【手続補正書】
【提出日】令和2年12月16日(2020.12.16)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヘテロ二量体ポリペプチドを含む多量体ポリペプチドであって、
前記ヘテロ二量体ポリペプチドは、
ａ）ｉ）ヒトパピローマウイルスＥ７エピトープを含むペプチドエピトープ、及び
ｉｉ）β２−ミクログロブリンポリペプチドである第１の主要組織適合抗原複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド
を含む第１のポリペプチドと、
ｂ）ｉ）ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドである第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチド
を含む第２のポリペプチドと
を含んでおり、
前記多量体ポリペプチドは、１つまたは複数の免疫調節ドメインを含んでおり、
前記１つまたは複数の免疫調節ドメインは、
Ａ）前記第１のポリペプチドのＣ末端、
Ｂ）前記第２のポリペプチドのＮ末端、
Ｃ）前記第２のポリペプチドのＣ末端、または
Ｄ）前記第１のポリペプチドのＣ末端及び前記第２のポリペプチドのＮ末端
に位置し、
前記１つまたは複数の免疫調節ドメインのうちの少なくとも１つは、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列を有するアルファポリペプチド、ベータポリペプチド、及びガンマポリペプチドを含むＩＬ−２受容体（ＩＬ２Ｒ）に対する配列番号１に示されるＩＬ−２アミノ酸配列の結合親和性と比較して、前記ＩＬ２Ｒに対する結合親和性の低下を示す、変異ＩＬ−２ポリペプチドである、
多量体ポリペプチド。
【請求項２】
前記第２のポリペプチドは、１つまたは２つの免疫調節ポリペプチドを含んでおり、
各免疫調節ポリペプチドは、
配列番号１に示されるものに対してＨ１６Ａ置換を含む変異ＩＬ−２ポリペプチド、
ならびに
配列番号１に示されるものに対してＨ１６Ａ置換及びＦ４２Ａ置換を含む変異ＩＬ−
２ポリペプチド
からなる群から選択される、
請求項１に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項３】
前記ペプチドエピトープは、ＨＰＶ１６Ｅ７／８２〜９０（ＬＬＭＧＴＬＧＩＶ、配列番号１１）、ＨＰＶ１６Ｅ７／８６〜９３（ＴＬＧＩＶＣＰＩ、配列番号１２）、ＨＰＶ１６Ｅ７／１１〜２０（ＹＭＬＤＬＱＰＥＴＴ、配列番号１３）、及びＨＰＶ１６Ｅ７／１１〜１９（ＹＭＬＤＬＱＰＥＴ、配列番号８７）からなる群から選択されるアミノ酸配列を有する、
請求項１または２に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項４】
前記ＩｇＦｃポリペプチドは、Ｌ２３４Ａ置換及びＬ２３５Ａ置換を含む、
請求項１〜３のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項５】
前記β２−ミクログロブリンポリペプチドは、図６に示される任意のアミノ酸配列のアミノ酸２１〜１１９を含み、任意選択で、前記アミノ酸配列はＲ１２Ｃ置換を含む、
請求項１〜４のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項６】
前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、ＨＬＡ−Ａの重鎖である、
請求項１〜５のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項７】
前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図５Ａに示されるアミノ酸配列（配列番号６５）のアミノ酸２５〜３６５を含み、任意選択で、前記アミノ酸配列は、Ｙ８４Ａ置換、Ａ２３６Ｃ置換、または、Ｙ８４Ａ置換及びＡ２３６Ｃ置換の両方を含む、
請求項１〜６のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項８】
前記第１のポリペプチドと前記第２のポリペプチドとが、非共有結合で結合されている、
請求項１〜７のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項９】
前記第１のポリペプチドと前記第２のポリペプチドとが、互いに共有結合で連結されている、
請求項１〜７のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１０】
前記共有結合は、ジスルフィド結合を介するものである、
請求項９に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１１】
前記ジスルフィド結合は、前記β２−ミクログロブリンポリペプチド中のＣｙｓ残基とＭＨＣ重鎖ポリペプチド中のＣｙｓ残基とを結合する、
請求項１０に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１２】
前記β２−ミクログロブリンポリペプチドのアミノ酸残基１２でのＣｙｓが、ＭＨＣ重鎖ポリペプチドのアミノ酸残基２３６でのＣｙｓにジスルフィド結合している、
請求項１１に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１３】
前記第１のポリペプチドは、前記ペプチドエピトープと前記β２−ミクログロブリンポリペプチドとの間にリンカーを含んでおり、
ジスルフィド結合は、前記リンカーに存在するＣｙｓとＭＨＣ重鎖ポリペプチドのＣｙｓとを連結している、
請求項１０に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１４】
ａ）ｉ）アミノ酸配列ＹＭＬＤＬＱＰＥＴＴ（配列番号１３）を含み、１０個のアミノ酸の長さを有するペプチドエピトープ、及び
ｉｉ）β２−ミクログロブリンポリペプチドである第１の主要組織適合抗原複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド
をＮ末端からＣ末端の順序で含む第１のポリペプチドと、
ｂ）ｉ）配列番号１に示されるものに対してＨ１６Ａ置換及びＦ４２Ａ置換を含む変異ＩＬ−２ポリペプチドである第１の免疫調節ポリペプチド、
ｉｉ）配列番号１に示されるものに対してＨ１６Ａ置換及びＦ４２Ａ置換を含む変異ＩＬ−２ポリペプチドである第２の免疫調節ポリペプチド、
ｉｉｉ）ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドである第２のＭＨＣポリペプチド、ならびに
ｉｖ）免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチド
をＮ末端からＣ末端の順序で含む第２のポリペプチドと
を含んでおり、
前記β２−ミクログロブリンポリペプチドは、図６に示される任意のアミノ酸配列のアミノ酸２１〜１１９を含み、任意選択で、前記アミノ酸配列はＲ１２Ｃ置換を含んでおり、
前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図５Ａに示されるアミノ酸配列（配列番号６５）のアミノ酸２５〜３６５を含み、任意選択で、前記アミノ酸配列は、Ｙ８４Ａ置換、Ａ２３６Ｃ置換、または、Ｙ８４Ａ置換及びＡ２３６Ｃ置換の両方を含んでおり、
前記第１のポリペプチドと前記第２のポリペプチドとが、ジスルフィド結合を介して互いに共有連結されており、
前記ジスルフィド結合は、前記β２−ミクログロブリンポリペプチドのアミノ酸残基１２でのＣｙｓとＭＨＣ重鎖ポリペプチドのアミノ酸残基２３６でのＣｙｓとを連結している、
請求項１に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１５】
ｉ）前記β２−ミクログロブリンポリペプチドは、図３４Ａに示されるアミノ酸配列を有し、
ｉｉ）前記変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図３４Ｂに示されるアミノ酸配列を有し、
ｉｉｉ）前記ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドは、図３４Ｃに示されるアミノ酸配列を有し、
ｉｖ）前記ＩｇＦｃポリペプチドは、図３３Ａ、図３３Ｂ、図３３Ｃ、または図３３Ｄに示されるアミノ酸配列を有している、
請求項１４に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１６】
前記第１のポリペプチドは、前記ペプチドエピトープと前記β２−ミクログロブリンポリペプチドとの間にリンカーを含んでおり、
前記第２のポリペプチドは、
ａ）前記変異ＩＬ−２ポリペプチドの第１のコピーと前記変異ＩＬ−２ポリペプチドの第２のコピーとの間、
ｂ）前記変異ＩＬ−２ポリペプチドと前記ＭＨＣ重鎖ポリペプチドとの間、及び
ｃ）前記ＭＨＣ重鎖ポリペプチドとＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドとの間
のうちの１つまたは複数にペプチドリンカーを含んでいる、
請求項１４に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１７】
前記ペプチドリンカーが、（ＧＧＧＧＳ）3 、（ＧＧＧＧＳ）4 、及びＡＡＡＧＧから選択される、
請求項１６に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１８】
ａ１）ｉ）アミノ酸配列ＹＭＬＤＬＱＰＥＴＴ（配列番号１３）を有するエピトープ、
ｉｉ）アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）n （ｎ＝３）（配列番号８９）を有するリンカー、及び
ｉｉｉ）図３４Ａに示されるアミノ酸配列（配列番号１７）を有するβ２−ミクログロブリンポリペプチド
を含む第１のポリペプチド、ならびに、
ｂ１）図２２に示されるアミノ酸配列を有する含む第２のポリペプチド、
または、
ａ２）ｉ）アミノ酸配列ＹＭＬＤＬＱＰＥＴＴ（配列番号１３）を有するエピトープ、
ｉｉ）アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）n （ｎ＝３）（配列番号８９）を有するリンカー、及び
ｉｉｉ）図３４Ａに示されるアミノ酸配列（配列番号１７）を有するβ２−ミクログロブリンポリペプチド
を含む第１のポリペプチド、ならびに、
ｂ２）図２５に示されるアミノ酸配列を有する含む第２のポリペプチド、
または、
ａ３）ｉ）アミノ酸配列ＹＭＬＤＬＱＰＥＴＴ（配列番号１３）を有するエピトープ、
ｉｉ）アミノ酸配列（ＧＧＧＧＳ）n （ｎ＝３）（配列番号８９）を有するリンカー、及び
ｉｉｉ）図３４Ａに示されるアミノ酸配列（配列番号１７）を有するβ２−ミクログロブリンポリペプチド
を含む第１のポリペプチド、ならびに、
ｂ３）図２８に示されるアミノ酸配列を有する含む第２のポリペプチド
を含む、
請求項１４〜１７のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項１９】
請求項１〜１８のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチドを２つ含んでおり、前記２つの多量体ポリペプチドのそれぞれは、免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチドを含んでいる、
タンパク質。
【請求項２０】
２つのヘテロ二量体は、前記ヘテロ二量体に存在するＦｃポリペプチドを介して互いにジスルフィド連結されている、
請求項１９に記載のタンパク質。
【請求項２１】
請求項１〜１８のいずれか１項に係る第１のポリペプチド及び／または第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、
核酸。
【請求項２２】
請求項２１に記載の核酸を含む、
発現ベクター。
【請求項２３】
請求項２２に記載の発現ベクターで遺伝子改変されている、
宿主細胞。
【請求項２４】
請求項１〜１８のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド、または請求項１９もしくは２０に記載のタンパク質を産生する方法であって、
請求項２３に記載の宿主細胞が前記多量体ポリペプチドを合成する条件下での培地において、前記宿主細胞をインビトロにて培養することを含む、
方法。
【請求項２５】
エピトープ特異的Ｔ細胞を選択的に活性化する方法であって、
前記エピトープ特異的Ｔ細胞と、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチドまたは請求項１９もしくは２０に記載のタンパク質との接触を含んでおり、
前記接触によって前記エピトープ特異的Ｔ細胞が選択的に活性化される、
方法。
【請求項２６】
前記接触は、インビトロのものである、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記接触は、インビボのものである、請求項２５に記載の方法。
【請求項２８】
ａ）請求項１〜１８のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド、または請求項１９もしくは２０に記載のタンパク質、及び、
ｂ）医薬的に許容可能な賦形剤
を含む、
組成物。
【請求項２９】
個体のがんを治療するための薬剤の製造時における請求項１〜１８のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド、請求項１９もしくは２０に記載のタンパク質、または請求項２８に記載の組成物の使用。
【請求項３０】
前記薬剤は、皮下に、静脈内に、または腫瘍周囲に投与されるものである、
請求項２９に記載の使用。
【請求項３１】
前記薬剤は、全身的に、治療部位から遠い位置に、局所的に、または、治療部位もしくはその近傍に投与されるものである、
請求項２９または３０に記載の使用。
【請求項３２】
前記薬剤は、静脈内に投与されるものである、
請求項３０に記載の使用。
【請求項３３】
ヘテロ二量体ポリペプチドを含む多量体ポリペプチドであって、
前記ヘテロ二量体ポリペプチドは、
ａ）ｉ）がん関連抗原に存在するエピトープを含むペプチド、及び
ｉｉ）β２−ミクログロブリンポリペプチドである第１の主要組織適合抗原複合体（ＭＨＣ）ポリペプチド
を含む第１のポリペプチドと、
ｂ）ｉ）ＭＨＣクラスＩ重鎖ポリペプチドである第２のＭＨＣポリペプチド、及び
ｉｉ）免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチド
を含む第２のポリペプチドと
を含んでおり、
前記多量体ポリペプチドは、１つまたは複数の免疫調節ドメインを含んでおり、
前記１つまたは複数の免疫調節ドメインのうちの少なくとも１つは、配列番号１に示されるものに対して少なくとも８５％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を含む変異ＩＬ−２ポリペプチドであり、
前記変異ＩＬ−２ポリペプチドは、配列番号１に示されるものと比較して１つまたは複数のアミノ酸置換を有し、
前記変異ＩＬ−２ポリペプチドは、図３Ａ〜３Ｃに示されるアミノ酸配列を有するアルファポリペプチド、ベータポリペプチド、及びガンマポリペプチドを含むＩＬ−２受容体（ＩＬ−２Ｒ）に対する配列番号１に示されるＩＬ−２アミノ酸配列の結合親和性と比較して、前記ＩＬ−２Ｒに対する結合親和性の低下を示す、
多量体ポリペプチド。
【請求項３４】
前記第２のポリペプチドは、
ｉ）配列番号１に示されるものに対してＨ１６Ａ置換及びＦ４２Ａ置換を含む変異ＩＬ−２ポリペプチドである第１の免疫調節ポリペプチドと、
ｉｉ）配列番号１に示されるものに対してＨ１６Ａ置換及びＦ４２Ａ置換を含む変異ＩＬ−２ポリペプチドである第２の免疫調節ポリペプチドと
を含む、
請求項３３に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項３５】
前記第１のポリペプチドと前記第２のポリペプチドとが、前記β２−ミクログロブリンポリペプチド中のＣｙｓ残基とＭＨＣ重鎖ポリペプチド中のＣｙｓ残基とを結合するジスルフィド結合を介して、互いに共有結合で連結されており、
任意選択で、前記β２−ミクログロブリンポリペプチドのアミノ酸残基１２でのＣｙｓが、ＭＨＣ重鎖ポリペプチドのアミノ酸残基２３６でのＣｙｓにジスルフィド結合している、
請求項３３または３４に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項３６】
前記第１のポリペプチドは、前記エピトープと前記β２−ミクログロブリンポリペプチドとの間にリンカーを含んでおり、
前記第２のポリペプチドは、
ａ）前記変異ＩＬ−２ポリペプチドの第１のコピーと前記変異ＩＬ−２ポリペプチドの第２のコピーとの間、
ｂ）前記変異ＩＬ−２ポリペプチドとＭＨＣ重鎖ポリペプチドとの間、及び
ｃ）前記ＭＨＣ重鎖ポリペプチドとＩｇＧ１  Ｆｃポリペプチドとの間
のうちの１つまたは複数にペプチドリンカーを含んでおり、
任意選択で、前記ペプチドリンカーが、（ＧＧＧＧＳ）3 、（ＧＧＧＧＳ）4 、及びＡＡＡＧＧから選択される、
請求項３３〜３５のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド。
【請求項３７】
請求項３３〜３６のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチドを２つ含んでおり、前記２つの多量体ポリペプチドのそれぞれは、免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｆｃポリペプチドを含んでおり、
任意選択で、２つのヘテロ二量体は、前記ヘテロ二量体に存在するＦｃポリペプチドを介して互いにジスルフィド連結されている、
タンパク質。
【請求項３８】
請求項３３〜３６のいずれか１項に係る第１のポリペプチド及び／または第２のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、
核酸。
【請求項３９】
請求項３８に記載の核酸を含む、
発現ベクター。
【請求項４０】
請求項３９に記載の発現ベクターで遺伝子改変されている、
宿主細胞。
【請求項４１】
請求項３３〜３６のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド、または請求項３７に記載のタンパク質を産生する方法であって、
請求項４０に記載の宿主細胞が前記多量体ポリペプチドを合成する条件下での培地において、前記宿主細胞をインビトロにて培養することを含む、
方法。
【請求項４２】
エピトープ特異的Ｔ細胞を選択的に活性化する方法であって、
前記エピトープ特異的Ｔ細胞と、請求項３３〜３６のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチドまたは請求項３７に記載のタンパク質との接触を含んでおり、
前記接触によって前記エピトープ特異的Ｔ細胞が選択的に活性化され、
前記接触は、インビトロまたはインビボのものである、
方法。
【請求項４３】
ａ）請求項３３〜３６のいずれか１項に記載の多量体ポリペプチド、または請求項３７に記載のタンパク質、及び、
ｂ）医薬的に許容可能な賦形剤
を含む、
組成物。
【請求項４４】
個体のがんを治療するための薬剤の製造時における請求項４３に記載の組成物の使用。