【手続補正書】
【提出日】令和3年7月8日(2021.7.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）培養培地中で試験化合物を転移性がん細胞試料と混合して、試験アッセイ物をもたらすこと、ここで、前記試料が、がん細胞中に少なくとも１０％の検出可能な染色体誤分離を含む、
（ｂ）前記試験化合物が細胞と会合するのにまたは細胞に浸透するのに十分な時間および条件下で、前記試験アッセイ物をインキュベートすること、
（ｃ）前記培養培地中、前記細胞中、もしくはそれらの組み合わせ中のｃＧＡＭＰの量もしくは濃度を測定して、試験アッセイ物の値を生成すること、および／または前記細胞の核へのＲＥＬＢ転座の量を測定すること、ならびに
（ｄ）
基準ｃＧＡＭＰ値よりも低い試験アッセイ物ｃＧＡＭＰ値、および／または
基準量よりも低い、前記細胞の核へのＲＥＬＢ転座の量
を有する試験化合物を選択し、それによって、染色体不安定性の治療に有効な試験化合物を選択すること
を含む、方法。
【請求項２】
基準が、
試験化合物を含有しないアッセイ物混合物中のｃＧＡＭＰの量もしくは濃度、および／または試験化合物を含有しないアッセイ物混合物内の転移性がん細胞の核へのＲＥＬＢ転座の量
である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ｃＧＡＭＰを測定する前に、前記試料または培養培地をアルコールで抽出して、アルコール抽出物を生成することをさらに含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
半純粋な（ｓｅｍｉ−ｐｕｒｅ）試験試料の前記ｃＧＡＭＰを測定する前に、１つ以上のアミノプロピル固相カラムを使用する固相抽出（ＳＰＥ）により前記アルコール抽出物を精製して、前記半純粋な試験試料を生成することをさらに含む、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
ｃＧＡＭＰの量または濃度を測定することが、ｃＧＡＭＰのレベルを測定するための液体クロマトグラフィーおよび／または質量分析を含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項６】
方法が、一連の細胞内の中心体間の距離を検出して、平均距離結果を生成することをさらに含み、選択された試験化合物が基準距離よりも小さい平均距離結果を有し、任意で、前記基準距離が試験化合物を含有しないアッセイ物混合物内の転移性がん細胞の中心体間の距離である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
（ａ）転移性がんを有する患者から得られた細胞試料または組織試料由来の既知数または既知重量の細胞または組織から産生されたｃＧＡＭＰの量または濃度を測定して、基準ｃＧＡＭＰ値を生成すること、ここで、前記試料はがん細胞内に少なくとも１０％の検出可能な染色体誤分離を含む、
（ｂ）前記試料由来の前記既知数または既知重量の細胞または組織を試験化合物と混合して、試験アッセイ物を生成すること、
（ｃ）前記試験アッセイ物中の前記ｃＧＡＭＰの量または濃度を測定して、試験アッセイ物ｃＧＡＭＰ値を生成すること、
（ｄ）任意に、ステップ（ｂ）および（ｃ）を繰り返すこと、ならびに前記基準ｃＧＡＭＰ値よりも低い試験アッセイ物ｃＧＡＭＰ値を有する任意の試験化合物を選択し、それによって、少なくとも１つの有効な試験化合物を同定すること
を含む、方法。
【請求項８】
前記ｃＧＡＭＰを測定する前に、前記細胞試料または組織試料をアルコールで抽出して、アルコール抽出物を生成することをさらに含む、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
前記細胞試料または組織試料をメタノールで抽出してメタノール抽出物を生成すること、および前記メタノール抽出物中の前記ｃＧＡＭＰを測定することをさらに含む、請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
半純粋な試験試料の前記ｃＧＡＭＰを測定する前に、１つ以上のアミノプロピル固相カラムを使用する固相抽出（ＳＰＥ）により前記アルコール抽出物または前記メタノール抽出物を精製して、前記半純粋な試験試料を生成することをさらに含む、請求項８または９に記載の方法。
【請求項１１】
ｃＧＡＭＰの量または濃度を測定することが、液体クロマトグラフィーおよび／または質量分析を含む、請求項７〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
前記有効な試験化合物を動物がんモデルに投与することをさらに含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１３】
患者における染色体不安定性または転移性がんを治療する方法において使用するための、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法により選択された有効な試験化合物。
【請求項１４】
（ａ）キネシン−１３タンパク質、任意でＫｉｆ２ｂ、Ｋｉｆ２ｃ／ＭＣＡＫ、および／もしくはＫＩＦ１３Ａ；
（ｂ）ＡＢＣＣ４タンパク質および／もしくはＡＢＣＧ２タンパク質；
（ｃ）Ｋｉｆ２ｂ、Ｋｉｆ２ｃ／ＭＣＡＫ、ＡＢＣＣ４、および／もしくはＡＢＣＧ２のアゴニスト、任意で前記Ｋｉｆ２ｃ／ＭＣＡＫアゴニストはＵＭＫ５７である；または
（ｄ）ＳＴＩＮＧ、ｃＧＡＳ、ＮＦ−κＢ転写因子ｐ５２、ＮＦ−κＢ転写因子ＲｅｌＢ、ＥＮＰＰ１、ＬＴβＲ、ＢＡＦＦＲ、ＣＤ４０、ＲＡＮＫ、ＦＮ１４、ＮＩＫ（ＭＡＰ３Ｋ１４）、ＭＳＴ１、もしくはそれらの任意の組み合わせの阻害物質
から選択される、請求項１３に記載の化合物。
【請求項１５】
細胞試料の１つ以上の細胞内に少なくとも１０％の検出可能な染色体誤分離を有し；かつ
非がん性基準試料と比較して、細胞試料中もしくは体液試料中に、少なくとも１０％超のｃＧＡＭＰの濃度もしくは量を有する、
細胞試料または体液試料
を有する患者への投与用である、転移化学療法剤を含む、転移性がんを治療するための医薬。
【請求項１６】
前記細胞試料の１つ以上の細胞内に少なくとも３％の検出可能な小核が存在し；かつ／または前記細胞試料の１つ以上の細胞内に検出可能なサイトゾル二本鎖ＤＮＡが存在する、請求項１５に記載の医薬。
【請求項１７】
前記患者の細胞内または体液内の染色体誤分離、小核、サイトゾル二本鎖ＤＮＡ、および／またはｃＧＡＭＰを定量化するために、前記患者由来の試料を経時的にモニタリングすることと組み合わせて用いられる、請求項１５または１６に記載の医薬。
【請求項１８】
前記転移化学療法剤が、１種類以上のキネシン−１３タンパク質、１種類以上のＭＣＡＫタンパク質、またはそれらの組み合わせを含む組成物である、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の医薬。
【請求項１９】
前記転移化学療法剤が組成物であり、前記組成物が、キネシン−１３核酸、または、キネシン−１３タンパク質をコードする核酸セグメントに操作可能に連結されたプロモーターを有する発現カセットを含む、請求項１５〜１７のいずれか一項に記載の医薬。
【請求項２０】
（ａ）患者由来の試験試料中の以下の遺伝子：ＰＥＬＩ２、ＢＭＰ２、ＳＨＨ、ＴＮＳ４、ＲＡＢ３Ｂ、ＲＯＢＯ１、ＡＲＨＧＡＰ２８、ＣＨＮ２、ＣＳＴ１、Ｆ１３Ａ１、ＣＰＶＬ、ＳＥＭＡ６Ｄ、Ｃ９ｏｒｆ１５２、ＮＨＳＬ２、ＧＴＦ２ＩＰ７、ＤＰＹＳＬ３、ＰＣＤＨ７、ＫＨＤＲＢＳ３、ＴＲＡＣ、ＴＭＥＭ１５６、ＣＳＴ４、ＣＤ２４、またはＦＧＦ５の発現レベルを定量化して、前記試験試料中の以下の遺伝子：ＰＥＬＩ２、ＢＭＰ２、ＳＨＨ、ＴＮＳ４、ＲＡＢ３Ｂ、ＲＯＢＯ１、ＡＲＨＧＡＰ２８、ＣＨＮ２、ＣＳＴ１、Ｆ１３Ａ１、ＣＰＶＬ、ＳＥＭＡ６Ｄ、Ｃ９ｏｒｆ１５２、ＮＨＳＬ２、ＧＴＦ２ＩＰ７、ＤＰＹＳＬ３、ＰＣＤＨ７、ＫＨＤＲＢＳ３、ＴＲＡＣ、ＴＭＥＭ１５６、ＣＳＴ４、ＣＤ２４、またはＦＧＦ５の各々の定量化した発現レベルを生成すること、および
（ｂ）各定量化した発現レベルをこれらの遺伝子の各々についての中央基準発現レベルと比較することを含み、各定量化した発現レベルがこれらの遺伝子の各々についての中央基準発現レベルよりも大きい場合、前記患者のより長い無転移生存期間が示される、
方法。
【請求項２１】
前記遺伝子の各々についての前記中央基準発現レベルが、転移性がんを有する一連の患者由来の試料中のこれらの遺伝子の各々についての中央発現値である、請求項２０に記載の方法。
【請求項２２】
前記患者が乳がんを有する、請求項２０または２１に記載の方法。
【請求項２３】
ａ．細胞試料の１つ以上の細胞内に少なくとも１０％の検出可能な染色体誤分離を有する、
ｂ．細胞試料の１つ以上の細胞内に少なくとも３％の検出可能な小核を有する、
ｃ．細胞試料の１つ以上の細胞内に検出可能なサイトゾル二本鎖ＤＮＡを有する、または
ｄ．細胞試料中もしくは体液試料中、非がん性基準試料より少なくとも１０％高いｃＧＡＭＰの濃度もしくは量を有する
細胞試料または体液試料を有する患者に投与するための組成物の製造における化学療法剤の使用。