【手続補正書】
【提出日】平成16年7月1日(2004.7.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
造血幹細胞（ＨＳＣ）またはその子孫を含む細胞試料を得る工程；
グルクロン酸およびＮ−アセチルグルコサミンのニ糖繰り返し配列の少なくとも１個を有する炭水化物配列またはその同等物の少なくとも１個の存在を検出する工程；および
その配列またはその同等物を有するＨＳＣまたその子孫を同定する工程、
を含むＨＳＣまたはその子孫を同定する方法。
【請求項２】
造血幹細胞（ＨＳＣ）またはその子孫を含む細胞試料を得る工程；
細胞上のヒアルロン酸（ＨＡ）またはヒアルロン酸シンターゼ（ＨＡＳ）もしくはその断片の存在を検出する工程；および
細胞上のＨＡ、ＨＡＳまたはその断片を有する細胞をＨＳＣまたはその子孫として同定する工程、
を含むＨＳＣまたはその子孫を同定する方法。
【請求項３】
ＨＡまたはＨＡＳを検出する、請求項２記載の方法。
【請求項４】
ＨＡＳの一部に対応するペプチド配列またはその同等物を検出する、請求項３記載の方法。
【請求項５】
細胞とマーカーとの相互作用を促進する手法で、試料をヒアルロン酸（ＨＡ）またはヒアルロン酸シンターゼ（ＨＡＳ）もしくはその断片用のマーカーに暴露するか、またはそのマーカーと混合する、請求項２記載の方法
【請求項６】
マーカーが、そのマーカーの同定を強化させるための標識を含む、請求項５記載の方法。
【請求項７】
蛍光、放射線または酵素標識が、検出を強化させるためのマーカーに結合している、請求項６記載の方法。
【請求項８】
マーカーが、細胞表面上のヒアルロン酸（ＨＡ）またはヒアルロン酸シンターゼ（ＨＡＳ）もしくはその断片を同定する請求項５記載の方法。
【請求項９】
マーカーが、ＨＡ，ＨＡＳまたはその断片への抗体；ＨＡ，ＨＡＳまたはその断片への結合蛋白質；ＤＮＡ，ＲＮＡ、ｍＲＮＡ、またはＨＡあるいはＨＡＳ蛋白質の存在によってＨＡまたはＨＡＳの発現を検出し得る核酸検出システム；およびＨＡ，ＨＡＳまたはその断片用の酵素、蛍光または比色アッセイからなる群から選択される、請求項８記載の方法。
【請求項１０】
マーカーが、ヒアルロン酸結合蛋白質（ＨＡＢＰ）またはＨＡＢＰに基づく合成指示薬である、請求項８記載の方法。
【請求項１１】
試料を、ＨＡ、ＨＡＳまたはその断片の検出前にＣＤ３４＋細胞に対して濃縮する、請求項２項記載の方法。
【請求項１２】
ＨＳＣまたはその子孫を含む細胞集団を得る工程；
その細胞集団をＨＡ，ＨＡＳまたはその断片に対する結合タンパク質と混合する工程；
細胞上のＨＡ，ＨＡＳまたはその断片の存在を検出する工程；および
ＨＡ、ＨＡＳまたはその断片の存在によって同定されたそれらの細胞を選び出す工程、
を含むＨＳＣまたはその子孫を濃縮した細胞集団を得る方法。
【請求項１３】
検出方法が、ＨＡもしくはＨＡＳへの抗体；またはＨＡへの結合蛋白質（ＨＡＢＰ）の使用を伴う、細胞上のＨＡ，ＨＡＳまたはその断片の存在を検出することをさらに含む、請求項１２記載の方法。
【請求項１４】
ＨＳＣまたはその子孫を含む細胞集団を得る工程；
細胞上のＨＡ，ＨＡＳまたはその断片の存在を検出する工程；および
細胞上のＨＡ，ＨＡＳまたはその断片の存在によって同定されたそれらの細胞を選び出す工程、
を含む細胞集団からＨＳＣまたはその子孫を除去する方法。
【請求項１５】
請求項２項記載の方法および特異的細胞系列用の特異的マーカーを用いて細胞系列を同定および単離することを含む、ＨＳＣ集団内の亜集団を単離するための方法。
【請求項１６】
ＣＤ３４＋を前濃縮し、請求項８記載のＨＡ、ＨＡＳまたはその断片の検出によってＨＳＣまたはその子孫を同定し、別のマーカーをＨＡ、ＨＡＳまたはその断片用のマーカーと別個か、または組合わせて用いて、その亜集団を識別することを含む、ＨＳＣ集団内の亜集団を識別するための方法。
【請求項１７】
細胞および抗体またはマーカーを、抗体またはマーカーがＨＡまたはＨＡＳおよびＨＳＣまたはその子孫に特異的に結合するのに十分な条件下で混合し、その後定量する、試料中のＨＳＣまたはその子孫の数を測定すための診断アッセイ。
【請求項１８】
ＨＳＣまたはその子孫を含む細胞集団を得ること；
細胞上のＨＡ、ＨＡＳまたはその断片の存在を検出すること；
細胞上のＨＡ，ＨＡＳまたはその断片の存在によって同定されたそれらの細胞を選択すること；
ＨＡ，ＨＡＳまたはその断片の存在によって同定されたそれらの細胞を単離すること、
を含むＨＳＣまたはその子孫を単離する方法。
【請求項１９】
ＨＳＣまたはその子孫を含む細胞集団を得ること；
その細胞集団をＨＡ，ＨＡＳまたはその断片に対する結合蛋白質と混合すること；
ＨＡ、ＨＡＳまたはその断片に対する結合蛋白質によって同定されたそれらの細胞を選択すること；
その結合蛋白質によって同定された細胞を単離すること、
を含むＨＳＣまたはその子孫を単離する方法。
【請求項２０】
ＨＳＣまたはその子孫を含む細胞集団を得ること；
その細胞集団をＨＡ，ＨＡＳまたはその断片に対する抗体と混合すること；
ＨＡ，ＨＡＳまたはその断片に対する抗体によって同定されたそれらの細胞を選択すること；
その抗体によって同定された細胞を単離すること、
を含むＨＳＣまたはその子孫を単離する方法。
【請求項２１】
抗体が、ＨＡまたはＨＡＳに特異的である、請求項２０記載の方法。
【請求項２２】
抗体が、全種のαＨＡポリクローナルヒツジ抗体である、請求項２１記載の方法。
【請求項２３】
ＣＤ３４＋、ＣＤ３８−、ｔｈｙ１＋およびＨＡ＋細胞を含む細胞の濃縮集団を含む、濃縮したＨＳＣおよびその子孫の組成物。
【請求項２４】
自家生着における諸求項２３記載の組成物の使用。
【請求項２５】
遺伝子欠損を修復するため、またはＨＳＣもしくはその子孫あるいはその子孫の生来欠いている遺伝子能力を提供するための、遺伝子導入によって改変された請求項２３記載の組成物の使用。
【請求項２６】
ＨＳＣまたはその子孫の再生および分化に関連する因子を単離および定義するための、請求項２３記載の組成物の使用。
【請求項２７】
ＨＳＣまたはその子孫を含む細胞集団を得ること；
その細胞集団をＨＡ，ＨＡＳまたはその断片に対する結合蛋白質と混合すること；
ＨＡ，ＨＡＳまたはその断片に対する結合蛋白質によって同定されたそれらの細胞を選択すること；
その結合蛋白質による選択の前の細胞集団中の細胞の量に対する選択細胞の量を定量すること、
を含むＨＳＣまたはそれらの子孫の含量を測定する方法。
【請求項２８】
ＨＳＣまたはその子孫を含む細胞集団を得ること；
その細胞集団をＨＡ，ＨＡＳまたはその断片に対する抗体と混合すること；
ＨＡ，ＨＡＳまたはその断片に対する抗体によって同定されたそれらの細胞を選択すること；
そのＨＡまたはＨＡＳ抗体による選択の前の細胞集団中の細胞の量に対する選択細胞の量を定量すること、
を含むＨＳＣまたはその子孫の含量を測定する方法。
【請求項２９】
ＨＳＣ関連状態の診断のための、請求項２７または２８記載の方法の使用。
【請求項３０】
ＨＡまたはＨＡＳもしくはその断片の指示薬および担体を含む、集団内のＨＳＣまたはその子孫を検出するための組成物。
【請求項３１】
ＨＡ，ＨＡＳまたはその断片の指示薬が、ＨＳＣまたはその子孫上のＨＡまたはＨＡＳもしくはその断片を同定し得る検出手段を含む、請求項３０記載の組成物。
【請求項３２】
指示薬が、ＨＡ，ＨＡＳまたはその断片への抗体または結合蛋白質である、請求項３１記載の組成物。
【請求項３３】
結合蛋白質が、ＨＡＢＰである、請求項３２記載の組成物。
【請求項３４】
特異的細胞系列を識別するための別のマー力一を含む、請求項３１記載の組成物。
【請求項３５】
請求項２記載の方法により細胞集団中のＨＳＣまたはその子孫の存在を同定することで、ＨＳＣまたはその子孫に関連する状態を診断する方法。
【請求項３６】
ＨＳＣまたはその子孫中のＨＡ，ＨＡＳまたはその断片の発現および／または活性を調整することを含む、ＨＳＣまたはその子孫の増殖および／また分化を制御する方法。
【請求項３７】
ＨＳＣ内のＨＡまたはＨＡＳの発現および／または活性の調整を、ＨＡまたはＨＡＳのアンタゴニスト、阻害剤、擬似物質または誘導体を用いて実行する、請求項３６記載の方法。
【請求項３８】
請求項１２記載の方法により調製されたＨＳＣまたはその子孫の濃縮集団を含む組成物の有効量を投与することを含む、ＨＳＣ関連状態を処置する方法。
【請求項３９】
エリトロポエチン、コロニー刺激因子、インターロイキンから選択される因子、およびＨＳＣまたはその子孫に関連するストローマ細胞を用いて、１種以上の選択系列への成熟、増殖および分化をもたらすことによる、免疫無防備状態の宿主を再生させるための、または特異的系列のための細胞源としての、請求項１２記載の方法により調製された細胞の使用。
【請求項４０】
造血細胞の分化および成熟に関連する因子の単離および評価における、請求項１２記載の方法により調製されたＨＳＣおよびその子孫の使用。
【請求項４１】
遺伝子疾患の処置のための、請求項１２記載の方法により調製されたＨＳＣの使用。
【請求項４２】
ＨＳＣまたはその子孫の非制御的増殖から生じるＨＳＣ関連状態を処置する方法であって、ＨＳＣまたはその子孫内でのＨＡ，ＨＡＳまたはその断片の発現を制御することを含む方法。
【請求項４３】
ＨＳＣまたはその子孫の非制御的増殖から生じるＨＳＣ関連状態を処置する方法であって、ＨＳＣまたはその子孫内でのＨＡ、ＨＡＳまたはその断片の発現および／または活性を低下させることを含む方法。
【請求項４４】
ＨＳＣまたはその子孫の分化から生じるＨＳＣ関連状態を処置する方法であって、ＨＳＣまたはその子孫内でのＨＡ，ＨＡＳまたはその断片の発現および／または活性を制御することを含む方法。
【請求項４５】
ＨＳＣまたはその子孫の分化から生じるＨＳＣ関連状態を処置する方法であって、ＨＳＣまたはその子孫内でのＨＡ，ＨＡＳまたはその断片の発現および／または活性を低下させることを含む方法。
【請求項４６】
ＨＳＣもしくはその子孫を同定または単離するための診断用構成品の調製におけるヒアルロン酸（ＨＡ）またはヒアルロン酸シンターゼ（ＨＡＳ）もしくはその断片用マーカーの使用。