【手続補正書】
【提出日】令和2年12月21日(2020.12.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
血球分析器と、希釈剤および／または染色剤と、結像チャンバを有する試験カートリッジとを利用して、血球および血小板を含む全血中の生体粒子を計数し分析する方法であって、
ａ）前記全血のサンプルを前記試験カートリッジに導入するステップと、
ｂ）前記試験カートリッジを前記血球分析器にインターフェース接続するステップであって、前記血球分析器が結像処理ソフトウェアを備える自動顕微鏡を有する、ステップと、
ｃ）第１の分かっている量のサンプルを前記試験カートリッジ内の前記サンプルの残りの量から分離するステップと、
ｄ）前記カートリッジ内の前記分かっている量のサンプルを、サンプルおよび希釈剤の実質的に均一な混合物を形成するのに十分な量の希釈剤および／または染色剤と混合するステップと、
ｅ）前記混合物を前記試験カートリッジの前記結像チャンバ内へと移送するステップと、
ｆ）前記結像チャンバ内の前記生体粒子の数および分布を統計的に表すように選択される、前記結像チャンバ内の前記混合物の１つまたは複数のデジタル画像を獲得するステップと、
ｆ）獲得する前記ステップで獲得された前記画像に基づいて、前記結像チャンバ内の前記粒子の分布の少なくとも１つの態様の定量的特性を導出するステップとを含む、方法。
【請求項２】
血球分析器と、希釈剤および／または染色剤と、結像チャンバを有する試験カートリッジとを利用して、血球および血小板を含む全血中の生体粒子を計数し分析する方法であって、
ａ）前記全血の第１のサンプルを前記試験カートリッジに導入するステップと、
ｂ）前記試験カートリッジを前記血球分析器にインターフェース接続するステップであって、前記血球分析器が結像処理ソフトウェアを備える自動顕微鏡を含む、ステップと、
ｃ）第１の分かっている量のサンプルを前記試験カートリッジ内の前記サンプルの残りの量から分離するステップと、
ｄ）前記カートリッジ内の前記分かっている量のサンプルを、サンプルおよび希釈剤の実質的に均一な混合物を形成するのに十分な分かっている量の希釈剤および／または染色剤と混合するステップと、
ｅ）前記混合物の所定の部分を前記試験カートリッジの前記結像チャンバ内へと移送するステップと、
ｆ）前記結像チャンバ内の前記生体粒子の数および分布を統計的に表すように選択される、前記結像チャンバ内の前記混合物の１つまたは複数のデジタル画像を獲得するステップと、
ｇ）獲得する前記ステップで獲得された前記画像に基づいて、前記結像チャンバ内の前記粒子の分布の少なくとも１つの態様の定量的特性を導出するステップとを含む、方法。
【請求項３】
前記定量的特性を導出する前記ステップが、パターン認識ソフトウェアを用いて、前記獲得画像中の前記生体粒子を分析することを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記定量的特性を導出する前記ステップが、結像処理ソフトウェアを使用して、前記画像における少なくとも１つのタイプの生体粒子の全てを計数することと、前記サンプル中の前記１つのタイプの生体粒子の単位体積当たりの粒子数を計算することとを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
前記デジタル画像の獲得が、明視野および蛍光画像を含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項６】
前記混合物を前記結像チャンバ内へと移送する前記ステップ後に、前記混合物中の前記粒子が前記結像チャンバの底に堆積することを可能にするステップを更に含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項７】
前記結像チャンバの幾何学形状が、前記粒子が前記結像チャンバの前記底に堆積したときに、前記血球が重なり合ったり、密集したり、または流れ出たりしないような形状である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項８】
前記デジタル画像を獲得する前記ステップが、前記結像チャンバ内の全ての粒子を含む画像を獲得することを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項９】
サンプルの量が１μＬから５０μＬであり、希釈剤の量が１０μＬから５００μＬである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１０】
希釈剤とサンプルの前記混合物における希釈剤対サンプルの比が１０：１から２５０：１である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１１】
希釈剤とサンプルの前記混合物を移送する速度が、前記混合物が実質的に均一のままであるような速度である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１２】
前記結像チャンバの幾何学形状が、前記混合物を前記結像チャンバ内へと移送したときに、前記混合物の粒子の分布が実質的に均質なままであるような形状である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１３】
前記希釈剤および／または染色剤が前記カートリッジ内のブリスタに予めパッケージングされる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１４】
混合する前記ステップが、前記サンプルを希釈剤、染色剤および血球球状化剤と混合することを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１５】
分離、混合、移送、獲得、計数、および計算の前記ステップが、血球、血小板、精子、細菌、胞子、および無機粒子のうち少なくとも１つを含むサンプルに適用される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１６】
ａ）前記全血サンプルを前記試験カートリッジに導入した後、第２の分かっている量のサンプルを前記試験カートリッジ内の前記サンプルの残りの量から分離するステップと、
ｂ）前記第１の分かっている量のサンプルを測光チャンバへと移送するステップと、
ｃ）前記測光チャンバ内の前記サンプルのヘモグロビンを測定するステップとを更に含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１７】
血球および血小板を含む全血のサンプル中の生体粒子を分析するための、自動顕微鏡および結像処理ソフトウェアを含む、血球分析器と共に使用される試験カートリッジであって、
ａ）前記サンプルを受け入れるサンプル収集ポートと、
ｂ）分かっている体積の前記サンプルを分離するように動作する、前記サンプル収集ポートに動作可能に接続される計量メカニズムと、
ｃ）希釈剤および／または染色剤を収容するチャンバと、
ｄ）所定の体積のサンプルならびに希釈剤および／または染色剤を受け入れるために、前記計量メカニズムに動作可能に接続され、前記希釈剤および／または染色剤のチャンバに動作可能に接続される結像チャンバであって、前記結像チャンバから、前記結像チャンバ内の少なくとも１つのタイプの前記生体粒子の数および分布を統計的に表す１つまたは複数の明視野および蛍光画像が、結像処理・パターン認識ソフトウェアを備える前記自動顕微鏡によって獲得され得る、結像チャンバとを含む、試験カートリッジ。
【請求項１８】
血球および血小板を含む全血のサンプル中の生体粒子を分析するための、自動顕微鏡および結像処理ソフトウェアを含む、血球分析器と共に使用される試験カートリッジであって、
ａ）前記サンプルを受け入れるサンプル収集ポートと、
ｂ）分かっている体積の前記サンプルを分離するように動作する、前記サンプル収集ポートに動作可能に接続される計量メカニズムと、
ｃ）分かっている体積の希釈剤および／または染色剤を収容するチャンバと、
ｄ）前記分かっている体積のサンプル、ならびに前記分かっている体積の希釈剤および／または染色剤を受け入れるために、前記計量メカニズムに動作可能に接続され、前記希釈剤および／または染色剤のチャンバに動作可能に接続される結像チャンバであって、前記結像チャンバから、前記結像チャンバ内の少なくとも１つのタイプの前記生体粒子の数および分布を統計的に表す１つまたは複数の画像が、明視野および蛍光結像を利用する、結像処理・パターン認識ソフトウェアを備える前記自動顕微鏡によって獲得され得る、結像チャンバとを含む、試験カートリッジ。
【請求項１９】
分かっている体積のサンプルを受け入れるために前記計量メカニズムに動作可能に接続される測光チャンバを更に含み、ヘモグロビンを測定するために測光測定が前記血球分析器によって行われ得る、請求項１７または１８の記載の試験カートリッジ。
【請求項２０】
前記計量メカニズムならびに前記希釈剤および／または染色剤のチャンバに動作可能に接続される混合チャンバを更に含み、前記混合チャンバ内で前記サンプルならびに前記希釈剤および／または染色剤が、サンプルならびに希釈剤および／または染色剤の実質的に均一な混合物を作るように混合され得る、請求項１７または１８に記載の試験カートリッジ。
【請求項２１】
前記計量メカニズムが回転弁内の容積によって規定される、請求項１７または１８に記載のカートリッジ。
【請求項２２】
前記結像チャンバが、前記生体粒子が前記結像チャンバの前記底に堆積したときに重なり合ったりまたは密集したりしないような幾何学形状を有する、請求項１７または１８に記載の試験カートリッジ。
【請求項２３】
前記結像チャンバが、分かっていない量の希釈剤および／または染色剤と混合されたとき、前記計量メカニズムからの前記所定の体積のサンプルの全てを収容するのに十分な容積を有する結像チャンバである、請求項１７に記載の試験カートリッジ。
【請求項２４】
前記希釈剤および／または染色剤が前記カートリッジ内のブリスタに予めパッケージングされる、請求項１７または１８に記載の試験カートリッジ。
【請求項２５】
前記結像チャンバの幅および深さが均一であり、前記結像チャンバの長さ対幅の比が２：１より大きい、請求項１７または１８に記載の試験カートリッジ。
【請求項２６】
前記結像チャンバの幅および深さが均一であり、前記結像チャンバの長さ対幅の比が約４００：１である、請求項１７または１８に記載の試験カートリッジ。
【請求項２７】
前記結像チャンバの幅が均一であり、０．５ｍｍから２．５ｍｍである、請求項１７または１８に記載の試験カートリッジ。
【請求項２８】
前記結像チャンバの幅および深さが均一である、請求項１７または１８に記載の試験カートリッジ。
【請求項２９】
前記結像チャンバの深さが均一であり、平面図における前記結像チャンバの形状が蛇行状である、請求項１７または１８に記載の試験カートリッジ。
【請求項３０】
前記蛇行状の結像チャンバの旋回外径が前記蛇行状の結像チャンバの旋回内径の約２倍である、請求項２９に記載の試験カートリッジ。
【請求項３１】
前記結像チャンバの深さが実質的に均一であり、平面図における前記結像チャンバの形状の形状が蛇行状であり、１．２５ｍｍの幅と、１．２５ｍｍの旋回内径と、２．５ｍｍの旋回外径と、０．１２５ｍｍの深さとを有する、請求項１７または１８に記載の試験カートリッジ。
【請求項３２】
前記深さが実質的に均一であり、平面図における前記結像チャンバの形状がヘリカル状である、請求項１７または１８に記載の試験カートリッジ。
【請求項３３】
前記深さが実質的に均一であり、平面図における前記結像チャンバの形状が胸壁のように凹凸状である、請求項１７または１８に記載の試験カートリッジ。
【請求項３４】
前記希釈剤および／または染色剤が、前記赤血球を等容的に再整形する両性イオン界面活性剤などの球状化剤を含む、請求項１７または１８に記載の試験カートリッジ。
【請求項３５】
前記希釈剤および／または染色剤が、特定の血球または血球と関連付けられた特定の抗原を標的にする、検出可能なラベルに接合された抗体を含む、請求項１７または１８に記載の試験カートリッジ。
【請求項３６】
顕微鏡の視野内に請求項１７または１８に記載のカートリッジを保持する血球分析器であって、顕微鏡に応答すると共に、前記カートリッジの前記結像チャンバ内にある粒子の少なくとも一部を全て計数するように動作するプロセッサを更に含む、血球分析器。