(57)【要約】【課題】リウマチ関節炎等の関節炎を効果的に治療でき、副作用のおそれの小さい関節炎治療剤を安価に提供することを目的とする。【解決手段】関節炎治療剤は、ｍｉｃｒｏＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）と安定化剤とを含有する。安定化剤としてアテロコラーゲンが好ましい。また、リウマチ関節炎の治療剤としは、ｍｉＲＮＡとして合成ｍｉＲＮＡ−１５ａ、合成ｍｉＲＮＡ−１４６、或いは、合成ｍｉＲＮＡ−３４ａが好ましい。ｍｉＲＮＡは安定化剤に保護され、分解されずに滑膜組織に広範囲に渡って取り込まれる。投与したｍｉＲＮＡが、関節炎を引き起こす遺伝子へタンパク翻訳されるｍｅｓｓｅｎｇｅｒＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を直接分解、或いはｍＲＮＡのタンパク翻訳を阻害するので、滑膜細胞の細胞死が導かれることにより関節炎を治療できる。【選択図】図５
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ｍｉｃｒｏＲＮＡと安定化剤とを含有することを特徴とする関節炎治療剤。
【請求項２】
前記ｍｉｃｒｏＲＮＡが合成ｍｉｃｒｏＲＮＡ−１５ａ、合成ｍｉｃｒｏＲＮＡ−１４６、或いは合成ｍｉｃｒｏＲＮＡ−３４ａであることを特徴とする請求項１に記載の関節炎治療剤。
【請求項３】
前記安定化剤がアテロコラーゲンであることを特徴とする請求項１に記載の関節炎治療剤。
【請求項４】
リウマチ関節炎治療剤であることを特徴とする請求項２に記載の関節炎治療剤。
【請求項５】
関節注射用製剤であることを特徴とする請求項１乃至４のいずれかに記載の関節炎治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、リウマチ関節炎等、関節炎の治療に用いる関節炎治療剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
関節炎は関節の炎症性疾患であり、主な疾患として、リウマチ関節炎や関節に炎症が認められるその類縁疾患があげられる。リウマチ関節炎は関節リウマチともいわれ、関節内包層の滑膜における炎症性変化を主要病変とする慢性多発性関節炎である。リウマチ関節炎などの関節炎は進行性であり、関節の変形、強直などの関節障害をきたし、効果的な治療が施されずに進行すれば、重症の身体障害にいたることも多い。
【０００３】
リウマチ関節炎等の関節炎治療では、手術療法或いは薬物療法がなされている。薬物療法では、生物学的製剤が浸透してきている。生物学的製剤とは化学的に合成したものではなく、生体が作る物質を薬剤として使用する製剤である。
【０００４】
その他、関節炎治療薬について、特許文献１〜３に開示されている。特許文献１では、チアジアゾリン誘導体を有効成分として含有する関節炎の治療及び／又は予防剤について開示されている。特許文献２では、主たる構成成分としてアンチトロンビンを含有する関節リウマチおよび若年性関節リウマチの治療用薬剤について開示されている。特許文献３では、キノリンまたはキナゾリン系関節炎予防・治療剤と速効性消炎鎮痛剤を組み合わせてなる医薬について開示されている。
【０００５】
【特許文献１】特開２００８−１３７８９３号公報
【特許文献２】特開２００４−２３１６１７号公報
【特許文献３】特開平９−１６９６４６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
上述の生物学的製剤は非常に高価という問題がある。
【０００７】
また、上述の生物学的製剤や関節炎治療剤を投与すると、いくつかの副作用が生じるおそれがある。例えば、副作用として結核や肺炎等の感染症、アレルギーを発症してしまう。
【０００８】
本発明は上記実状に鑑みてなされたものであり、リウマチ関節炎等の関節炎に有効に作用し、副作用のおそれが小さい安価な関節炎治療剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
上記課題を解決するため、本発明に係る関節炎治療剤は、ｍｉｃｒｏＲＮＡと安定化剤とを含有することを特徴とする。
【００１０】
また、前記ｍｉｃｒｏＲＮＡが合成ｍｉｃｒｏＲＮＡ−１５ａ、合成ｍｉｃｒｏＲＮＡ−１４６、或いは合成ｍｉｃｒｏＲＮＡ−３４ａであることが好ましい。
【００１１】
更に、前記安定化剤がアテロコラーゲンであることが好ましい。
【００１２】
更に、リウマチ関節炎治療剤であってもよい。
【００１３】
更に、関節注射用製剤であってもよい。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、リウマチ関節炎等の関節炎を効果的に治療でき、副作用のおそれの少ない関節炎治療剤を安価に提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
本実施形態に係る関節炎治療剤は、ｍｉｃｒｏＲＮＡ（以下、ｍｉＲＮＡ）と安定化剤とを含有する。
【００１６】
ｍｉＲＮＡは、２２〜２３塩基対からなる機能性ｎｏｎ−ｃｏｄｉｎｇ  ＲＮＡである。ｍｉＲＮＡは、遺伝子発現の転写後抑制をする機能を有する。具体的には、ｍｉＲＮＡが複数のタンパク質と複合体を形成し、標的となるｍｅｓｓｅｎｇｅｒＲＮＡ（以下、ｍＲＮＡ）に結合してｍＲＮＡのタンパク翻訳を抑制している。このようにして、ｍｉＲＮＡの機能により人間の全遺伝子の凡そ１／３が制御されているものと考えられている。
【００１７】
本発明者らは、リウマチ関節炎の滑膜細胞において、あるｍｉＲＮＡの発現量が大きく変化していることを見いだした。体内で自己治癒すべく、ｍｉＲＮＡが関節リウマチの滑膜細胞を減少させるために発現が増加したり、或いは、病態に関与している何らかの因子が、関節リウマチの滑膜細胞の細胞死を阻害しないよう、ｍｉＲＮＡの発現を抑えているものと考えられる。したがって、リウマチ関節炎等の病態によって発現量が変化するｍｉＲＮＡを、人為的に制御することで、リウマチ関節炎等の新たな治療となる。
【００１８】
ｍｉＲＮＡを滑膜組織に人為的に投与することで、リウマチ関節炎の滑膜細胞等、関節炎の原因となる滑膜細胞の増殖或いは細胞死の阻害に関与する遺伝子の発現を制御できる。ｍｉＲＮＡが関節炎を司る遺伝子へタンパク翻訳されるｍＲＮＡを分解、或いは当該遺伝子へのタンパク翻訳を阻害することにより、関節炎を効果的に治療することができる。
【００１９】
また、ｍｉＲＮＡは前述のように体内にて自然に発現するものゆえ、体内に人為的に投与したとしても副作用のおそれは少ない。
【００２０】
図１から図３は、リウマチ関節炎マウス（ＲＡ）の滑膜組織、及び通常のマウス（Ｎｏｒｍａｌ）の滑膜組織における各種ｍｉＲＮＡの発現量を相対的に示したものである。それぞれｒｅａｌ  ｔｉｍｅ  ＰＣＲを用いて評価した結果である。
【００２１】
リウマチ関節炎の滑膜組織において、図１に示すように、ｍｉＲＮＡ−１５ａの発現量が減少している。これは、リウマチ関節炎に関与している何らかの因子が滑膜細胞の細胞死を阻害しないよう、ｍｉＲＮＡの発現を抑えていること、或いはｍｉＲＮＡ−１５ａがリウマチ関節炎に関与している何らかの因子の排除に用いられ、相対的に減少したものと考えられる。
【００２２】
また、図２に示すように、リウマチ関節炎マウスでは滑膜組織におけるｍｉＲＮＡ−１４６の発現量が増加している。同様に、図３に示すように、リウマチ関節炎マウスでは滑膜組織におけるｍｉＲＮＡ−３４ａの発現量が増加している。これは、ｍｉＲＮＡ−１４６、ｍｉＲＮＡ−３４ａが遺伝子へタンパク翻訳されるｍＲＮＡを分解或いは当該遺伝子へのタンパク翻訳を阻害するため、相対的に発現量が増加したものと考えられる。
【００２３】
リウマチ関節炎の滑膜組織では、上述のように、ｍｉＲＮＡ−１５ａ、ｍｉＲＮＡ−１４６、及び、ｍｉＲＮＡ−３４ａの発現量が大きく変化していることから、リウマチ関節炎の治療を行う観点からは、ｍｉＲＮＡとして、ｍｉＲＮＡ−１５ａ、ｍｉＲＮＡ−１４６、或いはｍｉＲＮＡ−３４ａを用いるとよい。これらのｍｉＲＮＡは合成したものを用いればよい。合成は既知の手法によって行うことができ、安価に提供することが可能である。
【００２４】
リウマチ関節炎の場合、関節の滑膜組織に抗アポトーシス作用を有する遺伝子であるＢＣＬ２（Ｂ  Ｃｅｌｌ  Ｌｅｕｋｅｍｉａ／Ｌｙｍｐｈｏｍａ  ２）が発現し、ＢＣＬ２がリウマチ関節炎の滑膜細胞の細胞死を抑制している。アポトーシスとは、細胞死を導く性質をいう。したがって、リウマチ関節炎では、滑膜組織に発現するＢＣＬ２の抗アポトーシス作用により、滑膜細胞の細胞死が起こりにくいため、リウマチ関節炎の滑膜細胞が増殖してしまう。この結果、滑膜が肥厚化して炎症がおこる。
【００２５】
ｍｉＲＮＡによって、ＢＣＬ２へタンパク翻訳されるｍＲＮＡが直接分解されること、或いは、ｍＲＮＡのタンパク翻訳が阻害されることにより、ＢＣＬ２の発現が抑えられる。ＢＣＬ２の発現が抑えられれば、リウマチ関節炎の滑膜細胞の細胞死が阻害されず、壊死することになる。リウマチ関節炎の滑膜細胞が壊死によって減少し、関節滑膜の肥厚化が抑えられるので、効果的にリウマチ関節炎を治療できる。
【００２６】
しかしながら、ｍｉＲＮＡは非常に分解されやすい性質を有する。分解されやすい性質ゆえ、そのまま合成ｍｉＲＮＡを関節の滑膜組織に投与しても、ｍｉＲＮＡが分解されて一部の滑膜細胞にしか取り込まれない。従って、ＢＣＬ２の発現を効果的に抑制できない。ｍｉＲＮＡを分解されることなく、広範囲に渡って滑膜細胞に取り込ませるために、ｍｉＲＮＡに安定化剤を混入させる。
【００２７】
ｍｉＲＮＡに安定化剤を混入すると、図４の模式図に示すように、安定化剤１２がｍｉＲＮＡ１１を被覆した形態になる。ｍｉＲＮＡ１１が安定化剤１２に保護されるので、分解しにくい形態となる。
【００２８】
混入した安定化剤によって、滑膜組織に投与されたｍｉＲＮＡが分解されずに、広範囲に渡って滑膜細胞に取り込まれる。そして、滑膜細胞に取り込まれたｍｉＲＮＡが上述した機能を発揮し、滑膜組織におけるＢＣＬ２の発現が効果的に抑えられる。
【００２９】
安定化剤として、アテロコラーゲン（Ａｔｅｌｏ  Ｃｏｌｌａｇｅｎ）が好ましい。アテロコラーゲンは、不溶性コラーゲンをプロテアーゼ（タンパク分解酵素）処理して、コラーゲン分子の両末端にある抗原性のあるテロペプチドを除いて精製される。テロペプチドはコラーゲン分子本体とは異質なもので、アミノ酸組成も本体とは異なりアレルギー反応の原因にもなりやすい。したがって、テロペプチドを切断除外したアテロコラーゲンはアレルギー反応を起こしにくいコラーゲンであり、生体親和性に優れる。この様な理由から、滑膜組織に投与しても副作用が生じるおそれが小さい。
【００３０】
本実施形態に係る関節炎治療剤は、上述したように、安定化剤にｍｉＲＮＡを混入することで得られる。そして、この関節炎治療剤は、生理学的に許容されうる担体、賦形剤、結合剤、希釈剤などが混合していてもよい。
【００３１】
そして、関節注射用製剤として、関節注射により滑膜組織へ非経口投与することが好ましい。関節注射にて直接投与することで、リウマチ関節炎の滑膜細胞に効率よくｍｉＲＮＡを行き渡らせることができる。
【００３２】
注射用製剤、例えば、無菌注射用水性懸濁物あるいは油性懸濁物は、適当な分散化剤または湿化剤及び懸濁化剤を用いて当該分野で知られた方法で調整されうる。無菌注射用製剤は、例えば水溶液などの非毒性の非経口投与できる希釈剤、あるいは無菌の注射可能な溶液または懸濁液であってよい。
【実施例】
【００３３】
リウマチ関節炎マウスを用い、関節炎治療剤に含有するｍｉＲＮＡ−１５ａが滑膜細胞に取り込まれ、ＢＣＬ２の発現の抑制、及びリウマチ関節炎の滑膜細胞のアポトーシスを導くことを検証した。
【００３４】
ＤＢＡ１／Ｊマウス雄７週齢を用いて、抗（II）型コラーゲン抗体誘導による関節炎マウスを準備した。
【００３５】
合成ｍｉＲＮＡ−１５ａを準備し、１０μｌの純水に１０μｇの合成ｍｉＲＮＡ−１５ａを溶解し、１０μｌのアテロコラーゲンに混入して関節炎治療剤を用意した。この関節炎治療剤には、蛍光標識として蛍光蛋白を結合させた抗体を混入した。この抗体はｍｉＲＮＡ−１５ａに特異的に結合する抗体である。以下、これを試薬１と記す。
【００３６】
また、１０μｌの純水に１０μｇの合成ｓｃｒａｍｂｌｅ  ｓｈｏｒｔ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ  ＲＮＡ（合成ｓｉＲＮＡ）を溶解し、１０μｌのアテロコラーゲンに混入し、更に、試薬１と同様、蛍光標識として蛍光蛋白を結合させた抗体を混入した。以下、これを試薬２と記す。合成ｓｉＲＮＡは、ｍＲＮＡのタンパク翻訳を阻害する機能を有しないＲＮＡである。
【００３７】
試薬１及び試薬２それぞれ２０ｍｌをリウマチ関節炎マウスの右膝関節の滑膜組織に関節注射した。なお、それぞれの試薬について、５体のマウスの右膝関節に注射した。
【００３８】
それぞれの試薬の投与から２４時間後、投与した合成ｍｉＲＮＡ−１５ａが滑膜組織に取り込まれているか否かをｒｅａｌ  ｔｉｍｅ  ＰＣＲにより評価した。
【００３９】
図５は、試薬１及び試薬２を投与した滑膜組織におけるｍｉＲＮＡ−１５ａの相対量を示している。試薬１を投与した場合のｍｉＲＮＡ−１５ａの発現量は、試薬２を投与した場合の発現量に比べ凡そ３．５倍となっている。アテロコラーゲンの作用により、投与したｍｉＲＮＡ−１５ａは２４時間後にも分解されず、滑膜組織に取り込まれたことがわかる。
【００４０】
続いて、滑膜組織におけるｍｉＲＮＡ−１５ａの分布状況を顕微鏡により観察した。図６が試薬１を投与したマウスの右膝関節の滑膜組織の写真であり、図６（Ａ）が光学顕微鏡写真、図６（Ｂ）が図６（Ａ）と同部位におけるｍｉＲＮＡ−１５ａの分布状況を示す蛍光顕微鏡写真である。また、図７は試薬２を投与したマウスの右膝関節の滑膜組織の写真であり、図７（Ａ）が光学顕微鏡写真、図７（Ｂ）が図７（Ａ）と同部位におけるｍｉＲＮＡ−１５ａの分布状況を示す蛍光顕微鏡写真である。図６（Ｂ）及び図７（Ｂ）では、前述の蛍光蛋白で染色された箇所が表れている。
【００４１】
試薬１を投与した場合では、図６（Ｂ）を見ると、滑膜組織が染色されていることがわかる。合成ｍｉＲＮＡ−１５ａが広範囲に渡って滑膜組織に取り込まれていることがわかる。
【００４２】
一方、試薬２を投与した場合には、図７（Ｂ）に示すように、骨以外はあまり染色されていないことから、ｍｉＲＮＡ−１５ａは滑膜組織にほとんど存在しないことがわかる。
【００４３】
続いて、滑膜細胞にｍｉＲＮＡ−１５ａが取り込まれているかを、細胞核の免疫染色により検証した。
【００４４】
図８（Ａ）は図６（Ｂ）の破線で囲った箇所の拡大写真である。また、図８（Ｂ）は図８（Ａ）と同部位の細胞核を免疫染色した蛍光顕微鏡写真である。そして、図８（Ｃ）は滑膜細胞と細胞核双方の染色状況を示した写真である。なお、図８（Ｃ）は、理解の容易のため、図８（Ｂ）の色調を反転させ、図８（Ａ）と合成したものである。
【００４５】
図８（Ｃ）を見ると、ｍｉＲＮＡ−１５ａが取り込まれた細胞とその細胞核は一致していることがわかる。従って、ｍｉＲＮＡ−１５ａは広範囲に渡って滑膜組織に取り込まれ、且つ、それぞれの滑膜細胞に取り込まれていることを確認した。
【００４６】
続いて、ｍｉＲＮＡ−１５ａによってＢＣＬ２の発現が減少することを、ｗｅｓｔｅｒｎ  ｂｌｏｔｔｉｎｇ、及び滑膜組織中のＢＣＬ２の免疫染色により検証した。
【００４７】
ｗｅｓｔｅｒｎ  ｂｌｏｔｔｉｎｇ検出は、前述の試薬１を投与した滑膜組織及び試薬２を投与した滑膜組織を磨りつぶしたものを用意して行った。
【００４８】
図９（Ａ）に、ｗｅｓｔｅｒｎ  ｂｌｏｔｔｉｎｇ検出によるＢＣＬ２の発現量を示す。なお、ｗｅｓｔｅｒｎ  ｂｌｏｔｔｉｎｇ検出において、５２ｋＤａのバンドにＢＣＬ２が検出される。また、図９（Ｂ）は、４３ｋＤａのバンドにて検出されるＡｃｔｉｎの結果であり、ＢＣＬ２の検出結果の妥当性を示す指標となる。図９（Ｂ）で試薬１及び試薬２を投与した滑膜組織では、Ａｃｔｉｎの検出結果に差がないため、図９（Ａ）に示すＢＣＬ２の検出結果は妥当性を有している。
【００４９】
図９（Ａ）中に、黒く現れている箇所がＢＣＬ２の発現を示している。試薬１を投与した滑膜組織では、試薬２を投与した滑膜組織に比べ、黒く現れている部分が少ない。したがって、試薬１を投与することにより、ＢＣＬ２の発現が減少することを確認した。
【００５０】
図１０は、試薬１を投与した滑膜組織を用い、ＢＣＬ２の免疫染色を行った蛍光顕微鏡写真である。また、図１１は、試薬２を投与した滑膜組織を用いてＢＣＬ２の免疫染色を行った蛍光顕微鏡写真である。図１０及び図１１いずれもＢＣＬ２が染色されて表れている。
【００５１】
試薬１を投与した場合では、試薬２を投与した場合に比べて、染色部分が小さいことから、投与したｍｉＲＮＡ−１５ａの作用によりＢＣＬ２の発現が減少していることがわかる。
【００５２】
以上のｗｅｓｔｅｒｎ  ｂｌｏｔｔｉｎｇ検出及びＢＣＬ２の免疫染色の結果から、投与された合成ｍｉＲＮＡ−１５ａはアテロコラーゲンの作用により、滑膜組織の細胞に取り込まれ、ＢＣＬ２の発現が抑えられることを確認した。
【００５３】
更に、関節注射３日後におけるマウスの右膝関節に、アポトーシスの指標であるカスパーゼ３の免疫染色を行い、リウマチ関節炎の滑膜細胞のアポトーシスが誘導されるか否かを検証した。なお、カスパーゼは、細胞にアポトーシスを起因させるシグナル伝達経路を構成する、一群のシステインプロテアーゼであり、カスパーゼ３はアポトーシスの実行そのものに関わるエフェクター・カスパーゼの一種である。
【００５４】
試薬１及び試薬２を投与して３日経過した後のマウスの右膝関節に、カスパーゼ３と特異的に結合する抗体を反応させた。この抗体には蛍光標識として蛍光蛋白を結合させている。
【００５５】
図１２（Ａ）は試薬１を投与した滑膜組織のカスパーゼ３の免疫染色を示す蛍光顕微鏡写真、図１２（Ｂ）は図１２（Ａ）と同部位の細胞核の免疫染色を示す蛍光顕微鏡写真である。一方、図１３（Ａ）は試薬２を投与した滑膜組織のカスパーゼ３の免疫染色を示す蛍光顕微鏡写真、図１３（Ｂ）は図１３（Ａ）と同部位の細胞核の免疫染色を示す蛍光顕微鏡写真である。
【００５６】
図１２（Ａ）を見ると、図１３（Ａ）の結果に比べ、カスパーゼ３が多く発現していることがわかる。また、図１２（Ｂ）を見ると、図１３（Ｂ）と比較して細胞核が少ないことがわかる。カスパーゼ３の免疫染色の結果から、試薬１を投与することで、ＢＣＬ２の発現が抑制され、細胞のアポトーシスを起因するカスパーゼ３が発現し、リウマチ関節炎の滑膜細胞のアポトーシスが導かれ、滑膜細胞に細胞死を起こさせ得ることを確認した。
【００５７】
続いて、関節注射した合成ｍｉＲＮＡ−１５ａによる他の臓器への影響を、各臓器におけるｍｉＲＮＡ−１５ａの発現量にて検証した。ｍｉＲＮＡ−１５ａの発現は、ｒｅａｌ  ｔｉｍｅ  ＰＣＲを用いて評価した。
【００５８】
図１４に、他の臓器におけるｍｉＲＮＡ−１５ａの発現量を示す。試薬１を投与した場合、膝関節におけるｍｉＲＮＡ−１５ａの発現量は試薬２を投与した場合に比べて大きく増加しているが、他の肝臓、肺、脾臓、腎臓、及び心臓におけるｍｉＲＮＡ−１５ａの発現量は、試薬２を投与した場合と比べてさほど差がないことがわかる。したがって、本実施形態に係る関節炎治療剤を投与しても、体内のｍｉＲＮＡ−１５ａの量的バランスが崩れることに起因して副作用が生じるおそれは少ない。
【００５９】
以上の結果から、滑膜組織に投与された合成ｍｉＲＮＡ−１５ａは滑膜細胞内に取り込まれており、ＢＣＬ２の発現が少なくなっていることから、ＢＣＬ２の発現が抑制されること、或いはＢＣＬ２にタンパク翻訳されるｍＲＮＡが分解されることが検証できた。そして、ＢＣＬ２の発現が抑えられることで、細胞死を導くカスパーゼの発現が促進されることから、リウマチ関節炎の滑膜細胞は減少していくものと考えられる。従って、リウマチ関節炎に対する治療効果を有する。
【産業上の利用可能性】
【００６０】
医療現場において、リウマチ関節炎等、種々の関節炎の薬物療法に利用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００６１】
【図１】リウマチ関節炎の滑膜組織におけるｍｉＲＮＡ−１５ａの発現量を示す図である。
【図２】リウマチ関節炎の滑膜組織におけるｍｉＲＮＡ−１４６の発現量を示す図である。
【図３】リウマチ関節炎の滑膜組織におけるｍｉＲＮＡ−３４ａの発現量を示す図である。
【図４】安定化剤に被覆されたｍｉＲＮＡの模式図である。
【図５】実施例において、試薬１及び試薬２を投与した滑膜組織のｍｉＲＮＡ−１５ａの発現量を示す図である。
【図６】実施例において試薬１を投与した滑膜組織の顕微鏡写真（Ａ）、蛍光顕微鏡写真（Ｂ）である。
【図７】実施例において試薬２を投与した滑膜組織の顕微鏡写真（Ａ）、蛍光顕微鏡写真（Ｂ）である。
【図８】実施例において試薬１を投与した滑膜組織の蛍光顕微鏡写真（Ａ）、細胞核を染色した蛍光顕微鏡写真（Ｂ）、及び図８（Ａ）と図８（Ｂ）を合成した写真（Ｃ）である。
【図９】実施例におけるｗｅｓｔｅｒｎ  ｂｌｏｔｔｉｎｇ結果を示すＢＣＬ２の検出写真（Ａ）及びＡｃｔｉｎの検出写真（Ｂ）である。
【図１０】実施例において試薬１を投与した滑膜組織のＢＣＬ２の免疫染色を示す蛍光顕微鏡写真である。
【図１１】実施例において試薬２を投与した滑膜組織のＢＣＬ２の免疫染色を示す蛍光顕微鏡写真である。
【図１２】実施例において試薬１を投与した滑膜組織のカスパーゼ３の免疫染色を示す蛍光顕微鏡写真（Ａ）、及び細胞核を染色した蛍光顕微鏡写真（Ｂ）である。
【図１３】実施例において試薬２を投与した滑膜組織のカスパーゼ３の免疫染色を示す蛍光顕微鏡写真（Ａ）、及び細胞核を染色した蛍光顕微鏡写真（Ｂ）である。
【図１４】実施例において試薬１及び試薬２を投与したマウスの他の臓器におけるｍｉＲＮＡ−１５ａの発現量を示す図である。
【符号の説明】
【００６２】
１１    ｍｉＲＮＡ
１２    安定化剤
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図１４】
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【図６】
2010100581.tif 000009
【図７】
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【図８】
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【図９】
2010100581.tif 000012
【図１０】
2010100581.tif 000013
【図１１】
2010100581.tif 000014
【図１２】
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【図１３】
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