【手続補正書】
【提出日】令和3年1月15日(2021.1.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも２つのエフェクター分子を含む多標的分子であって、前記エフェクター分子は、エンドソーム切断可能なリンカー又はプロテアーゼ切断可能なリンカーを介して一緒に連結され、前記リンカーは炭水化物リンカーであり、前記リンカーは、血液若しくは血清（又は細胞外条件を模倣するように選択されたインビトロ条件下）と比較して、細胞内（又は細胞内条件を模倣するように選択されたインビトロ条件下）で少なくとも１．２５倍速く切断される、多標的分子。
【請求項２】
少なくとも１つのリガンドが前記多標的分子と共役される、請求項１に記載の多標的分子。
【請求項３】
前記エフェクター分子が、独立に、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アンチセンスオリゴヌクレオチド、マイクロＲＮＡ、抗マイクロＲＮＡ又は抗ｍｉｒ、スーパーｍｉｒ、アンタゴｍｉｒ、リボザイム、三重鎖形成性オリゴヌクレオチド、デコイオリゴヌクレオチド、スプライススイッチングオリゴヌクレオチド、免疫刺激オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化剤、Ｕ１アダプター、ＣＲＩＳＰＲ  Ｃａｓ及びこれらの任意の組合せからなる群から選択される、請求項１又は２に記載の多標的分子。
【請求項４】
前記多標的分子が、少なくとも２つの標的核酸の遺伝子発現を、前記エフェクター分子が一緒に連結されていない場合と比べてそれぞれ少なくとも７５％だけ調節する、請求項１から３のいずれか一項に記載の多標的分子。
【請求項５】
前記少なくとも２つのエフェクター分子の１つは第１の標的核酸の遺伝子発現を調節し、かつ前記少なくとも２つのエフェクター分子のもう１つは第２の核酸の遺伝子発現を調節する、請求項４に記載の多標的分子。
【請求項６】
前記第１の標的核酸及び前記第２の標的核酸が同じである、請求項５に記載の多標的分子。
【請求項７】
リガンドが前記少なくとも２つのエフェクター分子の１つの３’末端において共役される、又は
リガンドが前記少なくとも２つのエフェクター分子の１つの５’末端において共役される、請求項１から６のいずれか一項に記載の多標的分子。
【請求項８】
前記第１のエフェクター分子が第１の二本鎖ｓｉＲＮＡ分子であり、かつ前記第２のエフェクター分子が第２の二本鎖ｓｉＲＮＡ分子である、請求項１から７のいずれか一項に記載の多標的分子。
【請求項９】
前記第１のｓｉＲＮＡ分子のセンス鎖が前記第２のｓｉＲＮＡ分子のセンス鎖に共有結合される、又は
前記第１のｓｉＲＮＡ分子のセンス鎖が前記第２のｓｉＲＮＡ分子のアンチセンス鎖に共有結合される、又は
前記第１のｓｉＲＮＡ分子のアンチセンス鎖が前記第２のｓｉＲＮＡ分子のアンチセンス鎖に共有結合される、請求項８に記載の多標的分子。
【請求項１０】
リガンドがセンス鎖の１つと共役される、請求項８又は９に記載の多標的分子。
【請求項１１】
リガンドがアンチセンス鎖の１つと共役される、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の多標的分子。
【請求項１２】
修飾ヌクレオシド間結合、修飾核酸塩基、修飾糖及びこれらの任意の組合せからなる群から選択される少なくとも１つの修飾を含む、請求項８〜１１のいずれか一項に記載の多標的分子。
【請求項１３】
前記少なくとも１つの修飾がセンス鎖又はアンチセンス鎖に含まれる、請求項１２に記載の多標的分子。
【請求項１４】
前記リンカーが、
【化１−１】
2020505032.tif 000001
【化１−２】
2020505032.tif 000002
【化１−３】
2020505032.tif 000003
からなる群から選択される、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の多標的分子。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５９４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５９４】
本明細書において好ましい実施形態を示し、詳細に説明してきたが、当業者には、様々な改変形態、追加形態、代替形態などが本発明の趣旨を逸脱することなくなされ得、従って、これらは、以下の特許請求の範囲に定義する通り、本発明の範囲内であるとみなされることは明らかであろう。さらに、当業者であれば、既述していない範囲まで本明細書で説明及び例示した様々な実施形態のいずれか１つをさらに改変して、本明細書に開示する他の実施形態のいずれかに示される特徴を組み込み得ることが理解されるであろう。
最後に、本発明の好ましい実施態様を項分け記載する。
［実施態様１］
少なくとも２つのエフェクター分子を含む多標的分子であって、前記エフェクター分子は、エンドソーム切断可能なリンカー又はプロテアーゼ切断可能なリンカーを介して一緒に連結され、前記リンカーは、炭水化物リンカーであり、前記リンカーは、血液若しくは血清（又は細胞外条件を模倣するように選択されたインビトロ条件下）と比較して、細胞内（又は細胞内条件を模倣するように選択されたインビトロ条件下）で少なくとも１．２５倍速く切断される、多標的分子。
［実施態様２］
少なくとも１つのリガンドは、前記多標的分子と共役される、実施態様１に記載の多標的分子。
［実施態様３］
前記エフェクター分子は、独立に、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アンチセンスオリゴヌクレオチド、マイクロＲＮＡ、抗マイクロＲＮＡ又は抗ｍｉｒ、スーパーｍｉｒ、アンタゴｍｉｒ、リボザイム、三重鎖形成性オリゴヌクレオチド、デコイオリゴヌクレオチド、スプライススイッチングオリゴヌクレオチド、免疫刺激オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化剤、Ｕ１アダプター、ＣＲＩＳＰＲ  Ｃａｓ及びこれらの任意の組合せからなる群から選択される、実施態様１に記載の多標的分子。
［実施態様４］
前記エフェクター分子が一緒に連結されていない場合と比べてそれぞれ少なくとも７５％だけ少なくとも２つの標的核酸の遺伝子発現を調節する、実施態様１に記載の多標的分子。
［実施態様５］
前記少なくとも２つのエフェクター分子の１つは、第１の標的核酸の遺伝子発現を調節し、及び前記少なくとも２つのエフェクター分子のもう１つは、第２の核酸の遺伝子発現を調節する、実施態様４に記載の多標的分子。
［実施態様６］
前記第１の標的核酸及び前記第２の標的核酸は、同じである、実施態様５に記載の多標的分子。
［実施態様７］
前記第１の標的核酸及び前記第２の標的核酸は、同じヌクレオチド配列をターゲティングする、実施態様６に記載の多標的分子。
［実施態様８］
前記リガンドは、前記少なくとも２つのエフェクター分子の１つの３’末端において共役される、実施態様１に記載の多標的分子。
［実施態様９］
前記リガンドは、前記少なくとも２つのエフェクター分子の１つの５’末端において共役される、実施態様１に記載の多標的分子。
［実施態様１０］
前記第１のエフェクター分子は、第１の二本鎖ｓｉＲＮＡ分子であり、及び前記第２のエフェクター分子は、第２の二本鎖ｓｉＲＮＡ分子である、実施態様１に記載の多標的分子。
［実施態様１１］
前記第１のｓｉＲＮＡ分子のセンス鎖は、前記第２のｓｉＲＮＡ分子のセンス鎖に共有結合される、実施態様１０に記載の多標的分子。
［実施態様１２］
前記第１のｓｉＲＮＡ分子のセンス鎖は、前記第２のｓｉＲＮＡ分子のアンチセンス鎖に共有結合される、実施態様１０に記載の多標的分子。
［実施態様１３］
前記第１のｓｉＲＮＡ分子のアンチセンス鎖は、前記第２のｓｉＲＮＡ分子のアンチセンス鎖に共有結合される、実施態様１０に記載の多標的分子。
［実施態様１４］
前記第１及び第２のｓｉＲＮＡは、独立に、前記第１のｓｉＲＮＡ及び前記第２のｓｉＲＮＡが前記多標的分子の一部でない場合と比べて少なくとも７０％だけそれらのそれぞれの標的核酸の遺伝子発現を調節する、実施態様１０〜１３のいずれかに記載の多標的分子。
［実施態様１５］
前記第１のｓｉＲＮＡは、第１の標的核酸の遺伝子発現を調節し、及び前記第２のｓｉＲＮＡは、第２の核酸の遺伝子発現を調節する、実施態様１０〜１４のいずれかに記載の多標的分子。
［実施態様１６］
前記第１の標的核酸及び前記第２の標的核酸は、同じである、実施態様１５に記載の多標的分子。
［実施態様１７］
前記第１のｓｉＲＮＡ及び前記第２のｓｉＲＮＡは、同じ核酸配列をターゲティングする、実施態様１６に記載の多標的分子。
［実施態様１８］
前記リガンドは、前記センス鎖の１つと共役される、実施態様１０〜１７のいずれかに記載の多標的分子。
［実施態様１９］
前記リガンドは、前記センス鎖の１つの３’末端において共役される、実施態様１８に記載の多標的分子。
［実施態様２０］
前記リガンドは、前記センス鎖の１つの５’末端において共役される、実施態様１９に記載の多標的分子。
［実施態様２１］
前記リガンドは、前記アンチセンス鎖の１つの３’末端において共役される、実施態様１９に記載の多標的分子。
［実施態様２２］
前記リガンドは、前記アンチセンス鎖の１つの５’末端において共役される、実施態様１９に記載の多標的分子。
［実施態様２３］
修飾ヌクレオシド間結合、修飾核酸塩基、修飾糖及びこれらの任意の組合せからなる群から選択される少なくとも１つの修飾を含む、実施態様１０〜２２のいずれかに記載の多標的分子。
［実施態様２４］
前記少なくとも１つの修飾は、センス鎖又はアンチセンス鎖に含まれる、実施態様２３に記載の多標的分子。
［実施態様２５］
前記リンカーは、
【化１１６−１】
2020505032.tif 000004
【化１１６−２】
2020505032.tif 000005
【化１１６−３】
2020505032.tif 000006
からなる群から選択される、実施態様１〜２４のいずれかに記載の多標的分子。
［実施態様２６］
エンドソーム切断可能なリンカー又はプロテアーゼ切断可能なリンカーを介してリガンドに結合されたエフェクター分子を含むコンジュゲートであって、前記リンカーは、炭水化物リンカーであり、前記リンカーは、血液若しくは血清（又は細胞外条件を模倣するように選択されたインビトロ条件下）と比較して、細胞内（又は細胞内条件を模倣するように選択されたインビトロ条件下）で少なくとも１．２５倍速く切断される、コンジュゲート。
［実施態様２７］
前記エフェクター分子は、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、アンチセンスオリゴヌクレオチド、マイクロＲＮＡ、抗マイクロＲＮＡ又は抗ｍｉｒ、スーパーｍｉｒ、アンタゴｍｉｒ、リボザイム、三重鎖形成性オリゴヌクレオチド、デコイオリゴヌクレオチド、スプライススイッチングオリゴヌクレオチド、免疫刺激オリゴヌクレオチド、ＲＮＡ活性化剤、Ｕ１アダプター及びＣＲＩＳＰＲ  Ｃａｓからなる群から選択される、実施態様２６に記載のコンジュゲート。
［実施態様２８］
エンドソーム切断可能なリンカー又はプロテアーゼ切断可能なリンカーを介してリガンドと結合されたエンドソーム作用剤を含むコンジュゲート。
［実施態様２９］
前記リンカーは、図１〜６に示されるリンカーから選択される、実施態様２６〜２８のいずれかに記載のコンジュゲート。
［実施態様３０］
図１〜６に示されるリンカーから選択されるエンドソーム切断可能なリンカー又はプロテアーゼ切断可能なリンカーを含むプロドラッグ。