【手続補正書】
【提出日】令和3年3月10日(2021.3.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
a）配列番号1又はその変異体による核酸配列を含む、実質的に該核酸配列からなる、又は該核酸配列からなるヒト桿体光受容器特異的プロモーターエレメント（hRPSPE）と、コアプロモーター（CP）とを含むプロモーターと、
b）a）のプロモーターに作動可能に連結された少なくとも1つの導入遺伝子（TG）と、
をこの順序で含むポリヌクレオチドであって、
前記配列番号1の変異体は、配列番号1のヌクレオチド位置6〜位置13、位置32〜位置40、位置70〜位置83、及び位置87〜位置94の範囲外に1つ以上の核酸置換を含む、ポリヌクレオチド。
【請求項２】
(1)前記hRPSPEの5’末端は、配列番号2又はその変異体の1から160までの核酸位置にあり、3'末端は、配列番号2又はその変異体の290から310までの核酸位置にある、
(2) 前記CPは、TATAボックス及び／又はイニシエーター（Inr）を含む、
(3)前記プロモーターの5'末端は、配列番号2又はその変異体の1から160までの核酸位置にあり、3'末端は、配列番号2又はその変異体の340から350までの核酸位置にある、及び／又は
(4)前記導入遺伝子は、
（i）ヒト桿体の環状ヌクレオチド依存性チャネルβサブユニット（hCNGB1）、ABC A4、AIPL1、BEST1、CACNA1F、CLN3、CLRN1、CNGA1、CEP290、CRB1、CRB2、CRX、GP R98、GUCA1A、GUCA1B、MYO7A、NRL、PDE6A、PDE6B、PRPH2、PROM1、RHO、ROM1、RP 1、RP2、RPE65、RPGR、SAG、USH1C、USH1G、USH2A若しくはその機能的断片若しく は変異体をコードする核酸、それらのドミナントネガティブ突然変異体をコードす るmRNAを標的とするmiRNA若しくはshRNAをコードする核酸、及び／又はそれらのド ミナントネガティブ突然変異体に特異的に結合する抗体若しくは抗体結合フラグメ ントをコードする核酸を含む、又は、
（ii）桿体細胞の増殖を阻害するタンパク質、好ましくはトキシン、プロドラッグ 変換酵素、例えばチミジンキナーゼ、細胞周期阻害剤、例えば網膜芽細胞腫タンパ ク質（pRB）、p53、p21CIP1、p27KIP1、及びp57KIP2をコードする核酸を含み、そ の細胞周期阻害剤のドミナントネガティブ突然変異体をコードするmRNAを含み、及 び／又はその細胞周期阻害剤のドミナントネガティブ突然変異体をコードする核酸 を含む、
桿体の生理学的機能を維持又は改善するタンパク質をコードする核酸を含む、
請求項1に記載のポリヌクレオチド。
【請求項３】
前記hCNGB1は、配列番号3、配列番号40、若しくは配列番号41、又はそれらの変異体によるアミノ酸配列を含む、請求項2に記載のポリヌクレオチド。
【請求項４】
（i）ポリアデニル化シグナル（PAS）、前記PASがシミアンウイルス40のPASを含む、実質的にシミアンウイルス40のPASからなる、もしくはシミアンウイルス40のPASからなる、又は前記PASが配列番号4又はその機能的変異体による核酸を含む、実質的に該核酸からなる、もしくは該核酸からなる、及び／又は、
（ii）1又は2つの末端逆位反復（ITR）配列、又は前記ITR配列が、アデノ随伴ウイルス（AAV）のITRであり、前記AAVは、AVV血清型2、AVV血清型5、AVV血清型8、又はAVV血清型9である、及び／又は、
（iii）感染性ウイルスベクター、又はアデノウイルスベクター、レトロウイルスベクター、レンチウイルスベクター、ワクシニア／ポックスウイルスベクター、若しくはヘルペスウイルスベクター、又は単純ヘルペスウイルス（HSV）ベクターを形成するために必要なウイルスのヌクレオチド配列、
からなる群から選択される1つ以上の更なるヌクレオチド配列エレメントを含む、
請求項1〜3のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
【請求項５】
前記プロモーター及び前記導入遺伝子は、それらの5'末端でL-ITRと隣接しており、それらの3'末端でR-ITRと隣接している、又は前記L-ITRは、配列番号5若しくはその変異体による配列を含む、実質的に該配列からなる、若しくは該配列からなる、及び／又は前記R-ITRは、配列番号6若しくはその変異体による配列を含む、実質的に該配列からなる、若しくは該配列からなる、
請求項4に記載のポリヌクレオチド。
【請求項６】
前記ポリヌクレオチドの全長は、5200塩基以下、又は5100塩基以下、又は5000塩基以下である、請求項1〜5のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
【請求項７】
請求項1〜6のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含むプラスミド、又は配列番号7、配列番号42〜配列番号44又はそれらの変異体による核酸配列を含む、プラスミド。
【請求項８】
請求項1〜6のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含むウイルスベクター、又はウイルスが、AAV2、AAV5、AAV8、AVV9、又はそれらの変異体からなる群から選択される、ウイルスベクター。
【請求項９】
医薬として使用するための、請求項1〜6のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、請求項7に記載のプラスミド、及び／又は請求項8に記載のウイルスベクター。
【請求項１０】
請求項1〜6のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、請求項7に記載のプラスミド、及び／又は請求項8に記載のウイルスベクターと、薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物。
【請求項１１】
網膜の疾患、特に網膜変性の療法において使用するための、
(1)投与経路は、眼内、眼球内、硝子体内、又は網膜下から選択される、
(2)前記網膜変性は、遺伝子の突然変異、置換、及び／又は欠失と関連している、
(3)前記網膜変性は、夜盲症、盲目、網膜変性、網膜ジストロフィー、及び網膜色素変性症からなる群から選択される、及び／又は
(4)前記網膜色素変性症は、CNGB1連鎖性網膜色素変性症又は網膜色素変性症45型（RP45）である、
請求項1〜6のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、請求項7に記載のプラスミド、及び／又は請求項8に記載のウイルスベクター。
【請求項１２】
a）配列番号9又はその変異体による核酸配列を含むヒトロドプシンプロモーターと、
b）a）のプロモーターに作動可能に連結された少なくとも1つの導入遺伝子（TG）と、
(1)前記導入遺伝子は、桿体の生理学的機能を維持又は改善するタンパク質をコード する核酸を含む、前記導入遺伝子は、
（i）ヒト桿体の環状ヌクレオチド依存性チャネルβサブユニット（hCNGB1）、ABC A4、AIPL1、BEST1、CACNA1F、CLN3、CLRN1、CNGA1、CEP290、CRB1、CRB2、CRX、GP R98、GUCA1A、GUCA1B、MYO7A、NRL、PDE6A、PDE6B、PRPH2、PROM1、RHO、ROM1、RP 1、RP2、RPE65、RPGR、SAG、USH1C、USH1G、USH2A若しくはその機能的断片若しく は変異体をコードする核酸、それらのドミナントネガティブ突然変異体をコードす るmRNAを標的とするmiRNA若しくはshRNAをコードする核酸、及び／又はそれらのド ミナントネガティブ突然変異体に特異的に結合する抗体若しくは抗体結合フラグメ ントをコードする核酸を含む、又は、
（ii）桿体細胞の増殖を阻害するタンパク質又はトキシン、プロドラッグ変換酵素 又はチミジンキナーゼ、細胞周期阻害剤又は網膜芽細胞腫タンパク質（pRB）、p53 、p21CIP1、p27KIP1、及びp57KIP2をコードする核酸を含み、その細胞周期阻害剤 のドミナントネガティブ突然変異体をコードするmRNAを含み、及び／又はその細胞 周期阻害剤のドミナントネガティブ突然変異体をコードする核酸を含む、及び／又 は
(2)前記導入遺伝子は、桿体の生理学的機能を維持又は改善するタンパク質をコード する核酸を含む、
をこの順序で含むポリヌクレオチド。
【請求項１３】
（i）ポリアデニル化シグナル（PAS）、又は前記ポリアデニル化シグナルは、シミアンウイルス40のPASを含む、
（ii）1又は2つの末端逆位反復（ITR）配列、又は前記ITR配列は、アデノ随伴ウイルス（AAV）のITRであり、前記AAVは、AVV血清型2、AVV血清型5、AVV血清型8、又はAVV血清型9である、及び、
（iii）感染性ウイルスベクター、又はアデノウイルスベクター、レトロウイルスベクター、レンチウイルスベクター、ワクシニア／ポックスウイルスベクター、若しくははヘルペスウイルスベクター、又は単純ヘルペスウイルス（HSV）ベクターを形成するために必要なウイルスのヌクレオチド配列、
からなる群から選択される1つ以上の更なるヌクレオチド配列エレメントを含む、請求項12に記載のポリヌクレオチド。
【請求項１４】
請求項12又は13に記載のポリヌクレオチドを含むウイルスベクター、又はウイルスが、AAV2、AAV5、AAV8、AVV9、又はそれらの変異体からなる群から選択される、ウイルスベクター。
【請求項１５】
(1)網膜変性の治療を必要とする被験体において網膜変性を治療するための、治療的有効量の請求項12又は13に記載のポリヌクレオチド又は請求項14に記載のウイルスベクターを含む、
(2)網膜色素変性症の治療を必要とする被験体において網膜色素変性症を治療するための、治療的有効量の請求項12又は13に記載のポリヌクレオチド又は請求項14に記載のウイルスベクターを含む、
ここで、前記ポリヌクレオチド又はウイルスベクターは、配列番号43に示される核酸配列を含む、
(3)網膜変性の治療を必要とする被験体において網膜変性を治療するための、前記網膜変性が前記被験体の網膜細胞におけるCNGB1の欠陥又は不存在を特徴とし、配列番号43に示される核酸配列を含むウイルスベクターを治療的有効量含み、前記網膜変性は、CNGB1連鎖性網膜色素変性症又は網膜色素変性症45型（RP45）である、及び／又は
(4)CNGB1連鎖性網膜色素変性症又は網膜色素変性症45型（RP45）の治療を必要とする被験体においてCNGB1連鎖性網膜色素変性症又は網膜色素変性症45型（RP45）を治療するための、配列番号43に示される核酸配列を含むウイルスベクターを治療的有効量含む、
請求項12又は13に記載のポリヌクレオチド又は請求項14に記載のウイルスベクター。
【請求項１６】
a）配列番号1又はその変異体による核酸配列を含むヒト桿体光受容器特異的プロモーターエレメント（hRPSPE）と、コアプロモーター（CP）とを含むプロモーターと、
b）a）のプロモーターに作動可能に連結されたヒト桿体の環状ヌクレオチド依存性チャネルβサブユニット（hCNGB1）をコードする導入遺伝子と、
をこの順序で含むポリヌクレオチドであって、前記配列番号1の変異体が配列番号1のヌクレオチド位置6〜位置13、位置32〜位置40、位置70〜位置83、及び位置87〜位置94の範囲外に1つ以上の核酸置換を含む、ポリヌクレオチドと、
薬学的に許容可能な担体と、
を含む医薬組成物。