【手続補正書】
【提出日】令和2年12月28日(2020.12.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
レンチウイルス粒子を発現させるためのレンチウイルスベクター系であって、
ａ．ＰＡＲＰの発現を阻害するためのｓｈＲＮＡを含む治療用ベクターであって、前記ｓｈＲＮＡがＰＡＲＰ１特異的ｓｈＲＮＡを含む、治療用ベクター、
ｂ．前記ｓｈＲＮＡをニューロンに標的化するためのニューロン特異的配列を含む、エンベローププラスミド、ならびに
ｃ．ｇａｇ、ｐｏｌ、およびｒｅｖ遺伝子を含む、少なくとも１つのヘルパープラスミド
を含み、
前記治療用ベクター、前記エンベローププラスミド、および前記少なくとも１つのヘルパープラスミドがパッケージング細胞株にトランスフェクトされると、ＰＡＲＰの発現を阻害できるニューロン特異的レンチウイルス粒子が、前記パッケージング細胞株によって産生される、レンチウイルスベクター系。
【請求項２】
前記ｓｈＲＮＡが、配列番号６〜１０のうちのいずれか１つに、少なくとも８０％、または少なくとも８５％、または少なくとも９０％、または少なくとも９５％の配列同一性を有するｓｈＲＮＡを含む、請求項１に記載のレンチウイルスベクター系。
【請求項３】
前記ｓｈＲＮＡが、配列番号６〜１０のうちのいずれか１つを含む、請求項１に記載のレンチウイルスベクター系。
【請求項４】
前記ニューロン特異的配列が、ＶＳＶ−Ｇ、ＦＵＧ−Ｃ、もしくはｇｐ６４、またはそれらのバリアントをコードする、請求項１に記載のレンチウイルスベクター系。
【請求項５】
前記ニューロン特異的配列が、ＶＳＶ−Ｇまたはそのバリアントをコードする、請求項１に記載のレンチウイルスベクター系。
【請求項６】
前記ニューロン特異的配列が、ニューロンへの形質導入を改善するタンパク質をコードする、請求項１に記載のレンチウイルスベクター系。
【請求項７】
前記ニューロン特異的配列が、ＴＨ＋ニューロンへの形質導入を改善するタンパク質をコードする、請求項１に記載のレンチウイルスベクター系。
【請求項８】
パッケージング細胞によって産生され、細胞への感染が可能なレンチウイルス粒子であって、
ａ．前記細胞への感染が可能なエンベロープタンパク質、および
ｂ．ＰＡＲＰの発現を阻害するためのｓｈＲＮＡであって、ＰＡＲＰ１特異的ｓｈＲＮＡを含む、ｓｈＲＮＡ
を含む、レンチウイルス粒子。
【請求項９】
前記細胞が、ニューロンを含む、請求項８に記載のレンチウイルス粒子。
【請求項１０】
前記細胞が、ＴＨ＋ニューロンを含む、請求項８に記載のレンチウイルス粒子。
【請求項１１】
前記ｓｈＲＮＡが、配列番号６〜１０のうちのいずれか１つに、少なくとも８０％、または少なくとも８５％、または少なくとも９０％、または少なくとも９５％の配列同一性を有するｓｈＲＮＡを含む、請求項８に記載のレンチウイルス粒子。
【請求項１２】
前記ｓｈＲＮＡが、配列番号６〜１０のうちのいずれか１つを含む、請求項８に記載のレンチウイルス粒子。
【請求項１３】
パーキンソン病に罹患している被験体を処置する方法において使用するための、レンチウイルス粒子を含む組成物であって、前記方法が、前記被験体に、前記組成物を投与することを含み、前記レンチウイルス粒子が、
ａ．前記被験体の細胞への感染が可能なエンベロープタンパク質、および
ｂ．ＰＡＲＰの発現を阻害するためのｓｈＲＮＡであって、ＰＡＲＰ１特異的ｓｈＲＮＡを含む、ｓｈＲＮＡ
を含む、組成物。
【請求項１４】
前記細胞が、ニューロンを含む、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記細胞が、ＴＨ＋ニューロンを含む、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１６】
前記ｓｈＲＮＡが、配列番号６〜１０のうちのいずれか１つに、少なくとも８０％、または少なくとも８５％、または少なくとも９０％、または少なくとも９５％の配列同一性を有するｓｈＲＮＡを含む、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１７】
前記ｓｈＲＮＡが、配列番号６〜１０のうちのいずれか１つを含む、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１８】
前記方法が、第２の治療レジメンをさらに含む、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１９】
前記方法が、第２の治療レジメンをさらに含み、前記第２の治療レジメンが、外科的介入による切除、神経刺激、Ｌ−ＤＯＰＡの投与、またはドーパミンアゴニストの投与を含む、請求項１３に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
ＰＡＲＰレベルを抑制することによって、本明細書において開示されるレンチウイルスベクター系は、ニューロン死の速度を低減させ、正常なドーパミン産生能力を保存し、かつパーキンソン病の発症を遅延または予防する。本明細書において開示されるレンチウイルスベクター系は、ＡＡＶとは異なり、休止細胞に形質導入するための高い能力を有し、ニューロンに効率的に形質導入するように最適化することができ、導入遺伝子を細胞ＤＮＡに挿入することによって恒久的な修飾をもたらすことができる。加えて、本明細書において開示されるレンチウイルスベクター系は、ＡＡＶよりも炎症性が低く、そのため、より高い用量漸増が可能であり、別のエンベロープ糖タンパク質、ベクター組成、用量、および関連する送達方法を試験する場合、ベクター設計におけるより高い柔軟性が可能となる。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
レンチウイルス粒子を発現させるためのレンチウイルスベクター系であって、
ａ．ＰＡＲＰの発現を阻害するためのｓｈＲＮＡを含む治療用ベクター、
ｂ．前記ｓｈＲＮＡをニューロンに標的化するためのニューロン特異的配列を含む、エンベローププラスミド、ならびに
ｃ．ｇａｇ、ｐｏｌ、およびｒｅｖ遺伝子を含む、少なくとも１つのヘルパープラスミド
を含み、
前記治療用ベクター、前記エンベローププラスミド、および前記少なくとも１つのヘルパープラスミドがパッケージング細胞株にトランスフェクトされると、ＰＡＲＰの発現を阻害できるニューロン特異的レンチウイルス粒子が、前記パッケージング細胞株によって産生される、レンチウイルスベクター系。
（項目２）
前記ｓｈＲＮＡが、ＰＡＲＰ特異的ｓｈＲＮＡを含む、項目１に記載のレンチウイルスベクター系。
（項目３）
前記ｓｈＲＮＡが、ＰＡＲＰ１特異的ｓｈＲＮＡを含む、項目１に記載のレンチウイルスベクター系。
（項目４）
前記ｓｈＲＮＡが、配列番号６〜１０のうちのいずれか１つに、少なくとも８０％、または少なくとも８５％、または少なくとも９０％、または少なくとも９５％の配列同一性を有するｓｈＲＮＡを含む、項目１に記載のレンチウイルスベクター系。
（項目５）
前記ｓｈＲＮＡが、配列番号６〜１０のうちのいずれか１つを含む、項目１に記載のレンチウイルスベクター系。
（項目６）
前記ニューロン特異的配列が、ＶＳＶ−Ｇ、ＦＵＧ−Ｃ、もしくはｇｐ６４、またはそれらのバリアントをコードする、項目１に記載のレンチウイルスベクター系。
（項目７）
前記ニューロン特異的配列が、ＶＳＶ−Ｇまたはそのバリアントをコードする、項目１に記載のレンチウイルスベクター系。
（項目８）
前記ニューロン特異的配列が、ニューロンへの形質導入を改善するタンパク質をコードする、項目１に記載のレンチウイルスベクター系。
（項目９）
前記ニューロン特異的配列が、ＴＨ＋ニューロンへの形質導入を改善するタンパク質をコードする、項目１に記載のレンチウイルスベクター系。
（項目１０）
パッケージング細胞によって産生され、細胞への感染が可能なレンチウイルス粒子であって、
ａ．前記細胞への感染が可能なエンベロープタンパク質、および
ｂ．ＰＡＲＰの発現を阻害するためのｓｈＲＮＡ
を含む、レンチウイルス粒子。
（項目１１）
前記細胞が、ニューロンを含む、項目１０に記載のレンチウイルス粒子。
（項目１２）
前記細胞が、ＴＨ＋ニューロンを含む、項目１０に記載のレンチウイルス粒子。
（項目１３）
前記ｓｈＲＮＡが、ＰＡＲＰ特異的ｓｈＲＮＡを含む、項目１０に記載のレンチウイルス粒子。
（項目１４）
前記ｓｈＲＮＡが、ＰＡＲＰ１特異的ｓｈＲＮＡを含む、項目１０に記載のレンチウイルス粒子。
（項目１５）
前記ｓｈＲＮＡが、配列番号６〜１０のうちのいずれか１つに、少なくとも８０％、または少なくとも８５％、または少なくとも９０％、または少なくとも９５％の配列同一性を有するｓｈＲＮＡを含む、項目１０に記載のレンチウイルス粒子。
（項目１６）
前記ｓｈＲＮＡが、配列番号６〜１０のうちのいずれか１つを含む、項目１０に記載のレンチウイルス粒子。
（項目１７）
パーキンソン病に罹患している被験体を処置する方法であって、前記被験体に、レンチウイルス粒子を投与することを含み、前記レンチウイルス粒子が、
ａ．前記被験体の細胞への感染が可能なエンベロープタンパク質、および
ｂ．ＰＡＲＰの発現を阻害するためのｓｈＲＮＡ
を含む、方法。
（項目１８）
前記細胞が、ニューロンを含む、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記細胞が、ＴＨ＋ニューロンを含む、項目１７に記載の方法。
（項目２０）
前記ｓｈＲＮＡが、ＰＡＲＰ特異的ｓｈＲＮＡを含む、項目１７に記載の方法。
（項目２１）
前記ｓｈＲＮＡが、ＰＡＲＰ１特異的ｓｈＲＮＡを含む、項目１７に記載の方法。
（項目２２）
前記ｓｈＲＮＡが、配列番号６〜１０のうちのいずれか１つに、少なくとも８０％、または少なくとも８５％、または少なくとも９０％、または少なくとも９５％の配列同一性を有するｓｈＲＮＡを含む、項目１７に記載の方法。
（項目２３）
前記ｓｈＲＮＡが、配列番号６〜１０のうちのいずれか１つを含む、項目１７に記載の方法。
（項目２４）
第２の治療レジメンをさらに含む、項目１７に記載の方法。
（項目２５）
第２の治療レジメンをさらに含み、前記第２の治療レジメンが、外科的介入による切除、神経刺激、Ｌ−ＤＯＰＡの投与、またはドーパミンアゴニストの投与を含む、項目１７に記載の方法。