【誤訳訂正書】
【提出日】令和3年2月24日(2021.2.24)
【誤訳訂正１】
【訂正対象書類名】特許請求の範囲
【訂正対象項目名】全文
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
基板及びマイクロ流体回路材料を含むエンクロージャであって、それぞれ前記エンクロージャ内に位置するフロー領域及び少なくとも１つの隔離ペンを画定する、エンクロージャと、
前記少なくとも１つの隔離ペン内に配置される少なくとも１つのインサイチュー生成捕捉構造であって、固化ポリマー網目構造を含む、少なくとも１つのインサイチュー生成捕捉構造と
を含み、
前記固化ポリマー網目構造が、１つ又は複数の官能化部位を含む、
マイクロ流体デバイス。
【請求項２】
前記固化ポリマー網目構造が、アッセイ試薬又はアッセイ検体を含む、請求項１に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項３】
前記少なくとも１つの隔離ペンが、分離領域及び接続領域を含み、前記接続領域が、前記フロー領域への基端開口部及び前記分離領域への先端開口部を有する、請求項１又は２に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項４】
前記少なくとも１つのインサイチュー生成捕捉構造が、前記隔離ペンの前記分離領域内に配置される、請求項３に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項５】
前記固化ポリマー網目構造が、前記固化ポリマー網目構造に非共有結合的に付着されるアッセイ試薬を備える、請求項２から４のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項６】
前記固化ポリマー網目構造が、タンパク質、核酸、有機分子、及び／又はサッカリドを含むアッセイ試薬を備える、請求項２から５のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項７】
前記アッセイ試薬が、抗体又は抗原を含む、請求項６に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項８】
２つ以上のインサイチュー生成捕捉構造が、前記少なくとも１つの隔離ペンに配置される、請求項１から７のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項９】
前記固化ポリマー網目構造が、光開始ポリマーを含む、請求項１から８のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項１０】
前記固化ポリマー網目構造が、合成ポリマー、修飾合成ポリマー、生体ポリマー、又はそれらの任意の組合せを含む、請求項１から９のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項１１】
前記基板が、前記エンクロージャ内で誘電泳動（ＤＥＰ）力を生成するように構成される、請求項１から１０のいずれか１項に記載のマイクロ流体デバイス。
【請求項１２】
少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造を含むマイクロ流体デバイスにおいて微小物体をアッセイする方法であって、
前記マイクロ流体デバイス内において、固化ポリマー網目構造を含む前記少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造に近位する領域に微小物体を配置することであって、前記固化ポリマー網目構造が、アッセイ試薬又はアッセイ検体を含む、配置することと、
前記アッセイ試薬又は前記アッセイ検体を前記微小物体又は前記微小物体の生物学的産物に接触させることと、
前記アッセイ試薬又は前記アッセイ検体と前記微小物体又は前記生物学的産物との相互作用を検出することと、
を含む方法。
【請求項１３】
前記マイクロ流体デバイスが、基板及びマイクロ流体回路材料を含むエンクロージャを含み、前記エンクロージャが、フロー領域及び少なくとも１つの隔離ペンを画定し、
前記少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造が、前記少なくとも１つの隔離ペン内に配置される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記少なくとも１つの隔離ペンが、分離領域及び接続領域を含み、
前記接続領域が、前記フロー領域への基端開口部及び前記分離領域への先端開口部を有し、
前記少なくとも第１の捕捉構造が、前記隔離ペンの前記分離領域内に配置される、
請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記アッセイ試薬又は前記アッセイ検体が、前記固化ポリマー網目構造に非共有結合的に付着される、請求項１２から１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記固化ポリマー網目構造が、アッセイ試薬を含み、前記アッセイ試薬が、タンパク質を含む、請求項１２から１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記アッセイ試薬が、抗原又は抗体を含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記生物学的産物が、タンパク質、オリゴヌクレオチド、有機分子、又はサッカリドを含む、請求項１２から１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記微小物体の前記生物学的産物が、抗体又は抗原である、請求項１２から１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記アッセイ試薬又は前記アッセイ検体を前記生物学的産物又は前記微小物体に接触させることが、非共有結合複合体を形成することを更に含む、請求項１２から１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記相互作用を検出することが、検出可能な標識を有する検出試薬を、前記少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造に近位する前記領域に導入することを更に含む、請求項１２から２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２２】
前記検出可能な標識が、前記アッセイ試薬又は前記アッセイ検体が前記生物学的産物又は前記微小物体と相互作用するとき、前記少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造へ集中されるように構成される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記検出するステップが、前記少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造からの蛍光信号を検出することを含む、請求項１２から２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記マイクロ流体デバイスが、前記少なくとも１つの隔離ペン内に配置される第２のインサイチュー生成捕捉構造を更に含み、前記第２のインサイチュー生成捕捉構造が、第２の固化ポリマー網目構造を含み、
前記第２の固化ポリマー網目構造が、第２のアッセイ試薬又は第２のアッセイ検体を含み、前記第１のインサイチュー生成捕捉構造及び前記第２のインサイチュー生成捕捉構造のそれぞれが、異なるアッセイ試薬又はアッセイ検体を含み、前記検出するステップが、前記微小物体の第１の生物学的産物及び前記微小物体の第２の生物学的産物を検出することを含み、前記第１の生物学的産物が、前記第２の生物学的産物と異なる、
請求項１３から２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
前記マイクロ流体デバイス内において、前記少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造に近位する前記領域に前記微小物体を配置することが、誘電泳動力を使用して前記微小物体を移動させることを含む、請求項１２から２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記誘電泳動力が、光学的に作動される、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
基板及びマイクロ流体回路材料を含むエンクロージャであって、フロー領域及び少なくとも１つの隔離ペンを画定する、エンクロージャと、
制御可能に活性化されて、固化ポリマー網目構造を形成することができる官能化プレポリマーと、
を含むマイクロ流体デバイスを含むキット。
【請求項２８】
少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造を含むマイクロ流体デバイスを準備する方法であって、
前記少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造が、固化ポリマー網目構造を含み、前記固化ポリマー網目構造が、１つ又は複数の官能化部位を含み、
前記マイクロ流体デバイスを提供することであって、前記マイクロ流体デバイスが、基板及びマイクロ流体回路材料を含むエンクロージャを含み、前記エンクロージャが、フロー領域及び前記フロー領域に流体的に接続される少なくとも１つの隔離ペンを画定する、提供することと、
第１の流動性官能化プレポリマーを前記フロー領域に導入することと、
前記少なくとも１つの隔離ペンの少なくとも１つの選択されたエリアにおいて前記第１の流動性官能化プレポリマーの固化を活性化し、それにより、その中で前記少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造を形成することと、
を含む方法。
【請求項２９】
第１の官能化アッセイ試薬又はアッセイ検体を前記少なくとも１つの隔離ペン内の前記少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造に導入することと、
前記第１の官能化アッセイ試薬又はアッセイ検体を前記少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造の前記固化ポリマー網目構造の前記官能化部位に会合させることと
を更に含む、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
第２以上のインサイチュー生成捕捉構造を前記少なくとも１つの隔離ペン内に導入することを更に含み、前記第２以上のインサイチュー生成捕捉構造を導入することが、
第２の流動性官能化プレポリマーを前記フロー領域に導入するステップと、
前記少なくとも１つの隔離ペンの少なくとも第２の選択されたエリアにおいて前記第２の流動性官能化プレポリマーの固化を活性化し、それにより、その中に前記第２以上のインサイチュー生成捕捉構造を形成するステップと、
第２の官能化アッセイ試薬又はアッセイ検体を導入するステップであって、前記第２以上の官能化アッセイ試薬又はアッセイ検体が、前記少なくとも１つの隔離ペン内の第２以上のインサイチュー生成捕捉構造上の第２以上の官能化部位と会合するステップと、
を含み、
前記第２の官能化アッセイ試薬又はアッセイ検体が、前記第１の官能化アッセイ試薬又はアッセイ検体から検出可能に区別可能である、
請求項２９に記載の方法。
【誤訳訂正２】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０００４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０００４】
別の態様では、少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造を有するマイクロ流体デバイスにおいて微小物体をアッセイする方法が提供され、本方法は、マイクロ流体デバイス内において、固化ポリマー網目構造を含む第１のインサイチュー生成捕捉構造に近位する領域に微小物体を配置することを含み、更に、固化ポリマー網目構造は、アッセイ試薬を含む。生体細胞等の微小物体は、検体を解放又は生産することが許容され、検体及びアッセイ試薬は、相互作用することが許容される。検体とアッセイ試薬との相互作用が検出される。
【誤訳訂正３】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０７】
官能化捕捉構造を使用して微小物体をアッセイする方法
少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造を有するマイクロ流体デバイスにおいて、微小物体（例えば、生体細胞若しくは胚）又は微小物体によって生成される生物学的産物をアッセイする方法が提供され、この方法は、マイクロ流体デバイス内において、第１のインサイチュー生成捕捉構造に近位する領域に微小物体を配置するステップであって、インサイチュー生成捕捉構造は、固化ポリマー網目構造を含み、更に、固化ポリマー網目構造は、アッセイ試薬又はアッセイ検体を含む、ステップと、アッセイ試薬又はアッセイ検体を微小物体又は微小物体の生物学的産物に接触させるステップと、アッセイ試薬又はアッセイ検体と微小物体又は生物学的産物との相互作用を検出するステップとを含む。様々な実施形態では、少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造を有するマイクロ流体デバイスにおいて、微小物体（例えば、生体細胞）をアッセイする方法が提供され、この方法は、マイクロ流体デバイス内において、インサイチュー生成捕捉構造に近位する領域に微小物体を配置するステップであって、インサイチュー生成捕捉構造は、固化ポリマー網目構造を含み、更に、固化ポリマー網目構造は、アッセイ検体を含む、ステップと、アッセイ検体を微小物体の生物学的産物に接触させるステップと、アッセイ検体と生物学的産物との相互作用を検出するステップとを含む。
【誤訳訂正４】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１０８
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１０８】
更に他の実施形態では、少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造を有するマイクロ流体デバイスにおいて、微小物体（例えば、生体細胞）をアッセイする別の方法が提供され、この方法は、マイクロ流体デバイス内において、第１のインサイチュー生成捕捉構造に近位する領域に微小物体を配置するステップであって、インサイチュー生成捕捉構造は、固化ポリマー網目構造を含み、更に、固化ポリマー網目構造は、アッセイ検体を含む、ステップと、アッセイ検体を微小物体に接触させるステップと、アッセイ検体と微小物体との相互作用を検出するステップとを含む。更に他の実施形態では、少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造を有するマイクロ流体デバイスにおいて、微小物体（例えば、生体細胞）をアッセイする方法が提供され、この方法は、マイクロ流体デバイス内において、第１のインサイチュー生成捕捉構造に近位する領域に微小物体を配置するステップであって、インサイチュー生成捕捉構造は、固化ポリマー網目構造を含み、更に、固化ポリマー網目構造は、アッセイ試薬を含む、ステップと、アッセイ試薬を微小物体又は微小物体の生物学的産物に接触させるステップと、アッセイ試薬と微小物体又は生物学的産物との相互作用を検出するステップとを含む。
【誤訳訂正５】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１１４
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１１４】
微小物体をアッセイする方法のいずれかの様々な実施形態では、マイクロ流体デバイスの基板は、エンクロージャ内の流体媒体中の微小物体に対して誘電泳動（ＤＥＰ）力を生成するように構成し得る。マイクロ流体デバイス内において、少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造に近位する領域に微小物体（例えば、生体細胞）を配置するステップは、誘電泳動力を使用して微小物体を移動させることを含み得る。誘電泳動力は光学的に作動され得る。代替的に、マイクロ流体デバイスの基板は、エンクロージャ内の液滴に対してエレクトロウェッティング力を生成するように構成し得る。マイクロ流体デバイス内において、少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造に近位する領域に微小物体を配置するステップは、エレクトロウェッティング力を使用して微小物体を移動させることを含み得る。エレクトロウェッティング力は光学的に作動され得る。幾つかの実施形態では、マイクロ流体デバイスは、マイクロ流体デバイスのエンクロージャ内で誘電泳動力及びエレクトロウェッティング力の両方を生成するように構成され得る１つ又は複数の基板を含み得、これらの力は、それぞれ光作動され得る。代替的に、フロー領域（例えば、マイクロ流体チャネル）内の流体及び／又は重力を使用して、微小物体をマイクロ流体デバイス内に配置し得る。幾つかの実施形態では、誘電泳動力、エレクトロウェッティング力、重力、及び／又は流体フローの組合せを使用して微小物体を配置し得る。様々な実施形態では、マイクロ流体デバイスは、被覆材料を含む少なくとも１つの表面を有し得る。幾つかの実施形態では、被覆材料は、少なくとも１つの表面を共有結合的に修飾して、細胞の成長、生存性、可搬性、及びそれらの任意の組合せを強化する調整表面を提供し得る。調整表面は、本明細書に記載される任意の適する調整表面であるように選択し得る。
【誤訳訂正６】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１１９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１１９】
微小物体をアッセイする方法のいずれかの更に他の実施形態では、検出するステップは、検出可能な標識を有する検出試薬を、インサイチュー生成捕捉構造に近位する領域に導入することを更に含む。本明細書に記載される任意の適する検出試薬が使用可能である。検出試薬の導入は、マイクロ流体デバイスのフロー領域を通して、検出試薬を含む溶液を流入させることを含み得る。幾つかの実施形態では、少なくとも１つのインサイチュー生成捕捉構造が隔離ペン内に位置する場合、検出試薬は、マイクロ流体デバイスのエンクロージャに流入した後、実質的に拡散により又は拡散のみにより、インサイチュー生成捕捉構造を含む隔離ペンに入り得る。検出試薬の導入は、微小物体をエンクロージャ又は代替的に隔離ペンに配置するステップが実行された後に実行し得る。幾つかの実施形態では、検出試薬は、微小物体がエンクロージャ又は隔離ペンに導入される前に導入し得る。幾つかの実施形態では、検出試薬を導入するステップは、検出するステップを実行する直前に実行し得る。様々な実施形態では、検出試薬は、インサイチュー生成捕捉構造内及び／又はその上に含まれるアッセイ試薬が生物学的産物又は微小物体自体（例えば、アッセイの検体）と相互作用するとき、インサイチュー生成捕捉構造に集中するように構成される。検出試薬は、結合対の形成、標的オリゴヌクレオチドとのハイブリダイゼーション、それ自体がアッセイ試薬若しくはアッセイ検体／微小物体又はその生物学的産物の相互作用によりインサイチュー生成捕捉構造の直近領域に拘束される、生物学的産物又は微小物体の挿入又は共有結合的反応等の任意の適するメカニズムにより、インサイチュー生成捕捉構造に集中され得る（例えば、インサイチュー生成捕捉構造の直近領域に拘束される）。幾つかの実施形態では、検出試薬／微小物体又はその生物学的産物／アッセイ試薬又はアッセイ検体／インサイチュー生成捕捉構造の固化ポリマー網目構造間の相互作用は、検出試薬の検出可能な信号を集中させるように機能し得る複合体を形成し得る。幾つかの実施形態では、検出試薬の検出可能な標識は、インサイチュー生成捕捉構造に集中されるまで検出されない。例えば、検出試薬がインターカレーター染料又は分子ビーコン（ＦＲＥＴ消光ヘアピンプローブ）、Scorpion（ＦＲＥＴ消光プローブ／プライマー組合せ）、又はオリゴヌクレオチドの任意の他のＦＲＥＴ標識である場合、信号の検出は、検出試薬が微小物体の生物学的産物又は微小物体自体に結合するまで実行されず、幾つかの実施形態では、生物学的産物又は微小物体は、インサイチュー生成捕捉構造に固定し得る。様々な実施形態では、検出試薬の検出可能な標識は、アッセイ試薬又はアッセイ検体に非共有結合的に付着される。
【誤訳訂正７】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０１３５
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０１３５】
相互作用を検出するステップは、第１及び第２の捕捉構造に近位する領域に第１の検出試薬及び第２の検出試薬を導入することを更に含み得、第１及び第２の検出試薬は、それぞれ検出可能な標識を含む。第１の検出試薬及び第２の検出試薬の検出可能な標識は、それぞれ独立して蛍光性、比色性、又は発光性であり得る。検出するステップは、第１の検出可能な標識の第１の蛍光信号及び第２の検出可能な標識の第２の蛍光信号を検出することを更に含み得る。幾つかの実施形態では、第１の蛍光信号及び第２の蛍光信号は、物理的に区別可能であり得、例えば、エンクロージャ内の異なる位置又は代替的にその内部の隔離ペン内の異なる位置に位置し得る。他の実施形態では、第１の蛍光信号及び第２の蛍光信号は、スペクトルで区別可能であり得る。他の実施形態では、第１又は第２の検出可能な信号の一方は、蛍光性であり得、第１又は第２の検出可能な信号の他方は、蛍光性ではない。
【誤訳訂正８】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０３５３
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０３５３】
３３．少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造を含むマイクロ流体デバイスにおいて微小物体をアッセイする方法であって、マイクロ流体デバイス内において、少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造に近位する領域に微小物体を配置することであって、インサイチュー生成捕捉構造は、固化ポリマー網目構造を含み、固化ポリマー網目構造は、アッセイ試薬又はアッセイ検体を含む、配置することと、アッセイ試薬又はアッセイ検体を微小物体又は微小物体の生物学的産物に接触させることと、アッセイ試薬又はアッセイ検体と微小物体又は生物学的産物との相互作用を検出することとを含む方法。
【誤訳訂正９】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０３６６
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０３６６】
４６．相互作用を検出するステップは、検出可能な標識を有する検出試薬を、少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造に近位する領域に導入することを更に含み得る、実施形態３３〜４５のいずれか１つに記載の方法。
【誤訳訂正１０】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０３７９
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０３７９】
５９．相互作用を検出するステップは、第１のインサイチュー生成捕捉構造及び第２のインサイチュー生成捕捉構造に近位する領域に第１の検出試薬及び第２の検出試薬を導入することを更に含み得、第１の検出試薬及び第２の検出試薬は、それぞれ検出可能な標識を含み得る、実施形態５５〜５８のいずれか１つに記載の方法。
【誤訳訂正１１】
【訂正対象書類名】明細書
【訂正対象項目名】０３８７
【訂正方法】変更
【訂正の内容】
【０３８７】
６７．マイクロ流体デバイス内において、少なくとも第１のインサイチュー生成捕捉構造に近位する領域に微小物体を配置するステップは、誘電泳動力を使用して微小物体を移動させることを含み得る、実施形態３３〜６６のいずれか１つに記載の方法。