【手続補正書】
【提出日】平成15年8月27日(2003.8.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】Ｆ−１８陽電子放出トモグラフィー用のタン白及びペプチドのフッ素化方法
【特許請求の範囲】
【請求項１】  チオール含有ペプチドをフッ素−１８（Ｆ−１８）により放射標識する方法であって、遊離チオール基を含んでなるペプチドと一般式
18Ｆ−（ＣＨ2）m−ＣＲ1Ｒ2−（ＣＨ2）n−Ｘ
（式中、ｎは０、１または２であり、
ｍは０、１または２であり、
ｎ＋ｍは０、１または２であり、
Ｘはシアノ、ヨーダイド、ブロマイド、クロライド、アザイド、トシレート、メシレート、ノシレート、トリフレート、非置換マレイミド、一つまたは二つのアルキル基で置換されたマレイミド、及びスルホネート基で置換されたマレイミドからなる群から選ばれ、
Ｒ1及びＲ2は、同一あるいは異なり、ヨーダイド、ブロマイド、クロライド、アザイド、トシレート、メシレート、ノシレート、トリフレート、水素、−ＣＯＮＨ2、カルボキシル、ヒドロキシル、スルホン酸、３級アミン、４級アンモニウム、非置換マレイミド、一つまたは二つのアルキル基で置換されたマレイミド、３−スルホ−マレイミド、非置換アルキル、置換アルキル、−ＣＯＯＲ’、−ＣＯＮＲ’2、ＣＯＲ’からなる群から選ばれ、ここで、置換アルキルの置換基は、−ＣＯＮＨ2、カルボキシル、ヒドロキシル、スルホン酸、３級アミン及び４級アンモニウムからなる群から選ばれ、Ｒ’はＣ1−Ｃ6アルキルまたはフェニルである）
を有する標識試剤とを反応させることを含んでなる方法。
【請求項２】  ａ）患者の標的組織に特異的である少なくとも一つのアームとＦ−１８により標識されたペプチドまたはＦ−１８により標識されたペプチドに共役した低分子量のハプテンに特異的である少なくとももう一つのアームを含んでなる二特異的な抗体または抗体フラグメントを患者に投与し、二特異的な抗体または抗体フラグメントを標的組織に結合せしめ、非標的の二特異的な抗体または抗体フラグメントを除去し、
ｂ）Ｆ−１８により標識されたペプチドまたはそれと共役したハプテンを患者に投与し、Ｆ−１８により標識されたペプチドまたはそれと共役したハプテンを二特異的抗体または抗体フラグメントに結合せしめ、非結合のＦ−１８により標識されたペプチドまたはそれと共役したハプテンを除去し、
ｃ）Ｆ−１８により標識されたペプチドを検出し、それによって標的組織を検出する
ことを含んでなる組織を検出する方法。
【請求項３】  別々の容器に収容した、
Ｆ−１８により標識されたペプチドまたはそれと共役したハプテンと、
患者の標的組織に特異的である少なくとも一つのアームとＦ−１８により標識されたペプチドまたはＦ−１８により標識されたペプチドに共役した低分子量のハプテンに特異的である少なくとももう一つのアームを含んでなる二特異的な抗体または抗体フラグメントと
を含む患者の組織を検出する方法に使用されるキット。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
発明の背景
発明の分野
本発明は、タン白及びペプチドをフッ素−１８（Ｆ−１８）により放射標識する方法に関する。特に、タン白及びペプチド中に含有されるチオール基と、チオールと反応性のある基も有するＦ−１８を結合したラベル化剤を反応させることによって、タン白及びペプチドがＦ−１８により放射標識される。得られるＦ−１８によりラベルされたタン白及びペプチドは、臨床の陽電子放出トモグラフィーにより標的組織をイメージングするのに有用である。
【０００２】
関連技術の説明
陽電子放出トモグラフィー（ＰＥＴ）は、人間の病気を視覚化するための高分解能、非侵襲的なイメージング手法である。ＰＥＴにおいては、陽電子消滅崩壊時に生成する５１１ｋｅＶのガンマフォトンが検出される。臨床の現場においては、フッ素−１８（Ｆ−１８）は、最も広く使用される陽電子放出核種の一つである。Ｆ−１８は、１１０分の半減期（ｔ1/2）を有し、６３５ｋｅＶのエネルギーでβ+粒子を放出する。その存在比は９７％である。
【０００３】
Ｆ−１８の短い半減期により、抗体、抗体フラグメント、組換え抗体構成体及び長寿命の受容体標的ペプチド等の長寿命の特異的な標的ベクターと共にＦ−１８を使用することは制約あるいは排除されてきた。加えて、このような有機の標的ベクターに無機フルオライド種を結合するには、複雑な化学が必要とされる。典型的な合成法としては、中間体が放射フッ素化され、Ｆ−１８ラベルされた中間体がタン白のアミノ基に結合するのに精製される。例えば、Ｌａｎｇら，Ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｌ．，４５（１２）：１１５５−６３（１９９４）、Ｖａｉｄｙａｎａｔｈａｎら，Ｂｉｏｃｏｎｊ．Ｃｈｅｍ．，５：３５２−５６（１９９４）を見られたい。
【０００４】
これら方法は、実施するのが冗長で、特別な専門的な化学者の努力を必要とする。これらは、臨床の現場で使用するキット調合物に合わない。普通、中間体の多段の精製を必要とし、タン白のリジン残基への結合を含めて、最終ステップは、通常３０−６０％の収率の結果になり、患者への投与に先立ち更なる精製ステップが必要となる。加えて、これらの方法は、結果として、放射性金属に若干類似して、腎臓に蓄積するフルオライド標的種を生成する。
【０００５】
18Ｆ−フルオロヨードメタン（18ＦＣＨ2Ｉ）は有機中間体のフッ素化用の有用な中間体であることが最近報告された。Ｚｈｅｎｇら，Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．，３８：１７７頁（要約７６１）（１９９７）。この方法においては、ジヨードメタンがアセトニトリル溶媒中の室温反応によりＦ−１８イオンでフッ素化され、結果として４０％迄の収率をもたらす。次に、無水アセトニトリル中の種々の求核種を入れた反応バイアル中に18ＦＣＨ2Ｉを蒸留し、８０℃で１５分間反応させる。カルボキシレート、チオレート、フェノレート、特にアミンによる求核的攻撃によって、１０から３５％の総合収率で、18ＦＣＨ2Ｉの残存ヨードが置換される。反応生成物は、逆相ＨＰＬＣにより精製される。この方法により、フルオロメチルジエチルアミン、フルオロメチルベンゾエート、フルオロメチルベンジルチオエーテル及びフルオロメチル４−（２−ヒドロキシ−３−アミノプロポキシ）−カルバゾールが製造された。
【０００６】
上述のように、タン白をベースにした標的ベクターをＦ−１８により標識するのに現在入手できる方法は適当でない。それゆえ、タン白、抗体、抗体フラグメント、及び受容体標的のペプチド等のペプチド含有標的ベクター中にＦ−１８放射性核種を包含させ、日常使用する臨床の電子放出トモグラフィーにおいてこのような標的ベクターを使用できるようにする簡単で、効率的な方法に対するニーズが存在する。
【０００７】
発明の要約
本発明は、ペプチド含有標的ベクター中にＦ−１８放射性核種を包含させる方法を提供する。
【０００８】
本発明の一つの実施の形態によれば、チオール含有ペプチドをフッ素−１８（Ｆ−１８）により放射標識する方法であって、遊離チオール基を含んでなるペプチドと一般式
18Ｆ−（ＣＨ2）m−ＣＲ1Ｒ2−（ＣＨ2）n−Ｘ
を有する標識試剤とを反応させることを含んでなる方法が提供される。式中、
ｎは０、１または２であり、
ｍは０、１または２であり、
ｎ＋ｍは０、１または２であり、
Ｘは、ヨーダイド、ブロマイド、クロライド、アザイド、トシレート、メシレート、ノシレート、トリフレート、非置換マレイミド、一つまたは二つのアルキル基で置換されたマレイミド、及びスルホネート基で置換されたマレイミドからなる群から選ばれ、
Ｒ1及びＲ2は、同一あるいは異なり、ヨーダイド、ブロマイド、クロライド、アザイド、トシレート、メシレート、ノシレート、トリフレート、水素、−ＣＯＮＨ2、カルボキシル、ヒドロキシル、スルホン酸、３級アミン、４級アンモニウム、非置換アルキル、置換アルキル、−ＣＯＯＲ’、−ＣＯＮＲ’ 2、ＣＯＲ’からなる群から選ばれ、ここで、置換アルキルの置換基は、−ＣＯＮＨ2、カルボキシル、ヒドロキシル、スルホン酸、３級アミン及び４級アンモニウムからなる群から選ばれ、Ｒ’はＣ1−Ｃ6アルキルまたはフェニルである。
【０００９】
別な実施の形態によれば、チオール含有ペプチドをＦ−１８により放射標識する方法であって、遊離チオール基を含んでなるペプチドとＦ−１８フッ素化されたアルケンであって、２個の二重結合炭素原子の少なくとも一つが、ヨーダイド、ブロマイド、クロライド、アザイド、トシレート、メシレート、ノシレート及びトリフレートからなる群から選ばれる少なくとも一つの脱離基を保持するアルケンを反応させることを含んでなる方法が提供される。
【００１０】
別な実施の形態によれば、標的組織に特異的である少なくとも一つのアームとＦ−１８により標識されたペプチドまたはＦ−１８により標識されたペプチドに共役した低分子量のハプテンに特異的である少なくとももう一つのアームを含有する二特異的抗体（ｂｓＭＡｂ）または二特異的抗体フラグメント（ｂｓＦａｂ）を用いて、上述のようＦ−１８により放射標識されたペプチドが標的組織に送達される。
【００１１】
この方法においては、ｂｓＭＡｂ及びｂｓＦａｂが患者に投与され、標的組織に局在化される。すこし経った後（未結合のｂｓＭＡｂまたはｂｓＦａｂを除去した後）、Ｆ−１８により標識されたペプチドまたはそれに共役したハプテンが患者に投与される。ｂｓＭＡｂまたはｂｓＦａｂの少なくとも一つのアームは、Ｆ−１８により放射標識されたペプチドまたはそれに共役したハプテンに特異的であるので、Ｆ−１８により標識されたペプチドもまた標的に局在化される。未結合のＦ−１８により標識されたペプチドまたはそれに共役した未結合のハプテンを除去した後、標的を日常使用する臨床の陽電子放出トモグラフィーにより可視化させる。
【００１２】
ｂｓＭＡｂまたはｂｓＦａｂは、理想的にはモノクローナルであり、ヒト化されている。好ましくは、Ｆ−１８により放射標識されたペプチドはチオール基を含有している。好適なペプチドの例は、Ｘ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｘ）−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ（式中、Ｘは遊離あるいは保護されたアミノ酸基である）、Ａｃ−Ｃｙｓ（Ｙ）−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｃｙｓ（ｙ）−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨ（式中、Ｙは遊離あるいは保護されたチオール基である）、及びＡｃ−Ｇｌｙ−Ｄ−ヨード−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ａｃ）−Ｇｌｙ−Ｄ−ヨード−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨである。ハプテンは、磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）に有用な、例えば、マンガン、鉄、またはガドリニウムを含んでなる金属キレート錯体であってもよい。
【００１３】
ｂｓＭＡｂ、ｂｓＦａｂ及び上述の関連の方法は、ここでは、引用として包含されている米国仮出願番号６０／０９０，１４２（題名「二特異的抗体と共に使用する新規ペプチドをベースにした薬剤の製造と使用」、出願１９９８年６月２２日）に記述されている。
【００１４】
この明細書に含まれる教示に鑑みれば、本発明のこれら及び他の目的及び側面は当業者には明白になるであろう。
【００１５】
発明の詳細な説明
本発明は、タン白、抗体、抗体フラグメント、及び受容体標的のペプチド等のペプチド含有の標的ベクター中にＦ−１８放射性核種を包含させる、簡単で、効率的な方法を提供する。便宜上、「ペプチド」という語は、以下及びクレームにおいて、タン白、抗体、抗体フラグメント、及び受容体標的のペプチドを指すのに使用される。本発明の方法により、このような標的ベクターが日常使用する臨床の陽電子放出トモグラフィーに使用可能となる。
【００１６】
ペプチド上に存在するすべての求核試剤のうち、遊離チオール基のみが中性のｐＨと温和な温度で迅速にアルキル化される。本発明は、遊離チオール基のこの独特の性質を利用し、チオール含有ペプチドをＦ−１８により標識する方法を提供する。
【００１７】
一つの実施の形態によれば、本発明の方法は、次の反応
【化１】
2001515843.tif 000001
を含んでなる。式中、
ｎは０、１または２であり、
ｍは０、１または２であり、
ｎ＋ｍは０、１または２であり、
Ｘは、ヨーダイド、ブロマイド、クロライド、アザイド、トシレート、メシレート、ノシレート、トリフレート等の置換性脱離基である。あるいは、Ｘは、マレイミド、例えば、一つまたは二つのアルキル基またはスルホネート基で置換された置換マレイミドである。好適な置換マレイミドの例には、３−メチルマレイミド、３，４−ジメチルマレイミド及び３−スルホ−マレイミドが含まれる。Ｒ1及びＲ2は、同一あるいは異なり、以下に更に詳細に議論されるように、試剤にもたらされる望ましい物理的性質によって選ばれる。一般に、Ｒ1及びＲ2は、Ｘと同じグループから選ぶことができ、Ｘと同一あるいは異なってもよい。あるいは、Ｒ1及びＲ2は、各々独立に、水素、置換あるいは非置換アルキルまたは直鎖あるいは分岐アルキル、またはエステル、アミドまたはケトン、例えば、−ＣＯＯＲ’、−ＣＯＮＲ’2、またはＣＯＲ’（式中、Ｒ’はＣ1−Ｃ6アルキルまたはフェニルである）等のカルボニル性官能基であってもよい。好適なＲ1及びＲ2またはそれに付いた置換基の例には、−ＣＯＮＨ2、カルボキシル、ヒドロキシル、スルホン酸、３級アミン及び４級アンモニウム等の水溶性を付与する基が含まれる。
【００１８】
別な実施の形態によれば、ペプチドは、２個の二重結合炭素原子の少なくとも一つが、ヨーダイド、ブロマイド、クロライド、アザイド、トシレート、メシレート、ノシレート及びトリフレートからなる群から選ばれる少なくとも一つの脱離基を保持するＦ−１８フッ素化されたアルケンにより標識される。好適なフッ素化されたアルケンの例には、18Ｆ−ＣＨ＝ＣＩ2、18Ｆ−ＣＩ＝ＣＨ2、または18Ｆ−ＣＩ＝ＣＩ2が含まれる。標識化反応は、上述のものに類似である。
【００１９】
本発明の方法は、いずれのチオール含有ペプチドでも標識するのに使用することができる。特に興味のあるのは、標的ベクターとして有用なペプチドである。このような標的ベクターの例には、抗体、Ｆ（ａｂ’）2、Ｆ（ａｂ）2、Ｆａｂ’及びＦａｂフラグメント、ｓＦｖｓ等の単一鎖のサブフラグメント、ｄｓＦｖｓ等の２価の構成体、及び一つまたはそれ以上の遊離チオール基を含有するポリペプチドが含まれる。Ｃｈｏｉら，Ｃａｎｃｅｒ．Ｒｅｓ．，５５：５３２３−２９（１９９５）を見られたい。更なる例には、ＩｇＧ3またはＩｇＧ3−Ｆ（ａｂ’）2のフレームワークを含んでなる抗体等の抗体構成体が含まれる。ＩｇＧ3は、還元されて、多重の遊離チオール基を生成することができる、多重のヒンジ領域のダイサルファイド基を有する。
【００２０】
本発明によれば、最初に、ペプチドを変成し、当業者に公知の方法により遊離チオール基を付加することにより、元々、遊離チオール基を含まないペプチドを標識することができる。例えば、２−イミノチオラン等の試剤により、ペプチドをチオール化することができ、あるいはシスチン残基等の固有結合を還元することができる。リジン残基をＮ−サクシンイミジル−３−（２ピリジルチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）によりアシル化し、続いて付随されたダイサルファイド結合を制御して還元する等、双方の変成の組み合わせを行うこともできる。
【００２１】
本発明の一つの実施の形態として、ペプチドはＦａｂまたはＦａｂ’フラグメントである。これらのペプチドは、抗原標的サイトに特異的で、遠いサイトのヒンジ領域に遊離チオール基を有する。
【００２２】
チオール基含有ポリペプチドとの反応を最適化するために、標識試剤は、好ましくは次の物理的及び化学的性質を有する。
（１）試剤がＦ−１８から容易で迅速に合成される。
【００２３】
（２）試剤が中性（４−８）のｐＨ範囲で適当な水溶性を有する。「適当な水溶性」とは、この試剤が、使用されるチオール基含有ポリペプチドの化学量論的な量に匹敵する濃度迄容易に溶解するという意味である。例えば、抗体を標識するならば、通常の抗体濃度は、約３×１０ー4Ｍのモル濃度に相当する約５０ｍｇ／ｍＬである。この例においては、この試剤は約３×１０ー4Ｍの濃度で溶解しなければならない。更に低分子量のペプチド種については、更に多くのペプチドが沈殿なしに溶解し、更に多くの試剤を使用することができる。Ｆ−１８はキャリアフリーなので、更に低濃度のフッ素化剤も効果的である。
【００２４】
（３）この試剤の活性ハライドは、中性のｐＨ（４−８）で水により直ちに加水分解されない。かくして、ハライドは、Ｈ2ＯよりもＳＨまたはＳ-と更に容易に反応しなければならない。この試剤が水（あるいは中性の緩衝液）により直ちに加水分解されない限り、チオール基の選択性及び反応性によって、効率的なペプチドの標識反応が確保される。
【００２５】
（４）遊離チオール基によって、脱離基を迅速に、特異的に、ほぼ定量的に置換することができる。求核試剤により攻撃される炭素原子において炭素カチオン中心を発達させることができる。例えば、Ｒ1及びＲ2は電子吸引基とすることができる。−Ｃ−Ｘ官能基にアルファ位の電子吸引基の存在により、また、Ｘ部分の迅速な置換が促進される。有用な電子吸引基の例には、ＣＯＲ’、−ＣＯＮＲ’、−ＣＯ2Ｒ’−ＣＯＯＨ、ＣＯＮＨ2、及び−ＳＯ3Ｈ（式中、Ｒ’はＣ1−Ｃ6アルキルまたはフェニルである）が含まれる。
【００２６】
加えて、標識試剤中に一つ以上の脱離基が存在することは有利である。同一炭素原子に付いた、ヨード基等の多重の脱離基は立体ひずみを生じる。反応が単一の脱離基の脱離を含んでなる場合には、この立体ひずみが解除され、Ｘ基のチオールの置換の反応動力学が速められる。かくして、本発明の一つの実施の形態として、標識試剤は２つのヨード基等の少なくとも２つの脱離基を含んでなる。
【００２７】
かくして、本発明の一つの実施の形態として、ペプチドは一般式
18Ｆ−（ＣＨ2）m−ＣＲ1Ｒ2−（ＣＨ2）n−Ｘ
の標識試剤により標識される。式中、ｎは０、１または２であり、ｍは０、１または２であり、ｎ＋ｍは０、１または２であり、Ｘはヨーダイド、ブロマイド、クロライド、アザイド、トシレート、メシレート、ノシレート、トリフレート等の置換性脱離基である。あるいは、Ｘは、マレイミド、例えば、一つまたは二つのアルキル基で置換された置換マレイミドである。好適な置換マレイミドの例には、３−メチルマレイミド、３，４−ジメチルマレイミド及び３−スルホ−マレイミドが含まれる。Ｒ1及びＲ2は、同一あるいは異なり、以下に更に詳細に議論されるように、試剤にもたらされる望ましい物理的性質によって選ばれる。一般に、Ｒ1及びＲ2は、Ｘと同じグループから選ぶことができ、Ｘと同一あるいは異なってもよい。あるいは、Ｒ1及びＲ2は、各々独立に、水素、置換あるいは非置換アルキルまたは直鎖あるいは分岐アルキル基、またはエステル、アミドまたはケトン、例えば、−ＣＯＯＲ’、−ＣＯＮＲ’2、またはＣＯＲ’（式中、Ｒ’はＣ1−Ｃ6アルキルまたはフェニルである）等のカルボニル性官能基であってもよい。好適なＲ1及びＲ2またはそれに付いている置換基の例には、−ＣＯＮＨ2、カルボキシル、ヒドロキシル、スルホン酸、３級アミン及び４級アンモニウム等の水溶性を付与する基が含まれる。
【００２８】
好適な標識試剤の例には、18Ｆ−ＣＩ3、18Ｆ−ＣＨＩ2、18Ｆ−ＣＩ2ＣＯＯＨ、18Ｆ−ＣＩ2ＣＯＯＣＨ3、18Ｆ−ＣＩ2ＣＨ2ＯＨ、18Ｆ−ＣＨＩＣＨ2ＯＨ、18Ｆ−ＣＨＩＣＯＯＣＨ3、18Ｆ−ＣＩ2ＣＨ2ＣＯＯＨ、18Ｆ−ＣＩ2ＣＨ2Ｎ+（ＣＨ3）3、18Ｆ−ＣＩ2ＣＨ2マレイミド、18Ｆ−ＣＩ2ＣＯＮＨ2、18Ｆ−ＣＩ2ＣＯ2ＣＨ3、18Ｆ−ＣＨＢｒ2、18Ｆ−ＣＢｒ2ＣＨ2ＣＨ2ＳＯ3Ｈ、18Ｆ−ＣＨ2ＣＩ2ＣＯＯＨ、18Ｆ−ＣＨ2ＣＩ2ＣＯＮＨ2、18Ｆ−ＣＨＩＣＯ2ＣＨ3、18Ｆ−ＣＩ2ＣＯＮＨ2、18Ｆ−ＣＨＩＣＯＮＨ2、18Ｆ−ＣＢｒ2ＣＨ2ＯＨ、ＣＦ3ＣＯＣＩ2−18Ｆ、ＣＨ3ＣＯＣＢｒ2−18Ｆ、18Ｆ−ＣＨＢｒＣＮ、18Ｆ−ＣＩ2ＣＨＣＮ、ＣＢｒＦ2−18Ｆ、18Ｆ−ＣＢｒ（ＣＯＮＨ2）2及びＣ6Ｈ5−ＣＯＣＢｒ2−18Ｆが含まれる。他の好適な標識試剤は、当業者には明白である。
【００２９】
標識試剤は、対応する化合物のＦ−１８フッ素化により製造することができる。次は、フッ素化して、上述の標識試剤を製造することができる化合物の例である。ＣＩ4、ＣＨＩ3、ＣＨＩ2ＣＯＯＣＨ3、ＣＩ3ＣＯＯＨ、ＣＩ3ＣＯＯＣＨ3、ＣＩ3ＣＨ2ＯＨ、ＣＨＩ2ＣＨ2ＯＨ、ＣＩ3ＣＨ2ＣＯＯＨ、ＣＩ3ＣＨ2Ｎ+（ＣＨ3）3、ＣＩ3ＣＨ2−マレイミド、ＣＩ3ＣＯＮＨ2、ＣＩ3ＣＯＣＨ3、ＣＨＩＢｒ2、ＣＩＢｒ2ＣＨ2ＣＨ2ＳＯ3Ｈ、ＣＨ2ＣＩ3ＣＯＯＨ、ＣＨ2ＣＩ3ＣＯＮＨ2、ＣＨＩ2ＣＯ2ＣＨ3、ＣＩ3ＣＯＮＨ2、ＣＨＩ2ＣＯＮＨ2、ＣＢｒ3ＣＨ2ＯＨ、ＣＦ3ＣＯＣＩ3、ＣＨ3ＣＯＣＢｒ3、Ｂｒ2ＣＨＣＮ、ＣＩ3ＣＨＣＮ、ＣＢｒ2Ｆ2、ＣＢｒ2（ＣＯＮＨ2）2、Ｃ6Ｈ5ＣＯＣＢｒ3である。他の好適な化合物は、当業者には明白である。
【００３０】
別な実施の形態によれば、標識試剤は、２個の二重結合炭素原子の少なくとも一つが、ヨーダイド、ブロマイド、クロライド、アザイド、トシレート、メシレート、ノシレート及びトリフレートからなる群から選ばれる少なくとも一つの脱離基を保持するＦ−１８フッ素化されたアルケンである。好適なフッ素化されたアルケンの例には、18Ｆ−ＣＨ＝ＣＩ2、18Ｆ−ＣＩ＝ＣＨ2、及び18Ｆ−ＣＩ＝ＣＩ2が含まれる。これらの標識試剤は、ＩＣＨ＝ＣＩ2、ＣＩ2＝ＣＨ2、ＣＩ2＝ＣＩ2等の対応する化合物のＦ−１８フッ素化により製造することができる。本発明により有用な他のフッ素化されたアルケンは、当業者には明白である。
【００３１】
Ｆ−１８は、Ｏ−１８富化された水にプロトンを衝突させた後、サイクロンから得られる。Ｈ−18Ｆを含有する富化された水を、カリウムまたは別の一価イオン等、いずれかのアルカリ金属（Ｍ）の対イオンを有する塩基で中和し、水を蒸発、除去すると、残渣Ｍ−18Ｆが得られ、更に使用するために有機溶媒に抽出される。一般に、対イオンは、フッ素イオンを有機相中でハロゲンと迅速に反応させるように選ばれる。カリウムが、セシウムよりも安価なために、一般に対イオンとして使用される。しかしながら、キャリアーなしのＦ−１８については、わずかな量の対イオンを必要とし、対イオンのコストは大部分無視し得る。
【００３２】
本発明によれば、カリウムが対イオンとして有用であるが、セシウムは、大きなイオンであり、より拡散した電荷を持つために、カリウムよりも好ましい。従って、セシウムは、小さなフルオライド原子とより緩やかな相互作用を有し、それゆえ、フルオライドの求核的性質を妨害しない。類似の理由により、カリウムはナトリウムよりも好ましく、一般に、本発明によるＩａイオンの対イオンとしての好適性は、周期律表を下降するにつれて増大する。銀等のＩｂ族の試剤も、本発明による対イオンとして有用である。更に、テトラアルキルアンモニウム塩等の有機の相移動形のイオンも、対イオンとして使用される。
【００３３】
フルオライドは、最も電気陰性度の大きい元素であるために、水和し、求核性を失う傾向を有する。これを最小限にとどめるために、標識反応は、好ましくは無水の条件下で行われる。例えば、アセトニトリルまたはＴＨＦ等の有機溶媒中にフルオライド（フッ化カリウムとして、あるいは上述の他の対イオンのいずれかとの錯体として）を入れることができる。クリプトフィックス２．２，２（４，７，１３，１６，２１，２４−ヘキサオキサ−１，１０−ジアザビシクロ［８．８．８］−ヘキサコサン）等の対イオンに結合する試剤の助けを借りて、フッ素イオンはこれらの溶媒中で極めて求核的になる。
【００３４】
上述のように、Ｆ−１８と共にチオール含有ペプチドを含んでなる次の反応
【化２】
2001515843.tif 000002
により標的ベクターを標識するのに、標識試剤が使用される。あるいは、標識試剤は、２個の二重結合炭素原子の少なくとも一つが、ヨーダイド、ブロマイド、クロライド、アザイド、トシレート、メシレート、ノシレート、トリフレートからなる群から選ばれる少なくとも一つの脱離基を保持するＦ−１８フッ素化されたアルケンである。このＦ−１８フッ素化されたアルケンは、上述の反応に類似の方法で標的ベクターを標識する。
【００３５】
標的ベクター上の遊離チオール基にフッ素化標識試剤の反応を指向させると、短時間内に、標的ベクター中にＦ−１８をほぼ定量的に包含させることが可能になる。一般に、反応は室温で数分以内に完結し、複雑な精製ステップは必要ない。Ｆ−１８の半減期が極めて短いので、反応のスピードは極めて重要である。更に、遊離のＦ−１８は、骨中のヒドロキシアパタイトのヒドロキシルイオンと容易に交換し、それゆえに、骨を求める試剤であるために、最終製品中に残存する遊離フルオライドの量の低減も、本発明の重要な利点である。
【００３６】
本発明の実施の形態は、本発明の側面を示す実施例により、更に例示される。これらの実施例は本発明の特定な要素を例示するものであり、その範囲を制約するものとは考えられるべきでない。
【００３７】
実施例
フルオロジヨード酢酸（18Ｆ−ＣＩ2ＣＯＯＨ）
クリプトフィックス２．２，２（４，７，１３，１６，２１，２４−ヘキサオキサ−１，１０−ジアザビシクロ［８．８．８］−ヘキサコサン）を含有する乾燥テトラヒドロフラン中の１００ｍＣｉのＦ−１８フルオライド（Ｏ−１８富化された水の衝突から得られる）と炭酸カリウムのスラリーをトリヨード酢酸により処理する。室温での３０分間の反応の後、所望の標識試剤の18Ｆ−ＣＩ2ＣＯＯＨを得、逆相カラムクロマトグラフィーにより精製した。次に、多様なチオール含有標的ベクターを標識するのに、この標識試剤を使用、あるいは同一の使用のために臨床のサイトに出荷する。
【００３８】
Ｆ−１８により標識されたＦａｂ’−ＳＨフラグメント
親油化されたＦａｂ’−ＳＨ−ＮＰ4（抗発癌胚発生性抗原抗体フラグメント）の１ｍｇのバイアルを、ｐＨ６で０．１Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液中の18Ｆ−ＣＩ2ＣＯＯＨの１ｍＬの溶液により液とする。反応を室温で３０分間進行させる。
サイズ排除サイズカラムを用いるＨＰＬＣ及びシリカゲル含浸ガラスファイバー片（Ｇｅｌｍａｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いるＩＴＬＣ（インスタント薄層クロマトグラフィー）により分析するために混合物の一部を取り出す。この分析により、抗体フラグメントのヒンジ領域のチオール基は18Ｆ−ＣＩ2ＣＯＯＨの双方のヨード原子の求核的置換を起こさせ、この反応がほぼ定量的な収率で進行することが判明する。それゆえ、Ｆ−１８により標識されたＦａｂ’フラグメントはすぐ注射できる。
【００３９】
フルオロジヨードメタン（18Ｆ−ＣＨＩ2）
クリプトフィックス２２２を含有する乾燥アセトニトリル中の１００ｍＣｉのＦ−１８フルオライド（Ｏ−１８富化された水の衝突から得られる）試料と炭酸カリウムのスラリーをトリヨードメタンにより処理する。室温での３０分間の反応の後、標識試剤の18Ｆ−ＣＨＩ2を得、逆相カラムクロマトグラフィーにより精製した。次に、多様なチオール含有標的ベクターを標識するのに、この標識試剤を使用し、あるいは同じ使用のために臨床のサイトに出荷する。
【００４０】
Ｆ−１８により標識されたオクトレイド（ｏｃｔｒｅｏｔｉｄｅ）
親油化された、還元オクトレイド（Ｄ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−オール）の１ｍｇのバイアルを、ｐＨ６で、２０％のＤＭＳＯを含有する０．１Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液中の18Ｆ−ＣＨＩ2の１ｍＬの溶液により液とする。反応を室温で３０分間進行させる。あるいは、高温で、非水溶媒、例えばＤＭＳＯ中で行い、その後、冷却して、及び／または注射のために希釈することができる。
サイズ排除サイズカラムを用いるＨＰＬＣ及びシリカゲル含浸ガラスファイバー片（Ｇｅｌｍａｎ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いるＩＴＬＣ（インスタント薄層クロマトグラフィー）により分析するために標識混合物の一部を取り出す。この分析により、オクトレイドの２つのシステインのチオール基は、18Ｆ−ＣＨＩ2の双方のヨード原子の求核的置換を起こさせ、この反応がほぼ定量的な収率で進行することが判明する。それゆえ、Ｆ−１８標識され、再循環された（結合：−Ｓ−ＣＨ−18Ｆ−Ｓ−）オクトレイドのペプチドはすぐ注射できる。
【００４１】
フルオロジヨードアセトアミド（18Ｆ−ＣＩ2ＣＯＮＨ2）
クリプトフィックス２．２．２（４，７，１３，１６，２１，２４−ヘキサオキサ−１，１０−ジアザビシクロ［８．８．８］−ヘキサコサン）を含有する乾燥テトラヒドロフラン中の１００ｍＣｉのＦ−１８フルオライド（Ｏ−１８富化された水の衝突から得られる）と炭酸カリウムのスラリーをトリヨードアセトアミドにより処理する。室温での３０分間の反応の後、所望の標識試剤の18Ｆ−ＣＩ2ＣＯＮＨ2を得、逆相カラムクロマトグラフィーにより精製する。次に、多様なチオール含有標的ベクターを標識するのに、この標識試剤を使用し、あるいは同一の使用のために臨床のサイトに出荷する。
【００４２】
Ｆ−１８により標識されたＣｙｓ−ＬＨＲＨ
親油化されたＣｙｓ−ＬＨＲＨ（アミン末端が還元されたチオールの形の付随システインを保持するＬＨＲＨ）の１ｍｇのバイアルを、ｐＨ６で０．１Ｍ酢酸ナトリウム緩衝液中の18Ｆ−ＣＨＩＣＯＮＨ2の１ｍＬの溶液により液とする。
反応を５０℃で２時間進行させる。抗体で変成されたペプチドのチオール基は18Ｆ−ＣＨＩＣＯＮＨ2のヨード原子の求核的置換を起こさせ、この反応はほぼ定量的な収率で進行する。それゆえ、このＦ−１８により標識されたペプチドはすぐ注射できる。
【００４３】
当業者には、本発明に対して種々の改変及びバリエーションを行うことができるのは明白である。かくして、本発明は、クレーム及びそれらの均等物の範囲内であれば、この発明の改変及びバリエーションを包含するように企図されている。
すなわち、本発明は以下の実施の形態を含むことを確認する。
【００４４】
実施の形態１：チオール含有ペプチドをフッ素−１８（Ｆ−１８）により放射標識する方法であって、遊離チオール基を含んでなるペプチドと一般式
18Ｆ−（ＣＨ2）m−ＣＲ1Ｒ2−（ＣＨ2）n−Ｘ
（式中、ｎは０、１または２であり、
ｍは０、１または２であり、
ｎ＋ｍは０、１または２であり、
Ｘはシアノ、ヨーダイド、ブロマイド、クロライド、アザイド、トシレート、メシレート、ノシレート、トリフレート、非置換マレイミド、一つまたは二つのアルキル基で置換されたマレイミド、及びスルホネート基で置換されたマレイミドからなる群から選ばれ、
Ｒ1及びＲ2は、同一あるいは異なり、ヨーダイド、ブロマイド、クロライド、アザイド、トシレート、メシレート、ノシレート、トリフレート、水素、−ＣＯＮＨ2、カルボキシル、ヒドロキシル、スルホン酸、３級アミン、４級アンモニウム、非置換マレイミド、一つまたは二つのアルキル基で置換されたマレイミド、３−スルホ−マレイミド、非置換アルキル、置換アルキル、−ＣＯＯＲ’、−ＣＯＮＲ’2、ＣＯＲ’からなる群から選ばれ、ここで、置換アルキルの置換基は、−ＣＯＮＨ2、カルボキシル、ヒドロキシル、スルホン酸、３級アミン及び４級アンモニウムからなる群から選ばれ、Ｒ’はＣ1−Ｃ6アルキルまたはフェニルである）
を有する標識試剤とを反応させることを含んでなる方法。
【００４５】
実施の形態２：ＸがＩであり、Ｒ1及びＲ2の少なくとも一つがＩである実施の形態１の方法。
実施の形態３：ポリペプチドが、Ｆ（ａｂ’）2、Ｆ（ａｂ）2、Ｆａｂ’及びＦａｂ抗体フラグメント、単一鎖の抗体サブフラグメント、２価抗体フラグメント構成体（ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｓ）、及びＩｇＧ3またはＩｇＧ3−Ｆ（ａｂ’）2のフレームワークを含んでなる抗体等の抗体構成体からなる群から選ばれる実施の形態１の方法。
実施の形態４：標識試剤が、18Ｆ−ＣＩ3、18Ｆ−ＣＨＩ2、18Ｆ−ＣＨＩＣＯＯＣＨ3、18Ｆ−ＣＩ2ＣＯＯＨ、18Ｆ−ＣＩ2ＣＯＯＣＨ3、18Ｆ−ＣＩ2ＣＨ2ＯＨ、18Ｆ−ＣＨＩＣＨ2ＯＨ、18Ｆ−ＣＩ2ＣＨ2ＣＯＯＨ、18Ｆ−ＣＩ2ＣＨ2Ｎ+（ＣＨ3）3、18Ｆ−ＣＩ2ＣＨ2マレイミド、18Ｆ−ＣＨＩＣＯＮＨ2、18Ｆ−ＣＩ2ＣＯＮＨ2、18Ｆ−ＣＨＩＣＯ2ＣＨ3、18Ｆ−ＣＩ2ＣＯ2ＣＨ3、18Ｆ−ＣＨＢｒ2、18Ｆ−ＣＢｒ2ＣＨ2ＣＨ2ＳＯ3Ｈ、18Ｆ−ＣＢｒ2ＣＨ2ＯＨ、ＣＦ3ＣＯＣＩ2−18Ｆ、ＣＨ3ＣＯＣＢｒ2−18Ｆ、18Ｆ−ＣＨＢｒＣＮ、18Ｆ−ＣＩ2ＣＨＣＮ、ＣＢｒＦ2−18Ｆ、及び18Ｆ−ＣＢｒ（ＣＯＮＨ2）2からなる群から選ばれる実施の形態１の方法。
実施の形態５：標識試剤が18Ｆ−ＣＨ2ＣＩ2ＣＯＯＨ及び18Ｆ−ＣＨ2ＣＩ2ＣＯＮＨ2からなる群から選ばれる実施の形態１の方法。
【００４６】
実施の形態６：遊離チオール基を含んでなるペプチドと、２個の二重結合炭素原子の少なくとも一つが、ヨーダイド、ブロマイド、クロライド、アザイド、トシレート、メシレート、ノシレート及びトリフレートからなる群から選ばれる少なくとも一つの脱離基を保持するＦ−１８フッ素化されたアルケンを反応させることからなるチオール含有ペプチドをフッ素−１８（Ｆ−１８）により放射標識する方法。
実施の形態７：Ｆ−１８フッ素化されたアルケンが18Ｆ−ＣＨ＝ＣＩ2、18Ｆ−ＣＩ＝ＣＨ2、及び18Ｆ−ＣＩ＝ＣＩ2からなる群から選ばれる実施の形態６の方法。
実施の形態８：ポリペプチドが、Ｆ（ａｂ’）2、Ｆ（ａｂ）2、Ｆａｂ’及びＦａｂ抗体フラグメント、単一鎖の抗体サブフラグメント、二価の抗体フラグメント構成体、及びＩｇＧ3またはＩｇＧ3−Ｆ（ａｂ’）2のフレームワークを含んでなる抗体等の抗体構成体からなる群から選ばれる実施の形態６の方法。
【００４７】
実施の形態９：ａ）患者の標的組織に特異的である少なくとも一つのアームとＦ−１８により標識されたペプチドまたはＦ−１８により標識されたペプチドに共役した低分子量のハプテンに特異的である少なくとももう一つのアームを含んでなる二特異的な抗体または抗体フラグメントを患者に投与し、二特異的な抗体または抗体フラグメントを標的組織に結合せしめ、非標的の二特異的な抗体または抗体フラグメントを除去し、
ｂ）Ｆ−１８により標識されたペプチドまたはそれと共役したハプテンを患者に投与し、Ｆ−１８により標識されたペプチドまたはそれと共役したハプテンを二特異的抗体または抗体フラグメントに結合せしめ、非結合のＦ−１８により標識されたペプチドまたはそれと共役したハプテンを除去し、
ｃ）Ｆ−１８により標識されたペプチドを検出し、それによって標的組織を検出する
ことを含んでなる組織を検出する方法。
【００４８】
実施の形態１０：Ｆ−１８により標識されたペプチドがチオール基を含有する実施の形態９の方法。
実施の形態１１：Ｆ−１８により標識されたペプチドが実施の形態１に記載の方法により標識される実施の形態１０の方法。
実施の形態１２：Ｆ−１８により標識されたペプチドが実施の形態６に記載の方法により標識される実施の形態１０の方法。
実施の形態１３：Ｆ−１８により標識されたペプチドが、Ｘ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｘ）−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨであり、Ｘが遊離あるいは保護されたアミノ酸基を表す実施の形態９の方法。
実施の形態１４：Ｆ−１８により標識されたペプチドが、Ａｃ−Ｃｙｓ（Ｙ）−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｃｙｓ（Ｙ）−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨであり、Ｙが遊離あるいは保護されたチオール基を表す実施の形態９の方法。
実施の形態１５：Ｆ−１８により標識されたペプチドがＡｃ−Ｇｌｙ−Ｄ−ヨード−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ａｃ）−Ｇｌｙ−Ｄ−ヨード−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨである実施の形態９の方法。
実施の形態１６：ハプテンが金属キレート錯体である実施の形態９の方法。
実施の形態１７：金属キレート錯体がマンガン、鉄、またはガドリニウムを含んでなる実施の形態１６の方法。
実施の形態１８：二特異的な抗体または抗体フラグメントがモノクローナルである実施の形態９の方法。
実施の形態１９：抗体または抗体フラグメントがヒト化されている実施の形態９の方法。
実施の形態２０：Ｆ−１８により標識されたペプチドが陽電子放出トモグラフィーにより検出される実施の形態９の方法。
【００４９】
実施の形態２１：ａ）患者の標的組織に特異的である少なくとも一つのアームとＦ−１８により標識されたペプチドまたはＦ−１８により標識されたペプチドに共役した低分子量のハプテンに特異的である少なくとももう一つのアームを含んでなる二特異的な抗体または抗体フラグメントを投与し、二特異的な抗体または抗体フラグメントを標的組織に結合せしめ、非標的の二特異的な抗体または抗体フラグメントを除去し、
ｂ）Ｆ−１８により標識されたペプチドまたはそれと共役したハプテンを患者に投与し、Ｆ−１８により標識されたペプチドまたはそれと共役したハプテンを二特異的抗体または抗体フラグメントに結合せしめ、非結合のＦ−１８により標識されたペプチドまたはそれと共役したハプテンを除去し、
ｃ）Ｆ−１８により標識されたペプチドを検出し、それによって標的組織を検出することを含んでなる患者の組織を検出する方法に使用される
Ｆ−１８により標識されたペプチドまたは該ペプチドに共役したハプテン。
【００５０】
実施の形態２２：Ｆ−１８により標識されたペプチドがチオール基を含有する実施の形態２１に記載のＦ−１８により標識されたペプチドまたは該ペプチドに共役したハプテン。
実施の形態２３：Ｆ−１８により標識されたペプチドが実施の形態１に記載の方法により標識される実施の形態２２に記載のＦ−１８により標識されたペプチドまたは該ペプチドに共役したハプテン。
実施の形態２４：Ｆ−１８により標識されたペプチドが実施の形態６に記載の方法により標識される実施の形態２２に記載のＦ−１８により標識されたペプチドまたは該ペプチドに共役したハプテン。
実施の形態２５：Ｆ−１８により標識されたペプチドが、Ｘ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｘ）−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨであり、Ｘが遊離あるいは保護されたアミノ酸基を表す実施の形態２１に記載のＦ−１８により標識されたペプチドまたは該ペプチドに共役したハプテン。
実施の形態２６：Ｆ−１８により標識されたペプチドが、Ａｃ−Ｃｙｓ（Ｙ）−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｃｙｓ（Ｙ）−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨであり、Ｙが遊離あるいは保護されたチオール基を表す実施の形態２１のＦ−１８により標識されたペプチドまたは該ペプチドに共役したハプテン。
実施の形態２７：Ｆ−１８により標識されたペプチドがＡｃ−Ｇｌｙ−Ｄ−ヨード−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ａｃ）−Ｇｌｙ−Ｄ−ヨード−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨである実施の形態２１に記載のＦ−１８により標識されたペプチドまたは該ペプチドに共役したハプテン。
実施の形態２８：ハプテンが金属キレート錯体である実施の形態２１に記載のＦ−１８により標識されたペプチドまたは該ペプチドに共役したハプテン。
実施の形態２９：金属キレート錯体がマンガン、鉄、またはガドリニウムを含んでなる実施の形態２８に記載のＦ−１８により標識されたペプチドまたは該ペプチドに共役したハプテン。
【００５１】
実施の形態３０：別々の容器に収容した、
Ｆ−１８により標識されたペプチドまたはそれと共役したハプテンと、
患者の標的組織に特異的である少なくとも一つのアームとＦ−１８により標識されたペプチドまたはＦ−１８により標識されたペプチドに共役した低分子量のハプテンに特異的である少なくとももう一つのアームを含んでなる二特異的な抗体または抗体フラグメントと
を含む患者の組織を検出する方法に使用されるキット。
【００５２】
実施の形態３１：Ｆ−１８により標識されたペプチドがチオール基を含有する実施の形態３０に記載の患者の組織を検出する方法に使用されるキット。
実施の形態３２：Ｆ−１８により標識されたペプチドが実施の形態１に記載の方法により標識される実施の形態３０に記載の患者の組織を検出する方法に使用されるキット。
実施の形態３３：Ｆ−１８により標識されたペプチドが実施の形態６に記載の方法により標識される実施の形態３０に記載の患者の組織を検出する方法に使用されるキット。
実施の形態３４：Ｆ−１８により標識されたペプチドが、Ｘ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ｘ）−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨであり、Ｘが遊離あるいは保護されたアミノ酸基を表す実施の形態３０に記載の患者の組織を検出する方法に使用されるキット。
実施の形態３５：Ｆ−１８により標識されたペプチドが、Ａｃ−Ｃｙｓ（Ｙ）−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｃｙｓ（Ｙ）−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨであり、Ｙが遊離あるいは保護されたチオール基を表す実施の形態３０に記載の患者の組織を検出する方法に使用されるキット。
実施の形態３６：Ｆ−１８により標識されたペプチドがＡｃ−Ｇｌｙ−Ｄ−ヨード−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−Ｇｌｙ−Ｄ−Ｌｙｓ（Ａｃ）−Ｇｌｙ−Ｄ−ヨード−Ｔｙｒ−Ｄ−Ｔｒｐ−ＯＨである実施の形態３０に記載の患者の組織を検出する方法に使用されるキット。
実施の形態３７：ハプテンが金属キレート錯体である実施の形態３０に記載の患者の組織を検出する方法に使用されるキット。
実施の形態３８：金属キレート錯体がマンガン、鉄、またはガドリニウムを含んでなる実施の形態３７に記載の患者の組織を検出する方法に使用されるキット。