【手続補正書】
【提出日】令和3年10月7日(2021.10.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）遺伝子全体の欠失、実質的に遺伝子全体の欠失、ＡＣＴドメインの欠失、ＡＣＴドメインの５０％を超える欠失、ＡＣＴドメインの非活性化、およびＵＴａｓｅドメインの非活性化からなる群から選択される、ｇｌｎＤの修飾、
（ｉｉ）ｇｌｎＡの発現または活性の変化をもたらすｇｌｎＡの修飾、または
（ｉｉｉ）ｒｐｏＮの発現の変化、任意で、増加したｒｐｏＮの発現
を含む、遺伝子操作された細菌。
【請求項２】
前記修飾が、ｇｌｎＡの発現の低下をもたらす、請求項１に記載の遺伝子操作された細菌。
【請求項３】
前記ｇｌｎＡの修飾が、未変性のｇｌｎＡプロモーターを、より活性の低いプロモーター、ｇｌｎＢプロモーター、ｇｌｎＤプロモーター、またはｇｌｎＥプロモーターで置き換えることを含む、請求項１に記載の遺伝子操作された細菌。
【請求項４】
遺伝子操作されたジアゾ栄養細菌、または属間である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の遺伝子操作された細菌。
【請求項５】
未変性のｒｐｏＮプロモーターを削除し、強力な構成的プロモーターで置き換えることによって、ｒｐｏＮ発現が増加する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の遺伝子操作された細菌。
【請求項６】
外因性窒素の存在下で空中窒素を固定することができる、請求項１〜３のいずれか一項に記載の遺伝子操作された細菌。
【請求項７】
窒素固定遺伝子ネットワークまたは窒素同化遺伝子ネットワークの修飾をさらに含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の遺伝子操作された細菌。
【請求項８】
ＮｉｆＡの修飾、ＮｉｆＡの発現の増加をもたらす修飾、ＮｉｆＬの修飾、ＮｉｆＬの発現の低下をもたらす修飾、ＮｉｆＨの修飾、ＮｉｆＨの発現の増加をもたらす修飾、ＧｌｎＥの修飾、ＧｌｎＥの活性の低下をもたらす修飾、ＡｍｔＢの修飾、またはＡｍｔＢの活性の低下をもたらす修飾をさらに含む、請求項１〜３のいずれか一項に記載の遺伝子操作された細菌。
【請求項９】
植物中の大気由来窒素の量を増加させる方法であって、前記植物を、請求項１〜８のいずれか一項に記載の複数の前記遺伝子操作された細菌と接触させることを含む、方法。
【請求項１０】
前記遺伝子操作された細菌が、前記植物の種子に、前記植物の苗に、植え付け後、ただし前記植物の収穫前に、または、側面施肥として、前記植物に適用される、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記遺伝子操作された細菌が、液体製剤として前記植物に適用される、または、発芽後１ヶ月〜８ヶ月の間に、２ヶ月〜８ヶ月の間に、１ヶ月〜３ヶ月の間に、もしくは３ヶ月〜６ヶ月の間に適用される、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
前記植物が、穀物植物、トウモロコシ植物、稲植物、小麦植物、または大豆植物からなる群より選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
種子および種子コーティングを含む組成物であって、前記種子コーティングが、請求項１〜８のいずれか一項に記載の複数の前記遺伝子操作された細菌を含む、組成物。
【請求項１４】
前記種子が、穀物種子、トウモロコシ種子、小麦種子、稲種子、大豆種子、ライ麦種子、またはモロコシ種子である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
植物および請求項１〜８のいずれか一項に記載の複数の前記遺伝子操作された細菌を含む組成物であって、任意で、前記植物が、穀物植物、トウモロコシ植物、稲植物、小麦植物、大豆植物、ライ麦植物、またはモロコシ植物である、前記組成物。
【請求項１６】
前記植物が、苗である、請求項１５に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
本開示は、種子および種子コーティングを含む組成物を提供、ここで、種子コーティングは、本明細書に記載の複数の当該遺伝子操作された細菌を含む。いくつかの実施形態では、種子は、穀物種子である。いくつかの実施形態では、種子は、トウモロコシ種子、小麦種子、稲種子、大豆種子、ライ麦種子、およびモロコシ種子からなる群から選択される。本開示は、植物および本明細書に記載の複数の当該遺伝子操作された細菌を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、植物は、苗である。いくつかの実施形態では、種子は、穀物種子である。いくつかの実施形態では、種子は、トウモロコシ、稲、小麦、大豆、ライ麦、およびモロコシからなる群から選択される。
[本発明1001]
ｇｌｎＤの修飾を含む遺伝子操作された細菌であって、前記修飾が、遺伝子全体の欠失、実質的に遺伝子全体の欠失、ＡＣＴドメインの欠失、ＡＣＴドメインの50％を超える欠失、ＡＣＴドメインの非活性化、およびＵＴａｓｅドメインの非活性化からなる群から選択される、遺伝子操作された細菌。
[本発明1002]
ｇｌｎＡの発現または活性の変化をもたらすｇｌｎＡの修飾を含む、遺伝子操作された細菌。
[本発明1003]
前記修飾が、ｇｌｎＡの発現の低下をもたらす、本発明1002の遺伝子操作された細菌。
[本発明1004]
前記修飾が、未変性のｇｌｎＡプロモーターを、より活性の低いプロモーターで置き換えることを含む、本発明1002の遺伝子操作された細菌。
[本発明1005]
前記修飾が、前記未変性のｇｌｎＡプロモーターを、ｇｌｎＢプロモーター、ｇｌｎＤプロモーター、およびｇｌｎＥプロモーターからなる群から選択されるプロモーターで置き換えることを含む、本発明1002の遺伝子操作された細菌。
[本発明1006]
ｇｌｎＡの発現または活性の低下をもたらすｇｌｎＡの修飾を含む、遺伝子操作された細菌。
[本発明1007]
ｒｐｏＮの発現の変化を含む、遺伝子操作された細菌。
[本発明1008]
増加したｒｐｏＮの発現を有している、本発明1007の遺伝子操作された細菌。
[本発明1009]
増加したｒｐｏＮの発現を有している、本発明1008の遺伝子操作された細菌。
[本発明1010]
遺伝子操作されたジアゾ栄養細菌である、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1011]
未変性のｒｐｏＮプロモーターを削除し、強力な構成的プロモーターで置き換えることによって、ｒｐｏＮ発現が増加する、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1012]
属間である、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1013]
外因性窒素の存在下で空中窒素を固定することができる、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1014]
窒素固定遺伝子ネットワークの修飾を含む、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1015]
ＮｉｆＡの修飾を含む、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1016]
ＮｉｆＡの発現の増加をもたらす修飾を含む、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1017]
ＮｉｆＬの修飾を含む、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1018]
ＮｉｆＬの発現の低下をもたらす修飾を含む、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1019]
ＮｉｆＨの修飾を含む、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1020]
ＮｉｆＨの発現の増加をもたらす修飾を含む、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1021]
Ｎｉｆクラスター遺伝子の発現の増加をもたらす修飾を含む、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1022]
窒素同化遺伝子ネットワークの修飾を含む、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1023]
ＧｌｎＥの修飾を含む、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1024]
ＧｌｎＥの活性の低下をもたらす修飾を含む、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1025]
ａｍｔＢの活性の低下をもたらす修飾を含む、本発明1001〜1009のいずれかの遺伝子操作された細菌。
[本発明1026]
植物中の大気由来窒素の量を増加させる方法であって、前記植物を、本発明1001〜1025のいずれかの複数の前記遺伝子操作された細菌と接触させることを含む、方法。
[本発明1027]
前記遺伝子操作された細菌が、前記植物の種子に適用される、本発明1026の方法。
[本発明1028]
前記遺伝子操作された細菌が、前記植物の苗に適用される、本発明1026の方法。
[本発明1029]
前記遺伝子操作された細菌が、液体製剤で前記植物に適用される、本発明1026の方法。
[本発明1030]
前記遺伝子操作された細菌が、植え付け後、ただし前記植物の収穫前に前記植物に適用される、本発明1026の方法。
[本発明1031]
前記遺伝子操作された細菌が、側面施肥として前記植物に適用される、本発明1026の方法。
[本発明1032]
前記遺伝子操作された細菌が、発芽後1ヶ月〜8ヶ月の間に前記植物に適用される、本発明1026の方法。
[本発明1033]
前記遺伝子操作された細菌が、発芽後2ヶ月〜8ヶ月の間に前記植物に適用される、本発明1026の方法。
[本発明1034]
前記遺伝子操作された細菌が、発芽後1ヶ月〜3ヶ月の間に前記植物に適用される、本発明1026の方法。
[本発明1035]
前記遺伝子操作された細菌が、発芽後3ヶ月〜6ヶ月の間に前記植物に適用される、本発明1026の方法。
[本発明1036]
前記植物が、穀物植物である、本発明1026の方法。
[本発明1037]
前記植物が、トウモロコシ植物である、本発明1026の方法。
[本発明1038]
前記植物が、稲植物である、本発明1026の方法。
[本発明1039]
前記植物が、小麦植物である、本発明1026の方法。
[本発明1040]
前記植物が、大豆植物である、本発明1026の方法。
[本発明1041]
種子および種子コーティングを含む組成物であって、前記種子コーティングが、本発明1001〜1025のいずれかの複数の前記遺伝子操作された細菌を含む、組成物。
[本発明1042]
前記種子が、穀物種子である、本発明1041の組成物。
[本発明1043]
前記種子が、トウモロコシ種子、小麦種子、稲種子、大豆種子、ライ麦種子、およびモロコシ種子からなる群から選択される、本発明1041の組成物。
[本発明1044]
植物および本発明1001〜1025のいずれかの複数の前記遺伝子操作された細菌を含む、組成物。
[本発明1045]
前記植物が、苗である、本発明1044の組成物。
[本発明1046]
前記種子が、穀物種子である、本発明1044の組成物。
[本発明1047]
前記種子が、トウモロコシ、稲、小麦、大豆、ライ麦、およびモロコシからなる群から選択される、本発明1044の組成物。