【手続補正書】
【提出日】平成16年11月1日(2004.11.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分および病原性抗原分子と結合する第２抗原認識部分を有する二重特異性分子を作製する方法であって、N-インテイン第１抗原認識部分とC-インテイン第２抗原認識部分を、タンパク質トランススプライシングが起こる条件下で接触させることを含んでなり、ここで、該N-インテイン第１抗原認識部分は、分断インテインのN-インテインのアミノ末端にコンジュゲートされた第１抗原認識部分を含むものであり、また、該C-インテイン第２抗原認識部分は、該分断インテインのC-インテインのカルボキシ末端にコンジュゲートされた第２抗原認識部分を含むものであり、さらに、該C-インテインのスプライス部位のすぐC-末端側のアミノ酸残基が、システイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基であることを特徴とする、上記方法。
【請求項２】  C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分および病原性抗原分子と結合する第２抗原認識部分を有する二重特異性分子を作製する方法であって、
(a)  第１抗原認識部分を、分断インテインのN-インテインを含む分子のアミノ末端にコンジュゲートさせることにより、N-インテイン第１抗原認識部分を得ること、
(b)  第２抗原認識部分を、該分断インテインのC-インテインを含む分子のカルボキシ末端にコンジュゲートさせることにより、C-インテイン第２抗原認識部分を得ること、ここで、該C-インテインのスプライス部位のすぐC-末端側のアミノ酸残基は、システイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基であること、
(c)  該N-インテイン第１抗原認識部分および該C-インテイン第２抗原認識部分を、タンパク質トランススプライシングが起こる条件下で接触させて、二重特異性分子を作製すること、
を含んでなる、上記方法。
【請求項３】  分断インテインが天然に存在する分断インテインである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】  分断インテインのN-インテインの配列が配列番号１であり、該分断インテインのC-インテインの配列が配列番号２である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】  分断インテインが、天然に存在する非分断インテインをアミノ末端断片とカルボキシ末端断片に分離することにより生成される人工の分断インテインであり、その結果、該アミノ末端断片と該カルボキシ末端断片は再構成されてトランススプライシングを受けることができる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項６】  人工の分断インテインがヒト結核菌（Mycobacterium tuberculosis）RecAインテインから生成される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】  N-インテインがそのアミノ末端に結合された１個以上の天然の近位N-エクステインアミノ酸残基の配列をさらに含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項８】  N-インテインがそのアミノ末端に結合された３〜５個の天然の近位N-エクステインアミノ酸残基の配列を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】  C-インテインがスプライス部位のカルボキシ末端にシステイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基をさらに含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１０】  C-インテインがそのカルボキシ末端に結合された１個以上の天然の近位C-エクステインアミノ酸残基の配列をさらに含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】  C-インテインがそのカルボキシ末端に結合された３〜５個以上の天然の近位C-エクステインアミノ酸残基の配列を含む、請求項10に記載の方法。
【請求項１２】  N-インテインが非天然アミノ酸残基を含み、その結果、該非天然アミノ酸残基が適切な手段によって通常のアミノ酸残基に変換されると、該N-インテインがトランススプライシングに対して機能的となる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１３】  非天然アミノ酸残基がO-(2-ニトロベンジル)セリンであり、前記適切な手段が300〜350nmの範囲の波長をもつ光線を使って照射することを含む、請求項12に記載の方法。
【請求項１４】  第１抗原認識部分が、哺乳動物血液細胞上のC3b様受容体と結合する抗原結合ドメインおよび前記病原性抗原分子の該哺乳動物血液細胞から食細胞への移動を促進するエフェクタードメインを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１５】  第１抗原認識部分がモノクローナル抗体、または免疫グロブリンFcドメインのN-末端に融合されたC3b様受容体と結合するScFvである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１６】  第１抗原認識部分がモノクローナル抗体であり、そしてN-インテイン第１抗原認識部分が、前記モノクローナル抗体の重鎖または軽鎖のカルボキシ末端を該N-インテインのアミノ末端にコンジュゲートさせることにより生成される、請求項15に記載の方法。
【請求項１７】  第２抗原認識部分がポリペプチドを含んでなる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１８】  第２抗原認識部分が核酸を含んでなる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１９】  C-インテイン第２抗原認識部分が、組換えまたはペプチド合成により生産される、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】  第１抗原認識部分と第２抗原認識部分がポリペプチドであり、N-インテイン第１抗原認識部分とC-インテイン第２抗原認識部分が組換えにより１つの細胞において共発現され、そしてN-インテイン第１抗原認識部分とC-インテイン第２抗原認識部分が該細胞において再構成されてトランススプライシングを受け、前記二重特異性分子をもたらす、請求項１または２に記載の方法。
【請求項２１】  N-インテイン第１抗原認識部分とC-インテイン第２抗原認識部分が、別々の発現ベクターまたは１つの発現ベクターにより発現される、請求項20に記載の方法。
【請求項２２】  第１抗原認識部分と第２抗原認識部分がポリペプチドであり、N-インテイン第１抗原認識部分が組換えにより第１細胞で発現され、C-インテイン第２抗原認識部分が組換えにより第２細胞で発現され、そして該N-インテイン第１抗原認識部分と該C-インテイン第２抗原認識部分がin vitroで混合されて、前記二重特異性分子をもたらす、請求項１または２に記載の方法。
【請求項２３】  抗CR1 mAbの重鎖および軽鎖が組換えにより同一の細胞において発現される、請求項15に記載の方法。
【請求項２４】  前記抗CR1 mAbの重鎖および軽鎖が、組換えにより１つのベクターまたは別々のベクターを使って発現される、請求項23に記載の方法。
【請求項２５】  前記抗CR1 mAbの重鎖および軽鎖が組換えにより別々のベクターを使って別々の細胞において発現され、該重鎖と該軽鎖がin vitroで前記mAbへとアセンブルされる、請求項15に記載の方法。
【請求項２６】  C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分および病原性抗原分子と結合する第２抗原認識部分を有する二重特異性分子を作製する方法であって、
(a)  N-インテイン第１抗原認識部分とC-インテインストレプトアビジンを、トランススプライシングが起こる条件下で接触させて、第１抗原認識部分-ストレプトアビジン分子を作製すること、ここで、該N-インテイン第１抗原認識部分は、分断インテインのN-インテインのアミノ末端にコンジュゲートされた第１抗原認識部分を含むものであり、また、該C-インテインストレプトアビジンは、該分断インテインのC-インテインのカルボキシ末端にコンジュゲートされたコアストレプトアビジンを含むものであり、さらに、該C-インテインのスプライス部位のすぐC-末端側のアミノ酸残基が、システイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基であること、
(b)  該第１抗原認識部分-ストレプトアビジン分子およびビオチン化第２抗原認識部分を、ストレプトアビジンとビオチン間の結合を促す条件下で接触させて二重特異性分子を得ること、
を含んでなる、上記方法。
【請求項２７】  C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分および病原性抗原分子と結合する第２抗原認識部分を有する二重特異性分子を作製する方法であって、
(a)  該第１抗原認識部分を分断インテインのN-インテインのアミノ末端にコンジュゲートさせることによりN-インテイン第１抗原認識部分を得ること、
(b)  コアストレプトアビジンを該分断インテインのC-インテインのカルボキシ末端にコンジュゲートさせることによりC-インテインストレプトアビジンを得ること、ここで、該C-インテインのスプライス部位のすぐC-末端側のアミノ酸残基はシステイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基であること、
(c)  該N-インテイン第１抗原認識部分および該C-インテインストレプトアビジンを、タンパク質トランススプライシングが起こる条件下で接触させて、第１抗原認識部分-ストレプトアビジン分子を作製すること、ここで、該第１抗原認識部分は該ストレプトアビジンにコンジュゲートされること、
(d)  ビオチン化第２抗原認識部分を得ること、
(e)  該第１抗原認識部分-ストレプトアビジン分子および該ビオチン化第２抗原認識部分を、ストレプトアビジンとビオチン間の結合を促す条件下で接触させて二重特異性分子を得ること、
を含んでなる、上記方法。
【請求項２８】  C-インテインストレプトアビジンが組換えにより生成される、請求項26または27に記載の方法。
【請求項２９】  ステップ(b)において、C-インテインストレプトアビジンの多量体を解離させるステップをさらに含む、請求項28に記載の方法。
【請求項３０】  ビオチン化第２抗原認識部分がビオチン化モノクローナル抗体である、請求項26または27に記載の方法。
【請求項３１】  ビオチン化モノクローナル抗体が単一の部位でビオチン化される、請求項30に記載の方法。
【請求項３２】  ビオチン化モノクローナル抗体が、抗原認識ドメインの抗原結合能を損なわないような部位でビオチン化される、請求項30に記載の方法。
【請求項３３】  ビオチン化第２抗原認識部分がビオチン化核酸である、請求項26または27に記載の方法。
【請求項３４】  ビオチン化核酸が、核酸サンプルから、
(a)  該核酸を、制限エンドヌクレアーゼの制限消化部位を含むPCRプライマーを使って増幅すること、ここで、該制限エンドヌクレアーゼは該制限消化部位で切断したとき突出末端を生成させるものであること、また、該制限エンドヌクレアーゼは該PCRプライマーの配列内を除いて該核酸を切断しないものであること、
(b)  該PCRプライマーを含むPCR産物を該制限エンドヌクレアーゼで切断して突出末端を生成させること、
(c)  DNAポリメラーゼを用いて該突出末端にビオチン化ヌクレオチドを付加させてビオチン化核酸を生成させること、
により得られる、請求項33に記載の方法。
【請求項３５】  二重特異性分子のポリクローナルライブラリーを作製する方法であって、該ポリクローナルライブラリーの各メンバーは、C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分および病原性抗原分子と結合する第２抗原認識部分を有するものであり、複数のN-インテイン第１抗原認識部分と複数の異なるC-インテイン第２抗原認識部分を、タンパク質トランススプライシングが起こる条件下で接触させて、二重特異性分子のポリクローナルライブラリーを作製することを含んでなり、ここで、該複数のN-インテイン第１抗原認識部分のそれぞれは、分断インテインのN-インテインのアミノ末端にコンジュゲートされた第１抗原認識部分を含むものであり、また、該複数のC-インテイン第２抗原認識部分のそれぞれは、該分断インテインのC-インテインのカルボキシ末端にコンジュゲートされた、異なる結合特異性を有する第２抗原認識部分を含むものであり、さらに、該C-インテインのスプライス部位のすぐC-末端側のアミノ酸残基が、システイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基であることを特徴とする、上記方法。
【請求項３６】  二重特異性分子のポリクローナルライブラリーを作製する方法であって、該ポリクローナルライブラリーの各メンバーは、C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分および病原性抗原分子と結合する第２抗原認識部分を有するものであり、
(a)  複数の第１抗原認識部分のそれぞれを、分断インテインのN-インテインのアミノ末端にコンジュゲートさせることを含む方法によって、複数のN-インテイン第１抗原認識部分を得ること、
(b)  ファージディスプレイライブラリーから、アフィニティースクリーニングを用いて、それぞれ異なる結合特異性を有する抗原認識ポリペプチドを展示する複数のファージを選択すること、
(c)  該複数の抗原認識ポリペプチドをそれぞれコードする複数の核酸を得ること、
(d)  該複数の核酸の各核酸を該分断インテインのC-インテインのアミノ末端に融合させて、複数のC-インテイン抗原認識部分をコードする複数の核酸を得ること、ここで、該C-インテインのスプライス部位のすぐC-末端側のアミノ酸残基が、システイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基であること、
(e)  該複数のC-インテイン抗原認識部分断片をコードする該複数の核酸を宿主において発現させること、
(f)  該複数のC-インテイン抗原認識部分を該宿主から取得すること、
(g)  該複数のC-インテイン抗原認識部分と複数の該N-インテイン第１抗原認識部分を、タンパク質トランススプライシングが起こる条件下で接触させて、二重特異性分子のポリクローナルライブラリーを作製すること、
を含んでなる、上記方法。
【請求項３７】  二重特異性分子のポリクローナルライブラリーを作製する方法であって、該ポリクローナルライブラリーの各メンバーは、C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分および病原性抗原分子と結合する第２抗原認識部分を有するものであり、
(a)  複数の第１抗原認識部分のそれぞれを、分断インテインのN-インテインのアミノ末端にコンジュゲートさせることを含む方法によって、複数のN-インテイン第１抗原認識部分を得ること、
(b)  ファージディスプレイライブラリーの各メンバーにおけるポリペプチド抗体をコードする核酸のアミノ末端を、該分断インテインのC-インテインのカルボキシ末端に融合させて、C-インテイン抗原認識部分のレパートリーを展示するファージディスプレイライブラリーを得ること、ここで、該C-インテインのスプライス部位のすぐC-末端側のアミノ酸残基が、システイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基であること、
(c)  C-インテイン抗原認識部分のレパートリーを展示する該ファージディスプレイライブラリーから、アフィニティースクリーニングを用いて、それぞれ異なる結合特異性を有するC-インテイン抗原認識部分を展示する複数のファージを選択すること、
(d)  該複数のC-インテイン抗原認識部分をそれぞれコードする複数の核酸を得ること、
(e)  該複数のC-インテイン抗原認識部分をコードする該複数の核酸を宿主において発現させること、
(f)  該複数のC-インテイン抗原認識部分を該宿主から取得すること、
(g)  該複数のC-インテイン抗原認識部分と複数の該N-インテイン第１抗原認識部分を、タンパク質トランススプライシングが起こる条件下で接触させて、二重特異性分子のポリクローナルライブラリーを作製すること、
を含んでなる、上記方法。
【請求項３８】  二重特異性分子のポリクローナルライブラリーを作製する方法であって、該ポリクローナルライブラリーの各メンバーは、C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分および病原性抗原分子と結合する第２抗原認識部分を有するものであり、
(a)  N-インテイン第１抗原認識部分の集団とC-インテインストレプトアビジンの集団を、タンパク質トランススプライシングが起こる条件下で接触させて、第１抗原認識部分-ストレプトアビジン分子の集団を生成させること、ここで、該複数のN-インテイン第１抗原認識部分のそれぞれは、分断インテインのN-インテインのアミノ末端にコンジュゲートされた該第１抗原認識部分を含むものであり、また、該複数のC-インテインストレプトアビジンのそれぞれは、該分断インテインのC-インテインのカルボキシ末端にコンジュゲートされたコアストレプトアビジンを含むものであり、さらに、該C-インテインのスプライス部位のすぐC-末端側のアミノ酸残基が、システイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基であること、
(b)  第１抗原認識部分-ストレプトアビジン分子の該集団と、それぞれ異なる抗原認識特異性を有する複数のビオチン化第２抗原認識部分を、ストレプトアビジンとビオチン間の結合を促進する条件下で接触させて、二重特異性分子のポリクローナルライブラリーを作製すること、
を含んでなる、上記方法。
【請求項３９】  二重特異性分子のポリクローナルライブラリーを作製する方法であって、該ポリクローナルライブラリーの各メンバーは、C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分および病原性抗原分子と結合する第２抗原認識部分を有するものであり、
(a)  第１抗原認識部分の集団のそれぞれを分断インテインのN-インテインのアミノ末端にコンジュゲートさせることを含む方法によって、N-インテイン第１抗原認識部分の集団を得ること、
(b)  コアストレプトアビジンの集団のそれぞれを該分断インテインのC-インテインにコンジュゲートさせることを含む方法によって、C-インテインストレプトアビジンの集団を得ること、ここで、該C-インテインのスプライス部位のすぐC-末端側のアミノ酸残基は、システイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基であること、
(c)  N-インテイン第１抗原認識部分の該集団とC-インテインストレプトアビジンの該集団を、タンパク質トランススプライシングが起こる条件下で接触させて、第１抗原認識部分-ストレプトアビジン分子の集団を生成させること、
(d)  ファージディスプレイライブラリーから、アフィニティースクリーニングを用いて、それぞれ異なる結合特異性を有する抗原認識ポリペプチドを展示する複数のファージを選択すること、
(f)  該複数の抗原認識ポリペプチドをそれぞれコードする複数の核酸を得ること、
(g)  該複数の抗原認識ポリペプチドをコードする該複数の核酸を宿主において発現させること、
(h)  該複数の抗原認識ポリペプチドを該宿主から取得すること、
(i)  活性化されたビオチン剤を用いて、該複数の抗原認識ポリペプチドの各メンバーをビオチンとコンジュゲートさせることによって、複数のビオチン化抗原認識ポリペプチドを得ること、
(j)  該複数のビオチン化抗原認識ポリペプチドと第１抗原認識部分-ストレプトアビジン分子の該集団を、ストレプトアビジンとビオチン間の結合を促進する条件下で接触させて、二重特異性分子のポリクローナルライブラリーを作製すること、
を含んでなる、上記方法。
【請求項４０】  前記複数の第２抗原認識部分が１つの抗原の複数のエピトープに対する結合特異性を有する、請求項35〜39のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４１】  前記複数の第２抗原認識部分が１つの抗原の複数の変異体に対する結合特異性を有する、請求項35〜39のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４２】  前記複数の第２抗原認識ポリペプチドをコードする前記複数の核酸が、クローン単離せずに前記C-インテインに融合される、請求項36または39に記載の方法。
【請求項４３】  ステップ(a)が、複数の異なる第１抗原認識部分のそれぞれを前記分断インテインの複数のN-インテインのアミノ末端にコンジュゲートさせることによって、複数の異なるN-インテイン第１抗原認識部分を得ることをさらに含む、請求項36または39に記載の方法。
【請求項４４】  C-インテイン抗原認識部分ファージディスプレイライブラリーを作製する方法であって、該C-インテイン抗原認識部分ファージディスプレイライブラリー中の各ファージは、その表面に、異なるC-インテイン抗原認識部分を展示するものであり、ファージディスプレイライブラリーの複数のメンバーの各々においてポリペプチド抗体をコードする核酸のアミノ末端を、分断インテインのC-インテインのカルボキシ末端に融合させて、C-インテイン抗原認識部分のレパートリーを展示するファージディスプレイライブラリーを得ることを含んでなり、ここで、該C-インテインのスプライス部位のすぐC-末端側のアミノ酸残基は、システイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基であることを特徴とする、上記方法。
【請求項４５】  (a) C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分と、(b) 病原性抗原分子と結合する第２抗原認識部分とを含んでなり、該第１抗原認識部分がモノクローナル抗体を含み、該第２抗原認識部分が該第１抗原認識部分の重鎖または軽鎖のカルボキシ末端にコンジュゲートされている、二重特異性分子。
【請求項４６】  (a) C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分と、(b) リンカーと、(c) 病原性抗原分子と結合する第２抗原認識部分とを含んでなり、該第１抗原認識部分はポリペプチドを含み、該第２抗原認識部分が該リンカーを介して該第１抗原認識部分のカルボキシ末端にコンジュゲートされている、二重特異性分子。
【請求項４７】  前記リンカーが、ペプチドリンカー、ストレプトアビジン-ビオチンリンカーおよびポリ（エチレングリコール）リンカーからなる群より選択されるものである、請求項46に記載の二重特異性分子。
【請求項４８】  第１抗原認識部分が哺乳動物血液細胞上のC3b様受容体と結合する抗原結合ドメインおよび該哺乳動物血液細胞から食細胞への前記病原性抗原分子の移動を促進するエフェクタードメインを含む、請求項46に記載の二重特異性分子。
【請求項４９】  第１抗原認識部分がモノクローナル抗体である、請求項46に記載の二重特異性分子。
【請求項５０】  第２抗原認識部分が第１抗原認識部分の重鎖または軽鎖のカルボキシ末端にコンジュゲートされている、請求項49に記載の二重特異性分子。
【請求項５１】  第２抗原認識部分が２つの抗原認識成分を含み、それぞれが第１抗原認識部分の異なる重鎖のカルボキシ末端にコンジュゲートされているか、またはそれぞれが第１抗原認識部分の異なる軽鎖のカルボキシ末端にコンジュゲートされている、請求項45または49に記載の二重特異性分子。
【請求項５２】  第１抗原認識部分がアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ATCC）からのハイブリドーマ細胞系ATCC HB 8592により産生される抗CR1モノクローナル抗体であり、第２抗原認識部分がFcεRI受容体のαサブユニットを含む、請求項45または49に記載の二重特異性分子。
【請求項５３】  ２つの抗原認識成分が、同一のまたは異なる抗原認識成分である、請求項51に記載の二重特異性分子。
【請求項５４】  ２つの抗原認識成分が、協働して前記病原性抗原をターゲッティングする異なる抗原認識成分である、請求項53に記載の二重特異性分子。
【請求項５５】  ２つの異なる抗原認識成分の一方の作用が該異なる抗原認識成分の他方の結合親和性を高めることである、請求項54に記載の二重特異性分子。
【請求項５６】  第２抗原認識部分がペプチド、ポリペプチドまたは核酸を含む、請求項45または46に記載の二重特異性分子。
【請求項５７】  前記ペプチドまたはポリペプチドが抗体である、請求項56に記載の二重特異性分子。
【請求項５８】  前記ペプチドまたはポリペプチドがモノクローナル抗体である、請求項57に記載の二重特異性分子。
【請求項５９】  前記ペプチドまたはポリペプチドがエピトープを含む、請求項56に記載の二重特異性分子。
【請求項６０】  複数の二重特異性分子を含んでなる二重特異性分子のポリクローナルライブラリーであって、各二重特異性分子は、(a) C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分と、(b) 異なる結合特異性を有する別個の第２抗原認識部分とを含んでなり、ここで、該第１抗原認識部分はモノクローナル抗体を含み、該第２抗原認識部分は該第１抗原認識部分のカルボキシ末端にコンジュゲートされている、上記二重特異性分子のポリクローナルライブラリー。
【請求項６１】  複数の二重特異性分子を含んでなる二重特異性分子のポリクローナルライブラリーであって、各二重特異性分子は、(a) C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分と、(b) リンカーと、(c) 異なる結合特異性を有する別個の第２抗原認識部分とを含んでなり、ここで、該第１抗原認識部分はポリペプチドを含み、該第２抗原認識部分は該リンカーを介して該第１抗原認識部分のカルボキシ末端にコンジュゲートされている、上記二重特異性分子のポリクローナルライブラリー。
【請求項６２】  前記リンカーが、ペプチドリンカー、ストレプトアビジン-ビオチンリンカーおよびポリ（エチレングリコール）リンカーからなる群より選択されるものである、請求項61に記載の二重特異性分子のポリクローナルライブラリー。
【請求項６３】  各二重特異性分子の第１抗原認識部分が、哺乳動物血液細胞上のC3b様受容体と結合する抗原結合ドメインおよび該哺乳動物血液細胞から食細胞への前記病原性抗原分子の移動を促進するエフェクタードメインを含む、請求項61に記載の二重特異性分子のポリクローナルライブラリー。
【請求項６４】  各二重特異性分子の第１抗原認識部分がモノクローナル抗体である、請求項61に記載の二重特異性分子のポリクローナルライブラリー。
【請求項６５】  各二重特異性分子について、第２抗原認識部分が第１抗原認識部分の重鎖または軽鎖のカルボキシ末端にコンジュゲートされている、請求項60または64に記載の二重特異性分子のポリクローナルライブラリー。
【請求項６６】  各二重特異性分子について、第２抗原認識部分が２つの抗原認識成分を含み、それぞれが第１抗原認識部分の異なる重鎖のカルボキシ末端にコンジュゲートされているか、またはそれぞれが第１抗原認識部分の異なる軽鎖のカルボキシ末端にコンジュゲートされている、請求項60または64に記載の二重特異性分子のポリクローナルライブラリー。
【請求項６７】  各二重特異性分子について、２つの抗原認識成分が同一のまたは異なる抗原認識成分である、請求項66に記載の二重特異性分子のポリクローナルライブラリー。
【請求項６８】  各二重特異性分子について、２つの抗原認識成分が異なる抗原認識成分であり、そして各二重特異性分子について、前記異なる抗原認識成分は協働して前記病原性抗原をターゲッティングする、請求項66に記載の二重特異性分子のポリクローナルライブラリー。
【請求項６９】  ２つの異なる抗原認識成分の一方の作用が該異なる抗原認識成分の他方の結合親和性を高めることである、請求項68に記載の二重特異性分子のポリクローナルライブラリー。
【請求項７０】  各二重特異性分子について、第２抗原認識部分がペプチド、ポリペプチドまたは核酸を含む、請求項60または61に記載の二重特異性分子のポリクローナルライブラリー。
【請求項７１】  各二重特異性分子について、前記ペプチドまたはポリペプチドが抗体である、請求項70に記載の二重特異性分子のポリクローナルライブラリー。
【請求項７２】  前記ペプチドまたはポリペプチドがモノクローナル抗体である、請求項70に記載の二重特異性分子のポリクローナルライブラリー。
【請求項７３】  前記ペプチドまたはポリペプチドがエピトープを含む、請求項70に記載の二重特異性分子のポリクローナルライブラリー。
【請求項７４】  複数の精製二重特異性分子を含む組成物であって、該複数の精製二重特異性分子の各二重特異性分子は、C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分および病原性抗原分子と結合する第２抗原認識部分を含んでなり、ここで、第１抗原認識部分がモノクローナル抗体を含み、第２抗原認識部分が第１抗原認識部分の重鎖または軽鎖のカルボキシ末端にコンジュゲートされており、該複数の精製二重特異性分子はそれぞれ、異なる結合特異性をもつ別個の第２抗原認識部分を含むものである、上記組成物。
【請求項７５】  複数の精製二重特異性分子を含む組成物であって、該複数の精製二重特異性分子の各二重特異性分子は、(a) C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分と、(b) 病原性抗原分子と結合する第２抗原認識部分とを含んでなり、ここで、第１抗原認識部分がモノクローナル抗体を含み、第２抗原認識部分が第１抗原認識部分の重鎖または軽鎖のカルボキシ末端にコンジュゲートされており、該複数の精製二重特異性分子はそれぞれ、異なる結合特異性をもつ別個の第２抗原認識部分を含むものである、上記組成物。
【請求項７６】  (a) C3b様受容体と結合する抗原認識部分と、(b) 分断インテインのN-インテインを含むN-インテイン部分と、を含んでなる分子であって、該抗原認識部分が該N-インテイン部分のアミノ末端にコンジュゲートされている、上記分子。
【請求項７７】  前記N-インテイン部分がN-インテインである、請求項76に記載の分子。
【請求項７８】  前記抗原認識部分が、モノクローナル抗体またはFcドメインに融合されたScFvである、請求項76に記載の分子。
【請求項７９】  前記抗原認識部分が、ある生物種由来の可変ドメインまたは相補性決定領域（CDR）と別の生物種由来の定常ドメインとを含むキメラ抗体である、請求項76に記載の分子。
【請求項８０】  前記可変ドメインまたは相補性決定領域（CDR）がマウス由来であり、前記定常ドメインがヒト由来である、請求項79に記載の分子。
【請求項８１】  前記N-インテインが１個以上の天然の近位N-エクステインアミノ酸残基の配列をさらに含む、請求項76に記載の分子。
【請求項８２】  前記N-インテインが３〜５個の天然の近位N-エクステインアミノ酸残基の配列を含む、請求項81に記載の分子。
【請求項８３】  前記N-インテインがそのN-末端にO-(2-ニトロベンジル)セリンを含む、請求項76に記載の分子。
【請求項８４】  前記N-インテインがSspのDnaE遺伝子中にコードされる分断インテインのN-インテインである、請求項76〜83のいずれか１項に記載の分子。
【請求項８５】  前記抗原認識部分がアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ATCC）からのハイブリドーマ細胞系ATCC HB 8592により産生されるモノクローナル抗体である、請求項84に記載の分子。
【請求項８６】  前記N-インテインがMtu RecAインテインから作製される人工分断インテインのN-インテインである、請求項76〜83のいずれか１項に記載の分子。
【請求項８７】  前記抗原認識部分がリンカーを介して前記N-インテインにコンジュゲートされている、請求項76〜83のいずれか１項に記載の分子。
【請求項８８】  (a) 抗原認識部分と、(b) 分断インテインのC-インテインを含むC-インテイン部分と、を含んでなる分子であって、該抗原認識部分が該C-インテイン部分のカルボキシ末端にコンジュゲートされており、該C-インテインのスプライス部位のすぐC-末端側のアミノ酸残基が、システイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基である、上記分子。
【請求項８９】  前記C-インテイン部分がC-インテインである、請求項88に記載の分子。
【請求項９０】  前記抗原認識部分がペプチドまたはポリペプチドを含む、請求項88に記載の分子。
【請求項９１】  前記抗原認識部分が核酸を含む、請求項88に記載の分子。
【請求項９２】  前記C-インテインが、システイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択される前記アミノ酸残基の後に、１個以上の天然の近位C-エクステインアミノ酸残基の配列をさらに含む、請求項88に記載の分子。
【請求項９３】  前記C-インテインが、システイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択される前記アミノ酸残基の後に、３〜５個の天然の近位C-エクステインアミノ酸残基の配列を含む、請求項92に記載の分子。
【請求項９４】  (a) ストレプトアビジンと、(b) スプライス部位のすぐC-末端側にシステイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基を含む分断インテインのC-インテインと、を含んでなる分子であって、該ストレプトアビジンが該C-インテインのカルボキシ末端にコンジュゲートされている、上記分子。
【請求項９５】  前記ストレプトアビジンがリンカーを介して前記C-インテインにコンジュゲートされている、請求項94に記載の分子。
【請求項９６】  前記C-インテインが１個以上の天然の近位C-エクステインアミノ酸残基の配列をさらに含む、請求項94に記載の分子。
【請求項９７】  前記C-インテインが３〜５個の天然の近位C-エクステインアミノ酸残基の配列をさらに含む、請求項96に記載の分子。
【請求項９８】  前記C-インテインがSspのDnaE遺伝子中にコードされる分断インテインのC-インテインである、請求項88〜97のいずれか１項に記載の分子。
【請求項９９】  前記抗原認識部分がFcεRI受容体のαサブユニットを含む、請求項98に記載の分子。
【請求項１００】  前記C-インテインがMtu RecAインテインから作製される人工分断インテインのC-インテインである、請求項88、89、94または95に記載の分子。
【請求項１０１】  前記抗原認識部分がリンカーを介して前記C-インテインにコンジュゲートされている、請求項88〜97のいずれか１項に記載の分子。
【請求項１０２】  複数のファージを含むC-インテイン抗原認識部分ファージディスプレイライブラリーであって、該複数のファージのそれぞれが、その表面上に、異なるC-インテインポリペプチド融合タンパク質を展示しており、各ポリペプチドが異なる結合特異性を有するものである、上記ライブラリー。
【請求項１０３】  分断インテインのN-インテインのアミノ末端に融合されたC3b様受容体と結合する第１抗原認識部分をコードするヌクレオチド配列に機能的に連結された転写調節エレメントを含む発現ベクター。
【請求項１０４】  分断インテインのC-インテインのカルボキシ末端に融合された第２抗原認識部分をコードするヌクレオチド配列に機能的に連結された転写調節エレメントを含む発現ベクターであって、該C-インテインのスプライス部位のすぐC-末端側のアミノ酸残基が、システイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基である、上記発現ベクター。
【請求項１０５】  分断インテインのC-インテインのカルボキシ末端に融合されたコアストレプトアビジンをコードするヌクレオチド配列に機能的に連結された転写調節エレメントを含む発現ベクターであって、該C-インテインのスプライス部位のすぐC-末端側のアミノ酸残基が、システイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基である、上記発現ベクター。
【請求項１０６】  抗CR1モノクローナル抗体の重鎖または軽鎖のカルボキシ末端に融合されたN-インテインをコードする核酸。
【請求項１０７】  前記N-インテインがSspのDnaE遺伝子中にコードされる分断インテインのN-インテインである、請求項106に記載の核酸。
【請求項１０８】  前記N-インテインがMtu RecAインテインから作製される人工分断インテインのN-インテインである、請求項106に記載の核酸。
【請求項１０９】  前記抗CR1モノクローナル抗体がアメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ATCC）からのハイブリドーマ細胞系ATCC HB 8592により産生されるものである、請求項106に記載の核酸。
【請求項１１０】  scFvに融合されるFcドメインのカルボキシ末端に融合されたN-インテインをコードする核酸。
【請求項１１１】  抗原と結合するポリペプチドのアミノ末端に融合されたC-インテインをコードする核酸。
【請求項１１２】  コアストレプトアビジンのアミノ末端に、任意のリンカーを介して、融合されたC-インテインをコードする核酸。
【請求項１１３】  請求項106〜112のいずれか１項に記載のヌクレオチド配列に機能的に連結された転写調節エレメントを含む発現ベクター。
【請求項１１４】  １個以上の容器内に、(a)請求項45〜59の１項以上に記載の１以上の二重特異性分子、(b)請求項60〜73のいずれか１項に記載のポリクローナルライブラリー、(c)請求項76〜101の１項以上に記載の１以上の分子、(d)請求項103〜105および113の１項以上に記載の１以上の発現ベクター、または(e)請求項106〜112の１項以上に記載の１以上の核酸を含む、キット。
【請求項１１５】  請求項103〜105および113のいずれか１項に記載の発現ベクターにより形質転換された細胞。
【請求項１１６】  第１ベクターおよび第２ベクターにより形質転換された細胞であって、第１ベクターが分断インテインのN-インテインのアミノ末端に融合されたC3b様受容体と結合する第１抗原認識部分をコードする第１DNA配列を含み、第２ベクターが該分断インテインのC-インテインのカルボキシ末端に融合された第２抗原認識部分をコードする第２DNA配列を含み、該C-インテインのスプライス部位のすぐC-末端側のアミノ酸残基が、システイン、セリン、およびトレオニンからなる群より選択されるアミノ酸残基である、上記細胞。
【請求項１１７】  (i)請求項76〜87のいずれか１項に記載の分子、および/または(ii)請求項88〜101のいずれか１項に記載の分子を含有する細胞。
【請求項１１８】  病原体または病原性抗原分子の存在に関連した疾病または障害または望ましくない症状を有する哺乳動物を治療するための医薬の製造における、請求項45〜59のいずれか１項に記載の二重特異性分子または請求項60〜73のいずれか１項に記載の二重特異性分子のポリクローナルライブラリーの使用。
【請求項１１９】  病原体または病原性抗原分子の存在に関連した望ましくない症状を有する哺乳動物を治療するための医薬の製造における組成物の使用であって、前記組成物は治療に有効な量の造血細胞／二重特異性分子複合体を含んでなり、該複合体は本質的に１以上の二重特異性分子に結合したC3b様受容体を発現する造血細胞からなり、そして該二重特異性分子は、(a) C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分であって、モノクローナル抗体を含むもの、および、(b) 該病原体または病原性抗原分子のエピトープと結合する第２抗原認識部分であって、第１抗原認識部分の重鎖または軽鎖のカルボキシ末端にコンジュゲートされているもの、を含んでなる、上記使用。
【請求項１２０】  前記病原体または病原性抗原分子が、自己免疫抗原、感染因子および毒素からなる群より選択されるものである、請求項118または119に記載の使用。
【請求項１２１】  前記感染因子が、ウイルス、細菌、真菌および寄生体からなる群より選択されるものである、請求項120に記載の使用。
【請求項１２２】  前記感染因子が、HIV-1ウイルス、炭疽菌（Bacillus anthracis）および原生動物からなる群より選択されるものである、請求項121に記載の使用。
【請求項１２３】  医薬として、請求項45〜59のいずれか１項に記載の二重特異性分子または請求項60〜73のいずれか１項に記載の二重特異性分子のポリクローナルライブラリーを含んでなる組成物。
【請求項１２４】  医薬として使用するための造血細胞／二重特異性分子複合体を含んでなる組成物であって、前記複合体は本質的に１以上の二重特異性分子に結合したC3b様受容体を発現する造血細胞からなり、そして該二重特異性分子は、(a) C3b様受容体と結合する第１抗原認識部分であって、モノクローナル抗体を含むもの、および、(b) 病原体または病原性抗原分子のエピトープと結合する第２抗原認識部分であって、第１抗原認識部分の重鎖または軽鎖のカルボキシ末端にコンジュゲートされているもの、を含んでなる、上記組成物。