【手続補正書】
【提出日】令和3年4月2日(2021.4.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アグリカンに特異的に結合する免疫グロブリン単一可変ドメイン（ＩＳＶ）であって、好ましくは、ヒトアグリカン［配列番号１２５］に特異的に結合する、および、任意には、イヌアグリカン（配列番号１２６）、ウシアグリカン（配列番号１２７）、ラットアグリカン（配列番号１２８）；ブタ（コア）アグリカン（配列番号１２９）；マウスアグリカン（配列番号１３０）、ウサギアグリカン（配列番号１３１）；カニクイザルアグリカン（配列番号１３２）および／またはアカゲザルアグリカン（配列番号１３３）に特異的に結合する、前記ＩＳＶ。
【請求項２】
４つのフレームワーク領域（それぞれＦＲ１〜ＦＲ４）および３つの相補性決定領域（それぞれＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）から本質的になる、請求項１に記載のＩＳＶであって、ここで；
−  ＣＤＲ１が、配列番号２４、２０、２１、２２、２３、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７および１０９からなる群より選択され；好ましくは、配列番号２４、２０、２１、２５、２７、２９、３１、３４、３５、３６、３７および１０９からなる群より選択され；
−  ＣＤＲ２が、配列番号４２、３８、３９、４０、４１、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５および１１０からなる群より選択され；好ましくは、配列番号４２、３８、３９、４３、４５、４７、４９、５０、５３、５４、５５および１１０からなる群より選択され；ならびに
−  ＣＤＲ３が、配列番号６０、５６、５７、５８、５９、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４および１１１からなる群より選択され；好ましくは、配列番号６０、５６、５７、６１、６３、６５、６７、７１、７２、７３、７４および１１１からなる群より選択される、
前記ＩＳＶ。
【請求項３】
４つのフレームワーク領域（それぞれＦＲ１〜ＦＲ４）および３つの相補性決定領域（それぞれＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）から本質的になる、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のＩＳＶであって、ここで；
ｉ）ＣＤＲ１は、
ａ）配列番号２４、２０、２１、１０９；および
ｂ）配列番号２４のアミノ酸配列と５、４、３、２もしくは１のアミノ酸（単数または複数）の相違を有するアミノ酸配列、ここで、
−  位置２において、Ｓは、Ｒ、Ｆ、ＩもしくはＴに変更されている；
−  位置３において、Ｔは、Ｉに変更されている；
−  位置５において、Ｉは、Ｓに変更されている；
−  位置６において、Ｉは、Ｓ、ＴもしくはＭに変更されている；
−  位置７において、Ｎは、ＹもしくはＲに変更されている；
−  位置８において、Ｖは、Ａ、Ｙ、ＴもしくはＧに変更されている；
−  位置９において、Ｖは、Ｍに変更されている；および／または
−  位置１０において、Ｒは、Ｇ、ＫもしくはＡに変更されている；
からなる群より選択される、
ならびに／あるいは
ｉｉ）ＣＤＲ２は、
ｃ）配列番号４２、３８、３９、および１１０；および
ｄ）配列番号４２のアミノ酸配列と５、４、３、２もしくは１のアミノ酸（単数または複数）の相違を有するアミノ酸配列、ここで、
−  位置１において、Ｔは、ＡもしくはＧに変更されている；
−  ＳもしくはＮが位置３と位置４との間に挿入される；
−  位置３において、Ｓは、Ｒ、Ｗ、ＮもしくはＴに変更されている；
−  位置４において、Ｓは、ＴもしくはＧに変更されている；
−  位置５において、Ｇは、Ｓに変更されている；
−  位置６において、Ｇは、ＳもしくはＲに変更されている；
−  位置７において、Ｎは、Ｓ、ＴもしくはＲに変更されている；
−  位置８において、Ａは、Ｔに変更されている；および／または
−  位置９において、Ｎは、ＤもしくはＹに変更されている；
からなる群より選択される、
ならびに／あるいは
ｉｉｉ）ＣＤＲ３は、
ｅ）配列番号６０、５６、５７、および１１１；および
ｆ）配列番号６０のアミノ酸配列と５、４、３、２もしくは１のアミノ酸（単数または複数）の相違を有するアミノ酸配列、ここで、
−  位置１において、Ｐは、Ｇ、Ｒ、ＤもしくはＥに変更されているか、または不在である；
−  位置２において、Ｔは、Ｒ、Ｌ、ＰもしくはＶに変更されているか、または不在である；
−  位置３において、Ｔは、Ｍ、ＳもしくはＲに変更されているか、または不在である；
−  位置４において、Ｈは、Ｄ、Ｙ、ＧもしくはＴに変更されている；
−  位置５において、Ｙは、Ｆ、Ｖ、ＴもしくはＧに変更されている；
−  位置６において、Ｇは、Ｌ、Ｄ、Ｓ、ＹもしくはＷに変更されている；
−  Ｒ、Ｔ、ＹもしくはＶが、位置６と位置７との間に挿入される；
−  位置７において、Ｇは、ＰもしくはＳに変更されている；
−  位置８において、Ｖは、Ｇ、Ｔ、Ｈ、Ｒ、ＬもしくはＹに変更されている；
−  位置９において、Ｙは、Ｒ、Ａ、Ｓ、ＤもしくはＧに変更されている；
−  位置１０において、Ｙは、Ｎ、Ｅ、Ｇ、ＷもしくはＳに変更されている；
−  Ｗが、位置１０と位置１１との間に挿入される；
−  位置１１において、Ｇは、Ｓ、ＫもしくはＹに変更されている；
−  位置１２において、Ｐは、ＥもしくはＤに変更されているか、または不在である；および／または
−  位置１３において、Ｙは、Ｌに変更されているか、または不在である、
からなる群より選択される、前記ＩＳＶ。
【請求項４】
４つのフレームワーク領域（それぞれＦＲ１〜ＦＲ４）および３つの相補性決定領域（それぞれＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）から本質的になる、請求項１または２に記載のＩＳＶであって、ここで；
ｉ）ＣＤＲ１は、
ａ）配列番号３２、３０および２３；ならびに
ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列と３、２または１のアミノ酸（単数または複数）の相違を有するアミノ酸配列であって、ここで、
−  位置２において、Ｒは、Ｌに変更されている；
−  位置６において、Ｓは、Ｔに変更されている；および／または
−  位置８において、Ｔは、Ａに変更されている；
からなる群より選択される、
ならびに／あるいは
ｉｉ）ＣＤＲ２は、
ｃ）配列番号５０、４１、４８および５１；ならびに
ｄ）配列番号５０のアミノ酸配列と２または１のアミノ酸（単数または複数）の相違を有するアミノ酸配列であって、ここで、
−  位置７において、Ｇは、ＳもしくはＲに変更されている；および／または
−  位置８において、Ｒは、Ｔに変更されている；
からなる群より選択される、
ならびに／あるいは
ｉｉｉ）ＣＤＲ３は、
ｅ）配列番号６８、５９、６６および６９；ならびに
ｆ）配列番号６８のアミノ酸配列と５、４、３、２または１のアミノ酸（単数または複数）の相違を有するアミノ酸配列であって、ここで、
−  位置４において、Ｒは、ＶもしくはＰに変更されている；
−  位置６において、Ａは、Ｙに変更されている；
−  位置７において、Ｓは、Ｔに変更されている；
−  位置８において、Ｓは、不在である；
−  位置９において、Ｎは、Ｐに変更されている；
−  位置１０において、Ｒは、ＴもしくはＬに変更されている；
−  位置１１において、Ｇは、Ｅに変更されている；および／または
−  位置１２において、Ｌは、ＴもしくはＶに変更されている、
からなる群より選択される、前記ＩＳＶ。
【請求項５】
４つのフレームワーク領域（それぞれＦＲ１〜ＦＲ４）および３つの相補性決定領域（それぞれＣＤＲ１〜ＣＤＲ３）から本質的になる、請求項１または２に記載のＩＳＶであって、ここで；
ｉ）ＣＤＲ１は、
ａ）配列番号２８；および
ｂ）配列番号２８のアミノ酸配列と５、４、３、２または１のアミノ酸（単数または複数）の相違を有するアミノ酸配列であって、ここで、
−  位置１において、Ｇは、Ｒに変更されている；
−  位置２において、Ｐは、ＳもしくはＲに変更されている；
−  位置３において、Ｔは、Ｉに変更されている；
−  位置５において、Ｓは、Ｎに変更されている；
−  位置６において、Ｒは、Ｎ、ＭもしくはＳに変更されている；
−  位置７において、Ｙは、Ｒに変更されているか、または不在である；
−  位置８において、Ａは、Ｆに変更されているか、または不在である；および／または
−  位置１０において、Ｇは、Ｙに変更されている；
からなる群より選択される、
ならびに／あるいは
ｉｉ）ＣＤＲ２は、
ｃ）配列番号４６；および
ｄ）配列番号４６のアミノ酸配列と５、４、３、２または１のアミノ酸（単数または複数）の相違を有するアミノ酸配列であって、ここで、
−  位置１において、Ａは、ＳもしくはＹに変更されている；
−  位置４において、Ｗは、Ｌに変更されている；
−  位置５において、Ｓは、Ｎに変更されている；
−  位置６において、Ｓは、不在である；
−  位置７において、Ｇは、不在である；
−  位置８において、Ｇは、Ａに変更されている；
−  位置９において、Ｒは、Ｓ、ＤもしくはＴに変更されている；および／または
−  位置１１において、Ｙは、ＮもしくはＲに変更されている；
からなる群より選択される、
ならびに／あるいは
ｉｉｉ）ＣＤＲ３は、
ｅ）配列番号６４；および
ｆ）配列番号６４のアミノ酸配列と５、４、３、２または１のアミノ酸（単数または複数）の相違を有するアミノ酸配列であって、ここで、
−  位置１において、Ａは、ＲもしくはＦに変更されている；
−  位置２において、Ｒは、ＩもしくはＬに変更されている；
−  位置３において、Ｉは、ＨもしくはＱに変更されている；
−  位置４において、Ｐは、ＧもしくはＮに変更されている；
−  位置５において、Ｖは、Ｓに変更されている；
−  位置６において、Ｒは、Ｇ、ＮもしくはＦに変更されている；
−  位置７において、Ｔは、Ｒ、ＷもしくはＹに変更されている；
−  位置８において、Ｙは、ＲもしくはＳに変更されているか、または不在である；
−  位置９において、Ｔは、Ｓに変更されているか、または不在である；
−  位置１０において、Ｓは、Ｅ、Ｋに変更されているか、または不在である；
−  位置１１において、Ｅは、Ｎ、Ａに変更されているか、または不在である；
−  位置１２において、Ｗは、Ｄに変更されているか、または不在である；
−  位置１３において、Ｎは、Ｄに変更されているか、または不在である；
−  位置１４において、Ｙは、不在である；および／または
−  ＤおよびＮが、配列番号６４の位置１４の後に付加される、
からなる群より選択される、前記ＩＳＶ。
【請求項６】
−  ＣＤＲ１が、配列番号２４であり、ＣＤＲ２が、配列番号４２であり、およびＣＤＲ３が、配列番号６０である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号２０であり、ＣＤＲ２が、配列番号３８であり、およびＣＤＲ３が、配列番号５６である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号２１であり、ＣＤＲ２が、配列番号３９であり、およびＣＤＲ３が、配列番号５７である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号２５であり、ＣＤＲ２が、配列番号４３であり、およびＣＤＲ３が、配列番号６１である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号２７であり、ＣＤＲ２が、配列番号４５であり、およびＣＤＲ３が、配列番号６３である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号２９であり、ＣＤＲ２が、配列番号４７であり、およびＣＤＲ３が、配列番号６５である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号３１であり、ＣＤＲ２が、配列番号４９であり、およびＣＤＲ３が、配列番号６７である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号３４であり、ＣＤＲ２が、配列番号５０であり、およびＣＤＲ３が、配列番号７１である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号３５であり、ＣＤＲ２が、配列番号５３であり、およびＣＤＲ３が、配列番号７２である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号３６であり、ＣＤＲ２が、配列番号５４であり、およびＣＤＲ３が、配列番号７３である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号３７であり、ＣＤＲ２が、配列番号５５であり、およびＣＤＲ３が、配列番号７４である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号３２であり、ＣＤＲ２が、配列番号５０であり、およびＣＤＲ３が、配列番号６８である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号３２であり、ＣＤＲ２が、配列番号５１であり、およびＣＤＲ３が、配列番号６９である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号３０であり、ＣＤＲ２が、配列番号４８であり、およびＣＤＲ３が、配列番号６６である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号２３であり、ＣＤＲ２が、配列番号４１であり、およびＣＤＲ３が、配列番号５９である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号２８であり、ＣＤＲ２が、配列番号４６であり、およびＣＤＲ３が、配列番号６４である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号２２であり、ＣＤＲ２が、配列番号４０であり、およびＣＤＲ３が、配列番号５８である；
−  ＣＤＲ１が、配列番号２６であり、ＣＤＲ２が、配列番号４４であり、およびＣＤＲ３が、配列番号６２である；ならびに
−  ＣＤＲ１が、配列番号３３であり、ＣＤＲ２が、配列番号５２であり、およびＣＤＲ３が、配列番号７０である、
ＩＳＶの群より選択される、請求項２〜５のいずれか一項に記載のＩＳＶ。
【請求項７】
配列番号１〜１９および１１４〜１１８、好ましくは配列番号５、１、２、６、８、１０、１２、１６、１７、１８および１９を有するＩＳＶ、ならびに配列番号１〜１９および１１４〜１１８、好ましくは配列番号５、１、２、６、８、１０、１２、１６、１７、１８および１９のいずれか１つと９０％または９５％などの８０％より高い配列同一性を有するＩＳＶからなる群より選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載のＩＳＶ。
【請求項８】
アグリカンへの結合について、請求項１〜７のいずれか一項に記載のＩＳＶと競合する、
ドメイン抗体、ドメイン抗体としての使用のために好適な免疫グロブリン、単一ドメイン抗体、単一ドメイン抗体としての使用のために好適な免疫グロブリン、ｄＡｂ、ｄＡｂとしての使用のために好適な免疫グロブリン、ナノボディ、ＶＨＨ配列、ヒト化ＶＨＨ配列、ラクダ化ＶＨ配列、アグリカンのＧ１ドメインのエピトープビン１に結合する親和性成熟により得られたＶＨＨ配列、アグリカンのＧ１−ＩＧＤ−Ｇ２ドメインに結合する親和性成熟により得られたＶＨＨ配列、またはアグリカンのＧ２ドメインに結合する親和性成熟により得られたＶＨＨ配列。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の少なくとも１つのＩＳＶ、および場合によっては第２のＩＳＶ、場合によっては第３のＩＳＶ、および場合によっては第４のＩＳＶを含む、ポリペプチド。
【請求項１０】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の少なくとも２つのＩＳＶ、および場合によっては第３のＩＳＶ、および場合によっては第４のＩＳＶを含む、ポリペプチド。
【請求項１１】
少なくとも２つのＩＳＶが、同じであっても異なっていてもよい、好ましくは、前記少なくとも２つのＩＳＶは、独立して、配列番号１〜１９および１１４〜１１８からなる群より選択される、請求項１０に記載のポリペプチド。
【請求項１２】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の少なくとも１つのＩＳＶまたは請求項１〜８のいずれか一項に記載の少なくとも２つのＩＳＶが、セリンプロテアーゼファミリーのメンバー、カテプシン、マトリックスメタロプロテイナーゼ（ＭＭＰ）／マトリキシンまたはA Disintegrin and Metalloproteinase with Thrombospondin motifs（ＡＤＡＭＴＳ）、好ましくはＭＭＰ８、ＭＭＰ１３、ＭＭＰ１９、ＭＭＰ２０、ＡＤＡＭＴＳ５（アグリカナーゼ−２）、ＡＤＡＭＴＳ４（アグリカナーゼ−１）および／またはＡＤＡＭＴＳ１１に結合する、請求項９〜１１のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１３】
血清タンパク質結合部分または血清タンパク質をさらに含む、請求項９〜１２のいずれか一項に記載のポリペプチド。
【請求項１４】
請求項１〜８のいずれか一項に記載のＩＳＶまたは請求項９〜１３のいずれか一項に記載のポリペプチドを含むかまたはこれから本質的になるコンストラクトであって、１つ以上の他の基、残基、部分または結合単位をさらに含み、これらは、任意に１つ以上のペプチド性リンカーを介して連結されている、前記コンストラクト。
【請求項１５】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の少なくとも１つのＩＳＶ、請求項９〜１３のいずれか一項に記載のポリペプチド、または請求項１４に記載のコンストラクトを含む、組成物であって、好ましくは、医薬組成物であり、好ましくは、少なくとも１つの薬学的に受入可能なキャリア、希釈剤または賦形剤および／またはアジュバントをさらに含み、および任意に、１つ以上のさらなる医薬活性ポリペプチドおよび／または化合物を含む、前記組成物。
【請求項１６】
医薬としての使用のための、請求項１５に記載の組成物、請求項１〜８のいずれか一項に記載のＩＳＶ、請求項９〜１３のいずれか一項に記載のポリペプチド、または請求項１４に記載のコンストラクト。
【請求項１７】
関節症および軟骨ジストロフィー、関節炎疾患、例えば変形性関節症、関節リウマチ、痛風関節炎、乾癬性関節炎、外傷性の断裂または脱離、軟骨無形成症、肋軟骨炎、脊椎骨端骨幹端異形成症、椎間板ヘルニア、腰椎椎間板変性疾患、変性関節疾患、および再発性多発軟骨炎などを予防または処置することにおける使用のための、請求項１５に記載の組成物、請求項１〜８のいずれか一項に記載のＩＳＶ、請求項９〜１３のいずれか一項に記載のポリペプチド、または請求項１４に記載のコンストラクト。