【手続補正書】
【提出日】平成17年6月9日(2005.6.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正の内容】
【発明の名称】ワレカラを飼育する方法および海水の評価方法
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
外洋より採取した海水を表面コーティングされていないガラス容器に入れ、表面にワレカラがとまることができる凹凸を有する不溶性のシートを海水中に入れてワレカラを飼育する方法。
【請求項２】
珪藻を餌として与える請求項１に記載のワレカラを飼育する方法。
【請求項３】
珪藻が表面コーティングされていないガラス容器に入れられた外洋より採取した海水中で培養されたものである請求項２に記載のワレカラを飼育する方法。
【請求項４】
海水は海岸より３〜２０ｋｍの距離の海域で、海面より１０ｍの深さより採取したものである請求項１ないし請求項３のいずれかに記載のワレカラを飼育する方法。
【請求項５】
外洋より採取した海水と表面にワレカラがとまることができる凹凸を有する不溶性のシートを入れた表面コーティングされていないガラス容器中に成熟した雌のワレカラと成熟した雄のワレカラを入れて交尾させ、受精した雌のワレカラを試験対象の海水および表面にワレカラがとまることができる凹凸を有する不溶性のシートを入れた表面コーティングされていないガラス容器に移動させて受精卵をふ化させ、ふ化したワレカラを飼育し、ワレカラの生存率により試験対象の海水中の汚染物質の評価を行う海水の評価方法。
【請求項６】
前記ワレカラの生存率は、育胞から出た幼生ワレカラおよび生存しているワレカラの数を記録して求めるものである請求項５に記載の海水の評価方法。
【請求項７】
外洋より採取した海水と表面にワレカラがとまることができる凹凸を有する不溶性のシートを入れた表面コーティングされていないガラス容器中に成熟した雌のワレカラと成熟した雄のワレカラを入れて交尾させ、受精した雌のワレカラを試験対象の海水と表面にワレカラがとまることができる凹凸を有する不溶性のシートを入れた表面コーティングされていないガラス容器に移動させて受精卵をふ化させ、ふ化したワレカラを飼育し、ふ化したワレカラの性比により試験対象の海水中の汚染物質の評価を行う海水の評価方法。
【請求項８】
前記ワレカラとしてホソワレカラを用いる請求項５ないし請求項７のいずれかに記載の海水の評価方法。
【請求項９】
前記ワレカラとしてトゲワレカラを用いる請求項５ないし請求項７のいずれかに記載の海水の評価方法。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、ワレカラの人工的な飼育・繁殖ができるように、これまで実現されなかったワレカラの飼育方法を提供することである。また、ワレカラを使用した海水の評価方法を提供することである。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００４】
【課題を解決するための手段】
上記の課題を解決するために、本発明に係るワレカラの飼育方法は、外洋より採取した海水を表面コーティングされていないガラス容器に入れ、表面にワレカラがとまることができる凹凸を有する不溶性のシートを海水中に入れてワレカラを飼育するものである。珪藻を餌として与えることが好ましく、この珪藻が表面コーティングされていないガラス容器に入れられた外洋より採取した海水中で培養されたものであることが好ましい。海水は海岸より３〜２０ｋｍの距離の海域で、海面より１０ｍの深さより採取したものであることが好ましい。さらに、本発明に係る海水の評価方法は、外洋より採取した海水と表面にワレカラがとまることができる凹凸を有する不溶性のシートを入れた表面コーティングされていないガラス容器中に成熟した雌のワレカラと成熟した雄のワレカラを入れて交尾させ、受精した雌のワレカラを試験対象の海水および表面にワレカラがとまることができる凹凸を有する不溶性のシートを入れた表面コーティングされていないガラス容器に移動させて受精卵をふ化させ、ふ化したワレカラを飼育し、ワレカラの生存率により試験対象の海水中の汚染物質の評価を行うものである。また、外洋より採取した海水と表面にワレカラがとまることができる凹凸を有する不溶性のシートを入れた表面コーティングされていないガラス容器中に成熟した雌のワレカラと成熟した雄のワレカラを入れて交尾させ、受精した雌のワレカラを試験対象の海水と表面にワレカラがとまることができる凹凸を有する不溶性のシートを入れた表面コーティングされていないガラス容器に移動させて受精卵をふ化させ、ふ化したワレカラを飼育し、ふ化したワレカラの性比により試験対象の海水中の汚染物質の評価を行うものでもよい。ワレカラとして例えばホソワレカラやトゲワレカラを用いることができる。なお、本発明において単に「ワレカラ」という場合は、甲殻網フクロエビ上目端脚目ワレカラ亜目に属する一群の甲殻類であるワレカラ類一般を示す。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
【発明の実施の形態】
本発明に係るワレカラの飼育方法およびワレカラの飼育装置の実施の形態について図１を用いて説明する。図１はワレカラの飼育装置の例を示す断面図である。ワレカラの飼育装置１は温度管理された部屋に収められている。ガラス容器２は表面コーティングされていないものである。通常市販されているガラス容器のほとんどは何らかの表面コーティングがなされているが、表面コーティングされたガラス容器を使用するとコーティング剤がワレカラの飼育に悪影響をおよぼすことが判明した。したがって、本発明の飼育方法および飼育装置においては、表面コーティングされていないガラス容器を指定して使用する必要がある。このガラス容器２の大きさは任意であり、飼育を行う規模に合せて、シャーレのような小型のものから大型の水槽まで適宜選択できる。ガラス容器２の中にワレカラを飼育するための海水３を入れる。ここで、海水３は汚染のされていないものを用いなければならない。汚染されていない海水を得るために、フィルターや各種イオン交換膜等により不純物を除去することができる。本例においては外洋で採取した海水を使用した。すなわち、海岸より３〜２０ｋｍの距離の海域で、海面より１０ｍの深さより採取したものを０．４７μｍのガラス繊維フィルターで濾過して用いた。ワレカラは自然状態では沿岸に棲息するので、海岸から近い海域の海水が飼育に適しているようにも見えるが、本発明者は沿岸部および外洋の海水の水質調査を繰り返し、沿岸部の水はＴＢＴ（トリブチルスズ）等の有機スズ化合物が含まれていること、およびその濃度が時間的に大きく変動することを見出した。これらの汚染物質は従来の分析方法で検出できる最低レベルかそれ以下であったためさほど問題視されていなかったが、これらの汚染物質はワレカラの飼育に悪影響をおよぼすとともに、その濃度の時間的変動により均質なワレカラのサンプルを得ることができなくなることがわかった。一方、外洋においてはこれらの汚染物質は見られず、当然にその濃度の時間変動などは問題にならないため、ワレカラの飼育に適することも判明した。海水３の中にはフッ化樹脂などの不溶性のシート４を入れる。ワレカラはホンダワラ等の海藻の群生帯に棲息し、海藻の表面につかまっていることが多いが、不溶性の材料よりなるシートで表面に凹凸を有するものを置くことで、ワレカラはこれにつかまって休むことができる。このことがワレカラのストレスを減少させ、ワレカラの飼育によい影響を与えることがわかった。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
【発明の効果】
以上、本発明に係るワレカラの飼育方法は、ワレカラの人工飼育を実現できるという効果がある。これにより、均質なワレカラが試験用試料として提供できることとなる。また、人工的に管理飼育することにより同じ種のワレカラにおいても異なる性質を示す複数の血統グループを純血種として得ることができるようになり、ワレカラの基礎研究に資するものである。