【手続補正書】
【提出日】令和3年5月21日(2021.5.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）ＮＫＧ２Ｄに結合する第１の抗原結合部位と、
（ｂ）５Ｔ４、ＧＰＮＭＢ、ＦＲ−α、ＰＡＰＰ−ＡまたはＧＰＣ３に結合する第２の抗原結合部位と、
（ｃ）ＣＤ１６に結合するに十分な抗体Ｆｃドメインもしくはその一部分、またはＣＤ１６に結合する第３の抗原結合部位と
を含むタンパク質。
【請求項２】
前記第１の抗原結合部位が、ヒトおよび非ヒト霊長類のＮＫＧ２Ｄに結合する、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項３】
前記第１の抗原結合部位が、同じポリペプチド上に存在する重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、請求項１または２に記載のタンパク質。
【請求項４】
前記第２の抗原結合部位が、同じポリペプチド上に存在する重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、請求項３に記載のタンパク質。
【請求項５】
前記第１の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインが、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を有する、請求項４に記載のタンパク質。
【請求項６】
前記第１の抗原結合部位が、
ａ．配列番号８７のアミノ酸配列と同一の重鎖相補性決定領域１（ＣＤＲ１）配列、配列番号８８のアミノ酸配列と同一の重鎖相補性決定領域２（ＣＤＲ２）配列、配列番号８９のアミノ酸配列と同一の重鎖相補性決定領域３（ＣＤＲ３）配列、配列番号９０のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号９１のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号９２のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列；
ｂ．配列番号１０５のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１０６のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号１０７のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列；
ｃ．配列番号４３のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号４４のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号４５のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号４６のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号４７のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号４８のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列；
ｄ．配列番号５１のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号５２のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号５３のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号５４のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号５５のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号５６のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列；
ｅ．配列番号１８６のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１８７のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１８８のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号１８９のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１９０のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号１９１のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列；
ｆ．配列番号６３のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号６４のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号６５のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号６６のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号６７のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号６８のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列；
ｇ．配列番号７１のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号７２のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号７３のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号７４のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号７５のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号７６のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列；
ｈ．配列番号７９のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号８０のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号８１のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号８２のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号８３のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号８４のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列；または
ｉ．配列番号９５のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号９６のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号９７のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号９８のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号９９のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号１００のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列
を含む、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項７】
前記第１の抗原結合部位が、配列番号８５、配列番号１、配列番号４１、配列番号４９、配列番号５７、配列番号５９、配列番号６１、配列番号６９、配列番号７７および配列番号９３から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項８】
前記第１の抗原結合部位が、
ａ．配列番号８５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号８６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｂ．配列番号４１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号４２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｃ．配列番号４９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号５０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｄ．配列番号５７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号５８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｅ．配列番号５９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号６０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｆ．配列番号６１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号６２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｇ．配列番号６９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号７０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｈ．配列番号７７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号７８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｉ．配列番号９３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号９４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｊ．配列番号１０１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１０２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；または
ｋ．配列番号１０３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１０４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン
を含む、請求項７に記載のタンパク質。
【請求項９】
前記第１の抗原結合部位が、単一ドメイン抗体である、請求項１または２に記載のタンパク質。
【請求項１０】
前記単一ドメイン抗体が、ＶＨＨ断片またはＶＮＡＲ断片である、請求項９に記載のタンパク質。
【請求項１１】
前記第２の抗原結合部位が、同じポリペプチド上に存在する重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、請求項１〜２または９〜１０のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１２】
ａ．前記第２の抗原結合部位は、５Ｔ４に結合し、
ｉ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１０９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１１３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、
ｉｉ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１１７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１２１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、
ｉｉｉ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１２５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１２９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、
ｉｖ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１９２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１９６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、または
ｖ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号２００と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号２０４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、あるいは
ｂ．前記第２の抗原結合部位は、ＧＰＮＭＢに結合し、
ｉ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１３４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１３８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、または
ｉｉ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１４２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１４６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、あるいは
ｃ．前記第２の抗原結合部位は、ＦＲ−αに結合し、
ｉ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１５１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１５５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、
ｉｉ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１５９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１６３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、
ｉｉｉ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１６７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１７１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、あるいは
ｄ．ＧＰＣ３であり、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１７７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１８１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、
請求項１〜１１のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項１３】
前記第２の抗原結合部位は、５Ｔ４に結合し、
ａ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１１０のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１１１のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１１２のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１１４のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１１５のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１１６のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含む；
ｂ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１１８のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１１９のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１２０のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１２２のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１２３のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１２４のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含む．
ｃ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１２６のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１２７のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１２８のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１３０のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１３１のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１３２のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含む；
ｄ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１９３のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１９４のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１９５のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１９７のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１９８のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１９９のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含む；または
ｅ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号２０１のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号２０２のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号２０３のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号２０５のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号２０６のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号２０７のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含む、
請求項１〜１１のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１４】
前記第２の抗原結合部位が、単一ドメイン抗体である、請求項１〜３のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１５】
前記第２の抗原結合部位が、ＶＨＨ断片またはＶＮＡＲ断片である、請求項１４に記載のタンパク質。
【請求項１６】
前記タンパク質が、ＣＤ１６に結合するに十分な抗体Ｆｃドメインの一部分を含み、前記抗体Ｆｃドメインが、ヒンジおよびＣＨ２ドメインを含む、先行する請求項のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１７】
前記抗体Ｆｃドメインが、ヒトＩｇＧ１抗体のヒンジおよびＣＨ２ドメインを含む、請求項１６に記載のタンパク質。
【請求項１８】
前記Ｆｃドメインが、ヒトＩｇＧ１抗体のアミノ酸２３４〜３３２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、請求項１６または１７に記載のタンパク質。
【請求項１９】
前記Ｆｃドメインが、ヒトＩｇＧ１のＦｃドメインと少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、Ｑ３４７、Ｙ３４９、Ｌ３５１、Ｓ３５４、Ｅ３５６、Ｅ３５７、Ｋ３６０、Ｑ３６２、Ｓ３６４、Ｔ３６６、Ｌ３６８、Ｋ３７０、Ｎ３９０、Ｋ３９２、Ｔ３９４、Ｄ３９９、Ｓ４００、Ｄ４０１、Ｆ４０５、Ｙ４０７、Ｋ４０９、Ｔ４１１、およびＫ４３９からなる群から選択される１つまたは複数の位置において異なる、請求項１８に記載のタンパク質。
【請求項２０】
先行する請求項のいずれか一項に記載のタンパク質および薬学的に許容される担体を含む製剤。
【請求項２１】
請求項１から１９のいずれか一項に記載のタンパク質をコードする１つまたは複数の核酸を含む細胞。
【請求項２２】
治療における使用のための、請求項１から１９のいずれか一項に記載のタンパク質を含む組成物または請求項２０に記載の製剤。
【請求項２３】
有効量の前記タンパク質に、腫瘍細胞およびナチュラルキラー細胞を曝露する工程を包含する、腫瘍細胞死を増強する方法における使用のための、請求項１から１９のいずれか一項に記載のタンパク質を含む組成物または請求項２０に記載の製剤。
【請求項２４】
有効量の前記タンパク質または前記製剤を、患者に投与することを包含する、がんを処置する方法における使用のための、請求項１から１９のいずれか一項に記載のタンパク質を含む組成物または請求項２０に記載の製剤。
【請求項２５】
ａ．前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、５Ｔ４に結合し、処置される前記がんは、結腸直腸がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、腎臓がん、および胃がんからなる群より選択される、
ｂ．前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＧＰＮＭＢに結合し、処置される前記がんは、黒色腫、トリプルネガティブ乳がんを含む乳がん、骨肉腫、神経膠腫、および膠芽腫からなる群より選択される、
ｃ．前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＦＲαに結合し、処置される前記がんは、卵巣がん、トリプルネガティブ乳がんを含む乳がん、肺腺癌、および上皮起源の腫瘍からなる群より選択される、
ｄ．前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＰＡＰＰ−Ａに結合し、処置される前記がんは、肺がん、乳がん、卵巣がん、およびユーイング肉腫からなる群より選択される、または
ｅ．前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＧＰＣ３に結合し、処置される前記がんは、肝細胞癌、黒色腫、ウィルムス腫瘍、卵黄嚢腫、卵巣明細胞癌、胃がん、および食道がんからなる群より選択される、
請求項２４に記載の使用のための組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
本発明の別の態様は、患者のがんを処置する方法を提供する。本方法は、それを必要とする患者に、本明細書に記載の多重特異性結合タンパク質を治療有効量で投与することを含む。５Ｔ４を標的とする多重特異性結合タンパク質を使用して処置するがんとして、５Ｔ４を発現する任意のがん、例えば、結腸直腸がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、腎臓がん、および胃が挙げられる。ＧＰＮＭＢを標的とする多重特異性結合タンパク質を使用して処置するがんとして、ＧＰＮＭＢを発現する任意のがん、例えば、黒色腫、トリプルネガティブ乳がんを含む乳がん、骨肉腫、神経膠腫、および膠芽腫が挙げられる。ＦＲ−αを標的とする多重特異性結合タンパク質を使用して処置するがんとして、ＦＲ−αを発現する任意のがん、例えば、卵巣がん、トリプルネガティブ乳がんを含む乳がん、肺腺癌、および上皮起源の腫瘍が挙げられる。ＰＡＰＰ−Ａを標的とする多重特異性結合タンパク質を使用して処置するがんとして、ＰＡＰＰ−Ａを発現する任意のがん、例えば、肺がん、乳がん、卵巣がん、およびユーイング肉腫が挙げられる。ＧＰＣ３を標的とする多重特異性結合タンパク質を使用して処置するがんとして、ＧＰＣ３を発現する任意のがん、例えば、肝細胞癌、黒色腫、ウィルムス腫瘍、卵黄嚢腫、卵巣明細胞癌、胃がん、および食道がんが挙げられる。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
（ａ）ＮＫＧ２Ｄに結合する第１の抗原結合部位と、
（ｂ）５Ｔ４、ＧＰＮＭＢ、ＦＲ−α、ＰＡＰＰ−ＡまたはＧＰＣ３に結合する第２の抗原結合部位と、
（ｃ）ＣＤ１６に結合するに十分な抗体Ｆｃドメインもしくはその一部分、またはＣＤ１６に結合する第３の抗原結合部位と
を含むタンパク質。
（項目２）
前記第１の抗原結合部位が、ヒトまたは非ヒト霊長類のＮＫＧ２Ｄに結合する、項目１に記載のタンパク質。
（項目３）
前記第１の抗原結合部位が、重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、項目１または２に記載のタンパク質。
（項目４）
前記重鎖可変ドメインおよび前記軽鎖可変ドメインが、同じポリペプチド上に存在する、項目３に記載のタンパク質。
（項目５）
前記第２の抗原結合部位が、重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、項目３または４に記載のタンパク質。
（項目６）
前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインおよび前記軽鎖可変ドメインが、同じポリペプチド上に存在する、項目５に記載のタンパク質。
（項目７）
前記第１の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインが、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を有する、項目５または６に記載のタンパク質。
（項目８）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号１、配列番号４１、配列番号４９、配列番号５７、配列番号５９、配列番号６１、配列番号６９、配列番号７７、配列番号８５および配列番号９３から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインを含む、先行する項目のいずれか一項に記載のタンパク質。
（項目９）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号４１と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号４２と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１０）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号４９と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号５０と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１１）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号５７と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号５８と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１２）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号５９と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号６０と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１３）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号６１と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号６２と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１４）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号６９と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号７０と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１５）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号７７と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号７８と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１６）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号８５と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号８６と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１７）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号９３と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号９４と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１８）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号１０１と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号１０２と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１９）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号１０３と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号１０４と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目２０）
前記第１の抗原結合部位が、単一ドメイン抗体である、項目１または２に記載のタンパク質。
（項目２１）
前記単一ドメイン抗体が、ＶＨＨ断片またはＶＮＡＲ断片である、項目２０に記載のタンパク質。
（項目２２）
前記第２の抗原結合部位が、重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、項目１、２、または２０から２１のいずれか一項に記載のタンパク質。
（項目２３）
前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインおよび前記軽鎖可変ドメインが、同じポリペプチド上に存在する、項目２２に記載のタンパク質。
（項目２４）
前記第２の抗原結合部位は、５Ｔ４に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１０９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１１３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目２５）
前記第２の抗原結合部位は、５Ｔ４に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１１７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１２１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目２６）
前記第２の抗原結合部位は、５Ｔ４に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１２５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１２９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目２７）
前記第２の抗原結合部位は、５Ｔ４に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１９２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１９６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目２８）
前記第２の抗原結合部位は、５Ｔ４に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号２００と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号２０４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目２９）
前記第２の抗原結合部位は、ＧＰＮＭＢに結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１３４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１３８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３０）
前記第２の抗原結合部位は、ＧＰＮＭＢに結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１４２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１４６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３１）
前記第２の抗原結合部位は、ＦＲ−αに結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１５１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１５５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３２）
前記第２の抗原結合部位は、ＦＲ−αに結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１５９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１６３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３３）
前記第２の抗原結合部位は、ＦＲ−αに結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１６７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１７１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３４）
前記第２の抗原結合部位は、ＧＰＣ３に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１７７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１８１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３５）
前記第２の抗原結合部位が、単一ドメイン抗体である、項目１から４または８から２１のいずれか一項に記載のタンパク質。
（項目３６）
前記第２の抗原結合部位が、ＶＨＨ断片またはＶＮＡＲ断片である、項目３５に記載のタンパク質。
（項目３７）
前記タンパク質が、ＣＤ１６に結合するに十分な抗体Ｆｃドメインの一部分を含み、前記抗体Ｆｃドメインが、ヒンジおよびＣＨ２ドメインを含む、先行する項目のいずれか一項に記載のタンパク質。
（項目３８）
前記抗体Ｆｃドメインが、ヒトＩｇＧ１抗体のヒンジおよびＣＨ２ドメインを含む、項目３７に記載のタンパク質。
（項目３９）
前記Ｆｃドメインが、ヒトＩｇＧ１抗体のアミノ酸２３４〜３３２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目３７または３８に記載のタンパク質。
（項目４０）
前記Ｆｃドメインが、ヒトＩｇＧ１のＦｃドメインと少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、Ｑ３４７、Ｙ３４９、Ｌ３５１、Ｓ３５４、Ｅ３５６、Ｅ３５７、Ｋ３６０、Ｑ３６２、Ｓ３６４、Ｔ３６６、Ｌ３６８、Ｋ３７０、Ｎ３９０、Ｋ３９２、Ｔ３９４、Ｄ３９９、Ｓ４００、Ｄ４０１、Ｆ４０５、Ｙ４０７、Ｋ４０９、Ｔ４１１、Ｋ４３９からなる群から選択される１つまたは複数の位置において異なる、項目３９に記載のタンパク質。
（項目４１）
先行する項目のいずれか一項に記載のタンパク質および薬学的に許容される担体を含む製剤。
（項目４２）
項目１から４０のいずれか一項に記載のタンパク質を発現する１つまたは複数の核酸を含む細胞。
（項目４３）
有効量の、項目１〜４０のいずれか１項に記載のタンパク質に、腫瘍細胞およびナチュラルキラー細胞を曝露する工程を包含する、腫瘍細胞死を増強する方法。
（項目４４）
有効量の、項目１〜４０のいずれか１項に記載のタンパク質または項目４１に記載の製剤を、患者に投与することを包含する、がんを処置する方法。
（項目４５）
前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、５Ｔ４に結合し、処置される前記がんは、結腸直腸がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、腎臓がん、および胃がんからなる群より選択される、項目４４に記載の方法。
（項目４６）
前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＧＰＮＭＢに結合し、処置される前記がんは、黒色腫、トリプルネガティブ乳がんを含む乳がん、骨肉腫、神経膠腫、および膠芽腫からなる群より選択される、項目４４に記載の方法。
（項目４７）
前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＦＲαに結合し、処置される前記がんは、卵巣がん、トリプルネガティブ乳がんを含む乳がん、肺腺癌、および上皮起源の腫瘍からなる群より選択される、項目４４に記載の方法。
（項目４８）
前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＰＡＰＰ−Ａに結合し、処置される前記がんは、肺がん、乳がん、卵巣がん、およびユーイング肉腫からなる群より選択される、項目４４に記載の方法。
（項目４９）
前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＧＰＣ３に結合し、処置される前記がんは、肝細胞癌、黒色腫、ウィルムス腫瘍、卵黄嚢腫、卵巣明細胞癌、胃がん、および食道がんからなる群より選択される、項目４４に記載の方法。