【手続補正書】
【提出日】令和3年2月9日(2021.2.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
悪臭の原因となる物質によって活性化される嗅覚受容体の活性を結合、抑制、遮断、阻害、かつ／または調節する化合物を同定する方法であって：
ａ．試験物質および悪臭の原因となる物質を、Ｏｌｆｒ１１９３、Ｏｌｆｒ１０９３、Ｏｌｆｒ１０９７、Ｏｌｆｒ１６６、Ｏｌｆｒ１６９、Ｏｌｆｒ７３８、Ｏｌｆｒ７４２、Ｏｌｆｒ２０７、Ｏｌｆｒ６６５、Ｏｌｆｒ６６９、Ｏｌｆｒ１２１１、ＯＲ５２Ｎ５、ＯＲ２Ｌ１３、ＯＲ２ＡＪ１、ＯＲ４Ｃ１５、ＯＲ５ＡＣ２、ＯＲ８Ｈ３、ＯＲ１１Ｇ２、ＯＲ５２Ｎ２、およびＯＲ５Ｔ１からなる群から選択される少なくとも１つの嗅覚受容体に接触させること；
ｂ．前記嗅覚受容体の応答を、前記試験物質の存在下および非存在下で測定することにより、前記悪臭の原因となる物質に対する前記嗅覚受容体の応答を測定すること；
ｃ．前記試験物質の存在下および非存在下で測定された応答に基づいて、前記嗅覚受容体の応答を調節する試験物質を同定すること；および
ｄ．前記同定された試験物質を、前記悪臭の原因となる物質に対する前記嗅覚受容体の応答を調節する化合物として選択すること
を含み、
ここで、前記悪臭の原因となる物質は、三硫化ジメチル（ＤＭＴＳ）または二硫化ジメチル（ＤＭＤＳ）である、方法。
【請求項２】
悪臭抑制剤を同定する方法であって、
ａ．試験物質および悪臭の原因となる物質を少なくとも１つの嗅覚受容体に接触させることであって、前記受容体が、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２８、配列番号３０、配列番号３２、配列番号３４、配列番号３６、配列番号３８、または配列番号４０と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドを含むこと；
ｂ．前記悪臭の原因となる物質に対する前記嗅覚受容体ポリペプチドの応答を測定すること；
ｃ．前記測定された応答に基づいて、前記嗅覚受容体の応答を抑制できる試験物質を同定すること；および
ｄ．前記嗅覚受容体の応答を抑制する前記試験物質を、悪臭抑制剤として選択すること
を含み、
ここで、前記悪臭の原因となる物質がＤＭＴＳまたはＤＭＤＳである、方法。
【請求項３】
悪臭の原因となる物質によって活性化される少なくとも１つの嗅覚受容体の活性を結合、抑制、遮断、阻害、かつ／または調節する化合物を同定する方法であって、
ａ．前記受容体、またはキメラもしくはその断片を、化合物と接触させること；および
ｂ．前記化合物が前記受容体の活性に影響を及ぼすかどうかを判断すること
を含み、
ここで、前記受容体が、
ｉ）配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２８、配列番号３０、配列番号３２、配列番号３４、配列番号３６、配列番号３８、または配列番号４０と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むポリペプチドであるか；または
ｉｉ）配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、配列番号２５、配列番号２７、配列番号２９、配列番号３１、配列番号３３、配列番号３５、配列番号３７、配列番号３９またはその逆相補体と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する核酸配列を含む核酸分子によってコードされるポリペプチドであり、
ここで、前記悪臭の原因となる物質が、三硫化ジメチル（ＤＭＴＳ）または二硫化ジメチル（ＤＭＤＳ）である、方法。
【請求項４】
ＤＭＴＳまたはＤＭＤＳ関連悪臭を推定的に調節する化合物を同定する方法であって、（ｉ）ＤＭＴＳまたはＤＭＤＳ受容体ポリペプチドを発現する細胞株を、少なくとも１種の化合物と接触させること；（ｉｉ）前記嗅覚受容体ポリペプチドの活性を結合、抑制、遮断、阻害、かつ／または調節する化合物をスクリーニングすること；および（ｉｉｉ）前記ＤＭＴＳまたはＤＭＤＳ受容体ポリペプチドの活性を結合、抑制、遮断、阻害、かつ／または調節する場合、ＤＭＴＳまたはＤＭＤＳ関連悪臭を推定的に調節する化合物を同定することを含み、
ここで、前記受容体ポリペプチドが、
ａ．配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２８、配列番号３０、配列番号３２、配列番号３４、配列番号３６、配列番号３８、または配列番号４０と少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むか；または
ｂ．配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、配列番号２５、配列番号２７、配列番号２９、配列番号３１、配列番号３３、配列番号３５、配列番号３７、配列番号３９またはその逆相補体と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する核酸配列を含む核酸分子によってコードされる、方法。
【請求項５】
配列番号４、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２８、配列番号３０、配列番号３２、配列番号３６、配列番号３８、または配列番号４０と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、単離されたポリペプチド。
【請求項６】
単離された核酸分子であって、
ａ．請求項５記載のポリペプチドをコードする核酸配列；または
ｂ．配列番号３、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、配列番号２５、配列番号２７、配列番号２９、配列番号３１、配列番号３５、配列番号３７、配列番号３９またはその逆相補体と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する核酸配列
を含む、単離された核酸分子。
【請求項７】
組換え核酸分子であって、
ａ．Ｌｕｃｙタグ、ＦＬＡＧ（登録商標）タグ、および／またはＲｈｏタグのうち少なくとも１つを含むタグの組み合わせを含む核酸；および
ｂ．Ｏｌｆｒ１１９３、Ｏｌｆｒ１０９３、Ｏｌｆｒ１０９７、Ｏｌｆｒ１６６、Ｏｌｆｒ１６９、Ｏｌｆｒ７３８、Ｏｌｆｒ７４２、Ｏｌｆｒ２０７、Ｏｌｆｒ６６５、Ｏｌｆｒ６６９、Ｏｌｆｒ１２１１、ＯＲ４Ｓ２、ＯＲ５２Ｎ５、ＯＲ２Ｌ１３、ＯＲ２ＡＪ１、ＯＲ４Ｃ１５、ＯＲ５ＡＣ２、ＯＲ８Ｈ３、ＯＲ１１Ｇ２、ＯＲ５２Ｎ２、およびＯＲ５Ｔ１またはその相補体からなる群から選択される受容体をコードする核酸
を含む、組換え核酸分子。
【請求項８】
前記Ｌｕｃｙタグが、配列番号４７を含み、前記ＦＬＡＧ（登録商標）タグが、配列番号４３を含み、かつ前記Ｒｈｏタグが、配列番号４５を含む、請求項７記載の組換え核酸分子。
【請求項９】
請求項６から８までのいずれか１項記載の核酸を含む、発現ベクター。
【請求項１０】
ＤＭＴＳまたはＤＭＤＳによって活性化される受容体を発現するように改変された非ヒト宿主生物または宿主細胞であって、前記受容体が、
ａ．Ｏｌｆｒ１１９３、Ｏｌｆｒ１０９３、Ｏｌｆｒ１０９７、Ｏｌｆｒ１６６、Ｏｌｆｒ１６９、Ｏｌｆｒ７３８、Ｏｌｆｒ７４２、Ｏｌｆｒ２０７、Ｏｌｆｒ６６５、Ｏｌｆｒ６６９、Ｏｌｆｒ１２１１、ＯＲ５２Ｎ５、ＯＲ２Ｌ１３、ＯＲ２ＡＪ１、ＯＲ４Ｃ１５、ＯＲ５ＡＣ２、ＯＲ８Ｈ３、ＯＲ１１Ｇ２、ＯＲ５２Ｎ２、およびＯＲ５Ｔ１からなる群から選択されるか、または
ｂ．請求項５記載のポリペプチドまたは請求項６から８までのいずれか１項記載の核酸によってコードされるポリペプチド
を含む、非ヒト宿主生物または宿主細胞。
【請求項１１】
非ヒト宿主生物または宿主細胞であって、
ａ．請求項６から８までのいずれか１項記載の核酸；または
ｂ．請求項９記載の発現ベクター
を含む、非ヒト宿主生物または宿主細胞。
【請求項１２】
前記細胞が、真核細胞である、請求項１０または１１記載の非ヒト宿主生物または宿主細胞。
【請求項１３】
前記細胞が、原核細胞である、請求項１０または１１記載の非ヒト宿主生物または宿主細胞。
【請求項１４】
前記非ヒト宿主生物または宿主細胞が、ＨＥＫ２９３、ＣＨＯ、アフリカツメガエル卵母細胞、ＣＯＳ、酵母、および嗅覚プラコードに由来する細胞からなる群から選択される、請求項１０または１１記載の非ヒト宿主生物または宿主細胞。
【請求項１５】
悪臭調節化合物を同定するための、配列番号２、配列番号４、配列番号６、配列番号８、配列番号１０、配列番号１２、配列番号１４、配列番号１６、配列番号１８、配列番号２０、配列番号２２、配列番号２４、配列番号２６、配列番号２８、配列番号３０、配列番号３２、配列番号３４、配列番号３６、配列番号３８、または配列番号４０と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、ＤＭＴＳまたはＤＭＤＳによって活性化され得るポリペプチドの、使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００８】
また本明細書では、配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、配列番号２５、配列番号２７、配列番号２９、配列番号３１、配列番号３３、配列番号３５、配列番号３７、配列番号３９、またはその逆相補体と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性を有するヌクレオチド配列を含む核酸を有する発現ベクターも提供される。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３９】
本明細書の一実施形態では、配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、配列番号２５、配列番号２７、配列番号２９、配列番号３１、配列番号３３、配列番号３５、配列番号３７、配列番号３９またはその逆相補体と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％の配列同一性を有する核酸配列を含む単離された核酸分子が提供される。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４５】
また、本明細書では、配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、配列番号２５、配列番号２７、配列番号２９、配列番号３１、配列番号３３、配列番号３５、配列番号３７、配列番号３９またはその逆相補体と少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性を有する核酸配列を含む核酸を含む発現ベクターも提供される。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４６】
また、本明細書では、配列番号１、配列番号３、配列番号５、配列番号７、配列番号９、配列番号１１、配列番号１３、配列番号１５、配列番号１７、配列番号１９、配列番号２１、配列番号２３、配列番号２５、配列番号２７、配列番号２９、配列番号３１、配列番号３３、配列番号３５、配列番号３７、配列番号３９、またはその逆相補体と同一のヌクレオチド配列を含む核酸を有する発現ベクターも提供される。