【手続補正書】
【提出日】平成16年9月24日(2004.9.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉの化合物
【化１】
1998109966.tif 000001
［Ｒ１は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、−ＯＣＯ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、−Ｏ（ＣＯ）Ｏ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、−ＯＣＯＡｒ、−Ｏ（ＣＯ）ＯＡｒ（Ａｒはフェニル又は置換されていてもよいフェニルを表す）若しくは−ＯＳＯ２（Ｃ２−Ｃ６アルキル）を表す。
Ｒ２は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｏ（Ｃ１−Ｃ４アルキル）、−ＯＣＯ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、−Ｏ（ＣＯ）Ｏ（Ｃ１−Ｃ６アルキル）、−ＯＣＯＡｒ、−Ｏ（ＣＯ）ＯＡｒ（Ａｒはフェニル又は置換されていてもよいフェニルを表す）、−ＯＳＯ２（Ｃ２−Ｃ６アルキル）若しくはハロを表す。
Ｒ３は、１−ピペリジニル、１−ピロリジニル、メチル−１−ピロリジニル、ジメチル−１−ピロリジノ、４−モルホリノ、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ、ジイソプロピルアミノ又は１−ヘキサメチレンイミノを表す。
ｎは２又は３を表す。］
若しくは医薬的に許容できるその塩又は溶媒和物。
【請求項２】
Ｒ３が１−ピペリジニルである請求項１の化合物。
【請求項３】
以下の群から選択される請求項１に記載の化合物：
３，８−ジメトキシ−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３，８−ジヒドロキシ−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３−ヒドロキシ−８−メトキシ−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３−メトキシ−８−ヒドロキシ−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３，８，９−トリメトキシ−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３，８，１０−トリメトキシ−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
９−フルオロ−３，８−ジメトキシ−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
９−クロロ−３，８−ジメトキシ−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３，８−ジメトキシ−９−メチル−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３，８−ジメトキシ−９−エチル−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
８−メトキシ−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
８−ヒドロキシ−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
８，９−ジメトキシ−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
８，１０−ジメトキシ−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
９−フルオロ−８−メトキシ−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
９−クロロ−８−メトキシ−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
８−メトキシ−９−メチル−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
８−メトキシ−９−エチル−１１−［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３，８−ジメトキシ−１１−［４−［２−（１−ピロリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３，８−ジヒドロキシ−１１−［４−［２−（１−ピロリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３−ヒドロキシ−８−メトキシ−１１−［４−［２−（１−ピロリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３−メトキシ−８−ヒドロキシ−１１−［４−［２−（１−ピロリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
８−メトキシ−１１−［４−［２−（１−ピロリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
８−ヒドロキシ−１１−［４−［２−（１−ピロリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
８，９−ジメトキシ−１１−［４−［２−（１−ピロリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
８，１０−ジメトキシ−１１−［４−［２−（１−ピロリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３，８−ジメトキシ−１１−［４−［２−（１−メチルピロリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３，８−ジヒドロキシ−１１−［４−［２−（１−ヘキサメチレンイミノ）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３−ヒドロキシ−８−メトキシ−１１−［４−［２−（１−モルホリノ）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３−メトキシ−８−ヒドロキシ−１１−［４−［２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３，８，９−トリメトキシ−１１−［４−［２−（Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノ）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
３，８，１０−トリメトキシ−１１−［４−［２−（１−メチルピロリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
９−フルオロ−３，８−ジメトキシ−１１−［４−［２−（Ｎ，Ｎ−ジメチルアミノ）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
９−クロロ−３，８−ジメトキシ−１１−［４−［２−（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミノ）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
８−メトキシ−１１−［４−［２−（１−ピロリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
８−ヒドロキシ−１１−［４−［２−（１−メチルピロリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
８，９−ジメトキシ−１１−［４−［２−（１−メチルピロリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン、
および８，１０−ジメトキシ−１１−［４−［２−（１−メチルピロリジニル）エトキシ］フェニル］−５，６−ジヒドロ−１１Ｈ−ベンゾ［ａ］フルオレン。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１０】
反応式Ｉに示す最後の変換では、式VIIのアリルアルコール誘導体が環化-脱水反応を受けて、式IIのジヒドロベンゾフルオレン誘導体を与える。この反応は酸触媒反応であり、種々の無機酸、ルイス酸及び酢酸より強い有機酸を使用できる。これらの触媒には、アルキルスルホン酸、アリールスルホン酸、硫酸、塩化水素酸、臭化水素酸、ポリリン酸及び三フッ化ホウ素エーテル和物などがある。塩化水素酸が好ましい。この環化反応は通常、室温で進行するが、反応速度を高めるためには、より高い温度が有利であろう。
好ましい反応条件下では、５０℃で約５分〜約２時間攪拌、若しくは周囲温度で終夜攪拌することによって、式VIIの化合物から式IIの化合物への変換が完了する。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
式XIの化合物のカルボニル基を還元して式XIIのカルビノールを得る反応は、反応式Iについて上述した方法で達成される。
反応式IIIに示す最後の変換では、式XIIのジヒドロナフタレン誘導体が環化-脱水反応を受けて、式Iaのジヒドロベンゾフルオレン誘導体を与える。この反応は酸触媒反応であり、種々の無機酸、ルイス酸及び有機酸を使用できる。これらの触媒には、アルキルスルホン酸、アリールスルホン酸、硫酸、塩化水素酸、臭化水素酸、ポリリン酸及び三フッ化ホウ素エーテル和物などがある。塩化水素酸が好ましい。この環化反応は通常、室温で進行するが、反応速度を高めるためには、より高い温度が有利であろう。
好ましい反応条件下では、５０℃で約５分〜約２時間攪拌、若しくは周囲温度で終夜攪拌することによって、式XIIの化合物から式Iaの化合物への変換が完了する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
式Iaの化合物（Ｒ５及び/又はＲ６が存在する場合、それらはＣ１−Ｃ４アルキル（好ましくはメチル）を表す）は、本明細書に記述する方法に関して医薬的に活性である。したがってこれらの化合物は、式Iの化合物の本明細書における定義に包含される。
式Iaの化合物にＲ５及びＲ６ヒドロキシ保護基が存在する場合は、それらを周知の手法で切断することによって、式Iの好ましい化合物が得られる。このような保護基の形成と除去に関する反応は、Protective Groups in Organic Chemistry (Plenum Press, ロンドン及びニューヨーク, 1973)、Green, T. W., Protective Groups in Organic Synthesis (Wiley, ニューヨーク, 1981) 及びThe Peptides, 第Ｉ巻 (Schrooder及びLubke, Academic Press, ロンドン及びニューヨーク, 1965) など、いくつかの標準的著書に多数記述されている。好ましいＲ５及び/又はＲ６ヒドロキシ保護基（好ましくはメチル）の除去法は、本質的に下記実施例に説明する通りである。
式Iaの化合物は本明細書に記述する方法に関して医薬的に活性であり、本明細書に定義する式Iに包含される。式Iの化合物には１１位に生成する両異性体及び異性体の混合物が予期され、これらは式Iの化合物の範囲に包含される。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３１】
製造例２Ａ：［３，４−ジヒドロ−６−メトキシ−２−（３−［３，４−ジヒドロ−６−メトキシ−２−（３−メトキシフェニル）−１−ナフタレニル］［４−［２−（１−ピペリジニル）エトキシ］フェニル］メタノン塩酸塩
【化１８】
1998109966.tif 000002
窒素雰囲気下で水素化ナトリウム（鉱油中６０％，２．６８ｇ，０．０６７mol）を無水ＴＨＦ（３００mL）に懸濁し、その混合物を氷槽で５℃に冷却した。ＴＨＦ最少量中の製造例１Ａの化合物（２６．０ｇ，０．０６３８mol）からなる溶液を滴下し、水素の発生が沈静化した後、その混合物を冷却したまま１時間攪拌して、エノレートの生成を完了させた。冷却を続けながら、ＴＨＦ（７５mL）中のジフェニルクロロホスフェート（１７．１ｇ，１３．２mL，０．０６３８mol）を、反応混合物の温度が１０℃未満に維持されるような速度で加えた。添加が完了してから、攪拌を続けながら、反応混合物を室温に温めた。少量の試料をＴＬＣ（ＳｉＯ２，トルエン-ＥｔＯＡｃ９-１）で分析したところ、エノールホスフェート中間体の本質的に定量的な生成が認められた。その反応混合物を５℃近くに維持し、３−メトキシフェニルマグネシウムブロミド（０．６４Ｍ  ＴＨＦ溶液１５０mL，０．０９６mol）を、カニューレによって加えた。得られた混合物を０℃で１時間攪拌した後、２５℃まで終夜温まらせ、さらに１時間攪拌した。反応を冷却したまま、１Ｎ硫酸５０mLを徐々に添加することによって、注意深くクエンチした。pH７．０に調節したのち、THFのほとんどを減圧下に除去した。その水を含んだ残渣を水とクロロホルムに分配した。有機層をブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。濃縮によって油状物を得て、それをシリカゲルクロマトグラフィーにかけ、クロロホルムから９５：５クロロホルム：メタノールへの勾配で生成物を溶出させることによって精製した。適当な画分から粗製遊離塩基３６ｇを得た。この物質は製造例５の遊離塩基生成物と事実上同一であった。この遊離塩基をメタノールに溶解し、過剰の５Ｎ  ＨＣｌで処理した後、濃縮乾固した。その残渣をメタノール-酢酸メチルから再結晶して、所望の塩酸塩２７．８ｇ（８２％）を得た：1H NMR (DMSO-d6) δ10.09 (bs, 1H), 7.76 (d, J=8.7Hz, 1H), 7.11-7.02 (m, 2H), 6.94 (d, J=8.8Hz, 1H), 6.86 (d, J=1.2Hz, 1H), 6.81-6.72 (m, 2H), 6.66 (dd, J=8.2Hz, 2.5, 1H), 6.61 (d, J=3.1Hz, 1H), 4.37 (t, J=4.6Hz, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.57 (s, 3H), 3.01-2.82 (m, 4H), 2.78-2.63 (m, 2H), 1.81-1.58 (m, 5H), 1.31 (m, 1H)；MS (FD) m/e 497 (M+；HClの喪失)；分析.  C32H36ClNO4に関する計算値：C, 71.96；H, 6.79；N, 2.62.  実測値：C, 71.69；H, 6.77；N, 2.48。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４０】
骨粗鬆症試験法
上記ＯＶＸラット試験法の一般的準備処置の後、ラットを３５日間毎日処置し（１処置群あたり６ラット）、３６日目に二酸化炭素窒息によって犠牲にした。この３５日間という期間は、骨密度の最大減少に十分な日数である。犠牲にした時点で、子宮を摘出し、付着組織を切開除去し、内容液を排出した後、完全な卵巣切除に伴うエストロゲン欠乏症を確認するために湿重量を測定した。子宮重量は卵巣切除に応答して通例約７５％減少する。次に、子宮を１０％中性緩衝ホルマリンに入れて、以降の組織学的分析に備える。
右大腿骨を切開し、遠位骨幹端でディジタル化x-線（digitilized x-ray）を作成し、画像分析プログラム（ＮＩＨイメージ）によって分析する。これらの動物から得た脛骨の近位面も定量的コンピューター断層撮影法によってスキャンする。
上記の手法に従って、２０％ヒドロキシプロピルｂ−シクロデキストリン中の本発明化合物とエチニルエストラジオール（ＥＥ２）を試験動物に経口投与する。結果を卵巣切除に関する保護率（％）として報告する。上記表６に記載の子宮重量、子宮ＥＰＯおよび血清コレステロールに関するデータを参照。