【手続補正書】
【提出日】平成17年2月28日(2005.2.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ジカンバ分解Ｏ‐デメチラーゼをコードするＤＮＡ配列を含む単離ＤＮＡ分子であって、前記ＤＮＡ配列が、
ａ）ｉ）配列番号３、
ｉｉ）酵素活性を有する配列番号３のフラグメントであるアミノ酸配列、および
ｉｉｉ）配列番号３に少なくとも約６５％同一でありジカンバ分解オキシゲナーゼ活性を有するアミノ酸配列、
からなるグループから選択されるアミノ酸配列を含むジカンバ分解オキシゲナーゼと、
ｂ）ｉ）配列番号５を含むアミノ酸配列、
ｉｉ）生物学的活性を有する配列番号５のフラグメントであるアミノ酸配列、および
ｉｉｉ）配列番号５に少なくとも約６５％同一でありジカンバ分解フェレドキシン活性を有するアミノ酸配列、
からなるグループから選択されるアミノ酸配列を含むジカンバ分解フェレドキシンと、
ｃ）ｉ）配列番号７および配列番号９からなるグループから選択されるアミノ酸配列、
ｉｉ）酵素活性を有する前記ｉ）のアミノ酸配列のフラグメントであるアミノ酸配列、および
ｉｉｉ）前記ｉ）のアミノ酸配列に少なくとも約７５％同一でありジカンバ分解レダクターゼ活性を有するアミノ酸配列、
からなるグループから選択されるアミノ酸配列を含むジカンバ分解レダクターゼと
をコードすることを特徴とするＤＮＡ分子。
【請求項２】
配列番号３のアミノ酸配列を有するジカンバ分解オキシゲナーゼと、配列番号５のアミノ酸配列を有するジカンバ分解フェレドキシンと、配列番号７および配列番号９からなるグループから選択されるアミノ酸配列を有するジカンバ分解レダクターゼとをコードするＤＮＡ配列を含む請求項１に記載の単離ＤＮＡ分子。
【請求項３】
ａ）配列番号５を含むアミノ酸配列、
ｂ）酵素活性を有する配列番号５のフラグメントであるアミノ酸配列、および
ｃ）配列番号５に少なくとも約６５％同一でありジカンバ分解フェレドキシン活性を有
するアミノ酸配列、
からなるグループから選択されるアミノ酸配列を有するジカンバ分解フェレドキシンをコードするＤＮＡ配列を含む単離ＤＮＡ分子。
【請求項４】
配列番号５のアミノ酸配列を含むジカンバ分解フェレドキシンをコードするＤＮＡ配列を含む請求項３に記載のＤＮＡ分子。
【請求項５】
ａ）配列番号７および配列番号９からなるグループから選択されるアミノ酸配列、
ｂ）酵素活性を有する前記ａ）のアミノ酸配列のフラグメントであるアミノ酸配列、および
ｃ）前記ａ）のアミノ酸配列に少なくとも約７５％同一でありジカンバ分解レダクターゼ活性を有するアミノ酸配列、
からなるグループから選択されるアミノ酸配列を有するジカンバ分解レダクターゼをコードするＤＮＡ配列を含む単離ＤＮＡ分子。
【請求項６】
配列番号７のアミノ酸配列を含むジカンバ分解レダクターゼをコードするＤＮＡ配列を含む請求項５に記載のＤＮＡ分子。
【請求項７】
配列番号９のアミノ酸配列を含むジカンバ分解レダクターゼをコードするＤＮＡ配列を含む請求項５に記載のＤＮＡ分子。
【請求項８】
少なくとも１つの発現制御配列に機能的に連結された請求項１〜７のいずれか１項に記載のＤＮＡ分子を含むＤＮＡ構築物。
【請求項９】
核酸配列は双子葉植物において最適に発現するために選択されたコドンを有する、請求項８に記載のＤＮＡ構築物。
【請求項１０】
前記核酸配列を対象として植物細胞の細胞内小器官へ輸送する輸送ペプチドをコードする核酸配列をさらに含む、請求項８に記載のＤＮＡ構築物。
【請求項１１】
前記ＤＮＡ構築物はベクターである、請求項８に記載のＤＮＡ構築物。
【請求項１２】
請求項８に記載のＤＮＡ構築物を含む遺伝子導入された宿主細胞。
【請求項１３】
植物細胞である、請求項１２に記載の遺伝子導入された宿主細胞。
【請求項１４】
微生物である、請求項１２に記載の遺伝子導入された宿主細胞。
【請求項１５】
請求項８に記載のＤＮＡ構築物を含む１つ以上の細胞を含む、遺伝子導入された植物または植物の一部。
【請求項１６】
植物はジカンバ耐性の双子葉植物または単子葉植物である、請求項１５に記載の遺伝子導入された植物または植物の一部。
【請求項１７】
請求項１５に記載のジカンバ耐性の遺伝子導入植物を含む畑における雑草の制御方法であって、畑の雑草を制御するために有効な量のジカンバを畑に適用することを含む方法。
【請求項１８】
ジカンバを含む物質の除染を行う方法であって、物質中のジカンバの少なくとも一部を分解するために有効な量の、請求項１４に記載のジカンバ分解性遺伝子導入微生物または請求項８に記載のＤＮＡ構築物によりコードされるジカンバ分解Ｏ‐デメチラーゼを、該
物質に適用することを含む方法。
【請求項１９】
形質転換された植物細胞を選択する方法であって、
一群の植物細胞を提供することと、
該植物細胞群の少なくとも一部を、請求項８に記載のＤＮＡ構築物を用いて該細胞がジカンバ耐性となるように形質転換することと、
得られた植物細胞群を、形質転換された植物細胞は生育するが、形質転換されていない植物細胞は生育しないように選択された濃度のジカンバを含む培地で生育させることと、を含む方法。
【請求項２０】
形質転換された植物を選択する方法であって、
請求項８に記載のＤＮＡ構築物を用いてジカンバ耐性となるように形質転換された植物を含みうる一群の植物を提供することと、
該植物群に、形質転換された植物は生育するが、形質転換されていない植物の生育は阻害されるように選択された量のジカンバを適用することと、
を含む方法。
【請求項２１】
形質転換された宿主細胞、生物体全体、および生物体の一部を選択またはスクリーニングする方法であって、
請求項８に記載のＤＮＡ構築物を用いてジカンバを分解可能なように形質転換された宿主細胞、生物体全体、または生物体の一部を含みうる、一群の宿主細胞、生物体全体、または生物体の一部を提供することと、
該宿主細胞、生物体全体、または生物体の一部の群をジカンバと接触させることと、
宿主細胞、生物体全体、または生物体の一部においてジカンバの分解の結果生成される３，６−ジクロロサリチル酸による蛍光の存在またはレベルを確認することと、
を含む方法。
【請求項２２】
ａ）配列番号５を含むアミノ酸配列、
ｂ）酵素活性を有する配列番号５のフラグメントであるアミノ酸配列、および
ｃ）配列番号５に少なくとも約６５％同一であって、ジカンバ分解フェレドキシン酵素活性を有するアミノ酸配列、
からなるグループから選択されるアミノ酸配列を含む、単離され少なくとも部分的に精製されたジカンバ分解フェレドキシン。
【請求項２３】
配列番号５のアミノ酸配列を含む請求項２２に記載のジカンバ分解フェレドキシン。
【請求項２４】
ａ）配列番号７および配列番号９からなるグループから選択されるアミノ酸配列、
ｂ）酵素活性を有する前記ａ）のアミノ酸配列のフラグメントであるアミノ酸配列、および
ｃ）前記ａ）のアミノ酸配列に少なくとも約７５％同一であって、ジカンバ分解レダクターゼ酵素活性を有するアミノ酸配列、
からなるグループから選択されるアミノ酸配列を含む、単離され少なくとも部分的に精製されたジカンバ分解レダクターゼ。
【請求項２５】
配列番号７のアミノ酸配列を含む請求項２４に記載のジカンバ分解レダクターゼ。
【請求項２６】
配列番号９のアミノ酸配列を含む請求項２４に記載のジカンバ分解レダクターゼ。