【手続補正書】
【提出日】令和3年11月15日(2021.11.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
δ３γδＴＣＲに特有のエピトープに結合する抗体またはその断片。
【請求項２】
前記抗体またはその断片が、
ｉ）δ３−０８、δ３−２０、δ３−２３、δ３−３１、δ３−４２、δ３−４７、及びδ３−５８からなる群から選択される抗体、
ｉｉ）δ３−０８、δ３−２３、δ３−３１、δ３−４２、δ３−４７、及びδ３−５８からなる群から選択される抗体、
ｉｉｉ）δ３−０８、δ３−２３、δ３−４２、及びδ３−５８からなる群から選択される抗体、
ｉｖ）δ３−２３、δ３−４２、及びδ３−５８からなる群から選択される抗体、
ｖ）δ３−３１及びδ３−４２からなる群から選択される抗体、
ｖｉ）抗体δ３−０８、または
ｖｉｉ）抗体δ３−３１、
と同じ若しくは本質的に同じエピトープに結合する、又はこれらの相補性決定領域を含む、請求項１に記載の抗体またはその断片。
【請求項３】
前記抗体またはその断片が、γδＴＣＲのＶδ３に特異的に結合し、
前記抗体が、
ｉ）Ｖδ３のγ鎖結合境界面から遠位の領域；
ｉｉ）ＩＭＧＴ命名法による前記γδＴＣＲの前記Ｖδ３のβストランドＤ及びＥ；
ｉｉｉ）ＩＭＧＴ命名法による前記γδＴＣＲの前記Ｖδ３のβストランドＣ’’及びＤならびにβストランドＥとＦとの間のループ；又は
ｉｖ）ＩＭＧＴ命名法による前記γδＴＣＲの前記Ｖδ３のβストランドＡ、Ｂ、Ｄ、及びＥ
に結合してもよい、
請求項１に記載の抗体。
【請求項４】
前記抗体またはその断片が、γδＴ細胞及びαβＴ細胞を含む混合細胞集団中で、αβＴ細胞と比較してδ３γδＴ細胞を選択的に増殖させる、請求項１〜３のいずれか１項に記載の抗体またはその断片。
【請求項５】
前記抗体またはその断片が、δ３γδＴＣＲに結合するものである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の抗体またはその断片。
【請求項６】
前記δ３γδＴＣＲが、δ３γδＴ細胞の表面上で発現される、請求項５に記載の抗体またはその断片。
【請求項７】
前記抗体またはその断片が、人工抗原提示細胞（ａＡＰＣ）等の抗原提示細胞（ＡＰＣ）の細胞外表面に結合するものである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の抗体またはその断片。
【請求項８】
前記抗体またはその断片が、前記ＡＰＣまたはａＡＰＣの膜においてアンカーされる、または、
前記抗体またはその断片のＦｃ領域が、前記ＡＰＣまたはａＡＰＣにより発現されるＦｃ受容体に結合するものである、請求項７に記載の抗体またはその断片。
【請求項９】
前記抗体またはその断片が、
ｉ）δ３−０８、δ３−２０、δ３−２３、δ３−３１、δ３−４２、δ３−４７、及びδ３−５８からなる群から選択される抗体、
ｉｉ）δ３−０８、δ３−２３、δ３−３１、δ３−４２、δ３−４７、及びδ３−５８からなる群から選択される抗体、
ｉｉｉ）δ３−０８、δ３−２３、δ３−４２、及びδ３−５８からなる群から選択される抗体、
ｉｖ）δ３−２３、δ３−４２、及びδ３−５８からなる群から選択される抗体、
ｖ）δ３−３１及びδ３−４２からなる群から選択される抗体、
ｖｉ）抗体δ３−０８、または
ｖｉｉ）抗体δ３−３１、
に対して結合を競合する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の抗体またはその断片。
【請求項１０】
前記抗体またはその断片が、δ３γδＴ細胞の特異的活性化因子である、請求項１〜９のいずれか１項に記載の抗体またはその断片。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の抗体またはその断片のうちのいずれか１つをコードする核酸であって、前記核酸が、異種プロモーターに作動可能に連結されている、前記核酸。
【請求項１２】
請求項１〜１０に記載の抗体もしくはその断片のうちのいずれか１つまたは請求項１１に記載の核酸を含む、宿主細胞。
【請求項１３】
前記宿主細胞が人工抗原提示細胞（ａＡＰＣ）である、請求項１２に記載の宿主細胞。
【請求項１４】
δ３γδＴＣＲに特有のエピトープに結合する抗体またはその断片の作製方法であって、前記抗体またはその断片を産生させるのに十分な条件下で請求項１２に記載の宿主細胞を培養することを含む、前記方法。
【請求項１５】
濃縮γδＴ細胞集団を生産するためのエクスビボ方法であって、γδＴ細胞を含む第１の細胞集団を、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の１つまたは複数の抗体またはその断片と接触させることを含む、前記方法。
【請求項１６】
前記第１の細胞集団が、αβＴ細胞及びγδＴ細胞を含む単離された混合細胞集団である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記第１の細胞集団が、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の試料を含むか、または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の試料であるか、または、
前記第１の細胞集団が、末梢血試料、白血球アフェレーシス試料、臍帯血試料、腫瘍試料、または組織試料から選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記第１の細胞集団が、１％未満のδ３γδＴ細胞を含む、請求項１６又は１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記第１の細胞集団が、培養されていない初代細胞または継代されていない初代細胞を含む、請求項１５〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記方法が、前記単離された混合細胞集団を、前記１つまたは複数の抗体またはその断片と直接接触させることを含む、請求項１６〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記第１の細胞集団が、１つまたは複数の操作型γδＴ細胞を含む集団である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２２】
前記第１の細胞集団は、腫瘍認識部分を発現するように操作されており、好ましくは、
ａ．操作されたγδＴ細胞は、ＨＬＡ遺伝子座が欠如している；
ｂ．操作されたγδＴ細胞は、普遍的ドナー細胞である；
ｃ．操作されたγδＴ細胞は、腫瘍特異的同種γδT細胞である；又は
ｄ．操作されたγδＴ細胞は、２又はそれ以上の腫瘍認識部分を発現するように操作されており、
好ましくは、
ｉ．２又はそれ以上の腫瘍認識部分は異なっており、それぞれの異なる腫瘍認識部分は、同一抗原の異なるエピトープを認識するよう操作されているか；又は
ｉｉ．２又はそれ以上の腫瘍認識部分は異なっており、それぞれの異なる腫瘍認識部分は、異なる抗原の異なるエピトープを認識するよう操作されている、
請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
ａ．腫瘍認識部分は、腫瘍浸潤リンパ球に由来する；
ｂ．腫瘍認識部分は、Ｔ細胞からクローニングされている；
ｃ．腫瘍認識部分は、操作されたＴ細胞受容体であり、好ましくは、
ｉ．操作されたＴ細胞受容体は、ヒト又はマウスＴ細胞受容体である、
ｉｉ．操作されたＴ細胞受容体は、操作されたαβＴＣＲである、又は、
ｉｉｉ．操作されたＴ細胞受容体は、操作されたγδＴＣＲである、
ｄ．腫瘍認識部分は、腫瘍抗原を認識する、抗体、抗体断片、ｓｃＦｖ、単一ドメイン抗体、Ｆａｂである；又は、
ｅ．腫瘍抗原は、ペプチドＭＨＣ複合体であり、腫瘍認識部分は、ペプチドＭＨＣ複合体を認識する、
請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記第１の細胞集団は、抗原認識部分を発現するように操作されており、抗原認識部分は、自己免疫疾患と関連する抗原を認識する、又は、抗原認識部分は、病原体抗原を認識し、病原体抗原は、病原性細菌又はウイルスに由来する、
請求項２１に記載の方法。
【請求項２５】
前記第１の細胞集団が、増殖させたγδＴ細胞の第１の集団であり、
前記方法が、第１のγδＴ細胞増殖及び第２のγδＴ細胞増殖を含んでもよい、
請求項１５または２１に記載の方法。
【請求項２６】
（ｉ）前記方法が、少なくとも１０８個のδ３γδＴ細胞を含む濃縮γδＴ細胞集団を生産することを含み、
少なくとも１０８個のδ３γδＴ細胞を含む前記濃縮γδＴ細胞集団が、１２〜２１日以内に生産されてもよく、及び／又は
（ｉｉ）前記方法が、前記第１の細胞集団中で前記δ３γδＴ細胞を、少なくとも１，０００倍、好ましくは少なくとも５，０００倍、より好ましくは少なくとも１０，０００倍、または約１０，０００倍、または少なくとも約１０，０００倍増殖させることを含み、
指定の増殖倍率は１２〜２１日以内に達成されてもよい、
請求項１５〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
濃縮γδＴ細胞集団を生産するためのエクスビボ方法であって、
ａ）γδＴ細胞を含む第１の細胞集団を、γδＴ細胞を活性化させ、増殖させる１つまたは複数の第１の活性化剤と接触させることにより、増殖させた第１のγδＴ細胞集団を生産することと、
ｂ）前記増殖させた第１のγδＴ細胞集団を、γδＴ細胞を活性化させ、増殖させる１つまたは複数の第２の活性化剤と接触させることにより、前記濃縮γδＴ細胞集団を生産することと、
を含み、前記１つもしくは複数の第１の活性化剤のうちの少なくとも１つまたは前記１つもしくは複数の第２の活性化剤のうちの少なくとも１つが、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の抗体またはその断片である、前記方法。
【請求項２８】
（ｉ）前記方法が、ａ）の後かつｂ）の前に、前記増殖させた第１のγδＴ細胞集団を単離することを含む、及び／又は
（ｉｉ）ａ）が、抗原提示細胞（ＡＰＣ）及び前記１つまたは複数の第１の活性化剤の存在下で前記第１の細胞集団を培養することを含む、又は
ｂ）が、抗原提示細胞（ＡＰＣ）及び前記１つまたは複数の第２の活性化剤の存在下で前記増殖させた第１のγδＴ細胞集団を培養することを含む、
請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
前記第１の細胞集団が、αβＴ細胞及びγδＴ細胞を含む単離された混合細胞集団であり、
前記第１の細胞集団が、末梢血試料、白血球アフェレーシス試料、臍帯血試料、腫瘍試料、または組織試料から選択されてもよく、又は、
前記第１の細胞集団が、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の試料を含むか、または末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）の試料であり、
前記第１の細胞集団が、培養されていない初代細胞、継代されていない初代細胞を含んでもよい、
請求項２７又は２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記第１の細胞集団が、操作型γδＴ細胞の集団である、請求項２７又は２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記方法が、前記増殖させた第１のγδＴ細胞集団を遺伝子改変すること、または前記濃縮γδＴ細胞集団を遺伝子改変することを含む、請求項２７〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
操作されたγδＴ細胞の集団は、腫瘍認識部分を発現するように操作されており、好ましくは、
ａ．操作されたγδＴ細胞は、ＨＬＡ遺伝子座が欠如している；
ｂ．操作されたγδＴ細胞は、普遍的ドナー細胞である；
ｃ．操作されたγδＴ細胞は、腫瘍特異的同種γδT細胞である；又は
ｄ．操作されたγδＴ細胞は、２又はそれ以上の腫瘍認識部分を発現するように操作されており、
好ましくは、
ｉ．  ２又はそれ以上の腫瘍認識部分は異なっており、それぞれの異なる腫瘍認識部分は、同一抗原の異なるエピトープを認識するよう操作されているか；
ｉｉ．  ２又はそれ以上の腫瘍認識部分は異なっており、それぞれの異なる腫瘍認識部分は、異なる抗原の異なるエピトープを認識するよう操作されている、
請求項３０に記載の方法。
【請求項３３】
ａ．腫瘍認識部分は、腫瘍浸潤リンパ球に由来する；
ｂ．腫瘍認識部分は、Ｔ細胞からクローニングされている；
ｃ．腫瘍認識部分は、操作されたＴ細胞受容体であり、好ましくは、
ｉ．操作されたＴ細胞受容体は、ヒト又はマウスＴ細胞受容体である、
ｉｉ．操作されたＴ細胞受容体は、操作されたαβＴＣＲである、又は、
ｉｉｉ．操作されたＴ細胞受容体は、操作されたγδＴＣＲである、
ｄ．腫瘍認識部分は、腫瘍抗原を認識する、抗体、抗体断片、ｓｃＦｖ、単一ドメイン抗体、Ｆａｂである；又は、
ｅ．腫瘍抗原は、ペプチドＭＨＣ複合体であり、腫瘍認識部分は、ペプチドＭＨＣ複合体を認識する、
請求項３２に記載の方法。
【請求項３４】
操作されたγδＴ細胞の集団は、抗原認識部分を発現するように操作されており、抗原認識部分は、自己免疫疾患と関連する抗原を認識する、又は、抗原認識部分は、病原体抗原を認識し、病原体抗原は、病原性細菌又はウイルスに由来する、
請求項３０に記載の方法。
【請求項３５】
前記方法が、少なくとも１０８個のδ３γδＴ細胞を含む濃縮γδＴ細胞集団を生産することを含み、
少なくとも１０８個のδ３γδＴ細胞を含む前記濃縮γδＴ細胞集団が、１２〜２１日以内に生産されてもよい、
請求項２７〜３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
前記方法が、前記第１の細胞集団中で前記δ３γδＴ細胞を、少なくとも１，０００倍、好ましくは少なくとも５，０００倍、より好ましくは少なくとも１０，０００倍、または約１０，０００倍、または少なくとも約１０，０００倍増殖させることを含み、
指定の増殖倍率は１２〜２１日以内に達成されてもよい、
請求項２７〜３５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
前記１つまたは複数の第１の活性化剤のうちの少なくとも１つが、前記１つまたは複数の第２の活性化剤のうちの少なくとも１つと構造的に同一である；
前記１つまたは複数の第１の活性化剤のうちの少なくとも１つが、前記１つまたは複数の第２の活性化剤のうちの少なくとも１つとは構造的に異なる；及び／又は、
前記１つもしくは複数の第１の活性化剤のうちの少なくとも１つまたは前記１つもしくは複数の第２の活性化剤のうちの少なくとも１つが固定化されている、
前記固定化された活性化剤が、培養容器の表面上に、若しくは抗原提示細胞（ＡＰＣ）または人工抗原提示細胞（ａＡＰＣ）の表面上に、固定化されていてもよく；
固定化された活性化剤が、δ３γδＴＣＲに特有の前記エピトープに結合する前記抗体またはその断片であってもよい、
請求項２７〜３６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３８】
前記方法が、αβＴ細胞除去の前、またはαβＴ細胞除去の不在下で、３０％超、好ましくは４０％超のδ３γδＴ細胞を達成する、請求項１５〜２６または２７〜３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
増殖させたγδＴ細胞集団であって、前記増殖させたγδＴ細胞の３０％超、好ましくは４０％超、より好ましくは６０％超、なおもより好ましくは７０％超、さらにより好ましくは８０％超がδ３γδＴ細胞である、前記増殖させたγδＴ細胞集団。
【請求項４０】
前記増殖させたγδＴ細胞集団が、ポリクローン性のＴＣＲ多様性を含み、
前記δ３Ｔ細胞の６０超％または７０％超が、表現型ＣＤ４５ＲＡ＋／ＣＤ２７＋及び／またはＣＤ４５ＲＡ−／ＣＤ２７＋を発現してもよい、
請求項３９に記載の増殖させたγδＴ細胞集団。
【請求項４１】
腫瘍浸潤リンパ球に由来する、請求項３９又は４０に記載の増殖させたγδＴ細胞集団。
【請求項４２】
前記γδＴ細胞が、内因性または異種腫瘍認識部分を発現する、請求項３９〜４１のいずれか１項に記載の増殖させたγδＴ細胞集団。
【請求項４３】
前記集団が治療上有効量のγδＴ細胞を含む、請求項３９〜４２のいずれか１項に記載の増殖させたγδＴ細胞集団。
【請求項４４】
前記γδＴ細胞集団が、ＮＫｐ３０活性、ＮＫｐ４４活性、及び／またはＮＫｐ４６活性から独立した抗腫瘍細胞傷害性を含み、
前記γδＴ細胞集団が、ＮＫｐ３０活性依存性の抗腫瘍細胞傷害性、ＮＫｐ４４活性依存性の抗腫瘍細胞傷害性、及び／またはＮＫｐ４６活性依存性の抗腫瘍細胞傷害性を含まなくともよい；及び／又は、
前記γδＴ細胞の４０％未満が、検出可能なレベルのＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４、及び／またはＮＫｐ４６を発現する、
請求項３９〜４３のいずれか１項に記載の増殖させたγδＴ細胞集団。
【請求項４５】
ａ）請求項１５〜２６のいずれか１項に記載の方法、または
ｂ）請求項２７〜３８のいずれか１項に記載の方法、
によって生産される、増殖させたγδＴ細胞集団。
【請求項４６】
治療上有効量のδ３γδＴ細胞を含む、がん、炎症性疾患、または自己免疫疾患の処置を必要とする対象における、前記がん、炎症性疾患、または自己免疫疾患を治療するための医薬。
【請求項４７】
がん、炎症性疾患、または自己免疫疾患の処置を必要とする対象における、前記がん、炎症性疾患、または自己免疫疾患を治療するための医薬であって、
ａ）治療上有効量の、請求項３３〜４５のいずれか１項に記載のδ３γδＴ細胞を含み、
前記治療上有効量のδ３γδＴ細胞は前記対象に投与される、
前記医薬。
【請求項４８】
前記増殖させたγδＴ細胞集団は、第２の増殖させたγδＴ細胞集団と混和されて混和集団を形成し、前記混和集団は前記対象に投与される、請求項４７に記載の医薬。
【請求項４９】
前記第２の増殖させたγδＴ細胞集団が、＞６０％のδ１γδＴ細胞または＞６０％のδ２γδＴ細胞を含む、請求項４８に記載の医薬。
【請求項５０】
混和γδＴ細胞集団が、＞６０％のδ１γδＴ細胞または＞６０％のδ２γδＴ細胞を含む、請求項４８に記載の医薬。
【請求項５１】
混和γδＴ細胞集団が、＞６０％のδ３γδＴ細胞を含む、請求項４８に記載の医薬。