【手続補正書】
【提出日】平成15年9月2日(2003.9.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
グルココルチコイド感受性標的遺伝子のグルココルチコイドレセプター（ＧＲ）介在トランス活性化においてアンタゴニスト活性を有するがアゴニスト活性を有さず、ＧＲ介在トランス抑制においてアンタゴニスト活性を有さないＧＲリガンドを含む医薬組成物。
【請求項２】
前記リガンドが、｛３，５−ジブロモ−４−［５−イソプロピル−４−メトキシ−２−（３−メチル−ベンゾイル）−フェノキシ］フェニル｝−酢酸である請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
組成物が、グルココルチコイドとの共投薬として使用されるものである請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
組成物が、グルココルチコイド投薬に関連する副作用を防止又は抑制するために使用されるものである請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
グルココルチコイドが、炎症疾患、免疫疾患又はグルココルチコイドでの治療が必要とされる臨床状態の治療用薬剤として使用されるものである請求項３又は４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
免疫疾患が自己免疫疾患である請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
グルココルチコイドが、呼吸性疾患、リウマチ様疾患、自己免疫疾患、アレルギー、血管疾患、皮膚疾患、胃腸管疾患、腎疾患、肝疾患、眼疾患、耳疾患、神経疾患、内分泌疾患、ショック、悪性腫瘍、移植、糖尿病及び肥満の治療用薬剤として使用されるものである請求項３又は４に記載の医薬組成物。
【請求項８】
組成物が、更に、グルココルチコイドを含む請求項１又は２に記載の医薬組成物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の医薬組成物を製造するための、グルココルチコイド感受性標的遺伝子のグルココルチコイドレセプター（ＧＲ）介在トランス活性化においてアンタゴニスト活性を有するがアゴニスト活性を有さず、ＧＲ介在トランス抑制においてアンタゴニスト活性を有さないＧＲリガンドの使用。
【請求項１０】
解離したグルココルチコイドレセプター（ＧＲ）アンタゴニストのスクリーニング方法であって、
ａ）候補物質をＧＲと接触させること；
ｂ）候補物質のＧＲに対する結合を測定すること；
ｃ）ＧＲに対して結合親和性を有する候補物質を選択すること；
ｄ）グルココルチコイド感受性標的遺伝子のＧＲ介在トランス活性化における、選択された候補物質の活性を測定すること；
ｅ）トランス活性化においてアンタゴニスト活性を有するがアゴニスト活性を有さない候補物質を選択すること；
ｆ）グルココルチコイド感受性標的遺伝子のＧＲ介在トランス抑制における、選択された候補物質の活性を測定すること；及び
ｇ）トランス抑制におけるアンタゴニスト活性を有さない候補物質を選択すること
を含む方法。
【請求項１１】
ＧＲ介在トランス活性化により、ラット肝細胞腫におけるチロシンアミノトランスフェラーゼ（ＴＡＴ）の誘発、又は、ＨｅＬａ細胞におけるＭＭＴＶ（マウス乳腺癌ウイルス）プロモーターの刺激が生じる請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
ＧＲ介在トランス抑制により、炎症誘発又は免疫強化活性を有する遺伝子の抑制が生じる請求項１０又は１１に記載の方法。
【請求項１３】
遺伝子が、炎症又は免疫障害にそれぞれ関与するサイトカイン又は接着分子又は酵素をコードする遺伝子である請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
免疫障害が自己免疫疾患である請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
ＧＲ介在トランス抑制により、ＨｅＬａ細胞におけるＴＮＦ−α−誘発性のＩＣＡＭ−１プロモーター活性の抑制、又は、ＴＨＰ１−細胞におけるＬＰＳ−誘発性のＩＬ−８生成の抑制が生じる請求項１２〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
高速処理スクリーニングアッセイ（ＨＴＳ）である請求項１０〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
適切な局所用配合物としては、経皮的デバイス、例えば、プラスター、エアロゾル、クリーム、軟膏、ローション、散布剤などが挙げられる。
直腸投与に適する医薬組成物は、好ましくは、活性成分及び適切なキャリヤー、例えば、カカオバターを含む坐薬であろう。
上記キャリヤーに加えて、上記医薬組成物は、不活性希釈剤、緩衝液、フレーバー、バインダー、例えば、トラガカントガム、アカシア、トウモロコシデンプン、又は、ゼラチン；潤滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム；崩壊剤、例えば、トウモロコシデンプン、馬鈴薯デンプン、アルギン酸；界面活性剤又は分散剤；粒状化剤；増粘剤；酸化防止剤を含む保存剤；等張剤、例えば糖又は塩化ナトリウムなどを含んでいてもよい。
また、本発明の別の態様としては、グルココルチコイド感受性標的遺伝子のグルココルチコイドレセプター（ＧＲ）介在トランス活性化においてアンタゴニスト活性を有するがアゴニスト活性を有さず、ＧＲ介在トランス抑制においてアンタゴニスト活性を有さないＧＲリガンドであって、｛３，５−ジブロモ−４−［５−イソプロピル−４−メトキシ−２−（３−メチル−ベンゾイル）−フェノキシ］フェニル｝−酢酸でないリガンドが含まれる。このリガンドは、炎症誘発又は免疫強化活性を有する遺伝子より選ばれるグルココルチコイド感受性標的遺伝子、例えば、炎症又は自己免疫疾患を含む免疫障害にそれぞれ関与するサイトカイン又は接着分子又は酵素をコードする遺伝子のグルココルチコイドレセプター（ＧＲ）介在トランス活性化においてアンタゴニスト活性を有するがアゴニスト活性を有さず、ＧＲ介在トランス抑制においてアンタゴニスト活性を有さないのが好ましい。
本発明を、更に、以下の実施例により説明するが、これは、本発明を制限することを意味するものではない。


【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３６】
実施例７
ＥＸＲＳ１３７０ＳＥは、動物実験において解離したアンタゴニストグルココルチコイド活性を示した。１００ｍｇ／ｋｇの投与量で経口投与したＥＸＲＳ１３７０ＳＥは、耳炎症モデルにおいてプレドニゾロンの抗炎症作用を有意にアンタゴナイズしなかったが、肝臓におけるプレドニゾロン誘発性チロシンアミノトランスフェラーゼ誘導を有意にアンタゴナイズし得た。
ハーランから得た、体重約２０〜２５ｇの雌性アルビノマウス（Ｈａｎ：ＮＭＲＩ）を使用した。その動物に、標準化ペッレット食餌（アルトミン８０１３）を与え、水を自由に摂取することができるようにした。動物を、１２時間の明暗サイクルで調節された部屋(climate room)に入れ、グループ化した。


【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３７】
ＥＸＲＳ１３７０ＳＥを、ＷＯ９９／６３９７６に従って製造した。プレドニゾロンを、薬局からウルバゾンソルビル（登録商標）として購入した。ＰＭＡ（ホルボール１２−ミリステート１３−アセテート）、及びミフェプリストン(Mifepristone)（１１β−［４−ジメチルアミノ］フェニル−１７β−ヒドロキシ−１７［１−プロピニル］エストラ−４，９−ジエン−３−オン：ＲＵ−４８６）を、シグマから得た（それぞれ、Ｐ−８１３９及びＭ−８０４６）。
全ての試験化合物は、１００ｍｇ／ｋｇの投与量で経口投与（０．２ｍｌ／１０ｇ体重（ｂｗ））した。化合物は、０．２％ヒドロキシプロピルメチルセルローズ及びオリーブオイル混合物（１：１（ｖ／ｖ））に“溶解”した。


【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４０】
表１ａ：プレドニゾロンの抗炎症作用（マウスの耳における、ミエロペロキシダーゼの上昇として測定される、ＰＭＡ誘発性好中球インフラックスの抑制）及びプレドニゾロンの代謝作用（マウスの肝臓における、チロシンアミノトランスフェラーゼの誘導）におけるＥＸＲＳ１３７０ＳＥのアンタゴニスト活性。耳炎症のケースにおけるコントロールはＰＭＡで処理した動物であり、ＴＡＴ誘導についてのコントロール動物は、ビヒクルのみで処理したものである。
ＥＸＲＳ１３７０ＳＥは、プレドニゾロンによる耳炎症の抑制を有意にアンタゴナイズしなかった（ｐ＝０．０８、不対データについてのステューデントｔ試験）。しかしながら、ＥＸＲＳ１３７０ＳＥは、プレドニゾロンによるＴＡＴ誘導を有意にアンタゴナイズした（ｐ＝０．００３、不対データについてのステューデントｔ試験）。
2004519439.tif 000001
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】図３ｂ
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図３ｂ】
ＲＵ４８６及びＥＸＲＳ１３７０ＳＥによる、ラット肝細胞腫における、デキサメタゾン（３ｅ−９ｍｏｌ／ｌ）で前刺激したチロシンアミノトランスフェラーゼの抑制を示す。


【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】図４ｂ
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図４ｂ】
ＲＵ４８６及びＥＸＲＳ１３７０ＳＥによる、ＨｅＬａ細胞における、デキサメタゾン（３ｅ−８ｍｏｌ／ｌ）で前刺激したＭＭＴＶ−プロモーターの抑制を示す。