【手続補正書】
【提出日】令和3年9月22日(2021.9.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療用カーゴ部分を含むウイルスベクターであって、前記治療用カーゴ部分が、
ＰＡＨ配列またはその改変体と；
プロモーターと；
肝臓特異的エンハンサーと、
を含み、
前記ＰＡＨ配列またはその改変体が、前記プロモーターおよび前記肝臓特異的エンハンサーの両方によって作動的に調節される、
ウイルスベクター。
【請求項２】
前記肝臓特異的エンハンサーがプロトロンビンエンハンサーを含む、請求項１に記載のウイルスベクター。
【請求項３】
前記プロモーターが肝臓特異的プロモーターを含む、請求項２に記載のウイルスベクター。
【請求項４】
前記肝臓特異的プロモーターがｈＡＡＴプロモーターを含む、請求項３に記載のウイルスベクター。
【請求項５】
前記治療用カーゴ部分がβグロビンイントロンをさらに含む、請求項１に記載のウイルスベクター。
【請求項６】
前記治療用カーゴ部分が、少なくとも１つの肝細胞核因子結合部位をさらに含む、請求項１に記載のウイルスベクター。
【請求項７】
前記少なくとも１つの肝細胞核因子結合部位が、前記プロトロンビンエンハンサーの上流に配置されている、請求項６に記載のウイルスベクター。
【請求項８】
前記少なくとも１つの肝細胞核因子結合部位が、前記プロトロンビンエンハンサーの下流に配置されている、請求項６に記載のウイルスベクター。
【請求項９】
前記ＰＡＨ配列またはその改変体が、配列番号１、配列番号２、配列番号３または配列番号４と少なくとも８０％または少なくとも８５％または少なくとも９０％または少なくとも９５％のパーセント同一性を有する配列を含む、請求項１に記載のウイルスベクター。
【請求項１０】
前記ＰＡＨ配列またはその改変体が、配列番号１、配列番号２、配列番号３または配列番号４を含む、請求項９に記載のウイルスベクター。
【請求項１１】
前記プロトロンビンエンハンサーが、配列番号５と少なくとも８０％または少なくとも８５％または少なくとも９０％または少なくとも９５％のパーセント同一性を有する配列を含む、請求項２に記載のウイルスベクター。
【請求項１２】
前記プロトロンビンエンハンサーの配列が配列番号５を含む、請求項２に記載のウイルスベクター。
【請求項１３】
前記ｈＡＡＴプロモーターの配列が配列番号６を含む、請求項４に記載のウイルスベクター。
【請求項１４】
βグロビンイントロンの配列が配列番号７または８を含む、請求項５に記載のウイルスベクター。
【請求項１５】
肝細胞核因子結合部位の配列が、配列番号９〜１２のいずれか１つを含む、請求項６に記載のウイルスベクター。
【請求項１６】
前記ウイルスベクターがレンチウイルスベクターである、請求項１に記載のウイルスベクター。
【請求項１７】
標的細胞に感染することが可能なレンチウイルス粒子であって、前記レンチウイルス粒子が、
前記標的細胞に感染することに関して最適化されたエンベロープタンパク質と；
請求項１に記載のウイルスベクターと；
を含む、レンチウイルス粒子。
【請求項１８】
前記標的細胞が、肝細胞、筋肉細胞、上皮細胞、内皮細胞、神経細胞、神経内分泌細胞、内分泌細胞、リンパ球、骨髄系細胞、実質臓器内に存在する細胞または造血系統の細胞、造血幹細胞もしくは前駆造血幹細胞である、請求項１７に記載のレンチウイルス粒子。
【請求項１９】
被験体中のＰＫＵを処置するための、請求項１７または１８に記載のレンチウイルス粒子を含む組成物であって、治療有効量の前記レンチウイルス粒子が前記被験体に投与されることを特徴とする、組成物。
【請求項２０】
被験体中のＰＫＵを予防するための、請求項１７または１８に記載のレンチウイルス粒子を含む組成物であって、治療有効量の前記レンチウイルス粒子が前記被験体に投与されることを特徴とする、組成物。
【請求項２１】
ＰＫＵ表現型と相関する、前記被験体におけるＰＫＵ遺伝子型が診断されることを特徴とする、請求項１９または２０に記載の組成物。
【請求項２２】
前記被験体が子宮内に存在する、請求項１９または２０に記載の組成物。
【請求項２３】
前記診断が、前記被験体の出生前スクリーニングの間に行われる、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２４】
前記診断がインビトロで行われる、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２５】
前記治療的有効量の前記レンチウイルス粒子が、複数の単回用量の前記レンチウイルス粒子を含む、請求項１９または２０に記載の組成物。
【請求項２６】
前記治療的有効量の前記レンチウイルス粒子が、単回用量の前記レンチウイルス粒子を含む、請求項１９または２０に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
本開示の態様において、被験体中のＰＫＵを処置する方法が開示されている。該方法は、治療的有効量の本明細書に記載されたレンチウイルス粒子を被験体に投与することを含む。本開示の態様において、被験体中のＰＫＵを予防する方法は、治療的有効量の本明細書に記載されたレンチウイルス粒子を被験体に投与することを含む。実施形態において、該方法は、ＰＫＵ表現型と相関する、被験体においてＰＫＵ遺伝子型を診断することをさらに含む。実施形態において、被験体は子宮内に存在する。実施形態において、診断は被験体の出生前スクリーニングの間に行われる。実施形態において、診断はインビトロで行われる。実施形態において、治療的有効量のレンチウイルス粒子は、複数の単回用量のレンチウイルス粒子を含む。実施形態において、治療的有効量のレンチウイルス粒子は、単回用量のレンチウイルス粒子を含む。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
治療用カーゴ部分を含むウイルスベクターであって、前記治療用カーゴ部分が、
ＰＡＨ配列またはその改変体と；
プロモーターと；
肝臓特異的エンハンサーと、
を含み、
前記ＰＡＨ配列またはその改変体が、前記プロモーターおよび前記肝臓特異的エンハンサーの両方によって作動的に調節される、
ウイルスベクター。
（項目２）
前記肝臓特異的エンハンサーがプロトロンビンエンハンサーを含む、項目１に記載のウイルスベクター。
（項目３）
前記プロモーターが肝臓特異的プロモーターを含む、項目２に記載のウイルスベクター。
（項目４）
前記肝臓特異的プロモーターがｈＡＡＴプロモーターを含む、項目３に記載のウイルスベクター。
（項目５）
前記ＰＡＨ配列またはその改変体が末端切断されている、項目１に記載のウイルスベクター。
（項目６）
前記ＰＡＨ配列またはその改変体の末端切断された部分が、前記ＰＡＨ配列またはその改変体の３’非翻訳領域（ＵＴＲ）である、項目５に記載のウイルスベクター。
（項目７）
前記治療用カーゴ部分がβグロビンイントロンをさらに含む、項目１に記載のウイルスベクター。
（項目８）
前記治療用カーゴ部分が、少なくとも１つの肝細胞核因子結合部位をさらに含む、項目１に記載のウイルスベクター。
（項目９）
前記少なくとも１つの肝細胞核因子結合部位が、前記プロトロンビンエンハンサーの上流に配置されている、項目８に記載のウイルスベクター。
（項目１０）
前記少なくとも１つの肝細胞核因子結合部位が、前記プロトロンビンエンハンサーの下流に配置されている、項目８に記載のウイルスベクター。
（項目１１）
前記ＰＡＨ配列またはその改変体が、配列番号１、配列番号２、配列番号３または配列番号４と少なくとも８０％または少なくとも８５％または少なくとも９０％または少なくとも９５％のパーセント同一性を有する配列を含む、項目１に記載のウイルスベクター。
（項目１２）
前記ＰＡＨ配列またはその改変体が、配列番号１、配列番号２、配列番号３または配列番号４を含む、項目１１に記載のウイルスベクター。
（項目１３）
前記プロトロンビンエンハンサーが、配列番号５と少なくとも８０％または少なくとも８５％または少なくとも９０％または少なくとも９５％のパーセント同一性を有する配列を含む、項目２に記載のウイルスベクター。
（項目１４）
前記プロトロンビンエンハンサーの配列が配列番号５を含む、項目２に記載のウイルスベクター。
（項目１５）
前記ｈＡＡＴプロモーターの配列が配列番号６を含む、項目４に記載のウイルスベクター。
（項目１６）
βグロビンイントロンの配列が配列番号７または８を含む、項目５に記載のウイルスベクター。
（項目１７）
肝細胞核因子結合部位の配列が、配列番号９〜１２のいずれか１つを含む、項目６に記載のウイルスベクター。
（項目１８）
前記治療用カーゴ部分が、少なくとも１つの所定の相補的ｍＲＮＡ配列に結合することが可能な少なくとも１つの低分子ＲＮＡ配列をさらに含む、項目１に記載のウイルスベクター。
（項目１９）
前記少なくとも１つの低分子ＲＮＡ配列が、完全長ＵＴＲを含有する相補的ｍＲＮＡ配列を標的とする、項目１８に記載のウイルスベクター。
（項目２０）
前記少なくとも１つの所定の相補的ｍＲＮＡ配列がＰＡＨｍＲＮＡ配列である、項目１８に記載のウイルスベクター。
（項目２１）
前記少なくとも１つの低分子ＲＮＡ配列がｓｈＲＮＡを含む、項目１８に記載のウイルスベクター。
（項目２２）
前記少なくとも１つの低分子ＲＮＡ配列が第一のプロモーターの調節下にあり、かつ前記ＰＡＨ配列またはその改変体が第二のプロモーターの調節下にある、項目１８に記載のウイルスベクター。
（項目２３）
前記第一のプロモーターがＨ１プロモーターを含む、項目２０に記載のウイルスベクター。
（項目２４）
前記第二のプロモーターが肝臓特異的プロモーターを含む、項目２０に記載のウイルスベクター。
（項目２５）
前記肝臓特異的プロモーターがｈＡＡＴプロモーターを含む、項目２４に記載のウイルスベクター。
（項目２６）
前記少なくとも１つの低分子ＲＮＡ配列が、配列番号１３または配列番号１４と少なくとも８０％または少なくとも８５％または少なくとも９０％または少なくとも９５％のパーセント同一性を有する配列を含む、項目１８に記載のウイルスベクター。
（項目２７）
前記少なくとも１つの低分子ＲＮＡ配列が配列番号１３または配列番号１４を含む、項目２１に記載のウイルスベクター。
（項目２８）
前記ウイルスベクターがレンチウイルスベクターである、項目１に記載のウイルスベクター。
（項目２９）
標的細胞に感染することが可能なレンチウイルス粒子であって、前記レンチウイルス粒子が、
前記標的細胞に感染することに関して最適化されたエンベロープタンパク質と；
項目１に記載のウイルスベクターと；
を含む、レンチウイルス粒子。
（項目３０）
前記標的細胞が、肝細胞、筋肉細胞、上皮細胞、内皮細胞、神経細胞、神経内分泌細胞、内分泌細胞、リンパ球、骨髄系細胞、実質臓器内に存在する細胞または造血系統の細胞、造血幹細胞もしくは前駆造血幹細胞である、項目２９に記載のレンチウイルス粒子。
（項目３１）
被験体中のＰＫＵを処置する方法であって、治療的有効量の項目２９または３０に記載のレンチウイルス粒子を前記被験体に投与することを含む、方法。
（項目３２）
被験体中のＰＫＵを予防する方法であって、治療的有効量の項目２９または３０に記載のレンチウイルス粒子を前記被験体に投与することを含む、方法。
（項目３３）
ＰＫＵ表現型と相関する、前記被験体においてＰＫＵ遺伝子型を診断することをさらに含む、項目３１または３２に記載の方法。
（項目３４）
前記被験体が子宮内に存在する、項目３１または３２に記載の方法。
（項目３５）
前記診断することが、前記被験体の出生前スクリーニングの間に行われる、項目３３に記載の方法。
（項目３６）
前記診断することがインビトロで行われる、項目３３に記載の方法。
（項目３７）
前記治療的有効量の前記レンチウイルス粒子が、複数の単回用量の前記レンチウイルス粒子を含む、項目３１または３２に記載の方法。
（項目３８）
前記治療的有効量の前記レンチウイルス粒子が、単回用量の前記レンチウイルス粒子を含む、項目３１または３２に記載の方法。