(57)【要約】  非重合体カテキン類中のガレート体率を低減化して精製茶抽出物の呈味を改善する。  本発明の精製茶抽出物の製造方法は、茶抽出物を加水分解処理した後、活性炭に吸着させ、次いで塩基性水溶液又は有機溶媒水溶液を接触させて非重合体カテキン類を溶出させることを特徴とする。【特許請求の範囲】
【請求項１】
茶抽出物を加水分解し、次いで活性炭に吸着させた後に、活性炭に塩基性水溶液又は有機溶媒水溶液を接触させて非重合体カテキン類を溶出させる精製茶抽出物の製造方法。
【請求項２】
加水分解を、タンナーゼ活性を有する酵素、菌体又は培養液で行なう請求項１記載の精製茶抽出物の製造方法。
【請求項３】
活性炭に塩基性水溶液を接触させて非重合体カテキン類を溶出させた後、溶出液をｐＨ７以下に調整する請求項１又は２記載の精製茶抽出物の製造方法。
【請求項４】
茶抽出物を加水分解後、活性炭に吸着させ、活性炭を洗浄し、次いで活性炭に塩基性水溶液又は有機溶媒水溶液を接触させて非重合体カテキン類を溶出させる請求項１〜３のいずれか１項記載の精製茶抽出物の製造方法。
【請求項５】
茶抽出物の加水分解による非重合体カテキン類中のガレート体率の減少量が加水分解前の茶抽出物に対して５質量％以上である請求項１〜４のいずれか１項記載の精製茶抽出物の製造方法。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項記載の製造方法で製造された精製茶抽出物であって、固形分中の非重合体カテキン類が２５〜９５質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率が０〜７０質量％、没食子酸と非重合体カテキン類との比率が０〜０．１、カフェインと非重合体カテキン類の比率が０〜０．１４である精製茶抽出物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、非重合体カテキン類中のガレート体率を低減した精製茶抽出物の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
カテキンの生理効果としてはαアミラーゼ活性阻害作用などが報告されている（特許文献１）。このような生理効果を発現させるためには、より簡便に大量のカテキンを摂取することが必要であることから、飲料にカテキンを高濃度に配合する方法が望まれていた。【０００３】
この方法の一つとして、緑茶抽出物の濃縮物（特許文献２）などの茶抽出物を利用して、カテキンを飲料に溶解状態で添加する方法が用いられている。しかしながら、この方法によりカテキンを高濃度に配合する対象となる飲料の種類によっては、例えば紅茶抽出液や炭酸飲料にカテキンを添加する場合など、カフェイン及び緑茶由来の苦渋みの残存が飲料の商品価値を大きく損ねることがわかっている。【０００４】
紅茶等の発酵茶抽出液に対してタンナーゼ処理を行い、低温冷却時の懸濁、即ちテイークリーム形成を抑制できることは古くから知られていた。また、特許文献３に見られる、緑茶抽出液をタンナーゼ処理する方法によれば、苦味の原因となる非重合体カテキン類のガレート体を低減することができる。さらに、茶抽出物から、カフェイン等の夾雑物を取り除く方法としては、吸着法（特許文献４〜６）、抽出法（特許文献７）等が知られている。【０００５】
【特許文献１】特開平３−１３３９２８号公報
【特許文献２】特開昭５９−２１９３８４号公報
【特許文献３】特開２００４−３２１１０５号公報
【特許文献４】特開２００４−２２２７１９号公報
【特許文献５】特開平８―１０９１７８号公報
【特許文献６】特開２００２−３３５９１１号公報
【特許文献７】特開平１−２８９４４７号公報
【発明の開示】
【０００６】
本発明は、茶抽出物を加水分解し、次いで活性炭に吸着させた後に、活性炭に塩基性水溶液又は有機溶媒水溶液を接触させて非重合体カテキン類を溶出させる精製茶抽出物の製造方法を提供するものである。
【発明の実施の形態】
【０００７】
上記の如く、茶抽出物をタンナーゼ処理すれば、苦味の原因となる非重合体カテキン類のガレート体を低減することが可能であるが、酸味・エグ味という新たな問題が生じた。本発明者らは、その要因がタンナーゼ処理により茶抽出物が非重合体カテキン類と没食子酸の混合物になることにあるとの知見を得た。
【０００８】
本発明は、非重合体カテキン類の回収率が高く、非重合体カテキン類中のガレート体率、カフェイン及び没食子酸を低減した精製茶抽出物の製造法を提供することにある。
【０００９】
本発明者らは、茶抽出物中の非重合体カテキン類の精製処理を検討した結果、加水分解処理して非重合体カテキン類のガレート体を遊離型非重合体カテキン類と没食子酸に分解し、非重合体カテキン類中のガレート体率を低減させる第一の工程、更に、加水分解処理を行った後の茶抽出物を活性炭に通液し、一旦、活性炭に吸着させ、次いで、吸着した非重合体カテキン類を塩基性水溶液又は有機溶媒水溶液により溶出させる第二の工程を行うことにより、非重合体カテキン類中のガレート体率を低減させると共に、カフェイン含量及び、副生する没食子酸を低減させて呈味の改善された茶抽出物が得られることを見出した。
【００１０】
本発明により、処理前と比較して、非重合体カテキン類中のガレート体率が低減され、更にカフェイン含量、及び加水分解処理の際に副生する没食子酸量が大幅に低減されるため、呈味の改善された精製茶抽出物を得ることができる。
【００１１】
本発明で非重合体カテキン類とは、カテキン、ガロカテキン、カテキンガレート、ガロカテキンガレートなどの非エピ体カテキン、及びエピカテキン、エピガロカテキン、エピカテキンガレート、エピガロカテキンガレートなどのエピ体カテキンをあわせての総称である。
【００１２】
本発明で非重合体カテキン類のガレート体とは、カテキンガレート、ガロカテキンガレート、エピカテキンガレート、エピガロカテキンガレートなどをあわせての総称である。
【００１３】
本発明で用いる茶抽出物としては、緑茶、紅茶、烏龍茶等の茶葉から得られた抽出液が挙げられる。その他のカフェイン含有植物由来、例えばコーヒー等のカフェイン含有抽出物と茶抽出液の混合物等も用いることができる。使用する茶葉としては、より具体的には、Camellia属、例えばC.sinensis、C.assamica、やぶきた種又はそれらの雑種等から得られる茶葉から製茶された茶葉が挙げられる。製茶された茶葉には、煎茶、番茶、玉露、てん茶、釜炒り茶等の緑茶類がある。また、超臨界状態の二酸化炭素接触処理を施した茶葉を用いてもよい。本発明で用いる茶抽出物としては、非重合体カテキン類の含有量の点から緑茶抽出物が好ましい。
【００１４】
茶葉からの抽出は、抽出溶媒として水、水溶性有機溶媒又はそれらの混合物を使用し、攪拌抽出等により行われる。抽出の際、水、水溶性有機溶媒又はそれらの混合物にあらかじめアスコルビン酸ナトリウム等の有機酸塩類又は有機酸を添加してもよい。また、煮沸脱気や窒素ガス等の不活性ガスを通気して溶存酸素を除去しつつ、いわゆる非酸化的雰囲気下で抽出する方法を併用してもよい。このようにして得られた抽出液は、そのままでも、乾燥、濃縮しても本発明に使用できる。茶抽出物の形態としては、例えば、液体、スラリー、半固体、固体の状態が挙げられる。
【００１５】
本発明に使用する茶抽出物には、茶葉から抽出した抽出液を使用する代わりに、茶抽出物の濃縮物を水若しくは有機溶媒に溶解しても、又は水若しくは有機溶媒に希釈して用いてもよい。さらに、茶葉からの抽出液と茶抽出物の濃縮物とを併用してもよい。
ここで、茶抽出物の濃縮物とは、茶葉から熱水又は水溶性有機溶媒により抽出された抽出物を濃縮したものであり、例えば、特開昭５９−２１９３８４号公報、特開平４−２０５８９号公報、特開平５−２６０９０７号公報、特開平５−３０６２７９号公報等に記載されている方法により調製したものをいう。具体的には、緑茶抽出物として、市販の東京フードテクノ社製「ポリフェノン」、伊藤園社製「テアフラン」、太陽化学社製「サンフェノン」等の粗カテキン製剤を固体の緑茶抽出物として用いることもできる。
【００１６】
本発明においては、まず茶抽出物を加水分解処理する。当該加水分解処理により、非重合体カテキン類中のガレート体率が低下する。加水分解による非重合体カテキン類中のガレート体率の減少量は、呈味改善の点から加水分解前のガレート体率と比べて、５質量％以上、更に７質量％以上、特に１０質量％以上が好ましい。加水分解の方法は、酵素類による処理、酸処理、アルカリ処理等により行なわれる。酵素類としては、タンナーゼ活性を有する酵素、菌体又は培養液などが好ましい。また、酸としては、塩酸、硫酸、リン酸などが好ましく、アルカリとしては苛性ソーダなどが好ましい。中でも、反応制御の点から酵素類での加水分解が好ましい。ここでタンナーゼ活性を有するとは、タンニンを分解する活性を有することを意味し、本活性を有すれば任意の酵素、菌体、培養液を使用できる。
【００１７】
具体的には、タンナーゼ活性を有する酵素として市販品では、ペクチナーゼＰＬアマノ（天野エンザイム社製）、ヘミセルラーゼアマノ９０（天野エンザイム社製）、タンナーゼＫＴＦＨ（キッコーマン社製）等が利用できる。中でも、タンナーゼが好ましい。かかるタンナーゼとしては、例えば、アスペルギルス属、ペニシリウム属、リゾプス属のタンナーゼ生産菌を培養して得られるタンナーゼが挙げられる。このうちアスペルギルス  オリーゼ由来のものが好ましい。
タンナーゼ活性を有する菌体とは、タンナーゼ活性を有する酵素を産生することができる菌体であり、麹菌等が挙げられる。かかる麹菌としては、例えば、アスペルギルス属、ペニシリウム属等が挙げられ、このうちアスペルギルス  オリーゼが好ましい。
タンナーゼ活性を有する培養液とは、アスペルギルス属、ペニシリウム属、リゾプス属のタンナーゼ生産菌を培養して得られる培養液である。このような培養液としては、好ましくは、タンニン酸を唯一の炭素源として培養して得られる培養液を挙げることができ、精製品であっても未精製品であっても用いることができる。
風味劣化の抑制及び生産性の点から、加水分解は極力短時間で終了するのが好ましく、それには酵素又は培養液を利用することが好ましい。
本発明で使用するタンナーゼ活性を有する酵素又は培養液は、５００〜１００，０００Ｕ／ｇの酵素活性を有することが好ましい。５００Ｕ／ｇ未満であると工業的に限られた時間内で処理するために多量の酵素が必要となり、１００，０００Ｕ／ｇを超えると酵素反応速度が速すぎる為、反応系を制御することが困難となる。ここで1Ｕｎｉｔは３０℃の水中においてタンニン酸に含まれるエステル結合を１マイクロモル加水分解する酵素量を示す。
【００１８】
タンナーゼ活性を有する酵素及び培養液による処理を行うときの非重合体カテキン類濃度は、好ましくは０．１〜２２質量％、更に好ましくは０．１〜１５質量％、特に好ましくは０．５〜１０質量％、殊更好ましくは０．５〜３質量％である。０．１質量％未満では加水分解後の茶抽出物の活性炭への吸着量が低下し、２２質量％を超えると、加水分解処理に長時間を要し、生産性及び茶抽出物の味の点から好ましくない。
呈味を改善し得る非重合体カテキン類中のガレート体率とするためには、茶抽出物中の非重合体カテキン類に対して酵素又は培養液を０．０１〜１０質量％の範囲になるように添加することが好ましい。酵素失活の工程を含め、上記加水分解処理を工業的に最適な酵素反応時間で終了させるためには、酵素又は培養液濃度が０．０１〜７質量％、更に０．０３〜５質量％であることが好ましい。
緑茶抽出物中の非重合体カテキン類に対してタンナーゼ活性を有する酵素又は培養液を、好ましくは１〜３００Ｕｎｉｔ／ｇ−非重合体カテキン、更に好ましくは３〜２００Ｕｎｉｔ／ｇ−非重合体カテキン、特に好ましくは５〜１５０Ｕｎｉｔ／ｇ−非重合体カテキンになるように添加する。
酵素又は培養液による処理の温度は、最適な酵素活性が得られる０〜７０℃が好ましく、更に好ましくは０〜６０℃、特に好ましくは５〜５０℃である。
【００１９】
酵素又は培養液での加水分解反応を終了させるには、酵素を失活させる必要がある。酵素失活は、加熱することにより達成される。酵素失活温度は、７０〜１００℃で行う。
酵素の失活方法は、バッチ式若しくはプレート型熱交換機のような連続式で加熱を行うことで停止することができる。又、タンナーゼの失活終了後、遠心分離などの操作により茶抽出物を清澄化することができる。
【００２０】
菌体として例えば麹菌を利用する場合は、非重合体カテキンの濃度が、好ましくは０．１〜２２質量％、更に好ましくは０．１〜１５質量％、特に好ましくは０．５〜１５質量％である茶抽出物に麹菌を入れ加水分解処理を行なう。麹菌は、その種類等により大幅に異なるが、茶抽出物中の非重合体カテキン類に対して通常０．５〜１０質量％の範囲内、特に1．０〜５質量％の範囲内で添加される。温度条件としては、４５〜７０℃、更に５０〜６０℃が好ましい。醗酵時間は、通常１２時間〜２０日間、更に１日〜１０日間であることが好ましい。麹菌の酵素活性の失活は、酵素又は培養液での加水分解反応を終了させる時と同様である。
【００２１】
次に、加水分解後の茶抽出物を活性炭に吸着させる。吸着後、塩基性水溶液又は有機溶媒水溶液を接触させる前に、活性炭を洗浄し、活性炭中の没食子酸や不純物を除去するのが好ましい。次いで塩基性水溶液又は有機溶媒水溶液を接触させて非重合体カテキン類を溶出させる。当該活性炭処理により、カフェイン及び没食子酸が低減できる。本発明においては、加水分解工程と活性炭処理工程との間に、他の吸着剤、例えば合成吸着剤による吸脱着処理を介在させる必要がない。
【００２２】
用いる活性炭としては、一般に工業レベルで使用されているものであれば特に制限されず、例えば、ＺＮ−５０、Ｙ−１０Ｓ、ＧＳ-１、ＧＳ-Ｂ（味の素ファインテクノ製）、クラレコールＧＬＣ、クラレコールＰＫ−Ｄ、クラレコールＰＷ−Ｄ、クラレコールＧＷ、クラレコールＧＡ、クラレコールＧＡ-Ｄ、クラレコールＲＰ−１５（クラレケミカル社製）、白鷺ＡＷ５０、白鷺Ａ、白鷺Ｐ、白鷺ＫＬ、白鷺Ｍ、白鷺Ｃ、カルボラフィン、ＷＨ２Ｃ（日本エンバイロケミカルズ製）、ＧＭ１３０Ａ、ＣＷ１３０Ａ、ＣＷ１３０ＡＲ、ＣＷ３５０ＡＲ、ＧＬ１３０Ａ、ＳＧ、ＳＧＡ、ＳＧＰ（フタムラ化学製）、ヤシコール、ＭＡＳ印、梅蜂印、梅蜂Ｆ印（太平化学産業製）、ＣＰＧ、ＣＡＬ、Ｓ８０Ａ（三菱化学カルゴン製）等の市販品を用いることができる。
非重合体カテキン類を効率よく吸着させる点から、活性炭としては以下のものが好ましい。平均細孔径は０．５〜１０ｎｍ（ナノメーター）、さらに、１．０〜９．０ｎｍ（ナノメーター）、特に２．０〜８．０ｎｍ（ナノメーター）のものが好ましい。細孔容積は０．０１〜２．５ｍＬ／ｇ、さらに０．１〜２．０ｍＬ／ｇ、特に０．５〜１．７ｍＬ／ｇのものが好ましい。また、比表面積は８００〜２０００ｍ2／ｇ、さらに９００〜１６００ｍ2／ｇ、特に１０００〜１５００ｍ2／ｇの範囲のものが好ましい。なお、これらの物性値は窒素吸着法に基づく値である。
【００２３】
加水分解処理後の茶抽出物を活性炭に吸着させる手段としては、加水分解処理後の茶抽出物に活性炭を添加、撹拌し吸着後、ろ過操作により活性炭を回収するバッチ方法、又は活性炭を充填したカラムを用いて連続的に吸着処理を行なうカラム方法が採用されるが、生産性の点からカラムによる連続処理方法が好ましい。
【００２４】
加水分解処理後の茶抽出物を活性炭に吸着させる手段としては、活性炭が充填されたカラムに当該茶抽出物を通液するのが好ましい。茶抽出物を活性炭の充填したカラムに通液する条件としては、ＳＶ（空間速度）＝０．５〜１０［ｈ-1］の通液速度で、活性炭に対する通液倍数として０．５〜２０［ｖ／ｖ］で通液するのが好ましい。１０［ｈ-1］を超える通液速度や２０［ｖ／ｖ］を超える通液量であると非重合体カテキン類の吸着が不充分又は不安定となる場合がある。
更に、加水分解処理後の茶抽出物を活性炭に吸着させた後に洗浄する場合、洗浄に使用する水溶液としては、カテキンの回収率の点からｐＨ（２５℃、以下、同様である）７以下が好ましく、水溶性有機溶媒との混合系も使用することができる。水溶性有機溶媒としては、アセトン、メタノール、エタノールなどが挙げられ、食品への使用の観点から、エタノールが好ましい。含有する有機溶媒の濃度は、０〜５質量％未満、好ましくは０〜２質量％、より好ましくは０〜１質量％が非重合体カテキン類の回収率の点から好ましい。
ＳＶ（空間速度）＝０．５〜１０[ｈ-1]の通液速度で、活性炭に対する通液倍数として１〜１５[ｖ／ｖ]で、活性炭に付着した没食子酸や不純物を除去するのが好ましい。更にＳＶ＝０．５〜５[ｈ-1]の通液速度で、通液倍数として１〜７[ｖ／ｖ]で洗浄することが没食子酸や不純物の除去及び非重合体カテキン類の回収率の点から好ましい。
【００２５】
非重合体カテキン類の溶出に用いる塩基性水溶液としては、アルカリ金属塩、アルカリ土類のアルカリ水溶液が好ましく、特にナトリウム系のアルカリ性水溶液、例えば水酸化ナトリウム水溶液、炭酸ナトリウム水溶液等を好適に用いることができる。また、アルカリ性水溶液のｐＨは７〜１４の範囲が好ましい。非重合体カテキン類の回収率の点から、ｐＨは９〜１３．８、特に１０〜１３．５が好ましい。ｐＨ７〜１４のナトリウム系水溶液としては、４質量％以下の水酸化ナトリウム水溶液、１Ｎ−炭酸ナトリウム水溶液等が挙げられる。塩基性水溶液には、水溶性有機溶媒が含まれていてもよい。有機溶媒の濃度としては、カフェインと非重合体カテキン類の分離性の点から０〜９０質量％の範囲が好ましく、０〜５０質量％がより好ましく、０〜２０質量％が更に好ましい。
塩基性水溶液をカラムに通液する条件としては、ＳＶ（空間速度）＝２〜１０［ｈ-1］の通液速度で、合成吸着剤に対する通液倍数として１〜３０［ｖ／ｖ］で、非重合体カテキン類を溶出することが好ましい。更にＳＶ＝３〜７［ｈ-1］の通液速度で、通液倍数として３〜１５［ｖ／ｖ］で溶出することが生産性及び非重合体カテキン類の回収率の点から好ましい。
【００２６】
本発明で使用される活性炭は精製処理後に所定の方法を用いることにより再使用できる。具体的には、エタノールのような有機溶媒を通液し活性炭に吸着したカフェイン等の不要分を脱着させるか、又は水酸化ナトリウムのような高濃度アルカリ水溶液を通液し洗浄して活性炭に残存する水溶性成分をすべて脱着させる方法が挙げられる。更に水蒸気による洗浄を組み合わせても良い。
【００２７】
溶出工程においては、溶出に用いる塩基性水溶液として互いにｐＨが異なる２種以上の塩基性水溶液を用い、これら塩基性水溶液をｐＨが低い順に活性炭に接触させることができる。それぞれのｐＨ区分で異なる非重合体カテキン類や他の成分を脱着することができる。
【００２８】
非重合体カテキン類の溶出液は、塩基性水溶液で溶出したため塩基性であり、非重合カテキン類の安定性の観点から、溶出液のｐＨを７以下に調整することが好ましい。具体的には酸による中和、電気透析によるアルカリ金属イオンの除去、又はイオン交換樹脂によるアルカリ金属イオンの除去が利用できる。中でも、プロセスの簡便性からイオン交換樹脂によるｐＨ調整が好ましい。イオン交換樹脂としては特にＨ型のカチオン交換樹脂を用いるのが好ましい。カチオン交換樹脂としては、具体的には、アンバーライト２００ＣＴ、ＩＲ１２０Ｂ、ＩＲ１２４、ＩＲ１１８、ダイヤイオンＳＫ１Ｂ、ＳＫ１ＢＨ、ＳＫ１０２、ＰＫ２０８、ＰＫ２１２等を用いることができる。
【００２９】
次に有機溶媒水溶液で非重合体カテキン類を溶出する場合について説明する。
非重合体カテキン類の溶出に用いる有機溶媒水溶液としては、アセトン、メタノール、エタノールなどの水溶液が挙げられる。中でも、食品への使用の観点から、エタノールが好ましい。含有する有機溶媒の濃度は、５〜９０質量％、好ましくは８〜７０質量％、より好ましくは１０〜５０質量％であることがカフェイン及び色素成分との分離の点から好ましい。
ＳＶ（空間速度）＝０．１〜１０[ｈ-1]の通液速度で、活性炭に対する通液倍数として１〜１５[ｖ／ｖ]で非重合体カテキン類を溶出するのが好ましい。更にＳＶ＝０．５〜５[ｈ-1]の通液速度で、通液倍数として２〜１０[ｖ／ｖ]で溶出することがカフェイン及び色素成分との分離の点、非重合体カテキン類の回収率の点から好ましい。
【００３０】
更に非重合体カテキン類の溶出液は、必要に応じて濃縮して後の工程に付すことができる。
【００３１】
得られた非重合体カテキン類の溶出液が懸濁する場合は、除濁することが好ましい。除濁の具体的な操作としては、ろ過及び／又は遠心分離処理により固形分と水溶性部分とを固液分離することが挙げられる。
【００３２】
本発明によって得られる精製茶抽出物は、その固形分中に、非重合体カテキン類を２５〜９５質量％含有するが、４０〜９５質量％、更に５０〜９０質量％、特に５５〜８０質量％含有するのが好ましい。
【００３３】
また、本発明により得られる精製茶抽出物中のカテキンガレート、エピカテキンガレート、ガロカテキンガレート及びエピガロカテキンガレートからなるガレート体の全非重合体カテキン類中での割合は、０〜７０質量％、更に０〜５０質量％であるのが好ましく、特に０〜４０質量％であるのが、非重合体カテキン類の苦味低減の点で好ましい。
【００３４】
本発明で得られる精製茶抽出物中のカフェイン濃度は、非重合体カテキン類に対して、カフェイン／非重合体カテキン類（質量比）＝０〜０．１４、更に０〜０．１、特に０〜０．０５、殊更に０〜０．０３５であるのが呈味改善の点で好ましい。
【００３５】
また、本発明で得られる精製茶抽出物中の没食子酸濃度は、苦味、酸味等の呈味の点から、非重合体カテキン類に対して、没食子酸／非重合体カテキン類（質量比）＝０〜０．１、更に０〜０．０８、特に０〜０．０６が好ましい。
【００３６】
本発明で得られる精製茶抽出物としては、固形分中の非重合体カテキン類が２５〜９５質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率が０〜７０質量％、好ましくは、０〜５０質量％であり、没食子酸／非重合体カテキン類（質量比）が０〜０．１であり、カフェイン／非重合体カテキン類（質量比）が０〜０．１４であるものが、呈味改善の点で好ましい。
【００３７】
飲料の色調安定性向上のため、非重合体カテキン類の溶出液を脱色することが好ましい。具体的な脱色操作としては、膜分離するか、または、茶抽出物を有機溶媒水溶液に分散または溶解し、活性白土及び／又は酸性白土に接触させて脱色する方法が挙げられる。
【００３８】
本発明で得られた精製茶抽出物はそのままで使用できる。また、減圧濃縮、薄膜濃縮などの方法により溶媒を除去してもよい。また茶抽出物の製品形態として粉体が望ましい場合は、噴霧乾燥や凍結乾燥等の方法により粉体化できる。
【００３９】
本発明で得られた精製茶抽出物は容器詰飲料に配合できる。使用される容器は、一般の飲料と同様にポリエチレンテレフタレートを主成分とする成形容器（いわゆるＰＥＴボトル）、金属缶、金属箔やプラスチックフィルムと複合された紙容器、瓶などの通常の包装形態が挙げられる。ここでいう容器詰飲料とは希釈せずに飲用できるものをいう。
【００４０】
また上記の容器詰飲料は、例えば、金属缶のように容器に充填後、加熱殺菌できる場合にあっては食品衛生法に定められた殺菌条件で製造される。ＰＥＴボトル、紙容器のようにレトルト殺菌できないものについては、あらかじめ上記と同等の殺菌条件、例えばプレート式熱交換器などで高温短時間殺菌後、一定の温度迄冷却して容器に充填する等の方法が採用される。また無菌下で、充填された容器に別の成分を配合して充填してもよい。
【実施例】
【００４１】
（カテキン、カフェイン及び没食子酸の測定法）
試料溶液をフィルター（０．４５μｍ）で濾過し、島津製作所製、高速液体クロマトグラフ（型式ＳＣＬ−１０ＡＶＰ）を用い、オクタデシル基導入液体クロマトグラフ用パックドカラムＬ−カラムＴＭ  ＯＤＳ（４．６ｍｍφ×２５０ｍｍ：財団法人  化学物質評価研究機構製）を装着し、カラム温度３５℃でグラジエント法で行った。カテキン類の標準品としては、三井農林製のものを使用し、検量線法で定量した。移動相Ａ液は酢酸を０．１ｍｏｌ／Ｌ含有する蒸留水溶液、Ｂ液は酢酸を０．１ｍｏｌ／Ｌ含有するアセトニトリル溶液とし、試料注入量は２０μＬ、ＵＶ検出器波長は２８０ｎｍの条件で行った。【００４２】
（殺菌後の風味評価）
各実施例で得られた茶抽出物を非重合体カテキン類の含有率が０．１７５％［ｗ／ｖ］となるように脱イオン水で希釈し、その４０ｍＬを５０ｍＬの耐圧製ガラス容器に入れた。そこにアスコルビン酸Ｎａを０．１質量％添加し、５質量％重炭酸Ｎａ水溶液でｐＨを６．４に調整し、窒素置換を行い、オートクレーブで１２１℃、１０分間加熱滅菌した。その後、評価パネラー５名によって緑茶由来の苦味、酸味、雑味が感じられないか確認を行った。【００４３】
（硫酸キニーネ法（等価濃度試験法）による苦味評価）
硫酸キニーネ２水和物を表１に記載の苦味強度に対応した濃度に調整した。評価サンプルを試飲した後、標準苦味溶液のどのサンプルと苦味の強さが等しいか判断した。評価パネラー５名によって苦味強度の確認を行った（参考文献：新版官能検査ハンドブック  日科技連官能検査委員会p448-449、Perception & Psychophysics,5,1696,347-351）。【００４４】
【表１】
2009031306.tif 000002
【００４５】
（色相の測定法）
ＨＩＴＡＣＨＩの分光光度計（型式Ｕ−２００１型）を用い、ガラスセルにサンプル中の非重合体カテキン類の濃度が１７５ｍｇ／１００ｍＬの水溶液になるようにイオン交換水で希釈して測定した。分析時の分光光度計の測定波長は４５０ｎｍに設定した。【００４６】
実施例１
緑茶葉（ケニア産、大葉種）３ｋｇに８８℃の熱水４５ｋｇを添加し、６０分間攪拌バッチ抽出したのち、１００メッシュ金網で粗ろ過後、抽出液中の微粉を除去する為に遠心分離操作を行い、「緑茶抽出液１」３７．２ｋｇ（ｐＨ５．４）を得た（緑茶抽出液中の非重合体カテキン類濃度＝０．８９質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率＝５２．３質量％、カフェイン含有量＝０．１７質量％）。
この緑茶抽出液を温度１５℃に保持し、タンナーゼ（キッコーマン社製、タンナーゼＫＴＦＨ、５００Ｕ／ｇ）を緑茶抽出液に対して４３０ｐｐｍとなる濃度で添加し、５５分間保持し、ガレート体率が３２質量％になったところで、９０℃に溶液を加熱して、２分間保持し酵素を失活させ、反応を止めた（ｐＨ５．２）。次いで７０℃、６．７ｋｐａの条件下で、減圧濃縮でＢｒｉｘ濃度２０％まで濃縮処理を行い、更に噴霧乾燥して粉末状の「タンナーゼ処理した緑茶抽出物１」０．９ｋｇを得た。得られた緑茶抽出物は非重合体カテキン類含有量２９．０質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率３１．７質量％、カフェイン含有量５．８６質量％、没食子酸含有量３．０９質量％であった。
「タンナーゼ処理した緑茶抽出物１」１０ｇを、脱イオン水３００ｇに２５℃で３０分間攪拌溶解した（タンナーゼ処理液（１））。得られたタンナーゼ処理液は非重合体カテキン類含有量０．９４質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率３１．７質量％、カフェイン含有量０．１９質量％、没食子酸含有量０．１質量％であった。
ステンレスカラム１（内径２２ｍｍ×高さ１０５ｍｍ、容積４０ｍＬ）に活性炭太閤ＳＧＰ（フタムラ化学（株）製）を４０ｍＬ充填した。ステンレスカラム２（内径２２ｍｍ×高さ４２ｍｍ、容積１６ｍＬ）にイオン交換樹脂ＳＫ１ＢＨ（三菱化学（株）製）を１６ｍＬ充填した。タンナーゼ処理液（１）２００ｇ（５倍容積対活性炭）をＳＶ＝２（ｈ-1）でカラム１に通液し透過液は廃棄した。次いでＳＶ＝２（ｈ-1）で８０ｍＬ（２倍容積対活性炭）の水で洗浄した。水洗後、０．１質量％水酸化ナトリウム水溶液（ｐＨ１２．５）をＳＶ＝５（ｈ-1）で６００ｍＬ（１５倍容積対活性炭）通液し溶出液を得た。溶出液は連続でステンレスカラム２に通液し、脱イオンを行い、精製茶抽出物５９１ｇ（ｐＨ３．１）を得た。この精製茶抽出物中には非重合体カテキン類が０．２４質量％含まれており、タンナーゼ処理液（１）からの非重合体カテキン類の回収率は７７％、非重合体カテキン類中のガレート体率は３２質量％であった。又、カフェイン含有量０質量％、没食子酸含有量０．０１質量％であった。精製茶抽出物の固形分中の非重合体カテキン類は５８質量％であった。【００４７】
実施例２
実施例１で得られた「タンナーゼ処理した緑茶抽出物１」３０ｇを、脱イオン水９００ｇに２５℃で３０分間攪拌溶解した（タンナーゼ処理液（２））。得られたタンナーゼ処理液は非重合体カテキン類含有量０．９４質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率３０．６質量％、カフェイン含有量０．１９質量％、没食子酸含有量０．１１質量％であった。
ステンレスカラム３（内径３５ｍｍ×高さ１３０ｍｍ、容積１２５ｍＬ）に活性炭クラレコールＧＬＣ（クラレケミカル（株）製）を１２５ｍＬ充填した。ステンレスカラム４（内径２２ｍｍ×高さ１３２ｍｍ、容積５０ｍＬ）にイオン交換樹脂ＳＫ１ＢＨ（三菱化学（株）製）を５０ｍＬ充填した。タンナーゼ処理液（２）７５０ｇ（６倍容積対活性炭）をＳＶ＝２（ｈ-1）でカラム３に通液し透過液は廃棄した。次いでＳＶ＝２（ｈ-1）で６２５ｍＬ（５倍容積対活性炭）の水で洗浄した。水洗後、０．１質量％水酸化ナトリウム水溶液（ｐＨ１２．５）をＳＶ＝５（ｈ-1）で９００ｍＬ（７．２倍容積対活性炭）通液し溶出液を得た。溶出液は連続でステンレスカラム４に通液し、脱イオンを行い、精製茶抽出物８９７ｇ（ｐＨ２．８）を得た。この精製茶抽出物中には非重合体カテキン類が０．５７質量％含まれており、タンナーゼ処理液（２）からの非重合体カテキン類の回収率は７２％、非重合体カテキン類中のガレート体率は３０．４質量％であった。又、カフェイン含有量０質量％、没食子酸含有量０．０２質量％であった。精製茶抽出物の固形分中の非重合体カテキン類は５６質量％であった。【００４８】
比較例１
緑茶葉（中国雲南省、大葉種）１．８ｋｇに９０℃の熱水２７ｋｇを添加し、３０分間攪拌バッチ抽出したのち、１００メッシュ金網で粗濾過、遠心分離操作後、２号濾紙による濾過を行い、「緑茶抽出液２」２０．４ｋｇ（ｐＨ５．３）を得た。（緑茶抽出液の非重合体カテキン類濃度＝０．９６質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率＝６９．５質量％、カフェイン＝０．２４質量％、没食子酸＝０．０１質量％）
この緑茶抽出液を温度２５℃に設定し、タンナーゼ（キッコーマン社製、タンナーゼＫＴＦＨ、５００Ｕ／ｇ）を緑茶抽出液に対して３００ｐｐｍとなる濃度で添加し、８５分間保持し、ガレート体率が５２．４質量％になったところで、９０℃に溶液を加熱して、２分間保持し酵素を失活させ、反応を止めた（ｐＨ４．８）。得られたタンナーゼ処理液は非重合体カテキン類含有量０．８９質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率５２．４質量％、カフェイン含有量０．２０質量％、没食子酸含有量０．１０質量％であった。タンナーゼ処理液の固形分中の非重合体カテキン類は３２．３質量％であった。【００４９】
比較例２
実施例1と同様の方法で「緑茶抽出液３」を得た。（緑茶抽出液中の非重合体カテキン類濃度＝０．９２質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率＝５１．１質量％、カフェイン＝０．１７質量％）。
樹脂製カラム（内径２５ｍｍ×高さ７０ｍｍ、容積３２ｍＬ）に活性炭クラレコールＧＬＣ（クラレケミカル（株）製）を３２ｍＬ充填した。ステンレスカラム５（内径２２ｍｍ×高さ４５ｍｍ、容積１７ｍＬ）にイオン交換樹脂ＳＫ１ＢＨ（三菱化学（株）製）を１６ｍＬ充填した。「緑茶抽出液３」１９２ｇ（６倍容積対活性炭）をＳＶ＝２（ｈ-1）で樹脂製カラムに通液し透過液は廃棄した。次いで１質量％水酸化ナトリウム水溶液（ｐＨ１４）をＳＶ＝５（ｈ-1）で２２４ｍＬ（７倍容積対活性炭）通液し、溶出液を得た。溶出液は連続でステンレスカラム５に通液し、脱イオンを行い、精製茶抽出物２３２ｇ（ｐＨ２．０）を得た。この精製茶抽出物中には非重合体カテキン類が０．４９質量％含まれており、「緑茶抽出液３」からの非重合体カテキン類の回収率は６５％、非重合体カテキン類中のガレート体率は４８．６質量％であった。又、カフェイン含有量０質量％、没食子酸含有量０．０１６質量％であった。茶抽出物の固形分中の非重合体カテキン類５６質量％であった。【００５０】
比較例３
実施例１で得られた「緑茶抽出液１」を温度１５℃に保持し、タンナーゼ（キッコーマン社製、タンナーゼＫＴＦＨ、５００Ｕ／ｇ）を緑茶抽出液に対して４３０ｐｐｍとなる濃度で添加し、５５分間保持し、ガレート体率が３０．５質量％になったところで、９０℃に溶液を加熱して、２分間保持し酵素を失活させ、反応を止めた（ｐＨ５．１）。
次いで７０℃、６．７ｋｐａの条件下で、減圧濃縮でＢｒｉｘ濃度２０％まで濃縮処理を行い、更に噴霧乾燥して粉末状の「タンナーゼ処理した緑茶抽出物２」０．９１ｋｇを得た。得られた緑茶抽出物は非重合体カテキン類含有量２７．８質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率３０．３質量％、カフェイン含有量６．７４質量％、没食子酸含有量３．５８質量％であった。
「タンナーゼ処理した緑茶抽出物２」２８５ｇを、脱イオン水８５５０ｇに２５℃で３０分間攪拌溶解した（タンナーゼ処理液（３））。得られたタンナーゼ処理液は非重合体カテキン類含有量０．９０質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率３０．３質量％、カフェイン含有量０．２１質量％、没食子酸含有量０．１１質量％であった。
ステンレスカラム６（内径１１０ｍｍ×高さ２３０ｍｍ、容積２１８５ｍＬ）に合成吸着剤ＳＰ−７０（三菱化学（株）製）を２０４８ｍＬ充填した。タンナーゼ処理液（３）８１９１ｇ（４倍容積対合成吸着剤）をＳＶ＝１（ｈ-1）でカラム６に通液し透過液は廃棄した。次いでＳＶ＝２（ｈ-1）で２０４８ｍＬ（１倍容積対合成吸着剤）の水で洗浄した。水洗後、２０質量％エタノール水溶液をＳＶ＝２（ｈ-1）で１２２８７ｍＬ（６倍容積対合成吸着剤）を通液し、精製茶抽出物１２０９０ｇ（ｐＨ２．１）を得た。この精製茶抽出物中には非重合体カテキン類０．５１質量％が含まれており、タンナーゼ処理液（３）からの非重合体カテキン類の回収率は８３．９％、非重合体カテキン類中のガレート体率は２７．４質量％であった。又、カフェイン含有量０．０８質量％、没食子酸量０．００２質量％であった。精製茶抽出物の固形分中の非重合体カテキン類６２．５質量％であった。【００５１】
比較例４
酸性白土（ミズカエース＃６００、水澤化学社製）１００ｇを常温、３５０ｒ／ｍｉｎ攪拌条件下の９２．４質量％エタノール水溶液８００ｇ中に分散させ、約１０分間攪拌を行った後、（比較例３）で得られた「タンナーゼ処理した緑茶抽出物２」２００ｇを投入し、室温のまま約３時間の攪拌を続けた（ｐＨ  ４．０）。その後、生成している沈殿及び酸性白土を２号ろ紙でろ過した。得られたろ液を活性炭（クラレコールＧＬＣ、クラレケミカル社製）３０ｇと接触させ、続けて０．２μｍメンブランフィルターによってろ過を行った。最後にイオン交換水２００ｇを添加して、４０℃、２．７ｋＰａでエタノールを留去し、その後、水分量を調整して「精製緑茶抽出物」を得た。得られた抽出物は非重合体カテキン類が２０．２質量％含まれており、比較例３の「タンナーゼ処理した緑茶抽出物２」からの非重合体カテキン類の回収率は６０．５％、非重合体カテキン類中のガレート体率は２９．３質量％であった。又、カフェイン含有量０．７３質量％、没食子酸含有量２．５６質量％であった。精製茶抽出物の固形分中の非重合体カテキン類は５６．６質量％であった。【００５２】
実施例１〜２、比較例１〜４の結果を下表に示すが、タンナーゼ処理後の茶抽出物の分析値を表２に示し、活性炭から溶出後の精製茶抽出物の分析値を表３に示す。【００５３】
【表２】
2009031306.tif 000003
【００５４】
【表３】
2009031306.tif 000004
【００５５】
実施例１及び実施例２では処理前後における非重合体カテキン類の回収率が高く、非重合体カテキンガレート率、カフェイン、没食子酸が低減し呈味の改善された精製茶抽出物を得ることができた。比較例１では苦味、酸味、雑味の点で評価が劣り、比較例２では苦味の点で評価が劣り、比較例３ではカフェイン量が多く、比較例４ではカフェイン及び没食子酸の量が多く、しかも酸味の点で評価が劣るものであった。【００５６】
実施例３
緑茶葉（ケニア産、大葉種）３ｋｇに８８℃の熱水４５ｋｇを添加し、６０分間攪拌バッチ抽出したのち、１００メッシュ金網で粗ろ過後、抽出液中の微粉を除去する為に遠心分離操作を行い、「緑茶抽出液４」３７．２ｋｇ（ｐＨ５．４）を得た（緑茶抽出液中の非重合体カテキン類濃度＝０．８９質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率＝５２．３質量％、カフェイン含有量＝０．１７質量％）。
この緑茶抽出液を温度１５℃に保持し、タンナーゼ（キッコーマン社製、タンナーゼＫＴＦＨ、５００Ｕ／ｇ）を緑茶抽出液に対して４３０ｐｐｍとなる濃度で添加し、５５分間保持し、ガレート体率が３２質量％になったところで、９０℃に溶液を加熱して、２分間保持し酵素を失活させ、反応を止めた（ｐＨ５．２）。次いで７０℃、６．７ｋｐａの条件下で、減圧濃縮でＢｒｉｘ濃度２０％まで濃縮処理を行い、更に噴霧乾燥して粉末状の「タンナーゼ処理した緑茶抽出物４」０．９ｋｇを得た。得られた緑茶抽出物は非重合体カテキン類含有量２９．０質量％、非重合体カテキン類のガレート体率３１．７質量％、カフェイン含有量５．８６質量％、没食子酸含有量３．０９質量％であった。
「タンナーゼ処理した緑茶抽出物４」１０ｇを、脱イオン水３００ｇに２５℃で３０分間攪拌溶解した（タンナーゼ処理液（４））。得られたタンナーゼ処理液は非重合体カテキン類含有量０．９４質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率３１．１質量％、カフェイン含有量０．１９質量％、没食子酸含有量０．１質量％であった。
ステンレスカラム１（内径２２ｍｍ×高さ１０５ｍｍ、容積４０ｍＬ）に活性炭太閤ＳＧＰ（フタムラ化学（株）製）を４０ｍＬ充填した。タンナーゼ処理液（４）２００ｇ（５倍容積対活性炭）をＳＶ＝２（ｈ-1）でカラム１に通液し透過液は廃棄した。次いでＳＶ＝２（ｈ-1）で８０ｍＬ（２倍容積対活性炭）の水で洗浄した。水洗後、２５質量％エタノール水溶液をＳＶ＝２（ｈ-1）で３２０ｍＬ（８倍容積対活性炭）通液し精製茶抽出物３２０ｇを得た。この精製茶抽出物中には非重合体カテキン類が０．３２質量％含まれており、タンナーゼ処理液（４）からの非重合体カテキン類の回収率は５４％、非重合体カテキン類中のガレート体率は９．５質量％であった。又、カフェイン含有量０質量％、没食子酸含有量０．０３２質量％であった。精製茶抽出物の固形分中の非重合体カテキン類５９質量％であった。
更に減圧濃縮にて、４０℃、２．７ｋＰａでエタノールを留去し、その後、水分量を調整して「精製物３」を得た。得られた精製物の色相は、０．０１６であった。【００５７】
実施例４
実施例３で得られた「緑茶抽出液４」を温度１５℃に保持し、タンナーゼ（キッコーマン社製、タンナーゼＫＴＦＨ、５００Ｕ／ｇ）を緑茶抽出液に対して４３０ｐｐｍとなる濃度で添加し、７０分間保持し、ガレート体率が１５．５質量％になったところで、９０℃に溶液を加熱して、２分間保持し酵素を失活させ、反応を止めた（ｐＨ４．９）。次いで７０℃、６．７ｋｐａの条件下で、減圧濃縮でＢｒｉｘ濃度２０％まで濃縮処理を行い、更に噴霧乾燥して粉末状の「タンナーゼ処理した緑茶抽出物５」０．９ｋｇを得た。
「タンナーゼ処理した緑茶抽出物５」１２ｇを、脱イオン水３００ｇに２５℃で３０分間攪拌溶解した（タンナーゼ処理液（５））。得られたタンナーゼ処理液は非重合体カテキン類含有量０．９８質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率１５．０質量％、カフェイン含有量０．１９質量％、没食子酸含有量０．１９質量％であった。
ステンレスカラム２（内径２２ｍｍ×高さ１０５ｍｍ、容積４０ｍＬ）に活性炭太閤ＳＧＰ（フタムラ化学（株）製）を４０ｍＬ充填した。タンナーゼ処理液（５）２００ｇ（５倍容積対活性炭）をＳＶ＝２（ｈ-1）でカラム１に通液し透過液は廃棄した。次いでＳＶ＝２（ｈ-1）で２４０ｍＬ（６倍容積対活性炭）の水で洗浄した。水洗後、３０質量％エタノール水溶液をＳＶ＝２（ｈ-1）で３２０ｍＬ（８倍容積対活性炭）通液し、精製茶抽出物３２０ｇを得た。この精製茶抽出物中には非重合体カテキン類が０．３８質量％含まれており、タンナーゼ処理液（５）からの非重合体カテキン類の回収率は６２％、非重合体カテキン類中のガレート体率は２．８質量％であった。又、カフェイン含有量０質量％、没食子酸含有量０．０１５質量％であった。精製茶抽出物の固形分中の非重合体カテキン類７３質量％であった。
更に減圧濃縮にて、４０℃、２．７ｋＰａでエタノールを留去し、その後、水分量を調整して「精製物４」を得た。得られた精製物の色相は、０．００３であった。【００５８】
実施例５
溶出液に４０質量％エタノール水溶液を用いて実施例４と同様の操作を行ない、精製茶抽出物３２０ｇを得た。この精製茶抽出物中には非重合体カテキン類が０．４５質量％含まれており、タンナーゼ処理液（５）からの非重合体カテキン類の回収率は７３．１％、非重合体カテキン類中のガレート体率は７．８質量％であった。又、カフェイン含有量０．０１質量％、没食子酸含有量０．００９質量％であった。精製茶抽出物の固形分中の非重合体カテキン類６９質量％であった。
更に減圧濃縮にて、４０℃、２．７ｋＰａでエタノールを留去し、その後、水分量を調整して「精製物５」を得た。得られた精製物の色相は、０．０１９であった。【００５９】
実施例６
「タンナーゼ処理した緑茶抽出物４」１１ｇを、脱イオン水３００ｇに２５℃で３０分間攪拌溶解した（タンナーゼ処理液（６））。得られたタンナーゼ処理液は非重合体カテキン類含有量１．０５質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率３１．６質量％、カフェイン含有量０．２１質量％、没食子酸含有量０．１１質量％であった。
この原料を用いて実施例５と同様の作業を行い、精製茶抽出物３２０ｇを得た。この精製茶抽出物中には非重合体カテキン類が０．４６質量％含まれており、タンナーゼ処理液（６）からの非重合体カテキン類の回収率は７０．３％、非重合体カテキン類中のガレート体率は２７質量％であった。又、カフェイン含有量０．０２２質量％、没食子酸含有量０．００９質量％であった。精製茶抽出物の固形分中の非重合体カテキン類６６質量％であった。
更に減圧濃縮にて、４０℃、２．７ｋＰａでエタノールを留去し、その後、水分量を調整して「精製物６」を得た。得られた精製物の色相は、０．０２７であった。【００６０】
比較例５
緑茶葉（中国雲南省、大葉種）１．８ｋｇに９０℃の熱水２７ｋｇを添加し、３０分間攪拌バッチ抽出したのち、１００メッシュ金網で粗濾過、遠心分離操作後、２号濾紙による濾過を行い、「緑茶抽出液７」２０．４ｋｇ（ｐＨ５．３）を得た。（緑茶抽出液の非重合体カテキン類濃度＝０．９６質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率＝６９．５質量％、カフェイン含有量＝０．２４質量％、没食子酸含有量＝０．０１質量％）
この緑茶抽出液を温度２５℃に設定し、タンナーゼ（キッコーマン社製、タンナーゼＫＴＦＨ、５００Ｕ／ｇ）を緑茶抽出液に対して３００ｐｐｍとなる濃度で添加し、８５分間保持し、ガレート体率５２．４質量％になったところで、９０℃に溶液を加熱して、２分間保持し酵素を失活させ、反応を止めた（ｐＨ４．８）。得られた「タンナーゼ処理液（７）」は非重合体カテキン類含有量０．８９質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率５２．４質量％、カフェイン含有量０．２０質量％、没食子酸０．１０質量％であった。処理液の色相は、０．７であった。【００６１】
比較例６
実施例４で得られた「緑茶抽出液４」を温度１５℃に保持し、タンナーゼ（キッコーマン社製、タンナーゼＫＴＦＨ、５００Ｕ／ｇ）を緑茶抽出液に対して４３０ｐｐｍとなる濃度で添加し、５５分間保持し、ガレート体率が３０．５質量％になったところで、９０℃に溶液を加熱して、２分間保持し酵素を失活させ、反応を止めた（ｐＨ５．１）。次いで７０℃、６．７ｋｐａの条件下で、減圧濃縮でＢｒｉｘ濃度２０％まで濃縮処理を行い、更に噴霧乾燥して粉末状の「タンナーゼ処理した緑茶抽出物８」０．９１ｋｇを得た。得られた緑茶抽出物は非重合体カテキン類含有量２７．８質量％、非重合体カテキン類中ガレート体率３０．３質量％、カフェイン含有量６．７４質量％、没食子酸３．５８質量％であった。
「タンナーゼ処理した緑茶抽出物８」２８５ｇを、脱イオン水８５５０ｇに２５℃で３０分間攪拌溶解した（タンナーゼ処理液（８））。得られたタンナーゼ処理液は非重合体カテキン類含有量０．９０質量％、非重合体カテキン類中のガレート体率３０．３質量％、カフェイン含有量０．２１質量％、没食子酸含有量０．１１質量％であった。
ステンレスカラム３（内径１１０ｍｍ×高さ２３０ｍｍ、容積２１８５ｍＬ）に合成吸着剤ＳＰ−７０（三菱化学（株）製）を２０４８ｍＬ充填した。タンナーゼ処理液（８）８１９１ｇ（４倍容積対合成吸着剤）をＳＶ＝１（ｈ-1）でカラムに通液し透過液は廃棄した。次いでＳＶ＝２（ｈ-1）で２０４８ｍＬ（１倍容積対合成吸着剤）の水で洗浄した。水洗後、２０質量％エタノール水溶液をＳＶ＝２（ｈ-1）で１２２８７ｍＬ（６倍容積対合成吸着剤）を通液し、精製茶抽出物１２０９０ｇ（ｐＨ２．１）を得た。この精製茶抽出物中には非重合体カテキン類が０．５１質量％含まれており、非重合体カテキン類中のガレート体率は２７．４質量％であった。又、カフェイン含有量０．０８質量％、没食子酸含有量０．００２質量％であった。精製茶抽出物の固形分中の非重合体カテキン類６２．５質量％であった。
更に減圧濃縮にて、４０℃、２．７ｋＰａでエタノールを留去し、その後、水分量を調整して「精製物８」を得た。得られた精製物の色相は、０．３８であった。【００６２】
比較例７
酸性白土（ミズカエース＃６００、水澤化学社製）１００ｇを常温、３５０ｒ／ｍｉｎ攪拌条件下の９２．４質量％エタノール水溶液８００ｇ中に分散させ、約１０分間攪拌を行った後、比較例６で得られた「タンナーゼ処理した緑茶抽出物８」２００ｇを投入し、室温のまま約３時間の攪拌を続けた（ｐＨ４．０）。その後、生成している沈殿及び酸性白土を２号ろ紙でろ過した。得られたろ液を活性炭（クラレコールＧＬＣ、クラレケミカル社製）３０ｇと接触させ、続けて０．２μｍメンブランフィルターによってろ過を行った。最後にイオン交換水２００ｇを添加して、４０℃、２．７ｋＰａでエタノールを留去し、その後、水分量を調整して「精製物９」を得た。得られた精製茶抽出物中には非重合体カテキン類が２０．２質量％含まれており、「タンナーゼ処理した緑茶抽出物８」からの非重合体カテキン類の回収率は６０．５％、非重合体カテキン類中のガレート体率は２９．３質量％であった。又、カフェイン含有量０．７３質量％、没食子酸含有量２．５６質量％であった。精製茶抽出物の固形分中の非重合体カテキン類５６．６質量％であった。得られた精製物の色相は、０．０３であった。【００６３】
実施例３〜６、比較例５〜７の結果を下表に示すが、タンナーゼ処理後の茶抽出物の分析値を表４に示し、活性炭から溶出後の精製茶抽出物の分析値を表５に示す。【００６４】
【表４】
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【００６５】
【表５】
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【００６６】
実施例３〜６では非重合体カテキン類中のガレート率、カフェイン、没食子酸が低減し呈味が改善され、かつ色相の良好な精製茶抽出物を得ることができた。比較例５では苦味、酸味、雑味および色相の点で評価が劣り、比較例６ではカフェイン量及び色相の点で評価が劣り、比較例７では没食子酸及び酸味の点で評価が劣るものであった。【００６７】
実施例７
実施例１又は３の精製緑茶抽出物を用いて表６に記載の容器詰飲料を調製した。食品衛生法に基づく殺菌処理及びホットパック充填を行って容器詰飲料とした。【００６８】
製造した容器詰飲料を３７℃で３０日間保存した後、評価した。外観、呈味の安定性は良かった。【００６９】
【表６】
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【国際調査報告】
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