【手続補正書】
【提出日】令和3年8月6日(2021.8.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
それを必要とする対象の加齢関連症状を治療する医薬組成物であって、治療有効量のニコチンアミドモノヌクレオチド（ＮＭＮ）ならびにニコチン酸、ニセリトロール、ニコチン酸トコフェロール、β−ピリジルカルビノール、ヘキサニコチン酸イノシトール、そのいずれかのエステル、そのいずれかの薬学的に許容可能な塩、およびそのいずれかの組み合わせから成る群から選択される少なくとも１つの追加の化合物を含み、該加齢関連症状がインスリン感受性の損失、インスリン分泌の損失、インスリンの作用と分泌の損失、記憶機能の障害、眼機能の低下、網膜の変性、機能低下、およびそのいずれかの組み合わせから成る群から選択される少なくとも１つの症状を含む医薬組成物。
【請求項２】
前記少なくとも１つの追加の化合物がニコチン酸、そのいずれかのエステル、またはそのいずれかの薬学的に許容可能な塩を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
前記ニコチン酸のエステルまたは薬学的に許容可能な塩が構造式（Ｉ）
【化１】
2020530460.tif 000001
［式中、Ｒはメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−オクチル、２−クロロエチル、２−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、２−メトキシエチル、２−ブトキシエチル、カルバモイルメチル、１−カルバモイルエチル、２−ジメチルアミノエチル、３−アミノプロピル、テトラヒドロフルフリル、ベンジル、フェノキシエチル、ｐ−クロロフェニル、およびｐ−ニトロフェニルから成る群から選択される］で表される化合物である、請求項２に記載の医薬組成物。
【請求項４】
Ｒが２−ジメチルアミノエチル、ｐ−クロロフェニル、およびｐ−ニトロフェニルから成る群から選択される、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項５】
それを必要とする対象の医学症状を治療する医薬組成物であって、治療有効量のニコチンアミドモノヌクレオチド（ＮＭＮ）ならびにニコチン酸、ニセリトロール、ニコチン酸トコフェロール、β−ピリジルカルビノール、ヘキサニコチン酸イノシトール、そのいずれかのエステル、そのいずれかの薬学的に許容可能な塩、およびそのいずれかの組み合わせから成る群から選択される少なくとも１つの化合物を含み、該医学症状が筋疾患、２型糖尿病、肥満、およびそのいずれかの組み合わせから成る群から選択される少なくとも１つを含む医薬組成物。
【請求項６】
前記少なくとも１つの追加の化合物がニコチン酸、そのいずれかのエステル、またはそのいずれかの薬学的に許容可能な塩を含む、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
前記ニコチン酸のエステルまたは薬学的に許容可能な塩が構造式（Ｉ）
【化２】
2020530460.tif 000002
［式中、Ｒはメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−オクチル、２−クロロエチル、２−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、２−メトキシエチル、２−ブトキシエチル、カルバモイルメチル、１−カルバモイルエチル、２−ジメチルアミノエチル、３−アミノプロピル、テトラヒドロフルフリル、ベンジル、フェノキシエチル、ｐ−クロロフェニル、およびｐ−ニトロフェニルから成る群から選択される］で表される化合物である、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項８】
Ｒが２−ジメチルアミノエチル、ｐ−クロロフェニル、およびｐ−ニトロフェニルから成る群から選択される、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項９】
それを必要とする対象のＮＭＮの細胞内取込みを亢進させる医薬組成物であって、ニコチン酸、ニセリトロール、ニコチン酸トコフェロール、β−ピリジルカルビノール、ヘキサニコチン酸イノシトール、そのいずれかのエステル、そのいずれかの薬学的に許容可能な塩、およびそのいずれかの組み合わせから成る群から選択される治療有効量の化合物を含む医薬組成物。
【請求項１０】
前記化合物がニコチン酸、そのエステル、またはその薬学的に許容可能な塩を含む、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
ニコチン酸の前記エステルまたは薬学的に許容可能な塩が構造式（Ｉ）
【化３】
2020530460.tif 000003
［式中、Ｒはメチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ヘキシル、ｎ−オクチル、２−クロロエチル、２−ヒドロキシエチル、３−ヒドロキシプロピル、２−メトキシエチル、２−ブトキシエチル、カルバモイルメチル、１−カルバモイルエチル、２−ジメチルアミノエチル、３−アミノプロピル、テトラヒドロフルフリル、ベンジル、フェノキシエチル、ｐ−クロロフェニル、およびｐ−ニトロフェニルから成る群から選択される。］で表される化合物である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
Ｒが２−ジメチルアミノエチル、ｐ−クロロフェニル、およびｐ−ニトロフェニルから成る群から選択される、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
ＮＭＮ輸送を促進する化合物を同定するための候補化合物をスクリーニングする方法であって、該方法が
（ａ）該候補化合物を、ＮＭＮトランスポータータンパク質を発現している細胞またはＮＭＮトランスポータータンパク質を含むプロテオリポソームと接触させること、および
（ｂ）該細胞における該ＮＭＮトランスポータータンパク質の該発現または活性の変化、または該プロテオリポソームにおける該ＮＭＮトランスポータータンパク質の該活性の変化を検出することを含み、
ここで、該候補化合物との接触後の、該細胞における該ＮＭＮトランスポータータンパク質の該発現または活性の変化、または該プロテオリポソームにおける該ＮＭＮトランスポータータンパク質の該活性の変化が、該候補化合物がＮＭＮの前記輸送を調節することを意味することを特徴とする方法。
【請求項１４】
前記ＮＭＮトランスポータータンパク質がＳｌｃ１２ａ８タンパク質を含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記Ｓｌｃ１２ａ８タンパク質がＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２（マウスＳｌｃ１２ａ８タンパク質）、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３（マウスＳｌｃ１２ａ８変異体Ａタンパク質）、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４（マウスＳｌｃ１２ａ８変異体Ｂタンパク質）、またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５（ヒトＳｌｃ１２ａ８タンパク質）と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％、または１００％の配列相同性を有するアミノ酸配列を含む、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
（ｉ）前記候補化合物との接触後に、前記ＮＭＮトランスポータータンパク質を発現している前記細胞における前記ＮＭＮトランスポータータンパク質の該発現または活性、を
（ｉｉ）該候補化合物との接触後に、前記ＮＭＮトランスポータータンパク質を発現していない細胞、または前記ＮＭＮトランスポータータンパク質の発現または活性が阻害されている細胞における該ＮＭＮトランスポータータンパク質の該発現または活性、
と比較することをさらに含む、請求項１３〜１５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１７】
前記ＮＭＮトランスポータータンパク質を発現していない前記細胞がＳｌｃ１２ａ８ノックアウト動物の細胞を含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
（ｉ）前記候補化合物との接触後に、前記ＮＭＮトランスポータータンパク質を含む前記プロテオリポソームにおける前記ＮＭＮトランスポータータンパク質の前記活性、を
（ｉｉ）該候補化合物との接触後に、前記ＮＭＮトランスポータータンパク質を含まないプロテオリポソーム、または前記ＮＭＮトランスポータータンパク質の該活性が阻害されているプロテオリポソームにおける前記ＮＭＮトランスポータータンパク質の前記活性、
と比較することをさらに含む、請求項１３〜１５のいずれか１つに記載の方法。
【請求項１９】
前記ＮＭＮトランスポータータンパク質を含まない前記プロテオリポソームがＳｌｃ１２ａ８ノックアウト動物の細胞のプロテオリポソームを含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記細胞が哺乳動物線維芽細胞、腸管細胞、膵細胞、肝細胞、脂肪細胞、ニューロン、またはグリア細胞を含み、または前記プロテオリポソームが哺乳動物線維芽細胞、腸管細胞、膵細胞、肝細胞、脂肪細胞、ニューロン、またはグリア細胞に由来するプロテオリポソームを含む、請求項１３〜１９のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２１】
前記細胞が、
（１）Ｓｌｃ１２ａ８タンパク質をコードするｃＤＮＡであって、
（ａ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２（マウスＳｌｃ１２ａ８タンパク質）、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３（マウスＳｌｃ１２ａ８変異体Ａタンパク質）、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４（マウスＳｌｃ１２ａ８変異体Ｂタンパク質）、もしくはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５（ヒトＳｌｃ１２ａ８タンパク質）をコードするｃＤＮＡ；
（ｂ）ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１３、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１４、またはＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１５と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくは少なくとも９９％の相同性を有するタンパク質をコードするｃＤＮＡ；もしくは
（ｃ）ＧｅｎＢａｎｋ参照配列：ＮＭ＿１３４２５１（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１）またはＳｌｃ１２ａ８ヒト全長ｃＤＮＡ（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１１）と少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９９％、もしくは１００％の配列相同性を有するｃＤＮＡ配列、
を含むｃＤＮＡ
または
（２）Ｓｌｃ１２ａ８タンパク質をコードするｃＤＮＡであって、
該哺乳動物細胞または哺乳動物細胞株が胎盤由来の細胞を含まない、ｃＤＮＡ
を含む哺乳動物細胞もしくは哺乳動物細胞株
を含む、請求項１３〜２０のいずれか１つに記載の方法。
【請求項２２】
前記プロテオリポソームがＳｌｃ１２ａ８ｃＤＮＡを含む哺乳動物細胞または哺乳動物細胞株に由来するプロテオリポソームを含む、請求項１３〜２１のいずれか１つに記載の方法。