【手続補正書】
【提出日】平成17年4月11日(2005.4.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
体液又は組織から所定の細胞成分を収集する方法であって、
ａ）少なくとも１本の導入チューブと少なくとも１本の排出チューブを具備する、ドーナッツ形状の可撓性遠心機バッグを準備するステップと、
ｂ）遠心機を準備するステップと、
ｃ）前記可撓性遠心機バッグを前記遠心機内に固定して、前記遠心機中で回転できるようにするステップと、
ｄ）前記遠心機を回転して及び前記遠心機バッグを回転させるステップと、
ｅ）前記体液又は組織の一部を、回転している前記遠心機バッグ内に前記導入チューブを介して供給して、前記体液又は組織を２つ以上の分画として径方向に分離させるステップであって、前記分画の１つが、前記所定の細胞成分を含有し、前記排出チューブの遠位端が、前記所定の細胞成分と流体連通した状態にあるステップと、
ｆ）前記所定細胞の大部分が前記バッグから取り出されるまで、前記所定成分を含有する前記分画を、前記排出チューブを介して回転している前記遠心機バッグから抜き取り、前記排出チューブの前記遠位端付近に不要な分画が検出された時点で、前記所望細胞の抜取りを終了するステップと
を含む方法。
【請求項２】
体液又は組織から所定の細胞成分を収集する方法であって、
ａ）ｉ）軸方向コアを有する剛性環状本体と、
ｉｉ）外周及び内周を有し、断面を、最も狭い部分が前記内周により近く位置しやや偏心した８の字形状とする、遠心処理時に前記体液又は組織を収容及び保持するための内側収集チャンバと、
ｉｉｉ）前記コアから前記チャンバの外周近傍までの距離を径方向に延伸し、その遠位端を前記チャンバ内部と流体連通する導入チャネルと、
ｉｖ）前記コアから前記チャンバの最も狭い部分にほぼ隣接するまでの距離を径方向に延伸し、前記最も狭い部分にて前記チャンバ内部と流体連通している排出チャネルと
を含む剛性遠心機容器を準備するステップと、
ｂ）遠心機を準備するステップと、
ｃ）前記剛性遠心機容器を前記遠心機に固定するステップと、
ｄ）前記遠心機及び前記遠心機容器を回転させるステップと、
ｅ）前記体液又は組織の一部を、回転している前記遠心機容器内に前記導入チャネルを介して供給して、前記体液又は組織を、少なくとも２つの分画として前記チャンバ内にて径方向に分離させるステップであって、前記分画の１つが、前記所定の細胞成分を含有し、前記排出チャネルの遠位端が前記所定成分と流体連通するように配設されているステップと、
ｆ）前記所定成分を、回転している前記遠心機容器から前記排出チャネルを介して抜き取るステップと
を含む方法。
【請求項３】
体液又は組織から所定の細胞成分を収集する方法であって、
ａ）導入チューブと少なくとも１本の排出チューブとを具備する可撓性遠心機バッグを準備するステップと、
ｂ）前記可撓性遠心機バッグを間に保持するように、下方環状チャネルを有する環状基部と、上方環状チャネルを有する環状カバーとを含む回転自在なロータを準備するステップと、
ｃ）前記可撓性遠心機バッグを前記基部内に配設するステップと、
ｄ）前記カバーを前記基部上に重ね合わせることにより、内側チャンバを、前記上方チャネルと下方チャネルとでやや偏心した８の字断面形状とし、且つ前記遠心機バッグを、固定しながら前記ロータと回転できる状態にするステップと、
ｅ）前記ロータを回転させるステップと、
ｆ）前記体液又は組織の一部を、回転している前記遠心機バッグ内に前記導入チューブを介して導入して、前記体液又は組織を、それぞれの密度に基づく少なくとも２つの分画として、中心軸から異なる径方向距離に分離させるステップであって、前記分画の１つが前記所定成分を含有し、前記排出チューブの遠位端が前記所定成分と流体連通するように配設されているステップと、
ｇ）前記所定細胞成分の分画を、前記排出チューブを介して取り出すステップと
を含む方法。
【請求項４】
トランスフェクトされた遺伝子を含む自家由来血小板ゲルを作製する方法であって、
ａ）複数の不活性な血液成分を有する第一の抗凝固剤入り自家由来血液試料を受け入れて分離するための遠心容器を準備し、
ｂ）前記遠心容器を回転し、
ｃ）前記ゲルを適用される個体由来の前記第一の抗凝固剤入り自家由来全血試料の第１の一部を、前記遠心容器に供給し、それによって、前記全血を、径方向に、赤血球細胞を含む最も外側の分画と、白血球細胞及び血小板を含む中間軟層分画(a middle buffy coat fraction)と、貧血小板血漿を含む最も内側の分画とに分離し、
ｄ）前記軟層(buffy coat)分画を、前記回転している遠心容器から回収し、
ｅ）前記単離された軟層分画の前記血小板を活性化し、
ｆ）ステップｅ）からの前記単離された軟層分画中の前記白血球細胞に、ベクター／遺伝子の組合体をトランスフェクションし、
ｇ）前記トランスフェクトされた白血球を含む前記軟層分画に、前記第一の自家由来血液試料の第２の一部から又は前記個体由来の第二の自家由来血液試料から単離したトロンビン及び非活性の血液成分を組合わせる
トランスフェクトされた遺伝子を含む自家由来血小板ゲルを作製する方法。
【請求項５】
所定の幾何学的形状を有し、トランスフェクトされた遺伝子及び血液成分を含む自家由来血小板ゲルであって、前記血小板ゲルを形成する前記血液成分の総てが、前記ゲルを適用される個体から単離される、自家由来血小板ゲル。
【請求項６】
幹細胞、軟層、骨髄細胞、赤血球、白血球、血小板、血清、蛍光標識細胞、及び磁気標識細胞からなる群から選択される、体液又は組織からの所定の細胞成分を収集する方法であって、
ａ）前記体液又は組織を受け入れるための遠心容器を準備し、
ｂ）前記遠心容器を回転し、
ｃ）前記体液又は組織の一部を、前記遠心容器に供給し、それによって、前記体液又は組織を、径方向に、少なくとも２の分画であって、その１つが前記所定の細胞成分を含む分画に分離し、
ｄ）前記所定の細胞成分を含む前記分画を、前記回転している遠心容器から回収する
体液又は組織からの所定の細胞成分を収集する方法。
【請求項７】
無菌移植のための骨髄細胞を摘出する方法であって、
ａ）複数の成分を有する自家由来骨髄試料を遠心容器に導入し、
ｂ）前記遠心容器を回転し、それによって、前記骨髄を、径方向に、少なくとも２の分画であって、その１つが骨髄細胞を含む分画に分離し、
ｃ）前記骨髄細胞分画を、前記回転している遠心容器から回収する
無菌移植のための骨髄細胞を摘出する方法。
【請求項８】
第一の患者に由来する骨髄細胞を、第二の患者へ無菌移植する方法であって、
ａ）前記第一の患者由来の複数の成分を有する骨髄試料を、遠心容器に導入し、
ｂ）前記遠心容器を回転し、それによって、前記骨髄を、径方向に、少なくとも２の分画であって、その１つが骨髄細胞を含む分画に分離し、
ｃ）前記骨髄細胞分画を、前記回転している遠心容器から回収し、前記骨髄細胞分画を前記第二の患者へ導入する
第一の患者に由来する骨髄細胞を、第二の患者へ無菌移植する方法。
【請求項９】
軟層分画を全血から単離する方法であって、
ａ）複数の不活性な血液成分を有する抗凝固剤入り自家由来血液試料を、遠心容器へ導入し、
ｂ）前記遠心容器を回転し、それによって、前記全血を、径方向に、赤血球細胞を含む最も外側の分画と、白血球細胞及び血小板を含む中間軟層分画と、貧血小板血漿を含む最も内側の分画とに分離し、
ｃ）前記軟層分画を、前記回転している遠心容器から回収する
軟層分画を全血から単離する方法。
【請求項１０】
ベクター／遺伝子の組合体のための自家の生物学的な担体を全血から調整する方法であって、
ａ）複数の不活性な血液成分を有する抗凝固剤入り自家由来血液試料を、遠心容器へ導入し、
ｂ）前記遠心容器を回転し、それによって、前記全血を、径方向に、赤血球細胞を含む最も外側の分画と、白血球細胞及び血小板を含む中間軟層分画と、貧血小板血漿を含む最も内側の分画とに分離し、
ｃ）１以上の前記分画を、前記回転している遠心容器から回収する
ベクター／遺伝子の組合体のための自家の生物学的な担体を全血から調整する方法。
【請求項１１】
遺伝子治療用組成物の製造方法であって、
ａ）複数の不活性な血液成分を有する第一の抗凝固剤入り自家由来血液試料の第１の一部を、遠心容器へ導入し、
ｂ）前記遠心容器を回転し、それによって、前記全血を、径方向に、赤血球細胞を含む最も外側の分画と、白血球細胞及び血小板を含む中間軟層分画と、貧血小板血漿を含む最も内側の分画とに分離し、
ｃ）１以上の前記分画を、前記回転している遠心容器から回収し、
ｄ）前記１以上の回収された分画に、ベクター／遺伝子の組合体をトランスフェクションし、
ｅ）前記トランスフェクトされた分画に、前記第一の自家由来試料の第２の一部から又は第二の自家由来試料から単離したトロンビン及び非活性の血液成分を組合わせる
遺伝子治療用組成物の製造方法。
【請求項１２】
患者における新規骨髄の産生及び／又は骨髄密度を増加する方法であって、
ａ）複数の不活性な血液成分を有する抗凝固剤入り自家由来血液試料を、遠心容器へ導入し、
ｂ）前記遠心容器を回転し、それによって、前記全血を、径方向に、赤血球細胞を含む最も外側の分画と、白血球細胞及び血小板を含む中間軟層分画と、貧血小板血漿を含む最も内側の分画とに分離し、
ｃ）前記軟層分画を、前記回転している遠心容器から回収し、
ｄ）前記回収された軟層分画の前記血小板を活性化し、
ｅ）前記回収された軟層分画中の白血球に、ＬＭＰ−１アデノウイルスをトランスフェクションし、
ｆ）前記トランスフェクトされた軟層分画に、前記患者から単離したトロンビン及び非活性の血液成分を組み合わせ、
ｇ）前記組合わせたものを、前記患者の骨に注入する
患者における新規骨髄の産生及び／又は骨髄密度を増加する方法。
【請求項１３】
患者における新規骨髄の産生及び／又は骨髄密度を増加するための組成物であって、
ＬＭＰ−１アデノウイルスでトランスフェクションされた軟層と、トロンビン及び非活性の血液成分を含有するゲル担体とを含み、
前記軟層、前記トロンビン及び前記非活性の血液成分が、前記患者から単離される
患者における新規骨髄の産生及び／又は骨髄密度を増加するための組成物。
【請求項１４】
標識細胞を液体から分離する方法であって、
ａ）前記標識細胞を含有する前記液体を、遠心容器へ導入し、
ｂ）前記遠心容器を回転し、それによって、前記液体を、径方向に、少なくとも２の分画であって、その１つが前記標識細胞を含む分画に分離し、
ｃ）前記標識細胞を、前記回転している遠心容器から回収する
標識細胞を液体から分離する方法。
【請求項１５】
体液又は組織から所定の細胞成分を収集する方法であって、
ａ）前記体液又は組織の一部を、遠心容器へ導入し、
ｂ）前記遠心容器を回転し、それによって、前記体液又は組織を、径方向に、２以上の分画であって、その１つが前記所定の細胞成分を含む分画に分離し、
ｃ）前記所定の成分を、前記回転している遠心容器から回収する
体液又は組織から所定の細胞成分を収集する方法。