【手続補正書】
【提出日】令和3年3月25日(2021.3.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
チロシンキナーゼ受容体B（TrkB））をコードする第１のコード配列に作動可能に連結されたプロモーター、およびTrkB受容体アゴニストをコードする第２のコード配列を含む遺伝子構築物であって、
前記アゴニストが成熟BDNFまたは成熟NT-4であり、第２のコード配列がTrkB受容体アゴニストの分泌を促進するシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、また前記遺伝子構築物が第１および第２のコード配列の間に配置されたスペーサー配列を含み、前記スペーサー配列は消化されてTrkB受容体とアゴニストを別々の分子として産生するように構成されるペプチドスペーサーをコードする遺伝子構築物を含む組換えベクターを含む、神経変性障害の治療、予防、または改善に使用するための組成物。
【請求項２】
前記遺伝子構築物がウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメント（WHPE）をコードするヌクレオチド配列を含み、場合により前記WHPEは実質的に配列番号57または58に示される核酸配列、もしくは配列番号57または58と少なくとも65％の配列同一性を有する断片または変異体を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
ポリA鎖をコードするヌクレオチド配列を含み、場合により前記ポリA鎖は実質的に配列番号59に記載の核酸配列、もしくは配列番号59と少なくとも65％の配列同一性を有する断片または変異体を含む、請求項１または請求項２のいずれかに記載の組成物。
【請求項４】
プロモーターがヒトシナプシンI（SYN I）プロモーターであり、場合により前記プロモーターが実質的に配列番号1に記載のヌクレオチド配列、もしくは配列番号1と少なくとも65％の配列同一性を有する断片または変異体を含む、請求項１〜３のいずれかに記載の組成物。
【請求項５】
プロモーターがCAGプロモーターであり、場合により前記プロモーターが実質的に配列番号2、3または48に記載のヌクレオチド配列、もしくは配列番号2、3または48と少なくとも65％の配列同一性を有する断片または変異体を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記スペーサー配列が、ウイルスペプチドスペーサー配列、より好ましくはウイルス2Aペプチドスペーサー配列を含み、コードする、請求項１〜５のいずれかに記載の組成物。
【請求項７】
前記ペプチドスペーサー配列が、配列番号4に示されるアミノ酸配列、または配列番号4と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項１〜６のいずれかに記載の組成物。
【請求項８】
前記スペーサー配列が、配列番号5に示されるヌクレオチド配列、または配列番号5と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記ペプチドスペーサー配列が、配列番号6に示されるアミノ酸配列、または配列番号6と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記スペーサー配列が、配列番号7に示されるヌクレオチド配列、または配列番号7と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記ペプチドスペーサー配列が、配列番号8に示されるアミノ酸配列、または配列番号8と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記第１のコード配列が、TrkBのヒト正準アイソフォームをコードするヌクレオチド配列を含み、前記TrkBの正準アイソフォームは、配列番号9に示されるアミノ酸配列、または配列番号9と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項１〜１１のいずれかに記載の組成物。
【請求項１３】
前記第１のコード配列が、配列番号10に示されるヌクレオチド配列、または配列番号10と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項１〜１２のいずれかに記載の組成物。
【請求項１４】
前記第１のコード配列が、TrkBのアイソフォーム4をコードするヌクレオチド配列を含む、請求項１〜１３のいずれかに記載の組成物。
【請求項１５】
TrkBのアイソフォーム4が、配列番号11に示されるアミノ酸配列、または配列番号11と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
前記第１のコード配列が、配列番号12に示されるヌクレオチド配列、または配列番号12と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項１４または請求項１５のいずれかに記載の組成物。
【請求項１７】
前記第１のコード配列が、配列番号9に従ったヌクレオチド配列を含み、配列番号9の位置516、701、705、706および／または816の１つ以上のチロシン残基が異なるアミノ酸残基に改変されている、請求項１〜１６のいずれかに記載の組成物。
【請求項１８】
配列番号9の位置516、701、705、706および／または816の少なくとも２つ、３つまたは４つのチロシン残基が異なるアミノ酸残基に改変されている、請求項１７に記載の組成物。
【請求項１９】
配列番号9の位置516、701、705、706および／または816の５つすべてのチロシン残基が異なるアミノ酸残基に改変されている、請求項１８に記載の組成物。
【請求項２０】
前記または各チロシン残基が、グルタミン酸に改変されている、請求項１７〜１９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２１】
前記TrkB受容体の改変型が、配列番号13に示されるアミノ酸配列、または配列番号13と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項１７〜２０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項２２】
前記第１のコード配列が、配列番号14に示されるヌクレオチド配列、または配列番号14と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項２１に記載の組成物。
【請求項２３】
前記第２のコード配列がニューロトロフィン-4（NT-4）をコードし、該NT-4が配列番号49または55に示されるアミノ酸配列、または配列番号49または55と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含み、および／または前記第２のコード配列が、配列番号50または56に示されるヌクレオチド配列、または配列番号50または56と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項１〜２２のいずれかに記載の組成物。
【請求項２４】
前記第２のコード配列が、成熟BDNFをコードするヌクレオチド配列を含む、請求項１〜２３に記載の組成物。
【請求項２５】
前記成熟BDNFが、配列番号18に記載のアミノ酸配列、または配列番号18と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項２４に記載の組成物。
【請求項２６】
前記第２のコード配列が、配列番号19に記載のヌクレオチド配列、または配列番号19と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項２５に記載の組成物。
【請求項２７】
前記第２のコード配列が、TrkB受容体アゴニストのシグナルペプチド、最も好ましくはBDNFのシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、請求項１〜２６のいずれかに記載の組成物。
【請求項２８】
前記ヌクレオチド配列がBDNFの正準シグナルペプチドをコードし、
前記第２のコード配列が、配列番号20に記載のアミノ酸配列、または配列番号20と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含むシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む、請求項２７に記載の組成物。
【請求項２９】
前記第２のコード配列が、配列番号21に記載のヌクレオチド配列、または配列番号21と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項２７に記載の組成物。
【請求項３０】
前記第２のコード配列が、配列番号23、25、27または29に記載のいずれか１つのシグナル配列ペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、または前記シグナルペプチドが、配列番号22、24、26、または28に記載のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項１〜２９のいずれかに記載の組成物。
【請求項３１】
前記第２のコード配列が、配列番号31、33、35、37、39、41、43、45、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89、91、93、95、97、99、101または103に記載のいずれか１つのシグナル配列ペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み；または前記シグナルペプチドが、配列番号30、32、34、36、38、40、42、44、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90、92、94、96、98、100、または102に記載のいずれか１つのアミノ酸配列を含む、請求項１〜３０のいずれかに記載の組成物。
【請求項３２】
前記構築物が、配列番号107または108に記載されているヌクレオチド配列、または配列番号107または108と少なくとも65％の配列同一性を有する断片もしくは変異体を含む、請求項１〜３１のいずれかに記載の組成物。
【請求項３３】
前記ベクターが組換えAAV（rAAV）ベクターである、請求項１〜３２のいずれかに記載の組成物。
【請求項３４】
前記rAAVが、AAV-1、AAV-2、AAV-3A、AAV-3B、AAV-4、AAV-5、AAV-6、AAV-7、AAV-8、AAV-9、AAV-10、またはAAV-11である、請求項４０に記載の組成物。
【請求項３５】
前記rAAVがrAAV血清型-2である、請求項３４に記載の組成物。
【請求項３６】
前記神経変性障害が、アレキサンダー病、アルパーズ病、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ALS）、毛細血管拡張性運動失調症、ニューロンセロイド脂褐素症、バッテン病、牛海綿状脳症（BSE）、カナバン病、脳性麻痺、コケイン症候群、大脳皮質基底核変性症、クロイツフェルト・ヤコブ病、前頭側頭葉変性症、ゴーシェ病、ハンチントン病、HIV関連認知症、ケネディ病、クラッベ病、レビー小体型認知症、リソソーム蓄積障害、神経ボレリア症、マシャド・ジョセフ病、運動ニューロン病、多系統萎縮症、多発性硬化症、多種スルファターゼ欠損症、ムコリピド症、ナルコレプシー、ニーマン・ピック病C型、ニーマン・ピック病、パーキンソン病、ペリツェウス・メルツバッハ病、ピック病、ポンペ病、原発性側索硬化症、プリオン病、進行性核上性麻痺、レフサム病、サンドホフ病、シルダー病、悪性貧血に続発する亜急性連合性脊髄変性症、スピルマイヤー・フォークト・シェーグレン・バッテン病、脊髄小脳変性症、脊髄性筋萎縮症、スティール・リチャードソン・オルゼウスキー病、脊髄癆、およびテイ・サックス病からなる群から選択される、請求項１〜３５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３７】
前記神経変性障害がアルツハイマー病である、請求項１〜３５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項３８】
ニューロンにおけるタウリン酸化を低減する、請求項３７に記載の組成物。