【手続補正書】
【提出日】平成15年4月21日(2003.4.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
再配列されていないヒト抗体重鎖遺伝子座と、ヒト１４番染色体のセントロメアを含む導入染色体を保持し、かつ、マウス染色体に挿入された、再配列されていないヒト抗体軽鎖遺伝子座を有するトランスジーンを保持することを特徴とするマウス。
【請求項２】
前記導入染色体が、再配列されていないヒト抗体重鎖遺伝子座の全領域を含むものである、請求項１に記載のマウス。
【請求項３】
前記導入染色体が、ヒト１４番染色体断片を含むものである請求項１に記載のマウス。
【請求項４】
前記導入染色体が、ヒト１４番染色体断片である請求項１に記載のマウス。
【請求項５】
前記導入染色体が、ヒト１４番染色体断片ＳＣ２０である請求項１に記載のマウス。
【請求項６】
前記再配列されていないヒト抗体軽鎖遺伝子座を有するトランスジーンの少なくとも一部が、ＹＡＣベクターによりマウスに導入されたものである、請求項１に記載のマウス。
【請求項７】
前記再配列されていないヒト抗体軽鎖遺伝子座が、ヒト抗体軽鎖κ遺伝子座である請求項１に記載のマウス。
【請求項８】
前記再配列されていないヒト抗体軽鎖遺伝子座を有するトランスジーンが、ＫＣｏ５トランスジーンである請求項１に記載のマウス。
【請求項９】
前記導入染色体が、ヒト１４番染色体断片ＳＣ２０であり、前記再配列されていないヒト抗体軽鎖遺伝子座を有するトランスジーンが、ＫＣｏ５トランスジーンである請求項１に記載のマウス。
【請求項１０】
前記導入染色体が、ヒト１４番染色体断片および異なる染色体断片からなる融合染色体である請求項１に記載のマウス。
【請求項１１】
前記導入染色体が、再配列されていないヒト抗体軽鎖遺伝子座をさらに含むものである、請求項１に記載のマウス。
【請求項１２】
前記導入染色体が、自律複製可能なものである、請求項１に記載のマウス。
【請求項１３】
前記導入染色体が、マウス染色体に転座または挿入されたものである、請求項１に記載のマウス。
【請求項１４】
マウス抗体重鎖遺伝子座および少なくとも１つのマウス抗体軽鎖遺伝子座が不活性化されていることを特徴とする、請求項１に記載のマウス。
【請求項１５】
マウス抗体重鎖遺伝子座およびマウス抗体軽鎖κ遺伝子座が不活性化されていることを特徴とする、請求項１に記載のマウス。
【請求項１６】
自己抗原に対する免疫応答を増大させる遺伝子変異をさらに含むことを特徴とする、請求項１に記載のマウス。
【請求項１７】
前記自己抗原に対する免疫応答を増大させる遺伝子変異が、Fc-γIIB遺伝子の不性化である、請求項１６に記載のマウス。
【請求項１８】
ヒト抗体を発現するマウスＢ細胞を作製する方法であって：
請求項1から請求項１７のいずれか一項に記載のマウスを用意し；そして、
ヒト抗体を発現するＢ細胞を該マウスから取得すること、
を含む、上記方法。
【請求項１９】
所定の抗原でマウスを免疫する工程を含むものである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
ヒト抗体を発現するハイブリドーマを作製する方法であって：請求項１から請求項１７のいずれか一項に記載のマウスを用意し；そして、
ヒト抗体を発現するマウスＢ細胞を該マウスから取得し；
該Ｂ細胞をミエローマ細胞と融合させること、
を含む、上記方法。
【請求項２１】
所定の抗原でマウスを免疫する工程を含むものである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記ハイブリドーマを選抜する工程を含むものである、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記ハイブリドーマの選抜が、ヒト抗体の抗原に対する親和性に基づくものである請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
ヒト抗体鎖をコードする核酸の製造方法であって、
請求項１８に記載の方法で取得されたマウスＢ細胞または請求項２０に記載の方法で取得されたハイブリドーマから、ヒト抗体鎖をコードする核酸を単離することを特徴とする上記方法。
【請求項２５】
ヒト抗体鎖をコードする核酸が、少なくともヒト抗体重鎖もしくは軽鎖の可変領域をコードするものである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
ヒト抗体鎖をコードする核酸が、ヒト抗体重鎖または軽鎖の全長をコードするものである、請求項２４に記載の方法。
【請求項２７】
ヒト抗体を製造する方法であって、
請求項２４に記載の方法で取得されたヒト抗体鎖をコードする核酸を、該宿主細胞に導入し、該宿主細胞を培養し、ヒト抗体を産生させることを特徴とする上記方法。
【請求項２８】
ヒト抗体鎖をコードする核酸を、発現ベクターにクローニングする工程を含むものである請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
ヒト抗体鎖をコードする核酸が、少なくともヒト抗体の可変領域をコードするものであり、該可変領域配列を、所望のヒト抗体定常領域配列と結合させる工程を含むものである請求項２７に記載の方法。
【請求項３０】
宿主細胞が、原核宿主細胞もしくは真核宿主細胞である請求項２７に記載の方法。
【請求項３１】
宿主細胞が、哺乳動物由来の株化された細胞である請求項２７に記載の方法。
【請求項３２】
宿主細胞が、大腸菌、酵母、昆虫細胞、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、サル腎細胞、ＨｅＬａ細胞、Ｌ細胞、ヒト胎児腎細胞、ＢＨＫ細胞、マウスセルトリ細胞、アフリカミドリザル腎細胞、イヌ腎細胞、バッファローラット肝細胞、ヒト肺細胞、ヒト肝細胞、マウス乳癌細胞、ＴＲ１細胞およびミエローマ細胞から選択されるものである請求項２７に記載の方法。
【請求項３３】
ヒト抗体がモノクローナル抗体である請求項２７に記載の方法。
【請求項３４】
ヒト抗体がIgA、IgD、IgE、IgGおよびIgMから選択されるものである請求項２７に記載の方法。
【請求項３５】
前記IgAが、IgA1またはIgA2であることを特徴とする請求項３４に記載の方法
【請求項３６】
前記IgGが、IgG1、IgG2、IgG3またはIgG4であることを特徴とする請求項３４に記載の方法
【請求項３７】
ヒト抗体が、抗原結合部分を含む断片である請求項２７に記載の方法。
【請求項３８】
ヒト抗体が、Fab、F(ab’)2、Fv、Fd、dAbまたはscFvフラグメントであることを特徴とする、請求項２７に記載の方法。
【請求項３９】
ヒト抗体を製造する方法であって、
請求項１から請求項１７のいずれか一項に記載のマウスを用意し、そして、
該マウスを所定の抗原で免疫し、
該マウスからＢ細胞を取得し、
ミエローマ細胞との融合によりハイブリドーマ細胞を調製し、
該ハイブリドーマ細胞からヒト抗体鎖をコードする核酸を単離し、
該核酸を、該宿主細胞に導入し、
該宿主細胞を培養し、ヒト抗体を産生させることを特徴とする上記方法。
【請求項４０】
ヒト抗体鎖をコードする核酸を、発現ベクターにクローニングする工程を含むものである請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
ヒト抗体鎖をコードする核酸が、少なくともヒト抗体の可変領域をコードするものであり、該可変領域配列を、所望のヒト抗体定常領域配列と結合させる工程を含むものである請求項３９に記載の方法。
【請求項４２】
宿主細胞が、原核宿主細胞もしくは真核宿主細胞である請求項３９に記載の方法。
【請求項４３】
宿主細胞が、哺乳動物由来の株化された細胞である請求項３９に記載の方法。
【請求項４４】
宿主細胞が、大腸菌、酵母、昆虫細胞、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、サル腎細胞、ＨｅＬａ細胞、Ｌ細胞、ヒト胎児腎細胞、ＢＨＫ細胞、マウスセルトリ細胞、アフリカミドリザル腎細胞、イヌ腎細胞、バッファローラット肝細胞、ヒト肺細胞、ヒト肝細胞、マウス乳癌細胞、ＴＲ１細胞およびミエローマ細胞から選択されるものである請求項３９に記載の方法。
【請求項４５】
ヒト抗体がモノクローナル抗体である請求項３９に記載の方法。
【請求項４６】
ヒト抗体がIgA、IgD、IgE、IgGおよびIgMから選択されるものである請求項３９に記載の方法。
【請求項４７】
前記IgAが、IgA1またはIgA2であることを特徴とする請求項４６に記載の方法
【請求項４８】
前記IgGが、IgG1、IgG2、IgG3またはIgG4であることを特徴とする請求項４６に記載の方法
【請求項４９】
ヒト抗体が、抗原結合部分を含む断片である請求項３９に記載の方法。
【請求項５０】
ヒト抗体が、Fab、F(ab’)2、Fv、Fd、dAbまたはscFvフラグメントであることを特徴とする、請求項３９に記載の方法。
【請求項５１】
ヒト抗体ディスプレイライブラリーを作製する方法であって：
請求項１から請求項１７のいずれか一項に記載のマウスのリンパ系細胞からヒト抗体鎖をコードする一群の核酸を単離すること；および
抗体配列を提示するディスプレイパッケージライブラリーを作製すること、但しライブラリーのメンバーは該パッケージから提示される抗体配列をコードする核酸を含有する；
を含む、上記方法。
【請求項５２】
マウスに所定の抗原を免疫する工程を含むものである、請求項５１に記載の方法。
【請求項５３】
マウスが、単離工程を実施する際に免疫原に対する検出可能な力価を有していないことを特徴とする、請求項５１に記載の方法。
【請求項５４】
ヒト抗体を製造する方法であって、
請求項５１に記載の方法で作製されたヒト抗体ディスプレイライブラリーを、所定の抗原に対する親和性に基づきスクリーニングし、選抜されたヒト抗体鎖をコードする核酸を、該宿主細胞に導入し、該宿主細胞を培養し、ヒト抗体を産生させることを特徴とする上記方法。
【請求項５５】
ヒト抗体鎖をコードする核酸を、発現ベクターにクローニングする工程を含むものである請求項５４に記載の方法。
【請求項５６】
ヒト抗体鎖をコードする核酸が、少なくともヒト抗体の可変領域をコードするものであり、該可変領域配列を、所望のヒト抗体定常領域配列と結合させる工程を含むものである請求項５４に記載の方法。
【請求項５７】
宿主細胞が、原核宿主細胞もしくは真核宿主細胞である請求項５４に記載の方法。
【請求項５８】
宿主細胞が、哺乳動物由来の株化された細胞である請求項５４に記載の方法。
【請求項５９】
宿主細胞が、大腸菌、酵母、昆虫細胞、ＣＨＯ細胞、ＣＯＳ細胞、サル腎細胞、ＨｅＬａ細胞、Ｌ細胞、ヒト胎児腎細胞、ＢＨＫ細胞、マウスセルトリ細胞、アフリカミドリザル腎細胞、イヌ腎細胞、バッファローラット肝細胞、ヒト肺細胞、ヒト肝細胞、マウス乳癌細胞、ＴＲ１細胞およびミエローマ細胞から選択されるものである請求項５４に記載の方法。
【請求項６０】
ヒト抗体がモノクローナル抗体である請求項５４に記載の方法。
【請求項６１】
ヒト抗体がIgA、IgD、IgE、IgGおよびIgMから選択されるものである請求項５４に記載の方法。
【請求項６２】
前記IgAが、IgA1またはIgA2であることを特徴とする請求項６１に記載の方法
【請求項６３】
前記IgGが、IgG1、IgG2、IgG3またはIgG4であることを特徴とする請求項６１に記載の方法
【請求項６４】
ヒト抗体が、抗原結合部分を含む断片である請求項５４に記載の方法。
【請求項６５】
ヒト抗体が、Fab、F(ab’)2、Fv、Fd、dAbまたはscFvフラグメントであることを特徴とする、請求項５４に記載の方法。