【手続補正書】
【提出日】平成16年10月29日(2004.10.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  細胞の可逆的染色のための方法において：
（ａ）レセプター分子を有する細胞を含む試料を提供し、
（ｂ）この細胞と、
（ｉ）結合複合体の少なくとも一つの第１パートナーと結合している、前記レセプターと特異的に結合する少なくとも一つの成分；その際、成分とレセプターとは、低いアフィニティー相互作用を示すものであり、
（ｉｉ）第１パートナーに対する少なくとも２個の結合部位を有する結合複合体の少なくとも一つの他のパートナー；および
（ｉｉｉ）（ｉ）および／または（ｉｉ）と結合しているかまたは結合する能力を有する検出可能な標識とを接触させ、その際、結合複合体の１個または複数個の第１パートナーおよび１個または複数個の他のパートナーは、可逆的結合を形成する能力を有し、かつ、少なくとも２個の成分（ｉ）、少なくとも１個の成分（ｉｉ）および少なくとも１個の成分（ｉｉｉ）を含む結合体は、レセプター分子を介して前記細胞に結合し、その際、前記細胞は染色され、
（ｃ）場合によっては、前記試料の他の成分と前記染色細胞とを分離し、かつ、
（ｄ）場合によっては、可逆的結合を分断することによって、前記細胞から前記染色を除去する工程を含むことを特徴とする、細胞の可逆的染色のための方法。
【請求項２】  Ｔ細胞の可逆的染色のための方法において：
（ａ）Ｔ細胞レセプター（ＴＣＲ）分子を有する細胞を含む試料を提供し、
（ｂ）このＴ細胞と、
（ｉ）ＴＣＲ結合ペプチドおよび結合複合体の少なくとも一つの第１パートナーと結合されたＭＨＣ分子を有する少なくとも一つのＴＣＲ結合リガンド；および
（ｉｉ）結合複合体の第１パートナーに対する少なくとも２個の結合部位を有する結合複合体の少なくとも一つの他のパートナー；および
（ｉｉｉ）（ｉ）および／または（ｉｉ）と結合しているかまたは結合する能力を有する検出可能な標識とを接触させ、その際、結合複合体の１個または複数個の第１パートナーおよび１個または複数個の他のパートナーが、可逆的結合を形成する能力を有し、かつ、少なくとも２個のＴＣＲ結合リガンド（ｉ）、少なくとも一つの成分（ｉｉ）および少なくとも一つの成分（ｉｉｉ）を含む結合体が、ＴＣＲ分子を介して前記Ｔ細胞と結合し、その際、前記Ｔ細胞が染色され、
（ｃ）場合によっては、前記試料の他の成分と前記の染色されたＴ細胞とを分離し、かつ、
（ｄ）場合によっては、可逆的結合を分断することによって、Ｔ細胞から前記染色を除去する工程を含むことを特徴とする、Ｔ細胞の可逆的染色のための方法。
【請求項３】  工程（ｂ）、工程（ｃ）および工程（ｄ）を、１５℃以下、好ましくは約４℃の温度で実施する、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】  第１遊離パートナーが、染色すべき細胞に対して非毒性の化合物である、請求項１から３までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】  結合複合体が、
（ａ）（ｉ）ビオチンおよび（ｉｉ）ビオチンと可逆的結合が可能なストレプトアビジン類似体またはアビジン類似体、
（ｂ）（ｉ）ストレプトアビジンまたはアビジンと可逆的結合が可能なビオチン類似体、および（ｉｉ）ストレプトアビジンまたはアビジン、または前記ビオチン類似体と可逆的結合が可能なストレプトアビジン類似体またはアビジン類似体、および
（ｃ）（ｉ）ストレプトアビジン結合ペプチドまたはアビジン結合ペプチド、および（ｉｉ）ストレプトアビジンまたはアビジン、または前記ストレプトアビジン結合ペプチドまたはアビジン結合ペプチドと可逆的結合可能なストレプトアビジン類似体またはアビジン類似体
から選択される、請求項１から４までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】  染色の除去によって、染色細胞からのレセプター結合成分の解離が生じる、請求項１から５までのいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】  本質的にこれら本来の機能的性質を変化させることなくレセプター特異的細胞群を単離するか、あるいは本質的にレセプター結合成分不含のレセプター特異的細胞群を単離するための、請求項１から６までのいずれか１項に記載の使用。
【請求項８】  レセプター特異的細胞群の機能的性質を測定するか、あるいはレセプター特異的細胞群のｉｎ  ｖｉｔｒｏエキスパンションのための、請求項７に記載の使用。
【請求項９】  前記レセプター特異的細胞群が抗原特異的Ｔ細胞群であり、かつ、レセプター特異的結合成分がＭＨＣ−分子である、請求項７または８に記載の使用。
【請求項１０】  抗原特異的Ｔ細胞群を用いての養子免疫伝達または免疫療法であるか、あるいはＴ細胞診断のための、請求項９に記載の使用。
【請求項１１】  ＴＣＲ−ＭＨＣアフィニティー測定、特にＭＨＣ解離速度の測定のための、請求項９または１０に記載の使用。
【請求項１２】  Ｔ細胞群がＴ細胞系であるかまたはＴ細胞クローンである、請求項９から１１までのいずれか１項に記載の使用。
【請求項１３】  細胞の可逆的染色のための試薬キットにおいて、
（ｉ）結合複合体の少なくとも一つの第１パートナーと結合している、細胞上でレセプター分子と特異的に結合する少なくとも１個の成分、その際、成分とレセプターとは低いアフィニティー相互作用を示しており、
（ｉｉ）前記第１パートナーに対して少なくとも２個の結合部位を有する前記複合体の少なくとも一つの他のパートナー、および
（ｉｉｉ）（ｉ）および／または（ｉｉ）と結合しているかまたは結合する能力を有する検出可能な標識を含み、その際、結合複合体の１個または複数個の第１パートナーおよび１個または複数個の第２パートナーは、可逆的結合を形成する能力を有する、細胞の可逆的染色のための試薬キット。
【請求項１４】  Ｔ細胞の可逆的染色のための試薬キットにおいて、
（ｉ）結合複合体の少なくとも一つの第１パートナーと結合した少なくとも一つのＭＨＣ分子を有する、少なくとも一つのＴＣＲ結合リガンド、
（ｉｉ）結合複合体の第１パートナーに対して少なくとも２個の結合部位を有する結合複合体の少なくとも一つの他のパートナー、および
（ｉｉｉ）（ｉ）および／または（ｉｉ）と結合しているかあるいは結合する能力を有する検出可能な標識を含み、その際、結合複合体の１個または複数個の第１パートナーおよび１個または複数個の他のパートナーが、高いアフィニティーを有する可逆的結合を形成する能力を有する、Ｔ細胞の可逆的染色のための試薬キット。
【請求項１５】  細胞群を、特定の共通レセプターの存在によって定義し、かつ、共通レセプターと結合するアフィニティー試薬を用いて、不均質細胞群から精製し、その際、前記アフィニティー試薬は、本質的に完全に前記レセプターから除去されており、かつ細胞群の機能的性質は精製によって本質的に変化することはない、本質的に純粋な標的細胞群。
【請求項１６】  本質的に精製によって変化することのない機能的性質を有する、本質的に純粋な抗原特異的Ｔ細胞群。
【請求項１７】  Ｔ細胞系またはＴ細胞クローンである、請求項１６に記載のＴ細胞群。
【請求項１８】  レセプター結合リガンドをほぼ含まない、請求項１５から１７までのいずれか１項に記載の細胞群。
【請求項１９】  （ａ）結合複合体の第１パートナーである、少なくとも一つのペプチドドメイン、この場合、これは、結合複合体の少なくとも一つの他のパートナーとの可逆的な結合を形成する能力を有しており、および（ｂ）細胞表面上でレセプターと低いアフィニティーではあるが特異的に結合するリガンドドメインを有する、融合ポリペプチド。
【請求項２０】  少なくとも一つのストレプトアビジン−結合ペプチドおよび（ｂ）ＭＨＣ分子を有する、融合ポリペプチド。