【手続補正書】
【提出日】令和3年9月17日(2021.9.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下を含む複合体：
ａ）標的リガンド結合ポリペプチドに特異的に結合する親和性因子；
ｂ）リンカー；ならびに
ｃ）ｉ）光異性化基と、
ｉｉ）前記標的リガンド結合ポリペプチドに結合するリガンドと
を含む、光異性化調節因子。
【請求項２】
前記親和性因子が抗体である、請求項1に記載の複合体。
【請求項３】
前記親和性因子がアプタマーである、請求項1に記載の複合体。
【請求項４】
前記アプタマーがＤＮＡアプタマーである、請求項3に記載の複合体。
【請求項５】
前記アプタマーがＲＮＡアプタマーである、請求項3に記載の複合体。
【請求項６】
前記親和性因子が小分子である、請求項1に記載の複合体。
【請求項７】
前記親和性因子がペプチドである、請求項1に記載の複合体。
【請求項８】
前記リガンドが、アロステリック部位で結合する、請求項1〜7のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項９】
前記リガンドが、オルソステリック部位で結合する、請求項1〜7のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項１０】
前記標的リガンド結合ポリペプチドへの前記リガンドの結合が、前記標的リガンド結合ポリペプチドにおける機能的変化をもたらす、請求項1〜9のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項１１】
前記標的リガンド結合ポリペプチドへの前記リガンドの結合が、立体構造変化をもたらす、請求項1〜9のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項１２】
前記標的リガンド結合ポリペプチドへの前記リガンドの結合が、立体構造の安定化をもたらす、請求項1〜9のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項１３】
前記リガンドが、アゴニスト、アンタゴニスト、アロステリック調節因子、または遮断剤である、請求項1〜12のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項１４】
前記光異性化基が、アゾベンゼン、環状アゾベンゼン、アゾヘテロアレーン、フルギド、スピロピラン、トリフェニルメタン、チオインジゴ、ジアリールエテン、及び過密アルケン（ｏｖｅｒｃｒｏｗｄｅｄ  ａｌｋｅｎｅ）から選択される部分を含む、請求項1〜13のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項１５】
前記光異性化基が、アゾベンゼンを含む、請求項1〜13のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項１６】
前記標的リガンド結合ポリペプチドが、転写調節因子、イオンチャネル、カチオンチャネル、リガンド依存性イオンチャネル、電位依存性イオンチャネル、クオラムセンサー、フェロモン受容体、神経伝達物質受容体、及び酵素から選択される、請求項1〜15のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項１７】
前記カチオンチャネルが、カリウムチャネル、ナトリウムチャネル、またはカルシウムチャネルである、請求項16に記載の複合体。
【請求項１８】
前記リガンド結合ポリペプチドが、グルタミン酸受容体、代謝型グルタミン酸受容体、イオンチャネル型グルタミン酸受容体、イオンチャネル型ニコチン性アセチルコリン受容体、イオンチャネル型ＧＡＢＡ−Ａ受容体、またはイオンチャネル型プリン作動性Ｐ2Ｘ受容体である、請求項1〜15のいずれか一項に記載の複合体。
【請求項１９】
前記抗体が、ｓｃＦｖ、ｓｄＡｂ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、ナノボディ、Ｆａｂ’2、Ｆ（ａｂ’）2、Ｆｄ、Ｆｖ、Ｆｅｂ、及びＳＭＩＰから選択される、請求項2に記載の複合体。
【請求項２０】
請求項1〜19のいずれか一項に記載の複合体を含む、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにある細胞。
【請求項２１】
神経細胞である、請求項20に記載の細胞。
【請求項２２】
網膜細胞である、請求項20に記載の細胞。
【請求項２３】
筋細胞である、請求項20に記載の細胞。
【請求項２４】
標的ポリペプチドの活性の調節方法であって、前記方法が、
ａ）前記標的ポリペプチドを、請求項1〜19のいずれか一項に記載の複合体と接触させ、光調節性ポリペプチドを生成すること；及び
ｂ）前記光調節性ポリペプチドへのリガンドの結合をもたらす波長の光に前記光調節性ポリペプチドを曝露すること
を含み、
前記光調節性ポリペプチドへの前記リガンドの結合が、前記光調節性ポリペプチドの活性を調節する、前記調節方法。
【請求項２５】
前記リガンドがアゴニストであり、前記光調節性ポリペプチドへの前記リガンドの結合が、前記光調節性ポリペプチドの活性化をもたらす、請求項24に記載の方法。
【請求項２６】
前記リガンドがアンタゴニストであり、前記光調節性ポリペプチドへの前記リガンドの結合が、前記光調節性ポリペプチドの阻害、脱感作、または不活性化をもたらす、請求項24に記載の方法。
【請求項２７】
前記標的ポリペプチドが、転写調節因子、イオンチャネル、カチオンチャネル、リガンド依存性イオンチャネル、電位依存性イオンチャネル、クオラムセンサー、フェロモン受容体、神経伝達物質受容体、酵素、酵素、モータータンパク質、輸送体、膜輸送タンパク質、Ｇタンパク質共役受容体、Ｇタンパク質、受容体チロシンキナーゼ、骨格タンパク質、アダプタータンパク質、細胞骨格タンパク質、接着タンパク質、膜標的タンパク質、分泌を指示するタンパク質、及びタンパク質の局在化ドメインまたはタンパク質相互作用ドメインから選択される、請求項24〜26のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２８】
前記カチオンチャネルが、カリウムチャネル、ナトリウムチャネル、またはカルシウムチャネルである、請求項27に記載の方法。
【請求項２９】
前記標的ポリペプチドが、ｉｎ  ｖｉｔｒｏにある細胞内にある、請求項24〜28のいずれか一項に記載の方法。
【請求項３０】
前記細胞が網膜細胞である、請求項29に記載の方法。
【請求項３１】
前記細胞が神経細胞である、請求項29に記載の方法。
【請求項３２】
前記細胞が筋細胞である、請求項29に記載の方法。
【請求項３３】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏで実施される、標的細胞集団の活性の調節方法であって、前記方法が、前記標的細胞集団を光に曝露することを含み、
前記標的細胞集団が、請求項1〜19のいずれか一項に記載の複合体を含み、
前記光が、光調節性ポリペプチドへのリガンドの結合をもたらす波長の光であり、
前記光調節性ポリペプチドへの前記リガンドの結合が、前記標的細胞集団の前記活性を調節する、前記調節方法。
【請求項３４】
前記標的細胞集団が組織内に存在する、請求項33に記載の方法。
【請求項３５】
前記標的細胞集団が、前記標的細胞集団及び非標的細胞を含む混合細胞集団中に存在する、請求項33または34に記載の方法。
【請求項３６】
前記組織が脳組織である、請求項34に記載の方法。
【請求項３７】
前記組織が筋組織である、請求項34に記載の方法。
【請求項３８】
前記組織が血液細胞を含む、請求項34に記載の方法。
【請求項３９】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏで実施される、光に対する網膜細胞の感受性の増加方法であって、前記方法が、前記網膜細胞を光に曝露することを含み、
前記網膜細胞が、請求項1〜19のいずれか一項に記載の複合体を含み、
前記光が、光調節性ポリペプチドへのリガンドの結合をもたらす波長の光であり、
前記光調節性ポリペプチドへの前記リガンドの結合が、光に対する前記網膜細胞の前記感受性を増加させる、前記増加方法。
【請求項４０】
請求項1〜19のいずれか一項に記載の複合体を含む、網膜細胞へ光応答性を付与するための医薬組成物。
【請求項４１】
請求項1〜19のいずれか一項に記載の複合体を含む、光に対する応答性の低下を特徴とする眼障害を治療するための医薬組成物であって、前記眼障害を有する個体の眼に投与される、前記医薬組成物。
【請求項４２】
前記眼障害が遺伝性網膜変性疾患である、請求項41に記載の医薬組成物。
【請求項４３】
前記疾患が、網膜色素変性症または加齢性黄斑変性症である、請求項42に記載の医薬組成物。
【請求項４４】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏで実施される、標的ポリペプチドの活性の調節方法であって、前記方法が、以下：
ａ）前記標的ポリペプチドを含む細胞を、ｉ）光異性化基とｉｉ）前記標的リガンド結合ポリペプチドに結合するリガンドとを含む光異性化調節因子と接触させることであって、
前記細胞が、
ｉ）前記標的ポリペプチドによって提示されるエピトープに特異的に結合する親和性因子と、
ｉｉ）ＨＡＬＯタグ、ＳＮＡＰタグ、またはＣＬＩＰタグと
を含む融合ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を有する核酸で遺伝子改変されており、
前記融合ポリペプチドが、前記光異性化調節因子と複合体を形成し、
前記複合体に存在する前記親和性因子が、前記標的ポリペプチドに結合し、光調節性ポリペプチドを生成する、前記接触させること；ならびに
ｂ）前記光調節性ポリペプチドへのリガンドの結合をもたらす波長の光に前記光調節性ポリペプチドを曝露することであって、前記光調節性ポリペプチドへの前記リガンドの結合が、前記光調節性ポリペプチドの活性を調節する、前記曝露すること
を含む、前記調節方法。
【請求項４５】
前記核酸が、組換え発現ベクター中に存在する、請求項44に記載の方法。
【請求項４６】
前記親和性因子が抗体である、請求項44に記載の方法。
【請求項４７】
前記親和性因子がナノボディまたはｓｃＦｖである、請求項44に記載の方法。