【手続補正書】
【提出日】令和3年2月22日(2021.2.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
対象由来の生体試料中の循環腫瘍細胞（ＣＴＣ）を検出又は定量化するための方法であって、前記生体試料中の循環非造血細胞によるＣＤ３２１の発現を検出することを含み、循環非造血細胞によるＣＤ３２１の発現により、前記細胞が循環腫瘍細胞であると同定されることを含む、方法。
【請求項２】
前記生体試料から前記ＣＤ３２１を発現するＣＴＣを単離することを更に含む、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記生体試料が、対象の血液、尿、糞便、リンパ液、又は別の滲出液若しくは分泌液由来の循環細胞を含む、請求項１または２記載の方法。
【請求項４】
前記循環細胞が、対象の末梢血由来である、請求項３記載の方法。
【請求項５】
循環ＣＤ３２１陽性腫瘍細胞が、前記細胞による、少なくとも１つの汎白血球マーカー及び少なくとも１つの血小板マーカーの発現の不存在により非造血性であると同定される、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
ａ）前記対象由来の生体試料を提供することであって、前記生体試料は、前記対象由来の循環細胞、好ましくは対象の血液、尿、糞便、リンパ液、又は別の滲出液若しくは分泌液由来の循環細胞、より好ましくは対象の末梢血由来の循環細胞を含むこと、
ｂ）前記生体試料において、少なくとも１つの汎白血球マーカーに対して陰性であり、かつ少なくとも１つの血小板マーカーに対して陰性である非造血細胞を検出すること、
ｃ）ｂ）で検出される前記細胞によるＣＤ３２１の発現を検出することであって、ｂ）で検出される細胞によるＣＤ３２１の発現により、前記細胞が循環腫瘍細胞であると同定されること、
を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
ａ）前記汎白血球マーカーが、ＣＤ４５、ＬＳＰ１、ＣＤ４８、及びそれらの組み合わせからなる群から選択され、
ｂ）前記血小板マーカーが、ＣＤ３６、ＣＤ４１、ＣＤ４２ａ、ＣＤ４２ｂ、ＣＤ６１、及びそれらの組み合わせからなる群から選択され、
ｃ）前記汎白血球マーカーが、ＣＤ４５、ＬＳＰ１、ＣＤ４８、及びそれらの組み合わせからなる群から選択され、前記血小板マーカーが、ＣＤ３６、ＣＤ４１、ＣＤ４２ａ、ＣＤ４２ｂ、ＣＤ６１、及びそれらの組み合わせからなる群から選択され、
ｄ）前記汎白血球マーカーがＣＤ４５であり、
ｅ）前記血小板マーカーがＣＤ４２ａであり、又は、
ｆ）前記汎白血球マーカーがＣＤ４５であり、前記血小板マーカーがＣＤ４２ａである、請求項５又は６に記載の方法。
【請求項８】
前記腫瘍が固形腫瘍である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記腫瘍が、上皮、間葉、又はメラニン細胞由来である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記対象がヒトである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＣＤ３２１の発現を検出することが、ＣＤ３２１タンパク質若しくはＣＤ３２１ｍＲＮＡ又は両方を検出することを含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記ＣＴＣが、ＣＤ３２１に特異的に結合することができる１つ以上の作用因子を使用する技術を使用して検出、定量化、又は単離される、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
前記技術が、少なくとも１つの汎白血球マーカーに特異的に結合することができる１つ以上の作用因子と、少なくとも１つの血小板マーカーに特異的に結合することができる１つ以上の作用因子と、をさらに使用する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記１つ以上の作用因子が、それぞれ独立して、１つ以上の抗体、抗体断片、抗体様タンパク質足場、又はアプタマーである、請求項１２又は１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記ＣＴＣが、フローサイトメトリー、マスサイトメトリー、蛍光活性化細胞選別、蛍光顕微鏡法、親和性分離、磁気細胞分離、マイクロ流体分離、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される技術を使用して検出、定量化、又は単離される、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記単離されたＣＴＣ、その溶解物、又はその１つ以上の腫瘍抗原を腫瘍ワクチンに製剤化することをさらに含む、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記腫瘍ワクチンが樹状細胞をさらに含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記単離されたＣＴＣを生化学分析、突然変異分析、トランスクリプトーム分析、及び／又はプロテオーム分析に供することをさらに含む、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
対象における新生物疾患の診断、予後、又はモニタリングのための方法であって、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法によって前記対象におけるＣＴＣを検出又は定量化することを含む、方法。
【請求項２０】
対象における新生物疾患の転移能を決定するための方法であって、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法によって前記対象におけるＣＴＣを検出又は定量化することを含み、前記対象におけるＣＴＣの存在により、前記新生物疾患が転移能を有すると同定され
る、方法。
【請求項２１】
対象における新生物疾患の再発を決定するための方法であって、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法によって前記対象におけるＣＴＣを検出又は定量化することを含み、前記対象におけるＣＴＣの存在により、前記新生物疾患が再発したと同定されることを含む、方法。
【請求項２２】
対象が抗癌療法を必要としているかどうかを決定するための方法であって、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法によって前記対象におけるＣＴＣを検出又は定量化することを含み、前記対象におけるＣＴＣの存在により、前記対象が抗癌療法を必要としていると同定される、方法。
【請求項２３】
新生物疾患を有する対象における抗癌療法の有効性を決定するための方法であって、療法前及び療法中又は療法後に請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法によって前記対象におけるＣＴＣを検出又は定量化することを含み、療法中又は療法後の前記対象におけるＣＴＣの量が療法前と比較して低下したことにより、前記療法が有効であると同定される、方法。
【請求項２４】
ａ）−ＣＤ３２１に特異的に結合できる１つ以上の作用因子と、
−少なくとも１つの汎白血球マーカーに特異的に結合できる１つ以上の作用因子と、を含む部品のキット又は製造品、
ｂ）−ＣＤ３２１に特異的に結合できる１つ以上の作用因子と、
−少なくとも１つの血小板マーカーに特異的に結合できる１つ以上の作用因子と、
を含む部品のキット又は製造品、又は
ｃ）−ＣＤ３２１に特異的に結合できる１つ以上の作用因子と、
−少なくとも１つの汎白血球マーカーに特異的に結合できる１つ以上の作用因子と、
−少なくとも１つの血小板マーカーに特異的に結合できる１つ以上の作用因子と、
を含む部品のキット又は製造品
からなる群から選択される、部品のキット又は製造品。
【請求項２５】
ａ）前記汎白血球マーカーが、ＣＤ４５、ＬＳＰ１、ＣＤ４８、及びそれらの組み合わせからなる群から選択され、
ｂ）前記血小板マーカーが、ＣＤ３６、ＣＤ４１、ＣＤ４２ａ、ＣＤ４２ｂ、ＣＤ６１、及びそれらの組み合わせからなる群から選択され
ｃ）前記汎白血球マーカーが、ＣＤ４５、ＬＳＰ１、ＣＤ４８、及びそれらの組み合わせからなる群から選択され、前記血小板マーカーが、ＣＤ３６、ＣＤ４１、ＣＤ４２ａ、ＣＤ４２ｂ、ＣＤ６１、及びそれらの組み合わせからなる群から選択され、
ｄ）前記汎白血球マーカーがＣＤ４５であり、
ｅ）前記血小板マーカーがＣＤ４２ａであり、又は
ｆ）前記汎白血球マーカーがＣＤ４５であり、前記血小板マーカーがＣＤ４２ａである、
請求項２４に記載の部品のキット又は製造品。
【請求項２６】
前記１つ以上の作用因子が、フローサイトメトリー、マスサイトメトリー、蛍光活性化細胞選別、蛍光顕微鏡法、親和性分離、磁気細胞分離、マイクロ流体分離、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される技術における使用のために構成される、請求項２４又は２５に記載の部品のキット又は製造品。
【請求項２７】
前記１つ以上の作用因子が、それぞれ独立して、１つ以上の抗体、抗体断片、抗体様タンパク質足場、又はアプタマーである、請求項２４〜２６のいずれか一項に記載の部品の
キット又は製造品。