【手続補正書】
【提出日】令和2年12月8日(2020.12.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つのベクターを含むγδＴ細胞であって、前記少なくとも１つのベクターは、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）および生存因子および任意選択でストレス誘発性抗原受容体の発現を導き、前記ＣＡＲは、クロロトキシンまたは配列番号１と少なくとも約９０％の配列相同性を有するクロロトキシンの機能的変異体を含む細胞外ドメイン、膜貫通ドメインおよび少なくとも１つの細胞内シグナル伝達ドメインを含み、前記生存因子は、化学療法剤に対する耐性を付与するポリペプチドである、γδＴ細胞。
【請求項２】
前記細胞内シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３ゼータ、ＭＢ１鎖、Ｂ２９、ＦｃＲＩＩＩ、ＦｃＲＩ、およびこれらの組み合わせからなる群から選択される、請求項１に記載のγδＴ細胞。
【請求項３】
前記膜貫通ドメインが、Ｔ細胞受容体アルファ鎖、Ｔ細胞受容体ベータ鎖、Ｔ細胞受容体ゼータ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５４、ＫＩＲＤＳ２、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＬＦＡ−１、ＩＣＯＳ、４−１ＢＢ、ＧＩＴＲ、ＣＤ４０、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０、ＣＤ１６０、ＣＤ１９、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、ＩＴＧＡ１、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９Ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ−６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤｌｌｄ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＣＤ１ １ａ、ＬＦＡ−１、ＩＴＧＡＭ、ＣＤｌｌｂ、ＩＴＧＡＸ、ＣＤｌ  ｌｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ１８、ＬＦＡ−１、ＩＴＧＢ７、ＴＮＦＲ２、ＤＮＡＭ１、ＳＬＡＭＦ４、ＣＤ８４、ＣＤ９６、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、Ｌｙ９、ＣＤ１６０、ＰＳＧＬ１、ＣＤ１００、ＳＬＡＭＦ６、ＳＬＡＭ、ＢＬＡＭＥ、ＳＥＬＰＬＧ、ＬＴＢＲ、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、およびＮＫＧ２Ｃからなる群から選択される、請求項１および２のいずれか一項に記載のγδＴ細胞。
【請求項４】
前記ＣＡＲが、共刺激ドメインをさらに含む、請求項２または請求項３に記載のγδＴ細胞。
【請求項５】
前記共刺激ドメインが、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４−１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ−１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原−１（ＬＦＡ−１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７−Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンド、ＣＤ５、ＩＣＡＭ−１、ＧＩＴＲ、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＣＤ１６０、ＣＤ１９、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ８β、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、ＩＴＧＡ４、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９Ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ−６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤｌｌｄ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＣＤｌｌａ、ＬＦＡ−１、ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１ １ｂ、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ１ １ｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ１８、ＬＦＡ−１、ＩＴＧＢ７、ＴＮＦＲ２、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４、２Ｂ４）、ＣＤ８４、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＰＳＧＬ１、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ６９、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ−Ａ、Ｌｙ１０８）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０、ＩＰＧ−３）、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、ＬＴＢＲ、ＬＡＴ、ＧＡＤＳ、ＳＬＰ−７６、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、およびＮＫＧ２Ｄからなる群から選択されるポリペプチドの機能的シグナル伝達ドメインを含む、請求項４に記載のγδＴ細胞。
【請求項６】
前記ＣＡＲが、細胞外スペーサーをさらに含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載のγδＴ細胞。
【請求項７】
前記細胞外スペーサーが、ヒトＩｇＤまたはヒトＩｇＧ１のヒンジ領域の全部または一部、および任意選択でヒトＩｇＧ１由来の免疫グロブリン重鎖定常領域の全部または一部を含む、請求項６に記載のγδＴ細胞。
【請求項８】
前記ＣＡＲが、柔軟性リンカーをさらに含む、請求項１に記載のγδＴ細胞。
【請求項９】
前記柔軟性リンカーが、１〜１０コピー存在する、配列番号２の配列を有する、請求項８に記載のγδＴ細胞。
【請求項１０】
前記少なくとも１つのベクターが、ストレス誘発性抗原受容体をコードする遺伝子の発現を導く、請求項１〜９のいずれか一項に記載のγδＴ細胞。
【請求項１１】
前記γδＴ細胞が、ストレス誘発性抗原受容体を天然に発現する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のγδＴ細胞。
【請求項１２】
前記ストレス誘発性抗原受容体が、ＮＫＧ２Ｄ受容体である、請求項１１に記載のγδＴ細胞。
【請求項１３】
前記生存因子が、前記化学療法剤により作成される処置環境において前記γδＴ細胞が生存することを可能にする、請求項１〜１２のいずれか一項に記載のγδＴ細胞。
【請求項１４】
前記化学療法剤が、トリメトトレキセート、テモゾロミド、ラルチトレキセド、Ｓ−（４−ニトロベンジル）−６−チオイノシン、６−ベンジグアニジン（６−ｂｅｎｚｙｇｕａｎｉｄｉｎｅ）、ニトロソウレア、フォテムスチン、シタラビン、カンプトテシン、ドキソルビシン、メルファラン、ニトロソウレアおよびこれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、請求項１３に記載のγδＴ細胞。
【請求項１５】
前記生存因子が、Ｏ６−メチルグアニン−ＤＮＡメチルトランスフェラーゼ、多剤耐性タンパク質１、５’ヌクレオチダーゼＩＩ、ジヒドロ葉酸還元酵素およびチミジル酸シンターゼからなる群から選択され、前記ストレス誘発性抗原受容体が、ＮＫＧ２Ｄ受容体である、請求項１〜１４のいずれか一項に記載のγδＴ細胞。
【請求項１６】
前記γδＴ細胞が、単離されている、請求項１に記載のγδＴ細胞。
【請求項１７】
γδＴ細胞、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物であって、前記γδＴ細胞は、少なくとも１つのベクターを含み、前記少なくとも１つのベクターは、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）および生存因子の発現を導き、前記ＣＡＲは、クロロトキシンまたは配列番号１と少なくとも約９０％の配列相同性を有するクロロトキシンの機能的変異体を含む細胞外ドメイン、膜貫通ドメインおよび任意選択で少なくとも１つの細胞内シグナル伝達ドメインを含み、前記生存因子は、化学療法剤に対する耐性を付与するポリペプチドである、医薬組成物。
【請求項１８】
前記γδＴ細胞が、フローサイトメトリーによって決定されるとき、前記組成物の全細胞集団の６０％以上で存在する、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項１９】
前記ＣＡＲが、２つ以上のクロロトキシンまたは２つ以上の機能的変異体を含む、請求項１に記載のγδ１細胞。
【請求項２０】
前記細胞外ドメインがクロロトキシンを含み、前記生存因子がＯ６−メチルグアニン−ＤＮＡメチルトランスフェラーゼである、請求項１５に記載のγδＴ細胞。
【請求項２１】
前記細胞内シグナル伝達ドメインが存在し、ＣＤ３ζである、請求項２０に記載のγδＴ細胞。
【請求項２２】
前記γδＴ細胞がストレス誘発性抗原受容体を天然に発現し、前記ストレス誘発性抗原受容体がＮＫＧ２Ｄ受容体である、請求項２０または２１のいずれか一項に記載のγδＴ細胞。
【請求項２３】
前記細胞外ドメインがクロロトキシンを含み、前記生存因子がＯ６−メチルグアニン−ＤＮＡメチルトランスフェラーゼである、請求項１７または１８に記載の医薬組成物。
【請求項２４】
がんの処置において使用するための、請求項１７、１８および２３のいずれか一項に記載の医薬組成物であって、前記化学療法剤と同時に、もしくは前記化学療法剤の投与後、またはそれらの任意の組み合わせで投与するための医薬組成物。
【請求項２５】
がんが、神経膠腫、黒色腫、神経芽細胞腫、髄芽腫または小細胞肺癌からなる群から選択される、請求項２４に記載の医薬組成物。
【請求項２６】
がんが膠芽腫である、請求項２５に記載の医薬組成物。
【請求項２７】
前記化学療法剤がテモゾロミドである、請求項２３に記載の医薬組成物。