【手続補正書】
【提出日】平成15年2月26日(2003.2.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１種類のアスコルビン酸前駆体を含んでなる培地でＫｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ種またはＺｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ種の酵母を培養してアスコルビン酸またはその塩を産生させ、アスコルビン酸またはその塩を単離することを含んでなる、アスコルビン酸またはその塩の生成方法。
【請求項２】
酵母がＫ． ｌａｃｔｉｓまたはＺ． ｂａｉｌｉｉである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
酵母がＫ． ｌａｃｔｉｓ ＰＭ６−７Ａ株、またはＺ． ｂａｉｌｉｉ ＡＴＣＣ ６０４８３株、またはＺ． ｂａｉｌｉｉ ＡＴＣＣ ３６９４７株である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
アスコルビン酸前駆体がＬ−ガラクトース、Ｄ−グルコース、Ｌ−ガラクトノ−１，４−ラクトン、Ｌ−グロン酸、およびＬ−グロノ−１，４−ラクトンから選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
単離工程が酵母のリーシスを含んでなる、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
単離工程が遠心分離、濾過、精密濾過、限外濾過、ナノ濾過、液−液抽出、活性炭、結晶化、ヌクレアーゼまたはプロテアーゼを用いる酵素処理、またはクロマトグラフィーをも含んでなる、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
アスコルビン酸の生成方法であって、
ａ） アスコルビン酸前駆体をアスコルビン酸に転換することができる組換え酵母を得て、
ｂ） アスコルビン酸前駆体を含んでなる培地中で組換え酵母を培養することによってアスコルビン酸を形成し、
ｃ） アスコルビン酸を単離すること、
を含んでなる方法。
【請求項８】
酵母がＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅまたはＺ． ｂａｉｌｉｉ種に属する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
酵母がＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ菌株；ＮＲＲＬ Ｙ−３０３２１、ＮＲＲＬ Ｙ−３０３２２、ＮＲＲＬ Ｙ−３０３２３、ＮＲＲＬ Ｙ−３０３２４、ＮＲＲＬ Ｙ−３０３２５、ＮＲＲＬ Ｙ−３０３２６、ＮＲＲＬ Ｙ−３０３２７、ＮＲＲＬ Ｙ−３０３２８、ＮＲＲＬ Ｙ−３０３２９、ＮＲＲＬ Ｙ−３０４９１、ＮＲＲＬ Ｙ−３０４９２、ＮＲＲＬ Ｙ−３０４９３、またはＺ． ｂａｉｌｉｉ菌株；ＮＲＲＬ Ｙ−３０４９５、ＮＲＲＬ Ｙ−３０４９７、ＮＲＲＬ Ｙ−３０４９８、ＮＲＲＬ Ｙ−３０４９９、ＮＲＲＬ Ｙ−３０５００、ＮＲＲＬ Ｙ−３０５０１から選択される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
酵母がＬ−ガラクトースデヒドロゲナーゼ（ＬＧＤＨ）、Ｌ−ガラクトノ−１，４−ラクトンデヒドロゲナーゼ（ＡＧＤ）、Ｄ−アラビノースデヒドロゲナーゼ（ＡＲＡ）、Ｄ−アラビノノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＡＬＯ）、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＧＬＯ）、およびアルドノラクトナーゼ（ＡＬ）から選択される第一の酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項７に記載の方法。
【請求項１１】
ＬＧＤＨ酵素が配列番号：１１と少なくとも約７０％の類似性を有し、ＡＧＤ酵素が配列番号：１または配列番号：３と少なくとも約７０％の類似性を有し、ＡＲＡ酵素が配列番号：２０と少なくとも約７０％の類似性を有し、ＡＬＯ酵素が配列番号：５または配列番号：７と少なくとも約７０％の類似性を有し、ＧＬＯ酵素が配列番号：９と少なくとも約７０％の類似性を有し、ＡＬ酵素が配列番号：２９と少なくとも約７０％の類似性を有する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
ＬＧＤＨ酵素が配列番号：１１と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＧＤ酵素が配列番号：１または配列番号：３と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＲＡ酵素が配列番号：２０と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＬＯ酵素が配列番号：５または配列番号：７と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＧＬＯ酵素が配列番号：９と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＬ酵素が配列番号：２９と少なくとも約７０％の同一性を有する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
ＬＧＤＨ酵素をコードするコード領域が配列番号：１２と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＧＤ酵素をコードするコード領域が配列番号：２または配列番号：４のヌクレオチド５６〜１８５８と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＲＡ酵素をコードするコード領域が配列番号：２１のヌクレオチド２８５〜１３１９と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＬＯ酵素をコードするコード領域が配列番号：６または配列番号：８のヌクレオチド４〜１５８４と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＧＬＯ酵素をコードするコード領域が配列番号：１０のヌクレオチド２４〜１３４６と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＬ酵素をコードするコード領域が配列番号：３０と少なくとも約７０％の同一性を有する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１４】
酵母がＡＬＯ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項１０に記載の方法。
【請求項１５】
酵母がＬＧＤＨ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項１０に記載の方法。
【請求項１６】
酵母がＡＧＤ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項１０に記載の方法。
【請求項１７】
ＡＧＤ酵素がシグナル形成ペプチドを含んでなる、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
ＡＧＤ酵素がシグナル形成ペプチドを含まない、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
酵母がＧＬＯ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項１０に記載の方法。
【請求項２０】
酵母がＡＬ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項１０に記載の方法。
【請求項２１】
酵母がＡＲＡ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項１０に記載の方法。
【請求項２２】
ＡＲＡ酵素がアミノ酸配列ＧＸＲＸＸＤＸＡＸＸＸＸＸＥＸＸＸＧ（配列番号：１３）およびＧＸＸＮ（配列番号：２６）を含んでなる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
コード領域が酵母で活性なプロモーターに結合している、請求項１０に記載の方法。
【請求項２４】
プロモーターがＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅトリオースホスフェートイソメラーゼ（ＴＰＩ）プロモーターである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
コード領域がＡ． ｔｈａｌｉａｎａ、Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｒ． ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ、またはＺ． ｍｏｂｉｌｉｓから単離された、請求項１０に記載の方法。
【請求項２６】
ＬＧＤＨ酵素をコードするコード領域がＡ． ｔｈａｌｉａｎａから単離され、ＡＬＯ酵素をコードするコード領域がＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅから単離され、ＡＧＤ酵素をコードするコード領域がＡ． ｔｈａｌｉａｎａから単離され、ＡＲＡ酵素をコードするコード領域がＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅから単離され、ＧＬＯ酵素をコードするコード領域がＲ． ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓから単離され、ＡＬ酵素をコードするコード領域がＺ． ｍｏｂｉｌｉｓから単離された、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
酵母が第一の酵素を除く第二の酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されており、第二の酵素がＬＧＤＨ、ＡＧＤ、ＡＲＡ、ＡＬＯ、ＧＬＯ、およびＡＬから選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項２８】
第二の酵素をコードするコード領域が酵母中で活性なプロモーターに結合している、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
プロモーターがＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅトリオースホスフェートイソメラーゼ（ＴＰＩ）プロモーターである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
組換え酵母が炭素供給源のＬ−ガラクトース、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトン、またはＬ−グロン酸への転換と関連した酵素をコードする少なくとも１個のコード領域をも含んでなる、請求項１０に記載の方法。
【請求項３１】
酵母が第一の酵素をコードするコード領域によって機能的に形質転換されており、コード領域が配列番号：１２に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＬＧＤＨ酵素をコードするコード領域、配列番号：２に記載のポリヌクレオチドまたは配列番号：４のヌクレオチド５６〜１８５８に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＡＧＤ酵素をコードするコード領域、配列番号：２１のヌクレオチド２８５〜１３１９に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＡＲＡ酵素をコードするコード領域、配列番号：６に記載のポリヌクレオチドまたは配列番号：８のヌクレオチド４〜１５８４に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＡＬＯ酵素をコードするコード領域、配列番号：１０のヌクレオチド２４〜１３４６に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＧＬＯ酵素をコードするコード領域、または配列番号：３０に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＡＬ酵素をコードするコード領域から選択され、コード領域が緊縮ハイブリダイゼーション条件下でポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズする、請求項１０に記載の方法。
【請求項３２】
酵母が第一の酵素をコードするコード領域によって機能的に形質転換され、第一の酵素が配列番号：１１を有する酵素の免疫学的特性を有するＬＧＤＨ酵素、配列番号：１または配列番号：３を有する酵素の免疫学的特性を有するＡＧＤ酵素、配列番号：２０を有する酵素の免疫学的特性を有するＡＲＡ酵素、配列番号：５または配列番号：７を有する酵素の免疫学的特性を有するＡＬＯ酵素、配列番号：９を有する酵素の免疫学的特性を有するＧＬＯ酵素、および配列番号：２９を有する酵素の免疫学的特性を有するＡＬ酵素から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項３３】
アスコルビン酸前駆体が単糖類、オリゴ糖類、多糖類、Ｃ１〜Ｃ６アルコール、Ｃ２〜Ｃ６ポリオール、有機酸、およびＣ５〜Ｃ６ラクトンからなる群から選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項３４】
アスコルビン酸前駆体がトレハロース、ラフィノース、エタノール、キシロース、キシルロース、マルトース、グリセロール、フルクトース、アラビノース、Ｄ−グルコース−６−Ｐ、Ｄ−グルコース−１−Ｐ、ＵＤＰ−Ｄ−グルコース、ＵＤＰ−グルクロン酸、Ｄ−グルクロン酸−１−Ｐ、Ｄ−グルクロン酸、Ｄ−グルクロノラクトン、Ｌ−グロン酸、Ｄ−フルクトース−６−Ｐ、Ｄ−マンノース−６−Ｐ、Ｄ−マンノース−１−Ｐ、ＧＤＰ−Ｄ−マンノース、ＧＤＰ−Ｌ−ガラクトース、Ｌ−ガラクトース−１−Ｐ、ラクトース、スクロース、澱粉、セルロース、クエン酸塩、メタノール、ホルムアルデヒド、ギ酸塩、メチルアミン、アラニン、オレイン酸、Ｌ−ガラクトノ−１，４−ラクトン、Ｄ−グルコース、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトン、Ｌ−ガラクトース、およびＬ−グロン酸からなる群から選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項３５】
アスコルビン酸前駆体がＬ−ガラクトノ−１，４−ラクトン、Ｄ−グルコース、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトン、Ｌ−ガラクトース、およびＬ−グロン酸から選択される、請求項７に記載の方法。
【請求項３６】
アスコルビン酸前駆体が組換え酵母の炭素供給源でもある、請求項７に記載の方法。
【請求項３７】
単離工程が酵母のリーシスを含んでなる、請求項７に記載の方法。
【請求項３８】
単離工程が遠心分離、濾過、精密濾過、限外濾過、ナノ濾過、液−液抽出、活性炭、結晶化、ヌクレアーゼまたはプロテアーゼを用いる酵素処理、またはクロマトグラフィーをも含んでなる、請求項７に記載の方法。
【請求項３９】
アスコルビン酸またはその塩の生成方法であって、少なくとも１種類のアスコルビン酸前駆体を含んでなる培地でアスコルビン酸前駆体をアスコルビン酸またはその塩に転換することができる組換え酵母を培養することによってアスコルビン酸またはその塩を形成させ、酵母はアスコルビン酸を培地にバックグラウンドより高い濃度で蓄積することができ、アスコルビン酸またはその塩を単離することを含んでなる、方法。
【請求項４０】
酵母がＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｈａｎｓｅｎｕｌａ、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ、Ｄｅｂａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｎａｄｓｏｎｉａ、Ｌｉｐｏｍｙｃｅｓ、Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ、Ｋｌｏｅｃｋｅｒａ、Ｐｉｃｈｉａ、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｔｒｉｇｏｎｏｐｓｉｓ、Ｂｒｅｔｔａｎｏｍｙｃｅｓ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎ、Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ、Ｌｉｐｏｍｙｃｅｓ、Ｐｈａｆｆｉａ、Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ、Ｙａｒｒｏｗｉａ、またはＳｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓ属に属する、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
培養工程が少なくとも約２０ｍｇ／ｌの最終濃度で培地中にアスコルビン酸を蓄積することを含んでなる、請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
培養工程が少なくとも約４０ｍｇ／ｌの最終濃度で培地中にアスコルビン酸を蓄積することを含んでなる、請求項３９に記載の方法。
【請求項４３】
培養工程が少なくとも約７０ｍｇ／ｌの最終濃度で培地中にアスコルビン酸を蓄積することを含んでなる、請求項３９に記載の方法。
【請求項４４】
酵母がＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅまたはＺ． ｂａｉｌｉｉ種に属する、請求項３９に記載の方法。
【請求項４５】
酵母がＬ−ガラクトースデヒドロゲナーゼ（ＬＧＤＨ）、Ｌ−ガラクトノ−１，４−ラクトンデヒドロゲナーゼ（ＡＧＤ）、Ｄ−アラビノースデヒドロゲナーゼ（ＡＲＡ）、Ｄ−アラビノノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＡＬＯ）、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＧＬＯ）、およびアルドノラクトナーゼ（ＡＬ）から選択される第一の酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項３９に記載の方法。
【請求項４６】
ＬＧＤＨ酵素が配列番号：１１と少なくとも約７０％の類似性を有し、ＡＧＤ酵素が配列番号：１または配列番号：３と少なくとも約７０％の類似性を有し、ＡＲＡ酵素が配列番号：２０と少なくとも約７０％の類似性を有し、ＡＬＯ酵素が配列番号：５または配列番号：７と少なくとも約７０％の類似性を有し、ＧＬＯ酵素が配列番号：９と少なくとも約７０％の類似性を有し、ＡＬ酵素が配列番号：２９と少なくとも約７０％の類似性を有する、請求項４５に記載の方法。
【請求項４７】
ＬＧＤＨ酵素が配列番号：１１と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＧＤ酵素が配列番号：１または配列番号：３と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＲＡ酵素が配列番号：２０と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＬＯ酵素が配列番号：５または配列番号：７と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＧＬＯ酵素が配列番号：９と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＬ酵素が配列番号：２９と少なくとも約７０％の同一性を有する、請求項４５に記載の方法。
【請求項４８】
ＬＧＤＨ酵素をコードするコード領域が配列番号：１２と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＧＤ酵素をコードするコード領域が配列番号：２または配列番号：４のヌクレオチド５６〜１８５８と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＲＡ酵素をコードするコード領域が配列番号：２１のヌクレオチド２８５〜１３１９と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＬＯ酵素をコードするコード領域が配列番号：６または配列番号：８のヌクレオチド４〜１５８４と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＧＬＯ酵素をコードするコード領域が配列番号：１０のヌクレオチド２４〜１３４６と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＬ酵素をコードするコード領域が配列番号：３０と少なくとも約７０％の同一性を有する、請求項４５に記載の方法。
【請求項４９】
酵母がＡＬＯ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項４５に記載の方法。
【請求項５０】
酵母がＬＧＤＨ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項４５に記載の方法。
【請求項５１】
酵母がＡＧＤ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項４５に記載の方法。
【請求項５２】
ＡＧＤ酵素がシグナル形成ペプチドを含んでなる、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
ＡＧＤ酵素がシグナル形成ペプチドを含まない、請求項５１に記載の方法。
【請求項５４】
酵母がＧＬＯ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項４５に記載の方法。
【請求項５５】
酵母がＡＬ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項４５に記載の方法。
【請求項５６】
酵母がＡＲＡ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項４５に記載の方法。
【請求項５７】
ＡＲＡ酵素がアミノ酸配列ＧＸＲＸＸＤＸＡＸＸＸＸＸＥＸＸＸＧ（配列番号：１３）およびＧＸＸＮ（配列番号：２６）を含んでなる、請求項５６に記載の方法。
【請求項５８】
コード領域が酵母で活性なプロモーターに結合している、請求項４５に記載の方法。
【請求項５９】
プロモーターがＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅトリオースホスフェートイソメラーゼ（ＴＰＩ）プロモーターである、請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
コード領域がＡ． ｔｈａｌｉａｎａ、Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｒ． ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ、またはＺ． ｍｏｂｉｌｉｓから単離された、請求項４５に記載の方法。
【請求項６１】
ＬＧＤＨ酵素をコードするコード領域がＡ． ｔｈａｌｉａｎａから単離され、ＡＬＯ酵素をコードするコード領域がＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅから単離され、ＡＧＤ酵素をコードするコード領域がＡ． ｔｈａｌｉａｎａから単離され、ＡＲＡ酵素をコードするコード領域がＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅから単離され、ＧＬＯ酵素をコードするコード領域がＲ． ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓから単離され、ＡＬ酵素をコードするコード領域がＺ． ｍｏｂｉｌｉｓから単離された、請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
酵母が第一の酵素を除く第二の酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されており、第二の酵素がＬＧＤＨ、ＡＧＤ、ＡＲＡ、ＡＬＯ、ＧＬＯ、およびＡＬから選択される、請求項４５に記載の方法。
【請求項６３】
第二の酵素をコードするコード領域が酵母中で活性なプロモーターに結合している、請求項６２に記載の方法。
【請求項６４】
プロモーターがＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅトリオースホスフェートイソメラーゼ（ＴＰＩ）プロモーターである、請求項６３に記載の方法。
【請求項６５】
組換え酵母が炭素供給源のＬ−ガラクトース、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトン、またはＬ−グロン酸への転換と関連した酵素をコードする少なくとも１個のコード領域をも含んでなる、請求項４５に記載の方法。
【請求項６６】
酵母が第一の酵素をコードするコード領域によって機能的に形質転換されており、コード領域が配列番号：１２に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＬＧＤＨ酵素をコードするコード領域、配列番号：２に記載のポリヌクレオチドまたは配列番号：４のヌクレオチド５６〜１８５８に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＡＧＤ酵素をコードするコード領域、配列番号：２１のヌクレオチド２８５〜１３１９に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＡＲＡ酵素をコードするコード領域、配列番号：６に記載のポリヌクレオチドまたは配列番号：８のヌクレオチド４〜１５８４に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＡＬＯ酵素をコードするコード領域、配列番号：１０のヌクレオチド２４〜１３４６に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＧＬＯ酵素をコードするコード領域、または配列番号：３０に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＡＬ酵素をコードするコード領域から選択され、コード領域が緊縮ハイブリダイゼーション条件下でポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズする、請求項４５に記載の方法。
【請求項６７】
酵母が第一の酵素をコードするコード領域によって機能的に形質転換され、第一の酵素が配列番号：１１を有する酵素の免疫学的特性を有するＬＧＤＨ酵素、配列番号：１または配列番号：３を有する酵素の免疫学的特性を有するＡＧＤ酵素、配列番号：２０を有する酵素の免疫学的特性を有するＡＲＡ酵素、配列番号：５または配列番号：７を有する酵素の免疫学的特性を有するＡＬＯ酵素、配列番号：９を有する酵素の免疫学的特性を有するＧＬＯ酵素、および配列番号：２９を有する酵素の免疫学的特性を有するＡＬ酵素から選択される、請求項４５に記載の方法。
【請求項６８】
アスコルビン酸前駆体が単糖類、オリゴ糖類、多糖類、Ｃ１〜Ｃ６アルコール、Ｃ２〜Ｃ６ポリオール、有機酸、およびＣ５〜Ｃ６ラクトンからなる群から選択される、請求項３９に記載の方法。
【請求項６９】
アスコルビン酸前駆体がトレハロース、ラフィノース、エタノール、キシロース、キシルロース、マルトース、グリセロール、フルクトース、アラビノース、Ｄ−グルコース−６−Ｐ、Ｄ−グルコース−１−Ｐ、ＵＤＰ−Ｄ−グルコース、ＵＤＰ−グルクロン酸、Ｄ−グルクロン酸−１−Ｐ、Ｄ−グルクロン酸、Ｄ−グルクロノラクトン、Ｌ−グロン酸、Ｄ−フルクトース−６−Ｐ、Ｄ−マンノース−６−Ｐ、Ｄ−マンノース−１−Ｐ、ＧＤＰ−Ｄ−マンノース、ＧＤＰ−Ｌ−ガラクトース、Ｌ−ガラクトース−１−Ｐ、ラクトース、スクロース、澱粉、セルロース、クエン酸塩、メタノール、ホルムアルデヒド、ギ酸塩、メチルアミン、アラニン、オレイン酸、Ｌ−ガラクトノ−１，４−ラクトン、Ｄ−グルコース、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトン、Ｌ−ガラクトース、およびＬ−グロン酸からなる群から選択される、請求項３９に記載の方法。
【請求項７０】
アスコルビン酸前駆体がＬ−ガラクトノ−１，４−ラクトン、Ｄ−グルコース、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトン、Ｌ−ガラクトース、およびＬ−グロン酸から選択される、請求項３９に記載の方法。
【請求項７１】
アスコルビン酸前駆体が組換え酵母の炭素供給源でもある、請求項３９に記載の方法。
【請求項７２】
単離工程が酵母のリーシスを含んでなる、請求項３９に記載の方法。
【請求項７３】
単離工程が遠心分離、濾過、精密濾過、限外濾過、ナノ濾過、液−液抽出、活性炭、結晶化、ヌクレアーゼまたはプロテアーゼを用いる酵素処理、またはクロマトグラフィーをも含んでなる、請求項３９に記載の方法。
【請求項７４】
アスコルビン酸またはその塩を生成する方法であって、
少なくとも１種類のアスコルビン酸前駆体を含んでなる培地中で、アスコルビン酸前駆体をアスコルビン酸またはその塩に転換することによってアスコルビン酸またはその塩を形成させることができる組換え酵母を培養し、この酵母が前駆体の少なくとも約２５％をアスコルビン酸に転換することができ、アスコルビン酸またはその塩を単離することを含んでなる、方法。
【請求項７５】
酵母がＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｈａｎｓｅｎｕｌａ、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ、Ｄｅｂａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｎａｄｓｏｎｉａ、Ｌｉｐｏｍｙｃｅｓ、Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ、Ｋｌｏｅｃｋｅｒａ、Ｐｉｃｈｉａ、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｔｒｉｇｏｎｏｐｓｉｓ、Ｂｒｅｔｔａｎｏｍｙｃｅｓ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎ、Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ、Ｌｉｐｏｍｙｃｅｓ、Ｐｈａｆｆｉａ、Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ、Ｙａｒｒｏｗｉａ、またはＳｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓ属に属する、請求項７４に記載の方法。
【請求項７６】
組換え酵母が前駆体の少なくとも約３５％をアスコルビン酸に転換することができる、請求項７４に記載の方法。
【請求項７７】
組換え酵母が前駆体の少なくとも約４０％をアスコルビン酸に転換することができる、請求項７４に記載の方法。
【請求項７８】
酵母がＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、またはＺ． ｂａｉｌｉｉ種に属する、請求項７４に記載の方法。
【請求項７９】
酵母がＬ−ガラクトースデヒドロゲナーゼ（ＬＧＤＨ）、Ｌ−ガラクトノ−１，４−ラクトンデヒドロゲナーゼ（ＡＧＤ）、Ｄ−アラビノースデヒドロゲナーゼ（ＡＲＡ）、Ｄ−アラビノノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＡＬＯ）、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＧＬＯ）、およびアルドノラクトナーゼ（ＡＬ）から選択される第一の酵素をコードするコード領域によって機能的に形質転換されている、請求項７４に記載の方法。
【請求項８０】
ＬＧＤＨ酵素が配列番号：１１と少なくとも約７０％の類似性を有し、ＡＧＤ酵素が配列番号：１または配列番号：３と少なくとも約７０％の類似性を有し、ＡＲＡ酵素が配列番号：２０と少なくとも約７０％の類似性を有し、ＡＬＯ酵素が配列番号：５または配列番号：７と少なくとも約７０％の類似性を有し、ＧＬＯ酵素が配列番号：９と少なくとも約７０％の類似性を有し、ＡＬ酵素が配列番号：２９と少なくとも約７０％の類似性を有する、請求項７９に記載の方法。
【請求項８１】
ＬＧＤＨ酵素が配列番号：１１と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＧＤ酵素が配列番号：１または配列番号：３と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＲＡ酵素が配列番号：２０と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＬＯ酵素が配列番号：５または配列番号：７と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＧＬＯ酵素が配列番号：９と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＬ酵素が配列番号：２９と少なくとも約７０％の同一性を有する、請求項７９に記載の方法。
【請求項８２】
ＬＧＤＨ酵素をコードするコード領域が配列番号：１２と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＧＤ酵素をコードするコード領域が配列番号：２または配列番号：４のヌクレオチド５６〜１８５８と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＲＡ酵素をコードするコード領域が配列番号：２１のヌクレオチド２８５〜１３１９と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＬＯ酵素をコードするコード領域が配列番号：６または配列番号：８のヌクレオチド４〜１５８４と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＧＬＯ酵素をコードするコード領域が配列番号：１０のヌクレオチド２４〜１３４６と少なくとも約７０％の同一性を有し、ＡＬ酵素をコードするコード領域が配列番号：３０と少なくとも約７０％の同一性を有する、請求項７９に記載の方法。
【請求項８３】
酵母がＡＬＯ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項７９に記載の方法。
【請求項８４】
酵母がＬＧＤＨ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項７９に記載の方法。
【請求項８５】
酵母がＡＧＤ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項７９に記載の方法。
【請求項８６】
ＡＧＤ酵素がシグナル形成ペプチドを含んでなる、請求項８５に記載の方法。
【請求項８７】
ＡＧＤ酵素がシグナル形成ペプチドを含まない、請求項８５に記載の方法。
【請求項８８】
酵母がＧＬＯ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項７９に記載の方法。
【請求項８９】
酵母がＡＬ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項７９に記載の方法。
【請求項９０】
酵母がＡＲＡ酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されている、請求項７９に記載の方法。
【請求項９１】
ＡＲＡ酵素がアミノ酸配列ＧＸＲＸＸＤＸＡＸＸＸＸＸＥＸＸＸＧ（配列番号：１３）およびＧＸＸＮ（配列番号：２６）を含んでなる、請求項９０に記載の方法。
【請求項９２】
コード領域が酵母で活性なプロモーターに結合している、請求項７９に記載の方法。
【請求項９３】
プロモーターがＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅトリオースホスフェートイソメラーゼ（ＴＰＩ）プロモーターである、請求項９２に記載の方法。
【請求項９４】
コード領域がＡ． ｔｈａｌｉａｎａ、Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｒ． ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ、またはＺ． ｍｏｂｉｌｉｓから単離された、請求項７９に記載の方法。
【請求項９５】
ＬＧＤＨ酵素をコードするコード領域がＡ． ｔｈａｌｉａｎａから単離され、ＡＬＯ酵素をコードするコード領域がＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅから単離され、ＡＧＤ酵素をコードするコード領域がＡ． ｔｈａｌｉａｎａから単離され、ＡＲＡ酵素をコードするコード領域がＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅから単離され、ＧＬＯ酵素をコードするコード領域がＲ． ｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓから単離され、ＡＬ酵素をコードするコード領域がＺ． ｍｏｂｉｌｉｓから単離された、請求項９４に記載の方法。
【請求項９６】
酵母が第一の酵素を除く第二の酵素をコードするコード領域により機能的に形質転換されており、第二の酵素がＬＧＤＨ、ＡＧＤ、ＡＲＡ、ＡＬＯ、ＧＬＯ、およびＡＬから選択される、請求項７９に記載の方法。
【請求項９７】
第二の酵素をコードするコード領域が酵母中で活性なプロモーターに結合している、請求項９６に記載の方法。
【請求項９８】
プロモーターがＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅトリオースホスフェートイソメラーゼ（ＴＰＩ）プロモーターである、請求項９７に記載の方法。
【請求項９９】
組換え酵母が炭素供給源のＬ−ガラクトース、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトン、またはＬ−グロン酸への転換と関連した酵素をコードする少なくとも１個のコード領域をも含んでなる、請求項７９に記載の方法。
【請求項１００】
酵母が第一の酵素をコードするコード領域によって機能的に形質転換されており、コード領域が配列番号：１２に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＬＧＤＨ酵素をコードするコード領域、配列番号：２に記載のポリヌクレオチドまたは配列番号：４のヌクレオチド５６〜１８５８に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＡＧＤ酵素をコードするコード領域、配列番号：２１のヌクレオチド２８５〜１３１９に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＡＲＡ酵素をコードするコード領域、配列番号：６に記載のポリヌクレオチドまたは配列番号：８のヌクレオチド４〜１５８４に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＡＬＯ酵素をコードするコード領域、配列番号：１０のヌクレオチド２４〜１３４６に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＧＬＯ酵素をコードするコード領域、または配列番号：３０に記載のポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズするＡＬ酵素をコードするコード領域から選択され、コード領域が緊縮ハイブリダイゼーション条件下でポリヌクレオチドの相補性鎖にハイブリダイズする、請求項７９に記載の方法。
【請求項１０１】
酵母が第一の酵素をコードするコード領域によって機能的に形質転換され、第一の酵素が配列番号：１１を有する酵素の免疫学的特性を有するＬＧＤＨ酵素、配列番号：１または配列番号：３を有する酵素の免疫学的特性を有するＡＧＤ酵素、配列番号：２０を有する酵素の免疫学的特性を有するＡＲＡ酵素、配列番号：５または配列番号：７を有する酵素の免疫学的特性を有するＡＬＯ酵素、配列番号：９を有する酵素の免疫学的特性を有するＧＬＯ酵素、および配列番号：２９を有する酵素の免疫学的特性を有するＡＬ酵素から選択される、請求項７９に記載の方法。
【請求項１０２】
アスコルビン酸前駆体が単糖類、オリゴ糖類、多糖類、Ｃ１〜Ｃ６アルコール、Ｃ２〜Ｃ６ポリオール、有機酸、およびＣ５〜Ｃ６ラクトンからなる群から選択される、請求項７４に記載の方法。
【請求項１０３】
アスコルビン酸前駆体がトレハロース、ラフィノース、エタノール、キシロース、キシルロース、マルトース、グリセロール、フルクトース、アラビノース、Ｄ−グルコース−６−Ｐ、Ｄ−グルコース−１−Ｐ、ＵＤＰ−Ｄ−グルコース、ＵＤＰ−グルクロン酸、Ｄ−グルクロン酸−１−Ｐ、Ｄ−グルクロン酸、Ｄ−グルクロノラクトン、Ｌ−グロン酸、Ｄ−フルクトース−６−Ｐ、Ｄ−マンノース−６−Ｐ、Ｄ−マンノース−１−Ｐ、ＧＤＰ−Ｄ−マンノース、ＧＤＰ−Ｌ−ガラクトース、Ｌ−ガラクトース−１−Ｐ、ラクトース、スクロース、澱粉、セルロース、クエン酸塩、メタノール、ホルムアルデヒド、ギ酸塩、メチルアミン、アラニン、オレイン酸、Ｌ−ガラクトノ−１，４−ラクトン、Ｄ−グルコース、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトン、Ｌ−ガラクトース、およびＬ−グロン酸からなる群から選択される、請求項７４に記載の方法。
【請求項１０４】
アスコルビン酸前駆体がＬ−ガラクトノ−１，４−ラクトン、Ｄ−グルコース、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトン、Ｌ−ガラクトース、およびＬ−グロン酸から選択される、請求項７４に記載の方法。
【請求項１０５】
アスコルビン酸前駆体が組換え酵母の炭素供給源でもある、請求項７４に記載の方法。
【請求項１０６】
単離工程が酵母のリーシスを含んでなる、請求項７４に記載の方法。
【請求項１０７】
単離工程が遠心分離、濾過、精密濾過、限外濾過、ナノ濾過、液−液抽出、活性炭、結晶化、ヌクレアーゼまたはプロテアーゼを用いる酵素処理、またはクロマトグラフィーをも含んでなる、請求項７４に記載の方法。
【請求項１０８】
アスコルビン酸またはその塩を含んでなる培地中で酵母を培養してなる、アスコルビン酸またはその塩を培地中で安定化する方法。
【請求項１０９】
アスコルビン酸またはその塩を培地に添加する、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１０】
培地中のアスコルビン酸を酵母によって産生させ、酵母が少なくとも１種類のアスコルビン酸前駆体をアスコルビン酸に転換することによってアスコルビン酸を産生し、培地はアスコルビン酸前駆体を含んでなる、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１１】
酵母が組換え酵母である、請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１２】
酵母がＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｃａｎｄｉｄａ、Ｈａｎｓｅｎｕｌａ、Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ、Ｄｅｂａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｎａｄｓｏｎｉａ、Ｌｉｐｏｍｙｃｅｓ、Ｔｏｒｕｌｏｐｓｉｓ、Ｋｌｏｅｃｋｅｒａ、Ｐｉｃｈｉａ、Ｓｃｈｉｚｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ、Ｔｒｉｇｏｎｏｐｓｉｓ、Ｂｒｅｔｔａｎｏｍｙｃｅｓ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｏｎ、Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ、Ｌｉｐｏｍｙｃｅｓ、Ｐｈａｆｆｉａ、Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ、Ｙａｒｒｏｗｉａ、またはＳｃｈｗａｎｎｉｏｍｙｃｅｓ属に属する、請求項１０８に記載の方法。
【請求項１１３】
酵母がＳ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、Ｋ． ｌａｃｔｉｓまたはＺ． ｂａｉｌｉｉ種に属する、請求項１１２に記載の方法。
【請求項１１４】
アスコルビン酸前駆体が単糖類、オリゴ糖類、多糖類、Ｃ１〜Ｃ６アルコール、Ｃ２〜Ｃ６ポリオール、有機酸、およびＣ５〜Ｃ６ラクトンからなる群から選択される、請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１５】
アスコルビン酸前駆体がトレハロース、ラフィノース、エタノール、キシロース、キシルロース、マルトース、グリセロール、フルクトース、アラビノース、Ｄ−グルコース−６−Ｐ、Ｄ−グルコース−１−Ｐ、ＵＤＰ−Ｄ−グルコース、ＵＤＰ−グルクロン酸、Ｄ−グルクロン酸−１−Ｐ、Ｄ−グルクロン酸、Ｄ−グルクロノラクトン、Ｌ−グロン酸、Ｄ−フルクトース−６−Ｐ、Ｄ−マンノース−６−Ｐ、Ｄ−マンノース−１−Ｐ、ＧＤＰ−Ｄ−マンノース、ＧＤＰ−Ｌ−ガラクトース、Ｌ−ガラクトース−１−Ｐ、ラクトース、スクロース、澱粉、セルロース、クエン酸塩、メタノール、ホルムアルデヒド、ギ酸塩、メチルアミン、アラニン、オレイン酸、Ｌ−ガラクトノ−１，４−ラクトン、Ｄ−グルコース、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトン、Ｌ−ガラクトース、およびＬ−グロン酸からなる群から選択される、請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１６】
アスコルビン酸前駆体がＬ−ガラクトノ−１，４−ラクトン、Ｄ−グルコース、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトン、Ｌ−ガラクトース、およびＬ−グロン酸から選択される、請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１７】
アスコルビン酸前駆体が組換え酵母の炭素供給源でもある、請求項１１０に記載の方法。
【請求項１１８】
Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅであって、Ｌ−ガラクトースデヒドロゲナーゼ（ＬＧＤＨ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ。
【請求項１１９】
Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅであって、Ｄ−アラビノースデヒドロゲナーゼ（ＡＲＡ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ。
【請求項１２０】
Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅであって、Ｌ−ガラクトノ−１，４−ラクトンデヒドロゲナーゼ（ＡＧＤ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されており、菌株ＮＲＲＬ Ｙ−３０３２２のものであることを特徴とする、Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ。
【請求項１２１】
Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅであって、Ｄ−アラビノノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＡＬＯ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されており、菌株ＮＲＲＬ Ｙ−３０３２１および菌株ＮＲＲＬ Ｙ−３０３２７からなる群から選択されることを特徴とする、Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ。
【請求項１２２】
Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅであって、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＧＬＯ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ。
【請求項１２３】
Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅであって、アルドノラクトナーゼ（ＡＬ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ。
【請求項１２４】
Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅであって、Ｌ−ガラクトノ−１，４−ラクトンデヒドロゲナーゼ（ＡＧＤ）をコードするコード領域およびＬ−ガラクトースデヒドロゲナーゼ（ＬＧＤＨ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ。
【請求項１２５】
Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅであって、Ｄ−アラビノノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＡＬＯ）をコードするコード領域およびＬ−ガラクトースデヒドロゲナーゼ（ＬＧＤＨ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ。
【請求項１２６】
Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅであって、Ｄ−アラビノノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＡＬＯ）をコードするコード領域およびＤ−アラビノースデヒドロゲナーゼ（ＡＲＡ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ。
【請求項１２７】
Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅであって、アルドノラクトナーゼ（ＡＬ）をコードするコード領域およびＬ−グロノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＧＬＯ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｓ． ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ。
【請求項１２８】
Ｚ． ｂａｉｌｉｉであって、Ｌ−ガラクトースデヒドロゲナーゼ（ＬＧＤＨ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｚ． ｂａｉｌｉｉ。
【請求項１２９】
Ｚ． ｂａｉｌｉｉであって、Ｄ−アラビノースデヒドロゲナーゼ（ＡＲＡ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｚ． ｂａｉｌｉｉ。
【請求項１３０】
Ｚ． ｂａｉｌｉｉであって、Ｌ−ガラクトノ−１，４−ラクトンデヒドロゲナーゼ（ＡＧＤ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｚ． ｂａｉｌｉｉ。
【請求項１３１】
Ｚ． ｂａｉｌｉｉであって、Ｄ−アラビノノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＡＬＯ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｚ． ｂａｉｌｉｉ。
【請求項１３２】
Ｚ． ｂａｉｌｉｉであって、Ｌ−グロノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＧＬＯ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｚ． ｂａｉｌｉｉ。
【請求項１３３】
Ｚ． ｂａｉｌｉｉであって、アルドノラクトナーゼ（ＡＬ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｚ． ｂａｉｌｉｉ。
【請求項１３４】
Ｚ． ｂａｉｌｉｉであって、Ｌ−ガラクトノ−１，４−ラクトンデヒドロゲナーゼ（ＡＧＤ）をコードするコード領域およびＬ−ガラクトースデヒドロゲナーゼ（ＬＧＤＨ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｚ． ｂａｉｌｉｉ。
【請求項１３５】
Ｚ． ｂａｉｌｉｉであって、Ｄ−アラビノノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＡＬＯ）をコードするコード領域およびＬ−ガラクトースデヒドロゲナーゼ（ＬＧＤＨ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｚ． ｂａｉｌｉｉ。
【請求項１３６】
Ｚ． ｂａｉｌｉｉであって、Ｄ−アラビノノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＡＬＯ）をコードするコード領域およびＤ−アラビノースデヒドロゲナーゼ（ＡＲＡ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｚ． ｂａｉｌｉｉ。
【請求項１３７】
Ｚ． ｂａｉｌｉｉであって、アルドノラクトナーゼ（ＡＬ）をコードするコード領域およびＬ−グロノ−１，４−ラクトンオキシダーゼ（ＧＬＯ）をコードするコード領域によって機能的に形質転換されていることを特徴とする、Ｚ． ｂａｉｌｉｉ。