【手続補正書】
【提出日】令和2年12月7日(2020.12.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験体においてミエリン関連障害を治療することにおける使用のための、内因性ＰＬＰ１遺伝子を特異的にターゲティングして細胞におけるＰＬＰ１発現レベルを減少させる遺伝子サイレンシング剤であって、ここで該ミエリン関連障害は、好ましくは、異常なＰＬＰ１遺伝子活性および／または発現によって特徴付けられ、そしてここで該細胞は、機能的ミエリンを産生するか、あるいは機能的ミエリンを産生する細胞を産生するかまたはこうした細胞に分化する前駆細胞である、前記遺伝子サイレンシング剤。
【請求項２】
機能的ミエリン産生を増進させる細胞を生成することにおける使用のための、内因性ＰＬＰ１遺伝子を特異的にターゲティングして細胞におけるＰＬＰ１発現レベルを減少させる遺伝子サイレンシング剤であって、ここで該細胞は、機能的ミエリンを産生するか、あるいは機能的ミエリンを産生する細胞を産生するかまたはこうした細胞に分化する前駆細胞である、前記遺伝子サイレンシング剤。
【請求項３】
請求項１または２に記載の使用のための遺伝子サイレンシング剤であって、ここで前記遺伝子サイレンシング剤がアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）を含む、前記遺伝子サイレンシング剤。
【請求項４】
請求項１または２に記載の使用のための遺伝子サイレンシング剤であって、ここで前記遺伝子サイレンシング剤がＲＮＡｉ構築物（例えばｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、またはｍｉＲＮＡ）を含む、前記遺伝子サイレンシング剤。
【請求項５】
請求項１または２に記載の使用のための遺伝子サイレンシング剤であって、ここで前記遺伝子サイレンシング剤が：ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、ＴＡＬＥエフェクター（ＴＡＬＥＮ）、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系、およびＮｇＡｇｏ系からなる群より選択されるヌクレアーゼを含む、前記遺伝子サイレンシング剤。
【請求項６】
機能的ミエリン産生を増進させる細胞を生成する方法であって：
ＰＬＰ１発現レベルが減少するように内因性ＰＬＰ１遺伝子産物が修飾され、ここで該内因性ＰＬＰ１遺伝子産物の修飾が、ＰＬＰ１を特異的にターゲティングする遺伝子サイレンシング剤を細胞に送達することを含む
ように細胞を遺伝子修飾する工程を含み、
ここで、該細胞は、機能的ミエリンを産生するか、あるいは機能的ミエリンを産生する細胞を産生するかまたはこうした細胞に分化する前駆細胞であり；および、
ここで、該方法は、該遺伝子サイレンシング剤を含む送達ビヒクルと細胞とをｉｎ  ｖｉｔｒｏまたはｅｘ  ｖｉｖｏで接触させることを含み、任意選択で、該送達ビヒクルはＡＡＶベクター、アデノウイルスベクター、またはレンチウイルスベクターである、前記方法。
【請求項７】
請求項６に記載の方法であって、ここで前記内因性ＰＬＰ１遺伝子が、有害な疾患誘発性突然変異体ＰＬＰ１遺伝子である、前記方法。
【請求項８】
請求項６または７に記載の方法であって、ここで前記遺伝子サイレンシング剤が、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）を含む、前記方法。
【請求項９】
請求項６または７に記載の方法であって、ここで前記遺伝子サイレンシング剤がＲＮＡｉ構築物（例えばｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、またはｍｉＲＮＡ）である、前記方法。
【請求項１０】
請求項６または７に記載の方法であって、ここで前記遺伝子サイレンシング剤が：ジンクフィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、ＴＡＬＥエフェクター（ＴＡＬＥＮ）、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系、およびＮｇＡｇｏ系からなる群から選択されるヌクレアーゼを含む、前記方法。
【請求項１１】
請求項６〜１０のいずれか一項に記載の方法であって、ここで前記遺伝子修飾された細胞が、（例えば該細胞におけるＰＬＰ１関連毒性の減少によって）増進されたミエリン産生を示す、前記方法。
【請求項１２】
請求項６〜１１のいずれか一項に記載の方法によって生成される遺伝子修飾細胞、またはそれに由来する遺伝子修飾細胞であって、任意選択で、該細胞が神経幹細胞（ＮＳＣ）、オリゴデンドロサイト前駆細胞（ＯＰＣ）、またはオリゴデンドロサイト細胞より選択される、前記遺伝子修飾細胞。
【請求項１３】
請求項１２に記載の遺伝子修飾細胞を含む組成物。
【請求項１４】
被験体において機能的ミエリンを産生することによって該被験体におけるミエリン関連障害を治療することにおける使用のための、請求項６〜１１のいずれか一項に記載の方法によって生成される細胞であって、ここで該ミエリン関連障害は、好ましくは、異常なＰＬＰ１遺伝子活性および／または発現によって特徴付けられる、前記細胞。
【請求項１５】
機能的ミエリンを産生することによって、あるいは機能的ミエリンを産生する細胞を産生するかまたはこうした細胞に分化する前駆細胞であることによって機能的ミエリン産生を増進する、ミエリン関連障害を治療することにおける使用のための細胞であって、ここで該細胞は、ＰＬＰ１発現レベルが減少するように内因性ＰＬＰ１遺伝子産物が修飾されるように遺伝子修飾されていて、ここで該内因性ＰＬＰ１遺伝子産物の修飾が、ＰＬＰ１を特異的にターゲティングする遺伝子サイレンシング剤を細胞に送達することを含む、前記細胞。
【請求項１６】
請求項１４もしくは１５に記載の使用のための細胞、または請求項１〜５のいずれか一項に記載の使用のための遺伝子サイレンシング剤であって、ここで該ミエリン関連障害が、ペリツェウス・メルツバッハ病（ＰＭＤ）または白質ジストロフィーを含むか、あるいは多発性硬化症（ＭＳ）、視神経脊髄炎（ＮＭＯ）、横断性脊髄炎、慢性炎症性脱髄性多発ニューロパチー、ギラン・バレー症候群、進行性多巣性白質脳症（ＰＭＬ）、脳脊髄炎（ＥＰＬ）、橋中央ミエリン溶解（ＣＰＭ）、副腎白質ジストロフィー、アレクサンダー病、ペリツェウス・メルツバッハ病（ＰＭＤ）、ウォラー変性、視神経炎、筋委縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、アルツハイマー病、パーキンソン病、脊髄傷害、外傷性脳傷害、放射線照射後の傷害、化学療法の神経学的合併症、脳卒中、急性虚血性視神経症、ビタミンＥ欠乏、孤立性ビタミンＥ欠乏症候群、ＡＲ、バッセン・コーンツヴァイク症候群、マルキアファーヴァ・ビニャミ症候群、異染性白質ジストロフィー、三叉神経痛、急性散在性脳炎、マリー・シャルコー・ツース病およびベル麻痺より選択される、前記細胞または遺伝子サイレンシング剤。
【請求項１７】
請求項１６に記載の使用のための細胞または遺伝子サイレンシング剤であって、ここで前記ミエリン関連障害がＰＭＤを含み、そしてここで前記細胞または遺伝子サイレンシング剤が、被験体の寿命を、ミエリン関連障害を持たない対照被験体の少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約１００％まで回復させる、前記細胞または遺伝子サイレンシング剤。
【請求項１８】
請求項１７に記載の使用のための細胞または遺伝子サイレンシング剤であって、前記ミエリン関連障害を伴う被験体の少なくとも１つの症状（単数または複数）を回復させる、および／または前記被験体の機能を、ミエリン関連障害を持たない対照被験体の少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または約１００％まで回復し、好ましくは、該機能が運動協調、自発運動、および軸索伝達速度である、前記細胞または遺伝子サイレンシング剤。
【請求項１９】
請求項１４〜１８のいずれか一項に記載の使用のための細胞または遺伝子サイレンシング剤であって、ここで前記細胞が、遺伝子修飾ＮＳＣ、ＯＰＣ、およびオリゴデンドロサイトからなる群より選択される、細胞または遺伝子サイレンシング剤。
【請求項２０】
請求項１４〜１９のいずれか一項に記載の使用のための細胞または遺伝子サイレンシング剤であって、ここで前記被験体が哺乳動物、例えばヒト（例えば２０歳、１５歳、１０歳、５歳、３歳、２歳、１歳、６ヶ月齢、３ヶ月齢、１ヶ月齢、２週齢、１週齢、３日齢、または１日齢より若いヒト）である、前記細胞または遺伝子サイレンシング剤。