【手続補正書】
【提出日】令和3年9月17日(2021.9.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
がん特異的ｐ５３変異によってコードされている変異型ｐ５３アミノ酸配列に対して抗原特異性を有するＴ細胞を単離する方法であって、
少なくとも１つの変異型ｐ５３アミノ酸配列を提示するように患者の自己抗原提示細胞（ＡＰＣ）を誘導することと；
前記患者の自己Ｔ細胞を、前記変異型ｐ５３アミノ酸配列を提示する前記自己ＡＰＣと共培養することと；
（ａ）前記変異型ｐ５３アミノ酸配列を提示する前記自己ＡＰＣと共培養され、かつ（ｂ）前記患者が発現する主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）分子の枠の中で提示される前記変異型ｐ５３アミノ酸配列に対して抗原特異性を有する前記自己Ｔ細胞を選択して、前記がん特異的ｐ５３変異によってコードされている前記変異型ｐ５３アミノ酸配列に対して抗原特異性を有する単離されたＴ細胞を提供することと、
を含む方法。
【請求項２】
前記変異型ｐ５３アミノ酸配列を提示するように前記患者の自己ＡＰＣを誘導することが、前記変異型ｐ５３アミノ酸配列を含むペプチド、又はペプチドのプールであって、前記プールにおける各ペプチドが異なる変異型ｐ５３アミノ酸配列を含むプールをＡＰＣにパルスすることを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ペプチド又はペプチドのプールが、配列番号２〜１３の１つ以上の変異型ｐ５３ペプチドを含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記変異型ｐ５３アミノ酸配列を提示するように前記患者の自己ＡＰＣを誘導することが、前記変異型ｐ５３アミノ酸配列をコードしているヌクレオチド配列を前記ＡＰＣに導入することを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記自己ＡＰＣに導入される前記ヌクレオチド配列が、ｐ５３遺伝子を含む少なくとも１つのミニ遺伝子を含むタンデムミニ遺伝子（ＴＭＧ）コンストラクトであり、ｐ５３遺伝子を含む各ミニ遺伝子について、各ｐ５３遺伝子が、変異型ｐ５３アミノ酸配列をコードしているがん特異的ｐ５３変異を含み、前記ＴＭＧコンストラクトにおける各ｐ５３遺伝子が、異なる変異型ｐ５３アミノ酸配列をコードしている、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記ＴＭＧコンストラクトが、配列番号２〜１３の１つ以上の変異型ｐ５３ペプチドをコードしている、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記ＴＭＧコンストラクトが、配列番号１４のアミノ酸配列をコードしている、請求項５に記載の方法。
【請求項８】
前記変異型ｐ５３アミノ酸配列に対して抗原特異性を有する前記自己Ｔ細胞を選択することが、前記変異型ｐ５３アミノ酸配列に対して抗原特異性を有する前記自己Ｔ細胞を選択的に成長させることを含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記変異型ｐ５３アミノ酸配列に対して抗原特異性を有する前記自己Ｔ細胞を選択することが、プログラム細胞死１（ＰＤ−１）、リンパ球活性化遺伝子３（ＬＡＧ−３）、Ｔ細胞免疫グロブリン及びムチンドメイン３（ＴＩＭ−３）、４−１ＢＢ、ＯＸ４０、並びにＣＤ１０７ａのうちのいずれか１つ以上を発現するＴ細胞を選択することを含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記変異型ｐ５３アミノ酸配列に対して抗原特異性を有する前記自己Ｔ細胞を選択することが、（ｉ）ネガティブコントロールによって分泌される１つ以上のサイトカインの量と比較して、前記変異型ｐ５３アミノ酸配列を提示するＡＰＣと共培養した際に、より多量の前記１つ以上のサイトカインを分泌するか、又は（ｉｉ）前記１つ以上のサイトカインを分泌するネガティブコントロールＴ細胞の数と比較して、前記変異型ｐ５３アミノ酸配列を提示するＡＰＣと共培養した際に、１つ以上のサイトカインを分泌するＴ細胞の数が少なくとも２倍であるＴ細胞を選択することを含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記１つ以上のサイトカインが、インターフェロン（ＩＦＮ）−γ、インターロイキン（ＩＬ）−２、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）、顆粒球／単球コロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１７、及びＩＬ−２２を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
がん特異的ｐ５３変異によってコードされている変異型ｐ５３アミノ酸配列に対して抗原特異性を有するＴ細胞受容体（ＴＣＲ）又はその抗原結合部分を単離する方法であって、
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法に従って、がん特異的ｐ５３変異によってコードされている変異型ｐ５３アミノ酸配列に対して抗原特異性を有するＴ細胞を単離することと；
選択された自己Ｔ細胞から、ＴＣＲ又はその抗原結合部分をコードしているヌクレオチド配列を単離することであって、前記ＴＣＲ又はその抗原結合部分が、前記がん特異的ｐ５３変異によってコードされている前記変異型ｐ５３アミノ酸配列に対して抗原特異性を有することと、
を含む方法。
【請求項１３】
がん特異的ｐ５３変異によってコードされている変異型ｐ５３アミノ酸配列に対して抗原特異性を有するＴＣＲ又はその抗原結合部分を発現する細胞の集団を調製する方法であって、
請求項１２に記載の方法に従ってＴＣＲ又はその抗原結合部分を単離することと、
単離されたＴＣＲ又はその抗原結合部分をコードしているヌクレオチド配列を末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）に導入して、前記ＴＣＲ又はその抗原結合部分を発現する細胞を得ることと、
を含む方法。
【請求項１４】
がん特異的ｐ５３変異によってコードされている変異型ｐ５３アミノ酸配列に対して抗原特異性を有するＴ細胞の集団を調製する方法であって、
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法に従ってＴ細胞を単離することと、
選択された自己Ｔ細胞の数を拡大して、前記がん特異的ｐ５３変異によってコードされている前記変異型ｐ５３アミノ酸配列に対して抗原特異性を有するＴ細胞の集団を得ることと、
を含む方法。
【請求項１５】
その細胞の数を拡大することが、選択された細胞をフィーダーＰＢＭＣ、インターロイキン（ＩＬ）−２、及びＯＫＴ３の抗体と共に培養することを含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の方法に従って調製された、単離された細胞の集団。
【請求項１７】
請求項１６に記載の単離された細胞の集団と薬学的に許容し得る担体とを含む医薬組成物。
【請求項１８】
患者におけるがんの治療又は予防のための剤を製造する方法であって、
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法に従って、がん特異的ｐ５３変異によってコードされている変異型ｐ５３アミノ酸配列に対して抗原特異性を有するＴ細胞を単離することと；
請求項１２に記載の方法に従ってＴ細胞受容体（ＴＣＲ）又はその抗原結合部分を単離することと；
請求項１３に記載の方法に従ってＴＣＲ又はその抗原結合部分を発現する細胞の集団を調製することと；
請求項１４又は１５に記載の方法に従ってがん特異的ｐ５３変異によってコードされている変異型ｐ５３アミノ酸配列に対して抗原特異性を有するＴ細胞の集団を調製することと
を含み、
前記Ｔ細胞の集団が前記剤に製剤化される、方法。
【請求項１９】
前記がんが、上皮がんである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記がんが、胆管がん、黒色腫、結腸がん、直腸がん、卵巣がん、子宮内膜がん、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、神経膠芽腫、子宮頸がん、頭頸部がん、乳がん、膵臓がん、又は膀胱がんである、請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
前記単離された細胞の集団が、前記患者にとって自己である、請求項１８〜２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２２】
前記単離された細胞の集団が、前記患者にとって同種である、請求項１８〜２０のいずれか一項に記載の方法。