【手続補正書】
【提出日】平成16年9月7日(2004.9.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項７】
抗腫瘍剤がドキソルビシン又は (1S,9S)-1- アミノ-9- エチル-5- フルオロ-2,3- ジヒドロ-9- ヒドロキシ‐4- メチル-1H,12H-ベンゾ[de]ピラノ[3',4':6,7] インドリジノ[1,2-b] キノリン-10,13(9H,15H)- ジオンである請求項４に記載の薬物複合体。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１４】
H2N-Gly-Gly-Phe-Gly-COOHで示されるペプチドのＮ末端がカルボキシメチルプルランポリアルコールのカルボキシル基に酸アミド結合しており、該ペプチドのＣ末端が (1S,9S)-1- アミノ-9- エチル-5- フルオロ-2,3- ジヒドロ-9- ヒドロキシ-4- メチル-1H,12H-ベンゾ[de]ピラノ[3',4':6,7] インドリジノ[1,2-b] キノリン-10,13(9H,15H)- ジオンの1-アミノ基と酸アミド結合した請求項１に記載の薬物複合体。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１５】
(1S,9S)-1- アミノ-9- エチル-5- フルオロ-2,3- ジヒドロ-9- ヒドロキシ‐4- メチル-1H,12H-ベンゾ[de]ピラノ[3',4':6,7] インドリジノ[1,2-b] キノリン-10,13(9H,15H)- ジオン残基の導入量が 2〜10重量% の範囲である請求項14に記載の薬物複合体。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項１９】
(1S,9S)-1- アミノ-9- エチル-5- フルオロ-2,3- ジヒドロ-9- ヒドロキシ‐4- メチル-1H,12H-ベンゾ[de]ピラノ[3',4':6,7] インドリジノ[1,2-b] キノリン-10,13(9H,15H)- ジオン残基の導入量が 5〜7 重量% の範囲であり、カルボキシC1-4アルキルプルランポリアルコールの分子量が約 83,000 であり、カルボキシメチル化度が約 0.5である請求項14に記載の薬物複合体。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
上記の発明の好ましい態様として、カルボキシC1-4アルキルプルランポリアルコールを構成するプルランポリアルコールが、実質的に完全にポリアルコール化可能な条件下でプルランを処理して得られたプルランポリアルコールであることを特徴とする上記薬物複合体；カルボキシC1-4アルキルプルランポリアルコールがカルボキシメチルプルランポリアルコールである上記薬物複合体；医薬化合物が抗腫瘍剤又は抗炎症剤である上記薬物複合体；医薬化合物が濃度に依存した抗腫瘍作用を発現する抗腫瘍剤（より高い濃度でより強い抗腫瘍作用を発現する抗腫瘍剤：本明細書において濃度依存型の抗腫瘍剤という場合がある）である上記薬物複合体；医薬化合物が時間に依存した抗腫瘍作用を発現する抗腫瘍剤（より長い作用時間でより強い抗腫瘍作用を発現する抗腫瘍剤：本明細書において時間依存型の抗腫瘍剤という場合がある）である上記薬物複合体；並びに、抗腫瘍剤がドキソルビシン又は (1S,9S)-1- アミノ-9- エチル-5- フルオロ-2,3- ジヒドロ-9- ヒドロキシ‐4- メチル-1H,12H-ベンゾ[de]ピラノ[3',4':6,7] インドリジノ[1,2-b] キノリン-10,13(9H,15H)- ジオンである上記薬物複合体が提供される。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
本発明の特に好ましい態様として、H2N-Gly-Gly-Phe-Gly-COOHで示されるペプチドのＮ末端がカルボキシメチルプルランポリアルコールのカルボキシル基に酸アミド結合しており、該ペプチドのＣ末端が (1S,9S)-1- アミノ-9- エチル-5-フルオロ-2,3- ジヒドロ-9- ヒドロキシ‐4- メチル-1H,12H-ベンゾ[de]ピラノ[3',4':6,7] インドリジノ[1,2-b] キノリン-10,13(9H,15H)- ジオンの1-アミノ基と酸アミド結合した上記薬物複合体； (1S,9S)-1- アミノ-9- エチル-5- フルオロ-2,3- ジヒドロ-9- ヒドロキシ‐4- メチル-1H,12H-ベンゾ[de]ピラノ[3',4':6,7] インドリジノ[1,2-b] キノリン-10,13(9H,15H)- ジオン残基の導入量が2〜10重量% の範囲である上記薬物複合体；並びに、カルボキシC1-4アルキルプルランポリアルコールが、分子量 5,000〜500,000 の範囲、好ましくは 10,000〜350,000 の範囲、より好ましくは 50,000 〜200,000 の範囲のカルボキシメチルプルランポリアルコールであり、カルボキシメチル化度が構成糖残基あたり0.01〜2.66の範囲、好ましくは 0.1〜1.0 の範囲、より好ましくは 0.3〜0.6 の範囲である上記薬物複合体が提供される。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
医薬化合物の残基としては、例えば、ドキソルビシン、ダウノルビシン、マイトマイシンＣ、ブレオマイシン、シクロシチジン、ビンクリスチン、ビンブラスチン、メトトレキセート、白金系抗腫瘍剤（シスプラチン若しくはその誘導体）、タキソール若しくはその誘導体、カンプトテシン若しくはその誘導体（特開平6-87746 号公報に記載された抗腫瘍剤、好ましくは請求項２に記載された (1S,9S)-1- アミノ-9- エチル-5- フルオロ-2,3- ジヒドロ-9- ヒドロキシ‐4- メチル-1H,12H-ベンゾ[de]ピラノ[3',4':6,7] インドリジノ[1,2-b] キノリン-10,13(9H,15H)- ジオン等）などの抗腫瘍剤の残基を好適に用いることができる。また、例えば、コハク酸ヒドロコルチゾン、コハク酸プレドニゾロンなどのステロイド系抗炎症剤、又はメフェナム酸、フルフェナム酸、ジクロフェナク、イブプロフェン、チノリジンなどの非ステロイド系抗炎症薬の残基も好適である。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４３】
例１： (Boc-Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A
【化３】
1999092405.tif 000001
Boc-Gly-Gly-Phe-Gly (600 mg)および N- ヒドロキシスクシンイミド (160 mg) を N,N- ジメチルホルムアミド (20 ml)に溶解し、４℃に冷却した後、N,N'-ジシクロヘキシルカルボジイミド (280 mg) を添加した。この溶液にDX-8951 のメタンスルホン酸塩 (600 mg: 特開平6-87746 号公報の実施例50に記載された化合物) とトリエチルアミン (0.16 ml)を溶解したN,N-ジメチルホルムアミド (30ml)溶液を加えて、遮光下に室温で16時間撹拌しながら反応させた。この反応液を減圧乾固し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (溶出液：0.5%酢酸を含むジクロロメタン：メタノール = 10:1 溶液）で精製して標記化合物 (1.0g)を得た。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４５】
例２： (Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A トリフルオロ酢酸塩の合成
例１で得た (Boc-Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-A (79 mg) をトリフルオロ酢酸 (3 ml) に溶かし、１時間放置した。溶媒を留去し、メタノール (30 ml)で共沸を２回、エタノール (30 ml)で共沸を２回行った後、残渣をエーテルで洗浄して、標記化合物 (80 mg)を得た。
1H-NMR (DMSO-d6)δ: 8.53 (d,1H,J= 8.3Hz), 8.40-8.48 (m,2H), 8.28 (d,1H,J= 8.3Hz), 7.95-8.07 (br,3H), 7.81 (d,1H,J= 10.2Hz), 7.30-7.37 (m,2H), 7.15-7.30 (m,5H), 6.50-6.55 (br,1H), 5.50-5.57 (m,1H), 5.41 (d,2H,J= 7.82Hz), 5.25 (s,2H), 4.55-4.62 (m,1H), 3.55-3.92 (m,6H), 3.15-3.25 (br,2H),2.98-3.03 (m,1H), 2.73-2.82 (m,1H), 2.40 (s,3H), 2.05-2.25 (m,1H), 1.84-1.92 (m,2H), 0.88 (t,3H,J= 7.35Hz).
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４８】
このカルボキシメチルプルランポリアルコールのトリエチルアンモニウム塩(200 mg)をN,N-ジメチルホルムアミド(12 ml) に溶解させた。この溶液に、例２で得た (Gly-Gly-Phe-Gly)-NH-Aのトリフルオロ酢酸塩 (42 mg)とトリエチルアミン（0.014 ml) のN,N-ジメチルホルムアミド(5 ml)溶液、1-エトキシカルボニル-2- エトキシ-1,2- ジヒドロキシキノリン(200 mg)を順次加え、遮光して室温で一晩撹拌しながら反応させた。この反応液に水(300 ml）を加え、限外濾過膜 10K (フィルトロン社製) を用いて限外濾過した。膜を通過しない残留溶液を0.1N 水酸化ナトリウム水溶液で pH10 とし、濾過膜（0.16μm, フィルトロン社製）を通過させた。通過した溶液をバイオマックス-50 膜を用いた限外濾過法により脱塩し、ついでミリポアフィルター(0.22 μm)で濾過した後、凍結乾燥して標記化合物(210 mg)を得た。