【手続補正書】
【提出日】令和3年2月25日(2021.2.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
EU番号付けによる295位がシステインにより占有されている重鎖定常領域を含む抗体。
【請求項２】
EU番号付けによる239位がシステインにより占有されている、請求項1に記載の抗体。
【請求項３】
該抗体が、2つの重鎖および2つの軽鎖を含むヘテロ二量体である、請求項１に記載の抗体。
【請求項４】
定常領域がアイソタイプを有し、これがヒトIgG1、IgG2、IgG3またはIgG4である、請求項１〜３のいずれか1項に記載の抗体。
【請求項５】
重鎖定常領域が配列番号5〜12のいずれかの配列を有し、ただし、C末端リジンが存在しないことが可能である、請求項１〜４のいずれか1項に記載の抗体。
【請求項６】
チューブリシンMにコンジュゲート化されたシステインによりEU番号付けによる239位が占有されている重鎖定常領域を含む抗体を含む抗体薬物コンジュゲート。
【請求項７】
EU番号付けによる239位および295位がシステインにより占有されている重鎖定常領域を含む抗体の製造方法であって、
該抗体をコードするように操作された細胞を培養して、該抗体を発現させ、
該抗体を精製することを含む、製造方法。
【請求項８】
239位および295位のシステイン間のジスルフィド結合の形成を阻害する還元剤と該抗体とを接触させることを更に含む、請求項７に記載の製造方法。
【請求項９】
該抗体を培養する培地内に還元剤を含有させることにより、該抗体または融合タンパク質と還元剤とを接触させる、請求項８に記載の製造方法。
【請求項１０】
還元剤がジチオトレイトール、ベータ-メルカプトエタノールまたはトリス(2-カルボキシエチル)ホスフィンである、請求項８に記載の製造方法。
【請求項１１】
246、294、296、303、334、336、337、301、243、262、264又は267位がシステインにより占有されている重鎖定常領域を含む抗体又は融合タンパク質。
【請求項１２】
246、294、296、303、334、336,又は337位がシステインにより占有されている、請求項１１に記載の抗体又は融合タンパク質。
【請求項１３】
246、294又は303位がシステインにより占有されている、請求項１１に記載の抗体又は融合タンパク質。
【請求項１４】
EU番号付けによる239位がシステインにより占有されている、請求項１１に記載の抗体。
【請求項１５】
246、239及び303位がシステインにより占有されている、請求項１４に記載の抗体又は融合タンパク質。
【請求項１６】
246、294、296、303、334、336、337、301、243、262、264、又は267位のいずれかが、システインを介して薬物または標識にコンジュゲート化されている重鎖定常領域を含む抗体又は融合タンパク質。
【請求項１７】
請求項１６に記載の抗体または融合タンパク質及び生理学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項１８】
薬物にコンジュゲート化されている抗体または融合タンパク質の製造方法であって、
246、294、296、303、334、336、337、301、243、262、264、又は267位のいずれかがシステインにより占有されている重鎖定常領域を含む抗体又は融合タンパク質をコードするように操作された細胞を培養すること、ここで該抗体または融合タンパク質は発現され、
該抗体または融合タンパク質を精製すること、及び
該抗体または融合タンパク質を、該位置を占有するシステインを介して該薬物にコンジュゲート化することを含む、製造方法。
【請求項１９】
EU番号付けによる295位がシステインにより占有されている重鎖定常領域を含む抗体であって、該抗体は該システインを介して薬物にコンジュゲート化されている、抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２０】
重鎖定常領域のEU番号付けによる239位がシステインにより占有されている、請求項１９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２１】
抗体が、295及び239位における両方のシステインを介して薬物にコンジュゲート化されている、請求項２０に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２２】
該抗体が、2つの重鎖および2つの軽鎖を含むヘテロ二量体であり、該抗体の１つの分子が、両方の重鎖における295位および239位のシステインへのコンジュゲート化により4分子の薬物にコンジュゲート化されている、請求項２１に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２３】
重鎖定常領域がアイソタイプを有し、該アイソタイプがヒトIgG1、IgG2、IgG3またはIgG4である、請求項１９〜２２のいずれか1項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２４】
薬物がチューブリシンである、請求項１９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２５】
薬物がグルクロニドリンカーを介して該融合タンパク質にコンジュゲート化されている、請求項２４に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２６】
該抗体または融合タンパク質が、チューブリシンおよびグルクロニドリンカーを提供する以下に示す構造を有する化合物にコンジュゲート化されている、請求項２５に記載の抗体薬物コンジュゲート
【化１】
2020509010.tif 000001
。
【請求項２７】
薬物がMMAE、MMAFまたは副溝結合物質である、請求項１９〜２３のいずれか1項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２８】
重鎖定常領域が配列番号5〜12のいずれかの配列を有し、ただし、C末端リジンが存在しないことが可能である、請求項１９〜２７のいずれか1項に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項２９】
該抗体が、切断可能なリンカーを介して薬物にコンジュゲート化されている、請求項１９に記載の抗体薬物コンジュゲート。
【請求項３０】
請求項１９に記載の抗体薬物コンジュゲート及び生理学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項３１】
請求項６に記載の抗体薬物コンジュゲート及び生理学的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【請求項３２】
EU番号付けによる239位および295位がシステインにより占有されている重鎖定常領域を含む抗体を含む抗体薬物コンジュゲートの製造方法であって、
該抗体をコードするように操作された細胞を培養すること、ここで該抗体は発現される、
該抗体を精製すること、及び
該抗体を、239位のシステインおよび295位のシステインを介して、薬物にコンジュゲート化すること、を含む、前記製造方法。
【請求項３３】
239位および295位のシステイン間のジスルフィド結合の形成を阻害する還元剤と該抗体とを接触させることを更に含む、請求項３２に記載の製造方法。
【請求項３４】
該抗体を培養する培地内に還元剤を含有させることにより、該抗体と還元剤とを接触させる、請求項３３に記載の製造方法。
【請求項３５】
還元剤がジチオトレイトール、ベータ-メルカプトエタノールまたはトリス(2-カルボキシエチル)ホスフィンである、請求項３４に記載の製造方法。
【請求項３６】
還元剤が0.1〜2 mMの濃度のジチオトレイトールである、請求項３５に記載の製造方法。
【請求項３７】
EU番号付けによる295位がシステインにより占有されている重鎖定常領域を含む融合タンパク質。
【請求項３８】
295位のシステインを介して薬物または標識にコンジュゲート化されている、請求項３７に記載の融合タンパク質。
【請求項３９】
EU番号付けによる239位がシステインにより占有されている、請求項３７に記載の融合タンパク質。
【請求項４０】
295位のシステインおよび239位のシステインを介して、薬物又は標識にコンジュゲート化されている、請求項３９に記載の融合タンパク質。
【請求項４１】
定常領域がアイソタイプを有し、該アイソタイプがヒトIgG1、IgG2、IgG3またはIgG4である、請求項３７〜４０のいずれか1項に記載の融合タンパク質。
【請求項４２】
薬剤がチューブリシンである、請求項３７〜４１のいずれか１項に記載の融合タンパク質。
【請求項４３】
薬剤がグルクロニドリンカーを介して該融合タンパク質にコンジュゲート化されている、請求項４２に記載の融合タンパク質。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０３】
非経口投与用の医薬組成物は、無菌で、実質的に等張性（240〜360 mOsm/kg）であって、GMP条件下で製造されることが好ましい。医薬組成物は単位剤形（すなわち1回投与分の剤形）として提供することができる。医薬組成物は、1つもしくは複数の生理学的に許容される担体(基剤)、賦形剤、添加剤もしくは補助剤を用いて製剤することができる。製剤は選択される投与経路次第で決まる。注射用には、抗体は、水溶液として製剤されるが、好ましくはハンクス液、リンゲル液、または生理食塩水もしくは酢酸バッファー（注射部位の不快感を低減するため）などの生理的に適合するバッファー中で製剤することができる。溶液は、懸濁剤、安定化剤および/または分散剤などの配合剤を含有することができる。あるいはまた、抗体は、適切な溶媒、たとえば滅菌発熱性物質除去蒸留水、による使用前構成用に、凍結乾燥された形をとることもある。液体製剤中の抗体濃度は、たとえば、10 mg/mlなど、1〜100 mg/mlとすることができる。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４８】
IgG4      (配列番号20)
2020509010.tif 000002
本開示は以下の実施形態を包含する。  
[１]  EU番号付けによる295位がシステインにより占有されている重鎖定常領域を含む抗体または融合タンパク質。   
[２]  295位のシステインを介して薬物または標識にコンジュゲート化されている、実施形態1に記載の抗体または融合タンパク質。   
[３]  EU番号付けによる239位がシステインにより占有されている、実施形態1に記載の抗体または融合タンパク質。   
[４]  295位および239位のシステインを介して薬物または標識にコンジュゲート化されている、実施形態3に記載の抗体または融合タンパク質。   
[５]  該抗体が、2つの重鎖および2つの軽鎖を含むヘテロ二量体であり、1分子の該抗体が、両方の重鎖における295位および239位のシステインへのコンジュゲート化により4分子の薬物にコンジュゲート化されている、実施形態4に記載の抗体。   
[６]  定常領域がアイソタイプを有し、これがヒトIgG1、IgG2、IgG3またはIgG4である、実施形態１〜５のいずれかに記載の抗体または融合タンパク質。   
[７]  薬物がチューブリシン（tubulysin）である、実施形態１〜６のいずれかに記載の抗体または融合タンパク質。   
[８]  薬物がグルクロニドリンカーを介して該抗体または融合タンパク質にコンジュゲート化されている、実施形態7に記載の抗体または融合タンパク質。   
[９]  該抗体または融合タンパク質が、チューブリシンおよびグルクロニドリンカーを提供する以下に示す構造を有する化合物にコンジュゲート化されている、実施形態7に記載の抗体または融合タンパク質。   
化１
2020509010.tif 000003
[１０]  薬物がMMAE、MMAFまたは副溝結合物質である、実施形態1〜6のいずれかに記載の抗体または融合タンパク質。   
[１１]  重鎖定常領域が配列番号5〜12のいずれかの配列を有し、ただし、C末端リジンが存在しないことが可能である、実施形態１〜１０のいずれかに記載の抗体または融合タンパク質。   
[１２]  該抗体が、切断可能なリンカーを介して薬物にコンジュゲート化されている、実施形態1に記載の抗体または融合タンパク質。   
[１３]  実施形態１〜１２のいずれかに記載の抗体または融合タンパク質を含む、医薬組成物。   
[１４]  チューブリシンMにコンジュゲート化されたシステインによりEU番号付けによる239位が占有されている重鎖定常領域を含む抗体または融合タンパク質。   
[１５]  EU番号付けによる239位および295位がシステインにより占有されている重鎖定常領域を含む抗体または融合タンパク質の製造方法であって、
該抗体または融合タンパク質をコードするように操作された細胞を培養して、該抗体または融合タンパク質を発現させ、
該抗体または融合タンパク質を精製することを含む、製造方法。   
[１６]  該抗体または融合タンパク質を239位および295位のシステインを介して薬物にコンジュゲート化することを更に含む、実施形態15に記載の製造方法。   
[１７]  239位および295位のシステイン間のジスルフィド結合の形成を阻害する還元剤と該抗体または融合タンパク質とを接触させることを更に含む、実施形態15に記載の製造方法。   
[１８]  該抗体または融合タンパク質を培養する培地内に還元剤を含有させることにより、該抗体または融合タンパク質と還元剤とを接触させる、実施形態17に記載の製造方法。   
[１９]  還元剤がジチオトレイトール、ベータ-メルカプトエタノールまたはトリス(2-カルボキシエチル)ホスフィンである、実施形態17または18に記載の製造方法。   
[２０]  還元剤が0.1〜2 mMの濃度のジチオトレイトールである、実施形態18に記載の製造方法。