【手続補正書】
【提出日】令和3年3月8日(2021.3.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域を含む抗体であって、
ヒトPD-L1とヒトPD-1との結合を阻害し、かつ、
(i)ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体[547]と競合するが、ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列を含む抗体[511]とは競合しない、または
(ii)ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列を含む抗体[511]と競合するが、ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体[547]とは競合しない、
前記抗体。
【請求項２】
請求項1に記載の抗体とヒトPD-L1との結合が、SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体[547]によってブロックされる、請求項1に記載の抗体。
【請求項３】
ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:1に示したVH配列およびSEQ ID NO:5に示したVL配列を含む抗体[338]と競合する、請求項1に記載の抗体。
【請求項４】
請求項1〜3のいずれか一項に記載の抗体とヒトPD-L1との結合が、SEQ ID NO:53に示したVH配列およびSEQ ID NO:57に示したVL配列を含む抗体[476]によって置換されない、請求項1〜3のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項５】
請求項1〜4のいずれか一項に記載の抗体とヒトPD-L1との結合が、SEQ ID NO:106に示したVH配列およびSEQ ID NO:110に示したVL配列を含む抗体[625]の結合によってブロックされない、請求項1〜4のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項６】
(i)SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体[547]と同じヒトPD-L1エピトープに結合することができる、
(ii)SEQ ID NO:1に示したVH配列およびSEQ ID NO:5に示したVL配列を含む抗体[338]と同じヒトPD-L1エピトープに結合することができる、または
(iii)SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列を含む抗体[511]と同じヒトPD-L1エピトープに結合することができる、
請求項1に記載の抗体。
【請求項７】
請求項1〜4および6のいずれか一項に記載の抗体と、SEQ ID NO:94における位置113に対応する位置にあるアミノ酸残基(R113)、位置123に対応する位置にあるアミノ酸残基(Y123)、および位置125に対応する位置にあるアミノ酸残基(R125)のいずれか1つまたは複数がアラニンで置換されている変異体PD-L1との結合が、SEQ ID NO:94に示したアミノ酸配列を有する野生型PD-L1との結合と比較して低減しており、該抗体の結合の変化倍率がアラニン変異体全てにわたる結合の変化倍率の平均 - 1.5×SDよりも小さい場合に結合の低減が判定され、SDが変異体PDL1に対する該抗体の変化倍率計算値全ての標準偏差であり、かつ結合の変化倍率が実施例13に示した通りに算出される[338]、請求項1〜4および6のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項８】
請求項1〜2、および6のいずれか一項に記載の抗体が、PD-L1(SEQ ID NO:94)上のエピトープに結合し、該エピトープが、SEQ ID NO:94の位置113におけるアミノ酸残基(R113)、位置123におけるアミノ酸残基(Y123)、および/または位置125におけるアミノ酸残基(R125)を含む、請求項1〜2、および6のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項９】
請求項1、3、4、および6のいずれか一項に記載の抗体と、SEQ ID NO:94における位置19に対応する位置にあるアミノ酸残基(F19)、位置42に対応する位置にあるアミノ酸残基(F42)、位置45に対応する位置にあるアミノ酸残基(E45)、位置46に対応する位置にあるアミノ酸残基(K46)、位置94に対応する位置にあるアミノ酸残基(L94)、および位置116に対応する位置にあるアミノ酸残基(I116)のいずれか1つまたは複数がアラニンで置換されている変異体PD-L1との結合が、SEQ ID NO:94に示したアミノ酸配列を有する野生型PD-L1と比較して低減しており、該抗体の結合の変化倍率がアラニン変異体全てにわたる結合の変化倍率の平均 - 1.5×SDよりも小さい場合に結合の低減が判定され、SDが変異体PDL1に対する該抗体の変化倍率計算値全ての標準偏差であり、かつ結合の変化倍率が実施例13に示した通りに算出される[511]、請求項1、3、4、および6のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１０】
請求項1、3、4、および6のいずれか一項に記載の抗体が、PD-L1(SEQ ID NO:94)上のエピトープに結合し、該エピトープが、SEQ ID NO:94の位置45におけるアミノ酸残基(E45)、位置46におけるアミノ酸残基(K46)、および/または位置94におけるアミノ酸残基(L94)からなる群より選択される1つまたは複数のアミノ酸残基を含む、請求項1、3、4、および6のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１１】
請求項1、5、および6のいずれか一項に記載の抗体と、SEQ ID NO:94における位置58に対応する位置にあるアミノ酸残基(E58)および位置113に対応する位置にあるアミノ酸残基(R113)のいずれか1つまたは複数がアラニンで置換されている変異体PD-L1との結合が、SEQ ID NO:94に示したアミノ酸配列を有する野生型PD-L1と比較して低減しており、該抗体の結合の変化倍率がアラニン変異体全てにわたる結合の変化倍率の平均 - 1.5×SDよりも小さい場合に結合の低減が判定され、SDが変異体PDL1に対する該抗体の変化倍率計算値全ての標準偏差であり、かつ結合の変化倍率が実施例13に示した通りに算出される[547]、請求項1、5、および6のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１２】
請求項1、5、および6のいずれか一項に記載の抗体が、PD-L1(SEQ ID NO:94)上のエピトープに結合し、該エピトープが、SEQ ID NO:94の位置58におけるアミノ酸残基(E58)および/または位置113におけるアミノ酸残基(R113)を含む、請求項1、5、および6のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１３】
ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域が、CDR1配列、CDR2配列、およびCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、CDR1配列、CDR2配列、およびCDR3配列を含む軽鎖可変領域(VL)を含み、VH CDR3配列が、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:11、および SEQ ID NO:21に示した配列からなる群より選択される、請求項1〜12のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１４】
ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:19に示したCDR1配列、 SEQ ID NO:20に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:21に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:23に示した配列を有するCDR1、配列 DDNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:24に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[547]、
(ii)SEQ ID NO:2に示したCDR1配列、SEQ ID NO:3に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:4に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:6に示した配列を有するCDR1、配列KASを有するCDR2、およびSEQ ID NO:7に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[338]、または
(iii)SEQ ID NO:9に示したCDR1配列、SEQ ID NO:10に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:11に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:16に示した配列を有するCDR1、配列EDSを有するCDR2、およびSEQ ID NO:17に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[511]、
を含む、請求項1〜13のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１５】
ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:8、およびSEQ ID NO:18に示した配列からなる群より選択されるVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、または100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列を含む、請求項1〜14のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１６】
ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域が、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:15、およびSEQ ID NO:22に示した配列からなる群より選択されるVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、または100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列を含む、請求項1〜15のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１７】
ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:18に示したVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:22に示したVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列[547]、
(ii)SEQ ID NO:1に示したVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:5に示したVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列[338]、または
(iii)SEQ ID NO:8に示したVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:15に示したVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列[511]、
を含む、請求項1〜16のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項１８】
前記VH配列および前記VL配列がそれぞれ、3つのCDR配列、それぞれCDR1、CDR2、およびCDR3、ならびに4つのフレームワーク配列、それぞれFR1、FR2、FR3、およびFR4を含み、かつ、VHの各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列が、該VH配列の該各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、または少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有し、かつVH CDR配列が変異しておらず、かつVLの各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列が、該VL配列の該各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、または少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有し、かつVL CDR配列が変異していない、請求項17に記載の抗体。
【請求項１９】
抗体依存性細胞障害(ADCC)を介して、腺がんの上皮細胞の用量依存的溶解、例えば、MDA-MB-231の用量依存的溶解を誘導することができる、請求項1〜18のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２０】
細胞溶解の結果として前記上皮細胞の培養物中の細胞数を少なくとも5％、例えば、少なくとも6％、7％、8％、9％、または少なくとも10％低減することができる、請求項19に記載の抗体。
【請求項２１】
ADCCが、51Cr放出アッセイ法、例えば、実施例14に開示されるアッセイ法においてインビトロで測定される、請求項19または20に記載の抗体。
【請求項２２】
ADCCが、請求項19または20に記載の抗体とエフェクター細胞、例えば末梢血単核球(PBMC)とを含む組成物と共に前記上皮細胞を37℃、5％CO2で4時間インキュベートすることによってインビトロで測定され、該組成物中の抗体の量が0.1〜1μg/mLの範囲内であり、かつエフェクター細胞と上皮細胞の比が100:1である、請求項19または20に記載の抗体。
【請求項２３】
上皮細胞の前記溶解が、ADCCの代わりとしてのルシフェラーゼレポーターアッセイ法、例えば、実施例14に開示されるルミネセンスADCCレポーターバイオアッセイ法においてインビトロで測定される、請求項19または20に記載の抗体。
【請求項２４】
ADCCが、
(i)前記上皮細胞の培養物を、請求項23に記載の抗体とFcγRIIIa(CD16)およびホタルルシフェラーゼを安定発現するジャーカットヒトT細胞(エフェクター細胞)とを含む組成物と、1:1のエフェクター細胞:上皮細胞比で接触させ、
(ii)該上皮細胞の培養物および該エフェクター細胞を15分間室温に調節し、
(iii)該上皮細胞の培養物および該エフェクター細胞をルシフェラーゼ基質と共にインキュベートし、かつ
(iv)該細胞培養物におけるルシフェラーゼ生成を測定する
ことによって、インビトロで測定され、
該組成物中の抗体の量が0.5〜250ng/mLの範囲内であり、かつエフェクター細胞と上皮細胞の比が1:1である、請求項23に記載の抗体。
【請求項２５】
前記上皮細胞のADCCが、ルシフェラーゼレポーターアッセイ法、例えば、請求項23または24において定義されたレポーターアッセイ法において測定され、次いで、請求項19、20、23、および24のいずれか一項に記載の抗体を含む試験組成物と共に該上皮細胞の培養物をインキュベートした後に観察されたADCCが、参照抗体を含む組成物と共に該上皮細胞の培養物をインキュベートした後に観察されたADCCの少なくとも1.5倍であり、ADCCが相対発光量(RLU)として測定され、該試験組成物中の抗体濃度と参照抗体を含む該組成物中の抗体濃度が同じでありかつ20〜250ng/mlの範囲内であり、かつ該参照抗体が、
(a)SEQ ID NO:74に示したVH配列およびSEQ ID NO:78に示したVL配列を含む抗体;ならびに
(b)SEQ ID NO:81に示したVH配列およびSEQ ID NO:85に示したVL配列を含む抗体
より選択される、請求項19、20、23、および24のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２６】
ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列[547]、
(i)SEQ ID NO:1に示したVH配列およびSEQ ID NO:5に示したVL配列[338]、または
(ii)SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列[511]
を含む、請求項1〜25のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項２７】
ヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域を含む抗体であって、
(i)SEQ ID NO:33に示したCDR1配列、SEQ ID NO:34に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:35に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:37に示した配列を有するCDR1、配列KASを有するCDR2、SEQ ID NO:38に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[321]、または
(ii)SEQ ID NO:47に示したCDR1配列、SEQ ID NO:48に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:49に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:51に示した配列を有するCDR1、配列 DVIを有するCDR2、およびSEQ ID NO:52に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[421]、または
(iii)SEQ ID NO:54に示したCDR1配列、SEQ ID NO:55に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:56に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:58に示した配列を有するCDR1、配列 RDSを有するCDR2、およびSEQ ID NO:59に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[476]、または
(iv)SEQ ID NO:61に示したCDR1配列、SEQ ID NO:62に示したCDR2配列、および SEQ ID NO:63に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:65に示した配列を有するCDR1、配列 DDSを有するCDR2、およびSEQ ID NO:66に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[516]、または
(v)SEQ ID NO:107に示したCDR1配列、SEQ ID NO:108に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:109に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:111に示した配列を有するCDR1、配列EDSを有するCDR2、SEQ ID NO:113に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[625]、
(vi)SEQ ID NO:68に示したCDR1配列、SEQ ID NO:69に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:70に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:72に示した配列を有するCDR1、配列EDSを有するCDR2、およびSEQ ID NO:73に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[632]
を含む、該抗体。
【請求項２８】
(i)SEQ ID NO:32に示したVH配列およびSEQ ID NO:36に示したVL配列[321]、または
(ii)SEQ ID NO:46に示したVH配列およびSEQ ID NO:50に示したVL配列[421]、または
(iii)SEQ ID NO:53に示したVH配列およびSEQ ID NO:57に示したVL配列[476]、または
(iv)SEQ ID NO:60に示したVH配列およびSEQ ID NO:64に示したVL配列[516]、または
(v)SEQ ID NO:106に示したVH配列およびSEQ ID NO:110に示したVL配列[625]、または
(vi)SEQ ID NO:67に示したVH配列およびSEQ ID NO:71に示したVL配列[632]
を含む、請求項27に記載の抗体。
【請求項２９】
一価である、請求項1〜28のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項３０】
請求項1〜29のいずれか一項に記載の抗体が、ヒトPD-L1に結合することができる2つの抗原結合領域を有する二価抗体であり、かつ、該2つの抗原結合領域が同一の可変領域配列を有する、請求項1〜29のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項３１】
請求項1〜30のいずれか一項に記載の抗体が、二価二重特異性抗体であり、ヒトPD-L1に結合することができる(第1の)前記抗原結合領域に加えて、第2の抗原にまたは異なるヒトPD-L1エピトープに結合することができる(第2の)抗原結合領域を含み、該第2の抗原がヒトCD3εでない、請求項1〜30のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項３２】
ヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域と、ヒトCD3ε(イプシロン)に結合することができる抗原結合領域とを含む二重特異性抗体であって、
ヒトPD-L1に結合することができる該抗原結合領域が、請求項1〜31に示した特徴を有する、該二重特異性抗体。
【請求項３３】
ヒトCD3εに結合することができる前記抗原結合領域が、(a)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:28に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)を含む、請求項32に記載の二重特異性抗体。
【請求項３４】
(i)SEQ ID NO:19に示したCDR1配列、SEQ ID NO:20に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:21に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)と、SEQ ID NO:23に示した配列を有するCDR1配列、配列DDNを有するCDR2配列、およびSEQ ID NO:24に示した配列を有するCDR3配列を含む軽鎖可変領域(VL)とを含む、ヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域[547]、ならびに、(a)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:28に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)と、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)とを含む、ヒトCD3εに結合することができる抗原結合領域、
(ii)SEQ ID NO:2に示したCDR1配列、SEQ ID NO:3に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:4に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)と、SEQ ID NO:6に示した配列を有するCDR1、配列KASを有するCDR2、およびSEQ ID NO:7に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)とを含む、ヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域[338]、ならびに、(a)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:28に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)と、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)とを含む、ヒトCD3εに結合することができる抗原結合領域、または
(iii)SEQ ID NO:9に示したCDR1配列、SEQ ID NO:10に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:11に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)と、SEQ ID NO:16に示した配列を有するCDR1、配列EDSを有するCDR2、およびSEQ ID NO:17に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)とを含む、ヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域[338]、ならびに、(a)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:28に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)と、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)とを含む、ヒトCD3εに結合することができる抗原結合領域
を含む、請求項32または33に記載の二重特異性抗体。
【請求項３５】
ヒトCD3εに結合することができる前記抗原結合領域が、SEQ ID NO:25に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列を含む、請求項32〜34のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
【請求項３６】
(i)前記二重特異性抗体が、SEQ ID NO:25に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列を含むことができる抗原結合領域を有する抗体と比較して、ヒトCD3ε結合についてのより低い親和性を有し、好ましくは、該親和性が、少なくとも1/2倍、例えば、少なくとも1/5倍、例えば、少なくとも1/10倍、例えば、少なくとも1/25倍、例えば、少なくとも1/50倍であり、かつ
(ii)該二重特異性抗体が、例えば、本明細書中の実施例11に記載の通りにアッセイした場合に、PBMCまたは精製したT細胞をエフェクター細胞として使用した場合のMDA-MB-231細胞、PC-3細胞、および/またはHELA細胞の濃度依存性細胞障害を媒介することができる、
請求項32に記載の二重特異性抗体。
【請求項３７】
ヒトCD3εに結合することができる前記抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:99に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:28に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)、または
(ii)SEQ ID NO:100に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:28に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)、または
(iii)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:101に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)、または
(iv)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:102に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)、または
(v)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:103に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)、または
(vi)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:104に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)、または
(vii)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:105に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)
を含む、請求項36に記載の二重特異性抗体。
【請求項３８】
ヒトCD3εに結合することができる前記抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:39に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列、または
(ii)SEQ ID NO:40に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列、または
(iii)SEQ ID NO:41に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列、または
(iv)SEQ ID NO:42に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列、または
(v)SEQ ID NO:43に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列、または
(vi)SEQ ID NO:44に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列、または
(vii)SEQ ID NO:45に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列
を含む、請求項36または37に記載の二重特異性抗体。
【請求項３９】
ヒトPD-L1に結合することができる第1の抗原結合領域と、第2の抗原にまたは異なるヒトPD-L1エピトープに結合することができる第2の抗原結合領域とを含む多重特異性抗体であって、
ヒトPD-L1に結合することができる該抗原結合領域が請求項1〜31のいずれか一項に示した特徴を有する、該多重特異性抗体。
【請求項４０】
ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域が、CDR1配列、CDR2配列、およびCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、CDR1配列、CDR2配列、およびCDR3配列を含む軽鎖可変領域(VL)を含み、VH CDR3配列が、SEQ ID NO:21[547]、SEQ ID NO:4[338]、およびSEQ ID NO:11[511]に示した配列からなる群より選択される、請求項39に記載の多重特異性抗体。
【請求項４１】
ヒトPD-L1に結合することができる前記第1の抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:19に示したCDR1配列、SEQ ID NO:20に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:21に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:23に示した配列を有するCDR1、配列DDNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:24に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[547]、
(ii)SEQ ID NO:2に示したCDR1配列、SEQ ID NO:3に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:4に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:6に示した配列を有するCDR1、配列KASを有するCDR2、およびSEQ ID NO:7に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[338]、または
(iii)SEQ ID NO:9に示したCDR1配列、SEQ ID NO:10に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:11に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:16に示した配列を有するCDR1、配列EDSを有するCDR2、およびSEQ ID NO:17に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[511]
を含む、請求項40に記載の多重特異性抗体。
【請求項４２】
ヒトPD-L1に結合することができる前記第1の抗原結合領域が、SEQ ID NO:1[338]、SEQ ID NO:8[511]、およびSEQ ID NO:18[547]に示した配列からなる群より選択されるVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、または100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列を含む、請求項40または41に記載の多重特異性抗体。
【請求項４３】
ヒトPD-L1に結合することができる前記第1の抗原結合領域が、SEQ ID NO:5[338]、SEQ ID NO:15[511]、およびSEQ ID NO:22[547]に示した配列からなる群より選択されるVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、または100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列を含む、請求項40〜42のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項４４】
ヒトPD-L1に結合することができる前記第1の抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:18に示したVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:22に示したVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列[547]、
(ii)SEQ ID NO:1に示したVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:5に示したVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列[338]、または
(iii)SEQ ID NO:8に示したVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:15に示したVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列[511]
を含む、請求項40〜43のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項４５】
前記VH配列および前記VL配列がそれぞれ、3つのCDR配列、それぞれCDR1、CDR2、およびCDR3、ならびに、4つのフレームワーク配列、それぞれFR1、FR2、FR3、およびFR4を含み、かつ、VHの各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列が、該VH配列の該各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、または少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有し、かつVH CDR配列が変異しておらず、かつVLの各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列が、該VL配列の該各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、または少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有し、かつVL CDR配列が変異していない、請求項40〜44のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項４６】
ヒトPD-L1に結合することができる前記第1の抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列[547]、
(ii)SEQ ID NO:1に示したVH配列およびSEQ ID NO:5に示したVL配列[338]、または
(iii)SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列[511]
を含む、請求項40〜45のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項４７】
ヒトPD-L1に結合することができる第1の抗原結合領域と、第2の抗原にまたは異なるヒトPD-L1エピトープに結合することができる第2の抗原結合領域とを含む多重特異性抗体であって、
(i)ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体と競合するが、ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列を含む抗体とは競合しない、または
(ii)ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列を含む抗体と競合するが、ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体とは競合しない、
該多重特異性抗体。
【請求項４８】
ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:1に示したVH配列およびSEQ ID NO:5に示したVL配列を含む抗体と競合する、請求項47に記載の多重特異性抗体。
【請求項４９】
ヒトPD-L1に結合することができる第1の抗原結合領域と、第2の抗原にまたは異なるヒトPD-L1エピトープに結合することができる第2の抗原結合領域とを含む多重特異性抗体であって、
該抗体とヒトPD-L1との結合が、SEQ ID NO:53に示したVH配列およびSEQ ID NO:57に示したVL配列を含む抗体によって置換されない、該多重特異性抗体。
【請求項５０】
ヒトPD-L1とヒトPD-1との結合を阻害する、請求項49に記載の多重特異性抗体。
【請求項５１】
ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体と競合する、請求項49または50に記載の多重特異性抗体。
【請求項５２】
請求項49〜51のいずれか一項に記載の多重特異性抗体とヒトPD-L1との結合が、SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体によってブロックされる、請求項49〜51のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項５３】
ヒトPD-L1に結合することができる第1の抗原結合領域と、第2の抗原にまたは異なるヒトPD-L1エピトープに結合することができる第2の抗原結合領域とを含む多重特異性抗体であって、
該第1の抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体[547]と同じヒトPD-L1エピトープに結合することができる、
(ii)SEQ ID NO:1に示したVH配列およびSEQ ID NO:5に示したVL配列を含む抗体[338]と同じヒトPD-L1エピトープに結合することができる、または
(iii)SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列を含む抗体[511]と同じヒトPD-L1エピトープに結合することができる、
該多重特異性抗体。
【請求項５４】
二重特異性である、請求項40〜53のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項５５】
二価である、請求項54に記載の多重特異性抗体。
【請求項５６】
請求項40〜55のいずれか一項に記載の多重特異性抗体が第2の抗原に結合することができ、かつ該第2の抗原がヒトCD3εではない、請求項40〜55のいずれか一項に記載の多重特異性抗体。
【請求項５７】
完全長抗体である、請求項1〜56のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項５８】
完全長IgG1抗体である、請求項57に記載の抗体。
【請求項５９】
抗体断片である、請求項1〜56のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項６０】
請求項32〜59のいずれか一項に記載の抗体が、抗原結合領域をそれぞれが含む2つの半分子を含み、
(i)ヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域を含む半分子がキメラであり、かつ/または
(ii)ヒトCD3ε(イプシロン)に結合することができる抗原結合領域を含む半分子が、存在する場合にはキメラである、
請求項32〜59のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項６１】
(i)ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域がヒト化されており、かつ/または
(ii)ヒトCD3ε(イプシロン)に結合することができる前記抗原結合領域が、存在する場合にはヒト化されている、
請求項1〜60のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項６２】
(i)ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域がヒトであり、かつ/または
(ii)ヒトCD3ε(イプシロン)に結合することができる前記抗原結合領域が、存在する場合にはヒトである、
請求項1〜60のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項６３】
前記抗原結合領域のそれぞれが重鎖可変領域(VH)および軽鎖可変領域(VL)を含み、かつ該可変領域がそれぞれ、3つのCDR配列、それぞれCDR1、CDR2、およびCDR3、ならびに、4つのフレームワーク配列、それぞれFR1、FR2、FR3、およびFR4を含む、請求項1〜62のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項６４】
2つの重鎖定常領域(CH)と2つの軽鎖定常領域(CL)とを含む、請求項63に記載の抗体。
【請求項６５】
請求項1〜64のいずれか一項に記載の抗体が第1の重鎖および第2の重鎖を含み、該第1の重鎖および該第2の重鎖のそれぞれが、少なくとも、ヒンジ領域、CH2、およびCH3領域を含み、該第1の重鎖において、T366、L368、K370、D399、F405、Y407、およびK409(EUナンバリングに従う)からなる群より選択される位置に対応する位置にあるアミノ酸の少なくとも1つが置換されており、かつ該第2の重鎖において、T366、L368、K370、D399、F405、Y407、およびK409(EUナンバリングに従う)からなる群より選択される位置に対応する位置にあるアミノ酸の少なくとも1つが置換されており、かつ、該第1の重鎖および該第2の重鎖が同じ位置において置換されていない、請求項1〜64のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項６６】
(i)前記第1の重鎖において、F405(EUナンバリングに従う)に対応する位置にあるアミノ酸がLであり、かつ、前記第2の重鎖において、K409(EUナンバリングに従う)に対応する位置にあるアミノ酸がRであるか、または(ii)前記第1の重鎖において、K409(EUナンバリングに従う)に対応する位置にあるアミノ酸がRであり、かつ、前記第2の重鎖において、F405(EUナンバリングに従う)に対応する位置にあるアミノ酸がLである、請求項65に記載の抗体。
【請求項６７】
請求項1〜66のいずれか一項に記載の抗体が第1の重鎖および第2の重鎖を含み、かつ
該抗体が、改変されていない第1の重鎖および第2の重鎖を含む以外は同一の抗体と比べてより少ない程度まで、Fcを介したエフェクター機能を誘導するように、一方の重鎖または両方の重鎖が改変されている、
請求項1〜66のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項６８】
前記Fcを介したエフェクター機能が、Fcを介したCD69発現を判定することによって測定されるか、Fcγ受容体への結合によって測定されるか、C1qへの結合によって測定されるか、またはFcを介したFcR架橋結合の誘導によって測定される、請求項67に記載の抗体。
【請求項６９】
請求項67または68に記載の抗体が、野生型抗体と比較した場合に、Fcを介したCD69発現を少なくとも50％、少なくとも60％、少なくとも70％、少なくとも80％、少なくとも90％、少なくとも99％、または100％低減するように、重鎖定常配列および軽鎖定常配列が改変されており、
該Fcを介したCD69発現が、PBMCに基づく機能アッセイ法において測定される、
請求項67または68に記載の抗体。
【請求項７０】
請求項1〜69のいずれか一項に記載の抗体が第1の重鎖および第2の重鎖を含み、該第1の重鎖および該第2の重鎖の少なくとも1つにおいて、EUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、D265、N297、およびP331に対応する位置にある1つまたは複数のアミノ酸が、それぞれL、L、D、N、およびPでない、請求項1〜69のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項７１】
前記第1の重鎖および前記第2の重鎖において、EUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖における位置L234およびL235に対応する位置が、それぞれFおよびEである、請求項70に記載の抗体。
【請求項７２】
請求項71に記載の抗体が、第1の重鎖および第2の重鎖を含む二重特異性抗体であり、かつ該第1の重鎖および該第2の重鎖の両方の、EUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖における位置L234およびL235に対応する位置が、それぞれFおよびEであり、かつ、(i)第1の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるF405に対応する位置がLであり、かつ第2の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるK409に対応する位置がRであるか、または(ii)第1の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるK409に対応する位置がRであり、かつ第2の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるF405に対応する位置がLである、請求項71に記載の抗体。
【請求項７３】
前記第1の重鎖および前記第2の重鎖において、EUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応する位置が、それぞれF、E、およびAである、請求項70に記載の抗体。
【請求項７４】
請求項73に記載の抗体が、第1の重鎖および第2の重鎖を含む二重特異性抗体であり、かつ該第1の重鎖および該第2の重鎖の両方の、EUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応する位置が、それぞれF、E、およびAであり、かつ、(i)第1の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるF405に対応する位置がLであり、かつ第2の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるK409に対応する位置がRであるか、または(ii)第1の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるK409に対応する位置がRであり、かつ第2の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるF405に対応する位置がLである、請求項73に記載の抗体。
【請求項７５】
ヒトPD-L2に結合しない、請求項1〜74のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項７６】
本明細書中の実施例8に記載の通りに測定した場合に、約10-8Mまたはそれ未満、例えば、約10-9Mまたはそれ未満、例えば、約10-10Mまたはそれ未満のKDでヒトPD-L1に結合する、請求項1〜75のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項７７】
本明細書中の実施例11に記載の通りにアッセイした場合に、精製したT細胞をエフェクター細胞として使用した場合のMDA-MB-231細胞、PC-3細胞、および/またはHELA細胞の濃度依存性細胞障害を媒介する、請求項1〜76のいずれか一項に記載の抗体。
【請求項７８】
(i)請求項1〜31のいずれか一項において定義されたヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域を含む抗体の重鎖配列をコードする核酸配列、および/または
(ii)請求項1〜31のいずれか一項において定義されたヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域を含む抗体の軽鎖配列をコードする核酸配列
を含む、核酸構築物。
【請求項７９】
(i)請求項33〜38のいずれか一項において定義されたヒトCD3εに結合することができる抗原結合領域を含む抗体の重鎖配列をコードする核酸配列、および
(ii)請求項33〜38のいずれか一項において定義されたヒトCD3εに結合することができる抗原結合領域を含む抗体の軽鎖配列をコードする核酸配列
をさらに含む、請求項78に記載の核酸構築物。
【請求項８０】
請求項78または79において定義された核酸構築物を含む、発現ベクター。
【請求項８１】
請求項78もしくは79において定義された核酸構築物または請求項80において定義された発現ベクターを含む、宿主細胞。
【請求項８２】
チャイニーズハムスター卵巣細胞などの哺乳動物細胞である、請求項81に記載の宿主細胞。
【請求項８３】
請求項1〜77のいずれか一項に記載の抗体と、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物。
【請求項８４】
医薬として使用するための、請求項1〜77のいずれか一項に記載の抗体または請求項83に記載の薬学的組成物。
【請求項８５】
がんの治療において使用するための、請求項1〜77のいずれか一項に記載の抗体または請求項83に記載の薬学的組成物。
【請求項８６】
固形腫瘍の存在を特徴とするがん疾患の治療において使用するための、請求項1〜77のいずれか一項に記載の抗体または請求項83に記載の薬学的組成物。
【請求項８７】
黒色腫、卵巣がん、肺がん、結腸がん、および頭頸部がんからなる群より選択されるがん疾患の治療において使用するための、請求項1〜77のいずれか一項に記載の抗体または請求項83に記載の薬学的組成物。
【請求項８８】
がん、例えば、固形腫瘍の存在を特徴とするがん疾患、または黒色腫、卵巣がん、肺がん、結腸がん、および頭頸部がんからなる群より選択されるがん疾患を治療するための医薬などの医薬を製造するための、請求項1〜77のいずれか一項に記載の抗体の使用。
【請求項８９】
1種類または複数種類のさらなる治療用物質、例えば、化学療法剤と組み合わせて用いられることを特徴とする、請求項83〜87のいずれか一項に記載の抗体または薬学的組成物。
【請求項９０】
(a)請求項1〜13のいずれか一項において定義されたヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域を含む第1の抗体を産生する宿主細胞を培養し、かつ培養物から該第1の抗体を精製する工程;
(b)異なるPD-L1エピトープにまたは異なる抗原に結合することができる抗原結合領域、例えば、請求項14〜19のいずれか一項において定義されたヒトCD3ε結合領域を含む第2の抗体を産生する宿主細胞を培養し、かつ該培養物から該第2の抗体を精製する工程;
(c)ヒンジ領域におけるシステインがジスルフィド結合異性化を受けることを可能にするのに十分な還元条件下で、該第1の抗体を該第2の抗体と一緒にインキュベートする工程;および
(d)二重特異性抗体を得る工程
を含む、請求項1〜77のいずれか一項に記載の抗体を産生するための方法。
【請求項９１】
請求項1〜77のいずれか一項において定義されたヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域に結合する、抗イディオタイプ抗体。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
[本発明1001]
ヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域を含む抗体であって、
ヒトPD-L1とヒトPD-1との結合を阻害し、かつ、
(i)ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列を含む抗体[511]と競合するが、ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体[547]とは競合しない、または
(ii)ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体[547]と競合するが、ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列を含む抗体[511]とは競合しない、
前記抗体。
[本発明1002]
ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:1に示したVH配列およびSEQ ID NO:5に示したVL配列を含む抗体[338]と競合する、本発明1001の抗体。
[本発明1003]
前記本発明のいずれかの抗体とヒトPD-L1との結合が、SEQ ID NO:53に示したVH配列およびSEQ ID NO:57に示したVL配列を含む抗体[476]によって置換されない、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1004]
前記本発明のいずれかの抗体とヒトPD-L1との結合が、SEQ ID NO:106に示したVH配列およびSEQ ID NO:110に示したVL配列を含む抗体[625]の結合によってブロックされない、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1005]
前記本発明のいずれかの抗体とヒトPD-L1との結合が、SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体[547]によってブロックされる、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1006]
(i)SEQ ID NO:1に示したVH配列およびSEQ ID NO:5に示したVL配列を含む抗体[338]と同じヒトPD-L1エピトープに結合することができる、または
(ii)SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列を含む抗体[511]と同じヒトPD-L1エピトープに結合することができる、または
(iii)SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体[547]と同じヒトPD-L1エピトープに結合することができる、
本発明1001の抗体。
[本発明1007]
本発明1001〜1004および1006のいずれかの抗体と、SEQ ID NO:94における位置113に対応する位置にあるアミノ酸残基(R113)、位置123に対応する位置にあるアミノ酸残基(Y123)、および位置125に対応する位置にあるアミノ酸残基(R125)のいずれか1つまたは複数がアラニンで置換されている変異体PD-L1との結合が、SEQ ID NO:94に示したアミノ酸配列を有する野生型PD-L1との結合と比較して低減しており、該抗体の結合の変化倍率がアラニン変異体全てにわたる結合の変化倍率の平均 - 1.5×SDよりも小さい場合に結合の低減が判定され、SDが変異体PDL1に対する該抗体の変化倍率計算値全ての標準偏差であり、かつ結合の変化倍率が実施例13に示した通りに算出される[338]、本発明1001〜1004および1006のいずれかの抗体。
[本発明1008]
本発明1001〜1002、および1006のいずれかの抗体が、PD-L1(SEQ ID NO:94)上のエピトープに結合し、該エピトープが、SEQ ID NO:94の位置113におけるアミノ酸残基(R113)、位置123におけるアミノ酸残基(Y123)、および/または位置125におけるアミノ酸残基(R125)を含む、本発明1001〜1002、および1006のいずれかの抗体。
[本発明1009]
本発明1001、1003、1004、および1006のいずれかの抗体と、SEQ ID NO:94における位置19に対応する位置にあるアミノ酸残基(F19)、位置42に対応する位置にあるアミノ酸残基(F42)、位置45に対応する位置にあるアミノ酸残基(E45)、位置46に対応する位置にあるアミノ酸残基(K46)、位置94に対応する位置にあるアミノ酸残基(L94)、および位置116に対応する位置にあるアミノ酸残基(I116)のいずれか1つまたは複数がアラニンで置換されている変異体PD-L1との結合が、SEQ ID NO:94に示したアミノ酸配列を有する野生型PD-L1と比較して低減しており、該抗体の結合の変化倍率がアラニン変異体全てにわたる結合の変化倍率の平均 - 1.5×SDよりも小さい場合に結合の低減が判定され、SDが変異体PDL1に対する該抗体の変化倍率計算値全ての標準偏差であり、かつ結合の変化倍率が実施例13に示した通りに算出される[511]、本発明1001、1003、1004、および1006のいずれかの抗体。
[本発明1010]
本発明1001、1003、1004、および1006のいずれかの抗体が、PD-L1(SEQ ID NO:94)上のエピトープに結合し、該エピトープが、SEQ ID NO:94の位置45におけるアミノ酸残基(E45)、位置46におけるアミノ酸残基(K46)、および/または位置94におけるアミノ酸残基(L94)からなる群より選択される1つまたは複数のアミノ酸残基を含む、本発明1001、1003、1004、および1006のいずれかの抗体。
[本発明1011]
本発明1001、1005、および1006のいずれかの抗体と、SEQ ID NO:94における位置58に対応する位置にあるアミノ酸残基(E58)および位置113に対応する位置にあるアミノ酸残基(R113)のいずれか1つまたは複数がアラニンで置換されている変異体PD-L1との結合が、SEQ ID NO:94に示したアミノ酸配列を有する野生型PD-L1と比較して低減しており、該抗体の結合の変化倍率がアラニン変異体全てにわたる結合の変化倍率の平均 - 1.5×SDよりも小さい場合に結合の低減が判定され、SDが変異体PDL1に対する該抗体の変化倍率計算値全ての標準偏差であり、かつ結合の変化倍率が実施例13に示した通りに算出される[547]、本発明1001、1005、および1006のいずれかの抗体。
[本発明1012]
本発明1001、1005、および1006のいずれかの抗体が、PD-L1(SEQ ID NO:94)上のエピトープに結合し、該エピトープが、SEQ ID NO:94の位置58におけるアミノ酸残基(E58)および/または位置113におけるアミノ酸残基(R113)を含む、本発明1001、1005、および1006のいずれかの抗体。
[本発明1013]
ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域が、CDR1配列、CDR2配列、およびCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、CDR1配列、CDR2配列、およびCDR3配列を含む軽鎖可変領域(VL)を含み、VH CDR3配列が、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:11、および SEQ ID NO:21に示した配列からなる群より選択される、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1014]
ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:2に示したCDR1配列、SEQ ID NO:3に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:4に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:6に示した配列を有するCDR1、配列KASを有するCDR2、およびSEQ ID NO:7に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[338]、または
(ii)SEQ ID NO:9に示したCDR1配列、SEQ ID NO:10に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:11に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:16に示した配列を有するCDR1、配列EDSを有するCDR2、およびSEQ ID NO:17に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[511]、または
(iii)SEQ ID NO:19に示したCDR1配列、 SEQ ID NO:20に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:21に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:23に示した配列を有するCDR1、配列 DDNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:24に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[547]
を含む、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1015]
ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域が、SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:8、およびSEQ ID NO:18に示した配列からなる群より選択されるVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、または100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列を含む、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1016]
ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域が、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:15、およびSEQ ID NO:22に示した配列からなる群より選択されるVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、または100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列を含む、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1017]
ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:1に示したVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:5に示したVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列[338]、または
(ii)SEQ ID NO:8に示したVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:15に示したVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列[511]、または
(iii)SEQ ID NO:18に示したVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:22に示したVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列[547]
を含む、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1018]
前記VH配列および前記VL配列がそれぞれ、3つのCDR配列、それぞれCDR1、CDR2、およびCDR3、ならびに4つのフレームワーク配列、それぞれFR1、FR2、FR3、およびFR4を含み、かつ、VHの各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列が、該VH配列の該各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、または少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有し、かつVH CDR配列が変異しておらず、かつVLの各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列が、該VL配列の該各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、または少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有し、かつVL CDR配列が変異していない、本発明1017の抗体。
[本発明1019]
抗体依存性細胞障害(ADCC)を介して、腺がんの上皮細胞の用量依存的溶解、例えば、MDA-MB-231の用量依存的溶解を誘導することができる、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1020]
細胞溶解の結果として前記上皮細胞の培養物中の細胞数を少なくとも5％、例えば、少なくとも6％、7％、8％、9％、または少なくとも10％低減することができる、本発明1019の抗体。
[本発明1021]
ADCCが、51Cr放出アッセイ法、例えば、実施例14に開示されるアッセイ法においてインビトロで測定される、本発明1019または1020の抗体。
[本発明1022]
ADCCが、本発明1019または1020の抗体とエフェクター細胞、例えば末梢血単核球(PBMC)とを含む組成物と共に前記上皮細胞を37℃、5％CO2で4時間インキュベートすることによってインビトロで測定され、該組成物中の抗体の量が0.1〜1μg/mLの範囲内であり、かつエフェクター細胞と上皮細胞の比が100:1である、本発明1019または1020の抗体。
[本発明1023]
上皮細胞の前記溶解が、ADCCの代わりとしてのルシフェラーゼレポーターアッセイ法、例えば、実施例14に開示されるルミネセンスADCCレポーターバイオアッセイ法においてインビトロで測定される、本発明1019または1020の抗体。
[本発明1024]
ADCCが、
(i)前記上皮細胞の培養物を、本発明1023の抗体とFcγRIIIa(CD16)およびホタルルシフェラーゼを安定発現するジャーカットヒトT細胞(エフェクター細胞)とを含む組成物と、1:1のエフェクター細胞:上皮細胞比で接触させ、
(ii)該上皮細胞の培養物および該エフェクター細胞を15分間室温に調節し、
(iii)該上皮細胞の培養物および該エフェクター細胞をルシフェラーゼ基質と共にインキュベートし、かつ
(iv)該細胞培養物におけるルシフェラーゼ生成を測定する
ことによって、インビトロで測定され、
該組成物中の抗体の量が0.5〜250ng/mLの範囲内であり、かつエフェクター細胞と上皮細胞の比が1:1である、本発明1023の抗体。
[本発明1025]
前記上皮細胞のADCCが、ルシフェラーゼレポーターアッセイ法、例えば、本発明1023または1024において定義されたレポーターアッセイ法において測定され、次いで、本発明1019、1020、1023、および1024のいずれかの抗体を含む試験組成物と共に該上皮細胞の培養物をインキュベートした後に観察されたADCCが、参照抗体を含む組成物と共に該上皮細胞の培養物をインキュベートした後に観察されたADCCの少なくとも1.5倍であり、ADCCが相対発光量(RLU)として測定され、該試験組成物中の抗体濃度と参照抗体を含む該組成物中の抗体濃度が同じでありかつ20〜250ng/mlの範囲内であり、かつ該参照抗体が、
(a)SEQ ID NO:74に示したVH配列およびSEQ ID NO:78に示したVL配列を含む抗体;ならびに
(b)SEQ ID NO:81に示したVH配列およびSEQ ID NO:85に示したVL配列を含む抗体
より選択される、本発明1019、1020、1023、および1024のいずれかの抗体。
[本発明1026]
ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:1に示したVH配列およびSEQ ID NO:5に示したVL配列[338]、または
(ii)SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列[511]、または
(iii)SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列[547]
を含む、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1027]
ヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域を含む抗体であって、
(i)SEQ ID NO:33に示したCDR1配列、SEQ ID NO:34に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:35に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:37に示した配列を有するCDR1、配列KASを有するCDR2、SEQ ID NO:38に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[321]、または
(ii)SEQ ID NO:47に示したCDR1配列、SEQ ID NO:48に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:49に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:51に示した配列を有するCDR1、配列 DVIを有するCDR2、およびSEQ ID NO:52に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[421]、または
(iii)SEQ ID NO:54に示したCDR1配列、SEQ ID NO:55に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:56に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:58に示した配列を有するCDR1、配列 RDSを有するCDR2、およびSEQ ID NO:59に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[476]、または
(iv)SEQ ID NO:61に示したCDR1配列、SEQ ID NO:62に示したCDR2配列、および SEQ ID NO:63に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:65に示した配列を有するCDR1、配列 DDSを有するCDR2、およびSEQ ID NO:66に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[516]、または
(v)SEQ ID NO:107に示したCDR1配列、SEQ ID NO:108に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:109に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:111に示した配列を有するCDR1、配列EDSを有するCDR2、SEQ ID NO:113に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[625]、
(vi)SEQ ID NO:68に示したCDR1配列、SEQ ID NO:69に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:70に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:72に示した配列を有するCDR1、配列EDSを有するCDR2、およびSEQ ID NO:73に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[632]
を含む、該抗体。
[本発明1028]
(i)SEQ ID NO:32に示したVH配列およびSEQ ID NO:36に示したVL配列[321]、または
(ii)SEQ ID NO:46に示したVH配列およびSEQ ID NO:50に示したVL配列[421]、または
(iii)SEQ ID NO:53に示したVH配列およびSEQ ID NO:57に示したVL配列[476]、または
(iv)SEQ ID NO:60に示したVH配列およびSEQ ID NO:64に示したVL配列[516]、または
SEQ ID NO:106に示したVH配列およびSEQ ID NO:110に示したVL配列[625]、
(v)SEQ ID NO:67に示したVH配列およびSEQ ID NO:71に示したVL配列[632]
を含む、本発明1027の抗体。
[本発明1029]
一価である、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1030]
前記本発明のいずれかの抗体が、ヒトPD-L1に結合することができる2つの抗原結合領域を有する二価抗体であり、かつ、該2つの抗原結合領域が同一の可変領域配列を有する、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1031]
前記本発明のいずれかの抗体が、二価二重特異性抗体であり、ヒトPD-L1に結合することができる(第1の)前記抗原結合領域に加えて、第2の抗原にまたは異なるヒトPD-L1エピトープに結合することができる(第2の)抗原結合領域を含み、該第2の抗原がヒトCD3εでない、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1032]
ヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域と、ヒトCD3ε(イプシロン)に結合することができる抗原結合領域とを含む二重特異性抗体であって、
ヒトPD-L1に結合することができる該抗原結合領域が、前記本発明のいずれかに示した特徴を有する、該二重特異性抗体。
[本発明1033]
ヒトCD3εに結合することができる前記抗原結合領域が、(a)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:28に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)を含む、本発明1032の二重特異性抗体。
[本発明1034]
(i)SEQ ID NO:2に示したCDR1配列、SEQ ID NO:3に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:4に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)と、SEQ ID NO:6に示した配列を有するCDR1、配列KASを有するCDR2、およびSEQ ID NO:7に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)とを含む、ヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域[338]、ならびに、(a)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:28に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)と、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)とを含む、ヒトCD3εに結合することができる抗原結合領域、または
(ii)SEQ ID NO:9に示したCDR1配列、SEQ ID NO:10に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:11に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)と、SEQ ID NO:16に示した配列を有するCDR1、配列EDSを有するCDR2、およびSEQ ID NO:17に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)とを含む、ヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域[338]、ならびに、(a)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:28に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)と、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)とを含む、ヒトCD3εに結合することができる抗原結合領域、または
(iii)SEQ ID NO:19に示したCDR1配列、SEQ ID NO:20に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:21に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)と、SEQ ID NO:23に示した配列を有するCDR1配列、配列DDNを有するCDR2配列、およびSEQ ID NO:24に示した配列を有するCDR3配列を含む軽鎖可変領域(VL)とを含む、ヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域[547]、ならびに、(a)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:28に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)と、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)とを含む、ヒトCD3εに結合することができる抗原結合領域
を含む、本発明1032または1033の二重特異性抗体。
[本発明1035]
ヒトCD3εに結合することができる前記抗原結合領域が、SEQ ID NO:25に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列を含む、本発明1032〜1034のいずれかの二重特異性抗体。
[本発明1036]
(i)前記二重特異性抗体が、SEQ ID NO:25に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列を含むことができる抗原結合領域を有する抗体と比較して、ヒトCD3ε結合についてのより低い親和性を有し、好ましくは、該親和性が、少なくとも1/2倍、例えば、少なくとも1/5倍、例えば、少なくとも1/10倍、例えば、少なくとも1/25倍、例えば、少なくとも1/50倍であり、かつ
(ii)該二重特異性抗体が、例えば、本明細書中の実施例11に記載の通りにアッセイした場合に、PBMCまたは精製したT細胞をエフェクター細胞として使用した場合のMDA-MB-231細胞、PC-3細胞、および/またはHELA細胞の濃度依存性細胞障害を媒介することができる、
本発明1032の二重特異性抗体。
[本発明1037]
ヒトCD3εに結合することができる前記抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:99に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:28に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)、または
(ii)SEQ ID NO:100に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:28に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)、または
(iii)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:101に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)、または
(iv)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:102に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)、または
(v)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:103に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)、または
(vi)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:104に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)、または
(vii)SEQ ID NO:26に示した配列を有するCDR1、SEQ ID NO:27に示した配列を有するCDR2、およびSEQ ID NO:105に示した配列を有するCDR3を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:30に示した配列を有するCDR1、配列GTNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:31に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)
を含む、本発明1036の二重特異性抗体。
[本発明1038]
ヒトCD3εに結合することができる前記抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:39に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列、または
(ii)SEQ ID NO:40に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列、または
(iii)SEQ ID NO:41に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列、または
(iv)SEQ ID NO:42に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列、または
(v)SEQ ID NO:43に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列、または
(vi)SEQ ID NO:44に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列、または
(vii)SEQ ID NO:45に示したVH配列およびSEQ ID NO:29に示したVL配列
を含む、本発明1036または1037の二重特異性抗体。
[本発明1039]
ヒトPD-L1に結合することができる第1の抗原結合領域と、第2の抗原にまたは異なるヒトPD-L1エピトープに結合することができる第2の抗原結合領域とを含む多重特異性抗体であって、
ヒトPD-L1に結合することができる該抗原結合領域が本発明1001〜1031のいずれかに示した特徴を有する、該多重特異性抗体。
[本発明1040]
ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域が、CDR1配列、CDR2配列、およびCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、CDR1配列、CDR2配列、およびCDR3配列を含む軽鎖可変領域(VL)を含み、VH CDR3配列が、SEQ ID NO:4[338]、SEQ ID NO:11[511]、およびSEQ ID NO:21[547]に示した配列からなる群より選択される、本発明1039の多重特異性抗体。
[本発明1041]
ヒトPD-L1に結合することができる前記第1の抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:2に示したCDR1配列、SEQ ID NO:3に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:4に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:6に示した配列を有するCDR1、配列KASを有するCDR2、およびSEQ ID NO:7に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[338]、または
(ii)SEQ ID NO:9に示したCDR1配列、SEQ ID NO:10に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:11に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:16に示した配列を有するCDR1、配列EDSを有するCDR2、およびSEQ ID NO:17に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[511]、または
(iii)SEQ ID NO:19に示したCDR1配列、SEQ ID NO:20に示したCDR2配列、およびSEQ ID NO:21に示したCDR3配列を含む重鎖可変領域(VH)、ならびに、SEQ ID NO:23に示した配列を有するCDR1、配列DDNを有するCDR2、およびSEQ ID NO:24に示した配列を有するCDR3を含む軽鎖可変領域(VL)[547]
を含む、本発明1040の多重特異性抗体。
[本発明1042]
ヒトPD-L1に結合することができる前記第1の抗原結合領域が、SEQ ID NO:1[338]、SEQ ID NO:8[511]、およびSEQ ID NO:18[547]に示した配列からなる群より選択されるVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、または100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列を含む、本発明1040または1041の多重特異性抗体。
[本発明1043]
ヒトPD-L1に結合することができる前記第1の抗原結合領域が、SEQ ID NO:5[338]、SEQ ID NO:15[511]、およびSEQ ID NO:22[547]に示した配列からなる群より選択されるVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、または100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列を含む、本発明1040〜1042のいずれかの多重特異性抗体。
[本発明1044]
ヒトPD-L1に結合することができる前記第1の抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:1に示したVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:5に示したVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列[338]、または
(ii)SEQ ID NO:8に示したVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:15に示したVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列[511]、または
(iii)SEQ ID NO:18に示したVH配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVH配列、および、SEQ ID NO:22に示したVL配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、少なくとも99％、もしくは100％のアミノ酸配列同一性を有するVL配列[547]
を含む、本発明1040〜1043のいずれかの多重特異性抗体。
[本発明1045]
前記VH配列および前記VL配列がそれぞれ、3つのCDR配列、それぞれCDR1、CDR2、およびCDR3、ならびに、4つのフレームワーク配列、それぞれFR1、FR2、FR3、およびFR4を含み、かつ、VHの各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列が、該VH配列の該各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、または少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有し、かつVH CDR配列が変異しておらず、かつVLの各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列が、該VL配列の該各組み合わされたFR1、FR2、FR3、およびFR4フレームワーク配列との少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97％、または少なくとも99％のアミノ酸配列同一性を有し、かつVL CDR配列が変異していない、本発明1040〜1044のいずれかの多重特異性抗体。
[本発明1046]
ヒトPD-L1に結合することができる前記第1の抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:1に示したVH配列およびSEQ ID NO:5に示したVL配列[338]、または
(ii)SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列[511]、または
(iii)SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列[547]
を含む、本発明1040〜1045のいずれかの多重特異性抗体。
[本発明1047]
ヒトPD-L1に結合することができる第1の抗原結合領域と、第2の抗原にまたは異なるヒトPD-L1エピトープに結合することができる第2の抗原結合領域とを含む多重特異性抗体であって、
(i)ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列を含む抗体と競合するが、ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体とは競合しない、または
(ii)ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体と競合するが、ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列を含む抗体とは競合しない、
該多重特異性抗体。
[本発明1048]
ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:1に示したVH配列およびSEQ ID NO:5に示したVL配列を含む抗体と競合する、本発明1047の多重特異性抗体。
[本発明1049]
ヒトPD-L1に結合することができる第1の抗原結合領域と、第2の抗原にまたは異なるヒトPD-L1エピトープに結合することができる第2の抗原結合領域とを含む多重特異性抗体であって、
該抗体とヒトPD-L1との結合が、SEQ ID NO:53に示したVH配列およびSEQ ID NO:57に示したVL配列を含む抗体によって置換されない、該多重特異性抗体。
[本発明1050]
ヒトPD-L1とヒトPD-1との結合を阻害する、本発明1049の多重特異性抗体。
[本発明1051]
ヒトPD-L1との結合について、SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体と競合する、本発明1049または1050の多重特異性抗体。
[本発明1052]
本発明1049〜1051のいずれかの多重特異性抗体とヒトPD-L1との結合が、SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体によってブロックされる、本発明1049〜1051のいずれかの多重特異性抗体。
[本発明1053]
ヒトPD-L1に結合することができる第1の抗原結合領域と、第2の抗原にまたは異なるヒトPD-L1エピトープに結合することができる第2の抗原結合領域とを含む多重特異性抗体であって、
該第1の抗原結合領域が、
(i)SEQ ID NO:1に示したVH配列およびSEQ ID NO:5に示したVL配列を含む抗体[338]と同じヒトPD-L1エピトープに結合することができる、または
(ii)SEQ ID NO:8に示したVH配列およびSEQ ID NO:15に示したVL配列を含む抗体[511]と同じヒトPD-L1エピトープに結合することができる、または
(iii)SEQ ID NO:18に示したVH配列およびSEQ ID NO:22に示したVL配列を含む抗体[547]と同じヒトPD-L1エピトープに結合することができる、
該多重特異性抗体。
[本発明1054]
二重特異性である、本発明1040〜1053のいずれかの多重特異性抗体。
[本発明1055]
二価である、本発明1054の多重特異性抗体。
[本発明1056]
本発明1040〜1055のいずれかの多重特異性抗体が第2の抗原に結合することができ、かつ該第2の抗原がヒトCD3εではない、本発明1040〜1055のいずれかの多重特異性抗体。
[本発明1057]
完全長抗体である、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1058]
完全長IgG1抗体である、本発明1057の抗体。
[本発明1059]
抗体断片である、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1060]
本発明1032〜1059のいずれかの抗体が、抗原結合領域をそれぞれが含む2つの半分子を含み、
(i)ヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域を含む半分子がキメラであり、かつ/または
(ii)ヒトCD3ε(イプシロン)に結合することができる抗原結合領域を含む半分子が、存在する場合にはキメラである、
本発明1032〜1059のいずれかの抗体。
[本発明1061]
(i)ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域がヒト化されており、かつ/または
(ii)ヒトCD3ε(イプシロン)に結合することができる前記抗原結合領域が、存在する場合にはヒト化されている、
前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1062]
(i)ヒトPD-L1に結合することができる前記抗原結合領域がヒトであり、かつ/または
(ii)ヒトCD3ε(イプシロン)に結合することができる前記抗原結合領域が、存在する場合にはヒトである、
前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1063]
前記抗原結合領域のそれぞれが重鎖可変領域(VH)および軽鎖可変領域(VL)を含み、かつ該可変領域がそれぞれ、3つのCDR配列、それぞれCDR1、CDR2、およびCDR3、ならびに、4つのフレームワーク配列、それぞれFR1、FR2、FR3、およびFR4を含む、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1064]
2つの重鎖定常領域(CH)と2つの鎖定常領域(CL)とを含む、本発明1063の抗体。
[本発明1065]
前記本発明のいずれかの抗体が第1の重鎖および第2の重鎖を含み、該第1の重鎖および該第2の重鎖のそれぞれが、少なくとも、ヒンジ領域、CH2、およびCH3領域を含み、該第1の重鎖において、T366、L368、K370、D399、F405、Y407、およびK409(EUナンバリングに従う)からなる群より選択される位置に対応する位置にあるアミノ酸の少なくとも1つが置換されており、かつ該第2の重鎖において、T366、L368、K370、D399、F405、Y407、およびK409(EUナンバリングに従う)からなる群より選択される位置に対応する位置にあるアミノ酸の少なくとも1つが置換されており、かつ、該第1の重鎖および該第2の重鎖が同じ位置において置換されていない、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1066]
(i)前記第1の重鎖において、F405(EUナンバリングに従う)に対応する位置にあるアミノ酸がLであり、かつ、前記第2の重鎖において、K409(EUナンバリングに従う)に対応する位置にあるアミノ酸がRであるか、または(ii)前記第1の重鎖において、K409(EUナンバリングに従う)に対応する位置にあるアミノ酸がRであり、かつ、前記第2の重鎖において、F405(EUナンバリングに従う)に対応する位置にあるアミノ酸がLである、本発明1065の抗体。
[本発明1067]
前記本発明のいずれかの抗体が第1の重鎖および第2の重鎖を含み、かつ
該抗体が、改変されていない第1の重鎖および第2の重鎖を含む以外は同一の抗体と比べてより少ない程度まで、Fcを介したエフェクター機能を誘導するように、一方の重鎖または両方の重鎖が改変されている、
前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1068]
前記Fcを介したエフェクター機能が、Fcを介したCD69発現を判定することによって測定されるか、Fcγ受容体への結合によって測定されるか、C1qへの結合によって測定されるか、またはFcを介したFcR架橋結合の誘導によって測定される、本発明1067の抗体。
[本発明1069]
本発明1067または1068の抗体が、野生型抗体と比較した場合に、Fcを介したCD69発現を少なくとも50％、少なくとも60％、少なくとも70％、少なくとも80％、少なくとも90％、少なくとも99％、または100％低減するように、重鎖定常配列および軽鎖定常配列が改変されており、
該Fcを介したCD69発現が、PBMCに基づく機能アッセイ法において測定される、
本発明1067または1068の抗体。
[本発明1070]
前記本発明のいずれかの抗体が第1の重鎖および第2の重鎖を含み、該第1の重鎖および該第2の重鎖の少なくとも1つにおいて、EUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、D265、N297、およびP331に対応する位置にある1つまたは複数のアミノ酸が、それぞれL、L、D、N、およびPでない、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1071]
前記第1の重鎖および前記第2の重鎖において、EUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖における位置L234およびL235に対応する位置が、それぞれFおよびEである、本発明1070の抗体。
[本発明1072]
本発明1071の抗体が、第1の重鎖および第2の重鎖を含む二重特異性抗体であり、かつ該第1の重鎖および該第2の重鎖の両方の、EUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖における位置L234およびL235に対応する位置が、それぞれFおよびEであり、かつ、(i)第1の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるF405に対応する位置がLであり、かつ第2の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるK409に対応する位置がRであるか、または(ii)第1の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるK409に対応する位置がRであり、かつ第2の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるF405に対応する位置がLである、本発明1071の抗体。
[本発明1073]
前記第1の重鎖および前記第2の重鎖おいて、EUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応する位置が、それぞれF、E、およびAである、本発明1070の抗体。
[本発明1074]
本発明1073の抗体が、第1の重鎖および第2の重鎖を含む二重特異性抗体であり、かつ該第1の重鎖および該第2の重鎖の両方の、EUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖における位置L234、L235、およびD265に対応する位置が、それぞれF、E、およびAであり、かつ、(i)第1の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるF405に対応する位置がLであり、かつ第2の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるK409に対応する位置がRであるか、または(ii)第1の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるK409に対応する位置がRであり、かつ第2の重鎖のEUナンバリングに従うヒトIgG1重鎖におけるF405に対応する位置がLである、本発明1073の抗体。
[本発明1075]
ヒトPD-L2に結合しない、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1076]
本明細書中の実施例8に記載の通りに測定した場合に、約10-8Mまたはそれ未満、例えば、約10-9Mまたはそれ未満、例えば、約10-10Mまたはそれ未満のKDでヒトPD-L1に結合する、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1077]
本明細書中の実施例11に記載の通りにアッセイした場合に、精製したT細胞をエフェクター細胞として使用した場合のMDA-MB-231細胞、PC-3細胞、および/またはHELA細胞の濃度依存性細胞障害を媒介する、前記本発明のいずれかの抗体。
[本発明1078]
(i)本発明1001〜1031のいずれかにおいて定義されたヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域を含む抗体の重鎖配列をコードする核酸配列、および/または
(ii)本発明1001〜1031のいずれかにおいて定義されたヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域を含む抗体の軽鎖配列をコードする核酸配列
を含む、核酸構築物。
[本発明1079]
(i)本発明1033〜1038のいずれかにおいて定義されたヒトCD3εに結合することができる抗原結合領域を含む抗体の重鎖配列をコードする核酸配列、および
(ii)本発明1033〜1038のいずれかにおいて定義されたヒトCD3εに結合することができる抗原結合領域を含む抗体の軽鎖配列をコードする核酸配列
をさらに含む、本発明1073の核酸構築物。
[本発明1080]
本発明1078または1079において定義された核酸構築物を含む、発現ベクター。
[本発明1081]
本発明1078もしくは1079において定義された核酸構築物または本発明1080において定義された発現ベクターを含む、宿主細胞。
[本発明1082]
チャイニーズハムスター卵巣細胞などの哺乳動物細胞である、本発明1081の宿主細胞。
[本発明1083]
本発明1001〜1077のいずれかの抗体と、薬学的に許容される担体とを含む、薬学的組成物。
[本発明1084]
医薬として使用するための、本発明1001〜1077のいずれかの抗体または本発明1083の薬学的組成物。
[本発明1085]
がんの治療において使用するための、本発明1001〜1080のいずれかの抗体または本発明1070の薬学的組成物。
[本発明1086]
固形腫瘍の存在を特徴とするがん疾患の治療において使用するための、本発明1001〜1077のいずれかの抗体または本発明1070の薬学的組成物。
[本発明1087]
黒色腫、卵巣がん、肺がん、結腸がん、および頭頸部がんからなる群より選択されるがん疾患の治療において使用するための、本発明1001〜1078のいずれかの抗体または本発明1070の薬学的組成物。
[本発明1088]
それを必要とする対象に、本発明1001〜1075のいずれかの抗体または本発明1083の薬学的組成物を投与する工程を含む、疾患を治療する方法。
[本発明1089]
がん、例えば、固形腫瘍の存在を特徴とするがん疾患、または黒色腫、卵巣がん、肺がん、結腸がん、および頭頸部がんからなる群より選択されるがん疾患を治療するための医薬などの医薬を製造するための、本発明1001〜1077のいずれかの抗体の使用。
[本発明1090]
1種類または複数種類のさらなる治療用物質との組み合わせ、例えば、化学療法剤との組み合わせを含む、本発明1083〜1089のいずれかの方法または使用。
[本発明1091]
(a)本発明1001〜1013のいずれかにおいて定義されたヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域を含む第1の抗体を産生する宿主細胞を培養し、かつ培養物から該第1の抗体を精製する工程;
(b)異なるPD-L1エピトープにまたは異なる抗原に結合することができる抗原結合領域、例えば、本発明1014〜1019のいずれかにおいて定義されたヒトCD3ε結合領域を含む第2の抗体を産生する宿主細胞を培養し、かつ該培養物から該第2の抗体を精製する工程;
(c)ヒンジ領域におけるシステインがジスルフィド結合異性化を受けることを可能にするのに十分な還元条件下で、該第1の抗体を該第2の抗体と一緒にインキュベートする工程;および
(d)二重特異性抗体を得る工程
を含む、本発明1001〜1077のいずれかの抗体を産生するための方法。
[本発明1092]
本発明1001〜1077のいずれかにおいて定義されたヒトPD-L1に結合することができる抗原結合領域に結合する、抗イディオタイプ抗体。
本発明のこれらの局面および他の局面が下記でさらに詳細に説明される。