【手続補正書】
【提出日】令和3年7月9日(2021.7.9)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
遺伝子改変細胞を作製する方法であって、
第１の核酸及び第２の核酸を細胞に送達することを含み、
前記第１の核酸は、第１の細胞外結合ドメインまたはその一部、膜貫通ドメイン、及びシグナル伝達ドメインまたはその一部を含む、第１のポリペプチドをコードし、
前記第２の核酸は、第２の細胞外結合ドメインまたはその一部、膜貫通ドメイン、及びシグナル伝達ドメインまたはその一部を含む、第２のポリペプチドをコードし、
前記第１のポリペプチドのシグナル伝達ドメインが、インターロイキン−２受容体サブユニットガンマ（ＩＬ２Ｒｇ）ドメインを含み、
前記第２のポリペプチドのシグナル伝達ドメインが、インターロイキン−２受容体サブユニットベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインまたはインターロイキン−７受容体サブユニットアルファ（ＩＬ７Ｒａ）ドメインを含み、
前記第１のポリペプチド及び前記第２のポリペプチドは、発現されると、それらがリガンドの存在下で二量体化してシグナル伝達コンピテントポリペプチドヘテロ二量体を作り出すように配置され、
前記リガンドが、第１のポリペプチドの細胞外結合ドメイン及び第２のポリペプチドの細胞外結合ドメインに結合する、方法。
【請求項２】
遺伝子改変細胞を作製する方法であって、
第１の核酸及び第２の核酸を細胞に送達することを含み、
前記第１の核酸は、第１の細胞外結合ドメインまたはその一部、膜貫通ドメイン、及びシグナル伝達ドメインまたはその一部を含む、第１のポリペプチドをコードし、
前記第２の核酸は、第２の細胞外結合ドメインまたはその一部、膜貫通ドメイン、及びシグナル伝達ドメインまたはその一部を含む、第２のポリペプチドをコードし、
前記第１のポリペプチド及び前記第２のポリペプチドが同一のアミノ酸配列を含み、
各ポリペプチドの前記シグナル伝達ドメインが、インターロイキン−２受容体サブユニットガンマ（ＩＬ２Ｒｇ）ドメイン、インターロイキン−２受容体サブユニットベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメイン、インターロイキン−７受容体サブユニットアルファ（ＩＬ７Ｒａ）ドメインまたはトロンボポエチン受容体（ＭＰＬ）ドメインを含み、
前記第１のポリペプチド及び前記第２のポリペプチドは、発現されると、それらがリガンドの存在下で二量体化してシグナル伝達コンピテントポリペプチドホモ二量体を作り出すように配置され、
前記リガンドが、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドのホモ二量体ドメインに結合する、方法。
【請求項３】
前記リガンドが小分子である、請求項１または２の方法。
【請求項４】
前記第１のポリペプチドの膜貫通ドメイン及び前記第２のポリペプチドの膜貫通ドメインが、インターロイキン−２受容体膜貫通ドメイン、インターロイキン−７受容体膜貫通ドメイン、またはトロンボポエチン受容体膜貫通ドメインを含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記第１の細胞外結合ドメインまたはその一部が、ＦＫ５０６結合タンパク質（ＦＫＢＰ）ドメインもしくはその一部及び／またはＦＫＢＰラパマイシン結合（ＦＲＢ）ドメインもしくはその一部を含み、かつ／または
前記第２の細胞外結合ドメインまたはその一部が、ＦＫ５０６結合タンパク質（ＦＫＢＰ）ドメインもしくはその一部及び／またはＦＫＢＰラパマイシン結合（ＦＲＢ）ドメインもしくはその一部を含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記第１の細胞外結合ドメインまたはその一部が、ＦＫ５０６結合タンパク質（ＦＫＢＰ）ドメインまたはその一部を含み、前記第２の細胞外結合ドメインまたはその一部が、ＦＫＢＰラパマイシン結合（ＦＲＢ）ドメインまたはその一部を含む、請求項１及び３〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記第１のポリペプチドが、配列番号７または配列番号１１に示されるアミノ酸配列と、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含み、
前記第２のポリペプチドが、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１２及び配列番号１３のいずれか１つに示されるアミノ酸配列と、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１及び３〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドが、それぞれ配列番号１１、配列番号１３及び配列番号１４のいずれか１つに示されるアミノ酸配列と、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項２〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
前記リガンドが、
ｉ）ラパマイシン、
ｉｉ）ラパログ、任意で、エベロリムス、ＣＣＩ−７７９、Ｃ２０−メタリルラパマイシン、Ｃ１６−（Ｓ）−３−メチルインドールラパマイシン、Ｃ１６−ｉＲａｐ、ＡＰ２１９６７、ミコフェノール酸ナトリウム、塩酸ベニジピン、ＡＰ１９０３、もしくはＡＰ２３５７３、
ｉｉｉ）ラパマイシン代謝産物、または
ｉｖ）ＩＭＩＤクラスの薬物、任意で、サリドマイド、ポマリドマイド、レナリドマイドもしくはＩＭＩＤクラス薬物の類似体である、請求項１〜８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記リガンドが、０．０５ｎＭ〜１００ｎＭの範囲の量、任意で０．０５ｎＭ、０．１ｎＭ、０．５ｎＭ、１．０ｎＭ、５．０ｎＭ、１０．０ｎＭ、１５．０ｎＭ、２０．０ｎＭ、２５．０ｎＭ、３０．０ｎＭ、３５．０ｎＭ、４０．０ｎＭ、４５．０ｎＭ、５０．０ｎＭ、５５．０ｎＭ、６０．０ｎＭ、６５．０ｎＭ、７０．０ｎＭ、７５．０ｎＭ、８０．０ｎＭ、９０．０ｎＭ、９５．０ｎＭ、１００ｎＭの量、もしくは前述の量のうちのいずれか２つによって定義される範囲内の量で存在するか、または提供される、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
前記第１のポリペプチドがヒンジドメインをさらに含み、かつ／または前記第２のポリペプチドがヒンジドメインをさらに含む、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記第１の核酸及び第２の核酸が別々のベクター上に含まれる、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記第１の核酸及び第２の核酸が一つのベクター上にコードされる、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法で作製された、細胞。
【請求項１５】
細胞表面上に、第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドを発現する細胞であって、
前記第１のポリペプチドが、第１の細胞外結合ドメインまたはその一部、膜貫通ドメイン、及びシグナル伝達ドメインまたはその一部を含み、
前記第２のポリペプチドが、第２の細胞外結合ドメインまたはその一部、膜貫通ドメイン、及びシグナル伝達ドメインまたはその一部を含み、
前記第１のポリペプチドのシグナル伝達ドメインが、インターロイキン−２受容体サブユニットガンマ（ＩＬ２Ｒｇ）ドメインを含み、
前記第２のポリペプチドのシグナル伝達ドメインが、インターロイキン−２受容体サブユニットベータ（ＩＬ２Ｒｂ）ドメインまたはインターロイキン−７受容体サブユニットアルファ（ＩＬ７Ｒａ）ドメインを含み、
前記第１のポリペプチド及び前記第２のポリペプチドは、発現されると、それらがリガンドの存在下で二量体化してシグナル伝達コンピテントポリペプチドヘテロ二量体を作り出すように配置され、
前記リガンドが、前記第１のポリペプチドの細胞外結合ドメイン及び前記第２のポリペプチドの細胞外結合ドメインに結合する、細胞。
【請求項１６】
Ｔ細胞または前駆体Ｔ細胞である、請求項１４または１５に記載の細胞。
【請求項１７】
制御性Ｔ細胞である、請求項１６に記載の細胞。
【請求項１８】
ＦＯＸＰ３＋制御性Ｔ細胞である、請求項１４〜１７のいずれか１項に記載の細胞。
【請求項１９】
ＦＯＸＰ３遺伝子座に組み込まれたプロモーターを含み、任意で、前記プロモーターがＭＮＤプロモーターである、請求項１４〜１８のいずれか１項に記載の細胞。
【請求項２０】
インビトロで細胞の内部へのシグナルを活性化する方法であって、
（ｉ）請求項１４〜１９のいずれか１項に記載の細胞を提供すること、ならびに
（ｉｉ）前記細胞をリガンドと接触させ、それによって前記第１及び第２のポリペプチドを二量体化させ、これが前記細胞の内部にシグナルを伝達することを含む、方法。
【請求項２１】
細胞をリガンドと接触させ、それによって前記第１及び第２のポリペプチドを二量体化させ、これが前記細胞の内部にシグナルを伝達することを含む、細胞の内部へのシグナルを活性化する方法に使用するための、請求項１４〜１９のいずれか１項に記載の細胞。
【請求項２２】
（ａ）前記第１及び第２のポリペプチドを発現する細胞の増殖を誘導するシグナルを活性化する、
（ｂ）前記リガンドとの接触に続いて、前記第１及び第２のポリペプチドを発現する細胞が異種細胞集団から選択的に増幅される、かつ／または
（ｃ）前記リガンドが前記第１及び第２のポリペプチドを発現しない細胞において抗増殖効果をもたらす、請求項２０に記載の方法または請求項２１に記載の細胞。
【請求項２３】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の第１のポリペプチド及び／または第２のポリペプチドをコードする、核酸。
【請求項２４】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の第１のポリペプチド及び第２のポリペプチドをコードする、核酸。
【請求項２５】
プロモーターをさらに含み、前記プロモーターが、前記第１のポリペプチドをコードする核酸、及び／または前記第２のポリペプチドをコードする核酸に作動可能に連結されている、請求項２３または２４に記載の核酸。
【請求項２６】
請求項１〜１１のいずれか１項に記載の核酸を含む、ベクター。
【請求項２７】
ウイルスベクターであり、前記ウイルスベクターが任意のレトロウイルスベクター、レンチウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター、フォーミーウイルスベクター、アデノウイルスベクターである、請求項２６に記載のベクター。
【請求項２８】
前記ウイルスベクターがレンチウイルスベクターである、請求項２７に記載のベクター。
【請求項２９】
医薬品として使用される、請求項１５〜１９のいずれか１項に記載の細胞または請求項２６〜２８のいずれか１項に記載のベクター。
【請求項３０】
ラパマイシンまたはラパログの存在下で細胞増殖を増大することに使用される、請求項２６〜２８のいずれか１項に記載のベクター。
【請求項３１】
ラパマイシンまたはラパログに応答して増殖する遺伝子改変細胞を作製することに使用される、請求項２６〜２８のいずれか１項に記載のベクター。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００８２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００８２】
エベロリムス（類似体、誘導体を含み、及びそれらの薬学的に許容される塩を含む。エベロリムスは、ＲＡＤ００１、ゾートレス（Ｚｏｒｔｒｅｓｓ）、セルチカン（Ｃｅｒｔｉｃａｎ）、アフィニトール（Ａｆｉｎｉｔｏｒ）、Ｖｏｔｕｂｉａ、４２−Ｏ−（２−ヒドロキシエチル）ラパマイシン、（１Ｒ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｒ，１６Ｅ，１８Ｒ，１９Ｒ，２１Ｒ，２３Ｓ，２４Ｅ，２６Ｅ，２８Ｅ，３０Ｓ，３２Ｓ，３５Ｒ）−１，１８−ジヒドロキシ−１２−［（２Ｒ）−１−［（１Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）−４−（２−ヒドロキシエトキシ）−３−メトキシシクロヘキシル］プロパン−２−イル］−１９，３０−ジメトキシ−１５，１７，２１，２３，２９，３５−ヘキサメチル−１１，３６−ジオキサ−４−アザトリシクロ［３０．３．１．０４，９］ヘキサトリアコンタ−１６，２４，２６，２８−テトラエン−２，３，１０，１４，２０−ペントンを含み得る）；