【手続補正書】
【提出日】平成17年10月19日(2005.10.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項３】
二次元化像より、シワの部分を抽出し、シワ以外の部分の像を不可視化し、シワ部分の形状を物理量に変換する手段が、請求項２に記載のシワの生じた部分のレプリカ標本の写真上に、透明の及び／又は半透明のシートを置き、該透明の及び／又は半透明のシート上にシワの部分を写し取り、写し取った線分の長さを計測する方法であることを特徴とする、請求項２に記載のシワの評価法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】請求項４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【請求項４】
動物に生じたシワの評価法であって、次に示すステップに従って為されることを特徴とする、請求項１〜３何れか１項に記載のシワの評価法。
１）シワの生じた部位のレプリカ標本を作製するステップ。
２）前記レプリカ標本の写真を撮影するステップ。
３）前記レプリカ標本の写真の上に、透明の及び／又は半透明のシートを置き、該透明の及び／又は半透明のシート上にシワの部分を写し取るステップ。
４）透明の及び／又は半透明のシート上に写し取られた線分の長さを計測するステップ。５）動物ごとの線分の長さの代表値を算出するステップ。
６）群ごとに各動物の線分の長さの代表値を比較するステップ。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、この様な状況下為されたものであり、定量性のあるシワの評価法を提供することを課題とする。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
【課題を解決するための手段】
この様な状況に鑑みて、本発明者らは、定量性のあるシワの評価法を求めて、鋭意研究努力を重ねた結果、動物に生じたシワの評価法であって、シワの生じた部位の像を二次元化し、該二次元化像より、シワの部分を抽出し、シワ以外の部分の像を不可視化し、シワ部分の形状を物理量に変換し、個体ごとの該物理量を比較することにより、定量的なシワの評価が為しうることを見出し、発明を完成させるに至った。即ち、本発明は、以下に示す技術に関するものである。
（１）動物に生じたシワの評価法であって、シワの生じた部位の像を二次元化し、該二次元化像より、シワの部分を抽出し、シワ以外の部分の像を不可視化し、シワ部分の形状を物理量に変換し、個体ごとの該物理量を比較することを特徴とする、シワの評価法。
（２）シワの生じた部位の像を二次元化する手段が、シワの生じた部分からレプリカ標本を作製し、これを写真に撮すことであることを特徴とする（１）に記載のシワの評価法。（３）二次元化像より、シワの部分を抽出し、シワ以外の部分の像を不可視化し、シワ部分の形状を物理量に変換する手段が、（２）に記載のシワの生じた部分のレプリカ標本の写真上に、透明の及び／又は半透明のシートを置き、該透明の及び／又は半透明のシート上にシワの部分を写し取り、写し取った線分の長さを計測する方法であることを特徴とする、（２）に記載のシワの評価法。
（４）動物に生じたシワの評価法であって、次に示すステップに従って為されることを特徴とする、（１）〜（３）何れか１つに記載のシワの評価法。
１）シワの生じた部位のレプリカ標本を作製するステップ。
２）前記レプリカ標本の写真を撮影するステップ。
３）前記レプリカ標本の写真の上に、透明の及び／又は半透明のシートを置き、該透明の及び／又は半透明のシート上にシワの部分を写し取るステップ。
４）透明の及び／又は半透明のシート上に写し取られた線分の長さを計測するステップ。５）動物ごとの線分の長さの代表値を算出するステップ。
６）群ごとに各動物の線分の長さの代表値を比較するステップ。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
本発明のシワの評価法に於ける、シワの部分を抽出し、シワ以外の部分の像を不可視化する手段であるが、例えば、二次元化した像のシワの部分にマークを施し、その他の部分を消すような処置、シワの部分のみを無地の平面に転写する方法などが例示できる。前者としては、シワの部分に、その部分の輝点の輝度を極端に高くするか、極端に低くするか等のシワを表すマークをし、その輝点の性質を有さない輝点の輝度を平坦にする方法などが挙げられ、後者としては、マークした輝点の位置の二次元座標のマトリックスを、他の平面上に再現する方法や、もっと簡便には、二次元化した像に、透明の及び／又は半透明のシートを置き、該透明の及び／又は半透明のシート上にシワの部分を写し取る方法などが例示できる。前記透明の及び／又は半透明のシートとしては、ポリエチレンテレフタレートフィルム、ポリエステルフィルム、ポリビニリデンフィルム、ポリアルキレンフィルムなどの等の樹脂フィルム、硫酸処理紙、パラフィン含浸紙、シリコーンコート紙等の透明度の高い紙類などが好適に例示できる。又、転写方法としては、印刷或いはバッチ作業で手で、フェルトペンなどを用いて写し取ることなどが例示できる。特に好ましい形態は、手軽さと、その効果から、二次元化した像に、透明の及び／又は半透明のシートを置き、該透明の及び／又は半透明のシート上にシワの部分を、バッチ作業で写し取る方法である
。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１１】
即ち、本発明のシワの評価法は、特に好ましい形態としては、次に示す工程ステップに従って行うことが特に好ましい。
１）シワの生じた部位のレプリカ標本を作製するステップ。
２）前記レプリカ標本の写真を撮影するステップ。
３）前記レプリカ標本の写真の上に、透明の及び／又は半透明のシートを置き、該透明の及び／又は半透明のシート上にシワの部分を写し取るステップ。
４）透明の及び／又は半透明のシート上に写し取られた線分の長さを計測するステップ。５）動物ごとの線分の長さの代表値を算出するステップ。
６）群ごとに各動物の線分の長さの代表値を比較するステップ。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１４】
＜実施例１＞
ヘアレスマウスを用いて、これまで光によるシワ生成を抑制する作用が知られている、レチノイン酸を用いて、この物質の光老化抑制作用（光によるシワ生成の抑制作用）を調べた。即ち、１群５匹のヘアレスマウスを用い、光照射検体投与群と光照射検体非投与群の２群を設定した。光照射は、背中全面に８０ｍＪ／ｃｍ2の紫外線（ＳＥランプ：ＢＬＢランプ＝１：１）を３０分照射し、検体投与群は、紫外線照射後にレチノイン酸０．０５％エタノール溶液を５０μｌ背部全面に塗布し、検体非投与群はエタノールのみを同様に塗布した。かかる作業は週５日間連続で１日１回行った。この作業を８週間続け、シワの状態を、従来のスコア法と４５度光照射造影法と本発明のシワの評価法で観察した。スコア法では、シワなしをスコア１とし、最大のシワをスコア６とし、専門家がおこなった。又、４５度光照射造影法は特開平９−３８０４５の記載に準じて行った。本発明のシワ評価法は、４ｃｍ2の範囲のレプリカを写真に撮り、これに透明なＰＥＴシートをかぶせて、油性フェルトペンでシワ部分を写し取り、この長さを指標として評価した。スコア法の結果を表１に、造影法の結果を表２に、本発明の評価法の結果を表３に示す。これより、本発明の評価法に於いては、レチノイン酸とコントロールの差が如実に現れていることがわかる。更に、スコア法と造影法の相関関係を図１に、スコア法と本発明の評価法の相関関係を図２に示す。これより、スコア法と造影法はあまり相関性が無く、スコア法と本発明の評価法には優れた相関関係が存在するのがわかる。更に、スコア法の変域が１〜６であるのに対し、本発明の評価法では０〜２５０ｍｍであり、本発明の評価法によれば、これまでのスコア法のデータを生かしつつも、更に精密な観察ができることがわかる。尚、＊の判定マークは１％の危険率で有意差ありを、＊＊の判定マークは０．１％の危険率で有意差ありを示す。