【手続補正書】
【提出日】平成16年7月21日(2004.7.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】特許請求の範囲
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記の群より選ばれるＤＮＡまたはその相補鎖；
i）配列表の配列番号１に記載のＤＮＡ配列で示されるＤＮＡ、
ii）配列表の配列番号２に記載のＤＮＡ配列で示されるＤＮＡ、
iii）前記i）またはii）のＤＮＡと少なくとも約７０％のＤＮＡ配列上の相同性を有し、かつ細胞・細胞間の接着調節機能および／または細胞・細胞外マトリックス間の接着調節機能を有するペプチドをコードするＤＮＡ、
および
iv）前記i）からiii）のＤＮＡのＤＮＡ配列において、１ないし数個のＤＮＡの欠失、置換、付加などの変異を有し、かつ細胞・細胞間の接着調節機能および／または細胞・細胞外マトリックス間の接着調節機能を有するペプチドをコードするＤＮＡ。
【請求項２】
請求項１に記載のＤＮＡまたはその相補鎖とストリンジェントな条件下でハイブリダイゼーションし、かつ細胞・細胞間の接着調節機能および／または細胞・細胞外マトリックス間の接着調節機能を有するペプチドをコードするＤＮＡ。
【請求項３】
請求項１または２に記載のＤＮＡがコードするポリペプチド。
【請求項４】
請求項１または２に記載のＤＮＡまたはその相補鎖を含有する組換えベクター。
【請求項５】
ｐＣＭＶ−Ｔａｇ４−ｒＬｉｂ（ＦＥＲＭ  ＢＰ−７８１１号）。
【請求項６】
請求項４に記載の組換えベクターまたは請求項５に記載のプラスミドを用いて形質転換させた形質転換体。
【請求項７】
請求項６に記載の形質転換体を培養する工程を含む、請求項３に記載のポリペプチドの製造方法。
【請求項８】
請求項３に記載のポリペプチドを免疫学的に認識する抗体。
【請求項９】
細胞・細胞間の接着調節機能および／または細胞・細胞外マトリックス間の接着調節機能を有する化合物の同定方法であって、請求項１または２に記載のＤＮＡまたはその相補鎖、請求項３に記載のポリペプチド、請求項４に記載の組換えベクターまたは請求項５に記載のプラスミド、請求項６に記載の形質転換体および請求項８に記載の抗体のうち、少なくともいずれか１つを用いることを特徴とする方法。
【請求項１０】
請求項１または２に記載のＤＮＡまたはその相補鎖、請求項３に記載のポリペプチド、請求項４に記載の組換えベクターまたは請求項５に記載のプラスミド、請求項６に記載の形質転換体および請求項８に記載の抗体のうち、少なくともいずれか１つからなる医薬。
【請求項１１】
請求項１または２に記載のＤＮＡまたはその相補鎖、請求項３に記載のポリペプチド、請求項４に記載の組換えベクターまたは請求項５に記載のプラスミド、請求項６に記載の形質転換体および請求項８に記載の抗体のうち、少なくともいずれか１つを含有する医薬組成物。
【請求項１２】
請求項１または２に記載のＤＮＡまたはその相補鎖、請求項３に記載のポリペプチド、請求項４に記載の組換えベクターまたは請求項５に記載のプラスミド、請求項６に記載の形質転換体および請求項８に記載の抗体のうち、少なくともいずれか１つを含有する細胞・細胞間および／または細胞・細胞外マトリックス間の接着が関与する疾病の防止／治療に用いる医薬組成物。
【請求項１３】
請求項１または２に記載のＤＮＡまたはその相補鎖、請求項３に記載のポリペプチド、請求項４に記載の組換えベクターまたは請求項５に記載のプラスミド、請求項６に記載の形質転換体および請求項８に記載の抗体のうち、少なくともいずれか１つを含有する神経細胞死の防止／治療剤。
【請求項１４】
請求項１または２に記載のＤＮＡまたはその相補鎖、請求項３に記載のポリペプチド、請求項４に記載の組換えベクターまたは請求項５に記載のプラスミド、請求項６に記載の形質転換体および請求項８に記載の抗体のうち、少なくともいずれか１つを含有するアルツハイマー病の防止／治療剤。
【請求項１５】
請求項１または２に記載のＤＮＡまたはその相補鎖、請求項３に記載のポリペプチド、請求項４に記載の組換えベクターまたは請求項５に記載のプラスミド、請求項６に記載の形質転換体および請求項８に記載の抗体のうち、少なくともいずれか１つを用いて、試料中の請求項１または２に記載のＤＮＡもしくはその相補鎖および／または請求項３に記載のポリペプチドの存在量を測定する工程を含む細胞・細胞間、細胞・細胞外マトリックス間の接着が関与する疾病の検査方法。
【請求項１６】
請求項１または２に記載のＤＮＡまたはその相補鎖、請求項３に記載のポリペプチド、請求項４に記載の組換えベクターまたは請求項５に記載のプラスミド、請求項６に記載の形質転換体および請求項８に記載の抗体のうち、少なくともいずれか１つを用いて、試料中の請求項１または２に記載のＤＮＡもしくはその相補鎖および／または請求項３に記載のポリペプチドの存在量を測定する工程を含む神経細胞死の検査方法。
【請求項１７】
請求項１または２に記載のＤＮＡまたはその相補鎖、請求項３に記載のポリペプチド、請求項４に記載の組換えベクターまたは請求項５に記載のプラスミド、請求項６に記載の形質転換体および請求項８に記載の抗体のうち、少なくともいずれか１つを用いて、試料中の請求項１または２に記載のＤＮＡもしくはその相補鎖および／または請求項３に記載のポリペプチドの存在量を測定する工程を含むアルツハイマー病の検査方法。
【請求項１８】
請求項１または２に記載のＤＮＡまたはその相補鎖、請求項３に記載のポリペプチド、請求項４に記載の組換えベクターまたは請求項５に記載のプラスミド、請求項６に記載の形質転換体および請求項８に記載の抗体のうち、少なくともいずれか１つを含有する試薬キット。
【請求項１９】
請求項１または２に記載のＤＮＡまたはその相補鎖、請求項３に記載のポリペプチド、請求項４に記載の組換えベクターまたは請求項５に記載のプラスミド、請求項６に記載の形質転換体および請求項８に記載の抗体のうち、少なくともいずれか１つを含有する細胞・細胞間、細胞・細胞外マトリックス間の接着が関与する疾病の検査用キット。
【請求項２０】
請求項１または２に記載のＤＮＡまたはその相補鎖、請求項３に記載のポリペプチド、請求項４に記載の組換えベクターまたは請求項５に記載のプラスミド、請求項６に記載の形質転換体および請求項８に記載の抗体のうち、少なくともいずれか１つを含有する神経細胞死の検査用キット。
【請求項２１】
請求項１または２に記載のＤＮＡまたはその相補鎖、請求項３に記載のポリペプチド、請求項４に記載の組換えベクターまたは請求項５に記載のプラスミド、請求項６に記載の形質転換体および請求項８に記載の抗体のうち、少なくともいずれか１つを含有するアルツハイマー病の検査用キット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
すなわち、本発明は、
（１）下記の群より選ばれるＤＮＡまたは相補鎖；
i）配列表の配列番号１に記載のＤＮＡ配列で示されるＤＮＡ、
ii）配列表の配列番号２に記載のＤＮＡ配列で示されるＤＮＡ、
iii）前記i）またはii）のＤＮＡと少なくとも約７０％のＤＮＡ配列上の相同性を有し、かつ細胞・細胞間の接着調節機能および／または細胞・細胞外マトリックス間の接着調節機能を有するペプチドをコードするＤＮＡ、
および
iv）前記i）からiii）のＤＮＡのＤＮＡ配列において、１ないし数個のＤＮＡの欠失、置換、付加などの変異を有し、かつ細胞・細胞間の接着調節機能および／または細胞・細胞外マトリックス間の接着調節機能を有するペプチドをコードするＤＮＡ。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３７】
Ｌｉｂは常発現性遺伝子ではなく誘導遺伝子であり、サイトカイン類でも発現上昇を示したことから、新規炎症関連因子である。ＴＮＦ−α、ＩＬ−１βはアルツハイマー病脳に検出されており（ＭｃＧｅｅｒ，Ｐ．  Ｌ．，  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．  Ｒｅｖ．２１，ｐｐ１９５−２１８（１９９５））、またＩＦＮ−γもアルツハイマー病悪化への関与が指摘されている（Ｂｌａｓｋｏ，Ｉ．  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ．１１６，ｐｐ１−４（２００１），Ｉｉ，Ｍ．  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｒａｉｎ  Ｒｅｓ．７２０，ｐｐ９３−１００（１９９６））。アルツハイマー病その他の神経疾患で認められるように、グリア細胞は炎症時に患部へ移動し、それを取り囲み突起を内部に伸長している。Ｌｉｂは、定常時には低い発現に抑えられているが、炎症性刺激に対して発現が誘導され（図６）、グリアに見られる細胞・細胞間、もしくは細胞・細胞外マトリックス間の動的変化に関わる分子であると考えられる。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００４３】
（ポリペプチド）
本発明のポリペプチドは配列表の配列番号１または２のＤＮＡ配列で示されるＤＮＡおよび配列表の配列番号１または２に記載のＤＮＡ配列で示されるＤＮＡを含有するＤＮＡによりコードされるポリペプチドである。さらに配列表の配列番号１または２に記載のＤＮＡ配列で示されるＤＮＡと少なくとも約７０％のＤＮＡ配列上の相同性を有するＤＮＡによりコードされ、かつ細胞・細胞間の接着調節機能および／または細胞・細胞外マトリックス間の接着調節機能を有するポリペプチドである。また、上記ＤＮＡまたはその相補鎖とストリンジェントな条件下でハイブリダイゼーションするＤＮＡによりコードされ、かつ細胞・細胞間および／または細胞・細胞外マトリックス間の接着を調節する機能を有するポリペプチドである。さらに上記ＤＮＡのＤＮＡ配列において１ないし数個のＤＮＡの欠失、置換、付加などの変異を有するＤＮＡによりコードされ、かつ細胞・細胞間および／または細胞・細胞外マトリックス間の接着を調節する機能を有するポリペプチドである。また、これらのポリペプチドは、その構成アミノ基もしくはカルボキシル基などを修飾するなど、機能の著しい変更を伴わない程度に改変が可能である。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７２】
ヒトＬｉｂはクロモソーム３ｑ２９領域に存在し、この遺伝子がｍＲＮＡとして転写されていることは本発明者らがはじめて示した。ヒトオーソログの組織分布を調べるため、ヒトの各組織から抽出したｐｏｌｙ  Ａ（＋）ＲＮＡのノーザンブロット（ＣＬＯＮＴＥＣＨ）に、ヒトＬｉｂのｃＤＮＡを３２Ｐ標識後ハイブリダイゼーションさせた。胎盤で強い発現が認められ、脳では検出レベルを下回った（図４）。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７５】
（本発明の遺伝子の細胞内分布解析）
ラットＬｉｂ遺伝子のＣ末端にＤｓ−Ｒｅｄを融合したプラスミドをラットアストロサイトーマＣ６に一過的に発現させたのち、位相差顕微鏡下で、Ｌｉｂの細胞内分布を観察したところ、融合蛋白は細胞表面に発現していることが確認できた。
（プラスミドｐＣＭＶ−Ｔａｇ４−ｒＬｉｂの作製）
Ａβ処理ラットアストロサイト由来ｃＤＮＡライブラリーよりスクリーニングして得たｒａｔ  Ｌｉｂ  ｃＤＮＡをテンプレートとし、ｒａｔ  ＬｉｂのＯＲＦ部位をＯＲＦの両端に制限酵素サイト（５’側ＢｇｌＩＩ、３’側ＢａｍＨＩ）を付加した形でＰＣＲを用いて増幅した。