【手続補正書】
【提出日】令和3年5月26日(2021.5.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
単量体BTN1A1よりも二量体BTN1A1に優先的に結合する抗原結合断片を含む分子であって、
(a) 該抗原結合断片が単量体BTN1A1に対して示されるKDの半分未満のKDで二量体BTN1A1に結合し；
ここで任意に、該抗原結合断片が、単量体BTN1A1に対して示されるKDよりも少なくとも5倍小さい、少なくとも10倍小さい、少なくとも15倍小さい、少なくとも20倍小さい、少なくとも25倍小さい、少なくとも30倍小さい、少なくとも40倍小さい、又は少なくとも50倍小さいKDで二量体BTN1A1に結合し；
(b) 該抗原結合断片が非グリコシル化BTN1A1よりもグリコシル化BTN1A1に優先的に結合し；
ここで任意に、該抗原結合断片が非グリコシル化BTN1A1に対して示されるKDの半分未満のKDでグリコシル化BTN1A1に結合し、
ここで任意に、該抗原結合断片が、非グリコシル化BTN1A1に対して示されるKDよりも少なくとも5倍小さい、少なくとも10倍小さい、少なくとも15倍小さい、少なくとも20倍小さい、少なくとも25倍小さい、少なくとも30倍小さい、少なくとも40倍小さい、又は少なくとも50倍小さいKDでグリコシル化BTN1A1に結合する、前記分子。
【請求項２】
BTN1A1がヒトBTN1A1である、請求項1記載の分子。
【請求項３】
前記抗原結合断片が、
(a)
(1)配列番号7、10、13、16、35、38、41、及び44からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR1;
(2)配列番号8、11、14、17、36、39、42、及び45からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR2;並びに
(3)配列番号9、12、15、18、37、40、43、及び46からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR3;
を含む重鎖可変(VH)領域、並びに/又は
(b)
(1)配列番号19、22、25、28、47、50、53、及び56からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR1;
(2)配列番号20、23、26、29、48、51、54、及び57からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR2;並びに
(3)配列番号21、24、27、30、49、52、55、及び58からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR3
を含む軽鎖可変(VL)領域
を含む、請求項1記載の分子。
【請求項４】
(a) 前記重鎖可変(VH)領域が配列番号3又は31のアミノ酸配列を含み、かつ/又は
(b) 前記軽鎖可変(VL)領域が配列番号5又は33のアミノ酸配列を含む、請求項3記載の分子。
【請求項５】
前記分子がSTC703又はSTC810である、請求項1〜4のいずれか一項記載の分子。
【請求項６】
抗原結合ドメインが、表3a及び3bに示されているようなモノクローナル抗体STC810のVHドメイン、VLドメイン、VH CDR1、VH CDR2、VH CDR3、VL CDR1、VL CDR2、又はVL CDR3を含まない、請求項1〜4のいずれか一項記載の分子。
【請求項７】
前記抗原結合断片が、
(a)
(1)配列番号231、234、237、及び240からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR1;
(2)配列番号232、235、238、及び241からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR2;並びに
(3)配列番号233、236、239、及び242からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR3;
を含む重鎖可変(VH)領域、並びに/又は
(b)
(1)配列番号243、246、249、及び252からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR1;
(2)配列番号244、247、250、及び253からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR2;並びに
(3)配列番号245、248、251、及び254からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR3
を含む軽鎖可変(VL)領域
を含む、請求項1記載の分子。
【請求項８】
(a) 前記重鎖可変(VH)領域が配列番号227のアミノ酸配列を含み、かつ/又は
(b) 前記軽鎖可変(VL)領域が配列番号229のアミノ酸配列を含む、請求項7記載の分子。
【請求項９】
前記分子がSTC2714である、請求項7又は8のいずれか一項記載の分子。
【請求項１０】
前記抗原結合断片が、
(a)
(1)配列番号203、206、209、及び212からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR1;
(2)配列番号204、207、210、及び213からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR2;並びに
(3)配列番号205、208、211、及び214からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR3;
を含む重鎖可変(VH)領域、並びに/又は
(b)
(1)配列番号215、218、221、及び224からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR1;
(2)配列番号216、219、222、及び225からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR2;並びに
(3)配列番号217、220、223、及び226からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR3
を含む軽鎖可変(VL)領域
を含む、請求項1記載の分子。
【請求項１１】
(a) 前記重鎖可変(VH)領域が配列番号199のアミノ酸配列を含み、かつ/又は
(b) 前記軽鎖可変(VL)領域が配列番号201のアミノ酸配列を含む、請求項10記載の分子。
【請求項１２】
前記分子がSTC2602である、請求項10又は11記載の分子。
【請求項１３】
前記抗原結合断片が、
(a)
(1)配列番号259、262、265、及び268からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR1;
(2)配列番号260、263、266、及び269からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR2;並びに
(3)配列番号261、264、267、及び270からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR3
を含む重鎖可変(VH)領域、並びに/又は
(b)
(1)配列番号271、274、277、及び280からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR1;
(2)配列番号272、275、278、及び281からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR2;並びに
(3)配列番号273、276、279、及び282からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR3
を含む軽鎖可変(VL)領域
を含む、請求項1記載の分子。
【請求項１４】
(a) 前記重鎖可変(VH)領域が配列番号255のアミノ酸配列を含み、かつ/又は
(b) 前記軽鎖可変(VL)領域が配列番号257のアミノ酸配列を含む、請求項13記載の分子。
【請求項１５】
前記分子がSTC2739である、請求項13又は14記載の分子。
【請求項１６】
前記抗原結合断片が、
(a)
(1)配列番号287、290、293、及び296からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR1;
(2)配列番号288、291、294、及び297からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR2;並びに
(3)配列番号289、292、295、及び298からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR3;
を含む重鎖可変(VH)領域、並びに/又は
(b)
(1)配列番号299、302、305、及び308からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR1;
(2)配列番号300、303、306、及び309からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR2;並びに
(3)配列番号301、304、307、及び310からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR3
を含む軽鎖可変(VL)領域
を含む、請求項1記載の分子。
【請求項１７】
(a) 前記重鎖可変(VH)領域が配列番号283のアミノ酸配列を含み、かつ/又は
(b) 前記軽鎖可変(VL)領域が配列番号285のアミノ酸配列を含む、請求項16記載の分子。
【請求項１８】
前記分子がSTC2778である、請求項16又は17記載の分子。
【請求項１９】
前記抗原結合断片が、
(a)
(1)配列番号315、318、321、及び324からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR1;
(2)配列番号316、319、322、及び325からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR2;並びに
(3)配列番号317、320、323、及び326からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVH CDR3;
を含む重鎖可変(VH)領域、並びに/又は
(b)
(1)配列番号327、330、333、及び336からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR1;
(2)配列番号328、331、334、及び337からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR2;並びに
(3)配列番号329、332、335、及び338からなる群から選択されるアミノ酸配列を有するVL CDR3
を含む軽鎖可変(VL)領域
を含む、請求項1記載の分子。
【請求項２０】
(a) 前記重鎖可変(VH)領域が配列番号311のアミノ酸配列を含み、かつ/又は
(b) 前記軽鎖可変(VL)領域が配列番号313のアミノ酸配列を含む、請求項19記載の分子。
【請求項２１】
前記分子がSTC2781である、請求項19又は20記載の分子。
【請求項２２】
BTN1A1に免疫特異的に結合する抗原結合断片を有する分子であって、BTN1A1との結合が請求項1〜21のいずれか一項記載の分子とBTN1A1との結合を用量依存的な様式で競合的に遮断する、前記分子。
【請求項２３】
前記抗原結合断片が
(a) 1μM以下の解離定数(KD)で二量体BTN1A1に、又は
(b) 500nM以下、400nM以下、300nM以下、200nM以下、100nM以下、50nM以下、10nM以下、又は5nM以下の解離定数(KD)で、二量体BTN1A1に免疫特異的に結合する、請求項1〜22のいずれか一項記載の分子。
【請求項２４】
前記二量体BTN1A1がグリコシル化BTN1A1である、請求項23記載の分子。
【請求項２５】
前記分子が抗体、Fab'、F(ab')2、F(ab')3、一価scFv、二価scFv、又は単一ドメイン抗体であり；
ここで任意に、該抗体がモノクローナル抗体、ヒト抗体又はヒト化抗体であり； 
ここで任意に、該抗体が、IgG、IgM、又はIgAであり；かつ
ここで任意に、該分子が組換えにより産生される、請求項1〜24のいずれか一項記載の分子。
【請求項２６】
任意に非経口投与用に製剤化されている、請求項1〜25のいずれか一項記載の分子を含む医薬組成物。
【請求項２７】
対象の癌を治療するための医薬を製造するための、請求項1〜25のいずれか一項記載の分子又は請求項26記載の医薬組成物の使用であって、任意に：
(a) 該分子又は医薬組成物が、非経口投与のために製剤化され；
(b) 該医薬が、前記患者に高線量の放射線療法を施すことと組み合わせて使用され；
(c) 該癌が、肺癌、前立腺癌、膵臓癌、卵巣癌、肝臓癌、頭頸部癌、乳癌、及び胃癌からなる群から選択され；ここで任意に前記肺癌が、非小細胞肺癌(NSCLC)又は扁平上皮NSCLCである、前記使用。
【請求項２８】
CD8+細胞を活性化する方法であって、該細胞を請求項1〜25のいずれか一項記載の分子の有効量と接触させることを含み；
ここで任意に、CD8+細胞活性化がIFNγ分泌の誘導又はCD8+細胞クラスター形成の誘導を含む、前記方法。
【請求項２９】
単量体BTN1A1よりも二量体BTN1A1に優先的に結合する抗原結合断片を含む分子を産生する方法であって、
(a) BTN1A1抗原を提供して、BTN1A1に免疫特異的に結合する抗原結合断片を含む分子を産生すること、及び
(b) 該BTN1A1に免疫特異的に結合する抗原結合断片を含む分子を、単量体BTN1A1よりも二量体BTN1A1に優先的に結合する抗原結合断片を含む分子についてスクリーニングすること
を含み；ここで任意に、
(1) 該BTN1A1抗原がBTN1A1単量体であり；ここで任意に該BTN1A1単量体がBTN1A1-ECD-His6であり；又は
(2) 該BTN1A1抗原がBTN1A1二量体であり；ここで任意に該BTN1A1二量体がBTN1A1-ECD-Fcである、
前記方法。
【請求項３０】
スクリーニングが前記BTN1A1に免疫特異的に結合する抗原結合断片を含む分子の単量体BTN1A1又は二量体BTN1A1に対する結合レベル又は親和性を決定することを含み；ここで任意に
(a) 分子が単量体BTN1A1よりも二量体BTN1A1に対するより高い結合レベル又はより高い親和性を有する場合、該分子が単量体BTN1A1よりも二量体BTN1A1に優先的に結合する抗原結合断片を含み；あるいは
(b) 該単量体BTN1A1又は二量体BTN1A1に対する結合レベル又は親和性が細胞ベースのアッセイで決定され；
ここで任意に該細胞ベースのアッセイがフローサイトメトリーアッセイであり；
ここで任意に、前記単量体BTN1A1よりも二量体BTN1A1に優先的に結合する抗原結合断片が単量体BTN1A1に対して示されるMFIの少なくとも2倍高いMFIで二量体BTN1A1に結合し、かつ
ここで任意に、該抗原結合断片が、単量体BTN1A1に対して示されるMFIよりも、少なくとも5倍高い、少なくとも10倍高い、少なくとも15倍高い、少なくとも20倍高い、少なくとも25倍高い、少なくとも30倍高い、少なくとも40倍高い、又は少なくとも50倍高いMFIで二量体BTN1A1に結合する、請求項29記載の方法。
【請求項３１】
前記単量体BTN1A1又は二量体BTN1A1に対する結合レベル又は親和性が精製された単量体又は二量体BTN1A1タンパク質を用いて決定され；ここで任意に
(a) 該精製された単量体BTN1A1タンパク質がBTN1A1-ECD-Hisであり、該精製された二量体BTN1A1タンパク質がBTN1A1-ECD-Fcであり；
(b) 該単量体BTN1A1又は二量体BTN1A1に対する結合レベル又は親和性が、酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)、蛍光免疫吸着アッセイ(FIA)、化学発光免疫吸着アッセイ(CLIA)、放射免疫アッセイ(RIA)、酵素多重化免疫アッセイ(EMI)、固相放射免疫アッセイ(SPROA)、蛍光偏光(FP)アッセイ、蛍光共鳴エネルギー移動(FRET)アッセイ、時間分解蛍光共鳴エネルギー移動(TR-FRET)アッセイ、又は表面プラズモン共鳴(SPR)アッセイを用いて決定され；あるいは
(c) 前記単量体BTN1A1よりも二量体BTN1A1に優先的に結合する抗原結合断片が単量体BTN1A1に対して示されるKDの半分未満のKDで二量体BTN1A1に結合し、
ここで任意に、該抗原結合断片が、単量体BTN1A1に対して示されるKDよりも少なくとも5倍小さい、少なくとも10倍小さい、少なくとも15倍小さい、少なくとも20倍小さい、少なくとも25倍小さい、少なくとも30倍小さい、少なくとも40倍小さい、又は少なくとも50倍小さいKDで二量体BTN1A1と結合する、請求項30記載の方法。
【請求項３２】
請求項29〜31のいずれか一項記載の方法で同定される分子。