【誤訳訂正書】
【提出日】令和3年4月23日(2021.4.23)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ドナー被験者からの便細菌叢の凍結乾燥物を調製する方法であって、以下の工程、
A) ドナー被験者からの便細菌叢の試料を、(i)ポリオール、二糖〜五糖、又はそれらの混合物から少なくとも選択される凍結保護物質、及び(ii)マルトデキストリンを含む生理食塩水性溶液である希釈剤と混合する工程、及び
B) A)で得られた前記混合物を、-50℃未満の温度で凍結させ、次いで凍結乾燥させる工程、
を含む方法。
【請求項２】
前記希釈剤が、凍結保護物質として、少なくともガラクトース-ラクトース又はトレハロースを含む生理食塩水性溶液であることによって特徴づけられる、請求項1に記載の凍結乾燥物を調製する方法。
【請求項３】
前記希釈剤が、少なくともマルトデキストリンの混合物を含む生理食塩水性溶液であることによって特徴づけられる、請求項1又は2に記載の凍結乾燥物を調製する方法。
【請求項４】
前記生理食塩水性溶液中の凍結保護物質の全量が、前記溶液の全容量に対して3〜30重量%であることによって特徴づけられる、請求項1〜3の何れか1項に記載の凍結乾燥物を調製する方法。
【請求項５】
工程A)が、以下の工程、
A1) 凍結融解によって形成されるイオジキサノール又は5-（N-2,3-ジヒドロキシプロピルアセトアミド）-2,4,6-トリヨード-N,N'-ビス（2,3ジヒドロキシプロピル）イソフタルアミドの連続勾配を任意で調製する工程、
A2) 少なくとも1つのドナー被験者からの便細菌叢の試料とイオジキサノール又は5-（N-2,3-ジヒドロキシプロピルアセトアミド）-2,4,6-トリヨード-N,N'-ビス（2,3-ジヒドロキシプロピル）イソフタルアミドを任意で含む生理食塩水緩衝液を、嫌気条件下で混合する工程、
A3) A2)で得られた前記混合物の沈着物を、A1)で得られた前記勾配下で任意で形成する工程、
A4) A2)又はA3)で得られた前記混合物を、嫌気条件下で低加速度にて連続的に遠心分離又は超遠心分離する工程、
A5) 工程A4)を完了することで形成された前記細菌リング又は前記上清を、嫌気条件下で回収する工程、
A6) A5）で回収された前記細菌リング又は前記上清を、前記希釈剤と混合する工程、
を含むことによって特徴づけられる、請求項1〜4の何れか1項に記載の方法。
【請求項６】
工程A6)として、嫌気条件下で、以下の工程;
a)生理食塩水緩衝液に懸濁されたA5)で得られた前記細菌リング又は前記上清を、3000〜4000×gの加速度、5〜15分の時間、20〜30℃の温度で遠心分離する工程、
b) 工程a)を完了することで得られたペレットを回収し、生理食塩水緩衝液に再懸濁し、次いで200〜500×gの加速度、5〜15分の時間、20〜30℃の温度で遠心分離する工程、
c) 工程b)を完了することで得られた前記上清を回収し、生理食塩水緩衝液に再懸濁し、次いで3000〜4000×gの加速度、5〜15分の時間、20〜30℃の温度で遠心分離する工程、
d) 工程c)を完了することで得られたペレットを回収する工程、及び
e) d)において回収された前記ペレットを、前記希釈剤と混合する工程、
を含むことによって特徴づけられる、請求項1〜5の何れか1項に記載の方法。
【請求項７】
工程B)の前記凍結乾燥が、以下の条件:
B1) A)で得られた前記混合物を、-50℃未満の温度で凍結すること、
B2) 大気圧下、-50℃〜-30℃の温度の予め冷やされた凍結乾燥機(precooled lyophilizer)に、B1)で得られた前記凍結混合物を装填すること、次いで
B3) 前記圧力を80〜200μバールの値に低下させること、次いで前記棚の温度を0.2〜0.5℃/分の加熱速度を適用しながら、-20℃〜+25℃まで上昇させることを含む、B2）に装填された前記混合物の一次乾燥の少なくとも1つの工程、次いで
B4) 前記圧力を、80μバール以下の値、及び前記棚の温度を+25℃〜+35℃に0.1℃〜0.3℃/分の加熱温度で上昇させること、及びそれを8〜15時間維持すること、を含むB3)で得られた前記混合物の二次乾燥工程、
で実施されることによって特徴づけられる、請求項1〜6の何れか1項に記載の方法。
【請求項８】
前記生理食塩水緩衝液が、塩化ナトリウムを含むHEPESの水性溶液であることによって特徴づけられる、請求項5〜7の何れか1項に記載の方法。
【請求項９】
A1) 凍結融解によって形成されるイオジキサノール又は5-（N-2,3-ジヒドロキシプロピルアセトアミド）-2,4,6-トリヨード-N,N'-ビス（2,3ジヒドロキシプロピル）イソフタルアミドの連続勾配を、調製する工程、
A2) 少なくとも1つのドナー被験者からの便細菌叢の試料とイオジキサノール又は5-（N-2,3-ジヒドロキシプロピルアセトアミド）-2,4,6-トリヨード-N,N'-ビス（2,3-ジヒドロキシプロピル）イソフタルアミドを含む水性溶液に加えられた生理食塩水緩衝液を、嫌気条件下で混合する工程、
A3) A2)で得られた前記混合物の沈着物を、A1)で得られた前記勾配下で形成する工程、
A4) A3)で得られた前記混合物を、40〜50分間の時間、2℃〜6℃の温度、13000〜16000×gの速度で超遠心分離する工程、
A5) 工程A4)を完了することで形成された細菌リングを、嫌気条件下で回収する工程、
A6) A5）で回収された前記細菌リングを、前記希釈剤と混合する工程、及び
B) A6）で得られた前記混合物を、-50℃未満の温度で凍結させ、次いで凍結乾燥させる工程、
の工程を含むことによって特徴づけられる、請求項1〜8の何れか1項に記載の方法。
【請求項１０】
前記工程A1)において凍結融解によって形成されるイオジキサノールの連続勾配の調製が、以下の工程、
A1.a) イオジキサノール又は5-（N-2,3-ジヒドロキシプロピルアセトアミド）-2,4,6-トリヨード-N,N'-ビス（2,3-ジヒドロキシプロピル）イソフタルアミドの溶液を、-70℃〜-100℃の温度で少なくとも12時間、凍結する工程、次いで
A1.b) 周囲温度で2〜4時間、A1. a)で得られた前記溶液を解凍し、イオジキサノール又は5-（N-2,3-ジヒドロキシプロピルアセトアミド）-2,4,6-トリヨード-N,N'-ビス（2,3ジヒドロキシプロピル）イソフタルアミドの連続勾配を得る工程、
に従い実施されることによって特徴づけられる、請求項1〜9の何れか1項に記載の方法。
【請求項１１】
嫌気条件下で以下の工程、
A2) 少なくとも1つのドナー被験者からの便細菌叢の試料を、生理食塩水緩衝液と混合する工程、
A4) A2)で得られた前記混合物を、低加速度で連続的に遠心分離する工程、
A5) 工程A4)を完了することで形成された上清を、回収する工程、
A6) A5)で回収された前記上清を、前記希釈剤と混合する工程、及び
B) A6)で得られた前記混合物を、-50℃未満の温度で凍結させ、次いでそれを凍結乾燥させる工程、
を含むことによって特徴づけられる、請求項1〜8又は10の何れか1項に記載の方法。
【請求項１２】
工程A4)の低速での連続的な遠心分離が、200〜500×gの加速度、5〜15分の時間、20〜30℃の温度で実施されることによって特徴づけられる、請求項11に記載の方法。
【請求項１３】
前記自己又は同種の便細菌叢の移植に使用するため、又は腸のディスバイオシスを治療するための、請求項1〜12の何れか1項に記載の方法によって得られるドナー被験者からの便細菌叢の凍結乾燥物。
【請求項１４】
研究ツールとしての、請求項1〜12の何れか1項に記載の方法によって得られる凍結乾燥物の使用。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５７】
次いで、A)で得られた混合物を、-50℃未満、好ましくは-70℃〜-100℃の温度で凍結し、次いで凍結乾燥に供する: これは工程B)である。好ましくは、工程B)は、以下の条件で行われる:
B1) A)で得られた混合物を、-50℃未満、好ましくは-70℃〜-100℃、好ましくは約-80℃の温度で凍結すること、
B2) 大気圧下、-50℃〜-30℃の温度に予め冷却された凍結乾燥機(precooled lyophilizer)に、B1)で得られた凍結混合物を装填すること、次いで
B3) 圧力を80〜200μバール（好ましくは100〜150μバール）の値に低下させること、次いで棚の温度を0.2〜0.5℃/分の加熱速度を適用しながら、-20℃〜+25℃（好ましくは-10℃）まで上昇させることを含む、B2）に装填された混合物の一次乾燥の少なくとも1つの工程。圧力及び棚の温度の値は、昇華中の産物の温度が崩壊温度以下に維持されるように選択される。パラメータは、混合物から氷が完全になくなるまで一定に保たれ、次いで
B4) 圧力を80μバール未満又は等しい値、好ましくは装置の取り得る最低値まで低下させること、及び棚の温度を+25℃〜+35℃、優先的には25℃、0.1℃〜0.3℃/分の加熱温度で、上昇させること、及びそれを8〜15時間維持すること、を含むB3)で得られた混合物の二次乾燥工程。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００５９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００５９】
このようにして、凍結試料を、大気圧下で、-50℃〜-30℃の温度に予め冷却された凍結乾燥機に装填する; これは工程B2)である。