(57)【要約】【課題】塩化コリンなどの第四級アンモニウム化合物又はアミノ酸源で安定化されたケイ酸の、生物学的に利用可能な固体のガレヌス配合物を配合することを目的とする。【解決手段】本発明は、以下のステップ：ｉ）第四級アンモニウム化合物、又はアミノ酸、又はアミノ酸源、又はそれらの組み合わせ物である安定化剤の存在下に、ケイ素化合物をオルトケイ酸及び／又はそれのオリゴマーへ加水分解することによって、安定化されたケイ酸を形成し；ｉｉ）ケイ酸に対する担体の負荷容量以下で、上記安定化されたケイ酸を担体と混合し：及び、ｉｉｉ）それによって得られる混合物を押出して、押出物を形成する、を含むケイ酸含有押出物の製造法；この方法で得られる押出物；動物用飼料、補助飼料、人の食料、及び／又は補助食料の製造のための、並びに医薬又は化粧用製剤の製造のための使用、並びに感染症、爪、皮膚、歯、コラーゲン、結合組織、骨、細胞世代及び変性（老化）プロセスの治療のための使用；及び押出物を含む医薬組成物への使用に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下のステップ：
ｉ）第四級アンモニウム化合物、又はアミノ酸、又もしくはアミノ酸源、又はそれらの組み合わせ物である安定化剤の存在下で、ケイ素化合物をオルトケイ酸及び／又はそれのオリゴマーに加水分解することによって、安定化されたケイ酸を形成し；
ｉｉ）ケイ酸に対する担体の負荷容量（loading capacity）以下の量で、前記安定化されたケイ酸を担体と混合し；さらに、
ｉｉｉ）それによって得られた混合物を押出して、押出物を形成する工程、
を含み、
前記担体が、(i) 糖類、ラクトース、ペクチン及びアルギネートの混合物、ポリ‐及びオリゴ糖類の混合物、マルトデキストリン、グルカン類及びその誘導物の混合物、デンプン及びその誘導物の混合物、天然及び準合成ファイバー類の混合物、またはタンパク質及びタンパク質加水分解物の混合物であるか、または(ii) 前記(i)とセルロースとの混合物である、ケイ酸含有押出物の製造方法。
【請求項２】
前記ケイ酸がオルトケイ酸及び／又はオリゴマーである、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記第四級アンモニウム化合物が塩化コリンである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記アミノ酸が、プロリン、セリン、リシン、アルギニン、グリシン、又はそれらの組み合わせ物である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項５】
前記アミノ酸源がポリペプチド又はタンパク質加水分解物である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項６】
前記安定化されたケイ酸が、２．５〜３．５体積％のケイ素含有量、６５〜７５質量％のコリン含有量、１５〜２５質量％の水含有量を有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
それぞれ６５〜５０％及び３５〜５０％の割合で、前記担体が前記安定化されたケイ酸と混合される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記担体の、安定化されたケイ酸に対する負荷容量が、５０％未満である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
前記押出物が粒子へと球状化される、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１０】
前記粒子が乾燥され、８００〜１２００μｍの粒径をもつ、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法によって得られる押出物。
【請求項１２】
動物用飼料、補助飼料、人の食料及び／又は補助食料の製造に、並びに医薬又は化粧品製造に、並びに感染症、爪、毛髪、皮膚、歯、コラーゲン、結合組織、骨、骨減少症、細胞増殖及び変性（老化）プロセスの治療に用いるための、請求項１１に記載された押出物。
【請求項１３】
請求項１１に記載された押出物を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ケイ酸含有押出物の製造方法、前記押出物、その特定の使用、及び前記方法で得られる押出物を含む医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ケイ素（Ｓｉ）は、様々な生物、例えば、珪藻類、ケイ素蓄積植物類、鳥類、及び哺乳動物類において、必須の役割をもつことが報告された。結合組織成分、及びその他のさらに特殊化した組織、例えば骨及び軟骨など、の形成は、ケイ素の状態に依存することが示された。食餌のＳｉ不足は、骨の変形、薄い外皮、及び石灰化の少ない骨基質を引き起こす（Carlisle, 1989, Silicon in: Handbook of Nutritionally Essential Mineral Elements, B. L. Dell及びR. A. Sunde, Marcel Dekker Inc., New York, 第６０３〜６１８頁）。ラットにおいてケイ素が失われると、様変わりした骨のミネラル組成、及び骨に特異的なホスファターゼ酵素の活性低下を引き起こす（Seabomら、1994, J Trace Elem Exp Med, 7, 11）。ケイ素化合物の治療上の応用が、一般に、骨粗しょう症、アテローム性動脈硬化症、神経変性疾患、高血圧、老化皮膚、もろい毛髪若しくはもろい爪、免疫欠損、及び結合組織関連疾患などの様々な疾病に対する臨床前及び臨床研究の両者で報告された。
【０００３】
ケイ素の生物学的利用能はその化学的形態に左右される。固体の食餌用ケイ素化合物は低い溶解性しかもたず、かつ胃腸であまり吸収されない。水及びビールなどの飲料中にある可溶性ケイ素化合物は容易に吸収され、そのためケイ素の生物学的利用可能源と考えられる。これらの飲料中に存在する水溶性ケイ素化合物であるオルトケイ酸は、希釈濃度でのみ安定である。オルトケイ酸の濃縮された複合物が、第四級アンモニウム塩化合物及びアミノ酸などの安定化剤とともに記載されている（「安定化されたオルトケイ酸含有製剤及び生物学的製剤」”Stabilized orthosilicic acid comprising preparation and biological preparation”、米国特許第５，９２２，３６０号及び欧州特許ＥＰ０４７３９２２Ｂ１号）。これらの安定化された形態のオルトケイ酸は、その他のケイ素化合物と比較して、動物及びヒトの両者において、液状濃縮物として投与された場合に非常に高い生物学的利用能をもつことが発見された（Calommeら、1988, Comparative bioavailability study of silicon supplements in healthy subjects, Journal of Parenteral and Enteral Nutrition, 22, S12、及びVan Dyckら、1999, Bioavailability of silicon from foods and food supplements, Fresenius Journal of Analytical Chemistry, 363, 541‐544）。投与の正確性及びコンプライアンスなどの重要な問題を考慮した場合、液体配合物に比べて固体のガレヌス製剤形態が好まれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】米国特許第５，９２２，３６０号明細書
【特許文献２】欧州特許公報ＥＰ０４７３９２２Ｂ１号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
塩化コリンなどの第四級アンモニウム化合物又はアミノ酸源で安定化されたケイ酸の、生物学的に利用可能な、固体のガレヌス配合物、を配合するために様々な試験が行われた。そのような製剤を製造することはきわめて難しいが、なぜならオルトケイ酸が生物学的利用不能なゲル及び沈殿物に速やかに変化してしまうからである。実際に、非毒性溶媒を添加することなしに固体又は半固体の賦形剤を添加することは、オルトケイ酸の高分子への高分子化又はゲル化をまねき、それにより最終製剤の生物学的利用能を低下させる。ゼラチン又はメチルセルロースのカプセルを、安定化されたケイ酸の液状マトリクスで直接満たすことは、安定性試験においてインキュベートした場合にカプセルの変形及び漏れをまねく。オルトケイ酸の安定化剤、例えば塩化コリン、は非常に吸湿性であり、かつ周囲のカプセルから水を呼び込み、それはついには変形したカプセルとなる。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は上記課題を解決し、第一の局面においては、以下の：
ｉ）第四級アンモニウム化合物、又はアミノ酸、又はアミノ酸源、又はそれらの組み合わせ物である安定化剤の存在下で、ケイ素化合物を、オルトケイ酸及び／又はそれのオリゴマーに加水分解することによって、安定化されたケイ酸を形成し；さらに、
ｉｉ）ケイ酸に対する担体の負荷容量（loading capacity）以下の量で、安定化されたケイ酸を担体と混合し；さらに、
ｉｉｉ）それによって得られた混合物を押出して、押出物を形成する、
を含む、生物学的に利用可能なケイ酸を含有する押出物の製造方法を提供する。
本発明の第二の局面は、動物用飼料又は補助飼料の生産、人の食料又は補助食料の生産、及び、医薬用又は化粧品用製剤の生産において使用するため、並びに、感染症、爪、毛髪、皮膚、歯、コラーゲン、結合組織、骨、骨減少症、細胞世代及び変性（老化）プロセスの治療に使用するための上記押出物を提供する。
本発明の第三の局面は、上記押出物を含有する医薬組成物に関する。
【０００７】
本発明の好ましい態様においては、オルトケイ酸及びそれのオリゴマーが用いられる。オルトケイ酸（ＯＳＡ）のポリマー類は、百から数千のモノマー（ＯＳＡ）と呼ばれる単位から形成された高分子であるが、オリゴマーは中庸の大きさの分子（モノマー（ＯＳＡ）よりはずっと大きく、高分子よりは小さい）である（Brinker CJら、Sol-Gel Science, The Physics and Chemistry of Sol-gel processing, Academic Press, Boston,第５頁）。一般に、オルトケイ酸のオリゴマーは、最大約１００のオルトケイ酸単位、例えば２〜５０、２〜４０、又は２〜３０のオルトケイ酸単位を含む。オルトケイ酸の前駆物質としては、加水分解性ケイ素化合物、例えば、ハロゲン化ケイ素、ケイ素エステル、ケイ酸塩、又はエトキシシラノールなどのアルキルシラノール化合物、が用いられる。安定化剤としては、塩化コリンなどの第四級アンモニウム化合物；プロリン、セリン、リシン、アルギニン、グリシン、又はそれらの組み合わせ物などのアミノ酸；又はポリペプチド及びタンパク質加水分解物などのアミノ酸源を用いることができ、例えば、ブタコラーゲン又はゼラチンである。本発明の特に好ましい態様においては、上記安定化されたケイ酸及びそれのオリゴマーが２．５〜３．５体積％のケイ素含有量、６５〜７５質量％のコリン含有量、１５〜２５質量%の水含有量をもつ。
【０００８】
安定化されたケイ酸の生物学的利用可能な固体形態を提供するために、押出し成形技術で用いることができる担体賦形剤が添加される。安定化されたケイ酸のための担体として用いることができる代表的な化合物は、セルロース又はそれらの誘導物、例えば、セルロース、微結晶性セルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、もしくはセルロース・ガム、またはこれらの誘導物である。その他の担体又は担体とセルロースとの組合せ物は、糖類、ラクトース、ペクチン及びアルギネートの混合物、ポリ‐及びオリゴ糖類の混合物、マルトデキストリン、グルカン類及びその誘導物の混合物、デンプン及びその誘導物の混合物、天然及び準合成ファイバー類の混合物、タンパク質及びタンパク質加水分解物の混合物、またはこれらとセルロースとの混合物である。
【０００９】
本発明の好ましい態様においては、安定化されたケイ酸のための担体として、微結晶性セルロースが用いられる。これは、所望する狭い粒径分布をもつペレットに押出し可能かつ球状化可能なプラスチック塊をもたらす。好ましい態様においては、ケイ酸に対する負荷容量（loading capacity）が５０％未満であり、これは最大５０質量％の安定化されたケイ酸が、５０質量％の微結晶性セルロースと混合され、かつ、必要な粒状特性を得るために充分な適当量の水が添加されることを意味する。さらに好ましい態様は、３５質量％のコリン安定化ケイ酸を６５質量％の微結晶性セルロースとともに用いることである。
【００１０】
欧州特許公報ＥＰ１１１０９０９Ａ１号は、ケイ酸をベースとした製剤を開示するが、これは溶剤を用いることによって調製される。
【００１１】
本発明の好ましい態様において、上記の押出しされたストランドは、球状化装置（spheronizer）中に移され、ここで回転する摩擦板と接触して、それらは瞬時に粒子へと壊される。得られた粒子は、流動床乾燥又は別の方法により、好ましくは最大温度７０℃を用いて、ペレットへと乾燥される。このペレットの最終的な含水量は、好ましくは５質量％未満に保たれる。より高い水濃度又は７０℃より高い乾燥温度は、安定化されたケイ酸の重縮合を抑えるために避けることが好ましい。得られたペレットの篩分析は、上記の好ましい方法に従うことで９０％より多くのペレットが８００〜１２００μｍの粒径を有することを示す（図１を参照されたい）。得られたペレットは、カプセル化されることができ、錠剤にプレスされることができ、又は医薬組成物中の成分として、又は食料若しくは動物用飼料の製造に用いられることができる。
【００１２】
【表１】
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【００１３】
本発明のケイ酸押出物は、アテローム性動脈硬化症などの心臓血管疾患、骨減少症及び腱炎などの筋骨格疾患、粘膜の破壊を伴う慢性感染症、副鼻腔炎及び潰瘍状態、真菌性皮膚疾患などの感染症、神経疾患、変性（老化）プロセス、免疫不全、並びに、結合組織及び特殊化した組織、例えば骨、歯、毛髪、及び皮膚を冒す疾病の予防及び治療において、経口又は好ましいその他すべての適当な方法で投与することができる。
【００１４】
本発明の言及した特徴及び利点、並びにさらなる特徴及び利点は、以下の図及び例に基づいて理解される。これらの例は説明を目的としたものであり、したがって本発明の範囲を制限することを意図するものではない。
【実施例】
【００１５】
（製造例Ａ）
塩化コリンをドライの塩化水素酸で処理する。得られるコリン溶液に四塩化ケイ素（ＩＶ）を加える（塩化コリンに対するＳｉＣｌ４の割合は、１〜５ｍｏｌ当り１ｍｏｌ）。−１０℃〜−３０℃の温度範囲に冷却しながら、得られた溶液を水添加（氷／氷水）によって加水分解する。水酸化ナトリウムを加え、かつ温度を０℃より低く保つことによってこの溶液を中性化する。最終的なｐＨは１〜１．５である。活性炭による精製に続けて、沈殿物を活性炭とともに濾別する。２．５〜３．５体積％のケイ素、６５〜７５質量％のコリン、及び１５〜２５質量％の水を含有する調製物が得られるまで、真空下での蒸留によって含水量を低下させる。絶え間なく攪拌しながら、３５％のこの安定化されたケイ酸溶液（２１０ｇ）を、６５％の微結晶性セルロース（Ａｖｉｃｅｌ ｐＨ １０１又はＶｉｖａｐｕｒ ｔｙｐｅ １９１、１３９０ｇ）にゆっくり加える。脱塩水を加え（Ａｖｉｃｅｌの質量の約１７％）、所望の粒子特性を得る。バスケット押出し機（Ｃａｌｅｖａ Ｍｏｄｅｌ １０、Ｓｔｕｒｍｉｎｓｔｅｒ Ｎｅｗｔｏｎ，英国）を使用して、上記の湿った塊状物を押出し成形した。２〜３分間、７５０ｒｐｍ（Ｃａｌｅｖａ Ｍｏｄｅｌ １２０ スフェロナイザー、Ｓｔｕｒｍｉｎｓｔｅｒ Ｎｅｗｔｏｎ、英国）で押出物を球状化する。カール・フィッシャー滴定法によって決定して、その含水量が５％未満となるまで、得られた球体を乾燥する。空気にさらされたペレットは、表１に示したように水を急速に吸収する。このペレットのケイ素含有量は、０．７〜１．２質量％である。２９Ｓｉ‐ＮＭＲを使った構造解析は、−３０と−７０ｐｐｍの間、これは炭素（Ｃ）が結合したケイ素（Ｓｉ）に対するスペクトル領域であるが、にいかなるシグナルも示さなかった。このスペクトルは、−７２、−８２、−９２、−１０２、及び−１１２あたりに共鳴を示したが、これらはそれぞれＱ０、Ｑ１、Ｑ２、Ｑ３、及びＱ４化学種に対して特徴的である。１ｍｌのｐＨ９．５緩衝液又は人工胃液Ｒ（欧州薬局方、第４版、３２８頁）中での３５０ｍｇのペレットのインキュベーションの後、主として、化学種Ｑ０（オルトケイ酸）のシグナルが２９Ｓｉ‐ＮＭＲスペクトル中にみられる。
【００１６】
【表２】
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【００１７】
（製造例Ｂ）
溶液Ａ： 塩化コリンをドライの塩化水素酸で処理する。得られるコリン溶液に四塩化ケイ素（ＩＶ）を加える（塩化コリンに対するＳｉＣｌ４の割合は、１〜５ｍｏｌ当り１ｍｏｌ）。
溶液Ｂ： ブタ・ゼラチン加水分解物の水溶液を調製する（１〜５ｇのゼラチン加水分解物／水１００ｍｌ）。
溶液Ａ及びＢを混合し、その後すぐに、−１０℃〜−３０℃の温度範囲で冷却しながら水（氷／氷水）を加えることによって、得られた溶液を加水分解する。水酸化ナトリウムを添加し、かつ、温度を０℃より低く保つことによって、この溶液を中性化する。最終的なｐＨは１〜１．５の間である。活性炭による精製に続いて、活性炭とともに沈殿物を濾別する。真空下で蒸留することによって含水量を低下させる。間断なく攪拌しながら、６５％の微結晶性セルロース（Ａｖｉｃｅｌ ｐＨ １０１又はＶｉｖａｐｕｒ ｔｙｐｅ １０１、１３９０ｇ）に、３５％の上記安定化されたケイ酸溶液（２１０ｇ）をゆっくり加える。脱塩水を加えて（Ａｖｉｃｅｌの質量の約１７％）、所望する粒子特性を得る。バスケット押出し機（Ｃａｌｅｖａ Ｍｏｄｅｌ １０、Ｓｔｕｒｍｉｎｓｔｅｒ Ｎｅｗｔｏｎ，英国）を使用して、上記の湿った塊状物を押出し成形した。２〜３分間、７５０ｒｐｍ（Ｃａｌｅｖａ Ｍｏｄｅｌ １２０ スフェロナイザー、Ｓｔｕｒｍｉｎｓｔｅｒ Ｎｅｗｔｏｎ、英国）で押出物を球状化する。カール・フィッシャー滴定法によって決定したその含水量が５％未満となるまで、得られた球体を乾燥する。空気にさらされたペレットは、表１に示したように、水を急速に吸収する。このペレットのケイ素含有量は、０．２〜１．２質量％である。
【００１８】
（製造例Ｃ）
塩化コリンをドライの塩化水素酸で処理する。得られるコリン溶液に四塩化ケイ素（ＩＶ）を加える（塩化コリンに対するＳｉＣｌ４の割合は、１〜５ｍｏｌ当り１ｍｏｌ）。−１０℃〜−３０℃の温度範囲に冷却しながら、水添加（氷／氷水）によって、得られた溶液を加水分解する。水酸化ナトリウムを加え、かつ、温度を０℃より低く保つことによって、この溶液を中性化する。最終的なｐＨは１〜１．５である。活性炭による精製に続けて、沈殿物を活性炭とともに濾別する。コラーゲン加水分解物の水溶液（５％ｗ／ｖ）を１：１の割合で加える。真空下での蒸留によって含水量を低下させる。絶え間なく攪拌しながら、３５％の上記安定化されたケイ酸溶液（２１０ｇ）を、６５％の微結晶性セルロース（Ａｖｉｃｅｌ ｐＨ １０１又はＶｉｖａｐｕｒ ｔｙｐｅ １９１、１３９０ｇ）にゆっくり加える。脱塩水を加えて（Ａｖｉｃｅｌの質量の約１７％）、所望の粒子特性を得る。バスケット押出し機（Ｃａｌｅｖａ Ｍｏｄｅｌ １０、Ｓｔｕｒｍｉｎｓｔｅｒ Ｎｅｗｔｏｎ，英国）を使用して、上記の湿った塊状物を押出し成形する。２〜３分間、７５０ｒｐｍ（Ｃａｌｅｖａ Ｍｏｄｅｌ １２０ スフェロナイザー、Ｓｔｕｒｍｉｎｓｔｅｒ Ｎｅｗｔｏｎ、英国）で押出物を球状化する。カール・フィッシャー滴定法によって決定して、その含水量が５％未満になるまで、得られた球体を乾燥する。空気にさらされたペレットは、表１に示したように、水を急速に吸収する。このペレットのケイ素含有量は０．３〜１．２質量％である。
【００１９】
（製造例Ｄ）
塩化コリンをドライの塩化水素酸で処理する。得られるコリン溶液に四塩化ケイ素（ＩＶ）を加える（塩化コリンに対するＳｉＣｌ４の割合は、１〜５ｍｏｌ当り１ｍｏｌ）。−１０℃〜−３０℃の温度範囲に冷却しながら、水添加（氷／氷水）によって、得られた溶液を加水分解する。水酸化ナトリウムを加え、かつ、温度を０℃より低く保つことによって、この溶液を中性化する。最終的なｐＨは１〜１．５である。活性炭による精製に続けて、沈殿物を活性炭とともに濾別する。真空下での蒸留によって含水量を低下させる。絶え間なく攪拌しながら、３５％のこの安定化されたケイ酸溶液（２１０ｇ）を、５０％の微結晶性セルロース（Ａｖｉｃｅｌ ｐＨ １０１又はＶｉｖａｐｕｒ ｔｙｐｅ １９１、１３９０ｇ）および１５％の無水のコラーゲン加水分解物にゆっくり加える。脱塩水を加え（Ａｖｉｃｅｌの質量の約１７％）、所望の粒子特性を得る。バスケット押出し機（Ｃａｌｅｖａ Ｍｏｄｅｌ １０、Ｓｔｕｒｍｉｎｓｔｅｒ Ｎｅｗｔｏｎ，英国）を使用して、上記の湿った塊状物を押出し成形する。２〜３分間、７５０ｒｐｍ（Ｃａｌｅｖａ Ｍｏｄｅｌ １２０ スフェロナイザー、Ｓｔｕｒｍｉｎｓｔｅｒ Ｎｅｗｔｏｎ、英国）で、この押出物を球状化する。カール・フィッシャー滴定法によって決定した含水量が５％未満となるまで、得られた球体を乾燥する。空気にさらされたペレットは、表１に示したように、水を急速に吸収する。このペレットのケイ素含有量は、０．３〜１．２質量％である。
【００２０】
（配合例Ａ）
上記製造例に従って作られたペレットを、ベジキャップス サイズ０（ｖｅｇｉｃａｐｓ ｓｉｚｅ ０）中にカプセル化した。このカプセルは、ａｌｕ‐ａｌｕブリスター中にブリスター包装するか、又は高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）のボトル及びカバー中に詰めた。シリカゲル袋を入れ、かつ、ボトルを密封した。この包装したペレットを４０℃及び７５％相対湿度で６ヶ月間インキュベートした。このインキュベーション期間の後、両者の包装材料中のペレットの含水量は、インキュベーション前の含水量と同等であることがわかった（表２参照）。
【００２１】
【表３】
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【００２２】
（配合例Ｂ）
上記製造例に従って作られたペレットをベジキャップス サイズ０（ｖｅｇｉｃａｐｓ ｓｉｚｅ ０）中にカプセル化した。カプセル当りの平均のペレット質量は５０３ｍｇであり、これはカプセル当り４．５ｍｇのケイ素投与量に等しい。
【００２３】
状況説明と同意、承諾書の後、１２人の健康な被験者（男性６人、女性６人、年齢：２３〜５１歳）が参加した。本試験の開始前３ヶ月以内にＳｉサプリメントを摂取した人は一人もいない。空腹な各被験者は、クロスオーバー・プロトコルで、Ｓｉを以下のように経口投与された：液状のコリン安定化オルトケイ酸の形態中の９ｍｇのＳｉ（図２中の「液体」を参照されたい）、及び１週間後に２カプセルのペレット化押出物（図２の「押出物」を参照されたい）。サプリメント投与の前、及び投与後１、２、４、６、及び８時間後に、Ｓｉフリーのポリプロピレンチューブ中に血液サンプルを採取した。試験の間は、上記ケイ素サプリメントを投与した後２及び６時間に同じ食事がとられた。Ｓｉ濃度は、血清中についてＡＡＳ（ゼーマン原子吸光スペクトル測定装置、パーキン・エルマー社、図２を参照）で決定した。時間曲線の下の領域は線形台形公式を用いて計算し、サプリメントを投与した後の８時間の時間内の合計Ｓｉ吸収（生物学的利用能）のパラメータとして用いた（図３を参照されたい）。上記押出し形態の安定化ケイ酸の生物学的利用能は、液体形態に完全に匹敵し、かつ両形態とも血清中における類似の動的プロファイルをもつ。
【００２４】
【表４】
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【００２５】
【表５】
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【００２６】
（配合例Ｃ）
上記製造例Ａ、Ｂ、Ｃ、又はＤに従って作られたペレットを、ベジキャップ サイズ０中にカプセル化した。カプセル当たりのペレットの平均質量は３２４ｍｇであり、これはカプセル当たり３ｍｇのケイ素投与量に等しかった。
股関節部に、証拠書類によって立証された骨減少症のある４人の女性（−１．５以下のＴスコア、表３参照）に１２ヶ月の間、上記ペレット化押出物（毎日１カプセル、２人の患者）、又はプラシーボ（対照群、１カプセルに３２４ｍｇの微結晶性セルロース、２人の患者）でサプリメント投与した。全ての患者に、一日当たり１０００ｍｇのカルシウム及び２０マイクログラムのコレカルシフェロールをサプリメント投与した。股関節部の骨塩密度（ＢＭＤ）をベースライン（Ｔ０）及び１２ヶ月のサプリメント投与後（Ｔ１２）にＤＥＸＡで測定した。
【００２７】
【表６】
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【００２８】
上記ペレット化押出物を用いたサプリメント投与は骨塩密度の増加を引き起こしたが、プラシーボ群においてはＢＭＤが低下した。これらの結果は上記ペレット化押出物が、万一の場合のさらなる骨量の減少を防止するために有用でありうることを示唆する。