【手続補正書】
【提出日】令和3年6月17日(2021.6.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
植物材料から蛋白質単離物を製造するための方法であって、前記植物材料が乾燥重量基準で１０〜５０重量％の蛋白質を含み、
ａ）  植物材料を破砕又は微粉砕して、固体ケークを生成するステップ、
ｂ）  ステップａ）において得た固体ケークを、第１の溶媒の総重量を基準として少なくとも９０重量％の水を含む第１の溶媒を用いて抽出して、第１の固体画分と第１の液体画分との混合物を得るステップ、
ｃ）  第１の固体画分から第１の液体画分を分離するステップ、
ｄ）  ステップｃ）において得た第１の液体画分から蛋白質濃縮物を製造するステップであって、蛋白質濃縮物が、蛋白質濃縮物の総重量を基準として５０〜９０重量％の水を含み、蛋白質が第１の溶媒中に溶解しており、且つ／又は蛋白質が第２の固体画分中に存在し、濃縮物中の蛋白質含量が、濃縮物の総乾燥重量を基準として少なくとも４０重量％である、ステップ、
ｅ）  ステップｄ）において得た蛋白質濃縮物に第２の溶媒を加えるステップであって、第２の溶媒が、第２の溶媒の総重量を基準として少なくとも９０重量％の、１〜５個の炭素原子を有し室温で水に混和性であるアルコールを含む、ステップ、
ｆ）  ステップｅ）において得た混合物を、濾過、沈降、遠心分離、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される技法を用いて、第２の液体画分と第３の固体画分とに分離するステップであって、第３の固体画分の蛋白質含量が、第３の固体画分の総乾燥重量を基準として少なくとも６０重量％である、ステップ、
ｇ）  ステップｆ）において得た第３の固体画分に、第３の溶媒を加えるステップであって、前記第３の溶媒が、第３の溶媒の総重量を基準として少なくとも９０重量％の、最大５個の炭素原子を有する無極性且つ親油性の有機エステルを含み、最大５個の炭素原子を有する無極性且つ親油性の有機エステルが、室温において、第１の溶媒と少なくとも部分的に混和性であり、且つ第２の溶媒と完全に混和性であり、第３の溶媒の量が、全体としての液相が別個の液相に分離しないように選択される、ステップ、
ｈ）  ステップｇ）において得た混合物を、濾過、沈降、遠心分離、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される技法を用いて、第３の液体画分と第４の固体画分とに分離するステップであって、第４の固体画分の蛋白質含量が、第４の固体画分の総乾燥重量を基準として少なくとも９０重量％である、ステップ、
ｉ）  蛋白質単離物を得るために、ステップｈ）において得た第４の固体画分を、真空乾燥、噴霧乾燥、過熱水蒸気乾燥、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される技法に供するステップであって、蛋白質含量が、蛋白質単離物の総乾燥重量を基準として少なくとも９０重量％である、ステップ、
を含む上記方法。
【請求項２】
ステップａ）の前に植物材料を、機械的手段を用いて、好ましくはコールドプレスを用いて、少なくとも部分的に脱脂する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
機械的手段を用いる脱脂ステップにおいて、有機溶媒もミネラル溶媒も用いない、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
植物材料が乾燥重量基準で、少なくとも５重量％、好ましくは少なくとも１０重量％の脂肪、油及び脂質を含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項５】
ステップｂ）における抽出を低剪断条件下で実行する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
ステップｂ）における第１の溶媒が、水である、又は塩を含み任意選択により更なる添加剤を含む水溶液である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
１〜５個の炭素原子を有し室温で水に混和性であるアルコールが、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、イソブタノール、及びこれらの組み合わせからなる群から選択され、１〜５個の炭素原子を有し室温で水に混和性であるアルコールがエタノールである、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
ステップｇ）において用いる第３の溶媒中の、最大５個の炭素原子を有する無極性且つ親油性の有機エステルが酢酸エチルである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
ヘキサンなどの、６個以上の炭素原子を有する有機又はミネラル溶媒を用いずに実行する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
植物材料が、野菜、果実、脂肪種子を含む種子、ダイズ及び他の豆を含む豆類、豆果、ヒヨコマメ、赤、緑、黄及び茶レンズマメを含むエンドウ、穀粒、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１１】
植物材料が、ナタネ、アブラナ、ヒマワリ種子、亜麻仁、ベニバナ種子、綿実を含む脂肪種子、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
蛋白質単離物が、乾物を基準として少なくとも９５重量％の植物系蛋白質を含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
蛋白質単離物が、乾物を基準として少なくとも７０重量％の天然の植物系蛋白質を含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
乾物を基準として、少なくとも７０重量％の天然の植物系蛋白質、１重量％未満の炭水化物、０．２重量％未満のフェノール性化合物を含み、６個以上の炭素原子を有する有機溶媒又はミネラル溶媒を含まない、蛋白質単離物。
【請求項１５】
請求項１３又は１４に記載の蛋白質単離物の、食品における使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
やはり更なる態様では、本発明は、本明細書においてこれまでに規定した、又は本明細書においてこれまでに規定した方法によって得られる蛋白質単離物の、食品における使用に関する。
本発明の一態様を以下に示す。
［発明１］
植物材料から蛋白質単離物を製造するための方法であって、前記植物材料が乾燥重量基準で１０〜５０重量％の蛋白質を含み、
ａ）  植物材料を破砕又は微粉砕して、固体ケークを生成するステップ、
ｂ）  ステップａ）において得た固体ケークを、第１の溶媒の総重量を基準として少なくとも９０重量％の水を含む第１の溶媒を用いて抽出して、第１の固体画分と第１の液体画分との混合物を得るステップ、
ｃ）  第１の固体画分から第１の液体画分を分離するステップ、
ｄ）  ステップｃ）において得た第１の液体画分から蛋白質濃縮物を製造するステップであって、蛋白質濃縮物が、蛋白質濃縮物の総重量を基準として５０〜９０重量％の水を含み、蛋白質が第１の溶媒中に溶解しており、且つ／又は蛋白質が第２の固体画分中に存在し、濃縮物中の蛋白質含量が、濃縮物の総乾燥重量を基準として少なくとも４０重量％である、ステップ、
ｅ）  ステップｄ）において得た蛋白質濃縮物に第２の溶媒を加えるステップであって、第２の溶媒が、第２の溶媒の総重量を基準として少なくとも９０重量％の、１〜５個の炭素原子を有し室温で水に混和性であるアルコールを含む、ステップ、
ｆ）  ステップｅ）において得た混合物を、濾過、沈降、遠心分離、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される技法を用いて、第２の液体画分と第３の固体画分とに分離するステップであって、第３の固体画分の蛋白質含量が、第３の固体画分の総乾燥重量を基準として少なくとも６０重量％である、ステップ、
ｇ）  ステップｆ）において得た第３の固体画分に、第３の溶媒を加えるステップであって、前記第３の溶媒が、第３の溶媒の総重量を基準として少なくとも９０重量％の、最大５個の炭素原子を有する無極性且つ親油性の有機エステルを含み、最大５個の炭素原子を有する無極性且つ親油性の有機エステルが、室温において、第１の溶媒と少なくとも部分的に混和性であり、且つ第２の溶媒と完全に混和性であり、第３の溶媒の量が、全体としての液相が別個の液相に分離しないように選択される、ステップ、
ｈ）  ステップｇ）において得た混合物を、濾過、沈降、遠心分離、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される技法を用いて、第３の液体画分と第４の固体画分とに分離するステップであって、第４の固体画分の蛋白質含量が、第４の固体画分の総乾燥重量を基準として少なくとも９０重量％である、ステップ、
ｉ）  蛋白質単離物を得るために、ステップｈ）において得た第４の固体画分を、真空乾燥、噴霧乾燥、過熱水蒸気乾燥、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される技法に供するステップであって、蛋白質含量が、蛋白質単離物の総乾燥重量を基準として少なくとも９０重量％である、ステップ、
を含む上記方法。
［発明２］
ステップａ）の前に植物材料を、機械的手段を用いて、好ましくはコールドプレスを用いて、少なくとも部分的に脱脂する、発明１に記載の方法。
［発明３］
機械的手段を用いる脱脂ステップにおいて、有機溶媒もミネラル溶媒も用いない、発明２に記載の方法。
［発明４］
植物材料が乾燥重量基準で、少なくとも５重量％、好ましくは少なくとも１０重量％の脂肪、油及び脂質を含む、発明１〜３のいずれかに記載の方法。
［発明５］
ステップｂ）における抽出を低剪断条件下で実行する、発明１〜４のいずれかに記載の方法。
［発明６］
ステップｂ）とｃ）との間に、ステップｂ）において得た第１の固体画分と第１の液体画分との混合物中に存在する脂肪、油及び脂質の少なくとも一部を、好ましくは遠心分離、濾過、又はこれらの組み合わせを用いて除去する、発明１〜５のいずれかに記載の方法。
［発明７］
ステップｃ）における第１の固体画分から第１の液体画分の分離を、遠心分離、濾過、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される技法を用いて実行する、発明１〜６のいずれかに記載の方法。
［発明８］
ステップｄ）において、非蛋白質成分の少なくとも一部を除去するために第１の液体画分を１つ若しくは複数の透析濾過ステップに供し、且つ／又は第１の液体画分を蒸発ステップに供する、発明１〜７のいずれかに記載の方法。
［発明９］
ステップｂ）における第１の溶媒が、水である、又は塩を含み任意選択により更なる添加剤を含む水溶液である、発明１〜８のいずれかに記載の方法。
［発明１０］
１〜５個の炭素原子を有し室温で水に混和性であるアルコールが、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノール、イソブタノール、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、発明１〜９のいずれかに記載の方法。
［発明１１］
１〜５個の炭素原子を有し室温で水に混和性であるアルコールがエタノールである、発明１０に記載の方法。
［発明１２］
ステップｂ）において用いる第１の溶媒対ステップｅ）において用いる第２の溶媒の重量比が１：１０〜１：１、好ましくは１：３〜２：３である、発明１〜１１のいずれかに記載の方法。
［発明１３］
ステップｇ）において用いる第３の溶媒中の、最大５個の炭素原子を有する無極性且つ親油性の有機エステルが酢酸エチルである、発明１〜１２のいずれかに記載の方法。
［発明１４］
ヘキサンなどの、６個以上の炭素原子を有する有機又はミネラル溶媒を用いずに実行する、発明１〜１３のいずれかに記載の方法。
［発明１５］
０〜５０℃、好ましくは１０〜２０℃の温度で実行する、発明１〜１４のいずれかに記載の方法。
［発明１６］
５〜８のｐＨで実行する、発明１〜１５のいずれかに記載の方法。
［発明１７］
ステップｆ）の後且つステップｇ）の前の第３の固体画分を、第２の溶媒と第１の溶媒との混合物を用いる追加の洗浄ステップに、続いて固液分離ステップに供する、発明１〜１６のいずれかに記載の方法。
［発明１８］
ステップｈ）の後且つステップｉ）の前の第４の固体画分を、第３の溶媒を用いた追加の洗浄ステップに、続いて固液分離ステップに供する、発明１〜１７のいずれかに記載の方法。
［発明１９］
植物材料が、野菜、果実、種子、豆果、穀粒、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、発明１〜１８のいずれかに記載の方法。
［発明２０］
植物材料が、ナタネ、アブラナ、ヒマワリ、ベニバナ及び綿実を含む脂肪種子、ダイズを含む豆類、並びに、ヒヨコマメ、赤、緑、黄及び茶レンズマメを含む他の豆、豆果及びエンドウ、並びにこれらの組み合わせからなる群から選択される、発明１〜１９のいずれかに記載の方法。
［発明２１］
植物材料が、ナタネ、アブラナ、ヒマワリ種子、亜麻仁、ベニバナ種子、綿実を含む脂肪種子、及びこれらの組み合わせからなる群から選択され、植物材料が好ましくはナタネである、発明１９に記載の方法。
［発明２２］
蛋白質単離物が、乾物を基準として少なくとも９５重量％の植物系蛋白質を含む、発明１〜２１のいずれかに記載の方法。
［発明２３］
蛋白質単離物が、乾物を基準として少なくとも７０重量％の天然の植物系蛋白質を含む、発明１〜２２のいずれかに記載の方法。
［発明２４］
植物材料が未加工植物材料である、発明１〜２３のいずれかに記載の方法。
［発明２５］
乾物を基準として、少なくとも７０重量％の天然の植物系蛋白質、１重量％未満の炭水化物、０．２重量％未満のフェノール性化合物を含み、６個以上の炭素原子を有する有機溶媒又はミネラル溶媒を含まない、蛋白質単離物。
［発明２６］
発明１〜２４のいずれかに記載の方法によって得られうる、蛋白質単離物。
［発明２７］
乾物を基準として２重量％未満の脂肪、油及び脂質を含む、発明２５又は２６に記載の蛋白質単離物。
［発明２８］
発明２５〜２７のいずれかに記載の蛋白質単離物の、食品における使用。