(57)【要約】  良好な脂肪吸収抑制作用を示し、しかも副作用がなく安全で簡便に継続して摂取することができ、ひいては、過剰な脂肪吸収に関連する状態、例えば、肥満および／または高脂血症を予防および／または改善することができる組成物を提供する。本発明は、小麦胚芽を６５℃以下の温度およびｐＨ５.０以下の酸性条件下で水を用いて抽出し、得られた抽出液を下記（１）および／または（２）の条件：（１）ｐＨ６.０以上の条件、（２）温度７０℃以上の条件、に付すことにより不溶物として回収される成分を有効成分として含有する、脂肪吸収抑制組成物に関する。【特許請求の範囲】
【請求項１】
小麦胚芽を６５℃以下の温度およびｐＨ５.０以下の酸性条件下で水を用いて抽出し、得られた抽出液を下記（１）および／または（２）の条件：
（１）ｐＨ６.０以上の条件
（２）温度７０℃以上の条件
に付すことにより不溶物として回収される成分を有効成分として含有する、脂肪吸収抑制組成物。
【請求項２】
過剰な脂肪吸収に関連する状態を予防および／または改善するための、請求項１記載の組成物。
【請求項３】
過剰な脂肪吸収に関連する状態が肥満および／または高脂血症である、請求項２記載の組成物。
【請求項４】
リパーゼ阻害作用がないかまたは極めて低いことを特徴とする、請求項１〜３のいずれか１項記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、リパーゼ阻害作用がないかまたは極めて低い脂肪吸収抑制組成物に関する。より詳細には、小麦胚芽の成分を有効成分とし、リパーゼ阻害作用がないためリパーゼ阻害作用に基づく副作用がなく、安全で簡便に摂取ができる脂肪吸収抑制組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、運動不足および食生活の欧米化に伴い、肥満者の人口に占める割合は、増大してきており、肥満は現代社会における生活習慣病の危険因子の1つになっている。糖尿病、高脂血症、高血圧、インスリン抵抗性などの上流には内臓脂肪の蓄積があることが指摘され、肥満に加えて、高脂血、高血圧または高血糖の２項目以上の併発は、メタボリックシンドロームとよばれ、心血管疾患の高リスク群と認識されている。肥満の主たる要因は消費量を超える脂肪の過剰吸収であるが、個人差が大きく、他に遺伝的素因、社会的要因、家庭環境など様々な因子が影響しており、十分な予防・改善方法はないのが現状である。肥満に対する治療薬として、国内では、食欲抑制剤のマジンドールが唯一承認されているが、重篤な肥満にしか適用がなく、耐性や依存性、口渇、便秘、胃部不快感、悪心・嘔吐などの副作用が報告されている。また、外国ではリパーゼ阻害作用により腸管から脂肪吸収を抑制する作用を持つオルリスタットが肥満改善薬として市販されているが、放屁、脂肪便、排便数の増加、軟便、下痢および腹痛等の副作用が報告され、排便が気になって外出もできなくなるなど著しくクオリティオブライフ（ＱＯＬ）を低下させるという問題がある。【０００３】
肥満の予防・改善のためには、適度な運動を継続すると共に、食事制限により摂取カロリーを減らすことが有効な手段ではあるものの、過剰な運動や食事制限はかえって身体にとっては有害であり、また、リバウンドの問題もあって、日常生活においての実行は困難である場合が多い。したがって、食事由来の脂肪が体内に吸収されることを安全かつ健康的に抑制することは、肥満および関連する疾患の予防・治療のために極めて有用であると考えられる。【０００４】
医薬品ではない特定保健用食品として、脂肪吸収を抑制するものも市販されており、膵リパーゼ阻害により脂肪吸収を抑制するグロビン蛋白分解物や、脂肪に比べて消化吸収されにくい性質を持つジアシルグリセロールなどが市販されている。さらに同様の目的で新たな素材の探索も精力的に行われており、例えば、特許文献１には、脱脂米胚芽から抽出されたリパーゼ阻害剤が開示されており、また特許文献２には、小麦胚芽由来の塩基性蛋白質を有効成分とするリパーゼ阻害剤が開示されている。特許文献３には、ウーロン茶の主たるカテキン成分であるエピガロカテキンガレートを酵素で重合させたウーロンテアニンガレートを有効成分とするリパーゼ阻害剤が開示されている。【０００５】
しかしながら、上記のリパーゼ阻害剤は、効果が十分なものとはいえない上、オルリスタットと同様、リパーゼ阻害作用に基づく、放屁、脂肪便、排便数の増加、軟便、下痢および腹痛等の副作用があるため、継続的に摂取することはできない。
【特許文献１】特開平７−２５７７９号公報
【特許文献２】特開平４−４００８３９号公報
【特許文献３】特開２００６−１９０９号公報
【発明の開示】
【０００６】
本発明の課題は、良好な脂肪吸収抑制作用を示し、しかも副作用がなく安全で簡便に継続して摂取することができ、ひいては、過剰な脂肪吸収に関連する状態、例えば、肥満や高脂血症を予防および／または改善することができる組成物を提供することである。
【０００７】
本発明者らは、上記の問題点に鑑み、安全性の高い食経験のある植物抽出物の脂肪吸収抑制作用の検討を行い、リパーゼ阻害作用が極めて低いにもかかわらず、良好な脂肪吸収抑制作用を示す素材を見出し、本発明を完成させた。
【０００８】
すなわち、本発明は、以下の発明を包含する。
【０００９】
（Ｉ）小麦胚芽を６５℃以下の温度およびｐＨ５.０以下の酸性条件下で水を用いて抽出し、得られた抽出液を下記（１）および／または（２）の条件：
（１）ｐＨ６.０以上の条件
（２）温度７０℃以上の条件
に付すことにより不溶物として回収される成分を有効成分として含有する、脂肪吸収抑制組成物。
【００１０】
（II）過剰な脂肪吸収に関連する状態を予防および／または改善するための、（Ｉ）記載の組成物。
【００１１】
（III）過剰な脂肪吸収に関連する状態が肥満および／または高脂血症である、（II）記載の組成物。
【００１２】
（IV）リパーゼ阻害作用がないかまたは極めて低いことを特徴とする、（I)〜（III）のいずれかに記載の組成物。
【００１３】
本発明によれば、良好な脂肪吸収抑制作用を示し、しかもリパーゼ阻害剤のような放屁、脂肪便、排便数の増加、軟便、下痢および腹痛等の副作用がなく、安全な脂肪吸収抑制組成物が提供される。本発明の脂肪吸収抑制組成物は、食経験のある小麦胚芽を原料としているため、風味がよく簡便に継続して摂取することができる。さらに本発明の脂肪吸収抑制組成物は、過剰な脂肪吸収に関連する状態、例えば、肥満や高脂血症を予防および／または改善するためにも使用できる。
【００１４】
本明細書は、本願の優先権の基礎である特願２００７−２２９０６０号の明細書および特許請求の範囲に記載された内容を包含する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
以下、本発明の好適な実施形態について具体的に説明する。【００１６】
本発明において、脂肪吸収抑制とは、摂取された脂肪が、腸管から吸収されて生体内に取り込まれることを抑制するか、または遅延させる作用をさす。また、血液中の脂肪や脂肪酸の量を低下させ、脂肪摂取後の血液中脂肪増加を抑制することも、脂肪吸収抑制に包含される。脂肪吸収抑制を評価する方法としては、定量された脂肪を経口摂取するなどして腸管内に投与した後、血液中や便中の脂肪量を測定する方法、体脂肪量を経時的に測定する方法、摘出腸管標本の粘膜側から漿膜側への脂肪の移行を測定する方法などが挙げられる。【００１７】
本発明において、リパーゼ阻害作用とは、生体において主として膵臓から分泌される膵リパーゼのトリグリセリド分解作用を阻害する作用をさす。食品中の脂肪分、すなわちトリグリセリドはそのままでは生体に吸収されず、リパーゼによってモノアシルグリセロールと脂肪酸に加水分解されて吸収される。そのため、リパーゼ阻害作用を有する成分は、脂肪の体内吸収を抑制するが、吸収されないトリグリセリドが腸管内に多量に残される結果、これを投与された場合様々な副作用が現れてＱＯＬが低下する。被検物質のリパーゼ阻害作用を評価する方法としては、被検物質の存在下、リパーゼを基質のトリグリセリドとともにインキュベートし、分解されて遊離する脂肪酸量を測定する方法、リパーゼを基質のトリグリセリドとインキュベートし、残存するトリグリセリド量を測定する方法などが挙げられる。【００１８】
本発明において、リパーゼ阻害作用がない、または極めて少ないとは、後述する試験例２と同様のリパーゼ阻害作用の測定方法において、リパーゼ阻害率が２０％以下、好ましくは１５％以下であるものをさす。【００１９】
本発明の脂肪吸収抑制組成物は、小麦胚芽を原料とし、特定の方法を用いて精製を行って得られる成分（以下、小麦胚芽精製物と称する）を有効成分とする。ここで特定の方法とは、特開平１０−２１８８９０号公報に記載された方法を例として好適に用いることができる。具体的には、Ａ工程：小麦胚芽を６５℃以下の温度およびｐＨ５.０以下の酸性条件下に水を用いて抽出し、Ｂ工程：得られた抽出液を下記（１）および／または（２）の条件：
（１）ｐＨ６.０以上の条件
（２）温度７０℃以上の条件
に付すことにより不溶物を回収する方法である。【００２０】
以下、Ａ工程およびＢ工程について詳述する。【００２１】
（Ａ工程）
本抽出工程において用いられる水は、ｐＨおよび温度が規定の範囲であれば、本工程の妨げとならない範囲において、ＮａＣｌやＫＣｌなどの塩、イオン、微量金属などを含んでいてもよい。好適な水として、イオン交換水、蒸留水、純水、超純水、水道水および井戸水などを例示できる。ｐＨを５.０以下に調節するために用いられる酸性物質としては、塩酸、硫酸およびリン酸などの無機酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、蓚酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、リンゴ酸、乳酸、酒石酸、クエン酸および安息香酸などの有機酸、ならびに酸性水が挙げられるが、安全性の点からは、食用酸、例えば、クエン酸または乳酸を用いることが好ましい。酸性水とは、水を希硫酸や食塩のような電解質の存在のもとで電気分解すると陽極側に現れる水のことであり、酸化水または陽極水とも言われる。【００２２】
抽出温度は、６５℃以下、好ましくは１５〜６５℃の範囲、さらに好ましくは３０〜６０℃、特に好ましくは４５〜５５℃の範囲である。Ａ工程における抽出は、６５℃以下の温度およびｐＨ５．０以下、好ましくはｐＨ３．０〜５．０の酸性条件下、通常５〜２０時間、好ましくは１０〜１８時間かけて実施する。【００２３】
小麦胚芽は、そのままＡ工程に付すこともできるが、この小麦胚芽の形状には特に制限がなく、粉末状物、破砕物および粒状物のいずれであってもよいが、処理の容易さから粉末状物が好ましい。小麦胚芽は市販品を用いてもよく、例えば、脱脂胚芽を例示することができる。【００２４】
またＡ工程の前処理として、澱粉、蛋白質およびヘミセルロースなどを酵素分解する処理を行ってもよい。澱粉の酵素分解処理としてはアミラーゼ処理を、蛋白質の酵素分解処理としてはプロテアーゼ処理を、そしてヘミセルロースの酵素分解処理にはセルラーゼ処理を例示できるが、これらに限定されない。アミラーゼ処理、プロテアーゼ処理またはセルラーゼ処理等を行う場合は、これらの酵素処理において採用される通常の条件下、すなわちこれら酵素の至適温度および至適ｐＨの条件下で処理を行うことが好ましいが、これに限定されるものではない。【００２５】
Ａ工程において、温度を７０℃以上および／またはｐＨ６.０以上にすると、本発明において有効成分とする目的成分は不溶物となり、沈殿するなどして、抽出効率が低下するので、抽出工程の間の温度およびｐＨ管理は厳密に行う必要がある。ただし、前述の油脂成分の除去、酵素処理、または殺菌などを目的として、Ａ工程の前後で温度を７０℃以上にすることや、ｐＨを６.０以上にすることは構わない。また、Ｂ工程に適用する前に、抽出液中の不溶物や不純物を除去しておくのが好ましい。【００２６】
（Ｂ工程）
Ａ工程で得られた抽出液を、（１）温度７０℃以上および／または（２）ｐＨ６.０以上にすると、本発明における有効成分である目的成分が不溶物となるので、これを液体と分離することで、簡便に本発明の脂肪吸収抑制組成物の有効成分を精製することができる。Ｂ工程において、（１）温度７０℃以上の条件、および（２）ｐＨ６．０以上の条件については、いずれか片方の条件のみに付してもよいし、両方の条件に付してもよい。また、両方の条件に付す場合は、その順番は特に制限されず、また同時に両方の条件を満たすようにしてもよい。温度は、通常７０〜１００℃、好ましくは８０〜９５℃である。ｐＨは、通常６.０〜１２.５、好ましくは６.５〜１０.０、より好ましくは７.０〜９．０である。ｐＨ調整は、塩基性物質、例えば、水酸化ナトリウムおよび水酸化カリウムなどを用いて行うことができる。【００２７】
不溶物となった本発明の組成物を分離して回収する方法としては、公知の方法を適用することができ、例えば、濾過、遠心分離、フィルタープレスなどが挙げられる。また、本発明の脂肪吸収抑制組成物においては、上記不溶物をそのまま乾燥して用いてもよいが、必要に応じて有機溶媒や酸性溶液に溶解して溶液状とした後、賦形剤、例えば、デキストリン、乳糖、デンプンなどとともに、公知の方法を用いて、例えば、凍結乾燥、スプレードライ、スプレークールおよびドラムドライなどを用いて乾燥して用いてもよい。【００２８】
本発明者らは、上記小麦胚芽精製物が脂肪吸収抑制作用を有し、従って、過剰な脂肪吸収に関連する状態を予防および／または改善できることを見出した。すなわち、上記小麦胚芽精製物を有効成分とする本発明の脂肪吸収抑制組成物は、過剰な脂肪吸収に関連する状態を予防および／または改善するための組成物として使用することができる。過剰な脂肪吸収に関連する状態としては、例えば、肥満、高脂血症、糖尿病、高血圧およびメタボリックシンドロームなどが挙げられる。本発明の脂肪吸収抑制組成物は、特に、肥満および／または高脂血症の予防および／または改善に特に好適に使用される。【００２９】
本発明の脂肪吸収抑制組成物は、脂肪吸収およびそれに続く脂肪蓄積によって引き起こされる上記肥満、高脂血症、糖尿病、高血圧およびメタボリックシンドロームなどの状態のうち、リパーゼ活性に起因しない状態、あるいはリパーゼ活性を阻害しても予防および／または改善できない状態、リパーゼ活性を阻害することが好ましくない状態を、予防および／または改善するために特に有効である。また、本発明の脂肪吸収抑制組成物は、リパーゼ阻害作用がないかまたは極めて低いことから、リパーゼ阻害作用に基づく副作用、例えば、放屁、脂肪便、排便数の増加、軟便、下痢および腹痛等を生じない点で有利である。【００３０】
本発明において状態の予防には、その発生を抑えることおよび遅延させることが含まれ、再発に対する予防も含まれる。本発明において状態の改善には、治癒することおよび進行を抑えることが含まれる。【００３１】
本発明の組成物の投与対象は、好ましくは、哺乳動物である。本明細書において哺乳動物は、温血脊椎動物をさし、例えば、ヒトおよびサルなどの霊長類、マウス、ラットおよびウサギなどの齧歯類、イヌおよびネコなどの愛玩動物、ならびにウシ、ウマおよびブタなどの家畜が挙げられる。本発明の組成物は、霊長類、特にヒトへの投与に好適である。【００３２】
上記小麦胚芽精製物を有効成分とする本発明の脂肪吸収抑制組成物は、特に制限されないが、例えば、医薬組成物および食品組成物として調製することができる。【００３３】
本発明の脂肪吸収抑制組成物をヒトに適用する場合、乾燥質量を基準として、上記小麦胚芽精製物に換算して、成人１日当たり０．００１〜５０ｇの範囲で適用される。該小麦胚芽精製物は、小麦胚芽を原料としている安全性の高いものであるため、その摂取量をさらに増やすこともできる。１日当たりの摂取量は、１回で摂取してもよいが、数回に分けて摂取してもよい。【００３４】
本発明の脂肪吸収抑制組成物を医薬組成物として調製する場合、上記小麦胚芽精製物をそのまま単独で医薬組成物としてもよいが、通常、上記小麦胚芽精製物と好ましくは薬学的に許容される担体とを含む製剤として調製する。医薬組成物は、経口により、非経口により、例えば、皮膚に、皮下に、静脈内に、動脈内に、筋肉内に、腹腔内に、および鼻腔内に投与される。本発明の効果を阻害しない限り、添加剤や、他の公知の脂肪吸収抑制剤などを配合してもよい。【００３５】
医薬組成物の剤型としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、ドライシロップ剤、液剤および懸濁剤などの経口剤、ならびに吸入剤および坐剤などの経腸製剤などが挙げられる。これらのうちでは、経口剤が好ましい。【００３６】
このような剤型の医薬組成物には、上述した小麦胚芽精製物に、慣用される賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、界面活性剤、アルコール、水、水溶性高分子、甘味料、矯味剤および酸味料などの添加剤を剤型に応じて配合できる。なお、液剤および懸濁剤などの液体製剤は、服用直前に水または他の適当な媒体に溶解または懸濁する形であってもよく、また錠剤および顆粒剤の場合には周知の方法でその表面をコーティングしてもよい。【００３７】
本発明に係る医薬組成物において、有効成分である小麦胚芽精製物の含有量は、その剤型により異なるが、乾燥質量を基準として、通常は、０.００１〜９９質量％の範囲内、好ましくは０.０１〜８０質量％の範囲内であり、上述した成人１日当たりの摂取量を摂取できるよう、１日当たりの投与量が管理できる形にすることが望ましい。【００３８】
本発明の脂肪吸収抑制組成物を食品組成物として調製する場合、その形態は特に制限されず、健康食品、機能性食品および特定保健用食品などの他、上記小麦胚芽精製物を配合できるすべての食品が含まれる。具体的には、特定保健用食品では、経管経腸栄養剤などの流動食、錠剤、錠菓、チュアブル錠、粉剤、カプセル剤、顆粒剤などの各種製剤形態とすることができ、これらは前述の医薬組成物と同様の方法で製造することができる。本発明に係る食品には飲料も包含され、飲料の具体例としては、栄養補助食品（ドリンク剤など）、茶飲料（緑茶、ウーロン茶および紅茶など）、清涼飲料、ゼリー飲料、スポーツ飲料、乳飲料、炭酸飲料、果汁飲料、乳酸菌飲料、発酵乳飲料、粉末飲料、ココア飲料、コーヒー飲料、精製水などが挙げられる。さらに、本発明に係る食品は、スプレッド類（バター、ジャム、ふりかけ、マーガリンなど）、マヨネーズ、ショートニング、カスタードクリーム、ドレッシング類、パン類、米飯類、麺類、パスタ、味噌汁、豆腐、牛乳、ヨーグルト、スープ、ソース、菓子（例えば、ビスケット、クッキー、チョコレート、キャンディ、ケーキ、アイスクリーム、チューインガム、タブレット）などとして調製してもよい。【００３９】
本発明に係る食品は、有効成分である小麦胚芽精製物のほかに、食品や飼料の製造に用いられる他の食品素材、各種栄養素、各種ビタミン、ミネラル、アミノ酸、各種油脂、食物繊維、種々の添加剤（例えば、呈味成分、甘味料、有機酸などの酸味料、界面活性剤、ｐＨ調整剤、安定剤、酸化防止剤、色素、フレーバー）などを配合して、常法に従って製造することができる。また、通常食されている食品に小麦胚芽精製物を配合することにより、本発明の脂肪吸収抑制組成物としての食品組成物を製造してもよい。【００４０】
本発明の脂肪吸収抑制組成物を食品組成物とする場合、有効成分である小麦胚芽精製物の含有量は、食品の形態により異なるが、乾燥質量を基準として、通常は、０.００１〜８０質量％の範囲内、好ましくは０.０１〜５０質量％の範囲内、より好ましくは２０〜５０質量％の範囲内である。１日当たりの摂取量は、１回で摂取してもよいが、数回に分けて摂取してもよい。上述した、成人１日当たりの摂取量が飲食できるよう、１日当たりの摂取量が管理できる形にするのが好ましい。 
本発明において食品には、ヒト用の食品のみならず、家畜および競走馬などの飼料、ならびにペットフードなども包含される。飼料は、対象が動物であることを除いて、食品とほぼ等しいことから、本明細書における食品に関する記載は、飼料についても同様に当てはめることができる。【００４１】
さらに本発明の脂肪吸収抑制組成物には、他の機能性成分として、上記したもの以外に、例えば、共役リノール酸、タウリン、グルタチオン、カルニチン、クレアチン、コエンザイムＱ、グルクロン酸、グルクロノラクトン、トウガラシエキス、ショウガエキス、カカオエキス、ガラナエキス、ガルシニアエキス、テアニン、γ−アミノ酪酸、カプサイシン、カプシエイト、各種有機酸、フラボノイド類、ポリフェノール類、カテキン類、キサンチン誘導体、フラクトオリゴ糖などの難消化性オリゴ糖、ポリビニルピロリドン等を配合してもよい。これら機能性成分の配合量は、成分の種類と所望すべき摂取量に応じて適宜決められるが、本発明の脂肪吸収抑制組成物中、通常、０.０１〜７０質量％の範囲内であり、好ましくは０.１〜５０質量％の範囲内である。【００４２】
以下、実施例に基づいて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【実施例】
【００４３】
（実施例１）脂肪吸収抑制組成物の製造
脱脂小麦胚芽（日清ファルマ（株）製）２５０ｋｇに、水２０００Ｌおよびクエン酸４ｋｇを加え、ｐＨを５．０に調整し、撹拌して脱脂小麦胚芽を分散させた後、澱粉分解酵素（液化酵素Ｔ：エイチビィアイ（株）製）を１２５０ｇ添加し、加温した。８５℃の温度で１０分間保持した後、５０℃まで冷却した。その後、澱粉分解酵素（液化酵素Ｔ）１２５０ｇ、蛋白分解酵素（プロテアーゼＭ：天野エンザイム（株）製）６３０ｇを添加した。これをｐＨ５．０および５０℃で１４時間反応させた（Ａ工程）。混合物を９０℃で１０分間処理して酵素を失活させた後、６０℃まで冷却した。この冷却工程によって、本発明の組成物は可溶化されるので、遠心分離機により不溶物を除去し、上澄液に活性炭を添加して撹拌後、ケイソウ土を濾過助剤として用いて濾過し、濾液を減圧濃縮した。得られた抽出物としての濃縮液（Ｂｒｉｘ  ３５）を８５℃に調整し、不溶物を形成させた（Ｂ工程）。得られた不溶物を８５℃に維持しながらフィルターを用いて濾集し、減圧下で乾燥した。【００４４】
このようにして３．８５ｋｇの乾燥固体状の小麦胚芽精製物を本発明組成物として得た。この組成物は白色で、ほとんど無味であり無臭であった。【００４５】
（実施例２）脂肪吸収抑制組成物の製造
脱脂小麦胚芽（日清ファルマ（株）製）１５００ｋｇ、イオン交換水１２０００Ｌ、無水クエン酸１３１ｋｇ、澱粉分解酵素（液化酵素Ｔ：エイチビィアイ（株）製）１５ｋｇを釜に入れ、攪拌して温度を８５℃にし、１０分間分散させた。次に５０℃に冷却し、澱粉分解酵素（液化酵素Ｔ：エイチビィアイ（株）製）１５ｋｇ、蛋白分解酵素（プロテアーゼＭ：天野エンザイム（株）製）３．６ｋｇを添加した。これをｐＨ４．０に調節して５０℃で１４時間反応させた（Ａ工程）。反応終了後９０℃で１０分間処理して酵素を失活した後、６０℃に冷却した。ここに活性炭を添加し、６０℃で１時間不溶物を吸着させた。混合液をフィルタープレスで濾過し、濾液を３５℃まで冷却した。得られた抽出液としての濾液にＮａＯＨを加えてｐＨ９．０に調整し、不溶物を形成させた（Ｂ工程）。得られた不溶物を遠心分離機で回収し、真空乾燥して粉末を得た。この粉末を５倍質量の蒸留水に懸濁し、攪拌しながら塩酸を加えてｐＨ３．０に調整し、粉末を溶解させた。微量の不溶物を遠心分離により除去し、凍結乾燥により７１．９ｋｇの乾燥固体状の小麦胚芽精製物を本発明組成物として得た。この組成物はわずかに黄色で、ほとんど無味無臭であった。得られた組成物の成分分析を行ったところ、糖質０．２８質量％、蛋白質０．４７質量％、脂質１１．９質量％であった。【００４６】
（実施例３）脂肪吸収抑制組成物の製造
実施例２の組成物５０ｇをクロロホルム：メタノール＝５：１（体積比）溶液に加え、２時間攪拌後、脱脂綿を用いて濾液を得た。この濾液を乾固し、６．０ｇの無色の油状物を本発明組成物として得た。【００４７】
（実施例４）脂肪吸収抑制組成物の製造
脱脂小麦胚芽（日清ファルマ（株）製）１５００ｋｇ、イオン交換水１２０００Ｌ、無水クエン酸１３１ｋｇ、澱粉分解酵素（液化酵素Ｔ：エイチビィアイ（株）製）１５ｋｇを釜に入れ、攪拌して温度を８５℃にし、１０分間分散させた。次に５０℃に冷却し、澱粉分解酵素（液化酵素Ｔ：エイチビィアイ（株）製）１５ｋｇ、蛋白分解酵素（プロテアーゼＭ：天野エンザイム（株）製）３．６ｋｇを添加した。これをｐＨ４．０に調節して５０℃で１４時間反応させた（Ａ工程）。反応終了後９０℃で１０分間処理して酵素を失活した後、６０℃に冷却した。ここに活性炭を添加し、６０℃で１時間不溶物を吸着させた。混合液をフィルタープレスで濾過し、濾液を３５℃まで冷却した。得られた抽出液としての濾液にＮａＯＨを加えてｐＨ８．０に調整し、不溶物を形成させた（Ｂ工程）。得られた不溶物を遠心分離機で回収し、クエン酸溶液（ｐＨ３．１）に溶解した。濾過して微量の不溶物を除去した後、デキストリンを加えて噴霧乾燥し、２７３ｋｇの乾燥固体状の小麦胚芽精製物を本発明組成物として得た。【００４８】
（実施例５）脂肪吸収抑制組成物の製造
脱脂小麦胚芽（日清製粉(株)製）１２.５ｋｇに水１００Ｌを加え、乳酸でｐＨを４．０に調整し、３０℃で撹拌しながら４時間抽出した（Ａ工程）。遠心分離機で不溶物を除去した。得られた水溶液のｐＨをＮａＯＨで７.５に調整し、不溶物を形成させた（Ｂ工程）。得られた不溶物を遠心分離機で回収し、ペースト状の小麦胚芽精製物を本発明組成物として得た。【００４９】
（試験例１）脂肪吸収抑制活性の測定
ラット（ＳＤ、雄性）にイントラリピッド２０％（テルモ製）の１０ｍＬ／ｋｇ体重を経口投与し、経時的に採血して、脂肪が腸管から吸収されて血液中に移行する量を計測する試験を行った。実施例２、３および４の本発明組成物を１ｇ／ｋｇ体重で強制経口投与し、同時にイントラリピッドを強制経口投与した。投与前および投与後２時間に尾静脈より採血し、トリグリセライド測定キット（和光純薬工業製）を用いて血液中の中性脂肪量を測定した。本発明組成物を投与せず、イントラリピッドのみ投与したものをコントロール群とし、１群１０匹として試験を行った。結果は、イントラリピッド投与前の中性脂肪量、イントラリピッド投与後２時間の中性脂肪量、５時間までのＡＵＣで評価した。その結果を表１に示す。
【表１】
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【００５０】
表１から、本発明組成物が顕著に血液中への中性脂肪の吸収を抑制することが分かる。【００５１】
（試験例２）リパーゼ阻害作用の測定
基質エマルション８０μＬ（下記の緩衝液１００ｍＬにオリーブオイル３．０ｇを加えて超音波処理したもの）に、実施例２または３の本発明組成物の溶液１０μＬ（最終濃度が０.０１、０.１ｍｇ／ｍＬになるようにそれぞれ緩衝液で希釈した）、あるいは実施例４の本発明組成物の溶液１０μＬ（最終濃度１ｍｇ／ｍＬ）を加え、３７℃で１０分間静置した。ここにリパーゼ溶液１０μＬ（リパーゼ（シグマ製）を１．０ｍｇ／ｍＬになるよう緩衝液で希釈した）を添加し、３７℃で３０分間酵素反応させた。反応終了後、銅試薬０．５ｍＬ（１００ｍＬ中、トリエタノールアミン０．４５ｍｏｌ、酢酸０．０５ｍｏｌ、硫酸銅・５水和物３．８質量％、ＮａＣｌ  ２０質量％を含有する水溶液）を添加し、さらに抽出試薬１．５ｍＬ（クロロホルム：ｎ−ヘプタン：メタノール＝４９：４９：１）を添加して３０秒間よくミキシングした。これを遠心分離（３０００ｒｐｍ、１０分間）して上清０．５ｍＬをとり、これに発色液を加えて４８０ｎｍの吸光度を測定した。陽性対照として、小麦由来の塩基性蛋白質でリパーゼ阻害作用が知られている（特開平３−２８４６２７号参照）、ピューロチオニン（シグマ社製）の最終濃度０.１、１ｍｇ／ｍＬを用いた。結果は、本発明組成物、リパーゼ溶液を緩衝液に置換したブランク、および本発明組成物溶液を緩衝液に置換したコントロールの吸光度を用いて、下記式１にしたがって算出した。その結果を表２に示す。【００５２】
緩衝液組成
タウロケノデオキシコール酸  １ｍｍｏｌ／Ｌ
タウロコール酸ナトリウム  ９ｍｍｏｌ／Ｌ
コレステロール  ０．１ｍｍｏｌ／Ｌ
Ｌ−α−ホスファチジルコリン  ０．８ｍｇ／ｍＬ
酢酸カルシウム  １ｍｍｏｌ／Ｌ
トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン  １００ｍｍｏｌ／Ｌ
［式１］
阻害率（％）＝［１−［本発明組成物の吸光度−ブランクの吸光度］／［コントロールの吸光度−ブランクの吸光度］］
【表２】
2009031603.tif 000003
【００５３】
表２の結果から、本発明組成物が、全くリパーゼ阻害活性を示さないことが分かる。従って、本発明における小麦胚芽精製物が、従来のリパーゼ阻害薬とは全く異なる成分であることが分かる。【００５４】
（実施例６）錠剤の製造
実施例１の脂肪吸収抑制組成物８４ｇ、結晶セルロース（旭化成）１０ｇおよびポリビニルピロリドン（ＢＡＳＦ）５ｇを混合し、これにエタノール３０ｍＬを添加して、湿式法により常法にしたがって顆粒を製造した。この顆粒を乾燥した後、ステアリン酸マグネシウム１．２ｇを加えて打錠用顆粒末とし、打錠機を用いて打錠し、１錠が１ｇの錠剤１００個を製造した。【００５５】
（実施例７）顆粒剤の製造
実施例２の脂肪吸収抑制組成物１００ｇ、乳糖（ＤＭＶ）１００ｇおよび結晶セルロース（旭化成）４０ｇを混合し、これにエタノール１３０ｍＬを練合機に添加し、通常の方法により５分間練合した。練合終了後、１０メッシュで篩過し、乾燥機中にて５０℃で乾燥した。乾燥後、整粒し、顆粒剤２４０ｇを得た。【００５６】
（実施例８）パンの製造
小麦粉（強力粉）１６６ｇとドライイースト２ｇを混ぜた。これとは別に、実施例１の脂肪吸収抑制組成物２ｇ、砂糖２５ｇ、食塩３ｇ、脱脂粉乳６ｇを温湯７０ｇに溶かし、鶏卵１個を添加してよく混ぜた。これを上記の小麦粉とドライイーストの混合物に加え、よく手でこねた後、バター約４０ｇを加えてよくこね、２０個のロールパン生地を作った。次いで、これらのパン生地を発酵させた後、表面に溶き卵を塗り、オーブンにて１８０℃で約１５分焼き、ロールパンを作成した。外観、味、食感ともに良好であった。【００５７】
（実施例９）パスタ用ソースの製造
パスタ用のミートソース一人前（１５０ｇ）を鍋に入れ、これに実施例２の脂肪吸収抑制組成物１ｇを加えて加温した。このソースをパウチへ充填した後、窒素置換を行いながらパウチを密封し、１２１℃で１５分間殺菌を行って、パスタ用ミートソースを得た。【００５８】
本明細書中で引用した全ての刊行物、特許および特許出願をそのまま参考として本明細書中にとり入れるものとする。
【国際調査報告】
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