【手続補正書】
【提出日】平成15年12月24日(2003.12.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
タンパク質シェルに分子性物質、すなわち、一本鎖または二本鎖ＤＮＡ、一本鎖または二本鎖ＲＮＡ、ペプチド、ペプチドホルモン、タンパク質、タンパク質ドメイン、糖タンパク質、リボザイム、ＰＮＡ（ペプチド核酸）、薬剤物質、ヌクレオチド、ホルモン、脂質または炭水化物、もしくはこれらの物質の１又は複数の組み合わせ、を含有させる方法であって、
タンパク質シェルフラグメントを結合させることが可能な基質に対して、あるタンパク質シェル断片を第１領域で固定するステップと；
分子性物質をタンパク質シェル断片の第２領域に固定するために、基質に結合したタンパク質シェル断片を分子性物質と接触させるステップと；
該分子性物質が結合したタンパク質シェル断片を、または、該分子性物質が結合したタンパク質シェル断片の一部分を、基質から分離するステップと；
分離されたタンパク質シェル断片または結合した分子性物質を含む該タンパク質シェルの一部を、他のタンパク質シェル断片と組み合わせて、タンパク質シェルに組み立てるステップと；
から成り、
該分離と該組み立てはいかなる順序で行ってもよい、方法。
【請求項２】
前記分離および前記組み立てが、同時に起こるか、または最初に組み立てが起こってからその後分離が起こることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記基質に結合したタンパク質シェル断片を分子性物質と接触させた後、分子性物質のより小型の構造を達成するために１又は複数の縮合剤を加えることを特徴とする請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
ヒストン、ヒストン様タンパク質、ポリカチオン、ポリアルギニン、ポリリシン、スペルミジン、メチル化スペルミジン、ＣＴＡＢ（セチルトリメチル臭化アンモニウム）、カチオン性脂質、リポスペルミン、ポリエチレングリコール、ポリエチレンイミン、コバルトアミン化合物またはこれらの物質の１又は複数の組み合わせが縮合物質として使用されることを特徴とする請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
分子性物質として線形または環状のプラスミド；一本鎖または二本鎖のオリゴヌクレオチド；染色体または染色体断片；の形をしたＤＮＡ
または、
アンチセンスＲＮＡ、リボザイム、触媒ＲＮＡまたはコーディングｍＲＮＡの形をしたＲＮＡ、
または
分子性物質として、抗体、単一鎖抗体、酵素、構造タンパク質またはマーカータンパク質の形をしたタンパク質
が使用されることを特徴とする請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
タンパク質シェルは、ウィルスキャプシド、ファージキャプシドまたは内部空間を有するタンパク質の高分子会合体、好ましくはプロテアソームまたはシャペロン複合体であることを特徴とする請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
タンパク質シェルは、同一のタンパク質シェル断片から構成されるか、互いに異なるタンパク質シェル断片から構成されることを特徴とする請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
タンパク質シェル断片が、アデノビリダエ、アレナビリダエ、アルテリウィルス、アストロビリダエ、バシロビリダエ、バキュロビリダエ、バトナウィルス、バリナビリダエ、ビルナビリダエ、ブロモビリダエ、ブンヤビリダエ、カリシビリダエ、カプリビリダエ、カルラウィルス、カウリモウィルス、シルコビリダエ、クロステロウィルス、コモビリダエ、コロナビリダエ、コルチコビリダエ、シストビリダエ、ディアントウィルス、エマノウィルス、フィロビリダエ、フラビビリダエ、フロウィルス、フセロビリダエ、ゲニミビリダエ、グッタビリダエ、ヘパドナビリダエ、ヘルペスビリダエ、ホルデイウィルス、ヒピビリダエ、イダエノウィルス、イノビリダエ、イリドビリダエ、レビビリダエ、リポスリックスビリダエ、ルテオウィルス、マクロモウィルス、マラフィウィルス、ミクロビリダエ、ミオビリダエ、ネクロウィルス、ノダビリダエ、オルトミクソビリダエ、パポバビリダエ、パラミクソビリダエ、パルティティビリダエ、パルコビリダエ、フィコドナビリダエ、ピコルナビリダエ、プラスマビリダエ、ポドビリダエ、ポリドナビリダエ、ポテックスウィルス、ポティビリダエ、ポックスビリダエ、レオビリダエ、レトロビリダエ、ラブドビリダエ、リジディオウィルス、セキビリダエ、シホビリダエ、ソベモウィルス、テクチビリダエ、テヌイウィルス、テトラビリダエ、トバモウィルス、トブラウィルス、トガビリダエ、トムブスビリダエ、トチビリダエ、トリコウィルス、ティモウィルス、またはウンブラウィルスであるウィルスまたはファージのキャプソマーであるか、もしくは前記ウィルスおよびファージの修正キャプソマーであることを特徴とする請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
タンパク質シェル断片は、請求項６または８のキャプシドまたは会合体のモノマーサブユニットまたはサブユニットのダイマーまたはオリゴマーであることを特徴とする請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
第１領域のタンパク質シェル断片は、該第１領域が基質に対して改良された結合親和性を有するように修飾され、任意選択で前記第２領域が分子性物質に対して改良された結合親和性を示すように修飾されることを特徴とする請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
第１領域がタンパク質シェル断片のＣ末端部分にあると共に第２領域がＮ末端部分にあるか、第１領域がＮ末端部分にあると共に第２領域がＮ末端領域にあるか、第１および第２領域はタンパク質シェル断片の他の部分、好ましくはループ領域、に存在することを特徴とする請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
基質へのタンパク質シェル断片の第１領域での結合が可逆的であることを特徴とする請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
第１領域を介して基質に対するタンパク質シェル断片の不可逆的な結合が起こり、また、タンパク質シェル断片の第２領域に分子性物質が結合した後、タンパク質シェル断片の第２領域を含むタンパク質シェル断片の一部だけが分離され、その領域が他のタンパク質シェル断片と共にタンパク質シェルへと組み立てられることを特徴とする請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
タンパク質シェル断片にさらに（第３の領域で）標識が付与され、および／または分子性物質に標識が付与されることを特徴とする請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
タンパク質シェル断片および／または分子性物質の標識に、蛍光または放射性分子、特異的結合ペプチドセグメント、ビオチン化または別のタイプの標識が使用されることを特徴とする請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
キチン基質、セファロース基質、デキストラン基質またはジエチルアミノエチル基質が基質として使用されることを特徴とする請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
基質が固体またはゲルの形式であることを特徴とする請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
第１領域の修飾が、基質結合ドメインと組み合わせたインテインドメインの挿入により、特定のビオチン化により、または結合を媒介する分子の付着により起こり、かつ／または、第２領域の修飾が、パッケージすべき分子性物質に対して高い親和性を有するペプチドまたはタンパク質との融合により起こることを特徴とする請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
タンパク質シェル中に封入される分子性物質、すなわち一本鎖または二本鎖ＤＮＡ、一本鎖または二本鎖ＲＮＡ、ペプチド、ペプチドホルモン、タンパク質、タンパク質ドメイン、糖タンパク質、リボザイム、ＰＮＡ（ペプチド核酸）、薬剤物質、ヌクレオチド、ホルモン、脂質または炭水化物、もしくはこれらの物質の１又は複数の組み合わせが、タンパク質シェル断片に結合され、分子性物質と結び付けられた該タンパク質シェル断片を、少なくとも部分的に基質から取り外すことができることを特徴とする、組み立て可能なタンパク質シェル断片が結合した基質。
【請求項２０】
前記タンパク質シェル断片がさらなるタンパク質シェル断片と連結していることを特徴とする請求項１９に記載の基質。