【手続補正書】
【提出日】平成15年7月17日(2003.7.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０１】
実施例４：２−［２−（２−チオビフェニルカルボニルエトキシ）−エトキシ］エチル  ３−Ｏ−α−Ｄ−ガラクトピラノシル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２３）の調製
この調製のための試薬の合成及び調製スキームそれ自身は、それぞれ反応スキーム２及び３に示される。


【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０２】
２−［２−（２−チオビフェニルカルボニルエトキシ）−エトキシ］エチル  ３−Ｏ−α−Ｄ−ガラクトピラノシル−β−Ｄ−ガラクトピラノシドの合成のための試薬


【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０５】
２−［２−（２−チオベンゾイルエトキシ）エトキシ］エタノール（１４）
乾燥ＤＭＦ（２００ｍｌ）中の２−［２−（２−クロロエトキシ）エトキシ］エタノール（１３）（１７．１ｇ、１０１ｍｍｏｌ）及びセシウム  チオベンゾエート（３８．２４ｇ、１４２ｍｍｏｌ）の混合物を７５℃で１．５時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、蒸発乾固させた。残渣をジエチルエーテル（６００ｍｌ）に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（４００ｍｌ）で３回、水（５００ｍｌ）で洗浄した。有機相をＭｇＳＯ4で乾燥し、蒸発乾固させてクルード生成物２３ｇを得た。クルード残渣を移動相としてジエチルエーテルを用いたクロマトグラフィーにより精製して２−［２−（２−チオベンゾイルエトキシ）エトキシ］エタノール（１４）（１８．７５ｇ、６８％）をオレンジ色のシロップとして得た。
Ｒf０．６０（ジエチルエーテル／ＥｔＯＨ  １９：１）  ＭＳ（エレクトロスプレー）Ｃ13Ｈ18Ｏ4Ｓ（２７０．３４）ｍ／ｚ（％）２９３［Ｍ＋Ｎａ］+（６２），２７１［Ｍ＋Ｈ］+（１００）。


【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０９】
２−［２−（２−チオベンゾイルエトキシ）エトキシ］エチル  ４，６−Ｏ−ベンジリデン  ２−Ｏ−（４−クロロベンゾイル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１９）
メチル ４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−Ｏ−（４−クロロベンゾイル）−１−チオ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（６）（１０ｇ、２２．９３ｍｍｏｌ）、２−［２−（２−チオベンゾイルエトキシ）エトキシ］エタノール（１３）（６．８１ｇ、２５．２２ｍｍｏｌ）、粉末化モレキュラーシーブ４Å（２０ｇ）及びジメチル（メチルチオ）スルホニウム  テトラフルオロボレート（７．０ｇ、３５．７１ｍｍｏｌ）の混合物を、乾燥１，２−ジクロロエタン（１００ｍＬ）中、０℃で２時間撹拌した。混合物をトリエチルアミン（１０ｍＬ）で中和し、ＣＨ2Ｃｌ2（３００ｍＬ）で希釈しそしてセライトを通してろ過した。ろ液を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２００ｍＬ）で３回洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥し蒸発乾固させた。残渣をジイソプロピルエーテル（６００ｍＬ）に懸濁させろ過した。得られた固体をエタノール（５０ｍｌ）から結晶化させ、ジイソプロピルエーテル（２００ｍｌ）で洗浄し乾燥して２−［２−（２−チオベンゾイルエトキシ）エトキシ］エチル ４，６−Ｏ−ベンジリデン ２−Ｏ−（４−クロロベンゾイル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１９）（１０ｇ、６６％）を白色粉末として得た。
Ｒf０．３０（ジエチルエーテル／ＥｔＯＡｃ  ２：１）  ＭＳ（エレクトロスプレー）Ｃ33Ｈ35ＣｌＯ10Ｓ（６５９．１５）ｍ／ｚ（％）６８１［Ｍ＋Ｎａ］+（７０），６５９［Ｍ＋Ｈ］+（４０）。


【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１０】
２−［２−（２−チオベンゾイルエトキシ）エトキシ］エチル ４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−Ｏ−（４−クロロベンゾイル）−３−Ｏ−［４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ジ−Ｏ−（３，４−メチレンジオキシベンジル）］−α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２０）
２−［２−（２−チオベンゾイルエトキシ）エトキシ］エチル  ４，６−Ｏ−ベンジリデン ２−Ｏ−（４−クロロベンゾイル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１９）（８．５５ｇ、１２．９９ｍｍｏｌ）、メチル ４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ジ−Ｏ−（３，４−メチレンジオキシベンジル）−１−チオ−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（１８）（８．００ｇ、１４．２９ｍｍｏｌ）、粉末化モレキュラーシーブ４Ａ（２０ｇ）及びメチル トリフルオロメタンスルホネート（４．６８ｇ、２８．５８ｍｍｏｌ）を、乾燥１，２−ジクロロエタン（１００ｍＬ）中、室温で２時間撹拌した。混合物をトリエチルアミン（４ｍｌ）で中和し、ＣＨ2Ｃｌ2（２００ｍＬ）で希釈し、セライトを通してろ過した。ろ液を飽和ＮａＨＣＯ3溶液（２００ｍＬ）で３回洗浄し、ＭｇＳＯ4で乾燥して蒸発乾固させた。残渣を移動相としてジエチルエーテル−ＥｔＯＡｃ  ２：１を用いるクロマトグラフィーにより精製し７．５ｇの２−［２−（２−チオベンゾイルエトキシ）エトキシ］エチル ４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−Ｏ−（４−クロロベンゾイル）−３−Ｏ−［４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ジ−Ｏ−（３，４−メチレンジオキシベンジル）］−α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２０）（７．５ｇ、５０％）を白色固体フォームとして得た。
Ｒf０．５５（ジエチルエーテル／ＥｔＯＡｃ  ２：１）  ＭＳ（エレクトロスプレー）Ｃ62Ｈ61ＣｌＯ19Ｓ（１１７７．６７）ｍ／ｚ（％）１１９９［Ｍ＋Ｎａ］+（１００），１１７７（２１）。


【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１１】
２−［２−（２−チオベンゾイルエトキシ）エトキシ］エチル ４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−Ｏ−（４−クロロベンゾイル）−３−Ｏ−（４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２１）
ＣＨ2Ｃｌ2／Ｈ2Ｏ  ７：２の混合物（７０ｍｌ）中の２−［２−（２−チオベンゾイルエトキシ）エトキシ］エチル ４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−Ｏ−（４−クロロベンゾイル）−３−Ｏ−［４，６−Ｏ−ベンジリデン−２，３−ジ−Ｏ−（３，４−メチレンジオキシベンジル）］−α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２０）（７．０２ｇ、５．９７ｍｍｏｌ）及び２，３−ジクロロ−５，６−ジシアノ−１，４−ベンゾキノン（２．７１ｇ、１１．９３ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で１時間撹拌した。反応混合物をろ過し、ろ液をＣＨＣｌ3（３００ｍｌ）で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ3溶液（１５０ｍｌ）で２回洗浄し、濃縮乾固した。残渣を熱ジイソプロピルエーテル（１５０ｍｌ）に溶解し、その溶液を室温で２時間撹拌した。得られた懸濁液をろ過し、その後ＥｔＯＡｃ（４０ｍｌ）から結晶化させた。母液を移動相としてジエチルエーテル−ＥｔＯＡｃ  １：１を用いたクロマトグラフィーで精製した。精製した生成物を合わせて２−［２−（２−チオベンゾイルエトキシ）エトキシ］エチル ４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−Ｏ−（４−クロロベンゾイル）−３−Ｏ−（４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２１）（３．６９ｇ、６８％）を得た。
Ｒf０．３２（ジエチルエーテル／ＥｔＯＡｃ  ２：１）  ＭＳ（エレクトロスプレー）Ｃ46Ｈ49ＣｌＯ15Ｓ（９０９．４０）ｍ／ｚ（％）９３１［Ｍ＋Ｎａ］+（３５），９０９［Ｍ＋Ｈ］+（１００）。


【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１２】
２−［２−（２−チオベンゾイルエトキシ）エトキシ］エチル ２−Ｏ−（４−クロロベンゾイル）−３−Ｏ−α−Ｄ−ガラクトピラノシル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２２）
アセトニトリル−メタノール  １：１の混合物（３５０ｍｌ）中の２−［２−（２−チオベンゾイル）エトキシ］エチル ４，６−Ｏ−ベンジリデン−２−Ｏ−（４−クロロベンゾイル）−３−Ｏ−（４，６−Ｏ−ベンジリデン−α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２１）（３．５ｇ、３．８５ｍｍｏｌ）及びｐ−トルエンスルホン酸（１００ｍｇ）の混合物を、２時間還流下撹拌した。反応混合物を蒸発乾固し、その後残渣を移動相としてＭｅＣＮ−Ｈ2Ｏ  １０：１を用いてクロマトグラフィーを行い２−［２−（２−チオベンゾイルエトキシ）エトキシ］エチル ２−Ｏ−（４−クロロベンゾイル）−３−Ｏ−α−Ｄ−ガラクトピラノシル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２２）（２．４６ｇ、８７％）を得た。
Ｒf０．４２（ＭｅＣＮ／Ｈ2Ｏ １０：１）、  ＭＳ（エレクトロスプレー）Ｃ32Ｈ41ＣｌＯ15Ｓ（７３３．１３）ｍ／ｚ（％）７５５［Ｍ＋Ｎａ］+（５２），７３３［Ｍ＋Ｈ］+（１００）。


【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１１３】
２−［２−（２−チオビフェニルカルボニルエトキシ）エトキシ］エチル  ３−Ｏ−α−Ｄ−ガラクトピラノシル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２３）
２−［２−（２−チオベンゾイル）エトキシ］エチル ２−Ｏ−（４−クロロベンゾイル）−３−Ｏ−α−Ｄ−ガラクトピラノシル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２２）（２１０ｍｇ、０．２８７ｍｍｏｌ）及びナトリウムメトキシド（９ｍｇ、０．２８７ｍｍｏｌ）の乾燥メタノール（１５ｍｌ）中の混合物を、４０℃で４時間撹拌した。反応混合物を室温まで冷却し、ビフェニルカルボニルクロリド（６２．１７ｍｇ、０．２８７ｍｍｏｌ）を加えた。３０分間室温で撹拌した後、反応混合物を蒸発乾固させた。残渣を移動相としてＭｅＣＮ−Ｈ2Ｏ  ５：１を用いたクロマトグラフィーにより精製して２−［２−（２−チオビフェニルカルボニルエトキシ）エトキシ］エチル  ３−Ｏ−α−Ｄ−ガラクトピラノシル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（２３）（１２０ｍｇ、６２％）を得た。
Ｒf０．３５（ＭｅＣＮ／Ｈ2Ｏ  １０：２）  ＭＳ（エレクトロスプレー）Ｃ31Ｈ42Ｏ14Ｓ（６７０．７３）ｍ／ｚ（％）６９３［Ｍ＋Ｎａ］+（１００），６７１［Ｍ＋Ｈ］+（２０）。


【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３８】
実施例8：メチル4,6-O-ベンジリデン-3-O-フルオレニルメチルオキシカルボニル-2-O-ピバロイル-1-チオ-β-D-ガラクトピラノシドの合成
メチル6-O-tert-ブチルジメチルシリル)-3,4-O-イソプロピリデン-2-O-(ピバロイル)-1-チオ-β-D-ガラクトピラノシド(44)
1,2-ジクロロエタン[40mL]中メチル-6-O-tert-ブチルジメチルシリル-3,4-O-イソプロピリデン-1-チオ-β-D-ガラクトピラノシド[11.5g, 31.59mmol]及びDMAP[5.5g, 45.5mmol]の混合物に、2,2,2-トリメチルアセチルクロリドを滴下して加えた。該反応を2時間撹拌し、それからクロロホルム[100mL]で希釈し、10%クエン酸溶液[2 x 150mL]、飽和NaHCO3溶液[2 x 150mL]及び飽和塩水溶液[2 x 150mL]で洗った。層が分離し、その有機層をNa2SO4で乾燥させた。その溶媒を真空中で取り除くと、油状の残留物が得られた。該残留物をカラムクロマトグラフィー(5%酢酸エチル／石油エーテル)により精製すると、白い泡、つまりメチル6-O-tert-ブチルジメチルシリル-3,4-O-イソプロピリデン-2-O-ピバロイル-1-チオ-β-D-ガラクトピラノシド 44 [13.7g, 97%]が得られた。Rf = 0.75 (酢酸エチル／石油エーテル, 1 : 2, v/v) ; 1H NMR (CDCl3) δ 5.05 (dd, 1H, H-2), 4.29 (dd, 1H, H-4), 4.25 (d,1H, J1-2=10.12, H-1), 4.17 (dd, 1H, H-3), 3.93-3.84 (m, 3H, H-6a, H-6b, H-5), 2.16 (s, 3H, S-CH3)。


【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４３】
メチル2-O-アセチル-1-チオ-β-D-ガラクトピラノシドの合成(49)
メチル 2-O-アセチル-6-O-tert-ブチルジメチルシリル-3,4-O-イソプロピリデン-1-チオ-β-D-ガラクトピラノシド xを50%アセトニトリル／メタノール[50mL]に溶解させ、60℃で加熱した。その撹拌される溶液に、4-トルエンスルホン酸[10. mg, 53.19μmol]を加え、該反応を4時間放置した。それから、その反応温度を40℃に下げ、終夜放置した。それから、該反応混合物を濃縮し、その残留物をメタノールから結晶化させると、メチル 2-O-アセチル-1-チオ-β-D-ガラクトピラノシド 49が白い固体[1.26g, 79%]として得られた; Rf = 0.2 (25%アセトニトリル／酢酸エチル, v/v) ; 1H NMR (d-MeOH) δ 3.95 (t, 1H, H-2), 3.27 (d, 1H, J1-2=8.63, H-1), 2.92, 1H, H-4), 2.79-2.69 (m, 2H, H-6a及びH-6b), 2.62 (t, 1H, H-3), 2.38 (m, 1H, H-5) 1.37 (s, 3H, S-CH3), 1.31 (s, 3H, -C(O)CH3)。


【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４４】
メチル2-O-アセチル-4,6-O-ベンジリデン-3-O-フルオレニルメチルオキシカルボニル-1-チオ-β-D-ガラクトピラノシドの合成(50)
メチル 2-O-アセチル-1-チオ-β-D-ガラクトピラノシド 49をアセトニトリル[20mL]中に溶解させ、60℃に加熱した。その撹拌される溶液に、α,α-ジメトキシトルエン[1.09g, 7.10mmol]及び4-トルエンスルホン酸[10mg, 53.19μmol]を加えた。該反応を2時間撹拌し、それから室温に戻した。該反応を2当量のトリエチルアミンで中和し、乾燥するまで蒸発させた。その残留物をクロロホルム中に溶かし、希塩水[1 x 100mL]、飽和炭酸水素ナトリウム溶液[1 x 100mL]及び飽和塩水溶液[1 x 100mL]で洗った。層が分離し、その有機層をNa2SO4で乾燥させた。該溶液をろ過し、濃縮した。該残留物を連続して石油エーテルで洗い、その結果得られる白い固体を、それからトルエン中で懸濁させ、残っている水全てを共蒸発（co-evaporation）で共沸させた。前の段階からの該残留物を、1,2-ジクロロエタン[20mL]中で懸濁させ、0℃まで冷却した。その撹拌される懸濁液に、0℃で、4,4-ジメチルアミノピリジン[1.62g, 13.23mmol]及びFmoc-Cl [3.42g, 12.23mmol]を加えた。その今の溶液を室温に戻し、1時間撹拌した。この時、該反応をクロロホルムで希釈し、5%クエン酸溶液[2 x 75mL]及び飽和塩水溶液[2 x 75mL]で洗った。層が分離し、その有機層をNa2SO4で乾燥させた。該溶液をろ過し、該溶媒を真空中で取り除くと、黄色の油状残留物が得られ、これをカラムクロマトグラフィー(33%酢酸エチル／石油エーテル v/v)により精製すると、メチル2-O-アセチル-4,6-O-ベンジリデン-3-O-フルオレニルメチルオキシカルボニル-1-チオ-β-D-ガラクトピラノシド 50 [2.19g, 82%]が得られた Rf = 0.2 (33%酢酸エチル／石油エーテル, v/v) ; 1H NMR (CDCl3) 7.78-7.24 (13H, 芳香族), 5.60 (t, 1H, H-2), 5.55 (s, 1H, ベンジリデン), 4.88 (dd, 1H, H-2), 4.50 (d, 1H, H-4), 4.55-4.38 (m, 4H, H-1, Fmoc-CH2, H-6a), 4.28 (t, 1H, 9-フルオレニル-メチン), 4.06 (dd, 1H, H-6b), 3.63 (s, 1H, H-5), 2.29 (s, 3H, S-CH3), 2. 1 (s, 3H,-C(O)CH3)。


【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５０】
ベンジル2-アセトアミド-3,6-ジ-O-ベンジル-2-デオキシ-4-O-[4,6-O-ベンジリデン-2-O-ピバロイル-3-O-(2,3,4,6-テトラ-O-(4-クロロベンジル)-α-D-ガラクトピラノシル)-β-D-ガラクトピラノシル]]-β-D-グルコピラノシド(58)の合成
窒素雰囲気下、樹脂53 [300mg, 141 μmol]、メチル 4,6-O-ベンジリデン-3-O-フルオレニルメチルオキシカルボニル-2-O-ピバロイル-1-チオ-β-D-ガラクトピラノシド 47 [557mg, 846μmol]及びパウダー化されたモレキュラーシーブ4Å[600mg]をジクロロメタン[3mL]中に懸濁させ、続いてトリフルオロメタンスルホン酸メチル[95.7μL, 846μmol]を加えた。該反応容器を密閉し、該反応混合物を5時間、周囲温度で激しく撹拌した。それから、該樹脂をDMF [3 x 20mL]、50% MeOH/DCM [3 x 20mL]及びDCM [3 x 20mL]で洗った。それから、該樹脂をDCM中に浮かせて、該樹脂をすべての残っているシーブから分離した。樹脂 54を収集し、ハウスバキューム下で1時間乾燥させた。それから、該樹脂を20%トリエチルアミン／DMF溶液で25分間処理し、続いて上記のようにワークアップした。樹脂 55を、高真空下で終夜乾燥させた。それから、窒素雰囲気下で、該樹脂を、メチル2,3,4,6-テトラ-O-(4-クロロベンジル)-1-チオ-β-D-ガラクトピラノシド 8 [600mg, 846μmol]、パウダー化されたモレキュラーシーブ4Å [800mm]及びジクロロメタン[4mL]と混合し、続いてトリフルオロメタンスルホン酸メチル[95.74μL, 846μmol]を最後に加えた。該反応容器を密閉し、該反応混合物を周囲温度で５時間激しく撹拌した。それから、該樹脂を標準のように（as standard）洗い、焼結ロート上で収集し、乾燥させた。それから、反応容器中、樹脂 56を5%ヒドラジン一水和物(55%/H2O)/DMF [5mL]溶液と合わせて、周囲温度で4時間激しく撹拌した。そのDMF溶液を該樹脂からろ過し、それから該樹脂をさらにDMF [7mL]で洗った。そのろ液を合わせて、該溶媒を真空中で取り除いた。その残留物を最小限のジクロロメタン中に溶かし、シリカのプラグ(a plug of silica)を通過させた(溶離液; DCM, TLC: CH2Cl2:MeOH, 20:0.3)。その合わせたフラクションを濃縮し、残留物 57を1,2-ジクロロエタン[3mL]中に溶かし、３時間、周囲温度、DMAP [84mg, 684μmol]存在下で塩化アセチル[46μL, 648μmol]と反応させた。該反応をクロロホルム[20mL]で希釈し、飽和クエン酸溶液[2 x 20mL]、飽和炭酸水素ナトリウム溶液[2 x 20mL]及び飽和塩水溶液[2 x 20mL]で洗った。該有機層を分離し、Na2SO4で乾燥させ、濃縮すると、白い固体の残留物が得られた。該残留物をカラムクロマトグラフィー (0.5% MeOH/DCM, v/v)により精製すると、ベンジル 2-アセトアミド-3,6-ジ-O-ベンジル-2-デオキシ-4-O-[4,6-O-ベンジリデン-2-O-ピバロイル-3-O-(2,3,4,6-テトラ-O-(4-クロロベンジル)-α-D-ガラクトピラノシル)-β-D-ガラクトピラノシル]]-β-D-グルコピラノシド 58 (213mg, 76.3%)が得られた。Rf = 0.57 (66% 酢酸エチル／石油エーテル, v/v), ES-MS m/z (イオン、相対強度) 1486.29 ([M+H]+ 100%)。


【手続補正１３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５３】
2-アセトアミド-3,6-ジ-O-ベンジル-2-デオキシ-4-O-[4,6-O-ベンジリ-デン-3-O-(2,3,4,6-テトラ-O-(4-クロロベンジル)-α-D-ガラクトピラノシル)-β-D-ガラクトピラノ-シル]]-β-D-グルコピラノシド(61)の合成
ベンジル 2-アセトアミド-3,6-ジ-O-ベンジル-2-デオキシ-4-O-[4,6-O-ベンジリ-デン-2-O-ピバロイル-3-O-(2,3,4,6-テトラ-O-(4-クロロベンジル)-α-D-ガラクトピラノシル)-β-D-ガラクトピラノシル]]-β-D-グルコピラノシド 58 [288mg, 188μmol]をNaOMe/MeOHの溶液[0.13M, 10mL]中に懸濁させ、これにアセトニトリル[5mL]を加えた。TLCが、該反応が完結したことを示すまで(4-5日)、該反応を70℃で加熱した。それから、該反応混合物を濃縮し、ジクロロメタン[20mL]中に溶かし、10%クエン酸溶液[2 x 20mL]及び飽和塩水溶液[2 x 20mL]で洗った。その有機層を分離し、Na2SO2で乾燥させ、該溶媒を真空中で取り除くと、固体の白い残留物が得られた。該残留物を分取薄層クロマトグラフィー(溶離液: 13%アセトン／DCM)により精製すると、2-アセトアミド-3,6-ジ-O-ベンジル-2-デオキシ-4-O-[4,6-O-ベンジリデン- 3-O-(2,3,4,6-テトラ-O- (4-クロロベンジル)-α-D-ガラクトピラノシル)-β-D-ガラクトピラノシル]]-β-D-グルコピラノシド 61 [189mg, 69%]が得られた。Rf 0.24 (1.47% MeOH/DCM) ; ES-MS m/z (イオン、強度) 1403.29 ([M+H]+, 100%) 。