【手続補正書】
【提出日】令和3年4月22日(2021.4.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞表面結合グリピカン３（ＧＰＣ３）を特異的に認識する抗体部分を含む、単離された抗ＧＰＣ３コンストラクトであって、
（Ｉ）抗体部分が、高い結合親和性で細胞表面結合ＧＰＣ３を特異的に認識し、低い結合親和性で可溶性ＧＰＣ３に結合する、かつ／又は
（ＩＩ）抗ＧＰＣ３コンストラクトと細胞表面結合ＧＰＣ３との間の結合に競合する可溶性ＧＰＣ３のＩＣ５０が、約１μｇ／ｍＬ〜約１００μｇ／ｍＬである、単離された抗ＧＰＣ３コンストラクト。
【請求項２】
（Ｉ）抗体部分が、配列番号４６０〜４６４のいずれか１つのアミノ酸配列を含むヒトＧＰＣ３内のエピトープを特異的に認識する、又は
抗体部分が、ヘパリン硫酸側鎖を欠いているＧＰＣ３のＣ末端断片内のエピトープを特異的に認識する、
（ＩＩ）抗体部分が、ＧＣ３３と競合的に同じ又は実質的に同じＧＰＣ３エピトープに特異的に結合しない、かつ／又は
（ＩＩＩ）ＧＰＣ３が癌細胞の表面上で発現する、請求項１に記載の単離された抗ＧＰＣ３コンストラクト。
【請求項３】
細胞表面結合ＧＰＣ３を特異的に認識する抗体部分を含む、単離された抗ＧＰＣ３コンストラクトであって、抗体部分が、
Ｉ．（ａ）ｉ）配列番号３のアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域（ＨＣ−ＣＤＲ）１、配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０５のアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、及びｉｉ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域（ＬＣ−ＣＤＲ）１、配列番号２０７のアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ２、配列番号２５８のアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、及び／又は
（ｂ）ｉ）配列番号３０９のアミノ酸配列、又は配列番号３０９に少なくとも約８０％の配列同一性を有するその変異型を含むＶＨ、及びｉｉ）配列番号３６０のアミノ酸配列、又は配列番号３６０に少なくとも約８０％の配列同一性を有するその変異型を含むＶＬ、
又は
ＩＩ．（ａ）ｉ）配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域（ＨＣ−ＣＤＲ）１、配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２３のアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、及びｉｉ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域（ＬＣ−ＣＤＲ）１、配列番号２２５のアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ２、及び配列番号２７６のアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、及び／又は
（ｂ）ｉ）配列番号３２７のアミノ酸配列、又は配列番号３２７に少なくとも約８０％の配列同一性を有するその変異型を含むＶＨ、及びｉｉ）配列番号３７８のアミノ酸配列、又は配列番号３７８に少なくとも約８０％の配列同一性を有するその変異型を含むＶＬ、
又は
ＩＩＩ．（ａ）ｉ）配列番号２４のアミノ酸配列を含む重鎖相補性決定領域（ＨＣ−ＣＤＲ）１、配列番号７５のアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ２、及び配列番号１２６のアミノ酸配列を含むＨＣ−ＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、及びｉｉ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含む軽鎖相補性決定領域（ＬＣ−ＣＤＲ）１、配列番号２２８のアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ２、及び配列番号２７９のアミノ酸配列を含むＬＣ−ＣＤＲ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）、及び／又は
（ｂ）ｉ）配列番号３３０のアミノ酸配列、又は配列番号３３０に少なくとも約８０％の配列同一性を有するその変異型を含むＶＨ、及びｉｉ）配列番号３８１のアミノ酸配列、又は配列番号３８１に少なくとも約８０％の配列同一性を有するその変異型を含むＶＬ、を含む、単離された抗ＧＰＣ３コンストラクト。
【請求項４】
ＧＰＣ３を特異的に認識する抗体部分を含む単離された抗ＧＰＣ３コンストラクトであって、抗体部分が、
（ａ）ｉ）配列番号１〜３１のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは最大約５個のアミノ酸置換を含むその変異型を含む重鎖相補性決定領域（ＨＣ−ＣＤＲ）１、配列番号５２〜８２のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは最大約５個のアミノ酸置換を含むその変異型を含むＨＣ−ＣＤＲ２、及び配列番号１０３〜１３３のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは最大約５個のアミノ酸置換を含むその変異型を含むＨＣ−ＣＤＲ３を含む重鎖可変ドメイン（ＶＨ）と、
ｉｉ）配列番号１５４〜１８４のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは最大約５個のアミノ酸置換を含むその変異型を含む軽鎖相補性決定領域（ＬＣ−ＣＤＲ）１、配列番号２０５〜２３５のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは最大約３個のアミノ酸置換を含むその変異型を含むＬＣ−ＣＤＲ２、及び配列番号２５６〜２８６のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは最大約５個のアミノ酸置換を含むその変異型を含むＬＣ−ＣＤＲ３を含む軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）とを含むか、
又は
（ｂ）ｉ）配列番号３２〜５１のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは最大約５個のアミノ酸置換を含むその変異型を含むＨＣ−ＣＤＲ１、配列番号８３〜１０２のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは最大約５個のアミノ酸置換を含むその変異型を含むＨＣ−ＣＤＲ２、及び配列番号１３４〜１５３のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは最大約５個のアミノ酸置換を含むその変異型を含むＨＣ−ＣＤＲ３を含むＶＨと、
ｉｉ）配列番号１８５〜２０４のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは最大約５個のアミノ酸置換を含むその変異型を含むＬＣ−ＣＤＲ１、配列番号２３６〜２５５のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは最大約３個のアミノ酸置換を含むその変異型を含むＬＣ−ＣＤＲ２、及び配列番号２８７〜３０６のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは最大約５個のアミノ酸置換を含むその変異型を含むＬＣ−ＣＤＲ３を含むＶＬとを含み、
任意選択的に、抗体部分が、
（ａ）ｉ）配列番号３０７〜３３７のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは配列番号３０７〜３３７のいずれか１つに対して少なくとも約９５％の配列同一性を有するその変異型を含むＶＨと、ｉｉ）配列番号３５８〜３８８のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは配列番号３５８〜３８８のいずれか１つに対して少なくとも約９５％の配列同一性を有するその変異型を含むＶＬとを含むか、
又は
（ｂ）ｉ）配列番号３３８〜３５７のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは配列番号３３８〜３５７のいずれか１つに対して少なくとも約９５％の配列同一性を有するその変異型を含むＶＨと、ｉｉ）配列番号３８９〜４０８のいずれか１つのアミノ酸配列若しくは配列番号３８９〜４０８のいずれか１つに対して少なくとも約９５％の配列同一性を有するその変異型を含むＶＬとを含む、単離された抗ＧＰＣ３コンストラクト。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の単離された抗ＧＰＣ３コンストラクトと競合的にＧＰＣ３に特異的に結合する抗体部分を含む、単離された抗ＧＰＣ３コンストラクト。
【請求項６】
（ｉ）ＧＰＣ３を特異的に認識する抗体部分が、完全長抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である、かつ／又は
（ｉｉ）ＧＰＣ３を特異的に認識する抗体部分が、場合によりリンカーを介してＦｃ断片に融合している、請求項１〜５のいずれか一項に記載の単離された抗ＧＰＣ３コンストラクト。
【請求項７】
単離された抗ＧＰＣ３コンストラクトが、多重特異性であり、
任意選択的に、単離された抗ＧＰＣ３コンストラクトが、ペプチドリンカーによって連結された２つのｓｃＦｖを含むタンデムｓｃＦｖである、かつ／又は
単離された抗ＧＰＣ３コンストラクトが、第２の抗原を特異的に認識する第２の抗体部分を更に含み、
更に任意選択的に、第２の抗原が、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ２８、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＣＤ２７、ＣＤ４０Ｌ、及びＨＶＥＭからなる群から選択されるようなＴ細胞の表面上における抗原であり、例えば、第２の抗原がＣＤ３εである、
請求項１〜６のいずれか一項に記載の単離された抗ＧＰＣ３コンストラクト。
【請求項８】
単離された抗ＧＰＣ３コンストラクトが、
（ａ）抗体部分を含む細胞外ドメインと、
（ｂ）膜貫通ドメインと、
（ｃ）細胞内シグナル伝達ドメインと、
を含むキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）であり、
任意選択的に、細胞内シグナル伝達ドメインが、ＣＤ３ζの細胞内シグナル伝達配列及びＣＤ２８の細胞内シグナル伝達配列を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の単離された抗ＧＰＣ３コンストラクト。
【請求項９】
単離された抗ＧＰＣ３コンストラクトが、
（ａ）抗体部分を含む細胞外ドメインと、
（ｂ）第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ−ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）及び第２のＴＣＲ−ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含むＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）と、を含み、当該ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ会合シグナル伝達分子の動員を促進する、キメラ抗体−Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）コンストラクト（ｃａＴＣＲ）である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の単離された抗ＧＰＣ３コンストラクト。
【請求項１０】
単離された抗ＧＰＣ３コンストラクトが、
（ａ）抗体部分を含むリガンド結合モジュール、
（ｂ）膜貫通モジュール、及び
（ｃ）共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュール
を含むキメラ共刺激受容体（ＣＳＲ）である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の単離された抗ＧＰＣ３コンストラクト。
【請求項１１】
単離された抗ＧＰＣ３コンストラクトが、抗体部分及びエフェクタ分子を含む免疫複合体であり、
任意選択的に、
（ｉ）エフェクタ分子が、薬物、毒素、放射性同位体、タンパク質、ペプチド、及び核酸からなる群から選択される治療薬である、又は
（ｉｉ）エフェクタ分子が標識である、
請求項１〜６のいずれか一項に記載の単離された抗ＧＰＣ３コンストラクト。
【請求項１２】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の単離された抗ＧＰＣ３コンストラクトのポリペプチド構成要素をコードしている、単離された核酸、又は単離された核酸を含むベクター。
【請求項１３】
請求項１〜１１のいずれか一項に記載の抗ＧＰＣ３コンストラクト、請求項１２に記載の単離された核酸、又は請求項１２に記載のベクターを含む、単離された宿主細胞。
【請求項１４】
請求項７〜１１のいずれか一項に記載の単離された抗ＧＰＣ３コンストラクトを発現する、エフェクタ細胞であって、
任意選択的に、
（ｉ）エフェクタ細胞がＴ細胞である、
（ｉｉ）抗ＧＰＣ３コンストラクトの発現が、エフェクタ細胞の活性化によって誘導される、かつ／又は
（ｉｉｉ）エフェクタ細胞が、キメラ抗体−Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）コンストラクト（ｃａＴＣＲ）を更に含む、エフェクタ細胞。
【請求項１５】
エフェクタ細胞が、キメラ抗体−Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）コンストラクト（ｃａＴＣＲ）を更に含む、請求項１０に記載の抗ＧＰＣ３コンストラクトを発現する、エフェクタ細胞。
【請求項１６】
ｃａＴＣＲが抗ＧＰＣ３  ｃａＴＣＲである、請求項１５に記載のエフェクタ細胞。
【請求項１７】
抗ＧＰＣ３  ｃａＴＣＲが、
（ａ）細胞表面結合ＧＰＣ３を特異的に認識する抗体部分を含む細胞外ドメインであって、
（ｉ）抗体部分が、高い結合親和性で細胞表面結合ＧＰＣ３を特異的に認識し、低い結合親和性で可溶性ＧＰＣ３に結合する、かつ／又は
（ｉｉ）抗ＧＰＣ３コンストラクトと細胞表面結合ＧＰＣ３との間の結合に競合する可溶性ＧＰＣ３のＩＣ５０が、約１μｇ／ｍＬ〜約１００μｇ／ｍＬである、細胞外ドメイン、及び
（ｂ）第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ−ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）及び第２のＴＣＲ−ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含むＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）であって、ＴＣＲＭが少なくとも１つのＴＣＲ会合シグナル伝達分子の動員を促進する、ＴＣＲＭ、
を含む、請求項１６に記載のエフェクタ細胞。
【請求項１８】
ＧＰＣ３陽性疾患を有する個体を治療する方法における使用のための、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の単離された抗ＧＰＣ３コンストラクト、請求項１２に記載の単離された核酸又はベクター、又は請求項１４〜１７のいずれか一項に記載のエフェクタ細胞を含む医薬組成物であって、
方法が、前記医薬組成物の有効量を個体に投与することを含み、
任意選択的に、ＧＰＣ３陽性疾患が、ＨＣＣ、黒色腫、肺扁平上皮細胞癌、卵巣癌、卵黄嚢腫瘍、絨毛癌、神経芽細胞腫、肝芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、精巣非セミノーマ胚細胞腫瘍、胃癌、及び脂肪肉腫からなる群から選択されるような癌である、医薬組成物。
【請求項１９】
ＧＰＣ３陽性疾患を有する個体を診断する方法における使用のための、請求項１１に記載の単離された抗ＧＰＣ３コンストラクトであって、
診断が、
ａ）有効量の抗ＧＰＣ３コンストラクトを個体に投与することと、
ｂ）個体における標識のレベルを決定することであって、閾値レベルを上回る標識のレベルが、個体がＧＰＣ３陽性疾患を有することを示す、決定することと、を含み、
任意選択的に、ＧＰＣ３陽性疾患が、ＨＣＣ、黒色腫、肺扁平上皮細胞癌、卵巣癌、卵黄嚢腫瘍、絨毛癌、神経芽細胞腫、肝芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、精巣非セミノーマ胚細胞腫瘍、胃癌、及び脂肪肉腫からなる群から選択されるような癌である、
単離された抗ＧＰＣ３コンストラクト。
【請求項２０】
ＧＰＣ３陽性疾患を有する個体を診断するインビトロの方法であって、
ａ）個体に由来するサンプルを、請求項１１に記載の抗ＧＰＣ３コンストラクトと接触させることと、
ｂ）サンプル中の抗ＧＰＣ３コンストラクトに結合している細胞の数を決定することであって、閾値レベルを上回る、抗ＧＰＣ３コンストラクトに結合している細胞の数の値が、個体がＧＰＣ３陽性疾患を有することを示す、決定することと、を含み、
任意選択的に、ＧＰＣ３陽性疾患が、ＨＣＣ、黒色腫、肺扁平上皮細胞癌、卵巣癌、卵黄嚢腫瘍、絨毛癌、神経芽細胞腫、肝芽細胞腫、ウィルムス腫瘍、精巣非セミノーマ胚細胞腫瘍、胃癌、及び脂肪肉腫からなる群から選択されるような癌である、方法。
【請求項２１】
抗ＧＰＣ３コンストラクトを生成する方法であって、
（ａ）抗ＧＰＣ３コンストラクトを発現するのに有効な条件下で、請求項１２に記載の単離された核酸又はベクター、又は請求項１３に記載の単離された宿主細胞を含む宿主細胞を培養することと、
（ｂ）発現した抗ＧＰＣ３コンストラクトを前記宿主細胞から得ることと、を含む、方
法。