【手続補正書】
【提出日】平成17年1月7日(2005.1.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】培養組織の品質管理方法及び製造方法
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
インビトロで培養された三次元構造を有する培養組織の硬さ情報を測定し、該測定結果に基づいて前記培養組織の移植適性を判定する培養組織の品質管理方法。
【請求項２】
前記培養組織の硬さ情報を、予備実験により予め決定しておいた適性範囲と比較することによって、前記培養組織の移植適性を判定する請求項１に記載の培養組織の品質管理方法。
【請求項３】
前記培養組織の硬さ情報に基づいて培養組織の基質産生量を測定し、該産生基質量に基づいて前記培養組織の移植適性を判定する請求項１または請求項２に記載の培養組織の品質管理方法。
【請求項４】
接触部、該接触部に連結された振動子及び該振動子の振動を検出する振動検出部を備えた検出部と、該振動検出部からの検出結果に基づいた硬さ情報を算出する算出手段と、を有する硬さ測定装置を使用し、前記培養組織に前記接触部を接触させて該培養組織の硬さを測定して移植適正を判定する請求項１乃至請求項３のいずれかに記載の培養組織の品質管理方法。
【請求項５】
前記検出部が、前記接触部に加えられる荷重を検出する荷重検出部を更に備え、前記振動検出部により検出された振動子の振動と前記荷重検出部により検出された荷重との関係に基づいて前記培養組織の硬さを測定して移植適正を判定することを特徴とする請求項４に記載の培養組織の品質管理方法。
【請求項６】
前記検出部が、前記接触部の基準位置からの変位量を検出する変位量検出部を更に備え、前記振動検出部により検出された振動子の振動と前記変位量検出部により検出された変位量との関係に基づいて前記培養組織の硬さを測定して移植適正を判定することを特徴とする請求項４に記載の培養組織の品質管理方法。
【請求項７】
前記培養組織は、三次元構造を有する組織再生用基材に細胞を播種・培養することによって作製されることを特徴とする請求項１乃至６のいずれかに記載の培養組織の品質管理方法。
【請求項８】
前記培養組織とは別に、前記細胞を播種しない状態の組織再生用基材単体の硬さを測定し、この硬さ情報を基準硬さ情報とし、該基準硬さ情報と前記培養組織の硬さ情報とを比較することに基づいて移植適性を判定する請求項７に記載の培養組織の品質管理方法。
【請求項９】
前記組織再生用基材はコラーゲン、ゼラチン、ヒアルロン酸、フィブロネクチン、フィブリン、キチン、キトサン、ラミニン、デルマタン硫酸、ヘパラン硫酸、コンドロイチン硫酸、アルギン酸カルシウム、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、ポリグリコール酸、ポリ乳酸及びポリロタキサンのいずれか１つを含むことを特徴とする請求項７または請求項８に記載の培養組織の品質管理方法。
【請求項１０】
前記培養組織の源となる細胞としては軟骨細胞、骨芽細胞、線維芽細胞、内皮細胞、上皮細胞、筋芽細胞、脂肪細胞、肝細胞、神経細胞またはこれらの前駆細胞の少なくとも１つであることを特徴とする請求項１乃至請求項９のいずれかに記載の培養組織の品質管理方法。
【請求項１１】
インビトロで培養される培養組織の硬さ情報を培養開始から所定の時間後に測定して、測定後の前記培養組織の硬さ情報の時間的変化を予測し、該予測結果に基づいて前記培養組織の培養条件を制御することを特徴とする培養組織の品質管理方法。
【請求項１２】
前記予測結果から得られる硬さ情報に基づいて移植適正判定をおこない、該移植適正の判定結果に基づいて前記培養組織の培養条件を制御する請求項１１に記載の培養組織の品質管理方法。
【請求項１３】
前記測定が、接触部、該接触部に連結された振動子及び該振動子の振動を検出する振動検出部とを備えた検出部と、該振動検出部からの検出結果に基づいた硬さ情報を算出する手段と、を有する硬さ測定装置を使用することを特徴とする請求項１１に記載の培養組織の品質管理方法。
【請求項１４】
請求項１乃至１３のいずれかの品質管理方法を含む培養組織の製造方法。
【請求項１５】
請求項１４の製造方法により作製された培養組織。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、インビトロで培養された培養組織の品質管理方法及び、移植適正を有する培養組織の製造方法に関する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
本発明は、上記従来技術を鑑み、培養組織を破壊することなく培養組織の移植適正を容易に判定して、培養組織の品質を容易に且つ適切に管理可能な品質管理方法、及び確実に且つ容易に製造できる製造方法を提供することを技術課題とする。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
【課題を解決するための手段】
前記技術的課題を解決するための本発明は、（１）インビトロで培養された三次元構造を有する培養組織の硬さ情報を測定し、該測定結果に基づいて前記培養組織の移植適性を判定する培養組織の品質管理方法、
（２）前記培養組織の硬さ情報を、予備実験により予め決定しておいた適性範囲と比較することによって、前記培養組織の移植適性を判定する（１）に記載の培養組織の品質管理方法、
（３）前記培養組織の硬さ情報に基づいて培養組織の基質産生量を測定し、該産生基質量に基づいて前記培養組織の移植適性を判定する（１）または（２）に記載の培養組織の品質管理方法、
（４）接触部、該接触部に連結された振動子及び該振動子の振動を検出する振動検出部を備えた検出部と、該振動検出部からの検出結果に基づいた硬さ情報を算出する算出手段と、を有する硬さ測定装置を使用し、前記培養組織に前記接触部を接触させて該培養組織の硬さを測定して移植適正を判定する（１）乃至（３）のいずれかに記載の培養組織の品質管理方法、
（５）前記検出部が、前記接触部に加えられる荷重を検出する荷重検出部を更に備え、前記振動検出部により検出された振動子の振動と前記荷重検出部により検出された荷重との関係に基づいて前記培養組織の硬さを測定して移植適正を判定することを特徴とする（４）に記載の培養組織の品質管理方法、
（６）前記検出部が、前記接触部の基準位置からの変位量を検出する変位量検出部を更に備え、前記振動検出部により検出された振動子の振動と前記変位量検出部により検出された変位量との関係に基づいて前記培養組織の硬さを測定して移植適正を判定することを特徴とする（４）に記載の培養組織の品質管理方法、
（７）前記培養組織は、三次元構造を有する組織再生用基材に細胞を播種・培養することによって作製されることを特徴とする（１）乃至（６）のいずれかに記載の培養組織の品質管理方法、
（８）前記培養組織とは別に、前記細胞を播種しない状態の組織再生用基材単体の硬さを測定し、この硬さ情報を基準硬さ情報とし、該基準硬さ情報と前記培養組織の硬さ情報とを比較することに基づいて移植適性を判定する（７）に記載の培養組織の品質管理方法、
（９）前記組織再生用基材はコラーゲン、ゼラチン、ヒアルロン酸、フィブロネクチン、フィブリン、キチン、キトサン、ラミニン、デルマタン硫酸、ヘパラン硫酸、コンドロイチン硫酸、アルギン酸カルシウム、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、ポリグリコール酸、ポリ乳酸及びポリロタキサンのいずれか１つを含むことを特徴とする（７）または（８）に記載の培養組織の品質管理方法、
（１０）前記培養組織の源となる細胞としては軟骨細胞、骨芽細胞、線維芽細胞、内皮細胞、上皮細胞、筋芽細胞、脂肪細胞、肝細胞、神経細胞またはこれらの前駆細胞の少なくとも１つであることを特徴とする（１）乃至（９）のいずれかに記載の培養組織の品質管理方法、
（１１）インビトロで培養される培養組織の硬さ情報を培養開始から所定の時間後に測定して、測定後の前記培養組織の硬さ情報の時間的変化を予測し、該予測結果に基づいて前記培養組織の培養条件を制御することを特徴とする培養組織の品質管理方法、
（１２）前記予測結果から得られる硬さ情報に基づいて移植適正判定をおこない、該移植適正の判定結果に基づいて前記培養組織の培養条件を制御する（１１）に記載の培養組織の品質管理方法、
（１３）前記測定が、接触部、該接触部に連結された振動子及び該振動子の振動を検出する振動検出部とを備えた検出部と、該振動検出部からの検出結果に基づいた硬さ情報を算出する手段と、を有する硬さ測定装置を使用することを特徴とする（１１）に記載の品質意管理方法。
（１４）（１）乃至（１３）のいずれかの品質管理方法を含む培養組織の製造方法、および、
（１５）（１４）の製造方法により作製された培養組織である。
前記（４）の品質管理方法における培養組織の硬さ測定方法は、インビトロで培養された培養組織の移植適正を判定するために、接触部、該接触部に連結された振動子及び該振動子の振動を検出する振動検出器を備えた検出部と、該振動検出部からの検出結果に基づいた硬さ情報を算出する算出手段と、を有する硬さ測定装置を使用し、前記培養組織に前記接触部を接触させて該培養組織の硬さを測定することを特徴としている。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
前記（５）の品質管理方法における硬さ測定方法は、前記（４）の硬さ測定方法において、前記検出部が、前記接触部に加えられる荷重を検出する加重検出部を更に備え、前記振動検出部により検出された振動子の振動と前記荷重検出部により検出された荷重との関係に基づいて前記培養細胞の硬さを測定することを特徴としている。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
前記（６）の品質管理方法における硬さ測定方法は、前記（４）の硬さ測定方法において、前記検出部が、前記接触部の基準位置から変異量を検出する変位量検出部を更に備え、前記振動検出部により検出された振動子の振動と前記変位量検出部により検出された変位量との関係に基づいて前記培養組織の硬さを測定することを特徴としている。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
前記（８）の品質管理方法における硬さ測定方法は、上記硬さ測定方法において、前記培養組織が三次元構造を有する組織再生用基材に播種・培養された細胞及び該細胞から産生された産生基質のいずれか１つを有し、前記細胞を播種しない状態の組織再生用基材のみの硬さ、あるいは前記細胞播取直後の培養組織の硬さを予め測定し、その硬さ情報を基準硬さ情報とし、該基準硬さ情報と前記培養組織の硬さ情報とを比較することを特徴としている。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
上記培養組織の品質管理方法における前記組織再生用基材は、コラーゲン、ゼラチン、ヒアルロン酸、フィブロネクチン、フィブリン、キチン、キトサン、ラミニン、デルマタン硫酸、ヘパラン硫酸、コンドロイチン硫酸、アルギン酸カルシウム、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、ポリグリコール酸、ポリ乳酸及びポリロタキサンのいずれか１つを含むものであることができる。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
また、これらの上記培養組織の品質管理方法における前記細胞は、軟骨細胞、骨芽細胞、線維芽細胞、内皮細胞、上皮細胞、筋芽細胞、脂肪細胞、肝細胞、神経細胞またはこれらの前駆細胞の少なくとも１つであることができる。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
本発明の培養組織の品質管理方法は、前記（４）乃至（６）における硬さ測定方法のいずれかを使用することによって、培養組織の移植適正の判定を、培養組織を破壊することなく測定された硬さに基づいて客観的にかつ適切に判定することができる。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
前記（１１）の培養組織の品質管理方法は、インビトロで培養される培養組織の硬さを培養開始から所定時間後に測定して、測定後の前記培養組織の時間的変化を予測し、該予測結果に基づいて前記培養組織の培養条件を制御することを特徴とする。
【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
前記（１３）の培養組織の品質管理方法は、上記品質管理方法において、前記測定が、接触部、該接触部に連結された振動子及び該振動子の振動を検出する振動検出部とを備えた検出部と、該振動検出部からの検出結果に基づいた硬さ情報を算出する算出手段と、を有する硬さ測定装置を使用することを特徴としている。
【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
本発明は、前記（１）乃至（１３）のいずれかの品質管理方法を含む培養組織の製造方法を含む。
この培養組織の製造方法によれば、硬さを測定しながら培養するので、培養組織の硬さを指標として移植適正を判定しながら、培養組織を培養することができる。これにより、移植に適切な培養組織を確実に製造することができる。
【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
殊に、前記（１１）乃至（１３）のいずれかの品質管理方法を含む培養組織の製造方法は、インビトロで培養される培養組織の硬さを、移植適性を判定するために、培養開始から所定時間後に測定して測定後の前記培養組織の時間的変化を予測し、該予測結果に基づいて前記培養組織の培養条件を制御して、培養組織を製造することを特徴としている。
この培養組織製造方法によれば、培養組織の硬さに基づいて制御された培養条件下で培養組織を製造する。これにより、移植適性を有する培養組織を培養状態を調整しながら容易に且つ確実に製造することができる。