【手続補正書】
【提出日】平成16年10月26日(2004.10.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ａ）スプレー電圧：４．７ｋＶ；キャピラリー温度：２５０℃；キャピラリー電圧：９Ｖ
；注入様式５μｌ／分のエレクトロスプレー条件下にて、Ｔｈｅｒｍｏｆｉｎｎｉｇａｎ
ＬＣＱデカ装置上でアセトニトリル：水  ５０：５０中の０．０１ｍｇ／ｍｌ溶液から
記録される６４４ｍ／ｚにモノプロトン化イオンを与える質量スペクトル
Ｂ）３３５６；２９５６；２８５５；２２５６；２１２８；１６６３；１５９６；１４５
５；１３７８；１３４５；１１２３；１０５０；１０２６；１００２；８２５；７６４の
主バンド（ｃｍ-1）を示すＩＦＳ−４８フーリエ変換分光計を用いてヌジョールとして記録される赤外スペクトル（図２）
Ｃ）ＤＭＳＯ−ｄ6およびトリフルオロ酢酸（数滴）中にて２５℃で６００ＭＨｚで記録される以下の1Ｈシグナル：
【表１】
2005510573.tif 000001
を示す1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（図３）
Ｄ）ＤＭＳＯ−ｄ6およびトリフルオロ酢酸（数滴）中にて２５℃において１５０ＭＨｚで記録される以下の13Ｃシグナル
【表２】
2005510573.tif 000002
を示す13Ｃ−ＮＭＲスペクトル（図４）
Ｅ）"Ａｌｔｉｍａ"ＲＰ１８、５μｍ、２５０×４．６ｍｍ  ｉ．ｄカラムを備えた分析用ＨＰＬＣ  島津ＬＣ１０−ＡＳ；１ｍｌ／分流速、ギ酸の添加によりｐＨ４．５とした４０ｍＭ  ギ酸アンモニウムバッファーを用いて行うイソクラティック溶出；２３０ｎｍでのＵＶ検出を使用することにより測定される保持時間１４．１分
Ｆ）酸および塩基性官能基を有し；
Ｇ）モラクセーラ  カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）の成
長を阻害し；大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）および枯草菌（Ｂａｃｉｌｌ
ｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）が最少培地で培養された時に、これらバクテリアの成長を阻害
し；肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対してわず
かな活性を示し；カンジダ  アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ）の成長
を阻害しない、；
という特性を有する抗生物質ＧＥ８１１１２ファクターＡまたは酸もしくは塩基と該ファクターＡとの塩。
【請求項２】
ストレプトミセス種（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）ＤＳＭＺ１４３８６を、炭
素、窒素および無機塩の同化可能な供給源を含んでなる水性栄養培地中で好気的条件下で
培養することにより得られる、請求項１に記載の抗生物質ＧＥ８１１１２ファクターＡ。
【請求項３】
Ａ）スプレー電圧：４．７ｋＶ；キャピラリー温度：２５０℃；キャピラリー電圧：９Ｖ
；注入様式５μｌ／分のエレクトロスプレー条件下にて、Ｔｈｅｒｍｏｆｉｎｎｉｇａｎ
ＬＣＱデカ装置上でアセトニトリル：水  ５０：５０中の０．０１ｍｇ／ｍｌ溶液から
記録される６５９ｍ／ｚにモノプロトン化イオンを与える質量スペクトル
Ｂ）３３５９；２９５８；２８５２；２２５８；２１２９；１６８１；１５９１；１４５
０；１３８５；１３４７；１１２２；１０７２；１０２５；９９８；７６５の主バンド（
ｃｍ-1）を示すＩＦＳ−４８フーリエ変換分光計を用いて記録されるＫＢｒ中での赤外スペクトル（図６）
Ｃ）ＤＭＳＯ−ｄ6およびトリフルオロ酢酸（数滴）中にて２５℃で６００ＭＨｚで記録
される以下の1Ｈシグナル：
【表３】
2005510573.tif 000003
を示す1Ｈ−ＮＭＲスペクトル（図７）
Ｄ）ＤＭＳＯ−ｄ６およびトリフルオロ酢酸（数滴）中にて２５℃で１５０ＭＨｚで記録
される以下の13Ｃシグナル
【表４】
2005510573.tif 000004
を示す13Ｃ−ＮＭＲスペクトル（図８）
Ｅ）"Ａｌｔｉｍａ"ＲＰ１８、５μｍ、２５０×４．６ｍｍ  ｉ．ｄカラムを備えた分析用ＨＰＬＣ  島津ＬＣ１０−ＡＳ；１ｍｌ／分流速、ギ酸の添加によりｐＨ４．５とした４０ｍＭ  ギ酸アンモニウムバッファーを用いて行うイソクラティック溶出；２３０ｎｍでのＵＶ検出を使用することにより測定される保持時間２１．６分
Ｆ）酸および塩基性官能基を有し；
Ｇ）モラクセーラ  カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）の成
長を阻害し；大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）および枯草菌（Ｂａｃｉｌｌ
ｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）が最少培地で培養された時に、これらバクテリアの成長を阻害
し；肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対してわず
かな活性を示し；カンジダ  アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ）の成長
を阻害しない、
という特性を有する抗生物質ＧＥ８１１１２ファクターＢまたは酸もしくは塩基と該ファクターＢとの塩。
【請求項４】
ストレプトミセス種（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）ＤＳＭＺ１４３８６を、炭
素、窒素および無機塩の同化可能な供給源を含んでなる水性栄養培地中で好気的条件下で
培養することにより得られる、請求項３に記載の抗生物質ＧＥ８１１１２ファクターＢ。
【請求項５】
Ａ）スプレー電圧：４７ｋＶ；キャピラリー温度：２５０℃；キャピラリー電圧：９Ｖ；
注入様式５ｌ／分のエレクトロスプレー条件下にて、Ｔｈｅｒｍｏｆｉｎｎｉｇａｎ  Ｌ
ＣＱデカ装置上でアセトニトリル：水  ５０：５０中の０．０１ｍｇ／ｍｌ溶液から記録
される６５８ｍ／ｚにモノプロトン化イオンを与える質量スペクトル
Ｂ）ＤＭＳＯ−ｄ6中にて２５℃で６００ＭＨで記録される以下の1Ｈシグナル：
【表５】
2005510573.tif 000005
を示すＨ−ＮＭＲスペクトル（図１０）
Ｃ）ＤＭＳＯ−ｄ6中にて２５℃で１５０ＭＨｚで記録される以下の13Ｃシグナル：
【表６】
2005510573.tif 000006
を示す13Ｃ−ＮＭＲスペクトル（図１１）
Ｄ）"Ａｌｔｉｍａ"ＲＰ１８、５μｍ、２５０×４．６ｍｍ  ｉ．ｄカラムを備えた分析用ＨＰＬＣ  島津ＬＣ１０−ＡＳ；１ｍｌ／分流速、ギ酸の添加によりｐＨ４．５とした４０ｍＭ  ギ酸アンモニウムバッファーを用いて行うイソクラティック溶出；２３０ｎｍでのＵＶ検出を使用することにより測定される保持時間１８．４分、
Ｅ）酸および塩基性官能基を有し；
Ｆ）モラクセーラ  カタラーリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）の成
長を阻害し；大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）および枯草菌（Ｂａｃｉｌｌ
ｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）が最少培地で培養された時に、これらバクテリアの成長を阻害
し；肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）に対してわず
かな活性を示し；カンジダ  アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ）の成長
を阻害しない、
という特性を有する抗生物質ＧＥ８１１１２ファクターＢ１または酸もしくは塩基と該ァクターＢ１との塩。
【請求項６】
ストレプトミセス種（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）ＤＳＭＺ１４３８６を、炭
素、窒素および無機塩の同化可能な供給源を含んでなる水性栄養培地中で好気的条件下で
培養することにより得られる、請求項５に記載の抗生物質ＧＥ８１１１２ファクターＢ１
。
【請求項７】
請求項１ないし６のいずれかに記載のＧＥ８１１１２抗生物質を生産する方法であって
；
−炭素、窒素および無機塩の同化可能な供給源を含んでなる水性栄養培地中で好気的条件
下で、ストレプトミセス種（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）ＤＳＭＺ１４３８６ま
たはＧＥ８１１１２抗生物質を生産する遺伝的能力を維持しているその変種もしくは突然
変異体を培養し；
−生成した抗生物質混合物を発酵ブロスから回収し；
−回収した抗生物質混合物を精製し、そして３種の抗生物質ＧＥ８１１１２ファクターＡ
、ＢおよびＢ１を分離する、
ことを含んでなる上記生産方法。
【請求項８】
任意の比率の請求項１ないし６に記載の２以上の抗生物質ＧＥ８１１１２ファクターお
よび製薬学的に許容され得るそれらの塩の混合物。
【請求項９】
上記の抗生物質ＧＥ８１１１２ファクター混合物がストレプトミセス種（Ｓｔｒｅｐｔ
ｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）ＤＳＭＺ１４３８６または該ＧＥ８１１１２抗生物質を生産する
遺伝的能力を維持するそのＧＥ８１１１２抗生物質生産変種もしくは突然変異体の発酵ブ
ロスから単離されたものである、請求項８に記載の任意の比率の抗生物質ＧＥ８１１１２
ファクターの混合物。
【請求項１０】
請求項９に記載の抗生物質ＧＥ８１１１２ファクターの混合物を生産する方法であって
：
−ストレプトミセス種（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）ＤＳＭＺ１４３８６または
該ＧＥ８１１１２抗生物質を生産する遺伝的能力を維持しているその変種もしくは突然変
異体を培養し；
−生成したＧＥ８１１１２ファクターの抗生物質混合物を培養ブロスから回収し；そして
−抗生物質ＧＥ８１１１２ファクターの該混合物を精製する、
ことを含んでなる上記生産方法。
【請求項１１】
ストレプトミセス種（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）ＤＳＭＺ１４３８６、また
はＧＥ８１１１２抗生物質を生産する遺伝的能力を維持しているその変種もしくは突然変
異体を前培養する、請求項７および１０のいずれかに記載する方法。
【請求項１２】
回収がイオン交換樹脂で行われ、そして精製が吸着支持体、好ましくはポリスチレンま
たは混合ポリスチレン−ジビニルベンゼン樹脂で行われる、請求項７、１０および１１の
いずれかに記載の方法。
【請求項１３】
抗生物質ＧＥ８１１１２ファクターＡ、ＢおよびＢ１の分離がクロマトグラフィー技法
により行われる、請求項５、７、１０、１１および１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
クロマトグラフィー技法が調製用ＨＰＬＣ技法である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
請求項１ないし６、８および９のいずれかに記載の抗生物質を含んでなる製薬学的組成
物。
【請求項１６】
製薬学的に許容されうる担体を含んでなる請求項１５に記載の製薬学的組成物。
【請求項１７】
バクテリアの感染を処置する薬剤を製造するための請求項１ないし６、８および９のい
ずれかに記載の抗生物質の使用。
【請求項１８】
ストレプトミセス種（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｓｐ．）ＤＳＭＺ１４３８６株の生
物学的に純粋なカルチャー。