【手続補正書】
【提出日】令和3年5月10日(2021.5.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
組み換えフォリスタチンポリペプチドであって、以下：
（ｉ）配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、または配列番号５と少なくとも８０％同一であるアミノ酸の配列であって、前記組み換えフォリスタチンタンパク質が、ヘパリン結合配列（ＨＢＳ）を有し、かつ前記ＨＢＳ内の１つ以上のアミノ酸が、置換されたアミノ酸と比較してより少ない正電荷を有するアミノ酸で置換されている、アミノ酸の配列
（ｉｉ）配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも８０％同一であるアミノ酸の配列であって、Ｃ６６Ｓ、Ｃ６６Ａ、Ｇ７４Ｎ、Ｋ７５Ｅ、Ｋ７５Ｎ、Ｋ７６Ａ、Ｋ７６Ｄ、Ｋ７６Ｓ、Ｋ７６Ｅ、Ｃ７７Ｓ、Ｃ７７Ｔ、Ｒ７８Ｅ、Ｒ７８Ｎ、Ｎ８０Ｔ、Ｋ８１Ａ、Ｋ８１Ｄ、Ｋ８２Ａ、Ｋ８２Ｄ、Ｋ８１Ｅ、Ｋ８２Ｔ、Ｋ８２Ｅ、Ｋ８４Ｅ、Ｐ８５Ｔ、Ｒ８６Ｎ、Ｖ８８Ｅ、およびＶ８８Ｔまたはそれらの組み合わせからなる群から選択されるアミノ酸変異のうちのいずれか１つを含む、アミノ酸の配列、または
（ｉｉｉ）配列番号１２、配列番号１７〜３０、および配列番号３２〜４０からなる群から選択されるアミノ酸の配列
を含む、組み換えフォリスタチンポリペプチド。
【請求項２】
（ｉ）前記ＨＢＳ内の前記１つ以上のアミノ酸が、中性電荷を有するアミノ酸で置換されている、
（ｉｉ）前記１つ以上が少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個のアミノ酸を含み、必要に応じて、前記１つ以上が３個のアミノ酸を含む、
（ｉｉｉ）前記組み換えポリペプチドが、自然発生のフォリスタチンと比較して減少したヘパリン結合親和性を有し、例えば、前記ＨＢＳ中の前記アミノ酸置換の数を増加させることが、ヘパリン結合親和性を漸進的に減少させ、必要に応じて、前記ＨＢＳ内の前記アミノ酸置換の数が２個のアミノ酸または３個のアミノ酸である、
（ｉｖ）前記アミノ酸置換が、前記ＨＢＳドメインのアミノ酸残基８１〜８４によって特定されるＢＢＸＢモチーフ、および／もしくは前記ＨＢＳドメインのアミノ酸残基７５〜７８によって特定されるＢＢＸＢモチーフ内で行われ、必要に応じて、前記最初の２つの塩基性アミノ酸残基が、負電荷を有するかまたは中性のアミノ酸残基で置換され、必要に応じて、前記最初の２つの塩基性アミノ酸残基が、負電荷を有するアミノ酸残基で置換されている、ならびに／または
（ｖ）前記組み換えフォリスタチンタンパク質がＢＭＰ−９またはＢＭＰ−１０と結合しない、
請求項１（ｉ）に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
【請求項３】
前記組み換えフォリスタチンタンパク質が、配列番号１２〜４０または配列番号１０１〜１０６のうちのいずれか１つと少なくとも８０％同一である配列を有する、請求項１（ｉ）に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
【請求項４】
配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも８０％同一であるアミノ酸の配列を含み、
配列番号２、配列番号４、または配列番号５の６６〜８８位に対応する前記アミノ酸が、配列番号４２〜６７または配列番号１１１〜１１６のうちのいずれか１つと同一であり、必要に応じて、配列番号２、配列番号４、または配列番号５の６６〜８８位に対応する前記アミノ酸の配列が、配列番号５８〜６７または配列番号  １１１〜１１３のうちのいずれか１つと同一であり、例えば、前記組み換えフォリスタチンポリペプチドが高グリコシル化変異体である、
請求項１（ｉ）、２または３のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
【請求項５】
前記アミノ酸の配列が、
（ｉ）配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも９０％同一であるか、
（ｉｉ）配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも９５％同一であるか、
（ｉｉｉ）配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも９８％同一であるか、または
（ｉｖ）配列番号２、配列番号４、または配列番号５と１００％同一である、
請求項１（ｉｉ）または４に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
【請求項６】
（ｉ）請求項１〜５のいずれか１項に記載のフォリスタチンポリペプチドおよびＩｇＧ  Ｆｃドメイン、
（ｉｉ）フォリスタチンポリペプチドおよびヒトＩｇＧ  Ｆｃドメインであって、
前記組み換えフォリスタチンポリペプチドが、配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも８０％同一であるアミノ酸の配列を含み、
配列番号２、配列番号４、または配列番号５の６６〜８８位に対応する前記アミノ酸が、配列番号４１、４２、４３、または５８と同一である、フォリスタチンポリペプチドおよびヒトＩｇＧ  Ｆｃドメイン、
（ｉｉｉ）フォリスタチンポリペプチドおよびＩｇＧ  Ｆｃドメインであって、
前記フォリスタチンポリペプチドが、配列番号１２、配列番号１３、および配列番号１５〜配列番号４０からなる群のうちのいずれか１つから選択されるアミノ酸の配列を含む、フォリスタチンポリペプチドおよびＩｇＧ  Ｆｃドメイン、または
（ｉｖ）配列番号７３〜配列番号１００、配列番号１１７、または配列番号１１８のうちのいずれか１つのアミノ酸の配列
を含む組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
【請求項７】
前記組み換えフォリスタチンポリペプチドが、
（ｉ）配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも９０％同一であるか、
（ｉｉ）配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも９５％同一であるか、
（ｉｉｉ）配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも９８％同一であるか、または
（ｉｖ）配列番号２、配列番号４、または配列番号５と１００％同一である
アミノ酸の配列を含む、請求項６（ｉｉ）に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
【請求項８】
（ｉ）前記ＩｇＧ  Ｆｃドメインがアミノ酸置換を含み、
前記アミノ酸置換が、ＥＵナンバリングに従い、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｈ４３３Ｋ、Ｎ４３４Ｆおよびそれらの組み合わせからなる群から選択されるか、
（ｉｉ）前記ＩｇＧ  Ｆｃドメインが配列番号６のアミノ酸の配列を含み、
前記アミノ酸の配列が、ＥＵナンバリングに従い、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｈ４３３Ｋ、Ｎ４３４Ｆおよびそれらの組み合わせからなる群から選択されるアミノ酸置換を含むか、
（ｉｉｉ）前記ＩｇＧ  Ｆｃドメインが、配列番号７〜配列番号１１からなる群から選択されるアミノ酸の配列を含むか、
（ｉｖ）前記ＩｇＧ  ＦｃドメインがヒトＩｇＧ  Ｆｃドメインであるか、または
（ｖ）前記ＩｇＧ  ＦｃドメインがＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４  Ｆｃドメインである、
請求項６（ｉ）〜（ｉｉｉ）または７に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
【請求項９】
（ｉ）前記タンパク質が、１〜１００ｐＭの親和性解離定数（ＫＤ）でミオスタチンに結合するか、
（ｉｉ）前記タンパク質が、１〜１００ｐＭの親和性解離定数（ＫＤ）でアクチビンＡに結合するか、
（ｉｉｉ）前記タンパク質が、０．２ｎＭ〜２５ｎＭの範囲の骨形態形成タンパク質−９（ＢＭＰ−９）および／または骨形態形成タンパク質−１０（ＢＭＰ−１０）に結合しないか、
（ｉｖ）前記タンパク質が、０．１〜２５ｎＭ超の親和性解離定数（ＫＤ）でヘパリンに結合するか、
（ｖ）前記タンパク質が、２５〜４００ｎＭの親和性解離定数（ＫＤ）でＦｃＲｎ受容体に結合するか、
（ｖｉ）タンパク質が０．１〜１０ｎＭのＩＣ５０でミオスタチンを阻害するか、
（ｖｉｉ）タンパク質が０．１〜１０ｎＭのＩＣ５０でアクチビンＡを阻害するか、または
（ｖｉｉｉ）前記組み換えフォリスタチンタンパク質融合タンパク質が、野生型フォリスタチンと比較して増加した半減期を有する、
請求項６（ｉ）〜（ｉｖ）のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
【請求項１０】
請求項６〜９のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質および薬学的に許容可能な担体を含む医薬組成物。
【請求項１１】
（ｉ）請求項１〜５のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド、または
（ｉｉ）請求項６〜８のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質
をコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド。
【請求項１２】
請求項１１に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
【請求項１３】
請求項１１に記載のポリヌクレオチド、または請求項１２に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
【請求項１４】
請求項１３に記載の宿主細胞を培養することを含む、ミオスタチンに特異的に結合する組み換えフォリスタチン融合タンパク質を作製する方法。
【請求項１５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチドまたは請求項６〜８のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質を産生するハイブリドーマ細胞。
【請求項１６】
デュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）を治療する方法において使用するための、請求項６〜８のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質を含む組成物または請求項１０に記載の医薬組成物であって、
ＤＭＤの少なくとも１つの症状もしくは特徴の強度、重症度、または頻度が低減するか、またはそれらの開始を遅延させる、
組成物または医薬組成物。
【請求項１７】
請求項１６に記載の使用のための組成物または医薬組成物であって、
（ｉ）前記使用が、１つ以上の追加的治療薬を対象者に投与することをさらに含み、必要に応じて、前記１つ以上の追加的治療薬が、抗Ｆｌｔ−１抗体またはその断片、エダサロネキセント、パムレブルマブ、プレドニゾン、デフラザコート、ＲＮＡ調節治療薬、エクソンスキッピング治療薬、および遺伝子治療からなる群から選択される、
（ｉｉ）前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の有効量が非経口的に投与され、例えば、前記非経口的投与が、静脈内、皮内、髄腔内、吸入、経皮（局所的）、眼内、筋肉内、皮下、経粘膜投与、またはそれらの組み合わせからなる群から選択され、必要に応じて、
（ａ）前記非経口的投与が静脈内投与であり、必要に応じて、前記静脈内投与が月に１回行われるか、もしくは
（ｂ）前記非経口的投与が皮下投与であり、必要に応じて、前記皮下投与が週に１回行われ、必要に応じて、組み換えフォリスタチン融合タンパク質の投与が、用量に比例しているか、もしくは用量直線的である、
（ｉｉｉ）前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、
（ａ）静脈内投与で約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇであり、必要に応じて、前記静脈内投与が月に１回行われ、
（Ｉ）前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、静脈内投与で約８ｍｇ／ｋｇ〜１５ｍｇ／ｋｇであり、例えば、前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約８ｍｇ／ｋｇであり、必要に応じて、前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約１０ｍｇ／ｋｇであるか、もしくは
（ＩＩ）前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約５０ｍｇ／ｋｇである、もしくは
（ｂ）皮下投与で約２ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇであり、必要に応じて、前記皮下投与が週に１回行われ、必要に応じて、前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、皮下投与で約３ｍｇ／ｋｇ〜３０ｍｇ／ｋｇであり、例えば、前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、皮下投与で約２ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇであり、例えば、前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約２ｍｇ／ｋｇであり、必要に応じて、前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約３ｍｇ／ｋｇであり、必要に応じて前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、皮下投与で少なくとも約３０ｍｇ／ｋｇである、
（ｉｖ）前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質が、表１から選択される１つ以上の骨格筋に送達される、
（ｖ）前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記投与が、対照に対して筋肉量の増加をもたらし、必要に応じて、
（ａ）前記筋肉が、表１から選択される１つ以上の骨格筋であり、例えば、前記筋肉が、横隔膜、三頭筋、ヒラメ筋、前脛骨筋、腓腹筋、長指伸筋、腹直筋、四頭筋、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され、必要に応じて、前記筋肉が腓腹筋である、および／もしくは
（ｂ）前記筋肉量の増加が、対照に対して少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１５０％、２００％または５００％の増加である、
（ｖｉ）前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記投与により、筋肉再生、筋力の増加、柔軟性の増加、可動域の増加、スタミナの増加、易疲労性の低減、血流の増加、認知の改善、肺機能の改善、炎症の抑制、筋線維症の低減、筋壊死の低減、および／または体重の増加がもたらされる、ならびに／または
（ｖｉｉ）ＤＭＤの前記少なくとも１つの症状または特徴が、筋消耗、筋力低下、筋脆弱性、筋壊死、筋線維症、関節拘縮、骨格変形、心筋症、嚥下障害、腸・膀胱機能障害、筋虚血、認知機能障害、行動機能障害、社会化障害、脊柱側弯、および呼吸機能障害からなる群から選択される、
使用のための組成物または医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２４９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２４９】
同等物および範囲
当業者であれば、本明細書に記載の本発明の特定の実施形態に対する多数の均等物を日常的なものを超えない実験を使用して認識し、または確認することができるであろう。本発明の範囲は、上記の説明に限定されることは意図されず、むしろ以下の請求項に記載される。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、または配列番号５と少なくとも８０％同一であるアミノ酸の配列を含む組み換えフォリスタチンポリペプチドであって、前記組み換えフォリスタチンタンパク質が、ヘパリン結合配列（ＨＢＳ）を有し、かつ前記ＨＢＳ内の１つ以上のアミノ酸が、置換されたアミノ酸と比較してより少ない正電荷を有するアミノ酸で置換されている、組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目２)
前記ＨＢＳ内の前記１つ以上のアミノ酸が、中性電荷を有するアミノ酸で置換されている、項目１に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目３)
前記ＨＢＳ内の前記１つ以上のアミノ酸が、負電荷を有するアミノ酸で置換されている、項目１に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目４)
前記１つ以上が少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０個のアミノ酸を含む、項目１〜３のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目５)
前記１つ以上が３個のアミノ酸を含む、項目４に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目６)
前記組み換えポリペプチドが、自然発生のフォリスタチンと比較して減少したヘパリン結合親和性を有する、項目１〜５のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目７)
前記ＨＢＳ中の前記アミノ酸置換の数を増加させることが、ヘパリン結合親和性を漸進的に減少させる、項目６に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目８)
前記ＨＢＳ内の前記アミノ酸置換の数が２個のアミノ酸である、項目７に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目９)
前記ＨＢＳ内の前記アミノ酸置換の数が３個のアミノ酸である、項目８に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目１０)
前記アミノ酸置換が、前記ＨＢＳドメインのアミノ酸残基８１〜８４によって特定されるＢＢＸＢモチーフ内で行われる、項目１〜９のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目１１)
前記アミノ酸置換が、前記ＨＢＳドメインのアミノ酸残基７５〜７８によって特定されるＢＢＸＢモチーフ内で行われる、項目１〜１０のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目１２)
前記最初の２つの塩基性アミノ酸残基が、負電荷を有するかまたは中性のアミノ酸残基で置換されている、項目１０または１１に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目１３)
前記最初の２つの塩基性アミノ酸残基が、負電荷を有するアミノ酸残基で置換されている、項目１２に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目１４)
前記組み換えフォリスタチンタンパク質がＢＭＰ−９またはＢＭＰ−１０と結合しない、項目１〜１３のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目１５)
前記組み換えフォリスタチンタンパク質が、配列番号１２〜４０または配列番号１０１〜１０６のうちのいずれか１つと少なくとも８０％同一である配列を有する、項目１に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目１６)
配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも８０％同一であるアミノ酸の配列を含み、
配列番号２、配列番号４、または配列番号５の６６〜８８位に対応する前記アミノ酸が、配列番号４２〜６７または配列番号１１１〜１１６のうちのいずれか１つと同一である、項目１〜１５のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目１７)
配列番号２、配列番号４、または配列番号５の６６〜８８位に対応するアミノ酸の配列が、配列番号５８〜６７または配列番号  １１１〜１１３のうちのいずれか１つと同一である、項目１６に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目１８)
前記組み換えフォリスタチンポリペプチドが高グリコシル化変異体である、項目１７に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目１９)
配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも８０％同一であるアミノ酸の配列を含み、
Ｃ６６Ｓ、Ｃ６６Ａ、Ｇ７４Ｎ、Ｋ７５Ｅ、Ｋ７５Ｎ、Ｋ７６Ａ、Ｋ７６Ｄ、Ｋ７６Ｓ、Ｋ７６Ｅ、Ｃ７７Ｓ、Ｃ７７Ｔ、Ｒ７８Ｅ、Ｒ７８Ｎ、Ｎ８０Ｔ、Ｋ８１Ａ、Ｋ８１Ｄ、Ｋ８２Ａ、Ｋ８２Ｄ、Ｋ８１Ｅ、Ｋ８２Ｔ、Ｋ８２Ｅ、Ｋ８４Ｅ、Ｐ８５Ｔ、Ｒ８６Ｎ、Ｖ８８Ｅ、およびＶ８８Ｔまたはそれらの組み合わせからなる群から選択されるアミノ酸変異のうちのいずれか１つを含む、組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目２０)
前記アミノ酸の配列が、配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも９０％同一である、項目１６または１９に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目２１)
前記アミノ酸の配列が、配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも９５％同一である、項目１６または１９に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目２２)
前記アミノ酸の配列が、配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも９８％同一である、項目１６または１９に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目２３)
前記アミノ酸の配列が、配列番号２、配列番号４、または配列番号５と１００％同一である、項目１６または１９に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目２４)
配列番号１２、配列番号１７〜３０、および配列番号３２〜４０からなる群から選択されるアミノ酸の配列を含む、組み換えフォリスタチンポリペプチド。
(項目２５)
項目１〜２４のいずれか１項に記載のフォリスタチンポリペプチドおよびＩｇＧ  Ｆｃドメインを含む組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目２６)
フォリスタチンポリペプチドおよびヒトＩｇＧ  Ｆｃドメインを含む組み換えフォリスタチン融合タンパク質であって、
前記組み換えフォリスタチンポリペプチドが、配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも８０％同一であるアミノ酸の配列を含み、
配列番号２、配列番号４、または配列番号５の６６〜８８位に対応する前記アミノ酸が、配列番号４１、４２、４３、または５８と同一である、組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目２７)
前記組み換えフォリスタチンポリペプチドが、配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも９０％同一であるアミノ酸の配列を含む、項目２６に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目２８)
前記組み換えフォリスタチンポリペプチドが、配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも９５％同一であるアミノ酸の配列を含む、項目２６に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目２９)
前記組み換えフォリスタチンポリペプチドが、配列番号２、配列番号４、または配列番号５と少なくとも９８％同一であるアミノ酸の配列を含む、項目２６に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目３０)
前記組み換えフォリスタチンポリペプチドが、配列番号２、配列番号４、または配列番号５と１００％同一であるアミノ酸の配列を含む、項目２６に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目３１)
フォリスタチンポリペプチドおよびＩｇＧ  Ｆｃドメインを含む組み換えフォリスタチン融合タンパク質であって、
前記フォリスタチンポリペプチドが、配列番号１２、配列番号１３、および配列番号１５〜配列番号４０からなる群のうちのいずれか１つから選択されるアミノ酸の配列を含む、組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目３２)
前記ＩｇＧ  Ｆｃドメインがアミノ酸置換を含む、項目２５〜３１のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質であって、
前記アミノ酸置換が、ＥＵナンバリングに従い、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｈ４３３Ｋ、Ｎ４３４Ｆおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される、組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目３３)
前記ＩｇＧ  Ｆｃドメインが配列番号６のアミノ酸の配列を含む、項目２５〜３１のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質であって、
前記アミノ酸の配列が、ＥＵナンバリングに従い、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ、Ｈ４３３Ｋ、Ｎ４３４Ｆおよびそれらの組み合わせからなる群から選択されるアミノ酸置換を含む、組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目３４)
前記ＩｇＧ  Ｆｃドメインが、配列番号７〜配列番号１１からなる群から選択されるアミノ酸の配列を含む、項目２５〜３１のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目３５)
前記ＩｇＧ  ＦｃドメインがヒトＩｇＧ  Ｆｃドメインである、項目２５〜３１のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目３６)
前記ＩｇＧ  ＦｃドメインがＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４  Ｆｃドメインである、項目２５〜３１のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目３７)
配列番号７３〜配列番号１００、配列番号１１７、または配列番号１１８のうちのいずれか１つのアミノ酸の配列を含む組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目３８)
前記タンパク質が、１〜１００ｐＭの親和性解離定数（ＫＤ）でミオスタチンに結合する、項目２５〜３７のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目３９)
前記タンパク質が、１〜１００ｐＭの親和性解離定数（ＫＤ）でアクチビンＡに結合する、項目２５〜３７のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目４０)
前記タンパク質が、０．２ｎＭ〜２５ｎＭの範囲の骨形態形成タンパク質−９（ＢＭＰ−９）および／または骨形態形成タンパク質−１０（ＢＭＰ−１０）に結合しない、項目２５〜３７のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目４１)
前記タンパク質が、０．１〜２５ｎＭ超の親和性解離定数（ＫＤ）でヘパリンに結合する、項目２５〜３７のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目４２)
前記タンパク質が、２５〜４００ｎＭの親和性解離定数（ＫＤ）でＦｃＲｎ受容体に結合する、項目２５〜３７のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目４３)
タンパク質が０．１〜１０ｎＭのＩＣ５０でミオスタチンを阻害する、項目２５〜３７のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目４４)
タンパク質が０．１〜１０ｎＭのＩＣ５０でアクチビンＡを阻害する、項目２５〜３７のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質。
(項目４５)
前記組み換えフォリスタチンタンパク質融合タンパク質が、野生型フォリスタチンと比較して増加した半減期を有する、項目２５〜３７のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチンタンパク質融合タンパク質。
(項目４６)
項目２５〜４５のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質および薬学的に許容可能な担体を含む医薬組成物。
(項目４７)
項目１〜２４のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド。
(項目４８)
項目２５〜３７のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質をコードするヌクレオチド配列を含むポリヌクレオチド。
(項目４９)
項目４７または４８に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
(項目５０)
項目４７もしくは４８に記載のポリヌクレオチド、または項目３０に記載の発現ベクターを含む宿主細胞。
(項目５１)
項目５０に記載の宿主細胞を培養することを含む、ミオスタチンに特異的に結合する組み換えフォリスタチン融合タンパク質を作製する方法。
(項目５２)
項目１〜１７のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチンポリペプチドまたは項目２５〜３７のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質を産生するハイブリドーマ細胞。
(項目５３)
デュシェンヌ型筋ジストロフィー（ＤＭＤ）を治療する方法であって、
ＤＭＤの少なくとも１つの症状もしくは特徴の強度、重症度、または頻度が低減するか、またはそれらの開始を遅延させるように、項目２５〜３７のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質または項目３８に記載の医薬組成物の有効量を、ＤＭＤに罹患しているか、またはＤＭＤに感受性がある対象者に投与することを含む、方法。
(項目５４)
前記方法が、１つ以上の追加的治療薬を対象者に投与することをさらに含む、項目５３に記載の方法。
(項目５５)
前記１つ以上の追加的治療薬が、抗Ｆｌｔ−１抗体またはその断片、エダサロネキセント、パムレブルマブ、プレドニゾン、デフラザコート、ＲＮＡ調節治療薬、エクソンスキッピング治療薬、および遺伝子治療からなる群から選択される、項目５４に記載の方法。
(項目５６)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の有効量が非経口的に投与される、項目５３〜５５のいずれか１項に記載の方法。
(項目５７)
前記非経口的投与が、静脈内、皮内、髄腔内、吸入、経皮（局所的）、眼内、筋肉内、皮下、経粘膜投与、またはそれらの組み合わせからなる群から選択される、項目５６に記載の方法。
(項目５８)
前記非経口的投与が静脈内投与である、項目５７に記載の方法。
(項目５９)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、静脈内投与で約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇである、項目５３〜５８のいずれか１項に記載の方法。
(項目６０)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、静脈内投与で約８ｍｇ／ｋｇ〜１５ｍｇ／ｋｇである、項目５９に記載の方法。
(項目６１)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約８ｍｇ／ｋｇである、項目６０に記載の方法。
(項目６２)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約１０ｍｇ／ｋｇである、項目６１に記載の方法。
(項目６３)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約５０ｍｇ／ｋｇである、項目５９に記載の方法。
(項目６４)
前記静脈内投与が月に１回行われる、項目５８〜６３のいずれか１項に記載の方法。
(項目６５)
前記非経口的投与が皮下投与である、項目５７に記載の方法。
(項目６６)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、皮下投与で約２ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇである、項目５３〜５８、または項目６５のいずれか１項に記載の方法。
(項目６７)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、皮下投与で約３ｍｇ／ｋｇ〜３０ｍｇ／ｋｇである、項目６６に記載の方法。
(項目６８)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、皮下投与で約２ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇである、項目６７に記載の方法。
(項目６９)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約２ｍｇ／ｋｇである、項目６８に記載の方法。
(項目７０)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約３ｍｇ／ｋｇである、項目６９に記載の方法。
(項目７１)
組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約３０ｍｇ／ｋｇである、項目７０に記載の方法。
(項目７２)
前記皮下投与が週に１回行われる、項目６６〜７１のいずれか１項に記載の方法。
(項目７３)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の投与が、用量に比例している、項目５７〜７２のいずれか１項に記載の方法。
(項目７４)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の投与が、用量直線的である、項目５７〜７２のいずれか１項に記載の方法。
(項目７５)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質が、表１から選択される１つ以上の骨格筋に送達される、項目５３〜７４のいずれか１項に記載の方法。
(項目７６)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記投与が、対照に対して筋肉量の増加をもたらす、項目５３〜７５のいずれか１項に記載の方法。
(項目７７)
前記筋肉が、表１から選択される１つ以上の骨格筋である、項目７６に記載の方法。
(項目７８)
前記筋肉が、横隔膜、三頭筋、ヒラメ筋、前脛骨筋、腓腹筋、長指伸筋、腹直筋、四頭筋、およびそれらの組み合わせからなる群から選択される、項目７７に記載の方法。
(項目７９)
前記筋肉が腓腹筋である、項目７８に記載の方法。
(項目８０)
前記筋肉量の増加が、対照に対して少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、１５０％、２００％または５００％の増加である、項目７６〜７９のいずれか１項に記載の方法。
(項目８１)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記投与により、筋肉再生、筋力の増加、柔軟性の増加、可動域の増加、スタミナの増加、易疲労性の低減、血流の増加、認知の改善、肺機能の改善、炎症の抑制、筋線維症の低減、筋壊死の低減、および／または体重の増加がもたらされる、項目５３〜８０のいずれか１項に記載の方法。
(項目８２)
ＤＭＤの前記少なくとも１つの症状または特徴が、筋消耗、筋力低下、筋脆弱性、筋壊死、筋線維症、関節拘縮、骨格変形、心筋症、嚥下障害、腸・膀胱機能障害、筋虚血、認知機能障害、行動機能障害、社会化障害、脊柱側弯、および呼吸機能障害からなる群から選択される、項目５３〜８０のいずれか１項に記載の方法。
(項目８３)
対象者内のミオスタチンおよび／またはアクチビンを阻害する方法であって、
項目２５〜３７のいずれか１項に記載の組み換えフォリスタチン融合タンパク質の有効量を含む組成物を対象者に投与することを含む、方法。
(項目８４)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、静脈内投与で約１ｍｇ／ｋｇ〜５０ｍｇ／ｋｇである、項目８３に記載の方法。
(項目８５)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、静脈内投与で約８ｍｇ／ｋｇ〜１５ｍｇ／ｋｇである、項目８４に記載の方法。
(項目８６)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約８ｍｇ／ｋｇである、項目８５に記載の方法。
(項目８７)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約１０ｍｇ／ｋｇである、項目８６に記載の方法。
(項目８８)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約５０ｍｇ／ｋｇである、項目８７に記載の方法。
(項目８９)
前記静脈内投与が月に１回行われる、項目８４〜８８のいずれか１項に記載の方法。
(項目９０)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、皮下投与で約２ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇである、項目８３に記載の方法。
(項目９１)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、皮下投与で約３ｍｇ／ｋｇ〜３０ｍｇ／ｋｇである、項目９０に記載の方法。
(項目９２)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、皮下投与で約２ｍｇ／ｋｇ〜５ｍｇ／ｋｇである、項目９０に記載の方法。
(項目９３)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約２ｍｇ／ｋｇである、項目９２に記載の方法。
(項目９４)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が少なくとも約３ｍｇ／ｋｇである、項目９３に記載の方法。
(項目９５)
前記組み換えフォリスタチン融合タンパク質の前記有効量が、皮下投与で少なくとも約３０ｍｇ／ｋｇである、項目９１に記載の方法。
(項目９６)
前記皮下投与が週に１回行われる、項目９０〜９５のいずれか１項に記載の方法。