【手続補正書】
【提出日】平成15年5月26日(2003.5.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）水性反応混合物中の３−ヒドロキシニトリルを、１）ニトリルヒドラターゼおよびアミダーゼ活性または２）ニトリラーゼ活性を特徴とする酵素触媒と接触させ、
（ｂ）場合により、段階（ａ）で生成する３−ヒドロキシカルボン酸を回収する
段階を含んでなる、３−ヒドロキシニトリルを３−ヒドロキシカルボン酸に加水分解するための方法。
【請求項２】
（ａ）水性反応混合物中の３−ヒドロキシバレロニトリルを、
１）Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２Ｗ（ＡＴＣＣ  ５５７４６）、Ｃｏｍａｍｏｎａｓ  ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ  ２２−１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５３）、Ｃｏｍａｍｏｎａｓ  ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ  ５−ＭＧＡＭ−４Ｄ（ＡＴＣＣ  ５５７４４）、Ｄｉｅｔｚｉａ  ｓｐ．ＡＤＬ１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５４）、Ｓｙｃｔａｌｉｄｉｕｍ  ｓｐｐ．３ＬＤ−１２２Ｐ（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５５）、Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．２５−１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５６）、およびＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｐｕｔｉｄａ  ５Ｂ−ＭＧＮ−２Ｐ（ＮＲＲＬ−Ｂ−１８６６８）よりなる群から選択される微生物細胞のニトリルヒドラターゼ活性およびアミダーゼ活性、または
２）Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２−ＰＦ−１５（ＡＴＣＣ  ５５７４７）、Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２−ＰＦ−１７（ＡＴＣＣ  ５５７４５）、および熱処理してニトリルヒドラターゼ活性およびアミダーゼ活性を失活させたＡｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２Ｗ（ＡＴＣＣ  ５５７４６）よりなる群から選択される微生物細胞のニトリラーゼ活性
を特徴とする酵素触媒と接触させ、
（ｂ）場合により、段階（ａ）で生成する３−ヒドロキシ吉草酸を回収する
段階を含んでなる３−ヒドロキシ吉草酸の製造方法。
【請求項３】
構造Ｒ2Ｏ−ＣＲ4Ｒ5ＣＲ6Ｒ7Ｃ（Ｏ）ＯＲ1で表される少なくとも１種の線状３−ヒドロキシカルボン酸またはそのエステルと、構造（Ｒ2Ｏ）n−Ｒ−［Ｃ（Ｏ）ＯＲ1］mで表される少なくとも１種の高分枝性ヒドロキシカルボン酸またはそのエステル（式中、Ｒはｎ＋ｍの自由原子価をもつＣ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ1はＨ、Ｃ1〜12ヒドロカルビル基またはヒドロキシル置換Ｃ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7はＨまたはＣ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ2はＨまたは（Ｏ）ＣＲ3であり、ｎ＋ｍは３またはそれ以上であり、ただしｎおよびｍの一方は１である）から誘導される少なくとも２つの繰返し単位を含んでなる高度に分枝したコポリエステル。
【請求項４】
（ａ）１）構造（Ｒ2Ｏ）n−Ｒ−［Ｃ（Ｏ）ＯＲ1］mで表される少なくとも１種の高分枝性ヒドロキシカルボン酸またはそのエステル（式中、Ｒはｎ＋ｍの自由原子価をもつＣ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ1はＨ、Ｃ1〜12ヒドロカルビル基またはヒドロキシル置換Ｃ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7はＨまたはＣ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ2はＨまたは（Ｏ）ＣＲ3であり、ｎ＋ｍは３またはそれ以上であり、ただしｎおよびｍの一方は１である）、
２）構造Ｒ2Ｏ−ＣＲ4Ｒ5ＣＲ6Ｒ7Ｃ（Ｏ）ＯＲ1で表される線状３−ヒドロキシカルボン酸またはそのエステル、および
３）エステル化触媒
の混合物を接触させ且つ加熱し、
（ｂ）段階（ａ）の高度に分枝したコポリエステル生成物を捕集する
段階を含んでなる、高度に分枝したコポリエステル生成物の合成方法。
【請求項５】
（ａ）水性反応混合物中の３−ヒドロキシニトリルを、
１）Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２Ｗ（ＡＴＣＣ  ５５７４６）、Ｃｏｍａｍｏｎａｓ  ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ  ２２−１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５３）、Ｃｏｍａｍｏｎａｓ  ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ  ５−ＭＧＡＭ−４Ｄ（ＡＴＣＣ  ５５７４４）、Ｄｉｅｔｚｉａ  ｓｐ．ＡＤＬ１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５４）、Ｓｙｃｔａｌｉｄｉｕｍ  ｓｐｐ．３ＬＤ−１２２Ｐ（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５５）、Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．２５−１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５６）、およびＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｐｕｔｉｄａ  ５Ｂ−ＭＧＮ−２Ｐ（ＮＲＲＬ−Ｂ−１８６６８）よりなる群から選択される微生物細胞のニトリルヒドラターゼおよびアミダーゼ活性、または
２）Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２−ＰＦ−１５（ＡＴＣＣ  ５５７４７）、Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２−ＰＦ−１７（ＡＴＣＣ  ５５７４５）、およひ熱処理してニトリルヒドラターゼ活性およびアミダーゼ活性を失活させたＡｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２Ｗ（ＡＴＣＣ  ５５７４６）よりなる群から選択される微生物細胞のニトリラーゼ活性
を特徴とする酵素触媒と接触させ、
（ｂ）（１）構造（Ｒ2Ｏ）n−Ｒ−［Ｃ（Ｏ）ＯＲ1］mで表される少なくとも１種の高分枝性ヒドロキシカルボン酸（式中、Ｒはｎ＋ｍの自由原子価をもつＣ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ1はＨ、Ｃ1〜12ヒドロカルビル基またはヒドロキシル置換Ｃ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7はＨまたはＣ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ2はＨまたはＯ（Ｏ）ＣＲ3であり、ｎ＋ｍは３またはそれ以上であり、ただしｎおよびｍの一方は１である）、
（２）段階（ａ）で回収した、構造Ｒ2Ｏ−ＣＲ4  Ｒ5ＣＲ6  Ｒ7Ｃ（Ｏ）ＯＲ1で表される線状３−ヒドロキシカルボン酸、および
（３）エステル化触媒
の混合物を接触させ且つ加熱し、
（ｃ）段階（ｂ）の高度に分枝したコポリエステル生成物を捕集する
高度に分枝したコポリエステル生成物の合成方法。
【請求項６】
ニトリルヒドラターゼ活性およびアミダーゼ活性を特徴とし、Ｃｏｍａｍｏｎａｓ  ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ  ２２−１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５３）、Ｄｉｅｔｚｉａ  ｓｐ．ＡＤＬ１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５４）、Ｓｃｙｔａｌｉｄｉｕｍ  ｓｐｐ．３ＬＤ−１２２Ｐ（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５５）、およびＲｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．２５−１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５６）よりなる群から選択されることを特徴とする単離された微生物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０６】
実施例３３
スズ（ＩＩ）触媒を用いて３−ヒドロキシ吉草酸およびトリメチロール酢酸から高度に分枝したコポリエステルを合成
２０ｍＬ容のガラスバイアルに、トリメチロール酢酸（１ｇ、０．００６７モル）と、３−ヒドロキシ吉草酸（１ｇ、０．００８５モル）と、スズ（ＩＩ）ジ（２−エチルヘキサン酸）（Ｓｎ  （Ｏ2ＣＣ7Ｈ15）2（０．０１ｇ、０．００００２５モル）とを仕込み、真空度２０ｉｎ．Ｈｇの真空オーブン中にて１５０℃で加熱した。酸価の測定値によって反応の進み具合をモニタリングした。
合計で３．５時間経過後に反応を停止（ヒートオフ）させ、試料０．１ｇを抜き出し、ジメチルスルホキシドに溶解し、０．１Ｎの水酸化カリウムのメタノール溶液で滴定して酸価（１１２）を求めた。この透明なポリマーＴgを示差走査熱量測定で求めたところ、−３℃であった。これは、３−ヒドロキシ吉草酸の代わりにε−カプロラクトンを用いた類似のコポリマーのＴg＝−３２℃と比して望ましい形で有意に高い値であった。
なお、本発明の主たる特徴及び態様を示せば以下のとおりである。
１．  （ａ）水性反応混合物中の３−ヒドロキシニトリルを、１）ニトリルヒドラターゼおよびアミダーゼ活性または２）ニトリラーゼ活性を特徴とする酵素触媒と接触させ、
（ｂ）場合により、段階（ａ）で生成する３−ヒドロキシカルボン酸を回収する
段階を含んでなる、３−ヒドロキシニトリルを３−ヒドロキシカルボン酸に加水分解するための方法。
２．  ３−ヒドロキシニトリルが、３−ヒドロキシプロピオニトリル、３−ヒドロキシブチロニトリル、３−ヒドロキシバレロニトリル、３−ヒドロキシヘキサンニトリル、３−ヒドロキシヘプタンニトリル、３−ヒドロキシオクタンニトリル、３−ヒドロキシノナンニトリル、３−ヒドロキシ−３−イソプロピル−４−メチルペンタンニトリル、３−ヒドロキシ−３−フェニルプロパンニトリル、２−プロピル−３−ヒドロキシペンタンニトリル、および３−ヒドロキシ−３−メチル−ｎ−ペンタンニトリルよりなる群から選択される上記１に記載の方法。
３．  段階（ａ）（１）の酵素触媒が、Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２Ｗ（ＡＴＣＣ  ５５７４６）、Ｃｏｍａｍｏｎａｓ  ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ  ２２−１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５３）、Ｃｏｍａｍｏｎａｓ  ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ  ５−ＭＧＡＭ−４Ｄ（ＡＴＣＣ  ５５７４４）、Ｄｉｅｔｚｉａ  ｓｐ．ＡＤＬ１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５４）、Ｓｙｃｔａｌｉｄｉｕｍ  ｓｐｐ．３ＬＤ−１２２Ｐ（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５５）、Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．２５−１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５６）、およびＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｐｕｔｉｄａ  ５Ｂ−ＭＧＮ−２Ｐ（ＮＲＲＬ−Ｂ−１８６６８）よりなる群から選択される微生物細胞のニトリルヒドラターゼ活性およびアミダーゼ活性を特徴とし、
段階（ａ）（２）の酵素触媒が、Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２−ＰＦ−１５（ＡＴＣＣ  ５５７４７）、Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２−ＰＦ−１７（ＡＴＣＣ  ５５７４５）、および熱処理してニトリルヒドラターゼ活性およびアミダーゼ活性を失活させたＡｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２Ｗ（ＡＴＣＣ  ５５７４６）よりなる群から選択される微生物細胞のニトリラーゼ活性を特徴とする、
上記２に記載の方法。
４．  酵素触媒が、微生物細胞全体、浸透化処理した微生物細胞、微生物細胞抽出物の１もしくはそれ以上の成分、部分精製酵素（単数もしくは複数）または精製酵素（単数もしくは複数）の形態である上記３に記載の方法。
５．  酵素触媒が可溶性支持体または不溶性支持体の上または中に固定化されている上記４に記載の方法。
６．  （ａ）水性反応混合物中の３−ヒドロキシバレロニトリルを、
１）Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２Ｗ（ＡＴＣＣ  ５５７４６）、Ｃｏｍａｍｏｎａｓ  ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ  ２２−１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５３）、Ｃｏｍａｍｏｎａｓ  ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ  ５−ＭＧＡＭ−４Ｄ（ＡＴＣＣ  ５５７４４）、Ｄｉｅｔｚｉａ  ｓｐ．ＡＤＬ１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５４）、Ｓｙｃｔａｌｉｄｉｕｍ  ｓｐｐ．３ＬＤ−１２２Ｐ（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５５）、Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．２５−１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５６）、およびＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｐｕｔｉｄａ  ５Ｂ−ＭＧＮ−２Ｐ（ＮＲＲＬ−Ｂ−１８６６８）よりなる群から選択される微生物細胞のニトリルヒドラターゼ活性およびアミダーゼ活性、または
２）Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２−ＰＦ−１５（ＡＴＣＣ  ５５７４７）、Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２−ＰＦ−１７（ＡＴＣＣ  ５５７４５）、および熱処理してニトリルヒドラターゼ活性およびアミダーゼ活性を失活させたＡｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２Ｗ（ＡＴＣＣ  ５５７４６）よりなる群から選択される微生物細胞のニトリラーゼ活性
を特徴とする酵素触媒と接触させ、
（ｂ）場合により、段階（ａ）で生成する３−ヒドロキシ吉草酸を回収する
段階を含んでなる３−ヒドロキシ吉草酸の製造方法。
７．  酵素触媒が、微生物細胞全体、浸透化処理した微生物細胞、微生物細胞抽出物の１もしくはそれ以上の成分、部分精製酵素（単数もしくは複数）または精製酵素（単数もしくは複数）の形態である上記６に記載の方法。
８．  酵素触媒が可溶性支持体または不溶性支持体の上または中に固定化されている上記７に記載の方法。
９．  構造Ｒ2Ｏ−ＣＲ4Ｒ5ＣＲ6Ｒ7Ｃ（Ｏ）ＯＲ1で表される少なくとも１種の線状３−ヒドロキシカルボン酸またはそのエステルと、構造（Ｒ2Ｏ）n−Ｒ−［Ｃ（Ｏ）ＯＲ1］mで表される少なくとも１種の高分枝性ヒドロキシカルボン酸またはそのエステル（式中、Ｒはｎ＋ｍの自由原子価をもつＣ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ1はＨ、Ｃ1〜12ヒドロカルビル基またはヒドロキシル置換Ｃ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7はＨまたはＣ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ2はＨまたは（Ｏ）ＣＲ3であり、ｎ＋ｍは３またはそれ以上であり、ただしｎおよびｍの一方は１である）から誘導される少なくとも２つの繰返し単位を含んでなる高度に分枝したコポリエステル。
１０．  線状３−ヒドロキシカルボン酸が３−ヒドロキシ吉草酸であり、高分枝性ヒドロキシカルボン酸がジメチロールプロピオン酸および／またはトリメチオロ酢酸である上記９に記載の高度に分枝したコポリエステル。
１１．  （ａ）１）構造（Ｒ2Ｏ）n−Ｒ−［Ｃ（Ｏ）ＯＲ1］mで表される少なくとも１種の高分枝性ヒドロキシカルボン酸またはそのエステル（式中、Ｒはｎ＋ｍの自由原子価をもつＣ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ1はＨ、Ｃ1〜12ヒドロカルビル基またはヒドロキシル置換Ｃ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7はＨまたはＣ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ2はＨまたは（Ｏ）ＣＲ3であり、ｎ＋ｍは３またはそれ以上であり、ただしｎおよびｍの一方は１である）、
２）構造Ｒ2Ｏ−ＣＲ4Ｒ5ＣＲ6Ｒ7Ｃ（Ｏ）ＯＲ1で表される線状３−ヒドロキシカルボン酸またはそのエステル、および
３）エステル化触媒
の混合物を接触させ且つ加熱し、
（ｂ）段階（ａ）の高度に分枝したコポリエステル生成物を捕集する
段階を含んでなる、高度に分枝したコポリエステル生成物の合成方法。
１２．  高分枝性ヒドロキシカルボン酸がジメチロールプロピオン酸および／またはトリメチロール酢酸であり、線状３−ヒドロキシカルボン酸が３−ヒドロキシ吉草酸であり、エステル化触媒がジカルボン酸スズまたはプロトン酸である上記１１に記載の方法。
１３．  （ａ）水性反応混合物中の３−ヒドロキシニトリルを、
１）Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２Ｗ（ＡＴＣＣ  ５５７４６）、Ｃｏｍａｍｏｎａｓ  ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ  ２２−１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５３）、Ｃｏｍａｍｏｎａｓ  ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ  ５−ＭＧＡＭ−４Ｄ（ＡＴＣＣ  ５５７４４）、Ｄｉｅｔｚｉａ  ｓｐ．ＡＤＬ１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５４）、Ｓｙｃｔａｌｉｄｉｕｍ  ｓｐｐ．３ＬＤ−１２２Ｐ（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５５）、Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．２５−１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５６）、およびＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｐｕｔｉｄａ  ５Ｂ−ＭＧＮ−２Ｐ（ＮＲＲＬ−Ｂ−１８６６８）よりなる群から選択される微生物細胞のニトリルヒドラターゼおよびアミダーゼ活性、または
２）Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２−ＰＦ−１５（ＡＴＣＣ  ５５７４７）、Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２−ＰＦ−１７（ＡＴＣＣ  ５５７４５）、およひ熱処理してニトリルヒドラターゼ活性およびアミダーゼ活性を失活させたＡｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ｆａｃｉｌｉｓ  ７２Ｗ（ＡＴＣＣ  ５５７４６）よりなる群から選択される微生物細胞のニトリラーゼ活性
を特徴とする酵素触媒と接触させ、
（ｂ）（１）構造（Ｒ2Ｏ）n−Ｒ−［Ｃ（Ｏ）ＯＲ1］mで表される少なくとも１種の高分枝性ヒドロキシカルボン酸（式中、Ｒはｎ＋ｍの自由原子価をもつＣ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ1はＨ、Ｃ1〜12ヒドロカルビル基またはヒドロキシル置換Ｃ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ3、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6、Ｒ7はＨまたはＣ1〜12ヒドロカルビル基であり、Ｒ2はＨまたはＯ（Ｏ）ＣＲ3であり、ｎ＋ｍは３またはそれ以上であり、ただしｎおよびｍの一方は１である）、
（２）段階（ａ）で回収した、構造Ｒ2Ｏ−ＣＲ4  Ｒ5ＣＲ6  Ｒ7Ｃ（Ｏ）ＯＲ1で表される線状３−ヒドロキシカルボン酸、および
（３）エステル化触媒
の混合物を接触させ且つ加熱し、
（ｃ）段階（ｂ）の高度に分枝したコポリエステル生成物を捕集する
高度に分枝したコポリエステル生成物の合成方法。
１４．  ３−ヒドロキシニトリルが、３−ヒドロキシプロピオニトリル、３−ヒドロキシブチロニトリル、３−ヒドロキシバレロニトリル、３−ヒドロキシヘキサンニトリル、３−ヒドロキシヘプタンニトリル、３−ヒドロキシオクタンニトリル、３−ヒドロキシノナンニトリル、３−ヒドロキシ−３−イソプロピル−４−メチルペンタンニトリル、３−ヒドロキシ−３−フェニルプロパンニトリル、２−プロピル−３−ヒドロキシペンタンニトリル、および３−ヒドロキシ−３−メチル−ｎ−ペンタンニトリルよりなる群から選択される上記１３に記載の方法。
１５．  酵素触媒が、微生物細胞全体、浸透化処理した微生物細胞、微生物細胞抽出物の１もしくはそれ以上の成分、部分精製酵素（単数もしくは複数）または精製酵素（単数もしくは複数）の形態である上記１４に記載の方法。
１６．  （ａ）の酵素触媒が、微生物細胞全体または部分精製または精製酵素（単数もしくは複数）の形態であり、（ａ）の酵素触媒が、可溶性支持体または不溶性支持体の上または中に固定化されており、高分枝性ヒドロキシカルボン酸がジメチロールプロピオン酸および／またはトリメチロール酢酸であり、線状３−ヒドロキシカルボン酸が３−ヒドロキシ吉草酸であり、エステル化触媒がジカルボン酸スズまたはプロトン酸である上記１５に記載の方法。
１７．  ニトリルヒドラターゼ活性およびアミダーゼ活性を特徴とし、Ｃｏｍａｍｏｎａｓ  ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｉ  ２２−１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５３）、Ｄｉｅｔｚｉａ  ｓｐ．ＡＤＬ１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５４）、Ｓｃｙｔａｌｉｄｉｕｍ  ｓｐｐ．３ＬＤ−１２２Ｐ（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５５）、およびＲｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．２５−１（ＡＴＣＣ  ＰＴＡ−１８５６）よりなる群から選択されることを特徴とする単離された微生物。