【手続補正書】
【提出日】令和3年1月13日(2021.1.13)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞内のＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の発現を改変または変更するための組合せ物であって、
（ａ）Ｃａｓ９タンパク質または前記Ｃａｓ９タンパク質をコードする核酸；および
（ｂ）第１のガイドＲＮＡまたは前記第１のガイドＲＮＡをコードするＤＮＡであって、前記第１のガイドＲＮＡが、第１のＣＲＩＳＰＲ  ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）部分および第１のトランス活性化ＣＲＩＳＰＲ  ＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）部分を含み、前記第１のガイドＲＮＡが、前記Ｃａｓ９タンパク質と複合体を形成し、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子内の第１のガイドＲＮＡ標的配列を標的とし、前記第１のガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の開始コドンを含むかまたはそれに近接する、第１のガイドＲＮＡまたは前記第１のガイドＲＮＡをコードするＤＮＡ
を含み、前記Ｃａｓ９タンパク質が、前記第１のガイドＲＮＡ標的配列を切断し、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子において標的化遺伝子改変を生成するか、または前記Ｃａｓ９タンパク質が、前記第１のガイドＲＮＡ標的配列に結合し、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の発現を変更し；
前記組合せ物が、前記細胞に導入される、
組合せ物。
【請求項２】
（ａ）前記Ｃａｓ９タンパク質がヌクレアーゼ活性Ｃａｓ９タンパク質であり、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子が、組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号１と最適にアラインメントした場合、配列番号１の１２６６５位に対応するヌクレオチドと１２６６６位に対応するヌクレオチドとの間に挿入されたチミンを有さない；
（ｂ）前記Ｃａｓ９タンパク質が、転写リプレッサードメインと融合したヌクレアーゼ不活性Ｃａｓ９タンパク質であり、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号１と最適にアラインメントした場合、配列番号１の１２６６５位に対応するヌクレオチドと１２６６６位に対応するヌクレオチドとの間に挿入されたチミンを有さない；または
（ｃ）前記Ｃａｓ９タンパク質が、転写活性化ドメインと融合したヌクレアーゼ不活性Ｃａｓ９タンパク質であり、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号１と最適にアラインメントした場合、配列番号１の１２６６５位に対応するヌクレオチドと１２６６６位に対応するヌクレオチドとの間に挿入されたチミンを含む、
請求項１に記載の組合せ物。
【請求項３】
（ａ）前記第１のガイドＲＮＡ標的配列が、配列番号２０〜８１および２５９〜２６３のいずれか１つを含み、かつ／または
（ｂ）前記第１のガイドＲＮＡが、配列番号１４２３〜１４８４および１６４３〜１６４７のいずれか１つを含むＤＮＡ標的化セグメントを含み、かつ／または
（ｃ）前記第１のガイドＲＮＡが、配列番号５００〜５６１、７３０〜７９１、９６０〜１０２１、１１９０〜１２５１、７２０〜７２４、９５０〜９５４、１１８０〜１１８４、および１４１０〜１４１４のいずれか１つを含む、
請求項１または２に記載の組合せ物。
【請求項４】
前記第１のガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号１または２と最適にアラインメントした場合、配列番号１または２のエクソン１に対応する領域内にある、請求項１から３までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項５】
前記第１のガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の前記開始コドンの約１０、２０、３０、４０、５０、１００、２００、３００、４００、５００または１，０００ヌクレオチド内にあるか、または前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の前記開始コドンを含む、請求項１から４までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項６】
第２のガイドＲＮＡまたは前記第２のガイドＲＮＡをコードするＤＮＡをさらに含み、
前記第２のガイドＲＮＡが、第２のＣＲＩＳＰＲ  ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）部分および第２のトランス活性化ＣＲＩＳＰＲ  ＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）部分を含み、
前記第２のガイドＲＮＡが、前記Ｃａｓ９タンパク質と複合体を形成し、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子内の第２のガイドＲＮＡ標的配列を標的とし、かつ
前記第２のガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の開始コドンを含むかまたはそれに近接する、
請求項１から５までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項７】
前記第２のガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の前記開始コドンの約１０、２０、３０、４０、５０、１００、２００、３００、４００、５００または１，０００ヌクレオチド内にあるか、または前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の前記開始コドンを含む、請求項６に記載の組合せ物。
【請求項８】
前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の前記開始コドンの破壊をもたらす、請求項１から７までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項９】
第２のガイドＲＮＡまたは前記第２のガイドＲＮＡをコードするＤＮＡをさらに含み、
前記第２のガイドＲＮＡが、第２のＣＲＩＳＰＲ  ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）部分および第２のトランス活性化ＣＲＩＳＰＲ  ＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）部分を含み、
前記第２のガイドＲＮＡが、前記Ｃａｓ９タンパク質と複合体を形成し、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子内の第２のガイドＲＮＡ標的配列を標的とし、
前記第２のガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の終止コドンを含むかまたはそれに近接する、かつ
前記細胞が、前記第１のガイドＲＮＡ標的配列と前記第２のガイドＲＮＡ標的配列との間にＨＳＤ１７Ｂ１３コード領域の欠失を含むように改変される、
請求項１から５までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項１０】
（ａ）前記第２のガイドＲＮＡ標的配列が、配列番号８８〜２２５のいずれか１つを含み、かつ／または
（ｂ）前記第２のガイドＲＮＡが、配列番号１４８５〜１６２８のいずれか１つを含むＤＮＡ標的化セグメントを含み、かつ／または
（ｃ）前記第２のガイドＲＮＡが、配列番号５６２〜７０５、７９２〜９３５、１０２２〜１１６５および１２５２〜１３９５のいずれか１つを含む、
請求項９に記載の組合せ物。
【請求項１１】
前記第２のガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号１または２と最適にアラインメントした場合、配列番号１または２のエクソン７に対応する領域内にある、請求項９または１０に記載の組合せ物。
【請求項１２】
前記第２のガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の前記終止コドンの約１０、２０、３０、４０、５０、１００、２００、３００、４００、５００または１，０００ヌクレオチド内にあるか、または前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の前記終止コドンを含む、請求項９から１１までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項１３】
前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の前記コード配列が欠失される、請求項９から１２までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項１４】
前記標的化遺伝子改変が、非相同末端結合よって切断された第１のガイドＲＮＡ標的配列の修復によって生成される、請求項１から１３までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項１５】
前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の機能喪失をもたらす、請求項１から１４までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項１６】
前記組合せ物が、発現ベクターと組み合わせて前記細胞に導入されることを特徴とし、前記発現ベクターが、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号１と最適にアラインメントした場合、配列番号１の１２６６５位に対応するヌクレオチドと１２６６６位に対応するヌクレオチドとの間に挿入されたチミンを含む組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を含む、請求項１から１５までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項１７】
前記組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子がヒト遺伝子である、請求項１６に記載の組合せ物。
【請求項１８】
前記組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子が、前記遺伝子の１つまたは複数の非必須セグメントが対応する野生型ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子に対して欠失しているＨＳＤ１７Ｂ１３ミニ遺伝子であり、前記欠失したセグメントが、１つまたは複数のイントロン配列を含み、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３ミニ遺伝子が、配列番号２と最適にアラインメントした場合、配列番号２のイントロン６に対応するイントロンを含む、請求項１６または１７に記載の組合せ物。
【請求項１９】
前記組合せ物が、発現ベクターと組み合わせて前記細胞に導入されることを特徴とし、前記発現ベクターが、配列番号１５（ＨＳＤ１７Ｂ１３アイソフォームＤ）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質をコードする核酸を含み、必要に応じて、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質をコードする前記核酸が、配列番号７と最適にアラインメントした場合、配列番号７（ＨＳＤ１７Ｂ１３転写産物Ｄ）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である、請求項１から１５までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項２０】
前記組合せ物が、ＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質またはその断片と組み合わせて前記細胞に導入されることを特徴とし、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質またはその断片が、配列番号１５（ＨＳＤ１７Ｂ１３アイソフォームＤ）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である、請求項１から１５までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項２１】
前記組合せ物が、外因性ドナー配列と組み合わせて前記細胞に導入されることを特徴とし、前記外因性ドナー配列を、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子内の標的ゲノム遺伝子座と組換えて、標的化遺伝子改変を生じさせる、請求項１から１５までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項２２】
前記外因性ドナー配列による前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の修復が、非相同末端結合媒介性挿入を介して生じる、請求項２１に記載の組合せ物。
【請求項２３】
前記外因性ドナー配列による前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の修復が、相同組換え修復を介して生じる、請求項２１に記載の組合せ物。
【請求項２４】
前記外因性ドナー配列が、配列番号２の１２６６６位に対応する位置の５’側の標的配列とハイブリダイズする５’相同アーム、および配列番号２の１２６６６位に対応する位置の３’側の標的配列とハイブリダイズする３’相同アームを含み、前記外因性ドナー配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子と組換えられる、請求項２３に記載の組合せ物。
【請求項２５】
前記外因性ドナー配列が、５’相同アームと３’相同アームに挟まれた核酸挿入物をさらに含む、請求項２４に記載の組合せ物。
【請求項２６】
前記核酸挿入物がチミンを含み、前記外因性ドナー配列がＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子と組換えられると、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号１と最適にアラインメントした場合、配列番号１の１２６６５位に対応するヌクレオチドと１２６６６位に対応するヌクレオチドとの間に前記チミンが挿入される、請求項２５に記載の組合せ物。
【請求項２７】
前記外因性ドナー配列が、約５０ヌクレオチド〜約１ｋｂの長さである、請求項２１から２６までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項２８】
前記外因性ドナー配列が、約８０ヌクレオチド〜約２００ヌクレオチドの長さである、請求項２７に記載の組合せ物。
【請求項２９】
前記外因性ドナー配列が、一本鎖オリゴデオキシヌクレオチドである、２１から２８までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項３０】
前記第１のガイドＲＮＡが、前記第１のｃｒＲＮＡ部分が前記第１のｔｒａｃｒＲＮＡ部分に連結している単一分子ガイドＲＮＡである、請求項１から２８までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項３１】
前記第１のガイドＲＮＡが、配列番号１４２０、２５６、２５７または２５８に記載の配列を含む、請求項３０に記載の組合せ物。
【請求項３２】
前記第１のｃｒＲＮＡ部分および前記第１のｔｒａｃｒＲＮＡ部分が、別々のＲＮＡ分子である、請求項１から２８までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項３３】
前記第１のｃｒＲＮＡ部分が、配列番号１４２１に記載の配列を含み、かつ／または前記第１のｔｒａｃｒＲＮＡ部分が、配列番号１４２２に記載の配列を含む、請求項３２に記載の組合せ物。
【請求項３４】
前記第１のガイドＲＮＡが、改変または制御された安定性をもたらす改変を含む、請求項１から３３までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項３５】
前記Ｃａｓ９タンパク質をコードする前記核酸を含み、前記Ｃａｓ９タンパク質をコードする前記核酸がＤＮＡを含む、請求項１から３４までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項３６】
前記Ｃａｓ９タンパク質をコードする前記核酸を含み、前記Ｃａｓ９タンパク質をコードする前記核酸がＲＮＡを含む、請求項１から３４までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項３７】
ＲＮＡの形態で前記第１のガイドＲＮＡを含む、請求項１から３６までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項３８】
前記第１のガイドＲＮＡをコードするＤＮＡを含む、請求項１から３６までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項３９】
脂質ナノ粒子中にある、請求項１から３８までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項４０】
アデノ随伴ウイルスベクター中にある、請求項１から３９までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項４１】
前記細胞が、マウス細胞、ラット細胞またはヒト細胞である、請求項１から４０までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項４２】
前記細胞が、ヒト肝臓細胞、マウス肝臓細胞、ラット肝臓細胞、マウス多能性細胞またはラット多能性細胞である、請求項４１に記載の組合せ物。
【請求項４３】
前記細胞がヒト肝臓細胞である、請求項４２に記載の組合せ物。
【請求項４４】
前記細胞がヒト細胞であり、
（ａ）前記第１のガイドＲＮＡ標的配列が、配列番号２０〜８１のいずれか１つを含み、かつ／または
（ｂ）前記第１のガイドＲＮＡが、配列番号１４２３〜１４８４のいずれか１つを含むＤＮＡ標的化セグメントを含み、かつ／または
（ｃ）前記第１のガイドＲＮＡが、配列番号５００〜５６１、７３０〜７９１、９６０〜１０２１および１１９０〜１２５１のいずれか１つを含み、
必要に応じて、
（ａ）前記第１のガイドＲＮＡ標的配列が、配列番号２０〜４１のいずれか１つ、配列番号２１〜２３、３３および３５のいずれか１つ、または配列番号３３および３５のいずれか１つを含み、かつ／または
（ｂ）前記第１のガイドＲＮＡが、配列番号１４４７〜１４６８のいずれか１つ、配列番号１４４８〜１４５０、１４６０および１４６２のいずれか１つ、または配列番号１４６０および１４６２のいずれか１つを含むＤＮＡ標的化セグメントを含み、かつ／または
（ｃ）前記第１のガイドＲＮＡが、配列番号５２４〜５４５、７５４〜７７５、９８４〜１００５および１２１４〜１２３５のいずれか１つ、配列番号２９５〜２９７、５２５〜５２７、７５５〜７５７、９８５〜９８７、１２１５〜１２１７、３０７、３０９、５３７、５３９、７６７、７６９、９９７、９９９、１２２７および１２２９のいずれか１つ、または配列番号３０７、３０９、５３７、５３９、７６７、７６９、９９７、９９９、１２２７および１２２９のいずれか１つを含む、
請求項１から４３までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項４５】
前記細胞がマウス細胞であり、
（ａ）前記第１のガイドＲＮＡ標的配列が、配列番号２５９〜２６３のいずれか１つを含み、かつ／または
（ｂ）前記第１のガイドＲＮＡが、配列番号１６４３〜１６４７のいずれか１つを含むＤＮＡ標的化セグメントを含み、かつ／または
（ｃ）前記第１のガイドＲＮＡが、配列番号７２０〜７２４、９５０〜９５４、１１８０〜１１８４および１４１０〜１４１４のいずれか１つを含む、
請求項１から４２までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項４６】
前記細胞がｅｘ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏである、請求項１から４５までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【請求項４７】
前記細胞がｉｎ  ｖｉｖｏである、請求項４６に記載の組合せ物。
【請求項４８】
前記細胞が肝臓細胞であり、前記組合せ物がｉｎ  ｖｉｖｏで肝臓に導入される、請求項４７に記載の組合せ物。
【請求項４９】
前記細胞が、慢性肝疾患を有するか、またはそのリスクがある対象における肝臓細胞であり、必要に応じて、前記慢性肝疾患が、非アルコール性肝疾患、アルコール性脂肪性肝疾患、肝硬変、または肝細胞癌であり、必要に応じて、前記対象が、脂肪性肝炎、線維症、肝硬変および／または肝細胞癌を有するか、またはそのリスクがある、請求項１から４８までのいずれか一項に記載の組合せ物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００６６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００６６】
上記の方法のいずれかでは、対象は、ヒトであり得る。上記の方法のいずれかでは、慢性肝疾患は、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性脂肪性肝疾患、肝硬変、または肝細胞癌であり得る。同様に、上記の方法のいずれかでは、治療または予防方法は、アルコール性肝疾患または非アルコール性肝疾患である肝疾患に対するものであり得る。上記の方法のいずれかでは、対象に導入するステップは、流体力学的送達、ウイルス媒介性送達、脂質ナノ粒子媒介性送達、または静脈内注入を含み得る。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子に結合させるかまたはＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を切断するようにＣａｓ酵素を方向付けるのに有効なガイドＲＮＡであって、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子内のガイドＲＮＡ標的配列を標的とするＤＮＡ標的化セグメントを含む、ガイドＲＮＡ。
（項目２）
前記ガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号２と最適にアラインメントした場合、配列番号２の１２６６６位に対応する位置を含むかまたはその位置に近接している、項目１に記載のガイドＲＮＡ。
（項目３）
（ａ）前記ガイドＲＮＡ標的配列が、配列番号２２６〜２３９および２６４〜２６８のいずれか１つを含み、かつ／または
（ｂ）前記ＤＮＡ標的化セグメントが、配列番号１６２９〜１６４２および１６４８〜１６５２のいずれか１つを含み、かつ／または
（ｃ）前記ガイドＲＮＡが、配列番号７０６〜７１９；９３６〜９４９；１１６６〜１１７９、１３９６〜１４０９、７２５〜７２９、９５５〜９５９、１１８５〜１１８９、および１４１５〜１４１９のいずれか１つを含む、項目２に記載のガイドＲＮＡ。
（項目４）
（ａ）前記ガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号２と最適にアラインメントした場合、配列番号２のエクソン６および／またはイントロン６および／またはエクソン７に対応する領域内であり、かつ／または
（ｂ）前記ガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号２と最適にアラインメントした場合、配列番号２の１２６６６位に対応する位置から約１０００、５００、４００、３００、２００、１００、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、または５ヌクレオチドの範囲内であり、必要に応じて、前記ガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号２と最適にアラインメントした場合、配列番号２の１２６６６位に対応する位置を含む、項目２または３に記載のガイドＲＮＡ。
（項目５）
前記ガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の開始コドンを含むかまたはそれに近接している、項目１に記載のガイドＲＮＡ。
（項目６）
（ａ）前記ガイドＲＮＡ標的配列が、配列番号２０〜８１および２５９〜２６３のいずれか１つを含み、かつ／または
（ｂ）前記ＤＮＡ標的化セグメントが、配列番号１４２３〜１４８４および１６４３〜１６４７のいずれか１つを含み、かつ／または
（ｃ）前記ガイドＲＮＡが、配列番号５００〜５６１、７３０〜７９１、９６０〜１０２１、１１９０〜１２５１、７２０〜７２４、９５０〜９５４、１１８０〜１１８４、および１４１０〜１４１４のいずれか１つを含む、項目５に記載のガイドＲＮＡ。
（項目７）
（ａ）前記ガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号２と最適にアラインメントした場合、配列番号２のエクソン１に対応する領域内であり、かつ／または
（ｂ）前記ガイドＲＮＡ標的配列が、前記開始コドンから約１０００、５００、４００、３００、２００、１００、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、または５ヌクレオチドの範囲内である、項目５または６に記載のガイドＲＮＡ。
（項目８）
前記ガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の終止コドンを含むかまたはそれに近接している、項目１に記載のガイドＲＮＡ。
（項目９）
（ａ）前記ガイドＲＮＡ標的配列が、配列番号８２〜２２５のいずれか１つを含み、かつ／または
（ｂ）前記ＤＮＡ標的化セグメントが、配列番号１４８５〜１６２８のいずれか１つを含み、かつ／または
（ｃ）前記ガイドＲＮＡが、配列番号５６２〜７０５、７９２〜９３５、１０２２〜１１６５、および１２５２〜１３９５のいずれか１つを含む、項目８に記載のガイドＲＮＡ。
（項目１０）
（ａ）前記ガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号２と最適にアラインメントした場合、配列番号２のエクソン７に対応する領域内であり、かつ／または
（ｂ）前記ガイドＲＮＡ標的配列が、終止コドンから約１０００、５００、４００、３００、２００、１００、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、または５ヌクレオチドの範囲内である、項目８または９に記載のガイドＲＮＡ。
（項目１１）
前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子が、ヒトＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子またはマウスＨｓｄ１７ｂ１３遺伝子であり、必要に応じて、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子が、前記ヒトＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子であり、配列番号２を含む、項目１から１０までのいずれか一項に記載のガイドＲＮＡ。
（項目１２）
前記ＤＮＡ標的化セグメントを含むクラスター化された規則的な配置の短い回文配列リピート（ＣＲＩＳＰＲ）ＲＮＡ（ｃｒＲＮＡ）およびトランス活性化型ＣＲＩＳＰＲ  ＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）を含む、項目１から１１までのいずれか一項に記載のガイドＲＮＡ。
（項目１３）
前記ｃｒＲＮＡおよび前記ｔｒａｃｒＲＮＡが、互いにハイブリダイズする別々の分子であるモジュラーガイドＲＮＡであり、必要に応じて、前記ｃｒＲＮＡが、配列番号１４２１に記載の配列を含み、前記ｔｒａｃｒＲＮＡが、配列番号１４２２に記載の配列を含む、項目１２に記載のガイドＲＮＡ。
（項目１４）
前記ｃｒＲＮＡが前記ｔｒａｃｒＲＮＡとリンカーを介して融合している単一ガイドＲＮＡであり、必要に応じて、配列番号１４２０および２５６〜２５８のいずれか１つに記載の配列を含む、項目１２に記載のガイドＲＮＡ。
（項目１５）
細胞内のＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を改変する方法、または細胞内のＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の発現を変更するための方法における、項目１から１４までのいずれか一項に記載のガイドＲＮＡの使用。
（項目１６）
項目１から１４までのいずれか一項に記載のガイドＲＮＡをコードするＤＮＡを含む単離された核酸。
（項目１７）
配列番号４（ＨＳＤ１７Ｂ１３転写産物Ａ）内の配列とハイブリダイズし、細胞におけるＨＳＤ１７Ｂ１３転写産物Ａの発現を低減するアンチセンスＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｓｈＲＮＡ。
（項目１８）
（ａ）配列番号７（ＨＳＤ１７Ｂ１３転写産物Ｄ）には存在しない、配列番号４（ＨＳＤ１７Ｂ１３転写産物Ａ）に存在する配列とハイブリダイズし、かつ／または
（ｂ）配列番号４（ＨＳＤ１７Ｂ１３転写産物Ａ）のエクソン６とエクソン７との境界にまたがる配列とハイブリダイズする、項目１７に記載のアンチセンスＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｓｈＲＮＡ。
（項目１９）
細胞内のＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の発現を変更するための方法における、項目１７または１８に記載のアンチセンスＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｓｈＲＮＡの使用。
（項目２０）
項目１７または１８に記載のアンチセンスＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｓｈＲＮＡをコードするＤＮＡを含む単離された核酸。
（項目２１）
項目１６または２０に記載の単離された核酸および異種核酸を含むベクター。
（項目２２）
項目１から１４までのいずれか一項に記載のガイドＲＮＡおよび前記ガイドＲＮＡの安定性を増大させる担体を含む組成物であって、必要に応じて、Ｃａｓタンパク質をさらに含み、必要に応じて、前記Ｃａｓタンパク質がＣａｓ９である、組成物。
（項目２３）
項目１７または１８に記載のアンチセンスＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｓｈＲＮＡと、前記アンチセンスＲＮＡ、前記ｓｉＲＮＡ、または前記ｓｈＲＮＡの安定性を増大させる担体とを含む組成物。
（項目２４）
項目１から１４までのいずれか一項に記載のガイドＲＮＡを含む細胞。
（項目２５）
項目１７または１８に記載のアンチセンスＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｓｈＲＮＡを含む細胞。
（項目２６）
ヒト細胞であり、必要に応じて、肝細胞である、項目２４または２５に記載の細胞。
（項目２７）
齧歯類細胞、マウス細胞、またはラット細胞であり、必要に応じて、多能性細胞または肝細胞である、項目２４または２５に記載の細胞。
（項目２８）
細胞内のＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を改変する方法であって、前記細胞のゲノムを、
（ａ）Ｃａｓタンパク質；および
（ｂ）前記Ｃａｓタンパク質と複合体を形成し、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子内のガイドＲＮＡ標的配列を標的とするガイドＲＮＡであって、前記ガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号２と最適にアラインメントした場合、配列番号２の１２６６６位に対応する位置を含むかまたはその位置に近接している、ガイドＲＮＡ
と接触させるステップを含み、
前記Ｃａｓタンパク質が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を切断する、方法。
（項目２９）
（ａ）前記ガイドＲＮＡ標的配列が、配列番号２２６〜２３９および２６４〜２６８のいずれか１つを含み、かつ／または
（ｂ）前記ＤＮＡ標的化セグメントが、配列番号１６２９〜１６４２および１６４８〜１６５２のいずれか１つを含み、かつ／または
（ｃ）前記ガイドＲＮＡが、配列番号７０６〜７１９；９３６〜９４９；１１６６〜１１７９、１３９６〜１４０９、７２５〜７２９、９５５〜９５９、１１８５〜１１８９、および１４１５〜１４１９のいずれか１つを含む、項目２８に記載の方法。
（項目３０）
（ａ）前記ガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号２と最適にアラインメントした場合、配列番号２のエクソン６および／またはイントロン６および／またはエクソン７に対応する領域内であり、かつ／または
（ｂ）前記ガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号２と最適にアラインメントした場合、配列番号２の１２６６６位に対応する位置から約１０００、５００、４００、３００、２００、１００、５０、４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、または５ヌクレオチドの範囲内であり、必要に応じて、前記ガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号２と最適にアラインメントした場合、配列番号２の１２６６６位に対応する位置を含む、項目２８または２９に記載の方法。
（項目３１）
前記ゲノムを、配列番号２の１２６６６位に対応する位置の５’側の標的配列とハイブリダイズする５’相同アームおよび配列番号２の１２６６６位に対応する位置の３’側の標的配列とハイブリダイズする３’相同アームを含む外因性ドナー配列と接触させるステップをさらに含み、前記外因性ドナー配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子と組換えられる、項目２８から３０までのいずれか一項に記載の方法。
（項目３２）
前記外因性ドナー配列が、前記５’相同アームと前記３’相同アームとに挟まれた核酸挿入物をさらに含む、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記核酸挿入物がチミンを含み、前記外因性ドナー配列が前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子と組換えられると、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号１と最適にアラインメントした場合、配列番号１の１２６６５位に対応するヌクレオチドと１２６６６位に対応するヌクレオチドとの間に前記チミンが挿入される、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
（ａ）前記外因性ドナー配列が、約５０ヌクレオチド〜約１ｋｂの長さであり、必要に応じて、前記外因性ドナー配列が、約８０ヌクレオチド〜約２００ヌクレオチドの長さであり、かつ／または
（ｂ）前記外因性ドナー配列が、一本鎖オリゴデオキシヌクレオチドである、項目３１から３３までのいずれか一項に記載の方法。
（項目３５）
細胞内のＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を改変する方法であって、前記細胞のゲノムを、
（ａ）Ｃａｓタンパク質；および
（ｂ）前記Ｃａｓタンパク質と複合体を形成し、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子内の第１のガイドＲＮＡ標的配列を標的とする第１のガイドＲＮＡであって、前記第１のガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の開始コドンを含むか、または前記開始コドンから約１０、２０、３０、４０、５０、１００、２００、３００、４００、５００、または１，０００ヌクレオチドの範囲内である、第１のガイドＲＮＡ
と接触させるステップを含み、
前記Ｃａｓタンパク質が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を切断するかまたは前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の発現を変更する、方法。
（項目３６）
（ａ）前記第１のガイドＲＮＡ標的配列が、配列番号２０〜８１および２５９〜２６３のいずれか１つを含み、必要に応じて、前記第１のガイドＲＮＡ標的配列が、配列番号２０〜４１のいずれか１つ、配列番号２１〜２３、３３、および３５のいずれか１つ、または配列番号３３および３５のいずれか１つを含み、かつ／または
（ｂ）前記第１のガイドＲＮＡが、配列番号１４２３〜１４８４および１６４３〜１６４７のいずれか１つを含むＤＮＡ標的化セグメントを含み、必要に応じて、前記第１のガイドＲＮＡが、配列番号１４４７〜１４６８のいずれか１つ、配列番号１４４８〜１４５０、１４６０、および１４６２のいずれか１つ；または配列番号１４６０および１４６２のいずれか１つを含むＤＮＡ標的化セグメントを含み、かつ／または
（ｃ）前記第１のガイドＲＮＡが、配列番号５００〜５６１、７３０〜７９１、９６０〜１０２１、１１９０〜１２５１、７２０〜７２４、９５０〜９５４、１１８０〜１１８４、および１４１０〜１４１４のいずれか１つを含み、必要に応じて、前記第１のガイドＲＮＡが、配列番号５２４〜５４５、７５４〜７７５、９８４〜１００５、および１２１４〜１２３５のいずれか１つ、または配列番号２９５〜２９７、５２５〜５２７、７５５〜７５７、９８５〜９８７、１２１５〜１２１７、３０７、３０９、５３７、５３９、７６７、７６９、９９７、９９９、１２２７、および１２２９のいずれか１つ、または配列番号３０７、３０９、５３７、５３９、７６７、７６９、９９７、９９９、１２２７、および１２２９のいずれか１つを含む、項目３５に記載の方法。
（項目３７）
（ａ）前記Ｃａｓタンパク質が、ヌクレアーゼ−活性Ｃａｓタンパク質である；または
（ｂ）前記Ｃａｓタンパク質が、転写活性化ドメインまたは転写リプレッサードメインと融合したヌクレアーゼ−不活性Ｃａｓタンパク質である、項目３５または３６のいずれかに記載の方法。
（項目３８）
前記細胞のゲノムを、前記Ｃａｓタンパク質と複合体を形成し、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子内の第２のガイドＲＮＡ標的配列を標的とする第２のガイドＲＮＡと接触させるステップをさらに含み、前記第２のガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の終止コドンを含むか、または前記終止コドンから約１０、２０、３０、４０、５０、１００、２００、３００、４００、５００、または１，０００ヌクレオチドの範囲内であり、前記細胞が、前記第１のガイドＲＮＡ標的配列と前記第２のガイドＲＮＡ標的配列との間に欠失を含むように改変されている、項目３５から３７までのいずれか一項に記載の方法。
（項目３９）
（ａ）前記第２のガイドＲＮＡ標的配列が、配列番号８２〜２２５のいずれか１つを含み、かつ／または
（ｂ）前記第２のガイドＲＮＡが、配列番号１４８５〜１６２８のいずれか１つを含むＤＮＡ標的化セグメントを含み、かつ／または
（ｃ）前記第２のガイドＲＮＡが、配列番号５６２〜７０５、７９２〜９３５、１０２２〜１１６５、および１２５２〜１３９５のいずれか１つを含む、項目３８に記載の方法。
（項目４０）
細胞内のＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の発現を低減するための方法であって、前記細胞のゲノムを、配列番号４（ＨＳＤ１７Ｂ１３転写産物Ａ）内の配列とハイブリダイズし、ＨＳＤ１７Ｂ１３転写産物Ａの発現を低減するアンチセンスＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｓｈＲＮＡと接触させるステップを含む、方法。
（項目４１）
前記アンチセンスＲＮＡ、前記ｓｉＲＮＡ、または前記ｓｈＲＮＡが、配列番号７（ＨＳＤ１７Ｂ１３転写産物Ｄ）には存在しない配列番号４（ＨＳＤ１７Ｂ１３転写産物Ａ）に存在する配列とハイブリダイズし、必要に応じて、前記アンチセンスＲＮＡ、前記ｓｉＲＮＡ、または前記ｓｈＲＮＡが、配列番号４（ＨＳＤ１７Ｂ１３転写産物Ａ）のエクソン６とエクソン７との境界にまたがる配列とハイブリダイズする、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
前記細胞に発現ベクターを導入するステップをさらに含み、前記発現ベクターが、組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号１と最適にアラインメントした場合、配列番号１の１２６６５位に対応するヌクレオチドと１２６６６位に対応するヌクレオチドとの間に挿入されたチミンを含む前記組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を含み、必要に応じて、前記組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子がヒト遺伝子である、項目３５から４１までのいずれか一項に記載の方法。
（項目４３）
前記組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子が、前記遺伝子の１つまたは複数の非必須セグメントが対応する野生型ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子に対して欠失しているＨＳＤ１７Ｂ１３ミニ遺伝子であり、必要に応じて、前記欠失したセグメントが、１つまたは複数のイントロン配列を含み、必要に応じて、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３ミニ遺伝子が、配列番号２と最適にアラインメントした場合、配列番号２のイントロン６に対応するイントロンを含む、項目４２に記載の方法。
（項目４４）
前記細胞に発現ベクターを導入するステップをさらに含み、前記発現ベクターが、配列番号１５（ＨＳＤ１７Ｂ１３アイソフォームＤ）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質をコードする核酸を含み、必要に応じて、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質をコードする前記核酸が、配列番号７と最適にアラインメントした場合、配列番号７（ＨＳＤ１７Ｂ１３転写産物Ｄ）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である、項目３５から４１までのいずれか一項に記載の方法。
（項目４５）
前記細胞にＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質またはその断片を導入するステップをさらに含み、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質またはその断片が、配列番号１５（ＨＳＤ１７Ｂ１３アイソフォームＤ）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である、項目３５から４１までのいずれか一項に記載の方法。
（項目４６）
前記Ｃａｓタンパク質がＣａｓ９である、項目２８から４５までのいずれか一項に記載の方法。
（項目４７）
細胞を改変するための方法であって、前記細胞に発現ベクターを導入するステップを含み、前記発現ベクターが、組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号１と最適にアラインメントした場合、配列番号１の１２６６５位に対応するヌクレオチドと１２６６６位に対応するヌクレオチドとの間に挿入されたチミンを含む前記組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を含み、必要に応じて、前記組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子がヒト遺伝子である、方法。
（項目４８）
前記組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子が、前記遺伝子の１つまたは複数の非必須セグメントが対応する野生型ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子に対して欠失しているＨＳＤ１７Ｂ１３ミニ遺伝子であり、必要に応じて、前記欠失したセグメントが、１つまたは複数のイントロン配列を含み、必要に応じて、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３ミニ遺伝子が、配列番号２と最適にアラインメントした場合、配列番号２のイントロン６に対応するイントロンを含む、項目４７に記載の方法。
（項目４９）
細胞を改変するための方法であって、前記細胞に発現ベクターを導入するステップを含み、前記発現ベクターが、配列番号１５（ＨＳＤ１７Ｂ１３アイソフォームＤ）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質をコードする核酸を含み、必要に応じて、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質をコードする前記核酸が、配列番号７と最適にアラインメントした場合、配列番号７（ＨＳＤ１７Ｂ１３転写産物Ｄ）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である、方法。
（項目５０）
細胞を改変するための方法であって、前記細胞にＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質またはその断片を導入するステップを含み、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質またはその断片が、配列番号１５（ＨＳＤ１７Ｂ１３アイソフォームＤ）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である、方法。
（項目５１）
前記細胞が、齧歯類細胞、マウス細胞、またはラット細胞であり、必要に応じて、前記細胞が、多能性細胞または肝細胞である、項目２８から５０までのいずれか一項に記載の方法。
（項目５２）
前記細胞が、ヒト細胞であり、必要に応じて、前記細胞が、肝細胞である、項目２８から５０までのいずれか一項に記載の方法。
（項目５３）
前記細胞が、ｅｘ  ｖｉｖｏまたはｉｎ  ｖｉｖｏにある、項目２８から５２までのいずれか一項に記載の方法。
（項目５４）
ＨＳＤ１７Ｂ１３  ｒｓ７２６１３５６７バリアントの保因者ではなく、慢性肝疾患を有するかまたはそれを発症しやすい対象を処置する方法であって、前記対象に、
（ａ）Ｃａｓタンパク質または前記Ｃａｓタンパク質をコードする核酸；
（ｂ）ガイドＲＮＡまたは前記ガイドＲＮＡをコードする核酸であって、前記ガイドＲＮＡが、前記Ｃａｓタンパク質と複合体を形成し、ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子内のガイドＲＮＡ標的配列を標的とし、前記ガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号２と最適にアラインメントした場合、配列番号２の１２６６６位に対応する位置を含むかまたはその位置に近接している、ガイドＲＮＡまたは前記ガイドＲＮＡをコードする核酸；および
（ｃ）配列番号２の１２６６６位に対応する位置の５’側の標的配列とハイブリダイズする５’相同アーム、配列番号２の１２６６６位に対応する位置の３’側の標的配列とハイブリダイズする３’相同アーム、および前記５’相同アームと前記３’相同アームに挟まれたチミンを含む核酸挿入物を含む外因性ドナー配列
を導入するステップを含み、
前記Ｃａｓタンパク質が、前記対象の肝細胞内で前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を切断し、前記外因性ドナー配列が、前記肝細胞内で前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子と組換えられ、前記外因性ドナー配列が前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子と組換えられると、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号１と最適にアラインメントした場合、配列番号１の１２６６５位に対応するヌクレオチドと１２６６６位に対応するヌクレオチドとの間に前記チミンが挿入される、方法。
（項目５５）
ＨＳＤ１７Ｂ１３  ｒｓ７２６１３５６７バリアントの保因者ではなく、慢性肝疾患を有するかまたはそれを発症しやすい対象を処置する方法であって、前記対象に、
（ａ）Ｃａｓタンパク質または前記Ｃａｓタンパク質をコードする核酸；
（ｂ）第１のガイドＲＮＡまたは前記第１のガイドＲＮＡをコードする核酸であって、前記第１のガイドＲＮＡが、前記Ｃａｓタンパク質と複合体を形成し、ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子内の第１のガイドＲＮＡ標的配列を標的とし、前記第１のガイドＲＮＡ標的配列が、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子の開始コドンを含むか、または前記開始コドンから約１０、２０、３０、４０、５０、１００、２００、３００、４００、５００、または１，０００ヌクレオチドの範囲内であるか、または配列番号２０〜８１から選択される、第１のガイドＲＮＡまたは前記第１のガイドＲＮＡをコードする核酸；および
（ｃ）組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号１と最適にアラインメントした場合、配列番号１の１２６６５位に対応するヌクレオチドと１２６６６位に対応するヌクレオチドとの間に挿入されたチミンを含む前記組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を含む発現ベクター
を導入するステップを含み、
前記Ｃａｓタンパク質が、前記対象の肝細胞内で前記ＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を切断するか、またはその発現を変更し、前記発現ベクターが、前記対象の前記肝細胞内で前記組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を発現する、方法。
（項目５６）
ＨＳＤ１７Ｂ１３  ｒｓ７２６１３５６７バリアントの保因者ではなく、慢性肝疾患を有するかまたはそれを発症しやすい対象を処置する方法であって、前記対象に、前記対象の肝細胞内で配列番号４（ＨＳＤ１７Ｂ１３転写産物Ａ）内の配列とハイブリダイズし、ＨＳＤ１７Ｂ１３転写産物Ａの発現を低減するアンチセンスＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ、またはｓｈＲＮＡを導入するステップを含む、方法。
（項目５７）
ＨＳＤ１７Ｂ１３  ｒｓ７２６１３５６７バリアントの保因者ではなく、慢性肝疾患を有するかまたはそれを発症しやすい対象を処置する方法であって、前記対象に発現ベクターを導入するステップを含み、前記発現ベクターが、組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を配列番号１と最適にアラインメントした場合、配列番号１の１２６６５位に対応するヌクレオチドと１２６６６位に対応するヌクレオチドとの間に挿入されたチミンを含む前記組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を含み、前記発現ベクターが、前記対象の肝細胞内で前記組換えＨＳＤ１７Ｂ１３遺伝子を発現する、方法。
（項目５８）
ＨＳＤ１７Ｂ１３  ｒｓ７２６１３５６７バリアントの保因者ではなく、慢性肝疾患を有するかまたはそれを発症しやすい対象を処置する方法であって、前記対象に発現ベクターを導入するステップを含み、前記発現ベクターが、配列番号１５（ＨＳＤ１７Ｂ１３アイソフォームＤ）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質をコードする核酸を含み、前記発現ベクターが、前記対象の肝細胞内で前記ＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質をコードする前記核酸を発現する、方法。
（項目５９）
ＨＳＤ１７Ｂ１３  ｒｓ７２６１３５６７バリアントの保因者ではなく、慢性肝疾患を有するかまたはそれを発症しやすい対象を処置する方法であって、前記対象にメッセンジャーＲＮＡを導入するステップを含み、前記メッセンジャーＲＮＡが、配列番号１５（ＨＳＤ１７Ｂ１３アイソフォームＤ）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一であるＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質をコードし、前記ｍＲＮＡが、前記対象の肝細胞内で前記ＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質を発現する、方法。
（項目６０）
ＨＳＤ１７Ｂ１３  ｒｓ７２６１３５６７バリアントの保因者ではなく、慢性肝疾患を有するかまたはそれを発症しやすい対象を処置する方法であって、前記対象の肝臓にＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質またはその断片を導入するステップを含み、前記ＨＳＤ１７Ｂ１３タンパク質またはその断片が、配列番号１５（ＨＳＤ１７Ｂ１３アイソフォームＤ）と少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％同一である、方法。