【手続補正書】
【提出日】令和3年8月10日(2021.8.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
(a) 活性化抗体を含む第1溶液を提供する段階；
(b) 活性化ポリペプチドを含む第2溶液を提供する段階；
(c) 該第1溶液および第2溶液を、該活性化抗体が該活性化ポリペプチドと接触する連続流反応器に通し、それによって該抗体と該ポリペプチドとの間で共有結合を形成する段階
を含む、抗体-ポリペプチドコンジュゲートを作製する方法。
【請求項２】
前記抗体がIgGである、請求項1に記載の方法。
【請求項３】
前記抗体が抗CA125抗体である、請求項1に記載の方法。
【請求項４】
前記ポリペプチドが検出ポリペプチドである、請求項1に記載の方法。
【請求項５】
前記検出ポリペプチドが、酵素、ビオチン結合ポリペプチド、または蛍光タンパク質である、請求項1に記載の方法。
【請求項６】
前記酵素が、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、およびウレアーゼからなる群より選択される、請求項5に記載の方法。
【請求項７】
前記抗体が、スクシンイミジルエステル、ヘテロ二官能性試薬、カルボジイミド、または過ヨウ素酸ナトリウムにより活性化される、請求項1に記載の方法。
【請求項８】
前記スクシンイミジルエステルがスクシンイミジル4-(N-マレイミドメチル)シクロヘキサン-1-カルボン酸である、請求項7に記載の方法。
【請求項９】
前記ポリペプチドがN-スクシンイミジル-S-アセチルチオ-酢酸により活性化される、請求項1に記載の方法。
【請求項１０】
活性化抗体：活性化ポリペプチドの比が1:1〜約1:4である、請求項1に記載の方法。
【請求項１１】
約0.1 mL/min〜約10.0 mL/minの流速で前記溶液が前記連続流反応器に通される、請求項1に記載の方法。
【請求項１２】
約1.0 mL/min〜約5.0 mL/minの流速で前記溶液が前記連続流反応器に通される、請求項10に記載の方法。
【請求項１３】
前記流速が約30秒間〜約15分間の滞留時間を提供する、請求項11に記載の方法。
【請求項１４】
前記流速が約1分間〜約5分間の滞留時間を提供する、請求項11に記載の方法。
【請求項１５】
前記抗体-ポリペプチドコンジュゲートが1:1〜約1:3の抗体：ポリペプチド比を含む、請求項1に記載の方法。
【請求項１６】
段階 (c) の後に、停止溶液、クエンチャー、またはそれらの組み合わせを連続流反応器に添加する段階をさらに含む、請求項1に記載の方法。
【請求項１７】
前記抗体-ポリペプチドコンジュゲートを精製する段階をさらに含む、請求項1に記載の方法。
【請求項１８】
(a) 修飾型抗体を含む第1溶液を提供する段階；
(b) 該修飾型抗体に特異的に結合する検出ポリペプチドを含む第2溶液を提供する段階；
(c) 該溶液を、該修飾型抗体が該ポリペプチドと接触する連続流反応器に通し、それによって該抗体と該検出ポリペプチドとの間で非共有結合を形成する段階
を含む、抗体-ポリペプチドコンジュゲートを作製する方法。
【請求項１９】
抗体の修飾が、ビオチン化、カルボキシル化、リン酸化、メチル化、アセチル化、ニトロシル化、シトルリン化、および脱アミノ化からなる群より選択される、請求項18に記載の方法。
【請求項２０】
前記抗体がIgGである、請求項18に記載の方法。
【請求項２１】
前記抗体が抗CA125抗体である、請求項18に記載の方法。
【請求項２２】
前記検出ポリペプチドが、酵素、ビオチン結合ポリペプチド、または蛍光タンパク質である、請求項18に記載の方法。
【請求項２３】
前記酵素が、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、およびウレアーゼからなる群より選択される、請求項22に記載の方法。
【請求項２４】
前記ビオチン結合ポリペプチドが、ストレプトアビジン、アビジン、ニュートラアビジン、または抗ビオチン抗体である、請求項22に記載の方法。
【請求項２５】
活性化抗体：検出ポリペプチドの比が1:1〜約1:4である、請求項18に記載の方法。
【請求項２６】
約0.1 mL/min〜約10.0 mL/minの流速で前記溶液が前記連続流反応器に通される、請求項18に記載の方法。
【請求項２７】
約1.0 mL/min〜約5.0 mL/minの流速で前記溶液が前記連続流反応器に通される、請求項26に記載の方法。
【請求項２８】
前記流速が約30秒間〜約15分間の滞留時間を提供する、請求項26に記載の方法。
【請求項２９】
前記流速が約1分間〜約5分間の滞留時間を提供する、請求項26に記載の方法。
【請求項３０】
前記抗体-ポリペプチドコンジュゲートが1:1〜約1:3の抗体：ポリペプチド比を含む、請求項18に記載の方法。
【請求項３１】
段階 (c) の後に、停止溶液、クエンチャー、またはそれらの組み合わせを連続流反応器に添加する段階をさらに含む、請求項18に記載の方法。
【請求項３２】
前記抗体-ポリペプチドコンジュゲートを精製する段階をさらに含む、請求項18に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００３】
抗体ポリペプチドコンジュゲートを作製する方法が、本明細書において提供される。本方法は、活性化抗体を含む第1溶液を提供する段階；活性化ポリペプチドを含む第2溶液を提供する段階；溶液を、活性化抗体が活性化ポリペプチドと接触する連続流反応器に通し、それによって抗体-ポリペプチドコンジュゲートを形成する段階を含み得る。ポリペプチドは、酵素、ビオチン結合ポリペプチド、または蛍光タンパク質であってよい。溶液は、約0.1 mL/min〜約10.0 mL/minの流速で連続流反応器に通されることができる。流速は、約30秒間〜約15分間の滞留時間を提供し得る。いくつかの態様において、流速は、約1分間〜約5分間の滞留時間を提供し得る。抗体-ポリペプチドコンジュゲートは、1:1〜1:3の抗体：ポリペプチド比を含み得る。
[本発明1001]
(a) 活性化抗体を含む第1溶液を提供する段階；
(b) 活性化ポリペプチドを含む第2溶液を提供する段階；
(c) 該第1溶液および第2溶液を、該活性化抗体が該活性化ポリペプチドと接触する連続流反応器に通し、それによって該抗体と該ポリペプチドとの間で共有結合を形成する段階
を含む、抗体-ポリペプチドコンジュゲートを作製する方法。
[本発明1002]
前記抗体がIgGである、本発明1001の方法。
[本発明1003]
前記抗体が抗CA125抗体である、本発明1001の方法。
[本発明1004]
前記ポリペプチドが検出ポリペプチドである、本発明1001の方法。
[本発明1005]
前記検出ポリペプチドが、酵素、ビオチン結合ポリペプチド、または蛍光タンパク質である、本発明1001の方法。
[本発明1006]
前記酵素が、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、およびウレアーゼからなる群より選択される、本発明1004の方法。
[本発明1007]
前記抗体が、スクシンイミジルエステル、ヘテロ二官能性試薬、カルボジイミド、または過ヨウ素酸ナトリウムにより活性化される、本発明1001の方法。
[本発明1008]
前記スクシンイミジルエステルがスクシンイミジル4-(N-マレイミドメチル)シクロヘキサン-1-カルボン酸である、本発明1006の方法。
[本発明1009]
前記ポリペプチドがN-スクシンイミジル-S-アセチルチオ-酢酸により活性化される、本発明1001の方法。
[本発明1010]
活性化抗体：活性化ポリペプチドの比が1:1〜約1:4である、本発明1001の方法。
[本発明1011]
約0.1 mL/min〜約10.0 mL/minの流速で前記溶液が前記連続流反応器に通される、本発明1001の方法。
[本発明1012]
約1.0 mL/min〜約5.0 mL/minの流速で前記溶液が前記連続流反応器に通される、本発明1010の方法。
[本発明1013]
前記流速が約30秒間〜約15分間の滞留時間を提供する、本発明1011の方法。
[本発明1014]
前記流速が約1分間〜約5分間の滞留時間を提供する、本発明1011の方法。
[本発明1015]
前記抗体-ポリペプチドコンジュゲートが1:1〜約1:3の抗体：ポリペプチド比を含む、本発明1001の方法。
[本発明1016]
段階 (c) の後に、停止溶液、クエンチャー、またはそれらの組み合わせを連続流反応器に添加する段階をさらに含む、本発明1001の方法。
[本発明1017]
前記抗体-ポリペプチドコンジュゲートを精製する段階をさらに含む、本発明1001の方法。
[本発明1018]
(a) 修飾型抗体を含む第1溶液を提供する段階；
(b) 該修飾型抗体に特異的に結合する検出ポリペプチドを含む第2溶液を提供する段階；
(c) 該溶液を、該修飾型抗体が該ポリペプチドと接触する連続流反応器に通し、それによって該抗体と該検出ポリペプチドとの間で非共有結合を形成する段階
を含む、抗体-ポリペプチドコンジュゲートを作製する方法。
[本発明1019]
抗体の修飾が、ビオチン化、カルボキシル化、リン酸化、メチル化、アセチル化、ニトロシル化、シトルリン化、および脱アミノ化からなる群より選択される、本発明1018の方法。
[本発明1020]
前記抗体がIgGである、本発明1018の方法。
[本発明1021]
前記抗体が抗CA125抗体である、本発明1018の方法。
[本発明1022]
前記検出ポリペプチドが、酵素、ビオチン結合ポリペプチド、または蛍光タンパク質である、本発明1018の方法。
[本発明1023]
前記酵素が、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、およびウレアーゼからなる群より選択される、本発明1022の方法。
[本発明1024]
前記ビオチン結合ポリペプチドが、ストレプトアビジン、アビジン、ニュートラアビジン、または抗ビオチン抗体である、本発明1022の方法。
[本発明1025]
活性化抗体：検出ポリペプチドの比が1:1〜約1:4である、本発明1018の方法。
[本発明1026]
約0.1 mL/min〜約10.0 mL/minの流速で前記溶液が前記連続流反応器に通される、本発明1018の方法。
[本発明1027]
約1.0 mL/min〜約5.0 mL/minの流速で前記溶液が前記連続流反応器に通される、本発明1026の方法。
[本発明1028]
前記流速が約30秒間〜約15分間の滞留時間を提供する、本発明1026の方法。
[本発明1029]
前記流速が約1分間〜約5分間の滞留時間を提供する、本発明1026の方法。
[本発明1030]
前記抗体-ポリペプチドコンジュゲートが1:1〜約1:3の抗体：ポリペプチド比を含む、本発明1018の方法。
[本発明1031]
段階 (c) の後に、停止溶液、クエンチャー、またはそれらの組み合わせを連続流反応器に添加する段階をさらに含む、本発明1018の方法。
[本発明1032]
前記抗体-ポリペプチドコンジュゲートを精製する段階をさらに含む、本発明1018の方法。