【手続補正書】
【提出日】令和3年3月25日(2021.3.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（ａ）生体適合性ポリマーマトリクス；ならびに
（ｂ）ｉ）細胞培養培地およびｉｉ）前記細胞培養培地において培養された１個または複数の細胞によって合成され前記細胞から分泌された１種または複数の薬剤を含む馴化細胞培地
を含む、生体適合性組成物。
【請求項２】
前記細胞が、線維芽細胞、皮膚線維芽細胞、新生児皮膚線維芽細胞、骨芽細胞、線維芽細胞および骨芽細胞、線維芽細胞および骨芽細胞の共培養物、ならびに／あるいは活発に増殖している細胞である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
前記細胞培養培地が、基礎細胞培養培地を含み、かつウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、Ｌ−グルタミン、ヒト上皮増殖因子（ＥＧＦ）、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）およびアスコルビン酸からなる群より選択される１種または複数の補足物質をさらに含み、必要に応じて、前記基礎細胞培養培地が、ダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）である、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
前記補足物質が、組換え増殖因子であり、必要に応じて、前記組換え増殖因子が、ヒト組換え増殖因子である、請求項１、２および３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
前記細胞培養培地において培養された１個または複数の細胞によって合成され前記細胞から分泌された前記１種または複数の薬剤が、
ａ）増殖因子を含む；
ｂ）血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、ケラチノサイト増殖因子（ＫＧＦ）、トランスフォーミング増殖因子アルファ（ＴＧＦα）、トランスフォーミング増殖因子ベータ（ＴＧＦβ）、トランスフォーミング増殖因子ベータ−１（ＴＧＦβｌ）、トランスフォーミング増殖因子ベータ−２（ＴＧＦβ２）、インスリン様増殖因子（ＩＧＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）、インスリン、ヒドロコルチゾン、ウロガストロン、血小板由来創傷治癒因子（ＰＤＷＨＦ）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、血小板因子ＩＶ（ＰＦ  ＩＶ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）、コロニー刺激因子（ＣＳＦ）、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）、オステオカルシン、オステオポンチン、インターロイキン−１、インターロイキン−６、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、インターロイキン−１１および増殖分化因子（ＧＤＦ）、またはこれらの組み合わせからなる群より選択される；ならびに／あるいは
ｃ）培養前の前記細胞培養培地における濃度と比較して、約少なくとも２倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約１１倍、約１２倍、約１３倍、約１４倍、約１５倍、約１６倍、約１７倍、約１８倍、約１９倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約４０倍、約５０倍、約６０倍、約７０倍、約８０倍、約９０倍および約１００倍からなる群より選択される増加した濃度で前記馴化培地に存在する、
請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
前記細胞が、前記細胞培養培地において少なくとも２４時間、必要に応じて、少なくとも４８時間または少なくとも７２時間培養される、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項７】
前記生体適合性組成物が、細胞を含まない、請求項１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項８】
前記馴化細胞培地が
ａ）濃縮され、必要に応じて、前記馴化細胞培地が、タンジェンシャルフロー濾過によって濃縮される；および／または
ｂ）前記生体適合性組成物の体積の約５０％で存在する、
請求項１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項９】
前記ポリマーマトリクスが、アガロースであり、必要に応じて、前記アガロースが、
ａ）海藻に由来する；
ｂ）低融点アガロースまたは超低融点アガロースである；および／または
ｃ）約０．８％〜３．０％重量対体積（ｗ：ｖ）、約０．９％ｗ：ｖ、約１．０％ｗ：ｖ、約１．１％ｗ：ｖ、約１．２％ｗ：ｖ、約１．３％ｗ：ｖ、約１．４％ｗ：ｖ、約１．５％ｗ：ｖ、約１．６％ｗ：ｖ、約１．７％ｗ：ｖ、約１．８％ｗ：ｖ、約１．９％ｗ：ｖ、約２．０％ｗ：ｖ、約２．１％ｗ：ｖ、約２．２％ｗ：ｖ、約２．３％ｗ：ｖ、約２．４％ｗ：ｖ、約２．５％ｗ：ｖ、約２．６％ｗ：ｖ、約２．７％ｗ：ｖ、約２．８％ｗ：ｖ、約２．９％ｗ：ｖおよび約３．０％ｗ：ｖからなる群より選択される、
請求項１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項１０】
生体適合性組成物を産生するための方法であって、
（ａ）細胞培養培地において細胞を培養するステップと、
（ｂ）前記細胞培養培地における前記細胞によって合成され前記細胞から分泌された１種または複数の薬剤で馴化された前記細胞培養培地から培養された前記細胞を分離して、馴化細胞培地を産生するステップと、
（ｃ）前記馴化細胞培地を生体適合性ポリマーマトリクスと混合するステップであって、前記細胞が、線維芽細胞、線維芽細胞、新生児皮膚線維芽細胞、骨芽細胞、線維芽細胞および骨芽細胞、線維芽細胞および骨芽細胞の共培養物、ならびに／あるいは活発に増殖している細胞と
を含む、方法。
【請求項１１】
前記細胞培養培地が、基礎細胞培養培地を含み、かつウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、Ｌ−グルタミン、ヒト上皮増殖因子（ＥＧＦ）、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）およびアスコルビン酸からなる群より選択される１種または複数の補足物質をさらに含み、必要に応じて、前記基礎細胞培養培地が、ダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記補足物質が、組換え増殖因子であり、必要に応じて、前記組換え増殖因子が、ヒト組換え増殖因子である、請求項１０または１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記細胞培養培地において培養された１個または複数の細胞によって合成され前記細胞から分泌された前記１種または複数の薬剤が、
ａ）増殖因子を含む；
ｂ）血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、ケラチノサイト増殖因子（ＫＧＦ）、トランスフォーミング増殖因子アルファ（ＴＧＦα）、トランスフォーミング増殖因子ベータ（ＴＧＦβ）、トランスフォーミング増殖因子ベータ−１（ＴＧＦβｌ）、トランスフォーミング増殖因子ベータ−２（ＴＧＦβ２）、インスリン様増殖因子（ＩＧＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）、インスリン、ヒドロコルチゾン、ウロガストロン、血小板由来創傷治癒因子（ＰＤＷＨＦ）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、血小板因子ＩＶ（ＰＦ  ＩＶ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）、コロニー刺激因子（ＣＳＦ）、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）、オステオカルシン、オステオポンチン、インターロイキン−１、インターロイキン−６、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、インターロイキン−１１および増殖分化因子（ＧＤＦ）、またはこれらの組み合わせからなる群より選択される；ならびに／あるいは
ｃ）培養前の前記細胞培養培地における濃度と比較して、約少なくとも２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約１１倍、約１２倍、約１３倍、約１４倍、約１５倍、約１６倍、約１７倍、約１８倍、約１９倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約４０倍、約５０倍、約６０倍、約７０倍、約８０倍、約９０倍および約１００倍からなる群より選択される増加した濃度で前記馴化培地に存在する、
請求項１０〜１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１４】
前記細胞が、前記細胞培養培地において少なくとも２４時間、必要に応じて、少なくとも４８時間または少なくとも７２時間培養される、請求項１０〜１３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１５】
前記生体適合性組成物が、細胞を含まない、請求項１０〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
前記馴化細胞培地が、
ａ）前記馴化細胞培地を生体適合性ポリマーマトリクスと混合する前に濃縮され、必要に応じて、前記馴化細胞培地が、タンジェンシャルフロー濾過によって濃縮される；ならびに／あるいは
ｂ）前記生体適合性組成物の体積の約５０％で存在する、
請求項１０〜１５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１７】
前記ポリマーマトリクスが、アガロースであり、前記アガロースが、
ａ）海藻に由来する；
ｂ）低融点アガロースまたは超低融点アガロースである；ならびに／あるいは
ｃ）約０．８％〜３．０％重量対体積（ｗ：ｖ）、約０．９％ｗ：ｖ、約１．０％ｗ：ｖ、約１．１％ｗ：ｖ、約１．２％ｗ：ｖ、約１．３％ｗ：ｖ、約１．４％ｗ：ｖ、約１．５％ｗ：ｖ、約１．６％ｗ：ｖ、約１．７％ｗ：ｖ、約１．８％ｗ：ｖ、約１．９％ｗ：ｖ、約２．０％ｗ：ｖ、約２．１％ｗ：ｖ、約２．２％ｗ：ｖ、約２．３％ｗ：ｖ、約２．４％ｗ：ｖ、約２．５％ｗ：ｖ、約２．６％ｗ：ｖ、約２．７％ｗ：ｖ、約２．８％ｗ：ｖ、約２．９％ｗ：ｖおよび約３．０％ｗ：ｖからなる群より選択される、
請求項１０〜１６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１８】
ａ）医薬調製物の調製における、ｂ）骨成長および／または骨吸収阻害を必要とする部位を処置するための、あるいはｃ）ｉ）歯肉および／または骨成長、ならびに／あるいはｉｉ）歯肉浸食および／または骨吸収阻害を必要とする歯周部位を処置するための、請求項１〜８のいずれか一項に記載の生体適合性組成物の使用であって、必要に応じて、前記医薬調製物が、外用に適用される歯周処置として適合されている、使用。
【請求項１９】
被験体において骨を成長させるまたは骨吸収を阻害するための、骨成長および／または骨吸収阻害を必要とする部位に投与するために適合された、請求項１〜８のいずれか一項に記載の生体適合性組成物であって、必要に応じて、骨成長および／または骨吸収阻害の部位における新生骨成長の完全骨結合、垂直骨結合および／または水平骨結合が増強され、さらに必要に応じて、
ａ）前記被験体が、骨折、骨欠乏、転移性骨疾患、変形性関節症、骨粗鬆症および／または溶骨性骨疾患を有する；
ｂ）骨質量が、維持もしくは増加される、骨密度が、維持もしくは増加される、歯肉組織が、維持もしくは増加される、あるいはこれらの任意の組合せである；
ｃ）前記生体適合性組成物が、ａ）歯肉および／または骨成長を促進する、および／またはｂ）歯肉浸食および／または骨吸収を阻害する、有効量の治療剤の使用のために適合されており、必要に応じて、前記生体適合性組成物および前記治療剤が、逐次または同時使用のために適合されており、ならびに／あるいは前記治療剤が、骨形成因子、吸収抑制剤、骨原性因子、軟骨由来形態形成タンパク質、成長ホルモン、エストロゲン、ビスホスホネート、スタチン、分化因子、鎮痛薬、麻酔薬、抗菌剤、抗細菌剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤、抗生物質、抗炎症剤、抗酸化剤、消毒剤、免疫賦活剤およびこれらの組み合わせからなる群より選択される；
ｄ）前記生体適合性組成物が、前記部位への外用投与のために適合されており、必要に応じて、前記外用投与が、創傷被覆、外科的閉鎖、ステープリング、接着ストリップ、生体接着剤または歯肉皮弁からなる群より選択される；ならびに／あるいは
ｅ）前記被検体が、ヒト、ネコ、イヌ、ウマ、齧歯類、ならびに／あるいは歯周のｉ）歯肉および／または骨成長および／またはｉｉ）歯肉浸食および／または骨吸収阻害を必要とする障害の動物モデルである、
生体適合性組成物。
【請求項２０】
被験体におけるａ）歯肉および／または骨成長および／またはｂ）歯肉浸食および／または骨吸収阻害を必要とする歯周部位に投与するために適合された、請求項１〜８のいずれか一項に記載の生体適合性組成物であって、必要に応じて、前記歯周部位における新生骨成長の完全骨結合、垂直骨結合および／または水平骨結合が増強され、さらに必要に応じて、
ａ）前記被験体が、歯周疾患、歯肉炎症、齲歯、歯肉疾患、歯肉炎および／または歯周炎を有する；
ｂ）骨質量が、維持もしくは増加される、骨密度が、維持もしくは増加される、歯肉組織が、維持もしくは増加される、あるいはこれらの任意の組合せである；
ｃ）前記生体適合性組成物が、ａ）歯肉および／または骨成長を促進する、および／またはｂ）歯肉浸食および／または骨吸収を阻害する、有効量の治療剤の使用のために適合されており、必要に応じて、前記生体適合性組成物および前記治療剤が、逐次または同時使用のために適合されており、ならびに／あるいは前記治療剤が、骨形成因子、吸収抑制剤、骨原性因子、軟骨由来形態形成タンパク質、成長ホルモン、エストロゲン、ビスホスホネート、スタチン、分化因子、鎮痛薬、麻酔薬、抗菌剤、抗細菌剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤、抗生物質、抗炎症剤、抗酸化剤、消毒剤、免疫賦活剤およびこれらの組み合わせからなる群より選択される；
ｄ）前記生体適合性組成物が、前記部位への外用投与のために適合されており、必要に応じて、前記外用投与が、創傷被覆、外科的閉鎖、ステープリング、接着ストリップ、生体接着剤または歯肉皮弁からなる群より選択される；ならびに／あるいは
ｅ）前記被検体が、ヒト、ネコ、イヌ、ウマ、齧歯類、ならびに／あるいは歯周のｉ）歯肉および／または骨成長および／またはｉｉ）歯肉浸食および／または骨吸収阻害を必要とする障害の動物モデルである、
生体適合性組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
上述の通り、多数の実施形態が、本明細書に記載されている本発明のいずれかの態様のために考慮される。例えば、一実施形態では、被験体は、歯周疾患、歯肉炎症、齲歯、歯肉疾患、歯肉炎および／または歯周炎を有する。別の実施形態では、骨質量は、維持もしくは増加される、骨密度は、維持もしくは増加される、歯肉組織は、維持もしくは増加される、またはこれらのいずれかの組み合わせが生じる。また別の実施形態では、ａ）歯肉および／または骨成長を促進する、および／またはｂ）歯肉浸食および／または骨吸収を阻害する、有効量の治療剤が被験体に投与される。さらに別の実施形態では、生体適合性組成物の投与および治療剤の投与は、逐次または同時である。別の実施形態では、治療剤は、骨形成因子、吸収抑制剤、骨原性因子、軟骨由来形態形成タンパク質、成長ホルモン、エストロゲン、ビスホスホネート、スタチン、分化因子、鎮痛薬、麻酔薬、抗菌剤、抗細菌剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤、抗生物質、抗炎症剤、抗酸化剤、消毒剤、免疫賦活剤およびこれらの組み合わせからなる群より選択される。また別の実施形態では、生体適合性組成物は、部位に外用に投与される。さらに別の実施形態では、外用投与は、創傷被覆、外科的閉鎖、ステープリング、接着ストリップ、生体接着剤または歯肉皮弁からなる群より選択される。別の実施形態では、被験体は、ヒト、ネコ、イヌ、ウマまたは齧歯類等の哺乳動物である。また別の実施形態では、哺乳動物は、歯周のａ）歯肉および／または骨成長、および／またはｂ）歯肉浸食および／または骨吸収阻害を必要とする障害の動物モデルである。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
（ａ）生体適合性ポリマーマトリクス；ならびに
（ｂ）ｉ）細胞培養培地およびｉｉ）前記細胞培養培地において培養された１個または複数の細胞によって合成され前記細胞から分泌された１種または複数の薬剤を含む馴化細胞培地
を含む、生体適合性組成物。
（項目２）
前記細胞が、線維芽細胞である、項目１に記載の組成物。
（項目３）
前記線維芽細胞が、皮膚線維芽細胞である、項目２に記載の組成物。
（項目４）
前記皮膚線維芽細胞が、新生児皮膚線維芽細胞である、項目３に記載の組成物。
（項目５）
前記細胞が、骨芽細胞である、項目１に記載の組成物。
（項目６）
前記細胞が、線維芽細胞および骨芽細胞である、項目１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目７）
前記細胞が、線維芽細胞および骨芽細胞の共培養物である、項目１〜６のいずれか一項に記載の組成物。
（項目８）
前記細胞が、活発に増殖している細胞である、項目１〜７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目９）
前記細胞培養培地が、基礎細胞培養培地を含み、かつウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、Ｌ−グルタミン、ヒト上皮増殖因子（ＥＧＦ）、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）およびアスコルビン酸からなる群より選択される１種または複数の補足物質をさらに含む、項目１〜８のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１０）
前記基礎細胞培養培地が、ダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）である、項目９に記載の組成物。
（項目１１）
前記補足物質が、組換え増殖因子である、項目９または１０に記載の組成物。
（項目１２）
前記組換え増殖因子が、ヒト組換え増殖因子である、項目１１に記載の組成物。
（項目１３）
前記１種または複数の薬剤が、増殖因子を含む、項目１〜１２のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１４）
前記１種または複数の薬剤が、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、ケラチノサイト増殖因子（ＫＧＦ）、トランスフォーミング増殖因子アルファ（ＴＧＦα）、トランスフォーミング増殖因子ベータ（ＴＧＦβ）、トランスフォーミング増殖因子ベータ−１（ＴＧＦβｌ）、トランスフォーミング増殖因子ベータ−２（ＴＧＦβ２）、インスリン様増殖因子（ＩＧＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）、インスリン、ヒドロコルチゾン、ウロガストロン、血小板由来創傷治癒因子（ＰＤＷＨＦ）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、血小板因子ＩＶ（ＰＦ  ＩＶ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）、コロニー刺激因子（ＣＳＦ）、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）、オステオカルシン、オステオポンチン、インターロイキン−１、インターロイキン−６、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、インターロイキン−１１および増殖分化因子（ＧＤＦ）、またはこれらの組み合わせからなる群より選択される、項目１〜１３のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１５）
前記細胞培養培地において培養された１個または複数の細胞によって合成され前記細胞から分泌された前記１種または複数の薬剤が、培養前の前記細胞培養培地における濃度と比較して、約少なくとも２倍、約２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約１１倍、約１２倍、約１３倍、約１４倍、約１５倍、約１６倍、約１７倍、約１８倍、約１９倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約４０倍、約５０倍、約６０倍、約７０倍、約８０倍、約９０倍および約１００倍からなる群より選択される増加した濃度で前記馴化培地に存在する、項目１〜１４のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１６）
前記細胞が、前記細胞培養培地において少なくとも２４時間、必要に応じて、少なくとも４８時間または少なくとも７２時間培養される、項目１〜１５のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１７）
前記生体適合性組成物が、細胞を含まない、項目１〜１６のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１８）
前記馴化細胞培地が濃縮され、必要に応じて、前記馴化細胞培地が、タンジェンシャルフロー濾過によって濃縮される、項目１〜１７のいずれか一項に記載の組成物。
（項目１９）
前記ポリマーマトリクスが、アガロースである、項目１〜１８のいずれか一項に記載の組成物。
（項目２０）
前記アガロースが、海藻に由来する、項目１９に記載の組成物。
（項目２１）
前記アガロースが、低融点アガロースまたは超低融点アガロースである、項目１９または２０に記載の組成物。
（項目２２）
前記アガロースが、約０．８％〜３．０％重量対体積（ｗ：ｖ）、約０．９％ｗ：ｖ、約１．０％ｗ：ｖ、約１．１％ｗ：ｖ、約１．２％ｗ：ｖ、約１．３％ｗ：ｖ、約１．４％ｗ：ｖ、約１．５％ｗ：ｖ、約１．６％ｗ：ｖ、約１．７％ｗ：ｖ、約１．８％ｗ：ｖ、約１．９％ｗ：ｖ、約２．０％ｗ：ｖ、約２．１％ｗ：ｖ、約２．２％ｗ：ｖ、約２．３％ｗ：ｖ、約２．４％ｗ：ｖ、約２．５％ｗ：ｖ、約２．６％ｗ：ｖ、約２．７％ｗ：ｖ、約２．８％ｗ：ｖ、約２．９％ｗ：ｖおよび約３．０％ｗ：ｖからなる群より選択される、項目１９〜２１のいずれか一項に記載の組成物。
（項目２３）
前記馴化細胞培地が、前記生体適合性組成物の体積の約５０％である、項目１〜２２のいずれか一項に記載の組成物。
（項目２４）
生体適合性組成物を産生するための方法であって、
（ａ）細胞培養培地において細胞を培養するステップと、
（ｂ）前記細胞培養培地における前記細胞によって合成され前記細胞から分泌された１種または複数の薬剤で馴化された前記細胞培養培地から培養された前記細胞を分離して、馴化細胞培地を産生するステップと、
（ｃ）前記馴化細胞培地を生体適合性ポリマーマトリクスと混合するステップと
を含む、方法。
（項目２５）
前記細胞が、線維芽細胞である、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
前記線維芽細胞が、皮膚線維芽細胞である、項目２５に記載の方法。
（項目２７）
前記皮膚線維芽細胞が、新生児皮膚線維芽細胞である、項目２６に記載の方法。
（項目２８）
前記細胞が、骨芽細胞である、項目２５に記載の方法。
（項目２９）
前記細胞が、線維芽細胞および骨芽細胞である、項目２４〜２８のいずれか一項に記載の方法。
（項目３０）
前記細胞が、線維芽細胞および骨芽細胞の共培養物である、項目２４〜２９のいずれか一項に記載の方法。
（項目３１）
前記細胞が、活発に増殖している細胞である、項目２４〜３０のいずれか一項に記載の方法。
（項目３２）
前記細胞培養培地が、基礎細胞培養培地を含み、かつウシ胎仔血清（ＦＢＳ）、Ｌ−グルタミン、ヒト上皮増殖因子（ＥＧＦ）、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）およびアスコルビン酸からなる群より選択される１種または複数の補足物質をさらに含む、項目２４〜３１のいずれか一項に記載の方法。
（項目３３）
前記基礎細胞培養培地が、ダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）である、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
前記補足物質が、組換え増殖因子である、項目３２または３３に記載の方法。
（項目３５）
前記組換え増殖因子が、ヒト組換え増殖因子である、項目３４に記載の方法。
（項目３６）
前記１種または複数の薬剤が、増殖因子を含む、項目２４〜３５のいずれか一項に記載の方法。
（項目３７）
前記１種または複数の薬剤が、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、塩基性線維芽細胞増殖因子（ｂＦＧＦ）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、ケラチノサイト増殖因子（ＫＧＦ）、トランスフォーミング増殖因子アルファ（ＴＧＦα）、トランスフォーミング増殖因子ベータ（ＴＧＦβ）、トランスフォーミング増殖因子ベータ−１（ＴＧＦβｌ）、トランスフォーミング増殖因子ベータ−２（ＴＧＦβ２）、インスリン様増殖因子（ＩＧＦ）、神経成長因子（ＮＧＦ）、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）、インスリン、ヒドロコルチゾン、ウロガストロン、血小板由来創傷治癒因子（ＰＤＷＨＦ）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、血小板因子ＩＶ（ＰＦ  ＩＶ）、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（ＧＣＳＦ）、コロニー刺激因子（ＣＳＦ）、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）、オステオカルシン、オステオポンチン、インターロイキン−１、インターロイキン−６、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、インターロイキン−１１および増殖分化因子（ＧＤＦ）、またはこれらの組み合わせからなる群より選択される、項目２４〜３６のいずれか一項に記載の方法。
（項目３８）
前記細胞培養培地において培養された１個または複数の細胞によって合成され前記細胞から分泌された前記１種または複数の薬剤が、培養前の前記細胞培養培地における濃度と比較して、約少なくとも２倍、約３倍、約４倍、約５倍、約６倍、約７倍、約８倍、約９倍、約１０倍、約１１倍、約１２倍、約１３倍、約１４倍、約１５倍、約１６倍、約１７倍、約１８倍、約１９倍、約２０倍、約２５倍、約３０倍、約４０倍、約５０倍、約６０倍、約７０倍、約８０倍、約９０倍および約１００倍からなる群より選択される増加した濃度で前記馴化培地に存在する、項目２４〜３７のいずれか一項に記載の方法。
（項目３９）
前記細胞が、前記細胞培養培地において少なくとも２４時間、必要に応じて、少なくとも４８時間または少なくとも７２時間培養される、項目２４〜３８のいずれか一項に記載の方法。
（項目４０）
前記生体適合性組成物が、細胞を含まない、項目２４〜３９のいずれか一項に記載の方法。
（項目４１）
前記馴化細胞培地が、前記馴化細胞培地を生体適合性ポリマーマトリクスと混合する前に濃縮され、必要に応じて、前記馴化細胞培地が、タンジェンシャルフロー濾過によって濃縮される、項目２４〜４０のいずれか一項に記載の方法。
（項目４２）
前記ポリマーマトリクスが、アガロースである、項目２４〜４１のいずれか一項に記載の方法。
（項目４３）
前記アガロースが、海藻に由来する、項目４２に記載の方法。
（項目４４）
前記アガロースが、低融点アガロースまたは超低融点アガロースである、項目４２または４３に記載の方法。
（項目４５）
前記アガロースが、約０．８％〜３．０％重量対体積（ｗ：ｖ）、約０．９％ｗ：ｖ、約１．０％ｗ：ｖ、約１．１％ｗ：ｖ、約１．２％ｗ：ｖ、約１．３％ｗ：ｖ、約１．４％ｗ：ｖ、約１．５％ｗ：ｖ、約１．６％ｗ：ｖ、約１．７％ｗ：ｖ、約１．８％ｗ：ｖ、約１．９％ｗ：ｖ、約２．０％ｗ：ｖ、約２．１％ｗ：ｖ、約２．２％ｗ：ｖ、約２．３％ｗ：ｖ、約２．４％ｗ：ｖ、約２．５％ｗ：ｖ、約２．６％ｗ：ｖ、約２．７％ｗ：ｖ、約２．８％ｗ：ｖ、約２．９％ｗ：ｖおよび約３．０％ｗ：ｖからなる群より選択される、項目４２〜４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４６）
前記馴化細胞培地が、前記生体適合性組成物の体積の約５０％で存在する、項目２４〜４５のいずれか一項に記載の方法。
（項目４７）
医薬調製物の調製における項目１〜２３のいずれか一項に記載の生体適合性組成物の使用であって、必要に応じて、前記医薬調製物が、外用に適用される歯周処置である、使用。
（項目４８）
被験体において骨を成長させるまたは骨吸収を阻害する方法であって、前記被験体における骨成長および／または骨吸収阻害を必要とする部位に、有効量の項目１〜２３のいずれか一項に記載の生体適合性組成物を投与するステップを含み、必要に応じて、前記方法は、骨成長および／または骨吸収阻害の部位における新生骨成長の完全骨結合、垂直骨結合および／または水平骨結合を増強する、方法。
（項目４９）
前記被験体が、骨折、骨欠乏、転移性骨疾患、変形性関節症、骨粗鬆症および／または溶骨性骨疾患を有する、項目４８に記載の方法。
（項目５０）
被験体における歯周状態を処置する方法であって、前記被験体におけるａ）歯肉および／または骨成長および／またはｂ）歯肉浸食および／または骨吸収阻害を必要とする歯周部位に、有効量の項目１〜２３のいずれか一項に記載の生体適合性組成物を投与するステップを含み、必要に応じて、前記方法は、前記歯周部位における新生骨成長の完全骨結合、垂直骨結合および／または水平骨結合を増強する、方法。
（項目５１）
前記被験体が、歯周疾患、歯肉炎症、齲歯、歯肉疾患、歯肉炎および／または歯周炎を有する、項目５０に記載の方法。
（項目５２）
骨質量が、維持もしくは増加される、骨密度が、維持もしくは増加される、歯肉組織が、維持もしくは増加される、またはこれらのいずれかの組み合わせが生じる、項目４８〜５１のいずれか一項に記載の方法。
（項目５３）
前記被験体に、ａ）歯肉および／または骨成長を促進する、および／またはｂ）歯肉浸食および／または骨吸収を阻害する、有効量の治療剤を投与するステップをさらに含む、項目４８〜５２のいずれか一項に記載の方法。
（項目５４）
前記生体適合性組成物の投与および前記治療剤の投与が、逐次または同時である、項目５３に記載の方法。
（項目５５）
前記治療剤が、骨形成因子、吸収抑制剤、骨原性因子、軟骨由来形態形成タンパク質、成長ホルモン、エストロゲン、ビスホスホネート、スタチン、分化因子、鎮痛薬、麻酔薬、抗菌剤、抗細菌剤、抗ウイルス剤、抗真菌剤、抗生物質、抗炎症剤、抗酸化剤、消毒剤、免疫賦活剤およびこれらの組み合わせからなる群より選択される、項目５３または５４に記載の方法。
（項目５６）
前記生体適合性組成物が、前記部位に外用に投与される、項目４８〜５５のいずれか一項に記載の方法。
（項目５７）
前記外用投与が、創傷被覆、外科的閉鎖、ステープリング、接着ストリップ、生体接着剤または歯肉皮弁からなる群より選択される、項目５６に記載の方法。
（項目５８）
前記被験体が、哺乳動物である、項目４８〜５７のいずれか一項に記載の方法。
（項目５９）
前記哺乳動物が、ヒト、ネコ、イヌ、ウマまたは齧歯類である、項目５８に記載の方法。
（項目６０）
前記哺乳動物が、歯周のａ）歯肉および／または骨成長および／またはｂ）歯肉浸食および／または骨吸収阻害を必要とする障害の動物モデルである、項目５８に記載の方法。