(57)【要約】血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患の予防及び／又は治療に有効な医薬である、アスピリンと以下の（a）〜（d）のいずれかに記載の化合物とを組み合わせてなる医薬を提供する：（a）カルシウムハンドリング蛋白に作用して細胞内のカルシウム濃度又は細胞内カルシウムの濃度変化速度を調節する作用を有する化合物；（ｂ）細胞内カルシウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物；（ｃ）細胞内ナトリウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物；（ｄ）下記一般式（Ｉ）：2008032814.tif 000024（式中、Ｒ1 はＣ1−Ｃ6 のアルキル基等を表し；Ｒ2 は水素原子等を表し；ｎは１から４の整数を表す。）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物。
2008032814.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アスピリンと以下の（a）〜（d）のいずれかに記載の化合物とを組み合わせてなる医薬：
（a）カルシウムハンドリング蛋白に作用して細胞内のカルシウム濃度又は細胞内カルシウムの濃度変化速度を調節する作用を有する化合物；
（ｂ）細胞内カルシウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物；
（ｃ）細胞内ナトリウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物；
（ｄ）下記一般式（Ｉ）：
【化１】
2008032814.tif 000020
（式中、Ｒ1 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、Ｃ3−Ｃ7 のシクロアルキル基、Ｃ1−Ｃ4 のハロゲン化アルキル基、ハロゲン原子、又はＣ6−Ｃ12のアリール基を表し；Ｒ2 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、又はシアノ基、ニトロ基、Ｃ1−Ｃ6 のアルコキシ基、ハロゲン原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、及びアミノ基からなる群から選ばれる１又は２以上の置換基を有していてもよいＣ7−Ｃ12のアラルキル基を表し；ｎは１から４の整数を表す。）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物。
【請求項２】
カルシウムハンドリング蛋白がナトリウム／カルシウム交換系又は筋小胞体カルシウム−ＡＴＰアーゼである請求項１に記載の医薬。
【請求項３】
アスピリンと５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物とを組み合わせてなる請求項１又は２に記載の医薬。
【請求項４】
アスピリンと５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸・一水和物とを組み合わせてなる請求項１又は２に記載の医薬。
【請求項５】
血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患の予防及び／又は治療のための請求項１から４のいずれか一項に記載の医薬。
【請求項６】
血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患が虚血性疾患である請求項５に記載の医薬。
【請求項７】
血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患が心不全、心筋梗塞、脳梗塞、狭心症、又は末梢動脈閉塞症である請求項５に記載の医薬。
【請求項８】
抗血栓薬として用いる請求項１から４のいずれか一項に記載の医薬。
【請求項９】
下記一般式（Ｉ）
【化２】
2008032814.tif 000021
（式中、Ｒ1 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、Ｃ3−Ｃ7 のシクロアルキル基、Ｃ1−Ｃ4 のハロゲン化アルキル基、ハロゲン原子、又はＣ6−Ｃ12のアリール基を表し；Ｒ2 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、又はシアノ基、ニトロ基、Ｃ1−Ｃ6 のアルコキシ基、ハロゲン原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、及びアミノ基からなる群から選ばれる１又は２以上の置換基を有していてもよいＣ7−Ｃ12のアラルキル基を表し；ｎは１から４の整数を表す）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物を含むアスピリンの血小板凝集抑制作用の増強剤。
【請求項１０】
５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物を含むアスピリンの血小板凝集抑制作用の増強剤。
【請求項１１】
５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸・一水和物を含むアスピリンの血小板凝集抑制作用の増強剤。
【請求項１２】
アスピリンと以下の（a）〜（d）のいずれかに記載の化合物を併用することを特徴とする、血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患を予防及び／又は治療する方法：
（a）カルシウムハンドリング蛋白に作用して細胞内のカルシウム濃度又は細胞内カルシウムの濃度変化速度を調節する作用を有する化合物；
（ｂ）細胞内カルシウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物；
（ｃ）細胞内ナトリウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物；
（ｄ）下記一般式（Ｉ）：
【化３】
2008032814.tif 000022
（式中、Ｒ1 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、Ｃ3−Ｃ7 のシクロアルキル基、Ｃ1−Ｃ4 のハロゲン化アルキル基、ハロゲン原子、又はＣ6−Ｃ12のアリール基を表し；Ｒ2 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、又はシアノ基、ニトロ基、Ｃ1−Ｃ6 のアルコキシ基、ハロゲン原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、及びアミノ基からなる群から選ばれる１又は２以上の置換基を有していてもよいＣ7−Ｃ12のアラルキル基を表し；ｎは１から４の整数を表す。）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物。
【請求項１３】
カルシウムハンドリング蛋白がナトリウム／カルシウム交換系又は筋小胞体カルシウム−ＡＴＰアーゼである請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
アスピリンと５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物とを併用することを特徴とする、請求項１２又は１３に記載の方法。
【請求項１５】
アスピリンと５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸・一水和物とを併用することを特徴とする、請求項１２又は１３に記載の方法。
【請求項１６】
血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患が虚血性疾患である請求項１２から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患が心不全、心筋梗塞、脳梗塞、狭心症、又は末梢動脈閉塞症である請求項１２から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
胸痛発作を有する患者にアスピリンを投与し、さらに同一の患者に再灌流療法を実施する際に以下の（a）〜（d）のいずれかに記載の化合物を投与する、血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患を予防及び／又は治療する方法：
（a）カルシウムハンドリング蛋白に作用して細胞内のカルシウム濃度又は細胞内カルシウムの濃度変化速度を調節する作用を有する化合物；
（ｂ）細胞内カルシウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物；
（ｃ）細胞内ナトリウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物；
（ｄ）下記一般式（Ｉ）：
【化４】
2008032814.tif 000023
（式中、Ｒ1 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、Ｃ3−Ｃ7 のシクロアルキル基、Ｃ1−Ｃ4 のハロゲン化アルキル基、ハロゲン原子、又はＣ6−Ｃ12のアリール基を表し；Ｒ2 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、又はシアノ基、ニトロ基、Ｃ1−Ｃ6 のアルコキシ基、ハロゲン原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、及びアミノ基からなる群から選ばれる１又は２以上の置換基を有していてもよいＣ7−Ｃ12のアラルキル基を表し；ｎは１から４の整数を表す。）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物。
【請求項１９】
再灌流療法が経皮的冠動脈インターベンションである請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患が虚血性疾患である請求項１８又は１９に記載の方法。
【請求項２１】
血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患が心不全、心筋梗塞、脳梗塞、狭心症、又は末梢動脈閉塞症である請求項１８又は１９のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アスピリンを含む医薬、特に血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患の予防及び／又は治療のための医薬に関する。
【背景技術】
【０００２】
アスピリンは解熱消炎鎮痛薬として広く使用されている。これはアスピリンがアラキドン酸カスケードに働き、シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）の活性を阻害して炎症に重要な役割を果たすプロスタグランジンの生成を抑えることによる。また、上記シクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）はトロンボキサンの合成酵素でもあることからアスピリンによってシクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）の活性が阻害されると血小板でのトロンボキサンＡ２（ＴＸＡ２）の生成が抑えられる。従ってアスピリンは抗血栓薬としても有用であり、心筋梗塞や虚血性脳血管疾患などを軽減することにおいてアスピリンの治療効果は既に確立されている（Patrono, C., N. Engl. J. Med., 330, 1287-1294, 1994）。【０００３】
一方、アスピリンは血管壁のシクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）を阻害してプロスタサイクリン（ＰＧＩ２）の産生を抑える働きを有する。このＰＧＩ２は、ＴＸＡ２とは反対に血管拡張作用を有するのでアスピリンによってＰＧＩ２の生成が抑えられると血栓が形成される。つまり、アスピリンは、血栓を形成させない方向にも形成させる方向にも働く。このようにアスピリンは二つの相反する作用を有するが、この作用特性は「アスピリンジレンマ」と呼ばれ、臨床上問題となっている。これに対し、アスピリンジレンマの解決策の一つとしてアスピリンの少量使用が提言された。これは、血小板のシクロオキシゲナーゼはアスピリンに対して敏感で、しかもその阻害は不可逆的であるのに対し、血管壁のシクロオキシゲナーゼはアスピリンに対して比較的鈍感で、その阻害も早期に回復することから、アスピリンを少量与薬することによって血管壁のＣＯＸよりも血小板のＣＯＸの活性を選択的に阻害し、ＴＸＡ２の生成抑制を高め、ＰＧＩ２の生成抑制を低くするというものである。すなわち、低用量のアスピリンを投与すれば選択的に血小板のＣＯＸに働いてＴＸＡ２の生成のみが阻害され、血小板の凝集抑制に有利となる。
一方、下記の一般式（Ｉ）：【０００４】
【化１】
2008032814.tif 000003
【０００５】
（式中、Ｒ1 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、Ｃ3−Ｃ7 のシクロアルキル基、Ｃ1−Ｃ4 のハロゲン化アルキル基、ハロゲン原子、又はＣ6−Ｃ12のアリール基を表し；Ｒ2 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、又はシアノ基、ニトロ基、Ｃ1−Ｃ6 のアルコキシ基、ハロゲン原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、及びアミノ基からなる群から選ばれる１又は２以上の置換基を有していてもよいＣ7−Ｃ12のアラルキル基を表し；ｎは１から４の整数を表す）で示されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体は心筋又は血管平滑筋の細胞内カルシウムイオン（特開平3-7263号公報）、及び細胞内ナトリウムイオン（以下の参考例１を参照）の過蓄積を抑制すること、並びにカルシウムハンドリング蛋白であるナトリウム／カルシウム交換系（Journal of Cardiac Failure Vol.8 No.5 Suppl.2002, S230；以下の参考例２を参照）、及び筋小胞体カルシウム−ＡＴＰアーゼ（J. pharmacology and experimental therapeutics. 298, 1161-1166, 2001）に作用して細胞内のカルシウム濃度又は細胞内カルシウムの濃度変化速度を調節する作用を有することが知られている。さらに上記一般式（Ｉ）のアミノベンゼンスルホン酸誘導体は心筋又は血管平滑筋の細胞内カルシウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有することが知られており、β受容体刺激剤様の作用、β受容体遮断剤様の作用、又はカルシウムチャネル拮抗剤様の作用を有さずに心筋障害、心臓刺激伝導障害等を抑制又は軽減し、虚血性心疾患（例えば心筋梗塞、狭心症等）、心不全、高血圧あるいは不整脈等に対して有用な予防又は治療剤となりうることが特開平3-7263号公報、及び特開平4-139127号公報に開示されている。また、特開平10-298077号公報には同化合物が心筋症病態下における心機能低下を顕著に改善する作用を有するとともに、突発性の心筋症において長期的に生存率を改善し、延命させる効果を有することが、さらに、国際公開公報WO99/40919号には、同化合物が心筋筋小胞体におけるカルシウムイオン取り込み促進作用を有し、心拡張障害の治療又は予防に有用であることが開示されている。しかしながら、発明者らが知る限りにおいてかかる化合物はアスピリンと併用することについて従来全く報告がない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、アスピリンと、アスピリンと併用することにより血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患等を予防及び／又は治療することが可能となる物質とを組み合わせることで、アスピリン用量を低く抑えることができる医薬を提供することを目的とする。さらには、アスピリンと、アスピリンと併用することにより血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患等を予防及び／又は治療することが可能となる物質を併用することを特徴とする血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患等の予防及び／又は治療方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは上記の課題を解決すべく鋭意努力した結果、アスピリンにカルシウムハンドリング蛋白に作用して細胞内のカルシウム濃度又は細胞内カルシウムの濃度変化速度を調節する作用を有する化合物を併用すれば、本発明の目的が達成されることを見出し、本発明を完成するに至った。【０００８】
即ち、本発明によれば、（１）アスピリンと以下の（a）〜（d）のいずれかに記載の化合物とを組み合わせてなる医薬：
（a）カルシウムハンドリング蛋白に作用して細胞内のカルシウム濃度又は細胞内カルシウムの濃度変化速度を調節する作用を有する化合物；
（ｂ）細胞内カルシウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物；
（ｃ）細胞内ナトリウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物；
（ｄ）下記一般式（Ｉ）：
【化２】
2008032814.tif 000004
（式中、Ｒ1 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、Ｃ3−Ｃ7 のシクロアルキル基、Ｃ1−Ｃ4 のハロゲン化アルキル基、ハロゲン原子、又はＣ6−Ｃ12のアリール基を表し；Ｒ2 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、又はシアノ基、ニトロ基、Ｃ1−Ｃ6 のアルコキシ基、ハロゲン原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、及びアミノ基からなる群から選ばれる１又は２以上の置換基を有していてもよいＣ7−Ｃ12のアラルキル基を表し；ｎは１から４の整数を表す。）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物が提供される。【０００９】
本発明の好ましい態様によれば、（２）カルシウムハンドリング蛋白がナトリウム／カルシウム交換系又は筋小胞体カルシウム−ＡＴＰアーゼである上記医薬；（３）アスピリンと５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物とを組み合わせてなる上記項目（１）又は（２）に記載の医薬；および（４）アスピリンと５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸・一水和物とを組み合わせてなる上記項目（１）又は（２）に記載の医薬が提供される。【００１０】
本発明の別の好ましい態様によれば、（５）血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患の予防及び／又は治療のための上記いずれかの医薬；（６）血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患が虚血性疾患である上記項目（５）に記載の医薬；および（７）血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患が心不全、心筋梗塞、脳梗塞、狭心症、又は末梢動脈閉塞症である上記項目（５）に記載の医薬が提供される。【００１１】
また、本発明のさらに別の好ましい態様によれば、（８）抗血栓薬として用いる上記項目（１）から（４）のいずれか一項に記載の医薬が提供される。【００１２】
本発明の別の態様によれば、（９）下記一般式（Ｉ）
【化３】
2008032814.tif 000005
（式中、Ｒ1 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、Ｃ3−Ｃ7 のシクロアルキル基、Ｃ1−Ｃ4 のハロゲン化アルキル基、ハロゲン原子、又はＣ6−Ｃ12のアリール基を表し；Ｒ2 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、又はシアノ基、ニトロ基、Ｃ1−Ｃ6 のアルコキシ基、ハロゲン原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、及びアミノ基からなる群から選ばれる１又は２以上の置換基を有していてもよいＣ7−Ｃ12のアラルキル基を表し；ｎは１から４の整数を表す）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物を含むアスピリンの血小板凝集抑制作用の増強剤；（１０）５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物を含むアスピリンの血小板凝集抑制作用の増強剤；および（１１）５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸・一水和物を含むアスピリンの血小板凝集抑制作用の増強剤が提供される。【００１３】
本発明のさらに別の態様によれば、（１２）アスピリンと以下の（a）〜（d）のいずれかに記載の化合物を併用することを特徴とする、血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患を予防及び／又は治療する方法：
（a）カルシウムハンドリング蛋白に作用して細胞内のカルシウム濃度又は細胞内カルシウムの濃度変化速度を調節する作用を有する化合物；
（ｂ）細胞内カルシウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物；
（ｃ）細胞内ナトリウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物；
（ｄ）下記一般式（Ｉ）：
【化４】
2008032814.tif 000006
（式中、Ｒ1 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、Ｃ3−Ｃ7 のシクロアルキル基、Ｃ1−Ｃ4 のハロゲン化アルキル基、ハロゲン原子、又はＣ6−Ｃ12のアリール基を表し；Ｒ2 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、又はシアノ基、ニトロ基、Ｃ1−Ｃ6 のアルコキシ基、ハロゲン原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、及びアミノ基からなる群から選ばれる１又は２以上の置換基を有していてもよいＣ7−Ｃ12のアラルキル基を表し；ｎは１から４の整数を表す。）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物が提供される。【００１４】
本発明の好ましい態様によれば、（１３）カルシウムハンドリング蛋白がナトリウム／カルシウム交換系又は筋小胞体カルシウム−ＡＴＰアーゼである上記方法；（１４）アスピリンと５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物とを併用することを特徴とする、上記項目（１２）又は（１３）に記載の方法；（１５）アスピリンと５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸・一水和物とを併用することを特徴とする上記項目（１２）又は（１３）に記載の方法が提供される。【００１５】
本発明の別の好ましい態様によれば、（１６）血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患が虚血性疾患である上記項目（１２）から（１５）のいずれか一項に記載の方法；および（１７）血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患が心不全、心筋梗塞、脳梗塞、狭心症、又は末梢動脈閉塞症である上記項目（１２）から（１５）のいずれか一項に記載の方法が提供される。【００１６】
本発明のさらに別の好ましい態様によれば、（１８）胸痛発作を有する患者にアスピリンを投与し、さらに同一の患者に再灌流療法を実施する際に以下の（a）〜（d）のいずれかに記載の化合物を投与する、血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患を予防及び／又は治療する方法：
（a）カルシウムハンドリング蛋白に作用して細胞内のカルシウム濃度又は細胞内カルシウムの濃度変化速度を調節する作用を有する化合物；
（ｂ）細胞内カルシウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物；
（ｃ）細胞内ナトリウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物；
（ｄ）下記一般式（Ｉ）：【００１７】
【化５】
2008032814.tif 000007
【００１８】
（式中、Ｒ1 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、Ｃ3−Ｃ7 のシクロアルキル基、Ｃ1−Ｃ4 のハロゲン化アルキル基、ハロゲン原子、又はＣ6−Ｃ12のアリール基を表し；Ｒ2 は水素原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、又はシアノ基、ニトロ基、Ｃ1−Ｃ6 のアルコキシ基、ハロゲン原子、Ｃ1−Ｃ6 のアルキル基、及びアミノ基からなる群から選ばれる１又は２以上の置換基を有していてもよいＣ7−Ｃ12のアラルキル基を表し；ｎは１から４の整数を表す。）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物；（１９）再灌流療法が経皮的冠動脈インターベンションである上記項目（１８）に記載の方法；（２０）血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患が虚血性疾患である上記項目（１８）又は（１９）に記載の方法；および（２１）血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患が心不全、心筋梗塞、脳梗塞、狭心症、又は末梢動脈閉塞症である上記項目（１８）又は（１９）に記載の方法が提供される。【００１９】
本発明の別の側面によれば、血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患の予防及び／又は治療のための医薬の製造のためのアスピリン及び上記一般式（Ｉ）で示されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体若しくはその生理学的に許容される塩、又はそれらの水和物若しくは溶媒和物の組み合わせの使用が提供される。
なお、本明細書においては便宜上「アスピリンを含む医薬」を代表例として説明するが、本発明は合剤に限定されることなく、アスピリンと前記（a）〜（d）のいずれかに記載の化合物とを併用することも本発明の範囲に包含されるものとする。
【発明の効果】
【００２０】
本発明によれば、アスピリンと前記（a）〜（d）のいずれかに記載の化合物とを組み合わせてなる医薬が提供される。本発明の医薬は血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患の予防及び／又は治療に有用であり、また本発明の医薬はアスピリンを血小板凝集抑制の目的で用いる疾患の予防及び／又は治療に有用である。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】アスピリン及びカルダレット一水和物による血小板凝抑制効果を示す。
【図２】アスピリンの抗血小板凝集活性に対するカルダレット一水和物の影響を示す。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
本発明の医薬は第１の有効成分としてアスピリン（アセチルサリチル酸：ＣＨ3ＣＯＯＣ6Ｈ4ＣＯＯＨ）を含む。【００２３】
本発明の医薬は第２の有効成分として、以下の（a）から（d）のいずれか１つを含む。
（a）カルシウムハンドリング蛋白に作用して細胞内のカルシウム濃度又は細胞内カルシウムの濃度変化速度を調節する作用を有する化合物。
（b）細胞内カルシウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物。
（c）細胞内ナトリウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物。
（d）上記一般式（Ｉ）で表されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体もしくはその塩、又はそれらの水和物もしくは溶媒和物。
また、本発明の増強剤は上記の（a）から（d）のいずれか１つを含む。【００２４】
本発明の医薬の第２の有効成分の（a）は、カルシウムハンドリング蛋白に作用して細胞内のカルシウム濃度又は細胞内カルシウムの濃度変化速度を調節する作用を有する化合物であれば特に制限されない。本明細書においてカルシウムハンドリング蛋白とは電位依存性カルシウムチャネル、ナトリウム／カルシウム交換系、ナトリウム／プロトン交換系、細胞膜カルシウム−ＡＴＰアーゼ、カルシウム放出チャンネル及び筋小胞体カルシウム−ＡＴＰアーゼの群から選ばれる蛋白のことをいう。これらのカルシウムハンドリング蛋白のうち、本発明において好ましいものとしてはナトリウム／カルシウム交換系（Circ Res., 2001, 88, 864-876）、及び筋小胞体カルシウム−ＡＴＰアーゼ（Circ Res., 1994, 74, 555-564）を挙げることができる。有効成分がカルシウムハンドリング蛋白に作用して細胞内のカルシウム濃度又は細胞内カルシウムの濃度変化速度を調節するか否かは公知の方法、例えばJ. pharmacology and experimental therapeutics. 298, 1161-1166, 2001や本明細書の参考例２に記載の方法に準じて判断することができる。【００２５】
本発明の医薬の第２の有効成分の（b）は、細胞内カルシウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物であれば特に制限されない。細胞内カルシウムイオンの過蓄積を抑制する化合物かどうかは、特開平3-7263号公報や以下に示す参考例３等に示した方法に準じて判断することができる。【００２６】
本発明の医薬の第２の有効成分の（c）は、細胞内ナトリウムイオンの過蓄積を抑制する作用を有する化合物であれば特に制限されない。細胞内ナトリウムイオンの過蓄積を抑制する化合物かどうかは、以下に示す参考例２等に示した方法に準じて判断することが可能である。【００２７】
本発明の医薬の第２の有効成分の（d）である上記一般式（Ｉ）で表される化合物は、アスピリンの血小板凝集抑制作用を増強する物質として挙げられる。以下の実施例に示すように該化合物により、アスピリンの血小板凝集抑制作用が増強されるので、アスピリンと併用することによりアスピリン用量を低く抑えることが可能となる。上記一般式（Ｉ）中、Ｒ1で定義されるＣ1−Ｃ6アルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、sec-ブチル基、 tert-ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、 tert-ペンチル基、ヘキシル基、イソヘキシル基等が挙げられる。Ｃ3−Ｃ7 のシクロアルキル基としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘプチル基等が挙げられる。Ｃ1−Ｃ4のハロゲン化アルキル基としては、例えば、トリフルオロメチル基、トリフルオロエチル基、ペンタフルオロエチル基等が挙げられる。ハロゲン原子としては、例えば、フッ素原子、塩素原子、臭素原子等が挙げられる。Ｃ6−Ｃ12のアリール基としては、例えば、フェニル基、ナフチル基等が挙げられる。【００２８】
Ｒ1の好ましい例として、水素原子、Ｃ1−Ｃ6のアルキル基、Ｃ5−Ｃ6のシクロアルキル基、トリフルオロメチル基、ハロゲン原子又はフェニル基が挙げられ、さらに好ましい例として、Ｒ1がＣ1−Ｃ3のアルキル基、シクロヘキシル基、トリフルオロメチル基、塩素原子、臭素原子又はフェニル基が挙げられ、特にメチル基又はプロピル基であることが好ましい。【００２９】
Ｒ2で定義されるＣ1−Ｃ6 のアルキル基としては、例えば、上記Ｒ1で定義したようなアルキル基が挙げられる。Ｃ7−Ｃ12のアラルキル基としては、例えば、ベンジル基、フェネチル基、ナフチルメチル基等が挙げられる。このアラルキル基は、シアノ基；ニトロ基；メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、 tert-ブトキシ基、ペンチルオキシ基、イソペンチルオキシ基、 tert-ペンチルオキシ基、ヘキシルオキシ基等のＣ1−Ｃ6のアルコキシ基；上記Ｒ1で定義したようなハロゲン原子；上記Ｒ1で定義したようなアルキル基及びアミノ基からなる群から選ばれる１又は２個以上の置換基を有していてもよい。【００３０】
Ｒ2の好ましい例としては、水素原子；Ｃ1−Ｃ3のアルキル基；又は、Ｃ1−Ｃ3のアルキル基、Ｃ1−Ｃ3のアルコキシ基及びハロゲン原子から選ばれる１若しくは２以上の置換基を有していても良いＣ7−Ｃ12のアラルキル基が、さらに好ましい例としては、Ｒ2が水素原子又は１若しくは２以上のＣ1−Ｃ3のアルコキシ基を有していても良いＣ7−Ｃ12のアラルキル基が挙げられ、特に、水素原子であることが好ましい。また、上記一般式（Ｉ）中、ｎとしては２であることが好ましい。【００３１】
上記一般式（Ｉ）で表される化合物としては、具体的には下記表１〜表９に示す化合物が挙げられる。【００３２】
【表１】
2008032814.tif 000008
【００３３】
【表２】
2008032814.tif 000009
【００３４】
【表３】
2008032814.tif 000010
【００３５】
【表４】
2008032814.tif 000011
【００３６】
【表５】
2008032814.tif 000012
【００３７】
【表６】
2008032814.tif 000013
【００３８】
【表７】
2008032814.tif 000014
【００３９】
【表８】
2008032814.tif 000015
【００４０】
【表９】
2008032814.tif 000016
【００４１】
上記表１〜９に挙げた化合物のなかで、より好ましい化合物はＲ1の置換位置が５位である化合物であり、具体的には以下の化合物が挙げられる。【００４２】
５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸；
５−トリフルオロメチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸；
５−ｎ−プロピル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸；
５−フェニル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸；
５−クロロ−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸；
５−ブロモ−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸；
５−iso−プロピル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸；
５−シクロヘキシル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸；
５−ｎ−プロピル−２−（ホモピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸；
５−ｎ−プロピル−２−[４−（２，３，４−トリメトキシベンジル）−ピペラジン−１−イル]ベンゼンスルホン酸；
５−ｎ−プロピル−２−[４−（３，４−ジメトキシベンジル）−ピペラジン−１−イル]ベンゼンスルホン酸
なお、上記の化合物のうち、特に好ましい例としては、５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸及び５−ｎ−プロピル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸が挙げられる。【００４３】
また、上記で挙げた化合物の薬学的に許容されうる塩類も本発明の範囲に包含される。なお、塩や遊離形態の化合物の他、これらの任意の水和物あるいは溶媒和物を本発明の医薬の有効成分として用いてもよい。【００４４】
本発明の医薬の第２の有効成分としては、５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸・一水和物が最も好ましいものとして挙げられる。【００４５】
上記一般式（Ｉ）で示されるアミノベンゼンスルホン酸誘導体は公知の化合物であり、例えば日本特許出願特開平３−７２６３号及び特開平９−２２１４７９号各号公報、欧州特許出願公開公報３９０６５４号及び７７９２８３号、並びに、米国特許公報５０５３４０９号及び５９９０１１３号等に記載の方法により、容易に合成することができ、当業者が容易に入手することができる化合物である。【００４６】
本発明医薬の形態は特に限定されず当業者に利用可能な種々の形態をとることができ、経口的または非経口的に投与することができる。経口投与のための剤形としては、顆粒剤、細粒剤、散剤、錠剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤又は液剤等が挙げられる。また、非経口投与のための剤形としては、注射剤、坐剤、経皮剤等が挙げられる。【００４７】
有効成分は上記剤形中において、固体、もしくは液体の医薬用担体又は賦形剤、安定剤、潤滑剤、甘味剤、保存剤、懸濁化剤等の通常用いられる医薬用添加剤とともに含まれており、治療上又は予防上の有効成分の担体成分に対する含有割合は１重量％−９０重量％の範囲が好ましい。【００４８】
用いられる固体成分の例としては、乳糖、白陶土、ショ糖、結晶セルロース、コーンスターチ、タルク、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、レシチン、塩化ナトリウム等が挙げられる。液状担体の例としては、シロップ、グリセリン、落花生油、ポリビニルピロリドン、オリーブ油、エタノール、ベンジルアルコール、プロピレングリコール、水等が挙げられる。【００４９】
投与量は、患者の症状、体重、年齢や性別等を考慮して適宜各有効成分毎に決定すればよいが、第１の有効成分であるアスピリンは一日あたり０．０１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重、第２の有効成分は５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸・一水和物で表される化合物を代表例とすると、経口剤として用いる場合、０．０１〜１０００ｍｇ／ｋｇ体重を１日１〜数回に分けて投与することができる。【００５０】
本発明の医薬は血小板凝集抑制作用を有し、血栓の形成を防止することができるので抗血栓薬として有効である。従って、本発明の医薬は血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患、例えば、虚血性疾患、より具体的には心不全、心筋梗塞、脳梗塞、狭心症、動脈硬化症、末梢動脈閉塞症から成る群から選ばれる疾患の予防及び／又は治療に有効である。
また、本発明の医薬はアスピリンの血小板凝集抑制作用を増強することができるので、アスピリンを血小板凝集抑制の目的で用いる疾患、例えば、心不全、心筋梗塞、脳梗塞、狭心症、動脈硬化症、末梢動脈閉塞症から成る群から選ばれる疾患の予防及び／又は治療において併用されるアスピリンによる該疾患の予防及び／又は治療効果を増強することができる。さらには再灌流療法（冠動脈バイパス、経皮的冠動脈インターベーション、血栓溶解療法等）を実施する上記疾患治療にも有効である。【００５１】
本発明の医薬の投与経路は特に限定されず、経口的又は非経口的に投与することができる。例えば、上記疾患の発症を防ぐために予防的に本発明の医薬を経口投与しておくことができ、注射若しくは点滴などの非経口的投与によって手術中又はその前後に予防的に投与することもできる。また、上記疾患を発症した患者に対しては、症状の悪化の防止ないしは症状の軽減などを目的として、静脈内、動脈内、又は心臓内に注射により投与することもできる。【００５２】
本発明の医薬の投与形態は、特に限定されず、投与時に第１の有効成分であるアスピリンと第２の有効成分とが組み合わされていればよい。このような投与形態としては、例えば、（１）第１の有効成分と第２の有効成分とを同時に製剤化して得られる単一の製剤の投与、（２）第１の有効成分と第２の有効成分とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での同時投与、（３）第１の有効成分と第２の有効成分とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の同一投与経路での逐次投与、（４）第１の有効成分と第２の有効成分とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での同時投与、（５）第１の有効成分と第２の有効成分とを別々に製剤化して得られる２種の製剤の異なる投与経路での逐次投与等がある。また、逐次投与の場合、第１の有効成分、第２の有効成分の投与の順はいずれが先でもよい。具体的には第１の有効成分と第２の有効成分を別々に錠剤などの経口剤とし、該経口剤を同時に又は逐次的に投与することが例示される。【００５３】
本発明の「組み合わせてなる」医薬とは、第１の有効成分であるアスピリンと第２の有効成分の化合物とが組み合わされる投与形態を有する医薬をいい、上記（１）から（５）の投与形態による場合を含む。
同様に本発明の方法について、「併用する」というときには、上記（１）から（５）の投与形態による場合を含む。
【実施例】
【００５４】
以下、本発明を実施例によりさらに具体的に説明するが、本発明は下記の実施例により限定されるものではない。
なお、以下の実施例で示した化合物は、５−メチル−２−（ピペラジン−１−イル）ベンゼンスルホン酸・一水和物（以下、カルダレット一水和物という。）であり、特開平９−２２１４７９号公報の例１に記載の方法に従って製造したものを使用した。【００５５】
例１
（実験方法）
体重262.8〜299.6ｇの雄性Sprague-Dawleyラット（ＳＬＣジャパン）を使用した。動物は実験前１６時間絶食した。
エーテル麻酔したラットの腹部大動脈を穿刺後、血液試料を3.8％クエン酸ナトリウム溶液（血液の0.1容量）中に採取した。多血小板血漿（Platelet-rich plasma;ＰＲＰ)を室温にて１５分間１１００rpmで遠心分離（HITACHI, SCT5BAを使用)することによって得、また乏血小板血漿（Platelet-poor plasma;ＰＰＰ)を室温にて１０分間３０００rpmで遠心分離することによって得た。実験には３０匹のラットを使用し、一つのＰＲＰ試料は５匹のラットから蓄積したＰＲＰを含む。【００５６】
上記血小板懸濁液（ＰＲＰ試料）に、メタノールに溶解したアスピリンを３×１０-5Ｍ、１×１０-4Ｍ、３×１０-4Ｍの最終濃度で加えた。この溶液に、イオン交換水のみ（ベヒクル）、あるいはイオン交換水に溶解したカルダレット一水和物を１×１０-10Ｍ、１×１０-8Ｍ、１×１０-6Ｍの最終濃度で加えた。薬剤（カルダレット一水和物）又はベヒクルを混合した上記血小板懸濁液（ＰＲＰ試料）１００μlを絶えず攪拌しながら３７℃にて１分間インキュベートし、その後凝集をコラーゲンを１１μl加えることによって誘導した。
試料中のコラーゲンに対する反応性の潜在的な違いを考慮しつつ最大血小板凝集反応を示すコラーゲン最小濃度を各ＰＲＰ試料に対して測定した。血小板凝集はボーン（Born）及びクロス（Cross）の比濁法(Born, G V R., Cross, M J., J.Physiol., 168, 178-195, 1963)によってHEMA TRACER 801 (MC MEDICAL製)上でコラーゲン刺激後６分間モニタリングした。ＰＰＰをブランクとして用いた。【００５７】
凝集の程度は最大凝集振幅のパーセンテージで表した。結果は下式に従ってコラーゲン誘導凝集の阻害率（％）として表した。
阻害率（％）＝対照の最大凝集振幅−薬剤の最大凝集振幅／対照の最大凝集振幅
×１００
薬剤（ＭＣＣ−１３５）の効果を９５％信頼区間（95％ C.I)によって分析した。全てのデータは平均値±標準誤差（MEAN±SEM）で表した。【００５８】
（実験結果）
図１に、アスピリン及びカルダレット一水和物による血小板凝集抑制効果を示す。アスピリン単独ではコラーゲンによって誘導された血小板凝集に対して用量依存的な抑制作用が見られたのに対し、カルダレット一水和物単独ではそのような抑制作用は認められなかった（図１）。
図２に、アスピリンの抗血小板凝集活性に対するカルダレット一水和物の影響を示す。カルダレット一水和物はアスピリンの抗血小板凝集活性を向上させた（図２）。一方、カルダレット一水和物は低濃度のアスピリン（３×１０-5Ｍ、１×１０-4Ｍ）の抗血小板凝集活性を向上させたが、高濃度のアスピリン（３×１０-4Ｍ）ではその活性向上は認められなかった（表１０）。この結果は、カルダレット一水和物にはアスピリンの血小板凝集抑制能を増強させる効果があり、カルダレット一水和物を併用すればアスピリン用量を低下できる可能性が示唆される。【００５９】
【表１０】
2008032814.tif 000017
【００６０】
参考例１  心筋細胞内ナトリウムイオン含量増加を抑制する化合物の評価方法
（実験方法）
ラットの心臓を摘出し、ランゲンドルフ法に従ってクレブス（Krebs）緩衝液 (in mM; NaCl 119, KCl 4.6, MgSO4・7H2O 1.2, CaCl2・2H2O 1.3, NaHCO3 25, KH2PO4 1.2, グルコース 11; pH 7.4, 37(C)で灌流した。心尖に糸を縫いつけ、その端を張力トランスデューサーに接続して収縮張力を測定した。標本を安定化させた後、灌流圧を低下させることにより心筋虚血を誘発した（４５分間）。再灌流３０分後に心臓を硝酸中で融解し、原子吸光分析により心室の総ナトリウム含量を測定した。実験の間中収縮張力を測定し、実験開始時の収縮張力に対する、再灌流３０分後の時点での収縮張力の回復率を心臓収縮性の指標として用いた。【００６１】
（結果）
結果を下記表１１に示す。表中、＊＊は、対照に対するダネット（Dunnett）の多重比較検定によるＰが０．０１未満、＊＊＊は対照に対するダネットの多重比較検定によるＰが０．００１未満を示し、＃＃は、正常に対するｔ検定によるＰが０．０１未満、＃＃＃は正常に対するｔ検定によるＰが０．００１未満を示す。
虚血・再灌流心（対照）では正常心と比較して心室総ナトリウム含量の増加（ナトリウムオーバーロード）と収縮張力回復率の低下が観察された。再灌流液中に本発明化合物を添加すると、虚血再灌流により引き起こされた心室ナトリウム含量増加は抑制され、収縮張力回復率低下は改善された。アミロライド（Amiloride、ナトリウム・プロトン交換系阻害薬、シグマ社より購入）は高用量で収縮張力回復率低下を改善したものの、心室ナトリウム含量増加に対しては影響を及ぼさなかった。【００６２】
【表１１】
2008032814.tif 000018
【００６３】
上記の結果より、カルダレット一水和物は虚血・再灌流により誘発した心筋細胞内ナトリウムイオン含量増加の抑制に有効であることが示された。【００６４】
参考例２  心筋細胞内カルシウム含量増加を抑制する化合物の評価方法
（実験方法）
ラットの心臓を摘出し、ランゲンドルフ法に従ってクレブス緩衝液 (in mM; NaCl 119, KCl 4.6, MgSO4・7H2O 1.2, CaCl2・2H2O 1.3, NaHCO3 25, KH2PO4 1.2, グルコース 11; pH 7.4, 37(C)で灌流した。心尖に糸を縫いつけ、その端を張力トランスデューサーに接続して収縮張力を測定した。モネンシン（5μM；ナトリウム・イオノフォア）を含む灌流液で１０分間灌流した後、冠灌流量を０にして虚血を誘発した（１５分間）。再灌流３０分後に心臓を硝酸中で融解し、原紙吸光分析により心室の総カルシウム含量を測定した。実験の間中収縮張力を測定し、実験開始時の収縮張力に対する、再灌流３０分後の時点での収縮張力の回復率を心臓収縮性の指標として用いた。【００６５】
（結果）
結果を下記表１２に示す。表中、＊＊は、対照に対するダネットの多重比較検定によるＰが０．０１未満、＊＊＊は対照に対するダネットの多重比較検定によるＰが０．００１未満を示す。
モネンシン処理と虚血・再灌流の組み合わせた心臓（対照）においては、正常灌流心臓（正常）と比べて心室総カルシウム含量の増加と収縮張力回復率の低下が観察された。ここで増加したカルシウム含量は細胞内ナトリウム依存性であることより、ナトリウム・カルシウム交換系を介して流入したものであると考えられた。また、収縮張力回復率の低下は、モネンシンが無い条件では小さいことから、カルシウム含量増加と関連した変化であると考えられた。本発明化合物は、モネンシン処理及び虚血再灌流により引き起こされた心室カルシウム含量増加並びに収縮張力回復率低下を改善した。ジルチアゼム（Diltiazem、カルシウム拮抗薬、シグマ社より購入）及びアミロライドはこれらの作用を示さなかった。【００６６】
【表１２】
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【００６７】
上記の結果より、カルダレット一水和物は、ナトリウム・カルシウム交換系の阻害により、ナトリウム負荷並びに虚血・再灌流により誘発した心筋細胞内カルシウム含量増加の抑制に有効であることが示された。
【産業上の利用可能性】
【００６８】
本発明によれば、アスピリンと前記（a）〜（d）のいずれかに記載の化合物とを組み合わせてなる医薬が提供される。本発明の医薬は血栓もしくは塞栓の形成に伴う疾患又は血栓もしくは塞栓の形成により惹起される疾患の予防及び／又は治療に有用であり、また本発明の医薬はアスピリンを血小板凝集抑制の目的で用いる疾患の予防及び／又は治療に有用である。
本出願は、日本で出願された特願２００６−２４８８９０を基礎としており、その内容は本明細書にすべて包含されるものである。
【図１】
2008032814.tif 000025
【図２】
2008032814.tif 000026
【国際調査報告】
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