【手続補正書】
【提出日】令和3年2月5日(2021.2.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
β−クロトーに結合する単離抗体又はその抗原結合フラグメントであって、
配列番号１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）、及び
配列番号２６又は３２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）
を含む抗体又はその抗原結合フラグメント。
【請求項２】
配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項１に記載の単離抗体又は抗原結合フラグメント。
【請求項３】
前記抗体は、配列番号１７のアミノ酸を含む重鎖、及び配列番号２８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項１に記載の単離抗体又は抗原結合フラグメント。
【請求項４】
請求項１に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントと、薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物。
【請求項５】
体重を減少させる方法に使用するための医薬組成物であって、請求項１に記載の抗体又は抗原結合フラグメントを含む医薬組成物の有効な量を含み、前記方法は、必要とする対象に前記医薬組成物の有効な量を投与することを含む医薬組成物。
【請求項６】
食欲又は食物摂取量を減少させる方法に使用するための医薬組成物であって、請求項１に記載の抗体又は抗原結合フラグメントを含む医薬組成物の有効な量を含み、前記方法は、必要とする対象に前記医薬組成物の有効な量を投与することを含む医薬組成物。
【請求項７】
配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項１に記載の単離抗体又は抗原結合フラグメント。
【請求項８】
前記抗体は、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項１に記載の単離抗体又は抗原結合フラグメント。
【請求項９】
請求項２に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントと、薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物。
【請求項１０】
請求項７に記載の抗体又はその抗原結合フラグメントと、薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物。
【請求項１１】
対象の血漿トリグリセリド（ＴＧ）濃度又は血漿総コレステロール（ＴＣ）濃度を低下させる方法に使用するための医薬組成物であって、請求項１に記載の抗体又は抗原結合フラグメントを含む医薬組成物の有効な量を含み、前記方法は、必要とする対象に前記医薬組成物の有効な量を投与することを含む医薬組成物。
【請求項１２】
代謝障害を処置する方法に使用するための医薬組成物であって、請求項１に記載の抗体又は抗原結合フラグメントを含む医薬組成物の有効な量を含み、前記方法は、代謝障害を患う対象に前記医薬組成物の有効な量を投与することを含む医薬組成物。
【請求項１３】
前記対象は、肥満、１型糖尿病及び２型糖尿病、膵炎、脂質異常症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、インスリン抵抗性、高インスリン血症、耐糖能障害、高血糖、メタボリックシンドローム、急性心筋梗塞、高血圧、循環器疾患、粥状動脈硬化、末梢動脈疾患、脳卒中、心不全、冠動脈心疾患、腎疾患、糖尿病合併症、神経障害、胃不全麻痺、インスリンレセプター中における重度の不活性化突然変異と関連する障害のうちの１つ又は複数を患う、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記対象は、急性心筋梗塞、高血圧、循環器疾患、粥状動脈硬化、末梢動脈疾患、脳卒中、心不全、冠動脈心疾患のうちの１つ又は複数を患う、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記対象は、肥満を患う、請求項１３又は１４に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
前記対象は、脂質異常症を患う、請求項１３又は１４に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
前記脂質異常症は、高トリグリセリド血症である、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
前記対象は、糖尿病を患う、請求項１３〜１７のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記糖尿病は、２型糖尿病である、請求項１８に記載の医薬組成物。
【請求項２０】
前記対象は、インスリン抵抗性を患う、請求項１３〜１９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２１】
前記対象は、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を患う、請求項１３〜２０のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項２２】
前記対象は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を患う、請求項２１に記載の医薬組成物。
【請求項２３】
心血管障害を処置する方法に使用するための医薬組成物であって、請求項１に記載の抗体又はフラグメントを含む医薬組成物の有効な量を含み、前記方法は、心血管障害を患う対象に前記医薬組成物の有効な量を投与することを含む医薬組成物。
【請求項２４】
前記対象は、粥状動脈硬化、末梢動脈疾患、脳卒中、心不全、及び冠動脈心疾患のうちの１つ又は複数を患う、請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
請求項１〜３または７〜８のいずれか一項に記載の、β−クロトーに結合する抗体又はその抗原結合フラグメントをコードするポリヌクレオチド。
【請求項２６】
請求項２５に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
【請求項２７】
請求項２６に記載のベクターまたは請求項２５に記載のポリヌクレオチドを含む宿主細胞。
【請求項２８】
β−クロトーに結合する抗体又はその抗原結合フラグメントを製造する方法であって、前記抗体又はその抗原結合フラグメントの発現に適した条件下で、請求項２７に記載の宿主細胞を培養する工程を含む方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４５０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４５０】
参照による組み込み
本明細書で引用される全ての参考文献（例えば、特許、特許出願、論文、教科書、及び同類のもの）、並びにこの参考文献で引用される参考文献は、これらが既に組み込まれていない限りにおいて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本発明は、以下の態様を提供し得る。
[１]
β−クロトーに結合する単離抗体又はその抗原結合フラグメントであって、
配列番号６、９、１０、又は１２のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）；
配列番号７、１１、又は１３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）；
配列番号８又は１４のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）；
配列番号１９、３１、２２、又は２５のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）；
配列番号２０又は２３のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）；
及び
配列番号２１又は２４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）
を含む抗体又はその抗原結合フラグメント。
[２]
前記抗体又はその抗原結合フラグメントは、
配列番号６、９、１０又は１２のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）；
配列番号７、１１、又は１３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）；
配列番号８又は１４のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）；
配列番号３１、２２、又は２５のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）；
配列番号２０又は２３のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）；
及び
配列番号２１又は２４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）
を含む、上記[１]に記載の単離抗体又はその抗原結合フラグメント。
[３]
前記抗体又はその抗原結合フラグメントは、
配列番号６、９、１０、又は１２のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ１（ＨＣＤＲ１）；
配列番号７、１１、又は１３のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ２（ＨＣＤＲ２）；
配列番号８又は１４のアミノ酸配列を含む重鎖ＣＤＲ３（ＨＣＤＲ３）；
配列番号１９、２２、又は２５のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ１（ＬＣＤＲ１）；
配列番号２０又は２３のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ２（ＬＣＤＲ２）；
及び
配列番号２１又は２４のアミノ酸配列を含む軽鎖ＣＤＲ３（ＬＣＤＲ３）
を含む、上記[１]に記載の単離抗体又はその抗原結合フラグメント。
[４]
前記抗体又はその抗原結合フラグメントは、
（ｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号７のアミノ鎖配列を含むＨＣＤＲ２、配列番号８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、配列番号３１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３；
（ｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号７のアミノ鎖配列を含むＨＣＤＲ２、配列番号８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、配列番号３１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３；
（ｉｉｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１１のアミノ鎖配列を含むＨＣＤＲ２、配列番号８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、配列番号２２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３；
又は
（ｉｖ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１３のアミノ鎖配列を含むＨＣＤＲ２、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、配列番号２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３
を含む、上記[１]に記載の単離抗体又はその抗原結合フラグメント。
[５]
前記抗体又はその抗原結合フラグメントは、
（ｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号７のアミノ鎖配列を含むＨＣＤＲ２、配列番号８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３；
（ｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号７のアミノ鎖配列を含むＨＣＤＲ２、配列番号８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、配列番号１９のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３；
（ｉｉｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１１のアミノ鎖配列を含むＨＣＤＲ２、配列番号８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、配列番号２２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３；
又は
（ｉｖ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１３のアミノ鎖配列を含むＨＣＤＲ２、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、配列番号２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３
を含む、上記[１]に記載の単離抗体又はその抗原結合フラグメント。
[６]
前記抗体又はその抗原結合フラグメントは、
（ｉ）配列番号６のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号７のアミノ鎖配列を含むＨＣＤＲ２、配列番号８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、配列番号１９若しくは３１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３；
（ｉｉ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号７のアミノ鎖配列を含むＨＣＤＲ２、配列番号８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、配列番号１９若しくは３１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３；
（ｉｉｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１１のアミノ鎖配列を含むＨＣＤＲ２、配列番号８のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、配列番号２２のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２４のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３；
又は
（ｉｖ）配列番号１２のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ１、配列番号１３のアミノ鎖配列を含むＨＣＤＲ２、配列番号１４のアミノ酸配列を含むＨＣＤＲ３、配列番号２５のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ１、配列番号２３のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ２、及び配列番号２１のアミノ酸配列を含むＬＣＤＲ３
を含む、上記[１]に記載の単離抗体又はその抗原結合フラグメント。
[７]
前記抗体又はフラグメントは、（ｉ）配列番号１５のアミノ酸配列又はその少なくとも９０％若しくは９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；及び（ｉｉ）配列番号２６若しくは３２のアミノ酸配列又はその少なくとも９０％若しくは９５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、上記[１]〜[６]のいずれかに記載の単離抗体又は抗原結合フラグメント。
[８]
前記抗体又はフラグメントは、配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、上記[１]〜[７]のいずれかに記載の単離抗体又は抗原結合フラグメント。
[９]
前記抗体又はフラグメントは、配列番号２６又は３２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、上記[１]〜[８]のいずれかに記載の単離抗体又は抗原結合フラグメント。
[１０]
前記抗体又はフラグメントは、（ｉ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２６のアミノ酸配列を含むＶＬ、又は（ｉｉ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、上記[８]に記載の単離抗体又は抗原結合フラグメント。
[１１]
前記抗体は、（ｉ）配列番号１７のアミノ酸を含む重鎖、及び配列番号２８のアミノ酸配列を含む軽鎖、又は（ｉｉ）配列番号１７のアミノ酸を含む重鎖、及び配列番号３４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、上記[１]〜[１０]のいずれかに記載の単離抗体又は抗原結合フラグメント。
[１２]
β−クロトーに結合する単離抗体又はその抗原結合フラグメントであって、前記抗体又はフラグメントは、上記[１]〜[１１]のいずれかに記載の単離抗体又はフラグメントと同一のエピトープに結合し、前記抗体又は抗原結合フラグメントは、（ｉ）表２に記載された抗体ＮＯＶ００４の組合せＣＤＲ若しくはＫａｂａｔ  ＣＤＲ、並びに／又は（ｉｉ）配列番号４３若しくは５５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号４７若しくは５７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含まない、単離抗体又はその抗原結合フラグメント。
[１３]
β−クロトーに結合する単離抗体又はその抗原結合フラグメントであって、前記抗体又はフラグメントは、上記[１]〜[１１]のいずれかに記載の単離抗体又はフラグメントと、β−クロトーへの結合に関して競合し、前記抗体又は抗原結合フラグメントは、（ｉ）表２に記載された抗体ＮＯＶ００４の組合せＣＤＲ若しくはＫａｂａｔ  ＣＤＲ、並びに／又は（ｉｉ）配列番号４３若しくは５５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号４７若しくは５７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含まない、単離抗体又はその抗原結合フラグメント。
[１４]
前記抗体又はフラグメントは、（ｉ）表２に記載された抗体ＮＯＶ００４の組合せＣＤＲ若しくはＫａｂａｔ  ＣＤＲ、並びに／又は（ｉｉ）配列番号４３若しくは５５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号４７若しくは５７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含まない、上記[１]〜[１１]のいずれかに記載の単離抗体又は抗原結合フラグメント。
[１５]
上記[１]〜[１４]のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合フラグメントと、薬学的に許容可能な担体とを含む医薬組成物。
[１６]
代謝障害を処置する方法であって、上記[１]〜[１４]のいずれかに記載の抗体又は抗原結合フラグメントを含む医薬組成物の有効な量を、代謝障害を患う対象に投与することを含む方法。
[１７]
前記対象は、肥満、１型糖尿病及び２型糖尿病、膵炎、脂質異常症、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、インスリン抵抗性、高インスリン血症、耐糖能障害、高血糖、及びメタボリックシンドロームのうちの１つ又は複数を患う、上記[１６]に記載の方法。
[１８]
前記対象は、肥満、糖尿病、高トリグリセリド血症、及び脂質異常症のうちの１つ又は複数を患う、上記[１６]に記載の方法。
[１９]
心血管障害を処置する方法であって、上記[１]〜[１８]のいずれかに記載の抗体又はフラグメントを含む医薬組成物の有効な量を、心血管障害を患う対象に投与することを含む方法。
[２０]
前記対象は、粥状動脈硬化、末梢動脈疾患、脳卒中、心不全、及び冠動脈心疾患のうちの１つ又は複数を患う、上記[１９]に記載の方法。
[２１]
医薬としての使用のための、上記[１]〜[１４]のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合フラグメント。
[２２]
体重を減少させる方法であって、上記[１]〜[１４]のいずれかに記載の抗体又は抗原結合フラグメントを含む医薬組成物の有効な量を、必要とする対象に投与することを含む方法。
[２３]
食欲又は食物摂取量を減少させる方法であって、上記[１]〜[１４]のいずれかに記載の抗体又は抗原結合フラグメントを含む医薬組成物の有効な量を、必要とする対象に投与することを含む方法。
[２４]
対象の血漿トリグリセリド（ＴＧ）濃度又は血漿総コレステロール（ＴＣ）濃度を低下させる方法であって、上記[１]〜[１４]のいずれかに記載の抗体又は抗原結合フラグメントを含む医薬組成物の有効な量を、必要とする対象に投与することを含む方法。
[２５]
前記対象は代謝障害を患う、上記[２２]、[２３]、又は[２４]に記載の方法。
[２６]
前記対象は、肥満、１型糖尿病及び２型糖尿病、膵炎、脂質異常症、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、インスリン抵抗性、高インスリン血症、耐糖能障害、高血糖、及びメタボリックシンドロームのうちの１つ又は複数を患う、上記[２５]に記載の方法。
[２７]
上記[１]〜[２６]のいずれかに記載の抗体のうちの１つ若しくは複数、又は前記抗体のいずれか１つのＶＬ及び／若しくはＶＨをコードする核酸。
[２８]
表１に記載された配列に対して少なくとも９０％の同一性を有する配列を含む核酸。
[２９]
表１に記載された配列に対して少なくとも９５％の同一性を有する配列を含む核酸。
[３０]
表１に記載された配列を含む核酸。
[３１]
上記[２７]、[２８]、[２９]、又は[３０]に記載の核酸を含むベクター。
[３２]
上記[３１]に記載のベクターを含む宿主細胞。
[３３]
代謝障害の処置での使用のための、上記[１]〜[１４]のいずれかに記載の抗体又は抗原結合フラグメントを含む医薬組成物。
[３４]
β−クロトーに結合する抗体又はその抗原結合フラグメントを製造する方法であって、前記抗体又はそのフラグメントの発現に適した条件下で、上記[３２]に記載の宿主細胞を培養する工程を含む方法。
[３５]
前記代謝障害は、肥満、糖尿病、高トリグリセリド血症、及び脂質異常症である、上記[３３]に記載の医薬組成物。
[３６]
心血管障害の処置での使用のための、上記[１]〜[１４]のいずれかに記載の抗体又は抗原結合フラグメントを含む医薬組成物。
[３７]
体重を減少させる方法での使用のための、食欲又は食物摂取量を減少させる方法での使用のための、対象の血漿トリグリセリド（ＴＧ）濃度又は血漿総コレステロール（ＴＣ）濃度を低下させる方法での使用のための、上記[１]〜[１４]のいずれかに記載の抗体又は抗原結合フラグメントを含む医薬組成物。
[３８]
対象の、代謝障害を処置するための医薬の調製での、心血管障害を処置するための医薬の調製での、体重を減少させるための医薬の調製での、食欲又は食物摂取量を減少させるための医薬の調製での、血漿ＴＧ濃度又は血漿ＴＣ濃度を低下させるための医薬の調製での、上記[１]〜[１４]のいずれかに記載の抗体又はその抗原結合フラグメントの使用。