【手続補正書】
【提出日】平成17年2月3日(2005.2.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【書類名】  明細書
【発明の名称】  ラスパートマイシンの誘導体およびその調製および使用
【特許請求の範囲】
【請求項１】  ラスパートマイシンコアペプチド、その塩または水和物を製造する方法であって、該方法は、以下の工程を包含する：
培地で微生物Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ，ｓｓｐ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓ（ＡＴＣＣ  ２９８１４）を培養する工程；
該培地からラスパートマイシンを単離する工程；および
ラスパートマイシンから親油性断片を開裂して、それにより、該ラスパートマイシンコアペプチドを得る工程。
【請求項２】  さらに、前記ラスパートマイシンコアペプチドを単離する工程を包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】  前記培養工程が、約２４℃〜約３４℃の範囲の温度で実行される、請求項１に記載の方法。
【請求項４】  前記温度が、約２７℃〜約２９℃の範囲である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】  前記微生物が、ラスパートマイシンを単離する前に、前記培地から除去される、請求項１に記載の方法。
【請求項６】  前記培地が、前記微生物を除去する前に、酸性化される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】  前記培地が、約２．０〜約３．０の範囲のｐＨに酸性化される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】  前記微生物が、遠心分離により除去され、そして水に懸濁されて、それにより、水性懸濁液を提供する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】  前記水性懸濁液のｐＨが、塩基性ｐＨに調節される、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】  前記水性懸濁液の二価カチオン濃度が、約４ｍｍｏｌ／ｌ〜約１０ｍｍｏｌ／ｌの間に調節され、そして該水性懸濁液のｐＨが、塩基性ｐＨに調節される、請求項８に記載の方法。
【請求項１１】  前記調節したｐＨが、ｐＨ約８．０〜ｐＨ約９．０の範囲である、請求項９または１０に記載の方法。
【請求項１２】  前記二価カチオンが、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋およびＺｎ２＋からなる群から選択される、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】  ラスパートマイシンが、有機溶媒に抽出され、それにより、ラスパートマイシンの有機溶媒抽出物を提供する、請求項９または１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】  さらに、
前記ラスパートマイシンの有機溶媒抽出物を酸性化する工程；
ラスパートマイシンを水溶液に抽出する工程；
ラスパートマイシンを有機溶媒に抽出する工程；
ラスパートマイシンを水溶液に抽出する工程；および
該水溶液を濃縮して、ラスパートマイシンの塩を提供する工程を包含する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】  前記有機溶媒が、１−ブタノールである、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】  前記ラスパートマイシンの塩が、前記ラスパートマイシンの有機溶媒抽出物を水ベース溶液で洗浄することにより、水溶液に抽出される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】  ラスパートマイシンが、前記ラスパートマイシンの塩の水溶液を酸性化することにより、有機溶媒に抽出される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】  さらに、
前記ラスパートマイシンの塩を水性酸溶液に溶解する工程；
ラスパートマイシンを有機溶媒に抽出する工程；および
該有機溶媒を除去して、ラスパートマイシンを提供する工程を包含する、請求項１４に記載の方法。
【請求項１９】  前記親油性断片が、酵素で開裂される、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】  前記酵素が、デアシラーゼである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】  前記開裂工程が、さらに、
培地でデアシラーゼを産生できる微生物を培養する工程；および
ラスパートマイシンを該培地と接触させる工程を包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】  前記微生物が、Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｕｔａｈｅｎｓｉｓ（ＮＲＲＬ  １２０５２）である、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】  ラスパートマイシンが、約２９℃で、約１６時間にわたって、前記培地と接触される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】  ラスパートマイシンが、約２９℃で、約４時間にわたって、前記培地と接触される、請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】  前記ラスパートマイシンコアペプチドが、以下の構造またはその塩または水和物を有する、請求項２３に記載の方法：
【化１】
2004528268.tif 000001
【請求項２６】  前記ラスパートマイシンコアペプチドが、以下の構造またはその塩または水和物を有する、請求項２４に記載の方法：
【化２】
2004528268.tif 000002
【請求項２７】  請求項１、２３および２４のいずれか１項に記載の方法により産生される、ラスパートマイシンコアペプチド。
【請求項２８】  構造式（Ｉ）を有する、ラスパートマイシンコアペプチド誘導体、またはその塩または水和物であって：
（Ｉ）    Ｙ１−Ｌ−Ｘ１−Ｎ（Ｒ１）−Ｒ
ここで、以下の（ｉ）または（ｉｉ）のいずれかである：
（ｉ）Ｙ１−Ｌ−Ｘ１は、一緒になって、水素である；または
（ｉｉ）Ｙ１は、連結基である；
Ｌは、リンカーである；
Ｘ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＳ−、−ＰＯ−、−ＯＰＯ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣＯ−および−ＮＲ１ＣＯ−からなる群から選択される；
Ｎは、窒素である；
Ｒ１は、水素、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ１〜Ｃ１０）ヘテロアルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１５）アリールアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１５）ビアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した５員〜１０員ヘテロアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキル、および１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した６員〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される；
各Ｒ２は、独立して、−ＯＲ３、−ＳＲ３、−ＮＲ３Ｒ３、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ３、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ３Ｒ３、−Ｃ（ＮＲ３）ＮＲ３Ｒ３、−ＣＨＯ、−Ｒ３ＣＯ、−ＳＯ２Ｒ３、−ＳＯＲ３、−ＰＯ（ＯＲ３）２、−ＰＯ（ＯＲ３）、−ＣＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＰＯ３Ｈ、ハロゲンおよびトリハロメチルからなる群から選択される；
各Ｒ３は、独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、５員〜１０員ヘテロアリール、（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキルおよび６員〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される；および
Ｒは、ラスパートマイシンのコア環状ペプチドである、
ラスパートマイシンコアペプチド誘導体、またはその塩または水和物。
【請求項２９】  Ｒが、以下の構造を有する、請求項２８に記載のラスパートマイシンコアペプチド誘導体：
【化３】
2004528268.tif 000003
【請求項３０】  Ｙ１が、−ＮＨＲ１、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＰＨ、ハロゲン、−ＣＨＯ、−Ｒ１ＣＯ、−ＳＯ２Ｈ、−ＰＯ２Ｈ、−Ｎ３、−ＣＮ、−ＣＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＰＯ３Ｈ、−ＰＯ２（ＯＲ１）Ｈ、−ＣＯ２Ｒ１、−ＳＯ３Ｒ１および−ＰＯ（ＯＲ１）２からなる群から選択される、請求項２９に記載のラスパートマイシンコアペプチド誘導体。
【請求項３１】  Ｒ１が、水素である、請求項３０に記載のラスパートマイシンコアペプチド誘導体。
【請求項３２】  Ｙ１が、−ＳＨ、Ｈ２Ｎ−、−ＯＨ、−ＣＯ２Ｈおよび−ＣＯ２Ｒからなる群から選択され、Ｘ１が、カルボニルであり、そしてＬが、以下またはその塩または水和物からなる群から選択される、請求項３１に記載のラスパートマイシンコアペプチド誘導体であって：
【化４】
2004528268.tif 000004
2004528268.tif 000005
ここで、
ｎは、０、１、２または３である；
各Ｓ１は、水素、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ１〜Ｃ１０）ヘテロアルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１５）アリールアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１５）ビアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した５員〜１０員ヘテロアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキル、および１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した６員〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される；
各Ｒ４は、独立して、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−ＮＲ５Ｒ５、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ５、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ５Ｒ５、−Ｃ（ＮＲ５）ＮＲ５Ｒ５、−ＣＨＯ、−Ｒ５ＣＯ、−ＳＯ２Ｒ５、−ＳＯＲ５、−ＰＯ（ＯＲ５）２、−ＰＯ（ＯＲ５）、−ＣＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＰＯ３Ｈ、ハロゲンおよびトリハロメチルからなる群から選択される；
各Ｒ５は、独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、５員〜１０員ヘテロアリール、（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキルおよび６員〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される；および
各Ｋは、独立して、酸素、窒素、イオウおよびリンからなる群から選択される、ラスパートマイシンコアペプチド誘導体。
【請求項３３】  各Ｓ１が、独立して、遺伝的にコードされたα−アミノ酸の側鎖である、請求項３２に記載のラスパートマイシンコアペプチド誘導体。
【請求項３４】  Ｙ１が、Ｈ２Ｎ−であり、そしてＬが、以下である、請求項３２に記載のラスパートマイシンコアペプチド誘導体：
【化５】
2004528268.tif 000006
【請求項３５】  各Ｓ１が、独立して、遺伝的にコードされたα−アミノ酸の側鎖である、請求項３４に記載のラスパートマイシンコアペプチド誘導体。
【請求項３６】  ｎが、０であり、そしてＳ１が、−ＣＨ２Ｃ（Ｏ）ＯＨまたはその塩または水和物である、請求項３５に記載のラスパートマイシンコアペプチド誘導体。
【請求項３７】  ｎが、１であり、そしてＳ１が、−ＣＨ２ＣＯ２Ｈまたはその塩または水和物であり、そしてＳ２が、−ＣＨ２−インドール−２−イルである、請求項３５に記載のラスパートマイシンコアペプチド誘導体。
【請求項３８】  Ｙ１−Ｌ−Ｘ１が、一緒になって、水素であり、そしてＲ１が、水素である、請求項２８に記載のラスパートマイシンコアペプチド誘導体。
【請求項３９】  ラスパートマイシンコアペプチド誘導体を製造する方法であって、リンカー部分をラスパートマイシンコアペプチドに共有結合する工程を包含する、方法。
【請求項４０】  抗菌ラスパートマイシン誘導体を製造する方法であって、該方法は、以下の工程を包含する：
リンカー部分をラスパートマイシンコアペプチドに共有結合して、それにより、ラスパートマイシンコアペプチド誘導体を提供する工程；および
親油性基を該ラスパートマイシンコアペプチド誘導体に共有結合して、抗菌ラスパートマイシン誘導体を得る工程。
【請求項４１】  さらに、前記抗菌ラスパートマイシン誘導体を単離する工程を包含する、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】  前記ラスパートマイシンコアペプチドが、請求項１、２３および２４のいずれか１項に記載の方法により提供される、請求項４０に記載の方法。
【請求項４３】  前記ラスパートマイシンコアペプチドが、請求項３６および３８のいずれか１項に記載の化合物である、請求項４０に記載の方法。
【請求項４４】  抗菌ラスパートマイシン誘導体を製造する方法であって、該方法は、以下の工程を包含する：
親油性基をリンカーに共有結合して、親油性リンカー基を提供する工程；および
該親油性リンカー基をラスパートマイシンコアペプチド誘導体に共有結合して、抗菌ラスパートマイシン誘導体を得る工程。
【請求項４５】  さらに、前記抗菌ラスパートマイシン誘導体を単離する工程を包含する、請求項４４に記載の方法。
【請求項４６】  前記ラスパートマイシンコアペプチドが、請求項１、２３および２４のいずれか１項に記載の方法により提供される、請求項４４に記載の方法。
【請求項４７】  前記ラスパートマイシンコアペプチドが、請求項３６および３８のいずれか１項に記載の化合物である、請求項４４に記載の方法。
【請求項４８】  請求項４０および４４のいずれか１項に記載の方法により提供される、ラスパートマイシン誘導体。
【請求項４９】  構造式（ＩＩ）を有する、単離抗菌ラスパートマイシン誘導体、またはその薬学的に受容可能な塩または水和物であって：
（ＩＩ）    Ｙ２−（Ｘ２−Ｘ３）−Ｌ−Ｘ１−Ｎ（Ｒ１）−Ｒ
ここで、
Ｙ２は、親油性基である；
Ｘ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＳ−、−ＰＯ−、−ＯＰＯ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣＯ−および−ＮＲ１ＣＯ−からなる群から選択される；
Ｘ２は、連結基である；
Ｘ３は、連結基である；
Ｌは、リンカーである；
Ｎは、窒素である；
Ｒ１は、水素、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ１〜Ｃ１０）ヘテロアルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１５）アリールアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１５）ビアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した５員〜１０員ヘテロアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキル、および１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した６員〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される；
各Ｒ２は、独立して、−ＯＲ３、−ＳＲ３、−ＮＲ３Ｒ３、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ３、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ３Ｒ３、−Ｃ（ＮＲ３）ＮＲ３Ｒ３、−ＣＨＯ、−Ｒ３ＣＯ、−ＳＯ２Ｒ３、−ＳＯＲ３、−ＰＯ（ＯＲ３）２、−ＰＯ（ＯＲ３）、−ＣＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＰＯ３Ｈ、ハロゲンおよびトリハロメチルからなる群から選択される；
各Ｒ３は、独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、５員〜１０員ヘテロアリール、（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキルおよび６員〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される；および
Ｒは、ラスパートマイシンのコア環状ペプチドである、
ラスパートマイシン誘導体、またはその薬学的に受容可能な塩または水和物。
【請求項５０】  Ｒが、以下の構造を有する、請求項４９に記載のラスパートマイシン誘導体：
【化６】
2004528268.tif 000007
【請求項５１】  （Ｘ２−Ｘ３）が、一緒になって、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｏ（Ｏ）Ｃ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＲ１−、−ＮＲ１ＣＯ−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）Ｃ−、−ＯＳＯ２、−Ｓ（Ｏ２）Ｏ−、−ＮＨＳＯ２−、−ＮＲ１ＳＯ２、−Ｓ（Ｏ２）ＮＨ−、−Ｓ（Ｏ２）ＮＲ１、−Ｃ（Ｓ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｓ）−、−ＮＨＰ（Ｏ）−、−Ｐ（Ｏ）ＮＨ−、−ＯＰ（Ｏ）−、−Ｐ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＰ（Ｏ）−、−Ｐ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１−、−ＮＲ１Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＲ１−、−ＮＲ１Ｃ（Ｏ）ＮＨ−およびＮＲ１Ｃ（Ｏ）ＮＲ１からなる群から選択される、請求項５０に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項５２】  Ｒ１が、水素である、請求項５１に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項５３】  Ｘ１が、−ＣＯ−または−ＳＯ２−であり、そしてＬが、以下またはその薬学的に受容可能な塩または水和物からなる群から選択される、請求項５２に記載のラスパートマイシン誘導体：
【化７】
2004528268.tif 000008
ここで、
ｎは、０、１、２または３である；
各Ｓ１は、水素、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ１〜Ｃ１０）ヘテロアルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１５）アリールアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１５）ビアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した５員〜１０員ヘテロアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキル、および１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した６員〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される；
各Ｒ４は、独立して、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−ＮＲ５Ｒ５、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ５、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ５Ｒ５、−Ｃ（ＮＲ５）ＮＲ５Ｒ５、−ＣＨＯ、−Ｒ５ＣＯ、−ＳＯ２Ｒ５、−ＳＯＲ５、−ＰＯ（ＯＲ５）２、−ＰＯ（ＯＲ５）、−ＣＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＰＯ３Ｈ、ハロゲンおよびトリハロメチルからなる群から選択される；
各Ｒ５は、独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、５員〜１０員ヘテロアリール、（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキルおよび６員〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される；および
各Ｋは、独立して、酸素、窒素、イオウおよびリンからなる群から選択される、
ラスパートマイシン誘導体。
【請求項５４】  各Ｓ１が、独立して、遺伝的にコードされたα−アミノ酸の側鎖である、請求項５３に記載の化合物。
【請求項５５】  Ｌが、以下である、請求項５３に記載の化合物：
【化８】
2004528268.tif 000009
【請求項５６】  各Ｓ１が、独立して、遺伝的にコードされたα−アミノ酸の側鎖である、請求項５５に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項５７】  ｎが、０である、請求項５５に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項５８】  Ｓ１が、−ＣＨ２−ＣＯ２Ｈまたはその薬学的に受容可能な塩または水和物である、請求項５７に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項５９】  （Ｘ２−Ｘ３）が、一緒になって、−ＣＯＮＨ−である、請求項５８に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項６０】  Ｙ２が、テトラデカン−１−イルである、請求項５９に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項６１】  Ｌが、以下またはその塩または水和物である、請求項５５に記載のラスパートマイシン誘導体：
【化９】
2004528268.tif 000010
ここで、Ｓ２およびＳ３は、それぞれ独立して、遺伝的にコードされたα−アミノ酸の側鎖である、ラスパートマイシン誘導体。
【請求項６２】  Ｓ２が、−ＣＨ２−インドール−２−イルであり、そしてＳ３が、−ＣＨ２−ＣＯ２Ｈまたはその薬学的に受容可能な塩または水和物である、請求項６１に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項６３】  （Ｘ２−Ｘ３）が、一緒になって、−ＣＯＮＨ−である、請求項６２に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項６４】  Ｙ２が、ノナン−１−イルである、請求項６３に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項６５】  Ｓ２が、水素であり、そしてＳ３が、−ＣＨ２−ＣＯ２Ｈまたはその塩である、請求項６１に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項６６】  （Ｘ２−Ｘ３）が、一緒になって、−ＳＯ２ＮＨ−である、請求項６５に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項６７】  Ｙ２が、デカン−１−イルである、請求項６６に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項６８】  Ｌが、以下またはその塩または水和物である、請求項５５に記載のラスパートマイシン誘導体：
【化１０】
2004528268.tif 000011
ここで、Ｓ２、Ｓ３およびＳ４は、それぞれ別個に、遺伝的にコード化したα−アミノ酸の側鎖である、ラスパートマイシン誘導体。
【請求項６９】  Ｓ２が、−ＣＨ２−インドール−２−イルであり、Ｓ３が、−ＣＨ２−ＣＯ２Ｈまたはその塩であり、そしてＳ４が、−ＣＨ２−ＣＯ２Ｈまたはその塩である、請求項６８に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項７０】  （Ｘ２−Ｘ３）が、一緒になって、−ＣＯＮＨ−である、請求項６９に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項７１】  Ｙ２が、ノナン−１−イルである、請求項７０に記載のラスパートマイシン誘導体。
【請求項７２】  請求項４８に記載の化合物および薬学的に受容可能な賦形剤、担体または希釈剤を含有する、薬学的組成物。
【請求項７３】  微生物感染を処置する方法であって、被験体に、有効量の請求項４９に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。
【請求項７４】  微生物感染を処置する方法であって、被験体に、有効量の請求項７１に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。
【請求項７５】  微生物の増殖を阻止する方法であって、微生物に、有効量の請求項４８に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。
【請求項７６】  請求項４９に記載の化合物および薬学的に受容可能な賦形剤、担体または希釈剤を含有する、薬学的組成物。
【請求項７７】  微生物感染を処置する方法であって、被験体に、有効量の請求項４９に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。
【請求項７８】  微生物感染を処置する方法であって、被験体に、有効量の請求項７５に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。
【請求項７９】  微生物の増殖を阻止する方法であって、微生物に、有効量の請求項４９に記載の化合物を投与する工程を包含する、方法。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
本願は、２００１年１月１２日に出願された米国特許出願第０９／７６０，３２８号（これは、２０００年７月１７日に出願された米国仮特許出願第６０／２１９，０９５号および２０００年７月２６日に出願された米国仮特許出願第６０／２２０，９５０号から３５  Ｕ．Ｓ．Ｃ．１１９（ｅ）に基づく優先権を主張している）の部分継続出願である。上記出願の内容は、本明細書中で参考として援用されている。
【０００２】
（１．発明の分野）
本発明は、一般に、抗生物質および抗菌誘導体に関する。さらに特定すると、本発明は、ラスパートマイシン（ｌａｓｐａｒｔｏｍｙｃｉｎ）誘導体、ならびにラスパートマイシン誘導体を合成するのに有用な中間体に関する。
【０００３】
（２．発明の背景）
ラスパートマイシン（Ｕｍｅｚａｗａら、米国特許第３，６３９，５８２号；Ｎａｇａｎａｗａら、１９６８，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，２１，５５；Ｎａｇａｎａｗａら、１９７０，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，２３，４２３（これらの内容は、本明細書中で参考として援用されている））は、抗生物質、例えば、ザオマイシン（ｚａｏｍｙｃｉｎ）（Ｋｕｒｏｙａ，１９６０，Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  Ａｎｎ．，１９４；Ｋｕｒｏｙａ，日本特許第８１５０号）、クリスタロマイシン（ｃｒｙｓｔａｌｏｍｙｃｉｎ）、（Ｇａｕｚｅら、１９５７，Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｋｉ，２，９）、アスパルトシン（ａｓｐａｒｔｏｃｉｎ）（Ｓｈａｙら、１９６０，Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  Ａｎｎｕａｌ，１９４；Ｈａｕｓｍａｎら、１９６４，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，３５２；Ｈａｕｓｍａｎら、１９６９，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，２２，２０７；Ｍａｒｔｉｎら、１９６０，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２０７９）、アンホマイシン（Ｂｏｄａｎｓｚｋｙら、１９７３，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，９５，２３５２）、グルママイシン（ｇｌｕｍａｍｙｃｉｎ）（Ｆｕｊｉｎｏら、１９６５、Ｂｕｌｌ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｊａｐ．、３８，５１５）、ダプトマイシン（ｄａｐｔｏｍｙｃｉｎ）（Ｄｅｂｏｎｏら、１９８８，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１０９３）、抗生物質Ａ−１４３７（Ｈａｍｍａｎｎら、ＥＰ  ０  ６２９  ６３６  Ｂ１；Ｌａｔｔｒｅｌｌら、米国特許第５，６２９，２８８）号、抗生物質Ａ−５４１４５（Ｆｕｋａｄａら、米国特許第５，０３９，７８９号；Ｂｏｅｃｋら、１９９０，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４３，５８７）およびツシマイシン（ｔｓｕｓｈｉｍｙｃｉｎ）（Ｓｈｏｊｉら、１９６８，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，２１，４３９）と密接に関連している。上記化合物は、リポペプチド抗生物質であり、これらは、典型的には、グラム陽性菌を阻害する。リポペプチド抗生物質は、一般に、環状コアペプチドまたは環状コアデプシペプチドのいずれかからなり、これは、親油性断片（例えば、不飽和脂肪酸）でアシル化されている。
【０００４】
ラスパートマイシンは、微生物Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ  ｖａｒ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓを発酵することにより生成されるが、耐性ブドウ球菌に対して活性がある化合物についてスクリーニングしている間に、初めて単離された（Ｎａｇａｎａｗａら、１９６８，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，２１，５５；Ｕｍｅｚａｗａら、米国特許第３，６３９，５８２号）。ラスパートマイシンは、通常の方法により特徴付けられ、種々のグラム陽性菌（ブドウ球菌およびある種の真菌）に対して活性であることが明らかとなった（上記）。元素分析およびアミノ酸分析により、このリポペプチド抗生物質について、約１８２７の分子量が得られたのに対して、アミノ酸分析により、ラスパートマイシンのペプチド部分では、アミノ酸スレオニンおよびジアミノ酪酸の存在が明らかとなった（上記）。
【０００５】
他の研究では、ラスパートマイシンの主要親油性断片は、以下で図示するトランス−２−イソペンタデカン酸２であることが明らかになっている（Ｎａｇａｎａｗａら、１９７０，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．２３，４２３）。対照的に、アスパルトシン（ａｓｐａｒｔｏｃｉｎ）（Ｈａｕｓｍａｎｎら、１９６３，Ａｎｔｉｍｉｃｒ．Ａｇｅｎｔｓ  ＆  Ｃｈｅｍｏｔｈ．，３５２，１９６２）、グルママイシン（ｇｌｕｍａｍｙｃｉｎ）（Ｉｎｏｕｅ，１９６２，Ｂｕｌｌ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｊａｐ．，３５，１２５５）、ツシマイシン（ｔｓｕｓｈｉｍｙｃｉｎ）（Ｓｈｏｊｉら、１９６８，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，２１，４３９）およびアンホマイシン（Ｓｈｏｊｉら、１９６９，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，２２，４７３）のような抗生物質の親油性部分は、全て、シスβ−γ不飽和カルボン酸から誘導される。
【０００６】
【化１１】
2004528268.tif 000012
本願で記述した結果は、当該技術分野で開示されたアミノ酸分析および分子量が不正確であることを示している（Ｕｍｅｚａｗａら、米国特許第３，６３９，５８２号；Ｎａｇａｎａｗａら、１９６８，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，２１，５５）。特に、本願で開示された研究により、ラスパートマイシンのペプチドコアが他の公知の親油性抗菌抗生物質では発見されていない新規なアミノ酸を含有するみことが明らかとなっている。例えば、ラスパートマイシンは、このペプチドコアにジアミノプロピオン酸を含有する抗菌リポペプチドの唯一の構成要素である。アンホマイシン、アスパルトシン、ザオマイシン、ツシマイシンおよび抗生物質Ａ−１４３７は、その代わりに、その分子のペプチド部分に、２，３−ジアミノ酪酸を含有する（Ｋｕｒｏｙａ，１９６０，Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  Ａｎｎ．，１９４；Ｇａｕｚｅら、１９５７，Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｋｉ，２，９；Ｓｈａｙら、１９６０，Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ  Ａｎｎｕａｌ，１９４−１９８；Ｈａｕｓｍａｎら、１９６４，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇ．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．，３５２；Ｈａｕｓｍａｎら、１９６９，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，２２，２０７；Ｍａｒｔｉｎら、１９６０，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２０７９；Ｂｏｄａｎｓｚｋｙら、１９７３，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，９５，２３５２；Ｆｕｊｉｎｏら、１９６５，Ｂｕｌｌ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｊａｐ．，３８，５１５；Ｈａｍｍａｎｎら、ＥＰ  ０  ６２９  ６３６  Ｂ１；Ｌａｔｔｒｅｌｌら、米国特許第５，６２９，２８８；Ｓｈｏｊｉら、１９６８，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，２１，４３９）。それに加えて、ラスパートマイシンは、アロ−スレオニンを含有し、これは、他の公知のリポペプチドでは発見されていない。さらに、ラスパートマイシンは、化合物２でアシル化した環状コアペプチドのための約１２４７の分子量を有する公知のリポペプチドのうちで最小のものである。
【０００７】
グラム陽性菌に対する親油性抗生物質の有効性にもかかわらず、これらの抗生物質の医薬品化学作用は、大部分、未開拓のままである。しかしながら、抗生物質に耐性がある病原体および感染症が最近劇的に増加している（これは、一部には、抗生物質の乱用により引き起こされている）ことを考えると、新規な抗菌剤が緊急に必要とされている（Ｃｏｈｅｎら、１９９２，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２５７，１０５０〜１０５５）。具体的には、メチシリン耐性菌は、頻繁には、メチシリン以外の広範囲の他の抗生物質にも耐性があるので、特に問題である（Ｙｏｓｈｉｄａら、米国特許第５，１７１，８３６号）。グラム陽性菌（例えば、ブドウ球菌）は、持続的な感染を引き起こすが、メチシリン耐性であるとき、特に危険である。さらに警戒を要することに、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃｉｕｍのバンコマイシン耐性株が観察されている（Ｍｏｅｌｌｅｒｉｎｇ，１９９０，Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．，３，４６）。バンコマイシンに耐性がある株は、バンコマイシンが数種の有害な病原体に対する最終手段の抗生物質であるので、社会に対して十分な健康上の脅威をもたらす。それゆえ、メチシリンまたはバンコマイシンに耐性がある微生物に対して活性な抗菌剤が一般または特別に必要とされている。
【０００８】
（３．発明の要旨）
本発明は、抗菌ラスパートマイシン誘導体、抗菌ラスパートマイシン誘導体の薬学的組成物、抗菌ラスパートマイシン誘導体を製造する方法、微生物の成長を阻止する方法および被験体における微生物感染を治療または予防する方法を提供することにより、この必要性および他の必要性を検討する。本発明はまた、ラスパートマイシンコアペプチド、ラスパートマイシンコアペプチドを製造する方法およびラスパートマイシンコアペプチド誘導体およびラスパートマイシンコアペプチド誘導体を製造する方法を提供し、これらの全ては、抗菌ラスパートマイシン誘導体を合成する際に有用である。
【０００９】
１局面では、本発明は、抗菌ラスパートマイシン誘導体の合成における重要な中間体として使用され得るラスパートマイシンコアペプチド誘導体を提供する。このラスパートマイシンコアペプチド誘導体の必須部分は、窒素原子に結合したコア環状ペプチドであり、これは、種々の官能基（例えば、カーバメート、アミドまたはスルホンアミド）の一部であり得る。
【００１０】
１実施形態では、このラスパートマイシンコアペプチド誘導体は、リンカーを含有し、これは、典型的には、このラスパートマイシンコアペプチドの窒素に結合している。このリンカーは、アミノ酸、ポリアミド、ポリアミン、ポリエーテル、ポリスルホンアミドまたは他の当業者に公知のリンカーのような化合物から誘導され得る。このリンカーは、典型的には、連結基を含有し、これは、共有結合形成に関与できる任意の化学官能基であり得る。この連結基は、このラスパートマイシンコアペプチド誘導体をさらに変性する部位を提供する。例えば、この連結基は、親油性部分で変性されて、本発明のラスパートマイシン誘導体を提供し得る。
【００１１】
それゆえ、例証的な１実施形態では、本発明は、構造式（Ｉ）を有するラスパートマイシンコアペプチド誘導体、またはその塩または水和物を提供する：
【００１２】
【化１２】
2004528268.tif 000013
ここで、以下の（ｉ）または（ｉｉ）のいずれかである：
（ｉ）Ｙ１−Ｌ−Ｘ１は、一緒になって、水素である；または
（ｉｉ）Ｙ１は、連結基である；
Ｌは、リンカーである；
Ｘ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＳ−、−ＰＯ−、−ＯＰＯ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣＯ−および−ＮＲ１ＣＯ−からなる群から選択される；
Ｎは、窒素である；
Ｒ１は、水素、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ１〜Ｃ１０）ヘテロアルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１５）アリールアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１５）ビアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した５員〜１０員ヘテロアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ６〜Ｃ１６）アルキルアリールおよび１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した６員〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される；
各Ｒ２は、別個に、−ＯＲ３、−ＳＲ３、−ＮＲ３Ｒ３、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ３、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ３Ｒ３、−Ｃ（ＮＲ３）ＮＲ３Ｒ３、−ＣＨＯ、−Ｒ３ＣＯ、−ＳＯ２Ｒ３、−ＳＯＲ３、−ＰＯ（ＯＲ３）２、−ＰＯ（ＯＲ３）、−ＣＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＰＯ３Ｈ、ハロゲンおよびトリハロメチルからなる群から選択される；
各Ｒ３は、別個に、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、５員〜１０員ヘテロアリール、（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキルおよび６員〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される；および
Ｒは、ラスパートマイシンのコア環状ペプチドである。
【００１３】
別の局面では、本発明は、抗菌ラスパートマイシン誘導体を提供する。この抗菌ラスパートマイシン誘導体は、一般に、親油性部分でさらに変性された本発明のラスパートマイシンコアペプチド誘導体である。この親油性部分は、通常、このコアペプチド誘導体の窒素原子に共有結合した連結基に結合される。
【００１４】
それゆえ、他の例証的な実施形態では、本発明は、構造式（ＩＩ）を有する抗菌ラスパートマイシン誘導体、またはその薬学的に受容可能な塩または水和物を提供する：
【００１５】
【化１３】
2004528268.tif 000014
Ｙ２は、親油性基である；
Ｘ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＳ−、−ＰＯ−、−ＯＰＯ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣＯ−および−ＮＲ１ＣＯ−からなる群から選択される；
Ｘ２は、連結基である；
Ｘ３は、連結基である；そして
Ｎ、Ｌ、Ｒ１およびＲは、式（Ｉ）について先に定義したとおりである。
【００１６】
第三の局面では、本発明は、ラスパートマイシンコアペプチドを製造する方法を提供し、この方法は、培地で微生物Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ，ｓｓｐ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓ（ＡＴＣＣ  ２９８１４）を培養して、ラスパートマイシンを提供する工程を包含する。ラスパートマイシンの単離に続いて親油性断片を開裂すると、このラスパートマイシンコアペプチドが得られる。
【００１７】
第四の局面では、本発明は、ラスパートマイシンコアペプチド誘導体を合成する方法を提供する。連結部分は、ラスパートマイシンコアペプチドに共有結合されて、ラスパートマイシンコアペプチド誘導体を提供し得る。
【００１８】
第五の局面では、本発明は、抗菌ラスパートマイシン誘導体を合成する方法を提供する。第一方法では、連結部分は、ラスパートマイシンコアペプチドに共有結合されて、ラスパートマイシンコアペプチド誘導体を生じ得る。次いで、このラスパートマイシンコアペプチド誘導体に、親油性基が共有結合されて、抗菌ラスパートマイシン誘導体が提供され得る。第二方法では、連結部分は、親油性基に共有結合されて、リンカー−親油性基が生じ得る。次いで、このリンカー−親油性基は、このラスパートマイシンコアペプチドに共有結合されて、抗菌ラスパートマイシン誘導体が提供され得る。
【００１９】
第六の局面では、本発明は、本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体を含有する薬学的組成物を提供する。この薬学的組成物は、一般に、１種またはそれ以上の本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体、および／またはそれらの薬学的に受容可能な塩および薬学的に受容可能な担体、賦形剤または希釈剤を含有する。担体、賦形剤または希釈剤の選択は、特に、所望の投与様式に依存している。
【００２０】
第七の局面では、本発明は、微生物（例えば、グラム陽性菌、特に、メチシリン耐性黄色ブドウ球菌およびバンコマイシン耐性腸球菌）の成長を阻止する方法を提供する。この方法は、一般に、微生物の成長を阻止するのに有効な量で、この微生物を１種またはそれ以上の本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体（またはその薬学的に受容可能な塩）と接触させる工程を包含する。この方法は、この微生物の成長が阻止される場合、静菌効果を達成するために、またはこの微生物が殺される場合、殺菌効果を達成するために、実用的であり得る。
【００２１】
最終局面では、本発明は、被験体（例えば、ヒト、植物または動物）の微生物感染を治療および／または予防する方法を提供する。これらの方法は、被験体に、ヒト、動物または植物における微生物感染を治療または予防するのに有効な量で、１種またはそれ以上の本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体または薬学的組成物を投与する工程を包含する。これらの抗菌ラスパートマイシン誘導体、塩または組成物は、その微生物感染に依存して、全身的に投与され得るか、または局所的に適用され得る。
【００２２】
（４．発明の詳細な説明）
（４．１  定義）
本明細書中で使用する以下の用語は、以下の意味を有すると解釈される。
【００２３】
「ラスパートマイシン」とは、培地で微生物Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ，ｓｓｐ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓ（ＡＴＣＣ  ２９８１４）を培養することにより生成される少なくとも３種の異なる化合物の混合物を意味する。その親油性側鎖の構造は、これらの３種の化合物において、異なることが理解できるはずである。
【００２４】
【化１４】
2004528268.tif 000015
ラスパートマイシンの主要成分（典型的には、本願で使用される発酵および処理条件下にて、約８０％）は、上記Ｃ−１５α−β不飽和カルボン酸２でアシル化されて、下記Ｃ−１５ラスパートマイシン４が提供される。
【００２５】
【化１５】
2004528268.tif 000016
その２種の少量成分は、上記Ｃ−１５α−β不飽和カルボン酸２のＣ−１４およびＣ−１６類似物である。この培地の処方および培地成分の割合は、ラスパートマイシンの成分の割合に直接的な影響を有する。それゆえ、「ラスパートマイシン」との用語を使用する際には、特定の成分組成を有するとは解釈されない。
【００２６】
「親油性断片」とは、培地で微生物Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ，ｓｓｐ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓ（ＡＴＣＣ  ２９８１４）を培養することにより生成されるラスパートマイシンコアペプチドに結合した任意の親油性部分を意味する。それゆえ、親油性断片には、上記Ｃ−１４、Ｃ−１５およびＣ−１６α−β不飽和カルボン酸のＣ−１４、Ｃ−１５およびＣ−１６アシル類似物が挙げられるが、これらに限定されない。
【００２７】
「コア環状ペプチド」とは、下記ラスパートマイシンＲの環状部分を意味する：
【００２８】
【化１６】
2004528268.tif 000017
点線は、式（Ｉ）、（ＩＩ）および（ＩＩＩ）の窒素に結合した炭素原子を示す。
【００２９】
「ラスパートマイシンコアペプチド」とは、少なくとも親油性断片の開裂後のラスパートマイシンのペプチド部分を意味する。このラスパートマイシンコアペプチドは、下記式（ＩＩＩ）で表わされ得る：
【００３０】
【化１７】
2004528268.tif 000018
ここで、Ｒｘは、ＨまたはＮＨ２ＣＨ（ＣＨ２ＣＯ２Ｈ）ＣＯ−のいずれかであり、そしてＲは、上で定義したラスパートマイシンのコア環状ペプチドである。
【００３１】
「アルキル」とは、飽和または不飽和の分枝、直鎖または環状一価炭化水素基であって、親アルカン、アルケンまたはアルキンの単一炭素原子から１個の水素原子を除去することにより誘導されたものを意味する。典型的なアルキル基には、メチル；エチル（例えば、エタニル、エテニル、エチニル）；プロピル（例えば、プロパン−１−イル、プロパン−２−イル、シクロプロパン−１−イル、プロプ−１−エン−１−イル、プロプ−１−エン−２−イル、プロプ−２−エン−１−イル（アリル）、シクロプロプ−１−エン−１−イル、シクロプロプ−２−エン−１−イル、プロプ−１−イン−１−イル、プロプ−２−イン−１−イルなど）；ブチル（例えば、ブタン−１−イル、ブタン−２−イル、２−メチル−プロパン−１−イル、２−メチル−プロパン−２−イル、シクロブタン−１−イル、ブト−１−エン−１−イル、ブト−１−エン−２−イル、２−メチル−プロプ−１−エン−１−イル、ブト−２−エン−１−イル、ブト−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブト−１−エン−１−イル、シクロブト−１−エン−３−イル、シクロブト−１，３−ジエン−１−イル、ブト−１−イン−１−イル、ブト−１−イン−３−イル、ブト−３−イン−１−イルなど）などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３２】
「アルキル」との用語は、具体的には、任意の飽和度または飽和レベルを有する基、すなわち、炭素−炭素単結合だけを有する基、１個またはそれ以上の炭素−炭素二重結合を有する基、１個またはそれ以上の炭素−炭素三重結合を有する基、および炭素−炭素単結合、炭素−炭素二重結合および炭素−炭素三重結合の混合物を有する基を含むと解釈される。特定の飽和レベルを意味している場合、「アルカニル」、「アルケニル」および「アルキニル」との表現が使用される。「低級アルキル」との表現は、１個〜８個の炭素原子を含むアルキル基を意味する。
【００３３】
「アルカニル」とは、飽和の分枝、直鎖または環状アルキル基をいう。典型的なアルカニル基には、メタニル；エタニル；プロパニル（例えば、プロパン−１−イル、プロパン−２−イル（イソプロピル）、シクロプロパン−１−イルなど）；ブタニル（例えば、ブタン−１−イル、ブタン−２−イル（ｓｅｃ−ブチル）、２−メチル−プロパン−１−イル（イソブチル）、２−メチル−プロパン−２−イル（ｔ−ブチル）、シクロブタン−１−イルなど）などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３４】
「アルケニル」とは、少なくとも１個の炭素−炭素二重結合を有する不飽和の分枝、直鎖または環状アルキル基であって、親アルケンの単一炭素原子から１個の水素原子を除去することにより誘導されたものをいう。この基は、その二重結合の周りにおいて、シス立体配座またはトランス立体配座のいずれかであり得る。典型的なアルケニル基には、エテニル；プロペニル（例えば、プロプ−１−エン−１−イル、プロプ−１−エン−２−イル、プロプ−２−エン−１−イル（アリル）、プロプ−２−エン−２−イル、シクロプロプ−１−エン−１−イル、シクロプロプ−２−エン−１−イル）；ブテニル（例えば、ブト−１−エン−１−イル、ブト−１−エン−２−イル、２−メチル−プロプ−１−エン−１−イル、ブト−２−エン−１−イル、ブト−２−エン−２−イル、ブタ−１，３−ジエン−１−イル、ブタ−１，３−ジエン−２−イル、シクロブト−１−エン−１−イル、シクロブト−１−エン−３−イル、シクロブタ−１，３−ジエン−１−イルなど）などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３５】
「アルキニル」とは、少なくとも１個の炭素−炭素三重結合を有する不飽和の分枝、直鎖または環状アルキル基であって、親アルキンの単一炭素原子から１個の水素原子を除去することにより誘導されたものをいう。典型的なアルキニル基には、エチニル；プロピニル（例えば、プロプ−１−イン−１−イル、プロプ−２−イン−１−イルなど）；ブチニル（例えば、ブト−１−イン−１−イル、ブト−１−イン−３−イル、ブト−３−イン−１−イルなど）などが挙げられるが、これらに限定されない。
【００３６】
「アリール」とは、一価芳香族炭化水素基であって、親芳香環系の単一炭素原子から１個の水素原子を除去することにより誘導されたものをいう。典型的なアリール基には、以下から誘導された基が挙げられるが、これらに限定されない：アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、コロネン、フルオランテン、フルオレン、ヘキサセン、ヘキサフェン、ヘキサレン、ａｓ−インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン、オクタフェン、オクタレン、オバレン、ペンタ−２，４−ジエン、ペンタセン、ペンタレン、ペンタフェン、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン、プレイアデン、ピレン、ピラントレン、ルビセン、トリフェニレン、トリナフタレンなど。好ましい実施形態では、このアリール基は、（Ｃ５〜Ｃ１４）アリールであり、（Ｃ５〜Ｃ１０）がさらにより好ましい。
【００３７】
「アリールアリール」とは、環系の単一炭素原子から１個の水素原子を除去することにより誘導された一価炭化水素基であって、２個以上の同一または異なる親芳香環系が単一結合により共に直接接合されたものを意味し、ここで、このような直接的な環接合の数は、関与している親芳香環系の数よりも１個少ない。典型的なアリールアリール基には、ビフェニル、トリフェニル、フェニル−ナフチル、ビナフチル、ビフェニル−ナフチルなどが挙げられるが、これらに限定されない。アリールアリール基中の炭素原子の数が特定される場合、これらの数は、各親芳香環を構成する炭素原子をいう。例えば、（Ｃ５〜Ｃ１４）アリールアリールは、各芳香環が５個〜１４個の炭素を含むアリールアリール基（例えば、ビフェニル、トリフェニル、ビナフチル、フェニルナフチルなど）である。好ましくは、アリールアリール基の各親芳香環系は、独立して、（Ｃ５〜Ｃ１４）芳香族、さらに好ましくは、（Ｃ５〜Ｃ１０）芳香族である。また、この親芳香環系の全てが同一であるアリールアリール基（例えば、ビフェニル、トリフェニル、ビナフチル、トリナフチルなど）も、好ましい。
【００３８】
「ビアリール」とは、２個の同一親芳香環系が単一結合により共に直接接合したアリールアリール基をいう。典型的なビアリール基には、ビフェニル、ビナフチル、ビアントラシルなどが挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、この芳香環系は、（Ｃ５〜Ｃ１４）芳香環、さらに好ましくは、（Ｃ５〜Ｃ１０）芳香環である。特に好ましいビアリール基は、ビフェニルである。
【００３９】
「アリールアルキル」とは、炭素原子（典型的には、末端またはｓｐ３炭素原子）に結合した水素原子の１個がアリール基で置換された非環式アルキル基をいう。典型的なアリールアルキル基には、ベンジル、２−フェニルエタン−１−イル、２−フェニルエテン−１−イル、ナフチルメチル、２−ナフチルエタン−１−イル、２−ナフチルエテン−１−イル、ナフトベンジル、２−ナフトフェニルエタン−１−イルなどが挙げられるが、これらに限定されない。特定のアルキル部分が意図されている場合、アリールアルカニル、アリールアルケニルおよび／またはアリールアルキニルという学名が使用される。好ましい実施形態では、このアリールアルキル基は、（Ｃ６〜Ｃ２０）アリールアルキルであり、例えば、このアリールアルキル基のアルカニル、アルケニルまたはアルキニル部分は、（Ｃ１〜Ｃ６）であり、そのアリール部分は、（Ｃ５〜Ｃ１４）である。特に好ましい実施形態では、このアリールアルキル基は、（Ｃ６〜Ｃ１３）であり、例えば、このアリールアルキル基のアルカニル、アルケニルまたはアルキニル部分は、（Ｃ１〜Ｃ３）であり、そのアリール部分は、（Ｃ５〜Ｃ１０）である。
【００４０】
「ヘテロアリール」とは、一価ヘテロ芳香族基であって、親ヘテロ芳香環系の単一原子から１個の水素原子を除去することにより誘導されたものをいう。典型的なヘテロアリール基には、以下から誘導された基が挙げられるが、これらに限定されない：アクリジン、アルシンドール、カルバゾール、β−カルボリン、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソキサゾール、ナフチリジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペリミジン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサジン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール、キサンテンなど。好ましい実施形態では、このヘテロアリール基は、５員〜１４員のヘテロアリールであり、５員〜１０員のヘテロアリールが特に好ましい。最も好ましいヘテロアリール基は、チオフェン、ピロール、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、インドール、ピリジン、キノリン、イミダゾール、オキサゾールおよびピラジンから誘導されたものである。
【００４１】
「ヘテロアリールアルキル」とは、炭素原子（典型的には、末端またはｓｐ３炭素原子）に結合した水素原子の１個をヘテロアリール基で置換した非環式アルキル基をいう。特定のアルキル部分が意図されている場合、ヘテロアリールアルカニル、ヘテロアリールアルケニルおよび／またはヘテロアリールアルキニルとの学名が使用される。好ましい実施形態では、このヘテロアリールアルキル基は、６員〜２０員ヘテロアリールアルキルであり、例えば、このヘテロアリールアルキルのアルカニル、アルケニルまたはアルキニル部分は、１員〜６員であり、そのヘテロアリール部分は、５員〜１４員ヘテロアリールである。特に好ましい実施形態では、このヘテロアリールアルキルは、６員〜１３員ヘテロアリールアルキルであり、例えば、そのアルカニル、アルケニルまたはアルキニル部分は、１員〜３員であり、そのヘテロアリール部分は、５員〜１０員ヘテロアリールである。
【００４２】
「置換された」とは、１個以上の水素原子が、それぞれ独立して、同一または異なる置換基で置換された基をいう。典型的な置換基には、−Ｘ、−Ｒ６、−Ｏ−、＝Ｏ、−ＯＲ、−ＳＲ６、−Ｓ−、＝Ｓ、−ＮＲ６Ｒ６、＝ＮＲ６、−ＣＸ３、−ＣＦ３、−ＣＮ、−ＯＣＮ、−ＳＣＮ、−ＮＯ、−ＮＯ２、＝Ｎ２、−Ｎ３、−Ｓ（Ｏ）２Ｏ−、−Ｓ（Ｏ）２ＯＨ、−Ｓ（Ｏ）２Ｒ６、−ＯＳ（Ｏ２）Ｏ−、−ＯＳ（Ｏ）２ＯＨ、−ＯＳ（Ｏ）２Ｒ６、−Ｐ（Ｏ）（Ｏ−）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）（Ｏ−）、−ＯＰ（Ｏ）２（Ｏ−）、−Ｃ（Ｏ）Ｒ６、−Ｃ（Ｓ）Ｒ６、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ６および−Ｃ（ＮＲ６）ＮＲ６Ｒ６が挙げられるが、これらに限定されず、ここで、各Ｘは、独立して、ハロゲンである；各Ｒは、独立して、水素、ハロゲン、アルキル、アリール、アリールアルキル、アリールアリール、アリールヘテロアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、−ＮＲ７Ｒ７、−Ｃ（Ｏ）Ｒ７または−Ｓ（Ｏ）２Ｒ７である；そして各Ｒ７は、独立して、水素、アルキル、アルカニル、アルキニル、アリール、アリールアルキル、アリールヘテロアルキル、アリールアリール、ヘテロアリールまたはヘテロアリールアルキルである。
【００４３】
ここで、本発明の好ましい実施形態を詳細に言及する。本発明は、好ましい実施形態に関連して記述されているものの、本発明をこれらの好ましい実施形態に限定するとは解釈されないことが理解されるべきである。それと反対に、本発明は、添付の請求の範囲で規定される本発明の精神および範囲内に含まれる得る代替物、改変物および等価物を含むと解釈される。
【００４４】
（４．２  本発明）
本発明は、ラスパートマイシンコアペプチド、ラスパートマイシンコアペプチド誘導体、抗菌ラスパートマイシン誘導体、ラスパートマイシンコアペプチドを製造する方法、ラスパートマイシンコアペプチド誘導体を製造する方法、抗菌ラスパートマイシン誘導体を製造する方法、抗菌ラスパートマイシン誘導体の薬学的組成物、微生物の成長を阻止する方法および被験体における微生物感染を治療および／または予防する方法を提供する。
【００４５】
当業者は、一般式（Ｉ〜ＩＩＩ）に含まれる多数の化合物および本明細書中で具体的に記述した化合物種が、互変異性、配剤異性、幾何異性および／または立体異性の現象を示し得ることを理解する。本明細書および特許請求の範囲内の図式が、可能な互変異性、配座異性、鏡像異性または幾何異性形態の１つだけを示すことができるので、本発明は、本明細書中で記述した有用性の１つ以上を有する化合物の任意の互変異性形態、配座異性形態、鏡像異性形態および／または幾何異性形態、ならびにこれらの種々の異なる形態の混合物を含むことが理解されるべきである。
【００４６】
（４．２．１  ラスパートマイシンコアペプチド誘導体）
ラスパートマイシンコアペプチド誘導体は、先に記述した抗生物質よりも耐性種に対して高い活性を有し得る多種多様な抗菌ラスパートマイシン誘導体への合成アクセスを与える。ラスパートマイシンコアペプチド誘導体から多種多様な単離抗菌ラスパートマイシン誘導体が合成できるという簡単さにより、その親油性基および／またはリンカーおよび連結基に対して、構造−活性関係が確立され得る。従って、ラスパートマイシンコアペプチド誘導体にアクセスすると、抗菌ラスパートマイシン誘導体の医薬品化学作用が容易に研究できるようになり得る。
【００４７】
ラスパートマイシンコアペプチド誘導体には、構造式（Ｉ）で記述される化合物、あるいはそれらの塩または水和物が挙げられる：
（Ｉ）        Ｙ１−Ｌ−Ｘ１−Ｎ（Ｒ１）−Ｒ
ここで、以下の（ｉ）または（ｉｉ）のいずれかである：
（ｉ）Ｙ１−Ｌ−Ｘ１は、一緒になって、水素である；または
（ｉｉ）Ｙ１は、連結基である；
Ｌは、リンカーである；
Ｘ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＳ−、−ＰＯ−、−ＯＰＯ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣＯ−および−ＮＲ１ＣＯ−からなる群から選択される；
Ｎは、窒素である；
Ｒ１は、水素、１個以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、１個以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ１〜Ｃ１０）ヘテロアルキル、１個以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、１個以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１５）アリールアリール、１個以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１５）ビアリール、１個以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した５員〜１０員ヘテロアリール、１個以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキルおよび１個以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した６員〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される；
各Ｒ２は、独立して、−ＯＲ３、−ＳＲ３、−ＮＲ３Ｒ３、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ３、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ３Ｒ３、−Ｃ（ＮＲ３）ＮＲ３Ｒ３、−ＣＨＯ、Ｒ３ＣＯ−、−ＳＯ２Ｒ３、−ＳＯＲ３、−ＰＯ（ＯＲ３）２、−ＰＯ（ＯＲ３）、−ＣＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＰＯ３Ｈ、ハロゲンおよびトリハロメチルからなる群から選択される；
各Ｒ３は、独立して、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、５員〜１０員ヘテロアリール、（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキルおよび６員〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される；そして
Ｒは、ラスパートマイシンのコア環状ペプチドである。
【００４８】
当業者は、式（Ｉ）の化合物が共通の構造モチーフとして以下で示したラスパートマイシン５のコア環状ペプチドを有することを理解している。
【００４９】
【化１８】
2004528268.tif 000019
コア環状ペプチドＲは、特有の結合性を備えて配列された特定のアミノ酸から構成されるように図示されているものの、描写した特定の構造は、限定であるとは解釈されない。従って、図示した構造は、単に、その実際の化合物を表わす便利な方法として解釈されることが理解され、後のデータで、このラスパートマイシンのコア環状ペプチドの構造表現が正しくないことが発見され得るという点で、それは、いずれにしても、限定であるとは解釈されない。
【００５０】
一般式Ｉでコア環状ペプチドＲを表わす構造５の点線に共有結合した部分は、Ｎ（Ｒ１）である。ここで、Ｎは、コア環状ペプチドＲに直接結合した窒素を表わし、そしてＲ１は、窒素置換基である。
【００５１】
好ましい実施形態では、Ｒ１は、水素、１個以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、１個以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ３〜Ｃ７）アルケニル、１個以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換したＣ６アリール、１個以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換したＣ１２ビアリール、１個以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ６〜Ｃ１０）アリールアルキルおよび１個以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ６〜Ｃ１０）ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される。好ましくは、Ｒ１は、水素、メチル、アリル、ホモアリル、フェニル、置換フェニル、ベンジルおよび置換ベンジルからなる群から選択される。さらに好ましくは、Ｒ１は、水素である。
【００５２】
ラスパートマイシンコアペプチド誘導体は、Ｙ１−Ｌ−Ｘ１が一緒になって水素であるとき、Ｈ−Ｎ（Ｒ１）−Ｒであり得る。好ましくは、Ｒ１は、水素である。当業者は、この状況において、このラスパートマイシンコアペプチド誘導体が以下で示す構造式６（これは、Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｕｔａｈｅｎｓｉｓ（ＮＲＲＬ  １２０５２）（上記）でラスパートマイシンを脱アシル化することにより生成されるラスパートマイシンコアペプチドと同じである）で表わされ得ることを理解している。
【００５３】
【化１９】
2004528268.tif 000020
代替実施形態では、ラスパートマイシンコアペプチド誘導体は、式Ｙ１−Ｌ−Ｘ１−Ｎ（Ｒ１）−Ｒで記述され得る。一般に、Ｘ１は、窒素で共有結合を形成できる任意の種類の化学官能基（これらは、当業者に公知である）であり得る。代表的な実施形態では、Ｘ１は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＣＳ−、−ＰＯ−、−ＯＰＯ−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣＯ−および−ＮＲ１ＣＯ−からなる群から選択される。好ましくは、Ｘ１は、−ＣＯ−または−ＳＯ２−である。さらに好ましくは、Ｘ１は、−ＣＯ−である。
【００５４】
Ｙ１−Ｌ−Ｘ１−Ｎ（Ｒ１）−Ｒ形態のラスパートマイシンコアペプチド誘導体のＸ１には、式Ｙ１−Ｌ（ここで、Ｌは、リンカーであり、そしてＹ１は、連結基である）の連結部分が連結される。リンカーＬおよび連結基Ｙ１の性質は、広く変わり得る。リンカーＬは、親水性または疎水性、長鎖または短鎖、剛性、半剛性または可撓性であり得る。
【００５５】
このコア環状ペプチドから間隔を開けて連結基（例えば、Ｙ１）を配置するのに適切な、安定した結合から構成される多種多様なリンカーＬは、当該技術分野で公知であり、これには、限定ではなく一例として、アルキル、ヘテロアルキル、非環式ヘテロ原子架橋、アリール、アリールアリール、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリール−ヘテロアリール、置換ヘテロアリール−ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、ヘテロアリール−ヘテロアルキルなどが挙げられる。従って、リンカーＬには、単結合、二重結合、三重結合または芳香族炭素−炭素結合、窒素−窒素結合、炭素−窒素結合、炭素−酸素結合および／または炭素−イオウ結合が挙げられ得、従って、官能基（例えば、カルボニル、エーテル、チオエーテル、カルボキサミド、スルホンアミド、尿素、ウレタン、ヒドラジンなど）が挙げられ得る。
【００５６】
適切なリンカーの選択は、当業者の能力の範囲内である。例えば、剛性リンカーが望ましい場合、Ｌは、剛性でポリ不飽和のアルキルまたはアリール、ビアリール、ヘテロアリールなどであり得る。可撓性リンカーが望ましい場合、Ｌは、可撓性ペプチド（例えば、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ）または可撓性で不飽和のアルカニルまたはヘテロアルカニルであり得る。親水性リンカーは、例えば、ポリアルコールまたはポリエーテル（例えば、ポリアルキレングリコール）であり得る。疎水性リンカーは、例えば、アルキルまたはアリールであり得る。
【００５７】
好ましくは、連結基Ｙ１は、親油性基の相補的反応性官能性を備えた共有結合を形成して、単離抗菌ラスパートマイシン誘導体を提供できる。従って、連結基Ｙ１は、当業者に公知の任意の反応性官能基であり得る。Ｙ１は、例えば、光化学的に活性化した基、電気化学的に活性化した基、遊離ラジカル供与体、遊離ラジカル受容体、求核基または求電子基であり得る。しかしながら、当業者は、特定の反応条件下にて典型的に非反応性である種々の官能基が活性化して反応性にできることを認識している。活性化して反応性にできる基には、例えば、アルコール、カルボン酸およびエステル（それらの塩を含めて）が挙げられる。
【００５８】
従って、好ましい実施形態では、Ｙ１は、−ＮＨＲ１、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＰＨ、ハロゲン、−ＣＨＯ、−Ｒ１ＣＯ、−ＳＯ２Ｈ、−ＰＯ２Ｈ、−Ｎ３、−ＣＮ、−ＣＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＰＯ３Ｈ、−ＰＯ２（ＯＲ１）Ｈ、−ＣＯ２Ｒ１、−ＳＯ３Ｒ１および−ＰＯ（ＯＲ１）２からなる群から選択される。好ましくは、Ｙ１は、−ＮＨＲ１、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈ、Ｒ１ＣＯ−および−ＣＯ２Ｒ１からなる群から選択される。さらに好ましくは、Ｙ１は、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＣＯ２Ｈおよび−ＣＯ２Ｒ１からなる群から選択される。
【００５９】
Ｙ１−Ｌのいくつかの実施形態には、例えば、Ｌが−（ＣＨ２）ｎ−でありｎが１と８の間の整数でありＹ１が−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＣＯ２Ｈおよび−ＣＯ２Ｒ１からなる群から選択される化合物および対応する類似物が挙げられ、ここで、任意の適切な水素は、置換されている。Ｙ１−Ｌの他の実施形態には、任意のアミノ酸が挙げられ、これらは、例えば、ＤまたはＬ  α−アミノ酸、β−アミノ酸またはγ−アミノ酸であり得る。従って、Ｙ１−Ｌは、ジペプチド、トリペプチドまたはテトラペプチド（これらは、アミノ酸（好ましくは、α−アミノ酸）の任意の組合せから構成されている）であり得る。これらのペプチド中のペプチド結合の極性は、Ｃ→ＮまたはＮ→Ｃのいずれかであり得る。
【００６０】
このラスパートマイシンコアペプチド誘導体の好ましい実施形態では、Ｒ１は、水素であり、Ｙ１は、−ＮＨ２、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＣＯ２Ｈおよび−ＣＯ２Ｒからなる群から選択され、Ｘ１は、−ＣＯ−であり、そしてＬは、以下からなる群から選択されるか、またはその塩または水和物である：
【００６１】
【化２０】
2004528268.tif 000021
2004528268.tif 000022
ｎは、０、１、２または３である；
各Ｓ１は、水素、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ１〜Ｃ１０）アルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ１〜Ｃ１０）ヘテロアルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１５）アリールアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ５〜Ｃ１５）ビアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した５員〜１０員ヘテロアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した（Ｃ６〜Ｃ１６）アルキルアリールおよび１個またはそれ以上の同一または異なるＲ４基で必要に応じて置換した６員〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される；
各Ｒ４は、別個に、−ＯＲ５、−ＳＲ５、−ＮＲ５Ｒ５、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ５、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ５Ｒ５、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ５Ｒ５、−Ｃ（ＮＲ５）ＮＲ５Ｒ５、−ＣＨＯ、−Ｒ５ＣＯ、−ＳＯ２Ｒ５、−ＳＯＲ５、−ＰＯ（ＯＲ５）２、−ＰＯ（ＯＲ５）、−ＣＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＰＯ３Ｈ、ハロゲンおよびトリハロメチルからなる群から選択される；
各Ｒ５は、別個に、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、５員〜１０員ヘテロアリール、（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキルおよび６員〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される；そして
各Ｋは、別個に、酸素、窒素、イオウおよびリンからなる群から選択される。
【００６２】
好ましい実施形態では、Ｓ１は、遺伝的にコード化したα−アミノ酸の側鎖である。Ｙ１−Ｌ−Ｘ１−ＮＨ−Ｒ（ここで、Ｋは、別個に、酸素、窒素およびイオウからなる群から選択される）の代表的な好ましい実施形態には、以下の化合物が挙げられる：
【００６３】
【化２１】
2004528268.tif 000023
好ましくは、上で図示した実施形態では、Ｙ１は、−ＳＨ、−ＮＨ２または−ＯＨからなる群から選択される。さらに好ましくは、Ｙ１は、−ＯＨである。
【００６４】
このラスパートマイシンコアペプチド誘導体の他の好ましい実施形態では、Ｒ１は、水素であり、Ｙ１は、Ｈ２Ｎ−であり、Ｘ１は、−ＣＯ−であり、ｎは、先に定義したとおりであり、各Ｓ１は、別個に、先に記述したとおりであり、そしてＬは、先に定義したように、Ｌ１である。好ましくは、この実施形態では、各Ｓ１は、別個に、遺伝的にコード化したα−アミノ酸の側鎖である。さらに好ましくは、各Ｓ１は、別個に、グリシン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、グルタミン酸、トリプトファン、フェニルアラニン、チロシン、ロイシン、アラニン、イソロイシンまたはバリンの側鎖である。Ｙ１−Ｌ−Ｘ１−Ｎ（Ｈ）−Ｒ（ここで、各Ｓ１は、別個に、グリシン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、グルタミン酸またはトリプトファンの側鎖である）の代表的な好ましい実施形態には、以下の化合物（ここで、ＲおよびＹ１は、先に定義したとおりである）が挙げられる：
【００６５】
【化２２】
2004528268.tif 000024
2004528268.tif 000025
2004528268.tif 000026
2004528268.tif 000027
好ましくは、Ｙ１は、−ＯＨ、−ＳＨ、−ＮＨＲ１および−ＮＨ２からなる群から選択される。最も好ましくは、Ｙ１は、−ＮＨ２であり、そして図示したα−アミノ酸は、そのＬ立体配置を有する。
【００６６】
（４．２．２  ラスパートマイシンコアペプチドを製造する方法）
本発明は、ラスパートマイシンコアペプチドを製造する方法を提供し、この方法は、微生物Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ，ｓｓｐ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓ（ＡＴＣＣ  ２９８１４）を培地で培養してラスパートマイシンを提供する工程を包含する。ラスパートマイシンの単離に続いて親油性断片を開裂すると、このラスパートマイシンコアペプチドが得られる。
【００６７】
ラスパートマイシンの生化学合成に特に適切なＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ，ｓｓｐ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓ（ＡＴＣＣ
２９８１４）の親培養物は、当業者に公知の通常の方法により、選択され得る。ラスパートマイシンの収率が改善される親培地を選択する好ましい方法は、実施例１で記述されている。
【００６８】
接種材料を生育し培地を接種することもまた、当業者に周知であり、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ，ｓｓｐ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓに対する代表的な方法は、Ｕｍｅｚａｗａらの米国特許第３，６３９，５８２号（その内容は、本明細書中で参考として援用されている）および実施例２で記述されている。
【００６９】
一般に、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ，ｓｓｐ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓの成長を支持する任意の培地は、ラスパートマイシンの生化学合成で使用され得、このような培地の選択は、当業者の能力の範囲内である。Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ，ｓｓｐ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓの成長を支持する培地の代表的な例は、Ｕｍｅｚａｗａらの米国特許第３，６３９，５８２号および実施例３および４で見られる。
【００７０】
良好な収率のラスパートマイシンを生じるＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ，ｓｓｐ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓを培養するのに好ましい培地、時間、温度およびｐＨは、Ｕｍｅｚａｗａらの米国特許第３，６３９，５８２号および実施例３および４で記述されている。培地およびその成分の量的割合の選択は、ラスパートマイシンを含有する異なるリポペプチドの割合に直接影響を与えることに注目すべきである。
【００７１】
一般に、ラスパートマイシンは、任意の公知技術（高速液体クロマトグラフィー、向流抽出、遠心分離、濾過、沈殿、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、アフィニティークロマトグラフィーなど）により、精製され単離され得る。ラスパートマイシンを精製するのに使用される実際の条件は、一部には、正味の電荷、疎水性、親水性などのような因子に依存しており、当業者に明らかである。
【００７２】
好ましくは、ラスパートマイシンは、抽出手順により、その培地から単離される。好ましい１実施形態（例えば、実施例５を参照）では、ラスパートマイシンを含有する発酵ブロスは、有機溶媒（好ましくは、１−ブタノール）と混合される。理論で束縛するつもりはないが、アニオン形態のラスパートマイシンは、有機溶媒に溶解性の二価金属イオンとキレートを形成し得る。ラスパートマイシンを含有する有機相は、約３．０未満のｐＨ（最も好ましくは、約２．０のｐＨ）で、水性酸溶液と配合される。理論で束縛するつもりはないが、ラスパートマイシンのアニオンのプロトン化により、この二価金属キレート形態が崩壊され得る。
【００７３】
さらに好ましくは（例えば、実施例６を参照）、ラスパートマイシンを含有する発酵ブロスは、少なくとも約３．０のｐＨ（さらに好ましくは、約２．０のｐＨ）まで酸性化される。その細胞および任意の沈殿物は、次いで、当業者に公知の任意の便利な方法により分離され、そして水に懸濁され得る。この水性懸濁液のｐＨは、少なくともｐＨ約７．０に調節され、二価イオンが添加され、その水性懸濁液のｐＨは、約８．０〜約９．０に調節される。好ましくは、この水性懸濁液中の二価金属イオンの濃度は、約４ｍｍｏｌ／ｌと約１０ｍｍｏｌ／ｌの間である。１実施形態では、この二価金属イオンは、カルシウム、マグネシウムおよび亜鉛からなる群から選択される。最も好ましくは、この二価イオンは、カルシウムである。この水性懸濁液は、次いで、有機溶媒（好ましくは、１−ブタノール）で抽出される。ラスパートマイシンを含有する有機相は、次いで、約３．０未満のｐＨ（最も好ましくは、約２．０のｐＨ）で、水性酸溶液と配合される。
【００７４】
これからは、上記の好ましい実施形態のいずれかにて、ラスパートマイシンは、当業者に公知の通常の方法により、有機溶媒と水溶液との間で分配され得る。それゆえ、例えば、ラスパートマイシンの有機溶媒溶液を中性または塩基性水溶液で処理するとき、ラスパートマイシンは、水溶液に抽出され得る。ラスパートマイシンの水溶液を酸性化すると、ラスパートマイシンの有機溶媒への抽出が可能となる。好ましくは、ラスパートマイシンは、少なくとも２回、有機溶媒と水溶液との間で分配される。ラスパートマイシンは、当業者に公知の通常の方法により、遊離酸（例えば、実施例７を参照）または金属塩（例えば、実施例５および６を参照）のいずれかとして、単離され得る。
【００７５】
一般に、ラスパートマイシンの親油性部分は、酵素で開裂されて、このラスパートマイシンコアペプチドを提供し得る。その培地に適切な酵素を添加すると、このラスパートマイシンコアペプチドが直接生じ得、それにより、ラスパートマイシンを単離する必要がなくなることに注目すべきである。しかしながら、好ましくは、単離ラスパートマイシンは、当業者により選択され得る酵素で処理される。この酵素は、例えば、分解酵素（例えば、ペプチダーゼ、エステラーゼまたはチオラーゼ）であり得、その多数の例は、当該技術分野で存在している。好ましくは、この酵素は、デアシラーゼである。
【００７６】
代表的な実施形態では、この開裂工程は、適切な培地でデアシラーゼを生成できる微生物を培養する工程およびデアシラーゼを含有する培地にラスパートマイシンを接触する工程を包含する。デアシラーゼを生成する微生物は、当業者に周知である。好ましい実施形態では、微生物Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｕｔａｈｅｎｓｉｓ（ＮＲＲＬ  １２０５２）は、デアシラーゼを提供する。
【００７７】
ラスパートマイシンの親油性断片を開裂するのに特に適切なＡｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｕｔａｈｅｎｓｉｓ（ＮＲＲＬ  １２０５２）の親培地は、当業者に公知の方法により、選択され得る。ラスパートマイシンコアペプチドの収率が改善される親培地を選択する好ましい方法は、実施例８で記述されている。
【００７８】
接種材料を生育し培地を接種する方法もまた、当業者に周知であり、Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｕｔａｈｅｎｓｉｓ（ＮＲＲＬ  １２０５２）に代表的な方法は、Ｂｏｅｃｋら、１９８８，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，４１，１０８５およびＤｅｂｏｎｏら、１９８８，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１０９３（これらの内容は、本明細書中で参考として援用されている）および実施例８で記述されている。
【００７９】
Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｕｔａｈｅｎｓｉｓ（ＮＲＲＬ  １２０５２）の成長を助ける任意の培地が使用され得、このような培地の選択は、当業者の能力の範囲内である。Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｕｔａｈｅｎｓｉｓ（ＮＲＲＬ  １２０５２）の成長を助ける培地の代表例は、Ｂｏｅｃｋら、１９８８，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，４１，１０８５、Ｄｅｂｏｎｏら、１９８８，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１０９３および実施例８で見られ得る。
【００８０】
良好な収率のデアシラーゼを生じるＡｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｕｔａｈｅｎｓｉｓ（ＮＲＲＬ  １２０５２）を培養するのに好ましい培地、時間、温度およびｐＨは、Ｂｏｅｃｋら、１９８８，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，４１，１０８５、Ｄｅｂｏｎｏら、１９８８，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１０９３および実施例８で記載される。
【００８１】
好ましい実施形態では、ラスパートマイシンは、約２９℃で、約１６時間にわたって、Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｕｔａｈｅｎｓｉｓ（ＮＲＲＬ  １２０５２）を含有する培地と接触されて、以下の構造を有するラスパートマイシンコアペプチドを提供する：
【００８２】
【化２３】
2004528268.tif 000028
ラスパートマイシンを、約２９℃で、約４時間にわたって、Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｕｔａｈｅｎｓｉｓ（ＮＲＲＬ  １２０５２）を含有する培地と接触させると（例えば、実施例１０を参照）、以下の構造を有するラスパートマイシンコアペプチドに富んだ物質が得られることに注目すべきである：
【００８３】
【化２４】
2004528268.tif 000029
理論で束縛するつもりはないが、Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｕｔａｈｅｎｓｉｓ（ＮＲＲＬ  １２０５２）で生成したデアシラーゼは、エキソペプチダーゼであり得、これは、まず、ラスパートマイシンの親油性断片を開裂して、５４を提供する。５４の環外アスパラギン酸残基は、次いで、デアシラーゼまたはプロテアーゼで長時間処理することにより加水分解されて、化合物６が得られる。
【００８４】
このラスパートマイシンコアペプチドは、任意の当該技術分野で公知の技術（例えば、高速液体クロマトグラフィー、向流抽出、遠心分離、濾過、沈殿、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、アフィニティークロマトグラフィーなど）により、精製され単離され得る。このラスパートマイシンコアペプチドを精製するのに使用される実際の条件は、一部には、正味の電荷、疎水性、親水性などのような因子に依存しており、当業者に明らかである。好ましくは、このラスパートマイシンコアペプチドは、遠心分離および逆相樹脂上クロマトグラフィーにより、単離される（例えば、実施例９および１０を参照）。
【００８５】
（４．２．３  ラスパートマイシンコアペプチド誘導体を製造する方法）
ラスパートマイシンコアペプチド誘導体は、ラスパートマイシンコアペプチド６またはラスパートマイシンコアペプチド５４から出発して製造され得る。典型的には、６または５４のいずれかは、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ，ｓｓｐ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓ（ＡＴＣＣ  ２９８１４）を培養することにより得られるラスパートマイシンの脱アシル化により、生成される。しかしながら、環状ペプチドを合成するために、当該技術分野で公知の方法を使用して、６または５４のいずれかを合成することが可能であり得る。例えば、直鎖ペプチドは、溶液相または固相ヘプチド合成を使用して調製され、次いで、環化され得る。好ましくは、ラスパートマイシンコアペプチド６は、ラスパートマイシンコアペプチド誘導体を合成するための出発物質として、使用される。当業者は、以下で示した方法のいずれかがまた中間体５４からラスパートマイシンコアペプチド誘導体を調製するのに使用できることを理解している。
【００８６】
ラスパートマイシンコアペプチド６およびその中間体からラスパートマイシンコアペプチド誘導体を調製するのに有用な出発物質は、市販されているか、または通常の合成方法により調製され得るか、いずれかである。環状ペプチド６をラスパートマイシンコアペプチド誘導体に変換する多数の一般合成方法が想定され得る。これらには、スキームＩ〜ＩＩＩで概説された方法が挙げられるが、これらに限定されない。
【００８７】
スキームＩ    Ｙ１−Ｌ−Ｘ１’  ＋  ＮＨ（Ｒ１）−Ｒ
→  Ｙ１−Ｌ−Ｘ１Ｎ（Ｒ１）−Ｒ
スキームＩでは、Ｘ１’は、Ｘ１の活性化誘導体（例えば、−ＣＯ−Ｚ、−ＯＣＯ−Ｚ、−ＳＯ２−Ｚ、−ＣＳ−Ｚ、−ＰＯ−Ｚ、−ＯＰＯ−Ｚ、−ＯＣ（Ｏ）−Ｚ、−ＮＨＣＯ−Ｚまたは−ＮＲ１ＣＯ−Ｚ（ここで、Ｚは、残基（例えば、ハロゲンまたは活性エステル）である））であり得る。Ｘ１の活性化誘導体を製造しこれらの誘導体を第一級アミンまたは第二級アミンのいずれかと反応させてＸ１−Ｎ共有結合を形成する方法は、当業者に公知であり、標準合成方法の任意の概論で見られる（例えば、Ｍａｒｃｈ，Ｊ．，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ；Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，４版、１９９２；Ｌａｒｏｃｋ，Ｒ．，Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，ＶＣＨ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９；Ｂｏｄａｎｚｓｋｙ，Ｍ．，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ，１９８４；Ｂｏｄａｎｚｓｋｙ，Ｍ．，Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ，１９８４を参照）。遊離ラジカル化学、光化学または電気化学に基づいてＸ１−Ｎ結合を形成する他の合成方法は、当該技術分野で明らかである。
【００８８】
当業者は、Ｙ１および／またはＬのいずれかの保護がＸ１−Ｎ結合を形成するＸ１の活性化誘導体を製造するのに必要であり得ることを理解している。Ｘ１−Ｎ結合を形成するＹ１および／またはＬのいずれかを保護する必要がある場合、所望のラスパートマイシンコアペプチド誘導体を提供するには、Ｙ１および／またはＬのいずれかを脱保護する必要がある。共通の有機官能基を保護および脱保護する方法は、当業者に公知であり、必要なら、ラスパートマイシンコアペプチド誘導体の合成で使用され得る（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３版、１９９９を参照）。
【００８９】
スキーム２    Ｙ１−Ｌ３  ＋Ｌ２−Ｘ１−Ｎ（Ｒ１）Ｒ
→  Ｙ１−Ｌ−Ｘ１Ｎ（Ｒ１）−Ｒ
スキーム２は、Ｙ１−Ｌ−Ｘ１Ｎ（Ｒ１）−Ｒが２個の分子（Ｙ１−Ｌ３およびＬ２−Ｘ１−Ｎ（Ｒ１）Ｒ）を組み合わせてラスパートマイシンコアペプチド誘導体を形成することにより合成される集中方法を記述している。ここで、Ｌ３およびＬ２は、共有結合するとき、リンカーＬを形成する断片である。このような方法は、Ｌがオリゴマー（例えば、ポリアミドまたはポリエーテル）であるとき、特に有用であり得る。オリゴマーサブユニット（例えば、エーテルまたはアミドモノマー、ダイマーなど）を合体する方法は、当業者に公知である。Ｙ１−Ｌ３およびＬ２−Ｘ１’（これらは、上記のように、Ｘ１−Ｎ結合を形成するのに有用である）のような断片は、市販されているか、または標準合成方法により製造され得るか、いずれかである。
【００９０】
スキーム３    Ｙｘ−Ｌ−Ｘ１Ｎ（Ｒ１）−Ｒ
→  Ｙ１−Ｌ−Ｘ１Ｎ（Ｒ１）−Ｒ
最後に、Ｙｘ−Ｌ−Ｘ１Ｎ（Ｒ１）−ＲからＹｘ−Ｌ−Ｘ１Ｎ（Ｒ１）−Ｒを調製するのに、簡単な官能基交換が使用され得る。ここで、Ｙｘは、Ｙ１に変換され得る官能基である。官能基交換を起こす多くの方法は、合成化学の当業者に公知である（例えば、Ｍａｒｃｈ，Ｊ．，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ；Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｒｕｅ，第４版、１９９２；Ｌａｒｏｃｋ，Ｒ．，Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，ＶＣＨ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９を参照）。
【００９１】
（４．２．４  抗菌ラスパートマイシン誘導体）
本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体は、は、伝統的な抗生物質よりもある程度著しい利点を与える。抗菌ラスパートマイシン誘導体は、一般に、多くのグラム陽性菌に対して、活性である。さらに重要なことには、本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体は、メチシリン耐性菌および／またはバンコマイシン耐性株に対して、有効であり得る。それゆえ、この抗菌ラスパートマイシン誘導体は、公知の抗生物質に一般に耐性がある非常に多くの微生物の増殖を阻止または防止し得る。
【００９２】
抗菌ラスパートマイシン誘導体には、以下の構造式（ＩＩ）を有する化合物またはそれらの薬学的に受容可能な塩または水和物が挙げられる：
（ＩＩ）  Ｙ２−（Ｘ２−Ｘ３）−（Ｌ）−（Ｘ１）−Ｎ（Ｒ１）−Ｒ
Ｙ２は、親油性基である；
Ｘ２は、連結基である；
Ｘ３は、連結基である；そして
Ｘ１、Ｌ、Ｎ、Ｒ１およびＲは、本願の４．２．１節の式（Ｉ）で定義したとおりである。
【００９３】
式（ＩＩ）の単離抗菌ラスパートマイシン誘導体のＸ１には、式（Ｘ２−Ｘ３）（ここで、Ｌは、リンカーであり、そしてＸ２およびＸ３は、親油性分子Ｙ２をリンカーＬに結合する連結基である）の連結部分が連結される。リンカーＬおよび連結基Ｘ２およびＸ３の性質は、広く変わり得る。リンカーＬは、本願の４．２．１節で記述され定義されている。
【００９４】
当業者が理解するように、（Ｘ２−Ｘ３）のような連結基は、典型的には、少なくとも二官能性である。それゆえ、それらは、このリンカーと結合を形成できる少なくとも１個の官能基または部分および親油性基と結合を形成できる少なくとも１個の官能基または部分を有する。
【００９５】
好ましくは、連結部分（Ｘ２−Ｘ３）は、一緒になって、共有結合を形成する。この好ましい実施形態では、連結部分（Ｘ２−Ｘ３）は、当業者に公知の任意の方法により形成され得る任意の共有結合である。それゆえ、例えば、連結部分（Ｘ２−Ｘ３）は、２個の炭素原子間、炭素原子とヘテロ原子との間または２個のヘテロ原子間で形成できる任意の単結合、二重結合または三重結合であり得る。例えば、（Ｘ２−Ｘ３）としては、以下のような結合および対応する置換類似物（ここで、任意の適切な水素は、同一または異なる置換基で置換されている）が挙げられる：−ＣＨ２−ＣＨ２−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ＝ＣＨ−、−ＣＨ＝ＣＨ−、−Ｃ≡Ｃ−、−ＮＨ−ＣＨ２−、−Ｎ＝ＣＨ−、−ＣＨ２−ＮＨ−、−ＣＨ＝Ｎ−、−ＮＨ−ＮＨ−、−Ｎ＝Ｎ−、−Ｓ−Ｓ−、−Ｏ−Ｏ−、−Ｓｅ−Ｓｅ−、−Ｓ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｓ−、−Ｏ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｏ−、−Ｓｅ−ＣＨ２−、−ＣＨ２−Ｓｅ−、−ＮＨ−Ｓ−、−Ｐ−Ｎ−、−Ｎ−Ｏ−。
【００９６】
好ましくは、（Ｘ２−Ｘ３）は、一緒になって、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｏ（Ｏ）Ｃ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＲ１−、ＮＲ１ＣＯ−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）Ｃ−、−ＯＳＯ２−、−Ｓ（Ｏ２）Ｏ−、−ＮＨＳＯ２−、−ＮＲ１ＳＯ２−、−Ｓ（Ｏ２）ＮＨ−、−Ｓ（Ｏ２）ＮＲ１、−Ｃ（Ｓ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｓ）−、−ＮＨＰ（Ｏ）−、−Ｐ（Ｏ）ＮＨ−、ＯＰ（Ｏ）−、−Ｐ（Ｏ）Ｏ−、ＳＰ（Ｏ）−、−Ｐ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１−、−ＮＲ１Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＲ１−、−ＮＲ１Ｃ（Ｏ）ＮＨ−および−ＮＲ１Ｃ（Ｏ）ＮＲ１ならびにその対応する置換類似物（ここで、任意の適切な水素は、同一または異なる置換基で置換されている）からなる群から選択される。好ましい実施形態では、（Ｘ２−Ｘ３）は、一緒になって、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｏ（Ｏ）Ｃ−、ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＲ１−、−ＮＲ１ＣＯ−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）Ｃ−、−ＮＨＳＯ２−、−ＮＲ１ＳＯ２、−Ｓ（Ｏ２）ＮＨ−、−Ｓ（Ｏ２）ＮＲ１−、Ｃ（Ｓ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｓ）−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１−、−ＮＲ１Ｃ（Ｏ）Ｏ−および−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−および対応する置換類似物（ここで、任意の適切な水素は、同一または異なる置換基で置換されている）からなる群から選択される。別の好ましい実施形態では、（Ｘ２−Ｘ３）は、一緒になって、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｏ（Ｏ）Ｃ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＲ１−、−ＮＲ１ＣＯ−、−ＮＨＳＯ２−、−ＮＲ１ＳＯ２、−Ｓ（Ｏ２）ＮＨ−、−Ｓ（Ｏ２）ＮＲ１−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１−および−ＮＲ１Ｃ（Ｏ）Ｏ−およびその対応する置換類似物（ここで、任意の適切な水素は、同一または異なる置換基で置換されている）からなる群から選択される。
【００９７】
リンカーＬと結合される連結部分（Ｘ２−Ｘ３）のある実施形態としては、−（Ｘ２−Ｘ３）−（ＣＨ２）ｎ−のような部分構造が挙げられ、ここで、ｎは、１と８との間であり、（Ｘ２−Ｘ３）は、一緒になって、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｏ（Ｏ）Ｃ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−、−ＣＯＮＲ１−、−ＮＲ１ＣＯ−、−ＮＨＳＯ２−、−ＮＲ１ＳＯ２、−Ｓ（Ｏ２）ＮＨ−、−Ｓ（Ｏ２）ＮＲ１−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１−および−ＮＲ１Ｃ（Ｏ）Ｏ−および対応する置換類似物（ここで、任意の適切な水素は、同一または異なる置換基で置換されている）からなる群から選択される。リンカーＬと結合される連結部分（Ｘ２−Ｘ３）の他の実施形態は、一緒になったＸ３−Ｌがアミノ酸（これは、例えば、ＤまたはＬのα−アミノ酸、β−アミノ酸またはγ−アミノ酸であり得る）に由来し、そしてＸ２が、例えば、−ＣＯ−または−ＳＯ２−である表現が挙げられる。一緒になったＸ３−Ｌはまた、アミノ酸の任意の組合せから構成されるジペプチド、トリペプチドまたはテトラペプチドの誘導体であり得る。これらのペプチド中のペプチド結合の極性は、Ｃ→ＮまたはＮ→Ｃのいずれかであり得る。
【００９８】
一般に、親油性基Ｙ２は、疎水性であり、置換されるとき、疎水性置換基で置換される。当業者は、この親油性基のサイズおよび／または長さが、この抗菌ラスパートマイシン誘導体を含む断片（例えば、Ｌ、（Ｘ２−Ｘ３）、Ｘ１およびＲ１）の性質に部分的に依存することを理解している。
【００９９】
好ましい実施形態において、親油性基Ｙ２は、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ６〜Ｃ２５）アルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ６〜Ｃ２５）ヘテロアルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２５）アリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２５）アリールアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２５）ビアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した８員〜２５員ヘテロアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２５）アリールアルキルおよび１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した８員〜２５員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される；
各Ｒ２は、別個に、−ＯＲ３、−ＳＲ３、−ＮＲ３Ｒ３、−ＣＮ、−ＮＯ２、−Ｎ３、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ３、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ３Ｒ３、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ３Ｒ３、−Ｃ（ＮＲ３）ＮＲ３Ｒ３、−ＣＨＯ、−Ｒ３ＣＯ、−ＳＯ２Ｒ３、−ＳＯＲ３、−ＰＯ（ＯＲ３）２、−ＰＯ（ＯＲ３）、−ＣＯ２Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−ＰＯ３Ｈ、ハロゲンおよびトリハロメチルからなる群から選択される；
各Ｒ３は、別個に、水素、（Ｃ１〜Ｃ６）アルキル、（Ｃ５〜Ｃ１０）アリール、５員〜１０員ヘテロアリール、（Ｃ６〜Ｃ１６）アリールアルキルおよび６員〜１６員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される。
【０１００】
さらに好ましい実施形態では、親油性基Ｙ２は、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２０）アルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２０）ヘテロアルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２０）アリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２０）アリールアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２０）ビアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した８員〜２０員ヘテロアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２０）アリールアルキルおよび１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した８員〜２０員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択され、ここで、Ｒ２は、上で定義したとおりである。
【０１０１】
好ましい１実施形態では、親油性基Ｙ２は、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２０）アルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２０）ヘテロアルキル、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２０）アリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２０）アリールアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２０）ビアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した１０員〜２０員ヘテロアリール、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２０）アリールアルキルおよび１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した１０員〜２０員ヘテロアリールアルキルからなる群から選択される。他の好ましい実施形態では、親油性基Ｙ２は、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ８〜Ｃ２０）アルキルからなる群から選択される。さらに他の好ましい実施形態では、親油性基Ｙ２は、１個またはそれ以上の同一または異なるＲ２基で必要に応じて置換した（Ｃ１０〜Ｃ１６）アルキルからなる群から選択される。
【０１０２】
式（ＩＩ）の単離抗菌ラスパートマイシン誘導体の例示的な実施形態において、Ｘ１は、−ＣＯ−または−ＳＯ２−であり、（Ｘ２−Ｘ３）は、一緒になって、−Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−Ｏ（Ｏ）Ｃ−、−ＣＯＮＨ−、−ＮＨＣＯ−、−Ｃ（Ｏ）Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）Ｃ−、−ＯＳＯ２−、−Ｓ（Ｏ２）Ｏ−、−ＮＨＳＯ２−、−Ｓ（Ｏ２）ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｓ）−、−ＮＨＰ（Ｏ）−、−Ｐ（Ｏ）ＮＨ−、ＯＰ（Ｏ）−、−Ｐ（Ｏ）Ｏ−、−ＳＰ（Ｏ）−、−Ｐ（Ｏ）Ｓ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１−、−ＮＲ１Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＲ１−、−ＮＲ１Ｃ（Ｏ）Ｏ−、−ＯＣ（Ｏ）Ｏ−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＲ１−、およびーＮＲ１Ｃ（Ｏ）Ｏ−からなる群より選択され、Ｒ１は、水素であり、そしてＬは、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４からなる群から選択される（ここで、Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３およびＬ４は、本願の４．２．１節で定義したとおりである）。
【０１０３】
好ましい実施形態では、Ｓ１は、遺伝的にコード化したα−アミノ酸の側鎖である。Ｙ２−（Ｘ２−Ｘ３）−Ｌ−Ｘ１−Ｎ（Ｒ１）−Ｒ（ここで、Ｋは、別個に、酸素、窒素およびイオウからなる群から選択される）の例示的な好ましい実施形態には、Ｙ２、Ｘ２、Ｘ３およびＲが先に定義したとおりである以下の化合物が挙げられる：
【０１０４】
【化２５】
2004528268.tif 000030
好ましくは、これらの実施形態では、Ｘ３は、−Ｓ−、−Ｏ−または−ＮＨ−からなる群から選択され、そしてＸ２は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）−および−ＮＲ１Ｃ（Ｏ）−からなる群から選択される。代替実施形態では、Ｘ２は、−Ｓ−、−Ｏ−または−ＮＨ−からなる群から選択され、そしてＸ３は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）−および−ＮＲ１Ｃ（Ｏ）−からなる群より選択される。
【０１０５】
これらの抗菌ラスパートマイシン誘導体の好ましい実施形態では、Ｘ１は、−ＣＯ−または−ＳＯ２−であり、（Ｘ２−Ｘ３）は、一緒になって、−ＣＯＮＨ−、−Ｓ（Ｏ２）ＮＨ−、−Ｃ（Ｓ）ＮＨ−、−Ｐ（Ｏ）ＮＨ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＨ−、−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ１−、−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ−および−ＮＨＣ（Ｏ）ＮＲ１からなる群から選択され、Ｒ１は、水素であり、ｎは、本願の第４．２．１節で定義したとおりであり、そしてＬは、本願の第４．２．１節で定義したＬ１である。好ましくは、この実施形態では、各Ｓ１は、別個に、遺伝的にコード化したα−アミノ酸の側鎖である。さらに好ましくは、各Ｓ１は、別個に、グリシン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、グルタミン酸、トリプトファン、フェニルアラニン、チロシン、ロイシン、アラニン、イソロイシンまたはバリンの側鎖である。Ｙ２−（Ｘ２−Ｘ３）−Ｌ−Ｘ１−Ｎ（Ｒ１）−Ｒ（ここで、各Ｓ１は、別個に、グリシン、アスパラギン、アスパラギン酸、グルタミン、グルタミン酸、またはトリプトファンの側鎖である）の代表的な好ましい実施形態には、以下の化合物（ここで、Ｙ２、（Ｘ２−Ｘ３）は、一緒になり、そしてＲは、先に定義したとおりである）が挙げられる：
【０１０６】
【化２６】
2004528268.tif 000031
2004528268.tif 000032
2004528268.tif 000033
2004528268.tif 000034
好ましくは、これらの実施形態では、Ｘ３は、−Ｓ−、−Ｏ−または−ＮＨ−からなる群から選択され、そしてＸ２は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）−および−ＮＲ１Ｃ（Ｏ）−からなる群から選択される。代替実施形態では、Ｘ２は、−Ｓ−、−Ｏ−または−ＮＨ−からなる群から選択され、そしてＸ３は、−ＣＯ−、−ＳＯ２−、−ＯＣ（Ｏ）−、−ＮＨＣ（Ｏ）−および−ＮＲ１Ｃ（Ｏ）−からなる群より選択される。好ましくは、上で示した実施形態では、例証的なα−アミノ酸は、Ｌ立体配置を有する。
【０１０７】
好ましい実施形態では、Ｘ２−Ｘ３は、一緒になって、−ＣＯＮＨ−または−ＳＯ２ＮＨ−である。最も好ましくは、Ｘ２−Ｘ３は、一緒になって、−ＣＯＮＨ−である。Ｙ２の特に好ましい実施形態としては、テトラデカン−１−イル、ノナン−１−イル、デカン−１−イルおよび１２−メチルトリデカン−１−イルが挙げられる。
【０１０８】
構造式ＩＩを有する例示的な好ましい単離抗菌ラスパートマイシン誘導体には、以下が挙げられる：
【０１０９】
【化２７】
2004528268.tif 000035
2004528268.tif 000036
2004528268.tif 000037
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好ましくは、上で描写した実施形態では、描写したポリアミドリンカーは、図示したアミノ酸の炭素において、Ｌ立体配置を有する。
【０１１０】
（４．２．５  抗菌ラスパートマイシン誘導体を製造する方法）
抗菌ラスパートマイシン誘導体は、ラスパートマイシンコアペプチド６、ラスパートマイシンコアペプチド５４および式（Ｉ）のラスパートマイシンコアペプチド誘導体から合成され得る。式（Ｉ）のラスパートマイシンコアペプチド誘導体は、本願の４．２．２節で概説した方法により、合成され得る。当業者は、他の出発物質が抗菌ラスパートマイシン誘導体の合成において使用され得ることを理解する。
【０１１１】
ラスパートマイシンコアペプチド６、ラスパートマイシンコアペプチド５４および式Ｉのラスパートマイシンコアペプチド誘導体を抗菌ラスパートマイシン誘導体に変換する多数の一般合成方法が想定され得る。このようなものとしては、スキーム４〜５で概説された方法が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１１２】
スキーム４
【０１１３】
【化２８】
2004528268.tif 000045
スキーム４において、親油性断片Ｙ２およびリンカーＬ（これらは、連結基Ｘ２およびＸ３を介して結合されている）は、Ｘ１の活性化誘導体であり得るＸ１’に共有結合し、このＸ１’は、例えば、−ＣＯ−Ｚ、−ＯＣＯ−Ｚ、−ＳＯ２−Ｚ、−ＣＳ−Ｚ、−ＰＯ−Ｚ、−ＯＰＯ−Ｚ、−ＯＣ（Ｏ）−Ｚ、−ＮＨＣＯ−Ｚまたは−ＮＲ１ＣＯ−Ｚであり、ここで、Ｚはハロゲンまたは活性化エステルのような脱離基である。Ｘ１の活性化誘導体を作製し、そしてこれらの誘導体を第一級アミンまたは第二級アミンのいずれかと反応してＸ１−Ｎ共有結合を形成するための方法は、当業者に公知であり、そしてこの方法は、標準的な合成方法の、例えば、以下のような任意の概論において見出される：Ｍａｒｃｈ，Ｊ．，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ；Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，４版、１９９２；Ｌａｒｏｃｋ，Ｒ．，Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，ＶＣＨ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９；Ｂｏｄａｎｚｓｋｙ，Ｍ．，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ，１９８４；Ｂｏｄａｎｚｓｋｙ，Ｍ．，Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ，１９８４を参照）。フリーラジカル化学、光化学または電気化学に基づいてＸ１−Ｎ結合を形成する他の合成方法は、当業者にとって明らかである。このＸ１−Ｎ共有結合を形成することにより、この抗菌ラスパートマイシン誘導体が得られる。（Ｘ２−Ｘ３）結合（例えば、エステル、アミド、ホスホラミダイト、スルホンアミド、カルバメート、尿素など）を製造する方法もまた、通常であり、当業者に公知である（例えば、Ｍａｒｃｈ，Ｊ．，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ；Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，４版、１９９２；Ｌａｒｏｃｋ，Ｒ．，Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，ＶＣＨ：Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９９；Ｂｏｄａｎｚｓｋｙ，Ｍ．，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ，１９８４；Ｂｏｄａｎｚｓｋｙ，Ｍ．，Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ；  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｖｅｒｌａｇ，１９８４を参照）。
【０１１４】
スキーム５
【０１１５】
【化２９】
2004528268.tif 000046
スキーム５は、Ｙ２−Ｘ２’（Ｘ２’は、連結基Ｘ２の誘導体である）とＹ１−Ｌ−Ｘ１Ｎ（Ｒ１）−Ｒとを組み合わせて（Ｘ２−Ｘ３）結合を形成しそれによりラスパートマイシンコアペプチド誘導体を得る集中方法を記述している。（Ｘ２−Ｘ３）結合を形成する方法は、上で記述されている。Ｙ２−Ｘ２’のような断片は、市販されているか、または標準合成方法により製造され得るか、いずれかである。Ｙ１−Ｌ−Ｘ１Ｎ（Ｒ１）−Ｒは本願の４．４．２節に記載されるように作製され得る。
【０１１６】
当業者は、Ｙ２および／またはＬのいずれかの保護が（Ｘ２−Ｘ３）結合の形成に必要であり得ることを理解している。（Ｘ２−Ｘ３）結合の形成するのにＹ２および／またはＬのいずれかを保護する必要がある場合、この抗菌ラスパートマイシン誘導体を提供するには、Ｙ２および／またはＬのいずれかを脱保護する必要がある。共通の有機官能基を保護または脱保護する方法は、当業者に公知であり、必要なら、抗菌ラスパートマイシン誘導体の合成で使用され得る（例えば、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３版，（１９９９）を参照のこと）。
【０１１７】
（４．２．６  微生物の成長を阻止する方法）
一般に、本発明の活性単離抗菌ラスパートマイシン誘導体は、インビトロスクリーニングアッセイを使用して、同定される。実際、多くの場合、単離された本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体は、防腐剤、局所抗菌治療などとして、インビトロで使用される。さらに、インビトロ感受性試験には特定の明らかな制限があるにもかかわらず、臨床データにより、抗菌化合物の最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）試験結果とインビボ効力との間には、良好な相関が存在していることが明らかとなっている（Ｍｕｒｒａｙ，１９９４，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｉｎｇ，Ｐｏｕｐａｒｄら著、Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ；Ｋｎｕｄｓｅｎら、１９９５，Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂ．Ａｇｅｎｔｓ  Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒ．３９（６）：１２５３〜１２５８）。それゆえ、それに関連した感染および疾患を治療するのに有用な単離抗菌ラスパートマイシン誘導体もまた、特定の微生物標的に対するインビトロ抗菌活性を立証することにより、好都合に同定される。
【０１１８】
一般に、抗菌剤のインビトロ抗菌活性は、標準的なＮＣＣＬＳ細菌阻害アッセイまたはＭＩＣ試験を使用して、試験される（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｎ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ「Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  Ｔｅｓｔｉｎｇ」ＮＣＣＬＳ  Ｄｏｃｕｍｅｎｔ  Ｍ１００−Ｓ５  １４巻、１６号、１９９４年１２月；「Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  ｄｉｌｕｔｉｏｎ  ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ  ｔｅｓｔ  ｆｏｒ  ｂａｃｔｅｒｉａ  ｔｈａｔ  ｇｒｏｗ  ａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ−第３版」，Ａｐｐｒｏｖｅｄ  Ｓｔａｎｄａｒｄ  Ｍ７−Ａ３，Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｆｏｒ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ，Ｖｉｌｌａｎｏｖａ，ＰＡ）。
【０１１９】
あるいは、本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体は、インビボモデルを使用して、抗菌活性について評価され得る。この場合もやはり、このようなモデルは、当該技術分野で周知である。
【０１２０】
当該技術分野で周知であるか本開示を検討すると当業者に明らかとなる他のアッセイもまた、本発明の活性抗菌ラスパートマイシン誘導体を同定するのに使用され得ることが分かる。このようなアッセイとしては、Ｌｅｈｒｅｒら、１９８８，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  １０８：１５３ならびにＳｔｅｉｎｂｅｒｇおよびＬｅｈｒｅｒ、「Ｄｅｓｉｇｎｅｒ  Ａｓｓａｙｓ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ：Ｄｉｓｐｕｔｉｎｇ  ｔｈｅ  『Ｏｎｅ  Ｓｉｚｅ  Ｆｉｔｓ  Ａｌｌ』  Ｔｈｅｏｒｙ」Ｉｎ：Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，Ｓｈａｆｅｒ編，Ｈｕｍａｎａ  Ｐｒｅｓｓ，ＮＪで記述されたアッセイが挙げられる。
【０１２１】
一般に、本発明の単離抗菌ラスパートマイシン誘導体は、約６４μｇ／ｍＬ未満、通常、約３２μｇ／ｍＬ未満、好ましくは、約１６μｇ／ｍＬ未満、最も好ましくは、約４μｇ／ｍＬ未満のＭＩＣを示す。本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体はまた、標準インビトロアッセイにおいて、種々の菌類に対して、約５０μｇ／ｍＬ以下のＭＩＣを有する抗菌活性を示し得る。
【０１２２】
もちろん、これらの範囲の下限またはそれ以下のＭＩＣを有する化合物が好ましい。全身に及ぶ感染を処置または予防するにおける使用のために最も好ましいものは、著しい抗菌活性（すなわち、４μｇ／ｍＬ未満）、良好な水溶性（ほぼ中性のｐＨで）および低い毒性を示す抗菌ラスパートマイシン誘導体である。毒性は、局所投与には、水溶性と同様に、それほど問題ではない。
【０１２３】
（４．２．７  他の方法および薬学的組成物）
本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体は、微生物の成長を阻害するか微生物を殺すために、広範囲の用途で使用できる。例えば、これらの抗菌ラスパートマイシン誘導体は、食品、化粧品、医薬および他の栄養分含有物質のような物質の消毒剤または防腐剤として、使用され得る。これらの抗菌ラスパートマイシン誘導体はまた、被験体（例えば、植物および動物）での微生物感染に関連した疾患を処置または予防するのに使用できる。
【０１２４】
消毒剤または防腐剤として使用するために、これらの抗菌ラスパートマイシン誘導体は、単独で、または抗菌ラスパートマイシン誘導体の混合物として、または他の抗真菌剤および／もしくは抗菌剤と組み合わせて、所望の物質に添加できる。これらの抗菌ラスパートマイシン誘導体は、この化合物それ自体として供給され得るか、または当該技術分野で周知の種々のキャリア、希釈剤または賦形剤と混合され得る。
【０１２５】
微生物感染またはそれに関連する疾患を処置または予防するのに使用するとき、本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体は、単独で、２種以上の抗菌ラスパートマイシン誘導体の混合物として、他の抗真菌剤、抗生物質もしくは抗菌剤と組み合わせて、または他の薬学的に活性な薬剤と組合せて、投与または適用され得る。これらの抗菌ラスパートマイシン誘導体は、それ自体でまたは薬学的組成物として投与または適用され得る。その特定の薬学的処方は、所望の投与様式に依存しており、かつ当業者に明らかである。抗生物質の局所投与または全身投与のための非常に多くの組成物が文献で記述されている。これらの組成物のいずれかは、本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体と共に処方され得る。
【０１２６】
本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体を含有する薬学的組成物は、通常の混合、溶解、顆粒化、糖衣錠作製、すりつぶし、乳化、カプセル化、取り込みまたは凍結乾燥プロセスによって製造され得る。薬学的組成物は、１種以上の生理学的に受容可能な、キャリア、希釈剤、賦形剤または補助剤（これらは、この活性抗菌ラスパートマイシン誘導体を、薬学的に使用できる調製物に処理するのを促進する）を使用する通常の様式で、処方され得る。適切な処方は、選択される投与経路に依存している。
【０１２７】
局所投与には、本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体は、当該技術分野で周知のように、溶液、ゲル、軟膏、クリーム、懸濁液などとして処方され得る。
【０１２８】
全身処方には、注射（例えば、皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射、くも膜下腔内注射または腹腔内注射）により投与するように設計されたもの、ならびに経皮投与、経粘膜投与、経口投与または肺投与用に設計されたものが挙げられる。
【０１２９】
注射には、本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体は、水溶液、好ましくは、生理学的に適合性の緩衝液（例えば、ハンクス液、リンゲル液または生理食塩緩衝液）中に処方され得る。この溶液は、処方剤（例えば、懸濁剤、安定化剤および／または分散剤）を含有し得る。
【０１３０】
あるいは、これらの抗菌ラスパートマイシン誘導体は、使用前に、適切なビヒクル（例えば、無菌の、発熱物質を含まない水）を使って構成するための、粉末形態であり得る。
【０１３１】
経粘膜投与には、その処方物中に、浸透されるべき障壁に適切な浸透剤が使用される。このような浸透剤は、一般に、当該技術分野で公知である。
【０１３２】
経口投与には、これらの抗菌ラスパートマイシン誘導体を、それらを当該技術分野で周知の薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせることにより、容易に処方できる。このようなキャリアにより、本発明の化合物は、処置される患者による経口摂取のために、錠剤、丸薬、カプセル剤、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液などとして処方されるようになる。経口固形処方物（例えば、粉末、カプセル剤および錠剤）のために適切な賦形剤には、充填剤（例えば、糖（例えば、ラクトース、スクロース、マンニトールおよびソルビトール））；セルロース調製物（例えば、トウモロコシデンプン、コムギデンプン、コメデンプン、ジャガイモデンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよび／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ））；顆粒化剤；および結合剤が挙げられる。所望の場合、崩壊剤（例えば、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、アルギン酸またはその塩（例えば、アルギン酸ナトリウム））が添加され得る。所望の場合、固形投薬形態は、標準的な技術を使用して、糖被覆または腸溶被覆され得る。
【０１３３】
経口液体調製物（例えば、懸濁液、エリキシル剤および溶液）に適切なキャリア、賦形剤または希釈剤には、水、グリコール、オイル、アルコールなどが挙げられる。さらに、香料、防腐剤、着色剤などが添加され得る。
【０１３４】
頬投与には、これらの組成物は、通常の様式で処方された錠剤、ロゼンジなどの形態をとり得る。
【０１３５】
吸入による投与するためには、本発明に従って使用するための化合物は、好都合には、適切な噴霧剤（例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の適切なガス）を使用して、加圧パックからのエアロゾルスプレーまたは噴霧器の形態で、送達される。加圧エアロゾルの場合、その投薬単位は、計量した量を送達するためのバルブを設けることにより、決定され得る。例えば、吸入器または注入器で使用するゼラチンのカプセルおよびカートリッジは、この化合物の粉末混合物および適切な粉末ベース（例えば、ラクトースまたはデンプン）を含有して処方され得る。
【０１３６】
これらの抗菌ラスパートマイシン誘導体はまた、直腸組成物または膣組成物（例えば、座剤または保持浣腸剤（これは、例えば、通常の座剤ベース（例えば、ココアバターまたは他のグリセリドを含む）））で処方され得る。
【０１３７】
先に記述した処方物に加えて、これらの抗菌ラスパートマイシン誘導体はまた、蓄積調製物として処方され得る。このような長期にわたって作用する処方物は、移植（例えば、皮下または筋肉内）または筋肉内注射により、投与され得る。それゆえ、例えば、これらの化合物は、適切な高分子材料もしくは疎水性材料（例えば、適切なオイル中の乳濁液として）またはイオン交換樹脂、あるいは難溶性誘導体（例えば、難溶性塩）と共に処方され得る。
【０１３８】
あるいは、他の薬学的送達システムが使用され得る。リポソームおよび乳濁液は、本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体を送達するのに使用され得る送達ビヒクルの周知の例である。ある種の有機溶媒（例えば、ジメチルスルホキシド）もまた、通常、毒性が高いという代償を払うが、使用され得る。さらに、これらの抗菌ラスパートマイシン誘導体は、持続放出システム（例えば、この治療剤を含有する固形高分子の半浸透性マトリックス）を使用して、送達され得る。種々の持続放出材料が確立されており、当業者に周知である。持続放出カプセルは、それらの化学的性質に依存して、数週間から１００日を超えるまでにわたって、これらの化合物を放出し得る。
【０１３９】
本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体の特定のカルボン酸は、酸性であるので、またはその親油性基またはリンカーは、酸性置換基または塩基性置換基を含有し得るので、これらの抗菌ラスパートマイシン誘導体は、その遊離酸、遊離塩基または薬学的に受容可能な塩として、上記処方物のいずれかに含有され得る。薬学的に受容可能な塩には、これらの遊離の酸または塩基の抗菌活性を実質的に保持する塩、およびそれぞれ塩基または酸との反応により調製される塩がある。薬学的な塩は、対応する遊離の塩基または酸の形態であるよりも水性溶媒および他のプロトン性溶媒中でより溶解性である傾向にある。
【０１４０】
本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体またはそれらの組成物は、一般に、意図される目的を達成するのに有効な量で、使用される。もちろん、使用する量は、特定の適用に依存していることが理解されるべきである。
【０１４１】
例えば、消毒剤または防腐剤として使用するために、消毒または防腐されべきる物質には、抗菌有効量の抗菌ラスパートマイシン誘導体またはその組成物が適用または添加される。抗菌有効量とは、標的微生物の増殖を阻害するか標的微生物に致死性である抗菌ラスパートマイシン誘導体または組成物の量を意味する。その実際の量は、特定の標的微生物および適用に依存しているものの、これらの抗菌ラスパートマイシン誘導体またはそれらの組成物を消毒剤または防腐剤として使用するためには、通常、比較的少ない量で、消毒または防腐されるべき物質に添加または適用される。典型的には、この抗菌ラスパートマイシン誘導体は、消毒溶液または防腐されるべき物質の約５重量％未満、好ましくは、約１重量％未満、さらに好ましくは、約０．１重量％未満を構成する。当業者は、例えば、実施例で提供したインビトロアッセイを使用して、過度の実験なしで、特定用途のための特定の抗菌ラスパートマイシン誘導体の抗菌有効量を決定できる。
【０１４２】
微生物の感染を処置または予防するのに使用するために、本発明の抗菌ラスパートマイシン誘導体またはそれらの組成物は、治療有効量で、投与または適用される。治療有効量とは、微生物感染の症状を改善するか、あるいは微生物感染を改善、処置または予防するのに有効な量を意味する。治療有効量の決定は、特に、本明細書中で提示した詳細な開示に照らして、当業者の能力の範囲内に十分に入る。
【０１４３】
消毒剤および防腐剤の場合と同様に、微生物感染、酵母感染、真菌感染または他の感染を処置または予防するための局所投与には、例えば、実施例に提供されるインビトロアッセイを使用して、治療有効用量を決定し得る。この処置は、この感染が見えている間または見えないときでも、適用され得る。当業者は、過度の実験なしで、局所感染を処置する治療有効量を決定できる。
【０１４４】
全身投与のためには、治療有効用量は、最初に、インビトロアッセイから推定できる。例えば、用量は、細胞培養物で決定されるＩＣ５０（すなわち、細胞培養物の５０％にとって致死の試験化合物の濃度）、細胞培養物で決定されるＭＩＣ（すなわち、増殖に対する最小阻害濃度）または細胞培養物で決定されるＩＣ１００（すなわち、細胞培養物の１００％にとって致死の抗菌ラスパートマイシン誘導体の濃度）含む循環抗菌ラスパートマイシン誘導体の濃度範囲を達成するために、動物モデルで、処方し得る。このような情報は、ヒトでの有用な用量をさらに正確に決定するのに使用できる。
【０１４５】
初期投薬量もまた、当該技術分野で周知の技術を使用して、インビボデータ（例えば、動物モデル）から推定できる。当業者は、動物データに基づいて、ヒトへの投与を容易に最適化できる。
【０１４６】
あるいは、初期投薬量は、特定の抗菌ラスパートマイシン誘導体のＩＣ５０、ＭＩＣおよび／またはＩ１００と、公知の抗菌剤のそれらとを比較することにより、そして、それに従って、その初期投薬量を調節することにより、公知の抗菌剤（例えば、ラスパートマイシンなど）の投薬量から決定できる。その最適投薬量は、通常の最適化により、これらの初期値から得られ得る。
【０１４７】
投薬の量および間隔は、治療効果を維持するのに十分な血漿レベルの活性抗菌ラスパートマイシン誘導体を供給するために、個々に調節され得る。注射による投与のための通常の患者投薬量は、約０．１〜５ｍｇ／ｋｇ／日、好ましくは、約０．５〜１ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。治療有効血清レベルは、日々、単一毎日用量または複数用量を投与することにより、達成され得る。
【０１４８】
局所投与または選択的摂取の場合、抗菌ラスパートマイシン誘導体の有効局所濃度は、血漿濃度と無関係であり得る。当業者は、過度の実験なしで、治療有効局所投薬量を最適化できる。
【０１４９】
投与する抗菌ラスパートマイシン誘導体の量は、もちろん、他の要因のうち、処置される被験体、被験体の体重、苦痛の重症度、投与様式および処方する医師の判断に依存している。
【０１５０】
この抗菌療法は、感染が検出できる間、または感染が検出できないときでも、断続的に繰り返され得る。この療法は、単独でか、あるいは他の薬物（例えば、他の抗生物質または抗菌剤）または本発明の他の抗菌ラスパートマイシン誘導体と組み合わせて、提供され得る。
【０１５１】
好ましくは、本明細書中で記述した抗菌ラスパートマイシン誘導体の治療有効量は、実質的な毒性を生じることなく、治療上の利点を提供する。これらの抗菌ラスパートマイシン誘導体の毒性は、例えば、ＬＤ５０（その集団の５０％にとって致死的な用量）またはＬＤ１００（その集団の１００％にとって致死的な用量）を決定することにより、細胞培養物または実験動物での標準的な薬学的手順を使用して、決定できる。毒性と治療効果との間の用量比は、治療指数である。高い治療指数を示す抗菌ラスパートマイシン誘導体が好ましい。これらの細胞培養物アッセイおよび動物研究から得られるデータは、被験体でにおいて使用するのに毒性がない投薬量範囲を処方する際に使用できる。本明細書中で記述した抗菌ラスパートマイシン誘導体の投薬量は、好ましくは、循環濃度範囲内にあり、これらの濃度は、毒性が殆どまたは全くなしで、有効用量を含む。この投薬量は、使用する投薬形態および利用する投与経路に依存して、この範囲内で変わり得る。正確な処方、投与経路および投薬量は、患者の状態を考慮して、個々の医師により選択され得る（例えば、Ｆｉｎｇｌら、１９７５、Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｃｈ．１，ｐ．１を参照せよ）。
【０１５２】
（５．実施例）
本発明を記述してきたが、以下の実施例は、本発明の範囲を限定するのではなく、例示するために提示されている。これらの実施例は、本発明の種々の実施形態および特徴を説明する。
【０１５３】
（５．１  実施例１：親培養物の選択）
ラスパートマイシンの生化学合成に使用する親培養物は、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ  ｓｓｐ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓ，（ＡＴＣＣ−２９８１４，ＢＳＰ−Ｍ７２８）であり、これは、以下のようにして選択した。Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ  ｓｓｐ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓ，（ＡＴＣＣ−２９８１４）の細胞懸濁液を、約２８℃でインキュベートした後で、栄養培地に配置して分離したシングルコロニーをうまく得られるように、希釈した。数個のコロニーを単離し、そして形態学的観察（コロニーのサイズ、表面構造、縁部のプロフィールなど）（これらは、当業者の能力の範囲内である）に基づいてラスパートマイシンの収率を改善するために、発酵により試験した。コロニーＢＳＰ−Ｍ７２８／１は、より高く再現可能な収率を提供し、その発酵マッシュにおける菌糸密度と優れた相関を生じた。それゆえ、少なくともこれらの理由のために、ラスパートマイシンの生化学合成のために、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ  ｓｓｐ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓ，（ＢＳＰ−Ｍ７２８／１）を選択した。
【０１５４】
（５．２  実施例２：培地の接種）
理想的には、ラスパートマイシンの生化学合成は、以下から構成される培地を接種することにより、実行される：水道水中の約３．０％のトリプチカーゼ（ｔｒｙｐｔｉｃａｓｅ）大豆ブロス、約１．０％のコーンデキストリンおよび０．１％のＣａＣＯ３であって、胞子および菌糸は、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｒｉｄｏｃｈｒｏｍｏｇｅｎｅｓ  ｓｓｐ．ｋｏｍａｂｅｎｓｉｓ，（ＢＳＰ−Ｍ７２８／１）のスラント（ｓｌａｎｔ）から擦り取った。約５０ｍＬの接種した培地を、２８℃で、ロータリーシェーカー上にて、約２００回転／分（「ＲＰＭ」）で、約４８時間にわたってインキュベートして、相当かつ均一の増殖成長物を提供する。この成長物は、次いで、種々の発酵培地（例えば、実施例３を参照）を接種するのに使用され得る。好ましくは、この成長物は、発酵培地を接種するために使用するとき、約２．０％と約３．０％の間の濃度範囲の発酵培地を含有する。
【０１５５】
（５．３  実施例３：シェーカーフラスコ発酵）
実施例２で生成した接種材料は、以下のような多数の発酵培地を接種するのに使用され得る：（１）水中に、約２．０％のデキストロース、約０．５％の牛肉エキス、約０．５％のバクト−ペプトン（Ｂａｃｔｏ−ｐｅｐｔｏｎｅ）、約０．５％のＮａＣｌおよび約０．３５％のＣａＣＯ３を含有する培地；（２）水中に溶解した約０．５％のデキストロース、約１．５％のデキストリン、約１．０％の糖蜜、約１．０％のバクト−ペプトンおよび約０．１％のＣａＣＯ３を含有する培地；および（３）水中に、約０．５％のデキストロース、約１．５％のグリセロール、約０．７５％のソイトーン（Ｓｏｙｔｏｎｅ）、約０．２％のＮａＣｌおよび約０．１％のＣａＣＯ３を含有する培地。代表的なシェーカーフラスコ発酵において、約５０ｍＬの上記培地を、実施例２の接種材料を用いて接種し、そして約４日間と約７日間との間の期間にわたって、約１６０ＲＰＭと１８０ＲＰＭとの間で、ロータリーシェーカーにて約２８℃の温度でインキュベートする。
【０１５６】
（５．４  実施例４：ラスパートマイシンの生化学合成）
ラスパートマイシンの生化学合成は、好ましくは、水中に、約０．５％のデキストロース、約１．５％のコーンデキストリン、約０．７５％のソイトーン、０．３％のＮａＣｌおよび約０．１％のＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏおよび約０．１％のＣａＣＯ３を含有する培養培地で実行される。この培地の未調整ｐＨは、一般に、約７．２と約７．３との間である。接種した培地を、約２４℃〜約３４℃の間（好ましくは、約２７℃〜約２９℃の間、最も好ましくは、約２８℃）の温度で、ロータリーシェーカー上にて、約１４０ＲＰＭと約２００ＲＰＭとの間（好ましくは、約１６０ＲＰＭと約１８０ＲＰＭの間）、約４日間と約７日間の間（好ましくは、約５日間と約６日間の間）で、有意な量のラスパートマイシンが合成されるまで、インキュベートする。この培地の収集ｐＨ読み取り値は、約８．０と約８．６の間である。ラスパートマイシンの収量は、発酵培地１リットル当たり約６００ｍｇであるのに対して、そのＣ−１５ラスパートマイシン誘導体の収量は、発酵培地１リットル当たり約４００ｍｇである。この培地の処方およびその構成要素の定量割合は、ラスパートマイシンの個々のリポペプチド成分の割合に直接的な影響を有する。
【０１５７】
（５．５  実施例５：発酵ブロスからのラスパートマイシンの分離）
約１．８５リットルの発酵ブロス（これは、実施例４の方法により、生成した；約８．５のｐＨ）を、等量の１−ブタノールと混合し、相分離した。暗褐色の水相を捨て、僅かに着色した１−ブタノール相（これは、ラスパートマイシンを含有する）を、等量の蒸留水と合わせ、攪拌し、その混合物のｐＨを、１Ｎ  ＨＣｌで、約２．０に調節した。相分離し、その１−ブタノール相を、その容量の１／４の水で洗浄し、等量の水と混合し、その混合物のｐＨを、約７．０に調節した。再度、相分離し、ラスパートマイシンを含有する水相のｐＨを、約２．０に調節し、そして１−ブタノールからラスパートマイシンを抽出し、次いで、約７．０のｐＨで、水相に戻した。この水相は、その部分ナトリウム塩として、ラスパートマイシンを含有していた。この溶液を減圧下にてエバポレートさせて、残留１−ブタノールを除去し、次いで、凍結乾燥して、白色粉末として、約５６１ｍｇのラスパートマイシンナトリウム塩を得た。
【０１５８】
（５．６  実施例６：発酵ブロスからのラスパートマイシンの分離）
約１．８リットルの発酵ブロス（これは、実施例４の方法により生成した）を、ｐＨ約２．０に調節し、そして約４℃で、３時間放置した。その細胞および任意の沈殿物を遠心分離により分離し、そして約５００ｍＬの水に懸濁した。この懸濁液のｐＨを、１Ｎ  ＮａＯＨで、約７．０に調節し、得られた混合物を、室温で、約１時間攪拌した。この懸濁液に、塩化カルシウム（約５００ｍｇ）を添加し、その混合物のｐＨを、１．０Ｎ  ＮａＯＨで、約８．６と約９．０の間に調節した。約５００ｍＬの１−ブタノールに次いで約１００ｍＬの１−ブタノールの２回の連続洗浄により、この水性懸濁液から、ラスパートマイシンを抽出した。理論で束縛するつもりはないが、ラスパートマイシンは、追加したカルシウムイオンとキレートを形成し得る。合わせたブタノール抽出物を、等量の蒸留水と混合し、１Ｎ  ＨＣｌで、ｐＨ約２．０まで調節し、そして２００ｍＬの蒸留水（これは、ｐＨ約２．０に調節した）で２回リンスした。理論で束縛するつもりはないが、このラスパートマイシンカルシウムキレートは、酸性溶液で崩壊され得、カルシウムイオンは、酸性水で洗浄することにより、除去され得る。このコア抗生物質を含有する１−ブタノール相を分離し、等量の蒸留水と混合し、その混合物を、１Ｎ  ＮａＯＨで、ｐＨ約７．０に調節して、その水相にて、ラスパートマイシンを得た。この水相を分離し、次いで、ラスパートマイシンを、ｐＨ約３．０で、１−ブタノールに抽出し、次いで、ｐＨ約７．０で、水相に抽出した。その透明で殆ど無色の水相を、減圧下にて、エバポレートして、残留１−ブタノールを除去し、そして凍結乾燥して、白色粉末として、６６８ｍｇのラスパートマイシンナトリウム塩を得た。
【０１５９】
この塩のＨＰＬＣにより、その塩の約８０％がラスパートマイシンのＣ−１５成分であることが明らかとなった。高分解能ＦＡＢ−質量分析：Ｃ５７Ｈ９０Ｎ１２Ｏ１９＋Ｎａ（Ｍ＋Ｎａ）＋の計算値、１２６９．６３４３、実測値、１２６９．６２８９であり、これは、ラスパートマイシンのＣ−１５成分に対する分子式Ｃ５７Ｈ９０Ｎ１２Ｏ１９に対応している。
【０１６０】
ラスパートマイシンを、１２０℃で、１６時間にわたって、６Ｎ  ＨＣｌで加水分解した。アミノ酸分析により、指示したモル比で、以下のアミノ酸が得られた：アスパラギン酸（３モル）、グリシン（３モル）、ピペリコン酸（１モル）、アロ−スレオニン（１モル）、イソロイシン（１モル）、ジアミノプロピオン酸（１モル）およびプロリン（１モル）。
【０１６１】
（５．７  実施例７：酸性形態のラスパートマイシンの調製）
実施例６で調製したナトリウム塩（約１００ｍｇ）を約１０ｍＬの水に溶解し、その溶液のｐＨを、０．１Ｎ  ＨＣｌで、約２．０に調節することにより、酸性形態のラスパートマイシンを調製した。この水溶液を、約１０ｍＬの１−ブタノールで抽出した。その有機抽出物を、次いで、約５ｍＬの水で洗浄し、約２０ｍＬの別の水と混合し、減圧下にてエバポレートして、そのカルボン酸として、ラスパートマイシンの水溶液を得、そして凍結乾燥して、約７７ｍｇの白色粉末を得た。ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ：１２４８（Ｍ＋Ｈ）＋、１２７０（Ｍ＋Ｎａ）＋、および１２８６（Ｍ＋Ｋ）＋であり、これは、これは、ラスパートマイシンのＣ−１５成分に対する分子式Ｃ５７Ｈ９０Ｎ１２Ｏ１９に対応している。元素分析：実測値：Ｃ、５２．１３；Ｈ、７．５８；Ｎ、１１．８３；Ｏ、２８．３４。
【０１６２】
（５．８  実施例８：デアシラーゼ微生物の選択およびデアシラーゼの生化学合成）
Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ  ｕｔａｈｅｎｓｉｓ  ＮＲＲＬ  １２０５２を、水中好気発酵条件下にて培養して、デアシラーゼを得た。この培養液の単一コロニー単離体は、形態および酵素生成性能の両方について不均一であったので、安定な高生成改変体を回収するために、選択を行った。最初は、１２０５２株から調製した接種材料を使用して、複数回の発酵を実行した。最も高い脱アシル化活性を生じる栄養増殖物を、差次的寒天（ＣＭ）（例えば、ＣＭ寒天であり、これは、０．５％のコーンスティープリカー、０．５％のバクト−ペプトン、１．０％の可溶性デンプン、０．０５％のＮａＣｌ、０．０５％のＣａＣｌ２−２Ｈ２Ｏおよび２．０％のバクト寒天を含有する）にプレートした。さらに評価するために、コロニーを選択した。一般に、小さいコロニー型は、大きいコロニー型よりも良好な酵素産生株である。単離体１８番は、選択した全てのコロニーのうち最良のデアシラーゼ産生株であり、このデアシラーゼ酵素の生成に慣用的に使用した。
【０１６３】
この高生成天然改変体は、公知の発酵プロトコルで使用した（Ｂｏｅｃｋら、１９８８．Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔ．，４１，１０８５）。この高生成ＮＲＲＬ  １２０５２改変体の菌糸懸濁液を、約２５０ＲＰＭで周回するロータリーシェーカーにて、約３０℃で、約７２時間にわたって、約１０ｍＬの培地（これは、脱イオン水中にて、約２．０％のスクロース、約２．０％の加熱処理済みオートミール、約０．５％の蒸留器穀物（ｄｉｓｔｉｌｌｅｒ’ｓ  ｇｒａｉｎ）、約０．２５％のイースト菌、約０．１％のＫ２ＨＰＯ４、０．０５％のＫＣｌ、約０．０５％のＭｇＳＯ４−７Ｈ２Ｏおよび約０．０００２％のＦｅＳＯ４−７Ｈ２Ｏを含有していた）中の保存培養液（これは、−７０℃で、２０％グリセロール中にて保存した）から成長した。この菌糸体懸濁液を、約５０ｍＬのＰＭ３培地（これは、水道水中にて、２．０％のスクロース、１．０％の落花生かす、０．１２％のＫ２ＨＰＯ４、０．０５％のＫＨ２ＰＯ４および０．０２５％のＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏを含有していた）に移し、そして約３０℃の温度で、約６０時間と約９０時間の間にわたってインキュベートした。
【０１６４】
（５．９  実施例９：化合物６の合成）
約１２ｍＬの０．５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ約７．２）中のラスパートマイシン２５７ミリグラムを、約１２０ｍＬのデアシラーゼ発酵ブロス（これは、実施例８のように合成した）に添加し、そして約２９℃で、約１８０ｒｐｍで、約１６時間インキュベートした。このブロスを遠心分離し、その遠心分離物をデカントし、固形分を、約４０ｍＬの蒸留水で抽出した。プールした遠心分離物を、次いで、２．５×５．０ｃｍのスチレン−ジビニルベンゼン樹脂カラム（ＥＮＶＩＴＭ−Ｃｈｒｏｍ  Ｐ）に適用し、その生成物を、１０％および１１％アセトニトリル−ｐＨ７．２リン酸塩混合物で溶出した。プールした画分を遠心分離し、そのｐＨを、酢酸アンモニウム−酢酸緩衝液の添加により、約４．６５に調節した。これらの画分を、次いで、２．５×５．０ｃｍ樹脂カラム（ＥＮＶＩＴＭ−Ｃｈｒｏｍ  Ｐ）に適用した。所望の物質は、１２．５％アセトニトリル−ｐＨ４．６５酢酸塩混合物で溶出した。プールした画分のｐＨを、約７．８に調節したのに続いて、濃縮し、そして凍結乾燥して、灰白色固体として、約７４ｍｇの６を得、これは、２１５ｎｍで、高圧液体クロマトグラフィー（「ＨＰＬＣ」）により分析した場合、約９７％の純度であった。ＦＡＢ−ＭＳ  ｍ／ｚ  ９１０（６のＨＲ−ＦＡＢ−ＭＳ：Ｃ３８Ｈ５９Ｎ１１Ｏ１５＋Ｈに対する実測値９１０．４２５１（Ｍ＋Ｈ）＋、計算値９１０．４２７０）。また、灰白色固体として、約１４ｍｇの６の異性体を得た。ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ９１０（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１６５】
（５．１０  実施例１０：化合物６および化合物５４の合成）
約２．５ｇのラスパートマイシンを、明示した以外は実施例９で記述した条件と類似の条件下にて、そのデアシラーゼブロスで処理した。約１．０ｇのラスパートマイシンを、約２．０ｍｇ／ｍＬで、約３．７時間にわたって、デアシラーゼで処理して、５４に富んだ試料を生成した。約１．５ｇのラスパートマイシンを、約５．０ｍｇ／ｍＬで、約２０時間にわたって、デアシラーゼで処理した。これらの発酵ブロスをプールし、次いで、実施例９で記述したように処理して、約１００ｍｇの５４、約６００ｍｇの６および概算１５０ｍｇの６の異性体を得た。５４のＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  １０２６（Ｍ＋Ｈ）＋、１０４８（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０１６６】
（５．１１  実施例１１：ペンタデカノイル−Ｌ−アスパラギン酸−４−Ｏ−ベンジルエステルの合成）
テトラヒドロフラン中の等モル量のペンタデカン酸、ジシクロヘキシルカルボジイミドおよび１−ヒドロキシベンゾトリアゾールを一晩攪拌し、その反応混合物を濾過し、そしてエバポレートして、結晶性固体を得た。この固体を、次いで、酢酸エチルでスラリーにし、濾過し、そして乾燥して、ペンタデカノイル−１−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステルを得た。Ｌ−アスパラギン酸−４−Ｏ−ベンジルエステル（０．２５７８ｇ、１．１５６ｍｍｏｌ）を、２ｍＬの水および２ｍＬのテトラヒドロフランに添加し、続いて、１ｍＬの飽和重炭酸ナトリウム溶液を添加し、そして溶解するまで攪拌した。５ｍＬの水および５ｍＬのテトラヒドロフラン中のペンタデカノイル−１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．２７９８ｇ、０．７５８ｍｍｏｌ）のスラリーを添加し、その反応混合物を、室温で、一晩攪拌した。この反応混合物を、次いで、２０ｍＬの水に注ぎ、そして６Ｎ塩酸で、ｐＨ約１．０まで酸性化した。得られた沈殿物を冷却し、濾過し、そして乾燥して、収率７９％で、０．２７９２ｇのペンタデカニル−Ｌ−アスパラギン酸−４−Ｏ−ベンジルエステルを得た。ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  ４４８（Ｍ＋Ｈ）＋、４７０（Ｍ＋Ｎａ）＋、４９２（Ｍ＋２Ｎａ−Ｈ）＋。
【０１６７】
（５．１２  実施例１２：ペンタデカノイル−Ｌ−アスパラギン酸−４−Ｏ−ベンジル−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステルの合成）
テトラヒドロフラン５．０ｍＬ中のペンタデカノイル−Ｌ−アスパラギン酸−４−Ｏ−ベンジルエステル（０．２６１９ｇ、０．５８５１ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．０８９５ｇ、０．５８５１ｍｍｏｌ）およびジシクロヘキシルカルボジイミド（０．１２０５ｇ、０．５８５１ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で、一晩攪拌した。この反応混合物を濾過し、そして減圧下にて、乾燥するまでエバポレートした。得られたオイルをヘキサン中でスラリーにして、結晶性生成物（収率８８％）として、０．２９３３ｇのペンタデカノイル−Ｌ−アスパラギン酸−４−Ｏ−ベンジル−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステルを得た。
【０１６８】
（５．１３  実施例１３：１００のベンジルエステルの合成）
６（１４．８ｍｇ、０．０１６２ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．０２３ｍＬ、０．１３１９ｍｍｏｌ）の混合物を、ジメチルホルムアミド０．５ｍＬに添加し、そして室温で攪拌した。実施例１２で調製したヒドロキシベンゾトリアゾールエステル（４４．９ｍｇ、０．０７９４ｍｍｏｌ）の溶液のアリコート（０．２０ｍＬ）を、５時間にわたって、ラスパートマイシンコアペプチド誘導体の溶液に添加した。次いで、水を添加し、その反応混合物を、２．５×５．０ｃｍのスチレン−ジビニルベンゼン樹脂カラム（ＥＮＶＩＴＭ−Ｃｈｒｏｍ  Ｐ）に吸着させ、そして約４５％のアセトニトリルを含有するｐＨ７．２リン酸緩衝液で溶出した。所望の生成物を含有する画分を脱塩し、そして凍結乾燥して、白色粉末（１００のベンジルエステル）６．０ｍｇを得た。ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  １３３９（Ｍ＋Ｈ）＋、１３６１（Ｍ＋Ｎａ）＋および１３７７（Ｍ＋Ｋ）＋。
【０１６９】
（５．１４  実施例１４：１００の合成）
実施例１３で調製したベンジル誘導体３．０ｍｇ、５％炭素上パラジウム１１ｍｇおよびメタノール１．０ｍＬの混合物を、大気圧で、一晩水素化した。この混合物をＣｅｌｉｔｅを通して濾過し、乾燥状態までエバポレートし、水中でスラリーにし、そして凍結乾燥して、２．０ｍｇの１００を得た。ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  １２８７（Ｍ＋Ｋ）＋、１３０９（Ｍ＋Ｋ＋Ｎａ−Ｈ）＋。
【０１７０】
（５．１５  実施例１５：ジヒドロラスパートマイシンの合成）
ラスパートマイシン２１．３ｍｇ、５％炭素上パラジウム３５ｍｇおよびメタノール２５ｍＬの混合物を、大気圧で、一晩水素化した（バルーン技術）。この混合物をＣｅｌｉｔｅを通して濾過し、乾燥状態までエバポレートし、水中でスラリーにし、そして凍結乾燥して、１９．４ｍｇのジヒドロラスパートマイシンを得た。ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  １２５０（Ｍ＋Ｈ）＋、１２７２（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０１７１】
（５．１６  実施例１６：５４の保護誘導体の合成）
ｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−アスパラギン酸４−Ｏ−ブチル−１−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステルを、実施例１１で記述したようにして、ｔ−ブトキシカルボニル−４−Ｏ−ブチル−Ｌ−アスパラギン酸、ジシクロヘキシルカルボジイミドおよび１−ヒドロキシベンゾトリアゾールから調製し、以下のように使用した。
【０１７２】
ジメチルホルムアミド０．２０ｍＬ中の６（１５．２ｍｇ、０．０１６７ｍｍｏｌ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．０２５ｍＬ、０．１４３７ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で、窒素下にて、攪拌した。ｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−アスパラギン酸４−Ｏ−ｔ−ブチルエステル１−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステル（０．０３０ｍＬのアリコート）（これは、０．２０ｍＬで、その活性エステル０．０４９６ｍｇ（０．１２１８ｍｍｏｌ）を含有する）の溶液を、最初に添加し、再度、０．５０時間後に添加した。この反応の進行は、ＨＰＬＣで追跡した。この反応が完結したとき、その生成物を、実施例１３で記述したようにして、単離した。５４の保護誘導体の収量は、９．０ｍｇであり、ＨＰＬＣに基づいた概算純度９０％であった。ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  １１８２（Ｍ＋Ｈ）＋、１２０４（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０１７３】
（５．１７  実施例１７：５４の合成）
トリフルオロ酢酸０．３５ｍＬを、実施例１６で調製した化合物６．９ｍｇに添加し、その溶液を、室温で、１．５時間放置した。トリフルオロ酢酸を除去し、その残渣を凍結乾燥して、そのトリフルオロ酢酸塩として、４．８ｍｇの５４を得た。ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  １０２５（Ｍ＋Ｈ）＋、１０４７（Ｍ＋Ｎａ）＋、１０６３（Ｍ＋Ｋ）＋。
【０１７４】
（５．１８  実施例１８：１００の合成）
ジイソプロピルエチルアミン０．０５０ｍＬ（０．２８８ｍｍｏｌ）を含有するジメチルホルムアミド０．７０ｍＬ中の５４（４０ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で攪拌し、ジメチルホルムアミド４１ｍｇ（０．１１２ｍｍｏｌ）中でペンタデカノイル−１−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステルを含有する溶液を添加した。１．０時間後および２．０時間後、それぞれ、この溶液の追加量０．１７ｍＬおよび０．２５ｍＬを添加した。１．５時間後、ジイソプロピルエチルアミン（０．０２５ｍＬ）を添加した。この反応の進行は、ＨＰＬＣで追跡した。その生成物をスチレン−ジビニルベンゼン樹脂カラム（ＥＮＶＩＴＭ−Ｃｈｒｏｍ  Ｐ）から溶出する溶媒が水中の３３％アセトニトリルであったこと以外は、実施例１３で記述した一般手順により、生成物１００を単離して、白色粉末３５ｍｇ（ＨＰＬＣによる概算純度９６％）を得た。ＦＡＢ−ＭＳ：ｍ／ｚ  １２５０（Ｍ＋Ｈ）＋、１２７２（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０１７５】
（５．１９  実施例１９：１１２の合成）
ＤＭＦ（３ｍＬ）およびＴＨＦ（２ｍＬ）中のｐ−ドデシルオキシ安息香酸（０．３０１８ｇ、１．０１ｍｍｏｌｅ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．１５５９ｇ、１．０２ｍｍｏｌｅ）およびジシクロヘキシルカルボジイミド（０．２０９１ｇ、１．０２ｍｍｏｌｅ）の混合物を、室温で、３０分間攪拌した。この溶液の０．２５ｍＬアリコートを、５４（０．０６０ｇ）のＤＭＦ（０．２５ｍＬ）溶液に添加し、そして室温で攪拌した。４０分後および１００分後、この活性エステルの追加アリコート０．２０ｍＬを添加した。この反応混合物を、メタノール５．０ｍＬの添加によりクエンチし、１．５Ｍ水酸化アンモニウム（０．５５ｍＬ）の添加により、ｐＨ紙を使用して、ｐＨをｐＨ７に調節した。この溶液を、メタノールで平衡にしたＳｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０の２５×４２０ｍｍカラムに適用した。この試料を、約０．８ｍＬ／分で、メタノールで溶出し、７ｍＬの画分を収集した。生成物を含有する画分をプールし（約９１〜１１２ｍＬの保持容量）、減圧下にて、３０〜３５℃で、メタノールを除去した。その残渣を蒸留水８ｍＬに溶解し、そのｐＨを、小容量の１．５Ｍ水酸化アンモニウムの添加により、ｐＨ７に調節し、ＨＰＬＣで評価し、そして凍結乾燥した。収量：灰白色固体１２．８ｍｇ、ＨＰＬＣによる７０％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ６１Ｈ９２Ｎ１２Ｏ２０；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １３６６（Ｍ＋Ｎａ）＋（Ｃ６１Ｈ９２Ｎ１２Ｏ２０＋Ｎａに対する計算値、１３３６）。
【０１７６】
（５．２０  実施例２０：１１４の合成）
ＤＭＦ（０．８６ｍＬ）中のデカンスルホニル−Ｌ−フェニルアラニン（０．１１６７ｇ、０．３１５８ｍｍｏｌｅ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．０４８３ｇ、０．３１５８ｍｍｏｌｅ）およびジシクロヘキシルカルボジイミド（０．０６５０ｇ、０．３１５８ｍｍｏｌｅ）を、室温で、４５分間攪拌した。この溶液の０．２０ｍＬアリコートを、０．０６４ｇの５４の溶液に添加した。この反応混合物を、メタノール４．０ｍＬおよび蒸留水０．３０ｍＬで希釈し、１．５Ｍ水酸化アンモニウムの添加により、ｐＨ紙を使用して、そのｐＨをｐＨ約７に調節した。この溶液を、濾過膜（Ｗｈａｔｍａｎ  ＧＤ／Ｘ、１３ｍｍ）を使用して濾過し、そして実施例１９のようにして、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラムに適用した。生成物を含有する画分をプールし、減圧下にて、３０〜３５℃で、メタノールを除去した。その残渣を、Ｗａｔｅｒｓ  Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ  Ｃ−１８カラム（２５×２２０ｍｍ、放射状圧縮システム）の分離用ＨＰＬＣにより、さらに精製した。その弱溶出液は、０．０４Ｍリン酸アンモニウム（水溶液、ｐＨ７．２）で緩衝化した１０％イソプロパノールであり、強溶出液は、０．００８Ｍ（ｐＨ７．２）緩衝液で緩衝化した５０％イソプロパノールであった。その試料残渣を弱溶出液に溶解し、このカラムに適用し、そして室温で、１ｍＬ／分で、４０分間にわたって、１００％弱溶出液から２０／８０弱／強溶出液への勾配を使用して、溶出した。生成物を含有する画分（分析用ＨＰＬＣにより決定した）をプールし、そして減圧下にて、イソプロパノールを除去した。この生成物溶液を、調整したスチレン−ジビニルベンゼン樹脂カートリッジ（０．５ｇのＥｎｖｉＣｈｒｏｍ−Ｐ、Ｓｕｐｅｌｃｏ、１０ｍＬのアセトニトリルおよび６ｍＬの１２％アセトニトリルでリンスした）上に吸着させることにより、脱塩した。試料適用後、このカートリッジを、塩を含まない１２．５％アセトニトリル５ｍＬでリンスし、その生成物を、６ｍＬの６７％アセトニトリルで、このカートリッジから取り除いた。このアセトニトリルを、減圧下にて、３０〜３５℃で、除去し、その残渣を、蒸留水で、１０ｍＬまで希釈し、次いで、凍結乾燥した。収量：白色固体１０．０ｍｇ、ＨＰＬＣによる９１％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ６１Ｈ９３Ｎ１３Ｏ２１Ｓ；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １３７６（Ｍ＋Ｈ）＋、１３９８（Ｍ＋Ｎａ）＋、１４１４（Ｍ＋Ｋ）＋（Ｃ６１Ｈ９３Ｎ１３Ｏ２１Ｓ＋Ｈに対する計算値、１３７６）。
【０１７７】
（５．２１  実施例２１：１１６の合成）
ＤＭＦ（３．０ｍＬ）中のｐ−ドデシルオキシ安息香酸（０．１０８５ｇ、０．３９０ｍｍｏｌｅ）、ジイソプロピルエチルアミン（０．０６８ｍＬ、０．３９０ｍｍｏｌｅ）およびＯ−［（エトキシカルボニル）シアノメチレンアミノ］−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＯＴＵ）（０．１２７４ｇ、０．３９０ｍｍｏｌｅ）の混合物を、室温で、１．０時間攪拌した。この溶液の０．２７ｍＬアリコートを、５４（０．０５０ｇ）のＤＭＦ（１．０ｍＬ）溶液に添加し、そして室温で攪拌した。７０分後、この活性エステル溶液の追加量０．１４ｍＬを添加した。室温で９０分後、この反応混合物を、５０℃で、４０分間加熱した。この反応混合物を、メタノールで希釈することによりクエンチし、希水酸化アンモニウムで、そのｐＨをｐＨ約７に調節した；その生成物を、実施例１９のようにして、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラム上で単離した。生成物を含有する画分をプールし、減圧下にて、メタノールを除去して、淡黄色固体４３ｍｇを得た。この生成物を、スチレン−ジビニルベンゼン樹脂カートリッジ（０．５ｇ、ＥｎｖｉＣｈｒｏｍ−Ｐ、Ｓｕｐｅｌｃｏ）上の低分解能クロマトグラフィーにより精製した。そのＬＨ−２０単離固体を、２０％アセトニトリル（リン酸アンモニウム中の０．１０Ｍ（水溶液、ｐＨ７．２））１０ｍＬに溶解し、そして重力流れを使って、その開放カートリッジに適用した。このカートリッジを、リン酸アンモニウム（約０．０５Ｍ、ｐＨ７．２）中にて、段階的に濃度を高めたアセトニトリルで溶出した。実施例２０のようにして、生成物を含有する画分をプールし、脱塩し、そして凍結乾燥した。収量：淡褐色固体２３ｍｇ、ＨＰＬＣによる８７％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ５９Ｈ８８Ｎ１２Ｏ２０；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １２８５（Ｍ＋Ｈ）＋、１３０７（Ｍ＋Ｎａ）＋、１３２３（Ｍ＋Ｋ）＋（Ｃ５９Ｈ８８Ｎ１２Ｏ２０＋Ｈに対する計算値、１２８５）。
【０１７８】
（５．２２  実施例２２：１１８の合成）
ドデシルイソシアネート（０．０１０４ｇ、０．０４３ｍｍｏｌｅ）および５４（０．０４４ｇ、０．０４３ｍｍｏｌｅ）の混合物を、ＤＭＦ（０．６０ｍＬ）中で攪拌した。室温で６０分後、このイソシアネートの第二アリコート０．０１０４ｍＬを添加し、そして６０分間攪拌した。実施例１９のようにして、この反応をクエンチし、そしてＳｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０で単離した。生成物を含有する画分をプールし、減圧下にて、メタノールを除去し、その生成物を水溶液から凍結乾燥した。収量：淡褐色固体２３ｍｇ、ＨＰＬＣによる７７％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ５５Ｈ８９Ｎ１３Ｏ１９；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １２５９（Ｍ＋Ｎａ）＋（Ｃ５５Ｈ８９Ｎ１３Ｏ１９＋Ｈに対する計算値、１２５９）。
【０１７９】
（５．２３  実施例２３：１２０の合成）
ＤＭＦ（０．８０ｍＬ）中のドデシルクロロホルメート（０．０１０ｍＬ）および５４（０．０３５ｇ、０．０３４ｍｍｏｌｅ）の混合物を、室温で攪拌した。この反応混合物を、４．０ｍＬメタノールで希釈し、その生成物を、実施例１９のようにして、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラム上で単離した。この生成物を含有する画分から、減圧下にて、メタノールを除去した；その残渣を、リン酸アンモニウム（水溶液、ｐＨ７．２）中の１４％アセトニトリル（ＡｃＮ）（０．１０Ｍ）１０ｍＬに溶解した。この溶液を、スチレン−ジビニルベンゼン樹脂カートリッジ（０．５ｇ、Ｓｕｐｅｌｃｏ  ＥｎｖｉＣｈｒｏｍ−Ｐ、１０ｍＬのＡｃＮおよび６ｍＬの１４％ＡｃＮで調整した）に適用することにより、脱塩した；その試料装填カートリッジを、塩を含まない６７％ＡｃＮ（６ｍＬ）を使用して、取り除いた。減圧下にて、ＡｃＮを除去し、その生成物を、水溶液から凍結乾燥した。収量：白色固体１１ｍｇ、ＨＰＬＣによる８１％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ５５Ｈ８８Ｎ１２Ｏ２０；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １２３８（Ｍ＋Ｈ）＋、１２６０（Ｍ＋Ｎａ）＋、１２７６（Ｍ＋Ｋ）＋（Ｃ５５Ｈ８８Ｎ１２Ｏ２０＋Ｈに対する計算値、１２３８）。
【０１８０】
（５．２４  実施例２４：１２２の合成）
ＤＭＦ（０．５０ｍＬ）中の５４（０．０４３８ｇ）およびヘキサデシルイソシアネート（０．０１３ｍＬ）の混合物を、室温で攪拌した。７０分後、このイソシアネートの第二部分を添加した。この反応混合物をクエンチし、その生成物を、実施例１９のようにして、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラム上で単離した。この生成物を含有する画分から、減圧下にて、メタノールを除去して、黄色固体２９ｍｇを得た。この生成物を、実施例２１のような低分解能逆相クロマトグラフィーにより精製した。その生成物を、リン酸アンモニウム（水溶液、ｐＨ７．２）中の４０％ＡｃＮ（０．１０Ｍ）で溶出した。この画分を、実施例２３のようにして、等量の蒸留水で希釈し、そして脱塩した；この生成物を溶出するには、１８ｍＬの６７％ＡｃＮが必要であった。減圧下にて、ＡｃＮを除去し、その生成物を、水溶液から凍結乾燥した。収量：灰白色固体２４ｍｇ、ＨＰＬＣによる８３％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ５９Ｈ９７Ｎ１３Ｏ１９；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １２９２（Ｍ＋Ｈ）＋。
【０１８１】
（５．２５  実施例２５：１２４の合成）
ＤＭＦ（０．５ｍＬ）中の５４（０．０６２４ｇ）およびテトラデシルイソチオシアネート（０．０１５ｍＬ）の混合物を、室温で、１．０時間攪拌した。このイソチオシアネートの第二容量（０．０１５ｍＬ）を添加し、その反応混合物を、数時間にわたって、５０℃まで加熱し、次いで、６０℃まで上げ、この試薬０．０１５ｍＬを追加し、そして６０℃で、２時間加熱した。イソチオシアネートの第四容量（０．０１５ｍＬ）を添加し、その反応物を、室温で、一晩攪拌した。この反応混合物をクエンチし、その生成物を、実施例１９のようにして、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラム上で単離した。適切にプールした画分から、真空下にて、メタノールを除去して、固形物４３ｍｇを得た。この生成物を、実施例２１のようにして、０．５ｇスチレン−ジビニルベンゼン樹脂カートリッジ上で、さらに精製した；生成物を、リン酸アンモニウム（水溶液、ｐＨ７．２）中の３０％ＡｃＮ（０．０５Ｍ）で溶出した。生成物を含有する画分をプールし、等量の蒸留水で希釈し、実施例２３のようにして、０．５ｇ樹脂カートリッジ上で脱塩し、そして凍結乾燥した。収量：白色固形物１４ｍｇ、ＨＰＬＣによる７５％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ５７Ｈ９３Ｎ１３Ｏ１８Ｓ；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １２８０（Ｍ＋Ｈ）＋、１３０２（Ｍ＋Ｎａ）＋、１３１８（Ｍ＋Ｋ）＋（Ｃ５７Ｈ９３Ｎ１３Ｏ１８Ｓ＋Ｈに対する計算値、１２８０）。
【０１８２】
（５．２６  実施例２６：１２６の合成）
ＤＭＦ（１．０ｍＬ）中のｐ−ドデカンアミド安息香酸（０．１０７６ｇ、０．３４ｍｍｏｌｅ）、Ｏ−［（エトキシカルボニル）シアノメチレンアミノ］−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート（ＴＯＴＵ）（０．１１１７ｇ、０．３４ｍｍｏｌｅ）およびジイソプロピルエチルアミン（０．０５９ｍＬ、０．３４ｍｍｏｌｅ）の混合物を、室温で、１．０時間攪拌した。この活性エステルのこの溶液のアリコート０．１１ｍＬを、５４（０．０６２４ｇ）のＤＭＦ（０．５ｍＬ）溶液に添加し、そして室温で、１．０時間攪拌した。１．０時間後、活性エステル溶液の第二アリコート（０．１０ｍＬ）を添加し、そして１．７時間後、第三アリコート（０．１０ｍＬ）を添加した。この反応混合物をクエンチし、その生成物を、実施例１９のようにして、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラム上で単離した。生成物を含有する画分から、真空下にて、メタノールを除去して、固形物４７ｍｇを得、これを、実施例２１のようにして、０．５ｇスチレン−ジビニルベンゼン樹脂カートリッジ上でさらに精製した。この生成物を、リン酸アンモニウム（水溶液、ｐＨ７．２）中の２５％ＡｃＮ（０．０６Ｍ）ら溶出した；実施例２３のようにして、画分を脱塩し、そして凍結乾燥した。収量：白色固形物２４ｍｇ、ＨＰＬＣによる８８％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ６１Ｈ９１Ｎ１３Ｏ２０；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １３２６．５（Ｍ＋Ｈ）＋、１３４８．６（Ｍ＋Ｎａ）＋、１３６４．５（Ｍ＋Ｋ）＋（Ｃ６１Ｈ９１Ｎ１３Ｏ２０＋Ｈに対する計算値、１３２６．６）。
【０１８３】
（５．２７  実施例２７：１２８の合成）
ＤＭＦ（１．０ｍＬ）中のペンタデカノイル−Ｌ−フェニルグリシン−４−Ｏ−ｔ−ブチルアスパラギン酸（０．１８３４ｇ、０．３３５ｍｍｏｌｅ）、ジイソプロピルエチルアミン（０．０５２ｍＬ、０．２９８ｍｍｏｌｅ）およびＴＯＴＵ（０．０９７９ｇ、０．２９８ｍｍｏｌｅ）の混合物を、室温で、１．０時間攪拌した。この活性エステル溶液の０．２５ｍＬアリコートを、５４（０．０６９ｇ）のＤＭＦ（１．０ｍＬ）溶液に添加した。７５分後、この活性エステル溶液の第二部分０．５０ｍＬを添加した。４５分後、実施例１９のようにして、この反応混合物をクエンチし、遠心分離し、そして膜濾過した（Ｗｈａｔｍａｎ
ＧＤ／Ｘ、１３ｍｍ）。実施例１９のようにして、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラム上にて、その濾液から、生成物を単離した；生成物を含有する画分から、真空下にて、メタノールを除去して、固形物７２ｍｇを得た。この生成物を、調整したスチレン−ジビニルベンゼン樹脂カートリッジ（５．０ｇ、ＥｎｖｉＣｈｒｏｍ−Ｐ）上にて、さらに精製した。このＬＨ−２０カラム残留物を、リン酸アンモニウム（水溶液、ｐＨ７．２）中の２０％ＡｃＮ（０．０８Ｍ）１０ｍＬに溶解し、そして重力流れを使用して、その開放カートリッジに適用した。このカートリッジを、リン酸アンモニウム（ｐＨ７．２）中にて、段階的に濃度を高めたＡｃＮで溶出した；リン酸アンモニウム中の４５．５％ＡｃＮ（０．０４Ｍ）で、生成物を溶出した。生成物を含有する画分をプールし、そして等量の蒸留水で希釈した。この樹脂カートリッジを、無塩５０％ＡｃＮ（１６ｍＬ）、８０％ＡｃＮ（２５ｍＬ）および２０％ＡｃＮ（２０ｍＬ）でリンスし、希釈した画分プールを、脱塩用に、このカートリッジに適用した。このカートリッジを無塩１４％ＡｃＮ（２６ｍＬ）でリンスし、その生成物を、６７％ＡｃＮ（３０ｍＬ）で取り除いた。これらの画分から、真空下にて、ＡｃＮを除去し、その水溶液を凍結乾燥した。収量：白色固形物２５ｍｇ、ＨＰＬＣによる７４％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ６９Ｈ１０７Ｎ１３Ｏ２０；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １４３９（Ｍ＋Ｈ）＋、１４６１（Ｍ＋Ｎａ）＋（Ｃ６９Ｈ１０７Ｎ１３Ｏ２０＋Ｈに対する計算値、１４３９）。
【０１８４】
（５．２８  実施例２８：１３０の合成）
実施例２７の生成物（２４ｍｇ）をトリフロオロ酢酸（ＴＦＡ）１．０ｍＬに溶解し、そして室温で、１．０時間熟成した。真空下にて、ＴＦＡを除去して、少量の褐色がかった黄色オイルを得た。このオイルを、リン酸アンモニウム（水溶液、ｐＨ７．２）中の２０％ＡｃＮ（０．０８Ｍ）１０ｍＬに溶解し、脱色し、そして実施例２３のようにして、０．５ｇスチレン−ジビニルベンゼンカートリッジ上で脱塩した。適切に合わせた画分から、真空下にて、共沸混合物として、ＡｃＮを除去し、その水溶液を凍結乾燥した。収量：白色固形物２２ｍｇ、ＨＰＬＣによる７２％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ６５Ｈ９９Ｎ１３Ｏ２０；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １３８３（Ｍ＋Ｈ）＋、１４０５（Ｍ＋Ｎａ）＋、１４２１（Ｍ＋Ｋ）＋（Ｃ６５Ｈ９９Ｎ１３Ｏ２０＋Ｈに対する計算値、１３８３）。
【０１８５】
（５．２９  実施例２９：１６４の合成）
通常の様式で、ジシクロヘキシルカルボジイミドを使用して、Ｎ−ペンタデカノイル−（Ｏ−ベンジル）−Ｌ−グルタミン酸を、その１−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステルに変換し、そして６と反応させた。この反応混合物をクエンチし、生成物を、実施例２１のようにして、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラム上で単離した。生成物を含有する画分から、真空下にて、メタノールを除去し、その生成物を、実施例２７のようにして、５ｇ樹脂カートリッジ上にて、低分解能クロマトグラフィーにより、さらに精製した。生成物を、リン酸アンモニウム（水溶液、ｐＨ７．２）中の４６％ＡｃＮ（０．０２５Ｍ）で溶出した。真空下にて、ＡｃＮを除去した後、実施例２７のようにして、適切な画分を脱塩し、凍結乾燥により、生成物を単離した。収量：白色固形物２０ｍｇ、ＨＰＬＣによる約７０％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ６５Ｈ１００Ｎ１２Ｏ１９；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １３５３（Ｍ＋Ｈ）＋、１３７５（Ｍ＋Ｎａ）＋（Ｃ６５Ｈ１００Ｎ１２Ｏ１９＋Ｈに対する計算値、１３５３．７）。
【０１８６】
（５．３０  実施例３０：１６６の合成）
実施例２９の生成物（１８ｍｇ）を、メタノール４．０ｍＬに溶解し、炭素上５％パラジウム（５０ｍｇ）を添加した。この混合物を、２．０時間にわたって水素化し（バルーン技術）、膜濾過し（Ｗｈａｔｍａｎ  ＧＤ／Ｘ）、その濾液を、乾燥するまで蒸発させた。その残留物を、希水酸化アンモニウムでｐＨ７に調節することにより、水１０ｍＬに溶解し、次いで、凍結乾燥した。収量：白色固形物１３ｍｇ、ＨＰＬＣによる６４％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ５８Ｈ９４Ｎ１２Ｏ１９；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １２６４（Ｍ＋Ｈ）＋、１２８６（Ｍ＋Ｎａ）＋、および１３０８（Ｍ＋２Ｎａ）＋（Ｃ５８Ｈ９４Ｎ１２Ｏ１９＋Ｈに対する計算値、１２６３．７）。
【０１８７】
（５．３１  実施例３１：１４６の合成）
Ｎ−ペンタデカノイル−Ｌ−フェニルアラニン（７６．８ｍｇ、０．１９７ｍｍｏｌｅ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（３０．１ｍｇ、０．１９７ｍｍｏｌｅ）およびジシクロヘキシルカルボジイミド（４０．６ｍｇ、０．１９７ｍｍｏｌｅ）のＤＭＦ（１．０ｍＬ）溶液を超音波処理し、そして室温で、４５分間攪拌した。この溶液のアリコート０．２５ｍＬを、ＤＭＦ（０．２０ｍＬ）中の５４（４８ｍｇ）に添加し、そして室温で、７０分間攪拌した。活性エステル溶液の第二アリコート０．０５０ｍＬを添加し、そして４０分間攪拌した。この反応混合物をメタノール４ｍＬで希釈し、室温で、１０分間熟成し、そして膜（Ｇｅｌｍａｎ  Ａｃｒｏ  ＬＣ１３）で濾過した。この生成物を、実施例２１のようにして、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラムで単離した。この生成物を、実施例２７のようにして、５ｇ樹脂カートリッジ上にて、さらに精製し、この樹脂から、水酸化アンモニウム（ｐＨ７．２）中の４６％ＡｃＮ（０．０２５Ｍ）で溶出した。実施例２７のようにして、この生成物を脱塩し、そして凍結乾燥した。収量：白色固形物１０ｍｇ、ＨＰＬＣによる９６％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ６６Ｈ１０１Ｎ１３Ｏ２０；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １３９６（Ｍ＋Ｈ）＋、１４１８（Ｍ＋Ｎａ）＋および１４３４（Ｍ＋Ｋ）＋（Ｃ６６Ｈ１０１Ｎ１３Ｏ２０＋Ｈに対する計算値、１３９６．７）。
【０１８８】
（５．３２  実施例３２：１４６の合成）
Ｎ−ペンタデカノイル−Ｄ−フェニルアラニンを、そのＬ−異性体について実施例３１で記述したようにして、その活性エステルに変換し、そして５４と反応させた。この反応生成物をクエンチし、そして実施例３１のようにして、生成物を単離した；生成物を含有する画分から、真空下にて、メタノールを除去して、固形物３２ｍｇを得た。この生成物を、実施例３１のようにして、さらに精製し、そして単離した。収量：白色固形物１７ｍｇ、ＨＰＬＣによる９７％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ６６Ｈ１０１Ｎ１３Ｏ２０；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １３９７（Ｍ＋Ｈ）＋、１４１９（Ｍ＋Ｎａ）＋（Ｃ６６Ｈ１０１Ｎ１３Ｏ２０＋Ｈに対する計算値、１３９６．７）。
【０１８９】
（５．３３  実施例３３：１５２の合成）
α−Ｎ−ペンタデカノイル−ε−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−リシン（１０１ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌｅ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（３１ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌｅ）およびジシクロヘキシルカルボジイミド（４１ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌｅ）のＤＭＦ（１．５ｍＬ）溶液を、室温で、４５分間攪拌した。この溶液の０．４５ｍＬアリコートを、５４（５２．５ｍｇ）のＤＭＦ（０．３０ｍＬ）溶液に添加し、そして室温で、６０分間攪拌した。この反応混合物をメタノール５．０ｍＬで希釈し、膜（Ｇｅｌｍａｎ  Ａｃｒｏ  ＬＣ１３）で濾過し、実施例２１のようにして、その生成物を、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラム上にて、単離した。その固形残留物を、実施例２７のようにして、５ｇ樹脂カートリッジ上にて、さらに精製した；この生成物を、この樹脂から、リン酸アンモニウム（ｐＨ７．２）中の４６％ＡｃＮ（０．０２５Ｍ）で抽出した。実施例２５のようにして、適切な画分を脱塩し、凍結乾燥により、生成物を単離した。収量：白色固形物７ｍｇ、ＨＰＬＣによる７２％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ７１Ｈ１１０Ｎ１４Ｏ２２；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １５１２（Ｍ＋Ｈ）＋、１５３４（Ｍ＋Ｎａ）＋および１５５０（Ｍ＋Ｋ）＋（Ｃ７１Ｈ１１０Ｎ１４Ｏ２２＋Ｈに対する計算値、１５１１．８）。
【０１９０】
（５．３４  実施例３４：１５４の合成）
１５２（３．８ｍｇ）のメタノール２．０ｍＬ溶液に、炭素上１０％パラジウム５．５ｍｇを添加した。この混合物を攪拌し、そして室温で、１．０時間にわたって、水素化した（バルーン技術）。その触媒を濾過により除去し、そのメタノールを、減圧下にて、蒸発させた。その残留物を水に溶解し、そして凍結乾燥した。収量：２．５ｍｇ、ＨＰＬＣによる７２％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ６３Ｈ１０４Ｎ１４Ｏ２２；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １４００（Ｍ＋Ｎａ）＋（Ｃ６３Ｈ１０４Ｎ１４Ｏ２２＋Ｎａに対する計算値、１３９９．７）。
【０１９１】
（５．３５  実施例３５：１７８の合成）
ＤＭＦ（０．４３ｍＬ）中のペンタデカノイル−（Ｏ−ｔ−ブチル）−Ｌ−チロシン（５６ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌｅ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１９．８ｍｇ、０．１２９ｍｍｏｌｅ）およびジシクロヘキシルカルボジイミド（２５ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌｅ）の混合物を、室温で、４５分間攪拌した。この溶液のアリコート０．３０ｍＬを、ＤＭＦ（０．２５ｍＬ）中の５４（５８ｍｇ）に添加し、そして室温で攪拌した。１．０時間後、この活性エステルの残りを添加し、そして４０分間攪拌した。この反応混合物をクエンチし、実施例２１のようにして、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラム上にて、生成物を単離した。生成物を含有する画分から、真空下にて、メタノールを除去して、固形物２５ｍｇを得、これを、実施例２７のようにして、さらに精製し、そして５ｇ樹脂カートリッジ上にて、単離した。収量：１４ｍｇ、ＨＰＬＣによる９３％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ７０Ｈ１０９Ｎ１３Ｏ２１；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １４６８．５（Ｍ＋Ｈ）＋、１４９０．５（Ｍ＋Ｎａ）＋、１５０６．３（Ｍ＋Ｋ）＋（Ｃ７０Ｈ１０９Ｎ１３Ｏ２１＋Ｈに対する計算値、１４６８．８）。
【０１９２】
（５．３６  実施例３６：１８０の合成）
実施例３５の１７８（１１ｍｇ）の９５％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）１．５ｍＬ溶液を、室温で、７０分間攪拌した。ＨＰＬＣにより、この反応が完結したことが明らかとなった。乾燥窒素流でＴＦＡを除去し、その残留物を、真空中にて、水酸化カリウムで除去した。得られた乾燥固形物を、３％水酸化アンモニウム１滴を添加することにより、数ｍＬの水に溶解し、そして凍結乾燥した。収量：１０ｍｇ、ＨＰＬＣによる７０％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ６６Ｈ１０１Ｎ１３Ｏ２１；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １４１３（Ｍ＋Ｈ）＋、１４３５（Ｍ＋Ｎａ）＋（Ｃ６６Ｈ１０１Ｎ１３Ｏ２１＋Ｈに対する計算値、１４１２．７）。
【０１９３】
（５．３７  実施例３７：１３９の合成）
ＤＭＦ（０．５０ｍＬ）中のＮ−ヘキサデシルスルホニル−（Ｏ−ｔ−ブチル）−Ｌ−アスパラギン酸（１８９ｍｇ、０．３９５ｍｍｏｌｅ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（５５．１ｍｇ、０．３９５ｍｍｏｌｅ）およびジシクロヘキシルカルボジイミド（８２．５ｍｇ、０．３９５ｍｍｏｌｅ）を、室温で、４５分間攪拌した。この溶液のアリコート０．０５０ｍＬを、ＤＭＦ（０．２０ｍＬ）中の６（２５ｍｇ）のテトラブチルアンモニウム塩に添加し、そして室温で、６０分間攪拌した。この反応混合物を、リン酸アンモニウム（ｐＨ７．２）中の２５％アセトニトリル（ＡｃＮ）（０．１２Ｍ）８ｍＬで希釈することによりクエンチし、室温で熟成し、次いで、膜（Ｗｈａｔｍａｎ  ＧＤ／Ｘ）で濾過した。５ｇスチレン−ジビニルベンゼン樹脂カートリッジ（２５×４５ｍｍ、Ｓｕｐｅｌｃｏ  ＥｎｖｉＣｈｒｏｍ−Ｐ）上の低分解能逆相クロマトグラフィーにより、その濾液から、この生成物を単離した。試料を装填したカートリッジを、リン酸ナトリウム（水溶液、ｐＨ６．９）中にて、段階的に濃度を高めたＡｃＮで溶出した；生成物を、ｐＨ６．９緩衝液中の５７％ＡｃＮ（０．０１０Ｍ）で溶出した。生成物を含有する画分をプールし、等量の蒸留水で希釈し、次いで、同じ５ｇ樹脂カートリッジ（これは、７５％および２５％ＡｃＮでリンスした）上で脱塩した。希釈した画分プールを、このカートリッジに適用し、これを、リン酸アンモニウム（ｐＨ７．２）中の２５％ＡｃＮ（０．１２５Ｍ）１６ｍＬでリンスし、次いで、無塩２５％ＡｃＮ（２４ｍＬ）でリンスした。この生成物を、６７％ＡｃＮ（４８ｍＬ）を使って、このカートリッジから取り除いた。このストリップ画分から、真空下にて、ＡｃＮを除去し、その水溶液を凍結乾燥して、所望生成物を得た。収量：白色固形物４．７ｍｇ、ＨＰＬＣによる６９％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ６２Ｈ１０４Ｎ１２Ｏ２０Ｓ；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １３９２（Ｍ＋Ｎａ）＋（Ｃ６２Ｈ１０４Ｎ１２Ｏ２０Ｓ＋Ｎａに対する計算値、１３９１．７）。
【０１９４】
（５．３８  実施例３８：１４０の合成）
１３９（４．７ｍｇ）の９５％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）０．５０ｍＬ溶液を、室温で、３０分間攪拌した。乾燥窒素流でＴＦＡを除去し、その残留物を、ｔ−ブチルメチルエーテルで倍散し、そして遠心分離した。過剰のエーテルを除去し、得られた固形物を、３％水酸化アンモニウム１滴を添加することにより、水１．５ｍＬに溶解し、次いで、凍結乾燥した。収量：固形物２．５ｍｇ、ＨＰＬＣによる６３％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ５８Ｈ９６Ｎ１２Ｏ２０；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １３１３（Ｍ＋Ｈ）＋、１３３５（Ｍ＋Ｎａ）＋（Ｃ５８Ｈ９６Ｎ１２Ｏ２０＋Ｈに対する計算値、１３１３．６）。
【０１９５】
（５．３９  実施例３９：１５５の合成）
α−Ｎ−ペンタデカノイル−（Ｎ−ｔ−ブチルオキシカルボニル）−Ｌ−トリプトフィル−（Ｎ−トリチル）−Ｌ−アスパラギンを、通常のプロトコル（溶媒としてＤＭＦ）により、ジシクロヘキシルカルボジイミドを使用して、その１−ヒドロキシベンゾトリアゾール活性エステルに変換し、そして室温で、８０分間にわたって、ＤＭＦ（０．４ｍＬ）中の６（６３．６ｍｇ）と反応させた。この反応混合物をクエンチし、実施例２１のようにして、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラム上にて、生成物を単離した。この生成物を、実施例２７のようにして、５ｇ樹脂カートリッジ上にて、さらに精製した；生成物を、水酸化アンモニウム（ｐＨ７．２）中の６６％ＡｃＮ（０．００５Ｍ）で溶出した。実施例２７のようにして、生成物を含有する画分を脱塩し、そして凍結乾燥した。収量：白色固形物２２ｍｇ、ＨＰＬＣによる７９％（２２０ｎｍの面積％）；Ｃ９２Ｈ１２５Ｎ１５Ｏ２１；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １７７７（Ｍ＋Ｈ）＋、１７７９（Ｍ＋Ｎａ）＋（Ｃ９２Ｈ１２５Ｎ１５Ｏ２１＋Ｈに対する計算値、１７７６．９）。
【０１９６】
（５．４０  実施例４０：１５６の合成）
実施例３９の保護誘導体１５５を、室温で、３０分間にわたって、９５％トリフルオロ酢酸１．５ｍＬで処理した。この溶液を、実施例３８のようにして処理した。エーテルで沈殿した固形物を、水６ｍＬに溶解し、そのｐＨを、希水酸化アンモニウムで４．０に調節し、次いで、５０℃で、３０分間加熱した。この溶液のｐＨを、水酸化アンモニウムで、ｐＨ約７．０に調節し、次いで、凍結乾燥した。収量：１２ｍｇ、ＨＰＬＣによる７９％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ６８Ｈ１０３Ｎ１５Ｏ１９；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １４３５（Ｍ＋Ｈ）＋、１４５７（Ｍ＋Ｎａ）＋（Ｃ６８Ｈ１０３Ｎ１５Ｏ１９＋Ｈに対する計算値、１４３４．８）。
【０１９７】
（５．４１  実施例４１：１３３の合成）
Ｎ−ペンタデカニル−Ｌ−トリプロフィル−（Ｏ−ｔ−ブチル）−Ｌ−アスパラギン酸（５０ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌｅ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１４．６ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌｅ）およびジシクロヘキシルカルボジイミド（１７．２ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌｅ）のＤＭＦ（０．８０ｍＬ）溶液を、室温で、１．０時間攪拌した。この溶液のアリコート０．０５０ｍＬを、６（約８０ｍｇ）のＤＭＦ（０．２０ｍＬ）溶液に添加した。１００分後、追加活性エステル０．０５０ｍＬを添加し、さらに５０分間攪拌した。この反応混合物を、リン酸アンモニウム（ｐＨ７．２）中の３３％ＡｃＮ（０．１７Ｍ）６ｍＬで希釈し、次いで、膜（Ｗｈａｔｍａｎ  ＧＤ／Ｘ）で濾過した。Ｗａｔｅｒｓ
Ｄｅｌｔａ−Ｐａｋ  Ｃ１８カラム（２５×１１０ｍｍ）上での分離用ＨＰＬＣにより、２種のジアステレオマー生成物を単離した。その連結側鎖にあるアスパラギン酸残基のα炭素において、そのエピマー化が起こったと推定される。このカラムを、室温で、１０ｍＬ／分で、６０分間にわたって、リン酸ナトリウム（ｐＨ６．９）中の３８％ＡｃＮ（０．０２２Ｍ）からリン酸ナトリウム（ｐＨ６．９）中の５４％ＡｃＮ（０．０１６Ｍ）までの線形勾配を使用して、溶出した。これらの２種のジアステレオマー生成物の各々に対して、適切な画分をプールした；真空下にて、ＡｃＮを除去し、その画分を、実施例３７のようにして、３ｇ樹脂カートリッジ上で、脱塩した。これらのストリップ画分から、真空下にて、ＡｃＮを除去し、その水溶液を凍結乾燥した。収量：Ｄ−ジアステレオマー：白色固形物１８ｍｇ、ＨＰＬＣによる８８％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ７２Ｈ１１０Ｎ１４Ｏ２０；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １４９２（Ｍ＋Ｈ）＋、１５１４（Ｍ＋Ｎａ）＋（Ｃ７２Ｈ１１０Ｎ１４Ｏ２０＋Ｈに対する計算値、１４９１．８）。Ｌ−ジアステレオマー：白色固形物３０ｍｇ、ＨＰＬＣによる９５％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ７２Ｈ１１０Ｎ１４Ｏ２０；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １４９２（Ｍ＋Ｈ）＋、１５１３（Ｍ＋Ｎａ）＋（Ｃ７２Ｈ１１０Ｎ１４Ｏ２０＋Ｈに対する計算値、１４９１．８）。
【０１９８】
（５．４２  実施例４２：１３４の合成）
１３３の推定Ｌ−異性体（３０ｍｇ）のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）０．５０ｍＬ溶液を、室温で、アルゴン下にて、１．０時間攪拌した。ＴＦＡを、乾燥窒素流で除去した。その残留物を、真空中にて、一晩、水酸化カリウムで除去し、次いで、ｔ−ブタノールに溶解し、そして凍結乾燥した。収量：固形物２８ｍｇ、ＨＰＬＣによる９０％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ６８Ｈ１０２Ｎ１４Ｏ２０；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １４３５（Ｍ＋Ｈ）＋、１４５７（Ｍ＋Ｎａ）＋、１４７３（Ｍ＋Ｋ）＋（Ｃ６８Ｈ１０２Ｎ１４Ｏ２０＋Ｈに対する計算値、１４３５．７）。
【０１９９】
（５．４３  実施例４３：１３４の合成）
１３３の推定Ｄ−異性体（１８ｍｇ）のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）０．５０ｍＬ溶液を、室温で、アルゴン下にて、１．０時間攪拌した。ＴＦＡを、乾燥窒素流で除去した。その残留物を、真空中にて、一晩、水酸化カリウムで除去し、次いで、ｔ−ブタノールに溶解し、そして凍結乾燥した。収量：固形物１７ｍｇ、ＨＰＬＣによる９０％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ６８Ｈ１０２Ｎ１４Ｏ２０；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １４３５（Ｍ＋Ｈ）＋、１４５７（Ｍ＋Ｎａ）＋、１４７３（Ｍ＋Ｋ）＋（Ｃ６８Ｈ１０２Ｎ１４Ｏ２０＋Ｈに対する計算値、１４３５．７）。この化合物は、いずれのインビトロ生体活性も示さなかった。
【０２００】
（５．４４  実施例４４：１４３の合成）
１−ヒドロキシベンゾトリアゾールおよびジシクロヘキシルカルボジイミドを使用して、Ｎ−ペンタデカノイル−（Ｎ−ｔ−ブチルオキシカルボニル）−Ｌ−トリプトフィル−（Ｎ−トリチル）−Ｌ−アスパラギニル−（Ｏ−ｔ−ブチル）−Ｌ−アスパラギン酸を、ＤＭＦ中にて、その活性エステルに変換した。これを、ＤＭＦ（０．２０ｍＬ）中にて、６（４１ｍｇ）と反応させた。この反応混合物を、実施例４１のようにしてクエンチし、その生成物を、実施例２７のようにして、５ｇ樹脂カートリッジ上にて、単離した。この生成物を、６７％ＡｃＮ（緩衝塩なし）で溶出した。真空下にて、この生成物を含有する画分から、ＡｃＮおよび水を除去した。収量：白色固形物３２ｍｇ、ＨＰＬＣによる７１％（２２０ｎｍの面積％）；Ｃ１００Ｈ１３８Ｎ１６Ｏ２４。
【０２０１】
（５．４５  実施例４５：１４４の合成）
実施例４４で調製した保護ペプチド誘導体（３０ｍｇ）を、９５％ＴＦＡ（１．５ｍＬ）で処理し、そして実施例４０のようにして、加工した。加水分解した溶液を凍結乾燥して、灰白色固形物１３ｍｇを得た。この生成物をメタノール１．０ｍＬに溶解し、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラム（２５×８０ｍｍ、メタノールで平衡化した）上にて、さらに精製し、これを、メタノールで溶出した。生成物を含有する画分から、メタノールを除去し、そして水溶液から、生成物を凍結乾燥し、希水酸化アンモニウムで、ｐＨ７に調節した。収量：白色固形物９ｍｇ、ＨＰＬＣによる８０％（２２０ｎｍの面積％）；Ｃ７２Ｈ１０８Ｎ１６Ｏ２２；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ  １５５１（Ｍ＋Ｈ）＋、１５７１（Ｍ＋Ｎａ）＋、１５８８（Ｍ＋Ｋ）＋（Ｃ７２Ｈ１０８Ｎ１６Ｏ２２＋Ｈに対する計算値、１５４９．８）。
【０２０２】
（５．４６  実施例４６：１４２の合成）
５４（３８ｍｇ）のＤＭＦ（０．２０ｍｌ）溶液を、１．１当量のＮ−ペンタデカノイル−Ｌ−アラニン１−ヒドロキシベンゾトリアゾール活性エステル（これは、通常の様式で調製した）を含有するＤＭＦ溶液０．２０ｍｌで処理し、そして室温で攪拌した。１時間後、この活性化エステルの追加量０．２０ｍｌを添加した。この第二の添加の４５分後、この反応物を、水５０ｍｌ注ぐことにより、クエンチした。得られた混合物をｐＨ９．５に調節し、Ｃａ２Ｃｌ（９４ｍｇ）を添加し、得られた溶液を、１−ブタノール５０ｍｌに続いて別の１−ブタノール２５ｍｌで抽出した。合わせた１−ブタノール抽出物を、水（共沸混合物）の添加と共に蒸発させて水溶液にし、これを凍結乾燥して、白色粉末２０ｍｇを得た。この物質は、残留ＨＯＢＴを一部含有しており、標準方法（例えば、実施例２１を参照）により、ＭｅＯＨを使って、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０上でクロマトグラフィーにかけて、白色粉末１４ｍｇを得た。ＨＰＬＣによる純度８９％（２１５ｎｍの面積％）；Ｃ６０Ｈ９７Ｎ１３Ｏ２０；ＦＡＢＭＳ：ｍ／ｚ
１３２０（Ｍ＋Ｈ）＋、１３４２（Ｍ＋Ｎａ）＋（Ｃ６０Ｈ９７Ｎ１３Ｏ２０＋Ｈに対する計算値、１３２０．７）。
【０２０３】
（５．４７  実施例４７：ラスパートマイシン誘導体を合成するのに使用されるペプチド誘導体の質量スペクトルデータ）
前出の実施例でラスパートマイシン誘導体を合成するのに使用した種々のペプチド中間体の質量スペクトルデータを、以下に記載する。以下で記載したペプチド誘導体は、一般に、実施例２０のような活性エステル方法により、調製した。化合物＊                                              ＦＡＢＭＳ
Ｎ−ペンタデカノイル−Ｌ−フェニルグリシル          ５４７（Ｍ＋Ｈ）＋
−Ｌ−（Ｏ−ｔ−ブチル）−アスパラギン酸
Ｎ−ペンタデカノイル−Ｌ                            ９０（Ｍ＋Ｈ）＋
−フェニルグリシンメチルエステル
Ｎ−ペンタデカノイル−Ｌ−フェニルグリシン          ３７６（Ｍ＋Ｈ）＋、
３９８（Ｍ＋Ｎａ）＋（エステルの加水分解により調製）
Ｎ−ペンタデカノイル−Ｌ−（Ｏ−ベンジル）          ４２６（Ｍ＋Ｈ）＋
−グルタミン酸
Ｎ−ペンタデカノイル−Ｌ−（Ｏ−ｔ−ブチル）        ４７６（Ｍ＋Ｈ）＋
−チロシンメチルエステル
Ｎ−ペンタデカノイル−Ｌ−（Ｏ−ｔ−ブチル）        ４６２（Ｍ＋Ｈ）＋
−チロシン
（エステルの加水分解により調製）
Ｎ−ペンタデカノイル−Ｄ−フェニルアラニン          ３９０（Ｍ＋Ｈ）＋
Ｎ−ペンタデカノイル−Ｌ−フェニルアラニン          ３９０（Ｍ＋Ｈ）＋
α−Ｎ−ペンタデカノイル−ε                        ５０５（Ｍ＋Ｈ）＋
−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−リシン
Ｎ−ペンタデカノイル−Ｌ−アラニン            ３１４（Ｍ＋Ｈ）＋、３３６（Ｍ＋Ｎａ）＋
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−トリプトフィル    ５１０（Ｍ＋Ｈ）＋
−Ｌ−（Ｏ−ｔ−ブチル）−アスパラギン酸
Ｌ−トリプトフィル−Ｌ−（Ｏ−ｔ−ブチル）          ３７６（Ｍ＋Ｈ）＋
−アスパラギン酸
（ＣＢＺ誘導体の水素化分解により調製）
（５．９  ラスパートマイシン誘導体のＭＩＣデータ）
そのアッセイ有機体としてＳｔａｐｈｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓのＳｍｉｔｈ株を使用して、マイクロタイター連続希釈により、ＭＩＣ値を決定し、これを、ＣａＣｌ２を含むかまたは含まないＭｕｅｌｌｅｒ−Ｈｉｎｔｏｎブロス中で増殖した。
【０２０４】
【表１】
2004528268.tif 000047
2004528268.tif 000048
前述の発明は、理解し易くするために、ある程度詳細に記述されているものの、添付の請求の範囲内で、ある種の変更および改良が実行され得ることが明らかである。従って、本実施形態は、限定ではなく例示と見なすべきであり、本発明は、本明細書中で示した詳細には限定されず、添付の請求の範囲およびその等価物の範囲内で変更され得る。
【０２０４】
【配列表】
SEQUENCE LISTING
<110>  Micrologix Biotech, Incorporated
<120>  DERIVATIVES OF LASPARTOMYCIN ANDPREPARATION AND USE THEREOF
<130>  F103582110
<140>  JP P2002-511770
<141>  2001-07-17
<150>  60/219,059
<151>  2000-07-17
<150>  60/220,950
<151>  2000-07-26
<150>  09/760,328
<151>  2001-01-12
<160>  1
<170>  PatentIn version 3.2
<210>  1
<211>  10
<212>  PRT
<213>  Artificial
<220>
<223>  synthetic peptide
<220>
<221>  MISC_FEATURE
<222>  (1)..(1)
<223>  Xaa is 2,3-diaminopropanoic acid
<220>
<221>  MISC_FEATURE
<222>  (2)..(2)
<223>  Xaa is pipecolic acid
<400>  1
Xaa Xaa GlyAsp Gly Asp Gly Thr Ile Pro
1              5                  10