【手続補正書】
【提出日】平成16年10月12日(2004.10.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項２】
一般式（１）に表される基幹化合物が、アクチニド酸（Ａｃｔｉｎｉｄｉｃ  ａｃｉｄ；化合物１）、アミリン酸（Ａｍｉｒｉｎｉｃ  ａｃｉｄ；化合物２）、３−エピミクロメール酸（３−ｅｐｉ−Ｍｉｃｒｏｍｅｒｉｃ  ａｃｉｄ；化合物３）、イレクジノールＢ（ＩｒｅｋｕｄｉｎｏｌＢ；化合物４）、１−β−ヒドロキシ−２−オキソポモル酸（１−β−Ｈｙｄｒｏｘｙ−２−ｏｘｏｐｏｍｏｌｉｃ  ａｃｉｄ；化合物５）、エリプト酸（Ｅｌｌｉｐｔｉｃ  ａｃｉｄ；化合物６）、カマルデュレンス酸（Ｃａｍａｌｄｕｌｅｎｓｉｃ  ａｃｉｄ；化合物７）、カマルデュール酸（Ｃａｍａｌｄｕｌｉｃ  ａｃｉｄ；化合物８）、２−オキソアジア酸（２−Ｏｘｏａｓｉｔｉｃ  ａｃｉｄ；化合物９）、３−エピイレックスゲニンＡ（３−Ｅｐｉｉｌｅｘｇｅｎｉｎ  Ａ；化合物１０）、４−エピ−ピンフェンス酸（４−ｅｐｉ−Ｐｉｎｆａｅｎｓｉｃ  ａｃｉｄ；化合物１１）、モリノウルソール酸Ｂ（Ｍｏｒｉｎｏｕｒｓｏｌｉｃ  ａｃｉｄＢ；化合物１２）又はウルソール酸（化合物１３）であることを特徴とする、請求項１に記載の皮膚外用剤。
【化２】
2004091438.tif 000001
アクチニド酸
【化３】
2004091438.tif 000002
アミリン酸
【化４】
2004091438.tif 000003
３−エピミクロメール酸
【化５】
2004091438.tif 000004
イレクジノールＢ
【化６】
2004091438.tif 000005
１−β−ヒドロキシ−２−オキソポモル酸
【化７】
2004091438.tif 000006
エリプト酸
【化８】
2004091438.tif 000007
カマルデュレンス酸
【化９】
2004091438.tif 000008
カマルデュール酸
【化１０】
2004091438.tif 000009
２−オキソアジア酸
【化１１】
2004091438.tif 000010
３−エピイレックスゲニンＡ
【化１２】
2004091438.tif 000011
４−エピ−ピンフェンス酸
【化１３】
2004091438.tif 000012
モリノウルソール酸Ｂ
【化１４】
2004091438.tif 000013
ウルソール酸
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項５】
グルコシル−Ｌ−アスコルビン酸のアシル化誘導体が、２−Ｏ−α−
Ｄ−モノグルコシル−６−Ｏ−（２−プロピルペンタノイル）−Ｌ−アスコルビン酸（化合物Ａ）、６−Ｏ−（２−ブチルヘキサノイル）−２−Ｏ−α−Ｄ−モノグルコシル−Ｌ−アスコルビン酸（化合物Ｂ）又は２−Ｏ−α−Ｄ−モノグルコシル−６−Ｏ−（２−ペンチルヘプタノイル）−Ｌ−アスコルビン酸（化合物Ｃ）であることを特徴とする、請求項１〜４何れか１項に記載の皮膚外用剤。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１９】
【化２９】
2004091438.tif 000014
モリノウルソール酸Ｂ
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２２】
この様な一般式（Ｉ）に表される基幹化合物は、多くの植物生薬より抽出、精製することができる。この様な植物生薬としては、例えばツツジ科ウワウルシ、モチノキ科クチョウチャ、モクセイ科ネズミモチ、オリーブ、バラ科リンゴ、ビワ、バラ、ワレモコウ、カリン、シソ科ローズマリー、ウツボグサ、シソ、イラクサ科イラクサ、ヤドリギ科ヤドリギ、フトモモ科ユーカリノキ、クロウメモドキ科ナツメ、グミ科ナワシログミ、クワ科ホップ等が好ましく例示できる。使用する部位としては、葉、花、果皮、全草、芽、茎などが好ましく例示できる。これらの植物生薬より、一般式（Ｉ）に表される化合物を得る方法としては、植物体乃至はその加工物に１〜１０倍量の極性溶剤を加え、室温であれば数日間、沸点付近の温度であれば数時間浸漬して抽出し、溶剤を減圧濃縮などによって除去した後、アルカリ条件下、酢酸エチルと水で液液抽出し、含アルコール水溶液層を取り、酸を加えて液性を中性に戻した後、再度酢酸エチルを加えて液液抽出し、酢酸エチル層を取り、濃縮することによって分画することができる。これを更にシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶剤；クロロホルム：メタノール＝１００：０〜９０：１０）で精製することもできる。この様な製造法によれば、一般式（Ｉ）に表される化合物のフリー体（カルボン酸体）を得ることができる。本発明の皮膚外用剤に於いては、前記一般式（Ｉ）に表される基幹化合物、その塩乃至はその誘導体が存在していれば、後記アスコルビン酸誘導体との相互作用は得られるので、抽出物を分画、精製することなく、これが必要量含まれるような量だけ、生薬抽出物を組成物に含有させることもできる。更に、これらの
一般式（Ｉ）に表される化合物には既に市販されているものも存在し、この様な市販品を購入して使用することもできる。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２７】
＜製造例３＞
製造例１のナトリウムメトキシドを、イソオクタノールとソジュムハイドライドから誘導した、ナトリウムイソオクチルオキシドに代え、ウルソール酸イソオクチル（化合物１６）２１９ｍｇを得た。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４０
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４０】
（２）本発明の皮膚外用剤の必須成分であるグルコシル−Ｌ−アスコルビン酸のアシル化誘導体
本発明の皮膚外用剤の必須成分である、グルコシル−Ｌ−アスコルビン酸のアシル化誘導体は、前記アシル基が炭素数８〜２０の分岐の脂肪族アシル基であることを特徴とする。かかるアシル基としては、例えば、イソオクタノイル基、イソパルミトイル基、イソステアロイル基、２−プロピルペンタノイル基、２−ブチルヘキサノイル基、２−ペンチルへプタノイル基などが好適に例示でき、これらの中では、上記一般式（ＩＩ）の構造を有するアシル基が特に好ましく、具体的には、２−プロピルペンタノイル基、２−ブチルヘキサノイル基、２−ペンチルへプタノイル基が特に好ましく例示できる。かかるグルコシル−Ｌ−アスコルビン酸のアシル化誘導体は、諸種の方法により調製することができる。例えば、グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸に適宜のアシル化剤を反応させれば、所望のアシル化誘導体が得られる。このとき、必要とあれば、反応系内に触媒を共存させてもよく、その触媒はリパーゼなどの酵素であってもよい。原料となるグリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は、例えば、特開平３−１３９２８８号公報、特開平３−１３５９９２号公報及び特開平３−１８３４９２号公報に記載されているように、シクロマルトデキストリン・グルカノトランスフェラーゼなどの糖転移酵素の存在下でＬ−アスコルビン酸にシクロマルトデキストリンや澱粉加水分解物などのα−グルコシル化合物を反応させるか、あるいは、特開平６−２２８１８３号公報及び特開平６−２６３７９０号公報に記載されているように、β−ガラクトシダーゼの存在下で５，６−イソプロピリデン−Ｌ−アスコルビン酸にラクトースなどのβ−ガラクトシル化合物を反応させることによって得ることができる。ちなみに、２−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の市販品としては、例えば、『ＡＡ−２Ｇ』（固形分重量当りの２−Ｏ−α−Ｄ−モノグルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸含量９８％以上、株式会社林原商事販売）が挙げられる。用途にもよるが、この発明においては、グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸は必ずしも高度に精製されておらずともよく、調製方法に特有な類縁体や他の成分との未分離組成物であっても、実質的なアシル化を妨げない他の成分との混合物であってもよい。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５８】
＜実施例３＞
上記ローション化粧料１、対照例１及び対照例２を用いて、ヘアレスマウス長期間の累積光照射皮膚損傷モデルで、本発明の皮膚外用剤の効果を確認した。即ち、ヘアレスマウスは１群１０匹で、５群５０匹を用いた。１群は、ローション化粧水１投与群、１群は対照例１投与群、１群は対照例２投与群、１群は無処置群、残る１群は光対照群とした。各動物は最初の処置の前にＴＥＷＬ（経皮散逸水分量；単位：ｇ／ｍ2／ｈ）を測定し、１日１回背部に７０ｍＪ／ｃｍ2の紫外線（光源；ＳＥランプ）を照射した後、速やかに検体を０．０５ｍｌを照射部位に塗布した。無処置群は何の処置もせず、光対照群は検体を投与せず光照射のみを行った。この作業を１日１回、１週間で５回連続して８週間行った。最後の検体投与の２４時間後、再度ＴＥＷＬを測定し、皮膚の表面の張りを肉眼で観察し、しかる後、屠殺し、皮膚凍結標本を作製し、真皮コラーゲン線維束の状態を電子顕微鏡下観察した。観察の基準は、何れも無処置群の平均を評点１とし、光対照群の平均を評点５とした場合の等尺スケールにおける評点とした。結果を平均として、表２に示す。これより、本発明の皮膚外用剤が損傷からの回復促進作用に優れること、これ故に美肌を維持する作用に優れることがわかる。又、実施例２の結果とも良く適合していることもわかる。