【手続補正書】
【提出日】平成16年7月21日(2004.7.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
絨毛膜絨毛、羊水、または胎盤のサンプルからc-kit陽性細胞を選択する段階を含む、多能性胎児性幹細胞について増加させた細胞集団を製造するための方法。
【請求項２】
c-kitに対する抗体を用いて選択が行われる、請求項1記載の方法。
【請求項３】
抗体がモノクローナル抗体である、請求項2記載の方法。
【請求項４】
モノクローナル抗体が、ヒトc-kitの抗原性エピトープに対するマウスモノクローナルIgGである、請求項2記載の方法。
【請求項５】
抗体が蛍光色素に連結されたものである、請求項2記載の方法。
【請求項６】
抗体が磁気粒子に結合される、請求項2記載の方法。
【請求項７】
選択がフローサイトメトリーによるものである、請求項1記載の方法。
【請求項８】
選択が蛍光細胞分析分離または高勾配磁気分離によるものである、請求項1記載の方法。
【請求項９】
SSAEおよび／またはSSAE4胚性幹細胞によって発現されるマーカーを発現する細胞について付加的に選択することにより、多能性胎児性幹細胞についてさらに増加させる段階をさらに含む、請求項1記載の方法。
【請求項１０】
SSAE1マーカーを発現する細胞を集団から除去することによって、多能性胎児性幹細胞集団をさらに増加させる段階をさらに含む、請求項1または請求項9記載の方法。
【請求項１１】
絨毛膜絨毛、羊水、または胎盤のサンプルが、選択段階以前に凍結保存される、請求項1記載の方法。
【請求項１２】
c-kit陽性細胞を凍結保存する段階をさらに含む、請求項1記載の方法。
【請求項１３】
以下の段階を含む、多能性胎児性幹細胞について増加させた細胞集団を増殖させる方法：
（a）絨毛膜絨毛、羊水、または胎盤のサンプルから、少なくとも1つのc-kit陽性細胞を選択する段階；
（b）少なくとも1つの選択された該細胞を培養培地に導入する段階；および
（c）培養培地において、少なくとも1つの選択された該細胞を増殖させる段階。
【請求項１４】
絨毛膜絨毛、羊水、または胎盤のサンプルを提供する段階と、1つまたはそれ以上の分化誘導物質にサンプルを曝露することによって、該サンプル内のc-kit陽性細胞の分化を誘導する段階とを含む、c-kit陽性多能性胎児性幹細胞を分化する方法。
【請求項１５】
分化誘導物質によって、骨形成表現型、造血表現型、脂質生成表現型、筋表現型、肝表現型、神経表現型、および内皮表現型からなる群より選択される表現型を有する細胞がもたらされる、請求項14記載の方法。
【請求項１６】
以下の段階を含む、c-kit陽性多能性胎児性幹細胞を分化する方法：
（a）絨毛膜絨毛、羊水、または胎盤のサンプルを提供する段階；
（b）該サンプルから細胞を得る段階；および
（c）1つまたはそれ以上の分化誘導物質に該細胞を曝露することによって、該サンプル内の、段階（b）からのc-kit陽性細胞の分化を誘導する段階。
【請求項１７】
分化誘導物質への曝露以前に細胞が培養される、請求項16記載の方法。
【請求項１８】
分化誘導物質によって、骨形成表現型、造血表現型、脂質生成表現型、筋表現型、肝表現型、神経表現型、および内皮表現型からなる群より選択される表現型を有する細胞がもたらされる、請求項16記載の方法。
【請求項１９】
以下の段階を含む、多能性胎児性幹細胞を保存するための方法：
（a）ヒトの被験者から絨毛膜絨毛、羊水、または胎盤のサンプルを得る段階；
（b）サンプルから、実質的に増加させたc-kit陽性多能性胎児性幹細胞集団を単離する段階；および
（c）単離された、実質的に増加させたc-kit陽性多能性胎児性幹細胞集団を凍結保存する段階。
【請求項２０】
請求項1〜11のいずれか一項記載の方法に従って調製された多能性胎児性幹細胞。
【請求項２１】
c-kit陽性である、単離された多能性胎児性幹細胞。
【請求項２２】
実質的に増加させた多能性c-kit陽性ヒト胎児性幹細胞集団を、その必要のある個体に投与する段階を含む、ヒトにおける疾患を治療する方法。
【請求項２３】
増加させた多能性c-kit陽性ヒト胎児性幹細胞集団を、その必要のあるヒトに移植する方法。
【請求項２４】
増加させた多能性c-kit陽性ヒト胎児性幹細胞集団を含む、骨髄移植に適した組成物。
【請求項２５】
骨形成細胞系統、造血細胞系統、脂肪細胞系統、筋細胞系統、肝細胞系統、神経細胞系統、および内皮細胞系統から選択される系統に分化させた多能性c-kit陽性ヒト胎児性幹細胞を含む実質的に増加させた細胞集団を、その必要のあるヒトに投与する段階を含む、ヒトにおける疾患を治療する方法。
【請求項２６】
疾患がパーキンソン病である、請求項22または請求項25記載の方法。
【請求項２７】
疾患がパーキンソン病であり、細胞系統が神経細胞系統である、請求項25記載の方法。
【請求項２８】
骨形成表現型、造血表現型、脂質生成表現型、筋表現型、肝表現型、神経表現型、および内皮表現型から選択される系統に分化させた多能性c-kit陽性ヒト胎児性幹細胞を含む実質的に増加させた細胞集団を、その必要のあるヒトに移植する方法。
【請求項２９】
骨形成表現型、造血表現型、脂質生成表現型、筋表現型、肝表現型、神経表現型、および内皮表現型から選択される系統に分化させた多能性c-kit陽性ヒト胎児性幹細胞を含む実質的に増加させた細胞集団を含む、骨髄移植に適した組成物。
【請求項３０】
ヒトの胎盤の絨毛膜絨毛から組織検体を単離する段階を含む、多能性胎児性幹細胞について増加させた細胞集団を得る方法。
【請求項３１】
ヒトの胎盤から、その細胞を含有する組織検体を単離する段階を含む、多能性胎児性幹細胞について増加させた細胞集団を得る方法。
【請求項３２】
絨毛膜絨毛からのc-kit陽性細胞を選択する段階を含む、多能性胎児性幹細胞について増加させた細胞集団を得る方法。
【請求項３３】
羊水からのc-kit陽性細胞を選択する段階を含む、多能性胎児性幹細胞について増加させた細胞集団を得る方法。
【請求項３４】
胎盤からのc-kit陽性細胞を選択する段階を含む、多能性胎児性幹細胞について増加させた細胞集団を得る方法。  
【請求項３５】
以下の段階を含む、多能性胎児性幹細胞について増加させた細胞集団を得る方法：
（a）絨毛膜絨毛からの組織検体を凍結保存する段階；
（b）後日、凍結保存された検体を融解する段階；および
（c）c-kit陽性細胞を選択する段階。
【請求項３６】
以下の段階を含む、多能性胎児性幹細胞について増加させた細胞集団を得る方法：
（a）羊水の検体を凍結保存する段階；
（b）後日、凍結保存された検体を融解する段階；および
（c）c-kit陽性細胞を選択する段階。
【請求項３７】
以下の段階を含む、多能性胎児性幹細胞について増加させた細胞集団を得る方法：
（a）胎盤からの組織検体を凍結保存する段階；
（b）後日、凍結保存された検体を融解する段階；および
（c）c-kit陽性細胞を選択する段階。
【請求項３８】
以下の段階を含む、多能性胎児性幹細胞について増加させた細胞集団を製造する方法：
（a）絨毛膜絨毛からのc-kit陽性細胞を単離する段階；および
（b）培養培地において該細胞を増殖させる段階。
【請求項３９】
以下の段階を含む、分化した組織を製造する方法：
（a）絨毛膜絨毛からの組織検体を提供する段階；
（b）c-kit陽性細胞を増殖させる条件下において組織を培養する段階；および
（c）誘導して、c-kit陽性細胞を分化させる段階。
【請求項４０】
以下の段階を含む、分化した組織を製造する方法：
（a）羊水からの組織検体を提供する段階；
（b）c-kit陽性細胞を増殖させる条件下において組織を培養する段階；および
（c）誘導して、c-kit陽性細胞を分化させる段階。
【請求項４１】
以下の段階を含む、分化した組織を製造する方法：
（a）胎盤からの組織検体を提供する段階；
（b）c-kit陽性細胞を増殖させる条件下において組織を培養する段階；および
（c）誘導して、c-kit陽性細胞を分化させる段階。
【請求項４２】
絨毛膜絨毛からのc-kit陽性細胞を増加させるためにネガティブ選択が使用される、請求項32記載の方法。
【請求項４３】
羊水からのc-kit陽性細胞を増加させるためにネガティブ選択が使用される、請求項33記載の方法。
【請求項４４】
胎盤からのc-kit陽性細胞を増加させるためにネガティブ選択が使用される、請求項34記載の方法。
【請求項４５】
細胞が次に凍結保存される、請求項30、31、または47記載の方法。
【請求項４６】
生体適合性ポリマー足場および単離されたc-kit陽性胎児性幹細胞を含む、組織工学構築物。
【請求項４７】
羊水からの組織検体を単離する段階を含む、多能性胎児性幹細胞について増加させた細胞集団を得る方法。
【請求項４８】
以下の段階を含む、多能性胎児性幹細胞について増加させた細胞集団を製造する方法：
（a）胎盤からのc-kit陽性細胞を単離する段階；および
（b）培養培地において、該細胞を増殖させる段階。
【請求項４９】
以下の段階を含む、多能性胎児性幹細胞について増加させた細胞集団を製造する方法：
（a）羊水からのc-kit陽性細胞を単離する段階；および
（b）培養培地において、該細胞を増殖させる段階。