【手続補正書】
【提出日】令和3年6月1日(2021.6.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
キメラ抗原受容体(CAR)であって、以下：
細胞外リガンド結合ドメイン；
膜貫通ドメイン；
細胞内シグナル伝達ドメイン；及び
ある化合物の存在下でユビキチンリガーゼにより結合され得るユビキチン標的化タンパク質
を含み、
ユビキチン標的化タンパク質はセレブロン結合部位のヘアピンモチーフを含む135未満のアミノ酸長からなる、
前記キメラ抗原受容体。
【請求項２】
細胞外リガンド結合ドメインが、抗B細胞成熟抗原(BCMA)一本鎖Fvアミノ酸配列であり、場合により、抗BCMA一本鎖Fvアミノ酸配列が配列番号29を含む、請求項１に記載のCAR。
【請求項３】
膜貫通ドメインが、CD4、CD8、CD3又はCD28の膜貫通ドメインから選択され、場合により、CD8α膜貫通ドメインが配列番号17を含む、請求項１又は２に記載のCAR。
【請求項４】
細胞内シグナル伝達ドメインが免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ(ITAM)であり、場合により、ITAMが、CD3ゼータ、FcRガンマ、FcRベータ、FcRイプシロン、CD3ガンマ、CD3デルタ、CD3イプシロン、CD5、CD22、CD79a、CD79b又はCD66dのITAMから選択され、特に、CD3ζシグナル伝達ドメインが配列番号20を含む、請求項１〜３のいずれか1項に記載のCAR。
【請求項５】
共刺激ドメインをさらに含み、場合により、共刺激ドメインが、CD28、CD27、4-1BB(CD137)、OX40(CD134)、ICOS(CD278)、CD30、CD40、PD-1(CD279)、CD2、CD7、NKG2C(CD94)又はB7-H3(CD276)の共刺激ドメインから選択され、特に、共刺激ドメインが配列番号21を含む、請求項１〜４のいずれか1項に記載のCAR。
【請求項６】
ユビキチン標的化タンパク質がCARのC末端上にあり、場合により、ユビキチン標的化タンパク質が、リンカーにより細胞内シグナル伝達ドメインから分離されており、例えば、リンカーが、(GS)n及び/又は(GGGGS)pを含み、ここでn=1〜10且つp=1〜3であり、特に、リンカーが、配列番号23〜26のいずれか1つを含む、請求項１〜５のいずれか1項に記載のCAR。
【請求項７】
化合物が免疫調節イミド薬(IMiD)であり、場合により、IMiDが、サリドマイド、レナリドミド、ポマリドミド又はその機能的誘導体若しくは類似体から選択される、請求項１〜６のいずれか1項に記載のCAR。
【請求項８】
ユビキチン標的化タンパク質が、配列番号6〜14及び27からなる群から選択される配列からなる、請求項１〜７のいずれか1項に記載のCAR。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか1項に記載のCARをコードする、単離されたポリヌクレオチド。
【請求項１０】
請求項９に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
【請求項１１】
請求項９に記載のポリヌクレオチド又は請求項１０に記載の発現ベクターを含む細胞であって、場合により、免疫調節細胞であり、例えば、T細胞である、細胞。
【請求項１２】
治療法において使用するための、請求項１１に記載の細胞。
【請求項１３】
請求項１１に記載の複数の細胞を含む医薬組成物。
【請求項１４】
治療法、例えば遺伝子療法の方法において使用するための、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
免疫調節細胞を操作する方法であって、以下：
(a) 免疫調節細胞を提供すること；
(b) 請求項９に記載のポリヌクレオチド又は請求項１０に記載の発現ベクターを、前記免疫調節細胞に形質導入又はトランスフェクトすること；及び
(c) 前記ポリヌクレオチド又は前記発現ベクターを、免疫調節細胞中で発現させることを含む、前記方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２２４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２２４】
本明細書中に記載される実施形態は、本発明の全ての態様に適用され得ることが理解されるであろう。さらに、この明細書中で引用される全ての刊行物、例えば限定するものではないが、特許及び特許出願などは、完全に示されるかのように参照により本明細書中に組み込まれる。
本発明は、例えば以下の実施形態を包含する：
［実施形態１］ポリペプチド配列のレベルを制御する方法であって、以下：
a) 前記ポリペプチド配列と、セレブロン結合部位のヘアピンモチーフを含む135未満のアミノ酸長からなるユビキチン標的化タンパク質とを含む融合タンパク質を投与すること、及び
b) ユビキチン標的化タンパク質とセレブロンとの結合を媒介する化合物を投与することによりポリペプチド配列のレベルを制御すること
を含む、前記方法。
［実施形態２］ヘアピンモチーフが、配列番号2〜5、又は各アミノ酸配列中に存在するGLY残基を除いて1又は2個のアミノ酸が置換、付加又は欠失されていてもよいその機能的変異体からなる群から選択される配列を含む、実施形態１に記載の方法。
［実施形態３］ヘアピンモチーフが、配列番号2〜5からなる群から選択される配列を含む、実施形態１〜２のいずれかに記載の方法。
［実施形態４］ユビキチン標的化タンパク質が、100未満のアミノ酸長からなるポリペプチド配列である、実施形態１〜３のいずれかに記載の方法。
［実施形態５］ユビキチン標的化タンパク質が、ユビキチン化部位として機能するリシン残基を含む、実施形態１〜４のいずれかに記載の方法。
［実施形態６］ユビキチン標的化タンパク質が、配列番号6〜14及び27からなる群から選択される配列を含む、実施形態１〜５のいずれかに記載の方法。
［実施形態７］ユビキチン標的化タンパク質とセレブロンとの結合を媒介する化合物を投与することにより制御されるポリペプチド配列が、膜貫通タンパク質である、実施形態１〜６のいずれかに記載の方法。
［実施形態８］ユビキチン標的化タンパク質とセレブロンとの結合を媒介する化合物を投与することにより制御されるポリペプチド配列が、キメラ抗原受容体(CAR)である、実施形態１〜７のいずれかに記載の方法。
［実施形態９］化合物が免疫調節イミド薬(IMiD)である、実施形態１〜８のいずれかに記載の方法。
［実施形態１０］IMiDが、サリドマイド、レナリドミド、ポマリドミド又はその機能的誘導体若しくは類似体から選択される、実施形態９に記載の方法。
［実施形態１１］キメラ抗原受容体(CAR)であって、以下：
細胞外リガンド結合ドメイン；
膜貫通ドメイン；
細胞内シグナル伝達ドメイン；及び
ある化合物の存在下でユビキチンリガーゼにより結合され得る実施形態１〜６のいずれかに記載のユビキチン標的化タンパク質
を含む、前記キメラ抗原受容体。
［実施形態１２］細胞外リガンド結合ドメインが、抗B細胞成熟抗原(BCMA)一本鎖Fvアミノ酸配列である、実施形態１１に記載のCAR。
［実施形態１３］抗BCMA一本鎖Fvアミノ酸配列が配列番号29を含む、実施形態１２に記載のCAR。
［実施形態１４］膜貫通ドメインが、CD4、CD8、CD3又はCD28の膜貫通ドメインから選択される、実施形態１１〜１３のいずれかに記載のCAR。
［実施形態１５］CD8α膜貫通ドメインが配列番号17を含む、実施形態１４に記載のCAR。
［実施形態１６］細胞内シグナル伝達ドメインが免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ(ITAM)である、実施形態１１〜１５のいずれかに記載のCAR。
［実施形態１７］ITAMが、CD3ゼータ、FcRガンマ、FcRベータ、FcRイプシロン、CD3ガンマ、CD3デルタ、CD3イプシロン、CD5、CD22、CD79a、CD79b又はCD66dのITAMから選択される、実施形態１６に記載のCAR。
［実施形態１８］CD3ζシグナル伝達ドメインが配列番号20を含む、実施形態１７に記載のCAR。
［実施形態１９］共刺激ドメインをさらに含む、実施形態１1〜１８のいずれかに記載のCAR。
［実施形態２０］共刺激ドメインが、CD28、CD27、4-1BB(CD137)、OX40(CD134)、ICOS(CD278)、CD30、CD40、PD-1(CD279)、CD2、CD7、NKG2C(CD94)又はB7-H3(CD276)の共刺激ドメインから選択される、実施形態１９に記載のCAR。
［実施形態２１］共刺激ドメインが配列番号21を含む、実施形態１９〜２０のいずれかに記載のCAR。
［実施形態２２］ユビキチン標的化タンパク質がCARのC末端上にある、実施形態１１〜２１のいずれかに記載のCAR。
［実施形態２３］ユビキチン標的化タンパク質が、リンカーにより細胞内シグナル伝達ドメインから分離されている、実施形態１１〜２２のいずれかに記載のCAR。
［実施形態２４］リンカーが、(GS)n及び/又は(GGGGS)pを含み、ここでn=1〜10且つp=1〜3である、実施形態２３に記載のCAR。
［実施形態２５］リンカーが、配列番号２３〜２６のいずれか1つを含む、実施形態２４に記載のCAR。
［実施形態２６］化合物が免疫調節イミド薬(IMiD)である、実施形態１１〜２５のいずれかに記載のCAR。
［実施形態２７］IMiDが、サリドマイド、レナリドミド、ポマリドミド又はその機能的誘導体若しくは類似体から選択される、実施形態２６に記載のCAR。
［実施形態２８］ポリペプチド配列と、セレブロン結合部位のヘアピンモチーフを含む135未満のアミノ酸長からなるユビキチン標的化タンパク質とを含む融合タンパク質。
［実施形態２９］ユビキチン標的化タンパク質が、配列番号6〜14及び27からなる群から選択される配列からなる、実施形態２８に記載の融合タンパク質。
［実施形態３０］実施形態１〜１０のいずれかに記載のユビキチン標的化タンパク質、実施形態１１〜２７のいずれかに記載のCAR、又は実施形態２８〜２９のいずれかに記載の融合タンパク質をコードする、単離されたポリヌクレオチド。
［実施形態３１］実施形態３０に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
［実施形態３２］実施形態３０に記載のポリヌクレオチド又は実施形態３１に記載の発現ベクターを含む細胞。
［実施形態３３］免疫調節細胞である、実施形態３２に記載の細胞。
［実施形態３４］T細胞である、実施形態３３に記載の細胞。
［実施形態３５］治療法において使用するための、実施形態３２〜３４のいずれかに記載の細胞。
［実施形態３６］実施形態３２〜３４のいずれかに記載の複数の細胞を含む医薬組成物。
［実施形態３７］製薬上許容可能な賦形剤、担体、又は希釈剤をさらに含む、実施形態３６に記載の医薬組成物。
［実施形態３８］治療法において使用するための、実施形態３６又は実施形態３７に記載の医薬組成物。
［実施形態３９］治療法が遺伝子療法の方法である、実施形態３８に記載の医薬組成物。
［実施形態４０］免疫調節細胞を操作する方法であって、以下：
(a) 免疫調節細胞を提供すること；
(b) 実施形態３０に記載のポリヌクレオチド又は実施形態３１に記載の発現ベクターを、前記免疫調節細胞に形質導入又はトランスフェクトすること；及び
(c) 前記ポリヌクレオチド又は前記発現ベクターを、免疫調節細胞中で発現させることを含む、前記方法。