【手続補正書】
【提出日】平成17年4月22日(2005.4.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１，２−ジアシル化グリセロリン脂質およびそれらの合成または天然類似体の製造方法であって、１−アシルおよび２−アシル基が所定のものであり且つ同一であり、微小水性環境においてグリセロリン脂質をカルボン酸アシル供与体と、上記グリセロリン脂質のｓｎ−１およびｓｎ−２位置のいずれにおいてもエステル化／エステル交換／アシル化を触媒することができるホスホリパーゼ酵素の存在下で接触させることを含んでなる、上記方法。
【請求項２】
反応混合物の水含量が、反応混合物の体積の３０体積％未満であり、好ましくは５％未満であり、更に好ましくは０．５−３％である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
上記グリセロリン脂質が、グリセロホスホリルコリン（ＧＰＣ）、およびその誘導体であって、コリン残基がエタノールアミン、セリン、またはアルコール、好ましくはイノシトールまたはグリセロールによって置換されている上記誘導体からなる群から選択される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
上記カルボン酸アシル供与体が脂肪酸アシル供与体であり、好ましくは飽和または不飽和の短、中または長鎖の線状または分岐状脂肪酸誘導体であり、特に上記脂肪酸誘導体が遊離脂肪酸、脂肪酸塩化物、脂肪酸アルキルエステル、脂肪酸ビニルエステル、および無水脂肪酸からなる群から選択される、請求項１−３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
ホスホリパーゼ酵素が場合によっては不溶性マトリックス上で固定され、且つ場合によっては界面活性剤がコーティングされている、請求項１−４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
上記ホスホリパーゼ酵素が不溶性マトリックス上で固定され、且つ界面活性剤がコーティングされている、請求項１−５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
上記グリセロリン脂質のｓｎ−１およびｓｎ−２位置のいずれでもアシル化を触媒するホスホリパーゼ酵素がアスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）属に由来し、特に上記アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）がＳＡＮＫ  １１８７０である、請求項１−６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
上記グリセロリン脂質の１，２−ジアシル−グリセロリン脂質への転換収率が少なくとも２０％である、請求項１−７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
上記グリセロリン脂質がグリセロホスファチジルコリン（ＧＰＣ）である、請求項１−８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
１，２−ジアシル化−グリセロリン脂質およびそれらの合成または天然類似体の製造方法であって、１−アシルおよび２−アシル基が同一であり且つ所定のものであり、微小水性環境においてグリセロリン脂質を、カルボン酸アシル供与体、好ましくは同一の所望なアシル基を提供することができる脂肪酸誘導体と、上記グリセロリン脂質のｓｎ−１およびｓｎ−２位置のいずれにおいてもアシル化を触媒することができるホスホリパーゼ酵素の存在下で接触させることを含んでなる、上記方法。
【請求項１１】
溶媒、好ましくは有機溶媒、特に第三ブタノールを用いるとき、１−モノアシル−２−リゾ−グリセロリン脂質が形成される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１２】
生成物が１，２−ジ−アシル−グリセロホスファチジルコリンおよびその類似体のいずれか一つ、特に１，２−ジラウロイル−グリセロホスファチジルコリン、１，２−ジミリストイル−グリセロホスファチジルコリン、または１，２−ジパルミトイル−グリセロホスファチジルコリンである、請求項１−１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
ｓｎ−１およびｓｎ−２位置でのアシル化を触媒することができる、場合によっては界面活性剤がコーティングされている上記のホスホリパーゼが、物理的に、イオン的にまたは共有結合的に上記不溶性マトリックスに結合している、請求項５−１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
上記不溶性マトリックスが、吸着剤、イオン交換樹脂および活性化した不溶性マトリックスからなる群から選択され、好ましくは、上記の不溶性マトリックスが、Ｄｏｗｅｘ（登録商標）２２、Ｄｏｗｅｘ（登録商標）１ｘ２−４０、Ｄｏｗｅｘ（登録商標），２ｘ８−１００、セルロースホスフェート、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＩＲＡ−９５、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＩＲＡ−２００、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＩＲＡ−９００、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＸＡＤ−７、Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ（登録商標）ＸＡＤ−１６、Ｄｉａｎｎｏｎ（登録商標）ＳＡ−１０Ａ、Ｅｃｔｏｅｌａ（登録商標）セルロース、Ｓｅｐｈａｄｅｘ（登録商標）およびスルホキシエチルセルロース、セライト（Ｃｅｌｉｔｅ）、アルミナ、シリカゲル、炭酸カルシウム、ステアリン酸アルミニウム、木炭および硫酸カルシウムからなる群から選択され、上記界面活性剤が、好ましくは、糖脂肪酸エステル、糖アルキルエステル、ポリオール脂肪酸エステルおよびポリオールアルキルエーテルからなる群から選択され、特に上記界面活性剤が、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノミリステート、ソルビタンモノパルミテート、およびソルビタンモノステアレートである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
請求項１または２に記載の方法によって製造される１，２−ジアシル−グリセロリン脂質。
【請求項１６】
１−および２−アシル基が所定のものであり且つ同一である、請求項１または２に記載の方法によって製造される１，２−ジアシル−グリセロリン脂質。
【請求項１７】
請求項１５に記載の方法によって製造される１−モノアシル−２−リゾ−グリセロリン脂質、１−ステアロイル−２−リゾ−グリセロリン脂質、及び１−パルミトイル−２−リゾ−グリセロリン脂質。
【請求項１８】
１−アシル化−２−リゾ−グリセロリン脂質およびそれらの合成または天然類似体の製造方法であって、１−アシル基は所定のものであり、微小水性環境においてグリセロリン脂質をカルボン酸アシル供与体と、上記グリセロリン脂質のｓｎ−１位置（部位）でアシル化を触媒することができるホスホリパーゼの存在下、有機溶媒の存在下にて接触させることを含んでなる、上記方法。
【請求項１９】
反応混合物の水含量が、反応混合物の体積の３０体積％未満であり、好ましくは５％未満であり、更に好ましくは０．５−３％である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
上記カルボン酸アシル供与体が脂肪酸アシル供与体であり、好ましくは、上記脂肪酸アシル供与体が飽和または不飽和の短、中または長鎖の線状または分岐状脂肪酸誘導体であり、好ましくは、上記脂肪酸誘導体が遊離脂肪酸、脂肪酸塩化物、脂肪酸アルキルエステル、脂肪酸ビニルエステル、および無水脂肪酸からなる群から選択される、請求項１８または１９に記載の方法。
【請求項２１】
ホスホリパーゼが、場合によっては不溶性マトリックス上で固定され、場合によっては界面活性剤がコーティングされているホスホリパーゼＡ1である、請求項１８−２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
上記ホスホリパーゼが、固定され且つ界面活性剤がコーティングされている請求項１８−２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
請求項１８−２２のいずれか一項に記載の方法によって製造される１−アシル−２−グリセロリン脂質。
【請求項２４】
請求項１８−２２のいずれか一項に記載の方法によって製造される１−ラウロイル−２−リゾ−グリセロリン脂質。