【手続補正書】
【提出日】令和2年11月20日(2020.11.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞結合剤−細胞傷害剤コンジュゲートを調製する方法であって、
（ａ）以下の式：
【化１】
2020512276.tif 000001
またはその薬学的に許容される塩で表されるイミン含有細胞傷害剤のイミン部分を１．９〜５．０のｐＨの水溶液中で、二酸化硫黄、亜硫酸水素塩、またはメタ亜硫酸水素塩と反応させて、以下の式：
【化２】
2020512276.tif 000002
またはその薬学的に許容される塩で表される修飾イミン部分を含む修飾細胞傷害剤を形成するステップ、及び
（ｂ）前記修飾細胞傷害剤を細胞結合剤と反応させて、前記細胞結合剤−細胞傷害剤コンジュゲートを形成するステップ、
を含み、
Ｄが、イミン含有ベンゾジアゼピン化合物であり、Ｌが、リンカーである、前記方法。
【請求項２】
Ｄが、イミン含有インドリノベンゾジアゼピンまたはイミン含有ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）化合物である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ステップ（ａ）の前記反応が、２．９〜４．０のｐＨ、２．９〜３．７のｐＨ、３．１〜３．５のｐＨ、３．２〜３．４のｐＨ、または３．３のｐＨで実施される、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
ステップ（ａ）の前記反応が、緩衝液の存在下で実施される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記緩衝液が、クエン酸緩衝液、酢酸緩衝液、コハク酸緩衝液、及びリン酸緩衝液である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
細胞結合剤−細胞傷害剤コンジュゲートを調製する方法であって、
（ａ）以下の式： 
【化３】
2020512276.tif 000003
またはその薬学的に許容される塩で表されるイミン含有細胞傷害剤のイミン部分を、緩衝液の不存在下で、水溶液中で、二酸化硫黄、亜硫酸水素塩、またはメタ亜硫酸水素塩と反応させて、以下の式：
【化４】
2020512276.tif 000004
またはその薬学的に許容される塩で表される修飾イミン部分を含む修飾細胞傷害剤を形成するステップ、及び
（ｂ）前記修飾細胞傷害剤を細胞結合剤と反応させて、前記細胞結合剤−細胞傷害剤コンジュゲートを形成するステップ、
を含み、
Ｄが、イミン含有ベンゾジアゼピン化合物であり、Ｌが、リンカーである、前記方法。
【請求項７】
（ｉ）前記亜硫酸水素塩０．５〜５当量または前記メタ亜硫酸水素塩０．２５〜２．５当量を、前記イミン含有細胞傷害剤１当量と反応させるか；
（ｉｉ）前記亜硫酸水素塩０．８〜２．０当量または前記メタ亜硫酸水素塩０．４〜１．０当量を、前記イミン含有細胞傷害剤１当量と反応させるか；
（ｉｉｉ）前記亜硫酸水素塩１．１〜１．６当量または前記メタ亜硫酸水素塩０．５５〜０．８当量を、前記イミン含有細胞傷害剤１当量と反応させるか；または
（ｉｖ）前記亜硫酸水素塩１．４当量または前記メタ亜硫酸水素塩０．７当量を、イミン含有細胞傷害剤１当量と反応させる、
請求項１〜６に記載の方法。
【請求項８】
ステップ（ａ）の前記反応が、
（ｉ）２．９〜３．７のｐＨで実施され、前記亜硫酸水素塩１．０〜１．８当量または前記メタ亜硫酸水素塩０．５〜０．９当量を、前記イミン含有細胞傷害剤１当量と反応させるか；
（ｉｉ）３．１〜３．５のｐＨで実施され、前記亜硫酸水素塩１．１〜１．６当量または前記メタ亜硫酸水素塩０．５５〜０．８当量を、前記イミン含有細胞傷害剤１当量と反応させるか；または
（ｉｉｉ）３．３のｐＨで実施され、前記亜硫酸水素塩１．４当量または前記メタ亜硫酸水素塩０．７当量を、前記イミン含有細胞傷害剤１当量と反応させる、
請求項１または２に記載の方法。
【請求項９】
ステップ（ａ）の前記反応が、有機溶媒及び水の混合物中で実施される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
ステップ（ａ）の前記反応が、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）及び水の混合物中で実施される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
ステップ（ａ）において、前記イミン含有細胞傷害剤を、亜硫酸水素ナトリウムまたはメタ亜硫酸水素ナトリウムと反応させる、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記修飾細胞傷害剤が、ステップ（ｂ）における前記細胞結合剤との反応前に、精製されていない、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
ステップ（ｂ）の前記反応が、４〜９のｐＨ、５〜８．５のｐＨ、または５．５〜６．５のｐＨで実施される、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
Ｄが、以下の式：
【化５】
2020512276.tif 000005
またはその薬学的に許容される塩
（式中、Ｌ’、Ｌ’’、及びＬ’’’のうちの１つは、以下の式：
−Ｚ１−Ｐ１−Ｚ２−Ｒｘ１−Ｃ（＝Ｏ）−    （Ａ’）、または
−Ｎ（Ｒｅ）−Ｒｘ１−Ｃ（＝Ｏ）−    （Ｄ’）、で表され、
他の２つは、それぞれ独立して、−Ｈ、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、または環状アルキル、アルケニル、またはアルキニル、ポリエチレングリコール単位−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｒｃ、ハロゲン、グアニジニウム［−ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）ＮＨ２］、−ＯＲ、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＯ２、−ＮＲ’ＣＯＲ’’、−ＳＲ、−ＳＯＲ’、−ＳＯ２Ｒ’、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ’’、シアノ、アジド、−ＣＯＲ’、−ＯＣＯＲ’、及び−ＯＣＯＮＲ’Ｒ’’から選択され、
前記Ｚ１及びＺ２の一方は、−Ｃ（＝Ｏ）−であり、他方は、−ＮＲ５−であり、
Ｐ１は、アミノ酸残基または２〜２０のアミノ酸残基を含有するペプチドであり、
Ｒｘ１は、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、または環状アルキル、アルケニル、またはアルキニルであり、
Ｒｅは、−Ｈ、１〜１０の炭素原子を有する直鎖状、分枝状もしくは環状アルキル、アルケニル、もしくはアルキニル、または−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｒｋであり、Ｒｋは、−Ｈ、２級アミノ（例えば、−ＮＨＲ１０１）もしくは３級アミノ（−ＮＲ１０１Ｒ１０２）基を任意に有する、１〜６つの炭素原子を有する直鎖状、分枝状、もしくは環状アルキル、または５もしくは６員窒素含有複素環であり、Ｒ１０１及びＲ１０２は、それぞれ独立して、１〜１０の炭素原子を有する直鎖状、分枝状、もしくは環状アルキル、アルケニル、もしくはアルキニルであり、
Ｒは、出現毎に独立して、−Ｈ、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、もしくは環状アルキル、アルケニル、もしくはアルキニル、ポリエチレングリコール単位−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｒｃ、６〜１８の炭素原子を有する任意に置換されているアリール、独立して窒素、酸素、及び硫黄から選択される１つ以上のヘテロ原子を含有する任意に置換されている５〜１８員ヘテロアリール環、または独立してＯ、Ｓ、Ｎ、及びＰから選択される１〜６つのヘテロ原子を含有する任意に置換されている３〜１８員複素環式環からなる群より選択され、
Ｒ’及びＲ’’は、それぞれ独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＮＨＲ、−ＮＲ２、−ＣＯＲ、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、または環状アルキル、アルケニル、またはアルキニル、ポリエチレングリコール単位−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｒｃ、ならびに、独立してＯ、Ｓ、Ｎ、及びＰから選択される１〜６つのヘテロ原子を有する任意に置換されている３〜１８員複素環式環から選択され、
Ｒｃは、−Ｈ、または１〜４つの炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状もしくは分枝状アルキルであり、
ｎは、１〜２４の整数であり、
Ｘ１’は、−Ｈ、アミン保護基、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、または環状アルキル、アルケニル、またはアルキニル、ポリエチレングリコール単位−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｒｃ、６〜１８の炭素原子を有する任意に置換されているアリール、独立して窒素、酸素、及び硫黄から選択される１つ以上のヘテロ原子を含有する任意に置換されている５〜１８員ヘテロアリール環、ならびに独立してＯ、Ｓ、Ｎ、及びＰから選択される１〜６つのヘテロ原子を含有する、任意に置換されている３〜１８員複素環式環から選択され、
Ｙ１’は、−Ｈ、オキソ基、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、または環状アルキル、アルケニル、またはアルキニル、任意に置換されている６〜１８員アリール、独立して窒素、酸素、及び硫黄から選択される１つ以上のヘテロ原子を含有する任意に置換されている５〜１８員ヘテロアリール環、１〜６つのヘテロ原子を有する任意に置換されている３〜１８員複素環式環から選択され、
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ３’、及びＲ４’は、それぞれ独立して、−Ｈ、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、または環状アルキル、アルケニル、またはアルキニル、ポリエチレングリコール単位−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｒｃ、ハロゲン、グアニジニウム［−ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）ＮＨ２］、−ＯＲ、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＯ２、−ＮＣＯ、−ＮＲ’ＣＯＲ’’、−ＳＲ、−ＳＯＲ’、−ＳＯ２Ｒ’、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＳＯ２ＮＲ’Ｒ’’、シアノ、アジド、−ＣＯＲ’、−ＯＣＯＲ’、及び−ＯＣＯＮＲ’Ｒ’’からなる群より選択され、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｒ、−ＯＲ、−ＳＲ、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＯ２、またはハロゲンであり、
Ｇは、−ＣＨ−または−Ｎ−であり、
Ａ及びＡ’は、同じか、または異なっており、独立して、−Ｏ−、オキソ（−Ｃ（＝Ｏ）−）、−ＣＲＲ’Ｏ−、−ＣＲＲ’−、−Ｓ−、−ＣＲＲ’Ｓ−、−ＮＲ５、及び−ＣＲＲ’Ｎ（Ｒ５）−から選択され、
Ｒ５は、出現毎に独立して、−Ｈ、または１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状または分枝状アルキルである）で表される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
Ｌ’’およびＬ’’’が双方ともに、−Ｈであり；
Ｌ’が、以下の式： 
−ＮＲ５−Ｐ１−Ｃ（＝Ｏ）−（ＣＲａＲｂ）ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−    （Ｂ１’）、
−ＮＲ５−Ｐ１−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃｙ−（ＣＲａＲｂ）ｓ１’−Ｃ（＝Ｏ）−    （Ｂ２’）、
−Ｃ（＝Ｏ）−Ｐ１−ＮＲ５−（ＣＲａＲｂ）ｓ−Ｃ（＝Ｏ）−    （Ｃｌ’）、または
−Ｃ（＝Ｏ）−Ｐ１−ＮＲ５−Ｃｙ−（ＣＲａＲｂ）ｓ１’−Ｃ（＝Ｏ）−    （Ｃ２’）
（式中、
Ｒａ及びＲｂは、出現毎にそれぞれ独立して、−Ｈ、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、または
荷電置換基もしくはイオン化可能な基Ｑであり、
ｓは、１〜６の整数であり、
ｓ１’は、０または１〜６の整数であり、
Ｃｙは、ハロゲン、−ＯＨ、（Ｃ１−Ｃ３）アルキル、（Ｃ１−Ｃ３）アルコキシ、またはハロ（Ｃ１−Ｃ３）アルキルで任意に置換されている５または６つの環炭素原子を有する環状アルキルである）で表される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ１’、Ｒ２’、Ｒ３’及びＲ４’は全て、−Ｈであり、
Ｒ６は、−ＯＭｅであり、
Ｘ１’及びＹ１’は双方ともに、−Ｈであり、
Ａ及びＡ’が、−Ｏ−である、請求項１４または１５に記載の方法。
【請求項１７】
Ｄが、以下の構造式： 
【化６】
2020512276.tif 000006
【化７】
2020512276.tif 000007
またはその薬学的に許容される塩で表される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
−Ｌ−が、以下の構造式： 
【化８】
2020512276.tif 000008
またはその薬学的に許容される塩
（式中、ｓ１は、Ｄに共有結合している部位であり、ｓ２は、マレイミド基に共有結合している部位であり、
Ｒ２３及びＲ２４は、出現毎に独立して、Ｈまたは任意に置換されているアルキルであり、
ｍ’は、０〜１０の整数であり、
Ｒｈ’は、Ｈまたは任意に置換されているアルキルである）で表される、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記イミン含有細胞傷害剤が、以下の式：
【化９】
2020512276.tif 000009
またはその薬学的に許容される塩で表され、前記修飾細胞傷害剤が、以下の式：
【化１０】
2020512276.tif 000010
またはその薬学的に許容される塩で表される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
Ｄが、以下の式： 
【化１１】
2020512276.tif 000011
またはその薬学的に許容される塩
（式中、Ｘ’は、−Ｈ、−ＯＨ、１〜１０の炭素原子を有する置換もしくは非置換の直鎖状、分枝状、もしくは環状アルキル、アルケニル、もしくはアルキニル、フェニル、及びアミン保護基からなる群より選択され、
Ｙ’は、−Ｈ、オキソ基、１〜１０の炭素原子を有する置換もしくは非置換の直鎖状、分枝状、もしくは環状アルキル、アルケニル、もしくはアルキニルからなる群より選択され、
Ａ及びＡ’は、−Ｏ−及び−Ｓ−から選択され、
Ｗ’は、存在しないか、または−Ｏ−、−Ｎ（Ｒｅ）−、−Ｎ（Ｒｅ）−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｎ（Ｃ（＝Ｏ）Ｒｅ）−、−Ｓ−、もしくは−ＣＨ２−Ｓ−、−ＣＨ２ＮＲｅ−から選択され、
Ｒｘは、存在しないか、または１〜１０の炭素原子を有する直鎖状、分枝状、もしくは環状アルキルから選択され、
Ｒｅは、−Ｈ、１〜１０の炭素原子を有する直鎖状、分枝状もしくは環状アルキル、アルケニル、もしくはアルキニル、または−（ＣＨ２−ＣＨ２−Ｏ）ｎ−Ｒｋであり、Ｒｋは、−Ｈ、２級アミノ（例えば、−ＮＨＲ１０１）もしくは３級アミノ（−ＮＲ１０１Ｒ１０２）基を任意に有する、１〜６つの炭素原子を有する直鎖状、分枝状、もしくは環状アルキル、または５もしくは６員窒素含有複素環であり、Ｒ１０１及びＲ１０２は、それぞれ独立して、１〜１０の炭素原子を有する直鎖状、分枝状もしくは環状アルキル、アルケニル、もしくはアルキニルであり、
ｎは、１〜２４の整数であり、
Ｇは、−ＣＨ−または−Ｎ−から選択され、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｒ、−ＯＲ、−ＳＲ、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＯ２、またはハロゲンであり、
Ｒは、−Ｈ、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、もしくは環状アルキル、アルケニル、もしくはアルキニル、またはＰＥＧ基−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｒｃであり、ｎは、１〜２４の整数であり、Ｒｃは、１〜４つの炭素原子を有する直鎖状または分枝状アルキルであり、
Ｒ’及びＲ’’は、それぞれ独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＮＲＲｇ’、−ＣＯＲ、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、または環状アルキル、アルケニル、またはアルキニル、６〜１８の炭素原子を有する任意に置換されているアリール、Ｏ、Ｓ、Ｎ、及びＰから選択される１〜６つのヘテロ原子を有する任意に置換されている３〜１８員複素環式環、ＰＥＧ基−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｒｃから選択され、Ｒｇ’は、−Ｈ、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、もしくは環状アルキル、アルケニル、もしくはアルキニル、またはＰＥＧ基−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｒｃである）で表される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
Ｄが、以下の式：
【化１２】
2020512276.tif 000012
またはその薬学的に許容される塩
（式中、Ｗは、Ｃ＝Ｏ、Ｃ＝Ｓ、ＣＨ２、ＢＨ、ＳＯ、及びＳＯ２から選択され、
Ｘ１’は、−Ｈ、アミン保護基、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、または環状アルキル、アルケニル、またはアルキニル、ポリエチレングリコール単位−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｒｃ、６〜１８の炭素原子を有する任意に置換されているアリール、独立して窒素、酸素、及び硫黄から選択される１つ以上のヘテロ原子を含有する任意に置換されている５〜１８員ヘテロアリール環、ならびに独立してＯ、Ｓ、Ｎ、及びＰから選択される１〜６つのヘテロ原子を含有する任意に置換されている３〜１８員複素環式環から選択され、
Ｙ１’は、−Ｈ、オキソ基、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、または環状アルキル、アルケニル、またはアルキニル、任意に置換されている６〜１８員アリール、独立して窒素、酸素、及び硫黄から選択される１つ以上のヘテロ原子を含有する任意に置換されている５〜１８員ヘテロアリール環、１〜６つのヘテロ原子を有する任意に置換されている３〜１８員複素環式環から選択され、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｒ、−ＯＲ、−ＳＲ、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＯ２、またはハロゲンであり、
Ａ及びＡ’は、同じか、または異なっており、独立して−Ｏ−、オキソ（−Ｃ（＝Ｏ）−）、−ＣＲＲ’Ｏ−、−ＣＲＲ’−、−Ｓ−、−ＣＲＲ’Ｓ−、−ＮＲ５、及び−ＣＲＲ’Ｎ（Ｒ５）−から選択され、
Ｒは、出現毎に独立して、−Ｈ、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、もしくは環状アルキル、アルケニル、もしくはアルキニル、ポリエチレングリコール単位−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｒｃ、６〜１８の炭素原子を有する任意に置換されているアリール、独立して窒素、酸素、及び硫黄から選択される１つ以上のヘテロ原子を含有する任意に置換されている５〜１８員ヘテロアリール環、または独立してＯ、Ｓ、Ｎ、及びＰから選択される１〜６つのヘテロ原子を含有する任意に置換されている３〜１８員複素環式環からなる群より選択され、
Ｒ’及びＲ’’は、それぞれ独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＲ、−ＮＨＲ、−ＮＲ２、−ＣＯＲ、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、または環状アルキル、アルケニル、またはアルキニル、ポリエチレングリコール単位−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｒｃ、ならびに、独立してＯ、Ｓ、Ｎ、及びＰから選択される、１〜６つのヘテロ原子を有する任意に置換されている３〜１８員複素環式環から選択され、
Ｒｃは、−Ｈ、または１〜４つの炭素原子を有する置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状アルキル、またはそこに結合している反応性基を有する連結基であり、
ｎは、１〜２４の整数であり、
Ｒ５は、出現毎に独立して、−Ｈ、または１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状または分枝状アルキルであり、
Ｄ０及びＤ０’は、同じか、または異なっており、独立して、存在しないか、または１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、または環状アルキル、アルケニル、またはアルキニル、アミノ酸、２〜６つのアミノ酸を有するペプチド、及びポリエチレングリコール単位（−ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−であり、
Ｌは、存在しないか、リンカー、ポリエチレングリコール単位（−ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、もしくは環状アルキルもしくはアルケニル、任意に置換されているフェニル基、任意に置換されている３〜１８員複素環式環、または独立してＯ、Ｓ、Ｎ、及びＰから選択される１〜６つのヘテロ原子を有する５〜１８員ヘテロアリール環であり、
Ｒａ、Ｒａ’、Ｒｂ、及びＲｂ’は、同じか、または異なっており、独立して−Ｈ、ハロゲン化物、または１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている分枝状、直鎖状、または環状アルキル基から選択されるか、あるいは、Ｒａ及びＲａ’ならびに／またはＲｂ及びＲｂ’が共に、それぞれ＝Ｂ及び＝Ｂ’を含有する二重結合を形成し、
＝Ｂ及び＝Ｂ’は、同じか、または異なっており、独立して任意に置換されている分枝状または直鎖状アルケニルまたはカルボニル基から選択され、
Ｑは、Ｑ１−Ａｒ−Ｑ２であり、
Ｑ’は、Ｑ１’−Ａｒ’−Ｑ２’であり、
Ｑ１及びＱ１’は、それぞれ独立して、存在しないか、１〜６つの炭素原子を有する直鎖状、分枝状、もしくは環状アルキル、または−ＣＨ＝ＣＨ単位であり、
Ａｒ及びＡｒ’は、それぞれ独立して、存在しないか、またはアリール基を表し、
Ｑ２及びＱ２’は、それぞれ独立して、−Ｈ、リンカー、１〜１０の炭素原子を有する置換もしくは非置換の直鎖状、分枝状、もしくは環状アルキル、アルケニル、もしくはアルキニル、ポリエチレングリコール単位−Ｒｃ’−（ＯＣＨ２ＣＨ２）ｎ−Ｒｃ、または、ハロゲン、グアニジニウム［−ＮＨ（Ｃ＝ＮＨ）ＮＨ２］、−Ｒ、−ＯＲ、−ＮＲ’Ｒ’’、−ＮＯ２、−ＮＣＯ、−ＮＲ’ＣＯＲ’’、ＮＲ’（Ｃ＝Ｏ）ＯＲ’’−ＳＲ、−ＳＯＲ’で表されるスルホキシド、−ＳＯ２Ｒ’で表されるスルホン、スルホナート−ＳＯ３Ｍ、スルファート−ＯＳＯ３Ｍ、ＳＯ２ＮＲ’Ｒ’’で表されるスルホンアミド、シアノ、アジド、−ＣＯＲ’、−ＯＣＯＲ’、もしくは−ＯＣＯＮＲ’Ｒ’’から選択される置換基であり、
Ｒｃ’は、存在しないか、または１〜５つの炭素原子を有する直鎖状もしくは分枝状アルキル、アルケニル、もしくはアルキニルから選択される）で表される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記イミン含有細胞傷害剤が、以下の式：
【化１３】
2020512276.tif 000013
またはその薬学的に許容される塩
（式中、点線は、二重結合の任意の存在を示し、
Ｒ３’’は、Ｃ３−１２アルキレン基であり、
各Ｘ’は、出現毎に独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、または−Ｎ（Ｈ）−であり、
各Ｒ２は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｒ１’、−ＯＲ１’、−Ｏ−ＳＯ２−Ｒ１’、−ＣＯ２Ｒ１’、−ＣＯＲ１’、もしくはハロから選択されるか、または、双方のＲ２は、総合すると、＝Ｏ、＝ＣＨ２、＝ＣＨ−Ｒａ、もしくは＝Ｃ（Ｒａ）２であり、
各Ｒ２’は独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−ＣＮ、−Ｒ１’、−ＯＲ１’、−Ｏ−ＳＯ２−Ｒ１’、−ＣＯ２Ｒ１’、−ＣＯＲ１’、またはハロから選択され、
Ｒ４ｂは、−ＯＲ６’、−ＯＣＯＲ４’、−ＯＣＯＯＲ４’、−ＯＣＯＮＲ４’Ｒ５’、−ＮＲ４’Ｒ５’、−ＮＲ４’ＣＯＲ５’、−ＮＲ４’ＮＲ４’Ｒ５’、任意に置換されている５または６員窒素含有複素環（例えば、ピペリジン、テトラヒドロピロール、ピラゾール、モルホリン）、−ＮＲ４’（Ｃ＝ＮＨ）ＮＲ４’Ｒ５’で表されるグアニジニウム、アミノ酸、または−ＮＲ６’ＣＯＰ’で表されるペプチドから選択される脱離基であり、Ｐ’は、アミノ酸または２〜２０のアミノ酸単位を含有するポリペプチド、−ＳＲ６’、−ＳＯＲ４’、−ＳＯ２Ｍ、−ＳＯ３Ｍ、−ＯＳＯ３Ｍ、ハロゲン、シアノ、及びアジドであり、
ＲＬは、細胞結合剤（ＣＢＡ）と共に共有結合を形成し得るマレイミド部分を有するリンカーであり、
Ｒ６及びＲ９は独立して、−Ｈ、−Ｒ１’、−ＯＨ、−ＯＲ１’、−ＳＨ、−ＳＲ１’、−ＮＨ２、−ＮＨＲ１’、−ＮＲ１’Ｒ３’、−ＮＯ２、Ｍｅ３Ｓｎ、及びハロから選択され、
Ｒ１’及びＲ３’は、それぞれ独立して、任意に置換されているＣ１−１２アルキル、Ｃ３−２０ヘテロシクリル、またはＣ５−２０アリール基から選択され、任意に、基−ＮＲ１’Ｒ３’に関しては、Ｒ１’及びＲ３’は、それらが結合している窒素原子と共に、任意に置換されている４、５、６、もしくは７員複素環式環を形成するか、または、Ｒ６〜Ｒ９の任意の対の隣接基は共に、基−Ｏ−（ＣＨ２）ｐ−Ｏ−を形成し、ｐは、１もしくは２であり、
Ｒ４’及びＲ５’は、それぞれ独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＲ６’、−ＮＨＲ６’、−ＮＲ６’２、−ＣＯＲ６’、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、もしくは環状アルキル、アルケニル、もしくはアルキニル、ポリエチレングリコール単位−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｒｂ、または独立してＯ、Ｓ、Ｎ、またはＰから選択される１〜６つのヘテロ原子を有する任意に置換されている３〜１８員複素環式環から選択され、
Ｒ６’は、出現毎に、独立して、−Ｈ、１〜１０の炭素原子を有する任意に置換されている直鎖状、分枝状、または環状アルキル、アルケニル、またはアルキニル、ポリエチレングリコール単位−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）ｎ−Ｒｂ、６〜１８の炭素原子を有する任意に置換されているアリール、独立して窒素、酸素、または硫黄から選択される１つ以上のヘテロ原子を含有する任意に置換されている５〜１８員ヘテロアリール環、及び独立してＯ、Ｓ、ＮまたはＰから選択される１〜６つのヘテロ原子を有する任意に置換されている３〜１８員複素環式環から選択され、
Ｒａは独立して、−Ｒ１’、−ＣＯ２Ｒ１’、−ＣＯＲ１’、−ＣＨＯ、−ＣＯ２Ｈ、またはハロから選択され、
Ｒｂは、−Ｈ、または１〜４つの炭素原子を有する置換もしくは非置換の直鎖状もしくは分枝状アルキルであり、
Ｍは、Ｈまたは薬学的に許容されるカチオンであり、
ｎは、１〜２４の整数である）で表される、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。