(57)【要約】  本発明は、Ｉ型アレルギー疾患等のアレルギー疾患や、関節リウマチ、炎症性腸疾患等の自己免疫疾患を効果的、かつ安全に治療、改善、又は予防することが可能な医薬及び食品を提供することを目的とする。即ち本発明は、ブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを乳酸菌で発酵させて得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含むことを特徴とする医薬に関し、また、ブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを乳酸菌で発酵させて得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含むことを特徴とする食品に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
アレルギー疾患及び自己免疫疾患の少なくともいずれかを治療又は予防するための医薬であって、ブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを乳酸菌で発酵させて得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含むことを特徴とする医薬。
【請求項２】
ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更に有機溶媒で抽出することにより得られる有機溶媒抽出物である請求項１に記載の医薬。
【請求項３】
ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物である請求項１から２のいずれかに記載の医薬。
【請求項４】
ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質である請求項１から３のいずれかに記載の医薬。
【請求項５】
ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質であり、前記疎水性物質のゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内である請求項１から４のいずれかに記載の医薬。
【請求項６】
ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質であり、前記疎水性物質のゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内であり、かつ、吸着剤としてシリカゲルを使用し、展開溶媒としてクロロホルムとメタノールとの体積比率が１５：１であるクロロホルム−メタノール混合溶媒を使用した際の薄層クロマトグラフィーにおけるＲｆ値が０．３〜０．４の範囲内である請求項１から５のいずれかに記載の医薬。
【請求項７】
Ｉ型アレルギー疾患の治療又は予防に用いられる請求項１から６のいずれかに記載の医薬。
【請求項８】
関節リウマチの治療又は予防に用いられる請求項１から６のいずれかに記載の医薬。
【請求項９】
炎症性腸疾患の治療又は予防に用いられる請求項１から６のいずれかに記載の医薬。
【請求項１０】
アレルギー疾患及び自己免疫疾患の少なくともいずれかを改善又は予防するための食品であって、ブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを乳酸菌で発酵させて得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含むことを特徴とする食品。
【請求項１１】
ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更に有機溶媒で抽出することにより得られる有機溶媒抽出物である請求項１０に記載の食品。
【請求項１２】
ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物である請求項１０から１１のいずれかに記載の食品。
【請求項１３】
ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質である請求項１０から１２のいずれかに記載の食品。
【請求項１４】
ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質であり、前記疎水性物質のゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内である請求項１０から１３のいずれかに記載の食品。
【請求項１５】
ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質であり、前記疎水性物質のゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内であり、かつ、吸着剤としてシリカゲルを使用し、展開溶媒としてクロロホルムとメタノールとの体積比率が１５：１であるクロロホルム−メタノール混合溶媒を使用した際の薄層クロマトグラフィーにおけるＲｆ値が０．３〜０．４の範囲内である請求項１０から１４のいずれかに記載の食品。
【請求項１６】
Ｉ型アレルギー疾患の改善又は予防に用いられる請求項１０から１５のいずれかに記載の食品。
【請求項１７】
関節リウマチの改善又は予防に用いられる請求項１０から１５のいずれかに記載の食品。
【請求項１８】
炎症性腸疾患の改善又は予防に用いられる請求項１０から１５のいずれかに記載の食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アレルギー疾患や自己免疫疾患を治療、改善、又は予防することを目的とした、ブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを利用した医薬及び食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
アレルギー疾患に罹患している人口は、国民のおよそ３分の１と考えられており、多くの治療薬、治療法が導入されているにも関わらず、増加の一途をたどっている。アレルギーはＩ型〜ＩＶ型に分類され、花粉症、喘息、アトピー性皮膚炎などはＩ型アレルギーに属する。Ｉ型アレルギーは次のような機序で発症する。即ち、抗原感作により誘導されたＴｈ２細胞が、Ｂ細胞をＩｇＥ抗体産生細胞に分化させ、産生されたＩｇＥ抗体は、マスト細胞上に結合する。このマスト細胞上のＩｇＥ抗体に抗原が結合することにより、脱顆粒が起こり、ヒスタミンなどの炎症物質が放出され、発赤、腫脹、気道収縮などの即時型アレルギー反応が惹起される。更に、マスト細胞の脱顆粒後、マスト細胞から放出されるサイトカインによりＴｈ２細胞が活性化され、Ｔｈ２細胞から産生されるサイトカインにより好酸球が炎症局所に動員され、活性化される。活性化された好酸球は炎症性の物質を放出し、より重篤な遅発型の炎症が表れる。【０００３】
また、関節リウマチは世界人口のおよそ１％が罹患する極めて重要な疾患であり、その病因、発症機構はまだ完全には明らかにされていないが、自己抗原によって誘導されたＴｈ１細胞に起因する自己免疫疾患であると考えられている。Ｔｈ１細胞により活性化されたマクロファージから産生される腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）、インターロイキン１（ＩＬ−１）、ＩＬ−６、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）、一酸化窒素（ＮＯ）などの炎症性物質により、関節滑膜における慢性的な炎症が惹起され、関節の破壊が起こる。また、こうした抗原特異的な炎症反応の他、カラギナンなどの起炎剤により惹起される抗原非特異的な炎症反応もあるが、これはマクロファージが起炎剤により直接刺激を受けて活性化され、炎症性物質を産生することにより惹起される。即ち、このような反応も関節リウマチなどの自己免疫疾患同様、マクロファージがエフェクター細胞として働いている。【０００４】
また、潰瘍性大腸炎やクローン病に代表される炎症性腸疾患は、腸管に炎症を引き起こし、激しい下痢や血便などの症状を呈し、体重減少、貧血などの症状が現れる。また、潰瘍性大腸炎においては大腸癌の発生率が高くなることが知られている。発症の原因は不明であるが、自己腸管内常在性細菌に対する免疫寛容の破綻がその原因となる自己免疫疾患と考えられており、活性化されたマクロファージから産生されるＴＮＦ−αなどの炎症性サイトカインが傷害の原因とされている（例えば、非特許文献１参照）。薬物治療として抗炎症薬であるサラゾピリンが使われているが完治には至らず、症状の悪化に伴い、ステロイド、免疫抑制剤などが使われるが、こうした薬物は感染抵抗性低下などの重篤な副作用が問題となる。潰瘍性大腸炎は厚生労働省より特定疾患に指定されており、平成１８年度における特定疾患受給数によると、潰瘍性大腸炎患者が最も多く、約９万人とされており、さらに毎年増加する傾向が見られる。【０００５】
乳酸菌は、花粉症、アトピー性皮膚炎などのＩ型アレルギー反応に対し有効性が示されており、その作用メカニズムは、Ｔｈ１細胞の活性化によるＴｈ２細胞の抑制によるものとされている（例えば、非特許文献２参照）。乳酸菌を抗原感作段階から投与することにより、Ｔｈ２細胞の誘導が抑制され、その後のＩｇＥ抗体産生も抑制され、結果としてアレルギー反応が抑制されると考えられている。しかしながら、産生されたＩｇＥ抗体によりマスト細胞が感作された後、抗原がマスト細胞に結合することにより生じる脱顆粒反応に対しては乳酸菌に抑制作用はなく、有効性が示されていない。即ち、乳酸菌は、アレルギーが発症する前に予防的に投与したときには有効であるが、発症後に治療目的で投与しても有効ではないことを示している。また、乳酸菌は、Ｔｈ１細胞によって誘導される自己免疫疾患などへの有効性は認められていない。【０００６】
また、近年、植物の果皮や種子に多く含まれているフラボノイドが、多様な生理活性を持つことが報告されている。一般に、フラボノイドはエフェクター細胞に働き、抗炎症作用を発揮すると考えられている。このような炎症反応に対するフラボノイドの作用としては、例えば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験において、マスト細胞株を用いた脱顆粒抑制作用（例えば、非特許文献３参照）、マクロファージ細胞株を用いた炎症性サイトカイン産生抑制作用（例えば、非特許文献４参照）などが報告されている。また、ｉｎ  ｖｉｖｏ試験においては、フラボノイドの腹腔内投与により、マスト細胞の脱顆粒反応である受身皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）反応が抑制されることが報告されている（例えば、非特許文献５参照）。しかしながら、従来のフラボノイドの作用についての報告はｉｎ  ｖｉｔｒｏ試験によるものが多く、また、ｉｎ  ｖｉｖｏ試験においても、腹腔内投与、静脈内投与などの試験による評価はあるものの、経口投与による評価は極めて少ない。また、フラボノイドが乳酸菌のように抗原感作時に働き、抗原特異的なＩｇＥ抗体産生を抑制するとの報告はなされていない。【０００７】
このように、アレルギー疾患や自己免疫疾患を治療、改善、又は予防する方法としては従来から様々な方法が提唱されているが、依然としてこれらの疾患に悩まされる患者数は多く、より効果的で、かつ安全な治療、改善、又は予防方法が未だ求められているのが現状である。【０００８】
【非特許文献１】Ｒｅｉｎａｃｋｅｒ  Ｈ．Ｃ．ｅｔ．ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９４，１７４−１８１．１９９３
【非特許文献２】Ｊ．Ｄａｉｒｙ  Ｓｃｉ．１９９８；８１：４８−５３．
【非特許文献３】Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｃｅｍ．１９９８；６２：１２８４−１２８９．
【非特許文献４】Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｃｅｍ．２００４；６７：１５４９−１５５７．
【非特許文献５】Ｐｌａｎｔａ．Ｍｅｄ．２００５；７１：２４−２７．
【発明の開示】
【０００９】
本発明は、前記従来における諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、アレルギー疾患や自己免疫疾患を効果的、かつ安全に治療、改善、又は予防することが可能な医薬及び食品を提供することを目的とする。
【００１０】
前記課題を解決するため、本発明者らは鋭意検討した結果、以下のような知見を得た。即ち、ブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを乳酸菌で発酵させたブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、優れた血管透過性亢進抑制作用、ＩｇＥ抗体産生抑制作用、好酸球浸潤抑制作用、抗炎症作用、ＴＮＦ−α産生抑制作用等を有しており、そのため、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を利用することにより、アレルギー疾患や自己免疫疾患を効果的、かつ安全に治療、改善、又は予防することができるという知見である。
本発明者らは、ブドウの果皮及び種子を乳酸菌で発酵させたブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、マウスのアレルギーモデルにおいて、卵白アルブミン抗原によって誘導された抗原特異的ＩｇＥ抗体産生を抑制し、抗原誘発後の気管支、肺胞への好酸球浸潤を抑制することを見出した。また、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、ＩｇＥ抗体を受動感作したマウスにおける受身皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）反応を抑制することを見出した。更に本発明者らは、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、マウスの関節リウマチモデルにおいて、起炎剤であるカラギナンによって誘導された足浮腫を抑制し、II型コラーゲンの感作により誘発される関節炎の発症を抑制することを見出した。更に本発明者らは、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、マウスの潰瘍性大腸炎モデルにおいて、ＴＮＦ−α産生の増加などを抑制し、潰瘍性大腸炎の症状を緩和することを見出した（実施例参照、後述）。
これらの結果から、本発明者らは、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を利用することにより、アレルギー疾患や自己免疫疾患を効果的、かつ安全に治療、改善、又は予防できることを知見し、本発明の完成に至った。
【００１１】
本発明は、本発明者らによる前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
＜１＞  アレルギー疾患及び自己免疫疾患の少なくともいずれかを治療又は予防するための医薬であって、ブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを乳酸菌で発酵させて得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含むことを特徴とする医薬である。
＜２＞  乾燥した状態のブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを乳酸菌で発酵させて得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含む前記＜１＞に記載の医薬である。
＜３＞  微粉（パウダー）化された状態のブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを乳酸菌で発酵させて得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含む前記＜１＞から＜２＞のいずれかに記載の医薬である。
＜４＞  乾燥粉末（乾燥パウダー）の状態のブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを乳酸菌で発酵させて得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含む前記＜１＞から＜３＞のいずれかに記載の医薬である。
＜５＞  乳酸菌として、ラクトバチルス  プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス  サリバリウス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓａｌｉｖａｌｉｕｓ）、ラクトバチルス  アミロボラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｖｏｒｕｓ）、ラクトバチルス  カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃａｓｅｉ）、ラクトバチル  キタサトニス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｋｉｔａｓａｔｏｎｉｓｉ）、ラクトバチル  ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ）、ラクトバチル  ジョンソニ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｊｈｏｎｓｏｎｉｉ）、ラクトバチルス  アシドフィラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス  ブレビス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｂｒｅｖｉｓ）、ラクトバチルス  コリニホルミス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏｒｙｎｉｆｏｒｍｉｓ）、ラクトバチルス  カルバタス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｕｒｖａｔｕｓ）、ラクトバチルス  デルブリュキィ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）、ラクトバチルス  ファルシミナス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｆａｒｃｉｍｉｎｕｓ）、ラクトバチルス  ラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ペディオコッカス  ダムノサス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｄａｍｎｏｓｕｓｕ）、ペディオコッカス  ハロフィラス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、ペディオコッカス  パルバラス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｐａｒｖｕｌｕｓ）、ペディオコッカス  ペントサセウス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）、ビフィドバクテリウム  アドレセンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム  ビフィダス（（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｉｆｉｄｕｓ）、ラクトコッカス  クレモリス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、ラクトコッカス  ラクティス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｌａｃｔｉｓ）、リューコノストック  エノス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｏｅｎｏｓ）、リューコノストック  ラクティス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｌａｃｔｉｓ）、リューコノストック  メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）、及び、エンテロコッカス  フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ）からなる群より選択される少なくともいずれかを使用して得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含む前記＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の医薬である。
＜６＞  ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更に有機溶媒で抽出することにより得られる有機溶媒抽出物である前記＜１＞から＜５＞のいずれかに記載の医薬である。
＜７＞  ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物である前記＜１＞から＜６＞のいずれかに記載の医薬である。
＜８＞  ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質である前記＜１＞から＜７＞のいずれかに記載の医薬である。
＜９＞  ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質であり、前記疎水性物質のゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内である前記＜１＞から＜８＞のいずれかに記載の医薬である。
＜１０＞  ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質であり、前記疎水性物質のゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内であり、かつ、吸着剤としてシリカゲルを使用し、展開溶媒としてクロロホルムとメタノールとの体積比率が１５：１であるクロロホルム−メタノール混合溶媒を使用した際の薄層クロマトグラフィーにおけるＲｆ値が０．３〜０．４の範囲内である前記＜１＞から＜９＞のいずれかに記載の医薬である。
＜１１＞  ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質であり、前記疎水性物質のゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内であり、かつ、吸着剤としてシリカゲルを使用し、展開溶媒としてクロロホルムとメタノールと酢酸エチルとの体積比率が１５：１：１であるクロロホルム−メタノール−酢酸エチル混合溶媒を使用した際の薄層クロマトグラフィーにおけるＲｆ値が０．４〜０．５の範囲内である前記＜１＞から＜９＞のいずれかに記載の医薬である。
＜１２＞  Ｉ型アレルギー疾患の治療又は予防に用いられる前記＜１＞から＜１１＞のいずれかに記載の医薬である。
＜１３＞  関節リウマチの治療又は予防に用いられる前記＜１＞から＜１１＞のいずれかに記載の医薬である。
＜１４＞  炎症性腸疾患の治療又は予防に用いられる前記＜１＞から＜１１＞のいずれかに記載の医薬である。
＜１５＞  血管透過性亢進抑制作用を有する前記＜１＞から＜１４＞のいずれかに記載の医薬である。
＜１６＞  ＩｇＥ抗体産生抑制作用を有する前記＜１＞から＜１４＞のいずれかに記載の医薬である。
＜１７＞  好酸球浸潤抑制作用を有する前記＜１＞から＜１４＞のいずれかに記載の医薬である。
＜１８＞  抗炎症作用（例えば、浮腫抑制作用、腫脹抑制作用）を有する前記＜１＞から＜１４＞のいずれかに記載の医薬である。
＜１９＞  ＴＮＦ−α産生抑制作用を有する前記＜１＞から＜１４＞のいずれかに記載の医薬である。
【００１２】
＜２０＞  アレルギー疾患及び自己免疫疾患の少なくともいずれかを改善又は予防するための食品であって、ブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを乳酸菌で発酵させて得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含むことを特徴とする食品である。
＜２１＞  乾燥した状態のブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを乳酸菌で発酵させて得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含む前記＜２０＞に記載の食品である。
＜２２＞  微粉（パウダー）化された状態のブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを乳酸菌で発酵させて得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含む前記＜２０＞から＜２１＞のいずれかに記載の食品である。
＜２３＞  乾燥粉末（乾燥パウダー）の状態のブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを乳酸菌で発酵させて得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含む前記＜２０＞から＜２２＞のいずれかに記載の食品である。
＜２４＞  乳酸菌として、ラクトバチルス  プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス  サリバリウス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓａｌｉｖａｌｉｕｓ）、ラクトバチルス  アミロボラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｖｏｒｕｓ）、ラクトバチルス  カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃａｓｅｉ）、ラクトバチル  キタサトニス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｋｉｔａｓａｔｏｎｉｓｉ）、ラクトバチル  ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ）、ラクトバチル  ジョンソニ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｊｈｏｎｓｏｎｉｉ）、ラクトバチルス  アシドフィラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス  ブレビス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｂｒｅｖｉｓ）、ラクトバチルス  コリニホルミス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏｒｙｎｉｆｏｒｍｉｓ）、ラクトバチルス  カルバタス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｕｒｖａｔｕｓ）、ラクトバチルス  デルブリュキィ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）、ラクトバチルス  ファルシミナス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｆａｒｃｉｍｉｎｕｓ）、ラクトバチルス  ラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）、ペディオコッカス  ダムノサス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｄａｍｎｏｓｕｓｕ）、ペディオコッカス  ハロフィラス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、ペディオコッカス  パルバラス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｐａｒｖｕｌｕｓ）、ペディオコッカス  ペントサセウス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）、ビフィドバクテリウム  アドレセンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム  ビフィダス（（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｉｆｉｄｕｓ）、ラクトコッカス  クレモリス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、ラクトコッカス  ラクティス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｌａｃｔｉｓ）、リューコノストック  エノス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｏｅｎｏｓ）、リューコノストック  ラクティス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｌａｃｔｉｓ）、リューコノストック  メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ）、及び、エンテロコッカス  フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ）からなる群より選択される少なくともいずれかを使用して得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含む前記＜２０＞から＜２３＞のいずれかに記載の食品である。
＜２５＞  ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更に有機溶媒で抽出することにより得られる有機溶媒抽出物である前記＜２０＞から＜２４＞のいずれかに記載の食品である。
＜２６＞  ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物である前記＜２０＞から＜２５＞のいずれかに記載の食品である。
＜２７＞  ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質である前記＜２０＞から＜２６＞のいずれかに記載の食品である。
＜２８＞  ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質であり、前記疎水性物質のゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内である前記＜２０＞から＜２７＞のいずれかに記載の食品である。
＜２９＞  ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質であり、前記疎水性物質のゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内であり、かつ、吸着剤としてシリカゲルを使用し、展開溶媒としてクロロホルムとメタノールとの体積比率が１５：１であるクロロホルム−メタノール混合溶媒を使用した際の薄層クロマトグラフィーにおけるＲｆ値が０．３〜０．４の範囲内である前記＜２０＞から＜２８＞のいずれかに記載の食品である。
＜３０＞  ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物が、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更にアセトンで抽出することにより得られるアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質であり、前記疎水性物質のゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内であり、かつ、吸着剤としてシリカゲルを使用し、展開溶媒としてクロロホルムとメタノールと酢酸エチルとの体積比率が１５：１：１であるクロロホルム−メタノール−酢酸エチル混合溶媒を使用した際の薄層クロマトグラフィーにおけるＲｆ値が０．４〜０．５の範囲内である前記＜２０＞から＜２８＞のいずれかに記載の食品である。
＜３１＞  Ｉ型アレルギー疾患の改善又は予防に用いられる前記＜２０＞から＜３０＞のいずれかに記載の食品である。
＜３２＞  関節リウマチの改善又は予防に用いられる前記＜２０＞から＜３０＞のいずれかに記載の食品である。
＜３３＞  炎症性腸疾患の改善又は予防に用いられる前記＜２０＞から＜３０＞のいずれかに記載の食品である。
＜３４＞  血管透過性亢進抑制作用を有する前記＜２０＞から＜３３＞のいずれかに記載の食品である。
＜３５＞  ＩｇＥ抗体産生抑制作用を有する前記＜２０＞から＜３３＞のいずれかに記載の食品である。
＜３６＞  好酸球浸潤抑制作用を有する前記＜２０＞から＜３３＞のいずれかに記載の食品である。
＜３７＞  抗炎症作用（例えば、浮腫抑制作用、腫脹抑制作用）を有する前記＜２０＞から＜３３＞のいずれかに記載の食品である。
＜３８＞  ＴＮＦ−α産生抑制作用を有する前記＜２０＞から＜３３＞のいずれかに記載の食品である。
【００１３】
本発明によれば、前記従来における諸問題を解決し、前記目的を達成することができ、アレルギー疾患や自己免疫疾患を効果的、かつ安全に治療、改善、又は予防することが可能な医薬及び食品を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１Ａ】図１Ａは、実施例１における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物検体の受身皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）抑制作用を示したグラフである。
【図１Ｂ】図１Ｂは、実施例１における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物以外の検体の受身皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）抑制作用を示したグラフである。
【図２】図２は、実施例２における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物検体のＩｇＥ産生抑制作用を示したグラフである。
【図３】図３は、実施例３における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物検体の気管支、肺胞への好酸球浸潤抑制作用を示したグラフである。
【図４】図４は、実施例４における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のカラギナン誘発マウスの足浮腫抑制作用を示したグラフである。
【図５Ａ】図５Ａは、実施例５における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のII型コラーゲン誘発マウスの関節炎抑制作用を経日的に示したグラフである。
【図５Ｂ】図５Ｂは、実施例５における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のII型コラーゲン誘発マウスのピーク時における関節炎抑制作用を示したグラフである。
【図６Ａ】図６Ａは、実施例６における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のデキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）誘発マウスにおける体重減少抑制作用を示したグラフである。
【図６Ｂ】図６Ｂは、実施例６における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のデキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）誘発マウスにおけるヘマトクリット値低下抑制作用を示したグラフである。
【図６Ｃ】図６Ｃは、実施例６における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のデキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）誘発マウスにおける大腸短縮抑制作用を示したグラフである。
【図６Ｄ】図６Ｄは、実施例６における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のデキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）誘発マウスにおけるＴＮＦ−α産生抑制作用を示したグラフである。
【図７Ａ】図７Ａは、実施例７における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のアセトン抽出物、又はその残渣の受身皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）抑制作用を示したグラフである。
【図７Ｂ】図７Ｂは、実施例７における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のアセトン抽出物からＤＩＡＩＯＮ  ＨＰ−２０により分画した親水性様物質（Ｆｒａｃｔｉｏｎ１）と疎水性様物質（Ｆｒａｃｔｉｏｎ２）の受身皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）抑制作用を示したグラフである。
【図７Ｃ】図７Ｃは、実施例７における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のアセトン抽出物中の疎水性様物質（Ｆｒａｃｔｉｏｎ２）から、更にＳｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラムにより分子量の違いで分画した物質（Ｆｒａｃｔｉｏｎ３〜５）を薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）で展開した際のＴＬＣクロマトグラムである。
【図７Ｄ】図７Ｄは、実施例７における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のアセトン抽出物中の疎水性様物質（Ｆｒａｃｔｉｏｎ２）から、更にＳｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０カラムにより分子量の違いで分画した物質（Ｆｒａｃｔｉｏｎ３〜５）の受身皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）抑制作用を示したグラフである。
【図７Ｅ】図７Ｅは、実施例７における、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のアセトン抽出物、又は、未発酵物のアセトン抽出物を、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）で展開した際のＴＬＣクロマトグラムである。
【図７Ｆ】図７Ｆは、実施例７における、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）で分画したブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物に特異的に検出されるスポット（スポットｅ）の受身皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）抑制作用を示したグラフである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
（医薬）
本発明の医薬は、アレルギー疾患及び自己免疫疾患の少なくともいずれかを治療又は予防するための医薬であって、ブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを乳酸菌で発酵させて得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含み、必要に応じて適宜その他の成分を含む。【００１６】
＜ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物＞
前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物は、ブドウの果皮及び種子の少なくともいずれか（果皮・種子）を乳酸菌で発酵させて得られるものであれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。なお、本明細書中において、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を、「乳酸菌発酵ブドウ果皮・種子」等と称することがある。【００１７】
−ブドウ−
前記ブドウとしては、ブドウ科（Ｖｉｔａｃｅａｅ）ブドウ属（Ｖｉｔｉｓ）に属する植物であれば特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ヨーロッパ・ブドウ（ヴィティス・ヴィニフェラ（Ｖｉｔｉｓ  ｖｉｎｉｆｅｒａ））、アメリカ・ブドウ（ヴィティス・ラブルスカ（Ｖｉｔｉｓ  ｌａｂｒｕｓｃａ））、ヴィティス・アムレンシス（Ｖｉｔｉｓ  ａｍｕｒｅｎｓｉｓ）、ヴィティス・コイネティアエ（Ｖｉｔｉｓ  ｃｏｉｇｎｅｔｉａｅ）、これらの交雑種などが挙げられる。前記ブドウの品種としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、甲州（Ｋｏｓｈｕ）、シャルドネ（Ｃｈａｒｄｏｎｎａｙ）、ミュスカ（Ｍｕｓｃａｔ）、ソーヴィニヨン・ブラン（Ｓａｕｖｉｇｎｏｎ  Ｂｌａｎｃ）、セミヨン（Ｓｅｍｉｌｌｏｎ）、リースリング（Ｒｉｅｓｌｉｎｇ）、シルヴァナアー（Ｓｉｌｖａｎｅｒ）、ミューラ・トゥルガウ（Ｍｕｌｌｅｒ−Ｔｈｕｒｇａｕ）、ケルナー（Ｋｅｒｎｅｒ）、ゲヴュルツトラミネール（Ｇｅｗｕｒｚｔｒａｍｉｎｅｒ）、シャスラ（Ｃｈａｓｓｅｌａｓ）、シュナン・ブラン（Ｃｈｅｎｉｎ  Ｂｌａｎｃ）、セミヨン（Ｓｅｍｉｌｌｏｎ）、デラウェア（Ｄｅｌａｗａｒｅ）、バッカス（Ｂａｃｃｈｕｓ）、ピノ・グリ（Ｐｉｎｏｔ  Ｇｒｉｓ）、ピノ・プラン（Ｐｉｎｏｔ  Ｂｌａｎｃ）、フルミント（Ｆｕｒｍｉｎｎｔ）、ミュスカデ（Ｍｕｓｃａｄｅｔ）、ミュスカデル（Ｍｕｓｃａｄｅｌｌｅ）、リースリング（Ｒｉｅｓｌｉｎｇ）、カベルネ・ソーヴィニヨン（Ｃａｂｅｒｎｅｔ  Ｓａｕｖｉｇｎｏｎ）、マスカット・ベリーＡ（Ｍｕｓｃａｔ  Ｂａｉｌｅｙ  Ａ）、ネッビオーロ（Ｎｅｂｂｉｏｌｏ）、グルナッシュ（Ｇｒｅｎａｃｈｅ）、メルロー（Ｍｅｒｌｏｔ）、シラー（Ｓｙｒａｈ）、ネグロアマーロ（Ｎｅｇｒｏａｍａｒｏ）、サンジョヴェーゼ（Ｓａｎｇｉｏｖｅｓｅ）、タナ（Ｔａｎｎａｔ）、プリミティーボ（Ｐｒｉｍｉｔｉｖｏ）、ブルネエッロ（Ｂｒｕｎｅｌｌｏ）、カベルネ・フラン（Ｃａｂｅｒｎｅｔ  Ｆｒａｎｃ）、ガメイ（Ｇａｍａｙ）、コンコード（Ｃｏｎｃｏｒｄ）、サンジョヴェーゼ（Ｓａｎｇｉｏｖｅｓｅ）、サンソー（Ｃｉｎｓａｕｔ）、ジンファンデル（Ｚｉｎｆａｎｄｅｌ）、セルベル（Ｓｅｉｂｅｌ）、ツヴァイゲルトレーベ（Ｚｗｅｉｇｅｌｔｒｅｂｅ）、テンプラニーリョ（Ｔｅｍｐｒａｎｉｌｌｏ）、バラベーラ（Ｂａｒｂｅｒａ）、ピノ・ノワール（Ｐｉｎｏｔ  Ｎｏｉｒ）、ピノ・ムニエ（Ｐｉｎｏｔ  Ｍｅｕｎｉｅｒ）、プティ・ヴェルドー（Ｐｅｔｉｔ  Ｖｅｒｄｏｔ）、マルヴァジア（Ｍａｌｖａｓｉａ）、マルベック（Ｍａｌｂｅｃ）、ムールヴェードル（Ｍｏｕｒｖｅｒｄｅｒ）、巨峰（ｋｙｏｈｏ）などが挙げられる。【００１８】
−果皮・種子−
前記果皮・種子としては、前記したブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかであれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、前記果皮・種子の状態としては、生の状態であってもよいし、乾燥した状態であってもよい。また、前記果皮・種子のサイズとしては、前記果皮及び種子の少なくともいずれかを採取したそのままの状態であってもよいし、所望の大きさに裁断された状態であってもよいし、微粉（パウダー）化された状態であってもよい。中でも、前記果皮・種子は、後述する乳酸菌を作用させ易くする観点から、乾燥した状態であることが好ましく、また、微粉（パウダー）化された状態であることが好ましい。すなわち、前記果皮・種子は、乾燥粉末（乾燥パウダー）の状態であることが特に好ましい。前記果皮・種子の乾燥粉末（乾燥パウダー）を作製する方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、公知の手法を用いて行うことができる。前記果皮・種子の乾燥粉末（乾燥パウダー）の平均粒子径としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、１０〜２００メッシュが好ましい。前記平均粒子径が、１０メッシュ未満であると、発酵物の活性が弱いことがある。一方、前記平均粒子径が前記好ましい範囲内であると、強い活性を有する発酵物が得られる点で、有利である。
また、前記ブドウの果皮・種子としては、その入手方法に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、ワインやジュース等の製造過程で果汁を絞った後のブドウの残り滓を使用することが、コスト性に優れ、かつ、産業廃棄物を減らすことのできる点で、望ましいと考えられる。
また、前記ブドウの果皮・種子としては、前記ブドウの果皮を単独で使用してもよいし、前記ブドウの種子を単独で使用してもよいし、前記ブドウの果皮と種子とを併用してもよい。
ここで、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物の原料としては、その全てが必ずしも前記したブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかからなる必要はなく、その少なくとも一部に前記したブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかが含まれていればよい。例えば、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物の原料としては、前記ブドウの果皮・種子以外に、前記ブドウの果実、果汁、葉、茎などが適宜含まれていてもよい。前記ブドウの果皮・種子と、前記ブドウの果皮・種子以外との使用量比としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。【００１９】
−乳酸菌−
前記乳酸菌としては、発酵によって乳酸を産生する細菌であれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ラクトバチルス属（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）、ペディオコッカス属（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ）、ビフィドバクテリウム属（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、ラクトコッカス属（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ）、リューコノストック属（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ）、エンテロコッカス属（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ）に属する細菌などが挙げられる。前記乳酸菌の種としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、中でも、前記したブドウの果皮・種子を炭素源として、効率よく増殖を行うことのできる種を使用することが好ましい。このような好ましい種としては、例えば、ラクトバチルス属として、ラクトバチルス  プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ）、ラクトバチルス  サリバリウス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓａｌｉｖａｌｉｕｓ）、ラクトバチルス  アミロボラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｍｙｌｏｖｏｒｕｓ）、ラクトバチルス  カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃａｓｅｉ）、ラクトバチル  キタサトニス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｋｉｔａｓａｔｏｎｉｓｉ）、ラクトバチル  ロイテリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｅｕｔｅｒｉ）、ラクトバチル  ジョンソニ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｊｈｏｎｓｏｎｉｉ）、ラクトバチルス  アシドフィラス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス  ブレビス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｂｒｅｖｉｓ）、ラクトバチルス  コリニホルミス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｏｒｙｎｉｆｏｒｍｉｓ）、ラクトバチルス  カルバタス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｕｒｖａｔｕｓ）、ラクトバチルス  デルブリュキィ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉ）、ラクトバチルス  ファルシミナス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｆａｒｃｉｍｉｎｕｓ）、ラクトバチルス  ラムノサス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ）；ペディオコッカス属として、ペディオコッカス  ダムノサス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｄａｍｎｏｓｕｓｕ）、ペディオコッカス  ハロフィラス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｈａｌｏｐｈｉｌｕｓ）、ペディオコッカス  パルバラス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｐａｒｖｕｌｕｓ）、ペディオコッカス  ペントサセウス（Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ）；ビフィドバクテリウム属として、ビフィドバクテリウム  アドレセンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム  ビフィダス（（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｂｉｆｉｄｕｓ）；ラクトコッカス属として、ラクトコッカス  クレモリス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｃｒｅｍｏｒｉｓ）、ラクトコッカス  ラクティス（Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｌａｃｔｉｓ）；リューコノストック属として、リューコノストック  エノス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｏｅｎｏｓ）、リューコノストック  ラクティス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｌａｃｔｉｓ）、リューコノストック  メセンテロイデス（Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒ��ｉｄｅｓ）；エンテロコッカス属として、エンテロコッカス  フェカリス（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ）などが挙げられる。中でも、前記乳酸菌の種としては、ラクトバチルス  プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ）が、前記ブドウ果皮・種子を炭素源として効率よく増殖し、かつ、得られた発酵物の活性が強い点で、特に好ましい。【００２０】
−発酵−
前記発酵は、前記したブドウの果皮・種子を少なくとも一部に含む原料を、前記乳酸菌を用いて発酵させることにより行うことができる。前記発酵の方法としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記原料に、前記乳酸菌を添加し、培養する方法などが挙げられる。より具体的には、例えば、後述する実施例に記載の方法により前記発酵を行うことができる。【００２１】
前記発酵時の乳酸菌の使用量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記原料１０ｇに対して、１０１２ＣＦＵ以上が好ましく、１０１３ＣＦＵ以上が特に好ましい。前記乳酸菌の使用量が、１０１２ＣＦＵ未満であると、発酵物の活性が弱くなることがある。一方、前記乳酸菌の使用量が前記特に好ましい範囲内であると、強い活性を有する発酵物が得られる点で、有利である。【００２２】
前記発酵時の温度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、１０〜４０℃が好ましく、１７〜３０℃が特に好ましい。前記温度が、１０℃未満であると、菌の増殖が悪くなることがあり、４０℃を超えると、菌が生育できなくなることがある。一方、前記温度が前記特に好ましい範囲内であると、強い活性を有する発酵物が得られる点で、有利である。【００２３】
前記発酵時間としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、４８〜１４４時間が好ましく、７２時間が特に好ましい。前記発酵時間が、４８時間未満であると、発酵物の活性が弱いことがある。一方、前記発酵時間が、前記特に好ましい範囲内であると、強い活性を有する発酵物が得られる点で、有利である。【００２４】
前記発酵により、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を得ることができる。前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物は、そのままで、又は適宜加工することにより、前記医薬及び後述する本発明の食品の有効成分として使用される。【００２５】
−抽出・精製−
また、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物は、更に抽出・精製された状態で使用されてもよい。前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更に抽出・精製することによれば、より活性の強い物質が得られる点で、有利である。【００２６】
例えば、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物としては、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を更に有機溶媒で抽出することにより得られる有機溶媒抽出物を使用してもよい。前記有機溶媒としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、アセトン、クロロホルム、メタノール、エタノール、酢酸エチル、ヘキサンなどが挙げられ、これらの中でもアセトンが特に好ましい。
ここで、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物をアセトンで抽出する際の、アセトンの使用量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物１ｇに対して、７０％アセトンの量として、１００〜５００ｍＬが好ましい。
また、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物をアセトンで抽出する際の、抽出温度としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、２０〜６０℃が好ましい。
また、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物をアセトンで抽出する際の、抽出時間としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、１時間以上が好ましく、２４時間以上がより好ましい。
なお、前記アセトン抽出により得られた抽出液は、ロータリーエバポレーター等を用い、アセトンを除去した後に、凍結乾燥により水分を除去することが好ましい。
前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のアセトン抽出物は、活性が強く、特に血管透過性亢進抑制作用に優れる点で、有利である。【００２７】
また、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物としては、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のアセトン抽出物中に含まれる、疎水性物質を使用してもよい。ここで、前記疎水性物質としては、前記アセトン抽出物を、後述する実施例７に記載の手法により親水性様物質と疎水性様物質とに分画した際に、疎水性様物質として分画される物質をいうものとする。なお、前記疎水性物質は、後述する実施例７に記載の手法に限らずとも、例えば、従来公知の手法により、前記アセトン抽出物を親水性物質と疎水性物質とに分画することにより、得ることもできる。
前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質は、活性が強く、特に血管透過性亢進抑制作用に優れる点で、有利である。【００２８】
また、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物としては、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質のうち、ゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内である物質を使用してもよい。前記ゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内である物質は、例えば、前記疎水性物質をゲルろ過クロマトグラフィーで分画することにより得ることができる。
ここで、前記ゲルろ過クロマトグラフィーに用いるカラムとしては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ２０（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）、Ｂｉｏ−Ｇｅｌ  Ｐ−１（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）などが挙げられ、これらの中でも、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）が好ましい。
また、前記ゲルろ過クロマトグラフィーに用いる溶離液としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、水、エタノール、エタノールと水との混合液などが挙げられ、これらの中でも、エタノールと水との混合液が好ましい。
前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質のうち、ゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内である物質は、活性が強く、特に血管透過性亢進抑制作用に優れる点で、有利である。【００２９】
また、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物としては、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質であり、ゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内である物質のうち、吸着剤としてシリカゲルを使用し、展開溶媒としてクロロホルムとメタノールとの体積比率が１５：１であるクロロホルム−メタノール混合溶媒を使用した際の、薄層クロマトグラフィーにおけるＲｆ値が０．３〜０．４の範囲内である物質を使用してもよい。
前記物質は、例えば、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のアセトン抽出物や、前記アセトン抽出物中に含まれるゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内である疎水性物質などを、前記したような条件下（吸着剤としてシリカゲルを使用し、展開溶媒としてクロロホルムとメタノールとの体積比率が１５：１であるクロロホルム−メタノール混合溶媒を使用）、薄層クロマトグラフィーで分画することにより得ることができる。なお、ここで、前記シリカゲルとしては、シリカゲル６０（メルク社）を使用することが好ましい。
前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物のアセトン抽出物中に含まれる疎水性物質であり、ゲルろ過クロマトグラフィーによる分子量が１００〜１，０００の範囲内である物質のうち、前記条件下での薄層クロマトグラフィーにおけるＲｆ値が０．３〜０．４の範囲内である物質は、活性が強く、特に血管透過性亢進抑制作用に優れる点で、有利である。また、該物質は未発酵のブドウ果皮・種子には見出されず、そのため、該物質はブドウ果皮・種子の乳酸菌発酵により新たに生成された物質であり、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物における主要な活性成分であることが考えられる。（なお、該物質は、図７Ｃ及び図７Ｅのスポット「ｅ」に対応する物質である。）【００３０】
前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物として、前記したような各段階の抽出・精製物を使用することによれば、前記医薬の各作用を向上させることができ、特に血管透過性亢進抑制作用を向上させることができる点で、有利である。【００３１】
−含有量−
前記医薬中の前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物の含有量は、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、また、前記医薬は、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物そのものであってもよい。【００３２】
＜その他の成分＞
前記その他の成分としては、特に制限はなく、本発明の効果を損なわない範囲内で、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、医薬的に許容され得る担体などが挙げられる。前記担体としては、特に制限はなく、例えば、後述する前記医薬の剤型等に応じて適宜選択することができる。また、前記医薬中の前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。【００３３】
＜剤型＞
前記医薬の剤型としては、特に制限はなく、例えば、所望の投与方法に応じて適宜選択することができ、例えば、経口固形剤（錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等）、経口液剤（内服液剤、シロップ剤、エリキシル剤等）、注射剤（溶液、懸濁液、用事溶解用固形剤等）、坐剤、軟膏剤、貼付剤、ゲル剤、クリーム剤、外用散剤、スプレー剤、吸入散剤などが挙げられる。【００３４】
前記経口固形剤としては、例えば、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物に、賦形剤、更には必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味・矯臭剤等の添加剤を加え、常法により製造することができる。
前記賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、塩化ナトリウム、ブドウ糖、デンプン、炭酸カルシウム、カオリン、微結晶セルロース、珪酸などが挙げられる。前記結合剤としては、例えば、水、エタノール、プロパノール、単シロップ、ブドウ糖液、デンプン液、ゼラチン液、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルスターチ、メチルセルロース、エチルセルロース、シェラック、リン酸カルシウム、ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。前記崩壊剤としては、例えば、乾燥デンプン、アルギン酸ナトリウム、カンテン末、炭酸水素ナトリウム、炭酸カルシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ステアリン酸モノグリセリド、乳糖などが挙げられる。前記滑沢剤としては、例えば、精製タルク、ステアリン酸塩、ホウ砂、ポリエチレングリコールなどが挙げられる。前記着色剤としては、例えば、酸化チタン、酸化鉄などが挙げられる。前記矯味・矯臭剤としては、例えば、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸などが挙げられる。【００３５】
前記経口液剤としては、例えば、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物に、矯味・矯臭剤、緩衝剤、安定化剤等の添加剤を加え、常法により製造することができる。
前記矯味・矯臭剤としては、例えば、白糖、橙皮、クエン酸、酒石酸などが挙げられる。前記緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウムなどが挙げられる。前記安定化剤としては、例えば、トラガント、アラビアゴム、ゼラチンなどが挙げられる。【００３６】
前記注射剤としては、例えば、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物に、ｐＨ調節剤、緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法により皮下用、筋肉内用、静脈内用等の注射剤を製造することができる。
前記ｐＨ調節剤及び前記緩衝剤としては、例えば、クエン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウムなどが挙げられる。前記安定化剤としては、例えば、ピロ亜硫酸ナトリウム、ＥＤＴＡ、チオグリコール酸、チオ乳酸などが挙げられる。前記等張化剤としては、例えば、塩化ナトリウム、ブドウ糖などが挙げられる。前記局所麻酔剤としては、例えば、塩酸プロカイン、塩酸リドカインなどが挙げられる。【００３７】
前記坐剤としては、例えば、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物に、ポリエチレングリコール、ラノリン、カカオ脂、脂肪酸トリグリセリド等の公知の坐剤製剤用担体と、必要に応じてツイーン（ＴＷＥＥＮ：登録商標）等の界面活性剤などを加えた後、常法により製造することができる。【００３８】
前記軟膏剤としては、例えば、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物に、公知の基剤、安定剤、湿潤剤、保存剤等を配合し、常法により混合し、製造することができる。
前記基剤としては、例えば、流動パラフィン、白色ワセリン、サラシミツロウ、オクチルドデシルアルコール、パラフィンなどが挙げられる。前記保存剤としては、例えば、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピルなどが挙げられる。【００３９】
前記貼付剤としては、例えば、公知の支持体に前記軟膏剤としてのクリーム剤、ゲル剤、ペースト剤等を、常法により塗布し、製造することができる。前記支持体としては、例えば、綿、スフ、化学繊維からなる織布、不織布、軟質塩化ビニル、ポリエチレン、ポリウレタン等のフィルム、発泡体シートなどが挙げられる。【００４０】
＜投与＞
前記医薬の投与対象としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ヒト、マウス、ラット、ハムスター、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ブタ、サルなどが挙げられる。
また、前記医薬の投与方法としては、特に制限はなく、前記医薬の剤型等に応じて適宜選択することができ、例えば、経口投与、注射による投与などが挙げられる。
また、前記医薬の投与量としては、特に制限はなく、投与対象である患者の年齢、体重、性別、症状等に応じて適宜選択することができるが、ヒト成人１日あたり、有効成分である前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物の量として、５０ｍｇ〜５ｇ程度が好ましい。
また、前記医薬の投与頻度としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記１日あたりの投与量を、１日に１回で投与してもよいし、複数回に分けて投与してもよい。
また、前記医薬の投与時期としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記医薬は、治療的に投与されてもよいし、予防的に投与されてもよい。【００４１】
＜対象＞
前記医薬は、アレルギー疾患及び自己免疫疾患の少なくともいずれかの治療又は予防に好適である。アレルギー疾患は外部からの抗原に対して過剰な免疫反応が起こる疾患であり、自己免疫疾患は自己の体を構成する物質が抗原として認識されて過剰な免疫反応が起こる疾患であり、いずれも不必要に過剰な免疫反応に起因することで共通する。
前記「アレルギー疾患」としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、Ｉ型アレルギー疾患として、花粉症、アレルギー性鼻炎、気管支喘息、蕁麻疹、アトピー性皮膚炎、アナフィラキシーショック、食物アレルギー；ＩＩ型アレルギー疾患として、自己免疫性溶血性貧血、悪性貧血、リウマチ熱、橋本病；ＩＩＩ型アレルギーとして、全身性エリテマトーデス、急性糸球体腎炎、関節リウマチ、リウマチ性肺炎、多発性動脈炎、アレルギー性血管炎；ＩＶ型アレルギーとして、接触性皮膚炎；などが挙げられる。また、前記「自己免疫疾患」としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、全身性自己免疫疾患として、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、リウマチ熱、強皮症、シェーグレン症候群；臓器特異的自己免疫疾患として、潰瘍性大腸炎等の炎症性腸疾患、自己免疫性溶血性貧血、Ｉ型糖尿病、多発性硬化症、重症筋無力症、悪性貧血；などが挙げられる。なお、前記アレルギー疾患、前記自己免疫疾患に関連して起こり得る症状は、いずれも前記医薬の治療又は予防対象となり得る。
前記医薬は、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を少なくとも含むので、優れた血管透過性亢進抑制作用、ＩｇＥ抗体産生抑制作用、好酸球浸潤抑制作用、抗炎症作用（例えば、浮腫抑制作用、腫脹抑制作用）、ＴＮＦ−α産生抑制作用等を有しており、前記した各種疾患の中でも、Ｉ型アレルギー疾患、関節リウマチ、及び炎症性腸疾患の治療又は予防に、特に好適であると考えられる（実施例参照、後述）。【００４２】
（食品）
本発明の食品は、アレルギー疾患及び自己免疫疾患の少なくともいずれかを改善又は予防するための食品であって、ブドウの果皮及び種子の少なくともいずれかを乳酸菌で発酵させて得られるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含み、必要に応じて適宜その他の成分を含む。【００４３】
＜ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物＞
前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物は、ブドウの果皮及び種子の少なくともいずれか（果皮・種子）を乳酸菌で発酵させて得られるものであり、前記「ブドウ」、「果皮・種子」、「乳酸菌」、「発酵」としては、前記した本発明の医薬の項目に記載した通りである。また、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物は、更に抽出・精製された状態で使用されてもよい。前記「抽出・精製」としては、前記した本発明の医薬の項目に記載した通りである。
前記食品中の前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物の含有量は、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、また、前記食品は、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物そのものであってもよい。【００４４】
＜その他の成分＞
前記その他の成分としては、特に制限はなく、本発明の効果を損なわない範囲内で、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、各種食品原料などが挙げられる。前記食品原料としても、特に制限はなく、例えば、後述する前記食品の種類等に応じて適宜選択することができる。また、前記食品中の前記その他の成分の含有量としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。【００４５】
＜食品の種類＞
前記食品の種類としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、ゼリー、キャンディー、チョコレート、ビスケット、グミ等の菓子類；柿の種、おかき等のおつまみ類；緑茶、紅茶、コーヒー、清涼飲料等の嗜好飲料；原料乳、ヨーグルト、アイスクリーム等の乳製品；野菜飲料、果実飲料、ジャム類等の野菜・果実加工品；スープ等の液体食品；パン類、麺類等の穀物加工品；各種調味料；ハンバーグ、コロッケ、かまぼこ、さつま揚げ等の肉・魚介類加工品；などが挙げられる。これらの食品の製造方法としては、特に制限はなく、例えば、通常の各種食品の製造方法に応じて、適宜製造することができる。
また、前記食品は、例えば、錠剤、顆粒剤、カプセル剤等の経口固形剤や、内服液剤、シロップ剤等の経口液剤として製造されたものであってもよい。前記経口固形剤、経口液剤の製造方法は、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記した医薬の経口固形剤、経口液剤の製造方法にならい、製造することができる。【００４６】
前記食品の投与（摂取）形態としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記した本発明の医薬の投与形態（投与対象、投与方法、投与量、投与時期）に準じて、適宜投与（摂取）することができる。
また、前記食品の改善又は予防対象としては、特に制限はなく、前記した本発明の医薬の治療又は予防対象と同様であり、前記食品は、アレルギー疾患及び自己免疫疾患の少なくともいずれかの改善又は予防に好適である。【００４７】
前記食品は、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を少なくとも含むので、優れた血管透過性亢進抑制作用、ＩｇＥ抗体産生抑制作用、好酸球浸潤抑制作用、抗炎症作用（例えば、浮腫抑制作用、腫脹抑制作用）、ＴＮＦ−α産生抑制作用等を有しており、したがって、前記食品は、Ｉ型アレルギー疾患等のアレルギー疾患、関節リウマチ、炎症性腸疾患等の自己免疫疾患を改善又は予防する目的で摂取される機能性食品として、特に有用である。【００４８】
［効果］
本発明によれば、アレルギー疾患、自己免疫疾患を治療、改善、予防することが可能な、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を利用した医薬及び食品を提供することができる。
本発明の医薬及び食品は、従来は廃棄されていたブドウの果皮や種子を有効利用できることから、環境性の観点からも優れたものであるということができる。また、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物は、自然食品であるブドウを利用したものであり、そのため、前記ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を含む本発明の医薬及び食品は、アレルギー疾患、自己免疫疾患の治療、改善、予防効果に優れるのみならず、安全性にも極めて優れたものであるということができる。
【実施例】
【００４９】
以下に実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に何ら限定されるものではない。【００５０】
［検体作製法］
本実施例におけるブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物（乳酸菌発酵ブドウ果皮・種子）の検体の作製は、特に記す場合を除き、以下の方法で行った。
甲州、カベルネ・ソーヴィニオン、ミュスカ、ネグロアマーロ、プリミティーボのブドウ果皮及び種子を粉砕し、それぞれのブドウ果皮・種子乾燥粉末を作製した。なお、混合ブドウ果皮・種子乾燥粉末としては、それぞれのブドウ果皮・種子乾燥粉末を、甲州：カベルネ・ソーヴィニオン：ミュスカ：ネグロアマーロ：プリミティーボ＝３：３：１：１：１の割合で混合した。各ブドウ果皮・種子乾燥粉末の濃度が１０質量％になるように精製水に懸濁後、乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ（ＫＵ１４６））を１×１０１１ＣＦＵ／ｍｌの濃度になるよう接種した。３７℃、４８時間（２日間）培養後、培養液を回収し、８０℃、２時間熱処理した。得られた検体は蒸留水で希釈し、各実施例における所望の濃度に調整した。【００５１】
（実施例１：受身皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）抑制作用）
抗卵白アルブミン(ＯＶＡ)ＩｇＥ抗体を含んだ抗血清を皮下投与して局所のマスト細胞を感作させたマウスに、ＯＶＡ抗原を投与して抗原誘発することにより、抗体感作されたマスト細胞の脱顆粒が誘導され、顆粒中に含まれる炎症物質により、血管透過性が亢進し、局所炎症が惹起されることが知られている（受身皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）反応）。ここで、マスト細胞の抗体感作後の投与により前記ＰＣＡ反応を抑制できる物質は、Ｉ型アレルギー反応の発症後の投与においても有効性を示す、治療的投与に極めて有用な物質であると考えられる。本実施例１では、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物の、このようなＩ型アレルギー反応に対する治療的効果を以下のようにして確認した。
５週齢、雄性ＢＡＬＢ／ｃマウス（日本ＳＬＣ株式会社）の耳介に、抗ＯＶＡ  ＩｇＥ抗体を含む抗血清０．０１ｍｌを皮下投与して受動感作した。感作２４時間後にＯＶＡ  ０．１ｍｇ／マウスとエバンスブルー色素（和光純薬工業株式会社）０．６２５ｍｇ／マウスを静脈内投与して抗原誘発した。抗原誘発３０分後、耳を切り取り、１Ｎ  水酸化カリウム液０．２５ｍｌに２４時間浸して溶解した。３Ｎ  リン酸溶液０．１２５ｍｌで中和後、アセトン０．３２５ｍｌを加え、感作部位に漏出した色素を抽出した。２，５００ｒｐｍ、１０分間遠心後、アセトン層を回収し、波長５９５ｎｍで吸光度を測定して、色素量を定量した。各ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物検体は、１０又は１００ｍｇ／ｋｇの用量で、抗原誘発３０分前に経口投与した。また、比較対照として、無処置の各ブドウ果皮・種子粉末、或いは乳酸菌の死菌を接種したブドウ果皮・種子粉末を、１００ｍｇ／ｋｇの用量で同様に経口投与した。また、同じく比較対照として、１００ｍｇ／ｋｇの用量のブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物検体に含まれる量の乳酸菌のみを同様に経口投与した。また、コントロールとして、蒸留水を同様に経口投与した。
結果を図１Ａ及び図１Ｂに示す。縦軸には、蒸留水投与のコントロール群の色素漏出量を１００％としたときの各検体投与群の色素漏出量（％コントロール）を示した。
図１Ａに各ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物の結果を示す。コントロール群では抗原誘発により耳介部に炎症が生じ、血管透過性亢進による著明な色素漏出が認められた。一方、甲州、カベルネ・ソーヴィニオン、及び混合ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物投与群では、用量依存的な色素漏出の抑制作用が認められ、１０ｍｇ／ｋｇの投与量においても、それぞれコントロール群と比較して有意に色素漏出を抑制することが示された。
また、図１Ｂにブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物以外（比較対照群）の結果を示す。１００ｍｇ／ｋｇの用量の無処置ブドウ果皮・種子粉末、ブドウ果皮・種子粉末に乳酸菌死菌を加えた未発酵物、及び相当量の乳酸菌のみを投与した群では、いずれもコントロール群に対して有意な色素漏出抑制作用は認められなかった。
これらの結果から、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物は、マスト細胞の脱顆粒により引き起こされる血管透過性の亢進を抑制し、マスト細胞が関与するＩ型アレルギー反応（即時型反応）を効果的に抑制する作用を有することが示された。一方、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物以外の検体投与群ではいずれも有意な抑制作用は認められず、乳酸菌によるブドウ果皮・種子の発酵が重要であることが判る。【００５２】
（実施例２：ＩｇＥ抗体産生抑制作用）
マウスに卵白アルブミン（ＯＶＡ）を投与して感作することにより、感作Ｔｈ２細胞が誘導され、血中に多量のＩｇＥ抗体が検出される。抗原感作されたマウスに、同抗原を気道に投与して抗原誘発することにより、気管支、肺胞への好酸球が誘導され、喘息に似た症状を呈することが知られている。このような動物モデルにおいて、抗原感作時からの投与により、ＩｇＥ抗体産生、及び気管支、肺胞への好酸球浸潤を抑制する物質は、Ｔｈ２細胞の誘導によるＩ型アレルギー反応を予防的に抑制できることが考えられる。本実施例２、及び後述する実施例３では、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物の、このようなＩ型アレルギー反応に対する予防的効果を以下のようにして確認した。
５週齢、雄性ＢＡＬＢ／ｃマウス（日本ＳＬＣ株式会社）に、卵白アルブミン（ＯＶＡ；シグマ社）０．１ｍｇ／マウスと水酸化アルミニウムゲル１．６ｍｇ／マウスを、１週間おきに２回腹腔内投与して感作し、初回感作から２週間後にＯＶＡ  ０．１ｍｇ／マウスを１日おきに３回点鼻投与して抗原誘発した。最終抗原誘発から１日後に、眼底から血液を採取し、２，５００ｒｐｍ、１０分間遠心分離後、血清を分離した。血清中の抗原特異的ＩｇＥ抗体価はＥＬＩＳＡキット（大日本住友製薬株式会社）にて測定した。各検体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で、初回抗原感作日から最終抗原誘発日まで１日１回、計１３回経口投与し、コントロール群には蒸留水を同様に経口投与した。
結果を図２に示す。コントロール群では、抗原感作により抗原特異的ＩｇＥ抗体産生が誘導されたのに対して、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物投与群では、コントロール群と比較し、有意なＩｇＥ量の低下が認められた。このことから、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物は、ＩｇＥ抗体の産生を抑制し、ＩｇＥ抗体が関与するＩ型アレルギー反応を効果的に抑制する作用を有することが示された。一方、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物以外の検体投与群では、いずれも有意な抑制作用は認められず、乳酸菌によるブドウ果皮・種子の発酵が重要であることが判る。【００５３】
（実施例３：気管支、肺胞への好酸球浸潤抑制作用）
実施例２と同様に抗原感作、抗原誘発したマウスに、リン酸緩衝化食塩水（ＰＢＳ）１ｍｌを気道から注入して、気管支、肺胞洗浄液を回収した。気管支、肺胞洗浄液中に含まれる総細胞数を計測後、塗抹標本を作製し、ギムザ染色を行って好酸球の割合を計測した。
結果を図３に示す。コントロール群では抗原の感作、誘発により気管支、肺胞への好酸球浸潤が認められたが、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物投与群ではほとんど認められなかった。このことから、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物は、好酸球が関与するＩ型アレルギー反応（遅発型反応）を効果的に抑制する作用を有することが示された。一方、無処置のブドウ果皮・種子粉末投与群では、このような抑制作用は認められず、乳酸菌によるブドウ果皮・種子の発酵が重要であることが判る。【００５４】
（実施例４：カラギナン誘発マウスの足浮腫抑制作用）
起炎剤の一つであるカラギナンをマウスの足蹠に皮下投与すると、カラギナンは局所のマクロファージに直接取り込まれ、マクロファージを活性化させることが知られている。活性化されたマクロファージから産生されるＴＮＦ−α、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＰＧＥ２、ＮＯなどの炎症性物質により、足浮腫が惹起される。この炎症を抑制する物質は、マクロファージがエフェクター細胞となって誘導される関節リウマチなどの自己免疫疾患に対し有効であると考えられる。本実施例４では、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物の、このようなカラギナン誘発マウスの足浮腫に対する抑制効果を以下のようにして確認した。
７週齢、雄性ＩＣＲマウス（日本ＳＬＣ株式会社）に、２％カラギナン（和光純薬工業株式会社）溶液０．０２５ｍｌを右後足蹠へ皮内投与して、足浮腫を惹起した。カラギナン投与１、３、及び５時間後に、足の厚さをダイヤルシックネスゲージを用いて測定した。各検体は１００ｍｇ／ｋｇの用量でカラギナン投与の１時間前に経口投与し、コントロール群には蒸留水を同様に経口投与した。足浮腫の判定は次の式により算出した。
式：「足浮腫増加率＝（カラギナン投与後の足の厚さ−カラギナン投与前の足の厚さ）／カラギナン投与前の足の厚さ」
結果を図４に示す。カラギナン投与により惹起された足浮腫に対し、甲州、カベルネ・ソーヴィニオン、及び混合ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物投与群では、いずれも有意な浮腫抑制作用が認められた。このことから、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物は、マクロファージによる非特異的な即時型炎症を、効果的に抑制する作用を有することが示された。【００５５】
（実施例５：II型コラーゲン誘発マウスの関節炎抑制作用）
II型コラーゲンは関節の主要な構成成分であり、II型コラーゲンでマウスを強制的に免疫すると自己免疫状態となり、関節炎が発症することが知られている。これは関節リウマチのモデルと考えられており、II型コラーゲンに対する抗原特異的なＴｈ１細胞が誘導され、Ｔｈ１細胞によりマクロファージが活性化され、活性化されたマクロファージから産生されるＴＮＦ−α、ＩＬ−１、ＩＬ−６、ＰＧＥ２、ＮＯなどの炎症性物質により関節炎が惹起される（Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９９７；１４６：８５７−６８）。この関節炎を抑制する物質は関節リウマチなどの自己免疫疾患に対し有効であると考えられる。本実施例５では、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物の、このようなII型コラーゲン誘発マウスの関節炎に対する抑制効果を以下のようにして確認した。
鶏由来II型コラーゲン（シグマアルドリッチ株式会社）を０．１ｍＭの酢酸溶液に溶解し、２ｍｇ／ｍｌの濃度に調整した。この溶液に等量の完全フロイントアジュバント（ギブコ社）を混合してエマルジョンを作製した。０．１ｍｌのエマルジョンを９週齢、雄性ＤＢＡ／１Ｊマウス（日本ＳＬＣ株式会社）尾基部皮内に皮内投与して感作し、２１日後に同様の方法で２次感作を行った。各検体は抗原の２次感作後から１５０ｍｇ／ｋｇの用量で連日経口投与し、コントロール群には蒸留水を同様に経口投与した。前脚、後脚の腫脹の程度を観察し、以下の評価によりクリニカルスコアをつけた。
[クリニカルスコア]
スコア０：腫脹無し。
スコア１：掌、踵、指先などに発赤が見られる。
スコア２：手足の一部に腫脹が見られる。
スコア３：手足全体に腫脹が見られる。
スコア４：手足全体に強い腫脹が見られ、表面に荒れや炎症が見られる。
スコア５：手足全体に著しい腫脹が見られ、関節に変形が見られる。
各４本の脚について観察を行い、その合計を一個体のクリニカルスコアとして示した。
結果を図５Ａ及び図５Ｂに示す。図５Ａにおいてクリニカルスコアの経過日的変化を示し、図５Ｂにおいてピーク時のクリニカルスコアの値を示した。コントロール群では、２次感作後、急激にスコアが上昇し、ピーク時のスコアは１４．３であった。一方、各ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物投与群では、感作後２８日前後から、コントロール群に比べて関節炎発症の抑制効果が認められ、また、甲州、カベルネ・ソーヴィニオン、及び混合ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物投与群のピーク時のスコアについても、それぞれ９．３、１２．２、１１．３と、全てにおいて有意な関節炎発症の抑制効果が認められた。このことより、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物は、関節リウマチ等の自己免疫疾患に対して有効であることが示された。【００５６】
（実施例６：デキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）誘発マウスの潰瘍性大腸炎関連症状抑制作用）
硫酸多糖体のひとつであるデキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）をマウスに自由飲水させることで、潰瘍性大腸炎に類似した病態モデルが作製できることが知られており、実験的潰瘍性大腸炎モデルとして繁用されている。このモデルの潰瘍性大腸炎関連症状を抑制する物質は、潰瘍性大腸炎等の炎症性腸疾患に対し、有効であると考えられる。本実施例６では、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物の、このようなデキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ）誘発マウスの潰瘍性大腸炎関連症状に対する抑制効果を以下のようにして確認した。
７週齢、雄性ＢＡＬＢ／ｃマウス（日本ＳＬＣ株式会社）に、５％デキストラン硫酸ナトリウム（ＤＳＳ；和光純薬工業株式会社）を給水瓶に入れて自由飲水させた。飲水開始から１週間後にマウスの体重を測定し、心臓から全血を採血後、大腸を摘出した。血液は血球カウンター（コールターカウンター；コールター社）にてヘマトクリット値を測定し、大腸は盲腸下部から肛門までの長さを測定した。さらに各大腸に１００ｎＭ  フェニルメチルスルフォニルフルオリド（ＰＭＳＦ；和光純薬工業株式会社）を含むリン酸緩衝液１ｍｌを加えて粉砕し、１５，０００ｒｐｍ、１０分間遠心分離後、上清中に含まれるＴＮＦ−α量をＥＬＩＳＡキット（ＢＤ社）を用いて測定した。甲州ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物は１００ｍｇ／ｋｇの投与量でＤＳＳ飲水開始日より１日１回、合計７回経口投与した。また、比較対照として、無処置（未発酵）の甲州ブドウ果皮・種子粉末を１００ｍｇ／ｋｇの投与量で同様に経口投与した。また、コントロールとして、同量の精製水を投与した。グラフの値はそれぞれ１群５匹で行った平均値と標準誤差を示した。
結果を図６Ａ〜図６Ｄに示す。なお、コントロール群においては、ＤＳＳをマウスに自由飲水させることにより、飲水開始から１週間後においては、下痢、血便、体重減少などの症状がみられ、また、炎症による傷害の指標となる大腸の短縮、及び、ヘマトクリット値の低下も認められ、潰瘍性大腸炎の症状を呈していることが確認された。
図６Ａに体重減少の抑制作用を示す。グラフはＤＳＳ投与前の体重を１００％としたときの投与後の体重を示しており、ＤＳＳの自由飲水によりコントロール群では飲水開始から１週間後において体重の減少が認められた。一方、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を経口投与したマウスの群においては、有意な体重減少に対する回復効果が認められた。この有意な回復効果は、未発酵（無処置）のブドウ果皮・種子粉末の投与では認められなかった。
図６Ｂにヘマトクリット値低下の抑制作用を示す。コントロール群ではヘマトクリット値の低下が認められたが、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を経口投与したマウスの群においては、有意なヘマトクリット値低下の回復効果が認められた。この有意な回復効果は、未発酵（無処置）のブドウ果皮・種子粉末の投与では認められなかった。
図６Ｃに大腸短縮の抑制作用を示す。コントロール群では大腸短縮が認められたが、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を経口投与したマウスの群においては有意な回復効果が認められた。この有意な回復効果は未発酵（無処置）のブドウ果皮・種子粉末の投与では認められなかった。
図６Ｄに大腸ホモジネート中ＴＮＦ−αの抑制作用を示す。コントロール群では、大腸ホモジネート中ＴＮＦ−αの産生増加が認められたが、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を経口投与したマウスの群においては有意な抑制作用が認められた。この有意な抑制作用は無処置（未発酵）のブドウ果皮・種子粉末の投与では認められなかった。
これらの結果から、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物は、潰瘍性大腸炎の発症に重要と考えられているＴＮＦ−α産生の増加や、体重減少、ヘマトクリット値低下、大腸短縮といった潰瘍性大腸炎の症状を抑制する作用を有していることが示された。これらのことから、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物は、潰瘍性大腸炎等の炎症性腸疾患をはじめとした自己免疫疾患の治療、改善、又は予防に有効であることが示された。また、こうした作用は無処置（未発酵）のブドウ果皮・種子粉末には認められず、ブドウ果皮・種子の乳酸菌発酵により発現されることが示された。【００５７】
（実施例７：ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物からの抽出・精製物による受身皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）抑制作用）
本実施例７では、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物からの抽出・精製物の、受身皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）抑制作用を確認した。ここで、各抽出・精製物の、受身皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）抑制作用は、前記実施例１と同様な方法で評価した。各抽出・精製物の受身皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）抑制作用の結果は図７Ａ、７Ｂ、７Ｄ、７Ｆにそれぞれ示すが、いずれも、縦軸には、蒸留水投与のコントロール群の色素漏出量を１００％としたときの各抽出・精製物投与群の色素漏出量（％コントロール）を示した。
５ｇの甲州ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物に７０％アセトン１００ｍＬを加えて、室温で１時間ソニケーションを行い、成分抽出を行った。回収した抽出液をロータリーバキュームエバポレーターで蒸発乾固し、凍結乾燥して、アセトン抽出成分を得た。その結果、５ｇの甲州ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物より、０．９ｇのアセトン抽出物が得られた。図７Ａにアセトン抽出物、及びその残渣のＰＣＡ反応抑制作用について３００ｍｇ／ｋｇの甲州ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物の相当量で経口投与したときの作用について検討した結果を示す。アセトン抽出物に強い抑制作用が認められたが、その残渣では認められなかったことから、アセトン抽出によりＰＣＡ反応抑制に関わる成分が抽出されたことが示唆された。
次いで、アセトン抽出物より、さらに分画操作を行った。まず、親水性様物質と疎水性様物質に大きく分画した。アセトン抽出物１ｇをメタノール１００ｍｌに溶解し、２ｇの合成吸着剤芳香族系ビーズ  ＤＩＡＩＯＮ  ＨＰ−２０（ＮＩＰＰＯＮ  ＲＥＮＳＵＩ社）と混合し、エバポレ−ターによって、メタノールを蒸留しながら吸着させた。抽出物を吸着させたＤＩＡＩＯＮ  ＨＰ−２０をあらかじめカラムに充填したＤＩＡＩＯＮ  ＨＰ−２０の上部に重層し、溶離液である蒸留水によって流出したものをＦｒａｃｔｉｏｎ１、ＤＩＡＩＯＮ  ＨＰ−２０に吸着し、溶離液である１００％メタノールによって流出したものをＦｒａｃｔｉｏｎ２とした。すなわち、親水性様物質、及び疎水性様物質としてＦｒａｃｔｉｏｎ１及びＦｒａｃｔｉｏｎ２が得られ、回収率はそれぞれ０．５８ｇ、０．３９ｇであった。Ｆｒａｃｔｉｏｎ１とＦｒａｃｔｉｏｎ２のＰＣＡ反応抑制作用を図７Ｂに示した。１００ｍｇ／ｋｇの投与量においてＦｒａｃｔｉｏｎ１では抑制作用は認められなかったが、Ｆｒａｃｔｉｏｎ２は有意な抑制作用を示した。このことから、アセトン抽出物に含まれる疎水性に偏る化合物がＰＣＡ反応抑制に重要であることがわかった。
次に、ＰＣＡ反応で有意な抑制作用を示すＦａｃｔｉｏｎ２をさらに分子量の違いにより分画した。すなわち、膨潤させたＳｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨ−２０樹脂（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ社）４０ｍｌを充填したカラムにメタノール１ｍｌに溶解したＦｒａｃｔｉｏｎ２  ０．１ｇを添加して樹脂に吸着させた後、２００ｍｌの７０％エタノールにより溶出した。最初に溶出される４０ｍｌを捨て、次からの４０ｍずつを分取し、それぞれ溶出されてくる順番にＦｒａｃｔｉｏｎ３（分子量１００〜２００）、Ｆｒａｃｔｉｏｎ４（分子量２００〜３００）、Ｆｒａｃｔｉｏｎ５（分子量３００〜１，０００）とした。各Ｆｒａｃｔｉｏｎの回収量はＦｒａｃｔｉｏｎ３：０．０１４ｇ、Ｆｒａｃｔｉｏｎ４：０．０３３ｇ、Ｆｒａｃｔｉｏｎ５：０．０４７ｇの重量で得られた。図７Ｃに各ＦｒａｃｔｉｏｎについてＴＬＣ［吸着剤；シリカゲル６０（粒径  ０．０４０〜０．０６３ｍｍ）、展開溶媒；クロロホルム：メタノール＝１５：１、呈色試薬；１０％硫酸］により成分検索を行った結果を示す。ａ〜ｈで示した８つのスポットが確認された。ここで、前記条件下でのスポットｅのＲｆ値は０．３８であった。また、Ｆｒａｃｔｉｏｎ３、Ｆｒａｃｔｉｏｎ４、Ｆｒａｃｔｉｏｎ５のＰＣＡ反応抑制作用の結果を図７Ｄに示す。１００ｍｇ／ｋｇの投与量においてＦｒａｃｔｉｏｎ３、Ｆｒａｃｔｉｏｎ４は抑制作用を示さなかったのに対して、Ｆｒａｃｔｉｏｎ５は有意な抑制作用を示した。ＰＣＡ反応抑制活性を示す物質としてはＦｒａｃｔｉｏｎ５より検出されたスポットｅ、ｆ、ｇのいずれかまたは全てである可能性が示唆された。
また、図７Ｅに、甲州ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物と、未発酵物（無処置甲州ブドウ果皮・種子粉末）の７０％アセトン抽出成分において、ＴＬＣ［吸着剤；シリカゲル６０（粒径  ０．０４０〜０．０６３ｍｍ）、展開溶媒；クロロホルム：メタノール：酢酸エチル＝１５：１：１（体積比）、呈色試薬；１０％硫酸］により成分検索を行った結果を示す。乳酸菌発酵物で認められたａ〜ｈの８つのスポットの内、スポットｅは未発酵物においては確認されず、この物質が乳酸菌発酵により新たに生成されたＰＣＡ反応抑制に関与する物質である可能性が示唆された。ここで、前記条件下でのスポットｅのＲｆ値は０．４７であった。
このスポットｅを単離するため、甲州ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物の７０％アセトン抽出物１００ｍｇをメタノール−クロロホルム混合溶媒（メタノール：クロロホルム＝２：１（体積比））に溶解させ、分取用ＴＬＣプレート（シリカゲル６０；メルク社）で展開させた。展開溶媒としては、クロロホルム：メタノール：酢酸エチル＝１５：１：１（体積比）を使用した。ここで、前記条件下でのスポットｅのＲｆ値は０．４７であった。ＴＬＣプレートからシリカゲルごとスポットｅを剥し取り、剥し採った粉末に酢酸エチルを加えて抽出物だけ溶解させた。この液から綿栓ろ過によりシリカゲルを除去し、スポットｅの抽出物０．４３ｍｇが得られた。この物質のＰＣＡ反応抑制作用について図７Ｆに示す。ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物の１０ｍｇ／ｋｇの投与量での抑制効果に対し、抽出・精製物であるスポットｅはそれよりも低用量である３ｍｇ／ｋｇの投与量においてもさらに強い抑制作用を示し、比活性の上昇が示された。これらの結果より、この、ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物より抽出・精製された物質は、乳酸菌発酵により新たに生成された物質であり、Ｉ型アレルギー反応の抑制に主に関与する物質であることが示唆された。
【産業上の利用可能性】
【００５８】
ブドウ果皮・種子乳酸菌発酵物を利用した本発明の医薬及び食品は、例えば、Ｉ型アレルギー疾患等のアレルギー疾患や、関節リウマチ、炎症性腸疾患等の自己免疫疾患の治療、改善又は予防に、好適に利用可能である。
【図１Ａ】
2008105540.tif 000002
【図１Ｂ】
2008105540.tif 000003
【図２】
2008105540.tif 000004
【図３】
2008105540.tif 000005
【図４】
2008105540.tif 000006
【図５Ａ】
2008105540.tif 000007
【図５Ｂ】
2008105540.tif 000008
【図６Ａ】
2008105540.tif 000009
【図６Ｂ】
2008105540.tif 000010
【図６Ｃ】
2008105540.tif 000011
【図６Ｄ】
2008105540.tif 000012
【図７Ａ】
2008105540.tif 000013
【図７Ｂ】
2008105540.tif 000014
【図７Ｃ】
2008105540.tif 000015
【図７Ｄ】
2008105540.tif 000016
【図７Ｅ】
2008105540.tif 000017
【図７Ｆ】
2008105540.tif 000018
【国際調査報告】
2008105540.tif 000019
2008105540.tif 000020
2008105540.tif 000021
2008105540.tif 000022