【手続補正書】
【提出日】平成15年12月9日(2003.12.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
静止期細菌の表現型的に抗生物質耐性の亜個体群を調製する方法であって、
(i) 細菌培養菌を静止期まで発育させる工程、および
(ii)  前記静止期の培養菌を、発育細菌を殺すのに充分な濃度および時間にて一以上の抗菌剤でもって処置して、表現型的に抗生物質耐性の亜個体群を選択する工程
を有する方法。
【請求項２】
前記抗菌剤が、リファンピシン、カナマイシン、アンピシリンおよびピラジナミドからなる群から選択されることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記抗菌剤が、105〜109細菌/mlの濃度で存在する細菌について、25〜150μg/mlの濃度で用いられることを特徴とする請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記細菌が、Staphylococcus aureus、Escherichia coli、Haemophilus influenzae、Streptococcus pyogenes、Streptococcus gordoniiまたはMycobacterium tuberculosisで
あることを特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記細菌がMycobacterium tuberculosisであり、かつ、前記抗菌剤がリファンピシンであることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記細菌がEscherichia coliであり、かつ、前記抗菌剤がカナマイシンであることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記細菌がStaphylococcus aureusであり、かつ、前記抗菌剤がアンピシリンであることを特徴とする請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれかで定義された方法で入手可能な静止期細菌の表現型的に抗生物質耐性の亜個体群。
【請求項９】
試験化合物または薬剤の抗菌活性を評価するため、または静止期の細菌に対して抗菌活性を有する化合物または薬剤を単離するための方法であって、
(i) 請求項１〜７のいずれかで定義された方法に従って静止期の細菌の表現型的に抗生物質耐性の亜個体群を調製する工程、
(ii)  前記表現型的に耐性の亜個体群のサンプルに一以上の試験化合物または薬剤をインキュベートする工程、および
(iii) 前記表現型的に耐性の亜個体群に対する抗菌効果を評価し、および必要に応じて抗菌活性を示す化合物または薬剤を単離する工程
を有する方法。
【請求項１０】
同定または単離される薬剤または化合物がより大きい規模で製造される追加工程をさらに含む、請求項９で定義された方法。
【請求項１１】
請求項９または１０で定義された方法に従って同定または調製される抗菌剤。
【請求項１２】
請求項８で定義された、細菌の表現型的に抗生物質耐性の亜個体群に対する抗菌活性を示す化合物。
【請求項１３】
請求項１１または１２で定義された抗菌剤または化合物および製薬上許容される賦形剤または希釈剤を含有する組成物。
【請求項１４】
活発に発育する細菌に対して活性を有する少なくとも一つの抗菌剤および請求項１２または１３で定義された静止期細菌の表現型的に抗生物質耐性の亜個体群に対して活性を有する少なくとも一つの抗菌剤または化合物を含有する処方であって、当該処方は、細菌感染の処置において、同時、別個、または連続の使用のために組み合わせた調製剤として提供されることを特徴とする処方。
【請求項１５】
細菌感染の処置における使用のための、請求項１２または１３で定義された抗菌剤または化合物。
【請求項１６】
細菌感染の処置のための医薬の調製における、請求項１２または１３で定義された抗菌剤または化合物の使用。
【請求項１７】
細菌感染の処置方法であって、このような治療を必要とする患者に、請求項１２または１３で定義された抗菌剤または化合物の有効量を投与することを含む方法。
【請求項１８】
活発に発育する細菌に作用する一以上の抗菌剤を投与することをさらに有する請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記細菌感染が、感染後に休眠期に入ってもよい耐久性細菌の亜個体群により特徴づけられることを特徴とする請求項１４〜１８のいずれかに記載の処方、薬剤、化合物、使用または方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
表現型的に抗生物質耐性な副次集団が、インビボで代謝的に活性なままであり、疾病の再発または兆候を生じ得る持続性細菌の典型として見られた。したがって、たとえばStaphylococcus、Escherichia、HemophilusおよびMycobacterium属由来の細菌といった、インビボで休眠状態を示す細菌の抗生物質耐性集団は、特に興味深い。黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）、大腸菌（Escherichia coli）、インフルエンザ菌（Haemophilus influenzae）、Streptococcus pyogenes、Streptococcus gordoniiおよびマイコバクテリウム・ツベルクローシスなどの細菌由来の副次集団が特に好ましい。


【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
特に好ましい面においては、細菌は、リファンピシン、カナマイシンおよびアンピシリンでそれぞれ処置されたマイコバクテリウム・ツベルクローシス、大腸菌（Escherichia coli）および黄色ブドウ球菌（Staphylococcus aureus）である。
静止期の細菌を、多量の投薬量の抗菌剤で処置することにより得られる、このような表現型的に耐性な静止期の細菌の副次集団は、本発明のさらなる面を構成する。


【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
耐久性細菌の抗菌剤に対する耐性は細胞壁透過性の減少および／または代わりとなるシグマ因子（たとえばsigB）の使用に基づくことが信じられている。したがって、細胞壁透過性の増加または代わりとなるシグマ因子の使用を阻害する効果を有する新規の抗菌剤が特に好ましい。
本発明に従って同定された抗菌剤は、症候性疾患が始動または再始動する原因となるプールを、休眠細菌が提供する疾患または障害の処置における特別の用途を有する。特に、Staphylococcus、Escherichia、HemophilusおよびMycobacterium属の病原性細菌により引き起こされる疾患を標的とすることができる。前記耐久性細菌に対して活性を有する抗菌剤は、それらの耐久性細菌が休眠または非休眠段階にある場合に、疾患または状態の症候または無症候段階の間において用いることができ、かつ必要に応じて非休眠細菌に作用する薬剤と一緒に用いてもよい。ここで用いられるように、「非休眠細菌」は、その時は非休眠状態にある、つまり活発に発育しているが、他の時には休眠状態を示していても、いなくてもよい細菌を包含する。


【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３７】
本発明の各々の観点において、抗菌剤の標的となる静止期の細菌としては、病原性細菌、たとえばStaphylococcus aureus、Haemophilus influenzae、Streptococcus pyogenes
、Streptococcus gordonii、Escherichia coli、および特に好ましくはMycobacterium tuberculosisを挙げることができる。
以下の非限定的な実施例は、本発明を説明する役割を果たす。添付した図面は下記の通りである。