【手続補正書】
【提出日】平成16年12月21日(2004.12.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＴＳＥを検出する方法であって、（ａ）試験被験体からの組織、血液、または血液派生物のサンプルを、アルコールおよび洗浄剤で処理する工程、（ｂ）正常なプリオンタンパク質を分解する薬剤を添加する工程、（ｃ）異常なプリオンタンパク質を変性する薬剤を添加する工程、（ｄ）プリオン特異的抗体を添加する工程、ならびに（ｅ）サンプルに対する抗体の結合を検出する工程を包含する、方法。
【請求項２】
異常なプリオンタンパク質を基質に固定する方法であって、（ａ）前記異常なプリオンタンパク質、または前記異常なプリオンタンパク質を含むことが疑われるサンプルを、アルコールおよび洗浄剤で処理する工程、ならびに（ｂ）その基質の存在下で、プロテアーゼを添加する工程を包含する、方法。
【請求項３】
請求項１または２に記載の方法であって、ここで工程（ａ）がさらにタンパク質を添加することを包含する、方法。
【請求項４】
請求項３に記載の方法であって、前記タンパク質が高分子量タンパク質、またはそれらの誘導体から選択される、方法。
【請求項５】
請求項３または４に記載の方法であって、前記タンパク質が５％以下のタンパク質を含有する緩衝液中に処方される、方法。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれかに記載の方法であって、ここで工程（ａ）において使用されるアルコールが、Ｃ1〜Ｃ24のアルコールである、方法。
【請求項７】
請求項６に記載の方法であって、前記アルコールが、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ペンタノール、ヘキサノール、ヘプタノール、オクタノール、ノナノール、デカノール、ウンデカノール、ドデカノール、トリデカノール、ペンタデカノール、セチルアルコール、ヘプタデカノール、ステアリルアルコール、ノナデカノール、エイコサノール、ドカサノール、ドデシルアルコール、ラウリルアルコール、オクタデカノール、および一次、二次、および三次誘導体を含む、それぞれの誘導体から選択される、アルコールである、方法。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれかに記載の方法であって、前記アルコールが３０％（重量基準）以下のアルコールを含有する緩衝液中に処方される、方法。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれかに記載の方法であって、ここで工程（ａ）のアニオン性洗浄剤が、ドデシル硫酸ナトリウム、サルコシル、ドデシル硫酸リチウム、コール酸、デオキシコール酸、Ｔｒｉｔｏｎ  Ｘ-１００、オクタン酸、ポリオキシエチレンラウリルエーテルの３０％水溶液、Ｎ−セチル-Ｎ，Ｎ，Ｎ-トリメチル臭化アンモニウム、ＣＨＡＰＳ、ＣＨＡＰＳＯ、ジギトニン、ノナノイル-Ｎ-メチルグルクアミド、ｎ−オクチル-Ｂ-Ｄ-グルコピラノシド、アルキル硫酸ナトリウム、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム、オレイン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、１，２，３-オクタントリオール，３-ジメチルアミノ-１プロピン、コンドロイチナーゼＡＢＣ、ナトリウムＩｎｏｐｈｏｒｅ  １、およびそれぞれの誘導体から選択される、方法。
【請求項１０】
請求項１〜９のいずれかに記載の方法であって、前記洗浄剤が５〜３０％の洗浄剤を含有する緩衝液中に処方される、方法。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれかに記載の方法であって、ここで工程（ｂ）において、正常なプリオンタンパク質を分解する薬剤がプロテアーゼである、方法。
【請求項１２】
請求項１１に記載の方法であって、前記プロテアーゼが広い範囲のプロテアーゼから選択される、方法。
【請求項１３】
請求項１１に記載の方法であって、前記プロテアーゼが１０ｍｇ／ｍｌ以下のタンパク質を含有する緩衝液中に処方される、方法。
【請求項１４】
請求項１〜１３のいずれかに記載の方法であって、ここで工程（ｃ）において異常なプリオンタンパク質を変性する薬剤が、変性化塩溶液である、方法。
【請求項１５】
請求項１４に記載の方法であって、前記薬剤がグアニジン、尿素、カオトロピックな薬剤の標準変性化溶液、およびそれぞれの誘導体から選択される、方法。
【請求項１６】
請求項１〜１５のいずれかに記載の方法であって、前記変性化薬剤がさらに０．５Ｍ以下の水酸化ナトリウムを含む、方法。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれかに記載の方法であって、前記変性化塩が０．１〜１０Ｍの変性化塩を含有する緩衝液中に処方される、方法。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれかに記載の方法であって、ここで工程（ａ）の緩衝液（ホモジナイズ緩衝液）が、５．０〜１１．０の最終ｐＨを有するように作製される、方法。
【請求項１９】
請求項１〜１８のいずれかに記載の方法であって、ここで工程（ｂ）の緩衝液（特異的緩衝液）が、２．０〜１１．０の最終ｐＨに作製される、方法。
【請求項２０】
請求項１〜１９のいずれかに記載の方法であって、ここで工程（ｃ）の緩衝液（アッセイ誘発緩衝液）が、１〜１４のｐＨを有する、方法。
【請求項２１】
請求項１〜２０のいずれかに記載の方法であって、ここで工程（ｂ）に続いて、反応混合物が、１０％以下の緩衝化溶液を含有する第１の洗浄緩衝液で洗浄される、方法。
【請求項２２】
請求項１〜２１のいずれかに記載の方法であって、前記アッセイ誘発緩衝液が、約５〜３０分間、反応混合物とともにインキュベートすることを許容される、方法。
【請求項２３】
請求項１〜２２のいずれかに記載の方法であって、ここでアッセイ誘発緩衝液での処理後に、５．０〜１１．０の最終ｐＨを有する第２の緩衝液で、混合物が洗浄される、方法。
【請求項２４】
請求項２１に記載の方法であって、前記第１の洗浄緩衝液が、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、塩化亜鉛を含む、方法。
【請求項２５】
請求項２３に記載の方法であって、前記第２の洗浄緩衝液が、０〜５％のＴｗｅｅｎ  ２０の選択的な添加を伴なう、リン酸緩衝化生理食塩水を含む、方法。
【請求項２６】
請求項１〜２５のいずれかに記載の方法であって、前記血液または組織サンプルが支持体上に懸濁される、方法。
【請求項２７】
請求項１〜２６のいずれかに記載の方法であって、ここでプリオン特異的抗体が、プリオン配列のアミノ酸番号６０の５'側にあるプリオン配列に対して反応する、方法。
【請求項２８】
請求項１〜２７のいずれかに記載の試験方法であって、試験被験体から血液、または血液派生物、または組織のサンプルを得る工程、組織、血液、または血液派生物のサンプルと、プリオン特異的抗体とを反応する工程、および標準的な免疫アッセイによってサンプルに対する抗体の結合を検出する工程を包含し、前記抗体を添加する前に、組織、血液、または血液派生物のサンプルが、約０．１Ｍ（ＴＲＩＳ/ＨＣＬ）またはリン酸緩衝液、最終ｐＨ７．０〜９．０を有する緩衝液中の用量に対して作製される、０〜３０％のＣ1〜Ｃ5アルコール、５〜３０％のドデシル硫酸ナトリウム、または５〜３０％のドデシル硫酸ナトリウムおよび０〜５％サルコシル、ならびに０〜５％ウシ血清アルブミンを含有する第１の緩衝液とともに混合される、試験方法。
【請求項２９】
伝達性海綿状脳症のための試験方法であって、試験被験体からの血液、または血液派生物、または組織のサンプルを得る工程、組織、血液、または血液派生物サンプルと、プリオン特異的抗体とを反応する工程、ならびに標準的なイムノアッセイによってサンプルに対する抗体の結合を検出する工程を包含し、血液または組織サンプルは、不活性な支持体上に分注され、そして抗体との反応の前に、２．０〜１１．０の最終ｐＨを伴う緩衝液中に１０ｍｇ／ｍｌ以下の広い範囲のプロテアーゼ酵素を含有する緩衝液とともにインキュベートされる、試験方法。
【請求項３０】
伝達性海綿状脳症のための試験方法であって、試験被験体から血液、血液派生物、または組織のサンプルを得る工程、組織、血液、または血液派生物のサンプルと、プリオン特異的抗体とを反応する工程、および標準的なイムノアッセイによってサンプルに対する抗体の結合を検出する工程を包含し、サンプルは、抗体との反応の前に、室温にて、少なくともｐＨ１１で、逆浸透圧蒸留水中で作製される、０．１〜１０Ｍ変性化溶液、または２〜８Ｍ尿素、および０．５Ｍ以下の水酸化ナトリウムを含有する緩衝液とともにインキュベートされる、試験方法。
【請求項３１】
（１）５．０〜１１．０の最終ｐＨを有する緩衝液中の容量に対して作製される、０〜３０％のＣ1〜Ｃ24アルコール、５〜３０％洗浄剤、および０〜５％プロテイナーゼ；
（２）２．０〜１１．０の最終ｐＨを有する緩衝液中の０．０５ｍｇ／ｍｌ〜４ｍｇ／ｍｌのプロテアーゼ酵素；
（３）０．１〜１０Ｍ変性化溶液
から選択される緩衝液。