【手続補正書】
【提出日】令和3年9月14日(2021.9.14)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ｉ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または遺伝子導入Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）；および
（ｉｉ）前記細胞内で組み合わせて発現された場合に治療用小分子を合成することができる１つまたはより多い酵素をコードする１つまたはより多い操作されたポリヌクレオチド、
を含む操作された細胞。
【請求項２】
前記１つまたはより多い酵素が少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つまたは少なくとも５つの酵素を含む請求項１に記載の細胞。
【請求項３】
前記１つまたはより多い酵素が１つの操作されたポリヌクレオチドによってコードされる、請求項１または２に記載の細胞。
【請求項４】
前記操作されたポリヌクレオチドがオペロンである、請求項２または３に記載の細胞。
【請求項５】
前記１つまたはより多い酵素が単一のオープンリーディングフレームでコードされ、各酵素が切断部位により分けられる、請求項２から４に記載の細胞。
【請求項６】
前記切断部位がＦＭＤ−２Ａ様ペプチドをコードする配列などの自己切断部位である請求項５に記載の細胞。
【請求項７】
前記治療用小分子が細胞毒性分子、細胞増殖抑制分子、前記腫瘍の分化を誘導することが可能な薬剤および炎症性分子から選択される、請求項１から６のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項８】
前記治療用小分子がバイオラセインまたはミコフェノール酸である、請求項７に記載の細胞。
【請求項９】
前記治療用小分子がバイオラセインであり、前記操作されたポリヌクレオチドがトリプトファンからバイオラセインを合成するために必要なＶｉｏＡ、ＶｉｏＢ、ＶｉｏＣ、ＶｉｏＤおよびＶｉｏＥ酵素をコードする１つまたはより多いポリヌクレオチドである、請求項８に記載の細胞。
【請求項１０】
前記バイオラセインオペロンが、配列番号１として示される配列を含むポリペプチド、またはそれに対して少なくとも８０％配列同一性を有する改変体をコードする、請求項９に記載の細胞。
【請求項１１】
前記操作された細胞が、前記治療用小分子に対して低下した感度を有するようにさらに操作される、請求項１から１０のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１２】
前記治療用小分子がミコフェノール酸であり、前記細胞がさらにミコフェノレートに対して耐性のある変異イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ２を発現する、請求項１１に記載の細胞。
【請求項１３】
前記１つまたはより多い酵素の発現が前記ＣＡＲまたは遺伝子導入ＴＣＲへの抗原の結合により誘導される、請求項１から１２のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１４】
前記１つまたはより多い酵素の発現が腫瘍微小環境により誘導される、請求項１から１３のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１５】
前記１つまたはより多い酵素の発現が前記細胞への第二小分子の結合により誘導される、請求項１から１４のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１６】
前記細胞がアルファ―ベータＴ細胞、ＮＫ細胞、ガンマ―デルタＴ細胞またはサイトカイン誘導キラー細胞である、請求項１から１５のいずれか一項に記載の細胞。
【請求項１７】
（ｉ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または遺伝子導入ＴＣＲをコードする第一の核酸配列；および
（ｉｉ）細胞内で組み合わせて発現された場合に治療用小分子を合成することができる１つまたはより多い酵素をコードする１つまたはより多い核酸配列、
を含む核酸構築物。
【請求項１８】
前記第一および第二核酸配列が共発現部位により分けられる、請求項１７に記載の核酸構築物。
【請求項１９】
（ｉ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または遺伝子導入ＴＣＲをコードする第一核酸配列；および
（ｉｉ）細胞内で組み合わせて発現された場合に治療用小分子を合成することができる１つまたはより多い酵素をコードする１つまたはより多い核酸配列、
を含む核酸配列のキット。
【請求項２０】
請求項１７または１８に記載の核酸構築物を含むベクター。
【請求項２１】
（ｉ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または遺伝子導入ＴＣＲをコードする核酸配列を含む第一ベクター；および
（ｉｉ）細胞内で組み合わせて発現された場合に治療用小分子を合成することができる１つまたはより多い酵素を含む第二ベクター
を含むベクターのキット。
【請求項２２】
前記１つもしくはより多い酵素が請求項１から１５のいずれかで定義される、請求項１７もしくは１８に記載の核酸構築物、請求項１９に記載の核酸配列のキット、請求項２０に記載のベクターまたは請求項２１に記載のベクターのキット。
【請求項２３】
請求項１から１５のいずれかに記載の細胞、請求項１７または１８に記載の核酸構築物、請求項１９で定義されるような第一核酸配列および第二核酸配列、請求項２０に記載のベクターまたは請求項２１で定義されるような第一および第二ベクターを含む医薬組成物。
【請求項２４】
疾患の治療および／または予防における使用のための請求項２３に記載の医薬組成物。
【請求項２５】
疾患の治療および／または予防の方法において使用するための、請求項２３に記載の医薬組成物であって、前記方法は、それを必要としている被験者へ前記医薬組成物を投与するステップを含む、医薬組成物。
【請求項２６】
前記方法が以下のステップを含む、請求項２５に記載の医薬組成物
（ｉ）細胞包含試料を単離するステップ；
（ｉｉ）請求項１７または１８で定義されるような核酸構築物、請求項１９に記載のベクターまたは請求項２０で定義されるような第一および第二ベクターでの、前記細胞へ形質導入またはトランスフェクションするステップ；ならびに
（ｉｉｉ）前記被験者に（ｉｉ）由来の前記細胞を投与するステップ。
【請求項２７】
前記細胞が自己由来である請求項２６に記載の前記医薬組成物。
【請求項２８】
前記細胞が同種異系である請求項２６に記載の前記医薬組成物。
【請求項２９】
疾患の前記治療および／または予防のための医薬の製造における、請求項２３に記載の医薬組成物の使用。
【請求項３０】
前記疾患が癌である、請求項２４から２８のいずれか一項に記載の使用のための前記医薬組成物。
【請求項３１】
前記癌が固形腫瘍癌である、請求項３０に記載の、使用のための前記医薬組成物。
【請求項３２】
請求項１７または１８に記載の核酸構築物、請求項１９で定義されるような第一核酸配列および第二核酸配列、請求項２０に記載のベクターまたは請求項２１で定義されるような第一および第二ベクターを導入するステップを含む、請求項１から１５のいずれかに記載の細胞を作製する方法。
【請求項３３】
前記細胞が被験者から単離した試料由来である、請求項３２記載の方法。
【請求項３４】
前記疾患が癌である、請求項２９に記載の使用。
【請求項３５】
前記癌が固形腫瘍癌である、請求項３４に記載の使用。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２１７】
上記の明細書で言及されたすべての刊行物は、参照により本明細書中に援用される。本発明の記載された方法ならびにシステムの様々な修正および変形は、本発明の範囲および精神から逸脱することなく、当業者に明らかである。本発明は特定の好ましい実施形態に関連して記載されてきたが、請求される本発明はそのような特定の実施形態に過度に限定されるべきではないことを理解するべきである。実際、分子生物学または関連分野の当業者に明らかな、本発明を実施するための記載された様式の様々な改変は、以下の特許請求の範囲内であることが意図される。
特定の実施形態では、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
（ｉ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または遺伝子導入Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）；および
（ｉｉ）前記細胞内で組み合わせて発現された場合に治療用小分子を合成することができる１つまたはより多い酵素をコードする１つまたはより多い操作されたポリヌクレオチド、
を含む操作された細胞。
（項目２）
前記１つまたはより多い酵素が少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つまたは少なくとも５つの酵素を含む項目１に記載の細胞。
（項目３）
前記１つまたはより多い酵素が１つの操作されたポリヌクレオチドによってコードされる、任意の上記項目に記載の細胞。
（項目４）
前記操作されたポリヌクレオチドがオペロンである、項目２または３に記載の細胞。
（項目５）
前記１つまたはより多い酵素が単一のオープンリーディングフレームでコードされ、各酵素が切断部位により分けられる、項目２から４に記載の細胞。
（項目６）
前記切断部位がＦＭＤ−２Ａ様ペプチドをコードする配列などの自己切断部位である項目５に記載の細胞。
（項目７）
前記治療用小分子が細胞毒性分子、細胞増殖抑制分子、前記腫瘍の分化を誘導することが可能な薬剤および炎症性分子から選択される、任意の上記項目に記載の細胞。
（項目８）
前記治療用小分子がバイオラセインまたはミコフェノール酸である、項目７に記載の細胞。
（項目９）
前記治療用小分子がバイオラセインであり、前記操作されたポリヌクレオチドがトリプトファンからバイオラセインを合成するために必要なＶｉｏＡ、ＶｉｏＢ、ＶｉｏＣ、ＶｉｏＤおよびＶｉｏＥ酵素をコードする１つまたはより多いポリヌクレオチドである、項目８に記載の細胞。
（項目１０）
前記バイオラセインオペロンが、配列番号１として示される配列を含むポリペプチド、またはそれに対して少なくとも８０％配列同一性を有する改変体をコードする、項目９に記載の細胞。
（項目１１）
前記操作された細胞が、前記治療用小分子に対して低下した感度を有するようにさらに操作される、任意の上記項目記載の細胞。
（項目１２）
前記治療用小分子がミコフェノール酸であり、前記細胞がさらにミコフェノレートに対して耐性のある変異イノシン一リン酸デヒドロゲナーゼ２を発現する、項目１１に記載の細胞。
（項目１３）
前記１つまたはより多い酵素の発現が前記ＣＡＲまたは遺伝子導入ＴＣＲへの抗原の結合により誘導される、任意の上記項目に記載の細胞。
（項目１４）
前記１つまたはより多い酵素の発現が腫瘍微小環境により誘導される、任意の上記項目に記載の細胞。
（項目１５）
前記１つまたはより多い酵素の発現が前記細胞への第二小分子の結合により誘導される、任意の上記項目に記載の細胞。
（項目１６）
前記細胞がアルファ―ベータＴ細胞、ＮＫ細胞、ガンマ―デルタＴ細胞またはサイトカイン誘導キラー細胞である、任意の上記項目に記載の細胞。
（項目１７）
（ｉ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または遺伝子導入ＴＣＲをコードする第一の核酸配列；および
（ｉｉ）細胞内で組み合わせて発現された場合に治療用小分子を合成することができる１つまたはより多い酵素をコードする１つまたはより多い核酸配列、
を含む核酸構築物。
（項目１８）
前記第一および第二核酸配列が共発現部位により分けられる、項目１７に記載の核酸構築物。
（項目１９）
（ｉ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または遺伝子導入ＴＣＲをコードする第一核酸配列；および
（ｉｉ）細胞内で組み合わせて発現された場合に治療用小分子を合成することができる１つまたはより多い酵素をコードする１つまたはより多い核酸配列、
を含む核酸配列のキット。
（項目２０）
項目１７または１８に記載の核酸構築物を含むベクター。
（項目２１）
（ｉ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）または遺伝子導入ＴＣＲをコードする核酸配列を含む第一ベクター；および
（ｉｉ）細胞内で組み合わせて発現された場合に治療用小分子を合成することができる１つまたはより多い酵素を含む第二ベクター
を含むベクターのキット。
（項目２２）
前記１つもしくはより多い酵素が項目１から１５のいずれかで定義される、項目１７もしくは１８に記載の核酸構築物、項目１９に記載の核酸配列のキット、項目２０に記載のベクターまたは項目２１に記載のベクターのキット。
（項目２３）
項目１から１５のいずれかに記載の細胞、項目１７または１８に記載の核酸構築物、項目１９で定義されるような第一核酸配列および第二核酸配列、項目２０に記載のベクターまたは項目２１で定義されるような第一および第二ベクターを含む医薬組成物。
（項目２４）
疾患の治療および／または予防における使用のための項目２３に記載の医薬組成物。
（項目２５）
疾患の治療および／または予防方法であって、前記方法は、それを必要としている被験者への項目２３に記載の医薬組成物を投与するステップを含む、疾患の治療および／または予防方法。
（項目２６）
以下のステップを含む、項目２５に記載の方法
（ｉ）細胞包含試料を単離するステップ；
（ｉｉ）項目１７または１８で定義されるような核酸構築物、項目１９に記載のベクターまたは項目２０で定義されるような第一および第二ベクターでの、前記細胞へ形質導入またはトランスフェクションするステップ；ならびに
（ｉｉｉ）被験者に（ｉｉ）由来の前記細胞を投与するステップ。
（項目２７）
前記細胞が自己由来である項目２６に記載の前記方法。
（項目２８）
前記細胞が同種異系である項目２６に記載の前記方法。
（項目２９）
疾患の前記治療および／または予防のための医薬の製造における、項目２３に記載の医薬組成物の使用。
（項目３０）
前記疾患が癌である、項目２４に記載の使用のための前記医薬組成物、項目２５から２８のいずれかに記載の前記方法または項目２９に記載の前記使用。
（項目３１）
前記癌が固形腫瘍癌である、項目３０に記載の、使用のための前記医薬組成物、方法、または前記使用。
（項目３２）
項目１７または１８に記載の核酸構築物、項目１９で定義されるような第一核酸配列および第二核酸配列、項目２０に記載のベクターまたは項目２１で定義されるような第一および第二ベクターを導入するステップを含む、項目１から１５のいずれかに記載の細胞を作製する方法。
（項目３３）
前記細胞が被験者から単離した試料由来である、項目３２記載の方法。