｃは、オスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するｄ−アンフェタミンの影響を示す図である。
【図１５Ｄ】
図１５Ｄは、オスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するｄ−アンフェタミンの影響を示す図である。
【図１５Ｅ】
図１５Ｅは、オスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するｄ−アンフェタミンの影響を示す図である。
【図１５Ｆ】
図１５Ｆは、メスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するｄ−アンフェタミンの影響を示す図である。
【図１５Ｇ】
図１５Ｇは、メスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するｄ−アンフェタミンの影響を示す図である。
【図１５Ｈ】
図１５Ｈは、メスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するｄ−アンフェタミンの影響を示す図である。
【図１６Ａ】
図１６Ａは、オスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するフェンシクリジンの影響を示す図である。
【図１６Ｂ】
図１６Ｂは、オスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するフェンシクリジンの影響を示す図である。
【図１６Ｃ】
図１６Ｃは、オスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するフェンシクリジンの影響を示す図である。
【図１６Ｄ】
図１６Ｄは、オスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するフェンシクリジンの影響を示す図である。
【図１６Ｅ】
図１６Ｅは、オスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するフェンシクリジンの影響を示す図である。
【図１６Ｆ】
図１６Ｆは、メスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するフェンシクリジンの影響を示す図である。
【図１６Ｇ】
図１６Ｇは、メスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するフェンシクリジンの影響を示す図である。
【図１６Ｈ】
図１６Ｈは、メスのＧｑトランスジェニックラットにおける運動活動に対するフェンシクリジンの影響を示す図である。
【図１７】
図１７は、短期リチウム処置後の運動活動に対するｄ−アンフェタミンの影響を示す図である。
【図１８】
図１８は、短期リチウム処置後の運動活動に対するフェンシクリジンの影響を示す図である。
【図１９】
図１９は、塩化リチウム餌で飼育されたラットにおける運動活動に対するｄ−アンフェタミンの影響を示す図である。
【図２０】
図２０は、塩化リチウム餌で飼育されたラットにおける運動活動に対するフェンシクリジンの影響を示す図である。
【図２１】
図２１（ＡおよびＢ）は、オス（Ａ）およびメス（Ｂ）のＧｑトランスジェニックラットにおけるオープンフィールド行動（中心復帰時間）を示す図である。
【図２２】
図２２（ＡおよびＢ）は、Ｇｑトランスジェニックラットにおけるオープンフィールド行動（線横断）を示す図である。
【図２３】
図２３（Ａ〜Ｄ）は、１５分の期間における４回目の発生に基づく短期リチウム処置後のオープンフィールド行動（Ａ）、中心退去時間（Ｂ）、中心復帰時間（Ｃ）、消費時間（Ｄ）を示す図である。
【図２４】
図２４（ＡおよびＢ）は、Ｇｑトランスジェニックラットにおける頭振り（Ａ）および痙攣（Ｂ）に対する５−ＨＴ２Ａアゴニストの影響を示す図である。
【図２５】
図２５は、短期リチウム処置後の頭振りに対する５−ＨＴ２Ａアゴニストの影響を示す図である。
【図２６】
図２６は、短期リチウム処置後の痙攣に対する５−ＨＴ２Ａアゴニストの影響を示す図である。
【図２７】
図２７（ＡおよびＢ）は、長期リチウム餌で飼育されたラットにおける頭振り（Ａ）および致死性（Ｂ）に対する５−ＨＴ２Ａアゴニストの影響を示す図である。
【図２８】
図２８（Ａ〜Ｃ）は、Ｇｑトランスジェニックラットにおける振せん（Ａ）、痙攣（Ｂ）または死（Ｃ）を誘導することにおけるムスカリン性アゴニストの影響を示す図である。
【図２９】
図２９（Ａ〜Ｃ）は、短期リチウム処置後のムスカリン性アゴニストの影響を示す図である。
【図３０】
図３０（Ａ〜Ｃ）は、ＬｉＣｌ餌で飼育されたラットに対する振せん（Ａ）、痙攣（Ｂ）および死（Ｃ）を誘導することにおけるムスカリン性アゴニストの影響を示す図である。


【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】図面
【訂正対象項目名】全図
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図１Ａ】
2004500843.tif 000001
【図１Ｂ】
2004500843.tif 000002
【図１Ｃ】
2004500843.tif 000003
【図２】
2004500843.tif 000004
【図３】
2004500843.tif 000005
【図４】
2004500843.tif 000006
【図５】
2004500843.tif 000007
【図６】
2004500843.tif 000008
【図７】
2004500843.tif 000009
【図８】
2004500843.tif 000010
【図９】
2004500843.tif 000011
【図１０】
2004500843.tif 000012
【図１１】
2004500843.tif 000013
【図１２】
2004500843.tif 000014
【図１３Ａ】
2004500843.tif 000015
【図１３Ｂ】
2004500843.tif 000016
【図１３Ｃ】
2004500843.tif 000017
【図１３Ｄ】
2004500843.tif 000018
【図１３Ｅ】
2004500843.tif 000019
【図１３Ｆ】
2004500843.tif 000020
【図１４Ａ】
2004500843.tif 000021
【図１４Ｂ】
2004500843.tif 000022
【図１４Ｃ】
2004500843.tif 000023
【図１４Ｄ】
2004500843.tif 000024
【図１４Ｅ】
2004500843.tif 000025
【図１５Ａ】
2004500843.tif 000026
【図１５Ｂ】
2004500843.tif 000027
【図１５Ｃ】
2004500843.tif 000028
【図１５Ｄ】
2004500843.tif 000029
【図１５Ｅ】
2004500843.tif 000030
【図１５Ｆ】
2004500843.tif 000031
【図１５Ｇ】
2004500843.tif 000032
【図１５Ｈ】
2004500843.tif 000033
【図１６Ａ】
2004500843.tif 000034
【図１６Ｂ】
2004500843.tif 000035
【図１６Ｃ】
2004500843.tif 000036
【図１６Ｄ】
2004500843.tif 000037
【図１６Ｅ】
2004500843.tif 000038
【図１６Ｆ】
2004500843.tif 000039
【図１６Ｇ】
2004500843.tif 000040
【図１６Ｈ】
2004500843.tif 000041
【図１７】
2004500843.tif 000042
【図１８】
2004500843.tif 000043
【図１９】
2004500843.tif 000044
【図２０】
2004500843.tif 000045
【図２１】
2004500843.tif 000046
【図２２】
2004500843.tif 000047
【図２３】
2004500843.tif 000048
【図２４】
2004500843.tif 000049
【図２５】
2004500843.tif 000050
【図２６】
2004500843.tif 000051
【図２７】
2004500843.tif 000052
【図２８】
2004500843.tif 000053
【図２９】
2004500843.tif 000054
【図３０】
2004500843.tif 000055