(57)【要約】  ４−｛３−［４−（３−｛４−［アミノ（ブトキシカルボニルイミノ）メチル］フェノキシ｝プロピル）−１−ピペリジニル］プロポキシ｝−Ｎ’−（ブトキシカルボニル）ベンズアミジンのII型結晶、III型結晶およびIV型結晶は、優れた抗真菌剤の原薬として有用である。【特許請求の範囲】
【請求項１】
粉末Ｘ線回折パターンにおいて、２θで表される５．８、１８．２、２０．９および２４．７°の回折角度を有する４−｛３−［４−（３−｛４−［アミノ（ブトキシカルボニルイミノ）メチル］フェノキシ｝プロピル）−１−ピペリジニル］プロポキシ｝−Ｎ’−（ブトキシカルボニル）ベンズアミジンの結晶。
【請求項２】
粉末Ｘ線回折パターンにおいて、２θで表される８．７、１２．０、２２．２および２４．３°の回折角度を有する４−｛３−［４−（３−｛４−［アミノ（ブトキシカルボニルイミノ）メチル］フェノキシ｝プロピル）−１−ピペリジニル］プロポキシ｝−Ｎ’−（ブトキシカルボニル）ベンズアミジンの結晶。
【請求項３】
粉末Ｘ線回折パターンにおいて、２θで表される９．８および２３．５°の回折角度を有する４−｛３−［４−（３−｛４−［アミノ（ブトキシカルボニルイミノ）メチル］フェノキシ｝プロピル）−１−ピペリジニル］プロポキシ｝−Ｎ’−（ブトキシカルボニル）ベンズアミジンの結晶。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗真菌剤として開発されている４−｛３−［４−（３−｛４−［アミノ（ブトキシカルボニルイミノ）メチル］フェノキシ｝プロピル）−１−ピペリジニル］プロポキシ｝−Ｎ’−（ブトキシカルボニル）ベンズアミジンの新規な結晶に関する。
【背景技術】
【０００２】
４−｛３−［４−（３−｛４−［アミノ（ブトキシカルボニルイミノ）メチル］フェノキシ｝プロピル）−１−ピペリジニル］プロポキシ｝−Ｎ’−（ブトキシカルボニル）ベンズアミジン（以下、「化合物Ａ」とする。）は、アゾール系薬剤耐性真菌を含む真菌に対して強い活性を有し、経口吸収に優れ、他剤との相互作用が少なく、高い安全性を示し、抗真菌剤として有用である（特許文献１）。
特許文献１に記載されている製造法で製造される化合物Ａの結晶を「I型結晶」とする。【０００３】
【特許文献１】国際公開第２００７／０７４８６８号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
医薬の原薬としてさらに優れた性質、とりわけ、取り扱いが容易な性質を有する化合物Ａの結晶が強く望まれている。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
このような状況下、本発明者らは鋭意研究を行った結果、粉末Ｘ線回折パターンにおいて、２θで表される５．８、１８．２、２０．９および２４．７°の回折角度を有する化合物Ａの結晶（以下、「II型結晶」とする。）、粉末Ｘ線回折パターンにおいて、２θで表される８．７、１２．０、２２．２および２４．３°の回折角度を有する化合物Ａの結晶（以下、「III型結晶」とする。）ならびに粉末Ｘ線回折パターンにおいて、２θで表される９．８および２３．５°の回折角度を有する化合物Ａの結晶（以下、「IV型結晶」とする。）が、（１）嵩密度（タップ密度）が大きく、（２）帯電しにくく、（３）取り扱いが容易で、（４）圧縮成形性が良く、（５）スティッキング傾向が弱く、（６）大量製造が可能であり、医薬の原薬として優れていることを見出し、本発明を完成するに至った。
【発明の効果】
【０００６】
本発明の結晶は、（１）嵩密度（タップ密度）が大きく、（２）帯電しにくく、（３）取り扱いが容易で、（４）圧縮成形性が良く、（５）スティッキング傾向が弱く、（６）大量製造が可能であり、医薬の原薬として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明は、粉末Ｘ線回折パターンにおいて、２θで表される５．８、１８．２、２０．９および２４．７°の回折角度を有するII型結晶、粉末Ｘ線回折パターンにおいて、２θで表される８．７、１２．０、２２．２および２４．３°の回折角度を有するIII型結晶ならびに粉末Ｘ線回折パターンにおいて、２θで表される９．８および２３．５°の回折角度を有するIV型結晶に関する。本発明のこれらの結晶は、これまで全く知られておらず、特許文献１にも一切記載はなく、新規な結晶である。なお、粉末Ｘ線回折による特徴的なピークは、測定条件によって変動することがある。そのため、本発明化合物の粉末Ｘ線回折のピークは、厳密に解されるものではない。【０００８】
本発明化合物の製造法について説明する。
II型結晶は、たとえば、次に示す製造法により製造することができる。【０００９】
［製造法１］
I型結晶を溶媒中、懸濁攪拌することによりII型結晶を製造することができる。
この製造に使用される溶媒としては、メチルエチルケトンおよびメチルイソブチルケトンなどのケトン類；２−プロパノールおよびブタノールなどのアルコール類；酢酸エチルおよび酢酸ブチルなどのエステル類；１，４−ジオキサンなどのエーテル類；ヘプタンおよびシクロヘキサンなどの脂肪族炭化水素類；ジメチルスルホキシドなどのＳ−オキシド類；トルエンなどの芳香族炭化水素類；アセトニトリルなどのニトリル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドおよびＮ−メチルピロリドンなどのアミド類ならびに水などが挙げられる。これらの溶媒は、混合して使用しても良い。
溶媒の使用量は、I型結晶の重量を基準として、1〜100倍量（v/w）が好ましく、5〜10倍量（v/w）がより好ましい。
攪拌温度は、50〜150℃が好ましく、70〜120℃がより好ましい。
攪拌時間は、0.1〜5時間が好ましく、0.5〜3時間がより好ましい。
I型結晶の代わりに後述するIII型結晶またはIV型結晶を使用して、上記の方法によりII型結晶を製造することもできる。【００１０】
III型結晶は、たとえば、次に示す製造法により製造することができる。【００１１】
［製造法２］
I型結晶を含水溶媒中、懸濁攪拌することによりIII型結晶を製造することができる。
この製造に使用される溶媒としては、メチルエチルケトンなどのケトン類；ブタノールなどのアルコール類；酢酸エチルなどのエステル類；テトラヒドロフランなどのエーテル類；トルエンなどの芳香族炭化水素類ならびにクロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類などが挙げられる。これらの溶媒は、混合して使用しても良い。
含水溶媒の使用量は、I型結晶の重量を基準として、1〜100倍量（v/w）が好ましく、2〜10倍量（v/w）がより好ましい。
溶媒と水の比率は、溶媒／水が99／1〜30／70の範囲内が好ましく、90／10〜50／50の範囲内がより好ましい。
攪拌温度は、10〜40℃が好ましく、20〜30℃がより好ましい。
攪拌時間は、0.1時間〜30日間が好ましく、1時間〜14日間がより好ましい。
I型結晶の代わりにII型結晶を使用して、上記の方法によりIII型結晶を製造することもできる。【００１２】
［製造法３］
2009005077.tif 000002
塩基の存在下または不存在下、式［１］の化合物を反応性誘導体と反応させた後、晶析することにより、III型結晶を製造することができる。【００１３】
（１）塩基の存在下または不存在下、式［１］の化合物を反応性誘導体と反応させることにより、化合物Ａを製造することができる。
この反応で使用される溶媒としては、たとえば、メチルエチルケトンなどのケトン類；酢酸エチルなどのエステル類；テトラヒドロフランなどのエーテル類；トルエンなどの芳香族炭化水素類；クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドなどのアミド類ならびに水などが挙げられる。これらの溶媒は、混合して使用しても良い。
反応性誘導体としては、たとえば、ブチル＝クロロホルマート、ブチル＝４−ニトロフェニル＝カルボナートおよびブチル＝１Ｈ−イミダゾール−１−カルボキシラートなどが挙げられる。これらの反応性誘導体は、系内で調製後、単離せずに使用してもよい。
この反応で所望により使用される塩基としては、たとえば、ナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシド、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシドおよびナトリウムｔｅｒｔ−ブトキシドなどの金属アルコキシド類；水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水素化ナトリウムおよび水素化カリウムなどの無機塩類ならびにトリエチルアミン、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデク−７−エン（ＤＢＵ）およびピリジンなどの有機塩基が挙げられる。
反応性誘導体および塩基の使用量は、式［１］の化合物に対して2〜100倍モル、好ましくは2〜10倍モルであればよい。
この反応は、−20〜100℃、好ましくは20〜80℃で1分間〜24時間実施すればよい。この反応は、より好ましくは20〜80℃で1分間〜7時間実施すればよい。【００１４】
（２）反応終了後、製造された化合物Ａは、反応混合物から通常の方法で抽出される。
抽出に使用される溶媒としては、たとえば、メチルエチルケトンなどのケトン類；酢酸エチルなどのエステル類；テトラヒドロフランなどのエーテル類；トルエンなどの芳香族炭化水素類ならびにクロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類などが挙げられる。これらの溶媒は、混合して使用しても良い。
抽出の温度は、特に限定されないが、50〜80℃が好ましい。【００１５】
（３）抽出液にIII型結晶の種晶を添加した後、晶出を行うことにより、III型結晶を製造することができる。
晶析の条件は、12〜24時間を要して50〜80℃から0〜10℃まで冷却することが好ましい。【００１６】
IV型結晶は、たとえば、次に示す製造法により製造することができる。【００１７】
［製造法４］
II型結晶を溶媒中、懸濁攪拌することによりIV型結晶を製造することができる。
この製造に使用される溶媒としては、アセトンなどのケトン類などが挙げられる。
溶媒の使用量は、II型結晶の重量を基準として、1〜100倍量（v/w）が好ましく、2〜30倍量（v/w）がより好ましい。
攪拌温度は、0〜10℃が好ましい。
攪拌時間は、1〜30日間が好ましく、7〜30日間がより好ましい。【００１８】
本発明化合物（II型結晶、III型結晶およびIV型結晶）は、医薬として用いられる場合、単独または混合して用いられることができる。
本発明化合物を医薬として用いる場合、通常、製剤化に使用される賦形剤、担体および希釈剤などの製剤補助剤を適宜混合してもよく、これらは常法にしたがって、錠剤、カプセル剤、散剤、シロップ剤、顆粒剤、丸剤、懸濁剤、乳剤、液剤、粉体製剤、坐剤、点眼剤、点鼻剤、点耳剤、貼付剤、軟膏剤または注射剤などの形態で経口または非経口で投与することができる。また、投与方法、投与量および投与回数は、患者の年齢、体重および症状に応じて適宜選択することができる。通常、成人に対しては、経口または非経口（たとえば、注射、点滴および直腸部位への投与など）投与により、１日、0.01〜1000mg／kgを１回から数回に分割して投与すればよい。【００１９】
次に、本発明化合物の有用性を以下の試験例で説明する。
被験物質として、本発明化合物（II型結晶、III型結晶およびIV型結晶）およびI型結晶を用いた。【００２０】
試験例１  嵩密度（タップ密度）
篩（18メッシュ）を通した被験物質をメスシリンダーに充填し、充填された被験物質の重量W(g)を測定した。次いで、被験物質が充填されたメスシリンダーを粉体特性測定装置（パウダーテスターＰＴ−Ｅ、ホソカワミクロン株式会社）にて180回タップし、タップ後の嵩体積V1(mL)を測定した。以下の式により、嵩密度（タップ密度）(g/mL)を算出した。結果を表１に示す。
嵩密度（タップ密度）（g/mL）＝W／V1【００２１】
【表１】
2009005077.tif 000003
【００２２】
本発明化合物の嵩密度（タップ密度）は、I型結晶より大きかった。【００２３】
試験例２  表面電位
本試験は、恒温恒湿槽内（25℃、50％RH）で実施した。
被験物質をサンプルプレート（ＳＵＳ３０４、表面をバフ４００で研磨、容積：約6mL、深さ：3mm、円筒状、上面が開放）に入れ、加電装置からのコロナ放電（コロナ電圧：−4kV）で2分間チャージした（加電装置とサンプルプレートの距離：30mm）。チャージ終了後、被験物質の表面電位を測定した（センサーからサンプルまでの距離：5mm）。結果を表２に示す。
恒温恒湿槽：KCL-2000、EYELA社
表面電位測定装置：SK-200、キーエンス社
加電装置：SJ-G036、キーエンス社
データロガー：AD−DIO  CardBus、インタフェイス社【００２４】
【表２】
2009005077.tif 000004
【００２５】
本発明化合物の表面電位は、I型結晶より小さく、静電気を帯びにくかった。【００２６】
試験例３  スティッキング性試験
圧縮成形性測定装置（タブフレックスＴＡＢ−１０、岡田精工株式会社）にて被験物質200mgを含有する錠剤（平型、直径8.5mm）を製造した（荷重圧力：10kN）。次いで、錠剤がスクレーパーにて押し出されるときのスクレーパー荷重を測定した。結果を表３に示す。【００２７】
【表３】
2009005077.tif 000005
【００２８】
本発明化合物の錠剤のスクレーパー荷重は、I型結晶より小さかった。本発明化合物は、I型結晶に比べて、スティッキング障害（粉体の金属付着による打錠障害）を引き起こしにくい性質であることが示唆された。【００２９】
試験例４  金属カップへの付着性試験
篩（18メッシュ）を通した被験物質5gを金属カップ（ＳＵＳ３０４、内径：65mm、容積：約200mL）に入れた後、カップを反転して被験物質を除いた。カップ内に付着した被験物質の重量を測定した。結果を表４に示す。【００３０】
【表４】
2009005077.tif 000006
【００３１】
本発明化合物の付着量は、I型結晶より少なかった。本発明化合物は、金属カップへ付着しにくい性質であることが示唆された。【００３２】
試験例５  圧縮成形性試験
圧縮成形性測定装置（タブフレックスＴＡＢ−１０、岡田精工株式会社）にて被験物質200mgを含有する錠剤（平型、直径：8.5mm）を製造した（荷重圧力：5および10kN）。次いで、錠剤の破壊強度を錠剤硬度計（ＰＣ−３０、岡田精工株式会社）にて測定した。結果を表５に示す。【００３３】
【表５】
2009005077.tif 000007
【００３４】
I型結晶の錠剤の硬度は、荷重圧力を増加させても変化しなかった。一方、本発明化合物の錠剤の硬度は、I型結晶より大きかった。また、荷重圧力を増加することによって、本発明化合物の錠剤の硬度は、上昇した。本発明化合物の錠剤の圧縮成形性は、I型結晶よりも優れていた。【００３５】
試験例６  マウスにおけるカンジダ感染モデル試験（経口投与）
35℃で一夜培養したサブローデキストロース寒天培地（SDA）平板上のカンジダ・アルビカンス（Candida albicans）TIMM1623を滅菌生理食塩液に懸濁し、希釈して接種菌液を作製した。
雄性マウス（4週齢、1群5匹）を一過的な易感染状態にするため、感染4日前にシクロフォスファミド200mg/kgおよび感染翌日に100mg/kgを腹腔内投与した。調製したカンジダ・アルビカンスTIMM1623の接種菌液0.2mLをマウスの尾静脈に接種し、感染を惹起した（約3×104CFU/マウス）。被験物質を0.1mol/L塩酸に溶解後、滅菌水にて希釈し、マウスの体重当たり1mg/kg換算にて経口投与した。治療は、感染2時間後から開始し、1日1回４日間行った。被験物質非投与群には同量の滅菌生理食塩液を投与した。マウスの生存匹数を感染後14日間観察し、記録した。
その結果、被験物質非投与群ではマウスは全例死亡した。一方、参考例１、実施例１、実施例２および実施例４の化合物投与群は、80％以上のマウスが生存した。
参考例１、実施例１、実施例２および実施例４の化合物は、優れた治療効果を示した。【００３６】
次に、本発明を参考例および実施例を挙げて説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。【００３７】
粉末Ｘ線回折の測定条件
対陰極：Ｃｕ、管電圧：４０ｋV、管電流：４０ｍＡ
赤外吸収スペクトルには、結晶を識別する上で有用なピークの値を記載した。【００３８】
参考例1（I型結晶の製造、特許文献１、実施例３−２）
ブチル＝４−ニトロフェニル＝カルボナート1.82gのＮ、Ｎ−ジメチルホルムアミド15mL溶液に室温で４−{３−[４−（３−{４−[アミノ（イミノ）メチル]フェノキシ}プロピル）−１−ピペリジニル]プロポキシ}ベンズアミジン1.50gを加え、同温度で2時間攪拌した。反応混合物にクロロホルムおよび水を加えた。有機層を分取し、5％炭酸カリウム水溶液2回および飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で溶媒を留去した。得られた残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー[溶離液；クロロホルム：メタノール＝４：１]で精製した。得られた固体をクロロホルムに溶解し、5％炭酸カリウム水溶液2回および飽和塩化ナトリウム水溶液で順次洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧下で溶媒を留去し、白色固体の４−{３−[４−（３−{４−[アミノ（ブトキシカルボニルイミノ）メチル]フェノキシ}プロピル）−１−ピペリジニル]プロポキシ}−Ｎ’−（ブトキシカルボニル）ベンズアミジンのI型結晶1.39gを得た。
1H-NMR(CDCl3)δ値：0.95(6H,t,J=7.3Hz),1.20-1.50(9H,m),1.60-2.05(12H,m),2.45-2.54(2H,m),2.90-3.00(2H,m),3.99(2H,t,J=6.6Hz),4.06(2H,t,J=6.3Hz),4.16(4H,t,J=6.8Hz),6.88-6.96(4H,m),7.82-7.88(4H,m).
粉末Ｘ線回折データを表６、パターンを図1に示す。
ＩＲ（ＡＴＲ）：1075,1026cm-1【００３９】
【表６】
2009005077.tif 000008
【００４０】
実施例１  II型結晶の製造
I型結晶163gを酢酸エチル1630mLに加え、還流下、30分間撹拌した。反応混合液を60〜65℃に冷却後、同温度で30分間撹拌し、固形物を濾取、風乾し、II型結晶139gを得た。
粉末Ｘ線回折データを表７、パターンを図２に示す。
ＩＲ（ＡＴＲ）：1071,1048cm-1【００４１】
【表７】
2009005077.tif 000009
【００４２】
実施例２  III型結晶の製造
I型結晶87.2gにメチルエチルケトン435mLおよび水435mLを加え、室温で24時間撹拌した。固形物を濾取、風乾し、III型結晶69.8gを得た。
粉末Ｘ線回折データを表８、パターンを図３に示す。
ＩＲ（ＡＴＲ）：1072,1054,1018cm-1【００４３】
【表８】
2009005077.tif 000010
【００４４】
実施例３  III型結晶の製造
イミダゾール231gのメチルエチルケトン1800mL溶液に室温でブチル＝クロロホルマート232gを加え、同温度で一晩放置した。反応混合物に水1440mL、４−{３−[４−（３−{４−[アミノ（イミノ）メチル]フェノキシ}プロピル）−１−ピペリジニル]プロポキシ}ベンズアミジン３塩酸塩５水和物360gおよび酢酸エチル360mLを加え、還流下、3時間撹拌した。60〜70℃で有機層を分取し、水洗後、メチルエチルケトン720mLを加え、60〜70℃で不溶物を濾去し、濾滓をメチルエチルケトン720mLで洗浄した。濾液と洗液を合わせ、加熱溶解した後、40〜45℃でIII型結晶の種晶を加え、同温度で2時間撹拌した。5℃まで14時間を要して撹拌後、固形物を濾取し、III型結晶333gを得た。
ＩＲおよび粉末Ｘ線回折のパターンは、実施例２の値と一致した。【００４５】
実施例４  IV型結晶の製造
II型結晶0.20gにアセトン4mLを加え、5〜10℃で1週間撹拌した。固形物を濾取、風乾し、IV型結晶0.17gを得た。
粉末Ｘ線回折データを表９、パターンを図４に示す。
ＩＲ（ＡＴＲ）：1094,1070,1056,1019cm-1【００４６】
【表９】
2009005077.tif 000011
【図面の簡単な説明】
【００４７】
【図１】I型結晶の粉末Ｘ線回折パターン
【図２】II型結晶の粉末Ｘ線回折パターン
【図３】III型結晶の粉末Ｘ線回折パターン
【図４】IV型結晶の粉末Ｘ線回折パターン
【産業上の利用可能性】
【００４８】
本発明の結晶は、（１）嵩密度（タップ密度）が大きく、（２）帯電しにくく、（３）取り扱いが容易で、（４）圧縮成形性が良く、（５）スティッキング傾向が弱く、（６）大量製造が可能であり、医薬の原薬として有用である。
【図１】
2009005077.tif 000012
【図２】
2009005077.tif 000013
【図３】
2009005077.tif 000014
【図４】
2009005077.tif 000015
【国際調査報告】
2009005077.tif 000016
2009005077.tif 000017