【手続補正書】
【提出日】令和3年10月1日(2021.10.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下：
(i)hCMVエンハンサー配列、
(ii)hCMVプロモーター配列、
(iii)スプライスドナー領域、
(iv)細胞由来エンハンサー配列、及び
(v)スプライスアクセプター領域
を含むプロモーター。
【請求項２】
導入遺伝子及びプロモーターを含む発現カセットを含むアデノウイルスベクターであって、該プロモーターが
(i)hCMVエンハンサー配列、
(ii)hCMVプロモーター配列、
(iii)スプライスドナー領域、
(iv)細胞由来エンハンサー配列、及び
(v)スプライスアクセプター領域
を含む、上記アデノウイルスベクター。
【請求項３】
第１及び第２の発現カセットを含むアデノウイルスベクターであって、各発現カセットが導入遺伝子及びプロモーターを含み、第１の発現カセット及び／又は第２の発現カセットのプロモーターが、以下
(i)hCMVエンハンサー配列、
(ii)hCMVプロモーター配列、
(iii)スプライスドナー領域、
(iv)細胞由来エンハンサー配列、及び
(v)スプライスアクセプター領域
を含むプロモーターである、上記アデノウイルスベクター。
【請求項４】
上記細胞由来エンハンサー配列がユビキチン（UBC）エンハンサー配列である、請求項１〜３のいずれか１項に記載のプロモーター又はアデノウイルスベクター。
【請求項５】
上記UBCエンハンサーが配列番号１１の配列を含む、請求項４に記載のプロモーター又はアデノウイルスベクター。
【請求項６】
配列番号８、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２の１以上を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載のプロモーター又はアデノウイルスベクター。
【請求項７】
上記プロモーターが更に
(vi)ニワトリβ−アクチン配列の断片
を含み、該ニワトリβ−アクチン配列の断片がニワトリβ−アクチン配列の5'非翻訳領域を含み、かつ上記プロモーター配列を含まない、請求項１〜６のいずれか１項に記載のプロモーター又はアデノウイルスベクター。
【請求項８】
配列番号３に対して少なくとも84.1％の同一性を有する核酸配列を含む、請求項１に記載のプロモーター。
【請求項９】
導入遺伝子及びプロモーターを含む発現カセットを含む請求項２に記載のアデノウイルスベクターであって、該プロモーターが配列番号３に対して少なくとも84.1％の同一性を有する核酸配列を含む、上記アデノウイルスベクター。
【請求項１０】
第１及び第２の発現カセットを含む請求項３に記載のアデノウイルスベクターであって、各発現カセットが導入遺伝子及びプロモーターを含み、第１の発現カセット及び／又は第２の発現カセットのプロモーターが、配列番号３に対して少なくとも84.1％の同一性を有するプロモーターである、上記アデノウイルスベクター。
【請求項１１】
上記第１の発現カセットが上記プロモーターを含む、請求項１０に記載のアデノウイルスベクター。
【請求項１２】
上記第２の発現カセットが上記プロモーターを含む、請求項１０又は１１に記載のアデノウイルスベクター。
【請求項１３】
上記プロモーターが、配列番号３に対して少なくとも約84.5％、少なくとも約85％、少なくとも約86％、少なくとも約87％、少なくとも約88％、少なくとも約89％、又はそれ以上の配列同一性を有する核酸配列を含む、請求項８〜１２のいずれか１項に記載のプロモーター又はアデノウイルスベクター。
【請求項１４】
上記プロモーターが、配列番号３に対して少なくとも約90％、少なくとも約95％、少なくとも約96％、少なくとも約97％、少なくとも約98％、少なくとも約99％、又はそれ以上の配列同一性を有する核酸配列を含む、請求項８〜１３のいずれか１項に記載のプロモーター又はアデノウイルスベクター。
【請求項１５】
上記プロモーターが配列番号３の核酸配列を含む、請求項１〜６のいずれか１項に記載のプロモーター又はアデノウイルスベクター。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００９７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００９７】
この実験において、HeLaをmoi＝50vp／細胞で感染させ、ChAd155ウイルスの感染後2日（48時間）、4日（96時間）及び7日（1週間）でSeAPの測定を行った。
図７からわかるように、新規増強hCMVプロモーターを用いて構築したベクターは、測定した全ての時点において、他の2種のベクターよりも高いSeAP発現を示した。
本発明は以下を提供する。
１．  以下：
(i)hCMVエンハンサー配列、
(ii)hCMVプロモーター配列、
(iii)スプライスドナー領域、
(iv)細胞由来エンハンサー配列、及び
(v)スプライスアクセプター領域
を含むプロモーター。
２．  導入遺伝子及びプロモーターを含む発現カセットを含むアデノウイルスベクターであって、該プロモーターが
(i)hCMVエンハンサー配列、
(ii)hCMVプロモーター配列、
(iii)スプライスドナー領域、
(iv)細胞由来エンハンサー配列、及び
(v)スプライスアクセプター領域
を含む、上記アデノウイルスベクター。
３．  第１及び第２の発現カセットを含むアデノウイルスベクターであって、各発現カセットが導入遺伝子及びプロモーターを含み、第１の発現カセット及び／又は第２の発現カセットのプロモーターが、以下
(i)hCMVエンハンサー配列、
(ii)hCMVプロモーター配列、
(iii)スプライスドナー領域、
(iv)細胞由来エンハンサー配列、及び
(v)スプライスアクセプター領域
を含むプロモーターである、上記アデノウイルスベクター。
４．  上記細胞由来エンハンサー配列がユビキチン（UBC）エンハンサー配列である、上記１〜３のいずれかに記載のプロモーター又はアデノウイルスベクター。
５．  上記UBCエンハンサーが配列番号１１の配列を含む、上記４に記載のプロモーター又はアデノウイルスベクター。
６．  配列番号８、配列番号１０、配列番号１１及び配列番号１２の１以上を含む、上記１〜５のいずれかに記載のプロモーター又はアデノウイルスベクター。
７．  上記第１の発現カセットが上記プロモーターを含む、上記３に記載のアデノウイルスベクター。
８．  上記第２の発現カセットが上記プロモーターを含む、上記３又は７に記載のアデノウイルスベクター。
９．  上記プロモーターが更に
(vi)ニワトリβ−アクチン配列の断片
を含み、該ニワトリβ−アクチン配列の断片がニワトリβ−アクチン配列の5'非翻訳領域を含み、かつ上記プロモーター配列を含まない、上記１〜８のいずれかに記載のプロモーター又はアデノウイルスベクター。
１０．  配列番号３に対して少なくとも84.1％の同一性を有する核酸配列を含むプロモーター。
１１．  導入遺伝子及びプロモーターを含む発現カセットを含むアデノウイルスベクターであって、該プロモーターが配列番号３に対して少なくとも84.1％の同一性を有する核酸配列を含む、上記アデノウイルスベクター。
１２．  第１及び第２の発現カセットを含むアデノウイルスベクターであって、各発現カセットが導入遺伝子及びプロモーターを含み、第１の発現カセット及び／又は第２の発現カセットのプロモーターが、配列番号３に対して少なくとも84.1％の同一性を有するプロモーターである、上記アデノウイルスベクター。
１３．  上記第１の発現カセットが上記プロモーターを含む、上記１２に記載のアデノウイルスベクター。
１４．  上記第２の発現カセットが上記プロモーターを含む、上記１２又は１３に記載のアデノウイルスベクター。
１５．  上記プロモーターが、配列番号３に対して少なくとも約84.5％、少なくとも約85％、少なくとも約86％、少なくとも約87％、少なくとも約88％、少なくとも約89％、又はそれ以上の配列同一性を有する核酸配列を含む、上記１０〜１４のいずれかに記載のプロモーター又はアデノウイルスベクター。
１６．  上記プロモーターが、配列番号３に対して少なくとも約90％、少なくとも約95％、少なくとも約96％、少なくとも約97％、少なくとも約98％、少なくとも約99％、又はそれ以上の配列同一性を有する核酸配列を含む、上記１０〜１５のいずれかに記載のプロモーター又はアデノウイルスベクター。
１７．  上記プロモーターが配列番号３の核酸配列を含む、上記１〜７のいずれかに記載のプロモーター又はアデノウイルスベクター。
１８．  上記プロモーターが配列番号３の核酸配列からなる、上記１〜８のいずれかに記載のプロモーター又はアデノウイルスベクター。