【手続補正書】
【提出日】令和2年12月8日(2020.12.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
トリマーＴＮＦαの少なくとも以下の残基：
（ａ）Ｙ１１５
（ｂ）Ｑ１４９；及び
（ｃ）Ｎ１３７若しくはＫ９８、又は両方
を含むエピトープに結合する抗体であって、Ｙ１１５及びＱ１４９が、トリマーＴＮＦαのＣ鎖上に存在し、Ｎ１３７及びＫ９８が、トリマーＴＮＦαのＡ鎖上に存在し、かつ残基ナンバリングが配列番号３６に従う、上記抗体。
【請求項２】
（ａ）トリマーＴＮＦαのＣ鎖上のＥ１４６若しくはトリマーＴＮＦαのＣ鎖上のＰ１１７、又はＥ１４６及びＰ１１７の両方、及び／又は
（ｂ）トリマーＴＮＦαのＣ鎖上に存在する残基であるＡ１４５、及び／又は
（ｃ）ＴＮＦαのＡ鎖上に存在する残基であるＱ８８、及び／又は
Ｌ６３が、トリマーＴＮＦαのＣ鎖上に存在し、かつＬ９４、Ｓ９５及びＡ９６がトリマーＴＮＦαのＡ鎖上に存在する、Ｌ６３；Ｌ９４；Ｓ９５；及びＡ９６
からなる群から選択される、１又は複数の残基をさらに含むエピトープに結合する、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
（ａ）Ｉ９７、Ｌ９３及びＳ８１が、全てトリマーＴＮＦαのＡ鎖上に存在する、Ｉ９７；Ｌ９３；及びＳ８１からなる群から選択される１又は複数の残基、及び／又は
（ｂ）Ｋ６５、Ｑ６７、Ｐ１１３及びＤ１４３が、トリマーＴＮＦαのＣ鎖上に存在し、かつＴ７７、Ｔ７９、Ｉ８３、Ｔ８９、Ｋ９０、Ｖ９１、Ｎ９２、Ｅ１３５、Ｉ１３６及びＲ１３８が、トリマーＴＮＦαのＡ鎖上に存在する、Ｋ６５；Ｑ６７；Ｐ１１３；Ｄ１４３；Ｔ７７；Ｔ７９；Ｉ８３；Ｔ８９；Ｋ９０；Ｖ９１；Ｎ９２；Ｅ１３５；Ｉ１３６；及びＲ１３８からなる群から選択される１又は複数の残基、及び／又は、
（ｃ）Ｙ１１９、Ｑ４７及びＳ１３３の全てが、トリマーＴＮＦαのＡ鎖上に存在する、Ｙ１１９；Ｑ４７；及びＳ１３３からなる群から選択される１又は複数の残基をさらに含むエピトープに結合する、請求項１又は２に記載の抗体。
【請求項４】
以下の残基：
（ａ）トリマーＴＮＦαのＡ鎖上に存在する残基である、Ｔ７７、Ｔ７９、Ｔ８９、Ｋ９０、Ｖ９１、Ｎ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、Ｓ９５、Ａ９６、Ｉ９７、Ｅ１３５、Ｉ１３６、Ｎ１３７及びＲ１３８、並びにトリマーＴＮＦαのＣ鎖上に存在する残基である、Ｋ６５、Ｑ６７、Ｙ１１５、Ａ１４５、Ｅ１４６及びＱ１４９；
（ｂ）トリマーＴＮＦαのＡ鎖上に存在する残基である、Ｔ７７、Ｔ７９、Ｉ８３、Ｔ８９、Ｋ９０、Ｖ９１、Ｎ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、Ｓ９５、Ａ９６、Ｉ９７、Ｋ９８、Ｅ１３５、Ｉ１３６、Ｎ１３７及びＲ１３８、並びにトリマーＴＮＦαのＣ鎖上に存在する残基である、Ｌ６３、Ｋ６５、Ｑ６７、Ｐ１１３、Ｙ１１５、Ｄ１４３、Ａ１４５、Ｅ１４６及びＱ１４９；
（ｃ）トリマーＴＮＦαのＡ鎖上に存在する残基である、Ｔ７７、Ｔ７９、Ｓ８１、Ｉ８３、Ｑ８８、Ｔ８９、Ｋ９０、Ｖ９１、Ｎ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、Ｓ９５、Ａ９６、Ｉ９７、Ｋ９８、Ｅ１３５、Ｉ１３６、Ｎ１３７及びＲ１３８、並びにトリマーＴＮＦαのＣ鎖上に存在する残基である、Ｌ６３、Ｋ６５、Ｑ６７、Ｐ１１３、Ｙ１１５、Ｐ１１７、Ｄ１４３、Ａ１４５、Ｅ１４６及びＱ１４９；又は
（ｄ）トリマーＴＮＦαのＡ鎖上に存在する残基である、Ｑ２７、Ｑ４７、Ｔ７７、Ｔ７９、Ｓ８１、Ｉ８３、Ｑ８８、Ｔ８９、Ｋ９０、Ｖ９１、Ｎ９２、Ｌ９３、Ｌ９４、Ｓ９５、Ａ９６、Ｉ９７、Ｋ９８、Ｙ１１９、Ｒ１３１、Ｓ１３３、Ｅ１３５、Ｉ１３６、Ｎ１３７及びＲ１３８、並びにトリマーＴＮＦαのＣ鎖上に存在する残基である、Ｌ６３、Ｋ６５、Ｑ６７、Ｐ１１３、Ｙ１１５、Ｐ１１７、Ｄ１４３、Ａ１４５、Ｅ１４６及びＱ１４９
を含むエピトープに結合し、残基ナンバリングが、配列番号３６に従う、請求項１に記載の抗体。
【請求項５】
（ａ）１ｎＭ以下の親和性（ＫＤ−ａｂ）、所望により２００ｐＭ以下の親和性を有し、及び／又は
（ｂ）ヒト化抗体であり、及び／又は
（ｃ）Ｆａｂ、改変型Ｆａｂ、Ｆａｂ’、改変型Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、単一ドメイン抗体又はｓｃＦｖであり、及び／又は
トリマーＴＮＦαと、化合物（１）〜（７）：
【化１−１】
2020504604.tif 000001
【化１−２】
2020504604.tif 000002
【化１−３】
2020504604.tif 000003
のいずれか１つとの複合体に結合し、所望によりトリマー−化合物複合体に対して１ｎＭ以下の親和性（ＫＤ−ａｂ）、更に所望により２００ｐＭ以下の親和性を有する、請求項１から４までのいずれか一項に記載の抗体。
【請求項６】
ＴＮＦαへの結合について請求項１から５までのいずれか一項に記載の抗体と競合する抗体。
【請求項７】
請求項１から６までのいずれか一項に記載の抗体をコードする単離されたポリヌクレオチド。
。
【請求項８】
請求項１から６までのいずれか一項に記載の抗体と、薬学的に許容されるアジュバント及び／又は担体とを含む医薬組成物。
【請求項９】
治療によるヒト又は動物の身体の処置のための、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
対象から得られた試料中の化合物−トリマー複合体の検出のための標的遭遇（ターゲットエンゲージメント）バイオマーカーとしての請求項１から６までのいずれか一項に記載の抗体の使用であって、前記抗体が検出可能であり、前記複合体がトリマーＴＮＦαと、トリマーＴＮＦαに結合することができる化合物とを含み、それにより、化合物−トリマー複合体が、必要な受容体に結合し、受容体を介してトリマーにより誘導されるシグナル伝達を調節する、上記抗体の使用。
【請求項１１】
化合物−トリマー複合体が、必要な受容体に結合し、受容体を介してトリマーによって誘導されるシグナル伝達を調節する、トリマーＴＮＦαへの化合物の標的遭遇（ターゲットエンゲージメント）を検出する方法であって、
（ａ）前記化合物を投与された対象から試料を取得するステップ；
（ｂ）請求項１から６までのいずれか一項に記載の抗体と、前記試料及び対照試料とを接触させるステップであって、前記抗体が検出可能である、ステップ；
（ｃ）前記検出可能抗体の、前記試料及び前記対照試料への結合の量を決定するステップ
を含み、前記検出可能抗体の前記試料への結合が前記検出可能抗体の前記対照試料への結合よりも高いことが、前記化合物の前記トリマーＴＮＦαへの標的遭遇（ターゲットエンゲージメント）を示す、上記方法。
【請求項１２】
トリマーＴＮＦαのコンフォメーション変化を惹起する化合物のスクリーニングにおける請求項１から６までのいずれか一項に記載の抗体の使用であって、前記コンフォメーション変化が、トリマーＴＮＦαの結合に対する必要な受容体のシグナル伝達を調節する、上記使用。
【請求項１３】
ＴＮＦαトリマーに結合し、必要な受容体を介するトリマーのシグナル伝達を調節することができる化合物を同定する方法であって、
（ａ）ＴＮＦαトリマーと試験化合物とを含む試験化合物−トリマー複合体の、前記複合体に選択的に結合する請求項１から６までのいずれか一項に記載の抗体に対する結合親和性を測定するための結合アッセイを実行するステップ；
（ｂ）ステップ（ａ）で測定された結合親和性と、ステップ（ａ）に記載の抗体に高い親和性で結合することが公知の異なる化合物−トリマー複合体の結合親和性とを比較するステップ；及び
（ｃ）ステップ（ｂ）に記載の比較に照らして考慮した場合、その測定された結合親和性が許容される場合、ステップ（ａ）の化合物−トリマー複合体中に存在する化合物を選択するステップ
を含む、上記方法。
【請求項１４】
抗体が、
（ａ）ＴＮＦαトリマーの非存在下での化合物への結合及び／又は化合物の非存在下でのＴＮＦαトリマーへの結合と比較して、ＴＮＦαトリマー−化合物複合体に選択的に結合し、
所望により抗体が、化合物の非存在下でのＴＮＦαトリマーへの結合及び／又はＴＮＦαトリマーの非存在下での化合物への結合に関するＫＤ−ａｂの少なくとも１００分の１のＫＤ−ａｂでＴＮＦαのトリマー−化合物複合体に結合し、
更に所望により２００分の１のＫＤ−ａｂでＴＮＦαのトリマー−化合物複合体に結合し、及び／又は
（ｂ）試験化合物が、化合物の非存在下でのＴＮＦαトリマーの安定性と比較して、ＴＮＦαトリマーの安定性を増加させ、
所望により、（ｉ）安定性の増加が、少なくとも１℃のＴＮＦαトリマーの温度遷移中点（Ｔｍ）の増加をもたらし、
（ｉｉ）安定性の増加が、少なくとも１０℃のＴＮＦαトリマーの温度遷移中点（Ｔｍ）の増加をもたらし、又は
（ｉｉｉ）ＴＮＦαトリマーのＴｍの増加が１０℃〜２０℃であり、及び／又は
（ｃ）試験化合物が、化合物の非存在下でのＴＮＦαトリマーの、その受容体に対する結合親和性と比較して、ＴＮＦαトリマーの、必要な受容体に対する結合親和性を増加させ、
所望により、（ｉ）試験化合物が、化合物の非存在下でのＴＮＦαトリマーの、その受容体に対する結合に関する結合速度（ｋｏｎ−ｒ）及び解離速度（ｋｏｆｆ−ｒ）値と比較して、ｋｏｎ−ｒを増加させること及び／又はｋｏｆｆ−ｒを減少させることによって、ＴＮＦαトリマーの、必要な受容体に対する結合親和性を増加させ、
及び／又は（ｉｉ）試験化合物が、化合物の非存在下でのＴＮＦαトリマーの、その受容体に対するＫＤ−ｒと比較して、ＴＮＦαトリマーの、必要な受容体に対するＫＤ−ｒを減少させ、
化合物が、化合物の非存在下でのＴＮＦαトリマーの、その受容体に対するＫＤ−ｒと比較して、ＴＮＦαトリマーの、必要な受容体に対するＫＤ−ｒを少なくとも１０分の１に減少させ、
化合物の存在下での、必要な受容体への結合に関するＴＮＦαトリマーのＫＤ−ｒ値が１０ｎＭ未満であり、或いは
化合物が、化合物の非存在下でのＴＮＦαトリマーの、その受容体に対するＫＤ−ｒと比較して、ＴＮＦαトリマーの、必要な受容体に対するＫＤ−ｒを少なくとも４分の１に減少させ、
化合物の存在下での、必要な受容体への結合に関するＴＮＦαトリマーのＫＤ−ｒ値が６００ｐＭ未満であり、
所望により化合物の存在下での、必要な受容体への結合に関するＴＮＦαトリマーのＫＤ−ｒ値が２００ｐＭ未満であり、
所望により上記方法は、ハイスループットアッセイである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
（ａ）前記試験化合物が５００ｎＭ以下のＩＣ５０値を有し、及び／又は。
（ｂ）ステップ（ｂ）における化合物が、化合物（１）〜（７）、又はその塩若しくは溶媒和物からなる群から選択され、及び／又は
（ｃ）受容体がＴＮＦ受容体である、請求項１３又は１４に記載の方法。