(57)【要約】安全性が極めて高く、環境に対する負荷がほとんどない、以下：  式（Ｉ）：2008078723.tif 000011［式中、Ｒ１及びＲ２は各々独立に、Ｈ又はアルカリ金属原子を示す。］で表される化合物を有効成分とする抗菌剤；及び式（Ｉ）：2008078723.tif 000012［式中、Ｒ１及びＲ２は各々独立に、Ｈ又はアルカリ金属原子を示す。］で表される化合物を有効成分とする殺菌剤を提供する。
2008078723.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
2008078723.tif 000009
［式中、Ｒ１及びＲ２は各々独立に、Ｈ又はアルカリ金属原子を示す。］
で表される化合物を有効成分とする抗菌剤。
【請求項２】
式（Ｉ）：
2008078723.tif 000010
［式中、Ｒ１及びＲ２は各々独立に、Ｈ又はアルカリ金属原子を示す。］
で表される化合物を有効成分とする殺菌剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、優れた抗菌作用、殺菌作用を有し、かつ安全性が極めて高く、環境に対する負荷がほとんどない抗菌剤及び殺菌剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
これまでに非常に多くの抗菌剤が開発され、あらゆる分野で使用されている。これら抗菌剤は大別すると、銀、セラミック等の無機系の抗菌剤と、ソルビン酸、安息香酸、それらの塩等の有機系の抗菌剤とに分けられる。有機系の抗菌剤は、石油のナフサを原料として製造され、化粧品分野や食品分野では、パラベン、安息香酸、サリチル酸、トリクロサン等が知られている。しかし、これらの殺菌剤や防腐剤の多くは安全性の点で問題があり、添加する対象や添加量が制限されているのが現状である。
細菌（例えばサルモネラ菌）、酵母、カビ等の不快な微生物を抑制する目的で動物の飼料の製造に使用されるＢＩＯ−Ａｄｄと称される抗菌剤は、ギ酸を６８％含むが、ギ酸自体、極めて毒性が高く、安全性の面で問題がある。
安全性の高い天然物由来の抗菌剤も知られているが、天然物由来のものは少ない上に、ワサビチオール等はコストがかかるという問題がある。更に、近年では、自然界に排出されたときの環境に対する負荷も考慮しなければならない。
天然物由来の抗菌剤としては、柑橘類由来の抗菌剤が知られている（特開平８−３１７７８２号公報）。これは、レモン果皮を圧搾して得られる精油を濃縮した残渣を精製して得られる化合物を有効成分とするものであるが、所望の抗菌剤とするには濃度を調整しなければならないため、製造法が煩雑で経済的でない。
また、マメ科植物のクロバナエンジュ抽出物を含む抗菌剤が報告されているが（特開２００４−２５６４３７号公報）、クロバナエンジュは栽培系の植物ではなく、かつ溶媒抽出を要するため経済的ではない。特開２００２−１６１０７５号公報記載の抗菌剤は、本発明と同様なタンニン由来の没食子酸を原料としているが、合成には有機溶媒を必要とする。更にはクラウンエーテルのような毒性の高い物質を用いる必要がある。
更には、抗菌剤の有効成分として、天然物系のフェルラ酸を原料とするフェルラ酸エステル化合物も報告されているが（特開２００２−１６１００４号公報）、米糠から得られるフェルラ酸自体が高価であり、かつエステル化合物の安全性も確認されていない。
【発明の開示】
【０００３】
本発明は、上記課題を解決し、安全性が極めて高く、環境に対する負荷がほとんどない抗菌剤及び殺菌剤を提供することを目的とする。
本発明者らは、上記目的を達成するために鋭意検討した結果、下記式（Ｉ）で表される、２Ｈ−ピラン−２−オン−４，６−ジカルボン酸（以下、「ＰＤＣ」と称する）又はそのアルカリ金属塩が、グラム陰性菌及びグラム陽性菌に対して抗菌作用及び殺菌作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、式（Ｉ）：
2008078723.tif 000003
［式中、Ｒ１及びＲ２は各々独立に、Ｈ又はアルカリ金属原子を示す。］
で表される化合物を有効成分とする抗菌剤を提供するものである。
本発明はまた、式（Ｉ）：
2008078723.tif 000004
［式中、Ｒ１及びＲ２は各々独立に、Ｈ又はアルカリ金属属原子を示す。］
で表される化合物を有効成分とする殺菌剤を提供するものである。
本発明によれば、ＰＤＣ又はそのアルカリ金属塩は、優れた抗菌作用及び殺菌作用を有する。
従って、ＰＤＣ又はそのアルカリ金属塩は、天然物由来であり、安全性が極めて高く、環境に対する負荷がほとんどない抗菌剤及び殺菌剤の成分として工業的に有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００４】
本発明の抗菌剤及び殺菌剤は、それぞれ、ＰＤＣ又はそのアルカリ金属塩を有効成分とする。アルカリ金属原子としては、リチウム、ナトリウム、カリウム等が挙げられる。
ＰＤＣの製造方法は特に限定されないが、例えば、バニリン、シリンガアルデヒド、バニリン酸、シリンガ酸又はプロトカテク酸を出発物質として、シュードモナス属細菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｕｔｉｄａ  ＰｐＹ１１００）にＰＤＣの発酵生産プラスミドｐＫＴＶＬＡＢＣを導入した形質転換細胞を培養する方法（特開２００５−２７８５４９号公報）が挙げられる。ＰＤＣのアルカリ金属塩については、特開２００５−２７８５４９号公報に記載の製造方法において、ＰＤＣを含む微生物発酵液に塩化ナトリウム等の塩を存在させることによって高純度かつ高収率で得ることができる。
本発明の抗菌剤及び殺菌剤中の、式（Ｉ）で表されるＰＤＣ又はそのアルカリ金属塩の含有量は、通常、０．１〜２０質量％であり、好ましくは０．１〜１０質量％、より好ましくは０．１〜５質量％である。
本発明の抗菌剤及び殺菌剤は、各種の細菌に対して優れた抗菌作用及び殺菌作用を示すが、このような細菌としては、例えば、黄色ブドウ球菌、枯草菌、コアグラーゼ陰性ブドウ球菌、レンサ球菌、腸球菌等のグラム陽性菌；大腸菌、赤痢菌、サルモネラ菌、ペスト菌等のグラム陰性菌などが挙げられる。
本発明の抗菌剤及び殺菌剤は、例えば、生体表面に塗布し除菌消毒することを特徴とする皮膚の殺菌、歯の表面及び口腔内における望ましくない細菌叢の増殖を抑制することを特徴とする抗菌などの目的で、飲食品、香粧品、口腔用品、医薬品、医薬部外品等に添加することができる。本発明の抗菌剤及び殺菌剤を添加して口腔用品、医薬品等を調製する場合、本発明の効果を損なわない範囲内で、通常、口腔用品、医薬品等に用いられる成分を配合することができる。
【実施例】
【０００５】
次に実施例を挙げて本発明を詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に何ら限定されるものではない。
実施例１
［材料］
（１）被検物質
ＰＤＣ（式（Ｉ）においてＲ＝Ｈ）（純度：９９％、性状：粉末、保存条件：室温）
ＰＤＣは、特開２００５−２７８５４９号公報に記載の方法に準じて製造した。
（２）被検物質１０％、１．０％、０．１％の各水溶液の調製
（２−１）１０％水溶液
被検物質１ｇを秤量し、滅菌精製水（日本薬局方精製水：日本新薬株式会社製、高圧蒸気滅菌処理）で１０ｍＬにした。
（２−２）１．０％水溶液
１０％水溶液を滅菌精製水で１０倍希釈した。
（２−３）０．１％水溶液
１０％水溶液を滅菌精製水で１００倍希釈した。
（３）菌株
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ｓｕｂｓｐ． ａｕｒｅｕｓ（スタフィロコッカス・アウレウス亜種アウレウス）（ＮＢＲＣ  １３２７６）
Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ（エシェリキア・コリ）（ＮＢＲＣ  ３９７２）
Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ Ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ（サルモネラ・エンテリティデス）（ＮＢＲＣ  ３３１３）
括弧内は標準菌株番号を示す。
（４）培地
トリプケ−スソイ寒天培地（ＳＣＤ培地、日本ビオメリュー社製）
（５）滅菌シャーレ
滅菌ＮＥシャーレ（栄研器材株式会社製）
［抗菌性試験］
上記菌株をＳＣＤ寒天培地で３５±２℃で、１８〜２４時間培養後、滅菌精製水に懸濁し、ＭａｃＦａｒｌａｎｄ  Ｎｏ．１の濁度に合わせたものを接種菌液とした。寒天培地を用いて寒天平板混釈法に準じて接種菌液濃度を測定した（表１）。
【表１】
2008078723.tif 000005
被検物質１０％、１．０％、０．１％の各水溶液及び滅菌精製水（対照）をそれぞれ３ｍＬ準備した（ｎ＝１）。各試験液に０．０３ｍＬの上記接種菌液を室温で接種した。接種直後、接種１５分後及び接種１８０分後に、試験液０．５ｍＬを４９．５ｍＬの滅菌リン酸緩衝液（Ｐｒｏ−ｍｅｄｉａ  ＭＶ２−１０００、（株）エルメックス）４９．５ｍＬを加えて混和した。この各混和液の１０倍希釈系列を作製し、生菌数を測定し、試料又は対照の１ｍＬ中の菌数に換算した。生菌数の測定は、「第十四改正  日本薬局方  生菌数測定  寒天平板混釈法」に準じて行った。結果を表２に示す。
【表２】
2008078723.tif 000006
表２から明らかなように、本発明の抗菌剤及び殺菌剤は、０．１質量％という低濃度でも、細菌の増殖を有効に抑制できることが判明した。
実施例２
［材料］
（１）被検物質
ＰＤＣ（式（Ｉ）においてＲ＝Ｈ）（純度：９９％、性状：粉末、保存条件：室温）
当該ＰＤＣは、特開２００５−２７８５４９号公報に記載の方法に準じて製造した。
（２）被検物質２０％水溶液の調製
被検物質２ｇを秤量し、１０ｍＬの滅菌精製水（日本薬局方精製水：日本新薬株式会社製、高圧蒸気滅菌処理）で溶解した。
（３）比較物質
ＢＩＯ−Ａｄｄ（組成：ギ酸６８％、プロピオン酸２０％、水分１２％、性状：水溶液、保存条件：室温、Ｔｒｏｕｗ  Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ社製）
（４）菌株
Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ ｓｕｂｓｐ． ａｕｒｅｕｓ（スタフィロコッカス・アウレウス亜種アウレウス）（ＮＢＲＣ  １３２７６）
Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ（エシェリキア・コリ）（ＮＢＲＣ  ３９７２）
Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ Ｅｎｔｅｒｉｔｉｄｉｓ（サルモネラ・エンテリティデス）（ＮＢＲＣ  ３３１３）
括弧内は標準菌株番号を示す。
（５）培地
トリプケ−スソイ寒天培地（ＳＣＤ培地、日本ビオメリュー社製）
ＳＣＤＬＰブイヨン培地（栄研化学株式会社製）
（６）滅菌ＮＥシャーレ（栄研器材株式会社製）
［抗菌性試験］
上記菌株をＳＣＤ寒天培地で３５±２℃で、１８〜２４時間培養後、滅菌精製水に懸濁し、ＭａｃＦａｒｌａｎｄ  Ｎｏ．１の濁度に合わせたものを接種菌液とした。寒天培地を用いて寒天平板混釈法に準じて接種菌液濃度を測定した（表３）。
【表３】
2008078723.tif 000007
被検物質２０％水溶液、比較物質原液及び滅菌精製水（対照）をそれぞれ３ｍＬ準備した（ｎ＝１）。各試験液に０．０３ｍＬの前記接種菌液を室温で接種した。接種直後、接種１５分後及び接種１８０分後に、下記の条件で中和した：
被検物質：
試験液０．５ｍＬを減菌０．２５ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム水溶液（水酸化ナトリウム：和光純薬工業株式会社製）４．５ｍＬに添加し、混和後、直ちに滅菌リン酸緩衝液（Ｐｒｏ−ｍｅｄｉａ  ＭＶ２−１０００、（株）エルメックス）４５ｍＬを加えて混和した。
比較物質：
試験液０．５ｍＬを減菌２．０ｍｏｌ／Ｌの水酸化ナトリウム水溶液４．５ｍＬに添加し、混和後、
直ちに滅菌リン酸緩衝液４５ｍＬを加えて混和した。
滅菌精製水（対照）：
試験液０．５ｍＬを滅菌リン酸緩衝液４９．５ｍＬを加えて混和した。
上記の各中和液の１０倍希釈系列を作製し、生菌数を測定し、試料又は対照１ｍＬ中の菌数に換算した。生菌数の測定は、「第十四改正  日本薬局方  生菌数測定  寒天平板混釈法」に準じて行った。結果を表４に示す。
【表４】
2008078723.tif 000008
表４から明らかなように、本発明の抗菌剤及び殺菌剤は、比較物質であるＢＩＯ−Ａｄｄと同程度の抗菌作用及び殺菌作用を示した。
【産業上の利用可能性】
【０００６】
ＰＤＣ又はそのアルカリ金属塩は、安全性が極めて高く、環境に対する負荷がほとんどない抗菌剤及び殺菌剤の製造のために用いられる。
【国際調査報告】
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