【手続補正書】
【提出日】令和3年9月10日(2021.9.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
リノール酸、少なくとも１つの他のオメガ−６脂肪酸、コレステロール、およびシクロデキストリンを含み、前記コレステロールが、合成コレステロールまたは無動物起源コレステロールである、無血清細胞培養培地組成物または無血清細胞培養補助剤組成物。
【請求項２】
前記少なくとも１つの他のオメガ−６脂肪酸が、多価不飽和オメガ−６脂肪酸である、請求項１に記載の無血清細胞培養培地組成物または無血清細胞培養補助剤組成物。
【請求項３】
前記補助剤組成物の有効希釈度が、約１：１０〜約１：５０００である、請求項２に記載の無血清細胞培養補助剤組成物。
【請求項４】
ワクチン、ウイルス、ウイルス粒子、ウイルスタンパク質もしくは核酸、またはウイルス断片を産生し得る細胞を培養することができる、請求項２に記載の無血清細胞培養培地組成物または無血清細胞培養補助剤組成物。
【請求項５】
前記細胞が、ウシ細胞、イヌ細胞、ネコ細胞、昆虫細胞、鳥類細胞、霊長類細胞、またはヒト細胞である、請求項４に記載の無血清細胞培養培地組成物または無血清細胞培養補助剤組成物。
【請求項６】
前記細胞が、ＭＲＣ−５、ＭＲＣ−５  ＲＣＢ、ＭＲＣ−９、ＷＩ−３８、２ＢＳ、Ｗａｌｖａｘ−２、ＩＭＲ−９０、ＩＭＲ−９１、ＫＭＢ−１７、ＨＵＴ系列細胞、チャン肝臓、Ｕ９３７、ＭＤＣＫ、ＣＤ４発現Ｔ細胞、ＣＤ８発現Ｔ細胞、ＶＥＲＯ、および前述の細胞のクローンからなる群から選択される、請求項４に記載の無血清細胞培養培地組成物または無血清細胞培養補助剤組成物。
【請求項７】
二倍体細胞集団を培養するための方法であって、前記細胞集団を、シクロデキストリンおよび少なくとも１つの脂質を含む細胞培養培地中でインキュベートすることを含む、方法。
【請求項８】
前記細胞集団が、ワクチン産生二倍体細胞を含み、前記細胞集団を、シクロデキストリン、リノール酸、少なくとも１つの他のオメガ−６脂肪酸、およびコレステロールを含む無血清細胞培養培地中でインキュベートすることを含む、請求項７に記載の二倍体細胞集団を培養するための方法。
【請求項９】
前記シクロデキストリンが、メチル化シクロデキストリンである、請求項８に記載の二倍体細胞集団を培養するための方法。
【請求項１０】
前記コレステロールが、合成コレステロールまたは無動物起源コレステロールである、請求項８に記載の二倍体細胞集団を培養するための方法。
【請求項１１】
（ｉ）前記培地が、前記細胞の成長、前記細胞の生存細胞密度、ウイルスに感染した細胞のウイルス力価、またはそれらの組み合わせを増加させ、かつ／あるいは
（ｉｉ）前記二倍体細胞が、無血清条件下で、ワクチン、ウイルス、ウイルス粒子、ウイルスタンパク質もしくは核酸、またはそれらのウイルス断片を産生することができ、かつ／あるいは
（ｉｉｉ）前記細胞が、ウイルスに感染している、
請求項７〜１０のいずれかに記載の二倍体細胞集団を培養するための方法。
【請求項１２】
前記細胞集団が、ＭＲＣ−５、ＭＲＣ−５  ＲＣＢ、ＭＲＣ−９、ＷＩ−３８、２ＢＳ、Ｗａｌｖａｘ−２、ＩＭＲ−９０、ＩＭＲ−９１、ＫＭＢ−１７、ＨＵＴ系列細胞、チャン肝臓、Ｕ９３７、ＭＤＣＫ、ＣＤ４発現Ｔ細胞、ＣＤ８発現Ｔ細胞、ＶＥＲＯ、および前述の細胞のクローンからなる群から選択される、請求項７〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
Ｔ細胞亜集団のメンバーを優先的に増殖させるための方法であって、Ｔ細胞の混合集団を、
（ｉ）シクロデキストリン、および
（ｉｉ）２種以上の脂肪酸
に曝露することを含み、
２種以上の脂肪酸のモル比が、前記Ｔ細胞亜集団の前記メンバーを誘導して、他のＴ細胞亜集団のメンバーに対して優先的に増殖するように調整される、方法。
【請求項１４】
無血清細胞培養培地組成物であって、前記無血清細胞培養培地組成物が、シクロデキストリンおよびコレステロールを含む無血清細胞培養培地補助剤組成物であり、前記コレステロールが、合成コレステロールまたは無動物起源コレステロールである組成物。
【請求項１５】
前記補助剤組成物の有効希釈度が、約１：１０〜約１：５０００であるか、または前記補助剤組成物の有効希釈度が、約１：１００である、請求項１４に記載の無血清細胞培養培地補助剤組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６４０】
項１８４．細胞が、無血清条件下で、ワクチン、ウイルス、ウイルス粒子、ウイルスタンパク質もしくは核酸、またはウイルス断片を産生する、項１８２〜１８３に記載のキット。
本発明のまた別の態様は、以下のとおりであってもよい。
〔１〕リノール酸、少なくとも１つの他のオメガ−６脂肪酸、コレステロール、およびシクロデキストリンを含む、無血清細胞培養培地組成物。
〔２〕リノール酸、少なくとも１つの他のオメガ−６脂肪酸、コレステロール、およびシクロデキストリンを含む、無血清細胞培養補助剤組成物。
〔３〕前記シクロデキストリンが、メチル化シクロデキストリンである、前記〔１〕に記載の無血清細胞培養培地組成物または前記〔２〕に記載の無血清細胞培養補助剤組成物。
〔４〕前記メチル化シクロデキストリンが、約５０μＭ〜約２００μＭのレベルで存在する、前記〔３〕に記載の無血清細胞培養培地組成物または無血清細胞培養補助剤組成物。
〔５〕前記コレステロールが、合成コレステロールであり、かつ／または前記コレステロールが、約５μＭ〜約３０μＭのレベルで存在する、前記〔１〕〜〔４〕のいずれかに記載の無血清細胞培養培地組成物または前記〔１〕〜〔４〕のいずれかに記載の無血清細胞培養補助剤組成物。
〔６〕前記少なくとも１つの他のオメガ−６脂肪酸が、多価不飽和オメガ−６脂肪酸である、前記〔１〕〜〔５〕のいずれかに記載の無血清細胞培養培地組成物または前記〔１〕〜〔５〕のいずれかに記載の無血清細胞培養補助剤組成物。
〔７〕前記少なくとも１つの他のオメガ−６脂肪酸が、アラキドン酸である、前記〔１〕〜〔６〕のいずれかに記載の無血清細胞培養培地組成物または前記〔１〕〜〔６〕のいずれかに記載の無血清細胞培養補助剤組成物。
〔８〕前記多価不飽和オメガ−６脂肪酸が、アラキドン酸、リノール酸、リノレン酸、ミリスチン酸、オレイン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、およびステアリン酸からなる群から選択される、前記〔１〕〜〔７〕のいずれかに記載の無血清細胞培養培地組成物または前記〔１〕〜〔７〕のいずれかに記載の無血清細胞培養補助剤組成物。
〔９〕前記補助剤の有効希釈度が、約１：１０〜約１：５０００である、前記〔１〕〜〔８〕のいずれかに記載の無血清細胞培養補助剤組成物。
〔１０〕ワクチン、ウイルス、ウイルス粒子、ウイルスタンパク質もしくは核酸、またはウイルス断片を産生し得る細胞を培養することができる、前記〔１〕に記載の無血清細胞培養培地組成物または前記〔２〕に記載の無血清細胞培養補助剤組成物。
〔１１〕前記細胞が、動物細胞である、前記〔１〕〜〔１０〕のいずれかに記載の無血清細胞培養培地組成物または無血清細胞培養補助剤組成物。
〔１２〕前記動物細胞が、ウシ細胞、イヌ細胞、ネコ細胞、昆虫細胞、鳥類細胞、霊長類細胞、またはヒト細胞である、前記〔１１〕に記載の無血清細胞培養培地組成物または無血清細胞培養補助剤組成物。
〔１３〕前記動物細胞が、二倍体細胞である、前記〔１１〕または〔１２〕に記載の無血清細胞培養培地組成物または無血清細胞培養補助剤組成物。
〔１４〕２−デオキシ−Ｄ−グルコースをさらに含む、前記〔１〕〜〔１３〕のいずれかに記載の無血清細胞培養培地組成物。
〔１５〕前記細胞が、ＭＲＣ−５、ＭＲＣ−５  ＲＣＢ、ＭＲＣ−９、ＷＩ−３８、２ＢＳ、Ｗａｌｖａｘ−２、ＩＭＲ−９０、ＩＭＲ−９１、ＫＭＢ−１７、ＨＵＴ系列細胞、チャン肝臓、Ｕ９３７、ＭＤＣＫ、ＣＤ４発現Ｔ細胞、ＣＤ８発現Ｔ細胞、ＶＥＲＯ、および前述の細胞のクローンからなる群から選択される、前記〔１〕〜〔１４〕のいずれかに記載の無血清細胞培養培地組成物または無血清細胞培養補助剤組成物。
〔１６〕培地または補助剤が、前記細胞の成長、前記細胞の生存細胞密度、ウイルスに感染した細胞のウイルス力価、またはそれらの組み合わせを増加させる、前記〔１〕〜〔１５〕のいずれかに記載の無血清細胞培養培地組成物または無血清細胞培養補助剤組成物。
〔１７〕前記細胞が、ウイルスに感染している、前記〔１〕〜〔１６〕のいずれかに記載の無血清細胞培養培地組成物または無血清細胞培養補助剤組成物。
〔１８〕前記ウイルスが、動物ウイルス、植物ウイルス、またはバクテリオファージである、前記〔１６〕または〔１７〕に記載の無血清細胞培養培地組成物または無血清細胞培養補助剤組成物。
〔１９〕前記ウイルスが、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、風疹、麻疹、流行性耳下腺炎、Ａ型肝炎、アデノウイルス、ポリオ、ロタウイルス、痘瘡、水痘、黄熱、パピローマウイルス、エボラウイルス、ＨＩＶ、狂犬病または水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）、およびデングウイルスからなる群から選択される、前記〔１６〕〜〔１８〕に記載の無血清細胞培養培地組成物または無血清細胞培養補助剤組成物。
〔２０〕前記ウイルス粒子が、パルボウイルス科、レトロウイルス科、フラビウイルス科、またはバクテリオファージに由来する、前記〔１０〕〜〔１９〕のいずれかに記載の無血清細胞培養培地組成物または無血清細胞培養補助剤組成物。
〔２１〕ワクチン、ウイルス、ウイルス粒子、ウイルスタンパク質もしくは核酸、またはウイルス断片を産生することができる二倍体細胞を培養するために基本培地に添加され、前記細胞が、無血清条件下で培養されるものである、前記〔２〕に記載の無血清細胞培養補助剤組成物。
〔２２〕二倍体細胞集団を培養するための方法であって、前記細胞集団を、シクロデキストリンおよび少なくとも１つの脂質を含む細胞培養培地中でインキュベートすることを含む、方法。
〔２３〕ワクチン産生二倍体細胞を含む、前記〔２２〕に記載の細胞集団を培養する方法であって、前記細胞集団を、
（ｉ）シクロデキストリン、リノール酸、少なくとも１つの他のオメガ−６脂肪酸、およびコレステロール、または
（ｉｉ）好適な希釈度の表１および／もしくは表２に記載の補助剤を含む、無血清細胞培養培地中でインキュベートすることを含み、
前記培養が、シクロデキストリンを有しない血清含有培地中の生存細胞密度と比較して、前記無血清細胞培養培地中の生存細胞密度を増加させる、方法。
〔２４〕前記シクロデキストリンが、メチル化シクロデキストリンである、前記〔２３〕に記載の二倍体細胞集団を培養するための方法。
〔２５〕前記メチル化シクロデキストリンが、約５０μＭ〜約２００μＭのレベルで存在する、前記〔２４〕に記載の二倍体細胞集団を培養するための方法。
〔２６〕前記少なくとも１つの他のオメガ−６脂肪酸が、多価不飽和オメガ−６脂肪酸である、前記〔２３〕に記載の二倍体細胞集団を培養するための方法。
〔２７〕前記多価不飽和オメガ−６脂肪酸が、アラキドン酸、リノレン酸、ミリスチン酸、オレイン酸、パルミチン酸、パルミトレイン酸、およびステアリン酸からなる群から選択される、前記〔２３〕に記載の二倍体細胞集団を培養するための方法。
〔２８〕（ｉ）前記培地または補助剤が、前記細胞の成長、前記細胞の生存細胞密度、ウイルスに感染した細胞のウイルス力価、またはそれらの組み合わせを増加させ、かつ／あるいは
（ｉｉ）前記二倍体細胞が、無血清条件下で、ワクチン、ウイルス、ウイルス粒子、ウイルスタンパク質もしくは核酸、またはそれらのウイルス断片を産生することができ、かつ／あるいは
（ｉｉｉ）前記細胞が、ウイルスに感染している、
前記〔２２〕〜〔２７〕のいずれかに記載の二倍体細胞集団を培養するための方法。
〔２９〕（ｉ）前記ウイルスが、動物ウイルス、植物ウイルス、もしくはバクテリオファージであり、かつ／または
（ｉｉ）前記ウイルスが、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、風疹、麻疹、流行性耳下腺炎、Ａ型肝炎、アデノウイルス、ポリオ、ロタウイルス、痘瘡、水痘、黄熱、パピローマウイルス、エボラウイルス、ＨＩＶ、狂犬病もしくは水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）、およびデングウイルスからなる群から選択され、かつ／または
（ｉｉｉ）前記ウイルス粒子が、パルボウイルス科、レトロウイルス科、フラビウイルス科、もしくはバクテリオファージに由来する、前記〔２２〕〜〔２８〕のいずれかに記載の二倍体細胞集団を培養するための方法。
〔３０〕前記細胞集団が、ＭＲＣ−５、ＭＲＣ−５  ＲＣＢ、ＭＲＣ−９、ＷＩ−３８、２ＢＳ、Ｗａｌｖａｘ−２、ＩＭＲ−９０、ＩＭＲ−９１、ＫＭＢ−１７、ＨＵＴ系列細胞、チャン肝臓、Ｕ９３７、ＭＤＣＫ、ＣＤ４発現Ｔ細胞、ＣＤ８発現Ｔ細胞、ＶＥＲＯ、および前述の細胞のクローンからなる群から選択される、前記〔２２〕〜〔２９〕のいずれかに記載の方法。
〔３１〕（ｉ）細胞の集団、（ｉｉ）シクロデキストリンおよび少なくとも１つの脂質を含む無血清細胞培養培地、または
（ｉ）細胞の集団、（ｉｉ）無血清基本細胞培地、ならびに（ｉｉｉ）シクロデキストリンおよび少なくとも１つの脂質を含む補助剤、または
（ｉ）細胞の集団、（ｉｉ）無血清基本細胞培地、ならびに（ｉｉｉ）好適な希釈度の表１および／もしくは表２に記載の補助剤
を含む、組み合わせ。
〔３２〕（ｉ）前記細胞が、動物細胞であるか、または
（ｉｉ）前記動物細胞が、ウシ細胞、ネコ細胞、昆虫細胞、鳥類細胞、霊長類細胞、もしくはヒト細胞であるか、または
（ｉｉｉ）前記動物細胞が、二倍体細胞であるか、または
（ｉｖ）前記細胞が、ＭＲＣ−５、ＭＲＣ−５  ＲＣＢ、ＭＲＣ−９、ＷＩ−３８、２ＢＳ、Ｗａｌｖａｘ−２、ＩＭＲ−９０、ＩＭＲ−９１、ＫＭＢ−１７、ＨＵＴ系列細胞、チャン肝臓、Ｕ９３７、ＭＤＣＫ、ＣＤ４発現Ｔ細胞、ＣＤ８発現Ｔ細胞、ＶＥＲＯ、および前述の細胞のクローンからなる群から選択される、前記〔３１〕に記載の組み合わせ。
〔３３〕前記二倍体細胞が、無血清条件下で、ワクチン、ウイルス、ウイルス粒子、ウイルスタンパク質もしくは核酸、またはウイルス断片を産生する、前記〔３１〕または〔３２〕に記載の組み合わせ。
〔３４〕無血清二倍体細胞培養培地を作製する方法であって、（ｉ）基本培地と、（ｉｉ）シクロデキストリンおよび少なくとも１つの脂質を含む補助剤、または（ｉｉ）好適な希釈度の表１および／もしくは表２に記載の補助剤、のいずれかとを混合することを含む、方法。
〔３５〕前記補助剤が、成長因子をさらに含む、前記〔３４〕に記載の無血清二倍体細胞培養培地を作製する方法。
〔３６〕（ｉ）１種以上の異なるシクロデキストリンであって、各シクロデキストリンが、別個の容器内にある、シクロデキストリンと、（ｉｉ）２種以上の異なる脂肪酸であって、各脂肪酸が、別個の容器内にある、脂肪酸とを含む、二倍体細胞培地の補充のための系。
〔３７〕細胞または細胞株を培養するためのキットであって、
（ｉ）細胞の集団、（ｉｉ）シクロデキストリンおよび少なくとも１つの脂質を含む無血清細胞培養培地、または
（ｉ）細胞の集団、（ｉｉ）無血清基本細胞培地、ならびに（ｉｉｉ）シクロデキストリンおよび少なくとも１つの脂質を含む補助剤、または
（ｉ）細胞の集団、（ｉｉ）無血清基本細胞培地、ならびに（ｉｉｉ）好適な希釈度の表１および／もしくは表２に記載の補助剤、を含む、キット。
〔３８〕（ｉ）前記細胞が、動物細胞であるか、または
（ｉｉ）前記動物細胞が、ウシ細胞、イヌ細胞、ネコ細胞、昆虫細胞、鳥類細胞、霊長類細胞、もしくはヒト細胞であるか、または
（ｉｉｉ）前記動物細胞が、二倍体細胞であるか、または
（ｉｖ）前記細胞が、ＭＲＣ−５、ＭＲＣ−５  ＲＣＢ、ＭＲＣ−９、ＷＩ−３８、２ＢＳ、Ｗａｌｖａｘ−２、ＩＭＲ−９０、ＩＭＲ−９１、ＫＭＢ−１７、ＨＵＴ系列細胞、チャン肝臓、Ｕ９３７、ＭＤＣＫ、ＣＤ４発現Ｔ細胞、ＣＤ８発現Ｔ細胞、ＶＥＲＯ、および前述の細胞のクローンからなる群から選択される、前記〔３７〕に記載のキット。
〔３９〕前記細胞が、無血清条件下で、ワクチン、ウイルス、ウイルス粒子、ウイルスタンパク質もしくは核酸、またはウイルス断片を産生する、前記〔３７〕〜〔３８〕のいずれかに記載のキット。
〔４０〕（ｉ）Ｔ細胞の集団、ならびに（ｉｉ）シクロデキストリンおよび少なくとも１つの脂質を含む培地を含む、組み合わせ。
〔４１〕前記少なくとも１つの脂質が、コレステロール、脂肪酸、脂肪酸エステル、リン脂質、またはグリセロ脂質である、前記〔４０〕に記載の組み合わせ。
〔４２〕前記脂肪酸が、飽和脂肪酸、一価不飽和脂肪酸、または多価不飽和脂肪酸である、前記〔４１〕に記載の組み合わせ。
〔４３〕前記脂肪酸が、オメガ−３脂肪酸、オメガ−６脂肪酸、またはオメガ−９脂肪酸である、前記〔４１〕に記載の組み合わせ。
〔４４〕前記脂肪酸が、リノール酸である、前記〔４１〕に記載の組み合わせ。
〔４５〕リノレン酸をさらに含む、前記〔４１〕に記載の組み合わせ。
〔４６〕前記リノレン酸が、α−リノレン酸、γ−リノレン酸、またはα−リノレン酸およびγ−リノレン酸である、前記〔４５〕に記載の組み合わせ。
〔４７〕アラキドン酸をさらに含む、前記〔４１〕に記載の組み合わせ。
〔４８〕前記少なくとも１つの脂質が、コレステロールである、前記〔４０〕に記載の組み合わせ。
〔４９〕前記シクロデキストリンが、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、またはγ−シクロデキストリンである、前記〔４０〕に記載の組み合わせ。
〔５０〕前記シクロデキストリンが、メチル化されている、前記〔４０〕に記載の組み合わせ。
〔５１〕前記シクロデキストリンが、メチル−β−シクロデキストリンである、前記〔５０〕に記載の組み合わせ。
〔５２〕組成物が、複数の異なるシクロデキストリンを含み、前記複数のシクロデキストリンが、少なくとも２種のシクロデキストリンを含む、前記〔４０〕に記載の組み合わせ。
〔５３〕前記シクロデキストリン対コレステロールのモル比が、１１．５：１より小さいである、前記〔４８〕に記載の組み合わせ。
〔５４〕前記細胞培養培地が、約１０μＭ〜約２００μＭであるレベルのシクロデキストリンを含む、前記〔４０〕に記載の組み合わせ。
〔５５〕前記細胞培養培地が、無血清培養培地である、前記〔４０〕に記載の組み合わせ。
〔５６〕前記細胞培養培地が、アルブミンを含まない、前記〔４０〕に記載の組み合わせ。
〔５７〕２−デオキシ−Ｄ−グルコースをさらに含む、前記〔４０〕に記載の組み合わせ。
〔５８〕Ｔ細胞集団を培養するための方法であって、前記集団を、シクロデキストリンおよび少なくとも１つの脂質を含む細胞培養培地中でインキュベートすることを含む、方法。
〔５９〕前記細胞培養培地が、リノール酸、少なくとも１つの他のオメガ−６脂肪酸、コレステロール、およびシクロデキストリンを含む無血清細胞培養補助剤組成物を含む、前記〔５８〕に記載の方法。
〔６０〕前記Ｔ細胞集団が、ＣＤ８＋Ｔ細胞を含む、前記〔５８〕に記載の方法。
〔６１〕前記Ｔ細胞集団が、ＣＤ４＋Ｔ細胞を含む、前記〔５８〕に記載の方法。
〔６２〕前記Ｔ細胞集団が、ＣＤ８＋Ｔ細胞およびＣＤ４＋Ｔ細胞を含む、前記〔５８〕に記載の方法。
〔６３〕前記細胞培養培地が、２−デオキシ−Ｄ−グルコースをさらに含む、前記〔５８〕に記載の方法。
〔６４〕ＣＤ８＋Ｔ細胞およびＣＤ４＋Ｔ細胞を含むＴ細胞集団を培養する方法であって、前記集団を、シクロデキストリンおよび多価不飽和脂肪酸を含む細胞培養培地中でインキュベートすることを含み、
前記集団内のＣＤ４＋Ｔ細胞対ＣＤ８＋Ｔ細胞の比の変化が、１０日間の培養後に５０％未満であり、
前記細胞培養培地が、０．１ｍＭ〜約１０ｍＭの２−デオキシ−Ｄ−グルコースを含有する、方法。
〔６５〕前記多価不飽和脂肪酸が、オメガ−６多価不飽和脂肪酸である、前記〔６４〕に記載の方法。
〔６６〕前記オメガ−６多価不飽和脂肪酸が、リノール酸である、前記〔６４〕に記載の方法。
〔６７〕前記細胞培養培地が、コレステロールをさらに含む、前記〔６４〕に記載の方法。
〔６８〕前記集団が最初に前記培地と接触するとき、前記集団が、約１：１のＣＤ４＋Ｔ細胞対ＣＤ８＋Ｔ細胞の比を含む、前記〔６４〕に記載の方法。
〔６９〕Ｔ細胞亜集団のメンバーを優先的に増殖させるための方法であって、Ｔ細胞の混合集団を、
（ｉ）シクロデキストリン、および
（ｉｉ）２種以上の脂肪酸に曝露することを含み、
２種以上の脂肪酸のモル比が、前記Ｔ細胞亜集団の前記メンバーを誘導して、他のＴ細胞亜集団のメンバーに対して優先的に増殖するように調整される、方法。
〔７０〕前記Ｔ細胞亜集団が、ＣＤ８＋Ｔ細胞である、前記〔６９〕に記載の方法。
〔７１〕前記Ｔ細胞亜集団が、ＣＤ４＋Ｔ細胞である、前記〔６９〕に記載の方法。
〔７２〕前記Ｔ細胞の混合集団を、２−デオキシ−Ｄ−グルコースに曝露することをさらに含む、前記〔６９〕に記載の方法。
〔７３〕前記Ｔ細胞の混合集団が、他の脂肪酸よりも多くの多価不飽和脂肪酸に曝露される、前記〔６９〕に記載の方法。
〔７４〕前記Ｔ細胞が、初代Ｔ細胞である、前記〔６９〕に記載の方法。
〔７５〕前記Ｔ細胞が、ヒト対象の血液から単離されたものである、前記〔７４〕に記載の方法。
〔７６〕前記Ｔ細胞が、遺伝子改変Ｔ細胞である、前記〔６９〕に記載の方法。
〔７７〕前記Ｔ細胞が、遺伝子改変Ｔ細胞受容体を発現する、前記〔７６〕に記載の方法。
〔７８〕前記Ｔ細胞が、キメラ抗原受容体を発現する、前記〔６９〕に記載の方法。
〔７９〕ＣＤ８＋Ｔ細胞対ＣＤ４＋Ｔ細胞の比を増加させながらＣＤ８＋Ｔ細胞およびＣＤ４＋Ｔ細胞を含むＴ細胞集団を培養する方法であって、前記集団を、２−デオキシ−Ｄ−グルコースを含む細胞培養培地中でインキュベートすることを含む、方法。
〔８０〕前記２−デオキシ−Ｄ−グルコースが、約０．１ｍＭ〜約５ｍＭのレベルで存在する、前記〔７９〕に記載の方法。
〔８１〕前記細胞培養培地が、血清をさらに含む、前記〔７９〕に記載の方法。
〔８２〕前記細胞培養培地が、無血清細胞培養培地である、前記〔７９〕に記載の方法。
〔８３〕前記集団内のＣＤ８＋Ｔ細胞対ＣＤ４＋Ｔ細胞の比が、前記培養培地との最初の接触から７日後に２倍〜５倍増加する、前記〔７９〕に記載の方法。
〔８４〕前記Ｔ細胞が、初代Ｔ細胞である、前記〔７９〕に記載の方法。
〔８５〕前記Ｔ細胞が、ヒト対象の血液から単離されたものである、前記〔７９〕に記載の方法。
〔８６〕前記Ｔ細胞が、遺伝子改変Ｔ細胞である、前記〔７９〕に記載の方法。
〔８７〕前記Ｔ細胞が、遺伝子改変Ｔ細胞受容体を発現する、前記〔７９〕に記載の方法。
〔８８〕前記Ｔ細胞が、キメラ抗原受容体を発現する、前記〔７９〕に記載の方法。
〔８９〕前記Ｔ細胞が、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、ヘルパーＴ細胞、Ｔｈ１７細胞、Ｔｈ９細胞、メモリーＴ細胞、エフェクターメモリーＴ細胞、セントラルメモリーＴ細胞、高分化型エフェクター（ＴTD）Ｔ細胞、ナイーブＴ細胞、または操作されたＴ細胞である、前記〔７９〕に記載の方法。
〔９０〕疾患または病態に罹患しているか、またはそれに罹患するリスクがある対象への投与のための培養Ｔ細胞を調製することをさらに含む、前記〔７９〕に記載の方法。
〔９１〕前記Ｔ細胞を前記対象に投与することをさらに含む、前記〔９０〕に記載の方法。
〔９２〕疾患の治療を必要とする対象において疾患を治療するための方法であって、前記〔９１〕に記載の方法によって得られたＴ細胞を、前記対象に投与することを含む、方法。
〔９３〕無血清培地、シクロデキストリン、および１つ以上の脂質を含むＴ細胞を培養するための、キット。
〔９４〕２−デオキシ−Ｄ−グルコースをさらに含む、前記〔９３〕に記載のキット。