【手続補正書】
【提出日】令和3年6月30日(2021.6.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
複製可能ウイルスゲノムをコードするポリヌクレオチド配列を含む組換えＤＮＡ分子であって、
前記複製可能ウイルスをコードする前記ポリヌクレオチド配列の起源が非ウイルス性である、前記組換えＤＮＡ分子。
【請求項２】
前記組換えＤＮＡ分子が、非ウイルス性送達ビヒクルによって細胞内に導入されたときに複製可能ウイルスを生み出すことができる、請求項１に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項３】
前記ポリヌクレオチド配列が、３’連結部切断配列及び５’連結部切断配列によって挟まれている、請求項１または２に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項４】
前記３’連結部切断配列または前記５’連結部切断配列が、ｓｉＲＮＡ標的配列、前駆体ｍｉＲＮＡ（ｐｒｉ−ｍｉＲＮＡ）をコードする配列、ガイドＲＮＡ標的配列、リボザイムコード配列、またはその任意の組合せを含む、請求項３に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項５】
前記３’連結部切断配列及び／または前記５’連結部切断配列が、リボザイムコード配列を含む、請求項４に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項６】
前記３’連結部切断配列または前記５’連結部切断配列が、ハンマーヘッド型リボザイムをコードする配列またはデルタ肝炎ウイルスリボザイムをコードする配列を含む、請求項５に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項７】
前記リボザイムが、ウイルスゲノム転写産物の切断を媒介して、前記ウイルスゲノムの別個の天然末端を生成する、請求項５または６に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項８】
前記複製可能ウイルスゲノムが一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）ウイルスである、請求項１〜７のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項９】
前記複製可能ウイルスが、アデノウイルス、コクサッキーウイルス、ポリオウイルス、セネカバレーウイルス、ウマヘルペスウイルス、単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ−１）、ラッサウイルス、マウス白血病ウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、ニューカッスル病ウイルス、麻疹ウイルス、パルボウイルス、レオウイルス、シンドビスウイルス、ワクチニアウイルス、粘液腫ウイルス、水疱性口炎ウイルス（ＶＳＶ）、マラバウイルスからなる群から選択される、請求項１〜８のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項１０】
前記複製可能ウイルスが、ピコルナウイルスである、請求項１〜８のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項１１】
前記複製可能ウイルスが、セネカバレーウイルス（ＳＶＶ）またはコクサッキーウイルスである、請求項１〜８のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項１２】
前記複製可能ウイルスゲノムをコードする前記ポリヌクレオチドの中に挿入された１つ以上のマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）標的配列（ｍｉＲ−ＴＳ）カセットをさらに含み、
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが１つ以上のｍｉＲＮＡ標的配列を含み、
細胞における対応する１つ以上のｍｉＲＮＡの発現が、前記細胞における前記コードされるウイルスの複製を阻害する、
請求項１〜１１のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項１３】
前記ポリヌクレオチドが、レプリコン、プラスミド、コスミド、ファージミド、トランスポゾン、細菌人工染色体、酵母人工染色体、または末端閉鎖型線形二本鎖腫瘍溶解性ウイルス（Ｏｖ）ＤＮＡ分子から選択される核酸ベクターの中に挿入されている、請求項１〜１２のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項１４】
前記ポリヌクレオチドが、ＤＮＡポリヌクレオチドであり、さらに、前記複製可能ウイルスゲノムをコードする前記核酸配列の５’末端に第１ＡＡＶ由来末端逆位反復配列（ＩＴＲ）、及び前記複製可能ウイルスゲノムをコードする前記核酸配列の３’末端に第２ＡＡＶ由来ＩＴＲを含む、請求項１〜１２のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項１５】
前記ポリヌクレオチド配列が、哺乳動物ＲＮＡポリメラーゼＩＩ（Ｐｏｌ  ＩＩ）に結合することができるプロモーター配列に機能可能に繋げられている、請求項１〜１４のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項１６】
前記プロモーター配列が選択的にがん細胞における前記ポリヌクレオチドの転写を促す、請求項１５に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項１７】
前記プロモーター配列が、ｈＴＥＲＴ、ＨＥ４、ＣＥＡ、ＯＣ、ＡＲＦ、ＣｇＡ、ＧＲＰ７８、ＣＸＣＲ４、ＨＭＧＢ２、ＩＮＳＭ１、メソテリン、ＯＰＮ、ＲＡＤ５１、ＴＥＴＰ、Ｈ１９、ｕＰＡＲ、ＥＲＢＢ２、ＭＵＣ１、Ｆｒｚ１、またはＩＧＦ２−Ｐ４からなる群から選択される遺伝子に由来する、請求項１５または１６に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項１８】
細胞毒性ポリペプチド、サイトカイン、ケモカイン、抗原結合性分子、細胞表面受容体に対するリガンド、可溶性受容体、酵素、サソリポリペプチド、ヘビポリペプチド、クモポリペプチド、ハチポリペプチド、カエルポリペプチド及び治療用核酸からなる群から選択される搭載薬分子をコードする核酸配列をさらに含む、請求項１〜１７のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項１９】
１つ以上のｍｉＲ−ＴＳカセットが、前記搭載薬分子をコードする前記核酸配列の５’非翻訳領域（ＵＴＲ）または３’ＵＴＲ配列の中に組み込まれている、請求項１８に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項２０】
前記搭載薬タンパク質が、サイトカイン、ケモカイン、または抗原結合性分子であり、
前記サイトカインが、Ｆｌｔ３リガンド及びＩＬ−１８から選択される；
前記ケモカインが、ＣＸＣＬ１０及びＣＣＬ４から選択される；または
前記抗原結合性分子は、免疫チェックポイント受容体に対する結合及び阻害を行うことができる、請求項１８または１９に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項２１】
前記細胞毒性ポリペプチドが、ｐ５３、ジフテリア毒素（ＤＴ）、シュードモナス外毒素Ａ（ＰＥＡ）、Ｉ型リボソーム不活性化タンパク質（ＲＩＰ）、ＩＩ型ＲＩＰ及び志賀様毒素１（Ｓｌｔ１）から選択される；
前記酵素が、
メタロプロテアーゼ、コラゲナーゼ、エラスターゼ、ヒアルロニダーゼ、カスパーゼ、ゼラチナーゼ、または
遺伝子指向性酵素プロドラッグ療法（ＧＤＥＰＴ）システムの一部であり単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ、シトシンデアミナーゼ、ニトロレダクターゼ、カルボキシペプチダーゼＧ２、プリンヌクレオシドホスホリラーゼもしくはシトクロムＰ４５０から選択される酵素
から選択される；
前記サイトカインが、オステオポンチン、ＩＬ−１３、ＴＧＦβ、ＩＬ−３５、ＩＬ−１８、ＩＬ−１５、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＦＮα、ＩＦＮβ及びＩＦＮγからなる群から選択される；
前記ケモカインが、ＣＸＣＬ１０、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＸＣＬ９及びＣＣＬ２１から選択される；
細胞表面受容体に対する前記リガンドが、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ニューロピリンリガンド、Ｆｌｔ３リガンドまたはＣＤ４７リガンドである；
前記抗原結合性分子が、
ＰＤ−１、ＰＤＬ−１、ＣＴＬＡ４、ＣＣＲ４、ＯＸ４０、ＣＤ２００Ｒ、ＣＤ４７、ＣＳＦ１Ｒ、ＥｐｈＡ２、ＣＤ１９、ＥｐＣＡＭ、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＣＤ３３、ＥＧＦＲ、ＣＣＲ４、ＣＤ２００、ＣＤ４０、ＣＤ４７、ＨＥＲ２、ＤＬＬ３、４−１ＢＢ、１７−１Ａ、ＧＤ２、及び表７中に列挙されている腫瘍抗原のうちの任意の１つ以上
からなる群から選択される細胞表面抗原に結合する；
前記サソリポリペプチドが、クロロトキシン、ＢｍＫｎ−２、ネオプラジン１、ネオプラジン２及びマウリポリン（ｍａｕｒｉｐｏｒｉｎ）からなる群から選択される；
前記ヘビポリペプチドが、コントルトロスタチン、アポキシンＩ、ボトロプストキシンＩ、ＢＪｃｕＬ、ＯＨＡＰ−１、ロドストミン（ｒｈｏｄｏｓｔｏｍｉｎ）、ｄｒＣＴ−Ｉ、ＣＴＸ−ＩＩＩ、Ｂ１Ｌ、及びＡＣＴＸ−６からなる群から選択される；
前記クモポリペプチドが、ラタルシン及びヒアルロニダーゼからなる群から選択される；
前記ハチポリペプチドが、メリチン及びアパミンからなる群から選択される；
前記カエルポリペプチドが、ＰｓＴ−１、ＰｄＴ−１、及びＰｄＴ−２からなる群から選択される；
前記搭載薬ポリペプチドが、
ヒト細胞表面抗原に結合することができる第１ドメインと、ヒト腫瘍細胞抗原に結合することができる第２ドメインとを含む二分ポリペプチド
である；あるいは
前記治療用核酸が、アンタゴミール、短鎖ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、リボザイムまたはアプタマーである、請求項１８または１９に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項２２】
前記ｍｉＲ−ＴＳカセット中に含まれた前記ｍｉＲＮＡ標的配列に結合する１つ以上のｍｉＲＮＡが発現している細胞において前記ポリヌクレオチドが複製されない、または最小限に複製される、請求項１２〜２１のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項２３】
前記１つ以上のｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ−１２４、ｍｉＲ−１、ｍｉＲ−１４３、ｍｉＲ−１２８、ｍｉＲ−２１９、ｍｉＲ−２１９ａ、ｍｉＲ−１２２、ｍｉＲ−２０４、ｍｉＲ−２１７、ｍｉＲ−１３７、及びｍｉＲ−１２６から選択される、請求項２２に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項２４】
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが、
ｍｉＲ−１２４標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−１標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−１４３標的配列の１つ以上のコピー；
ｍｉＲ−１２８標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−２１９ａ標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−１２２標的配列の１つ以上のコピー；
ｍｉＲ−１２８標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−２０４標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−２１９標的配列の１つ以上のコピー；あるいは
ｍｉＲ−２１７標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−１３７標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−１２６標的配列の１つ以上のコピー
を含む、請求項１２〜２３のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項２５】
前記組換えＤＮＡ分子が、前記自己複製性ポリヌクレオチドを含むプラスミドである、請求項１〜２４のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項２６】
組換えＤＮＡ分子であって、
（ｉ）ウイルスゲノムのセンス配列を含む第１一本鎖ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）分子、及び
（ｉｉ）前記ウイルスゲノムのアンチセンス配列を含む第２ｓｓＤＮＡ分子
を含み、
前記第１及び第２ｓｓＤＮＡ分子の各々が３’末端逆位反復配列（ＩＴＲ）及び５’ＩＴＲを含むものであり、
前記センスｓｓＤＮＡ分子の前記３’末端が前記アンチセンスｓｓＤＮＡ分子の前記５’末端に共有結合で繋げられ、かつ前記センスｓｓＤＮＡ分子の前記５’末端が前記アンチセンスｓｓＤＮＡ分子の前記３’末端に共有結合で繋げられて末端閉鎖型線形二本鎖腫瘍溶解性ウイルス（Ｏｖ）ＤＮＡ分子を形成している、前記組換えＤＮＡ分子。
【請求項２７】
前記コードされるウイルスがポリオウイルス（ＰＶ）または水疱性口炎ウイルス（ＶＳＶ）ゲノムである、請求項２６に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項２８】
前記第１及び第２ｓｓＤＮＡ分子の各々がさらに、前記ウイルスゲノム配列のすぐ５’側のリボザイムコード配列、及び前記ウイルスゲノム配列のすぐ３’側のリボザイムコード配列を含む、請求項２６または２７に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項２９】
前記３’及び５’ＩＴＲがＡＡＶに由来する、請求項２６〜２８のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子。
【請求項３０】
有効量の、請求項１〜２９のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子と、
哺乳動物対象への投与に適した担体と
を含む組成物。
【請求項３１】
請求項１〜２９のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子を含む粒子。
【請求項３２】
前記粒子が、ナノ粒子、エクソソーム、リポソーム及びリポプレックスからなる群から選択される、請求項３１に記載の粒子。
【請求項３３】
前記粒子が、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）である、請求項３１に記載の粒子。
【請求項３４】
前記ＬＮＰが、カチオン性脂質、コレステロール及び中性脂質を含む、請求項３３に記載の粒子。
【請求項３５】
前記カチオン性脂質が１，２−ジオレオイル−３−トリメチルアンモニウム−プロパン（ＤＯＴＡＰ）であり、前記中性脂質が１，２−ジラウロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＬＰＥ）または１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）である、請求項３４に記載の粒子。
【請求項３６】
リン脂質−ポリマー複合体をさらに含み、
前記リン脂質−ポリマー複合体が、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−ポリ（エチレングリコール）（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ）、または１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［アミノ（ポリエチレングリコール）］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−アミン）である、
請求項３４または３５に記載の粒子。
【請求項３７】
前記ＬＮＰを細胞と接触させることでウイルス粒子が前記細胞によって産生され、前記ウイルス粒子が感染性及び溶解性である、請求項３３〜３６のいずれかに記載の粒子。
【請求項３８】
複数の、請求項３３〜３７のいずれか１項に記載の粒子を含む、治療用組成物であって、前記複数の粒子の平均粒径が約１５０ｎｍ〜約５００ｎｍである、前記治療用組成物。
【請求項３９】
対象への前記組成物の送達によって前記カプセル封入ＤＮＡ発現カセットが標的細胞に送達され、前記カプセル封入ＤＮＡ発現カセットが、前記標的細胞を溶解させることができる感染性ウイルスを生み出す、請求項３８に記載の治療用組成物。
【請求項４０】
前記組成物が静脈内または腫瘍内に送達される、請求項３９に記載の治療用組成物。
【請求項４１】
前記標的細胞ががん細胞である、請求項３９または４０に記載の治療用組成物。
【請求項４２】
請求項１〜２９のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子を含む無機粒子。
【請求項４３】
前記無機粒子が、金ナノ粒子（ＧＮＰ）、金ナノロッド（ＧＮＲ）、磁気ナノ粒子（ＭＮＰ）、磁気ナノチューブ（ＭＮＴ）、カーボンナノホーン（ＣＮＨ）、カーボンフラーレン、カーボンナノチューブ（ＣＮＴ）、リン酸カルシウムナノ粒子（ＣＰＮＰ）、メソポーラスシリカナノ粒子（ＭＳＮ）、シリカナノチューブ（ＳＮＴ）、または星状中空シリカナノ粒子（ＳＨＳＮ）からなる群から選択される、請求項４２に記載の粒子。
【請求項４４】
がん細胞を死滅させる方法における使用のための、請求項３１〜３７及び４２〜４３のいずれか１項に記載の粒子を含む組成物、または請求項３８〜４１のいずれか１項に記載の治療用組成物であって、
前記方法が、前記がん細胞を、前記組成物または治療用組成物に、前記粒子を前記がん細胞に細胞内送達するのに十分な条件の下で曝露すること
を含み、カプセル封入ポリヌクレオチドによって生み出される複製可能ウイルスが前記がん細胞の死滅をもたらす、前記組成物または治療用組成物。
【請求項４５】
前記方法が、生体内、試験管内または生体外で実施されることを特徴とする、請求項４４に記載の組成物または治療用組成物。
【請求項４６】
対象のがんを治療するための、請求項３１〜３７及び４２〜４３のいずれか１項に記載の粒子を含む組成物、または請求項３８〜４１のいずれか１項に記載の治療用組成物。
【請求項４７】
前記組成物または前記治療用組成物が、静脈内に投与される、鼻腔内に投与される、吸入剤として投与される、または腫瘍中に直接注射されることを特徴とする、請求項４６に記載の組成物または治療用組成物。
【請求項４８】
前記組成物または前記治療用組成物が前記対象に繰り返し投与されることを特徴とする、請求項４６または４７に記載の組成物または治療用組成物。
【請求項４９】
前記がんが、肺癌、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、大腸癌、結腸癌、膵臓癌、肝臓癌、胃癌、頭頸部癌、甲状腺癌、悪性神経膠腫、神経膠芽腫、メラノーマ、Ｂ細胞慢性リンパ球性白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、及び辺縁帯リンパ腫（ＭＺＬ）から選択される、請求項４６〜４８のいずれかに記載の組成物または治療用組成物。
【請求項５０】
前記肺癌が小細胞肺癌または非小細胞肺癌である、請求項４９に記載の組成物または治療用組成物。
【請求項５１】
前記肝臓癌が肝細胞癌腫（ＨＣＣ）である、請求項４９に記載の組成物または治療用組成物。
【請求項５２】
請求項１〜２９のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子を製造する方法であって、
ａ．前記組換えＤＮＡ分子を第１ウイルス発現ベクターの中に挿入すること
であって、前記組換えＤＮＡ分子が前記ポリヌクレオチドの５’アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）由来末端逆位反復配列（ＩＴＲ）及び３’ＡＡＶ由来ＩＴＲ末端を含む、前記挿入すること、
ｂ．ＩＴＲによって媒介される複製に必要とされるＡＡＶタンパク質をコードするポリヌクレオチドを第２ウイルス発現ベクターの中に挿入すること、ならびに
ｃ．前記第１及び前記第２ウイルス発現ベクターを細胞に細胞内送達すること
を含み、
前記組換えＤＮＡ分子がゲノムの中に安定的に組み込まれ、
前記細胞が、前記ＩＴＲに挟まれたポリヌクレオチドを、ＩＴＲの非存在下で生み出される場合よりも多い量で産生する、前記方法。
【請求項５３】
前記ウイルス発現ベクターがヘルペスウイルスまたはバキュロウイルスである、請求項５２に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５９】
一実施形態では、ウイルス発現ベクターはヘルペスウイルスまたはバキュロウイルスである。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
複製可能ウイルスゲノムをコードするポリヌクレオチド配列を含む組換えＤＮＡ分子を含む脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）であって、
前記ポリヌクレオチド配列が、哺乳動物ＲＮＡポリメラーゼＩＩ（Ｐｏｌ  ＩＩ）に結合することができるプロモーター配列に機能可能に繋げられており、かつ３’リボザイムコード配列と５’リボザイムコード配列とに挟まれており、
前記複製可能ウイルスゲノムをコードする前記ポリヌクレオチドの起源が非ウイルス性である、前記ＬＮＰ。
（項目２）
前記複製可能ウイルスゲノムが一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）ウイルスである、項目１に記載のＬＮＰ。
（項目３）
前記複製可能ウイルスゲノムが、一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）ウイルスであり、プラスセンス（（＋）センス）またはマイナスセンス（（−）センス）ｓｓＲＮＡウイルスである、項目１に記載のＬＮＰ。
（項目４）
前記複製可能ウイルスゲノムが（＋）センスｓｓＲＮＡウイルスであり、前記（＋）センスｓｓＲＮＡウイルスがピコルナウイルスである、項目３に記載のＬＮＰ。
（項目５）
前記ピコルナウイルスがセネカバレーウイルス（ＳＶＶ）またはコクサッキーウイルスである、項目４に記載のＬＮＰ。
（項目６）
前記ＬＮＰを細胞と接触させることでウイルス粒子が前記細胞によって産生され、前記ウイルス粒子が感染性及び溶解性である、項目１〜５のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
（項目７）
前記組換えＤＮＡ分子がさらに、外来搭載薬タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列を含む、項目１〜６のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
（項目８）
前記外来搭載薬タンパク質が、蛍光タンパク質、酵素タンパク質、サイトカイン、ケモカイン、または細胞表面受容体に結合することができる抗原結合性分子である、項目７に記載のＬＮＰ。
（項目９）
前記サイトカインがＦｌｔ３リガンド及びＩＬ−１８から選択される、項目８に記載のＬＮＰ。
（項目１０）
前記ケモカインがＣＸＣＬ１０及びＣＣＬ４から選択される、項目８に記載のＬＮＰ。
（項目１１）
前記抗原結合性分子が、免疫チェックポイント受容体に対する結合及び阻害を行うことができる、項目８に記載のＬＮＰ。
（項目１２）
前記免疫チェックポイント受容体がＰＤ１である、項目１１に記載のＬＮＰ。
（項目１３）
前記複製可能ウイルスゲノムをコードする前記核酸配列の中にマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）標的配列（ｍｉＲ−ＴＳ）カセットが挿入されており、前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが１つ以上のｍｉＲＮＡ標的配列を含み、細胞における対応する１つ以上のｍｉＲＮＡの発現が前記細胞における前記複製可能ウイルスゲノムの複製を阻害する、項目１〜１２のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
（項目１４）
前記１つ以上のｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ−１２４、ｍｉＲ−１、ｍｉＲ−１４３、ｍｉＲ−１２８、ｍｉＲ−２１９、ｍｉＲ−２１９ａ、ｍｉＲ−１２２、ｍｉＲ−２０４、ｍｉＲ−２１７、ｍｉＲ−１３７、及びｍｉＲ−１２６から選択される、項目１３に記載のＬＮＰ。
（項目１５）
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが、ｍｉＲ−１２４標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−１標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−１４３標的配列の１つ以上のコピーを含む、項目１４に記載のＬＮＰ。
（項目１６）
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが、ｍｉＲ−１２８標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−２１９ａ標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−１２２標的配列の１つ以上のコピーを含む、項目１４に記載のＬＮＰ。
（項目１７）
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが、ｍｉＲ−１２８標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−２０４標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−２１９標的配列の１つ以上のコピーを含む、項目１４に記載のＬＮＰ。
（項目１８）
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが、ｍｉＲ−２１７標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−１３７標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−１２６標的配列の１つ以上のコピーを含む、項目１４に記載のＬＮＰ。
（項目１９）
前記組換えＤＮＡ分子が、複製可能ウイルスゲノムをコードする前記ポリヌクレオチド配列を含むプラスミドである、項目１〜１８のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
（項目２０）
前記ＬＮＰが、カチオン性脂質、コレステロール及び中性脂質を含む、項目１〜１９のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
（項目２１）
前記カチオン性脂質が１，２−ジオレオイル−３−トリメチルアンモニウム−プロパン（ＤＯＴＡＰ）であり、前記中性脂質が１，２−ジラウロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＬＰＥ）または１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）である、項目２０に記載のＬＮＰ。
（項目２２）
リン脂質−ポリマー複合体をさらに含み、
前記リン脂質−ポリマー複合体が、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−ポリ（エチレングリコール）（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ）、または１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［アミノ（ポリエチレングリコール）］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−アミン）である、
項目２０または項目２１に記載のＬＮＰ。
（項目２３）
ヒアルロナンが前記ＬＮＰの表面と複合している、項目１〜２２のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
（項目２４）
複数の、項目１〜２３のいずれか１項に記載の脂質ナノ粒子
を含む、治療用組成物であって、前記複数のＬＮＰの平均粒径が約１５０ｎｍ〜約５００ｎｍである、前記治療用組成物。
（項目２５）
前記複数のＬＮＰの平均粒径が、約２００ｎｍ〜約５００ｎｍ、約３００ｎｍ〜約５００ｎｍ、約３５０ｎｍ〜約５００ｎｍ、約４００ｎｍ〜約５００ｎｍ、約４２５ｎｍ〜約５００ｎｍ、約４５０ｎｍ〜約５００ｎｍ、または約４７５ｎｍ〜約５００ｎｍである、項目２４に記載の治療用組成物。
（項目２６）
前記複数のＬＮＰの平均ゼータ電位が、約−２０ｍＶ未満、約−３０ｍＶ未満、約３５ｍＶ未満、または約−４０ｍＶ未満である、項目２４または項目２５に記載の治療用組成物。
（項目２７）
前記複数のＬＮＰの平均ゼータ電位が、約−５０ｍＶ〜約−２０ｍＶ、約−４０ｍＶ〜約−２０ｍＶ、または約−３０ｍＶ〜約−２０ｍＶである、項目２６に記載の治療用組成物。
（項目２８）
前記複数のＬＮＰの平均ゼータ電位が、約−３０ｍＶ、約−３１ｍＶ、約−３２ｍＶ、約−３３ｍＶ、約−３４ｍＶ、約−３５ｍＶ、約−３６ｍＶ、約−３７ｍＶ、約−３８ｍＶ、約−３９ｍＶ、または約−４０ｍＶである、項目２６または項目２７に記載の治療用組成物。
（項目２９）
対象への前記治療用組成物の投与によって前記組換えＤＮＡポリヌクレオチドが前記対象の標的細胞に送達され、前記組換えＤＮＡポリヌクレオチドが、前記対象の前記標的細胞を溶解させることができる感染性ウイルスを生み出す、項目２４〜２８のいずれか１項に記載の治療用組成物。
（項目３０）
前記組成物が静脈内または腫瘍内に送達される、項目２９に記載の治療用組成物。
（項目３１）
前記標的細胞ががん細胞である、項目２９に記載の治療用組成物。
（項目３２）
がん性腫瘍の成長を阻害することを、それを必要とする対象において行う方法であって、項目２４〜３１のいずれか１項に記載の治療用組成物を、それを必要とする前記対象に投与することを含み、前記組成物の投与が前記腫瘍の前記成長を阻害する、前記方法。
（項目３３）
前記投与が腫瘍内投与または静脈内投与である、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
前記がんが肺癌または肝臓癌である、項目３２または項目３３に記載の方法。
（項目３５）
複製可能ウイルスゲノムをコードするポリヌクレオチド配列を含む組換えＤＮＡ分子であって、
前記ポリヌクレオチド配列が、哺乳動物ＲＮＡポリメラーゼＩＩ（Ｐｏｌ  ＩＩ）に結合することができるプロモーター配列に機能可能に繋げられており、かつ３’リボザイムコード配列と５’リボザイムコード配列とに挟まれており、
前記複製可能ウイルスゲノムをコードする前記ポリヌクレオチドの起源が非ウイルス性である、前記組換えＤＮＡ分子。
（項目３６）
前記コードされるウイルスが一本鎖ＲＮＡ（ｓｓＲＮＡ）ウイルスである、項目３５に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目３７）
前記ｓｓＲＮＡウイルスがプラスセンス（（＋）センス）またはマイナスセンス（（−）センス）ｓｓＲＮＡウイルスである、項目３６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目３８）
前記（＋）センスｓｓＲＮＡウイルスがピコルナウイルスである、項目３７に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目３９）
前記ピコルナウイルスがセネカバレーウイルス（ＳＶＶ）またはコクサッキーウイルスである、項目３８に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目４０）
前記組換えＤＮＡ分子が、非ウイルス性送達ビヒクルによって細胞内に導入されたときに感染性の溶解性ウイルスを生み出すことができる、項目３５〜３９のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目４１）
前記組換えＤＮＡ分子がさらに、外来搭載薬タンパク質をコードするポリヌクレオチド配列を含む、項目３５〜３９のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目４２）
前記外来搭載薬タンパク質が、蛍光タンパク質、酵素タンパク質、サイトカイン、ケモカイン、細胞表面受容体に対するリガンド、または細胞表面受容体に結合することができる抗原結合性分子である、項目４１に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目４３）
前記サイトカインがＩＬ−１８である、項目４２に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目４４）
細胞表面受容体に対する前記リガンドがＦｌｔ３リガンドである、項目４２に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目４５）
前記ケモカインがＣＸＣＬ１０及びＣＣＬ４から選択される、項目４２に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目４６）
前記抗原結合性分子が、免疫チェックポイント受容体に対する結合及び阻害を行うことができる、項目４２に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目４７）
前記免疫チェックポイント受容体がＰＤ１である、項目４６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目４８）
前記複製可能ウイルスゲノムをコードする前記核酸配列の中にマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）標的配列（ｍｉＲ−ＴＳ）カセットが挿入されており、
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが１つ以上のｍｉＲＮＡ標的配列を含み、
細胞における対応する１つ以上のｍｉＲＮＡの発現が、前記細胞における前記コードされるウイルスの複製を阻害する、
項目３５〜４７のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目４９）
前記１つ以上のｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ−１２４、ｍｉＲ−１、ｍｉＲ−１４３、ｍｉＲ−１２８、ｍｉＲ−２１９、ｍｉＲ−２１９ａ、ｍｉＲ−１２２、ｍｉＲ−２０４、ｍｉＲ−２１７、ｍｉＲ−１３７、及びｍｉＲ−１２６から選択される、項目４８に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目５０）
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが、ｍｉＲ−１２４標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−１標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−１４３標的配列の１つ以上のコピーを含む、項目４９に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目５１）
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが、ｍｉＲ−１２８標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−２１９ａ標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−１２２標的配列の１つ以上のコピーを含む、項目４９に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目５２）
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが、ｍｉＲ−１２８標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−２０４標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−２１９標的配列の１つ以上のコピーを含む、項目４９に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目５３）
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが、ｍｉＲ−２１７標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−１３７標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−１２６標的配列の１つ以上のコピーを含む、項目４９に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目５４）
前記組換えＤＮＡ分子が、複製可能ウイルスゲノムをコードする前記ポリヌクレオチド配列を含むプラスミドまたはＮａｎｏＶである、項目３５〜５３のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目５５）
複製可能ウイルスゲノムをコードするポリヌクレオチド配列を含む組換えＤＮＡ分子であって、
前記複製可能ウイルスをコードする前記ポリヌクレオチド配列の起源が非ウイルス性であり、
前記組換えＤＮＡ分子が、非ウイルス性送達ビヒクルによって細胞内に導入されたときに複製可能ウイルスを生み出すことができる、
前記組換えＤＮＡ分子。
（項目５６）
前記複製可能ウイルスゲノムがＤＮＡウイルスのゲノムまたはＲＮＡウイルスのゲノムである、項目５５に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目５７）
前記ＤＮＡゲノムまたはＲＮＡゲノムが二本鎖または一本鎖ウイルスである、項目５６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目５８）
前記一本鎖ゲノムがプラスセンス（（＋）センス）またはマイナスセンス（（−）センス）ゲノムである、項目５７に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目５９）
前記細胞が哺乳動物細胞である、項目５５に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目６０）
前記細胞が、哺乳動物対象の中に存在している哺乳動物細胞である、項目５９に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目６１）
前記複製可能ウイルスが、アデノウイルス、コクサッキーウイルス、ポリオウイルス、セネカバレーウイルス、ウマヘルペスウイルス、単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ−１）、ラッサウイルス、マウス白血病ウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、ニューカッスル病ウイルス、麻疹ウイルス、パルボウイルス、レオウイルス、シンドビスウイルス、ワクチニアウイルス、粘液腫ウイルス、水疱性口炎ウイルス（ＶＳＶ）、マラバウイルスからなる群から選択される、項目５５に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目６２）
前記複製可能ウイルスゲノムをコードする前記ポリヌクレオチドの中に挿入された１つ以上のマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）標的配列（ｍｉＲ−ＴＳ）カセットをさらに含み、
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが１つ以上のｍｉＲＮＡ標的配列を含み、
細胞における対応する１つ以上のｍｉＲＮＡの発現が、前記細胞における前記コードされるウイルスの複製を阻害する、
項目５５〜６１のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目６３）
前記１つ以上のｍｉＲ−ＴＳカセットが１つ以上の必須ウイルス遺伝子の５’非翻訳領域（ＵＴＲ）または３’ＵＴＲの中に組み込まれている、項目６２に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目６４）
前記１つ以上の必須ウイルス遺伝子が、ＵＬ１、ＵＬ５、ＵＬ６、ＵＬ７、ＵＬ８、ＵＬ９、ＵＬ１１、ＵＬ１２、ＵＬ１４、ＵＬ１５、ＵＬ１７、ＵＬ１８、ＵＬ１９、ＵＬ２０、ＵＬ２２、ＵＬ２５、ＵＬ２６、ＵＬ２６．５、ＵＬ２７、ＵＬ２８、ＵＬ２９、ＵＬ３０、ＵＬ３１、ＵＬ３２、ＵＬ３３、ＵＬ３４、ＵＬ３５、ＵＬ３６、ＵＬ３７、ＵＬ３８、ＵＬ３９、ＵＬ４０、ＵＬ４２、ＵＬ４８、ＵＬ４９、ＵＬ５０、ＵＬ５２、ＵＬ５３、ＵＬ５４、ＵＳ１、ＵＳ３、ＵＳ４、ＵＳ５、ＵＳ６、ＵＳ７、ＵＳ８、ＵＳ１２、ＩＣＰ０、ＩＣＰ４、ＩＣＰ２２、ＩＣＰ２７、ＩＣＰ４７、ＰＢ、Ｆ、Ｂ５Ｒ、ＳＥＲＯ−１、Ｃａｐ、Ｒｅｖ、ＶＰ１〜４、核タンパク質（Ｎ）、リンタンパク質（Ｐ）、マトリックスタンパク質（Ｍ）、糖タンパク質（Ｇ）、ポリメラーゼ（Ｌ）、Ｅ１、Ｅ２、Ｅ３、Ｅ３、ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３、ＶＰ４、２Ａ、２Ｂ、２Ｃ、３Ａ、３Ｂ、３Ｃ、及び３Ｄからなる群から選択される、項目６３に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目６５）
前記１つ以上のｍｉＲ−ＴＳカセットが１つ以上の非必須遺伝子の５’非翻訳領域（ＵＴＲ）または３’ＵＴＲの中に組み込まれている、項目６２に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目６６）
前記ポリヌクレオチドが、レプリコン、プラスミド、コスミド、ファージミド、トランスポゾン、細菌人工染色体、酵母人工染色体、または末端閉鎖型線形二本鎖腫瘍溶解性ウイルス（Ｏｖ）ＤＮＡ分子から選択される核酸ベクターの中に挿入されている、項目５５〜６５のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目６７）
前記ポリヌクレオチドが、ＤＮＡポリヌクレオチドであり、さらに、前記複製可能ウイルスゲノムをコードする前記核酸配列の５’末端に第１ＡＡＶ由来末端逆位反復配列（ＩＴＲ）、及び前記複製可能ウイルスゲノムをコードする前記核酸配列の３’末端に第２ＡＡＶ由来ＩＴＲを含む、項目５５に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目６８）
前記ポリヌクレオチドが、ＤＮＡポリヌクレオチドであり、さらに、前記複製可能ウイルスゲノムをコードする前記核酸配列のすぐ３’側の第１リボザイムコード配列、及び前記複製可能ウイルスゲノムをコードする前記核酸配列のすぐ５’側の第２リボザイムコード配列を含む、項目５５に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目６９）
前記第１及び第２リボザイムコード配列が、ハンマーヘッド型リボザイムまたはデルタ肝炎ウイルスリボザイムをコードする、項目６８に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目７０）
前記プロモーター配列が、真核生物ＲＮＡポリメラーゼに結合することができる、項目５５に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目７１）
前記プロモーター配列が、哺乳動物ＲＮＡポリメラーゼに結合することができる、項目５５に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目７２）
前記ポリヌクレオチドがＤＮＡポリヌクレオチドであり、前記哺乳動物ポリメラーゼが感染性複製可能ＲＮＡウイルスの転写を促す、項目５５に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目７３）
前記ポリヌクレオチドがＤＮＡポリヌクレオチドであり、前記哺乳動物ポリメラーゼが感染性複製可能ＤＮＡウイルスの転写を促す、項目５５に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目７４）
前記プロモーター配列が選択的にがん細胞における前記ポリヌクレオチドの転写を促す、項目５５に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目７５）
前記プロモーター配列が、ｈＴＥＲＴ、ＨＥ４、ＣＥＡ、ＯＣ、ＡＲＦ、ＣｇＡ、ＧＲＰ７８、ＣＸＣＲ４、ＨＭＧＢ２、ＩＮＳＭ１、メソテリン、ＯＰＮ、ＲＡＤ５１、ＴＥＴＰ、Ｈ１９、ｕＰＡＲ、ＥＲＢＢ２、ＭＵＣ１、Ｆｒｚ１、またはＩＧＦ２−Ｐ４からなる群から選択される遺伝子に由来する、項目５５〜７６のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目７６）
細胞毒性ポリペプチド、サイトカイン、ケモカイン、抗原結合性分子、細胞表面受容体に対するリガンド、可溶性受容体、酵素、サソリポリペプチド、ヘビポリペプチド、クモポリペプチド、ハチポリペプチド、カエルポリペプチド及び治療用核酸からなる群から選択される搭載薬分子をコードする核酸配列をさらに含む、項目５５〜７５のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目７７）
１つ以上のｍｉＲ−ＴＳカセットが、前記搭載薬分子をコードする前記核酸配列の５’非翻訳領域（ＵＴＲ）または３’ＵＴＲ配列の中に組み込まれている、項目７６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目７８）
前記細胞毒性ポリペプチドが、ｐ５３、ジフテリア毒素（ＤＴ）、シュードモナス外毒素Ａ（ＰＥＡ）、Ｉ型リボソーム不活性化タンパク質（ＲＩＰ）、ＩＩ型ＲＩＰ、または志賀様毒素１（Ｓｌｔ１）から選択される、項目７６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目７９）
前記酵素が、
メタロプロテアーゼ、コラゲナーゼ、エラスターゼ、ヒアルロニダーゼ、カスパーゼ、ゼラチナーゼ、または
遺伝子指向性酵素プロドラッグ療法（ＧＤＥＰＴ）システムの一部であり単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼ、シトシンデアミナーゼ、ニトロレダクターゼ、カルボキシペプチダーゼＧ２、プリンヌクレオシドホスホリラーゼもしくはシトクロムＰ４５０から選択される酵素
から選択される、項目７６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目８０）
前記ゼラチナーゼが線維芽細胞活性化タンパク質（ＦＡＰ）である、項目７９に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目８１）
前記メタロプロテアーゼがマトリックスメタロプロテアーゼ（例えばＭＭＰ９）またはＡＤＡＭ１７である、項目７９に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目８２）
前記サイトカインが、オステオポンチン、ＩＬ−１３、ＴＧＦβ、ＩＬ−３５、ＩＬ−１８、ＩＬ−１５、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＦＮα、ＩＦＮβ、ＩＦＮγからなる群から選択される、項目７６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目８３）
前記ケモカインが、ＣＸＣＬ１０、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＸＣＬ９及びＣＣＬ２１から選択される、項目７６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目８４）
細胞表面受容体に対する前記リガンドが、ＮＫＧ２Ｄリガンド、ニューロピリンリガンド、Ｆｌｔ３リガンド、ＣＤ４７リガンドである、項目７６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目８５）
前記抗原結合性分子が、
ＰＤ−１、ＰＤＬ−１、ＣＴＬＡ４、ＣＣＲ４、ＯＸ４０、ＣＤ２００Ｒ、ＣＤ４７、ＣＳＦ１Ｒ、ＥｐｈＡ２、ＣＤ１９、ＥｐＣＡＭ、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＣＤ３３、ＥＧＦＲ、ＣＣＲ４、ＣＤ２００、ＣＤ４０、ＣＤ４７、ＨＥＲ２、ＤＬＬ３、４−１ＢＢ、１７−１Ａ、ＧＤ２、及び表７中に列挙されている腫瘍抗原のうちの任意の１つ以上
からなる群から選択される細胞表面抗原に結合する、項目７６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目８６）
前記サソリポリペプチドが、クロロトキシン、ＢｍＫｎ−２、ネオプラジン１、ネオプラジン２及びマウリポリン（ｍａｕｒｉｐｏｒｉｎ）からなる群から選択される、項目７６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目８７）
前記ヘビポリペプチドが、コントルトロスタチン、アポキシンＩ、ボトロプストキシンＩ、ＢＪｃｕＬ、ＯＨＡＰ−１、ロドストミン（ｒｈｏｄｏｓｔｏｍｉｎ）、ｄｒＣＴ−Ｉ、ＣＴＸ−ＩＩＩ、Ｂ１Ｌ、及びＡＣＴＸ−６からなる群から選択される、項目７６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目８８）
前記クモポリペプチドが、ラタルシン及びヒアルロニダーゼからなる群から選択される、項目７６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目８９）
前記ハチポリペプチドが、メリチン及びアパミンからなる群から選択される、項目７６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目９０）
前記カエルポリペプチドが、ＰｓＴ−１、ＰｄＴ−１、及びＰｄＴ−２からなる群から選択される、項目７６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目９１）
前記搭載薬タンパク質が免疫細胞に対して作用する、項目７６〜８４のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目９２）
前記免疫細胞が、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ＮＫＴ細胞、マクロファージ、及び／または樹状細胞からなる群から選択される、項目９１に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目９３）
前記搭載薬ポリペプチドが、
ヒト細胞表面抗原に結合することができる第１ドメインと、ヒト腫瘍細胞抗原に結合することができる第２ドメインとを含む二分ポリペプチド
である、項目７６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目９４）
前記二分ポリペプチドの片方または両方のドメインが、抗体、一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、Ｆ（ａｂ）、免疫グロブリン重鎖可変ドメイン、ダイアボディ、フレキシボディ、ＤＯＣＫ−ＡＮＤ−ＬＯＣＫ（商標）抗体、及びモノクローナル抗イディオタイプ抗体（ｍＡｂ２）からなる群から選択される抗原結合性分子である、項目９３に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目９５）
前記二分ポリペプチドが、二重可変ドメイン抗体（ＤＶＤ−Ｉｇ（商標））、二重特異性Ｔ細胞係合子（ＢｉＴＥ（商標））、ＤｕｏＢｏｄｙ（登録商標）、二重親和性再指向性（ＤＡＲＴ）ポリペプチドまたはＴａｎｄａｂ（登録商標）である、項目９４に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目９６）
前記抗体が、操作されたＦｃドメインを有するＩｇＧ抗体である、項目９４に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目９７）
前記治療用核酸が、アンタゴミール、短鎖ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、リボザイムまたはアプタマーである、項目７６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目９８）
前記ｍｉＲ−ＴＳカセット中に含まれた前記ｍｉＲＮＡ標的配列に結合するｍｉＲＮＡが発現している細胞において前記ポリヌクレオチドが複製されない、または最小限に複製される、項目６２〜９７のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目９９）
前記ｍｉＲＮＡが表３から選択される、項目９８に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１００）
前記１つ以上のｍｉＲＮＡが、ｍｉＲ−１２４、ｍｉＲ−１、ｍｉＲ−１４３、ｍｉＲ−１２８、ｍｉＲ−２１９、ｍｉＲ−２１９ａ、ｍｉＲ−１２２、ｍｉＲ−２０４、ｍｉＲ−２１７、ｍｉＲ−１３７、及びｍｉＲ−１２６から選択される、項目９８に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１０１）
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが、ｍｉＲ−１２４標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−１標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−１４３標的配列の１つ以上のコピーを含む、項目１００に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１０２）
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが、ｍｉＲ−１２８標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−２１９ａ標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−１２２標的配列の１つ以上のコピーを含む、項目１００に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１０３）
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが、ｍｉＲ−１２８標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−２０４標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−２１９標的配列の１つ以上のコピーを含む、項目１００に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１０４）
前記ｍｉＲ−ＴＳカセットが、ｍｉＲ−２１７標的配列の１つ以上のコピー、ｍｉＲ−１３７標的配列の１つ以上のコピー、及びｍｉＲ−１２６標的配列の１つ以上のコピーを含む、項目１００に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１０５）
前記組換えＤＮＡ分子が、前記自己複製性ポリヌクレオチドを含むプラスミドである、項目５５〜１０４のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１０６）
組換えＤＮＡ分子であって、
（ｉ）ウイルスゲノムのセンス配列を含む第１一本鎖ＤＮＡ（ｓｓＤＮＡ）分子、及び
（ｉｉ）前記ウイルスゲノムのアンチセンス配列を含む第２ｓｓＤＮＡ分子
を含み、
前記第１及び第２ｓｓＤＮＡ分子の各々が３’末端逆位反復配列及び５’末端逆位反復配列を含むものであり、
前記センスｓｓＤＮＡ分子の前記３’末端が前記アンチセンスｓｓＤＮＡ分子の前記５’末端に共有結合で繋げられ、かつ前記センスｓｓＤＮＡ分子の前記５’末端が前記アンチセンスｓｓＤＮＡ分子の前記３’末端に共有結合で繋げられて末端閉鎖型線形二本鎖腫瘍溶解性ウイルス（Ｏｖ）ＤＮＡ分子を形成している、前記組換えＤＮＡ分子。
（項目１０７）
前記コードされるウイルスがマイナスセンスまたはプラスセンス一本鎖（ｓｓ）ＲＮＡウイルスである、項目１０６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１０８）
前記プラスセンスｓｓＲＮＡウイルスがポリオウイルス（ＰＶ）である、項目１０７に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１０９）
前記マイナスセンスｓｓＲＮＡウイルスが水疱性口炎ウイルス（ＶＳＶ）ゲノムである、項目１０７に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１１０）
前記第１及び第２ｓｓＤＮＡ分子の各々がさらに、前記ウイルスゲノム配列のすぐ５’側のリボザイムコード配列、及び前記ウイルスゲノム配列のすぐ３’側のリボザイムコード配列を含む、項目１０６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１１１）
前記ウイルスゲノムが、１つ以上の必須ウイルス遺伝子の中に挿入された１つ以上のマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）標的配列を含む、項目１０６〜１１０のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１１２）
前記１つ以上のｍｉＲＮＡ標的配列が、前記１つ以上の必須ウイルス遺伝子の３’非翻訳領域（ＵＴＲ）及び／または５’ＵＴＲの中に挿入されている、項目１１１に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１１３）
前記１つ以上のｍｉＲＮＡ標的配列が、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つまたはそれより多くの必須ウイルス遺伝子の中に挿入されている、項目１１１または項目１１２に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１１４）
少なくとも２つ、少なくとも３つまたは少なくとも４つのｍｉＲＮＡ標的配列が１つ以上の必須ウイルス遺伝子の中に挿入されている、項目１１１〜１１３のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１１５）
前記少なくとも２つ、少なくとも３つまたは少なくとも４つのｍｉＲＮＡ標的配列が、１つのｍｉＲＮＡの標的配列を含む、項目１１４に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１１６）
前記少なくとも２つ、少なくとも３つまたは少なくとも４つのｍｉＲＮＡ標的配列が、少なくとも２つ、少なくとも３つまたは少なくとも４つの異なるｍｉＲＮＡの標的配列を含む、項目１１４に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１１７）
前記ウイルスゲノムがＶＳＶゲノムであり、前記１つ以上のｍｉＲＮＡ標的配列が、核タンパク質（Ｎ）、リンタンパク質（Ｐ）、マトリックスタンパク質（Ｍ）、糖タンパク質（Ｇ）及び／またはポリメラーゼ（Ｌ）タンパク質をコードする遺伝子の１つ以上の中に挿入されている、項目１０６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１１８）
前記ウイルスゲノムがＰＶゲノムであり、前記１つ以上のｍｉＲＮＡ標的配列が、ＶＰ１、ＶＰ２、ＶＰ３、ＶＰ４、２Ａ、２Ｂ、２Ｃ、３Ａ、３Ｂ（ＶＰｇ）、３Ｃまたは３Ｄタンパク質をコードする遺伝子の１つ以上の中に挿入されている、項目１０６に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１１９）
３’及び５’ＩＴＲがＡＡＶに由来する、項目１０６〜１１８のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１２０）
前記ＡＡＶがＡＡＶ２である、項目１１９に記載の組換えＤＮＡ分子。
（項目１２１）
有効量の、項目１〜１２０のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子と、
哺乳動物対象への投与に適した担体と
を含む組成物。
（項目１２２）
項目５５〜１２０のいずれか１項に記載の組換えＤＮＡ分子を含む粒子。
（項目１２３）
前記粒子が生分解性である、項目１２２に記載の粒子。
（項目１２４）
前記粒子が、ナノ粒子、エクソソーム、リポソーム及びリポプレックスからなる群から選択される、項目１２３に記載の粒子。
（項目１２５）
前記エクソソームが、完全エクソソームまたは空エクソソームに由来する改変型エクソソームである、項目１２４に記載の粒子。
（項目１２６）
前記ナノ粒子が、カチオン性脂質、コレステロール及び中性脂質を含む脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）である、項目１２４に記載の粒子。
（項目１２７）
前記カチオン性脂質が１，２−ジオレオイル−３−トリメチルアンモニウム−プロパン（ＤＯＴＡＰ）であり、前記中性脂質が１，２−ジラウロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＬＰＥ）または１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）である、項目１２６に記載のＬＮＰ。
（項目１２８）
リン脂質−ポリマー複合体をさらに含み、
前記リン脂質−ポリマー複合体が、１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−ポリ（エチレングリコール）（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ）、または１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン−Ｎ−［アミノ（ポリエチレングリコール）］（ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−アミン）である、
項目１２６または項目１２７に記載のＬＮＰ。
（項目１２９）
ヒアルロナンが前記ＬＮＰの表面と複合している、項目１２６〜１２８のいずれか１項に記載のＬＮＰ。
（項目１３０）
複数の、項目１２６〜１２９のいずれか１項に記載の脂質ナノ粒子
を含む、治療用組成物であって、前記複数のＬＮＰの平均粒径が約１５０ｎｍ〜約５００ｎｍである、前記治療用組成物。
（項目１３１）
前記複数のＬＮＰの平均粒径が、約２００ｎｍ〜約５００ｎｍ、約３００ｎｍ〜約５００ｎｍ、約３５０ｎｍ〜約５００ｎｍ、約４００ｎｍ〜約５００ｎｍ、約４２５ｎｍ〜約５００ｎｍ、約４５０ｎｍ〜約５００ｎｍ、または約４７５ｎｍ〜約５００ｎｍである、項目１３０に記載の治療用組成物。
（項目１３２）
前記複数のＬＮＰの平均ゼータ電位が、約−２０ｍＶ未満、約−３０ｍＶ未満、約３５ｍＶ未満、または約−４０ｍＶ未満である、項目１３０または項目１３１に記載の治療用組成物。
（項目１３３）
前記複数のＬＮＰの平均ゼータ電位が、約−５０ｍＶ〜約−２０ｍＶ、約−４０ｍＶ〜約−２０ｍＶ、または約−３０ｍＶ〜約−２０ｍＶである、項目１３２に記載の治療用組成物。
（項目１３４）
前記複数のＬＮＰの平均ゼータ電位が、約−３０ｍＶ、約−３１ｍＶ、約−３２ｍＶ、約−３３ｍＶ、約−３４ｍＶ、約−３５ｍＶ、約−３６ｍＶ、約−３７ｍＶ、約−３８ｍＶ、約−３９ｍＶ、または約−４０ｍＶである、項目１３１または項目１３２に記載の治療用組成物。
（項目１３５）
対象への前記組成物の送達によって前記カプセル封入ＤＮＡ発現カセットが標的細胞に送達され、前記カプセル封入ＤＮＡ発現カセットが、前記標的細胞を溶解させることができる感染性ウイルスを生み出す、項目１３０〜１３４のいずれか１項に記載の治療用組成物。
（項目１３６）
前記組成物が静脈内または腫瘍内に送達される、項目１３５に記載の治療用組成物。
（項目１３７）
前記標的細胞ががん細胞である、項目１３６に記載の治療用組成物。
（項目１３８）
項目１〜１２０のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドを含む無機粒子。
（項目１３９）
前記無機粒子が、金ナノ粒子（ＧＮＰ）、金ナノロッド（ＧＮＲ）、磁気ナノ粒子（ＭＮＰ）、磁気ナノチューブ（ＭＮＴ）、カーボンナノホーン（ＣＮＨ）、カーボンフラーレン、カーボンナノチューブ（ＣＮＴ）、リン酸カルシウムナノ粒子（ＣＰＮＰ）、メソポーラスシリカナノ粒子（ＭＳＮ）、シリカナノチューブ（ＳＮＴ）、または星状中空シリカナノ粒子（ＳＨＳＮ）からなる群から選択される、項目１３８に記載の粒子。
（項目１４０）
前記粒子の平均直径が、約５００ｎｍ未満である、約２５０ｎｍ〜約５００ｎｍである、または約３５０ｎｍである、項目１３８または項目１３９に記載の粒子を含む組成物。
（項目１４１）
がん細胞を死滅させる方法であって、
前記がん細胞を、項目１２２〜１４０のいずれか１項に記載の粒子もしくは組成物、またはその組成物に、前記粒子を前記がん細胞に細胞内送達するのに十分な条件の下で曝露すること
を含み、カプセル封入ポリヌクレオチドによって生み出される複製可能ウイルスが前記がん細胞の死滅をもたらす、前記方法。
（項目１４２）
前記複製可能ウイルスが非がん性細胞では生み出されない、項目１４１に記載の方法。
（項目１４３）
前記方法が、生体内、試験管内または生体外で実施される、項目１４１または項目１４２に記載の方法。
（項目１４４）
対象のがんを治療する方法であって、
前記がんに罹患している対象に有効量の、項目１２２〜１４０のいずれか１項に記載の粒子もしくは組成物、またはその組成物を投与すること
を含む、前記方法。
（項目１４５）
前記粒子またはその組成物が、静脈内に投与される、鼻腔内に投与される、吸入剤として投与される、または腫瘍中に直接注射される、項目１４４に記載の方法。
（項目１４６）
前記粒子またはその組成物が前記対象に繰り返し投与される、項目１４４または項目１４５に記載の方法。
（項目１４７）
前記対象が、マウス、ラット、ウサギ、ネコ、イヌ、ウマ、非ヒト霊長類またはヒトである、項目１４４〜１４６のいずれかに記載の方法。
（項目１４８）
前記がんが、肺癌、乳癌、卵巣癌、子宮頸癌、前立腺癌、精巣癌、大腸癌、結腸癌、膵臓癌、肝臓癌、胃癌、頭頸部癌、甲状腺癌、悪性神経膠腫、神経膠芽腫、メラノーマ、Ｂ細胞慢性リンパ球性白血病、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、及び辺縁帯リンパ腫（ＭＺＬ）から選択される、項目１４４〜１４７のいずれかに記載の方法。
（項目１４９）
前記肺癌が小細胞肺癌または非小細胞肺癌である、項目１４８に記載の方法。
（項目１５０）
前記肝臓癌が肝細胞癌腫（ＨＣＣ）である、項目１４８に記載の方法。
（項目１５１）
先行項目のいずれかに記載の組換えＤＮＡ分子を製造する方法であって、
ａ．前記組換えＤＮＡ分子を第１ウイルス発現ベクターの中に挿入すること
であって、前記組換えＤＮＡ分子が前記ポリヌクレオチドの５’アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）由来末端逆位反復配列（ＩＴＲ）及び３’ＡＡＶ由来ＩＴＲ末端を含む、前記挿入すること、
ｂ．ＩＴＲによって媒介される複製に必要とされるＡＡＶタンパク質をコードするポリヌクレオチドを第２ウイルス発現ベクターの中に挿入すること、ならびに
ｃ．前記第１及び前記第２ウイルス発現ベクターを細胞に細胞内送達すること
を含み、
前記組換えＤＮＡ分子がゲノムの中に安定的に組み込まれ、
前記細胞が、前記ＩＴＲに挟まれたポリヌクレオチドを、ＩＴＲの非存在下で生み出される場合よりも多い量で産生する、前記方法。
（項目１５２）
前記ウイルス発現ベクターがヘルペスウイルスまたはバキュロウイルスである、項目１４４に記載の方法。