【手続補正書】
【提出日】令和3年3月19日(2021.3.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
角化細胞を拡大するための方法であって、該方法は、
角化細胞を、α４鎖またはα５鎖を含むラミニンでコーティングされた基材上にプレートする工程、
を包含する方法。
【請求項２】
前記α４鎖またはα５鎖を含むラミニンは、ラミニン−４１１、ラミニン−４２１、ラミニン−５１１、またはラミニン−５２１のうちの少なくとも１つである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記角化細胞を、異種由来物質非含有の細胞培養培地中で培養する工程をさらに包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
新しく単離された角化細胞を、前記基材上にプレートする工程をさらに包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記角化細胞を、約０．７×１０５／ｃｍ２〜約１．２×１０５／ｃｍ２の密度で前記基材上にプレートする工程をさらに包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記角化細胞を、約３０℃〜約４０℃の温度で前記基材上で培養する工程をさらに包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記角化細胞を、約５％  ＣＯ２〜約１５％  ＣＯ２を含む雰囲気中で培養する工程をさらに包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記角化細胞を周期的に解離し、継代する工程をさらに包含する、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記角化細胞の継代は、１  細胞〜約１．５×１０４  細胞／ｃｍ２の密度に達した際に起こる、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記基材は、ラミニン−５１１およびラミニン−４２１の両方でコーティングされる、請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
ラミニン−５１１  対  ラミニン−４２１重量比は、１５：１〜１：１５である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
角化細胞を拡大するためのシステムであって、該システムは、
ラミニン−４１１、ラミニン−４２１、ラミニン−５１１、またはラミニン−５２１を含む基材；および
細胞培養培地、
を含むシステム。
【請求項１３】
前記細胞培養培地は、異種由来物質非含有である、請求項１２に記載のシステム。
【請求項１４】
前記細胞培養培地は、いかなる動物血清をも含まない、請求項１２に記載のシステム。
【請求項１５】
前記システムは、いかなるフィーダー細胞をも含まない、請求項１２に記載のシステム。
【請求項１６】
前記基材は、ラミニン−５１１およびラミニン−４２１の両方を含む、請求項１２に記載のシステム。
【請求項１７】
角化細胞をインビトロで拡大するための細胞培養キットであって、該キットは、
ラミニン−４１１、ラミニン−４２１、ラミニン−５１１、またはラミニン−５２１のコーティングを有する細胞培養基材；および
無血清細胞培養培地、
を含むキット。
【請求項１８】
患者の熱傷による創傷を処置するための組成物を作製する方法であって、該組成物は基材からの角化細胞を含み、該方法は、
該患者のドナー部位から採取した角化細胞を該基材上にプレートする工程であって、該基材がラミニン−４１１、ラミニン−４２１、ラミニン−５１１、またはラミニン−５２１でコーティングされている、工程；および
該角化細胞を該基材上で拡大する工程；
を包含し、該熱傷による創傷は、該組成物で覆われる、
方法。
【請求項１９】
患者の慢性的な創傷を処置するための組成物を作製する方法であって、該組成物は基材からの角化細胞を含み、該方法は、
該患者のドナー部位から採取した角化細胞を該基材上にプレートする工程であって、該基材が、ラミニン−４１１、ラミニン−４２１、ラミニン−５１１、またはラミニン−５２１でコーティングされている、工程；および
該角化細胞を該基材上で拡大する工程；
を包含し、該創傷は、該組成物で覆われる、
方法。
【請求項２０】
上皮のみが傷ついた、および／または上皮欠損が傷害の構成要素である場合を含む、ヒト身体における任意の傷害または状態を処置するための組成物を作製する方法であって、該組成物は基材からの角化細胞を含み、該方法は、
該患者のドナー部位から採取した角化細胞を該基材上にプレートする工程であって、該基材が、ラミニン−４１１、ラミニン−４２１、ラミニン−５１１、またはラミニン−５２１でコーティングされている、工程；および
該角化細胞を、該基材上で拡大する工程；
を包含し、該上皮欠損は、該組成物で覆われる、
方法。
【請求項２１】
前記ヒト身体における傷害または状態は、眼、膀胱、口腔、または腸にある、請求項２０に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２７】
本開示は、例示的実施形態に言及して記載されてきた。明らかに、改変および変更が、前述の詳細な説明を読んで理解した際に想起される。本開示は、添付の請求項またはその均等物の範囲内にある限りにおいて、全てのこのような改変および変更を含むと解釈されることが意図される。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
角化細胞を拡大するための方法であって、該方法は、
角化細胞を、α４鎖またはα５鎖を含むラミニンでコーティングされた基材上にプレートする工程、
を包含する方法。
(項目２)
前記α４鎖またはα５鎖を含むラミニンは、ラミニン−４１１、ラミニン−４２１、ラミニン−５１１、またはラミニン−５２１のうちの少なくとも１つである、項目１に記載の方法。
(項目３)
前記角化細胞を、異種由来物質非含有の細胞培養培地中で培養する工程をさらに包含する、項目１に記載の方法。
(項目４)
新しく単離された角化細胞を、前記基材上にプレートする工程をさらに包含する、項目１に記載の方法。
(項目５)
前記角化細胞を、約０．７×１０５／ｃｍ２〜約１．２×１０５／ｃｍ２の密度で前記基材上にプレートする工程をさらに包含する、項目１に記載の方法。
(項目６)
前記角化細胞を、約３０℃〜約４０℃の温度で前記基材上で培養する工程をさらに包含する、項目１に記載の方法。
(項目７)
前記角化細胞を、約５％  ＣＯ２〜約１５％  ＣＯ２を含む雰囲気中で培養する工程をさらに包含する、項目１に記載の方法。
(項目８)
前記角化細胞を周期的に解離し、継代する工程をさらに包含する、項目１に記載の方法。
(項目９)
前記角化細胞の継代は、１  細胞〜約１．５×１０４  細胞／ｃｍ２の密度に達した際に起こる、項目８に記載の方法。
(項目１０)
前記基材は、ラミニン−５１１およびラミニン−４２１の両方でコーティングされる、項目１に記載の方法。
(項目１１)
ラミニン−５１１  対  ラミニン−４２１重量比は、１５：１〜１：１５である、項目１０に記載の方法。
(項目１２)
角化細胞を拡大するためのシステムであって、該システムは、
ラミニン−４１１、ラミニン−４２１、ラミニン−５１１、またはラミニン−５２１を含む基材；および
細胞培養培地、
を含むシステム。
(項目１３)
前記細胞培養培地は、異種由来物質非含有である、項目１２に記載のシステム。
(項目１４)
前記細胞培養培地は、いかなる動物血清をも含まない、項目１２に記載のシステム。
(項目１５)
前記システムは、いかなるフィーダー細胞をも含まない、項目１２に記載のシステム。
(項目１６)
前記基材は、ラミニン−５１１およびラミニン−４２１の両方を含む、項目１２に記載のシステム。
(項目１７)
角化細胞をインビトロで拡大するための細胞培養キットであって、該キットは、
ラミニン−４１１、ラミニン−４２１、ラミニン−５１１、またはラミニン−５２１のコーティングを有する細胞培養基材；および
無血清細胞培養培地、
を含むキット。
(項目１８)
患者の熱傷による創傷を処置するための方法であって、該方法は、
該患者のドナー部位から採取した角化細胞を、ラミニン−４１１、ラミニン−４２１、ラミニン−５１１、またはラミニン−５２１でコーティングされた基材上にプレートする工程；
該角化細胞を該基材上で拡大する工程；および
該熱傷による創傷を、該基材からの該角化細胞で覆う工程、
を包含する方法。
(項目１９)
患者の慢性的な創傷を処置するための方法であって、該方法は、
該患者のドナー部位から採取した角化細胞を、ラミニン−４１１、ラミニン−４２１、ラミニン−５１１、またはラミニン−５２１でコーティングされた基材上にプレートする工程；
該角化細胞を該基材上で拡大する工程；および
該創傷を、該基材からの該角化細胞で覆う工程、
を包含する方法。
(項目２０)
上皮のみが傷ついた、および／または上皮欠損が傷害の構成要素である場合を含む、ヒト身体における任意の傷害または状態を処置するための方法であって、該方法は、
該患者のドナー部位から採取した角化細胞を、ラミニン−４１１、ラミニン−４２１、ラミニン−５１１、またはラミニン−５２１でコーティングされた基材上にプレートする工程；
該角化細胞を、該基材上で拡大する工程；および
該上皮欠損を、該基材からの該角化細胞で覆う工程、
を包含する方法。
(項目２１)
前記ヒト身体における傷害または状態は、眼、膀胱、口腔、または腸にある、項目２０に記載の方法。