【手続補正書】
【提出日】平成16年12月6日(2004.12.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１の相対量の組み合わせの２個または３個以上の蛍光標識を含む粒子であって、該蛍光標識は、同一の第１の励起波長の光によって励起することができ、７５０ｎｍより長い最大波長の互いに区別できる光を発光することができる、粒子。
【請求項２】
前記蛍光標識は前記粒子の内部に埋め込まれた、請求項１に記載の粒子。
【請求項３】
第２の励起波長の光で励起可能で、励起されるとき、最大波長の光を発光することができる、第１の蛍光被検体検出色素を含む、請求項１または２に記載の粒子。
【請求項４】
第１の蛍光被検体検出色素の発光の最大波長は、前記蛍光標識の発光の最大波長とは少なくとも１００ｎｍ離れている、請求項３に記載の粒子。
【請求項５】
第１および第２の励起波長は少なくとも１００ｎｍ離れており、該励起波長のうちの１個は約７５０ｎｍより長い、請求項３または４に記載の粒子。
【請求項６】
第１の蛍光被検体検出色素は前記粒子の外部で該粒子の外側との複合体を形成し、前記蛍光標識は前記粒子の内部に埋め込まれた、請求項３または４に記載の粒子。
【請求項７】
前記蛍光標識は、全て蛍光波長が７５０ｎｍより長いシアニン色素である、請求項１−６のいずれか１つに記載の粒子。
【請求項８】
第２の励起波長の光は前記蛍光標識からの蛍光を実質的に励起せず、第１の励起波長の光は前記被検体検出色素からの蛍光を実質的に励起しない、第１の蛍光被検体検出色素を含む請求項３−７のいずれか１つに記載の粒子。
【請求項９】
第２の励起波長は７５０ｎｍより短い、第１の蛍光被検体検出色素を含む請求項３−８のいずれか１つに記載の粒子。
【請求項１０】
第１の励起波長は７５０ｎｍより長い、請求項１−９に記載の粒子。
【請求項１１】
前記蛍光標識の発光の最大強度は少なくとも２０ｎｍ離れている、請求項１−１０に記載の粒子。
【請求項１２】
第１および第２の被検体検出色素を含む、請求項３−１１に記載の粒子。
【請求項１３】
請求項１−１２に記載の粒子を第１の粒子とする粒子と、第２の相対量の組み合わせの２個または３個以上の蛍光標識を有する第２の粒子とを含み、該蛍光標識のそれぞれは、第２の同一の励起波長の光で励起可能で、７５０ｎｍより長い最大波長の光であって互いに区別できる光を発光することができる、粒子。
【請求項１４】
第１の粒子は第１の蛍光被検体検出色素を含み、第２の粒子は、励起波長の光で励起可能で、励起されるとき、最大波長の光を発光することができる第２の蛍光被検体検出色素を含む、請求項１３に記載の粒子。
【請求項１５】
前記蛍光標識は予め定められた量が第１および第２の粒子内に存在する、請求項１３に記載の粒子。
【請求項１６】
各粒子内の蛍光標識の相対量の組み合わせが異なる、請求項１３に記載の粒子。
【請求項１７】
第１の粒子は第１の粒径を有し、第２の粒子は第２の粒径を有し、第１および第２の粒子はそれぞれ照射されるとき散乱光を発光することができ、第１の粒子の散乱光は第２の粒子の散乱光とは異なる、請求項１３に記載の粒子。
【請求項１８】
第１および第２の蛍光被検体検出色素は同一波長の光で励起可能である、請求項１４に記載の粒子。
【請求項１９】
第１および第２の蛍光被検体検出色素は、異なる波長の光で励起可能である、請求項１４に記載の粒子。
【請求項２０】
（ａ）少なくとも第１の蛍光被検体検出色素を含む請求項３−１９のいずれか１つに記載の１個または２個以上の粒子と、
（ｂ）前記蛍光被検体検出色素を励起する手段と、
（ｃ）前記蛍光標識を励起する手段と、
（ｄ）前記発光された光を検出する手段と、
（ｅ）前記検出された光を分析中の特定の粒子と対応させる手段とを含む、被検体検出システム。
【請求項２１】
（ａ）少なくとも第１の蛍光被検体検出色素を含む請求項３−１９に記載のいずれか１つに記載の粒子と、
（ｂ）第２の励起波長の光で励起可能で、励起されるとき、光を発光することができる、蛍光被検体検出色素と、
（ｃ）第１のレセプターと、
（ｄ）被検体とを含み、
前記被検体と、第１のレセプターと、前記蛍光被検体検出色素とは粒子上で蛍光複合体を形成する、アッセイシステム。
【請求項２２】
前記蛍光被検体検出色素の発光は、前記蛍光標識のそれぞれの発光の波長とは少なくとも１００ｎｍ離れており、第１および第２の励起波長は少なくとも１００ｎｍ離れており、該励起波長のうち１つは約７５０ｎｍより長い、請求項２１に記載のアッセイシステム。
【請求項２３】
第２のレセプターを含み、第１のレセプターと、前記被検体と、第２のレセプターとは前記粒子上で蛍光複合体を形成する、請求項２１に記載のアッセイシステム。
【請求項２４】
粒子上の被検体を検出する方法であって、
（ａ）各粒子が蛍光被検体検出色素と２個または３個以上の蛍光標識とを有する、１個または２個以上の粒子を、検査ゾーンを通って移動させること、
（ｂ）第１の波長の励起光を検査ゾーン内の各粒子に向けること、
（ｃ）第２の波長の励起光を検査ゾーン内の各粒子に向けること、
（ｄ）第１の蛍光被検体検出色素の発光と、第１および第２の蛍光標識の発光とを検出すること、および
（ｅ）検出された発光を分析中の粒子と対応させることを含み、
前記蛍光被検体検出色素および蛍光標識はそれぞれ異なる発光を発生し、該発光はそれぞれ互いに区別できる最大波長を有し、
前記蛍光被検体検出色素の発光の最大波長は、前記蛍光標識のそれぞれの発光の最大波長とは少なくとも１００ｎｍ離れており、励起光の１つは約７５０ｎｍより長い、粒子上の被検体を検出する方法。
【請求項２５】
２個以上の粒子を含み、各粒子は、異なる蛍光被検体検出色素と、異なる相対量の組み合わせの２個または３個以上の蛍光標識とを有し、各粒子での該蛍光標識の組み合わせが異なる、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
各粒子の粒径が異なる２個または３個以上の粒子を、検査ゾーンを通って移動させることを含む、請求項２４または２５に記載の方法であって、
（ｆ）第２の波長の励起光を検査ゾーン内の各粒子に向けて、散乱光を発生させること、
（ｇ）前記散乱光を検出すること、および
（ｈ）前記検出された散乱光を、前記発光および分析中の粒子と対応させることを含む、請求項２４または２５に記載の方法。
【請求項２７】
２個または３個以上の粒子を、検査ゾーンを通って移動させることを含み、
（ｆ）第３の波長の励起光を検査ゾーン内の各粒子に向けて、蛍光被検体検出色素を励起すること、
（ｇ）第３の励起光からの発光を検出すること、および
（ｈ）前記検出された発光を、前記分析中の粒子と対応させることを含む、請求項２４または２５に記載の方法。
【請求項２８】
前記粒子はそれぞれ異なる粒径を有し、
（ｉ）前記検査ゾーン内の各粒子に励起光を向けて、散乱光を発生させること、
（ｊ）前記散乱光を検出すること、および
（ｋ）前記検出された散乱光を、前記発光および分析中の粒子と対応させることを含む、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
以下の化学式１の蛍光標識を含む粒子であって、
【化１】
2005509857.tif 000001
上記の化学式１において、
環ＡおよびＢはシアニン核を形成するのに十分な炭素原子を有する環状構造を表し、
ＸおよびＹは、Ｏ、Ｓ、ＮＲ９およびＣＲ９Ｒ１０からなるグループからそれぞれ独立に選択され、
Ｒ１およびＲ２は、Ｈ、Ｃ１−Ｃ２０アルキル基、Ｃ１−Ｃ２０ハロアルキル基、Ｃ１−Ｃ２０アルキレン基およびＣ１−Ｃ２０ハロアルキレン基からなるグループからそれぞれ独立に選択され、
Ｒ３は、Ｈ、ハロゲン、ＯＨ、ＯＲ１１、ＳＲ１１、ＮＲ１１Ｒ１２、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ１−Ｃ６アルキレン基、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル基、Ｃ３−Ｃ６シクロヘテロアルキル基、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキレン基、Ｃ３−Ｃ６シクロヘテロアルキレン基、フェニル基、ビアリル基、ヘテロアリル基およびヘテロビアリル基からなるグループからそれぞれ独立に選択され、該Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ１−Ｃ６アルキレン基、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル基、Ｃ３−Ｃ６シクロヘテロアルキル基、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキレン基、Ｃ３−Ｃ６シクロヘテロアルキレン基、フェニル基、ビアリル基、ヘテロアリル基およびヘテロビアリル基は、置換されないか、あるいは、ハロゲン、ＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル基またはＣ１−Ｃ４ハロアルキル基で置換され、
Ｒ８は、Ｃ１−Ｃ４アルキル基およびＣ１−Ｃ４ハロアルキル基からなるグループから選択され、
Ｒ９およびＲ１０は、水素、Ｃ１−Ｃ４アルキル基およびＣ１−Ｃ４ハロアルキル基からなるグループからそれぞれ独立に選択され、
Ｒ１１およびＲ１２は、Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル基、フェニル基、ビアリル基、ヘテロアリル基またはヘテロビアリル基からなるグループからそれぞれ独立に選択され、該Ｃ１−Ｃ６アルキル基、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル基、フェニル基、ビアリル基、ヘテロアリル基およびヘテロビアリル基は、置換されないか、ハロゲン、ＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル基またはＣ１−Ｃ４ハロアルキル基で置換されるか、あるいは、Ｒ３がＮＲ１１Ｒ１２を表すときには、Ｒ１１およびＲ１２は、一体となって、任意的に置換されるＣ３−Ｃ６脂肪族またはＣ３−Ｃ６芳香族環を形成する、化学式１の蛍光標識を含む粒子。
【請求項３０】
前記蛍光標識は以下の化学式２の蛍光標識である、請求項２９に記載の蛍光標識を含む粒子であって、
【化２】
2005509857.tif 000002
前記化学式２において、
Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６およびＲ７は、ハロゲン、ＯＨ、Ｃ１−Ｃ４アルキル基またはＣ１−Ｃ４ハロアルキル基、フェニル基およびヘテロアリル基からなるグループからそれぞれ独立に選択される、請求項２９に記載の蛍光標識を含む粒子。
【請求項３１】
前記蛍光標識は以下の化学式３の蛍光標識である、請求項２９または３０に記載の蛍光標識を含む粒子であって、
【化３】
2005509857.tif 000003
Ｒ１およびＲ２は、それぞれ独立のＣ１−Ｃ２０アルキル基で、
Ｒ３は、Ｈ、ハロゲンまたはＳ−フェニル基である、請求項２９または３０に記載の蛍光標識を含む粒子。
【請求項３２】
Ｒ１とＲ２とは同一である、請求項２９、３０または３１に記載の蛍光標識を含む粒子。
【請求項３３】
前記粒子は、第１の相対量の組み合わせの２個または３個以上の蛍光標識を含み、該蛍光標識は同一の励起波長の光で励起可能で、それぞれ互いに区別できる最大波長の光を発光することができる、請求項２９−３２のいずれか１つに記載の粒子。
【請求項３４】
前記蛍光標識は７５０ｎｍより長い発光を有する、請求項２９−３３のいずれか１つに記載の蛍光標識を含む粒子。
【請求項３５】
前記蛍光標識の励起波長は７５０ｎｍより長い、請求項２９−３４のいずれか１つに記載の蛍光標識を含む粒子。
【請求項３６】
前記蛍光標識は全て７５０ｎｍより長い発光を有し、前記蛍光標識の発光最大波長は、少なくとも２０ｎｍ離れている、請求項３３に記載の２個または３個以上の蛍光標識を含む粒子。
【請求項３７】
前記蛍光標識は前記粒子の内部に埋め込まれた、請求項２９−３６のいずれか１つに記載の粒子。
【請求項３８】
請求項２９−３７のいずれか１つに記載の粒子内の蛍光標識を使用することを含む、被検体を検出する方法。
【請求項３９】
粒子内に２個または３個以上の蛍光標識を取り込む方法であって、
（ａ）粒子の懸濁液を用意すること、および
（ｂ）前記懸濁液に２個または３個以上の蛍光標識の溶液を添加して、該蛍光標識を前記粒子に取り込むことを含み、
前記粒子は請求項２９−３７のいずれか１つに記載の蛍光標識を含む、方法。
【請求項４０】
前記粒子はポリマービーズである、請求項３９に記載の方法。