【手続補正書】
【提出日】令和3年10月29日(2021.10.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
遺伝子改変された造血幹細胞または前駆細胞を含む増幅された集団をｅｘ  ｖｉｖｏで作製する方法であって、前記方法は、
（ａ）複数の造血幹細胞または前駆細胞における内因性遺伝子を破壊し、それにより遺伝子改変された造血幹細胞または前駆細胞を含む集団を作製するステップ；および
（ｂ）前記遺伝子改変された造血幹細胞または前駆細胞を含む集団を、増幅量のアリール炭化水素受容体アンタゴニストと接触させるステップ
を含み、
前記アリール炭化水素受容体アンタゴニストは、式（ＩＶ）または（Ｖ）の化合物：
【化１】
2021502824.tif 000001
（式中：
Ｌは、−ＮＲ７ａ（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−Ｏ（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−Ｃ（Ｓ）（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−Ｓ（Ｏ）０−２（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−ＮＲ７ａＣ（Ｏ）（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−ＮＲ７ａＣ（Ｓ）（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−ＯＣ（Ｏ）（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−ＯＣ（Ｓ）（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ７ａ（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ７ａ（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−Ｃ（Ｏ）Ｏ（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−Ｃ（Ｓ）Ｏ（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ７ａ（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−ＮＲ７ａＳ（Ｏ）２（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、−ＮＲ７ａＣ（Ｏ）ＮＲ７ｂ（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−、および−ＮＲ７ａＣ（Ｏ）Ｏ（ＣＲ８ａＲ８ｂ）ｎ−からなる群から選択され、ここで、Ｒ７ａ、Ｒ７ｂ、Ｒ８ａおよびＲ８ｂは、水素および任意に置換されたＣ１−４アルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され、各ｎは独立して２〜６の整数であり、
Ｒ１は、−Ｓ（Ｏ）２ＮＲ９ａＲ９ｂ、−ＮＲ９ａＣ（Ｏ）Ｒ９ｂ、−ＮＲ９ａＣ（Ｓ）Ｒ９ｂ、−ＮＲ９ａＣ（Ｏ）ＮＲ９ｂＲ９ｃ、−Ｃ（Ｏ）Ｒ９ａ、−Ｃ（Ｓ）Ｒ９ａ、−Ｓ（Ｏ）０−２Ｒ９ａ、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ９ａ、−Ｃ（Ｓ）ＯＲ９ａ、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ９ａＲ９ｂ、−Ｃ（Ｓ）ＮＲ９ａＲ９ｂ、−ＮＲ９ａＳ（Ｏ）２Ｒ９ｂ、−ＮＲ９ａＣ（Ｏ）ＯＲ９ｂ、−ＯＣ（Ｏ）ＣＲ９ａＲ９ｂＲ９ｃ、−ＯＣ（Ｓ）ＣＲ９ａＲ９ｂＲ９ｃ、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたシクロアルキル、および任意に置換されたヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、ここで、Ｒ９ａ、Ｒ９ｂおよびＲ９ｃは、水素、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたヘテロアルキル、任意に置換されたシクロアルキル、および任意に置換されたヘテロシクロアルキルからなる群からそれぞれ独立して選択され、
Ｒ２は、水素および任意に置換されたＣ１−４アルキルからなる群から選択され、
Ｒ３は、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたシクロアルキル、および任意に置換されたヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、
Ｒ４は、水素および任意に置換されたＣ１−４アルキルからなる群から選択され、
Ｒ５は、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたヘテロアルキル、任意に置換されたシクロアルキル、および任意に置換されたヘテロシクロアルキルからなる群から選択され、
Ｒ６は、水素、任意に置換されたアリール、任意に置換されたヘテロアリール、任意に置換されたアルキル、任意に置換されたヘテロアルキル、任意に置換されたシクロアルキル、および任意に置換されたヘテロシクロアルキルからなる群から選択される）
あるいはその塩である、方法。
【請求項２】
前記ステップ（ａ）の前に、前記複数の造血幹細胞または前駆細胞を、アリール炭化水素受容体アンタゴニストと接触させる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ステップ（ａ）は、前記造血幹細胞または前駆細胞を、前記造血幹細胞または前駆細胞における内因性核酸の切断を触媒するヌクレアーゼと接触させることを含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記ヌクレアーゼはＣＲＩＳＰＲ関連タンパク質である、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記ヌクレアーゼはカスパーゼ９である、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記ヌクレアーゼは、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ、メガヌクレアーゼ、またはジンクフィンガーヌクレアーゼである、請求項３に記載の方法。
【請求項７】
前記遺伝子改変された造血幹細胞または前駆細胞を含む集団を患者に移植すると、前記造血幹細胞または前駆細胞、またはそれらの子孫は、前記内因性遺伝子の破壊を少なくとも２日間維持する、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記遺伝子改変された造血幹細胞または前駆細胞を含む集団を患者に移植すると、前記造血幹細胞または前駆細胞、またはそれらの子孫は、前記内因性遺伝子の破壊を少なくとも３日間維持する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記遺伝子改変された造血幹細胞または前駆細胞を含む集団を患者に移植すると、前記造血幹細胞または前駆細胞、またはそれらの子孫は、前記内因性遺伝子の破壊を少なくとも４日間維持する、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記遺伝子改変された造血幹細胞または前駆細胞を含む集団を患者に移植すると、前記造血幹細胞または前駆細胞、またはそれらの子孫は、前記内因性遺伝子の破壊を少なくとも５日間維持する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記遺伝子改変された造血幹細胞または前駆細胞を含む集団を患者に移植すると、前記造血幹細胞または前駆細胞、またはそれらの子孫は、前記内因性遺伝子の破壊を少なくとも６日間維持する、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記遺伝子改変された造血幹細胞または前駆細胞を含む集団を患者に移植すると、前記造血幹細胞または前駆細胞、またはそれらの子孫は、前記内因性遺伝子の破壊を少なくとも７日間維持する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記遺伝子改変された造血幹細胞または前駆細胞を含む集団を患者に移植すると、前記造血幹細胞または前駆細胞、またはそれらの子孫は、前記内因性遺伝子の破壊を少なくとも１４日間維持する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記遺伝子改変された造血幹細胞または前駆細胞を含む集団を患者に移植すると、前記造血幹細胞または前駆細胞、またはそれらの子孫は、前記内因性遺伝子の破壊を少なくとも１６日間維持する、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記導入するステップは、前記造血幹細胞または前駆細胞を、前記ポリヌクレオチドを含むベクターと接触させることを含む、請求項１〜２のいずれかに記載の方法。
【請求項１６】
前記ベクターはウイルスベクターである、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記ウイルスベクターは、アデノウイルス（Ａｄ）、レトロウイルス、ポックスウイルス、アデノ随伴ウイルス、バキュロウイルス、単純ヘルペスウイルス、およびワクシニアウイルスからなる群から選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記レトロウイルスは、レンチウイルスまたはγレトロウイルスである、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記ベクターは転移因子である、請求項１５に記載の方法。
【請求項２０】
前記転移因子は、ピギーバックトランスポゾンまたはスリーピングビューティートランスポゾンである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記アリール炭化水素受容体アンタゴニストは、ＳＲ−１または化合物２である、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記アリール炭化水素受容体アンタゴニストは、化合物（３）、（４）、（５）、（６）、（７）、（８）、（９）、（１０）、（１１）、（１２）、（１３）、（１４）、（１５）、（１６）、（１７）、（１８）、（１９）、（２０）、（２１）、（２２）、（２３）、（２４）、（２５）、（２６）、（２７）、（２８）、（２９）、または（３０）
【化２−１】
2021502824.tif 000002
【化２−２】
2021502824.tif 000003
【化２−３】
2021502824.tif 000004
【化２−４】
2021502824.tif 000005
あるいはその塩である、請求項１〜２１のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
患者の障害の処置に使用するための組成物であって、先行する請求項のいずれかに記載の方法に従って調製された、造血幹細胞または前駆細胞、またはそれらの子孫を含む、組成物。
【請求項２４】
患者の障害を処置するための医薬品の調製における、先行する請求項のいずれかに記載の方法に従って調製された、造血幹細胞または前駆細胞、またはそれらの子孫を含む組成物の使用。
【請求項２５】
前記患者はヒトである、請求項２３に記載の組成物または請求項２４に記載の使用。
【請求項２６】
前記障害はヘモグロビン症障害である、請求項２３に記載の組成物または請求項２４に記載の使用。
【請求項２７】
前記ヘモグロビン症障害は、鎌状赤血球貧血、サラセミア、ファンコニ貧血、再生不良性貧血、およびウィスコット・アルドリッチ症候群からなる群から選択される、請求項２６に記載の組成物または使用。
【請求項２８】
前記障害は免疫不全障害である、請求項２３に記載の組成物または請求項２４に記載の使用。
【請求項２９】
前記免疫不全障害は先天性免疫不全である、請求項２８に記載の組成物または使用。
【請求項３０】
前記免疫不全障害は後天性免疫不全である、請求項２８に記載の組成物または使用。
【請求項３１】
前記後天性免疫不全は、ヒト免疫不全ウイルス性または後天性免疫不全症候群である、請求項３０に記載の組成物または使用。
【請求項３２】
前記障害は代謝障害である、請求項２３に記載の組成物または請求項２４に記載の使用。
【請求項３３】
前記代謝障害は、糖原蓄積症、ムコ多糖症、ゴーシェ病、ハーラー病、スフィンゴリピドーシス、および異染性白質ジストロフィーからなる群から選択される、請求項３２に記載の組成物または使用。
【請求項３４】
前記障害は癌である、請求項２３に記載の組成物または請求項２４に記載の使用。
【請求項３５】
前記癌は血液癌である、請求項３４に記載の組成物または使用。
【請求項３６】
前記癌は、白血病、リンパ腫、多発性骨髄腫、および神経芽細胞腫からなる群から選択される、請求項３４に記載の組成物または使用。
【請求項３７】
前記癌は、急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、多発性骨髄腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、または非ホジキンリンパ腫である、請求項３４に記載の組成物または使用。
【請求項３８】
前記障害は、アデノシンデアミナーゼ欠損症および重症複合免疫不全、高免疫グロブリンＭ症候群、チェディアック・東病、遺伝性リンパ組織球増殖症、大理石骨病、骨形成不全症、貯蔵病、サラセミアメジャー、全身性硬化症、全身性エリテマトーデス、多発性硬化症、および若年性関節リウマチからなる群から選択される障害である、請求項２３に記載の組成物または請求項２４に記載の使用。
【請求項３９】
前記障害は自己免疫障害である、請求項２３に記載の組成物または請求項２４に記載の使用。
【請求項４０】
前記自己免疫障害は、多発性硬化症、ヒト全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、炎症性腸疾患、処置中の乾癬（ｔｒｅａｔｉｎｇ  ｐｓｏｒｉａｓｉｓ）、Ｉ型糖尿病、急性散在性脳脊髄炎、アジソン病、汎発性脱毛症、強直性脊椎炎、抗リン脂質抗体症候群、再生不良性貧血、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性内耳疾患、自己免疫性リンパ増殖症候群、自己免疫性卵巣炎、バロー病、ベーチェット病、水疱性類天疱瘡、心筋症、シャーガス病、慢性疲労免疫機能障害症候群、慢性炎症性脱髄性多発神経炎、クローン病、瘢痕性類天疱瘡、セリアックスプルー・疱疹状皮膚炎、寒冷凝集素症、クレスト症候群、デゴス病、円板状エリテマトーデス、自律神経失調症、子宮内膜症、本態性混合型クリオグロブリン血症、線維筋痛症・線維筋炎、グッドパスチャー症候群、グレーブス病、ギランバレー症候群、橋本甲状腺炎、化膿性汗腺炎、特発性および／または急性型血小板減少性紫斑病、特発性肺線維症、ＩｇＡニューロパチー、間質性膀胱炎、若年性関節炎、川崎病、扁平苔癬、ライム病、メニエール病、混合性結合組織病、重症筋無力症、神経性筋強直症、オプソクローヌス・ミオクローヌス運動失調、視神経炎、オード甲状腺炎、尋常性天疱瘡、悪性貧血、多発性軟骨炎、多発性筋炎および皮膚筋炎、原発性胆汁性肝硬変、結節性多発性動脈炎、多腺性症候群、リウマチ性多発筋痛症、原発性無ガンマグロブリン血症、レイノー現象、ライター症候群、リウマチ熱、サルコイドーシス、強皮症、シェーグレン症候群、全身硬直症候群、高安動脈炎、側頭動脈炎、潰瘍性大腸炎、ぶどう膜炎、血管炎、白斑、外陰部痛、およびウェゲナー肉芽腫症からなる群から選択される、請求項３９に記載の組成物または使用。
【請求項４１】
前記障害は神経障害である、請求項２３に記載の組成物または請求項２４に記載の使用。
【請求項４２】
前記神経障害は、パーキンソン病、アルツハイマー病、多発性硬化症、筋萎縮性側索硬化症、ハンチントン病、軽度認知障害、アミロイドーシス、ＡＩＤＳ関連認知症、脳炎、脳卒中、頭部外傷、てんかん、気分障害、および認知症からなる群から選択される、請求項４１に記載の組成物または使用。
【請求項４３】
前記造血幹細胞または前駆細胞は、前記患者に関して自己である、請求項２３に記載の組成物または請求項２４に記載の使用。
【請求項４４】
前記造血幹細胞または前駆細胞は、前記患者に関して同種である、請求項２３に記載の組成物または請求項２４に記載の使用。
【請求項４５】
前記造血幹細胞または前駆細胞は、前記患者に関してＨＬＡ適合である、請求項４５に記載の組成物または使用。
【請求項４６】
前記造血幹細胞または前駆細胞、またはそれらの子孫は、前記造血幹細胞または前駆細胞の前記患者への注入から２日以上経過した後、造血幹細胞としての機能的ポテンシャルを維持する、先行する請求項のいずれかに記載の組成物または使用。
【請求項４７】
前記造血幹細胞または前駆細胞、またはそれらの子孫は、前記造血幹細胞または前駆細胞の前記患者への注入後、造血組織に局在し、かつ／または血球新生を再確立する、先行する請求項のいずれかに記載の組成物または使用。
【請求項４８】
前記造血幹細胞または前駆細胞は、前記患者に注入されると、巨核球、栓球（ｔｈｒｏｍｂｏｃｙｔｅｓ）、血小板（ｐｌａｔｅｌｅｔｓ）、赤血球、マスト細胞、骨髄芽球、好塩基球、好中球、好酸球、ミクログリア、顆粒球、単球、破骨細胞、抗原提示細胞、マクロファージ、樹状細胞、ナチュラルキラー細胞、Ｔリンパ球、およびＢリンパ球からなる群から選択される細胞集団の回復を引き起こす、先行する請求項のいずれかに記載の組成物または使用。