【誤訳訂正書】
【提出日】令和3年3月22日(2021.3.22)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｊｏｈｎ  Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む薬物送達システムを提供するための方法であって、該方法は、以下の工程：
ａ）  ＶＰ１タンパク質を含む組成物を提供する工程、
ｂ）  該ａ）の組成物の該ＶＰ１タンパク質を、ＶＬＰへとアセンブルするように該ＶＰ１を誘導する条件に曝す工程、
ｃ）  該ｂ）の組成物の該ＶＬＰを、該ＶＬＰをペンタマーへと脱アセンブルする条件に曝す工程、
ｄ）  該（ｃ）の組成物の該ペンタマーを、ＶＬＰへと再アセンブルするように該ペンタマーを誘導する条件に曝す工程
ｅ）  該ｄ）の組成物の該ＶＬＰを、該ＶＬＰをペンタマーへと脱アセンブルする条件へと曝す工程、
ｆ）  該ｅ）の組成物の該ペンタマーを、カーゴと会合したＶＬＰへとアセンブルするように、該カーゴおよび該ペンタマーを誘導する条件に曝す工程、
を包含する方法。
【請求項２】
工程ｄ）の前に、前記ｃ）の組成物の前記ペンタマーは、該ペンタマーの凝集を誘導する条件へと曝される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記凝集は、沈殿剤、好ましくは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルコール、塩またはこれらの組み合わせからなる群より選択される沈殿剤によって、最も好ましくは塩によって誘導される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記塩は、シトレート（Ｃ６Ｈ５Ｏ７３−）、ホスフェート（ＰＯ４３−）、スルフェート（ＳＯ４２−）、リン酸水素（ＨＰＯ４２−）、リン酸二水素（Ｈ２ＰＯ４−）、ヨウ素酸（ＩＯ３−）、ヒドロキシド（ＯＨ−）、フルオリド（Ｆ−）、臭素酸（ＢｒＯ３−）またはアセテート（ＣＨ３ＣＯＯ−）、四級アンモニウム化合物（ＮＲ４＋）であって、Ｒは、アルキル基もしくはアリール基であるもの、好ましくはテトラメチルアンモニウム（（ＣＨ３）４Ｎ＋）またはジメチルアンモニウム（（ＣＨ３）２Ｎ２＋）、アンモニウム（ＮＨ４＋）、カリウム（Ｋ＋）、セシウム（Ｃｓ＋）、ルビジウム（Ｒｂ＋）またはリチウム（Ｌｉ＋）からなる群より選択される、アニオンおよびカチオンを含み、好ましくはＳＯ４２−および／またはＮＨ４＋を含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記塩は、（ＮＨ４）２ＳＯ４、Ｋ２ＳＯ４、Ｎａ２ＳＯ４、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４およびＮａ２ＨＰＯ４からなる群より選択され、好ましくは（ＮＨ４）２ＳＯ４である、請求項３または４に記載の方法。
【請求項６】
工程ｄ）は、ｄ）の組成物のペンタマーを、該ペンタマーの凝集を誘導する条件から分離することを包含する、請求項２〜５のいずれかに記載の方法。
【請求項７】
前記分離は、塩および緩衝液、ならびに６〜８．５の、好ましくは６．５〜８．５の、より好ましくは７〜８の、最も好ましくは７．２〜７．５の、特に７．５のｐＨを含む組成物に対する透析によって達成される、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記工程ｄ）の組成物は、
ａ）０．３未満、好ましくは０．２未満、好ましくは０．１未満の、動的光散乱法（ＤＬＳ）によって決定された多分散指数（ＰＤＩ）、より好ましくは０．０１〜０．０９の間の範囲の、動的光散乱法（ＤＬＳ）によって決定された多分散指数、および／または
ｂ）ＶＬＰのうちの少なくとも７０％が２０ｎｍ〜７０ｎｍの、好ましくは３０ｎｍ〜７０ｎｍの、より好ましくは３５ｎｍ〜６５ｎｍの、より好ましくは４０〜６０ｎｍの平均直径を有する、
によって特徴づけられる、請求項１〜７のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
約−８０℃〜約４℃の温度において少なくとも１０時間、１５時間、２０時間、好ましくは少なくとも２４時間にわたって、より好ましくは約−８０℃の温度において少なくとも２４時間にわたって、前記工程ｄ）の組成物からのＶＬＰを貯蔵する工程を包含する、請求項１〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
貯蔵する工程は、凍結防止添加剤、好ましくはポリオール、糖、無機塩、有機塩、アミノ酸、ポリマー、エクストリモライト、またはこれらの誘導体もしくは組み合わせを含む群から選択される凍結防止添加剤を含む組成物の中で起こる、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記無機塩は、スルフェートアニオンを含み、好ましくは硫酸アンモニウムであり、そして／または前記アミノ酸は、グリシン、グルタミン、プロリン、アラニンであり、そして／または前記アミノ酸誘導体は、ベタインである、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記工程ｂ）のＶＬＰ、前記工程ｃ）のペンタマーおよび／または前記工程ｄ）のＶＬＰは精製に供される、請求項１〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
前記ＶＰ１は、配列番号１に従うアミノ酸配列と、その全長にわたって少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、好ましくは配列番号１のアミノ酸配列を有し、ここで、該ＶＰ１はキャプシドへとアセンブルし得る、請求項１〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
前記ＶＰ１タンパク質のヌクレオチド配列は、配列番号２のヌクレオチド配列と、その全長にわたって少なくとも９０％同一であり、好ましくは配列番号２のヌクレオチド配列であり、ここで、該ＶＰ１タンパク質はキャプシドへとアセンブルし得る、請求項１〜１３のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
以下のパラメーターのうちの１またはこれより多くによって特徴づけられる、Ｊｏｈｎ  Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む組成物であって、請求項１に記載の方法で得られた組成物：
ａ）０．３未満、好ましくは０．２未満、好ましくは０．１未満、より好ましくは０．０１〜０．０９の間の範囲の、動的光散乱法（ＤＬＳ）によって決定された多分散指数（ＰＤＩ）、
ｂ）前記ＶＬＰのうちの少なくとも７０％が、２０ｎｍ〜７０ｎｍ、好ましくは３０ｎｍ〜７０ｎｍの、より好ましくは３５ｎｍ〜６５ｎｍの、より好ましくは４０〜６０ｎｍの平均直径を有する、
ｃ）ＶＬＰ含有量が、少なくとも８０％（ｖ／ｖ）。好ましくは少なくとも８５％（ｖ／ｖ）、好ましくは少なくとも９０％（ｖ／ｖ）、好ましくは少なくとも９５％（ｖ／ｖ）。
【請求項１６】
請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法によって得られた、薬物送達システム。
【請求項１７】
必要性のある被験体における治療および／または診断の方法における使用のための、好ましくは神経学的障害の、特にＣＮＳ疾患の処置のための、請求項１６に記載の薬物送達システム。
【請求項１８】
請求項１の工程ａ）〜ｅ）、および前記ｅ）の組成物の前記ペンタマーをＶＬＰへとアセンブルするように該ペンタマーを誘導する条件に曝すというさらなる工程を包含する方法によって得られた、Ｊｏｈｎ  Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）。
【請求項１９】
前記ＶＬＰは血液脳関門（ＢＢＢ）を横断する、請求項１６もしくは１７に記載の薬物送達システム、または請求項１８に記載のＶＬＰ。
【請求項２０】
前記ＶＬＰは、前記薬物送達システムの投与後に、好ましくはｉ．ｖ．投与後に、１０日間以内にＣＮＳにおいて検出可能である、請求項１９に記載の薬物送達システムまたはＶＬＰ。
【請求項２１】
前記ＶＬＰは、生理学的に無傷のＢＢＢを横断する、請求項１９または２０に記載の薬物送達システムまたはＶＬＰ。
【請求項２２】
前記横断は、前記ＢＢＢの完全性の喪失または透過性の増大を要求しない、請求項２０に記載の薬物送達システムまたはＶＬＰ。
【請求項２３】
前記被験体は、彼のＢＢＢの透過性を増大させるか、またはその混乱を誘導するという処置を受けたことがない、請求項１７に記載の薬物送達システム。
【請求項２４】
塩および緩衝液を含み、そしてｐＨ７．０〜８．０、好ましくは７．５の、請求項１５に記載の組成物であって、該組成物は、好ましくは：
ａ）１２０ｍＭ〜１７０ｍＭ  ＮａＣｌ、好ましくは１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、
ｂ）１〜５ｍＭ  ＣａＣｌ２、好ましくは２ｍＭ  ＣａＣｌ２、および
ｃ）５〜３０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、好ましくは１０〜２５ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、より好ましくは１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、
を含む、組成物。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１６９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１６９】
次の工程において、これらのサンプルを、ルシフェラーゼアッセイにおいて使用した（図９Ｂ）。予測外なことには、そのルシフェラーゼ活性は、硫酸アンモニウムを含む組成物中に貯蔵されたＶＬＰによって強力に増大された。ベタインはまた、凍結防止添加剤なしのサンプルおよび他の試験した凍結防止添加剤と比較した場合に有利であった。従って、凍結防止添加剤、特に硫酸アンモニウムの使用は、ＶＬＰの安定性をかなり増大させ、その装填ＶＬＰの感染性およびカーゴ送達有効性を増大させた。繰り返すと、この効果は、そのＶＬＰが迅速に凍結されたか（黒い棒）またはゆっくりと凍結されたか（白い棒）に関わらず無関係であった。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
Ｊｏｈｎ  Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む薬物送達システムを提供するための方法であって、該方法は、以下の工程：
ａ）  ＶＰ１タンパク質を含む組成物を提供する工程、
ｂ）  該ａ）の組成物の該ＶＰ１タンパク質を、ＶＬＰへとアセンブルするように該ＶＰ１を誘導する条件に曝す工程、
ｃ）  該ｂ）の組成物の該ＶＬＰを、該ＶＬＰをペンタマーへと脱アセンブルする条件に曝す工程、
ｄ）  該（ｃ）の組成物の該ペンタマーを、ＶＬＰへと再アセンブルするように該ペンタマーを誘導する条件に曝す工程
ｅ）  該ｄ）の組成物の該ＶＬＰを、該ＶＬＰをペンタマーへと脱アセンブルする条件へと曝す工程、
ｆ）  該ｅ）の組成物の該ペンタマーを、カーゴと会合したＶＬＰへとアセンブルするように、該カーゴおよび該ペンタマーを誘導する条件に曝す工程、
を包含する方法。
(項目２)
工程ｄ）の前に、前記ｃ）の組成物の前記ペンタマーは、該ペンタマーの凝集を誘導する条件へと曝される、項目１に記載の方法。
(項目３)
前記凝集は、沈殿剤、好ましくは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、アルコール、塩またはこれらの組み合わせからなる群より選択される沈殿剤によって、最も好ましくは塩によって誘導される、項目２に記載の方法。
(項目４)
前記塩は、シトレート（Ｃ６Ｈ５Ｏ７３−）、ホスフェート（ＰＯ４３−）、スルフェート（ＳＯ４２−）、リン酸水素（ＨＰＯ４２−）、リン酸二水素（Ｈ２ＰＯ４−）、ヨウ素酸（ＩＯ３−）、ヒドロキシド（ＯＨ−）、フルオリド（Ｆ−）、臭素酸（ＢｒＯ３−）またはアセテート（ＣＨ３ＣＯＯ−）、四級アンモニウム化合物（ＮＲ４＋）であって、Ｒは、アルキル基もしくはアリール基であるもの、好ましくはテトラメチルアンモニウム（（ＣＨ３）４Ｎ＋）またはジメチルアンモニウム（（ＣＨ３）２Ｎ２＋）、アンモニウム（ＮＨ４＋）、カリウム（Ｋ＋）、セシウム（Ｃｓ＋）、ルビジウム（Ｒｂ＋）またはリチウム（Ｌｉ＋）からなる群より選択される、アニオンおよびカチオンを含み、好ましくはＳＯ４２−および／またはＮＨ４＋を含む、項目３に記載の方法。
(項目５)
前記塩は、（ＮＨ４）２ＳＯ４、Ｋ２ＳＯ４、Ｎａ２ＳＯ４、（ＮＨ４）２ＨＰＯ４、Ｋ２ＨＰＯ４およびＮａ２ＨＰＯ４からなる群より選択され、好ましくは（ＮＨ４）２ＳＯ４である、項目３または４に記載の方法。
(項目６)
工程ｄ）は、ｄ）の組成物のペンタマーを、該ペンタマーの凝集を誘導する条件から分離することを包含する、項目２〜５のいずれかに記載の方法。
(項目７)
前記分離は、塩および緩衝液、ならびに６〜８．５の、好ましくは６．５〜８．５の、より好ましくは７〜８の、最も好ましくは７．２〜７．５の、特に７．５のｐＨを含む組成物に対する透析によって達成される、項目６に記載の方法。
(項目８)
前記工程ｄ）の組成物は、
ａ）０．３未満、好ましくは０．２未満、好ましくは０．１未満の多分散指数（ＰＤＩ）、より好ましくは０．０１〜０．０９の間の範囲の多分散指数、および／または
ｂ）ＶＬＰのうちの少なくとも７０％が２０ｎｍ〜７０ｎｍの、好ましくは３０ｎｍ〜７０ｎｍの、より好ましくは３５ｎｍ〜６５ｎｍの、より好ましくは４０〜６０ｎｍの平均直径を有する、
によって特徴づけられる、前述の項目のいずれかに記載の方法。
(項目９)
約−８０℃〜約４℃の温度において少なくとも１０時間、１５時間、２０時間、好ましくは少なくとも２４時間にわたって、より好ましくは約−８０℃の温度において少なくとも２４時間にわたって、前記工程ｄ）の組成物からのＶＬＰを貯蔵する工程を包含する、前述の項目のいずれかに記載の方法。
(項目１０)
貯蔵する工程は、凍結防止添加剤、好ましくはポリオール、糖、無機塩、有機塩、アミノ酸、ポリマー、エクストリモライト、またはこれらの誘導体もしくは組み合わせを含む群から選択される凍結防止添加剤を含む組成物の中で起こる、項目９に記載の方法。
(項目１１)
前記無機塩は、スルフェートアニオンを含み、好ましくは硫酸アンモニウムであり、そして／または前記アミノ酸は、グリシン、グルタミン、プロリン、アラニンであり、そして／または前記アミノ酸誘導体は、ベタインである、項目１０に記載の方法。
(項目１２)
前記工程ｂ）のＶＬＰ、前記工程ｃ）のペンタマーおよび／または前記工程ｄ）のＶＬＰは精製に供される、前述の項目のいずれかに記載の方法。
(項目１３)
前記ＶＰ１は、配列番号１に従うアミノ酸配列と、その全長にわたって少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％同一であるアミノ酸配列を含み、好ましくは配列番号１のアミノ酸配列を有する、前述の項目のいずれかに記載の方法。
(項目１４)
前記ＶＰ１タンパク質のヌクレオチド配列は、配列番号２のヌクレオチド配列と、その全長にわたって少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％、より好ましくは少なくとも９０％同一であり、好ましくは配列番号２のヌクレオチド配列である、前述の項目のいずれかに記載の方法。
(項目１５)
以下のパラメーターのうちの１またはこれより多くによって特徴づけられる、Ｊｏｈｎ  Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む組成物：
ａ）０．３未満、好ましくは０．２未満、好ましくは０．１未満、より好ましくは０．０１〜０．０９の間の範囲の多分散指数（ＰＤＩ）、
ｂ）ＶＬＰのうちの少なくとも７０％が、２０ｎｍ〜７０ｎｍ、好ましくは３０ｎｍ〜７０ｎｍの、より好ましくは３５ｎｍ〜６５ｎｍの、より好ましくは４０〜６０ｎｍの平均直径を有する、
ｃ）前記組成物内のＶＬＰ含有量が、少なくとも８０％（ｖ／ｖ）。好ましくは少なくとも８５％（ｖ／ｖ）、好ましくは少なくとも９０％（ｖ／ｖ）、好ましくは少なくとも９５％（ｖ／ｖ）。
(項目１６)
前述の項目のいずれかに記載の方法によって得られ得る、薬物送達システム。
(項目１７)
必要性のある被験体における治療および／または診断の方法における使用のための、好ましくは神経学的障害の、特にＣＮＳ疾患の処置のための、項目１６に記載の薬物送達システム。
(項目１８)
項目１の工程ａ）〜ｅ）、および前記ｅ）の組成物の前記ペンタマーをＶＬＰへとアセンブルするように該ペンタマーを誘導する条件に曝すというさらなる工程を包含する方法によって得られ得る、Ｊｏｈｎ  Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）。
(項目１９)
前記ＶＬＰは血液脳関門（ＢＢＢ）を横断する、項目１６もしくは１７に記載の薬物送達システム、または項目１８に記載のＶＬＰ。
(項目２０)
ＶＬＰは、前記薬物送達システムの投与後に、好ましくはｉ．ｖ．投与後に、１０日間以内にＣＮＳにおいて検出可能である、項目１９に記載の薬物送達システムまたはＶＬＰ。
(項目２１)
前記ＶＬＰは、生理学的に無傷のＢＢＢを横断する、項目１９または２０に記載の薬物送達システムまたはＶＬＰ。
(項目２２)
前記横断は、前記ＢＢＢの完全性の喪失または透過性の増大を要求しない、項目２０に記載の薬物送達システムまたはＶＬＰ。
(項目２３)
前記被験体は、彼のＢＢＢの透過性を増大させるか、またはその混乱を誘導するという処置を受けたことがない、項目１７に記載の薬物送達システム。
(項目２４)
塩および緩衝液を含み、そしてｐＨ７．０〜８．０、好ましくは７．５の、Ｊｏｈｎ  Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス（ＪＣＶ）に由来するウイルス様粒子（ＶＬＰ）を含む組成物であって、該組成物は、好ましくは：
ａ）１２０ｍＭ〜１７０ｍＭ  ＮａＣｌ、好ましくは１５０ｍＭ  ＮａＣｌ、
ｂ）１〜５ｍＭ  ＣａＣｌ２、好ましくは２ｍＭ  ＣａＣｌ２、および
ｃ）５〜３０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、好ましくは１０〜２５ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、より好ましくは１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、
を含む、組成物。