【手続補正書】
【提出日】平成16年10月19日(2004.10.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）により腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）ＲＮＡの切断を指示する化学的に合成された二本鎖短干渉核酸（ｓｉＮＡ）分子であって，
ａ）  前記ｓｉＮＡ分子の各鎖は約１９−約２３ヌクレオチドの長さであり；および
ｂ）  前記ｓｉＮＡ分子の一方の鎖は，前記ＴＮＦ  ＲＮＡに対して，ｓｉＮＡ分子がＲＮＡ干渉によりＴＮＦ  ＲＮＡの切断を指示するのに十分な相補性を有するヌクレオチド配列を含む，
ことを特徴とするｓｉＮＡ分子。
【請求項２】
前記ｓｉＮＡ分子がリボヌクレオチドを含まない，請求項１記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項３】
前記ｓｉＮＡ分子が１またはそれ以上のリボヌクレオチドを含む，請求項１記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項４】
前記二本鎖ｓｉＮＡ分子の一方の鎖はＴＮＦ遺伝子のヌクレオチド配列またはその一部に相補的なヌクレオチド配列を含み，前記二本鎖ｓｉＮＡ分子の第２の鎖は前記ＴＮＦ  ＲＮＡのヌクレオチド配列またはその一部に実質的に類似するヌクレオチド配列を含む，請求項１記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項５】
ｓｉＮＡ分子の各鎖は約１９−約２３ヌクレオチドを含み，各鎖は他方の鎖のヌクレオチドに相補的な少なくとも約１９ヌクレオチドを含む，請求項４記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項６】
前記ｓｉＮＡ分子はＴＮＦ遺伝子のヌクレオチド配列またはその一部に相補的なヌクレオチド配列を含むアンチセンス領域を含み，前記ｓｉＮＡはさらにセンス領域を含み，前記センス領域は前記ＴＮＦ遺伝子のヌクレオチド配列またはその一部に実質的に類似するヌクレオチド配列を含む，請求項１記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項７】
前記アンチセンス領域および前記センス領域は約１９−約２３ヌクレオチドを含み，前記アンチセンス領域はセンス領域のヌクレオチドに相補的な少なくとも約１９ヌクレオチドを含む，請求項６記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項８】
前記ｓｉＮＡ分子はセンス領域およびアンチセンス領域を含み，前記アンチセンス領域はＴＮＦ遺伝子によりコードされるＲＮＡのヌクレオチド配列またはその一部に相補的なヌクレオチド配列を含み，および前記センス領域は前記アンチセンス領域に相補的なヌクレオチド配列を含む，請求項１記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項９】
前記ｓｉＮＡ分子は２つの別々のオリゴヌクレオチドフラグメントから組み立てられており，一方のフラグメントは前記ｓｉＮＡ分子のセンス領域を含み，第２のフラグメントは前記ｓｉＮＡ分子のアンチセンス領域を含む，請求項６記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項１０】
前記センス領域がリンカー分子を介してアンチセンス領域と連結されている，請求項６記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項１１】
前記リンカー分子がポリヌクレオチドリンカーである，請求項１０記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項１２】
前記リンカー分子が非ヌクレオチドリンカーである，請求項１０記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項１３】
センス領域中のピリミジンヌクレオチドが２’−Ｏ−メチルピリミジンヌクレオチドである，請求項６記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項１４】
センス領域中のプリンヌクレオチドが２’−デオキシプリンヌクレオチドである，請求項６記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項１５】
センス領域中に存在するピリミジンヌクレオチドが２’−デオキシ−２’−フルオロピリミジンヌクレオチドである，請求項６記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項１６】
前記センス領域を含むフラグメントは，前記センス領域を含むフラグメントの５’末端，３’末端，または５’末端および３’末端の両方に末端キャップ成分を含む，請求項９記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項１７】
前記末端キャップ成分が反転デオキシ無塩基成分である，請求項１６記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項１８】
前記アンチセンス領域のピリミジンヌクレオチドが２’−デオキシ−２’−フルオロピリミジンヌクレオチドである，請求項６記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項１９】
前記アンチセンス領域のプリンヌクレオチドが２’−Ｏ−メチルプリンヌクレオチドである，請求項６記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項２０】
前記アンチセンス領域中に存在するプリンヌクレオチドが２’−デオキシ−プリンヌクレオチドを含む，請求項６記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項２１】
前記アンチセンス領域が前記アンチセンス領域の３’末端にホスホロチオエートヌクレオチド間結合を含む，請求項１８記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項２２】
前記アンチセンス領域が前記アンチセンス領域の３’末端にグリセリル修飾を含む，請求項６記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項２３】
前記ｓｉＮＡ分子の２つのフラグメントのそれぞれが約２１ヌクレオチドを含む，請求項９記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項２４】
ｓｉＮＡ分子の各フラグメントの約１９ヌクレオチドはｓｉＮＡ分子の他方のフラグメントの相補的ヌクレオチドと塩基対形成しており，ｓｉＮＡ分子の各フラグメントの少なくとも２つの３’末端ヌクレオチドはｓｉＮＡ分子の他方のフラグメントのヌクレオチドと塩基対形成していない，請求項２３記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項２５】
ｓｉＮＡ分子の各フラグメントの２つの３’末端ヌクレオチドのそれぞれが２’−デオキシ−ピリミジンである，請求項２４記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項２６】
前記２’−デオキシ−ピリミジンが２’−デオキシ−チミジンである，請求項２５記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項２７】
ｓｉＮＡ分子の各フラグメントの約２１ヌクレオチドすべてがｓｉＮＡ分子の他方のフラグメントの相補的ヌクレオチドと塩基対形成している，請求項２３記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項２８】
アンチセンス領域の約１９ヌクレオチドがＴＮＦ遺伝子によりコードされるＲＮＡのヌクレオチド配列またはその一部と塩基対形成している，請求項２３記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項２９】
アンチセンス領域の約２１ヌクレオチドがＴＮＦ遺伝子によりコードされるＲＮＡのヌクレオチド配列またはその一部と塩基対形成している，請求項２３記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項３０】
前記アンチセンス領域を含むフラグメントの５’末端が任意にリン酸基を含む，請求項９記載のｓｉＮＡ分子。
【請求項３１】
薬学的に許容しうる担体または希釈剤中に請求項１記載のｓｉＮＡ分子を含む組成物。
【請求項３２】
ＴＮＦ  ＲＮＡがＧｅｎｅｂａｎｋ受託番号ＮＭ＿０００５９４を含む，請求項１記載のｓｉＮＡ。
【請求項３３】
前記ｓｉＮＡが，配列番号１−２２６のいずれかを含む，請求項１記載のｓｉＮＡ。
【請求項３４】
請求項３２記載のｓｉＮＡを薬学的に許容しうる担体または希釈剤とともに含む組成物。
【請求項３５】
請求項３３記載のｓｉＮＡを薬学的に許容しうる担体または希釈剤とともに含む組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
１つの態様においては，ＴＮＦ  ｓｉＮＡコンストラクトのアンチセンス領域は，配列番号１−８８または４２３−４２６のいずれかを有する配列に相補的な配列を含むことができる。１つの態様においては，アンチセンス領域は，配列番号８９−１７６，４３５−４３８，４４３−４４６，４５１−４５４，４９１，４９３，４９５，４９７，４９９，または５００のいずれかを有する配列を含むことができる。別の態様においては，ＴＮＦコンストラクトのセンス領域は，配列番号１−８８，４２３−４２６，４３１−４３４，４３９−４４２，４４７−４５０，４９０，４９２，４９４，４９６，または４９８のいずれかを有する配列を含むことができる。センス領域は配列番号４９７の配列を含むことができ，アンチセンス領域は配列番号４８０の配列を含むことができる。センス領域は配列番号４８１の配列を含むことができ，アンチセンス領域は配列番号４８２の配列を含むことができる。センス領域は配列番号４８３の配列を含むことができ，アンチセンス領域は配列番号４８４の配列を含むことができる。センス領域は配列番号４８５の配列を含むことができ，アンチセンス領域は配列番号４８６の配列を含むことができる。センス領域は配列番号４８７の配列を含むことができ，アンチセンス領域は配列番号４８８の配列を含むことができる。センス領域は配列番号４８５の配列を含むことができ，アンチセンス領域は配列番号４８９の配列を含むことができる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２０】
１つの態様においては，ＴＮＦレセプターｓｉＮＡコンストラクトのアンチセンス領域は，配列番号１７７−２９９または４２７−４３０のいずれかを有する配列に相補的な配列を含むことができる。１つの態様においては，アンチセンス領域はまた，配列番号３００−４２２，４５９−４６２，４６７−４７０，または４７５−４７８のいずれかを有する配列を含むことができる。別の態様においては，ＴＮＦレセプターコンストラクトのセンス領域は，配列番号１７７−２９９，４２７−４３０，４５５−４５８，４６３−４６６，または４７１−４７４のいずれかを有する配列を含むことができる。センス領域は配列番号４７９の配列を含むことができ，アンチセンス領域は配列番号４８０の配列を含むことができる。センス領域は配列番号４８１の配列を含むことができ，アンチセンス領域は配列番号４８２の配列を含むことができる。センス領域は配列番号４８３の配列を含むことができ，アンチセンス領域は配列番号４８４の配列を含むことができる。センス領域は配列番号４８５の配列を含むことができ，アンチセンス領域は配列番号４８６の配列を含むことができる。センス領域は配列番号４８７の配列を含むことができ，アンチセンス領域は配列番号４８８の配列を含むことができる。センス領域は配列番号４８５の配列を含むことができ，アンチセンス領域は配列番号４８９の配列を含むことができる。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２１】
１つの態様においては，本発明のｓｉＮＡ分子は配列番号１−５００のいずれかを含む。配列番号１−５００に示される配列は限定ではない。本発明のｓｉＮＡ分子は，任意の連続するＴＮＦおよび／またはＴＮＦレセプター配列（例えば，約１９−約２５個，または約１９，２０，２１，２２，２３，２４または２５個の連続するＴＮＦおよび／またはＴＮＦレセプターヌクレオチド）を含むことができる。
【手続補正５】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図４】
2005517433.tif 000001
【手続補正６】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図５】
2005517433.tif 000002