(57)【要約】  アルキルガレートの抗真菌・抗ウイルス・抗バクテリア活性の増強を図ることと、水への可溶化を可能とする新しい技術手段を提供する。  本発明のアルキルガレート薬剤組成物は、（Ａ）アルキル基の炭素数が５〜１６の範囲のアルキルガレート、および（Ｂ）アルキル基の炭素数が前記（Ａ）のものより小さいアルキルガレートを含有することを特徴とする。好ましくは、アルキルガレート（Ｂ）のアルキル基の炭素数は２〜７の範囲であり、（Ｃ）アルカリ金属塩、ホウ酸、ホウ酸ナトリウム、および有機塩から選ばれる少なくとも１種を含有する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルキル基とガロイル基がエステル結合しているアルキルガレートを抗真菌、抗ウイルス、もしくは抗バクテリア作用の有効成分としている薬剤組成物であって、下記の２種類のアルキルガレート：
（Ａ）アルキル基の炭素数が５〜１６の範囲のアルキルガレート、および
（Ｂ）アルキル基の炭素数が前記（Ａ）のものより小さいアルキルガレート
を含有することを特徴とするアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項２】
アルキルガレート（Ｂ）のアルキル基の炭素数が２〜７の範囲であることを特徴とする請求項１に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項３】
（Ｃ）アルカリ金属塩、ホウ酸、ホウ酸ナトリウム、および有機塩から選ばれる少なくとも１種を含有することを特徴とする請求項１または２に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項４】
非イオン界面活性剤、ポリエチレングリコール、およびアルギニンまたはその誘導体の塩酸塩から選ばれる少なくとも１種と共に水溶液中にて混合することにより、あるいはｐＨ緩衝液中にて混合することによりアルキルガレートが可溶化された水溶液であることを特徴とする請求項１から３のいずれかに記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項５】
アルキルガレート１重量部に対して、非イオン界面活性剤１〜１０重量部および水１００〜５０００重量部を混合することによりアルキルガレートが可溶化された水溶液であることを特徴とする請求項４に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項６】
３０〜９５℃の温度において加熱混合し、次いで室温まで冷却することによりアルキルガレートが可溶化された水溶液であることを特徴とする請求項５に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬、農薬、化粧品および機能性食品として有用な抗真菌・抗バクテリア・抗ウイルス作用を有する薬剤組成物に関するものである。さらに詳しくは、本発明は、アルキルガレートによる抗真菌・抗バクテリア・抗ウイルス活性の増強方法に関するもので、外用殺菌消毒一般、皮膚科領域、口腔歯科領域（齲歯、歯周炎、口臭、口内炎）、眼科領域、婦人科領域(woman's health and sanitary protection)の感染治療剤および予防のための処方剤などとして、医薬、農薬（家畜動物、ペット、水産、植物）、化粧品および機能性食品などに有用な新しい薬剤組成物に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
アルキルガレートのなかには、WHO・FDAにより食品添加物として認可されているもの(propyl gallate, octyl gallate, dodecyl gallate)や、日本の厚生労働省により医薬品添加物として認可されているもの（propyl gallate）、そして医薬部外品として認可されているもの（octyl gallate）があることから、安全性に優れている。【０００３】
これらのアルキルガレートについて、本発明者は、新しい観点からの詳細な検討によって抗真菌・抗バクテリア・抗ウイルス作用活性があることを見出し、これを薬剤とすることをすでに提案している（特許文献１）。【０００４】
しかしながら、これらのアルキルガレートの抗真菌・抗バクテリア・抗ウイルス作用活性は、必ずしも十分に強いとはいえず、それらの活性の増強が望まれていた。また、アルキルガレートは疎水性が高いため、水に難溶のことから製剤化が必ずしも容易ではなかった。
【特許文献１】特開２００６−３０６８３６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、以上のような背景から、発明者によるこれまでの検討を更に発展、深化させて、アルキルガレートの抗真菌・抗ウイルス・抗バクテリア活性の増強を図ることと、水への可溶化を可能とする新しい技術手段を提供することを課題としている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、上記の課題を解決するものとして以下のことを特徴としている。【０００７】
第１：アルキル基とガロイル基がエステル結合しているアルキルガレートを抗真菌、抗ウイルス、もしくは抗バクテリア作用の有効成分としている薬剤組成物であって、下記の２種類のアルキルガレート：
（Ａ）アルキル基の炭素数が５〜１６の範囲のアルキルガレート、および
（Ｂ）アルキル基の炭素数が前記（Ａ）のものより小さいアルキルガレート
を含有することを特徴とするアルキルガレート薬剤組成物。【０００８】
第２：アルキルガレート（Ｂ）のアルキル基の炭素数が２〜７の範囲であることを特徴とする上記第１のアルキルガレート薬剤組成物。【０００９】
第３：（Ｃ）アルカリ金属塩、ホウ酸、ホウ酸ナトリウム、および有機塩から選ばれる少なくとも１種を含有することを特徴とする上記第１または第２のアルキルガレート薬剤組成物。【００１０】
第４：非イオン界面活性剤、ポリエチレングリコール、およびアルギニンまたはその誘導体の塩酸塩から選ばれる少なくとも１種と共に水溶液中にて混合することにより、あるいはｐＨ緩衝液中にて混合することによりアルキルガレートが可溶化された水溶液であることを特徴とする上記第１から第３のいずれかのアルキルガレート薬剤組成物。【００１１】
第５：アルキルガレート１重量部に対して、非イオン界面活性剤１〜１０重量部および水１００〜５０００重量部を混合することによりアルキルガレートが可溶化された水溶液であることを特徴とする上記第４のアルキルガレート薬剤組成物。【００１２】
第６：３０〜９５℃の温度において加熱混合し、次いで室温まで冷却することによりアルキルガレートが可溶化された水溶液であることを特徴とする上記第５のアルキルガレート薬剤組成物。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、アルキルガレート含有の薬剤において、抗真菌、抗ウイルス、抗バクテリア活性を増強することを可能とし、さらには水への可溶化を可能とすることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】MRSA COL株に対するオクチルガレートとプロピルガレートとの併用による殺菌時間の短縮を示すグラフである。
【図２】Candida albicans ATCC10231に対するオクチルガレートとプロピルガレートとの併用による殺カビ時間の短縮を示すグラフである。
【図３】ｎ−ドデシルガレートの殺インフルエンザウイルス活性のｎ−ヘキシルガレートとｎ−ブチルガレートによる活性増強を示すグラフである。横軸は、ｎ−ドデシルガレートの濃度を示す。
【図４】オクチルガレートによるＭＤＣＫ細胞における抗インフルエンザウイルス活性のプロピルガレートによる活性増強を示すグラフである。
【図５】オクチルガレートによるＨＳＶ−１の抗ウイルス活性のプロピルガレートによる増強効果を示すグラフである。
【図６】インフルエンザB/T/1/05に対するオクチルガレートとプロピルガレートとの併用による殺ウイルス時間の短縮を示すグラフである。
【図７】オクチルガレート単独でのインフルエンザウイルスB/T/1/05に対する殺ウイルス活性の時間経過を示すグラフである。
【図８】プロピルガレート単独でのインフルエンザウイルスB/T/1/05に対する殺ウイルス活性の時間経過を示すグラフである。
【図９】オクチルガレート(5mg/L)によるインフルエンザウイルスB/T/1/05に対する殺ウイルス活性の時間経過に対するプロピルガレートの濃度効果を示すグラフである。
【図１０】オクチルガレート(10mg/L)によるインフルエンザウイルスB/T/1/05に対する殺ウイルス活性の時間経過に対するプロピルガレートの濃度効果を示すグラフである。
【図１１】オクチルガレート(20mg/L)によるインフルエンザウイルスB/T/1/05に対する殺ウイルス活性の時間経過に対するプロピルガレートの濃度効果を示すグラフである。
【図１２】オクチルガレート(30mg/L)とプロピルガレート（300mg/L）との併用によるインフルエンザウイルスB/T/1/05に対する殺ウイルス活性増強の時間経過を示すグラフである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
以下に、本発明の実施の形態について説明する。【００１６】
なお、本発明におけるアルキルガレートは、アルキル基とガロイル基とのエステル結合基以外に、適宜に他の置換基、たとえばアルキル基、シクロアルキル基、アリール基、アルコキシ基、エステル基、アミド基、アミノ基等を有していてもよい。【００１７】
また、本発明におけるアルキルガレートのアルキル基の具体例としては、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｎ−アミル基、イソアミル基、ｎ−ヘキシル基、ｎ−ヘプチル基、ｎ−オクチル基、ｎ−ノニル基、ｎ−デシル基、ｎ−ウンデシル基、ｎ−ドデシル基などが挙げられる。【００１８】
また、本発明における「抗真菌」、「抗ウイルス」および「抗バクテリア」の用語は、各々、「殺真菌」、「殺ウイルス」および「殺バクテリア」の意味も包含している。【００１９】
本発明の有効成分としての作用が増強されたアルキルガレート薬剤組成物では、前記のように、
（Ａ）アルキル基の炭素数が５〜１６の範囲内のアルキルガレートと、
（Ｂ）アルキル基の炭素数がこの（Ａ）のものより小さいアルキルガレートとの複数のものによって構成されていることを本質的な特徴としている。ここで、アルキルガレート（Ｂ）のアルキル基の炭素数は、好ましくは２〜７であり、たとえば、アルキル基の炭素数が８〜１２の範囲内のアルキルガレート（Ａ）と、アルキル基の炭素数が３〜７の範囲内のアルキルガレート（Ｂ）との組み合わせが好ましいものとして例示される。【００２０】
以下に、上記特徴点の意義について詳しく説明する。【００２１】
なお、以下の説明においては、表中のＮＤは、Not Detectedで、菌の増殖が完全に阻止されており、菌が検出されなかったことを示している。
１．抗菌活性の増強
表１は、グラム陽性菌とグラム陰性菌のオクチルガレートによるＭＩＣ（最少発育阻止濃度）値が、抗菌活性を示さないＭＩＣ以下の濃度のイソアミルガレートの添加により低下すること、そしてこの低下は、ＮａＣｌの添加によりさらに増強されることを示している。【００２２】
同様の現象は、イソアミルガレートの代わりに、抗菌活性を示さないＭＩＣ以下の濃度のｎ−ヘプチルガレート、ｎ−ヘキシルガレート、ｎ−ペンチルガレート、ｎ−ブチルガレート、イソブチルガレートやｎ−プロピルガレート（及びこれらの構造類似型）の添加によっても起こることが明らかになった。また同様に、ｎ−ドデシルガレート、ｎ−ウンデシルガレート、ｎ−デシルガレート、ｎ−ノニルガレートのＭＩＣ値も、抗菌活性を示さないＭＩＣ以下の濃度のｎ−ヘプチルガレート、ｎ−ヘキシルガレート、ｎ−ペンチルガレート、ｎ−ブチルガレート、イソブチルガレートやｎ−プロピルガレート（及びこれらの構造類似型）の添加によって低下することが明らかになった。【００２３】
表２より、抗菌活性を示さないＭＩＣ以下の濃度のイソアミルガレートとＮａＣｌの添加により、細菌のオクチルガレートによるＭＩＣ値が、既存の消毒薬であるchlorhexidine gluconateのＭＩＣ値に比べて遙かに低くなることが分かり（最高で６４０倍）、これはオクチルガレートが優れた殺菌剤・消毒薬となることを示している。【００２４】
上記の現象の理由は次のように推測される。現在までに得られているデータから総合して考察すると、オクチルガレートの菌に対する作用点は、菌の増殖阻止にかかわる部位と、菌の増殖には関係しない部位との２種類あることが分かる。そしてイソアミルガレートが後者に結合してしまうと、オクチルガレートは、前者の菌の増殖に関わる部位のみに特異的に結合するため、遙かに少ない濃度で菌の増殖を阻害し、ＭＩＣ値が低下したものと推測される。【００２５】
以上の結果に基づき、本発明はつぎのように要約される。【００２６】
アルキルガレート（Ａ）（アルキル鎖の炭素数が５〜１６）による抗真菌・抗バクテリア・抗ウイルス活性は、アルキルガレート（Ａ）よりもアルキル鎖の炭素数が小さいアルキルガレート（Ｂ）、および１価の塩（Ｃ）（ＮａＣｌ，ＫＣｌ，ＬｉＣｌ，ＮａＨＣＯ３）等のアルカリ金属塩、ホウ酸、ホウ酸ナトリウム、または有機塩により増強され、アルキルガレート（Ａ）のＭＩＣ値を低下させることができる。【００２７】
【表１】
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【００２８】
【表２】
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【００２９】
なお、表１および表２、さらには後述の表８の場合の実験方法は以下のとおりである。【００３０】
最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）の測定は、Mueller Hinton II Agar（ＢＢＬ）を用いて、日本化学療法学会標準法（三橋進  他、1981、「最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）測定法再改定について」、Chemotherapy、２９、p. ７６−７９）に準拠して寒天平板を用いた２倍段階希釈法により行った。供試薬剤は、Octyl Gallate(東京化成)、Isoamyl Gallate(東京化成)、NaCl(関東化学)である。対照薬剤として、５％ヒビテン液(住友製薬)を用いた。被検菌をMueller Hinton Broth(DIFCO)に接種し、３７℃、１８時間増菌培養し、生理食塩水で１×１０６ＣＦＵ／ｍＬに希釈、接種用菌液とした。この菌液をミクロプランター（佐久間製作所）を用いて薬剤添加寒天平板に接種した。３７℃、２４時間培養後、完全に発育が阻止された濃度をＭＩＣ(minimum inhibition concentration)とした。【００３１】
表３Ａは、オクチルガレートによる一般細菌（グラム陽性菌、グラム陰性菌）に対する抗菌活性の０．９％（ｗ／ｖ）クエン酸三ナトリウムとプロピルガレートの添加による増強効果を示している。【００３２】
オクチルガレートによる一般細菌（グラム陽性菌、グラム陰性菌）に対する抗菌活性が、０．９％（ｗ／ｖ）クエン酸三ナトリウムとプロピルガレートの添加により、増強されることを明確に示している。なお、クエン酸三ナトリウム添加量が多いほど、より低い濃度のプロピルガレートにより、オクチルガレートのＭＩＣ値が低下した。クエン酸三ナトリウムの代わりにクエン酸水素二ナトリウムを用いた場合も同様の傾向を示した。なお、表中、MHAはMueller Hinton II Agarを示し、DDWは、滅菌水を示す。オクチルガレートは、J1816（オクチルガレート量の３倍量）で後述の例６の方法で可溶化した。プロピルガレートは、後述の例５の方法で可溶化した。【００３３】
【表３Ａ】
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【００３４】
表３Ｂは、臨床分離株MRSA（２１株）とMSSA(８株)に対する高純度に再結晶化したオクチルガレート（後述の例２の方法にてJ1216で可溶化した）のＭＩＣ値を示したもので、クエン酸三ナトリウムよりもクエン酸水素二ナトリウムのほうが抗菌活性を強めること、そして５０ｍｇ／Ｌのプロピルガレート（後述の例３の方法にて可溶化した）の併用で、その抗菌活性が顕著に強められ、すべての株が、１．２５ｍｇ／Ｌのオクチルガレートにより死滅されたことがわかる。この実験結果より、オクチルガレートの不純物が抗菌活性を示すのではなく、オクチルガレートの本体が抗菌作用を示すことが確証された。【００３５】
表３Ｃは、グラム陽性菌とグラム陰性菌に対する高純度に再結晶化したオクチルガレート（後述の例２の方法にてJ1216で可溶化した）のＭＩＣ値を示したもので、クエン酸三ナトリウム(同表右欄)よりもクエン酸水素二ナトリウムのほうが抗菌活性を強めること、３００ｍｇ／Ｌのプロピルガレートにより、３種の菌を除いて、完全に菌を死滅させたことがわかる。また、１００ｍｇ／Ｌのプロピルガレートとの併用により、オクチルガレートのＭＩＣ値を低下させること（抗菌活性を強めること）がわかる。この実験結果より、オクチルガレートの不純物が抗菌活性を示すのではなく、オクチルガレートの本体が一般細菌に対して抗菌作用を示すことが確証された。【００３６】
【表３Ｂ】
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【００３７】
【表３Ｃ】
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【００３８】
図１は、MRSA COL株に対するオクチルガレートとプロピルガレートとの併用による殺菌時間の短縮を示している。プロピルガレート単独での殺活性は弱いが、オクチルガレートと併用することにより、殺菌に要する時間が大幅に短縮されることが分かる。【００３９】
表４は、オクチルガレートによる一般細菌（グラム陽性菌、グラム陰性菌）に対する抗菌活性に対するＮａＣｌの添加効果を示している。【００４０】
ＮａＣｌの添加量（２〜４％）が多いほど、イソアミルガレートによるオクチルガレートのＭＩＣ値の低下が著しいことがわかる。【００４１】
【表４】
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【００４２】
表５は、真菌（カビ）におけるオクチルガレートによる抗菌活性に対する０．９％（ｗ／ｖ）クエン酸三ナトリウムとプロピルガレートの添加による増強効果を示している。【００４３】
オクチルガレートによる真菌（カビ）に対する抗菌活性が、０．９％（ｗ／ｖ）クエン酸三ナトリウムとプロピルガレートの添加により増強されることを明確に示している。【００４４】
【表５】
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【００４５】
図２は、Candida albicans ATCC10231に対するオクチルガレートとプロピルガレートとの併用による殺カビ時間の短縮を示している。プロピルガレート単独での殺活性は弱いが、オクチルガレートと併用することにより、殺カビに要する時間が大幅に短縮されることが分かる。【００４６】
表６は、Pseudomonas aeruginosa POA1に対するラウリルガレートによる抗菌作用の３％ＮａＣｌ存在下におけるイソアミルガレートあるいはプロピルガレートによる増強効果を示している。【００４７】
ラウリルガレートによるPseudomonas aeruginosa POA1に対する抗菌作用が、３％ＮａＣｌ存在下においてイソアミルガレートあるいはプロピルガレートにより増強されることが分かる。【００４８】
【表６】
2008081901.tif 000009
【００４９】
表７は、オクチルガレートによる臨床分離株のＭＲＳＡやＭＳＳＡに対する抗菌作用のイソアミルガレートによる増強効果を示している。【００５０】
表７より、オクチルガレートによる臨床分離株のＭＲＳＡやＭＳＳＡに対する抗菌作用が、イソアミルガレートにより増強されることが示されている。オクチルガレートとイソアミルガレートは、アルキルガレートの３．５倍量（重量比）のJ1816で可溶化した。【００５１】
【表７】
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【００５２】
２．アルキルガレートによるＭＲＳＡのβラクタム剤感受性増強効果のさらなる増強
アルキルガレートは、ＭＲＳＡのβラクタム剤感受性を増強することが明らかになっているが（ＰＣＴ／ＪＰ２００４／０００７５１）、この増強効果は、オクチルガレートよりもアルキル鎖の炭素数が小さいアルキルガレートとの共存在により、強力に増強できることを見出した。表８、表９に抗菌活性を示さない濃度のプロピルガレートとイソアミルガレートの例を示しているが、これらのガレートの共存在により、オクチルガレートによるオキサシリンのＭＲＳＡのＭＩＣ値の低下が、１．５６μｇ／ｍｌという低濃度でも起こることを示している。【００５３】
【表８】
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【００５４】
【表９】
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【００５５】
表１０は、臨床分離株ＭＲＳＡにおけるオキサシリン単独のＭＩＣ値とオクチルガレート併用時のオキサシリンのＭＩＣ値を示している。【００５６】
すなわち、２倍段階寒天平板希釈法を用いて測定した、オキサシリン単独のＭＩＣ値と、オクチルガレートを併用したときのオキサシリンのＭＩＣ値を、試験した各菌株について示している。１２．５μｇ／ｍＬのオクチルガレート併用時に、いくつかの菌株においてＩＬＳＭＲ効果を確認することができ、２５μｇ／ｍＬのオクチルガレート併用時では、オクチルガレートのみで全ての菌株において増殖阻害効果が確認された。【００５７】
【表１０】
2008081901.tif 000013
【００５８】
表１１は、オキサシリンにオクチルガレートを併用させた際に、オキサシリンのＭＩＣ値を２μｇ／ｍＬ以下にするために必要なオクチルガレートの濃度を、それぞれの菌株について示している。すなわち、短鎖ガレート類を共存在させずにオクチルガレートのみを併用した場合と、オクチルガレートに加えてイソアミルガレートもしくはプロピルガレートを併用した場合について示している。２５μｇ／ｍＬのイソアミルガレートを共存在させたときは、オキサシリンのＭＩＣを２μｇ／ｍＬにするためには、１．５６μｇ／ｍＬのオクチルガレートを併用すれば十分であることがわかる。【００５９】
【表１１】
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【００６０】
表１２は、臨床分離株ＭＲＳＡにおけるオクチルガレートによるオキサシリン感受性増強作用の短鎖アルキルガレート併用効果を調べたものであるが、表７で示したオキサシリンのＭＩＣ値を２μｇ／ｍＬ以下にするために必要なオクチルガレートの濃度を、Ｒａｎｇｅと、Ｃ５０、Ｃ１００でまとめた。Ｃ５０、Ｃ１００はそれぞれ、５０％、１００％の菌株が２μｇ／ｍＬ以下のオキサシリンによって増殖阻止できるようなオクチルガレートの併用濃度である。プロピルガレートを２５μｇ／ｍＬで共存在させると、６．２５μｇ／ｍＬのオクチルガレートの併用により１００％のＭＲＳＡ株が２μｇ／ｍＬ以下のオキサシリンによって増殖阻止され、イソアミルガレートを２５μｇ／ｍＬで共存在させると、１．５６μｇ／ｍＬのオクチルガレートの併用により１００％のＭＲＳＡ株が２μｇ／ｍＬ以下のオキサシリンによって増殖阻止された。なお、２μｇ／ｍＬのオキサシリンのＭＩＣ値は、感受性株（ＭＳＳＡ）の指標とされる。【００６１】
【表１２】
2008081901.tif 000015
【００６２】
３．殺ウイルス活性と抗ウイルス活性の増強
１）殺ウイルス活性の増強（図３）
図３中の白丸はドデシルガレート単独での殺インフルエンザウイルス作用である。そこに１００μｇ/ｍｌのヘキシルガレートを共存させた時の作用を図３中に白四角で示したが、ドデシルガレートの殺ウイルス作用が非常に増強され２０μｇ/ｍｌでも生き残りが見られなかった。この濃度では殺ウイルス作用の見られないブチルガレートの添加（白三角）によっても、ドデシルガレートの殺ウイルス作用が非常に増強され、種々調べた結果、アルキルガレートＡ（アルキル鎖の炭素数が５〜１６）による殺ウイルス活性は、アルキルガレートＡよりもアルキル鎖の炭素数が小さいアルキルガレートＢにより増強された。
２）抗ウイルス活性の増強（図４）
インフルエンザウイルスのＭＤＣＫ細胞でのウイルスの増殖をオクチルガレートは抑制するが、その増殖抑制は、抗ウイルス活性のない濃度のプロピルガレートにより、顕著に増強された。【００６３】
種々調べた結果、アルキルガレートＡ（アルキル鎖の炭素数が５〜１６）による抗ウイルス活性は、アルキルガレートＡよりもアルキル鎖の炭素数が小さいアルキルガレートＢにより増強された。【００６４】
本発明の対象バクテリア、真菌、ウイルスを表１３に記した。【００６５】
【表１３】
2008081901.tif 000016
【００６６】
表１４〜１６は、オクチルガレートによるヘルペスウイルス（ＨＳＶ−１）とインフルエンザウイルスに対する殺ウイルス活性は、J1816とプロピルガレートの添加により、著しく増強されることを示している。【００６７】
６ｍｇ／ＬのＪ１８１６の共存下では、２ｍｇ／Ｌのオクチルガレート（J1816非存在下では２０ｍｇ／Ｌ）によって、ＨＳＶ−１は細胞への感染能を完全に消失した。同様に、インフルエンザウイルスの場合にも、３０ｍｇ／ＬのJ1816の存在下（Ｊ１８１６非存在下では６０ｍｇ／Ｌ）で、１０ｍｇ／Ｌのオクチルガレートによって、細胞への感染能を完全に消失した。従って、オクチルガレートによるヘルペスウイルス（ＨＳＶ−１）とインフルエンザウイルスに対する殺ウイルス活性は、J1816の添加により、著しく増強されたことがわかる。【００６８】
【表１４】
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【００６９】
【表１５】
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【００７０】
【表１６】
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【００７１】
また、図５は、オクチルガレートによるＨＳＶ−１の殺ウイルス活性が、６０ｍｇ／Ｌのプロピルガレートによって顕著に増強されたことを示している。【００７２】
図６は、インフルエンザB/T/1/05に対するオクチルガレートとプロピルガレートとの併用による殺ウイルス時間の短縮を示している。プロピルガレート単独での殺活性は弱いが、オクチルガレートと併用することにより、殺ウイルスに要する時間が大幅に短縮されることが分かる。【００７３】
図７〜１２の実験は、３７℃で行った。ウイルスによる感染能の測定は、MDCK細胞を用い、プラークアッセイ法で、測定した。【００７４】
図７より、オクチルガレートはインフルエンザウイルスB/T/1/05に対し、殺ウイルス活性があるが、図８より、プロピルガレートは、その活性が弱いことが分かる。ところが、オクチルガレートによる殺ウイルス活性は、プロピルガレートとの併用により、顕著に増強されることを図９〜１２は示しており、図１２では、両者の併用により、１分以内に細胞への感染能が消失しており、極めて有効な殺ウイルス剤となることが期待される。このオクチルガレートによる殺ウイルス活性は、インフルエンザウイルスA/Aichi(H3N2)に対しても上記と同様に、プロピルガレートにより増強された。
４．応用範囲
強力な抗真菌・抗バクテリア・抗ウイルス作用を有し、かつ低毒性であるため、医薬、農薬（家畜動物、養殖魚、ペット、植物）、化粧品および機能性食品に関する下記に示す広範囲の応用が可能である。【００７５】
１）外用殺菌消毒一般（手術器具、医療用器具の消毒、医療施設の消毒、手の消毒）院内感染予防
２）耳鼻科領域（鼻腔内ＭＲＳＡなど除菌）
３）皮膚科領域（褥瘡、熱傷、ニキビの予防と治療、体臭の除去）ニキビ治療用化粧品、シャンプーやボディシャンプーなど
４）口腔歯科領域(風邪の予防と治療、咽頭炎の予防と治療、齲歯の治療と予防、歯周病の治療と予防、口臭の除去と予防、口内炎の治療と予防)：うがい薬、薬用歯磨粉、洗口剤
５）眼科領域(細菌、真菌、ウイルス感染の治療と予防、コンタクトレンズの殺菌消毒)：目薬、消毒薬
６）婦人科領域（抗菌・抗真菌・抗ウイルス生理衛生用品、ＨＩＶなどの殺ウイルス剤）
７）食中毒領域（Vibrio parahaemolyticus, Campylobacter jejuni/coli, Salmonella, Echerichia coli, Clostridium perfringens, Bacillus cereus, Yersinia enterocolitica, Vibrio cholerae, Vivrio mimicus, Vibrio fluvialis, Aeromonashydrophila, Aeromonas Sobria, Plesimonas shigelloides, Staphylococcus aureus, Clostridium botulinum, ノロウイルスなどが引き起こす食中毒の治療と予防）：食中毒治療剤と予防剤
８）肺炎治療剤（Mycoplasma pneummoniae, Streptococcus pneumoniae, Hemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae, Legionella pneumophila, Moraxella catarrhalis, Staphylococcus aureus, Mycobacteria tuberculosis、各種ウイルスによる肺炎の治療と予防）、インハレーションによる治療と予防
９）機能性食品(ガムなどに含有させることによる口臭除去、風邪・口内炎の予防および治療)
本発明の抗真菌、抗ウイルス、もしくは抗バクテリア作用を有する薬剤組成物においては、その投与形態として、通常の抗生物質と同様に非経口投与、経口投与、局所投与などが挙げられる。一般的には、注射剤による投与が好適である。この場合注射剤は常法により調製され、注射剤の形態として、適当なビヒクル、たとえば滅菌した蒸留水、生理食塩水等で溶解される場合も含まれる。【００７６】
また様々な投薬型で経口投与することもできる。たとえば、錠剤、カプセル、糖などで被覆した錠剤、液状溶液または懸濁液の形態である。【００７７】
予防・治療で用いる上記有効成分の投与量は、年齢、体重、患者の症状および投与経路によって変えることができ、たとえば、成人に対して投与する場合は、１回投与当たり、１ｍｇ〜３ｇ（体重１ｋｇあたり）を１日に１回から３回経口投与する。これらの投与量および投与経路を変化させることによって最良の治療効果を上げるようにする。【００７８】
本発明の薬剤組成物は、通常、常法に従って調製され、医薬的に適切な形態とされる。たとえば、固体形態では、活性化合物と共に、ラクトース、デキストロース、サッカロース、セルロース、トウモロコシ澱粉、およびジャガイモ澱粉などの希釈剤、シリカ、タルク、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウムまたはステアリン酸カルシウムおよび／またはポリエチレングリコールなどの滑沢剤、澱粉、アラビアゴム、ゼラチン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ポリビニルピロリジンなどの結合剤、澱粉、アルギン酸、アルギン酸塩、グリコール酸デンプンナトリウムなどの崩壊剤、発泡剤、色素、甘味料、例えばレシチン、ポリソルベート、ラウリル硫酸塩などの湿潤剤、および一般に非毒性および医薬的処方に用いられる薬学的に非活性な物質を含んでいてもよい。これらの薬剤組成物は既知の方法、例えば混合、粒状化、錠剤化、糖衣、被覆などにより製造される。【００７９】
非経口投与の場合、直腸への適用を意図した坐剤でも可能であるが、汎用剤形は注射剤である。注射剤では液体製剤、用時溶解型製剤、懸濁製剤などの外観を異にする剤形があるが、基本的には活性成分を適当な方法により無菌化したのち、直接容器に入れ、密封する点で同一と考えられる。【００８０】
最も簡単な製剤化法としては、活性有効成分を適当な方法により無菌化したのち、これを別々に、または物理的に混合した後、その一定量を分割製剤化する方法がある。液剤形態を選ぶ場合には活性成分を適当な媒体に溶解し、これを滅菌濾過したのち適当なアンプルまたはバイアルに充填、密封する方法をとることができる。【００８１】
この場合汎用される媒体は注射用蒸留水であるが、本発明においては、これに拘束されるものではない。また必要ならば、塩酸プロカイン、塩酸キシロカイン、ベンジルアルコールおよびフェノールなどの局所麻酔作用を有する無痛化剤、ベンジルアルコール、フェノール、メチルまたはプロピルパラベン、およびクロロブタノールなどの防腐剤、クエン酸、酢酸、リン酸のナトリウム塩などの緩衝剤、エタノール、プロピレングリコール、塩酸アルギニンなどの溶解補助剤、Ｌ−システイン、Ｌ−メチオニン、Ｌ−ヒスチジンなどの安定化剤、さらには等張化剤などの添加剤を添加することも可能である。
５．アルキルガレート水溶液の作製法
アルキルガレートは、疎水性が高く水に難溶で製剤化が困難であった。本発明は、アルキルガレートの透明な水溶液の作製法に関する。アルキルガレート１重量部、非イオン性界面活性剤１〜１０重量部、水１００〜５０００重量部をミキサーや超音波などで混合しながら、３０〜９５℃に加温することにより溶解すると乳白色となるが、室温（０〜３０℃ぐらい）まで冷却することにより透明な水溶液を作製することができる。非イオン性界面活性剤としては、ショ糖脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンヒマシ油・硬化ヒマシ油、グリセリン脂肪酸エステル、ポリエチレンマクロゴールなどが挙げられる。【００８２】
例１：オクチルガレート１００ｍｇ、ショ糖ステアリン酸エステル（三菱化学フーズ株式会社 J1816）３００ｍｇ、水１００ｍｌを高速ミキサーで混合し、約６０〜７０℃に加温すると乳白色となる。室温まで放置すると透明な水溶液が得られる。【００８３】
例２：５０〜７０℃に加温したMilli-Q水約６０ｍｌにオクチルガレート１００ｍｇを加え、激しく振とうし、完全に分散後、あらかじめMilli-Q水で可溶化しておいたショ糖脂肪酸エステル（通常１０ｍｇ／ｍｌ、三菱化学フーズ株式会社製、J1216（D1216）、J1416（D1416）、J1616（D1616）、J1816（D1816）など）１０〜３５ｍｌを加え、攪拌すると無色透明な水溶液が得られる。次いで、Milli-Q水を加えて全容量を１００ｍｌにする。【００８４】
例３：約６０〜７０℃に加温したMilli-Q水１００ｍｌにプロピルガレート３００〜５００ｍｇを添加し、激しく振とうすると無色透明な水溶液が得られる。【００８５】
例４：オクチルガレート１００ｍｇ、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（日光ケミカルス株式会社製 HCO-60）５００ｍｇ、水１００ｍｌを高速ミキサーで混合し、約６０〜７０℃に加温するとやや乳白色となる。室温まで放置すると透明な水溶液が得られる。【００８６】
例５：プロピルガレート５００ｍｇ、５ｍＭリン酸緩衝液（ＫＨ２ＰＯ４−Ｎａ２ＨＰＯ４、ｐＨ６．５）、Milli-Q水１００ｍｌ（５０〜６０℃）を混合し、Potter-Elvehjemテフロン（登録商標）ガラスホモジナイザーなどの高速ホモジナイザーでホモジナイズすると無色透明な水溶液が得られる。なお、得られた水溶液は、褐色ガラス瓶に保存する。水溶液の調整中も遮光することが望ましい。保存は、室温または冷蔵保存する。得られたアルキルガレート水溶液中に含まれている空気をアルゴンガス、Heガス、Ｎ２ガスなどで置換するか、あるいは抗酸化剤を添加すると永く保存が可能である。【００８７】
例６：オクチルガレート１００ｍｇ、ショ糖ステアリン酸エステル（三菱化学フーズ株式会社J1816）１００〜３００ｍｇに６０〜７０℃に加温したMilli-Q水約５０ｍｌを加え、Potter-Elvehjemテフロン（登録商標）ガラスホモジナイザーにより高速でホモジナイズすると、無色であるが若干濁度のある水溶液が得られる。得られた水溶液にMilli-Q水を加えて、１００ｍｌとする。保存は、室温または冷蔵保存する。【００８８】
例７：オクチルガレート１００ｍｇにポリエチレングリコール（第１工業製薬株式会社、マクロゴール＃６０００）１００〜５００ｍｇ、Milli-Q水約５０ｍｌを加え、４０〜７０℃に加温するとともに攪拌溶解後、ショ糖ステアリン酸エステル（三菱化学フーズ株式会社 J1816）１００〜３００ｍｇを添加後、Potter-Elvehjemテフロン（登録商標）ガラスホモジナイザーで高速でホモジナイズすると、完全に透明な水溶液が得られる。Milli-Q水を加えて１００ｍｌにする。保存は、室温または冷蔵保存する。【００８９】
例８：約７０℃に加温したMilli-Q水１００ｍｌにオクチルガレート１０ｍｇを添加し、激しく振とうし、完全に分散後、アルギニン塩酸塩１Ｍを添加すると、無色透明な水溶液が得られる。アルギニン塩酸塩は、ブチロイルアルギニン塩酸塩などのアルキルアルギニン塩酸塩であってもよい。【００９０】
例９：殺真菌・殺ウイルス・殺バクテリアのカクテルの調製
殺真菌・殺ウイルス・殺バクテリアのカクテルとして下記のカクテルを調製した。
Optimized formulation (1)
Octyl gallate  < 200 mg/L（なお、この上限濃度は、日本の厚生労働省により、医薬部外品として許容されている濃度である。）
Propyl gallate  < 2,000 mg/L（なお、この上限濃度は、日本の厚生労働省により、医薬品添加物として許容されている濃度である。）
J1816  < 2,000 mg/L
Trisodium citrate  or Disodium Hydrogen citrate  < 4 ％ (w/v)
KH2PO4-Na2HPO4  < 10 mM
Polyethyleneglycol
Macrogol #6000  < 100 mg/L
アスコルビン酸、アスコルビン酸ナトリウム、ビタミンＥなどの抗酸化剤  < 1,000 mg/L
Final pH：4−8
上記のMacrogol #6000を含有するカクテルを歯ブラシに付けて歯を磨くと、歯垢や歯石が簡単にとれることが判明した。【００９１】
なお、例９で得られたカクテルの水溶液中に含まれている空気をアルゴンガス、Ｈｅ２やＮ２ガスなどで置換すると永久保存が可能である。【００９２】
例１０：殺真菌・殺ウイルス・殺バクテリアのカクテルの調製
殺真菌・殺ウイルス・殺バクテリアのカクテルとして下記のカクテルを調製した。
Optimized formulation (2)
Octyl gallate  < 200 mg/L
Propyl gallate  < 2,000 mg/L
J1216  < 600 mg/L
Disodium hydrogen citrate  < 4 % (w/v)
リン酸バッファーなどの緩衝液
抗酸化剤（sodium ascorbateやビタミンEなど）
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【手続補正書】
【提出日】平成20年10月28日(2008.10.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルキル基とガロイル基がエステル結合しているアルキルガレートを抗真菌、抗ウイルス、もしくは抗バクテリア作用の有効成分としている薬剤組成物であって、下記の２種類のアルキルガレート：
（Ａ）アルキル基の炭素数が５〜１６の範囲のアルキルガレート、および
（Ｂ）アルキル基の炭素数が前記（Ａ）のものより小さいアルキルガレート
を含有することを特徴とするアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項２】
アルキルガレート（Ｂ）のアルキル基の炭素数が２〜７の範囲であることを特徴とする請求項１に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項３】
（Ｃ）アルカリ金属塩、ホウ酸、ホウ酸ナトリウム、および有機塩から選ばれる少なくとも１種を含有することを特徴とする請求項１または２に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項４】
非イオン界面活性剤、ポリエチレングリコール、およびアルギニンまたはその誘導体の塩酸塩から選ばれる少なくとも１種と共に水溶液中にて混合することにより、あるいはｐＨ緩衝液中にて混合することによりアルキルガレートが可溶化された水溶液であることを特徴とする請求項１から３のいずれかに記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項５】
アルキルガレート１重量部に対して、非イオン界面活性剤１〜１０重量部および水１００〜５０００重量部を混合することによりアルキルガレートが可溶化された水溶液であることを特徴とする請求項４に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項６】
３０〜９５℃の温度において加熱混合し、次いで室温まで冷却することによりアルキルガレートが可溶化された水溶液であることを特徴とする請求項５に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項７】
アルキルガレート（Ａ）および（Ｂ）を殺真菌作用の有効成分として含有することを特徴とする請求項３に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項８】
アルキルガレート（Ａ）および（Ｂ）を殺ウイルス作用の有効成分として含有することを特徴とする請求項３に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項９】
アルキルガレート（Ａ）および（Ｂ）を抗インフルエンザウイルス作用の有効成分として含有することを特徴とする請求項８に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項１０】
アルキルガレート（Ａ）および（Ｂ）を抗ヘルペスウイルス作用の有効成分として含有することを特徴とする請求項８に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項１１】
アルキルガレート（Ａ）および（Ｂ）を抗バクテリア作用の有効成分として含有することを特徴とする請求項３に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項１２】
アルキルガレート（Ａ）および（Ｂ）を抗ＭＲＳＡ作用の有効成分として含有することを特徴とする請求項１１に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項１３】
アルキルガレート（Ａ）および（Ｂ）を抗ＭＳＳＡ作用の有効成分として含有することを特徴とする請求項１２に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項１４】
βラクタム剤の活性増強剤であることを特徴とする請求項１２に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項１５】
βラクタム剤がオキサシリンであることを特徴とする請求項１４に記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項１６】
アルキルガレート（Ａ）がオクチルガレートであり、アルキルガレート（Ｂ）がプロピルガレートであることを特徴とする請求項７から１５のいずれかに記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項１７】
アルキルガレート（Ａ）がオクチルガレートであり、アルキルガレート（Ｂ）がイソアミルガレートであることを特徴とする請求項７から１５のいずれかに記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【請求項１８】
アルキルガレート（Ａ）がオクチルガレートであり、アルキルガレート（Ｂ）がプロピルガレートであり、（Ｃ）がクエン酸水素二ナトリウムまたはクエン酸三ナトリウムであることを特徴とする請求項７から１５のいずれかに記載のアルキルガレート薬剤組成物。
【国際調査報告】
2008081901.tif 000032
2008081901.tif 000033
2008081901.tif 000034