【手続補正書】
【提出日】令和3年3月23日(2021.3.23)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞構成物であって、
（ｉ）複数のマイクロウェルを備える、基材と、
（ｉｉ）大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含む、組織外植片であって、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含む、組織外植片と、を含み、
前記組織外植片が、前記基材と平面接触にあり、それによって、前記ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞構成物の管腔側表面および基底膜側表面が提供され、前記上皮細胞の前記極性が、前記ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞構成物において維持される、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞構成物。
【請求項２】
前記組織外植片が、小腸上皮、輪走筋層、および腸絨毛を含む、請求項１に記載のｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞構成物。
【請求項３】
前記組織外植片が、
（ｉ）前記胃腸管の回腸；
（ｉｉ）前記胃腸管の空腸；または
（ｉｉｉ）前記胃腸管の胃、十二指腸、食道、頬側、舌部、または結腸
に由来し、
必要に応じて、前記組織外植片が、ブタ胃腸管に由来する、請求項１〜２のいずれか１項に記載の構成物。
【請求項４】
前記組織外植片が、完全にインタクトな細胞外マトリクスを含み、
必要に応じて、前記完全にインタクトな細胞外マトリクスが、粘膜固有層を含み、
さらに必要に応じて、前記完全にインタクトな細胞外マトリクスが、筋板を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の構成物。
【請求項５】
前記組織外植片が、
（ｉ）培養物中で粘液層を形成する；
（ｉｉ）２４時間、２日間、３日間、１週間、２週間、３週間、４週間、またはそれよりも長い間、培養物中で維持される；および／または
（ｉｉｉ）培養物中で維持するために、外因性増殖因子を必要とせず、必要に応じて、前記外因性増殖因子が、Ｗｎｔ３ａである、
請求項１から４のいずれか１項に記載の構成物。
【請求項６】
前記組織外植片が、
（ｉ）腸エンテロサイトを含み、必要に応じて、腸エンテロサイトが、ビリン、ｅ−カドヘリン、ケラチン２０、および／または脂肪酸結合タンパク質１（ＦＡＢＰ１）の存在によって特定される；
（ｉｉ）タイトジャンクションを含む；
（ｉｉｉ）ムチン分泌性杯細胞を含み、必要に応じて、ムチン分泌性杯細胞が、ムチン２（Ｍｕｃ２）および／または尾部型ホメオボックス２（ＣＤＸ２）の存在によって特定される；
（ｉｖ）腸幹細胞を含み、必要に応じて、腸幹細胞が、ロイシンリッチ反復配列含有Ｇタンパク質共役型受容体５（ＬＧＲ５）および／またはオルファクトメジン４（ＯＬＦＭ４）の存在によって特定される；
（ｖ）腸内分泌細胞を含み、必要に応じて、腸内分泌細胞が、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）の存在によって特定され、さらに必要に応じて、腸内分泌細胞が、Ｌ細胞である；
（ｖｉ）少なくとも１つの薬物トランスポーターを含み、必要に応じて、前記薬物トランスポーターが、ＭＤＲ−１である；
（ｖｉｉ）少なくとも１つの代謝酵素を含み、必要に応じて、前記代謝酵素が、ＣＹＰ３Ａ４である；
（ｖｉｉｉ）小襞細胞を含み、必要に応じて、小襞細胞が、ビメンチンの存在によって特定される；
（ｉｘ）粘液物質を含み、必要に応じて、前記粘液物質が、糖タンパク質、糖脂質、またはムチンである；
（ｘｉ）神経系細胞を含み、必要に応じて、神経系細胞が、ネスチンの存在によって特定される；
（ｘｉｉ）インタクトな陰窩を含む；ならびに／あるいは
（ｘｉｉｉ）チオレドキシン還元酵素活性を含み、必要に応じて、チオレドキシン還元酵素活性が、少なくとも７日間維持される、
請求項１から５のいずれか１項に記載の構成物。
【請求項７】
前記組織外植片が、それが由来する前記胃腸管のｉｎ  ｖｉｖｏ構成を模倣する、請求項１から６のいずれか１項に記載の構成物。
【請求項８】
前記組織外植片が、一定レベルの分泌Ｗｎｔ３ａを維持し、必要に応じて、前記分泌Ｗｎｔ３ａのレベルが、ウエスタンブロット分析によって決定される、請求項１から７のいずれか１項に記載の構成物。
【請求項９】
前記組織外植片が、ＧＬＰ−１またはＭｕｃ−２を産生する、ならびに／あるいはグルコースおよび／または毒素に対して応答性である、請求項１から８のいずれか１項に記載の構成物。
【請求項１０】
前記毒素が、
（ｉ）胃腸毒性を有する物質または細胞毒性を有する物質である；
（ｉｉ）非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）であり、必要に応じて、前記ＮＳＡＩＤが、ナプロキセンである；または
（ｉｉｉ）ドキシサイクリンである、請求項９に記載の構成物。
【請求項１１】
前記基材が、６個、１２個、２４個、４８個、９６個、３８４個、または１５３６個のマイクロウェルを備える、請求項１から１０のいずれか１項に記載の構成物。
【請求項１２】
それぞれのマイクロウェルが、前記組織外植片によって完全に被覆される、請求項１から１１のいずれか１項に記載の構成物。
【請求項１３】
前記基材が、外因性の細胞外マトリクスを含まない、請求項１から１２のいずれか１項に記載の構成物。
【請求項１４】
高スループットの薬物吸収スクリーニングアッセイにおいて使用するための、請求項１から１３のいずれか１項に記載の構成物を含む細胞培養システムであって、
それによって、前記組織外植片を通じた薬物の吸収の測定が可能となる、細胞培養システム。
【請求項１５】
請求項１から１３のいずれか１項に記載の構成物を含む高スループットのシステム。
【請求項１６】
胃腸組織外植片を通じた試験化合物の吸収を決定するための方法であって、
（ａ）請求項１から１３のいずれか１項に記載のｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞構成物を提供するステップと、
（ｂ）前記組織外植片を、試験化合物と接触させるステップと、
（ｃ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記試験化合物の存在を検出することによって、吸収を決定するステップであって、前記基底膜側表面における前記試験化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、を含む、方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１０１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１０１】
さらなる態様では、本開示は、胃腸組織外植片に対する試験化合物の組織蓄積の影響を決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片に、少なくとも１つの第１のアッセイを行うステップであって、組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、腸上皮が、組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、上皮細胞の極性が、組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップと、
（ｃ）組織外植片に、少なくとも１つの第２のアッセイを行うステップと、
（ｄ）第１のアッセイおよび第２のアッセイの結果を比較するステップであって、第１および第２のアッセイが、同じアッセイである、ステップと、を含み、
それによって、化合物の組織蓄積の影響を決定する、方法を提供する。
特定の実施形態では、例えば、以下が提供される：
（項目１）
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞構成物であって、
（ｉ）複数のマイクロウェルを備える、基材と、
（ｉｉ）大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含む、組織外植片であって、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含む、組織外植片と、を含み、
前記組織外植片が、前記基材と平面接触にあり、それによって、前記ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞構成物の管腔側表面および基底膜側表面が提供され、前記上皮細胞の前記極性が、前記ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞構成物において維持される、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞構成物。
（項目２）
前記組織外植片が、小腸上皮、輪走筋層、および腸絨毛を含む、項目１に記載のｉｎ
ｖｉｔｒｏ細胞構成物。
（項目３）
前記組織外植片が、前記胃腸管の回腸に由来する、項目１〜２のいずれか１項に記載の構成物。
（項目４）
前記組織外植片が、前記胃腸管の空腸に由来する、項目１〜２のいずれか１項に記載の構成物。
（項目５）
前記組織外植片が、前記胃腸管の胃、十二指腸、食道、頬側、舌部、または結腸に由来する、項目１に記載の構成物。
（項目６）
前記組織外植片が、完全にインタクトな細胞外マトリクスを含む、項目１〜５のいずれか１項に記載の構成物。
（項目７）
前記完全にインタクトな細胞外マトリクスが、粘膜固有層を含む、項目６に記載の構成物。
（項目８）
前記完全にインタクトな細胞外マトリクスが、筋板を含む、項目６〜７のいずれか１項に記載の構成物。
（項目９）
前記組織外植片が、ブタ胃腸管に由来する、項目１〜８のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１０）
前記組織外植片が、培養物中で粘液層を形成する、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１１）
前記組織外植片が、２４時間、２日間、３日間、１週間、２週間、３週間、４週間、またはそれよりも長い間、培養物中で維持される、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１２）
前記組織外植片が、培養物中で維持するために、外因性増殖因子を必要としない、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１３）
前記外因性増殖因子が、Ｗｎｔ３ａである、項目１２に記載の構成物。
（項目１４）
前記組織外植片が、哺乳動物を失血させた後に得られる、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１５）
前記組織外植片が、腸エンテロサイトを含む、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１６）
腸エンテロサイトが、ビリン、ｅ−カドヘリン、ケラチン２０、および／または脂肪酸結合タンパク質１（ＦＡＢＰ１）の存在によって特定される、項目１５に記載の構成物。
（項目１７）
前記組織外植片が、タイトジャンクションを含む、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１８）
前記組織外植片が、ムチン分泌性杯細胞を含む、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１９）
ムチン分泌性杯細胞が、ムチン２（Ｍｕｃ２）および／または尾部型ホメオボックス２（ＣＤＸ２）の存在によって特定される、項目１８に記載の構成物。
（項目２０）
前記組織外植片が、腸幹細胞を含む、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目２１）
腸幹細胞が、ロイシンリッチ反復配列含有Ｇタンパク質共役型受容体５（ＬＧＲ５）および／またはオルファクトメジン４（ＯＬＦＭ４）の存在によって特定される、項目２０に記載の構成物。
（項目２２）
前記組織外植片が、腸内分泌細胞を含む、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目２３）
腸内分泌細胞が、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）の存在によって特定される、項目２２に記載の構成物。
（項目２４）
腸内分泌細胞が、Ｌ細胞である、項目２２〜２３のいずれか１項に記載の構成物。
（項目２５）
前記組織外植片が、少なくとも１つの薬物トランスポーターを含む、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目２６）
前記薬物トランスポーターが、ＭＤＲ−１である、項目２５に記載の構成物。
（項目２７）
前記組織外植片が、少なくとも１つの代謝酵素を含む、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目２８）
前記代謝酵素が、ＣＹＰ３Ａ４である、項目２７に記載の構成物。
（項目２９）
前記組織外植片が、小襞細胞を含む、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目３０）
小襞細胞が、ビメンチンの存在によって特定される、項目２９に記載の構成物。
（項目３１）
前記組織外植片が、粘液物質を含む、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目３２）
前記粘液物質が、糖タンパク質、糖脂質、またはムチンである、項目３１に記載の構成物。
（項目３３）
前記組織外植片が、神経系細胞を含む、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目３４）
神経系細胞が、ネスチンの存在によって特定される、項目３３に記載の構成物。
（項目３５）
前記組織外植片が、それが由来する前記胃腸管のｉｎ  ｖｉｖｏ構成を模倣する、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目３６）
前記組織外植片が、一定レベルの分泌Ｗｎｔ３ａを維持する、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目３７）
前記分泌Ｗｎｔ３ａのレベルが、ウエスタンブロット分析によって決定される、項目３６に記載の構成物。
（項目３８）
前記組織外植片が、インタクトな陰窩を含む、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目３９）
前記組織外植片が、チオレドキシン還元酵素活性を含む、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目４０）
チオレドキシン還元酵素活性が、少なくとも７日間維持される、項目３９に記載の構成物。
（項目４１）
前記大型の非ヒト哺乳動物が、少なくとも３週齢である、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目４２）
前記大型の非ヒト哺乳動物が、３週齢〜１２週齢である、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目４３）
前記組織外植片が、ＧＬＰ−１またはＭｕｃ−２を産生する、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目４４）
前記組織外植片が、グルコースに対して応答性である、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目４５）
前記組織外植片が、毒素に対して応答性である、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目４６）
前記毒素が、胃腸毒性を有する物質または細胞毒性を有する物質である、項目４５に記載の構成物。
（項目４７）
前記毒素が、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）である、項目４６に記載の構成物。
（項目４８）
前記ＮＳＡＩＤが、ナプロキセンである、項目４７に記載の構成物。
（項目４９）
前記毒素が、ドキシサイクリンである、項目４７に記載の構成物。
（項目５０）
前記基材が、６個、１２個、２４個、４８個、９６個、３８４個、または１５３６個のマイクロウェルを備える、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目５１）
それぞれのマイクロウェルが、前記組織外植片によって完全に被覆される、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目５２）
前記組織外植片の血液含量が、最小限に抑えられている、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目５３）
前記基材が、外因性の細胞外マトリクスを含まない、先行する項目のいずれか１項に記載の構成物。
（項目５４）
高スループットの薬物吸収スクリーニングアッセイにおいて使用するための細胞培養システムであって、
（ｉ）複数のマイクロウェルを備える、基材と、
（ｉｉ）大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含む、組織外植片であって、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含む、組織外植片と、を含み、
前記組織外植片が、前記基材と平面接触にあり、それによって、管腔側表面および基底膜側表面が提供され、前記上皮細胞の前記極性が、前記細胞培養システムにおいて維持され、
それによって、前記組織外植片を通じた薬物の吸収の測定が可能となる、細胞培養システム。
（項目５５）
高スループットのシステムであって、（ｉ）複数のマイクロウェルを備える、基材と、（ｉｉ）大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含む、組織外植片であって、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含む、組織外植片と、を含み、前記組織外植片が、前記基材と平面接触にあり、それによって、管腔側表面および基底膜側表面が提供され、前記上皮細胞の前記極性が、前記システムにおいて維持される、高スループットのシステム。
（項目５６）
胃腸組織外植片を通じた試験化合物の吸収を決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片を、試験化合物と接触させるステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、（ｂ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記試験化合物の存在を検出することによって、吸収を決定するステップであって、前記基底膜側表面における前記試験化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、を含む、方法。
（項目５７）
前記試験化合物の存在を検出することが、前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の濃度を決定することを含む、項目５６に記載の方法。
（項目５８）
胃腸組織外植片における試験化合物の濃度を決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記組織外植片内の前記化合物の存在を検出するステップと、を含む、方法。
（項目５９）
前記化合物の濃度を決定することが、ハイコンテンツ共焦点分析を含む、項目５８に記載の方法。
（項目６０）
胃腸組織外植片を通じた試験化合物の経口バイオアベイラビリティを決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出するステップであって、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記化合物の経口バイオアベイラビリティを示す、ステップと、を含む、方法。
（項目６１）
ヒト胃腸管を通じた試験化合物の吸収を予測するための方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することによって、吸収を予測するステップであって、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記ヒト胃腸管を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、を含む、方法。
（項目６２）
組織外植片における試験化合物の吸収に対する、薬物−食物の相互作用の影響を決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記組織外植片を、消化された食物と接触させるステップと、
（ｃ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することによって、吸収を決定するステップであって、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、を含む、方法。
（項目６３）
前記組織外植片が、前記組織外植片を、前記大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する天然の腸媒質と接触させるステップをさらに含む、項目６２に記載の方法。
（項目６４）
前記組織外植片を前記目的の化合物と接触させる前に、前記目的の化合物を、天然の腸媒質に可溶化するステップをさらに含む、項目６３に記載の方法。
（項目６５）
前記組織外植片を、前記消化された食物および前記目的の化合物と接触させることが、同時である、項目６２〜６４のいずれか１項に記載の方法。
（項目６６）
前記消化された食物の存在下または不在下において、目的の化合物の吸収の差を決定するステップをさらに含む、項目６２〜６５のいずれか１項に記載の方法。
（項目６７）
胃腸組織外植片を通じた試験化合物の吸収の時間経過分析のための方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）吸収を、ある期間にわたって決定するステップであって、異なる時点において、前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することを含み、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、を含む、方法。
（項目６８）
組織外植片を通じた試験化合物の灌流速度を決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）灌流を、ある期間にわたって決定するステップであって、異なる時点において、前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することを含み、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記組織外植片を通じて灌流される前記化合物の能力を示す、ステップと、を含む、方法。
（項目６９）
胃腸組織外植片に対する試験化合物の影響を決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片に、少なくとも１つの第１のアッセイを行うステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップと、
（ｃ）前記組織外植片に、少なくとも１つの第２のアッセイを行うステップと、
（ｄ）前記第１のアッセイの結果および前記第２のアッセイの結果を比較するステップであって、前記第１のアッセイおよび前記第２のアッセイが、同じアッセイである、ステップと、を含み、
それによって、前記化合物の影響を決定する、方法。
（項目７０）
前記第１のアッセイおよび前記第２のアッセイが、薬物溶解アッセイ、吸収アッセイ、細胞毒性アッセイ、薬物分解アッセイ、およびホルモン分泌アッセイからなる群より選択される、項目６９に記載の方法。
（項目７１）
１つを上回るアッセイが、同時に行われる、項目６９〜７０のいずれか１項に記載の方法。
（項目７２）
組織外植片を通じた試験化合物の吸収に対する、薬物トランスポーターの影響を決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片における前記薬物トランスポーターの発現を修飾するステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップと、
（ｃ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することによって、吸収を決定するステップであって、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、
（ｄ）修飾された薬物トランスポーターありまたはなしの前記組織外植片の間で吸収を比較し、それによって、前記化合物の吸収に対する前記薬物トランスポーターの影響を決定するステップと、を含む、方法。
（項目７３）
ヒト胃腸管を通じた化合物の吸収に対する、代謝酵素の影響を決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片における前記代謝酵素の発現を修飾するステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップと、
（ｃ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することによって、吸収を決定するステップであって、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、
（ｄ）修飾された代謝酵素ありまたはなしの前記組織外植片の間で吸収を比較し、それによって、前記化合物の吸収に対する前記薬物トランスポーターの影響を決定するステップと、を含む、方法。
（項目７４）
（ａ）が、遺伝子修飾を含む、項目７２〜７３のいずれか１項に記載の方法。
（項目７５）
遺伝子修飾が、ｓｉＲＮＡノックダウンを含む、項目７４に記載の方法。
（項目７６）
高スループットの薬物スクリーニングのための方法であって、組織外植片を、化合物ライブラリーと接触させるステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、前記組織外植片に対する前記化合物ライブラリーの影響を決定するステップと、を含む、方法。
（項目７７）
薬物製剤の吸収を分析するための高スループットの方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物および賦形剤を含む製剤ライブラリーと接触させるステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することによって、前記組織外植片を通じた前記目的の化合物の吸収を測定するステップであって、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、
（ｃ）それぞれの製剤で、前記目的の化合物の吸収を比較し、それによって薬物吸収のための製剤を特定するステップとを含む、方法。
（項目７８）
複数の薬物組成物が、吸収に関して同時にアッセイされる、高スループットの薬物吸収スクリーニング方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物および賦形剤を含む複数の薬物組成物と、前記組織外植片上の異なる位置において、接触させるステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することによって、前記組織外植片を通じた前記目的の化合物の吸収を測定するステップであって、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、を含む、方法。
（項目７９）
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ腸モデルを作製する方法であって、
（ａ）組織外植片を提供するステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記組織外植片を、複数のマイクロウェルを備える基材と接触させるステップと、を含む、方法。
（項目８０）
組織外植片とともに使用するのに好適な基材アセンブリであって、
複数のマイクロウェルが形成されており、複数の締結具受容開口部が形成されている、本体を有する、第１のプレートと、
本体を有し、複数のマイクロウェルが形成されており、複数の締結具受容開口部が形成されている、第２のプレートと、
複数の磁石であって、前記複数の磁石のうちの１つが、前記第１のプレートおよび前記第２のプレートの前記複数の締結具受容開口部のそれぞれの中に固定されている、複数の磁石と、を備える、基材アセンブリ。
（項目８１）
前記第１のプレートが、上面および反対側の底面を有し、前記底面が、前記底面の上にその周縁部の周りにそこから外向きに延在して形成されるリム部分を有し、前記リム部分が、チャンバを形成する、項目８０に記載の基材アセンブリ。
（項目８２）
前記第１のプレートの前記底面の中央部分に沿ってそこから外向きに延在して形成されるリッジ部分をさらに備え、前記リッジ部分が、前記チャンバを複数の部分チャンバに分割し、それぞれの部分チャンバが、組織外植片を固定するように適合される、項目８１に記載の基材アセンブリ。
（項目８３）
前記リム部分が、前記第１のプレートの前記本体の両側面に沿って形成される、１つまたは複数の切欠き特徴部を有する、項目８１に記載の基材アセンブリ。
（項目８４）
前記第２のプレートが、上面および反対側の底面を有し、前記上面が、前記上面の上にその周縁部の周りにそこから外向きに延在して形成されるリム部分を有し、前記リム部分が、チャンバを形成する、項目８１に記載の基材アセンブリ。
（項目８５）
前記第２のプレートの前記上面の中央部分に沿ってそこから外向きに延在して形成されるリッジ部分をさらに備え、前記リッジ部分が、前記チャンバを複数の部分チャンバに分割し、それぞれの部分チャンバが、組織外植片を固定するように適合される、項目８４に記載の基材アセンブリ。
（項目８６）
前記第２のプレートの前記上面に形成される前記リム部分が、上部プレートの前記本体の両側面に沿って形成される、１つまたは複数の切欠き特徴部を有する、項目８４に記載の基材アセンブリ。
（項目８７）
前記第１のプレートおよび前記第２のプレートの前記複数のマイクロウェルが、６個、
１２個、２４個、２８個、９６個、３８４個、または１５３６個のマイクロウェルを含む、項目８０に記載の基材アセンブリ。
（項目８８）
前記複数のマイクロウェルのそれぞれのマイクロウェルが、組織外植片によって完全に被覆される、項目８０に記載の基材アセンブリ。
（項目８９）
胃腸組織外植片内で、試験化合物の吸収および溶解を同時に決定するための方法であって、
（ａ）試験化合物を溶媒中に溶解し、それによって、薬物溶液を生成し、前記薬物溶液を、十分な期間にわたって蒸発させて、結果としての薬物の粉末を生成するステップと、
（ｂ）（ａ）により得られた前記薬物の粉末を、賦形剤と組み合わせるステップと、
（ｃ）組織外植片を、（ｂ）により得られた前記薬物の粉末と接触させるステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと
（ｄ）上清中の濃度を検出することによって、溶解を決定するステップと、
（ｅ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記試験化合物の存在を検出することによって、吸収を決定するステップであって、前記基底膜側表面における前記試験化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、を含む、方法。
（項目９０）
前記組織外植片を通じた吸収が、ｉｎ  ｖｉｖｏで測定される吸収と比較した場合に、Ｃａｃｏ−２細胞を使用して決定される吸収のピアソン相関値と比べて、高いピアソン相関値を有する、項目５６に記載の方法。
（項目９１）
前記高いピアソン相関値が、少なくとも０．７０、少なくとも０．７５、少なくとも０．８０、少なくとも０．８５、または少なくとも０．９０である、項目９０に記載の方法。
（項目９２）
前記組織外植片を通じた吸収が、Ｃａｃｏ−２細胞を使用して決定される吸収と比べて、低い変動係数を有する、項目５６に記載の方法。
（項目９３）
胃腸組織外植片に対する試験化合物の組織蓄積の影響を決定するための方法であって、（ａ）組織外植片に、少なくとも１つの第１のアッセイを行うステップであって、前記組織外植片が、大型の非ヒト哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップと、
（ｃ）前記組織外植片に、少なくとも１つの第２のアッセイを行うステップと、
（ｄ）前記第１のアッセイの結果および前記第２のアッセイの結果を比較するステップであって、前記第１のアッセイおよび前記第２のアッセイが、同じアッセイである、ステップと、を含み、
それによって、前記化合物の組織蓄積の影響を決定する、方法。
（項目９４）
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞構成物であって、
（ｉ）複数のマイクロウェルを備える、基材と、
（ｉｉ）大型の哺乳動物胃腸管に由来する腸上皮を含む、組織外植片であって、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含む、組織外植片と、を含み、
前記組織外植片が、前記基材と平面接触にあり、それによって、前記ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞構成物の管腔側表面および基底膜側表面が提供され、前記上皮細胞の前記極性が、前記ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞構成物において維持される、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞構成物。
（項目９５）
前記組織外植片が、小腸上皮、輪走筋層、および腸絨毛を含む、項目９４に記載のｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞構成物。
（項目９６）
前記組織外植片が、
（ｉ）前記胃腸管の回腸、
（ｉｉ）前記胃腸管の空腸、
（ｉｉｉ）前記胃腸管の胃、
（ｉｖ）前記胃腸管の食道、
（ｖ）前記胃腸管の頬側組織、
（ｖｉ）前記胃腸管の舌組織、または
（ｖｉｉ）前記胃腸管の結腸に由来する、項目９４〜９５のいずれか１項に記載の構成物。
（項目９７）
前記組織外植片が、完全にインタクトな細胞外マトリクスを含み、必要に応じて、前記完全にインタクトな細胞外マトリクスが、粘膜固有層、筋板、またはそれらの両方を含む、項目９４〜９６のいずれか１項に記載の構成物。
（項目９８）
前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する、項目９４〜９７のいずれか１項に記載の構成物。
（項目９９）
前記組織外植片が、培養物中で粘液層を形成する、項目９４〜９８のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１００）
前記組織外植片が、２４時間、２日間、３日間、１週間、２週間、３週間、４週間、またはそれよりも長い間、培養物中で維持される、項目９４〜９９のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１０１）
前記組織外植片が、培養物中で維持するために、外因性増殖因子を必要としない、項目９４〜１００のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１０２）
前記外因性増殖因子が、Ｗｎｔ３ａである、項目１０１に記載の構成物。
（項目１０３）
前記組織外植片が、
（ｉ）腸エンテロサイトであって、必要に応じて、腸エンテロサイトが、ビリン、ｅ−カドヘリン、ケラチン２０、および／もしくは脂肪酸結合タンパク質１（ＦＡＢＰ１）の存在によって特定される、腸エンテロサイト、ならびに／または
（ｉｉ）タイトジャンクション、ならびに／または
（ｉｉｉ）ムチン分泌性杯細胞であって、必要に応じて、ムチン分泌性杯細胞が、ムチン２（Ｍｕｃ２）および／もしくは尾部型ホメオボックス２（ＣＤＸ２）の存在によって特定される、ムチン分泌性杯細胞、ならびに／または
（ｉｖ）腸幹細胞であって、必要に応じて、腸幹細胞が、ロイシンリッチ反復配列含有Ｇタンパク質共役型受容体５（ＬＧＲ５）および／もしくはオルファクトメジン４（ＯＬＦＭ４）の存在によって特定される、腸幹細胞、ならびに／または
（Ｖ）腸内分泌細胞であって、必要に応じて、腸内分泌細胞が、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）の存在によって特定され、さらに、必要に応じて、内分泌細胞が、Ｌ細胞である、腸内分泌細胞、ならびに／または
（ｖｉ）小襞細胞であって、必要に応じて、小襞細胞が、ビメンチンの存在によって特定される、小襞細胞、ならびに／または
（ｖｉｉ）神経系細胞であって、必要に応じて、神経系細胞が、ネスチンの存在によって特定される、神経系細胞
を含む、項目９４〜１０２のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１０４）
前記組織外植片が、少なくとも１つの薬物トランスポーターを含み、必要に応じて、前記薬物トランスポーターが、ＭＤＲ−１である、項目９４〜１０３のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１０５）
前記組織外植片が、少なくとも１つの代謝酵素を含み、必要に応じて、前記代謝酵素が、ＣＹＰ３Ａ４である、項目９４〜１０４のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１０６）
前記組織外植片が、粘液物質を含み、必要に応じて、前記粘液物質が、糖タンパク質、糖脂質、またはムチンである、項目９４〜１０５のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１０７）
前記組織外植片が、それが由来する前記胃腸管のｉｎ  ｖｉｖｏ構成を模倣する、項目９４〜１０６のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１０８）
前記組織外植片が、一定レベルの分泌Ｗｎｔ３ａを維持し、必要に応じて、前記分泌Ｗｎｔ３ａのレベルが、ウエスタンブロット分析によって決定される、項目９４〜１０７のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１０９）
前記組織外植片が、インタクトな陰窩を含む、項目９４〜１０８のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１１０）
前記組織外植片が、チオレドキシン還元酵素活性を含み、必要に応じて、チオレドキシン還元酵素活性が、少なくとも７日間維持される、項目９４〜１０９のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１１１）
前記組織外植片が、ＧＬＰ−１もしくはＭｕｃ−２を産生する、および／またはグルコースに対して応答性である、項目９４〜１１０のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１１２）
前記組織外植片が、毒素に対して応答性である、項目９４〜１１１のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１１３）
前記毒素が、胃腸毒性を有する物質または細胞毒性を有する物質である、項目１１２に記載の構成物。
（項目１１４）
前記毒素が、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）である、項目１１３に記載の構成物。
（項目１１５）
前記ＮＳＡＩＤが、ナプロキセンである、項目１１４に記載の構成物。
（項目１１６）
前記毒素が、ドキシサイクリンである、項目１１３に記載の構成物。
（項目１１７）
前記基材が、６個、１２個、２４個、４８個、９６個、３８４個、または１５３６個のマイクロウェルを備える、項目９４〜１１６のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１１８）
それぞれのマイクロウェルが、前記組織外植片によって完全に被覆される、項目９４〜１１７のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１１９）
前記組織外植片の血液含量が、最小限に抑えられている、項目９４〜１１８のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１２０）
前記基材が、外因性の細胞外マトリクスを含まない、項目９４〜１１９のいずれか１項に記載の構成物。
（項目１２１）
高スループットの薬物吸収スクリーニングアッセイにおいて使用するための細胞培養システムであって、
（ｉ）複数のマイクロウェルを備える、基材と、
（ｉｉ）ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含む、組織外植片であって、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含む、組織外植片と、を含み、
前記組織外植片が、前記基材と平面接触にあり、それによって、管腔側表面および基底膜側表面が提供され、前記上皮細胞の前記極性が、前記細胞培養システムにおいて維持され、
それによって、前記組織外植片を通じた薬物の吸収の測定が可能となる、細胞培養システム。
（項目１２２）
高スループットのシステムであって、（ｉ）複数のマイクロウェルを備える、基材と、（ｉｉ）ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含む、組織外植片であって、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含む、組織外植片と、を含み、前記組織外植片が、前記基材と平面接触にあり、それによって、管腔側表面および基底膜側表面が提供され、前記上皮細胞の前記極性が、前記システムにおいて維持される、高スループットのシステム。
（項目１２３）
胃腸組織外植片を通じた試験化合物の吸収を決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片を、試験化合物と接触させるステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記試験化合物の存在を検出することによって、吸収を決定するステップであって、前記基底膜側表面における前記試験化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、を含む、方法。
（項目１２４）
前記試験化合物の存在を検出することが、前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の濃度を決定することを含む、項目１２３に記載の方法。
（項目１２５）
胃腸組織外植片における試験化合物の濃度を決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記組織外植片内の前記化合物の存在を検出するステップと、を含む、方法。
（項目１２６）
前記化合物の濃度を決定することが、ハイコンテンツ共焦点分析を含む、項目１２５に記載の方法。
（項目１２７）
胃腸組織外植片を通じた試験化合物の経口バイオアベイラビリティを決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出するステップであって、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記化合物の経口バイオアベイラビリティを示す、ステップと、を含む、方法。
（項目１２８）
ヒト胃腸管を通じた試験化合物の吸収を予測するための方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することによって、吸収を予測するステップであって、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記ヒト胃腸管を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、を含む、方法。
（項目１２９）
組織外植片における試験化合物の吸収に対する、薬物−食物の相互作用の影響を決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記組織外植片を、消化された食物と接触させるステップと、
（ｃ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することによって、吸収を決定するステップであって、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、を含む、方法。
（項目１３０）
前記組織外植片が、前記組織外植片を、前記ヒト胃腸管に由来する天然の腸媒質と接触させるステップをさらに含む、項目１２９に記載の方法。
（項目１３１）
前記組織外植片を前記目的の化合物と接触させる前に、前記目的の化合物を、天然の腸媒質に可溶化するステップをさらに含む、項目１３０に記載の方法。
（項目１３２）
前記組織外植片を、前記消化された食物および前記目的の化合物と接触させることが、同時である、項目１２９〜１３１のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３３）
前記消化された食物の存在下または不在下において、目的の化合物の吸収の差を決定するステップをさらに含む、項目６２〜６５のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３４）
胃腸組織外植片を通じた試験化合物の吸収の時間経過分析のための方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）吸収を、ある期間にわたって決定するステップであって、異なる時点において、前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することを含み、
前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、を含む、方法。
（項目１３５）
組織外植片を通じた試験化合物の灌流速度を決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）灌流を、ある期間にわたって決定するステップであって、異なる時点において、前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することを含み、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記組織外植片を通じて灌流される前記化合物の能力を示す、ステップと、を含む、方法。
（項目１３６）
胃腸組織外植片に対する試験化合物の影響を決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片に、少なくとも１つの第１のアッセイを行うステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップと、
（ｃ）前記組織外植片に、少なくとも１つの第２のアッセイを行うステップと、
（ｄ）前記第１のアッセイの結果および前記第２のアッセイの結果を比較するステップであって、前記第１のアッセイおよび前記第２のアッセイが、同じアッセイである、ステップと、を含み、
それによって、前記化合物の影響を決定する、方法。
（項目１３７）
前記第１のアッセイおよび前記第２のアッセイが、薬物溶解アッセイ、吸収アッセイ、細胞毒性アッセイ、薬物分解アッセイ、およびホルモン分泌アッセイからなる群より選択される、項目１３６に記載の方法。
（項目１３８）
１つを上回るアッセイが、同時に行われる、項目１３６〜１３７のいずれか１項に記載の方法。
（項目１３９）
組織外植片を通じた試験化合物の吸収に対する、薬物トランスポーターの影響を決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片における前記薬物トランスポーターの発現を修飾するステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップと、
（ｃ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することによって、吸収を決定するステップであって、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、
（ｄ）修飾された薬物トランスポーターありまたはなしの前記組織外植片の間で吸収を比較し、それによって、前記化合物の吸収に対する前記薬物トランスポーターの影響を決定するステップと、を含む、方法。
（項目１４０）
ヒト胃腸管を通じた化合物の吸収に対する、代謝酵素の影響を決定するための方法であって、
（ａ）組織外植片における前記代謝酵素の発現を修飾するステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップと、
（ｃ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することによって、吸収を決定するステップであって、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、
（ｄ）修飾された代謝酵素ありまたはなしの前記組織外植片の間で吸収を比較し、それによって、前記化合物の吸収に対する前記薬物トランスポーターの影響を決定するステップと、を含む、方法。
（項目１４１）
（ａ）が、遺伝子修飾を含む、項目１３９〜１４０のいずれか１項に記載の方法。
（項目１４２）
遺伝子修飾が、ｓｉＲＮＡノックダウンを含む、項目１４１に記載の方法。
（項目１４３）
高スループットの薬物スクリーニングのための方法であって、組織外植片を、化合物ライブラリーと接触させるステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、前記組織外植片に対する前記化合物ライブラリーの影響を決定するステップと、を含む、方法。
（項目１４４）
薬物製剤の吸収を分析するための高スループットの方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物および賦形剤を含む製剤ライブラリーと接触させるステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することによって、前記組織外植片を通じた前記目的の化合物の吸収を測定するステップであって、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、
（ｃ）それぞれの製剤で、前記目的の化合物の吸収を比較し、それによって薬物吸収のための製剤を特定するステップとを含む、方法。
（項目１４５）
複数の薬物組成物が、吸収に関して同時にアッセイされる、高スループットの薬物吸収スクリーニング方法であって、
（ａ）組織外植片を、目的の化合物および賦形剤を含む複数の薬物組成物と、前記組織外植片上の異なる位置において、接触させるステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記化合物の存在を検出することによって、前記組織外植片を通じた前記目的の化合物の吸収を測定するステップであって、前記基底膜側表面における前記化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、を含む、方法。
（項目１４６）
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ腸モデルを作製する方法であって、
（ａ）組織外植片を提供するステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、
前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記組織外植片を、複数のマイクロウェルを備える基材と接触させるステップと、を含む、方法。
（項目１４７）
胃腸組織外植片内で、試験化合物の吸収および溶解を同時に決定するための方法であって、
（ａ）試験化合物を溶媒中に溶解し、それによって、薬物溶液を生成し、前記薬物溶液を、十分な期間にわたって蒸発させて、結果としての薬物の粉末を生成するステップと、
（ｂ）（ａ）により得られた前記薬物の粉末を、賦形剤と組み合わせるステップと、
（ｃ）組織外植片を、（ｂ）により得られた前記薬物の粉末と接触させるステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと
（ｄ）上清中の濃度を検出することによって、溶解を決定するステップと、
（ｅ）前記管腔側表面および前記基底膜側表面における前記試験化合物の存在を検出することによって、吸収を決定するステップであって、前記基底膜側表面における前記試験化合物の存在が、前記組織外植片を通じて吸収される前記化合物の能力を示す、ステップと、を含む、方法。
（項目１４８）
前記組織外植片を通じた吸収が、ｉｎ  ｖｉｖｏで測定される吸収と比較した場合に、Ｃａｃｏ−２細胞を使用して決定される吸収のピアソン相関値と比べて、高いピアソン相関値を有する、項目１２３に記載の方法。
（項目１４９）
前記高いピアソン相関値が、少なくとも０．７０、少なくとも０．７５、少なくとも０．８０、少なくとも０．８５、または少なくとも０．９０である、項目１４８に記載の方法。
（項目１５０）
胃腸組織外植片に対する試験化合物の組織蓄積の影響を決定するための方法であって、（ａ）組織外植片に、少なくとも１つの第１のアッセイを行うステップであって、前記組織外植片が、ヒト胃腸管に由来する腸上皮を含み、前記腸上皮が、前記組織外植片において極性を有する上皮細胞を含み、前記組織外植片が、管腔側表面および基底膜側表面を提供し、前記上皮細胞の前記極性が、前記組織外植片において維持される、ステップと、
（ｂ）前記組織外植片を、目的の化合物と接触させるステップと、
（ｃ）前記組織外植片に、少なくとも１つの第２のアッセイを行うステップと、
（ｄ）前記第１のアッセイの結果および前記第２のアッセイの結果を比較するステップであって、前記第１のアッセイおよび前記第２のアッセイが、同じアッセイである、ステップと、を含み、
それによって、前記化合物の組織蓄積の影響を決定する、方法。