【手続補正書】
【提出日】令和3年9月30日(2021.9.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片を、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片及びＨ２Ｌ２抗体またはその抗原結合断片を含む抗体組成物から分離する方法であって、
（ｉ）Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片及びＨ２Ｌ２抗体またはその抗原結合断片がカチオン交換樹脂に結合するように、前記抗体組成物を前記樹脂に接触させることと、
（ｉｉ）約３．８〜約５．０のｐＨ、かつ／または約３００ｍＭ〜約６００ｍＭの塩濃度の溶出組成物を前記カチオン交換樹脂に接触させることと、
（ｉｉｉ）前記樹脂から溶出したＨ２Ｌ２組成物を収集することと、を含む、前記方法。
【請求項２】
前記Ｈ２Ｌ２組成物中の前記抗体またはその抗原結合断片の２％以下、１％以下、または０．５％以下が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記Ｈ２Ｌ２組成物中の前記抗体またはその抗原結合断片の少なくとも９８％、少なくとも９９％、または少なくとも９９．５％が、Ｈ２Ｌ２抗体またはその抗原結合断片である、請求項１〜２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４】
前記Ｈ２Ｌ２組成物が、前記カチオン交換樹脂に適用された前記抗体組成物中に２５％以下、２０％以下、１５％以下、１０％以下、または５％以下の前記Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片を含む、請求項１〜２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記Ｈ２Ｌ２組成物が、１〜９のカラム体積から選択される１つ以上の溶出されたカラム体積を含み、必要に応じて前記Ｈ２Ｌ２組成物が、１〜４の溶出されたカラム体積を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記カチオン交換樹脂が、架橋ポリ（スチレンジビニルベンゼン）及び／またはスフロプロピル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−）表面官能性を有する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記カチオン交換樹脂の粒径が、約５０μｍである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記カチオン交換樹脂が、二峰性孔径分布を有し、必要に応じて前記二峰性孔径分布が、直径約５００ｎＭの細孔及び直径約２２ｎＭの細孔を含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記溶出組成物が、塩を含み、必要に応じて前記溶出組成物中の前記塩が、塩化物塩であり、さらに必要に応じて前記塩化物塩が、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、または塩化マグネシウムである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記溶出組成物が、約３．８〜約６．５、約３．８〜約５．０、または約４．２のｐＨを有する、請求項２〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記方法が、平衡組成物を前記カチオン交換樹脂に接触させた後に、前記抗体組成物を前記カチオン交換樹脂に接触させることを含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記平衡組成物が、酢酸ナトリウムを含み、必要に応じて前記平衡組成物中の前記酢酸ナトリウムの濃度が、約１０ｍＭ〜１５０ｍＭである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記平衡組成物が、約３．８〜約６．５、または約４．２のｐＨを有する、請求項１１または１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記抗体組成物が、約１０〜約１００ｇ／Ｌのタンパク質、約３０ｇ／Ｌ〜約５０ｇ／Ｌのタンパク質、約３５ｇ／Ｌ〜約４５ｇ／Ｌのタンパク質、または約４０ｇ／Ｌのタンパク質を含む、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記抗体組成物が、約３．８〜約６．５、または約４．２のｐＨを有する、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記抗体組成物中の前記抗体またはその抗原結合断片の約１％〜約２０％が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片であり、必要に応じて前記抗体組成物中の前記抗体またはその抗原結合断片の約１％〜約１５％、約５％〜約１５％、約３％〜約１２％、または約１０％〜約１５％が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片である、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記Ｈ２Ｌ２組成物が、前記カチオン交換樹脂に接触させた前記抗体組成物中に少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、または少なくとも５５％の前記Ｈ２Ｌ２抗体またはその抗原結合断片を含む、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記抗体組成物が、システイン操作抗体またはその抗原結合断片を含み、必要に応じて前記システイン操作抗体またはその抗原結合断片が、ＥＵ／ＯＵ番付位置４４２に操作されたシステイン残基を含む、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記抗体組成物が、ＣＨＯ細胞株から産生された抗体またはその抗原結合断片を含む、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記Ｈ２Ｌ２組成物中の前記Ｈ２Ｌ２抗体またはその抗原結合断片を細胞毒にコンジュゲートして、イムノコンジュゲート組成物を形成することをさらに含む、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
（ｉ）前記カチオン交換樹脂が、架橋ポリ（スチレンジビニルベンゼン）、スフロプロピル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−）表面官能性、約５０μｍの粒径、ならびに直径約５００ｎＭの細孔及び直径約２２ｎＭの細孔を含む二峰性孔径分布を有し、
（ｉｉ）前記溶出組成物が、約３００〜６００ｍＭの塩化物塩、及び約３．８〜約５．０のｐＨを含み、
（ｉｉｉ）前記抗体組成物が、約１０〜約１００ｇ／Ｌのタンパク質を含み、前記抗体組成物中の約１０％〜約１５％の前記抗体またはその抗原結合断片が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片であり、
（ｉｖ）前記Ｈ２Ｌ２組成物が、１〜９のカラム体積から選択される１つ以上の溶出されたカラム体積を含み、
（ｖ）前記Ｈ２Ｌ２組成物中の前記抗体またはその抗原結合断片の２％以下が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片である、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
（ｉ）前記カチオン交換樹脂が、架橋ポリ（スチレンジビニルベンゼン）、スフロプロピル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−）表面官能性、約５０μｍの粒径、ならびに直径約５００ｎＭの細孔及び直径約２２ｎＭの細孔を含む二峰性孔径分布を有し、
（ｉｉ）前記溶出組成物が、約４００ｍＭ  ＮａＣｌ及び４．２のｐＨを有し、
（ｉｉｉ）前記抗体組成物が、約３０〜約５０ｇ／Ｌのタンパク質を含み、前記抗体組成物中の前記抗体またはその抗原結合断片の約１０％〜約１５％が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片であり、
（ｉｖ）前記Ｈ２Ｌ２組成物が、１〜４の溶出されたカラム体積を含み、
（ｖ）前記Ｈ２Ｌ２組成物中の前記抗体またはその抗原結合断片の１％以下が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片である、請求項１に記載の方法。
【請求項２３】
抗ＣＤ１２３  Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片を、抗ＣＤ１２３  Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片及び抗ＣＤ１２３  Ｈ２Ｌ２抗体またはその抗原結合断片を含む抗ＣＤ１２３抗体組成物から分離する方法であって、
（ｉ）抗ＣＤ１２３  Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片及び抗ＣＤ１２３  Ｈ２Ｌ２抗体またはその抗原結合断片がカチオン交換樹脂に結合するように、前記抗ＣＤ１２３抗体組成物を前記樹脂に接触させることと、
（ｉｉ）約３．８〜約５．５のｐＨ、かつ／または約３００ｍＭ〜約６００ｍＭの塩濃度の溶出組成物を前記カチオン交換樹脂に接触させることと、
（ｉｉｉ）前記樹脂から溶出した抗ＣＤ１２３  Ｈ２Ｌ２組成物を収集することと、を含み、
前記抗ＣＤ１２３  Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片及び前記抗ＣＤ１２３  Ｈ２Ｌ２抗体またはその抗原結合断片が、それぞれ、配列番号５〜７の可変重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列と、それぞれ、配列番号８〜１０の可変軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列と、を含む、前記方法。
【請求項２４】
前記抗ＣＤ１２３抗体が、配列番号１の可変重鎖配列及び／または配列番号２の可変軽鎖配列を含み、必要に応じて前記抗体が、配列番号３の重鎖配列及び／または配列番号４の軽鎖配列を含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記抗ＣＤ１２３抗体またはその抗原結合断片が、システイン操作されている、請求項２３または２４に記載の方法。
【請求項２６】
前記Ｈ２Ｌ２組成物中の前記抗体またはその抗原結合断片の２％以下、１％以下、または０．５％以下が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片である、請求項２３〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２７】
前記Ｈ２Ｌ２組成物中の前記抗体またはその抗原結合断片の少なくとも９８％、少なくとも９９％、または少なくとも９９．５％が、Ｈ２Ｌ２抗体またはその抗原結合断片である、請求項２３〜２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２８】
前記Ｈ２Ｌ２組成物が、前記カチオン交換樹脂に接触させた前記抗体組成物中に２５％以下、２０％以下、１５％以下、１０％以下、または５％以下の前記Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片を含む、請求項２３〜２７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２９】
前記Ｈ２Ｌ２組成物が、１〜９のカラム体積から選択される１つ以上の溶出されたカラム体積を含み、必要に応じて前記Ｈ２Ｌ２組成物が、１〜４の溶出されたカラム体積を含む、請求項２３〜２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３０】
前記カチオン交換樹脂が、架橋ポリ（スチレンジビニルベンゼン）及び／またはスフロプロピル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−）表面官能性を有する、請求項２３〜２９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３１】
前記カチオン交換樹脂の粒径が、約５０μｍである、請求項２３〜３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３２】
前記カチオン交換樹脂が、二峰性孔径分布を有し、必要に応じて前記二峰性孔径分布が、直径約５００ｎＭの細孔及び直径約２２ｎＭの細孔を含む、請求項２３〜３１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
前記溶出組成物が、塩を含み、必要に応じて前記溶出組成物中の前記塩が、塩化物塩であり、さらに必要に応じて前記塩化物塩が、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、または塩化マグネシウムである、請求項２３〜３２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
前記溶出組成物が、約３．８〜約６．５、約３．８〜約５．０、または約４．２のｐＨを有する、請求項２３〜３３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
前記方法が、平衡組成物を前記カチオン交換樹脂に接触させた後に、前記抗体組成物を前記カチオン交換樹脂に接触させることを含む、請求項２３〜３４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３６】
前記平衡組成物が、酢酸ナトリウムを含み、必要に応じて前記平衡組成物中の前記酢酸ナトリウムの濃度が、約１０ｍＭ〜１５０ｍＭである、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
前記平衡組成物が、約３．８〜約６．５、または約４．２のｐＨを有する、請求項３５または３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記抗体組成物が、約１０〜約１００ｇ／Ｌのタンパク質、約３０ｇ／Ｌ〜約５０ｇ／Ｌのタンパク質、約３５ｇ／Ｌ〜約４５ｇ／Ｌのタンパク質、または約４０ｇ／Ｌのタンパク質を含む、請求項２３〜３７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３９】
前記抗体組成物が、約３．８〜約６．５、または約４．２のｐＨを有する、請求項２３〜３８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４０】
前記抗体組成物中の前記抗体またはその抗原結合断片の約１％〜約２０％が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片であり、必要に応じて前記抗体組成物中の前記抗体またはその抗原結合断片の約１％〜約１５％、または約５％〜約１５％、または約３％〜約１２％、または約１０％〜約１５％が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片である、請求項２３〜３９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４１】
前記Ｈ２Ｌ２組成物が、前記カチオン交換樹脂に接触させた前記抗体組成物中に少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、または少なくとも５５％の前記Ｈ２Ｌ２抗体またはその抗原結合断片を含む、請求項２３〜４０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４２】
前記抗体組成物が、システイン操作抗体またはその抗原結合断片を含み、必要に応じて前記システイン操作抗体またはその抗原結合断片が、ＥＵ／ＯＵ番付位置４４２に操作されたシステイン残基を含む、請求項２３〜４１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４３】
前記抗体組成物が、ＣＨＯ細胞株から産生された抗体またはその抗原結合断片を含む、請求項２３〜４２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４４】
前記Ｈ２Ｌ２組成物中の前記Ｈ２Ｌ２抗体またはその抗原結合断片を細胞毒にコンジュゲートして、イムノコンジュゲート組成物を形成することをさらに含む、請求項２３〜４３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項４５】
請求項１〜２０及び２５〜４４のいずれか１項に記載の方法により産生されたＨ２Ｌ２組成物であって、必要に応じて前記組成物が、２％以下、１％以下、または０．５％以下のＨ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片を含む、Ｈ２Ｌ２組成物。
【請求項４６】
請求項２０または４４に記載の方法により産生されたイムノコンジュゲート組成物であって、必要に応じて前記イムノコンジュゲート組成物が、２％以下、１％以下、または０．５％以下のＨ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片を含む、イムノコンジュゲート組成物。
【請求項４７】
（ｉ）前記カチオン交換樹脂が、架橋ポリ（スチレンジビニルベンゼン）、スフロプロピル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−）表面官能性、約５０μｍの粒径、ならびに直径約５００ｎＭの細孔及び直径約２２ｎＭの細孔を含む二峰性孔径分布を有し、
（ｉｉ）前記溶出組成物が、約３００〜６００ｍＭの塩化物塩、及び約３．８〜約５．０のｐＨを含み、
（ｉｉｉ）前記抗体組成物が、約１０〜約１００ｇ／Ｌのタンパク質を含み、前記抗体組成物中の前記抗体またはその抗原結合断片の約１０％〜約１５％が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片であり、
（ｉｖ）前記Ｈ２Ｌ２組成物が、１〜９のカラム体積から選択される１つ以上の溶出されたカラム体積を含み、
（ｖ）前記Ｈ２Ｌ２組成物中の前記抗体またはその抗原結合断片の２％以下が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片である、請求項２３に記載の方法。
【請求項４８】
（ｉ）前記カチオン交換樹脂が、架橋ポリ（スチレンジビニルベンゼン）、スフロプロピル（−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＳＯ３−）表面官能性、約５０μｍの粒径、ならびに直径約５００ｎＭの細孔及び直径約２２ｎＭの細孔を含む二峰性孔径分布を有し、
（ｉｉ）前記溶出組成物が、約４００ｍＭ  ＮａＣｌ及び４．２のｐＨを有し、
（ｉｉｉ）前記抗体組成物が、約３０〜約５０ｇ／Ｌのタンパク質を含み、前記抗体組成物中の前記抗体またはその抗原結合断片の約１０％〜約１５％が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片であり、
（ｉｖ）前記Ｈ２Ｌ２組成物が、１〜４の溶出されたカラム体積を含み、
（ｖ）前記Ｈ２Ｌ２組成物中の前記抗体またはその抗原結合断片の１％以下が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片である、請求項２３に記載の方法。
【請求項４９】
抗ＣＤ１２３抗体またはその抗原結合断片を含む組成物であって、前記抗ＣＤ１２３抗体またはその抗原結合断片の１％未満が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片であり、前記抗ＣＤ１２３抗体またはその抗原結合断片が、それぞれ、配列番号５〜７の可変重鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列と、それぞれ、配列番号８〜１０の可変軽鎖ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３配列と、を含む、前記組成物。
【請求項５０】
前記抗ＣＤ１２３抗体が、配列番号１の可変重鎖配列及び／または配列番号２の可変軽鎖配列を含み、必要に応じて前記抗ＣＤ１２３抗体が、配列番号３の重鎖配列及び／または配列番号４の軽鎖配列を含む、請求項４９に記載の組成物。
【請求項５１】
前記抗ＣＤ１２３抗体またはその抗原結合断片が、システイン操作されている、請求項４９または５０に記載の組成物。
【請求項５２】
前記抗ＣＤ１２３抗体またはその抗原結合断片の０．５％未満が、Ｈ２Ｌ３抗体またはその抗原結合断片である、請求項４９〜５１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５３】
請求項４９〜５２のいずれか１項に記載の組成物であって、前記抗ＣＤ１２３抗体またはその抗原結合断片が、前記イムノコンジュゲート中のＤＧＮ５４９−Ｃに連結される、組成物。
【請求項５４】
前記イムノコンジュゲートが次の構造を有する、請求項２０〜５３のいずれか１項に記載の組成物。
【化４】
2020534332.tif 000001