【手続補正書】
【提出日】令和3年4月12日(2021.4.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療剤の相乗的ｉｎ  ｖｉｖｏ産生を可能にするように遺伝子改変Ｂ細胞を被験体に投与する方法における使用のための、遺伝子改変Ｂ細胞を含む組成物であって、前記方法が、前記治療剤の最大ｉｎ  ｖｉｖｏ産生を誘導するための、前記改変Ｂ細胞の最適な単回用量濃度を決定するステップと、前記改変Ｂ細胞の前記最適な単回用量濃度を減少させて、前記改変Ｂ細胞の最適に満たない単回用量濃度を得るステップと、２またはそれよりも多い用量の前記最適に満たない単回用量濃度の前記改変Ｂ細胞を前記被験体に投与するステップとを含む、組成物。
【請求項２】
前記改変Ｂ細胞の最適な単回用量濃度が決定されるように、前記改変Ｂ細胞の複数の単回投薬量が検査される、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
改変Ｂ細胞の単回用量濃度で存在する改変Ｂ細胞の前記投薬量の増加が、前記治療剤の産生の線形増加をもたらす、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
最適投薬量が見つかるように、前記改変Ｂ細胞の複数の最適に満たない単回用量濃度が検査され、得られた投薬量が、より低い投薬量の場合よりも、線形を超える増加をもたらす、請求項１に記載の組成物。
【請求項５】
前記最適に満たない単回用量濃度が、前記最適な単回用量濃度の用量の２分の１または３分の１である、請求項１に記載の組成物。
【請求項６】
前記最適に満たない単回用量濃度が、前記最適な単回用量濃度の用量の３分の１未満である、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
前記被験体への２またはそれよりも多い用量の前記最適に満たない単回用量濃度の前記改変Ｂ細胞の投与によって得られる、前記治療剤の前記相乗的ｉｎ  ｖｉｖｏ産生が、Ｂ細胞産物の静脈内注射によって得られる、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記Ｂ細胞が、前記治療剤を発現するように操作される、請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記改変Ｂ細胞が、前記治療剤を分泌するように遺伝子操作される、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
前記治療剤が、ＩＤＵＡである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記治療剤が、ＦＩＸ、ＬＰＬまたはＬＣＡＴである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、配列番号１と同一である配列を有するポリヌクレオチドを含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１３】
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、配列番号１と少なくとも約８５％同一である、または配列番号１と少なくとも約９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくは９９％超同一である配列を有するポリヌクレオチドを含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１４】
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、ｐＫＴ２／ＥＥＫ−ＩＤＵＡ−ＤＨＦＲ二機能性導入遺伝子をコードするポリヌクレオチド含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１５】
治療剤のｉｎ  ｖｉｖｏ産生のために遺伝子改変Ｂ細胞を被験体に投与する方法における使用のための、遺伝子改変Ｂ細胞を含む組成物であって、前記方法が、２またはそれよりも多い逐次用量の遺伝子改変Ｂ細胞を被検体に投与するステップを含み、ｉ）前記遺伝子改変Ｂ細胞が、配列番号１と少なくとも約８５％同一である、または配列番号１と少なくとも約９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくは９９％超同一である配列を有するポリヌクレオチドを含むか、あるいはｉｉ）前記遺伝子改変Ｂ細胞が、配列番号１と同一である配列を有するポリヌクレオチドを含む、組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
本発明の一態様は、治療剤のｉｎ  ｖｉｖｏ産生のために遺伝子改変Ｂ細胞を被験体に投与する方法であって、最適な単回用量の遺伝子改変Ｂ細胞を被験体に投与するステップを含む方法を提供する。一部の実施形態では、治療剤は、ＩＤＵＡである。一部の実施形態では、治療剤は、ＦＩＸ、ＬＰＬまたはＬＣＡＴである。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
治療剤のｉｎ  ｖｉｖｏ産生のために遺伝子改変Ｂ細胞を被験体に投与する方法であって、
２またはそれよりも多い逐次用量の遺伝子改変Ｂ細胞を被験体に投与するステップ
を含む、方法。
（項目２）
投与ステップが、最適に満たない単回用量濃度で２またはそれよりも多い用量の前記遺伝子改変Ｂ細胞を含む、項目１に記載の方法。
（項目３）
投与ステップが、３またはそれよりも多い用量の遺伝子改変Ｂ細胞を含む、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、前記被験体に対して自家である、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、前記被験体に対して同種異系である、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記被験体が、ヒトである、項目１に記載の方法。
（項目７）
前記治療剤が、タンパク質、ポリヌクレオチドまたはＤＮＡコード小分子である、項目１に記載の方法。
（項目８）
前記タンパク質が、酵素、抗体もしくはその抗原結合性断片、融合タンパク質、細胞表面受容体、分泌タンパク質、シグナル伝達分子、抗原性断片、凝固因子、または接着分子である、項目７に記載の方法。
（項目９）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、ＣＤ２０−、ＣＤ３８−かつＣＤ１３８−である、項目１に記載の方法。
（項目１０）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、ＣＤ２０−、ＣＤ３８＋かつＣＤ１３８＋である、項目１に記載の方法。
（項目１１）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、ＣＤ２０−、ＣＤ３８＋かつＣＤ１３８−である、項目１に記載の方法。
（項目１２）
前記投与ステップが、静脈内、腹腔内、皮下または筋肉内注射を含む、項目１に記載の方法。
（項目１３）
前記投与ステップが、静脈内注射を含む、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、前記Ｂ細胞において前記治療剤を発現するようにスリーピングビューティートランスポゾンを使用して調製された、項目１に記載の方法。
（項目１５）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、前記Ｂ細胞において前記治療剤を発現するように組換えウイルスベクターを使用して調製された、項目１に記載の方法。
（項目１６）
前記組換えウイルスベクターが、組換えレトロウイルス、組換えレンチウイルス、組換えアデノウイルスまたは組換えアデノ随伴ウイルスをコードする、項目１５に記載の方法。
（項目１７）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、前記Ｂ細胞のゲノムへの、前記治療剤をコードするポリヌクレオチド配列の標的化組込みによって調製された、項目１に記載の方法。
（項目１８）
前記標的化組込みが、ジンクフィンガーヌクレアーゼ媒介性遺伝子組込み、ＣＲＩＳＰＲ／ＣＡＳ９媒介性遺伝子組込み、ＴＡＬＥ−ヌクレアーゼ媒介性遺伝子組込みまたはメガヌクレアーゼ媒介性遺伝子組込みを含む、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記ポリヌクレオチドの前記標的化組込みが、相同組換えにより起こった、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
前記標的化組込みが、標的ＤＮＡ部位においてＤＮＡ切断を誘導することができるヌクレアーゼのウイルスベクター媒介性送達を含む、項目１７に記載の方法。
（項目２１）
前記ヌクレアーゼが、ジンクフィンガーヌクレアーゼ、ＣＡＳ９ヌクレアーゼ、ＴＡＬＥ−ヌクレアーゼまたはメガヌクレアーゼである、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、配列番号１と同一である配列を有するポリヌクレオチドを含む、項目１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
（項目２３）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、配列番号１と少なくとも約８５％同一である、または配列番号１と少なくとも約９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくは９９％超同一である配列を有するポリヌクレオチドを含む、項目１〜２１のいずれか一項に記載の方法。
（項目２４）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、培養後２日目または３日目に操作される、項目１〜２３のいずれか一項に記載の方法。
（項目２５）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、エレクトロポレーションを含む方法を使用して操作される、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、操作後の培養における４日目、５日目、６日目または７日目に、被験体への投与のために収集される、項目１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
（項目２７）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、操作後の培養における８日目またはそれよりも後に、被験体への投与のために収集される、項目１〜２５のいずれか一項に記載の方法。
（項目２８）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、操作後の培養における１０日目またはそれよりも前に、被験体への投与のために収集される、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
収集された前記遺伝子改変Ｂ細胞が、顕著なレベルの炎症性サイトカインを産生しない、項目１〜２８のいずれか一項に記載の方法。
（項目３０）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、顕著なレベルの炎症性サイトカインを産生しないことが決定された培養中の時点で収集される、項目１〜２８のいずれか一項に記載の方法。
（項目３１）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、操作前および後の培養期間全体にわたって、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１５、ＩＬ−３１および多量体化ＣＤ４０リガンドのそれぞれを含む培養系において育成される、項目１〜３０のいずれか一項に記載の方法。
（項目３２）
前記多量体化ＣＤ４０リガンドが、抗ｈｉｓ抗体を使用して多量体化された、ＨＩＳタグ付きＣＤ４０リガンドである、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記被験体への前記投与ステップの前に、前記遺伝子改変Ｂ細胞を拡大増殖するステップをさらに含む、項目１〜３２のいずれか一項に記載の方法。
（項目３４）
拡大増殖された遺伝子改変Ｂ細胞の最終集団が、高い程度のポリクロナリティーを示す、項目３３に記載の方法。
（項目３５）
拡大増殖された遺伝子改変Ｂ細胞の前記最終集団におけるあらゆる特定のＢ細胞クローンが、総Ｂ細胞集団の０．２％未満を構成する、項目３３に記載の方法。
（項目３６）
拡大増殖された遺伝子改変Ｂ細胞の前記最終集団におけるあらゆる特定のＢ細胞クローンが、総Ｂ細胞集団の０．０５％未満を構成する、項目３３に記載の方法。
（項目３７）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、メトトレキセートに対して増強された耐性を有するヒトＤＨＦＲ遺伝子をコードするポリヌクレオチドを含む、項目１〜３６のいずれか一項に記載の方法。
（項目３８）
メトトレキセートに対して増強された耐性を有する前記ヒトＤＨＦＲ遺伝子が、アミノ酸２２におけるロイシンからチロシンへの置換変異、およびアミノ酸３１におけるフェニルアラニンからセリンへの置換変異を含有する、項目３７に記載の方法。
（項目３９）
投与のための収集の前に、前記遺伝子改変Ｂ細胞をメトトレキセートで処置するステップを含む、項目１〜３８のいずれか一項に記載の方法。
（項目４０）
メトトレキセートによる前記処置が、１００ｎＭ〜３００ｎＭの間である、項目３９に記載の方法。
（項目４１）
メトトレキセートによる前記処置が、２００ｎＭである、項目４０に記載の方法。
（項目４２）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、前記被験体に投与されると、多様な組織へと遊走する、項目１〜４１のいずれか一項に記載の方法。
（項目４３）
前記被験体に投与される遺伝子改変Ｂ細胞の前記集団のうち少なくとも１個の遺伝子改変Ｂ細胞が、骨髄、腸、筋肉、脾臓、腎臓、心臓、肝臓、肺および脳からなる群より選択される１種または複数の組織へと遊走する、項目１〜４１のいずれか一項に記載の方法。
（項目４４）
前記被験体に投与される遺伝子改変Ｂ細胞の前記集団のうち少なくとも１個の遺伝子改変Ｂ細胞が、前記被験体の骨髄、腸、筋肉、脾臓、腎臓、心臓、肝臓、肺および脳へと遊走する、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
前記遺伝子改変Ｂ細胞によって産生される前記治療剤が、イズロニダーゼ（ＩＤＵＡ）である、項目１〜４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４６）
前記被験体への前記遺伝子改変Ｂ細胞の前記投与が、前記被験体の多様な組織におけるグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）の低下をもたらす、項目４５に記載の方法。
（項目４７）
前記被験体への前記遺伝子改変Ｂ細胞の前記投与が、骨髄、腸、筋肉、脾臓、腎臓、心臓、肝臓、肺および脳からなる群より選択される前記被験体の１種または複数の組織におけるＧＡＧの低下をもたらす、項目４５に記載の方法。
（項目４８）
前記被験体への前記遺伝子改変Ｂ細胞の前記投与が、前記被験体の骨髄、腸、筋肉、脾臓、腎臓、心臓、肝臓、肺および脳におけるＧＡＧの低下をもたらす、項目４７に記載の方法。
（項目４９）
前記被験体が、ムコ多糖症Ｉ型（ＭＰＳ  Ｉ）を有する、項目１〜４８のいずれか一項に記載の方法。
（項目５０）
前記遺伝子改変Ｂ細胞の前記投与が、前記被験体のＭＰＳ  Ｉを処置する、項目４９に記載の方法。
（項目５１）
ｉｎ  ｖｉｖｏで複数の組織に治療剤を送達するための方法であって、２またはそれよりも多い用量の遺伝子改変Ｂ細胞を被験体に投与するステップを含む、方法。
（項目５２）
被験体におけるＭＰＳ  Ｉを処置するための方法であって、２またはそれよりも多い逐次用量の、ＩＤＵＡを産生するように遺伝子改変されたＢ細胞を、ＭＰＳ  Ｉを有する前記被験体に投与するステップを含む、方法。
（項目５３）
ＭＰＳ  Ｉを有する被験体におけるグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）の量を低下させるための方法であって、２またはそれよりも多い逐次用量の、ＩＤＵＡを産生するように遺伝子改変されたＢ細胞を前記被験体に投与するステップを含む、方法。
（項目５４）
ｐＫＴ２／ＥＥＫ−ＩＤＵＡ−ＤＨＦＲ二機能性導入遺伝子を含む改変Ｂ細胞。
（項目５５）
ｉｎ  ｖｉｖｏで１種または複数の組織に治療剤を送達するための方法であって、１または複数用量の遺伝子改変Ｂ細胞を被験体に投与するステップを含み、前記遺伝子改変Ｂ細胞が遊走性である、方法。
（項目５６）
前記Ｂ細胞の少なくとも約２０％が、ＣＸＣＬ１２を使用した走化性アッセイにおいて遊走する、項目５５に記載の方法。
（項目５７）
前記Ｂ細胞の少なくとも約４０％、少なくとも約４５％または少なくとも約５０％が、ＣＸＣＬ１２を使用した走化性アッセイにおいて遊走する、項目５５に記載の方法。
（項目５８）
前記Ｂ細胞の少なくとも約２０％が、ＣＸＣＬ１３を使用した走化性アッセイにおいて遊走する、項目５５〜５７のいずれか一項に記載の方法。
（項目５９）
前記Ｂ細胞の少なくとも約４０％、少なくとも約４５％または少なくとも約５０％が、ＣＸＣＬ１３を使用した走化性アッセイにおいて遊走する、項目５５〜５８のいずれか一項に記載の方法。
（項目６０）
前記Ｂ細胞の少なくとも約４０％が、ＣＸＣＬ１２を使用した走化性アッセイにおいて遊走し、前記Ｂ細胞の少なくとも約４０％が、ＣＸＣＬ１３を使用した走化性アッセイにおいて遊走する、項目５５に記載の方法。
（項目６１）
前記改変Ｂ細胞が、前記治療剤を発現するように遺伝子操作される、項目５５〜６０のいずれか一項に記載の方法。
（項目６２）
前記改変Ｂ細胞が、前記治療剤を分泌するように遺伝子操作される、項目５５〜６１のいずれか一項に記載の方法。
（項目６３）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、前記Ｂ細胞が操作後約７日間未満にわたり培養下に置かれたときに投与される、項目５５に記載の方法。
（項目６４）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、前記Ｂ細胞が４〜９日間培養下に置かれたときに投与される、項目５５に記載の方法。
（項目６５）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、前記Ｂ細胞が操作後５、６または７日間培養下に置かれた後に投与される、項目５５に記載の方法。
（項目６６）
前記治療剤が、ＩＤＵＡである、項目５５〜６５のいずれか一項に記載の方法。
（項目６７）
前記治療剤が、ＦＩＸ、ＬＰＬまたはＬＣＡＴである、項目５５〜６５のいずれか一項に記載の方法。
（項目６８）
少なくとも２用量の前記改変Ｂ細胞を投与するステップを含む、項目５５〜６７のいずれか一項に記載の方法。
（項目６９）
前記投与ステップが、静脈内注射を含む、項目５５〜６８のいずれか一項に記載の方法。
（項目７０）
治療剤の相乗的ｉｎ  ｖｉｖｏ産生を可能にするように遺伝子改変Ｂ細胞を被験体に投与する方法であって、前記治療剤の最大ｉｎ  ｖｉｖｏ産生を誘導するための、前記改変Ｂ細胞の最適な単回用量濃度を決定するステップと、前記改変Ｂ細胞の前記最適な単回用量濃度を減少させて、前記改変Ｂ細胞の最適に満たない単回用量濃度を得るステップと、２またはそれよりも多い用量の前記最適に満たない単回用量濃度の前記改変Ｂ細胞を前記被験体に投与するステップとを含む、方法。
（項目７１）
前記改変Ｂ細胞の最適な単回用量濃度が決定されるように、前記改変Ｂ細胞の複数の単回投薬量が検査される、項目７０に記載の方法。
（項目７２）
改変Ｂ細胞の単回用量濃度で存在する改変Ｂ細胞の前記投薬量の増加が、前記治療剤の産生の線形増加をもたらす、項目７１に記載の方法。
（項目７３）
最適投薬量が見つかるように、前記改変Ｂ細胞の複数の最適に満たない単回用量濃度が検査され、得られた投薬量が、より低い投薬量の場合よりも、線形を超える増加をもたらす、項目７０に記載の方法。
（項目７４）
前記最適に満たない単回用量濃度が、前記最適な単回用量濃度の用量の２分の１または３分の１である、項目７０に記載の方法。
（項目７５）
前記最適に満たない単回用量濃度が、前記最適な単回用量濃度の用量の３分の１未満である、項目７０に記載の方法。
（項目７６）
前記被験体への２またはそれよりも多い用量の前記最適に満たない単回用量濃度の前記改変Ｂ細胞の投与によって得られる、前記治療剤の前記相乗的ｉｎ  ｖｉｖｏ産生が、Ｂ細胞産物の静脈内注射によって得られる、項目７０〜７５のいずれか一項に記載の方法。
（項目７７）
前記Ｂ細胞が、前記治療剤を発現するように操作される、項目７０〜７６のいずれか一項に記載の方法。
（項目７８）
前記改変Ｂ細胞が、前記治療剤を分泌するように遺伝子操作される、項目７７に記載の方法。
（項目７９）
前記治療剤が、ＩＤＵＡである、項目７０〜７８のいずれか一項に記載の方法。
（項目８０）
前記治療剤が、ＦＩＸ、ＬＰＬまたはＬＣＡＴである、項目７０〜７８のいずれか一項に記載の方法。
（項目８１）
治療剤を産生するように操作された遺伝子改変Ｂ細胞。
（項目８２）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が投与される被験体に対して自家である、項目８１に記載の遺伝子改変Ｂ細胞。
（項目８３）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が投与される被験体に対して同種異系である、項目８１に記載の遺伝子改変Ｂ細胞。
（項目８４）
前記被験体が、ヒトである、項目８２または８３に記載の遺伝子改変Ｂ細胞。
（項目８５）
前記治療剤が、タンパク質、ポリヌクレオチドまたはＤＮＡコード小分子である、項目８１に記載の遺伝子改変Ｂ細胞。
（項目８６）
前記タンパク質が、酵素、抗体もしくはその抗原結合性断片、融合タンパク質、細胞表面受容体、分泌タンパク質、シグナル伝達分子、抗原性断片、凝固因子、または接着分子である、項目８５に記載の遺伝子改変Ｂ細胞。
（項目８７）
前記治療剤が、ＩＤＵＡである、項目８１に記載の遺伝子改変Ｂ細胞。
（項目８８）
前記治療剤が、ＦＩＸ、ＬＰＬまたはＬＣＡＴである、項目８１に記載の遺伝子改変Ｂ細胞。
（項目８９）
ＣＤ２０−、ＣＤ３８−かつＣＤ１３８−である、項目８１に記載の遺伝子改変Ｂ細胞。
（項目９０）
ＣＤ２０−、ＣＤ３８＋かつＣＤ１３８＋である、項目８１に記載の遺伝子改変Ｂ細胞。
（項目９１）
ＣＤ２０−、ＣＤ３８＋かつＣＤ１３８−である、項目８１に記載の遺伝子改変Ｂ細胞。
（項目９２）
治療剤を産生するように操作された遺伝子改変Ｂ細胞の集団を含む組成物であって、前記遺伝子改変Ｂ細胞が最適な遊走能にあるものである、組成物。
（項目９３）
前記治療剤が、ＩＤＵＡである、項目９２に記載の組成物。
（項目９４）
前記治療剤が、ＦＩＸ、ＬＰＬまたはＬＣＡＴである、項目９２に記載の組成物。
（項目９５）
治療剤を産生するように操作された遺伝子改変Ｂ細胞の集団を含む組成物であって、前記組成物における前記遺伝子改変Ｂ細胞が、顕著な量の炎症性サイトカインを産生しない時点で培養物から収集される、組成物。
（項目９６）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、前記遺伝子改変Ｂ細胞が投与される被験体に対して自家である、項目９２〜９５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目９７）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、前記遺伝子改変Ｂ細胞が投与される被験体に対して同種異系である、項目９２〜９５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目９８）
前記被験体が、ヒトである、項目９６〜９７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目９９）
前記治療剤が、タンパク質、ポリヌクレオチドまたはＤＮＡコード小分子である、項目９２または９５に記載の組成物。
（項目１００）
前記タンパク質が、酵素、抗体もしくはその抗原結合性断片、融合タンパク質、細胞表面受容体、分泌タンパク質、シグナル伝達分子、抗原性断片、凝固因子、または接着分子である、項目９９に記載の組成物。
（項目１０１）
前記治療剤が、ＩＤＵＡである、項目９２〜１００のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１０２）
前記治療剤が、ＦＩＸ、ＬＰＬまたはＬＣＡＴである、項目９２〜１００のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１０３）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、ＣＤ２０−、ＣＤ３８−かつＣＤ１３８−である、項目９２〜１０２のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１０４）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、ＣＤ２０−、ＣＤ３８＋かつＣＤ１３８＋である、項目９２〜１０２のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１０５）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、ＣＤ２０−、ＣＤ３８＋かつＣＤ１３８−である、項目９２〜１０２のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１０６）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、前記Ｂ細胞において前記治療剤を発現するようにスリーピングビューティートランスポゾンを使用して調製された、項目９２〜１０５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１０７）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、前記Ｂ細胞において前記治療剤を発現するように組換えウイルスベクターを使用して調製された、項目９２〜１０５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１０８）
前記組換えウイルスベクターが、組換えレトロウイルス、組換えレンチウイルス、組換えアデノウイルスまたは組換えアデノ随伴ウイルスをコードする、項目１０７に記載の組成物。
（項目１０９）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、前記Ｂ細胞のゲノムへの、前記治療剤をコードするポリヌクレオチド配列の標的化組込みによって調製された、項目９２〜１０５および１０６〜１０８のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１０）
前記標的化組込みが、ジンクフィンガーヌクレアーゼ媒介性遺伝子組込み、ＣＲＩＳＰＲ／ＣＡＳ９媒介性遺伝子組込み、ＴＡＬＥ−ヌクレアーゼ媒介性遺伝子組込みまたはメガヌクレアーゼ媒介性遺伝子組込みを含む、項目１０９に記載の組成物。
（項目１１１）
前記ポリヌクレオチドの前記標的化組込みが、相同組換えにより起こった、項目１１０に記載の組成物。
（項目１１２）
前記標的化組込みが、標的ＤＮＡ部位においてＤＮＡ切断を誘導することができるヌクレアーゼのウイルスベクター媒介性送達を含む、項目１０９に記載の組成物。
（項目１１３）
前記ヌクレアーゼが、ジンクフィンガーヌクレアーゼ、ＣＡＳ９ヌクレアーゼ、ＴＡＬＥ−ヌクレアーゼまたはメガヌクレアーゼである、項目１１２に記載の組成物。
（項目１１４）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、配列番号１と同一である配列を有するポリヌクレオチドを含む、項目９２〜１１３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１５）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、配列番号１と少なくとも約８５％同一である、または配列番号１と少なくとも約９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくは９９％超同一である配列を有するポリヌクレオチドを含む、項目９２〜１１３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１６）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、培養後２日目または３日目に操作される、項目９２〜１１５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１７）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、エレクトロポレーションを含む方法を使用して操作される、項目１１６に記載の組成物。
（項目１１８）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、操作後の培養における４日目、５日目、６日目または７日目に、被験体への投与のために収集される、項目９２〜１１７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１１９）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、操作後の培養における８日目またはそれよりも後に、被験体への投与のために収集される、項目９２〜１１７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２０）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、操作後の培養における１０日目またはそれよりも前に、被験体への投与のために収集される、項目９２〜１１９のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２１）
収集された前記遺伝子改変Ｂ細胞が、顕著なレベルの炎症性サイトカインを産生しない、項目９２〜１２０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２２）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、顕著なレベルの炎症性サイトカインを産生しないことが決定された培養中の時点で収集される、項目９２〜１２１のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２３）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、操作前および後の培養期間全体にわたって、ＩＬ−２、ＩＬ−４、ＩＬ−１０、ＩＬ−１５、ＩＬ−３１および多量体化ＣＤ４０リガンドのそれぞれを含む培養系において育成される、項目９２〜１２２のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２４）
前記多量体化ＣＤ４０リガンドが、抗ｈｉｓ抗体を使用して多量体化された、ＨＩＳタグ付きＣＤ４０リガンドである、項目１２３に記載の組成物。
（項目１２５）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、前記被験体への投与の前に拡大増殖される、項目９２〜１２４のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１２６）
拡大増殖された遺伝子改変Ｂ細胞の最終集団が、高い程度のポリクロナリティーを示す、項目１２５に記載の組成物。
（項目１２７）
拡大増殖された遺伝子改変Ｂ細胞の前記最終集団におけるあらゆる特定のＢ細胞クローンが、総Ｂ細胞集団の０．２％未満を構成する、項目１２６に記載の組成物。
（項目１２８）
拡大増殖された遺伝子改変Ｂ細胞の前記最終集団におけるあらゆる特定のＢ細胞クローンが、総Ｂ細胞集団の０．０５％未満を構成する、項目１２６に記載の組成物。
（項目１２９）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、メトトレキセートに対して増強された耐性を有するヒトＤＨＦＲ遺伝子をコードするポリヌクレオチドを含む、項目９２〜１２８のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１３０）
メトトレキセートに対して増強された耐性を有する前記ヒトＤＨＦＲ遺伝子が、アミノ酸２２におけるロイシンからチロシンへの置換変異、およびアミノ酸３１におけるフェニルアラニンからセリンへの置換変異を含有する、項目１２９に記載の組成物。
（項目１３１）
前記遺伝子改変Ｂ細胞が、投与のための収集の前にメトトレキセートで処置された、項目９２〜１３０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１３２）
メトトレキセートによる前記処置が、１００ｎＭ〜３００ｎＭの間である、項目１３１に記載の組成物。
（項目１３３）
メトトレキセートによる前記処置が、２００ｎＭである、項目１３２に記載の組成物。
（項目１３４）
前記組成物に含まれる前記遺伝子改変Ｂ細胞が、被験体に投与されると、多様な組織へと遊走する、項目９２〜１３３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１３５）
遺伝子改変Ｂ細胞の前記組成物が、被験体に投与されると、前記組成物に含まれる遺伝子改変Ｂ細胞の前記集団のうち少なくとも１個の遺伝子改変Ｂ細胞が、骨髄、腸、筋肉、脾臓、腎臓、心臓、肝臓、肺および脳からなる群より選択される１種または複数の組織へと遊走する、項目９２〜１３３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１３６）
遺伝子改変Ｂ細胞の前記組成物が、被験体に投与されると、前記組成物に含まれる遺伝子改変Ｂ細胞の前記集団のうち少なくとも１個の遺伝子改変Ｂ細胞が、前記被験体の骨髄、腸、筋肉、脾臓、腎臓、心臓、肝臓、肺および脳へと遊走する、項目１３５に記載の組成物。
（項目１３７）
前記遺伝子改変Ｂ細胞によって産生される前記治療剤が、イズロニダーゼ（ＩＤＵＡ）である、項目９２〜１３６のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１３８）
被験体への前記遺伝子改変Ｂ細胞を含む前記組成物の投与が、前記被験体の多様な組織におけるグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）の低下をもたらす、項目１３７に記載の組成物。
（項目１３９）
被験体への前記遺伝子改変Ｂ細胞を含む前記組成物の投与が、骨髄、腸、筋肉、脾臓、腎臓、心臓、肝臓、肺および脳からなる群より選択される前記被験体の１種または複数の組織におけるＧＡＧの低下をもたらす、項目１３７に記載の組成物。
（項目１４０）
被験体への前記遺伝子改変Ｂ細胞を含む前記組成物の投与が、前記被験体の骨髄、腸、筋肉、脾臓、腎臓、心臓、肝臓、肺および脳におけるＧＡＧの低下をもたらす、項目１３７に記載の方法。
（項目１４１）
ムコ多糖症Ｉ型（ＭＰＳ  Ｉ）を有する被験体に投与される、項目９２〜１４０のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１４２）
前記遺伝子改変Ｂ細胞を含む前記組成物の投与が、前記被験体のＭＰＳ  Ｉを処置する、項目１４１に記載の組成物。
（項目１４３）
前記遺伝子改変Ｂ細胞によって産生される前記治療剤が、ＦＩＸ、ＬＰＬおよびＬＣＡＴから選択される、項目９２〜１３６のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１４４）
治療剤のｉｎ  ｖｉｖｏ産生のために遺伝子改変Ｂ細胞を被験体に投与する方法であって、最適な単回用量の遺伝子改変Ｂ細胞を被験体に投与するステップを含む、方法。
（項目１４５）
前記被験体が、ヒトである、項目１４４に記載の方法。
（項目１４６）
前記最適単回用量が、ヒト等価量の３×１０７個の改変Ｂ細胞／Ｋｇである、項目１４５に記載の方法。
（項目１４７）
前記用量が、１．５×１０９個の遺伝子改変Ｂ細胞／Ｋｇである、項目１４４〜１４６のいずれか一項に記載の方法。
（項目１４８）
前記最適な単回用量の遺伝子改変Ｂ細胞が、最適投薬量の３分の２またはそれに満たない投薬量と比較して、治療薬の注入細胞１個あたりのレベルで線形を超える増加をもたらす、項目１４４〜１４７のいずれか一項に記載の方法。
（項目１４９）
前記最適な単回用量の遺伝子改変Ｂ細胞が、単回Ｂ細胞注入の状況において、細胞１個あたりの、治療薬の最大ｉｎ  ｖｉｖｏレベルをもたらす、項目１４４〜１４８のいずれか一項に記載の方法。
（項目１５０）
前記薬剤が、ＩＤＵＡである、項目１４４〜１４９のいずれか一項に記載の方法。