【手続補正書】
【提出日】令和3年1月6日(2021.1.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトPD-1に結合するが、ヒトPD-1とヒトPD-L1及び/又はPD-L2との相互作用を遮断しない単離されたシングルドメイン抗体。
【請求項２】
前記シングルドメイン抗体が、ヒトPD-1のR104、D105、F106、H107、M108、S109、及びV110から選択される1つ又は複数の残基を含むエピトープに結合し、
場合により、前記シングルドメイン抗体が、ヒトPD-1のG103、V111、R112、及びA113から選択される1つ又は複数の残基を更に含むエピトープに結合してもよく、
場合により、前記エピトープが、N102、D105、F106、H107、M108、R114、及びR115から選択される1つ、1つ超、又は、N102、D105、F106、H107、M108、R114、及びR115の全ての残基を更に含んでもよく、
場合により、前記エピトープが、N33、P34、P35、T36、F37、S38、C54、F55、S56、N57、T58、S59、E60、S61、F62、V63、L64、N65、W66、P101、N102、及びG103から選択される1つ、複数、又は、N33、P34、P35、T36、F37、S38、C54、F55、S56、N57、T58、S59、E60、S61、F62、V63、L64、N65、W66、P101、N102、及びG103の全ての残基を更に含んでもよく、
場合により、前記エピトープが、S60、E61、S62、F63、V64、L65、N66、W67、Y68、R69、M70、S71、G90、Q91、D92、C93、R94、F95、R96、V97、T98、V111、R112、A113、及びR114から選択される1つ、1つ超、又は、S60、E61、S62、F63、V64、L65、N66、W67、Y68、R69、M70、S71、G90、Q91、D92、C93、R94、F95、R96、V97、T98、V111、R112、A113、及びR114の全ての残基を更に含んでもよい、
請求項1に記載の単離されたシングルドメイン抗体。
【請求項３】
前記単離されたシングルドメインが、ヒト重鎖可変ドメイン(VH)であり、
場合により、前記単離されたシングルドメイン抗体は、配列番号1又は1若しくは2個のアミノ酸置換を有する配列番号1に示されるCDR1、配列番号2又は1から5個のアミノ酸置換を有する配列番号2に示されるCDR2、及び配列番号3又は1から5個のアミノ酸置換を有する配列番号3に示されるCDR3を含んでもよく、
場合により、前記単離されたシングルドメイン抗体は、以下のVH配列：配列番号4、8、12、16、20、24、28、32、36、40、44、48、52、56、60、64、68、72、76、80、104、108、112、116、120、124、128、132、136、140、144、148、152、156、160、164、168、172、176、180、184、188、192、196、200、204、208、212、216、又は220のCDR1から3から選択されるCDR1、CDR2、及びCDR3を含んでもよく
場合により、前記単離されたシングルドメイン抗体は、配列番号4、8、12、16、20、24、28、32、36、40、44、48、52、56、60、64、68、72、76、80、104、108、112、116、120、124、128、132、136、140、144、148、152、156、160、164、168、172、176、180、184、188、192、196、200、204、208、212、216、若しくは220から選択される配列、又はそれと少なくとも60%、70%、80%、若しくは90%の相同性を有する配列を含んでもよい、
請求項1又は２に記載の単離されたシングルドメイン抗体。
【請求項４】
配列番号251又は1若しくは2個のアミノ酸置換を有する配列番号251に示されるCDR1、配列番号252又は1から5個のアミノ酸置換を有する配列番号252に示されるCDR2、及び配列番号253又は1から5個のアミノ酸置換を有する配列番号253に示されるCDR3を含み、
場合により、以下のVH配列：配列番号254、258、262、266、270、274、278、282、286、290、294、298、302、306、310、314、318、322、326、330、334、338、342、346、350、354、358、362、366、370、374、378、382、386、390、394、398、402、406、410、414、418、422、426、430、434、438、442、446、450、454、458、又は462のCDR1〜3から選択されるCDR1、CDR2、及びCDR3を含んでもよく、
場合により、配列番号254、258、262、266、270、274、278、282、286、290、294、298、302、306、310、314、318、322、326、330、334、338、342、346、350、354、358、362、366、370、374、378、382、386、390、394、398、402、406、410、414、418、422、426、430、434、438、442、446、450、454、458、若しくは462から選択される配列、又はそれと少なくとも60%、70%、80%、若しくは90%の相同性を有する配列を含んでもよい、請求項1から3のいずれか一項に記載の単離されたシングルドメイン抗体。
【請求項５】
PD-1とPD-L1との相互作用及び/又はPD-1とPD-L2との相互作用を遮断する抗体と競合しない、請求項1から4のいずれか一項に記載の単離されたシングルドメイン抗体。
【請求項６】
ヒトV、D、及びJ領域を含むトランスジーンを発現するトランスジェニック齧歯類から得られた又は得ることができ、好ましくは、前記齧歯類が、いかなる機能的な内因性の軽鎖及び重鎖も産生しない、請求項1から5のいずれか一項に記載の単離されたシングルドメイン抗体。
【請求項７】
請求項1から6のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体と本質的に同じエピトープに結合する、単離された結合剤、または
請求項1から6のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体とヒトPD-1に対する結合に関して競合する、単離された結合剤。
【請求項８】
抗体又はその断片であり、場合により、前記断片が、ヒト重鎖可変ドメイン(VH)であってもよい、請求項７に記載の単離された結合剤。
【請求項９】
請求項1から６のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体を含む単離された結合剤であって、
好ましくは、前記シングルドメイン抗体が、PD-1に結合しない第2の結合分子に連結しており、
より好ましくは、前記第2のシングルドメイン抗体が、免疫腫瘍学標的に結合する、または、
前記シングルドメイン抗体が、PD-1に結合する第2の結合分子に連結しており、
好ましくは、前記結合分子が、PD-1とPDL-1及び/又はPDL-2との相互作用を遮断する、結合剤。
【請求項１０】
前記結合分子が抗体又はその断片であり、場合により、前記結合分子がヒト重鎖可変ドメイン(VH)であってもよい、請求項９に記載の単離された結合剤。
【請求項１１】
毒素、酵素、放射性同位体、半減期延長部分、治療分子、又は他の化学部分にコンジュゲートされており、
場合により、前記半減期延長部分が、アルブミン結合部分、トランスフェリン結合部分、ポリエチレングリコール分子、組換えポリエチレングリコール分子、ヒト血清アルブミン、ヒト血清アルブミンの断片、及びアルブミン結合ペプチド又はヒト血清アルブミンに結合するシングルドメイン抗体からなる群から選択される、
請求項1から4のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体、または、請求項7から10のいずれか一項に記載の単離された結合剤。
【請求項１２】
多特異性結合剤又は多価結合剤における請求項1から6のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体の使用。
【請求項１３】
治療剤に連結され、場合により、前記治療剤が毒素、酵素、放射性同位体、又は他の化学部分であってもよい、請求項1から6のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体又は請求項7から11のいずれか一項に記載の結合剤を含む免疫コンジュゲート。
【請求項１４】
請求項1から6のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体、請求項7から11のいずれか一項に記載の結合剤、又は請求項13に記載の免疫コンジュゲート、並びに薬学的担体を含む、医薬組成物。
【請求項１５】
医薬として使用するための、請求項1から6のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体、請求項7から11のいずれか一項に記載の結合剤、又は請求項13に記載の免疫コンジュゲート、又は請求項14に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
好ましくは骨がん、膵臓がん、皮膚がん、頭頸部がん、皮膚又は眼内悪性黒色腫、子宮がん、卵巣がん、直腸がん、肛門領域のがん、胃がん、精巣がん、乳がん、脳がん、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣癌、外陰癌、食道がん、小腸がん、内分泌系のがん、甲状腺がん、副甲状腺がん、副腎がん、腎臓がん、軟部組織肉腫、尿道がん、膀胱がん、腎臓がん、肺がん、非小細胞肺がん、胸腺腫、尿路上皮癌、白血病、前立腺がん、中皮腫、副腎皮質癌、リンパ腫、例えばホジキン病、非ホジキンリンパ腫、胃がん、及び多発性骨髄腫から選択される、がん、免疫障害、神経疾患、炎症障害、アレルギー、移植拒絶反応、ウイルス感染症、免疫不全、及び他の免疫系関連障害の処置に使用するための、請求項1から6のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体、請求項7から11のいずれか一項に記載の結合剤、又は請求項13に記載の免疫コンジュゲート、又は請求項14に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
請求項1から6のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体、請求項7から11のいずれか一項に記載の結合剤、請求項13に記載の免疫コンジュゲート、又は請求項14に記載の医薬組成物を投与する工程を含む、免疫応答を調節する方法。
【請求項１８】
請求項1から6のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体をコードするヌクレオチド配列を含み、好ましくは配列番号81から100、221から250、又は463から515から選択される、単離された核酸分子。
【請求項１９】
請求項18に記載の核酸を含むベクター、または
前記ベクターまたは請求項18に記載の核酸を含み、好ましくは細菌、昆虫、植物、ウイルス、又は哺乳動物細胞である、宿主細胞。
【請求項２０】
請求項1から6のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体を産生する方法であって、宿主細胞において前記結合分子をコードする核酸を発現させる工程及び宿主細胞から結合分子を単離する工程を含む、方法。
【請求項２１】
請求項1から6のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体、請求項7から11のいずれか一項に記載の結合剤、請求項13に記載の免疫コンジュゲート、又は請求項14に記載の医薬組成物を含むキット。
【請求項２２】
試験試料中のヒトPD-1の存在を検出する方法であって、前記試料を請求項1から6のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体及び少なくとも1つの検出可能な標識と接触させる工程、並びにヒトPD-1に対する前記シングルドメイン抗体の結合を検出する工程を含む、方法。
【請求項２３】
ヒトPD-1に結合するが、PD-1とPD-L1及び/又はPD-L2との相互作用を遮断しないシングルVHドメイン抗体を産生する方法であって:
a)ヒト重鎖V遺伝子を含む核酸構築物を発現し、機能的な内因性の軽鎖又は重鎖を作製することができないトランスジェニック動物を、PD-1抗原によって免疫する工程、
b)前記動物からライブラリを生成する工程
c)前記ライブラリからシングルVHドメイン抗体を単離する工程
d)ヒトPD-1に結合するが、PD-1とPD-L1及び/又はPD-L2との相互作用を遮断しないシングルVHドメイン抗体を同定する工程、及び
e)前記抗体を単離する工程
を含む方法。
【請求項２４】
請求項23に記載の方法によって得られた又は得ることができるシングルVHドメイン抗体。
【請求項２５】
ヒトPD-1に結合するが、PD-1とPD-L1及び/又はPD-L2との相互作用を遮断しない、VHドメインを含む単離された重鎖のみの抗体。
【請求項２６】
請求項25に記載の重鎖のみの抗体を産生するトランスジェニック齧歯類。
【請求項２７】
前記シングルドメイン抗体とは異なる結合特異性を有する第2の機能的部分に連結されており、
場合により、前記第2の部分が、抗体、抗体断片、又は抗体模倣体であってもよく、
場合により、前記第2の部分が免疫腫瘍学標的に結合してもよい、
請求項1から6のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体を含む二特異性分子。
【請求項２８】
アゴニストとして使用するための、請求項1から6のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体を含む多価結合剤であって、
好ましくは、前記結合分子が、請求項1から6のいずれか一項に記載の2つ又はそれより多くのシングルドメイン抗体を含み、または、
前記結合分子が、請求項1から6のいずれか一項に記載のシングルドメイン抗体、及び、PD-1に結合し、PD-L1及び/又はPD-L2との相互作用を遮断するシングルドメイン抗体を含む、多価結合剤。