【手続補正書】
【提出日】平成17年2月22日(2005.2.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  複数の共刺激分子またはその機能性部分をコードする外来核酸配列を含む組換えベクター。
【請求項２】  核酸配列が少なくとも３つの共刺激分子をコードする、請求項１に記載の組換えベクター。
【請求項３】  それぞれの共刺激分子をコードする核酸配列が哺乳動物源に由来する、請求項１に記載の組換えベクター。
【請求項４】  複数の共刺激分子が、Ｂ７−１、Ｂ７−２、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−３、４−１ＢＢＬ、ＣＤ５９、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＯＸ−４０Ｌ、ＶＣＡＭ−１、およびその哺乳動物相同体よりなる群から選択される、請求項１に記載の組換えベクター。
【請求項５】  複数の共刺激分子が、Ｂ７−１、ＩＣＡＭ−１およびＬＦＡ−３である、請求項５に記載の組換えベクター。
【請求項６】  さらに、少なくとも１つのサイトカイン、ケモカイン、Ｆｌｔ−３Ｌ、またはその組合わせをコードする外来核酸配列を含む、請求項１に記載の組換えベクター。
【請求項７】  さらに複数のプロモーターを含む、請求項１に記載の組換えベクター。
【請求項８】  プロモーターが真核細胞源、原核細胞源、またはウイルス源に由来する、請求項７に記載の組換えベクター。
【請求項９】  プロモーターが、ＳＶ４０初期プロモーター、ＲＳＶプロモーター、アデノウイルス主要後期プロモーター、ヒトＣＭＶ極初期Ｉプロモーター、ポックスウイルスプロモーター、３０Ｋプロモーター、Ｉ３プロモーター、ｓＥ／Ｌプロモーター、７．５Ｋプロモーター、４０Ｋプロモーター、およびＣ１プロモーターよりなる群から選択される、請求項７に記載の組換えベクター。
【請求項１０】  組換えベクターが、細菌、ウイルス、および核酸ベースのベクターよりなる群から選択される、請求項１に記載の組換えベクター。
【請求項１１】  組換えベクターが、ポックスウイルス、アデノウイルス、ヘルペスウイルス、アルファウイルス、レトロウイルス、ピコルナウイルス、およびイリドウイルスよりなる群から選択される、請求項１に記載の組換えベクター。
【請求項１２】  組換えベクターが組換えポックスウイルスである、請求項１１に記載の組換えベクター。
【請求項１３】  組換えポックスウイルスが複製性ウイルスまたは非複製性ウイルスである、請求項１２に記載の組換えベクター。
【請求項１４】  組換えポックスウイルスがオルトポックス、アビポックス、カプリポックスまたはスイポックスである、請求項１２に記載の組換えベクター。
【請求項１５】  アビポックスが、ニワトリポックス、カナリアポックス、またはその誘導体である、請求項１４に記載の組換えベクター。
【請求項１６】  オルトポックスが、ワクシニア、ワクシニア−コペンハーゲン株、ワクシニア−Ｗｙｅｔｈ株、ＮＹＶＡＣ、ワクシニア−ＭＶＡ株、アライグマポックスまたはウサギポックスである、請求項１４に記載の組換えベクター。
【請求項１７】  さらに、少なくとも１つのターゲット抗原またはその免疫エピトープをコードする外来核酸配列を含む、請求項１に記載の組換えベクター。
【請求項１８】  ターゲット抗原が、配列番号：２〜配列番号：４０よりなる群から選択されるアミノ酸配列をもつ、請求項１７に記載の組換えベクター。
【請求項１９】  ターゲット抗原が、腫瘍特異性抗原、腫瘍関連抗原、組織特異性抗原、細菌抗原、ウイルス抗原、酵母抗原、真菌抗原、原虫抗原、および寄生虫抗原ならびにマイトジェンよりなる群から選択される、請求項１７に記載の組換えベクター。
【請求項２０】  細菌抗原が、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ、Ｍｅｎｉｎｇｉｏｃｏｃｃｕｓ、Ａ群Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｈｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、ＳａｌｍｏｎｅｌｌａおよびＬｉｓｔｅｒｉａよりなる群から選択される細菌に由来する、請求項１８に記載の組換えベクター。
【請求項２１】  ウイルス抗原が、レンチウイルス、ヘルペスウイルス、肝炎ウイルス、オルトミクソウイルスおよびパピローマウイルスよりなる群から選択されるウイルスに由来する、請求項１８に記載の組換えベクター。
【請求項２２】  レンチウイルスがＨＩＶ−１またはＨＩＶ−２である、請求項２１に記載の組換えベクター。
【請求項２３】  ヘルペスウイルスがＨＳＶまたはＣＭＶである、請求項２１に記載の組換えベクター。
【請求項２４】  肝炎ウイルスがＡ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎またはＥ型肝炎である、請求項２１に記載の組換えベクター。
【請求項２５】  オルトミクソウイルスがインフルエンザウイルスである、請求項２１に記載の組換えベクター。
【請求項２６】  腫瘍関連抗原、腫瘍特異性抗原または組織特異性抗原が、ＣＥＡ、ＭＡＲＴ−１、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−３、ＧＰ−１００、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−２、点変異ラット癌遺伝子、正常または点変異ｐ５３、過剰発現ｐ５３、ＣＡ−１２５、ＰＳＡ、Ｃ−ｅｒｂ／Ｂ２、ＢＲＣＡ  Ｉ、ＢＲＣＡ  ＩＩ、ＰＳＭＡ、チロシナーゼ、ＴＲＰ−１、ＴＲＰ−２、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＴＡＧ７２、ＫＳＡ、ＨＥＲ−２／ｎｅｕ、ｂｃｒ−ａｂｌ、ｐａｘ３−ｆｋｈｒ、ｅｗｓ−ｆｌｉ−１、修飾ＴＡＡ類、ＴＡＡ類のスプライス変異体、その機能性エピトープおよびエピトープアゴニストよりなる群から選択される、請求項１８に記載の組換えベクター。
【請求項２７】  抗原が、アミノ酸位置５７６にアミノ酸アスパラギン酸をもつＣＥＡ（６Ｄ）である、請求項２６に記載の組換えベクター。
【請求項２８】  抗原がＰＳＡおよびＰＳＭＡである、請求項２６に記載の組換えベクター。
【請求項２９】  抗原が、シグナル配列、１０コピーの縦列反復配列、および３’側コード配列を含む一部切除（ｔｒｕｎｃａｔｅｄ）ＭＵＣ−１遺伝子によりコードされるＭＵＣ−１である、請求項２６に記載の組換えベクター。
【請求項３０】  酵母抗原または真菌抗原が、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ、Ｎｏｃａｒｄｉａ、Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍｏｓｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ、およびＣｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉａよりなる群から選択される酵母または真菌に由来する、請求項１８に記載の組換えベクター。
【請求項３１】  寄生虫抗原が、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ属種、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎｄｉｉ、Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｒｉｎｉｉ、Ｔｒｙｐａｓｏｓｏｍａ属種、またはＬｅｉｓｈｍａｎｉａ属種に由来する、請求項１８に記載の組換えベクター。
【請求項３２】  ベクターがさらに選択性マーカーを含む、請求項１に記載の組換えベクター。
【請求項３３】  選択性マーカーが、ｌａｃＺ遺伝子、チミジンキナーゼ、ｇｐｔ、ＧＵＳおよびワクシニアＫ１Ｌ宿主域遺伝子よりなる群から選択される、請求項３２に記載の組換えベクター。
【請求項３４】  請求項１〜３３のいずれか１項に記載の少なくとも１つの組換えベクターおよび医薬的に許容できるキャリヤーを含む、医薬組成物。
【請求項３５】  請求項１〜１６のいずれか１項に記載の少なくとも１つの組換えベクター、少なくとも１つのターゲット抗原またはその免疫エピトープをコードする少なくとも１つの核酸配列を含む第２組換えベクター、および医薬的に許容できるキャリヤーを含む、医薬組成物。
【請求項３６】  さらに、サイトカイン、ケモカインまたはＦｌｔ−３Ｌを含む、請求項３４または３５に記載の医薬組成物。
【請求項３７】  請求項１〜３３のいずれか１項に記載の組換えベクターで感染、トランスフェクションまたは誘発した宿主細胞。
【請求項３８】  請求項１〜１６のいずれか１項に記載の少なくとも１つの組換えベクターで感染、トランスフェクションまたは誘発し、かつ少なくとも１つのターゲット抗原またはその免疫エピトープをコードする少なくとも１つの外来核酸配列を含む第２組換えベクターで感染、トランスフェクションまたは誘発した宿主細胞。
【請求項３９】  宿主細胞が抗原提示細胞またはその前駆体、悪性前細胞、過形成細胞または腫瘍細胞である、請求項３８に記載の宿主細胞。
【請求項４０】  抗原提示細胞が樹状細胞またはその前駆体、単球、マクロファージ、Ｂ細胞、線維芽細胞または筋細胞である、請求項３９に記載の宿主細胞。
【請求項４１】  抗原提示細胞が骨髄、脾臓、皮膚、末梢血、腫瘍、リンパ節または筋肉に由来する、請求項３９に記載の宿主細胞。
【請求項４２】  宿主細胞が抗原提示細胞もしくはその前駆体、悪性前細胞、過形成細胞または腫瘍細胞である、請求項３８に記載の宿主細胞。
【請求項４３】  抗原提示細胞が樹状細胞、その前駆体もしくは誘導体、単球、マクロファージ、Ｂ細胞、線維芽細胞または筋細胞である、請求項４２に記載の宿主細胞。
【請求項４４】  誘導体がＴＮＦα処理樹状細胞、ＣＤ４０処理樹状細胞、または付着細胞サブポピュレーションである、請求項４３に記載の宿主細胞。
【請求項４５】  複数の共刺激分子をコードする外来核酸配列を含む樹状細胞またはその前駆体。
【請求項４６】  複数の共刺激分子をコードする外来核酸配列を含む腫瘍細胞またはその前駆体。
【請求項４７】  細胞が少なくとも３つの共刺激分子をコードする外来核酸配列を含む、請求項４５または４６に記載の細胞。
【請求項４８】  複数の共刺激分子が、Ｂ７−１、Ｂ７−２、ＩＣＡＭ−１、ＬＦＡ−３、４−１ＢＢＬ、ＣＤ５９、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＯＸ−４０Ｌ、ＶＣＡＭ−１、その哺乳動物相同体、およびその組合わせよりなる群から選択される、請求項４５または４６に記載の細胞。
【請求項４９】  複数の共刺激分子が、少なくともＢ７−１、ＩＣＡＭ−１およびＬＦＡ−３である、請求項４５または４６に記載の細胞。
【請求項５０】  さらに、少なくとも１つのターゲット抗原またはその免疫エピトープをコードする外来核酸配列を含む、請求項４５または４６に記載の細胞。
【請求項５１】  少なくとも１つのターゲット抗原またはその免疫エピトープをコードする外来核酸配列が、組換えベクター、腫瘍細胞溶解物由来のＲＮＡもしくはＤＮＡにより、またはその配列を含む腫瘍細胞との融合により供給される、請求項５０に記載の細胞。
【請求項５２】  ターゲット抗原またはその免疫エピトープが、腫瘍特異性抗原、腫瘍関連抗原、組織特異性抗原、細菌抗原、ウイルス抗原、酵母抗原、真菌抗原、原虫抗原、寄生虫抗原およびマイトジェンよりなる群から選択される、請求項５０に記載の細胞。
【請求項５３】  請求項４５〜５２のいずれか１項に記載の細胞、および所望によりターゲット抗原またはその免疫エピトープの外因性供給源を含む、医薬組成物。
【請求項５４】  複数の共刺激分子をコードする外来ＤＮＡがウイルスゲノムに組み込まれた組換えポックスウイルスであって、複数の共刺激分子をコードする外来ＤＮＡを含むプラスミドベクターを親ポックスウイルスゲノムと組み換えて、外来ＤＮＡがそのゲノムに挿入された組換えポックスウイルスを作成することを含む方法で作成された組換えポックスウイルス。
【請求項５５】  ＬＦＡ−３、ＩＣＡＭ−１および少なくとも１つのＢ７分子をコードする外来ＤＮＡがウイルスゲノムに組み込まれた組換えポックスウイルスであって、ＬＦＡ−３、ＩＣＡＭ−１および少なくとも１つのＢ７分子をコードする外来ＤＮＡを含むプラスミドベクターを親ポックスウイルスゲノムと組み換えて、外来ＤＮＡがそのゲノムに挿入された組換えポックスウイルスを作成することを含む方法で作成された組換えポックスウイルス。
【請求項５６】  ゲノムがさらに、外来ＤＮＡの発現を制御しうる複数のポックスウイルスプロモーターを含む、請求項５４または５５に記載の組換えポックスウイルス。
【請求項５７】  さらに、少なくとも１つのターゲット抗原またはその免疫エピトープをコードする外来遺伝子を含む、請求項５４または５５に記載の組換えポックスウイルス。
【請求項５８】  請求項５４〜５７のいずれか１項に記載の組換えポックスウイルスおよび医薬的に許容できるキャリヤーを含む、医薬組成物。
【請求項５９】  請求項５４〜５７のいずれか１項に記載の組換えポックスウイルスを含み、さらに少なくとも１つのターゲット抗原またはその免疫エピトープをコードする少なくとも１つの外来核酸配列を含む第２組換えポックスウイルスを含む、医薬組成物。
【請求項６０】  請求項５４〜５７のいずれか１項に記載の組換えポックスウイルスを感染させた宿主細胞。
【請求項６１】  細胞が抗原提示細胞前駆体、抗原提示細胞または工学的に処理した抗原提示細胞である、請求項６０に記載の宿主細胞。
【請求項６２】  細胞が樹状細胞前駆体、樹状細胞、単球、マクロファージ、Ｂ細胞、線維芽細胞または筋細胞である、請求項６１に記載の宿主細胞。
【請求項６３】  細胞が過形成細胞、悪性前細胞または腫瘍細胞である、請求項６０に記載の宿主細胞。
【請求項６４】  複数の共刺激分子またはその機能性部分をコードする核酸配列を含むプラスミドベクター。
【請求項６５】  さらに、選択性マーカーをコードする遺伝子を含む、請求項６４に記載のプラスミドベクター。
【請求項６６】  共刺激分子がヒト由来、非ヒト霊長類由来またはネズミ由来である、請求項６４に記載のプラスミドベクター。
【請求項６７】  さらに、少なくとも１つのターゲット抗原またはその免疫エピトープをコードする外来核酸配列を含む、請求項６４に記載のプラスミドベクター。
【請求項６８】  ターゲット抗原が、腫瘍特異性抗原、腫瘍関連抗原、組織特異性抗原、細菌抗原、ウイルス抗原、酵母抗原、真菌抗原、原虫抗原、寄生虫抗原およびマイトジェンよりなる群から選択される、請求項６７に記載のプラスミドベクター。
【請求項６９】  ターゲット抗原が、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）またはその免疫エピトープである、請求項６８に記載のプラスミドベクター。
【請求項７０】  ＬＦＡ−３、ＩＣＡＭ−１および少なくとも１つのＢ７分子の３つの共刺激分子をコードする外来核酸配列を発現しうる組換えポックスウイルスを作成するために設計された、ポックスウイルスとの組み換えのためのプラスミドベクターであって、（ａ）複数のポックスウイルスプロモーター、（ｂ）ＬＦＡ−３、ＩＣＡＭ−１および少なくとも１つのＢ７分子をコードする外来核酸配列、（ｃ）要素（ａ）および（ｂ）の構築体をフランキングするＤＮＡ配列を含み、５’末端および３’末端の両方のフランキング配列が、要素（ａ）および（ｂ）を挿入する領域の親ポックスウイルスゲノムに相同である、プラスミドベクター。
【請求項７１】  ｐＴ５０６４と表示される、ＡＴＣＣに寄託Ｎｏ．２０３４８２で寄託された、請求項６４に記載のプラスミドベクター。
【請求項７２】  ｐＴ５０４９と表示される、ＡＴＣＣに寄託Ｎｏ．２０３４８１で寄託された、請求項６７に記載のプラスミドベクター。
【請求項７３】  請求項６４〜７２のいずれか１項に記載のプラスミドベクターおよび所望により親ポックスウイルスを含む、組換えポックスウイルス作成用キット。
【請求項７４】  組換えポックスウイルスの作成方法であって、請求項６４〜７２のいずれか１項に記載のプラスミドベクターを親ポックスウイルスゲノムと組み換えて、外来ＤＮＡおよび外来ＤＮＡ発現を制御しうる複数のポックスウイルスプロモーターがそのゲノムに挿入された組換えポックスウイルスを作成することを含む方法。
【請求項７５】  個体において免疫応答を増強するための請求項３４に記載の医薬組成物。
【請求項７６】  静脈内、皮下、リンパ内、腫瘍内、皮内、筋肉内、腹腔内、直腸内、膣内、鼻内、経口投与、膀胱点滴注入、または乱刺法に適している、請求項７５に記載の医薬組成物。
【請求項７７】  増強する免疫応答が細胞仲介性または体液性応答である、請求項７５に記載の医薬組成物。
【請求項７８】  増強が、ＣＤ４+Ｔ細胞増殖、ＣＤ８+Ｔ細胞増殖またはその組合わせの増強である、請求項７５に記載の医薬組成物。
【請求項７９】  増強が、ＣＤ４+Ｔ細胞機能、ＣＤ８+Ｔ細胞機能またはその組合わせの増強である、請求項７５に記載の医薬組成物。
【請求項８０】  増強がＩＬ−２産生、ＩＦＮ−γ産生またはその組合わせにおける増強である、請求項７５に記載の医薬組成物。
【請求項８１】  増強が抗原提示細胞の増殖、機能またはその組合わせの増強である、請求項７５に記載の医薬組成物。
【請求項８２】  個体においてターゲット抗原またはその免疫エピトープに対する抗原特異性Ｔ細胞応答を増強するための医薬組成物であって、少なくとも１つのＢ７分子をコードする外来核酸配列、ＩＣＡＭ−１をコードする外来核酸配列、およびＬＦＡ−３をコードする外来核酸配列、ならびに所望により、ターゲット抗原またはその免疫エピトープをコードする外来核酸配列を含む組換えポックスウイルスを含み、それぞれの核酸配列は個体の感染細胞において少なくともＴ細胞応答を増強するのに有効な量で発現し、その際、この増強が単一の共刺激分子または２つの共刺激分子を用いて得られる増強より大きい、前記医薬組成物。
【請求項８３】  増強が、ＣＤ４+Ｔ細胞増殖、ＣＤ８+Ｔ細胞増殖またはその組合わせの増強である、請求項８２に記載の医薬組成物。
【請求項８４】  増強が、ＩＬ−２産生、ＩＦＮ−γ産生またはその組合わせにおける増強である、請求項８２に記載の医薬組成物。
【請求項８５】  増強が抗原特異性細胞毒性の増強である、請求項８２に記載の医薬組成物。
【請求項８６】  感染細胞が抗原提示細胞である、請求項８２に記載の医薬組成物。
【請求項８７】  細胞が樹状細胞、その前駆体、単球、マクロファージ、Ｂ細胞、線維芽細胞または筋細胞である、請求項８６に記載の医薬組成物。
【請求項８８】  感染細胞が腫瘍細胞またはその前駆体である、請求項８２に記載の医薬組成物。
【請求項８９】  個体において疾病を治療または予防する医薬組成物であって、Ｔリンパ球を単独で、またはターゲット抗原と組み合わせて、免疫応答を増強するのに十分な量で含み、ここで、Ｔリンパ球が、単独の、またはターゲット抗原もしくはその免疫エピトープと組み合わせた請求項３７に記載の細胞にｉｎ  ｖｉｔｒｏで曝露することにより活性化される、前記医薬組成物。
【請求項９０】  Ｔリンパ球が個体とオートロガスである、請求項８９に記載の医薬組成物。
【請求項９１】  さらに、サイトカイン、ケモカイン、ｆｌｔ−３ｌまたはその組合わせを含む、請求項８９に記載の医薬組成物。
【請求項９２】  免疫応答が、腫瘍特異性抗原、腫瘍関連抗原、組織特異性抗原、細菌抗原、ウイルス抗原、酵母抗原、真菌抗原、原虫抗原および寄生虫抗原よりなる群から選択されるターゲット抗原に対するものである、請求項８９に記載の医薬組成物。
【請求項９３】  免疫応答が、ウイルス、細菌、原虫、寄生虫、悪性前細胞および腫瘍細胞よりなる群から選択される細胞または生物により引き起こされる疾病を予防または治療する、請求項８９に記載の医薬組成物。
【請求項９４】  免疫応答を増強するのに有効な量の請求項４５〜５２のいずれか１項に記載の細胞を含む、個体において免疫応答を増強する医薬組成物。
【請求項９５】  細胞が個体とオートロガス、同系または同種異系である、請求項９４に記載の医薬組成物。
【請求項９６】  細胞がターゲット抗原またはそのエピトープでパルス処理されている、請求項９４に記載の医薬組成物。
【請求項９７】  さらに、ターゲット細胞、ターゲット抗原、またはそのエピトープを含む、請求項９４に記載の医薬組成物。
【請求項９８】  さらに、活性化したターゲット抗原特異性リンパ球を含む、請求項９４に記載の方法。
【請求項９９】  複数の共刺激分子を過剰発現する樹状細胞前駆体または樹状細胞を作成する方法であって、
（ａ）複数の共刺激分子をコードする外来遺伝子を含む組換えベクターを、細胞が複数の共刺激分子を過剰発現するのに十分な期間、細胞に供給する
ことを含む方法。
【請求項１００】  細胞が骨髄から単離されたものまたは末梢血単核細胞である、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０１】  組換えベクターがさらに、少なくとも１つのターゲット抗原またはその免疫エピトープをコードする外来遺伝子を含む、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０２】  さらに、（ｂ）少なくとも１つのターゲット抗原またはその免疫エピトープをコードする外来遺伝子を含む第２組換えベクターを細胞に供給することを含む、請求項９９に記載の方法。
【請求項１０３】  ターゲット抗原に対するワクチンの有効性を評価するｉｎ  ｖｉｔｒｏ方法であって、
（ａ）予めターゲット抗原またはその免疫エピトープを接種した個体からリンパ球を採取し、
（ｂ）請求項３９に記載の抗原提示細胞の存在下でターゲット抗原特異性リンパ球の数および機能を測定し、その際、ターゲット抗原特異性リンパ球の数、機能またはその組合わせの増大はそのワクチンの有効性を示すものである
ことを含む方法。
【請求項１０４】  多数のペプチドから新規な免疫原ペプチドをスクリーニングするための方法であって、
（ａ）複数の共刺激分子をコードする組換えベクターを感染させた抗原提示細胞を多数のペプチドでパルス処理して、ペプチドパルスした抗原提示細胞を形成し；
（ｂ）ペプチドパルスした抗原提示細胞の存在下でリンパ球の免疫反応性を測定し、その際、免疫反応性の増大はペプチドパルスした抗原提示細胞上に免疫原ペプチドがあることを示すものである
ことを含む方法。
【請求項１０５】  多数のペプチドの供給源がコンビナトリアルペプチドライブラリーである、請求項１０４に記載の方法。