【手続補正書】
【提出日】令和3年1月29日(2021.1.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
骨または歯の試料からの核酸抽出方法であって、
ａ．粉末に摩砕されたまたは断片に打砕かれた試料を提供し；
ｂ．脱塩緩衝液を核酸含有材料に添加して、混合物を得、ここに、前記脱塩緩衝液は、いずれの他の化学薬品も含まない０．３〜０．７Ｍ ＥＤＴＡ溶液であり；
ｃ．前記混合物を激しく混合し；次いで
ｄ．前記混合物を分離して、液体上清を得、ここに、液体上清は抽出された核酸を含有することを含み、
骨試料の脱塩は６０分未満行なわれ、歯試料の脱塩は１８０分未満行なわれる、前記方法。
【請求項２】
分離工程が、核酸を濃縮することを含まない、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記試料が分解された骨または歯の試料である、請求項１記載の方法。
【請求項４】
骨または歯の試料からの核酸抽出方法であって、
ａ．粉末に摩砕されたまたは断片に打砕かれた骨または歯の試料を提供し；
ｂ．いずれの他の化学薬品も含まない５００μ１未満の０．３〜０．７Ｍ ＥＤＴＡ溶液または等価な脱塩緩衝液を核酸含有材料に添加して、混合物を得；
ｃ．前記混合物を激しく混合し；
ｄ．混合物を加熱に付すか、あるいは該加熱を付すことなく、少なくとも１分間前記混合物をインキュベートし；
ｅ．前記混合物を分離して、濃縮なく液体上清を得、ここに、液体上清は抽出された核酸を含有する
ことを含み、
骨試料の脱塩は６０分未満、好ましくは１０分未満行なわれ、歯試料の脱塩は１８０分未満、好ましくは１０分未満行なわれる、前記方法。
【請求項５】
前記試料が１０ｍｇ未満の重量を有する、請求項４記載の方法。
【請求項６】
前記試料が分解された骨または歯の試料である、請求項４記載の方法。
【請求項７】
混合物を分離して液体上清を得る工程が、遠心分離によって達成される、請求項１記載の方法。
【請求項８】
前記遠心分離が、２０，０００ｒｃｆ以上の速度での２分間以上である、請求項７記載の方法。
【請求項９】
液体上清の一部分を核酸分析に付す工程をさらに含む、請求項１記載の方法。
【請求項１０】
前記核酸分析が迅速ＤＮＡ処理システムに液体上清の一部分を移すことを含む、請求項９記載の方法。
【請求項１１】
混合物を激しく混合する工程が、混合物を約３０秒以上ボルテックス混合することにより実施される、請求項１記載の方法。
【請求項１２】
核酸含有材料からの迅速な核酸抽出用キットであって、
ａ．脱塩緩衝液；および
ｂ．請求項１に記載の迅速な核酸抽出方法を詳述する小冊子
を含む前記キット。
【請求項１３】
迅速ＤＮＡ分析システムに抽出された核酸を輸送するための媒体をさらに含む請求項１２記載のキット。
【請求項１４】
骨および歯の試料を洗浄し清浄化する溶液をさらに含む請求項１２記載のキット。
【請求項１５】
前記溶液が７０％エタノールおよび１０％漂白剤である、請求項１４記載のキット。
【請求項１６】
前記脱塩緩衝液が０．５Ｍ ＥＤＴＡである請求項１２記載のキット。
【請求項１７】
骨または歯の試料からの核酸のＳＴＲプロフィールを決定するための方法であって、
ａ．粉末に摩砕されたまたは断片に打砕かれた骨または歯を提供し；
ｂ．脱塩緩衝液を骨または歯に添加して、混合物を得、ここに、前記脱塩緩衝液は、いずれの他の化学薬品も含まない０．３〜０．７Ｍ ＥＤＴＡ溶液であり；
ｃ．前記混合物を激しく混合し；
ｄ．前記混合物を分離して、液体上清を得；ここに、液体上清は抽出された核酸を含有し；次いで、
ｅ．液体上清の一部分を核酸分析に付して、骨または歯からの核酸のＳＴＲプロフィールを決定する
ことを含み、
骨試料の脱塩は６０分未満行なわれ、歯試料の脱塩は１８０分未満行なわれる、前記方法。
【請求項１８】
前記試料が分解された骨または歯の試料である、請求項１７記載の方法。
【請求項１９】
混合物を分離して、液体上清を得るための工程が、遠心分離によって達成される、請求項１７記載の方法。
【請求項２０】
前記遠心分離が２０，０００ｒｃｆ以上の速度での２分間以上である、請求項１９記載の方法。
【請求項２１】
混合物を激しく混合する工程が、混合物を約３０秒以上ボルテックス混合することにより、実施される、請求項１７記載の方法。
【請求項２２】
前記核酸分析が、迅速ＤＮＡ処理システムに液体上清の一部分を移すことを含む、請求項１７記載の方法。
【請求項２３】
少なくとも７つのＳＴＲ遺伝子座が統合される、請求項２２記載の方法。
【請求項２４】
前記脱塩緩衝液が０．５Ｍ ＥＤＴＡである、請求項１７記載の方法。
【請求項２５】
精液試料からの核酸のＳＴＲプロフィールを決定するための方法であって、
ａ．スワブ上に精液試料を収集し；
ｂ．適切な量の精子破壊剤をスワブヘッド上に適用し；次いで
ｃ．迅速ＤＮＡ処理システムにスワブを移す
ことを含む前記方法。
【請求項２６】
前記精液試料が、ニートの精液または精液汚れであり得る請求項２５記載の方法。
【請求項２７】
精子破壊剤が、ＤＴＴまたはＴＣＥＰであり、各々、約１５０ｍＭまたは５０ｍＭの濃度を有し、かつＤＴＴまたはＴＣＥＰ溶液の適切な体積が５０μｌである、請求項２５記載の方法。
【請求項２８】
少なくとも７つのＳＴＲ遺伝子座が、質問（interrogated）される、請求項２５記載の方法。
【請求項２９】
骨または歯の試料からの核酸のＳＴＲプロフィールを決定するためのキットであって、
ａ．請求項１７記載の脱塩緩衝液；
ｂ．請求項１９に記載の迅速な核酸抽出方法を詳述する小冊子；および
ｃ．迅速ＤＮＡ分析システムにおける抽出された核酸を分析するためのスワブ
を含む前記キット。
【請求項３０】
前記骨または歯の試料を洗浄し清浄化するための溶液をさらに含む請求項２９記載のキット。
【請求項３１】
前記溶液が７０％エタノールおよび１０％漂白剤である請求項２９記載のキット。
【請求項３２】
少なくとも７つのＳＴＲ遺伝子座が質問される請求項２９記載のキット。
【請求項３３】
前記脱塩溶液が０．５Ｍ ＥＤＴＡである請求項２９記載のキット。
【請求項３４】
精液試料からの核酸のＳＴＲプロフィールを決定するためのキットであって、
ａ．ＤＴＴまたはＴＣＥＰ溶液；
ｂ．請求項２５に記載の迅速な核酸抽出方法を詳述する小冊子；および
ｃ．迅速ＤＮＡ分析システムにおける抽出された核酸を分析するためのスワブ
を含む前記キット。
【請求項３５】
前記ＤＴＴまたはＴＣＥＰ溶液が、各々、１５０ｍＭおよび５０ｍＭに等しいまたはそれに近い濃度を有する請求項３４記載のキット。
【請求項３６】
ファブリックまたは他の担体から精液試料を収集するためのツールをさらに含む請求項３４記載のキット。
【請求項３７】
少なくとも７つのＳＴＲが統合される請求項３４記載のキット。
【請求項３８】
性交後の膣および膣頚部のスワブ中の女性上皮細胞から精子細胞を分離する方法であって、
ａ．スワブからの上皮細胞の溶解；
ｂ．溶解された上皮細胞からの無傷の精子細胞の物理的分離；
ｃ．無傷の精子細胞からの溶解された水性上皮画分の除去；
ｄ．洗浄緩衝液による無傷の精子細胞の洗浄；
ｅ．ヌクレアーゼ処理による細胞外ＤＮＡの分解；
ｆ．ヌクレアーゼの不活性化；
ｇ．精子破壊剤による精子細胞の溶解；
ｈ．溶解した精子画分の収集
を含む前記方法。
【請求項３９】
性交後の膣または膣頚部のスワブからの核酸のＳＴＲプロフィールを決定するためのキットであって、
ａ．溶解溶液、
ｂ．回転バスケット、
ｃ．洗浄緩衝液、
ｄ．精子破壊剤、
ｅ．試料収集および請求項３８に記載の迅速な核酸抽出方法を詳述する小冊子、および；
ｆ．抽出された核酸を輸送するための媒体
を含む前記キット。
【請求項４０】
少なくとも７つのＳＴＲが質問される請求項３９記載のキット。
【請求項４１】
精子を含有する疑いがある試料からの核酸抽出方法であって、
ａ．試料を第１の溶解溶液を含有する試料容器に挿入し、撹拌して、第１の混合物を作製し；
ｂ．第１の混合物を遠心分離し；
ｃ．緩衝液で前記第１の容器中のペレットを洗浄し；
ｄ．第１の容器を第２の遠心分離に付し、前記試料中に存在するいずれの精子も再ペレット化し；
ｅ．ＤＮＡを分解するのに十分な量でかつ十分な条件下で、ヌクレアーゼを含有する第２の容器に少なくとも一部分の精子を移し；
ｆ．精子破壊剤を添加し；
ｇ．さらなる処理のための破壊した精子画分を回収する
ことを含む前記方法。
【請求項４２】
前記試料が膣または膣頚部のスワブ試料を含み、破壊した精子画分が核酸の単数もしくは複数のドナーのＳＴＲプロフィールを決定するさらなる分析のために移される、請求項４１記載の方法。
【請求項４３】
核酸の単数もしくは複数のドナーのＳＴＲプロフィールを決定する前記分析が、迅速ＤＮＡ鑑定によって行なわれる、請求項４２記載の方法。
【請求項４４】
前記迅速ＤＮＡ鑑定が、データ分析用の完全自動エキスパートシステムを含む、請求項４３記載の方法。