【手続補正書】
【提出日】平成15年7月31日(2003.7.31)
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【書類名】明細書
【発明の名称】エストロゲンアゴニスト／アンタゴニスト代謝物
【特許請求の範囲】
【請求項１】一般式Ｉに相当する（−）−シス−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オールの代謝物：
【化１】
2004510693.tif 000001
［ここで、Ｒ１は、
【化２】
2004510693.tif 000002
またはＮＨ（ＣＨ２）３ＣＯＲ６から選ばれ；
Ｒ５は、ＨまたはＣＨ３から選ばれ；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ７は、同じか又は異なっており、ＨおよびＯＲ５から選ばれ；そして
Ｒ６は、−ＯＨまたは−ＮＨＣＨ２ＣＯＯＨから選ばれるが、
但し、
（ａ）Ｒ１が
【化３】
2004510693.tif 000003
もしくは−ＮＨ（ＣＨ２）３ＣＯＯＨであり、そして
（ｂ）Ｒ２が、ＯＨもしくはＯＣＨ３であり、Ｒ３およびＲ７がＨである場合、またはＲ１が、上記（ａ）で定義した通りであり、そして
（ｃ）Ｒ２およびＲ７がＨであり、Ｒ３がＯＨもしくはＯＣＨ３である場合、
Ｒ４は、Ｈではない］
またはその光学、立体、位置もしくは立体配置異性体もしくは幾何異性体またはその互変異性体、薬学的に許容することのできる塩、Ｎ−オキシド、エステル、四級アンモニウム塩、もしくはプロドラッグ。
【請求項２】以下から成る群から選ばれる請求項１に記載の（−）−シス−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オールの代謝物：
【化４】
2004510693.tif 000004
【化５】
2004510693.tif 000005
【化６】
2004510693.tif 000006
並びにその立体異性体、互変異性体、位置および立体配置異性体；ならびにその薬学的に許容することのできる塩、Ｎ−オキシド、エステル、四級アンモニウム塩、およびプロドラッグ並びにその組み合わせ。
【請求項３】一般式Ｉに相当する（−）−シス−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オールの代謝物：
【化７】
2004510693.tif 000007
［ここで、Ｒ１は、
【化８】
2004510693.tif 000008
または−ＮＨ（ＣＨ２）３ＣＯＲ６から選ばれ；
Ｒ５は、ＨまたはＣＨ３から選ばれ；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ７は、同じか又は異なっており、ＨおよびＯＲ５から選ばれ；そして
Ｒ６は、−ＯＨまたは−ＮＨＣＨ２ＣＯＯＨから選ばれるが、
但し、
（ａ）Ｒ１が
【化９】
2004510693.tif 000009
もしくは−ＮＨ（ＣＨ２）３ＣＯＯＨであり、そして
（ｂ）Ｒ２が、ＯＨもしくはＯＣＨ３であり、Ｒ３およびＲ７がＨである場合、またはＲ１が、上記（ａ）で定義した通りであり、そして
（ｃ）Ｒ２およびＲ７がＨであり、Ｒ３がＯＨもしくはＯＣＨ３である場合、
Ｒ４は、Ｈではない］
またはその光学、立体、位置もしくは立体配置異性体もしくは幾何異性体またはその互変異性体、薬学的に許容することのできる塩、Ｎ−オキシド、エステル、四級アンモニウム塩、もしくはプロドラッグを含むキット。
【請求項４】（−）−シス−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オールの当該代謝物が、
【化１０】
2004510693.tif 000010
【化１１】
2004510693.tif 000011
【化１２】
2004510693.tif 000012
並びにその立体異性体、互変異性体、位置および立体配置異性体；並びにその薬学的に許容することのできる塩、Ｎ−オキシド、エステル、四級アンモニウム塩、およびプロドラッグ並びにその組み合わせから成る群から選ばれる、請求項３に記載のキット。
【請求項５】その必要のある対象者に効果的な量の一般式Ｉに相当する（−）−シス−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オールの代謝物：
【化１３】
2004510693.tif 000013
［ここで、Ｒ１は、
【化１４】
2004510693.tif 000014
またはＮＨ（ＣＨ２）３ＣＯＲ６から選ばれ；
Ｒ５は、ＨまたはＣＨ３から選ばれ；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ７は、同じか又は異なっており、ＨおよびＯＲ５から選ばれ；そして
Ｒ６は、−ＯＨまたは−ＮＨＣＨ２ＣＯＯＨから選ばれるが、
但し、
（ａ）Ｒ１が
【化１５】
2004510693.tif 000015
もしくは−ＮＨ（ＣＨ２）３ＣＯＯＨであり、そして
（ｂ）Ｒ２が、ＯＨもしくはＯＣＨ３であり、Ｒ３およびＲ７がＨである場合、またはＲ１が、上記（ａ）で定義した通りであり、そして
（ｃ）Ｒ２およびＲ７がＨであり、Ｒ３がＯＨもしくはＯＣＨ３である場合、
Ｒ４は、Ｈではない］
またはその光学、立体、位置もしくは立体配置異性体もしくは幾何異性体またはその互変異性体、薬学的に許容することのできる塩、Ｎ−オキシド、エステル、四級アンモニウム塩、もしくはプロドラッグを投与することを含む、疾患を治療する方法。
【請求項６】（−）−シス−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オールの当該代謝物が、
【化１６】
2004510693.tif 000016
【化１７】
2004510693.tif 000017
【化１８】
2004510693.tif 000018
並びにその立体異性体、互変異性体、位置および立体配置異性体；並びにその薬学的に許容することのできる塩、Ｎ−オキシド、エステル、四級アンモニウム塩、およびプロドラッグ並びにその組み合わせから成る群から選ばれる、請求項５で特許請求した通りの方法。
【請求項７】当該方法が、エストロゲン投与と関係する付随するマイナス面である不利な作用を実質的に減少させる、請求項５で特許請求した通りの方法。
【請求項８】当該方法が、エストロゲン投与と関係する付随するマイナス面である不利な作用を実質的に減少させる、請求項６で特許請求した通りの方法。
【請求項９】一般式Ｉに相当する（−）−シス−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オールの代謝物：
【化１９】
2004510693.tif 000019
［ここで、Ｒ１は、
【化２０】
2004510693.tif 000020
または−ＮＨ（ＣＨ２）３ＣＯＲ６から選ばれ；
Ｒ５は、ＨまたはＣＨ３から選ばれ；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ７は、同じか又は異なっており、ＨおよびＯＲ５から選ばれ；そして
Ｒ６は、−ＯＨまたは−ＮＨＣＨ２ＣＯＯＨから選ばれるが、
但し、
（ａ）Ｒ１が
【化２１】
2004510693.tif 000021
もしくは−ＮＨ（ＣＨ２）３ＣＯＯＨであり、そして
（ｂ）Ｒ２が、ＯＨもしくはＯＣＨ３であり、Ｒ３およびＲ７がＨである場合、またはＲ１が、上記（ａ）で定義した通りであり、そして
（ｃ）Ｒ２およびＲ７がＨであり、Ｒ３がＯＨもしくはＯＣＨ３である場合、
Ｒ４は、Ｈではない］
またはその光学、立体、位置もしくは立体配置異性体もしくは幾何異性体またはその互変異性体、薬学的に許容することのできる塩、Ｎ−オキシド、エステル、四級アンモニウム塩、もしくはプロドラッグ、および
薬学的に許容することのできる担体、賦形剤または希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項１０】（−）−シス−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オールの当該代謝物が、
【化２２】
2004510693.tif 000022
【化２３】
2004510693.tif 000023
【化２４】
2004510693.tif 000024
並びにその立体異性体、互変異性体、位置および立体配置異性体；並びにその薬学的に許容することのできる塩、Ｎ−オキシド、エステル、四級アンモニウム塩、およびプロドラッグ並びにその組み合わせから成る群から選ばれる、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】化合物：
６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２，３−ジオール；
３−メトキシ−７−フェニル−８−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール；
３−メトキシ−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール；
６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−１，２−ジオール；
２−メトキシ−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−１−オール；
１−メトキシ−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール；
並びにその立体異性体、互変異性体、位置および立体配置異性体；並びにその薬学的に許容することのできる塩、Ｎ−オキシド、エステル、四級アンモニウム塩、およびプロドラッグ並びにその組み合わせ。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
《発明の属する分野》
本発明は、（−）−シス−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オールの哺乳類の代謝物である化合物に関する。本発明の化合物は、分析測定における標準として、および治療薬として有用である。
【０００２】
《発明の背景》
薬理学的に、（−）−シス−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール（ＰＰＴＮ）は、米国特許第５，５５２，４１２号（特許文献１）に開示されているエストロゲンアゴニスト／アンタゴニストである。゛エストロゲンアゴニスト／アンタゴニスト゛は、必ずしも全部ではないがエストロゲンが影響を与える同じ受容体のいくつかに影響を与える化合物であり、ある場合には、エストロゲンを拮抗または遮断する。それは、゛選択的エストロゲン受容体モジュレーター゛（ＳＥＲＭ）としても知られている。エストロゲンアゴニスト／アンタゴニストは、いくつかのエストロゲン受容体でエストロゲン活性を有するけれども、抗エストロゲン薬とも呼ばれることがある。エストロゲンアゴニスト／アンタゴニストは、従って、普通゛純粋な抗エストロゲン薬゛と呼ばれるものではない。アゴニストとしても作用することのできる抗エストロゲン薬は、Ｉ型抗エストロゲン薬と呼ばれる。Ｉ型抗エストロゲン薬は、長時間、しかし受容体補給が損なわれた状態で、核内で強固に結合するようエストロゲン受容体を活性化する（クラーク(Clark)等, Steroids 1973; 22: 707（非特許文献１）；カポニー(Capony)等, Mol Cell Endocrinol,
1975; 3: 233（非特許文献２））。
【特許文献１】米国特許第５，５５２，４１２号
【非特許文献１】クラーク(Clark)等, Steroids 1973; 22: 707
【非特許文献２】カポニー(Capony)等, Mol Cell Endocrinol,
1975; 3: 233
【０００３】
本発明の化合物は、ＰＰＴＮの代謝物であり、親化合物；ＰＰＴＮにより有されているものと類似した又は同一の顕著な薬理学的活性を有すると考えられる。
【０００４】
《発明の概要》
本発明は、エストロゲンアゴニスト／アンタゴニスト；ＰＰＴＮの哺乳類代謝物である化合物に関する。
【０００５】
本発明の第二の相(A second aspect)は、ＰＰＴＮの代謝物またはその光学もしくは幾何異性体；またはその薬学的に許容することのできる塩、Ｎ−オキシド、エステル、四級アンモニウム塩および薬学的に許容することのできる担体、賦形剤または希釈剤を含む医薬組成物に関する。
【０００６】
本発明の第三の相(A third aspect)は、効果的な量の、薬理学的活性を有するＰＰＴＮの代謝物またはその薬学的に許容することのできる塩、Ｎ−オキシド、エステル、もしくは四級アンモニウム塩を投与することを含む、疾患を治療する方法に関する。ＰＰＴＮの代謝物は、エストロゲン投与と関係する付随するマイナス面である不利な作用を実質的に減少させる限り、効果的である。
【０００７】
第四の相(A fourth aspect)として、本発明は、疾患を治療する消費者による使用のためのキットを供給する。キットは、ａ）ＰＰＴＮの哺乳類代謝物；および任意にｂ）疾患を治療するためのＰＰＴＮの代謝物の使用方法を説明する指示書を含んでも良い。また、指示書は、キットが、エストロゲン投与と関係する付随するマイナス面である不利な作用を実質的に減少させる間の疾患の治療用であることを示しても良い。
【０００８】
本発明の第五の相(A fifth aspect)は、ＰＰＴＮの代謝物またはその薬学的に許容することのできる塩、Ｎ−オキシド、エステル、および四級アンモニウム塩の測定における分析標準としての用途用キットに関する。キットは、実質的に純粋な形態のＰＰＴＮ代謝物、および代謝物をいれるための容器を含む。
【０００９】
第六の相として(A sixth aspect)、本発明は、医薬の製造のための、ＰＰＴＮの哺乳類代謝物またはその薬学的に許容することのできる塩、Ｎ−オキシド、エステル、および四級アンモニウム塩の使用法を提供する。
【００１０】
《発明の詳細な説明》
本発明は、ＰＰＴＮの代謝物に関する。代謝物は、一般式Ｉにより表される化合物に相当する：
【化２５】
2004510693.tif 000025
［ここで、Ｒ１は、
【化２６】
2004510693.tif 000026
または−ＮＨ（ＣＨ２）３ＣＯＲ６から選ばれ；
Ｒ５は、ＨまたはＣＨ３、グルクロン酸およびＳＯ３Ｈから選ばれ；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ７は、同じか又は異なっており、ＨおよびＯＲ５から選ばれ；そして
Ｒ６は、−ＯＨまたは−ＮＨＣＨ２ＣＯＯＨ、グルクロン酸および−ＮＨＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３Ｈから選ばれるが、
但し、
（ａ）Ｒ１が
【化２７】
2004510693.tif 000027
もしくは−ＮＨ（ＣＨ２）３ＣＯＯＨであり、そして
（ｂ）Ｒ２が、ＯＨもしくはＯＣＨ３であり、Ｒ３およびＲ７がＨである場合、またはＲ１が、上記（ａ）で定義した通りであり、そして
（ｃ）Ｒ２およびＲ７がＨであり、Ｒ３がＯＨもしくはＯＣＨ３である場合、
Ｒ４は、Ｈではない］。
【００１１】
一般式Ｉの好ましい化合物としては、
Ｒ１が、
【化２８】
2004510693.tif 000028
または−ＮＨ（ＣＨ２）３ＣＯＲ６から選ばれ；
Ｒ５が、ＨまたはＣＨ３から選ばれ；
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４およびＲ７が、同じか又は異なっており、ＨおよびＯＲ５から選ばれ；そして
Ｒ６が、−ＯＨまたは−ＮＨＣＨ２ＣＯＯＨから選ばれるが、
但し、
（ａ）Ｒ１が
【化２９】
2004510693.tif 000029
もしくは−ＮＨ（ＣＨ２）３ＣＯＯＨであり、そして
（ｂ）Ｒ２が、ＯＨもしくはＯＣＨ３であり、Ｒ３およびＲ７がＨである場合、またはＲ１が、上記（ａ）で定義した通りであり、そして
（ｃ）Ｒ２およびＲ７がＨであり、Ｒ３がＯＨもしくはＯＣＨ３である場合、
Ｒ４が、Ｈではない化合物が挙げられる。
【００１２】
ＰＰＴＮの好ましい代謝化合物としては、表Ｉに例示したものが挙げられる。
【表１】
2004510693.tif 000030
【表２】
2004510693.tif 000031
【表３】
2004510693.tif 000032
【表４】
2004510693.tif 000033
【表５】
2004510693.tif 000034
【表６】
2004510693.tif 000035
【００１３】
ＰＰＴＮの更に好ましい代謝物化合物としては、表ＩＩに例示したものが挙げられる。
【表７】
2004510693.tif 000036
【表８】
2004510693.tif 000037
【表９】
2004510693.tif 000038
【００１４】
別の相において、本発明は、上述のようなＰＰＴＮの実質的に純粋な代謝物に関する。
【００１５】
特に断らない限り、以下の定義が当てはまる。
【００１６】
本明細書で用いる゛治療゛には、予防的（例えば予防）および緩和的治療が含まれ、本明細書で用いる゛治療する゛は、予防的および／または緩和的治療を提供する行為を指す。
【００１７】
゛対象者゛は、本発明の化合物、組成物、方法およびキットを用いて治療することのできるヒト種を含む動物である。゛対象者゛または゛複数の対象者゛は、一方の性を特に示さない限り、雄性および雌性の両者を意味するつもりである。好ましい対象者は、閉経後の女性である。
【００１８】
゛エストロゲン投与と関係する不利な作用゛としては、女性における乳房圧痛、乳癌、鼓脹、頭痛、増大した血液凝固および月経出血が挙げられる。無競争のエストロゲン療法は、子宮内膜癌のリスクを増大させる。長期エストロゲン療法中の女性は、共存するプロゲスチンにより逆転されないという増大したリスクがあるかもしれない(N. Engl. J. Med. 1995; 332: 1589)。男性においては、エストロゲンの不利な作用としては、増大した血液凝固、女性化乳房、女性化および減少したリビドーが挙げられる。
【００１９】
用語゛閉経後の女性゛は、閉経を通過した高齢の女性のみならず子宮摘出術を受けた、または何らかの別の理由でエストロゲン産生を抑制した女性、例えば、コルチコステロイドの長期投与を受けた、クッシング症候群に罹患している、または性器発育異常がある女性を含むものと定義する。
【００２０】
゛乳癌゛は、胸の管または小葉に沿った上皮細胞の悪性増殖と定義される。
【００２１】
゛グルクロン酸゛は、相ＩＩの共役反応のグルクロニド化から得られる代謝物を形成するために代謝物に導入される又は親化合物に導入される置換基である。グルクロン酸は、代謝物または親化合物上の酸またはアルコールまたはフェノール部分と反応して゛グルクロニド゛を形成する。グルクロニド置換基は、本明細書の式中で゛Ｇｌｕ゛または゛グルクロニド゛と省略される。
【００２２】
゛硫酸゛は、相ＩＩの共役反応の硫酸エステル化から得られる代謝物を形成するために代謝物に導入される又は親化合物に導入される置換基である。硫酸は、代謝物または親化合物上のアルコールまたはフェノール部分と反応して゛硫酸エステル゛を形成する。
【００２３】
ＰＰＴＮ代謝物と単数の更なる化合物または複数の更なる化合物の多剤併用薬の゛共投与゛は、これらの成分を、１個の組成物として、または同じ単一の剤形の一部として共に投与することができることを意味する。゛共投与゛は、また、ＰＰＴＮ代謝物および単数の更なる化合物または複数の更なる化合物を別々ではあるが同じ治療法の治療プログラムまたは養生計画の一部として投与することも含む。そのように所望であればそうすることができるが、これらの成分は、必ずしも実質的に同時に投与する必要はない。従って、゛共投与゛には、例えば、ＰＰＴＮ代謝物および更なる化合物を同時ではあるが別々の用量または剤形として投与することが含まれる。゛共投与゛には、また、いずれの順序でも異なる時間での別々の投与も含まれる。例えば、適切である場合、患者は、午前中に一つ以上の治療成分、および夜に一つ以上の他の成分をとってもよい。
【００２４】
通常の能力を有する化学者は、本発明の特定の化合物が、立体異性体、互変異性体、位置および立体配置異性体を生じさせる特定の立体化学、互変、または位置コンフィギュレーションにあってもよい一つ以上の原子を有することを認めるはずである。このような異性体及びその混合物の全てが、本発明に含まれる。本発明の化合物の水和物および溶媒和物も、やはり含まれる。
【００２５】
本発明には、また、1個以上の原子が、天然に普通に見出される原子質量または質量数と異なる原子質量または質量数を有する原子により置換されているという事実を除いては、本発明により包含される他の化合物の中でも一般式Ｉ−ＸＸＶで示されるものと同一である同位体標識した化合物も含まれる。本発明の化合物に組み込まれることのできる同位体の例としては、それぞれ、２Ｈ、３Ｈ、１３Ｃ、１４Ｃ、１５Ｎ、１８Ｏ、１７Ｏ、３１Ｐ、３２Ｐ、３５Ｓ、１８Ｆ、および３６Ｃｌのような水素、炭素、窒素、酸素、燐、硫黄、フッ素および塩素の同位体が挙げられる。前述の同位体および／または他の原子の他の同位体を含有する本発明の化合物、そのプロドラッグ、及びこれらの化合物又はこれらのプロドラッグの薬学的に許容することのできる塩は、本発明の範囲内にある。本発明の特定の同位体標識化合物、例えば、３Ｈおよび１４Ｃのような放射性同位体を組み込んでいるものは、薬物および／または基質組織分布測定に有用である。トリチウム化、即ち３Ｈ、および炭素−１４、即ち、１４Ｃ同位体は、調製の容易さ及び検出能ゆえに特に好ましい。更に、ジウテリウム、即ち、２Ｈのようなより重い同位体での置換は、より大きい代謝安定性に起因する特定の治療上の有利性、例えば、増大したインビボ半減期または減少した必要量を得ることができ、従って、ある状況では好ましいかもしれない。本発明の一般式Ｉ−ＸＸＶの同位体標識化合物及びそのプロドラッグは、通常、下記に例示した手法または当業界で公知のものを実行することにより調製することができる。１４Ｃ−ＰＰＴＮは、同位体標識していない試薬を容易に入手可能な同位体標識試薬に取り替えることにより、米国特許第５，５５２，４１２号に概説され例示された方法により調製することができる。
【００２６】
実質的に純粋な形態または既知の組成の混合物のＰＰＴＮ代謝物は、インビトロもしくはインビボ代謝研究の分析標準として、または新規な化学物質の化学合成もしくは生合成の中間体として用いることができる。本代謝物は、固体または溶液として単離することができる。
【００２７】
本発明の化合物は、疾患の治療に有用であると考えられる。本化合物が効果的であり得る疾患または症状の例としては、骨粗鬆症、乳癌、高脂質血症、アテローム動脈硬化症、アルツハイマー病、白内障、性無欲症、雄性の性的機能不全、結腸癌、皮膚のしわ、自己免役疾患、脱毛症、アクネ、心血管疾患、白内障、糖尿病、子宮内膜症、雌性の性的機能不全、高血糖、肥満、強迫障害、月経前症候群、前立腺癌、良性前立腺過形成、肺高血圧、再灌流損傷、慢性関節リウマチ、変形性関節症、脂漏症、老年性女性化乳房、テストステロン欠乏症およびテストステロン上昇が関与する症状、ターナー症候群、子宮線維症、萎縮性膣炎、失禁、子宮癌、多毛症、大食症、食欲不振、性欲低下、性的覚醒障害、性交疼痛症、膣痙、ならびに創傷治癒の促進が挙げられる。本化合物は、また、オルガスムの頻度の増加、脱の治療、膣のｐＨの低下、尿路感染症の治療、脳卒中、心筋梗塞、急性または慢性腎機能不全、末梢動脈閉塞疾患、およびレイノ現象の治療または予防、ならびに卵巣、肝臓、および膵臓の癌、およびデスモイド癌、神経膠腫および腎細胞癌の治療に効果的であり得る。上記の疾患または症状の一つ以上を治療する方法は、効果的な量のＰＰＴＮ代謝物の投与を含む。
【００２８】
本発明の治療法において、表にあるような代謝物を対象者に直接投与することができるし、または対象者の体内で代謝を通じて生成されることにより代謝物を投与することができる。例えば、一定量のＰＰＴＮを対象者に投与し、投与後、対象者の体内で代謝を通じて所望の代謝物が形成されることにより、疾患または症状を治療するよう対象者に本発明の代謝物を効果的に投与することができる。更に、ＰＰＴＮの投与経路および用量は、所望のインビボ濃度および代謝物の生成速度を得られるように所望通りに変えることができる。
【００２９】
一つ以上の上記の症状の治療に用いる場合、ＰＰＴＮ代謝物は、ＰＰＴＮとスタチン類、例えば、米国特許第４，４４４，７８４号に開示されたシンバスタチン；米国特許第４，３４６，２２７号に開示されたプラバスタチン；米国特許第５，５０２，１９９号に開示されたセリバスタチン；米国特許第３，９８３，１４０号に開示されたメバスタチン；米国特許第４，４４８，７８４号および米国特許第４，４５０，１７１号に開示されたベロスタチン；米国特許第４，７３９，０７３号に開示されたフルバスタチン；米国特許第４，８０４，７７０号に開示されたコンパクチン；米国特許第４，２３１，９３８号に開示されたロバスタチン；ヨーロッパ特許出願番号７３８５１０Ａ２に開示されたダルバスタチン；ヨーロッパ特許出願番号３６３９３４Ａ１に開示されたフルインドスタチン；米国特許第４，６８１，８９３号に開示されたアトルバスタチン；米国特許第５，２７３，９９５号に開示されたアトルバスタチンカルシウム；米国特許第４，４５０，１７１号に開示されたジヒドロコンパクチン；米国特許第５，２６０，４４０号に開示されたＺＤ−４５２２；米国特許第５，０８２，８５９号に開示されたベルバスタチン；および米国特許第５，１０２，８８８号に開示されたＮＫ−１０４と組み合わせて（別々に又は同じ医薬組成物内のいずれかで共投与）用いることができる。ＰＰＴＮ代謝物は、また、ビスホスホナート化合物、例えば、アレンドロン酸、アレンドロナート、シマドロナート、クロドロン酸、クロドロナート、１−ヒドロキシ−３−（１−ピロリジニル）−プロピリデン−１，１−ビスホスホン酸、エチドロン酸、イバンドロナート、ネリドロナート、オルパドロナート、パミドロナート、ピリドロナート、リセドロナート、チルドロナートおよびゾレンドロナートと組み合わせて用いることもできる。更に、ＰＰＴＮ代謝物は、シルデナフィル（１−［［３−（６，７−ジヒドロ−１−メチル−７−オキソ−３−プロピル−１Ｈ−ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン−５−イル）−４−エトキシ−フェニル］スルホニル］−４−メチルピペラジンクエン酸塩）のようなサイクリックグアノシン３´，５´一燐酸上昇剤と組み合わせて用いることができる。
【００３０】
本発明の化合物の薬学的に許容することのできる酸付加塩は、化合物それ自体、またはそのいずれかのエステルから形成することができ、それとしては、製薬化学でしばしば用いられる薬学的に許容することのできる塩が挙げられる。例えば、塩は、塩酸、臭化水素酸、沃化水素酸、ナフタレンスルホン酸、メタンスルホン酸およびトルエンスルホン酸のような物質を含むスルホン酸、硫酸、硝酸、燐酸、酒石酸、ピロ硫酸、メタ硫酸、コハク酸、蟻酸、フタル酸、乳酸等のような無機または有機酸を用いて、最も好ましくは、塩酸、クエン酸、安息香酸、マレイン酸、酢酸およびプロピオン酸を用いて形成することができる。
【００３１】
本発明の化合物は、上記で考察したように、薬学的に許容することのできる塩の形態で投与することができる。塩は、有機化学において通例であるように、塩基性である場合本発明の化合物と上述したような適切な酸との反応により容易に形成される。塩は、中位の温度で高収率で素早く形成され、しばしば、合成の最終工程として適切な酸性洗浄液から本化合物を単に単離することにより調製される。塩を形成する酸を、適切な有機溶媒、またはアルカノール、ケトンもしくはエステルのような水性有機溶媒に溶解する。他方、本発明の化合物を遊離塩基形態で所望であれば、通常の慣習により、塩基性最終洗浄工程から単離する。塩酸塩を調製する好ましい技法は、本遊離塩基を適切な溶媒に溶解し、それに塩化水素ガスを吹き込む前に、モレキュラーシーブを用いる際、溶液を徹底的に乾燥することである。
【００３２】
医薬として用いる場合、ヒトに投与する本発明の化合物の用量は、ある程度大きく変えることができ、担当する医師の判断に委ねられる。その塩形成部分がかなりの分子量を有する、ラウリン酸塩のような塩の形態で投与される場合、化合物の用量を調整する必要があるかもしれないことを注意すべきである。本化合物の通常の範囲の効果的な投与の度合いは、約０．００１ｍｇ／日から約２００ｍｇ／日である。好ましい範囲は、約０．０１ｍｇ／日から１００ｍｇ／日である。当然のことながら、化合物の毎日の用量を一日のさまざまな時間に少しずつ投与することが、しばしば実際的である。しかしながら、いずれの場合にも、投与する化合物の量は、活性成分の溶解度、用いる処方物および投与経路のような因子に依存する。
【００３３】
本発明の化合物の投与経路は、決定的ではない。本化合物は、消化管から吸収してもよいが、しかしながら、本化合物は、ある場合に所望であれば、経皮的に、または直腸による吸収用坐剤として投与しても良い。錠剤、チュアブル錠剤、カプセル剤、液剤、非経口液剤、トローチ剤、坐剤および懸濁剤を含む通常の型の組成物の全てを用いることができる。組成物は、単一の錠剤またはカプセル剤または都合の良い容量の液剤であってもよい、毎日の服用量または毎日の服用量の都合の良い分割量を投薬単位で含有するよう処方される。
【００３４】
概ね、全組成物が、製薬化学における通常の方法により調製されている、および／または本明細書で例示したもののようなインビボもしくはインビトロ代謝反応物から単離される。親化合物ＰＰＴＮは、米国特許第５，５５２，４１２号に概説された及び／又は例示された手法により調製される。代謝物は、直接、合成することができるし、または実施例で説明するもののようなインビトロもしくはインビボで酵素もしくは代謝反応により形成することができる。
【００３５】
処方の方法は、当業界で周知であり、例えば、レミングトン：製薬の科学と慣習(Remington: The Science and Practice of Pharmacy),マック出版(Mack Publishing Company),イーストン(Easton), Pa.,第１９版(1995)に開示されている。本発明の範囲内の用途用医薬組成物は、滅菌した非発熱性液状液剤もしくは懸濁剤、被覆したカプセル剤、坐剤、凍結乾燥した散剤、経皮パッチ剤の形態または当業界で公知の他の形態であってもよい。
【００３６】
カプセル剤は、本化合物と適切な希釈剤とを混合し適切な量の混合物をカプセルに充填することにより調製する。通常の希釈剤としては、多数の異なる種類のデンプン、粉末化セルロース、特に結晶または微結晶セルロース、フルクトース、マンニトールおよび白糖のような糖類、穀物の粉および同様の食用粉末のような不活性な粉末化物質が挙げられる。
【００３７】
錠剤は、直接の圧縮により、湿潤顆粒化により、または乾燥顆粒化により調製する。処方物は、通常、希釈剤、結合剤、滑沢剤および崩壊剤ならびに本化合物を包含する。典型的希釈剤としては、例えば、種々の型のデンプン、ラクトース、マンニトール、カオリン、燐酸もしくは硫酸カルシウム、塩化ナトリウムのような無機塩および粉砂糖が挙げられる。粉末化セルロース誘導体も、やはり有用である。典型的錠剤結合剤は、デンプン、ゼラチンおよび、糖類、例えば、ラクトース、フルクトース、グルコース等のような物質である。アラビアゴム、アルギン酸塩、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン等を含む天然および合成ゴムも、好都合である。ポリエチレングリコール、エチルセルロース及びろうも、結合剤として役立つことができる。
【００３８】
ダイの中で錠剤およびパンチが粘着するのを防止するために、錠剤処方物中に滑沢剤が必要かもしれない。滑沢剤は、タルク、ステアリン酸マグネシウムおよびカルシウム、ステアリン酸ならびに水素添加植物油のような良くすべる固形物から選択する。
【００３９】
錠剤崩壊剤は、錠剤が湿潤になった時、錠剤の崩壊を容易にして化合物を放出する物質である。それらとしては、デンプン類、白土類、セルロース類、アルギン類およびゴム類が挙げられ、更に詳しくは、例えば、トウモロコシおよびパレイショデンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、木材セルロース、粉末化天然海綿、カチオン交換樹脂、アルギン酸、グアガム、シトラスパルプならびにカルボキシメチルセルロースも、ラウリル硫酸ナトリウム同様用いることができる。
【００４０】
錠剤は、しばしば、着香剤およびシーラントとしての糖、または錠剤の溶解特性を変化させるためのフィルム形成保護物質で被覆する。本化合物は、処方物中に大量のマンニトールのような食べておいしい物質を用いることにより、今現在当業界で充分確立されているチュアブル錠剤として処方することもできる。
【００４１】
化合物を坐剤として投与することを所望である場合、代表的基剤を用いることができる。ココアバターは、ろう類の添加によりその融点が僅かに上昇するよう変えることのできる伝統的坐剤基剤である。特に種々の分子量のポリエチレングリコール類から成る水混和性坐剤基剤は、広い用途がある。
【００４２】
本化合物の作用は、適切な処方により遅延または持続させることができる。例えば、本化合物の徐々に溶解するペレットを調製し、錠剤またはカプセル剤に包含させることができる。この技法は、いくつかの異なる溶解速度のペレットを製造し、ペレットの混合物をカプセル剤に充填することにより改良することができる。錠剤またはカプセル剤は、予測できる一定時間溶解に耐えるフィルムで被覆してもよい。非経口製剤でさえ、血清に徐々にしか分散しないようにする油性または乳化賦形剤に本化合物を溶解または懸濁することにより、長時間作用にすることができる。
【００４３】
用語゛プロドラッグ゛は、インビボで変換されて本発明の化合物が得られる化合物を意味する。変換は、血中での加水分解を通じるような種々のメカニズムにより起こり得る。プロドラッグの使用に関する良い考察は、Ｔ．ヒグチおよびＷ．ステラ(W. Stella),゛新規な送達システムとしてのプロドラッグ(Pro-drugs as Novel Delivery Systems)゛,Ａ．Ｃ．Ｓ．シンポジウムシリーズの１４巻により、および薬物設計における生体可逆担体(Bioreversible
Carriers in Drug Design),エドワードＢ．ロシェ(Edward B. Roche)編,アメリカンファーマシューティカルアソシエーションアンドパーガモンプレス(American Pharmaceutical Association and Pergamon Press),1987に提供されている。
【００４４】
例えば、本発明の化合物がカルボン酸官能基を有するならば、（Ｃ１−Ｃ８）アルキル、（Ｃ２−Ｃ１２）アルカノイルオキシメチル、４個から９個の炭素原子を有する１−（アルカノイルオキシ）エチル、５個から１０個の炭素原子を有する１−メチル−１−（アルカノイルオキシ）−エチル、３個から６個の炭素原子を有するアルコキシカルボニルオキシメチル、４個から７個の炭素原子を有する１−（アルコキシカルボニルオキシ）エチル、５個から８個の炭素原子を有する１−メチル−１−（アルコキシカルボニルオキシ）エチル、３個から９個の炭素原子を有するＮ−（アルコキシカルボニル）アミノメチル、４個から１０個の炭素原子を有する１−（Ｎ−（アルコキシカルボニル）アミノ）エチル、３−フタリジル、４−クロトノラクトニル、ガンマ−ブチロラクトン−４−イル、ジ−Ｎ，Ｎ−（Ｃ１−Ｃ２）アルキルアミノ（Ｃ２−Ｃ３）アルキル（例えば、β−ジメチルアミノエチル）、カルバモイル−（Ｃ１−Ｃ２）アルキル、Ｎ，Ｎ−ジ（Ｃ１−Ｃ２）アルキルカルバモイル−（Ｃ１−Ｃ２）アルキルおよびピペリジノ−、ピロリジノ−またはモルホリノ（Ｃ２−Ｃ３）アルキルのような基での酸基の水素原子の置換により形成されたエステルを含むことができる。
【００４５】
同様に、本発明の化合物がアルコール官能基を含むならば、プロドラッグは、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシメチル、１−（（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ）エチル、１−メチル−１−（（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイルオキシ）エチル、（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニルオキシメチル、Ｎ−（Ｃ１−Ｃ６）アルコキシカルボニルアミノメチル、スクシノイル、（Ｃ１−Ｃ６）アルカノイル、α−アミノ（Ｃ１−Ｃ４）アルカノイル、アリールアシルおよびα−アミノアシル、またはα−アミノアシル−α−アミノアシル｛ここで、各α−アミノアシル基は、天然に存在するＬ−アミノ酸から独立に選ばれる｝、Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル）２またはグリコシル（ヘミアセタール型の炭水化物のヒドロキシル基の除去により生じる基）のような基でのアルコール基の水素原子の置換により形成することができる。
【００４６】
本発明の化合物がアミン官能基を含むならば、プロドラッグは、ＲＸ−カルボニル、ＲＸＯ−カルボニル、ＮＲＸＲＸ´−カルボニル｛ここで、ＲＸおよびＲＸ´は、それぞれ独立に（（Ｃ１−Ｃ１０）アルキル、（Ｃ３−Ｃ７）シクロアルキル、ベンジルであるか、またはＲＸ−カルボニルは、天然のα−アミノアシルもしくは天然のα−アミノアシル−天然のα−アミノアシルである｝、−Ｃ（ＯＨ）Ｃ（Ｏ）ＯＹＸ｛ここで、ＹＸは、Ｈ、（Ｃ１−Ｃ６）アルキルまたはベンジルである｝、−Ｃ（ＯＹＸ０）ＹＸ１｛ここで、ＹＸ０は、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルであり、そしてＹＸ１は、（（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、カルボキシ（Ｃ１−Ｃ６）アルキル、アミノ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルまたはモノ−Ｎ−もしくはジ−Ｎ，Ｎ−（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノアルキルである｝、−Ｃ（ＹＸ２）ＹＸ３｛ここで、ＹＸ２は、Ｈまたはメチルであり、そしてＹＸ３は、モノ−Ｎ−もしくはジ−Ｎ，Ｎ−（Ｃ１−Ｃ６）アルキルアミノ、モルホリノ、ピペリジン−１−イルまたはピロリジン−１−イルである｝のような基でのアミン基内の水素原子の置換により形成することができる。
【００４７】
本明細書で用いる場合、用語゛効果的な量゛は、特定の疾患および病的症状を治療することのできる本発明の方法の化合物の量を意味する。本発明により投与される化合物の特定の用量は、当然のことながら、例えば、投与する化合物、投与経路、対象者の状態、および治療される病的症状の重篤度を含むそのケースを取り巻く特定の状況により決定される。
【００４８】
有利なことには、本発明は、また、疾患を治療するための、消費者による使用のためのキットも提供する。キットは、ａ）エストロゲンアゴニスト／アンタゴニストおよび薬学的に許容することのできる担体、賦形剤または希釈剤を含む医薬組成物；ならびに任意にｂ）特定の疾患を治療するためにこの医薬組成物を用いる方法を説明する指示書を含む。指示書は、また、キットが、エストロゲン投与と関係する付随するマイナス面である不利な作用を実質的に減少させる間に疾患を治療するためのものであることを示しても良い。
【００４９】
本出願物で用いる゛キット゛は、分かれた瓶または分かれた箔パッケージのような別々の単位剤形を入れるための容器を含む。容器は、薬学的に許容することのできる物質、例えば、紙もしくはボール箱、ガラスもしくはプラスチックのビン若しくはつぼ、再密封可能な袋（例えば、異なる容器に入れるための錠剤の゛レフィル゛をいれる）、または治療スケジュールに従ってパックから押し出すための個々の服用量を有するブリスタパックでできている当業界で公知のようないずれの従来の形状または形態であってもよい。用いる容器は、関係する正確な剤形に依存しても良く、例えば、従来のボール箱は、通常、液状懸濁剤を入れるためには用いられないであろう。単一の剤形を市販するのに単一のパッケージの中に一つより多い容器を共に用い得るということは、実行可能である。例えば、錠剤は、順次、箱の中に入れられる瓶の中に入っていても良い。
【００５０】
このようなキットの一例は、いわゆるブリスタパックである。ブリスタパックは、包装産業界で周知であり、医薬単位剤形（錠剤、カプセル剤等）の包装に広く用いられている。ブリスタパックは、通常、好ましくは透明なプラスチック材料の箔で覆われた比較的固い材料のシートから成る。包装処理中、プラスチック箔に窪みが形成される。窪みは、包装しようとする個々の錠剤またはカプセル剤の大きさと形状を有するか、または包装しようとする複数の錠剤および／またはカプセル剤を収容するための大きさおよび形状を有しても良い。次に、錠剤またはカプセル剤を適宜窪みに置き、比較的固い材料のシートを、窪みが形成された方向の反対側にある箔面でプラスチック箔に対して密封する。結果として、錠剤またはカプセル剤が、プラスチック箔とシートの間の窪みに所望通りに個々に密封または集合的に密封される。好ましくは、シートの強度は、窪みに掛けられた手先の圧力によりシートの窪みの場所に開口が形成されることによりブリスタパックから錠剤またはカプセル剤を取り出すことができるほどのものである。錠剤またはカプセル剤は、次いで、この開口を通じて取り出すことができる。
【００５１】
書いた記憶の手助けとなるものが、例えば、そのように指定された錠剤またはカプセル剤を取るべき養生計画の日と数が一致する錠剤またはカプセル剤の隣の数の形態で、医師、薬剤師または対象者用の情報および／または指示が入っている型のもの、または同じ型の情報が入っているカードである、書いた記憶の手助けとなるものを提供することが望ましいかもしれない。このような記憶の手助けになるものの別の例は、例えば、次のように゛第１週、月曜日、火曜日、゛…等…゛第二週、月曜日、火曜日、…゛等のカード上に印刷されたカレンダーである。記憶の手助けとなるものの他の変形例は、容易に明白である。゛毎日の用量゛は、所定の日に取るべき只一つの錠剤もしくはカプセル剤または数錠の錠剤もしくはカプセル剤であってもよい。
【００５２】
キットの別の特定の態様は、一度に一つ毎日の用量を調剤するように設計された調剤器である。好ましくは、本調剤器は、養生計画の服薬遵守が更に容易になるように記憶の手助けとなるものを装備している。このような記憶の手助けとなるものの一例は、調合されている毎日の用量の数を示す機械的計数器である。このような記憶の手助けとなるものの別の例は、例えば、最後に毎日の用量をとった日を読み出す、および／または次の用量をいつとることになっているか思い出させる、液晶読み出し又は聞き取れる思い出させるシグナルと結び付けた電池を動力とするマイクロチップメモリーである。
【００５３】
この説明および特許請求の範囲の読み取りに基づき、本明細書で述べた組成物および方法に対する特定の改変は、当業者に明白である。本明細書に付記する特許請求の範囲は、これらの改変を包含することを意図する。
【００５４】
ここで引用した全ての参考文献および特許物は、参照により本明細書に含めるものとする。
【００５５】
【実施例】
以下の略号を、本明細書で用いる。
ＨＯＡｃ    酢酸
Ｐｈ        フェニル
ＢｕＬｉ    ｎ−ブチルリチウム
Ｅｔ２Ｏ     ジエチルエーテル
ＮＢＳ     ｎ−ブロモスクシンアミド
ＤＭＦ     ジメチルホルムアミド
ＡＩＢＮ    アゾジイソブチロニトリル
Ｍｅ        メチル
ＥｔＯＨ    エタノール
ｒｔ        室温
ＴＨＮ     テトラヒドロナフタレン
【００５６】
《実施例１：エストロゲン受容体結合》
エストロゲンおよびＰＰＴＮ代謝物結合親和性を、以下のプロトコールにより測定する：
【００５７】
ヒトＥＲαのｃＤＮＡクローニング：  ヒトＥＲαのコード領域を、製造元の指示書に従いイクスパンド(Expand)（商標）ハイフィデリティ(High Fidelity)ＰＣＲシステムズ（ベーリンガー−マンハイム(Boehringer-Mannheim)、インジアナポリス、ＩＮ）を用いヒト乳癌細胞ｍＲＮＡからＲＴ―ＰＣＲによりクローンする。ＰＣＲ生成物を、ｐＣＲ２．１ＴＡクローニングキット（インビトローゲン(Invitrogen)、カールスバッド(Carlsbad)、ＣＡ）中にクローンし、配列決定する。各受容体コード領域を、哺乳類発現ベクターｐｃＤＮＡ３（インビトローゲン、カールスバッド、ＣＡ）中にサブクローンする。
【００５８】
哺乳類の細胞発現．  受容体蛋白質を、２９３Ｔ細胞内で過剰発現させる。ＨＥＫ２９３細胞（ＡＴＣＣ、マナサス(Manassas)、ＶＡ）から誘導したこれらの細胞は、ラージＴ抗原を安定に発現するよう工作されており、従って、ＳＶ４０由来の複製を有するプラスミドを高コピー数に複製することができる。２９３Ｔ細胞を、製造元（ギブコ(Gibco)／ＢＲＬ、ベセスダ(Bethesda)、ＭＤ）により説明されるようなリポフェクタミンを用いｈＥＲα−ｐｃＤＮＡ３またはｈＥＲβ−ｐｃＤＮＡ３のいずれかでトランスフェクションする。トランスフェクションの４８時間後に、０．５ｍＭのＥＤＴＡ含有燐酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中に細胞を回収する。細胞ペレットを、ＰＢＳ／ＥＤＴＡで１回洗浄する。ダウンスホモジナイザーを用いＴＥＧバッファー（５０ｍＭのトリスｐＨ７．４、１．５ｍＭのＥＤＴＡ、５０ｍＭのＮａＣｌ、１０％グリセロール、５ｍＭのＤＴＴ、５μｇ／ｍｌのアプロチニン、１０μｇ／ｍｌのロイペプチン、０．１ｍｇ／ｍｌのペファブロク(Pefabloc)（商標）（ペンタファーム(Pentapharm)ＡＧ、バセル(Basel)、スイス））中に均質化することにより、全細胞溶解産物を調製する。抽出物を、４℃で１００，０００ｘｇで２時間遠心分離し、上澄を集める。全蛋白質濃度を、バイオラッド(BioRad)試薬（バイオラッド、ハーキュルズ(Hercules)、ＣＡ）を用いて測定する。
【００５９】
競合結合測定．  ［３Ｈ］−エストラジオール結合を阻害するＰＰＴＮ代謝物の能力を、説明されているように（リーケ(Leake)ＲＥ，ハビブ(Habib)Ｆ１９８７ステロイドホルモン受容体：測定および特徴付け,Ｂ．グリーン(Green)およびＲ．Ｅ．リーケ（編）,ステロイドホルモン実際的アプローチ,ＩＲＬプレスＬｔｄ、オックスフォード．６７−９２）デキストラン被覆炭を用い競合結合測定により測定する。ｈＥＲαまたはｈＥＲβのいずれかを発現する２３９Ｔ細胞抽出物を、０．２ｍＬの最終容量で、５０ｍＭのトリスＨＣｌ  ｐＨ７．４、１．５ｍＭのＥＤＴＡ、５０ｍＭのＮａＣｌ、１０％グリセロール、５ｍＭのＤＴＴ、０．５ｍｇ／ｍＬのβ−ラクトグロブリン中の増加する濃度のＰＰＴＮ代謝物および固定した濃度の［３Ｈ］−エストラジオール（１４１μＣｉ／ミリモル、ニューイングランドヌクレア(New England Nuclear)、ボストン、ＭＡ）の存在下でインキュベートする。全ＰＰＴＮ代謝物を、ジメチルスルホキシドまたは水性溶媒に溶解する。受容体の最終濃度は、０．５ｎＭの［３Ｈ］−エストラジオールで５０ｐＭである。４℃で１６時間後、デキストラン被覆炭（２０μＬ）を加える。室温で１５分後、炭を遠心分離により除去し、上澄に存在する放射性リガンドを、シンチレーションカウンティングにより測定する。全ての試薬は、特に断らない限り、シグマ(Sigma)（セントルイス、ＭＯ）から得られる。
【００６０】
《実施例２：インビトロでのヒト乳腫瘍細胞成長の阻害》
ＰＰＴＮ代謝物のインビトロでの抗増殖作用を、二つの型のヒト乳癌細胞系：ＥＲおよびプロゲステロン受容体（ＰｇＲ）を有する第一のＭＣＦ−７細胞、ならびにＥＲおよびＰｇＲを欠きＥＲメカニズムと無関係である作用の決定をすることができる第二のＭＤＡ−ＭＢ−２３１細胞を用いて調査する。これらの異なる細胞系の成長に対するＰＰＴＮ代謝物の作用は、種々のエストロゲンアゴニスト／アンタゴニスト濃度で６日間、細胞のインキュベーションにより測定する。抗増殖作用を、次いで、直接的細胞カウントにより測定する。
【００６１】
《実施例３：マウスにおけるＰＰＴＮ代謝物の生合成》
投薬量の１４Ｃ−ＰＰＴＮを、約０．８９８ｍｇ／ｇの濃度で０．５％メチルセルロース（Ｗ／Ｗ）中に懸濁液として調製する。投薬溶液を、投薬前後に重複して測定する。ＰＰＴＮの代謝物を、放射能検出と共に高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により測定し、液体クロマトグラフィーとマススペクトロメトリー／マススペクトロメトリー分析（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）により同定する。
【００６２】
この例では、一群のＣＤ−１マウス（Ｎ＝９／性、２５−３０ｇ）に経口的強制により投薬し、尿および糞の別々の収集のためにナルジーン(Nalgene)（商標）代謝ケージ（ナルジヌンクインターナショナル(Nalge Nunc International)、ロチェスター(Rochester)、ＮＹ）内でケージ当たり３匹の動物（３／性）の群に分けて飼育する。各動物に与える実際の投薬量を測定するために投薬の前後に強制チューブを計量する。各ケージから７日間、投薬後０−２４、２４−４８、４８−７２、７２−９６、９６−１２０、１２０−１４４および１４４−１６８時に、尿、糞およびケージ洗浄液を、予め計量した試料容器の中に定量的に集める。異なる時点で得られた尿、糞およびケージ洗浄液の重量を記録する。尿および糞試料は、分けて、分析するまで−２０℃で暗所で貯蔵する。循環代謝物の同定のため、第二群の動物（Ｎ＝６／性、２５−３０ｇ）に経口的強制により投薬する。この第二群において、各性の３匹の動物を、投薬の１および４時間後に屠殺し、血液を、ヘパリン添加チューブに集める。
【００６３】
各群から得た尿（０−４８時間のプールから約３ｍｌ）を遠心分離し、上澄を清浄なチューブに移し、窒素下でエバポレーターを用いて濃縮する。残分を約１ｍｌのＨＰＬＣ移動相に溶解し、一部（８０−１００μｌ）を更に精製することなくＨＰＬＣに注入する。投薬後０−７２時間に動物から得た糞便のホモジネート（−２ｇ）を、各時間間隔で集めた重要性に基づいてプールし、プールした試料を、アセトニトリル（６ｍｌ）で希釈する。懸濁液を、一晩、磁気攪拌器により攪拌し、遠心分離する。上澄を取り出し、抽出を、メタノール（６ｍｌ）およびメタノール：水（５０：５０、６ｍｌ）で繰り返す。全ての上澄を合わせ、少量をカウントする。有機溶媒を、ターボバップ(Turbo Vap)を用いて蒸発させる。残分を、約１ｍｌのメタノール：酢酸アンモニウム（１：１）に溶解する。一部（２０−５０μｌ）を、ＨＰＬＣに注入する。プールした血漿（２ｍｌ、１および４時間）を、４ｍｌのアセトニトリルで希釈し、沈殿した蛋白質を遠心分離により取り出す。ペレットを更に２ｍｌのアセトニトリルで洗浄し、両方の上澄を合わせる。上澄をエバポレーターにより濃縮し、残分を、５００μｌのメタノール：酢酸アンモニウム（１：１）中に再構成する。一部（１００μｌ）を、ＨＰＬＣに注入する。
【００６４】
ＨＰＬＣを、ヒューレットパッカードＨＰ１１００四基一組のポンプおよび放射能検出器（β−ＲＡＭ、ＩＮ／ＵＳシステムズ社、タムパ(Tampa)、ＦＬ）を備えた自動試料採取器（ヒューレットパッカード(Hewlett Packard)、パロアルト(Palo Alto)、カリフォルニア）を用いて行う。クロマトグラフィーを、１０ｍＭの酢酸アンモニウム（溶媒Ａ）およびメタノール（溶媒Ｂ）の二成分混合物を用いベックマンウルトラスフェア(Beckman Ultrasphere)（商標）Ｃ−１８カラム（４．６ｍｍｘ２５０ｍｍ、５μｍ）（ベックマンコールター社(Beckman Coulter Inc.)、フラートン(Fullerton)、ＣＡ）により行う。移動相は、初め溶媒Ａ／溶媒Ｂ（８０：２０）から成り、次いで、３０分にわたって溶媒Ａ／溶媒Ｂ（２０：８０）へと直線的に計画通り進め、次いで、５分の内に溶媒Ａ／溶媒Ｂ（５：９５）へと計画通り進め、そして５分間維持する。移動相組成を、５分にわたって出発溶媒混合物に戻す。このシステムは、次の注入をする前に約１５分間平衡にすることができる。１．０ｍｌ／分の流速を、全ての分析に用いる。
【００６５】
代謝物の定量化を、放射能検出器を用いたＨＰＬＣにより分かれる個々のピークの放射能を測定することにより行う。放射能検出器は、分当たりのカウント（ＣＰＭ）および放射性標識した物質のパーセンテージ、ならびにピークの表示が合体したプリントアウトを提供する。放射能検出器を、紫外線検出後の流出液に３ｍｌ／分で移動相に相容性のシンチレーションカクテルを加えながら均質な液体シンチレーションカウント様式で操作する。
【００６６】
代謝物の同定を、フィニガン(Finnigan)ＴＳＱ７０００ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ（サーモクエスト(Thermo Quest)、サンジョセ(San Jose)、ＣＡ）により実施する。ＨＰＬＣカラムから得た流出液を分け、約５０μｌ／分を、空気圧により補助されるエレクトロスプレーインターフェースを通じ質量分析計大気イオン化源に導入する。残りの流出液を、放射能検出器のフローセルに導入する。放射能検出器の応答は、放射能および質量分析データの同時検出を提供する質量分析計データシステムによりリアルタイムで記録される。二つの検出器間の応答の遅れは、約０．２分であり、質量分析応答が、先に記録される。エレクトロスプレーインターフェースは、約４０００Ｖで操作され、質量分析計は、ポジティブ様式で操作される。衝突が誘導する解離（ＣＩＤ）研究を、アルゴンガスを用い約３０から約４０ｅＶの衝突エネルギーおよび約２．３ミリトールの衝突ガス圧で行う。
【００６７】
《実施例４：ヒトにおけるＰＰＴＮ代謝物の生合成》
約１．９３ｍＣｉ／ミリモルの比活性を有する１４Ｃ−ＰＰＴＮ（酒石酸塩）を調製する。
【００６８】
１８から４５才の年齢の普通の健康な男性対象者が、調査に参加するために選ばれる。対象者は、投薬の約１２時間前に臨床施設に入り、継続的医学的観察下、投薬後少なくとも５７６時間そこにとどまる。全対象者は、１回量の約２０ｍｇの遊離塩基相当量の１４Ｃ−ＰＰＴＮ（−８０μＣｉ／対象者）を与えられる前に少なくとも１２時間断食する。用量を、午前中、自由形式で投与する。標準食が、４時間後に提供される。投薬処方物は、放射性標識したＰＰＴＮを水に懸濁することにより調製する。対象者は、ラグ（ｒｕｇ）投与後初めの４時間の間は、寝転ぶ、食べる、またはカフェイン入り及び炭酸入り飲料を飲むことを控えるよう要求される。
【００６９】
投薬後、代謝物同定の目的で、２０ｍｌの血漿を得るのに十分な血液を、２４および４８時間に集める。全ての試料にラベルをはり、直ちに冷凍する。
【００７０】
投薬後２４および４８時間に各対象者から得た血漿試料（２０ｍｌ）を、４０ｍｌのアセトニトリルと混合し、攪拌し、音波処理する。混合物を遠心分離し、上澄を取り出す。ペレットを５ｍｌのアセトニトリルと混合し、遠心分離し、二つの上澄を合わせる。上澄を、窒素下で濃縮乾涸する。残渣を、３００μｌのメタノール／水（１：１）中に再構成し、遠心分離して不溶性物質を除去し、一部の１００μｌをＨＰＬＣカラムに注入する。血漿試料から抽出したＰＰＴＮ代謝物を、放射能検出つきＨＰＬＣにより、および上記実施例３で述べたＬＣ／ＭＳ／ＭＳにより同定する。
【００７１】
《実施例５：マウスＰＰＴＮ代謝物の単離および同定》
ＰＰＴＮ代謝物の生合成を、実施例３で述べた方法によりマウスで行う。マウスに２０ｍｇ／ｋｇの用量で投薬する。尿および糞便を、一群のマウスから集める。二群のマウスに投薬し、循環代謝物の単離および同定のため血液を集める。研究の結果を、図１−１８に示す。図１−３は、それぞれ、尿、糞便および循環代謝物の代表的ラジオクロマトグラムである。ＨＰＬＣにより単離した代謝物の構造的指定と共に代表的質量スペクトルデータを、図４−１８に示す。
【化３０】
2004510693.tif 000039
【００７２】
《実施例１》
〈１−｛２−［４−（６，７−ジメトキシ−３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン〉
２５０ｍｌのエーテル中の６．７５ｇ（０．０２５モル）の１−（２−（４−ブロモフェノキシ）エチル）ピロリジンの溶液を、Ｎ２下で−７８℃に冷却した。数ｍｌのＴＨＦを加えて透明な溶液を維持した。１６．７ｍｌの１．６Ｍのｎ−ブチルリチウムを滴下して温度を−７０℃未満に維持した。−７８℃で１時間攪拌した後、２５ｍｌのＴＨＦ中の５ｇ（０．０２４モル）の６，７−ジメトキシ−１−テトラロンの溶液を、温度を−７０℃未満に維持している１時間の間に滴下した。−７８℃で２．５時間攪拌した後、１００ｍｌの２ＮのＨＣｌの添加により反応を停止した。反応液を室温に温め、５ＮのＮａＯＨの添加によりｐＨを７に調整した。Ｅｔ２Ｏ層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。合わせたＥｔ２Ｏ／ＥｔＯＡｃ層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、蒸発させて９ｇの粗生成物を得、出発物質テトラロンを取り出すために９５／５のＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨで、次いで、３．３ｇの生成物を得るために８５／１５のＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨで溶出する４００ｇのシリカゲル上で精製した。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（１．９７，ｂｓ，４Ｈ），（２．５５，ｍ，２Ｈ），（２．８４，ｔ，２Ｈ），２．９８，ｂｓ，４Ｈ），（３．１９，ｓ，２Ｈ），（３．６８，ｓ，３Ｈ），（３．８４，ｓ，３Ｈ），（４．３１，ｓ，２Ｈ），（５．９３，ｔ，１Ｈ），（６．５９，ｓ，１Ｈ），（６．７３，ｓ，１Ｈ），（６．９０（ｄ，２Ｈ），（７．２５，ｄ，２Ｈ）．
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：３７９．８．
出発物質：
６，７−ジメトキシ−１−テトラロン（アルドリッヒ、ミルウォーキー、ＷＩ）．
１−［２−（４−ブロモフェノキシ）エチル］ピロリジン（アルドリッヒ、ミルウォーキー、ＷＩ）．
【００７３】
《実施例２》
〈１−｛２−［４−（２−ブロモ−６，７−ジメトキシ−３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン〉
室温でＮ２下、２００ｍｌのＤＭＦ中の６ｇ（０．０１６モル）の｛２−［４−（６，７−ジメトキシ−３，４−ジヒドロナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジンの溶液に、２０ｍｌのＤＭＦ中の２．８ｇ（０．０１６モル）のＮ−ブロモスクシンイミドの溶液を滴下した。ＡＩＢＮ（１００ｍｇ）を加え、反応物を１時間攪拌し、次いで、水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。ＥｔＯＡｃ層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、蒸発させて７ｇの生成物を得、精製することなく次の工程に用いた。
ＮＭＲ（アセトン−ｄ６）ｐｐｍ：（１．７３，ｍ，４Ｈ），（２．５５，ｍ，４Ｈ），（２．８０，ｍ，４Ｈ），（３．４８，ｓ，３Ｈ），（３．８０，ｓ，３Ｈ），（４．１５，ｓ，３Ｈ），（６．２４，ｓ，１Ｈ），（６．８４，ｓ，１Ｈ），（７．００，ｄ，２Ｈ），（７．００，ｄ，２Ｈ），（７．１３，ｄ，２Ｈ）．
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：４５８．
【００７４】
《実施例３》
〈１−｛２−［４−（６，７−ジメトキシ−２−フェニル−３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン〉
５００ｍｌのＥｔＯＨ中の７ｇ（０．０１５モル）の１−｛２−［−（２−ブロモ−６，７−ジメトキシ−３，４−ジヒドロナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン、５．６ｇ（０．０４７モル）のフェニルボロン酸、６２０ｍｇ（０．０００５４モル）のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムおよび７．６ｇ（０．０７２モル）の炭酸ナトリウムの混合物を、窒素下で１０時間加熱した。ＥｔＯＨを蒸発させた。水およびＥｔＯＡｃを加え、ＥｔＯＡｃ層を分離し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、蒸発させて９ｇの粗生成物を油状物質として得た。油状物質を、９／１のＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨで溶出する６００ｇのシリカゲル上で精製して３．６ｇの生成物を得た。
ＮＭＲ（アセトンｄ６）ｐｐｍ：（１．７４，ｍ，４Ｈ），（２．６０，ｂｓ，２Ｈ），（２．７１，ｍ，２Ｈ），（２．８５，ｍ，６Ｈ），（３．４８，ｓ，３Ｈ），（３．８２，ｓ，３Ｈ），（４．１０，ｔ，２Ｈ），（６．３５，ｓ，１Ｈ），（６．８０−７．１６，ｍ，１０Ｈ）．
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：４５６．
【００７５】
《実施例４》
〈１−｛２−［４−（６，７−ジメトキシ−２−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン〉
１．９ｇの炭担持水酸化パラジウムを含有する、３．６ｇ（０．００７９モル）の１−｛２−［４−（６，７−ジメトキシ−２−フェニル−３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン、１０ｍｌの２ＮのＨＣｌ、３０ｍｌのＨ２Ｏおよび１００ｍｌのＥｔＯＨの溶液を、３０ｐｓｉ（２０６８４３パスカル）のＨ２雰囲気下で５０℃で１５時間パー(Parr)のシェーカーで震盪した。反応物を濾過して触媒を除去し、ＥｔＯＨを蒸発させ、５ＮのＮａＯＨを加えて水性物質のｐＨを８に調整した。水性物質をＥｔＯＡｃで抽出し、ＥｔＯＡｃ層を乾燥し、蒸発させて３．０ｇの生成物を黄色油状物質として得た。
ＮＭＲ（アセトンｄ６）ｐｐｍ：（１．６５，ｍ，４Ｈ），（１．７４，ｍ，１Ｈ），（１．９０，ｄ，１Ｈ），（２．２０，ｍ，１Ｈ），（２．５３，ｂｓ，４Ｈ），（２．６３，ｔ，２Ｈ），（３．００，ｍ，２Ｈ），（２．５３，ｄ，１Ｈ），（３．６０，ｓ，３Ｈ），（３．８０，ｓ，３Ｈ），（３．９３，ｔ，２Ｈ），（４．２０，ｄ，１Ｈ），（６．３５，ｄ，２Ｈ），（６．４５，ｓ，１Ｈ），（６．５３，ｄ，２Ｈ），（６．６８，ｓ，１Ｈ），（７．１０，ｍ，３Ｈ）．
３４
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：４５８．
【００７６】
《実施例５》
〈６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２，３−ジオールおよび３−メトキシ−７−フェニル−８−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロナフタレン−２−オールと３−メトキシ−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オールの混合物〉
２ｇ（０．００４４モル）の１−｛２−［４−（６，７−ジメトキシ−２−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン、８０ｍｌのＨＯＡｃおよび８０ｍｌの４８％水性ＨＢｒの溶液を、Ｎ２下９０℃で２時間加熱した。反応物を、次いで、氷浴で０℃に冷却した。３０％水性ＮＨ４ＯＨを加えてｐＨを１０に調整した。水性物質をＥｔＯＡｃで抽出し、合わせたＥｔＯＡｃ層を乾燥し、蒸発させて１．６ｇの粗生成物を得た。この物質を、９９／１次いで９５／５、次いで９０／１０および最後に８５／１５のＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨで溶出する１２０ｇのシリカゲル上で精製して５２０ｍｇの３−メトキシ−７−フェニル−８−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オールと３−メトキシ−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オールの混合物を得た。
ＮＭＲ（アセトンｄ６）ｐｐｍ：（１．０５，ｍ，１Ｈ），（１．２４，ｄ，１Ｈ），（１．７６，ｂｓ，５Ｈ），（２．２０，ｍ，１Ｈ），（３．００，ｍ，４Ｈ），（３．３１，ｄ，１Ｈ），（３．８２，ｓ，３Ｈ），（４．０５，ｔ，２Ｈ），（４．１８，ｄ，１Ｈ），（６．３４，ｍ，３Ｈ），（６．５３，ｄ，２Ｈ），（６．７８，ｓ，１Ｈ），（７．８５，ｓ，２Ｈ），（７．１５，ｍ，３Ｈ），（８．２０，ｂｓ，１Ｈ）．
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：４４４．
および次に、１８０ｍｇの６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２，３−ジオール
ＮＭＲ（アセトンｄ６）：（１．６５，ｍ，４Ｈ），（２．２０，ｍ，１Ｈ），（２．５０，ｍ，４Ｈ），（２．８０，ｍ，４Ｈ），（２．９５，ｍ，１Ｈ），（３．５０，ｄ，１Ｈ），（３．９５，ｔ，２Ｈ），（４．０５，ｄ，１Ｈ），（６．３３，ｍ，２Ｈ），（６．６０，ｄ，２Ｈ），（６．６６，ｓ，１Ｈ），（６．８４，ｄ，２Ｈ），（７．１０，ｍ，３Ｈ），（７．５５，ｓ，２Ｈ）．質量スペクトル：（ペアレント＋１）：４３０．
融点（ｍｐ）−１３２−１３４℃．
【化３１】
2004510693.tif 000040
【００７７】
《実施例６》
〈７−ヒドロキシ−６−メトキシ−１−テトラロン〉
１００ｍｌのＨＯＡｃおよび１００ｍｌの４８％水性ＨＢｒ中の１０ｇ（０．０４８モル）の６，７−ジメトキシ−１−テトラロンの溶液を、９５℃で７時間加熱した。反応物を室温に冷まし、水に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃで抽出した。ＥｔＯＡｃ層を乾燥し、１２ｇの粗生成物へと蒸発させた。ＣＨ２Ｃｌ２中の１０％Ｅｔ２Ｏで溶出する１２００ｇのシリカゲル上での精製により、７．５ｇの生成物を得た。融点１４７−１４８℃（文献の融点１４８−１５２℃、Journal of Organic Chemistry, 33, 1968, p.508）。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（２．０９，ｍ，２Ｈ），（２．５８，ｍ，２Ｈ），（２．８５，ｍ，２Ｈ），（３．９０，ｓ，３Ｈ），（５．５０，ｂｓ，１Ｈ），（６．６４，ｓ，１Ｈ），（７．５５，ｓ，１Ｈ）．
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：１９３
出発物質：６，７−ジメトキシ−１−テトラロン（アルドリッヒ、ミルウォーキー、ＷＩ）．
【００７８】
《実施例７》
〈７−ベンジルオキシ−６−メトキシ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ナフタレン−１−オン〉
１５０ｍｌのアセトン中の４．５ｇ（０．０２３３モル）の７−ヒドロキシ−６−メトキシ−１−テトラロン、５．４ｇ（０．０３２モル）の臭化ベンジルおよび１０ｇ（０．０７２モル）のＫ２ＣＯ３の混合物を、一晩加熱還流した。反応物を冷まし、水に注ぎ入れ、ＥｔＯＡｃで抽出した。ＥｔＯＡｃ層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥し、蒸発させて７ｇの粗生成物を得た。Ｅｔ２Ｏでの結晶化により、４．１３ｇの生成物を白色固形物融点１１０−１１１℃として得た。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（２．０９，ｍ，２Ｈ），（２．５５，ｔ，２Ｈ），（２．８７，ｔ，２Ｈ），（３．９０，ｓ，３Ｈ），（５．１４，ｓ，２Ｈ），（６．６５，ｓ，１Ｈ），（７．２５−７．４５，ｍ，５Ｈ），（７．５８，ｓ，１Ｈ）．
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：２８３
【００７９】
《実施例８》
〈１−｛２−［４−（７−ベンジルオキシ−６−メトキシ−，３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン〉
実施例１と同様の手法を用い、５．１３ｇ（０．０１８２モル）の７−ベンジルオキシ−６−メトキシ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ナフタレン−１−オン、ヘキサン中の１３．６３ｍｌの１．６Ｍのｎ−ブチルリチウム、および５．１６ｇ（０．０１９モル）の１−（２−（４−ブロモフェノキシ）エチル）ピロリジンから、３．５ｇの標記生成物を得た。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（２．０５，ｂｓ，４Ｈ），（２．３０，ｍ，２Ｈ），（２．７４，ｔ，２Ｈ），（３．１０−３．４０，ｍ，６Ｈ），（３．９０，ｓ，３Ｈ），（４．４５，ｂｓ，２Ｈ），（４．９５，ｓ，２Ｈ），（５．９０，ｔ，１Ｈ），（６．５８，ｓ，１Ｈ），（６．７４，ｓ，１Ｈ），（６．８０，ｄ，２Ｈ），（７．１０，ｄ，２Ｈ），（７．２５，ｍ，５Ｈ）．
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：４５６．
【００８０】
《実施例９》
〈１−｛２−［４−（７−ベンジルオキシ−２−ブロモ−６−メトキシ−，３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン〉
実施例２と同様の手法を用い、５０ｍｌのＤＭＦ中の２．４７ｇ（０．００５４モル）の１−｛２−［４−（７−ベンジルオキシ−６−メトキシ−，３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン、９６５ｍｇ（０．００５４モル）のＮＢＳおよび９０ｍｇのＡＩＢＮから２．３７ｇの標記生成物を得た。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（１．９０，ｂｓ，４Ｈ），（２．６９，ｓ，４Ｈ），（２．８８，ｂｓ，４Ｈ），（３．１０，ｔ，２Ｈ），（３．８３，ｔ，２Ｈ），（４．８３，ｓ，２Ｈ），（６．２０，ｓ，１Ｈ），（６．６５，ｓ，１Ｈ），（６．９０，ｄ，２Ｈ），（７．００，ｄ，２Ｈ），（７．２１，ｍ，５Ｈ）
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：５３６．
【００８１】
《実施例１０》
〈１−｛２−［４−（７−ベンジルオキシ−６−メトキシ−２−フェニル−，３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン〉
実施例３と同様の手法を用い、５０ｍｌのＥｔＯＨ中の２．３７ｇ（０．００４４モル）の１−｛２−［４−（７−ベンジルオキシ−２−ブロモ−６−メトキシ−，３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン、１．３５ｇ（０．０１１モル）のフェニルボロン酸、１５３ｍｇ（０．１３ミリモル）のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムおよび１．８８ｇ（０．０１７モル）のＮａ２ＣＯ３から１．３８ｇの標記生成物を得た。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（１．８３，ｂｓ，４Ｈ），（２．７０，ｍ，６Ｈ），（２．８６，ｍ，２Ｈ），（２．９６，ｍ，２Ｈ），（３．９０，ｓ，３Ｈ），（４．１４，ｔ，２Ｈ），（６．３７，ｓ，１Ｈ），（６．６５−７．３０，ｍ，１５Ｈ）．
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：５３２．
【００８２】
《実施例１１》
〈３−メトキシ−７−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール〉
１．３８ｇ（０．００２６モル）の１−｛２−［４−（７−ベンジルオキシ−６−メトキシ−２−フェニル−３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン、１．４６ｇの炭担持水酸化パラジウム、４ｍｌの２ＮのＨＣｌ、１５ｍｌのＨ２Ｏおよび１００ｍｌのＥｔＯＨの混合物を、３０ｐｓｉのＨ２雰囲気下で５０℃で３６時間パーのシェーカーで震盪した。反応物を濾過して触媒を除去し、ＥｔＯＨを蒸発させた。１ＮのＮａＯＨを加えてｐＨを８に調整し、水性物質をＥｔＯＡｃで抽出した。ＥｔＯＡｃ層を乾燥し、蒸発させて６４０ｍｇの標記生成物を得た。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（１．８０，ｄ，１Ｈ），（１．９５，ｂｓ，４Ｈ），（２．１０，ｍ，１Ｈ），（２．８５−３．２０，ｍ，７Ｈ），（３．３０，ｄ，１Ｈ），（３．８８，ｓ，３Ｈ），（４．１４，ｔ，２Ｈ），（６．３０，ｄ，２Ｈ），（６．４３，ｓ，１Ｈ），（６．５０，ｄ，２Ｈ），（６．６８，ｓ，１Ｈ），（６．８０，ｍ，２Ｈ），（７．１８，ｍ，３Ｈ）
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：４４４
【００８３】
２−ＯＭｅ，１−ＯＨ代謝物および３−ＯＨ，２−ＯＭｅ代謝物は、模式図４および５に概説した手法を用いて合成することができる。
【００８４】
３−メトキシ−６−フェニルテトラヒドロ−ナフタレン−２−オール代謝物は、模式図５に概説した手法を用いて合成することができる。
【化３２】
2004510693.tif 000041
【００８５】
《実施例１２》
〈１−｛２−［４−（５，６−ジメトキシ−，３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン〉
実施例１と同様の手法を用い、１０ｇ（０．０４８モル）の５，６−ジメトキシ−１−テトラロン、ヘキサン中の３３．４ｍｌの１．６Ｍのｎ−ブチルリチウム、および１３．５ｇの１−（２−（４−ブロモフェノキシ）エチル）ピロリジンから、６．５ｇの標記生成物を得た。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（１．９０，ｂｓ，４Ｈ），（２．３１，ｍ，２Ｈ），（２．８７，ｔ，２Ｈ），（２．９０，ｂｓ，４Ｈ），（３．１０，ｂｓ，２Ｈ），（３．７８，ｓ，３Ｈ），（３．８２，ｓ，３Ｈ），（４．２８，ｂｓ，２Ｈ），（５．９０，ｓ，１Ｈ），（６．６３，ｄ，１Ｈ），（６．７０，ｄ，１Ｈ），（６．９０，ｄ，２Ｈ），（７．２２，ｄ，２Ｈ）
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：３７９．８
出発物質
５，６−ジメトキシ−１−テトラロン；参考文献：Organic Process Research & Development, 1999, 3, 71-72.
【００８６】
《実施例１３》
〈１−｛２−［４−（２−ブロモ−５，６−ジメトキシ−３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン〉
実施例２と同様の手法を用い、５０ｍｌのＤＭＦ中の５．３３ｇ（０．１４モル）の１−｛２−［４−（５，６−ジメトキシ−３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン、２．５ｇ（０．０１４モル）のＮＢＳおよび２３０ｍｇのＡＩＢＮから６．２５ｇの標記生成物を得た。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（１．９６，ｂｓ，４Ｈ），（２．９０，ｍ，６Ｈ），（３．０５，ｔ，２Ｈ），（３．１５，ｔ，２Ｈ），（３．８０，ｓ，６Ｈ），（４．３０，ｔ，２Ｈ），（６．３５，ｄ，１Ｈ），（６．５３，ｄ，１Ｈ），（６．９５，ｄ，２Ｈ），（７．１０，ｄ，２Ｈ）
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：４５８
【００８７】
《実施例１４》
〈１−｛２−［４−（５，６−ジメトキシ−２−フェニル−３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン〉
実施例３と同様の手法を用い、２００ｍｌのＥｔＯＨ中の６．２５ｇ（０．０１３６モル）の１−｛２−［４−（２−ブロモ−５，６−ジメトキシ−，３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン、４．１６ｇ（０．０３４モル）のフェニルボロン酸、４７２ｍｇ（０．４１ミリモル）のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムおよび５．７８ｇ（０．０５４モル）のＮａ２ＣＯ３から６．３ｇの標記生成物を得た。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（１．８０，ｂｓ，４Ｈ），（２．６５，ｂｓ，４Ｈ），（２．７３，ｔ，２Ｈ），（２．９０，ｔ，２Ｈ），（３．００，ｔ，２Ｈ），（３．８３，ｓ，６Ｈ），（４．０８，ｔ，２Ｈ），（６．５３，ｄ，１Ｈ），（６．６０，ｄ，１Ｈ），（６．７４，ｄ，２Ｈ），（６．９５，ｄ，２Ｈ），（７．０５，ｍ，５Ｈ）．
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：４５６．
【００８８】
《実施例１５》
〈１−｛２−［４−（５，６−ジメトキシ−２−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン〉
実施例４と同様の手法を用い、１００ｍｌのＥｔＯＨ中の６．３ｇ（０．０１３８モル）の１−｛２−［４−（５，６−ジメトキシ−２−フェニル−，３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン、７．７ｇ（０．０５５モル）の炭担持水酸化パラジウム、５ｍｌの２ＮのＨＣｌおよび１０ｍｌのＨ２Ｏから、５．０６ｇの標記生成物を得た。
ＮＭＲ（アセトンｄ６）ｐｐｍ：（１．９５，ｂｓ，４Ｈ），（２．７０，ｍ，１Ｈ），（２．８５，ｂｓ，４Ｈ），（２．９５，ｍ，１Ｈ），（３．２０，ｂｓ，２Ｈ），（３．３８，ｂｓ，２Ｈ），（３．７８，ｓ，３Ｈ），（３．８２，ｓ，３Ｈ），（４．４０，ｂｓ，２Ｈ），（６．４３，ｄ，１Ｈ），（６．７４，ｄ，１Ｈ），（６．８５−７．１５，ｍ，７Ｈ）
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：４５８
【００８９】
《実施例１６》
〈６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−１，２−ジオールおよび２−メトキシ−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−１−オールと１−メトキシ−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オールの混合物〉
実施例５と同様の手法を用い、２．３ｇ（０．００５モル）の１−｛２−［４−（５，６−ジメトキシ−２−フェニル−１，２，３，４−テトラヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン、８０ｍｌのＨＯＡｃおよび８０ｍｌの４８％水性ＨＢｒから、６５０ｍｇの２−メトキシ−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−１−オールと１−メトキシ−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オールの混合物を得た。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（１．８８，ｂｓ，６Ｈ），（２．１０，ｍ，１Ｈ），（２．８４，ｂｓ，４Ｈ），（３．００，ｂｓ，２Ｈ），（３．２５，ｄｔ，１Ｈ），（３．３５，ｄ，２Ｈ），（３．８５，ｓ，３Ｈ），（４．１０，ｂｓ，２Ｈ），（４．２５，ｄ，１Ｈ），（６．２５−６．８８，ｍ，８Ｈ），（７．１５，ｍ，３Ｈ）
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：４４４
および１４０ｍｇの６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−１，２−ジオール
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：４３０
【化３３】
2004510693.tif 000042
【００９０】
《実施例１７》
〈５−ヒドロキシ−６−メトキシ−１−テトラロン〉
実施例６と同様の手法を用い、１０ｇ（０．０４８モル）の５，６−ジメトキシ−１−テトラロン、１００ｍｌのＨＯＡｃおよび１００ｍｌの４８％水性ＨＢｒから７ｇの標記生成物、融点１６３℃を得た。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（２．０９，ｍ，２Ｈ），（２．６７，ｔ，２Ｈ），（２．９０，ｔ，２Ｈ），（３．９２，ｓ，３Ｈ），（５．７０，ｂｓ，１Ｈ），（６．８０，ｄ，１Ｈ），（７．６８，ｄ，１Ｈ）．
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：１９３
出発物質
５，６−ジメトキシ−１−テトラロン；参考文献：Organic Process Research and Development, 1999, 3, 71-72.
【００９１】
《実施例１８》
〈５−ベンジルオキシ−６−メトキシ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ナフタレン−１−オン〉
実施例７と同様の手法を用い、４．５ｇ（０．０２４モル）の５−ヒドロキシ−６−メトキシ−１−テトラロン、５．４ｇ（０．０３１モル）の臭化ベンジルおよび１０ｇ（１００ｍｌのアセトン中の０．０７２モルのＫ２ＣＯ３）から、標記生成物（５．１３ｇ）を、エーテルを用いた結晶化により白色固形物融点９０℃として得た。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（２．１０，ｍ，２Ｈ），（２．５５，ｔ，２Ｈ），（２．８８，ｔ，２Ｈ），（３．８８，ｓ，３Ｈ），（５．１１，ｓ，２Ｈ），（６．６３，ｓ，１Ｈ），（７．２０−７．４５，ｍ，５Ｈ），（７．６０，ｓ，１Ｈ）
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：２８３．
【００９２】
《実施例１９》
〈１−｛２−［４−（５−ベンジルオキシ−６−メトキシ−，３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン〉
実施例１と同様の手法を用い、１０ｇ（０．３５５５モル）の５−ベンジルオキシ−６−メトキシ−３，４−ジヒドロ−２Ｈ−ナフタレン−１−オン、９．８８ｇ（０．３６６モル）の１−（２−（４−ブロモフェノキシ）エチル）ピロリジンおよびヘキサン中の１３．６３ｍｌの１．６Ｍのｎ−ブチルリチウムから、４．３ｇの標記生成物を得た。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（１．９０，ｂｓ，４Ｈ），（２．２０，ｍ，２Ｈ），（２．７８，ｔ，２Ｈ），（２．９０，ｂｓ，２Ｈ），（３．１０，ｂｓ，１Ｈ），（３．８４，ｓ，３Ｈ），（４．２６，ｔ，２Ｈ），（４．９８，ｓ，２Ｈ），（５．８６，ｔ，１Ｈ），（６．６５，ｄ，１Ｈ），（６．７４，ｄ，Ｈ），（６．８８，ｄ，２Ｈ），（７．２５，ｄ，２Ｈ），（７．２８−７．５０，ｍ，５Ｈ）
【００９３】
《実施例２０》
〈１−｛２−［４−（５−ベンジルオキシ−２−ブロモ−６−メトキシ−３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン〉
実施例２と同様の手法を用い、５０ｍｌのＤＭＦ中の４．３ｇ（０．００９４モル）の１−｛２−［４−（５−ベンジルオキシ−６−メトキシ−３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン、１．６８ｇ（．００９４モル）のＮＢＳおよび１５６ｍｇのＡＩＢＮから４ｇの標記生成物を得た。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（１．９５，ｂｓ，４Ｈ），（２．７５，ｔ，２Ｈ），（２．９０，ｔ，２Ｈ），（３．００，ｂｓ，４Ｈ），（３．１０，ｂｓ，２Ｈ），（３．８０，ｓ，３Ｈ），（４．３３，ｓ，２Ｈ），（６．３５，ｄ，１Ｈ），（６．５７，ｄ，１Ｈ），（６．９３，ｄ，２Ｈ），（７．１５−７．３０，ｍ，５Ｈ）
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：５３６
【００９４】
《実施例２１》
〈１−｛２−［４−（５−ベンジルオキシ−６−メトキシ−２−フェニル−３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン〉
実施例３と同様の手法を用い、１５０ｍｌのＥｔＯＨ中の４．０ｇ（０．００７５モル）の１−｛２−［４−（５−ベンジルオキシ−２−ブロモ−６−メトキシ−３，４−ジヒドロ−ナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン、２．２８ｇ（０．１８６モル）のフェニルボロン酸、２５９ｍｇ（０．２２４ミリモル）のテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムおよび３．７ｇ（０．０３モル）のＮａ２ＣＯ３から３．２ｇの標記生成物を得た。
ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）ｐｐｍ：（１．８４，ｂｓ，４Ｈ），（２．８３，ｍ，２Ｈ），（２．７４，ｍ，４Ｈ），（２．９５，ｍ，４Ｈ），（３．８４，ｓ，３Ｈ），（４．１０，ｔ，２Ｈ），（５．０３，ｓ，２Ｈ），（６．５５，ｄ，１Ｈ），（６．６５，ｄ，１Ｈ），（６．７５，ｄ，２Ｈ），（６．９０−７．５０，ｍ，１２Ｈ）．
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：５３２
【００９５】
《実施例２２》
〈２−メトキシ−６−フェニル−５−［４−（２−ピロリジン−１−イル−エトキシ）−フェニル］−５，６，７，８−テトラヒドロ−ナフタレン−１−オール〉
実施例１１と同様の手法を用い、３．２ｇ（０．００７モル）の１−｛２−［４−（５−ベンジルオキシ−６−メトキシ−２−フェニル−３，４−ジヒドロナフタレン−１−イル）−フェノキシ］−エチル｝−ピロリジン、３．４ｇの炭担持水酸化パラジウム、１０ｍｌの２ＮのＨＣｌ、３０ｍｌのＨ２Ｏおよび１００ｍｌのＥｔＯＨから２．２ｇの生成物を得た。
質量スペクトル：（ペアレント＋１）：４４４．
【００９６】
１−メトキシ−６−フェニル−テトラヒドロ−ナフタレン−２−オール代謝物は、模式図６に示す通りに合成することができる。
【化３４】
2004510693.tif 000043
【化３５】
2004510693.tif 000044
【図面の簡単な説明】
【図１】
経口投与後のマウスにおけるＰＰＴＮの尿代謝物の代表的ＨＰＬＣラジオクロマトグラムである。縦軸の尺度は、放射能の１分当たりのカウント（ＣＰＭ）である。横軸の尺度は、分での保持時間である。
【図２】
経口投与後のマウスにおけるＰＰＴＮの糞便代謝物の代表的ＨＰＬＣラジオクロマトグラムである。縦軸の尺度は、放射能の１分当たりのカウント（ＣＰＭ）である。横軸の尺度は、分での保持時間である。
【図３】
経口投与後のマウスにおけるＰＰＴＮの循環代謝物の代表的ＨＰＬＣラジオクロマトグラムである。縦軸の尺度は、放射能の１分当たりのカウント（ＣＰＭ）である。横軸の尺度は、分での保持時間である。
【図４】
ＰＰＴＮ代謝物ＸＩのフラグメンテーションパターンおよび質量スペクトルデータである。縦軸の尺度は、比存在度である。横軸の尺度は、電荷に対する質量比；ｍ／ｚである。
【図５】
ＰＰＴＮ代謝物ＸＩＩのフラグメンテーションパターンおよび質量スペクトルデータである。縦軸の尺度は、比存在度である。横軸の尺度は、電荷に対する質量比；ｍ／ｚである。
【図６】
ＰＰＴＮ代謝物ＸＸＩのフラグメンテーションパターンおよび質量スペクトルデータである。縦軸の尺度は、比存在度である。横軸の尺度は、電荷に対する質量比；ｍ／ｚである。
【図７】
ＰＰＴＮ代謝物ＸＩＶのフラグメンテーションパターンおよび質量スペクトルデータである。縦軸の尺度は、比存在度である。横軸の尺度は、電荷に対する質量比；ｍ／ｚである。
【図８】
ＰＰＴＮ代謝物ＶＩのフラグメンテーションパターンおよび質量スペクトルデータである。縦軸の尺度は、比存在度である。横軸の尺度は、電荷に対する質量比；ｍ／ｚである。
【図９】
ＰＰＴＮ代謝物ＩＩのフラグメンテーションパターンおよび質量スペクトルデータである。縦軸の尺度は、比存在度である。横軸の尺度は、電荷に対する質量比；ｍ／ｚである。
【図１０】
ＰＰＴＮ代謝物ＸＶＩのフラグメンテーションパターンおよび質量スペクトルデータである。縦軸の尺度は、比存在度である。横軸の尺度は、電荷に対する質量比；ｍ／ｚである。
【図１１】
ＰＰＴＮ代謝物Ｘのフラグメンテーションパターンおよび質量スペクトルデータである。縦軸の尺度は、比存在度である。横軸の尺度は、電荷に対する質量比；ｍ／ｚである。
【図１２】
ＰＰＴＮ代謝物ＸＶＩＩのフラグメンテーションパターンおよび質量スペクトルデータである。縦軸の尺度は、比存在度である。横軸の尺度は、電荷に対する質量比；ｍ／ｚである。
【図１３】
ＰＰＴＮ代謝物ＩＶのフラグメンテーションパターンおよび質量スペクトルデータである。縦軸の尺度は、比存在度である。横軸の尺度は、電荷に対する質量比；ｍ／ｚである。
【図１４】
ＰＰＴＮ代謝物ＸＶのフラグメンテーションパターンおよび質量スペクトルデータである。縦軸の尺度は、比存在度である。横軸の尺度は、電荷に対する質量比；ｍ／ｚである。
【図１５】
ＰＰＴＮ代謝物Ｖのフラグメンテーションパターンおよび質量スペクトルデータである。縦軸の尺度は、比存在度である。横軸の尺度は、電荷に対する質量比；ｍ／ｚである。
【図１６】
ＰＰＴＮ代謝物ＸＩＩＩのフラグメンテーションパターンおよび質量スペクトルデータである。縦軸の尺度は、比存在度である。横軸の尺度は、電荷に対する質量比；ｍ／ｚである。
【図１７】
ＰＰＴＮ代謝物ＩＸのフラグメンテーションパターンおよび質量スペクトルデータである。縦軸の尺度は、比存在度である。横軸の尺度は、電荷に対する質量比；ｍ／ｚである。
【図１８】
ＰＰＴＮ代謝物ＶＩＩＩのフラグメンテーションパターンおよび質量スペクトルデータである。縦軸の尺度は、比存在度である。横軸の尺度は、電荷に対する質量比；ｍ／ｚである。


【手続補正３】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】全図
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図１】
2004510693.tif 000045
【図２】
2004510693.tif 000046
【図３】
2004510693.tif 000047
【図４】
2004510693.tif 000048
【図５】
2004510693.tif 000049
【図６】
2004510693.tif 000050
【図７】
2004510693.tif 000051
【図８】
2004510693.tif 000052
【図９】
2004510693.tif 000053
【図１０】
2004510693.tif 000054
【図１１】
2004510693.tif 000055
【図１２】
2004510693.tif 000056
【図１３】
2004510693.tif 000057
【図１４】
2004510693.tif 000058
【図１５】
2004510693.tif 000059
【図１６】
2004510693.tif 000060
【図１７】
2004510693.tif 000061
【図１８】
2004510693.tif 000062