【手続補正書】
【提出日】令和3年9月7日(2021.9.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
共有結合性閉端を有する非ウイルス性カプシド不含ＤＮＡベクター（ｃｅＤＮＡベクター）であって、前記ｃｅＤＮＡベクターが、非対称逆位末端反復（非対称ＩＴＲ）の間に操作可能に位置付けられた少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列を含み、前記非対称ＩＴＲのうちの少なくとも１つが、機能的末端分解部位およびＲｅｐ結合部位を含む、ｃｅＤＮＡベクター。
【請求項２】
前記ｃｅＤＮＡベクターが、前記ｃｅＤＮＡベクター上に単一認識部位を有する制限酵素で消化され、未変性ゲルおよび変性ゲルの両方の電気泳動によって分析されたときに、直鎖状で非連続的なＤＮＡ対照と比較して特徴的な直鎖状で連続的なＤＮＡのバンドを示す、請求項１に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項３】
前記非対称ＩＴＲが、パルボウイルス、ディペンドウイルス、およびアデノ関連ウイルス（ＡＡＶ）から選択されるウイルスに由来する、請求項１または２に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項４】
前記非対称ＩＴＲが、異なるウイルス血清型に由来する、請求項３に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項５】
前記非対称ＩＴＲが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、およびＡＡＶ１２から選択されるＡＡＶ血清型に由来する、請求項４に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項６】
前記非対称ＩＴＲのうちの１つ以上が、合成である、請求項１〜３のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項７】
前記ＩＴＲのうちの１つ以上が、野生型ＩＴＲではない、請求項１〜３および６のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項８】
前記非対称ＩＴＲのうちの１つ以上が、野生型ＩＴＲである、請求項１〜７のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項９】
前記非対称ＩＴＲのうちの１つ以上両方が、Ａ、Ａ’、Ｂ、Ｂ’、Ｃ、Ｃ’、Ｄ、およびＤ’から選択される領域のうちの少なくとも１つにおける欠失、挿入、および／または置換によって修飾されている、請求項１〜７のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項１０】
前記欠失、挿入、および／または置換が、通常はＡ、Ａ’、Ｂ、Ｂ’、Ｃ、またはＣ’領域によって形成されるステムループ構造の全部または一部の欠失をもたらす、請求項９に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項１１】
前記非対称ＩＴＲのうちの一方または両方が、通常は前記ＢおよびＢ’領域によって形成されるステムループ構造の全部または一部の欠失をもたらす欠失、挿入、および／または置換によって修飾されている、請求項９または請求項１０に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項１２】
前記非対称ＩＴＲのうちの一方または両方が、通常は前記ＣおよびＣ’領域によって形成されるステムループ構造の全部または一部の欠失をもたらす欠失、挿入、および／または置換によって修飾されている、請求項９〜１１のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項１３】
前記非対称ＩＴＲのうちの一方または両方が、通常は前記ＢおよびＢ’領域によって形成される第１のステムループ構造と、前記ＣおよびＣ’領域によって形成される第２のステムループ構造と、を含む領域に単一ステムループ構造を含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項１４】
前記非対称ＩＴＲのうちの一方または両方が、通常は前記ＢおよびＢ’領域によって形成される第１のステムループ構造と、前記ＣおよびＣ’領域によって形成される第２のステムループ構造と、を含む前記領域に単一ステムおよび２つのループを含む、請求項１３に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項１５】
前記非対称ＩＴＲのうちの一方または両方が、通常は前記ＢおよびＢ’領域によって形成される第１のステムループ構造と、前記ＣおよびＣ’領域によって形成される第２のステムループ構造と、を含む前記領域に単一ステムおよび単一ループを含む、請求項１３または請求項１４に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項１６】
前記異種ヌクレオチド配列の全部または一部が、少なくとも１つの調節スイッチの制御下にある、請求項１〜１５のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項１７】
前記ベクターが、ナノ担体中に存在する、請求項１〜１６のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項１８】
前記ナノ担体が、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）を含む、請求項１７に記載のｃｅＤＮＡベクター。
【請求項１９】
前記ｃｅＤＮＡベクターが、
ａ．少なくとも１つのＲｅｐタンパク質の存在下、ｃｅＤＮＡ発現構築物を内包する昆虫細胞の集団を、前記昆虫細胞内で前記ｃｅＤＮＡベクターの産生を誘導するために効果的な条件下、かつそのために十分な時間にわたってインキュベートするステップであって、前記ｃｅＤＮＡ発現構築物が、前記ｃｅＤＮＡベクターをコードする、ステップと、
ｂ．前記ｃｅＤＮＡベクターを前記昆虫細胞から単離するステップと、を含むプロセスから取得される、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の共有結合性閉端を有する非ウイルス性カプシド不含ＤＮＡベクター（ｃｅＤＮＡベクター）。
【請求項２０】
請求項１〜１６のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクターをコードする、ｃｅＤＮＡ発現構築物。
【請求項２１】
請求項２０に記載のｃｅＤＮＡ発現構築物を含む、宿主細胞。
【請求項２２】
ａ．前記ｃｅＤＮＡベクターの産生を誘導するために効果的な条件下、かつそのために十分な時間にわたって、請求項２１に記載の前記宿主細胞をインキュベートすることと、
ｂ．前記ｃｅＤＮＡを前記宿主細胞から単離することと、を含む、ｃｅＤＮＡベクターを産生する方法。
【請求項２３】
対象における疾患または障害を治療、予防、改善、監視、または診断するための、請求項１〜１６のうちのいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクターを含む薬学的組成物であって、前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、前記疾患または障害を治療、予防、改善、診断、または監視するために選択される、薬学的組成物。
【請求項２４】
前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、転写または翻訳されたときに、前記対象における内因性タンパク質の異常な量を補正するか、または前記対象における内因性タンパク質または経路の異常な機能または活性を補正する、請求項２３に記載の薬学的組成物。
【請求項２５】
前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、ＲＮＡｉ、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ＩｎｃＲＮＡ、およびアンチセンスオリゴヌクレオチドまたはアンチセンスポリヌクレオチドから選択されるヌクレオチド分子をコードするか、または含むか、あるいは前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、タンパク質をコードする、請求項２３〜２４のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２６】
前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、前記疾患または障害に関連する内因性タンパク質または経路のアゴニストまたはアンタゴニストをコードする、請求項２３〜２５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２７】
前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、抗体をコードする、請求項２３〜２５のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項２８】
請求項１〜１６のいずれかに記載のｃｅＤＮＡベクターを含む薬学的組成物であって、前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、治療タンパク質をコードする、薬学的組成物。
【請求項２９】
請求項１〜１６のいずれかに記載のｃｅＤＮＡベクターおよびナノ担体を含み、添付文書とともに容器にパッケージ化される、キット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０３８６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０３８６】
参照文献
特許、特許出願、国際特許出願および公開を含む、明細書および実施例に列挙され、開示されるすべての参照文献は、参照によりそれら全体が本明細書に組み込まれる。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
共有結合性閉端を有する非ウイルス性カプシド不含ＤＮＡベクター（ｃｅＤＮＡベクター）であって、前記ｃｅＤＮＡベクターが、非対称逆位末端反復配列（非対称ＩＴＲ）の間に操作可能に位置付けられた少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列を含み、前記非対称ＩＴＲのうちの少なくとも１つが、機能的末端分解部位およびＲｅｐ結合部位を含む、ｃｅＤＮＡベクター。
（項目２）
前記ｃｅＤＮＡベクターが、前記ｃｅＤＮＡベクター上に単一認識部位を有する制限酵素で消化され、未変性ゲルおよび変性ゲルの両方の電気泳動によって分析されたときに、直鎖状で非連続的なＤＮＡ対照と比較して特徴的な直鎖状で連続的なＤＮＡのバンドを示す、項目１に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目３）
前記非対称ＩＴＲ配列のうちの１つ以上が、パルボウイルス、ディペンドウイルス、およびアデノ関連ウイルス（ＡＡＶ）から選択されるウイルスに由来する、項目１または２に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目４）
前記非対称ＩＴＲが、異なるウイルス血清型に由来する、項目３に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目５）
前記１つ以上の非対称ＩＴＲが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、およびＡＡＶ１２から選択されるＡＡＶ血清型に由来する、項目４に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目６）
前記非対称ＩＴＲ配列のうちの１つ以上が、合成である、項目１〜３のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目７）
前記ＩＴＲのうちの１つ以上が、野生型ＩＴＲではない、項目１〜３および６のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目８）
前記非対称ＩＴＲのうちの１つ以上両方が、Ａ、Ａ’、Ｂ、Ｂ’、Ｃ、Ｃ’、Ｄ、およびＤ’から選択される前記ＩＴＲ領域のうちの少なくとも１つにおける欠失、挿入、および／または置換によって修飾されている、項目１〜７のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目９）
前記欠失、挿入、および／または置換が、通常はＡ、Ａ’、Ｂ、Ｂ’、Ｃ、またはＣ’領域によって形成されるステムループ構造の全部または一部の欠失をもたらす、項目８に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目１０）
前記非対称ＩＴＲのうちの一方または両方が、通常は前記ＢおよびＢ’領域によって形成されるステムループ構造の全部または一部の欠失をもたらす欠失、挿入、および／または置換によって修飾されている、項目８または項目９に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目１１）
前記非対称ＩＴＲのうちの一方または両方が、通常は前記ＣおよびＣ’領域によって形成されるステムループ構造の全部または一部の欠失をもたらす欠失、挿入、および／または置換によって修飾されている、項目８〜１０のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目１２）
前記非対称ＩＴＲのうちの一方または両方が、通常は前記ＢおよびＢ’領域によって形成されるステムループ構造の一部ならびに／または通常は前記ＣおよびＣ’領域によって形成されるステムループ構造の一部の欠失をもたらす欠失、挿入、および／または置換によって修飾されている、項目１０または項目１１に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目１３）
前記非対称ＩＴＲのうちの一方または両方が、通常は前記ＢおよびＢ’領域によって形成される第１のステムループ構造と、前記ＣおよびＣ’領域によって形成される第２のステムループ構造と、を含む領域に単一ステムループ構造を含む、項目１〜１２のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目１４）
前記非対称ＩＴＲのうちの一方または両方が、通常は前記ＢおよびＢ’領域によって形成される第１のステムループ構造と、前記ＣおよびＣ’領域によって形成される第２のステムループ構造と、を含む前記領域に単一ステムおよび２つのループを含む、項目１３に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目１５）
前記非対称ＩＴＲのうちの一方または両方が、通常は前記ＢおよびＢ’領域によって形成される第１のステムループ構造と、前記ＣおよびＣ’領域によって形成される第２のステムループ構造と、を含む前記領域に単一ステムおよび単一ループを含む、項目１３または項目１４に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目１６）
少なくとも１つの非対称ＩＴＲが、図２６Ａまたは２６ＢのＩＴＲ、配列番号１０１〜４９９または５４５〜５４７、図２６Ａまたは２６ＢのＩＴＲに対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＩＴＲ、ならびに配列番号１０１〜４９９および５４５〜５４７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するＩＴＲから選択されるヌクレオチド配列を含む、修飾型ＡＡＶ２  ＩＴＲである、項目１〜１５のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目１７）
少なくとも１つの非対称ＩＴＲが、配列番号２、５２、６３、もしくは６４のヌクレオチド配列、または配列番号２、５２、６３、もしくは６４に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するヌクレオチド配列を含む、修飾型ＡＡＶ２  ＩＴＲである、項目１〜１６のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目１８）
５’ＩＴＲが、野生型ＡＡＶ  ＩＴＲであり、３’ＩＴＲが、配列番号２、６４、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、４６９〜４８３、および５４６、ならびに図２６Ａに示されるＩＴＲ配列、ならびに前記配列のうちのいずれかに対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列から選択される配列を含む、項目１〜１６のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目１９）
３’ＩＴＲが、野生型ＡＡＶ  ＩＴＲであり、５’ＩＴＲが、配列番号５２、６３、１０１、１０３、１０５、１０７、１０９、１１１、１１３、１１５、１１７、１１９、１２１、１２３、１２５、１２７、１２９、１３１、１３３、４８４〜４９９、５４５、および５４７、ならびに図２６Ｂに示されるＩＴＲ配列、ならびに前記配列のうちのいずれかに対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列から選択される配列を含む、項目１〜１６のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目２０）
５’ＩＴＲが、配列番号５２、６３、１０１、１０３、１０５、１０７、１０９、１１１、１１３、１１５、１１７、１１９、１２１、１２３、１２５、１２７、１２９、１３１、１３３、４８４〜４９９、５４５、および５４７、ならびに図２６Ｂに示されるＩＴＲ配列、ならびに前記配列のうちのいずれかに対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列から選択される配列を含み、３’ＩＴＲが、配列番号２、６４、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１１２、１１４、１１６、１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、４６９〜４８３、および５４６、ならびに図２６Ａに示されるＩＴＲ配列、ならびに前記配列のうちのいずれかに対して少なくとも９５％の配列同一性を有する配列から選択される配列を含む、項目１〜１６のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目２１）
ａ．配列番号１および配列番号５２、ならびに
ｂ．配列番号２および配列番号５１から選択される少なくとも２つの非対称ＩＴＲを含む、項目１に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目２２）
ａ．配列番号１および配列番号５２、ならびに
ｂ．配列番号２および配列番号５１から選択される非対称ＩＴＲの対を含む、項目１に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目２３）
一方または両方の非対称ＩＴＲが、配列番号２、５２、６３、６４、１１３、１１４、および５５７以外の配列を含む、項目１〜２０のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目２４）
前記異種ヌクレオチド配列の全部または一部が、少なくとも１つの調節スイッチの制御下にある、項目１〜２４のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目２５）
少なくとも１つの調節スイッチが、表１１の前記調節スイッチから選択される、項目２４に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目２６）
前記ベクターが、ナノ担体中に存在する、項目１〜２５のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目２７）
前記ナノ担体が、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）を含む、項目２６に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目２８）
前記ｃｅＤＮＡベクターが、
ａ．少なくとも１つのＲｅｐタンパク質の存在下、ｃｅＤＮＡ発現構築物を内包する昆虫細胞の集団をインキュベートするステップであって、前記ｃｅＤＮＡ発現構築物が、前記昆虫細胞内で前記ｃｅＤＮＡベクターの産生を誘導するために効果的な条件下、かつそのために十分な時間にわたって、前記ｃｅＤＮＡベクターをコードする、ステップと、
ｂ．前記ｃｅＤＮＡベクターを前記昆虫細胞から単離するステップと、を含むプロセスから取得される、項目１〜２５のいずれか一項に記載の共有結合性閉端を有する非ウイルス性カプシド不含ＤＮＡベクター（ｃｅＤＮＡベクター）。
（項目２９）
前記ｃｅＤＮＡ発現構築物が、ｃｅＤＮＡプラスミド、ｃｅＤＮＡバクミド、およびｃｅＤＮＡバキュロウイルスから選択される、項目２８に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目３０）
前記昆虫細胞が、少なくとも１つのＲｅｐタンパク質を発現する、項目２８または項目２９に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目３１）
少なくとも１つのＲｅｐタンパク質が、パルボウイルス、ディペンドウイルス、およびアデノ関連ウイルス（ＡＡＶ）から選択されるウイルスに由来する、項目３０に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目３２）
少なくとも１つのＲｅｐタンパク質が、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、およびＡＡＶ１２から選択されるＡＡＶ血清型に由来する、項目３１に記載のｃｅＤＮＡベクター。
（項目３３）
項目１〜２５のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクターをコードする、ｃｅＤＮＡ発現構築物。
（項目３４）
ｃｅＤＮＡプラスミド、ｃｅＤＮＡバクミド、またはｃｅＤＮＡバキュロウイルスである、項目３３に記載のｃｅＤＮＡ発現構築物。
（項目３５）
項目３３または項目３４に記載のｃｅＤＮＡ発現構築物を含む、宿主細胞。
（項目３６）
少なくとも１つのＲｅｐタンパク質を発現する、項目３５に記載の宿主細胞。
（項目３７）
少なくとも１つのＲｅｐタンパク質が、パルボウイルス、ディペンドウイルス、およびアデノ関連ウイルス（ＡＡＶ）から選択されるウイルスに由来する、項目３６に記載の宿主細胞。
（項目３８）
少なくとも１つのＲｅｐタンパク質が、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、およびＡＡＶ１２から選択されるＡＡＶ血清型に由来する、項目３７に記載の宿主細胞。
（項目３９）
昆虫細胞である、項目３５〜３８のいずれか一項に記載の宿主細胞。
（項目４０）
Ｓｆ９細胞である、項目３９に記載の宿主細胞。
（項目４１）
ａ．前記ｃｅＤＮＡベクターの産生を誘導するために効果的な条件下、かつそのために十分な時間にわたって、項目３５〜４０のいずれか一項に記載の前記宿主細胞をインキュベートすることと、
ｂ．前記ｃｅＤＮＡを前記宿主細胞から単離することと、を含む、ｃｅＤＮＡベクターを産生する方法。
（項目４２）
対象における疾患または障害を治療、予防、改善、監視、または診断するための方法であって、前記方法が、それを必要とする対象に、項目１〜２５のうちのいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクターを含む組成物を投与することを含み、前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、前記疾患または障害を治療、予防、改善、診断、または監視するために選択される、方法。
（項目４３）
前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、転写または翻訳されたときに、前記対象における内因性タンパク質の異常な量を補正する、項目４２に記載の方法。
（項目４４）
前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、転写または翻訳されたときに、前記対象における内因性タンパク質または経路の異常な機能または活性を補正する、項目４２に記載の方法。
（項目４５）
前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、ＲＮＡｉ、ｓｉＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ＩｎｃＲＮＡ、およびアンチセンスオリゴヌクレオチドまたはアンチセンスポリヌクレオチドから選択されるヌクレオチド分子をコードするか、または含む、項目４２〜４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４６）
前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、タンパク質をコードする、項目４２〜４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４７）
前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、マーカータンパク質をコードする、項目４２に記載の方法。
（項目４８）
前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、前記疾患または障害に関連する内因性タンパク質または経路のアゴニストまたはアンタゴニストをコードする、項目４２〜４６のいずれか一項に記載の方法。
（項目４９）
前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、抗体をコードする、項目４２〜４６のいずれか一項に記載の方法。
（項目５０）
前記ｃｅＤＮＡベクターが、薬学的に許容される担体と組み合わせて投与される、項目４２〜４９に記載の方法。
（項目５１）
治療タンパク質を対象に送達するための方法であって、前記方法が、
項目１〜２５のいずれかに記載のｃｅＤＮＡベクターを含む組成物を対象に投与することを含み、前記少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列が、治療タンパク質をコードする、方法。
（項目５２）
前記治療タンパク質が、治療抗体である、項目５１に記載の方法。
（項目５３）
項目１〜２５のいずれかに記載のｃｅＤＮＡベクターおよびナノ担体を含み、添付文書とともに容器にパッケージ化される、キット。
（項目５４）
ｃｅＤＮＡベクターを産生するためのキットであって、前記キットが、
ａ．少なくとも１つの異種ヌクレオチド配列の挿入のための少なくとも１つの制限部位、または調節スイッチ、または両方を含む、発現構築物を含み、前記少なくとも１つの制限部位が、非対称逆位反復配列（非対称ＩＴＲ）の間に操作可能に位置付けられており、前記非対称ＩＴＲのうちの少なくとも１つが、機能的末端分解部位およびＲｅｐ結合部位を含む、キット。
（項目５５）
項目１〜２５のいずれか一項に記載のｃｅＤＮＡベクターを産生するために好適である、項目５４に記載のキット。
（項目５６）
Ｒｅｐタンパク質の存在下、前記ｃｅＤＮＡベクターの産生を誘導し得る、ウイルスカプシドコード配列を欠いている昆虫細胞の集団をさらに含む、項目５４または項目５５に記載のキット。
（項目５７）
少なくとも１つのＲｅｐタンパク質をコードするポリヌクレオチド配列を含むベクターをさらに含み、前記ベクターが、昆虫細胞中の前記少なくとも１つのＲｅｐタンパク質を発現するのに好適である、項目５４〜５６のいずれか一項に記載のキット。