【手続補正書】
【提出日】令和3年3月29日(2021.3.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式ＩａまたはＩｂの化合物であって、
【化１】
2020520981.tif 000001
式中、
Ｒ１は、直鎖もしくは分岐鎖（Ｃ１〜Ｃ１８）アルキル、または（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキルから選択され；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立して、分岐鎖（Ｃ３〜Ｃ１８）アルキルもしくは（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキルから選択されるか、またはＲ２およびＲ３はこれらが結合している炭素原子と一緒になって環式もしくは多環式の縮合環、スピロ環もしくは架橋環を形成し；
Ｒ４は、式：
【化２】
2020520981.tif 000002
の基であり；
Ｒ５はＨまたは−Ｏ−Ｒ４基に対してオルト位もしくはパラ位のいずれかで結合したハロゲンであり；
Ａは−Ｏ−Ｒ４基に対してオルト位もしくはパラ位のいずれかで結合した式−ＣＨ＝ＣＨ−Ｅのπ＊アクセプター基であり、Ｅは−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯ（Ｃ１〜Ｃ１８）アルキル、４−ピリジニル、メチルピリジニウム−４−イル、３，３−ジメチル−３Ｈ−インドリル、または１，３，３−トリメチル−３Ｈ−インドール−１−イウム−２−イルであり；
Ｐｅｐ１は、少なくとも２個のアミノ酸残基からなるプロテアーゼ切断可能ペプチド部分であり、そのカルボン酸基を介して前記アニリン基と結合しており、前記ペプチド部分は保護されていているか、もしくはそのアミノ基によりポリエチレングリコール（ＰＥＧ）含有基と結合しており；
Ｌは存在せず；ならびに
Ｐｅｐ２は存在しない、化合物。
【請求項２】
式ＩａまたはＩｂの化合物であって、
【化３】
2020520981.tif 000003
式中、
Ｒ１は、直鎖もしくは分岐鎖（Ｃ１〜Ｃ１８）アルキル、または（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキルから選択され；
Ｒ２およびＲ３は、各々独立して、分岐鎖（Ｃ３〜Ｃ１８）アルキルもしくは（Ｃ３〜Ｃ７）シクロアルキルから選択されるか、またはＲ２およびＲ３はこれらが結合している炭素原子と一緒になって環式もしくは多環式の縮合環、スピロ環もしくは架橋環を形成し；
Ｒ４は、式：
【化４】
2020520981.tif 000004
の基であり；
Ｒ５はＨまたは−Ｏ−Ｒ４基に対してオルト位もしくはパラ位のいずれかで結合したハロゲンであり；
Ａは−Ｏ−Ｒ４基に対してオルト位もしくはパラ位のいずれかで結合した式−ＣＨ＝ＣＨ−Ｅのπ＊アクセプター基であり、Ｅは−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯ（Ｃ１〜Ｃ１８）アルキル、４−ピリジニル、メチルピリジニウム−４−イル、３，３−ジメチル−３Ｈ−インドリル、または１，３，３−トリメチル−３Ｈ−インドール−１−イウム−２−イルであり；
Ｐｅｐ１は、少なくとも２個のアミノ酸残基からなるプロテアーゼ切断可能ペプチド部分であり、そのカルボン酸基を介して前記アニリン基と結合しており；
ＬはＰｅｐ１のカルボン酸基もしくはアミノ基のいずれかによりＰｅｐ１とアミド結合を介して結合したリンカーであり；ならびに
Ｐｅｐ２はそのアミノ基もしくはカルボン酸基によりアミド結合を介して、もしくはそのチオール基のいずれかによりＬと結合した細胞透過性ペプチド部分である、
化合物。
【請求項３】
（ｉ）Ｒ１は、直鎖または分岐鎖（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルである、および／または
（ｉｉ）Ｒ２およびＲ３はこれらが結合している炭素原子と一緒になって多環式の縮合環、スピロ環もしくは架橋環を形成する、および／または
（ｉｉｉ）Ｒ５は、−Ｏ−Ｒ４基に対してオルト位もしくはパラ位のいずれかで結合したハロゲンである、および／または
（ｉｖ）Ａは−Ｏ−Ｒ４基に対してオルト位に結合した−ＣＨ＝ＣＨ−Ｅであり、Ｅは
−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯ（Ｃ１〜Ｃ８）アルキル、４−ピリジニル、メチルピリジニウム−４−イル、３，３−ジメチル−３Ｈ−インドリル、または１，３，３−トリメチル−３Ｈ−インドール−１−イウム−２−イルである、
請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
（ｉ）Ｒ２およびＲ３はこれらが結合している炭素原子と一緒になってアダマンチルを形成する、および／または
（ｉｉ）Ｅは、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、または−ＣＯＯ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルである、請求項３に記載の化合物。
【請求項５】
Ｒ１は、直鎖または分岐鎖（Ｃ１〜Ｃ８）アルキルであり；
Ｒ２およびＲ３はこれらが結合している炭素原子と一緒になって多環式の縮合環、スピロ環もしくは架橋環を形成し；
Ｒ５は、−Ｏ−Ｒ４基に対してオルト位に結合したハロゲンであり；ならびに
Ａは、−Ｏ−Ｒ４基に対してオルト位に結合した−ＣＨ＝ＣＨ−Ｅであり、Ｅは、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯ（Ｃ１〜Ｃ8）アルキル、４−ピリジニル、メチルピリジニウム−４−イル、３，３−ジメチル−３Ｈ−インドリル、または１，３，３−トリメチル−３Ｈ−インドール−１−イウム−２−イルである、
請求項１または２に記載の化合物。
【請求項６】
Ｒ１はメチルであり；Ｒ２およびＲ３はこれらが結合している炭素原子と一緒になってアダマンチルを形成し；Ｒ５は−Ｏ−Ｒ４基に対してオルト位に結合したハロゲンであり；ならびにＥは−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯ（Ｃ１〜Ｃ４）アルキルである、請求項５に記載の化合物。
【請求項７】
Ｅは、−ＣＮ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＣＨ３、または−ＣＯＯＣ（ＣＨ３）３である、請求項６に記載の化合物。
【請求項８】
Ｐｅｐ１は、アミノ酸配列Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｎｌｅ、Ａｌａ−Ａｌａ−ＡｓｎまたはＨｉｓ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎを含むまたはからなるペプチド部分であり、前記アミノ酸配列は（ｉ）それぞれ、シトルリン、リジン、グリシン、ノルロイシン、アスパラギンまたはグルタミンのカルボン酸基を介して前記アニリン基と結合し；および（ｉｉ）そのアミノ基において保護されているか、もしくはアミド結合を介して前記アミノ基によりＰＥＧ含有基と結合している、請求項１および３〜７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項９】
（ｉ）前記ＰＥＧ含有基は、式：
【化５】
2020520981.tif 000005
（式中、ｎは１〜２２７の整数である。）
である、または
（ｉｉ）Ｐｅｐ１は、それぞれ、シトルリン、リジン、グリシン、ノルロイシン、アスパラギンまたはグルタミンのカルボン酸基を介して前記アニリン基と結合された配列Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｎｌｅ、Ａｌａ−Ａｌａ−ＡｓｎまたはＨｉｓ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−
Ｇｌｎのペプチド部分であり、それぞれ、バリン、フェニルアラニン、グリシン、グリシン、アラニンまたはヒスチジンのαアミノ基においてアミノ保護基により保護されている、または
（ｉｉｉ）Ｐｅｐ１は、それぞれ、シトルリン、リジン、グリシン、ノルロイシン、アスパラギンまたはグルタミンのカルボン酸基を介して前記アニリン基と結合された配列Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｎｌｅ、Ａｌａ−Ａｌａ−ＡｓｎまたはＨｉｓ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎのペプチド部分であり、それぞれ、バリン、フェニルアラニン、グリシン、グリシン、アラニンまたはヒスチジンのαアミノ基を介して式：
【化６】
2020520981.tif 000006
（式中、ｎは１〜２２７の整数である。）
のＰＥＧ含有基と結合している、
請求項８に記載の化合物。
【請求項１０】
Ｐｅｐ１は、それぞれ、シトルリン、リジン、グリシン、ノルロイシン、アスパラギンまたはグルタミンのカルボン酸基を介して前記アニリン基と結合したアミノ酸配列Ｖａｌ−Ｃｉｔ、Ｐｈｅ−Ｌｙｓ、Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｌｅｕ−Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｎｌｅ、Ａｌａ−Ａｌａ−ＡｓｎまたはＨｉｓ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎを含むまたはからなるペプチド部分であり；ＬはＰｅｐ１のカルボン酸基またはアミノ基のいずれかによりアミド結合を介してＰｅｐ１と結合したリンカーであり；およびＰｅｐ２はそのチオール基によりＬと結合したペプチド部分である、請求項２〜７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項１１】
Ｌは、Ｐｅｐ１のアミノ基によりアミド結合を介してＰｅｐ１と結合した式：
【化７】
2020520981.tif 000007
（式中、ｍは１〜２０の整数である。）
のリンカーであり、Ｌのアルキレン鎖は１つ以上の−Ｏ−基が割り込んでいてもよく；および
Ｐｅｐ２は前記システイン残基のチオール基によりＬと結合した配列Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓのペプチド部分である、
請求項１０に記載の化合物。
【請求項１２】
Ｒ１はメチルであり；Ｒ２およびＲ３はこれらが結合している炭素原子と一緒になってアダマンチルを形成し；Ｒ５は−Ｏ−Ｒ４基に対してオルト位に結合したＣｌであり；Ａは−Ｏ−Ｒ４基に対してオルト位に結合した−ＣＨ＝ＣＨ−Ｅであり；Ｅは−ＣＯＯＣＨ３または−ＣＮであり；
（ｉ）Ｐｅｐ１は、シトルリンのカルボン酸基を介して前記アニリン基と結合した配列Ｖａｌ−Ｃｉｔのペプチド部分であり、バリンのアミノ基においてカルボキシベンジルにより保護されており；
（ｉｉ）Ｐｅｐ１は、グルタミンのカルボン酸基を介して前記アニリン基と結合した配列Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎのペプチド部分であり、ヒスチジンのαアミノ基においてＮ-モルホリンカルボニルにより保護されており；
（ｉｉｉ）Ｐｅｐ１は、シトルリンのカルボン酸基を介して前記アニリン基と結合した配列Ｖａｌ−Ｃｉｔのペプチド部分であり、バリンのアミノ基を介して式：
【化８】
2020520981.tif 000008
（式中、ｎは１７である。）
のＰＥＧ含有基と結合しているか；または
（ｉｖ）Ｐｅｐ１は、それぞれ、シトルリンもしくはグルタミンのカルボン酸基を介して前記アニリン基と結合した配列Ｖａｌ−ＣｉｔもしくはＨｉｓ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎのペプチド部分であり；Ｌは、それぞれ、バリンもしくはヒスチジンのαアミノ基によりアミド結合を介してＰｅｐ１と結合した式：
【化９】
2020520981.tif 000009
（式中、ｍは５の整数である。）
のリンカーであり、Ｐｅｐ２は前記システイン残基のチオール基によりＬと結合した配列Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓのペプチド部分である、
請求項１または２に記載の化合物。
【請求項１３】
化合物Ｉｂ−１ａ、Ｉｂ−１ｂ、Ｉｂ−２ａ、Ｉｂ−２ｂ、Ｉｂ−３ａ、Ｉｂ−３ｂ、Ｉｂ−４ａ、Ｉｂ−４ｂ、Ｉｂ−５ａ、またはＩｂ−５ｂ：
【表１−１】
2020520981.tif 000010
【表１−２】
2020520981.tif 000011
【表１−３】
2020520981.tif 000012
から選択される、請求項１２に記載の化合物。
【請求項１４】
請求項１〜１３に記載の化合物および担体を含む組成物。
【請求項１５】
請求項１２または１３に記載の化合物を含む、請求項１４に記載の組成物。
【請求項１６】
診断またはイメージングにおいてインビボで使用するための、請求項１４または１５に記載の組成物。
【請求項１７】
インビトロでのサンプル中のプロテアーゼの存在の決定方法、またはそのレベルの測定方法であって、前記方法は：
（ｉ）Ｐｅｐ１が前記プロテアーゼにより切断可能な基である、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の化合物と、または前記化合物を含む組成物と、前記サンプルとを接触させて、これにより前記化合物を、前記サンプル中に存在する場合に前記プロテアーゼにより発光性化学種に加水分解すること、および
（ｉｉ）前記発光性化学種の化学発光を検出すること、
を含む、方法。
【請求項１８】
前記サンプルは、体液、前記体液が溶解している水溶液、および組織生検サンプルからなる群から選択される生体サンプルである、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記プロテアーゼは、カテプシンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｋ、Ｌ１、Ｌ２、Ｏ、Ｓ、ＷおよびＺなどのカテプシン、レグマイン、前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、またはメタロプロテアーゼである、請求項１７または１８に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４５】
特定の実施形態では、本明細書に開示されている化合物は、式ＩａまたはＩｂの化合物であり、Ｒ１はメチルであり；Ｒ２およびＲ３はこれらが結合する炭素原子と一緒になってアダマンチルを形成し；Ｒ５は−Ｏ−Ｒ４基に対してオルト位に結合したＣｌであり；Ａは−Ｏ−Ｒ４基に対してオルト位に結合した−ＣＨ＝ＣＨ−Ｅであり；Ｅは−ＣＯＯＣＨ３または−ＣＮであり；（ｉ）Ｐｅｐ１はシトルリンのカルボン酸基を介してアニリン基と結合した配列Ｖａｌ−Ｃｉｔのペプチド部分であり、バリンのアミノ基においてカルボキシベンジルにより保護されており（例えば、表２の化合物Ｉｂ−１ａおよびＩｂ−１ｂ）；（ｉｉ）Ｐｅｐ１はグルタミンのカルボン酸基を介してアニリン基と結合した配列Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎのペプチド部分であり、ヒスチジンのαアミノ基においてＮ−モルホリンカルボニルにより保護されており（例えば、表２の化合物Ｉｂ−２ａおよびＩｂ−２ｂ）；（ｉｉｉ）Ｐｅｐ１はシトルリンのカルボン酸基を介してアニリン基と結合された配列Ｖａｌ−Ｃｉｔのペプチド部分であり、バリンのアミノ基を介して式：
【化８】
2020520981.tif 000013
（式中、ｎは１７である（例えば、表２の化合物Ｉｂ−３ａおよびＩｂ−３ｂ）。）
のＰＥＧ含有基と結合している；かまたは（ｉｖ）Ｐｅｐ１は、それぞれ、シトルリンもしくはグルタミンのカルボン酸基を介して前記アニリン基と結合した配列Ｖａｌ−ＣｉｔもしくはＨｉｓ−Ｓｅｒ−Ｓｅｒ−Ｌｙｓ−Ｌｅｕ−Ｇｌｎのペプチド部分であり；Ｌは、それぞれ、バリンまたはヒスチジンのαアミノ基によりアミド結合を介してＰｅｐ１と結合した式：
【化９】
2020520981.tif 000014
（式中、ｍは５の整数である。）
のリンカーであり；Ｐｅｐ２はシステイン残基のチオール基によりＬと結合した配列Ｃｙｓ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓのペプチド部分である（例えば、表２の化合物Ｉｂ−４ａ、Ｉｂ−４ｂ、Ｉｂ−５ａおよびＩｂ−５ｂ）。