【手続補正書】
【提出日】令和3年7月19日(2021.7.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体における腫瘍を治療するための医薬の製造における、エコーウイルス２５（ＥＣＨＯ２５）若しくはその改変形、又は単離された核酸分子の使用であって、
前記単離された核酸分子は、以下の：
（１）ＥＣＨＯ２５又はその改変形のゲノム配列又はｃＤＮＡ配列と、
（２）前記ゲノム配列又は前記ｃＤＮＡ配列の相補的配列と、
から選択される配列を含む、使用。
【請求項２】
前記ＥＣＨＯ２５は、野生型ＥＣＨＯ２５であり、
好ましくは、前記ＥＣＨＯ２５は、エコーウイルス２５に感染した個体から分離された臨床分離株であり、
好ましくは、前記ＥＣＨＯ２５又はその改変形は、配列番号１２に示されるヌクレオチド配列に対して少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するゲノム配列を有し、好ましくは、前記ＥＣＨＯ２５又はその改変形のゲノム配列は、配列番号１２に示されるヌクレオチド配列であり、
好ましくは、前記ＥＣＨＯ２５又はその改変形は、配列番号１に示されるヌクレオチド配列に対して少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有するｃＤＮＡ配列を有し、好ましくは、前記ＥＣＨＯ２５又はその改変形のｃＤＮＡ配列は、配列番号１に示されるヌクレオチド配列である、請求項１に記載の使用。
【請求項３】
前記改変形は、改変ＥＣＨＯ２５であり、そのゲノムが野生型ＥＣＨＯ２５と比較して、以下の：
（１）非翻訳領域（例えば、５’ＵＴＲ又は３’ＵＴＲ）における１つ以上の突然変異と、
（２）１つ以上の外因性核酸の挿入と、
（３）１つ以上の内因性遺伝子の欠失又は突然変異と、
（４）前記３つの項目の任意の組み合わせと、
から選択される１つ以上の改変を有する、請求項１又は２に記載の使用。
【請求項４】
前記１つ以上の外因性核酸は、サイトカインをコードする核酸配列、抗腫瘍タンパク質若しくはポリペプチドをコードする核酸配列、及びマイクロＲＮＡの標的配列から選択される；
好ましくは、前記サイトカインは、ＧＭ−ＣＳＦであり、
好ましくは、前記抗腫瘍タンパク質若しくはポリペプチドは、ＰＤ−１又はＰＤ−Ｌ１に対するｓｃＦｖであり、
好ましくは、前記マイクロＲＮＡは、ｍｉＲ−１３３及び／又はｍｉＲ−２０６から選択される、請求項３に記載の使用。
【請求項５】
前記非翻訳領域における１つ以上の突然変異は、５'非翻訳領域（５'ＵＴＲ）における内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）配列の、外因性ＩＲＥＳ配列との置換を含み、
好ましくは、前記外因性ＩＲＥＳ配列は、ヒトライノウイルス２（ＨＲＶ２）の内部リボソーム進入部位配列である、請求項３又は４に記載の使用。
【請求項６】
前記改変ＥＣＨＯ２５は、以下の特徴：
（１）前記改変ＥＣＨＯ２５のゲノム配列は、配列番号１３〜配列番号１６に示されるヌクレオチド配列から選択されるヌクレオチド配列に対して少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有し、好ましくは、前記改変ＥＣＨＯ２５のゲノム配列は、配列番号１３〜配列番号１６のいずれか１つに示されるヌクレオチド配列から選択されること、及び、
（２）前記改変ＥＣＨＯ２５のｃＤＮＡ配列は、配列番号８〜配列番号１１に示されるヌクレオチド配列から選択されるヌクレオチド配列に対して少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有し、好ましくは、前記改変ＥＣＨＯ２５のｃＤＮＡ配列は、配列番号８〜配列番号１１のいずれか１つに示されるヌクレオチド配列から選択されること、
の１つを有する、請求項３〜５のいずれか一項に記載の使用。
【請求項７】
以下の、
（１）前記単離された核酸分子は、前記ＥＣＨＯ２５又はその改変形のゲノム配列からなること、又は
（２）前記単離された核酸分子は、前記ＥＣＨＯ２５若しくはその改変形のｃＤＮＡ配列、又は前記ｃＤＮＡ配列の相補的配列を含むベクターであること、
好ましくは、前記単離された核酸分子は、配列番号１２〜配列番号１６のいずれか１つに示されるヌクレオチド配列を有する、又は、配列番号１、配列番号８〜配列番号１１のいずれか１つに示されるヌクレオチド配列もしくはその相補的配列を含むベクターであること、
の１つによって特徴づけられる、請求項１〜６のいずれか一項に記載の使用。
【請求項８】
前記ＥＣＨＯ２５若しくはその改変形、又は前記単離された核酸分子は、抗腫瘍活性を有する追加の薬学的活性剤と組み合わせて投与され、
好ましくは、前記追加の薬学的活性剤は、追加の腫瘍溶解性ウイルス、化学療法剤又は免疫療法剤から選択され、
好ましくは、前記追加の薬学的活性剤は、以下；、
（１）前記追加の腫瘍溶解性ウイルスは、ヘルペスウイルス、アデノウイルス、パルボウイルス、レオウイルス、ニューカッスル病ウイルス、水疱性口内炎ウイルス、麻疹ウイルス又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択されること、
（２）前記化学療法剤は、５−フルオロウラシル、マイトマイシン、メトトレキサート、ヒドロキシ尿素、シクロホスファミド、ダカルバジン、ミトキサントロン、アントラサイクリン類（例えば、エピルビシン又はドキソルビシン）、エトポシド、白金化合物（例えば、カルボプラチン又はシスプラチン）、タキサン類（例えば、パクリタキセル又はタキソテール）又はそれらの任意の組み合わせから選択されること、
（３）前記免疫療法剤は、免疫チェックポイント阻害薬（例えば、抗ＰＤ−１抗体、抗ＰＤ−Ｌ１抗体又は抗ＣＴＬＡ−４抗体）、腫瘍特異的標的化抗体（例えば、リツキシマブ又はハーセプチン）又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択されること、
の１つ以上によって特徴づけられる、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用。
【請求項９】
以下の特徴：
（１）前記腫瘍は、胃癌、肝臓癌、卵巣癌（例えば、卵巣非明細胞癌）、子宮内膜癌、黒色腫、前立腺癌、神経膠腫、食道癌、膀胱癌、リンパ腫（例えば、組織球性リンパ腫）、白血病（例えば、慢性骨髄性白血病）、横紋筋肉腫、結腸直腸癌、非小細胞肺癌（例えば、非小細胞肺腺癌）、子宮頸癌（例えば、ＨＰＶ陰性子宮頸癌）、乳癌（例えば、乳房髄様癌）、腎臓癌（例えば、明細胞腎臓癌）及び膵臓癌からなる群から選択されること、
（２）前記被験体はヒトであること、
の少なくとも１つを有する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用。
【請求項１０】
野生型ＥＣＨＯ２５と比較して、５'ＵＴＲにおける内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）配列の、ヒトライノウイルス２（ＨＲＶ２）の内部リボソーム進入部位配列との置換を有する改変ＥＣＨＯ２５であって、
好ましくは、前記改変ＥＣＨＯ２５は、以下の特徴：
１）前記ヒトライノウイルス２（ＨＲＶ２）の内部リボソーム進入部位配列は、配列番号２に示されていること、
２）前記野生型ＥＣＨＯ２５のゲノム配列は、配列番号１２に示されるヌクレオチド配列に対して少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有し、好ましくは、前記野生型ＥＣＨＯ２５のゲノム配列は、配列番号１２に示されるヌクレオチド配列であること、
３）前記野生型ＥＣＨＯ２５のｃＤＮＡ配列は、配列番号１に示されるヌクレオチド配列に対して少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有し、好ましくは、前記野生型ＥＣＨＯ２５のｃＤＮＡ配列は、配列番号１に示されるヌクレオチド配列であること、
の少なくとも１つを有する、改変ＥＣＨＯ２５。
【請求項１１】
前記改変ＥＣＨＯ２５は、サイトカインをコードする核酸配列、抗腫瘍タンパク質若しくはポリペプチドをコードする核酸配列及びマイクロＲＮＡの標的配列から選択される外因性核酸を更に含み；
好ましくは、前記サイトカインはＧＭ−ＣＳＦであり；、
好ましくは、前記抗腫瘍タンパク質若しくはポリペプチドは、ＰＤ−１又はＰＤ−Ｌ１であり；
好ましくは、前記マイクロＲＮＡは、ｍｉＲ−１３３及び／又はｍｉＲ−２０６から選択される；
請求項１０に記載の改変ＥＣＨＯ２５。
【請求項１２】
前記改変ＥＣＨＯ２５は、以下の特徴：
（１）前記改変ＥＣＨＯ２５のゲノム配列は、配列番号１３に示されるヌクレオチド配列に対して少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有し、好ましくは、前記改変ＥＣＨＯ２５のゲノム配列は、配列番号１３に示されるヌクレオチド配列であること、
（２）前記改変ＥＣＨＯ２５のｃＤＮＡ配列は、配列番号８に示されるヌクレオチド配列に対して少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％の配列同一性を有し、好ましくは、前記改変ＥＣＨＯ２５のｃＤＮＡ配列は、配列番号８に示されるヌクレオチド配列であること、
の１つを有する、請求項１０又は１１に記載の改変ＥＣＨＯ２５。
【請求項１３】
単離された核酸分子であって、
（１）請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の改変ＥＣＨＯ２５のゲノム配列又はｃＤＮＡ配列と、
（２）前記ゲノム配列又は前記ｃＤＮＡ配列の相補的配列と、
からなる群から選択される配列を含む、単離された核酸分子。
【請求項１４】
以下の特徴
（１）前記単離された核酸分子は、前記改変されたＥＣＨＯ２５のゲノム配列からなること；又は
（２）前記単離された核酸分子は、前記改変されたＥＣＨＯ２５のｃＤＮＡ配列、又前記ｃＤＮＡ配列の相補的配列を含むベクターであること；
好ましくは、前記単離された核酸分子は、配列番号１３に示されるヌクレオチド配列を有するか、又は、配列番号８に示されるヌクレオチド配列若しくはその相補的配列を含むベクターである、
の１つによって特徴づけられる、請求項１３に記載の単離された核酸分子。
【請求項１５】
被験体における腫瘍の治療のための医薬の製造における、請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の改変ＥＣＨＯ２５又は請求項１３又は１４に記載の単離された核酸分子の使用であって、
好ましくは、前記腫瘍は、胃癌、肝臓癌、卵巣癌（例えば、卵巣非明細胞癌）、子宮内膜癌、黒色腫、前立腺癌、神経膠腫、食道癌、膀胱癌、リンパ腫（例えば、組織球性リンパ腫）、白血病（例えば、慢性骨髄性白血病）、咽頭扁平上皮癌、甲状腺癌、横紋筋肉腫、結腸直腸癌、非小細胞肺癌（例えば、非小細胞肺腺癌）、子宮頸癌（例えば、ＨＰＶ陰性子宮頸癌）、乳癌（例えば、乳房髄様癌）、腎臓癌（例えば、明細胞腎臓癌）及び膵臓癌からなる群から選択される、使用。