(57)【要約】  脂肪細胞が脂肪を蓄積して肥大化するのを抑制でき、かつ副作用の心配がなく安全性が高い上に、簡便に摂取可能かつ長期間の継続的摂取が容易である組成物を提供する。  本発明は、キク科バラモンジン属（Tragopogon）に属する植物およびキク科フタナミソウ属（Scorzonera）に属する植物から選択される少なくとも１種の植物、またはその抽出物を有効成分として含む、脂肪細胞の脂肪蓄積抑制用の組成物、脂肪細胞の小型化促進化用組成物、脂肪細胞の分化抑制用組成物、ならびに肥満および／またはメタボリックシンドロームを予防および／または改善するための組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
キク科バラモンジン属（Tragopogon）に属する植物およびキク科フタナミソウ属（Scorzonera）に属する植物から選択される少なくとも１種の植物、または該植物の抽出物を含有することを特徴とする、脂肪細胞の小型化促進用組成物。
【請求項２】
キク科バラモンジン属（Tragopogon）に属する植物およびキク科フタナミソウ属（Scorzonera）に属する植物から選択される少なくとも１種の植物、または該植物の抽出物を含有することを特徴とする、脂肪細胞の脂肪蓄積抑制用組成物。
【請求項３】
キク科バラモンジン属（Tragopogon）に属する植物およびキク科フタナミソウ属（Scorzonera）に属する植物から選択される少なくとも１種の植物、または該植物の抽出物を含有することを特徴とする、脂肪細胞の分化抑制用組成物。
【請求項４】
キク科バラモンジン属（Tragopogon）に属する植物およびキク科フタナミソウ属（Scorzonera）に属する植物から選択される少なくとも１種の植物、または該植物の抽出物を含有することを特徴とする、肥満を予防および／または改善するための組成物。
【請求項５】
キク科バラモンジン属（Tragopogon）に属する植物およびキク科フタナミソウ属（Scorzonera）に属する植物から選択される少なくとも１種の植物、または該植物の抽出物を含有することを特徴とする、メタボリックシンドロームを予防および／または改善するための組成物。
【請求項６】
キク科バラモンジン属（Tragopogon）に属する植物が、バラモンジン（Tragopogon porrifolius L）およびキバナムギナデシコ（Tragopogon pratensis L.）から選択される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
キク科フタナミソウ属（Scorzonera）に属する植物が、キクゴボウ（Scorzonera hispanica L.）である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、脂肪細胞の小型化促進用組成物、脂肪細胞の脂肪蓄積抑制用組成物、脂肪細胞の分化抑制用組成物、ならびに肥満およびメタボリックシンドロームを予防および／または改善するための組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、虚血性心疾患などの動脈硬化性疾患の発症に関連する、インスリン抵抗性、高脂血症、高血圧などの病態の上流に、内臓脂肪の蓄積が大きく関与することが指摘されている。【０００３】
脂肪細胞が脂肪を蓄積すると、細胞が肥大化するとともに、当該細胞が分泌するアディポサイトカインが変化し、インスリン抵抗性を改善するアディポネクチンの分泌量が低下し、逆にインスリン抵抗性を惹起するＴＮＦ−αや脂肪酸の分泌量が増加する。インスリン抵抗性が亢進すると、耐糖能異常、脂質代謝異常、血圧異常などを合併し、メタボリックシンドロームへ進展するといわれている。さらに、そのまま放置しておくと、糖尿病や動脈硬化へと進展するといわれている。なお、メタボリックシンドロームとは、単なる内蔵脂肪型肥満をさすこともあるが、内臓脂肪の過剰蓄積に加えて、高トリグリセリド血症、低ＨＤＬコレステロール血症、高血圧および高血糖のうちいずれか２つ以上を伴った症状と定義される。【０００４】
したがって、メタボリックシンドロームや、その後発症し得る糖尿病、高血圧、高脂血症、動脈硬化などの疾患を予防および改善するためには、アディポネクチンを正常に分泌し、ＴＮＦ−αや脂肪酸を過剰分泌しないような小型脂肪細胞の比率を増やすことが重要である。医薬品である抗糖尿病薬や高脂血症治療薬は強い小型脂肪細胞の増加作用を有しているが、これらの医薬品には強い副作用があり、継続的な使用には問題がある。そのため、肥大した脂肪細胞を減らし、小型の脂肪細胞を増加させるような作用を有する素材を、日々簡便に、安全な食品として摂取することが重要と考えられる。【０００５】
食品素材としてそのような観点から研究された例として、コショウ科コショウ属に属する南米原産の植物マティコの抽出物が、前駆脂肪細胞から脂肪細胞への分化促進作用および肥大化脂肪細胞から小型脂肪細胞への分化促進作用を有することが報告されている（特許文献１）。また、これまで、種々の物質を有効成分とする痩身剤や糖代謝改善剤などが開発されている。例えば、キク科の植物にα−グルコシダーゼ阻害作用があることが報告され、これらを含有する抗肥満剤が提案されている（特許文献２）。【０００６】
しかしながら、これらの成分の作用は、脂肪の燃焼や糖質の吸収抑制に関するものであり、腸間膜を中心とした内臓脂肪において、脂肪細胞が肥大化してアディポサイトカイン分泌が変化することを直接的に抑制するものではないため、メタボリックシンドロームを改善しないか、改善するとしても長期間を要し、継続が非常に困難であるなどの問題がある。【０００７】
したがって、脂肪細胞への分化を抑制し、小型脂肪細胞が脂肪を蓄積して肥大化脂肪細胞になるのを抑制し得る組成物に対する要望は高い。そして、かかる組成物は、副作用の心配がなく安全性が高い上に、簡便に摂取可能かつ長期間の継続的摂取が容易であることが望ましい。
【特許文献１】特開２００６−２８０４９号公報
【特許文献２】特開２０００−２２９８７５号公報
【発明の開示】
【０００８】
本発明は、脂肪細胞が脂肪を蓄積して肥大化するのを抑制でき、かつ副作用の心配がなく安全性が高い上に、簡便に摂取可能かつ長期間の継続的摂取が容易である組成物を提供することを課題とする。
【０００９】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、キク科バラモンジン属に属する植物やキク科フタナミソウ属に属する植物が、優れた脂肪細胞の脂肪蓄積抑制作用、脂肪細胞の小型化促進作用および脂肪細胞の脂肪滴小型化作用を兼ね備えることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
すなわち、本発明は以下の発明を包含する。
【００１１】
（１）キク科バラモンジン属（Tragopogon）に属する植物およびキク科フタナミソウ属（Scorzonera）に属する植物から選択される少なくとも１種の植物、または該植物の抽出物を含有することを特徴とする、脂肪細胞の小型化促進用組成物。
【００１２】
（２）キク科バラモンジン属（Tragopogon）に属する植物およびキク科フタナミソウ属（Scorzonera）に属する植物から選択される少なくとも１種の植物、または該植物の抽出物を含有することを特徴とする、脂肪細胞の脂肪蓄積抑制用組成物。
【００１３】
（３）キク科バラモンジン属（Tragopogon）に属する植物およびキク科フタナミソウ属（Scorzonera）に属する植物から選択される少なくとも１種の植物、または該植物の抽出物を含有することを特徴とする、脂肪細胞の分化抑制用組成物。
【００１４】
（４）キク科バラモンジン属（Tragopogon）に属する植物およびキク科フタナミソウ属（Scorzonera）に属する植物から選択される少なくとも１種の植物、または該植物の抽出物を含有することを特徴とする、肥満を予防および／または改善するための組成物。
【００１５】
（５）キク科バラモンジン属（Tragopogon）に属する植物およびキク科フタナミソウ属（Scorzonera）に属する植物から選択される少なくとも１種の植物、または該植物の抽出物を含有することを特徴とする、メタボリックシンドロームを予防および／または改善するための組成物。
【００１６】
（６）キク科バラモンジン属（Tragopogon）に属する植物が、バラモンジン（Tragopogon porrifolius L）およびキバナムギナデシコ（Tragopogon pratensis L.）から選択される、（１）〜（５）のいずれかに記載の組成物。
【００１７】
（７）キク科フタナミソウ属（Scorzonera）に属する植物が、キクゴボウ（Scorzonera hispanica L.）である、（１）〜（６）のいずれかに記載の組成物。
【００１８】
本発明により、脂肪細胞が脂肪を蓄積して肥大化するのを抑制でき、かつ副作用の心配がなく安全性が高い上に、簡便に摂取可能かつ長期間の継続的摂取が容易である組成物を提供することができる。
【００１９】
本明細書は、本願の優先権の基礎である特願2007-175339号の特許請求の範囲および明細書に記載された内容を包含する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
本発明は、キク科バラモンジン属（Tragopogon）に属する植物およびキク科フタナミソウ属（Scorzonera）に属する植物から選択される少なくとも１種の植物、またはその抽出物を有効成分として含む、脂肪細胞の小型化促進用組成物、脂肪細胞の脂肪蓄積抑制用組成物、脂肪細胞の分化抑制用組成物、ならびに肥満および／またはメタボリックシンドロームを予防および／または改善するための組成物に関する。以下、これらをまとめて本発明の組成物として記載する。【００２１】
キク科バラモンジン属（Tragopogon）に属する植物としては、例えば、バラモンジン（Tragopogon porrifolius L；別名、サルシファイ、セイヨウゴボウ、ムギナデシコとも呼ばれる）、キバナムギナデシコ（Tragopogon pratensis L.；別名、バラモンギク、キバナノバラモンジンとも呼ばれる）、トラゴポゴン・ドゥビウス（Tragopogon dubius Scop.）およびトラゴポゴン・オリエンタリス（Tragopogon orientalis L）を挙げることができる。これらの中で、バラモンジンおよびキバナムギナデシコが好ましい。【００２２】
キク科フタナミソウ属に属する植物としては、例えば、キクゴボウ（Scorzonera hispanica L.；別名、キバナバラモンジン、ブラックサルシファイとも呼ばれる）、フタナミソウ（Scorzonera rebunensis Tatew. et Kitam.）、ヤナギババラモンジン(Scorzonera albicaulis Bunge)、スコルゾネラ・デリシオサ（Scorzonera deliciosa DC.）、スコルゾネラ・モリス（Scorzonera mollis Bieb.）およびスコルゾネラ・タウサギス（Scorzonera tau-saghyz Lipsch. et Bosse）を挙げることができる。これらの中で、キクゴボウが好ましい。【００２３】
本発明の組成物の調製には、上記のうちの１種の植物を用いてもよく、同じ属に属する複数種の植物を用いてもよく、異なる属に属する複数種の植物を用いてもよい。植物は、全植物体でもよく、花、花柄、茎および葉などの地上部、ならびに種子および根など地下部など各部位でもよい。これらの各部位は、単独で用いてもよく、２種以上を組み合わせて用いてもよい。植物は、植物の破砕物、小片に切断したもの、乾燥物、乾燥させた後で破砕や粉砕したものなどの植物処理物でもよい。また、植物の抽出物を用いることもできる。好ましくは、植物の地上部の抽出物を用いる。本発明の組成物は、植物と植物抽出物の双方を含んでいてもよい。【００２４】
以下、本発明に用いられるキク科バラモンジン属に属する植物およびキク科フタナミソウ属に属する植物の抽出物の製造方法について詳細に説明する。【００２５】
抽出に用いる溶媒は特に制限されないが、好ましくは有機溶媒、具体的には、室温で液体であるアルコール、例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノール等の低級アルコール、および１,３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の多価アルコールなど；ジエチルエーテル、プロピルエーテル等のエーテル；酢酸ブチル、酢酸エチル等のエステル；アセトン、エチルメチルケトン等のケトン；ヘキサン；ならびにクロロホルム等を挙げることができる。これらを単独で用いてもよいし、２種以上を組み合わせて用いてもよい。上記の有機溶媒の中で、操作性や環境への影響の点から、例えば、炭素原子数１〜４の低級アルコールが好ましく、残留溶媒による安全性の観点からはエタノールがより好ましい。【００２６】
抽出に用いる溶媒として、有機溶媒にさらに水性成分が含まれている含水有機溶媒を用いてもよい。抽出効率を高く保持する観点からは、上記含水有機溶媒中の水性成分の含有量は、通常８０体積％以下、好ましくは６５体積％以下、より好ましくは５０体積％以下である。含水有機溶媒としては、好ましくは上記のようなアルコールにさらに水性成分が含まれている含水アルコール、より好ましくは含水エタノールを挙げることができる。【００２７】
抽出操作は、植物、例えば、葉や茎などの地上部をそのまま、またはその処理物、例えば、小片に切断したもの、乾燥物、乾燥して水や熱水を用いて戻したもの、破砕または粉砕などの処理により粉末化したものなどを、上述した抽出溶媒と一緒に用いて行うことができる。具体的な抽出方法としては、植物または上記のような植物処理物を、常圧または加圧下で、室温または加温した溶媒中に加え、浸漬および攪拌しながら抽出する方法、溶媒中で還流しながら抽出する方法などが挙げられる。また、二酸化炭素などを用いる超臨界流体抽出法により抽出操作を実施することもできる。【００２８】
ついで、抽出液および残渣を含む混合物を、必要に応じて濾過または遠心分離などに供し、残渣である固形成分を除去して抽出液を得る。なお、除去した固形成分を再度、抽出操作に供することもでき、さらにこの操作を何回か繰り返してもよい。【００２９】
このようにして得られた抽出液をそのまま抽出物として用いてもよく、さらに必要に応じて、乾燥して粉末化したものを、抽出物として用いてもよい。【００３０】
抽出液を乾燥する具体的な方法は、抽出液に含まれる有効成分が変性や熱分解を起こさない条件下で行いうるのであれば、どのような方法でもよく、例えば、濾過、遠心分離、遠心濾過、濃縮、エバポレーション、スプレードライ、スプレークール、ドラムドライ、真空乾燥、凍結乾燥等の方法が挙げられ、必要に応じて賦形剤を添加して乾燥を行ってもよい。これらの方法は、単独でまたは組み合わせて採用することができる。【００３１】
さらにこの粗抽出物を分配クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、カラムクロマトグラフィー、ＨＰＬＣなどの各種クロマトグラフィーなどで段階的に精製して得られる精製物を用いることもできる。【００３２】
脂肪細胞は、組織間に散在するか、または疎性結合組織の一つとして毛細血管の走行に沿う集団として脂肪組織を形成する多量の脂肪を含む細胞をさし、主に褐色脂肪細胞と白色脂肪細胞に分類され、好ましくは白色脂肪細胞をさす。【００３３】
本発明において、脂肪細胞の小型化促進作用とは、主として、脂肪細胞の肥大化を抑制する作用および／または肥大化脂肪細胞を減少させる作用をさす。脂肪細胞の小型化とは、後述する試験例１の培養条件で、０.１％ＤＭＳＯを用いて培養した３Ｔ３−Ｌ１細胞（マウス線維芽細胞）由来の脂肪細胞に比べて、細胞の大きさ（直径）の平均値が８５％以下、好ましくは８０％以下である場合をさす。【００３４】
脂肪細胞の小型化促進作用は、培養脂肪細胞を用いて、両親媒性の溶媒であるＤＭＳＯに被験物質を溶解して細胞培養液に添加した場合と、被験物質を含まないＤＭＳＯを細胞培養液に添加した場合の間において、培養脂肪細胞の大きさを比較することにより評価することができる。また、脂肪細胞の小型化促進作用は、脂肪細胞の分化抑制作用や、脂肪細胞内の脂肪滴の小型化を見ることによっても評価することができる。脂肪細胞の分化抑制作用の評価方法や脂肪細胞内の脂肪滴の小型化の評価方法については、後述する。【００３５】
脂肪細胞の脂肪蓄積が抑制されると、脂肪細胞が小型化してアディポネクチン分泌が促進される上に、脂肪細胞からの脂肪酸分泌が低下するため、肥満、脂肪蓄積、メタボリックシンドローム、高脂血症、動脈硬化に対して、改善効果が得られる。【００３６】
本発明において、脂肪細胞の脂肪蓄積抑制作用とは、主として脂肪細胞が脂肪を細胞内器官である脂肪滴に蓄積して肥大化するのを抑制する作用をさす。脂肪細胞の脂肪蓄積を抑制することにより、肥大化脂肪細胞を減らし、小型脂肪細胞の数、または肥大化脂肪細胞数に対する小型脂肪細胞の比率を増加させることができる。脂肪細胞の脂肪蓄積抑制作用は、換言すれば、脂肪細胞の肥大化抑制作用、または脂肪細胞の小型化促進作用である。【００３７】
脂肪細胞における脂肪蓄積抑制作用は、脂肪細胞の脂肪含量を測定することにより評価することができる。脂肪細胞の脂肪含量を測定する方法としては、脂肪細胞を顕微鏡で観察し、個々の細胞の細胞質に脂肪が蓄積されて生ずる脂肪滴の多少を目視で判断する方法、脂肪滴の大きさ（直径）と数を測定する方法、細胞内脂質を抽出しトリグリセリドを測定する方法、細胞内の脂肪を酵素分解し生じたグリセロールを定量することにより脂肪含量を測定する方法、または脂肪細胞をオイルレッドＯで染色した後、細胞を溶解し、溶解液中のオイルレッドＯの量を分光光度計等で定量することにより該細胞の脂肪含量を測定する方法など公知の方法を挙げることができる。【００３８】
一実施形態において本発明における脂肪細胞の脂肪蓄積抑制作用および脂肪細胞の小型化促進作用は、脂肪細胞に含まれる脂肪滴の肥大化を抑制すること、換言すれば脂肪細胞の脂肪滴を小型化することに基づくものである。従って、本発明の組成物は、脂肪細胞の脂肪滴小型化用組成物として用いることもできる。脂肪細胞の脂肪滴小型化とは、例えば、後述する試験例１の培養条件で、脂肪細胞に含まれる脂肪滴の大きさ（直径）の平均値が、０.１％ＤＭＳＯを用いて培養した３Ｔ３−Ｌ１細胞（マウス線維芽細胞）由来の脂肪細胞に比べて、６０％以下、好ましくは５５％以下である場合をさす。【００３９】
脂肪細胞の脂肪滴小型化作用は、培養脂肪細胞を用いて、両親媒性の溶媒であるＤＭＳＯに被験物質を溶解して細胞培養液に添加した場合と、被験物質を含まないＤＭＳＯだけを細胞培養液に添加した場合において、培養脂肪細胞内の脂肪滴の大きさを比較することにより評価することができる。また、脂肪細胞の脂肪滴小型化作用は、脂肪細胞の分化を抑制する作用を見ることによっても評価することができる。脂肪細胞の分化抑制作用の評価方法については、後述する。【００４０】
一実施形態において本発明における脂肪細胞の脂肪蓄積抑制作用および脂肪細胞の小型化促進作用は、脂肪細胞の分化抑制に基づくものである。従って、本発明の組成物は、脂肪細胞の分化抑制用組成物として用いることもできる。脂肪細胞の分化抑制とは、未分化の脂肪細胞（前駆脂肪細胞）の脂肪細胞、すなわち成熟脂肪細胞への分化を抑制することをさす。脂肪細胞は間葉系細胞から発生し、脂肪前駆細胞から分化誘導されて形成される。そして、脂肪細胞に脂肪が蓄積されることにより脂肪細胞が肥大化する。従って、脂肪細胞の分化を抑制することは、脂肪細胞の脂肪蓄積抑制および脂肪細胞の肥大化の抑制につながる。【００４１】
脂肪細胞の分化抑制は、細胞分化マーカーであるＧＰＤＨ（グリセロール−３−リン酸脱水素酵素）活性を測定することにより評価することができる。また、酢酸（１４Ｃ−ＣＨ３ＣＯＯＨ）の取り込み活性、グルコース（１４Ｃ−２−デオキシグルコース）取り込み活性を測定する方法で評価することもできる。ｍＲＮＡレベルの検出においては、ａＰ２遺伝子をはじめとした脂肪細胞分化マーカーの検出を行うことによっても評価することが可能である。【００４２】
本発明の組成物は、脂肪細胞に含まれる脂肪滴を小型化し、脂肪細胞が脂肪を蓄積して肥大化するのを抑制し、小型脂肪細胞の比率を増加させるため、脂肪細胞の過剰な脂肪蓄積に起因する疾患もしくは症状、および脂肪細胞の肥大化に起因する疾患もしくは症状を、予防および／または改善するために用いることができる。【００４３】
脂肪細胞の過剰な脂肪蓄積に起因する疾患もしくは症状、および脂肪細胞の肥大化に起因する疾患もしくは症状は、換言すれば、脂肪細胞の脂肪蓄積抑制、脂肪細胞の小型化、脂肪細胞の脂肪滴小型化および／または脂肪細胞の分化抑制により予防および／または改善することができる疾患または症状である。【００４４】
脂肪細胞の過剰な脂肪蓄積に起因する疾患もしくは症状、および脂肪細胞の肥大化に起因する疾患もしくは症状の具体例として、肥満（特に脂質代謝異常を伴う肥満）、メタボリックシンドローム（特に脂質代謝異常を伴うメタボリックシンドローム）、内臓脂肪の蓄積、高脂血症、高トリグリセリド血症、高血圧、冠動脈疾患、閉塞性動脈硬化、脂肪肝、蜂巣炎、脂質代謝異常、脂質蓄積症が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の組成物は、脂肪細胞の脂肪蓄積を抑制し、脂肪細胞の肥大化を直接的に抑制するため、肥満の病態の上流に位置する脂肪細胞に直接作用するものであり、これらの疾患に対して特に有効である。従って、本発明の組成物は、上記疾患または症状のうち、特に、血糖値に関連しない疾患または症状、糖質吸収に関連しない疾患または症状、ならびにα−グルコシダーゼ活性に関連しない疾患または症状の予防および／または改善に特に好適に用いられる。血糖値に関連する疾患または症状、糖質吸収に関連する疾患または症状、ならびにα−グルコシダーゼ活性に関連する疾患または症状としては、例えば、過（高）血糖に由来する肥満、耐糖能異常を伴う肥満、２型糖尿病、脂肪肝、高血圧、糖尿病を伴う肥満、食後高血糖等が挙げられることから、本発明の組成物は、これらの疾患または症状を除く、脂肪細胞の過剰な脂肪蓄積に起因する疾患もしくは症状、および脂肪細胞の肥大化に起因する疾患もしくは症状の予防および／または改善に好適に用いられる。また、脂肪細胞の過剰な脂肪蓄積に起因する疾患もしくは症状、および脂肪細胞の肥大化に起因する疾患もしくは症状のうち、血糖値、糖質吸収またはα−グルコシダーゼ活性に関連しない疾患もしくは症状として、例えば、脂肪細胞の量的異常による肥満、脂質代謝異常による肥満、脂質代謝異常を伴う高トリグリセリド血症、脂質代謝異常を伴う高コレステロール血症、脂質代謝異常を伴う低ＨＤＬコレステロール血症、高トリグリセリド血症を伴うメタボリックシンドローム、高コレステロール血症を伴うメタボリックシンドローム、低ＨＤＬコレステロール血症を伴うメタボリックシンドローム、肥満に伴う脂質代謝異常、肥満に伴う高血圧、脂肪細胞の量的異常による肥満症に伴う睡眠時無呼吸症候群、脂肪細胞の量的異常による肥満症に伴う骨関節疾患、脂肪細胞の量的異常による肥満症に伴う月経異常等が挙げられることから、本発明の組成物は、これらの疾患または症状の予防および／または改善に特に好適に用いられる。【００４５】
本発明において疾患または症状の予防には、発症を抑えることおよび遅延させることが含まれ、再発に対する予防も含まれる。本発明において疾患または症状の改善には、治癒することおよび進行を抑えることが含まれる。【００４６】
本発明の組成物は、前記植物抽出物の乾燥質量を基準として、通常、成人１日当たり０.０１〜５０ｇの範囲内、好ましくは０.０５〜２０ｇの範囲内、さらに好ましくは０.１〜１０ｇの範囲内で摂取される。植物抽出物は安全性の高いものであるため、その摂取量をさらに増やすこともできる。１日当たりの摂取量は、１回で摂取してもよいが、数回に分けて摂取してもよい。【００４７】
本発明の組成物の投与対象は、好ましくは、哺乳動物である。本明細書において哺乳動物は、温血脊椎動物をさし、例えば、ヒトおよびサルなどの霊長類、マウス、ラットおよびウサギなどの齧歯類、イヌおよびネコなどの愛玩動物、ならびにウシ、ウマおよびブタなどの家畜が挙げられる。本発明の組成物は、霊長類、特にヒトへの投与に好適である。【００４８】
本発明の組成物は、特に制限されないが、例えば、医薬組成物、食品組成物および化粧料組成物として調製することができる。【００４９】
本発明の組成物を医薬組成物として調製する場合は、上記植物、その処理物または抽出物をそのまま単独で医薬組成物としてもよいが、通常、上記植物、その処理物または抽出物と好ましくは薬学的に許容される担体とを含む製剤として調製する。医薬組成物は、経口により、非経口により、例えば、皮膚に、皮下に、静脈内に、動脈内に、筋肉内に、腹腔内に、および鼻腔内に投与される。本発明の効果を阻害しない限り、添加剤や、他の公知の脂肪細胞分化抑制剤、脂肪細胞分化促進剤および脂肪蓄積抑制剤などを配合してもよい。【００５０】
本発明の組成物を医薬組成物として調製する場合の剤型としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、ドライシロップ剤、液剤、懸濁剤などの経口剤、吸入剤、坐剤などの経腸製剤、軟膏、クリーム剤、ゲル剤、貼付剤などの皮膚外用剤、点滴剤、注射剤などが挙げられる。これらのうちでは、経口剤が好ましい。【００５１】
このような剤型の医薬組成物は、有効成分である植物、その処理物または抽出物に、慣用される添加剤、例えば、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、界面活性剤、アルコール、水、水溶性高分子、甘味料、矯味剤、酸味料等を剤型に応じて配合し、常法に従って製造することができる。なお、液剤、懸濁剤等の液体製剤は、服用直前に水または他の適当な媒体に溶解または懸濁する形であってもよく、また錠剤、顆粒剤の場合には周知の方法でその表面をコーティングしてもよい。【００５２】
医薬組成物における有効成分の含有量は、その剤型により異なるが、植物抽出物を基準として、乾燥質量に基づいて、通常、０.００１〜９９質量％の範囲内、好ましくは０.０１〜８０質量％の範囲内であり、上述した成人１日当たりの摂取量を達成できるよう、１日当たりの投与量が管理できる形にすることが望ましい。【００５３】
本発明の組成物を食品組成物として調製する場合、その形態は特に制限されず、飲料も包含される。健康食品、機能性食品および特定保健用食品も包含される。健康食品、機能性食品および特定保健用食品は、具体的には、細粒剤、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、チュアブル錠、粉剤、ドリンク剤、シロップ剤、液剤、経管経腸栄養剤などの流動食等の各種製剤形態とすることができる。製剤形態の食品組成物は、医薬製剤と同様に製造することができ、例えば、適当な賦形剤（例えば、でん粉、加工でん粉、乳糖、ブドウ糖、水等）を加えた後、慣用の手段を用いて製造することができる。さらに、食品組成物は、緑茶、ウーロン茶、紅茶などの茶飲料、清涼飲料、ゼリー飲料、スポーツ飲料、乳飲料、炭酸飲料、果汁飲料、乳酸菌飲料、発酵乳飲料、粉末飲料、ココア飲料、精製水などの飲料；バター、ジャム、ふりかけ、マーガリンなどのスプレッド類；マヨネーズ、ショートニング、カスタードクリーム、ドレッシング類、パン類、米飯類、麺類、パスタ、味噌汁、豆腐、牛乳、ヨーグルト、スープまたはソース類、菓子（例えば、ビスケット、クッキー、チョコレート、キャンディ、ケーキ、アイスクリーム、チューインガム、タブレット）などとして調製してもよい。【００５４】
食品組成物には、さらに、食品や飼料の製造に用いられる他の食品素材、各種栄養素、各種ビタミン、ミネラル、アミノ酸、各種油脂、食物繊維、種々の添加剤（例えば、呈味成分、甘味料、有機酸等の酸味料、界面活性剤、ｐＨ調整剤、安定剤、酸化防止剤、色素、フレーバー）などを配合してよい。【００５５】
食品組成物における有効成分の含有量は、食品の形態により異なるが、植物抽出物を基準として、乾燥質量に基づいて、通常、０.００１〜８０質量％の範囲内、好ましくは０.０１〜５０質量％の範囲内、より好ましくは２０〜５０質量％の範囲内である。１日当たりの摂取量は、１回で摂取してもよいが、数回に分けて摂取してもよい。上述した、成人１日当たりの摂取量を達成できるよう、１日当たりの摂取量が管理できる形にするのが好ましい。【００５６】
食品組成物は、ヒト用に限られず、家畜および競走馬などの飼料、ペットフードなども包含する。飼料は、対象が動物であることを除いて、食品とほぼ等しいことから、上記食品に関する記載は、飼料についても同様に当てはめることができる。【００５７】
本発明の組成物は、安全性が高いため、化粧料組成物として調製することもできる。本発明に係る化粧料組成物は、継続的に適用することができ、特に、蜂巣炎を予防および／または改善するために有効である。【００５８】
本発明の組成物を化粧料組成物として調製する場合、その形態は特に制限されず、溶液、乳液、粉末、水-油二層系、水-油-粉末三層系、ゲル、エアゾール、ミストおよびカプセル等任意の形態とすることができる。また、化粧料組成物の製品形態も任意であり、例えば、フェイス用およびボディ用の乳液、化粧液、クリーム、ローション、エッセンス、パックおよびシート；ファンデーション、おしろい、頬紅、口紅、アイシャドー、アイライナー、マスカラおよびサンスクリーン等のメーキャップ用化粧料；メーク落とし、洗顔料およびボディーシャンプー等の皮膚洗浄料；ヘアーリンスおよびシャンプー等の毛髪化粧料；浴用剤、軟膏、医薬部外品、あぶら取り紙、芳香化粧料等が挙げられる。【００５９】
化粧料組成物は、化粧品、医薬部外品および医薬品等に慣用される他の成分、例えば、粉末成分、液体油脂、固体油脂、ロウ、炭化水素、高級脂肪酸、高級アルコール、エステル、シリコーン、アニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、両性界面活性剤、非イオン界面活性剤、保湿剤、水溶性高分子、増粘剤、皮膜剤、紫外線吸収剤、金属イオン封鎖剤、低級アルコール、多価アルコール、糖、アミノ酸、有機アミン、高分子エマルジョン、pH調整剤、皮膚栄養剤、ビタミン、酸化防止剤、酸化防止助剤、香料、水等を必要に応じて配合し、常法により製造することができる。【００６０】
化粧料組成物における有効成分の含有量は、その形態により異なるが、植物抽出物を基準として、乾燥質量に基づいて、通常、０.００１〜８０質量％の範囲内、好ましくは０.０１〜５０質量％の範囲内である。【００６１】
さらに本発明の組成物には、他の機能性成分として、上記したもの以外に、例えば、共役リノール酸、タウリン、グルタチオン、カルニチン、クレアチン、コエンザイムＱ、グルクロン酸、グルクロノラクトン、トウガラシエキス、ショウガエキス、カカオエキス、ガラナエキス、ガルシニアエキス、テアニン、γ−アミノ酪酸、カプサイシン、カプシエイト、各種有機酸、フラボノイド類、ポリフェノール類、カテキン類、キサンチン誘導体、フラクトオリゴ糖などの難消化性オリゴ糖、ポリビニルピロリドン等を配合してもよい。これら機能性成分の配合量は、成分の種類と所望すべき摂取量に応じて適宜決められるが、本発明の組成物中、通常、０.０１〜７０質量％の範囲内であり、好ましくは０.１〜５０質量％の範囲内である。【００６２】
本発明によれば、脂肪細胞が肥大化して、インスリン抵抗性を惹起するＴＮＦ−αや脂肪酸などを過剰に分泌することを抑制し、小型脂肪細胞の比率を増加させることにより、インスリン抵抗性を改善するアディポネクチンの分泌を増加させることができる。そして、肥満、脂肪蓄積またはメタボリックシンドロームに対し、優れた予防または改善作用が期待できる。さらに、本発明の組成物は、副作用の心配がなく安全性が高い上に、風味がよく簡便に摂取可能で長期間の継続的摂取が容易である。【００６３】
以下、実施例に基づいて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【実施例】
【００６４】
実施例１〜８  メタノールを用いた植物抽出物の調製
表１に示す植物の各部位をとりわけ、水を用いて洗浄した後、風乾した。さらに６０℃の高温で乾燥させた後、ハンマーミルを用いて粉砕した。１ｋｇの粉砕物を１０Ｌのガラス容器に入れ、粉砕物乾燥質量の５倍量（ｗ/ｗ）のメタノールを加えて１週間、時々攪拌しながら抽出した。抽出後に固形分を濾過により除去し、液体分を濃縮乾燥してそれぞれ、８８ｇ〜１７５ｇの植物抽出物を得た。【００６５】
なお、実施例３、１１のバラモンジンと実施例４、１２のバラモンジンは、植物としては同一であるが、産地が異なるものである。【００６６】
実施例９〜１６  ８０％エタノールを用いた植物抽出物の調製
表１に示す植物の各部位をとりわけ、水を用いて洗浄した後、風乾した。さらに６０℃の高温で乾燥させた後、ハンマーミルを用いて粉砕した。１ｋｇの粉砕物を１０Ｌのガラス容器に入れ、粉砕物乾燥質量の８倍量（ｗ/ｗ）の水：エタノール＝２０：８０（ｖ/ｖ）溶液を加えて４８時間、振とうしながら抽出した。抽出後に固形分を濾過により除去し、液体分を濃縮乾燥してそれぞれ１１２ｇ〜３３０ｇの植物抽出物を得た。
【表１】
2009005115.tif 000002
【００６７】
比較例１〜２  メタノールを用いたキク科植物抽出物の調製
表２に示す植物の全草を、水を用いて洗浄した後、風乾した。さらに６０℃の高温で乾燥させた後、ハンマーミルを用いて粉砕した。１ｋｇの粉砕物を１０Ｌのガラス容器に入れ、粉砕物乾燥質量の５倍量（ｗ/ｗ）のメタノールを加えて１週間、時々攪拌しながら抽出した。抽出後に固形分を濾過により除去し、液体分を濃縮乾燥してそれぞれの植物抽出物を得た。
【表２】
2009005115.tif 000003
【００６８】
試験例１  脂肪細胞の観察
（１）脂肪細胞への分化・培養
３Ｔ３−Ｌ１細胞（マウス、繊維芽様細胞）を、２４ウェルプレートに播種し、分化誘導培地（０．５ｍＭ  １−メチル−３−イソブチルキサンチン、０．２５μＭ  デキサメタゾン、１０μｇ/ｍＬ  インスリンを含む１０％ＦＣＳ添加ＤＭＥＭ培地）で２日間培養し、脂肪細胞に分化誘導した。その後、成熟促進培地（５μｇ/ｍＬ  インスリンを含む１０％ＦＣＳ添加ＤＭＥＭ培地）に変えて７日間培養した。この際、上記分化誘導培地および成熟促進培地に、実施例４、６または８および比較例１または２の植物抽出物を１０μｇ／ｍＬの濃度で添加した。【００６９】
（２）オイルレッドＯ染色液の調製
脂肪細胞の脂肪滴は、オイルレッドＯ染色液により染色し、測定した。オイルレッドＯ染色液原液は、オイルレッドＯ染色液粉末０．５ｇを２−プロパノール１００ｍＬに溶解し、３，０００ｒｐｍで５分程度遠心し、上清を０．５〜１．０μｍのシリンジフィルターで濾過することにより調製した。オイルレッドＯ染色液は、測定時にこの原液６ｍＬに水４ｍＬを加え、１時間静置後、０．５〜１．０μｍのシリンジフィルターで濾過して使用した。【００７０】
（３）脂肪細胞の測定
合計９日間の培養終了後、２４ウェルプレートから培養液を除去し、１０％ホルマリン溶液５００μＬを添加して、４℃  １時間で細胞をウェル上に固定した。ホルマリン除去後、ＰＢＳ（−）で洗浄し、オイルレッドＯ染色液３００μＬをウェルに添加し、室温で３０分間静置して細胞内の脂肪を染色した。染色液除去後、ＰＢＳ（−）で洗浄し、各実施例および対照群について同じ倍率で顕微鏡写真を撮影した。顕微鏡写真の一定範囲内において、脂肪細胞５個を選択し、細胞の直径の平均を測定した。さらに上記範囲内の脂肪細胞内の脂肪滴数および、脂肪細胞内の脂肪滴の直径の平均を測定した。また、脂肪含量を、脂肪滴数に脂肪滴直径を三乗することにより算出した。結果は、植物抽出物を添加せず培養した対照群を１００％としたときの相対値で表３に示す。
【表３】
2009005115.tif 000004
【００７１】
表３の結果から、本発明の組成物は、比較例および対照群（１００％）に比べて脂肪細胞を小型化し、脂肪細胞内の脂肪滴の大きさを小型化することがわかる。また、本発明の組成物は、脂肪滴数を増加させるが、それ以上に脂肪滴を小型化するため、結果として脂肪蓄積を抑制することがわかる。【００７２】
試験例２  分化抑制作用の測定
（１）脂肪細胞への分化・培養
試験例１と同様にして２４ウェルプレートを用いて３Ｔ３−Ｌ１細胞を培養した。この際、分化誘導培地および成熟促進培地に、実施例３〜８の植物抽出物を１μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬまたは１００μｇ／ｍＬとなるように添加した。培養終了後、ＧＰＤＨ（グリセロール−３−リン酸脱水素酵素）活性の測定を、ＧＰＤＨ測定キット（株式会社ホクドー製）を用いて行った。対照群として、植物抽出物を添加しない培地で培養したものを使用した。【００７３】
（２）ＧＰＤＨ活性の測定
培養終了後、ウェルを０．５ｍＬのＰＢＳ（−）で３回洗浄し、その後、酵素抽出液を０．５ｍＬ加え、ピペッティングにより、細胞をウェル底から剥がした。ついで、剥がした細胞をサンプリングチューブに酵素抽出液ごと入れ、このサンプリングチューブを液体窒素に数分間浸し、内容物を凍結させた。その後、このサンプリングチューブを３７℃に設定したウォーターバスに浸し、内容物を融解させた。この凍結融解を計３回繰り返して行い、細胞を破砕させ、得られた破砕液を１５，０００Ｇ、４℃で、５分間、遠心分離し、上清を回収した。回収した上清を検体として用いた。【００７４】
反応基質溶液１００μＬを９６ウェルプレートに入れ、２５℃で約５分間加温した。ついで、この９６ウェルプレートに上記検体５０μＬを入れ、かるく撹拌した後、３４０ｎｍでの吸光度の減少を経時的に（１分置きに１０分間）測定し、１分間当たりの吸光度の変化量を求めた。【００７５】
求めた吸光度の変化量を、下記式に当てはめＧＰＤＨ活性を決定した。【００７６】
［数１］
ＧＰＤＨ活性（Ｕ/ｍＬ）=ΔＯ.Ｄ.(３４０ｎｍ)/分×０.４８２
式中ΔＯ.Ｄ.(３４０ｎｍ)/分は、３４０ｎｍでの１分間当たりの吸光度の変化量（減少量）を示す。【００７７】
結果を、対照群を１００％としたときの相対値で表４に示す。
【表４】
2009005115.tif 000005
【００７８】
表４の結果から、本発明の組成物が、対照群（１００％）に比べてＧＰＤＨ活性を抑制し、細胞分化抑制活性を有することがわかる。【００７９】
試験例３  脂肪蓄積抑制活性の測定
（１）脂肪細胞への分化・培養
試験例１と同様にして９６ウェルプレートを用いて３Ｔ３−Ｌ１細胞を培養した。ただし、成熟促進培地で５日間培養した。この際、分化誘導培地および成熟促進培地に、実施例１〜８および比較例１〜２の植物抽出物を１０μｇ／ｍＬまたは１００μｇ／ｍＬの濃度で添加して、培養終了後、細胞中に蓄積されている脂肪量の測定を行った。対照群として、植物抽出物を添加しない培地で培養したものを使用した。【００８０】
（２）脂肪量の測定
合計７日間の培養終了後、９６ウェルプレートから培養液を除去し、５０μＬのＰＢＳ（−）で３回洗浄し、水気をよく切ったあと、１００μＬの２−プロパノールを各ウェルに加えた。２０分間プレートシェーカーで振とうし、中性脂肪を抽出した（トリグリセライド抽出液）。トリグリセライド測定キット（トリグリセライド  Ｅ−テストワコー：和光純薬工業株式会社製）の発色試薬を２００μＬずつ別の９６ウェルプレートに入れておき、ここにトリグリセライド抽出液をそれぞれ４０μＬずつ添加し、３７℃のウォーターバスで１時間発色させた後、プレートリーダーを用いて吸光度を測定した（６００ｎｍ〜７００ｎｍ）。【００８１】
結果を、対照群の中性脂肪量を１００％としたときの相対値で表５に示す。
【表５】
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【００８２】
表５の結果から、本発明組成物は、対照群（１００％）に比べて脂肪細胞の脂肪量を低下させることがわかる。【００８３】
実施例１７  錠剤の製造
実施例４で得られた植物抽出物２０ｇ、結晶セルロース（旭化成）７３.８ｇおよびポリビニルピロリドン（ＢＡＳＦ）５ｇを混合し、これにエタノール３０ｍＬを添加して、湿式法により常法にしたがって顆粒を製造する。この顆粒を乾燥した後、ステアリン酸マグネシウム１．２ｇを加えて打錠用顆粒末とし、打錠機を用いて打錠し、１錠が１ｇの錠剤１００個を製造する。【００８４】
実施例１８  顆粒剤の製造
実施例６で得られた植物抽出物２０ｇ、乳糖（ＤＭＶ）１６０ｇおよび結晶セルロース（旭化成）６０ｇを混合し、これにエタノール１３０ｍＬを添加し、練合機を用いて通常の方法で５分間練合する。練合終了後、１０メッシュで篩過し、乾燥機中にて５０℃で乾燥する。乾燥後、整粒し、顆粒剤２４０ｇを得る。【００８５】
実施例１９  シロップ剤の製造
精製水４００ｇを煮沸し、これをかき混ぜながら、白糖７５０ｇおよび実施例６で得られた植物抽出物１０ｇを加えて溶解し、熱時に布ごしし、これに精製水を加えて全量１０００ｍＬとし、シロップ剤を製造する。【００８６】
実施例２０  クリーム剤の製造
下記の組成に従い、クリーム剤を製造する。
【表６】
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【００８７】
本明細書中で引用した全ての刊行物、特許及び特許出願をそのまま参考として本明細書中にとり入れるものとする。
【国際調査報告】
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