【手続補正書】
【提出日】令和3年5月21日(2021.5.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）ＮＫＧ２Ｄに結合する第１の抗原結合部位と、
（ｂ）ＲＯＲ１またはＲＯＲ２に結合する第２の抗原結合部位と、
（ｃ）ＣＤ１６に結合するに十分な抗体Ｆｃドメインもしくはその一部分、またはＣＤ１６に結合する第３の抗原結合部位と
を含むタンパク質。
【請求項２】
前記第１の抗原結合部位が、ヒトおよび非ヒト霊長類のＮＫＧ２Ｄに結合する、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項３】
前記第１の抗原結合部位が、同じポリペプチド上に存在する重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、請求項１または２に記載のタンパク質。
【請求項４】
前記第２の抗原結合部位が、同じポリペプチド上に存在する重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、請求項３に記載のタンパク質。
【請求項５】
前記第１の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインが、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を有する、請求項４に記載のタンパク質。
【請求項６】
前記第１の抗原結合部位が、
ａ．配列番号８７のアミノ酸配列と同一の重鎖相補性決定領域１（ＣＤＲ１）配列、配列番号８８のアミノ酸配列と同一の重鎖相補性決定領域２（ＣＤＲ２）配列、配列番号８９のアミノ酸配列と同一の重鎖相補性決定領域３（ＣＤＲ３）配列、配列番号９０のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号９１のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号９２のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列；
ｂ．配列番号１８６のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１８７のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号１８８のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列；
ｃ．配列番号４３のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号４４のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号４５のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号４６のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号４７のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号４８のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列；
ｄ．配列番号５１のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号５２のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号５３のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号５４のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号５５のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号５６のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列；
ｅ．配列番号１８０のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１８１のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号１８２のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号１８３のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号１８４のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号１８５のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列；
ｆ．配列番号６３のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号６４のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号６５のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号６６のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号６７のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号６８のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列；
ｇ．配列番号７１のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号７２のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号７３のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号７４のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号７５のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号７６のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列；
ｈ．配列番号７９のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号８０のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号８１のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号８２のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号８３のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号８４のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列；または
ｉ．配列番号９５のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ１配列、配列番号９６のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ２配列、配列番号９７のアミノ酸配列と同一の重鎖ＣＤＲ３配列、配列番号９８のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ１配列、配列番号９９のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ２配列、および配列番号１００のアミノ酸配列と同一の軽鎖ＣＤＲ３配列
を含む、請求項１に記載のタンパク質。
【請求項７】
前記第１の抗原結合部位が、配列番号８５、配列番号１、配列番号４１、配列番号４９、配列番号５７、配列番号５９、配列番号６１、配列番号６９、配列番号７７および配列番号９３から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項８】
前記第１の抗原結合部位が、
ａ．配列番号８５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号８６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン
ｂ．配列番号４１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号４２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｃ．配列番号４９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号５０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｄ．配列番号５７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号５８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｅ．配列番号５９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号６０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｆ．配列番号６１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号６２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｇ．配列番号６９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号７０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｈ．配列番号７７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号７８と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｉ．配列番号９３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号９４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；
ｊ．配列番号１０１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１０２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン；または
ｋ．配列番号１０３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインおよび配列番号１０４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメイン
を含む、請求項１〜５のいずれかに記載のタンパク質。
【請求項９】
前記第１の抗原結合部位が、単一ドメイン抗体である、請求項１または２に記載のタンパク質。
【請求項１０】
前記単一ドメイン抗体が、ＶＨＨ断片またはＶＮＡＲ断片である、請求項９に記載のタンパク質。
【請求項１１】
前記第２の抗原結合部位が、同じポリペプチド上に存在する重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、請求項１〜２または９〜１０のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１２】
ａ．前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ１に結合し、
ｉ．前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１０５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１０９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、
ｉｉ．前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１１３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１１７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、
ｉｉｉ．前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１２１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１２５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、
ｉｖ．前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１２９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１３３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、
ｖ．前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１３７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１４１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、
ｖｉ．前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１４５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１４９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、または
ｖｉｉ．前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１５３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１５７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、
ｂ．前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ２に結合し、
ｉ．前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１６２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１６６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、または
ｉｉ．前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１７０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１７４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、
請求項１〜１１のいずれか１項に記載のタンパク質。
【請求項１３】
前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ１に結合し、
ａ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１０６のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１０７のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１０８のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１１０のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１１１のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１１２のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含む；
ｂ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１１４のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１１５のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１１６のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１１８のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１１９のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１２０のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含む；
ｃ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１２２のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１２３のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１２４のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１２６のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１２７のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１２８のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含む；
ｄ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１３０のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１３１のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１３２のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１３４のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１３５のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１３６のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含む；
ｅ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１３８のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１３９のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１４０のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１４２のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１４３のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１４４のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含む；
ｆ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１４６のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１４７のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１４８のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１５０のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１５１のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１５２のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含む；または
ｇ．前記重鎖可変ドメインは、配列番号１５４のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１５５のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１５６のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１５８のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ１配列、配列番号１５９のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ２配列、および配列番号１６０のアミノ酸配列と同一のＣＤＲ３配列を含む、
請求項１〜１１のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１４】
前記第２の抗原結合部位が、単一ドメイン抗体である、請求項１〜３のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１５】
前記第２の抗原結合部位が、ＶＨＨ断片またはＶＮＡＲ断片である、請求項１４に記載のタンパク質。
【請求項１６】
前記タンパク質が、ＣＤ１６に結合するに十分な抗体Ｆｃドメインの一部分を含み、前記抗体Ｆｃドメインが、ヒンジおよびＣＨ２ドメインを含む、先行する請求項のいずれか一項に記載のタンパク質。
【請求項１７】
前記抗体Ｆｃドメインが、ヒトＩｇＧ１抗体のヒンジおよびＣＨ２ドメインを含む、請求項１６に記載のタンパク質。
【請求項１８】
前記Ｆｃドメインが、ヒトＩｇＧ１抗体のアミノ酸２３４〜３３２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、請求項１６または１７に記載のタンパク質。
【請求項１９】
前記Ｆｃドメインが、ヒトＩｇＧ１のＦｃドメインと少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、Ｑ３４７、Ｙ３４９、Ｌ３５１、Ｓ３５４、Ｅ３５６、Ｅ３５７、Ｋ３６０、Ｑ３６２、Ｓ３６４、Ｔ３６６、Ｌ３６８、Ｋ３７０、Ｎ３９０、Ｋ３９２、Ｔ３９４、Ｄ３９９、Ｓ４００、Ｄ４０１、Ｆ４０５、Ｙ４０７、Ｋ４０９、Ｔ４１１、およびＫ４３９からなる群から選択される１つまたは複数の位置において異なる、請求項１８に記載のタンパク質。
【請求項２０】
先行する請求項のいずれか一項に記載のタンパク質および薬学的に許容される担体を含む製剤。
【請求項２１】
請求項１〜１９のいずれか一項に記載のタンパク質をコードする１つまたは複数の核酸を含む細胞。
【請求項２２】
治療における使用のための、請求項１〜１９のいずれか一項に記載のタンパク質を含む組成物または請求項２０に記載の製剤。
【請求項２３】
有効量の前記タンパク質または製剤に、腫瘍細胞およびナチュラルキラー細胞を曝露する工程を包含する、腫瘍細胞死を増強する方法における使用のための、請求項１〜１９のいずれか一項に記載のタンパク質を含む組成物または請求項２０に記載の製剤。
【請求項２４】
有効量の前記タンパク質または前記製剤を、患者に投与することを包含する、がんを処置する方法における使用のための、請求項１〜１９のいずれか一項に記載のタンパク質を含む組成物または請求項２０に記載の製剤。
【請求項２５】
前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ１に結合し、処置される前記がんは、悪性黒色腫、前立腺がん、慢性リンパ芽球性白血病、血液悪性腫瘍、卵巣がん、トリプルネガティブ乳がん、非小細胞肺がん、および結腸直腸がんからなる群より選択される、請求項２４に記載の使用のための組成物。
【請求項２６】
がんを処置する方法における使用のための、請求項１〜１２または１４〜１９のいずれか一項に記載のタンパク質を含む組成物またはこれを含む製剤であって、前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ２に結合し、処置される前記がんは、骨肉腫、腎細胞癌、黒色腫、結腸がん、頭頚部の扁平上皮癌、乳がん、膀胱がん、子宮頚がん、リンパ腫、中皮腫、膵臓がん、卵巣がん、肺がん、子宮がん、肉腫、および前立腺がんからなる群より選択される、組成物または製剤。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３５】
本発明の別の態様は、患者のがんを処置する方法を提供する。本方法は、それを必要とする患者に、本明細書に記載の多重特異性結合タンパク質を治療有効量で投与することを含む。ＲＯＲ１を標的とする多重特異性結合タンパク質を使用して処置するがんとして、ＲＯＲ１を発現する任意のがん、例えば、悪性黒色腫、前立腺がん、慢性リンパ芽球性白血病、血液悪性腫瘍、卵巣がん、トリプルネガティブ乳がん、非小細胞肺がん、および結腸直腸がんが挙げられる。ＲＯＲ２を標的とする多重特異性結合タンパク質を使用して処置するがんとして、ＲＯＲ２を発現する任意のがん、例えば、骨肉腫、腎細胞癌、黒色腫、結腸がん、頭頚部の扁平上皮癌、乳がん、膀胱がん、子宮頚がん、リンパ腫、中皮腫、膵臓がん、卵巣がん、肺がん、子宮がん、肉腫、および前立腺がんが挙げられる。
本発明の実施形態において、例えば以下の項目が提供される。
（項目１）
（ａ）ＮＫＧ２Ｄに結合する第１の抗原結合部位と、
（ｂ）ＲＯＲ１またはＲＯＲ２に結合する第２の抗原結合部位と、
（ｃ）ＣＤ１６に結合するに十分な抗体Ｆｃドメインもしくはその一部分、またはＣＤ１６に結合する第３の抗原結合部位と
を含むタンパク質。
（項目２）
前記第１の抗原結合部位が、ヒト、非ヒト霊長類、およびげっ歯動物のＮＫＧ２Ｄに結合する、項目１に記載のタンパク質。
（項目３）
前記第１の抗原結合部位が、重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、項目１または２に記載のタンパク質。
（項目４）
前記重鎖可変ドメインおよび前記軽鎖可変ドメインが、同じポリペプチド上に存在する、項目３に記載のタンパク質。
（項目５）
前記第２の抗原結合部位が、重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、項目３または４に記載のタンパク質。
（項目６）
前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインおよび前記軽鎖可変ドメインが、同じポリペプチド上に存在する、項目５に記載のタンパク質。
（項目７）
前記第１の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインが、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を有する、項目５または６に記載のタンパク質。
（項目８）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号１、配列番号４１、配列番号４９、配列番号５７、配列番号５９、配列番号６１、配列番号６９、配列番号７７、配列番号８５および配列番号９３から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインを含む、先行する項目のいずれか一項に記載のタンパク質。
（項目９）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号４１と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号４２と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１０）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号４９と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号５０と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１１）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号５７と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号５８と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１２）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号５９と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号６０と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１３）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号６１と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号６２と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１４）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号６９と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号７０と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１５）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号７７と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号７８と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１６）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号８５と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号８６と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１７）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号９３と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号９４と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１８）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号１０１と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号１０２と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目１９）
前記第１の抗原結合部位が、配列番号１０３と少なくとも９０％同一の重鎖可変ドメインと、配列番号１０４と少なくとも９０％同一の軽鎖可変ドメインとを含む、項目１から７のいずれかに記載のタンパク質。
（項目２０）
前記第１の抗原結合部位が、単一ドメイン抗体である、項目１または２に記載のタンパク質。
（項目２１）
前記単一ドメイン抗体が、ＶＨＨ断片またはＶＮＡＲ断片である、項目２０に記載のタンパク質。
（項目２２）
前記第２の抗原結合部位が、重鎖可変ドメインおよび軽鎖可変ドメインを含む、項目１、２、または２０から２１のいずれか一項に記載のタンパク質。
（項目２３）
前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインおよび前記軽鎖可変ドメインが、同じポリペプチド上に存在する、項目２２に記載のタンパク質。
（項目２４）
前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ１に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１０５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１０９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目２５）
前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ１に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１１３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１１７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目２６）
前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ１に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１２１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１２５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目２７）
前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ１に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１２９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１３３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目２８）
前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ１に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１３７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１４１と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目２９）
前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ１に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１４５と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１４９と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３０）
前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ１に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１５３と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１５７と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３１）
前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ２に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１６２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１６６と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３２）
前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ２に結合し、前記第２の抗原結合部位の前記重鎖可変ドメインは、配列番号１７０と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、前記第２の抗原結合部位の前記軽鎖可変ドメインは、配列番号１７４と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目１〜２３のいずれか１項に記載のタンパク質。
（項目３３）
前記第２の抗原結合部位が、単一ドメイン抗体である、項目１から４または８から２１のいずれか一項に記載のタンパク質。
（項目３４）
前記第２の抗原結合部位が、ＶＨＨ断片またはＶＮＡＲ断片である、項目３３に記載のタンパク質。
（項目３５）
前記タンパク質が、ＣＤ１６に結合するに十分な抗体Ｆｃドメインの一部分を含み、前記抗体Ｆｃドメインが、ヒンジおよびＣＨ２ドメインを含む、先行する項目のいずれか一項に記載のタンパク質。
（項目３６）
前記抗体Ｆｃドメインが、ヒトＩｇＧ１抗体のヒンジおよびＣＨ２ドメインを含む、項目３５に記載のタンパク質。
（項目３７）
前記Ｆｃドメインが、ヒトＩｇＧ１抗体のアミノ酸２３４〜３３２と少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含む、項目３５または３６に記載のタンパク質。
（項目３８）
前記Ｆｃドメインが、ヒトＩｇＧ１のＦｃドメインと少なくとも９０％同一のアミノ酸配列を含み、Ｑ３４７、Ｙ３４９、Ｌ３５１、Ｓ３５４、Ｅ３５６、Ｅ３５７、Ｋ３６０、Ｑ３６２、Ｓ３６４、Ｔ３６６、Ｌ３６８、Ｋ３７０、Ｎ３９０、Ｋ３９２、Ｔ３９４、Ｄ３９９、Ｓ４００、Ｄ４０１、Ｆ４０５、Ｙ４０７、Ｋ４０９、Ｔ４１１、Ｋ４３９からなる群から選択される１つまたは複数の位置において異なる、項目３７に記載のタンパク質。
（項目３９）
先行する項目のいずれか一項に記載のタンパク質および薬学的に許容される担体を含む製剤。
（項目４０）
項目１から３８のいずれか一項に記載のタンパク質を発現する１つまたは複数の核酸を含む細胞。
（項目４１）
有効量の、項目１〜３８のいずれか１項に記載のタンパク質に、腫瘍細胞およびナチュラルキラー細胞を曝露する工程を包含する、腫瘍細胞死を増強する方法。
（項目４２）
有効量の、項目１〜３８のいずれか１項に記載のタンパク質または項目３９に記載の製剤を、患者に投与することを包含する、がんを処置する方法。
（項目４３）
前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ１に結合し、処置される前記がんは、悪性黒色腫、前立腺がん、慢性リンパ芽球性白血病、血液悪性腫瘍、卵巣がん、トリプルネガティブ乳がん、非小細胞肺がん、および結腸直腸がんからなる群より選択される、項目４２に記載の方法。
（項目４４）
前記タンパク質の前記第２の抗原結合部位は、ＲＯＲ２に結合し、処置される前記がんは、骨肉腫、腎細胞癌、黒色腫、結腸がん、頭頚部の扁平上皮癌、乳がん、膀胱がん、子宮頚がん、リンパ腫、中皮腫、膵臓がん、卵巣がん、肺がん、子宮がん、肉腫、および前立腺がんからなる群より選択される、項目４２に記載の方法。