【手続補正書】
【提出日】令和3年7月2日(2021.7.2)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号１６４、１〜１６３、１６５〜４８９および配列番号１６４、１〜１６３、１６５〜４８９と少なくとも８８％相同的なその変異配列からなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなるペプチド、およびその薬学的に許容可能な塩であって；前記変異型が、主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）分子と結合し、および／またはＴ細胞を前記変異型ペプチドと交差反応させ；前記ペプチドが完全長ポリペプチドでない、ペプチド。
【請求項２】
ＭＨＣクラスＩまたはＩＩ分子に結合する能力を有し、前記ＭＨＣに結合した際に、ＣＤ４および／またはＣＤ８Ｔ細胞によって認識されることができるようになる、請求項１に記載のペプチド。
【請求項３】
そのアミノ酸配列が、配列番号１６４、１〜１６３、１６５〜４８９のいずれか１つに記載の一続きのアミノ酸を含んでなる、請求項１または２に記載のペプチドまたはその変異型。
【請求項４】
前記ペプチドまたはその変異型が、８〜１００、好ましくは８〜３０、より好ましくは８〜１６のアミノ酸の全長を有し、最も好ましくは前記ペプチドが、配列番号１６４、１〜１６３、１６５〜４８９のいずれかに記載のアミノ酸配列からなり、またはそれから本質的になる、請求項１〜３のいずれか一項に記載のペプチドまたはその変異型。
【請求項５】
前記ペプチドが、修飾され、および／または非ペプチド結合を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載のペプチドまたはその変異型。
【請求項６】
前記ペプチドが、特にＨＬＡ−ＤＲ抗原関連不変鎖（Ｉｉ）のＮ末端アミノ酸を含んでなる融合タンパク質の一部である、請求項１〜５のいずれか一項に記載のペプチドまたはその変異型。
【請求項７】
ＭＨＣ分子と結合した際に、好ましくは請求項１〜５のいずれか一項に記載のペプチドまたはその変異型である、請求項１〜５のいずれか一項に記載のペプチドまたはその変異型を特異的に認識する、特に可溶性または膜結合抗体である、抗体、好ましくはモノクローナル抗体またはその断片。
【請求項８】
ＭＨＣ分子と結合した際に、請求項１〜５のいずれか一項に記載のペプチドまたはその変異型であり、好ましくは請求項１〜５のいずれか一項に記載のペプチドまたはその変異型である、ＨＬＡリガンドと反応する、Ｔ細胞受容体、好ましくは可溶性または膜結合性、またはその断片。
【請求項９】
前記リガンドアミノ酸配列が、配列番号１６４、１〜１６３、１６５〜４８９のいずれか１つと少なくとも８８％同一であり、または前記リガンドアミノ酸配列が配列番号１６４、１〜１６３、１６５〜４８９のいずれか１つからなる、請求項８に記載のＴ細胞受容体。
【請求項１０】
前記Ｔ細胞受容体が可溶性分子として提供され、任意選択的に、免疫刺激ドメインまたは毒素などのさらなるエフェクター機能を保有する、請求項８または９に記載のＴ細胞受容体。
【請求項１１】
請求項１〜５のいずれか一項に記載のペプチドまたはその変異型、好ましくはＭＨＣ分子と結合している請求項１〜５のいずれか一項に記載のペプチドまたはその変異型を特異的に認識する、アプタマー。
【請求項１２】
請求項１〜５のいずれか一項に記載のペプチドまたはその変異型、請求項７に記載の抗体またはその断片、請求項８または９に記載のＴ細胞受容体またはその断片をコードする核酸であって、任意選択的に異種プロモーター配列または前記核酸を発現する発現ベクターに連結している、核酸。
【請求項１３】
請求項１〜６のいずれか一項に記載のペプチド、請求項７に記載の抗体またはその断片、請求項８または９に記載のＴ細胞受容体またはその断片、または請求項１２に記載の核酸または発現ベクターを含んでなり、好ましくは樹状細胞、Ｔ細胞またはＮＫ細胞などの抗原提示細胞から選択される、組換え宿主細胞。
【請求項１４】
Ｔ細胞を、適切な抗原提示細胞の表面または抗原提示細胞を模倣する人工コンストラクトの表面に発現される抗原負荷ヒトクラスＩまたはＩＩ  ＭＨＣ分子に、前記Ｔ細胞を抗原特異的様式で活性化するのに十分な時間にわたり、生体外で接触させるステップを含んでなり、前記抗原が、請求項１〜４のいずれか一項に記載のペプチドである、活性化Ｔリンパ球を製造するインビトロ法。
【請求項１５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載のアミノ酸配列を含んでなるポリペプチドを提示する細胞を選択的に認識する、請求項１４に記載の方法によって製造される活性化Ｔリンパ球。
【請求項１６】
請求項１〜６のいずれか一項に記載のペプチド、請求項７に記載の抗体またはその断片
、請求項８または９に記載のＴ細胞受容体またはその断片、請求項１１に記載のアプタマー、請求項１２に記載の核酸または発現ベクター、請求項１３に記載の宿主細胞、または請求項１５に記載の活性化Ｔリンパ球、またはコンジュゲートされまたは標識された活性成分からなる群から選択される、少なくとも１つの活性成分と、薬学的に許容可能な担体、および任意選択的に、薬学的に許容可能な賦形剤および／または安定剤を含んでなる医薬組成物。
【請求項１７】
請求項１３に記載の宿主細胞を培養するステップと、前記宿主細胞および／またはその培養液から、ペプチドまたはその変異型、抗体またはその断片、またはＴ細胞受容体またはその断片を単離するステップとを含んでなる、請求項１〜６のいずれか一項に記載のペプチドまたはその変異型、請求７項に記載の抗体またはその断片、または請求項８または９に記載のＴ細胞受容体またはその断片を製造する方法。
【請求項１８】
医薬品で使用するための請求項１〜６のいずれか一項に記載のペプチド、請求項７に記載の抗体またはその断片、請求項８または９に記載のＴ細胞受容体またはその断片、請求項１１に記載のアプタマー、請求項１２に記載の核酸または発現ベクター、請求項１３に記載の宿主細胞、または請求項１５に記載の活性化Ｔリンパ球。
【請求項１９】
請求項１５で定義される活性Ｔ細胞の有効数を患者に投与するステップを含んでなる、その標的細胞が、請求項１〜４のいずれか一項に記載のアミノ酸配列を含んでなるポリペプチドを提示する患者において、標的細胞を死滅させる方法。
【請求項２０】
がんの診断および／または治療で使用するための、またはがんに対する薬剤の製造で使用するための、請求項１〜６のいずれか一項に記載のペプチド、請求項７に記載の抗体またはその断片、請求項８または９に記載のＴ細胞受容体またはその断片、請求項１１に記載のアプタマー、請求項１２に記載の核酸または発現ベクター、請求項１３に記載の宿主細胞、または請求項１５に記載の活性化Ｔリンパ球。
【請求項２１】
前記がんが、ペプチド配列番号１６４、１〜１６３、１６５〜４８９がそれに由来するタンパク質の過剰発現を示す、肺がん（ＮＳＣＬＣおよびＳＣＬＣをはじめとする）、急性骨髄性白血病、乳がん、胆管がん、脳がん、慢性リンパ球性白血病、結腸直腸がん、食道がん、胆嚢がん、胃がん、頭頸部扁上皮がん、肝細胞がん、黒色腫、非ホジキンリンパ腫、卵巣がん、膵臓がん、前立腺がん、腎細胞がん、尿膀胱がん、子宮がん、およびその他の腫瘍の群から選択される、請求項２０に記載の使用。
【請求項２２】
（ａ）溶液または凍結乾燥形態にある、請求項１〜６のいずれか一項に記載のペプチドまたは変異型、請求項７に記載の抗体またはその断片、請求項８または９に記載のＴ細胞受容体またはその断片、請求項１１に記載のアプタマー、請求項１２に記載の核酸または発現ベクター、請求項１３に記載の宿主細胞、または請求項１５に記載の活性化Ｔリンパ球を含有する医薬組成物を含んでなる容器；
（ｂ）任意選択的に、前記凍結乾燥製剤のための希釈剤または再構成溶液を含有する第２の容器；
（ｃ）任意選択的に、配列番号１〜配列番号５３１からなる群から選択される少なくとももう１つのペプチド、および
（ｄ）任意選択的に、（ｉ）溶液の使用、または（ｉｉ）凍結乾燥製剤の再構成および／または使用のための取扱説明書を含んでなるキット。
【請求項２３】
（ｉｉｉ）緩衝液、（ｉｖ）希釈剤、（ｖ）フィルター、（ｖｉ）針、または（ｖ）シリンジの１つまたは複数をさらに含んでなる、請求項２２に記載のキット。
【請求項２４】
ａ）前記個々の患者からの腫瘍サンプルによって提示される腫瘍関連ペプチド（ＴＵＭＡＰ）を同定するステップと；
ｂ）ａ）で同定された前記ペプチドを、正常組織との比較で腫瘍における免疫原性および／または過剰提示について予備選別されたペプチド貯蔵庫と比較するステップと；
ｃ）少なくとも１つのペプチドを、前記患者において同定されたＴＵＭＡＰと一致する前記貯蔵庫から選択するステップと；
ｄ）ステップｃ）に基づいて、個別化ワクチンまたは化合物ベースのまたは細胞療法を作成および／または処方するステップと
を含んでなる、個々の患者のための化合物ベースのおよび／または細胞療法のための個別化抗がんワクチンを生産する方法。
【請求項２５】
前記ＴＵＭＡＰが、
ａ１）前記腫瘍サンプルからの発現データを前記腫瘍サンプルの組織型に対応する正常組織サンプルからの発現データと比較して、前記腫瘍サンプルにおいて過剰発現されまたは異常に発現されるタンパク質を同定するステップと；
ａ２）前記発現データを、前記腫瘍サンプル中のＭＨＣクラスＩ／またはクラスＩＩ分子と結合しているＭＨＣリガンドの配列と相関させて、前記腫瘍によって過剰発現されまたは異常に発現されるタンパク質に由来するＭＨＣリガンドを同定するステップとによって同定される、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
結合ペプチドを前記腫瘍サンプルから単離されたＭＨＣ分子から溶出させて、前記溶出したリガンドを配列決定することで、ＭＨＣリガンドの配列が同定される、請求項２４または２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記腫瘍サンプルの組織型に対応する前記正常組織が、前記同一患者から得られる、請求項２４〜２６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記貯蔵庫に包含される前記ペプチドが、
ａａ．正常組織または組織群と比較して悪性組織で過剰発現される遺伝子を同定するステップを含んでなる、マイクロアレイまたは配列決定ベース発現プロファイリングなどの高度並列法によって、ゲノム規模メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）発現解析を実施するステップと；
ａｂ．ステップａａで検出された、選択的に発現されまたは過剰発現される遺伝子によってコードされる、ペプチドを選択するステップと；
ａｃ．健常ドナーまたは前記患者からのヒトＴ細胞を使用した生体外免疫原性アッセイを含んでなる、前記選択されたペプチドによる生体内Ｔ細胞応答の誘導を判定するステップ；または
ｂａ．ＨＬＡリガンドを前記腫瘍サンプルから質量分析を使用して同定するステップと；
ｂｂ．正常組織または組織群と比較して悪性組織で過剰発現される遺伝子を同定するステップを含んでなる、マイクロアレイまたは配列決定ベース発現プロファイリングなどの高度並列法によって、ゲノム規模メッセンジャーリボ核酸（ｍＲＮＡ）発現解析を実施するステップと；
ｂｃ．前記同定されたＨＬＡリガンドを前記遺伝子発現データと比較するステップと；  ｂｄ．ステップｂｃで検出された、選択的に発現されまたは過剰発現される遺伝子によってコードされる、ペプチドを選択するステップと；
ｂｅ．ステップｂｄから選択されたＴＵＭＡＰを腫瘍組織上で再検出し、健常組織上の検出の欠如または希な検出が、ｍＲＮＡレベルにおける過剰発現の関連性を裏付けるステップと；
ｂｆ．健常ドナーまたは前記患者からのヒトＴ細胞を使用した生体外免疫原性アッセイを含んでなる、前記選択されたペプチドによる生体内Ｔ細胞応答の誘導を判定するステップに基づいて同定される、請求項２４〜２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２９】
前記貯蔵庫に包含される前記ペプチドの免疫原性が、生体外免疫原性アッセイ、個々のＨＬＡ結合についての患者免疫モニタリング、ＭＨＣ多量体染色、ＥＬＩＳＰＯＴアッセイおよび／または細胞内サイトカイン染色を含んでなる方法によって判定される、請求項２４〜２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記貯蔵庫が、配列番号１６４、１〜１６３、１６５〜５３１からなる群から選択される複数のペプチドを含んでなる、請求項２４〜２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３１】
前記個々の患者からの正常な対応する組織と比較して前記腫瘍サンプルに特有の少なくとも１つの変異を同定するステップと、前記ワクチンに包含するために、または細胞療法を作成するために、前記変異に関連があるペプチドを選択するステップとをさらに含んでなる、請求項２４〜３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３２】
前記少なくとも１つの変異が、全ゲノム配列決定を使用して同定される、請求項３１に記載の方法。