【手続補正書】
【提出日】令和3年1月19日(2021.1.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
フリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ  ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を生成する方法であって、
（ａ）Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、ならびにカゼイン、ラクテート、デキストロース、フルクトース、フルクタン、グルコース、スクロース、ラクトース、マルトース、アセテート、グリセロール、マンニトール、サッカロース、キシロース、糖蜜、フコース、グルコサミン、デキストラン、脂肪、油、グリセロール、酢酸ナトリウム、アラビノース、ダイズタンパク質、可溶性タンパク質、ラフィノース、アミロース、デンプンおよびそれらの組合せからなる群から選択される、少なくとも２種の炭素源を含む増殖培地を含む培養物を、嫌気性条件下で調製するステップと、
（ｂ）嫌気性条件下、前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと、
を含み、
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇのフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が生成される、
方法。
【請求項２】
前記少なくとも２種の炭素源が、約５０〜９０％の第１の炭素源、および約１０〜５０％の第２の炭素源からなり、前記第２の炭素源が、前記第１の炭素源とは異なり、前記少なくとも２種の炭素源の１００％が、前記第１の炭素源および前記第２の炭素源からなる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
フリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ  ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を生成する方法であって、
（ａ）Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞および増殖培地を含む培養物を調製するステップと、  （ｂ）前記培養物がその対数増殖期を終えた後の１２時間以内に、嫌気性条件下で前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと
を含み、
フリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が生成される、方法。
【請求項４】
前記収穫するステップが、遠心分離、濾過、透析、逆浸透およびそれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの技法を含み、必要に応じて、
前記濾過がタンジェンシャルフロー濾過を含む、および／または
前記培養物が液体を含み、前記収穫するステップが、前記液体の約６０％〜約１００％を除去することを含む、
嫌気性条件下で前記細胞を収穫する前記ステップが、前記培養物が定常増殖期に入る前に行われる、および／または
前記凍結するステップが、約−８０℃〜約−２１０℃の温度におけるものである、
請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
フリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ  ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を生成する方法であって、
（ａ）Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞および増殖培地を含む培養物を調製するステップと、
（ｂ）前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）収穫の５時間以内に、約−８０℃〜約−２１０℃の温度で前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと
を含み、
フリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が生成される、方法。
【請求項６】
前記凍結するステップが、前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を含む容器を液体窒素と接触させることを含む、および／または
前記凍結するステップが、前記細胞を液体窒素と接触させることを含む、および／または
前記凍結するステップが、約−１９６℃の温度におけるものであり、前記細胞を含む凍結ペレットを生成し、前記凍結ペレットの直径が、約０．００１〜約０．５インチである、および／または
収穫前の前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ培養物のｐＨが、約４．５〜約７．０の間である、
請求項１から５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇの前記フリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が、少なくとも２週間、約２５℃の温度での保管後、生存可能である、または
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇの前記フリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が、少なくとも１か月間、約４℃での保管後、生存可能である、
請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記培養物が、少なくとも１つの凍結保護物質をさらに含み、必要に応じて、
前記少なくとも１つの凍結保護物質が、フルクトース、グルコース、スクロース、粉ミルク、乳児用調製粉乳、脱脂粉乳、トレハロース、マルトデキストリン、ベタインおよびそれらの組合せからなる群から選択され、必要に応じて、
前記少なくとも１つの凍結保護物質が、前記培養物の約１％〜約２０％（ｗ／ｖ）の量で存在する、
請求項１から７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記フリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉが、商業規模で生成され、必要に応じて、
前記培養物の体積が、少なくとも約５０リットルである、
請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
約１×１０３〜１×１０１２ＣＦＵ／ｇのＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が、フリーズドライ後、生存可能である、および／または
前記培養物中の前記細胞が、Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞からなる、
請求項３から９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法によって生成されるフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を含む固形飼料添加物。
【請求項１２】
別の微生物をさらに含む、および／または
粉末、顆粒、微粒子、ペレット、ケーキまたはそれらの組合せからなる群から選択される、および／または
プロバイオティックである、
請求項１１に記載の固形飼料添加物。
【請求項１３】
請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法によって生成されるフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、または請求項１１から１２のいずれか一項に記載の固形飼料添加物を含む組成物であって、必要に応じてカプセル剤である、組成物。
【請求項１４】
請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法によって生成されるフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、請求項１１から１２のいずれか一項に記載の固形飼料添加物、または請求項１３に記載の組成物を含むキット。
【請求項１５】
動物の胃腸管における乳酸産生に関連する状態または障害の処置または予防における使用のための、請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法によって生成されるフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を含む組成物、請求項１１から１２のいずれか一項に記載の固形飼料添加物を含む組成物、または請求項１３に記載の組成物。
【請求項１６】
前記状態または障害が、アシドーシス、第一胃アシドーシス、呼吸器疾患、蹄葉炎、または感染症である、請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法によって生成されるフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を含む組成物、請求項１１から１２のいずれか一項に記載の固形飼料添加物を含む組成物、または請求項１３もしくは１５に記載の組成物。
【請求項１７】
動物の胃腸管における日和見微生物の増殖を予防するまたは低下させる、動物の食餌における植物由来のリンの生体利用率を改善する、または動物における成長成績を改善するための方法であって、前記動物に、請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法によって生成されるフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、請求項１１から１２のいずれか一項に記載の固形飼料添加物、または請求項１３に記載の組成物の有効量を投与するステップを含み、前記動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、ミルク生産動物におけるミルク生産量、家禽における産卵数、骨石灰化またはそれらの組合せの改善である、方法。
【請求項１８】
前記フリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、前記固形飼料添加物または前記組成物が、動物に食物を与える前、それと同時に、またはその後に投与されるか、または
前記方法が、投与前に、前記フリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞または前記固形飼料添加物を液体と混合するステップをさらに含み、必要に応じて、
前記液体が、経口的に、または前記動物に前記液体を噴霧することによって投与される、
請求項１５もしくは１６に記載の組成物または請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、飼料添加物または組成物の単回投与を含む、および／または
前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、飼料添加物または組成物の毎日の投与を含む、および／または
１日に、前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、飼料添加物または組成物の１回より多い投与を含む、
請求項１５、１６および１８のいずれか一項に記載の組成物または請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記動物が、反芻動物または非反芻動物であり、必要に応じて、前記反芻動物が、ウシ、ヒツジ、ヤギ、シカ、バッファローおよびトナカイからなる群から選択され、必要に応じて、前記非反芻動物が、ウマ科、家禽およびブタからなる群から選択され、必要に応じて、前記家禽動物が、ニワトリ、ガチョウ、アヒル、ウズラ、シチメンチョウ、ハト、ブロイラー、ブロイラー種ニワトリまたは産卵用ニワトリからなる群から選択され、必要に応じて、前記動物がウマ科であり、必要に応じて、前記ウマ科が、ウマ、ポニー、ロバまたはラバである、有効量の請求項１から１０のいずれか一項に記載の方法によって生成されるフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、請求項１１または１２のいずれかに記載の固形飼料添加物、請求項１３もしくは１５に記載の組成物、または請求項１７に記載の方法。
【請求項２１】
家禽動物またはウマ科動物の胃腸管における乳酸産生に関連する状態または障害の処置または予防における使用のための、Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を含む組成物。
【請求項２２】
前記状態または障害が、アシドーシスである、または
前記状態または障害が、呼吸器疾患である、または
前記状態または障害が、感染症である、または
前記感染症が、ＳａｌｍｏｎｅｌｌａまたはＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒによるものである、
請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
ブタ動物、家禽動物またはウマ科動物の胃腸管における日和見微生物の増殖を予防するまたは低下させる、ブタ動物、家禽動物またはウマ科動物の食餌における植物由来のリンの生体利用率を改善する、あるいはブタ動物、家禽動物またはウマ科動物の成長成績を改善するための方法であって、前記ブタ動物、家禽動物またはウマ科動物に有効量のＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を投与するステップを含み、前記家禽動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、産卵数、骨石灰化またはそれらの組合せの改善であり、前記ウマ科動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、ミルク生産量、骨石灰化またはそれらの組合せの改善であり、前記ブタ動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、ミルク生産量、骨石灰化またはそれらの組合せの改善である、方法。
【請求項２４】
飼料添加物が、前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を含み、必要に応じて、
前記飼料添加物が、粉末、顆粒、微粒子、ペレット、ケーキ、液体、ゲルまたはそれらの組合せである、および／または
組成物が、前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞または前記細胞を含む飼料添加物を含み、必要に応じて、前記組成物が、カプセル剤である、
請求項２１もしくは２２に記載の組成物または請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が、フリーズドライ細胞であるか、または
前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が、液体で投与され、必要に応じて、
前記方法が、飼料添加物またはフリーズドライ細胞を再水和して、前記液体を生成するステップをさらに含み、さらに必要に応じて、
前記液体が、経口強制飼養によって、または前記動物に前記液体を噴霧することによって投与される、
請求項２１もしくは２２に記載の組成物または請求項２３に記載の方法。
【請求項２６】
前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が、前記動物に食物を与える前、それと同時に、またはその後に投与され、必要に応じて、
前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞の単回投与を含むか、または
前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞の毎日の投与を含み、必要に応じて、
１日に、前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞の１回より多い投与を含む、
請求項２１、２２、２４および２５のいずれか一項に記載の組成物または請求項２３から２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
カプセル封入したフリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ細胞を生成する方法であって、
（ａ）Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ細胞、ならびにカゼイン、ラクテート、デキストロース、フルクトース、フルクタン、グルコース、スクロース、ラクトース、マルトース、アセテート、グリセロール、マンニトール、ソルビトール、サッカロース、キシロース、糖蜜、フコース、グルコサミン、デキストラン、脂肪、油、グリセロール、酢酸ナトリウム、アラビノース、ダイズタンパク質、可溶性タンパク質、ラフィノース、アミロース、デンプン、トリプトン、酵母抽出物およびそれらの組合せからなる群から選択される、少なくとも２種の炭素源を含む増殖培地を含む培養物を、嫌気性条件下で調製するステップと、
（ｂ）嫌気性条件下、前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと、
（ｅ）前記細胞をカプセル封入するステップと
を含み、
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇのカプセル封入したフリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ細胞が生成される、
方法。
【請求項２８】
動物の成長成績の改善における使用のための、または動物の胃腸管における日和見微生物の増殖を予防するまたは低下させるための、請求項２７に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ細胞を含む組成物であって、前記動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、ミルク生産動物におけるミルク生産量、家禽における産卵数、骨石灰化またはそれらの組合せの改善である、組成物。
【請求項２９】
請求項２７に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ細胞を含む組成物。
【請求項３０】
フリーズドライ嫌気性細菌細胞を生成する方法であって、
（ａ）嫌気性細菌細胞、ならびにカゼイン、ラクテート、デキストロース、フルクトース、フルクタン、グルコース、スクロース、ラクトース、マルトース、アセテート、グリセロール、マンニトール、ソルビトール、サッカロース、キシロース、糖蜜、フコース、グルコサミン、デキストラン、脂肪、油、グリセロール、酢酸ナトリウム、アラビノース、ダイズタンパク質、可溶性タンパク質、ラフィノース、アミロース、デンプン、トリプトン、酵母抽出物およびそれらの組合せからなる群から選択される、少なくとも２種の炭素源を含む増殖培地を含む培養物を、嫌気性条件または部分嫌気性条件下で調製するステップと、
（ｂ）嫌気性条件または部分嫌気性条件下、前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと
を含み、
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇのフリーズドライ嫌気性細菌細胞が生成される、方法。
【請求項３１】
動物の成長成績の改善における使用のための、または動物の胃腸管における日和見微生物の増殖を予防するまたは低下させるための、請求項３０に記載の方法によって生成されるフリーズドライ嫌気性細菌細胞を含む組成物であって、前記動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、ミルク生産動物におけるミルク生産量、家禽における産卵数、骨石灰化またはそれらの組合せの改善である、組成物。
【請求項３２】
請求項３０に記載の方法によって生成されるフリーズドライ嫌気性細菌細胞を含む組成物。
【請求項３３】
カプセル封入したフリーズドライ嫌気性細菌細胞を生成する方法であって、
（ａ）嫌気性細菌細胞、ならびにカゼイン、ラクテート、デキストロース、フルクトース、フルクタン、グルコース、スクロース、ラクトース、マルトース、アセテート、グリセロール、マンニトール、ソルビトール、サッカロース、キシロース、糖蜜、フコース、グルコサミン、デキストラン、脂肪、油、グリセロール、酢酸ナトリウム、アラビノース、ダイズタンパク質、可溶性タンパク質、ラフィノース、アミロース、デンプン、トリプトン、酵母抽出物およびそれらの組合せからなる群から選択される、少なくとも２種の炭素源を含む増殖培地を含む培養物を、嫌気性条件または部分嫌気性条件下で調製するステップと、
（ｂ）嫌気性条件または部分嫌気性条件下、前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと、
（ｅ）前記細胞をカプセル封入するステップと
を含み、
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇのカプセル封入したフリーズドライ嫌気性細菌細胞が生成される、
方法。
【請求項３４】
動物の成長成績の改善における使用のための、または動物の胃腸管における日和見微生物の増殖を予防するまたは低下させるための、請求項３３に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライ嫌気性細菌細胞を含む組成物であって、前記動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、ミルク生産動物におけるミルク生産量、家禽における産卵数、骨石灰化またはそれらの組合せの改善である、組成物。
【請求項３５】
請求項３３に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライ嫌気性細菌細胞を含む組成物。
【請求項３６】
フリーズドライ好気性細菌および／または酵母細胞を生成する方法であって、
（ａ）好気性細菌細胞および／または酵母細胞、ならびにカゼイン、ラクテート、デキストロース、フルクトース、フルクタン、グルコース、スクロース、ラクトース、マルトース、アセテート、グリセロール、マンニトール、ソルビトール、サッカロース、キシロース、糖蜜、フコース、グルコサミン、デキストラン、脂肪、油、グリセロール、酢酸ナトリウム、アラビノース、ダイズタンパク質、可溶性タンパク質、ラフィノース、アミロース、デンプン、トリプトン、酵母抽出物およびそれらの組合せからなる群から選択される、少なくとも２種の炭素源を含む増殖培地を含む培養物を、好気性条件下で調製するステップと、
（ｂ）前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと
を含み、
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇのフリーズドライ好気性細菌および／または酵母細胞が生成される、
方法。
【請求項３７】
動物の成長成績の改善における使用のための、または動物の胃腸管における日和見微生物の増殖を予防するまたは低下させるための、請求項３６に記載の方法によって生成されるフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞を含む組成物であって、前記動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、ミルク生産動物におけるミルク生産量、家禽における産卵数、骨石灰化またはそれらの組合せの改善である、組成物。
【請求項３８】
請求項３７に記載の方法によって生成されるフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞を含む組成物。
【請求項３９】
カプセル封入したフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞を生成する方法であって、
（ａ）好気性細菌細胞および／または酵母細胞、ならびにカゼイン、ラクテート、デキストロース、フルクトース、フルクタン、グルコース、スクロース、ラクトース、マルトース、アセテート、グリセロール、マンニトール、ソルビトール、サッカロース、キシロース、糖蜜、フコース、グルコサミン、デキストラン、脂肪、油、グリセロール、酢酸ナトリウム、アラビノース、ダイズタンパク質、可溶性タンパク質、ラフィノース、アミロース、デンプン、トリプトン、酵母抽出物およびそれらの組合せからなる群から選択される、少なくとも２種の炭素源を含む増殖培地を含む培養物を、好気性条件下で調製するステップと、
（ｂ）好気性条件下、前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと、
（ｅ）前記細胞をカプセル封入するステップと
を含み、
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇのカプセル封入したフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞が生成される、
方法。
【請求項４０】
動物の成長成績の改善における使用のための、または動物の胃腸管における日和見微生物の増殖を予防するまたは低下させるための、請求項３９に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞を含む組成物であって、前記動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、ミルク生産動物におけるミルク生産量、家禽における産卵数、骨石灰化またはそれらの組合せの改善である、組成物。
【請求項４１】
請求項３９に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞を含む組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１２９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１２９】
ある特定の実施形態では、組成物は、カプセル封入したフリーズドライ好気性細菌細胞
および／または酵母細胞を含む。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
フリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ  ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を生成する方法であって、
（ａ）Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、ならびにカゼイン、ラクテート、デキストロース、フルクトース、フルクタン、グルコース、スクロース、ラクトース、マルトース、アセテート、グリセロール、マンニトール、サッカロース、キシロース、糖蜜、フコース、グルコサミン、デキストラン、脂肪、油、グリセロール、酢酸ナトリウム、アラビノース、ダイズタンパク質、可溶性タンパク質、ラフィノース、アミロース、デンプンおよびそれらの組合せからなる群から選択される、少なくとも２種の炭素源を含む増殖培地を含む培養物を、嫌気性条件下で調製するステップと、
（ｂ）嫌気性条件下、前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと、
を含み、
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇのフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が生成される、
方法。
（項目２）
前記少なくとも２種の炭素源が、約５０〜９０％の第１の炭素源、および約１０〜５０％の第２の炭素源からなり、前記第２の炭素源が、前記第１の炭素源とは異なり、前記少なくとも２種の炭素源の１００％が、前記第１の炭素源および前記第２の炭素源からなる、項目１に記載の方法。
（項目３）
フリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ  ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を生成する方法であって、
（ａ）Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞および増殖培地を含む培養物を調製するステップと、  （ｂ）前記培養物がその対数増殖期を終えた後の１２時間以内、かつ前記培養物がその定常増殖期を開始する前に、嫌気性条件下で前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと
を含み、
フリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が生成される、方法。
（項目４）
前記収穫するステップが、遠心分離、濾過、透析、逆浸透およびそれらの組合せからなる群から選択される少なくとも１つの技法を含む、項目１から３のいずれか一項に記載の方法。
（項目５）
前記濾過がタンジェンシャルフロー濾過を含む、項目４に記載の方法。
（項目６）
前記培養物が液体を含み、前記収穫するステップが、前記液体の約６０％〜約１００％を除去することを含む、項目１から５のいずれか一項に記載の方法。
（項目７）
前記凍結するステップが、約−８０℃〜約−２１０℃の温度におけるものである、項目１から６のいずれか一項に記載の方法。
（項目８）
フリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ  ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を生成する方法であって、
（ａ）Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞および増殖培地を含む培養物を調製するステップと、
（ｂ）前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）収穫の５時間以内に、約−８０℃〜約−２１０℃の温度で前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと
を含み、
フリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が生成される、方法。
（項目９）
前記凍結するステップが、前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を含む容器を液体窒素と接触させることを含む、項目１から８のいずれか一項に記載の方法。
（項目１０）
前記凍結するステップが、前記細胞を液体窒素と接触させることを含む、項目１から９のいずれか一項に記載の方法。
（項目１１）
前記凍結するステップが、約−１９６℃の温度におけるものであり、前記細胞を含む凍結ペレットを生成し、前記凍結ペレットの直径が、約０．００１〜約０．５インチである、項目１から１０のいずれか一項に記載の方法。
（項目１２）
収穫前の前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ培養物のｐＨが、約４．５〜約７．０の間である、項目１から１１のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３）
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇの前記フリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が、少なくとも２週間、約２５℃の温度での保管後、生存可能である、項目１から１２のいずれか一項に記載の方法。
（項目１４）
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇの前記フリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が、少なくとも１か月間、約４℃での保管後、生存可能である、項目１から１２のいずれか一項に記載の方法。
（項目１５）
前記培養物が、少なくとも１つの凍結保護物質をさらに含む、項目１から１４のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６）
前記少なくとも１つの凍結保護物質が、フルクトース、グルコース、スクロース、粉ミルク、乳児用調製粉乳、脱脂粉乳、トレハロース、マルトデキストリン、ベタインおよびそれらの組合せからなる群から選択される、項目１５に記載の方法。
（項目１７）
前記少なくとも１つの凍結保護物質が、前記培養物の約１％〜約２０％（ｗ／ｖ）の量で存在する、項目１５または１６に記載の方法。
（項目１８）
前記フリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉが、商業規模で生成される、項目１から１７のいずれか一項に記載の方法。
（項目１９）
前記培養物の体積が、少なくとも約５０リットルである、項目１から１８のいずれか一項に記載の方法。
（項目２０）
約１×１０３〜１×１０１２ＣＦＵ／ｇのＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が、フリーズドライ後、生存可能である、項目３から１９のいずれか一項に記載の方法。
（項目２１）
前記培養物中の前記細胞が、Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞からなる、項目１から２０のいずれか一項に記載の方法。
（項目２２）
項目１から２１のいずれか一項に記載の方法によって生成されるフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を含む固形飼料添加物。
（項目２３）
別の微生物をさらに含む、項目２２に記載の固形飼料添加物。
（項目２４）
粉末、顆粒、微粒子、ペレット、ケーキまたはそれらの組合せからなる群から選択される、項目２２または２３に記載の固形飼料添加物。
（項目２５）
プロバイオティックである、項目２２から２４のいずれか一項に記載の固形飼料添加物。
（項目２６）
項目１から２１のいずれか一項に記載の方法によって生成されるフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、または項目２２から２５のいずれか一項に記載の固形飼料添加物を含む組成物。
（項目２７）
カプセル剤である、項目２６に記載の組成物。
（項目２８）
項目１から２１のいずれか一項に記載の方法によって生成されるフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、項目２２から２５のいずれか一項に記載の固形飼料添加物、または項目２６もしくは２７に記載の組成物を含むキット。
（項目２９）
動物にＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を投与する方法であって、前記動物に、項目１から２１のいずれか一項に記載の方法によって生成されるフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、項目２２から２５のいずれか一項に記載の固形飼料添加物、または項目２６もしくは２７に記載の組成物を投与するステップを含む方法。
（項目３０）
動物の胃腸管における乳酸産生に関連する状態または障害を処置または予防するための方法であって、前記動物に、項目１から２１のいずれか一項に記載の方法によって生成されるフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、項目２２から２５のいずれか一項に記載の固形飼料添加物、または項目２６もしくは２７に記載の組成物の有効量を投与するステップを含む方法。
（項目３１）
前記状態または障害が、アシドーシスである、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
前記状態または障害が、第一胃アシドーシスである、項目３０または３１に記載の方法。
（項目３３）
前記状態または障害が、呼吸器疾患である、項目３０に記載の方法。
（項目３４）
前記状態または障害が、蹄葉炎である、項目３０に記載の方法。
（項目３５）
前記状態または障害が、感染症である、項目３０に記載の方法。
（項目３６）
前記感染症が、ＳａｌｍｏｎｅｌｌａまたはＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒによるものである、項目３５に記載の方法。
（項目３７）
動物の胃腸管における日和見微生物の増殖を予防するまたは低下させるための方法であって、前記動物に、項目１から２１のいずれか一項に記載の方法によって生成されるフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、項目２２から２５のいずれか一項に記載の固形飼料添加物、または項目２６もしくは２７に記載の組成物の有効量を投与するステップを含む方法。
（項目３８）
前記日和見微生物が、病原性である、項目３７に記載の方法。
（項目３９）
前記日和見微生物が、ＳａｌｍｏｎｅｌｌａまたはＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒである、項目３７または３８に記載の方法。
（項目４０）
動物の食餌における植物由来のリンの生体利用率を改善する方法であって、前記動物に、項目１から２１のいずれか一項に記載の方法によって生成されるフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、項目２２から２５のいずれか一項に記載の固形飼料添加物、または項目２６もしくは２７に記載の組成物の有効量を投与するステップを含む方法。
（項目４１）
動物における成長成績を改善する方法であって、前記動物に、項目１から２１のいずれか一項に記載の方法によって生成されるフリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、項目２２から２５のいずれか一項に記載の固形飼料添加物、または項目２６もしくは２７に記載の組成物の有効量を投与するステップを含み、前記動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、ミルク生産動物におけるミルク生産量、家禽における産卵数、骨石灰化またはそれらの組合せの改善である、方法。
（項目４２）
前記フリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、前記固形飼料添加物または前記組成物が、動物に食物を与える前、それと同時に、またはその後に投与される、項目２９から４１のいずれか一項に記載の方法。
（項目４３）
投与前に、前記フリーズドライＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞または前記固形飼料添加物を液体と混合するステップをさらに含む、項目２９から４１のいずれか一項に記載の方法。
（項目４４）
前記液体が、経口的に、または前記動物に前記液体を噴霧することによって投与される、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、飼料添加物または組成物の単回投与を含む、項目２９から４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４６）
前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、飼料添加物または組成物の毎日の投与を含む、項目２９から４５のいずれか一項に記載の方法。
（項目４７）
１日に、前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞、飼料添加物または組成物の１回より多い投与を含む、項目２９から４６のいずれか一項に記載の方法。
（項目４８）
前記動物が、反芻動物である、項目２９から４７のいずれか一項に記載の方法。
（項目４９）
前記反芻動物が、ウシ、ヒツジ、ヤギ、シカ、バッファローおよびトナカイからなる群から選択される、項目４８に記載の方法。
（項目５０）
前記動物が、非反芻動物である、項目２９から４７のいずれか一項に記載の方法。
（項目５１）
前記非反芻動物が、ウマ科、家禽およびブタからなる群から選択される、項目５０に記載の方法。
（項目５２）
前記動物が、家禽動物である、項目２９から３３、３５から４７、５０または５１のいずれか一項に記載の方法。
（項目５３）
前記家禽動物が、ニワトリ、ガチョウ、アヒル、ウズラ、シチメンチョウまたはハトからなる群から選択される、項目５２に記載の方法。
（項目５４）
前記家禽動物が、ブロイラー、ブロイラー種ニワトリおよび産卵用ニワトリからなる群から選択される、項目５２または５３に記載の方法。
（項目５５）
前記家禽動物が、ニワトリである、項目５２から５４のいずれか一項に記載の方法。
（項目５６）
前記動物が、ウマ科である、項目２９から４７、５０または５１のいずれか一項に記載の方法。
（項目５７）
前記ウマ科が、ウマ、ポニー、ロバまたはラバである、項目５６に記載の方法。
（項目５８）
家禽動物の胃腸管における乳酸産生に関連する状態または障害を処置または予防するための方法であって、前記家禽動物に有効量のＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を投与するステップを含む方法。
（項目５９）
前記状態または障害が、アシドーシスである、項目５８に記載の方法。
（項目６０）
前記状態または障害が、呼吸器疾患である、項目５８に記載の方法。
（項目６１）
前記状態または障害が、感染症である、項目５８に記載の方法。
（項目６２）
前記感染症が、ＳａｌｍｏｎｅｌｌａまたはＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒによるものである、項目６１に記載の方法。
（項目６３）
家禽動物の胃腸管における日和見微生物の増殖を予防するまたは低下させるための方法であって、前記家禽動物に有効量のＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を投与するステップを含む
方法。
（項目６４）
前記日和見微生物が、病原性である、項目６３に記載の方法。
（項目６５）
前記日和見微生物が、ＳａｌｍｏｎｅｌｌａまたはＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒである、項目６３または６４に記載の方法。
（項目６６）
家禽動物の食餌における植物由来のリンの生体利用率を改善する方法であって、前記家禽動物に有効量のＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を投与するステップを含む方法。
（項目６７）
家禽動物の成長成績を改善する方法であって、前記家禽動物に有効量のＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を投与するステップを含み、前記動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、産卵数、骨石灰化またはそれらの組合せの改善である、方法。
（項目６８）
前記家禽動物が、ニワトリ、ガチョウ、アヒル、ウズラ、シチメンチョウまたはハトからなる群から選択される、項目５８から６７のいずれか一項に記載の方法。
（項目６９）
前記家禽動物が、ブロイラー、ブロイラー種ニワトリおよび産卵用ニワトリからなる群から選択される、項目５８から６８のいずれか一項に記載の方法。
（項目７０）
前記家禽動物が、ニワトリである、項目５８から６９のいずれか一項に記載の方法。
（項目７１）
ウマ科の胃腸管における乳酸産生に関連する状態または障害を処置または予防するための方法であって、前記ウマ科に有効量のＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を投与するステップを含む方法。
（項目７２）
前記状態または障害が、アシドーシスである、項目７１に記載の方法。
（項目７３）
前記状態または障害が、呼吸器疾患である、項目７１に記載の方法。
（項目７４）
前記状態または障害が、蹄葉炎である、項目７１に記載の方法。
（項目７５）
前記状態または障害が、感染症である、項目７１に記載の方法。
（項目７６）
前記感染症が、ＳａｌｍｏｎｅｌｌａまたはＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒによるものである、項目７５に記載の方法。
（項目７７）
ウマ科の胃腸管における日和見微生物の増殖を予防するまたは低下させるための方法であって、前記ウマ科に有効量のＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を投与するステップを含む方法。
（項目７８）
前記日和見微生物が、病原性である、項目７７に記載の方法。
（項目７９）
前記日和見微生物が、ＳａｌｍｏｎｅｌｌａまたはＣａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒである、項目７７または７８に記載の方法。
（項目８０）
ウマ科の食餌における植物由来のリンの生体利用率を改善する方法であって、前記ウマ科に有効量のＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を投与するステップを含む方法。
（項目８１）
ウマ科の成長成績を改善する方法であって、前記ウマ科に有効量のＭ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を投与するステップを含み、前記動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、ミルク生産量、骨石灰化またはそれらの組合せの改善である、方法。
（項目８２）
前記ウマ科が、ウマ、ポニー、ロバまたはラバである、項目７１から８１のいずれか一項に記載の方法。
（項目８３）
飼料添加物が、前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞を含む、項目５８から８２のいずれか一項に記載の方法。
（項目８４）
前記飼料添加物が、粉末、顆粒、微粒子、ペレット、ケーキ、液体、ゲルまたはそれらの組合せである、項目８３に記載の方法。
（項目８５）
組成物が、前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞または前記細胞を含む飼料添加物を含む、項目５８から８４のいずれか一項に記載の方法。
（項目８６）
前記組成物が、カプセル剤である、項目８５に記載の組成物。
（項目８７）
前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が、フリーズドライ細胞である、項目５８から８６のいずれか一項に記載の方法。
（項目８８）
前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が、液体で投与される、項目５８から８５のいずれか一項に記載の方法。
（項目８９）
飼料添加物またはフリーズドライ細胞を再水和して、前記液体を生成するステップをさらに含む、項目８８に記載の方法。
（項目９０）
前記液体が、経口強制飼養によって、または前記動物に前記液体を噴霧することによって投与される、項目８８または８９に記載の方法。
（項目９１）
前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞が、前記動物に食物を与える前、それと同時に、またはその後に投与される、項目５８から９０のいずれか一項に記載の方法。
（項目９２）
前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞の単回投与を含む、項目５８から９１のいずれか一項に記載の方法。
（項目９３）
前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞の毎日の投与を含む、項目５８から９１のいずれか一項に記載の方法。
（項目９４）
１日に、前記Ｍ．ｅｌｓｄｅｎｉｉ細胞の１回より多い投与を含む、項目５８から９３のいずれか一項に記載の方法。
（項目９５）
カプセル封入したフリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ細胞を生成する方法であって、
（ａ）Ｍｅｇａｓｐｈａｅｒａ細胞、ならびにカゼイン、ラクテート、デキストロース、フルクトース、フルクタン、グルコース、スクロース、ラクトース、マルトース、アセテート、グリセロール、マンニトール、ソルビトール、サッカロース、キシロース、糖蜜、フコース、グルコサミン、デキストラン、脂肪、油、グリセロール、酢酸ナトリウム、アラビノース、ダイズタンパク質、可溶性タンパク質、ラフィノース、アミロース、デンプン、トリプトン、酵母抽出物およびそれらの組合せからなる群から選択される、少なくとも２種の炭素源を含む増殖培地を含む培養物を、嫌気性条件下で調製するステップと、
（ｂ）嫌気性条件下、前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと、
（ｅ）前記細胞をカプセル封入するステップと
を含み、
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇのカプセル封入したフリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ細胞が生成される、
方法。
（項目９６）
動物にＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ細胞を投与する方法であって、前記動物に、項目９５に記載の方法によって生成される前記カプセル封入したフリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ細胞を投与するステップを含む方法。
（項目９７）
動物の成長成績を改善する方法であって、前記動物に、有効量の項目９５に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ細胞を投与するステップを含み、前記動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、ミルク生産動物におけるミルク生産量、家禽における産卵数、骨石灰化またはそれらの組合せの改善である、方法。
（項目９８）
動物の胃腸管における日和見微生物の増殖を予防するまたは低下させるための方法であって、前記動物に有効量の項目９５に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ細胞を投与するステップを含む方法。
（項目９９）
項目９５に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライＭｅｇａｓｐｈａｅｒａ細胞を含む組成物。
（項目１００）
フリーズドライ嫌気性細菌細胞を生成する方法であって、
（ａ）嫌気性細菌細胞、ならびにカゼイン、ラクテート、デキストロース、フルクトース、フルクタン、グルコース、スクロース、ラクトース、マルトース、アセテート、グリセロール、マンニトール、ソルビトール、サッカロース、キシロース、糖蜜、フコース、グルコサミン、デキストラン、脂肪、油、グリセロール、酢酸ナトリウム、アラビノース、ダイズタンパク質、可溶性タンパク質、ラフィノース、アミロース、デンプン、トリプトン、酵母抽出物およびそれらの組合せからなる群から選択される、少なくとも２種の炭素源を含む増殖培地を含む培養物を、嫌気性条件または部分嫌気性条件下で調製するステップと、
（ｂ）嫌気性条件または部分嫌気性条件下、前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと
を含み、
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇのフリーズドライ嫌気性細菌細胞が生成される、方法。
（項目１０１）
動物に嫌気性細菌細胞を投与する方法であって、前記動物に、項目１００に記載の方法によって生成される前記フリーズドライ嫌気性細菌細胞を投与するステップを含む方法。
（項目１０２）
動物の成長成績を改善する方法であって、前記動物に、有効量の項目１００に記載の方法によって生成されるフリーズドライ嫌気性細菌細胞を投与するステップを含み、前記動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、ミルク生産動物におけるミルク生産量、家禽における産卵数、骨石灰化またはそれらの組合せの改善である、方法。
（項目１０３）
動物の胃腸管における日和見微生物の増殖を予防するまたは低下させるための方法であって、前記動物に有効量の項目１００に記載の方法によって生成されるフリーズドライ嫌気性細菌細胞を投与するステップを含む方法。
（項目１０４）
項目１００に記載の方法によって生成されるフリーズドライ嫌気性細菌細胞を含む組成物。
（項目１０５）
カプセル封入したフリーズドライ嫌気性細菌細胞を生成する方法であって、
（ａ）嫌気性細菌細胞、ならびにカゼイン、ラクテート、デキストロース、フルクトース、フルクタン、グルコース、スクロース、ラクトース、マルトース、アセテート、グリセロール、マンニトール、ソルビトール、サッカロース、キシロース、糖蜜、フコース、グルコサミン、デキストラン、脂肪、油、グリセロール、酢酸ナトリウム、アラビノース、ダイズタンパク質、可溶性タンパク質、ラフィノース、アミロース、デンプン、トリプトン、酵母抽出物およびそれらの組合せからなる群から選択される、少なくとも２種の炭素源を含む増殖培地を含む培養物を、嫌気性条件または部分嫌気性条件下で調製するステップと、
（ｂ）嫌気性条件または部分嫌気性条件下、前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと、
（ｅ）前記細胞をカプセル封入するステップと
を含み、
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇのカプセル封入したフリーズドライ嫌気性細菌細胞が生成される、
方法。
（項目１０６）
動物に嫌気性細菌細胞を投与する方法であって、前記動物に、項目１０５に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライ嫌気性細菌細胞を投与するステップを含む方法。
（項目１０７）
動物の成長成績を改善する方法であって、前記動物に、有効量の項目１０５に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライ嫌気性細菌細胞を投与するステップを含み、前記動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、ミルク生産動物におけるミルク生産量、家禽における産卵数、骨石灰化またはそれらの組合せの改善である、方法。
（項目１０８）
動物の胃腸管における日和見微生物の増殖を予防するまたは低下させるための方法であって、前記動物に有効量の項目１０５に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライ嫌気性細菌細胞を投与するステップを含む方法。
（項目１０９）
項目１０５に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライ嫌気性細菌細胞を含む組成物。
（項目１１０）
フリーズドライ好気性細菌および／または酵母細胞を生成する方法であって、
（ａ）好気性細菌細胞および／または酵母細胞、ならびにカゼイン、ラクテート、デキストロース、フルクトース、フルクタン、グルコース、スクロース、ラクトース、マルトース、アセテート、グリセロール、マンニトール、ソルビトール、サッカロース、キシロース、糖蜜、フコース、グルコサミン、デキストラン、脂肪、油、グリセロール、酢酸ナトリウム、アラビノース、ダイズタンパク質、可溶性タンパク質、ラフィノース、アミロース、デンプン、トリプトン、酵母抽出物およびそれらの組合せからなる群から選択される、少なくとも２種の炭素源を含む増殖培地を含む培養物を、好気性条件下で調製するステップと、
（ｂ）前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと
を含み、
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇのフリーズドライ好気性細菌および／または酵母細胞が生成される、
方法。
（項目１１１）
動物に好気性細菌および／または酵母細胞を投与する方法であって、前記動物に、項目１１０に記載の方法によって生成されるフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞を投与するステップを含む方法。
（項目１１２）
動物の成長成績を改善する方法であって、前記動物に、有効量の項目１１０に記載の方法によって生成されるフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞を投与するステップを含み、前記動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、ミルク生産動物におけるミルク生産量、家禽における産卵数、骨石灰化またはそれらの組合せの改善である、方法。
（項目１１３）
動物の胃腸管における日和見微生物の増殖を予防するまたは低下させるための方法であって、前記動物に有効量の項目１１０に記載の方法によって生成されるフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞を投与するステップを含む方法。
（項目１１４）
項目１１０に記載の方法によって生成されるフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞を含む組成物。
（項目１１５）
カプセル封入したフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞を生成する方法であって、
（ａ）好気性細菌細胞および／または酵母細胞、ならびにカゼイン、ラクテート、デキストロース、フルクトース、フルクタン、グルコース、スクロース、ラクトース、マルトース、アセテート、グリセロール、マンニトール、ソルビトール、サッカロース、キシロース、糖蜜、フコース、グルコサミン、デキストラン、脂肪、油、グリセロール、酢酸ナトリウム、アラビノース、ダイズタンパク質、可溶性タンパク質、ラフィノース、アミロース、デンプン、トリプトン、酵母抽出物およびそれらの組合せからなる群から選択される、少なくとも２種の炭素源を含む増殖培地を含む培養物を、好気性条件下で調製するステップと、
（ｂ）好気性条件下、前記細胞を収穫するステップと、
（ｃ）前記細胞を凍結するステップと、
（ｄ）前記細胞をフリーズドライするステップと、
（ｅ）前記細胞をカプセル封入するステップと
を含み、
約１×１０３〜約１×１０１２ＣＦＵ／ｇのカプセル封入したフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞が生成される、
方法。
（項目１１６）
動物に好気性細菌および／または酵母細胞を投与する方法であって、前記動物に、項目１１５に記載のカプセル封入したフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞を投与するステップを含む方法。
（項目１１７）
動物の成長成績を改善する方法であって、前記動物に、有効量の項目１１５に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞を投与するステップを含み、前記動物の前記成長成績の改善が、飼料摂食量、１日あたりの平均体重増加、飼料転換比、枝肉の重量増加、ミルク生産動物におけるミルク生産量、家禽における産卵数、骨石灰化またはそれらの組合せの改善である、方法。
（項目１１８）
動物の胃腸管における日和見微生物の増殖を予防するまたは低下させるための方法であって、前記動物に有効量の項目１１５に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞を投与するステップを含む方法。
（項目１１９）
項目１１５に記載の方法によって生成されるカプセル封入したフリーズドライ好気性細菌細胞および／または酵母細胞を含む組成物。