【手続補正書】
【提出日】令和3年5月21日(2021.5.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）ＮＫＧ２Ｄに結合する第１の抗原結合部位と、
（ｂ）ＣＤ１９、ＣＤ３７、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ５２またはＣＤ１３３に結合する第２の抗原結合部位と、
（ｃ）ＣＤ１６に結合するに十分な抗体Ｆｃドメインもしくはその一部分、またはＣＤ１６に結合する第３の抗原結合部位と
を含むタンパク質。
【請求項２】
前記第１の抗原結合部位が、ヒトおよびカニクイザルのＮＫＧ２Ｄに結合する、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項３】
前記第１の抗原結合部位が、重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、請求項１または２に記載のタンパク質。
【請求項４】
前記重鎖可変ドメインおよび前記軽鎖可変ドメインが、同じポリペプチド上に存在する、請求項３に記載のタンパク質。
【請求項５】
前記第２の抗原結合部位が、重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、請求項３または４に記載のタンパク質。
【請求項６】
前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインおよび前記軽鎖可変ドメインが、同じポリペプチド上に存在する、請求項５に記載のタンパク質。
【請求項７】
前記第１の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインが、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を有する、請求項５または６に記載のタンパク質。
【請求項８】
前記第１の抗原結合部位が、配列番号１、配列番号４１、配列番号４９、配列番号５７、配列番号５９、配列番号６１、配列番号６９、配列番号７７、配列番号８５および配列番号９３から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインを含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項９】
前記第１の抗原結合部位が、
（ａ）配列番号４１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号４２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｂ）配列番号４９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号５０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｃ）配列番号５７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号５８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｄ）配列番号５９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号６０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｅ）配列番号６１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号６２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｆ）配列番号６９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号７０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｇ）配列番号７７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号７８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｈ）配列番号８５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号８６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｉ）配列番号９３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号９４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｊ）配列番号１０１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１０２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｋ）配列番号１０３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１０４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；または
（ｌ）配列番号１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメイン
を含む、請求項１〜７のいずれかに記載のタンパク質。
【請求項１０】
前記第１の抗原結合部位が、
（ａ）配列番号１０５の重鎖相補性決定領域１（ＣＤＲ１）アミノ酸配列；
配列番号１０６の重鎖相補性決定領域２（ＣＤＲ２）アミノ酸配列；および
配列番号１０７の重鎖相補性決定領域３（ＣＤＲ３）アミノ酸配列；
（ｂ）配列番号４３の重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号４４の重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；
配列番号４５の重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
配列番号４６の軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号４７の軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；および
配列番号４８の軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
（ｃ）配列番号５１の重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号５２の重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；
配列番号５３の重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
配列番号５４の軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号５５の軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；および
配列番号５６の軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
（ｄ）配列番号３２４の重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号３２５の重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；
配列番号３２６の重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
配列番号３２７の軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号３２８の軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；および
配列番号３２９の軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
（ｅ）配列番号６３の重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号６４の重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；
配列番号６５の重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
配列番号６６の軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号６７の軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；および
配列番号６８の軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
（ｆ）配列番号７１の重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号７２の重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；
配列番号７３の重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
配列番号７４の軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号７５の軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；および
配列番号７６の軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
（ｇ）配列番号７９の重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号８０の重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；
配列番号８１の重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
配列番号８２の軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号８３の軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；および
配列番号８４の軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
（ｈ）配列番号８７の重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号８８の重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；
配列番号８９の重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
配列番号９０の軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号９１の軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；および
配列番号９２の軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；または
（ｉ）配列番号９５の重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号９６の重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；
配列番号９７の重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
配列番号９８の軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列；
配列番号９９の軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列；および
配列番号１００の軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む、請求項１〜８のいずれかに記載のタンパク質。
【請求項１１】
前記第１の抗原結合部位が、単一ドメイン抗体である、請求項１または２に記載のタンパク質。
【請求項１２】
前記単一ドメイン抗体が、ＶＨＨ断片またはＶＮＡＲ断片である、請求項１１に記載のタンパク質。
【請求項１３】
前記第２の抗原結合部位が、重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、請求項１〜２または１１〜１２のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１４】
前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインおよび前記軽鎖可変ドメインが、同じポリペプチド上に存在する、請求項１３に記載のタンパク質。
【請求項１５】
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ１９に結合し、
（ａ）配列番号１７５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１７９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｂ）配列番号１８３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１８７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｃ）配列番号１９１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１９５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；または
（ｄ）配列番号１９９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２０３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン
を含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項１６】
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ１９に結合し、
ａ）配列番号１７６の重鎖相補性決定領域１（ＣＤＲ１）アミノ酸配列、配列番号１７７の重鎖相補性決定領域２（ＣＤＲ２）アミノ酸配列、および配列番号１７８の重鎖相補性決定領域３（ＣＤＲ３）アミノ酸配列；ならびに配列番号１８０の軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１８１の軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号１８２の軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
ｂ）配列番号１８４の重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１８５の重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号１８６の重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；ならびに配列番号１８８の軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１８９の軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号１９０の軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；
ｃ）配列番号１９２の重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１９３の重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号１９４の重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；ならびに配列番号１９６の軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１９７の軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号１９８の軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；または
ｄ）配列番号２００の重鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２０１の重鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号２０２の重鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列；ならびに配列番号２０４の軽鎖ＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号２０５の軽鎖ＣＤＲ２アミノ酸配列、および配列番号２０６の軽鎖ＣＤＲ３アミノ酸配列
を含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項１７】
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ３７に結合し、
（ａ）配列番号１０９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１１３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｂ）配列番号１１７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１２１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；または
（ｃ）配列番号１２５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１２９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン
を含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項１８】
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ２０に結合し、
（ａ）配列番号１３４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１３８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｂ）配列番号１４２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１４６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｃ）配列番号１５０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１５４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｄ）配列番号１５８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１６２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；または
（ｅ）配列番号１６６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１７０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン
を含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項１９】
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ２２に結合し、
（ａ）配列番号２０８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２１２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｂ）配列番号２１６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２２０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；または
（ｃ）配列番号２２４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２２８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン
を含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項２０】
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ３０に結合し、
（ａ）配列番号２３３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２３７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｂ）配列番号２４１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２４５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｃ）配列番号２４９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２５３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｄ）配列番号２５７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２６１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；または
（ｅ）配列番号２６５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２６９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン
を含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項２１】
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ５２に結合し、
（ａ）配列番号２７４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２７８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；または
（ｂ）配列番号２８２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２８６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン
を含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項２２】
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ１３３に結合し、
（ａ）配列番号２９１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号２９５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｂ）配列番号２９９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号３０３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
（ｃ）配列番号３０７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号３１１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；または
（ｄ）配列番号３１５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号３１９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン
を含む、請求項１〜１４のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項２３】
前記第２の抗原結合部位が、単一ドメイン抗体である、請求項１〜４および８〜１１のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項２４】
前記第２の抗原結合部位が、ＶＨＨ断片またはＶＮＡＲ断片である、請求項２３に記載のタンパク質。
【請求項２５】
前記タンパク質が、ＣＤ１６に結合するに十分な抗体Ｆｃドメインの一部分を含み、前記抗体Ｆｃドメインが、ヒンジおよびＣＨ２ドメインを含む、請求項１〜２４のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項２６】
前記抗体Ｆｃドメインが、
（ｉ）ヒトＩｇＧ１抗体のヒンジおよびＣＨ２ドメイン；
（ｉｉ）ヒトＩｇＧ１抗体のアミノ酸２３４〜３３２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列；および
（ｉｉｉ）ヒトＩｇＧ１のＦｃドメインと少なくとも９０％同一のアミノ酸配列であって、Ｑ３４７、Ｙ３４９、Ｌ３５１、Ｓ３５４、Ｅ３５６、Ｅ３５７、Ｋ３６０、Ｑ３６２、Ｓ３６４、Ｔ３６６、Ｌ３６８、Ｋ３７０、Ｎ３９０、Ｋ３９２、Ｔ３９４、Ｄ３９９、Ｓ４００、Ｄ４０１、Ｆ４０５、Ｙ４０７、Ｋ４０９、Ｔ４１１、およびＫ４３９からなる群から選択される１つまたは複数の位置において異なる、アミノ酸配列
のうちの少なくとも１つを含む、請求項２５に記載のタンパク質。
【請求項２７】
請求項１〜２６のいずれか一項に記載のタンパク質および薬学的に許容される担体を含む製剤。
【請求項２８】
請求項１〜２６のいずれか一項に記載のタンパク質をコードする１つまたは複数の核酸を含む細胞。
【請求項２９】
治療における使用のための、請求項１〜２６のいずれか１項に記載のタンパク質を含む組成物または請求項２７に記載の製剤。
【請求項３０】
有効量の前記タンパク質に、腫瘍細胞およびナチュラルキラー細胞を曝露する工程を包含する、腫瘍細胞死の増強における使用のための、請求項１〜２６のいずれか１項に記載のタンパク質を含む組成物。
【請求項３１】
有効量の前記タンパク質または前記製剤を、患者に投与することを包含する、がんを処置する方法における使用のための、請求項１〜２６のいずれか１項に記載のタンパク質を含む組成物または請求項２７に記載の製剤。
【請求項３２】
（ａ）前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ３７に結合し、処置される前記がんは、Ｂ細胞性慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、ヘアリー細胞白血病（ＨＣＬ）、非ホジキンリンパ腫、および急性骨髄性白血病からなる群より選択される、
（ｂ）前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ２０に結合し、処置される前記がんは、慢性リンパ性白血病、非ホジキンリンパ腫、濾胞性リンパ腫、およびＢ細胞悪性腫瘍からなる群より選択される、
（ｃ）前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ１９に結合し、処置される前記がんは、慢性リンパ性白血病、非ホジキンリンパ腫、濾胞性リンパ腫、急性リンパ芽球性白血病、Ｂ細胞悪性腫瘍、多発性骨髄腫、および急性骨髄性白血病からなる群より選択される、
（ｄ）前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ２２に結合し、処置される前記がんは、慢性リンパ性白血病、非ホジキンリンパ腫、濾胞性リンパ腫、急性リンパ芽球性白血病、Ｂ細胞悪性腫瘍、およびヘアリー細胞白血病からなる群より選択される、
（ｅ）前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ３０に結合し、処置される前記がんは、ホジキンリンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病−リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、および胎児性細胞癌からなる群より選択される、
（ｆ）前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ５２に結合し、処置される前記がんは、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫およびＴ細胞性前リンパ球性白血病、Ｂ細胞悪性腫瘍、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病−リンパ腫、成熟Ｔ／ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞新生物、ならびに胸腺腫からなる群より選択される、または
（ｇ）前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ１３３に結合し、処置される前記がんは、乳がん、結腸がん、前立腺がん、肝臓がん、膵臓がん、肺がん、卵巣がん、腎臓がん、子宮がん、精巣胚細胞がん、急性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、神経膠腫、膠芽腫、および頭頚部の扁平上皮癌からなる群より選択される、
請求項３１に記載の使用のための組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５６】
本発明の別の態様は、患者のがんを処置する方法を提供する。本方法は、それを必要とする患者に、本明細書に記載の多重特異性結合タンパク質を治療有効量で投与することを含む。ＣＤ３７を標的とする多重特異性結合タンパク質を使用して処置するがんとして、ＣＤ３７を発現する任意のがん、例えば、Ｂ細胞性慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、ヘアリー細胞白血病（ＨＣＬ）、非ホジキンリンパ腫、および急性骨髄性白血病が挙げられる。ＣＤ２０を標的とする多重特異性結合タンパク質を使用して処置するがんとして、ＣＤ２０を発現する任意のがん、例えば、慢性リンパ性白血病、非ホジキンリンパ腫、濾胞性リンパ腫、およびＢ細胞悪性腫瘍が挙げられる。ＣＤ１９を標的とする多重特異性結合タンパク質を使用して処置するがんとして、ＣＤ１９を発現する任意のがん、例えば、慢性リンパ性白血病、非ホジキンリンパ腫、濾胞性リンパ腫、急性リンパ芽球性白血病、Ｂ細胞悪性腫瘍、多発性骨髄腫、および急性骨髄性白血病が挙げられる。ＣＤ２２を標的とする多重特異性結合タンパク質を使用して処置するがんとして、慢性リンパ性白血病、非ホジキンリンパ腫、濾胞性リンパ腫、急性リンパ芽球性白血病、Ｂ細胞悪性腫瘍、およびヘアリー細胞白血病を発現する任意のがんが挙げられる。ＣＤ３０を標的とする多重特異性結合タンパク質を使用して処置するがんとして、ＣＤ３０を発現する任意のがん、例えば、ホジキンリンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病−リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、および胎児性細胞癌が挙げられる。ＣＤ５２を標的とする多重特異性結合タンパク質を使用して処置するがんとして、ＣＤ５２を発現する任意のがん、例えば、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫およびＴ細胞性前リンパ球性白血病、Ｂ細胞悪性腫瘍、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病−リンパ腫、成熟Ｔ／ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞新生物、ならびに胸腺腫が挙げられる。ＣＤ１３３を標的とする多重特異性結合タンパク質を使用して処置するがんとして、ＣＤ１３３を発現する任意のがん、例えば、乳がん、結腸がん、前立腺がん、肝臓がん、膵臓がん、肺がん、卵巣がん、腎臓がん、子宮がん、精巣胚細胞がん、急性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、神経膠腫、膠芽腫、および頭頚部の扁平上皮癌が挙げられる。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
（ａ）ＮＫＧ２Ｄに結合する第１の抗原結合部位と、
（ｂ）ＣＤ３７、ＣＤ２０、ＣＤ１９、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ５２またはＣＤ１３３に結合する第２の抗原結合部位と、
（ｃ）ＣＤ１６に結合するに十分な抗体Ｆｃドメインもしくはその一部分、またはＣＤ１６に結合する第３の抗原結合部位と
を含むタンパク質。
（項目２）
前記第１の抗原結合部位が、ヒトのＮＫＧ２Ｄに結合する、項目１に記載のタンパク質。
（項目３）
前記第１の抗原結合部位が、重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、項目１または２に記載のタンパク質。
（項目４）
前記重鎖可変ドメインおよび前記軽鎖可変ドメインが、同じポリペプチド上に存在する、項目３に記載のタンパク質。
（項目５）
前記第２の抗原結合部位が、重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、項目３または４に記載のタンパク質。
（項目６）
前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインおよび前記軽鎖可変ドメインが、同じポリペプチド上に存在する、項目５に記載のタンパク質。
（項目７）
前記第１の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインが、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を有する、項目５または６に記載のタンパク質。
（項目８）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号１、配列番号４１、配列番号４９、配列番号５７、配列番号５９、配列番号６１、配列番号６９、配列番号７７、配列番号８５および配列番号９３から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインを含む、先行する項目のいずれか一項に記載のタンパク質。
（項目９）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号４１と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号４２と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１０）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号４９と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号５０と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１１）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号５７と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号５８と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１２）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号５９と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号６０と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１３）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号６１と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号６２と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１４）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号６９と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号７０と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１５）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号７７と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号７８と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１６）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号８５と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号８６と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１７）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号９３と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号９４と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１８）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号１０１と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号１０２と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１９）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号１０３と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号１０４と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目２０）
前記第１の抗原結合部位が、単一ドメイン抗体である、項目１または２に記載のタンパク質。
（項目２１）
前記単一ドメイン抗体が、ＶＨＨ断片またはＶＮＡＲ断片である、項目２０に記載のタンパク質。
（項目２２）
前記第２の抗原結合部位が、重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、項目１、２、または２０から２１のいずれか一項に記載のタンパク質。
（項目２３）
前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインおよび前記軽鎖可変ドメインが、同じポリペプチド上に存在する、項目２２に記載のタンパク質。
（項目２４）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ３７に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１０９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１１３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目２５）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ３７に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１１７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１２１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目２６）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ３７に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１２５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１２９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目２７）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ２０に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１３４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１３８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目２８）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ２０に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１４２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１４６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目２９）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ２０に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１５０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１５４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３０）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ２０に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１５８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１６２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３１）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ２０に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１６６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１７０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３２）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ１９に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１７５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１７９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３３）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ１９に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１８３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１８７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３４）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ１９に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１９１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１９５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３５）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ１９に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１９９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号２０３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３６）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ２２に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号２０８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号２１２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３７）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ２２に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号２１６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号２２０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３８）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ２２に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号２２４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号２２８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３９）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ３０に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号２３３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号２３７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目４０）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ３０に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号２４１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号２４５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目４１）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ３０に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号２４９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号２５３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目４２）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ３０に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号２５７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号２６１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目４３）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ３０に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号２６５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号２６９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目４４）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ５２に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号２７４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号２７８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目４５）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ５２に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号２８２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号２８６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目４６）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ１３３に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号２９１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号２９５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目４７）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ１３３に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号２９９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号３０３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目４８）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ１３３に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号３０７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号３１１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目４９）
前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ１３３に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号３１５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号３１９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目５０）
前記第２の抗原結合部位が、単一ドメイン抗体である、項目１から４または８から２１のいずれか一項に記載のタンパク質。
（項目５１）
前記第２の抗原結合部位が、ＶＨＨ断片またはＶＮＡＲ断片である、項目５０に記載のタンパク質。
（項目５２）
前記タンパク質が、ＣＤ１６に結合するに十分な抗体Ｆｃドメインの一部分を含み、前記抗体Ｆｃドメインが、ヒンジおよびＣＨ２ドメインを含む、先行する項目のいずれか一項に記載のタンパク質。
（項目５３）
前記抗体Ｆｃドメインが、ヒトＩｇＧ１抗体のヒンジおよびＣＨ２ドメインを含む、項目５２に記載のタンパク質。
（項目５４）
前記Ｆｃドメインが、ヒトＩｇＧ１抗体のアミノ酸２３４〜３３２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目５２または５３に記載のタンパク質。
（項目５５）
前記Ｆｃドメインが、ヒトＩｇＧ１のＦｃドメインと少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、Ｑ３４７、Ｙ３４９、Ｌ３５１、Ｓ３５４、Ｅ３５６、Ｅ３５７、Ｋ３６０、Ｑ３６２、Ｓ３６４、Ｔ３６６、Ｌ３６８、Ｋ３７０、Ｎ３９０、Ｋ３９２、Ｔ３９４、Ｄ３９９、Ｓ４００、Ｄ４０１、Ｆ４０５、Ｙ４０７、Ｋ４０９、Ｔ４１１、Ｋ４３９からなる群から選択される１つまたは複数の位置において異なる、項目５４に記載のタンパク質。
（項目５６）
先行する項目のいずれか一項に記載のタンパク質および薬学的に許容される担体を含む製剤。
（項目５７）
項目１から５５のいずれか一項に記載のタンパク質を発現する１つまたは複数の核酸を含む細胞。
（項目５８）
有効量の、項目１〜５５のいずれか１項に記載のタンパク質に、腫瘍細胞およびナチュラルキラー細胞を曝露する工程を包含する、腫瘍細胞死を増強する方法。
（項目５９）
有効量の、項目１〜５５のいずれか１項に記載のタンパク質または項目５６に記載の製剤を、患者に投与することを包含する、がんを処置する方法。
（項目６０）
前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ３７に結合し、処置される前記がんは、Ｂ細胞性慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、ヘアリー細胞白血病（ＨＣＬ）、非ホジキンリンパ腫、および急性骨髄性白血病からなる群より選択される、項目５９に記載の方法。
（項目６１）
前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ２０に結合し、処置される前記がんは、慢性リンパ性白血病、非ホジキンリンパ腫、濾胞性リンパ腫、およびＢ細胞悪性腫瘍からなる群より選択される、項目５９に記載の方法。
（項目６２）
前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ１９に結合し、処置される前記がんは、慢性リンパ性白血病、非ホジキンリンパ腫、濾胞性リンパ腫、急性リンパ芽球性白血病、Ｂ細胞悪性腫瘍、多発性骨髄腫、および急性骨髄性白血病からなる群より選択される、項目５９に記載の方法。
（項目６３）
前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ２２に結合し、処置される前記がんは、慢性リンパ性白血病、非ホジキンリンパ腫、濾胞性リンパ腫、急性リンパ芽球性白血病、Ｂ細胞悪性腫瘍、およびヘアリー細胞白血病からなる群より選択される、項目５９に記載の方法。
（項目６４）
前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ３０に結合し、処置される前記がんは、ホジキンリンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病−リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、および胎児性細胞癌からなる群より選択される、項目５９に記載の方法。
（項目６５）
前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ５２に結合し、処置される前記がんは、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、末梢Ｔ細胞リンパ腫およびＴ細胞性前リンパ球性白血病、Ｂ細胞悪性腫瘍、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、未分化大細胞リンパ腫、成人Ｔ細胞白血病−リンパ腫、成熟Ｔ／ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞新生物、ならびに胸腺腫からなる群より選択される、項目５９に記載の方法。
（項目６６）
前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＣＤ１３３に結合し、処置される前記がんは、乳がん、結腸がん、前立腺がん、肝臓がん、膵臓がん、肺がん、卵巣がん、腎臓がん、子宮がん、精巣胚細胞がん、急性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、神経膠腫、膠芽腫、および頭頚部の扁平上皮癌からなる群より選択される、項目５９に記載の方法。