【手続補正書】
【提出日】令和3年3月25日(2021.3.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒト対象を、頭部損傷について査定する一助となる方法であって、
ａ）推測される頭部への損傷後約２時間以内に、前記対象から得られた試料に対するアッセイを実施して、ユビキチンカルボキシ末端ヒドロラーゼＬ１（ＵＣＨ−Ｌ１）、グリア原線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）又はこれらの組合せを含む早期バイオマーカーの試料中レベルを測定するステップ、及び
ｂ）前記対象が、軽度、重度又は中等度〜重度の外傷性脳損傷（ＴＢＩ）を負っているのかどうかを決定するステップであって、（１）前記早期バイオマーカーの試料中レベルが、前記早期バイオマーカーの基準レベルより高い場合、前記対象が、中等度、重度若しくは中等度〜重度の外傷性脳損傷を有すると決定される、又は（２）前記早期バイオマーカーの試料中レベルが、前記早期バイオマーカーの基準レベルより低い場合、前記対象が、軽度外傷性脳損傷を有すると決定されるステップ
を含む方法。
【請求項２】
前記対象が、前記アッセイが実施される前に、又は実施された後において、ＧＣＳ（Ｇｌａｓｇｏｗ  Ｃｏｍａ  Ｓｃａｌｅ）スコアを受けている、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記対象が、前記ＧＣＳ（Ｇｌａｓｇｏｗ  Ｃｏｍａ  Ｓｃａｌｅ）スコアに基づき、中等度、重度又は中等度〜重度の外傷性脳損傷を有すると推測される、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記基準レベルが、中等度〜重度の外傷性脳損傷を有する対象と相関する、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記基準レベルが、３〜１２のＧＣＳ（Ｇｌａｓｇｏｗ  Ｃｏｍａ  Ｓｃａｌｅ）スコアと相関する、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記対象が、前記ＧＣＳ（Ｇｌａｓｇｏｗ  Ｃｏｍａ  Ｓｃａｌｅ）スコアに基づき、軽度外傷性脳損傷を有すると推測される、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
前記基準レベルが、軽度外傷性脳損傷を有する対象と相関する、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
前記基準レベルが、１３〜１５のＧＣＳ（Ｇｌａｓｇｏｗ  Ｃｏｍａ  Ｓｃａｌｅ）スコアと相関する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記基準レベルが、頭部損傷を負っていない対照対象と相関する、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
ＧＦＡＰについての前記基準レベルが、約９．０ｐｇ／ｍＬ、約１１．７ｐｇ／ｍＬ又は約４２．０ｐｇ／ｍＬである、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記基準レベルが、約９．０ｐｇ／ｍＬ、約１１．７ｐｇ／ｍＬ又は約４２．０ｐｇ／ｍＬの１．５倍、２．０倍、２．５倍、３．０倍、３．５倍、４．０倍、４．５倍又は５．０倍である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
ＵＣＨ−Ｌ１についての前記基準レベルが、約７３．５ｐｇ／ｍＬ、約８８．２ｐｇ／ｍＬ又は約３７１ｐｇ／ｍＬである、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
前記基準レベルが、約７３．５ｐｇ／ｍＬ、約８８．２ｐｇ／ｍＬ又は約３７１ｐｇ／ｍＬの１．５倍、２．０倍、２．５倍、３．０倍、３．５倍、４．０倍、４．５倍又は５．０倍である、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記基準レベルが、（ａ）少なくとも約６５％〜１００％の間の感度及び少なくとも約３０％〜１００％の間の特異度を有するアッセイにより決定される；（ｂ）少なくとも約９９％の感度及び少なくとも約７５％の特異度を有するアッセイにより決定される；（ｃ）少なくとも約５ｐｇ／ｍＬ〜約３５００ｐｇ／ｍＬの間である；又は（ｄ）少なくとも約１０ｐｇ／ｍＬ〜約１０００ｐｇ／ｍＬの間である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
ＵＣＨ−Ｌ１についての前記基準レベルが、少なくとも約７０ｐｇ／ｍＬ〜約３５００ｐｇ／ｍＬであり、ＧＦＡＰについての前記基準レベルが、少なくとも約５ｐｇ／ｍＬ〜約２０００ｐｇ／ｍＬである、請求項１〜９及び１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記試料が、推測される頭部への損傷後、約５分以内、約１０分以内、約１２分以内、約１５分以内、約２０分以内、約３０分以内、約６０分以内又は約９０分以内に採取される、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
中等度〜重度の外傷性脳損傷を有すると評価された前記対象を、外傷性脳損傷処置により処置するステップをさらに含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
軽度外傷性脳損傷を有すると評価された前記対象をモニタリングするステップをさらに含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
頭部への損傷を負った、又は負った可能性があるヒト対象に対して、頭部コンピュータ断層撮影（ＣＴ）スキャンを実施するのかどうかの査定の一助となる方法であって、
ａ）推測される頭部への損傷後約２時間以内に、前記対象から得られた試料に対するアッセイを実施して、試料中の、ユビキチンカルボキシ末端ヒドロラーゼＬ１（ＵＣＨ−Ｌ１）、グリア原線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）又はこれらの組合せを含む早期バイオマーカーの試料中レベルを測定するステップ、及び
ｂ）前記早期バイオマーカーの試料中レベルが、前記早期バイオマーカーの基準レベルより高い場合に、対象に対して、ＣＴスキャンを実施し、前記早期バイオマーカーの試料中レベルが、前記早期バイオマーカーの基準レベルより低い場合に、対象に対して、ＣＴスキャンを実施しないステップ
を含む方法。
【請求項２０】
前記対象が、前記アッセイが実施される前に、又は実施された後において、ＣＴスキャンを受けている、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記対象が、前記ＣＴスキャンに基づき、外傷性脳損傷を有すると推測される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記基準レベルが、陽性の頭部コンピュータ断層撮影と相関する、請求項１９〜２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２３】
前記基準レベルが、頭部損傷を負っていない対照対象と相関する、請求項１９に記載の方法。
【請求項２４】
ＧＦＡＰについての前記基準レベルが、約９．０ｐｇ／ｍＬ、約１１．７ｐｇ／ｍＬ又は約４２．０ｐｇ／ｍＬである、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記基準レベルが、約９．０ｐｇ／ｍＬ、約１１．７ｐｇ／ｍＬ又は約４２．０ｐｇ／ｍＬの１．５倍、２．０倍、２．５倍、３．０倍、３．５倍、４．０倍、４．５倍又は５．０倍である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
ＵＣＨ−Ｌ１についての前記基準レベルが、約７３．５ｐｇ／ｍＬ、約８８．２ｐｇ／ｍＬ又は約３７１ｐｇ／ｍＬである、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記基準レベルが、約７３．５ｐｇ／ｍＬ、約８８．２ｐｇ／ｍＬ又は約３７１ｐｇ／ｍＬの１．５倍、２．０倍、２．５倍、３．０倍、３．５倍、４．０倍、４．５倍又は５．０倍である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記基準レベルが、（ａ）少なくとも約６５％〜１００％の間の感度及び少なくとも約３０％〜１００％の間の特異度を有するアッセイにより決定される；（ｂ）少なくとも約９９％の感度及び少なくとも約７５％の特異度を有するアッセイにより決定される；（ｃ）少なくとも約５ｐｇ／ｍＬ〜約３５００ｐｇ／ｍＬの間である；又は（ｄ）少なくとも約１０ｐｇ／ｍＬ〜約１０００ｐｇ／ｍＬの間である、請求項１９〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
ＵＣＨ−Ｌ１についての前記基準レベルが、少なくとも約７０ｐｇ／ｍＬ〜約３５００ｐｇ／ｍＬの間であり、ＧＦＡＰについての前記基準レベルが、少なくとも約５ｐｇ／ｍＬ〜約２０００ｐｇ／ｍＬの間である、請求項１９〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記試料が、推測される頭部への損傷後、約５分以内、約１０分以内、約１２分以内、約１５分以内、約２０分以内、約３０分以内、約６０分以内又は約９０分以内に採取される、請求項１９〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
ＵＣＨ−Ｌ１のレベルを測定するステップが、イムノアッセイ又は臨床化学アッセイによりなされる、請求項１〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
ＵＣＨ−Ｌ１のレベルを測定するステップが、
Ａ．前記試料を、同時に、又は逐次的に、任意の順序において、
（１）ＵＣＨ−Ｌ１上又はＵＣＨ−Ｌ１断片上のエピトープに結合してＵＣＨ−Ｌ１捕捉抗体−ＵＣＨ−Ｌ１抗原複合体を形成するＵＣＨ−Ｌ１捕捉抗体、及び
（２）検出可能な標識を含み、前記ＵＣＨ−Ｌ１捕捉抗体が結合していないＵＣＨ−Ｌ１上のエピトープに結合してＵＣＨ−Ｌ１抗原−ＵＣＨ−Ｌ１検出抗体複合体を形成するＵＣＨ−Ｌ１検出抗体
と接触させて、ＵＣＨ−Ｌ１捕捉抗体−ＵＣＨ−Ｌ１抗原−ＵＣＨ−Ｌ１検出抗体複合体を形成すること、並びに
Ｂ．ＵＣＨ−Ｌ１の、前記試料中量又は前記試料中濃度を、前記ＵＣＨ−Ｌ１捕捉抗体−ＵＣＨ−Ｌ１抗原−ＵＣＨ−Ｌ１検出抗体複合体内の前記検出可能な標識により発生したシグナルに基づき測定すること
を含む、請求項１〜３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３３】
ＧＦＡＰのレベルを測定するステップが、イムノアッセイ又は臨床化学アッセイによりなされる、請求項１〜３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３４】
ＧＦＡＰのレベルを測定するステップが、
Ａ．前記試料を、同時に、又は逐次的に、任意の順序において、
（１）ＧＦＡＰ上又はＧＦＡＰ断片上のエピトープに結合してＧＦＡＰ捕捉抗体−ＧＦＡＰ抗原複合体を形成するＧＦＡＰ捕捉抗体、及び
（２）検出可能な標識を含み、前記ＧＦＡＰ捕捉抗体が結合していないＧＦＡＰ上のエピトープに結合してＧＦＡＰ抗原−ＧＦＡＰ検出抗体複合体を形成するＧＦＡＰ検出抗体
と接触させて、ＧＦＡＰ捕捉抗体−ＧＦＡＰ抗原−ＧＦＡＰ検出抗体複合体を形成すること、並びに
Ｂ．ＧＦＡＰの、前記試料中量又は前記試料中濃度を、前記ＧＦＡＰ捕捉抗体−ＧＦＡＰ抗原−ＧＦＡＰ検出抗体複合体内の前記検出可能な標識により発生したシグナルに基づき測定すること
を含む、請求項１〜３３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３５】
前記試料が、全血試料、血清試料、脳脊髄液試料及び血漿試料からなる群から選択される、請求項１〜３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３６】
前記対象が、物理的振盪、閉鎖性頭部外傷若しくは開放性頭部外傷をもたらす外部の機械的力若しくは他の力、１回以上の転倒、爆発若しくは爆破による鈍的衝撃により引き起こされた頭部への損傷又は他の種類の鈍力外傷を負った後において、前記試料が得られる、請求項１〜３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３７】
前記対象が、化学物質、毒素又は化学物質と毒素との組合せを摂取した、又はこれらへと曝露された後において、前記試料が得られる、請求項１〜３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３８】
前記化学物質又は毒素が、火、カビ、アスベスト、害虫駆除剤、殺虫剤、有機溶剤、塗料、糊、ガス、有機金属、乱用薬物又はこれらの１つ以上の組合せである、請求項３７に記載の方法。
【請求項３９】
前記試料が、自己免疫疾患、代謝性障害、脳腫瘍、低酸素症、ウイルス、髄膜炎、水頭症又はこれらの組合せを患う対象から得られる、請求項１〜３５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４０】
前記対象の臨床状態、前記対象の検査値、軽度、中等度、重度又は中等度〜重度の外傷性脳損傷の罹患についての前記対象の分類、前記対象による低レベル又は高レベルのＵＣＨ−Ｌ１、ＧＦＡＰ又はＵＣＨ−Ｌ１及びＧＦＡＰの呈示、及び前記対象が頭部への損傷を負った可能性がある任意の事象のタイミングからなる群から選択される因子に関わらず、任意の対象に対して実行されうる、請求項１〜３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４１】
前記試料が、全血試料、血清試料、血漿試料、脳脊髄液試料、組織試料又は体液である、請求項１〜４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項４２】
前記アッセイが、イムノアッセイである、請求項４１に記載の方法。
【請求項４３】
前記アッセイが、臨床化学アッセイである、請求項４１に記載の方法。
【請求項４４】
前記アッセイが、単一分子検出アッセイ又はポイントオブケアアッセイである、請求項４１に記載の方法。