【手続補正書】
【提出日】令和3年8月20日(2021.8.20)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗体又はその抗原結合断片の製造方法であって、以下を含む方法：
ａ．培地で抗体又はその抗原結合断片を産生できる宿主細胞を培養する；
ｂ．産生段階を通じて培養を進行させる、ここで抗体又はその抗原結合断片が前記細胞によって産生され、前記産生段階中に、培養物が
・産生される抗体又はその抗原結合断片の予想される総量の１０重量％〜３０重量％の総量までのシステイン又はシスチン；及び
・産生される抗体又はその抗原結合断片の予想される総量の８重量％〜３５重量％の総量までのトリプトファン、
で補充される；及び
ｃ．任意に、細胞培養培地から抗体又はその抗原結合断片を回収する、
ここで、抗体又はその抗原結合断片が以下である：
１）ａ．配列番号１で定義される配列を有するＣＤＲ−Ｈ１；配列番号２で定義される配列を有するＣＤＲ−Ｈ２；配列番号３で定義される配列を有するＣＤＲ−Ｈ３；配列番号４で定義される配列を有するＣＤＲ−Ｌ１；配列番号５で定義される配列を有するＣＤＲ−Ｌ２及び配列番号６で定義される配列を有するＣＤＲ−Ｌ３を含む抗体又はその抗原結合断片；又は
ｂ．配列番号７で定義される配列を有する軽可変領域と、配列番号８で定義される配列を有する重可変領域とを含む抗体又はその抗原結合断片；又は
ｃ．配列番号７で定義される配列に対して少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する軽可変領域と、配列番号８で定義される配列に対して少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する重可変領域とを含む抗体又はその抗原結合断片；
ｄ．配列番号７で定義される配列を有する軽可変領域と、配列番号１１で定義される配列を有する重鎖とを含む抗体又はその抗原結合断片；又は
ｅ．配列番号７で定義される配列に対して少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する軽可変領域と、配列番号１１で定義される配列に対して少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する重鎖とを含む抗体又はその抗原結合断片；又は
２）配列番号９で定義される配列を有する軽鎖と配列番号１０で定義される配列を有する重鎖とを含む抗体；又は
３）配列番号９で定義される配列に対して少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する軽鎖と、配列番号１０で定義される配列に対して少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する重鎖とを含む抗体。
【請求項２】
培養物が、産生される抗体又はその抗原結合断片の予想される総量の１２重量％〜２８重量％の総量まで、例えば産生される抗体又はその抗原結合断片の予想される総量の、１２重量％〜２５重量％、例えば１２重量％〜２０重量％の総量までのシステイン又はシスチンで補充される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
培養物が、産生される抗体又はその抗原結合断片の予想される総量の８重量％〜３０重量％の総量まで、例えば産生される抗体又はその抗原結合断片の予想される総量の、８重量％〜２５重量％、例えば８重量％〜２０重量％の総量までのトリプトファンで補充される、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
方法中に提供されるシステイン又はシスチンの総量が２．９〜１２ｇ／（１０１２細胞）、例えば２．９〜７ｇ／（１０１２細胞）、例えば５．６〜７ｇ／（１０１２細胞）であり、ここで細胞は産生段階の終了時に予想される積分生細胞数を指す、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
方法中に提供されるトリプトファンの総量が２．５〜７ｇ／（１０１２細胞）、例えば２．５〜３．５ｇ／（１０１２細胞）であり、ここで細胞は産生段階の終了時に予想される積分生細胞数を指す、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
培養物中のシステイン又はシスチン及びトリプトファンの総量が、細胞培養培地にシステイン又はシスチン及びトリプトファンを：
ａ．産生段階の開始時に、
ｂ．産生段階中の任意の時点で１回又は複数回、
ｃ．産生段階中の継続的な添加を通して、又は
ｄ．ａ．、ｂ．及びｃ．の任意の組み合わせで
添加することにより達成される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記方法が、流加プロセスなどのバッチプロセスである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
システイン又はシスチン及びトリプトファンが、産生段階中の毎日の添加により提供される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
システイン又はシスチンを翌日に添加する前に、例えば、システイン又はシスチンの添加を５．６〜７ｇ／（１０１２細胞）のレベルに減少させることによって、培養物中のシステイン又はシスチンを枯渇させ、ここで前記細胞は産生段階の終了時に予想される積分生細胞数を指す、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
産生の後期段階中に、すなわち、細胞が既に最大生存細胞密度に達したとき、トリプトファンが翌日添加される前に、培養物中のトリプトファンを枯渇させる、請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１１】
細胞培養培地中のシステイン又はシスチン濃度が産生段階中の任意の時点で０．９ｇ／Ｌを超えない、好ましくは、細胞培養培地中のシステイン又はシスチン濃度が産生段階中の任意の時点で０．３ｇ／Ｌを超えない、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
細胞培養培地中のトリプトファン濃度が産生段階中の任意の時点で０．６ｇ／Ｌを超えない、好ましくは、細胞培養培地中のトリプトファン濃度が産生段階中の任意の時点で０．３ｇ／Ｌを超えない、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
産生段階が少なくとも７日間、好ましくは少なくとも１４日間、実施される方法。
【請求項１４】
産生段階の後半の任意の時点で：
・培養物中のシステイン又はシスチンの量が、産生される抗体又はその抗原結合断片の予想される量の１０重量％〜３０％である；及び
・培養物中のトリプトファンの量が、産生される抗体又はその抗原結合断片の予想される量の８重量％〜３５％である、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
産生段階中の任意の時点で：
・培養物中のシステイン又はシスチンの量が、産生される抗体又はその抗原結合断片の予想される量の１０重量％〜３０％である；及び
・培養物中のトリプトファンの量が、産生される抗体又はその抗原結合断片の予想される量の８重量％〜３５％である、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記宿主細胞は、哺乳動物細胞、好ましくはＣＨＯ細胞である、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
産生段階が、好ましくは５０Ｌ以上、１００Ｌ以上、５００Ｌ以上、１０００Ｌ以上、２０００Ｌ以上、５０００Ｌ以上、１００００Ｌ以上、又は２０，０００Ｌ以上の容量のバイオリアクター中で行われる、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
方法は、抗体又はその抗原結合断片を細胞培養培地から回収するステップ、及び抗体又はその抗原結合断片を精製するさらなるステップを含む、請求項１〜１７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１９】
精製がプロテインＡクロマトグラフィーを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
精製された抗体又はその抗原結合断片を製剤化するステップをさらに含む、請求項１８又は１９に記載の方法。
【請求項２１】
抗体又はその抗原結合断片が、１つ以上のアミノ酸及び界面活性剤を含む液体製剤に製剤化される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
製剤がヒスチジン及び／又はプロリンを含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
製剤が５ｍＭ〜１００ｍＭの濃度で、例えば１０ｍＭ〜５０ｍＭの濃度でヒスチジンを、及び／又は１００ｍＭ〜５００ｍＭの濃度でプロリンを、５〜７．４、例えば５〜６．５、例えば５〜６のｐＨで含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
製剤は、５．２〜６．０のｐＨで、３０ｍＭの濃度でヒスチジンを、及び２５０ｍＭの濃度でプロリンを含む、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
界面活性剤は、好ましくは、０．００１％〜０．１％（ｗ／ｖ）、例えば、０．００５％〜０．１％、例えば、０．０１％〜０．１％、たとえば０．０１％〜０．０５％、例えば０．０３％の濃度の、ポリソルベート８０である、請求項２１〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
抗体又はその抗原結合断片が１０ｍｇ／ｍｌ〜２５０ｍｇ／ｍｌ、例えば２０ｍｇ／ｍｌ〜２５０ｍｇ／ｍｌ、例えば５０ｍｇ／ｍｌ〜２５０ｍｇ／ｍｌ、例えば、１２０ｍｇ／ｍｌ〜１６０ｍｇ／ｍｌ、例えば１４０ｍｇ／ｍｌの濃度で製剤化される、請求項２１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２７】
前記方法は産生される抗体又はその抗原結合断片の不均質を減少させるものであり、ここで前記不均質の減少とは
ａ．電荷の不均質、好ましくは酸性ピーク群（ＡＰＧ）；及び／又は
ｂ．アミノ酸酸化、異性化、断片化、他の共有結合付加物糖化、脱アミド、システイニル化；及び／又は
ｃ．例えば抗体又はその抗原結合断片の異なるバッチ間の、色又は色の強度；及び／又は
ｄ．高分子量種（ＨＭＷＳ）；及び／又は
ｅ．抗体又はその抗原結合断片不安定性、
を減少させることを含む、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
請求項１から２７のいずれか一項に記載の方法により得られ得る又は得られる抗体又はその抗原結合断片調製物。
【請求項２９】
抗体又はその抗原結合断片を含む医薬組成物であって、該組成物が請求項２１から２６のいずれか一項に記載のさらなる特徴の１つ以上を有し、ここで抗体又はその抗原結合断片が以下である、上記医薬組成物：
１）ａ．配列番号１で定義される配列を有するＣＤＲ−Ｈ１；配列番号２で定義される配列を有するＣＤＲ−Ｈ２；配列番号３で定義される配列を有するＣＤＲ−Ｈ３；配列番号４で定義される配列を有するＣＤＲ−Ｌ１；配列番号５で定義される配列を有するＣＤＲ−Ｌ２及び配列番号６で定義される配列を有するＣＤＲ−Ｌ３を含む抗体又はその抗原結合断片；又は
ｂ．配列番号７で定義される配列を有する軽可変領域と、配列番号８で定義される配列を有する重可変領域とを含む抗体又はその抗原結合断片；又は
ｃ．配列番号７で定義される配列に対して少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する軽可変領域と、配列番号８で定義される配列に対して少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する重可変領域とを含む抗体又はその抗原結合断片；
ｄ．配列番号７で定義される配列を有する軽可変領域と、配列番号１１で定義される配列を有する重鎖とを含む抗体又はその抗原結合断片；又は
ｅ．配列番号７で定義される配列に対して少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する軽可変領域と、配列番号１１で定義される配列に対して少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する重鎖とを含む抗体又はその抗原結合断片；又は
２）配列番号９で定義される配列を有する軽鎖と配列番号１０で定義される配列を有する重鎖とを含む抗体；又は
３）配列番号９で定義される配列に対して少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する軽鎖と、配列番号１０で定義される配列に対して少なくとも８０％の同一性又は類似性、好ましくは９０％の同一性又は類似性を有する重鎖とを含む抗体。