【手続補正書】
【提出日】令和3年6月14日(2021.6.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
媒体（５０）中の生体分子（１１４）の検出システムを製造する方法であって、
第１のチャネル領域（２１５）を備えた第１の検出器部（２１０）および第２のチャネル領域（２２５）を備えた第２の検出器部（２２０）を提供し、前記第１の検出器部（２１０）および前記第２の検出器部（２２０）のそれぞれは、基板（６１０、６１０ｂ）を含み、かつ、第１の電極（３１５）および第２の電極（３２５）は、前記第１の検出器部（２１０）の前記基板（６１０ａ）上に形成されるステップ（Ｓ１１０）と、
少なくとも１つの細孔（１１０）を備えた膜（１２０）を提供するステップ（Ｓ１２０）と、
前記第１のチャネル領域（２１５）および前記第２のチャネル領域（２２５）の少なくとも一部が前記膜（１２０）によって分離され、前記第１のチャネル領域（２１５）および前記第２のチャネル領域（２２５）は、前記媒体（５０）が前記膜（１２０）の前記少なくとも１つの細孔（１１０）を通る流路（１３０）を形成するために、互いに接続されて、チャネルシステムを形成するように、前記第１の検出器部（２１０）および前記第２の検出器部（２２０）を前記膜（１２０）の両側に配置するステップ（Ｓ１３０）と、を含み、
前記膜を通る前記流路（１３０）に沿って、バイオレセプター（１１２）を前記膜（１２０）上に形成して、前記流路（１３０）に沿った流れを測定することによって前記媒体（５０）中の前記生体分子（１１４）の濃度を決定し、
前記配置ステップ（Ｓ１３０）が、
前記第１の検出器部（２１０）または前記第２の検出器部（２２０）上に前記膜（１２０）を配置することと、次いで
検出器領域（１２５）の外側の前記膜（１２０）の一部を除去する、
方法。
【請求項２】
前記膜（１２０）と接触する粘着層（６８０）を形成することを更に含み、前記粘着層（６８０）は、前記細孔（１１０）の少なくとも数個を前記粘着層（６８０）によって閉じられるような様式で前記膜（１２０）と接触させ、それにより前記媒体（５０）の流量測定のための前記細孔（１１０）の数を減らすことによって前記膜（１２０）の感度を上げる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
機能化によって前記膜（１２０）に前記バイオレセプター（１１２）を付着させることを更に含み、前記機能化は、前記膜（１２０）の両側の前記第１の検出器部（２１０）および前記第２の検出器部（２２０）の前記配置の前または後に行われる、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記機能化は、少なくとも以下の機能化ステップ：
−アミン反応性中間体を得るためにカルボキシ末端基を活性化するステップと、
−前記膜（１２０）上に所望のバイオレセプター（１１２）を形成するために前記アミン反応性中間体をアミド化するステップと、を含み、
前記機能化が前記膜（１２０）のすべての領域で同じ様式で起こるか、あるいは、前記膜（１２０）が異なった生体分子（１１４）に感受性となるように、前記機能化中に、異なったバイオレセプター（１１２）が異なった領域内の前記細孔（１１０）で形成される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記第１の検出器部（２１０）および／または前記第２の検出器部（２２０）上に前記膜（１２０）を積層することを更に含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記第１の検出器部（２１０）および前記第２の検出器部（２２０）が、少なくとも５０℃または少なくとも６５℃の温度での熱処理によって前記膜（１２０）の両側で互いに接続される、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記媒体（５０）中の前記生体分子（１１４）の前記濃度が、以下の測定：（ｉ）前記少なくとも１つの細孔（１１０）を通る流量測定、（ｉｉ）インピーダンス測定、および（ｉｉｉ）動電測定、特に電気泳動測定または電気浸透測定、のうちの少なくとも１つによって決定される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記生体分子（１１４）が、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）を含み、前記バイオレセプター（１１２）が、特に以下のアプタマー：
ｄ）ＮＨ２−Ｃ６−ＣＣＧＵＣＡＧＧＵＣＡＣＧＧＣＡＧＣＧＡＡＧＣＵＣＵＡＧＧＣＧＣＧ
ＧＣＣＡＧＵＵＧＣ−ＯＨ、
ｅ）ＮＨ２−Ｃ６−ＴＴＴＴＴＡＡＴＴＡＡＡＧＣＴＣＧＣＣＡＴＣＡＡＡＴＡＧＣＴＴＴ−ＯＨ、
ｆ）ＮＨ２−Ｃ６−ＡＣＧＣＴＣＧＧＡＴＧＣＣＡＣＴＡＣＡＧＧＴＴＧＧＧＧＴＣＧＧＧＣＡＴＧＣＧＴＣＣＧＧＡＧＡＡＧＧＧＣＡＡＡＣＧＡＧＡＧＧＴＣＡＣＣＡＧＣＡＣＧＴＣＣＡＴＧＡＧ−ＯＨのうちの１つであるアプタマーを含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
媒体（５０）中の生体分子（１１４）のための検出システムであって、
第１のチャネル領域（２１５）を有する第１の検出器部（２１０）および第２のチャネル領域（２２５）を有する第２の検出器部（２２０）であって、前記第１の検出器部（２１０）および前記第２の検出器部（２２０）のそれぞれは基板（６１０、６１０ｂ）を含み、および、前記第１の検出器部（２１０）の前記基板（６１０ａ）上および前記媒体（５０）を導入することができる前記第１のチャネル領域（２１５）および前記第２のチャネル領域（２２５）内において形成される第１の電極（３１５）および第２の電極（３２５）と、
前記第１の検出器部（６８０ａ）の前記基板（６８０ａ）上の第１の粘着層（６８０ａ）および前記第２の検出器部（６８０ｂ）の前記基板（６８０ｂ）上の第２の粘着層（６８０ｂ）と、
少なくとも１つの細孔（１１０）を含み、前記第１のチャネル領域（２１５）を前記第２のチャネル領域（２２５）から分離し、前記第１の電極（３１５）と前記第２の電極（３２５）との間に流動的に配置され、前記第１の粘着層（６８０ａ）および前記第２の粘着層（６８０ｂ）の間で形成され、かつ、前記第１の粘着層および前記第２の粘着層（６８０ａ、６８０ｂ）を検出器領域（１２５）の外側でも分離する、膜（１２０）と、を含み、
バイオレセプター（１１２）が前記細孔（１１０）上またはその中に形成され、特に以下のアプタマー：
（ｉｖ）ＮＨ２−Ｃ６−ＣＣＧＵＣＡＧＧＵＣＡＣＧＧＣＡＧＣＧＡＡＧＣＵＣＵＡＧＧＣＧＣＧＧＣＣＡＧＵＵＧＣ−ＯＨ、
（ｖ）ＮＨ２−Ｃ６−ＴＴＴＴＴＡＡＴＴＡＡＡＧＣＴＣＧＣＣＡＴＣＡＡＡＴＡＧＣＴＴＴ−ＯＨ、
（ｖｉ）ＮＨ２−Ｃ６−ＡＣＧＣＴＣＧＧＡＴＧＣＣＡＣＴＡＣＡＧＧＴＴＧＧＧＧＴＣＧＧ
ＧＣＡＴＧＣＧＴＣＣＧＧＡＧＡＡＧＧＧＣＡＡＡＣＧＡＧＡＧＧＴＣＡＣ
ＣＡＧＣＡＣＧＴＣＣＡＴＧＡＧ−ＯＨのうちの１つを含み、
それによって、前記媒体（５０）中のＰＳＡ濃度が、前記第１の電極（３１５）と前記第２の電極（３２５）との間の前記媒体（５０）の流路（１３０）に沿った抵抗測定によって測定できる、検出システム。
【請求項１０】
前記膜（１２０）内の前記少なくとも１つの細孔（１１０）が前記流路（１３０）に沿ってテーパー状または円筒状のプロファイルを有する、請求項９に記載の検出システム。
【請求項１１】
異なった生体分子（１１４）の同時検出を可能にするために、異なった領域の前記膜が異なったレセプター（１１２）またはアプタマーを含む、請求項９または１０に記載の検出システム。
【請求項１２】
前記第１のチャネル領域（２１５）および／または前記第２のチャネル領域（２２５）は、前記流路（１３０）に垂直な、最大１ｍｍまたは最大５０ミクロンもしくはせいぜい１０ミクロンの最大チャネル幅を有する、請求項９〜１１のいずれか１項に記載の検出システム。
【請求項１３】
検出に必要な媒体（５０）の量を減らすために、媒体（５０）を分析物注入口（５３０）に、また電解質を電解質注入口（５２０）に導入できるように、前記第２の電極（３２５）に前記電解質注入口（５２０）および前記第１の電極（３１５）に前記分析物注入口（５３０）を更に含む、請求項９〜１２のいずれか１項に記載の検出システム。
【請求項１４】
前記電極（３１５）と前記第２の電極（３２５）との間の電気抵抗の関数である電気変数を測定することによって、ヒトの体外で、媒体（５０）中の生体分子（１１４）を検出するための、請求項９〜１３のいずれか１項に記載の検出システムの使用。