【誤訳訂正書】
【提出日】令和3年10月18日(2021.10.18)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下を含むヒト化抗−ＣＤ１９抗体またはその抗原結合断片：
（ｉ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号５のＣＤＲＬ２、及び序列番号６のＣＤＲＬ３；
（ｉｉ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号５のＣＤＲＬ２、及び序列番号４０のＣＤＲＬ３；
（ｉｉｉ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号５のＣＤＲＬ２、及び序列番号４１のＣＤＲＬ３；
（ｉｖ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３０のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号３６のＣＤＲＬ２、及び序列番号４０のＣＤＲＬ３；
（ｖ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３１のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号５のＣＤＲＬ２、及び序列番号４０のＣＤＲＬ３；
（ｖｉ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３２のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号３７のＣＤＲＬ２、及び序列番号４０のＣＤＲＬ３；
（ｖｉｉ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３３のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号３８のＣＤＲＬ２、及び序列番号４０のＣＤＲＬ３；
（ｖｉｉｉ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３４のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号３９のＣＤＲＬ２、及び序列番号４０のＣＤＲＬ３；または
（ｉｘ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３５のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号５のＣＤＲＬ２、及び序列番号４０のＣＤＲＬ３。
【請求項２】
前記重鎖可変領域及び前記軽鎖可変領域は、それぞれ以下を含むことを特徴とする、請求項１に記載のヒト化抗−ＣＤ１９抗体またはその抗原結合断片：
（ｉ）序列番号７及び８の序列；
（ｉｉ）序列番号４２及び４３の序列；
（ｉｉｉ）序列番号４６及び４７の序列；
（ｉｖ）序列番号５０及び５１の序列；
（ｖ）序列番号５４及び５５の序列；
（ｖｉ）序列番号５８及び５９の序列；
（ｖｉｉ）序列番号６２及び６３の序列；
（ｖｉｉｉ）序列番号６６及び６７の序列；または
（ｉｘ）序列番号７０及び７１の序列。
【請求項３】
請求項１または２のヒト化抗−ＣＤ１９抗体またはその抗原結合断片をエンコーディングする核酸分子。
【請求項４】
請求項３の核酸分子を含む組換えベクター。
【請求項５】
請求項４の組換えベクターに形質転換された宿主細胞。
【請求項６】
以下を含むＣＤ１９特異的キメラ抗原受容体：
（ａ）ヒト化抗−ＣＤ１９抗体またはその抗原結合断片を含む細胞外ドメイン（Extracellular domain）；
（ｂ）膜横断ドメイン（transmembrane domain）；及び
（ｃ）細胞内信号伝達ドメイン、
ここで前記ヒト化抗−ＣＤ１９抗体またはその抗原結合断片は以下を含む：
（ｉ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号５のＣＤＲＬ２、及び序列番号６のＣＤＲＬ３；
（ｉｉ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号５のＣＤＲＬ２、及び序列番号４０のＣＤＲＬ３；
（ｉｉｉ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号５のＣＤＲＬ２、及び序列番号４１のＣＤＲＬ３；
（ｉｖ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３０のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号３６のＣＤＲＬ２、及び序列番号４０のＣＤＲＬ３；
（ｖ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３１のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号５のＣＤＲＬ２、及び序列番号４０のＣＤＲＬ３；
（ｖｉ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３２のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号３７のＣＤＲＬ２、及び序列番号４０のＣＤＲＬ３；
（ｖｉｉ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３３のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号３８のＣＤＲＬ２、及び序列番号４０のＣＤＲＬ３；
（ｖｉｉｉ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３４のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号３９のＣＤＲＬ２、及び序列番号４０のＣＤＲＬ３；または
（ｉｘ）次の重鎖ＣＤＲ（Complementarity determining region）アミノ酸序列を含む重鎖可変領域：序列番号１のＣＤＲＨ１、序列番号２のＣＤＲＨ２、及び序列番号３５のＣＤＲＨ３；並びに次の軽鎖ＣＤＲアミノ酸序列を含む軽鎖可変領域：序列番号４のＣＤＲＬ１、序列番号５のＣＤＲＬ２、及び序列番号４０のＣＤＲＬ３。
【請求項７】
前記重鎖可変領域及び前記軽鎖可変領域は、それぞれ以下を含むことを特徴とする、請求項６に記載のＣＤ１９特異的キメラ抗原受容体：
（ｉ）序列番号７及び８の序列；
（ｉｉ）序列番号４２及び４３の序列；
（ｉｉｉ）序列番号４６及び４７の序列；
（ｉｖ）序列番号５０及び５１の序列；
（ｖ）序列番号５４及び５５の序列；
（ｖｉ）序列番号５８及び５９の序列；
（ｖｉｉ）序列番号６２及び６３の序列；
（ｖｉｉｉ）序列番号６６及び６７の序列；または
（ｉｘ）序列番号７０及び７１の序列。
【請求項８】
請求項６または７のキメラ抗原受容体を発現する効果器細胞。
【請求項９】
請求項８の効果器細胞を含むＣＤ１９を発現する細胞と関連した疾患、自己免疫疾患または炎症疾患の予防または治療用薬剤学的組成物。
【請求項１０】
請求項６または７のキメラ抗原受容体をエンコーディングする核酸分子。
【請求項１１】
請求項１０の核酸分子を含む組換えベクター。
【請求項１２】
請求項１１の組換えベクターに形質転換された宿主細胞。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】００４０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【００４０】
２５．第２４項において、前記膜横断ドメインは、Ｔ−細胞受容体、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３エプシロン、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８（ＣＤ８α）、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、及びＣＤ１５４のアルファ、ベータ、またはゼタ鎖からなる群より選択された蛋白質の膜横断ドメインである、ＣＤ１９特異的キメラ抗原受容体。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１４１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１４１】
本明細書で、用語“発現ベクター”は宿主細胞で目的遺伝子を発現させるために、発現させるヌクレオシド序列に作動可能に連結された発現制御序列を含む再組合せヌクレオシドを含むベクターを称する。発現ベクターは発現のための充分のシス作用因子（cis-acting element）を含み、発現のための他の要素は宿主細胞または試験官内発現システムにより提供できる。前記発現ベクターは再組合せポリヌクレオチドを含むプラスミドベクター；コスミドベクター；そしてバクテリオファージベクター、アデノウイルスベクター、レンチウイルス、レトロウイルスベクター、及びアデノ−関連ウイルスベクターのようなウイルスベクターを含む。本発明の具体的な具現例によれば、本発明のベクターで前記抗体またはその抗原結合断片、またはキメラ抗原受容体をコーディングする核酸分子は前記ベクターのプロモータと作動的に結合（operatively linked）されている。本明細書で、用語“作動的に結合された”は、核酸発現調節序列（例：プロモータ、シグナル序列、または転写調節因子結合位置のアレイ）と他の核酸序列との間の機能的な結合を意味し、これにより前記調節序列は前記他の核酸序列の転写及び／又は解読を調節するようになる。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１９０
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１９０】
まず、ヒトのnaive Ｔ細胞を分離してDynabeadsTM Human T-Activator CD3/CD28(Thermofisher scientific、米国）で２４時間の間刺激し、ポリブレン（Sigma-Aldrich、米国）及び前記レンチウイルスを前記細胞に添加して２４時間の間培養しながら形質導入させた。以後、ＩＬ−２（Gibco、米国）が含まれた培地に交替して５％  ＣＯ２、３７℃の条件で培養した。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１９１
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１９１】
前記のように製造されたＣＤ１９＿１２．１８抗体断片を含むキメラ抗原受容体が表面に提示されたＴ細胞（ＣＤ１９＿１２．１８  ＣＡＲ−Ｔ ｃｅｌｌ）は、製造後、２４時間以内に以後の実験に使用した。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１９３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１９３】
具体的に、ＣＤ１９陽性細胞株であるＲａｊｉとＣＤ１９陰性細胞株であるＪｕｒｋａｔ  Ｅ６．１細胞株を１０％ウシ胎児血清及び１％ペニシリン−ストレプトマイシンが添加されたＲＰＭＩ−１６４０培地に培養して使用した。まず、ＣＤ１９陽性あるいは陰性細胞株を底の丸い形態の９６−ウェルプレートにウェル当たり３x１０４個になるように株分けした。培養上等液を除去した後、ウェル当たり処理比率に合うように製造したキメラ抗原受容体Ｔ細胞（ＣＤ１９＿１２．１８  ＣＡＲ−Ｔ  ｃｅｌｌ）を添加し、５％  ＣＯ２及び３７℃の条件で２４時間の間培養した。その結果、培地に分泌されたインターフェロンガンマの量をＥＬＩＳＡキットを使用して製造社のプロトコルの通り測定し、その結果を図６に示した。この際、対照群として細胞を培養しないプレートにキメラ抗原受容体Ｔ細胞を添加した群（Effector T cell only）、細胞を培養したプレートになんにも添加しない群（Target cell only）を使用した。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１９４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１９４】
図６に示すように、本発明のＣＤ１９＿１２．１８抗体断片を含むキメラ抗原受容体Ｔ細胞（ＣＤ１９＿１２．１８  ＣＡＲ−Ｔ  ｃｅｌｌ）とＣＤ１９陽性細胞株（Ｒａｊｉ）でインターフェロンガンマの分泌が有意的に増加することを確認した。したがって、本発明のＣＤ１９＿１２．１８抗体断片を含むキメラ抗原受容体が表面に提示された細胞毒性Ｔ細胞（ＣＤ１９＿１２．１８  ＣＡＲ−Ｔ  ｃｅｌｌ）はキメラ抗原受容体を使用してＣＤ１９陽性細胞（Ｒａｊｉ）の表面のＣＤ１９を認識することによって、キメラ抗原受容体細胞の活性化を誘導することを確認した。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０２０６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０２０６】
実施例１０：ヒンジ領域、膜通過ドメイン及び補助刺激ドメインの変更を通じてのキメラ抗原受容体の開発
開発された抗体断片を用いたキメラ抗原受容体活性を最適化するためにキメラ抗原受容体を構成するヒンジ領域（ＣＤ８、ＣＤ２８、Ｆｃ）、膜横断ドメイン（ＣＤ８、ＣＤ２８、ＩＣＯＳ）及び補助刺激ドメイン（ＣＤ１３７、ＣＤ２８、ＩＣＯＳ、ＣＤ３）の変更を通じて新たなキメラ抗原受容体（ＣＡＲ２乃至ＣＡＲ７）を開発しており、活性を確認するためにＣＤ１９抗原に結合する抗体断片部位はｈｚＣＤ１９＿１２１８．８１を用いた（図９）。ＣＡＲ１乃至ＣＡＲ７の各々のキメラ抗原受容体は実施例８と同一な方法によりプロモータがＥＦ−１  ａｌｐｈａに変更されたｐＬｅｎｔｉ６．３／Ｖ５ＴＯＰＯレンチウイルスベクター（Invitrogen、米国）に切断及び結紮させており、製造されたコンストラクトは塩基序列分析を通じて確認した。前記開発されたＣＡＲ１乃至ＣＡＲ７のコンストラクトのアミノ酸及びヌクレオチド序列は序列番号７４乃至８７の序列で序列目録に添付された。開発された各々のコンストラクトは実施例８のプロトコルの通りレンチウイルスを製造及び濃縮して保管した。