(57)【要約】【課題】病理組織等の薄片の長期保存に便利であり、しかも薄片が必要な数量を無駄なく素早く提供できる保存具を提供する。  更に、この保存具と接着剤層が形成された透明プレート体とを備えた顕微鏡観察用具を提供する。【解決手段】試料ブロックから切り出された薄片又は細胞ブロックの薄片を表面の接着剤層を介して接着固定する樹脂製のフイルム小片と、当該フイルム小片の裏面を粘着剤層を介して表面に着脱可能に粘着固定する支持体とを備えている。  顕微鏡観察用具は、保存具と保存具から剥離したフイルム小片を接着固定する透明プレート体からなる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料ブロックから切り出された薄片または細胞ブロックの薄片を、接着固定する樹脂製のフイルム小片と、当該フイルム小片の裏面で着脱可能に粘着固定する樹脂製の支持体とを備えていることを特徴とする、検体薄片の保存具。
【請求項２】
支持体は、一辺が止着された開閉自在なカバーフイルムを備えており、当該カバーフイルムが支持体の表面に粘着固定されたフイルム小片を覆う大きさに形成されていることを特徴とする、請求の範囲１の検体薄片の保存具。
【請求項３】
支持体は、表面に粘着剤層を形成したものであることを特徴とする、請求の範囲１又は２記載の検体薄片の保存具。
【請求項４】
支持体表面にフイルム小片を粘着固定する手段は、両面粘着テープであることを特徴とする、請求の範囲１又は２記載の検体薄片の保存具。
【請求項５】
支持体は、複数のフイルム小片を粘着固定することができることを特徴とする、請求の範囲１〜４のいずれかに記載の検体薄片の保存具。
【請求項６】
試料ブロックがパラフィンブロックに直径０．５から３ｍｍの複数個のコアを格子点状に包埋したものであり、当該試料ブロックから切り出された薄片をフイルム小片の表面に接着固定したことを特徴とする、請求の範囲１〜５のいずれかに記載の検体薄片の保存具。
【請求項７】
請求の範囲１ないし６のいずれかに記載した検体薄片の保存具と当該保存具からフイルム小片を剥離し、表面に接着固定する透明プレート体とを備えたこと特徴とする、顕微鏡観察用具。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、検体となる試料ブロックから切り出した薄片又は細胞ブロックの薄片を長期に亘って保存することができるとともに、必要なときに必要な数量を無駄なく素早く提供することができる薄片の保存具に関するものである。
特に、免疫染色やｉｎ  ｓｉｔｕ分析等に好適な薄片の保存具及び、この保存具にスライドガラス等を設けた顕微鏡観察用具に係る。
【背景技術】
【０００２】
病気の診断や組織内部の観察のため、動植物の組織を薄片化し、さらに染色などを行ったものを顕微鏡で観察することが行われている。
その際に作製される試料ブロックとして、動植物から採取・摘出した組織または臓器をパラフィンに包埋したパラフィン組織ブロックがあり、培養細胞等の細胞を固定、脱水、パラフィン処理したパラフィン細胞ブロックがある（以下、パラフィンブロックと総称する。）。
また、目的に応じて、そのまま凍結した凍結ブロックが作製される。
試料ブロックとして、パラフィンブロック及び凍結ブロッック等のドナーブロック中の組織または臓器の病巣部等に中空針を刺入して直径０．６〜３ｍｍの円筒形組織芯（以下、コアという。）を採取し、このコアを別の直方体パラフィンブロックに格子点状に配置したもの（以下、アレイブロックという。）がある。【０００３】
従来、試料ブロックは、矩形の浅い木製ないしステンレス製の整理箱に格子状の仕切り板を嵌め込み、仕切り板により形成された各区画領域に試料ブロックを投入し、常温または低温で保存されている。
そして、免疫染色やｉｎ  ｓｉｔｕ分析を行うとき、即ちパラフィンブロック又は凍結ブロックから切り出された組織薄切り片やアレイブロックから切り出された薄切りコア（以下、薄片という。）が必要になった場合、試料ブロックを整理箱から取り出し、ミクロトームや凍結切片作製装置の鋭利なナイフで薄切りし、パラフィンブロックではこの薄片を水槽に浮かべてスライドガラスで掬い取り、凍結ブロックではそのままスライドガラスに貼り付けていた。
ここで、試料ブロックがアレイブロックであれば、掬い取る薄片または貼り付ける薄片に複数個の薄切りコアが包埋または凍結されているから、スライドガラス上に多数の薄切りコアが格子状に配列されたもの（以下、組織アレイという。）となる。【０００４】
上記のような方法は熟練を要し、薄片の欠落を発生するという問題があった。
このような問題は下記する粘着テープ薄切り方式によって解決されている。
粘着テープ薄切り方式は、粘着テープを試料ブロックの上面に押し付け、テープが粘着固定した部分のわずかな下方位置で鋭利なナイフを水平方向に移動させて、粘着テープとともに薄片を切り取るというものである。
この粘着テープは、切り取った薄片を貼り付けた状態のまま染色、脱水、透徹等の操作を行ったあと、天地逆にし、表面に封入剤層を形成したスライドガラスに密着させて、粘着テープとスライドガラスの間に薄片を封止することにより、顕微鏡観察をするための検査用スライドを作成していた（特許文献１）。【０００５】
一方、スライドグラスの本質的な欠点である割れやすいという欠点を克服するため、スライドガラスに代わる吸水性の低い薄膜状の高分子支持体、具体的には、厚さ５０〜３００μｍのポリエチレンテレフタレート又ポリエチレンナフタレートの高分子支持体が知られている。
この支持体は、その表面に組織切片又は細胞を接着させ、組織切片又は細胞を染色した後、顕微鏡観察に使用する（特許文献２）。
【特許文献１】特開２００６−３８８４８号公報
【特許文献２】特開２００１−２１５１８１号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
特許文献１に記載の粘着テープ薄切り方式は、必要時に試料ブロックから薄片を切り出し、染色処理等を行ってから検査用スライドを作成するものであるから、各種の研究や検査に素早く対応ができない。
また、粘着テープとスライドガラスの間に薄片を封止するものであるから、全体としての形状及び重量が大きくなって整理箱への収容数が制限されるという問題がある。
また、検査用スライドの主材料がガラスであるから破損しやすく取り扱いが面倒であるという問題がある。
また、テープを剥がす必要性が生じた場合、粘着テープから薄片を剥がすことが困難であるという問題がある。
また、特許文献２の高分子支持体は、単にスライドガラスの代わりとして使用するものである。【０００７】
更に組織アレイの場合は、一枚のスライドガラスに多数の薄切りコアが接着固定されているが、実際の検査・研究で必要な薄切りコアはそのうちの一部で十分なことが多々あり、上記試験用スライドでは不要なコアについても同時免疫染色等の処理を行うことになり、貴重な薄切りコアが無駄になるという問題があった。【０００８】
本発明は、軽量で整理箱などに多数収納することができ、取り扱いに便利で、安価で廃棄制限もなく、長期の保存に便利な薄片の保存具を提供することを目的としており、必要時必要な数量の薄片を無駄なく素早く提供することができ、迅速な試験を必要とする免疫染色やｉｎ  ｓｉｔｕ分析に好適な保存具を提供することを目的としている。
更に、この保存具と接着剤層を形成した透明プレート体とを設けた顕微鏡観察用具を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
（１）本発明に係る検体となる薄片の保存具は、試料ブロックから切り出された薄片又は細胞ブロックの薄片を表面に接着固定する樹脂製のフイルム小片と、当該フイルム小片の裏面で着脱可能に粘着固定する樹脂製の支持体とを備えていることを特徴とするものである。
本発明において試料ブロックとは、動植物から採取・摘出した組織又は臓器等を、パラフィンに包埋したパラフィン組織ブロック、アクリル樹脂等の樹脂に包埋した樹脂ブロック、試料をそのまま凍結した凍結ブロックの他に培養細胞等の細胞を固定、脱水、パラフィン処理といった組織の包埋処理に準じた方法で作製されたパラフィン細胞ブロックも包含する。
また、細胞ブロックの薄片とは、検体となる細胞を培養し、ゲル化物とし、フイルム又はシート状にしたものをいい、本発明の対象を凍結ブロック及び包埋処理したものに限定しないことを明確にする趣旨である。【００１０】
ここでいう接着とは、薄片のような被着体を接合したときに、接着剤層が固化した状態となって接合の機能を果たすものであり、粘着のように接合の機能を発揮する段階でも液体状態が保たれているものとは異なる。
したがって接着剤と粘着剤とは、組成はもちろんこと、強度その他の力学的特性をはじめとする物理的・化学的性状が大きく異なる。
更に、接着剤層は、いったん破壊したならば、これの再生にはそれなりの処理が必要とされるのに対して、粘着剤層は、接合部位を破壊（剥がすこと）しても表面を汚さない限り繰り返し再利用できるという特徴がある。【００１１】
接着剤層は、溶剤乾燥型、化学反応型、ホットメルト型などを使用することができる。
後続する溶剤処理を考慮すると化学反応型が望ましい。
化学反応型として、熱硬化型、嫌気硬化型、紫外線硬化型、縮合反応型、付加反応型、ラジカル重合型などがある。
また、接着剤は、免疫染色やｉｎ  ｓｉｔｕ分析等に先立って行われる各種の処理によって影響を受けるものであってはならず、薄片の染色に使用する染色液に染色されないことが望ましい。
更に薄片を脱水、透徹、封入等で使用する有機溶剤に浸漬しても溶解せず、かつ膨大の少ない透明な層を形成するものが望ましい。
また、生体適合性の良いものが好ましく、例えば、フィブリン糊、ゼラチン糊、ポリ−Ｌ−リジンなどのポリペプチド系接着剤、シアノアクリレート系接着剤、ウレタン系接着剤、合成ゴムなどを挙げることができる。【００１２】
粘着剤層は、樹脂製のフイルム小片と樹脂製の支持体を接合するものであるから、従来公知の粘着剤を使用することができる。
例えば天然ゴムや合成ゴム、アクリル系ポリマーなどといったガラス転移温度が室温以下の高分子がある。
耐熱性を必要とする場合、シリコーンゴム系のものがポリエステルテープなどに用いられる。
ポリエステルテープは、耐熱・耐寒性、耐薬品性などに優れた性能を持っている。【００１３】
本発明に使用する樹脂製フィルムは、例えば、ポリエチレンテレフタレート、ポリエチレンナフタレート、アタクティックポリスチレン、シンジオタクティックポリスチレン、ポリカーボネート、トリアセチルセルロース、ポリメチルメタクリレート、ポリスルフォン、ポリアリレートなどから選ばれる１または２種以上の高分子を主成分とするフィルムが挙げられる。
好ましいのはポリエチレンテレフタレートまたはポリエチレンナフタレートを主成分とするフィルムである。
また、樹脂製フィルムの厚さは、上面に薄切り片を載せ、かつスライドグラスなどに貼付することから、２５μｍ以下が好ましく、１０μｍ〜２０μｍがより好ましい。【００１４】
上記樹脂フィルムの片側または両側の表面は親水化処理されていてもよい。
ここで親水化処理とは、グロー処理、コロナ処理、紫外線処理、火焔処理、高周波処理などの１またはは２以上の操作により高分子支持体の表面を親水性にする処理のほか、必要により親水性の物質を塗布することによって親水性を付与する方法、砂状のものを吹きつけ、フィルム表面を微細な凹凸状とする方法などを含むものである。
また、親水化処理として、２以上の処理を組み合わせて用いてもよい。
ポリエステル系樹脂フィルムのグロー処理、コロナ処理の方法は、例えば、上記特許文献２に記載の方法で行えばよい。【００１５】
塗布によって親水性を付与する場合、例えば、塩化ビニル、塩化ビニリデン、ブタジエン、スチレン、メタクリル酸、アクリル酸、イタコン酸、無水マレイン酸などから選ばれるモノマーの１種または２種以上を重合させて得られる重合体または共重合体、ポリエチレンイミン、エポキシ樹脂、グラフト化ゼラチン、ニトロセルロースなどの重合体を塗布することが好ましい。
親水性の薄膜は１層または多層のいずれでもよい。
塗布方法は特に限定されず、例えば、ディップコート法、エアーナイフコート法、カーテンコート法、ローラーコート法、ワイヤーバーコート法、グラビアコート法、ホッパーを使用するエクストルージョンコート法などが挙げられる。【００１６】
支持体は、プレート状またはシート状であり、透明であっても不透明であってもよく、ポリエチレンテレフタレート、ポリエチレンナフタレート、ポリスチレン、ポリカーボネート、ポリメチルメタクリレート、ポリスルフォン、ポリアリレートなどの射出成形品を用いることができる。
また、支持体は、組織切片を可視化しやすくするために暗色調のものが好ましい。【００１７】
薄片は、例えば、病理組織検査で使用される組織、培養した細胞等を対象とし、パラフィンブロック、樹脂ブロック、凍結ブロック及び包埋処理した細胞ブロックから薄切りされた厚さ１０μｍ以下、好ましくは、２〜５μｍ厚の薄切り切片である。
また、細胞ブロックの場合には上記のように包埋処理したものの他に、培養ゲル化物とし、シート状またはフィルム状とした薄片でもよい。
また、培養する細胞は、不死化した細胞、遺伝子導入された細胞のいずれでもよい。【００１８】
（２）支持体は一辺が止着された開閉自在なカバーフイルムを備えており、当該カバーフイルムが支持体の表面に粘着固定されたフイルム小片を覆う大きさに形成されていてもよい。
このようなカバーフイルムは、粘着剤層の汚れの付着を防止することができるので、粘着力の低下を防止することができる。【００１９】
（３）支持体は、表面に粘着剤層を形成したものであるとよい。
ここで、粘着剤層を支持体の全面に形成すると、フイルム小片を任意の位置に粘着することができる。【００２０】
（４）支持体表面にフイルム小片を粘着固定する手段として両面粘着テープを用いてもよい。
フイルム小片と同形ないし一回り狭い平面形状の両面テープを使用することにより、支持体に粘着剤層を形成するという手間を省くことができる。【００２１】
（５）支持体が複数のフイルム小片を粘着固定することができる大きさに形成されていてもよい。
これにより支持体に複数個の薄片を配置することができる。【００２２】
（６）試料ブロックがパラフィンブロックに直径０．５から３ｍｍの複数個のコアを格子点状に包埋したものであり、当該試料ブロックから切り出された薄片をフイルム小片の表面に接着固定したものでもよい。
フイルム小片が多数のコアを配置したものであり、かつ、支持体が多数のフイルム小片を配置したものであれば高集積組織アレイにすることができる。【００２３】
（７）顕微鏡観察用具は、上記（１）〜（６）のいずれかに記載した検体薄片の保存具と、この保存具から剥離したフイルム小片を、表面に接着固定する透明プレート体とを備えたことを特徴とする。
ここで、透明プレート体はスライドガラスを代表例とし、有色透明、無色透明な硬質系の樹脂製でもよい。
薄片の保存具に加えて、上記スライドガラス等の透明プレート体を設けたので、薄片の保存具から取り出したフイルム片を透明プレート体上に接着固定して各種処理を行うことができ、顕微鏡観察スライドを素早く作成することができる。
ここで使用する接着剤は、樹脂製フイルム小片と透明プレート体とを接着するものであり、多種多様なものが市販されている。
例えば、紫外線硬化型のアクリル系接着剤など上記した接着剤層に使用される接着剤の他、キシレンにカナダバルサムを溶解したものなどを例示することができる。【００２４】
本発明の薄片保存具の製造は、例えば、パラフィンブロックに、包埋した組織の薄片あるいは培養細胞の薄片を、一定形状に裁断した樹脂製フイルム小片に貼付するか、またはシート状またはフィルム状にした培養細胞の細胞ブロックの薄片を一定形状に裁断した樹脂製フイルム小片に載せ、次いで、粘着剤層が表面に塗布された樹脂製支持体に載せることにより製造することができる。
【発明の効果】
【００２５】
以上のように、本発明は、予め試料ブロックから薄片を切り出しておき、この切り出した薄片をフイルム小片に接着し、フイルム小片を介して薄片を支持体に粘着して保存するものであるから、あらためて切り出す必要がなく、必要時に必要な数量のフイルム小片を支持体から剥がすことにより素早く無駄なく提供することができる。
また、ゲル化物とした細胞ブロック薄片を予め支持体に粘着保存しておくことも可能である。
フイルム小片及び支持体が樹脂製であるから、収納箱に多数収容収納しても重くなく、破損しにくいので取り扱いに便利である。【００２６】
請求の範囲５記載の発明によれば、支持体が複数のフイルム小片を粘着固定することができる大きさに形成されているので、複数個の薄片を使い勝手のよいように支持体上に配置することができる。
しかもフイルム小片は着脱可能であるから、必要な部位の薄片を必要な数量だけ素早く無駄なく提供することができる。【００２７】
請求の範囲６記載の発明によれば、複数個のコアを格子点状に配置した薄片を接着したフイルム小片を支持体に多数粘着したものであるから、多数のコアを一枚の支持体に配列することができ、統計学的有用な検体数（サンプル数）を有する高集積組織アレイを提供することができる。【００２８】
本発明の顕微鏡観察用具は、前記の薄片の保存具と、支持体から剥離したフイルム小片を接着層を介して表面に接着固定するスライドガラスとを有しているから、支持体から剥離した薄片をフイルム小片を介してスライドガラス上に接着し、顕微鏡観察に先立つ免疫染色等の処理を迅速かつ円滑に行うことができる。【００２９】
本発明の薄片保存具における樹脂製フィルムで保持された薄片または細胞ブロックは、病理組織検査の精度管理用のコントロールとして使用することができる。
具体的には、薄片または細胞ブロックが保持された樹脂製フィルムと新たに薄切りされた組織切片とを１枚のスライドガラス上に載せ、次いで、特異的抗体を用いた免疫染色法で蛍光標識あるいは金コロイド標識などの手段により目的抗原を可視化する方法を用い、両者を比較することで、例えば、癌などで特異的に発現するタンパク質を定性的または半定量的に測定することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１】本発明の実施の形態１に係る薄切り片の保存具である。
【図２】本発明の実施の形態１の変形例を示す薄切り片の保存具である。
【図３】本発明の実施の形態１の使用例を示す説明図である。
【図４】本発明の実施の形態２に係る薄切り片の保存具である。
【符号の説明】
【００３１】
１、１ａ  フイルム小片
２、２ａ  摘み
３、３ａ  接着剤層
４、４ａ  支持体
５、５ａ  粘着剤層
６、６ａ  カバーフイルム
７  離型紙
１２  パラフィンブロック
１３  ドナーブロック
１５  薄片
２１  アレイブロック
２２  コア
２３  パラフィンブロック
２５  薄片
２６  接着剤層
２７  フイルム小片
２９  支持体
３１  粘着剤層
３２  保存用スライド
３３  データ表示部
【発明を実施するための最良の形態】
【００３２】
以下に、患者から採取したがん組織をパラフィンブロックに包埋したドナーブロックを例にとって本発明の実施の形態を説明する。
図１〜図３は本発明の実施の形態１を示したものであり、図１は薄切り片の保存装置の斜視図、図２はその変形例、図３は作成方法の説明図である。【００３３】
図１において、１は厚さ２０μｍで、短軸５ｍｍで長軸１０ｍｍの楕円形のポリエステル製のフイルム小片であり、２はこのフイルム小片１の長軸の延長上に設けられた摘み、３はフイルム小片１の表面中央部に塗布された接着剤層、４は厚さ２．５ｍｍで、縦２６ｍｍ、横１９ｍｍの長方形のアクリル樹脂製の支持体、５は支持体４の表面に厚さ０．１ｍｍで塗布された円形の粘着剤層、６は支持体４の奥辺に一端が止着された透明なポリエステル製のカバーフイルムである。【００３４】
ここで使用されているフイルム小片１は、押出成形機から押し出されたポリエチレンテレフタレートの透明フイルムを２軸方向に延伸したものを楕円形状に裁断したものである。
このフイルム小片１の物性値は、引っ張り強度１４〜２４．６ｋｇ／ｍｍ２、線膨張係数６×１０−５／℃、熱収縮＜０．５％、１００℃、３０ｍｉｎ、耐熱温度１５０℃、耐寒温度−６０℃、ガラス転移温度８１℃、融点２６４℃である。
接着剤層３は、ポリ−Ｌ−リジン（武藤化学株式会社製）で形成されており、フイルム小片と薄切り片とを接着している接着剤は、アルコールやキシレンに溶けず、熱収縮率が少なく、かつ、透明である。
支持体４は水平で反っておらず、上面に形成された粘着剤層は汎用粘着タイプのアクリル系ポリマーである。【００３５】
図２は本発明の実施の形態１の変形例を示したものである。
図２において、１ａは厚さ１６μｍで、縦横５ｍｍのポリエステル製の正方形フイルム小片であり、２ａはフイルム小片の奥側一辺に設けられた摘み、３ａはアクリルオリゴマーに光開始剤を添加した紫外線硬化型の接着剤層、４ａは厚さ２．５ｍｍで、縦２０ｍｍ、横２５ｍｍの長方形のアクリル樹脂製の支持体である。
粘着剤層５ａは、上下の面に離型紙をそれぞれ貼り付けた両面粘着テープを利用してつくられたものであり、上面の離型紙を剥がしてフイルム小片の裏面に貼り付けることにより形成される。
下面には離型紙がそのまま貼付されている。
８は支持体４ａの上面をフイルム小片と同形に区画している目印線であり、上面には粘着剤層は設けられていない。
２０は各薄片の識別記号を表示する領域である。【００３６】
別々のドナーブロックから切り出した薄片を接着したフイルム小片を、その裏面の粘着剤層を介して支持体４ａの目印線８に沿って順次縦横格子状に３列ずつ配列していくと、一枚の支持体４ａに９個の別人の薄片を保持した組織アレイを形成ことができる。
別人の同種摘出部位の薄片を９つ有する保管用スライドを多数枚の保管箱に蓄積しておくことにより、癌に関する摘出部位ごとのデーターベースを構築することができる。【００３７】
上記アクリル製支持体の物性値は、引張弾性率３．３ＧＰａ、曲げ弾性率３．３ＧＰａ、全光線透過率９３％、線膨張係数６×１０−５（１／℃）である。【００３８】
パラフィンで包埋処理した細胞ブロックの薄片は、例えば、以下の手順で作製することができる。
１．細胞株をシャーレに培養する。
２．細胞がコンフルエントになれば、培養液を捨て、一度リン酸緩衝食塩液で洗う。
３．スクレイパーで細胞を掻きとる。
４．掻き取られた細胞をピペットでエッペンチューブに移す。
５．遠心器で２５００ｒｐｍ／３分、遠沈する。
６．上清をすて、ホルマリンを注ぎ、２４時間室温で固定する
７．ホルマリンを静かに捨て、７０％エタノールを入れ、１時間振とうする。
８．７０％エタノールを捨て、１００％エタノールを入れる１時間×２回、振とうする。
９．１００％エタノールに変えて、一夜静置。      
１０．エタノールを捨て、キシレンを入れ、３０分間静置。この際に細胞塊が浮く。
１１．キシレンを２度交換する。各２０分間静置。
１２．細胞塊をフラン器に入った高温槽で暖めた約６５℃のパラフィンの中に入れる。これを１５分ごとに３槽分移動させなじませる。
１３．包埋皿に細胞塊を入れ、パラフィンを適量注入し、カセットを被せ、冷却する。
このようにして得られた塊状のパラフィン細胞ブロックはミクロトーム等にて薄片に切り出す。
また、詳細は省略するが培養細胞の水分をヒアルロン酸のようなムコ多糖で置換した細胞ゲル化物をシート状又はフイルム状にして、細胞ブロックの薄片とすることもできる。【００３９】
図３に基づいて実施の形態１の薄片の保存具の使用方法を説明する。
患者から摘出した組織にがん細胞が含まれているか否の検査をする場合、摘出した直径２ｍｍの組織１１をパラフィンブロック１２に包埋してパラフィンドナーブロック１３を作成し（Ａ）、このドナーブロックの表層を鋭利なナイフ１４でパラフィンブロック１２ａ及び組織切片１１ａが厚さ０．６ｍｍとなる薄片１５を切り出す（Ｂ）。
切り出された薄片１５をフイルム小片の接着剤層３に貼り付け、加熱して接着剤層５を硬化する。
はみ出した部分はけずりおとして薄片が接着された保持用のフイルム小片１６を作成する（Ｃ）。【００４０】
次に、支持体４のカバーフイルム６を開き、中央部に形成された粘着剤層５に薄片が接着されたフイルム小片１６の裏面を押し付け、フイルム小片を着脱自在に支持体４に粘着固定する（Ｄ）。
カバーフイルム６を閉じて表面を指でなでると、カバーフイルム６が静電気により支持体４に張り付く。
なお、支持体の周縁部に破線で示す枠形の粘着剤層１７を設けておけばカバーフイルム６を閉じることにより、薄片１５を外気から封鎖することができる。
このようにして、カバーフイルム１６を閉じることにより長期に亘って保存できる薄片の保存用スライド１８を作成することができる（Ｅ）。
通常はこの保存用スライドに患者のカルテ番号、採取の部位や日付、連続番号、管理日付なのデータとリンクする識別番号をつけて保管箱１９に収納し保管する（Ｆ）。【００４１】
薄片が病理診断で必要になったときは、収納箱１９から必要な保存用スライド１８を取り出し、その支持体４から薄片１５が接着されたフイルム小片１６を剥離し、その裏面を接着剤層を介してスライドガラスに貼付し、熱等の外部エネルギーを与えて接着剤層を硬化する。【００４２】
このスライドガラスを使って検査用スライドを作成するときは、薄片が接着固定されたフイルム小片１を貼り付けたままの状態で、キシレンにスライドガラスごと浸漬して脱パラフィン処理を行う。
その後スライドガラスを水に浸漬してキシレンを除去したのち、免疫染色を行う。
スライドガラスの上に、紫外線硬化型接着剤ＧＬ−１００２（有限会社グルーラボ製、主成分はアクリル樹脂、硬化収縮率７．３、接着強さ＞２５０Ｎ／ｃｍ２）を塗布しておき、フイルム小片を貼り付けた後、カバーガラス（２２×２２ｍｍ）を載置して硬化させてカバーガラスが浮き上がるのを防止して検査用スライドガラスを作成する。
このように作成された検査用スライドを通常のスライドガラスと同様な操作で光学顕微鏡で観察する。【００４３】
以上のようにして作成した検査用スライドは、免疫染色した後、顕微鏡で染色領域があるか否かで良性か悪性かを判断する際に使用される。
染色領域があると悪性と判断され、化学療法、外科手術その他の治療が行われる。
なお、検査用スライドには、同様な方法で作成した標準試料（コントロールと呼ばれている。）を並置することがある。【００４４】
図４は本発明の実施の形態２及その使用例を示したものである。
２１はパラフィン製のアレイブロックであり、このアレイブロック２１は、手術により摘出した肝臓の癌をパラフィンに包埋した後、内径２ｍｍの中空針を差し込んで、その中空部に取り込まれた直径２ｍｍの円筒状コア２２を採取し、このコアを別体の直方体形パラフィンブロック２３に格子点状に包埋したものである（Ａ）。
このアレイブロック２１をナイフ１４で薄片２５を切り出し（Ｂ）、切り出された薄片２５をフイルム小片に貼り付け（Ｃ）、接着剤層を硬化させて薄片２５を接着固定したフイルム小片２７を作成する（Ｄ）。
２８はフイルム小片の奥辺の突設された摘み、２９はアクリル樹脂製の支持体である。
薄片２５が支持体２９の粘着剤層３１で粘着固定されて保存用スライド３２が作成される（Ｅ）。【００４５】
なお、実施の形態２の支持体２９は、奥側に一段高いデータ表示部３３を有しており、手前側に低い上面全体に粘着剤層３１を有している。
この支持体２９に薄片を接着したフイルム小片２７を、その裏面を介して順序よく粘着固定して高集積組織アレイを作成することができる。
必要があればカバーフイルムを貼り付けて保存用スライドが完成される。
この高集積組織アレイは、検体数（コア数）が多く、統計学的有用性と考えられており、試験研究に好適である。
しかも、カバーフイルムを剥がし、目的の薄片を接着したフイルム小片を剥がして、素早くスライドガラスに接着して検査用スライドを作成することが出来るから、必要なときに必要な数量の薄片を接着した検査用スライドを簡易迅速に作成することができるからきわめて有用である。
【産業上の利用可能性】
【００４６】
本発明の薄片保存具およびこれを備えた顕微鏡観察用具は、病理組織検査及び細胞検査における免疫染色の精度管理を行う際のコントロールとして有用である。
また、簡易迅速な高集積組織アレイの作製に有用である。
【図１】
2008123410.tif 000003
【図２】
2008123410.tif 000004
【図３】
2008123410.tif 000005
【図４】
2008123410.tif 000006
【手続補正書】
【提出日】平成21年4月10日(2009.4.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
免疫染色又はｉｎ  ｓｉｔｕ分析に用いる検体薄片の保存具であって、
当該検体薄片は、動物から採取・摘出した組織もしくは臓器をパラフィンに包埋したパラフィン組織ブロック、培養細胞を固定・脱水及びパラフィン処理したパラフィン細胞ブロック、前記組織、臓器もしくは細胞を凍結した凍結ブロックのいずれかの試料ブロックから切り出された薄片または細胞ブロックの薄片であり、
当該検体薄片を、免疫染色又はｉｎ  ｓｉｔｕ分析のために行われる各種の処理によって影響を受けず、かつ、脱水・透徹・封入で使用する有機溶剤に浸漬しても溶解しない接着剤層で接着固定する樹脂製フイルム小片と、
当該フイルム小片の裏面で粘着固定するための、粘着と剥がしが繰り返し可能な粘着剤層を有する樹脂製の支持体とを備えていることを特徴とする、検体薄片の保存具。
【請求項２】
当該フイルム小片は前記支持体から剥がすための摘みを有していることを特徴とする、請求の範囲１記載の検体薄片の保存具。
【請求項３】
前記接着剤層は、生体適合性に優れたフイブリンのり、ゼラチンのり、ポリペプチド系接着剤、シアノアクリレート系接着剤、ウレタン系接着剤のいずれかであることを特徴とする、請求の範囲１又は２記載の検体薄片の保存具。
【請求項４】
（削除）
【請求項５】
支持体は、複数のフイルム小片を粘着固定することができることを特徴とする、請求の範囲１〜３のいずれかに記載の検体薄片の保存具。
【請求項６】
当該検体薄片は、パラフィンブロックに直径０．５から３ｍｍの複数個のコアを格子状に包埋した試料ブロックから切り出された薄片であり、
当該コアは、動物から採取・摘出した組織もしくは臓器をパラフィンに包埋したパラフィン組織ブロック又は培養細胞を固定・脱水及びパラフィン処理したパラフィン細胞ブロックから採取したものであり、
当該試料ブロックから切り出された薄片を、免疫染色又はｉｎ  ｓｉｔｕ分析のために行われる各種の処理によって影響を受けず、かつ、脱水・透徹・封入で使用する有機溶剤に浸漬しても溶解しない接着剤層で接着固定するフイルム小片と、
当該フイルム小片の裏面で粘着固定するための、粘着と剥がしが繰り返し可能な粘着剤層を有する樹脂製の支持体とを備えていることを特徴とする、検体薄片の保存具。
【請求項７】
請求の範囲１，２，３，５，６のいずれかに記載した検体薄片の保存具と、その表面に当該保存具から剥離したフイルム小片を接着固定する透明プレート体を備えたことを特徴とする、顕微鏡観察用具。
【国際調査報告】
2008123410.tif 000007
2008123410.tif 000008