【手続補正書】
【提出日】令和3年6月1日(2021.6.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
Ｔｏｌｌ様受容体３（ＴＬＲ−３）アゴニスト、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−γ、ＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−１βおよびＴｏｌｌ様受容体−７／８（ＴＬＲ−７／８）アゴニストの存在下で未成熟樹状細胞を培養するステップを含む、成熟樹状細胞を産生するインビトロの方法。
【請求項２】
ＴＬＲ−３アゴニストがリタトリモドであり、ＴＬＲ−７／８アゴニストがＲ８４８である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
ＴＬＲ−３アゴニストが、ｐｏｌｙ［Ｉ］：ｐｏｌｙ［ＣｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ｉ］：ｐｏｌｙ［ＧｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ａ］：ｐｏｌｙ［ＵｘＣ］；ｐｏｌｙ［Ａ］：ｐｏｌｙ［ＵｘＧ］；ｐｏｌｙ［Ｕ］：ｐｏｌｙ［ＡｘＣ］；ｐｏｌｙ［Ｕ］：ｐｏｌｙ［ＩｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ｃ］：ｐｏｌｙ［ＧｘＡ］；ｐｏｌｙ［Ｃ］：ｐｏｌｙ［ＧｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ｇ］：ｐｏｌｙ［ＣｘＡ］；およびｐｏｌｙ［Ｇ］：ｐｏｌｙ［ＣｘＵ］からなる群から選択される高分子量ｄｓＲＮＡポリマーであり、ｘが３〜４０の整数である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
未成熟樹状細胞が末梢血単核細胞のサンプルから培養され、任意で、サンプルがヒトまたは動物から単離される、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
樹状細胞が抗原の存在下で培養され、任意で、抗原が癌抗原または感染症抗原である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
ＴＬＲ−３アゴニスト、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−γ、ＣＤＬ４０、ＩＬ−１βおよびＴＬＲ−７／８アゴニストを含む、樹状細胞成熟カクテル。
【請求項７】
ＴＬＲ−３アゴニストがリタトリモドであり、ＴＬＲ−７／８アゴニストがＲ８４８である、請求項６に記載の樹状細胞成熟カクテル。
【請求項８】
ＴＬＲ−３アゴニストが、ｐｏｌｙ［Ｉ］：ｐｏｌｙ［ＣｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ｉ］：ｐｏｌｙ［ＧｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ａ］：ｐｏｌｙ［ＵｘＣ］；ｐｏｌｙ［Ａ］：ｐｏｌｙ［ＵｘＧ］；ｐｏｌｙ［Ｕ］：ｐｏｌｙ［ＡｘＣ］；ｐｏｌｙ［Ｕ］：ｐｏｌｙ［ＩｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ｃ］：ｐｏｌｙ［ＧｘＡ］；ｐｏｌｙ［Ｃ］：ｐｏｌｙ［ＧｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ｇ］：ｐｏｌｙ［ＣｘＡ］；およびｐｏｌｙ［Ｇ］：ｐｏｌｙ［ＣｘＵ］からなる群から選択される高分子量ｄｓＲＮＡポリマーであり、ｘが３〜４０の整数である、請求項６に記載の樹状細胞成熟カクテル。
【請求項９】
樹状細胞成熟カクテルが、抗原の存在下で未成熟樹状細胞のインビトロ成熟のために使用され、任意で、抗原が癌抗原または感染症抗原である、請求項６〜８のいずれか１項に記載の樹状細胞成熟カクテル。
【請求項１０】
未成熟樹状細胞を抗原に曝露するステップ；および請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法に従って、または請求項６〜８のいずれか１項に記載の樹状細胞成熟カクテルを用いて、樹状細胞を成熟させるステップを含む、インビトロで成熟抗原提示樹状細胞を産生する方法。
【請求項１１】
抗原が癌抗原または感染症抗原である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
未成熟樹状細胞が抗原を捕捉および処理するように誘導するために十分な時間、未成熟樹状細胞が抗原に曝露される、請求項１０または１１に記載の方法。
【請求項１３】
インビトロで未成熟樹状細胞を抗原に曝露するステップ；請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法に従って、または請求項６〜８のいずれか１項に記載の樹状細胞成熟カクテルを用いて、十分な数の樹状細胞が抗原提示成熟樹状細胞になるまで未成熟樹状細胞を成熟させるステップ；および抗原提示成熟樹状細胞を薬学的に許容される製剤に製剤化するステップを含む、対象における細胞性免疫応答を誘導するためのワクチンを製造する方法。
【請求項１４】
抗原が癌抗原または感染症抗原であり、細胞性免疫応答が癌または感染症に対するものである、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
インビトロで未成熟樹状細胞を樹状細胞成熟カクテルおよび抗原とともに培養して、抗原提示成熟樹状細胞を産生するステップであって、抗原が癌抗原または感染症抗原であるステップ；および免疫原的に有効な量の抗原提示成熟樹状細胞を対象に投与するステップを含む、対象における癌または感染症に対する免疫応答を誘導する方法で使用するための、請求項６〜８のいずれか１項に記載の樹状細胞成熟カクテル。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４２】
高レベルのＴｈ−１エフェクターサイトカインＩＬ−１２ｐ７０を発現する樹状細胞をインビトロで最適に成熟できることを示したので、我々は成熟樹状細胞がインビトロでエフェクター細胞をプライミングして、結核菌の封じ込めが増加するか否かを決定したいと望んだ。精製タンパク質誘導体および完全カクテルで成熟させた樹状細胞でプライミングされたエフェクター細胞は、プライミングされていないままであるか、または精製タンパク質誘導体若しくはＩＦＮ含有カクテルで成熟させた樹状細胞でプライミングしたエフェクター細胞と比較して、エフェクターを介した封じ込めを２倍増加させた（ｐ＜０．０５；図１２）。
本発明のまた別の態様は、以下のとおりであってもよい。
〔１〕Ｔｏｌｌ様受容体３（ＴＬＲ−３）アゴニスト、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−γ、ＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−１βおよびＴｏｌｌ様受容体−７／８（ＴＬＲ−７／８）アゴニストの存在下で未成熟樹状細胞を培養するステップを含む、成熟樹状細胞を産生するインビトロの方法。
〔２〕ＴＬＲ−３アゴニストがリタトリモドであり、ＴＬＲ−７／８アゴニストがＲ８４８である、前記〔１〕に記載の方法。
〔３〕ＴＬＲ−３アゴニストが、ｐｏｌｙ［Ｉ］：ｐｏｌｙ［ＣｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ｉ］：ｐｏｌｙ［ＧｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ａ］：ｐｏｌｙ［ＵｘＣ］；ｐｏｌｙ［Ａ］：ｐｏｌｙ［ＵｘＧ］；ｐｏｌｙ［Ｕ］：ｐｏｌｙ［ＡｘＣ］；ｐｏｌｙ［Ｕ］：ｐｏｌｙ［ＩｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ｃ］：ｐｏｌｙ［ＧｘＡ］；ｐｏｌｙ［Ｃ］：ｐｏｌｙ［ＧｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ｇ］：ｐｏｌｙ［ＣｘＡ］；およびｐｏｌｙ［Ｇ］：ｐｏｌｙ［ＣｘＵ］からなる群から選択される高分子量ｄｓＲＮＡポリマーであり、ｘが３〜４０の整数である、前記〔１〕に記載の方法。
〔４〕未成熟樹状細胞が末梢血単核細胞のサンプルから培養される、前記〔１〕〜〔３〕のいずれか１項に記載の方法。
〔５〕サンプルがヒトまたは動物から単離される、前記〔４〕に記載の方法。
〔６〕樹状細胞が抗原の存在下で培養される、前記〔１〕〜〔５〕のいずれか１項に記載の方法。
〔７〕抗原が癌抗原または感染症抗原である、前記〔６〕に記載の方法。
〔８〕ＴＬＲ−３アゴニスト、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−γ、ＣＤＬ４０、ＩＬ−１βおよびＴＬＲ−７／８アゴニストを含む、樹状細胞成熟カクテル。
〔９〕ＴＬＲ−３アゴニストがリタトリモドであり、ＴＬＲ−７／８アゴニストがＲ８４８である、前記〔８〕に記載の樹状細胞成熟カクテル。
〔１０〕ＴＬＲ−３アゴニストが、ｐｏｌｙ［Ｉ］：ｐｏｌｙ［ＣｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ｉ］：ｐｏｌｙ［ＧｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ａ］：ｐｏｌｙ［ＵｘＣ］；ｐｏｌｙ［Ａ］：ｐｏｌｙ［ＵｘＧ］；ｐｏｌｙ［Ｕ］：ｐｏｌｙ［ＡｘＣ］；ｐｏｌｙ［Ｕ］：ｐｏｌｙ［ＩｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ｃ］：ｐｏｌｙ［ＧｘＡ］；ｐｏｌｙ［Ｃ］：ｐｏｌｙ［ＧｘＵ］；ｐｏｌｙ［Ｇ］：ｐｏｌｙ［ＣｘＡ］；およびｐｏｌｙ［Ｇ］：ｐｏｌｙ［ＣｘＵ］からなる群から選択される高分子量ｄｓＲＮＡポリマーであり、ｘが３〜４０の整数である、前記〔８〕に記載の樹状細胞成熟カクテル。
〔１１〕樹状細胞成熟カクテルが、抗原の存在下で未成熟樹状細胞のインビトロ成熟のために使用される、前記〔８〕〜〔１０〕のいずれか１項に記載の樹状細胞成熟カクテル。
〔１２〕抗原が癌抗原または感染症抗原である、前記〔１１〕に記載の樹状細胞成熟カクテル。
〔１３〕未成熟樹状細胞を抗原に曝露するステップ；および前記〔１〕〜〔５〕のいずれか１項に記載の方法に従って、または前記〔８〕〜〔１０〕のいずれか１項に記載の樹状細胞成熟カクテルを用いて、樹状細胞を成熟させるステップを含む、インビトロで成熟抗原提示樹状細胞を産生する方法。
〔１４〕抗原が癌抗原または感染症抗原である、前記〔１３〕に記載の方法。
〔１５〕未成熟樹状細胞が抗原を捕捉および処理するように誘導するために十分な時間、未成熟樹状細胞が抗原に曝露される、前記〔１３〕または〔１４〕に記載の方法。
〔１６〕インビトロで未成熟樹状細胞を抗原に曝露するステップ；前記〔１〕〜〔５〕のいずれか１項に記載の方法に従って、または前記〔８〕〜〔１０〕のいずれか１項に記載の樹状細胞成熟カクテルを用いて、十分な数の樹状細胞が抗原提示成熟樹状細胞になるまで未成熟樹状細胞を成熟させるステップ；および抗原提示成熟樹状細胞を薬学的に許容される製剤に製剤化するステップを含む、対象における細胞性免疫応答を誘導するためのワクチンを製造する方法。
〔１７〕抗原が癌抗原または感染症抗原であり、細胞性免疫応答が癌または感染症に対するものである、前記〔１６〕に記載の方法。
〔１８〕前記〔１３〕から〔１５〕のいずれか１項に記載の方法に従って製造された、抗原提示成熟樹状細胞。
〔１９〕前記〔１３〕から〔１５〕のいずれか１項に記載の方法により産生された抗原提示成熟樹状細胞を含む、ワクチン。
〔２０〕適切な希釈剤、賦形剤またはアジュバントをさらに含む、前記〔１９〕に記載のワクチン。
〔２１〕免疫原的に有効な量のワクチンを対象に投与することを含む、対象における癌または感染症に対する免疫応答を誘導する方法で使用するための、前記〔１９〕または〔２０〕に記載のワクチン。
〔２２〕前記〔１９〕または〔２０〕に記載の免疫原的に有効な量のワクチンを対象に投与することを含む、対象における癌または感染症に対する免疫応答を誘導する方法。