【手続補正書】
【提出日】令和2年12月9日(2020.12.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
CTLA-4阻害剤をコードする腫瘍溶解性ウイルス。
【請求項２】
CTLA-4阻害剤が抗CTLA-4抗体又はその抗原結合断片である、請求項1に記載のウイルス。
【請求項３】
断片がscFv分子を含む；断片が1以上のIgG1定常領域に連結されたscFv分子である；又は、抗体若しくは断片が、IgG重鎖に連結された軽鎖可変領域配列を含む、請求項2に記載のウイルス。
【請求項４】
抗体又は断片が、
（a）配列番号1に示される軽鎖可変領域配列及び配列番号3に示される重鎖可変領域配列を含む；
（b）配列番号11に示される軽鎖可変領域配列及び配列番号12に示される重鎖可変領域配列を含む；
（c）配列番号9のアミノ酸配列を含む；
（d）配列番号14のアミノ酸配列を含む；
（e）配列番号10のヌクレオチド配列によりコードされる；又は
（f）配列番号15のヌクレオチド配列によりコードされる、
請求項2又は3に記載のウイルス。
【請求項５】
（a）GM-CSFをコードする遺伝子；
（b）免疫共刺激経路活性化分子又は免疫共刺激経路活性化分子をコードする遺伝子；及び/又は
（c）融合誘導性タンパク質をコードする遺伝子
をさらに含む、請求項1〜4のいずれか1項に記載のウイルス。
【請求項６】
（a）免疫共刺激経路活性化分子をコードする遺伝子が、CD40リガンド(CD40L)、ICOSリガンド、GITRリガンド、4-1-BBリガンド、OX40リガンド、TL1A、CD30リガンド、CD27若しくはflt3リガンドをコードする；
（b）融合誘導性タンパク質が、水疱性口内炎ウイルス(VSV)Gタンパク質、シンシチン-1、シンシチン-2、シミアンウイルス5(SV5)Fタンパク質、麻疹ウイルス(MV)Hタンパク質、MV Fタンパク質、呼吸器合胞体ウイルス(RSV)Fタンパク質、及びRペプチドが欠失しているテナガザル(gibbon ape)白血病ウイルス(GALV)、マウス白血病ウイルス(MLV)、Mason-Pfizerサルウイルス(MPMV)若しくはウマ感染性貧血ウイルス(EIAV)由来の糖タンパク質からなる群から選択される；並びに/又は
（c）融合誘導性タンパク質が、テナガザル白血病ウイルス(GALV)由来の糖タンパク質であり、R膜貫通ペプチドが突然変異若しくは除去されている(GALV-R-)、
請求項5に記載のウイルス。
【請求項７】
1つ以上の免疫共刺激経路活性化分子をコードする、請求項1〜6のいずれか1項に記載のウイルス。
【請求項８】
（a）ウイルスの臨床分離株に由来する；
（b）2つ以上の腫瘍細胞株を、同種のウイルスの1つ以上の参照臨床分離株よりも、インビトロで迅速に及び/若しくは低用量で死滅させる、ウイルスの改変された臨床分離株である；並びに/又は
（c）ヘルペスウイルス、ポックスウイルス、アデノウイルス、レトロウイルス、ラブドウイルス、パラミクソウイルス及びレオウイルスからなる群から選択される、
請求項1〜7のいずれか1項に記載のウイルス。
【請求項９】
（i）単純ヘルペスウイルス(HSV)である；
（ii）HSV1である；又は
（iii）HSVが、
(a)機能的ICP34.5を発現しない、
(b)機能的ICP47を発現しない、及び/若しくは
(c)US11遺伝子を前初期遺伝子として発現する、
請求項1〜8のいずれか1項に記載のウイルス。
【請求項１０】
（a）抗CTLA-4阻害剤タンパク質をコードする遺伝子が、挿入、部分的欠失、若しくは完全な欠失によって、ICP34.5をコードする遺伝子座に挿入されている；又は
（b）GM-CSFなどの1以上の免疫刺激遺伝子及び/若しくは免疫共刺激経路活性化分子をコードする遺伝子及び/若しくは融合誘導性タンパク質をコードする遺伝子も含むカセットに含まれている抗CTLA-4阻害剤タンパク質をコードする遺伝子が、挿入、部分的欠失、若しくは完全な欠失によって、ICP34.5をコードする遺伝子座に挿入されている、
請求項9に記載のウイルス。
【請求項１１】
CTLA-4阻害剤をコードする配列、GM-CSFをコードする配列、免疫共刺激経路活性化分子をコードする配列及び/又は融合誘導性タンパク質をコードする遺伝子が、標的細胞における発現レベルを増加させるようにコドン最適化されている、請求項1〜10のいずれか1項に記載のウイルス。
【請求項１２】
3つの異種遺伝子を発現し、3つの異種遺伝子の各々が、CMVプロモーター、RSVプロモーター、SV40プロモーター（配列番号）及び、MMLVなどに由来するレトロウイルスLTRプロモーターから選択される異なるプロモーターによって駆動される；並びに/又は、3つの異種遺伝子の各々が、BGH、SV40、HGH及びRBGポリアデニル化配列から選択される異なるポリアデニル化配列によって終結される、請求項1〜11のいずれか1項に記載のウイルス。
【請求項１３】
CMVプロモーター、RSVプロモーター、SV40プロモーター及び、MMLVなどに由来するレトロウイルスLTRプロモーターの各々によってそれぞれ駆動される4つの異種遺伝子を発現する；並びに／又は、BGH、SV40、HGH及びRBGポリアデニル化配列の各々によってそれぞれ終結される、請求項12に記載のウイルス。
【請求項１４】
ポックスウイルスである、請求項12又は13に記載のウイルス。
【請求項１５】
請求項1〜14のいずれか1項に記載のウイルス及び医薬として許容される担体又は希釈剤を含む医薬組成物。
【請求項１６】
療法によってヒト又は動物の体を治療する方法に使用するための、請求項1〜14のいずれか1項に記載のウイルスを含む組成物。
【請求項１７】
がんを治療する方法に使用するための、請求項1〜14のいずれか1項に記載のウイルスを含む組成物。
【請求項１８】
方法が、
（a）さらなる抗がん剤をウイルスと同時に又は別々に投与すること；
（b）さらなる抗がん剤をウイルスと同時に又は別々に投与することであって、さらなる抗がん剤が、PD-1阻害剤、PD-L1阻害剤、LAG-3阻害剤、TIM-3阻害剤、VISTA阻害剤、aCSF1R阻害剤、IDO阻害剤、KIR阻害剤、SLAMF7阻害剤、CEACAM1阻害剤若しくはCD47阻害剤などの免疫共阻害経路を標的とする薬剤、GITRアゴニスト、4-1-BBアゴニスト、OX40アゴニスト、CD40アゴニスト若しくはICOSアゴニストなどの免疫共刺激経路を標的とする薬剤、放射線療法及び/又は化学療法、腫瘍において生じる特定の遺伝子突然変異を標的とする薬剤、1つ以上の腫瘍抗原又はネオ抗原に対する免疫応答を誘導することが意図された薬剤、T細胞又はNK細胞に由来する細胞生成物、STING、cGAS、TLR又は他の自然免疫応答及び/若しくは炎症経路を刺激することが意図された薬剤、第2のウイルス、場合により腫瘍溶解性ウイルス、並びにそれらの組み合わせから選択される；
（c）さらなる抗がん剤をウイルスと同時に又は別々に投与することであって、さらなる抗がん剤が抗体である；又は
（d）インドールアミン2,3-ジオキシゲナーゼ(IDO)経路の阻害剤及び免疫共阻害経路のさらなるアンタゴニスト、又は免疫共刺激経路のアゴニストを投与すること
を含む、請求項17に記載の組成物。
【請求項１９】
がんが固形腫瘍である、請求項17又は18に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
がんが、原発部位における腫瘍及び/又は元の腫瘍の部位から転移した腫瘍である、請求項17〜19のいずれか1項に記載の組成物。
【請求項２１】
がんを治療する方法において使用するための医薬の製造における、請求項1〜14のいずれか1項に記載のウイルスの使用。
【請求項２２】
医薬が、さらなる抗がん剤を含む、請求項21に記載の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０３】
記載された投与経路及び投薬量は、熟練した医師が最適な投与経路及び投薬量を容易に決定することができるため、指針としてのみ意図される。用量は、様々なパラメータに従って、特に腫瘍の位置、腫瘍の大きさ、治療される患者の年齢、体重及び状態、並びに投与経路に従って決定され得る。好ましくは、ウイルスは、腫瘍又は体腔内への直接注射によって投与される。ウイルスはまた、血管内への注射によって投与され得る。最適な投与経路は、腫瘍の位置及び大きさに依存する。複数回の用量は、免疫学的又は臨床的効果を達成するために必要とされ得、これは、必要に応じて、典型的には、2日〜12週間の間隔、好ましくは3日〜3週間の間隔で投与される。治療されている腫瘍のタイプの応答速度及び特定の患者の応答、また、与えられ得る任意の併用療法に依存して、最大5年以上好ましくは最大1カ月〜2年間の反復投与が与えられ得る。
本発明は、例えば以下の実施形態を包含する：
［実施形態１］CTLA-4阻害剤をコードする腫瘍溶解性ウイルス。
［実施形態２］CTLA-4阻害剤がCTLA-4抗体又はその抗原結合断片である、実施形態1に記載のウイルス。
［実施形態３］断片がscFv分子を含む、実施形態2に記載のウイルス。
［実施形態４］断片が1以上のIgG1定常領域に連結されたscFv分子である、実施形態2に記載のウイルス。
［実施形態５］抗体又は断片が、IgG重鎖に連結された軽鎖可変領域を含む、実施形態2〜4のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態６］抗体又は断片が、（a）配列番号1に示される軽鎖可変領域配列及び配列番号3に示される重鎖可変領域配列、又は（b）配列番号11に示される軽鎖可変領域配列及び配列番号12に示される重鎖可変領域配列を含む、実施形態2〜5のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態７］抗体又は断片が、（a）配列番号9のアミノ酸配列、又は（b）配列番号14のアミノ酸配列を含む、実施形態6に記載のウイルス。
［実施形態８］抗体又は断片が、（a）配列番号10のヌクレオチド配列、又は（b）配列番号15のヌクレオチド配列によりコードされる、実施形態7に記載のウイルス。
［実施形態９］GM-CSFをコードする遺伝子をさらに含む、実施形態1〜8のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態１０］免疫共刺激経路活性化分子又は免疫共刺激経路活性化分子をコードする遺伝子をさらに含む、実施形態1〜9のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態１１］免疫共刺激経路活性化分子をコードする遺伝子が、CD40リガンド(CD40L)、ICOSリガンド、GITRリガンド、4-1-BBリガンド、OX40リガンド、TL1A、CD30リガンド、CD27若しくはflt3リガンド又はこれらのいずれかの改変バージョンをコードする、実施形態10に記載のウイルス。
［実施形態１２］免疫共刺激経路活性化分子をコードする遺伝子が、CD40リガンド、GITRリガンド、4-1-BBリガンド、OX40リガンド、ICOSリガンド、又はこれらのいずれかの改変バージョンをコードする、実施形態10又は11に記載のウイルス。
［実施形態１３］融合誘導性タンパク質をコードする遺伝子をさらに含む、実施形態1〜12のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態１４］融合誘導性タンパク質が、水疱性口内炎ウイルス(VSV)Gタンパク質、シンシチン-1、シンシチン-2、シミアンウイルス5(SV5)Fタンパク質、麻疹ウイルス(MV)Hタンパク質、MV Fタンパク質、呼吸器合胞体ウイルス(RSV)Fタンパク質、及びRペプチドが欠失しているテナガザル(gibbon ape)白血病ウイルス(GALV)、マウス白血病ウイルス(MLV)、Mason-Pfizerサルウイルス(MPMV)又はウマ感染性貧血ウイルス(EIAV)由来の糖タンパク質からなる群から選択される、実施形態13に記載のウイルス。
［実施形態１５］融合誘導性タンパク質が、テナガザル白血病ウイルス(GALV)由来の糖タンパク質であり、R膜貫通ペプチドが突然変異又は除去されている(GALV-R-)、実施形態13又は14に記載のウイルス。
［実施形態１６］1つ以上の免疫共刺激経路活性化分子をコードする、実施形態1〜15のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態１７］ウイルスの臨床分離株に由来する、実施形態1〜16のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態１８］2つ以上の腫瘍細胞株を、同種のウイルスの1つ以上の参照臨床分離株よりも、インビトロで迅速に及び/又は低用量で死滅させる、ウイルスの改変された臨床分離株である、実施形態1〜17のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態１９］ヘルペスウイルス、ポックスウイルス、アデノウイルス、レトロウイルス、ラブドウイルス、パラミクソウイルス及びレオウイルスからなる群から選択される、実施形態1〜18のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態２０］単純ヘルペスウイルス(HSV)である、実施形態1〜19のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態２１］HSV1である、実施形態20に記載のウイルス。
［実施形態２２］HSVが、
(a)機能的ICP34.5を発現しない、
(b)機能的ICP47を発現しない、及び/又は
(c)US11遺伝子を前初期遺伝子として発現する、
実施形態21に記載のウイルス。
［実施形態２３］抗CTLA-4阻害剤タンパク質をコードする遺伝子が、挿入、部分的欠失、又は完全な欠失によって、ICP34.5をコードする遺伝子座に挿入されている、実施形態20〜22のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態２４］抗CTLA-4阻害剤タンパク質をコードする遺伝子が、GM-CSFなどの1以上の免疫刺激遺伝子及び/又は免疫共刺激経路活性化分子をコードする遺伝子及び/又は融合誘導性タンパク質をコードする遺伝子も含むカセットに含まれている、実施形態23に記載のウイルス。
［実施形態２５］CTLA-4阻害剤をコードする配列、GM-CSFをコードする配列、免疫共刺激経路活性化分子をコードする配列及び/又は融合誘導性タンパク質をコードする遺伝子が、標的細胞における発現レベルを増加させるようにコドン最適化されている、実施形態1〜24のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態２６］3つの異種遺伝子を発現し、3つの異種遺伝子の各々が、CMVプロモーター、RSVプロモーター、SV40プロモーター（配列番号）及びレトロウイルスLTRプロモーターから選択される異なるプロモーターによって駆動される、実施形態1〜25のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態２７］CMVプロモーター、RSVプロモーター、SV40プロモーター及びレトロウイルスLTRプロモーターの各々によってそれぞれ駆動される4つの異種遺伝子を発現する、実施形態26に記載のウイルス。
［実施形態２８］レトロウイルスLTRがMMLV（配列番号）由来である、実施形態26又は27に記載のウイルス。
［実施形態２９］3つの異種遺伝子を発現し、3つの異種遺伝子の各々が、BGH、SV40、HGH及びRBGポリアデニル化配列から選択される異なるポリアデニル化配列によって終結される、実施形態1〜28のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態３０］BGH、SV40、HGH及びRBGポリアデニル化配列の各々によってそれぞれ終結される4つの異種遺伝子を発現する、実施形態29に記載のウイルス。
［実施形態３１］ポックスウイルスである、実施形態26〜30のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態３２］実施形態1〜31のいずれかに記載のウイルス及び医薬として許容される担体又は希釈剤を含む医薬組成物。
［実施形態３３］療法によってヒト又は動物の体を治療する方法に使用するための、実施形態1〜31のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態３４］がんを治療する方法に使用するための、実施形態1〜31のいずれかに記載のウイルス。
［実施形態３５］方法が、さらなる抗がん剤を投与することを含む、実施形態34に記載の使用のためのウイルス。
［実施形態３６］さらなる抗がん剤が、免疫共阻害経路又は免疫共刺激経路を標的とする薬剤、放射線療法及び/又は化学療法、腫瘍において生じる特定の遺伝子突然変異を標的とする薬剤、1つ以上の腫瘍抗原又はネオ抗原に対する免疫応答を誘導することが意図された薬剤、T細胞又はNK細胞に由来する細胞生成物、STING、cGAS、TLR又は他の自然免疫応答及び/若しくは炎症経路を刺激することが意図された薬剤、第2のウイルス、場合により腫瘍溶解性ウイルス、並びにそれらの組み合わせから選択される、実施形態35に記載の使用のためのウイルス。
［実施形態３７］免疫共阻害経路を標的とする薬剤が、PD-1阻害剤、PD-L1阻害剤、LAG-3阻害剤、TIM-3阻害剤、VISTA阻害剤、aCSF1R阻害剤、IDO阻害剤、KIR阻害剤、SLAMF7阻害剤、CEACAM1阻害剤若しくはCD47阻害剤であり、及び/又は免疫共刺激経路を標的とする薬剤が、GITRアゴニスト、4-1-BBアゴニスト、OX40アゴニスト、CD40アゴニスト若しくはICOSアゴニストである、実施形態36に記載の使用のためのウイルス。
［実施形態３８］さらなる抗がん剤が抗体である、実施形態35〜37のいずれかに記載の使用のためのウイルス。
［実施形態３９］方法が、インドールアミン2,3-ジオキシゲナーゼ(IDO)経路の阻害剤及び免疫共阻害経路のさらなるアンタゴニスト、又は免疫共刺激経路のさらなるアゴニストを投与することを含む、実施形態35〜38のいずれかに記載の使用のためのウイルス。
［実施形態４０］ウイルス及びさらなる抗がん剤が別々に投与される、実施形態34〜39のいずれかに記載の使用のためのウイルス。
［実施形態４１］ウイルス及びさらなる抗がん剤が同時に投与される、実施形態34〜39のいずれかに記載の使用のためのウイルス。
［実施形態４２］がんが固形腫瘍である、実施形態34〜41のいずれかに記載の使用のためのウイルス。
［実施形態４３］実施形態1〜31のいずれかに記載のウイルスを滅菌バイアル、アンプル又はシリンジ中に含む製造物。
［実施形態４４］治療有効量の実施形態1〜31のいずれかに記載のウイルス又は実施形態32に記載の医薬組成物を、それを必要とする患者に投与することを含む、がんを治療する方法。
［実施形態４５］治療有効量のさらなる抗がん剤を、それを必要とする患者に投与することをさらに含む、実施形態44に記載の方法。
［実施形態４６］さらなる抗がん剤が、免疫共阻害経路又は免疫共刺激経路を標的とする薬剤、放射線療法及び/又は化学療法、腫瘍において生じる特定の遺伝子突然変異を標的とする薬剤、1つ以上の腫瘍抗原又はネオ抗原に対する免疫応答を誘導することが意図された薬剤、T細胞又はNK細胞に由来する細胞生成物、STING、cGAS、TLR又は他の自然免疫応答及び/若しくは炎症経路を刺激することが意図された薬剤、第2のウイルス、場合により腫瘍溶解性ウイルス、並びにそれらの組み合わせからなる群から選択される、実施形態45に記載の方法。
［実施形態４７］免疫共阻害経路を標的とする薬剤が、PD-1阻害剤、PD-L1阻害剤、LAG-3阻害剤、TIM-3阻害剤、VISTA阻害剤、aCSF1R阻害剤、IDO阻害剤、KIR阻害剤、SLAMF7阻害剤、CEACAM1阻害剤若しくはCD47阻害剤であり、及び/又は免疫共刺激経路を標的とする薬剤が、GITRアゴニスト、4-1-BBアゴニスト、OX40アゴニスト、CD40アゴニスト若しくはICOSアゴニストである、実施形態46に記載の方法。
［実施形態４８］さらなる抗がん剤が抗体を含む、実施形態45〜47のいずれかに記載の方法。
［実施形態４９］ウイルス及びさらなる抗がん剤が別々に投与される、実施形態45〜48のいずれかに記載の方法。
［実施形態５０］ウイルス及びさらなる抗がん剤が同時に投与される、実施形態45〜48のいずれかに記載の方法。
［実施形態５１］がんが固形腫瘍である、実施形態44〜50のいずれかに記載の方法。
［実施形態５２］がんを治療する方法において使用するための医薬の製造における、実施形態1〜31のいずれかに記載のウイルスの使用。
［実施形態５３］方法が、さらなる抗がん剤を投与することを含む、実施形態52に記載の使用。