【手続補正書】
【提出日】平成15年12月22日(2003.12.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
体細胞又は体細胞核を透明帯のない除核卵母細胞へ移植する工程を含む、核移植の方法。
【請求項２】
卵母細胞が、非ヒト哺乳動物の卵管及び／又は卵巣より単離される、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
卵母細胞が、卵管採取法又は経膣採取法により単離される、請求項2に記載の方法。
【請求項４】
卵母細胞が吸引によって単離される、請求項2に記載の方法。
【請求項５】
卵母細胞が前期I又は中期IIのものである、請求項1に記載の方法。
【請求項６】
卵母細胞が前期Iのものである、請求項5に記載の方法。
【請求項７】
体細胞、体細胞核、及び／又は卵母細胞が、ウシ科、ヒツジ科、シカ科、イノシシ科、ウマ科、及びラクダ科の代表的な家畜又は野生動物からなる群より選択される有蹄哺乳動物から単離される、請求項1に記載の方法。
【請求項８】
有蹄哺乳動物が、雌ウシ又は雄ウシ、バイソン、ヤギュウ、ヒツジ、オオツノヒツジ、ウマ、ポニー、ロバ、ラバ、シカ、ヘラジカ、カリブー、ヤギ、スイギュウ、ラクダ、ラマ、アルパカ、又はブタである、請求項7に記載の方法。
【請求項９】
ウシ科の種が、ボス・タウルス、ボス・インディクス、又はボス・バッファローズの雌ウシ又は雄ウシである、請求項7に記載の方法。
【請求項１０】
透明帯が、物理的操作、化学処理、及び酵素消化からなる群より選択される方法によって除去される、請求項1に記載の方法。
【請求項１１】
透明帯が酵素消化によって除去される、請求項10に記載の方法。
【請求項１２】
酵素消化が、プロテアーゼ、プロナーゼ、又はそれらの組み合わせへの曝露による、請求項10に記載の方法。
【請求項１３】
酵素消化がプロナーゼへの曝露による、請求項12に記載の方法。
【請求項１４】
プロナーゼが、0.1％から5％の濃度で使用される、請求項13に記載の方法。
【請求項１５】
プロナーゼが、0.25％から2％の濃度で使用される、請求項13に記載の方法。
【請求項１６】
プロナーゼが、約0.5％の濃度で使用される、請求項13に記載の方法。
【請求項１７】
除核の工程が、吸引、物理的除去、DNA特異的蛍光色素の使用、及び紫外線照射からなる群より選択される方法による、請求項1に記載の方法。
【請求項１８】
除核が物理的除去による、請求項17に記載の方法。
【請求項１９】
物理的除去が、二分割である、請求項18記載の方法。
【請求項２０】
体細胞が、上皮細胞、神経細胞、表皮細胞、ケラチノサイト、造血細胞、メラノサイト、軟骨細胞、リンパ球（Bリンパ球及びTリンパ球）、赤血球、マクロファージ、単球、単核細胞、繊維芽細胞、心筋細胞、並びにその他の筋細胞からなる群より選択される、請求項1に記載の方法。
【請求項２１】
体細胞が、皮膚細胞、肺細胞、膵細胞、肝細胞、胃細胞、腸細胞、心細胞、生殖器細胞、膀胱細胞、腎細胞、尿道細胞、及びその他の泌尿器細胞からなる群より得られる、請求項20に記載の方法。
【請求項２２】
体細胞が繊維芽細胞又は顆粒膜細胞である、請求項21に記載の方法。
【請求項２３】
体細胞が、インビトロ培養された繊維芽細胞又は顆粒膜細胞である、請求項21に記載の方法。
【請求項２４】
体細胞がトランスジェニック細胞である、請求項21に記載の方法。
【請求項２５】
トランスジェニック細胞が、所望の1個または複数の遺伝子の挿入、欠失、又は修飾によって改変されている、請求項24に記載の方法。
【請求項２６】
体細胞又は核を移植する工程が融合による、請求項1に記載の方法。
【請求項２７】
融合の方法が、化学的融合、電気融合、及び生物学的融合からなる群より選択される、請求項26に記載の方法。
【請求項２８】
化学的融合又は生物学的融合が、透明帯のない除核卵母細胞と体細胞との組み合わせを融合剤に曝すことにより達成される、請求項27に記載の方法。
【請求項２９】
融合剤が、体細胞ドナーを透明帯のない除核卵母細胞レシピエントに隣接させた場合に、異なる細胞の原形質膜の一部が融合する確率を増加させ得る、任意の化合物又は生物である、請求項28に記載の方法。
【請求項３０】
融合剤が、ポリエチレングリコール（PEG）、トリプシン、ジメチルスルホキシド（DMSO）、レクチン、凝集素、ウイルス、及びセンダイウイルスからなる群より選択される、請求項29に記載の方法。
【請求項３１】
電気融合が、電気パルスの適用によって誘導される、請求項27に記載の方法。
【請求項３２】
電気融合が、透明帯のない除核卵母細胞と体細胞との組み合わせに、1つまたは複数の電気パルスを送る工程を含む、請求項31に記載の方法。
【請求項３３】
請求項1に記載の方法よって得られる、非ヒト哺乳動物。
【請求項３４】
請求項33に記載の非ヒト哺乳動物より得られる、細胞、組織、又は器官。
【請求項３５】
遺伝子操作された、又はトランスジェニックの非ヒト哺乳動物を作製するための方法であって、
（i）非ヒト体細胞又は細胞核において、所望の1個または複数の遺伝子を挿入、除去、又は改変する段階；
（ii）再構成された細胞の形成にとって適当な条件下で、体細胞又は細胞核を、透明帯のない除核卵母細胞へ挿入する段階；
（iii）胚を形成させるため、再構成された細胞を活性化する段階；
（iv）該胚を2細胞期を過ぎるまで培養する段階；及び
（v）該胚がトランスジェニック胎児へと発生するように、該培養された胚を宿主哺乳動物へ移植する段階
を含む方法。
【請求項３６】
卵母細胞が、非ヒト哺乳動物の卵管及び／又は卵巣より単離される、請求項35に記載の方法。
【請求項３７】
卵母細胞が、卵管採取法又は経膣採取法により単離される、請求項36に記載の方法。
【請求項３８】
卵母細胞が吸引によって単離される、請求項36に記載の方法。
【請求項３９】
卵母細胞が前期I又は中期IIのものである、請求項36に記載の方法。
【請求項４０】
卵母細胞が前期Iのものである、請求項36に記載の方法。
【請求項４１】
卵母細胞が、インビトロ培養により中期IIにまで成熟する、請求項36に記載の方法。
【請求項４２】
卵母細胞、再構成された細胞、胚、又は胎児を低温保存する工程をさらに含む、請求項36に記載の方法。
【請求項４３】
体細胞、体細胞核、及び／又は卵母細胞が、ウシ科、ヒツジ科、シカ科、イノシシ科、ウマ科、及びラクダ科の代表的な家畜又は野生動物からなる群より選択される有蹄哺乳動物から単離される、請求項36に記載の方法。
【請求項４４】
有蹄哺乳動物が、雌ウシ又は雄ウシ、バイソン、ヤギュウ、ヒツジ、オオツノヒツジ、ウマ、ポニー、ロバ、ラバ、シカ、ヘラジカ、カリブー、ヤギ、スイギュウ、ラクダ、ラマ、アルパカ、又はブタである、請求項43に記載の方法。
【請求項４５】
ウシ科の種が、ボス・タウルス、ボス・インディクス、又はボス・バッファローズの雄ウシ又は雌ウシである、請求項43に記載の方法。
【請求項４６】
透明帯が、物理的操作、化学処理、及び酵素消化からなる群より選択される方法によって除去されている、請求項36に記載の方法。
【請求項４７】
透明帯が酵素消化によって除去される、請求項36に記載の方法。
【請求項４８】
酵素消化が、プロテアーゼ、プロナーゼ、又はそれらの組み合わせへの曝露による、請求項47に記載の方法。
【請求項４９】
酵素消化がプロナーゼへの曝露による、請求項48に記載の方法。
【請求項５０】
プロナーゼが、0.1％から5％の濃度で使用される、請求項49に記載の方法。
【請求項５１】
プロナーゼが、0.25％から2％の濃度で使用される、請求項49に記載の方法。
【請求項５２】
プロナーゼが、約0.5％の濃度で使用される、請求項49に記載の方法。
【請求項５３】
除核の工程が、吸引、物理的除去、DNA特異的蛍光色素の使用、及び紫外線照射からなる群より選択される方法による、請求項36に記載の方法。
【請求項５４】
除核が物理的除去による、請求項36に記載の方法。
【請求項５５】
物理的除去が、二分割である、請求項54記載の方法。
【請求項５６】
体細胞が、上皮細胞、神経細胞、表皮細胞、ケラチノサイト、造血細胞、メラノサイト、軟骨細胞、リンパ球（Bリンパ球及びTリンパ球）、赤血球、マクロファージ、単球、単核細胞、繊維芽細胞、心筋細胞、並びにその他の筋細胞からなる群より選択される、請求項36に記載の方法。
【請求項５７】
体細胞が、皮膚細胞、肺細胞、膵細胞、肝細胞、胃細胞、腸細胞、心細胞、生殖器細胞、膀胱細胞、腎細胞、尿道細胞、及びその他の泌尿器細胞からなる群より得られる、請求項36に記載の方法。
【請求項５８】
体細胞が繊維芽細胞又は顆粒膜細胞である、請求項57に記載の方法。
【請求項５９】
体細胞が、インビトロ培養された繊維芽細胞又は顆粒膜細胞である、請求項57に記載の方法。
【請求項６０】
体細胞がトランスジェニック細胞である、請求項57に記載の方法。
【請求項６１】
トランスジェニック細胞が、所望の1個または複数の遺伝子の挿入、欠失、又は修飾によって改変されている、請求項60に記載の方法。
【請求項６２】
体細胞又は核を移植する工程が融合による、請求項36に記載の方法。
【請求項６３】
融合の方法が、化学的融合、電気融合、及び生物学的融合からなる群より選択される、請求項62に記載の方法。
【請求項６４】
化学的融合又は生物学的融合が、透明帯のない除核卵母細胞と体細胞との組み合わせを融合剤に曝すことにより達成される、請求項63に記載の方法。
【請求項６５】
融合剤が、体細胞ドナーを透明帯のない除核卵母細胞レシピエントに隣接させた場合に、異なる細胞の原形質膜の一部が融合する確率を増加させ得る、任意の化合物又は生物である、請求項64に記載の方法。
【請求項６６】
融合剤が、ポリエチレングリコール（PEG）、トリプシン、ジメチルスルホキシド（DMSO）、レクチン、凝集素、ウイルス、及びセンダイウイルスからなる群より選択される、請求項65に記載の方法。
【請求項６７】
電気融合が、電気パルスの適用によって誘導される、請求項63に記載の方法。
【請求項６８】
電気融合が、透明帯のない除核卵母細胞と体細胞との組み合わせに、1つまたは複数の電気パルスを送る工程を含む、請求項67に記載の方法。
【請求項６９】
請求項36に記載の方法よって得られる、非ヒト哺乳動物。
【請求項７０】
請求項69に記載の非ヒト哺乳動物より得られる、細胞、組織、又は器官。
【請求項７１】
1個または複数のさらなる透明帯のない卵母細胞を、再構成された細胞と融合させる工程をさらに含む、請求項36に記載の方法。
【請求項７２】
さらなる工程が、請求項36の工程（ii）と連続して又は同時に開始される、請求項71に記載の方法。
【請求項７３】
非ヒト哺乳動物のクローニングのための方法であって、
（i）再構成された細胞の形成にとって適当な条件下で、所望の非ヒト体細胞又は細胞核を、透明帯のない除核卵母細胞へ挿入する段階；
（ii）胚を形成させるため、再構成された細胞を活性化する段階；
（iii）該胚を2細胞期を過ぎるまで培養する段階；及び
（iv）該胚が胎児へと発生するように、該培養された胚を宿主哺乳動物へ移植する段階
を含む方法。
【請求項７４】
卵母細胞が、非ヒト哺乳動物の卵管及び／又は卵巣より単離される、請求項73に記載の方法。
【請求項７５】
卵母細胞が、卵管採取法又は経膣採取法により単離される、請求項74に記載の方法。
【請求項７６】
卵母細胞が吸引によって単離される、請求項75に記載の方法。
【請求項７７】
卵母細胞が前期I又は中期IIのものである、請求項73に記載の方法。
【請求項７８】
卵母細胞が前期Iのものである、請求項73に記載の方法。
【請求項７９】
卵母細胞が、インビトロ培養により中期IIにまで成熟する、請求項73に記載の方法。
【請求項８０】
卵母細胞、再構成された細胞、胚、又は胎児を低温保存する工程をさらに含む、請求項73に記載の方法。
【請求項８１】
体細胞、体細胞核、及び／又は卵母細胞が、ウシ科、ヒツジ科、シカ科、イノシシ科、ウマ科、及びラクダ科の代表的な家畜又は野生動物からなる群より選択される有蹄哺乳動物から単離される、請求項73に記載の方法。
【請求項８２】
有蹄哺乳動物が、雌ウシ又は雄ウシ、バイソン、ヤギュウ、ヒツジ、オオツノヒツジ、ウマ、ポニー、ロバ、ラバ、シカ、ヘラジカ、カリブー、ヤギ、スイギュウ、ラクダ、ラマ、アルパカ、又はブタである、請求項81に記載の方法。
【請求項８３】
ウシ科の種が、ボス・タウルス、ボス・インディクス、又はボス・バッファローズの雄ウシ又は雌ウシである、請求項81に記載の方法。
【請求項８４】
透明帯が、物理的操作、化学処理、及び酵素消化からなる群より選択される方法によって除去されている、請求項73に記載の方法。
【請求項８５】
透明帯が酵素消化によって除去される、請求項73に記載の方法。
【請求項８６】
酵素消化が、プロテアーゼ、プロナーゼ、又はそれらの組み合わせへの曝露による、請求項85に記載の方法。
【請求項８７】
酵素消化がプロナーゼへの曝露による、請求項86に記載の方法。
【請求項８８】
プロナーゼが、0.1％から5％の濃度で使用される、請求項87に記載の方法。
【請求項８９】
プロナーゼが、0.25％から2％の濃度で使用される、請求項87に記載の方法。
【請求項９０】
プロナーゼが、約0.5％の濃度で使用される、請求項87に記載の方法。
【請求項９１】
除核の工程が、吸引、物理的除去、DNA特異的蛍光色素の使用、及び紫外線照射からなる群より選択される方法による、請求項73に記載の方法。
【請求項９２】
除核が物理的除去による、請求項73に記載の方法。
【請求項９３】
物理的除去が、二分割である、請求項91記載の方法。
【請求項９４】
体細胞が、上皮細胞、神経細胞、表皮細胞、ケラチノサイト、造血細胞、メラノサイト、軟骨細胞、リンパ球（Bリンパ球及びTリンパ球）、赤血球、マクロファージ、単球、単核細胞、繊維芽細胞、心筋細胞、並びにその他の筋細胞からなる群より選択される、請求項73に記載の方法。
【請求項９５】
体細胞が、皮膚細胞、肺細胞、膵細胞、肝細胞、胃細胞、腸細胞、心細胞、生殖器細胞、膀胱細胞、腎細胞、尿道細胞、及びその他の泌尿器細胞からなる群より得られる、請求項73に記載の方法。
【請求項９６】
体細胞が繊維芽細胞又は顆粒膜細胞である、請求項95に記載の方法。
【請求項９７】
体細胞が、インビトロ培養された繊維芽細胞又は顆粒膜細胞である、請求項95に記載の方法。
【請求項９８】
体細胞がトランスジェニック細胞である、請求項95に記載の方法。
【請求項９９】
トランスジェニック細胞が、所望の1個または複数の遺伝子の挿入、欠失、又は修飾によって改変されている、請求項98に記載の方法。
【請求項１００】
体細胞又は核を移植する工程が融合による、請求項73に記載の方法。
【請求項１０１】
融合の方法が、化学的融合、電気融合、及び生物学的融合からなる群より選択される、請求項100に記載の方法。
【請求項１０２】
化学的融合又は生物学的融合が、透明帯のない除核卵母細胞と体細胞との組み合わせを融合剤に曝すことにより達成される、請求項101に記載の方法。
【請求項１０３】
融合剤が、体細胞ドナーを透明帯のない除核卵母細胞レシピエントに隣接させた場合に、異なる細胞の原形質膜の一部が融合する確率を増加させ得る、任意の化合物又は生物である、請求項102に記載の方法。
【請求項１０４】
融合剤が、ポリエチレングリコール（PEG）、トリプシン、ジメチルスルホキシド（DMSO）、レクチン、凝集素、ウイルス、及びセンダイウイルスからなる群より選択される、請求項103に記載の方法。
【請求項１０５】
電気融合が、電気パルスの適用によって誘導される、請求項103に記載の方法。
【請求項１０６】
電気融合が、透明帯のない除核卵母細胞と体細胞との組み合わせに、1つまたは複数の電気パルスを送る工程を含む、請求項105に記載の方法。
【請求項１０７】
請求項73に記載の方法によって得られる、非ヒト哺乳動物。
【請求項１０８】
請求項107に記載の非ヒト哺乳動物より得られる、細胞、組織、又は器官。
【請求項１０９】
1個または複数のさらなる透明帯のない卵母細胞を、再構成された細胞と融合させる工程をさらに含む、請求項73に記載の方法。
【請求項１１０】
さらなる工程が、請求項73の工程（ii）と連続して又は同時に開始される、請求項109に記載の方法。
【請求項１１１】
再構成された細胞を活性化する工程が、電気パルス、化学的誘導ショック、精子の侵入、細胞内二価陽イオンレベルの増加、及びリン酸化の減少からなる群より選択される、請求項73に記載の方法。
【請求項１１２】
胎児が、同調させたレシピエントの子宮内に移植される、請求項73に記載の方法。
【請求項１１３】
レシピエントが雌性非ヒト哺乳動物である、請求項112に記載の方法。
【請求項１１４】
非ヒト哺乳動物のクローニングのための方法であって、
（i）再構成された細胞の形成にとって適当な条件下で、所望の非ヒト体細胞又は細胞核を、第一の透明帯のない除核哺乳動物卵母細胞へ挿入する段階；
（ii）第二又はそれ以上の卵母細胞を該再構成された細胞と融合させ、それにより細胞質の容積を増加させる段階；
（iii）胚を形成させるため、再構成された細胞を活性化する段階；
（iv）該胚を2細胞期を過ぎるまで培養する段階；及び
（v）該胚が胎児へと発生するように、該培養された胚を宿主哺乳動物へ移植する段階
を含む方法。
【請求項１１５】
工程（i）及び工程（ii）が、連続して又は同時に開始される、請求項114に記載の方法。
【請求項１１６】
工程（i）及び工程（ii）が同時に行われる、請求項114に記載の方法。
【請求項１１７】
再構成された細胞を活性化する工程が、電気パルス、化学的誘導ショック、精子の侵入、細胞内二価陽イオンレベルの増加、及びリン酸化の減少からなる群より選択される、請求項114に記載の方法。
【請求項１１８】
胎児が、同調させたレシピエントの子宮内に移植される、請求項114に記載の方法。
【請求項１１９】
レシピエントが雌性非ヒト哺乳動物である、請求項118に記載の方法。
【請求項１２０】
再構成された細胞（胚）を培養する方法であって、
（i）再構成された細胞（胚）の形成にとって適当な条件下で、所望の非ヒト体細胞又は細胞核を、透明帯のない除核卵母細胞へ挿入する段階；
（ii）再構成された細胞を活性化する段階；
（iii）8から128細胞の間の胚が発生するまで、該細胞の1個または複数をインキュベートし培養する段階
を含む方法。
【請求項１２１】
2個またはそれ以上の細胞が一緒に培養される、請求項120に記載の方法。
【請求項１２２】
2個又は3個の細胞が一緒に培養される、請求項120に記載の方法。
【請求項１２３】
単一の再構成された細胞が、8から128細胞の間の胚が生じるまで培養され、次いで2個またはそれ以上の胚を組み合わせ、凝集物として一緒に培養する、請求項120に記載の方法。
【請求項１２４】
核移植の方法であって、
体細胞または体細胞核を透明帯のない除核卵母細胞に接着させる段階、
該体細胞または体細胞核を透明帯のない除核卵母細胞内に移植する段階
を含む方法。
【請求項１２５】
遺伝子操作された、又はトランスジェニックの非ヒト哺乳動物を作製するための方法であって、
（i）非ヒト体細胞又は細胞核において、所望の1個または複数の遺伝子を挿入、除去、又は改変する段階；
（ii）体細胞または細胞核を透明帯のない除核卵母細胞に接着させ、再構成された細胞の形成にとって適当な条件下で、該体細胞又は細胞核を該卵母細胞内に挿入する段階；
（iii）胚を形成させるため、再構成された細胞を活性化する段階；
（iv）該胚を2細胞期を過ぎるまで培養する段階；及び
（v）該胚がトランスジェニック胎児へと発生するように、該培養された胚を宿主哺乳動物へ移植する段階
を含む方法。
【請求項１２６】
非ヒト哺乳動物のクローニングのための方法であって、
（i）再構成された細胞の形成にとって適当な条件下で、所望の非ヒト体細胞又は細胞核を、透明帯のない除核卵母細胞に接着させ、挿入する段階；
（ii）胚を形成させるため、再構成された細胞を活性化する段階；
（iii）該胚を2細胞期を過ぎるまで培養する段階；及び
（iv）該胚が胎児へと発生するように、該培養された胚を宿主哺乳動物へ移植する段階
を含む方法。
【請求項１２７】
卵母細胞が、非ヒト哺乳動物の卵管及び／又は卵巣より単離される、請求項124に記載の方法。
【請求項１２８】
卵母細胞が、卵管採取法又は経膣採取法により単離される、請求項127に記載の方法。
【請求項１２９】
卵母細胞が吸引によって単離される、請求項127に記載の方法。
【請求項１３０】
卵母細胞が前期I又は中期IIのものである、請求項124に記載の方法。
【請求項１３１】
卵母細胞が前期Iのものである、請求項130に記載の方法。
【請求項１３２】
卵母細胞が、インビトロ培養により中期IIにまで成熟する、請求項125に記載の方法。
【請求項１３３】
卵母細胞、再構成された細胞、胚、又は胎児を低温保存する工程をさらに含む、請求項125に記載の方法。
【請求項１３４】
哺乳動物が、ウシ科、ヒツジ科、シカ科、イノシシ科、ウマ科、及びラクダ科の代表的な家畜又は野生動物からなる群より選択される有蹄動物である、請求項125に記載の方法。
【請求項１３５】
哺乳動物が、雌ウシ又は雄ウシ、バイソン、ヤギュウ、ヒツジ、オオツノヒツジ、ウマ、ポニー、ロバ、ラバ、シカ、ヘラジカ、カリブー、ヤギ、スイギュウ、ラクダ、ラマ、アルパカ、又はブタである、請求項125に記載の方法。
【請求項１３６】
ウシ科の種が、ボス・タウルス、ボス・インディクス、又はボス・バッファローズの雄ウシ又は雌ウシである、請求項135に記載の方法。
【請求項１３７】
透明帯が、物理的操作、化学処理、及び酵素消化からなる群より選択される方法によって除去されている、請求項125に記載の方法。
【請求項１３８】
透明帯が酵素消化によって除去される、請求項137に記載の方法。
【請求項１３９】
酵素消化が、プロテアーゼ、プロナーゼ、又はそれらの組み合わせへの曝露による、請求項138に記載の方法。
【請求項１４０】
酵素消化がプロナーゼへの曝露による、請求項139に記載の方法。
【請求項１４１】
プロナーゼが、0.1％から5％の濃度で使用される、請求項140に記載の方法。
【請求項１４２】
プロナーゼが、0.25％から2％の濃度で使用される、請求項140に記載の方法。
【請求項１４３】
プロナーゼが、約0.5％の濃度で使用される、請求項140に記載の方法。
【請求項１４４】
除核の工程が、吸引、物理的除去、DNA特異的蛍光色素の使用、及び紫外線照射からなる群より選択される方法による、請求項140に記載の方法。
【請求項１４５】
除核が物理的除去による、請求項144に記載の方法。
【請求項１４６】
物理的除去が、二分割である、請求項145記載の方法。
【請求項１４７】
体細胞が、上皮細胞、神経細胞、表皮細胞、ケラチノサイト、造血細胞、メラノサイト、軟骨細胞、リンパ球（Bリンパ球及びTリンパ球）、赤血球、マクロファージ、単球、単核細胞、繊維芽細胞、心筋細胞、並びにその他の筋細胞からなる群より選択される、請求項140に記載の方法。
【請求項１４８】
体細胞が、皮膚細胞、肺細胞、膵細胞、肝細胞、胃細胞、腸細胞、心細胞、生殖器細胞、膀胱細胞、腎細胞、尿道細胞、及びその他の泌尿器細胞からなる群より得られる、請求項147に記載の方法。
【請求項１４９】
体細胞が繊維芽細胞又は顆粒膜細胞である、請求項147に記載の方法。
【請求項１５０】
体細胞が、インビトロ培養された繊維芽細胞又は顆粒膜細胞である、請求項147に記載の方法。
【請求項１５１】
体細胞がトランスジェニック細胞である、請求項147に記載の方法。
【請求項１５２】
トランスジェニック細胞が、所望の1個または複数の遺伝子の挿入、欠失、又は修飾によって改変されている、請求項151に記載の方法。
【請求項１５３】
体細胞又は核を移植する工程が融合による、請求項140に記載の方法。
【請求項１５４】
融合の方法が、化学的融合、電気融合、及び生物学的融合からなる群より選択される、請求項153に記載の方法。
【請求項１５５】
化学的融合又は生物学的融合が、透明帯のない除核卵母細胞と体細胞との組み合わせを融合剤に曝すことにより達成される、請求項154に記載の方法。
【請求項１５６】
融合剤が、体細胞ドナーを透明帯のない除核卵母細胞レシピエントに隣接させた場合に、異なる細胞の原形質膜の一部が融合する確率を増加させ得る、任意の化合物又は生物である、請求項155に記載の方法。
【請求項１５７】
融合剤が、ポリエチレングリコール（PEG）、トリプシン、ジメチルスルホキシド（DMSO）、レクチン、凝集素、ウイルス、及びセンダイウイルスからなる群より選択される、請求項156に記載の方法。
【請求項１５８】
電気融合が、電気パルスの適用によって誘導される、請求項155に記載の方法。
【請求項１５９】
電気融合が、透明帯のない除核卵母細胞と体細胞との組み合わせに、1つまたは複数の電気パルスを送る工程を含む、請求項155に記載の方法。
【請求項１６０】
体細胞または細胞核を接着させる工程が、透明帯のない除核卵母細胞を、細胞を凝集させる能力を有する化合物に曝曝することによる、請求項124に記載の方法。
【請求項１６１】
化合物が、炭水化物と結合するか又は炭水化物を凝集させる能力を有するタンパク質又は糖タンパク質である、請求項160に記載の方法。
【請求項１６２】
化合物がレクチンである、請求項161に記載の方法。
【請求項１６３】
レクチンが、コンカナバリンA、カナバリンA、リシン、ダイズ・レクチン、ミヤコグサ種子レクチン、及びフィトヘマグルチニン（PHA）からなる群より選択される、請求項162に記載の方法。
【請求項１６４】
化合物がPHAである、請求項163に記載の方法。
【請求項１６５】
透明帯のない除核卵母細胞が、体細胞との接触の前にPHAに曝露される、請求項164に記載の方法。
【請求項１６６】
透明帯のない除核卵母細胞が、50から400μg/mlの範囲の濃度のPHAに曝露される、請求項42に記載の方法。
【請求項１６７】
濃度が約200μg/mlである、請求項166に記載の方法。
【請求項１６８】
透明帯のない除核卵母細胞が、1から60秒間PHAに曝露される、請求項164に記載の方法。
【請求項１６９】
除核卵母細胞が、3秒間PHAに曝露される、請求項168に記載の方法。
【請求項１７０】
1個または複数のさらなる透明帯のない卵母細胞を、再構成された細胞と融合させる工程をさらに含む、請求項125に記載の方法。
【請求項１７１】
さらなる工程が、請求項125の工程（ii）と連続して又は同時に開始される、請求項170に記載の方法。
【請求項１７２】
非ヒト哺乳動物のクローニングのための方法であって、
（i）再構成された細胞の形成にとって適当な条件下で、所望の非ヒト体細胞又は細胞核を、第一の透明帯のない除核哺乳動物卵母細胞に接着させ、挿入する段階；
（ii）第二又はそれ以上の卵母細胞を該再構成された細胞と融合させ、それにより細胞質の容積を増加させる段階；
（iii）胚を形成させるため、再構成された細胞を活性化する段階；
（iv）該胚を2細胞期を過ぎるまで培養する段階；及び
（v）該胚が胎児へと発生するように、該培養された胚を宿主哺乳動物へ移植する段階
を含む方法。
【請求項１７３】
工程（i）及び工程（ii）が、連続して又は同時に開始される、請求項172に記載の方法。
【請求項１７４】
工程（i）及び工程（ii）が同時に行われる、請求項172に記載の方法。
【請求項１７５】
再構成された細胞を活性化する工程が、電気パルス、化学的誘導ショック、精子の侵入、細胞内二価陽イオンレベルの増加、及びリン酸化の減少からなる群より選択される、請求項125に記載の方法。
【請求項１７６】
胎児が、同調させたレシピエントの子宮内に移植される、請求項125に記載の方法。
【請求項１７７】
レシピエントが雌性哺乳動物である、請求項176に記載の方法。
【請求項１７８】
再構成された細胞（胚）を培養する方法であって、
（i）再構成された細胞（胚）の形成にとって適当な条件下で、所望の非ヒト体細胞又は細胞核を、透明帯のない除核卵母細胞に接着させ、挿入する段階；
（ii）再構成された細胞を活性化する段階；
（iii）8から128細胞の間の胚が発生するまで、該細胞の1個または複数をインキュベートし培養する段階
を含む方法。
【請求項１７９】
2個またはそれ以上の細胞が一緒に培養される、請求項178に記載の方法。
【請求項１８０】
2個又は3個の細胞が一緒に培養される、請求項178に記載の方法。
【請求項１８１】
単一の再構成された細胞が、8から128細胞の間の胚が生じるまで培養され、次いで2個またはそれ以上の胚を組み合わせ、凝集物として一緒に培養する、請求項178に記載の方法。
【請求項１８２】
請求項124に記載の方法によって得られる、非ヒト哺乳動物。
【請求項１８３】
請求項182に記載の非ヒト哺乳動物より得られる、細胞、組織、又は器官。