【手続補正書】
【提出日】平成16年4月1日(2004.4.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）
【化１】
1998287678.tif 000001
｛式中、Ｒ１は水素、置換もしくは非置換の低級アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、カルボキシ、低級アルカノイル、低級アルコキシカルボニル、低級アルカノイルオキシ、ＮＲ２Ｒ３（式中、Ｒ２およびＲ３は同一または異なって水素、置換もしくは非置換の低級アルキルまたは低級アルカノイルを表すか、Ｒ２とＲ３が一緒になって置換もしくは非置換のＮをはさんで形成される複素環基を表す）、ニトロまたはハロゲンを表し、Ｗ、Ｘ、Ｙ、Ｚのうち１つはＮを表し、他は同一または異なってＮまたはＣＲ４［式中、Ｒ４は水素、置換もしくは非置換の低級アルキル、ヒドロキシ、低級アルコキシ、ＮＲ５Ｒ６（式中、Ｒ５およびＲ６は同一または異なって水素、置換もしくは非置換の低級アルキルまたは低級アルカノイルを表すか、Ｒ５とＲ６が一緒になって置換もしくは非置換のＮをはさんで形成される複素環基を表す）、ニトロまたはハロゲンを表す］を表す｝で表されるピラノアジン誘導体またはその薬理上許容される塩。
【請求項２】
ＺがＣＨである請求項１記載のピラノアジン誘導体またはその薬理上許容される塩。
【請求項３】
ＺがＮである請求項１記載のピラノアジン誘導体またはその薬理上許容される塩。
【請求項４】
ＹがＮまたはＣＨである請求項２記載のピラノアジン誘導体またはその薬理上許容される塩。
【請求項５】
ＹがＣＨまたはＣ−ＣＨ３である請求項３記載のピラノアジン誘導体またはその薬理上許容される塩。
【請求項６】
ＸがＮまたはＣＨである請求項１〜５のいずれかに記載のピラノアジン誘導体またはその薬理上許容される塩。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれかに記載のピラノアジン誘導体またはその薬理上許容される塩を有効成分として含有する抗エストロゲン剤。
【請求項８】
請求項１〜６のいずれかに記載のピラノアジン誘導体またはその薬理上許容される塩を有効成分として含有する抗腫瘍剤。
【請求項９】
請求項１〜６のいずれかに記載のピラノアジン誘導体またはその薬理上許容される塩を有効成分として含有する乳癌の治療剤。
【請求項１０】
請求項１〜６のいずれかに記載のピラノアジン誘導体またはその薬理上許容される塩を有効成分として含有する抗菌剤。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００２】
【従来の技術】
２−フェニルピラノアジン誘導体としては、例えば２−フェニル−４Ｈ−ピラノ［３，２−ｂ］ピリジン−４−オン誘導体（Ｂｏｌｌ．Ｃｈｉｍ．Ｆａｒｍ．，１３０巻，３１２頁，１９９１年；Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，２５巻，１１５０頁，１９７７年）、２−フェニル−４Ｈ−ピラノ［３，２−ｃ］ピリジン−４−オン誘導体（Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ Ｃｈｅｍ．，１６巻，９３９頁，１９７９年；Ｂｕｌｌ．Ｓｏｃ．Ｃｈｉｍ．Ｆｒ．，４巻，１４３５頁，１９７２年）、２−フェニル−４Ｈ−ピラノ［２，３−ｂ］ピリジン−４−オン誘導体（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，３５巻，３５９６頁，１９７０年；Ｂｕｌｌ．Ｓｏｃ．Ｃｈｉｍ．Ｆｒ．，２巻，６３１頁，１９７０年；Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．（Ｃ），１８３６頁，１９６７年）、２−フェニル−４Ｈ−ピラノ［２，３−ｄ］ピリミジン−４−オン誘導体（Ｙｏｕｊｉ Ｈｕａｘｕｅ，８巻，２５０頁，１９８８年）等が知られている。しかしながら、フェニル基の３’位にフッ素を有する化合物およびフェニル基の４’位にアミノ基を有する化合物は知られていない。


【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３６】
実験例２
ヒト乳癌細胞(MCF-7) 生育阻害試験
96穴マイクロタイタープレートの各穴に、RPMI1640培地に10％牛胎児血清、10-8mol/lエストラジオール (シグマ社製) 、100 単位／mlのペニシリンおよび100 μg/mlのストレプトマイシンを添加した培地（以下、培地Ｂという）で５×104 個／mlに調製したMCF-7 細胞を0.1ml ずつ分注した。該プレートを炭酸ガスインキュベーター内で37℃、20時間培養後、培地Ｂにより適宜希釈した検体（試験化合物）を0.05mlずつ加え、炭酸ガスインキュベーター内で37℃、72時間培養した。培養上清を除去後、残渣に0.02％ニュートラルレッドを添加した培地Ｂを0.1mlずつ加え、37℃で1 時間炭酸ガスインキュベーター内で培養し、細胞を染色した。培養上清を除去後、残渣を生理食塩水で１回洗浄した。次いで、0.001 規定塩酸／30% エタノールで色素を抽出後、マイクロプレートリーダーにより550nm の吸光度を測定した。無処理細胞と既知濃度の検体で処理した細胞の吸光度を比較することにより、細胞の増殖を50% 阻害する検体濃度（ＩＣ50）を算出した。その結果を第３表に示す。


【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４７】
実施例２（化合物２）
化合物１(2.27 g, 6.68 mmol) に硫酸 (20 mL)を加え、50℃で7 分間撹拌した。反応液を氷水に注ぎ、10 mol/l水酸化ナトリウム水溶液でアルカリ性とし、析出した結晶を濾取した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム：メタノール＝40：1 〜20：1)で精製し、メタノールから再結晶することにより、化合物２ (1.02 g, 60%)を得た。


【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５１】
上記化合物 (1.70 g, 4.57 mmol)に硫酸 (20 mL)を加え、100 ℃で1.3 時間撹拌した。反応液を氷水に注ぎ、10 mol/l水酸化ナトリウム水溶液でpHを9 とし、析出した結晶を濾取した。クロロホルムでトリチュレーションし、化合物３ (278 mg, 24%)を得た。


【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５９】
アルゴン雰囲気下、カリウム ｔｅｒｔ−ブトキシド (682 mg, 6.08 mmol)をテトラヒドロフラン (20 mL)に懸濁し、氷冷下、上記化合物 (697 mg, 1.52 mmol)のテトラヒドロフラン溶液 (10 mL)を5 分間で滴下した。30分後、反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣を酢酸 (10 mL)に溶解し、硫酸 (0.5 mL) を加え、2 時間加熱還流した。酢酸を減圧留去した後、2 mol/l水酸化ナトリウム水溶液で中和し、クロロホルムで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム：メタノール＝20：1)で精製し、化合物６ (676 mg, 99%)を得た。


【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６５】
実施例９（化合物９）
アルゴン雰囲気下、60% 水素化ナトリウム (2.04 g, 51.0 mmol)をジオキサン−トルエン混合溶媒 (1:1, 20 mL) に懸濁し、氷冷下、参考例１−３で得られるエチル １−（２−テトラヒドロピラニル）−２Ｈ−２−オキソピリジン−３−カルボキシラート (7.94 g, 31.6 mmol)および３’−フルオロ−４’−ピバロイルアミノアセトフェノン (6.47 g, 27.3 mmol)の上記混合溶媒溶液 (80 mL)を10分間で滴下した。さらに80℃で40分間加熱還流した後、反応液を氷冷した。10%クエン酸水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、溶媒を減圧留去した。上記操作をもう一度行い、2 回分の残渣を合わせて酢酸 (180 mL) に溶解し、硫酸 (20 mL)を加え、40℃で2.5 時間撹拌した。反応液に10 mol/l水酸化ナトリウム水溶液 (80 mL)を加え、酢酸エチルで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム) で精製し、n-ヘキサンでトリチュレーションすることにより、化合物９ (5.43 g, 2 段階 30%) を得た。


【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６９】
実施例１１（化合物１１）
アルゴン雰囲気下、エチル ２−ヒドロキシ−６−メチル−３−ピリジンカルボキシラート (4.50 g, 24.8 mmol)および３’−フルオロ−４’−ピバロイルアミノアセトフェノン (2.95 g, 12.4 mmol)をジメチルホルムアミド (120 mL) に溶解し、氷冷下、60% 水素化ナトリウム (2.24 g, 56.0 mmol)を加え、室温で1.5 時間撹拌した。反応液に水を加え、n-ヘキサンで2 回洗浄した。水層に10% クエン酸水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣を酢酸 (45 mL)に溶解し、硫酸 (5 mL) を加え、室温で14時間撹拌した。反応液に10 mol/l水酸化ナトリウム水溶液 (20 mL)を加え、酢酸エチルで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム) で精製し、化合物１１ (697 mg, 2 段階 16%) を得た。


【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７３】
実施例１３（化合物１３）
アルゴン雰囲気下、60% 水素化ナトリウム (2.63 g, 65.8 mmol)をジオキサン(20 mL)に懸濁し、加熱還流下、参考例１−４で得られるエチル ２−メトキシ−４−ピバロイルアミノ−３−ピリジンカルボキシラート (5.53 g, 19.8 mmol)および３’−フルオロ−４’−ピバロイルアミノアセトフェノン (3.90 g, 16.5 mmol)のジオキサン (30 mL)溶液を7 分間で滴下した。さらに4 時間加熱還流した後、反応液を氷冷し、水を加え、n-ヘキサンで洗浄した。水層に10% クエン酸水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣を酢酸 (90 mL)に溶解し、硫酸 (10 mL)を加え、室温で24時間撹拌した。反応液に10 mol/l水酸化ナトリウム水溶液 (40 mL)を加え、酢酸エチルで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (n-ヘキサン：アセトン＝4 ：1)で精製し、クロロホルム／n-ヘキサンから再結晶することにより、化合物１３ (1.64g, 2 段階 23%) を得た。


【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７９】
実施例１６（化合物１６）
アルゴン雰囲気下、参考例４で得られる（３−フルオロ−４−ピバロイルアミノフェニル）アセチレン (306 mg, 1.38 mmol)のテトラヒドロフラン (7 mL) 溶液を-78 ℃に冷却した。この溶液にn-ブチルリチウム (1.6 mol/l n-ヘキサン溶液,1.9 mL, 3.04 mmol)を内温が-50 ℃を越えないように滴下し、30分間撹拌した。参考例３−１で得られる４−（２−トリメチルシリルエトキシ）−５−ピリミジンカルボキシアルデヒド (282 mg, 1.26 mmol)のテトラヒドロフラン (2 mL) 溶液を滴下し、30分間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (n-ヘキサン：酢酸エチル＝4 ：1 〜 1：1)で精製し、３−（３−フルオロ−４−ピバロイルアミノフェニル）−１−［４−（２−トリメチルシリルエトキシ）−５−ピリミジニル］プロピノール (233 mg, 42%)を得た。


【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８７】
実施例１８（化合物１８）
アルゴン雰囲気下、参考例４で得られる１，１−ジブロモ−２−（３−フルオロ−４−ピバロイルアミノフェニル）エテン (134 mg, 0.355 mmol) のテトラヒドロフラン (3 mL) 溶液を-78 ℃に冷却した。この溶液にn-ブチルリチウム (1.6 mol/l n-ヘキサン溶液, 0.70 mL, 1.06 mmol) を内温が-50 ℃を越えないように滴下し、10分間撹拌した。参考例３−２で得られる４−メトキシ−６−（２−トリメチルシリルエトキシ）−５−ピリミジンカルボキシアルデヒド (90.3 mg, 0.355 mmol)のテトラヒドロフラン (1 mL) 溶液を滴下し、30分間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (n-ヘキサン：酢酸エチル＝6 ：1)で精製し、３−（３−フルオロ−４−ピバロイルアミノフェニル）−１−［４−メトキシ−６−（２−トリメチルシリルエトキシ）−５−ピリミジニル］プロピノール (111 mg, 66%)を得た。


【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９７】
実施例２１（化合物２１）
アルゴン雰囲気下、参考例４で得られる（３−フルオロ−４−ピバロイルアミノフェニル）アセチレン (650 mg, 2.96 mmol)のテトラヒドロフラン (7 mL) 溶液を-78 ℃に冷却した。この溶液にn-ブチルリチウム (1.6 mol/l n-ヘキサン溶液,3.7 mL, 5.93 mmol)を内温が-50 ℃を越えないように滴下し、10分間撹拌した。参考例３−３で得られる３−（２−トリメチルシリルエトキシ）−２−ピラジンカルボキシアルデヒド (664 mg, 2.96 mmol)のテトラヒドロフラン (2 mL) 溶液を滴下し、1 時間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (n-ヘキサン：酢酸エチル＝6 ：1 〜3 ：1)で精製し、３−（３−フルオロ−４−ピバロイルアミノフェニル）−１−［３−（２−トリメチルシリルエトキシ）−２−ピラジニル］プロピノール (638 mg, 49%)を得た。


【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０９】
参考例１−２
エチル ３−メトキシメトキシ−４−ピリジンカルボキシラート
アルゴン雰囲気下、ジイソプロピルアミン (2.5 mL, 18.0 mmol)をテトラヒドロフラン (30mL) に溶解し、-78 ℃に冷却した。この溶液にn-ブチルリチウム (1.6 mol/l n-ヘキサン溶液, 11.3 mL, 18.0 mmol) を内温が-50 ℃を越えないように滴下し、20分間撹拌した。３−ピリジニル Ｎ，Ｎ−ジエチルカルバメート (3.0 g, 15.5 mmol) のテトラヒドロフラン (9 mL) 溶液を5 分間で滴下した。30分間撹拌した後、ドライアイス (約1 g)を加え、室温まで昇温しながら1 時間撹拌した。反応液を氷冷後、1 mol/l 塩酸でpHを4 とし、クロロホルムで抽出した。溶媒を減圧留去することにより、３−ジエチルカルバモイルオキシ−４−ピリジンカルボン酸 (3.23 g, 88%)を得た。


【手続補正１４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１１】
上記化合物 (1.64 g, 6.90 mmol)にメタノール (15 mL)および2 mol/l 水酸化ナトリウム水溶液 (15 mL)を加え、4.5 時間加熱還流した。メタノールの大部分を減圧留去後、氷冷し、塩酸で酸性とした。析出した結晶を濾取することにより、３−ヒドロキシ−４−ピリジンカルボン酸 (956 mg, 99%)を得た。


【手続補正１５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１２】
上記化合物 (956 mg, 6.88 mmol)にエタノール (15 mL)および硫酸 (3 mL) を加え、2.5 時間加熱還流した。エタノールの大部分を減圧留去後、氷および2 mol/l水酸化ナトリウム水溶液を加え、pHを8 に調節した。クロロホルムで抽出し、溶媒を減圧留去することにより、エチルエステル (863 mg, 75%)を得た。


【手続補正１６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２０】
上記化合物 (8.10 g, 34.8 mmol)をテトラヒドロフラン (150 mL) に溶解し、トリフェニルホスフィン (1.00 g, 38.2 mmol)を加え、室温で2 時間撹拌した。1 mol/l 塩酸 (50 mL)を加え、さらに30分間撹拌した。1 mol/l水酸化ナトリウム水溶液(100 mL) を加え、酢酸エチルで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (n-ヘキサン：酢酸エチル＝3 ：2)で精製し、４−アミノ−３−ブロモ−２−クロロピリジン (6.91 g, 96%)を得た。


【手続補正１７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２６】
上記化合物 (7.17 g, 25.0 mmol)をテトラヒドロフラン (100 mL) に溶解し、-78 ℃に冷却した。この溶液にn-ブチルリチウム (1.6 mol/l n-ヘキサン溶液, 39 mL, 62 mmol) を25分間かけて滴下し、さらに5 分間撹拌した。クロロぎ酸エチル(4.8 mL, 50 mmol)を加え、10分間撹拌した後、水を加え、酢酸エチルで抽出した。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (n-ヘキサン：酢酸エチル＝4 ：1)で精製することにより、標記化合物 (5.64 g, 81%)を得た。


【手続補正１８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２８】
参考例２−１
３−アセチル−４−メトキシピリジン
アルゴン雰囲気下、４−メトキシピリジン (10.9 g, 100 mmol) をテトラヒドロフラン (200 mL) に溶解し、-78 ℃に冷却した。この溶液にn-ブチルリチウム(1.6 mol/l n-ヘキサン溶液, 62 mL, 99 mmol) を1 時間かけて滴下し、さらに10分間撹拌した。アセトアルデヒド (11 mL)を気相で導入し、2 時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム：メタノール＝20：1)で精製し、３−（１−ヒドロキシエチル）−４−メトキシピリジン (3.38 g, 22%)を得た。


【手続補正１９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３２】
参考例２−２
４−アセチル−３−ヒドロキシ−５−ピバロイルアミノピリジン
５−ヒドロキシニコチン酸 (1.0 g, 7.19 mmol) をメタノール (15 mL)に溶解し、硫酸 (3 mL) を加え、4 時間加熱還流した。反応液を氷冷後、2 mol/l 水酸化ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出した。溶媒を減圧留去することにより、メチルエステル (1.01 g, 92%)を得た。


【手続補正２０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３６】
上記化合物 (1.57 g, 7.98 mmol)にメタノール (20 mL) および2 mol/l 水酸化ナトリウム水溶液 (10 mL)を加え、4 時間加熱還流した。メタノールの大部分を減圧留去後、氷冷し、塩酸で酸性とした。析出した結晶を濾取することにより、５−メトキシメトキシニコチン酸 (1.52 g, 99%)を得た。


【手続補正２１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４２】
アルゴン雰囲気下、上記化合物 (2.11 g, 8.85 mmol)をテトラヒドロフラン (30 mL)に溶解し、-78 ℃に冷却した。この溶液にn-ブチルリチウム (1.6 mol/l n-ヘキサン溶液, 13.8 mL, 22.1 mmol) を10分間かけて滴下し、さらに15分間撹拌した。アセトアルデヒド (1.0 mL) を気相で導入し、2.5 時間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出し、溶媒を減圧留去した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム：メタノール＝20：1)で精製し、４−（１−ヒドロキシエチル）−３−メトキシメトキシ−５−ピバロイルアミノピリジン (1.90 g, 76%)を得た。


【手続補正２２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４６】
上記化合物 (1.27 g, 4.51 mmol)をメタノール (10 mL)および1 mol/l 塩酸水溶液(10 mL)の混合溶媒に溶解し、80℃で30分間撹拌した。メタノールの大部分を減圧留去後、2 mol/l 水酸化ナトリウム水溶液で中和し、クロロホルムで抽出した。溶媒を減圧留去し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (クロロホルム：メタノール＝9 ：1)で精製することにより、標記化合物 (1.03 g, 97%)を得た。


【手続補正２３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５０】
アルゴン雰囲気下、ジイソプロピルアミン (3.6 mL, 26.0 mmol)をテトラヒドロフラン (50 mL)に溶解し、-78 ℃に冷却した。この溶液にn-ブチルリチウム (1.6 mol/l n-ヘキサン溶液, 16.2 mL, 26.0 mmol) を内温が-50 ℃を越えないように滴下し、20分間撹拌した。上記化合物 (5.0 g, 21.7 mmol) のテトラヒドロフラン (10 mL)溶液を10分間で滴下した。30分間撹拌した後、クロロぎ酸エチル (2.5 mL, 26.0 mmol)を加え、1.5 時間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (n-ヘキサン：酢酸エチル＝4 ：1)で精製し、エチル ４−クロロ−６−（２−トリメチルシリルエトキシ）−５−ピリミジンカルボキシラ−ト (3.95 g, 64%)を得た。


【手続補正２４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６０】
アルゴン雰囲気下、ジイソプロピルアミン (4.9 mL, 35.4 mmol)をテトラヒドロフラン (60 mL)に溶解し、-78 ℃に冷却した。この溶液にn-ブチルリチウム (1.6 mol/l n-ヘキサン溶液, 22.1 mL, 35.4 mmol) を内温が-50 ℃を越えないように滴下し、30分間撹拌した。上記化合物 (5.34 g, 23.6 mmol)のテトラヒドロフラン (20 mL)溶液を10分間で滴下した。30分間撹拌した後、ジメチルホルムアミド(3.0 mL) を加え、1 時間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (n-ヘキサン：酢酸エチル＝4 ：1)で精製し、標記化合物 (4.04 g, 67%)を得た。


【手続補正２５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６３】
1H NMR (270 MHz, CDCl3) δ(ppm) 0.09 (s, 9H), 1.15 (t, J = 8.4 Hz, 2H),4.42 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 8.07 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 8.18 (s, 1H)
アルゴン雰囲気下、２，２，６，６−テトラメチルピペリジン (3.10 mL, 18.3 mmol) をテトラヒドロフラン (30 mL)に溶解し、-78 ℃に冷却した。この溶液にn-ブチルリチウム (1.6 mol/l n-ヘキサン溶液, 11.5 mL, 18.3 mmol) を内温が-50 ℃を越えないように滴下し、20分間撹拌した。上記化合物 (3.00 g, 15.3 mmol)のテトラヒドロフラン (10 mL)溶液を10分間で滴下した。1 時間撹拌した後、ぎ酸エチル (2.0 mL) を加え、30分間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (n-ヘキサン：酢酸エチル＝6 ：1)で精製し、標記化合物 (1.50 g, 44%)を得た。


【手続補正２６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６５】
参考例４
（３−フルオロ−４−ピバロイルアミノフェニル）アセチレン
アルゴン雰囲気下、４−ブロモ−２−フルオロ−Ｎ−ピバロイルアニリン (2.18 g, 7.96 mmol)のテトラヒドロフラン (30 mL)溶液を-78 ℃に冷却した。この溶液にn-ブチルリチウム (1.6 mol/l n-ヘキサン溶液, 12.0 mL, 19.1 mmol) を内温が-50 ℃を越えないように滴下し、40分間撹拌した。ジメチルホルムアミド (5mL) を加え、室温まで昇温し、2.5 時間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (n-ヘキサン：酢酸エチル＝4 ：1)で精製し、３−フルオロ−４−ピバロイルアミノベンズアルデヒド (1.21 g, 68%)を得た。


【手続補正２７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６８】
アルゴン雰囲気下、上記化合物 (1.00 g, 2.64 mmol)のテトラヒドロフラン (20 mL)溶液を-78 ℃に冷却した。この溶液にn-ブチルリチウム (1.6 mol/l n-ヘキサン溶液, 6.6 mL, 10.6 mmol)を内温が-50 ℃を越えないように滴下し、20分間撹拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、溶媒を減圧留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (n-ヘキサン：酢酸エチル＝6 ：1)で精製し、標記化合物 (508 mg, 88%)を得た。


【手続補正２８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７０】
参考例５
メチル ３−フルオロ−４−ピバロイルアミノベンゾアート
アルゴン雰囲気下、４−ブロモ−２−フルオロピバロイルアニリン (8.49 g,31.0 mmol)をテトラヒドロフラン (100 mL) に溶解し、-78 ℃に冷却した。この溶液にn-ブチルリチウム (1.6 mol/l n-ヘキサン溶液, 43 mL, 68 mmol) を1 時間かけて滴下し、さらに10分間撹拌した。ドライアイス (約2 g)を加え、室温まで昇温しながら2 時間撹拌した。反応液に水を加え、酢酸エチルで洗浄した後、水層に塩酸を加え、pHを3 とした。析出した白色結晶を濾取することにより、３−フルオロ−４−ピバロイルアミノ安息香酸 (5.35 g, 72%)を得た。