【手続補正書】
【提出日】令和3年10月25日(2021.10.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生存間葉系間質細胞（ＭＳＣ）を使用する免疫抑制治療に対して応答する可能性が高い患者を同定するためのデータを作成する方法であって、前記患者由来の試料が、インビトロで生存ＭＳＣにおいて少なくともいくらかのアポトーシスを起こすように誘導することができるかどうかを判定するステップを含み、前記試料における、前記アポトーシスを誘導する能力が、前記免疫抑制治療に対する前記患者の応答性を示す、前記方法。
【請求項２】
ＭＳＣにアポトーシスを引き起こす試料の能力が、前記試料を生存ＭＳＣとインキュベートし、その後、インキュベート物中のアポトーシス性ＭＳＣの存在を検出することによって判定される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
試料に添加されたＭＳＣの少なくとも１１％がインキュベーション後にアポトーシス性であるという所見が、免疫抑制治療に対する患者の応答性を示す、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
ＭＳＣにアポトーシスを引き起こす試料の能力が、前記試料を生存ＭＳＣとインキュベートし、インキュベート物又はそこから得られた上清中のプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）のレベルを検出し、前記レベルを免疫抑制治療に対する患者の応答性と関連付けることにより判定される、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
４０００ｐｇ／ｍｌを超えるＰＧＥ２のレベルが、免疫抑制治療に対する  患者の応答性を示す、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
ＰＧＥ２のレベルが、定量的ＥＬＩＳＡを使用して判定される、請求項４又は５に記載の方法。
【請求項７】
生存ＭＳＣを使用する免疫抑制治療に対して応答性であると判定された患者が、ＭＳＣによる治療が有効な患者であることを示し、前記免疫抑制治療に非応答性であると判定された患者が、アポトーシス性ＭＳＣによる治療が有効な患者であることを示す、請求項１〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
インビトロで生存間葉系間質細胞（ＭＳＣ）を使用する方法であって、インビトロで前記生存ＭＳＣを患者由来の生体試料と接触させるステップと、
インビトロでの前記生存ＭＳＣにおけるアポトーシス性ＭＳＣの存在、又は前記試料中のプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）のレベルの上昇のいずれかを検出するステップと
を含み、インビトロでの前記生存ＭＳＣにおけるアポトーシス性ＭＳＣの存在又はＰＧＥ２のレベルの上昇が、生存ＭＳＣを使用する免疫抑制治療に対する前記患者の応答性を示す、前記方法。
【請求項９】
インビトロでの生存ＭＳＣの複数の試料を、複数の患者における異なる患者由来の生体試料と接触させるステップと、インビトロでの生存ＭＳＣの各試料におけるアポトーシス性ＭＳＣの存在を検出するステップとをさらに含む、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
その又は各々の接触させるステップが、生体試料を生存ＭＳＣとインキュベートするステップを含み、その又は各々の検出するステップが、インキュベート物中のアポトーシス性ＭＳＣの存在を検出するステップ及び／又はその効力を判定するステップを含む、請求項８又は９に記載の方法。
【請求項１１】
試料との接触後にインビトロでの生存ＭＳＣの少なくとも１１％がアポトーシス性である、又は上清中のプロスタグランジンＥ２のレベルが４０００ｐｇ／ｍｌを超えるという所見が、免疫抑制治療に対する患者の応答性を示す、請求項８〜１０のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
インビトロでの生存ＭＳＣにおけるアポトーシス性ＭＳＣの存在及び／又はＰＧＥ２のレベルの上昇が検出される場合、患者が生存ＭＳＣにより治療され、インビトロでの生存ＭＳＣにおけるアポトーシス性ＭＳＣの存在が検出されない場合、前記患者がアポトーシス性ＭＳＣにより治療される、請求項８〜１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１３】
試料が、血液又は血清試料である、請求項１〜１２のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
アポトーシス性ＭＳＣの存在が共焦点顕微鏡法又はフローサイトメトリーによって判定される、請求項１〜１３のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
間葉系間質細胞（ＭＳＣ）免疫抑制治療による治療のために患者を層別化するためのデータを作成する方法であって、請求項１〜１４のいずれかに記載の方法を実施するステップを含み、患者が生存ＭＳＣを使用する免疫抑制治療に対して応答性を示した場合、生存ＭＳＣによる治療が患者に有効であることを示し、患者が生存ＭＳＣを使用する免疫抑制治療に対して非応答性を示した場合、アポトーシス性ＭＳＣによる治療が患者に有効であることを示す、前記方法。
【請求項１６】
組織損傷から回復する対象の適合性を同定するためのデータを作成する方法であって、前記対象由来の試料が、インビトロで生存間葉系間質細胞（ＭＳＣ）において少なくともいくらかのアポトーシスを起こすように誘導することができるかどうかを判定するステップ、及び／又はプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）のレベルの上昇を検出するステップを含み、前記試料における、前記アポトーシスを誘導する能力、又はＰＧＥ２のレベルの上昇の存在が、前記患者の回復する能力を示す、前記方法。
【請求項１７】
生存間葉系間質細胞（ＭＳＣ）又はアポトーシス性ＭＳＣを含む、それを必要とする患者における免疫抑制をするための剤であって、生存ＭＳＣを、前記患者由来の生体試料とインビトロで接触させた場合、インビトロでの生存ＭＳＣにおいて少なくともいくらかのアポトーシスの存在が検出されたときに、前記患者に生存ＭＳＣが投与され、インビトロでの生存ＭＳＣにおいてアポトーシスの存在が検出されなかったときに、前記患者にアポトーシス性ＭＳＣが投与される、前記剤。
【請求項１８】
患者が、免疫介在性疾患若しくは状態に罹患しているか、又は組織修復を刺激する再生医療を必要とする、請求項１７に記載の剤。
【請求項１９】
移植された臓器の拒絶反応の予防若しくは治療のためのものであるか、又は疾患又は状態が同種免疫疾患若しくは自己免疫疾患である、請求項１７又は１８に記載の剤。
【請求項２０】
疾患が、移植片対宿主病；多発性硬化症；クローン病又は潰瘍性大腸炎などの炎症性腸疾患；関節リウマチ、強直性脊椎炎、又は乾癬性関節炎などの関節炎；あるいは急性呼吸窮迫症候群；である、請求項１９に記載の剤。
【請求項２１】
患者における治療の有効性が、ＭＳＣを投与した後に前記患者から採取された試料中の食細胞又はＩＤＯの存在を検出することによってモニターされる、請求項１５又は１６に記載の方法。
【請求項２２】
請求項１〜１２のいずれかに記載の方法を実施するために必要とされる構成要素を含むキット。
【請求項２３】
免疫抑制治療において使用するためのアポトーシス性間葉系間質細胞（ＭＳＣ）を産生する方法であって、少なくとも３０％のＭＳＣがアポトーシス性である細胞培養物を形成するのに十分な２４時間未満の期間内、生存ＭＳＣを薬学的に許容されるアポトーシス誘導剤とインキュベートするステップを含む、前記方法。
【請求項２４】
薬学的に許容されるアポトーシス誘導剤が生物学的薬剤である、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
生物学的薬剤がセリンプロテアーゼ及び／又は抗ＦＡＳ抗体である、請求項２４に記載の方法。
【請求項２６】
セリンプロテアーゼがヒトグランザイムＢ（ＧｒＢ）である、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
薬学的に許容されるアポトーシス誘導剤がＧｒＢと抗ＦＡＳ抗体の組合せを含む、請求項２３〜２６のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】
請求項２３〜２７のいずれかに記載の方法を使用して得ることができるアポトーシス性ＭＳＣ。
【請求項２９】
免疫抑制治療において使用するための請求項２８に記載のアポトーシス性ＭＳＣ。
【請求項３０】
自殺遺伝子、特にカスパーゼ９又はカスパーゼ３などのカスパーゼ誘導遺伝子の形態であってもよい、自殺メカニズムを含む、請求項２８又は２９に記載のアポトーシス性ＭＳＣ。
【請求項３１】
請求項２８〜３０のいずれかに記載のアポトーシス性ＭＳＣを含む医薬組成物。
【請求項３２】
生存ＭＳＣをさらに含む、請求項３１に記載の医薬組成物。
【請求項３３】
アポトーシス性間葉系間質細胞（ＭＳＣ）を含む、それを必要とする患者における免疫抑制をするための剤。
【請求項３４】
患者が、免疫介在性疾患若しくは状態に罹患しているか、又は組織修復を刺激する再生医療を必要とする、請求項３３に記載の剤。
【請求項３５】
移植された臓器の拒絶反応の予防若しくは治療のためのものであるか、又は疾患若しくは状態が同種免疫疾患若しくは自己免疫疾患である、請求項３３又は３４に記載の剤。
【請求項３６】
疾患が、移植片対宿主病；多発性硬化症；クローン病又は潰瘍性大腸炎などの炎症性腸疾患；関節リウマチ、強直性脊椎炎、又は乾癬性関節炎などの関節炎；あるいは急性呼吸窮迫症候群；である、請求項３５に記載の剤。
【請求項３７】
患者における治療の有効性が、ＭＳＣを投与した後に前記患者から採取された試料中の食細胞又はＩＤＯの存在を検出することによってモニターされる、請求項３３〜３６のいずれかに記載の剤。
【請求項３８】
患者における回復への適合性及び／又は免疫抑制治療に対する応答性を判定するためのバイオマーカーとしてのプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）の使用及び／又はアポトーシス性間葉系間質細胞（ＭＳＣ）の使用。
【請求項３９】
患者由来の試料中のアポトーシス性ＭＳＣの存在及び量の検出並びに／又はＰＧＥ２のレベルの上昇の検出を含む、請求項３８に記載の使用。