【手続補正書】
【提出日】令和3年5月25日(2021.5.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（ＩＩＢ）の構造を有するＰＮＡコンジュゲート：
2021507695.tif 000001
［式中、
「特異的結合体」は、抗体、抗体断片、薬物／抗体複合体、および核酸からなる群から選択され；
「リンカー」は、２から８０個の炭素原子を有し、Ｏ、Ｎ、またはＳから選択される１つまたは複数のヘテロ原子を有していてもよい、分岐または非分岐、直鎖または環状、置換または非置換、飽和または不飽和の基であり；
「ＰＮＡ」は、ガンマ炭素の位置に置換基を含む少なくとも１つのヌクレオチドを有するＰＮＡ配列であり；
Ｘは、ビオチン、酵素、色素原、フルオロフォア、ハプテン、および質量分析タグからなる群から選択され；
Ｙは、１から１２個の炭素原子を有し、１つまたは複数のＯ、Ｎ、またはＳヘテロ原子を有していてもよい、分岐または非分岐、直鎖または環状、置換または非置換、飽和または不飽和の基であり；
ｍは、０または１から６の範囲の整数であり；
ｚは、０または１であり；
ｎは、１から１２の範囲の整数である］。
【請求項２】
「特異的結合体」が、抗体である、請求項１に記載のＰＮＡコンジュゲート。
【請求項３】
少なくとも１つの置換されたヌクレオチドが、リジン残基、２０個未満のアミノ酸を有するペプチド配列、ポリマー、およびｍｉｎｉＰＥＧからなる群から選択され、任意選択的に、少なくとも１つのレポーター部分が、少なくとも１つの置換されたヌクレオチドに連結している、請求項１または２に記載のＰＮＡコンジュゲート。
【請求項４】
ｍが０であり、ｚが０であり、ｎが１より大きく、任意選択的に、ｎが、２から６の範囲の整数である、請求項１から３のいずれか一項に記載のＰＮＡコンジュゲート。
【請求項５】
「リンカー」が、少なくとも１つの親水性基を含む、請求項１から４のいずれか一項に記載のＰＮＡコンジュゲート。
【請求項６】
「リンカー」が、式（ＩＶＡ）に示される構造を有する：
2021507695.tif 000002
［式中、
ｄおよびｅは、それぞれ独立して、２から２０の範囲の整数であり；
Ｑは、結合、Ｏ、Ｓ、またはＮ（Ｒｃ）（Ｒｄ）であり；
ＲａおよびＲｂは、独立して、Ｈ、Ｃ１〜Ｃ４アルキル基、Ｆ、Ｃｌ、またはＮ（Ｒｃ）（Ｒｄ）であり；
ＲｃおよびＲｄは、独立して、ＣＨ３またはＨであり；
ＡおよびＢは、独立して、１から１２個の炭素原子を有し、１つまたは複数のＯ、Ｎ、またはＳヘテロ原子を有していてもよい、分岐または非分岐、直鎖または環状、置換または非置換、飽和または不飽和の基である］、請求項１から５のいずれか一項に記載のＰＮＡコンジュゲート。
【請求項７】
ｄおよびｅが、２から６の範囲の整数である、請求項６に記載のＰＮＡコンジュゲート。
【請求項８】
ＡまたはＢの少なくとも一方が、切断可能な部分を含む、請求項６に記載のＰＮＡコンジュゲート。
【請求項９】
切断可能な部分が、光開裂性基であるか、または化学的に切断可能な基である、請求項８に記載のＰＮＡコンジュゲート。
【請求項１０】
「特異的結合体」が、抗体であり、「リンカー」が、少なくとも１つのアルキレンオキシド基を含み、ｍが０であり、ｚが０であり、ｎが１より大きい、請求項１から９のいずれか一項に記載のＰＮＡコンジュゲート。
【請求項１１】
「特異的結合体」が、抗体であり、「リンカー」が、少なくとも１つのアルキレンオキシド基を含み、ｎが１より大きい、請求項１から９のいずれか一項に記載のＰＮＡコンジュゲート。
【請求項１２】
Ｘが、ハプテンである、請求項１１に記載のＰＮＡコンジュゲート。
【請求項１３】
試料中の標的を検出する方法であって、
試料を第１のＰＮＡコンジュゲートと接触させることであって、ここで、第１のＰＮＡコンジュゲートが、請求項１に記載のＰＮＡコンジュゲートである、接触させることと；  試料を第１の検出試薬と接触させて、ＰＮＡコンジュゲートの検出を容易にすること
とを含む、方法。
【請求項１４】
「特異的結合体」が、一次抗体であり、一次抗体が、第１の標的に特異的であるか、または「特異的結合体」が、二次抗体であり、前記方法が、試料を第１のＰＮＡコンジュゲートと接触させる前に、試料を第１の標的に特異的な一次抗体と接触させる工程をさらに含み、第１のＰＮＡコンジュゲートは、第１の一次抗体に特異的である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
第１の検出試薬が、ＰＮＡコンジュゲートの標識に特異的な抗標識抗体であり、任意選択的に、標識が、ハプテンであり、抗標識抗体が、抗ハプテン抗体である、請求項１３または１４に記載の方法。
【請求項１６】
検出試薬が、第１のＰＮＡコンジュゲートのＰＮＡ配列またはガンマＰＮＡ配列に対して相補的なＰＮＡまたはＤＮＡ配列を含み、相補的なＰＮＡまたはＤＮＡ配列が、レポーター部分にコンジュゲートしている、請求項１３から１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
レポーター部分が、フルオロフォアであるか、またはレポーター部分が、ハプテンであり、前記方法が、試料を相補的なＰＮＡまたはＤＮＡ配列のハプテンに特異的な抗ハプテン抗体と接触させることをさらに含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
第１のＰＮＡコンジュゲートの「リンカー」が、切断可能な部分を含み、前記方法が、試料を試薬と接触させて、「リンカー」上の切断可能な部分を切断することと、切断された「ＰＮＡ」配列の量を定量することとをさらに含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１９】
ＰＮＡ配列の量の定量が、ＮａｎｏＳｔｒｉｎｇ  ｎＣｏｕｎｔｅｒ技術、Ｇｙｒｏｓ技術、または質量分析を使用して行われる、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
切断可能な部分が、光開裂性基、化学的に切断可能な基、または酵素的に切断可能な基からなる群から選択される、請求項１８または１９に記載の方法。
【請求項２１】
ＰＮＡ配列が切断された特異的結合体を可視化することをさらに含む、請求項１８から２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
式（ＩＢ）のコンジュゲート：
2021507695.tif 000003
［式中、
「特異的結合体」は、抗体、抗体断片、薬物／抗体複合体、および核酸からなる群から選択され；
「リンカー」は、２から８０個の炭素原子を有し、Ｏ、Ｎ、またはＳから選択される１つまたは複数のヘテロ原子を有していてもよい、分岐または非分岐、直鎖または環状、置換または非置換、飽和または不飽和の基であり；
Ｚは、ガンマ炭素の位置に置換基を含む少なくとも１つのヌクレオチドを有するＰＮＡ配列であり；
Ｘは、ビオチン、酵素、色素原、フルオロフォア、ハプテン、および質量分析タグからなる群から選択され；
Ｙは、１から１２個の炭素原子を有し、１つまたは複数のＯ、Ｎ、またはＳヘテロ原子を有していてもよい、分岐または非分岐、直鎖または環状、置換または非置換、飽和または不飽和の基であり；
ｍは、０または１から６の範囲の整数であり；
ｚは、０または１であり；
ｎは、１から１２の範囲の整数である］。
【請求項２３】
「特異的結合体」が、一次抗体である、請求項２２に記載のコンジュゲート。
【請求項２４】
少なくとも１つの置換されたヌクレオチドが、リジン残基、２０個未満のアミノ酸を有するペプチド配列、ポリマー、およびｍｉｎｉＰＥＧからなる群から選択され、任意選択的に、少なくとも１つのレポーター部分が、少なくとも１つの置換されたヌクレオチドに連結される、請求項２２に記載のコンジュゲート。