【手続補正書】
【提出日】令和3年5月26日(2021.5.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
トランケート型非免疫原性ＨＥＲ１ポリペプチド；
トランケート型非免疫原性ＣＤ２０ポリペプチド；
トランケート型非免疫原性ＣＤ５２ポリペプチド；または
トランケート型非免疫原性ＬＮＧＦＲポリペプチド
を含む、細胞表面ポリペプチドを含むポリペプチド構築物。
【請求項２】
前記トランケート型非免疫原性ＨＥＲ１ポリペプチドが、ＨＥＲ１ドメインＩＩＩまたはその断片；およびトランケート型ＨＥＲ１ドメインＩＶを含む、請求項１に記載のポリペプチド構築物。
【請求項３】
前記ＨＥＲ１ドメインＩＩＩが、配列番号２００の配列に対する、少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；かつ、前記トランケート型ＨＥＲ１ドメインＩＶが、配列番号２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、および２０９のいずれか一つの配列に対する、少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項２に記載のポリペプチド構築物。
【請求項４】
配列番号５７の配列に対する、少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載のポリペプチド構築物。
【請求項５】
前記トランケート型非免疫原性ＣＤ２０ポリペプチドが、配列番号１０９の配列に対する、少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のポリペプチド構築物。
【請求項６】
前記トランケート型非免疫原性ＣＤ５２ポリペプチドが、配列番号１４３の配列に対する、少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１に記載のポリペプチド構築物。
【請求項７】
膜貫通ドメインをさらに含む、請求項１〜６のいずれか1項に記載のポリペプチド構築物。
【請求項８】
前記膜貫通ドメインが、非ＨＥＲ１膜貫通ドメインである、請求項７に記載のポリペプチド構築物。
【請求項９】
前記細胞表面ポリペプチドを前記膜貫通ドメインへと共役するためのペプチドリンカーを含む、請求項７または８に記載のポリペプチド構築物。
【請求項１０】
前記膜貫通ドメインが、前記細胞表面ポリペプチドの二量体化を誘導し得る、請求項７〜９のいずれか1項に記載のポリペプチド構築物。
【請求項１１】
前記細胞表面ポリペプチドが、配列番号２１１〜２１７のいずれか１つのアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％の同一性を有するトランケート型非免疫原性ＨＥＲ１ポリペプチドを含む、請求項１０に記載のポリペプチド構築物。
【請求項１２】
前記細胞表面ポリペプチドが、配列番号２１８〜２２０のいずれか１つのアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％の同一性を有するトランケート型非免疫原性ＣＤ２０ポリペプチドを含む、請求項１０に記載のポリペプチド構築物。
【請求項１３】
前記細胞表面ポリペプチドが、配列番号１５６、１５８および１６０のいずれか１つのアミノ酸配列に対する、少なくとも８５％の同一性を有するトランケート型非免疫原性ＬＮＧＦＲポリペプチドを含む、請求項１０に記載のポリペプチド構築物。
【請求項１４】
前記膜貫通ドメインが、相補的な二量体化ドメインと共に、ホモ二量体またはヘテロ二量体を形成しうる、請求項７〜１３のいずれか１項に記載のポリペプチド構築物。
【請求項１５】
前記膜貫通ドメインが、少なくとも１つのシステイン残基を含む、請求項７〜１４のいずれか１項に記載のポリペプチド構築物。
【請求項１６】
前記膜貫通ドメインが、グリコホリンＡ膜貫通ドメインまたはその断片もしくは変異体；グリコホリンＡ−インテグリンβ３キメラ膜貫通ドメインまたはその断片もしくは変異体；またはＣＤ３ゼータ膜貫通ドメインを含む、請求項７〜１５のいずれか１項に記載のポリペプチド構築物。
【請求項１７】
ＨＥＲ１ドメインＩＩＩとトランケート型ＨＥＲ１ドメインＩＶとからなるトランケート型非免疫原性ＨＥＲ１ポリペプチドであって、抗ＨＥＲ１抗体に結合するトランケート型非免疫原性ＨＥＲ１ポリペプチドと；
ＣＤ２８膜貫通ドメインと；
前記トランケート型非免疫原性ＨＥＲ１ポリペプチドを、前記ＣＤ２８膜貫通ドメインへと共役するためのペプチドリンカーと
を含む、請求項１〜４、７〜９および１１のいずれか１項に記載のポリペプチド構築物。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか１項に記載のポリペプチド構築物をコードするポリヌクレオチド。
【請求項１９】
請求項１８に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
【請求項２０】
請求項１８に記載のポリヌクレオチドを含む操作細胞。
【請求項２１】
ＩＬ−１５またはその断片もしくは変異体；およびＩＬ−１５Ｒαまたはその断片もしくは変異体を含有する膜結合のＩＬ−１５をさらに含む、請求項２０に記載の操作細胞。
【請求項２２】
対象における遺伝子操作細胞の活性を調節する方法であって、
前記対象が前記細胞を提供されており、
当該方法が、結合しそれによって前記細胞の活性を調節するのに十分な量で、結合パートナーを前記対象へ提供するステップを含み、
前記結合パートナーが、前記遺伝子操作細胞により発現される請求項１の細胞表面ポリペプチドに結合し得る、方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４８０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４８０】
本明細書では、本開示の好ましい実施形態を示し、それらについて記載してきたが、当業者には、このような実施形態が、例だけを目的として提示されていることが明らかであろう。今や、本開示から逸脱しない限りにおいて、当業者は、多数の変更、変化、および代用に想到するであろう。本明細書で記載される実施形態、またはこれらの実施形態、もしくはその中で記載される態様のうちの１または複数の組合せに対する、多様な代替物を、本開示の実施において利用しうることを理解されたい。以下の特許請求の範囲は、本開示の範囲を規定するものであり、これらの特許請求の範囲の範囲内にある方法および構造、ならびにそれらの均等物は、その対象となることが意図される。
本発明は以下の態様を含み得る。
［１］
少なくともＨＥＲ１ドメインＩＩＩまたはその断片と、トランケート型ＨＥＲ１ドメインＩＶとからなるトランケート型非免疫原性ＨＥＲ１ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドであって、前記ＨＥＲ１ポリペプチドが、抗ＨＥＲ１抗体に結合し、
前記ＨＥＲ１ポリペプチドが、操作細胞内で発現される、
ポリヌクレオチド。
［２］
前記トランケート型ＨＥＲ１ドメインＩＶが、前記ＨＥＲ１ドメインＩＶのうちの、少なくとも１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％のトランケーションを含む、請求項１に記載のポリヌクレオチド。
［３］
前記トランケート型ＨＥＲ１ドメインＩＶが、配列番号２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、および２０９に示される配列に対する、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または９９．５％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、請求項１に記載のポリヌクレオチド。
［４］
前記トランケート型ＨＥＲ１ドメインＩＶが、配列番号２０３、２０４、２０５、２０６、２０７、２０８、および２０９に示される配列を含むポリペプチド配列を含む、請求項３に記載のポリヌクレオチド。
［５］
前記ＨＥＲ１ドメインＩＩＩまたはその断片が、配列番号２００に示される配列に対する、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または９９．５％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、請求項１に記載のポリヌクレオチド。［６］
前記ＨＥＲ１ドメインＩＩＩが、配列番号２００に示される配列を含むポリペプチド配列を含む、請求項５に記載のポリヌクレオチド。
［７］
ＣＤ２８膜貫通ドメインと、前記ＨＥＲ１ポリペプチドを、前記ＣＤ２８膜貫通ドメインへと共役するためのペプチドリンカーとをさらにコードする、請求項１から６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
［８］
配列番号５７に示される配列を含むポリペプチド配列を含むポリペプチド構築物をコードする、請求項７に記載のポリヌクレオチド。
［９］
前記抗ＨＥＲ１抗体が、リツキシマブ、セツキシマブ、フツキシマブ、デパツキシズマブ、イムガツズマブ、ラプリツキシマブ、マツズマブ、ネシツムマブ、ニモツズマブ、パニツムマブ、およびザルツムマブのうちの少なくとも１つを含む、請求項１から８のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
［１０］
抗ＣＤ２０抗体に結合するトランケート型非免疫原性ＣＤ２０ポリペプチド
をコードするポリヌクレオチドであって、
前記トランケート型非免疫原性ＣＤ２０ポリペプチドが、内因性受容体に結合しない、ポリヌクレオチド。
［１１］
前記ＣＤ２０ポリペプチドが、配列番号１０９に示される配列に対する、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または９９．５％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、請求項１０に記載のポリヌクレオチド。
［１２］
前記ＣＤ２０ポリペプチドが、配列番号１０９の配列を含むポリペプチド配列を含む、請求項１０に記載のポリヌクレオチド。
［１３］
前記ＣＤ２０ポリペプチドが、天然ＣＤ２０の、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％の結合効率で、前記抗ＣＤ２０抗体に結合する、請求項１０から１２のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
［１４］
前記抗ＣＤ２０抗体が、リツキシマブ、トシツモマブ、ベルツズマブ、アフツズマブ、ブロンツベトマブ、およびオビヌツズマブのうちの少なくとも１つを含む、請求項１３に記載のポリヌクレオチド。
［１５］
抗ＣＤ５２抗体に結合するトランケート型非免疫原性ＣＤ５２ポリペプチド
をコードするポリヌクレオチドであって、
前記トランケート型非免疫原性ＣＤ５２ポリペプチドが、内因性受容体に結合せず、
前記非免疫原性ＣＤ５２ポリペプチドが、操作細胞内で発現される、
ポリヌクレオチド。
［１６］
前記ＣＤ５２ポリペプチドが、配列番号１４３に示される配列に対する、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または９９．５％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、請求項１５に記載のポリヌクレオチド。
［１７］
前記ＣＤ５２ポリペプチドが、配列番号１４３に示される配列を含むポリペプチド配列を含む、請求項１６に記載のポリヌクレオチド。
［１８］
少なくとも１つの異種遺伝子をコードする、少なくとも１つの配列をさらに含む細胞内で発現される、請求項１０から１７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
［１９］
前記少なくとも１つの異種遺伝子が、誘導性プロモーターによりモジュレートされる、請求項１８に記載のポリヌクレオチド。
［２０］
前記少なくとも１つの異種遺伝子が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、およびサイトカインのうちの少なくとも１つを含む、請求項１８に記載のポリヌクレオチド。
［２１］
前記少なくとも１つの異種遺伝子が、ＣＡＲを含み、前記ＣＡＲが、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＢＣＭＡ、ＣＤ４４、α−葉酸受容体、ＣＡＩＸ、ＣＤ３０、ＲＯＲ１、ＣＥＡ、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−４０、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、葉酸結合性タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ＫＤＲ、ＥＤＢ−Ｆ、メソテリン、ＣＤ２２、ＥＧＦＲ、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−１６、ＭＡＧＥ−Ａ１、ｈ５Ｔ４、ＰＳＭＡ、ＴＡＧ−７２、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１２３、およびＶＥＧＦ−Ｒ２のうちの少なくとも１つに結合する、請求項２０に記載のポリヌクレオチド。
［２２］
前記少なくとも１つの異種遺伝子が、サイトカインを含む、請求項１８から２０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
［２３］
前記サイトカインが、ＩＬ−１５、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−２１、およびＩＬ−１５とＩＬ−ＩＬ−１５Ｒαとの融合体のうちの少なくとも１つを含む、請求項２２に記載のポリヌクレオチド。
［２４］
前記サイトカインが、分泌形態である、請求項２３に記載のポリヌクレオチド。
［２５］
前記サイトカインが、膜結合形態である、請求項２３に記載のポリヌクレオチド。
［２６］
請求項１０から２５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
［２７］
レンチウイルスベクター、レトロウイルスベクター、または非ウイルスベクターである、請求項２６に記載のベクター。
［２８］
前記非ウイルスベクターが、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾンである、請求項２７に記載のベクター。
［２９］
ゲノム編集により、操作細胞へと組み込まれる、請求項１０から２５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
［３０］
前記ゲノム編集が、少なくとも部位特異的セリンリコンビナーゼ系の使用を含む、請求項２９に記載のポリヌクレオチド。
［３１］
請求項１０から２５および２９から３０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含む操作細胞。
［３２］
Ｔ細胞またはＮＫ細胞である、請求項３１に記載の操作細胞。
［３３］
細胞表面ポリペプチドと、膜貫通二量体化ドメインと
を含むポリペプチド構築物であって、
前記膜貫通二量体化ドメインが、前記細胞表面ポリペプチドの二量体化を誘導し、
前記細胞表面ポリペプチドが、所定の抗体またはその変異体もしくは断片に結合する、ポリペプチド構築物。
［３４］
前記細胞表面ポリペプチドが、ＨＥＲ１ポリペプチド、ＬＮＧＦＲポリペプチド、ＣＤ２０ポリペプチド、またはＣＤ５２ポリペプチドのうちの少なくとも１つを含む、請求項３３に記載のポリペプチド構築物。
［３５］
前記細胞表面ポリペプチドが、ＨＥＲ１ポリペプチドを含み、前記ＨＥＲ１ポリペプチドが、配列番号２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、または２１７に示される配列に対する、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または９９．５％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、請求項３４に記載のポリペプチド構築物。
［３６］
前記ＨＥＲ１ポリペプチドが、配列番号２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、または２１７に示される配列を含むポリペプチド配列を含む、請求項３５に記載のポリペプチド構築物。
［３７］
前記細胞表面ポリペプチドが、ＣＤ２０ポリペプチドを含み、前記ＣＤ２０ポリペプチドが、配列番号２１８、配列番号２１９、または配列番号２２０に示される配列に対する、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または９９．５％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、請求項３４に記載のポリペプチド構築物。
［３８］
前記ＣＤ２０ポリペプチドが、配列番号２１８、配列番号２１９、または配列番号２２０に示される配列を含むポリペプチド配列を含む、請求項３７に記載のポリペプチド構築物。
［３９］
前記細胞表面ポリペプチドが、ＬＮＧＦＲポリペプチドを含み、前記ＬＮＧＦＲポリペプチドが、配列番号１５６、配列番号１５８、または配列番号１６０に示される配列に対する、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または９９．５％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、請求項３４に記載のポリペプチド構築物。
［４０］
前記細胞表面ポリペプチドが、ＬＮＧＦＲポリペプチドを含み、前記ＬＮＧＦＲポリペプチドが、配列番号１５６、配列番号１５８、または配列番号１６０に示される配列に対する、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または９９．５％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、請求項３４に記載のポリペプチド構築物。
［４１］
前記細胞表面ポリペプチドが、内因性受容体に結合しない、請求項３３から４０のいずれか一項に記載のポリペプチド構築物。
［４２］
前記膜貫通二量体化ドメインが、相補的な二量体化ドメインと共に、ホモ二量体またはヘテロ二量体を形成しうる、請求項３３から４１のいずれか一項に記載のポリペプチド構築物。
［４３］
前記膜貫通二量体化ドメインが、少なくとも１つのシステイン残基を含む、請求項３３から４２のいずれか一項に記載のポリペプチド構築物。
［４４］
前記膜貫通二量体化ドメインが、グリコホリンＡ膜貫通ドメインまたはその断片もしくは変異体、グリコホリンＡ−インテグリンβ３キメラ膜貫通ドメインまたはその断片もしくは変異体、またはＣＤ３ゼータ膜貫通ドメインを含む、請求項３３から４３のいずれか一項に記載のポリペプチド構築物。
［４５］
前記細胞表面ポリペプチドが、少なくともＨＥＲ１ポリペプチドを含む、請求項４４に記載のポリペプチド構築物。
［４６］
操作細胞内で発現される、請求項３３から４５のいずれか一項に記載のポリペプチド構築物。
［４７］
前記操作細胞が、動物細胞である、請求項４６に記載のポリペプチド構築物。
［４８］
前記動物細胞が、ヒト細胞である、請求項４７に記載のポリペプチド構築物。
［４９］
前記ヒト細胞が、Ｔ細胞またはＮＫ細胞である、請求項４８に記載のポリペプチド構築物。
［５０］
前記操作細胞が、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポザーゼをさらに含む、請求項４６から４９のいずれか一項に記載のポリペプチド構築物。
［５１］
前記操作細胞が、少なくとも１つの、さらなる外因性ポリペプチドをさらに発現する、請求項４６から５０のいずれか一項に記載のポリペプチド構築物。
［５２］
前記操作細胞が、少なくとも１つの、外因性受容体ポリペプチドまたはその断片をさらに発現する、請求項４６から５０のいずれか一項に記載のポリペプチド構築物。
［５３］
前記操作細胞が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、およびサイトカインのうちの少なくとも１つをさらに発現する、請求項４６から５０のいずれか一項に記載のポリペプチド構築物。
［５４］
前記操作細胞が、少なくとも１つのＣＡＲをさらに発現し、前記ＣＡＲが、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＢＣＭＡ、ＣＤ４４、α−葉酸受容体、ＣＡＩＸ、ＣＤ３０、ＲＯＲ１、ＣＥＡ、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−４０、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、葉酸結合性タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ＫＤＲ、ＥＤＢ−Ｆ、メソテリン、ＣＤ２２、ＥＧＦＲ、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−１６、ＭＡＧＥ−Ａ１、ｈ５Ｔ４、ＰＳＭＡ、ＴＡＧ−７２、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１２３、およびＶＥＧＦ−Ｒ２のうちの少なくとも１つに結合する、請求項５３に記載のポリペプチド構築物。
［５５］
前記操作細胞が、少なくとも１つの組換えサイトカインをさらに発現する、請求項５２から５３のいずれか一項に記載のポリペプチド構築物。
［５６］
前記組換えサイトカインが、ＩＬ−１５、ｍｂＩＬ−１５、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、またはＩＬ−２１である、請求項５５に記載のポリペプチド構築物。
［５７］
ゲノム編集により、前記操作細胞へと組み込まれたポリヌクレオチドによりコードされる、請求項４６から５６のいずれか一項に記載のポリペプチド構築物。
［５８］
前記ゲノム編集が、少なくとも部位特異的セリンリコンビナーゼ系の使用を含む、請求項５７に記載のポリペプチド構築物。
［５９］
前記細胞表面ポリペプチドを、前記膜貫通二量体化ドメインと融合させるリンカーを含む、請求項３３から５８のいずれか一項に記載のポリペプチド構築物。
［６０］
請求項３３から５９のいずれか一項に記載のポリペプチド構築物を含む、ポリペプチドのホモ二量体またはヘテロ二量体。
［６１］
膜貫通二量体化ドメインと融合させた非免疫原性細胞表面ポリペプチド
を含むポリペプチド構築物をコードするポリヌクレオチドであって、前記膜貫通二量体化ドメインが、前記細胞表面ポリペプチドの二量体化を誘導する、
ポリヌクレオチド。
［６２］
前記細胞表面ポリペプチドが、内因性受容体に結合しない、請求項６１に記載のポリヌクレオチド。
［６３］
前記細胞表面ポリペプチドが、任意の内因性シグナル伝達機能またはトラフィッキング機能を含有しない、請求項６１に記載のポリヌクレオチド。
［６４］
少なくとも１つの異種遺伝子をコードする、少なくとも１つの配列をさらに含む細胞内で発現された、請求項６１から６３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
［６５］
前記少なくとも１つの異種遺伝子が、誘導性プロモーターによりモジュレートされる、請求項６４に記載のポリヌクレオチド。
［６６］
前記少なくとも１つの異種遺伝子が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、およびサイトカインのうちの少なくとも１つを含む、請求項６４に記載のポリヌクレオチド。
［６７］
前記少なくとも１つの異種遺伝子が、前記ＣＡＲを含み、前記ＣＡＲが、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＢＣＭＡ、ＣＤ４４、α−葉酸受容体、ＣＡＩＸ、ＣＤ３０、ＲＯＲ１、ＣＥＡ、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−４０、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、葉酸結合性タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ＫＤＲ、ＥＤＢ−Ｆ、メソテリン、ＣＤ２２、ＥＧＦＲ、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−１６、ＭＡＧＥ−Ａ１、ｈ５Ｔ４、ＰＳＭＡ、ＴＡＧ−７２、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１２３、およびＶＥＧＦ−Ｒ２のうちの少なくとも１つに結合する、請求項６６に記載のポリヌクレオチド。
［６８］
前記少なくとも１つの異種遺伝子が、サイトカインを含む、請求項６６から６７のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
［６９］
前記サイトカインが、ＩＬ−１５、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＩＬ−２１、およびＩＬ−１５とＩＬ−ＩＬ−１５Ｒαとの融合体のうちの少なくとも１つを含む、請求項６８に記載のポリヌクレオチド。
［７０］
前記サイトカインが、分泌形態である、請求項６８に記載のポリヌクレオチド。
［７１］
前記サイトカインが、膜結合形態である、請求項６８に記載のポリヌクレオチド。
［７２］
２Ａ、ＧＳＧ−２Ａ、ＧＳＧリンカー（配列番号１６）、ＳＧＳＧリンカー（配列番号１８）、フューリンリンク変異体、およびそれらの誘導体を含むポリペプチドリンカーをコードする、少なくとも１つの配列を含む、請求項６１から７１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
［７３］
前記２Ａリンカーが、ｐ２Ａリンカー、Ｔ２Ａリンカー、Ｆ２Ａリンカー、またはＥ２Ａリンカーである、請求項７２に記載のポリヌクレオチド。
［７４］
前記ポリペプチド構築物が、細胞を濃縮するか、細胞を選択するか、または前記細胞表面ポリペプチドを発現する細胞における細胞死を誘導するタグとして作用する、請求項６１から７３のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
［７５］
前記細胞表面ポリペプチドが、ＨＥＲ１ポリペプチド、ＬＮＧＦＲポリペプチド、ＣＤ２０ポリペプチド、およびＣＤ５２ポリペプチドのうちの少なくとも１つを含む、請求項６１から７４のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
［７６］
前記膜貫通二量体化ドメインが、グリコホリンＡ膜貫通ドメインまたはその断片もしくは変異体、グリコホリンＡ−インテグリンβ３キメラ膜貫通ドメインまたはその断片もしくは変異体、またはＣＤ３ゼータ膜貫通ドメインを含む、請求項６１から７５のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
［７７］
請求項６１から７６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
［７８］
レンチウイルスベクター、レトロウイルスベクター、または非ウイルスベクターである、請求項７７に記載のベクター。
［７９］
前記非ウイルスベクターが、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ  Ｂｅａｕｔｙトランスポゾンである、請求項７８に記載のベクター。
［８０］
ゲノム編集により、操作細胞へと組み込まれる、請求項６１から７６のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド。
［８１］
前記ゲノム編集が、少なくとも部位特異的セリンリコンビナーゼ系の使用を含む、請求項８０に記載のポリヌクレオチド。
［８２］
対象における遺伝子操作細胞の活性を調節する方法であって、
前記対象へ、膜貫通二量体化ドメインと融合させた細胞表面ポリペプチドを含むポリペプチド構築物をコードする、ある量の遺伝子操作細胞を提供するステップであって、前記膜貫通二量体化ドメインが、前記細胞表面ポリペプチドの二量体化を誘導し、前記細胞表面ポリペプチドが、所定の結合パートナーまたはその変異体もしくは断片に結合する、ステップと；
前記遺伝子操作細胞に結合し、それにより、前記遺伝子操作細胞の活性を調節するのに十分な量で、前記対象へ、前記所定の結合パートナーを提供するステップと
を含む方法。
［８３］
前記細胞表面ポリペプチドが、非免疫原性ポリペプチドである、請求項８２に記載の方法。
［８４］
前記細胞表面ポリペプチドが、ＨＥＲ１ポリペプチド、ＬＮＧＦＲポリペプチド、ＣＤ２０ポリペプチド、およびＣＤ５２ポリペプチドのうちの少なくとも１つを含む、請求項８２から８３のいずれか一項に記載の方法。
［８５］
前記細胞表面ポリペプチドが、内因性受容体に結合しない、請求項８２から８４のいずれか一項に記載の方法。
［８６］
前記膜貫通二量体化ドメインが、相補的な二量体化ドメインと共に、ホモ二量体またはヘテロ二量体を形成しうる、請求項８２から８５のいずれか一項に記載の方法。
［８７］
前記膜貫通二量体化ドメインが、少なくとも１つのシステイン残基を含む、請求項８２から８５のいずれか一項に記載の方法。
［８８］
前記膜貫通二量体化ドメインが、グリコホリンＡ膜貫通ドメインまたはその断片もしくは変異体、グリコホリンＡ−インテグリンβ３キメラ膜貫通ドメインまたはその断片もしくは変異体、またはＣＤ３ゼータ膜貫通ドメインを含む、請求項８２から８５のいずれか一項に記載の方法。
［８９］
前記結合パートナーが、抗体、またはその細胞表面ポリペプチド結合性領域を含む、請求項８２から８８のいずれか一項に記載の方法。
［９０］
前記抗体が、モノクローナル抗体、ｓｃＦｖ、ｓｃＦａｂ、ダイアボディー、およびラクダ科動物抗体のうちの少なくとも１つを含む、請求項８９に記載の方法。
［９１］
前記抗体が、リツキシマブ、セツキシマブ、アレムツズマブ、パニツムマブ、およびネシツムマブのうちの少なくとも１つを含む、請求項８９に記載の方法。
［９２］
前記遺伝子操作細胞が、Ｔ細胞およびＮＫ細胞のうちの少なくとも１つを含む、請求項８２から９１のいずれか一項に記載の方法。
［９３］
前記遺伝子操作細胞のうちの少なくとも１つが、少なくとも１つの、さらなる外因性ポリペプチドをさらに発現する、請求項８２から９２のいずれか一項に記載の方法。
［９４］
前記遺伝子操作細胞のうちの少なくとも１つが、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、およびサイトカインのうちの少なくとも１つをさらに発現する、請求項８２から９２のいずれか一項に記載の方法。
［９５］
前記遺伝子操作細胞のうちの少なくとも１つが、少なくとも１つのＣＡＲをさらに発現し、前記ＣＡＲが、ＣＤ１９、ＣＤ３３、ＢＣＭＡ、ＣＤ４４、α−葉酸受容体、ＣＡＩＸ、ＣＤ３０、ＲＯＲ１、ＣＥＡ、ＥＧＰ−２、ＥＧＰ−４０、ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、葉酸結合性タンパク質、ＧＤ２、ＧＤ３、ＩＬ−１３Ｒ−ａ２、ＫＤＲ、ＥＤＢ−Ｆ、メソテリン、ＣＤ２２、ＥＧＦＲ、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−１６、ＭＡＧＥ−Ａ１、ｈ５Ｔ４、ＰＳＭＡ、ＴＡＧ−７２、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＣＤ１２３、およびＶＥＧＦ−Ｒ２のうちの少なくとも１つに結合する、請求項９４に記載の方法。
［９６］
前記遺伝子操作細胞のうちの少なくとも１つが、少なくとも１つの組換えサイトカインをさらに発現する、請求項９４に記載の方法。
［９７］
前記組換えサイトカインが、ＩＬ−１５、ｍｂＩＬ−１５、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、およびＩＬ−２１のうちの少なくとも１つを含む、請求項９６に記載の方法。
［９８］
前記所定の結合パートナーを、サイトカインストームまたは全身性炎症性応答と関連する、少なくとも１つの症状の軽減を引き起こすのに十分な量で提供する、請求項８２から９７のいずれか一項に記載の方法。
［９９］
前記所定の結合パートナーを、腫瘍溶解症候群と関連する、少なくとも１つの症状の軽減を引き起こすのに十分な量で提供する、請求項８２から９８のいずれか一項に記載の方法。
［１００］
前記ポリペプチド構築物が、ゲノム編集により、前記操作細胞へと組み込まれたポリヌクレオチドによりコードされる、請求項８２から９９のいずれか一項に記載の方法。
［１０１］
前記ゲノム編集が、少なくとも部位特異的セリンリコンビナーゼ系の使用を含む、請求項１００に記載の方法。
［１０２］
請求項１〜２５、２９〜３０、６１〜７６、および８０〜８１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドによりコードされるポリペプチド。
［１０３］
がんを処置する方法であって、対象へ、有効量の、請求項１〜２５、２９〜３０、６１〜７６、および８０〜８１のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含む操作細胞を投与するステップを含む方法。
［１０４］
前記操作細胞上で発現させたポリペプチドへの結合が可能な、少なくとも１つの結合パートナーを投与するステップをさらに含む、請求項１０３に記載の方法。
［１０５］
前記結合パートナーが、抗体である、請求項１０４に記載の方法。
［１０６］
対象における遺伝子操作細胞の活性を調節する方法であって、
前記対象へ、第１のトランケート型非免疫原性ポリペプチドと、第２のトランケート型非免疫原性ポリペプチドとを含むキメラポリペプチドである細胞表面ポリペプチドを含むポリペプチド構築物をコードする、ある量の遺伝子操作細胞を提供するステップであって、前記細胞表面ポリペプチドが、少なくとも１つの所定の結合パートナーまたはその変異体もしくは断片に結合する、ステップと；
前記遺伝子操作細胞に結合し、それにより、前記遺伝子操作細胞の活性を調節するのに十分な量で、前記対象へ、前記所定の結合パートナーを提供するステップと
を含む方法。
［１０７］
前記第１のトランケート型非免疫原性ポリペプチドが、ＥＧＦＲファミリーのメンバーの断片または誘導体を含む、請求項１０６に記載の方法。
［１０８］
前記第２のトランケート型非免疫原性ポリペプチドが、ＥＧＦＲファミリーのメンバーの断片または誘導体を含む、請求項１０６または１０７に記載の方法。
［１０９］
前記第１のトランケート型非免疫原性ポリペプチドが、ＨＥＲ１ポリペプチドを含む、請求項１０６から１０８のいずれか一項に記載の方法。
［１１０］
前記ＨＥＲ１ポリペプチドが、配列番号２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、または２１７に示される配列に対する、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または９９．５％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、請求項１０９に記載の方法。
［１１１］
前記ＨＥＲ１ポリペプチドが、配列番号２１１、２１２、２１３、２１４、２１５、２１６、または２１７に示される配列を含むポリペプチド配列を含む、請求項１１０に記載の方法。
［１１２］
前記ＨＥＲ１ポリペプチドが、配列番号２１１に示される配列を含むポリペプチド配列を含む、請求項１１１に記載の方法。
［１１３］
前記第２のトランケート型非免疫原性ポリペプチドが、ＨＥＲ２ポリペプチド、ＥｒｂＢ３ポリペプチド、またはＥｒｂＢ４ポリペプチドを含む、請求項１０９から１１２のいずれか一項に記載の方法。
［１１４］
前記ポリペプチド構築物が、配列番号８９、配列番号９３、配列番号９７、配列番号１０１、または配列番号１０５に示される配列に対する、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または９９．５％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、請求項１１３に記載の方法。
［１１５］
前記少なくとも１つの所定の結合パートナーが、前記ＨＥＲ１ポリペプチドに結合する、請求項１０９に記載の方法。
［１１６］
前記少なくとも１つの所定の結合パートナーが、リツキシマブ、セツキシマブ、フツキシマブ、デパツキシズマブ、イムガツズマブ、ラプリツキシマブ、マツズマブ、ネシツムマブ、ニモツズマブ、パニツムマブ、およびザルツムマブのうちの少なくとも１つを含む、請求項１１５に記載の方法。
［１１７］
前記少なくとも１つの所定の結合パートナーが、前記第２のトランケート型非免疫原性ポリペプチドに結合する、第２の所定の結合パートナーをさらに含む、請求項１１６に記載の方法。
［１１８］
前記第２のトランケート型非免疫原性ポリペプチドが、ＨＥＲ２ポリペプチドであり、前記第２の所定の結合パートナーが、ペルツズマブである、請求項１１７に記載の方法。
［１１９］
前記ポリペプチド構築物が、シグナルペプチドをさらに含む、請求項１０６に記載の方法。
［１２０］
前記ポリペプチド構築物が、膜貫通ドメインをさらに含む、請求項１０６に記載の方法。
［１２１］
前記膜貫通ドメインが、膜貫通二量体化ドメインを含む、請求項１２０に記載の方法。
［１２２］
前記膜貫通二量体化ドメインが、グリコホリンＡ膜貫通ドメイン、グリコホリンＡ−インテグリンβ３キメラ膜貫通ドメイン、またはＣＤ３ゼータ膜貫通ドメインを含む、請求項１２１に記載の方法。
［１２３］
前記膜貫通二量体化ドメインが、配列番号２６、配列番号２８、配列番号３０、または配列番号３２に示される配列に対する、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または９９．５％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、請求項１２１に記載の方法。
［１２４］
前記膜貫通二量体化ドメインが、配列番号２６、配列番号２８、配列番号３０、または配列番号３２に示されるポリペプチド配列を含む、請求項１２３に記載の方法。
［１２５］
前記第１のトランケート型非免疫原性ポリペプチドが、ＣＤ２０ポリペプチドを含む、請求項１０６に記載の方法。
［１２６］
前記ＣＤ２０ポリペプチドが、配列番号２１８、配列番号２１９、または配列番号２２０に示される配列に対する、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または９９．５％の同一性を有するポリペプチド配列を含む、請求項１２５に記載の方法。
［１２７］
前記ＣＤ２０ポリペプチドが、配列番号２１８、配列番号２１９、または配列番号２２０に示される配列を含むポリペプチド配列を含む、請求項１２６に記載の方法。
［１２８］
前記少なくとも１つの所定の結合パートナーが、リツキシマブ、トシツモマブ、ベルツズマブ、アフツズマブ、ブロンツベトマブ、およびオビヌツズマブのうちの少なくとも１つを含む、請求項１２５から１２７のいずれか一項に記載の方法。
［１２９］
ＨＥＲ１ドメインＩＩＩと、トランケート型ＨＥＲ１ドメインＩＶとからなるトランケート型非免疫原性ＨＥＲ１ポリペプチドであって、抗ＨＥＲ１抗体に結合するＨＥＲ１ポリペプチドと；
ＣＤ２８膜貫通ドメインと；
前記ＨＥＲ１ポリペプチドを、前記ＣＤ２８膜貫通ドメインへと共役するためのペプチドリンカーと
を含むポリペプチド構築物であって、
操作細胞内で発現される、
ポリペプチド構築物。
［１３０］
前記ＨＥＲ１ドメインＩＩＩが、配列番号２００に示される配列を含むポリペプチド配列を含み、前記ＨＥＲ１ドメインＩＶが、配列番号２０３に示される配列を含むポリペプチド配列を含む、請求項１２９に記載のポリペプチド構築物。
［１３１］
前記ＣＤ２８膜貫通ドメインが、配列番号３６に示される配列を含むポリペプチド配列を含み、前記ペプチドリンカーが、Ｇ４Ｓペプチドリンカー（配列番号２２１）を含む、請求項１３０に記載のポリペプチド構築物。
［１３２］
前記Ｇ４Ｓペプチドリンカー（配列番号２２１）が、配列番号２２に示される配列を含むポリペプチド配列を含む、請求項１３１に記載のポリペプチド構築物。
［１３３］
配列番号５７に示される配列を含むポリペプチド配列を含む、請求項１３２に記載のポリペプチド構築物。
［１３４］
前記抗ＨＥＲ１抗体が、リツキシマブ、セツキシマブ、フツキシマブ、デパツキシズマブ、イムガツズマブ、ラプリツキシマブ、マツズマブ、ネシツムマブ、ニモツズマブ、パニツムマブ、およびザルツムマブのうちの少なくとも１つを含む、請求項１２９から１３３のいずれか一項に記載のポリペプチド構築物。
［１３５］
抗ＣＤ２０抗体に結合するトランケート型非免疫原性ＣＤ２０ポリペプチド
を含むポリペプチド構築物であって、
操作細胞内で発現されるポリペプチド構築物。
［１３６］
配列番号１０９に示される配列に対する、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％、または９９．５％の同一性を有する、請求項１３５に記載のポリペプチド構築物。
［１３７］
配列番号１０９に示される配列を含むポリペプチド配列を含む、請求項１３６に記載のポリペプチド構築物。
［１３８］
前記抗ＣＤ２０抗体が、リツキシマブ、トシツモマブ、ベルツズマブ、アフツズマブ、ブロンツベトマブ、およびオビヌツズマブのうちの少なくとも１つを含む、請求項１３５から１３７のいずれか一項に記載のポリペプチド構築物。