【手続補正書】
【提出日】令和3年10月25日(2021.10.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式Ｉ
【化１】
2021501198.tif 000001
（式中、
Ａは、フェニルであり、
Ｒ1は、−ＮＲb−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1a、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲb−Ｒ1a、−ＮＲb−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1b、−ＮＲb−Ｘ1−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1a、−Ｃ（Ｏ）−Ｘ1−ＮＲb−Ｒ1a、−Ｘ1−Ｃ（Ｏ）−ＮＲb−Ｒ1a、−Ｘ1−ＮＲb−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1a、−ＮＲb−Ｃ（Ｏ）−Ｘ1−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1b、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲb−Ｘ1−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1b、−ＮＲb−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ1a、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲb−Ｒ1a、−Ｘ1−ＮＲb−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ1a、−Ｘ1−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲb−Ｒ1a、−ＮＲb−Ｒ1a、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1a、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1a、ハロ、および−ＮＯ2からなる群から選択され、
Ｒ1aは、Ｃ1-10アルキル、Ｈ、およびＣ1-10ハロアルキルからなる群から選択され、
Ｒ1bは、−ＯＲa、−ＮＲaＲb、ヘテロシクロアルキル、およびフェニルからなる群から選択され、ここで、
ヘテロシクロアルキルはそれぞれ、窒素、酸素、および硫黄からなる群から選択される１〜３個のヘテロ原子環員を有する５〜６個の環員を含み、かつ
ヘテロシクロアルキルおよびフェニルはそれぞれ、置換されていないか、１〜４個のＣ1-4アルキル、−ＯＨ、およびハロにより置換されていて、
Ｒ2はそれぞれ、ハロゲン、−ＣＮ、−Ｃ1-8アルキル、−Ｃ2-8アルケニル、Ｃ2-8アルキニル、Ｃ1-8ハロアルキル、−Ｃ1-8アルコキシ、−Ｘ1−Ｃ1-8アルコキシ、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ2a、−ＳＲa、−Ｘ1−ＳＲa、−ＯＲa、−Ｘ1−ＯＲa、  −ＮＲaＲb、−Ｘ1−ＮＲaＲb、−Ｓ（Ｏ）2Ｒa、−Ｓ（Ｏ）2ＮＲaＲb、−Ｘ1−Ｓ（Ｏ）2Ｒa、−Ｘ1−Ｓ（Ｏ）2ＮＲaＲb、および−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒaからなる群から独立して選択され、
Ｒ3はそれぞれ、ハロゲン、−ＣＮ、−Ｃ1-8アルキル、−Ｃ2-8アルケニル、Ｃ2-8アルキニル、Ｃ1-8ハロアルキル、−Ｃ1-8アルコキシ、−Ｘ1−Ｃ1-8アルコキシ、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ3a、−ＳＲa、−Ｘ1−ＳＲa、−ＯＲa、−Ｘ1−ＯＲa、−ＮＲaＲb、−Ｘ1−ＮＲaＲb、−Ｓ（Ｏ）2Ｒa、−Ｓ（Ｏ）2ＮＲaＲb、−Ｘ1−Ｓ（Ｏ）2Ｒa、および−Ｘ1−Ｓ（Ｏ）2ＮＲaＲbからなる群から独立して選択され、
Ｒ2aおよびＲ3aはそれぞれ、Ｈ、Ｃ1-10アルキル、Ｃ1-10ハロアルキル、−ＯＲa、−Ｘ1−ＯＲa、−ＮＲaＲb、および−Ｘ1−ＮＲaＲbからなる群から独立して選択され、
Ｒ4aは、−ＯＲa、−ＮＲaＲb、−Ｏ−Ｃ（Ｏ）−Ｒa、およびシアノからなる群から選択され、
Ｒ4bはＨであり、またはＲ4aとＲ4bは結合してオキソまたはオキシム部分を形成し、
ＲaおよびＲbはそれぞれ、ＨおよびＣ1-4アルキルからなる群から独立して選択され、
Ｘ1はそれぞれ、Ｃ1-4アルキレンであり、
下付きのｎは、０〜３の整数であり、
下付きのｍは、０〜２の整数であり、
ただし、式Ｉの化合物は、２−フルオロ−９Ｈ−フルオレン−９−オン、２−アミノ−９Ｈ−フルオレン−９−オン、２−ニトロ−９Ｈ−フルオレン−９−オン、Ｎ−（９−オキソ−９Ｈ−フルオレン−２−イル）アセトアミドではない）
の化合物、またはその薬学的に許容される塩、水和物、もしくは溶媒和物。
【請求項２】
Ｒ4aは−ＯＲaであり、Ｒ4bはＨであり、またはＲ4aとＲ4bは結合してオキソ部分を形成する、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
Ｒ4aは−ＯＲaであり、Ｒ4bはＨである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
Ｒ1は、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1a、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1b、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ1a、および−ＮＲb−Ｒ1aからなる群から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ1は、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1a、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1b、および−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ1aからなる群から選択される、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ1は、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1aである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
Ｒ2およびＲ3はそれぞれ、ハロゲン、−Ｃ1-8アルキル、Ｃ1-8ハロアルキル、−ＯＲa、−Ｘ1−ＯＲa、−ＮＲaＲb、および−Ｘ1−ＮＲaＲbからなる群から独立して選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
Ｒ2およびＲ3はそれぞれ、−ＯＲa、−Ｘ1−ＯＲa、−ＮＲaＲb、または−Ｘ1−ＮＲaＲbからなる群から独立して選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
Ｒ1aは、Ｃ2-6アルキル、またはＣ1-6ハロアルキルである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｒ1aは、Ｃ2-6アルキルである、請求項１〜８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
ＲaおよびＲbはそれぞれ、ＨおよびＣ1-2アルキルからなる群から独立して選択される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１２】
下付きのｎは、０である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１３】
下付きのｍは、０である、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１４】
式Ｉの化合物は、式Ｉａ
【化２】
2021501198.tif 000002
の構造を有する、請求項４〜１３のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、水和物、もしくは溶媒和物。
【請求項１５】
式Ｉａの化合物は、式Ｉａ’ 
【化３】
2021501198.tif 000003
の構造を有する、請求項１４に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、水和物、もしくは溶媒和物。
【請求項１６】
式Ｉａの化合物は、式Ｉａ１またはＩａ２
【化４】
2021501198.tif 000004
（式中、
Ｒ4aは、−ＯＲaおよび−ＮＲaＲbからなる群から選択され、
Ｒ4bはＨである）
の構造を有する、請求項１４に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、水和物、もしくは溶媒和物。
【請求項１７】
式Ｉａ１またはＩａ２の化合物は、式Ｉａ１’またはＩａ２’
【化５】
2021501198.tif 000005
の構造を有する、請求項１６に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、水和物、もしくは溶媒和物。
【請求項１８】
Ｒ4aは、−ＯＨである、請求項１４〜１７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１９】
Ｒ1は、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1a、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ1a、−ＮＨ−Ｘ1−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1a、および−ＮＨ−Ｒ1aからなる群から選択され、
Ｒ2およびＲ3はそれぞれ、−ＮＨ2、−ＯＨ、−Ｘ1−ＮＨ2、−Ｘ1−ＯＨからなる群から独立して選択され、
Ｒ1aは、Ｃ1-6アルキルおよびＣ1-6ハロアルキルからなる群から選択され、
Ｘ1はそれぞれ、Ｃ1-2アルキレンであり、
下付きのｎは、０〜２の整数であり、
下付きのｍは、０または１である、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項２０】
式IIの化合物は、式IIａ
【化６】
2021501198.tif 000006
の構造を有する、請求項１９に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、水和物、もしくは溶媒和物。
【請求項２１】
式IIａの化合物は、式IIａ’
【化７】
2021501198.tif 000007
の構造を有する、請求項２０に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、水和物、もしくは溶媒和物。
【請求項２２】
式IIａの化合物は、式IIａ１
【化８】
2021501198.tif 000008
の構造を有する、請求項２０に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、水和物、もしくは溶媒和物。
【請求項２３】
Ｒ1は、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1aからなる群から選択され、
Ｒ2は、−ＮＨ2、または−ＯＨからなる群から独立して選択され、
Ｒ1aは、Ｃ1-6アルキルおよびＣ1-6ハロアルキルからなる群から選択され、
下付きのｎは、０または１である、請求項２１または２２に記載の化合物。
【請求項２４】
式III の化合物は、式III ａ
【化９】
2021501198.tif 000009
の構造を有する、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、水和物、もしくは溶媒和物。
【請求項２５】
式III の化合物は、式III ａ’
【化１０】
2021501198.tif 000010
の構造を有する、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、水和物、もしくは溶媒和物。
【請求項２６】
式III の化合物は、式III ａ１
【化１１】
2021501198.tif 000011
の構造を有する、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、水和物、もしくは溶媒和物。
【請求項２７】
Ｒ1は、−ＮＨ−Ｃ（Ｏ）−Ｒ1aであり、
Ｒ2は、−ＮＨ2または−ＯＨからなる群から選択され、
Ｒ1aは、Ｃ1-6アルキルおよびＣ1-6ハロアルキルからなる群から選択され、
下付きのｎは、０または１である、請求項２５または２６に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩、水和物、もしくは溶媒和物。
【請求項２８】
前記化合物は、表１から選択される、請求項１に記載の化合物。
【請求項２９】
培養中の造血幹細胞を増殖する方法であって、培養中のＣＤ３４＋細胞の供給源を、有効量の請求項１〜２８のいずれか一項に記載の化合物と接触させ、それにより培養中の造血幹細胞を増殖することを含む、方法。
【請求項３０】
前記ＣＤ３４＋細胞の供給源は、骨髄、臍帯血、動員末梢血、および非動員末梢血からなる群から選択される、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記ＣＤ３４＋細胞の供給源は、臍帯血である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３２】
前記ＣＤ３４＋細胞の供給源は、骨髄である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３３】
前記ＣＤ３４＋細胞の供給源は、（ａ）ＣＤ３４＋造血前駆細胞、（ｂ）ＣＤ３４＋初期造血前駆細胞および／または幹細胞、（ｃ）ＣＤ１３３＋初期造血前駆細胞および／または幹細胞、（ｄ）ＣＤ９０＋初期造血前駆細胞および／または幹細胞、（ｅ）ＣＤ４５ＲＡ−初期造血前駆細胞および／または幹細胞、および／または（ｆ）ＣＤ３８低／−初期造血前駆細胞および／または幹細胞のうちの１つ以上を含む、請求項３０に記載の方法。
【請求項３４】
前記方法はさらに、細胞を、トロンボポエチン（ＴＰＯ）、幹細胞因子（ＳＣＦ）、およびｆｍｓ関連チロシンキナーゼ３リガンド（ＦＬＴ３Ｌ）と接触させることを含む、請求項２９〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記方法はさらに、細胞を、トロンボポエチン（ＴＰＯ）、幹細胞因子（ＳＣＦ）、ｆｍｓ関連チロシンキナーゼ３リガンド（ＦＬＴ３Ｌ）、およびインターロイキン６（ＩＬ−６）と接触させることを含む、請求項２９〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
前記方法はさらに、細胞を、トロンボポエチン（ＴＰＯ）および幹細胞因子（ＳＣＦ）と接触させることを含む、請求項２９〜３３のいずれか一項記載の方法。
【請求項３７】
前記方法は、造血幹細胞表現型を安定させる、請求項２９〜３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
前記造血幹細胞表現型は、ＣＤ４５＋、ＣＤ３４＋、ＣＤ１３３＋、ＣＤ９０＋、ＣＤ４５ＲＡ−、ＣＤ３８低／−を含み、かつＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ５６を含む主要な造血系統マーカーに対して陰性である、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
ＣＤ１３３＋および／またはＣＤ９０＋陽性細胞は、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の化合物と接触させていない培養中の細胞と比較して、増加している、請求項２９〜３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
前記細胞は、培養７日後に、請求項１〜２８のいずれか一項に記載の化合物と接触していない培養中の細胞と比較して、ＣＤ１３３＋および／またはＣＤ９０＋陽性細胞の数が少なくとも約２倍である、請求項３９に記載の方法。
【請求項４１】
培養中の造血幹細胞を増殖させるための培地であって、以下
（ａ）（ｉ）基本培地または（ii）フィード培地(feed medium)、および
（ｂ）請求項１〜２８のいずれか一項に記載の化合物
を含む、培地。
【請求項４２】
培養中の造血幹細胞を増殖する方法であって、培養中のＣＤ３４＋細胞の供給源を、請求項４１に記載の培地と接触させ、それにより培養中の造血幹細胞を増殖することを含む、方法。
【請求項４３】
（ａ）培養中のＣＤ３４＋細胞の供給源、および（ｂ）請求項４１に記載の培地を含む、培養中の造血幹細胞を増殖するシステム。
【請求項４４】
（ａ）（ｉ）基本培地または（ii）フィード培地、および
（ｂ）請求項１〜２８のいずれか一項に記載の化合物、
を含むキット。
【請求項４５】
請求項２９〜４０または４２のいずれか一項に記載の方法によって生成される造血幹細胞集団。
【請求項４６】
請求項４５に記載の造血幹細胞集団を含む治療薬。
【請求項４７】
造血再構築を必要とする個体を治療するための、請求項４６に記載の治療薬。
【請求項４８】
前記個体は、骨髄ドナーまたはレシピエントである、請求項４７に記載の治療薬。
【請求項４９】
前記個体は、がんと診断されている、請求項４８に記載の治療薬。
【請求項５０】
前記個体は、自己免疫疾患と診断されている、請求項４７に記載の治療薬。
【請求項５１】
（ａ）基本培地またはフィード培地、および（ｂ）請求項１〜２８のいずれか一項に記載の化合物を組み合わせることを含む、造血幹細胞（ＨＳＣ）を培養するための細胞培養培地を生成する方法。