【手続補正書】
【提出日】令和3年10月1日(2021.10.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体試料中のミスフォールドトランスサイレチン（ＴＴＲ）を検出する方法であって、
（ａ）生体試料をＴＴＲの残基８９〜９７内のエピトープに特異的に結合する捕捉抗体およびＴＴＲの異なるエピトープに特異的に結合するレポーター抗体と接触させることであって；前記試料中にミスフォールドＴＴＲが存在する場合、前記捕捉抗体および前記レポーター抗体が前記ミスフォールドＴＴＲに結合してサンドイッチ複合体を形成する、接触させることと；
（ｂ）段階（ａ）でサンドイッチ複合体を形成する前記レポーター抗体を、もしあれば検出して前記ミスフォールドＴＴＲの有無を示すこと
を含む、方法。
【請求項２】
前記生体試料が、遺伝性ＡＴＴＲ患者に由来する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記生体試料が、Ｖ３０Ｍ、Ｙ１１４Ｃ、Ｇ４７Ｒ、Ｓ５０Ｉ、Ｔ４９Ｓ、Ｆ３３Ｖ、Ａ４５Ｔ、Ｅ８９Ｋ、Ｅ８９Ｑ、およびＶ１２２Ｉからなる群より選択される変異を有する遺伝性ＡＴＴＲ患者に由来する、請求項２に記載の方法。
【請求項４】
前記捕捉抗体が、９Ｄ５である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記レポーター抗体が、１８Ｃ５、８Ｃ３、７Ｇ７、ＡＤ７Ｆ６、ＲＴ２４、ＮＩ−３０１．３５Ｇ１１、ＭＦＤ１０１、ＭＤＦ１０２、ＭＦＤ１０３、ＭＦＤ１０５、ＭＦＤ１０７、ＭＦＤ１０８、ＭＦＤ１０９、ＭＦＤ１１１、ＭＦＤ１１４、またはそのキメラ型もしくはヒト化型またはポリクローナル抗ＴＴＲ抗体である、請求項１〜４のいずれかに記載の方法。
【請求項６】
前記レポーター抗体が、ＴＴＲの残基１０１〜１０９、１１８〜１２２、１１５〜１２４、５３〜６３、５４〜６１、３６〜４９、４９〜６１、１０９〜１２１、３０〜６６、７０〜１２７、８０〜１２７、９０〜１２７、１００〜１２７、１１０〜１２７、または１１５〜１２７内を結合する抗体である、請求項１〜４に記載の方法。
【請求項７】
前記ミスフォールドＴＴＲが、Ｅ８９Ｋ置換またはＥ８９Ｑ置換を含む、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記生体試料が、収集試料の第一のアリコートでありかつ前記方法が、ＴＴＲへの結合に関して前記捕捉抗体と競合する被験抗体をさらに含む前記収集試料の第二のアリコートに対して段階（ａ）および（ｂ）を繰り返すことをさらに含み、前記段階を繰り返すときに前記サンドイッチ複合体を形成する減少したレポーター抗体が、ミスフォールドＴＴＲに結合する前記被験抗体の能力の兆候をもたらす、請求項１〜７に記載の方法。
【請求項９】
前記被験抗体が、１４Ｇ８またはそのキメラ型もしくはヒト化型であり、前記捕捉抗体が、９Ｄ５であり、かつ前記レポーター抗体が、ポリクローナル抗ＴＴＲ抗体である、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
生体試料中の総多量体ミスフォールドトランスサイレチン（ＴＴＲ）のレベル対総ミスフォールドＴＴＲのレベルの比を決定する方法であって、
（ａ）生体試料を２部に分けることと；
（ｂ）
（ｉ）前記生体試料の第一の部分をＴＴＲの残基８９〜９７内のエピトープに特異的に結合する捕捉抗体およびＴＴＲの異なるエピトープに特異的に結合するレポーター抗体、またはＴＴＲの残基１０１〜１０９内のエピトープに特異的に結合する捕捉抗体およびＴＴＲの異なるエピトープに特異的に結合するレポーター抗体と接触させることであって；ミスフォールドＴＴＲが前記試料中に存在する場合、前記捕捉抗体および前記レポーター抗体が前記ミスフォールドＴＴＲに結合してサンドイッチ複合体を形成する、接触させること；ならびに
（ｉｉ）段階（ｂ）（ｉ）でサンドイッチ複合体を形成する前記レポーター抗体を、もしあれば検出して前記ミスフォールドＴＴＲの有無を示すこと
によって前記生体試料の前記第一の部分中の総ミスフォールドＴＴＲを検出することと；
（ｃ）
（ｉ）前記生体試料の第二の部分を残基８９〜９７内のエピトープに特異的に結合する捕捉抗体およびＴＴＲの残基８９〜９７内のエピトープに特異的に結合するレポーター抗体、または残基１０１〜１０９内のエピトープに特異的に結合する捕捉抗体およびＴＴＲの残基１０１〜１０９内のエピトープに特異的に結合するレポーター抗体と接触させることであって；前記試料中に多量体ミスフォールドＴＴＲが前記試料中に存在する場合、前記捕捉抗体および前記レポーター抗体が前記多量体ミスフォールドＴＴＲに結合してサンドイッチ複合体を形成する、接触させることと；
（ｉｉ）段階（ｃ）（ｉ）でサンドイッチ複合体を形成する前記レポーター抗体を、もしあれば検出して前記多量体ミスフォールドＴＴＲの有無を示すこと
（ｄ）によって前記生体試料の前記第二の部分中の総多量体ミスフォールドＴＴＲを検出することと、（ｃ）の総多量体ミスフォールドＴＴＲのレベル対（ｂ）の総ミスフォールドＴＴＲのレベルの比を算出すること
を含む、方法。
【請求項１１】
生体試料中のミスフォールドトランスサイレチン（ＴＴＲ）を検出する方法であって、
（ａ）生体試料をＴＴＲの残基１０１〜１０９内のエピトープに特異的に結合する捕捉抗体およびＴＴＲの異なるエピトープに特異的に結合するレポーター抗体と接触させることであって；ミスフォールドＴＴＲが前記試料中に存在する場合、前記捕捉抗体および前記レポーター抗体が前記ミスフォールドＴＴＲに結合してサンドイッチ複合体を形成する、接触させることと；
（ｂ）段階（ａ）で前記ミスフォールドＴＴＲに結合する前記レポーター抗体を、もしあれば検出して前記ミスフォールドＴＴＲの有無を示すこと
を含む、方法。
【請求項１２】
前記生体試料が、遺伝性ＡＴＴＲ患者に由来する、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記生体試料が、Ｖ３０Ｍ、Ｙ１１４Ｃ、およびＳ５０Ｌからなる群より選択される変異を有する遺伝性ＡＴＴＲ患者に由来する、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記捕捉抗体が、１８Ｃ５である、請求項１１に記載の方法。
【請求項１５】
前記レポーター抗体が、９Ｄ５、１４Ｇ８、５Ａ１、６Ｃ１、８Ｃ３、７Ｇ７、ＡＤ７Ｆ６、ＲＴ２４、ＮＩ−３０１．３５Ｇ１１、ＭＦＤ１０１、ＭＤＦ１０２、ＭＦＤ１０３、ＭＦＤ１０５、ＭＦＤ１０７、ＭＦＤ１０８、ＭＦＤ１０９、ＭＦＤ１１１、ＭＦＤ１１４、またはそのキメラ型もしくはヒト化型またはポリクローナル抗ＴＴＲ抗体である、請求項請求項１１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記レポーター抗体が、ＴＴＲの残基８９〜９７、１１８〜１２２、１１５〜１２４、５３〜６３、５４〜６１、３６〜４９、４９〜６１、１０９〜１２１、３０〜６６、７０〜１２７、８０〜１２７、９０〜１２７、１００〜１２７、１１０〜１２７、または１１５〜１２７内を結合する抗体である、請求項１１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
被験抗体で治療された対象由来の生体試料中に残存するミスフォールドトランスサイレチン（ｍｉｓ−ＴＴＲ）を検出することによる標的が前記ｍｉｓ−ＴＴＲの残基１０１〜１０９内のエピトープである、前記対象に投与された前記被験抗体のｉｎ  ｖｉｖｏ標的結合を決定する方法であって、
（ａ）前記生体試料を残基１０１〜１０９内のエピトープに特異的に結合する捕捉抗体および前記捕捉抗体のものとは異なるＴＴＲ内のエピトープに特異的に結合するレポーター抗体と接触させることであって；ミスフォールドＴＴＲが前記試料中に存在する場合、前記捕捉抗体および前記レポーター抗体が前記ミスフォールドＴＴＲに結合してサンドイッチ複合体を形成する、接触させることと；
（ｂ）段階（ａ）でサンドイッチ複合体を形成する前記レポーター抗体を、あるならば検出して前記ミスフォールドＴＴＲの有無を示すこと
を含む、方法。
【請求項１８】
前記レポーター抗体が、電気化学発光標識を有しかつ電気化学発光によって検出される、請求項１〜１７のいずれかに記載の方法。
【請求項１９】
前記捕捉抗体が、ビオチン標識を有する、請求項１〜１８のいずれかに記載の方法。
【請求項２０】
前記捕捉抗体が、前記接触させる段階の前に固相に結合される、請求項１〜１９のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】
前記捕捉抗体が、リンカーを介して前記固相に結合される、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記固相が、少なくとも１つの電極を含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項２３】
前記生体試料が、トランスサイレチン介在性のアミロイドーシスのための治療を受けている患者に由来する、請求項１〜２２のいずれかに記載の方法。
【請求項２４】
９Ｄ５または１８Ｃ５およびポリクローナル抗ＴＴＲ抗体を含む、キット。