【手続補正書】
【提出日】平成16年10月18日(2004.10.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  Ｄｅｌ−１ポリペプチドを機能的にコードする核酸およびその核酸のバイオアベイラビリティー局在を長期化する化合物を含む、血管形成を刺激する処置組成物。
【請求項２】  核酸のバイオアベイラビリティー局在を長期化する化合物がポロキサマーである、請求項１記載の組成物。
【請求項３】  ポロキサマーが組成物中、約１０％ｗ／ｖ以下の濃度で存在する、請求項２記載の組成物。
【請求項４】  ポロキサマーが約８０％以上の親水性成分、および９５０−４０００ダルトンの疎水性部分を有する、請求項３記載の組成物。
【請求項５】  ポロキサマーが、Pluronics（登録商標）Ｆ３８、Ｆ６８、Ｆ８７、Ｆ８８、Ｆ１０８およびＦ１２７の特性を有するポロキサマーからなる群から選ばれる、請求項３記載の組成物。
【請求項６】  ポロキサマーが約１−１０％ｗ／ｖの濃度のポロキサマー１８８である、請求項５記載の組成物。
【請求項７】  ポロキサマー１８８が約５％の濃度で存在する、請求項６記載の組成物。
【請求項８】  核酸のバイオアベイラビリティー局在を長期化する化合物がポリグルタメートである、請求項１記載の組成物。
【請求項９】  Ｄｅｌ−１ポリペプチドをコードする核酸が配列番号：１の配列を含む、請求項１記載の組成物。
【請求項１０】  Ｄｅｌ−１ポリペプチドをコードする核酸がプロモーター、５’ＵＴＲ、合成イントロンおよび３’ＵＴＲをさらに含む、請求項１記載の組成物。
【請求項１１】  核酸がプラスミドである、請求項１記載の組成物。
【請求項１２】  プラスミドが配列番号：２である、請求項１１記載の組成物。
【請求項１３】  ＶＥＧＦタンパク質をコードする核酸をさらに含む、請求項１記載の組成物。
【請求項１４】  ＶＥＧＦタンパク質をコードする核酸が、ヒトにおける発現に最適化されている少なくとも５つのコドンを有する、請求項１３記載の組成物。
【請求項１５】  ＶＥＧＦタンパク質をコードする核酸が配列番号：３の配列を含む、請求項１４記載の組成物。
【請求項１６】  ｄｅｌ−１をコードする核酸およびＶＥＧＦをコードする核酸が２つの別個のプラスミドベクターに含まれている、請求項１３記載の組成物。
【請求項１７】  ｄｅｌ−１をコードする核酸およびＶＥＧＦをコードする核酸が１つのプラスミドベクターに含まれている、請求項１３記載の組成物。
【請求項１８】  ２−８℃において安定なように製剤化されている、請求項１記載の組成物。
【請求項１９】  凍結乾燥されている、請求項１８記載の組成物。
【請求項２０】  逆行性静脈灌流によって供給される、請求項１記載の組成物。
【請求項２１】  逆行性静脈灌流による供給が、手足、腎、肝、脳および心臓のなかから選ばれる哺乳動物の器官に対するものである、請求項２０記載の組成物。
【請求項２２】  筋肉内注射、静脈内注射および関節内注射から選ばれる注射により供給される、請求項１記載の組成物。
【請求項２３】  核酸のバイオアベイラビリティー局在を長期化する化合物が核酸を凝集させない、請求項１記載の組成物。
【請求項２４】  ポロキサマー、ポロキサミン、エチレンビニルアセテート、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリビニルアセテート、ポリグルタメートおよびそれらのコポリマーのなかから選ばれる非凝縮ポリマーとともに製剤化されている、血管形成タンパク質をコードする核酸配列を含むベクターを含有する、血管形成を刺激するための組成物。
【請求項２５】  血管形成タンパク質がα−ｖ,β−３インテグリン受容体と結合できる、請求項２４記載の組成物。
【請求項２６】  血管形成タンパク質がＤｅｌ−１である、請求項２５記載の組成物。
【請求項２７】  血管形成タンパク質がＶＥＧＦタンパク質であり、ＶＥＧＦをコードする核酸配列がヒトにおける発現に最適化されている少なくとも５つのコドンを有する、請求項２４記載の組成物。
【請求項２８】  ＶＥＧＦのコドン最適化配列が配列番号：３である、請求項２７記載の組成物。
【請求項２９】  ベクターがプロモーター、５’ＵＴＲ、合成イントロンおよび３’ＵＴＲを含むプラスミドである、請求項２４記載の組成物。
【請求項３０】  ヒトにおける発現に最適化されているコドンである、ＶＥＧＦタンパク質をコードする核酸をさらに含む、請求項２６記載の組成物。
【請求項３１】  ベクターがポロキサマーとともに製剤化されているウイルスベクターであり、逆行性静脈灌流によって哺乳動物に供給される、請求項２４記載の組成物。
【請求項３２】  虚血組織における側枝血管の成長を促進させる方法であって、１０％ｗ／ｖ以下の濃度のポロキサマーを含む製剤中の血管形成タンパク質をコードする核酸を虚血組織に局所的に供給する方法。
【請求項３３】  製剤化された核酸を虚血組織に直接注射することにより供給する、請求項３２記載の方法。
【請求項３４】  虚血組織が心臓組織であり、製剤化された核酸が、冠静脈洞に流入する静脈に配置されたバルーンカテーテルを介して逆行性静脈注入により供給される、請求項３３記載の方法。
【請求項３５】  冠静脈洞に流入する静脈が、大心臓静脈（ＧＣＶ）、中心静脈（ＭＣＶ）、左心室後静脈（ＰＶＬＶ）、前室間静脈（ＡＩＶ）、およびそれらの側枝のなかから選ばれる、請求項３４記載の方法。
【請求項３６】  ８０％以上の親水性成分および９５０−４０００ダルトンの分子量の疎水性部分を含むポロキサマーを含有する組成物中にＤｅｌ−１タンパク質を機能的にコードする核酸を製剤化することを特徴とする、哺乳動物の心臓における虚血領域の側枝血管の成長を促進させる方法であって、得られる製剤が、冠静脈洞に流入する静脈に配置されたバルーンカテーテルを介して心筋組織に供給され、次いで製剤化された核酸が正常な血流とは逆の方向にてかつ虚血組織領域に血管外漏出するに充分な圧力をもって静脈に注入されるよう製剤化する方法。
【請求項３７】  冠静脈洞に流入する静脈が、大心臓静脈（ＧＣＶ）、中心静脈（ＭＣＶ）、左心室後静脈（ＰＶＬＶ）、前室間静脈（ＡＩＶ）、およびそれらの側枝のなかから選ばれる、請求項３６記載の方法。
【請求項３８】  ポロキサマーが約１−１０％ｗ／ｖの濃度のポロキサマー１８８である、請求項３６記載の方法。
【請求項３９】  組成物がＶＥＧＦタンパク質をコードする核酸をさらに含む、請求項３８記載の方法。
【請求項４０】  水溶液中のポロキサマーを含む組成物中に血管形成タンパク質を機能的にコードする核酸を含むベクターを製剤化することを特徴とする、哺乳動物の心臓における虚血領域の側枝血管の成長を促進させる方法であって、バルーンカテーテルを冠静脈洞に流入する静脈に配置し、製剤化された核酸が、正常な血流とは逆の方向にてかつ虚血組織領域に血管外漏出するに充分な圧力をもって静脈に注入されることにより心筋組織に供給される方法。
【請求項４１】  冠静脈洞に流入する静脈が、大心臓静脈（ＧＣＶ）、中心静脈（ＭＣＶ）、左心室後静脈（ＰＶＬＶ）、前室間静脈（ＡＩＶ）、およびそれらの側枝のなかから選ばれる、請求項４０記載の方法。
【請求項４２】  血管形成タンパク質がＤｅｌ−１である、請求項４０記載の方法。
【請求項４３】  組成物がＶＥＧＦタンパク質をコードする核酸をさらに含む、請求項４０記載の方法。
【請求項４４】  血管形成タンパク質がＶＥＧＦタンパク質であり、ＶＥＧＦをコードする核酸が、ヒトにおける発現に最適化されている少なくとも５つのコドンを有する、請求項４０記載の方法。
【請求項４５】  ベクターがウイルスベクターである、請求項４０記載の方法。
【請求項４６】  濃度５％ｗ／ｖのポロキサマー１８８および５．０ｍＭトリス−ＨＣｌ緩衝液とともに製剤化されている、ｄｅｌ−１をコードする核酸配列を含むプラスミド、を含有する医薬組成物。
【請求項４７】  ５ｍｇのｐＤＬ１６８０、２５０ｍｇのポロキサマー１８８、０．４５ｍｇのＴＲＩＳおよび０．７０ｍｇのトリス−ＨＣｌを含む、医薬組成物のバイアル。