【手続補正書】
【提出日】令和3年1月29日(2021.1.29)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
医薬の製造における、多量体オリゴヌクレオチドの使用であって、
前記多量体オリゴヌクレオチドが、サブユニット
2020518552.tif 000001
を含み、
前記サブユニット
2020518552.tif 000002
の各々が、独立して一本鎖または二本鎖オリゴヌクレオチドであり、かつ前記サブユニット
2020518552.tif 000003
の各々が、共有結合リンカー●によって別のサブユニットに連結されており、
前記多量体オリゴヌクレオチドが、糸球体濾過によるそのクリアランスを減少させるように設定された分子量及び／または分子サイズを有し、かつ
前記多量体オリゴヌクレオチドの前記分子量が、少なくとも約４５ｋＤである、
前記使用。
【請求項２】
前記多量体オリゴヌクレオチドが含有するサブユニットの個数が、ｍであり、ｍが、糸球体濾過による前記多量体オリゴヌクレオチドのクリアランスを減少させるように設定された前記分子量及び／または分子サイズを前記多量体オリゴヌクレオチドが有することを可能にするように選択される整数である、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記多量体オリゴヌクレオチドが構造２１
2020518552.tif 000004
を含み、かつｎが０以上の整数である、請求項１及び請求項２のいずれか１項に記載の使用。
【請求項４】
前記サブユニットが一本鎖オリゴヌクレオチドである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５】
ｎが１以上である、請求項３に記載の使用。
【請求項６】
前記サブユニットが二本鎖オリゴヌクレオチドである、請求項１〜３及び請求項５のいずれか１項に記載の使用。
【請求項７】
ｎ＝０の場合、糸球体濾過による前記多量体オリゴヌクレオチドの前記クリアランスが、前記多量体オリゴヌクレオチドの単量体サブユニット
2020518552.tif 000005
及び／または二量体サブユニット
2020518552.tif 000006
のそれに比べて減少し、かつ
ｎ≧１の場合、糸球体濾過による前記多量体オリゴヌクレオチドの前記クリアランスが、前記多量体オリゴヌクレオチドの単量体サブユニット
2020518552.tif 000007
、二量体サブユニット
2020518552.tif 000008
、及び／または三量体サブユニット
2020518552.tif 000009
のそれに比べて減少する、
請求項３に記載の使用。
【請求項８】
サブユニット
2020518552.tif 000010
を含む多量体オリゴヌクレオチドであって、
前記サブユニット
2020518552.tif 000011
の各々が、独立して一本鎖または二本鎖オリゴヌクレオチドであり、かつ前記サブユニット
2020518552.tif 000012
の各々が、共有結合リンカー●によって別のサブユニットに連結されており、
前記多量体オリゴヌクレオチドが、糸球体濾過によるそのクリアランスを減少させるように設定された分子量及び／または分子サイズを有し、かつ
前記多量体オリゴヌクレオチドの前記分子量が、少なくとも約４５ｋＤである、
前記多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項９】
前記多量体オリゴヌクレオチドが含有するサブユニットの個数が、ｍであり、ｍが、糸球体濾過による前記多量体オリゴヌクレオチドのクリアランスを減少させるように設定された前記分子量及び／または分子サイズを前記多量体オリゴヌクレオチドが有することを可能にするように選択される整数である、請求項８に記載の多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項１０】
構造２１
2020518552.tif 000013
を含む、請求項８または９に記載の多量体オリゴヌクレオチドであって、
前記サブユニット
2020518552.tif 000014
の少なくとも１つは、
その３’末端に連結された１つの前記共有結合リンカー●と、その５’末端に連結された別の前記共有結合リンカーとを有する、一本鎖
を含み、かつｎが０以上の整数である、
前記多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項１１】
各サブユニット
2020518552.tif 000015
の長さが１５〜３０、１７〜２７、１９〜２６、または２０〜２５ヌクレオチドである、請求項８〜１０のいずれか１項に記載の多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項１２】
ｎ≧１かつｎ≦１７である、請求項１０に記載の多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項１３】
ｎが１、２、３、４、または５である、請求項１２に記載の多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項１４】
各サブユニットが一本鎖オリゴヌクレオチドである、請求項８〜１３のいずれか１項に記載の多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項１５】
各サブユニットが二本鎖オリゴヌクレオチドである、請求項８〜１３のいずれか１項に記載の多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項１６】
各サブユニットが二本鎖ＲＮＡであり、ｎ≧１である、請求項１５に記載の多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項１７】
各サブユニットがＲＮＡ、ＤＮＡ、または人工もしくは非天然型の核酸アナログである、請求項８〜１５のいずれか１項に記載の多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項１８】
１つまたは複数の標的指向性リガンドをさらに含む、請求項８〜１７のいずれか１項に記載の多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項１９】
前記サブユニットの少なくとも１つが標的指向性リガンドである、請求項８〜１８のいずれか１項に記載の多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項２０】
前記標的指向性リガンドがアプタマーである、請求項１８または１９に記載の多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項２１】
各サブユニットが二本鎖ｓｉＲＮＡであり、かつ前記共有結合リンカーの各々が前記ｓｉＲＮＡのセンス鎖同士を連結している、請求項１５に記載の多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項２２】
前記共有結合リンカー●の１つまたは複数が、切断可能な共有結合リンカーを含む、請求項８〜２１のいずれか１項に記載の多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項２３】
各共有結合リンカー●が同じである、請求項１０〜２２のいずれか１項に記載の多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項２４】
前記共有結合リンカー●が、２種以上の異なる共有結合リンカーを含む、請求項１０〜２２のいずれか１項に記載の多量体オリゴヌクレオチド。
【請求項２５】
以下の構造５４を含む、請求項１０に記載の多量体オリゴヌクレオチド：
2020518552.tif 000016
ここで、ｄは１以上の整数である。
【請求項２６】
構造５１
2020518552.tif 000017
を含む多量体オリゴヌクレオチドを合成する方法であって、
ここで、各
2020518552.tif 000018
は一本鎖オリゴヌクレオチドであり、各●は、隣接する一本鎖オリゴヌクレオチド同士を連結している共有結合リンカーであり、かつａは１以上の整数であり、
以下のステップを含む、前記方法：
（ｉ）
2020518552.tif 000019
と、
2020518552.tif 000020
とを反応させ、
ここで、○は結合部分であり、Ｒ１は、前記結合部分○と反応することができる化学基であり、ｂ及びｃは各々独立して０以上の整数であり、ｂ及びｃが両方とも同時に０であることはできず、かつｂ＋ｃ＝ａであり、
それによって構造５１
2020518552.tif 000021
を形成するステップ。
【請求項２７】
構造５４
2020518552.tif 000022
を含む多量体オリゴヌクレオチドを合成する方法であって、
ここで、各
2020518552.tif 000023
は一本鎖オリゴヌクレオチドであり、各●は、隣接する一本鎖オリゴヌクレオチド同士を連結している共有結合リンカーであり、かつａは１以上であり、
以下のステップを含む、前記方法：（ｉ）構造５１
2020518552.tif 000024
を相補的一本鎖オリゴヌクレオチド
2020518552.tif 000025
とアニーリングさせ、それによって構造５４
2020518552.tif 000026
を形成するステップ。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５４】
本発明の技術のこれら及びその他の利点は、添付の図面及び以下の説明を参照すれば明らかであろう。
[本発明1001]
多量体オリゴヌクレオチドを、それを必要とする対象に投与する方法であって、前記方法は、有効量の前記多量体オリゴヌクレオチドを前記対象に投与することを含み、
前記多量体オリゴヌクレオチドが、サブユニット
2020518552.tif 000027
を含み、
前記サブユニット
2020518552.tif 000028
の各々が、独立して一本鎖または二本鎖オリゴヌクレオチドであり、かつ前記サブユニット
2020518552.tif 000029
の各々が、共有結合リンカー●によって別のサブユニットに連結されており、
前記多量体オリゴヌクレオチドが、糸球体濾過によるそのクリアランスを減少させるように設定された分子量及び／または分子サイズを有し、かつ
前記多量体オリゴヌクレオチドの前記分子量が、少なくとも約45ｋＤである、
前記方法。
[本発明1002]
前記多量体オリゴヌクレオチドが含有するサブユニットの個数が、ｍであり、ｍが、糸球体濾過による前記多量体オリゴヌクレオチドのクリアランスを減少させるように設定された前記分子量及び／または分子サイズを前記多量体オリゴヌクレオチドが有することを可能にするように選択される整数である、本発明1001の方法。
[本発明1003]
前記多量体オリゴヌクレオチドが構造21
2020518552.tif 000030
を含み、かつｎが0以上の整数である、本発明1001及び本発明1002のいずれかの方法。
[本発明1004]
前記サブユニットが一本鎖オリゴヌクレオチドである、本発明1001〜1003のいずれかの方法。
[本発明1005]
ｎが1以上である、本発明1003の方法。
[本発明1006]
前記サブユニットが二本鎖オリゴヌクレオチドである、本発明1001〜1003及び本発明1005のいずれかの方法。
[本発明1007]
ｎ＝0の場合、糸球体濾過による前記多量体オリゴヌクレオチドの前記クリアランスが、前記多量体オリゴヌクレオチドの単量体サブユニット
2020518552.tif 000031
及び／または二量体サブユニット
2020518552.tif 000032
のそれに比べて減少し、かつ
ｎ≧1の場合、糸球体濾過による前記多量体オリゴヌクレオチドの前記クリアランスが、前記多量体オリゴヌクレオチドの単量体サブユニット
2020518552.tif 000033
、二量体サブユニット
2020518552.tif 000034
、及び／または三量体サブユニット
2020518552.tif 000035
のそれに比べて減少する、
本発明1003の方法。
[本発明1008]
糸球体濾過によるクリアランスの前記減少が、前記多量体オリゴヌクレオチドのインビボでの循環半減期の増加をもたらす、本発明1001〜1007のいずれかの方法。
[本発明1009]
糸球体濾過によるクリアランスの前記減少が、
前記多量体オリゴヌクレオチドを前記対象に投与した後に前記多量体オリゴヌクレオチドのインビボでの循環半減期を測定すること
によって判定される、本発明1001〜1008のいずれかの方法。
[本発明1010]
糸球体濾過によるクリアランスの前記減少が、
前記多量体オリゴヌクレオチドの血清中濃度が所定値にまで減少するのに要する時間を測定すること
によって判定される、本発明1001〜1007のいずれかの方法。
[本発明1011]
糸球体濾過によるクリアランスの前記減少が、
前記多量体オリゴヌクレオチドを前記対象に投与した後の所定時に前記多量体オリゴヌクレオチドの血清中濃度を測定すること
によって判定される、本発明1001〜1007のいずれかの方法。
[本発明1012]
糸球体濾過によるクリアランスの前記減少が、
前記多量体オリゴヌクレオチドを前記対象に投与した後の経時的な前記多量体オリゴヌクレオチドの血清中濃度を表すグラフの曲線下面積を測定すること
によって判定される、本発明1001〜1007のいずれかの方法。
[本発明1013]
糸球体濾過によるクリアランスの前記減少が、前記多量体オリゴヌクレオチドのインビボでの生物学的利用能を向上させる、本発明1001〜1012のいずれかの方法。
[本発明1014]
糸球体濾過によるクリアランスの前記減少が、前記多量体オリゴヌクレオチドのインビボでの細胞内取込みを増加させる、本発明1001〜1012のいずれかの方法。
[本発明1015]
糸球体濾過によるクリアランスの前記減少が、前記多量体オリゴヌクレオチドのインビボでの治療指数／治療率を上昇させる、本発明1001〜1012のいずれかの方法。
[本発明1016]
サブユニット
2020518552.tif 000036
を含む多量体オリゴヌクレオチドであって、
前記サブユニット
2020518552.tif 000037
の各々が、独立して一本鎖または二本鎖オリゴヌクレオチドであり、かつ前記サブユニット
2020518552.tif 000038
の各々が、共有結合リンカー●によって別のサブユニットに連結されており、
前記多量体オリゴヌクレオチドが、糸球体濾過によるそのクリアランスを減少させるように設定された分子量及び／または分子サイズを有し、かつ
前記多量体オリゴヌクレオチドの前記分子量が、少なくとも約45ｋＤである、
前記多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1017]
前記多量体オリゴヌクレオチドが含有するサブユニットの個数が、ｍであり、ｍが、糸球体濾過による前記多量体オリゴヌクレオチドのクリアランスを減少させるように設定された前記分子量及び／または分子サイズを前記多量体オリゴヌクレオチドが有することを可能にするように選択される整数である、本発明1016の多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1018]
構造21
2020518552.tif 000039
を含む、本発明1016及び本発明1017のいずれかの多量体オリゴヌクレオチドであって、
前記サブユニット
2020518552.tif 000040
の少なくとも1つは、
その3’末端に連結された1つの前記共有結合リンカー●と、その5’末端に連結された別の前記共有結合リンカーとを有する、一本鎖
を含み、かつｎが0以上の整数である、
前記多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1019]
各サブユニット
2020518552.tif 000041
の長さが15〜30、17〜27、19〜26、または20〜25ヌクレオチドである、本発明1016〜1018のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1020]
ｎ≧1かつｎ≦17である、本発明1018の多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1021]
ｎ≧1かつｎ≦5である、本発明1018及び本発明1020のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1022]
ｎが1、2、3、4、または5である、本発明1018、本発明1020、及び本発明1021のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1023]
各サブユニットが二本鎖ＲＮＡであり、かつｎ≧1である、本発明1018の多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1024]
各サブユニットが一本鎖オリゴヌクレオチドである、本発明1016〜1022のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1025]
各サブユニットが二本鎖オリゴヌクレオチドである、本発明1016〜1022のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1026]
前記サブユニットが、一本鎖オリゴヌクレオチドと二本鎖オリゴヌクレオチドとの組み合わせを含む、本発明1016〜1022のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1027]
各サブユニットがＲＮＡ、ＤＮＡ、または人工もしくは非天然型の核酸アナログである、本発明1016〜1022及び本発明1024〜1026のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1028]
1つまたは複数の標的指向性リガンドをさらに含む、本発明1016〜1027のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1029]
前記サブユニットの少なくとも1つが標的指向性リガンドである、本発明1016〜1028のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1030]
前記標的指向性リガンドがアプタマーである、本発明1028及び本発明1029のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1031]
各サブユニットがＲＮＡである、本発明1016〜1022及び本発明1024〜1030のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1032]
各サブユニットがｓｉＲＮＡ、ｓａＲＮＡ、またはｍｉＲＮＡである、本発明1016〜1031のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1033]
各サブユニットが二本鎖ｓｉＲＮＡであり、かつ前記共有結合リンカーの各々が前記ｓｉＲＮＡのセンス鎖同士を連結している、本発明1016〜1023、本発明1025、及び本発明1028〜1032のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1034]
前記共有結合リンカー●の1つまたは複数が、切断可能な共有結合リンカーを含む、本発明1016〜1033のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1035]
前記切断可能な共有結合リンカーが、酸で切断可能な結合、還元剤で切断可能な結合、生物学的に切断可能な結合、または酵素で切断可能な結合を含有する、本発明1034の多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1036]
前記切断可能な共有結合リンカーが、細胞内条件下で切断可能である、本発明1034及び本発明1035のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1037]
各共有結合リンカー●が同じである、本発明1018〜1036のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1038]
前記共有結合リンカー●が、2種以上の異なる共有結合リンカーを含む、本発明1018〜1036のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1039]
各共有結合リンカー●が、2つの単量体サブユニット
2020518552.tif 000042
を連結している、本発明1016〜1038のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1040]
少なくとも1つの共有結合リンカー●が、3つ以上の単量体サブユニット
2020518552.tif 000043
を連結している、本発明1016〜1038のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1041]
実質的に同一なサブユニット
2020518552.tif 000044
のホモ多量体を含む、本発明1016〜1040のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1042]
2種以上の実質的に異なるサブユニット
2020518552.tif 000045
のヘテロ多量体を含む、本発明1016〜1040のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1043]
少なくとも75、80、85、90、95、96、97、98、99、または100％純粋である、本発明1016〜1042のいずれかの多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1044]
各サブユニット
2020518552.tif 000046
が、独立して二本鎖オリゴヌクレオチド
2020518552.tif 000047
であり、かつｎが1以上の整数である、本発明1018の多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1045]
各サブユニット
2020518552.tif 000048
が、独立して二本鎖オリゴヌクレオチド
2020518552.tif 000049
であり、ｎが1以上の整数であり、かつ各共有結合リンカー●が同一鎖上にある、本発明1018の多量体オリゴヌクレオチド：
2020518552.tif 000050
ここで、ｄは1以上の整数である。
[本発明1046]
構造22または構造23
2020518552.tif 000051
を含む、本発明1017の多量体オリゴヌクレオチドであって、
各
2020518552.tif 000052
は二本鎖オリゴヌクレオチドであり、各●は、隣接する二本鎖オリゴヌクレオチド同士を連結している共有結合リンカーであり、ｆは1以上の整数であり、かつｇは0以上の整数である、
前記多量体オリゴヌクレオチド。
[本発明1047]
構造51
2020518552.tif 000053
を含む多量体オリゴヌクレオチドを合成する方法であって、
ここで、各
2020518552.tif 000054
は一本鎖オリゴヌクレオチドであり、各●は、隣接する一本鎖オリゴヌクレオチド同士を連結している共有結合リンカーであり、かつａは1以上の整数であり、
以下のステップを含む、前記方法：
（ｉ）
2020518552.tif 000055
と、
2020518552.tif 000056
とを反応させ、
ここで、○は結合部分であり、Ｒ1は、前記結合部分○と反応することができる化学基であり、ｂ及びｃは各々独立して0以上の整数であり、ｂ及びｃが両方とも同時に0であることはできず、かつｂ＋ｃ＝ａであり、
それによって構造51
2020518552.tif 000057
を形成するステップ、ならびに
（ｉｉ）任意で、構造51
2020518552.tif 000058
を相補的一本鎖オリゴヌクレオチド
2020518552.tif 000059
とアニーリングさせ、それによって構造54
2020518552.tif 000060
を形成するステップ。
[本発明1048]
構造54
2020518552.tif 000061
を含む多量体オリゴヌクレオチドを合成する方法であって、
ここで、各
2020518552.tif 000062
は一本鎖オリゴヌクレオチドであり、各●は、隣接する一本鎖オリゴヌクレオチド同士を連結している共有結合リンカーであり、かつａは1以上であり、
以下のステップを含む、前記方法：（ｉ）構造51
2020518552.tif 000063
を相補的一本鎖オリゴヌクレオチド
2020518552.tif 000064
とアニーリングさせ、それによって構造54
2020518552.tif 000065
を形成するステップ。