【手続補正書】
【提出日】令和3年10月27日(2021.10.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
塩基性塩培地及び少なくとも1つの添加剤を含む培地調合物であって、前記塩基性塩培地が、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、塩化カリウム（ＫＣｌ）、塩化カルシウム二水和物（ＣａＣｌ2・2Ｈ2Ｏ）、塩化マグネシウム、六水和物（ＭｇＣｌ2・6Ｈ2Ｏ）、重炭酸ナトリウム（ＮａＨＣＯ3）、リン酸ナトリウム一塩基性脱水物（ＮａＨ2ＰＯ4・2Ｈ2Ｏ）、リン酸二水素カリウム（ＫＨ2ＰＯ4）、フルクトース、ソルビトール、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、クエン酸、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも1つの成分を含み、かつ前記少なくとも1つの添加剤が、ホスファチジルセリン（ＰＳ）及びＮＳＡＩＤである、前記培地調合物。
【請求項２】
抗酸化剤、塩化亜鉛、コエンザイムＱ10、クマリン化合物、ピラノクマリン化合物、リノレン酸、脂肪酸、Ｄ−アスパラギン酸、フッ化ナトリウム、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも1つの添加剤を更に含む、請求項1に記載の培地調合物。
【請求項３】
バッファーを更に含み、前記バッファーがＴＲＩＳまたはＨＥＰＥＳである、請求項1または2に記載の培地調合物。
【請求項４】
前記ＮＳＡＩＤがアセチルサリチル酸である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の培地調合物。
【請求項５】
前記ピラノクマリン化合物がデクルシンである、請求項2〜4のいずれか一項に記載の培地調合物。
【請求項６】
フッ化ナトリウム濃度が約0ｍＭ〜約6ｍＭである、請求項1〜5のいずれか一項に記載の培地調合物。
【請求項７】
哺乳動物生殖細胞の活性を増強させる、胚細胞由来の接合子／胚盤胞の形成を増強させる、精子細胞の生存能力、移動性、および／もしくは受精能力を増強させる、精子を受精適格状態に維持する、または凍結融解プロセスによる細胞の減損もしくはＤＮＡの損傷を軽減する、請求項1〜6のいずれか一項に記載の培地調合物。
【請求項８】
受精適格性が、前記培地調合物に曝露された精子細胞の、人工授精、ならびに体外および生体内の両方における受精、卵割または胚盤胞変換を介して妊娠を生起させる能力である、かつ／または
細胞生存能力を少なくとも24時間延長する、かつ／または
前記哺乳動物生殖細胞が、配偶子、一倍体細胞、胚細胞、性細胞、精子細胞、および卵細胞からなる群から選択される、かつ／または
前記哺乳動物生殖細胞が、雄哺乳動物由来の射精液に由来し得る、
請求項7に記載の培地調合物。
【請求項９】
哺乳動物生殖細胞と、請求項1〜8のいずれか一項に記載の培地調合物とを含む、哺乳動物生殖細胞組成物。
【請求項１０】
雄哺乳動物由来の射精液を含む、請求項9に記載の哺乳動物生殖細胞組成物。
【請求項１１】
凍結保存されている、請求項10に記載の哺乳動物生殖細胞組成物。
【請求項１２】
哺乳動物生殖細胞試料を準備するステップと、前記哺乳動物生殖細胞試料を処理するステップと、請求項1〜8のいずれか一項に記載の培地調合物を処理された哺乳動物生殖細胞試料に添加して哺乳動物生殖細胞組成物を提供するステップとを含む、哺乳動物生殖細胞を処理する方法。
【請求項１３】
前記処理が、精液試料の採取、雌雄鑑別、選別、分離、凍結、人工授精、体外受精、冷却、輸送、および関連プロセスからなる群から選択される少なくとも1つのステップを含む、請求項12に記載の方法。
【請求項１４】
前記処理が、精液試料を雌雄鑑別して精子細胞組成物を準備するステップを含み、前記雌雄鑑別が、液滴選別、機械的選別、マイクロ流体処理、マイクロチップ処理、ジェットおよび空気処理、フローサイトメトリー処理、ならびにレーザーアブレーションの1つまたは複数によって達成される、請求項12または13に記載の方法。
【請求項１５】
前記哺乳動物生殖細胞が、雄牛または雄豚に由来する、請求項12〜14のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記処理された哺乳動物生殖細胞が、容器、チューブ、もしくはストローに捕集される、かつ／または
前記哺乳動物生殖細胞が、配偶子、一倍体細胞、胚細胞、性細胞、精子細胞、および卵細胞からなる群から選択される、
請求項12〜15のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記哺乳動物生殖細胞が精子細胞であり、かつ前記生殖細胞組成物が精子細胞組成物である、請求項16に記載の方法。
【請求項１８】
雌哺乳動物から得られた卵を準備し、前記雌哺乳動物と同じ種の雄哺乳動物由来の請求項17に記載の精子細胞組成物を準備し、そして1つ以上の卵を前記精子細胞組成物と混合するステップを含む、1つ以上の卵を受精させる方法。
【請求項１９】
前記哺乳動物が雄牛または雄豚である、請求項18に記載の方法。
【請求項２０】
請求項17に記載の方法によって提供される精子細胞組成物を生殖補助医療技術において使用することを含む、胚を生成する方法であって、前記生殖補助医療技術が、体外受精（ＩＶＦ）、人工授精（ＡＩ）、細胞質内精子注入（ＩＣＳＩ）、複数回の排卵および胚移植（ＭＯＥＴ）、ならびに他の胚移植技術からなる群から選択される、方法。
【請求項２１】
前記塩基性塩培地が、精巣上体尾部血漿（ＣＥＰ2）培地を含む、請求項1に記載の培地調合物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３７】
[本発明1001]
塩基性塩培地を含む培地調合物であって、前記塩基性塩培地が、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、塩化カリウム（ＫＣｌ）、塩化カルシウム二水和物（ＣａＣｌ2・2Ｈ2Ｏ）、塩化マグネシウム、六水和物（ＭｇＣｌ2・6Ｈ2Ｏ）、重炭酸ナトリウム（ＮａＨＣＯ3）、リン酸ナトリウム一塩基性脱水物（ＮａＨ2ＰＯ4・2Ｈ2Ｏ）、リン酸二水素カリウム（ＫＨ2ＰＯ4）、フルクトース、ソルビトール、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、クエン酸、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも1つの成分を含む、前記培地調合物。
[本発明1002]
抗酸化剤、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、塩化亜鉛、コエンザイムＱ10、クマリン化合物、ピラノクマリン化合物、ＮＳＡＩＤ、リノレン酸、脂肪酸、Ｄ−アスパラギン酸、フッ化ナトリウム、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも1つの添加剤を更に含む、本発明1001の培地調合物。
[本発明1003]
バッファーを更に含む、本発明1001または1002の培地調合物。
[本発明1004]
前記バッファーがＴＲＩＳまたはＨＥＰＥＳである、本発明1003の培地調合物。
[本発明1005]
前記ＮＳＡＩＤがアセチルサリチル酸である、本発明1002〜1004のいずれかの培地調合物。
[本発明1006]
前記ピラノクマリン化合物がデクルシンである、本発明1002〜1005のいずれかの培地調合物。
[本発明1007]
フッ化ナトリウム濃度が約0ｍＭ〜約6ｍＭである、本発明1002〜1006のいずれかの培地調合物。
[本発明1008]
哺乳動物生殖細胞の活性を増強させる、胚細胞由来の接合子／胚盤胞の形成を増強させる、精子細胞の生存能力、移動性、および／もしくは受精能力を増強させる、精子を受精適格状態に維持する、または凍結融解プロセスによる細胞の減損もしくはＤＮＡの損傷を軽減する、本発明1002〜1007のいずれかの培地調合物。
[本発明1009]
受精適格性が、前記培地調合物に曝露された精子細胞の、人工授精、ならびに体外および生体内の両方における受精、卵割または胚盤胞変換を介して妊娠を生起させる能力である、本発明1008の培地調合物。
[本発明1010]
細胞生存能力を少なくとも24時間延長する、本発明1008または1009の培地調合物。
[本発明1011]
前記哺乳動物生殖細胞が、配偶子、一倍体細胞、胚細胞、性細胞、精子細胞、および卵細胞からなる群から選択される、本発明1008〜1010のいずれかの培地調合物。
[本発明1012]
前記哺乳動物生殖細胞が、雄哺乳動物由来の射精液に由来し得る、本発明1008〜1011のいずれかの培地調合物。
[本発明1013]
哺乳動物生殖細胞と、本発明1002〜1010のいずれかの培地調合物とを含む、哺乳動物生殖細胞組成物。
[本発明1014]
雄哺乳動物由来の射精液と、本発明1002〜1010のいずれかの培地調合物とを含む、射精液組成物。
[本発明1015]
凍結保存されている、本発明1014の射精液組成物。
[本発明1016]
哺乳動物生殖細胞試料を準備するステップと、前記哺乳動物生殖細胞試料を処理するステップと、本発明1002〜1010のいずれかの培地調合物を添加するステップとを含む、哺乳動物生殖細胞を処理する方法。
[本発明1017]
前記処理が、精液試料の採取、雌雄鑑別、選別、分離、凍結、人工授精、体外受精、冷却、輸送、および関連プロセスからなる群から選択される少なくとも1つのステップを含む、本発明1016の方法。
[本発明1018]
前記雌雄鑑別が、液滴選別、機械的選別、マイクロ流体処理、マイクロチップ処理、ジェットおよび空気処理、フローサイトメトリー処理、ならびにレーザーアブレーションによって達成される、本発明1017の方法。
[本発明1019]
前記哺乳動物生殖細胞が、雄牛または雄豚に由来する、本発明1016〜1018のいずれかの方法。
[本発明1020]
前記処理された哺乳動物生殖細胞が、容器、チューブ、またはストローに捕集される、本発明1016〜1019のいずれかの方法。
[本発明1021]
前記哺乳動物生殖細胞が、配偶子、一倍体細胞、胚細胞、性細胞、精子細胞、および卵細胞からなる群から選択される、本発明1016〜1020のいずれかの方法。
[本発明1022]
本発明1016〜1021のいずれかの方法により生成される、精子細胞組成物。
[本発明1023]
雌哺乳動物から得られた卵を準備し、前記雌哺乳動物と同じ種の雄哺乳動物由来の本発明1022の精子細胞組成物を準備し、そして1つ以上の卵を前記精子組成物と混合するステップを含む、1つ以上の卵を受精させる方法。
[本発明1024]
前記哺乳動物が雄牛または雄豚である、本発明1023の方法。
[本発明1025]
本発明1022の精子細胞組成物を生殖補助医療技術に使用することを含む、胚を生成する方法。
[本発明1026]
前記生殖補助医療技術が、体外受精（ＩＶＦ）、人工授精（ＡＩ）、細胞質内精子注入（ＩＣＳＩ）、複数回の排卵および胚移植（ＭＯＥＴ）、ならびに他の胚移植技術からなる群から選択される、本発明1025の方法。
[本発明1027]
前記生殖補助医療技術が、体外受精（ＩＶＦ）または人工授精（ＡＩ）である、本発明1026の方法。
[本発明1028]
精子細胞試料を準備するステップと、前記精子細胞試料を少なくとも1つの亜集団に雌雄鑑別するステップと、前記精子細胞試料に対し、抗酸化剤、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、ピラノクマリン化合物、塩化亜鉛、コエンザイムＱ10、ＮＳＡＩＤ、リノレン酸、脂肪酸、Ｄ−アスパラギン酸、フッ化ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも1つの添加物を添加するステップとを含む、精子細胞集団を雌雄鑑別する方法。
[本発明1029]
前記ＮＳＡＩＤがアセチルサリチル酸である、本発明1028の方法。
[本発明1030]
前記ピラノクマリン化合物がデクルシンである、本発明1028または1029の方法。
[本発明1031]
前記精子細胞集団が、精液成分および／または未処理射精液を更に含む、本発明1028〜1030のいずれかの方法。
[本発明1032]
前記雌雄鑑別された亜集団が、Ｘ染色体保有またはＹ染色体保有精子細胞の少なくとも1つの性が富化された集団を含む、本発明1028〜1031のいずれかの方法。
[本発明1033]
本発明1028〜1032のいずれかの方法により生成される、精子細胞組成物。
[本発明1034]
雌哺乳動物から得られた卵を準備するステップと、前記雌哺乳動物と同じ種の雄哺乳動物由来の本発明1033の精子細胞組成物を準備するステップと、1つ以上の卵を前記精子組成物と混合するステップとを含む、1つ以上の卵を受精させる方法。
[本発明1035]
本発明1033の精子細胞組成物を生殖補助医療技術に使用することを含む、胚を生成する方法。
[本発明1036]
前記生殖補助医療技術が、体外受精（ＩＶＦ）、人工授精（ＡＩ）、細胞質内精子注入（ＩＣＳＩ）、複数回の排卵および胚移植（ＭＯＥＴ）、ならびに他の胚移植技術からなる群から選択される、本発明1035の方法。
[本発明1037]
前記生殖補助医療技術が、体外受精（ＩＶＦ）または人工授精（ＡＩ）である、本発明1036の方法。
[本発明1038]
前記塩基性塩培地が、精巣上体尾部血漿（ＣＥＰ2）培地と同様に調合される、本発明1001の方法。
[本発明1039]
前記塩基性塩培地が、抗酸化剤、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、デクルシン、塩化亜鉛、コエンザイムＱ10、クマリン化合物、ピラノクマリン化合物、ＮＳＡＩＤ、リノレン酸、脂肪酸、Ｄ−アスパラギン酸、フッ化ナトリウム、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも1つの添加剤を補充したものである、本発明1038の方法。
[本発明1040]
前記ＮＳＡＩＤがアセチルサリチル酸である、本発明1039の方法。
[本発明1041]
哺乳動物生殖細胞が、前記培地中で少なくとも24時間にわたって存続延長される、本発明1039または1040の方法。
[本発明1042]
前記哺乳動物生殖細胞が、配偶子、一倍体細胞、胚細胞、性細胞、精子細胞、および卵細胞からなる群から選択される、本発明1039〜1041のいずれかの方法。
[本発明1043]
哺乳動物生殖細胞と、本発明1039または1040の培地調合物とを含む、哺乳動物生殖細胞組成物。
[本発明1044]
雄哺乳動物由来の射精液と、本発明1039または1040の培地調合物とを含む、射精液組成物。
[本発明1045]
哺乳動物生殖細胞試料を準備するステップと、前記哺乳動物生殖細胞試料を処理するステップと、本発明1039または1040の培地調合物を添加するステップとを含む、哺乳動物生殖細胞を処理する方法。
[本発明1046]
前記処理が、精液試料の採取、雌雄鑑別、選別、分離、凍結、人工授精、体外受精、冷却、輸送、および関連プロセスからなる群から選択される少なくとも1つのステップを含む、本発明1045の方法。
[本発明1047]
前記雌雄鑑別が、液滴選別、機械的選別、マイクロ流体処理、マイクロチップ処理、ジェットおよび空気処理、フローサイトメトリー処理、ならびにレーザーアブレーションによって達成される、本発明1046の方法。
[本発明1048]
前記哺乳動物生殖細胞が、雄牛または雄豚に由来する、本発明1045〜1047のいずれかの方法。
[本発明1049]
前記処理された哺乳動物生殖細胞が、容器、チューブ、またはストローに捕集される、本発明1045〜1048のいずれかの方法。
[本発明1050]
前記哺乳動物生殖細胞が、配偶子、一倍体細胞、胚細胞、性細胞、精子細胞、および卵細胞からなる群から選択される、本発明1045〜1049のいずれかの方法。
[本発明1051]
本発明1050の方法により生成される、精子細胞組成物。
[本発明1052]
雌哺乳動物から得られた卵を準備し、前記雌哺乳動物と同じ種の雄哺乳動物由来の本発明1051の精子細胞組成物を準備し、そして1つ以上の卵を前記精子組成物と混合するステップを含む、1つ以上の卵を受精させる方法。
[本発明1053]
前記哺乳動物が雄牛または雄豚である、本発明1052の方法。
[本発明1054]
本発明1051の精子細胞組成物を生殖補助医療技術に使用することを含む、胚を生成する方法。
[本発明1055]
前記生殖補助医療技術が、体外受精（ＩＶＦ）、人工授精（ＡＩ）、細胞質内精子注入（ＩＣＳＩ）、複数回の排卵および胚移植（ＭＯＥＴ）、ならびに他の胚移植技術からなる群から選択される、本発明1054の方法。
[本発明1056]
前記生殖補助医療技術が、体外受精（ＩＶＦ）または人工授精（ＡＩ）である、本発明1055の方法。
[本発明1057]
精子細胞試料を準備するステップと、前記精子細胞試料を少なくとも1つの亜集団に雌雄鑑別するステップと、本発明1039または1040の培地調合物を添加するステップとを含む、精子細胞集団を雌雄鑑別する方法。
[本発明1058]
前記精子細胞集団が、精液成分および／または未処理射精液を更に含む、本発明1057の方法。
[本発明1059]
前記雌雄鑑別された亜集団が、Ｘ染色体保有またはＹ染色体保有精子細胞の少なくとも1つの性が富化された集団を含む、本発明1057または1058の方法。
[本発明1060]
本発明1057〜1059のいずれかの方法により生成される、精子細胞組成物。
[本発明1061]
雌哺乳動物から得られた卵を準備するステップと、前記雌哺乳動物と同じ種の雄哺乳動物由来の本発明1060の精子細胞組成物を準備するステップと、1つ以上の卵を前記精子組成物と混合するステップとを含む、1つ以上の卵を受精させる方法。
[本発明1062]
本発明1060の精子組成物を生殖補助医療技術に使用することを含む、胚を生成する方法。
[本発明1063]
前記生殖補助医療技術が、体外受精（ＩＶＦ）、人工授精（ＡＩ）、細胞質内精子注入（ＩＣＳＩ）、複数回の排卵および胚移植（ＭＯＥＴ）、ならびに他の胚移植技術からなる群から選択される、本発明1062の方法。
[本発明1064]
前記生殖補助医療技術が、体外受精（ＩＶＦ）または人工授精（ＡＩ）である、本発明1063の方法。
[本発明1065]
雌哺乳動物から得られた卵を準備するステップと、
前記雌哺乳動物と同じ種の雄哺乳動物由来の精子試料を準備するステップであって、前記精子試料が、精子細胞と、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、1つ以上のクマリン化合物またはピラノクマリン化合物、塩化亜鉛、コエンザイムＱ10、1つ以上のＮＳＡＩＤ、リノレン酸、脂肪酸、Ｄ−アスパラギン酸、フッ化ナトリウム、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも1つの添加物とを含む、前記準備するステップと、
1つ以上の卵を前記精子試料と混合するステップと
を含む、生殖補助医療技術を使用して1つ以上の卵を受精させる方法。
[本発明1066]
前記ＮＳＡＩＤがアセチルサリチル酸である、本発明1065の方法。
[本発明1067]
前記ピラノクマリン化合物がデクルシンである、本発明1065または1066の方法。
[本発明1068]
前記生殖補助医療技術が、体外受精（ＩＶＦ）、人工授精（ＡＩ）、細胞質内精子注入（ＩＣＳＩ）、複数回の排卵および胚移植（ＭＯＥＴ）、ならびに他の胚移植技術からなる群から選択される、本発明1065〜1067のいずれかの方法。
[本発明1069]
前記生殖補助医療技術が、体外受精（ＩＶＦ）または人工授精（ＡＩ）である、本発明1068の方法。
[本発明1070]
雄哺乳動物から射精液を得ることと、前記射精液を、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、1つ以上のクマリン化合物またはピラノクマリン化合物、塩化亜鉛、コエンザイムＱ10、1つ以上のＮＳＡＩＤ、リノレン酸、脂肪酸、Ｄ−アスパラギン酸、フッ化ナトリウム、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも1つの添加剤を含む培地調合物に配合することとを含む、精子試料を保管する方法。
[本発明1071]
前記ＮＳＡＩＤがアセチルサリチル酸である、本発明1070の方法。
[本発明1072]
前記ピラノクマリン化合物がデクルシンである、本発明1070または1071の方法。
[本発明1073]
培地に補充するためのキットであって、抗酸化剤、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、デクルシン、塩化亜鉛、コエンザイムＱ10、クマリン化合物、ピラノクマリン化合物、ＮＳＡＩＤ、リノレン酸、脂肪酸、Ｄ−アスパラギン酸、フッ化ナトリウム、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも1つの添加剤を含む、前記キット。
[本発明1074]
前記ＮＳＡＩＤがアセチルサリチル酸である、本発明1070のキット。
[本発明1075]
前記ピラノクマリン化合物がデクルシンである、本発明1073または1074のキット。
[本発明1076]
培地を調製すること、哺乳動物生殖細胞を処理すること、1つ以上の卵を受精させること、または胚を生成することに関する指示書を更に含む、本発明1073〜1075のいずれかのキット。
[本発明1077]
多成分ストック溶液から調製される、本発明1001〜1012のいずれかの培地調合物。
他の態様は、下記の説明、ならびに例示的態様および実施形態を検討することにより、当業者にとって明らかになるであろう。