【手続補正書】
【提出日】令和3年2月12日(2021.2.12)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）メカニズムを介して遺伝子サイレンシングを誘発可能である長鎖の二本鎖ＲＮＡ（ｌｄＲＮＡ）であって、
前記長鎖の二本鎖ＲＮＡは２つの実質的に相補的なＲＮＡ鎖からなり、１又は複数の標的ｍＲＮＡに相補的な少なくとも１つのガイド配列を含み、
前記長鎖の二本鎖ＲＮＡのそれぞれは４０〜８０ヌクレオチドの範囲内でありかつ３’末端にオーバーハングを有する、長鎖の二本鎖ＲＮＡ。
【請求項２】
前記ＲＮＡ鎖はそれぞれ４０〜６２ヌクレオチドの範囲内にある、請求項１に記載のｌｄＲＮＡ。
【請求項３】
前記ＲＮＡ鎖はそれぞれ４０〜５２ヌクレオチドの範囲内にある、請求項１に記載のｌｄＲＮＡ。
【請求項４】
同一の標的ｍＲＮＡに相補的な２つ以上の８ｂｐ以上の配列を含む、請求項１に記載のｌｄＲＮＡ。
【請求項５】
２以上の異なる標的ｍＲＮＡに相補的な２つ以上の８ｂｐ以上の配列を含む、請求項１に記載のｌｄＲＮＡ。
【請求項６】
前記ｌｄＲＮＡの一末端が、前記標的ｍＲＮＡに相補的なアンチセンス配列の５’末端を含む、請求項１に記載のｌｄＲＮＡ。
【請求項７】
前記標的ｍＲＮＡに相補的な前記配列が、８〜５０ヌクレオチド長である配列から独立して選択される、請求項１に記載のｌｄＲＮＡ。
【請求項８】
前記標的ｍＲＮＡがウイルスｍＲＮＡである、請求項１に記載のｌｄＲＮＡ。
【請求項９】
前記標的ｍＲＮＡが、
がん細胞の成長及び生存に重要な複数の経路に関与している、
同一のシグナル伝達経路において機能する、又は
共通のシグナルから発する２以上のシグナル伝達経路で機能する、
請求項１に記載のｌｄＲＮＡ。
【請求項１０】
前記標的ｍＲＮＡが、酵素、転写因子、分泌シグナリングタンパク質、シグナル伝達タンパク質、キナーゼ若しくはホスファターゼ、細胞受容体若しくはイオンチャネル、又は分泌タンパク質をコードする、請求項１に記載のｌｄＲＮＡ。
【請求項１１】
前記オーバーハングがジヌクレオチドオーバーハングである、請求項１に記載のｌｄＲＮＡ。
【請求項１２】
自然免疫応答の誘導を阻害する、請求項１に記載のｌｄＲＮＡ。
【請求項１３】
前記自然免疫応答がＲＩＧ−Ｉによって媒介される、請求項１２に記載のｌｄＲＮＡ。
【請求項１４】
請求項１〜請求項１３のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡを含む、遺伝子発現を阻害するための組成物。
【請求項１５】
１又は複数のｍＲＮＡの発現を低下させるための、請求項１〜請求項１３のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ、ここで前記低下させることは前記ｌｄＲＮＡを哺乳類の細胞、組織、又は動物に投与することを含む。
【請求項１６】
請求項１〜請求項１３のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ及び医薬的に許容される担体を含む、医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００５６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００５６】
当業者は、本明細書に具体的に記載された特定の実施形態に対する多数の均等物を、通常の実験のみを使用して認識又は確認することが可能であろう。そのような均等物は、以下の特許請求の範囲に包含されることが意図される。
本発明の例示的な態様を以下に記載する。
＜１＞
４０塩基対以上の二本鎖長を有する２つの実質的に相補的なＲＮＡ鎖及び少なくとも１つのガイド配列を含む、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）メカニズムを介して遺伝子サイレンシングを誘発可能である長鎖の二本鎖ＲＮＡ（ｌｄＲＮＡ）。
＜２＞
１又は複数の修飾ヌクレオチドを含む、＜１＞に記載のｌｄＲＮＡ。
＜３＞
１又は複数のホスホロチオエート結合ヌクレオチドを含む、＜２＞に記載のｌｄＲＮＡ。
＜４＞
Ｔｏｌｌ様受容体によるＲＮＡ認識を抑制する１又は複数の修飾ヌクレオチドを含む、＜２＞又は＜３＞に記載のｌｄＲＮＡ。
＜５＞
前記修飾ヌクレオチドがシュードウリジンを含む、＜４＞に記載のｌｄＲＮＡ。
＜６＞
前記修飾ヌクレオチドが５−メチルシチジンを含む、＜４＞に記載のｌｄＲＮＡ。
＜７＞
前記修飾ヌクレオチドがＮ１−メチルシュードウリジンを含む、＜５＞に記載のｌｄＲＮＡ。
＜８＞
さらに親油性コンジュゲートを含む、＜１＞〜＜７＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ。
＜９＞
前記親油性コンジュゲートが、コレステロール、コレステン、コレスタン、コレスタジエン、胆汁酸、コール酸、デオキシコール酸、及びデヒドロコール酸から選択される、＜８＞に記載のｌｄＲＮＡ。
＜１０＞
前記親油性部分がコレステロールである、＜８＞に記載のｌｄＲＮＡ。
＜１１＞
前記親油性コンジュゲートが、ポリリボヌクレオチドの３’末端に結合している、＜８＞〜＜１０＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ。
＜１２＞
前記ｌｄＲＮＡの一方又は両方の末端が平滑化されている、＜１＞〜＜１１＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ。
＜１３＞
前記二本鎖長が４５ｂｐ以上である、＜１＞〜＜１２＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ。
＜１４＞
前記二本鎖長が５０ｂｐ以上である、＜１＞〜＜１２＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ。
＜１５＞
前記二本鎖長が６０ｂｐ以上である、＜１＞〜＜１２＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ。
＜１６＞
相対的ＩＲＦ活性化度が１０以下である、＜１＞〜＜１５＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ。
＜１７＞
相対的ＩＲＦ活性化度が５以下である、＜１＞〜＜１５＞のいずれか一項に記載の前記ｌｄＲＮＡ。
＜１８＞
１又は複数のｍＲＮＡに相補的な１つ又は複数の８ｂｐ以上の配列を含む、＜１＞〜＜１７＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ。
＜１９＞
同一のｍＲＮＡに相補的な２つ以上の８ｂｐ以上の配列を含む、＜１８＞に記載のｌｄＲＮＡ。
＜２０＞
２以上の異なるｍＲＮＡに相補的な２つ以上の８ｂｐ以上の配列を含む、＜１８＞に記載のｌｄＲＮＡ。
＜２１＞
３以上の異なるｍＲＮＡに相補的な３つ以上の８ｂｐ以上の配列を含む、＜１８＞に記載のｌｄＲＮＡ。
＜２２＞
前記ｌｄＲＮＡの一末端が、ｍＲＮＡに相補的なアンチセンス配列の５’末端を含む、＜１＞〜＜２１＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ。
＜２３＞
前記ｌｄＲＮＡの両末端が、ｍＲＮＡに相補的なアンチセンス配列の５’末端を含む、＜１＞〜＜２１＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ。
＜２４＞
ｍＲＮＡに相補的な前記配列が、８〜５０ヌクレオチド長である配列から独立して選択される、＜１８＞〜＜２３＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ。
＜２５＞
ｍＲＮＡに相補的な前記配列が、１５〜５０ヌクレオチド長の範囲内の配列から独立して選択される、＜２４＞に記載のｌｄＲＮＡ。
＜２６＞
前記ｍＲＮＡがウイルスｍＲＮＡである、＜１８＞〜＜２５＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ。
＜２７＞
前記ｍＲＮＡが、がん細胞の成長及び生存に重要な複数の経路に関与している、＜１８＞〜＜２５＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ。
＜２８＞
前記ｍＲＮＡが同一のシグナル伝達経路において機能する、＜１８＞〜＜２５＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ。
＜２９＞
前記ｍＲＮＡが、共通のシグナルから発する２以上のシグナル伝達経路で機能する、＜９＞〜＜２５＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ。
＜３０＞
＜１＞〜＜２９＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ及び医薬的に許容される担体を含む、医薬組成物。
＜３１＞
ポリヌクレオチドの細胞への輸送を促進するビヒクルをさらに含む、＜３０＞に記載の組成物。
＜３２＞
前記ビヒクルが、リン酸カルシウム、カチオン性脂質、カチオン性ポリマー、ポリエチレンイミン又はタンパク質ベースのトランスフェクション試薬である、＜３１＞に記載の組成物。
＜３３＞
＜１＞〜＜２９＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ又は＜３０＞〜＜３２＞のいずれか一項に記載の医薬組成物を、哺乳類の細胞、組織、又は動物に投与することを含む、１又は複数のｍＲＮＡのレベルを低下させる方法。
＜３４＞
前記細胞がｓｉＲＮＡ治療に対して免疫感受性である、＜３３＞に記載の方法。
＜３５＞
少なくとも１つのｍＲＮＡが酵素をコードする、＜３３＞に記載の方法。
＜３６＞
少なくとも１つのｍＲＮＡが、転写因子をコードする、＜３３＞に記載の方法。
＜３７＞
少なくとも１つのｍＲＮＡが、分泌シグナリングタンパク質をコードする、＜３３＞に記載の方法。
＜３８＞
少なくとも１つのｍＲＮＡがシグナル伝達タンパク質をコードする、＜３３＞に記載の方法。
＜３９＞
少なくとも１つのｍＲＮＡが、キナーゼ又はホスファターゼをコードする、＜３３＞に記載の方法。
＜４０＞
少なくとも１つのｍＲＮＡが、細胞受容体又はイオンチャネルをコードする、＜３３＞に記載の方法。
＜４１＞
少なくとも１つのｍＲＮＡが、分泌タンパク質をコードする、＜３３＞に記載の方法。
＜４２＞
前記ｌｄＲＮＡ組成物が局所投与される、＜３３＞〜＜４１＞のいずれか一項に記載の方法。
＜４３＞
前記ｌｄＲＮＡ組成物が非経口投与により投与される、＜３３＞〜＜４１＞のいずれか一項に記載の方法。
＜４４＞
前記ｌｄＲＮＡ組成物が吸入により投与される、＜３３＞〜＜４１＞のいずれか一項に記載の方法。
＜４５＞
前記ｌｄＲＮＡ組成物が静脈内投与される、＜３３＞〜＜４１＞のいずれか一項に記載の方法。
＜４６＞
疾患又は状態が皮膚に影響を与えるものである、＜３３＞〜＜４５＞のいずれか一項に記載の方法。
＜４７＞
＜３０＞〜＜３２＞のいずれか一項に記載のｌｄＲＮＡ組成物を対象へ投与することを含む、前記対象の細胞における１又は複数のｍＲＮＡの発現を低下させる方法。