【手続補正書】
【提出日】平成17年3月10日(2005.3.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）経路の活性を検出する方法であって、
ＧＰＣＲを発現する少なくとも１個の細胞および複数の複合タンパク質を供するステップであって、該複数の複合タンパク質の各々が、アレスチンタンパク質と検出可能な分子とを複合化させることによって形成され、該複数の複合タンパク質が、該少なくとも１個の細胞の細胞質内に実質的に均等に分布されるステップと、
前記検出可能な分子から放出されるエネルギーの量を検出することによって前記少なくとも１個の細胞の第一の画像を得て、該エネルギーの量に対応する値を保存するステップと、
前記少なくとも１個の細胞を、試験化合物で処理するステップと、
前記検出可能な分子から放出されるエネルギーの量を検出することによって前記少なくとも１個の細胞の第二の画像を得て、該エネルギーの量に対応する値を保存するステップと、
前記第一の画像および前記第二の画像を比較し、前記複数の複合タンパク質の少なくともいくつかの局在を検出するステップと
を含む方法。
【請求項２】
前記少なくとも１個の細胞の第二の画像を得るステップが、前記細胞質に均等に分布した検出可能な分子から放出されるエネルギーが排除されるように、閾値強度を設定するステップを含む請求項１の方法。
【請求項３】
前記閾値強度が、前記細胞質に均等に分布した前記検出可能な分子から放出されるエネルギーをできるだけ排除し、エンドサイトーシス小胞中の前記検出可能な分子から放出されるエネルギーをできるだけ排除しないように設定される請求項２の方法。
【請求項４】
前記閾値強度が、対照細胞中で放出される全エネルギーの平均強度に標準偏差の２倍を足したものに設定される請求項２の方法。
【請求項５】
前記閾値強度が、対照細胞中で放出される全エネルギーの平均強度に標準偏差の３倍を足したものに設定される請求項２の方法。
【請求項６】
前記試験化合物が、アゴニストである可能性があるもの、またはアンタゴニストである可能性があるものである請求項１の方法。
【請求項７】
Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）経路の活性を検出する方法であって、
ＧＰＣＲを発現する少なくとも１個の細胞および複数の複合タンパク質を供するステップであって、該複数の複合タンパク質の各々が、アレスチンタンパク質と検出可能な分子とを複合化させることによって形成され、該複数の複合タンパク質が、該少なくとも１個の細胞の細胞質内に実質的に均等に分布されるステップと、
前記検出可能な分子から放出されるエネルギーを検出および測定することによって前記少なくとも１個の細胞の第一のデジタル画像を得るステップであって、該第一のデジタル画像が、それぞれの強度値を各々有する複数の画素の配列から形成され、それぞれの強度値が、該配列における画素の位置に対応した前記検出可能な分子から放出されるエネルギーの強度に基づいているステップと、
前記少なくとも１個の細胞を、試験化合物で処理するステップと、
前記検出可能な分子から放出されるエネルギーを検出および測定することによって前記少なくとも１個の細胞の第二の画像を得るステップであって、該第二のデジタル画像が、それぞれの強度値を各々有する複数の画素の配列から形成され、それぞれの強度値が、該配列における画素の位置に対応した前記検出可能な分子から放出されるエネルギーの強度に基づいているステップと、
前記第一のデジタル画像および前記第二のデジタル画像を比較し、前記複数の複合タンパク質の少なくともいくつかの局在を検出するステップであって、前記複数の複合タンパク質の少なくともいくつかの局在が、検出可能な分子から放出されるエネルギーの見掛けの強度の変化であって、前記複数の画素の少なくともいくつかの値を増加させる変化により検出されるステップと
を含む方法。
【請求項８】
Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）経路の活性を検出する方法であって、
ＧＰＣＲを発現する少なくとも１個の細胞および複数の複合タンパク質を供するステップであって、該複数の複合タンパク質の各々が、アレスチンタンパク質と検出可能な分子とを複合化させることによって形成され、該複数の複合タンパク質が、該少なくとも１個の細胞の細胞質内に実質的に均等に分布されるステップと、
前記少なくとも１個の細胞を、試験化合物で処理するステップと、
前記検出可能な分子から放出されるエネルギーを検出および測定することによって前記少なくとも１個の細胞のデジタル画像を得るステップであって、該デジタル画像が、それぞれの強度値を各々有する複数の画素の配列から形成され、それぞれの強度値が、該配列における画素の位置に対応した前記検出可能な分子から放出されるエネルギーの強度に基づいているステップと、
前記複数の複合タンパク質の少なくともいくつかの局在を検出するステップであって、前記複数の複合タンパク質の少なくともいくつかの局在が、検出可能な分子から放出されるエネルギーの見掛けの強度の変化であって、閾値強度より大きい値を有する前記複数の画素の少なくともいくつかが生じる変化により検出されるステップと
を含む方法。
【請求項９】
前記少なくとも１個の細胞のデジタルの画像を得るステップが、前記細胞質に均等に分布した検出可能な分子から放出されるエネルギーが排除されるように、閾値強度を設定するステップを含む請求項８の方法。
【請求項１０】
前記閾値強度が、前記細胞質に均等に分布した前記検出可能な分子から放出されるエネルギーをできるだけ排除し、エンドサイトーシス小胞中の前記検出可能な分子から放出されるエネルギーをできるだけ排除しないように設定される請求項９の方法。
【請求項１１】
前記閾値強度が、対照細胞中の検出可能な分子から放出される全エネルギーの平均強度に基づいて設定される請求項８の方法。
【請求項１２】
前記閾値強度が、対照細胞中の検出可能な分子から放出される全エネルギーの平均強度に標準偏差の２倍を足したものに設定される請求項１１の方法。
【請求項１３】
前記閾値強度が、対照細胞中の検出可能な分子から放出される全エネルギーの平均強度に標準偏差の３倍を足したものに設定される請求項１１の方法。
【請求項１４】
試験化合物が、アゴニストである可能性があるもの、またはアンタゴニストである可能性があるものである請求項８の方法。
【請求項１５】
Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）経路の活性を検出する方法であって、
ＧＰＣＲを発現する少なくとも１個の細胞および複数の複合タンパク質を供するステップであって、該複数の複合タンパク質の各々が、アレスチンタンパク質と検出可能な分子とを複合化させることによって形成され、該複数の複合タンパク質が、該少なくとも１個の細胞の細胞質内に実質的に均等に分布されるステップと、
前記少なくとも１個の細胞を、試験化合物で処理するステップと、
前記検出可能な分子から放出されるエネルギーを検出および測定することによって前記少なくとも１個の細胞のデジタル画像を得るステップであって、該デジタル画像が、それぞれの強度値を各々有する複数の画素の配列から形成され、それぞれの強度値が、該配列における画素の位置に対応した前記検出可能な分子から放出されるエネルギーの強度に基づいているステップと、
検出可能な分子から放出されるエネルギーの見掛けの強度における変化であって、閾値強度より大きい値を有する前記複数の画素の少なくともいくつかが生じる変化により前記複数の複合タンパク質の少なくともいくつかの局在を検出するステップと
を含む方法。
【請求項１６】
前記少なくとも１個の細胞のデジタル画像を得るステップが、前記細胞質に均等に分布した検出可能な分子から放出されるエネルギーが排除されるように、閾値強度を設定するステップを含む請求項１５の方法。
【請求項１７】
前記閾値強度が、前記細胞質に均等に分布した前記検出可能な分子から放出されるエネルギーをできるだけ排除し、エンドサイトーシス小胞中の前記検出可能な分子から放出されるエネルギーをできるだけ排除しないように設定される請求項１６の方法。
【請求項１８】
前記閾値強度が、対照細胞中の検出可能な分子から放出される全エネルギーの平均強度に基づいて設定される請求項１５の方法。
【請求項１９】
前記閾値強度が、対照細胞中の検出可能な分子から放出される全エネルギーの平均強度に標準偏差の２倍を足したものに設定される請求項１８の方法。
【請求項２０】
前記閾値強度が、対照細胞中の検出可能な分子から放出される全エネルギーの平均強度に標準偏差の３倍を足したものに設定される請求項１８の方法。
【請求項２１】
前記試験化合物が、アゴニストである可能性があるもの、またはアンタゴニストである可能性があるものである請求項１５の方法。