【手続補正書】
【提出日】平成15年10月14日(2003.10.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
脊椎動物の細胞、組織又は器官における標的遺伝子の発現を抑制し、遅延させ、又はその他の方法で低減させるエクス・ビボの方法であって、（ａ）該標的遺伝子又はその領域と実質的に同一なヌクレオチド配列の多重コピーを含む、分散した核酸分子又は外来性核酸分子の一つ以上を提供する工程であり、該コピーの少なくとも一つがセンス方向であり且つ別のコピーの少なくとも一つがアンチセンス方向である工程、及び（ｂ）該分散した核酸分子又は外来性核酸分子を該細胞、組織又は器官に導入する工程を含む方法。
【請求項２】
該多重コピーが逆方向反復配列又は分断されたパリンドローム配列を含むものである請求項１記載の方法。
【請求項３】
センス方向のコピーの少なくとも一つが、ヌクレオチド配列又はその同族体、類似体若しくは誘導体を含むスタッファー断片により、アンチセンス方向の別のコピーから隔てられているものである、請求項１又は請求項２記載の方法。
【請求項４】
該スタッファー断片がイントロン配列である、請求項３記載の方法。
【請求項５】
該多重コピーがそれぞれ約１〜２００のヌクレオチド長である、請求項１〜請求項４いずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
分散された核酸分子又は外来性核酸分子において、該多重コピーの一つが第一ののプロモーター配列にセンス方向で機能しうるように連結され、且つ該コピーの別の一つが第二のプロモーター配列にアンチセンス方向で機能しうるように連結されているものである、請求項１〜請求項５いずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
該標的遺伝子が細胞のゲノム、該細胞の病原体のゲノム、該細胞を含む器官のゲノム、又は該細胞内のウイルスのゲノムに由来するものである、請求項１〜請求項６いずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
脊椎動物の細胞、組織又は器官中の標的遺伝子のイン・ビトロ発現を抑制し、遅延させ又はその他の方法で低減させる方法であって、
（ｉ）  該標的遺伝子又はその領域と実質的に同一なヌクレオチド配列の多重コピー（定義のとおり）を含む分散した核酸分子又は外来性核酸分子であって、該コピーの少なくとも一つがセンス方向であり且つ別のコピーの少なくとも一つがアンチセンス方向である核酸分子の一つ以上を選択する工程、
（ii）  分散した核酸分子又は外来性核酸分子を含む合成遺伝子を製造する工程、
（iii）該細胞、組織又は器官に該合成遺伝子を導入する工程、及び
（iv）  該細胞、組織又は器官中の該合成遺伝子を、該合成遺伝子を発現させるための時間及び条件の下に置く工程
を含む方法。
【請求項９】
該合成遺伝子が、該分散した核酸分子又は該外来性核酸分子の発現を容易にするため、該分散した核酸分子又は外来性核酸分子の一つ以上に機能しうるように連結された、該細胞、組織又は器官で機能しうるプロモーター配列をさらに含むものである、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
該多重コピーが逆方向反復配列又は分断されたパリンドローム配列を含むものである、請求項８又は請求項９記載の方法。
【請求項１１】
センス方向のコピーの少なくとも一つとアンチセンス方向のコピーの一つがヌクレオチド配列又はその同族体、類似体若しくは誘導体を含むスタッファー断片により隔てられているものである請求項８〜請求項１０いずれか１項に記載された方法。
【請求項１２】
該スタッファー断片がイントロン配列である請求項１１記載の方法。
【請求項１３】
該分散した核酸分子又は外来性核酸分子がウイルスのレプリカーゼ、ポリメラーゼ、コートタンパク質又はコート以外の遺伝子又はそれらの領域をコードするヌクレオチド配列の多重コピー又はその領域を含むものである、請求項８〜請求項１２いずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
該分散した核酸分子又は外来性核酸分子がウイルスのポリメラーゼ又はウイルスのコートタンパク質をコードする核酸配列の多重コピー又はその領域を含むものである、請求項１１記載の方法。
【請求項１５】
遺伝子構築物でトランスフェクトされた脊椎動物の細胞、組織又は器官において、標的遺伝子の発現を遅延させ、抑制し又他の方法で低減させる遺伝子構築物であって、該遺伝子構築物が該標的遺伝子又は該標的遺伝子の領域と実質的に同一なヌクレオチド配列の多重コピーを含む分散した核酸分子又は外来性核酸分子を一つ以上含み、且つ該コピーの少なくとも一つがセンス方向であり、該コピーの少なくとも別の一つがアンチセンス方向である遺伝子構築物。
【請求項１６】
該分散した核酸分子又は外来性核酸分子において、該多重コピーの一つが第一のプロモーター配列にセンス方向で機能しうるように連結され、且つ、該コピーの別の一つが第二のプロモーター配列にアンチセンス方向で機能しうるように連結されるものである、請求項１５記載の遺伝子構築物。
【請求項１７】
遺伝子構築物でトランスフェクトされた脊椎動物の細胞、組織又は器官において、標的遺伝子の発現を遅延させ、抑制し又他の方法で低減させ得る遺伝子構築物であって、該遺伝子構築物が該標的遺伝子又は該標的遺伝子の領域と実質的に同一なヌクレオチド配列の多重コピーを含み、且つ該多重コピーが該細胞、組織又は器官で機能しうる１個のプロモーターの制御の下で機能しうるように配置され、且つ、該コピーの少なくとも一つがセンス方向で機能しうるように配置されそして該コピーの別の一つがアンチセンス方向で機能しうるように配置されるものである遺伝子構築物。
【請求項１８】
該プロモーターに関してセンス方向に配置された少なくとも一つのコピー、及び該プロモーター配列に関してアンチセンス方向に配置された少なくとも一つの別のコピーが核酸スタッファー断片により互いに隔てられているものである、請求項１８記載の遺伝子構築物。
【請求項１９】
該スタッファー断片がイントロン配列である、請求項１８記載の遺伝子構築物。
【請求項２０】
該多重コピーが逆方向反復配列又は分断されたパリンドローム配列を含むものである、請求項１５から請求項１９いずれか１項に記載の遺伝子構築物。
【請求項２１】
該多重コピーがそれぞれ約１〜２００のヌクレオチド長である、請求項１５〜請求項２０いずれか１項に記載の遺伝子構築物。
【請求項２２】
該標的遺伝子が該細胞のゲノム、該細胞の病原体のゲノム、該細胞を含む生物のゲノム、又は該細胞内のウイルスのゲノムに由来するものである、請求項１５〜請求項２１いずれか１項に記載の遺伝子構築物。
【請求項２３】
別の状況では同じものを発現するであろう、エクス・ビボの脊椎動物細胞、組織又は器官中でのα−１，３−ガラクトシルトランスフェラーゼの発現を調節するための請求項１５〜請求項２２いずれか１項に記載の遺伝子構築物の使用。
【請求項２４】
請求項１５〜請求項２２いずれか１項に記載の遺伝子構築物を含む、単離された脊椎動物の細胞、組織又は器官、又はヒト以外の脊椎動物。
【請求項２５】
脊椎動物の細胞、組織又は器官の標的遺伝子又はその領域と実質的に同一なヌクレオチド配列の多重コピーを含む一つ以上の分散した核酸分子又は外来性核酸分子であって、少なくとも一つのコピーがセンス方向であり且つ少なくとも別の一つのコピーがアンチセンス方向である核酸分子、及び担体、賦形剤又は希釈剤を含む組成物。
【請求項２６】
該多重コピーが逆方向反復配列又は分断されたパリンドローム配列を含むものである、請求項２５記載の組成物。
【請求項２７】
少なくとも二つのコピーがヌクレオチド配列、又はその同族体、類似体若しくは誘導体を含むスタッファー断片により隔てられているものである請求項２５又は請求項２６記載の組成物。
【請求項２８】
該スタッファー断片がイントロン配列である請求項２７記載の組成物。
【請求項２９】
該多重コピーがそれぞれ約１〜２００のヌクレオチド長である、請求項２５〜請求項２８いずれか１項に記載の組成物。
【請求項３０】
該多重コピーが分散した核酸分子又は外来性核酸分子中で第一のプロモーター配列及び第二のプロモーター配列に機能しうるように連結されており、該コピーの少なくとも一つが第一のプロモーター配列に関してセンス方向であり第二のプロモーター配列に関してアンチセンス方向であるように、これら二つのプロモーターが該多重コピーの遠位末端と近位末端に配置されるものである、請求項２５〜請求項２９いずれか１項に記載の組成物。
【請求項３１】
該分散した核酸分子又は外来性核酸分子が該細胞、組織又は器官において機能しうるプロモーター配列を含んでおり、該多重コピーの少なくとも一つが該プロモーター配列の制御の下で機能しうるようにセンス方向に配置され、該多重コピーの少なくとも別の一つが該プロモーター配列の制御の下で機能しうるようにアンチセンスの方向に配置されるものである、請求項２５〜請求項３０いずれか１項に記載の組成物。
【請求項３２】
該標的遺伝子が該細胞のゲノム、該細胞の病原体のゲノム、該細胞を含む器官のゲノム、又は該細胞内のウイルスのゲノムに由来するものである、請求項２５〜請求項３１いずれか１項に記載の組成物。
【請求項３３】
分散した核酸分子又は外来性核酸分子を脊椎動物の細胞、組織又は器官中に導入し、該細胞、組織又は器官中の分散した核酸分子又は外来性核酸分子を該核酸分子の発現に適した時間及び条件の下に置くことにより、該脊椎動物の細胞、組織又は器官中の標的遺伝子の発現を抑制し、遅延させ又は他の方法で低減させるための薬物の調製における、分散した核酸分子又は外来性核酸分子の一つ以上の使用であって、該核酸分子又は外来性核酸分子が該脊椎動物の細胞、組織又は器官の標的遺伝子又はその領域と実質的に同一なヌクレオチド配列の多重コピーを含むものであり、該多重コピーの少なくとも二つがプロモーター配列の制御の下で機能しうるものであり、該コピーの少なくとも一つがセンス方向を向いており且つ該コピーの少なくとも別の一つがアンチセンス方向を向いているものであり、該標的遺伝子の発現の抑制、遅延又は他の方法による低減が少なくとも部分的に転写後である使用。
【請求項３４】
該多重コピーが逆方向反復配列又は分断されたパリンドローム配列を含むものである、請求項３３記載の使用。
【請求項３５】
該コピーの少なくとも二つがヌクレオチド配列又はその同族体、類似体若しくは誘導体を含むスタッファー断片により隔てられているものである、請求項３３又は請求項３４記載の使用。
【請求項３６】
該スタッファー断片がイントロン配列である、請求項３５記載の使用。
【請求項３７】
該分散した核酸分子又は外来性核酸分子が該細胞、組織又は器官内で機能しうるプロモーター配列を含む請求項３３〜請求項３６のいずれか１項に記載の使用であって、該多重コピーの少なくとも一つが該プロモーター配列の制御下で機能しうるようにセンス方向に配置され、該多重コピーの別の少なくとも一つが該プロモーター配列の制御下で機能しうるようにアンチセンス方向に配置されるものである使用。
【請求項３８】
該標的遺伝子が該細胞のゲノム、該細胞の病原体のゲノム、該細胞を含む生物のゲノム、又は該細胞内のウイルスのゲノムに由来するものである、請求項３３〜請求項３７いずれか１項に記載の使用。
【請求項３９】
病気の治療及び／又は予防のための薬物の調製における、標的遺伝子又はその領域と実質的に同一なヌクレオチド配列の多重コピーを含む一つ以上の分散した核酸分子又は外来性核酸分子の使用であって、少なくとも一つのコピーがセンス方向であり且つ少なくとも別の一つのコピーがアンチセンス方向である使用。
【請求項４０】
該多重コピーが逆方向反復配列又は分断されたパリンドローム配列を含むものである、請求項３９記載の使用。
【請求項４１】
該コピーの少なくとも二つがヌクレオチド配列又はその同族体、類似体若しくは誘導体を含むスタッファー断片により隔てられているものである、請求項３９又は請求項４０記載の使用。
【請求項４２】
該スタッファー断片がイントロン配列である、請求項４１記載の使用。
【請求項４３】
該分散した核酸分子又は外来性分子が該細胞、組織又は器官内で機能しうるプロモーター配列を含む請求項３９〜請求項４２いずれか１項に記載の使用であって、該多重コピーの少なくとも一つが該プロモーター配列の制御の下で機能しうるようにセンス方向で配置され、該多重コピーの別の少なくとも一つが該プロモーター配列の制御の下で機能しうるようにアンチセンス方向で配置されているものである使用。
【請求項４４】
該標的遺伝子が該細胞又は該細胞を含む生物の病原体のゲノムに由するものである、請求項３９〜４３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４５】
病気の治療及び／又は予防のための合成遺伝子の調製における、脊椎動物の細胞、組織又は器官の標的遺伝子又はその領域と実質的に同一なヌクレオチド配列の多重コピーを含む一つ以上の分散した核酸分子又は外来性核酸分子の使用であって、該多重コピーの少なくとも二つが該プロモーター配列の制御の下で機能しうるものでり、該コピーの少なくとも一つがセンス方向を向いており且つ該コピーの別の少なくとも一つがアンチセンス方向を向いているものである使用。
【請求項４６】
該多重コピーが逆方向反復配列又は分断されたパリンドローム配列を含むものである、請求項４５記載の使用。
【請求項４７】
該コピーの少なくとも二つがヌクレオチド配列又はその同族体、類似体若しくは誘導体を含むスタッファー断片により隔てられているものである、請求項４５又は請求項４６記載の使用。
【請求項４８】
該スタッファー断片がイントロン配列である、請求項４７記載の使用。
【請求項４９】
該多重コピーがそれぞれ約１〜２００のヌクレオチド長である、請求項４５〜請求項４８いずれか１項に記載の使用。
【請求項５０】
脊椎動物の細胞、組織又は器官中に合成遺伝子を導入すると、該脊椎動物細胞、組織又は器官の標的遺伝子の発現を少なくとも部分的には転写後に抑制し、遅延し又他の方法で低減させるための合成遺伝子の調製における、該脊椎動物の細胞、組織又は器官内で標的遺伝子又はその領域と実質的に同一なヌクレオチド配列の多重コピーを含む一つ以上の分散した核酸分子又は外来性核酸分子の使用であって、該多重コピーの少なくとも二つが一つのプロモーター配列の制御下で機能しうるものであり、該コピーの少なくとも一つがセンス方向を向いており且つ該コピーの少なくとも別の一つがアンチセンス方向を向いているものである使用。
【請求項５１】
該多重コピーが逆方向反復配列又は分断されたパリンドローム配列を含むものである、請求項５０記載の使用。
【請求項５２】
該コピーの少なくとも二つがヌクレオチド配列又はその同族体、類似体若しくは誘導体を含むスタッファー断片により隔てられているものである、請求項５０又は請求項５１記載の使用。
【請求項５３】
該スタッファー断片がイントロン配列である、請求項５２記載の使用。
【請求項５４】
該分散した核酸分子又は外来性核酸分子が該細胞、組織又は器官内で機能しうるプロモーター配列を含んでおり、該多重コピーの少なくとも一つが該プロモーター配列の制御の下で機能しうるようにセンス方向に配置され、該多重コピーの少なくとも別の一つが該プロモーター配列の制御の下で機能しうるようにアンチセンス方向に配置されるものである、請求項５０〜請求項５３いずれか１項に記載の使用。
【請求項５５】
該標的遺伝子が該細胞のゲノム、該細胞の病原体のゲノム、該細胞を含む生物のゲノム、又は該細胞内のウイルスのゲノムに由来するものである、請求項５０〜請求項５４いずれか１項に記載の使用。