【手続補正書】
【提出日】平成16年12月20日(2004.12.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項９】
式（I）
(S1-L1)m-B1-(F1)n      （I）
（式中、S1は被験化合物残基を表し、L1はS1とB1とをL1を介して位置特異的かつ化学的に結合させることができる生体適合性高分子残基を表し、F1は画像化試薬残基を表し、B1は1〜60個のL1と1〜10個のF1とをB1を介して化学的に結合させることができる、または1〜60個のL1と結合することのできるリンカーを表し、mは1〜60の整数を表し、nは0〜10の整数を表す）で表される、被験化合物の生体内集積部位検出用プローブ。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２３】
化学療法剤が、抗癌剤、抗炎症剤、抗血管形成剤および血管形成促進剤からなる群より選ばれる化学療法剤である請求項２１記載の臓器送達性化合物。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２４】
粒子が、リポソーム、マイクロスフェアー、ナノスフェアーおよびミセルからなる群より選ばれる粒子である請求項２１記載の臓器送達性化合物。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項３１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３１】
請求項１７〜３０のいずれかに記載の臓器送達性化合物を含有する、膵臓を構成する細胞の機能障害を伴う疾患、前立腺を構成する細胞の機能障害を伴う疾患または胸腺を構成する細胞の機能亢進や障害を伴う疾患の診断薬。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項３３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３３】
請求項１７〜３０のいずれかに記載の臓器送達性化合物を含有する、膵臓を構成する細胞の機能障害を伴う疾患、前立腺を構成する細胞の機能障害を伴う疾患または胸腺を構成する細胞の機能亢進や障害を伴う疾患の治療剤。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３５】
請求項１７〜３０のいずれかに記載の臓器送達性化合物を含有する、膵臓を構成する細胞の機能障害を伴う疾患、前立腺を構成する細胞の機能障害を伴う疾患または胸腺を構成する細胞の機能亢進や障害を伴う疾患の予防剤。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１３】
【課題を解決するための手段】
本発明は、以下の（１）〜（３９）に関する。
（１）式（I）
(S1-L1)m-B1-(F1)n      （I）
（式中、S1は被験化合物残基を表し、L1はS1とB1とをL1を介して位置特異的かつ化学的に結合させることができる生体適合性高分子残基を表し、F1は画像化試薬残基を表し、B1は1〜60個のL1と1〜10個のF1とをB1を介して化学的に結合させることができる、または1〜60個のL1と結合することのできるリンカーを表し、mは1〜60の整数を表し、nは0〜10の整数を表す）で表されるプローブをヒト以外の動物に投与し、一定時間後に、動物自体または該動物から採取した臓器、組織もしくは細胞の画像測定により該プローブの定量を行い、被験化合物が集積する臓器、組織または細胞を同定することを特徴とする、動物の特定部位に集積する化合物のスクリーニング方法。
（２）  S1が、単糖、二糖、オリゴ糖、アミノ酸、ペプチド、抗体フラグメント、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、輸送基質、ホルモン、脂質および合成低分子化合物からなる群より選ばれる化合物の残基である上記（１）記載のスクリーニング方法。
（３）  S1が、オリゴ糖残基である上記（１）記載のスクリーニング方法。
（４）  L1が、ポリアルキレングリコール類、多糖類、スチレンマレイン酸コポリマー、ジビニルエーテル無水マレイン酸コポリマー、ポリ(N-イソプロピルアクリルアミド)およびN-(2-ヒドロキシプロピル)メタクリルアミドからなる群より選ばれる化合物の残基である上記（１）〜（３）のいずれかに記載のスクリーニング方法。
（５）  L1が、ポリエチレングリコール残基である上記（１）〜（３）のいずれかに記載のスクリーニング方法。
（６）  B1が、アルブミン、アビジン、グリーンフルオレッセントプロテイン、イエローフルオレッセントプロテイン、シアンフルオレッセントプロテイン、ブルーフルオレッセントプロテイン、ポリリジン、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸およびリポソームからなる群より選ばれる化合物の残基である上記（１）〜（５）のいずれかに記載のスクリーニング方法。
（７）  F1が、蛍光物質または発光物質の残基である上記（１）〜（６）のいずれかに記載のスクリーニング方法。
（８）  F1が、フルオレセイン誘導体残基である上記（１）〜（６）のいずれかに記載のスクリーニング方法。
（９）  式（I）
(S1-L1)m-B1-(F1)n      （I）
（式中、S1は被験化合物残基を表し、L1はS1とB1とをL1を介して位置特異的かつ化学的に結合させることができる生体適合性高分子残基を表し、F1は画像化試薬残基を表し、B1は1〜60個のL1と1〜10個のF1とをB1を介して化学的に結合させることができる、または1〜60個のL1と結合することのできるリンカーを表し、mは1〜60の整数を表し、nは0〜10の整数を表す）で表される、被験化合物の生体内集積部位検出用プローブ。
（１０）  S1が、単糖、二糖、オリゴ糖、アミノ酸、ペプチド、抗体フラグメント、ヌクレオチド、オリゴヌクレオチド、輸送基質、ホルモン、脂質、および合成低分子化合物からなる群より選ばれる化合物の残基である上記（９）記載のプローブ。
（１１）  S1が、オリゴ糖残基である上記（９）記載のプローブ。
（１２）  L1が、ポリアルキレングリコール類、多糖類、スチレンマレイン酸コポリマー、ジビニルエーテル無水マレイン酸コポリマー、ポリ(N-イソプロピルアクリルアミド)およびN-(2-ヒドロキシプロピル)メタクリルアミドからなる群より選ばれる化合物の残基である上記（９）〜（１１）のいずれかに記載のプローブ。
（１３）  L1がポリエチレングリコール残基である上記（９）〜（１１）のいずれかに記載のプローブ。
（１４）  B1が、アルブミン、アビジン、グリーンフルオレッセントプロテイン、イエローフルオレッセントプロテイン、シアンフルオレッセントプロテイン、ブルーフルオレッセントプロテイン、ポリリジン、ポリグルタミン酸、ポリアスパラギン酸およびリポソームからなる群より選ばれる化合物の残基である上記（９）〜（１３）のいずれかに記載のプローブ。
（１５）  F1が、蛍光物質または発光物質の残基である上記（９）〜（１４）のいずれかに記載のプローブ。
（１６）  F1が、フルオレセイン誘導体残基である上記（９）〜（１４）のいずれかに記載のプローブ。
（１７）  Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4Glcで表されるオリゴ糖（LNnT）または構造中にLNnTモチーフを有するオリゴ糖誘導体の残基と生理活性物質残基とを含む化合物であって、動物に投与した場合、膵臓、胸腺、精巣および前立腺からなる群より選ばれる一つ以上の臓器に特異的に集積し、該生理活性物質を該臓器に送達することができる臓器送達性化合物。
（１８）  LNnTまたは構造中にLNnTモチーフを有するオリゴ糖誘導体残基と生理活性物質残基とを含む化合物が、式（II）
[S2-(L2)u]t-B2      （II）
（式中、S2は、LNnTまたは構造中にLNnTモチーフを有するオリゴ糖誘導体の残基を表し、L2は、S2とB2とをL2を介して位置特異的かつ化学的に結合させる生体適合性高分子残基を表し、B2は、生理活性物質残基を表し、uは０または１を表し、tは１以上の整数を表す）で表される化合物である上記（１７）記載の臓器送達性化合物。
（１９）  L2が、ポリアルキレングリコール類、多糖類、スチレンマレイン酸コポリマー、ジビニルエーテル無水マレイン酸コポリマー、ポリ(N-イソプロピルアクリルアミド)およびN-(2-ヒドロキシプロピル)メタクリルアミドからなる群より選ばれる化合物の残基である上記（１８）記載の臓器送達性化合物。
（２０）  L2がポリエチレングリコール残基である上記（１８）記載の臓器送達性化合物。
（２１）  生理活性物質残基における生理活性物質が、化学療法剤、毒素、放射線治療剤、放射線感受性試薬、アンチセンス化合物、サイトカイン、酵素、抗体、抗体フラグメント、ペプチド、ホルモン、同種抗原、異種抗原、遺伝子治療用DNA、画像化試薬およびこれらのうちの１つまたは２つ以上を包含する粒子からなる群より選ばれるものである上記（１７）〜（２０）のいずれかに記載の臓器送達性化合物。
（２２）  生理活性物質残基における生理活性物質が、組換えタンパク質である上記（１７）〜（２０）のいずれかに記載の臓器送達性化合物。
（２３）  化学療法剤が、抗癌剤、抗炎症剤、抗血管形成剤および血管形成促進剤からなる群より選ばれる化学療法剤である上記（２１）記載の臓器送達性化合物。
（２４）  粒子が、リポソーム、マイクロスフェアー、ナノスフェアーおよびミセルからなる群より選ばれる粒子である上記（２１）記載の臓器送達性化合物。
（２５）  画像化試薬が、蛍光物質または発光物質である上記（２１）記載の臓器送達性化合物。
（２６）  画像化試薬が、フルオレセイン誘導体である上記（２１）記載の臓器送達性化合物。
（２７）  放射線治療剤が、インジウム111、テクネチウム99、ヨード123、ヨード125、ヨード131、クリプトン81、キセノン33およびガリウム67からなる群より選ばれるものである上記（２１）記載の臓器送達性化合物。
（２８）  生理活性物質残基における生理活性物質がインスリン分泌促進剤またはβ細胞増殖因子である上記（１７）〜（２０）のいずれかに記載の臓器送達性化合物。
（２９）  生理活性物質残基における生理活性物質が免疫抑制剤である上記（１７）〜（２０）のいずれかに記載の臓器送達性化合物。
（３０）  オリゴ糖誘導体が、NeuAcα2-6Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4GlcまたはO-アセチル(Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4Glc)である上記（１７）〜（２９）のいずれかに記載の臓器送達性化合物。
（３１）  上記（１７）〜（３０）のいずれかに記載の臓器送達性化合物を含有する、膵臓を構成する細胞の機能障害を伴う疾患、前立腺を構成する細胞の機能障害を伴う疾患または胸腺を構成する細胞の機能亢進や障害を伴う疾患の診断薬。
（３２）  膵臓を構成する細胞の機能障害を伴う疾患が、膵癌、急性膵炎、慢性膵炎または糖尿病であり、前立腺を構成する細胞の機能障害を伴う疾患が前立腺癌であり、胸腺を構成する細胞の機能亢進や障害を伴う疾患が自己免疫疾患、アレルギー、アトピー、喘息、花粉症、気道過敏症、HIV感染症、慢性関節リウマチ、移植片−対−宿主疾患、インスリン依存性糖尿病または糸球体腎炎である上記（３１）記載の診断薬。
（３３）  上記（１７）〜（３０）のいずれかに記載の臓器送達性化合物を含有する、膵臓を構成する細胞の機能障害を伴う疾患、前立腺を構成する細胞の機能障害を伴う疾患または胸腺を構成する細胞の機能亢進や障害を伴う疾患の治療剤。
（３４）  膵臓を構成する細胞の機能障害を伴う疾患が、膵癌、急性膵炎、慢性膵炎または糖尿病であり、前立腺を構成する細胞の機能障害を伴う疾患が前立腺癌であり、胸腺を構成する細胞の機能亢進や障害を伴う疾患が自己免疫疾患、アレルギー、アトピー、喘息、花粉症、気道過敏症、HIV感染症、慢性関節リウマチ、移植片−対−宿主疾患、インスリン依存性糖尿病または糸球体腎炎である上記（３３）記載の治療剤。
（３５）  上記（１７）〜（３０）のいずれかに記載の臓器送達性化合物を含有する、膵臓を構成する細胞の機能障害を伴う疾患、前立腺を構成する細胞の機能障害を伴う疾患または胸腺を構成する細胞の機能亢進や障害を伴う疾患の予防剤。
（３６）  膵臓を構成する細胞の機能障害を伴う疾患が、膵癌、急性膵炎、慢性膵炎または糖尿病であり、前立腺を構成する細胞の機能障害を伴う疾患が前立腺癌であり、胸腺を構成する細胞の機能亢進や障害を伴う疾患が自己免疫疾患、アレルギー、アトピー、喘息、花粉症、気道過敏症、HIV感染症、慢性関節リウマチ、移植片−対−宿主疾患、インスリン依存性糖尿病または糸球体腎炎である上記（３５）記載の予防剤。
（３７）  生理活性物質を膵臓、胸腺、精巣および前立腺からなる群より選ばれる臓器に送達することができる臓器送達性化合物の製造のための、Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4Glcで表されるオリゴ糖（LNnT）または構造中にLNnTモチーフを有するオリゴ糖誘導体の使用。
（３８）  NeuAcα2-6Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4Glcで表されるオリゴ糖誘導体。
（３９）  O-アセチル(Galβ1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4Glc)で表されるオリゴ糖誘導体。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
抗体フラグメントとしては、例えば抗体をペプシン、パパイン等の酵素で消化して得られるFab、Fab’、(Fab’)2等のフラグメント、1本鎖抗体等が挙げられ、抗体としては免疫グロブリンの各クラス、サブクラス等が挙げられる。
ヌクレオチドとしては、例えばATP、GTP、CTP、UTP、これらのデオキシ体、cAMP等のプリンヌクレオチド、ピリミジンヌクレオチド、これらの誘導体等が挙げられる。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５０】
抗体フラグメントは、前記抗体を酵素消化して得られる断片であり、例えばFab、Fab’、(Fab’)2、遺伝子組換えにより可変領域同士を結合した単鎖抗体等が挙げられる。
ペプチドとは、アミノ酸の2〜100mer程度の鎖長のものからなり、例えば合成的に得るか、天然物より抽出等により得るか、あるいはタンパク質、臓器もしくは組織等の分解物または抽出物等より得られるもの等を指す。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６５】
化合物4A、4B、4Cおよび4Dの末端カルボキシをバックマン（Buckmann）らの方法［マクロモレキュラー・ケミストリー (Makromol. Chem.), 182, 1379-1384 (1981)］に従ってエステル化し、それぞれ化合物5A、5B、5Cおよび5Dを得た。
17mgのBSAを575μlの150mmol/lリン酸水素二ナトリウム水溶液に溶解し、25℃に設定した。FITC（同仁化学社製）を1.0mg含む4.4mlの150mmol/lリン酸水素二ナトリウム水溶液を滴下し、25℃で1時間静置した。反応液を50mmol/lホウ酸ナトリウム緩衝液(pH9.5)で平衡化したPD-10カラム（Amersham Pharmacia Biotech社製）に通塔し、化合物6を得た。FITC導入数(n)はジョバギイ（Jobbagy）らの方法[バイオキミカ・エ・バイオフィジカ・アクタ (Biochim. Biophys. Acta.), 124, 166-175 (1966)]に従って、5と決定された。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６７】
化合物4Aの末端がオリゴ糖残基の代わりにメチルであるmPEG［平均分子量9,000、日本油脂（株）製］を用いて、化合物4Aよりプローブ7Aを製造するのと同様の方法で、プローブ7Aの末端がオリゴ糖の代わりにメチルであるプローブAを製造し、対照化合物とした。