【手続補正書】
【提出日】平成16年7月13日(2004.7.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  標的組織において増大した活性を与えるメトキシホスホネートヌクレオチドアナログプロドラッグを同定するためのスクリーニング方法であって、該方法は、以下：
（ａ）少なくとも１つの該プロドラッグを提供する工程；
（ｂ）少なくとも１つの治療標的組織および少なくとも１つの非標的組織を選択する工程；
（ｃ）該プロドラッグを、該標的組織および該少なくとも１つの非標的組織に投与する工程；ならびに
（ｄ）工程（ｃ）において、該組織中の該プロドラッグによって与えられた相対活性を決定する工程、
を包含する、方法。
【請求項２】  前記活性が、抗ウイルス活性または抗腫瘍活性である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】  前記活性が、抗ウイルス活性である、請求項２に記載の方法。
【請求項４】  前記活性が、抗ＨＩＶ活性または抗ＨＢＶ活性である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】  前記プロドラッグが、ＰＭＰＡまたはＰＭＥＡのプロドラッグである、請求項１に記載の方法。
【請求項６】  前記プロドラッグが、ホスホノアミデート、ホスホノエステルまたは混合ホスホノアミデート／ホスホノエステルである、請求項５に記載の方法。
【請求項７】  前記アミデートが、アミノ酸アミデートである、請求項６に記載の方法。
【請求項８】  前記エステルが、アリールエステルである、請求項６に記載の方法。
【請求項９】  前記標的組織において、前記非標的組織の活性の１０倍より大きい相対活性を有するプロドラッグを選択する工程をさらに包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】  請求項１に記載の方法であって、前記標的組織および非標的組織が動物中に存在し、前記プロドラッグが該動物に投与され、そして前記相対活性が、該プロドラッグの投与後に、該動物の組織の分析によって決定される、方法。
【請求項１１】  請求項１に記載の方法であって、前記標的組織および非標的組織における活性が、組織中の前記プロドラッグの少なくとも１つの代謝産物の量をアッセイすることによって決定される、方法。
【請求項１２】  前記代謝産物が、親薬物である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１３】  前記代謝産物が、前記親薬物のジホスフェートである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】  前記標的組織がウイルス感染した組織であり、そして前記非標的組織が、ウイルス感染していない同じ組織である、請求項１に記載の方法。
【請求項１５】  前記標的組織がリンパ組織であり、そして前記活性が抗ＨＩＶ活性である、請求項１に記載の方法。
【請求項１６】  前記標的組織が肝臓であり、そして前記活性が抗ＨＢＶ活性である、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】  前記標的組織が血液学的であり、そして前記活性が抗腫瘍活性である、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】  前記標的組織が悪性であり、そして前記非標的組織が、悪性ではない同じ組織である、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】  以下の構造（１）を有する化合物、ならびにそのキラル富化組成物、その塩、それらの遊離塩基および溶媒和物であって：
【化１】
2004504402.tif 000001
ここで、Ｒａは、Ｈまたはメチルである、化合物。
【請求項２０】  以下の構造（２）を有する化合物、ならびにその富化されたジアステレオマー、塩、遊離塩基および溶媒和物：
【化２】
2004504402.tif 000002
【請求項２１】  以下の構造（３）を有するジアステレオマー富化化合物、ならびにそれらの塩、遊離塩基および溶媒和物であって：
【化３】
2004504402.tif 000003
該化合物は、実質的に以下のジアステレオマー（４）を含まず：
【化４】
2004504402.tif 000004
ここで、
Ｒ１は、インビボで加水分解可能なオキシエステル、またはヒドロキシルであり；
Ｂは、複素環塩基であり；
Ｒ２は、ヒドロキシル、またはアミノ酸の残基であり、該アミノ酸の残基は、該アミノ酸のアミノ基を介してＰ原子に結合され、そしてそれぞれが、必要に応じてエステル化された該アミノ酸のカルボキシ置換基を有し、
ただし、Ｒ１およびＲ２の両方が、ヒドロキシルではなく；
Ｅは、−ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２）２−、−ＣＨ２ＯＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＯＣＨ（ＣＨ２Ｆ）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＯＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＯＣＨ（ＣＨ＝ＣＨ２）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＯＣＨ（Ｃ≡ＣＨ）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＯＣＨ（ＣＨ２Ｎ３）ＣＨ２−、
【化５】
2004504402.tif 000005
−ＣＨ２ＯＣＨ（Ｒ６）ＯＣＨ（Ｒ６’）−、−ＣＨ２ＯＣＨ（Ｒ９）ＣＨ２Ｏ−、または−ＣＨ２ＯＣＨ（Ｒ８）Ｏ−であり、ここで右側の結合は、該複素環塩基に結合され；
点線は、任意の二重結合を表し；
Ｒ４およびＲ５は、独立して、水素、ヒドロキシ、ハロ、アミノ、またはアシルオキシ、アルキルオキシ、アルキルチオ、アルキルアミノおよびジアルキルアミノから選択される１〜５個の炭素原子を有する置換基であり；
Ｒ６およびＲ６’は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、またはＣ２〜Ｃ７アルカノイルであり；
Ｒ７は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであるか、または一緒になって−Ｏ−もしくは−ＣＨ２−を形成し；
Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、またはＣ１〜Ｃ６ハロアルキルであり；そして
Ｒ９は、Ｈ、ヒドロキシメチル、またはアシルオキシメチルである、
化合物。
【請求項２２】  以下の構造（５ａ）を有するジアステレオマー富化化合物、ならびにその塩、互変異性体、遊離塩基および溶媒和物であって：
【化６】
2004504402.tif 000006
該化合物は、実質的に以下のジアステレオマー（５ｂ）を含まず：
【化７】
2004504402.tif 000007
ここで、
Ｒ５は、メチルまたは水素であり；
Ｒ６は、独立して、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールまたはアリールアルキルであるか、Ｒ６は、独立して、アルキルアミノ、アルキルアミノアルキル、ジアルキルアミノアルキル、ジアルキルアミノ、ヒドロキシル、オキソ、ハロ、アミノ、アルキルチオ、アルコキシ、アルコキシアルキル、アリールオキシ、アリールオキシアルキル、アリールアルコキシ、アリールアルコキシアルキル、ハロアルキル、ニトロ、ニトロアルキル、アジド、アジドアルキル、アルキルアシル、アルキルアシルアルキル、カルボキシルまたはアルキルアシルアミノから選択される１〜３個の置換基で置換された、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールまたはアリールアルキルであり；
Ｒ７は、任意の天然に存在するアミノ酸または薬学的受容可能なアミノ酸の側鎖であり、該側鎖がカルボキシルを含む場合、該カルボキシル基は、アルキル基またはアリール基で必要に応じてエステル化され；
Ｒ１１は、アミノ、アルキルアミノ、オキソまたはジアルキルアミノであり；そして
Ｒ１２は、アミノまたはＨである、
化合物。
【請求項２３】  以下の構造（６）の化合物、ならびにその塩および溶媒和物：
【化８】
2004504402.tif 000008
【請求項２４】  以下の構造（７）の化合物：
【化９】
2004504402.tif 000009
【請求項２５】  請求項１９〜２４、３４および３５のいずれか１項に記載の化合物および薬学的に有効な賦形剤を含む、組成物。
【請求項２６】  前記賦形剤がゲルである、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】  局所投与に適切である、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２８】  抗ウイルス治療または予防のための方法であって、該方法は、請求項１９〜２４、３４および３５のいずれか１項に記載の化合物を、治療的または薬学的に有効な量で、このような治療または予防を必要とする被験体に投与する工程を包含する、方法。
【請求項２９】  マグネシウムアルコキシドを使用するための方法であって、該方法は、９−（２−ヒドロキシプロピル）アデニン（ＨＰＡ）または９−（２−ヒドロキシエチル）アデニン（ＨＥＡ）、マグネシウムアルコキシド、および保護したｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネートを反応させる工程を包含する、方法。
【請求項３０】  ＰＭＰＡまたはＰＭＥＡをそれぞれ回収する工程をさらに包含する、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】  前記ｐ−トルエンスルホニルオキシメチルホスホネートのホスホネートが、エチルエステルによって保護される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】  前記アルコキシドが、Ｃ１〜Ｃ６アルコキシドである、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】  前記アルコキシドが、ｔ−ブチルオキシドまたはイソプロピルオキシドである、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】  以下の構造（６ａ）：
【化９−１】
2004504402.tif 000010
のジアステレオマー富化化合物、ならびにその塩および溶媒和物であって、
該化合物は、以下のジアステレオマー（６ｂ）：
【化９−２】
2004504402.tif 000011
を実質的に含まない、化合物。
【請求項３５】  以下の構造（７ａ）：
【化９−３】
2004504402.tif 000012
のジアステレオマー富化化合物、ならびにその塩および溶媒和物であって、
該化合物は、以下のジアステレオマー（７ｂ）：
【化９−４】
2004504402.tif 000013
を実質的に含まない、化合物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
【化１３】
2004504402.tif 000014
ここで、
Ｒ１は、インビボで加水分解可能なオキシエステル、またはヒドロキシルであり；
Ｂは、複素環塩基であり；
Ｒ２は、ヒドロキシル、またはアミノ酸の残基であり、このアミノ酸の残基は、このアミノ酸のアミノ基を介してＰ原子に結合され、そしてそれぞれが、必要に応じてエステル化されたこのアミノ酸のカルボキシ置換基を有し、
ただし、Ｒ１およびＲ２の両方が、ヒドロキシルではなく；
Ｅは、−ＣＨ２Ｏ（ＣＨ２）２−、−ＣＨ２ＯＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＯＣＨ（ＣＨ２Ｆ）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＯＣＨ（ＣＨ２ＯＨ）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＯＣＨ（ＣＨ＝ＣＨ２）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＯＣＨ（Ｃ≡ＣＨ）ＣＨ２−、−ＣＨ２ＯＣＨ（ＣＨ２Ｎ３）ＣＨ２−、
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１２】
【化１４】
2004504402.tif 000015
−ＣＨ２ＯＣＨ（Ｒ６）ＯＣＨ（Ｒ６’）−、−ＣＨ２ＯＣＨ（Ｒ９）ＣＨ２Ｏ−、または−ＣＨ２ＯＣＨ（Ｒ８）Ｏ−であり、ここで右側の結合は、この複素環塩基に結合され；
点線は、任意の二重結合を表し；
Ｒ４およびＲ５は、独立して、水素、ヒドロキシ、ハロ、アミノ、またはアシルオキシ、アルキルオキシ、アルキルチオ、アルキルアミノおよびジアルキルアミノから選択される１〜５個の炭素原子を有する置換基であり；
Ｒ６およびＲ６’は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、またはＣ２〜Ｃ７アルカノイルであり；
Ｒ７は、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキルであるか、または一緒になって−Ｏ−もしくは−ＣＨ２−を形成し；
Ｒ８は、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ６アルキル、Ｃ１〜Ｃ６ヒドロキシアルキル、またはＣ１〜Ｃ６ハロアルキルであり；そして
Ｒ９は、Ｈ、ヒドロキシメチル、またはアシルオキシメチルである。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
（発明の詳細な説明）
このスクリーニング方法において使用するためのメトキシホスホネートヌクレオチドアナログ親薬物は、構造Ａ−ＯＣＨ２Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２を有する化合物であり、ここで、Ａは、ヌクレオシドアナログの残基である。これらの化合物はそれ自体公知であり、そして本発明の部分ではない。より詳細には、親化合物は、複素環の塩基ＢおよびアグリコンＥを含み、一般的に以下の構造を有する：
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５９】
Ｅ基は、メトキシホスホネートヌクレオチドアナログにおいて使用されるアグリコンを示す。好ましくは、Ｅ基は、−ＣＨ２ＯＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−または−ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２−である。また、アグリコンにおけるキラル中心の側鎖は、（濃縮された（Ｓ）エナンチオマーであるヒドロキシメチルを除いて）実質的に（Ｒ）構造のみであることが好ましい。