【手続補正書】
【提出日】令和3年4月15日(2021.4.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
１４〜２４炭素原子を有する複数の脂質分子を含む脂質二重層を含む融合性リポソームであって、
該脂質分子の少なくとも一つがカチオン基、カチオン性天然または合成ポリマー、カチオン性アミノ糖、カチオン性ポリアミノ酸またはカチオン性Ｚ両親媒性癌細胞結合ペプチドをさらに含み、
該脂質分子の少なくとも一つがポリエチレングリコール(ＰＥＧ)、ポリプロピレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン(ＰＶＰ)、デキストラン、ポリアミノ酸、メチル−ポリオキサゾリン、ポリグリセロール、ポリ(アクリロイルモルホリン)およびポリアクリルアミドから選択される安定化部分をさらに含み、
該脂質分子の少なくとも一つが特異的結合対の第一官能基で官能化されており、該結合対の相補的第二官能基に結合できる、
融合性リポソーム。
【請求項２】
該結合対の第一官能基に結合した相補的第二官能基で活性化された免疫系活性化剤をさらに含む、請求項１に記載の融合性リポソーム。
【請求項３】
該免疫系活性化剤が融合性リポソームの外層で、内層でまたは外側および内層両者で、該第二官能基を経て、該脂質分子の少なくとも一つの第一官能基に結合される、請求項２に記載の融合性リポソーム。
【請求項４】
免疫系活性化剤がＴ細胞活性化剤；炎症誘発性サイトカイン；記憶キラーＴ細胞活性化ペプチド；ウイルスペプチドを提示する可溶性ヒト白血球抗原(ｓＨＬＡ)；およびスーパー抗原から選択される、請求項２に記載の融合性リポソーム。
【請求項５】
Ｔ細胞活性化剤が抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ８抗体、抗ＮＫＧ２Ｄ抗体またはこれらの組み合わせ、ＣＤ３およびＣＤ８両者と結合できる抗体およびＣＤ３およびＮＫＧ２Ｄ両者と結合できる抗体から選択される、請求項４に記載の融合性リポソーム。
【請求項６】
(ｉ)カチオン基を含む該脂質分子の少なくとも一つが１,２−ジオレイル−３−トリメチルアンモニウムプロパンクロライド(ＤＯＴＡＰ)、ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン(ＤＯＧＳ)、１,２−ジ−Ｏ−オクタデセニル−３−トリメチルアンモニウムプロパン(ＤＯＴＭＡ)、ジメチルジオクタデシルアンモニウム(１８：０  ＤＤＡＢ)およびＮ１−[２−((１Ｓ)−１−[(３−アミノプロピル)アミノ]−４−[ジ(３−アミノ−プロピル)アミノ]ブチル−カルボキサミド)エチル]−３,４−ジ[オレイルオキシ]−ベンズアミド(ＭＶＬ５)から選択される；
(ii)該合成ポリマーがポリエチレンイミン(ＰＥＩ)およびポリ(２−(ジメチルアミノ)エチルメタクリレートから選択される；
(iii)該天然ポリマーがキトサンである；
(iv)該アミノ糖がグルコサミンである、請求項８に記載の融合性リポソーム。
(ｖ)該カチオン性ポリアミノ酸がポリ(Ｌ−リシン)、ポリ(Ｌ−アルギニン)、ポリ(Ｄ−リシン)、ポリ(Ｄ−アルギニン)、ポリ(Ｌ−オルニチン)およびポリ(Ｄ−オルニチン)から選択される；
(vi)該両親媒性癌細胞結合ペプチドがセクロピンＡ；セクロピンＡ１〜８；および環状ＣＮＧＲＣから選択される；
(vii)該脂質分子の少なくとも一つがホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸またはこれらの組み合わせからなる群から選択されるリン脂質であり、その各々が１個または２個の同一または異なる脂肪酸残基を含み、ここで、ホスファチジル部分における脂肪酸残基が飽和、モノ−不飽和またはポリ−不飽和であり、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３または２４炭素長の炭素鎖を有し、例えばミリストイル、ステアロイル、パルミトイル、オレオイル、リノレオイル、リノレノイル(結合リノレノイルを含む)、リン脂質およびリゾリン脂質配置のアラキドノイルならびにこれらの組み合わせである；
(viii)安定化部分が約１０６Da〜約４kDaの分子量のＰＥＧである；
(ix)特定の結合対の該第一官能基が該結合対の該相補的第二官能基と共有結合を形成できる；
(ｘ)特定の結合対の該第一官能基が該結合対の該相補的第二官能基と非共有結合を形成できる；
(xi)該安定化部分が切断可能ペプチドリンカーを経て該脂質分子の少なくとも一つに結合される；または
(xii)融合性リポソームが脂質二重層と第一官能基の間に第一スペーサーをさらに含む、
請求項１に記載の融合性リポソーム。
【請求項７】
該リン脂質が１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(ＰＯＰＣ)および１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＯＰＥ)；１,２−ジミリストイル−３−ホスファチジルコリン(ＤＭＰＣ)；１,２−ジステアロイル−３−ホスファチジルコリン(ＤＳＰＣ)；１,２−ジミリストレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１４：１(Δ９−Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジミリステライドイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１４：１(Δ９−Ｔｒａｎｓ)ＰＣ)；１,２−ジパルミトレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１６：１(Δ９−Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジパルミテライドイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１６：１(Δ９−Ｔｒａｎｓ)ＰＣ)；１,２−ジペトロセレノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：１(Δ６−Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルコリン(１８：１(Δ９−Ｃｉｓ)ＰＣ(ＤＯＰＣ))；１,２−ジエライドイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：１(Δ９−Ｔｒａｎｓ)ＰＣ)；１,２−ジリノレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：２(Ｃｉｓ)ＰＣ(ＤＬＰＣ))；１,２−ジリノレノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：３(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジエイコセノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２０：１(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジアラキドノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２０：４(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジドコサヘキサエノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２２：６(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジエルコイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２２：１(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジネルボノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２４：１(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジミリストイル−３−−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＭＰＥ)；１,２−ジパルミトイル−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＰＰＥ)；ジパルミトイルホスファチジルコリン(ＤＰＰＣ)；１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＯＰＥ)；１,２−ジステアロイル−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＳＰＥ)；１,２−ジミリストイル−３−ホスファチジルセリン(ＤＭＰＳ)；１,２−ジパルミトイル−３−ホスファチジルセリン(ＤＰＰＳ)；パルミトイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン(ＰＯＰＥ)；および１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルセリン(ＤＯＰＳ)から選択される、請求項６に記載の融合性リポソーム。
【請求項８】
該リン脂質がＤＯＰＣ、ＰＯＰＣ、ＤＭＰＣ、ＤＰＰＣ、ＤＯＰＥ、ＰＯＰＥ、ＤＳＰＥ、ＤＭＰＥおよびＤＰＰＥから選択される、請求項７に記載の融合性リポソーム。
【請求項９】
ＰＥＧが約２kDaの分子量である、請求項６に記載の融合性リポソーム。
【請求項１０】
ｉ)特定の結合対の第一官能基がアルキンまたはホスフィンであり、該結合対の第二官能基がアジドであるかまたはその逆であり；ii)特定の結合対の第一官能基がシクロアルケン、シクロアルキン、シクロプロパン、イソニトリル(イソシアニド)またはビニルボロン酸であり、該結合対の第二官能基がテトラジンであるかまたはその逆であり；iii)特定の結合対の第一官能基がアルキンまたはマレイミドであり、該結合対の第二官能基がチオールであるかまたはその逆であり；iv)特定の結合対の第一官能基が結合ジエンであり、該結合対の第二官能基が置換アルケンであるかまたはその逆であり；ｖ)特定の結合対の第一官能基がアルケン、アルキンまたはアセチレン化銅であり、該結合対の第二官能基がニトロンであるかまたはその逆であり；vi)特定の結合対の第一官能基がアルデヒドまたはケトンであり、該結合対の第二官能基がアルコキシアミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジンまたはヒドラジドであるかまたはその逆であり；またはvii)特定の結合対の第一官能基がアルデヒド、ケトン、イソチオシアネート、カルボン酸またはその誘導体、例えばエステル、無水物、アシルハライド、トシルおよびＮ−ヒドロスクシンイミド(ＮＨＳ),であり、該結合対の第二官能基がアミンであるかまたはその逆である、請求項６に記載の融合性リポソーム。
【請求項１１】
特定の結合対がアルキン−アジドである、請求項１０に記載の融合性リポソーム。
【請求項１２】
特定の結合対の第一官能基がビオチンであり、該結合対の第二官能基がビオチン結合ペプチドまたはビオチン結合タンパク質から選択されるその結合パートナーであるかまたはその逆である、請求項６に記載の融合性リポソーム。
【請求項１３】
該ビオチン結合タンパク質がアビジン、ストレプトアビジンおよび抗ビオチン抗体から選択される、請求項１２に記載の融合性リポソーム。
【請求項１４】
該ビオチン結合ペプチドがAEGEFCSWAPPKASCGDPAK(配列番号１１)、CSWRPPFRAVC(配列番号１２)、CSWAPPFKASC(配列番号１３)およびCNWTPPFKTRC(配列番号１４)から選択される、請求項１２に記載の融合性リポソーム。
【請求項１５】
免疫系活性化剤が免疫系活性化剤と第二官能基間に第二スペーサーをさらに含む、請求項２に記載の融合性リポソーム。
【請求項１６】
第一または第二スペーサーがＰＥＧ、(Ｃ６−Ｃ１２)アルキル、フェノール酸、安息香酸またはナフトエモノ、ジもしくはトリカルボン酸、テトラヒドロピレンモノ、ジもしくはトリカルボン酸またはその塩、環状エーテル、グルタル酸、コハク酸、ムコン酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸およびセバシン酸および約２〜２０アミノ酸残基長、例えば３アミノ酸残基長のポリ−Ｇｌｙペプチドなどのペプチドから選択される、請求項６または１５に記載の融合性リポソーム。
【請求項１７】
第一または第二スペーサーが約１０６Da〜約４kDaの分子量のＰＥＧである、請求項１６に記載の融合性リポソーム。
【請求項１８】
ＰＥＧが約１９４Daの分子量(ＰＥＧ４)のものである、請求項１７に記載の融合性リポソーム。
【請求項１９】
第一または第二スペーサーが(Ｃ６−Ｃ１２)アルキル、好ましくはヘプチルまたはドデカノイルである、請求項１６に記載の融合性リポソーム。
【請求項２０】
コレステロール(ＣＨＯ)またはその誘導体をさらに含む、請求項１に記載の融合性リポソーム。
【請求項２１】
リポソームが最大２００nm、例えば約１５nm〜約２００nm、約２０nm〜約１００nm、約５０nm〜約１５０nm、約５０nm〜約９０nm、約８０nm〜約１００nm、約１１０nm〜約２００nm、例えば約１００nmのサイズを有する、請求項１〜２０のいずれかに記載の融合性リポソーム。
【請求項２２】
融合性リポソームが：
ａ. ＤＯＰＣ：ＤＯＴＡＰ：ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋ：ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４−Ｎ３またはＤＯＰＣ：ＤＯＴＡＰ：ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋ：ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４−ＢＣＮ；または
ｂ. ＤＭＰＣ：コレステロール：ＤＭＰＥ−ＰＥＧ４−Ｎ３またはＤＭＰＣ：コレステロール：ＤＭＰＥ−ＰＥＧ４−ＢＣＮ
を含み、ここで、ＰＥＧ２Ｋが約２kDaの分子量を有するＰＥＧを表し、そしてＰＥＧ４が約１９４Daの分子量を有するＰＥＧを表し、そしてＤＯＰＣの相対的モル量が最大約８０％であり、ＤＯＴＡＰの相対的モル量が最大約８０％であり、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋの相対的モル量が最大約２０％であり、ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４の相対的モル量が最大約２０％であり、ＨＳＰＣの相対的モル量が最大約６５％であり、コレステロールの相対的モル量が最大約４０％であり、そしてＤＭＰＣの相対的モル量が最大約７０％であり、そして融合性リポソームが約５０nm〜約３００nmのサイズを有する、請求項２１に記載の融合性リポソーム。
【請求項２３】
(ｉ)モル比５２.５：３５：０.６：１０、５２.５：３５：１.２５：１０、５２.５：３５：２.５：１０、５２.５：３５：５：１０、５２.５：３５：０.６：５、５２.５：３５：１.２５：５、５２.５：３５：２.５：５、５２.５：３５：５：５、６５：２０：５：１０、５０：３５：５：１０、５２.５：３５：１.２５：７、５２.５：３５：１.２５：５または５２.５：３５：２.５：７でＤＯＰＣ：ＤＯＴＡＰ：ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋ：ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４−Ｎ３またはＤＯＰＣ：ＤＯＴＡＰ：ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋ：ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４−ＢＣＮ；または
(ii)モル比６０：３５：５でＤＭＰＣ：Ｃｈｏｌ：ＤＭＰＥ−ＰＥＧ４−Ｎ３またはＤＭＰＣ：Ｃｈｏｌ：ＤＭＰＥ−ＰＥＧ４−ＢＣＮ
を含む、請求項２２に記載の融合性リポソーム。
【請求項２４】
モル比５２.５：３５：２.５：５でＤＯＰＣ：ＤＯＴＡＰ：ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋ：ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４−Ｎ３を含む、請求項２３に記載の融合性リポソーム。
【請求項２５】
リポソームの融解温度(Ｔｍ)が４５℃未満であり、そこで融合性リポソームが非結晶転移相を維持し、それにより、リポソームの細胞膜との融合に必要な膜流動性を提供する、請求項１〜２４の何れかに記載の融合性リポソーム。
【請求項２６】
乳癌、黒色腫および肺癌などの処置に使用するための、請求項１〜２５の何れかに記載の融合性リポソーム。
【請求項２７】
外層で結合した免疫系活性化剤を伴う融合性リポソームを製造する方法であって、請求項１に記載の融合性リポソームと、結合対の相補的第二官能基で官能化された免疫系活性化剤の反応を含み、ここで、該第二官能基は該第一官能基に結合し、それにより外層で結合した該免疫系活性化剤を有する該融合性リポソームを産生する、方法。
【請求項２８】
ａ. 請求項１に記載の融合性リポソームを含む第一容器；
ｂ. 該脂質分子の該第一官能基と結合できる結合対の第二官能基で官能化されたＴ細胞活性化剤を含む第二容器；および
ｃ. 患者に(ａ)の融合性リポソームおよび続いて(ｂ)のＴ細胞活性化剤を投与することを含む、癌の処置に使用するためについての指示を含むパンフレット
を含む、キット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１７８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１７８】
参考文献
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さらに、本発明は次の態様を包含する。
１. 免疫系活性化剤で癌細胞を標識することにより癌を処置する方法であって、該方法は、癌患者に融合性リポソームを投与することを含み、ここで、
(ｉ)該癌患者に(ａ)１４〜２４炭素原子および特定の結合対の相補的第二官能基と結合できる該結合対の第一官能基を有する複数の脂質分子を含む脂質二重層；および(ｂ)該第一官能基に結合できる該結合対の該相補的第二官能基を含む免疫系活性化剤を含む免疫系活性化融合性リポソームを投与するか；または
(ii)該癌患者に１４〜２４炭素原子を有し、少なくとも一つが特異的結合対の第一官能基で官能化されており、該結合対の相補的第二官能基に結合できる複数の脂質分子を含む脂質二重層を含む官能化融合性リポソームを投与し；そして過程(ii)に続いて
(iii)該脂質分子の該第一官能基に結合できる結合対の相補的第二官能基で官能化された免疫系活性化剤を投与する
過程を含む、方法。
２. 該免疫系活性化剤が融合性リポソームの外層で、該第二官能基を経て、該脂質分子の少なくとも一つの第一官能基に結合される、項１に記載の方法。
３. 該免疫系活性化剤が融合性リポソームの内層で、該第二官能基を経て、該脂質分子の少なくとも一つの第一官能基に結合される、項１に記載の方法。
４. 該免疫系活性化剤が融合性リポソームの外側および内層両者で、該第二官能基を経て、該脂質分子の少なくとも一つの第一官能基に結合される、項１に記載の方法。
５. 免疫系活性化剤がＴ細胞活性化剤；炎症誘発性サイトカイン；記憶キラーＴ細胞活性化ペプチド；ウイルスペプチドを提示する可溶性ヒト白血球抗原(ｓＨＬＡ)；およびスーパー抗原から選択される、項１に記載の方法。
６. 免疫系活性化剤がＴ細胞活性化剤である、項５に記載の方法。
７. Ｔ細胞活性化剤が抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ８抗体、抗ＮＫＧ２Ｄ抗体またはこれらの組み合わせ、ＣＤ３およびＣＤ８両者と結合できる抗体およびＣＤ３およびＮＫＧ２Ｄ両者と結合できる抗体から選択される、項６に記載の方法。
８. 該脂質分子の少なくとも一つがカチオン基、カチオン性天然または合成ポリマー、カチオン性アミノ糖、カチオン性ポリアミノ酸または両親媒性癌細胞結合ペプチドをさらに含む、項１に記載の方法。
９. カチオン基を含む該脂質分子の少なくとも一つが１,２−ジオレイル−３−トリメチルアンモニウムプロパンクロライド(ＤＯＴＡＰ)、ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン(ＤＯＧＳ)、１,２−ジ−Ｏ−オクタデセニル−３−トリメチルアンモニウムプロパン(ＤＯＴＭＡ)、ジメチルジオクタデシルアンモニウム(１８：０  ＤＤＡＢ)およびＮ１−[２−((１Ｓ)−１−[(３−アミノプロピル)アミノ]−４−[ジ(３−アミノ−プロピル)アミノ]ブチル−カルボキサミド)エチル]−３,４−ジ[オレイルオキシ]−ベンズアミド(ＭＶＬ５)から選択される、項８に記載の方法。
１０. カチオン基を含む該脂質分子の少なくとも一つがＤＯＴＡＰである、項９に記載の方法。
１１. 該合成ポリマーがポリエチレンイミン(ＰＥＩ)およびポリ(２−(ジメチルアミノ)エチルメタクリレートから選択される、項８に記載の方法。
１２. 該天然ポリマーがキトサンである、項８に記載の方法。
１３. 該アミノ糖がグルコサミンである、項８に記載の方法。
１４. 該カチオン性ポリアミノ酸がポリ(Ｌ−リシン)、ポリ(Ｌ−アルギニン)、ポリ(Ｄ−リシン)、ポリ(Ｄ−アルギニン)、ポリ(Ｌ−オルニチン)およびポリ(Ｄ−オルニチン)から選択される、項８に記載の方法。
１５. 該両親媒性癌細胞結合ペプチドがセクロピンＡ；セクロピンＡ１〜８；および環状ＣＮＧＲＣから選択される、項８に記載の方法。
１６. 該脂質分子の少なくとも一つがホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸またはこれらの組み合わせからなる群から選択されるリン脂質であり、その各々が１個または２個の同一または異なる脂肪酸残基を含み、ここで、ホスファチジル部分における脂肪酸残基が飽和、モノ−不飽和またはポリ−不飽和であり、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３または２４炭素長の炭素鎖を有し、例えばミリストイル、ステアロイル、パルミトイル、オレオイル、リノレオイル、リノレノイル(結合リノレノイルを含む)、リン脂質およびリゾリン脂質配置のアラキドノイルならびにこれらの組み合わせである、項１に記載の方法。
１７. 該リン脂質が１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(ＰＯＰＣ)および１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＯＰＥ)；１,２−ジミリストイル−３−ホスファチジルコリン(ＤＭＰＣ)；１,２−ジステアロイル−３−ホスファチジルコリン(ＤＳＰＣ)；１,２−ジミリストレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１４：１(Δ９−Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジミリステライドイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１４：１(Δ９−Ｔｒａｎｓ)ＰＣ)；１,２−ジパルミトレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１６：１(Δ９−Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジパルミテライドイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１６：１(Δ９−Ｔｒａｎｓ)ＰＣ)；１,２−ジペトロセレノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：１(Δ６−Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルコリン(１８：１(Δ９−Ｃｉｓ)ＰＣ(ＤＯＰＣ))；１,２−ジエライドイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：１(Δ９−Ｔｒａｎｓ)ＰＣ)；１,２−ジリノレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：２(Ｃｉｓ)ＰＣ(ＤＬＰＣ))；１,２−ジリノレノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：３(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジエイコセノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２０：１(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジアラキドノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２０：４(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジドコサヘキサエノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２２：６(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジエルコイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２２：１(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジネルボノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２４：１(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジミリストイル−３−−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＭＰＥ)；１,２−ジパルミトイル−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＰＰＥ)；ジパルミトイルホスファチジルコリン(ＤＰＰＣ)；１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＯＰＥ)；１,２−ジステアロイル−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＳＰＥ)；１,２−ジミリストイル−３−ホスファチジルセリン(ＤＭＰＳ)；１,２−ジパルミトイル−３−ホスファチジルセリン(ＤＰＰＳ)；パルミトイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン(ＰＯＰＥ)；および１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルセリン(ＤＯＰＳ)からなる群から選択される、項１６に記載の方法。
１８. 該リン脂質がＤＯＰＣ、ＰＯＰＣ、ＤＭＰＣ、ＤＰＰＣ、ＤＯＰＥ、ＰＯＰＥ、ＤＳＰＥ、ＤＭＰＥおよびＤＰＰＥから選択される、項１７に記載の方法。
１９. 該脂質分子の少なくとも一つに結合した安定化部分をさらに含む、項１に記載の方法。
２０. 該安定化部分がポリエチレングリコール(ＰＥＧ)、ポリプロピレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン(ＰＶＰ)、デキストラン、ポリアミノ酸、メチル−ポリオキサゾリン、ポリグリセロール、ポリ(アクリロイルモルホリン)およびポリアクリルアミドから選択される、項１９に記載の方法。
２１. 安定化部分が約１０６Da〜約４kDaの分子量のＰＥＧである、項２０に記載の方法。
２２. ＰＥＧが約２kDaの分子量である、項２１に記載の方法。
２３. 該安定化部分が切断可能ペプチドリンカーを経て該脂質分子の少なくとも一つに結合される、項１９に記載の方法。
２４. 特定の結合対の該第一官能基が該結合対の該相補的第二官能基と共有結合を形成できる、項１に記載の方法。
２５. 特定の結合対の該第一官能基がクリック化学反応により該結合対の該相補的第二官能基と共有結合を形成できる、項２４に記載の方法。
２６. ｉ)特定の結合対の第一官能基がアルキンまたはホスフィンであり、該結合対の第二官能基がアジドであるかまたはその逆であり；ii)特定の結合対の第一官能基がシクロアルケン、シクロアルキン、シクロプロパン、イソニトリル(イソシアニド)またはビニルボロン酸であり、該結合対の第二官能基がテトラジンであるかまたはその逆であり；iii)特定の結合対の第一官能基がアルキンまたはマレイミドであり、該結合対の第二官能基がチオールであるかまたはその逆であり；iv)特定の結合対の第一官能基が結合ジエンであり、該結合対の第二官能基が置換アルケンであるかまたはその逆であり；ｖ)特定の結合対の第一官能基がアルケン、アルキンまたはアセチレン化銅であり、該結合対の第二官能基がニトロンであるかまたはその逆であり；vi)特定の結合対の第一官能基がアルデヒドまたはケトンであり、該結合対の第二官能基がアルコキシアミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジンまたはヒドラジドであるかまたはその逆であり；またはvii)特定の結合対の第一官能基がアルデヒド、ケトン、イソチオシアネート、カルボン酸またはその誘導体、例えばエステル、無水物、アシルハライド、トシルおよびＮ−ヒドロスクシンイミド(ＮＨＳ),であり、該結合対の第二官能基がアミンであるかまたはその逆であり；viii)官能基である、項２４に記載の方法。
２７. 特定の結合対がアルキン−アジドである、項２６に記載の方法。
２８. 特定の結合対の該第一官能基が該結合対の該相補的第二官能基と非共有結合を形成できる、項１に記載の方法。
２９. 特定の結合対の第一官能基がビオチンであり、該結合対の第二官能基がビオチン結合ペプチドまたはビオチン結合タンパク質から選択されるその結合パートナーであるかまたはその逆である、項２８に記載の方法。
３０. 該ビオチン結合タンパク質がアビジン、ストレプトアビジンおよび抗ビオチン抗体から選択される、項２９に記載の方法。
３１. 該ビオチン結合ペプチドがAEGEFCSWAPPKASCGDPAK(配列番号１１)、CSWRPPFRAVC(配列番号１２)、CSWAPPFKASC(配列番号１３)およびCNWTPPFKTRC(配列番号１４)から選択される、項２９に記載の方法。
３２. 融合性リポソームが脂質二重層と第一官能基の間に第一スペーサーをさらに含む、項１に記載の方法。
３３. 免疫系活性化剤が免疫系活性化剤と第二官能基間に第二スペーサーをさらに含む、項１に記載の方法。
３４. 第一または第二スペーサーがＰＥＧ、(Ｃ６−Ｃ１２)アルキル、フェノール酸、安息香酸またはナフトエモノ、ジもしくはトリカルボン酸、テトラヒドロピレンモノ、ジもしくはトリカルボン酸またはその塩、環状エーテル、グルタル酸、コハク酸、ムコン酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸およびセバシン酸および約２〜２０アミノ酸残基長、例えば３アミノ酸残基長のポリ−Ｇｌｙペプチドなどのペプチドからなる群から選択される、項３２または３３に記載の方法。
３５. 第一または第二スペーサーが約１０６Da〜約４kDaの分子量のＰＥＧである、項３４に記載の方法。
３６. ＰＥＧが約１９４Daの分子量(ＰＥＧ４)のものである、項３５に記載の方法。
３７. 第一または第二スペーサーが(Ｃ６−Ｃ１２)アルキル、好ましくはヘプチルまたはドデカノイルである、項３４に記載の方法。
３８. 融合性リポソームがコレステロール(ＣＨＯ)またはその誘導体をさらに含む、項１に記載の方法。
３９. リポソームが最大２００nm、例えば約１５nm〜約２００nm、約２０nm〜約１００nm、約５０nm〜約１５０nm、約５０nm〜約９０nm、約８０nm〜約１００nm、約１１０nm〜約２００nm、例えば約１００nmのサイズを有する、項１に記載の方法。
４０. 該免疫系活性化剤が融合性リポソーム外層、内側または外側および内側両者で該第二官能基を経て該脂質分子の少なくとも一つの第一官能基に結合し；免疫系活性化剤がＴ細胞活性化剤；炎症誘発性サイトカイン；記憶キラーＴ細胞活性化ペプチド；ウイルスペプチドを提示する可溶性ヒト白血球抗原(ｓＨＬＡ)；およびスーパー抗原から選択され；該脂質の少なくとも一部がカチオン基、カチオン性天然または合成ポリマー、カチオン性アミノ糖、カチオン性ポリアミノ酸または両親媒性癌細胞結合ペプチドを含み；該脂質の少なくとも一部がホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸またはこれらの組み合わせからなる群から選択されるリン脂質であり、その各々が１個または２個の同一または異なる脂肪酸残基を含み、ここで、ホスファチジル部分における脂肪酸残基が飽和、モノ−不飽和またはポリ−不飽和であり、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３または２４炭素の炭素鎖長を有し、例えばミリストイル、ステアロイル、パルミトイル、オレオイル、リノレオイル、リノレノイル(結合リノレノイルを含む)、リン脂質およびリゾリン脂質配置のアラキドノイルならびにこれらの組み合わせであり；該リポソームが該脂質または該カチオン性ポリマーの少なくとも一つに結合した安定化部分をさらに含み；特定の結合対の該第一官能基が該結合対の該相補的第二官能基と共有結合を形成できるまたは特定の結合対の該第一官能基が該結合対の該相補的第二官能基と非共有結合を形成でき；第一または第二スペーサーがＰＥＧ、(Ｃ６−Ｃ１２)アルキル、フェノール酸、安息香酸またはナフトエモノ、ジもしくはトリカルボン酸、テトラヒドロピレンモノ、ジもしくはトリカルボン酸またはその塩、環状エーテル、グルタル酸、コハク酸、ムコン酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸およびセバシン酸、約２〜２０アミノ酸残基長、例えば３アミノ酸残基長のポリ−Ｇｌｙペプチドなどのペプチドからなる群から選択され；そしてリポソームが最大２００nm、例えば約１５nm〜約２００nm、約２０nm〜約１００nm、約５０nm〜約１５０nm、約５０nm〜約９０nm、約８０nm〜約１００nm、約１１０nm〜約２００nm、例えば約１００nmのサイズを有する、項１に記載の方法。
４１. 免疫系活性化剤がＴ細胞活性化剤であり；カチオン基を含む該脂質分子の少なくとも一つが１,２−ジオレイル−３−トリメチルアンモニウムプロパンクロライド(ＤＯＴＡＰ)、ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン(ＤＯＧＳ)、１,２−ジ−Ｏ−オクタデセニル−３−トリメチルアンモニウムプロパン(ＤＯＴＭＡ)、ジメチルジオクタデシルアンモニウム(１８：０  ＤＤＡＢ)およびＮ１−[２−((１Ｓ)−１−[(３−アミノプロピル)アミノ]−４−[ジ(３−アミノ−プロピル)アミノ]ブチル−カルボキサミド)エチル]−３,４−ジ[オレイルオキシ]−ベンズアミド(ＭＶＬ５)から選択され、該合成ポリマーがポリエチレンイミン(ＰＥＩ)およびポリ(２−(ジメチルアミノ)エチルメタクリレートから選択され、該天然ポリマーがキトサンであり、該アミノ糖がグルコサミンであり、該カチオン性ポリアミノ酸がポリ(Ｌ−リシン)、ポリ(Ｌ−アルギニン)、ポリ(Ｄ−リシン)、ポリ(Ｄ−アルギニン)、ポリ(Ｌ−オルニチン)およびポリ(Ｄ−オルニチン)から選択されまたは該両親媒性癌細胞結合ペプチドがセクロピンＡ；セクロピンＡ１〜８；および環状ＣＮＧＲＣから選択され；該脂質分子の少なくとも一つが１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(ＰＯＰＣ)および１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＯＰＥ)；１,２−ジミリストイル−３−ホスファチジルコリン(ＤＭＰＣ)；１,２−ジステアロイル−３−ホスファチジルコリン(ＤＳＰＣ)；１,２−ジミリストレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１４：１(Δ９−Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジミリステライドイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１４：１(Δ９−Ｔｒａｎｓ)ＰＣ)；１,２−ジパルミトレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１６：１(Δ９−Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジパルミテライドイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１６：１(Δ９−Ｔｒａｎｓ)ＰＣ)；１,２−ジペトロセレノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：１(Δ６−Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルコリン(１８：１(Δ９−Ｃｉｓ)ＰＣ(ＤＯＰＣ))；１,２−ジエライドイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：１(Δ９−Ｔｒａｎｓ)ＰＣ)；１,２−ジリノレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：２(Ｃｉｓ)ＰＣ(ＤＬＰＣ))；１,２−ジリノレノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：３(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジエイコセノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２０：１(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジアラキドノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２０：４(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジドコサヘキサエノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２２：６(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジエルコイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２２：１(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジネルボノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２４：１(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジミリストイル−３−−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＭＰＥ)；１,２−ジパルミトイル−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＰＰＥ)；ジパルミトイルホスファチジルコリン(ＤＰＰＣ)；１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＯＰＥ)；１,２−ジステアロイル−３−ホスファチジルエタノールアミ���(ＤＳＰＥ)；１,２−ジミリストイル−３−ホスファチジルセリン(ＤＭＰＳ)；１,２−ジパルミトイル−３−ホスファチジルセリン(ＤＰＰＳ)；パルミトイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン(ＰＯＰＥ)；および１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルセリン(ＤＯＰＳ)からなる群から選択され；該安定化部分がポリエチレングリコール(ＰＥＧ)、ポリプロピレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン(ＰＶＰ)、デキストラン、ポリアミノ酸、メチル−ポリオキサゾリン、ポリグリセロール、ポリ(アクリロイルモルホリン)およびポリアクリルアミドから選択され；特定の結合対の該第一官能基がクリック化学反応により該結合対の該相補的第二官能基と共有結合を形成でき、ｉ)特定の結合対の第一官能基がアルキンまたはホスフィンであり、該結合対の第二官能基がアジドであるかまたはその逆であり；ii)特定の結合対の第一官能基がシクロアルケン、シクロアルキン、シクロプロパン、イソニトリル(イソシアニド)またはビニルボロン酸であり、該結合対の第二官能基がテトラジンであるかまたはその逆であり；iii)特定の結合対の第一官能基がアルキンまたはマレイミドであり、該結合対の第二官能基がチオールであるかまたはその逆であり；iv)特定の結合対の第一官能基が結合ジエンであり、該結合対の第二官能基が置換アルケンであるかまたはその逆であり；ｖ)特定の結合対の第一官能基がアルケン、アルキンまたはアセチレン化銅であり、該結合対の第二官能基がニトロンであるかまたはその逆であり；vi)特定の結合対の第一官能基がアルデヒドまたはケトンであり、該結合対の第二官能基がアルコキシアミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジンまたはヒドラジドであるかまたはその逆であり；またはvii)特定の結合対の第一官能基がアルデヒド、ケトン、イソチオシアネートまたはカルボン酸またはその誘導体、例えばエステル、無水物、アシルハライド、トシルおよびＮ−ヒドロスクシンイミド(ＮＨＳ)であり、該結合対の第二官能基がアミンであるかまたはその逆であり；viii)または特定の結合対の第一官能基がビオチンであり、該結合対の第二官能基がビオチン結合ペプチドまたはビオチン結合タンパク質から選択されるその結合パートナーであるかまたはその逆であり；および第一または第二スペーサーが約１０６Da〜約４kDaの分子量のＰＥＧまたは(Ｃ６−Ｃ１２)アルキル、好ましくはヘプチルまたはドデカノイルである、項４０に記載の方法。
４２. Ｔ細胞活性化剤が抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ８抗体、抗ＮＫＧ２Ｄ抗体またはこれらの組み合わせ、ＣＤ３およびＣＤ８両者と結合できる抗体およびＣＤ３およびＮＫＧ２Ｄ両者と結合できる抗体から選択され；カチオン基を含む該脂質分子の少なくとも一つがＤＯＴＡＰであり；該リン脂質がＤＯＰＣ、ＰＯＰＣ、ＤＭＰＣ、ＤＰＰＣ、ＤＯＰＥ、ＰＯＰＥ、ＤＳＰＥ、ＤＭＰＥおよびＤＰＰＥから選択され；安定化部分が約１０６Da〜約４kDaの分子量のＰＥＧであり；特定の結合対がアルキン−アジドであり、該ビオチン結合タンパク質がアビジン、ストレプトアビジンおよび抗ビオチン抗体から選択されまたは該ビオチン結合ペプチドがAEGEFCSWAPPKASCGDPAK(配列番号１１)、CSWRPPFRAVC(配列番号１２)、CSWAPPFKASC(配列番号１３)およびCNWTPPFKTRC(配列番号１４)から選択され；そして第一または第二スペーサーが約１９４Da(ＰＥＧ４)の分子量のＰＥＧである、項４１に記載の方法。
４３. 安定化部分が約２kDaの分子量のＰＥＧである、項４２に記載の方法。
４４. 融合性リポソームが：
ａ. ＤＯＰＣ：ＤＯＴＡＰ：ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋ：ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４−Ｎ３またはＤＯＰＣ：ＤＯＴＡＰ：ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋ：ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４−ＢＣＮ；または
ｂ. ＤＭＰＣ：コレステロール：ＤＭＰＥ−ＰＥＧ４−Ｎ３またはＤＭＰＣ：コレステロール：ＤＭＰＥ−ＰＥＧ４−ＢＣＮ、
を含み、ここで、ＰＥＧ２Ｋが約２kDaの分子量を有するＰＥＧを表し、そしてＰＥＧ４が約１９４Daの分子量を有するＰＥＧを表し、そしてＤＯＰＣの相対的モル量が最大約８０％であり、ＤＯＴＡＰの相対的モル量が最大約８０％であり、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋの相対的モル量が最大約２０％であり、ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４の相対的モル量が最大約２０％であり、ＨＳＰＣの相対的モル量が最大約６５％であり、コレステロールの相対的モル量が最大約４０％であり、そしてＤＭＰＣの相対的モル量が最大約７０％であり、そして融合性リポソームが約５０nmまたは３００nmのサイズを有する、項４３に記載の方法。
４５. 融合性リポソームが
(ｉ)モル比５２.５：３５：０.６：１０、５２.５：３５：１.２５：１０、５２.５：３５：２.５：１０、５２.５：３５：５：１０、５２.５：３５：０.６：５、５２.５：３５：１.２５：５、５２.５：３５：２.５：５、５２.５：３５：５：５、６５：２０：５：１０、５０：３５：５：１０、５２.５：３５：１.２５：７、５２.５：３５：１.２５：５または５２.５：３５：２.５：７でＤＯＰＣ：ＤＯＴＡＰ：ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋ：ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４−Ｎ３またはＤＯＰＣ：ＤＯＴＡＰ：ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋ：ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４−ＢＣＮ；または
(ii)モル比６０：３５：５でＤＭＰＣ：Ｃｈｏｌ：ＤＭＰＥ−ＰＥＧ４−Ｎ３またはＤＭＰＣ：Ｃｈｏｌ：ＤＭＰＥ−ＰＥＧ４−ＢＣＮ
を含む、項４４に記載の方法。
４６. 融合性リポソームがモル比５２.５：３５：２.５：５でＤＯＰＣ：ＤＯＴＡＰ：ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋ：ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４−Ｎ３を含む、項４５に記載の方法。
４７. 該Ｔ細胞活性化剤が融合性リポソームの外層で、該第二官能基を経て、該脂質分子の少なくとも一つの第一官能基に結合される、項４４〜４６の何れかに記載の方法。
４８. 該Ｔ細胞活性化剤が融合性リポソームの内層で、該第二官能基を経て、該脂質分子の少なくとも一つの第一官能基に結合される、項４４〜４６の何れかに記載の方法。
４９. 該Ｔ細胞活性化剤が融合性リポソームの内層および外層両者で、該第二官能基を経て、該脂質分子の少なくとも一つの第一官能基に結合される、項４４〜４６の何れかに記載の方法。
５０. リポソームの融解温度(Ｔｍ)が４５℃未満であり、そこで融合性リポソームが非結晶転移相を維持し、それにより、リポソームの細胞膜との融合に必要な膜流動性を提供する、項１〜４９の何れかに記載の方法。
５１. 癌がトリプルネガティブ乳癌などの乳癌、黒色腫および肺癌からなる群から選択される、項１〜５０の何れかに記載の方法。
５２. 少なくとも一つが特異的結合対の第一官能基で官能化されており、該結合対の相補的第二官能基に結合できる、１４〜２４炭素原子を有する複数の脂質分子を含む脂質二重層を含む融合性リポソーム。
５３. 融合性リポソームが脂質二重層と第一官能基の間に第一スペーサーをさらに含む、項５２に記載の融合性リポソーム。
５４. 該第一官能基に結合した相補的該結合対の第二官能基で官能化された免疫系活性化剤をさらに含む、項５２に記載の融合性リポソーム。
５５. 該免疫系活性化剤が融合性リポソームの外層で、該第二官能基を経て、該脂質分子の少なくとも一つの第一官能基に結合される、項５４に記載の融合性リポソーム。
５６. 該免疫系活性化剤が融合性リポソームの内層で、該第二官能基を経て、該脂質分子の少なくとも一つの第一官能基に結合される、項５４に記載の融合性リポソーム。
５７. 該免疫系活性化剤が融合性リポソームの外側および内層両者で、該第二官能基を経て、該脂質分子の少なくとも一つの第一官能基に結合される、項５４に記載の融合性リポソーム。
５８. 免疫系活性化剤が免疫系活性化剤と第二官能基間に第二スペーサーをさらに含む、項５４に記載の融合性リポソーム。
５９. 免疫系活性化剤がＴ細胞活性化剤；炎症誘発性サイトカイン；記憶キラーＴ細胞活性化ペプチド；ウイルスペプチドを提示する可溶性ヒト白血球抗原(ｓＨＬＡ)；およびスーパー抗原から選択される、項５２〜５８の何れかに記載の融合性リポソーム。
６０. 免疫系活性化剤がＴ細胞活性化剤である、項５９に記載の融合性リポソーム。
６１. Ｔ細胞活性化剤が抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ８抗体、抗ＮＫＧ２Ｄ抗体またはこれらの組み合わせ、ＣＤ３およびＣＤ８両者と結合できる抗体およびＣＤ３およびＮＫＧ２Ｄ両者と結合できる抗体から選択される、項６０に記載の融合性リポソーム。
６２. 該免疫系活性化剤が融合性リポソームの外層、内側または外側および内側両者で該第二官能基を経て該脂質分子の少なくとも一つの第一官能基に結合され；免疫系活性化剤がＴ細胞活性化剤；炎症誘発性サイトカイン；記憶キラーＴ細胞活性化ペプチド；およびスーパー抗原から選択され；該脂質の少なくとも一部がカチオン基、カチオン性天然または合成ポリマー、カチオン性アミノ糖、カチオン性ポリアミノ酸または両親媒性癌細胞結合ペプチドをさらに含み；該脂質の少なくとも一部がホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジン酸またはこれらの組み合わせからなる群から選択されるリン脂質であり、その各々が１個または２個の同一または異なる脂肪酸残基を含み、ここで、ホスファチジル部分における脂肪酸残基が飽和、モノ−不飽和またはポリ−不飽和であり、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３または２４炭素の炭素鎖長を有し、例えばミリストイル、ステアロイル、パルミトイル、オレオイル、リノレオイル、リノレノイル(結合リノレノイルを含む)、リン脂質およびリゾリン脂質配置のアラキドノイルならびにこれらの組み合わせであり；該リポソームが該脂質または該カチオン性ポリマーの少なくとも一つに結合した安定化部分をさらに含み；特定の結合対の該第一官能基が該結合対の該相補的第二官能基と共有結合を形成できるまたは特定の結合対の該第一官能基が該結合対の該相補的第二官能基と非共有結合を形成でき；第一または第二スペーサーがＰＥＧ、(Ｃ６−Ｃ１２)アルキル、フェノール酸、安息香酸またはナフトエモノ、ジもしくはトリカルボン酸、テトラヒドロピレンモノ、ジもしくはトリカルボン酸またはその塩、環状エーテル、グルタル酸、コハク酸、ムコン酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸およびセバシン酸、約２〜２０アミノ酸残基長、例えば３アミノ酸残基長のポリ−Ｇｌｙペプチドなどのペプチドからなる群から選択され；そしてリポソームが最大２００nm、例えば約１５nm〜約２００nm、約２０nm〜約１００nm、約５０nm〜約１５０nm、約５０nm〜約９０nm、約８０nm〜約１００nm、約１１０nm〜約２００nm、例えば約１００nmのサイズを有する、項５４に記載の融合性リポソーム。
６３. 免疫系活性化剤がＴ細胞活性化剤であり；カチオン基を含む該脂質分子の少なくとも一つが１,２−ジオレイル−３−トリメチルアンモニウムプロパンクロライド(ＤＯＴＡＰ)、ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン(ＤＯＧＳ)、１,２−ジ−Ｏ−オクタデセニル−３−トリメチルアンモニウムプロパン(ＤＯＴＭＡ)、ジメチルジオクタデシルアンモニウム(１８：０  ＤＤＡＢ)およびＮ１−[２−((１Ｓ)−１−[(３−アミノプロピル)アミノ]−４−[ジ(３−アミノ−プロピル)アミノ]ブチル−カルボキサミド)エチル]−３,４−ジ[オレイルオキシ]−ベンズアミド(ＭＶＬ５)から選択され、該合成ポリマーがポリエチレンイミン(ＰＥＩ)およびポリ(２−(ジメチルアミノ)エチルメタクリレートから選択され、該天然ポリマーがキトサンであり、該アミノ糖がグルコサミンであり、該カチオン性ポリアミノ酸がポリ(Ｌ−リシン)、ポリ(Ｌ−アルギニン)、ポリ(Ｄ−リシン)、ポリ(Ｄ−アルギニン)、ポリ(Ｌ−オルニチン)およびポリ(Ｄ−オルニチン)から選択されまたは該両親媒性癌細胞結合ペプチドがセクロピンＡ；セクロピンＡ１〜８；および環状ＣＮＧＲＣから選択され；該脂質分子の少なくとも一つが１−パルミトイル−２−オレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(ＰＯＰＣ)および１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＯＰＥ)；１,２−ジミリストイル−３−ホスファチジルコリン(ＤＭＰＣ)；１,２−ジステアロイル−３−ホスファチジルコリン(ＤＳＰＣ)；１,２−ジミリストレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１４：１(Δ９−Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジミリステライドイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１４：１(Δ９−Ｔｒａｎｓ)ＰＣ)；１,２−ジパルミトレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１６：１(Δ９−Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジパルミテライドイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１６：１(Δ９−Ｔｒａｎｓ)ＰＣ)；１,２−ジペトロセレノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：１(Δ６−Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルコリン(１８：１(Δ９−Ｃｉｓ)ＰＣ(ＤＯＰＣ))；１,２−ジエライドイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：１(Δ９−Ｔｒａｎｓ)ＰＣ)；１,２−ジリノレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：２(Ｃｉｓ)ＰＣ(ＤＬＰＣ))；１,２−ジリノレノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(１８：３(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジエイコセノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２０：１(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジアラキドノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２０：４(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジドコサヘキサエノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２２：６(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジエルコイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２２：１(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジネルボノイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン(２４：１(Ｃｉｓ)ＰＣ)；１,２−ジミリストイル−３−−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＭＰＥ)；１,２−ジパルミトイル−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＰＰＥ)；ジパルミトイルホスファチジルコリン(ＤＰＰＣ)；１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルエタノールアミン(ＤＯＰＥ)；１,２−ジステアロイル−３−ホスファチジルエタノールアミ���(ＤＳＰＥ)；１,２−ジミリストイル−３−ホスファチジルセリン(ＤＭＰＳ)；１,２−ジパルミトイル−３−ホスファチジルセリン(ＤＰＰＳ)；パルミトイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン(ＰＯＰＥ)；および１,２−ジオレイル−３−ホスファチジルセリン(ＤＯＰＳ)からなる群から選択され；該安定化部分がポリエチレングリコール(ＰＥＧ)、ポリプロピレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン(ＰＶＰ)、デキストラン、ポリアミノ酸、メチル−ポリオキサゾリン、ポリグリセロール、ポリ(アクリロイルモルホリン)およびポリアクリルアミドから選択され；特定の結合対の該第一官能基がクリック化学反応により該結合対の該相補的第二官能基と共有結合を形成でき、ｉ)特定の結合対の第一官能基がアルキンまたはホスフィンであり、該結合対の第二官能基がアジドであるかまたはその逆であり；ii)特定の結合対の第一官能基がシクロアルケン、シクロアルキン、シクロプロパン、イソニトリル(イソシアニド)またはビニルボロン酸であり、該結合対の第二官能基がテトラジンであるかまたはその逆であり；iii)特定の結合対の第一官能基がアルキンまたはマレイミドであり、該結合対の第二官能基がチオールであるかまたはその逆であり；iv)特定の結合対の第一官能基が結合ジエンであり、該結合対の第二官能基が置換アルケンであるかまたはその逆であり；ｖ)特定の結合対の第一官能基がアルケン、アルキンまたはアセチレン化銅であり、該結合対の第二官能基がニトロンであるかまたはその逆であり；vi)特定の結合対の第一官能基がアルデヒドまたはケトンであり、該結合対の第二官能基がアルコキシアミン、ヒドロキシルアミン、ヒドラジンまたはヒドラジドであるかまたはその逆であり；またはvii)特定の結合対の第一官能基がアルデヒドであり、該結合対の第二官能基がアミンであるかまたはその逆であり；viii)官能基または特定の結合対の第一官能基がビオチンであり、該結合対の第二官能基がビオチン結合ペプチドまたはビオチン結合タンパク質から選択されるその結合パートナーであるかまたはその逆であり；そして第一または第二スペーサーが約１０６Da〜約４kDaの分子量のＰＥＧまたは(Ｃ６−Ｃ１２)アルキル、好ましくはヘプチルまたはドデカノイルである、項６２に記載の融合性リポソーム。
６４. Ｔ細胞活性化剤が抗ＣＤ３抗体、抗ＣＤ８抗体、抗ＮＫＧ２Ｄ抗体またはこれらの組み合わせ、ＣＤ３およびＣＤ８両者と結合できる抗体およびＣＤ３およびＮＫＧ２Ｄ両者と結合できる抗体から選択され；カチオン基を含む該脂質分子の少なくとも一つがＤＯＴＡＰであり；該リン脂質がＤＯＰＣ、ＰＯＰＣ、ＤＭＰＣ、ＤＰＰＣ、ＤＯＰＥ、ＰＯＰＥ、ＤＳＰＥ、ＤＭＰＥおよびＤＰＰＥから選択され；安定化部分が約１０６Da〜約４kDaの分子量のＰＥＧであり；特定の結合対がアルキン−アジドであり、該ビオチン結合タンパク質がアビジン、ストレプトアビジンおよび抗ビオチン抗体から選択されまたは該ビオチン結合ペプチドがAEGEFCSWAPPKASCGDPAK(配列番号１１)、CSWRPPFRAVC(配列番号１２)、CSWAPPFKASC(配列番号１３)およびCNWTPPFKTRC(配列番号１４)から選択され；そして第一または第二スペーサーが約１９４Da(ＰＥＧ４)の分子量のＰＥＧである、項６３に記載の融合性リポソーム。
６５. 安定化部分が約２kDaの分子量のＰＥＧである、項６４に記載の融合性リポソーム。
６６. 融合性リポソームが
ａ. ＤＯＰＣ：ＤＯＴＡＰ：ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋ：ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４−Ｎ３またはＤＯＰＣ：ＤＯＴＡＰ：ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋ：ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４−ＢＣＮ；または
ｂ. ＤＭＰＣ：コレステロール：ＤＭＰＥ−ＰＥＧ４−Ｎ３またはＤＭＰＣ：コレステロール：ＤＭＰＥ−ＰＥＧ４−ＢＣＮ、
を含み、ここで、ＰＥＧ２Ｋが約２kDaの分子量を有するＰＥＧを表し、そしてＰＥＧ４が約１９４Daの分子量を有するＰＥＧを表し、そしてＤＯＰＣの相対的モル量が最大約８０％であり、ＤＯＴＡＰの相対的モル量が最大約８０％であり、ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋの相対的モル量が最大約２０％であり、ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４の相対的モル量が最大約２０％であり、ＨＳＰＣの相対的モル量が最大約６５％であり、コレステロールの相対的モル量が最大約４０％であり、そしてＤＭＰＣの相対的モル量が最大約７０％であり、そして融合性リポソームが約８０nmまたは１００nmのサイズを有する、項６５に記載の方法。
６７. 融合性リポソームが
(ｉ)モル比５２.５：３５：０.６：１０、５２.５：３５：１.２５：１０、５２.５：３５：２.５：１０、５２.５：３５：５：１０、５２.５：３５：０.６：５、５２.５：３５：１.２５：５、５２.５：３５：２.５：５、５２.５：３５：５：５、６５：２０：５：１０、５０：３５：５：１０、５２.５：３５：１.２５：７、５２.５：３５：１.２５：５または５２.５：３５：２.５：７でＤＯＰＣ：ＤＯＴＡＰ：ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋ：ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４−Ｎ３またはＤＯＰＣ：ＤＯＴＡＰ：ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋ：ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４−ＢＣＮ；または
(ii)モル比６０：３５：５でＤＭＰＣ：コレステロール：ＤＭＰＥ−ＰＥＧ４−Ｎ３またはＤＭＰＣ：コレステロール：ＤＭＰＥ−ＰＥＧ４−ＢＣＮ
を含む、項６６に記載の方法。
６８. 融合性リポソームがモル比５２.５：３５：２.５：５でＤＯＰＣ：ＤＯＴＡＰ：ＤＳＰＥ−ＰＥＧ２Ｋ：ＤＯＰＥ−ＰＥＧ４−Ｎ３を含む、項６７に記載の融合性リポソーム。
６９. 項１〜６８の何れかに定義された融合性リポソーム。
７０. 外層で結合した免疫系活性化剤を伴う融合性リポソームを製造する方法であって、項５２に記載の融合性リポソームと、結合対の相補的第二官能基で官能化された免疫系活性化剤の反応を含み、ここで、該第二官能基は該第一官能基に結合し、それにより外層で結合した該Ｔ細胞活性化剤を有する該融合性リポソームを産生する、方法。
７１. 内層および外層両者に結合した免疫系活性化剤を有する融合性リポソームを製造する方法であって：
(ｉ)複数の項５２に記載の脂質分子と、結合対の第二官能基で官能化されたＴ細胞活性化剤を反応させ、ここで、該第二官能基は該脂質分子の該第一官能基に結合し、それにより、Ｔ細胞活性化剤に結合した脂質分子を産生し；そして
(ii)工程(ｉ)で得られた該脂質分子から該融合性リポソームを調製し、
それにより、内層および外層両者で結合した該Ｔ細胞活性化剤で官能化された融合性リポソームを産生する
工程を含む、方法。
７２. 内層で結合した免疫系活性化剤を伴う融合性リポソームを製造する方法であって、
(ｉ)項５２に記載の脂質分子および該脂質分子の該第一官能基に結合できる結合対の第二官能基で官能化された免疫系活性化剤を含むリポソームを溶液中で調製し、それにより、該Ｔ細胞活性化剤の一部を封入し；
(ii)溶液から非封入Ｔ細胞活性化剤を除去し；
(iii)工程(ｉ)で調製したリポソームの水性内部で脂質分子と封入Ｔ細胞活性化剤を反応させここで、該Ｔ細胞活性化剤の該第二官能基は該脂質分子の該第一官能基に結合し、それにより、内層で結合した該Ｔ細胞活性化剤で官能化された融合性リポソームを産生する
工程を含む、方法。
７３. 該溶液が少なくとも一つの酸化−還元触媒をさらに含む、項７２に記載の方法。
７４. 該少なくとも一つの酸化−還元触媒が銅(Ｉ)塩であり、これが非封入Ｔ細胞活性化剤に加えて工程(ii)で除去され、工程(iii)の反応が銅依存的クリック化学反応である、項７３に記載の方法。
７５. 融合性リポソームが最大２００nm、例えば約１５nm〜約２００nm、約２０nm〜約１００nm、約５０nm〜約１５０nm、約５０nm〜約９０nm、約８０nm〜約１００nm、約１１０nm〜約２００nm、例えば約１００nmのサイズを有する、項７０〜７４の何れかに記載の方法。
７６.
ａ. 項５２に記載の融合性リポソームを含む第一容器；
ｂ. 該脂質分子の該第一官能基と結合できる結合対の第二官能基で官能化されたＴ細胞活性化剤を含む第二容器；および
ｃ. 患者に(ａ)の融合性リポソームおよび続いて(ｂ)のＴ細胞活性化剤を投与することを含む、癌を処置する方法についての指示を含むパンフレット
を含む、キット。