【手続補正書】
【提出日】令和3年3月18日(2021.3.18)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
マイクロ流体デバイスを用いてサポニンを含むリポソームアジュバントを製造する方法であって、以下:
(a)デバイス内で溶媒、ホスファチジルコリン脂質及びステロールを含む第1の溶液、並びに水及びサポニンを含む第2の溶液を混合するステップ、並びに
(b)溶媒を除去するステップ
を含む、前記方法。
【請求項２】
マイクロ流体デバイスを用いてサポニンを含むリポソームアジュバントを製造する方法であって、以下:
(a)デバイス内で溶媒、ホスファチジルコリン脂質及びステロールを含む第1の溶液、並びに水を含む第2の溶液を混合するステップ、
(b)サポニンを加えるステップ、並びに
(c)溶媒を除去するステップ
を含む、前記方法。
【請求項３】
マイクロ流体デバイスを用いてサポニンを含むリポソームアジュバントを製造する方法であって、以下:
(a)デバイス内で溶媒、ホスファチジルコリン脂質及びステロールを含む第1の溶液、並びに水を含む第2の溶液を混合するステップ、
(b)溶媒を除去するステップ、並びに
(c)サポニンを加えるステップ
を含む、前記方法。
【請求項４】
マイクロ流体デバイスを用いてサポニンを含むリポソームアジュバントの調製に有用なリポソーム濃縮物を製造する方法であって、デバイス内で溶媒、ホスファチジルコリン脂質及びステロールを含む第1の溶液、並びに水及びサポニンを含む第2の溶液を混合するステップを含む、前記方法。
【請求項５】
マイクロ流体デバイスを用いてサポニンを含むリポソームアジュバントの調製に有用なリポソーム濃縮物を製造する方法であって、以下:
(a)デバイス内で溶媒、ホスファチジルコリン脂質及びステロールを含む第1の溶液、並びに水を含む第2の溶液を混合するステップ、並びに
(b)サポニンを加えるステップ
を含む、前記方法。
【請求項６】
マイクロ流体デバイスを用いてサポニン及びTLR4アゴニストを含むリポソームアジュバントの調製に有用なリポソーム濃縮物を製造する方法であって、以下:
(a)デバイス内で溶媒、ホスファチジルコリン脂質及びステロールを含む第1の溶液、並びに水を含む第2の溶液を混合するステップ、
(b)サポニンを加えるステップ、並びに
(c)TLR4アゴニストを加えるステップ
を含み、ステップ(b)及び(c)はいずれの順序でもよく、又は単一のステップで行ってもよい、前記方法。
【請求項７】
第1の溶液が更にTLR4アゴニストを含む、請求項１〜６のいずれか１項記載の方法。
【請求項８】
マイクロ流体デバイスが混合チャンバーへの第1の溶液のための1つの入口及び混合チャンバーへの第2の溶液のための2つの入口を有する、請求項１〜７のいずれか１項記載の方法。
【請求項９】
混合チャンバーの断面積が0.2〜3.2mm2であり、且つ混合チャンバーが実質的に長方形の横断面である、請求項１〜８のいずれか１項記載の方法。
【請求項１０】
混合チャンバーの横断面が1.6〜2.4mmの長辺及び0.1〜4mmの短辺を有する、請求項１〜９のいずれか１項記載の方法。
【請求項１１】
混合チャンバーが1〜10cmの長さである、請求項１〜１０のいずれか１項記載の方法。
【請求項１２】
マイクロ流体デバイスが、横断面が長方形の混合チャンバーを含み、該混合チャンバーが0.2〜3.2mm2の断面積、1.4〜3.2mmの長辺、0.1〜1.2mmの短辺、第1の溶液のための1つの入口及び該混合チャンバーの近位端に対称に配置された第2の溶液のための2つの入口、1.5〜5cmの混合チャンバー長さ並びに該混合チャンバーの遠位端に位置する出口を有する、請求項１〜１１のいずれか１項記載の方法。
【請求項１３】
混合チャンバーへの総流量が混合チャンバー横断面の単位面積当たり12〜30ml/min/mm2である、請求項１〜１２のいずれか１項記載の方法。
【請求項１４】
第1と第2の溶液の流量の比率が1:2〜1:6の範囲である、請求項１〜１３のいずれか１項記載の方法。
【請求項１５】
マイクロ流体デバイスが複数の混合チャンバーを含み、且つ、複数の混合チャンバー内の全ての混合チャンバーが同一のポンプにより供給され、且つ、全ての混合チャンバーからの混合された材料が更に処理及び/又は貯蔵する前に収集される、請求項１〜１４のいずれか１項記載の方法。
【請求項１６】
溶媒が70〜90%v/vのエタノール及び10〜30%v/vのイソプロパノールを含む、請求項１〜１５のいずれか１項記載の方法。
【請求項１７】
第1の溶液が100〜170mg/mlのホスファチジルコリン脂質、20〜50mg/mlのステロール及び4〜10mg/mlのTLR4アゴニストを含む、請求項１〜１６のいずれか１項記載の方法。
【請求項１８】
ステロールがコレステロールであり、サポニンがQS-21であり、且つ、TLR4アゴニストが3D-MPLである、請求項１〜１７のいずれか１項記載の方法。
【請求項１９】
第2の溶液が少なくとも90%w/wの水及び1〜4mg/mlのサポニンを含む、請求項１〜１８のいずれか１項記載の方法。
【請求項２０】
免疫原若しくは抗原、又は免疫原若しくは抗原をコードするポリヌクレオチドを含むアジュバント化免疫原性組成物の調製方法であって、
(i)請求項１〜１９のいずれか１項記載の方法に従ってリポソームアジュバントを製造するステップ、
(ii)リポソームアジュバントを免疫原若しくは抗原、又は免疫原若しくは抗原をコードするポリヌクレオチドと混合するステップ
を含む、前記方法。
【請求項２１】
アジュバント化免疫原性組成物の製造方法であって、免疫原若しくは抗原、又は免疫原若しくは抗原をコードするポリヌクレオチドを、請求項１〜１９のいずれか１項記載の方法に従って製造されたリポソームアジュバントと組み合わせるステップを含む、前記方法。
【請求項２２】
請求項１〜１９のいずれか１項記載の方法に従って製造されたサポニン、TLR4アゴニスト、DOPC及びステロールを含むリポソームアジュバント。
【請求項２３】
請求項２１記載の方法に従って製造されたアジュバント化免疫原性組成物。
【請求項２４】
溶媒及び100〜170mg/mlの脂質を含む溶液であって、溶媒が70〜90%v/vのエタノール、例えば75〜85%v/vのエタノール、及び10〜30%v/vのイソプロピルアルコール、例えば15〜25%v/vのイソプロパノールを含む、前記溶液。
【請求項２５】
脂質がホスファチジルコリンである、請求項２４記載の溶液。
【請求項２６】
溶媒、脂質、コレステロール及びTLR4アゴニストを含む溶液の調製方法であって、
(i)溶媒の少なくとも一部分中のTLR4アゴニストの懸濁液を調製するステップ、
(ii)懸濁したTLR4アゴニストをホスファチジルコリン脂質及びコレステロールと組み合わせるステップ、
(iii)更なる溶媒を加えるステップ、
(iv)混合するステップ
を含む、前記方法。
【請求項２７】
溶媒、脂質、コレステロール及びTLR4アゴニストを含む溶液の調製方法であって、
(i)溶媒の少なくとも一部分中のTLR4アゴニストの懸濁液を調製するステップ、
(ii)懸濁したTLR4アゴニストをホスファチジルコリン脂質及びコレステロールと組み合わせるステップ、
(iii)更なる溶媒を加えるステップ、
(iv)混合するステップ、
(v)追加の溶媒を加えるステップ
を含む、前記方法。
【請求項２８】
溶媒の除去に先立って請求項１〜２７のいずれか１項記載の方法に従って第1の溶液及び第2の溶液を混合することにより得ることができるリポソーム含有溶液。
【請求項２９】
ホスファチジルコリン脂質がジラウロイルホスファチジルコリン(DLPC)、ジミリストイルホスファチジルコリン(DMPC)、ジパルミトイルホスファチジルコリン(DPPC)、ジステアロイルホスファチジルコリン(DSPC)及びジアラキドイルホスファチジルコリン(DAPC)、ジパルミトレオイルホスファチジルコリン及びジオレオイルホスファチジルコリン(DOPC)、並びにこれらの混合物から選択される、請求項１〜２８のいずれか１項記載の方法、アジュバント、組成物又は溶液。
【請求項３０】
ホスファチジルコリン脂質がDOPCである、請求項２９記載の方法、アジュバント、組成物又は溶液。
【請求項３１】
複数の混合チャンバー、第1の溶液のための各混合チャンバーへの少なくとも1つの入口、第2の溶液のための各混合チャンバーへの少なくとも1つの入口、及び混合された材料の回収のための各混合チャンバーからの少なくとも1つの出口を含む、マイクロ流体デバイス。
【請求項３２】
各混合チャンバーが、約0.2〜3.2mm2、約0.4〜1.6mm2、約0.6〜1.2mm2又は約0.7〜1.0mm2の断面積を有し、且つ、各混合チャンバーが実質的に長方形の横断面である、請求項３１記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項３３】
各混合チャンバーが、1〜10cm、例えば1.5〜5cm、殊に1.8〜4cm、特に2〜3cm、例えば2.5cmの長さを有する、請求項３１又は３２記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項３４】
各混合チャンバーが、1〜8mm、例えば1.6〜2.4mm、殊に2mmの長辺を有する、請求項３１〜３３のいずれか１項記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項３５】
各混合チャンバーが、0.1〜4mm、例えば0.2〜0.6mm、例えば0.4mmの短辺を有する、請求項３１〜３４のいずれか１項記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項３６】
幾つかの混合チャンバーが、例えば8つの混合チャンバーを含有する、単一のチップに組み合わされる、請求項３１〜３５のいずれか１項記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項３７】
各混合チャンバーへの第1の溶液のための1つの入口、及び各混合チャンバーへの第2の溶液のための2つの入口を有する、請求項３１〜３６のいずれか１項記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項３８】
マイクロ流体デバイスが、横断面が長方形の複数の混合チャンバーを含み、各混合チャンバーが0.2〜3.2mm2の断面積、1.4〜3.2mmの長辺、0.1〜1.2mmの短辺、第1の溶液のための1つの入口及び各混合チャンバーの近位端に対称に配置された第2の溶液のための2つの入口、1.5〜5cmの混合チャンバー長さ並びに各混合チャンバーの末端に位置する出口を有する、請求項３１〜３７のいずれか１項記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項３９】
マイクロ流体デバイスが、横断面が長方形の複数の混合チャンバーを含み、各混合チャンバーが0.2〜3.2mm2の断面積、1〜8mmの長辺、0.1〜1.2mmの短辺、第1の溶液のための1つの入口及び第2の溶液のための2つの入口、1.5〜5cmの混合チャンバー長さ並びに混合された材料の回収のための混合チャンバーからの少なくとも1つの出口を有し、混合チャンバーへの第1の溶液及び第2の溶液の流れの方向が混合チャンバーを通る流れの全般的な方向に対して実質的に平行である、請求項３１〜３７のいずれか１項記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項４０】
複数の混合チャンバーを並行して作動させてもよい、請求項３１〜３９のいずれか１項記載のマイクロ流体デバイス。