【手続補正書】
【提出日】令和3年3月12日(2021.3.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
単離されたトロポミオシン受容体キナーゼＢ（ＴｒｋＢ）アゴニスト抗体またはその抗原結合フラグメントであって、
１）配列番号４８〜５０の３つの重鎖ＣＤＲ配列、および配列番号４５〜４７の３つの軽鎖ＣＤＲ配列；
２）配列番号４０〜４２の３つの重鎖ＣＤＲ配列、および配列番号３７〜３９の３つの軽鎖ＣＤＲ配列；
３）配列番号１２〜１４の３つの重鎖ＣＤＲ配列、および配列番号９〜１１の３つの軽鎖ＣＤＲ配列；
４）配列番号１８〜２０の３つの重鎖ＣＤＲ配列、および配列番号１５〜１７の３つの軽鎖ＣＤＲ配列；
５）配列番号２４〜２６の３つの重鎖ＣＤＲ配列、および配列番号２１〜２３の３つの軽鎖ＣＤＲ配列；
６）配列番号３２〜３４の３つの重鎖ＣＤＲ配列、および配列番号２９〜３１の３つの軽鎖ＣＤＲ配列；
７）配列番号５６〜５８の３つの重鎖ＣＤＲ配列、および配列番号５３〜５５の３つの軽鎖ＣＤＲ配列；
８）配列番号６４〜６６の３つの重鎖ＣＤＲ配列、および配列番号６１〜６３の３つの軽鎖ＣＤＲ配列；または
９）配列番号７２〜７４の３つの重鎖ＣＤＲ配列、および配列番号６９〜７１の３つの軽鎖ＣＤＲ配列
を含む、上記抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項２】
配列番号５２、４４、２８、３６、６０、６８、７６またはそれらのヒト化型からなる群から選択される重鎖可変領域を含む、請求項１に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項３】
配列番号５１、４３、２７、３５、５９、６７、７５またはそれらのヒト化型からなる群から選択される軽鎖可変領域を含む、請求項１または２に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項４】
前記抗体がＴｒｋＢに結合すると、ＴｒｋＢは、ＴｒｋＢのＹ５１５、Ｙ７０１、Ｙ７０５、Ｙ７０６およびＹ８１６の少なくとも１つのアミノ酸残基でリン酸化される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項５】
少なくとも１２時間の半減期（Ｔ１／２）でＴｒｋＢに結合することが可能な、請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体と同じエピトープに結合するか、または請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗体と競合結合する、単離されたＴｒｋＢアゴニスト抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項７】
３ｎＭ未満のＥＣ５０を有する、請求項１〜６のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項８】
ビアコアによって測定した場合、４．５ｎＭ未満のＫＤ値のＴｒｋＢに対する親和性を有する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項９】
Ｐ７５ニューロトロフィン受容体（Ｐ７５ＮＴＲ）、チロシン受容体Ａ（ＴｒｋＡ）またはチロシン受容体Ｃ（ＴｒｋＣ）に結合しない、請求項１〜８のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１０】
神経細胞の生存を強化すること、シナプスの発生および／または可塑性を調節すること、軸索突起の伸長を強化すること、またはそれらの組合せが可能である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１１】
前記神経細胞が、ＰＣ１２細胞、海馬ニューロン、網膜神経節細胞、運動ニューロン、およびドーパミン作動性ニューロンを含む、請求項１０に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１２】
二重特異性抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、モノクローナル抗体、組換え抗体、標識された抗体、２価抗体、または抗イディオタイプ抗体である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１３】
単一ドメイン抗体、ラクダ単一ドメイン抗体、ＶＮＡＲ、ナノボディ、操作されたヒトＶＨ／ＶＬ単一ドメイン抗体、ダイアボディ、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ二量体、ＢｓＦｖ、ｄｓＦｖ、（ｄｓＦｖ）２、ｄｓＦｖ−ｄｓＦｖ’、Ｆｖフラグメント、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｄｓダイアボディ、ドメイン抗体、単離されたＣＤＲおよび２価ドメイン抗体からなる群から選択される抗原結合フラグメントである、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメント。
【請求項１４】
治療有効量の請求項１〜１３のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントおよび製剤用担体を含む医薬組成物。
【請求項１５】
ＢＤＮＦおよび／またはＮＴ−４を含む第２の治療剤をさらに含む、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
請求項１〜１３のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントをコードするポリヌクレオチド。
【請求項１７】
請求項１６に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
【請求項１８】
請求項１７に記載のベクターを含む単離された宿主細胞。
【請求項１９】
前記ポリヌクレオチドによってコードされた抗体またはその抗原結合フラグメントを生産する、請求項１８に記載の宿主細胞。
【請求項２０】
ＴｒｋＢに関連する状態を診断すること、予防すること、遅らせること、または治療することにおける、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントまたは請求項１４または１５に記載の医薬組成物を含むキット。
【請求項２１】
ＴｒｋＢに特異的に結合する抗体またはその抗原結合フラグメントを生産する方法であって、ＴｒｋＢタンパク質をコードするポリヌクレオチドを、請求項１９に記載の宿主細胞に導入すること、および該ポリヌクレオチドが発現される条件下で該宿主細胞を培養することを含む、上記方法。
【請求項２２】
ＴｒｋＢに関連する状態を治療すること、またはそのリスクを低減するための、請求項１４または１５に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
前記状態が、神経変性疾患、視神経症、網膜変性状態、聴力損失を伴う障害、精神障害、神経発達障害、体重の調節の障害、筋障害、代謝性疾患または脳傷害である、請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
前記状態が、アルツハイマー病（ＡＤ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、緑内障、ハンチントン病（ＨＤ）、パーキンソン病（ＰＤ）、運動ニューロン疾患、レヴィ小体病、脊髄性筋萎縮症、多系統萎縮症、認知症およびタウオパチー、前部虚血性視神経症（ＡＩＯＮ）、後部虚血性視神経症、放射線視神経症、圧迫性視神経症、ミトコンドリア性視神経症、中毒性視神経症、外傷性視神経症、遺伝性視神経症、視神経炎、加齢性黄斑変性症、網膜色素変性症、神経性難聴、迷路性難聴、耳鳴り、感覚神経聴力損失、複合型の聴力損失、不安、気分障害、うつ病、パニック障害、心的外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、双極性障害、統合失調症、アンジェルマン症候群、プラダー−ウィリー症候群、自閉性障害、レット症候群、思春期やせ症、悪液質、不要な体重の減少、サルコペニア、肥満症、オピオイドによって誘発された嘔吐、糖尿病性神経障害、てんかん、多発性硬化症、片頭痛、神経傷害、末梢神経障害、神経筋疾患、睡眠障害、外傷性脳傷害（ＴＢＩ）および卒中からなる群から選択される、請求項２２に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
細胞分化および／またはシナプスの発生を強化する方法であって、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントまたは請求項１４または１５に記載の医薬組成物を、ＴｒｋＢを発現する生体サンプルと接触させることを含む、上記方法。
【請求項２６】
神経傷害の修復および／または軸索突起の分岐を強化する方法であって、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントまたは請求項１４または１５に記載の医薬組成物を、ＴｒｋＢを発現する生体サンプルと接触させることを含む、上記方法。
【請求項２７】
細胞のアポトーシスおよび／またはネクロトーシスを予防する方法であって、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントまたは請求項１４または１５に記載の医薬組成物を、ＴｒｋＢを発現する生体サンプルと接触させることを含む、上記方法。
【請求項２８】
細胞生存を強化する方法であって、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントまたは請求項１４または１５に記載の医薬組成物を、ＴｒｋＢを発現する生体サンプルと接触させることを含む、上記方法。
【請求項２９】
対象におけるＴｒｋＢに関連する状態を治療すること、またはそのリスクを低減するための医薬であって、細胞表面上で請求項１〜１３のいずれか一項に記載の抗体またはその抗原結合フラグメントを発現する細胞を含む、上記方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２２１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２２１】
[00283]具体的な実施態様（その一部は、好ましい実施態様である）を参照しながら本
開示を具体的に示し説明したが、当業者であれば、本明細書で開示される本発明の開示の
本質および範囲から逸脱することなく、形態および詳細における様々な変化をなすことが
できることを理解しているものとする。
国際出願時の特許請求の範囲
〔項１〕  ＴｒｋＢの細胞外ドメインの１つに含有されるエピトープに結合し、ＴｒｋＢを活性化することが可能である単離されたＴｒｋＢアゴニスト抗体であって、該細胞外ドメインは、ＴｒｋＢの、配列番号２の配列を有する細胞外Ｄ１ドメイン、配列番号３の配列を有するＤ２ドメイン、配列番号４の配列を有するＤ３ドメイン、配列番号５の配列を有するＤ４ドメイン、配列番号６の配列を有するＤ５ドメイン、および配列番号７の配列を有する膜近傍のドメインを含む、上記抗体。
〔項２〕  膜近傍のドメインに含有されるエピトープに結合し、配列番号８の配列を有する短縮化されたＴｒｋＢを活性化することが可能である、請求項１に記載の抗体。
〔項３〕  単離されたＴｒｋＢアゴニスト抗体であって、配列番号９〜２６、２９〜３４、３７〜４２、４５〜５０、５３〜５８、６１〜６６、および６９〜７４から選択される１、２、３、４、５もしくは６つのＣＤＲ、またはそれらの少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体を含む、上記抗体。
〔項４〕  １）配列番号１２〜１４、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；２）配列番号１８〜２０、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；３）配列番号２４〜２６、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；４）配列番号３２〜３４、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；５）配列番号４０〜４２、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；６）配列番号４８〜５０、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；７）配列番号５６〜５８、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；８）配列番号６４〜６６、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；または９）配列番号７２〜７４、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体からなる群から選択される３つの重鎖ＣＤＲ配列を含む、請求項３に記載の抗体。
〔項５〕  １）配列番号９〜１１、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；２）配列番号１５〜１７、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；３）配列番号２１〜２３、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；４）配列番号２９〜３１、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；または５）配列番号３７〜３９、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；６）配列番号４５〜４７、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；７）配列番号５３〜５５、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；８）配列番号６１〜６３、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体；または９）配列番号６９〜７１、またはその少なくとも８０％の配列同一性を有する相同体からなる群から選択される３つの軽鎖ＣＤＲ配列を含む、請求項３または４に記載の抗体。
〔項６〕  １）配列番号１２〜１４、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；２）配列番号１８〜２０、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；３）配列番号２４〜２６、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；４）配列番号３２〜３４、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；５）配列番号４０〜４２、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；６）配列番号４８〜５０、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；７）配列番号５６〜５８、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；８）配列番号６４〜６６、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；または９）配列番号７２〜７４、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアントからなる群から選択される３つの重鎖ＣＤＲ配列を含む、請求項３に記載の抗体。
〔項７〕  １）配列番号９〜１１、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；２）配列番号１５〜１７、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；３）配列番号２１〜２３、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；４）配列番号２９〜３１、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；または５）配列番号３７〜３９、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；６）配列番号４５〜４７、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；７）配列番号５３〜５５、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；８）配列番号６１〜６３、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアント；または９）配列番号６９〜７１、または１、２または３つのアミノ酸改変を有するそのバリアントからなる群から選択される３つの軽鎖ＣＤＲ配列を含む、請求項３または４に記載の抗体。
〔項８〕  配列番号２８、３６、４４、５２、６０、６８、７６またはそれらのヒト化型からなる群から選択される重鎖可変領域を含む、請求項３〜７のいずれか一項に記載の抗体。
〔項９〕  配列番号２７、３５、４３、５１、５９、６７、７５またはそれらのヒト化型からなる群から選択される軽鎖可変領域を含む、請求項３〜７のいずれか一項に記載の抗体。
〔項１０〕  ＢＤＮＦおよび／またはＮＴ−４の場合とは異なるエピトープに結合することによって、相加効果でＴｒｋＢを活性化することが可能であり、ここで該相加効果は、ＴｒｋＢがＢＤＮＦおよび／またはＮＴ−４によるピークの活性化状態のときに、前記抗体によって追加のＴｒｋＢ活性化の増加がもたらされることである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の抗体。
〔項１１〕  前記抗体がＴｒｋＢに結合すると、ＴｒｋＢは、ＴｒｋＢのＹ５１５、Ｙ７０１、Ｙ７０５、Ｙ７０６およびＹ８１６の少なくとも１つのアミノ酸残基でリン酸化される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の抗体。
〔項１２〕  少なくとも１２時間の半減期（Ｔ１／２）でＴｒｋＢに結合することが可能な、単離されたＴｒｋＢアゴニスト抗体。
〔項１３〕  請求項１〜１２のいずれか一項に記載の抗体と同じエピトープに結合するか、または請求項１〜１２のいずれか一項に記載の抗体と競合結合する、単離されたＴｒｋＢアゴニスト抗体。
〔項１４〕  ３ｎＭ未満のＥＣ５０を有する、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の抗体。
〔項１５〕  ビアコアによって測定した場合、４．５ｎＭ未満のＫＤ値のＴｒｋＢに対する親和性を有する、単離されたＴｒｋＢアゴニスト抗体。
〔項１６〕  Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、Ｄ５または膜近傍に結合する、請求項１２、１４および１５のいずれか一項に記載の抗体。
〔項１７〕  Ｐ７５ニューロトロフィン受容体（Ｐ７５ＮＴＲ）、チロシン受容体Ａ（ＴｒｋＡ）またはチロシン受容体Ｃ（ＴｒｋＣ）に結合しない、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の抗体。
〔項１８〕  神経細胞の生存を強化すること、シナプスの発生および／または可塑性を調節すること、軸索突起の伸長を強化すること、またはそれらの組合せが可能である、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の抗体。
〔項１９〕  前記神経細胞が、ＰＣ１２細胞、海馬ニューロン、網膜神経節細胞、運動ニューロン、およびドーパミン作動性ニューロンを含む、請求項１８に記載の抗体。
〔項２０〕  二重特異性抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、モノクローナル抗体、組換え抗体、標識された抗体、２価抗体、または抗イディオタイプ抗体である、請求項１〜１９のいずれか一項に記載の抗体。
〔項２１〕  単一ドメイン抗体、ラクダ単一ドメイン抗体、ＶＮＡＲ、ナノボディ、操作されたヒトＶＨ／ＶＬ単一ドメイン抗体、ダイアボディ、ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ二量体、ＢｓＦｖ、ｄｓＦｖ、（ｄｓＦｖ）２、ｄｓＦｖ−ｄｓＦｖ’、Ｆｖフラグメント、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｄｓダイアボディ、ドメイン抗体、単離されたＣＤＲおよび２価ドメイン抗体からなる群から選択される抗原結合フラグメントである、請求項１〜２０のいずれか一項に記載の抗体。
〔項２２〕  治療有効量の請求項１〜２１のいずれか一項に記載の抗体および製剤用担体を含む医薬組成物。
〔項２３〕  ＢＤＮＦおよび／またはＮＴ−４を含む第２の治療剤をさらに含む、請求項２２に記載の医薬組成物。
〔項２４〕  請求項１〜２１のいずれか一項に記載の抗体をコードするポリヌクレオチド。
〔項２５〕  請求項２４に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
〔項２６〕  請求項２５に記載のベクターを含む単離された宿主細胞。
〔項２７〕  前記ポリヌクレオチドによってコードされた抗体を生産する、請求項２６に記載の宿主細胞。
〔項２８〕  ＴｒｋＢに関連する状態を診断すること、予防すること、遅らせること、または治療することにおける、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の抗体または請求項２２〜２３のいずれか一項に記載の医薬組成物を含むキット。
〔項２９〕  ＴｒｋＢに特異的に結合する抗体を生産する方法であって、ＴｒｋＢタンパク質をコードするポリヌクレオチドを、請求項２７に記載の宿主細胞に導入すること、および該ポリヌクレオチドが発現される条件下で該宿主細胞を培養することを含む、上記方法。
〔項３０〕  対象におけるＴｒｋＢに関連する状態を治療すること、またはそのリスクを低減するための方法であって、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の抗体または請求項２２〜２３のいずれか一項に記載の医薬組成物を該対象に投与すること、それによって該状態を治療することを含む、上記方法。
〔項３１〕  前記状態が、神経変性疾患、視神経症、網膜変性状態、聴力損失を伴う障害、精神障害、神経発達障害、体重の調節の障害、筋障害、代謝性疾患または脳傷害である、請求項３０に記載の方法。
〔項３２〕  前記状態が、アルツハイマー病（ＡＤ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、緑内障、ハンチントン病（ＨＤ）、パーキンソン病（ＰＤ）、運動ニューロン疾患、レヴィ小体病、脊髄性筋萎縮症、多系統萎縮症、認知症およびタウオパチー、緑内障、前部虚血性視神経症（ＡＩＯＮ）、後部虚血性視神経症、放射線視神経症、圧迫性視神経症、ミトコンドリア性視神経症、中毒性視神経症、外傷性視神経症、遺伝性視神経症、視神経炎、加齢性黄斑変性症、網膜色素変性症、神経性難聴、迷路性難聴、耳鳴り、感覚神経聴力損失、複合型の聴力損失、不安、気分障害、うつ病、パニック障害、心的外傷後ストレス障害（ＰＴＳＤ）、注意欠陥多動性障害（ＡＤＨＤ）、双極性障害、統合失調症、アンジェルマン症候群、プラダー−ウィリー症候群、自閉性障害、レット症候群、思春期やせ症、悪液質、不要な体重の減少、サルコペニア、肥満症、オピオイドによって誘発された嘔吐、サルコペニア、糖尿病性神経障害、てんかん、多発性硬化症、片頭痛、神経傷害、末梢神経障害、神経筋疾患、睡眠障害、外傷性脳傷害（ＴＢＩ）および卒中からなる群から選択される、請求項３０に記載の方法。
〔項３３〕  細胞分化および／またはシナプスの発生を強化する方法であって、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の抗体または請求項２２〜２３のいずれか一項に記載の医薬組成物を、ＴｒｋＢを発現する生体サンプルと接触させることを含む、上記方法。
〔項３４〕  神経傷害の修復および／または軸索突起の分岐を強化する方法であって、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の抗体または請求項２２〜２３のいずれか一項に記載の医薬組成物を、ＴｒｋＢを発現する生体サンプルと接触させることを含む、上記方法。
〔項３５〕  細胞のアポトーシスおよび／またはネクロトーシスを予防する方法であって、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の抗体または請求項２２〜２３のいずれか一項に記載の医薬組成物を、ＴｒｋＢを発現する生体サンプルと接触させることを含む、上記方法。
〔項３６〕  細胞生存を強化する方法であって、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の抗体または請求項２２〜２３のいずれか一項に記載の医薬組成物を、ＴｒｋＢを発現する生体サンプルと接触させることを含む、上記方法。
〔項３７〕  対象におけるＴｒｋＢに関連する状態を治療すること、またはそのリスクを低減するための方法であって、細胞表面上で請求項１〜２１のいずれか一項に記載の抗体を発現する細胞、または請求項２２〜２３のいずれか一項に記載の医薬組成物を該対象に投与することを含む、上記方法。