【手続補正書】
【提出日】平成17年7月21日(2005.7.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
【課題を解決するための手段】
この様な状況に鑑みて、日焼け後の活性酸素を効率的に除去する作用に優れ、且つ、該除去に際し、塗布する皮膚外用剤により、一過性の刺激を誘起しない、皮膚外用剤を求めて、鋭意研究努力を重ねた結果、１）グルコシル−Ｌ−アスコルビン酸のアシル化誘導体と２）ショ糖脂肪酸エステル及び／又はポリグリセリン脂肪酸エステルとを含有する皮膚外用剤であって、３）前記グルコシル−Ｌ−アスコルビン酸のアシル化誘導体に於けるアシル基が炭素数８〜２０の分岐の脂肪族アシル基である皮膚外用剤が、日焼けによって生じる活性酸素を消去する作用に優れながら、一過性の刺激発現も殆ど無いことを見出し、発明を完成させるに至った。即ち、本発明は、以下に示す技術に関するものである。
（１）１）グルコシル−Ｌ−アスコルビン酸のアシル化誘導体と２）ショ糖脂肪酸エステル及び／又はポリグリセリン脂肪酸エステルとを含有する皮膚外用剤であって、３）前記グルコシル−Ｌ−アスコルビン酸のアシル化誘導体に於けるアシル基が炭素数８〜２０の分岐の脂肪族アシル基であることを特徴とする、皮膚外用剤。
（２）グルコシル−Ｌ−アスコルビン酸のアシル化誘導体における、アシル基の構造が、次に示す一般式（Ｉ）に表されるものであることを特徴とする、（１）に記載の皮膚外用剤。
【化２】
2004091437.tif 000001
一般式（Ｉ）
（但し、式中ｍは２〜８の整数を表す。）
（３）グルコシル−Ｌ−アスコルビン酸のアシル化誘導体が、２−Ｏ−α−Ｄ−モノグルコシル−６−Ｏ−（２−プロピルペンタノイル）−Ｌ−アスコルビン酸（化合物１）、６−Ｏ−（２−ブチルヘキサノイル）−２−Ｏ−α−Ｄ−モノグルコシル−Ｌ−アスコルビン酸（化合物２）又は２−Ｏ−α−Ｄ−モノグルコシル−６−Ｏ−（２−ペンチルヘプタ
ノイル）−Ｌ−アスコルビン酸（化合物３）であることを特徴とする、（１）又は（２）に記載の皮膚外用剤。
（４）ショ糖脂肪酸エステル及び／又はポリグリセリン脂肪酸エステルが、ショ糖モノステアリン酸エステル、ショ糖モノラウリン酸エステル、デカグリセリンモノステアリン酸エステル、デカグリセリンモノオレイン酸エステル及びデカグリセリンモノイソステアリン酸エステルから選択される１種乃至は２種以上である、（１）〜（３）何れか１項に記載の皮膚外用剤。
（５）日焼けした皮膚上に適用されるものであることを特徴とする、（１）〜（４）何れか１項に記載の皮膚外用剤。
（６）化粧料であることを特徴とする、（１）〜（５）何れか１項に記載の皮膚外用剤。
以下、本発明について更に詳細に説明を加える。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
（１）本発明の皮膚外用剤の必須成分であるグルコシル−Ｌ−アスコルビン酸のアシル化誘導体
本発明の皮膚外用剤の必須成分である、グルコシル−Ｌ−アスコルビン酸のアシル化誘導体は、前記アシル基が炭素数８〜２０の分岐の脂肪族アシル基であることを特徴とする。かかるアシル基としては、例えば、イソオクタノイル基、イソパルミトイル基、イソステアロイル基、２−プロピルペンタノイル基、２−ブチルヘキサノイル基、２−ペンチルへプタノイル基などが好適に例示でき、これらの中では、上記一般式（Ｉ）の構造を有するアシル基が特に好ましく、具体的には、２−プロピルペンタノイル基、２−ブチルヘキサノイル基、２−ペンチルへプタノイル基が特に好ましく例示できる。かかるグルコシル−Ｌ−アスコルビン酸のアシル化誘導体は、諸種の方法により調製することができる。例えば、グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸に適宜のアシル化剤を反応させれば、所望のアシル化誘導体が得られる。このとき、必要とあれば、反応系内に触媒を共存させてもよく、その触媒はリパーゼなどの酵素であってもよい。原料となるグリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は、例えば、特開平３−１３９２８８号公報、特開平３−１３５９９２号公報及び特開平３−１８３４９２号公報に記載されているように、シクロマルトデキストリン・グルカノトランスフェラーゼなどの糖転移酵素の存在下でＬ−アスコルビン酸にシクロマルトデキストリンや澱粉加水分解物などのα−グルコシル化合物を反応させるか、あるいは、特開平６−２２８１８３号公報及び特開平６−２６３７９０号公報に記載されているように、β−ガラクトシダーゼの存在下で５，６−イソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸にラクトースなどのβ−ガラクトシル化合物を反応させることによって得ることができる。ちなみに、２−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の市販品としては、例えば、『ＡＡ−２Ｇ』（固形分重量当りの２−Ｏ−α−Ｄ−モノグルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸含量９８％以上、株式会社林原商事販売）が挙げられる。用途にもよるけれども、この発明においては、グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は必ずしも高度に精製されておらずともよく、調製方法に特有な類縁体や他の成分との未分離組成物であっても、実質的なアシル化を妨げない他の成分との混合物であってもよい。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
（２）本発明の皮膚外用剤の必須成分であるショ糖脂肪酸エステル及び／又はポリグリセ
リン脂肪酸エステル。
本発明の皮膚外用剤は、ショ糖脂肪酸エステル及び／又はポリグリセリン脂肪酸エステルを必須成分として含有する。ショ糖脂肪酸エステルとしては、ショ糖のモノ脂肪酸エステルが好ましく、脂肪酸部分としては、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸が好ましく例示できる。脂肪酸残基にすると、ラウリル基、パルミチル基、ステアリル基、オレイル基が好ましい。化合物としては、ショ糖モノステアレート及びショ糖モノラウレートが特に好ましい。ポリグリセリン脂肪酸エステルのポリグリセリンの部分としては、グリセリンの５〜２０量体が好ましく例示でき、脂肪酸部分としては、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸或いはベヘン酸等が好ましく例示できる。即ち、脂肪酸残基にすると、ラウリル基、ミリスチル基、パルミチル基、ステアリル基、オレイル基、リノリル基が好ましい。エステル化度は１分子あたり平均１〜３が好ましい。この様なものの多くが市販されており、この様な市販されているものの内、特に好ましいものとしては、デカグリセリンモノステアリン酸エステル、デカグリセリンモノオレイン酸エステル及びデカグリセリンモノイソステアリン酸エステル等が例示できる。これらショ糖脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステルは唯一種を含有させることもできるし、二種以上を組み合わせて含有させることもできる。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
＜実施例２＞
実施例１のローション化粧料１のｉｎ  ｖｉｖｏでの活性酸素消去効果を調べた。即ち、ハートレー系白色種モルモット（雄性、３００〜３５０ｇ）１群３匹の背部を剃毛し、右半側を用いて予め紫外線（光源；ＳＥランプ）に対する最少紅斑量（ＭＥＤ）を測定した。この時左半側は覆いをして紫外線が当たらないようにした。その３日後左半側にＭＥＤの２／３量の紫外線を照射し、その後ローション化粧料１を０．１ｍｌ塗布して処置し、塗布後１０分に動物を屠殺し、照射部位の皮膚を切り出し直ちに凍結切片を作成した。凍結切片を蛍光顕微鏡下観察した。無処置群としては剃毛の処置のもの、光対照群としては、剃毛して紫外線照射し皮膚外用剤の処理を行わないものを用いた。比較例１としてはローション化粧料１の化合物３をアスコルビン酸に置換したものを、比較例２としては２−Ｏ−α−Ｄ−モノグルコシル−Ｌ−アスコルビン酸に置換したものを用いた。評価は顕微鏡像を画像として取り込み、３例の画像をモーフィングにより平均化し、平均画像を作成し、この群の平均画像同士を次の基準で検知可能な蛍光点の出現程度を比較し、スコアを判定した。活性酸素による損傷が大きいほど、蛍光顕微鏡像には蛍光点の出現が増える。基準は、無処置群の平均画像と同程度の蛍光点の出現をスコア１、光対照群と同程度の蛍光点の出現をスコア５とした。この間を等尺に配分し、スコア１〜５を設定した。結果を表１に示す。これより本発明の皮膚外用剤は、ｉｎ  ｖｉｖｏにおける活性酸素を消去する作用に優れることがわかる。これは、本発明の必須成分である、化合物３の生体内への吸収が良いためであると考えられる。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２５】
＜実施例３＞
本発明の皮膚外用剤であるローション化粧料１について、一過性の刺激を動物モデルで評価した。動物モデルは、ＩＣＲマウス・テール・スティンギングモデルを用いた。即ち
、ＩＣＲマウス（雄性、４週齢）の尻尾を紙ヤスリで擦過し、損傷モデルを作成し、これに検体０．０１ｍｌを滴下し、その刺激により、飛翔する距離を求めた。例数は５匹とし、飛翔距離の平均値を群の代表値とした。検体は実施例２のローション化粧料１、比較例１、２、ローション化粧料１のショ糖モノラウレートとデカグリセリンモノオレートとをＰＯＥ（６０）硬化ヒマシ油に置換した比較例３、ＰＯＥ（２０）オレイルエーテルに置換した比較例４及びＰＯＥ（２０）ステアレートに置換した比較例５を用いた。結果を表２に示す。これより、本発明の皮膚外用剤は、一過性の刺激が極めて低いことがわかる。