【手続補正書】
【提出日】令和3年7月16日(2021.7.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト５Ｔ４に特異的に結合する５Ｔ４結合ドメインと、ヒト４−１ＢＢに特異的に結合する４−１ＢＢ結合ドメインとを含む多特異性ポリペプチドであって、
前記５Ｔ４結合ドメインは、（ｉ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域（ＶＨ）と、（ｉｉ）ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域（ＶＬ）と、を含み、
（ａ）前記ＨＣＤＲ１は配列番号３０のアミノ酸配列を含み；
（ｂ）前記ＨＣＤＲ２は配列番号３２のアミノ酸配列を含み；
（ｃ）前記ＨＣＤＲ３は配列番号３４のアミノ酸配列を含み；
（ｄ）前記ＬＣＤＲ１は配列番号４２のアミノ酸配列を含み；
（ｅ）前記ＬＣＤＲ２は配列番号１０のアミノ酸配列を含み；
（ｆ）前記ＬＣＤＲ３は配列番号３６のアミノ酸配列を含み；
前記４−１ＢＢ結合ドメインは、（ｉ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と、（ｉｉ）ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域と、を含み、
（ａ）該ＨＣＤＲ１は配列番号２のアミノ酸配列を含み；
（ｂ）該ＨＣＤＲ２は配列番号４のアミノ酸配列を含み；
（ｃ）該ＨＣＤＲ３は配列番号６のアミノ酸配列を含み；
（ｄ）該ＬＣＤＲ１は配列番号８のアミノ酸配列を含み；
（ｅ）該ＬＣＤＲ２は配列番号１０のアミノ酸配列を含み；
（ｆ）該ＬＣＤＲ３は配列番号１２のアミノ酸配列を含む、
前記多特異性ポリペプチド。
【請求項２】
前記５Ｔ４結合ドメインが配列番号３８および４６からなる群から選択される配列に対し少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、又は
前記５Ｔ４結合ドメインが配列番号３８および４６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、又は
前記５Ｔ４結合ドメインが配列番号４４、４８、および５０からなる群から選択される配列に対し少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、又は
前記５Ｔ４結合ドメインが配列番号４４、４８、および５０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、
請求項１に記載の多特異性ポリペプチド。
【請求項３】
前記４−１ＢＢ結合ドメインが、
配列番号１４に対し少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、又は
前記４−１ＢＢ結合ドメインが配列番号１４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む、及び／又は
配列番号１６に対し少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９７％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、又は
配列番号１６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、
請求項１又は２に記載の多特異性ポリペプチド。
【請求項４】
前記５Ｔ４結合ドメインの前記ＶＨ及び／又はＶＬ領域は、フレームワーク領域中に１又は複数の突然変異を有し；及び／又は前記４−１ＢＢ結合ドメインの前記ＶＨ及び／又はＶＬ領域は、フレームワーク領域中に１又は複数の突然変異を有し；
任意に、前記５Ｔ４結合ドメイン中の突然変異は、配列番号１３０又は１７０のフレームワーク領域と比較されるものであり、
任意に、前記突然変異は、安定化のためのジスルフィド結合を導入するものである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の多特異性ポリペプチド。
【請求項５】
前記５Ｔ４結合ドメインと前記４−１ＢＢ結合ドメインは、結合ドメインリンカー又は結合ドメインリンカーと免疫グロブリンＦc領域によって結合され、該免疫グロブリンＦc領域はヒンジ領域及び、配列番号１５８又は１６０に示されるアミノ酸配列を含む免疫グロブリン定常領域のような免疫グロブリン定常領域を含み：
任意に、前記多特異性ポリペプチドは、(i) ５Ｔ４結合ドメイン、(ii)ヒンジ領域、(iii)免疫グロブリン定常領域、(iv)結合ドメインリンカー、及び(v) ４−１ＢＢ結合ドメインを、アミノ末端からカルボキシル末端に向かってこの順で含み；又は(i) ４−１ＢＢ結合ドメイン、(ii)結合ドメインリンカー、(iii) 免疫グロブリン定常領域、(iv)ヒンジ領域、及び(v) ５Ｔ４結合ドメインを、アミノ末端からカルボキシル末端に向かってこの順で含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の多特異性ポリペプチド。
【請求項６】
前記５Ｔ４結合ドメインが単鎖可変領域フラグメント（ｓｃＦｖ）及び／又は前記４−１ＢＢ結合ドメインがｓｃＦｖである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の多特異性ポリペプチド。
【請求項７】
前記ｓｃＦｖがリンカーポリペプチドを含み、任意に、前記リンカーポリペプチドが前記ｓｃＦｖの軽鎖可変領域と重鎖可変領域との間に存在し、及び／又は前記リンカーポリペプチドが、
Ｇｌｙ４Ｓｅｒリンカーを含むリンカーポリペプチド、
ｎ＝１〜５である式（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）ｎを含むリンカーポリペプチド、
配列番号８５〜１０８から選択されるアミノ酸配列を含むリンカーポリペプチド、又は
配列番号９８に記載のアミノ酸配列（ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ）を含む、請求項６に記載の多特異性ポリペプチド。
【請求項８】
前記５Ｔ４結合ドメインｓｃＦｖが、
配列番号１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、および１７０からなる群から選択されるアミノ酸配列に対し少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する配列、又は配列番号１１８、１２０、１２２、１２４、１２６、１２８、１３０、１３２、１３４、および１７０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含み、及び／又は
前記４−１ＢＢ結合ドメインｓｃＦｖが、配列番号１１０、１１２、１１４、および１１６からなる群から選択されるアミノ酸配列に対し少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する配列、又は配列番号１１０、１１２、１１４、および１１６からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項６又は７に記載の多特異性ポリペプチド。
【請求項９】
多特異性ポリペプチドのエフェクター細胞への結合が、エフェクター細胞の活性化を増強する、又は
多特異性ポリペプチドのエフェクター細胞への結合が、エフェクター細胞の活性化および／若しくはエフェクター細胞の増殖を増大させる、又は
多特異性ポリペプチドのエフェクター細胞および５Ｔ４発現細胞への結合が、エフェクター細胞依存的な、５Ｔ４発現細胞の溶解を増強する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の多特異性ポリペプチド。
【請求項１０】
前記５Ｔ４結合ドメインの前記軽鎖可変領域および／若しくは前記重鎖可変領域がヒト型化されている、並びに／又は、記４−１ＢＢ結合ドメインの前記軽鎖可変領域および／または前記重鎖可変領域がヒト型化されている、請求項１〜９のいずれか一項に記載の多特異性ポリペプチド。
【請求項１１】
２個の同一のポリペプチドを含み、該２個のポリペプチドが請求項１〜１０のいずれか１項に記載のポリペプチドである、ダイマー。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載のポリペプチドまたは請求項１１に記載のダイマーと、薬剤的に許容できる担体、希釈剤、または賦形剤と、を含み；任意に、経口投与用単位剤形、静脈内投与用単位剤形、鼻腔内投与用単位剤形、坐剤用単位剤形、皮内投与用単位剤形、筋肉内投与用単位剤形、腹腔内投与用単位剤形、皮下投与用単位剤形、硬膜外投与用単位剤形、舌下投与用単位剤形、および脳内投与用単位剤形からなる群から選択される剤形に製剤化され；又は錠剤、丸剤、ペレット剤、カプセル剤、散剤、菓子錠剤、粒剤、水剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤、徐放性製剤、エアゾール剤、および噴霧剤からなる群から選択される経口投与用単位剤形として製剤化された、医薬組成物。
【請求項１３】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載のポリペプチド又は請求項１１記載のダイマー又は請求項１２記載の医薬組成物を含む、対象における、５Ｔ４の発現を特徴とする障害の治療剤。
【請求項１４】
前記障害ががんであり、任意に、該がんが、乳がん、膵がん、卵巣がん、非小細胞肺がん、中皮腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞白血病（ｍａｎｔｌｅ  ｃｅｌｌ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）（ＭＣＬ）、急性リンパ芽球白血病（ＡＬＬ）、メラノーマ、扁平上皮癌、副腎がん、膀胱がん、子宮頸がん、腎がん、胃がん、前立腺がん、甲状腺がん、肝臓がん、子宮がん、神経線維腫、肉腫、癌腫、または頭頚部がんである、請求項１３に記載の治療剤。
【請求項１５】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載のポリペプチド又は請求項１１記載のダイマーをコードする、単離された核酸分子であって、任意に、該核酸分子は、配列番号１０９、１１１、１１３、１１５、１１７、１１９、１２１、１２３、１２５、１２７、１２９、１３１、１３３、１３５、１３７、１３９、１４１、１４３、１４５、１４７、１４９、１５１、１５３、１５５、１７１、および１７３からなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、単離された核酸分子。
【請求項１６】
請求項１５記載の単離された核酸分子を含み、任意に、該核酸分子が、宿主細胞における前記核酸セグメントの発現に好適な制御配列に作動可能なように連結されている、発現ベクター。
【請求項１７】
請求項１６に記載の前記発現ベクターを含む、組換え宿主細胞。
【請求項１８】
５Ｔ４結合ドメインを含むポリペプチドを製造するための方法であって、請求項１６に記載の発現ベクターを含む組換え宿主細胞を、前記核酸セグメントが発現される条件下で培養することで、前記５Ｔ４結合ドメインを含むポリペプチドを産生させることを含む、前記方法。