【手続補正書】
【提出日】令和3年1月27日(2021.1.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０２３９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０２３９】
本願を通じて、様々な刊行物が参照されている。本発明が関連する分野の現状をさらに充分に説明する目的で、これらの刊行物の開示内容は、本願での参照により、その全体が、本明細書に援用される。上に示した実施例と実施形態を参照して、本発明について説明してきたが、本発明の趣旨から逸脱しなければ、様々な修正を行えることを理解されたい。
本件出願は、以下の態様の発明を提供する。
（態様１）
（ｉ）そのＣＲＢＮのＮ末端にユウロピウム−抗Ｈｉｓ抗体を有するＣＲＢＮと、（ｉｉ）Ｃｙ５コンジュゲート小分子とを含む複合体であって、前記Ｃｙ５コンジュゲート小分子が前記ＣＲＢＮと結合する前記複合体。
（態様２）
ＤＤＢ１をさらに含む、態様１に記載の複合体。
（態様３）
前記Ｃｙ５コンジュゲート小分子が、前記ＣＲＢＮにおいてＴｒｐ３８０、Ｔｒｐ３８６及びＴｒｐ４００によって形成された疎水性のトリトリプトファンポケット内で結合する、態様１または２に記載の複合体。
（態様４）
前記Ｃｙ５コンジュゲート小分子が、下記の式（Ｉ）の構造を有する、態様１〜３のいずれか１項に記載の複合体。
（化１）
2020510632.tif 000001
（態様５）
化合物がセレブロン（ＣＲＢＮ）に結合するかの判断方法であって、前記化合物を複合体と接触させることを含み、前記複合体が、
（ｉ）そのＣＲＢＮのＮ末端にユウロピウム−抗Ｈｉｓ抗体を有するＣＲＢＮと、
（ｉｉ）Ｃｙ５コンジュゲート小分子と、を含み、前記Ｃｙ５コンジュゲート小分子が前記ＣＲＢＮと結合する前記方法。
（態様６）
前記複合体がＤＤＢ１をさらに含む、態様５に記載の方法。
（態様７）
前記Ｃｙ５コンジュゲート小分子が、前記ＣＲＢＮにおいてＴｒｐ３８０、Ｔｒｐ３８６及びＴｒｐ４００によって形成された疎水性のトリトリプトファンポケット内で結合する、態様５または６に記載の方法。
（態様８）
前記Ｃｙ５コンジュゲート小分子が、下記の式（Ｉ）の構造を有する、態様５〜７のいずれか１項に記載の方法。
（化２）
2020510632.tif 000002
（態様９）
前記化合物を前記複合体と接触させた後に、蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）を測定することをさらに含む、態様５〜８のいずれか１項に記載の方法。
（態様１０）
前記化合物を前記複合体と接触させる前に、ＦＲＥＴを測定することをさらに含む、態様９に記載の方法。
（態様１１）
前記化合物を前記複合体と接触させた後に、ＦＲＥＴが減少した場合に、前記化合物が前記ＣＲＢＮに結合すると判断することをさらに含む、態様９〜１０のいずれか１項に記載の方法。
（態様１２）
３４０ｎｍで励起して、６１５ｎｍでの発光（Ｎｏｎ−ＦＲＥＴ発光）と６６５ｎｍでの発光（ＦＲＥＴ発光）をモニタリングすることによってＦＲＥＴを観察する、態様９〜１０のいずれか１項に記載の方法。
（態様１３）
前記化合物を前記複合体と接触させる前に、第１のＦＲＥＴ効率を求め、前記化合物を前記複合体と接触させた後に、第２のＦＲＥＴ効率を求め、ＦＲＥＴ効率が、６１５ｎｍでのＮｏｎ−ＦＲＥＴ発光に対する６６５ｎｍでのＦＲＥＴ発光の比率である、態様１２に記載の方法。
（態様１４）
前記第２のＦＲＥＴ効率が、前記第１のＦＲＥＴ効率よりも低い場合に、前記化合物が前記ＣＲＢＮに結合すると判断することをさらに含む、態様１３に記載の方法。
（態様１５）
セレブロン（ＣＲＢＮ）に対する化合物の親和性の測定方法であって、前記化合物を複合体と接触させることを含み、前記複合体が、
（ｉ）そのＣＲＢＮのＮ末端にユウロピウム−抗Ｈｉｓ抗体を有するＣＲＢＮと、
（ｉｉ）Ｃｙ５コンジュゲート小分子と、を含み、前記Ｃｙ５コンジュゲート小分子が前記ＣＲＢＮと結合する前記方法。
（態様１６）
前記複合体が、ＤＤＢ１をさらに含む、態様１５に記載の方法。
（態様１７）
前記Ｃｙ５コンジュゲート小分子が、前記ＣＲＢＮにおいてＴｒｐ３８０、Ｔｒｐ３８６及びＴｒｐ４００によって形成された疎水性のトリトリプトファンポケット内で結合する、態様１５または１６に記載の方法。
（態様１８）
前記Ｃｙ５コンジュゲート小分子が、下記の式（Ｉ）の構造を有する、態様１５〜１７のいずれか１項に記載の方法。
（化３）
2020510632.tif 000003
（態様１９）
前記化合物を前記複合体と接触させた後に、蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）を測定することをさらに含む、態様１５〜１８のいずれか１項に記載の方法。
（態様２０）
前記化合物を前記複合体と接触させる前に、ＦＲＥＴを測定することをさらに含む、態様１９に記載の方法。
（態様２１）
３４０ｎｍで励起して、６１５ｎｍでの発光（Ｎｏｎ−ＦＲＥＴ発光）と６６５ｎｍでの発光（ＦＲＥＴ発光）をモニタリングすることによってＦＲＥＴを観察する、態様１９〜２０のいずれか１項に記載の方法。
（態様２２）
前記化合物を前記複合体と接触させる前に、第１のＦＲＥＴ効率を求め、前記化合物を前記複合体と接触させた後に、第２のＦＲＥＴ効率を求め、ＦＲＥＴ効率が、６１５ｎｍでのＮｏｎ−ＦＲＥＴ発光に対する６６５ｎｍでのＦＲＥＴ発光の比率である、態様２１に記載の方法。
（態様２３）
前記第１のＦＲＥＴ効率と前記第２のＦＲＥＴ効率との差を測定することによって、ＣＲＢＮに対する前記化合物の親和性を求める、態様２２に記載の方法。
（態様２４）
疾患を治療するための化合物の特定方法であって、前記化合物を複合体と接触させることを含み、前記複合体が、
（ｉ）そのＣＲＢＮのＮ末端にユウロピウム−抗Ｈｉｓ抗体を有するＣＲＢＮと、
（ｉｉ）Ｃｙ５コンジュゲート小分子と、を含み、前記Ｃｙ５コンジュゲート小分子が前記ＣＲＢＮと結合する前記方法。
（態様２５）
前記複合体がＤＤＢ１をさらに含む、態様２４に記載の方法。
（態様２６）
前記Ｃｙ５コンジュゲート小分子が、前記ＣＲＢＮにおいてＴｒｐ３８０、Ｔｒｐ３８６及びＴｒｐ４００によって形成された疎水性のトリトリプトファンポケット内で結合する、態様２４または２５に記載の方法。
（態様２７）
前記Ｃｙ５コンジュゲート小分子が、下記の式（Ｉ）の構造を有する、態様２４〜２６のいずれか１項に記載の方法。
（化４）
2020510632.tif 000004
（態様２８）
前記化合物を前記複合体と接触させた後に、蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）を測定することをさらに含む、態様２４〜２７のいずれか１項に記載の方法。
（態様２９）
前記化合物を前記複合体と接触させる前に、ＦＲＥＴを測定することをさらに含む、態様２８に記載の方法。
（態様３０）
前記化合物を前記複合体と接触させた後に、ＦＲＥＴが減少した場合に、前記疾患の治療に、前記化合物を使用できる可能性があると判断することをさらに含む、態様２８〜２９のいずれか１項に記載の方法。
（態様３１）
３４０ｎｍで励起して、６１５ｎｍでの発光（Ｎｏｎ−ＦＲＥＴ発光）と６６５ｎｍでの発光（ＦＲＥＴ発光）をモニタリングすることによってＦＲＥＴを観察する、態様２８〜２９のいずれか１項に記載の方法。
（態様３２）
前記化合物を前記複合体と接触させる前に、第１のＦＲＥＴ効率を求め、前記化合物を前記複合体と接触させた後に、第２のＦＲＥＴ効率を求め、ＦＲＥＴ効率が、６１５ｎｍでのＮｏｎ−ＦＲＥＴ発光に対する６６５ｎｍでのＦＲＥＴ発光の比率である、態様３１に記載の方法。
（態様３３）
前記第２のＦＲＥＴ効率が、前記第１のＦＲＥＴ効率よりも低い場合に、前記疾患の治療に、前記化合物を使用できる可能性があると判断することをさらに含む、態様３２に記載の方法。
（態様３４）
前記疾患が、ＣＲＢＮ介在性疾患である、態様２４に記載の方法。
（態様３５）
態様１〜４のいずれか１項に記載の複合体を含む組成物。