【手続補正書】
【提出日】令和3年7月26日(2021.7.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
（i）2μmと5μmとの間または約2μmと5μmとの間の直径を含むビーズである粒子、および
（ii）ビーズの表面と結びついた結合分子
を含む表面修飾粒子であって、
結合分子が、特異的にキメラ抗原受容体の細胞外抗原結合ドメインと結合する、
表面修飾粒子。
【請求項２】
結合分子が、組換え抗原受容体のリンカーまたはスペーサー領域と結合せずかつそれを認識せず、該リンカーまたはスペーサー領域が、抗原結合ドメインを抗原受容体の膜貫通ドメインと接続している、請求項1記載の表面修飾粒子。
【請求項３】
結合分子が、抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原もしくは細胞外ドメインまたはその一部を含む、請求項1または請求項2記載の表面修飾粒子。
【請求項４】
組換え抗原が、BCMAであるか、または抗原結合ドメインにより認識されるその一部である、請求項3記載の表面修飾粒子。
【請求項５】
結合分子が、部分構造に連結した組換え抗原またはその一部を含む融合ポリペプチドであり、部分構造が、粒子との結びつきを促進する、請求項3または4記載の表面修飾粒子。
【請求項６】
部分構造が、組換え抗原のC末端に連結している、かつ/または
部分構造が、Fcドメインであるかもしくはそれを含む、
請求項5記載の表面修飾粒子。
【請求項７】
結合分子が、抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントを含む、請求項1または請求項2記載の表面修飾粒子。
【請求項８】
抗原結合ドメインにより認識される抗原が、CD19である、請求項1、2、および7のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
【請求項９】
キメラ抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体SJ25C1またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、請求項1〜3、7、および8のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
【請求項１０】
キメラ抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体FMC63またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、請求項1〜3、7、および8のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
【請求項１１】
抗原結合性フラグメントが、scFvであるかまたはそれを含む、請求項1〜3および7〜10のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
【請求項１２】
抗イディオタイプ抗体もしくはその抗原結合性フラグメントが、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部を含む、かつ/または
抗イディオタイプ抗体もしくはその抗原結合性フラグメントが、CH2ドメインおよびCH3ドメインを含むFc領域またはFcの一部を含む、かつ/または
抗イディオタイプ抗体もしくはその抗原結合性フラグメントが、インタクト抗体もしくは完全長抗体である、
請求項7〜11のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
【請求項１３】
結合分子が、結合分子のC末端アミノ酸残基でまたはその近くで、粒子に結びついている、請求項1〜12のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
【請求項１４】
結合分子が、前記粒子に共有結合的に結びついている、かつ/または
結合分子が、表面に露出した官能基を介して前記粒子に共有結合的に結びついており、表面に露出した官能基が、アミノ基、カルボキシル基、チオール基、アルデヒド基、クロロメチル基、エポキシ基、ヒドロキシル基、トシル基、もしくはヒドラジン基から選択される、かつ/または
結合分子が、トシル基である表面に露出した官能基を介して前記粒子に共有結合的に結びついており、表面に露出した官能基が、トシル基である、
請求項1〜13のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
【請求項１５】
ビーズである、請求項1〜14のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
【請求項１６】
2μmと5μmとの間もしくは約2μmと5μmとの間の直径または2.8μmもしくは4.5μmまたは約2.8μmもしくは約4.5μmの直径を有する、請求項1〜15のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
【請求項１７】
結合分子の少なくとも10コピー、少なくとも102コピー、少なくとも103、少なくとも104コピー、少なくとも105コピーもしくは少なくとも106コピー、または少なくとも約10コピー、少なくとも約102コピー、少なくとも約103コピー、少なくとも約104コピー、少なくとも約105コピーもしくは少なくとも約106コピーを含む、請求項1〜16のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
【請求項１８】
前記粒子が、粒子の表面と結びついた少なくとも1種の作用物質をさらに含み、少なくとも1種の作用物質が、細胞上の追加的な分子と特異的に結合して、補助シグナルを提供しかつ/または抑制シグナルを遮断する、請求項1〜17のいずれか一項記載の表面修飾粒子。
【請求項１９】
少なくとも1種の作用物質が、リガンドであるか、または抗体もしくはその抗原結合性フラグメントである、かつ/または
少なくとも1つの作用物質が、粒子に共有結合的に結びついている、かつ/または
結合分子と、粒子と結びついている少なくとも1種の作用物質との比が、1：1または約1：1である、
請求項18記載の表面修飾粒子。
【請求項２０】
追加的な分子が、共刺激分子もしくは活性化共受容体である、または
追加的な分子が、OX-40、ICOS、DAP10、B7-1、B7-2、CD28、もしくは4-1BBである、または
追加的な分子が、抑制性受容体である、または
追加的な分子が、CTLA-4、PD-1、LAG-3、Tim-3、BTLA、もしくはTIGITである、または
追加的な分子が、T細胞表面タンパク質である、
追加的な分子が、CD2もしくはCD3である、または
追加的な分子が、CD2もしくはCD28である、
請求項18または請求項19記載の表面修飾粒子。
【請求項２１】
抗CD2抗体および抗CD28抗体のうち一方または両方を含む、請求項20記載の表面修飾粒子。
【請求項２２】
請求項1〜21のいずれか一項記載の複数の表面修飾粒子を含む、組成物。
【請求項２３】
組成物中の結合分子の濃度が、0.5μg/mLと500μg/mLとの間、1μg/mLと200μg/mLとの間もしくは5μg/mLと100μg/mLとの間、または約0.5μg/mLと500μg/mLとの間、約1μg/mLと200μg/mLとの間もしくは約5μg/mLと100μg/mLとの間である、あるいは
組成物中の結合分子の濃度が、少なくとも1μg/mL、少なくとも5μg/mL、少なくとも10μg/mL、少なくとも25μg/mL、少なくとも50μg/mL、少なくとも100μg/mLもしくは少なくとも200μg/mL、または少なくとも約1μg/mL、少なくとも約5μg/mL、少なくとも約10μg/mL、少なくとも約25μg/mL、少なくとも約50μg/mL、少なくとも約100μg/mLもしくは少なくとも約200μg/mLである、
請求項22記載の組成物。
【請求項２４】
複数の表面修飾粒子が、2μmと5μmとの間もしくは約2μmと5μmとの間の平均直径を含むか、または
複数の表面修飾粒子が、1g/cm3と2g/cm3との間もしくは約1g/cm3と約2g/cm3との間の平均密度を含む、
請求項22または23記載の組成物。
【請求項２５】
請求項1〜21のいずれか一項記載の表面修飾粒子または請求項22〜24のいずれか一項記載の組成物と、使用説明書とを含む、キットであって、任意で、
説明書が、結合分子により特異的に認識される抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体を発現している細胞を、細胞集団から選択もしくは富化するためのものであるか、または
説明書が、結合分子により特異的に認識される抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体を発現している細胞を、細胞集団から刺激もしくは増大させるためのものである、
キット。
【請求項２６】
請求項1〜21のいずれか一項記載の表面修飾粒子または請求項22〜24のいずれか一項記載の組成物と共に、細胞集団をインキュベートする工程を含む、細胞を増大させるための方法。
【請求項２７】
前記集団が、特異的に抗原と結合するかまたはそれを認識する細胞外抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体を発現している細胞を含み、かつ
表面修飾粒子の結合分子または組成物中の複数の表面修飾粒子のそれぞれの結合分子が、キメラ抗原受容体の細胞外抗原結合ドメインと特異的に結合するかまたはそれを特異的に認識し、かつ
結合分子の細胞外抗原結合ドメインへの結合が、キメラ抗原受容体を含む細胞の増大を誘導する、
請求項26記載の方法。
【請求項２８】
細胞外抗原結合ドメインが、特異的にB細胞成熟抗原（BCMA）と結合するかまたはそれを認識し、かつ
結合分子が、BCMAの細胞外ドメインまたは細胞外抗原結合ドメインにより認識される該細胞外ドメインの一部である、
請求項27に記載の方法。
【請求項２９】
細胞外抗原結合ドメインが、特異的にCD19と結合するかまたはそれを認識し、かつ
結合分子が、該抗原結合ドメインと特異的に結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントである、
請求項27に記載の方法。
【請求項３０】
インキュベートする間に、集団中の総細胞と組成物の複数の表面修飾粒子との比が、5：1〜1：5、3：1〜1：3、もしくは2：1〜1：2、または約5：1〜1：5、約3：1〜1：3、もしくは約2：1〜1：2（両端の値を含む）である、請求項26〜29のいずれか一項記載の方法。
【請求項３１】
前記比が、1:1または約1:1である、請求項30記載の方法。
【請求項３２】
インキュベーションが、2時間超、4時間超、8時間超、12時間超、24時間超、2日超、3日超、4日超、5日超、6日超、7日超、8日超、9日超、10日超、11日超、12日超、13日超、14日超、15日超、もしくは16日超、または約2時間超、約4時間超、約8時間超、約12時間超、約24時間超、約2日超、約3日超、約4日超、約5日超、約6日超、約7日超、約8日超、約9日超、約10日超、約11日超、約12日超、約13日超、約14日超、約15日超、もしくは約16日超にわたって実施される、請求項26〜31のいずれか一項記載の方法。
【請求項３３】
前記集団が、免疫細胞を含む、かつ/または
前記集団が、T細胞もしくはNK細胞を含む、かつ/または
前記集団が、人工多能性幹細胞（iPSC）を含む、かつ/または
前記集団が、CD4+ T細胞およびCD8+ T細胞のうち一方もしくは両方を含む、かつ/または
前記集団が、対象、任意でヒト対象から得られた初代細胞を含む、
請求項26〜32のいずれか一項記載の方法。
【請求項３４】
CD4+細胞とCD8+細胞との比が、1：2と2：1との間もしくは1：3と3：1との間、または約1：2と2：1との間もしくは約1：3と3：1との間であるか、または1：1もしくは約1：1である、請求項33記載の方法。
【請求項３５】
（a）細胞の組成物を、キメラ抗原受容体をコードする核酸分子と、組成物中の1つまたは複数の細胞中に核酸分子を導入するための条件下で接触させる工程であって、それにより、インプット組成物を産生する、工程、および
（b）インプット組成物の細胞を、請求項26〜34のいずれか一項記載の方法によりインキュベートする工程
を含む、細胞を遺伝子操作する方法。
【請求項３６】
接触させる工程およびインキュベートする工程の少なくとも一部が、同時に実施される、請求項35記載の方法。
【請求項３７】
接触させる工程が、ウイルスベクターによる形質導入により実施される、請求項35または36記載の方法。
【請求項３８】
ウイルスベクターが、レトロウイルスベクター、ガンマレトロウイルスベクター、またはレンチウイルスベクターである、請求項37記載の方法。
【請求項３９】
キメラ抗原受容体を含むアウトプット組成物中の細胞の数が、インプット組成物中の抗原受容体を含む細胞の数と比較して、1.2倍、2.0倍、3.0倍、4.0倍、5.0倍、6.0倍、7.0倍、8.0倍、9.0倍、10倍またはそれよりも大きく増加または富化される、請求項35〜38のいずれか一項記載の方法。
【請求項４０】
請求項1〜21のいずれか一項記載の表面修飾粒子または請求項22〜24のいずれか一項記載の組成物と、細胞集団を接触させる工程を含む、細胞を選択または富化する方法。
【請求項４１】
特異的に抗原と結合するかまたはそれを認識する細胞外抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体（CAR）を発現しているT細胞を含むインプット組成物を、インプット組成物中の細胞におけるCAR依存性活性を刺激するための条件下で、少なくとも10日間インキュベートし、それにより、アウトプット組成物を産生する工程、および
アウトプット組成物の1つまたは複数の細胞の1つまたは複数の表現型または活性を評価する工程
を含む、
細胞組成物を評価するための長期刺激方法であって、
CAR依存性活性を刺激するための条件が、特異的にCARの抗原結合ドメインと結合する結合分子の存在を含み、かつ
結合分子が、固体支持体と結びついている、
方法。
【請求項４２】
固体支持体が、マイクロプレートのウェルもしくはビーズの表面である、または
固体支持体が、マイクロプレートと結びついた結合分子を有するマイクロプレートであり、インキュベーションが、マイクロプレート中で実施される、または
固体支持体が、結合分子が結びついたビーズであり、インキュベーションが、複数のビーズの存在下で実施される、
請求項41記載の方法。
【請求項４３】
結合分子が、抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原またはその一部であるかまたはそれを含む、請求項41または42記載の方法。
【請求項４４】
組換え抗原またはその一部が、BCMAであるか、または抗原結合ドメインにより認識されるその一部である、請求項43記載の方法。
【請求項４５】
結合分子が、特異的に抗原結合ドメインと結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、請求項41または42記載の方法。
【請求項４６】
抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体SJ25C1もしくはその抗原結合性フラグメントであるかもしくはそれを含む、または
抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体FMC63もしくはその抗原結合性フラグメントであるかもしくはそれを含む、
請求項45記載の方法。
【請求項４７】
アウトプット組成物の1つもしくは複数の細胞の活性化、疲弊、もしくは分化状態の1つもしくは複数の表現型を評価する工程、および/または
アウトプット組成物の1つまたは複数の細胞の1つまたは複数の活性を評価する工程、および/または
CAR依存性活性を評価する工程、および/または
細胞溶解活性またはサイトカイン産生を評価する工程
を含む、
請求項41〜46のいずれか一項記載の方法。
【請求項４８】
期間が、少なくとも11日、少なくとも12日、少なくとも13日、少なくとも14日、もしくは少なくとも15日、または少なくとも約11日、少なくとも約12日、少なくとも約13日、少なくとも約14日、もしくは少なくとも約15日である、
期間が、11日、12日、13日、14日もしくは15日であるか、または約11日、約12日、約13日、約14日もしくは約15日である、
請求項41〜47のいずれか一項記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００７１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００７１】
長期刺激方法の任意の態様のいくつかにおいて、方法は、アウトプット組成物の表現型または活性と、対照組成物の表現型または活性とを比較することをさらに含み、任意で、対照組成物は、CAR依存性活性を刺激するための同じ条件で少なくとも10日間インキュベートされていたT細胞の組成物であって、試験作用物質もしくは化合物の存在下で産生されたものではない、またはインプット組成物と比較して代替的な工程により産生されていたT細胞の組成物である。いくつかの態様において、方法は、例えば対照組成物と比較して、低下した疲弊、低下した活性化または減少した分化を示すアウトプット組成物を同定することをさらに含む。いくつかの態様において、減少した分化は、1つまたは複数のナイーブ様T細胞マーカーの増加した発現を含む。
[本発明1001]
特異的に抗原と結合するかまたはそれを認識する細胞外抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体を発現している細胞を含むインプット組成物を、ビーズであるかまたはそれを含む複数の粒子と共にインキュベートする工程を含む、細胞を増大させる方法であって、
複数の粒子が、2μmと5μmとの間または約2μmと5μmとの間の平均直径を含み、かつ特異的に抗原結合ドメインと結合するかまたはそれを認識する結合分子と結びついており、
抗原結合ドメインへの結合分子の結合が、キメラ抗原受容体を含む細胞の増大を誘導し、それにより、増大した細胞を含むアウトプット組成物を産生する、
方法。
[本発明1002]
結合分子が、キメラ抗原受容体のリンカーまたはスペーサー領域と結合せずかつそれを認識せず、リンカーまたはスペーサー領域が、抗原結合ドメインを抗原受容体の膜貫通ドメインと接続している、本発明1001の方法。
[本発明1003]
結合分子が、特異的に抗原結合ドメインと結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントである、本発明1001または本発明1002の方法。
[本発明1004]
抗原がCD19である、本発明1001〜1003のいずれかの方法。
[本発明1005]
結合分子が、抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原またはその一部を含む、本発明1001または本発明1002の方法。
[本発明1006]
組換え抗原が、BCMAであるか、または抗原結合ドメインにより認識されるその一部である、本発明1005の方法。
[本発明1007]
特異的にB細胞成熟抗原（BCMA）と結合するかまたはそれを認識する抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体（CAR）を発現している細胞を含むインプット組成物を、抗原結合ドメインにより認識されるBCMAの細胞外ドメインまたは細胞外ドメインの一部を含む結合分子が結びついた複数の粒子と共にインキュベートする工程を含む、細胞を増大させる方法であって、
抗原結合ドメインへのBCMAの細胞外ドメインまたはその一部の結合が、キメラ抗原受容体を含む細胞の増大を誘導し、それにより、増大した細胞を含むアウトプット組成物を産生する、
方法。
[本発明1008]
結合分子が、部分構造に連結した組換え抗原またはその一部を含む融合ポリペプチドであり、任意で、部分構造が、粒子との結びつきを促進する、本発明1005〜1007のいずれかの方法。
[本発明1009]
部分構造が、組換え抗原のC末端に連結している、本発明1008の方法。
[本発明1010]
部分構造が、Fcドメインであるかまたはそれを含む、本発明1008または本発明1009の方法。
[本発明1011]
特異的にCD19と結合するかまたはそれを認識する抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体（CAR）を発現している細胞を含むインプット組成物を、特異的に抗原結合ドメインと結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントである結合分子が結びついた複数の粒子と共にインキュベートする工程を含む、細胞を増大させる方法であって、
抗原結合ドメインへの抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントの結合が、キメラ抗原受容体を含む細胞の増大を誘導し、それにより、増大した細胞を含むアウトプット組成物を産生する、
方法。
[本発明1012]
抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体SJ25C1またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、本発明1003、1004または本発明1011の方法。
[本発明1013]
抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体FMC63またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、本発明1003、1004または本発明1011の方法。
[本発明1014]
粒子が、合成粒子、不溶性粒子、固体粒子または非細胞性粒子である、本発明1007〜1013のいずれかの方法。
[本発明1015]
複数の粒子が、ビーズを含む、本発明1007〜1014のいずれかの方法。
[本発明1016]
複数の粒子が、0.5μg/mLと500μg/mLとの間または約0.5μg/mLと500μg/mLとの間（両端の値を含む）の結合分子濃度を有する組成物からのものである、本発明1001〜1015のいずれかの方法。
[本発明1017]
インキュベートする間に、インプット組成物中に存在する総細胞と複数の粒子との比が、5：1〜1：5または約5：1〜1：5（両端の値を含む）である、本発明1001〜1016のいずれかの方法。
[本発明1018]
特異的に抗原と結合するかまたはそれを認識する細胞外抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体を発現している細胞を含むインプット組成物を、特異的に抗原結合ドメインと結合するかまたはそれを認識する結合分子が結びついたビーズであるかまたはそれを含む複数の粒子と共にインキュベートする工程を含む、細胞を増大させる方法であって、
複数の粒子が、0.5μg/mLと500μg/mLとの間または約0.5μg/mLと500μg/mLとの間（両端の値を含む）の結合分子濃度を有する組成物からのものであり、インキュベートする間に、インプット組成物中に存在する総細胞と、複数の粒子との比が、5：1〜1：5または約5：1〜1：5（両端の値を含む）であり、
抗原結合ドメインへの結合分子の結合が、キメラ抗原受容体を含む細胞の増大を誘導し、それにより、増大した細胞を含むアウトプット組成物を産生する、
方法。
[本発明1019]
結合分子が、キメラ抗原受容体のリンカーまたはスペーサー領域と結合せずかつそれを認識せず、リンカーまたはスペーサー領域が、抗原結合ドメインを抗原受容体の膜貫通ドメインと接続している、本発明1018の方法。
[本発明1020]
結合分子が、特異的に抗原結合ドメインと結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントである、本発明1018または1019の方法。
[本発明1021]
抗原がCD19である、本発明1020の方法。
[本発明1022]
結合分子が、抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原またはその一部を含む、本発明1018または本発明1019の方法。
[本発明1023]
組換え抗原が、BCMAであるか、または抗原結合ドメインにより認識されるその一部である、本発明1022の方法。
[本発明1024]
複数の粒子が、1μg/mLと200μg/mLとの間もしくは5μg/mLと100μg/mLとの間または約1μg/mLと200μg/mLとの間もしくは約5μg/mLと100μg/mLとの間（それぞれ両端の値を含む）の結合分子濃度を有する組成物からのものである、あるいは
複数の粒子が、少なくとも1μg/mL、少なくとも5μg/mL、少なくとも10μg/mL、少なくとも25μg/mL、少なくとも50μg/mL、少なくとも100μg/mLもしくは少なくとも200μg/mL、または少なくとも約1μg/mL、少なくとも約5μg/mL、少なくとも約10μg/mL、少なくとも約25μg/mL、少なくとも約50μg/mL、少なくとも約100μg/mLもしくは少なくとも約200μg/mLの結合分子濃度を含む組成物からのものである、
本発明1001〜1023のいずれかの方法。
[本発明1025]
複数の粒子が、5μg/mL、10μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、100μg/mLもしくは200μg/mL、または約5μg/mL、約10μg/mL、約25μg/mL、約50μg/mL、約100μg/mLもしくは約200μg/mLの結合分子濃度を有する組成物からのものである、本発明1001〜1024のいずれかの方法。
[本発明1026]
インキュベーションの間に、インプット組成物中に存在する総細胞と複数の粒子との比が、3：1〜1：3もしくは2：1〜1：2、または約3：1〜1：3もしくは約2：1〜1：2である（それぞれ両端の値を含む）、本発明1001〜1025のいずれかの方法。
[本発明1027]
インキュベーションの間に、インプット組成物中に存在する総細胞と複数の粒子との比が、1：1または約1：1である、本発明1001〜1026のいずれかの方法。
[本発明1028]
複数のビーズが、2μmと5μmとの間もしくは約2μmと5μmとの間の平均直径または1g/cm3と2g/cm3との間もしくは約1g/cm3と約2g/cm3との間の平均密度を含む、本発明1015〜1027のいずれかの方法。
[本発明1029]
平均直径が、2.8μmもしくは4.5μm、または約2.8μmもしくは約4.5μmである、本発明1001〜1006および1028のいずれかの方法。
[本発明1030]
抗原結合性フラグメントが、scFvであるかまたはscFvを含む、本発明1003、1004、1011〜1017、1020、1021および1024〜1029のいずれかの方法。
[本発明1031]
抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントが、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部、任意で、CH2ドメインおよびCH3ドメインを含むFc領域またはFcの一部を含む、本発明1003、1004および1011〜1030のいずれかの方法。
[本発明1032]
抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントが、インタクト抗体または完全長抗体である、本発明1003、1004、1011〜1017、1020、1021、および1024〜1031のいずれかの方法。
[本発明1033]
結合分子が、複数の粒子のそれぞれと、結合分子のC末端アミノ酸残基でまたはその近くで結びついている、本発明1001〜1032のいずれかの方法。
[本発明1034]
複数の粒子が、単分散性である、本発明1001〜1033のいずれかの方法。
[本発明1035]
結合分子が、表面に露出した官能基を介して粒子と共有結合的に結びついている、本発明1001〜1034のいずれかの方法。
[本発明1036]
表面に露出した官能基が、アミノ基、カルボキシル基、チオール基、アルデヒド基、クロロメチル基、エポキシ基、ヒドロキシル基、トシル基またはヒドラジン基である、本発明1035の方法。
[本発明1037]
表面に露出した官能基が、トシル基である、本発明1035または本発明1036の方法。
[本発明1038]
複数の粒子が、ガラス、シリカ、ヒドロキシカルボン酸のポリエステル、ジカルボン酸のポリ無水物、ヒドロキシカルボン酸のコポリマー、ジカルボン酸のコポリマー、または金属を含む粒子を含む、本発明1001〜1037のいずれかの方法。
[本発明1039]
粒子が、ポリマー、多糖、シリカ、脂肪酸、炭素またはそれらの組み合わせを含む表面を含む、本発明1001〜1038のいずれかの方法。
[本発明1040]
ポリマーが、ポリエチレングリコール、乳酸グリコール酸共重合体、ポリグルタルアルデヒド、ポリウレタン、ポリスチレン、およびポリビニルアルコールまたはそれらの組み合わせである、本発明1039の方法。
[本発明1041]
複数の粒子が、疎水性表面を含む粒子を含む、本発明1001〜1040のいずれかの方法。
[本発明1042]
複数の粒子が、ポリスチレン表面を含む粒子を含む、本発明1001〜1041のいずれかの方法。
[本発明1043]
複数の粒子が、
磁性である、および/または磁性コア、常磁性コア、もしくは超常磁性コアを含む、粒子
を含む、本発明1001〜1042のいずれかの方法。
[本発明1044]
細胞上の追加的な分子と特異的に結合して、補助シグナルを提供しかつ/または抑制シグナルを遮断する作用物質の存在下で、インキュベーションの少なくとも一部が行われる、本発明1001〜1043のいずれかの方法。
[本発明1045]
作用物質が、粒子と一緒に提供され、任意で、作用物質が、複数の粒子またはそのサブセットのそれぞれと結びついている、本発明1044の方法。
[本発明1046]
作用物質が、粒子と結びついており、作用物質が、細胞上の追加的な分子と特異的に結合して、補助シグナルを提供しかつ/または抑制シグナルを遮断する、本発明1044または本発明1045の方法。
[本発明1047]
作用物質が、リガンドであるか、または抗体もしくはその抗原結合性フラグメントである、本発明1044〜1046のいずれかの方法。
[本発明1048]
追加的な分子が、
共刺激分子であるか、または活性化共受容体、任意で、OX-40、ICOS、DAP10、B7-1、B7-2、CD28もしくは4-1BBである、あるいは
抑制性受容体、任意で、CTLA-4、PD-1、LAG-3、Tim-3、BTLAまたはTIGITである、あるいは
T細胞表面タンパク質、任意で、CD2またはCD3である、
本発明1044〜1047のいずれかの方法。
[本発明1049]
追加的な分子が、CD2またはCD28である、本発明1044〜1048のいずれかの方法。
[本発明1050]
粒子が、抗CD2抗体および抗CD28抗体のうち一方または両方を含む、本発明1044〜1049のいずれかの方法。
[本発明1051]
結合分子が、抗CD19抗イディオタイプ抗体である、本発明1050の方法。
[本発明1052]
結合分子が、キメラ抗原受容体により認識される組換え抗原であり、任意で、組換え抗原が、BCMAであるか、または抗原結合ドメインにより認識されるその一部である、本発明1050の方法。
[本発明1053]
作用物質が、粒子と共有結合的に結びついている、本発明1045〜1052のいずれかの方法。
[本発明1054]
結合分子と、粒子と結びついている作用物質との比、任意で、モル比または重量比が、1：1または約1：1である、本発明1045〜1053のいずれかの方法。
[本発明1055]
インキュベーションが、2時間超、4時間超、8時間超、12時間超、24時間超、2日超、3日超、4日超、5日超、6日超、7日超、8日超、9日超、10日超、11日超もしくは12日超、または約2時間超、約4時間超、約8時間超、約12時間超、約24時間超、約2日超、約3日超、約4日超、約5日超、約6日超、約7日超、約8日超、約9日超、約10日超、約11日超もしくは約12日超にわたって実施される、本発明1001〜1054のいずれかの方法。
[本発明1056]
インキュベーションが、24時間超、2日超、3日超、4日超、5日超、6日超、7日超、8日超、9日超、10日超、11日超もしくは12日超、または約24時間超、約2日超、約3日超、約4日超、約5日超、約6日超、約7日超、約8日超、約9日超、約10日超、約11日超もしくは約12日超にわたって実施される、本発明1001〜1055のいずれかの方法。
[本発明1057]
インキュベーションが、10日超、11日超、12日超、13日超、14日超、15日超、もしくは16日超、または10日超、11日超、12日超、13日超、14日超、15日超、もしくは16日超にわたって実施される、本発明1001〜1056のいずれかの方法。.
[本発明1058]
細胞が、免疫細胞または人工多能性幹細胞（iPSC）を含む、本発明1001〜1057のいずれかの方法。
[本発明1059]
免疫細胞が、T細胞またはNK細胞である、本発明1001〜1058のいずれかの方法。
[本発明1060]
細胞が、CD4+ T細胞およびCD8+ T細胞のうち一方または両方を含む、本発明1001〜1059のいずれかの方法。
[本発明1061]
CD4+細胞とCD8+細胞との比が、1：2と2：1との間もしくは1：3と3：1との間、または約1：2と2：1との間もしくは約1：3と3：1との間であるか、または1：1もしくは約1：1である、本発明1001〜1060のいずれかの方法。
[本発明1062]
細胞が、対象、任意でヒト対象から得られた初代細胞である、本発明1001〜1061のいずれかの方法。
[本発明1063]
細胞の組成物を、キメラ抗原受容体をコードする核酸分子と、組成物中の1つまたは複数の細胞中に核酸分子を導入するための条件下で接触させる工程を含む方法により、インプット組成物が産生される、本発明1001〜1062のいずれかの方法。
[本発明1064]
（a）細胞の組成物を、キメラ抗原受容体をコードする核酸分子と、組成物中の1つまたは複数の細胞中に核酸分子を導入するための条件下で接触させる工程であって、それにより、インプット組成物を産生する、工程、および
（b）インプット組成物の細胞を、本発明1001〜1063のいずれかの方法によりインキュベートする工程
を含む、細胞を遺伝子操作する方法。
[本発明1065]
接触させる工程およびインキュベートする工程の少なくとも一部が、同時に実施される、本発明1063または本発明1064の方法。
[本発明1066]
接触させる工程が、ウイルスベクターによる形質導入により実施され、任意で、ウイルスベクターが、レトロウイルスベクター、ガンマレトロウイルスベクター、またはレンチウイルスベクターである、本発明1063〜1065のいずれかの方法。
[本発明1067]
細胞の組成物が、複数のT細胞を含み、前記方法が、接触させる工程の前にT細胞を刺激する工程も活性化する工程も含まない、本発明1062〜1066のいずれかの方法。
[本発明1068]
細胞の組成物が、複数のT細胞を含み、
前記方法が、接触させる工程の前に、TCR複合体を経由するシグナルを誘導することが可能な1種もしくは複数種の作用物質の存在下で組成物をインキュベートする工程、ならびに/またはT細胞、CD4+ T細胞、および/もしくはCD8+ T細胞の増殖を誘導することが可能な1種もしくは複数種の作用物質、ならびに/またはCD3結合分子、CD28結合分子、組換えIL-2、組換えIL-15、および組換えIL-7もしくはそれらの組み合わせの存在下でのインキュベーションを含まず、
任意で、前記方法が、抗CD3抗体および/または抗CD28抗体の存在下でT細胞を刺激する工程を含まない、本発明1063〜1067のいずれかの方法。
[本発明1069]
アウトプット組成物中に存在する細胞の活性化マーカーまたは疲弊マーカーの表面発現が、類似のインキュベーション後であるが、TCR複合体の1つまたは複数の成分の1つまたは複数の細胞内シグナル伝達ドメインを活性化することが可能なポリクローナル刺激分子の存在下で産生される細胞の組成物中のマーカーの表面発現よりも少なく、
任意で、ポリクローナル刺激分子が、抗CD3抗体もしくはフラグメントおよび/または抗CD28抗体もしくはフラグメントを含む、
本発明1001〜1068のいずれかの方法。
[本発明1070]
疲弊マーカーが、抑制性受容体、任意で、PD-1、CTLA-4、TIM-3、LAG-3、BTLAまたはTIGITである、本発明1069の方法。
[本発明1071]
活性化マーカーが、HLA-DR、CD25、CD69、CD71、CD40Lまたは4-1BBである、本発明1069の方法。
[本発明1072]
キメラ抗原受容体を含むアウトプット組成物中の細胞の数が、インプット組成物中の抗原受容体を含む細胞の数と比較して、1.2倍、2.0倍、3.0倍、4.0倍、5.0倍、6.0倍、7.0倍、8.0倍、9.0倍、10倍またはそれよりも大きく増加または富化される、本発明1001〜1071のいずれかの方法。
[本発明1073]
インビトロまたはエクスビボで行われる、本発明1001〜1072のいずれかの方法。
[本発明1074]
CARが、特異的に抗原と結合する細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通領域、およびITAMを含む細胞内シグナル伝達領域を含む、本発明1001〜1073のいずれかの方法。
[本発明1075]
細胞内シグナル伝達ドメインが、CD3-ゼータ（CD3ζ）鎖の細胞内ドメインを含む、本発明1074の方法。
[本発明1076]
CARが、CD28または4-1BBのシグナル伝達ドメインを含む共刺激シグナル伝達領域をさらに含む、本発明1074または本発明1075の方法。
[本発明1077]
アウトプット組成物から複数のビーズを除去する工程をさらに含む、本発明1001〜1076のいずれかの方法。
[本発明1078]
本発明1001〜1077のいずれかの方法により産生される細胞の組成物。
[本発明1079]
（i）2μmと5μmとの間または約2μmと5μmとの間の直径を含むビーズである粒子、および
（ii）ビーズの表面と結びついた結合分子
を含む表面修飾粒子であって、
結合分子が、特異的にキメラ抗原受容体の細胞外抗原結合ドメインと結合する、
表面修飾粒子。
[本発明1080]
結合分子が、組換え抗原受容体のリンカーまたはスペーサー領域と結合せずかつそれを認識せず、該リンカーまたはスペーサー領域が、抗原結合ドメインを抗原受容体の膜貫通ドメインと接続している、本発明1079の表面修飾粒子。
[本発明1081]
結合分子が、抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原またはその一部を含む、本発明1079または本発明1080の表面修飾粒子。
[本発明1082]
組換え抗原が、BCMAであるか、または抗原結合ドメインにより認識されるその一部である、本発明1081の表面修飾粒子。
[本発明1083]
粒子と、粒子の表面と結びついた結合分子とを含む、表面修飾粒子であって、
結合分子が、B細胞成熟抗原（BCMA）である組換え抗原の細胞外ドメインまたはその一部を含む、
表面修飾粒子。
[本発明1084]
結合分子が、部分構造に連結した組換え抗原またはその一部を含む融合ポリペプチドであり、任意で、部分構造が、粒子との結びつきを促進する、本発明1081〜1083のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1085]
部分構造が、組換え抗原のC末端に連結している、本発明1084の表面修飾粒子。
[本発明1086]
部分構造が、Fcドメインであるかまたはそれを含む、本発明1084または本発明1085の表面修飾粒子。
[本発明1087]
結合分子が、抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントを含む、本発明1079または本発明1080の表面修飾粒子。
[本発明1088]
抗原結合ドメインにより認識される抗原が、CD19である、本発明1079、1080および1087のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1089]
キメラ抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体SJ25C1またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、本発明1087または本発明1088の表面修飾粒子。
[本発明1090]
キメラ抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体FMC63またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、本発明1087または本発明1088の表面修飾粒子。
[本発明1091]
抗原結合性フラグメントが、scFvであるかまたはそれを含む、本発明1089または本発明1090の表面修飾粒子。
[本発明1092]
抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントが、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部、任意で、CH2ドメインおよびCH3ドメインを含むFc領域またはFcの一部を含む、本発明1087〜1091のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1093]
抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントが、インタクト抗体または完全長抗体である、本発明1087〜1092のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1094]
結合分子が、結合分子のC末端アミノ酸残基でまたはその近くで、粒子に結びついている、本発明1079〜1093のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1095]
合成粒子、不溶性粒子、固体粒子または非細胞性粒子である、本発明1083〜1094のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1096]
ビーズである、本発明1083〜1095のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1097]
2μmと5μmとの間または約2μmと5μmとの間の直径を有する、本発明1079〜1096のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1098]
2.8μmもしくは4.5μmまたは約2.8μmもしくは約4.5μmの直径を有する、本発明1079〜1097のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1099]
結合分子が、前記粒子に共有結合的に結びついている、本発明1079〜1098のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1100]
結合分子が、表面に露出した官能基を介して前記粒子に共有結合的に結びついている、本発明1079〜1099のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1101]
表面に露出した官能基が、アミノ基、カルボキシル基、チオール基、アルデヒド基、クロロメチル基、エポキシ基、ヒドロキシル基、トシル基またはヒドラジン基である、本発明1100の表面修飾粒子。
[本発明1102]
表面に露出した官能基が、トシル基である、本発明1101の表面修飾粒子。
[本発明1103]
ガラス、シリカ、ヒドロキシカルボン酸のポリエステル、ジカルボン酸のポリ無水物、ヒドロキシカルボン酸のコポリマー、ジカルボン酸のコポリマー、または金属であるかまたはそれを含む、本発明1079〜1102のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1104]
ポリマー、多糖、シリカ、脂肪酸、炭素またはそれらの組み合わせを含む表面を含む、本発明1079〜1103のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1105]
ポリマーが、ポリエチレングリコール、乳酸グリコール酸共重合体、ポリグルタルアルデヒド、ポリウレタン、ポリスチレン、およびポリビニルアルコールまたはそれらの組み合わせである、本発明1104の表面修飾粒子。
[本発明1106]
疎水性表面を含む、本発明1079〜1105のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1107]
ポリスチレン表面を含む、本発明1079〜1106のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1108]
磁性である、および/または磁性コア、常磁性コア、もしくは超常磁性コアを含む、本発明1079〜1107のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1109]
結合分子の少なくとも10コピー、少なくとも102コピー、少なくとも103、少なくとも104コピー、少なくとも105コピーもしくは少なくとも106コピー、または少なくとも約10コピー、少なくとも約102コピー、少なくとも約103コピー、少なくとも約104コピー、少なくとも約105コピーもしくは少なくとも約106コピーを含む、本発明1079〜1108のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1110]
前記粒子が、粒子の表面と結びついた少なくとも1種の作用物質をさらに含み、少なくとも1種の作用物質が、細胞上の追加的な分子と特異的に結合して、補助シグナルを提供しかつ/または抑制シグナルを遮断する、本発明1079〜1109のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1111]
少なくとも1種の作用物質が、リガンドであるか、または抗体もしくはその抗原結合性フラグメントである、本発明1110の表面修飾粒子。
[本発明1112]
追加的な分子が、共刺激分子または活性化共受容体、任意で、OX-40、ICOS、DAP10、B7-1、B7-2、CD28または4-1BBである、本発明1110または本発明1111の表面修飾粒子。
[本発明1113]
追加的な分子が、抑制性受容体、任意で、CTLA-4、PD-1、LAG-3、Tim-3、BTLAまたはTIGITである、本発明1110または本発明1111の表面修飾粒子。
[本発明1114]
追加的な分子が、T細胞表面タンパク質、任意で、CD2またはCD3である、本発明1110または本発明1111の表面修飾粒子。
[本発明1115]
追加的な分子が、CD2またはCD28である、本発明1110または本発明1111の表面修飾粒子。
[本発明1116]
抗CD2抗体および抗CD28抗体のうち一方または両方を含む、本発明1115の表面修飾粒子。
[本発明1117]
少なくとも1つの作用物質が、粒子に共有結合的に結びついている、本発明1110〜1116のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1118]
結合分子と、粒子により含まれる少なくとも1種の作用物質との比、任意で、モル比または重量比が、1：1または約1：1である、本発明1110〜1117のいずれかの表面修飾粒子。
[本発明1119]
本発明1079〜1118のいずれかの複数の表面修飾粒子を含む、組成物。
[本発明1120]
組成物中の結合分子の濃度が、0.5μg/mLと500μg/mLとの間、1μg/mLと200μg/mLとの間もしくは5μg/mLと100μg/mLとの間、または約0.5μg/mLと500μg/mLとの間、約1μg/mLと200μg/mLとの間もしくは約5μg/mLと100μg/mLとの間である、あるいは
組成物中の結合分子の濃度が、少なくとも1μg/mL、少なくとも5μg/mL、少なくとも10μg/mL、少なくとも25μg/mL、少なくとも50μg/mL、少なくとも100μg/mLもしくは少なくとも200μg/mL、または少なくとも約1μg/mL、少なくとも約5μg/mL、少なくとも約10μg/mL、少なくとも約25μg/mL、少なくとも約50μg/mL、少なくとも約100μg/mLもしくは少なくとも約200μg/mLである、
本発明1119の組成物。
[本発明1121]
複数の表面修飾粒子が、単分散性である、本発明1119または本発明1120の組成物。
[本発明1122]
本発明1079〜1118のいずれかの表面修飾粒子または本発明1119〜1121のいずれかの組成物と、使用説明書とを含む、キット。
[本発明1123]
説明書が、結合分子により特異的に認識される抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体を発現している細胞を、細胞集団から選択または富化するためのものである、本発明1122のキット。
[本発明1124]
説明書が、結合分子により特異的に認識される抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体を発現している細胞を、細胞集団から刺激または増大させるためのものである、本発明1122のキット。
[本発明1125]
本発明1079〜1118のいずれかの表面修飾粒子または本発明1119〜1121のいずれかの組成物と共に、細胞集団をインキュベートする工程を含む、細胞を増大させるための方法。
[本発明1126]
本発明1079〜1118のいずれかの表面修飾粒子または本発明1119〜1121のいずれかの組成物と、細胞集団を接触させる工程を含む、細胞を選択または富化する方法。
[本発明1127]
特異的に抗原と結合するかまたはそれを認識する細胞外抗原結合ドメインを含むキメラ抗原受容体（CAR）を発現しているT細胞を含むインプット組成物を、インプット組成物中の細胞におけるCAR依存性活性を刺激するための条件下で、少なくとも10日間インキュベートし、それにより、アウトプット組成物を産生する工程、および
アウトプット組成物の1つまたは複数の細胞の1つまたは複数の表現型または活性を評価する工程
を含む、細胞組成物を評価するための長期刺激方法。
[本発明1128]
CAR依存性活性を刺激するための条件が、特異的にCARの抗原結合ドメインと結合する結合分子の存在を含む、本発明1127の方法。
[本発明1129]
結合分子が、支持体と結びついている、本発明1128の方法。
[本発明1130]
支持体が、固体支持体である、本発明1129の方法。
[本発明1131]
固体支持体が、マイクロプレートのウェルまたはビーズの表面である、本発明1130の方法。
[本発明1132]
固体支持体が、マイクロプレートと結びついた結合分子を有するマイクロプレートであり、インキュベーションが、マイクロプレート中で実施される、本発明1130または本発明1131の方法。
[本発明1133]
固体支持体が、結合分子が結びついたビーズであり、インキュベーションが、複数のビーズの存在下で実施される、本発明1130または本発明1131の方法。
[本発明1134]
結合分子が、抗原結合ドメインにより認識される組換え抗原またはその一部であるかまたはそれを含む、本発明1128〜1133のいずれかの方法。
[本発明1135]
組換え抗原またはその一部が、BCMAであるか、または抗原結合ドメインにより認識されるその一部である、本発明1134の方法。
[本発明1136]
結合分子が、特異的に抗原結合ドメインと結合する抗イディオタイプ抗体またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、本発明1128〜1133のいずれかの方法。
[本発明1137]
抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体SJ25C1またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、本発明1136の方法。
[本発明1138]
抗原受容体の抗原結合ドメインが、抗体FMC63またはその抗原結合性フラグメントであるかまたはそれを含む、本発明1136の方法。
[本発明1139]
インビトロまたはエクスビボで実施される、本発明1127〜1138のいずれかの方法。
[本発明1140]
インプット組成物が、組換えサイトカインを含まない培地の存在下でインキュベートされる、本発明1127〜1139のいずれかの方法。
[本発明1141]
インキュベーションが、連続的に実施される、またはある期間にわたり中断されない、本発明1127〜1140のいずれかの方法。
[本発明1142]
インキュベーションの間に、細胞が再播種されず、培地が交換されず、かつ結合分子が添加されない、本発明1127〜1140のいずれかの方法。
[本発明1143]
アウトプット組成物の1つまたは複数の細胞の活性化、疲弊または分化状態の1つまたは複数の表現型を評価する工程を含む、本発明1127〜1142のいずれかの方法。
[本発明1144]
表現型が疲弊であり、評価する工程が、CTLA-4、FOXP3、PD-1、TIGIT、LAB-3、2B4、BTLA、TIM3、VISTA、またはCD96より選択される1つまたは複数のマーカーの発現、任意で表面発現を測定することを含む、本発明1143の方法。
[本発明1145]
表現型が活性化であり、評価する工程が、CD25、CD26、CD27、CD28、CD30、CD71、CD154、CD40L、CD127、LAG3、またはKi67より選択される1つまたは複数のマーカーの発現、任意で表面発現を測定することを含む、本発明1143の方法。
[本発明1146]
表現型が分化状態であり、
評価する工程が、
（i）CD25、CD45RO、CD56、KLRG1、CD95の1つもしくは複数、ならびに/または
（ii）CD45RA、CD27、CD28、CD62L、およびCCR7の1つもしくは複数
より選択される1つまたは複数のマーカーを測定することを含み、
任意で、1つまたは複数のマーカーが、ナイーブ様T細胞と正または逆に関連するマーカーである、
本発明1143の方法。
[本発明1147]
アウトプット組成物の1つまたは複数の細胞の1つまたは複数の活性を評価する工程を含む、本発明1127〜1146のいずれかの方法。
[本発明1148]
1つまたは複数の活性が、CAR依存性活性、任意で、抗原に刺激される活性を含む、本発明1127〜1147のいずれかの方法。
[本発明1149]
1つまたは複数の活性が、細胞溶解活性またはサイトカイン産生を含む、本発明1147または1148の方法。
[本発明1150]
期間が、少なくとも11日、少なくとも12日、少なくとも13日、少なくとも14日、もしくは少なくとも15日、または少なくとも約11日、少なくとも約12日、少なくとも約13日、少なくとも約14日、もしくは少なくとも約15日である、本発明1127〜1149のいずれかの方法。
[本発明1151]
期間が、11日、12日、13日、14日もしくは15日であるか、または約11日、約12日、約13日、約14日もしくは約15日である、本発明1127〜1149のいずれかの方法。
[本発明1152]
インプット組成物が、インキュベーションの前に試験作用物質または化合物に曝露または接触されていた細胞を含み、任意で、曝露または接触させることが、CARを発現しているT細胞を含むインプット組成物を産生するためのプロセスの1つまたは複数の段階の間に実施される、本発明1127〜1151のいずれかの方法。
[本発明1153]
前記方法が、複数のインプット組成物に対して実施され、複数の該インプット組成物のそれぞれが、異なるプロセスにより産生される、本発明1127〜1152のいずれかの方法。
[本発明1154]
前記方法が、アウトプット組成物の表現型または活性と、対照組成物の表現型または活性とを比較する工程をさらに含み、
任意で、対照組成物が、CAR依存性活性を刺激するための同じ条件下で少なくとも10日間インキュベートされていたT細胞の該組成物であり、
T細胞の該組成物が、試験作用物質もしくは化合物の存在下で産生されたものではないか、またはインプット組成物と比較して代替的なプロセスにより産生されたものである、本発明1127〜1153のいずれかの方法。
[本発明1155]
前記方法が、低下した疲弊、低下した活性化または減少した分化を示すアウトプット組成物を同定する工程をさらに含み、任意で、減少した分化が、1つまたは複数のナイーブ様T細胞マーカーの増加した発現を含む、本発明1127〜1154のいずれかの方法。