Podtech/llm-jp-corpus-v4-ja_patent huggingface dataset:
【手続補正書】
【提出日】平成15年11月11日(2003.11.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
発明の要旨
本発明は、同軸に取り付けられた２つの管又は流路が本体に取り付けられている外科ハンドピースを提供することによって、従来技術に改良を施す。第１の管は、吸引のために使用されるものであり、第２の管よりも直径が小さく、第１の管と第２の管との間に環状間隙を形成するようになっている。環状間隙は２つの電極の間に形成されたポンプ室と連通している。ポンプ室は少量の外科用流体を沸騰させることによって機能する。流体が沸騰すると、流体は急速に膨張し、それによりポンプ室の下流側の液体を環状間隙から押し出す。これら電極は互いから絶縁されている。


【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
図７において最もよく示されているように、本発明の第１の実施形態では、ポンプ室４２は、電極４５及び４７によって両端を封鎖された比較的大きなポンプ貯槽４３を含んでいる。電力は、図示されていない絶縁電線により電極４５及び４７に供給されている。使用においては、外科用流体（例えば、生理食塩水洗浄溶液）がポート５５、管３４、及び当該技術分野で周知の逆止弁５３を通って貯槽４３に進入する。外科用流体は導電性であるので、電流（好ましくは高周波交流、すなわちＲＦＡＣ）が電極４５及び４７に供給され、該電極４５及び４７を横切って電流が流れる。電気が外科用流体を通って流れると、外科用流体が沸騰する。外科用流体が沸騰すると、外科用流体はポートを通ってポンプ室４２から管３０内へと急速に膨張する（逆止弁５３は膨張した流体が管３４へ進入することを防止する）。膨張した気泡はポンプ室４２の下流側で管３０内の外科用流体を前方へ押し進める。後続の電流パルスは気泡を順次形成していき、該気泡により外科用流体を管３０に沿って下流へ移動させる。ポンプ室４２によって得られる流体パルスの大きさ及び圧力は、電極４５及び４７に送られる電気パルスの長さ、タイミング及び／又は電力を変化させること及び貯槽４３の寸法を変化させることにより、変化させることができる。さらに、外科用流体はポンプ室４２に進入するに先だって予熱されてもよい。外科用流体を予熱することにより、ポンプ室４２が必要とする電力を減少させ、且つ／又は圧力パルスを生じさせることができる速さを増加させる。


【手続補正３】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図３】
2003512132.tif 000001
【手続補正４】
【補正対象書類名】図面
【補正対象項目名】図４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【図４】
2003512132.tif 000002
【手続補正書】
【提出日】平成17年1月5日(2005.1.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  対象とするタンパク質を生産する方法であって：
(a) 昆虫の幼虫内で対象のタンパク質を発現可能なトランスポゾン発現系で昆虫の生殖細胞を形質転換し;
(b) 昆虫を繁殖させて幼虫を産生し;
(c) 該幼虫を大量飼育し;そして、
(d) 該幼虫から対象のタンパク質を単離すること;
を含む、上記方法。
【請求項２】  昆虫を形質転換することが以下のステップ:
(a) 昆虫内で活性のあるトランスポサーゼタンパク質をコードする転移可能なエレメントを提供し;
(b) 対象のタンパク質をコードするコード配列を挿入することによって、該転移可能なエレメントを改変し;そして、
(c) 該改変された転移可能なエレメントで標的とする昆虫を形質転換すること、を含む、請求項１記載の方法。
【請求項３】  上記転移可能なエレメントが、Minos、mariner、Hermes、sleeping beautyおよびpiggyBacからなる群より選択されるものである、請求項２記載の方法。
【請求項４】  上記発現系が、昆虫の幼虫内で機能する誘導可能な転写制御エレメントの制御下に対象とするタンパク質をコードするコード配列を含む、請求項１〜３のいずれか1項記載の方法。
【請求項５】  上記誘導可能な制御系が、テトラサイクリンまたはオエストロゲンにより制御可能なものである、請求項４記載の方法。
【請求項６】  上記発現系が、昆虫の幼虫内で機能する構成的転写制御エレメントの制御下に対象のタンパク質をコードするコード配列を含む、請求項１〜３のいずれか１項記載の方法。
【請求項７】  上記構成的制御エレメントが、キイロショウジョウバエのAct5Cプロモーターを含む細胞質アクチンプロモーター、および細胞質チューブリンプロモーターからなる群より選択される、請求項６記載の方法。
【請求項８】  誘導可能な発現制御配列が、キイロショウジョウバエhsp70プロモーターまたはチチュウカイミバエ hsp70 プロモーターを含む熱ショックプロモーターである請求項４記載の方法。
【請求項９】  タンパク質産物が脂肪体または血リンパ中に蓄積する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】  幼虫の血清タンパク質プロモーターが該タンパク質産物の血リンパ中への分泌を指令するものであり、Hsp70プロモーターを脂肪体での発現のために使用する、請求項９記載の方法。
【請求項１１】  昆虫が２つ以上の発現系または２つ以上のコード配列を含む発現系で形質転換される、請求項１〜１０のいずれか１項記載の方法。
【請求項１２】  発現系の維持がバランサー染色体の使用により支持される、請求項１０記載の方法。
【請求項１３】  対象のタンパク質が酵素、サイトカイン、ホルモン、またはタンパク質性医薬からなる群より選択される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】  昆虫がバクトロセラ・オレアエ(Bactrocera oleae)(オリーブバエ)、バクトロセラ・オリエンタリス(Bactrocera orientalis)(オリエンタルショウジョウバエ)、ヘリオチス・アルミゲラ(Heliothis armigera)(オオタバコガ)、トリコプルサ・ニ(Trichoplusa ni)(イラクサキンウワバ)、マンデュカ・セクスタ(Manduca sexta)( タバコスズメガ)、ロベシア・ボトラナ(Lobesia botrana)(グレープバインガ)、ハマダラカ(Anopheles gambiae)(カ)、アエデス・アエジプティ(Aedes aegypti)(ネッタイシマカ(yellow fever mosquito))、グロシナ・モルシタンス(Glossina morsitans)(ツェツェバエ)、ブユ属(Simulium sp.)(ブユ)、サシチョウバエ属(Phlebotomus sp.)(スナバエ)、ムスカ・ドメスチカ(Musca domestica)(イエバエ)およびセラチチス・キャピタタ(Ceratitis capitata)(チチュウカイミバエ)からなる群より選択される、請求項１〜１３のいずれか１項記載の方法。
【請求項１５】  昆虫がセラチチス・キャピタタである、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】  昆虫がキイロショウジョウバエである、請求項１４記載の方法。
【請求項１７】  幼虫の飼育を飼育温度の操作により同調させる、請求項１〜１６のいずれか１項記載の方法。
【誤訳訂正書】
【提出日】平成17年5月11日(2005.5.11)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５１】
極めて平滑なテーブル板１４が、図６に示すように錠剤のコンベアシステムに用いられる。そのほかに、装置の各部品、より詳しくは錠剤のコンベアシステムの各部品は、できるかぎり平坦で平滑であり、それにより簡単に清浄と消毒ができるようにされる。容易に取り外せるセグメント１７が、この平坦なテーブル板の上方に取り付けられており、各セグメントはテーブル板１４の上方に数十分の一ミリメートル浮いた状態に配設される。セグメントは、錠剤６がフィットする孔２４を備えている。セグメントをテーブル板の上方で１８の方向に移動させることにより、錠剤６は、搬送される。ここで、錠剤は、極めて平滑なテーブル板１４の上に静止する。
【手続補正書】
【提出日】平成16年8月26日(2004.8.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
異種ポリペプチドの内部挿入を含む修飾を有する修飾細菌表層（S層）タンパク質。
【請求項２】
（a）未修飾タンパク質が、グラム陽性もしくは非水生細菌、場合によっては乳酸菌もしくはLactobacillus属に由来する、及び／又は
（b）異種ポリペプチドが機能的ポリペプチドもしくは目的とするポリペプチド、場合によっては結合性もしくは標的化タンパク質（例えば、抗原、抗体又はそれらの一部）である、請求項1記載のタンパク質。
【請求項３】
（c）タンパク質が未修飾S層タンパク質の完全長配列のほとんどを保有する、
（d）ポリペプチドが、CもしくはN末端から少なくとも5アミノ酸の内部位置に挿入されている、及び／又は
（e）修飾タンパク質が40〜70kDaのサイズを有する、請求項1又は2記載のタンパク質。
【請求項４】
（f）主として塩基性もしくは疎水性である結晶化もしくはC末端ドメインを有する、
（g）主として親水性であるN末端ドメインを有する、又は
（h）疎水性領域及び親水性領域を交互に有する、
前記請求項のいずれか1項記載のタンパク質。
【請求項５】
異種ポリペプチドが、
（i）細胞表面上に露出又は存在するように、
（j）表層又は細胞壁に存在するように、
（k）外部タンパク質分解プロセシングから保護される又は外部抗体により認識も結合もされないように、タンパク質内の位置に挿入されている、前記請求項のいずれか1項記載のタンパク質。
【請求項６】
修飾又は未修飾タンパク質が、
（l）結晶化し、場合によっては斜格子（例えば、p1又はp2対称）に結晶化する、
（m）細胞壁アンカードメインを有する、
（n）少なくとも7のpIを有する、及び／又は
（o）主として塩基性である、前記請求項のいずれか1項記載のタンパク質。
【請求項７】
ポリペプチドが、疾患を引き起こす抗原又は疾患に特異的である抗原を含み、場合によっては、抗体により認識されうる抗原である、又は嫌気性細菌、場合によってはClostridium属由来の抗原の全部もしくは一部である、前記請求項のいずれか1項記載のタンパク質。
【請求項８】
（未修飾形態においては）Lactobacillus acidophilus、crispatus、helveticus、amylovorus又はgallinarumに由来する、前記請求項のいずれか1項記載のタンパク質。
【請求項９】
細菌表層（S層）タンパク質の断片であって、
a）N末端断片、又は他のそのような断片と二量体を若しくは2つの他のそのような断片と三量体を形成しうる断片である、
b）もう1つのそのような断片と二量体を形成する能力を有し、
（i）免疫優性又は露出ループ領域を含み、20〜200アミノ酸長であるか、又は
（ii）全免疫優性又は露出ループ領域を含まず、20〜155アミノ酸長である、前記断片。
【請求項１０】
請求項1〜9のいずれか1項記載のタンパク質をコードするポリヌクレオチド。
【請求項１１】
請求項10記載のポリヌクレオチドを含んでなるベクター。
【請求項１２】
請求項11記載のベクターを含んでなる、又は請求項11記載のベクターで形質転換された宿主細胞。
【請求項１３】
請求項1〜9のいずれか1項記載の表層タンパク質（又は断片）を発現する細菌。
【請求項１４】
乳酸菌、場合によってはLactobacillus属細菌、好ましくはL. plantarum、L. acidophilus又はL. caseiである、請求項13記載の細菌。
【請求項１５】
異種表層（S層）タンパク質を発現するように修飾された（L. casei又はBacillus属以外の）修飾細菌。
【請求項１６】
通常は、あるいは野生型又は未修飾形態では表層を有さない、請求項15記載の細菌。
【請求項１７】
Lactobacillus属の細胞である、及び／又はS層がそれ自身の元の細胞壁アンカーを有する、請求項15又は16記載の修飾細菌。
【請求項１８】
Lactobacillus属細菌細胞である、及び／又はS層タンパク質がL. acidophilusのようなLactobacillus属細菌に由来する、請求項15〜17のいずれか1項記載の細菌。
【請求項１９】
L. crispatus由来ではない、又はコラーゲン結合性タンパク質ではない細菌表層（S層）タンパク質を発現するL. casei細菌細胞。
【請求項２０】
S層タンパク質がL. acidophilusからのものである、又はL. acidophilusに由来する、請求項19記載のL. casei細胞。
【請求項２１】
異種の又は修飾された表層（S層）タンパク質を唯一発現するか、あるいはそれを均一に発現する修飾細菌。
【請求項２２】
細菌が、異種S層タンパク質をコードするポリヌクレオチドを含むゲノムを有し、場合によっては、異種S層タンパク質をコードするポリヌクレオチドがゲノム内に組込まれている、及び／又は、通常の若しくは野生型のS層タンパク質をコードするポリヌクレオチドがサイレント状態にされているか、置換されているか、非作動化されているか、又は発現されないようにされている、請求項21記載の細菌。
【請求項２３】
異種又は修飾S層タンパク質が、細菌細胞により発現される唯一の又はたった1つのS層タンパク質である、及び／又は、細胞が野生型S層タンパク質を全く発現しない、請求項22又は23記載の細菌。
【請求項２４】
S層タンパク質が細胞壁の表面に存在する、及び／又は、多数のS層タンパク質がS層を形成する、請求項22〜24のいずれか1項記載の細菌。
【請求項２５】
請求項13〜24のいずれか1項記載の細菌を含んでなるワクチン。
【請求項２６】
経口又は鼻腔内ワクチンである、及び／又は、さらにアジュバントを含む、請求項25記載のワクチン。
【請求項２７】
複数の細菌表層タンパク質を含んでなり、それらのうちの少なくとも1つが請求項1〜8のいずれか1項記載の修飾タンパク質であるシート又は（場合によっては結晶性）単層又は二次元アレイ。
【請求項２８】
請求項27記載のシート、単層又はアレイを含んでなる固体表面、液-気界面、脂質フィルム、リポソーム又は溶液。
【請求項２９】
1以上の（巨大）分子、例えば酵素、抗体もしくは他の結合性分子、受容体、抗原又はリガンドが結合する、請求項28記載の固体表面。
【請求項３０】
Sタンパク質の層を含んでなる固体表面であって、Sタンパク質のうちの少なくとも複数が、表面と機能分子の層との間に挟まれた請求項1〜8のいずれか1項記載の修飾タンパク質である、前記固体表面。
【請求項３１】
請求項27記載のシート、層もしくはアレイ又は請求項28〜30のいずれか1項記載の表面を含んでなるセンサー、分子ふるい又はイオントラップ。
【手続補正書】
【提出日】平成17年2月15日(2005.2.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  切削用インサートホルダー（１２）及び切削用インサート（１４）を備え、切削用インサートホルダーがボデー部分（１６）とインサート保持部分（１８）とを有し、インサート保持部分が直径Ｄ１と長手方向軸線Ａの一般に円筒状の内側面（３２）を有している切削工具組立体（１０）であって、
インサート保持部分（１８）は、ボデー部分（１６）に連結された固定部分（２２）及び半径方向に向いているクランプ面（４２）を有し軸方向に伸びているクランプ用ジョー（２４）を備え、軸方向に伸びているクランプ用ジョー（２４）は一方の側において軸方向に伸びている連接部（２５）に沿って固定部分（２２）に連結されかつ他方の側において軸方向に伸びている開口（２７）により軸方向に伸びている自由端（３０）に沿って固定部分（２２）から離され、軸方向に伸びている開口（２７）は一方の側においてはクランプ用ジョー（２４）の自由端（３０）により、そして反対の側においては、内面（３２）に隣接して、固定部分（２２）の軸方向に伸びている第１の位置決め面（３６）により境界が決められ、
切削用インサート（１４）は、長手方向軸線Ｂを有する一般に円柱状の部分（４４）及びこれに連結され軸方向に伸びている半径方向突起（４６）を有し、半径方向突起は、円柱状部分（４４）に連結されかつ側面（５７）により分けられた上下の面（５５、６２）を有し、上面（５５）と側面（５７）とは少なくも一部分が切れ刃（５６）を構成する縁において出会い、そして下面（６２）は第１の位置決め面を構成し、更に
切削用インサート（１４）は、軸方向に伸びている半径方向突起（４６）が軸方向に伸びている開口（２７）から突き出ている状態でインサート保持部分（１８）内に置かれ、切削用インサートの第１の位置決め面（６２）はインサート保持部分（１８）の第１の位置決め面（３６）に当たり、
クランプ用ジョー（２４）が、スロット（２６）によりボデー部分（１６）から分けられ固定部分（２２）に関して弾性的に変位可能であること、及び切削用インサート（１４）が、切削用インサート（１４）の一般に円柱状の部分（４４）においてクランプ用ジョー（２４）のクランプ面（４２）により加えられた弾性的な半径方向の力の手段により定位置にクランプされていることを特徴とする切削工具組立体。
【請求項２】  切削用インサート（１４）に、軸方向に伸びていて中央に置かれた貫通穴（６６）が設けられ、更に切削用インサートホルダー（１２）に、インサート保持部分（１８）の後壁（４５）内に開口している組み合わせられ中央に置かれた穴（４３）が設けられる請求項１による切削工具組立体。
【請求項３】  円柱状部分（４４）が、半径方向突起（４６）の軸方向の長さより大きい軸方向長さのものである請求項１による切削工具組立体。
【請求項４】  切削用インサート（１４）の一般に円柱状の部分（４４）に、３個の軸方向に伸びているリブ（５０、５２、５４）が設けられる請求項１による切削工具組立体。
【請求項５】  ３個の軸方向に伸びているリブの内の２個（５０、５２）が、軸線として長手方向軸線Ｂを有する直径Ｄ２の円筒状包絡面上にある半径方向最外側領域を有する請求項４による切削工具組立体。
【請求項６】  Ｄ２がＤ１に等しい請求項５による切削工具組立体。
【請求項７】  ３個の軸方向に伸びているリブの内の１個（５４）が、直径Ｄ３の円筒状包絡面上にある半径方向最外側領域を有する請求項４による切削工具組立体。
【請求項８】  Ｄ３がＤ１より大きい請求項７による切削工具組立体。
【請求項９】  ３個の軸方向に伸びているリブの内の２個（５０、５２）が、直径Ｄ２の円筒状包絡面上にある半径方向最外側領域を有し、そしてＤ３がＤ２より大きい請求項７による切削工具組立体。
【請求項１０】  ３個の軸方向に伸びているリブ（５０、５２、５４）が、軸線Ｂに関して、角度方向で互いに１２０゜に配置される請求項４による切削工具組立体。
【請求項１１】  クランプ用ジョー（２４）のクランプ面（４２）が一般に円柱状の部分（４４）の軸方向に伸びているリブ（５４）に当たっている状態で切削用インサートが定位置にクランプされる請求項１による切削工具組立体。
【請求項１２】  長手方向軸線Ｂを有する略円柱状の部分（４４）及びこれに連結され軸方向に伸びている半径方向突起（４６）を備え、半径方向突起は円柱状部分に連結されかつ側面（５７）により分離された上下の面（５５、６２）を有し、上面（５５）と側面（５７）とは、少なくも一部分が切れ刃（５６）を構成する縁において出会い、更に下面（６２）が第１の位置決め面を構成し、略円柱状の部分に軸方向に伸びている３個のリブが設けられ、軸方向に伸びている３個のリブのうちの２個（５０、５２）が、軸線として長手方向軸線Ｂを有する直径Ｄ２の円筒状包絡面上にある半径方向最外側領域を有する切削用インサート（１４）であって、
３個の軸方向に伸びているリブの１個（５４）が直径Ｄ３の円筒状包絡面上にある半径方向最外側領域を有し、直径Ｄ３が直径Ｄ２より大きいことを特徴とする切削用インサート。
【請求項１３】  切削用インサートに、軸方向に伸びていて中心に置かれた貫通穴（６６）が設けられる請求項１２による切削用インサート。
【請求項１４】  ３個の軸方向に伸びているリブ（５０、５２、５４）が、軸線Ｂに関して、角度方向で互いに１２０゜に配置される請求項１２による切削用インサート。
【請求項１５】  第１の位置決め面（６２）が平面である請求項１２による切削用インサート。
【手続補正書】
【提出日】平成16年5月19日(2004.5.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６２】
荷重振幅
種々の荷重振幅がフレームの加振に使用された。図２９に示めすように、締付力とブレースにおけるプレストレス荷重と荷重繰返し速度とは制御され、種々荷重振幅０．４０，０．５０，０．６０，０．７０，０．７５，０．８０，０．８５及び０．９０kNが使用された。
本試験の設定において、ダンパは０．４，０．５及び０．６kNで作動せずに、かつ摺動も起きなかったけれど、荷重が０．７kNに増加されると、摺動が始まり、荷重を増加する場合はいつでも変位が増加した。図１１において、特に０．８kNの荷重を使用しさらに０．８５及び０．９kNへと増加してゆく場合、フレームはわずかに非線形的に応答している。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６６】
長時間運転試験
ダンパを取りつけた鋼製フレームモデルが、種々の繰返し速度と加振力での長時間運転試験が行なわれた。図１６は、荷重繰返し速度３．０Hz、加振力０．８kNでの試験結果における時間履歴を示めしている。フレーム応答は非常に安定し一定したものであり（図１６Ｂ）、さらにプレートの相対的回転も安定したものであった（図１６Ｄ）。１００サイクル以上の試験後に、ダンパ性能は非常に満足のゆくものであることが結論された。
フレームの数百サイクル試験も計画されたが、実験装置の制限で中止された。結果を図３２に示めす。
【手続補正書】
【提出日】平成15年8月14日(2003.8.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
視覚化スクリーン(8)上で表示可能な指示（indication）に変換可能でバルブ(2)の位置を示す圧力信号を発生させるための圧力信号発生手段(12)であって、少なくとも1つの液圧カートリッジである圧力信号発生手段(12)；
圧力信号を長距離にわたって伝送するための圧力信号伝送手段(6)；
バルブ(2)の位置を検知するための機械的手段(11)；
を含んでなる、流体の移送のためのメイン液圧系(4)の一部を形成する隠れたバルブ(2)の位置指示器(1)であって、
機械的手段(11)が、バルブ(2)を作動させる回転アクチュエーターシャフト(3')の回転時に圧力信号発生手段(12)に作動するように、バルブ(2)の回転アクチュエーターシャフト(3')上に固定配置された少なくとも1つのカムであり、該機械的手段(11)がアクチュエーターシャフト(3')の円運動を、圧力信号発生手段(12)の一部の直線運動に変換し、バルブ(2)の位置の圧力信号指示を発生させることを特徴とするバルブの位置指示器。
【請求項２】
圧力信号伝送手段(6)が圧力信号をコンバーター(7)に伝送し、該コンバーター(7)が圧力信号を、バブル(2)位置を示すアナログおよびデジタル信号から選択される信号に変換し、バルブ位置をスクリーン(8)上に表示することを特徴とする請求項1に記載の位置指示器。
【請求項３】
圧力信号伝送手段(6)が、メイン液圧系(4)に連結されている第2液圧系であることを特徴とする請求項1または2に記載の位置指示器。
【手続補正書】
【提出日】平成16年10月29日(2004.10.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  フレームと、
フレームに取付けられたレンズと、
前記フレームを、帽子のつばに、収納位置と使用位置との間で回動的に取付ける手段と、を有し、
前記収納位置では、前記レンズは、つばの近くに隣接して収まり、前記使用位置では、前記レンズは、つばから下方に垂れ下がり、前記回動的に取付ける手段は、一対のクリップを有し、各クリップは第１端部及び第２端部を有し、一方のクリップは、前記第１端部でつばの一方の側に取付けられ、他方のクリップは、前記第１端部でつばの他方の側に取付けられ、前記クリップの前記第２端部は各々、それらが互いに向かい合うように球状のソケットを備え、前記フレームには一対の柱が、一方の柱が前記フレームの一方の端部に隣接し、他方の柱が前記フレームの他方の端部に隣接するように固定され、各柱は、互いに反対側を向き、前記柱に隣接する前記クリップのソケットに受け入れられる大きさにされた球状ボールを備えることを特徴とする、つばを有する帽子と共に使用するアイシールドアセンブリ。
【請求項２】  前記クリップがプラスチック製であることを特徴とする請求項１記載のアイシールドアセンブリ。
【請求項３】  前記レンズが色付けされていることを特徴とする請求項１記載のアイシールドアセンブリ。
【請求項４】  前記レンズが紫外線遮断物を含むことを特徴とする請求項１記載のアイシールドアセンブリ。
【請求項５】  前記レンズが全体的に凹形形状であることを特徴とする請求項１記載のアイシールドアセンブリ。
【手続補正書】
【提出日】平成15年2月24日(2003.2.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２４】
配列番号１〜４：ＭＴＢ３２Ａ（Ｒａ３５ＦＬまたはＲａ３５成熟）、この配列はまた、米国特許出願第０８／５２３，４３６号、同第０８／５２３，４３５号、同第０８／６５８，８００号、同第０８／６５９，６８３号、同第０８／８１８，１１２号、同第０９／０５６，５５６号、および同第０８／８１８，１１１号ならびにＷＯ９７／０９４２８およびＷＯ９７／０９４２９の出願において、配列番号１７（ｃＤＮＡ）および配列番号７９（タンパク質）として開示される（例えば、Ｓｋｅｉｋｙら、Ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ６７：３９９８−４００７（１９９９）もまた参照のこと）。用語ＭＴＢ３２Ａはまた、三つ組活性部位の３つのアミノ酸（Ｈｉｓ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ）のうちのいずれか１つ（例えば、配列番号２におけるアミノ酸２０８位または配列番号４におけるアミノ酸１８３位のセリン残基）が、別のアミノ酸（例えば、アラニン、Ｒａ３５ＦＬＭｕｔＳＡ、例えば、図６および配列番号６を参照のこと）に変化したＭＴＢ３２Ａアミノ酸を含む。


【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５１】
配列番号４６および４７：ＤＰＶ−ＭＴＩ−ＭＳＬ（ＭＴｂ３１Ｆ）、この配列は、米国特許出願番号第０９／２８７，８４９号およびＰＣＴ／ＵＳ９９／０７７１７出願の配列番号１８（ｃＤＮＡ）および配列番号１９（タンパク質）に開示される。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５２】
配列番号４８および４９：ＤＰＶ−ＭＴＩ−ＭＳＬ−ＭＴＣＣ＃２（ＭＴｂ７１Ｆ）、この配列は、米国特許出願番号第０９／２８７，８４９号およびＰＣＴ／ＵＳ９９／０７７１７出願に、配列番号１５（核酸）および配列番号１６（タンパク質）として開示される。
【手続補正書】
【提出日】平成17年4月15日(2005.4.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗原−特異的調節Ｔｒ１リンパ球を得るために、ＨＬＡ系のクラスII分子およびヒトＬＦＡ−３分子を発現するが、共刺激分子Ｂ７−１、Ｂ７−２、Ｂ７−Ｈ１、ＣＤ４０、ＣＤ２３またはＩＣＡＭ−１のいずれも発現しない人工抗原−提示細胞の使用。
【請求項２】
患者のリンパ球から抗原−特異的調節Ｔｒ１リンパ球の調製方法であって、
−請求項１で定義したような人工抗原−提示細胞にて提示される選択抗原の存在下で、前記リンパ球をインビトロで活性化し、そして
−前記リンパ球から、前記抗原に特異的な少なくとも１０％のＴｒ１リンパ球を含む活性化されたＣＤ４+Ｔリンパ球の集団を回収すること
を含むことを特徴とする方法。
【請求項３】
使用される人工抗原−提示細胞が、クラスIIＨＬＡ分子のα鎖をエンコードする核酸配列、クラスIIＨＬＡ分子のβ鎖をエンコードする核酸配列およびヒトＬＦＡ−３をエンコードする核酸配列で、繊維芽細胞、ケラチン生成細胞、尿細管細胞、シュワン細胞、筋原細胞、内皮細胞の中から選択される哺乳類細胞のコトランスフェクションで得られることを特徴とする請求項２で請求されている方法。
【請求項４】
前記リンパ球のインビトロでの活性化を、選択抗原の存在下で、前記リンパ球と前記抗原提示細胞を共培養することで行うことを特徴とする請求項２または３で請求されている方法。
【請求項５】
ＣＤ４+Ｔリンパ球が、インビトロでの選択抗原の存在下で活性化される工程の繰り返しと、前記抗原に特異的な少なくとも３０％のＴｒ１リンパ球からなる細胞集団の回収とからなることを特徴とする請求項２〜４のいずれか１つで請求されている方法。
【請求項６】
さらに、回収された細胞集団からのＴｒ１リンパ球クローンの単離および増殖を含むことを特徴とする請求項２〜５のいずれか１つで請求されている方法。
【請求項７】
請求項２〜６のいずれか１つによる方法によって抗原−特異的Ｔｒ１リンパ球を調製し、それらを患者に投与するのに適した製剤に、先のＴｒ１リンパ球を包装することを含むことを特徴とする炎症疾患および／または自己免疫疾患の治療を意図する医薬組成物の調製方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
本発明は、炎症疾患および／または自己免疫疾患の治療を意図する医薬品の調製方法に関し、本発明による方法によって抗原−特異的Ｔｒ１リンパ球を調製し、それらを患者に投与するのに適した製剤に、前記Ｔｒ１リンパ球を包装することを含むことを特徴とする。
本発明は、続く残りの記載によって、より理解されるであろうし、本発明による方法をどのようにして実行するかを説明する実施例に限定されるものではないことを記載する。
【手続補正書】
【提出日】平成15年12月19日(2003.12.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
固定台座（４）及び動物収容モジュール（６）を有し、動物収容モジュール（６）が長手方向軸の周りに回転し得るように台座（４）上に支承され、直立状態で麻酔される被屠殺動物（１２）が歩行し得る床（１８）と第１の側壁（２２）を有する牛等の大型の被屠殺動物のための麻酔ボックスにおいて、
麻酔ボックス（２）の第２の側壁（８）が動物収容モジュール（６）と別個に設けられており、麻酔した被屠殺動物（１２）が麻酔ボックス（２）の中で倒れることを防止するために腹部支持部材（４８）が設けられ、腹部支持部材（４８）が旋回又は並進運動により麻酔される被屠殺動物（１２）の支持位置に配置されることを特徴とする麻酔ボックス。
【請求項２】
被屠殺動物の頭部（４８）を下から支えるために下側ヘッドホルダー（３４）が設けられ、旋回又は並進運動により上下に移動し得る上側ヘッドホルダー（３６）が設けられ、上側ヘッドホルダー（３６）が電気麻酔のための２個の電極（４０）を内蔵することを特徴とする、請求項１に記載の麻酔ボックス。
【請求項３】
下側ヘッドホルダー（３４）が旋回又は並進運動により上下又は左右に移動し得ることを特徴とする、請求項２に記載の麻酔ボックス。
【請求項４】
麻酔の際に被屠殺動物（１２）の頭部（４８）が麻酔ボックス（２）から前方へ突出するように、下側ヘッドホルダー（３４）と上側ヘッドホルダー（３６）が麻酔ボックス（２）の側面図で見て麻酔ボックス（２）の前壁（１４）に近い位置に設けられていることを特徴とする、請求項２又は３に記載の麻酔ボックス。
【請求項５】
１個の心臓電極又は１対の心臓電極（５０）が設けられていることを特徴とする、請求項１乃至４のいずれか一項に記載の麻酔ボックス。
【請求項６】
単数個又は複数個の心臓電極（５０）を旋回又は並進運動により、麻酔される被屠殺動物（１２）と接触させることができることを特徴とする、請求項５に記載の麻酔ボックス。
【請求項７】
後ろ側にドア（４２）が設けられ、ドア（４２）を旋回又は並進運動により開放位置と閉鎖位置の間で移動することができることを特徴とする、請求項１乃至６のいずれか一項に記載の麻酔ボックス。
【請求項８】
押圧部材（４４）が設けられ、麻酔される被屠殺動物（１２）にこの押圧部材（４４）で後方から圧力を働かせて完全に前方へ歩行させることを特徴とする、請求項１乃至７のいずれか一項に記載の麻酔ボックス。
【請求項９】
動物収容モジュール（６）が前部支持板（１４）と後部支持板（１６）を有し、各支持板（１４、１６）が麻酔ボックス（２）の長手方向軸（３０）を横切って延び、各支持板（１４、１６）の縁端の少なくとも部分長が円弧形に丸みを帯びており、少なくとも後部支持板（１６）が扇形切欠部（２４）を有することを特徴とする、請求項１乃至８のいずれか一項に記載の麻酔ボックス。
【請求項１０】
腹部支持部材（４８）と単数個又は複数個の心臓電極（５０）が組合せ部材として設けられていることを特徴とする、請求項１乃至９のいずれか一項に記載の麻酔ボックス。
【請求項１１】
請求項５乃至１０のいずれか一項に記載のボックス（２）を使用して牛等の大型の被屠殺動物を麻酔及び屠殺するための方法において、
当該被屠殺動物（１２）をボックス（２）に入れ、２個の頭部電極（４０）により電流で被屠殺動物の脳麻酔を行い、脳麻酔と一部時間的に重複して又は脳麻酔の後に１個の心臓電極（５０）と少なくとも１個の頭部電極（４０）により、又は２個の心臓電極（５０）により、電流で被屠殺動物（１２）の心臓麻酔を行い、脳麻酔の開始の前又は心臓麻酔の開始の前に腹部支持部材（４８）を配置し、心臓麻酔のための通電を終了する前又は心臓麻酔のための通電を終了した後にボックス（２）を長手方向軸（３０）の周りに回転して、被屠殺動物（１２）をボックスの第１の側壁（２２）の上に横たわらせ、ボックス（２）の回転の前又はボックス（２）の回転の後に屠殺のために被屠殺動物（１２）の血管を切開することを特徴とする方法。
【請求項１２】
心臓麻酔電流がまだ流れている間に血管を切開することを特徴とする、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
頭部電極（４０）を内蔵するヘッドホルダーを近づけることによって２個の頭部電極（４０）を配置することを特徴とする、請求項１１又は１２に記載の方法。
【請求項１４】
心臓麻酔では脳麻酔より低い電流周波数を使用することを特徴とする、請求項１１乃至１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
心臓麻酔では脳麻酔より低い電流強度を使用することを特徴とする、請求項１１乃至１４のいずれか一項に記載の方法。
【手続補正書】
【提出日】平成17年1月6日(2005.1.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
オレンジジュース不耐性を有する個人により摂取されたときに胸やけ保護特性を有するオレンジジュース製品であって、低酸性及び低オイル状態を有するオレンジジュース製品を含んでなり、
オレンジジュース製品が、
（ａ）オレンジジュース製品の全重量に基づき０．７重量％以下の滴定酸度；及び
（ｂ）オレンジジュース製品の全体積に基づき０．０２体積％以下のオレンジジュース製品中のシトラスオイル濃度；
を有するものである、前記オレンジジュース製品。
【請求項２】
シトラスオイル濃度が、オレンジジュース製品の全体積に基づき０．０１２体積％以下である、請求項１に記載の製品。
【請求項３】
オレンジジュース製品の滴定酸度が、オレンジジュース製品の全重量に基づき０．５〜０．６重量％である、請求項１又は２に記載の製品。
【請求項４】
前記低オイル状態が、オレンジジュース製品の８０ｐｐｍ未満であるオレンジジュース製品中のテルペンの濃度を含む、請求項１〜３の何れかに記載の製品。
【請求項５】
前記低オイル状態が、オレンジジュース製品の６０ｐｐｍ未満であるオレンジジュース製品中のテルペンの濃度を含む、請求項１〜３の何れかに記載の製品。
【請求項６】
オレンジジュース製品が、
（ａ）オレンジジュース製品の全重量に基づき０．６重量％以下の滴定酸度；
（ｂ）オレンジジュース製品の全体積に基づき０．０２体積％未満のオレンジジュース製品中のシトラスオイル濃度；及び
（ｃ）オレンジジュース製品の全重量に基づき０．０４重量％を超えるカルシウム濃度となるようなクエン酸カルシウム成分；
を有するものである、請求項１に記載の製品。
【請求項７】
前記オレンジジュース製品が、添加されたカルシウム成分を、オレンジジュース製品中のカルシウム濃度がオレンジジュース製品の全重量に基づき０．０４重量％を超えるように更に含む、請求項１〜５の何れかに記載の製品。
【請求項８】
カルシウム成分が、クエン酸カルシウム成分である、請求項７に記載の製品。
【請求項９】
クエン酸カルシウム成分が、クエン酸三カルシウム四水和物である、請求項８に記載の製品。
【請求項１０】
オレンジジュース製品のカルシウム濃度が、オレンジジュース製品の全重量に基づき０．２重量％以下である、請求項７に記載の製品。
【請求項１１】
オレンジジュース中への乾燥固体粒子として、製品にカルシウム源が添加されている、請求項１に記載の製品。
【手続補正書】
【提出日】平成16年1月6日(2004.1.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０９】
【表２】
2004526455.tif 000001
の特異的プライマー対で逆転写されたＲＮＡを増幅することにより転写物を検出した。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２３】
【表３】
2004526455.tif 000002
の特異的プライマー対で逆転写されたＲＮＡを増幅することにより転写物を検出した。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２７】
【表４】
2004526455.tif 000003
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１３８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１３８】
ＥＬＩＳＡ系を利用して、抗ヒト全Ｉｇおよび抗ＩｇＭ（Cappel-Cooper Biomedical, West Chester、ペンシルバニア州）および抗ＩｇＧ１または抗ＩｇＧ４（Pharmingen）を用いることにより、ヒト全Ｉｇ、ＩｇＭ、ＩｇＧ１およびＩｇＧ４免疫グロブリンを定量した。全ＥＬＩＳＡを二重で実施し、各々のプレートで研究室標準を含めた。再構築しなかったＳＣＩＤマウスに由来する血清を全ＥＬＩＳＡ測定の陰性対照として用いた。ＨＩＶ−１  ｇｐ４１タンパク質の５９１〜６１１アミノ酸に相当する特異的ペプチド（すなわちＥＲＹＬＫＤＱＱＬＬＧＩＷＧＣＳＧＫＬＩＣ  配列番号２３）を用いて、特異的抗ＨＩＶ抗体を検出するためのＥＬＩＳＡを実施した。合成ペプチドを４℃で一晩インキュベートすることにより、Dytnatec（Dynal, Oslo、スウェーデン）マイクロタイタープレートに固定した。段階希釈マウス血清を添加し、そして室温で９０分間インキュベートした。最終的に基質色素原と共にインキュベートした後のＡ４９０値を読むことにより結合が表された。値は、二重で試験された各個体の血清の吸光度の平均値を示す。すべての対照血清の吸光度の平均値プラス０．１００Ａとしてカットオフを算出した。この閾値よりも高いＡ４９０値を示す血清を抗ＨＩＶ抗体に関する陽性と考えた。
【手続補正書】
【提出日】平成16年12月22日(2004.12.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）第一表面と第二表面を有する補てつコンポーネントであって、その第二表面が、上記コンポーネントを移植すべき骨の方に配向されるように構成されている補てつコンポーネント；
（ｂ）上記第一表面から上記第二表面まで延びる少なくとも一つの開口とを備え、その開口は、挿入部材を受容するように構成され、（ｉ）上記第一表面から開口の大部分を通って延びる延長円錐台形テーパー部分、及び（ii）上記第一表面のテーパー部分より直径が小さい上記第二表面の部分を含み、かつ、挿入部材を上記補てつコンポーネントに対して複数の方位から収容するように構成されてなる移植可能な補てつ具。
【請求項２】
前記開口が、球形か又は球形に近いヘッドを有する挿入部材を収容するように構成され、使用中にその挿入部材のヘッドが前記延長円錐台形テーパー部分と界接する請求項１に記載の移植可能な補てつ具。
【請求項３】
前記補てつ具が股関節置換システムを含み、そして前記第一表面と第二表面が寛骨臼カップの表面である請求項１又は２に記載の移植可能な補てつ具。
【請求項４】
前記開口が万能形開口である請求項１〜３のいずれか一つに記載の移植可能な補てつ具。
【請求項５】
前記第二表面の部分が、平坦な端縁、面を取った端縁、傾斜表面、丸みをつけた表面又は球形表面である請求項１〜４のいずれか一つに記載の移植可能な補てつ具。
【請求項６】
さらに、（ｄ）寛骨臼カップの内側面を内張りするライナー、並びに
（ｅ）患者の大腿骨に挿入する大腿骨コンポーネント及び前記寛骨臼カップとライナーと協働するアダプター、
を含む請求項１〜５のいずれか一つに記載の移植可能な補てつ具。
【請求項７】
前記球形の又は球形に近いヘッドが、球形、球形に近い、トロイダル形、楕円形、地球形、わずかに湾曲しているかもしくは丸みがついている外側端縁を含んでいる請求項１〜６のいずれか一つに記載の移植可能な補てつ具。
【請求項８】
請求項１に記載の移植可能な補てつ具中に挿入されるように構成された挿入部材であって、球形又は球形に近いヘッドを備え、前記移植可能な補てつ具の開口中に挿入されてそのヘッドが前記延長円錐台形部分と界接するように構成される挿入部材。
【請求項９】
適切な方向が選択されるとき、前記円錐台形テーパー部分に対してロックされるように構成された請求項８に記載の挿入部材。
【請求項１０】
挿入部材のヘッドは、完全に挿入されたときに、第一表面を越えて突出しない請求項８又は９に記載の挿入部材。
【請求項１１】
１又は２以上の骨ねじ、骨釘、骨スパイク又は通孔カバーを備えている請求項８〜１０のいずれか一つに記載の挿入部材。
【請求項１２】
球形又は球形に近いヘッドが、中心点を有する球体のスライス部分で構成され、そしてそのヘッドが前記中心点を包含している請求項８〜１１のいずれか一つに記載の挿入部材。
【請求項１３】
前記球形又は球形に近いヘッドが、そのヘッドと前記延長テーパーの界面が液密シールを構成するように構成されている請求項８〜１２のいずれか一つに記載の挿入部材。
【請求項１４】
（ａ）第一表面と第二表面を有する補てつコンポーネントであって、その第二表面が、移植すべき骨の方に配向されるように構成されている補てつコンポーネントと、
（ｂ）上記第一表面から上記第二表面まで延びる少なくとも一つの開口であって、挿入部材を受容するように構成され、かつ（ｉ）上記第一表面から開口の大部分を通って延びる延長円錐台形テーパー部分、及び（ii）上記第一表面のテーパー部分より直径が小さい上記第二表面の部分を含み、かつ、挿入部材を上記補てつコンポーネントに対して複数の方向から収容するよう構成されている開口と、
（ｃ）球形又は球形に近いヘッドを有し、前記開口に挿入されてその球形又は球形に近いヘッドが前記延長円錐台形テーパー部分と界接するように構成されている挿入部材と、を備えてなる移植可能な補てつ具。
【請求項１５】
前記挿入部材の適切な方向が一旦選択されると、その挿入部材は、そのヘッドが前記第一表面を越えて突出しないように円錐台形テーパーに対してロックされるように構成されている請求項１４に記載の移植可能な補てつ具。
【請求項１６】
前記第二表面の部分が、平坦な端縁、面を取った端縁、傾斜した表面、丸みをつけた表面又は球形表面である請求項１４又は１５に記載の移植可能な補てつ具。
【請求項１７】
前記球形又は球形に近いヘッドが、球形、球形に近い、トロイダル形、楕円形、地球形、わずかに湾曲しているかもしくは丸みをつけた外側端縁を備えている請求項１４〜１６のいずれか一つに記載の移植可能な補てつ具。
【請求項１８】
前記挿入部材が、１又は２以上の骨ねじ、骨釘、骨スパイク又は通孔カバーで構成されている請求項１４〜１７のいずれか一つに記載の移植可能な補てつ具。
【請求項１９】
前記球形又は球形に近いヘッドが、中心点を有する球体のスライス部分で構成され、そしてそのヘッドが前記中心点を包含している請求項１４〜１８のいずれか一つに記載の移植可能な補てつ具。
【請求項２０】
前記開口が内壁を有し、前記球形又は球形に近いヘッドが外周縁を有し、そして、前記挿入部材が、前記内壁と前記外周縁の定点接触を維持しながら、前記開口中に角度をつけて挿入されるように構成されている請求項１４〜１９のいずれか一つに記載の移植可能な補てつ具。
【請求項２１】
前記補てつ具が股関節置換システムを含み、そして前記第一表面と第二表面が寛骨臼カップの表面である請求項１４〜２０のいずれか一つに記載の移植可能な補てつ具。
【請求項２２】
前記球形又は球形に近いヘッドと前記延長テーパー部分の界面が、液密シールを構成している請求項１４〜２１のいずれか一つに記載の移植可能な補てつ具。
【請求項２３】
前記開口が万能形の開口であり、そして前記挿入部材が骨ねじ、骨釘、骨スパイク又は通孔カバーのいずれか一つで構成され、そして前記骨ねじ、骨釘、骨スパイク又は通孔カバーのいずれか一つが、前記万能形開口に対応する万能形の球形又は球形に近いヘッドを備えている請求項１４〜２０のいずれか一つに記載の移植可能な補てつ具。
【手続補正書】
【提出日】平成15年9月24日(2003.9.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
挿入端部を有する少なくとも一つのニードル；
少なくとも一つの拡張器；及び
患者の腹部壁から尿道へと伸び、腹部壁へと戻るための十分な長さを有するスリング材料；
で構成され、
前記拡張器が、第一端部分を有し、かつ、前記スリングを前記拡張器に関連付けるための関連付け手段を伴い；
前記拡張器が、第二端部分を有し、かつ：
該拡張器／前記ニードル組み合わせ物を形成するために、該拡張器が、前記挿入端部へと確実に結合するために適合された結合手段；及び
該拡張器が、前記ニードルによって前記患者の前記組織を介して引き抜かれる際、前記該拡張器／前記ニードル組み合わせ物の通過に伴い組織を押しのけるべく寸法付けされ成形される傾斜表面；
で構成されることを特徴とする患者を処置するための外科的装置。
【手続補正書】
【提出日】平成16年10月4日(2004.10.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７４】
表１は、単一塩基ミスマッチを含有するヘテロ二重鎖合成基質のＴｍａエンドヌクレアーゼＶ開裂の結果の要約を提供している。あらゆる可能性のある塩基変化に対して、次を形成する２種の可能性のあるヘテロ二重鎖生成物がある。Ａ⇔Ｇ（Ａ−Ｃ，Ｇ−Ｔ）；Ｃ⇔Ｔ（Ｃ−Ａ，Ｔ−Ｇ）；Ａ⇔Ｃ（Ａ−Ｇ，Ｃ−Ｔ）；Ｇ⇔Ｔ（Ｇ−Ａ，Ｔ−Ｃ）；Ａ⇔Ｔ（Ａ−Ａ，Ｔ−Ｔ）、およびＧ⇔Ｃ（Ｇ−Ｇ，Ｃ−Ｃ）。
（表１）単一塩基ミスマッチを含有するヘテロ二重鎖合成基質のＴｍａエンドヌクレアーゼＶ開裂の要約
2004526423.tif 000001
備考：
上方鎖：
2004526423.tif 000002
下方鎖：
2004526423.tif 000003
開裂記号：（＋＋＋）：高強度の開裂。（＋＋）：中強度の開裂。（＋）：低強度の開裂。（−）開裂なし。
これらのヘテロ二重鎖生成物の開裂は必ずしも同一ではないが（即ち、Ａ−ＣをＣ−Ａと比較する）、これは隣接配列変化の結果としてのＤＮＡの構造における繊細さを反映している。それでも、可能性のある各塩基変化に対して、少なくとも１本の上方鎖および少なくとも１本の下方鎖に対してシグナルが生成される。従って、ＴｍａエンドＶ酵素は、いずれかの可能性のある単一塩基変異または多型性を認識できるはずである。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５２】
タンパク質−基質相互作用に直接関係する残基は、同一ファミリーの酵素間で保存される強度の傾向を有している。このため、一次アミノ酸配列アライメントにおいて、高度に保存された残基は突然変異誘発のための優れた候補を表している。突然変異誘発に適したテルモトガ・マリチマ・エンドＶにおける位置を同定するために、ＰＡＭ２５０残基重量表を用いたＣｌｕｓｔａｌＷアライメントアルゴリズム（ペアワイズアライメント・パラメーター：Ｋｔｕｐｌｅ＝１、ギャップペナルティ＝３、ウィンドウ＝５、およびＤｉａｇｏｎａｌｓ  Ｓａｖｅｄ＝５；複数アライメント／パラメーター：ギャップペナルティ＝１０およびギャップ長ペナルティ＝１０）を使用して高温性および中温性始原菌および真核生物（即ち、テルモトガ・マリチマ（配列番号：３７）、ピロバクルム・アエロフィウム（配列番号：３８）、ピロコッカス・ホリコシ（配列番号：３９）、ピロコッカス・アビッシ（配列番号：４０）、ピロコッカス・フリオサス（配列番号：４１）、アルカエグロブス・フルギドゥス（配列番号：４２）、アエロピルム・ペルニクス（配列番号：４３）、クロストリジウム・アセトブチリクム（配列番号：４４）、ペスト菌（配列番号：４５）、大腸菌（配列番号：４６）、枯草菌（配列番号：４７）、ネズミチフス菌（配列番号：４８）、およびストレプトミセス・コエリカラー（Ｓｔｒｅｐｔｏｎｙｃｅｓ  ｃｏｅｌｉｃｏｌｏｒ）（配列番号：４９）、大多数の配列、一番上の行（配列番号：５０））からの１３種の同定されたおよび推定されたエンドＶ酵素間で一次アミノ酸配列アライメントを実施した（図１９）。アライメントに利用した酵素の大多数は推定エンドＶ酵素であるので、これらの酵素の大多数のミスマッチ特異性は不明である。その結果として、テルモトガ・マリチマ・エンドＶ中の候補残基を同定するためにアライメントを利用すると、同種酵素が類似または相違する特異性のどちらを有するのかを推定できる。類似特異性を有すると推定した場合は、エンドＶの大多数に対して高度に保存されている残基が候補を提供する。相違する特異性を推定した場合は、２セットの高度に保存された残基が存在する位置は候補を表している。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１６８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１６８】
実施例２７  異型エンドヌクレアーゼ類をアッセイするためのＤＮＡ開裂反応
蛍光標識デオキシオリゴヌクレオチド基質は、（参照してここにその全体が組み込まれるＨｕａｎｇ  Ｊ.ら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，４０（３０）：８７３８−８７４８（２００１））に記載されている通りに作製した。典型的なイノシン基質の配列（各々、配列番号：１〜２）は次の通りである。
2004526423.tif 000004
上方鎖でのニック事象は、２７ｎｔ標識生成物を生成するが下方鎖では３８ｎｔ標識生成物を生成する。開裂反応は、１０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７.４）、１ｍＭ  ＤＴＴ、２％グリセロール、他に規定されていない限り５ｍＭ  ＭｇＣｌ２、１０ｎＭ  ＤＮＡ基質、および指示された量の精製ＴｍａエンドヌクレアーゼＶタンパク質を含有する２０μＬ反応混合物中で６５℃で３０分間実施した。この反応は等量のＧｅｎｅＳｃａｎ停止液を添加することで終了させた。この反応混合物をその後９４℃で２分間加熱し、氷上で冷却した。３μＬの検体を１０％ＧｅｎｅＳｃａｎ変性ポリアクリルアミドゲル（パーキン・エルマー製）上に装填した。電気泳動は、ＡＢＩ３７７シーケンサー（パーキン・エルマー製）を使用して１，５００ボルトで１時間実施した。開裂生成物および残留基質は、ＧｅｎｅＳｃａｎ解析ソフトウエア、バージョン２.１または３.０を使用して定量した。