(57)【要約】  本発明は、癌の免疫療法に有用な免疫賦活作用を示す物質、特にヒト免疫関連細胞に対してIFNβの産生を誘導し、及び／又はNK活性を増強させる物質を提供することを課題とする。  本発明は、麻疹ウイルス由来のRNAを含むdiRNAを有効成分とする免疫治療用薬剤、該免疫治療用薬剤とグラム陽性菌の細胞壁骨格とを含む腫瘍免疫治療用組成物を提供する。本発明の免疫治療用薬剤は、細菌等の異物あるいは癌などの新生腫瘍等に対してのヒトの免疫防御力を高めることが出来る、極めて安全な医薬となり得る。
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
麻疹ウイルス由来のRNA配列を有するdiRNAを有効成分とする免疫治療用薬剤。
【請求項２】
腫瘍免疫治療に用いるための請求項１に記載の免疫治療用薬剤。
【請求項３】
麻疹ウイルスが馴化ウイルス株又はワクチン株である、請求項１又は２に記載の免疫治療用薬剤。
【請求項４】
馴化ウイルス株がEdmonston株、Nagahata株又はIchinose-V株である、請求項３に記載の免疫治療用薬剤。
【請求項５】
ワクチン株がSchwarz株又はTanabe株である、請求項３に記載の免疫治療用薬剤。
【請求項６】
diRNAが配列番号１〜５に示されるいずれかのRNA配列を有するdiRNAである、請求項１又は２に記載の免疫治療用薬剤。
【請求項７】
diRNAが配列番号９〜１５に示されるいずれかのRNA配列からなるdiRNAである、請求項６に記載の免疫治療用薬剤。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれかに記載の免疫治療用薬剤とグラム陽性菌の細胞壁骨格とを含む腫瘍免疫治療用組成物。
【請求項９】
グラム陽性菌の細胞壁骨格がBCG-CWSである、請求項８に記載の腫瘍免疫治療用組成物。
【請求項１０】
麻疹ウイルス由来のRNA配列を有するdiRNAを有効成分とする、インターフェロンの発現を促進させる及び／又はNK活性を増強させるための医薬。
【請求項１１】
麻疹ウイルスが馴化ウイルス株又はワクチン株である、請求項１０に記載の医薬。
【請求項１２】
馴化ウイルス株がEdmonston株、Nagahata株又はIchinose-V株である、請求項１１に記載の医薬。
【請求項１３】
ワクチン株がSchwarz株又はTanabe株である、請求項１１に記載の医薬。
【請求項１４】
diRNAが配列番号１〜５に示されるいずれかのRNA配列を有するdiRNAである、請求項１０に記載の医薬。
【請求項１５】
diRNAが配列番号９〜１５に示されるいずれかのRNA配列からなるdiRNAである、請求項１４に記載の医薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、麻疹ウイルス由来のRNA配列を有するdiRNAを有効成分とする免疫治療用薬剤、ならびに当該diRNAとグラム陽性菌の細胞壁骨格とを含む腫瘍免疫治療用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
癌の治療法の一つに、患者自身の癌細胞に対する免疫力を亢進させて癌の退縮を誘導する、いわゆる癌免疫療法がある。この療法において、癌抗原としてペプチドワクチンを投与する方法が主流であるが、Rosenbergら（非特許文献１）によれば、この方法の有効率は2.5％に留まるとされている。【０００３】
この癌免疫療法の有効率を上げる方法として、癌抗原の投与と同時に、樹状細胞を活性化させるアジュバントを同時投与する方法が提唱されている（特許文献１）。特許文献１が開示するアジュバントは、グラム陽性菌であるマイコバクテリウムボビスのカルメット―ゲラン菌の細胞壁骨格（以下、BCG−CWSとする）であり、未成熟樹状細胞を成熟樹状細胞に成熟化させる機能を有しており、その結果、細胞障害Tリンパ球（CTL）が誘導され、癌に対する免疫が賦活化される。【０００４】
BCG−CWSは、実際に癌患者に投与することで５年生存率を10％以上向上させる他、殆ど副作用を示さないという利点を有する。しかしその後の研究により、BCG−CWSはTLR（Toll Like Receptor）２及び４を活性化するリガンドであることが明らかとなった。この事実は、BCG−CWSがヒト樹状細胞に対するI型インターフェロン（I型interferon、IFN-βとする） 誘導能ならびにNK活性を増強させる能力のいずれも有しないアジュバントである事実と一致する。また、BCG−CWSの単独投与により誘導されるCTLは、MHCクラスI蛋白質の発現レベルが低い癌を殺傷することができない。そのため、Rosenbergらのペプチドワクチンと比べて抗癌作用は優れるものの、癌の完全退縮を行うことは難しいと考えられる。
【特許文献１】WO01/048154
【非特許文献１】Rosenbergら、Nat. Med．、2004年、第10巻、第9号、第909-925頁
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、BCG−CWSに代わり、あるいはこれと同時に利用することによってさらに優れた抗癌作用を示す、特に癌の免疫療法に利用可能な免疫治療用薬剤を提供すること、ならびに癌の免疫療法に有用な免疫賦活作用を示す物質、特にIFNβの産生を誘導し、及び／又はNK活性を増強させる物質を提供することを課題とする。【０００６】
本発明者らは、まったく意外なことに、麻疹ウイルス、特に馴化麻疹ウイルス株ならびに麻疹ウイルスワクチン株の中に所望の活性を有する物質の存在を確認し、さらにその物質がdiRNA（defective interference RNA、defective interfering, またはループ型RNAとも呼ばれる）であることを突き止め、下記の各発明を完成した。【０００７】
（１）麻疹ウイルス由来のRNA配列を有するdiRNAを有効成分とする免疫治療用薬剤。【０００８】
（２）腫瘍免疫治療に用いるための（１）に記載の免疫治療用薬剤。【０００９】
（３）麻疹ウイルスが馴化ウイルス株又はワクチン株である、（１）又は（２）に記載の免疫治療用薬剤。【００１０】
（４）馴化ウイルス株がEdmonston株、Nagahata株又はIchinose-V株である、（３）に記載の免疫治療用薬剤。【００１１】
（５）ワクチン株がSchwarz株又はTanabe株である、（３）に記載の免疫治療用薬剤。【００１２】
（６）diRNAが配列番号１〜５に示されるいずれかのRNA配列を有するdiRNAである、（１）又は（２）に記載の免疫治療用薬剤。【００１３】
（７）diRNAが配列番号９〜１５に示されるいずれかのRNA配列からなるdiRNAである、（６）に記載の免疫治療用薬剤。【００１４】
（８）（１）〜（７）のいずれかに記載の免疫治療用薬剤とグラム陽性菌の細胞壁骨格とを含む腫瘍免疫治療用組成物。【００１５】
（９）グラム陽性菌の細胞壁骨格がBCG-CWSである、（８）に記載の腫瘍免疫治療用組成物。【００１６】
（１０）麻疹ウイルス由来のRNA配列を有するdiRNAを有効成分とする、インターフェロンの発現を促進させる及び／又はNK活性を増強させるための医薬
（１１）麻疹ウイルスが馴化ウイルス株又はワクチン株である、（１０）に記載の医薬。【００１７】
（１２）馴化ウイルス株がEdmonston株、Nagahata株又はIchinose-V株である、（１１）に記載の医薬。【００１８】
（１３）ワクチン株がSchwarz株又はTanabe株である、（１１）に記載の医薬。【００１９】
（１４）diRNAが配列番号１〜５に示されるいずれかのRNA配列を有するdiRNAである、（１０）に記載の医薬。【００２０】
（１５）diRNAが配列番号９〜１５に示されるいずれかのRNA配列からなるdiRNAである、（１４）に記載の医薬。
【発明の効果】
【００２１】
本発明の免疫治療用薬剤は、細菌等の異物あるいは癌などの新生腫瘍等に対してのヒトの免疫防御力を高めることが出来、抗癌剤あるいは腫瘍免疫療法剤として利用可能である。また、本発明の免疫治療用薬剤とBCG-CWSとを組み合わせて使用することにより、癌の免疫治療に有効な医薬組成物（腫瘍免疫治療用組成物）となり得る。また本発明にかかるdiRNAは、マウス、ヒトに皮下投与（100μg）しても毒性は見られず、安全な医薬となり得る。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】各麻疹ウイルス株のdiRNAの検出結果を示す電気泳動写真である。
【図２】p(+)MV DI GFPプラスミドの概略図を示す。
【図３】diRNA-ICV-Gの概略図を示す。
【図４】diRNA-ICV-Gを導入したHEK細胞のルシフェラーゼの蛍光量を示す。
【図５】diRNA-ICV-Gの投与による移植担癌の退縮効果を示す。
【図６】diRNA-ICV-Gの投与（−○−）によるNK細胞の細胞傷害活性の増加を示す。●はコントロールを示す。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２３】
diRNAは、例えば麻疹ウイルス、特に馴化麻疹ウイルス又は麻疹ウイルスワクチン株の中に含まれている様な、ステム＆ループ構造を有する２重鎖RNAである。麻疹ウイルスワクチン株においては、diRNAは夾雑物であり、ウイルスの複製過程に生じる非感染性のRNAであると報告されている（Robertら、Cell、1981年、第26巻、第145-154頁）。diRNAは、麻疹ウイルスワクチン株並びに馴化麻疹ウイルスにおいてその存在が確認されているが、麻疹ウイルスの複製には全く不要の物質と考えられており、ウイルスの複製、増殖における役割や被感染宿主に対する影響等について、殆ど注目されることのなかった物質である。【００２４】
また、麻疹ウイルス、特に麻疹ワクチンウイルスは、投与された個体に対して麻疹ウイルスの感染に対する免疫能を与えるが、逆に個体の免疫力自体は低下することが報告されている（Hahm Bら、Virology、2004年、第323巻、第2号、第292-302頁）。本発明は、全く意外にも、かかる麻疹ウイルスワクチンの中に癌に対する免疫力を高める物質が存在し、さらに該物質がdiRNAであることが確認されたことに基づく発明である。【００２５】
diRNAは、トレイラー配列及びリーダー配列、又はトレイラー配列及び該トレイラー配列に相補的な配列のどちらかの組み合わせを有し、これによって形成されるステム＆ループ構造を有するRNAである。トレイラー配列はウイルスゲノムの5’末端部分に存在し、リーダー配列は3'末端部分に存在し、それぞれ麻疹ウイルスゲノムの転写、複製等に必須の特異的配列である。トレイラー配列とリーダー配列はほぼ相補的な配列となっており、これらがアニーリングすることによって、diRNAのステム＆ループ構造が形成される。トレイラー配列と該トレイラー配列の相補的配列を有するdiRNAも、これらがアニーリングすることによってステム＆ループ構造が形成される。【００２６】
馴化麻疹ウイルス株であるEdmonston(ED)株、Ichinose-V（IC-V）株、及びワクチン株であるSchwarz株、Tanabe株のウイルスゲノムは、配列番号１に示されるRNA配列からなるトレイラー配列を有している。また馴化麻疹ウイルス株であるNagahata（NV）株は、配列番号１に示されるRNA配列の１５塩基目のみがグアニンからアデニンへ変異した配列番号２に示されるRNA配列からなるトレイラー配列を有する。また、馴化麻疹ウイルス株であるIC-V株は配列番号３に示されるRNA配列からなるリーダー配列を、Edmonston(ED)株は配列番号４に示されるRNA配列からなるリーダー配列を、ワクチン株であるSchwarz株は配列番号５に示されるRNA配列からなるリーダー配列をそれぞれ有している。なお、配列番号３〜５に示される各リーダー配列は、２６番目、４２番目、５０番目の塩基が異なる以外は、同一のRNA配列となっている。【００２７】
麻疹ウイルス由来のdiRNAは、RNA配列や塩基数のバリエーションを有する一方で、トレイラー配列及びリーダー配列、又はトレイラー配列及び該トレイラーと相補的な配列を含み、ステム＆ループ構造を形成するという構造的な特徴も有している。従って本発明は、上記配列番号１〜５に示される具体的なRNA配列のいずれかを含むdiRNAに限定されず、麻疹ウイルス由来のRNAを含み、ステム＆ループ構造が保持され、かつ生体の癌に対する免疫力を高める機能を維持する限りにおいて、上記RNA配列において複数の、好ましくは数個から数十の塩基が置換、欠失、付加等されたRNA配列からなるdiRNAも含む。【００２８】
後述する実施例において示すように、diRNAを含む本発明の免疫治療用薬剤をインビトロでヒト細胞に加えると細胞からのインターフェロンの産生が誘導され、また移植担癌マウスにdiRNAを含む本発明の免疫治療用薬剤を腹腔投与すると、NK細胞の細胞傷害活性による明らかな癌の退縮が観察された。その一方、投与されたdiRNAによる感染症その他の有害事象は全く観察されなかった。【００２９】
本発明にかかるdiRNAはRobertらに報告されるように従来公知であり、医療関係者に広く供給されている麻疹ウイルス、特に馴化麻疹ウイルス又は麻疹ウイルスワクチン株からManiatisらの方法（Molecular Cloning、1989年、Cold Spring Harbor Laboratory Press）に準じて分離、精製することができる。馴化麻疹ウイルス株であるED株、NV株、IC-V株は、それぞれ国立感染症研究所より入手することができる。また麻疹ウイルスワクチン株であるSchwarz株、Tanabe株は、それぞれ武田薬品工業株式会社、田辺製薬株式会社より入手可能である。【００３０】
また、上記の株より得られるdiRNAあるいはそれらを基にRNA配列の一部を人為的に組み換えてなるdiRNAは、一般的な遺伝子組み換え手法を用いて製造することもできる。遺伝子組み換え手法による製造は、例えば配列番号１〜５に示されるいずれかのRNA配列に相補的な塩基配列を含むDNAを組み込んだ適当な発現ベクターを宿主細胞内で発現させてdiRNAを生産させ、回収すればよい。あるいはインビトロで配列番号１〜５に示されるいずれかのRNA配列に相補的な塩基配列を含むDNAを鋳型にしてRNAを生産し、回収すればよい。本発明で利用可能な発現ベクターやプロモーター等の遺伝子発現系の種類、さらには組み換え宿主細胞の種類、インビトロ転写系、さらにはRNAの回収方法などには格別の制限はなく、当業者が利用可能なあらゆる手法を用いることができる。【００３１】
本発明の腫瘍免疫治療用組成物は、上記のdiRNAを有効成分とする免疫治療用薬剤とグラム陽性菌の細胞壁骨格とを含む。グラム陽性菌の細胞壁骨格は、グラム陽性菌を物理的に粉砕した後、除核酸、除タンパク、脱脂などの精製工程を経て得られる不溶性残渣であり、特許文献１に詳しく記載されている。【００３２】
本発明におけるグラム陽性菌の細胞壁骨格としては、マイコバクテリア属細菌、ノカルディア属細菌、コリネバクテリア属細菌等の細胞壁骨格が挙げられるが、特にマイコバクテリア属ウシ型結核菌の細胞壁骨格（BCG−CWS）が好ましい。このグラム陽性菌の細胞壁骨格と麻疹ウイルス由来のdiRNAを含む本発明の腫瘍免疫治療用組成物は、癌の種類、特にMHCクラスI蛋白質の発現の高低によらずに、癌を退縮させる効果を有する。【００３３】
本発明の腫瘍免疫治療用組成物は、グラム陽性菌の細胞壁骨格とdiRNAの他に、生体への投与経路、剤型などに応じた種々の賦形剤、担体、他の医薬成分そのほかの成分を配合して調整することができる。本発明の腫瘍免疫治療用組成物の投与経路には格別の制限は無いが、経口投与ならびに皮下投与、血管投与、経粘膜投与が好ましい。【００３４】
また本発明にかかるdiRNAは、上記の通りヒト細胞に対してIFN-β発現を誘導し、またNK細胞のNK活性を増強させる機能を有していることから、IFN-βの発現を促進させる及び／又はNK活性を増強させるための医薬として利用することも可能である。前述の通り、麻疹ウイルスワクチンは生体の免疫力を弱めることが知られているが、麻疹ウイルスワクチンに含まれるdiRNAが、生体に対してIFN-βの発現を促進させる等によって生体の免疫防御能を高める機能を有していることは意外な知見であった。【００３５】
本発明にかかるdiRNAを含むインターフェロンの発現を促進させる及び／又はNK活性を増強させるための医薬は、有効成分であるdiRNAの他に、生体への投与経路、剤型に応じた種々の賦形剤、担体、他の医薬成分その他の成分を配合して調整することができる。投与経路にも格別の制限はないが、経口投与ならびに皮下投与、血管投与が好ましい。【００３６】
以下、実施例を通じてさらに本発明を詳細に説明するが、本発明はかかる実施例に限定されるものではない。
【実施例】
【００３７】
＜実施例１＞  diRNAの確認、生産
（１）表１に示される任意の麻疹ウイルス株からQIAamp Viral RNA Mini kit (QIAGEN社)を用いて2μgの全RNAを抽出し、70℃にて5分熱処理した後、氷上にて2分冷却した。
【表１】
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【００３８】
冷却後、MMRV-reverse transcriptase (Promega社)を用いて90分間37℃にて逆転写反応を行った。逆転写後、作製されたcDNAを鋳型としてPCRを行い、PCR産物の有無を電気泳動にて確認した。以下にPCRに使用したプライマー配列（P1、P2）を示す。【００３９】
P1：5’-TATAAGCTTACCAGACAAAGCTGGGAATAGAAACTTCG-3’（配列番号６）
P2：5’-CGAAGATATTCTGGTGTAAGTCTAGTA-3’（配列番号７）
PCR反応が進行していることを示すコントロール反応用のプライマーは上記P1とP3を用いた。【００４０】
P3：5’-TTTATCCAGAATCTCAARTCCGG-3’（配列番号８）
その結果、図１に示すようにED株、NV株、IC-V株、Schwarz株で各１種類、Tanabe株で３種類のPCR産物が確認された。各PCR産物をそれぞれpCR blant vector (Invitrogen社)に挿入し、BigDye（登録商標） Terminator v3.1 Cycle Sequence Kit (Applied Biosystems社)を用いてRNA配列を決定した（diRNA-ED：配列番号９、diRNA-NV：配列番号１０、diRNA-ICV：配列番号１１、diRNA-SH：配列番号１２、diRNA-TA1：配列番号１３、diRNA-TA2：配列番号１４、diRNA-TA3：配列番号１５）。【００４１】
diRNA-ED、diRNA-ICV、diRNA-SH、diRNA-TA1、diRNA-TA2、diRNA-TA3は配列番号１に示されるトレイラー配列及び該トレイラー配列に相補的な配列を含み、diRNA-NVは配列番号２に示されるトレイラー配列及び該トレイラー配列に相補的な配列を含んでいた。【００４２】
（２）IC-V株のゲノム配列を有するプラスミド（Takedaら、J. Virol、2000年、第74巻、第6643-6647頁）にGFP蛍光蛋白質をコードするDNAを組み込んだp(+)MV323GFPプラスミド（Singaiら、J. Immunol.、2005年、第175巻5号、第3252-3261頁）を鋳型とし、同プラスミドからリーダー配列（配列番号３）及びトレイラー配列（配列番号１）を除くIC-V株のゲノム配列を欠失させたプラスミドp(+)MV DI GFPを、下記の塩基配列からなるプライマー（P4、P5）を用いて、PCR法によって作製した(図２)。【００４３】
P4：5’-GCCATCGATTATTACTTGTACAGCTCGTCC-3’  （配列番号１６）
P5：5’-GGATCGATTAAGGATTAATTGGTTGAACTCC-3’  （配列番号１７）
次に、p(+)MV DI GFPを鋳型とし、リーダー配列−GFP−トレイラー配列を鋳型とは逆向きに有するプラスミドp(-)MV DI GFPを、下記の2組のプライマー（P6及びP7、ならびにP8及びP9）を用いて、PCR法によって作製した。【００４４】
P6：5’-GGCCGGCATGGTCCCAGCCTCCTCGCT-3’   （配列番号１８）
P7：5’-TATAGTGAGTCGTATTACGCGCGCTT-3’   （配列番号１９）
P8：5’-ACCAAACAAAGTTGGGTAAGGATAGATCAATCAATGATCAT-3’（配列番号２０）
P9：5’-ACCAGACAAAGCTGGGAATAGAAACTTCGTATTTTCAAAGT-3’（配列番号２１）
このp(-)MV DI GFPを鋳型として、MEGAscript T7 kit (Ambion社)を用い、GFP蛍光タンパク質をコードする領域がループアウトされたステム＆ループ構造を有するdiRNA-ICV-G（図３）をインビトロで調製した。【００４５】
＜実施例２＞diRNAによるIFN-βの産生誘導
（１）IFN産生を誘導する転写因子であるIFN-stimulated response element (ISRE)をコードする塩基配列の下流にルシフェラーゼ蛍光タンパク質をコードする塩基配列を組み込んだpISRE-Lucプラスミド（Stratagene社）を、Lipofectin（QIAGEN社）を用いてHEK293細胞（ATCC American type culture collection社）に導入し、形質転換細胞を得た。【００４６】
（２）Dulbecco’s modified Eagle’s medium (DMEM) (Invitrogen, CA)／10% FCS培地で24時間培養した（１）の形質転換HEK293細胞に、LipofectAMINE 2000（Invitrogen社）を用いて実施例２で調製したdiRNA-ICV-Gを導入し、導入から6時間後にルシフェラーゼの蛍光量を測定した。また、コントロールとして、p(+)MV323プラスミドのみを導入した（１）の形質転換HEK293細胞と、熱処理によって変性したdiRNA-ICV-G (denatured DI RNA)を導入した（１）の形質転換HEK293細胞とを用意し、それぞれについてルシフェラーゼの蛍光量を測定した。その結果、未変性のdiRNA-ICV-Gを導入した形質転換HEK293細胞において、コントロールと比較してルシフェラーゼの蛍光量が増加していることが確認された（図４）。【００４７】
＜実施例３＞diRNAによる移植担癌の退縮
C57BL/6近交系マウスの側腹部にB16メラノーマ細胞（大阪府立成人病センター研究所より分与）を１×10６cells移植し、腫瘍の大きさの経時的変化を計測した（図５）。なお、B16メラノーマ細胞はMHCクラスI分子を発現していないため、キラーT細胞の活性化が誘導されず、インターフェロンによって増強されたNK細胞の活性によってのみB16メラノーマ腫瘍が退縮する。特許文献１に記載されている方法によって調製したBCG-CWS 25μg／0.1 ml、MALP-2（Oncologica社, Nagoya Japan）10μg／ml、diRNA-ICV-G 10μg／mlそれぞれを含む生理食塩水をアジュバントとして用意し、B16メラノーマ細胞の癌抗原エピトープであるTRP2-pep8（Rosenberg S.より分与）0.1 mgと共に、B16メラノーマ細胞の移植前に隔週で３回、ならびに移植後に隔週で３回（図５の矢印の時点）腹腔投与を行った。この結果、diRNA-ICV-Gを投与した場合において、顕著な癌の退縮効果（増殖抑制効果）が認められた。【００４８】
＜実施例４＞diRNAによるNK細胞活性増強作用
実施例３でアジュバントを投与した３種類のマウスから、Lympholyte-M   (Cederlane Laboratory社)を用いてリンパ球を抽出した後、MACS beads(Miltenyi Biotec 社)を用いたNK 調製用ネガティブセレクションにより、NK細胞を得た。NK細胞とB16メラノーマ細胞を、RPMI-1640培地を用いて共培養し、５１Cr-release assay法によるNK細胞の細胞傷害活性を測定した。図６に示すように、diRNA-ICV-Gを投与したマウス由来のNK細胞は、食塩水を投与したマウス由来のNK細胞（コントロール）と比較して顕著な細胞傷害活性の上昇が認められた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】平成20年9月30日(2008.9.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
馴化麻疹ウイルス株又は麻疹ウイルスワクチン株由来のｄｉＲＮＡを有効成分とする免疫治療用薬剤。
【請求項２】
腫瘍免疫治療に用いるための請求項１に記載の免疫治療用薬剤。
【請求項３】
（削除）
【請求項４】
馴化ウイルス株がＥｄｍｏｎｓｔｏｎ株、Ｎａｇａｈａｔａ株又はＩｃｈｉｎｏｓｅ−Ｖ株である、請求項１又は２に記載の免疫治療用薬剤。
【請求項５】
ワクチン株がＳｃｈｗａｒｚ株又はＴａｎａｂｅ株である、請求項１又は２に記載の免疫治療用薬剤。
【請求項６】
ｄｉＲＮＡが配列番号１〜５に示されるいずれかのＲＮＡ配列を有するｄｉＲＮＡである、請求項１又は２に記載の免疫治療用薬剤。
【請求項７】
ｄｉＲＮＡが配列番号９〜１５に示されるいずれかのＲＮＡ配列からなるｄｉＲＮＡである、請求項６に記載の免疫治療用薬剤。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれかに記載の免疫治療用薬剤とグラム陽性菌の細胞壁骨格とを含む腫瘍免疫治療用組成物。
【請求項９】
グラム陽性菌の細胞壁骨格がＢＣＧ−ＣＷＳである、請求項８に記載の腫瘍免疫治療用組成物。
【請求項１０】
馴化麻疹ウイルス株又は麻疹ウイルスワクチン株由来のｄｉＲＮＡを有効成分とする、インターフェロンの発現を促進させる及び／又はＮＫ活性を増強させるための医薬。
【請求項１１】
（削除）
【請求項１２】
馴化ウイルス株がＥｄｍｏｎｓｔｏｎ株、Ｎａｇａｈａｔａ株又はＩｃｈｉｎｏｓｅ−Ｖ株である、請求項１０に記載の医薬。
【請求項１３】
ワクチン株がＳｃｈｗａｒｚ株又はＴａｎａｂｅ株である、請求項１０に記載の医薬。
【請求項１４】
ｄｉＲＮＡが配列番号１〜５に示されるいずれかのＲＮＡ配列を有するｄｉＲＮＡである、請求項１０に記載の医薬。
【請求項１５】
ｄｉＲＮＡが配列番号９〜１５に示されるいずれかのＲＮＡ配列からなるｄｉＲＮＡである、請求項１０に記載の医薬。
【国際調査報告】
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