【手続補正書】
【提出日】令和3年8月19日(2021.8.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
組換え型アデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ビリオンであって、
（ａ）少なくとも３つの異なるＡＡＶ血清型に由来する、各セグメントが約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する少なくとも５つのセグメントを含み、かつ、
（ｉ）野生型ＡＡＶビリオンを含む対照ＡＡＶビリオンによる神経幹細胞への感染力と比較して前記神経幹細胞への感染力が高い、
（ｉｉ）野生型ＡＡＶビリオンを含む対照ＡＡＶビリオンによる神経細胞への感染力と比較して前記神経細胞への感染力が高い、
（ｉｉｉ）野生型ＡＡＶカプシドを含む対照ＡＡＶビリオンが細胞障壁を通過する能力と比較して前記細胞障壁を通過する能力が高い、
（ｉｖ）ヒトＡＡＶ中和抗体に対する耐性が、野生型ＡＡＶカプシドを含む対照ＡＡＶビリオンが示す耐性と比較して高い、
という特性のうち１つ以上を付与する、変異ＡＡＶカプシドタンパク質、及び
（ｂ）異種遺伝子産物をコードするヌクレオチド配列を含む異種核酸
を含む、前記組換え型アデノ随伴ウイルスビリオン。
【請求項２】
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって順に、以下を含む、請求項１に記載のｒＡＡＶビリオン：
（ａ１）第１のＡＡＶ血清型のアミノ酸１〜アミノ酸１６０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第１のセグメント、
（ｂ１）第２のＡＡＶ血清型のアミノ酸５１〜アミノ酸３２０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第２のセグメント、
（ｃ１）第３のＡＡＶ血清型のアミノ酸１０１〜アミノ酸４８０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第３のセグメント、
（ｄ１）前記第２のＡＡＶ血清型のアミノ酸１５１〜アミノ酸６４０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第４のセグメント、
（ｅ１）前記第２のＡＡＶ血清型のアミノ酸２０１〜アミノ酸８００に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第５のセグメント、
（ｆ１）前記第４のＡＡＶ血清型のアミノ酸２５１〜アミノ酸９６０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第６のセグメント、
（ｇ１）前記第２のＡＡＶ血清型のアミノ酸３０１〜アミノ酸１１２０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第７のセグメント、及び
（ｈ１）前記第２のＡＡＶ血清型のアミノ酸３５１からＣ末端までのアミノ酸に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第８のセグメント、
ここで任意で、前記第１のＡＡＶ血清型はＡＡＶ６であり、前記第２のＡＡＶ血清型はＡＡＶ９であり、前記第３のＡＡＶ血清型はＡＡＶ８であり、および／または前記第４のＡＡＶ血清型はＡＡＶ２である；あるいは
（ａ２）第１のＡＡＶ血清型のアミノ酸１〜アミノ酸１６０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第１のセグメント、
（ｂ２）第２のＡＡＶ血清型のアミノ酸５１〜アミノ酸３２０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第２のセグメント、
（ｃ２）第３のＡＡＶ血清型のアミノ酸１０１〜アミノ酸４８０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第３のセグメント、
（ｄ２）前記第２のＡＡＶ血清型のアミノ酸１５１〜アミノ酸６４０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第４のセグメント、及び
（ｅ２）前記第２のＡＡＶ血清型のアミノ酸２０１からＣ末端までのアミノ酸に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第５のセグメント、
ここで任意で、前記第１のＡＡＶ血清型はＡＡＶ６であり、前記第２のＡＡＶ血清型はＡＡＶ９であり、および／または前記第３のＡＡＶ血清型はＡＡＶ８である；あるいは
（ａ３）第１のＡＡＶ血清型のアミノ酸１〜アミノ酸１６０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第１のセグメント、
（ｂ３）第２のＡＡＶ血清型のアミノ酸５１〜アミノ酸３２０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第２のセグメント、
（ｃ３）第３のＡＡＶ血清型のアミノ酸１０１〜アミノ酸４８０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第３のセグメント、
（ｄ３）前記第２のＡＡＶ血清型のアミノ酸１５１〜アミノ酸６４０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第４のセグメント、及び
（ｅ３）第４のＡＡＶ血清型のアミノ酸２０１からＣ末端までのアミノ酸に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第５のセグメント、
ここで任意で、前記第１のＡＡＶ血清型はＡＡＶ６であり、前記第２のＡＡＶ血清型はＡＡＶ９であり、前記第３のＡＡＶ血清型はＡＡＶ８であり、および／または前記第４のＡＡＶ血清型はＡＡＶ２である；あるいは、
（ａ４）第１のＡＡＶ血清型のアミノ酸１〜アミノ酸１６０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第１のセグメント、
（ｂ４）第２のＡＡＶ血清型のアミノ酸５１〜アミノ酸３２０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第２のセグメント、
（ｃ４）第３のＡＡＶ血清型のアミノ酸１０１〜アミノ酸４８０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第３のセグメント、
（ｄ４）前記第２のＡＡＶ血清型のアミノ酸１５１〜アミノ酸６４０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第４のセグメント、
（ｅ４）第４のＡＡＶ血清型のアミノ酸２０１〜アミノ酸８００に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第５のセグメント、
（ｆ４）前記第４のＡＡＶ血清型のアミノ酸２５１〜アミノ酸９６０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第６のセグメント、
（ｇ４）前記第２のＡＡＶ血清型のアミノ酸３０１〜アミノ酸１１２０に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第７のセグメント、及び
（ｈ４）前記第２のＡＡＶ血清型のアミノ酸３５１からＣ末端までのアミノ酸に由来する約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する第８のセグメント、
ここで任意で、前記第１のＡＡＶ血清型はＡＡＶ６であり、前記第２のＡＡＶ血清型はＡＡＶ９であり、前記第３のＡＡＶ血清型はＡＡＶ８であり、および／または前記第４のＡＡＶ血清型はＡＡＶ２である。
【請求項３】
前記ｒＡＡＶビリオンは、対応する親ＡＡＶカプシドタンパク質を含む前記対照ＡＡＶビリオンによる神経幹細胞への感染力と比較して、少なくとも５倍または少なくとも１０倍高い前記神経幹細胞への感染力を示し、任意で、前記対照ＡＡＶビリオンはＡＡＶ９またはＡＡＶ２である、請求項１または２に記載のｒＡＡＶビリオン。
【請求項４】
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、図８に示すＳＣＨ９アミノ酸配列または図９に示すＳＣＨ２アミノ酸配列に対する少なくとも約９０％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載のｒＡＡＶビリオン。
【請求項５】
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、ヒトＡＡＶ中和抗体に対し、野生型ＡＡＶカプシドタンパク質を含む対照ＡＡＶビリオンが示す耐性と比較して高い耐性を示し、任意で、前記対照ＡＡＶビリオンはＡＡＶ９またはＡＡＶ２である、請求項１〜４のいずれか一項に記載のｒＡＡＶビリオン。
【請求項６】
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、ヒトＡＡＶ中和抗体に対し、野生型ＡＡＶカプシドを含む対照ＡＡＶビリオンが示す耐性と比較して少なくとも約１．５倍、少なくとも約３倍、少なくとも約５倍、または少なくとも約１０倍高い耐性を示す、請求項１〜５のいずれか一項に記載のｒＡＡＶビリオン。
【請求項７】
前記遺伝子産物は、ポリペプチド、干渉ＲＮＡ、アプタマー、またはＲＮＡ誘導型エンドヌクレアーゼおよびガイドＲＮＡである、請求項１〜６のいずれか１項に記載のｒＡＡＶビリオン。
【請求項８】
前記遺伝子産物はポリペプチドであり、前記ポリペプチドは、神経保護ポリペプチド、血管新生阻害ポリペプチド、神経幹細胞の分化を誘導するポリペプチド、神経幹細胞の機能を高めるポリペプチド、セレブロライシン、ラミニン−ＩＫＶＡＶ、ｃｒｉｐｔｏ、下垂体アデニル酸シクラーゼ活性化ポリペプチド、神経成長因子、脳由来神経栄養因子、グリア由来神経栄養因子、線維芽細胞増殖因子２、ニュールツリン、毛様体神経栄養因子、上皮成長因子、Ｘ連鎖アポトーシス抑制因子、芳香族Ｌ−アミノ酸脱炭酸酵素、グルタミン酸脱炭酸酵素、トリペプチジルペプチダーゼ、アスパルトアシクラーゼ、ソニック・ヘッジホッグ、ゲノム編集酵素、ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓポリペプチド、Ｖ型ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓポリペプチド、またはＶＩ型ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓポリペプチドである、請求項７に記載のｒＡＡＶビリオン。
【請求項９】
（ａ）請求項１〜８のいずれか１項に記載の組換え型アデノ随伴ウイルスビリオン、及び
（ｂ）薬理学的に許容される添加剤
を含む、医薬組成物。
【請求項１０】
個体の神経幹細胞に遺伝子産物を送達するための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の組換え型アデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ビリオンを含む、医薬組成物。
【請求項１１】
神経性障害を治療するための、請求項１〜８のいずれか１項に記載の組換え型アデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ビリオンを含む、医薬組成物。
【請求項１２】
変異アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）カプシドタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む単離された核酸であって、
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質が、少なくとも３つの異なるＡＡＶ血清型に由来する、各セグメントが約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する少なくとも５つのセグメントを含み、かつ
前記変異カプシドタンパク質が、野生型ＡＡＶカプシドを含む対照ＡＡＶビリオンによる神経幹細胞への感染力と比較して、前記神経幹細胞への高い感染力を付与する、
前記核酸。
【請求項１３】
請求項１２に記載の核酸を含む、単離された遺伝子改変宿主細胞。
【請求項１４】
変異アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）カプシドタンパク質であって、
少なくとも３つの異なるＡＡＶ血清型に由来する、各セグメントが約５０アミノ酸長〜約１６０アミノ酸長を有する少なくとも５つのセグメントを含み、かつ
野生型ＡＡＶカプシドを含む対照ＡＡＶビリオンによる神経幹細胞への感染力と比較して、前記神経幹細胞への高い感染力を付与する、
前記変異アデノ随伴ウイルスカプシドタンパク質。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００４】
概要
本開示は、変異カプシドタンパク質を有する組換え型アデノ随伴ウイルスビリオンを提供し、ここで、かかる組換え型ＡＡＶ（ｒＡＡＶ）ビリオンは、対照ＡＡＶと比較して、神経細胞障壁を通過する高い能力、神経幹細胞への高い感染力、神経細胞への高い感染力、及び抗体による中和に対する低い感受性のうち１つ以上を示し、かつ、異種核酸を含む。本開示は、個体の神経幹細胞または神経細胞に遺伝子産物を送達する方法を提供する。本開示は、神経幹細胞内または神経細胞内に存在する標的核酸を修飾する方法も提供する。
[本発明1001]
組換え型アデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ビリオンであって、
（ａ）少なくとも3つの異なるＡＡＶ血清型に由来する、各セグメントが約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する少なくとも5つのセグメントを含み、かつ、
（ｉ）野生型ＡＡＶビリオンを含む対照ＡＡＶビリオンによる神経幹細胞への感染力と比較して前記神経幹細胞への感染力が高い、
（ｉｉ）野生型ＡＡＶビリオンを含む対照ＡＡＶビリオンによる神経細胞への感染力と比較して前記神経細胞への感染力が高い、
（ｉｉｉ）野生型ＡＡＶカプシドを含む対照ＡＡＶビリオンが細胞障壁を通過する能力と比較して前記細胞障壁を通過する能力が高い、
（ｉｖ）ヒトＡＡＶ中和抗体に対する耐性が、野生型ＡＡＶカプシドを含む対照ＡＡＶビリオンが示す耐性と比較して高い、
という特性のうち1つ以上を付与する、変異ＡＡＶカプシドタンパク質、及び
（ｂ）異種遺伝子産物をコードするヌクレオチド配列を含む異種核酸
を含む、前記組換え型アデノ随伴ウイルスビリオン。
[本発明1002]
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって順に、
（ａ）第1のＡＡＶ血清型のアミノ酸1〜アミノ酸160に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第1のセグメント、
（ｂ）第2のＡＡＶ血清型のアミノ酸51〜アミノ酸320に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第2のセグメント、
（ｃ）第3のＡＡＶ血清型のアミノ酸101〜アミノ酸480に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第3のセグメント、
（ｄ）前記第2のＡＡＶ血清型のアミノ酸151〜アミノ酸640に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第4のセグメント、及び
（ｅ）前記第2のＡＡＶ血清型のアミノ酸201からＣ末端までのアミノ酸に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第5のセグメント
を含む、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1003]
前記第1のＡＡＶ血清型はＡＡＶ6である、本発明1002のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1004]
前記第2のＡＡＶ血清型はＡＡＶ9である、本発明1002のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1005]
前記第3のＡＡＶ血清型はＡＡＶ8である、本発明1002のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1006]
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって順に、
（ａ）第1のＡＡＶ血清型のアミノ酸1〜アミノ酸160に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第1のセグメント、
（ｂ）第2のＡＡＶ血清型のアミノ酸51〜アミノ酸320に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第2のセグメント、
（ｃ）第3のＡＡＶ血清型のアミノ酸101〜アミノ酸480に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第3のセグメント、
（ｄ）前記第2のＡＡＶ血清型のアミノ酸151〜アミノ酸640に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第4のセグメント、及び
（ｅ）第4のＡＡＶ血清型のアミノ酸201からＣ末端までのアミノ酸に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第5のセグメント
を含む、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1007]
前記第1のＡＡＶ血清型はＡＡＶ6である、本発明1006のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1008]
前記第2のＡＡＶ血清型はＡＡＶ9である、本発明1006のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1009]
前記第3のＡＡＶ血清型はＡＡＶ8である、本発明1006のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1010]
前記第4のＡＡＶ血清型はＡＡＶ2である、本発明1006のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1011]
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって順に、
（ａ）第1のＡＡＶ血清型のアミノ酸1〜アミノ酸160に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第1のセグメント、
（ｂ）第2のＡＡＶ血清型のアミノ酸51〜アミノ酸320に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第2のセグメント、
（ｃ）第3のＡＡＶ血清型のアミノ酸101〜アミノ酸480に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第3のセグメント、
（ｄ）前記第2のＡＡＶ血清型のアミノ酸151〜アミノ酸640に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第4のセグメント、及び
（ｅ）第4のＡＡＶ血清型のアミノ酸201〜アミノ酸800に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第5のセグメント、
（ｆ）前記第4のＡＡＶ血清型のアミノ酸251〜アミノ酸960に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第6のセグメント、
（ｇ）前記第2のＡＡＶ血清型のアミノ酸301〜アミノ酸1120に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第7のセグメント、及び
（ｈ）前記第2のＡＡＶ血清型のアミノ酸351からＣ末端までのアミノ酸に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第8のセグメント
を含む、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1012]
前記第1のＡＡＶ血清型はＡＡＶ6である、本発明1011のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1013]
前記第2のＡＡＶ血清型はＡＡＶ9である、本発明1011のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1014]
前記第3のＡＡＶ血清型はＡＡＶ8である、本発明1011のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1015]
前記第4のＡＡＶ血清型はＡＡＶ2である、本発明1011のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1016]
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、Ｎ末端からＣ末端に向かって順に、
（ａ）第1のＡＡＶ血清型のアミノ酸1〜アミノ酸160に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第1のセグメント、
（ｂ）第2のＡＡＶ血清型のアミノ酸51〜アミノ酸320に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第2のセグメント、
（ｃ）第3のＡＡＶ血清型のアミノ酸101〜アミノ酸480に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第3のセグメント、
（ｄ）前記第2のＡＡＶ血清型のアミノ酸151〜アミノ酸640に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第4のセグメント、及び
（ｅ）第4のＡＡＶ血清型のアミノ酸201〜アミノ酸800に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第5のセグメント、
（ｆ）前記第4のＡＡＶ血清型のアミノ酸251〜アミノ酸960に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第6のセグメント、
（ｇ）前記第2のＡＡＶ血清型のアミノ酸301〜アミノ酸1120に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第7のセグメント、及び
（ｈ）前記第2のＡＡＶ血清型のアミノ酸351からＣ末端までのアミノ酸に由来する約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する第8のセグメント
を含む、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1017]
前記第1のＡＡＶ血清型はＡＡＶ6である、本発明1016のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1018]
前記第2のＡＡＶ血清型はＡＡＶ9である、本発明1016のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1019]
前記第3のＡＡＶ血清型はＡＡＶ8である、本発明1016のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1020]
前記第4のＡＡＶ血清型はＡＡＶ2である、本発明1016のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1021]
前記ｒＡＡＶビリオンは、対応する親ＡＡＶカプシドタンパク質を含む前記対照ＡＡＶビリオンによる神経幹細胞への感染力と比較して、少なくとも5倍高い前記神経幹細胞への感染力を示す、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1022]
前記対照ＡＡＶビリオンはＡＡＶ9である、本発明1021のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1023]
前記対照ＡＡＶビリオンはＡＡＶ2である、本発明1021のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1024]
前記ｒＡＡＶビリオンは、対応する親ＡＡＶカプシドタンパク質を含む前記対照ＡＡＶビリオンによる神経幹細胞への感染力と比較して、少なくとも10倍高い前記神経幹細胞への感染力を示す、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1025]
前記対照ＡＡＶビリオンはＡＡＶ9である、本発明1024のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1026]
前記対照ＡＡＶビリオンはＡＡＶ2である、本発明1024のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1027]
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、図8に示すアミノ酸配列に対する少なくとも約90％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1028]
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、図8に示すアミノ酸配列に対する少なくとも約95％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1029]
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、図8に示すアミノ酸配列を含む、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1030]
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、図9に示すアミノ酸配列に対する少なくとも約90％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1031]
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、図9に示すアミノ酸配列に対する少なくとも約95％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1032]
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、図9に示すアミノ酸配列を含む、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1033]
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、ヒトＡＡＶ中和抗体に対し、野生型ＡＡＶカプシドタンパク質を含む対照ＡＡＶビリオンが示す耐性と比較して高い耐性を示す、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1034]
前記対照ＡＡＶビリオンはＡＡＶ9である、本発明1033のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1035]
前記対照ＡＡＶビリオンはＡＡＶ2である、本発明1033のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1036]
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、ヒトＡＡＶ中和抗体に対し、野生型ＡＡＶカプシドを含む対照ＡＡＶビリオンが示す耐性と比較して少なくとも約1．5倍高い耐性を示す、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1037]
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、ヒトＡＡＶ中和抗体に対し、野生型ＡＡＶカプシドを含む対照ＡＡＶビリオンが示す耐性と比較して少なくとも約3倍高い耐性を示す、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1038]
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、ヒトＡＡＶ中和抗体に対し、野生型ＡＡＶカプシドを含む対照ＡＡＶビリオンが示す耐性と比較して少なくとも約5倍高い耐性を示す、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1039]
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質は、ヒトＡＡＶ中和抗体に対し、野生型ＡＡＶカプシドを含む対照ＡＡＶビリオンが示す耐性と比較して少なくとも約10倍高い耐性を示す、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1040]
前記神経幹細胞は脳室下帯由来である、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1041]
前記神経幹細胞は小脳由来である、本発明1001のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1042]
前記遺伝子産物は、干渉ＲＮＡまたはアプタマーである、本発明1001〜1041のいずれかのｒＡＡＶビリオン。
[本発明1043]
前記遺伝子産物はポリペプチドである、本発明1001〜1041のいずれかのｒＡＡＶビリオン。
[本発明1044]
前記ポリペプチドは、神経保護ポリペプチド、血管新生阻害ポリペプチド、神経幹細胞の分化を誘導するポリペプチド、または神経幹細胞の機能を高めるポリペプチドである、本発明1043のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1045]
前記ポリペプチドは、セレブロライシン、ラミニン−ＩＫＶＡＶ、ｃｒｉｐｔｏ、下垂体アデニル酸シクラーゼ活性化ポリペプチド、神経成長因子、脳由来神経栄養因子、グリア由来神経栄養因子、線維芽細胞増殖因子2、ニュールツリン、毛様体神経栄養因子、上皮成長因子、Ｘ連鎖アポトーシス抑制因子、芳香族Ｌ−アミノ酸脱炭酸酵素、グルタミン酸脱炭酸酵素、トリペプチジルペプチダーゼ、アスパルトアシクラーゼ、またはソニック・ヘッジホッグである、本発明1043のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1046]
前記ポリペプチドはゲノム編集酵素である、本発明1043のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1047]
前記ゲノム編集酵素は、Ｃａｓ9ポリペプチド、ジンクフィンガーヌクレアーゼ、ＴＡＬＥＮ、または酵素的に不活性なＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓポリペプチドである、本発明1046のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1048]
前記ポリペプチドは、ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓポリペプチド、Ｖ型ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓポリペプチド、及びＶＩ型ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓポリペプチドから選択されるＲＮＡ誘導型エンドヌクレアーゼである、本発明1047のｒＡＡＶビリオン。
[本発明1049]
前記遺伝子産物は、ＲＮＡ誘導型エンドヌクレアーゼ及びガイドＲＮＡである、本発明1001〜1041のいずれかのｒＡＡＶビリオン。
[本発明1050]
（ａ）本発明1001〜1049のいずれかの組換え型アデノ随伴ウイルスビリオン、及び
（ｂ）薬理学的に許容される添加剤
を含む、医薬組成物。
[本発明1051]
個体の神経幹細胞に遺伝子産物を送達する方法であって、
本発明1001〜1049のいずれかの組換え型アデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ビリオンまたは本発明1050の組成物を前記個体に投与することを含む、前記方法。
[本発明1052]
前記投与は、頭蓋内注射、脳室内注射、髄腔内注射、大槽内注射、または静脈内注射による、本発明1051の方法。
[本発明1053]
前記遺伝子産物は、短鎖干渉ＲＮＡまたはアプタマーである、本発明1051の方法。
[本発明1054]
前記遺伝子産物はポリペプチドである、本発明1051の方法。
[本発明1055]
前記ポリペプチドは、神経保護ポリペプチド、血管新生阻害ポリペプチド、神経幹細胞の分化を誘導するポリペプチド、または神経幹細胞の機能を高めるポリペプチドである、本発明1054の方法。
[本発明1056]
前記ポリペプチドは、セレブロライシン、ラミニン−ＩＫＶＡＶ、ｃｒｉｐｔｏ、下垂体アデニル酸シクラーゼ活性化ポリペプチド、神経成長因子、脳由来神経栄養因子、グリア由来神経栄養因子、線維芽細胞増殖因子2、ニュールツリン、毛様体神経栄養因子、上皮成長因子、Ｘ連鎖アポトーシス抑制因子、またはソニック・ヘッジホッグである、本発明1054の方法。
[本発明1057]
前記ポリペプチドはゲノム編集酵素である、本発明1054の方法。
[本発明1058]
前記ゲノム編集酵素は、Ｃａｓ9ポリペプチド、ジンクフィンガーヌクレアーゼ、ＴＡＬＥＮ、または酵素的に不活性なＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓポリペプチドである、本発明1057の方法。
[本発明1059]
前記ポリペプチドは、ＩＩ型ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓポリペプチド、Ｖ型ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓポリペプチド、及びＶＩ型ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓポリペプチドから選択されるＲＮＡ誘導型エンドヌクレアーゼである、本発明1057の方法。
[本発明1060]
前記遺伝子産物は、ＲＮＡ誘導型エンドヌクレアーゼ及びガイドＲＮＡである、本発明1051の方法。
[本発明1061]
神経性障害を治療する方法であって、
本発明1001〜1049のいずれかの組換え型アデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）ビリオンまたは本発明1050の組成物の有効量を、それを必要とする個体に投与することを含む、前記方法。
[本発明1062]
前記神経性障害は、脊髄小脳失調症、ハンチントン病、パーキンソン病、アルツハイマー病、リソソーム蓄積障害、フリードライヒ運動失調症、神経膠芽腫、レット症候群、前頭側頭型認知症、またはてんかんである、本発明1061の方法。
[本発明1063]
変異アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）カプシドタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む単離された核酸であって、
前記変異ＡＡＶカプシドタンパク質が、少なくとも3つの異なるＡＡＶ血清型に由来する、各セグメントが約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する少なくとも5つのセグメントを含み、かつ
前記変異カプシドタンパク質が、野生型ＡＡＶカプシドを含む対照ＡＡＶビリオンによる神経幹細胞への感染力と比較して、前記神経幹細胞への高い感染力を付与する、
前記核酸。
[本発明1064]
本発明1063の核酸を含む、単離された遺伝子改変宿主細胞。
[本発明1065]
変異アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）カプシドタンパク質であって、
少なくとも3つの異なるＡＡＶ血清型に由来する、各セグメントが約50アミノ酸長〜約160アミノ酸長を有する少なくとも5つのセグメントを含み、かつ
野生型ＡＡＶカプシドを含む対照ＡＡＶビリオンによる神経幹細胞への感染力と比較して、前記神経幹細胞への高い感染力を付与する、
前記変異アデノ随伴ウイルスカプシドタンパク質。