【手続補正書】
【提出日】平成16年10月20日(2004.10.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
複雑な生物流体の試験サンプルまたは試験サンプルのアリコート中の１つまたは複数の分析物の濃度を定量する方法において、
ａ）該サンプルまたは該サンプルのアリコートと固体、溶液、プレミックス溶液などの１つの試薬とを混合し、該試薬は１つのコンテナまたはコンテナの区画中に入れられ、該方法の実行中に他の試薬を添加せず、該試薬は１つまたは複数の該分析物と特異的親和性を有する少なくとも１つの型の結合分子を含み、更に該試薬は結合対を形成する該結合分子と共有結合する蛍光部分を含み、
ここで該結合対は該分析物の蛍光部分または蛍光アナログ、フラグメントまたは誘導体に複合体化したアプタマーまたは他の合成結合剤を含むか、または、該結合対は蛍光部分に複合体化したペプチドまたはペプチド性の合成結合剤であり、ここでこの混合により変化した大きさの分析物結合分子−蛍光部分複合体が与えられるか、または、該結合対は該分析物（単数または複数）の蛍光アナログ、または蛍光フラグメントまたは蛍光誘導体に複合体化した抗体または免疫活性抗体画分を含み、ここでこの混合によって競合反応が起こることにより変化した蛍光が生じ、
ｂ）該混合によって得られた混合物に偏光を照射して該蛍光分子を励起させ、
ｃ）放射光の偏光を測定し、
ｄ）該分析物（単数または複数）の濃度（単数または複数）を計算することを特徴とする定量法。
【請求項２】
試験サンプルまたは試験サンプルのアリコートが全血または抗凝固全血であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ａ）前記分析物（単数または複数）に特異的親和性を示す抗体または抗体の免疫活性フラグメントと、
ｂ）前記分析物（単数または複数）の蛍光アナログもしくは蛍光フラグメントまたは蛍光誘導体との間に、
免疫複合体を含む各分析物用の試薬を使用することを特徴とする請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
ａ）前記分析物に特異的親和性を示すアプタマーまたは別の合成結合剤と、
ｂ）前記分析物（単数または複数）の蛍光アナログもしくは蛍光フラグメントまたは蛍光誘導体との間に、
複合体を含む各分析物用の試薬を使用することを特徴とする請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
１つまたは複数の前記分析物に特異的親和性を示す結合分子および前記結合分子に共有結合した６００ｎｍと１０００ｎｍとの間、好ましくは６２０ｎｍを超える吸収極大の蛍光部分を含む試薬を使用し、前記結合分子が任意選択的に組み合わせ化学技術、ファージディスプレイ、または核酸選択技術によって同定されるペプチドまたは合成結合剤であることを特徴とする請求項１または２に記載の方法。
【請求項６】
Ｃ反応性たんぱく質の定量のために、アミノ酸配列Ａｌａ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−ＡｓｎまたはＡｌａ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｓｎを含むペプチドまたはペプチド誘導体を含む試薬を使用することを特徴とする請求項５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
１つの分析物に特異的親和性を示す蛍光結合分子または１つの分析物のみの蛍光アナログ、蛍光フラグメント、もしくは蛍光誘導体を含む試薬を使用することを特徴とする請求項１、３、４、５または６の何れか１項に記載の方法。
【請求項８】
異なる特異的親和性を示す、異なる結合分子に共有結合した、異なる蛍光部分を含む試薬を使用することを特徴とする請求項１乃至７の何れか１項に記載の方法。
【請求項９】
分析物に特異的結合親和性を示す１つまたは複数のペプチドまたはペプチド誘導体を含む試薬を使用し、該結合ペプチドが、共有結合した蛍光性残基を有し、３０個未満のアミノ酸で構成されていることを特徴とする請求項１乃至８の何れか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記結合ペプチドが、２０個未満のアミノ酸で構成されていることを特徴とする請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記結合ペプチドが、１５個未満のアミノ酸で構成されていることを特徴とする請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
最大吸光係数が６４０ｎｍを超える波長の蛍光性残基を含む試薬を使用することを特徴とする請求項１乃至１１の何れか１項に記載の方法。
【請求項１３】
細胞溶解性物質または抗凝固薬または界面活性剤を含む試薬を使用することを特徴とする請求項１乃至１２の何れか１項に記載の方法。
【請求項１４】
フルオレセイン、テキサスレッド、Ｃｙ５、他のＣｙ  Ｄｙｅ  ＦｌｕｏｒＬｉｎｋ物質、他のシアニン誘導体、ローダミン、メチルローダミン、Ｂｉｏｄｙｐｉ  ６３０／６５０−Ｘ／ＭｅＯＨ、Ｂｉｏｄｙｐｉ  ６５０／６５５−Ｘ／ＭｅＯＨ、Ｂｉｏｄｙｐｉ  ＦＬ／ＭｅＯＨ、Ｂｉｏｄｙｐｉ  Ｒ６Ｇ／ＭｅＯＨ、Ｂｉｏｄｙｐｉ  ＴＭＲ−Ｘ／ＭｅＯＨ、Ｂｉｏｄｙｐｉ  ＴＲ−Ｘ／ＭｅＯＨ、またはＢｉｏｄｉｐｙ群物質由来の他の物質、波長の異なるＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒｏ  Ｄｙｅ、ルテニウムリガンド複合体、ＤＴＰＡ、ＥＤＴＡ、またはＮ１などのキレートリガンドに結合させたユーロピウム、サマリウム、またはテルビウム複合体などのランタノイド元素からなる群から選択される１つまたは複数の蛍光部分を含む試薬を使用することを特徴とする請求項１乃至１３の何れか１項に記載の方法。
【請求項１５】
放射光の偏光が、連続的な速度の読み取りもしくは２つ以上の測定点の間の放射光の偏光の変化の読み取りとしての時間の関数、または規定の測定点後の放射光の偏光の測定によって測定されることを特徴とする請求項１乃至１４の何れか１項に記載の方法。
【請求項１６】
サンプル物質またはサンプル物質のアリコートが、生体物質または該生体物質の希釈物もしくは抽出物から構成されているか、該生体物質から溶解されているか濾過されていることを特徴とする請求項１乃至１５の何れか１項に記載の方法。
【請求項１７】
サンプル物質または該サンプル物質のアリコートが、血液、血清、血漿、血球、または血液もしくは血球由来の溶解物、尿、脳脊髄液、涙液、痰、精液、原形質、胃腸管もしくは糞便から吸引した精液または物質、糞尿の懸濁液からの抽出物または濾過物、植物物質もしくはその抽出物、または植物溶解物もしくは濾過物から構成されていることを特徴とする請求項１乃至１６の何れか１項に記載の方法。
【請求項１８】
既知濃度の分析物（単数または複数）を含む標準物質またはキャリブレーターを使用し、さらに、未知のサンプル中の該分析物（単数または複数）の濃度（単数または複数）が、未知のサンプルから得られた値を既知の標準物質またはキャリブレーターから得た検量線に代入して計算されることを特徴とする請求項１乃至１７の何れか１項に記載の方法。
【請求項１９】
任意選択的に蛍光偏光装置使用時に接続された人工メモリに格納された検量線を使用することを特徴とする請求項１乃至１８の何れか１項に記載の方法。
【請求項２０】
標準物質および未知のサンプル、標準物質もしくは未知のサンプルの間の異なる測定時間での温度差による蛍光偏光の差異を補正するために、経験的または理論的に作成された温度修正アルゴリズムを使用することを特徴とする請求項１乃至１９の何れか１項に記載の方法。
【請求項２１】
使用前に希釈または再構成される濃縮形態または乾燥形態の試薬であって、該試薬が、使用前に１つの試薬に組み合わされるために異なる区画に分割されていることを特徴とする請求項１乃至２０の何れか１項に記載の方法。
【請求項２２】
１つまたは複数の分析物に特異的親和性を示す少なくとも１つの型の結合分子を含み、結合分子に共有結合した蛍光部分、分析物（単数または複数）の蛍光アナログ、蛍光フラグメント、または蛍光誘導体をさらに含むことを特徴とする、請求項１乃至２１の何れか１項に記載の方法。
【請求項２３】
ａ）少なくとも１つの分析物に特異的親和性を示す抗体、抗体の免疫活性フラグメント、アプタマー、または合成結合剤と、
ｂ）前記分析物（単数または複数）の蛍光アナログ、蛍光フラグメント、または蛍光誘導体との間に複合体を含むことを特徴とする請求項２２に記載の試薬。
【請求項２４】
１つまたは複数の前記分析物に特異的親和性を示す結合分子および任意選択的に前記結合分子に共有結合した６００ｎｍと１０００ｎｍとの間、好ましくは６２０ｎｍを超え、より好ましくは６４０ｎｍを超える吸収極大の蛍光部分を含む試薬であり、前記結合分子が任意選択的に組み合わせ化学技術、ファージディスプレイ、または核酸選択技術によって同定されるペプチド、アプタマー組成物、または合成結合剤であることを特徴とする請求項２２または２３に記載の方法。
【請求項２５】
アミノ酸配列が、Ａｌａ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ａｒｇ−Ａｓｎおよび／またはＡｌａ−Ａｒｇ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ａｓｎを含む、前記結合剤の蛍光誘導体が含まれるペプチド結合剤またはペプチド誘導体の結合剤を含むアッセイ試薬であることを特徴とする請求項２２乃至２４のいずれか１項に記載の試薬。
【請求項２６】
必要とされる、生きた生物由来の生体物質のサンプル中の臨床関連物質の濃度を測定するための請求項１乃至２１の何れか１項に記載の使用。
【請求項２７】
複雑な生物流体の試験サンプルまたは試験サンプルのアリコート中の１つまたは複数の分析物の濃度の定量用キットにおいて、１つまたは複数のコンテナを含み、該コンテナ（単数または複数）またはコンテナの区画（単数または複数）は、好ましくは液状の請求項２１〜２４の何れか１項に記載の１つの試薬を含み、該試薬は測定すべき分析物（単数または複数）に対する１つまたは複数の蛍光標識した特異的結合分子、または該分析物の蛍光標識アナログ、蛍光フラグメントまたは蛍光誘導体を含み、試験すべき複雑な生物流体の正確な体積（単数または複数）を得るための該方法を適切に行うために必要なデバイスを同様に含むことを特徴とするキット。
【請求項２８】
コンテナまたはコンテナの区画に含まれる試薬が、分析前、分析直前、または分析と同時に異なるコンテナの内容物と混合されることによって利用可能な状態の試薬に形成することを特徴とする請求項２７に記載のキット。