(57)【要約】  本発明は、優れた神経栄養因子の作用増強効果を有する新規なビステトラヒドロフラン化合物及びその製造方法を提供する。本発明のビステトラヒドロフラン化合物は、一般式（１）［化１］2008105495.tif 000025［式中、Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なって、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−５アルコキシ基、アリールＣ１−５アルコキシ基、Ｃ２−５アルケニルオキシ基又はアリールＣ２−５アルケニルオキシ基を示すか、或いはＲ１とＲ２は一緒になって＝Ｏ又は＝ＣＨ２を示す。Ｒ３は、水素原子又は基−ＣＨ２−Ｏ−Ｒ４を示す。Ｒ４は、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−５アルキルカルボニル基又はアリール環上に置換基を有することのあるアリールＣ１−４アルキル基を示す。ａとｂとの炭素間結合は一重結合又は二重結合を示す。］で表され、優れた神経栄養因子の作用増強効果を有する。
2008105495.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
2008105495.tif 000023
［式中、Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なって、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−５アルコキシ基、アリールＣ１−５アルコキシ基、Ｃ２−５アルケニルオキシ基又はアリールＣ２−５アルケニルオキシ基を示すか、或いはＲ１とＲ２は一緒になって＝Ｏ又は＝ＣＨ２を示す。Ｒ３は、水素原子又は基−ＣＨ２−Ｏ−Ｒ４を示す。Ｒ４は、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−5アルキルカルボニル基又はアリール環上に置換基を有することのあるアリールＣ１−4アルキル基を示す。ａとｂとの炭素間結合は一重結合又は二重結合を示す。］
で表されるビステトラヒドロフラン化合物。
【請求項２】
一般式（１）においてＲ１とＲ２が一緒になって＝Ｏを示す、請求項１に記載のビステトラヒドロフラン化合物。
【請求項３】
一般式（１）においてＲ１とＲ２が一緒になって＝ＣＨ２を示す、請求項１に記載のビステトラヒドロフラン化合物。
【請求項４】
一般式（１）において、Ｒ１がＣ１−４アルキル基を示し、Ｒ２がＣ１−5アルコキシ基、アリールＣ１−５アルコキシ基、Ｃ２−５アルケニルオキシ基又はアリールＣ２−５アルケニルオキシ基を示す、請求項１に記載のビステトラヒドロフラン化合物。
【請求項５】
一般式（２）
【化２】
2008105495.tif 000024
［式中、Ｒ３及びａとｂとの炭素間結合は、前記に同じ。Ｒ５は、Ｃ１−４アルキル基を示す。Ｒ６は、シリル系保護基を示す。］
で表されるアクリル酸化合物に、フッ化四級アンモニウムを反応させることにより、請求項２に記載のビステトラヒドロフラン化合物を製造する方法。
【請求項６】
請求項２に記載のビステトラヒドロフラン化合物に、テッベ試薬を反応させることにより、請求項３に記載のビステトラヒドロフラン化合物を製造する方法。
【請求項７】
請求項３に記載のビステトラヒドロフラン化合物を、酸触媒の存在下、アルコール中で反応させることにより、請求項４に記載のビステトラヒドロフラン化合物を製造する方法。
【請求項８】
請求項１に記載のビステトラヒドロフラン化合物を含有する神経栄養因子の作用増強剤。
【請求項９】
神経栄養因子が神経成長因子又は脳由来神経栄養因子である請求項８に記載の作用増強剤。
【請求項１０】
請求項１に記載のビステトラヒドロフラン化合物を含有する神経疾患改善用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ビステトラヒドロフラン化合物、その製造方法及び該化合物の用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
高齢化社会を迎え、アルツハイマー型認知症、レビー小体型認知症、パーキンソン病等の老人性認知症が大きな社会問題となっている。【０００３】
これら認知症の発症メカニズムは未だ十分に解明されていないが、アルツハイマー型認知症では、コリン作動性ニューロンの顕著な変性が認められており、また、パーキンソン病では、中脳ドーパミン作動性神経細胞の変性・脱落が認められ、これらの変性もしくは脱落が認知症の発症原因と考えられている。【０００４】
神経栄養因子（neurotrophic factor：ＮＴＦ）とは、神経細胞の生存、分化、再生を促進させる物質の総称であり、神経成長因子（nerve growth factor：ＮＧＦ）、脳由来神経栄養因子（brain-derived neurotrophic factor：ＢＤＮＦ）、ニューロトロフィン３（neurotrophin-3：ＮＴ−３）等の高分子タンパク質である。ＮＧＦはコリン作動性ニューロンに作用し、ＢＤＮＦはコリン作動性ニューロンへの作用に加え、中脳のドーパミン作動性神経細胞に作用する。これら神経栄養因子の活性を増強することができれば、上記認知症に対する有効な予防又は治療が期待できる。【０００５】
特許文献１には、キク科植物の１成分であるヘリオキサンチンが細胞分化誘導因子作用増強剤として使用できることが開示されている。【０００６】
しかしながら、今後増加が予想される老人性認知症患者に対する有効な予防又は治療剤は、未だ開発されていない。
【特許文献１】特開平９−１５１１３２号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、神経栄養因子の作用増強効果に優れた新規なビステトラヒドロフラン化合物及び該ビステトラヒドロフラン化合物の製造方法を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、本発明者らが初めて合成したビステトラヒドロフラン化合物が神経栄養因子の作用を増強する効果に優れていることを見出した。本発明は、この様な知見に基づき完成されたものである。【０００９】
本発明は、下記項１〜１０に示すビステトラヒドロフラン化合物、その製造方法及び該化合物を含有する神経栄養因子の作用増強剤又は神経疾患改善用組成物を提供する。
項１．  一般式（１）【００１０】
【化１】
2008105495.tif 000003
【００１１】
［式中、Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なって、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−５アルコキシ基、アリールＣ１−５アルコキシ基、Ｃ２−５アルケニルオキシ基又はアリールＣ２−５アルケニルオキシ基を示すか、或いはＲ１とＲ２は一緒になって＝Ｏ又は＝ＣＨ２を示す。Ｒ３は、水素原子又は基−ＣＨ２−Ｏ−Ｒ４を示す。Ｒ４は、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−5アルキルカルボニル基又はアリール環上に置換基を有することのあるアリールＣ１−4アルキル基を示す。ａとｂとの炭素間結合は一重結合又は二重結合を示す。］
で表されるビステトラヒドロフラン化合物。
項２．  一般式（１）においてＲ１とＲ２が一緒になって＝Ｏを示す、項１に記載のビステトラヒドロフラン化合物。
項３．  一般式（１）においてＲ１とＲ２が一緒になって＝ＣＨ２を示す、項１に記載のビステトラヒドロフラン化合物。
項４．  一般式（１）において、Ｒ１がＣ１−４アルキル基を示し、Ｒ２がＣ１−5アルコキシ基、アリールＣ１−５アルコキシ基、Ｃ２−５アルケニルオキシ基又はアリールＣ２−５アルケニルオキシ基を示す、項１に記載のビステトラヒドロフラン化合物。
項５．  一般式（２）【００１２】
【化２】
2008105495.tif 000004
【００１３】
［式中、Ｒ３及びａとｂとの炭素間結合は、前記に同じ。Ｒ５は、Ｃ１−４アルキル基を示す。Ｒ６は、シリル系保護基を示す。］
で表されるアクリル酸化合物に、フッ化四級アンモニウムを反応させることにより、項２に記載のビステトラヒドロフラン化合物を製造する方法。
項６．  項２に記載のビステトラヒドロフラン化合物に、テッベ試薬を反応させることにより、項３に記載のビステトラヒドロフラン化合物を製造する方法。
項７．  項３に記載のビステトラヒドロフラン化合物を、酸触媒の存在下、アルコール中で反応させることにより、項４に記載のビステトラヒドロフラン化合物を製造する方法。
項８．  項１に記載のビステトラヒドロフラン化合物を含有する神経栄養因子の作用増強剤。
項９．  神経栄養因子が神経成長因子又は脳由来神経栄養因子である項８に記載の作用増強剤。
項１０．  項１に記載のビステトラヒドロフラン化合物を含有する神経疾患改善用組成物。
【発明の効果】
【００１４】
本発明の一般式（１）で表されるビステトラヒドロフラン化合物は、優れた神経栄養因子の作用増強効果を有するので、アルツハイマー病に代表される老人性認知症、ダウン症、パーキンソン病、クロイツフェルト・ヤコブ病、筋萎縮性脊髄側索硬化症（ＡＬＳ）、糖尿病性ニューロパシー等の神経変性疾患；うつ病、精神分裂病等の精神疾患等の神経障害による疾患；脳炎後遺症、脳性麻痺、頭部や脊髄等の損傷による神経障害；脳梗塞、脳出血、脳動脈硬化に伴う脳血管障害等の予防又は治療に好適に使用できる。一般式（１）で表されるビステトラヒドロフラン化合物のうち、特に一般式（１Ｃ）及び一般式（１Ｄ）で表されるビステトラヒドロフラン化合物は、上記効果に優れている。【００１５】
本発明の製造方法によれば、上記優れた神経栄養因子の作用増強効果を有する新規なビステトラヒドロフラン化合物を提供することができる。【００１６】
本発明の一般式（１Ａ）及び一般式（１Ｂ）で表されるビステトラヒドロフラン化合物は、一般式（１Ｃ）及び一般式（１Ｄ）で表されるビステトラヒドロフラン化合物を製造するための中間体として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】図１は、ＤＭＳＯを含む培地で培養した細胞の様子を示す顕微鏡図である。
【図２】図２は、ＤＭＳＯ及びＮＧＦ（２０ｎｇ／ｍｌ）を含む培地で培養した細胞の様子を示す顕微鏡図である。
【図３】図３は、ＤＭＳＯ、ＮＧＦ（２０ｎｇ／ｍｌ）及び本発明のビステトラヒドロフラン化合物（１Ｃ−２−１）（１μＭ）を含む培地で培養した細胞の様子を示す顕微鏡図である。
【図４】図４は、ＤＭＳＯ、ＮＧＦ（２０ｎｇ／ｍｌ）及び本発明のビステトラヒドロフラン化合物（１Ｃ−２−１）（１０μＭ）を含む培地で培養した細胞の様子を示す顕微鏡図である。
【図５】図５は、ＤＭＳＯ、ＮＧＦ（２０ｎｇ／ｍｌ）及び本発明のビステトラヒドロフラン化合物（１Ｄ−２−１）（１μＭ）を含む培地で培養した細胞の様子を示す顕微鏡図である。
【図６】図６は、ＤＭＳＯ、ＮＧＦ（２０ｎｇ／ｍｌ）及び本発明のビステトラヒドロフラン化合物（１Ｄ−２−１）（１０μＭ）を含む培地で培養した細胞の様子を示す顕微鏡図である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１８】
一般式（１）において、Ｒ１、Ｒ２及びＲ４で示されるＣ１−４アルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基等の炭素数１〜４の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基を挙げることができる。Ｃ１−４アルキル基は、メチル基、エチル基及びｎ−ブチル基が好ましく、メチル基が特に好ましい。【００１９】
一般式（１）において、Ｒ１及びＲ２で示されるＣ１−５アルコキシ基としては、例えば、メトキシ基、エトキシ基、イソプロポキシ基、ｔｅｒｔ−ブトキシ基、プレニル基（３−メチル−２−ブテニル基）等の炭素数１〜５の直鎖状又は分岐鎖状のアルコキシ基を挙げることができる。Ｃ１−５アルコキシ基は、メトキシ基及びエトキシ基が好ましく、エトキシ基が特に好ましい。【００２０】
一般式（１）において、Ｒ１及びＲ２で示されるアリールＣ１−５アルコキシ基としては、例えば、ベンジルオキシ基、１−フェニルエトキシ基、２−フェニルエトキシ基、ナフチルメトキシ基、アントラセニルメトキシ基、フェナントレニルメトキシ基等のアルコキシ部分が炭素数１〜４の直鎖状又は分岐鎖状のアルコキシ基であるアリールアルコキシ基を挙げることができる。アリールＣ１−５アルコキシ基は、ベンジルオキシ基が好ましい。【００２１】
一般式（１）において、Ｒ１及びＲ２で示されるＣ２−５アルケニルオキシ基としては、例えば、アリルオキシ基、２−ブテニルオキシ基、３−メチル−２−ブテニルオキシ基、３−ブテニルオキシ基、４−ペンテニルオキシ基、３−ペンテニルオキシ基等の二重結合を１〜３個（好ましくは１個）有する炭素数１〜５の直鎖状又は分岐鎖状のアルケニルオキシ基を挙げることができる。Ｃ２−５アルケニルオキシ基は、アリルオキシ基及び３−メチル−２−ブテニルオキシ基が好ましい。【００２２】
一般式（１）において、Ｒ１及びＲ２で示されるアリールＣ２−５アルケニルオキシ基としては、例えば、３−フェニル−２−プロペニルオキシ基、４−フェニル−２−ブテニルオキシ基、４−フェニル−３−ブテニルオキシ基、５−フェニル−４−ペンテニルオキシ基、５−フェニル−３−ペンテニルオキシ基、４−フェニル−１，３−ブタジエニルオキシ基、３−（１−ナフチル）−２−プロペニルオキシ基、３−（２−ナフチル）−２−プロペニルオキシ基等のアルケニル部分が二重結合を１〜３個（好ましくは１個）有する炭素数１〜５の直鎖状又は分岐鎖状のアルケニル基であるアリールアルケニルオキシ基を挙げることができる。アリールＣ２−５アルケニルオキシ基は、３−フェニル−２−プロペニルオキシ基が好ましい。【００２３】
一般式（１）において、Ｒ４で示されるＣ１−5アルキルカルボニル基としては、例えば、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基、イソバレリル基、ピバロイル基、３-メチル-２-ブテノイル基等のアルキル部分が炭素数１〜４の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基であるアルキルカルボニル基を挙げることができる。Ｃ１−5アルキルカルボニル基は、アセチル基及び３-メチル-２-ブテノイル基が好ましい。【００２４】
一般式（１）において、Ｒ４で示されるアリールＣ１−４アルキル基としては、ベンジル基、１−フェネチル基、２−フェネチル基、ナフチルメチル基、アントラセニルメチル基、フェナントレニルメチル基等のアルキル部分が炭素数１〜４の直鎖状又は分岐鎖状のアルキル基であるアリールアルキル基を挙げることができる。アリールＣ１−４アルキル基は、ベンジル基が好ましい。アリールＣ１−４アルキル基を構成するアリール基は、置換基を１〜５個、好ましくは１〜３個有していてもよく、アリール基上の置換基としては、例えばＣ１−４アルキル基、Ｃ１−４アルコキシ基、Ｃ１−４アルキルカルボニル基、Ｃ１−４アルコキシカルボニル基、アミノ基、ニトロ基、シアノ基、カルボキシル基、カルバモイル基、ハロゲン原子等を挙げることができる。ここで、Ｃ１−４アルキル基、Ｃ１−４アルコキシ基及びＣ１−４アルキルカルボニル基としては、上記したＣ１−４アルキル基、Ｃ１−４アルコキシ基及びＣ１−４アルキルカルボニル基と同じである。Ｃ１−４アルコキシカルボニル基としては、例えば、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基等のアルコキシ部分が炭素数１〜４の直鎖状又は分岐鎖状のアルコキシ基であるアルコキシカルボニル基を挙げることができる。ハロゲン原子としては、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子等を挙げることができる。【００２５】
一般式（１）で表されるビステトラヒドロフラン化合物には、下記一般式（１Ａ）、（１Ｂ）、（１Ｃ）及び（１Ｄ）で表される化合物が包含される。【００２６】
【化３】
2008105495.tif 000005
【００２７】
［各式中、Ｒ３及びａとｂとの炭素間結合は、前記に同じ。Ｒ１ｃ及びＲ２ｄは、Ｃ１−５アルコキシ基、アリールＣ１−５アルコキシ基、Ｃ２−５アルケニルオキシ基又はアリールＣ２−５アルケニルオキシ基を示す。Ｒ１ｄ及びＲ２ｃは、Ｃ１−４アルキル基を示す。］
一般式（１）で表されるビステトラヒドロフラン化合物は、より具体的には、下記一般式（１Ａ−１）、（１Ａ−２）、（１Ｂ−１）、（１Ｂ−２）、（１Ｃ−１）、（１Ｃ−２）、（１Ｄ−１）及び（１Ｄ−２）で表される化合物が含まれる。【００２８】
【化４】
2008105495.tif 000006
【００２９】
［各式中、Ｒ１ｃ、Ｒ１ｄ、Ｒ２ｃ、Ｒ２ｄ及びＲ３は、前記に同じ。］
上記一般式（１Ａ−１）、（１Ａ−２）、（１Ｂ−１）、（１Ｂ−２）、（１Ｃ−１）、（１Ｃ−２）、（１Ｄ−１）及び（１Ｄ−２）で表される化合物においては、Ｒ３が水素原子であることが好ましい。【００３０】
本発明の一般式（１）で表されるビステトラヒドロフラン化合物は、例えば、下記反応式−１〜反応式−３で示される工程によって製造することができる。【００３１】
【化５】
2008105495.tif 000007
【００３２】
［式中、Ｒ３及びａとｂとの炭素間結合は、前記に同じ。Ｒ５は、Ｃ１−４アルキル基を示す。Ｒ６は、シリル系保護基を示す。］
反応式−１に示すように、本発明のビステトラヒドロフラン化合物（１Ａ）は、一般式（２）で表される化合物にフッ化四級アンモニウム塩を反応させることにより、製造される。【００３３】
上記一般式（２）において、Ｒ５は、炭素数１〜４の直鎖状又は分枝鎖状のＣ１−４アルキル基である。【００３４】
Ｒ６で示されるシリル系保護基としては、例えば、トリメチルシリル基（ＴＭＳ）、トリエチルシリル基（ＴＥＳ）、トリイソプロピルシリル基（ＴＩＰＳ）、トリイソブチルシリル基、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基（ＴＢＳ）、ｔｅｒｔ−ブチルメトキシフェニルシリル基（ＴＢＭＰＳ）、ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基（ＴＢＤＰＳ）、ｔｅｒｔ−ヘキシルジメチルシリル基（ＴＤＳ）、トリフェニルシリル基（ＴＰＳ）等のシリル基を挙げることができ、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリル基及びｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル基が好ましい。【００３５】
本反応は、溶媒中で行うのが好ましい。使用する溶媒としては、反応に悪影響を及ぼさない限り公知の溶媒を広く使用でき、例えば、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素；クロロベンゼン、ジクロロベンゼン等のハロゲン化芳香族炭化水素；ヘキサン、シクロヘキサン、石油エーテル等の脂肪族炭化水素；ジクロロメタン、１,２−クロロエタン、クロロホルム、四塩化炭素等の脂肪族ハロゲン化炭化水素；ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、ジオキサン、テトラヒドロフラン、エチレングリコールジメチルエーテル、エチレングリコールジエチルエーテル等のエーテル；アセトン、２−ブタノン、メチルイソブチルケトン等のケトン；アセトニトリル、プロピオニトリル、ベンゾニトリル等のニトリル；Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド 、ヘキサメチルホスホリックトリアミド （ＨＭＰＡ）等のアミド；ジメチルスルホキシド等のスルホキシド；又はこれらの混合溶媒を挙げることができる。【００３６】
本反応で使用するフッ化四級アンモニウムとしては、例えば、テトラブチルアンモニウムフルオリド（ＴＢＡＦ）、テトラエチルアンモニウムフルオリド（ＴＥＦ）、アンモニウムフルオリド等を挙げることができ、テトラブチルアンモニウムフルオリドが好ましい。【００３７】
フッ化四級アンモニウムの使用量は、特に限定されず広い範囲から適宜選択される。フッ化四級アンモニウムは、化合物（２）１モルに対して、通常、０．５〜５モル、好ましくは１．５〜３モル使用する。【００３８】
反応温度は特に限定されないが、通常、−１０℃から使用する溶媒の沸点温度以下の範囲内とすればよく、好ましくは０〜５０℃、さらに好ましくは１０〜４０℃程度とすればよい。また、反応時間は、原料化合物の種類及びその使用量、反応温度等の条件によって異なるが、通常１０時間以内、好ましくは３０分〜５時間程度である。【００３９】
斯くして得られるビステトラヒドロフラン化合物（１Ａ）は、通常の単離、精製手段、例えば、カラムクロマトグラフィー、再結晶等により反応混合物から容易に単離し、精製することができる。【００４０】
化合物（１Ｂ）は、下記反応式−２に示す工程に従って製造される。【００４１】
【化６】
2008105495.tif 000008
【００４２】
［式中、Ｒ3及びａとｂとの炭素間結合は、前記に同じ。］
反応式−２に示すように、化合物（１Ｂ）は、前記反応式−１で製造された化合物（１Ａ）にテッベ（Ｔｅｂｂｅ）試薬を反応させることにより、製造される。【００４３】
テッベ試薬及び反応条件等については、J. Am. Chem. Soc., 100, 3611 (1978)、J. Am. Chem. Soc., 119, 7483 (1997)等を参照すればよい。反応式−２に示される工程は、例えば、THF、トルエン、ピリジン等の溶媒、好ましくは無水溶媒中、化合物（１Ａ）にテッベ試薬を室温下で滴下し、１時間〜数時間程度室温で撹拌した後、冷却下に１０%水酸化ナトリウム水溶液等のアルカリ水溶液を滴下し、得られた反応液を濾過、濃縮することにより行うことができる。【００４４】
斯くして得られる化合物（１Ｂ）は、通常の単離、精製手段、例えば、カラムクロマトグラフィー、再結晶等により反応混合物から容易に単離し、精製することができる。【００４５】
【化７】
2008105495.tif 000009
【００４６】
［式中、Ｒ１ｃ、Ｒ１ｄ、Ｒ２ｃ、Ｒ２ｄ、Ｒ３及びａとｂとの炭素間結合は、前記に同じ。ＲはＲ１ｃ又はＲ２ｄと同じであり、Ｃ１−５アルコキシ基、アリールＣ１−５アルコキシ基、Ｃ２−５アルケニルオキシ基又はアリールＣ２−５アルケニルオキシ基を示す。］
反応式−３に示すように、本発明のビステトラヒドロフラン化合物（１Ｃ）及び（１Ｄ）は、化合物（１Ｂ）を、酸触媒の存在下、一般式（３）で表されるアルコール中で反応させることより、製造される。【００４７】
本反応で使用するアルコール（３）の具体例を示すと、例えば、メタノール、エタノール、ｎ−プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、ｎ−ブチルアルコール、イソブチルアルコール、ｓｅｃ−ブチルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、プレニルアルコール(３?メチル-２?ブテノノール)、ベンジルアルコール、アリルアルコール、シンナミルアルコール等を挙げることができる。これらの中でも、メタノール、エタノール、ｎ−プロピルアルコール及びイソプロピルアルコールが好ましく、メタノール、エタノール及びｎ−プロピルアルコールが特に好ましい。【００４８】
アルコール（３）の使用量は、特に限定されず広い範囲から適宜選択される。化合物（１Ｂ）１モルに対して０．８モル以上、好ましくは１．２モル以上使用すればよい。通常は、アルコール（３）を溶媒として使用するため、化合物（１Ｂ）１重量部に対してアルコール（３）を１〜１０００重量部、好ましくは１０〜１００重量部程度使用される。【００４９】
本反応は、さらに適当な溶媒を加えて行ってもよい。溶媒としては、本反応に悪影響を及ぼさない限り公知の溶媒を広く使用でき、例えば、ＴＨＦ、ジクロロメタン等を使用できる。【００５０】
本反応で使用する触媒としては、例えば、ｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム（ＰＰＴＳ）、ドデシルベンゼンスルホン酸ピリジニウム、テトラフルオロホウ酸ピリジニウム、硫酸水素ピリジニウム、ピリジン／ＳＯ3錯体、ｐ−トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ドデシルベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸塩化物、ｐ−トルエンスルホン酸無水物、塩化ベンゾイル、塩化２，４，６−トリメチルベンゾイル、硫酸、アミド硫酸（スルファミン酸）、硫酸水素ナトリウム、無水塩化亜鉛、無水塩化鉄（III）、無水塩化アルミニウム、トリフルオロメタンスルホン酸スカンジウム（III）、トリフルオロメタンスルホン酸イットリウム（III）、トリフルオロメタンスルホン酸イッテルビウム（III）、ヨウ素等を挙げることができる。これらの中では、ｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウム、ドデシルベンゼンスルホン酸ピリジニウム、テトラフルオロホウ酸ピリジニウム、硫酸水素ピリジニウム等のピリジニウム塩化合物が好ましく、ｐ−トルエンスルホン酸ピリジニウムが特に好ましい。【００５１】
触媒の使用量は、通常、化合物（１Ｂ）に対して、０．１〜３０重量％程度、好ましくは５〜２０重量％程度である。【００５２】
反応温度は、特に限定されないが、通常、−１０℃から使用する溶媒の沸点温度以下の範囲内とすればよく、好ましくは０〜５０℃、さらに好ましくは０℃付近とすればよい。また、反応時間は、原料化合物の種類及びその使用量、反応温度等の反応条件によって異なるが、通常１〜６０分程度、好ましくは5分程度である。【００５３】
斯くして得られる化合物（１Ｃ）及び（１Ｄ）は、通常の単離、精製手段、例えば、カラムクロマトグラフィー、再結晶等により反応混合物から容易に単離し、精製することができる。【００５４】
本反応においては、化合物（１Ｃ）及び（１Ｄ）が混合物として生成するが、シリカゲルカラムクロマトグラフィー等の分離手段によって、これらを容易に単離精製することができる。その結果、本反応においては、化合物（４）に対して化合物（３）が２〜４倍程度生成する。【００５５】
反応式−１において用いられる原料化合物（２）は、公知の方法に従って製造することができるものである。【００５６】
例えば、原料化合物（２）は、下記反応式−４に示す工程に従って製造することができる。【００５７】
【化８】
2008105495.tif 000010
【００５８】
［式中、Ｒ3、Ｒ５及びＲ６及びａとｂとの炭素間結合は、前記に同じ。Ｘは、ハロゲン原子を示す。］
反応式−４に示すように、化合物（２）は、化合物（４）に一般式（５）で表されるシリルハライド化合物を反応させることにより、化合物（４）の水酸基をシリル系保護基で保護し、次いで得られた化合物（６）に一般式（７）で表されるプロピン酸エステルをリチウムジイソプロピルアミド（ＬＤＡ）等の強塩基に反応させ、さらに得られた化合物（８）を水素化ビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウムナトリウム（Ｒｅｄ−Ａｌ）で還元することにより、製造される。【００５９】
これらの反応は、公知の反応条件を適用することにより、又は公知の方法に準じて行われる。【００６０】
本発明のビステトラヒドロフラン化合物（１）は、後記の試験例で明らかなように、神経栄養因子の作用を増強することができる。従って、本発明の一般式（１）で表されるビステトラヒドロフラン化合物、特に一般式（１Ｃ）及び一般式（１Ｄ）で表される化合物は、神経栄養因子の作用増強剤として有用であり、神経障害による疾患等の改善又は治療に使用される組成物の有効成分として有用である。【００６１】
本発明で対象とする神経栄養因子としては、神経成長因子（nerve growth factor：NGF）、脳由来神経栄養因子（brain-derived neurotrophic factor：BDNF）、ニューロトロフィン３（neurotrophin-3：NT-3）、グリア由来神経栄養因子 （glia-derivedneurotrophic factor：GDNF）、NT-4/5等が挙げられ、ＮＧＦ又はＢＤＮＦが好ましく、ＮＧＦが特に好ましい。【００６２】
本発明は、一般式（１）で表されるビステトラヒドロフラン化合物を有効成分とする神経栄養因子の作用増強剤又は神経障害による疾患等の改善用組成物（以下、「製剤」ともいう）を提供する。【００６３】
本発明の製剤は、化合物（１）だけからなるものであってもよいし、化合物（１）を任意の担体、添加剤等と組み合わせて、公知の方法で所望の用途に適した形態に調製した組成物であってもよい。【００６４】
本発明の製剤の形態は、特に制限されないが、例えば錠剤、粉末剤、顆粒剤、丸剤、粉末シロップ剤、カプセル剤（硬カプセル及び軟カプセル）等の固体状の製剤；クリーム、軟膏、ジェル等のペースト状又はゲル状の製剤；液剤、懸濁剤、乳液剤、シロップ、エリキシル剤等の液体状の製剤等とすることができる。【００６５】
本発明の製剤中ビステトラヒドロフラン化合物（１）の配合量は、神経栄養因子の作用増強効果を発揮する割合であれば特に制限されず、製剤１００重量％中、０.００１〜９９重量％、好ましくは０．０１〜５０重量％、より好ましくは０.１〜３０重量％の範囲である。【００６６】
当該製剤は、ビステトラヒドロフラン化合物（１）を、神経栄養因子の作用を増強する効果を発揮する割合で含むものであればよく、この効果を妨げない範囲で他成分を配合することもできる。かかる他成分は、薬理学的及び製剤学的に許容されるものであれば制限されないが、例えば、賦形剤、結合剤、分散剤、増粘剤、滑沢剤、ｐＨ調整剤、可溶化剤等の一般に製剤の製造に使用される担体のほか、抗生物質、抗菌剤、殺菌剤、防腐剤、ビルダー、漂白剤、酵素、キレート剤、消泡剤、着色料（染料、顔料など）、柔軟剤、保湿剤、界面活性剤、酸化防止剤、香料、矯味剤、矯臭剤、溶媒等が含まれる。さらに、従来公知の神経栄養因子、神経栄養因子様活性物質、又は本発明の増強剤以外の神経栄養因子の活性増剤もしくは賦活剤を添加してもよい。【００６７】
本製剤の使用方法は、本製剤を経口投与、点滴、注射等により体内に摂取させる方法や、患部への局所的な施用等を挙げることができる。【００６８】
本発明の製剤の使用量は、剤形や投与（使用）方法等によって異なるため、一概に限定することはできないが、例えば、適当な1日の投与量は、上記本発明のビステトラヒドロフラン化合物（１）の投与量に換算して、通常、成人１Ｋｇあたり１ｎｇ〜１００ｍｇ、好ましくは１０ｎｇ〜５０ｍｇ程度の範囲で、患者の年齢、症状に応じて適宜設定することができる。これらの製剤は、１日１〜数回に分けて投与するのがよい。
【実施例】
【００６９】
以下に、本発明のビステトラヒドロフラン化合物（１）の製造例、製剤例及び試験例を挙げて、本発明を一層明らかにするが、本発明はこれらに限定されるものではない。以下、Ｍｅとあるのはメチル基を意味する。【００７０】
使用した測定機器
核磁気共鳴スペクトル（以下、「NMR」という）の測定には、バリアン（Varian）社製Gemini-200型、Mercury-300型、Unity-600型及び日本電子社製JMN-ECP-400型を使用した。測定試料は、テトラメチルシラン(TMS)、クロロホルム(CHCl3)又はベンゼン(C6H6)を内部標準とし、化学シフト(d)はppm単位、結合定数(J)はHz単位で表記した。また、シグナルは、一重線をs、二重線をd、三重線をt、四重線をq及び多重線をmで表し、幅広信号は、brと表記した。【００７１】
順層シリカゲルカラムクロマトグラフィーは、メルク社製の Kieselgel 60 (70-230 mesh ASTM)及び関東化学社製の順層シリカゲル 60（球状，63-210 μm）を使用し、逆相カラムクロマトグラフィーは、ナカライテスク社製のCosmosil 140 C18-PREPを使用した。【００７２】
高速液体クロマトグラフィー(HPLC)は、日本分光社製のJASCO 880-PU 型クロマトポンプを使用し、日本分光JASCO v/wの比で示した。融点（以下、「mp」ということがある）の測定には、YANAAKO社製の微量融点測定器を使用した。【００７３】
赤外吸収スペクトル（以下、「IR」ということがある）は、FT-IR410型装置を使用し、反射法で測定した。【００７４】
質量分析スペクトル（以下、「MS」ということがある）は、日本電子社製 AX-500型を使用し、電子衝撃イオン化法（以下「EI」ということがある）、化学イオン化法（以下CIと言うことがある）及び高速原子衝撃法（以下「FAB」ということがある）により測定した。【００７５】
X線結晶解析(X-ray)は、Mac-Science社製(DIP-2020) X線解析装置、線源はMo-Ka線を使用し、反射データを集めてMac-Science社製結晶解析プログラムで解析した。【００７６】
使用した溶媒、試薬
特に断りのない限り、反応はAr（アルゴン）雰囲気下で行い、反応溶媒には、特級溶媒もしくは脱水溶媒を使用した。また、無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）は関東化学社製無水テトラヒドロフラン（安定剤無添加）を用い、無水ジクロロメタンは関東化学社製無水ジクロロメタンを使用した。【００７７】
溶媒抽出後の乾燥には、無水硫酸マグネシウム(MgSO4)又は無水硫酸ナトリウム(Na2SO4)を使用し、溶媒の留去は減圧下のエバポレーターで行った。【００７８】
分析用薄層クロマトグラフィー(TLC)には、メルク社製のKiselgel 60F 254 (0.25 mm, 0.5 mm)を使用した。スポットの検出は、254 nmのUVランプの照射又はアニスアルデヒド-硫酸発色剤に浸した後に加熱することにより検出した。【００７９】
製造例１【００８０】
【化９】
2008105495.tif 000011
【００８１】
本発明の原料化合物（２）に相当する上記エステル体（２Ａ）(1.5 g, 4.59 mmol)の無水THF溶液 (45 ml) に、TBAF (1.0 M, THF, 13,78 ml, 13.78 mmol) を滴下し、室温下に30分間撹拌した。この混合溶液に飽和食塩水を加え、酢酸エチルで3回抽出した。得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過後濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー(シリカゲル 30 g, ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝ 1 : 1) で精製し、本発明のビステトラヒドロフラン化合物（１Ａ−２−１）(757.5 mg, 収率92%) を得た。
FTIR (ニート) 3526, 2945, 2319, 1790cm-1
1H NMR (300 MHz, CDCl3) δｐｐｍ：1.49-1.59 (1H, m), 1.83-1.92 (2H, m), 1.96-2.32 (3H, m), 2.79 (2H, d, J = 3.6 Hz), 4.31 (1H, dd, J = 1.8, 3.6 Hz), 4.39 (1H, dd, J = 2.1, 12.0 Hz), 4.57 (1H, dq, J = 2.1, 12.0 Hz), 5.93 (1H, m)
13C NMR (75 MHz, CDCl3) δｐｐｍ：17.2t, 24.1t, 29.1t, 36.9t, 69.8t, 81.9d, 88.1s, 125.4d, 134.6s, 174.83s
MS (CI) m/z 181 (M++H)
HRMS (CI) m/z  C10H13O3 (M++H) としての計算値181.0865 実測値181.0862
m.p. 68-71℃。【００８２】
製造例２【００８３】
【化１０】
2008105495.tif 000012
【００８４】
乾燥した二口フラスコに無水THF (6 ml)、無水トルエン(2 ml)、無水ピリジン(40 μl, 0.49 mmol)及び製造例１で得られた本発明のビステトラヒドロフラン化合物（１Ａ−２−１） (400 mg, 2.197 mmol)を加え、テッベ（Tebbe）試薬(0.5 M, トルエン，8.79 ml, 4.39 mmol) を室温で滴下した。この混合液を室温で1時間撹拌した後、−20℃まで冷却し、１０%水酸化ナトリウム水溶液を滴下した。次に、この混合液をセライトで濾過した後、濃縮し、得られた残渣を精製することなく次の工程に使用した。【００８５】
得られた残渣をメタノール(30 ml)に溶かし、PPTS (301.46 mg, 1.2 mmol)を室温で加え、5時間撹拌した。この混合溶液を0℃に冷却した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで3回抽出した。得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過後濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー (シリカゲル 1.5 g, ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝ 3 : 1)で精製し、無色油状のジアステレオマー混合物（１C−２−１）及び（１D−２−１） (369 mg, 収率80%) を得た。次に、得られたジアステレオマー混合物を順相HPLC (Cosmosil 5SL-II Water (20 x 250), ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝ 6 : 1, 17.0 ml/min, 検出器 : RI) により、化合物（１C−２−１）と化合物（１D−２−１）とに分離した。【００８６】
化合物（１Ｃ−２−１）の物性：
FTIR (ニート) 2985, 2943, 2863, 2830, 1698cm-1
1H NMR (300 MHz, C6D6) δｐｐｍ：1.13 (1H, dt, J = 3.0, 12.9 Hz), 1.43 (3H, s), 1.52-1.60 (1H, m), 1.64-1.79 (1H, m), 1.85-2.00 (2H, m), 2.14 (1H, dt, J= 3.3, 9.7 Hz), 2.26 (1H, dd, J = 1.7, 14.3 Hz), 2.24 (1H, dd, J = 5.8, 14.3 Hz), 3.15 (3H, s), 4.16 (1H, dq, J= 1.7, 11.5 Hz), 4.23 (1H, dd, J = 1.7, 5.8 Hz), 4.55 (1H, dq, J = 3.0, 11.5 Hz), 5.31 (1H, brs)
13C NMR (150 MHz, C6D6) δｐｐｍ：18.7t, 23.4q, 24.7t, 30.2t, 47.7t, 48.7q, 69.8t, 87.6s, 88.2d, 109.9s, 121.04d, 139.8s
MS (CI) m/z 209 (M+-H)
HRMS (CI) m/z  C12H17O3 (M+-H) としての計算値209.1205 実測値209.1155。【００８７】
化合物（１D−２−１）の物性：
FTIR (ニート) 2984, 2939, 2870, 2829, 1431, 1375cm-1
1H NMR (300 MHz, C6D6) δｐｐｍ：1.16 (1H, ddd, J = 3.3, 12.6, 13.8 Hz), 1.30 (3H, s), 1.46-1.55 (1H, m), 1.67-1.83 (3H, m), 1.87-2.09 (2H, m), 2.52 (1H, d, J= 14.1 Hz), 3.20 (3H, s), 4.26 (1H, d, J= 6.0 Hz), 4.24 (1H, dd, J = 1.4, 10.7 Hz), 4.83 (1H, dq, J = 2.1, 10.7 Hz), 5.36 (1H, brs)
13C NMR (150 MHz, C6D6) δｐｐｍ：18.5t, 23.6q, 24,5t, 32.2t, 47.3t, 48.7q, 70.7t, 87.6s, 87.9d, 108.3s, 121.0d, 140.3s
MS (CI) m/z 209 (M+-H)
HRMS (CI) m/z C12H17O3(M+-H) としての計算値209.1178 実測値209.1177。【００８８】
製造例３【００８９】
【化１１】
2008105495.tif 000013
【００９０】
上記製造例１で得られた本発明のテトラヒドロフラン化合物（１Ａ−２−１） (1 g, 5.5 mmol)をメタノール (55 ml) に溶解し、パラジウム-活性炭素（活性炭素パラジウムとして290 mg）を加えて、1気圧水素下，室温で12時間撹拌した。得られた反応混合物を濾過後濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル 20 g, ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝ 3 :1）で精製し、本発明のテトラヒドロフラン化合物（１Ａ−１−１） (838 mg, 収率83%)を無色油状物として得た。
FTIR (ニート) 2938, 2862, 1773, 1451cm-1
1H NMR (600 MHz, CDCl3) δｐｐｍ：1.26-1.38 (3H, m), 1.64-1.77 (1H, m), 1.84-1.94 (4H, m), 2.31 (1H, quintet, J = 4.9 Hz), 2.67 (1H, d, J = 18.4 Hz), 2.76 (1H, dd, J = 5.5, 18.4 Hz), 3.65 (1H, d, J = 8.5 Hz), 4.07 (1H, dd, J = 4.4, 8.5 Hz), 4.55 (1H, d, J = 5.5 Hz)
13C NMR (75 MHz, CDCl3) δｐｐｍ：23.1t, 23.8t, 28.3t, 30.0t, 36.4t, 44.0d, 73.7t, 78.0d, 95.4s, 175.4s
MS (CI) m/z 183 (M++H)
HRMS (CI) m/z C10H15O3(M++H) としての計算値183.1021 実測値 183.1024。【００９１】
製造例４【００９２】
【化１２】
2008105495.tif 000014
【００９３】
乾燥した二口フラスコに無水THF (5 ml)、無水トルエン (1.6 ml)、無水ピリジン (30 ml, 0.37 mmol)及び上記製造例３で得られた本発明のビステトラヒドロフラン化合物（１Ａ−１−１）(300 mg, 1.66 mmol) を加え、テッベ試薬 (0.5 M, トルエン, 6.6 ml, 3.29 mmol) を室温で滴下した。室温下2時間撹拌した後、−20℃まで冷却し、１０%水酸化ナトリウム水溶液を滴下した。次に得られた混合液をセライトを用いて濾過した後、濃縮し、残渣を精製することなく次の工程に用いた。【００９４】
得られた残渣をメタノール (16 ml) に溶かし、PPTS (164.8 mg, 0.66 mmol) を室温で加え、5時間撹拌した。この混合液を0℃に冷却し飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え酢酸エチルで3回抽出した。得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過後濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー (シリカゲル 10 g, ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝ 2 : 1) で精製し無色油状のジアステレオマー混合物（１Ｄ−１−１）及び（１Ｃ−１−１） (278 mg, 収率80%) を得た。次に、得られたジアステレオマー混合物を順相HPLC (Cosmosil 5SL-II Water (20 x 250), ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝ 6 : 1, 17.0 ml/min, 検出器 : RI)により、（１Ｄ−１−１）と（１Ｃ−１−１）とに分離した。【００９５】
化合物（１C−１−１）の物性：
FTIR (ニート) 2984, 2934, 2860, 2826, 1451, 1375cm-1
1H NMR (300 MHz, C6D6) δｐｐｍ：0.99 (2H, dt, J = 3.0, 11.0 Hz), 1.06-1.24 (1H, m), 1.40 (3H, s), 1.45-1.67 (4H, m), 1.91 (1H, dt, J = 5.0, 11.5 Hz), 2.12 (1H, brd, J = 11.5 Hz), 2.21 (1H, d, J = 14.4 Hz), 2.28 (1H, dd, J = 6.3, 14.4 Hz), 3.17 (3H, s), 3.43 (1H, d, J = 7.7 Hz), 4.05 (1H, dd, J = 4.5, 7.7 Hz), 4.40 (1H, dd, J = 1.1, 6.3 Hz)
13C NMR (75 MHz, C6D6) δｐｐｍ：22.8q, 24.3t, 24.7t, 29.3t, 32.1t, 45.8d, 48.3t, 48.7q, 73.4t, 83.2d, 94.3s, 108.9s
MS (CI) m/z 213 (M++H)
HRMS (CI) m/z C12H20O3(M++H) としての計算値213.1491 実測値 213.1471。【００９６】
化合物（１Ｄ−１−１）の物性：
FTIR (ニート) 2982, 2934, 2856, 2826, 1449, 1375cm-1
1H NMR (300 MHz, C6D6) δｐｐｍ：0.88-1.09 (2H,m), 1.21 (1H, dq, J = 3.4, 13.2 Hz), 1.31 (3H, s), 1.31-1.62 (5H, m), 1.68 (1H, dd, J = 5.3, 14.1 Hz), 1.88 (1H, dt, J = 5.3, 11.4 Hz), 2.48 (1H, d, J = 14.1 Hz), 3.22 (3H, s), 3.47 (1H, d, J = 7.5 Hz), 4.22 (1H, d, J = 5.4 Hz), 4.37 (1H, dd, J = 4.3 Hz)
13C NMR (75 MHz,C6D6) δｐｐｍ：24.3q, 24.6t, 24.7t, 29.8t, 33.0t, 46.0d, 46.4t, 49.0q, 74.0t, 83.2d, 95.2s, 108.1s
MS (CI) m/z 211 (M++H)
HRMS (CI) m/z C12H19O3(M+-H) としての計算値211.1334 実測値211.1353。【００９７】
製造例５
乾燥した二口フラスコに無水THF (5 ml)、無水トルエン (1.6 ml)、無水ピリジン (30 ml, 0.37 mmol)及び上記製造例３で得られた本発明のビステトラヒドロフラン化合物（１Ａ−１−１）(300 mg, 1.66 mmol) を加え、テッベ試薬 (0.5 M, トルエン, 6.6 ml, 3.29 mmol) を室温で滴下した。室温下2時間撹拌した後、−20℃まで冷却し、１０%水酸化ナトリウム水溶液を滴下した。次に得られた混合液をセライトを用いて濾過した後、濃縮し、残渣を精製することなく次の工程に用いた。【００９８】
得られた残渣をベンジルアルコール (16 ml) に溶かし、PPTS (164.8 mg, 0.66 mmol) を室温で加え、5時間撹拌した。この混合液を0℃に冷却し飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え酢酸エチルで3回抽出した。得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過後濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー (シリカゲル 10 g, ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝ 2 : 1) で精製し、無色油状のジアステレオマー混合物（１Ｃ−２−２）及び（１Ｄ−２−２） (278 mg, 収率80%) を得た。次に、得られたジアステレオマー混合物を順相HPLC (Cosmosil 5SL-II Water (20 x 250), ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝ 6 : 1, 17.0 ml/min, 検出器 : RI)により、下記に示す（１Ｃ−２−２）と（１Ｄ−２−２）とに分離した。【００９９】
【化１３】
2008105495.tif 000015
【０１００】
化合物（１Ｃ−２−２）の物性：
1H NMR (600 MHz in C6D6) δｐｐｍ：1.07 (1H, dt, 3.9, 14.4 Hz), 1.50 (1H, m), 1.52 (3H, s), 1.70 (1H, m), 1.89 (2H, m), 2.16 (1H, dt, J = 3.0, 14.4 Hz), 2.35 (1H, dd, J = 2.4, 15.0 Hz), 2.51 (1H, dd, J = 6.0, 15.0 Hz), 4.17 (1H, dd, J = 2.4, 12.0 Hz), 4.20 (1H, dd, J = 2.4, 7.2 Hz), 4.48 (1H, d, J = 12.0 Hz), 4.55 (1H, dq, J = ,3.0, 12.0 Hz), 4.68 (1H, d, J = 12.0 Hz), 5.31 (1H, br s), 7.11 (1H, t, J = 8.4 Hz), 7.20 (2H, t, J = 8.4 Hz), 7.34 (2H, d, J = 8.4 Hz)
13C NMR (150 MHz in C6D6) δｐｐｍ：18.60t, 24.48q, 24.68t, 30.05t, 47.98t, 63.96t, 69.92t, 87.97s, 88.14d, 110.12s, 121.17d, 127.32d, 127.72d (2C), 128.48d (2C), 139.73s, 139.88s。【０１０１】
化合物（１Ｄ−２−２）の物性：
1H NMR (600 MHz in C6D6) δｐｐｍ：1.16 (1H, ddd, J = 3.3, 12.6, 14.6 Hz), 1.37 (3H, s), 1.53 (1H, m), 1.73 (2H, dt, J = 3.3, 11.4 Hz), 1.76 (2H, dd, J = 5.6, 14.3 Hz), 1.77 (1H, m), 1.74 (1H, br d, J = 11.4 Hz), 2.24 (1H, m), 2.62 (1H, d, J = 14.3 Hz), 4.14 (1H, dd, J = 1.6, 11.4 Hz), 4.22 (1H, d, J = 5.8 HZ), 4.59 (1H, d, J = 12.0 Hz), 4.70 (1H, d, J = 12.0 Hz), 4.79 (1H, ddt, J = 2.2, 3.0, 11.4 Hz), 5.31 (1H, br s), 7.08 (1H, t, J = 7.4 Hz), 7.18 (2H, t, J = 8.4 Hz), 7.38 (2H, d, J = 7.4 Hz)
13C NMR (150 MHz in C6D6) δｐｐｍ：18.48t, 24.57t, 24.75q, 32.16t, 47.48t, 63.82t, 70.74t, 87.90d, 87.95s, 108.77s, 121.16d, 127.14d, 127.84d (2C), 128.00d (2C), 139.98s, 140.21s。【０１０２】
製造例６
ベンジルアルコールの代わりにエチルアルコール(16 ml) を使用する以外は、製造例５と同様にして無色油状のジアステレオマー混合物（１Ｃ−２−３）及び（１Ｄ−２−４）を得た。次に、得られたジアステレオマー混合物を順相HPLC (Cosmosil 5SL-II Water (20 x 250), ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝ 6 : 1, 17.0 ml/min, 検出器 : RI)により、下記に示す（１Ｃ−２−３）と（１Ｄ−２−３）とに分離した。【０１０３】
【化１４】
2008105495.tif 000016
【０１０４】
化合物（１Ｃ−２−３）の物性：
1H NMR (600 MHz in C6D6) δｐｐｍ：1.11 (3H, t, J = 6.9 Hz), 1.15 (1H, ddd, J = 3.0, 12.9, 13.2 Hz), 1.48 (3H, s), 1.58 (1H, m), 1.74 (1H, m), 1.90 (2H, m), 2.19 (1H, dt, J = 3.3, 13.2 Hz), 2.31 (1H, dd, J = 1.6, 14.0 Hz), 2.67 (1H, dd, J = 5.8, 14.0 Hz), 2.67 (1H, dd, J = 5.8, 14.0 Hz), 3.37 (1H, dq, J = 6.9, 16.2 Hz), 3.62 (1H, dq, J = 3.9, 16.2 Hz), 4.17 (1H, ddt, J = 1.6, 1.9, 13.8 Hz), 4.24 (1H, dd, J = 1.4, 6.0 Hz), 4.54 (1H, dddd, J = 2.1, 3.0, 8.4, 13.8 Hz), 5.31 (1H, br s)
13C NMR (150 MHz in C6D6) δｐｐｍ：15.89q, 18.58t, 24.24q, 24.69t, 30.31t, 47.99t, 56.72t, 69.87t, 87.53s, 88.22d, 109.70s, 120.96d, 139.89s。【０１０５】
化合物（１Ｄ−２−３）の物性：
1H NMR (300 MHz in C6D6) δｐｐｍ：1.14 (3H, t, J = 6.9 Hz), 1.17 (1H, m), 1.34 (3H, s), 1.53 (1H, m), 1.70-2.17 (5H, m), 2.54 (1H, d, J = 14.4 Hz), 3.45 (1H, dq, J = 1.9, 6.9 Hz), 3.65 (1H, dq, J = 1.9, 6.9 Hz), 4.23 (1H, d, J = 6.0 Hz), 4.25 (1H, d, J = 11.1 HZ), 4.93 (1H, dq, J = 2.1, 11.1 Hz), 5.37 (1H, br s)。【０１０６】
製造例７
ベンジルアルコールの代わりにｎ−ブチルアルコール(16 ml) を使用する以外は、製造例５と同様にして無色油状のジアステレオマー混合物（１Ｃ−２−４）及び（１Ｄ−２−４）を得た。次に、得られたジアステレオマー混合物を順相HPLC (Cosmosil 5SL-II Water (20 x 250), ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝ 6 : 1, 17.0 ml/min, 検出器 : RI)により、下記に示す（１Ｃ−２−４）と（１Ｄ−２−４）とに分離した。【０１０７】
【化１５】
2008105495.tif 000017
【０１０８】
化合物（１Ｃ−２−４）の物性：
1H NMR (600 MHz in C6D6) δｐｐｍ：0.88 (3H, t, J = 7.4 Hz), 1.13 (1H, ddd, J = 3.0, 12.6, 13.8 Hz), 1.37 (2H, m), 1.50 (3H, s), 1.55-1.60 (3H, m), 1.72 (1H, m), 1.92 (2H, m), 2.18 (1H, dt, J = 3.0, 12.6 Hz), 2.32 (1H, dd, J = 1.4, 14.4 Hz), 2.44 (1H, dd, J = 5.6, 14.4 Hz), 3.38 (1H, dt, J = 6.3, 9.0 Hz), 3.62 (1H, dt, J = 6.6, 9.0 Hz), 4.17 (1H, dd, J = 1.9, 9.8 Hz), 4.19 (1H, dd, J = 1.1, 5.4 Hz), 4.54 (1H, m), 5.30 (1H, br s)
13C NMR (150 MHz in C6D6) δｐｐｍ：14.12q, 18.63t, 19.84t, 24.42q, 24.72t, 30.22t, 32.68t, 47.93t, 61.09t, 69.97t, 87.58s, 88.26d, 109.76s, 120.93d, 139.95s。【０１０９】
化合物（１Ｄ−２−４）の物性：
1H NMR (600 MHz in C6D6) δｐｐｍ：0.84 (3H, t, J = 7.4 Hz), 1.16 (1H, ddd, J = 3.6, 12.6, 14.4 Hz), 1.34 (2H, m), 1.36 (3H, s), 1.49-1.62 (3H, m), 1.71-1.80 (3H, m), 1.92 (1H, m), 2.00 (1H, m), 2.54 (1H, d, J = 14.4 Hz), 3.44 (1H, dt, J = 6.9, 9.0, Hz), 3.53 (1H, ddd, J = 5.8, 7.2, 9.0 Hz), 4.20 (1H, d, J = 5.6 Hz), 4.26 (1H, dd, J = 1.6, 10.8 Hz), 4.92 (1H, ddt, J = 2.2, 3.6, 10.8, Hz), 5.37 (1H, br s)
13C NMR (150 MHz in C6D6) δｐｐｍ：14.14q, 18.50t, 19.85t, 24.59t, 24.81q, 32.25t, 32.69t, 47.49t, 61.49t, 70.70t, 87.56s, 88.03d, 108.48s, 120.95d, 140.47。【０１１０】
製造例８
ベンジルアルコールの代わりにアリルアルコール(16 ml) を使用する以外は、製造例５と同様にして無色油状のジアステレオマー混合物（１Ｃ−２−５）及び（１Ｄ−２−５）を得た。【０１１１】
【化１６】
2008105495.tif 000018
【０１１２】
化合物（１Ｃ−２−５）及び化合物（１Ｄ−２−５）のジアステレオマー混合物の物性：
1H NMR (300 MHz in C6D6) δｐｐｍ：1.23 (1H, dt, J = 3.0, 13.2 Hz, major), 1.43 (3H, s, minor), 1.55 (3H, s, major), 1.60-2.01 (m), 2.29 (1H, dt, J = 3.6, 12.9 Hz), 2.40 (1H, dd, J = 1.5, 14.4 Hz), 2.59 (1H, dd, J = 5.7, 14.4 Hz), 2.66 (1H, d, J = 14.4 Hz), 4.01 (1H, ddt, J = 1.8, 4.8, 12.9 Hz, major), 4.89 (1H, ddt, J = 1.8, 4.8, 13.2 Hz, minor), 4.19-4.35 (m), 4.62 (1H, dq, J = 3.0, 11.4 Hz), 5.00 (1H, dq, J = 2.4, 11.1 Hz, minor), 5.14 (1H, dq, 1.8, 10.5 Hz, major), 5.34-5.46 (2H, m), 6.0 (1H, m)。【０１１３】
製造例９
ベンジルアルコールの代わりにプレニルアルコール(16 ml) を使用する以外は、製造例５と同様にして無色油状のジアステレオマー混合物（１Ｃ−２−６）及び（１Ｄ−２−６）を得た。【０１１４】
【化１７】
2008105495.tif 000019
【０１１５】
化合物（１Ｃ−２−６）及び化合物（１Ｄ−２−６）のジアステレオマー混合物の物性：
1H NMR (200 MHz in C6D6) δｐｐｍ：1.15 (1H, dt, J = 3.2, 12.8 Hz), 1.51 (3H, s), 1.54 (3H, s), 1.61 (3H, s), 1.7-2.0 (m), 2.26 (1H, dt, J = 3.0, 13.0 Hz), 2.30 (1H, dd, J = 1.6, 14.0 Hz), 2.51 (1H, dd, J =5.6, 14.0 Hz), 4.03 (1H, dd, J = 6.6, 11.2 Hz), 4.12-4.29 (m), 4.53 (1H, dq, J = 3.0, 11.4 Hz), 5.33 (1H, br s), 5.49 (1H, br t, J = 6.8 Hz)。【０１１６】
製造例１０
ベンジルアルコールの代わりにシンナミルアルコール(16 ml) を使用する以外は、製造例５と同様にして無色油状のジアステレオマー混合物（１Ｃ−２−７）及び（１Ｄ−２−７）を得た。【０１１７】
【化１８】
2008105495.tif 000020
【０１１８】
化合物（１Ｃ−２−７）及び化合物（１Ｄ−２−７）のジアステレオマー混合物の物性：
1H NMR (200 MHz in C6D6) δｐｐｍ：1.15 (1H, m), 1.28-2.05 (m), 1.39 (3H, s, minor), 1.52 (3H, s, major), 2.25(1H, dt, J = 3.0, 13.0 Hz), 2.34 (1H, dd, J = 1.6, 14.4 Hz), 2.54 (1H, dd, J = 5.8, 14.4 Hz), 2.61 (1H, d, J = 14.4 Hz), 4.02-4.37 (m), 4.55 (1H, dq, J = 3.0, 11.4 Hz, major), 4.95 (1H, dq, J = 3.0, 11.0 Hz, minor), 5.33 (1H, br s), 6.27 (1H, dt, J = 5.4, 16.0 Hz, major), 6.29 (1H, dt, J= 5.4, 15.8 Hz, minor), 6.62 (1H, br d, J= 16.0 Hz, major), 6.66 (1H, dt, J = 1.8, 16.0 Hz, minor), 6.99-7.16 (m), 7.26 (2H, dt, J = 1.4, 6.2 Hz)。【０１１９】
試験例
培地、試薬の調製【０１２０】
・ダルベッコ変法イーグル培地（Dulbecco’s Modified Eagle Medium ）(DMEM) / 10% HS, 5% FBS の調製
DMEM (全量 50 ml) に ウマ血清 (Donor horse serum : HS) (5 ml)、ウシ胎仔血清 (Fetal bovine serum : FBS)(2.5 ml)及びペニシリン（penicillin)-ストレプトマイシン(streptomycin )(0.5 ml) を加え、DMEM / 10% HS, 5% FBS を調製した。【０１２１】
・DMEM / 2% HS, 1% FBS の調製
DMEM (全量 50 ml) に HS (1 ml)、FBS (0.5 ml)及びペニシリン（penicillin)-ストレプトマイシン(streptomycin )(0.5 ml) を加え、DMEM / 2% HS, 1% FBS を調製した。【０１２２】
・0.25% トリプシン（trypsin） / PBS（リン酸緩衝液）の調製
2.5%トリプシン（trypsin） をPBS で 10 倍に希釈し、0.25% トリプシン（trypsin) / PBS とした。【０１２３】
・0.4% トリパンブルーの調製
トリパンブルー0.2 g をPBS 50 ml に溶解したものを0.4% トリパンブルーとした。【０１２４】
サンプルの調製
溶媒が エタノール のとき、濃度は1 mM、 0.1 mM及び10 mM とし、初めに1 mM を調製した。サンプルの量が 1 mg のとき、100% エタノール (1/分子量 ×1000)/2 ml に溶かし、同量のミリQ (1/分子量 ×1000)/2 ml を加え、0.45 mM のフィルターに通しサンプルチューブに得た。【０１２５】
0.1 mM濃度のサンプルは、1 mM 溶液から50% エタノール で10 倍に希釈して調製した。同様に、10 mM 濃度のサンプルは、0.1 mM 溶液から調製した。【０１２６】
溶媒が DMSO のとき、濃度は 10 mM、 1 mM及び0.1 mM とした。【０１２７】
エタノール で調製したサンプルは、培地により100 倍希釈に、DMSO で調製したサンプルは、培地により1000 倍に希釈されるため、実際の濃度はエタノール及びDMSOで調製した場合共に、それぞれ10 mM、 1 mM、 0.1 mM となる。【０１２８】
突起測定法
測定に際しては、以下の機器及びソフトウェアを使用した。
倒立型研究用顕微鏡 IX70： オリンパス社製
高解像度デジタルカラー冷却 CCD カメラ C4742-95-12SC：浜松ホトニクス社製
Lumina Vision 蛍光画像解析システム及びMacSCOPE 画像処理パッケージ：三谷商事社製。【０１２９】
統計処理
得られた各データの統計処理は、「Origin ver. 7.0」(OriginLab. USA)及びMac 統計解析を使用し、有意差検定は、Student’s T-test 及びDunnett’s T-test を採用した。【０１３０】
実験材料、試薬【０１３１】
細胞
PC12 細胞 (Pheochromocytoma cells) は、ヒューマンサイエンス振興財団研究資源バンクより購入した。資源番号 : JCRB0733、資源名 PC-12。【０１３２】
試薬
DMEM、ペニシリン（penicillin)-ストレプトマイシン(streptomycin)、ＨＳ、ＦＢＳ、トリプシン（trypsin)及び神経成長因子（nerve growth factor (NGF)） は GIBCOBAL 社製品を用いた。DULBECCO’S PBS は、大日本製薬株式会社製品を用いた。エタノール及びジメチルスルホキシド(DMSO) は、ナカライテスク社製品を用いた。【０１３３】
実験方法【０１３４】
細胞培養
PC12 細胞は、ラット尾由来コラーゲンでコーティングされた培養フラスコに、DMEM / 10% HS、 5% FBS、 50 IU/ml ペニシリン（penicillin)及び50 mg/ml ストレプトマイシン(streptomycin) で組成された培地中、湿度95%及び炭酸ガス5%環境下のインキュベーター内で培養した。細胞密度が明らかに少な過ぎたり、細胞が増殖しすぎると、細胞に負荷がかかり、増殖に時間を要したり細胞が死滅してしまうため、フラスコ内に約80% の密度で生存する様に継代した。継代培養又は活性評価試験を行う際は、トリプシン（trypsin） (0.25%、 5 min) で処理し、細胞浮遊液を得た後、コラーゲンでコーティングされた培養フラスコ又はプレートに各々播種した。【０１３５】
細胞単離、播種
PC12 細胞の状態を確認し、PC12 細胞が 50% 以上融合し増殖したことを確認した。プレートにラット尾由来のコラーゲンでコーティングを行ない、翌日、ミリ Q で 2 回洗浄した。DMEM / 10% HS、 5% FBS、 50 IU/ml ペニシリン（penicillin)及び50 mg/ml ストレプトマイシン(streptomycin) の組成の培地を調製した。【０１３６】
培養フラスコ内の培地を吸引除去し、PC12 細胞を PBS (5 mL) で 2 回洗浄後、トリプシン（trypsin） (3 mL) を加えて室温で約5分間放置し、ピペッティングにより細胞浮遊液を得る。トリプシン（trypsin） の活性を止めるために、該細胞浮遊液を血清入りの培地 (2 mL) を入れた 50 mL 遠心管に移し、PBSで全量を10 mL に調整して遠心 (1000 rpm x 5 min) した。遠心後、上澄みをポンプで吸引除去し PBS (10 mL) を加えて先曲がり駒込ピペットで数回ピペッティングした後、再び遠心にかけて同様の操作を 2 回繰り返した。2 回目の遠心終了後、調整した培地 (5 mL) を加え、先曲がり駒込ピペットで数回ピペッティングして細胞浮遊液を得た。【０１３７】
スクリーニング方法
前記した方法で細胞を単離し、48 ウエルプレートにDMEM / 10% HS、 5% FBS 組成培地で2000 cells/cm2  の細胞密度になるように播種した。24 時間インキュベータ内で培養した後、サンプル混入のDMEM / 2% HS、 1% FBS 組成培地、DMEM / 2% HS、 1% FBS に 10 ng/ml NGF を含む培地に各々交換した。インキュベータ内で培養を続け、翌日から1 週間後まで細胞形態を顕微鏡で観察した。その間、突起の伸展が認められれば、デジタルカメラによる写真撮影を行った。【０１３８】
サンプルの調製は、50% エタノール及びDMSOを用いる。50% エタノール で調製したサンプルは、培地により 100 倍希釈に、DMSO で調製したサンプルは培地により 1000 倍に希釈して用いた。【０１３９】
突起伸展活性の判断
突起伸展活性については、細胞体よりも長い突起をもつ細胞について突起形成が認められたと判断し、突起の長さをコントロール (50% エタノール又は0.1% DMSO) と NGF 10 ng/ml を添加し、分化誘導させた細胞とそれぞれ比較することで判定した。【０１４０】
活性試験結果 【０１４１】
【化１９】
2008105495.tif 000021
【０１４２】
図１は、ＤＭＳＯを含む培地で培養した細胞の様子を示す顕微鏡図である。図２は、ＤＭＳＯ及びＮＧＦ（２０ｎｇ／ｍｌ）を含む培地で培養した細胞の様子を示す顕微鏡図である。図３は、ＤＭＳＯ、ＮＧＦ（２０ｎｇ／ｍｌ）及び化合物（１Ｃ−２−１）（１μＭ）を含む培地で培養した細胞の様子を示す顕微鏡図である。図４は、ＤＭＳＯ、ＮＧＦ（２０ｎｇ／ｍｌ）及び化合物（１Ｃ−２−１）（１０μＭ）を含む培地で培養した細胞の様子を示す顕微鏡図である。図３及び４から明らかな通り、DMSO及びNGF (20 ng/ml)の存在下、化合物(１Ｃ−２−１)を１μＭ又は１０μＭ加えた試料は、化合物(１Ｃ−２−１)を加えない試料（図１及び２）に比して、一段と優れた神経突起伸展増強活性が認められた。【０１４３】
【化２０】
2008105495.tif 000022
【０１４４】
図５は、ＤＭＳＯ、ＮＧＦ（２０ｎｇ／ｍｌ）及び化合物（１Ｄ−２−１）（１μＭ）を含む培地で培養した細胞の様子を示す顕微鏡図である。図６は、ＤＭＳＯ、ＮＧＦ（２０ｎｇ／ｍｌ）及び化合物（１Ｄ−２−１）（１０μＭ）を含む培地で培養した細胞の様子を示す顕微鏡図である。図５及び６から明らかな通り、DMSO及びNGF (20 ng/ml)の存在下、化合物（１Ｄ−２−１）を１μＭ又は１０μＭ加えた試料は、化合物（１Ｄ−２−１）を加えない試料（図１及び２）に比して、一段と優れた神経突起伸展増強活性が認められた。【０１４５】
化合物（１Ｄ−２−３）、及び化合物（１Ｃ−２−５）と化合物（１Ｄ−２−５）とのジアステレオマー混合物についても、上記と同様に活性試験を行った。その結果、DMSO及びNGF (20 ng/ml)の存在下、化合物（１Ｄ−２−３）を１０μＭ加えた試料は、化合物（１Ｄ−２−３）を加えない試料に比して、一段と優れた神経突起伸展増強活性を有していることを確認できた。また、DMSO及びNGF (20 ng/ml)の存在下、化合物（１Ｃ−２−５）と化合物（１Ｄ−２−５）とのジアステレオマー混合物を１０μＭ加えた試料は、化合物（１Ｃ−２−５）と化合物（１Ｄ−２−５）とのジアステレオマー混合物を加えない試料に比して、一段と優れた神経突起伸展増強活性を有していることを確認できた。
【図１】
2008105495.tif 000026
【図２】
2008105495.tif 000027
【図３】
2008105495.tif 000028
【図４】
2008105495.tif 000029
【図５】
2008105495.tif 000030
【図６】
2008105495.tif 000031
【国際調査報告】
2008105495.tif 000032
2008105495.tif 000033
2008105495.tif 000034
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