【手続補正書】
【提出日】令和3年10月15日(2021.10.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
標的遺伝子の発現を阻害することができるキラル修飾二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）剤であって、センス鎖及びアンチセンス鎖を含み、各鎖は１４〜４０ヌクレオチドを有し、
前記センス鎖が、５’末端に１つ又は複数の末端キラル修飾ヌクレオチド間結合を含み、
前記アンチセンス鎖が、５’末端に１つ又は複数の末端キラル修飾ヌクレオチド間結合、及び３’末端に１つ又は複数の末端キラル修飾ヌクレオチド間結合を含み、
各末端キラル修飾ヌクレオチド間結合がホスホロチオエート結合であり、
末端キラル修飾が、前記アンチセンス鎖の３’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在し、その結合リン原子がＳｐ配置にある、キラル修飾二本鎖ＲＮＡ剤。
【請求項２】
各末端キラル修飾ヌクレオチド間結合のキラル結合リン原子に関するキラル純度が少なくとも５０％である、請求項１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項３】
末端キラル修飾が、前記アンチセンス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在し、その結合リン原子がＲｐ配置にある、及び／または
末端キラル修飾が、前記センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在し、その結合リン原子がＲｐ配置又はＳｐ配置のいずれかにある、請求項１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項４】
結合リン原子がＳｐ配置にある、アンチセンス鎖の３’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾、
結合リン原子がＲｐ配置にある、アンチセンス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾、及び
結合リン原子がＲｐ配置又はＳｐ配置のいずれかにある、センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾
を含む、請求項１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項５】
４つ以上の末端キラル修飾ヌクレオチド間結合を含み、
結合リン原子がＳｐ配置にある、アンチセンス鎖の３’末端の１番目及び２番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾、
結合リン原子がＲｐ配置にある、アンチセンス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾、及び
結合リン原子がＲｐ配置又はＳｐ配置のいずれかにある、センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾
を含む、請求項１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項６】
５つ以上の末端キラル修飾ヌクレオチド間結合を含み、
（ｉ）
結合リン原子がＳｐ配置にある、アンチセンス鎖の３’末端の１番目、２番目、及び３番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾、
結合リン原子がＲｐ配置にある、アンチセンス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾、及び
結合リン原子がＲｐ配置又はＳｐ配置のいずれかにある、センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾
を含む、あるいは
（ｉｉ）
結合リン原子がＳｐ配置にある、アンチセンス鎖の３’末端の１番目及び２番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾、
結合リン原子がＲｐ配置にある、アンチセンス鎖の３’末端の３番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾、
結合リン原子がＲｐ配置にある、アンチセンス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾、及び
結合リン原子がＲｐ配置又はＳｐ配置のいずれかにある、センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾
を含む、あるいは
（ｉｉｉ）
結合リン原子がＳｐ配置にある、アンチセンス鎖の３’末端の１番目及び２番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾、
結合リン原子がＲｐ配置にある、アンチセンス鎖の５’末端の１番目及び２番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾、及び
結合リン原子がＲｐ配置又はＳｐ配置のいずれかにある、センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端キラル修飾
を含む、
請求項１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項７】
６つ以上の末端キラル修飾ヌクレオチド間結合を含む、請求項１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項８】
８つ以上の末端キラル修飾ヌクレオチド間結合を含む、請求項１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項９】
前記末端キラル修飾ヌクレオチド間連結によって結合されたジヌクレオチドの各ヌクレオチドが、独立に、非環状ヌクレオチド、ＬＮＡ、ＨＮＡ、ＣｅＮＡ、２’−Ｏ−メトキシアルキル、２’−Ｏ−メチル、２’−Ｏ−アリル、２’−Ｃ−アリル、２’−デオキシ、２’−フルオロ、２’−Ｏ−Ｎ−メチルアセトアミド（２’−Ｏ−ＮＭＡ）、２’−Ｏ−ジメチルアミノエトキシエチル（２’−Ｏ−ＤＭＡＥＯＥ）、２’−Ｏ−アミノプロピル（２’−Ｏ−ＡＰ）、及び２’−ａｒａ−Ｆからなる群から選択される修飾で修飾されている、請求項１〜８のいずれか一項に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１０】
前記センス鎖及び前記アンチセンス鎖のそれぞれが独立に、非環状ヌクレオチド、ＬＮＡ、ＨＮＡ、ＣｅＮＡ、２’−Ｏ−メトキシアルキル、２’−Ｏ−メチル、２’−Ｏ−アリル、２’−Ｃ−アリル、２’−デオキシ、２’−フルオロ、２’−Ｏ−Ｎ−メチルアセトアミド（２’−Ｏ−ＮＭＡ）、２’−Ｏ−ジメチルアミノエトキシエチル（２’−Ｏ−ＤＭＡＥＯＥ）、２’−Ｏ−アミノプロピル（２’−Ｏ−ＡＰ）、及び２’−ａｒａ−Ｆからなる群から選択される修飾で修飾されている、請求項１〜８のいずれか一項に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１１】
前記センス鎖及び前記アンチセンス鎖のそれぞれが１５〜３０ヌクレオチドを有する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１２】
前記センス鎖が１９〜２２ヌクレオチドを有し、前記アンチセンス鎖が１９〜２５ヌクレオチドを有する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１３】
少なくとも１つのアシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰＲ）リガンドをさらに含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１４】
前記ＡＳＧＰＲリガンドが、前記センス鎖又は前記アンチセンス鎖の３’末端に付着している、請求項１３に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１５】
前記ＡＳＧＰＲリガンドが、１つ又は複数の切断可能なリンカーを介して付着している、請求項１３または１４に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１６】
前記ＡＳＧＰＲリガンドが、２価又は３価の分岐リンカーを介して付着した１つ又は複数のＧａｌＮＡｃ誘導体である、請求項１３〜１５のいずれか一項に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１７】
前記ＡＳＧＰＲリガンドが、
【化１】
2021507709.tif 000001
である、請求項１６に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤及び薬学的に許容される担体又は賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１９】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤を含む、標的遺伝子の発現を阻害するための組成物。
【請求項２０】
皮下投与又は静脈内投与によって投与される、請求項１９に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０６０６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０６０６】
上記の詳細な説明に照らして、これら及び他の変更を実施形態に加えることができる。一般に、以下の特許請求の範囲では、使用される用語は、本明細書及び特許請求の範囲に開示される特定の実施形態に請求項を限定するように解釈されるべきではなく、可能なすべての実施形態及びそのような請求項が権利を与えられる等価物の全範囲を含むように解釈されるべきである。従って、請求項は本開示によって限定されない。
最後に、本発明の好ましい実施態様を項分け記載する。
［実施態様１］
標的遺伝子の発現を阻害することができるキラル修飾二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）剤であって、センス鎖及びアンチセンス鎖を含み、各鎖は１４〜４０ヌクレオチドを有し、
前記センス鎖が、５’末端に１つ又は複数の末端のキラル修飾ヌクレオチド間結合を含み、
前記アンチセンス鎖が、５’末端に１つ又は複数の末端のキラル修飾ヌクレオチド間結合、及び３’末端に１つ又は複数の末端のキラル修飾ヌクレオチド間結合を含む、キラル修飾二本鎖ＲＮＡ剤。
［実施態様２］
各末端のキラル修飾ヌクレオチド間結合のキラル結合リン原子に関するキラル純度が少なくとも５０％である、実施態様１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様３］
各末端のキラル修飾ヌクレオチド間結合がホスホロチオエート結合である、実施態様１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様４］
前記末端のキラル修飾が、前記アンチセンス鎖の３’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在し、前記結合リン原子がＳｐ配置にある、実施態様３に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様５］
末端のキラル修飾が、前記アンチセンス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在し、前記結合リン原子がＲｐ配置にある、実施態様３に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様６］
末端のキラル修飾が、前記センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在し、前記結合リン原子が、Ｒｐ配置又はＳｐ配置のいずれかにある、実施態様３に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様７］
前記結合リン原子がＳｐ配置にある、前記アンチセンス鎖の３’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾、
前記結合リン原子がＲｐ配置にある、前記アンチセンス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾、及び
前記結合リン原子がＲｐ配置又はＳｐ配置のいずれかにある、前記センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾鎖を含む、実施態様３に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様８］
４つ以上の末端のキラル修飾ヌクレオチド間結合を含む、実施態様１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様９］
前記結合リン原子がＳｐ配置にある、前記アンチセンス鎖の３’末端の１番目及び２番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾、
前記結合リン原子がＲｐ配置にある、前記アンチセンス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾、及び
前記結合リン原子がＲｐ配置又はＳｐ配置のいずれかにある、前記センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾を含む、実施態様８に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様１０］
５つ以上の末端のキラル修飾ヌクレオチド間結合を含む、実施態様１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様１１］
前記結合リン原子がＳｐ配置にある、前記アンチセンス鎖の３’末端の１番目、２番目、及び３番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾、
前記結合リン原子がＲｐ配置にある、前記アンチセンス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾、及び
前記結合リン原子がＲｐ配置又はＳｐ配置のいずれかにある、前記センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾を含む、実施態様１０に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様１２］
前記結合リン原子がＳｐ配置にある、前記アンチセンス鎖の３’末端の１番目及び２番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾、
前記結合リン原子がＲｐ配置にある、前記アンチセンス鎖の３’末端の３番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾、
前記結合リン原子がＲｐ配置にある、前記アンチセンス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾、及び
前記結合リン原子がＲｐ配置又はＳｐ配置のいずれかにある、前記センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾を含む、実施態様１０に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様１３］
前記結合リン原子がＳｐ配置にある、前記アンチセンス鎖の３’末端の１番目及び２番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾、
前記結合リン原子がＲｐ配置にある、前記アンチセンス鎖の５’末端の１番目及び２番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾、及び
前記結合リン原子がＲｐ配置又はＳｐ配置のいずれかにある、前記センス鎖の５’末端の１番目のヌクレオチド間結合に存在する末端のキラル修飾を含む、実施態様１０に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様１４］
６つ以上の末端のキラル修飾ヌクレオチド間結合を含む、実施態様１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様１５］
８つ以上の末端のキラル修飾ヌクレオチド間結合を含む、実施態様１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様１６］
前記末端のキラル修飾ヌクレオチド間連結によって結合されたジヌクレオチドの各ヌクレオチドが独立に、非環状ヌクレオチド、ＬＮＡ、ＨＮＡ、ＣｅＮＡ、２’−Ｏ−メトキシアルキル、２’−Ｏ−メチル、２’−Ｏ−アリル、２’−Ｃ−アリル、２’−デオキシ、２’−フルオロ、２’−Ｏ−Ｎ−メチルアセトアミド（２’−Ｏ−ＮＭＡ）、２’−Ｏ−ジメチルアミノエトキシエチル（２’−Ｏ−ＤＭＡＥＯＥ）、２’−Ｏ−アミノプロピル（２’−Ｏ−ＡＰ）、及び２’−ａｒａ−Ｆからなる群から選択される修飾で修飾される、実施態様１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様１７］
前記センス鎖及び前記アンチセンス鎖のそれぞれが独立に、非環状ヌクレオチド、ＬＮＡ、ＨＮＡ、ＣｅＮＡ、２’−Ｏ−メトキシアルキル、２’−Ｏ−メチル、２’−Ｏ−アリル、２’−Ｃ−アリル、２’−デオキシ、２’−フルオロ、２’−Ｏ−Ｎ−メチルアセトアミド（２’−Ｏ−ＮＭＡ）、２’−Ｏ−ジメチルアミノエトキシエチル（２’−Ｏ−ＤＭＡＥＯＥ）、２’−Ｏ−アミノプロピル（２’−Ｏ−ＡＰ）、及び２’−ａｒａ−Ｆからなる群から選択される修飾で修飾される、実施態様１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様１８］
前記センス鎖及び前記アンチセンス鎖のそれぞれが１５〜３０ヌクレオチドを有する、実施態様１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様１９］
前記センス鎖が１９〜２２ヌクレオチドを有し、前記アンチセンス鎖が１９〜２５ヌクレオチドを有する、実施態様１３に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様２０］
少なくとも１つのＡＳＧＰＲリガンドをさらに含む、実施態様１に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様２１］
前記ＡＳＧＰＲリガンドが、前記センス鎖又は前記アンチセンス鎖の３’末端に付着している、実施態様２０に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様２２］
前記ＡＳＧＰＲリガンドが、１つ又は複数の切断可能なリンカーを介して付着している、実施態様２０に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様２３］
前記ＡＳＧＰＲリガンドが、２価又は３価の分岐リンカーを介して付着した１つ又は複数のＧａｌＮＡｃ誘導体である、実施態様２０に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様２４］
前記ＡＳＧＰＲリガンドが、
【化５３】
2021507709.tif 000002
である、実施態様２３に記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤。
［実施態様２５］
実施態様１〜２４のいずれかに記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤及び薬学的に許容される担体又は賦形剤を含む医薬組成物。
［実施態様２６］
実施態様１〜２５のいずれかに記載のキラル修飾ｄｓＲＮＡ剤を標的遺伝子の発現を阻害するのに十分な量で投与する工程を含む、標的遺伝子の発現を阻害するための方法。
［実施態様２７］
前記キラル修飾ｄｓＲＮＡ剤が、皮下投与又は静脈内投与によって投与される、実施態様３０に記載の方法。