【手続補正書】
【提出日】令和3年1月15日(2021.1.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＬＡＧ−３に結合することができるリポカリンムテインであって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８〜１８、２０〜２８、５７〜７０、および８５〜９５からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも８５％の配列同一性を有する、リポカリンムテイン。
【請求項２】
（ｉ）Ｋｄで測定して約２５０ｎＭ以下、約５０ｎＭ以下、約３ｎＭ以下、約０．１ｎＭ以下、もしくは約０．０５ｎＭ以下である親和性でＬＡＧ−３に結合することができる、
（ｉｉ）約３２０ｎＭ以下、約１０ｎＭ以下、もしくは約０．２ｎＭ以下のＥＣ５０値でＬＡＧ−３に結合する、
（ｉｉｉ）ヒトＬＡＧ−３およびカニクイザルＬＡＧ−３の両方と交差反応する、または
（ｉｖ）主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩに対するヒトＬＡＧ−３の結合を妨害することができる、
請求項１に記載のリポカリンムテイン。
【請求項３】
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）と比較して、以下の変異アミノ酸残基：
2020505948.tif 000001
のうちの少なくとも１２個を含む、請求項１または２に記載のリポカリンムテイン。
【請求項４】
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）と比較して、以下の変異アミノ酸残基：
2020505948.tif 000002
のうちの少なくとも２０個を含む、請求項１または２に記載のリポカリンムテイン。
【請求項５】
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）と比較して、以下の変異アミノ酸残基：
2020505948.tif 000003
のうちの少なくとも２１個を含む、請求項１または２に記載のリポカリンムテイン。
【請求項６】
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）と比較して、以下の変異アミノ酸残基：
2020505948.tif 000004
と、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）と比較して、以下の変異アミノ酸残基：
2020505948.tif 000005
のうちの１つまたは複数とを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載のリポカリンムテイン。
【請求項７】
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）と比較して、以下の変異アミノ酸残基：
2020505948.tif 000006
と、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）と比較して、以下の変異アミノ酸残基：
2020505948.tif 000007
のうちの１つまたは複数とを含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載のリポカリンムテイン。
【請求項８】
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）と比較して、以下の変異アミノ酸残基のセット：
(a) Ala 5 → Thr; Glu 8 → Gln; Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Asp; Glu 34 → Val; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Lys 65 → Glu; Glu 69 → Gly; Val 85 → Ala; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; Cys 153 → Ser; およびSer 154 → Ala;
(b) Ala 5 → Thr; Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Asp; Glu 34 → Val; Gly 46 → Asp; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Lys 65 → Glu; Val 85 → Ala; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; Ser 150 → Gly; およびCys 153 → Ser;
(c) Asp 7 → Gly; Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Asp; Glu 34 → Val; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Val 85 → Asp; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; Arg 148 → Trp; Thr 152 → Pro; およびCys 153 → Ser;
(d) Ala 5 → Thr; Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Asp; Glu 34 → Val; Val 53 → Ala; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Lys 65 → Glu; Ala 79 → Thr; Tyr 97 → His; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; およびCys 153 → Ser;
(e) Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Asp; Glu 34 → Val; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Glu 63 → Asp; Val 85 → Asp; Arg 90 → Ser; His 96 → Asn; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; Leu 124 → Gln; およびCys 153 → Ser;
(f) Thr 16 → Met; Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Asp; Glu 34 → Val; Leu 44 → His; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Lys 65 → Glu; Ile 89 → Ser; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; およびCys 153 → Ser;
(g) Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Asp; Glu 34 → Val; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Glu 63 → Asp; Lys 65 → Glu; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; Gln 149 → Leu; およびCys 153 → Ser;
(h) Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Asp; Glu 34 → Val; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Lys 65 → Glu; Lys 70 → Arg; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; およびCys 153 → Ser;
(i) Ala 5 → Thr; Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Asp; Glu 34 → Val; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Lys 65 → Glu; Asp 80 → Gly; Ile 89 → Asn; Ile 98 → Val; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; およびCys 153 → Ser;
(j) Ile 10 → Phe; Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Asp; Glu 34 → Val; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Lys 65 → Glu; Glu 73 → Ala; Ile 89 → Asn; Val 93 → Glu; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; およびCys 153 → Ser;
(k) Ala 5 → Thr; Glu 8 → Gln; Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Asp; Glu 34 → Val; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Cys 61 → Trp; Lys 65 → Glu; Glu 69 → Gly; Val 85 → Ala; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; Cys 153 → Ser; およびSer 154 → Ala;
(l) Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Arg 26 → Asp; Phe 28 → Asp; Asn 32 → Thr; Lys 52 → Arg; Met 55 → Val; Ser 58 → Asp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; His 84 → Tyr; Ala 86 → Asp; Cys 101 → Phe; Leu 105 → Gly; Lys 108 → Thr; Val 110 → Gly; Gly 112 → Met; Lys 114 → Ala; およびLys 121 → Thr;
(m) Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Arg 26 → Glu; Phe 28 → Asp; Met 31 → Leu; Asn 32 → Thr; Lys 52 → Arg; Met 55 → Val; Ser 58 → Asp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; His 84 → Tyr; Ala 86 → Asp; Cys 101 → Phe; Leu 105 → Gly; His 106 → Gln; Lys 108 → Thr; Val 110 → Gly; Gly 112 → Met; Lys 114 → Ala; およびLys 121 → Thr;
(n) Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Arg 26 → Glu; Phe 28 → Asp; Asn 32 → Thr; Lys 52 → Arg; Met 55 → Val; Ser 58 → Asp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; His 84 → Tyr; Ala 86 → Asp; Cys 101 → Phe; Leu 105 → Gly; His 106 → Glu; Lys 108 → Thr; Val 110 → Gly; Gly 112 → Val; Lys 114 → Ala; およびLys 121 → Thr;
(o) Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Arg 26 → Asp; Phe 28 → Asp; Asn 32 → Thr; Lys 52 → Arg; Met 55 → Val; Ser 58 → Asp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; His 84 → Tyr; Ala 86 → Asp; Cys 101 → Phe; Leu 105 → Gly; His 106 → Gln; Lys 108 → Thr; Val 110 → Gly; Gly 112 → Leu; Lys 114 → Ala; およびLys 121 → Thr;
(p) Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Arg 26 → Ser; Phe 28 → Asp; Asn 32 → Thr; Lys 52 → Arg; Met 55 → Val; Ser 58 → Asp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; His 84 → Tyr; Ala 86 → Asp; Cys 101 → Phe; Leu 105 → Gly; His 106 → Gln; Lys 108 → Thr; Val 110 → Gly; Gly 112 → Met; Lys 114 → Ala; およびLys 121 → Thr;
(q) Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Arg 26 → Ala; Phe 28 → Asp; Asn 32 → Thr; Lys 52 → Arg; Met 55 → Val; Ser 58 → Asp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; His 84 → Tyr; Ala 86 → Asp; Cys 101 → Phe; Leu 105 → Gly; His 106 → Lys; Lys 108 → Thr; Val 110 → Gly; Gly 112 → Met; Lys 114 → Ala; およびLys 121 → Thr;
(r) Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Phe 28 → Asp; Asn 32 → Thr; Lys 52 → Arg; Met 55 → Val; Ser 58 → Asp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; Ala 86 → Asp; Cys 101 → Phe; Leu 105 → Gly; His 106 → Gln; Lys 108 → Thr; Val 110 → Asn; Gly 112 → Met; Val 113 → Ala; Lys 114 → Ala; およびLys 121 → Thr;
(s) Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Arg 26 → Gly; Phe 28 → Asp; Met 31 → Leu; Asn 32 → Thr; Lys 52 → Arg; Met 55 → Val; Ser 58 → Asp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; His 84 → Tyr; Ala 86 → Asp; Cys 101 → Phe; Leu 105 → Gly; His 106 → Pro; Lys 108 → Thr; Val 110 → Gly; Gly 112 → Met; Lys 114 → Ala; およびLys 121 → Thr;
(t) Ser 14 → Pro; Asp 25 → Ser; Arg 26 → Asp; Phe 28 → Asp; Asn 32 → Thr; Lys 52 → Arg; Met 55 → Val; Ser 58 → Asp; Ala 66 → Asn; Ala 79 → Glu; His 84 → Leu; Ala 86 → Asp; Cys 101 → Phe; Leu 105 → Gly; His 106 → Gln; Lys 108 → Thr; Val 110 → Gly; Gly 112 → Met; Val 113 → Leu; Lys 114 → Ala; およびLys 121 → Thr;または
(u) Arg 26 → Ser; Glu 27 → Asp; Phe 28 → Cys; Pro 29 → Phe; Glu 30 → Trp; Met 31 → Ile; Asn 32 → Asp; Leu 33 → Asp; Glu 34 → Val; Leu 56 → Asp; Ser 58 → Phe; Arg 60 → Phe; Glu 63 → Asp; Lys 65 → Glu; Cys 101 → Ser; Leu 105 → Cys; His 106 → Ala; Lys 108 → Tyr; Arg 111 → Pro; Lys 114 → Trp; およびGln 149 → Leu
のうちの１つを含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載のリポカリンムテイン。
【請求項９】
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１）と比較して、以下の変異アミノ酸残基のセット：
2020505948.tif 000008
のうちの１つを含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載のリポカリンムテイン。
【請求項１０】
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８〜１８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０〜２８、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７〜７０、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５〜９５からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７．５％または少なくとも９９％の配列同一性を有する、請求項１〜９のいずれか一項に記載のリポカリンムテイン。
【請求項１１】
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８〜１８、２０〜２８、５７〜７０、および８５〜９５からなる群から選択されるアミノ酸配列またはこれらのフラグメントもしくは変異体を含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載のリポカリンムテイン。
【請求項１２】
（ｉ）有機分子、酵素標識、放射性標識、着色標識、蛍光標識、発色性標識、発光性標識、ハプテン、ジゴキシゲニン、ビオチン、細胞分裂阻害剤、毒素、金属錯体、金属、およびコロイド金からなる群から選択される化合物にコンジュゲートされている、
（ｉｉ）そのＮ末端および／もしくはそのＣ末端において、タンパク質、タンパク質ドメイン、もしくはペプチドである融合パートナーに融合されている、
（ｉｉｉ）そのＮ末端および／もしくはそのＣ末端において、抗体もしくは抗体フラグメントである融合パートナーに融合されている、または
（ｉｖ）前記ムテインの血清半減期を延ばす化合物にコンジュゲートされており、好ましくは前記血清半減期を延ばす化合物が、ポリアルキレングリコール分子、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）分子もしくはその活性化誘導体、ヒドロキシエチルデンプン、免疫グロブリンのＦｃ部分、免疫グロブリンのＣＨ３ドメイン、免疫グロブリンのＣＨ４ドメイン、アルブミン結合ペプチド、およびアルブミン結合タンパク質からなる群から選択される、
請求項１〜１１のいずれか一項に記載のリポカリンムテイン。
【請求項１３】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載のリポカリンムテインをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
【請求項１４】
請求項１３に記載の核酸分子を含有する宿主細胞。
【請求項１５】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載のリポカリンムテインを生成する方法であって、前記リポカリンムテインが、前記リポカリンムテインをコードする核酸から出発して生成される、方法。
【請求項１６】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の１種類または複数種類のリポカリンムテインを含む、
（ｉ）対象におけるＬＡＧ−３との結合剤、
（ｉｉ）対象における免疫応答刺激剤、
（ｉｉｉ）対象におけるＴリンパ球の増殖誘発剤、
（ｉｖ）対象における主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩに対するヒトＬＡＧ−３の結合の妨害剤、または
（ｖ）ＭＨＣクラスＩＩを発現する細胞に対するヒトＬＡＧ−３の結合についての競合剤。
【請求項１７】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載の１種類または複数種類のリポカリンムテインを含む、
がん、感染性疾患、または自己免疫疾患の治療剤。
【請求項１８】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載のリポカリンムテインと、薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項１９】
治療薬に連結された請求項１〜１２のいずれか一項に記載のリポカリンムテイン、またはそのフラグメントを含む、イムノコンジュゲートまたは融合タンパク質。
【請求項２０】
生物学的試料中のＬＡＧ−３への結合／ＬＡＧ−３の検出のための請求項１〜１２のいずれか一項に記載のリポカリンムテインの使用であって、
前記試料と前記リポカリンムテインとを、前記リポカリンムテインとＬＡＧ−３との間の複合体の形成を可能にする条件下で接触させること
を含む、使用。
【請求項２１】
請求項１〜１２のいずれか一項に記載のリポカリンムテインを含む、診断または分析キット。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３５】
「試料」は、任意の対象から採取された生物学的試料と定義される。生物学的試料には、血液、血清、尿、糞便、精液、または組織が包含されるが、それらに限定されるわけではない。
[本発明1001]
Ｋｄで測定して約250ｎＭ以下である親和性でＬＡＧ−3に結合することができるリポカリンムテイン。
[本発明1002]
Ｋｄで測定して約50ｎＭ以下である親和性でＬＡＧ−3に結合することができる、本発明1001のリポカリンムテイン。
[本発明1003]
Ｋｄで測定して約3ｎＭ以下である親和性でＬＡＧ−3に結合することができる、本発明1001のリポカリンムテイン。
[本発明1004]
Ｋｄで測定して約0．1ｎＭ以下である親和性でＬＡＧ−3に結合することができる、本発明1001のリポカリンムテイン。
[本発明1005]
Ｋｄで測定して約0．05ｎＭ以下である親和性でＬＡＧ−3に結合することができる、本発明1001のリポカリンムテイン。
[本発明1006]
前記Ｋｄ値が、実施例4に本質的に記載されるように表面プラズモン共鳴分析によって決定される、本発明1001〜1005のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1007]
成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1）の配列位置5、7〜8、10、14、16、25〜34、44、46、52〜53、55〜56、58、60〜61、63、65〜66、69〜70、73、79〜80、84〜86、89〜90、93、96〜98、101、105〜106、108、110〜114、121、124、148〜150、および152〜154における少なくとも2つ以上の変異アミノ酸残基を含む、本発明1001〜1007のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1008]
成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1）の配列位置14、25〜26、28、31〜32、52、55、58、66、79、84、86、101、105〜106、108、110、112〜114、および121における少なくとも1つの変異アミノ酸残基を含む、本発明1001〜1006のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1009]
成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1）の配列位置5、7〜8、10、16、26〜34、44、46、53、56、58、60〜61、63、65〜66、69〜70、73、79〜80、85、89〜90、93、96〜98、101、105〜106、108、110〜111、114、121、124、148〜150、152〜154、および156〜157における少なくとも1つまたは複数の変異アミノ酸残基をさらに含む、本発明1001〜1007のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1010]
成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1）の配列位置5、7〜8、10、16、26〜34、44、46、53、56、58、60〜61、63、65、69〜70、73、79〜80、85、89〜90、93、96〜98、101、105〜106、108、111、114、124、148〜150、152〜154、および156〜157における少なくとも1つまたは複数の変異アミノ酸残基をさらに含む、本発明1001〜1007のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1011]
成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1）の配列位置5、7〜8、10、16、44、46、63、65、69〜70、73、80、84、89〜90、93、96〜98、113、124、148〜150、152、および154における少なくとも1つまたは複数の変異アミノ酸残基を含む、本発明1001〜1010のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1012]
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1）と比較して、以下の変異アミノ酸残基：
2020505948.tif 000009
のうちの2つ以上を含む、本発明1007のリポカリンムテイン。
[本発明1013]
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1）と比較して、以下の変異アミノ酸残基：
2020505948.tif 000010
のうちの少なくとも1つを含む、本発明1007のリポカリンムテイン。
[本発明1014]
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1）と比較して、以下の変異アミノ酸残基：
2020505948.tif 000011
のうちの少なくとも1つを含む、本発明1007のリポカリンムテイン。
[本発明1015]
約320ｎＭ以下のＥＣ50値でＬＡＧ−3に結合する、本発明1001〜1014のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1016]
約10ｎＭ以下のＥＣ50値でＬＡＧ−3に結合する、本発明1015のリポカリンムテイン。
[本発明1017]
約0．2ｎＭ以下のＥＣ50値でＬＡＧ−3に結合する、本発明1015のリポカリンムテイン。
[本発明1018]
前記ＥＣ50値が、実施例5に本質的に記載されるように蛍光活性化細胞選別によって測定される、本発明1015〜1017のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1019]
ヒトＬＡＧ−3およびカニクイザルＬＡＧ−3の両方と交差反応する、本発明1001〜1018のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1020]
主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩに対するヒトＬＡＧ−3の結合を妨害することができる、本発明1001〜1019のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1021]
主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩに対するヒトＬＡＧ−3の結合を妨害する能力が、実施例6に本質的に記載されるように蛍光活性化細胞選別によって分析される、本発明1020のリポカリンムテイン。
[本発明1022]
前記ムテインのアミノ酸配列が、以下のアミノ酸突然変異：
2020505948.tif 000012
と、以下のアミノ酸突然変異：
2020505948.tif 000013
のうちの1つまたは複数とを含む、本発明1001〜1021のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1023]
前記ムテインのアミノ酸配列が、以下のアミノ酸突然変異：
2020505948.tif 000014
と、以下のアミノ酸突然変異：
2020505948.tif 000015
のうちの1つまたは複数とを含む、本発明1001〜1021のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1024]
前記ムテインのアミノ酸配列が、以下のアミノ酸突然変異のセット：
2020505948.tif 000016
2020505948.tif 000017
2020505948.tif 000018
2020505948.tif 000019
のうちの1つを含む、本発明1001〜1023のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1025]
前記ムテインのアミノ酸配列が、以下のアミノ酸突然変異のセット：
2020505948.tif 000020
のうちの1つを含む、本発明1001〜1023のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1026]
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1）の配列位置61および153におけるシステイン残基を含む、本発明1001〜1025のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1027]
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1）と比較して、以下の変異アミノ酸残基：
Ａｌａ5→ＴｈｒおよびＡｓｐ12→Ａｓｎ
のうちの1つまたは2つをさらに含む、本発明1001〜1025のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1028]
前記ムテインのアミノ酸配列が、成熟ヒト涙液リポカリンの直鎖ポリペプチド配列（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：1）と比較して、以下の変異アミノ酸残基：
2020505948.tif 000021
のうちの少なくとも1つをさらに含む、本発明1001〜1025のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1029]
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：8〜18、20〜28、57〜70、および85〜95またはこれらのフラグメントもしくは変異体からなる群から選択されるアミノ酸配列を含む、本発明1001〜1028のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1030]
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：8〜18、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：20〜28、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：57〜70、およびＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：85〜95からなる群から選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも97．5％または少なくとも99％の配列同一性を有する、本発明1001〜1028のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1031]
有機分子、酵素標識、放射性標識、着色標識、蛍光標識、発色性標識、発光性標識、ハプテン、ジゴキシゲニン、ビオチン、細胞分裂阻害剤、毒素、金属錯体、金属、およびコロイド金からなる群から選択される化合物にコンジュゲートされている、本発明1001〜1030のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1032]
そのＮ末端および／またはそのＣ末端において、タンパク質、タンパク質ドメイン、またはペプチドである融合パートナーに融合されている、本発明1001〜1031のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1033]
そのＮ末端および／またはそのＣ末端において、抗体または抗体フラグメントである融合パートナーに融合されている、本発明1001〜1032のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1034]
前記ムテインの血清半減期を延ばす化合物にコンジュゲートされている、本発明1001〜1033のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1035]
前記血清半減期を延ばす化合物が、ポリアルキレングリコール分子、ヒドロエチルデンプン、免疫グロブリンのＦｃ部分、免疫グロブリンのＣＨ3ドメイン、免疫グロブリンのＣＨ4ドメイン、アルブミン結合ペプチド、およびアルブミン結合タンパク質からなる群から選択される、本発明1034のリポカリンムテイン。
[本発明1036]
前記ポリアルキレングリコール分子がポリエチレン（ＰＥＧ）またはその活性化誘導体である、本発明1035のリポカリンムテイン。
[本発明1037]
本発明1001〜1036のいずれかのリポカリンムテインをコードするヌクレオチド配列を含む核酸分子。
[本発明1038]
本発明1037の核酸分子を含む発現ベクター。
[本発明1039]
本発明1038の核酸分子を含有する宿主細胞。
[本発明1040]
本発明1001〜1036のいずれかのリポカリンムテインを生成する方法であって、前記ムテインが、前記ムテインまたはそのフラグメントをコードする核酸から出発して、遺伝子操作法によって生成される、方法。
[本発明1041]
対象におけるＬＡＧ−3への結合方法であって、本発明1001〜1036のいずれかの1種類もしくは複数種類のリポカリンムテイン、またはこのようなムテインを含む1種類もしくは複数種類の組成物を適用することを含む、方法。
[本発明1042]
対象において免疫応答を刺激する方法であって、本発明1001〜1036のいずれかの1種類もしくは複数種類のリポカリンムテイン、またはこのようなムテインを含む1種類もしくは複数種類の組成物を適用することを含む、方法。
[本発明1043]
対象においてＴリンパ球の増殖を誘発する方法であって、本発明1001〜1036のいずれかの1種類もしくは複数種類のリポカリンムテイン、またはこのようなムテインを含む1種類もしくは複数種類の組成物を適用することを含む、方法。
[本発明1044]
対象において主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩに対するヒトＬＡＧ−3の結合を妨害する方法であって、本発明1001〜1036のいずれかの1種類もしくは複数種類のリポカリンムテイン、またはこのようなムテインを含む1種類もしくは複数種類の組成物を適用することを含む、方法。
[本発明1045]
主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩを発現する細胞に対するヒトＬＡＧ−3の結合と競合する、本発明1001〜1036のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1046]
実施例6に本質的に記載されるような蛍光活性化細胞選別アッセイで測定したときに、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩを発現する細胞に対するヒトＬＡＧ−3の結合と競合する、本発明1001〜1036のいずれかのリポカリンムテイン。
[本発明1047]
本発明1001〜1036のいずれかのリポカリンムテインと、薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
[本発明1048]
治療薬に連結された本発明1001〜1036のいずれかのリポカリンムテイン、またはそのフラグメントを含む、イムノコンジュゲートまたは融合タンパク質。
[本発明1049]
ＬＡＧ−3への結合／ＬＡＧ−3の検出のための本発明1001〜1036のいずれかのムテインの使用であって、
（ａ）前記ムテインと、ＬＡＧ−3を含有する疑いのある試験試料とを接触させ、それにより前記ムテインとＬＡＧ−3との間の複合体の形成を可能にすること；および
（ｂ）前記ムテインとＬＡＧ−3との間の複合体を適切なシグナルにより検出すること
を含む、使用。
[本発明1050]
本発明1001〜1036のいずれかのムテインを含む、診断または分析キット。
[本発明1051]
生物学的試料中のＬＡＧ−3の存在を検出する方法であって、前記試料と、本発明1001〜1036のいずれかのムテインとを、前記ムテインおよびＬＡＧ−3の複合体の形成を可能にする条件下で接触させることを含む、方法。
[本発明1052]
前記ムテインおよびＬＡＧ−3の複合体を検出することをさらに含む、本発明1051の方法。
[本発明1053]
前記生物学的試料がヒトから単離される、本発明1051または1052の方法。
[本発明1054]
前記試料が体液を含む、本発明1051〜1053のいずれかの方法。