【手続補正書】
【提出日】平成16年10月27日(2004.10.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞表面膜上にＣＤ１９特異的キメラ受容体を発現および保有し、該キメラ受容体が免疫細胞のエフェクター機能のための細胞内シグナリングドメイン、少なくとも１つの膜貫通ドメインおよび少なくとも１つの細胞外ドメインからなり、細胞外ドメインがＣＤ１９特異的受容体を含む、遺伝子工学的に作製されたＣＤ１９特異的免疫細胞。
【請求項２】
免疫細胞が、Ｔ細胞、ナチュラルキラー細胞、マクロファージ、好中球および骨髄幹細胞よりなる群から選択される、請求項１に記載のＣＤ１９特異的免疫細胞。
【請求項３】
悪性でないヒト細胞である、請求項２に記載のＣＤ１９特異的免疫細胞。
【請求項４】
細胞表面膜上にＣＤ１９特異的キメラ受容体を発現および保有し、該キメラ受容体が
ａ）（１）ＣＤ３のゼータ、イータ、デルタ、ガンマまたはイプシロン鎖、（２）ＭＢ１鎖、（３）Ｂ２９、（４）ＦｃγＲＩＩＩおよび（５）ＦｃεＲＩよりなる群から選択される細胞内シグナリングドメインの群から選択される細胞内シグナリングドメイン；
ｂ）少なくとも１つの膜貫通ドメイン；ならびに
ｃ）ＣＤ１９特異的受容体を含む少なくとも１つの細胞外ドメイン
からなる、遺伝子工学的に作製されたＣＤ１９特異的Ｔ細胞。  
【請求項５】
ＣＤ４＋であり、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでＣＤ１９＋悪性Ｂ細胞と共存培養した際にＩＬ−２を産生する、請求項４に記載のＣＤ１９特異的Ｔ細胞。
【請求項６】
ＣＤ８＋またはＣＤ４＋であり、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでターゲット細胞と共存培養した際にＣＤ１９＋ターゲット悪性Ｂ細胞を溶解する、請求項４に記載のＣＤ１９特異的Ｔ細胞。
【請求項７】
ＣＤ４＋細胞とＣＤ８＋細胞の混合集団を含む、請求項４に記載のＣＤ１９特異的Ｔ細胞。
【請求項８】
ＣＤ１９特異的受容体がＣＤ１９に対する一本鎖モノクローナル抗体のＦｖ領域を含む、請求項４に記載のＣＤ１９特異的Ｔ細胞。
【請求項９】
細胞内シグナリングドメインがヒトＣＤ３ゼータ鎖に由来する、請求項８に記載のＣＤ１９特異的Ｔ細胞。
【請求項１０】
ＣＤ１９特異的キメラ受容体がｓｃＦｖＦｃ：ζを含み、ここでｓｃＦｖＦｃは細胞外ドメインを表わし、ｓｃＦｖはＣＤ１９に対する一本鎖モノクローナル抗体のＶＨおよびＶＬ鎖を表わし、ＦｃはＩｇＧ１の定常部の少なくとも一部を表わし、そしてζはヒトＣＤ３のゼータ鎖の細胞内シグナリングドメインを表わす、請求項９に記載のＣＤ１９特異的Ｔ細胞。
【請求項１１】
細胞外ドメインと細胞内シグナリングドメインがヒトＣＤ４の膜貫通ドメインにより連結されている、請求項１０に記載のＣＤ１９特異的Ｔ細胞。
【請求項１２】
キメラ受容体がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２のアミノ酸２３〜６３４である、請求項１０に記載のＣＤ１９特異的Ｔ細胞。
【請求項１３】
下記よりなるＣＤ１９特異的キメラＴ細胞受容体：
ａ）（１）ＣＤ３のゼータ、イータ、デルタ、ガンマまたはイプシロン鎖、（２）ＭＢ１鎖、（３）Ｂ２９、（４）ＦｃγＲＩＩＩおよび（５）ＦｃεＲＩよりなる群から選択される細胞内シグナリングドメインの群から選択される細胞内シグナリングドメイン；
ｂ）少なくとも１つの膜貫通ドメイン；ならびに
ｃ）ＣＤ１９特異的受容体を含む少なくとも１つの細胞外ドメイン。
【請求項１４】
ｓｃＦｖＦｃ：ζを含むキメラＴ細胞受容体であり、ここでｓｃＦｖＦｃは細胞外ドメインを表わし、ｓｃＦｖはＣＤ１９に対する一本鎖モノクローナル抗体のＶＨおよびＶＬ鎖を表わし、ＦｃはＩｇＧ１の定常部の少なくとも一部を表わし、そしてζはヒトＣＤ３のゼータ鎖のエフェクター機能細胞内シグナリングドメインを表わす、請求項１３に記載のＣＤ１９特異的キメラＴ細胞受容体。
【請求項１５】
細胞外ドメインと細胞内ドメインがヒトＣＤ４の膜貫通ドメインにより連結されている、請求項１４に記載のＣＤ１９特異的キメラＴ細胞受容体。
【請求項１６】
ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２のアミノ酸２３〜６３４である、請求項１５に記載のＣＤ１９特異的キメラＴ細胞受容体。
【請求項１７】
請求項１３〜１６のいずれか１項に記載のＣＤ１９特異的キメラＴ細胞受容体をコードするＤＮＡ構築体。
【請求項１８】
請求項１７に記載のＤＮＡ構築体を発現に適正な配向で含むプラスミド発現ベクター。
【請求項１９】
請求項１に記載のＣＤ１９特異的免疫細胞を療法有効量含む、哺乳動物におけるＣＤ１９＋悪性疾患を処置するための組成物。
【請求項２０】
請求項４〜１２のいずれか１項に記載のＣＤ１９特異的Ｔ細胞を療法有効量含み、所望により同時にＩＬ−２をＴ細胞の効果の補助に有効な量を含む、ヒト患者におけるＣＤ１９＋悪性疾患を処置するための組成物。
【請求項２１】
悪性疾患が、ＣＤ１９＋急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ芽球性白血病、ＣＤ１９＋リンパ腫および慢性リンパ球性白血病よりなる群から選択される、請求項１９または２０に記載の組成物。
【請求項２２】
患者が以前に骨髄除去化学療法および幹細胞レスキューを受けている、請求項１９または２０に記載の組成物。
【請求項２３】
請求項４に記載のＣＤ１９特異的Ｔ細胞を作製および拡張する方法であって、ＣＤ１９特異的キメラ受容体をコードするＤＮＡ構築体を含む発現ベクターでＴ細胞をトランスフェクションし、次いで細胞をＣＤ１９＋細胞、組換えＣＤ１９、または該キメラ受容体に対する抗体で刺激して細胞を増殖させることを含む方法。
【請求項２４】
ＤＮＡから内毒素を枯渇させておき、細胞をマイトジェンで刺激した後にエレクトロポレーションを行う、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
Ｔ細胞が悪性でないヒト細胞である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
Ｔ細胞が末梢血単核細胞である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
キメラ受容体の細胞内シグナリングドメインがヒトＣＤ３のゼータ鎖である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２８】
ＣＤ１９特異的キメラ受容体がｓｃＦｖＦｃ：ζを含み、ここでｓｃＦｖＦｃは細胞外ドメインを表わし、ｓｃＦｖはＣＤ１９に対する一本鎖モノクローナル抗体のＶＨおよびＶＬ鎖を表わし、ＦｃはＩｇＧ１の定常部の少なくとも一部を表わし、そしてζはヒトＣＤ３のゼータ鎖の細胞内シグナリングドメインを表わす、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
細胞外ドメインと細胞内シグナリングドメインがヒトＣＤ４の膜貫通ドメインにより連結されている、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
キメラ受容体がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２のアミノ酸２３〜６３４である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
トランスフェクションした細胞をクローニングし、組み込まれた再配列していない単一プラスミドの存在およびキメラ受容体の発現を示すクローンをｅｘ  ｖｉｖｏで拡張する、請求項２３〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
ｅｘ  ｖｉｖｏ拡張のために選択したクローンがＣＤ８＋であり、ＣＤ１９＋ターゲット細胞を特異的に認識して溶解する能力を示す、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
ｅｘ  ｖｉｖｏ拡張のために選択したクローンが、同じ方法でトランスフェクションした他の細胞と比較して、ＣＤ１９＋ターゲット細胞を特異的に認識して溶解する能力の増強を示す、請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
キメラ受容体がｓｃＦｖＦｃ：ζ受容体を含み、クローンをＩＬ−２およびＯＫＴ３抗体で刺激することにより拡張させる、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
請求項４に記載のＣＤ１９特異的Ｔ細胞を療法有効量含む、患者における有害なＢ細胞機能を阻害するための組成物。
【請求項３６】
ＣＤ１９特異的Ｔ細胞を投与して患者の自己免疫疾患を処置することを特徴とする、請求項３５に記載の組成物。
【請求項３７】
自己免疫疾患が全体的または部分的にＢ細胞により仲介される、請求項３６に記載の組成物。
【請求項３８】
患者に外来物質を投与する前に、ＣＤ１９特異的再指向Ｔ細胞を投与して、患者において免疫抑制を生じさせることを特徴とする、請求項３７に記載の組成物。
【請求項３９】
外来物質がモノクローナル抗体、ＤＮＡ、ウイルスまたは細胞である、請求項３８に記載の組成物。