(57)【要約】【課題】慢性腎不全治療剤又は糖尿病性腎症治療剤として有用な化合物を提供する。【解決手段】発明者等は、EP4受容体拮抗作用を有する化合物について鋭意検討した結果、カルボキシル基又はその等価体を有する種々のアミド誘導体が良好なEP4受容体拮抗作用を示すことを知見し、本発明を完成させた。  本発明化合物は、良好なEP4受容体拮抗作用を有することから、慢性腎不全又は糖尿病性腎症の予防剤及び/又は治療剤として有用である。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（I）の化合物又はその製薬学的に許容される塩。
【化１１】
2009005076.tif 000044
（式中の記号は以下の意味を示す。
B環、D環：同一又は互いに異なって、置換されていてもよいアリール又は置換されていてもよいヘテロ環、
X：単結合、-O-、-S-、-NH-、-N(R0)-、-N(R0)-R00-、-O-R00-、-R00-O-、-R00-又は-(低級アルケニレン)-、
R0：低級アルキル、
R00：低級アルキレン、
R1：H又はR0、
A：-Z-R3、或いは下記式（II）〜（VII）の何れかの式で示される基、
【化１２】
2009005076.tif 000045
E環：置換されていてもよいヘテロ環又はシクロアルカンジイル、
Y：CH又はN、
R2：H又はR0、
m：０又は１、
Z：単結合又はR00、
但し、Aが-Z-R3のときZはR00、
G：O、S、-N(R2)-又は-(HC=CH)-、
R3：-CO2H又はその生物学的等価体。
但し、Dが置換されていてもよいフェニル又はピリジルであり、Aが上記式（II）で示される基であり、YがCHであり、かつZが単結合のとき、R3が-CO2H、テトラゾール、スルホンアミド又はカルボン酸エステルである化合物を除く。）
【請求項２】
D環がハロゲン又はR0で置換されていてもよい二環性のヘテロ環であり、Aが式（II）又は式（V）で示される基であり、YがCHであり、R2がHである、請求項１の化合物又はその製薬学的に許容される塩。
【請求項３】
D環がハロゲン又はR0で置換されていてもよいインドリルであり、Aが式（II）又は式（V）で示される基であり、YがCHであり、R2がHである、請求項１の化合物又はその製薬学的に許容される塩。
【請求項４】
D環がハロゲン又はR0で置換されていてもよいインドリルであり、E環がシクロヘキサンジイルである、請求項１の化合物又はその製薬学的に許容される塩。
【請求項５】
D環がハロゲン又はR0で置換されていてもよいインドール-1,2-ジイル又はピロール-1,2-ジイルである、請求項１の化合物又はその製薬学的に許容される塩。
【請求項６】
Aが式（II）〜（V）の何れかの式で示される基であり、YがNである、請求項１の化合物又はその製薬学的に許容される塩。
【請求項７】
請求項１記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩、及び製薬学的に許容される賦形剤を含有する医薬組成物。
【請求項８】
請求項１記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩を含有する慢性腎不全又は糖尿病性腎症の予防用若しくは治療用医薬組成物。
【請求項９】
慢性腎不全又は糖尿病性腎症の予防若しくは治療剤の製造のための請求項１記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１０】
請求項１記載の化合物又はその製薬学的に許容される塩の有効量を患者に投与することからなる慢性腎不全又は糖尿病性腎症の予防若しくは治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬、殊に慢性腎不全又は糖尿病性腎症治療剤として有用な新規なアミド化合物に関する。
【背景技術】
【０００２】
PGE2はアラキドン酸カスケードの代謝物の一つとして知られている。PGE2は種々の活性を示し、例えば発痛増強作用、炎症促進作用、炎症抑制作用、子宮収縮作用、消化管蠕動運動促進作用、覚醒作用、胃酸分泌抑制作用、血圧降下作用、血小板凝集阻害作用、骨再吸収促進作用、血管新生作用などである。
PGE2の受容体にはEP1、EP2、EP3およびEP4の4種類のサブタイプが存在し、これらは種々の組織に広く分布している。EP1受容体の活性化は細胞内Ca2+の増加を引き起こすと考えられている。EP3受容体は異なった2次メッセンジャー系経路を持つ受容体の一つである。EP2およびEP4受容体の活性化はアデニル酸サイクラーゼの活性化を引き起こし、細胞内のcAMPレベルを増加させると考えられている。特にEP4受容体は平滑筋の弛緩、炎症反応の促進または抑制、リンパ球分化、メサンギウム細胞の肥大または増殖、胃腸粘液の分泌などに関わっているとされている。
PGE2受容体の阻害剤、つまりPGE2アンタゴニストはPGE2受容体に対する結合活性を持つ。つまり、PGE2アンタゴニストはPGE2アンタゴニスト活性またはPGE2阻害活性を示す。従って、PGE2アンタゴニストはPGE2に起因する疾患を治療する薬剤として期待されている。中でも、EP4受容体拮抗剤はEP4に関連した疾患、例えば腎臓病、炎症疾患、種々の疼痛などに対するヒトおよび動物での治療薬として期待される。更に、EP4受容体選択的拮抗剤は他のEP1、EP2又はEP3のサブタイプに基づく副作用を回避できる点から望ましい。【０００３】
EP4受容体拮抗作用を有する化合物として、例えば、特許文献１には下記化合物が開示されている。
【化１】
2009005076.tif 000002
（式中、Aはフェニル又はピリジルを示し、Eは1,4-フェニレンを示し、R5は-CO2H、テトラゾール、スルホンアミド又はカルボン酸エステルを示す。詳細は当該公報参照。）
また、特許文献２及び３には、特許文献１に包含される化合物が開示されている。【０００４】
更に、特許文献４にはEP4受容体拮抗作用を有する化合物として、下記化合物が開示されている。
【化２】
2009005076.tif 000003
（式中、R3は、ハロゲン、C1-4アルキル、C1-4フルオロアルキル、C1-4アルコキシ、C1-4フルオロアルコキシ及びアセチルから選択される基に限定されており、R3がHである化合物に関する示唆も開示も無い。更に、インドール-1,2-ジイルやピロール-1,2-ジイル、並びにヒドラジン化合物に関する示唆も開示もない。詳細は当該公報参照）【０００５】
更に、特許文献６にはEP4受容体拮抗作用を有する化合物として、下記化合物が開示されている。
【化３】
2009005076.tif 000004
当該特許文献の化合物はチオフェン化合物に関するものであり、インドリル化合物に関する示唆も開示もない。詳細は当該公報を参照。【０００６】
【特許文献１】国際公開WO2005/021508号パンフレット
【特許文献２】国際公開WO2005/105732号パンフレット
【特許文献３】国際公開WO2005/105733号パンフレット
【特許文献４】国際公開WO2007/121578号パンフレット
【特許文献５】国際公開WO2007/143825号パンフレット
【特許文献６】国際公開WO2008/017164号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の課題は、新規なEP4受容体拮抗作用を有する医薬、特に慢性腎不全又は糖尿病性腎症治療剤として有用な、新規な化合物の提供である。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
発明者らはEP4受容体拮抗作用を有する化合物について鋭意検討した結果、下記式(I)で示される化合物が良好なEP4受容体拮抗作用を示すことを知見し、本発明を完成させた。
即ち、本発明は、下記式（I）の化合物又はその製薬学的に許容される塩に関する。
【化４】
2009005076.tif 000005
（式中の記号は以下の意味を示す。
B環、D環：同一又は互いに異なって、置換されていてもよいアリール又は置換されていてもよいヘテロ環、
X：単結合、-O-、-S-、-NH-、-N(R0)-、-N(R0)-R00-、-O-R00-、-R00-O-、-R00-又は-(低級アルケニレン)-、
R0：低級アルキル、
R00：低級アルキレン、
R1：H又はR0、
A：-Z-R3、或いは下記式（II）〜（VII）の何れかの式で示される基、
【化５】
2009005076.tif 000006
E環：置換されていてもよいヘテロ環又はシクロアルカンジイル、
Y：CH又はN、
R2：H又はR0、
m：０又は１、
Z：単結合又はR00、
但し、Aが-Z-R3のときZはR00、
G：O、S、-N(R2)-又は-(HC=CH)-、
R3：-CO2H又はその生物学的等価体。
但し、Dが置換されていてもよいフェニル又はピリジルであり、Aが上記式（II）で示される基であり、YがCHであり、かつZが単結合のとき、R3が-CO2H、テトラゾール、スルホンアミド又はカルボン酸エステルである化合物を除く。）【０００９】
また、本願は、式（I）の化合物又はその塩を有効成分とする医薬組成物に関し、殊にEP4受容体拮抗剤、或いは慢性腎不全又は糖尿病性腎症の予防剤及び/又は治療剤に関する。【００１０】
更に、本願は、慢性腎不全治療剤又は糖尿病性腎症治療剤の製造のための、式（I）の化合物又はその製薬学的に許容される塩の使用、並びに、式（I）の化合物又はその製薬学的に許容される塩の有効量を患者に投与することからなる、慢性腎不全又は糖尿病性腎症の治療方法にも関する。
【発明の効果】
【００１１】
式（I）の化合物は、EP4受容体拮抗作用を有することから、腎臓病、特に慢性腎不全又は糖尿病性腎症等の予防及び/又は治療剤として有益である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１２】
以下、本発明を詳細に説明する。
本明細書中、「低級アルキル」として好ましくは直鎖状又は分枝状の、炭素数が１から６（以後、C1-6と略す）のアルキル、具体的には、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、sec-ブチル、tert-ブチル、n-ペンチル、n-ヘキシル基等である。好ましくはC1-3アルキルであり、より好ましくはメチル、エチル及びイソプロピルである。
「低級アルキレン」は、上記「低級アルキル」の任意の水素原子１個を除去してなる二価基（C1-6アルキレン）を意味し、好ましくはC1-4アルキレンであり、より好ましくはC1-3アルキレンであり、更に好ましくはメチレンである。
「低級アルケニレン」として好ましくは直鎖または分枝状の、C2-6アルケニレン、具体的には、ビニレン、エチリデン、プロペニレン、ブテニレン、ペンテニレン、ヘキセニレン、1,3-ブタジエニレン、1,3-ペンタジエニレン基等である。より好ましくはC2-4アルケニレンであり、特に好ましくはエチリデンである。
「ハロゲン」は、F、Cl、Br、Iを意味する。
「ハロゲノ低級アルキル」とは、１個以上のハロゲンで置換されたC1-6アルキルである。好ましくは１〜５個のハロゲンで置換された低級アルキルであり、より好ましくはトリフルオロメチル、2-フルオロエチル及び3-フルオロプロピルである。【００１３】
「シクロアルカンジイル」は、C3-10の飽和炭化水素環基の任意の２個の水素原子を除去してなる二価基（C3-10シクロアルカンジイル）を意味し、架橋していてもよい。結合位置としては1,1-、1,2-、1,3-又は1,4-ジイル等の何れでも良く、好ましくはシクロヘキサンジイルである。
「アリール」とは、C6-14の単環乃至三環式芳香族炭化水素環基であり、その部分的に水素化された環基を包含する。具体的には、フェニル、ナフチル、5-テトラヒドロナフチル、1-インダニル基等である。好ましくはフェニル及びナフチルであり、より好ましくはフェニルである。【００１４】
「ヘテロ環」基とは、i) 酸素、硫黄及び窒素から選択されるヘテロ原子を１〜４個含有する単環３〜８員、好ましくは５〜７員ヘテロ環、並びに、ii) 当該単環ヘテロ環が、単環へテロ環、ベンゼン環、C5-8シクロアルカンおよびC5-8シクロアルケンからなる群より選択される１または２個の環と縮環し形成される、酸素、硫黄および窒素から選択されるヘテロ原子を１〜５個含有する二乃至三環式ヘテロ環、からなる環基を意味する。環原子である硫黄または窒素が酸化されオキシドやジオキシドを形成してもよい。
「ヘテロ環」基として好ましくは、以下の基である：
(1) 単環式飽和へテロ環基
i) １〜４個の窒素原子を含むもの、具体的には、アゼパニル、ジアゼパニル、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、ピペリジニル、ピラゾリジニル、ピペラジニル基等；
ii) １〜３個の窒素原子、ならびに１〜２個の硫黄原子及び／又は１〜２個の酸素原子を含むもの、具体的には、チオモルホリニル、チアゾリジニル、イソチアゾリジニル、オキサゾリジニル、モルホリニル基等；
iii) １〜２個の硫黄原子を含むもの、具体的には、テトラヒドロチイニル基等；
iv) １〜２個の硫黄原子および１〜２個の酸素原子を含むもの、具体的には、オキサチオラン基等；
v) １〜２個の酸素原子を含むもの、具体的には、オキシラニル、ジオキソラニル、オキソラニル、テトラヒドロピラニル、1,4-ジオキサニル基等；
(2) 単環式不飽和へテロ環基
i) １〜４個の窒素原子を含むもの、具体的には、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、ピリジル、ジヒドロピリジル、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアゾリル、テトラゾリル、ジヒドロトリアジニル、アゼピニル基等；
ii) １〜３個の窒素原子、ならびに１〜２個の硫黄原子および／または１〜２個の酸素原子を含むもの、具体的には、チアゾリル、イソチアゾリル、チアジアゾリル、ジヒドロチアジニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、オキサジアゾリル、オキサジニル基等；
iii) １〜２個の硫黄原子を含むもの、具体的には、チエニル、チエピニル、ジヒドロジチイニル、ジヒドロジチオニル基等；
iv) １〜２個の硫黄原子および１〜２個の酸素原子を含むもの、具体的には、ジヒドロオキサチイニル基等；
v) １〜２個の酸素原子を含むもの、具体的には、フリル、ピラニル、オキセピニル、ジオキソリル基等；
(3) 縮合多環式飽和へテロ環基
i) １〜５個の窒素原子を含むもの、具体的には、キヌクリジン、7-アザビシクロ[2.2.1]ヘプチル、3-アザビシクロ[3.2.2]ノナニル基等；
ii) １〜４個の窒素原子、ならびに１〜３個の硫黄原子および／または１〜３個の酸素原子を含むもの、具体的には、トリチアジアザインデニルジオキソロイミダゾリジニル基等；
iii) １〜３個の硫黄原子および／または１〜３個の酸素原子を含むもの、具体的には、2,6-ジオキサビシクロ[3.2.2]オクト-7-イル基等；
(4) 縮合多環式不飽和へテロ環基
i) １〜５個の窒素原子を含むもの、具体的には、インドリル、イソインドリル、インドリニル、インドリジニル、ベンゾイミダゾリル、キノリル、テトラヒドロキノリル、イソキノリル、テトラヒドロイソキノリル、インダゾリル、イミダゾピリジル、ベンゾトリアゾリル、テトラゾロピリダジニル、カルバゾリル、キノキサリニル、ジヒドロインダゾリル、ベンゾピリミジニル、ナフチリジニル、キナゾリニル、シンノリニル基等；
ii) １〜４個の窒素原子、ならびに１〜３個の硫黄原子および／または１〜３個の酸素原子を含むもの、具体的には、ベンゾチアゾリル、ジヒドロベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、イミダゾチアゾリル、イミダゾチアジアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾオキサジアゾリル基等；
iii) １〜３個の硫黄原子を含むもの、具体的には、ベンゾチエニル、ベンゾジチイニル基等；
iv) １〜３個の硫黄原子および１〜３個の酸素原子を含むもの、具体的には、ベンゾオキサチイニル、フェノキサジニル基等；
v) １〜３個の酸素原子を含むもの、具体的には、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、クロメニル、ベンゾジヒドロフラニル基等；【００１５】
上記「アリール」及び「ヘテロ環」は一価基として記載してあるが、これらの基が例えばD環の場合のように二価以上の基となる場合は、任意の位置の水素原子を除去してなる基を示す。【００１６】
「-CO2H又はその生物学的等価体」は、カルボン酸、若しくはカルボン酸と同等の電子的又は立体的配置を有し、共通の生物学的性質を有する他の原子や原子団を意味する。これらは、当業者が通常用いるいわゆるカルボン酸バイオアイソスター、保護されたカルボキシル基、又はカルボン酸のプロドラッグ等であり、例えば、カルボン酸、カルボン酸エステル、ヒドロキサム酸(R-CO-NH-OH)、スルホンアミド(R-NH-SO2-R')、アシルシアナミド(R-CO-NH-CN)、アシルスルホンアミド(R-CO-NH-SO2-R')、或いは、テトラゾール、オキサジアゾロン、オキサジアゾールチオン、オキサチアジアゾール、チアジアゾロン、トリアゾールチオン、ヒドロキシイソキサゾール等が挙げられ、好ましくは、カルボン酸及びオキサジアゾロンである。
「保護されたカルボキシル」基は、以下の基を包含しうる。
(1) エステル化されたカルボキシル基：具体的には、-CO-O-R0、-CO-O-(低級アルケニル)、-CO-O-(低級アルキニル)、-CO-OR00-O-R0、-CO-O-R00-(アリール)、-CO-O-R00-O-(アリール)基等；
(2) アミド化されたカルボキシル基：具体的には、-CO-NH2、-CO-NH-R0、-CO-N(R0)2、-CO-N(R0)-(アリール)、-CO-N(R0)-R00-(アリール)、-CO-NH-R00-OH、-CO-NH-R00-CO2H基等。【００１７】
「置換されていてもよい」とは、「無置換」あるいは「同一又は異なる置換基を１〜５個有していること」を示す。なお、複数個の置換基を有する場合、それらの置換基は同一でも互いに異なっていてもよい。
「置換されていてもよいアリール」及び「置換されていてもよいヘテロ環」における置換基として、好ましくは、-R0、ハロゲノ低級アルキル、-OH、-OR0、ハロゲン、オキソ、-NO2、-CN及び-S(O)2-R0から選択される基であり、より好ましくは、-R0、ハロゲン及びオキソから選択される基である。
「EP4受容体選択的拮抗作用」における「選択的」とは、PGE2受容体の４つのサブタイプEP1、EP2、EP3及びEP4のうち、EP4に対する親和性が他の３つのサブタイプよりも高いことを意味する。その親和性の差は好ましくは５倍、より好ましくは１０倍、更に好ましくは１００倍以上である。【００１８】
式（I）の化合物の置換基の好ましい態様を以下に示す。
（１）B環としては、好ましくはR0、ハロゲン、ハロゲノ低級アルキル、-OR0及び-S(O)2R0からなる群より選択される基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、チエニル、ピリジル又はキノリルであり、より好ましくはハロゲン又は-OR0でそれぞれ置換されていてもよいフェニルであり、更に好ましくはクロロフェニルであり、より更に好ましくは4-クロロフェニルである。
（２）D環としては、好ましくはハロゲン又はR0でそれぞれ置換されていてもよい、単環又は二環性のヘテロ環であり、より好ましくはハロゲン又はR0でそれぞれ置換されていてもよい二環性のヘテロ環であり、更に好ましくはハロゲンでそれぞれ置換されていてもよいインドリル、インドリニル、インダゾリル、ベンゾオキサジニル、ベンゾオキサゾリル又はベンゾトリアゾリルであり、より更に好ましくはClで置換されていてもよいインドリルである。
D環として、別の好ましい態様としては、ハロゲン又はR0でそれぞれ置換されていてもよい、フェニル、ピリジル、ピロリル又はチエニルである。また、D環として更に別の好ましい態様としては、ハロゲン又はR0で置換されていてもよいインドリルであり、また更に別の好ましい態様としてはハロゲン又はR0でそれぞれ置換されていてもよいインドール-1,2-ジイル又はピロール-1,2-ジイルである。
（３）Xとしては、好ましくは-O-、メチレン又は-R00-O-であり、より好ましくはメチレンである。
（４）Aとしては、好ましくは下記式（II）、（III）又は（V）で示される基であり、
【化６】
2009005076.tif 000007
より好ましくは式（II）で示される基である。また、Aとして別の好ましい態様としては、式（II）又は式（V）の何れかの式で示される基である。
（５）R2としては、好ましくはH又はC1-3アルキルであり、更に好ましくはメチルである。
（６）Zとしては、好ましくは単結合である。
（７）R3としては、好ましくは-CO2Hである。
（８）Yとしては、好ましくはCHであり、別の好ましい態様としてはNである。
（９）R2としては、好ましくはHであり、別の好ましい態様としてはR0である。【００１９】
式（I）の化合物のある態様としては、上記（１）〜（９）に記載の各好ましい基の組合せからなる化合物であり、下記の化合物又はその製薬学的に許容される塩が挙げられる。
（１０）B環がR0、ハロゲン、ハロゲノ低級アルキル、-OR0及び-S(O)2R0からなる群より選択される基でそれぞれ置換されていてもよいフェニル、チエニル、ピリジル又はキノリルであり、D環がハロゲン又はR0でそれぞれ置換されていてもよい二環性のヘテロ環であり、Xが-O-、メチレン又は-R00-O-であり、Aが式（II）、（III）又は（V）で示される基である化合物。
（１１）B環がハロゲン又は-OR0でそれぞれ置換されていてもよいフェニルであり、D環がハロゲンでそれぞれ置換されていてもよいフェニル、ピリジル、ピロリル、チエニル、インドリル又はインドリニルであり、Xがメチレンであり、Aが式（II）で示される基であり、R2がH又はC1-3アルキルであり、Zが単結合であり、R3がカルボン酸である化合物。
（１２）B環が4-クロロフェニルであり、D環がハロゲンで置換されていてもよいインドリルであり、R2がメチルである上記（１１）に記載の化合物。
（１３）D環がハロゲン又はR0で置換されていてもよい二環性のヘテロ環であり、Aが式（II）又は式（V）で示される基であり、YがCHであり、R2がHである化合物。
（１４）D環がハロゲン又はR0で置換されていてもよいインドリルであり、Aが式（II）又は式（V）で示される基であり、YがCHであり、R2がHである化合物。
（１５）D環がハロゲン又はR0で置換されていてもよいインドリルであり、E環がシクロヘキサンジイルである化合物。
（１６）D環がハロゲン又はR0で置換されていてもよいインドール-1,2-ジイル又はピロール-1,2-ジイルである化合物。
（１７）Aが式（II）〜（V）の何れかの式で示される基であり、YがNである化合物。【００２０】
式（I）の化合物は、置換基の種類によっては他の互変異性体や幾何異性体が存在する場合もある。本明細書中、それら異性体の一形態のみで記載することがあるが、本発明にはこれらの異性体も包含し、異性体の分離したもの、あるいは混合物も包含する。
また、式（I）の化合物は不斉炭素原子や軸不斉を有する場合があり、これに基づく(R)体、(S)体などの光学異性体が存在しうる。本発明はこれらの光学異性体の混合物や単離されたものを全て包含する。
更に、本発明には、式（I）の化合物の薬理学的に許容されるプロドラッグも含まれる。薬理学的に許容されるプロドラッグとは、加溶媒分解により又は生理学的条件下でアミノ基、OH、CO2H等に変換できる基を有する化合物である。プロドラッグを形成する基としては、例えば、Prog. Med., 5, 2157-2161 (1985)や「医薬品の開発」（廣川書店、1990年）第７巻  分子設計163-198に記載の基が挙げられる。【００２１】
また、式（I）化合物は、置換基の種類によっては酸付加塩又は塩基との塩を形成する場合もあり、かかる塩が製薬学的に許容され得る塩である限りにおいて本発明に包含される。具体的には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機酸や、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、アスパラギン酸、又はグルタミン酸等の有機酸との酸付加塩、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、アルミニウム等の無機塩基、メチルアミン、エチルアミン、エタノールアミン、リシン、オルニチン等の有機塩基との塩やアンモニウム塩等が挙げられる。
更に、本発明は、式（I）の化合物及びその製薬学的に許容される塩の各種の水和物や溶媒和物、及び結晶多形の物質をも包含する。また、本発明は、種々の放射性又は非放射性同位体でラベルされた化合物も包含する。【００２２】
(製造法)
式（I）の化合物及びその製薬学的に許容され得る塩は、その基本骨格あるいは置換基の種類に基づく特徴を利用し、種々の公知の合成法を適用して製造することができる。その際、官能基の種類によっては、当該官能基を原料乃至中間体の段階で適当な保護基（容易に当該官能基に転化可能な基）に置き換えておくことが製造技術上効果的な場合がある。このような官能基としては例えばアミノ基、水酸基、カルボキシル基等であり、それらの保護基としては例えばグリーン(Greene)及びウッツ(Wuts)著、「Protective Groups in Organic Synthesis(第3版、1999年)」に記載の保護基等を挙げることができ、これらを反応条件に応じて適宜選択して用いればよい。このような方法では、当該保護基を導入して反応を行った後、必要に応じて保護基を除去することにより、所望の化合物を得ることができる。
また、式（I）化合物のプロドラッグは上記保護基と同様、原料乃至中間体の段階で特定の基を導入、あるいは得られた化合物（I）を用い反応を行うことで製造できる。反応は通常のエステル化、アミド化、脱水等、当業者により公知の方法を適用することにより行うことができる。
以下、式（I）化合物の代表的な製造法を説明する。各製法は、当該説明に付した参考文献を参照して行うこともできる。なお、本発明の製造法は以下に示した例には限定されない。【００２３】
（第１製法）
【化７】
2009005076.tif 000008
本製法は、化合物（VII）と化合物（VIII）とを反応させ、式（I）の化合物を製造する方法である。
反応は、化合物（VII）と化合物（VIII）とを等量若しくは一方を過剰量用い、縮合剤の存在下、反応に不活性な溶媒中、冷却下から加熱下、好ましくは-20℃〜60℃において、通常0.1時間〜5日間撹拌することによって行なわれる。ここに、溶媒としては特に限定はされないが、例えば、ベンゼン、トルエン若しくはキシレン等の芳香族炭化水素類、ジクロロメタン(DCM)、1,2-ジクロロエタン(DCE)若しくはクロロホルム等のハロゲン化炭化水素類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン(THF)、ジオキサン、ジメトキシエタン(DME)等のエーテル類、N,N-ジメチルホルムアミド(DMF)、ジメチルスルホキシド(DMSO)、酢酸エチル、アセトニトリル又は水、或いはこれらの混合物が挙げられる。縮合剤としては、1-[ビス(ジメチルアミノ)メチレン]-1H-1,2,3-トリアゾロ[4,5-b]ピリジン-1-イウム3-オキシド ヘキサフルオロホスファート(HATU)、1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド(WSC)、ジシクロヘキシルカルボジイミド(DCC)、1,1'-カルボニルジイミダゾール(CDI)、ジフェニルリン酸アジド、オキシ塩化リン、または縮合剤を担持したポリスチレン樹脂、例えばPS-カルボジイミド(PS-Carbodiimide)(アルゴノートテクノロジー社（Argonaut Technologies）、米国）等を用いることが好ましい場合があるが、これらに限定されるものではない。添加剤（例えば1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBt)等）を用いることが反応に好ましい場合があり、例えばトリエチルアミン、N,N-ジイソプロピルエチルアミン(DIPEA)若しくはN-メチルモルホリン等の有機塩基、又は炭酸カリウム、炭酸ナトリウム若しくは水酸化カリウム等の無機塩基の存在下に反応させるのが、反応を円滑に進行させる上で有利な場合がある。更に反応終了後の過剰なアミンを除去する目的でイソシアナートを担持したポリスチレン樹脂、例えばPS-イソシアナート(PS-Isocyanate）(アルゴノートテクノロジー社、米国）等を用いることが好ましい。更に反応終了後の過剰なカルボン酸及び前述の添加剤等を除去する目的で四級アンモニウム塩を担持したポリスチレン樹脂、例えばMP-カルボナート(MP-Carbonate)(アルゴノートテクノロジー社、米国)等を用いることが好ましい場合がある。
また、化合物（VII）を反応性誘導体へ導いた後に化合物（VIII）と反応させる方法も用いることができる。ここに化合物（VII）の反応性誘導体としては、オキシ塩化リン、塩化チオニル等のハロゲン化剤と反応して得られる酸ハロゲン化物、クロロギ酸イソブチル等と反応して得られる混合酸無水物、HOBt等と縮合して得られる活性エステル等が挙げられる。これらの反応性誘導体と化合物（VIII）との反応は、ハロゲン化炭化水素類、芳香族炭化水素類、エーテル類等の反応に不活性な溶媒中、冷却下〜加熱下、好ましくは、-20℃〜60℃で行うことができる。【００２４】
（第２製法）
【化８】
2009005076.tif 000009
（式中、Lは脱離基を示す。以下同様。）
本製法は、化合物（IX）と化合物（X）とを反応させ、本発明化合物（I-a）を得る方法である。ここで、脱離基としては、例えばハロゲン、メタンスルホニルオキシ、p-トルエンスルホニルオキシ基等が挙げられる。
反応は、化合物（IX）と化合物（X）とを等量若しくは一方を過剰量用い、反応に不活性な溶媒中、又は無溶媒下、冷却下から加熱還流下、好ましくは0℃から80℃において、通常0.1時間〜5日間撹拌することによって行なわれる。ここに、溶媒としては特に限定はされないが、例えば、芳香族炭化水素類、エーテル類、ハロゲン化炭化水素類、DMF、DMSO、酢酸エチル、アセトニトリル或いはこれらの混合物が挙げられる。トリエチルアミン、DIPEA若しくはN-メチルモルホリン等の有機塩基、又は炭酸カリウム、炭酸ナトリウム若しくは水酸化カリウム等の無機塩基の存在下に反応させるのが、反応を円滑に進行させる上で有利な場合がある。
なお、R3がカルボン酸エステルである式（I）の化合物のアルカリ加水分解或いはカルボン酸の脱保護を行なうことにより、R3がカルボン酸である式（I）の化合物を得ることができる。【００２５】
（原料合成）
原料製法１
【化９】
2009005076.tif 000010
化合物（XIII）は、化合物（XI）と化合物（XII）の反応により製造することができる。反応は、塩基存在下、反応に不活性な溶媒中、冷却下から加熱還流下、好ましくは0℃〜80℃において、通常0.1時間〜5日間撹拌することによって行なわれる。溶媒としては特に限定はされないが、芳香族炭化水素類、エーテル類、ハロゲン化炭化水素類、DMF、DMSO、酢酸エチル、アセトニトリル或いはこれらの混合物が挙げられる。塩基としては、トリエチルアミン、DIPEA、1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]-7-ウンデセン、n-ブチルリチウム等の有機塩基、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、水素化ナトリウム、カリウムtert-ブトキシド等の無機塩基が挙げられる。更に本反応は、塩化テトラ-n-ブチルアンモニウム等の相間移動触媒又は銅-ヨウ化銅触媒等の存在下で行うことが好ましい場合がある。
生成した化合物（XIII）を加水分解することにより対応するカルボン酸を製造することができる。【００２６】
原料製法２
【化１０】
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（P1及びP2はそれぞれアミノ基及びカルボン酸の保護基を示す。P1としてはt-ブトキシカルボニル基が好ましく、P2としてはC1-6アルキル又はアリルが好ましい。以下同様。）
化合物（XVI）は、化合物（XIV）のカルボン酸の保護に次ぐアミノ基の脱保護により得られる化合物（XV）のヒドラジノ化によって製造することができる。【００２７】
式（I）の化合物は、遊離化合物、その製薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、あるいは結晶多形の物質として単離され、精製される。式（I）の化合物の製薬学的に許容される塩は、常法の造塩反応に付すことにより製造することもできる。
単離、精製は、抽出、分別結晶化、各種分画クロマトグラフィー等通常の化学操作を適用して行われる。
各種の異性体は、適当な原料化合物を選択することにより、あるいは異性体間の物理化学的性質の差を利用して分離することができる。例えば、光学異性体は一般的な光学分割法(例えば、光学活性な塩基又は酸とのジアステレオマー塩に導く分別結晶化やキラルカラム等を用いたクロマトグラフィー等)により、立体化学的に純粋な異性体に導くことができる。また、適当な光学活性な原料化合物より製造することもできる。【００２８】
式（I）の化合物の薬理活性は以下の試験により確認した。
試験例１  ラットEP4受容体親和性評価試験
細胞培養およびtransfection
コラーゲンコートの10 cm dish（Asahi Glass）を用いてHEK293細胞をD-MEM培地で培養し、confluent(90-100%密集状態)で培地を除き、リン酸緩衝食塩水(PBS)で洗浄後、N,N,N′,N′-テトラキス(カルボキシメチル)エチレンジアミン(EDTA)にて剥がした。細胞数をカウントし、70% confluentとなるようにコラーゲンコートの15 cm dishに播種した。翌日、1.2 mL/dishのOpti-MEM培地にLipofectamine 2000（Invitrogen）を60 μL/dishで添加し、室温で5分間静置した。pcDNA3.1-V5-His-topoのTAクローニングサイトにrat EP4（配列番号１）を挿入したプラスミドを15 μg/dishとなるように添加した。室温で30分静置した後、dishに添加して20-24時間培養した。細胞培養はCO2インキュベーター（37℃、5% CO2）内で行った。
膜画分の調製
培地を吸引除去し、15 cm dishあたり10 mLの冷却PBSを加えてcell scraper（Sumitomo Bakelite）を用いて細胞を掻きとった。冷却PBSで洗浄（1,200 rpm、4℃、5 min）した後、dishあたり6 mLの冷却20 mM Tris-HCl（pH7.4；ナカライテスク、5 mM EDTA（ナカライテスク）を含む）に懸濁し、ポリトロンを用いてホモジナイズし、そのホモジネートを遠心（26,000 rpm、20 min、4℃）した。得られた沈殿を冷却20 mM Tris-HClに再懸濁させ、再びポリトロンを用いてホモジナイズし、そのホモジネートを遠心（26,000 rpm、20 min、4℃）した。得られた沈殿にdishあたり1 mLとなるように50 mM HEPES（pH7.5；Dojindo Laboratories）に懸濁させ、ポリトロンを用いてホモジナイズして膜画分として-80℃凍結保存した。このとき一部をタンパク濃度の測定に用いた。タンパク濃度の測定はBio-Rad Protein assay kit（Bio-Rad Laboratories）を用い、添付の標準プロトコールに従ってduplicateで行った。
Binding Assay
[3H]PGE2 50 μL（最終濃度0.3 nM；Perkin Elmer）、ラットEP4発現細胞から調製した膜画分100 μL（20 μg/well）及び試験化合物50 μLを96 wellマイクロプレート（Sumitomo Bakelite）上に混和し、室温にて1時間インキュベートした後、FilterMateハーベスター（Perkin Elmer）を用いてUniFilter-96 GF/B（Perkin Elmer）上に吸引濾過し、300 μL/wellの冷却assay bufferにて3回洗浄した。[3H]PGE2および膜画分の希釈はassay buffer（50 mM HEPES、10 mM MgCl2）にて、試験化合物およびunlabeled PGE2の希釈はDMSOおよびassay bufferにて行った。また、ヒト血清アルブミン(HSA)添加の場合は4%HSA（最終濃度1%；Sigma）を含むassay bufferで希釈した。UniFilter-96 GF/Bは予め200 μL/well冷却assay bufferにて2回洗浄して馴染ませた。濾過後のUniFilter-96 GF/Bは乾燥機にて一晩乾燥させ、MicroScint20（Perkin Elmer）50 μL/wellを加えた後、TopCount（Perkin Elmer）にて放射活性を測定した。非特異的結合の測定にはunlabeled PGE2（最終濃度1 μM；Cayman）を添加した。測定はすべてduplicateで行い、特異的結合量は総結合量から非特異的結合量を差し引いて求めた。【００２９】
上記試験方法に従い、式（I）の化合物のラットEP4受容体親和性(Ki)を測定した。本発明の代表的実施例化合物のKi値を下記表１に示す。Exは実施例化合物番号を示す。【００３０】
【表１】
2009005076.tif 000012
【００３１】
また、特許文献３の実施例５１の化合物を上記試験方法に従って評価した結果、当該化合物のラットEP4受容体親和性(Ki)は48 nMであることが判明した。【００３２】
試験例２：ストレプトゾトシン(STZ)誘発糖尿病ラットの尿中アルブミンに対する効果検討試験
予め8週齢の雄性Wistar (Crj)ラットを尿中アルブミン排泄(UAE)に偏りのないよう群分けを行い、STZ (50 mg/kg)を静脈内投与した。STZ投与の翌日より連続経口投与を行い、定期的に代謝ケージにて24時間の採尿を実施し、UAEを測定した。【００３３】
上記の各試験の結果、本発明化合物が医薬品として、殊に、EP4が関与する以下のような種々の疾患の予防及び/又は治療剤として有用であることが確認された。例えば、腎臓病（例として、急性腎炎、再発性血尿、持続性血尿、慢性腎炎、急速進行性腎炎、急性腎不全、慢性腎不全、糖尿病性腎症、バーター症候群等）、炎症性皮膚疾患（例として、日焼け、火傷、湿疹、皮膚炎等）、動脈硬化症に起因する虚血性心疾患（特に、心筋梗塞、狭心症等）、動脈硬化症に起因する脳血管障害（脳卒中、ラクナ梗塞も含む脳卒中、脳血栓、脳出血、くも膜下出血、脳梗塞等）、消化性潰瘍（胃潰瘍、十二指腸潰瘍等）、悪性腫瘍及びその転移（結腸癌、乳癌等）などヒトまたは動物における同種の疾患、特に、慢性腎不全及び糖尿病性腎症等の腎臓病の治療剤として有用である。
式（I）の化合物またはその塩は利尿作用を持つ医薬品製剤としても有益である。利尿作用を持つことは、種々の浮腫（例として、心臓性浮腫、脳浮腫等）、悪性高血圧症などのような高血圧症、月経前緊張症、尿路結石、急性または慢性疾患によって引き起こされるような尿乏症、高リン血症など、これらを治療もしくは予防する薬剤として有益である。【００３４】
式（I）の化合物又はその塩の１種又は２種以上を有効成分として含有する製剤は、当分野において通常用いられている薬剤用担体、賦形剤等を用いて通常使用されている方法によって調製することができる。
投与は錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤等による経口投与、又は、関節内、静脈内、筋肉内等の注射剤、坐剤、点眼剤、眼軟膏、経皮用液剤、軟膏剤、経皮用貼付剤、経粘膜液剤、経粘膜貼付剤、吸入剤等による非経口投与のいずれの形態であってもよい。【００３５】
本発明による経口投与のための固体組成物としては、錠剤、散剤、顆粒剤等が用いられる。このような固体組成物においては、1種又は2種以上の有効成分を、少なくとも1種の不活性な賦形剤、例えば乳糖、マンニトール、ブドウ糖、ヒドロキシプロピルセルロース、微結晶セルロース、デンプン、ポリビニルピロリドン、及び/又はメタケイ酸アルミン酸マグネシウム等と混合される。組成物は、常法に従って、不活性な添加剤、例えばステアリン酸マグネシウムのような潤滑剤やカルボキシメチルスターチナトリウム等のような崩壊剤、安定化剤、溶解補助剤を含有していてもよい。錠剤又は丸剤は必要により糖衣又は胃溶性若しくは腸溶性物質のフィルムで被膜してもよい。
経口投与のための液体組成物は、薬剤的に許容される乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤又はエリキシル剤等を含み、一般的に用いられる不活性な希釈剤、例えば精製水又はエタノールを含む。当該液体組成物は不活性な希釈剤以外に可溶化剤、湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、防腐剤を含有していてもよい。
非経口投与のための注射剤は、無菌の水性又は非水性の溶液剤、懸濁剤又は乳濁剤を含有する。水性の溶剤としては、例えば注射用蒸留水又は生理食塩液が含まれる。非水溶性の溶剤としては、例えばプロピレングリコール、ポリエチレングリコール又はオリーブ油のような植物油、エタノールのようなアルコール類、又はポリソルベート８０（局方名）等がある。このような組成物は、さらに等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、又は溶解補助剤を含んでもよい。これらは例えばバクテリア保留フィルターを通す濾過、殺菌剤の配合又は照射によって無菌化される。また、これらは無菌の固体組成物を製造し、使用前に無菌水又は無菌の注射用溶媒に溶解又は懸濁して使用することもできる。【００３６】
外用剤としては、軟膏剤、硬膏剤、クリーム剤、ゼリー剤、パップ剤、噴霧剤、ローション剤、点眼剤、眼軟膏等を包含する。一般に用いられる軟膏基剤、ローション基剤、水性又は非水性の液剤、懸濁剤、乳剤等を含有する。例えば、軟膏又はローション基剤としては、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、白色ワセリン、サラシミツロウ、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、モノステアリン酸グリセリン、ステアリルアルコール、セチルアルコール、ラウロマクロゴール、セスキオレイン酸ソルビタン等が挙げられる。
吸入剤や経鼻剤等の経粘膜剤は固体、液体又は半固体状のものが用いられ、従来公知の方法に従って製造することができる。例えば公知の賦形剤や、更に、pH調整剤、防腐剤、界面活性剤、滑沢剤、安定剤や増粘剤等が適宜添加されていてもよい。投与は、適当な吸入又は吹送のためのデバイスを使用することができる。例えば、計量投与吸入デバイス等の公知のデバイスや噴霧器を使用して、化合物を単独で又は処方された混合物の粉末として、もしくは医薬的に許容し得る担体と組み合わせて溶液又は懸濁液として投与することができる。乾燥粉末吸入器等は、単回又は多数回の投与用のものであってもよく、乾燥粉末又は粉末含有カプセルを利用することができる。あるいは、適当な駆出剤、例えば、クロロフルオロアルカン、ヒドロフルオロアルカン又は二酸化炭素等の好適な気体を使用した加圧エアゾールスプレー等の形態であってもよい。【００３７】
通常経口投与の場合、1日の投与量は、体重当たり約0.001〜100 mg/kg、好ましくは0.1〜30 mg/kg、更に好ましくは0.1〜10 mg/kgが適当であり、これを1回であるいは2乃至4回に分けて投与する。静脈内投与される場合は、1日の投与量は、体重当たり約0.0001〜10 mg/kgが適当で、1日1回乃至複数回に分けて投与する。また、経粘膜剤としては、体重当たり約0.001〜100 mg/kgを1日1回乃至複数回に分けて投与する。投与量は症状、年令、性別等を考慮して個々の場合に応じて適宜決定される。【００３８】
式（I）の化合物は、前述の本発明化合物が有効と考えられる疾患の種々の治療又は予防剤と併用することができる。当該併用は、同時投与、或いは別個に連続してもしくは所望の時間間隔をおいて投与してもよい。同時投与製剤は、配合剤であっても別個に製剤化されていてもよい。
【実施例】
【００３９】
以下、実施例に基づき式（I）の化合物の製法を更に詳細に説明する。式（I）の化合物は下記実施例に記載の化合物に限定されるものではない。また原料化合物の製法を製造例に示す。【００４０】
製造例１
2,5-ジクロロニコチン酸(0.99 g)及びDMF(15 mL)の混合物に室温下3,4-ジフルオロフェノール(0.80 g)、炭酸カリウム(1.6 g)、銅(0.072 g)及びヨウ化銅(0.078 g)を加え、170℃で4時間撹拌した。反応混合物を放冷した後に酢酸エチルを加え不溶物をセライトでろ別した。ろ液を1M塩酸、水及び飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥して減圧下濃縮した。残渣にメタノール(25 mL)及び濃硫酸(1.0 mL)を加え100℃で3時間撹拌した。次いで氷冷下飽和重曹水を加え(pH約8)、析出した固体をろ取し、水で洗浄してシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル=9:1)で精製し、5-クロロ-2-(3,4-ジフルオロフェノキシ)ニコチン酸メチル(1.1g)を得た。
製造例２
5-クロロ-2-(3,4-ジフルオロフェノキシ)ニコチン酸メチル(1.0 g)、メタノール(10 mL)及びTHF(10 mL)の混合物に、室温下1M水酸化ナトリウム水溶液(10 mL)を加え11時間撹拌した。次いで氷冷下1M塩酸(10 mL)を加え、析出した固体をろ取し、水で洗浄して5-クロロ-2-(3,4-ジフルオロフェノキシ)ニコチン酸(0.94 g)を得た。
製造例３
4-[(tert-ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ]安息香酸(2.7 g)、DMF(27 mL)及び炭酸カリウム(2.2 g)の混合物に室温下、臭化アリル(1.1 mL)を加え15時間撹拌した。次いで水及び酢酸エチルを加え有機層を分離し、飽和重曹水、水及び飽和食塩水で順次洗浄した後に、無水硫酸マグネシウムで乾燥し減圧下濃縮した。残渣にジオキサン(10 mL)、4M塩化水素-ジオキサン溶液(30 mL)を加え30時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し、残渣にジエチルエーテルを加え、析出した固体をろ取し、ジエチルエーテルで洗浄して4-(メチルアミノ)安息香酸アリル 塩酸塩(2.09 g)を得た。【００４１】
製造例４
4-(メチルアミノ)安息香酸アリル 塩酸塩(2.09 g)、濃塩酸(10 mL)及び水(10 mL)の混合物に氷冷下、亜硝酸ナトリウム(0.67 g)の水溶液(10 mL)を滴下し、同温で3時間撹拌した。析出した固体をろ取し1M塩酸及び水で洗浄した。固体に酢酸(10 mL)、水(5.0 mL)及び亜鉛(2.7 g)を加え、室温で1.5時間撹拌した。不溶物をセライトでろ別し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣に酢酸エチル及び飽和重曹水を加え、不溶物をろ別した後に有機層を分離した。有機層を飽和重曹水、水及び飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後ろ過した。ろ液を減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル=3:1)で精製した。得られた油状物にジオキサン及び4M塩酸-ジオキサン溶液を加え、析出した固体をろ取した。固体をジエチルエーテルで洗浄し、4-(1-メチルヒドラジノ)安息香酸アリル 塩酸塩(1.3 g)を得た。
製造例５
メチル 5-オキソ-5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-カルボキシレート(0.93 g)及びメタノール(20 mL)の混合物に室温下、ヒドロキシルアミン 塩酸塩(0.35 g)及び酢酸ナトリウム(0.41 g)を加えて11時間撹拌した。反応混合物に水を加え、析出した固体をろ取し、水で洗浄してメチル 5-(ヒドロキシイミノ)-5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-カルボキシレート(0.97 g)を得た。
製造例６
メチル 5-(ヒドロキシイミノ)-5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-カルボキシレート(0.96 g)及びメタノール(20 mL)の混合物にラネーニッケル(1.0 mL)を加え、水素雰囲気下、室温3気圧にて24時間撹拌した。不溶物をセライトでろ別し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣にメタノール及びジエチルエーテルを加え氷冷下4M塩化水素-ジオキサン溶液(2.0 mL)を加えて析出した固体をろ取し、ジエチルエーテルで洗浄してメチル 5-アミノ-5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-カルボキシレート 塩酸塩(0.91 g)を得た。【００４２】
製造例７
3-[4-(tert-ブトキシカルボニルアミノメチル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-5(4H)-オン(1.64 g)及び酢酸エチル(4.9 mL)の混合物に4M塩化水素-酢酸エチル溶液(21.1 mL)を加え室温で4時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し、残渣をヘキサン(15 mL)で洗浄することにより、3-[4-(アミノメチル)フェニル]-1,2,4-オキサジアゾール-5(4H)-オン 塩酸塩(1.24 g)を白色固体として得た。
製造例８
tert-ブチル [(1S)-1-(4-シアノフェニル)エチル]カルバマート(2.44 g)及びヒドロキシルアミン塩酸塩(2.07 g)のエタノール(36.6 mL)懸濁液に室温下、トリエチルアミン(4.14 mL)を加え80℃で終夜撹拌した。次いで室温まで放冷し、水(100 mL)を加え酢酸エチル(120 mL)で抽出した。有機層を飽和重曹水及び飽和食塩水で順次洗浄後、硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下濃縮してtert-ブチル [(1S)-1-{4-[アミノ(ヒドロキシイミノ)メチル]フェニル}エチル]カルバマート(2.44 g)を白色固体として得た。
製造例９
tert-ブチル [(1S)-1-{4-[アミノ(ヒドロキシイミノ)メチル]フェニル}エチル]カルバマート(2.43 g)、ピリジン(1.06 mL)及びDMF(36.5 mL)の混合物を氷冷し、2-エチルヘキシル クロロカーボネート(1.69 mL)を徐々に加え同温で1時間撹拌した。反応混合物に水(80 mL)を加え酢酸エチル(100 mL)で抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥して減圧下濃縮した。残渣をヘキサン(50 mL)で洗浄することにより、tert-ブチル [(1S)-1-(4-{アミノ[({[(2-エチルヘキシル)オキシ]カルボニル}オキシ)イミノ]メチル}フェニル)エチル]カルバマート(3.5 g)を白色固体として得た。【００４３】
製造例１０
tert-ブチル [(1S)-1-(4-{アミノ[({[(2-エチルヘキシル)オキシ]カルボニル}オキシ)イミノ]メチル}フェニル)エチル]カルバマート(3.5 g)及びキシレン(35 mL)の混合物を外温140℃で1時間撹拌した。室温まで放冷後、氷冷で30分間撹拌した。析出した固体をろ取してジエチルエーテル(10 mL)で洗浄し、tert-ブチル {(1S)-1-[4-(5-オキソ-4,5-ジヒドロ-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル)フェニル]エチル}カルバマート(2.2 g)を白色固体として得た。
製造例１１
2-アミノ-3-ヒドロキシ安息香酸メチル(2.5 g)、炭酸カリウム(4.6 g)、ジクロロエタン(20 mL)及び水(20 mL)の混合物にクロロアセチルクロリド(1.3 mL)を加え、70℃で終夜撹拌した。反応混合物を放冷後、クロロホルム(40 mL)及び水(40 mL)を加え、分離した有機層を1M塩酸、飽和重曹水及び飽和食塩水で順次洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮した。残渣を酢酸エチル(2 mL)で再結晶することにより、メチル 3-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾキサジン-5-カルボキシレート(746 mg)を淡赤色結晶として得た。
製造例１２
メチル 3-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾキサジン-5-カルボキシレート(735 mg)及びDMF(11 mL)の混合物を氷冷し、水素化ナトリウム(156 mg)を加え30分間撹拌した。次いで4-クロロベンジルブロミド(765 mg)を加え同温で30分、室温で2時間撹拌した。反応混合物に水(40 mL)及び酢酸エチル(40 mL)を加え、分離した有機層を1M塩酸、飽和重曹水及び飽和食塩水で順次洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル=3:1)で精製することにより、メチル 4-(4-クロロベンジル)-3-オキソ-3,4-ジヒドロ-2H-1,4-ベンゾキサジン-5-カルボキシレート(1.07 g)を無色シロップとして得た。【００４４】
製造例１３
5-クロロ-1H-インドール-7-カルボン酸(500 mg)、トリフェニルホスフィン(1.01 g)、エタノール(235 mg)及びトルエン(20 mL)の混合物に室温下、アゾジカルボン酸ジエチル(2.2Mトルエン溶液、1.74 mL)を滴下し2時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル)で精製し、5-クロロ-1H-インドール-7-カルボン酸エチル(550 mg)を白色固体として得た。
製造例１４
2-アミノ-3-ヒドロキシ安息香酸メチル(2 g)及び塩化メチレン(40 mL)の混合物を氷冷し、トリエチルアミン(3.34 mL)、4-クロロフェニルアセチルクロリド(1.93 mL)を順次加え同温で2時間、室温で終夜撹拌した。反応混合物に水(50 mL)及びクロロホルム(50 mL)を加え、分離した有機層を1M塩酸、飽和重曹水及び飽和食塩水で順次洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮した。残渣をトルエン(40 mL)に溶解し、p-トルエンスルホン酸(2.47 g)を加えて4時間加熱還流した。放冷後、酢酸エチル(80 mL)で希釈し1M塩酸、飽和重曹水及び飽和食塩水で順次洗浄した。析出した固体をろ去後、ろ液を硫酸マグネシウムで乾燥し減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル=3:1)で精製し、メチル 2-(4-クロロベンジル)-1,3-ベンゾキサゾール-4-カルボキシレート(850 mg)を淡黄色シロップとして得た。
製造例１５
2-クロロ-3-ニトロ安息香酸メチル(1.50 g)及びTHF(15 mL)の混合物にトリエチルアミン(1.94 mL)及びp-クロロベンジルアミン(934 μL)を室温で加え60℃で終夜撹拌した。反応液を放冷後、減圧下濃縮し、残渣に水を加えてクロロホルムで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し減圧下濃縮した。エタノールから再結晶を行い、2-[(4-クロロベンジル)アミノ]-3-ニトロ安息香酸メチル(1.63 g)を黄色結晶として得た。【００４５】
製造例１６
2-[(4-クロロベンジル)アミノ]-3-ニトロ安息香酸メチル(1.43 g)、鉄(1.24 g)及び酢酸(14 mL)の混合物を60℃で3時間撹拌した。放冷後、反応液をエタノールで希釈し、セライトろ過により不溶物を除去した。ろ液を減圧下濃縮し、残渣に酢酸エチルを加えた溶液を飽和重曹水で2回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。更に減圧下濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル)で精製し、3-アミノ-2-[(4-クロロベンジル)アミノ]安息香酸メチル(1.13 g)を黄色油状物として得た。
製造例１７
3-アミノ-2-[(4-クロロベンジル)アミノ]安息香酸メチル(200 mg)及び酢酸(4 mL)の混合物に、室温下亜硝酸ナトリウム(57 mg)を加え終夜撹拌した。反応液にトルエンを加え、減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル)で精製し、1-(4-クロロベンジル)-1H-ベンゾトリアゾール-7-カルボン酸メチル(199 mg)を白色固体として得た。
製造例１８
4-ヒドラジノ安息香酸(1.0 g)、酢酸 tert-ブチル(15 mL)の混合物に室温下、三フッ化ホウ素-ジエチルエーテル錯体(1.8 mL)を加え、室温で3時間撹拌した。反応混合物を1M水酸化ナトリウム水溶液(50 mL)に注ぎ、有機層を分離して水及び飽和食塩水で洗浄した。次いで無水硫酸マグネシウムで乾燥し減圧下濃縮して、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン:酢酸エチル=3:1→2:1)で精製し、4-ヒドラジノ安息香酸 tert-ブチル(0.22 g)を得た。【００４６】
製造例１９
7-({(1S)-1-[4-(メトキシカルボニル)フェニル]エチル}カルバモイル)インドリン-1-カルボン酸 tert-ブチル(972 mg)、メタノール(4 mL)及び4M塩化水素-ジオキサン溶液(8 mL)の混合物を室温で6時間撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し4-{(1S)-1-[(2,3-ジヒドロ-1H-インドール-7-イルカルボニル)アミノ]エチル}安息香酸メチル 塩酸塩(989 mg)を得た。
製造例２０
1-(4-クロロベンジル)-1H-インドール-7-カルボン酸メチル(200 mg)及びDMF(2 mL)の混合物に氷冷下、オキシ塩化リン(110 μL)を滴下した。室温で20分間撹拌し60℃で12時間撹拌した。室温に放冷後、反応混合物を水中に注いで飽和重曹水を加え中和した後、酢酸エチル及びジエチルエーテルの混合液で抽出した。有機層を水及び飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧下濃縮した。得られた残渣に室温下、THF(2 mL)及びBH3・THF錯体(1.0M THF溶液、1 mL)を加え、60℃で2時間撹拌した。反応混合物に氷冷下、メタノールを徐々に加え減圧下濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル)で精製し、1-(4-クロロベンジル)-3-メチル-1H-インドール-7-カルボン酸メチル(66 mg)を白色固体として得た。
製造例２１
1-アミノインダン-5-カルボニトリル 塩酸塩(403 mg)及び水(4.0 mL)の混合物に、濃硫酸(0.40 mL)を加え、100℃で終夜撹拌した。放冷後、減圧下濃縮し、メタノール(10 mL)を加えて80℃で3日間撹拌した。次いで水及び炭酸カリウムを加え酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧下濃縮し、メチル 1-アミノインダン-5-カルボキシレート(152 mg)を白色固体として得た。【００４７】
製造例２２
1H-インドール-7-カルボン酸メチル(2.00 g)及びtert-ブタノール(100 mL)の混合物に室温下、N-ブロモスクシンイミド(1.10 g)を徐々に加え1時間撹拌した。更にN-ブロモスクシンイミド(2.20 g)を加え室温で2時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮した後、残渣に飽和重曹水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル)で精製し、3-ブロモ-1H-インドール-7-カルボン酸メチル(490 mg)を白色固体として得た。
製造例２３
1-(tert-ブトキシカルボニル) インドリン-6-カルボン酸(4.58 g)にDMF(46 mL)を加え氷冷下、炭酸カリウム(3.61 g)及び臭化アリル(2.53 g)を加えて室温で2日間撹拌した。反応混合物に氷冷下、水(50 mL)及び1M水酸化ナトリウム水溶液(50 mL)を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥して減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル＝20/1〜10/1)で精製し、6-アリル 1-tert-ブチル インドリン-1,6-ジカルボキシレート(4.95 g)を無色油状物として得た。
製造例２４
5-(1-ヒドロキシエチル)チオフェン-2-カルボン酸エチル(1.01 g)、ジフェニルホスホリルアジド(1.67 g)及びトルエン(10 mL)の混合物に氷冷下、1,8-ジアザビシクロ[5.4.0]ウンデカ-7-エン(905 μL)を加え氷冷下30分、室温で15時間撹拌した。反応液を水及び1M塩酸で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。次いで減圧下濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル)で精製し、5-(1-アジドエチル)チオフェン-2-カルボン酸エチル(1.03 g)を無色油状物として得た。【００４８】
製造例２５
5-(1-アジドエチル)チオフェン-2-カルボン酸エチル(1.03 g)、THF(20 mL)及び水(4 mL)の混合物にトリフェニルホスフィン(2.35 g)を室温で加え60℃で3時間撹拌した。放冷後、減圧下濃縮し、トルエンと共沸した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(クロロホルム-メタノール)で精製し、4M塩化水素-酢酸エチル溶液(1.5 mL)を加え3分間撹拌した後、再度減圧下濃縮した。ジイソプロピルエーテルを加え、析出した白色固体をろ取し、5-(1-アミノエチル)チオフェン-2-カルボン酸エチル 塩酸塩(979 mg)を白色固体として得た。
製造例２６
1H-インドール-7-カルボン酸メチル(100 mg)及びDMF(1 mL)の混合物に室温下、tert-ブトキシカリウム(75 mg)を加え5分間撹拌した後、4-メトキシベンジルクロリド(91 μL)を加え室温で2時間撹拌した。次いで水及び酢酸エチルを加え、分離した有機層を水及び飽和食塩水で順次洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮して残渣(216 mg)を得た。得られた残渣にTHF(10 mL)、メタノール(5 mL)及び1M水酸化ナトリウム水溶液(2.5 mL)を加え60℃で終夜撹拌した。放冷後、減圧下濃縮して得られた残渣に酢酸エチルを加え水で抽出した。水層に酢酸エチル及び1M塩酸(2.5 mL)を加え、分離した有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下濃縮し、1-(4-メトキシベンジル)-1H-インドール-7-カルボン酸(157 mg)を淡黄色固体として得た。
製造例２７
アルゴン雰囲気下、7-ブロモ-1-(4-クロロベンジル)-2-メチル-1H-インドール(360 mg)及びTHF(5 mL)の混合物を-78℃に冷却しn-ブチルリチウム(1.58Mヘキサン溶液、749 μL)を滴下した。同温で30分間撹拌した後ドライアイス(1.0 g)を加え徐々に室温まで昇温し30分間撹拌した。次いで1M塩酸を加え(pH酸性)、酢酸エチルで抽出をした。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮して1-(4-クロロベンジル)-2-メチル-1H-インドール-7-カルボン酸(310 mg)を淡黄色固体として得た。【００４９】
製造例２８
3-アミノ-2-ヒドロキシ安息香酸メチル(700 mg)及びTHF(21 mL)の混合物に、4-クロロフェニル イソチオシアネート(717 mg)を加え、室温で終夜撹拌した。反応混合物にヨウ化銅(0.87 g)及びトリエチルアミン(641 μL)を加え、60℃で終夜撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮してメタノールに溶解し、生じた黒色の沈殿物をセライトろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。再度、残渣に酢酸エチル(20 mL)を加えて不溶物をろ去し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン:酢酸エチル = 2:1)で精製した後、ヘキサン-酢酸エチル(10:1, 11 mL)で洗浄することにより、メチル 2-[(4-クロロフェニル)アミノ]-1,3-ベンゾキサゾール-7-カルボキシレート(270 mg)を淡黄色固体として得た。
製造例２９
2-(5-クロロ-1H-インドール-1-イル)ベンゾニトリル(753 mg)及びエチレングリコール(10.0 mL)の混合物に、1M水酸化ナトリウム水溶液(15.0 mL)を加え、180℃で6時間撹拌した。室温で放冷後1M塩酸(15.0 mL)を加え中和し、酢酸エチルで抽出した。有機層を水及び飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して減圧下濃縮して2-(5-クロロ-1H-インドール-1-イル)安息香酸(844 mg)を得た。
製造例３０
tert-ブチル [(1R)-1-(4-ブロモフェニル)エチル]カーバマート(1.3 g)、1,3-プロパンジイルビス(ジフェニルホスフィン)(0.18 g)、二酢酸パラジウム(0.10 g)、DMF(13 mL)、メタノール(20 mL)及びトリエチルアミン(1.9 mL)の混合物に室温下、一酸化酸素ガスを通じ、80℃で17.5時間撹拌した。放冷後、水を加えジエチルエーテルで抽出した。有機層を水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮して残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン:酢酸エチル=7:1)で精製し、4-{(1R)-1-[(tert-ブトキシカルボニル)アミノ]エチル}安息香酸メチル(1.1 g)を得た。【００５０】
製造例３１
インドール-7-カルボン酸メチル(6.0 g)及びDMF(60 mL)の混合物を氷冷し、tert-ブトキシカリウム(5.38 g)を加え同温で30分間攪拌した。次いで4-クロロベンジルブロミド(7.39 g)を加え、室温で3時間攪拌した。反応混合物を氷冷し、水(60 mL)を加え、酢酸エチル(80 mL)で抽出した。有機層を1M塩酸、飽和重曹水及び飽和食塩水で順次洗浄して硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下濃縮した。残渣を3日間静置して固化させ、ヘキサン-酢酸エチル(8:1, 18 mL)で洗浄することにより、メチル 1-(4-クロロベンジル)-1H-インドール-7-カルボキシレート(4.94 g)を淡黄色固体として得た。
製造例３２
1-メチル-2H-チエノ[3,2-d][1,3]オキサジン-2,4(1H)-ジオン(0.16 g)及びエタノール(5.0 mL)の混合物に、トリエチルアミン(0.18 mL)及び4-[(1S)-1-アミノエチル]安息香酸メチル 塩酸塩(0.22 g)を加え、13時間加熱還流した。室温で放冷後、氷冷下10%クエン酸水溶液を加え、析出した固体をろ取して水で洗浄し、4-[(1S)-1-({[3-(メチルアミノ)-2-チエニル]カルボニル}アミノ)エチル]安息香酸メチル(0.23 g)を得た。【００５１】
前記製造例１〜３２の化合物と同様の製法により、後記表に示す製造例化合物を、それぞれ対応する原料を使用して製造した。製造例化合物の構造、製法及び物理化学的データを表２〜１１に示す。【００５２】
実施例１（製法A）
5-クロロ-2-(3,4-ジフルオロフェノキシ)ニコチン酸(0.30 g)、4-(1-メチルヒドラジノ)安息香酸 アリル 塩酸塩(0.28 g)及びDMF(6.0 mL)の混合物に室温下、HOBt(0.16 g)及びWSC(0.26 mL)を加え3日撹拌した。次いで水を加え、酢酸エチルで抽出し、有機層を10%クエン酸水溶液、飽和重曹水、水及び飽和食塩水で順次洗浄した。更に無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧下濃縮し、4-(2-{[5-クロロ-2-(3,4-ジフルオロフェノキシ)ピリジン-3-イル]カルボニル}-1-メチルヒドラジノ)安息香酸アリル(0.55 g)を得た。
実施例２（製法B）
4-(2-{[5-クロロ-2-(3,4-ジフルオロフェノキシ)ピリジン-3-イル]カルボニル}-1-メチルヒドラジノ)安息香酸アリル(0.54 g)及びTHF(5.0 mL)の混合物に氷冷下、テトラキス(トリフェニルホスフィノ)パラジウム(IV) (66 mg)及びモルホリン(0.50 mL)を加え、氷冷下0.5時間、室温下3時間、次いで50℃で24時間撹拌した。更にモルホリン(1.0 mL)及びTHF(10 mL)を加え、50℃で13時間撹拌した。放冷後、テトラキス(トリフェニルホスフィノ)パラジウム(IV) (0.13 g)を追加し、再度50℃で8時間撹拌した。反応混合物を放冷し、10%クエン酸水溶液を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を水及び飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン:THF=3:1+1%ギ酸)で精製し、得られた固体をジエチルエーテルで洗浄し、4-(2-{[5-クロロ-2-(3,4-ジフルオロフェノキシ)ピリジン-3-イル]カルボニル}-1-メチルヒドラジノ)安息香酸(0.28 g)を得た。
実施例３（製法C）
4-(2-{[5-クロロ-2-(3,4-ジフルオロフェノキシ)ピリジン-3-イル]カルボニル}ヒドラジノ)安息香酸 tert-ブチル(0.13 g)及び塩化メチレン(2.0 mL)の混合物に室温下、トリフルオロ酢酸(2.0 mL)を加えて0.5時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し、残渣に水を加えて析出した固体をろ取した。得られた固体を水で洗浄し、酢酸エチル-ヘキサンより再結晶し、4-(2-{[5-クロロ-2-(3,4-ジフルオロフェノキシ)ピリジン-3-イル]カルボニル}ヒドラジノ)安息香酸(0.050 g)を得た。【００５３】
実施例４（製法D）
メチル 1-{[2-(4-クロロベンジル)ベンゾイル]アミノ}インドリン-5-カルボキシレート (308 mg)、メタノール(2 mL)及びTHF(2 mL)の混合物に、1M水酸化ナトリウム水溶液(2 mL)を加え、60℃で終夜撹拌した。室温で放冷後、10％クエン酸水溶液(5 mL)を加え撹拌した。析出した固体をろ取して水で洗浄し、得られた固体を60％エタノール水溶液で再結晶し白色固体とした。更にこれを分取高速液体クロマトグラフィー(ODS；アセトニトリル-0.1%トリフルオロ酢酸水溶液)で精製し、1-{[2-(4-クロロベンジル)ベンゾイル]アミノ}-1H-インドール-5-カルボン酸(5 mg)を得た。
実施例５（製法E）
1-(4-クロロベンジル)-1H-インドール-7-カルボン酸(0.20 g)及びTHF(2.0 mL)の混合物に氷冷下、塩化オキザリル(0.10 mL)、DMF一滴を加え同温で0.5時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し、残渣をトルエンで共沸した。得られた残渣にピリジン(4.0 mL)を加え氷冷下、4-(1-イソプロピルヒドラジノ)安息香酸メチル 塩酸塩(0.19 g)を加え、室温で3時間撹拌した。反応混合物に氷冷下、水を加え、酢酸エチルで抽出した。有機層を10%クエン酸水溶液、飽和重曹水、水及び飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥して減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(酢酸エチル-ヘキサン=0→30%)にて精製し、4-(2-{[1-(4-クロロベンジル)-1H-インドール-7-イル]カルボニル}-1-イソプロピルヒドラジノ)安息香酸メチル(0.22 g)を得た。
実施例６（製法F）
アリル インドリン-6-カルボキシレート 塩酸塩(1.5 g)に、濃塩酸(1.5 mL)及び水(3 mL)を加え氷冷下、亜硝酸ナトリウム(0.47g)と水(1.5 mL)の溶液をゆっくり滴下した。次いで、水(15 mL)及び濃塩酸(15 mL)を加え30分間撹拌した後、更に酢酸(20 mL)及び亜鉛(2.5 g)を加え室温で終夜撹拌した。反応混合液をセライトろ過し、ろ液を酢酸エチルで洗浄した。水層を飽和重曹水で中和して酢酸エチルを加え、分離した有機層を飽和食塩水で洗浄した後、硫酸ナトリウムで乾燥し減圧下濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル＝9/1〜1/1)で精製し、アリル 1-アミノインドリン-6-カルボキシレート(248 mg)を黄色油状物として得た。
アリル 1-アミノインドリン-6-カルボキシレート(238 mg)、1-(4-クロロベンジル)-1H-インドール-7-カルボン酸(260 mg)及びDMF(4 mL)の混合物に氷冷下、HATU(415 mg)及びDIPEA(190 μL)を加え、60℃で22時間撹拌した。放冷後、10％クエン酸水溶液を加えてpH約3とし、酢酸エチルで抽出し得られた有機層を飽和重曹水、飽和食塩水で順次洗浄した。更に硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル＝95/5-70/30)で精製し、アリル 1-({[1-(4-クロロベンジル)-1H-インドール-7-イル]カルボニル}アミノ)インドリン-6-カルボキシレート(260 mg)を得た。【００５４】
実施例９（製法G）
メチル 5-({[5-クロロ-2-(3,4-ジフルオロフェノキシ)ピリジン-3-イル]カルボニル}アミノ)-5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-カルボキシレート(0.30 g)、メタノール(3.0 mL)及びTHF(3.0 mL)の混合物に室温下、1M水酸化ナトリウム水溶液(3.0 mL)を加え8時間撹拌した。次いで1M塩酸(3.0 mL)を加え、析出した結晶をろ取し、水で洗浄した。得られた結晶をTHFより再結晶させて5-({[5-クロロ-2-(3,4-ジフルオロフェノキシ)ピリジン-3-イル]カルボニル}アミノ)-5,6,7,8-テトラヒドロナフタレン-2-カルボン酸(0.043 g)を得た。
実施例１０（製法H）
4-{(1S)-1-[(2,3-ジヒドロ-1H-インドール-7-イルカルボニル)アミノ]エチル}安息香酸メチル 塩酸塩(140 mg)、炭酸カリウム(134 mg)の混合物にDMF(3 mL)、p-クロロベンジルブロミド(100 mg)を順に加えた。反応混合物を室温で1時間撹拌した後、90℃で2時間撹拌した。反応混合物を室温に放冷した後、水を加え、酢酸エチルで抽出した。この有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、減圧下濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン-酢酸エチル)で精製し、4-[(1S)-1-({[1-(4-クロロベンジル)-2,3-ジヒドロ-1H-インドール-7-イル]カルボニル}アミノ)エチル]安息香酸メチル(135 mg)を無色アモルファスとして得た。
実施例１１（製法I）
4-[(1S)-1-({[3-(メチルアミノ)-2-チエニル]カルボニル}アミノ)エチル]安息香酸メチル(0.22 g)及び1,3-ジメチルイミダゾリジン-2-オン(2.0 mL)の混合物に、炭酸カリウム(150 mg)及び臭化4-クロロベンジル(175 mg)を加え、50℃で8時間撹拌した。更に炭酸カリウム(75 mg)及び臭化4-クロロベンジル(88 mg)を加え50℃で14時間撹拌した。また更に炭酸カリウム(150 mg)及び臭化4-クロロベンジル(175 mg)を追加し50℃で2日間撹拌した。反応混合物に氷冷下10%クエン酸水溶液を加えて酢酸エチルで抽出した。有機層を10%クエン酸水溶液、飽和重曹水、水及び飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(THF-ヘキサン=10%→30%)で精製し、4-{(1S)-1-[({3-[(4-クロロベンジル)(メチル)アミノ]-2-チエニル}カルボニル)アミノ]エチル}安息香酸メチル(0.26 g)を得た。
実施例１２（製法J）
1-(4-クロロベンジル)-1H-インドール-7-カルボン酸(8.6 mg)、メチル 6-アミノヘキサノアート 塩酸塩(6.4 mg)、HOBt(4.1 mg)、トリエチルアミン(9.7 μL)及びDMF(1.0 mL)の混合物に室温下、PS-カルボジイミド(100 mg)を加え終夜撹拌した。更に反応液にMP-カルボナート(50 mg)及びPS-イソシアナート(50 mg)を加え室温で4時間撹拌し、不溶物をろ過した。ろ液を減圧下濃縮して得られた残渣をエタノール(0.5 mL)及びTHF(0.5 mL)の混合溶媒に溶解し、これに室温下、1M水酸化ナトリウム水溶液(0.5 mL)を加え終夜撹拌した。反応液をWaters社製OASIS(登録商標)MAX(溶出液、ギ酸：メタノール＝1：49)を用いた固相抽出により精製し、6-({[1-(4-クロロベンジル)-1H-インドール-7-イル]カルボニル}アミノ)ヘキサン酸(1.0 mg)を得た。【００５５】
前記実施例の方法と同様にして、後記表に示す実施例化合物を、それぞれ対応する原料を使用して製造した。各実施例１〜実施例１１４の化合物の構造を表１２〜表２５に、製法及び物理化学的データを表２６〜表３２に示す。
また、製造例、実施例及び後記表中以下の略号を用いる。Pre：製造例番号、Ex：実施例番号、Str：構造式、Syn：製法（前記の実施例/製造例のうち、同様にして製造された製造例番号又は実施例の製法を示す。例えば、製造例３４の化合物は製造例５の化合物と同様にして製造したことを示す。また、実施例の製法A〜Jで製造された化合物は、それぞれ実施例１〜６及び実施例９〜１２の化合物と同様にして製造されたことを意味する）、Dat：物理化学的データ（NMR1：DMSO-d6中の1H NMRにおけるδ(ppm)、NMR2：CDCl3中の1H NMRにおけるδ(ppm)、FAB+：FAB-MS (陽イオン)、FAB-：FAB-MS (陰イオン)、ESI+：ESI-MS (陽イオン)、ESI-：ESI-MS (陰イオン)、EI：EI-MS (陽イオン)、CI＋：CI-MS (陽イオン)）、Me：メチル、Et：エチル、nPr：ノルマルプロピル、nBu：ノルマルブチル、iPr：イソプロピル、tBu：tert-ブチル、Boc：tert-ブトキシカルボニル。
【００５６】
【表２】
2009005076.tif 000013
【００５７】
【表３】
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【００５８】
【表４】
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【００５９】
【表５】
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【００６０】
【表６】
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【００６１】
【表７】
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【００６２】
【表８】
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【００６３】
【表９】
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【００６４】
【表１０】
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【００６５】
【表１１】
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【００６６】
【表１２】
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【００６７】
【表１３】
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【００６８】
【表１４】
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【００６９】
【表１５】
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【００７０】
【表１６】
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【００７１】
【表１７】
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【００７２】
【表１８】
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【００７３】
【表１９】
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【００７４】
【表２０】
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【００７５】
【表２１】
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【００７６】
【表２２】
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【００７７】
【表２３】
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【００７８】
【表２４】
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【００７９】
【表２５】
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【００８０】
【表２６】
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【００８１】
【表２７】
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【００８２】
【表２８】
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【００８３】
【表２９】
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【００８４】
【表３０】
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【００８５】
【表３１】
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【００８６】
【表３２】
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【配列表フリーテキスト】
【００８７】
以下の配列表数字見出し＜４００＞にはラットEP4の塩基配列（配列番号１）を記載する。
【配列表】
2009005076000001.app
【国際調査報告】
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