【手続補正書】
【提出日】平成16年8月27日(2004.8.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】  （a）＋29位のアラニンがチロシン、ロイシン、トリプトファンおよびスレオニンからなる群より選択されるアミノ酸で置換され、かつ（b）＋104位のロイシンがグルタミン酸で置換されているCTLA4の細胞外ドメインを含む、CD80および/またはCD86を結合する可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項２】  可溶性CTLA4突然変異体分子の溶解性、アフィニティーまたは結合価を変化させるアミノ酸配列をさらに含む請求項１の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項３】  アミノ酸配列がヒト免疫グロブリン定常領域を含む請求項２の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項４】  可溶性CTLA4突然変異体分子の分泌を可能にするアミノ酸配列をさらに含む請求項２の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項５】  アミノ酸配列がオンコスタチンMシグナルペプチドを含む請求項４の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項６】  図7に示すように＋1位のメチオニンおよび＋124位のアスパラギン酸を含む請求項１の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項７】  図7に示すように−1位のアラニンおよび＋124位のアスパラギン酸を含む請求項１の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項８】  ヒト免疫グロブリン定常領域が図7に示すように＋130位のシステインがセリンで置換され、＋136位のシステインがセリンで置換され、＋139位のシステインがセリンで置換され、かつ＋148位のプロリンがセリンで置換されるように突然変異している請求項３の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項９】  ＋104位のロイシンがグルタミン酸で置換されているCTLA4の細胞外ドメインを含む、CTLA4より高いアビディティーでCD80および/またはCD86に結合する可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項１０】  請求項１または９の可溶性CTLA4突然変異体分子に相当するアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
【請求項１１】  図7または図8に示すようにヌクレオチド位置＋1のアデニンで始まり＋1071のアデニンで終わるヌクレオチド配列を持つ請求項１０の核酸分子。
【請求項１２】  図7または図8に示すように−3のグアニジンで始まり＋1071のアデニンで終わるヌクレオチド配列を持つ請求項１０の核酸分子。
【請求項１３】  請求項１０のヌクレオチド配列を含むベクター。
【請求項１４】  適切な宿主細胞に請求項１３のベクターを含んでなる宿主ベクター系。
【請求項１５】  適切な宿主細胞が細菌細胞または真核細胞である請求項１４の宿主ベクター系。
【請求項１６】  請求項１３のベクターを持つ宿主細胞。
【請求項１７】  真核細胞である請求項１６の宿主細胞
【請求項１８】  真核細胞がCOS細胞である請求項１７の宿主細胞。
【請求項１９】  真核細胞がチャイニーズハムスター卵巣（CHO）細胞である請求項１７の宿主細胞。
【請求項２０】  CHO細胞がDG44、CHO-K1、CHO-K1 Tet-On細胞株、ECACC85050302のCHO、CHOクローン13、CHOクローンB、CHO-K1/SFおよびRR-CHOK1からなる群より選択される請求項１９の宿主細胞。
【請求項２１】  可溶性CTLA4突然変異体タンパク質の製造方法であって、請求項１４の宿主ベクター系をCTLA4突然変異体タンパク質が宿主細胞内で産生されるように生育すること、およびそのようにして産生されたタンパク質を回収することを含む方法。
【請求項２２】  請求項２１の方法によって製造される可溶性CTLA4突然変異体タンパク質。
【請求項２３】  T細胞とCD80陽性および/またはCD86陽性細胞との相互作用を調節する方法であって、T細胞とCD80陽性および/またはCD86陽性細胞との相互作用を妨害するCTLA4突然変異体分子/CD80複合体またはCTLA4突然変異体分子/CD86複合体が形成されるように、CD80陽性および/またはCD86陽性細胞を請求項１の可溶性CTLA4突然変異体分子と接触させることを含む方法。
【請求項２４】  T細胞とCD80陽性および/またはCD86陽性細胞との相互作用を調節する方法であって、T細胞とCD80陽性および/またはCD86陽性細胞との相互作用を妨害するCTLA4突然変異体分子/CD80複合体またはCTLA4突然変異体分子/CD86複合体が形成されるように、CD80陽性および/またはCD86陽性細胞を請求項９の可溶性CTLA4突然変異体分子と接触させることを含む方法。
【請求項２５】  CD80陽性および/またはCD86陽性細胞が抗原提示細胞である請求項２３または２４の方法。
【請求項２６】  CTLA4陽性T細胞とCD80陽性およびCD86陽性細胞との相互作用が阻害される請求項２３または２４の方法。
【請求項２７】  請求項１の可溶性CTLA4突然変異体分子を含む、T細胞とCD80陽性および/またはCD86陽性細胞との相互作用によって媒介される免疫系疾患処置用医薬組成物。
【請求項２８】  請求項９の可溶性CTLA4突然変異体分子を含む、T細胞とCD80陽性および/またはCD86陽性細胞との相互作用によって媒介される免疫系疾患処置用医薬組成物。
【請求項２９】  前記T細胞相互作用が阻害される請求項２７または２８の医薬組成物。
【請求項３０】  請求項１の可溶性CTLA4突然変異体分子と、IL-4と反応するリガンドとを含む、移植片対宿主疾患抑制用医薬組成物。
【請求項３１】  請求項９の可溶性CTLA4突然変異体分子と、IL-4と反応するリガンドとを含む、移植片対宿主疾患抑制用医薬組成物。
【請求項３２】  野生型CTLA4より高いアビディティーでCD86を結合する可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項３３】  結合しているCD80および/またはCD86からの解離速度が野生型CTLA4より遅い可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項３４】  CD80および/またはCD86への結合速度ならびに結合しているCD80および/またはCD86からの解離速度が野生型CTLA4より遅い請求項３３の可溶性CTAL4突然変異体分子。
【請求項３５】  ATCC番号PTA-2104の核酸分子によってコードされる可溶性CTAL4突然変異体分子の一部を含む可溶性CTAL4突然変異体分子。
【請求項３６】  突然変異体CTLA4分子の全細胞外ドメインをコードする、可溶性CTLA4突然変異体分子をコードするATCC番号PTA-2104の核酸分子の一部を含む核酸分子。
【請求項３７】  医薬的に許容できる担体および請求項１、９、１０または３５の可溶性CTLA4突然変異体分子を含む免疫系疾患処置用医薬組成物。
【請求項３８】  CTLA4の細胞外ドメインを含む、CD80および/またはCD86を結合する可溶性CTLA4突然変異体分子であって、
（a）CTLA4の細胞外ドメインが＋1位のメチオニンまたは−1位のアラニンから始まって＋124位のアスパラギン酸で終わり；
（b）CTLA4の細胞外ドメインの＋104位のロイシンがグルタミン酸で置換され；および
（c）CTLA4の細胞外ドメインの＋29位のアラニンがチロシン、ロイシン、トリプトファンおよびスレオニンからなる群より選択されるアミノ酸で置換される；
可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項３９】  （a）図7に示すように＋1位のメチオニンから始まって＋124位のアスパラギン酸で終わるアミノ酸配列；または
（b）図7に示すように−1位のアラニンから始まって＋124位のアスパラギン酸で終わるアミノ酸配列；
を含む可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項４０】  （a）図7に示すように＋1位のメチオニンから始まって＋124位のアスパラギン酸で終わるアミノ酸配列；または
（b）図7に示すように−1位のアラニンから始まって＋124位のアスパラギン酸で終わるアミノ酸配列；
を含む可溶性CTLA4突然変異体分子、またはCD80および/またはCD86を結合するその一部。
【請求項４１】  T細胞とCD80陽性および/またはCD86陽性細胞との相互作用を調節する方法であって、T細胞とCD80陽性および/またはCD86陽性細胞との相互作用を妨害するCTLA4突然変異体分子/CD80複合体またはCTLA4突然変異体分子/CD86複合体が形成されるように、CD80陽性および/またはCD86陽性細胞を請求項３８、３９または４０の可溶性CTLA4突然変異体分子と接触させることを含む方法。
【請求項４２】  請求項３８、３９または４０の可溶性CTLA4突然変異体分子を含む、T細胞とCD80陽性および/またはCD86陽性細胞との相互作用によって媒介される免疫系疾患処置用医薬組成物。
【請求項４３】  請求項３８、３９または４０の可溶性CTLA4突然変異体分子と、IL-4と反応するリガンドとを含む、移植片対宿主疾患抑制用医薬組成物。
【請求項４４】  可溶性CTLA4突然変異体分子の溶解性またはアフィニティーを変化させるアミノ酸配列をさらに含む請求項３８、３９または４０の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項４５】  溶解性またはアフィニティーを変化させるアミノ酸配列が免疫グロブリン部分を含む請求項２または４４の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項４６】  免疫グロブリン部分が免疫グロブリン定常領域またはその一部を含む請求項４５の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項４７】  免疫グロブリン部分がエフェクター機能を低下させるための１つ以上の突然変異を含む請求項４５または４６の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項４８】  免疫グロブリン定常領域が免疫グロブリン分子のヒンジ、CH2およびCH3領域を含む請求項４６または４７の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項４９】  免疫グロブリン定常領域またはその一部がヒトまたはサル免疫グロブリン定常領域である請求項４６の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項５０】  図7に示すように＋130位のシステインがセリンで置換され、＋136位のシステインがセリンで置換され、＋139位のシステインがセリンで置換され、および＋148位のプロリンがセリンで置換されるようにヒト免疫グロブリン定常領域が突然変異される請求項４６の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項５１】  （a）図7に示すように＋1位のメチオニンから始まって＋357位のリジンで終わるアミノ酸配列；または
（b）図7に示すように−1位のアラニンから始まって＋357位のリジンで終わるアミノ酸配列；
を含む可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項５２】  （a）図7に示すように＋1位のメチオニンから始まって＋357位のリジンで終わるアミノ酸配列；または
（b）図7に示すように−1位のアラニンから始まって＋357位のリジンで終わるアミノ酸配列；
からなる請求項５１の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項５３】  T細胞とCD80陽性および/またはCD86陽性細胞との相互作用を調節する方法であって、T細胞とCD80陽性および/またはCD86陽性細胞との相互作用を妨害するCTLA4突然変異体分子/CD80複合体またはCTLA4突然変異体分子/CD86複合体が形成されるように、CD80陽性および/またはCD86陽性細胞を請求項５１または５２の可溶性CTLA4突然変異体分子と接触させることを含む方法。
【請求項５４】  請求項５１または５２の可溶性CTLA4突然変異体分子を含む、T細胞とCD80陽性および/またはCD86陽性細胞との相互作用によって媒介される免疫系疾患処置用医薬組成物。
【請求項５５】  請求項５１または５２の可溶性CTLA4突然変異体分子と、IL-4と反応するリガンドとを含む、移植片対宿主疾患抑制用医薬組成物。
【請求項５６】  可溶性CTLA4突然変異体分子の分泌を可能にするアミノ酸配列をさらに含む請求項３８、３９、４０、５１または５２の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項５７】  分泌を可能にするアミノ酸配列がオンコスタチンMシグナルペプチドを含む請求項５６の可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項５８】  請求項３８、３９、４０、５１または５２の可溶性CTLA4突然変異体分子をコードする核酸分子。
【請求項５９】  a）図7に示すように＋1位のアデニンから始まって＋372位のチミンで終わる核酸分子；または
（b）図7に示すように−3位のグアニンから始まって＋372位のチミンで終わる核酸分子；
を含む請求項５６の核酸分子。
【請求項６０】  a）図7に示すように＋1位のアデニンから始まって＋1071位のアデニンで終わる核酸分子；または
（b）図7に示すように−3位のグアニンから始まって＋1071位のアデニンで終わる核酸分子；
を含む請求項５８の核酸分子。
【請求項６１】  図7に示すように−78位のアデニンで始まり＋1071のアデニンで終わる核酸分子を含む請求項５８の核酸分子。
【請求項６２】  DNA分子がATCC番号PTA-2104で寄託される可溶性CTLA4突然変異体分子をコードするDNA分子。
【請求項６３】  ATCC番号PTA-2104の核酸分子によってコードされる可溶性CTLA4突然変異体分子。
【請求項６４】  請求項５８の核酸分子を含むベクター。
【請求項６５】  請求項６２のDNA分子を含むベクター。
【請求項６６】  ATCC番号PTA-2104でATCCに寄託された可溶性CTLA4突然変異体分子をコードするベクター。
【請求項６７】  請求項６４、６５および６６のベクターを含んでなる宿主細胞。
【請求項６８】  細菌または真核細胞である請求項６７の宿主細胞。
【請求項６９】  真核細胞がCOS細胞またはチャイニーズハムスター卵巣（CHO）細胞である請求項６８の宿主細胞。
【請求項７０】  可溶性CTLA4突然変異体分子の製造方法であって、請求項６７の宿主細胞をCTLA4突然変異体分子が宿主細胞内で産生されるように生育すること、およびそのようにして産生された分子を回収することを含む方法。
【請求項７１】  請求項７０の方法によって製造される可溶性CTLA4突然変異体タンパク質。
【請求項７２】  ＋104位のロイシンがグルタミン酸で置換されているCTLA4の細胞外ドメインを含む、CD80および/またはCD86を結合する可溶性CTLA4突然変異体分子および医薬的に許容できる担体を含む医薬組成物。
【請求項７３】  CTLA4の細胞外ドメインの＋29位のアラニンがチロシン、ロイシン、トリプトファンおよびスレオニンからなる群より選択されるアミノ酸で置換されている請求項７２の医薬組成物。
【請求項７４】  図7に示すように細胞外ドメインの＋29位のアラニンがチロシンで置換され、＋104位のロイシンがグルタミン酸で置換されている請求項７３の医薬組成物。
【請求項７５】  ATCC番号PTA-2104の核酸分子によってコードされる可溶性CTLA4突然変異体分子を含む医薬組成物。
【請求項７６】  可溶性CTLA4突然変異体分子が＋1位のメチオニンから始まって＋357位のリジンで終わる図7のアミノ酸配列を含む請求項７２の医薬組成物。
【請求項７７】  野生型CTLA4より高いアビディティーでCD86に結合する請求項３２の可溶性CTLA4突然変異体分子を含む医薬組成物。
【請求項７８】  CD80および/またはCD86からの解離速度が野生型CTLA4より遅い請求項３５の可溶性CTLA4突然変異体分子を含む医薬組成物。
【請求項７９】  CD80および/またはCD86との間における結合および解離速度が野生型CTLA4より遅い請求項３６の可溶性CTLA4突然変異体分子を含む医薬組成物。
【請求項８０】  可溶性CTLA4突然変異体分子がATCC番号PTA-2104の核酸分子によってコードされる可溶性CTLA4突然変異体分子の一部を含む請求項７２の医薬組成物。