【手続補正書】
【提出日】平成17年5月27日(2005.5.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
特定の培養条件で培養した細胞が培養容器の底面に接着したときの接着面積を求め、その接着面積に基づいて継代培養を続けるか否かを判定する継代培養限界判定方法。
【請求項２】
予めある細胞を前記特定の培養条件で繰り返し継代培養したときの接着面積と残り細胞分裂回数との相関関係を求めておき、今回求めた接着面積をこの相関関係に照らすことにより継代培養を続けるか否かを判定する
請求項１記載の継代培養限界判定方法。
【請求項３】
継代培養を続けるか否かを判定するにあたっては、前記接着面積が所定の閾値より小さいときに継代培養を続けると判定する
請求項１又は２記載の継代培養限界判定方法。
【請求項４】
前記所定の閾値は、予めある細胞を前記特定の培養条件で繰り返し継代培養したときの接着面積と残り細胞分裂回数との相関関係に基づいて決定される
請求項３記載の継代培養限界判定方法。
【請求項５】
前記接着面積を求めるにあたっては、前記細胞による前記底面の被覆割合を示す表面被覆率と前記底面の単位面積あたりいくつの細胞が接着しているかを表す接着細胞濃度とから前記細胞１個あたりの接着面積を求める
請求項１〜４のいずれか記載の継代培養限界判定方法。
【請求項６】
前記接着面積を求めるにあたっては、前記培養容器の底面を撮像した画像に基づいて前記表面被覆率及び前記接着細胞濃度を算出し、前記表面被覆率と前記接着細胞濃度とから前記細胞１個あたりの接着面積を算出する
請求項５記載の継代培養限界判定方法。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれかに記載の継代培養限界判定方法であって、
前記特定の培養条件で培養した細胞の倍加時間を求め、前記接着面積及び前記倍加時間の両方に基づいて継代培養を続けるか否かを判定する
継代培養限界判定方法。
【請求項８】
特定の培養条件で培養した細胞の倍加時間を求め、その倍加時間に基づいて継代培養を続けるか否かを判定する継代培養限界判定方法。
【請求項９】
請求項７又は８に記載の継代培養限界判定方法であって、
予めある細胞を前記特定の培養条件で繰り返し継代培養したときの倍加時間と残り細胞分裂回数との相関関係を求めておき、今回求めた倍加時間をこの相関関係に照らすことにより継代培養を続けるか否かを判定する
継代培養限界判定方法。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれかに記載の継代培養限界判定方法であって、
前記特定の培養条件で培養した細胞の比増殖速度を求め、前記比増殖速度を指標の一つとして継代培養を続けるか否かを判定する
継代培養限界判定方法。
【請求項１１】
特定の培養条件で培養した細胞の比増殖速度を求め、その比増殖速度に基づいて継代培養を続けるか否かを判定する継代培養限界判定方法。
【請求項１２】
請求項１０又は１１に記載の継代培養限界判定方法であって、
予めある細胞を前記特定の培養条件で繰り返し継代培養したときの比増殖速度と残り細胞分裂回数との相関関係を求めておき、今回求めた比増殖速度をこの相関関係に照らすことにより継代培養を続けるか否かを判定する
継代培養限界判定方法。
【請求項１３】
特定の培養条件で培養した細胞が培養容器の底面に接着したときの接着面積を求める接着面積算出手段と、
前記接着面積算出手段によって算出された接着面積に基づいて継代培養を続けるか否かを判定する判定手段と
を備えた継代培養限界判定装置。
【請求項１４】
前記判定手段は、
前記接着面積算出手段によって算出された接着面積を、予めある細胞を前記特定の培養条件で繰り返し継代培養したときの接着面積と残り細胞分裂回数との相関関係に照らすことにより、継代培養を続けるか否かを判定する
請求項１３に記載の継代培養限界判定装置。
【請求項１５】
前記判定手段は、
前記接着面積が所定の閾値より小さいときに継代培養を続けると判定する、
請求項１３又は１４記載の継代培養限界判定装置。
【請求項１６】
前記所定の閾値は、予めある細胞を前記特定の培養条件で繰り返し継代培養したときの接着面積と残り細胞分裂回数との相関関係に基づいて決定される
請求項１５記載の継代培養限界判定装置。
【請求項１７】
前記接着面積算出手段は、
前記細胞による前記底面の被覆割合を示す表面被覆率と前記底面の単位面積あたりいくつの細胞が接着しているかを表す接着細胞濃度とから前記細胞１個あたりの接着面積を算出する
請求項１３〜１６のいずれか記載の継代培養限界判定装置。
【請求項１８】
前記培養容器の底面を撮像する撮像手段を備え、
前記接着面積算出手段は、前記撮像手段によって撮像された画像に基づいて前記表面被覆率及び前記接着細胞濃度を算出し、前記表面被覆率と前記接着細胞濃度とから前記細胞１個あたりの接着面積を算出する
請求項１７に記載の継代培養限界判定装置。
【請求項１９】
請求項１３〜１８のいずれかに記載の継代培養限界判定装置であって、
前記特定の培養条件で培養した細胞の倍加時間を求める倍加時間算出手段を備え、
前記判定手段は、前記細胞接着面積算出手段によって算出された接着面積及び前記倍加時間算出手段によって算出された倍加時間の両方に基づいて継代培養を続けるか否かを判定する
継代培養限界判定装置。
【請求項２０】
特定の培養条件で培養した細胞の倍加時間を求める倍加時間算出手段と、
前記倍加時間算出手段によって算出された倍加時間に基づいて継代培養を続けるか否かを判定する判定手段と
を備えた継代培養限界判定装置。
【請求項２１】
請求項１９又は２０に記載の継代培養限界判定装置であって、
前記判定手段は、
前記倍加時間算出手段によって算出された倍加時間を、予めある細胞を前記特定の培養条件で繰り返し継代培養したときの倍加時間と残り細胞分裂回数との相関関係に照らすことにより、継代培養を続けるか否かを判定する
継代培養限界判定装置。
【請求項２２】
請求項１３〜２１のいずれかに記載の継代培養限界判定装置であって、
前記特定の培養条件で培養した細胞の比増殖速度を求める比増殖速度算出手段を備え、
前記判定手段は、前記比増殖速度算出手段によって算出された比増殖速度を指標の一つとして継代培養を続けるか否かを判定する
継代培養限界判定装置。
【請求項２３】
特定の培養条件で培養した細胞の比増殖速度を求める比増殖速度算出手段と、
前記比増殖速度算出手段によって算出された比増殖速度に基づいて継代培養を続けるか否かを判定する判定手段と
を備えた継代培養限界判定装置。
【請求項２４】
請求項２２又は２３に記載の継代培養限界判定装置であって、
前記判定手段は、
前記比増殖速度算出手段によって算出された比増殖速度を、予めある細胞を前記特定の培養条件で繰り返し継代培養したときの比増殖速度と残り細胞分裂回数との相関関係に照らすことにより、継代培養を続けるか否かを判定する
継代培養限界判定装置。
【請求項２５】
コンピュータに請求項１〜１２のいずれかに記載の継代培養限界判定方法を実現させるか、又は、コンピュータを請求項１３〜２４のいずれかに記載の継代培養限界判定装置として機能させるためのプログラム。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
本発明の継代培養限界判定方法において、予めある細胞を前記特定の培養条件で繰り返し継代培養したときの接着面積と残り細胞分裂回数との相関関係を求めておき、今回求めた接着面積をこの相関関係に照らすことにより継代培養を続けるか否かを判定してもよい。こうすれば、細胞の接着面積から残り細胞分裂回数を予測することができるため、継代培養を続けるか否かを判定しやすい。具体的には、残り細胞分裂回数が所定値（例えば１回とか２回）になったときを継代培養の限界点と定めたとすると、予め残り細胞分裂回数がその所定値になるときの接着面積を閾値として求めておき、今回算出された接着面積とその閾値とを比較することにより継代培養を続けるか否かを判定してもよい。より具体的には、本発明の継代培養限界判定方法において、継代培養を続けるか否かを判定するにあたっては、前記接着面積が所定の閾値より小さいときに継代培養を続けると判定してもよい。