【手続補正書】
【提出日】令和3年7月2日(2021.7.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下のCDR1、2、及び3の組合せ:配列番号438、439、440;配列番号1、2、3;配列番号5、6、7;配列番号9、10、11;配列番号13、14、15;配列番号17、18、19;配列番号21、22、23;配列番号25、26、27;配列番号29、30、31;配列番号33、34、35;配列番号37、38、39;配列番号41、42、43;配列番号45、46、47;配列番号49、50、51;配列番号53、54、55;配列番号57、58、59;配列番号61、62、63;配列番号65、66、67;配列番号69、70、71;配列番号73、74、75;配列番号77、78、79;配列番号101、102、103;配列番号105、106、107;配列番号109、110、111;配列番号113、114、115;配列番号117、118、119;配列番号121、122、123;配列番号125、126、127;配列番号129、130、131;配列番号133、134、135;配列番号137、138、139;配列番号141、142、143;配列番号145、146、147;配列番号149、150、151;配列番号153、154、155;配列番号157、158、159;配列番号161、162、163;配列番号165、166、167;配列番号169、170、171;配列番号173、174、175;配列番号177、178、179;配列番号181、182、183;配列番号185、186、187;配列番号189、190、191;配列番号193、194、195;配列番号197、198、199;配列番号201、202、203;配列番号205、206、207;配列番号209、210、211;配列番号213、214、215;配列番号217、218、219;配列番号221、222、223;配列番号225、226、227;配列番号229、230、231;配列番号233、234、235;配列番号237、238、239;配列番号241、242、243;配列番号245、246、247;配列番号249、250、251;配列番号253、254、255;配列番号257、258、259;配列番号261、262、263;配列番号265、266、267;配列番号269、270、271;配列番号273、274、275;配列番号277、278、279;配列番号281、282、283;配列番号285、286、287;配列番号289、290、291;配列番号366、367、368;配列番号370、371、372;配列番号374、375、376;配列番号378、379、380;配列番号382、383、384;配列番号386、387、388;配列番号390、391、392;配列番号394、395、396;配列番号398、399、400;配列番号402、403、404;配列番号406、407、408;配列番号410、411、412;配列番号414、415、416;配列番号418、419、420;配列番号422、423、424;配列番号426、427、428;配列番号430、431、432;配列番号434、435、436;配列番号442、443、444;配列番号446、447、448;配列番号450、451、452;配列番号454、455、456;配列番号458、459、460;配列番号462、463、464;配列番号466、467、468;配列番号470、471、472;配列番号474、475、476;配列番号478、479、480;配列番号482、483、484;配列番号486、487、488;配列番号490、491、492;配列番号494、495、496;配列番号498、499、500;配列番号502、503、504;配列番号506、507、508;配列番号510、511、512;配列番号514、515、516;配列番号518、519、520;配列番号522、523、524;配列番号526、527、528、又は配列番号530、531、532のうちの1つを含むヒトPD-1に結合する単離されたVHシングルドメイン抗体。
【請求項２】
配列番号4、8、12、16、20、24、28、32、36、40、44、48、52、56、60、64、68、72、76、80、84、88、92、96、100、104、108、112、116、120、124、128、132、136、140、144、148、152、156、160、164、168、172、176、180、184、188、192、196、200、204、208、212、216、220、224、228、232、236、240、244、248、252、256、260、264、268、272、276、280、284、288、292、369、373、377、381、385、389、393、397、401、405、409、413、417、421、425、429、433、437、441、445、449、453、457、461、465、469、473、477、481、485、489、493、497、501、505、509、513、517、521、525、529、若しくは533から選択される配列、又はそれらと少なくとも60%、70%、80%、若しくは90%相同性を有する配列を含む、請求項1に記載の単離されたVHシングルドメイン抗体。
【請求項３】
ヒトV、D、及びJ領域を含むトランスジーンを発現するトランスジェニック齧歯類であって、好ましくはいかなる機能的な内因性の軽鎖及び重鎖も産生しないトランスジェニック齧歯類から得られた又は得ることができる、請求項1または2に記載の単離されたVHシングルドメイン抗体。
【請求項４】
請求項1から3のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体と本質的に同じエピトープに結合する、または、
請求項1から3のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体とヒトPD-1に対する結合に関して競合する、単離された結合剤。
【請求項５】
抗体又はその断片であり、場合により前記断片がFab、Fab′、F(ab′)2、dAb、Fd、Fv、又は一本鎖Fv断片、ヒト重鎖可変ドメイン(VH)、又は単離されたCDRであってもよい、請求項4に記載の単離された結合剤。
【請求項６】
請求項1から3のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体を含む単離された結合剤。
【請求項７】
前記シングルドメイン抗体が、PD-1に結合しない第2の結合分子に連結され、好ましくは前記第2のシングルドメイン抗体が免疫腫瘍学標的に結合する、請求項6に記載の単離された結合剤。
【請求項８】
前記シングルドメイン抗体が、同じ、重複する、又は異なるエピトープでPD-1に結合する第2の結合分子に連結される、請求項6に記載の単離された結合剤。
【請求項９】
前記結合分子が抗体又はその断片であり、場合により前記結合分子がヒト重鎖可変ドメイン(VH)であってもよい、請求項4から8のいずれか一項に記載の単離された結合剤。
【請求項１０】
毒素、酵素、放射性同位体、半減期延長部分、治療分子、又は他の化学部分にコンジュゲートされており、
場合により前記半減期延長部分がアルブミン結合部分、トランスフェリン結合部分、ポリエチレングリコール分子、組換えポリエチレングリコール分子、ヒト血清アルブミン、ヒト血清アルブミンの断片、及びアルブミン結合ペプチド又はヒト血清アルブミンに結合するシングルドメイン抗体からなる群から選択される、請求項1若しくは2に記載の単離されたVHシングルドメイン抗体、または請求項4から9のいずれか一項に記載の単離された結合剤。
【請求項１１】
多特異性結合剤又は多価結合剤における請求項1から3のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体の使用。
【請求項１２】
治療剤、好ましくは毒素、酵素、放射性同位体、又は他の化学部分である治療剤に連結された、請求項1から3のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体又は請求項4から10のいずれか一項に記載の結合剤を含む免疫コンジュゲート。
【請求項１３】
請求項1から3のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体、請求項4から10のいずれか一項に記載の結合剤、又は請求項12に記載の免疫コンジュゲート、並びに薬学的担体を含む、医薬組成物。
【請求項１４】
医薬として使用するための、請求項1から3のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体、請求項4から10のいずれか一項に記載の結合剤、又は請求項12に記載の免疫コンジュゲート、又は請求項13に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
好ましくは骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭頸部がん、皮膚又は眼内悪性黒色腫、子宮がん、卵巣がん、直腸がん、肛門領域のがん、胃がん、精巣がん、乳がん、脳がん、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣癌、外陰癌、食道がん、小腸がん、内分泌系のがん、甲状腺がん、副甲状腺がん、副腎がん、腎臓がん、軟部組織肉腫、尿道がん、膀胱がん、腎臓がん、肺がん、非小細胞肺がん、胸腺腫、尿路上皮癌、白血病、前立腺がん、中皮腫、副腎皮質癌、リンパ腫、例えばホジキン病、非ホジキンリンパ腫、胃がん、及び多発性骨髄腫から選択される、がん、免疫障害、神経疾患、炎症障害、アレルギー、移植拒絶反応、ウイルス感染症、免疫不全、及び他の免疫系関連障害の処置に使用するための、請求項1から3のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体、請求項4から10のいずれか一項に記載の結合剤、又は請求項12に記載の免疫コンジュゲート、又は請求項13に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
請求項1から3のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体、請求項4から10のいずれか一項に記載の結合剤、請求項12に記載の免疫コンジュゲート、又は請求項13に記載の医薬組成物を投与する工程を含む、免疫応答を調節する方法。
【請求項１７】
請求項1から3のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体をコードするヌクレオチド配列を含み、好ましくは配列番号293から365、又は534から575から選択される、単離された核酸分子。
【請求項１８】
請求項17に記載の核酸を含むベクター、または
前記ベクター若しくは請求項17に記載の核酸を含み、好ましくは細菌、酵母、昆虫、植物、ウイルス、又は哺乳動物細胞である、宿主細胞。
【請求項１９】
請求項1から3のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体を産生する方法であって、宿主細胞において前記結合分子をコードする核酸を発現させる工程及び宿主細胞から結合分子を単離する工程を含む、方法。
【請求項２０】
請求項1から3のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体、請求項4から10のいずれか一項に記載の結合剤、請求項12に記載の免疫コンジュゲート、又は請求項13に記載の医薬組成物を含むキット。
【請求項２１】
試験試料中のヒトPD-1の存在を検出する方法であって、前記試料を請求項1から3のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体及び少なくとも1つの検出可能な標識と接触させる工程、並びにヒトPD-1に対する前記シングルドメイン抗体の結合を検出する工程を含む、方法。
【請求項２２】
ヒトPD-1に結合するシングルVHドメイン抗体を産生する方法であって、
a)ヒト重鎖V遺伝子を含む核酸構築物を発現するが、機能的な内因性の軽鎖又は重鎖を作製することができないトランスジェニック動物を、PD-1抗原によって免疫する工程、
b)前記動物からライブラリを生成する工程、
c)前記ライブラリからシングルVHドメイン抗体を単離する工程、
d)ヒトPD-1に結合するシングルVHドメイン抗体を同定する工程、及び
e)前記抗体を単離する工程
を含む、方法。
【請求項２３】
請求項22に記載の方法によって得られた又は得ることができるシングルVHドメイン抗体。
【請求項２４】
ヒトPD-1に結合するVHドメインを含む、単離された重鎖のみの抗体。
【請求項２５】
請求項24に記載の重鎖のみの抗体を産生するトランスジェニック齧歯類。
【請求項２６】
ヒトV、D、及びJ座を発現するが、機能的な内因性のラムダ及びカッパ軽鎖及び重鎖を産生しないトランスジェニックマウスから得られた又は得ることができる、ヒトPD-1に結合するVHドメインを含む重鎖のみの抗体。
【請求項２７】
前記シングルドメイン抗体とは異なる結合特異性を有する第2の機能的部分に連結されており、場合により、前記第2の部分が、抗体、抗体断片、又は抗体模倣体であり、場合により、前記第2の部分が免疫腫瘍学標的に結合する、請求項1から3のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体を含む二特異性分子。