【手続補正書】
【提出日】令和3年3月11日(2021.3.11)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
網膜色素上皮（RPE）細胞の治療有効量を含む、対象における網膜の疾患または障害を治療するまたはその進行を遅らせるための薬学的組成物。
【請求項２】
対象が、20/64もしくはそれ未満、20/70もしくはそれ未満、または約20/64〜約20/400のBCVAを含む、請求項1に記載の薬学的組成物。
【請求項３】
治療有効量のRPE細胞の投与が、少なくとも約6ヶ月〜約12ヶ月間、または約90日〜約24ヶ月間維持される色素沈着の増加をもたらす、請求項1または2に記載の薬学的組成物。
【請求項４】
RPE細胞の治療的有効量が、投与当たり約50,000〜5,000,000個の細胞である、請求項1〜3のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項５】
約500細胞/μl〜約10,000細胞/μlを含む、請求項1〜4のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項６】
前記細胞の少なくとも95％が、プレメラノソームタンパク質（PMEL17）と細胞性レチンアルデヒド結合タンパク質（CRALBP）とを共発現する、請求項1〜5のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項７】
RPE細胞が、ヒト胚性幹細胞のエクスビボ分化によって生成された細胞である、請求項1〜6のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項８】
RPE細胞を移植することによる投与用である、請求項1〜7のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項９】
RPE細胞の移植が、地図状萎縮（GA）病変の端から少なくとも1乳頭直径離れてRPE細胞を注入することを含む、請求項8に記載の薬学的組成物。
【請求項１０】
RPE細胞の移植が、
GA病変を覆うこと、中心窩を覆うこと、GA病変に接する移行帯の一部もしくは全部を覆うこと、またはGA病変に隣接する周囲の健常組織を覆うこと
のうちの1つまたは複数においてRPE細胞を注入することを含む、請求項1〜9のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１１】
RPE細胞が、
（a）ニコチンアミドを含む培地中でヒト胚性幹細胞または人工多能性幹細胞を培養し、分化細胞を生成すること;
（b）ニコチンアミドとアクチビンAとを含む培地中で該分化細胞を培養し、RPE系統へとさらに分化する細胞を生成すること;および
（c）RPE系統へとさらに分化する該細胞を、ニコチンアミドを含むがアクチビンAを含まない培地中で培養すること
によって生成された細胞である、
請求項1〜10のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１２】
胚性幹細胞または人工多能性幹細胞を、非接着条件下でbFGFおよびTGFβを含む培地中で増殖させる、請求項11に記載の薬学的組成物。
【請求項１３】
（a）の培地がアクチビンAを実質的に含まない、請求項11に記載の薬学的組成物。
【請求項１４】
前記細胞が単回投与で投与されるように用いられることを特徴とする、請求項1〜13のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１５】
前記細胞が対象の網膜下腔に投与されるように用いられることを特徴とする、請求項1〜14のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１６】
カニューレによる投与用である、請求項1〜15のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１７】
免疫抑制薬と組み合わせて使用され、該免疫抑制薬が、RPE細胞の投与後1日〜3ヶ月間、対象に投与される、請求項1〜16のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１８】
網膜の疾患または状態が、中程度の萎縮型AMD、網膜色素変性症、網膜剥離、網膜異形成、網膜萎縮、網膜症、黄斑ジストロフィー、錐体ジストロフィー、錐体-杆体ジストロフィー、マラチア・レベンチネズ（Malattia Leventinese）、ドイン蜂巣状ジストロフィー、ソースビージストロフィー、パターン/蝶形ジストロフィー、ベスト卵黄様ジストロフィー、ノースカロライナジストロフィー、中心性輪紋状脈絡膜ジストロフィー、網膜色素線条症、中毒性黄斑症、シュタルガルト病、病的近視、網膜色素変性症、および黄斑変性からなる群より選択される、請求項1〜17のいずれか一項に記載の薬学的組成物。
【請求項１９】
約50,000〜500,000個のRPE細胞を活性物質として含む、網膜の疾患または障害を治療するまたはその進行を遅らせるための薬学的組成物。
【請求項２０】
約50,000〜500,000個のRPE細胞を活性物質として含む、網膜の疾患または障害を有する対象のRPEを安定化するための薬学的組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７８】
いくつかの態様によれば、網膜の疾患または障害を治療するまたはその進行を遅らせることは、栄養因子の細胞分泌によって増強される。
[本発明1001]
網膜色素上皮（RPE）細胞を含む治療有効量の薬学的組成物を対象に投与する工程を含む、網膜の疾患または障害を治療するまたはその進行を遅らせる方法。
[本発明1002]
治療有効量の網膜色素上皮（RPE）細胞の投与が、ベースラインから測定して、約1日〜約3ヶ月間、1日〜約15ヶ月間または1日〜約24ヶ月間または約90日〜約24ヶ月間低下しない最高矯正視力（BCVA）をもたらす、本発明1001の方法。
[本発明1003]
対象が、20/64もしくはそれ未満、20/70もしくはそれ未満、または約20/64〜約20/400のBCVAを含む、本発明1001の方法。
[本発明1004]
治療有効量の網膜色素上皮（RPE）細胞の投与が、ベースラインから測定して、約1日〜約15ヶ月間、または1日〜約24ヶ月間または約90日〜約24ヶ月間安定なままである最高矯正視力（BCVA）をもたらす、本発明1001の方法。
[本発明1005]
治療有効量の網膜色素上皮（RPE）細胞の投与が、対象の約89％〜約96％において色素沈着の増加をもたらす、本発明1001の方法。
[本発明1006]
色素沈着の増加が、少なくとも約6ヶ月〜約12ヶ月間、または約90日〜約24ヶ月間維持される、本発明1005の方法。
[本発明1007]
治療有効量の網膜色素上皮（RPE）細胞の投与が網膜色素沈着をもたらす、本発明1001の方法。
[本発明1008]
治療有効量の網膜色素上皮（RPE）細胞の投与が、ベースラインから測定して、少なくとも約2ヶ月〜約1年間、または90日〜約24ヶ月間、網膜色素沈着の増加をもたらす、本発明1007の方法。
[本発明1009]
投与後約2〜約12ヶ月で、または約90日〜約24ヶ月で、網膜色素沈着が安定化される、本発明1007の方法。
[本発明1010]
投与後約3〜約9ヶ月で網膜色素沈着が安定化される、本発明1007の方法。
[本発明1011]
前記細胞が投与されるブレブ内の網膜下液が48時間未満で吸収される、本発明1001の方法。
[本発明1012]
治療有効量の網膜色素上皮（RPE）細胞の投与がエリプソイド領域の回復をもたらす、本発明1001の方法。
[本発明1013]
エリプソイド領域の回復が、エリプソイド領域分析による回復を含む、本発明1012の方法。
[本発明1014]
エリプソイド領域分析が、エリプソイド領域の視覚的分析を含み、対象のエリプソイド領域を、年齢が一致し性別が一致する対照、ベースライン、または僚眼と比較する、本発明1012の方法。
[本発明1015]
回復が、年齢が一致し性別が一致する対照、ベースライン、または僚眼と比較して正常な構造の復元によって示される、本発明1012の方法。
[本発明1016]
回復が、外境界膜、ミオイド領域（光受容体の内節）、エリプソイド領域（IS/OS接合部）、光受容体の外節、ドルーゼンの喪失、および網状偽ドルーゼンの消失のうちの1つまたは複数がより組織化されつつあるという主観的評価を含む、本発明1012の方法。
[本発明1017]
回復が、網膜の基本的な基礎層の1つまたは複数がより組織化されつつあるという主観的評価を含む、本発明1012の方法。
[本発明1018]
より組織化されつつある網膜の基本的な基礎層が、外境界膜、ミオイド領域（光受容体の内節）、エリプソイド領域（IS/OS接合部）、および光受容体の外節のうちの1つまたは複数を含む、本発明1017の方法。
[本発明1019]
新しいまたは悪化しつつあるERMが、投与の約1週間〜約12ヶ月、または約1週間〜約24ヶ月、または約90日〜約24ヶ月以内に外科的除去を必要としない、本発明1001の方法。
[本発明1020]
RPE細胞が、投与の約1週間〜約1年、または約1週間〜約24ヶ月、または約90日〜約24ヶ月以内に腫瘍形成性を示さない、本発明1001の方法。
[本発明1021]
RPE細胞が、投与の約9ヶ月以内に0％〜約5％の組織学的腫瘍形成性を示す、本発明1001の方法。
[本発明1022]
治療有効量の網膜色素上皮（RPE）細胞の投与が網膜の裂孔または破裂をもたらさない、本発明1001の方法。
[本発明1023]
治療有効量の網膜色素上皮（RPE）細胞の投与が網膜浮腫をもたらさない、本発明1001の方法。
[本発明1024]
RPE細胞の治療的有効量が、投与当たり約50,000〜5,000,000個の細胞である、本発明1001の方法。
[本発明1025]
RPE細胞の治療的有効量が、投与当たり約200,000個の細胞である、本発明1001の方法。
[本発明1026]
RPE細胞の治療的有効量が、投与当たり約500,000個の細胞である、本発明1001の方法。
[本発明1027]
薬学的組成物が、約500細胞/μl〜約10,000細胞/μlを含む、本発明1001の方法。
[本発明1028]
前記量が投与当たり50,000個の細胞である場合、薬学的組成物が約500〜1,000細胞/μlを含む、本発明1001の方法。
[本発明1029]
前記量が投与当たり200,000個の細胞である場合、薬学的組成物が約2,000細胞/μlを含む、本発明1001の方法。
[本発明1030]
前記量が投与当たり500,000個の細胞である場合、薬学的組成物が約5,000細胞/μlを含む、本発明1001の方法。
[本発明1031]
前記量が投与当たり1,000,000個の細胞である場合、薬学的組成物が約10,000細胞/μlを含む、本発明1001の方法。
[本発明1032]
前記細胞の少なくとも95％がプレメラノソームタンパク質（PMEL17）と細胞性レチンアルデヒド結合タンパク質（CRALBP）とを共発現する、本発明1001の方法。
[本発明1033]
前記細胞の経上皮電気抵抗が、対象に対して100オームより大きい、本発明1032の方法。
[本発明1034]
RPE細胞が、ヒト胚性幹細胞のエクスビボ分化によって生成される、本発明1001の方法。
[本発明1035]
投与が、RPE細胞を移植することを含む、本発明1001の方法。
[本発明1036]
RPE細胞移植の前に、RPE用量の調製をさらに含む、本発明1035の方法。
[本発明1037]
RPEの用量の調製が、用量を解凍することを含む、本発明1036の方法。
[本発明1038]
RPEの用量の調製が、RPE細胞を混合し、送達装置に充填することを含む、本発明1037の方法。
[本発明1039]
RPE細胞移植の前に、硝子体切除術を実施することをさらに含む、本発明1035の方法。
[本発明1040]
硝子体切除術を実施することが、硝子体を染色するためにトリアムシノロンを投与し、硝子体牽引を除去することを含む、本発明1039の方法。
[本発明1041]
硝子体切除術を実施する前に、手術部位を洗浄することをさらに含む、本発明1035の方法。
[本発明1042]
RPE細胞を移植した後、手術部位を洗浄することをさらに含む、本発明1035の方法。
[本発明1043]
投与が、手術部位の洗浄、硝子体切除術の実施、RPE用量の調製、およびRPE細胞移植を含む、本発明1001の方法。
[本発明1044]
RPE細胞の移植が、地図状萎縮（GA）病変の端から少なくとも1乳頭直径離れてRPE細胞を注入することを含む、本発明1001の方法。
[本発明1045]
RPE細胞の移植が、GA病変を覆う、中心窩を覆う、GA病変に接する移行帯の一部もしくは全部を覆う、またはGA病変に隣接する周囲の健常組織を覆う工程のうちの1つまたは複数においてRPE細胞を注入することを含む、本発明1001の方法。
[本発明1046]
移行帯が、無傷の網膜と変性網膜との間の領域を含む、本発明1045の方法。
[本発明1047]
GA病変を覆う工程が、GA病変全体をブレブで覆うことを含む、本発明1045の方法。
[本発明1048]
GAの大きさが、0.1mm2〜約50mm2、約0.5mm2〜約30mm2、約0.5mm2〜約15mm2、約0.1mm2〜約10mm2、約0.25mm2〜約5mm2、または2点間の任意の点を含む、本発明1045の方法。
[本発明1049]
投与が、中心黄斑視力が維持されるようにRPE細胞を投与することを含む、本発明1001の方法。
[本発明1050]
RPE細胞が、
（a）ニコチンアミドを含む培地中でヒト胚性幹細胞または人工多能性幹細胞を培養し、分化細胞を生成すること;
（b）ニコチンアミドとアクチビンAとを含む培地中で該分化細胞を培養し、RPE系統へとさらに分化する細胞を生成すること;および
（c）RPE系統へとさらに分化する該細胞を、ニコチンアミドを含むがアクチビンAを含まない培地中で培養すること
によって生成される、
本発明1001の方法。
[本発明1051]
胚性幹細胞または人工多能性幹細胞を、非接着条件下でbFGFおよびTGFβを含む培地中で増殖させる、本発明1050の方法。
[本発明1052]
（a）の培地がアクチビンAを実質的に含まない、本発明1050の方法。
[本発明1053]
前記細胞を単回投与で投与する、本発明1001の方法。
[本発明1054]
前記細胞を対象の網膜下腔に投与する、本発明1001の方法。
[本発明1055]
網膜下投与が、経硝子体投与または脈絡膜上投与である、本発明1001の方法。
[本発明1056]
投与がカニューレによる、本発明1001の方法。
[本発明1057]
カニューレによる投与部位の治癒が約1日〜約30日以内である、本発明1056の方法。
[本発明1058]
カニューレによる投与部位の治癒が約5日〜約21日以内または約7日〜約15日以内である、本発明1056の方法。
[本発明1059]
RPE細胞の投与後1日〜3ヶ月間、対象に免疫抑制を施すことをさらに含む、本発明1001の方法。
[本発明1060]
RPE細胞の投与後3ヶ月間、対象に免疫抑制を施すことをさらに含む、本発明1001の方法。
[本発明1061]
RPE細胞の投与後1日〜1ヶ月間、対象に免疫抑制を施すことをさらに含む、本発明1001の方法。
[本発明1062]
網膜の疾患または状態が、中程度の萎縮型AMD、網膜色素変性症、網膜剥離、網膜異形成、網膜萎縮、網膜症、黄斑ジストロフィー、錐体ジストロフィー、錐体-杆体ジストロフィー、マラチア・レベンチネズ（Malattia Leventinese）、ドイン蜂巣状ジストロフィー、ソースビージストロフィー、パターン/蝶形ジストロフィー、ベスト卵黄様ジストロフィー、ノースカロライナジストロフィー、中心性輪紋状脈絡膜ジストロフィー、網膜色素線条症、中毒性黄斑症、シュタルガルト病、病的近視、網膜色素変性症、および黄斑変性からなる群より選択される、本発明1001の方法。
[本発明1063]
疾患が加齢黄斑変性である、本発明1062の方法。
[本発明1064]
加齢黄斑変性が萎縮型加齢黄斑変性である、本発明1063の方法。
[本発明1065]
治療有効量の網膜色素上皮（RPE）細胞を、全身性免疫抑制を施されていない対象に投与する工程を含む、萎縮型AMDを有する対象を治療する方法の安全性を高める方法。
[本発明1066]
治療下で発現した有害事象の発生率および頻度が、免疫抑制を用いる場合よりも低い、本発明1065の方法。
[本発明1067]
治療有効量の網膜色素上皮（RPE）細胞を投与する工程を含む、GAを有する対象の網膜のエリプソイド領域を組織化する方法であって、投与後に、組織化されていないエリプソイド領域が組織化される、前記方法。
[本発明1068]
エリプソイド領域の回復が、エリプソイド領域分析による回復を含む、本発明1067の方法。
[本発明1069]
エリプソイド領域分析が、エリプソイド領域の視覚的分析を含み、対象のエリプソイド領域を、年齢が一致し性別が一致する対照、ベースライン、または僚眼と比較する、本発明1067の方法。
[本発明1070]
回復が、年齢が一致し性別が一致する対照、ベースライン、または僚眼と比較して正常な構造の復元によって示される、本発明1067の方法。
[本発明1071]
回復が、外境界膜、ミオイド領域（光受容体の内節）、エリプソイド領域（IS/OS接合部）、光受容体の外節、ドルーゼンの喪失、および網状偽ドルーゼンの消失のうちの1つまたは複数がより組織化されつつあるという主観的評価を含む、本発明1067の方法。
[本発明1072]
回復が、網膜の基本的な基礎層の1つまたは複数がより組織化されつつあるという主観的評価を含む、本発明1067の方法。
[本発明1073]
より組織化されつつある網膜の基本的な基礎層が、外境界膜、ミオイド領域（光受容体の内節）、エリプソイド領域（IS/OS接合部）、および光受容体の外節のうちの1つまたは複数を含む、本発明1017の方法。
[本発明1074]
対象が、20/64もしくはそれ未満、20/70もしくはそれ未満、または約20/64〜約20/400のBCVAを含む、本発明1067の方法。
[本発明1075]
網膜疾患を治療するまたはその進行を遅らせることが、微小視野測定で評価される視力の回復によって実証され、微小視野測定で評価される視力の回復が、ベースラインと比較した微小視野測定での網膜感度とEZ欠損との相関関係を含む、本発明1001の方法。
[本発明1076]
微小視野測定で評価される視力の回復が、RPE細胞の投与部位または投与部位の近傍の網膜の部位が、ベースラインの微小視野測定評価と比較して改善された微小視野測定評価を含むことを実証することを含む、本発明1001の方法。
[本発明1077]
網膜疾患を治療するまたはその進行を遅らせることが、投与後1年でベースラインまたは僚眼と比較して約5％〜約20％のGA病変成長率の低下、または約5％〜約50％、または約5％〜約25％、または約5％〜約100％、約5％〜約10％の低下を含む、本発明1001の方法。
[本発明1078]
網膜疾患を治療するまたはその進行を遅らせることが、年齢が一致し性別が一致する対照、ベースライン、または僚眼と比較した場合に、安定したBCVA；低輝度試験成績の低下なし；または微小視野測定での感度の低下なし；または読み取り速度の低下なし、のうちの1つまたは複数を含み、比較が1ヶ月、3ヶ月、6ヶ月、または1年のうちの1つまたは複数の時点においてである、本発明1001の方法。
[本発明1079]
約50,000〜500,000個のRPE細胞を活性物質として含む、網膜の疾患または障害を治療するまたはその進行を遅らせるための薬学的組成物。
[本発明1080]
約50,000〜500,000個のRPE細胞を活性物質として含む、網膜の疾患または障害を有する対象のRPEを安定化するための薬学的組成物。
[本発明1081]
RPE細胞が、
（a）少なくとも95％の細胞がプレメラノソームタンパク質（PMEL17）と細胞性レチンアルデヒド結合タンパク質（CRALBP）とを共発現するという特性;および
（b）細胞の経上皮電気抵抗が、細胞が投与された対象に対して100オームより大きく、投与後約90日〜約24ヶ月で、対象の網膜色素沈着が安定化するという特性
によって特徴付けられる、
本発明1080の組成物。
[本発明1082]
エリプソイド領域の回復が、EZ-RPEの厚さ、面積、または体積測定値のうちの1つまたは複数の改善を含む、本発明1012の方法。
[本発明1083]
EZ-RPEの厚さ、面積、または体積測定値のうちの1つまたは複数の改善が視力と逆相関する、本発明1082の方法。
[本発明1084]
エリプソイド領域分析が、年齢が一致し性別が一致する対照、ベースライン、または僚眼と比較したEZ体積の減少によってEZの組織化を実証する、本発明1012の方法。
[本発明1085]
EZ体積の減少が、少なくとも2％もしくは少なくとも5％もしくは少なくとも7％もしくは少なくとも10％、または1〜5％もしくは1〜10％もしくは1〜50％もしくは10〜50％を含む、本発明1084の方法。
[本発明1086]
EZの組織化が、ベースラインから少なくとも2％、少なくとも5％、少なくとも10％、約1％〜約50％のEZの構造体の体積の減少を含む、本発明1084の方法。
[本発明1087]
網膜の疾患または障害を治療するまたはその進行を遅らせることが、栄養因子の細胞分泌によって増強される、本発明1001の方法。