【手続補正書】
【提出日】平成17年4月15日(2005.4.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質、
（ｂ）ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質の少なくとも膜貫通ドメイン、
（ｃ）ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質の少なくとも細胞外ループ、および
（ｄ）ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質の少なくとも孔領域、
からなる群から選択されるポリペプチドと少なくとも８０％のアミノ酸配列同一性を有するポリペプチドをコードする単離された核酸。
【請求項２】
（ａ）ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質をコードする配列、
（ｂ）ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質の少なくとも膜貫通ドメインをコードする配列、
（ｃ）ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質の少なくとも細胞外ループをコードする配列、
（ｄ）ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質の少なくとも孔領域をコードする配列、
（ｅ）高い予測された抗原性を有するＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質の少なくともエピトープをコードする配列、および
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）の配列のいずれか１つに相補的な配列、
からなる群から選択されるヌクレオチド配列を有する単離された核酸。
【請求項３】
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１、
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３、
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２の残基４４７−４６８、４８１−５０２、５１６−５３３、５４２−５６３、５８３−６０４または６４９−６７０を含むポリペプチドをコードする配列、
（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４の残基３５１−３７２、３８５−４０６、４１９−４３８、４４８−４６９、４８９−５１０、または５５５−５７６を含むポリペプチドをコードする配列、
（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２の残基４６９−４８０、５３４−５４１、または６０５−６４８を含むポリペプチドをコードする配列、
（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４の残基３７３−３８４、４３９−４４８、および５１１−５５４を含むポリペプチドをコードする配列、
（ｇ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２の残基６１６−６３５を含むポリペプチドをコードする配列、
（ｈ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４のおよそ残基５２２−５４１の残基を含むポリペプチドをコードする配列、
（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２の残基２−３４、５２−７０、１０８−１３０、２６４−３０５、３８７−４１７、または６０６−６１４を含むポリペプチドをコードする配列、
（ｊ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４の残基２−４０、１２０−１４８、１６０−２００、または５１２−５２０を含むポリペプチドをコードする配列、および
（ｋ）（ａ）〜（ｊ）の配列のいずれか１つに相補的な配列、
からなる群から選択される請求項２に記載の単離された核酸。
【請求項４】
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３の少なくとも１０個の連続するヌクレオチド、
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３の少なくとも１２個の連続するヌクレオチド、
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３の少なくとも１４個の連続するヌクレオチド、
（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３の少なくとも１６個の連続するヌクレオチド、
（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３の少なくとも１８個の連続するヌクレオチド、および
（ｆ）（ａ）〜（ｅ）の配列のいずれか１つに相補的な配列、
【請求項５】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：５から選択される少なくとも１００個の連続するヌクレオチドと少なくとも８０％のヌクレオチド配列同一性を有する調節要素を含み、
前記調節要素は、ＣａｔＳｐｅｒ１遺伝子が発現可能な哺乳類細胞内で該調節要素に操作可能に接合するコーディング配列の転写を促進することが可能である、単離された核酸。
【請求項６】
６５℃で１．０×ＳＳＣの洗浄ステップを含む条件下でＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３の核酸の少なくとも一部にハイブリダイズする請求項１または２のヌクレオチド配列を含む単離された核酸。
【請求項７】
核酸であって、
（i）ＣａｔＳｐｅｒ１活性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列であって、当該核酸が６５℃で１．０×ＳＳＣの洗浄ステップを含む条件下でＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：３の核酸の少なくとも一部にハイブリダイズする、ヌクレオチド配列と、
（ii）前記配列が発現するように前記配列に操作可能に接合する非相同調節領域と、
を含む請求項１または２の核酸。
【請求項８】
（i）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２または４のアミノ酸配列と少なくとも８０パーセントのアミノ酸配列同一性を有するポリペプチドをコードするヌクレオチド配列と、
（ii）前記配列が発現するように前記配列に操作可能に接合する非相同調節領域と、
を含む請求項１または２の核酸。
【請求項９】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の単離された核酸と、該単離された核酸を検出する手段とを含む、ＣａｔＳｐｅｒ１核酸の少なくとも一部を検出するキット。
【請求項１０】
前記単離された核酸を検出する前記手段は、前記単離された核酸に特異的にハイブリダイズする標識された二次核酸を含む、請求項９に記載のキット。
【請求項１１】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の単離された核酸を含むベクター。
【請求項１２】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の核酸で形質転換された細胞。
【請求項１３】
前記細胞は、哺乳類体細胞、胎児細胞、胚幹細胞、接合子、配偶子、生殖系列細胞およびトランスジェニック動物細胞からなる群から選択される請求項１２に記載の細胞。
【請求項１４】
非ヒトトランスジェニック動物であって、遺伝子コンストラクトが該動物、またはその原種のゲノムに修飾を導入し、該修飾は、ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質の少なくともフラグメントをコードする核酸の挿入、内在性ＣａｔＳｐｅｒ１遺伝子の不活化、およびＣａｔＳｐｅｒ１調節要素に操作可能に接合するレポーター遺伝子の相同組換えによる挿入からなる群から選択される、非ヒトトランスジェニック動物。
【請求項１５】
請求項１〜８のいずれか１項に記載の核酸の挿入である前記修飾された請求項１４に記載の動物。
【請求項１６】
請求項１〜８のいずれか１項の核酸によって読みとられるポリペプチドを含む実質的に純粋な蛋白質製剤。
【請求項１７】
前記ポリペプチドは、
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２、
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４、
（ｃ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２の残基４４７−４６８、４８１−５０２、５１６−５３３、５４２−５６３、５８３−６０４または６４９−６７０、
（ｄ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４の残基３５１−３７２、３８５−４０６、４１９−４３８、４４８−４６９、４８９−５１０、または５５５−５７６、
（ｅ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２の残基４６９−４８０、５３４−５４１、または６０５−６４８、
（ｆ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４の残基３７３−３８４、４３９−４４８、および５１１−５５４、
（ｇ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２の残基６１６−６３５、
（ｈ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４の残基５２２−５４１、
（ｉ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２の残基２−３４、５２−７０、１０８−１３０、２６４−３０５、３８７−４１７、または６０６−６１４、および
（ｊ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４の残基２−４０、１２０−１４８、１６０−２００、または５１２−５２０、
からなる群から選択される請求項１６に記載の実質的に純粋な蛋白質製剤。
【請求項１８】
ＣａｔＳｐｅｒ１エピトープに対して産生される抗体を含む実質的に純粋な抗体製剤。
【請求項１９】
前記エピトープは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２の残基２−３４、５２−７０、１０８−１３０、２６４−３０５、３８７−４１７、および６０６−６１４、ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４の残基２−４０、１２０−１４８、１６０−２００、または５１２−５２０からなる群から選択されるアミノ酸配列内のアミノ酸配列を含む請求項１８に記載の実質的に純粋な抗体製剤。
【請求項２０】
前記抗体は、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ′）2フラグメント、Ｆｖフラグメント、および一本鎖Ｆｖフラグメント（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される抗体フラグメントである請求項１８〜１９のいずれか１項に記載の実質的に純粋な抗体製剤。
【請求項２１】
請求項１８〜２０のいずれか１項に記載の抗ＣａｔＳｐｅｒ１抗体および該抗体を検出する手段を含む、ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質の少なくともエピトープを検出するキット。
【請求項２２】
ＣａｔＳｐｅｒ１活性の潜在的モジュレーターを識別する方法であって、
ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質を発現させる細胞と候補化合物を接触させるステップ、
前記細胞においてＣａｔＳｐｅｒ１活性のインジケーターを測定するステップ、
前記候補化合物が基準レベルに対して前記インジケーターの上昇または低下を引き起こしたかどうかを判定するステップ、および
前記上昇または低下が有意である場合に前記候補化合物をＣａｔＳｐｅｒ１活性の潜在的モジュレーターとして識別するステップ、
を含む方法。
【請求項２３】
前記インジケーターは、前記ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質、またはＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質のレベルのインジケーター、または前記細胞の膜を横切るカチオンフラックスのインジケーター、または前記細胞の全細胞またはチャネル電流のインジケーターをコードするｍＲＮＡのレベルのインジケーターである請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記細胞は成熟精子細胞であり、前記インジケーターは精子運動性の尺度である請求項２２に記載の方法。
【請求項２５】
ＣａｔＳｐｅｒ１活性の潜在的モジュレーターを識別する方法であって、
生理的条件下で候補化合物をＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質の少なくとも構造ドメインを含むＣａｔＳｐｅｒ１部分と接触させるステップ、
前記候補化合物と前記ＣａｔＳｐｅｒ１部分の間の結合がもしあればそれを測定するステップ、
前記結合が有意である場合に前記候補化合物をＣａｔＳｐｅｒ１活性の潜在的モジュレーターとして識別するステップ、
を含む方法。
【請求項２６】
前記ＣａｔＳｐｅｒ１部分は、
（ａ）ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質、
（ｂ）ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質の少なくとも膜貫通ドメイン、
（ｃ）ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質の少なくとも細胞外ループ、および
（ｄ）ＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質の少なくとも孔領域、
からなる群から選択されるポリペプチドである請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
雄被験体の妊性を低下させるための薬物の製剤における、ＣａｔＳｐｅｒ１活性を低下させる化合物の使用。
【請求項２８】
雄被験体に可逆的不妊を引き起こす請求項２７に記載の化合物の使用。
【請求項２９】
雌への投与のための避妊の製剤における、ＣａｔＳｐｅｒ１活性を低下させる化合物の使用。
【請求項３０】
前記雌被験体は哺乳動物であり、前記化合物は前記雌の膣、子宮および輸卵管の少なくとも１つに投与される請求項２９に記載の使用。
【請求項３１】
前記化合物は、ＣａｔＳｐｅｒ１遺伝子の少なくとも一部に対してアンチセンスである核酸、およびＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質に対する抗体からなる群から選択される請求項２７〜２９のいずれか１項に記載の使用。
【請求項３２】
前記化合物は、Ｆａｂフラグメント、Ｆ（ａｂ′）2フラグメント、Ｆｖフラグメント、およびｓｃＦｖフラグメントからなる群から選択される抗体フラグメントである請求項３１に記載の使用。
【請求項３３】
ＣａｔＳｐｅｒ１活性を低下させる化合物を含む避妊製剤。
【請求項３４】
前記化合物は、ＣａｔＳｐｅｒ１遺伝子の少なくとも一部に対してアンチセンスである核酸、およびＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質に対する抗体からなる群から選択される請求項３３に記載の製剤。
【請求項３５】
精子または精子幹細胞にＣａｔＳｐｅｒ１活性を提供する該蛋白質は低下したＣａｔＳｐｅｒ１活性による不妊の処置のための薬剤としてのＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質の使用
【請求項３６】
雌の泌尿生殖路に存在する抗ＣａｔＳｐｅｒ１抗体によって引き起こされる抗ＣａｔＳｐｅｒ１抗体媒介性不妊を処置するための薬剤であって、前記抗ＣａｔＳｐｅｒ１抗体と前記泌尿生殖路内の精子に存在するＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質との結合を阻害するのに有効な量の抗ＣａｔＳｐｅｒ１抗体に特異的に結合する作用物質の使用。
【請求項３７】
前記作用物質は、高い予測された抗原性を有するエピトープを含むＣａｔＳｐｅｒ１蛋白質の少なくともフラグメントを含む請求項３６に記載の使用。
【請求項３８】
前記エピトープは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２の残基２−３４、５２−７０、１０８−１３０、２６４−３０５、３８７−４１７、および６０６−６１４、ならびにＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４の残基２−４０、１２０−１４８、１６０−２００、および５１２−５２０からなる群から選択される配列内に含まれる請求項３７に記載の使用。