【誤訳訂正書】
【提出日】令和3年4月23日(2021.4.23)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）肝細胞に取り込まれ、および胆汁に排泄される第１の活性医薬成分（ＡＰＩ）；および、
（ｉｉ）腎から排泄される第２のＡＰＩ；
を含み、
前記第１のＡＰＩおよび前記第２のＡＰＩのそれぞれが、キーランドまたはその誘導体および常磁性金属イオンを含む金属キレートであり、前記第１のＡＰＩ対前記第２のＡＰＩのモル比が１：１０から４：１であり、
前記第１のＡＰＩ対前記第２のＡＰＩのそれぞれが、哺乳類投与に適した形態で、生体適合性担体と共に医薬組成物として提供される、
医薬製剤であって、
前記第１のＡＰＩが、ガドキセテートであり、
前記第２のＡＰＩが、ガドジアミド、ガドルベセタミド、ガドペンテテート、ガドテリドール、ガドブトロール、ガドベネート、およびガドテレートを含む群から選択され、
前記第１のＡＰＩおよび第２のＡＰＩの併用用量が、０．１２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラム未満である、
医薬製剤。
【請求項２】
前記常磁性金属イオンが遷移金属またはランタニドである、請求項１に記載の医薬製剤。
【請求項３】
前記常磁性金属イオンが、Ｅｕ、Ｇｄ、Ｄｙ、Ｈｏ、Ｃｒ、ＭｎおよびＦｅを含む群から選択される、請求項２に記載の医薬製剤。
【請求項４】
前記常磁性金属イオンが、Ｇｄ、Ｍｎ、ＦｅおよびＣｒを含む群から選択される、請求項３に記載の医薬製剤。
【請求項５】
前記常磁性金属イオンが、Ｇｄ（ＩＩＩ）およびＭｎ（ＩＩ）を含む群から選択される、請求項４に記載の医薬製剤。
【請求項６】
前記常磁性金属イオンが、Ｇｄ（ＩＩＩ）である、請求項５に記載の医薬製剤。
【請求項７】
前記キーランドまたはその誘導体が、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）；４−カルボキシ−５，８，１１−トリス（カルボキシメチル）−１−フェニル−２−オキサ−５，８，１１−トリアザトリデカン−１３−オイック酸（ＢＯＰＴＡ）；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＤＯ３Ａ）；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）；エチレンジアミン四酢酸（ｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ）（ＥＤＴＡ）；１０−（２−ヒドロキシプロピル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＨＰ−ＤＯ３Ａ）；２−メチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＭＣＴＡ）；テトラメチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＭＡ）；３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）；Ｎ，Ｎ’−ビス（２−アミノエチル）−１，２−エタンジアミン（ＴＥＴＡ）；１，４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸（ＴＲＩＴＡ）；１，１２−ジカルボニル，１５−（４−イソチオシアナトベンジル）１，４，７，１０，１３−ペンタアザシクロヘキサデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’三酢酸（ＨＥＴＡ）；［（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ）−４，７−ビス−カルボキシメチル−２，５，８，１１−テトラメチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロ−ドデカン−１−イル］酢酸、（Ｍ４ＤＯ３Ａ）；１１−Ｏ−ホスホノメチル−１，４，７，１−Ｏ−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＭＰＤＯ３Ａ）；ヒドロキシベンジル−エチレンジアミン−二酢酸（ＨＢＥＤ）；およびＮ，Ｎ’−エチレンビス−［２−（ｏ−ヒドロキシフェニル）グリシン］（ＥＨＰＧ）；２−［［２−［ビス（カルボキシラトメチル）アミノ］−３−（４−エトキシフェニル）プロピル］−［２−［ビス（カルボキシラトメチル）アミノ］エチル］アミノ］アセテート（ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）；１０−［（１ＳＲ，２ＲＳ）−２，３−ジヒドロキシ−１−ヒドロキシメチルプロピル］−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＢＴ−ＤＯ３Ａ）；２−［ビス［２−［カルボキシラトメチル−［２−（メチルアミノ）−２−オキソエチル］アミノ］エチル］アミノ］アセテート（ＤＴＰＡ−ＢＭＡ）；および２−［ビス［２−［カルボキシラトメチル−［２−（２−メトキシエチルアミノ）−２−オキソエチル］アミノ］エチル］アミノ］アセテート（ＤＴＰＡ−ＢＭＥＡ）；Ｎ−［２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］−３−（４−エトキシフェニル）プロピル］−Ｎ−［２−［ビス（カルボキシメチル）−アミノ］エチル］−Ｌ−グリシン（ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）、Ｎ，Ｎ−ビス［２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］−エチル］−Ｌ−グルタミン酸（ＤＴＰＡ−Ｇｌｕ）、Ｎ，Ｎ−ビス［２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］−エチル］−Ｌ−リジン（ＤＴＰＡ−Ｌｙｓ）、Ｎ，Ｎ−ビス［２−［カルボキシメチル［（メチ���カルバモイル）メチル］アミノ］−エチル］グリシン（ＤＴＰＡ−ＢＭＡ）；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸モノ−（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル）エステル（ＤＯＴＡ−ＮＨＳ）；［（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ）−４，７，１０−トリス−カルボキシメチル−２，５，８，１１−テトラメチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル］酢酸（Ｍ４ＤＯＴＡ）；（Ｒ）−２−［（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ）−４，７，１０−トリス−（（Ｒ）−１−カルボキシエチル）−２，５，８，１１−テトラメチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル］プロピオン酸（Ｍ４ＤＯＴＭＡ）；ＰＣＴＡ１２；シクロ−ＰＣＴＡ１２；Ｎ，Ｎ’−ビス（２−アミノエチル）−１，２−エタンジアミン−Ｎ−ヒドロキシ−スクシンイミドエステル（ＴＥＴＡ−ＮＨＳ）を含む群から選択される、請求項１乃至６のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項８】
前記第１のＡＰＩおよび前記第２のＡＰＩのそれぞれが、哺乳類投与に適した形態で、生体適合性担体と共に医薬組成物として提供される、請求項１乃至７のいずれか１項に記載の医薬製剤。
【請求項９】
対象に投与される特定用量の医薬製剤であって、
前記医薬製剤が、請求項１乃至８のいずれか１項に記載の医薬製剤であり、
前記用量が、前記第１のＡＰＩおよび第２のＡＰＩの併用用量が０．１２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムを超えないことを条件として、０．０１〜０．０４ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０１〜０．１ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩである、特定用量の医薬製剤。
【請求項１０】
０．０２〜０．０３ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩを含む、請求項９に記載の特定用量の医薬製剤。
【請求項１１】
０．０２５〜０．１ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含み、前記第２のＡＰＩが、磁場強度１．５〜３Ｔにおいて３ｍＭ−１ｓ−１以上の緩和度を有する、請求項９または１０に記載の特定用量の医薬製剤。
【請求項１２】
０．０２〜０．０９ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含み、前記第２のＡＰＩが、磁場強度１．５〜３Ｔにおいて５ｍＭ−１ｓ−１以上の緩和度を有する、請求項９または１０に記載の特定用量の医薬製剤。
【請求項１３】
０．０２〜０．０７ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含み、前記第２のＡＰＩが、７ｍＭ−１ｓ−１以上の緩和度および磁場強度１．５〜３Ｔを有する、請求項９または１０に記載の特定用量の医薬製剤。
【請求項１４】
０．０１〜０．０６ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含み、前記第２のＡＰＩが、磁場強度１．５〜３Ｔにおいて９ｍＭ−１ｓ−１以上の緩和度を有する、請求項９または１０に記載の特定用量の医薬製剤。
【請求項１５】
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩを含む、請求項９乃至１４のいずれか１項に記載の特定用量の医薬製剤。
【請求項１６】
０．１ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含む、請求項９乃至１５のいずれか１項に記載の特定用量の医薬製剤。
【請求項１７】
０．０５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含む、請求項９乃至１５のいずれか１項に記載の特定用量の医薬製剤。
【請求項１８】
前記対象が、生存しているヒトまたは非ヒト動物の身体である、請求項９乃至１７に記載の特定用量の医薬製剤。
【請求項１９】
方法に使用するための薬剤の製造における、請求項１乃至１８のいずれか１項に記載の医薬製剤の使用であって、前記方法が、
（ａ）請求項９乃至１８のいずれか１項に記載の特定用量の医薬製剤を対象に投与するステップと、
（ｂ）前記投与ステップに続いて、前記対象に対して磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）を実施して、磁気共鳴（ＭＲ）信号を前記組成物が分布している前記対象または前記対象の部分から検出するステップと、
（ｃ）検出されたＭＲ信号からＭＲ画像および／またはＭＲスペクトルを生成するステップと、
を含む、使用。
【請求項２０】
前記対象が、生存しているヒトまたは非ヒト動物の身体である、請求項１９に記載の使用。
【請求項２１】
前記医薬製剤が、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）においてコントラストを増強するのに適した量で投与される、請求項１９または２０に記載の使用。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【発明の詳細な説明】
【発明の名称】ＭＲＩ造影剤の併用を含む製剤
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体内画像化、特に磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）に関する。本発明によって、ＭＲＩ手順における使用に適した医薬製剤であり、他の公知のこのような製剤を上回る利点を提供する医薬製剤が提供される。本発明の医薬製剤の特定の用量、ならびに、生体内画像化の方法における前記用量の使用もまた想定される。
【背景技術】
【０００２】
ガドキセテート（Ｇａｄｏｘｅｔａｔｅ）（Ｇｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡ、欧州のプリモビスト（Ｐｒｉｍｏｖｉｓｔ）、米国のエオビスト（Ｅｏｖｉｓｔ））は、肝臓特異的な磁気共鳴画像法造影剤であり、正常肝臓で最大５０％の肝胆汁排泄を有する。静脈注射後、動脈、門脈および肝胆道相の間、ガドキセテートは血管および血管外の空間に、そして徐々に肝細胞および胆管に分配される。ガドキセテートは、動脈および門脈相の間に非特異的なガドリニウムキレートと同様に挙動し、肝胆道相の間に実体情報を追加し、限局性肝病変およびびまん性肝疾患の検出および特徴付けを改善する（Ｂｅｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ  ２０１２  Ｊ  Ｈｅｐａｔｏｌ；５７（２）：４２１−４２９）。
【０００３】
しかし、ガドキセテートは、非特異的ガドリニウムキレートと比較して、全体的に乏しい動的血管相（動脈相「ＡＰ」、門脈相「ＰＶＰ」および後期静脈相「ＬＶＰ」を含む）に悩まされることはよく認識されている（Ｆｒｙｄｒｙｃｈｏｗｉｃｚ  ｅｔ  ａｌ  ２０１２  ＪＭＲＩ；３５（３）：４９２−５１１）。このことに対して考えられる改善措置としては、より高い用量のガドキセテートの使用、ガドキセテート注入速度の低下、または動的血管相をよりよく造影することが公知の汎用（非特異的）薬剤の追加注入が挙げられる。
【０００４】
Ｚｅｃｈら（２００９  Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔ  Ｒａｄｉｏｌ；４４（６）：３０５−３１０）は、遅い注入速度（または「ボーラスストレッチ」）を評価し、標準的な臨床用量のガドキセテートで良好なボーラス形状を実証した。このボーラスストレッチは、単回用量のガドキセテートでより少量のガドリニウムを補償し、動的血管相の初期部分でＡＰの潜在的改善をもたらす。しかし、補償効果は、静脈血管（すなわち、ＰＶＰおよびＬＶＰ）および肝実質の細胞外造影効果に拡張されない。代わりに、二倍用量のガドキセテートまたは単回投与の汎用細胞外Ｇｄ系造影剤（Ｇｄ−ＤＴＰＡ）のいずれかと比較して、ガドリニウムの量が低いほど、これらの構造における有意に低い信号増加に関連する。Ｚｅｃｈらは、ＰＶＰおよびＬＶＰの造影効果は注入速度によって有意に影響されなかったが、二倍用量のガドキセテートで改善したことを実証した。この後者のアプローチは、二倍用量のガドリニウムを意味し、欠点がないわけではない。
【０００５】
バイエルによって提案されたアプローチ（臨床試験ＮＣＴ０２１５６７３９）では、０．０２５ｍｍｏｌ／ｋｇのガドキセテートの投与の２０分後に、０．１ｍｍｏｌ／ｋｇの汎用薬ガドペンテト酸ジメグルミンを患者に投与した。ガドキセテートの投与の２０分後に細胞外薬剤を追加注入することにより、肝臓脈管構造の信号強度が、ガドキセテートにより造影された肝臓に匹敵するレベルになり、それによって肝臓が（鮮明な健康な肝細胞および鮮明な血管により）無地の白色に表される。このアプローチは、病変の特徴付けを改善するために均一に造影された臓器を生成することを目的としているが、ガドキセテートの比較的乏しい動的血管相を改善するものは何もない。
【０００６】
ガドキセテートの乏しい動的相画像化に関連する問題を克服するための改善された方法が必要である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】国際公開第２００９１０３７４４号
【発明の概要】
【０００８】
第１の態様において、本発明は、
（ｉ）肝細胞への取り込みおよび胆汁排泄を有する第１の活性医薬成分（ＡＰＩ）；および、
（ｉｉ）腎排泄を有する第２のＡＰＩ；
を含む医薬製剤を提供する；
前記第１のＡＰＩおよび前記第２のＡＰＩのそれぞれは、キーランド（ｃｈｅｌａｎｄ）および常磁性金属イオンを含む金属キレートであり、前記第１のＡＰＩ対前記第２のＡＰＩの比は１：１０から４：１である。
【０００９】
本発明はまた、第２の態様において、対象に投与される本明細書において定義される医薬製剤の用量であって、前記第１のＡＰＩおよび第２のＡＰＩの併用用量が０．１２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムを超えないことを条件として、０．０１〜０．０４ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩおよび０．０１〜０．１ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含む用量を提供する。
【００１０】
第３の態様において、本発明は、
（ａ）本明細書に定義される用量の医薬組成物を対象に投与するステップ；
（ｂ）前記投与ステップに続いて、前記対象に対して磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）を実施して、磁気共鳴（ＭＲ）信号を組成物が分布している対象または対象の部分から検出するステップ、
（ｃ）検出されたＭＲ信号からＭＲ画像および／またはＭＲスペクトルを生成するステップ、
を含む方法を提供する。
【００１１】
ＭＲＩ造影剤のボーラス注入後の動的血管相は、正常な血管構造の正確な視覚化および診断および治療計画のための病理学的プロセスとのそれらの関係の評価にとって非常に重要であることが知られている。本発明は、全ての血管相にわたって、特に後期ＰＶＰおよびＬＶＰならびに肝臓特異的薬剤に対して比較的遅い後血管相において持続性血管造影効果の改善を実証している。追加の血管信号は、肝病変の特徴付けに有用であり、従来の病変遅延造影効果プロファイルに加えて、病変造影効果のウォッシュインおよびウォッシュアウトのパターンなどの血管バイオマーカープロファイリングを容易にすることができる。
【００１２】
本発明の医薬製剤は、（異なる相において血管病変を検出する代理マーカーとして作用し得る）持続性血管造影効果を提供することが実証されている。改善された相対的血管強度の性能は、公知のプロトコルと比較して、患者へのガドリニウム負荷が同様または低減した肝臓病変の血管造影効果および遅延造影効果の両方の同時評価を容易にする。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】図１は、本発明の第１のＡＰＩ（下）および第２のＡＰＩ（上）を使用したＭＲＩ手順で得られた画像の例を示す。
【図２】図２は、いくつかの市販のＭＲＩ剤の緩和度値を示す。
【図３】図３は、以下の実施例に記載の各試験品目の大動脈、下大静脈（ＩＶＣ）、門脈（ＰＶ）および肝実質のピーク信号強度曲線（Ａ〜Ｅ）ならびにピーク動脈造影効果（Ｆ）を示す。
【図４】図４は、以下の実施例に記載のように得られた、各試験品目の大動脈、下大静脈（ＩＶＣ）および門脈（ＰＶ）の相対血管強度（ＲＶＩ）曲線（Ａ〜Ｅ）ならびに総ＡＵＣ  ＲＶＩ（Ｆ）を示す。
【図５】図５は、以下の実施例において評価した各試験品目の、３０秒における動脈相（ＡＰ）、後期静脈相（ＬＰＶ）、６０秒における門脈相（ＰＶＰ）ならびに１２０秒における後期（ＰＶ）の相対血管強度のパーセンテージ（１−ＲＶＩ％）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
特許請求される本発明の主題をさらに明白かつ簡潔に記載し示すために、本明細書および特許請求の範囲を通して使用される特定の用語には、以下の定義が与えられる。本明細書における特定の用語の例示は、非限定的な例として考慮されるべきである。
【００１５】
用語「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」は、本出願を通じてその慣習的な意味を有し、薬剤または組成物が列挙された本質的な特徴または構成要素を有さなければならないが、他の特徴または構成要素がさらに存在してもよいことを意味する。用語「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、好ましいサブセットとして、他の特徴または構成要素が存在せずに列挙された構成要素を組成物が有することを意味する「実質的に〜からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ  ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ  ｏｆ）」を含む。
【００１６】
第１の実施形態において、本発明は、医薬製剤を提供する。用語「医薬製剤」は、本明細書において定義される第１のＡＰＩおよび第２のＡＰＩを含み、これらの同時投与を可能にする医薬として許容される任意の製剤を意味すると解釈される。
【００１７】
用語「活性医薬成分」は、生物学的に活性な医薬製剤中の成分を意味すると理解され得る。本発明の文脈において、用語「生物学的に活性な」は、治療剤としてではなく生体内画像化の目的を意味すると理解されるべきである。
【００１８】
投与後、本発明の第１のＡＰＩおよび第２のＡＰＩの両方は、典型的には「動的血管相」と称される（「細胞外相」とも呼ぶことができる）の間に、血管内および間質液区画内で迅速に平衡化する。動的血管相は、動脈相（ＡＰ）、門脈相（ＰＶＰ）および後期静脈相（ＬＶＰ）を順次含むと理解することができる。本発明の第１のＡＰＩの場合、「肝細胞への取り込みおよび胆汁排泄」も実証しており、すなわち、動的血管相の後、ＡＰＩは肝細胞によって取り込まれ、肝胆道系を介して除去される。一実施形態において、この肝細胞への取り込みおよび胆汁排泄は、前記第１のＡＰＩのクリアランスのかなりの割合を占める。一実施形態において、前記第１のＡＰＩの肝胆道クリアランスの割合は、＞１０％であり、別の実施形態において＞２０％、さらなる実施形態において＞３０％、さらに別の実施形態において＞４０％である。一実施形態において、前記第１のＡＰＩの肝胆道クリアランスの割合は、１０〜５０％の間であり、別の実施形態において２０〜５０％の間、さらなる実施形態において３０〜５０％の間、さらに別の実施形態において４０〜５０％の間である。第１のＡＰＩは、第２のＡＰＩと比較して相対的に乏しい動的血管相を有し、特に、「持続性血管造影効果」と呼ばれるもの、すなわちＰＶＰおよびＬＶＰへ続く造影効果を示さない。いくつかの実施形態において、第１のＡＰＩは、「造影効果欠損」として公知の、ＰＶＰおよびＬＶＰにおける造影効果の完全またはほぼ完全な欠如を有し得る。他方、第２のＡＰＩは、このレベルの肝細胞への取り込みおよび胆汁排泄は有さず、むしろ動的血管相の後で腎臓を介して主に排泄される、すなわち「腎排泄」を有する。一実施形態において、前記第２のＡＰＩのこの腎排泄は、特化した腎排泄とみなすことができ、すなわち、前記第２のＡＰＩの肝胆道クリアランスの割合は無視できる程度であるとみなすことができる。一実施形態において、肝胆道クリアランスによって除去される前記第２のＡＰＩの割合は、１０％以下である。一実施形態において、肝胆道クリアランスによって除去される前記第２のＡＰＩの割合は、５％以下である。
【００１９】
本発明の文脈における用語「金属キレート」は、常磁性金属イオンが、キーランドに含まれる分子またはアニオンの周囲の配列に結合される配位錯体を意味すると解釈される。「キーランド」は、２つ以上のドナー原子を介して常磁性金属イオンと配位結合を形成することができる有機化合物として本明細書において定義される。本発明に適した典型的なキーランドは、２〜６、好ましくは２〜４の金属ドナー原子が、（金属ドナー原子を連結する炭素原子または非配位性ヘテロ原子のいずれかの非配位性骨格を有することにより）５または６員環が得られるように配置されている。キレート化剤の一部として常磁性金属イオンに良好に結合するドナー原子タイプの例は、アミン、チオール、アミド、オキシム、およびホスフィンである。本発明の金属キレートが「トランスキレーションに対して耐性」である、すなわち金属配位部位に対する他の潜在的に競合する配位子と配位子交換を容易に受けないことが非常に好ましい。潜在的に競合する配位子には、金属キレート自体と製剤中の他の賦形剤、またはインビボの内在性化合物が含まれる。
【００２０】
「常磁性金属イオン」は、分子磁気双極子モーメントとして挙動する不対電子を有する。常磁性金属イオンの局所磁場は、常磁性イオンと水素との間の双極子相互作用に起因して周囲水素核のＴ１およびＴ２緩和時間を減少させる。
【００２１】
「前記第１のＡＰＩ対前記第２のＡＰＩの比」とは、前記医薬製剤中に存在する前記第１のＡＰＩ対前記第２のＡＰＩのそれぞれの相対量を意味する。一実施形態において、前記第１のＡＰＩ対前記第２のＡＰＩのそれぞれの量は、モル量として定義される。
【００２２】
ＭＲＩでの使用に適した常磁性金属イオンは、例えばＳｃｈｏｕｍａｎ−ＣｌａｅｙｓおよびＦｒｉｊａによる「ＭＲＩ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｂｏｄｙ」（２０１２  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ  Ｂｅｒｌｉｎ  Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ；Ｄａｎｉｅｌ  Ｖａｎｅｌ  ＆  Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｔ．  ＭｃＮａｍａｒａ，  Ｅｄｓ．）の「Ｃｏｎｔｒａｓｔ  ｍｅｄｉａ」の章の教示により当業者に周知である。本発明の一実施形態において、前記常磁性金属イオンは、遷移金属またはランタニドである。本発明の別の実施形態において、前記常磁性金属イオンは、Ｅｕ、Ｇｄ、Ｄｙ、Ｈｏ、Ｃｒ、ＭｎおよびＦｅを含む群から選択される。本発明のさらなる実施形態において、前記常磁性金属イオンは、Ｇｄ、Ｍｎ、ＦｅおよびＣｒを含む群から選択される。本発明のなおさらなる実施形態において、前記常磁性金属イオンは、Ｇｄ（ＩＩＩ）およびＭｎ（ＩＩ）を含む群から選択される。本発明のなおさらなる実施形態において、前記常磁性金属イオンはＧｄ（ＩＩＩ）である。
【００２３】
ＭＲＩにおける使用のために、常磁性金属イオンは、これらの金属イオンの遊離形態における任意の毒性作用を回避するために、金属キレートとして投与される。安定に錯体化された常磁性金属イオンと同様に、キーランドの形状は、金属イオンの常磁性効果が維持されるようなものでなければならない。一実施形態において、キーランドは、高度に安定な金属キレート錯体を生成できる任意の配位子、例えば少なくとも１０１２の熱力学的安定度定数を有するものである。さまざまな実施形態において、キーランドは直鎖状、環状または分枝状のキレート化剤、例えば、直鎖モノ−、またはポリキレート剤、大環状キレート剤または分枝状ポリキレート剤（例えば、樹枝状ポリキレート剤）であってよい。１つの実施形態において、キーランドはポリアミノポリオキシ酸（例えば、ポリアミノポリカルボン酸）である。適切なキーランドの例は当技術分野において記載されており、例えば、Ｎｙｃｏｍｅｄ（Ｎｙｃｏｍｅｄ  ＩｍａｇｉｎｇおよびＮｙｃｏｍｅｄ  Ｓａｌｕｔａｒを含む）、Ｓｔｅｒｌｉｎｇ  Ｗｉｎｔｈｒｏｐ、Ｓｃｈｅｒｉｎｇ、Ｂｒａｃｃｏ、Ｓｑｕｉｂｂ、Ｍａｌｌｉｎｃｋｒｏｄｔ、Ｇｕｅｒｂｅｔ  ａｎｄ  Ｍｅｔａｓｙｎの特許公報、例えば米国特許第４６４７４４７号、欧州特許出願第００７１５６４号、国際公開第１９９６００３１５４号、国際公開第１９９６００１６５５号、欧州特許出願公開第０４３０８６３号、国際公開第１９９６０４１８３０号、国際開第１９９３０１０８２４号、国際公開第１９８９０００５５７号、欧州特許出願公開第０２９２６８９号、欧州特許出願公開第０２３２７５１号、欧州特許出願公開第０２３０８９３号、欧州特許出願公開第０２５５４７１号、欧州特許出願公開第０２７７０８８号、欧州特許出願公開０２８７４６５号に教示されているランタノイドキレート化のために提案されたモノおよびポリキレート剤の１つである。米国特許第５３３４３７１号は、Ｍｎ（ＩＩ）イオンを含有する大環状ポリアザビシクロ化合物を開示している。国際公開第２０１１０７３３７１号（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ  ＡＳ）は、動力学的に安定であり、最適な水交換動力学を示す、Ｍｎ（ＩＩ）のキレート化のために最適化されたキーランドを開示している。国際公開第２０１１１２１００２号および米国特許出願第２０１４００８６８４６号（Ｇｅｎｅｒａｌ  Ｅｌｅｃｔｒｉｃ  Ｃｏｍｐａｎｙ）は、遷移金属、特に鉄のキレート化のために最適化されたキーランド構造を教示している。ＤＴＰＡ−ビスアルキルアミドおよびその調製方法は、米国特許第４６８７６５９号に開示されており、ＤＴＰＡ−ビス（ヒドロキシアルキル−アミド）およびその調製方法は、米国特許第４８２６６７３号および欧州特許出願公開第１３０９３４号に開示されている。国際公開第２００９１０３７４４号、国際公開第２０１６０８３５９７号、国際公開第２０１６０８３６０５号および国際公開第２０１６０８３６００号は全て、ＤＯＴＡキーランドおよびガドリニウム（Ｇｄ３＋）からなるガドリニウム系のＭＲＩ造影剤を得る方法を記載している。本発明の医薬製剤の一実施形態において、前記キーランドは、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）；４−カルボキシ−５，８，１１−トリス（カルボキシメチル）−１−フェニル−２−オキサ−５，８，１１−トリアザトリデカン−１３−オイック酸（ＢＯＰＴＡ）；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＤＯ３Ａ）；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）；エチレンジアミン四酢酸（ｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ）（ＥＤＴＡ）；１０−（２−ヒドロキシプロピル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＨＰ−ＤＯ３Ａ）；２−メチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＭＣＴＡ）；テトラメチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＭＡ）；３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）；Ｎ，Ｎ’−ビス（２−アミノエチル）−１，２−エタンジアミン（ＴＥＴＡ）；１，４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸（ＴＲＩＴＡ）；１，１２−ジカルボニル，１５−（４−イソチオシアナトベンジル）１，４，７，１０，１３−ペンタアザシクロヘキサデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’三酢酸（ＨＥＴＡ）；［（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ）−４，７−ビス−カルボキシメチル−２，５，８，１１−テトラメチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロ−ドデカン−１−イル］酢酸、（Ｍ４ＤＯ３Ａ）；１−Ｏ−ホスホノメチル−１，４，７，１−Ｏ−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＭＰＤＯ３Ａ）；ヒドロキシベンジル−エチレンジアミン−二酢酸（ＨＢＥＤ）；Ｎ，Ｎ’−エチレンビス−［２−（ｏ−ヒドロキシフェニル）グリシン］（ＥＨＰＧ）；１０−［（１ＳＲ，２ＲＳ）−２，３−ジヒドロキシ−１−ヒドロキシメチルプロピル］−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＢＴ−ＤＯ３Ａ）；および２−［ビス［２−［カルボキシラトメチル−［２−（２−メトキシエチルアミノ）−２−オキソエチル］アミノ］エチル］アミノ］アセテート（ＤＴＰＡ−ＢＭＥＡ）を含む群から選択される。
【００２４】
キーランドの「誘導体」は、本発明の文脈において、キーランドのキレート特性を妨害しないさらなる化学基を含むキーランドとして理解されるべきである。このような化学基は、金属キレートを生物学的標的化部分で官能化するために、または金属キレートの薬物動態特性を調節するために含まれることがある。キーランド誘導体の非限定的な例としては、ＤＴＰＡ誘導体、Ｎ−［２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］−３−（４−エトキシフェニル）プロピル］−Ｎ−［２−［ビス（カルボキシメチル）−アミノ］エチル］−Ｌ−グリシン（ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）、Ｎ，Ｎ−ビス［２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］−エチル］−Ｌ−グルタミン酸（ＤＴＰＡ−Ｇｌｕ）、Ｎ，Ｎ−ビス［２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］−エチル］−Ｌ−リジン（ＤＴＰＡ−Ｌｙｓ）、Ｎ，Ｎ−ビス［２−［カルボキシメチル［（メチルカルバモイル）メチル］アミノ］−エチル］グリシン（ＤＴＰＡ−ＢＭＡ）；ＤＯＴＡ誘導体、例えば１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸モノ−（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル）エステル（ＤＯＴＡ−ＮＨＳ）および［（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ）−４，７，１０−トリス−カルボキシメチル−２，５，８，１１−テトラメチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル］酢酸（Ｍ４ＤＯＴＡ）；ＤＯＴＭＡ誘導体、例えば、（Ｒ）−２−［（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ）−４，７，１０−トリス−（（Ｒ）−１−カルボキシエチル）−２，５，８，１１−テトラメチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル］プロピオン酸（Ｍ４ＤＯＴＭＡ）；ＰＣＴＡ誘導体、例えば、ＰＣＴＡ１２およびシクロ−ＰＣＴＡ１２；ならびにＴＥＴＡ誘導体、例えば、Ｎ，Ｎ’−ビス（２−アミノエチル）−１，２−エタンジアミン−Ｎ−ヒドロキシ−スクシンイミドエステル（ＴＥＴＡ−ＮＨＳ）が挙げられる。
【００２５】
本発明の医薬製剤のさらなる実施形態において、前記キーランドは、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡまたはこれらの誘導体から選択される。本発明の医薬製剤のなおさらなる実施形態において、前記キーランドまたはこの誘導体は、ＥＯＢ−ＤＴＰＡ、ＤＴＰＡ−ＢＭＡ、ＤＴＰＡ−ＢＭＥＡ、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＢＯＰＴＡ、ＨＰ−ＤＯ３ＡおよびＢＴ−ＤＯ３Ａから選択される。
【００２６】
第１のＡＰＩおよび第２のＡＰＩのそれぞれは、当業者に周知の方法によって、適切なキーランドと適切な常磁性金属とを一緒に反応させることによって調製することができる。この反応は、典型的には水溶液中、例えば、場合により混和性の共溶媒を含有する蒸留水中で、高温（例えば、７０〜９５℃、好ましくは８０〜９０℃において実施される。反応中、ｐＨは一般に３〜６であり、酸または塩基、例えば、塩酸および水酸化ナトリウムのような、医薬として許容される中和生成物を生成する酸または塩基の添加によって制御することができる。反応の進行は、未反応キーランドまたは常磁性金属イオンの残留量を決定し、例えば、安定した低濃度のキーランドおよびごくわずかな遊離の常磁性金属イオンが検出され、必要に応じて追加分を加えて反応が完了したとみなされるまで、一般に監視される。典型的にはその後、反応混合物は、例えば、２５℃以下に冷却される。次いで必要に応じて、反応混合物のｐＨは、例えば、水酸化ナトリウムを使用して例えば約６に調整される。次いで、溶液は濾過され、金属キレートが当業者に周知の方法、例えば、結晶化クロマトグラフィーによって単離され、その後、生体適合性担体および本明細書において定義される１または複数の賦形剤と混合される。本発明の医薬製剤の一実施形態において、前記第１のＡＰＩ対前記第２のＡＰＩの比は、１：５〜３：２である。別の実施形態において、前記比は１：４〜１：１である。さらなる実施形態において、前記比は１：１である。さらなる実施形態において、前記比は１：２である。さらなる実施形態において、前記比は１：３である。さらなる実施形態において、前記比は１：４である。
【００２７】
本発明の併用ＡＰＩ用量は、単一のＡＰＩ用量の推奨を超えてはならない。特定の実施形態において、総累積用量は、０．１２５ｍｍｏｌ／ｋｇ以下である。
【００２８】
化学構造を、特定の公知のＡＰＩおよび製剤化されている市販のＭＲＩ医薬製剤について下の表に提供する（対イオンが存在する場合、化学構造から省かれることに留意されたい）：
【００２９】
【表１】
2019500333.tif 000001
2019500333.tif 000002
本発明の医薬製剤の一実施形態において、前記第１のＡＰＩはガドキセテート（ｇａｄｏｘｅｔａｔｅ）である。
【００３０】
本発明の医薬製剤の一実施形態において、前記第２のＡＰＩは、ガドジアミド、ガドルベセタミド、ガドペンテテート（ｇａｄｏｐｅｎｔｅｔａｔｅ）、ガドテリドール、ガドブトロール、ガドベネート、ガドホスベセットおよびガドテレートを含む群から選択される。別の実施形態において、前記第２のＡＰＩは、ガドテリドール、ガドブトロールおよびガドテレートを含むリストから選択される。さらなる実施形態において、前記第２のＡＰＩは、ガドブトロールおよびガドテレートから選択される。
【００３１】
ガドキセテートは、正常肝臓で最大５０％の肝胆汁排泄を有する。静脈注射後、動的血管相の間、ガドキセテートは血管および血管外の空間に分配され、肝胆道相の間、徐々に肝細胞および胆管に分配される。ガドキセテートは肝胆道相の間に実体情報を追加し、限局性肝病変およびびまん性肝疾患の検出および特徴付けを改善する（Ｂｅｅｒｓ  ２０１２  Ｊ
Ｈｅｐａｔｏｌ；５７（２）：４２１−４２９）。
【００３２】
図１は、第１のＡＰＩ（下＝ガドキセテート）および第２のＡＰＩ（上＝ガドテレート）の非限定的な例を使用して、経時的に得られたヒト肝臓のＭＲ画像を示す。
【００３３】
「プレ」画像（「プレコントラスト画像」と呼ばれることもある）は、画像にいずれかのＡＰＩが到着する前に取得される。「動的」画像（「動的造影ＭＲＩ」と呼ばれることもある）は、いずれかのＡＰＩが画像に到着した直後に取得される。「遅延」画像（「遅延造影ＭＲＩ」と呼ばれることもある）は、いずれかのＡＰＩが画像に到達した後の時点で取得される。動的血管相の３つの異なる段階について：ＡＰでは、ＡＰＩは主に肝動脈を介して送達されている；ＰＶＰでは、肝臓内のＡＰＩが下大静脈および門脈を介しても送達されている；ＬＶＰでは第２のＡＰＩが主に細胞外に分布している。「ＨＢＰ」（肝胆道相）画像は、第１のＡＰＩが肝細胞に蓄積するのに十分な時間を有し、良好なコントラスト・ノイズ比で取得可能な時点で取得される。
【００３４】
本発明の医薬製剤の一実施形態において、前記第１のＡＰＩおよび前記第２のＡＰＩは、別々に提供されるが、同時投与を可能にするように構成される。例えば、２種のＡＰＩは、個別の速度および投与制御で２つの注射器を同時に注入できる装置（インジェクタ）に配置された別々の注射器内に提供されてもよいことが想定される。したがって、２種のＡＰＩは、患者に入る前に、個々の注射器を離れると混合される。代替の実施形態において、２種のＡＰＩは、注入時点まで分離されるように２連の注射器に配置することができる。さらなる実施形態において、２種のＡＰＩは、注入時に穿孔され、注入時に混合可能にする膜によって分離された１つの注射器に提供されてもよい。
【００３５】
本発明の医薬製剤の一実施形態において、前記第１のＡＰＩおよび前記第２のＡＰＩの各々が、生体適合性担体と共に医薬組成物として提供される。
【００３６】
「生体適合性担体」は、得られる組成物が生理学的に忍容性であるように、すなわち、毒性または過度の不快感なく哺乳動物の身体に投与できるように、第１のＡＰＩまたは第２のＡＰＩ（または両方のＡＰＩが一緒に）懸濁または溶解される流体、特に液体である（用語「哺乳動物投与に適した」の定義であると理解することができる）。
【００３７】
別の実施形態において、本発明の医薬製剤は、前記第１のＡＰＩおよび前記第２のＡＰＩが生体適合性担体と共に製剤化された医薬組成物として提供される。この実施形態の場合、２種のＡＰＩは、本明細書で定義される第１のＡＰＩおよび第２のＡＰＩの最適な割合を含む新しい製剤として予混合され、分配されてもよい。
【００３８】
一実施形態において、本発明の医薬組成物は、１または複数の医薬として許容される賦形剤を含み得る。適切な医薬として許容される賦形剤の非限定的な例としては、緩衝剤、安定剤、抗酸化剤、浸透圧調節剤、緩衝液、ｐＨ調節剤、過剰キーランド、カルシウムキレートのような生理学的忍容性イオンの弱い錯体、塩化カルシウム、アスコルビン酸カルシウム、グルコン酸カルシウムまたは乳酸カルシウムなどのカルシウムまたはナトリウム塩が挙げられる。これらおよび他の適切な賦形剤は、当業者に周知であり、さらに、例えば、国際公開第１９９０００３８０４号、欧州特許出願公開第０４６３６４４号、欧州特許出願公開第０２５８６１６号および米国特許第５８７６６９５号に記載されている。一実施形態における本発明の医薬組成物は、非経口投与、例えば注射に適した形態である。したがって、本発明のＡＰＩは、生理学的に許容される担体媒体、例えば注射用水中の溶液、懸濁液および分散液などの従来の医薬投与形態であってもよい。したがって、本発明による医薬組成物は、生理学的に許容される賦形剤を使用して投与するために、当業者の技術範囲内の方法で製剤化することができる。例えば、場合により医薬として許容される賦形剤を添加したＡＰＩを、水性媒体中に別々にまたは一緒に懸濁または溶解し、次いで得られた溶液または懸濁液を滅菌してもよい。医薬として許容される賦形剤の非限定的な例としては、例えば、生理学的に生体適合性の緩衝液（例えば、塩酸トロメタミン）、他のキーランド（例えば、ジエチレントリアミン五酢酸）または場合によりカルシウムまたはナトリウム塩（例えば、塩化カルシウム、アスコルビン酸カルシウム、グルコン酸カルシウムまたは乳酸カルシウム）のわずかな添加が挙げられる。ＭＲＩ手順の場合、典型的な投与様式は非経口、例えば静脈内の投与である。非経口的に投与可能な形態、例えば静脈注射用溶液は、滅菌され、生理学的に許容されない薬剤を含んではならず、投与時の刺激または他の有害な影響を最小限に抑えるために浸透圧が低くなければならず、したがって、この医薬組成物は等張性またはわずかに高張性でなければならない。適切なビヒクルには、非経口投与溶液の投与に習慣的に使用される水性ビヒクル、例えば、塩化ナトリウム注射液、リンゲル注射液、デキストロース注射液、デキストロースおよび塩化ナトリウム注射液、乳酸加リンゲル液、ならびにＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２２ｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００６  Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ）およびＴｈｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ（ｈｔｔｐｓ：／／ｂｏｏｋｓ．ｇｏｏｇｌｅ．ｃｏｍ／ｂｏｏｋｓ？ｉｄ＝Ｏ３ｑｉｘＰＥＭｗｓｓＣ＆ｑ＝ＴＨＥ＋ＮＡＴＩＯＮＡＬ＋ＦＯＲＭＵＬＡＲＹ＆ｄｑ＝ＴＨＥ＋ＮＡＴＩＯＮＡＬ＋ＦＯＲＭＵＬＡＲＹ＆ｈｌ＝ｅｎ＆ｓａ＝Ｘ＆ｖｅｄ＝０ＣＣ８Ｑ６ＡＥｗＡＧｏＶＣｈＭＩｍｆＰＨｒｄＴｑｙＡＩＶＪｆＮｙＣｈ１ＲＪｗ＿Ｅ）に記載の他の溶液などが挙げられる。医薬組成物はまた、非経口溶液中で慣用的に使用される保存剤、抗菌剤、緩衝液および抗酸化剤、ならびにキーランドおよび関連金属キレートに適合し、最���製品の製造、貯蔵または使用を妨害しない他の賦形剤を含有することもできる。
【００３９】
一実施形態において、第１のＡＰＩおよび第２のＡＰＩの各々は電荷平衡化対イオンを含み、これは有機カチオンであっても、または無機カチオンであってもよい。したがって、一実施形態において、電荷平衡化対イオンは無機カチオンである。無機カチオンの非限定的な例としては、アルカリ金属カチオン、アルカリ土類金属カチオン、遷移金属カチオン、および無機アンモニウムカチオン（ＮＨ４＋）が挙げられる。別の実施形態において、電荷平衡化対イオンは、有機カチオン、例えば有機アンモニウムカチオン、有機ホスホニウムカチオン、有機スルホニウムカチオン、またはそれらの混合物である。一実施形態において、電荷平衡化対イオンは２−（Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウム）−２−デオキシグルコースのようなアミノ糖のアンモニウム塩である。一実施形態において、電荷平衡化対イオンはＮ−メチルグルカミンのプロトン化形態である。
【００４０】
医薬組成物の調製方法は当技術分野において周知である。生体適合性担体と共に第１のＡＰＩおよび第２のＡＰＩを含む医薬組成物を調製するために、金属キレートを別々に調製し、次に所望の比で混合することができる。非経口的に、すなわち注射によって投与される医薬組成物に関しては、その調製は、有機溶媒の除去、生体適合性緩衝液ならびに賦形剤または緩衝液などの任意のさらなる成分の添加を含むステップをさらに含む。非経口投与のためには、医薬組成物が無菌であり、非発熱性であることを確実にするための工程も必要とされる。
【００４１】
第１のＡＰＩおよび第２のＡＰＩが同じ医薬組成物中に存在する一実施形態において、沈殿およびトランスメタル化のリスクを低減するように特別に製剤化される。一実施形態において、緩衝液の選択により、ＡＰＩの塩形態の沈殿の危険性を排除するように作用し得る。一実施形態において、過剰なキーランドの添加は、組成物を安定化させ、トランスメタル化を回避するように作用し得る。本発明の医薬製剤の一実施形態において、ガドキセテート（ｇａｄｏｘｅｔａｔｅ）およびガドテル酸メグルミンは、過剰のＥＯＢ−ＤＴＰＡの遊離酸と共に製剤化され、メグルミンは単独の緩衝剤である。ガドキセテート（ｇａｄｏｘｅｔａｔｅ）およびガドテル酸メグルミンの相対的な組成は画像化効果から決定することができる。別の実施形態において、ガドキセテート（ｇａｄｏｘｅｔａｔｅ）およびガドテル酸メグルミンを含むこの医薬製剤は、カルシウムおよびナトリウムイオンの代わりにメグルミンを含み、ガドテル酸のナトリウム塩の沈殿の危険性を排除する。この実施形態は、ガドキセテート（ｇａｄｏｘｅｔａｔｅ）製剤で一般的に使用される緩衝剤、トロメタモールが含まれていないので、製剤が簡略化される点でさらに有利である。この実施形態の化学組成を以下に示す。
【００４２】
【化１】
2019500333.tif 000003
上記の製剤は、以下のスキームに示すように、市販のガドテル酸メグルミンの液体バルクとＧｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡ−ビス−メグルミン塩／溶液とを混合することによって得ることができた。
【００４３】
【化２】
2019500333.tif 000004
別の実施形態において、錯体化反応において市販のＤＯＴＡおよびキーランドＥＯＢ−ＤＴＰＡを利用し、酸化ガドリニウムをＤＯＴＡ／ＥＯＢ−ＤＴＰＡリガンド混合物に添加し、過剰遊離リガンド（ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）の割合を、（例えば、欧州特許第２２４２５１５号に記載されているように）メグルミンによるｐＨ調整の前の測定および調整ステップによって設定するプロセスを使用することができる。
【００４４】
【化３】
2019500333.tif 000005
Ｇｄキレート製剤中の過剰なキーランドの量と動物モデルで沈着したＧｄの量との間には相関があることが公知である（Ｓｉｅｂｅｒ  ２００８  Ｊ  Ｍａｇ  Ｒｅｓ  Ｉｍａｇｉｎｇ；２７（５）：９５５−６２）。したがって、第１のＡＰＩおよび第２のＡＰＩが一緒に製剤化され、前記第１のＡＰＩおよび前記第２のＡＰＩの少なくとも１つがＧｄを含む別の実施形態において、Ｇｄスカベンジャーとして作用して、注入後の製剤からのＧｄの放出を低減または防止できるように一定量の過剰なキーランドが選択される。遊離キーランドの最適量は、適切な物理化学的特性（すなわち、粘度、溶解度および重量オスモル濃度）を有する医薬組成物をもたらし、遊離キーランドが多すぎる場合の亜鉛枯渇などの毒性作用を回避する。
【００４５】
第２の実施形態において、本発明の医薬製剤は、対象に投与される用量として提供される。
【００４６】
本発明において、用語「用量」は、ＭＲＩ手順の目的のために一度に対象に投与される、本明細書で定義される医薬製剤の測定量を意味すると解釈される。
【００４７】
「対象」は、任意のヒトまたは動物対象であり得る。一実施形態において、対象は哺乳動物、すなわちインビボで無傷の哺乳動物体である。一実施形態において、対象は、生存しているヒトまたは非ヒト動物の身体である。
【００４８】
本発明の用量の一実施形態において、前記第１のＡＰＩおよび第２のＡＰＩの併用用量は、０．１２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラム未満である。
【００４９】
一実施形態において、本発明の用量は、０．０２〜０．０３ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩを含む。
【００５０】
本発明の用量では、第２のＡＰＩの動的相の間に第１のＡＰＩからの動的寄与を利用することができるので、比率の変更が可能である。特定の実施形態において、このことにより、（第１ＡＰＩからの信号寄与と組み合わせて）十分に造影された動脈相を維持しながら、造影剤用量の低減が可能になる。
【００５１】
本発明の特定の実施形態において、前記第１のＡＰＩおよび前記第２のＡＰＩのそれぞれの絶対量および相対量は、前記第２のＡＰＩの緩和度に基づいて決定される。ＭＲＩ剤の「緩和度」の概念は当業者に周知であり、周囲の水プロトンスピンの緩和速度を高める磁性化合物の能力を指す。緩和度は、ＭＲ画像のコントラストを改善し、造影剤がよりよく拡散する組織特異的領域を研究するか、または機能的ＭＲＩを実施するために使用される。ＭＲＩ剤の緩和度は、錯体の分子構造および動態に依存する。緩和度は、温度、磁場強度、および造影剤が溶解している物質に依存する。本発明の文脈において、緩和度の値が設定された条件は、（例えば約２０℃の周囲温度における水中とは対照的に）３７℃においてインビボである。一般に使用されているＧｄ系ＭＲＩ剤の緩和度８は、Ｓｈｅｎら（２０１５  Ｉｎｖｅｓｔ  Ｒａｄｉｏｌ；５０（５）：３３０−８）によって記載されている。図２は、１．５Ｔおよび３Ｔにおけるいくつかの公知ＭＲＩ剤の血中緩和度値を示す。
【００５２】
一実施形態において、本発明の用量は、０．０２５〜０．１ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含み、前記第２のＡＰＩは、磁場強度１．５〜３において３ｍＭ−１ｓ−１以上の緩和度を有する。一実施形態において、３ｍＭ−１ｓ−１以上の値は３〜５ｍＭ−１ｓ−１を包含するとみなすことができ、別の実施形態において３〜４ｍＭ−１ｓ−１、さらなる実施形態において４〜５ｍＭ−１ｓ−１さらに別の実施形態において３．５ｍＭ−１ｓ−１を包含するとみなすことができる。特定の実施形態において、この段落の実施形態による用量は、
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０４〜０．１ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０５〜０．１ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０３〜０．１ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０４〜０．１ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．１ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０３ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２５〜０．１ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０３ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０４〜０．０９５ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；
から選択される。
【００５３】
一実施形態において、本発明の用量は、０．０２〜０．０９ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含み、前記第２のＡＰＩは、磁場強度１．５〜３Ｔにおいて５ｍＭ−１ｓ−１以上の緩和度を有する。一実施形態において、５ｍＭ−１ｓ−１以上の値は５〜７ｍＭ−１ｓ−１を包含するとみなすことができ、別の実施形態において５〜６ｍＭ−１ｓ−１を包含するとみなすことができる。特定の実施形態において、この段落の実施形態による用量は、
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０３〜０．０９ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０４〜０．０９ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２５〜０．０９ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０３〜０．０８ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０３ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０９ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０３ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０３〜０．０７５ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；
から選択される。
【００５４】
一実施形態において、本発明の用量は、０．０２〜０．０７ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含み、前記第２のＡＰＩは、磁場強度１．５〜３Ｔにおいて７ｍＭ−１ｓ−１以上の緩和度を有する。一実施形態において、７ｍＭ−１ｓ−１以上の値は８ｍＭ−１ｓ−１以上を包含するとみなすことができ、別の実施形態において８〜９ｍＭ−１ｓ−１を包含するとみなすことができる。特定の実施形態において、この段落の実施形態による用量は、
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０７ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０３〜０．０６ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０７ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２５〜０．０６ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０３ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０６ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；
から選択される。
【００５５】
一実施形態において、本発明の用量は、０．０１〜０．０６ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含み、前記第２のＡＰＩは、磁場強度１．５〜３Ｔにおいて９ｍＭ−１ｓ−１以上の緩和度を有する。一実施形態において、９ｍＭ−１ｓ−１以上の値は９〜１１ｍＭ−１ｓ−１を包含するとみなすことができ、別の実施形態において５〜１０ｍＭ−１ｓ−１を包含するとみなすことができる。特定の実施形態において、この段落の実施形態による用量は、
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０６ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０５ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０６ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０５ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０３ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０１〜０．０５ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；
から選択される。
【００５６】
第３の実施形態において、本発明は、本明細書で定義される用量の本発明の医薬製剤の投与を含むＭＲＩ法を提供する。
【００５７】
適切と想定される投与方法および対象は、医薬組成物と関連して上記に記載されている。医薬組成物は、ＭＲ画像法の方法において造影に適切な量で投与される。本明細書に記載の第１のＡＰＩおよび第２のＡＰＩなどのＡＰＩを使用するＭＲＩ方法は、当業者に周知であり、例えば「Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  Ｉｍａｇｉｎｇ：Ｐｈｙｓｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ」（４ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ  ２０１５  Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｓｔｅｗａｒｔ  Ｃａｒｌｙｌｅ  Ｂｕｓｈｏｎｇ＆Ｇｅｏｆｆｒｅｙ  Ｃｌａｒｋｅ，Ｅｄｓ．）の第２７章「Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ａｇｅｎｔｓ  ａｎｄ  Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  Ｉｍａｇｉｎｇ」、または「Ｃｏｎｔｒａｓｔ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｉ：Ｍａｇｎｅｔｉｃ  Ｒｅｓｏｎａｎｃｅ  Ｉｍａｇｉｎｇ」（２００２  Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｎｇ，Ｗｅｒｎｅｒ  Ｋｒａｕｓｅ，Ｅｄ．）に教示されている。
【００５８】
本発明の方法は、診断のための方法としての有用性を有する。本明細書の実施例は、本発明の方法が、公知のこのような方法と比較して、限局性肝病変およびびまん性肝疾患の検出および特徴付けに有用な確かな利点を提供することを実証する。本発明者らは、単独ＡＰＩとしてガドキセテート（本明細書で定義される「第１ＡＰＩ」の例）またはガドテレート（本明細書で定義される「第２ＡＰＩ」の例）のいずれかを含む製剤の性能を、ガドキセテートと、ガドテレートもしくはガドブトロール（本明細書で定義される「第２のＡＰＩ」の別の例）のいずれかとの併用を含むいくつかの製剤の性能と比較した。併用製剤は、本発明による医薬製剤の実施形態を表し、実施例では「コンボ」製剤と称される。インビボでの用量の投与後のコンボ配合物の血管強度の解析において、全ての製剤はＡＰにおいてピークＲＶＩ％（相対血管強度％）を提供し、後期ＰＶＰおよびＬＶＰにおいて信号が低減した。他の全ての被験製剤（コンボ１、コンボ２、コンボ３およびガドテレート）と比較して、単独ＡＰＩとしてガドキセテートを有する製剤では、ＰＶＰ相においてＲＶＩ％の有意な低減が見られた。この傾向はＬＶＰまで低減し続け、注入後１２０秒でガドキセテートによる明らかな血管造影効果がなく、この肝臓特異的薬剤の乏しい血管持久性を実証している。後血管相におけるこの造影効果欠損は、非特異的ガドリニウム系のコントラストと比較して、肝胆道系薬剤の落とし穴として以前に認識されている（Ｆｒｙｄｒｙｃｈｏｗｉｃｚ  ｅｔ  ａｌ  ２０１２，ＪＭＲＩ；３５（３）：４９２−５１１）。ＡＵＣは、全てのコンボ試験品目（コンボ１、コンボ２およびコンボ３）においてガドキセテートと比較して（９３．８ＡＵ、７６．７ＡＵ、８４．９ＡＵ対３４．２ＡＵ）、およびガドテレートと比較して（９３．８ＡＵ、７６．７ＡＵ、８４．９ＡＵ対６３．２ＡＵ）有意に増加した。これらの結果は、本発明の医薬製剤が、良好な早期動脈造影効果と、血管相全体にわたる持続性ＲＶＩの改善との両方を提供することを実証する。これらの観察は、単独ＡＰＩとしてガドキセテートを含む製剤と対比するだけでなく、単独ＡＰＩとしてガドテレートを含む製剤とも対比して、コンボ製剤についてなされた。
【００５９】
本明細書は、最良の様式を含む本発明を開示するため、およびどのような当業者も、任意のデバイスまたはシステムの作製および使用ならびに任意の組み込まれた方法の実行を含む本発明の実践を可能にするために、実施例を使用している。本発明の特許性のある範囲は、特許請求の範囲によって定義され、当業者が想到する他の実施例を含むことができる。このような他の実施例は、それらが特許請求の範囲の文言から相違しない構造要素を有する場合、または特許請求の範囲の文言から実質的には相違しない同等の構造要素を含む場合、特許請求の範囲の技術的範囲に包含される。本明細書に言及された全ての文献の全開示は、参照により本明細書に組み込まれる。
【実施例】
【００６０】
実施例で使用される略語のリスト
ＡＵＣ  曲線下面積
ＩＣＰ−ＭＳ  誘導結合プラズマ質量分析法；
ＩＶ  静脈内
ＦｏＶ  視野
ＩＶＣ  下大静脈
ＬＡＶＡ  Ｌｉｖｅｒ  Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  Ｖｏｌｕｍｅ  Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ
ＭＲＩ  磁気共鳴画像法
ＮＥＸ  励起回数
ＮＭＲ  核磁気共鳴
ＰＡＣ  留置ポート（Ｐｏｒｔ−ａ−ｃａｔｈ）
ＰＶ  肝内門脈
ＲＯＩ  関心領域
ＲＶＩ  相対血管強度
ＳＩ  信号強度
ＴＥ  エコー時間
ＴＲ  繰り返し時間
ＵＺＢ  ブリュッセル自由大学病院
試験品目
以下の試験品目を用いて本発明を評価した。
【００６１】
（ｉ）ガドキセテート（二ナトリウム；２−［［２−ビス（カルボキシラトメチル）アミノ）−３−（４−エトキシフェニル）プロピル］−［２−ビス（カルボキシラトメチル）アミノ］エチル］アミノ］アセテート、ガドリニウム（３＋））は、Ｂａｙｅｒ  Ｐｈａｒｍａ  ＡＧ（Ｄ−１３３４２  Ｂｅｒｌｉｎ  Ｇｅｒｍａｎｙ）から購入した。市販のガドキセテート製剤は、０．２５ｍｍｏｌ／ｍｌに相当する１８１．４３ｍｇ／ｍｌのガドキセト酸二ナトリウム、賦形剤であるカロキセト酸三ナトリウム、トロメタモール、塩酸および／または水酸化ナトリウム（ｐＨ調整用）ならびに注射用水を含有する。これらの研究に使用するために、注射用水（ＢＢｒａｕｎ）で０．０８３ｍｍｏｌ／ｍｌの濃度に希釈し、０．３ｍｌ／ｋｇで投与して最終用量（０．０２５ｍｍｏｌ／ｋｇ）を得た。
【００６２】
（ｉｉ）ガドテレート（２−［４，７−ビス（カルボキシラトメチル）−１０−（カルボキシメチル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル］アセテート；ガドリニウム（３＋）はＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅにより製造された。ガドテル酸メグルミンは、０．５ｍｍｏｌ／ｍｌに相当する２７９．３ｍｇ／ｍｌのガドテレートおよび賦形剤であるメグルミンならびに注射用水を含有する。これらの研究に使用するために、注射用水（ＢＢｒａｕｎ）で０．３３３ｍｍｏｌ／ｍｌの濃度に希釈し、０．３ｍｌ／ｋｇで投与して最終用量（０．１ｍｍｏｌ／ｋｇ）を得た。
【００６３】
（ｉｉｉ）コンボ１は、ガドキセテートとガドテレートとの併用である。コンボ１は、注射用水（ＢＢｒａｕｎ）中それぞれ０．０８３ｍｍｏｌ／ｍｌおよび０．３３３ｍｍｏｌ／ｍｌの濃度に製剤化された。０．３ｍｌ／ｋｇの投与により、ガドキセテート（０．０２５ｍｍｏｌ／ｋｇ）およびガドテレート（０．１ｍｍｏｌ／ｋｇ）の最終用量を得た。
【００６４】
（ｉｖ）コンボ２は、ガドキセテートとガドテレートとの組み合わせである。コンボ２は、注射用水（ＢＢｒａｕｎ）中それぞれ０．０８３ｍｍｏｌ／ｍｌおよび０．１６７ｍｍｏｌ／ｍｌの濃度に製剤化された。０．３ｍｌ／ｋｇの投与により、ガドキセテート（０．０２５ｍｍｏｌ／ｋｇ）およびガドテレート（０．０５ｍｍｏｌ／ｋｇ）の最終用量を得た。
【００６５】
（ｖ）コンボ３は、ガドキセテートとガドブトロールとの組み合わせである。ガドブトロール（１０−（２，３−ジヒドロキシ−１−ヒドロキシメチルプロピル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸）はＢａｙｅｒ  Ｐｈａｒｍａ  ＡＧ（Ｄ−１３３４２  Ｂｅｒｌｉｎ  Ｇｅｒｍａｎｙ）から購入した。市販のガドブトロール製剤は、６０４．７２ｍｇ／ｍｌのガドブトロール（１．０ｍｍｏｌ／ｍｌに相当）および注射用水を含有する。これらの研究に使用するために、注射用水（ＢＢｒａｕｎ）で０．３３３ｍｍｏｌ／ｍｌの濃度に希釈した（ガドテレートと等モル濃度）。希釈したガドブトロール溶液をコンボ３の調製に使用した。コンボ３は、注射用水（ＢＢｒａｕｎ）中それぞれガドキセテートが０．０８３ｍｍｏｌ／ｍｌおよびガドブトロールが０．１６７ｍｍｏｌ／ｍｌの濃度に製剤化された。０．３ｍｌ／ｋｇの投与により、ガドキセテート（０．０２５ｍｍｏｌ／ｋｇ）およびガドブトロール（０．０５ｍｍｏｌ／ｋｇ）の最終用量を得た。
【００６６】
以下の表１は、インビボで投与された試験品目および用量をまとめたものである。全ての試験品目は、生理食塩水を用いて１５ｍｌの標準溶液に調製した。
【００６７】
【表２】
2019500333.tif 000006
投与レジメンの論拠
個体に投与される試験品目の用量範囲およびコンボ１の用量レジメンは、これらの薬剤の典型的な臨床用量を反映するように選択されている。コンボ２およびコンボ３は、ガドキセテートの用量を維持しながら、ガドテレートまたはガドブトロールのいずれかの用量を低下させることにより低減させた累積ガドリニウム用量を有する（標準臨床用量より５０％低い＝０．０５ｍｍｏｌ／ｋｇ）。
【００６８】
インビトロの緩和度測定を使用して、単体の市販の造影剤と比較して、コンボ製剤の有効性（緩和度）を評価した。縦緩和時間は、６０ＭＨｚで作動するＭｉｎｉｓｐｅｃ  ＭｑベンチトップＮＭＲ緩和計（Ｂｒｕｋｅｒ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｒｈｅｉｎｓｔｅｔｔｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して３７℃において１５０ｍＭの生理食塩水中で測定した。錯体の縦緩和度は、Ｔ１緩和時間の逆数に対して各個別の薬剤および試験したコンボ製剤についてＩＣＰ−ＭＳによって決定したガドリニウム濃度をプロットすることによって計算した。
【００６９】
実験計画
この研究は、動物実験に関して、ブリュッセル自由大学病院（ＵＺＢ）、ベルギー地方倫理委員会により２０１６年３月９日に承認された（ＥＣ番号：１６−２７２−４）。全ての動物実験は適用される法律および規定に従って行われた。その心臓機能および血管動態が人のそれと非常に似ているので、ナイーブミニブタ（Ｇｏｔｔｉｎｇｅｎ  ｍｉｎｉｐｉｇｓ、Ｅｌｌｅｇａａｒｄ  Ｇｏｔｔｉｎｇｅｎ  Ｍｉｎｉｐｉｇｓ、Ｄｅｎｍａｒｋ）をモデルとして選択し、動的血管相の評価のための最適な空間的および時間的分解能を可能にした。
【００７０】
この試験は、５つの投薬群（単一の独立型用量として投与された造影剤の２群；コンボ製剤を投与された３群）からなっていた。各動物を、１週間のウォッシュアウト期間で各投薬群内で１回試験した。
【００７１】
手順
各ＭＲＩ検査について、ゾレチル（Ｚｏｌｅｔｉｌ）混合物のボーラス（０．０６ｍｌ／ｋｇ、筋肉内）で麻酔を誘導し、ネスドナール（Ｎｅｓｄｏｎａｌ）（０．６ｍｌ／ｋｇ／時、静脈内（ＩＶ）投与）の注入によって維持した。試験品目は、ＰＡＣ装置（Ｐｏｒｔ−ａ−ｃａｔｈ、Ｐｏｗｅｒ  ＰＡＣ  ＩＩ、１．９ｍｍ、Ｓｍｉｔｈｓ  Ｍｅｄｉｃａｌ、ベルギー）を介して単回注入としてＩＶ投与した。試験品目は自動注入器（Ｍｅｄｒａｄ  Ｓｐｅｃｔｒｉｓ  Ｓｏｌａｒｉｓ）を使用して２ｍｌ／秒の速度で０．３ｍｌ／ｋｇの容量で投与した。投与直後に、２０ｍｌの生理食塩水を細管に通し、残留した試験品目を洗い流した。
【００７２】
造影ＭＲ画像法
全てのＭＲＩの取得は、ブタの腹部に配置された腹部相−アレイ表面コイルを使用して、臨床３．０Ｔ  ＧＥ  ＭＲ７５０ｗスキャナー（ＧＥ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ、ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、Ｗａｕｋｅｓｈａ、ＷＩ）で行った。多相動的３Ｄ  Ｔ１ｗ  ＬＡＶＡ  （Ｌｉｖｅｒ  Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ  ｗｉｔｈ  Ｖｏｌｕｍｅ  Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ）を、早期動脈から後期静脈血管相を捕捉するボーラスタイミングを使用し、下記の画像化パラメータを使用して実施した：ＴＲ／ＴＥ＝２．９／１．３ｍｓ、ＦＡ＝１２°、ＦｏＶ＝４２ｘ４０ｃｍ、マトリックス２２０ｘ１６０、スライス厚＝３ｍｍ、スライス数＝４０、ＮＥＸ＝１。このプロトコルには、試験品目の投与前および投与後（遅延造影効果相の間）の両方で取得された自由呼吸ナビゲートＬＡＶＡも含まれていた。
【００７３】
画像解析
時間分解動的シリーズについての定量分析を、Ａｄｖａｎｔａｇｅ  Ｗｉｎｄｏｗｓ  ＶｏｌｕｍｅＳｈａｒｅ  ７  Ｗｏｒｋｓｔａｔｉｏｎ（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用して、完了した。関心領域（ＲＯＩ）を大動脈、下大静脈（ＩＶＣ）、肝内門脈（ＰＶ）および正常肝実質に設定した。全てのＲＯＩ位置の視覚的検証は、腹部放射線科医によって行われた。各試験品目について、各ＲＯＩに対する絶対信号強度（ＳＩ）曲線を解析し、２５％および７５％の四分位範囲でピーク値として表した。
【００７４】
血管造影効果を計算するために、相対血管強度（ＲＶＩ）を、以下の式を使用して、大動脈、ＩＶＣおよびＰＶを肝臓実質に対して正規化した。
【００７５】
相対血管強度（ＲＶＩ）＝（ＳＩ（血管）−ＳＩ（肝臓））／（ＳＩ（肝臓））
ＲＶＩ曲線を使用して、大動脈、ＩＶＣおよびＰＶからの全ての血管信号を包含する複合血管強度曲線が得られた。各試験品目に関連する全血管造影効果は、曲線下面積（ＡＵＣ）の台形則によって決定され、ｙ＝０より上の正の信号が含まれた。このことから、動脈相（ＡＰ：３０秒）、門脈相（ＰＶＰ：６０秒）および後期静脈相（ＬＶＰ：１２０秒）における時間−相対画分は、全血管ＡＵＣの割合として表され（ＲＶＩ％）、１−ＲＶＩ％として計算して、各相を通して減少率を得た。
【００７６】
遅延相については、試験品目の投与前および投与後の造影効果の有無について、経験豊富な放射線科医が定性的評価を行った。
【００７７】
試験品目のインビトロ緩和度
コンボ１、コンボ２およびコンボ３は、さまざまなＡＰＩ割合（表２）に基づいて、予想される緩和度およびｒ２／ｒ１比を有することが示された。緩和度の測定は、全ての薬剤が実行可能であり、基準緩和度（ｒ１）の範囲内であることを示した。
【００７８】
以下の表２は、各試験品目について３７℃、６０ＭＨｚで水中で測定した緩和度（ｒ１）およびｒ２／ｒ１比を示す。
【００７９】
【表３】
2019500333.tif 000007
試験品目のＨＰＬＣ分析。
【００８０】
検出器：ＥＳＡ  Ｃｏｒｏｎａ、荷電化粒子検出器およびＵＶ検出器（２８０ｎｍ）；
カラム：ＳｅＱｕａｎｔ  ＺＩＣ−ｐＨＩＬＩＣ（５μｍ、１５０×４．６ｍｍ）。
【００８１】
試料調製：３０μＬの試験品目に、Ｍｎ（ＯＡｃ）２（１０μＬ、１０ｍｇ／ｍＬ）を加え、次いでＭＱ−水（３６０μＬ）、続いてＭｅＣＮ（６００μＬ）＊を加えた。
【００８２】
注入量：２０μＬ；
移動相：１００ｍＭ酢酸アンモニウム（Ａ）、アセトニトリル（Ｂ）。
【００８３】
カラムを、試料注入前に初期組成（Ａ：Ｂが１５：８５）で、流量１ｍＬ／分で少なくとも５分間コンディショニングした。
【００８４】
勾配：
【００８５】
【表４】
2019500333.tif 000008
以下の保持時間で観察した：
保持時間（分）
メグルミン              ２１．８
ＧｄＤＯＴＡ            ２３．５
Ｇｄ−ＥＯＢ−ＤＴＰＡ  １３．８
Ｎａ                    １７．５
Ｇｄ−ＢＴ−ＤＯ３Ａ    ２４．２
＊ＤＯＴＡ、ＥＯＢ−ＤＴＰＡおよびＢＴ−ＤＯ３Ａを、対応するＭｎ錯体として間接的に分析した。
【００８６】
コンボ１、コンボ２およびコンボ３は、ＨＰＬＣ分析において予想されるＡＰＩ比を有することが示された。コンボ製剤中の異なるＡＰＩの化学的完全性が確認された。
【００８７】
定量分析および信号強度曲線
各試験品目ついて、図３に示すように、ＲＯＩである大動脈、ＩＶＣ、ＰＶおよび肝臓実質について信号強度（ＳＩ）曲線をプロットした。全ての試験品目でピーク動脈造影効果が明白であり、コンボ１、コンボ２およびガドテレートにより最も高いＳＩが明白であり（表３）、図３Ａ〜３Ｅはそれぞれ、ガドキセテート、ガドテレート、コンボ１、コンボ２およびコンボ３のピークＳＩ曲線を示す。これは、肝臓特異的薬剤であるガドキセテートを含む、全ての薬剤で同等の早期動脈造影効果が存在することを示している。
【００８８】
以下の表３は、パーセンタイル範囲２５％〜７５％の大動脈からのピーク信号強度および各試験品目の相対血管指数（ＲＶＩ）曲線からの曲線下面積（ＡＵＣ）を示す。
【００８９】
【表５】
2019500333.tif 000009
血管強度分析
ＲＶＩ曲線を各試験品目について計算し、ＡＵＣを表３に報告し、複合血管強度曲線を決定して各試験品目をプロファイルした。図４Ａ〜４Ｅはそれぞれ、ガドキセテート、ガドテレート、コンボ１、コンボ２およびコンボ３のＲＶＩ曲線を示す。
【００９０】
各血管相（ＡＰ：３０秒、ＰＶＰ：６０秒、ＬＶＰ：１２０秒）について、時間−相対画分を、各試験品目の全ＡＵＣの相対的血管強度パーセント（ＲＶＩ％）として表した、（図５、表４）。
【００９１】
以下の表４は、動脈相（３０秒）、門脈静脈相（６０秒）および後期静脈相（１２０秒）についての、相対血管強度（１−ＲＶＩ％）のパーセンテージとして表される動的血管相を示す。
【００９２】
【表６】
2019500333.tif 000010
緩和がより高いコンボ剤
コンボ１、コンボ２（ガドテレート）およびコンボ３（ガドブトロール）を製剤化するために、２つの異なる非特異的ガドリニウム系造影剤をこの研究に使用した。両方の薬剤は、ガドテレート単独と比較してＡＵＣの増加を示し、各血管相について同様のＲＶＩ％を示した。
【００９３】
遅延造影効果相の定性評価
遅延相について、放射線学的評価は、試験品目の投与前と投与後の間で、ガドキセテートと比較して、コンボ１、コンボ２およびコンボ３の肝臓実質の十分な造影効果を示した。［実施態様１］
（ｉ）肝細胞への取り込みおよび胆汁排泄を有する第１の活性医薬成分（ＡＰＩ）；および、
（ｉｉ）腎排泄を有する第２のＡＰＩ；
を含み、
前記第１のＡＰＩおよび前記第２のＡＰＩのそれぞれが、キーランドまたはその誘導体および常磁性金属イオンを含む金属キレートであり、前記第１のＡＰＩ対前記第２のＡＰＩの比が１：１０から４：１である医薬製剤。
［実施態様２］
前記常磁性金属イオンが遷移金属またはランタニドである、実施態様１に記載の医薬製剤。
［実施態様３］
前記常磁性金属イオンが、Ｅｕ、Ｇｄ、Ｄｙ、Ｈｏ、Ｃｒ、ＭｎおよびＦｅを含む群から選択される、実施態様２に記載の医薬製剤。
［実施態様４］
前記常磁性金属イオンが、Ｇｄ、Ｍｎ、ＦｅおよびＣｒを含む群から選択される、実施態様３に記載の医薬製剤。
［実施態様５］
前記常磁性金属イオンが、Ｇｄ（ＩＩＩ）およびＭｎ（ＩＩ）を含む群から選択される、実施態様４に記載の医薬製剤。
［実施態様６］
前記常磁性金属イオンがＧｄ（ＩＩＩ）である、実施態様５に記載の医薬製剤。
［実施態様７］
前記キーランドまたはその誘導体が、ジエチレントリアミン五酢酸（ＤＴＰＡ）；４−カルボキシ−５，８，１１−トリス（カルボキシメチル）−１−フェニル−２−オキサ−５，８，１１−トリアザトリデカン−１３−オイック酸（ＢＯＰＴＡ）；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＤＯ３Ａ）；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＡ）；エチレンジアミン四酢酸（ｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ  ａｃｉｄ）（ＥＤＴＡ）；１０−（２−ヒドロキシプロピル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＨＰ−ＤＯ３Ａ）；２−メチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＭＣＴＡ）；テトラメチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ＤＯＴＭＡ）；３，６，９，１５−テトラアザビシクロ［９．３．１］ペンタデカ−１（１５），１１，１３−トリエン−３，６，９−三酢酸（ＰＣＴＡ）；Ｎ，Ｎ’−ビス（２−アミノエチル）−１，２−エタンジアミン（ＴＥＴＡ）；１，４，７，１０−テトラアザシクロトリデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸（ＴＲＩＴＡ）；１，１２−ジカルボニル，１５−（４−イソチオシアナトベンジル）１，４，７，１０，１３−ペンタアザシクロヘキサデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’三酢酸（ＨＥＴＡ）；［（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ）−４，７−ビス−カルボキシメチル−２，５，８，１１−テトラメチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロ−ドデカン−１−イル］酢酸、（Ｍ４ＤＯ３Ａ）；１１−Ｏ−ホスホノメチル−１，４，７，１−Ｏ−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＭＰＤＯ３Ａ）；ヒドロキシベンジル−エチレンジアミン−二酢酸（ＨＢＥＤ）；およびＮ，Ｎ’−エチレンビス−［２−（ｏ−ヒドロキシフェニル）グリシン］（ＥＨＰＧ）；２−［［２−［ビス（カルボキシラトメチル）アミノ］−３−（４−エトキシフェニル）プロピル］−［２−［ビス（カルボキシラトメチル）アミノ］エチル］アミノ］アセテート（ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）；１０−［（１ＳＲ，２ＲＳ）−２，３−ジヒドロキシ−１−ヒドロキシメチルプロピル］−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（ＢＴ−ＤＯ３Ａ）；２−［ビス［２−［カルボキシラトメチル−［２−（メチルアミノ）−２−オキソエチル］アミノ］エチル］アミノ］アセテート（ＤＴＰＡ−ＢＭＡ）；および２−［ビス［２−［カルボキシラトメチル−［２−（２−メトキシエチルアミノ）−２−オキソエチル］アミノ］エチル］アミノ］アセテート（ＤＴＰＡ−ＢＭＥＡ）；Ｎ−［２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］−３−（４−エトキシフェニル）プロピル］−Ｎ−［２−［ビス（カルボキシメチル）−アミノ］エチル］−Ｌ−グリシン（ＥＯＢ−ＤＴＰＡ）、Ｎ，Ｎ−ビス［２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］−エチル］−Ｌ−グルタミン酸（ＤＴＰＡ−Ｇｌｕ）、Ｎ，Ｎ−ビス［２−［ビス（カルボキシメチル）アミノ］−エチル］−Ｌ−リジン（ＤＴＰＡ−Ｌｙｓ）、Ｎ，Ｎ−ビス［２−［カルボキシメチル［（メチ���カルバモイル）メチル］アミノ］−エチル］グリシン（ＤＴＰＡ−ＢＭＡ）；１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−Ｎ，Ｎ’，Ｎ’’，Ｎ’’’−四酢酸モノ−（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミジル）エステル（ＤＯＴＡ−ＮＨＳ）；［（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ）−４，７，１０−トリス−カルボキシメチル−２，５，８，１１−テトラメチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル］酢酸（Ｍ４ＤＯＴＡ）；（Ｒ）−２−［（２Ｓ，５Ｓ，８Ｓ，１１Ｓ）−４，７，１０−トリス−（（Ｒ）−１−カルボキシエチル）−２，５，８，１１−テトラメチル−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１−イル］プロピオン酸（Ｍ４ＤＯＴＭＡ）；ＰＣＴＡ１２；シクロ−ＰＣＴＡ１２；Ｎ，Ｎ’−ビス（２−アミノエチル）−１，２−エタンジアミン−Ｎ−ヒドロキシ−スクシンイミドエステル（ＴＥＴＡ−ＮＨＳ）を含む群から選択される、実施態様１乃至６のいずれか１項に記載の医薬製剤。
［実施態様８］
前記キーランドまたはその誘導体が、ＥＯＢ−ＤＴＰＡ、ＤＴＰＡ−ＢＭＡ、ＤＴＰＡ−ＢＭＥＡ、ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、ＢＯＰＴＡ、ＨＰ−ＤＯ３Ａ、ＢＴ−ＤＯ３Ａから選択される、実施態様７に記載の医薬製剤。
［実施態様９］
前記第１のＡＰＩ対前記第２のＡＰＩの比が１：５〜３：２である、実施態様１乃至８のいずれか１項に記載の医薬製剤。
［実施態様１０］
前記第１のＡＰＩ対前記第２のＡＰＩの比が１：４〜１：１である、実施態様９に記載の医薬製剤。
［実施態様１１］
前記第１のＡＰＩ対前記第２のＡＰＩの比が１：１である、実施態様１０に記載の医薬製剤。
［実施態様１２］
前記第１のＡＰＩ対前記第２のＡＰＩの比が１：２である、実施態様１０に記載の医薬製剤。
［実施態様１３］
前記第１のＡＰＩ対前記第２のＡＰＩの比が１：３である、実施態様１０に記載の医薬製剤。
［実施態様１４］
前記第１のＡＰＩ対前記第２のＡＰＩの比が１：４である、実施態様１０に記載の医薬製剤。
［実施態様１５］
前記第１のＡＰＩがガドキセテート（ｇａｄｏｘｅｔａｔｅ）である、実施態様１乃至１４のいずれか１項に記載の医薬製剤。
［実施態様１６］
前記第２のＡＰＩが、ガドジアミド、ガドルベセタミド、ガドリニウムジエチレントリアミン五酢酸、ガドテリドール、ガドブトロール、ガドベン酸ジメグルミンおよびガドテル酸メグルミンを含む群から選択される、実施態様１乃至１５のいずれか１項に記載の医薬製剤。
［実施態様１７］
前記第２のＡＰＩが、ガドテリドール、ガドブトロールおよびガドテル酸メグルミンを含むリストから選択される、実施態様１６に記載の医薬製剤。
［実施態様１８］
前記第１のＡＰＩおよび前記第２のＡＰＩが別々に提供されるが、同時投与を可能にするように構成されている、実施態様１乃至１７のいずれか１項に記載の医薬製剤。
［実施態様１９］
前記第１のＡＰＩおよび前記第２のＡＰＩの各々が、哺乳類投与に適した形態で生体適合性担体と共に医薬組成物として提供される、実施態様１乃至１８のいずれか１項に記載の医薬製剤。
［実施態様２０］
前記第１のＡＰＩおよび前記第２のＡＰＩが、哺乳類投与に適した形態で生体適合性担体と共に製剤化された医薬組成物として提供される、実施態様１乃至１７のいずれか１項に記載の医薬製剤。
［実施態様２１］
前記医薬組成物が１または複数の医薬として許容される賦形剤をさらに含む、実施態様１９または実施態様２０に記載の医薬製剤。
［実施態様２２］
前記１または複数の医薬として許容される賦形剤が緩衝剤を含む、実施態様２１に記載の医薬製剤。
［実施態様２３］
前記１または複数の医薬として許容される賦形剤が過剰なキーランドを含む、実施態様２１に記載の医薬製剤。
［実施態様２４］
ガドキセテート（ｇａｄｏｘｅｔａｔｅ）およびガドテル酸メグルミンが、過剰のＥＯＢ−ＤＴＰＡの遊離酸と共に製剤化され、メグルミンが単独の緩衝剤である。実施態様２０乃至２３のいずれか１項に記載の医薬製剤。
［実施態様２５］
対象に投与される実施態様１乃至２４のいずれか１項に記載の医薬製剤の用量であって、前記第１のＡＰＩおよび第２のＡＰＩの併用用量が０．１２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムを超えないことを条件として、０．０１〜０．０４ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩおよび０．０１〜０．１ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含む用量。
［実施態様２６］
前記第１のＡＰＩおよび第２のＡＰＩの併用用量が、０．１２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラム未満である、実施態様２５に記載の用量。
［実施態様２７］
０．０２〜０．０３ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩを含む、実施態様２５または実施態様２６に記載の用量。
［実施態様２８］
０．０２５〜０．１ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含み、前記第２のＡＰＩが、磁場強度１．５〜３Ｔにおいて３ｍＭ−１ｓ−１以上の緩和度を有する、実施態様２５乃至２７のいずれか１項に記載の用量。
［実施態様２９］
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０４〜０．１ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０５〜０．１ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０３〜０．１ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０４〜０．１ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０３ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２５〜０．１ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０３ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０４〜０．０９５ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；
を含む、実施態様２８に記載の用量。
［実施態様３０］
０．０２〜０．０９ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含み、前記第２のＡＰＩが、磁場強度１．５〜３Ｔにおいて５ｍＭ−１ｓ−１以上の緩和度を有する、実施態様２５乃至２７のいずれか１項に記載の用量。
［実施態様３１］
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０３〜０．０９ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０４〜０．０９ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２５〜０．０９ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０３〜０．０８ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０３ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０９ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０３ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０３〜０．０７５ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；
を含む、実施態様３０に記載の用量。
［実施態様３２］
０．０２〜０．０７ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含み、前記第２のＡＰＩが、７ｍＭ−１ｓ−１以上の緩和度および磁場強度１．５〜３Ｔを有する、実施態様２５乃至２７のいずれか１項に記載の用量。
［実施態様３３］
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０７ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０３〜０．０６ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０７ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２５〜０．０６ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０３ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０６ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；
を含む、実施態様３２に記載の用量。
［実施態様３４］
０．０１〜０．０６ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含み、前記第２のＡＰＩが、磁場強度１．５〜３Ｔにおいて９ｍＭ−１ｓ−１以上の緩和度を有する、実施態様２５乃至２７のいずれか１項に記載の用量。
［実施態様３５］
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０６ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０５ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０６ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０２〜０．０５ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；または、
０．０３ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩ、および０．０１〜０．０５ｍｍｏｌの間／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩ；
を含む、実施態様３４に記載の用量。
［実施態様３６］
０．０２５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第１のＡＰＩを含む、実施態様２５乃至３５のいずれか１項に記載の用量。
［実施態様３７］
０．１ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含む、実施態様２５乃至３６のいずれか１項に記載の用量。
［実施態様３８］
０．０５ｍｍｏｌ／前記対象１キログラムの前記第２のＡＰＩを含む、実施態様２５乃至３６のいずれか１項に記載の用量。
［実施態様３９］
前記対象が、生存しているヒトまたは非ヒト動物の身体である、実施態様２５乃至３８のいずれか１項に記載の用量。
［実施態様４０］
（ａ）実施態様２５乃至３９のいずれか１項に記載の用量の医薬組成物を対象に投与するステップ；
（ｂ）前記投与ステップに続いて、前記対象に対して磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）を実施して、磁気共鳴（ＭＲ）信号を前記組成物が分布している前記対象または前記対象の部分から検出するステップ、
（ｃ）検出されたＭＲ信号からＭＲ画像および／またはＭＲスペクトルを生成するステップ、
を含む方法。
［実施態様４１］
前記対象が、生存しているヒトまたは非ヒト動物の身体である、実施態様４０に記載の方法。
［実施態様４２］
前記組成物が、ＭＲ画像法の方法において造影に適切な量で投与される、実施態様４０または４１に記載の方法。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】図面
【訂正対象項目名】図３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図３】
2019500333.tif 000011
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】図面
【訂正対象項目名】図４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図４】
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【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】図面
【訂正対象項目名】図５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【図５】
2019500333.tif 000013