【手続補正書】
【提出日】令和3年3月12日(2021.3.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
複数の免疫細胞を含む組成物の有効量を被験体に投与することを含む、被験体の少なくとも１種の標的細胞を除去する方法であって、前記複数の免疫細胞は、少なくとも１種の標的細胞上の標的リガンドに特異的に結合する１つ以上のキメラリガンド受容体（ＣＬＲ）を発現し、前記少なくとも１種の標的細胞は、造血幹細胞（ＨＳＣ）を含み、そして、前記前記少なくとも１種の標的ＨＳＣ上の前記標的リガンドは、ｃ−ＫＩＴ／ＣＤ１１７、ＣＤ１３３、又はこれらの組み合わせを含み、そして、前記標的リガンドへの１つ以上のＣＬＲの特異的結合は免疫細胞を活性化し、そして、活性化された免疫細胞は標的細胞の死を誘発する上記方法。
【請求項２】
前記複数の免疫細胞を除去する工程をさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
複数の治療用造血幹細胞（ＨＳＣ）を含む組成物の有効量を被験体に投与することをさらに含む、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
複数の免疫細胞を含む前記組成物がＴ細胞、ＮＫ細胞、又はこれらの組み合わせを含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記少なくとも１種の標的ＨＳＣ上の前記標的リガンドが、ＣＤ４５、ＣＤ３４、Ｔｈｙ１／ＣＤ９０、ｃ−ｍｐｌ／ＣＤ１１０、ＣＤ４９ｆ、ＡＢＣＧ２／ＣＤ３３８、炭酸脱水酵素ＩＸ／ＣＡ９、ＣＤ１２３、及びＣＤ１５０の１つ以上をさらに含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記１つ以上のＣＬＲのそれぞれが、以下：
（ａ）リガンド認識領域を含む外部ドメイン、
（ｂ）膜貫通ドメイン、及び
（ｃ）少なくとも１種の同時刺激ドメインを含む内部ドメイン、
を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記リガンド認識領域が、タンパク質足場、センチリン、１本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、ＶＨＨ、免疫グロブリン、又は抗体模倣物の１つ以上を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
（ａ）の外部ドメインがシグナルペプチドをさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項９】
前記シグナルペプチドが、ヒトＣＤ２、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３ζ、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ１９、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、又はＧＭ−ＣＳＦＲシグナルペプチドをコードする配列を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
（ａ）の外部ドメインが、リガンド認識領域と膜貫通ドメインとの間にヒンジをさらに含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１１】
前記ヒンジが、ヒトＣＤ８α、ＩｇＧ４、及び／又はＣＤ４配列に由来する配列を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記膜貫通ドメインが、ヒトＣＤ２、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γ、ＣＤ３ζ、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ１９、ＣＤ２８、４−１ＢＢ、又はＧＭ−ＣＳＦＲ膜貫通ドメインをコードする配列を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１３】
前記内部ドメインがヒトＣＤ３ζ内部ドメインを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１４】
前記少なくとも１つの同時刺激ドメインが、ヒト４−１ＢＢ、ヒトＣＤ２８、ヒトＣＤ４０、ヒトＩＣＯＳ、ヒトＭｙＤ８８、ヒトＯＸ−４０細胞内セグメント、又はこれらの任意の組み合わせを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１５】
前記少なくとも１つの同時刺激ドメインが、ヒトＣＤ２８及び／又はヒト４−１ＢＢ同時刺激ドメインを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項１６】
前記４−１ＢＢ同時刺激ドメインが、膜貫通ドメインとＣＤ２８同時刺激ドメインとの間に位置する、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記免疫細胞が、誘導性カスパーゼポリペプチド又は誘導性カスパーゼポリペプチドをコードする配列を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記誘導性カスパーゼポリペプチドが以下を含む、請求項１７に記載の方法：
（ａ）リガンド結合領域、
（ｂ）リンカー、及び
（ｃ）切断型カスパーゼ９ポリペプチド。
【請求項１９】
前記複数の免疫細胞を除去する工程が、誘導剤の有効量を被験体に投与してカスパーゼポリペプチドを誘導し、それにより免疫細胞の死を開始させることを含む、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記被験体が、免疫系疾患又は障害、自己免疫疾患又は障害、癌、炎症性障害、貧血、凝固障害、出血状態、血球、血液中を循環する免疫細胞、骨髄細胞、又はその前駆細胞に現れる疾患又は障害の遺伝的又はエピジェネティックマーカーを有するか、又は発症するリスクがあるか、あるいは、前記被験体が、免疫無防備状態である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記癌が、リンパ腫、白血病、骨髄腫、又は悪性免疫増殖性疾患である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記シグナルペプチドが、ヒトＣＤ８αシグナルペプチドをコードする配列を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項２３】
前記シグナルペプチドが、配列番号３１のアミノ酸配列を含む、請求項８に記載の方法。
【請求項２４】
前記ヒンジ領域が、ヒトＣＤ８α配列に由来する配列を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項２５】
前記ヒンジ領域が、配列番号４０のアミノ酸配列を含む、請求項１０に記載の方法。
【請求項２６】
前記膜貫通ドメインが、ヒトＣＤ８α膜貫通ドメインをコードする配列を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項２７】
前記膜貫通ドメインが、配列番号３３のアミノ酸配列を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項２８】
前記内部ドメインが、配列番号３６のアミノ酸配列を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項２９】
前記少なくとも１つの同時刺激ドメインが、ヒト４−１ＢＢ同時刺激ドメインを含む、請求項６に記載の方法。
【請求項３０】
前記少なくとも１つの同時刺激ドメインが、配列番号３８のアミノ酸配列を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項３１】
前記ＣＬＲの外部ドメインが、配列番号６９〜８７のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列を含む、請求項６に記載の方法。
【請求項３２】
前記１つ以上のＣＬＲが、配列番号５〜２７のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３３】
前記１つ以上のＣＬＲが：
配列番号７７〜７９の１つのアミノ酸配列を含む外部ドメイン；
配列番号４０のアミノ酸配列を含むヒトＣＤ８αヒンジ領域；
配列番号３３のアミノ酸配列を含むヒトＣＤ８α膜貫通ドメイン；
配列番号３８のアミノ酸配列を含むヒト４−１ＢＢ同時刺激ドメイン；
配列番号３６のアミノ酸配列を含むヒトＣＤ３ζ内部ドメイン、
を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３４】
前記１つ以上のＣＬＲが：
配列番号３１のアミノ酸配列を含むヒトＣＤ８αシグナルペプチド；
配列番号６９〜７６又は８０〜８７のアミノ酸配列を含むリガンド認識領域；
配列番号４０のアミノ酸配列を含むヒトＣＤ８αヒンジ領域；
配列番号３３のアミノ酸配列を含むヒトＣＤ８α膜貫通ドメイン；
配列番号３８のアミノ酸配列を含むヒト４−１ＢＢ同時刺激ドメイン；
配列番号３６のアミノ酸配列を含むヒトＣＤ３ζ内部ドメイン、
を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３５】
前記リガンド認識領域が、配列番号７３のアミノ酸配列を含む、請求項３４に記載の方法。
【請求項３６】
前記免疫細胞が、前記ＣＬＲをコードする配列を含むトランスポゾンを用いて前記１つ以上のＣＬＲを発現するように遺伝的に改変されている、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項３７】
前記トランスポゾンが、前記ＣＬＲをコードする配列、誘導性カスパーゼポリペプチドをコードする配列、及び選択遺伝子を含むpiggyBac（登録商標）（ＰＢ）トランスポゾンである、請求項３６に記載の方法。
【請求項３８】
前記複数の免疫細胞の少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％が、前記１つ以上のＣＬＲを発現する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。