【手続補正書】
【提出日】令和3年7月28日(2021.7.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抱合部分に共有結合される少なくとも１つの非天然アミノ酸を含む、修飾されたインターロイキン２（ＩＬ−２）ポリペプチドであって、
前記少なくとも１つの非天然アミノ酸の位置は、Ｋ３５、Ｔ３７、Ｒ３８、Ｔ４１、Ｆ４２、Ｋ４３、Ｆ４４、Ｙ４５、Ｅ６０、Ｅ６１、Ｅ６２、Ｋ６４、Ｐ６５、Ｅ６８、Ｖ６９、Ｎ７１、Ｌ７２、Ｍ１０４、Ｃ１０５、およびＹ１０７から選択され、残基の位置は、ＳＥＱＩＤＮＯ：１に記載の位置３５、３７、３８、４１、４２、４３、４４、４５、６１、６２、６４、６５、６８、６９、７１、７２、１０４、１０５、および１０７に対応し；
前記抱合部分は水溶性ポリマーであり；
前記修飾されたＩＬ−２ポリペプチドは、ＳＥＱＩＤＮＯ：１に対して少なくとも８０％の配列同一性を含む、
修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項２】
少なくとも１つの非天然アミノ酸の位置は、Ｔ３７、Ｒ３８、Ｔ４１、Ｆ４２、Ｋ４３、Ｆ４４、Ｙ４５、Ｅ６１、Ｅ６２、Ｐ６５、Ｅ６８、およびＬ７２から選択され、残基の位置はＳＥＱＩＤＮＯ：１に記載の位置３７、３８、４１、４２、４３、４４、４５、６１、６２、６５、６８、および７２に対応する、請求項１に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項３】
少なくとも１つの非天然アミノ酸の位置は、Ｋ３５、Ｋ６４、Ｖ６９、Ｎ７１、Ｍ１０４、Ｃ１０５、およびＹ１０７から選択され、残基の位置はＳＥＱＩＤＮＯ：１に記載の位置３５、６４、６９、７１、１０４、１０５、および１０７に対応する、請求項１に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項４】
少なくとも１つの非天然アミノ酸の位置は、Ｔ３７、Ｒ３８、Ｔ４１、Ｙ４５、Ｅ６１、  Ｅ６８、およびＬ７２から選択され、残基の位置はＳＥＱＩＤＮＯ：１に記載の位置３７、３８、４１、４５、６１、６８、および７２に対応する、請求項１に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項５】
少なくとも１つの非天然アミノ酸の位置は、Ｆ４２、Ｋ４３、Ｆ４４、Ｅ６２、およびＰ６５から選択され、残基の位置はＳＥＱＩＤＮＯ：１に記載の位置４２、４３、４４、６２、および６５に対応する、請求項１に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項６】
少なくとも１つの非天然アミノ酸の位置はＰ６５であり、残基の位置はＳＥＱＩＤＮＯ：１に記載の位置６５に対応する、請求項５に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項７】
少なくとも１つの非天然アミノ酸は：
リジンアナログである、または
芳香族側鎖を含む、
請求項１〜６のいずれか１項に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項８】
少なくとも１つの非天然アミノ酸は、Ｎ６−アジドエトキシ−Ｌ−リジン（ＡｚＫ）、Ｎ６−プロパルギルエトキシ−Ｌ−リジン（ＰｒａＫ）、ＢＣＮ−Ｌ−リジン、ノルボルネンリジン、ＴＣＯリジン、メチルテトラジンリジン、アリルオキシカルボニルリジン、ｐ−アセチル−Ｌ−フェニルアラニン、ｐ−アジドメチル−Ｌ−フェニルアラニン（ｐＡＭＦ）、ｐ−ヨード−Ｌ−フェニルアラニン、ｍ−アセチルフェニルアラニン、ｐ−プロパギルオキシフェニルアラニン、ｐ−プロパルギル−フェニルアラニン、３−メチル−フェニルアラニン、フッ素処理したフェニルアラニン、イソプロピル−Ｌ−フェニルアラニン、ｐ−アジド−Ｌ−フェニルアラニン、ｐ−アシル−Ｌ−フェニルアラニン、ｐ−ベンゾイル−Ｌ−フェニルアラニン、ｐ−ブロモフェニルアラニン、ｐ−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン、イソプロピル−Ｌ−フェニルアラニン、Ｏ−アリルチロシン、Ｏ−メチル−Ｌ−チロシン、Ｏ−４−アリル−Ｌ−チロシン、４−プロピル−Ｌ−チロシン、ホスホノチロシン、Ｌ−３−（２−ナフチル）アラニン、２−アミノ−３−（（２−（（３−（ベンジルオキシ）−３−オキソプロピル）アミノ）エチル）セラニル）プロパン酸、または、２−アミノ−３−（フェニルセラニル）プロパンを含む、請求項７に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項９】
水溶性ポリマーは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ（プロピレングリコール）（ＰＰＧ）、エチレングリコールとプロピレングリコールのコポリマー、ポリ（オキシエチル化ポリオール）、ポリ（オレフィンアルコール）、ポリ（ビニルピロリドン）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリルアミド）、ポリ（ヒドロキシアルキルメタクリラート）、ポリ（サッカライド）、ポリ（α−ヒドロキシ酸）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリホスファゼン、ポリオキサゾリン（ＰＯＺ）、ポリ（Ｎ−アクリロイルモルホリン）、あるいはこれらの組み合わせを含む、請求項１〜８のいずれか１項に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項１０】
水溶性ポリマーはＰＥＧを含む、請求項９に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項１１】
ＰＥＧは、約２０，０００ダルトンから約８５，０００ダルトンの重量平均分子量を有する、請求項１０に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項１２】
ＰＥＧは、約２０，０００ダルトン、約２５，０００ダルトン、約３０，０００ダルトン、約３５，０００ダルトン、約４０，０００ダルトン、約４５，０００ダルトン、または約５０，０００ダルトンの重量平均分子量を有する、請求項１１に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項１３】
抱合部分は、リンカーを介して修飾されたＩＬ−２ポリペプチドの少なくとも１つの非天然アミノ酸に結合する、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項１４】
リンカーは、ホモ二機能性リンカー、ヘテロ二機能性リンカー、切断あるいは非切断ジペプチドリンカー、マレイミド基、スペーサー、あるいはこれらの組み合わせを含む、請求項１３に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項１５】
修飾されたＩＬ−２ポリペプチドは、Ｎ末端欠失を含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項１６】
Ｎ末端欠失は、Ｎ末端から最初の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、２０、２５、あるいは３０の残基の欠失を含み、ここで、残基位置は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１の位置を基準にしている、請求項１５に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項１７】
修飾されたＩＬ−２ポリペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１に対して少なくとも約８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、あるいは９９％の配列同一性を含む、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項１８】
修飾されたＩＬ−２ポリペプチドは、ＣＤ４＋ヘルパー細胞、ＣＤ８＋エフェクターナイーブ細胞、ＣＤ８＋エフェクター記憶細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞集団、あるいはこれらの組み合わせを拡張することができる、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項１９】
抱合部分または非天然アミノ酸は、ＩＬ−２のＩＬ−２Ｒαとの結合を損なうか、妨害する、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項２０】
修飾されたＩＬ−２ポリペプチドによる、ＩＬ−２Ｒβγ複合体を介する、ＣＤ４＋ヘルパー細胞、ＣＤ８＋エフェクターナイーブ細胞、ＣＤ８＋エフェクター記憶細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、あるいは、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞集団の活性化は、野生型のＩＬ−２ポリペプチドと比較して、前記細胞集団の活性化の有意な効力を維持する、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項２１】
ＩＬ−２Ｒβγ複合体に対する修飾されたＩＬ−２ポリペプチドの受容体シグナル伝達能力は、ＩＬ−２Ｒβγ複合体に対する野生型のＩＬ−２ポリペプチドの受容体シグナル伝達能力よりも高い、請求項２０に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項２２】
ＩＬ−２Ｒβγ複合体に対する修飾されたＩＬ−２ポリペプチドの受容体シグナル伝達能力は、ＩＬ−２Ｒβγ複合体に対する野生型のＩＬ−２ポリペプチドの受容体シグナル伝達能力よりも低い、請求項２０に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項２３】
修飾されたＩＬ−２ポリペプチドは、ＩＬ−２Ｒβγに対する第１の受容体シグナル伝達能力と、ＩＬ−２Ｒαβγに対する第２の受容体シグナル伝達能力を示し、ここで、第１の受容体シグナル伝達能力は、第２の受容体シグナル伝達能力よりも、少なくとも１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、２０倍、３０倍、５０倍、１００倍、５００倍、あるいはそれ以上高い、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項２４】
修飾されたＩＬ−２ポリペプチドの第１の受容体シグナル伝達能力は、ＩＬ−２Ｒβγに対する野生型のＩＬ−２ポリペプチドの受容体シグナル伝達能力よりも高く、修飾されたＩＬ−２ポリペプチドの第２の受容体シグナル伝達能力は、ＩＬ−２Ｒβγに対する野生型のＩＬ−２ポリペプチドの受容体シグナル伝達能力よりも低い、請求項２３に記載の
修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項２５】
修飾されたＩＬ−２ポリペプチドの第１の受容体シグナル伝達能力は、野生型のＩＬ−２ポリペプチドの受容体シグナル伝達能力よりも少なくとも１倍低い、請求項２３に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド。
【請求項２６】
請求項１〜２５のいずれか１項に記載の修飾されたＩＬ−２ポリペプチド、および、薬学的に許容可能な賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項２７】
前記医薬組成物は全身送達のために製剤化される、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項２８】
前記医薬組成物は非経口投与のために製剤化される、請求項２６に記載の医薬組成物。
【請求項２９】
それを必要とする被験体の増殖性疾患または疾病を処置する方法で使用するための、請求項２６〜２８のいずれか１項に記載の医薬組成物であって、前記方法は、治療上有効な量の医薬組成物を、被験体に投与する工程を含む、医薬組成物。
【請求項３０】
前記増殖性疾患または疾病は癌である、請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項３１】
癌は固形腫瘍癌である、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３２】
固形腫瘍癌は、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳癌、大腸癌、食道癌、眼癌、頭頚部癌、腎癌、肺癌、黒色腫、卵巣癌、膵臓癌、あるいは前立腺癌である、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
癌は血液悪性腫瘍である、請求項３０に記載の医薬組成物。
【請求項３４】
血液悪性腫瘍は、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、多発性骨髄腫、節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫、非バーキットリンパ高悪性度Ｂリンパ腫、原発性縦隔Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＬ）、免疫芽細胞性大細胞型リンパ腫、前駆Ｂリンパ芽球性リンパ腫、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、リンパ形質細胞性リンパ腫、脾臓周辺帯リンパ腫、形質細胞性骨髄腫、形質細胞腫、縦隔（胸腺）大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、血管内大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、原発性体腔性リンパ腫、あるいはリンパ腫様肉芽腫症である、請求項３３に記載の医薬組成物。
【請求項３５】
方法は、追加の治療薬を投与する工程をさらに含む、請求項２９に記載の医薬組成物。
【請求項３６】
医薬組成物および追加の治療剤は同時に投与される、請求項３５に記載の医薬組成物。
【請求項３７】
医薬組成物および追加の治療剤は順次投与される、請求項３５に記載の医薬組成物。
【請求項３８】
医薬組成物は、追加の治療剤の前に投与される、請求項３５に記載の医薬組成物。
【請求項３９】
医薬組成物は、追加の治療剤の投与後に投与される、請求項３５に記載の医薬組成物。
【請求項４０】
ＣＤ４＋ヘルパー細胞、ＣＤ８＋エフェクターナイーブおよび記憶細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、あるいはナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞集団を拡張する方法で使用するための、請求項２６〜２８のいずれか１項に記載の医薬組成物であって、前記方法
は：
ＩＬ−２Ｒβγで複合体の形成を誘発するのに十分な時間にわたって、医薬組成物を、細胞集団に接触させる工程であって、それによって、Ｔｅｆｆおよび／またはＮＫ細胞集団の拡張を刺激する工程、を含む、医薬組成物。
【請求項４１】
医薬組成物は、２０％、１５％、１０％、５％、１％、あるいは０．１％未満、ＣＤ４＋Ｔｒｅｇ細胞を拡張する、請求項４０に記載の医薬組成物。
【請求項４２】
医薬組成物は、細胞集団中のＣＤ４＋Ｔｒｅｇ細胞を拡張しない、請求項４０に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
医薬組成物によるインキュベーション後の細胞集団中のＴｅｆｆ細胞対Ｔｒｅｇ細胞の比率は、約あるいは少なくとも２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１、２０：１、５０：１、あるいは１００：１である、請求項４０に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
前記方法はインビボの方法である、請求項４０に記載の医薬組成物。
【請求項４５】
前記方法はインビトロの方法である、請求項４０に記載の医薬組成物。
【請求項４６】
前記方法はエクスビボの方法である、請求項４０に記載の医薬組成物。
【請求項４７】
被験体はヒトである、請求項２９〜３５のいずれか１つに記載の医薬組成物。