(57)【要約】【課題】  汎用検出器を備えた液体クロマトグラフ装置において、キャピラリー液体クロマトグラフといった微小流量を送液するクロマトグラフへ適用可能な装置を提供すること。【解決の手段】  試料液中に含まれる成分を分離する分析カラム、分析カラムから溶出した試料液が流れる中空パイプと前記中空パイプを自由振動し得るように保持する保持手段と前記中空パイプの振動を励起する励振素子と前記中空パイプの振動を検出するピックアップ素子と前記中空パイプの振動数から密度を算出する演算手段と少なくとも前記中空パイプ／前記励振素子／前記ピックアップ素子を収納する収納手段から構成される前記分析カラムから溶出した試料液の密度を測定する測定手段、及び前記測定手段より出力された密度の変化を検出する検出手段を備えた液体クロマトグラフ装置により前記課題を解決することができた。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
試料液中に含まれる成分を分離する分析カラムと、
前記分析カラムから溶出した試料液の密度を測定する測定手段と、
前記測定手段より出力された密度の変化を検出する検出手段を備えた、液体クロマトグラフ装置において、前記測定手段が、
分析カラムから溶出した試料液が流れる中空パイプと、
前記中空パイプを自由振動し得るように保持する保持手段と、
前記中空パイプの振動を励起する励振素子と、
前記中空パイプの振動を検出するピックアップ素子と、
前記中空パイプの振動数から密度を算出する演算手段と、
少なくとも前記中空パイプ、前記励振素子、及び前記ピックアップ素子を収納する収納手段から構成される、前記装置。
【請求項２】
試料液中に含まれる成分を分離する分析カラムと、
前記分析カラムから溶出した試料液の密度と前記分析カラムを通過しない参照液の密度との差を測定する測定手段と、
前記測定手段より出力された密度差の変化を検出する検出手段を備えた、液体クロマトグラフ装置において、前記測定手段が、
分析カラムから溶出した試料液が流れる中空パイプと、
前記分析カラムを通過しない参照液が流れる中空パイプと、
前記２本の中空パイプを自由振動し得るように保持する保持手段と、
前記２本の中空パイプの振動をそれぞれ励起する励振素子と、
前記２本の中空パイプの振動をそれぞれ検出するピックアップ素子と、
前記２本の中空パイプの振動数から密度差を算出する演算手段と、
少なくとも前記中空パイプ、前記励振素子、及び前記ピックアップ素子を収納する収納手段から構成される、前記装置。
【請求項３】
前記測定手段における前記２本の中空パイプが、一つの収納手段に収納されていることを特徴とする、請求項２に記載の装置。
【請求項４】
前記測定手段における前記２本の中空パイプが、中空パイプ毎に別の収納手段に収納され、かつ前記収納手段がさらに一つの収納手段に収納されていることを特徴とする、請求項２に記載の装置。
【請求項５】
前記測定手段における収納手段内部の空間が所定温度に温度制御されていることを特徴とする、請求項１から４に記載の装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は汎用検出器を備えた液体クロマトグラフ装置に関する。特に本発明はキャピラリー液体クロマトグラフといった微小流量を送液する液体クロマトグラフ装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
液体クロマトグラフ用検出器は、汎用性が高い検出器と選択性が高い検出器に大別され、用途に応じて選択される。
【０００３】
選択性の高い検出器としては、特定のＵＶ吸収を持つ物質のみを検出するＵＶ吸収検出器や、特定の蛍光を持つ物質のみを検出する蛍光検出器があげられる。
【０００４】
汎用性が高い検出器としては示差屈折率計がよく用いられる。示差屈折率計は、ほとんどのすべての物質が溶媒に溶け込むと溶液の屈折率が変化することを利用した検出器であり、溶媒（参照液という）と成分が溶けた溶媒（試料液という）の屈折率の差を測定する。さらに示差屈折率計は、屈折率による反射光強度の変化を検出するフレネル型示差屈折率計と屈折角の変化を検出するブライス型示差屈折率計がよく知られている。
【０００５】
示差屈折率計をキャピラリー液体クロマトグラフといった微小流量を送液する液体クロマトグラフに適用する場合、セルの内容積を１００ｎＬ以下、好ましくは数十ｎＬに抑える必要がある。しかしながら、フレネル型示差屈折率計では、セルの厚さを薄く形成することによってセル内容積を数μＬまで小さくすることが可能であるものの、それ以下に抑えることは困難であり、かつ反射光量の微量な変化を高感度に検出することは困難である。また、ブライス型示差屈折率計も直角三角形柱の流路をもつため、性能を低下させることなくセルの内容積を数μＬより小さくすることは困難である。さらに、ブライス型示差屈折率計はセルを透過した透過光の変位を拡大して検出するため、感度を上げるためにはセルとセンサの長さを長くとる必要があり、熱膨張や外力による光学ブロックの歪みの影響を受けやすくなる問題もある。
【０００６】
一方、ほとんどの物質は溶媒に溶け込むと溶液の密度が変化するため、分析カラムから溶出された試料液の密度を測定し、その密度変化を検出することで、前記分析カラムから溶出された成分を検出することができる。よって、溶液の密度変化を検出する検出器は、示差屈折率計に代わる、汎用性の高い検出器として用いることができる。
【０００７】
密度を測定する方法としては、一定流量で溶出される試料液を容器に採取し、その質量を所定時間毎に天秤で測定し、質量の増加量を流量で割って求める方法があげられる。前記方法は流速数ｍＬ／分といった比較的流量が多い一般的なクロマトグラフについては適用可能であるものの、キャピラリー液体クロマトグラフといった微小流量を送液するクロマトグラフに前記方法を適用する場合は、前記微小流量を完全に一定に保つことが困難であり、かつ天秤の精度上、質量の微小変化を精密に検出するのも困難である。
【０００８】
密度を測定する別の方法としては、液体で満たされた中空パイプの固有振動数を利用する方法がある。前記方法を利用した装置の一例として、ＩＳＳＹＳ社から発表されている装置（特許文献１、非特許文献１）があげられ、原理を説明するための図を図１に示す。前記装置（１００）において、液体が流れるシリコン製中空パイプ（１２０）は、基板（１１０）からわずかに宙に浮いた状態で配置されており、前記中空パイプ（１２０）の両端を保持手段（１３０）で保持することで、前記中空パイプ（１２０）を自由に振動させることができる。また、前記中空パイプの外壁のうち基板に面している側と基板には１対の電極（１４１、１４２）が配置されている。なお、前記電極（１４１、１４２）は、前記中空パイプの振動を励起させる励振素子、及び前記パイプの振動を検出するピックアップ素子も兼ねている。液体で満たされた状態における前記中空パイプ（１２０）の曲げ振動の固有振動数は、パイプの質量、形状、サイズ、剛性、液体の密度により固有の値である。したがって、前記中空パイプ（１２０）を流れる液体の密度が変化すると、液体で満たされた前記中空パイプ（１２０）の全質量が変化し、曲げ振動の固有振動数も変化する。前記装置（１００）の場合、前記中空パイプ（１２０）の流路幅は１０から１０００μｍ、内容積は１μＬ以下であり、前記中空パイプ（１２０）は１０ｋＨｚ前後で振動する。なお、Ｑ値（共振の鋭さを示す無次元数）を高くするために、前記装置（１００）を含む空間は真空または圧力が低くなるように保持する。前記装置（１００）を利用した検出器は微小流量であっても、溶液中の密度を精密に測定することができる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】米国特許６４７７９０１号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｄ．Ｓｐａｒｋｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ  Ｓｅｎｓｏｒｓ  Ｅｘｐｏ，Ｆａｌｌ  ２００２，１７１−１７６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
汎用検出器を備えた液体クロマトグラフ装置において、キャピラリー液体クロマトグラフといった微小流量を送液するクロマトグラフへ適用可能な装置を提供することが本発明の課題である。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
上記課題を鑑みてなされた本発明は、以下の発明を包含する。
【００１３】
第一の発明は、
試料液中に含まれる成分を分離する分析カラムと、
前記分析カラムから溶出した試料液の密度を測定する測定手段と、
前記測定手段より出力された密度の変化を検出する検出手段を備えた、液体クロマトグラフ装置において、前記測定手段が、
分析カラムから溶出した試料液が流れる中空パイプと、
前記中空パイプを自由振動し得るように保持する保持手段と、
前記中空パイプの振動を励起する励振素子と、
前記中空パイプの振動を検出するピックアップ素子と、
前記中空パイプの振動数から密度を算出する演算手段と、
少なくとも前記中空パイプ、前記励振素子、及び前記ピックアップ素子を収納する収納手段から構成される、前記装置である。
【００１４】
第二の発明は、
試料液中に含まれる成分を分離する分析カラムと、
前記分析カラムから溶出した試料液の密度と前記分析カラムを通過しない参照液の密度との差を測定する測定手段と、
前記測定手段より出力された密度差の変化を検出する検出手段を備えた、液体クロマトグラフ装置において、前記測定手段が、
分析カラムから溶出した試料液が流れる中空パイプと、
前記分析カラムを通過しない参照液が流れる中空パイプと、
前記２本の中空パイプを自由振動し得るように保持する保持手段と、
前記２本の中空パイプの振動をそれぞれ励起する励振素子と、
前記２本の中空パイプの振動をそれぞれ検出するピックアップ素子と、
前記２本の中空パイプの振動数から密度差を算出する演算手段と、
少なくとも前記中空パイプ、前記励振素子、及び前記ピックアップ素子を収納する収納手段から構成される、前記装置である。
【００１５】
第三の発明は、前記測定手段における前記２本の中空パイプが、一つの収納手段に収納されていることを特徴とする、第二の発明に記載の装置である。
【００１６】
第四の発明は、前記測定手段における前記２本の中空パイプが、中空パイプ毎に別の収納手段に収納され、かつ前記収納手段がさらに一つの収納手段に収納されていることを特徴とする、第二の発明に記載の装置である。
【００１７】
第五の発明は、前記測定手段における収納手段内部の空間が所定温度に温度制御されていることを特徴とする、第一から第四の発明に記載の装置である。
【００１８】
以下、本発明を詳細に説明する。
【００１９】
本発明は、測定手段が、
分析カラムから溶出した試料液が流れる中空パイプと、
前記中空パイプを自由振動し得るように保持する保持手段と、
前記中空パイプの振動を励起する励振素子と、
前記中空パイプの振動を検出するピックアップ素子と、
前記中空パイプの振動数から密度を算出する演算手段と、
少なくとも前記中空パイプ、前記励振素子、及び前記ピックアップ素子を収納する収納手段から構成される、液体クロマトグラフ装置である。前記測定手段の一例としては、前述した図１に示す装置（１００）があげられる。
【００２０】
本発明の装置の測定手段における、前記中空パイプの形状は、コの字形状、Ｕ字形状、Ｖ字形状、ジグザグ形状など、あらゆる形状が取り得るが、装置の小型化ができる点、安定した振動が得られる点で、図１に示すようなＵ字形状が好ましい。また、前記中空パイプの材料は、剛性が高く、かつ液体に対して耐久性に優れた素材であればよく、ガラス、金属、シリコンが例示できるが、特にＭＥＭＳ（Ｍｉｃｒｏ  Ｅｌｅｃｔｒｏ  Ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）技術を用いることで、より小型の検出器が製作可能なシリコンを材料として採用するのが好ましい。
【００２１】
本発明の装置の測定手段における、前記励振素子は、コイルと磁石、圧電素子、近接した１対の電極を例示することができる。また、前記検出器における、前記ピックアップ素子は、磁石とコイル、磁気抵抗素子といった磁気センサ、圧電素子、近接した１対の電極、光センサを例示することができる。さらに、前記励振素子が前記ピックアップ素子を兼ねる場合もある。
【００２２】
本発明の装置の測定手段において、前記中空パイプ、前記励振素子、及び前記ピックアップ素子で構成された振動子と電気回路を組み合わせることで、水晶発振器や音叉発振器と同様の連続発振する発振器を形成することができる。前記発振器は中空パイプの固有振動数で発振する。なお、前記発振器からの信号を増幅させるための増幅回路をさらに設置してもよい。一方、一定の時間間隔で前記励振素子にインパルス信号を加えて前記中空パイプを固有振動数で振動させ、その減衰する振動を前記ピックアップ素子で検出し電気的に増幅することによって固有振動を検出することもできる。
【００２３】
固有振動の周波数を求める方法は、公知の技術を使うことができる。周波数は、所定の計数時間に含まれる波の数を計数することによって求めることができるが、信号をバンドパスフィルタやローパスフィルタに通し、ノイズを減衰させた後で、周波数を小数点以下の桁数で求めることが好ましい。また、わずかに混入した商用周波数のノイズを減衰させるためにノッチフィルタを使用するのも有効である。計数時間は、液体クロマトグラフの時間分解能に応じて選ばれるが、通常、０．１秒から５秒の間から選ばれる。
【００２４】
また、周波数は、例えば図３のブロック図（３００）に示すように、周期にゼロを負から正方向に通過する回数をかけた時間が所定の計数時間を越えた時の時間を正確に求め、通過回数を時間で割ることによって周波数を極めて高い精度で求めることができる。
【００２５】
本発明の装置の測定手段において、少なくとも前記中空パイプ、前記励振素子、及び前記ピックアップ素子は、収納手段に収納される。前記中空パイプが前記収納手段の内部空間に収納されることで、前記中空パイプの温度を一定に保ちやすくなる。なお、前記収納手段の内部空間の温度をさらに一定に保つことを目的に、前記内部空間の温度を一定に保つための温調手段を配置してもよい。前記収納手段は商用電源からノイズを拾わないようにするために、導電性材料で作られるのが好ましい。特に前記収納手段のうち、少なくとも一部がアルミニウムや真鍮といった熱伝導性材料で作られると、収納手段の内部空間の温度をより一定に保ちやすくなる点で好ましい。さらに、前記収納手段を発泡ウレタンや発泡ポリエチレンといった断熱材で覆うと、温調手段がなく、環境温度が変化する場合においても、収納手段の内部空間の温度を一定に保ちやすくなるため、好ましい。また、収納手段の内部空間を真空または圧力を低く保つことによって前記中空パイプの共振を鋭くする（Ｑ値を高くする）ことができる。
【００２６】
本発明の液体クロマトグラフ装置の好ましい態様は、測定手段が、
分析カラムから溶出した試料液が流れる中空パイプと、
前記分析カラムを通過しない参照液が流れる中空パイプと、
前記２本の中空パイプを自由振動し得るように保持する保持手段と、
前記２本の中空パイプの振動をそれぞれ励起する励振素子と、
前記２本の中空パイプの振動をそれぞれ検出するピックアップ素子と、
前記２本の中空パイプの振動数から密度差を求める演算手段と、
少なくとも前記中空パイプ、前記励振素子、及び前記ピックアップ素子を収納する収納手段から構成される装置である。
【００２７】
液体の密度は温度に依存して変化するが、前記装置は、前記測定手段にて試料液で満たされた中空パイプの固有振動数と参照液で満たされた中空パイプの固有振動数を基に分析カラムから溶出した試料液と前記分析カラムを通過しない参照液との密度差を測定し、その密度差の変化を検出手段にて検出するため、中空パイプが１本のみからなる前述の測定手段（例えば図１の装置）を用いた装置と比較し、環境温度の変化による測定精度の低下を防止することができる。
【００２８】
前記測定手段の一例として、図２に示す装置（２００）をあげる。前記装置（２００）において、分析カラムから溶出した試料液及び分析カラムを通過しない参照液が流れる２本の中空パイプ（２２１、２２２）は、基板（２１０）からわずかに宙に浮いた状態で同一平面上に配置されており、前記中空パイプ（２２１、２２２）の両端が保持手段（２３０）で保持されていることで、前記中空パイプ（２２１、２２２）を自由に振動させることができる。前記中空パイプのそれぞれの外壁のうち基板に面している側と基板には２対の電極（２４１、２４２、２４３、２４４）が配置されている。なお、前記２本の中空パイプ（２２１、２２２）は、同一材質、同一形状、同一サイズで、固有振動数をほぼ同一にするのが好ましい。また、前記２本の中空パイプの固有振動数がほぼ同一ではない場合は、パイプに小さな付加物をつけてパイプの質量を変えることで、固有振動数を微調整すればよい。
【００２９】
前記測定手段においては、密度を測定する際に、液体で満たされた各中空パイプの固有振動数を基に密度差を算出するが、密度差を算出する方法としては、以下の方法が例示できる。
［１］各周波数を計数し、計数値の差から密度差を求める方法（図４）
［２］各周波数を計数し、計数値から密度を計算後、密度差を求める方法（図５）
［３］両振動を掛け合わせて差信号を生成し、差信号の周波数を計数し、密度の差を求める方法（図６）
固有振動の周波数あるいは固有振動の差信号の周波数を求める方法は、公知の技術を使うことができる。周波数は、所定の計数時間に含まれる波の数を計数することによって求めることができるが、信号をバンドパスフィルタやローパスフィルタに通し、ノイズを減衰させた後で、周波数を小数点以下の桁数で求めることが好ましい。また、わずかに混入した商用周波数のノイズを減衰させるためにノッチフィルタを使用するのも有効である。計数時間は、液体クロマトグラフの時間分解能に応じて選ばれるが、通常、０．１秒から５秒の間から選ばれる。
【００３０】
また、周波数は、例えば図３のブロック図（３００）に示すように、周期にゼロを負から正方向に通過する回数をかけた時間が所定の計数時間を越えた時の時間を正確に求め、通過回数を時間で割ることによって周波数を極めて高い精度で求めることができる。この場合、前記［３］の方法が、前記［１］及び［２］の方法と比較し、高い精度で周波数の差を求めることができる。一方、所定の計数時間の始まりと終わりの時間での正確な位相角度を求め、
（位相角度）÷（３６０×計数時間［秒］）
により、小数点以下の桁数で周波数を測定することができる。この場合、位相角度は１周期ごとに３６０を差し引かない値である。
【００３１】
前記測定手段において、前記２本の中空パイプは、中空パイプ毎に別の収納手段に収納してもよいし、前記２本の中空パイプをともに１つの収納手段に収納してもよいが、後者の方法は、前者の方法と比較し、前記２本の中空パイプが近接して設置できるため、前記２本の中空パイプの温度差が生じにくくなる点で好ましい。さらに、後者の方法は、前者の方法と比較し、装置を小型化できるため、温度均一性がよく、また環境温度の変化を受けても温度均一性が良好に保たれる点で好ましい。なお、２本の中空パイプを近接して設置する場合には、２本の中空パイプの振動が互いに干渉しないように遮蔽する必要がある。例えば、電極が励起素子及びピックアップ素子を兼ねる場合には、一方の電極対を他方の電極対と離すか電気的に遮蔽する必要がある。
【００３２】
なお、密度は温度に依存するので、微小な密度差を検出するためには、前記２本の中空パイプの温度差を０．０１℃以内に保持することが好ましい。さらに前記２本の中空パイプの温度を０．００１℃以内に保持することがより好ましい。
【００３３】
前記２本の中空パイプは、一方に分析カラムから溶出した試料液を流し、他方に分析カラムを通過しない参照液を流す。試料液と参照液の流量は等しくするのが好ましいが、参照液の流量を下げたり、参照液の流れを止めて測定してもよい。
【発明の効果】
【００３４】
本発明は液体クロマトグラフ装置において、分析カラムから溶出した試料液が流れる中空パイプと、前記中空パイプを自由振動し得るように保持する保持手段と、前記中空パイプの振動を励起する励振素子と、前記中空パイプの振動を検出するピックアップ素子と、前記中空パイプの振動数から密度を算出する演算手段と、少なくとも前記中空パイプ、前記励振素子、及び前記ピックアップ素子を収納する収納手段から構成される、分析カラムから溶出した試料液の密度を測定する測定手段を備えていることを特徴としている。ほとんどの物質は溶媒に溶け込むと溶液の密度が変化するため、前記測定手段より出力された密度の変化を検出することで、示差屈折率計での検出では困難であった、屈折率変化が小さい試料液に対しても、分析カラムから溶出された成分の検出が可能となる。また、前記検出手段は内部の中空パイプの小型化が可能であり、具体的には中空パイプ内の液量を１μＬ以下に抑えることができる。よって、示差屈折率計では困難であった、汎用検出器を備えたセミマイクロ液体クロマトグラフ装置やキャピラリー液体クロマトグラフ装置を提供することができる。
【００３５】
本発明の好ましい態様である、分析カラムから溶出した試料液が流れる中空パイプと、前記分析カラムを通過しない参照液が流れる中空パイプと、前記２本の中空パイプを自由振動し得るように保持する保持手段と、前記２本の中空パイプの振動をそれぞれ励起する励振素子と、前記２本の中空パイプの振動をそれぞれ検出するピックアップ素子と、前記２本の中空パイプの振動数から密度差を求める演算手段と、少なくとも前記中空パイプ、前記励振素子、及び前記ピックアップ素子を収納する収納手段からなる測定手段を有した液体クロマトグラフ装置は、試料液と参照液との密度差を測定するため、小型かつ環境温度の変化に強い液体クロマトグラフ用汎用検出器を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３６】
【図１】本発明の装置の測定手段で用いる密度検出装置。
【図２】本発明の装置の測定手段で用いる密度検出装置。
【図３】本発明の装置の測定手段で用いる周波数測定回路のブロック図。
【図４】本発明の装置の測定手段で用いる周波数を測定する手段の回路図。
【図５】本発明の装置の測定手段で用いる密度差を測定する手段の回路図。
【図６】本発明の装置の測定手段で用いる周波数の差を測定する手段の回路図。
【図７】本発明の液体クロマトグラフ装置の構成図。
【図８】図７の装置で分析したときのクロマトグラム（試料液側及び参照液側の密度信号）。
【図９】図７の装置で分析したときのクロマトグラム（試料液側と参照液側との密度差信号）。
【実施例】
【００３７】
以下に本発明を更に詳細に説明するために実施例を示すが、これら実施例は本発明の一例を示すものであり、本発明は実施例に限定されるものではない。
【００３８】
実施例１  本発明の液体クロマトグラフ装置における測定手段（その１）
分析カラムから溶出した試料液の密度を測定する測定手段として、図１に示す密度検出装置、及び図４に示す周波数を測定する手段からなる測定手段を構築した。図４で測定した周波数は密度信号に変換して出力した。なお、図４（Ｂ）は図４（Ａ）に示す中空パイプ、励起素子及びピックアップ素子の組合せを水晶振動子や音叉振動子と同じように一つの振動子として模式的に表した図である。
【００３９】
実施例２  本発明の液体クロマトグラフ装置における測定手段（その２）
分析カラムから溶出した試料液と分析カラムを通過しない参照液との密度差を測定する測定手段として、図２に示す密度検出装置、及び図６に示す周波数の差を測定する手段からなる測定手段を構築した。なお、図６のうち周波数測定回路（６７３）は、図３の回路（３００）を用いている。また、図３の回路では、パルスの長さが差周波数信号の周期の整数倍が０．１秒を超えた時の時間に等しいパルス信号を生成し、パルス信号の時間を１０−７秒の分解能で求め、前記整数を時間で割ることによって差周波数信号の周波数を１０−６の精度で求めることができる。
【００４０】
本実施例の測定手段、及び前記測定手段より出力された密度差の変化を検出する検出手段により、試料液側と参照液側の周波数の差が１００Ｈｚ存在するとき、ジッターやノイズがなければ、１０−４Ｈｚの変化を検出することができる。また、密度１ｇ／ｃｍ３で周波数が２．５ｋＨｚ変化する場合、４０ｎｇ／ｃｍ３の密度差を検出することができる。
【００４１】
実施例３  本発明の液体クロマトグラフ装置
２つの図１に示す密度検出装置、及び図５に示す密度差を測定する手段を含んだ測定手段を液体クロマトグラフ装置に適用した例を図７に示す。
【００４２】
溶離液（７１０）はポンプ（７２０）を用いて送液され、途中分岐手段（７３０）により試料液用カラム（７５１）への流路と、参照液用カラム（７５２）への流路とに分岐される。分岐手段（７３０）と試料分析用カラム（７５１）との間にある試料注入バルブ（７４０）により注入された試料は溶離液によって試料分析用カラム（７５１）へ送液される。試料分析用カラム（７５１）から溶出した試料は図１に示す試料液側密度検出装置（７０１）内の中空パイプを通過し、廃液側へ送液される。一方、参照用カラムへの流路に送液された溶離液はそのまま参照液用カラム（７５２）を通過後、図１に示す参照液側密度検出装置（７０２）内の中空パイプを通過し、廃液側へ送液される。前記２つの密度検出装置（７０１、７０２）内の中空パイプを通過した液体の密度は、図５に示す密度差を測定する手段（７７３、７７４、７７７、７７８、７７９）により、それぞれの密度検出装置における固有振動数の周波数から試料液側／参照液側の密度を計算後、密度差を計算する。前記計算した密度差の変化から得られる、試料分析用カラム（７５１）から溶出した試料のピークを検出手段で検出し、検出結果をクロマトグラムとして出力する。
【００４３】
試料として１Ｍ  ＫＣｌ  ０．５ｍＬ、溶離液として水、１．５ｍＬ／分の流量で分析を行なったときのクロマトグラムを図８及び９に示す。クロマトグラムのうち、図８は試料液側または参照液側の密度検出装置内の中空パイプを流れる液体の密度の変化を示したクロマトグラムであり、図９は試料液側の密度検出装置内の中空パイプを流れる液体の密度と参照液側の密度検出装置内の中空パイプを流れる液体の密度との差の変化をとったクロマトグラムである。密度検出装置内の中空パイプを試料が通過することに伴う密度変化を見ることにより、試料の分析が可能であることが示された。
【産業上の利用可能性】
【００４４】
本発明の液体クロマトグラフ装置は、分析カラムから溶出した試料液の密度を測定する測定手段、及びその密度変化を検出する検出手段を有しているため、示差屈折率計では検出困難な、屈折率変化が小さい試料液に対しても、分析カラムから溶出された試料を検出できる。また、当該測定手段内部にある中空パイプは小型であるため、示差屈折率計では困難であった、汎用検出器を備えたキャピラリー液体クロマトグラフ装置を提供することができる。
【符号の説明】
【００４５】
１００、２００、４００：密度検出装置
１１０、２１０：基板
１２０、２２１、２２２、４２０：中空パイプ
１３０、２３０：保持手段
１４１、１４２、２４１、２４２、２４３、２４４、３４１、３４２：電極
１５０、２５１：試料液
２５２：参照液
３００、４７３、５７３、５７４、６７３、７７３、７７４：周波数測定回路
４６１、５６１、５６２、６６１、６６２：増幅回路
４７１、５７１、５７２、６７１：クロック回路
５０１、６０１、７０１：密度検出装置（試料液側）
５０２、６０２、７０２：密度検出装置（参照液側）
５７７、５７８、７７７、７７８：密度測定回路
５７９、７７９：密度差測定回路
６６３；差動増幅回路
６７５：低域通過フィルタ回路
７１０：溶離液
７２０：ポンプ
７３０：分岐手段
７４０：試料注入バルブ
７５１、７５２：カラム
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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