【手続補正書】
【提出日】令和3年7月1日(2021.7.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
アルファ−ＥＮａＣ遺伝子の発現を阻害するためのＲＮＡｉ剤であって、
表２または表３に提供される配列のいずれか１つと０または１個のヌクレオチドが異なる少なくとも１７個の連続するヌクレオチドを含むアンチセンス鎖；および
前記アンチセンス鎖と少なくとも部分的に相補的であるヌクレオチド配列を含むセンス鎖
を含む、ＲＮＡｉ剤。
【請求項２】
前記アンチセンス鎖が、表２または表３に提供される配列のいずれか１つのヌクレオチド２〜１８を含む、請求項１に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項３】
前記センス鎖が、表２または表４に提供される配列のいずれか１つと０または１個のヌクレオチドが異なる少なくとも１７個の連続するヌクレオチドのヌクレオチド配列を含み、前記センス鎖が、前記アンチセンス鎖の１７個の連続するヌクレオチドにわたって少なくとも８５％の相補性の領域を有する、請求項１または請求項２に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項４】
前記アルファ−ＥＮａＣ  ＲＮＡｉ剤の少なくとも１個のヌクレオチドが、改変ヌクレオチドであるか、または改変ヌクレオシド間連結を含む、請求項１から３のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項５】
前記ヌクレオチドの全部または実質的に全部が、改変ヌクレオチドである、請求項１から３のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項６】
前記改変ヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチルヌクレオチド、２’−フルオロヌクレオチド、２’−デオキシヌクレオチド、２’，３’−ｓｅｃｏヌクレオチド模倣体、ロックドヌクレオチド、２’−Ｆ−アラビノヌクレオチド、２’−メトキシエチルヌクレオチド、脱塩基ヌクレオチド、リビトール、反転ヌクレオチド、反転２’−Ｏ−メチルヌクレオチド、反転２’−デオキシヌクレオチド、２’−アミノ改変ヌクレオチド、２’−アルキル改変ヌクレオチド、モルホリノヌクレオチド、ビニルホスホネートデオキシリボヌクレオチド、および３’−Ｏ−メチルヌクレオチドからなる群より選択される、請求項４または５に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項７】
前記ヌクレオチドの全部または実質的に全部が、２’−Ｏ−メチルヌクレオチドまたは２’−フルオロヌクレオチドで改変される、請求項５に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項８】
前記アンチセンス鎖が、表３に提供される改変配列のいずれか１つのヌクレオチド配列を含む、請求項１から７のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項９】
前記センス鎖が、表４に提供される改変配列のいずれか１つのヌクレオチド配列を含む、請求項１から８のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項１０】
前記アンチセンス鎖が、表３に提供される改変配列のいずれか１つのヌクレオチド配列を含み、前記センス鎖が、表４に提供される改変配列のいずれか１つのヌクレオチド配列を含む、請求項１に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項１１】
標的化リガンドに連結されている、請求項１から１０のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項１２】
前記標的化リガンドが、インテグリン標的化リガンドを含む、請求項１１に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項１３】
前記インテグリン標的化リガンドが、αｖβ６インテグリン標的化リガンドである、請求項１２に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項１４】
前記αｖβ６インテグリン標的化リガンドが、図４〜１１の構造のいずれか１つによって表される構造を有する、請求項１３に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項１５】
前記標的化リガンドが前記センス鎖にコンジュゲートされている、請求項１１から１４のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項１６】
前記標的化リガンドが、前記センス鎖の５’末端にコンジュゲートされている、請求項１５に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項１７】
前記センス鎖が、１８〜３０ヌクレオチド長であり、前記アンチセンス鎖が、１８〜３０ヌクレオチド長である、請求項１から１６のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項１８】
前記センス鎖および前記アンチセンス鎖が、それぞれ１８〜２７ヌクレオチド長である、請求項１７に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項１９】
前記センス鎖および前記アンチセンス鎖が、それぞれ１８〜２４ヌクレオチド長である、請求項１８に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項２０】
前記センス鎖および前記アンチセンス鎖が、それぞれ２１ヌクレオチド長である、請求項１９に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項２１】
２個の平滑末端を有する、請求項２０に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項２２】
前記センス鎖が、１つまたは２つの末端キャップを含む、請求項１から２１のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項２３】
前記センス鎖が、１つまたは２つの反転脱塩基残基を含む、請求項１から２２のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項２４】
表５の二本鎖のいずれか１つの構造を有する二本鎖を形成するセンス鎖およびアンチセンス鎖から構成される、請求項１に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項２５】
前記ＲＮＡｉ剤がセンス鎖およびアンチセンス鎖から構成され、前記アンチセンス鎖が、以下のヌクレオチド配列（５’→３’）：
ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｕＧｆｕＵｆｃＵｆｇＧｆｕＵｆｇＣｆａＣｆａＧｆｓｇ（配列番号２）；
ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｕＧｆｕＵｆｃＵｆｇＧｆｕＵｆｇＣｆａＣｆａＧｆｓｃ（配列番号６）；
ｃＰｒｐｕｓＡｆｓｕｓＵｆｕＧｆｕＵｆｃＵｆｇＧｆｕＵｆｇＣｆａＣｆａＧｆｓｇ（配列番号１０）；
ｕｓＧｆｓａｓＵｆｕＵｆｇＵｆｕＣｆｕＧｆｇＵｆｕＧｆｃＡｆｃＡｆｓｇ（配列番号１０７）；または
ａｓＧｆｓａｓＡｆｇＵｆｃＡｆｕＵｆｃＵｆｇＣｆｕＣｆｕＧｆｃｕｓｕ（配列番号１５２）；
の１つと０または１個のヌクレオチドが異なる改変ヌクレオチド配列を含み、ここで、ａ、ｃ、ｇおよびｕは、それぞれ、２’−Ｏ−メチルアデノシン、シチジン、グアノシン、またはウリジンを表し；Ａｆ、Ｃｆ、Ｇｆ、およびＵｆは、それぞれ、２’−フルオロアデノシン、シチジン、グアノシン、またはウリジンを表し；ｓは、ホスホロチオエート連結を表し、ｃＰｒｐｕは、５’−シクロプロピルホスホネート−２’−Ｏ−メチルウリジンを表し、前記センス鎖上のヌクレオチドの全部または実質的に全部が、改変ヌクレオチドである、請求項１に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項２６】
前記センス鎖が、３’末端に脱塩基残基をさらに含む、請求項２５に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項２７】
前記ＲＮＡｉ剤がアンチセンス鎖およびセンス鎖を含み、前記アンチセンス鎖および前記センス鎖が、配列番号２および４；配列番号３および５；配列番号６および８；配列番号７および９；ならびに配列番号１０および４からなる群より選択されるヌクレオチド配列対を含む、請求項１に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項２８】
ＡＤ０５４５３、ＡＤ０５６２５、ＡＤ０５３４７、ＡＤ０５８３１、ＡＤ０５８３３、ＡＤ０４８３５、およびＡＤ０５９２４からなる群より選択される二本鎖構造を有する、請求項１に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項２９】
前記ＲＮＡｉ剤がアンチセンス鎖およびセンス鎖を含み、前記アンチセンス鎖および前記センス鎖が、以下のヌクレオチド配列（５’→３’）対：
ＵＡＵＵＵＧＵＵＣＵＧＧＵＵＧＣＡＣＡＧＧ（配列番号３）およびＣＣＵＧＵＧＣＡＡＣＣＡＧＡＡＣＡＡＡＵＡ（配列番号５）；
ＵＡＵＵＵＧＵＵＣＵＧＧＵＵＧＣＡＣＡＧＣ（配列番号７）およびＧＣＵＧＵＧＣＡＡＣＣＡＧＡＡＣＡＡＡＵＡ（配列番号９）；
ＵＧＡＵＵＵＧＵＵＣＵＧＧＵＵＧＣＡＣＡＧ（配列番号２３０）およびＣＵＧＵＧＣＡＡＣＣＡＧＡＡＣＡＡＡＵＣＡ（配列番号２５９）；または
ＡＧＡＡＧＵＣＡＵＵＣＵＧＣＵＣＵＧＣＵＵ（配列番号２５４）およびＧＣＡＧＡＧＣＡＧＡＡＵＧＡＣＵＵＣＵＵＵ（配列番号２８９）
の１つと０または１個のヌクレオチドが異なるヌクレオチド配列からなるか、それから本質的になるか、またはそれを含む、請求項１に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項３０】
前記ヌクレオチドの全部または実質的に全部が、改変ヌクレオチドである、請求項２９に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項３１】
前記ＲＮＡｉ剤の前記センス鎖が、標的化リガンドに連結されている、請求項２４から３０のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項３２】
前記標的化リガンドが、上皮細胞上に発現される細胞受容体に対する親和性を有する、請求項３１に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項３３】
前記標的化リガンドが、αｖβ６インテグリン標的化リガンドである、請求項３１または３２に記載のＲＮＡｉ剤。
【請求項３４】
薬学的に許容される賦形剤を含む、請求項１から３３のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤を含む組成物。
【請求項３５】
アルファ−ＥＮａＣの発現を阻害するための第２のＲＮＡｉ剤をさらに含む、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
１つまたは複数のさらなる治療剤をさらに含む、請求項３４または３５に記載の組成物。
【請求項３７】
吸入による投与のために製剤化される、請求項３６に記載の組成物。
【請求項３８】
定量吸入器、ジェットネブライザー、振動メッシュネブライザー、またはソフトミスト吸入器によって送達される、請求項３７に記載の組成物。
【請求項３９】
細胞中でのアルファ−ＥＮａＣ遺伝子の発現を阻害するための方法において使用するための、請求項１から３３のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤を含む組成物、または請求項３４から３８のいずれか一項に記載の組成物であって、前記方法は、細胞中に、請求項１から３３のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤または請求項３４から３８のいずれか一項に記載の組成物を導入するステップを含む、組成物。
【請求項４０】
前記細胞が被験体内にある、請求項３９に記載の組成物。
【請求項４１】
前記被験体がヒト被験体である、請求項４０に記載の組成物。
【請求項４２】
前記アルファ−ＥＮａＣ遺伝子の発現が少なくとも約３０％阻害される、請求項３９から４１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４３】
症状または疾患の処置を必要とするヒト被験体において、ＥＮａＣ活性レベルの増強または上昇と関連する１つまたは複数の症状または疾患を処置するための、請求項３４から３８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４４】
前記疾患が、呼吸器疾患である、請求項４３に記載の組成物。
【請求項４５】
前記呼吸器疾患が、嚢胞性線維症、慢性気管支炎、非嚢胞性線維症性気管支拡張症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、気道感染症、原発性線毛運動障害、または肺癌嚢胞性線維症である、請求項４４に記載の組成物。
【請求項４６】
前記疾患が、ドライアイ症候群などの眼疾患である、請求項４３に記載の組成物。
【請求項４７】
前記ＲＮＡｉ剤が、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．５００ｍｇ／ｋｇ体重の用量で投与されることを特徴とする、請求項４３から４６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４８】
前記ＲＮＡｉ剤が、２つまたはそれより多い用量で投与されることを特徴とする、請求項３９から４７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項４９】
ＥＮａＣ活性および／またはアルファ−ＥＮａＣ遺伝子発現によって少なくとも部分的に媒介される疾患、障害、または症状の処置のための、請求項１から３３のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤を含む組成物。
【請求項５０】
ＥＮａＣ活性および／またはアルファ−ＥＮａＣ遺伝子発現によって少なくとも部分的に媒介される疾患、障害、または症状の処置のための、請求項３４から３８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５１】
ＥＮａＣ活性および／またはアルファ−ＥＮａＣ遺伝子発現によって少なくとも部分的に媒介される疾患、障害、または症状の処置のための医薬の製造のための、請求項３４から３８のいずれか一項に記載の組成物の使用。
【請求項５２】
前記疾患が嚢胞性線維症である、請求項４９から５１のいずれか一項に記載の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２７６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２７６】
他の実施形態
本発明をその詳細な説明と共に説明してきたが、前記説明は、添付の特許請求の範囲によって定義される、本発明の範囲を例示することを意図するものであり、それを限定することを意図するものではないことが理解されるべきである。他の態様、利点、および改変は、以下の特許請求の範囲内にある。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
アルファ−ＥＮａＣ遺伝子の発現を阻害するためのＲＮＡｉ剤であって、
表２または表３に提供される配列のいずれか１つと０または１個のヌクレオチドが異なる少なくとも１７個の連続するヌクレオチドを含むアンチセンス鎖；および
前記アンチセンス鎖と少なくとも部分的に相補的であるヌクレオチド配列を含むセンス鎖
を含む、ＲＮＡｉ剤。
（項目２）
前記アンチセンス鎖が、表２または表３に提供される配列のいずれか１つのヌクレオチド２〜１８を含む、項目１に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目３）
前記センス鎖が、表２または表４に提供される配列のいずれか１つと０または１個のヌクレオチドが異なる少なくとも１７個の連続するヌクレオチドのヌクレオチド配列を含み、前記センス鎖が、前記アンチセンス鎖の１７個の連続するヌクレオチドにわたって少なくとも８５％の相補性の領域を有する、項目１または項目２に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目４）
前記アルファ−ＥＮａＣ  ＲＮＡｉ剤の少なくとも１個のヌクレオチドが、改変ヌクレオチドであるか、または改変ヌクレオシド間連結を含む、項目１から３のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目５）
前記ヌクレオチドの全部または実質的に全部が、改変ヌクレオチドである、項目１から３のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目６）
前記改変ヌクレオチドが、２’−Ｏ−メチルヌクレオチド、２’−フルオロヌクレオチド、２’−デオキシヌクレオチド、２’，３’−ｓｅｃｏヌクレオチド模倣体、ロックドヌクレオチド、２’−Ｆ−アラビノヌクレオチド、２’−メトキシエチルヌクレオチド、脱塩基ヌクレオチド、リビトール、反転ヌクレオチド、反転２’−Ｏ−メチルヌクレオチド、反転２’−デオキシヌクレオチド、２’−アミノ改変ヌクレオチド、２’−アルキル改変ヌクレオチド、モルホリノヌクレオチド、ビニルホスホネートデオキシリボヌクレオチド、および３’−Ｏ−メチルヌクレオチドからなる群より選択される、項目４または５に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目７）
前記ヌクレオチドの全部または実質的に全部が、２’−Ｏ−メチルヌクレオチドまたは２’−フルオロヌクレオチドで改変される、項目５に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目８）
前記アンチセンス鎖が、表３に提供される改変配列のいずれか１つのヌクレオチド配列を含む、項目１から７のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目９）
前記センス鎖が、表４に提供される改変配列のいずれか１つのヌクレオチド配列を含む、項目１から８のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目１０）
前記アンチセンス鎖が、表３に提供される改変配列のいずれか１つのヌクレオチド配列を含み、前記センス鎖が、表４に提供される改変配列のいずれか１つのヌクレオチド配列を含む、項目１に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目１１）
標的化リガンドに連結されている、項目１から１０のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目１２）
前記標的化リガンドが、インテグリン標的化リガンドを含む、項目１１に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目１３）
前記インテグリン標的化リガンドが、αｖβ６インテグリン標的化リガンドである、項目１２に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目１４）
前記αｖβ６インテグリン標的化リガンドが、図４〜１１の構造のいずれか１つによって表される構造を有する、項目１３に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目１５）
前記標的化リガンドが前記センス鎖にコンジュゲートされている、項目１１から１４のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目１６）
前記標的化リガンドが、前記センス鎖の５’末端にコンジュゲートされている、項目１５に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目１７）
前記センス鎖が、１８〜３０ヌクレオチド長であり、前記アンチセンス鎖が、１８〜３０ヌクレオチド長である、項目１から１６のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目１８）
前記センス鎖および前記アンチセンス鎖が、それぞれ１８〜２７ヌクレオチド長である、項目１７に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目１９）
前記センス鎖および前記アンチセンス鎖が、それぞれ１８〜２４ヌクレオチド長である、項目１８に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目２０）
前記センス鎖および前記アンチセンス鎖が、それぞれ２１ヌクレオチド長である、項目１９に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目２１）
２個の平滑末端を有する、項目２０に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目２２）
前記センス鎖が、１つまたは２つの末端キャップを含む、項目１から２１のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目２３）
前記センス鎖が、１つまたは２つの反転脱塩基残基を含む、項目１から２２のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目２４）
表５の二本鎖のいずれか１つの構造を有する二本鎖を形成するセンス鎖およびアンチセンス鎖から構成される、項目１に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目２５）
前記ＲＮＡｉ剤がセンス鎖およびアンチセンス鎖から構成され、前記アンチセンス鎖が、以下のヌクレオチド配列（５’→３’）：
ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｕＧｆｕＵｆｃＵｆｇＧｆｕＵｆｇＣｆａＣｆａＧｆｓｇ（配列番号２）；
ｕｓＡｆｓｕｓＵｆｕＧｆｕＵｆｃＵｆｇＧｆｕＵｆｇＣｆａＣｆａＧｆｓｃ（配列番号６）；
ｃＰｒｐｕｓＡｆｓｕｓＵｆｕＧｆｕＵｆｃＵｆｇＧｆｕＵｆｇＣｆａＣｆａＧｆｓｇ（配列番号１０）；
ｕｓＧｆｓａｓＵｆｕＵｆｇＵｆｕＣｆｕＧｆｇＵｆｕＧｆｃＡｆｃＡｆｓｇ（配列番号１０７）；または
ａｓＧｆｓａｓＡｆｇＵｆｃＡｆｕＵｆｃＵｆｇＣｆｕＣｆｕＧｆｃｕｓｕ（配列番号１５２）；
の１つと０または１個のヌクレオチドが異なる改変ヌクレオチド配列を含み、ここで、ａ、ｃ、ｇおよびｕは、それぞれ、２’−Ｏ−メチルアデノシン、シチジン、グアノシン、またはウリジンを表し；Ａｆ、Ｃｆ、Ｇｆ、およびＵｆは、それぞれ、２’−フルオロアデノシン、シチジン、グアノシン、またはウリジンを表し；ｓは、ホスホロチオエート連結を表し、ｃＰｒｐｕは、５’−シクロプロピルホスホネート−２’−Ｏ−メチルウリジンを表し、前記センス鎖上のヌクレオチドの全部または実質的に全部が、改変ヌクレオチドである、項目１に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目２６）
前記センス鎖が、３’末端に脱塩基残基をさらに含む、項目２５に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目２７）
前記ＲＮＡｉ剤がアンチセンス鎖およびセンス鎖を含み、前記アンチセンス鎖および前記センス鎖が、配列番号２および４；配列番号３および５；配列番号６および８；配列番号７および９；ならびに配列番号１０および４からなる群より選択されるヌクレオチド配列対を含む、項目１に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目２８）
ＡＤ０５４５３、ＡＤ０５６２５、ＡＤ０５３４７、ＡＤ０５８３１、ＡＤ０５８３３、ＡＤ０４８３５、およびＡＤ０５９２４からなる群より選択される二本鎖構造を有する、項目１に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目２９）
前記ＲＮＡｉ剤がアンチセンス鎖およびセンス鎖を含み、前記アンチセンス鎖および前記センス鎖が、以下のヌクレオチド配列（５’→３’）対：
ＵＡＵＵＵＧＵＵＣＵＧＧＵＵＧＣＡＣＡＧＧ（配列番号３）およびＣＣＵＧＵＧＣＡＡＣＣＡＧＡＡＣＡＡＡＵＡ（配列番号５）；
ＵＡＵＵＵＧＵＵＣＵＧＧＵＵＧＣＡＣＡＧＣ（配列番号７）およびＧＣＵＧＵＧＣＡＡＣＣＡＧＡＡＣＡＡＡＵＡ（配列番号９）；
ＵＧＡＵＵＵＧＵＵＣＵＧＧＵＵＧＣＡＣＡＧ（配列番号２３０）およびＣＵＧＵＧＣＡＡＣＣＡＧＡＡＣＡＡＡＵＣＡ（配列番号２５９）；または
ＡＧＡＡＧＵＣＡＵＵＣＵＧＣＵＣＵＧＣＵＵ（配列番号２５４）およびＧＣＡＧＡＧＣＡＧＡＡＵＧＡＣＵＵＣＵＵＵ（配列番号２８９）
の１つと０または１個のヌクレオチドが異なるヌクレオチド配列からなるか、それから本質的になるか、またはそれを含む、項目１に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目３０）
前記ヌクレオチドの全部または実質的に全部が、改変ヌクレオチドである、項目２９に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目３１）
前記ＲＮＡｉ剤の前記センス鎖が、標的化リガンドに連結されている、項目２４から３０のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目３２）
前記標的化リガンドが、上皮細胞上に発現される細胞受容体に対する親和性を有する、項目３１に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目３３）
前記標的化リガンドが、αｖβ６インテグリン標的化リガンドである、項目３１または３２に記載のＲＮＡｉ剤。
（項目３４）
薬学的に許容される賦形剤を含む、項目１から３３のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤を含む組成物。
（項目３５）
アルファ−ＥＮａＣの発現を阻害するための第２のＲＮＡｉ剤をさらに含む、項目３４に記載の組成物。
（項目３６）
１つまたは複数のさらなる治療剤をさらに含む、項目３４または３５に記載の組成物。
（項目３７）
吸入による投与のために製剤化される、項目３６に記載の組成物。
（項目３８）
定量吸入器、ジェットネブライザー、振動メッシュネブライザー、またはソフトミスト吸入器によって送達される、項目３７に記載の組成物。
（項目３９）
細胞中でのアルファ−ＥＮａＣ遺伝子の発現を阻害するための方法であって、細胞中に、有効量の、項目１から３３のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤または項目３４から３８のいずれか一項に記載の組成物を導入するステップを含む、方法。
（項目４０）
前記細胞が被験体内にある、項目３９に記載の方法。
（項目４１）
前記被験体がヒト被験体である、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
前記アルファ−ＥＮａＣ遺伝子の発現が少なくとも約３０％阻害される、項目３９から４１のいずれか一項に記載の方法。
（項目４３）
ＥＮａＣ活性レベルの増強または上昇と関連する１つまたは複数の症状または疾患を処置する方法であって、それを必要とするヒト被験体に、治療有効量の項目３４から３８のいずれか一項に記載の組成物を投与するステップを含む、方法。
（項目４４）
前記疾患が、呼吸器疾患である、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
前記呼吸器疾患が、嚢胞性線維症、慢性気管支炎、非嚢胞性線維症性気管支拡張症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、喘息、気道感染症、原発性線毛運動障害、または肺癌嚢胞性線維症である、項目４４に記載の方法。
（項目４６）
前記疾患が、ドライアイ症候群などの眼疾患である、項目４３に記載の方法。
（項目４７）
前記ＲＮＡｉ剤が、約０．００１ｍｇ／ｋｇ体重〜約０．５００ｍｇ／ｋｇ体重の用量で投与される、項目４３から４６のいずれか一項に記載の方法。
（項目４８）
前記ＲＮＡｉ剤が、２つまたはそれより多い用量で投与される、項目３９から４７のいずれか一項に記載の方法。
（項目４９）
ＥＮａＣ活性および／またはアルファ−ＥＮａＣ遺伝子発現によって少なくとも部分的に媒介される疾患、障害、または症状の処置のための、項目１から３３のいずれか一項に記載のＲＮＡｉ剤の使用。
（項目５０）
ＥＮａＣ活性および／またはアルファ−ＥＮａＣ遺伝子発現によって少なくとも部分的に媒介される疾患、障害、または症状の処置のための、項目３４から３８のいずれか一項に記載の組成物の使用。
（項目５１）
ＥＮａＣ活性および／またはアルファ−ＥＮａＣ遺伝子発現によって少なくとも部分的に媒介される疾患、障害、または症状の処置のための医薬の製造のための、項目３４から３８のいずれか一項に記載の組成物の使用。
（項目５２）
前記疾患が嚢胞性線維症である、項目４９から５１のいずれか一項に記載の使用。