(57)【要約】【解決手段】  式（１）【化１】2008078674.tif 000042（式中、＊を付した炭素原子の立体配置がＲ配置であり、Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なって水素原子、ハロゲン原子、アミノ基、水酸基、ヒドロキシアミノ基、ニトロ基、シアノ基、スルファモイル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ６のアルキルスルファニル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルキルスルフィニル基又はＣ１〜Ｃ６のアルキルスルホニル基を示し、Ａは置換基を有してもよいヘテロアリール基を示す。）で表される化合物又は薬学的に許容されるその塩。
2008078674.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（１）
【化１】
2008078674.tif 000037
（式中、＊を付した炭素原子の立体配置はＲ配置であり、Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なって水素原子、ハロゲン原子、アミノ基、水酸基、ヒドロキシアミノ基、ニトロ基、シアノ基、スルファモイル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ６のアルキルスルファニル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルキルスルフィニル基又はＣ１〜Ｃ６のアルキルスルホニル基を示し、Ａは置換基を有してもよいヘテロアリール基を示す。）で表される化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項２】
Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２がＣ１〜Ｃ６のアルキルスルホニル基である請求項１記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項３】
Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２がメチルスルホニル基である請求項１記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項４】
一般式（１ａ）
【化２】
2008078674.tif 000038
（式中、＊、Ｒ１、Ｒ２及びＡは前記定義に同じ）
で表される請求項１〜３のいずれかに記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項５】
一般式（１ｂ）
【化３】
2008078674.tif 000039
（式中、＊、Ｒ１、Ｒ２及びＡは前記定義に同じ）
で表される請求項１〜３のいずれかに記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項６】
Ａが、無置換又はハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシ基、ニトロ基、シアノ基、若しくは式
-（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＯＲ３
（式中、Ｒ３  は水素原子又はＣ１〜Ｃ６のアルキル基を示し、ｍは０〜２の整数を示す。）で表される基でモノ置換されたヘテロアリール基である請求項１〜５のいずれかに記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項７】
Ａが、無置換又はハロゲン原子若しくはＣ１〜Ｃ６のアルキル基でモノ置換されたヘテロアリール基である請求項１〜５のいずれかに記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項８】
Ａが、無置換又はモノ置換された５員又は６員芳香族複素環であって、該芳香族複素環は硫黄原子、酸素原子、窒素原子から選ばれる１〜３のヘテロ原子を含み、そのうち１個のヘテロ原子は結合環原子に隣接する窒素原子である請求項６又は７に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項９】
Ａが、無置換又はモノ置換された５員又は６員芳香族複素環を有する縮合複素環であって、該芳香族複素環は硫黄原子、酸素原子、窒素原子から選ばれる１〜３のヘテロ原子を含み、そのうち１個のヘテロ原子は結合環原子に隣接する窒素原子である請求項６又は７に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１０】
Ａが、無置換又は置換基を有する下記より選ばれる基である請求項６又は７に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【化４】
2008078674.tif 000040
【請求項１１】
(Ｒ)−３−((１ｒ,３Ｒ，４Ｓ)−３，４−ジフルオロシクロペンチル)−２−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−Ｎ−(チアゾール−２−イル)プロピオン酸アミド、(Ｒ)−３−((１ｒ,３Ｒ，４Ｓ)−３，４−ジフルオロシクロペンチル)−２−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−Ｎ−(５−フルオロチアゾール−２−イル)プロピオン酸アミド、(Ｒ)−３−((１ｒ,３Ｒ，４Ｓ)−３，４−ジフルオロシクロペンチル)−２−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−Ｎ−(１−メチルピラゾール−３−イル)プロピオン酸アミド、(Ｒ)−３−((１ｒ,３Ｒ，４Ｓ)−３，４−ジフルオロシクロペンチル)−２−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−Ｎ−(ピリド[３，２−ｄ]チアゾール−２−イル)プロピオン酸アミド若しくは(Ｒ)−３−((１ｒ,３Ｒ，４Ｓ)−３，４−ジフルオロシクロペンチル)−２−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−Ｎ−(３−メチルチアジアゾール−５−イル)プロピオン酸アミド又はそれらの薬学的に許容されるその塩。
【請求項１２】
（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１３】
（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（５−フルオロチアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１４】
（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（１−メチルピラゾール−３−イル）プロピオン酸アミド又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１５】
（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（ピリド[３，２−ｄ]チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１６】
（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（３−メチルチアジアゾール−５−イル）プロピオン酸アミド又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１７】
請求項１〜１６のいずれかに記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩を投与する糖尿病の治療又は予防方法。
【請求項１８】
糖尿病の治療又は予防のための医薬を製造するための請求項１〜１６のいずれかに記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩の使用。
【請求項１９】
請求項１〜１６のいずれかに記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩及び薬学的に許容されうる担体を含有する医薬組成物。
【請求項２０】
一般式（３）
【化５】
2008078674.tif 000041
（式中、＊を付した炭素原子の立体配置はＲ配置であり、Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なって水素原子、ハロゲン原子、アミノ基、水酸基、ヒドロキシアミノ基、ニトロ基、シアノ基、スルファモイル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ６のアルキルスルファニル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルキルスルフィニル基又はＣ１〜Ｃ６のアルキルスルホニル基を示す。）で表される化合物。
【請求項２１】
Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２がメチルスルホニル基である請求項２０記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、グルコキナーゼ（以下、ＧＫと略すことがある）の活性化物質に関する。また、本発明はＧＫの活性化物質を有効成分とする糖尿病、肥満などの治療又は予防のための医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
厚生労働省平成14年の患者調査では、日本の糖尿病の総患者数は228万人であり、同年行われた糖尿病実態調査では「糖尿病が強く疑われる人」と「糖尿病の可能性が否定できない人」を合わせると1620万人と増加しており問題となっている。【０００３】
国内市場は、日本人はインスリン分泌能が弱いという遺伝的要因があり、インスリン分泌不全が中心となっている。しかし、食生活の欧米化から近年インスリン抵抗性の患者数が徐々に増加してきている。このためインスリン分泌不全とインスリン抵抗性のどちらに対しても有効性が期待できる薬剤が望ましい。【０００４】
グルコースのリン酸化を触媒するグルコキナーゼ（ＧＫ）は、体内グルコースセンサーとして機能しており、高グルコース時にインスリンの分泌や肝臓におけるグルコース利用を亢進させる。糖尿病患者は体内グルコース濃度の恒常性が正常に保たれていない状態であることから、ＧＫを活性化させることにより、膵臓ではグルコース濃度依存性のインスリン分泌を促進させ、肝臓においてはグルコース利用の亢進やグルコース放出の抑制をおこし（ｄｕａｌ  ａｃｔｉｏｎ）、血糖を低下させる（非特許文献１〜３）。それ故、糖尿病治療薬としてインスリン分泌不全（膵臓作用）とインスリン抵抗性（肝臓作用）両方に効果を示すＧＫ活性化物質を提供するのが望ましい。【０００５】
このようなＧＫ活性化物質として、アリールシクロアルキルプロピオンアミド類（特許文献１）、２，３−ジ置換トランスオレフィン系Ｎ−芳香族複素環−又はウレイドプロピオンアミド類（特許文献２）、アルキニルフェニルヘテロ芳香環アミド（特許文献３）、ヒダントイン類（特許文献４）、置換フェニルアセトアミド類（特許文献５）、パラ−アルキル、アリル、シクロヘテロアルキル又はヘテロアリール（カルボニル又はスルホニル）アミン置換フェニルアミド類（特許文献６）、アルファ−アシル及びアルファ−ヘテロ原子置換ベンゼンアセトアミド類（特許文献７）、テトラゾリルフェニルアセトアミド類（特許文献８）、縮環ヘテロ芳香族類（特許文献９）、ヘテロ環若しくは炭素員の１個が置換されたシクロアルカンを有するフェニルアセトアミド類（特許文献１０）など様々なアミド化合物が知られている（特許文献１１〜１９）。しかし、２個のフッ素原子がシクロペンチル基の異なる炭素原子に置換したＧＫ活性化物質については開示がない。
特許文献１ WO2000/058293号パンフレット
特許文献２ WO2001/044216号パンフレット
特許文献３ WO2001/083465号パンフレット
特許文献４ WO2001/083478号パンフレット
特許文献５ WO2001/085706号パンフレット
特許文献６ WO2001/085707号パンフレット
特許文献７ WO2002/008209号パンフレット
特許文献８ WO2002/014312号パンフレット
特許文献９ WO2002/046173号パンフレット
特許文献１０ WO2003/095438号パンフレット
特許文献１１ WO2004/052869号パンフレット
特許文献１２ WO2004/072031号パンフレット
特許文献１３ WO2004/072066号パンフレット
特許文献１４ WO2005/103021号パンフレット
特許文献１５ WO2006/016174号パンフレット
特許文献１６ WO2006/016178号パンフレット
特許文献１７ WO2006/016194号パンフレット
特許文献１８ WO2006/059163号パンフレット
特許文献１９ 米国特許第6911545号明細書
非特許文献１ Diabetes  45，223−241 (1996)
非特許文献２ Diabetes  41，792−806 (1992)
非特許文献３ FASEB  J．10，1213−1218 (1996)
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、優れたＧＫ活性化作用又は血糖降下作用を有する化合物を提供し、糖尿病、肥満などの治療又は予防に役立てることを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意検討を行った結果、プロピオン酸アミド化合物の３位に３，４−ジフルオロシクロペンチル基を有するものの中で、ある特定の立体構造を持つ化合物が優れたＧＫ活性化作用、血糖降下作用を示すことを見出し、本発明を完成するに至った。【０００８】
すなわち、本発明は、
１）一般式（１）【０００９】
【化１】
2008078674.tif 000003
【００１０】
（式中、＊を付した炭素原子の立体配置はＲ配置であり、Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なって水素原子、ハロゲン原子、アミノ基、水酸基、ヒドロキシアミノ基、ニトロ基、シアノ基、スルファモイル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ６のアルキルスルファニル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルキルスルフィニル基又はＣ１〜Ｃ６のアルキルスルホニル基を示し、Ａは置換基を有してもよいヘテロアリール基を示す。）で表される化合物又は薬学的に許容されるその塩、【００１１】
２）  Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２がＣ１〜Ｃ６のアルキルスルホニル基である１）記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩、【００１２】
３）  Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２がメチルスルホニル基である１）記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩、【００１３】
４）  一般式（１ａ）【００１４】
【化２】
2008078674.tif 000004
【００１５】
（式中、＊、Ｒ１、Ｒ２及びＡは前記定義に同じ）
で表される１）〜３）のいずれかに記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩、【００１６】
５）  一般式（１ｂ）【００１７】
【化３】
2008078674.tif 000005
【００１８】
（式中、＊、Ｒ１、Ｒ２及びＡは前記定義に同じ）
で表される１）〜３）のいずれかに記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩、【００１９】
６）  Ａが、無置換又はハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシ基、ニトロ基、シアノ基、若しくは式
-（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＯＲ３
（式中、Ｒ３  は水素原子又はＣ１〜Ｃ６のアルキル基を示し、ｍは０〜２の整数を示す。）で表される基でモノ置換されたヘテロアリール基である１）〜５）のいずれかに記載された化合物又は薬学的に許容されるその塩、【００２０】
７）  Ａが、無置換又はハロゲン原子若しくはＣ１〜Ｃ６のアルキル基でモノ置換されたヘテロアリール基である１）〜５）のいずれかに記載された化合物又は薬学的に許容されるその塩、【００２１】
８）  Ａが、無置換又はモノ置換された５員又は６員芳香族複素環であって、該芳香族複素環は硫黄原子、酸素原子、窒素原子から選ばれる１〜３のヘテロ原子を含み、そのうち１個のヘテロ原子は結合環原子に隣接する窒素原子である６）又は７）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩、【００２２】
９）  Ａが、無置換又はモノ置換された５員又は６員芳香族複素環を有する縮合複素環であって、該芳香族複素環は硫黄原子、酸素原子、窒素原子から選ばれる１〜３のヘテロ原子を含み、そのうち１個のヘテロ原子は結合環原子に隣接する窒素原子である６）又は７）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩、【００２３】
１０）  Ａが、無置換又は置換基を有する下記より選ばれる芳香族複素環である６）又は７）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩、【００２４】
【化４】
2008078674.tif 000006
【００２５】
１１）  (Ｒ)−３−((１ｒ,３Ｒ，４Ｓ)−３，４−ジフルオロシクロペンチル)−２−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−Ｎ−(チアゾール−２−イル)プロピオン酸アミド、(Ｒ)−３−((１ｒ,３Ｒ，４Ｓ)−３，４−ジフルオロシクロペンチル)−２−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−Ｎ−(５−フルオロチアゾール−２−イル)プロピオン酸アミド、(Ｒ)−３−((１ｒ,３Ｒ，４Ｓ)−３，４−ジフルオロシクロペンチル)−２−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−Ｎ−(１−メチルピラゾール−３−イル)プロピオン酸アミド、(Ｒ)−３−((１ｒ,３Ｒ，４Ｓ)−３，４−ジフルオロシクロペンチル)−２−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−Ｎ−(ピリド[３，２−ｄ]チアゾール−２−イル)プロピオン酸アミド若しくは(Ｒ)−３−((１ｒ,３Ｒ，４Ｓ)−３，４−ジフルオロシクロペンチル)−２−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−Ｎ−(３−メチルチアジアゾール−５−イル)プロピオン酸アミド又はそれらの薬学的に許容されるその塩、【００２６】
１２）  式（２）【００２７】
【化５】
2008078674.tif 000007
【００２８】
で表される（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド又は薬学的に許容されるその塩、【００２９】
１３）  （−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（５−フルオロチアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド又は薬学的に許容されるその塩、【００３０】
１４）  （−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（１−メチルピラゾール−３−イル）プロピオン酸アミド又は薬学的に許容されるその塩、【００３１】
１５）  （−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（ピリド[３，２−ｄ]チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド又は薬学的に許容されるその塩、【００３２】
１６）  （−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（３−メチルチアジアゾール−５−イル）プロピオン酸アミド又は薬学的に許容されるその塩、【００３３】
１７)  １）〜１６）のいずれかに記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩を投与する糖尿病の治療又は予防方法、【００３４】
１８）糖尿病の治療又は予防のための医薬を製造するための１）〜１６）のいずれかに記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩の使用、【００３５】
１９）  １）〜１６）のいずれかに記載の化合物及び薬学的に許容されうる担体を含有する医薬組成物、【００３６】
２０）  一般式（３）【００３７】
【化６】
2008078674.tif 000008
【００３８】
（式中、＊を付した炭素原子の立体配置はＲ配置であり、Ｒ１及びＲ２は、同一又は異なって水素原子、ハロゲン原子、アミノ基、水酸基、ヒドロキシアミノ基、ニトロ基、シアノ基、スルファモイル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシ基、Ｃ１〜Ｃ６のアルキルスルファニル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルキルスルフィニル基又はＣ１〜Ｃ６のアルキルスルホニル基を示す。）で表される化合物、【００３９】
２１）Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２がメチルスルホニル基である２０）記載の化合物、
に関する。
【発明の効果】
【００４０】
本発明により、優れたＧＫ活性化作用又は血糖降下作用を有し、副作用（例えば、ＱＴ間隔延長、低血糖症状など）の少ない化合物が提供され、糖尿病、肥満などの治療又は予防に優れた医薬の提供が可能となった。
【発明を実施するための最良の形態】
【００４１】
ハロゲン原子とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子を意味する。【００４２】
Ｃ１〜Ｃ６のアルキル基とは、炭素数１〜６の直鎖若しくは分岐鎖のアルキル基又は炭素数３〜６の環状アルキル基であり、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、sec-ブチル基、tert-ブチル基、シクロプロピル基、シクロブチル基などを挙げることができる。【００４３】
Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシ基とは、炭素数１〜６の直鎖若しくは分岐鎖のアルコキシ基又は炭素数３〜６の環状アルコキシ基であり、例えば、メトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基、イソプロポキシ基、ブトキシ基、イソブトキシ基、sec-ブトキシ基、tert-ブトキシ基、シクロプロポキシ基、シクロブトキシ基などを挙げることができる。【００４４】
Ｃ１〜Ｃ６のアルキルスルファニル基とは、炭素数１〜６の直鎖若しくは分岐鎖のアルキルスルファニル基であり、例えば、メチルスルファニル基、エチルスルファニル基、プロピルスルファニル基、イソプロピルスルファニル基、ブチルスルファニル基、イソブチルスルファニル基、sec-ブチルスルファニル基、tert-ブチルスルファニル基などを挙げることができる。【００４５】
Ｃ１〜Ｃ６のアルキルスルフィニル基とは、炭素数１〜６の直鎖若しくは分岐鎖のアルキルスルフィニル基であり、例えば、メチルスルフィニル基、エチルスルフィニル基、プロピルスルフィニル基、イソプロピルスルフィニル基、ブチルスルフィニル基、イソブチルスルフィニル基、sec-ブチルスルフィニル基、tert-ブチルスルフィニル基などを挙げることができる。【００４６】
Ｃ１〜Ｃ６のアルキルスルホニル基とは、炭素数１〜６の直鎖若しくは分岐鎖のアルキルスルホニル基であり、例えば、メチルスルホニル基、エチルスルホニル基、プロピルスルホニル基、イソプロピルスルホニル基、ブチルスルホニル基、イソブチルスルホニル基、sec-ブチルスルホニル基、tert-ブチルスルホニル基などを挙げることができる。【００４７】
ヘテロアリール基は、環の構成原子として硫黄原子、酸素原子、窒素原子から選ばれる１〜３のヘテロ原子を含む５員若しくは６員芳香族複素環であって、該芳香族複素環は任意にベンゼン環又は５員若しくは６員芳香族複素環と縮合環を形成してもよい。好ましいヘテロアリール基としては、該芳香族複素環が硫黄原子、酸素原子、窒素原子から選ばれる１〜３のヘテロ原子を含み、そのうち１個のヘテロ原子が結合環原子に隣接する窒素原子である基が挙げられる。なお、結合環原子とは、アミド基の窒素原子との結合にあずかる環内原子を意味し、このような結合環原子としては炭素原子が好ましい。【００４８】
好ましいヘテロアリール基としては、チアゾリル基、チアジアゾリル基、ピラゾリル基、ピリジニル基、ピラジニル基、ピリミジニル基、ピリダジニル基、オキサゾリル基、イミダゾリル基、トリアジニル基、ベンゾチアゾリル基、ベンゾオキサゾリル基、ベンゾイミダゾリル基、ピリドチアゾリル基、キノリニル基などが挙げられる。更に好ましくはチアゾリル基、ピリジニル基、ピラジニル基、ピラゾリル基、チアジアゾリル基又はピリドチアゾリル基である。【００４９】
Ａの「置換基を有してもよいヘテロアリール基」としては、無置換又はモノ置換のヘテロアリール基が好ましく、置換基としてはハロゲン原子、Ｃ１〜Ｃ６のアルキル基、Ｃ１〜Ｃ６のアルコキシ基、ニトロ基、シアノ基、式
-（ＣＨ２）ｍＣ（Ｏ）ＯＲ３
（式中、Ｒ３  は水素原子又はＣ１〜Ｃ６のアルキル基を示し、ｍは０〜２の整数を示す。）で表される基が挙げられる。【００５０】
本発明の化合物は、かかる立体構造をとることにより、優れたＧＫ活性化作用を有する。また、Ａが無置換又はハロゲン原子若しくはＣ１〜Ｃ６のアルキル基でモノ置換されたヘテロアリール基では、優れた薬物動態特性に基づく血中移行性を実現し、優れた血糖降下作用を示す。例えば、後述するように、シクロペンチル基とこれに結合したフッ素原子の立体構造及び／又は＊を付した炭素原子の立体配置が異なる（＋）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド（Ｓ配置）、（−）−３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド、（＋）−３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミドでは本発明のような優れた血糖降下作用は示さない。【００５１】
なお、本発明において旋光度（−）とは、特に規定しない限りクロロホルムを溶媒としてナトリウムＤ線で測定した旋光度が（−）であることを意味する。【００５２】
また、（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミドは、（Ｒ）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミドや(Ｒ)−３−((１ｒ,３Ｒ，４Ｓ)−３，４−ジフルオロシクロペンチル)−２−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−Ｎ−(チアゾール−２−イル)プロピオン酸アミドと、（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（５−フルオロチアゾール−２−イル）プロピオン酸アミドは、（Ｒ）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（５−フルオロチアゾール−２−イル）プロピオン酸アミドや(Ｒ)−３−((１ｒ,３Ｒ，４Ｓ)−３，４−ジフルオロシクロペンチル)−２−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−Ｎ−(５−フルオロチアゾール−２−イル)プロピオン酸アミドと、（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（１−メチルピラゾール−３−イル）プロピオン酸アミドは、（Ｒ）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（１−メチルピラゾール−３−イル）プロピオン酸アミドや(Ｒ)−３−((１ｒ,３Ｒ，４Ｓ)−３，４−ジフルオロシクロペンチル)−２−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−Ｎ−(１−メチルピラゾール−３−イル)プロピオン酸アミドと、（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（ピリド[３，２−ｄ]チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミドは、（Ｒ）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（ピリド[３，２−ｄ]チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミドや(Ｒ)−３−((１ｒ,３Ｒ，４Ｓ)−３，４−ジフルオロシクロペンチル)−２−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−Ｎ−(ピリド[３，２−ｄ]チアゾール−２−イル)プロピオン酸アミドと、（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，
４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（３−メチルチアジアゾール−５−イル）プロピオン酸アミドは、（Ｒ）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（３−メチルチアジアゾール−５−イル）プロピオン酸アミドや(Ｒ)−３−((１ｒ,３Ｒ，４Ｓ)−３，４−ジフルオロシクロペンチル)−２−(４−(メチルスルホニル)フェニル)−Ｎ−(３−メチルチアジアゾール−５−イル)プロピオン酸アミドと命名することができる。【００５３】
薬学的に許容されるその塩とは、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、リン酸、クエン酸、ギ酸、マレイン酸、酢酸、コハク酸、酒石酸、などのような無機又は有機の酸との任意の塩などである。【００５４】
本発明の一般式（１）で示される化合物群は、一般式（３）で表される化合物を中間体として例えば下記の製造工程に従って製造することができる。【００５５】
【化７】
2008078674.tif 000009
【００５６】
（式中、＊、Ｒ１、Ｒ２及びＡは前記定義に同じ）
本工程は、前記一般式（３）で表される化合物とヘテロアリールアミンを適当な試薬存在下で反応させ、前記一般式（１）で表される化合物を製造するものである。【００５７】
本反応は、一般的な縮合剤を用いる方法か、活性エステル法、混合酸無水物法、酸ハロゲン化物法、又はカルボジイミド法等を適宜採用して行うことができる。このような反応の場合に用いられる試薬としては、例えば塩化チオニル、塩化オキザリル、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド、１−メチル−２−ブロモピリジニウムヨーダイド、Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール、ジフェニルリン酸クロリド、ジフェニルリン酸アジド、Ｎ，Ｎ−ジスクシニミジルカーボネート、Ｎ，Ｎ’−ジスクシニミジルオキザレート、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、クロロギ酸エチル、クロロギ酸イソブチル、ベンゾトリアゾ−１−イル−オキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェイト、Ｎ−ブロモスクシンイミド／トリフェニルホスフィン等が挙げられる。本工程においては、上記試薬と共に塩基や縮合補助剤を用いてもよい。この場合に用いられる塩基としては、反応に関与しない限りいかなる塩基も用いることができるが、例えばナトリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドのようなアルカリ金属アルコキシド、水素化ナトリウム、水素化カリウムのようなアルカリ金属水素化物、n-ブチルリチウム、リチウムビス（トリメチルシリル）アミド、ナトリウムビス（トリメチルシリル）アミド、カリウムビス（トリメチルシリル）アミドのようなアルカリ金属有機塩基、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン、Ｎ−メチルモルホリン、イミダゾール、Ｎ−メチルピロリジン、Ｎ−メチルピペリジン、１，５−ジアザビシクロ[４．３．０]ノナ−５−エン、１，８−ジアザビシクロ[５．４．０]ウンデ−７−セン等の三級有機塩基、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウム等の無機塩基の存在下で行うことができる。また縮合補助剤としては、例えばＮ−ヒドロキシベンゾトリアゾール水和物、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド、Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン−２，３−ジカルボキシイミド、３−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロ−４−オキソ−１，２，３−ベンゾトリアゾール、ペンタフルオロフェノール等を用いることができる。反応溶媒としては、反応に関与しない限りいかなる溶媒も用いることができるが、例えばペンタン、ヘキサン、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエン、キシレン等の炭化水素系溶媒、ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、クロロホルム、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素系溶媒、ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン等のエーテル系溶媒、アセトニトリル、プロピオニトリル、ニトロメタン、ニトロエタン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピペリドン、スルホラン、またはジメチルスルホキシド等の非プロトン性極性溶媒が好適に用いられる。反応は、通常−78°C〜200°Cで円滑に進行する。【００５８】
また、本発明の一態様は、式（１）で表される化合物又は薬学的に許容されるその塩を有効成分とする医薬に関する。本発明の医薬は、ＧＫ活性化作用又は血糖降下作用を有することから、１型糖尿病、２型糖尿病、高脂血症（高ＬＤＬコレステロール血症、高トリグリセライド血症及び低ＨＤＬコレステロール血症）、肥満、インスリン抵抗性、耐糖能異常、メタボリックシンドロームなどの治療又は予防に有用である。【００５９】
本発明の医薬は、経口又は直腸内、皮下、静脈内、筋肉内、経皮等の非経口投与することができる。【００６０】
本発明の化合物又は薬学的に許容されるその塩を医薬として用いるためには、固体組成物、液体組成物、及びその他の組成物のいずれの形態でもよく、必要に応じて最適のものが選択される。本発明の医薬は、本発明の化合物に薬学的に許容される担体を配合して製造することができる。具体的には、常用の賦形剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、被覆剤、糖衣剤、ｐＨ調整剤、溶解剤、又は水性若しくは非水性溶媒などを添加し、常用の製剤技術によって、錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、粉剤、散剤、液剤、乳剤、懸濁剤、注射剤、などに調製することができる。【００６１】
本発明化合物又は薬学的に許容されるその塩の投与量は、疾患、症状、体重、年齢、性別、投与経路等により異なるが、成人に対し、経口投与の場合、好ましくは約０．０１〜約１０００ｍｇ／ｋｇ体重／日であり、より好ましくは約０．５〜約２００ｍｇ／ｋｇ体重／日であり、これを１日１回又は数回に分けて投与することができる。
本発明の化合物又は薬学的に許容されるその塩は、必要であれば1種以上のＧＫの活性化物質以外の化合物と併用することができる。例えば、スルホニル尿素類、ビグアニド類、グルカゴンアンタゴニスト、α−グルコシダーゼ阻害剤、インスリン分泌促進物質、インスリン増感剤等を含む１またはそれ以上の抗糖尿病剤若しくは抗高血糖剤又は抗肥満剤との組合せで適宜用いられ得る。
スルホニル尿素類としては、グリブリド、グリメピリド、グリピリド、グリピジド、クロルプロパミド、グリクラジド、グリソキセピド、アセトヘキサミド、グリボルヌリド、トルブタミド、トラザミド、カルブタミド、グリキドン、グリヘキサミド、フェンブタミド、トルシクラミド等が挙げられ、ビグアニド類としては、メトフォルミン、フェンフォルミン、ブフォルミン等などが挙げられ、グルカゴンアンタゴニストとしては、ペプチドまたは非ペプチドグルカゴンアンタゴニストが挙げられ、α−グルコシダーゼ阻害剤としては、アカルボース、ボグリボース、ミグリトール等が挙げられ、インスリン増感剤としては、トログリタゾン、ロシグリタゾン、ピオグリタゾン、シグリタゾン等が挙げられ、抗肥満剤としては、シブトラミン、オルリスタット等が挙げられる。本発明の化合物又は薬学的に許容されるその塩は、他の抗糖尿病剤、抗高血糖剤又は抗肥満剤と、同時、連続または分割して投与することができる。【００６２】
実施例１
（±）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸【００６３】
【化８】
2008078674.tif 000010
【００６４】
Ｎ，Ｎ−ジメチルプロピレン尿素（３．９２  ｍＬ）を含むリチウムジイソプロピルアミド（１０．２  ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン溶液（２０  ｍＬ） に、４−メチルスルホニルフェニル酢酸（１．０４  ｇ）のテトラヒドロフラン溶液（７  ｍＬ）を−７８℃にて滴下し、−４５〜−３０℃で2時間撹拌した。（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチルメチルヨーダイド（１．２０  ｇ）を−７８℃にて滴下して、撹拌しながら室温まで徐々に昇温した。水（１５  ｍＬ）を加えてテトラヒドロフランを減圧留去した。残渣に６  ｍｏｌ／Ｌ塩酸を加えてｐＨ２として酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濾過、濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、（±）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸（９５６  ｍｇ）を得た。
MS (CI+) m/z: 333 (MH+).
HRMS (CI+) for C15H19F2O4S(MH+):
calcd, 333.0972; found, 333.0997.【００６５】
実施例２
（４Ｒ）−4−ベンジル−3−［３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロパノイル］オキサゾリジン−２−オン【００６６】
【化９】
2008078674.tif 000011
【００６７】
（±）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸（９３１  ｍｇ）のテトラヒドロフラン溶液（１２  ｍＬ）にトリエチルアミン（９７５  mＬ）を加え、食塩氷冷下でピバロイルクロライド（３６２  mＬ）を滴下して、１時間撹拌した。反応液に（Ｒ）−４−ベンジルオキサゾリジノン（４９４  ｍｇ）およびリチウムクロライド（１３０  ｍｇ）を加えて室温で４時間撹拌した後、不溶物を濾去した。濾液を濃縮して得られた残渣の酢酸エチル溶液を、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濾過、濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(Ｓｉ６０ＮＳ，関東化学製，溶出溶媒：トルエン：酢酸エチル＝３：１)で精製して、（４Ｒ）−4−ベンジル−3−［３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロパノイル］オキサゾリジン−２−オンである、後から溶出する高極性異性体Ａ（５２１  ｍｇ）および先に溶出する低極性異性体Ｂ（４３３  ｍｇ）を得た。
異性体Ａ：
MS (EI) m/z: 491 (M+).
HRMS (EI) for C25H27F2NO5S(M+):
calcd, 491.1578; found, 491.1557.
異性体Ｂ：
MS (EI) m/z: 491 (M+).
HRMS (EI) for C25H27F2NO5S(M+):
calcd, 491.1578; found, 491.1578.【００６８】
実施例３
（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸【００６９】
【化１０】
2008078674.tif 000012
【００７０】
（４Ｒ）−4−ベンジル−3−［３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロパノイル］オキサゾリジン−２−オンの異性体Ａ（２５０  ｍｇ）のテトラヒドロフラン溶液（５  ｍＬ）に、３０％過酸化水素水（２０６  μＬ）を含む水酸化リチウム（２４．０  ｍｇ）の水溶液（１．３  ｍＬ）を氷冷下で加えて１時間撹拌した。反応液に１  ｍｏｌ／Ｌ亜硫酸ナトリウム水溶液および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルにて洗浄した。水層を１  ｍｏｌ／Ｌ塩酸にてｐＨ２とし、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濾過、濃縮した。得られた残渣をジエチルエーテルで洗浄して、（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸（１５９  ｍｇ）を得た。1H
NMR (CDCl3) δ 1.62-2.33 (m, 7H), 3.06 (s, 1H), 3.71 (t, J=7.9 Hz,1H), 4.71-4.93 (m, 2H), 7.53 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.93 (d, J=8.6 Hz, 2H).
MS (CI+) m/z: 333 (MH+).
HRMS (CI+) for C15H19F2O4S(MH+):
calcd, 333.0972; found, 333.0974.【００７１】
実施例４
（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド（発明化合物１）【００７２】
【化１１】
2008078674.tif 000013
【００７３】
トリフェニルホスフィン（１２０  ｍｇ）のジクロロメタン溶液（１．４  ｍＬ）にＮ−ブロモスクシン酸イミド（８１．９  ｍｇ）を氷冷下で加えて３０分間撹拌した後、（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸（９０．６  ｍｇ）を加えて、室温で４０分間撹拌した。反応液に２−アミノチアゾール（６７．８  ｍｇ）を加えて、室温で１．５時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈して、水、１  ｍｏｌ／Ｌ塩酸、５％  炭酸水素ナトリウム水溶液、および飽和食塩水で順次洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、濾過、濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、（−）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド（１０６  ｍｇ）を得た。
1H NMR (CDCl3) δ 1.65-2.49 (m, 7H), 3.04 (s, 3H), 3.74(t, J=7.3 Hz, 1H), 4.73-4.90 (m, 2H), 7.08 (d, J=3.7 Hz), 7.48-7.51 (m, 3H),7.88 (d, J=8.6 Hz, 2H), 10.65 (brs, 1H).
MS (EI) m/z: 414 (M+).
HRMS (EI) for C25H27F2NO5S(M+):
calcd, 414.0883; found, 414.0890.【００７４】
実施例５
発明化合物２〜９９を実施例４と同様な操作により製造した。なお、表中の旋光度は、発明化合物７、１５はＤＭＳＯを溶媒とし、発明化合物１７、３２、４４、４５、４７〜５０、５４〜５８、７２〜７５、７８はＤＭＦを溶媒とし、残りはクロロホルムを溶媒として測定した。【００７５】
【化１２】
2008078674.tif 000014
【００７６】
（＊を付した炭素原子の立体配置はＲ配置）【００７７】
【表１】
2008078674.tif 000015
【００７８】
【表２】
2008078674.tif 000016
【００７９】
【表３】
2008078674.tif 000017
【００８０】
【表４】
2008078674.tif 000018
【００８１】
【表５】
2008078674.tif 000019
【００８２】
【表６】
2008078674.tif 000020
【００８３】
【表７】
2008078674.tif 000021
【００８４】
【表８】
2008078674.tif 000022
【００８５】
【表９】
2008078674.tif 000023
【００８６】
【表１０】
2008078674.tif 000024
【００８７】
【表１１】
2008078674.tif 000025
【００８８】
【表１２】
2008078674.tif 000026
【００８９】
【表１３】
2008078674.tif 000027
【００９０】
【表１４】
2008078674.tif 000028
【００９１】
【表１５】
2008078674.tif 000029
【００９２】
【表１６】
2008078674.tif 000030
【００９３】
参考例１
（＋）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸
実施例３と同様の方法により、（４Ｒ）−4−ベンジル−3−［３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロパノイル］オキサゾリジン−２−オンの異性体Ｂ（２０２  ｍｇ）から、（＋）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸（１１８  ｍｇ）を得た。
MS (CI+) m/z: 333 (MH+)
HRMS (CI+) for C15H19F2O4S(MH+):calcd, 333.0972; found, 333.0983.【００９４】
参考例２
（＋）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド
実施例４と同様の方法により、（＋）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸（９０．８  ｍｇ）および２−アミノチアゾール（６７．８  ｍｇ）から、（＋）−３−［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド（１０４  ｍｇ）を得た。
MS (EI) m/z: 414 (M+).
HRMS (EI) for C25H27F2NO5S(M+):
calcd, 414.0883; found, 414.0885.【００９５】
参考例３
（±）−３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸
実施例1と同様の方法により、４−メチルスルホニルフェニル酢酸（１．０４  ｇ）および（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチルメチルヨーダイド（１．２０  ｇ）から、（±）−３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸（１．２４  ｇ）を得た。
MS (CI+) m/z: 333 (MH+).
HRMS (CI+) for C15H19F2O4S(MH+):
calcd, 333.0972; found, 333.0986.【００９６】
参考例４
（４Ｒ）−４−ベンジル−３−［３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロパノイル］オキサゾリジン−２−オン
実施例２と同様の方法により、（±）−３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸（１．１５  ｇ）および（Ｒ）−４−ベンジルオキサゾリジノン（６１３  ｍｇ）から、（４Ｒ）−４−ベンジル−３−［３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロパノイル］オキサゾリジン−２−オンの、低極性異性体Ａ’（１３９  ｍｇ）および高極性異性体Ｂ’（２０７  ｍｇ）を得た。
異性体Ａ’：
MS (EI) m/z: 491 (M+).
HRMS (EI) for C25H27F2NO5S(M+):
calcd, 491.1578; found, 491.1562.
異性体Ｂ’：
MS (EI) m/z: 491 (M+).
HRMS (EI) for C25H27F2NO5S(M+):
calcd, 491.1578; found, 491.1560.【００９７】
参考例５
（−）−３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸
実施例３と同様の方法により、（４Ｒ）−４−ベンジル−３−［３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロパノイル］オキサゾリジン−２−オンの異性体Ａ’（１５０  ｍｇ）から、（−）−３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸（８５．９  ｍｇ）を得た。
MS (CI+) m/z: 333 (MH+).
HRMS (CI+) for C15H19F2O4S(MH+):
calcd, 333.0972; found, 333.0934.【００９８】
参考例６
（＋）−３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸
実施例３と同様の方法により、（４Ｒ）−４−ベンジル−３−［３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロパノイル］オキサゾリジン−２−オンの異性体Ｂ’（１１０  ｍｇ）から、（＋）−３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸（６７．３  ｍｇ）を得た。
MS (CI+) m/z: 333 (MH+).
HRMS (CI+) for C15H19F2O4S(MH+):
calcd, 333.0972; found, 333.0952.【００９９】
参考例７
（−）−３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド
実施例４と同様の方法により、（−）−３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸（６６．６  ｍｇ）および２−アミノチアゾール（４９．０  ｍｇ）から、（−）−３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド（６０．３  ｍｇ）を得た。
MS (EI) m/z: 414 (M+).
HRMS (EI) for C25H27F2NO5S(M+):
calcd, 414.0883; found, 414.0891.【０１００】
参考例８
（＋）−３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド
実施例４と同様の方法により、（＋）−３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）プロピオン酸（４５．３  ｍｇ）および２−アミノチアゾール（３３．９  ｍｇ）から、（＋）−３−［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］−２−（４−（メチルスルホニル）フェニル）−Ｎ−（チアゾール−２−イル）プロピオン酸アミド（４０．６  ｍｇ）を得た。
MS (EI) m/z: 414 (M+).
HRMS (EI) for C25H27F2NO5S(M+):
calcd, 414.0883; found, 414.0844.【０１０１】
参考例９
（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチルメチルヨーダイド
第一工程
安息香酸  ［（１α，３β，４β）−３，４−ジヒドロキシシクロペンチル］メチル【０１０２】
【化１３】
2008078674.tif 000031
【０１０３】
N−メチルモルホリン N−オキシド（５０％水溶液、２２．０  ｍＬ）及び四酸化オスミウム（２．５% t−ブタノール溶液、１．９０  ｍＬ）をアセトン（１９０  ｍＬ）に溶解し、攪拌しながら安息香酸  （３−シクロペンテン−１−イル）メチル（特表平７−５０６８１６）（２０．２  ｇ）のアセトン（１２５  ｍＬ）溶液を１０５分かけて滴下した後、室温でさらに１５時間攪拌した。反応混合物にクロロホルム（３１０  ｍＬ）及び水（１９０  ｍＬ）を加えて有機層を分取した。分取した有機層を１  ｍｏｌ／Ｌ塩酸（２×９０  ｍＬ）、水（９０  ｍＬ）、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（６０  ｍＬ）の順で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。残渣にトルエン（１２０  ｍＬ）を加えて析出晶を濾取し、安息香酸  ［（１α，３β，４β）−３，４−ジヒドロキシシクロペンチル］メチル（１６．９  ｇ）を得た。
1H NMR (CDCl3) δ 1.71-1.78 (m, 2H), 1.95-2.02 (m, 2H),2.27 (br, 2H), 2.75-2.87(m, 1H), 4.19-4.23 (m, 4H), 7.43-7.47 (m, 2H),7.55-7.59 (m, 1H), 8.01-8.04 (m,2H).
濾液を減圧濃縮し、安息香酸  ［（１α，３β，４β）−３，４−ジヒドロキシシクロペンチル］メチルと安息香酸  ［（１β，３β，４β）−３，４−ジヒドロキシシクロペンチル］メチルの混合物（４．２３  ｇ、１Ｈ  ＮＭＲの積分比から約１：２の混合物）を得た。
1H NMR (CDCl3) δ 1.58-1.65 (m, 1.3H), 1.71-1.78 (m,0.7H), 1.96-2.17 (m, 2H), 2.75-2.85 (m, 1H), 4.09-4.32 (m, 4H), 7.42-7.46 (m,2H), 7.54-7.59 (m, 1H), 8.01-8.06 (m, 2H).【０１０４】
第二工程
安息香酸  （３ａα，５α，６ａα）−（テトラヒドロ−４Ｈ−シクロペンタ−１，３，２−ジオキサチオール−５−イル）メチルエステルＳ，Ｓ−ジオキシド【０１０５】
【化１４】
2008078674.tif 000032
【０１０６】
安息香酸  ［（１α，３β，４β）−３，４−ジヒドロキシシクロペンチル］メチル（５．００  ｇ）を四塩化炭素（７５  ｍＬ）に懸濁し、塩化チオニル（１．９０  ｍＬ）を加え、攪拌しながら１．５時間加熱還流した。反応混合物に塩化チオニル（０．５０  ｍＬ）を追加し、攪拌しながらさらに１時間加熱還流した。反応混合物を減圧濃縮し、残渣にトルエン（２５  ｍＬ）を加えて減圧濃縮後、減圧乾燥して安息香酸  （３ａα，５α，６ａα）−（テトラヒドロ−４Ｈ−シクロペンタ−１，３，２−ジオキサチオール−５−イル）メチルエステルＳ−オキシド（６．０９  ｇ）を得た。得られた安息香酸  （３ａα，５α，６ａα）−（テトラヒドロ−４Ｈ−シクロペンタ−１，３，２−ジオキサチオール−５−イル）メチルエステルＳ−オキシド（４．２７  ｇ）、アセトニトリル（３０ｍＬ）及び四塩化炭素（３０  ｍＬ）を混合し、過よう素酸ナトリウム（６．４６  ｇ）、塩化ルテニウム水和物（３１．３  ｍｇ）次いで水（３０  ｍＬ）を加え、室温で３０分攪拌した。反応混合物にジクロロメタン（５０  ｍＬ）を加え、不溶物を濾去した後、濾液の有機層を分取し、水層をジクロロメタン（５０  ｍＬ）で抽出した。有機層とジクロロメタン抽出液を合わせ、１  ｍｏｌ／Ｌチオ硫酸ナトリウム水溶液（２×４０  ｍＬ）、次いで水（２×４０  ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。残渣を減圧乾燥し、安息香酸  （３ａα，５α，６ａα）−（テトラヒドロ−４Ｈ−シクロペンタ−１，３，２−ジオキサチオール−５−イル）メチルエステルＳ，Ｓ−ジオキシド（４．３５  ｇ）を得た。
MS (CI+) m/z: 299 (MH+).
HRMS (CI+) for C13H15O6S ( MH+):
calcd, 299.0589; found, 299.0593.【０１０７】
第三工程
安息香酸  ［（１α，３α，４β）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロペンチル］メチル【０１０８】
【化１５】
2008078674.tif 000033
【０１０９】
テトラブチルアンモニウムフルオリド水和物（５７１ｍｇ）を脱水アセトニトリル（５ｍＬ）に溶解し、減圧濃縮した。同様の操作をあと２回繰り返した後、残渣を４０℃で４５分間減圧乾燥した。この残渣を脱水アセトニトリル（５  ｍL）に溶解し、安息香酸  （３ａα，５α，６ａα）−（テトラヒドロ−４Ｈ−シクロペンタ−１，３，２−ジオキサチオール−５−イル）メチルエステルＳ，Ｓ−ジオキシド（５００  ｍｇ）を加え、攪拌しながら４５分間加熱還流した後、反応混合物を減圧濃縮した。残渣をエタノール（５  ｍＬ）に溶解し、硫酸（０．１５  ｍＬ）を加え、攪拌しながら１０分加熱還流した後、反応混合物を減圧濃縮した。残渣を酢酸エチル（４０  ｍＬ）に溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（５  ｍＬ）次いで飽和食塩水（５  ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１：１）で精製し、安息香酸  ［（１α，３α，４β）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロペンチル］メチル（３４２  ｍｇ）を得た。
MS (EI) m/z: 238 (M+).
HRMS (EI) for C13H15FO3(M+):
calcd,238.1005; found, 238.1046.【０１１０】
第四工程
安息香酸  ［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロ−シクロペンチル］メチル【０１１１】
【化１６】
2008078674.tif 000034
【０１１２】
安息香酸  ［（１α，３α，４β）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロペンチル］メチル（３２６  ｍｇ）を脱水テトラヒドロフラン（５  ｍＬ）に溶解し、ビス（２−メトキシエチル）アミノ硫黄トリフルオリド（４５５  ｍｇ）の脱水テトラヒドロフラン（２  ｍＬ）溶液を加え、攪拌しながら１．５時間加熱還流した。反応混合物を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１０  ｍＬ）中にあけ、酢酸エチル（２×３０  ｍＬ）で抽出した。酢酸エチル抽出液を合わせ、飽和食塩水（２×１０  ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝４：１）で精製し、安息香酸［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロ−シクロペンチル］メチル（２３３  ｍｇ）を得た。
MS (CI+) m/z: 241 ( MH+).
HRMS (CI+) for C13H15F2O2(MH+): calcd, 241.1040; found, 241.1043.【０１１３】
第五工程
［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］メタノール【０１１４】
【化１７】
2008078674.tif 000035
【０１１５】
安息香酸  ［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］メチル（２２１  ｍｇ）をエタノール（３  ｍＬ）に溶解し、炭酸カリウム（１９１  ｍｇ）の水（１  ｍＬ）溶液を加え、攪拌しながら４時間加熱還流した。反応混合物を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルカラム（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１：２）で精製し、［（１α，３α，４α）−３、４−ジフルオロシクロペンチル］メタノール（１２３  ｍｇ）を得た。
MS (CI+) m/z: 137 (MH+).
HRMS (CI+) for C6H11F2O (MH+):
calcd, 137.0778; found, 137.0801.【０１１６】
第六工程
（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチルメチルヨーダイド【０１１７】
【化１８】
2008078674.tif 000036
【０１１８】
イミダゾール（６４．５  ｍｇ）およびトリフェニルホスフィン（１２４  ｍｇ）のジクロロメタン溶液（２．０  ｍＬ）に氷冷下でヨウ素（１２０  ｍｇ）を加えて室温で３０分間撹拌した後、［（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］メタノール（４３．０  ｍｇ）のジクロロメタン溶液（０．５  ｍＬ）を加えて室温で４時間撹拌した後、不溶物を濾去した。濾液を濃縮して得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製して、（１α，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチルメチルヨーダイド（２８．０  ｍｇ）を得た。
MS (EI) m/z: 246 ( M+).
HRMS (EI) for C6H9F2I (M+):
calcd,245.9717; found, 245.9741.【０１１９】
参考例１０
（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチルメチルヨーダイド
第一工程
安息香酸  （３ａα，５β，６ａα）−（テトラヒドロ−４Ｈ−シクロペンタ−１，３，２−ジオキサチオール−５−イル）メチルエステルＳ，Ｓ−ジオキシド
参考例９の第一工程で得た安息香酸  ［（１α，３β，４β）−３，４−ジヒドロキシシクロペンチル］メチルと安息香酸  ［（１β，３β，４β）−３，４−ジヒドロキシシクロペンチル］メチルの混合物（４．２３  ｇ）と四塩化炭素（７５  ｍＬ）を混合し、塩化チオニル（２．００  ｍＬ）を加え、攪拌しながら３０分加熱還流した。反応混合物を減圧濃縮し、残渣にトルエン（７５  ｍＬ）を加えて減圧濃縮後、残渣を減圧乾燥した。この残渣とアセトニトリル（３５  ｍＬ）及び四塩化炭素（３５  ｍＬ）を混合し、過よう素酸ナトリウム（７．６６  ｇ）、塩化ルテニウム水和物（３７．１ｍｇ）、次いで水（３５  ｍＬ）を加え、室温で３０分攪拌した。反応混合物にジクロロメタン（６０ｍＬ）を加え、不溶物を濾去した後、濾液の有機層を分取し、水層をジクロロメタン（６０  ｍＬ）で抽出した。有機層とジクロロメタン抽出液を合わせ、１  ｍｏｌ／Ｌチオ硫酸ナトリウム水溶液（２×５０  ｍＬ）、次いで水（２×５０  ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラム（溶出溶媒：ヘキサン／酢酸エチル＝１：１）で精製し、安息香酸  （３ａα，５β，６aα）−（テトラヒドロ−４Ｈ−シクロペンタ−１，３，２−ジオキサチオール−５−イル）メチルエステルＳ，Ｓ−ジオキシド（２．４３  ｇ）と安息香酸  （３ａα，５α，６ａα）−（テトラヒドロ−４Ｈ−シクロペンタ−１，３，２−ジオキサチオール−５−イル）メチルエステルＳ，Ｓ−ジオキシド（１．３３  ｇ）を得た。
MS (EI) m/z: 298 (M+).
HRMS (EI) for C13H14O6S (M+):
calcd, 298.0511; found, 298.0493.【０１２０】
第二工程
安息香酸  ［（１β，３α，４β）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロペンチル］メチル
安息香酸  （３ａα，５β，６ａα）−（テトラヒドロ−４Ｈ−シクロペンタ−１，３，２−ジオキサチオール−５−イル）メチルエステルＳ，Ｓ−ジオキシド（１．００  ｇ）を用い、参考例９の第三工程と同様に反応を行い、安息香酸  ［（１β，３α，４β）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロペンチル］メチル（６６０  ｍｇ）を得た。
MS (CI+) m/z: 239 ( MH+).
HRMS (CI+) for C13H16FO3( MH+):
calcd, 239.1083; found, 239.1040.【０１２１】
第三工程
安息香酸  ［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロ−シクロペンチル］メチル
安息香酸  ［（１β，３α，４β）−３−フルオロ−４−ヒドロキシシクロペンチル］メチル（６４４  ｍｇ）を用い参考例９の第四工程と同様に反応を行い、安息香酸  ［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロ−シクロペンチル］メチル（３６５  ｍｇ）を得た。
MS (CI+) m/z: 241 ( MH+).
HRMS (CI+) for C13H15F2O2(MH+):
calcd, 241.1040; found, 241.1012.【０１２２】
第四工程
［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチル］メタノール
安息香酸  ［（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロ−シクロペンチル］メチル（３４９  ｍｇ）を用い、参考例９の第五工程と同様に反応を行い、［（１β，３α，４α）−３、４−ジフルオロシクロペンチル］メタノール（１８４  ｍｇ）を得た。
MS (CI+) m/z: 137 ( MH+).
HRMS (CI+) for C6H11F2O ( MH+):
calcd, 137.0778; found, 137.0754.【０１２３】
第五工程
（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチルメチルヨーダイド
（１β，３α，４α）−３、４−ジフルオロシクロペンチル］メタノール（３．４６  ｇ）を用い、参考例９の第六工程と同様に反応を行い、（１β，３α，４α）−３，４−ジフルオロシクロペンチルメチルヨーダイド（４．７２  ｇ）を得た。
MS (EI) m/z: 246 ( M+).
HRMS (EI) for C6H9F2I (M+):
calcd,245.9717; found, 245.9749.【０１２４】
試験例１  ＧＫ活性測定
ＧＫ活性は酵素反応により生成するグルコース６リン酸を直接測定するのではなく、グルコース−６−デヒドロゲナーゼによる共役反応によって生成するＮＡＤＨ量を測定することによって調べた。【０１２５】
（リコンビナントＧＫの調製）
ヒト肝臓型、膵臓型ＧＫのクローニング及び組換え蛋白の取得
ＧｅｎｅＢａｎｋ上に登録されているヒト肝臓型ＧＫの配列Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｕｍｂｅｒ；ＮＭ＿０３３５０７、ヒト膵臓型ＧＫの配列Ａｃｃｅｓｓｉｏｎ  Ｎｕｍｂｅｒ；ＮＭ＿０００１６２を参考にして、それぞれヒト肝臓ｃＤＮＡ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ社製）、ヒト膵臓ｃＤＮＡ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ社製）を鋳型としてＰｙｒｏｂｅｓｔ  ＤＮＡ  Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ（ＴａＫａＲａ社製）によりＰＣＲクローニングを行った。さらにＣ末端側に（Ｈｉｓ）６標識してＨｉｓタグ融合蛋白として大腸菌内で可溶性画分に発現させた。菌体を超音波破砕したのち、遠心分離を行い上清を回収した。回収した上清を金属キレートアフィニティークロマトグラフィーで精製した。【０１２６】
精製後、この酵素を、１２．５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．３）、７５ｍＭ  ＫＣｌ、０．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、０．５ｍＭ  ＤＴＴ、２．５ｍＭ  Ｇｌｕｃｏｓｅ、５０％  Ｇｌｙｃｅｒｏｌにて−８０℃に保存した。【０１２７】
（ＧＫ活性測定）
アッセイはＣｏｓｔａｒ製の平底の２分の１エリア９６穴プレートを用いて２５℃で行った。インキュベーション混合液は、最終的に２５ｍＭ  ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．１）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）、２５ｍＭ  ＫＣｌ（和光純薬製）、２ｍＭ  ＭｇＣｌ２（和光純薬製）、５ｍＭＤ−グルコース（和光純薬製）、１ｍＭ  ＡＴＰ（Ｒｏｃｈｅ社製）、１ｍＭ  ＮＡＤ（Ｓｉｇｍａ製）、１ｍＭジチオスレイトール（和光純薬製）、５Ｕｎｉｔ／ｍＬ  Ｇ６ＰＤＨ（Ｓｉｇｍａ製）、０．１％  ＢＳＡ（Ｓｉｇｍａ社製）試験化合物或いは５％ＤＭＳＯ及びＧＫが含まれるように調製した。【０１２８】
被験化合物は予めＤＭＳＯに溶解し、２μＬをＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．１）、ＫＣｌ、ＭｇＣｌ２、Ｄ−グルコース、ＡＴＰ、ＮＡＤ及びジチオスレイトールを含む溶液２０μＬに添加した。次に、Ｇ６ＰＤＨ、ＢＳＡ及びリコンビナントＧＫを含む溶液を１８μＬ加え反応を開始させた。ＧＫは５％ＤＭＳＯ存在下で１分間あたりの吸光度増加分が０．００２から０．００３の間になるように加えた。反応開始後、ＳＰＥＣＴＲＡｍａｘ１９０マイクロプレート分光光度計（モレキュラーデバイス社製）を用いて、３４０ｎｍにおける吸光度の増加を１５分間測定し、始めの１０分間の増加分を用いて活性を評価した。【０１２９】
発明化合物１１、１４は、それを含まないウェルと比較して１０μＭで１５０％以上のヒト肝臓ＧＫ活性化作用が認められ、発明化合物１〜１０、１２、１３、１５〜１７、２０、２１、２３、２５、２７、３０、３１、３３〜３６、４３〜４６、４８、５０、５４、５５、６０、６１、６８、６９、７１、７３〜７５、７９〜８２は１０μＭで２００％以上のヒト肝臓ＧＫ活性化作用が認められた。【０１３０】
試験例２  血糖降下試験
ＩＣＲマウス(雄性、７−９週齢；日本チャールズリバー社)を使用し、被験化合物による血糖値への作用を測定した。各々の化合物をＧｅｌｕｃｉｒｅ４４／１４（商品名、Ｇａｔｅｆｏｓｓｅ社製）：ＰＥＧ４００＝６０：４０の混合液に溶解させ、餌を２時間抜いたマウスに経口投与(３０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍＬ／ｋｇ)した。投与直前(Ｐｒｅ値)および投与後０．５、２および４時間のポイントで尾静脈よりエチレンジアミン四酢酸２カリウムをコーティングした採血管で採血し、遠心分離(４℃、３，６００×ｇ、３分間)して血漿サンプルを得た。【０１３１】
各サンプルを生理食塩水で５倍希釈してグルコースＣII−テストワコー（商品名、和光純薬製）を用いて血糖値を測定した。９６穴平板プレートにサンプル、生理食塩水およびブドウ糖標準液１００ｍｇ／ｄＬ（ブドウ糖標準液２００ｍｇ／ｄＬを生理食塩水で２倍希釈した）の各々１０μＬ／穴をセットして発色液を１５０μＬ／穴添加後、３７℃に５分間静置して発色させた。測定はＬｕｃｙ２ルミネッセンス・リーダー（商品名、Ａｌｏｋａ社製）を使用しＯＤ４９２ｎｍで測定した。各採血ポイントのＰｒｅ値に対するグルコース低下率からΣグルコース低下率（各採血ポイントのＰｒｅ値に対するグルコース低下率の平均）を算出した。【０１３２】
発明化合物１、２、３、１７、２７、３０、３５、３６、４６、５４、５５、７４は、３０％以上のΣグルコース低下率が認められた。一方、参考例２、７、８の化合物には１５％超えるようなΣグルコース低下率を示すものはなかった。【０１３３】
試験例３  in vivo薬物動態評価
ＩＣＲマウス（雄性、試験時６週齢；日本チャールズリバー社）を使用し、経口バイオアベイラビリティを評価した。被験化合物をあらかじめジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ、Ｓｉｇｍａ社製）に溶解し、1/15Mの濃度に調製したリン酸２水素ナトリウム（和光純薬製）水溶液へ２００μＭとなるように添加し、ＤＭＳＯを最終３０％になるように追加したものを投与溶媒とした。静注群として、一晩絶食したＩＣＲマウスに尾静脈内投与した（１μmoｌ/kg、５mL/kg）。静脈内投与後５、１５、３０分、１、２、４、８、２４時間後にヘパリンコーティングした毛細管を用いて眼底採血を行い、遠心後血漿を得た。また、経口投与群として同溶液を強制経口投与し（２μmoｌ/kg、１０mL/kg）、投与後１５、３０分、１、２、４、８、２４時間に眼底採血を行い、遠心分離後同様に血漿を得た。分離血漿１０μLを生理食塩水１００μＬ及びジメチルスルホキシド（Ｓｉｇｍａ社製）１０μLによって希釈し、液体クロマトグラフィー付トリプル四重極質量分析装置（アプライドバイオシステム社、ＡＰＩ−３０００）にて血漿中未変化体濃度を測定した。血漿中濃度時間曲線下面積（ＡＵＣ）を台形法にて算出し、投与量補正後の経口投与群の平均ＡＵＣを静脈内投与群の平均ＡＵＣで除することによってバイオアベイラビリティを求めた。発明化合物１は、５０％以上の経口バイオアベイラビリティを示した。【０１３４】
試験例４  in vitro肝ミクロソーム代謝安定性評価
（方法１）
ガラス試験管内で、ヒト（XENOTECH社）、マウス（雄性、７週齢、ＩＣＲを用いた自社調製；日本チャールスリバー社）肝ミクロソーム溶液と被験化合物を３７℃にて５分インキュベートし、代謝安定性評価を行った。インキュベーション混合液には、１００ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．４、和光純薬製）、３ｍＭＭｇＣｌ２（和光純薬製）、５ｍＭグルコース６リン酸（Ｒｏｃｈｅ社製）、1ｍＭ  ＥＤＴＡ（東京化成製）、１Ｉ．Ｕ．グルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ（Ｒｏｃｈｅ社製）、1mg/mLの肝ミクロソームが含まれる。被験化合物をあらかじめＤＭＳＯへ溶解し、反応液へ終濃度１μＭとなるように添加した。代謝反応は終濃度１ｍＭとなるようにＮＡＤＰＨ（Ｒｏｃｈｅ社製）溶液を添加することで開始し、５分後、反応液と等容積のアセトニトリル（フィッシャー社製）を添加することで反応停止した。反応停止後、遠心上清を液体クロマトグラフィー付質量分析装置（島津製作所、Ｓｈｉｍａｄｚｕ２０１０Ａ）にて未変化体濃度を測定した。発明化合物１、２、３のヒト及びマウスにおける代謝固有クリアランスは、いずれにおいても0.06
mL/min/mg protein以下であった。【０１３５】
（方法２）
ガラス試験管内で、ヒト（XENOTECH社）、マウス（雄性、７週齢、ＩＣＲを用いた自社調製；日本チャールスリバー社）肝ミクロソーム溶液と被験化合物を３７℃にて２５分インキュベートし、代謝安定性評価を行った。インキュベーション混合液には、１００ｍＭリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．４、和光純薬製）、３ｍＭＭｇＣｌ２（和光純薬製）、５ｍＭグルコース６リン酸（Ｒｏｃｈｅ社製）、１ｍＭ  ＥＤＴＡ（東京化成製）、１Ｉ．Ｕ．グルコース６リン酸デヒドロゲナーゼ（Ｒｏｃｈｅ社製）、0.2mg/mLの肝ミクロソームが含まれる。被験化合物をあらかじめＤＭＳＯへ溶解し、反応液へ終濃度１μＭとなるように添加した。代謝反応は終濃度１ｍＭとなるようにＮＡＤＰＨ（Ｒｏｃｈｅ社製）溶液を添加することで開始し、２５分後、反応液と等容積のアセトニトリル（フィッシャー社製）を添加することで反応停止した。反応停止後、遠心上清を液体クロマトグラフィー付質量分析装置（島津製作所、Ｓｈｉｍａｄｚｕ２０１０Ａ）にて未変化体濃度を測定した。発明化合物１、１７、２７、３０、３５、３６、４６のヒト及びマウスにおける代謝固有クリアランスは、いずれにおいても0.05
mL/min/mg protein以下であった。
【産業上の利用可能性】
【０１３６】
本発明のグルコキナーゼ活性化物質は、優れたＧＫ活性化作用又は血糖降下作用を有し、副作用（例えば、ＱＴ間隔延長、低血糖症状など）が少ないので、糖尿病、肥満などの治療又は予防のための医薬として有用である。
【国際調査報告】
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