【手続補正書】
【提出日】令和3年9月3日(2021.9.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）材料からのイソチオシアネート含有製品の調製方法であって、
ｉ）前記アブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）材料を前処理し、ミロシナーゼのグルコシノレートへの接近を改善することと、
ｉｉ）ステップｉ）で得られる前記材料を乳酸菌で発酵させ、前記イソチオシアネート含有製品を形成することと
を含む、前記調製方法。
【請求項２】
前記前処理が、以下：
ｉ）加熱、
ｉｉ）浸漬、
ｉｉｉ）マイクロ波処理、
ｉｖ）高周波音波（超音波）への曝露、または
ｖ）パルス電界処理
のうち１つ以上を含み、
前記アブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）材料の温度が、前処理中に約７５℃を超えない、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記前処理が、内因性ミロシナーゼ活性を維持しながら、エピチオ特異タンパク質（ＥＳＰ）活性を減少させる、請求項１または請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前処理が、以下の工程：
ｉ）前記アブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）材料を加熱して浸漬すること、ここで、前記アブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）材料の前記温度が、前処理中に約７５℃を超えない；及び
ｉｉ）前記アブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）材料を約５０℃〜約７０℃の温度に加熱し、続いて浸漬すること
の一方又は両方を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
以下の工程：
ａ）請求項１のステップｉｉ）からの前記イソチオシアネート含有製品を、ｐＨが約４．４以下となるまで酸性化すること；
ｂ）約１０時間から約１７日間発酵させること；
ｃ）約１０時間から約２４時間発酵させること；
ｄ）約２２℃から約３４℃で発酵させること；
ｅ）約３０℃で発酵させること；及び
ｆ）発酵又は酸性化後、前記イソチオシアネート含有製品を後処理し、微生物を不活性化すること、
のうち１つ以上をさらに含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記乳酸菌が：
ｉ）Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ、Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ａｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｃａｒｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ、Ｏｅｎｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｐｏｒｏｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ、Ｔｅｔｒａｇｅｎｏｃｏｃｃｕｓ、Ｖａｇｏｃｏｃｃｕｓ及びＷｅｉｓｓｅｌｌａから選択される属；
ｉｉ）Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｅｎｔｏｓｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｂｒｅｖｉｓ、Ｌａｃｔｏｃｏｃｕｓ  ｌａｃｔｉｓ、Ｐｅｄｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｅｎｔｏｓａｃｅｕｓ、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ及びＰｅｄｉｃｏｃｃｕｓ  ａｃｉｄｉｌａｃｔｉ；
ｉｉｉ）ブロッコリーから単離されたものであり、及び／または前記乳酸菌が、ミロシナーゼ活性を欠いている、前記ｉ）又はｉｉ）の細菌；
ｉｖ）
ａ）Ｌｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ、
ｂ）Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍ、
ｃ）Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｅｎｔｏｓｕｓ、
ｄ）Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｒｈａｍｎｏｓｕｓ、
ｅ）ａ）及びｂ）の組合せ、
ｆ）ａ）、ｂ）及びｃ）の組合せ、ならびに
ｇ）ａ）、ｂ）及びｄ）の組合せ；
ｖ）２０１７年９月２５日に、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７２９の下で寄託されたＢＦ１及び／または２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３０の下で寄託されたＢＦ２；
ｖｉ）
ａ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３１の下で寄託されたＢ１、
ｂ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３２の下で寄託されたＢ２、
ｃ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３３の下で寄託されたＢ３、
ｄ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３４の下で寄託されたＢ４、及び
ｅ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３５の下で寄託されたＢ５
のうち１つ以上または全て、
の１つ以上から選択される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記イソチオシアネート含有製品が、以下の特徴：
ｉ）浸漬したアブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）材料よりも、少なくとも約１０倍多くイソチオシアネートを含むこと；
ｉｉ）抽出可能なグルコシノレート含量に基づく、イソチオシアネートの予想される最大収量の少なくとも約２倍を含むこと；
ｉｉｉ）前記製品中のイソチオシアネートが、約４℃〜約２５℃で保存される場合、少なくとも４週間、または少なくとも８週間、または少なくとも１２週間は安定していること；
ｉｖ）約４℃〜約２５℃で保存される場合、少なくとも４週間、または少なくとも８週間、または少なくとも１２週間は、酵母、カビ及び／または大腸菌の増殖に対して耐性があること；
ｖ）少なくとも１０8ＣＦＵ／ｇの濃度で乳酸菌を含むこと；
ｖｉ）イソチオシアネート生物活性誘導体を含むこと；及び
ｖｉｉ）前記イソチオシアネートがスルフォラファンであること、
のうち１つ以上または全てを有する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記グルコシノレートが、グルコラファニン（４−メチルスルフィニルブチル）、シニグリン（２−プロペニル）、グルコナピン（３−ブテニル）、グルコブラシカナピン（４−ペンテニル）、プロゴイトリン（２（Ｒ）−２−ヒドロキシ−３−ブテニル）、エピプロゴイトリン（２（Ｓ）−２−ヒドロキシ−３−ブテニル）、グルコナポレイフェリン（２−ヒドロキシ−４−ペンテニル）、グルコイベルビリン（３−メチルチオプロピル）、グルコエルシン（４−メチルチオブチル）、デヒドロエルシン（４−メチルチオ−３−ブテニル）、グルコイベリン（３−メチルスルフィニルプロピル）、グルコラフェニン（４−メチルスルフィニル−３−ブテニル）、グルコアリシン（５−メチルスルフィニルペンテニル）、グルコエリソリン（３−メチルスルホニルブチル、４−メルカプトブチル）、グルコブラシシン（３−インドリルメチル）、４−ヒドロキシグルコブラシシン（４−ヒドロキシ−３−インドリルメチル）、４−メトキシグルコブラシシン（４−メトキシ−３−インドリルメチル）、ネオグルコブラシシン（１−メトキシ−３−インドリルメチル）、グルコトロパエオリン（ベンジル）、及びグルコナスツルチイン２−フェニルエチルのうち１つ以上から選択される、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記アブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）が、Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｏｌｅｒａｃｅａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｂａｌｅａｒｉｃａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｃａｒｉｎａｔａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｅｌｏｎｇａｔｅ、Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｆｒｕｔｉｃｕｌｏｓａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｈｉｌａｒｉｏｎｉｓ、Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｊｕｎｃｅａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｎａｐｕｓ、Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｎａｒｉｎｏｓａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｎｉｇｒａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｐｅｒｖｉｒｉｄｉｓ、Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｒａｐａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｒｕｐｅｓｔｒｉｓ、Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｓｅｐｔｉｃｅｐｓ及びＢｒａｓｓｉｃａ  ｔｏｕｒｎｅｆｏｒｔｉｉから選択される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
ｉ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７２９の下で寄託されたＢＦ１、
ｉｉ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３０の下で寄託されたＢＦ２、
ｉｉｉ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３１の下で寄託されたＢ１、
ｉｖ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３２の下で寄託されたＢ２、
ｖ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３３の下で寄託されたＢ３、
ｖｉ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３４の下で寄託されたＢ４、及び
ｖｉｉ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３５の下で寄託されたＢ５
から選択される、乳酸菌の単離株。
【請求項１１】
ｉ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７２９の下で寄託されたＢＦ１、
ｉｉ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３０の下で寄託されたＢＦ２、
ｉｉｉ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３１の下で寄託されたＢ１、
ｉｖ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３２の下で寄託されたＢ２、
ｖ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３３の下で寄託されたＢ３、
ｖｉ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３４の下で寄託されたＢ４、及び
ｖｉｉ）２０１７年９月２５日に、前記Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ＡｕｓｔｒａｌｉａにＶ１７／０２１７３５の下で寄託されたＢ５
のうち１つ以上または全てから選択される乳酸菌を含む、プロバイオティック組成物。
【請求項１２】
イソチオシアネート含有アブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）製品であって、
ｉ）前記浸漬したアブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）材料よりも、少なくとも約１０倍多くイソチオシアネートを含む、及び／又は
ｉｉ）抽出可能なグルコシノレート含量に基づく、イソチオシアネートの前記予想される最大収量の少なくとも約２倍を含む、前記イソチオシアネート含有アブラナ科（Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ）製品。
【請求項１３】
前記イソチオシアネート含有製品が、以下の特徴：
ｉ）約４℃〜約２５℃で保存される場合、少なくとも４週間、または少なくとも８週間、または少なくとも１２週間は安定していること、
ｉｉ）約４℃〜約２５℃で保存される場合、少なくとも４週間、または少なくとも８週間、または少なくとも１２週間は、酵母、カビ及び／または大腸菌の増殖に対して耐性があること、ならびに
ｉｉｉ）少なくとも１０7ＣＦＵ／ｇのＬｅｕｃｏｎｏｓｔｏｃ  ｍｅｓｅｎｔｅｒｏｉｄｅｓ及び／またはＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌａｎｔａｒｕｍを含むこと
のうち１つ以上または全てを有する、請求項１２に記載のイソチオシアネート含有製品。
【請求項１４】
前記製品が、栄養補助食品、サプリメント、食品成分、及びプロバイオティックから選択される、請求項１２又は１３に記載のイソチオシアネート含有製品。
【請求項１５】
前記製品が粉末形態である、請求項１２〜１４のいずれか１項に記載のイソチオシアネート含有製品。