(57)【要約】【課題】  核酸を有する微粒子による汚染状況の評価を迅速かつ的確に行えるシステムを提供すること。【解決手段】  下記工程、すなわち（１）核酸を有する微粒子を微粒子付着用部材に付着させる微粒子付着工程、（２）付着された微粒子の膜を放電により破壊する膜破壊工程、（３）前記微粒子をゲルの厚さ方向に電気泳動し、微粒子中の核酸を負極側から正極側に移動させ、核酸検出用部材の表面に核酸を付着させる電気泳動工程、（４）前記核酸検出用部材の表面を蛍光染色し、核酸の濃度を計測する核酸計測工程を備えた微粒子の計測システムによって達成される。【選択図】          図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記工程を備えたことを特徴とする核酸を有する微粒子の計測方法；
（１）核酸を有する微粒子を微粒子付着用部材に付着させる微粒子付着工程、
（２）付着された微粒子の膜を放電により破壊する膜破壊工程、
（３）前記微粒子をゲルの厚さ方向に電気泳動し、微粒子中の核酸を負極側から正極側に移動させ、核酸検出用部材の表面に核酸を付着させる電気泳動工程、
（４）前記核酸検出用部材の表面を蛍光染色し、核酸の濃度を計測する核酸計測工程。
【請求項２】
前記微粒子付着工程においては、前記微粒子付着用部材をコロナ放電電極の滑らかな電極側の表面に置き、前記微粒子付着用部材の表面に空中に浮遊する核酸を持つ微粒子を付着させることを特徴とする請求項１に記載の核酸を有する微粒子の計測方法。
【請求項３】
前記膜破壊工程においては、相対する電極間に絶縁板を挿入した電極系を用い、前記電極の間隙に前記微粒子付着用部材を挿入し、前記電極間に交番電圧を印加することで微粒子の膜を破壊することを特徴とする請求項１または２に記載の核酸を有する微粒子の計測方法。
【請求項４】
前記核酸検出用部材において核酸が電気泳動される面は、正の表面電荷を有することを特徴とする請求項１〜３のいずれか一つに記載の核酸を有する微粒子の計測方法。
【請求項５】
核酸を有する微粒子を付着させる微粒子付着用部材と、この微粒子付着用部材の表面に核酸を有する微粒子を付着させる微粒子付着装置と、前記微粒子付着用部材に付着した前記微粒子の膜を放電により破壊する膜破壊装置と、電荷中和剤を備えたテープとこのテープの一面側に設けたゲルとを備えた核酸検出用部材と、前記微粒子付着用部材の表面に付着している核酸を前記核酸検出用部材のゲルを通して電気泳動させて前記テープ側に移動させる電気泳動装置と、前記核酸検出用部材のゲルを取り除いた状態で前記テープ表面の核酸を検出する核酸検出装置とを備えたことを特徴とする核酸を有する微粒子の計測システム。
【請求項６】
前記微粒子付着装置は、針電極と平板電極とを設けたコロナ放電電極を備えており、前記平板電極に前記微粒子付着用部材を載置した状態で表面に前記微粒子を付着させることを特徴とする請求項５に記載の核酸を有する微粒子の計測システム。
【請求項７】
前記膜破壊装置は、相対する電極と、この電極間に挿入された絶縁板と、前記微粒子付着用部材を挿入する部材装着空間とを備えており、前記電極間に交番電圧を印加することで前記膜を破壊することを特徴とする請求項５または６に記載の核酸を有する微粒子の計測システム。
【請求項８】
前記核酸検出用部材のテープは、正の表面電荷を有することを特徴とする請求項５〜７のいずれか一つに記載の核酸を有する微粒子の計測システム。
【請求項９】
前記核酸検出用部材は、前記微粒子付着用部材を兼用しており、前記ゲルの表面に核酸を有する微粒子を付着させた状態で、微粒子の膜破壊操作を行うことを特徴とする請求項５〜８のいずれか一つに記載の核酸を有する微粒子の計測システム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、病院・食品工場の空気・壁面・床、あるいは手術・食品製造に用いる器具・衣服の微生物による汚染状況などを把握するための核酸を有する微粒子の計測に関する方法および装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
従来より、病院や食品工場などのように、特に衛生面に気を配る必要がある場所における空気中、壁面、及び床面の微生物による汚染状況、並びに手術や食品製造に用いる器具及び衣服の微生物による汚染状況を調べる必要があった（非特許文献１）。従来の方法では、培地や細胞を多数固定した膜に試料を溶液として塗布し、微生物に対してはコロニーを形成し、またウイルスに対しては膜状に張った細胞の欠損を生じさせて、コロニー数あるいは欠損数を計数することで評価していた（非特許文献２）。【０００３】
一方、近年の技術開発の進歩により、一分子ＤＮＡの操作や計測技術が進んだことで、一分子のＤＮＡを蛍光染色することで鮮明に観察できるようになって来た（非特許文献３）。これを用いて、細胞からのＤＮＡ分子の取り出し、ＤＮＡ分子の基板への伸張固定、また伸張固定したＤＮＡに蛍光染色した制限酵素を付着させて蛍光顕微鏡による制限地図の作成などが可能となってきている（特許文献１，非特許文献４）。
【特許文献１】特開２００３−２００４００号公報
【非特許文献１】柳  宇：事務所ビルにおけるバイオエアロゾルの挙動とその制御方法，クリーンテクノロジー，vol 17，No.5，44-47，2007
【非特許文献２】石松維世：浮遊微生物粒子の捕集と検出，クリーンテクノロジー，vol 17，No.5，48-51，2007
【非特許文献３】Morikawa K., and Yanagida M., J. Biochem., 89, pp.693-696, 1981
【非特許文献４】A. Bensimon, A. Simon, A. Chiffaudel, V. Croquette, F. Heslot, D. Bensimon, ”Alignment and sensitive detection of DNA by a moving interface”, Science, Vol.265(5181), pp2096-2098, 1994
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は一分子を可視化する方法を核酸を持つ粒子の検出に応用することで、環境中の微生物を迅速かつ的確に計数するものである。
従来、環境中の微生物による汚染状況の評価は、培養によるコロニー形成あるいは細胞欠損により行われている。しかしながら、細胞の培養や細胞にウイルスを感染させ細胞欠損を起こすには数日の時間が必要である。蛍光色素を用いて細胞内のＤＮＡを染色して観察する方法も、細胞膜の色素透過性が高くなく、１０時間程度以上の染色処理時間が必要である（非特許文献２）。このとき細胞内小器官が同時に蛍光染色されることが多く、誤差の原因となっていた。また、処理時間短縮のために細胞膜を壊して蛍光染色を行うと、核酸以外の生体高分子も染色されてしまい、誤差の原因となってしまう。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
上記事情に鑑み、本発明者は鋭意検討を重ねた結果、次の発明を完成させるに至った。
第１の発明に係る核酸を有する微粒子の計測方法は、下記工程、すなわち、（１）核酸を有する微粒子を微粒子付着用部材に付着させる微粒子付着工程、（２）付着された微粒子の膜を放電により破壊する膜破壊工程、（３）前記微粒子をゲルの厚さ方向に電気泳動し、微粒子中の核酸を負極側から正極側に移動させ、核酸検出用部材の表面に核酸を付着させる電気泳動工程、（４）前記核酸検出用部材の表面を蛍光染色し、核酸の濃度を計測する核酸計測工程を備えたことを特徴とする。
本発明において、前記微粒子付着工程においては、前記微粒子付着用部材をコロナ放電電極の滑らかな電極側の表面に置き、前記微粒子付着用部材の表面に空中に浮遊する核酸を持つ微粒子を付着させることが好ましい。
また、前記膜破壊工程においては、相対する電極間に絶縁板を挿入した電極系を用い、前記電極の間隙に前記微粒子付着用部材を挿入し、前記電極間に交番電圧を印加することで微粒子の膜を破壊することが好ましい。
また、前記核酸検出用部材において核酸が電気泳動される面は、正の表面電荷を有することが好ましい。【０００６】
第２の発明に係る核酸を有する微粒子の計測システムは、核酸を有する微粒子を付着させる微粒子付着用部材と、この微粒子付着用部材の表面に核酸を有する微粒子を付着させる微粒子付着装置と、前記微粒子付着用部材に付着した前記微粒子の膜を放電により破壊する膜破壊装置と、電荷中和剤を備えたテープとこのテープの一面側に設けたゲルとを備えた核酸検出用部材と、前記微粒子付着用部材の表面に付着している核酸を前記核酸検出用部材のゲルを通して電気泳動させて前記テープ側に移動させる電気泳動装置と、前記核酸検出用部材のゲルを取り除いた状態で前記テープ表面の核酸を検出する核酸検出装置とを備えたことを特徴とする。【０００７】
本発明において、前記微粒子付着装置は、針電極と平板電極とを設けたコロナ放電電極を備えており、前記平板電極に前記微粒子付着用部材を載置した状態で表面に前記微粒子を付着させることが好ましい。
また、前記膜破壊装置は、相対する電極と、この電極間に挿入された絶縁板と、前記微粒子付着用部材を挿入する部材装着空間とを備えており、前記電極間に交番電圧を印加することで前記膜を破壊することが好ましい。
また、前記核酸検出用部材のテープは、正の表面電荷を有することが好ましい。
また、前記核酸検出用部材は、前記微粒子付着用部材を兼用しており、前記ゲルの表面に核酸を有する微粒子を付着させた状態で、微粒子の膜破壊操作を行うことが好ましい。【０００８】
核酸とは、ＲＮＡまたはＤＮＡのいずれも含まれる。また、一本鎖または二本鎖のいずれでもよく、環状または直鎖状のいずれも含まれる。
核酸を有する微粒子とは、核酸を有するものを意味しており、例えば微生物（細菌、菌類、酵母、カビなどを含む）、ウイルス、ウイロイドなどが含まれる。
【発明の効果】
【０００９】
核酸を持つ細菌やウイルス粒子などの微粒子の濃度を調べるためには、細胞膜やタンパクのエンベロープを効率良く破壊して内部に含まれている核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）を取り出し、この核酸のみを蛍光染色して計数する必要がある。核酸を細菌やウイルスから迅速に取り出すために本発明では放電を用いる。特に、相対する電極間に絶縁板を挿入した電極系を用いた放電破壊を行うことで、数分以内に細胞を破壊して核酸を取り出すことができる。これは細胞膜を破壊する酵素反応などに比べ極めて短時間である。
また、本発明の目的は、核酸を有する微粒子の濃度計測を短時間で行うことである。上記放電破壊を用いれば、微粒子付着用部材に付着させた微粒子をその場で破壊することができる。従来のように、核酸を有する微粒子を一旦溶液に移して核酸抽出操作を行うためには、かなりの量の試料が必要となる。このため、多くの試料を集めるためには長時間の微粒子捕集操作が必要となり、迅速な濃度計数ができなかった。【００１０】
一方、本願発明によれば、微粒子付着用部材の表面で破壊された細胞やウイルスから表面に拡散する核酸は、微粒子付着用部材の表面に塗布した界面活性剤などの電荷中和剤により、ヒストンなどのタンパクと分離される。つまり、核酸を放電破壊により微粒子から取り出した後、他の構成分子と区別するため、ゲル電気泳動により核酸を分別する。電気泳動の時間を短縮するためにはできるだけ泳動距離を短くする必要がある。本発明の核酸検出用部材では、テープの表面に薄いゲル層を有する膜を用いて、ゲル層の厚さ方向に核酸を電気泳動することで、他の生体高分子から分別する。ゲル層を通過してテープまで電気泳動された核酸はテープ表面に付着する。このとき、核酸は負電荷を帯びているので、正極性表面電荷を持たせたテープを用いれば、分離した核酸をテープに確実に付着させ保持できる。【００１１】
電気泳動を行った後にゲルをテープから剥離する。次に、テープに付着した核酸を蛍光染色する。蛍光染色には、ＹＯＹＯや臭化エチジウム、ＤＡＰＩなど、ＤＮＡやＲＮＡを蛍光染色するための一般的な色素を用いることができる。電気泳動後の核酸を確実に表面に保持するために、テープには正の表面電荷を有する素材を用いることが望ましい。核酸を持つ微粒子一個から抽出された核酸の数は複数になる場合も多いが、その分布範囲は概ね微粒子の直径の数倍以内になるため、その群を画像処理により同定することで、一つの微粒子の核酸群として計数することができる。【００１２】
微粒子付着用部材の表面に微粒子を付着させるため、空気中浮遊微粒子に対してはコロナ放電を用いる。これにより高効率で微粒子を膜表面に電気集塵できる。また必要に応じてコロナ放電電圧あるいはコロナ放電場に導入する微粒子を含む空気流量を調節して、核酸を持つ微粒子の付着密度を制御することで、微粒子の計数精度を向上できる。
また、微粒子付着用部材と核酸検出用部材とを兼用させる構成とし、核酸検出用部材をテープとこのテープの一面側に設けたゲルとから構成すれば、核酸検出用部材を連続的に供給しながら、微粒子付着工程、膜破壊工程、電気泳動工程、及び核酸計測工程を行えるので、非常に迅速な測定システムとすることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
図１は、本実施形態の概要を説明するための工程を示す図である。この工程図では、微粒子付着用部材２２と、核酸検出用部材２３とが異なる構成としている。核酸２０を有する微粒子２１は、図示左上側から矢印に向かって工程を進み、右上側から右下側、更に左下側の工程に至ることにより、核酸２０が計測される。
まず、左上の微粒子付着工程では、微粒子付着用部材２２の表面に核酸を有する微粒子２１を付着させる。こうして、微粒子２１を付着した微粒子付着用部材２２は、次の膜破壊工程に進む（図示右上）。
次に、膜を破壊された微粒子について、ゲル１を用いて、その厚さ方向に電気泳動工程を行い、核酸２０を負極側から正極側に移動させる。こうして、核酸２０は、核酸検出用部材２３のテープ２の表面に移動する（図示右下）。
最後に、核酸検出用部材２３のゲル１を取り除き、テープ２の表面に付着したを蛍光染色し、核酸２０の濃度を計測する（核酸計測工程）。【００１４】
次に、各工程の詳細について説明する。図２には、微粒子２１を電気泳動するための核酸検出用部材２３の側断面図を示した。核酸検出用部材２３には、正極性の表面電荷を持つようにアミノ基（NH2+）で表面処理をした不織布でできたプラスチックテープ２を基板として、その表面にアガロースゲル１を１ｍｍ程度以下の厚みで塗布した膜を備えている。このゲル１を用いて核酸を持つ微粒子２１を電気泳動する。このテープ状の膜とした核酸検出用部材２３は、カートリッジに入れて保管しておき、連続的に供給できる。例えばテープの幅は１ｍｍから５ｍｍ程度でよい。この核酸検出用部材２３は、微粒子付着用部材２２として兼用することができる。すなわち、アガロースゲル１の表面上に微粒子２１を付着させた後に、微粒子２１の膜を破壊させ、次いで電気泳動を行うことで、核酸２０をテープ２の方向に移動させ、その表面に付着させる。【００１５】
空気中に浮遊する核酸を持った微粒子をテープ状の膜に付着させるには、図３に示すコロナ放電装置（微粒子付着装置）２４を用いることができる。コロナ放電装置２４には、針状の高電圧電極３と平板状接地電極９とが設けられている。両電極３，９の距離を約５ｍｍから１０ｍｍ程度の間隔で設置し、平板状接地電極９の表面に微粒子付着用部材２２を供給する。
壁や衣服などに付着した核酸を持つ微粒子を付着させるために、テープ状の核酸検出用部材２３を用いるには、核酸検出用部材２３をカートリッジから引き出し、直接に壁や衣服などにゲル１の表面を接触させる。あるいは直径数ｍｍ程度の膜状の微粒子付着用部材２２（または微粒子付着用部材２２を兼用する核酸検出用部材２３）を別途用意しておき、それを壁や衣服などに接触させ、その後に核酸抽出と蛍光染色などの後処理を行ってもよい。【００１６】
図４には、膜破壊工程に使用できる膜破壊装置２５を示した。膜破壊装置２５には、相対する無声放電電極５，１９と、両電極間に挿入された絶縁板６と、微粒子付着用部材２２を挿入する部材装着空間２６が備えられている。両放電電極５，１９は、平行平板電極とされており、電極の一方側に絶縁板６を設けることにより、部材装着空間２６の空隙を２ｍｍ程度以下とされている。上側の電極５は、ステンレスメッシュにより構成されており、下側の電極１９は、接地電極である。電極５には、高電圧交番電源４が接続されている。また、絶縁板６と電極９との間には、所定厚さのスペーサー７が挟み付けられている。これに例えば３０ｋＨｚ、１０ｋＶ程度の交番電圧を印加して無声放電を発生させる。
核酸２０を持つ微粒子２１を微粒子付着用部材２２に付着させた後、部材装着空間２６に微粒子付着用部材２２を挿入し、無声放電により微粒子２１の膜を破壊する。【００１７】
続いて、微粒子付着用部材２２の表面に付着した核酸２０を持つ微粒子２１を破壊した膜の表面にＳＤＳなどの界面活性剤を加えて核酸２０を抽出する。その後に図５に示す電気泳動装置２７を用いて、核酸２０の電気泳動を行う。電気泳動装置２７には、導電性を有する水溶液（電解質液１０）を入れる容器３０と、この容器３０の底面と上面に設けられた正負一対の電極２８，２９が設けられている。両電極２８，２９の間に核酸検出用部材２３を挿入し、核酸２０の電気泳動を行う。電気泳動は、核酸検出用部材２３のゲル１側が負となり、テープ２側が正となるように、ゲル１の厚さ方向に行い、核酸２０をゲル１表面からテープ２まで電気泳動させる。電気泳動に要する時間は通常数分程度である。【００１８】
電気泳動を行った後に核酸検出用部材２３を電気泳動装置２７から取り出し、ゲル１をスクレーパーで剥ぎ取って、核酸２０が付着したテープ２のみとする。その後に蛍光染色液を入れた容器中にテープ２を通して、付着した核酸２０を蛍光染色する。
その後に蛍光を発するよう励起光をテープ２に照射して蛍光を発する核酸２０の計数を行う。
【実施例】
【００１９】
（コロナ放電による核酸を有する微粒子の捕集）
図６に示すコロナ放電極を備えた微粒子付着装置を用いて空気中に浮遊する細菌の捕集を行った。この装置には、コロナ放電用の針状の高電圧電極３’と平板状接地電極（集じん電極）として培地１３と、高電圧直流電源１５とが設けられている。なお、符号１３Ａは、培地１３を接地するための電極である。装置の上面側には、ファン１２が設けられている。このファン１２の駆動により、室内の空気は、上面側から導入され（符号１１）、下面側から排出される（符号１４）。空気が両電極３’，１３間を通過する際に、核酸を有する微粒子が培地１３に捕集される。
図７には、この装置を用いて微粒子を捕集したときのコロニー数の計数結果を示した。毎秒１８リットルの室内空気をファン１２で下方に送り、銀製の針電極３’と培地１３との間にコロナ放電を発生させた。培地１３側を正極（positive）または負極（negative）とし、電圧を０ｋＶから３０ｋＶまで変化させて、１０分間のコロナ放電を行った後に、培地１３を２日間培養したときに確認されたコロニー数を計数した。
その結果、（１）１０分間のコロナ放電により、正極または負極のいずれを用いた場合でも、捕集される菌数が１０倍以上（負極では２２倍、正極では４７倍）に増加すること、及び（２）正極性コロナ放電を用いることで、負極性コロナ放電を用いた場合に比べると、生菌の捕集効率が上がることが確認できた。正極からのコロナ放電の方が菌コロニー数が多かったのは、銀製の正極における大気圧コロナ放電は、細菌に有害なオゾンの発生が低く抑えられるためと思われた。【００２０】
（無声放電による菌の破壊）
図８には、膜を破壊した後の大腸菌の写真を示した。蛍光を発するよう、クラゲ由来の蛍光タンパク質ＧＦＰを作る遺伝子を導入した大腸菌を用いた。図４に示す無声放電電極５，１９を備えた膜破壊装置２５に、この大腸菌を塗布した微粒子付着用部材２２を置き、３０ｋＨｚ，２５ｋＶｐｐの交流電圧を印加した。大腸菌の細胞膜が破壊されると、細胞内に含まれていたＧＦＰが拡散するため、蛍光強度が大きく減衰することが確認できる。比較のため無声放電処理をしていない大腸菌を、無声放電で破壊した大腸菌と混合したサンプルでの蛍光写真からも、無声放電処理により、蛍光強度が大きく減衰することが確認できた。通常、大腸菌の細胞膜の破壊には酵素反応を用いるがその処理には数時間を要するので、無声放電による菌の破壊は極めて短時間で行える特長を有している。【００２１】
（ＤＮＡの電気泳動）
図９は、微粒子付着用部材２２の表面にＤＮＡ分子群を塗布したときの蛍光写真である。図１０に模式的に示すように、この微粒子付着用部材２２のうちＤＮＡ分子を塗布した面側（図示下面側）に、核酸検出用部材２３を密着させて、電気泳動装置２７により、ＤＮＡの電気泳動を行った。
図１１には、電気泳動後に核酸検出用部材２３のテープ２を蛍光染色した結果である。染色によるＤＮＡ量の測定から、微粒子付着用部材２２からテープ２に、約３０から５０％のＤＮＡ分子が電気泳動により移動して付着することが確認できた。図１２は、テープ２に付着したＤＮＡの蛍光顕微鏡写真像である。個々のＤＮＡ分子を識別できることが示された。また電気泳動時間は数分程度であり、薄いゲルを通してＤＮＡをサンプリングすることが可能であることが示された。【００２２】
（核酸を有する微粒子の計数システム）
図１３には、本実施形態の計数システムの概要を示した。このシステムでは、微粒子付着用部材と核酸検出用部材２３とは、兼用する構成となっている。核酸検出用部材２３は、帯状に連続して製造されており、図示左側から右側に向かって、所定の速度で移動することにより、微粒子付着工程（Ａ）、膜破壊工程（Ｂ）、電気泳動工程（Ｃ）、及び核酸計測工程（Ｄ）を経るようになっている。
すなわち、核酸検出用部材２３は、ゲル１を上方に向けた状態で、コロナ放電装置２４を通過する。このとき、ゲル１の表面には、核酸を有する微粒子２１が付着する。次に、核酸検出用部材２３が、膜破壊装置２５の部材装着空間２６内を通過すると、無声放電により、微粒子２１の膜が破壊される。
次いで、核酸検出用部材２３が電気泳動装置２７を通過するときに、核酸２０が負極側から正極側に電気泳動されつつゲル１の内部を移動し、テープ２の表面に付着する。
電気泳動装置２７を通過した後には、核酸検出用部材２３のゲル１が剥ぎとられてテープ２のみとされた後に、励起光を発生する核酸検出装置２８からの照射によって、核酸２０が計測される。【００２３】
このように、本発明によれば、核酸２０を持った微粒子２１の捕集から、微粒子２１の破壊と核酸２０の抽出、電気泳動によるテープ２表面への固定、蛍光染色と計数が１０分以内で行うことが可能となった。
【産業上の利用可能性】
【００２４】
この発明により、病院や食品工場の空気および壁面や床、あるいは手術や食品製造に用いる器具や衣服の微生物やウイルスによる汚染状況の評価が１０分以内で行うことができるため、感染の危険性の把握、あるいは感染防止に必要な処置をほぼリアルタイムで行うことができ、衛生管理への応用が期待できる。
【図面の簡単な説明】
【００２５】
【図１】本実施形態の概要を説明するための工程を示す図である。
【図２】核酸を含む微粒子を捕捉する核酸検出用部材の側断面図である。
【図３】コロナ放電装置の概略図である。
【図４】微粒子の膜を破壊するための膜破壊装置の概略図である。
【図５】核酸をゲル表面からテープまで移動させるための電気泳動装置の概略図である。
【図６】コロナ放電により核酸を持つ微粒子を捕集する微粒子付着装置の概略図である。
【図７】コロナ放電により捕集した微粒子中に含まれる生菌数の測定結果を示すグラフである。図中の白抜きグラフは、培地を正極側（positive）としたときの結果を、黒塗りグラフは、培地を負極側（negative）としたときの結果をそれぞれ示す。
【図８】蛍光タンパク質ＧＦＰを体内に含む大腸菌に無声放電処理を行ったときの結果を示す写真である。放電処理を施すことにより、大腸菌の膜が破壊されて細胞内に含まれていたGFPが拡散し、蛍光強度が大きく減衰したことが分かる。
【図９】各種フィルタ表面に塗布したＤＮＡの蛍光写真である。
【図１０】微粒子付着用部材と核酸検出用部材とを密着させて、ＤＮＡを電気泳動しているときの様子を模式的に示す側断面図である。
【図１１】電気泳動処理後に核酸検出用部材のテープ上に転送されたＤＮＡの写真である。点線四角Ｔは、標準量のＤＮＡを滴下した領域を示し、点線円Ｓは、電気泳動されたＤＮＡの領域を示す。また、Ｔ及びＳ内部の数値は、ＤＮＡ量を示す。
【図１２】フィルタに付着したＤＮＡの蛍光顕微鏡写真像である。
【図１３】核酸を有する微粒子の計数システムの概要を示す図である。
【符号の説明】
【００２６】
１…アガロースゲル、２…正電荷を持つプラスチック膜、３，３’…針電極、５…放電電極、６…絶縁板、９，１９…接地電極、１３…培地（平板状接地電極）、２０…核酸、２１…微粒子、２２…微粒子付着用部材、２３…核酸検出用部材、２４…微粒子付着装置、２５…膜破壊装置、２６…部材装着空間、２７…電気泳動装置、２８…核酸検出装置
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図１０】
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【図９】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【国際調査報告】
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2008156135.tif 000017
2008156135.tif 000018
2008156135.tif 000019