【手続補正書】
【提出日】平成16年12月17日(2004.12.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）疎水性標的タンパク質とリガンド分子との少なくとも１個の複合体の形成が促進されるように、両親媒性物質が結合している疎水性標的タンパク質を多数の分子に曝すことによるアフィニティ選択によってリガンド分子を選択する工程と、
（ｂ）該複合体を非結合分子から分離する工程と、
（ｃ）リガンド分子を同定する工程と
からなる疎水性タンパク質のリガンドを同定する方法。
【請求項２】
前記疎水性標的タンパク質を多数の分子に曝すことが、均一溶液相の条件下で行われる請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記疎水性標的タンパク質を多数の分子に曝すことが、不均一溶液相の条件下で行われる請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記リガンド分子の選択が、多次元クロマトグラフィを使用して行われる請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記疎水性標的タンパク質が、
（ａ）膜タンパク質と、
（ｂ）内在性膜タンパク質と
（ｃ）膜貫通タンパク質と、
（ｄ）モノトピック型膜タンパク質と、
（ｅ）ポリトピック型膜タンパク質と、
（ｆ）ポンプ・タンパク質と、
（ｇ）チャネル・タンパク質と、
（ｈ）受容体キナーゼタンパク質と、
（ｉ）Ｇタンパク質共役受容体タンパク質と、
（ｊ）膜結合酵素と、
（ｋ）輸送体タンパク質と
からなる群から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記多数の分子はマスコードされた分子ライブラリである請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記多数の分子はマスコードされていない分子ライブラリである請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記両親媒性物質が、
（ａ）極性脂質と、
（ｂ）両親媒性高分子ポリマーと、
（ｃ）表面活性物質または界面活性剤と、
（ｄ）両親媒性ポリペプチドと
からなる群から選択される請求項１に記載の方法。
【請求項９】
リガンド分子の同定が、質量スペクトル分析によって行われる請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記リガンド分子のデコンボリューションが質量スペクトル分析によって行われる請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記複合体の前記非結合分子からの分離が、固相クロマトグラフィ媒体により行われる請求項１に記載の方法。
【請求項１２】
前記疎水性標的タンパク質が、
（ａ）少なくとも１つの膜貫通ドメイン配列と、
（ｂ）アフィニティ選択に有用な少なくとも２つのタグ配列と、
（ｃ）疎水性タンパク質（ＨＰ）配列と
からなる請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記疎水性タンパク質配列が、
（ａ）膜タンパク質と、
（ｂ）内在性膜タンパク質と、
（ｃ）膜貫通タンパク質と、
（ｄ）モノトピック型膜タンパク質と、
（ｅ）ポリトピック型膜タンパク質と、
（ｆ）ポンプ・タンパク質と、
（ｇ）チャネル・タンパク質と、
（ｈ）受容体キナーゼタンパク質と、
（ｉ）Ｇタンパク質共役受容体タンパク質と、
（ｊ）膜結合酵素と、
（ｋ）輸送体タンパク質と
からなる群から選択される請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記タグ配列が、
（ａ）ＦＬＡＧタグ（ＮＨ２−ＤＹＫＤＤＤＤＫ−ＣＯＯＨ）（配列番号２９）と、
（ｂ）ＥＥタグ（ＮＨ２−ＥＥＥＥＹＭＰＭＥ−ＣＯＯＨ）（配列番号３０）と、
（ｃ）ヘマグルチニン・タグ（ＮＨ２−ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ−ＣＯＯＨ）（配列番号３１）と、
（ｄ）ｍｙｃタグ（ＮＨ２−ＫＨＫＬＥＱＬＲＮＳＧＡ−ＣＯＯＨ）（配列番号３２）と、
（ｅ）ＨＳＶタグ（ＮＨ２−ＱＰＥＬＡＰＥＤＰＥＤ−ＣＯＯＨ）（配列番号３３）と
からなる群から選択されるエピトープ・タグ配列を含む請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記疎水性標的タンパク質が、
（ａ）タグ１−タグ２−ＨＰと、
（ｂ）タグ１−ＨＰ−タグ２と、
（ｃ）ＨＰ−タグ１−タグ２と
からなる群から選択された順序でアミノ末端からカルボキシ末端まで並ぶ配列を含む請求項１２に記載の方法。
【請求項１６】
前記疎水性標的タンパク質が、
（ａ）Ｍｙｃタグ−ＥＥタグ−ヒトｍ２  ｍＡＣｈＲ（配列番号７）と、
（ｂ）Ｆｌａｇタグ−ヒトβ２アドレナリン受容体−ＥＥタグ（配列番号８）と、
（ｃ）ヒトニューロキニン３受容体−ＨＳＶタグ−Ｍｙｃタグ（配列番号９）と、
（ｄ）Ｆｌａｇタグ−ヒトｍ１  ｍＡＣｈＲ−ＥＥタグ（配列番号１０）と、
（ｅ）ラットｍ３  ｍＡＣｈＲ−ＨＳＶタグ−８Ｈｉｓタグ（配列番号１１）と
からなる群から選択される請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記疎水性標的タンパク質が、アミノ末端に異種シグナル配列（ＳＳ）をさらに含む請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記異種シグナル配列が、
（ａ）メリチン・シグナル配列ＮＨ２−ＫＦＬＶＮＶＡＬＶＦＭＶＶＹＩＳＹＩＹＡ−ＣＯＯＨ（配列番号１２）と、
（ｂ）ＧＰシグナル配列ＮＨ２−ＶＲＴＡＶＬＩＬＬＬＶＲＦＳＥＰ−ＣＯＯＨ（配列番号１３）と、
（ｃ）ヘマグルチニン・シグナル配列ＮＨ２−ＫＴＩＩＡＬＳＹＩＦＣＬＶＦＡ−ＣＯＯＨ（配列番号１４）と、
（ｄ）ロドプシン・タグ１シグナル配列ＮＨ２−ＭＮＧＴＥＧＰＮＦＹＶＰＦＳＮＫＴＧＶＶＲＳＰＦＥＡＰＱＹＹＬＡＥＰ−ＣＯＯＨ（配列番号１５）と、
（ｅ）ロドプシン・タグＩＤ４シグナル配列ＮＨ２−ＧＫＮＰＬＧＶＲＫＴＥＴＳＱＶＡＰＡ−ＣＯＯＨ（配列番号１６）と
からなる群から選択される請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記タグ配列が、ヘキサヒスチジン配列（配列番号１７）とデカヒスチジン配列（配列番号１８）とをさらに含む請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記疎水性標的タンパク質が、
（ａ）ＧＰ６７  ＳＳ−Ｍｙｃタグ−ＥＥタグ−ヒトｍ２  ｍＡＣｈＲ（配列番号１９）と、
（ｂ）メリチンＳＳ−Ｆｌａｇタグ−ヒトβ２アドレナリン受容体−ＥＥタグ（配列番号２０）と、
（ｃ）ヘマグルチニンＳＳ−ヒトニューロキニン３受容体−ＨＳＶタグ−Ｍｙｃタグ（配列番号２１）と、
（ｄ）メリチンＳＳ−Ｆｌａｇタグ−ヒトｍ１  ｍＡＣｈＲ−ＥＥタグ（配列番号２２）と、
（ｅ）ヘマグルチニンＳＳ−ラットｍ３  ｍＡＣｈＲ−ＨＳＶタグ−８Ｈｉｓタグ（配列番号２３）と
からなる群から選択される請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
（ａ）疎水性タンパク質をショ糖勾配超遠心法によって精製する工程と、
（ｂ）該疎水性タンパク質を抗体アフィニティ精製によって精製する工程と、
（ｃ）該疎水性タンパク質を固定化金属アフィニティ・クロマトグラフィによって精製する工程と
からなる、疎水性タンパク質を単離する方法。
【請求項２２】
前記疎水性タンパク質が、
（ａ）少なくとも１つの膜貫通ドメイン配列と、
（ｂ）アフィニティ選択に有用な少なくとも２つのタグ配列と、
（ｃ）疎水性タンパク質（ＨＰ）配列と
からなる請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記疎水性タンパク質配列が、
（ａ）膜タンパク質と、
（ｂ）内在性膜タンパク質と、
（ｃ）膜貫通タンパク質と、
（ｄ）モノトピック型膜タンパク質と、
（ｅ）ポリトピック型膜タンパク質と、
（ｆ）ポンプ・タンパク質と、
（ｇ）チャネル・タンパク質と、
（ｈ）受容体キナーゼタンパク質と、
（ｉ）Ｇタンパク質共役受容体タンパク質と、
（ｊ）膜結合酵素と、
（ｋ）輸送体タンパク質と
からなる群から選択される請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記タグ配列が、
（ａ）ＦＬＡＧタグ（ＮＨ２−ＤＹＫＤＤＤＤＫ−ＣＯＯＨ）（配列番号２９）と、
（ｂ）ＥＥタグ（ＮＨ２−ＥＥＥＥＹＭＰＭＥ−ＣＯＯＨ）（配列番号３０）と、
（ｃ）ヘマグルチニン・タグ（ＮＨ２−ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ−ＣＯＯＨ）（配列番号３１）と、
（ｄ）ｍｙｃタグ（ＮＨ２−ＫＨＫＬＥＱＬＲＮＳＧＡ−ＣＯＯＨ）（配列番号３２）と、
（ｅ）ＨＳＶタグ（ＮＨ２−ＱＰＥＬＡＰＥＤＰＥＤ−ＣＯＯＨ）（配列番号３３）と
からなる群から選択されるエピトープ・タグ配列を含む請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
前記疎水性タンパク質が、
（ａ）タグ１−タグ２−ＨＰと、
（ｂ）タグ１−ＨＰ−タグ２と、
（ｃ）ＨＰ−タグ１−タグ２と
からなる群から選択された順序でアミノ末端からカルボキシ末端まで並ぶ配列を含む請求項２２に記載の方法。
【請求項２６】
前記疎水性タンパク質が、
（ａ）Ｍｙｃタグ−ＥＥタグ−ヒトｍ２  ｍＡＣｈＲ（配列番号７）と、
（ｂ）Ｆｌａｇタグ−ヒトβ２アドレナリン受容体−ＥＥタグ（配列番号８）と、
（ｃ）ヒトニューロキニン３受容体−ＨＳＶタグ−Ｍｙｃタグ（配列番号９）と、
（ｄ）Ｆｌａｇタグ−ヒトｍ１  ｍＡＣｈＲ−ＥＥタグ（配列番号１０）と、
（ｅ）ラットｍ３  ｍＡＣｈＲ−ＨＳＶタグ−８Ｈｉｓタグ（配列番号１１）と
からなる群から選択される請求項２２に記載の方法。
【請求項２７】
前記疎水性タンパク質が、アミノ末端に異種シグナル配列（ＳＳ）をさらに含む請求項
２２に記載の方法。
【請求項２８】
前記異種シグナル配列が、
（ａ）メリチン・シグナル配列ＮＨ２−ＫＦＬＶＮＶＡＬＶＦＭＶＶＹＩＳＹＩＹＡ−ＣＯＯＨ（配列番号１２）と、
（ｂ）ＧＰシグナル配列ＮＨ２−ＶＲＴＡＶＬＩＬＬＬＶＲＦＳＥＰ−ＣＯＯＨ（配列番号１３）と、
（ｃ）ヘマグルチニン・シグナル配列ＮＨ２−ＫＴＩＩＡＬＳＹＩＦＣＬＶＦＡ−ＣＯＯＨ（配列番号１４）と、
（ｄ）ロドプシン・タグ１シグナル配列ＮＨ２−ＭＮＧＴＥＧＰＮＦＹＶＰＦＳＮＫＴＧＶＶＲＳＰＦＥＡＰＱＹＹＬＡＥＰ−ＣＯＯＨ（配列番号１５）と、
（ｅ）ロドプシン・タグＩＤ４シグナル配列ＮＨ２−ＧＫＮＰＬＧＶＲＫＴＥＴＳＱＶＡＰＡ−ＣＯＯＨ（配列番号１６）と
からなる群から選択される請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記タグ配列が、ヘキサヒスチジン配列（配列番号１７）とデカヒスチジン配列（配列番号１８）とをさらに含む請求項２２に記載の方法。
【請求項３０】
前記疎水性標的タンパク質が、
（ａ）ＧＰ６７  ＳＳ−Ｍｙｃタグ−ＥＥタグ−ヒトｍ２  ｍＡＣｈＲ（配列番号１９）と、
（ｂ）メリチンＳＳ−Ｆｌａｇタグ−ヒトβ２アドレナリン受容体−ＥＥタグ（配列番号２０）と、
（ｃ）ヘマグルチニンＳＳ−ヒトニューロキニン３受容体−ＨＳＶタグ−Ｍｙｃタグ（配列番号２１）と、
（ｄ）メリチンＳＳ−Ｆｌａｇタグ−ヒトｍ１  ｍＡＣｈＲ−ＥＥタグ（配列番号２２）と、
（ｅ）ヘマグルチニンＳＳ−ラットｍ３  ｍＡＣｈＲ−ＨＳＶタグ−８Ｈｉｓタグ（配列番号２３）と
からなる群から選択される請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
（ａ）真核細胞におけるタンパク質発現用のベクター・ポリヌクレオチド配列と、
（ｂ）下記の要素、すなわち
（ｉ）Ｎ末端メチオニン残基、
（ｉｉ）異種シグナル配列（ＳＳ）、
（ｉｉｉ）少なくとも１つの膜貫通ドメイン配列、
（ｉｖ）アフィニティ選択に有用な少なくとも２つのタグ配列、および
（ｖ）疎水性タンパク質（ＨＰ）配列
からなる人工的に改変された疎水性タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列と
を含む疎水性タンパク質の発現に適した単離核酸分子。
【請求項３２】
前記Ｎ末端メチオニン配列および前記異種シグナル配列が、
（ａ）ＭＫＦＬＶＮＶＡＬＶＦＭＶＶＹＩＳＹＩＹＡ（配列番号２４）と、
（ｂ）ＭＶＲＴＡＶＬＩＬＬＬＶＲＦＳＥＰ（配列番号２５）と、
（ｃ）ＭＫＴＩＩＡＬＳＹＩＦＣＬＶＦＡ（配列番号２６）と、
（ｄ）ＭＭＮＧＴＥＧＰＮＦＹＶＰＦＳＮＫＴＧＶＶＲＳＰＦＥＡＰＱＹＹＬＡＥＰ−ＣＯＯＨ（配列番号２７）と、
（ｅ）ＭＧＫＮＰＬＧＶＲＫＴＥＴＳＱＶＡＰＡ−ＣＯＯＨ（配列番号２８）と
からなる群から選択される請求項３１に記載の単離核酸分子。
【請求項３３】
前記タグ配列が、
（ａ）ＦＬＡＧタグ（ＮＨ２−ＤＹＫＤＤＤＤＫ−ＣＯＯＨ）（配列番号１）と、
（ｂ）ＥＥタグ（ＮＨ２−ＥＥＥＥＹＭＰＭＥ−ＣＯＯＨ）（配列番号２）と、
（ｃ）ヘマグルチニン・タグ（ＮＨ２−ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ−ＣＯＯＨ）（配列番号３）と、
（ｄ）ｍｙｃタグ（ＮＨ２−ＫＨＫＬＥＱＬＲＮＳＧＡ−ＣＯＯＨ）（配列番号４）と、
（ｅ）ＨＳＶタグ（ＮＨ２−ＱＰＥＬＡＰＥＤＰＥＤ−ＣＯＯＨ）（配列番号５）と
からなる群から選択されたエピトープ・タグ配列からなる請求項３１に記載の単離核酸分子。
【請求項３４】
前記人工的に改変された疎水性タンパク質の前記要素が、
（ａ）ＳＳ−タグ１−タグ２−ＨＰと、
（ｂ）ＳＳ−タグ１−ＨＰ−タグ２と、
（ｃ）ＳＳ−ＨＰ−タグ１−タグ２と
からなる群から選択された順序でアミノ末端からカルボキシ末端まで配列される請求項３３に記載の単離核酸分子。
【請求項３５】
前記タグ配列がヘキサヒスチジン配列（配列番号１７）とデカヒスチジン配列（配列番号１８）とをさらに含む請求項３４に記載の単離核酸分子。
【請求項３６】
前記人工的に改変された疎水性タンパク質が、
（ａ）ＧＰ６７−Ｍｙｃ−ＥＥ−ヒトｍ２  ｍＡＣｈＲ（配列番号１９）と、
（ｂ）メリチン−Ｆｌａｇタグ−ヒトｍ１  ｍＡＣｈＲ−ＥＥ（配列番号２０）と
からなる群から選択される請求項３５に記載の単離核酸分子。
【請求項３７】
（ａ）（ｉ）膜タンパク質、
（ｉｉ）内在性膜タンパク質、
（ｉｉｉ）膜貫通タンパク質、
（ｉｖ）モノトピック型膜タンパク質、
（ｖ）ポリトピック型膜タンパク質、
（ｖｉ）ポンプ・タンパク質、
（ｖｉｉ）チャネル・タンパク質、
（ｖｉｉｉ）受容体キナーゼタンパク質、
（ｉｘ）Ｇタンパク質共役受容体タンパク質、
（ｘ）膜結合酵素、および
（ｘｉ）輸送体タンパク質
からなる群から疎水性標的タンパク質を選択する工程と、
（ｘｉｉ）該疎水性タンパク質に両親媒性物質が結合していることと、
（ｂ）（ｉ）極性脂質、
（ｉｉ）両親媒性高分子ポリマー、
（ｉｉｉ）表面活性物質または界面活性剤、および
（ｉｖ）両親媒性ポリペプチド
からなる群から該疎水性タンパク質に結合する両親媒性物質を選択する工程と、
（ｃ）該疎水性標的タンパク質と該リガンド分子との少なくとも１つの複合体の形成が促進されるように、均一溶液相の条件下、両親媒性物質が結合している該疎水性標的タンパク質をマスコード・ライブラリ由来の多数の分子に曝すことによるアフィニティ選択により、多次元クロマトグラフィを使用してリガンド分子を選択する工程と、
（ｄ）該複合体を非結合分子から分離する工程と、
（ｅ）質量スペクトル分析によって該リガンド分子を同定する工程と
からなる、疎水性タンパク質のリガンドを同定する方法。
【請求項３８】
（ａ）（ｉ）膜タンパク質、
（ｉｉ）内在性膜タンパク質、
（ｉｉｉ）膜貫通タンパク質、
（ｉｖ）モノトピック型膜タンパク質、
（ｖ）ポリトピック型膜タンパク質、
（ｖｉ）ポンプ・タンパク質、
（ｖｉｉ）チャネル・タンパク質、
（ｖｉｉｉ）受容体キナーゼタンパク質、
（ｉｘ）Ｇタンパク質共役受容体タンパク質、
（ｘ）膜結合酵素、および
（ｘｉ）輸送体タンパク質
からなる群から疎水性標的タンパク質を選択する工程と、
（ｘｉｉ）該疎水性タンパク質に両親媒性物質が結合していることと、
（ｂ）（ｉ）極性脂質、
（ｉｉ）両親媒性高分子ポリマー、
（ｉｉｉ）表面活性物質または界面活性剤、および
（ｉｖ）両親媒性ポリペプチド
からなる群から該疎水性タンパク質に結合する両親媒性物質を選択する工程と、
（ｃ）疎水性標的タンパク質とリガンド分子との少なくとも１つの複合体の形成が促進されるように、不均一溶液相の条件下、両親媒性物質が結合している疎水性標的タンパク質をマスコードされていないライブラリ由来の多数の分子に曝すことによるアフィニティ選択により、多次元クロマトグラフィを使用してリガンド分子を選択する工程と、
（ｄ）複合体を非結合分子から分離する工程と、
（ｅ）質量スペクトル分析によって該リガンド分子を同定する工程と
からなる、疎水性タンパク質のリガンドを同定する方法。
【請求項３９】
（ａ）（ｉ）少なくとも１つの膜貫通ドメイン配列、
（ｉｉ）（１）ＦＬＡＧタグ（ＮＨ２−ＤＹＫＤＤＤＤＫ−ＣＯＯＨ）（配列番号２９）、
（２）ＥＥタグ（ＮＨ２−ＥＥＥＥＹＭＰＭＥ−ＣＯＯＨ）（配列番号３０）、
（３）ヘマグルチニン・タグ（ＮＨ２−ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ−ＣＯＯＨ）（配列番号３１）、
（４）ｍｙｃタグ（ＮＨ２−ＫＨＫＬＥＱＬＲＮＳＧＡ−ＣＯＯＨ）（配列番号３２）、および
（５）ＨＳＶタグ（ＮＨ２−ＱＰＥＬＡＰＥＤＰＥＤ−ＣＯＯＨ）（配列番号３３）
からなる群から選択されるアフィニティ選択に有用な少なくとも２つのタグ配列、
（ｉｉｉ）（１）膜タンパク質、
（２）内在性膜タンパク質、
（３）膜貫通タンパク質、
（４）モノトピック型膜タンパク質、
（５）ポリトピック型膜タンパク質、
（６）ポンプ・タンパク質、
（７）チャネル・タンパク質、
（８）受容体キナーゼタンパク質、
（９）Ｇタンパク質共役受容体タンパク質、
（１０）膜結合酵素、および
（１１）輸送体タンパク質
からなる群から選択される疎水性タンパク質（ＨＰ）配列
からなる疎水性タンパク質を選択する工程と、
（ｂ）該疎水性タンパク質をショ糖勾配超遠心法によって精製する工程と、
（ｃ）該疎水性タンパク質を抗体アフィニティ精製によって精製する工程と、
（ｄ）該疎水性タンパク質を固定化金属アフィニティ・クロマトグラフィによって精製する工程と
からなる疎水性タンパク質を単離する方法。
【請求項４０】
（ａ）真核細胞におけるタンパク質発現用のベクター・ポリヌクレオチド配列と、
（ｂ）下記の要素、すなわち
（ｉ）Ｎ末端メチオニン残基、
（ｉｉ）該Ｎ末端メチオニン配列および異種シグナル配列が、
（１）ＭＫＦＬＶＮＶＡＬＶＦＭＶＶＹＩＳＹＩＹＡ（配列番号２４）、
（２）ＭＶＲＴＡＶＬＩＬＬＬＶＲＦＳＥＰ（配列番号２５）、
（３）ＭＫＴＩＩＡＬＳＹＩＦＣＬＶＦＡ（配列番号２６）、
（４）ＭＭＮＧＴＥＧＰＮＦＹＶＰＦＳＮＫＴＧＶＶＲＳＰＦＥＡＰＱＹＹＬＡＥＰ−ＣＯＯＨ（配列番号２７）、および
（５）ＭＧＫＮＰＬＧＶＲＫＴＥＴＳＱＶＡＰＡ−ＣＯＯＨ（配列番号２８）
からなる群から選択される異種シグナル配列（ＳＳ）、
（ｉｉｉ）少なくとも１つの膜貫通ドメイン配列、
（ｉｖ）（１）ＦＬＡＧタグ（ＮＨ２−ＤＹＫＤＤＤＤＫ−ＣＯＯＨ）（配列番号１）、
（２）ＥＥタグ（ＮＨ２−ＥＥＥＥＹＭＰＭＥ−ＣＯＯＨ）（配列番号２）、
（３）ヘマグルチニン・タグ（ＮＨ２−ＹＰＹＤＶＰＤＹＡ−ＣＯＯＨ）（配列番号３）、
（４）ｍｙｃタグ（ＮＨ２−ＫＨＫＬＥＱＬＲＮＳＧＡ−ＣＯＯＨ）（配列番号４）、および
（５）ＨＳＶタグ（ＮＨ２−ＱＰＥＬＡＰＥＤＰＥＤ−ＣＯＯＨ）（配列番号５）からなる群から選択されるアフィニティ選択に有用な少なくとも２つのタグ配列、
（ｖ）（１）膜タンパク質、
（２）内在性膜タンパク質
（３）膜貫通タンパク質、
（４）モノトピック型膜タンパク質、
（５）ポリトピック型膜タンパク質、
（６）ポンプ・タンパク質、
（７）チャネル・タンパク質、
（８）受容体キナーゼタンパク質、
（９）Ｇタンパク質共役受容体タンパク質、
（１０）膜結合酵素、および
（１１）輸送体タンパク質
からなる群から選択される疎水性タンパク質（ＨＰ）配列
を含む人工的に改変された疎水性タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列と
を含む、疎水性タンパク質の発現に適した単離核酸分子。