【手続補正書】
【提出日】平成17年7月8日(2005.7.8)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【書類名】      明細書
【発明の名称】  α−ＭＳＨ抑制用の皮膚外用組成物
【特許請求の範囲】
【請求項１】  ７−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロカダリン（化学構造式１）及び／又はその生理的に許容される塩からなる、α−ＭＳＨ阻害剤。
【化１】
2001220310.tif 000001
化学構造式１
【請求項２】 α−ＭＳＨ関与の色素生成の抑制を目的とすることを特徴とする、請求項１に記載のα−ＭＳＨ阻害剤。
【請求項３】 炎症及び／又は免疫関与の色素異常症対応用のものであることを特徴とする、請求項１に記載のα−ＭＳＨ阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、α−ＭＳＨ阻害剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】
白く美しい肌は万人が欲するものであり、この様な肌の具現を一大テーマに、種々の美白化粧料が開発されてきた。この様な美白に関する、メカニズムとしては、以前はチロシナーゼ阻害作用が中心に論議されていたが、近年に於いてはこれに加えて、チロシナーゼ関連タンパクの生成阻害作用、ピンクアイダイリュートジーン発現阻害作用、α−ＭＳＨの受容体への結合阻害作用等のメカニズムが知られるようになってきている。しかしながら、これらのメカニズムについてのそれぞれの作用を有する物質については未だ多くは知られていない。これらの内、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連蛋白、ピンクアイダイリュートジーンの発現異常が直接アルビノへ関与するのに比して、α−ＭＳＨのレセプター発現異常、言い換えれば、α−ＭＳＨのそのレセプターへの結合不全は、北部ヨーロッパの赤毛、皮膚の白色化現象であるように、その関与する色素異常症が異なっていることが推定される。その一方、チロシナーゼの発現抑制に優れる物質を投与しても改善しない色黒があることから、前記チロシナーゼ関連蛋白、ピンクアイダイリュートジーンの発現抑制作用或いはα−ＭＳＨの結合阻害作用等新規メカニズムを有する有効成分を含有する美白剤の開発が望まれていた。中でも、炎症或いは免疫が関与する色黒（色素異常）に対応した美白剤の開発が望まれていた。又、α−ＭＳＨは色素異常に関与するばかりではなく、免疫系や炎症系へも大きく関与していると言われており、これらの系に於けるα−ＭＳＨの過剰な発現も種々の疾病の原因になっていると言われており、この様な過剰発現の抑制手段の開発も望まれていた。
【０００３】
一方、後記７−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロカダリン及び／又はその生理的に許容される塩は、既に公知の化合物であるが、これらの化合物にα−ＭＳＨ阻害作用が有ることは全く知られていなかった。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、この様な状況下為されたものであり、α−ＭＳＨを阻害し、これが関与する疾病或いは生体に好ましくない現象の発現を予防或いは改善する手段を提供することを課題とする。
【０００５】
【課題の解決手段】
本発明者らは、この様な状況に鑑みて、α−ＭＳＨを阻害し、これが関与する疾病或いは生体に好ましくない現象の発現を予防或いは改善する手段を求めて、鋭意研究努力を重ねた結果、上記７−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロカダリン及び／又は生理的に許容されるその塩に優れたα−ＭＳＨ阻害作用を見いだし発明を完成させた。更に、かかる化合物は、α−ＭＳＨが関与する皮膚の疾病或いは異常、例えば、炎症或いは免疫が関与する色黒（色素異常）に著効を有することを見いだし、発明を完成させるに至った。即ち、本発明は、次に示す技術に関するものである。
（１）７−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロカダリン（化学構造式１）及び／又はその生理的に許容される塩からなる、α−ＭＳＨ阻害剤。
（２）α−ＭＳＨ阻害が、α−ＭＳＨ関与の色素生成の抑制を目的とすることを特徴とする、（１）に記載のα−ＭＳＨ阻害剤。
（３）炎症及び／又は免疫関与の色素異常症対応用のものであることを特徴とする、（１）に記載のα−ＭＳＨ阻害剤。
以下、本発明について、実施の形態を中心に更に詳細に説明を加える。
【０００６】
【化２】
2001220310.tif 000002
化学構造式１
【０００７】
【発明の実施の形態】
（１）本発明のα−ＭＳＨ阻害剤
本発明のα−ＭＳＨ阻害剤は、上記７−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロカダリン及び／又は生理的に許容されるその塩からなる。このものの好ましい立体構造は化学構造式２に表されるものが天然に存在する確率が最も高いので好ましい。この様な化合物は、植物体中に含まれているので、植物体の抽出物を精製することにより得ることが出来る。例えば、アルニカ等のキク科ウサギギク属の植物体中に多く含まれており、これらの植物体にメタノールなどの溶媒を加え、室温であれば数日、沸点付近の温度であれば数時間浸漬し、濾過して不溶物を取り除いた後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーやＯＤＳカラムを装着した逆相の分取液体クロマトグラフィーによって分離精製する事が出来る。又、構造が比較的簡単なため、化学合成によって合成することも可能であり、この様に製造されて、α―ＭＳＨ阻害のために使用されるものも、本発明のα−ＭＳＨ阻害剤の技術的範囲に属する。又、本発明のα−ＭＳＨ阻害剤として、塩の形態で用いる場合、かかる塩としては、生理的に許容されるものであれば、特段の限定は受けず、例えば、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属塩、カルシウムやマグネシウムのようなアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、トリエタノールアミンやトリエチルアミンなどの有機アミン塩、リジンやアルギニンなどの塩基性アミノ酸塩等が好適に例示できる。その他、水酸基に、アルキルハライドと塩基、アシルハライドと塩基のような試薬の組合せで処理して、アシル基或いはアルキル基を導入した誘導体や糖鎖を導入した配糖体も本発明の技術的範囲に属する。本発明の皮膚外用剤において、この様な本発明のα−ＭＳＨ阻害剤は唯一種を含有することも出来るし、２種以上を組み合わせて含有することも出来る。
【０００８】
＜製造例＞
キク科アルニカの植物体（地上部）５００ｇに１００％メタノール５ｌを加え、３時間加熱還流し、冷却、濾過、濃縮の工程を経て、濃縮物に水５ｌとクロロホルム５ｌとを加え、液液抽出し、クロロホルム層を取り、濃縮した後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶出溶媒；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１００：０→５０：５０）で精製し、ｎ−ヘキサンから再結晶して、７−ヒドロキシ−３，４−ジヒドロカダリン（化学構造式１）を得た。このものの立体は化学構造式２であるものと、ＮＭＲの測定結果より推定された。
【０００９】
【化３】
2001220310.tif 000003
化学構造式２
【００１０】
（２）本発明のα−ＭＳＨ阻害剤の皮膚外用剤への応用
本発明のα−ＭＳＨ阻害剤は、α−ＭＳＨ阻害用の皮膚外用剤として用いると好ましい。本発明で言う、皮膚外用剤とは、皮膚上に外用で適用される組成物の総称であり、例えば、化粧料、皮膚外用医薬、皮膚外用消毒剤、皮膚外用殺菌剤等が例示でき、これらの内では、化粧料と皮膚外用医薬が好ましく例示でき、中でも化粧料が特に好適に例示できる。これは、本発明のα−ＭＳＨ阻害剤の作用が極めてマイルドである為、日常的な使用が可能であるからである。ここで、α―ＭＳＨ阻害用とは、α―ＭＳＨの発現が関与する疾病或いは生体にとって好ましくない反応を予防或いは改善する目的で使用されることを意味する。この様な疾病或いは生体に好ましくない反応としては、例えば、免疫異常、炎症、或いは色素異常などが挙げられ、この中ではα−ＭＳＨ関与の色素異常或いはトラブルが好適に例示できる。かかるα−ＭＳＨ関与の色素トラブルとしては、炎症或いは免疫反応が関与するもの等が例示できる。この様な色素トラブルには、通常のアスコルビン酸乃至はその誘導体などにより緩和することのできないくすみ等が例示できる。本発明に係る皮膚外用剤に於いては、上記α−ＭＳＨ阻害剤が、α−ＭＳＨとそのレセプターの結合を阻害するため、色素異常以外にもこのものが関与する好ましくない生理作用を阻害することができる。この様な生理作用としては化学物質に対する過敏な反応や炎症反応が例示できる。この為、本発明に係るα−ＭＳＨ阻害用の皮膚外用剤は炎症反応が起こりやすい夏の時期の化粧料として有用である。又、通常の化粧料などの皮膚外用剤が使用しにくい、敏感肌の人に適用しても、その抗炎症作用のためトラブルを起こすことは通常の化粧料に比較して極めて少ない。この様な用途も本発明の目的として好適である。
【００１１】
本発明に係る皮膚外用剤では、上記本発明のα−ＭＳＨ阻害剤以外に、通常化粧料、皮膚外用医薬などの皮膚外用剤で使用される任意の成分を含有することができる。この様な任意の成分としては、例えば、スクワラン、ワセリン、マイクロクリスタリンワックス等の炭化水素類、ホホバ油、カルナウバワックス，オレイン酸オクチルドデシル等のエステル類、オリーブ油、牛脂、椰子油等のトリグリセライド類、ステアリン酸、オレイン酸、リチノレイン酸等の脂肪酸、オレイルアルコール、ステアリルアルコール、オクチルドデカノール等の高級アルコール、スルホコハク酸エステルやポリオキシエチレンアルキル硫酸ナトリウム等のアニオン界面活性剤類、アルキルベタイン塩等の両性界面活性剤類、ジアルキルアンモニウム塩等のカチオン界面活性剤類、ソルビタン脂肪酸エステル、脂肪酸モノグリセライド、これらのポリオキシエチレン付加物、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル等の非イオン界面活性剤類、ポリエチレングリコール、グリセリン、１，３−ブタンジオール等の多価アルコール類、増粘・ゲル化剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤、色剤、防腐剤、粉体等を含有することができる。これらの必須の成分と任意の成分とを常法に従って処理することにより、本発明に係る皮膚外用剤を得ることができる。
【００１２】
【実施例】
以下に、実施例を挙げて、本発明について更に詳細に説明を加えるが、本発明は、かかる実施例にのみ限定を受けるものではない。
【００１３】
＜実施例１＞
上記製造例で示す方法によって得た、推定化学構造式２の化合物について、α−ＭＳＨに対する作用を、培養細胞（メラノーマＢ−１６細胞）を用いて、サイクリックＡＭＰの産生量を指標に検討した。細胞は１０％ＦＢＳ加ＭＥＭ（イーグルの最少培地）で５％炭酸ガス湿度９５％３７℃の条件で９６ウェルのプレートで細胞１０4個／ウェル、培地１６０μｌ／ウェルの条件で１晩培養した。これにα−ＭＳＨ（１×１０-7Ｍ）及びα−ＭＳＨ阻害剤１の種々の濃度を加え、アマシャム社製のバイオトレイク・セルラー・コミュニケーション・アッセーｃＡＭＰエンザイムイムノアッセイ・システム（コードＲＰＮ２２５）を用いて、４５０ｎｍの分光光度として測定した。対照としてはα−ＭＳＨ、α−ＭＳＨ阻害剤を共に添加しないものを用い、このｃＡＭＰ濃度を１００として、それぞれのｃＡＭＰ比濃度を測定した。ここで、ｃＡＭＰの産生量を指標としたのは、細胞がα−ＭＳＨに作用するとｃＡＭＰの産生を促す作用が知られているからである。結果を図１に示す。これより本発明のα−ＭＳＨ阻害剤は優れたα−ＭＳＨの活性阻害作用を示すことがわかる。
【００１４】
＜応用例１＞
下記に示す処方に従って、本発明に係る皮膚外用剤である化粧水を作成した。即ち、処方成分を攪拌・可溶化し、化粧水を得た。このものを今までビタミンＣを有効成分とする美白化粧料を使用していてもくすみが改善しなかった人に朝・晩２回３週間使用してもらったところ、著しいくすみの改善を認めた。
グリセリン                              ５    重量部
１，３−ブタンジオール                  ５    重量部
エタノール                              ８    重量部
ローヤルゼリー                          ０．１重量部
ヒアルロン酸ナトリウム                  ０．１重量部
推定化学構造式２の化合物                ０．１重量部
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油          ０．１重量部
メチルパラベン                          ０．２重量部
水                                    ８１．４重量部
【００１５】  
＜応用例２＞
以下に示す処方に従って、本発明に係る皮膚外用剤である、乳液を作成した。即ち、イ、ロ、ハをそれぞれ７０℃に加熱して、イにロを加え中和し、これにハを徐々に加え乳化し、ホモジナイザーで粒子を整えた後、攪拌冷却し乳液を得た。このものをアトピー性皮膚炎によるくすみに悩む人に６週間朝・晩２回使用してもらったところ、著しい炎症とくすみの改善を観察した。
イ
水                                     ４７   重量部
メタクリル酸（C10-30）
アルキル・アクリル酸ポリマー            ０．３重量部
１，２−ペンタンジオール                ５    重量部
１，３−ブタンジオール                  ５    重量部
推定化学構造式２                        ０．５重量部
ロ
水                                      ３０  重量部
水酸化カリウム                          ０．２重量部
ハ
スクワラン                              ８    重量部
ホホバ油                                ４    重量部
グリセリルモノウンデシレート            ２    重量部
【００１６】  
＜応用例３＞
以下に示す処方に従って、本発明に係る皮膚外用剤である、乳液（皮膚外用医薬；抗真菌剤）を作成した。即ち、イ、ロ、ハをそれぞれ７０℃に加熱して、イにロを加え中和し、これにハを徐々に加え乳化し、ホモジナイザーで粒子を整えた後、攪拌冷却し乳液を得た。このものをビラン性のメンタグロファイトによる水虫に悩む人に６週間１日１回使用してもらったところ、水虫の治癒と炎症部位の色沈の改善を観察した。
イ
水                                    ４７    重量部
メタクリル酸（C10-30）
アルキル・アクリル酸ポリマー            ０．３重量部
１，２−ペンタンジオール                ５    重量部
１，３−ブタンジオール                  ５    重量部
推定化学構造式                        ２０．５重量部
ロ
水                                    ３０    重量部
水酸化カリウム                          ０．２重量部
ハ
スクワラン                              ８    重量部
ホホバ油                                ３    重量部
グリセリルモノウンデシレート            ２    重量部
ビフォナゾール                          １    重量部
【００１７】
【発明の効果】
本発明によれば、α−ＭＳＨの関与する疾病又は生体に好ましくない反応を改善するα−ＭＳＨ阻害剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】 α−ＭＳＨ阻害活性を示す図である。