(57)【要約】      （修正有）【課題】標的指向性の細胞傷害化合物と、新生物や他の状態の治療へのその療法的使用に関する方法の提供。【解決手段】生物学的受容体のリガンドのような標的指向部分へ結合した細胞傷害部分を含んでなる、標的指向性の細胞傷害化合物。細胞傷害部分がアントラサイクリン、カンプトテシン、パクリタキセル、ドキソルビシン、又はそれらの誘導体、であり、標的指向部分がソマトスタチン、ボンベシン、若しくはＬＨＲＨ、あるいはそれらの類似体、又は前記リガンド又は前記類似体の誘導体である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
Ｘ−Ｂ１−Ｂ２−Ｂ３−Ｂ４−Ｚ    （Ｉ）
［式中：
Ｘは、カンプトテシン又はカンプトテシン誘導体、ドキソルビシン又はドキソルビシン誘導体、及びパクリタキセル又はパクリタキセル誘導体からなる群から選択され；
Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、及びＢ４のそれぞれは、それぞれの出現につき独立して、（Ｄｏｃ）ｍ、（Ａｅｐａ）ｎ、−（Ｃ（Ｏ）−Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ｃ（Ｏ））ｓ−、又は（アミノ酸）ｐであり；ここでアミノ酸はＧｌｙ，Ｖａｌ，Ａｂｕ，Ｇａｂａ，Ｄｏｃ及びＳａｒからなる群から選択され；
Ａ１及びＡ５のそれぞれは、それぞれの出現につき独立して、ＣＲ１Ｒ２であり；
Ｒ１及びＲ２のそれぞれは、それぞれの出現につきＨであり；
Ａ２、Ａ３、及びＡ４のそれぞれは、それぞれの出現につき独立して、ＣＲ６Ｒ７、（ＣＨ２）ｔであるか、又は非存在であり；
Ｒ６及びＲ７のそれぞれは、それぞれの出現につき独立して、Ｈであり；
ｍは、それぞれの出現につき独立して、０、１、２、３、４、５、又は６であり；
ｎは、それぞれの出現につき独立して、０、１、又は２であり；
ｐは、それぞれの出現につき独立して、０、１、又は２であり；
ｓは、それぞれの出現につき独立して、０、１、又は２であり；
ｔは、それぞれの出現につき独立して、０、１、２、又は３であり；そして
Ｚは、下記から選択されるペプチドである：
-Lys-DTyr-DTyr-cyclo(Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
-DPhe-cyclo(Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
-DPhe-cyclo(Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Val-Cys)-Thr-NH2;
-Gln-Trp-Ala-Val-βAla-His-Leu-Leu-NH2 ;
-DPhe-Gln-Trp-Ala-Val-βAla-His-Leu-Leu-NH2 ;
-Gln-Trp-Ala-Val-βAla-His-Leu-Nle-NH2 ;
-cyclo(DCys-3Pal-DTrp-Lys-DCys)-Thr(Bzl)-Tyr-NH2; 及び
-pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-DLys[Nε- ]-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2;
但し、Ｘがドキソルビシン又はドキソルビシン誘導体であるとき、ｍ及びｎの少なくとも１つは０ではなく；そしてＢ１、Ｂ２、Ｂ３、及びＢ４の少なくとも１つは（Ｄｏｃ）ｍ又は（Ａｅｐａ）ｎであり；
Ｘがパクリタキセル又はパクリタキセル誘導体であるとき、Ｂ１は、Ｇｌｙ，Ｖａｌ，Ｇａｂａ，Ｄｏｃ及びＳａｒからなる群から選択される（アミノ酸）ｐであり、ｐは１又は２であり；
Ｘがパクリタキセル又はパクリタキセル誘導体であるとき、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、及びＢ４の少なくとも１つは（Ｄｏｃ）ｍであり、ｍは０ではなく；そして
Ｘがカンプトテシン又はカンプトテシン誘導体であるとき、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、及びＢ４の少なくとも１つは−（Ｃ（Ｏ）−Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ｃ（Ｏ））ｓ、−（Ｄｏｃ）ｍ又は（Ａｅｐａ）ｎであり、ｍ及びｎのそれぞれは０でない］の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項２】
Ｘがドキソルビシン又はドキソルビシン誘導体である、請求項１に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項３】
Ｘがカンプトテシン、カンプトテシン誘導体、パクリタキセル、又はパクリタキセル誘導体である、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
前記カンプトテシン誘導体が：
【化１】
2010265271.tif 000244
【化２】
2010265271.tif 000245
である、請求項３に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項５】
Ｘがパクリタキセル又はパクリタキセル誘導体であり、前記パクリタキセル誘導体が：
【化３】
2010265271.tif 000246
である、請求項３に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項６】
Ｘがドキソルビシン又はドキソルビシン誘導体であり、前記ドキソルビシン誘導体が：
【化４】
2010265271.tif 000247
である、請求項２に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項７】
Ｚが、ソマトスタチン、ボンベシン、若しくはＬＨＲＨ、又はそれらの類似体、あるいは前記リガンド又は前記類似体の誘導体である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項８】
Ｚが式：
-Lys-DTyr-DTyr-cyclo(Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
-DPhe-cyclo(Cys-Tyr-DTrp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
-DPhe-cyclo(Cys-3ITyr-DTrp-Lys-Val-Cys)-Thr-NH2;
のソマトスタチン類似体である、請求項７に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項９】
Ｚが式：
-pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-DLys[Nε- ]-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2
のＬＨＲＨ類似体である、請求項７に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１０】
Ｚが式：
-Gln-Trp-Ala-Val-βAla-His-Leu-Leu-NH2 ;
-Gln-Trp-Ala-Val-βAla-His-Leu-Nle-NH2 ;
のボンベシン類似体である、請求項７に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１１】
ｍ及びｎの少なくとも１つが０ではない、請求項１に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１２】
【化５】
2010265271.tif 000248
【化６】
2010265271.tif 000249
【化７】
2010265271.tif 000250
【化８】
2010265271.tif 000251
【化９】
2010265271.tif 000252
【化１０】
2010265271.tif 000253
【化１１】
2010265271.tif 000254
【化１２】
2010265271.tif 000255
【化１３】
2010265271.tif 000256
【化１４】
2010265271.tif 000257
の式を含む、請求項１に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１３】
式が：
【化１５】
2010265271.tif 000258
【化１６】
2010265271.tif 000259
を含む、請求項１１に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１４】
式：
【化１７】
2010265271.tif 000260
を含む、請求項１２に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１５】
式：
【化１８】
2010265271.tif 000261
を含む、請求項１２に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１６】
【化１９】
2010265271.tif 000262
【化２０】
2010265271.tif 000263
【化２１】
2010265271.tif 000264
【化２２】
2010265271.tif 000265
【化２３】
2010265271.tif 000266
【化２４】
2010265271.tif 000267
【化２５】
2010265271.tif 000268
【化２６】
2010265271.tif 000269
【化２７】
2010265271.tif 000270
【化２８】
2010265271.tif 000271
【化２９】
2010265271.tif 000272
【化３０】
2010265271.tif 000273
【化３１】
2010265271.tif 000274
【化３２】
2010265271.tif 000275
【化３３】
2010265271.tif 000276
【化３４】
2010265271.tif 000277
【化３５】
2010265271.tif 000278
【化３６】
2010265271.tif 000279
【化３７】
2010265271.tif 000280
【化３８】
2010265271.tif 000281
【化３９】
2010265271.tif 000282
【化４０】
2010265271.tif 000283
【化４１】
2010265271.tif 000284
【化４２】
2010265271.tif 000285
【化４３】
2010265271.tif 000286
【化４４】
2010265271.tif 000287
【化４５】
2010265271.tif 000288
【化４６】
2010265271.tif 000289
【化４７】
2010265271.tif 000290
【化４８】
2010265271.tif 000291
【化４９】
2010265271.tif 000292
【化５０】
2010265271.tif 000293
【化５１】
2010265271.tif 000294
【化５２】
2010265271.tif 000295
【化５３】
2010265271.tif 000296
【化５４】
2010265271.tif 000297
【化５５】
2010265271.tif 000298
【化５６】
2010265271.tif 000299
【化５７】
2010265271.tif 000300
【化５８】
2010265271.tif 000301
【化５９】
2010265271.tif 000302
【化６０】
2010265271.tif 000303
【化６１】
2010265271.tif 000304
【化６２】
2010265271.tif 000305
【化６３】
2010265271.tif 000306
【化６４】
2010265271.tif 000307
【化６５】
2010265271.tif 000308
【化６６】
2010265271.tif 000309
【化６７】
2010265271.tif 000310
【化６８】
2010265271.tif 000311
【化６９】
2010265271.tif 000312
【化７０】
2010265271.tif 000313
【化７１】
2010265271.tif 000314
【化７２】
2010265271.tif 000315
【化７３】
2010265271.tif 000316
【化７４】
2010265271.tif 000317
【化７５】
2010265271.tif 000318
【化７６】
2010265271.tif 000319
【化７７】
2010265271.tif 000320
【化７８】
2010265271.tif 000321
【化７９】
2010265271.tif 000322
【化８０】
2010265271.tif 000323
【化８１】
2010265271.tif 000324
【化８２】
2010265271.tif 000325
【化８３】
2010265271.tif 000326
【化８４】
2010265271.tif 000327
【化８５】
2010265271.tif 000328
【化８６】
2010265271.tif 000329
【化８７】
2010265271.tif 000330
【化８８】
2010265271.tif 000331
【化８９】
2010265271.tif 000332
【化９０】
2010265271.tif 000333
【化９１】
2010265271.tif 000334
【化９２】
2010265271.tif 000335
【化９３】
2010265271.tif 000336
【化９４】
2010265271.tif 000337
【化９５】
2010265271.tif 000338
【化９６】
2010265271.tif 000339
【化９７】
2010265271.tif 000340
【化９８】
2010265271.tif 000341
【化９９】
2010265271.tif 000342
【化１００】
2010265271.tif 000343
【化１０１】
2010265271.tif 000344
の式を含む、請求項１に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１７】
【化１０２】
2010265271.tif 000345
の式を含む、請求項１に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１８】
【化１０３】
2010265271.tif 000346
の式を含む、請求項１に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項１９】
【化１０４】
2010265271.tif 000347
の式を含む、請求項１に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【請求項２０】
【化１０５】
2010265271.tif 000348
の式を含む、請求項１に記載の化合物、又はその医薬的に許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、治療組成物と疾患状態の治療におけるその使用に関する。より特別には、本発明は、異常であるか又は望まれない細胞の増殖、遊走、及び／又は生理学的活性に関連した疾患状態を治療するための化合物、組成物、及び方法を提供する。
【背景技術】
【０００２】
ほとんどの細胞傷害薬は、治療効果を必要とする組織又は細胞に対する選択作用の不足のために、望まれない有毒な副作用を明示する。細胞傷害剤の標的細胞種への選択的な送達を達成するために様々なアプローチが求められてきた。
【０００３】
これらの薬物を目的の細胞へ標的指向するために生物学的受容体リガンドを薬物の担体として使用することにより、有毒な副作用を抑制して、薬物送達の効率を大いに向上させることができる。例えば、国際特許公開公報番号ＷＯ９７／１９９５４は、ドキソルビシンのようなアントラサイクリン細胞傷害剤と、ＬＨＲＨ、ボンベシン、又はソマトスタチンのようなペプチドホルモンとのコンジュゲートを開示する。この細胞傷害剤は、式：−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（Ｏ）−（ｎ＝０〜７）のリンカーを介してペプチドへ共有結合する。
【０００４】
同様に、ヨーロッパ特許出願番号ＥＰ１１１８３３６は、ソマトスタチン類似体（例、オクトレオチド、ランレオチド、及びバプレオチド）と、パクリタキセル、ドキソルビシン、又はカンプトテシンのような細胞傷害薬とのスペーサーを介したコンジュゲートを開示し、ここでもスペーサーは、構造：−Ｃ（Ｏ）−（ＣＨ２）ｎ−Ｃ（Ｏ）−（ｎ＝０〜７）を有すると示されている。
【０００５】
米国特許出願公開公報番号２００２／０１１５５９６は、細胞傷害剤とオリゴペプチドとのコンジュゲートを開示し、ここでこのペプチドのアミノ酸配列は、遊離した前立腺特異抗原により選好的に切断されることが示される。このようなコンジュゲートは、前立腺癌と良性前立腺肥大の治療に有用であると言われる。
【０００６】
米国特許出願公開公報番号２００３／００６４９８４は、切断可能なリンカーアームを伴う、ＣＣ−１０６５及びズオカルマイシン（duocarmycins）の細胞傷害類似体と、抗体又はペプチドのような標的指向剤とのコンジュゲートを開示する。この細胞傷害類似体は、リンカーの切断時に放出されることが示される。
【０００７】
国際特許出願番号ＷＯ０２／３４２３７は、活性剤がポリペプチドへ直接共有結合しているコンジュゲートを開示する。このポリペプチドは、活性剤を例えば胃においてコンホメーション保護により安定化させると言われる。
【０００８】
しかしながら、標的指向性の特異性、全身毒性、及び薬物動態に関して特性が改善された、標的指向性の細胞傷害薬への重大なニーズが依然としてある。
発明の要約
本発明は、例えば生物学的受容体のリガンドのような標的指向部分へ結合した細胞傷害部分を含んでなる、標的指向性の細胞傷害化合物を提供する。この２つの部分は、例えば、式Ｉ：
Ｘ−Ｂ１−Ｂ２−Ｂ３−Ｂ４−Ｚ    （Ｉ）
に記載されるようなリンカーを介して結合する［式中：
Ｘは、細胞傷害剤又は細胞分裂抑制剤であり；
Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、及びＢ４のそれぞれは、それぞれの出現につき独立して、（Ｄｏｃ）ｍ、（Ａｅｐａ）ｎ、−（Ｃ（Ｏ）−Ａ１−Ａ２−Ａ３−Ａ４−Ａ５−Ｃ（Ｏ））ｓ−、又は（アミノ酸）ｐであり；
Ａ１及びＡ５のそれぞれは、それぞれの出現につき独立して、ＣＲ１Ｒ２であり；
Ｒ１及びＲ２のそれぞれは、それぞれの出現につき独立して、Ｈ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、Ｃ（１−３０）アルキル、Ｃ（２−３０）アルケニル、置換Ｃ（１−３０）アルキル、置換Ｃ（２−３０）アルケニル、ＳＲ３、Ｓ（Ｏ）Ｒ４、又はＳ（Ｏ）２Ｒ５であるか、又はＲ１及びＲ２は、一緒にＣ（３−３０）シクロアルキル、Ｃ（３−３０）複素環、又はＣ（５−３０）アリール環を形成してよく；
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５のそれぞれは、それぞれの出現につき独立して、Ｃ（１−３０）アルキル、Ｃ（２−３０）アルケニル、置換Ｃ（１−３０）アルキル、又は置換Ｃ（２−３０）アルケニルであり；
Ａ２、Ａ３、及びＡ４のそれぞれは、それぞれの出現につき独立して、ＣＲ６Ｒ７、Ｏ、Ｓ、（ＣＨ２）ｔであるか、又は非存在であり；
Ｒ６及びＲ７のそれぞれは、それぞれの出現につき独立して、Ｈ、Ｆ、Ｂｒ、Ｃｌ、Ｉ、Ｃ（１−３０）アルキル、Ｃ（２−３０）アルケニル、置換Ｃ（１−３０）アルキル、置換Ｃ（２−３０）アルケニル、ＳＲ３、Ｓ（Ｏ）Ｒ４、又はＳ（Ｏ）２Ｒ５であるか；又はＲ６及びＲ７は、一緒に環系を形成してよく；
ｍは、それぞれの出現につき独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；
ｎは、それぞれの出現につき独立して、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；
ｐは、それぞれの出現につき独立して、０、１、又は２であり；
ｓは、それぞれの出現につき独立して、１、２、３、４、又は５であり；
ｔは、それぞれの出現につき独立して、０、１、２、又は３であり；そして
Ｚは、生物学的受容体のリガンド、その類似体、又は、前記リガンド又は前記類似体の誘導体である；
但し、
Ｘがドキソルビシン又はドキソルビシン誘導体であるとき、ｍ及びｎの少なくとも１つは０ではなく；そして
Ｘがパクリタキセル又はパクリタキセル誘導体であるとき、そのときＢ１は、（アミノ酸）ｐであり、ｐは１又は２である］。
【０００９】
第一の好ましい態様は、Ｘが細胞傷害部分である、式（Ｉ）による化合物を特徴とする。より好ましくは、Ｘがアントラサイクリンである。なおより好ましくは、Ｘがカンプトテシン、カンプトテシン誘導体、パクリタキセル、パクリタキセル誘導体、ドキソルビシン、又はドキソルビシン誘導体である；但し、Ｘがドキソルビシン又はドキソルビシン誘導体であるとき、ｍ及びｎの少なくとも１つは０ではなく；そして、Ｘがパクリタキセル又はパクリタキセル誘導体であるとき、そのときＢ１は、（アミノ酸）ｐであり、ｐは１又は２である。
【００１０】
前記第一の好ましい態様のさらに好ましい態様において、本発明は、式（Ｉ）：［式中、Ｘが、カンプトテシン又はカンプトテシン誘導体である（ここで前記カンプトテシン誘導体は：
【００１１】
【化１】
2010265271.tif 000002
【００１２】
【化２】
2010265271.tif 000003
【００１３】
である）、又はＸが、パクリタキセル又はパクリタキセル誘導体である（ここで、前記パクリタキセル誘導体は：
【００１４】
【化３】
2010265271.tif 000004
【００１５】
である）、又はＸが、ドキソルビシン又はドキソルビシン誘導体である（ここで、前記ドキソルビシンは：
【００１６】
【化４】
2010265271.tif 000005
【００１７】
である）］の化合物を特徴とする。
第二の好ましい態様は、Ｚのリガンドが、ソマトスタチン、ボンベシン、若しくはＬＨＲＨ、あるいはそれらの類似体、又は前記リガンド又は前記類似体の誘導体である、式（Ｉ）による化合物を特徴とする。
【００１８】
前記第二の好ましい態様のさらに好ましい態様において、本発明は、Ｚが、式：
【００１９】
【化５】
2010265271.tif 000006
【００２０】
のソマトスタチン類似体である、式（Ｉ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩；又は式：
【００２１】
【化６】
2010265271.tif 000007
【００２２】
のＬＨＲＨ類似体である、式（Ｉ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩；又は式：
【００２３】
【化７】
2010265271.tif 000008
【００２４】
【化８】
2010265271.tif 000009
【００２５】
のボンベシン類似体である、式（Ｉ）の化合物、又はその医薬的に許容される塩を特徴とする。
第三の好ましい態様は、ｍ及びｎの少なくとも１つが０ではない、式（Ｉ）による化合物を特徴とする。
【００２６】
第四の好ましい態様は、その構造が本明細書において具体的に開示される化合物を特徴とする。より好ましいのは、本明細書の実施例１〜７９に記載される化合物及び中間体である。なおより好ましいのは、実施例１９〜２５、２８〜３２、４０〜４２、４５〜６５、及び７４〜７９の化合物である。
【００２７】
第五の好ましい態様は、式：
【００２８】
【化９】
2010265271.tif 000010
【００２９】
【化１０】
2010265271.tif 000011
【００３０】
【化１１】
2010265271.tif 000012
【００３１】
【化１２】
2010265271.tif 000013
【００３２】
【化１３】
2010265271.tif 000014
【００３３】
【化１４】
2010265271.tif 000015
【００３４】
【化１５】
2010265271.tif 000016
【００３５】
【化１６】
2010265271.tif 000017
【００３６】
【化１７】
2010265271.tif 000018
【００３７】
による化合物、又はその医薬的に許容される塩を特徴とする。より好ましいのは、式：
【００３８】
【化１８】
2010265271.tif 000019
【００３９】
【化１９】
2010265271.tif 000020
【００４０】
による化合物、又はその医薬的に許容される塩である。なおより好ましいのは、式：
【００４１】
【化２０】
2010265271.tif 000021
【００４２】
を含んでなる化合物、又はその医薬的に許容される塩である。
第六の好ましい態様は、表Ａに収載される化合物より選択される化合物を特徴とする。
第七の好ましい態様は、表Ｂに収載される化合物より選択される化合物を特徴とする。
【００４３】
第八の好ましい態様は、表Ｃに収載される化合物より選択される化合物を特徴とする。
第九の好ましい態様は、表Ｄに収載される化合物より選択される化合物を特徴とする。
第十の好ましい態様は、表Ｅに収載される化合物より選択される化合物を特徴とする。
【００４４】
第十一の好ましい態様は、表Ｆに収載される化合物より選択される化合物を特徴とする。
第十二の好ましい態様は、表Ｇに収載される化合物より選択される化合物を特徴とする。
【００４５】
第十三の好ましい態様は、表Ｈに収載される化合物より選択される化合物を特徴とする。
第十四の好ましい態様は、表Ｉに収載される化合物より選択される化合物を特徴とする。
【００４６】
第二の側面において、本発明は、例えば生物学的受容体のリガンドのような標的指向部分へ結合した細胞傷害部分を含んでなる、標的指向性の細胞傷害化合物又はその医薬的に許容される塩の有効量と医薬的に許容される担体とを含んでなる医薬組成物を特徴とする。この２つの部分は、例えば、本明細書に定義される式Ｉにより記載されるようなリンカーを介して結合する。
【００４７】
第三の側面において、本発明は、治療の必要な対象において疾患を治療する方法を特徴とし、前記方法は、本明細書に定義される式Ｉによる標的指向性の細胞傷害化合物又はその医薬的に許容される塩の治療有効量を前記対象へ投与することを含んでなり、ここで前記疾患は、線維症、良性前立腺肥大、アテローム性動脈硬化症、再狭窄、乳癌、結腸癌、膵臓癌、前立腺癌、肺癌、小細胞肺癌、卵巣癌、表皮癌、及び造血癌からなる群より選択される。
【００４８】
第四の側面において、本発明は、治療の必要な対象において疾患を治療する方法を特徴とし、前記方法は、本明細書に定義される式Ｉによる標的指向性の細胞傷害化合物又はその医薬的に許容される塩の治療有効量を前記対象へ投与することを含んでなり、ここで前記疾患は、良性前立腺肥大、再狭窄、乳癌、結腸癌、膵臓癌、前立腺癌、肺癌、小細胞肺癌、卵巣癌、表皮癌、及び造血癌からなる群より選択される。
【００４９】
第五の側面において、本発明は、治療の必要な対象において疾患を治療する方法を特徴とし、前記方法は、本明細書に定義される式Ｉによる標的指向性の細胞傷害化合物又はその医薬的に許容される塩の治療有効量を前記対象へ投与することを含んでなり、ここで前記疾患は、１以上のソマトスタチン型受容体を発現する細胞の望まれない増殖を特徴とする。
【００５０】
第六の側面において、本発明は、治療の必要な対象において疾患を治療する方法を特徴とし、前記方法は、本明細書に定義される式Ｉによる標的指向性の細胞傷害化合物又はその医薬的に許容される塩の治療有効量を前記対象へ投与することを含んでなり、ここで前記疾患は、１以上のボンベシン型受容体を発現する細胞の望まれない増殖を特徴とする。
【００５１】
第七の側面において、本発明は、治療の必要な対象において疾患を治療する方法を特徴とし、前記方法は、本明細書に定義される式Ｉによる標的指向性の細胞傷害化合物又はその医薬的に許容される塩の治療有効量を前記対象へ投与することを含んでなり、ここで前記疾患は、１以上のＬＨＲＨ型受容体を発現する細胞の望まれない増殖を特徴とする。
【００５２】
本明細書に使用する用語「アミノ酸」は、天然に存在するアミノ酸と非天然のアミノ酸を意味し、限定されないが、α−アミノ酸、β−アミノ酸、γ−アミノ酸が含まれ、他に述べなければ、Ｄ−アミノ酸でもＬ−アミノ酸でもよい。Ｎ末端アミノ酸を除き、本開示中のアミノ酸のすべての略号（例えば、Ａｌａ）は、−ＮＨ−Ｃ（Ｒ）（Ｒ’）−ＣＯ−の構造を表し、ここでＲとＲ’は、それぞれ独立して、水素又はアミノ酸の側鎖（例えば、Ａｌａでは、Ｒ＝ＣＨ３で、Ｒ’＝Ｈ）であるか、又はＲとＲ’は、結合して環系を形成してよい。Ｎ末端アミノ酸では、略号は、（Ｒ２Ｒ３）−Ｎ−Ｃ（Ｒ）（Ｒ’）−ＣＯ−の構造を表し、ここでＲ２とＲ３は、式（Ｉ）に定義される通りである。
【００５３】
好ましいアミノ酸の例示リストには、限定されないが、Ａｌａ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｕ、ｐＧｌｕ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、Ｈｉｓ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｖａｌ、β−Ａｌａ、Ａｃｔ、Ａｐｃ、Ｇａｂａ、Ａｐｎ、Ａｈｘ、Ａｈｐ、Ａｏｃ、Ａｎｃ、Ａｄｃ、Ａｕｎ、Ａｄｏ、Ａｃｃ、Ａ３ｃ、Ａ４ｃ、Ａ５ｃ、Ａ６ｃ、Ａｉｂ、Ｏｒｎ、Ｄａｂ、Ｄａｐ、ｈＡｒｇ、４Ｐａｌ、３ｐａｌ、２Ｐａｌ、Ａｂｕ、Ｃｈａ、Ｃｉｔ、Ｎｌｅ、Ｎｖａ、Ｔａｚ、２Ｔｈｉ、３Ｔｈｉ、Ｄｈｐ、Ｄｍｔ、２Ｆｕａ、３Ｈｙｐ、４Ｈｙｐ、Ｉｎｃ、Ｉｎｐ、Ｋｔｐ、ｈＬｅｕ、Ｏｉｃ、ｈＰｈｅ、Ｐｉｐ、Ｓａｒ、Ｔｈｚ、Ｔｉｃ、Ｔｌｅ、Ｐｈｇ、及びＣａｅｇが含まれる。
【００５４】
本発明の化合物のペプチド部分は、本明細書において、例えば、（Ｔｙｒ１１）ソマトスタチン（１−１４）−ＮＨ２のように別の形式によって示してもよく、天然の配列より置換されたアミノ酸が第一の括弧のセットの間に置かれる（例えば、ソマトスタチンのＰｈｅ１１に代わるＴｙｒ１１）。第二の括弧のセットの間の数字は、ペプチド中に存在するアミノ酸の数を意味する（例えば、ソマトスタチン（１−１１）は、ソマトスタチンのペプチド配列のアミノ酸１〜１１を意味する）。例えば、（Ｔｙｒ１１）ソマトスタチン（１−１４）−ＮＨ２におけるような表示「ＮＨ２」は、このペプチドのＣ末端がアミド化されていることを示す。（Ｔｙｒ１１）ソマトスタチン（１−１４）、あるいは（Ｔｙｒ１１）ソマトスタチン（１−１４）−ＯＨは、Ｃ末端が遊離酸であることを示す。
【００５５】
「アルキル」は、１以上の炭素原子を含有する炭化水素基を意味し、ここで多数の炭素原子が存在していれば、それらは単結合によって結合している。アルキル炭化水素基は、直鎖であっても、１以上の分岐又は環式基を含有してもよい。
【００５６】
「置換アルキル」は、炭化水素基の１以上の水素原子が、ハロゲン（即ち、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素）、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣＨ３、−ＮＯ２、１〜６のハロゲンで置換された−Ｃ１−２アルキル、−ＣＦ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、及び−（ＣＨ２）０−４−ＣＯＯＨからなる群より選択される１以上の置換基で置き換えられているアルキルを意味する。異なる態様において、１、２、３又は４の置換基が存在する。−（ＣＨ２）０−４−ＣＯＯＨの存在は、アルキル酸の生成をもたらす。−（ＣＨ２）０−４−ＣＯＯＨを含有するか又はそれからなるアルキル酸の例には、２−ノルボルナン酢酸、ｔｅｒｔ−酪酸、及び３−シクロペンチルプロピオン酸が含まれる。
【００５７】
「ヘテロアルキル」は、炭化水素基中の１以上の炭素原子が以下の基の１以上で置き換えられているアルキルを意味する：アミノ、アミド、−Ｏ−、又はカルボニル。異なる態様において、１又は２のヘテロ原子が存在する。
【００５８】
「置換ヘテロアルキル」は、炭化水素基の１以上の水素原子が、ハロゲン（即ち、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素）、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣＨ３、−ＮＯ２、１〜６のハロゲンで置換された−Ｃ１−２アルキル、−ＣＦ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、及び−（ＣＨ２）０−４−ＣＯＯＨからなる群より選択される１以上の置換基で置き換えられているヘテロアルキルを意味する。異なる態様において、１、２、３又は４の置換基が存在する。
【００５９】
「アルケニル」は、１以上の炭素−炭素二重結合が存在する２以上の炭素からなる、炭化水素基を意味する。アルケニル炭化水素基は、直鎖であっても、１以上の分岐又は環式基を含有してもよい。
【００６０】
「置換アルケニル」は、１以上の水素が、ハロゲン（即ち、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素）、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＨＣＨ３、−ＮＯ２、１〜６のハロゲンで置換された−Ｃ１−２アルキル、−ＣＦ３、−ＯＣＨ３、−ＯＣＦ３、及び−（ＣＨ２）０−４−ＣＯＯＨからなる群より選択される１以上の置換基で置き換えられているアルケニルを意味する。異なる態様において、１、２、３又は４の置換基が存在する。
【００６１】
「アリール」は、共役π電子系を有する少なくとも１つの環があり、２までの共役又は縮合環系を含有する、置換されていてもよい芳香族基を意味する。アリールには、炭素環式アリール、複素環式アリール、及びビアリール基が含まれる。好ましくは、アリールは、５又は６員環である。複素環式アリールに好ましい原子は、１以上のイオウ、酸素、及び／又は窒素である。アリールの例には、フェニル、１−ナフチル、２−ナフチル、インドール、キノリン、２−イミダゾール、及び９−アントラセンが含まれる。アリール置換基は、−Ｃ１−４アルキル、−Ｃ１−４アルコキシ、ハロゲン（即ち、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素）、−ＯＨ、−ＣＮ、−ＳＨ、−ＮＨ２、−ＮＯ２、１〜５のハロゲンで置換された−Ｃ１−２アルキル、−ＣＦ３、−ＯＣＦ３、及び−（ＣＨ２）０−４−ＣＯＯＨからなる群より選択される。異なる態様において、アリールは、１、２、３又は４の置換基を含有する。
【００６２】
「アルキルアリール」は、「アリール」へ結合した「アルキル」を意味する。
用語「シクロアルキル」は、当業者に知られる指定された炭素数のモノシクロアルキル基又はビシクロアルキル（bi-cycloalkyl）基を包含するように企図される。
【００６３】
用語「複素環」には、酸素、窒素、及び／又はイオウのようなヘテロ原子を１以上有する単環式及び二環式の系が含まれる。この環系は、芳香族、例えば、ピリジン、インドール、キノリン、ピリミジン、チオフェン（チエニルとしても知られる）、フラン、ベンゾチオフェン、テトラゾール、ジヒドロインドール、インダゾール、Ｎ−ホルミルインドー
ル、ベンゾイミダゾール、チアゾール、及びチアジアゾールであり得る。環系は、非芳香族、例えば、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、等であってもよい。
【００６４】
通常の技能の化学者は、本発明に収載されるヘテロ原子含有置換基のある組合せにより、生理学的条件の下ではより安定でない化合物が定義されることを認めるだろう。故に、そのような化合物の好ましさはより低い。
【００６５】
Ｄｏｃは、８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸であり、構造：
【００６６】
【化２１】
2010265271.tif 000022
【００６７】
によって表される。
Ａｅｐａは、４−（２−アミノエチル）−１−カルボキシメチル−ピペラジンであり、構造：
【００６８】
【化２２】
2010265271.tif 000023
【００６９】
によって表される。
Ｓｕｃ又はｓｕｃｃは、スクシニルであり、構造：
【００７０】
【化２３】
2010265271.tif 000024
【００７１】
によって表される。
Ｇｌｕｔ又はグルタリルは：
【００７２】
【化２４】
2010265271.tif 000025
【００７３】
の構造を有する。
カンプトテシン部分は：
【００７４】
【化２５】
2010265271.tif 000026
【００７５】
の構造を有する。
カンプトテシン誘導体部分には、限定されないが：
【００７６】
【化２６】
2010265271.tif 000027
【００７７】
【化２７】
2010265271.tif 000028
【００７８】
が含まれる。
パクリタキセル部分は：
【００７９】
【化２８】
2010265271.tif 000029
【００８０】
の構造を有する。
ドキソルビシン部分は：
【００８１】
【化２９】
2010265271.tif 000030
【００８２】
の構造を有する。
ドキソルビシン誘導体部分には、限定されないが：
【００８３】
【化３０】
2010265271.tif 000031
【００８４】
が含まれる。
ＤＬｙｓ（−）は、構造：
【００８５】
【化３１】
2010265271.tif 000032
【００８６】
によって表される。
ＤＯｒｎ（−）は、構造：
【００８７】
【化３２】
2010265271.tif 000033
【００８８】
によって表される。
ＤＤａｂ（−）は、構造：
【００８９】
【化３３】
2010265271.tif 000034
【００９０】
によって表される。
ＤＤａｐ（−）は、構造：
【００９１】
【化３４】
2010265271.tif 000035
【００９２】
によって表される。
ＤＡｐａ（−）は、構造：
【００９３】
【化３５】
2010265271.tif 000036
【００９４】
によって表される。
本明細書に使用する特定の略語は、以下のように定義される：
Ａｂｕ  α−アミノ酪酸
Ａｃｃ  １−アミノ−１−シクロ（Ｃ３〜Ｃ９）アルキルカルボン酸
Ａ３ｃ  １−アミノ−１−シクロプロパンカルボン酸
Ａ４ｃ  １−アミノ−１−シクロブタンカルボン酸
Ａ５ｃ  １−アミノ−１−シクロペンタンカルボン酸
Ａ６ｃ  １−アミノ−１−シクロヘキサンカルボン酸
Ａｃｔ  ４−アミノ−４−カルボキシテトラヒドロピラン、構造：
【００９５】
【化３６】
2010265271.tif 000037
【００９６】
によって表される。
Ａｉｂ  α−アミノイソ酪酸
Ａｌａ又はＡ  アラニン
β−Ａｌａ  β−アラニン
Ａｐｃ  構造：
【００９７】
【化３７】
2010265271.tif 000038
【００９８】
を示す。
Ａｒｇ又はＲ  アルギニン
ｈＡｒｇ  ホモアルギニン
Ａｓｎ又はＮ  アスパラギン
Ａｓｐ又はＤ  アスパラギン酸
Ａｖａ  ５−アミノ吉草酸
Ｃｈａ  β−シクロヘキシルアラニン
Ｃｙｓ又はＣ  システイン
Ｄａｂ  ２，４−ジアミノ酪酸
Ｄａｐ  ２，３−ジアミノプロピオン酸
Ｄｈｐ  ３，４−デヒドロプロリン
Ｄｍｔ  ５，５−ジメチルチアゾリジン−４−カルボン酸
Ｄｏｃ  ８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸、構造：
【００９９】
【化３８】
2010265271.tif 000039
【０１００】
によって示される。
２Ｆｕａ  β−（２−フリル）−アラニン
Ｇｌｎ又はＱ  グルタミン
Ｇｌｕ又はＥ  グルタミン酸
ｐＧｌｕ又はＧｌｐ  ピログルタミン酸
Ｇｌｙ又はＧ  グリシン
Ｈｉｓ又はＨ  ヒスチジン
３Ｈｙｐ  ｔｒａｎｓ−３−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン、即ち、（２Ｓ，３Ｓ）−３−ヒドロキシピロリジン−２−カルボン酸
４Ｈｙｐ  ４−ヒドロキシプロリン、即ち、（２Ｓ，４Ｒ）−４−ヒドロキシピロリジン−２−カルボン酸
Ｉｌｅ又はＩ  イソロイシン
Ｉｎｃ  インドリン−２−カルボン酸
Ｉｎｐ  イソニペコチン酸
Ｋｔｐ  ４−ケトプロリン
Ｌｅｕ又はＬ  ロイシン
ｈＬｅｕ  ホモロイシン
Ｌｙｓ又はＫ  リジン
Ｍｅｔ又はＭ  メチオニン
Ｎｌｅ  ノルロイシン
Ｎｖａ  ノルバリン
Ｏｉｃ  オクタヒドロインドール−２−カルボン酸
Ｏｒｎ  オルニチン
２Ｐａｌ  β−（２−ピリジニル）アラニン
３Ｐａｌ  β−（３−ピリジニル）アラニン
４Ｐａｌ  β−（４−ピリジニル）アラニン
Ｐｈｅ又はＦ  フェニルアラニン
ｈＰｈｅ  ホモフェニルアラニン
Ｐｉｐ  ピペコリン酸
Ｐｒｏ又はＰ  プロリン
Ｓａｒ  サルコシン又はＮ−メチルグリシン
Ｓｅｒ又はＳ  セリン
Ｔａｚ  β−（４−チアゾリル）アラニン、構造：
【０１０１】
【化３９】
2010265271.tif 000040
【０１０２】
によって示される。
２Ｔｈｉ  β−（２−チエニル）アラニン
３Ｔｈｉ  β−（３−チエニル）アラニン
Ｔｈｒ又はＴ  スレオニン
Ｔｈｚ  チアゾリジン−４−カルボン酸
Ｔｉｃ  １，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−３−カルボン酸
Ｔｌｅ  ｔｅｒｔ−ロイシン
Ｔｒｐ又はＷ  トリプトファン
Ｔｙｒ又はＹ  チロシン
Ｖａｌ又はＶ  バリン
Ｇａｂａ  ４−アミノ酪酸
Ａｐｎ  ５−アミノペンタン酸
Ａｈｘ  ６−アミノヘキサン酸
Ａｈｐ  ７−アミノヘプタン酸
Ａｏｃ  ８−アミノオクタン酸
Ａｎｃ  ９−アミノノナン酸
Ａｄｃ  １０−アミノデカン酸
Ａｕｎ  １１−アミノウンデカン酸
Ａｄｏ  １２−アミノドデカン酸
Ｐｈｇ  フェニルグリシン
Ｃａｅｇ  Ｎ−（２−アミノエチル）−Ｎ−（２−シトシニル−１−オキソ−エチル）−グリシン、構造：
【０１０３】
【化４０】
2010265271.tif 000041
【０１０４】
によって示される。
本明細書に使用する特定の他の略語は、以下のように定義される：
Ａｌｏｃ：アリルオキシカルボニル
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニル
Ｂｈｏｃ：ベンズヒドリルオキシカルボニル
Ｂｚｌ：ベンジル
ＤＣＭ：ジクロロメタン
Ｄｄｅ：１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘクス−１−イリジン）エチル
ＤＩＣ：Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＥＡ：ジイソプロピルエチルアミン
Ｄｍａｂ：４−｛Ｎ−（１−（４，４−ジメチル−２，６−ジオキソシクロヘキシリデン）−３−メチルブチル）−アミノ｝ベンジル
ＤＭＡＰ：４−（ジメチルアミノ）ピリジン
ＤＭＦ：ジメチルホルムアミド
ＤＮＰ：２，４−ジニトロフェニル
Ｅｔ：エチル
Ｆｍｏｃ：フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＨＢＴＵ：ヘキサフルオロリン酸２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム
ｃＨｅｘ：シクロヘキシル
ＨＯＡＴ：ヘキサフルオロリン酸Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム
ＨＯＢｔ：１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール
Ｍｍｔ：４−メトキシトリチル
ＮＭＰ：Ｎ−メチルピロリデン
Ｐｂｆ：２，２，４，６，７−ペンタメチルジヒドロベンゾフラン−５−スルホニル
ｔＢｕ：ｔｅｒｔ−ブチル
ＴＩＳ：トリイソプロピルシラン
ＴＯＳ：トシル
ｔｒｔ：トリチル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＦＦＨ：ヘキサフルオロリン酸テトラメチルフルオロホルアミジニウム
Ｚ：ベンジルオキシカルボニル
発明の詳細な説明
本発明は、例えば生物学的受容体のリガンドのような標的指向部分へ結合した細胞傷害部分を含んでなる、標的指向性の細胞傷害化合物と、新生物、過形成、及び、細胞の望まれない増殖と関連した他の状態の治療へのその療法的使用に関する方法を特徴とする。
【０１０５】
本発明に有用なソマトスタチンペプチドの例は、本明細書に記載される。さらなる例は、以下に記載する公開公報（そのいずれもそのまま参照により本明細書に組み込まれる）中の式によりカバーされるもの又は特に引用されるものである：
【０１０６】
【化４１】
2010265271.tif 000042
【０１０７】
（Application No.：特許出願番号）
Horvath, A. et al.抄録「抗腫瘍活性を有するソマトスタチン類似体のコンホメーション（Conformations of Somatostatin Analogs Having Antitumor Activity）」第２２回
欧州ペプチドシンポジウム、１９９２年９月１３〜１９日、インターラーケン、スイス；
【０１０８】
【化４２】
2010265271.tif 000043
【０１０９】
【化４３】
2010265271.tif 000044
【０１１０】
（Application No.：特許出願番号；Patent No．：特許番号；U.S.：米国；U.K.：イギリス；French：フランス）
本発明に有用なＬＨＲＨ（黄体形成ホルモン放出ホルモン）ペプチドの例は、本明細書に記載される。さらなる例は、以下に記載する公開公報（そのいずれもそのまま参照により本明細書に組み込まれる）中の式によりカバーされるもの又は特に引用されるものである：
【０１１１】
【化４４】
2010265271.tif 000045
【０１１２】
（Application No.：特許出願番号；Patent No．：特許番号；U.S.：米国）
本発明に有用なボンベシンペプチドの例は、本明細書に記載される。さらなる例は、以下に記載する公開公報（そのいずれもそのまま参照により本明細書に組み込まれる）中の式によりカバーされるもの又は特に引用されるものである：
【０１１３】
【化４５】
2010265271.tif 000046
【０１１４】
（Application No.：特許出願番号；Patent No．：特許番号；U.S.：米国）
ソマトスタチン、ＬＨＲＨ、及びボンベシンペプチドを合成する方法は、十分に文書化されて、当業者の能力内にある。さらなる合成手順を以下の実施例に提供する。以下の実施例はまた、本発明の標的指向性の細胞傷害化合物を合成する方法を例示する。
【実施例】
【０１１５】
実施例１
【０１１６】
【化４６】
2010265271.tif 000047
【０１１７】
表題の保護化ペプチド−樹脂は、アプライド・バイオシステムズ（ＡＢＩ）（カリフォ
ルニア州フォスターシティ）モデル４３３Ａペプチド合成機で、フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）化学を使用することによって自動的に合成した。０．７２ミリモル／ｇの置換があるＲｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ（４−メチルベンジルヒドリルアミン）樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ，カリフォルニア州サンディエゴ）を使用した。以下のＦｍｏｃアミノ酸（ＡｎａＳｐｅｃ，カリフォルニア州サンホセ）を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＴｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、及びＦｍｏｃ−Ａｂｕ−ＯＨ。合成は、０．２５ミリモルスケールで行った。Ｆｍｏｃ基は、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）中２０％ピペリジンで３０分間の処理によって外した。各カップリング工程において、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中０．４５Ｍヘキサフルオロリン酸２−（１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，２，３−テトラメチルウロニウム（ＨＢＴＵ）及び０．４５Ｍ  １−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）を含有する２ｍｌの溶液においてはじめにＦｍｏｃアミノ酸（４当量、１ミリモル）をプレ活性化した。生じる活性化アミノ酸エステル、１ｍＬのジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）、及び１ｍＬのＮＭＰを樹脂へ加えた。以下の反応サイクルを実施するよう、ＡＢＩ  ４３３Ａペプチド合成機をプログラムした：（１）ＮＭＰで洗浄すること、（２）ＮＭＰ中２０％ピペリジンで３０分間Ｆｍｏｃ保護基を外すこと、（３）ＮＭＰで洗浄すること、（４）プレ活性化Ｆｍｏｃアミノ酸と１時間のカップリング。配列に従って連続的に樹脂をカップリングした。ペプチド鎖を組み立てた後で、Ｆｍｏｃを外し、ＤＭＦ及びジクロロメタン（ＤＣＭ）を使用することによって樹脂を完全に洗浄した。
【０１１８】
実施例２
【０１１９】
【化４７】
2010265271.tif 000048
【０１２０】
表題の保護化ペプチド−樹脂は、実施例１に記載の手順に実質的に従って合成した。Ｆｍｏｃ−８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（Ｆｍｏｃ−Ｄｏｃ−ＯＨ）は、Ｃｈｅｍ−Ｉｍｐｌｅｘ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（イリノイ州ウッドデール）より購入した。Ｈ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＤＴｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｙｒ（ｔＢｕ）−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ａｂｕ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ  Ｒｅｓｉｎ（０．４５ミリモルスケール）の組立て後、この保護化ペプチド−樹脂をマニュアル合成のためにシェーカー上の反応容器へ移した。この樹脂を、Ｆｍｏｃ−Ｄｏｃ−ＯＨ（１．５当量、０．７５ミリモル）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ，１．５当量、０．７５ミリモル）、及びＨＯＢＴ（１．５当量、０．７５ミリモル）のＤＭＦ溶液とともに２時間振り混ぜた。この樹脂をＤＭＦで洗浄し、ＤＭＦ中２０％ピペリジンで処理して、Ｆｍｏｃ保護基を外した。同じマニュアル操作手順を使用して、この樹脂へ３つのＤｏｃ残基の残りを連続的にカップリングした。ＤＭＦ中２０％ピペリジンでＦｍｏｃ保護基を外した後で、保護化ペプチド−樹脂をＤＭＦ及びＤＣＭで洗浄した。
【０１２１】
実施例３
【０１２２】
【化４８】
2010265271.tif 000049
【０１２３】
表題の保護化ペプチド−樹脂は、実施例２に記載の手順に実質的に従って合成した。
【０１２４】
実施例４
【０１２５】
【化４９】
2010265271.tif 000050
【０１２６】
表題の保護化ペプチド−樹脂は、実施例１に記載の手順に実質的に従って合成した。Ｆｍｏｃ−４−（２−アミノエチル）−１−カルボキシメチル−ピペラジン（Ｆｍｏｃ−Ａｅｐａ−ＯＨ）は、Ｎｅｏｓｙｓｔｅｍ（ストラスブール、フランス）より購入した。Ｈ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＤＴｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｙｒ（ｔＢｕ）−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ａｂｕ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ  Ｒｅｓｉｎの組立て後、この保護化ペプチド−樹脂をマニュアル合成のためにシェーカー上の反応容器へ移した。２ｍＬのＤＭＦ中のヘキサフルオロリン酸Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム（ＨＡＴＵ，１．４当量、０．７ミリモル）及び１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡＴ，１．４当量、０．７ミリモル）で２分間Ｆｍｏｃ−Ａｅｐａ−ＯＨ（１．５当量、０．７５ミリモル）をプレ活性化した。生じるＦｍｏｃ−Ａｅｐａ−ＯＨの活性化エステルと１ｍＬのＤＩＥＡを反応容器へ加え、この混合物を２時間振り混ぜた。この樹脂をＤＭＦで洗浄し、ＤＭＦ中２０％ピペリジンで処理してＦｍｏｃ保護基を外した。この保護化ペプチド−樹脂をＤＭＦ及びＤＣＭで洗浄した。
【０１２７】
実施例５
【０１２８】
【化５０】
2010265271.tif 000051
【０１２９】
表題の保護化ペプチド−樹脂は、実施例４に記載の手順に実質的に従って合成した。Ｆｍｏｃ−Ｄｏｃ−ＯＨのカップリングは、実施例２に記載の対応する手順に従って実施した。
【０１３０】
実施例６
【０１３１】
【化５１】
2010265271.tif 000052
【０１３２】
表題の保護化ペプチド−樹脂は、実施例１に記載の手順に実質的に従って合成した。Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨは、ＡｎａＳｐｅｃ（カリフォルニア州サンホセ）より購入した
。
【０１３３】
実施例７
【０１３４】
【化５２】
2010265271.tif 000053
【０１３５】
表題の保護化ペプチド−樹脂は、実施例４に記載の手順に実質的に従って合成した。
【０１３６】
実施例８
５−Ｏ−ｔＢｏｃ−グリシル−５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン：
【０１３７】
【化５３】
2010265271.tif 000054
【０１３８】
５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−５−ヒドロキシ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン（３００ｍｇ）、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（９２３ｍｇ，７当量）、及び４−（ジメチルアミノ）ピリジン（ＤＭＡＰ）（５６０．４ｍｇ，６当量）をＤＣＭ及びＤＭＦ（３０ｍＬ，ｖ／ｖ，３０／０．５）の混合溶媒系に溶かした。この溶液へ１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）（１．０８ｇ，７．５当量）を加えた。この混合物を室温で一晩撹拌し、溶媒を減圧下で除去した。残渣を１００ｍＬのＤＣＭに溶かし、１０％クエン酸水溶液（２０ｍＬｘ２）、飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬｘ２）、及び塩水（１０ｍＬｘ３）で連続的に洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して、減圧下で蒸発させた。ＤＣＭ中１０％メタノールを溶出液として使用するシリカゲルカラムでのフラッシュクロマトグラフィーによって粗生成物を精製して、５−Ｏ−ｔＢｏｃ−グリシル−５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオンの純粋な生成物を得た。３３０ｍｇ，ＴＬＣ（シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：９／１）：Ｒｆ＝０．４３。エレクトロスプレーイオン化質量分析法（ＥＳＩ  ＭＳ）の分析は、分子量を５５６．４に示した（５５５．５の計算分子量と一致）。
【０１３９】
実施例９
５−Ｏ−グリシル−５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオンＴＦＡ塩
【０１４０】
【化５４】
2010265271.tif 000055
【０１４１】
５−Ｏ−ｔＢｏｃ−グリシル−５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン（３３０ｍｇ）をＤＣＭ中３０％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）溶液で窒素下に１時間処理した。ＴＦＡと溶媒を減圧下で除去した。残渣を冷エーテルで摩砕して、淡黄色の粉末を得た。ＴＬＣ（シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：９／１）：Ｒｆ＝０．１３。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を４５６．０に示した（４５５．４の計算分子量と一致）。
【０１４２】
実施例１０
５−Ｏ−（Ｎ−グルタリル−グリシル）−５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン
【０１４３】
【化５５】
2010265271.tif 000056
【０１４４】
ＤＭＦ（７ｍＬ）中の５−Ｏ−グリシル−５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン（２０８ｍｇ，０．３７ミリモル）、無水グルタル酸（６６ｍｇ，０．５８ミリモル、１．５当量）、及びトリエチルアミン（２４３ｍＬ）の混合物を室温で３時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残渣を水（１０ｍＬ）に溶かし、０．５Ｎ  ＨＣｌ溶液を０℃で加えることによって、この溶液のｐＨを３へ調整した。生じた沈殿を濾過により採取して、冷水とエーテルで洗浄した。減圧下で乾燥後、固形物（１６０ｍｇ）を入手した。収率は、７７％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を５７０．０に示した（５６９．５の計算分子量と一致）。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９８％であった。
【０１４５】
実施例１１
５−Ｏ−（Ｎ−スクシニル−グリシル）−５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン
【０１４６】
【化５６】
2010265271.tif 000057
【０１４７】
表題化合物は、無水コハク酸を使用することによって、実施例１０に記載の手順に実質的に従って合成した。収率は、８６％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を５５６．２に示した（５５５．５０の計算分子量と一致）。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９６％であった。
【０１４８】
実施例１２
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−［Ｏ−（ｔＢｏｃ−グリシル）］
【０１４９】
【化５７】
2010265271.tif 000058
【０１５０】
カンプトテシン（０．７９ｇ，２．２ミリモル）、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（１．２ｇ，６．８ミリモル、３当量）、及びＤＭＡＰ（０．８３ｇ，６．８ミリモル、３当量）をＤＣＭ及びＴＨＦ（１８ｍＬ，ｖ／ｖ，５／１）の混合溶媒系に溶かした。この混合物を氷−水浴中で冷やした。これへ１，３−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）（１．１ｍＬ，６．８ミリモル、３．１当量）を加えた。０℃で０．５時間撹拌後、この混合物を室温へ温め、一晩撹拌した。この溶液を５０ｍＬのＤＣＭで希釈し、１０％クエン酸水溶液（２０ｍＬｘ２）、飽和ＮａＨＣＯ３（２０ｍＬｘ２）、及び塩水（１０ｍＬｘ３）で連続的に洗浄した。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して、減圧下で蒸発乾固させた。ＤＣＭ中４％メタノールを溶出液として使用するシリカゲルカラムでのフラッシュクロマトグラフィーによって粗生成物を精製して、カンプトテシン−２０−（Ｓ）−（Ｏ−ｔＢｏｃ−グリシル）（１．０７ｇ，白い固形物）の純粋な生成物を得た。ＴＬＣ（シリカ、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：９／１）：Ｒｆ＝０．６。ＭＳ  ＥＳＩ分析は、分子量を５０６．３に示した（５０５．５３の計算分子量と一致）。
【０１５１】
実施例１３
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−（Ｏ−グリシル）ＴＦＡ塩
【０１５２】
【化５８】
2010265271.tif 000059
【０１５３】
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−［Ｏ−（Ｂｏｃ−グリシル）］（１．０７ｇ，２．１ミリモル）をＤＣＭ中５０％  ＴＦＡでＮ２下に１時間処理した。ＴＦＡと溶媒を減圧下で除去した。残渣を冷エーテルで摩砕した。生じる沈殿を濾過により採取して、冷エーテルで洗浄し、淡黄色の粉末（０．９ｇ，１．７８ミリモル）を得た。収率＝８３％。ＴＬＣ（シリカゲル、ＤＣＭ／ＭｅＯＨ：９／１）：Ｒｆ＝０．２３。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を４０６．２に示した（４０５．４１の計算分子量と一致）。
【０１５４】
実施例１４
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−［Ｏ−（Ｎ−スクシニル−グリシル）］
【０１５５】
【化５９】
2010265271.tif 000060
【０１５６】
ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のカンプトテシン−２０−（Ｓ）−（Ｏ−グリシル）ＴＦＡ（０．９ｇ，１．７ミリモル）、無水コハク酸（０．３５ｇ，３．５ミリモル、２当量）、及びトリエチルアミン（０．７２ｍＬ，３当量）の混合物を室温で５分間撹拌した。生じた沈殿を濾過により採取した。採取した固形物を冷水（１０ｍＬ）に懸濁させた。５％クエン酸水溶液を加えることによって、この水懸濁液のｐＨを２へ調整した。０℃で０．５時
間撹拌後、沈殿を濾過し、冷水とエーテルで洗浄して、減圧下で乾燥させた。０．８８ｇ（１．５８ミリモル）の固形物を入手した。収率は、９９％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を５０５．７に示した（５０５．４９の計算分子量と一致）。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９９％であった。
【０１５７】
実施例１５
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−［Ｏ−（Ｎ−グルタリル−グリシル）］
【０１５８】
【化６０】
2010265271.tif 000061
【０１５９】
表題化合物は、無水グルタル酸を使用することによって、実施例１４に記載の手順に実質的に従って合成した。収率は、７５％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を５２０．５に示した（５１９．５２の計算分子量と一致）。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９８％であった。
【０１６０】
実施例１６
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−［Ｏ−（Ｂｏｃ−バリル）］
【０１６１】
【化６１】
2010265271.tif 000062
【０１６２】
カンプトテシン（３５０ｍｇ）及びＤＭＡＰ（１８０ｍｇ）のＤＣＭ（１０ｍＬ）中の懸濁液へ、文献の方法（Carpino et al., J. Org. Chem., 56, 2611, 1991）を使用する
ことによって製造したＢｏｃ−Ｖａｌ−Ｆ（２当量）のＤＣＭ溶液を０℃で加えた。０〜５℃で３０分間撹拌後、この混合物を室温へ温めて、撹拌を一晩続けた。この混合物をクロロホルム（３０ｍＬ）で希釈し、水、１０％クエン酸水溶液、及び飽和ＮａＨＣＯ３で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させて、濾過した。溶媒を減圧下で除去後、クロロホルム／アセトン（９：１）で溶出させるシリカゲルカラムでのクロマトグラフィーによって残渣を精製した。所望される生成物を含有する分画をプールして、減圧下で濃縮し、固形物を得た。
【０１６３】
実施例１７
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−（Ｏ−バリル）ＴＦＡ塩
【０１６４】
【化６２】
2010265271.tif 000063
【０１６５】
実施例１６で入手したカンプトテシン−２０−（Ｓ）−［Ｏ−（Ｂｏｃ−バリニル）］
をクロロホルム（１０ｍＬ）中３５％  ＴＦＡで３０分間処理した。ＴＦＡと溶媒を真空で除去し、固形物を得た。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を４４８．４に示した（４４７．５０の計算分子量と一致）。
【０１６６】
実施例１８
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−［Ｏ−（Ｎ−スクシニル−バリル）］
【０１６７】
【化６３】
2010265271.tif 000064
【０１６８】
クロロホルム（１０ｍＬ）中のカンプトテシン−２０−（Ｓ）−（Ｏ−バリル）ＴＦＡ塩（１５０ｍｇ）、無水コハク酸（４当量）、及びＤＭＡＰ（２当量）の混合物へトリエチルアミン（６当量）を加えた。室温で一晩撹拌後、この混合物をクロロホルム（２０ｍＬ）で希釈した。生じる溶液を水とクエン酸水溶液で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させて、濾過した。溶媒を真空で除去し、残渣をアセトンで摩砕した。１２０ｍｇの表題化合物を入手した。ＴＬＣ（シリカゲル、クロロホルム／メタノール＝９：１）：Ｒｆ＝０．２２。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を５４８．２に示した（５４７．５７の計算分子量と一致）。
【０１６９】
実施例１９
｛５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン−５−Ｏ−グリシル−グルタリル｝−（Ｄｏｃ）６−Ｌｙｓ−ＤＴｙｒ−ＤＴｙｒ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ−）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０１７０】
【化６４】
2010265271.tif 000065
【０１７１】
実施例３のＨ−（Ｄｏｃ）６−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＤＴｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｙｒ（ｔＢｕ）−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ａｂｕ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ  Ｒｅｓｉｎ（０．１９６ミリモル）を５ｍＬのＤＣＭ中の５−Ｏ−（Ｎ−グルタリル−グリシル）−５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン（０．１２３ｇ，０．２２ミリモル、１．１当量）（実施例１０）、ＤＩＣ（１３６μＬ，０．８８ミリモル、４．４当量）、及び１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡＴ）（３０ｍｇ，０．２２ミリモル、１．１当量）と混合した。この混合物を２日間振り混ぜた。この樹脂をＤＭＦ、メタノール、及びＤＣＭで連続的に洗浄した。空気中での乾燥後、樹脂をＴＦＡ、Ｈ２Ｏ、及びトリイソプロピルシラン（ＴＩＳ）（９．５ｍＬ／０．８５ｍＬ／０．８ｍＬ）の混合物で２時間処理した。樹脂を濾過して除き、濾液を１００ｍＬの冷エーテルへ注いだ。遠心分離の後で、沈殿を採取した。この粗生成物を１００ｍＬの５％  ＡｃＯＨ水溶液に溶かし、これへヨウ素メタ
ノール溶液を黄色い色が維持されるまで滴下した。この反応溶液をさらに１時間撹拌した。１０％  Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液を加えて、過剰なヨウ素を失活させた。この溶液中の粗生成物を、Ｃ１８  ＤＹＮＡＭＡＸ−１００Ａ０（Ｖａｒｉａｎ，カリフォルニア州ウォルナットクリーク）のカラム（４ｘ４３ｃｍ）付き分取用ＨＰＬＣシステムで精製した。８０％  Ａと２０％  Ｂ〜５５％  Ａと４５％  Ｂ（ここでＡは、水中０．１％  ＴＦＡであり、Ｂは、アセトニトリル中０．１％  ＴＦＡである）の５０分での線形勾配でこのカラムを溶出させた。分析用ＨＰＬＣによって分画をチェックした。純粋な生成物を含有するものをプールして、凍結乾燥させた。収率：２５％。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９９．９％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２７６１．１に示した（２７６１．０４の計算分子量と一致）。
【０１７２】
実施例２０
｛５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン−５−Ｏ−グリシル−グルタリル｝−（Ｄｏｃ）４−Ｌｙｓ−ＤＴｙｒ−ＤＴｙｒ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ−）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０１７３】
【化６５】
2010265271.tif 000066
【０１７４】
表題化合物は、実施例２のＨ−Ｄｏｃ−Ｄｏｃ−Ｄｏｃ−Ｄｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＤＴｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｙｒ（ｔＢｕ）−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ａｂｕ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ  Ｒｅｓｉｎを使用することによって、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。収率は、２１．４％であった。純度：分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９９％。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２４７１．２に示した（２４７１．７２７の計算分子量と一致）。
【０１７５】
実施例２１
｛５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン−５−Ｏ−グリシル−スクシニル｝−Ａｅｐａ−ＤＰｈｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０１７６】
【化６６】
2010265271.tif 000067
【０１７７】
表題化合物は、５−Ｏ−（Ｎ−スクシニル−グリシル）−５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン（実施例１１）とＨ−Ａｅｐａ−ＤＰｈｅ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ａｂｕ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ  Ｒｅｓｉｎ（実施例７）を使用することによって、実施例１９の手順に
実質的に従って合成した。収率は、４８％であった。純度：分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９９．９％。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を１７３９．８に示した（１７４０．１４の計算分子量と一致）。
【０１７８】
実施例２２
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−Ｏ−グリシル−スクシニル−Ｄｏｃ−Ｄｏｃ−Ｄｏｃ−Ｄｏｃ−Ａｅｐａ−ＤＰｈｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０１７９】
【化６７】
2010265271.tif 000068
【０１８０】
表題化合物は、カンプトテシン−２０−（Ｓ）−［Ｏ−（Ｎ−スクシニル−グリシル）］（実施例１４）とＨ−Ｄｏｃ−Ｄｏｃ−Ｄｏｃ−Ｄｏｃ−Ａｅｐａ−ＤＰｈｅ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ａｂｕ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ  Ｒｅｓｉｎを使用することによって、実施例１９の手順に実質的に従って合成した。収率は、３２％であった。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９９％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２２６９．０に示した（２２６９．８の計算分子量と一致）。
【０１８１】
実施例２３
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−Ｏ−グリシル−グルタリル−Ａｅｐａ−Ｌｙｓ−ＤＴｙｒ−ＤＴｙｒ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０１８２】
【化６８】
2010265271.tif 000069
【０１８３】
表題化合物は、カンプトテシン−２０−（Ｓ）−［Ｏ−（Ｎ−グルタリル−グリシル）］（実施例１５）とＨ−Ａｅｐａ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＤＴｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｙｒ（ｔＢｕ）−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ａｂｕ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ  Ｒｅｓｉｎ（実施例４）を使用することによって、実施例１９の手順に実質的に従って合成した。収率は、１１％であった。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９５％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２００８．９に示した（２００９．２の計算分子量と一致）。
【０１８４】
実施例２４
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−Ｏ−バリル−スクシニル−ＤＰｈｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０１８５】
【化６９】
2010265271.tif 000070
【０１８６】
表題化合物は、カンプトテシン−２０−（Ｓ）−［Ｏ−（Ｎ−スクシニル−バリル）］（実施例１８）とＨ−ＤＰｈｅ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ａｂｕ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ  Ｒｅｓｉｎ（実施例６）を使用することによって、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。１４５ｍｇの薄黄色の固形物を入手した。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を１５６２．４に示した（１５６１．８の計算分子量と一致）。
【０１８７】
実施例２５
｛５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン−５−Ｏ−グリシニル−スクシニル｝−ＤＰｈｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０１８８】
【化７０】
2010265271.tif 000071
【０１８９】
表題化合物は、５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン−５−Ｏ−（Ｎ−スクシニル−グリシル）（実施例１１）とＨ−ＤＰｈｅ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ａｂｕ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ  Ｒｅｓｉｎ（実施例６）を使用することによって、実施例１９の手順に実質的に従って合成した。黄色い固形物を入手した。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を１５７０．２に示した（１５６９．７２の計算分子量と一致）。
【０１９０】
実施例２６
【０１９１】
【化７１】
2010265271.tif 000072
【０１９２】
表題の保護化ペプチド−樹脂は、実施例５に記載の手順に実質的に従って合成した。Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、及びＦｍｏｃ−βＡｌａ−ＯＨは、ＡｎａＳｐｅｃ（カリフォルニア州サンホセ）より購入した。
【０１９３】
実施例２７
【０１９４】
【化７２】
2010265271.tif 000073
【０１９５】
表題の保護化ペプチド−樹脂は、実施例２６に記載の手順に実質的に従って合成した。
【０１９６】
実施例２８
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−Ｏ−グリシニル−スクシニル−Ａｅｐａ−（Ｄｏｃ）４−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−βＡｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−ＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４）
【０１９７】
【化７３】
2010265271.tif 000074
【０１９８】
ＤＣＭ（７ｍＬ）及びＤＭＦ（７ｍＬ）中の実施例２６のＨ−Ａｅｐａ−（Ｄｏｃ）４−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−βＡｌａ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ  樹脂（０．１２５ミリモル）、カンプトテシン−２０−（Ｓ）−［Ｏ−（Ｎ−グリシル−スクシニル）］（実施例１４）（０．１３８ミリモル、１．１当量）、ＤＩＣ（０．５５ミリモル、４．４当量）、及びＨＯＢｔ（０．２７５ミリモル、２．２当量）の混合物を室温で５日間振り混ぜた。ＴＦＡ、Ｈ２Ｏ、及びＴＩＳ（９．５ｍＬ／０．８５ｍＬ／０．８ｍＬ）の溶液を２時間使用して、ペプチドを樹脂から切断した。樹脂を濾過して除き、ジエチルエーテルを使用してペプチドを沈殿させた。この懸濁液を遠心分離後、粗製ペプチドのペレットを入手した。この粗生成物を１００％  Ａと０％  Ｂ〜２０％  Ａと８０％  Ｂの線形勾配で溶出させるＭｉｃｒｏｓｏｒｂ  Ｃ１８カラム付き分取用ＨＰＬＣシステムで精製した。Ａは、水中０．１％  ＴＦＡであり、Ｂは、アセトニトリル中０．１％  ＴＦＡであった。分析用ＨＰＬＣによって分画をチェックした。所望される生成物を含有する分画をプールして、凍結乾燥させた。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９６．１％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２１７２．９に示した（２１７３．４４の計算分子量と一致）。
【０１９９】
実施例２９
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−Ｏ−グリシニル−スクシニル−Ａｅｐａ−（Ｄｏｃ）４−ＤＰｈｅ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−βＡｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−ＮＨ２
【０２００】
【化７４】
2010265271.tif 000075
【０２０１】
表題ペプチドは、実施例２８に記載の手順に実質的に従って合成した。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９９．９％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２３２１．１に示した（２３２０．６２の計算分子量と一致）。
【０２０２】
実施例３０
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−Ｏ−グリシニル−スクシニル−Ａｅｐａ−（Ｄｏｃ）２−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−βＡｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−ＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：４）
【０２０３】
【化７５】
2010265271.tif 000076
【０２０４】
表題ペプチドは、実施例２８に記載の手順に実質的に従って合成した。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９９．９％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を１８８２．８に示した（１８８３．１３の計算分子量と一致）。
【０２０５】
実施例３１
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−Ｏ−グリシニル−スクシニル−Ａｅｐａ−（Ｄｏｃ）２−ＤＰｈｅ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−βＡｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−ＮＨ２
【０２０６】
【化７６】
2010265271.tif 000077
【０２０７】
表題ペプチドは、実施例２８に記載の手順に実質的に従って合成した。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９９．９％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２０３０．７に示した（２０３０．３０の計算分子量と一致）。
【０２０８】
実施例３２
カンプトテシン−２０−（Ｓ）−Ｏ−グリシニル−スクシニル−Ａｅｐａ−（Ｄｏｃ）４−Ｇａｂａ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−βＡｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｎｌｅ−ＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）
【０２０９】
【化７７】
2010265271.tif 000078
【０２１０】
表題ペプチドは、Ａｅｐａ−（Ｄｏｃ）４−Ｇａｂａ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−βＡｌａ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｌｅｕ−Ｎｌｅ−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ樹脂（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）を使用することによって、実施例２８に記載の手順に実質的に従って合成する。
【０２１１】
実施例３３
【０２１２】
【化７８】
2010265271.tif 000079
【０２１３】
表題ペプチド樹脂は、実施例１に記載の手順に実質的に従って合成した。Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＬｙｓ（Ｄｄｅ）−ＯＨは、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ（カリフォルニア州サンディエゴ）より購入した。ｐＧｌｕ−ＯＨは、Ｃｈｅｍ−Ｉｍｐｅｘ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（イリノイ州ウッドデール）より購入した。合成は、０．２５ミリモルスケールで行った。Ｆｍｏｃ基は、Ｎ−メチルピロリジン（ＮＭＰ）中２０％ピペリジンで３０分間の処理によって外す。ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＬｙｓ（Ｄｄｅ）−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ樹脂の組立てを完了後、この保護化ペプチド−樹脂をマニュアル合成のためにシェーカー上の反応容器へ移した。ＤＭＦ中２％ヒドラジンを０．５時間使用することによって、ＤＬｙｓ残基上のＤｄｅ保護基を外した。この樹脂をＤＭＦ、ＭｅＯＨ、及びＤＣＭで完全に洗浄し、０．５ｍＬのＤＩＥＡを含有するＤＭＦ中のプレ活性化Ｆｍｏｃ−Ａｅｐａ−ＯＨエステル溶液（実施例４に記載）とともに２時間振り混ぜた。この樹脂をＤＭＦで洗浄し、ＤＭＦ中２０％ピペリジンで処理して、Ａｅｐａ残基上のＦｍｏｃ保護基を外した。この保護化ペプチド−樹脂を、ＤＭＦ及びＤＣＭを使用することによって完全に洗浄した。
【０２１４】
実施例３４
【０２１５】
【化７９】
2010265271.tif 000080
【０２１６】
表題の保護化ペプチド樹脂は、ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＬｙｓ［Ｎε−Ａｅｐａ］−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ樹脂（実施例３３）を使用することによって、実施例２の手順に実質的に従って合成した。
【０２１７】
実施例３５
【０２１８】
【化８０】
2010265271.tif 000081
【０２１９】
表題の保護化ペプチド樹脂は、実施例５の手順に実質的に従って合成する。Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＣｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、及びＦｍｏｃ−３Ｐａｌ−ＯＨは、Ｃｈｅｍ−Ｉｍｐｅｘ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（イリノイ州ウッドデール）からのものである。Ｆｍｏｃ−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、及びＦｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨは、ＡｎａＳｐｅｃ（カリフォル
ニア州サンホセ）からのものである。Ｆｍｏｃ−Ｃａｅｇ（Ｂｈｏｃ）−ＯＨは、ＰｅｐＳｅｐｔｉｖｅ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（マサチューセッツ州フラミンガム）からのものである。
【０２２０】
実施例３６
【０２２１】
【化８１】
2010265271.tif 000082
【０２２２】
表題の保護化ペプチド樹脂は、実施例５の手順に実質的に従って合成する。Ｆｍｏｃ−３ＩＴｙｒ−ＯＨとＦｍｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨは、Ｃｈｅｍ−Ｉｍｐｅｘ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ（イリノイ州ウッドデール）からのものである。
【０２２３】
実施例３７
パクリタキセル−２’−Ｏ−グリシル
【０２２４】
【化８２】
2010265271.tif 000083
【０２２５】
１０ｍＬのジクロロメタン中のＢｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（５３ｍｇ）及びパクリタキセル（２１５ｍｇ）の溶液へ４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ，１０ｍｇ）に続き、ＥＤＣ（５８ｍｇ）を加えた。室温で一晩撹拌後、この反応混合物を２０ｍＬのジクロロメタンで希釈し、この混合物を１０％クエン酸水溶液、飽和ＮａＨＣＯ３、及び水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させて、濾過した。溶媒を真空で除去した。この粗生成物をジクロロメタン中３０％  ＴＦＡで、室温で４５分間処理した。ＴＦＡと溶媒を真空で除去し、固形物（０．２５６ｇ）を得た。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を９１１．０に示した（９１１．１の計算分子量と一致）。
【０２２６】
実施例３８
パクリタキセル−２’−Ｏ−（Ｎ−グリシル−スクシニル）
【０２２７】
【化８３】
2010265271.tif 000084
【０２２８】
５ｍＬのピリジン中のパクリタキセル−２’−Ｏ−グリシルＴＦＡ塩（１２７ｍｇ，１当量）及び無水コハク酸（１５０ｍｇ，１２当量）の混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を真空で除去した。残渣を水で１時間摩砕して、沈殿を濾過により採取し、水で洗浄し、乾燥させて、固形物（９４．８ｍｇ）を得た。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を１０１０．９に示した（１０１１．０６の計算分子量と一致）。
【０２２９】
実施例３９
パクリタキセル−２’−Ｏ−（Ｎ−バリル−スクシニル）
【０２３０】
【化８４】
2010265271.tif 000085
【０２３１】
表題化合物は、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨを使用することによって、実施例３７及び３８に記載の手順に実質的に従って合成した。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を１０５２．５に示した（１０５３．２７の計算分子量と一致）。
【０２３２】
実施例４０
パクリタキセル−２’−Ｏ−Ｇｌｙ−スクシニル−Ａｅｐａ−Ｌｙｓ−ＤＴｙｒ−ＤＴｙｒ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０２３３】
【化８５】
2010265271.tif 000086
【０２３４】
５ｍＬのＤＣＭ中のＨ−Ａｅｐａ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＤＴｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｙｒ（ｔＢｕ）−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ（Ｂｏ
ｃ）−Ａｂｕ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ樹脂（０．１ミリモル）（実施例４）、パクリタキセル−２’−Ｏ−（Ｎ−グリシル−スクシニル）（実施例３９）（１．１当量）、ＤＩＣ（１３６μＬ，４．４当量）、及びＨＯＡＴ（３０ｍｇ，１．１当量）の混合物を２日間振り混ぜた。この樹脂をＤＭＦ、メタノール、及びＤＣＭで連続的に洗浄した。空気中での乾燥後、樹脂をＴＦＡ、Ｈ２Ｏ、及びトリイソプロピルシラン（ＴＩＳ）（９．５ｍＬ／０．８５ｍＬ／０．８ｍＬ）の混合物で２時間処理した。樹脂を濾過して除き、濾液を１００ｍＬの冷エーテルへ注いだ。遠心分離の後で、沈殿を採取した。この粗生成物を混合溶液系（１００ｍＬの５％酢酸水溶液と３０ｍＬのアセトニトリル）に溶かした。この溶液へヨウ素メタノール溶液を黄色い色が維持されるまで滴下した。この反応溶液をさらに４５分間撹拌した。１０％  Ｎａ２Ｓ２Ｏ３水溶液を加えて、過剰なヨウ素を失活させた。この溶液中の粗生成物を、Ｃ１８  ＤＹＮＡＭＡＸ−１００Ａ０（Ｖａｒｉａｎ，カリフォルニア州ウォルナットクリーク）のカラム（４ｘ４３ｃｍ）付き分取用ＨＰＬＣシステムで精製した。８０％  Ａと２０％  Ｂ〜５５％  Ａと４５％  Ｂ（ここでＡは、水中０．１％  ＴＦＡであり、Ｂは、アセトニトリル中０．１％  ＴＦＡである）の５０分での線形勾配でこのカラムを溶出させた。分析用ＨＰＬＣによって分画をチェックした。純粋な生成物を含有するものをプールして、凍結乾燥させた。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９８％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２５００．９に示した（２５０１．０の計算分子量と一致）。
【０２３５】
実施例４１
パクリタキセル−２’−Ｏ−Ｖａｌ−スクシニル−ＤＰｈｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０２３６】
【化８６】
2010265271.tif 000087
【０２３７】
表題ペプチドは、実施例４０に記載の手順に実質的に従って合成した。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９９％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２０６６．２に示した（２０６７．４の計算分子量と一致）。
【０２３８】
実施例４２
パクリタキセル−２’−Ｏ−Ｖａｌ−スクシニル−Ａｅｐａ−Ｌｙｓ−ＤＴｙｒ−ＤＴｙｒ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０２３９】
【化８７】
2010265271.tif 000088
【０２４０】
表題ペプチドは、実施例４０に記載の手順に実質的に従って合成した。純度は、分析用
ＨＰＬＣ分析に基づいて、９５％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２５４４．３に示した（２５４３．９の計算分子量と一致）。
【０２４１】
実施例４３
Ｎ−Ｂｏｃ−ドキソルビシン−１４−Ｏ−（Ｆｍｏｃ−グリシン）エステル
【０２４２】
【化８８】
2010265271.tif 000089
【０２４３】
ドキソルビシン−ＨＣｌ（１９０ｍｇ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液へ（ＢＯＣ）２Ｏ（１．２当量）に続き、ジイソプロピルエチルアミン（２．５当量）を加える。３時間撹拌後、揮発物質を真空で除去し、残渣を水で処理する。固形物を濾過により採取し、水で洗浄して、乾燥させる。生じる生成物をＤＭＦ（１０ｍＬ）に溶かす。これへＦｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（１．２当量）、ＤＭＡＰ（０．２当量）、及びＥＤＣ（１．２当量）を加える。この混合物を室温で４時間撹拌する。溶媒の蒸発後、残渣をクロロホルム−メタノールと水の間に分画する。有機層をＭｇＳＯ４で乾燥させて、濾過する。溶媒を真空で除去し、クロロホルム−メタノール（９：１）で溶出させるシリカゲルで残渣をクロマトグラフ処理する。所望される生成物を含有する分画をプールして、溶媒を真空で蒸発させる。
【０２４４】
実施例４４
Ｎ−ＢＯＣ−ドキソルビシン−１４−Ｏ−［（Ｎ−スクシニル）グリシン］エステル
【０２４５】
【化８９】
2010265271.tif 000090
【０２４６】
Ｂｏｃ−ドキソルビシン−１４−Ｏ−（Ｆｍｏｃ−グリシン）エステル（１００ｍｇ）のＤＭＦ（５ｍＬ）溶液へ１ｍＬのピペリジンを加える。室温で２時間撹拌後、この混合物をクロロホルム（２０ｍＬ）で希釈する。この混合物を塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させて、濾過する。溶媒を真空で除去して少量（約５ｍＬ以下）とする。この混合物へ無水コハク酸（４当量）、ＤＭＡＰ（２当量）、及びトリエチルアミン（４当量）を加える。この溶液を室温で一晩撹拌する。揮発物質を真空で除去する。残渣を５％クエン酸水溶液で摩砕する。沈殿を濾過により採取し、水で洗浄して、乾燥させる。
【０２４７】
実施例４５
ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ＤＬｙｓ［Ｎε−（ドキソルビシン−１４−Ｏ−グリシル−スクシニル−Ａｅｐａ−（Ｄｏｃ）４−）］−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＮＨ２
【０２４８】
【化９０】
2010265271.tif 000091
【０２４９】
表題化合物は、ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＬｙｓ［Ｎε−（Ａｅｐａ−（Ｄｏｃ）４−）］Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ樹脂（実施例３４）とＢｏｃ−ドキソルビシン−１４−Ｏ−［（Ｎ−スクシニル）グリシン］エステル（実施例４４）を使用することによって、実施例２８の手順に実質的に従って合成する。
【０２５０】
実施例４６
ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ＤＬｙｓ［Ｎε−（ドキソルビシン−１４−Ｏ−Ｇｌｙ−スクシニル−（Ｄｏｃ）４−Ｇａｂａ−］−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＮＨ２
【０２５１】
【化９１】
2010265271.tif 000092
【０２５２】
表題化合物は、実施例４５の手順に実質的に従って合成した。Ｆｍｏｃ−Ｇａｂａ−ＯＨは、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ（カリフォルニア州サンディエゴ）からのものであった。
【０２５３】
実施例４７
ドキソルビシン−１４−Ｏ−グリシル−スクシニル−（Ｄｏｃ）４−Ａｅｐａ−Ｃａｅｇ−シクロ（ＤＣｙｓ−３Ｐａｌ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−ＤＣｙｓ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ−ＮＨ２
【０２５４】
【化９２】
2010265271.tif 000093
【０２５５】
表題化合物は、実施例１９の手順に実質的に従って合成する。Ｈ−（Ｄｏｃ）４−Ａｅｐａ−Ｃａｅｇ−ＤＣｙｓ（Ｔｒｔ）−３Ｐａｌ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＤＣｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（Ｂｚｌ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ樹脂（実施例３５）とＢＯＣ−ドキソルビシン−１４−Ｏ−［（Ｎ−スクシニル）グリシン］エステル（実施例４４）を使用する。
【０２５６】
実施例４８
パクリタキセル−２’−Ｏ−グリシル−スクシニル−（Ｄｏｃ）４−Ａｅｐａ−ＤＰｈ
ｅ−シクロ［Ｃｙｓ−３ＩＴｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ］−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０２５７】
【化９３】
2010265271.tif 000094
【０２５８】
表題化合物は、Ｈ−（Ｄｏｃ）４−Ａｅｐａ−ＤＰｈｅ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−３ＩＴｙｒ−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−Ｖａｌ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ樹脂（実施例３６）とパクリタキセル−２’−Ｏ−（Ｎ−グリシル−スクシニル）（実施例３８）を使用することによって、実施例４０の手順に実質的に従って合成する。
【０２５９】
実施例４９
パクリタキセル−２’−Ｏ−グリシル−スクシニル−Ａｅｐａ−（Ｄｏｃ）２−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−βＡｌａ−Ｈｉｓ−Ｐｈｅ−Ｎｌｅ−ＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ
ＮＯ：６）
【０２６０】
【化９４】
2010265271.tif 000095
【０２６１】
表題化合物は、Ｈ−Ａｅｐａ−（Ｄｏｃ）２−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ａｌａ−Ｖａｌ−βＡｌａ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｐｈｅ−Ｎｌｅ−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ
ＭＢＨＡ樹脂（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６）とパクリタキセル−２’−Ｏ−（Ｎ−グリシル−スクシニル）（実施例３８）を使用することによって、実施例２８の手順に実質的に従って合成する。
【０２６２】
実施例５０
ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ＤＬｙｓ［Ｎε−（パクリタキセル−２’−Ｏ−グリシル−スクシニル−Ａｅｐａ−（Ｄｏｃ）４−）］−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＮＨ２
【０２６３】
【化９５】
2010265271.tif 000096
【０２６４】
表題化合物は、ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＤＬｙｓ［Ｎε−Ａｅｐａ−（Ｄｏｃ）４−）］−Ｌｅｕ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ樹脂（実施例３４）と２’−Ｏ−（Ｎ−スクシニル−グリシル）−パクリタキセル（実施例３８）を使用することによって、実施例４５の手順に実質的に従って合成した。
【０２６５】
実施例５１
ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−ＤＬｙｓ［Ｎε−（カンプトテシン−２０−（Ｓ）−Ｏ−グリシニル−スクシニル−（Ｄｏｃ）４−Ａｅｐａ−）］−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−ＮＨ２
【０２６６】
【化９６】
2010265271.tif 000097
【０２６７】
表題化合物は、カンプトテシン−２０−（Ｓ）−［Ｏ−（Ｎ−スクシニル−グリシル）］（実施例１４）を使用することによって、実施例５０の手順に実質的に従って合成する。
【０２６８】
実施例５２
【０２６９】
【化９７】
2010265271.tif 000098
【０２７０】
表題化合物は、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。収率＝１１％。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９９．９％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を１８９１．８に示した（１８９１．１の計算分子量と一致）。
【０２７１】
実施例５３
カンプトテシン−Ｇｌｙ−グルタリル−Ｌｙｓ−ＤＴｙｒ−ＤＴｙｒ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０２７２】
【化９８】
2010265271.tif 000099
【０２７３】
表題化合物は、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。収率＝２３％。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９９％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を１８４１．９に示した（１８４１．１の計算分子量と一致）。
【０２７４】
実施例５４
カンプトテシン−Ｇｌｙ−スクシニル−（Ｄｏｃ）６−ＤＰｈｅ−ｃ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０２７５】
【化９９】
2010265271.tif 000100
【０２７６】
表題化合物は、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。収率＝１８％。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９８％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２３９０．０に示した（２３９０．７の計算分子量と一致）。
【０２７７】
実施例５５
カンプトテシン−Ｇｌｙ−グルタリル−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−Ｌｙｓ−ＤＴｙｒ−ＤＴｙｒ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０２７８】
【化１００】
2010265271.tif 000101
【０２７９】
表題化合物は、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。収率＝１２％。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、１００％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２０９７．０に示した（２０９７．４の計算分子量と一致）。
【０２８０】
実施例５６
カンプトテシン−Ｇｌｙ−スクシニル−（Ｄｏｃ）４−ＤＰｈｅ−ｃ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０２８１】
【化１０１】
2010265271.tif 000102
【０２８２】
表題化合物は、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。収率＝３１％。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、１００％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量
を２１００．９に示した（２１００．３の計算分子量と一致）。
【０２８３】
実施例５７
カンプトテシン−Ｇｌｙ−スクシニル−Ａｅｐａ−ＤＰｈｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０２８４】
【化１０２】
2010265271.tif 000103
【０２８５】
表題化合物は、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。収率＝２１％。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９７％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を１６８８．０に示した（１６８８．９の計算分子量と一致）。
【０２８６】
実施例５８
カンプトテシン−Ａｂｕ−スクシニル−（Ｄｏｃ）４−Ｌｙｓ−ＤＴｙｒ−ＤＴｙｒ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０２８７】
【化１０３】
2010265271.tif 000104
【０２８８】
表題化合物は、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。収率＝２３％。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９５％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２４３５．２に示した（２４３５．８の計算分子量と一致）。
【０２８９】
実施例５９
カンプトテシン−グルタリル−（Ｄｏｃ）２−Ｌｙｓ−ＤＴｙｒ−ＤＴｙｒ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０２９０】
【化１０４】
2010265271.tif 000105
【０２９１】
表題化合物は、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。収率＝１１％。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９５％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２０７４．０に示した（２０７４．４の計算分子量と一致）。
【０２９２】
実施例６０
カンプトテシン−グルタリル−Ｄｏｃ−Ｌｙｓ−ＤＴｙｒ−ＤＴｙｒ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０２９３】
【化１０５】
2010265271.tif 000106
【０２９４】
表題化合物は、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。収率＝１６％。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９５％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を１９２９．５に示した（１９２９．２の計算分子量と一致）。
【０２９５】
実施例６１
カンプトテシン−２０−グルシニル−スクシノイル−ＤＰｈｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０２９６】
【化１０６】
2010265271.tif 000107
【０２９７】
表題化合物は、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。収率＝１５．６％。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９４％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を１５２０．１に示した（１５１９．７１の計算分子量と一致）。
【０２９８】
実施例６２
｛５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン−５−Ｏ−グリシル−スクシニル｝−（Ｄｏｃ）４−Ａｅｐａ−ＤＰｈｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０２９９】
【化１０７】
2010265271.tif 000108
【０３００】
表題化合物は、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。収率＝２５％。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９７％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２３２０．０に示した（２３１９．６の計算分子量と一致）。
【０３０１】
実施例６３
｛５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン−５−Ｏ−グリシル−グルタリル｝−Ａｅｐａ−Ｌｙｓ−ＤＴｙｒ−ＤＴｙｒ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０３０２】
【化１０８】
2010265271.tif 000109
【０３０３】
表題化合物は、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。収率＝２４％。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９５％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２０５９．４に示した（２０６０．３の計算分子量と一致）。
【０３０４】
実施例６４
｛５−（Ｒ）−エチル−９，１０−ジフルオロ−１，４，５，１３−テトラヒドロ−３Ｈ，１５Ｈ−オキセピノ［３’，４’：６，７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１５−ジオン−５−Ｏ−グリシル−スクシニル｝−（Ｄｏｃ）４−Ａｅｐａ−Ｌｙｓ−ＤＴｙｒ−ＤＴｙｒ−ｃ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０３０５】
【化１０９】
2010265271.tif 000110
【０３０６】
表題化合物は、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。収率＝４８％。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９９．９％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２６２６．０に示した（２６２６．９の計算分子量と一致）。
【０３０７】
実施例６５
カンプトテシン−２０−グルタリル−（Ｄｏｃ）４−Ｌｙｓ−ＤＴｙｒ−ＤＴｙｒ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０３０８】
【化１１０】
2010265271.tif 000111
【０３０９】
表題化合物は、実施例１９に記載の手順に実質的に従って合成した。収率＝１０％。純度は、分析用ＨＰＬＣ分析に基づいて、９８．９％であった。ＥＳＩ  ＭＳ分析は、分子量を２３６５．０に示した（２３６５．０の計算分子量と一致）。
【０３１０】
実施例６６
【０３１１】
【化１１１】
2010265271.tif 000112
【０３１２】
表題のペプチドは、アプライド・バイオシステムズ（カリフォルニア州フォスターシティ）モデル４３３Ａペプチド合成機で、フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ
）化学に基づいて自動的に合成した。０．７２ミリモル／ｇの置換があるＲｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＭＢＨＡ樹脂（ＮｏｖａＢｉｏｃｈｅｍ，カリフォルニア州サンディエゴ）を使用した。以下の側鎖保護のあるＦｍｏｃアミノ酸（ＡｎａＳｐｅｃ，カリフォルニア州サンホセ）を使用した：Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ａｌｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−ＤＰｈｅ−ＯＨ、及びＦｍｏｃ−Ａｂｕ−ＯＨ。合成は、０．２５ミリモルスケールで行った。Ｆｍｏｃ基は、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）中２０％ピペリジンで３０分間の処理によって外した。各カップリング工程において、ＤＭＦ中０．４５Ｍヘキサフルオロリン酸２−（１−Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，２，３−テトラメチルウロニウム／１−ヒドロキシ−ベンゾトリアゾール（ＨＢＴＵ／ＨＯＢＴ）によってはじめにＦｍｏｃアミノ酸（４当量、１ミリモル）をプレ活性化した。この活性化アミノ酸エステルを１ｍＬのジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）及びＮＭＰとともに樹脂へ加えた。以下の反応サイクルを実施するよう、ＡＢＩ  ４３３Ａペプチド合成機をプログラムした：（１）ＮＭＰで洗浄すること、（２）ＮＭＰ中２０％ピペリジンで３０分間Ｆｍｏｃ保護基を外すこと、（３）ＮＭＰで洗浄すること、（４）プレ活性化Ｆｍｏｃアミノ酸と１時間のカップリング。Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）２、Ｔｙｒ（ｔＢｕ）３、及びＤＴｒｐ（Ｂｏｃ）４に対して単一カップリングを適用した。他のすべてのアミノ酸については、二重カップリングを使用した。配列に従って連続的に樹脂をカップリングした。ペプチド鎖を組み立てた後で、Ｆｍｏｃを外し、ＤＭＦ及びＤＣＭによって完全に洗浄した。
【０３１３】
実施例６７
【０３１４】
【化１１２】
2010265271.tif 000113
【０３１５】
表題ペプチドは、実施例６６からのペプチドより開始して合成した。Ｆｍｏｃ−Ａｅｐａ−ＯＨ（Ｎｅｏｓｙｓｔｅｍ  Ｌａｂｏｒａｔｏｉｒｅ，ジェヌヴィリエ、フランス；１．５当量、０．７５ミリモル）を２ｍＬのＤＭＦ中の［ヘキサフルオロリン酸Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム］（ＨＡＴＵ，１．４当量、０．７ミリモル）及び１−ヒドロキシ−７−アザベンゾトリアゾール（ＨＯＡＴ，１．４当量、０．７ミリモル）で５分間プレ活性化した。上記の樹脂を小さな反応容器へ移し、このＦｍｏｃ−Ａｅｐａ−ＯＨの活性化エステルと１ｍＬのＤＩＥＡとともにシェーカー上で２時間振り混ぜた。この樹脂をＤＭＦ及びＤＣＭで入念に洗浄した。
【０３１６】
実施例６８
【０３１７】
【化１１３】
2010265271.tif 000114
【０３１８】
表題ペプチドは、実施例６６からのペプチドより開始して合成した。樹脂をＤＭＦで洗浄し、ＤＭＦ中２５％ピペリジンで処理し、Ｆｍｏｃを外した。この樹脂をＦｍｏｃ−Ｄｏｃ−ＯＨ（Ｃｈｅｍ−Ｉｍｐｅｘ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，イリノイ州ウッドデール、１．５当量、０．７５ミリモル）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ，１．５当量、０．７５ミリモル）、及びＨＯＢＴ（１．５当量、０．７５ミリモル）
のＤＭＦ溶液と２時間混合した。第一のＦｍｏｃ−Ｄｏｃ−ＯＨのカップリングの記載と同じ手順を使用して、この樹脂へ第二〜第四のＦｍｏｃ−Ｄｏｃ−ＯＨをカップリングした。この方法を繰り返して、ペプチド鎖の組立てを完了した。
【０３１９】
最後のＦｍｏｃをＤＭＦ中２５％ピペリジンで外した。この樹脂をＤＭＦ及びＤＣＭで洗浄した。
【０３２０】
実施例６９
【０３２１】
【化１１４】
2010265271.tif 000115
【０３２２】
１９ｍＬのＴＦＡ（トリフルオロ酢酸、Ｈａｌｏｃａｒｂｏｎ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ社、ニュージャージー州リバーエッジ）、１．６ｍＬのＴＩＳ（トリイソプロピルシラン、アルドリッチ）、及び１．７ｍＬの水を２時間使用して、Ｒｅｓｉｎ（樹脂）よりペプチドを切断した。この樹脂を濾過し、エーテルへ注ぐことによって、ペプチドを沈殿させた。この沈殿を１５０ｍＬの５％酢酸と３０ｍＬのアセトニトリルに溶かした。継続的な赤色が存在するまで、Ｉ２（ＭｅＯＨ中２０ｍｇ／ｍｌ）を滴下した。このフラスコを熱い水道水の浴に入れて、２時間撹拌した。１０％  Ｎａ２ＳＳＯ３を使用して、反応を失活させた。このペプチドを、６０分にわたる５〜６０％  ＣＨ３ＣＮ勾配のＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｃ１８カラムを使用して精製した（ここで緩衝液Ａは、水中０．１％  ＴＦＡであり、緩衝液Ｂは、ＣＨ３ＣＮ中０．１％  ＴＦＡである）。生成物を含有する分画を凍結乾燥させて、１８６ｍｇ（収率４０％）の白色の粉末を得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）：１７２２．２。
【０３２３】
実施例７０
【０３２４】
【化１１５】
2010265271.tif 000116
【０３２５】
表題ペプチドは、実施例６７からのペプチドより開始して合成した。樹脂をＤＭＦで洗浄し、ＤＭＦ中２５％ピペリジンで処理してＦｍｏｃを外した。この樹脂をＦｍｏｃ−Ｄｏｃ−ＯＨ（Ｃｈｅｍ−Ｉｍｐｅｘ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，イリノイ州ウッドデール、１．５当量、０．７５ミリモル）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ，１．５当量、０．７５ミリモル）、及びＨＯＢＴ（１．５当量、０．７５ミリモル）のＤＭＦ溶液と２時間混合した。第一のＦｍｏｃ−Ｄｏｃ−ＯＨのカップリングの記載と同じ手順を使用して、この樹脂へ第二〜第三のＦｍｏｃ−Ｄｏｃ−ＯＨをカップリングした。この方法を繰り返して、ペプチド鎖の組立てを完了した。最後のＦｍｏｃをＤＭＦ中２５％ピペリジンで外した。この樹脂をＤＭＦ及びＤＣＭで洗浄した。
【０３２６】
実施例７１
【０３２７】
【化１１６】
2010265271.tif 000117
【０３２８】
１９ｍＬのＴＦＡ（トリフルオロ酢酸、Ｈａｌｏｃａｒｂｏｎ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ社、
ニュージャージー州リバーエッジ）、１．６ｍＬのＴＩＳ（トリイソプロピルシラン、アルドリッチ）、及び１．７ｍＬの水を２時間使用して、Ｒｅｓｉｎ（樹脂）よりペプチドを切断した。この樹脂を濾過し、エーテルへ注ぐことによって、ペプチドを沈殿させた。この沈殿を１５０ｍＬの５％酢酸と３０ｍＬのアセトニトリルに溶かした。継続的な赤色が存在するまで、Ｉ２（ＭｅＯＨの２０ｍｇ／ｍｌ）を滴下した。このフラスコを熱い水道水の浴に入れて、２時間撹拌した。１０％  Ｎａ２ＳＳＯ３を使用して、反応物を失活させた。このペプチドを、６０分にわたる５〜６０％  ＣＨ３ＣＮ勾配のＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｃ１８カラムを使用して精製した（ここで緩衝液Ａは、水中０．１％  ＴＦＡであり、緩衝液Ｂは、ＣＨ３ＣＮ中０．１％  ＴＦＡである）。生成物を含有する分画を凍結乾燥させて、１８０ｍｇ（収率４２％）の白色の粉末を得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）：１７２２．２。
【０３２９】
実施例７２
パクリタキセル−２’−グルタレート
【０３３０】
【化１１７】
2010265271.tif 000118
【０３３１】
１０ｍＬのピリジン中のパクリタキセル（ＨａｎｄｅＴｅｃｈ  ＵＳＡ社、テキサス州ヒューストン、１ｇ，１．１７ミリモル）へ無水グルタル酸（アルドリッチ、１．６ｇ，１４．１ミリモル、１２当量）を加えた。生じる溶液を室温で４時間撹拌してから、減圧で蒸発させた。２０ｍＬの水を加えた。粘稠な固形物を濾過により採取した。アセトン／水からの再結晶により、０．８４２ｇ（０．８６９ミリモル、収率７４％）の白色の固形物を得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）：９６９．０。
【０３３２】
実施例７３
パクリタキセル−２’−Ｄｏｃ−Ｓｕｃ−ＯＨ
【０３３３】
【化１１８】
2010265271.tif 000119
【０３３４】
２５ｍＬのＤＣＭ中のパクリタキセル（１ｇ，１．１７ミリモル）及びＢｏｃ−Ｄｏｃ−ＯＨ（０．３１ｇ，１．１７ミリモル）の溶液へＤＩＣ（０．２４１ｍＬ，１．５４ミリモル）に続き、ＤＭＡＰ（５０ｍｇ，０．４ミリモル）を加えた。生じる溶液を室温で４時間撹拌した。この溶液を３ｘ１０％クエン酸、３ｘ飽和ＮａＨＣＯ３、１ｘ飽和ＮａＣｌで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、濾過して、蒸発させた。生じる残渣をＥｔＯＡｃに溶かしてから、ヘキサンで沈殿させた。生成物を濾過により採取し、減圧で乾燥させた。固形物（１．１９ｇ，１．０８ミリモル）を入手した。収率は９２％であった。ＭＳ（エレクトロスプレー）：ｍ／ｅ＝１０９９．７（＋１），純度は、ＨＰＬＣにより９５％であった。生じるＢｏｃ−Ｄｏｃ−パクリタキセル（１．１９ｇ，１．０８ミリモル）を２０ｍＬのギ酸に溶かし、３０分間撹拌してから、蒸発させた。この生成物を１５ｍＬのピリジンに溶かした。この溶液へ無水コハク酸（１．２９ｇ，１３ミリモル）を加えた。この混合物を室温で一晩撹拌した。減圧での蒸発によりピリジンを除去した。残渣を水で摩砕して、採取した（０．９９ｇ，０．９１ミリモル、収率８４％）。ＭＳ（エレクトロスプレー）は、１０９９．４（＋１），１１２１．６（Ｎａ＋１）を示した。純度は、ＨＰＬＣにより７５％であった。
【０３３５】
実施例７４
パクリタキセル−２’−グルタリル−（Ｄｏｃ）４−Ａｅｐａ−ＤＰｈｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２
【０３３６】
【化１１９】
2010265271.tif 000120
【０３３７】
実施例６９からのペプチド（１２５ｍｇ，０．０６７ミリモル）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液へパクリタキセル−２’−Ｇｌｕｔ−ＯＨ（実施例７２、６５ｍｇ，０．０６７ミリモル）、ＨＯＢＴ（２０ｍｇ，０．１４７ミリモル）、ＢＯＰ（２９ｍｇ，０．０６７ミリモル）、及びＤＩＥＡ（８当量、９３μＬ）を加えた。この溶液を一晩撹拌してから、減圧で蒸発させた。残渣を最少量のＭｅＯＨに溶かし、エーテルで沈殿させた。固形物（１０８ｍｇ，０．０４ミリモル）を入手した。収率は６０％であった。ＭＳ（エレクトロスプレー）は、１４０９．５（＋２）を示した。ＬｙｓよりＡｌｏｃを外すために、このペプチドをＤＣＭ／ＴＨＦ（無水、１５ｍＬ／５ｍＬ）に溶かした。これへ氷酢酸（１５μＬ，５当量）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１２ｍｇ，０．３当量）、及びＢｕ３ＳｎＨ（２ｘ３１μＬ，３当量）を０℃で加えた。１時間撹拌後、エーテル中０．５Ｍ  ＨＣｌ（０．７ｍＬ，１０当量）を使用して、この溶液を失活させた。ペプチドをエーテルで沈殿させた。この粗製ペプチドを、１時間にわたる５〜９０％の勾配（ここで溶媒Ａは、水中５％  ＭｅＯＨであり、溶媒Ｂは、ＣＨ３ＣＮである）を使用するＰＬＲＰ−Ｓカラム（Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｌａｂｓ，１００Ａ，８μ）で精製した。純粋な分画を合わせ、凍結乾燥させて、４２ｍｇのペプチドを得た。ＭＳ（エレクトロスプレー）は、２７３１．４を示した（２７３２．１の計算分子量と一致）。純度は、ＨＰＬＣ分析に基づいて、９９．９％であった。
【０３３８】
実施例７５
【０３３９】
【化１２０】
2010265271.tif 000121
【０３４０】
実施例７１からのペプチド（２００ｍｇ，０．１２ミリモル）のＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液へパクリタキセル−２’−Ｄｏｃ−Ｓｕｃ−ＯＨ（実施例７３、１４０ｍｇ，０．１２８ミリモル）、ＨＯＢＴ（３９ｍｇ，０．２８１ミリモル）、ＢＯＰ（７４ｍｇ，０．１６６ミリモル）、及びＤＩＥＡ（８当量、１７７μＬ）を加えた。この溶液を一晩撹拌して、減圧で蒸発させた。固形物（３５５ｍｇ，０．１２６ミリモル）を入手した。
【０３４１】
ＬｙｓよりＡｌｏｃを外すために、この生成物をＤＣＭ／ＴＨＦ（無水、１５ｍＬ／５ｍＬ）に溶かした。これへ氷酢酸（１９μＬ，５当量）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（１２ｍｇ，０．３当量）、及びＢｕ３ＳｎＨ（２ｘ５４μＬ，３当量）を０℃で加えた。この溶液を１時間撹拌してから、エーテル中０．５Ｍ  ＨＣｌ（０．７ｍＬ，１０当量）を使用し
て失活させた。生成物をエーテルで沈殿させた。１時間にわたる５〜９０％の勾配（ここで溶媒Ａは、水中５％  ＭｅＯＨであり、溶媒Ｂは、ＣＨ３ＣＮである）を使用するＰＬＲＰ−Ｓカラム（Ｐｏｌｙｍｅｒ  Ｌａｂｓ，１００Ａ，８μ）で精製を行った。純粋な分画を合わせ、凍結乾燥させた。ＭＳ（エレクトロスプレー）は、２７１７．３を示した（２７１８．１の計算分子量と一致）。純度は、ＨＰＬＣ分析に基づいて、９９．９％であった。
【０３４２】
実施例７６
【０３４３】
【化１２１】
2010265271.tif 000122
【０３４４】
表題化合物は、２’−Ｏ−（Ｎ−スクシニル−Ｎ−メチル−グリシル）−パクリタキセル（実施例３８）とＨ−Ｄｏｃ−Ｄｏｃ−Ｄｏｃ−Ｄｏｃ−Ａｅｐａ−ＤＰｈｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ（Ａｌｏｃ）−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２（実施例６９）を使用することによって、実施例２８に記載の手順に実質的に従って合成した。収率は１８．８％であり、純度は、ＨＰＬＣ分析に基づいて、９５％であった。分子量は、２７８９．２であると決定した。
【０３４５】
実施例７７
【０３４６】
【化１２２】
2010265271.tif 000123
【０３４７】
表題化合物は、パクリタキセル−２’−スクシニル（無水グルタル酸の代わりの無水コハク酸を用いて実施例７２のように製造した）と、Ｈ−Ｄｏｃ−Ｄｏｃ−Ｄｏｃ−Ｄｏｃ−Ｇａｂａ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−βＡｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｎｌｅ−ＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）（ここで、このペプチドは、実質的に実施例１に記載のように製造してから、実質的に実施例２に記載のように４つのＤｏｃ残基へカップリングした）を使用することによって、実施例２８に記載の手順に実質的に従って合成した。収率は１２．１％であり、純度は、ＨＰＬＣ分析に基づいて、９７％であった。分子量は、２５３７．８であると決定した。
【０３４８】
実施例７８
【０３４９】
【化１２３】
2010265271.tif 000124
【０３５０】
表題化合物は、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨの代わりにＢｏｃ−Ｓａｒ−ＯＨを使用して実質的に実施例３８に記載のように製造したパクリタキセル−２’−Ｏ−（Ｎ−スクシニル−Ｎ−メチル−グリシル）と、Ｈ−（Ｄｏｃ）４−Ａｅｐａ−Ｇａｂａ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−βＡｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｎｌｅ−ＮＨ２（ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）（ここで、このペプチドは、実質的に実施例１のように合成してから、実施例４に記載のようにＡｅｐａ残基へカップリングして、続いて実施例５に記載のように４つのＤｏｃ残基へカップリングした）を使用することによって、実施例２８に記載の手順に実質的に従って合成した。収率は１３．４％であり、純度は、ＨＰＬＣ分析に基づいて、９８％であった。分子量は、２７７８．１であると決定した。
【０３５１】
実施例７９
【０３５２】
【化１２４】
2010265271.tif 000125
【０３５３】
表題化合物は、カンプトテシン−２０−（Ｓ）−［Ｏ−（Ｎ−スクシニル−グリシル）］（実施例１４）と、Ｈ−（Ｄｏｃ）４−Ａｅｐａ−Ｇａｂａ−Ｇｌｎ−Ｔｒｐ−Ａｌａ−Ｖａｌ−βＡｌａ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ−Ｎｌｅ−ＮＨ２（実施例７８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１２）を使用することによって、実施例２８に記載の手順に実質的に従って合成した。収率は１４．４％であり、純度は、ＨＰＬＣ分析に基づいて、９９．４％であった。分子量は、質量分析法によって２２５８であると決定した。
【０３５４】
他の化合物の合成
以下の表Ａ〜Ｉに収載する化合物は、上記の手順に従って合成することができる。
【０３５５】
【化１２５】
2010265271.tif 000126
【０３５６】
【化１２６】
2010265271.tif 000127
【０３５７】
【化１２７】
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【０３５８】
【化１２８】
2010265271.tif 000129
【０３５９】
【化１２９】
2010265271.tif 000130
【０３６０】
【化１３０】
2010265271.tif 000131
【０３６１】
【化１３１】
2010265271.tif 000132
【０３６２】
【化１３２】
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【０３６３】
【化１３３】
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【０３６４】
【化１３４】
2010265271.tif 000135
【０３６５】
【化１３５】
2010265271.tif 000136
【０３６６】
【化１３６】
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【０３６７】
【化１３７】
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【０３６８】
【化１３８】
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【０３６９】
【化１３９】
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【０３７０】
【化１４０】
2010265271.tif 000141
【０３７１】
【化１４１】
2010265271.tif 000142
【０３７２】
【化１４２】
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【０３７３】
【化１４３】
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【０３７４】
【化１４４】
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【０３７５】
【化１４５】
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【０３７６】
【化１４６】
2010265271.tif 000147
【０３７７】
【化１４７】
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【０３７８】
【化１４８】
2010265271.tif 000149
【０３７９】
【化１４９】
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【０３８０】
【化１５０】
2010265271.tif 000151
【０３８１】
【化１５１】
2010265271.tif 000152
【０３８２】
【化１５２】
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【０３８３】
【化１５３】
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【０３８４】
【化１５４】
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【０３８５】
【化１５５】
2010265271.tif 000156
【０３８６】
【化１５６】
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【０３８７】
【化１５７】
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【０３８８】
【化１５８】
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【０３８９】
【化１５９】
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【０３９０】
【化１６０】
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【０３９１】
【化１６１】
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【０３９２】
【化１６２】
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【０３９３】
【化１６３】
2010265271.tif 000164
【０３９４】
【化１６４】
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【０３９５】
【化１６５】
2010265271.tif 000166
【０３９６】
【化１６６】
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【０３９７】
【化１６７】
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【０３９８】
【化１６８】
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【０３９９】
【化１６９】
2010265271.tif 000170
【０４００】
【化１７０】
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【０４０１】
【化１７１】
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【０４０２】
【化１７２】
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【０４０３】
【化１７３】
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【０４０４】
【化１７４】
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【０４０５】
【化１７５】
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【０４０６】
【化１７６】
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【０４０７】
【化１７７】
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【０４０８】
【化１７８】
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【０４０９】
【化１７９】
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【０４１０】
【化１８０】
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【０４１１】
【化１８１】
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【０４１２】
【化１８２】
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【０４１３】
【化１８３】
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【０４１４】
【化１８４】
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【０４１５】
【化１８５】
2010265271.tif 000186
【０４１６】
【化１８６】
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【０４１７】
【化１８７】
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【０４１８】
【化１８８】
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【０４１９】
【化１８９】
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【０４２０】
【化１９０】
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【０４２１】
【化１９１】
2010265271.tif 000192
【０４２２】
【化１９２】
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【０４２３】
【化１９３】
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【０４２４】
【化１９４】
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【０４２５】
【化１９５】
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【０４２６】
【化１９６】
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【０４２７】
【化１９７】
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【０４２８】
【化１９８】
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【０４２９】
【化１９９】
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【０４３０】
【化２００】
2010265271.tif 000201
【０４３１】
【化２０１】
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【０４３２】
【化２０２】
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【０４３３】
【化２０３】
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【０４３４】
【化２０４】
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【０４３５】
【化２０５】
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【０４３６】
【化２０６】
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【０４３７】
【化２０７】
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【０４３８】
【化２０８】
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【０４３９】
【化２０９】
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【０４４０】
【化２１０】
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【０４４１】
【化２１１】
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【０４４２】
【化２１２】
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【０４４３】
【化２１３】
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【０４４４】
【化２１４】
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【０４４５】
【化２１５】
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【０４４６】
【化２１６】
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【０４４７】
【化２１７】
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【０４４８】
【化２１８】
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【０４４９】
【化２１９】
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【０４５０】
【化２２０】
2010265271.tif 000221
【０４５１】
【化２２１】
2010265271.tif 000222
【０４５２】
【化２２２】
2010265271.tif 000223
【０４５３】
【化２２３】
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【０４５４】
【化２２４】
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【０４５５】
【化２２５】
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【０４５６】
【化２２６】
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【０４５７】
【化２２７】
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【０４５８】
【化２２８】
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【０４５９】
【化２２９】
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【０４６０】
【化２３０】
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【０４６１】
【化２３１】
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【０４６２】
【化２３２】
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【０４６３】
【化２３３】
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【０４６４】
【化２３４】
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【０４６５】
【化２３５】
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【０４６６】
【化２３６】
2010265271.tif 000237
【０４６７】
【化２３７】
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【０４６８】
【化２３８】
2010265271.tif 000239
【０４６９】
【化２３９】
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【０４７０】
【化２４０】
2010265271.tif 000241
【０４７１】
【化２４１】
2010265271.tif 000242
【０４７２】
【化２４２】
2010265271.tif 000243
【０４７３】
生物学的アッセイ
ソマトスタチン受容体−放射リガンド結合アッセイ
in vitro 受容体結合アッセイ用の膜は、ヒトソマトスタチン受容体サブタイプ（ｈＳ
ＳＴＲ−１、ｈＳＳＴＲ−２、ｈＳＳＴＲ−３、ｈＳＳＴＲ−４、又はｈＳＳＴＲ−５）を発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞を氷冷５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ中においてホモジェナイズすること（Ｐｏｌｙｔｒｏｎ，６に設定、１５秒）、及び、新鮮な緩衝液中の中間の再懸濁とともに３９，０００ｇ（１０分）で２回遠心分離することによって入手した。最終ペレットをアッセイのために１０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌに再懸濁した。ｈＳＳＴＲ−１、ｈＳＳＴＲ−３、及びｈＳＳＴＲ−４のアッセイでは、膜調製物のアリコートを、ＢＳＡ（０．２％）；ＭｇＣｌ２（５ｍＭ）を含有する５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）において０．０５ｎＭ［１２５Ｉ−Ｔｙｒ１１］ＳＲＩＦ−１４とともにインキュベートした（９０分／２５℃）。最終アッセイ容量は０．３ｍｌであった。ｈＳＳＴＲ−２及びｈＳＳＴＲ−５のアッセイでは、［１２５Ｉ］−［４−（２−ヒドロキシエチル）］−１−ピペラジニルアセチル−ＤＰｈｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２（０．０５ｎＭ）と［１２５Ｉ］−ＤＰｈｅ−シクロ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２を放射リガンドとしてそれぞれ利用して、インキュベーション時間は、９０分／２５℃であった。インキュベーションは、Ｂｒａｎｄｅｌ濾過マニホルドを使用して、ＧＦ／Ｃフィルター（０．３％ポリエチレンイミンに予め浸漬しておいた）を通す急速濾過によって終了させた。次いで、それぞれの管及びフィルターを氷冷緩衝液の５ｍｌアリコートで３回洗浄した。特異結合を「結合した放射リガンド全体」−「（ｈＳＳＴＲ−１、ｈＳＳＴＲ−３、ｈＳＳＴＲ−４、又はｈＳＳＴＲ−５では）１０００ｎＭ  ＳＲＩＦ−１４、又は（ｈＳＳＴＲ−２では）１０００ｎＭ  ＤＰｈｅ−ｃ（Ｃｙｓ−Ｔｙｒ−ＤＴｒｐ−Ｌｙｓ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ）−Ｔｈｒ−ＮＨ２の存在下に結合した放射リガンド」と定義した。
【０４７４】
in vitro 増殖アッセイ
in vitro 増殖アッセイでは、培養したＣＨＯ−Ｋ１細胞、又はｈＳＳＴＲ−２受容体
を発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞を、１０％胎仔ウシ血清（ＦＢＳ）を含有するＲＰＭＩ  １６４０培地（ＤＭＥＭ）中においてプラスチック２４ウェルプレートへ約１０４細胞／ウェル／１．０ｍｌの密度で播いた。試験ペプチドを所望の濃度で加え、培養状態（５％  ＣＯ２，３７℃，加湿空気）に１〜３日間維持した。この細胞を無血清ＲＰＭＩ培地で濯ぎ、トリプシン処理し、ＲＰＭＩ  １６４０（＋１０％  ＦＢＳ）に再懸濁し、Ｃｏｕｌｔｅｒ  Ｃｏｕｎｔｅｒを使用して１：２０希釈で計数した。
【０４７５】
ＬＨＲＨ放射リガンド結合
ラット組換えＬＨＲＨ受容体を発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞の、Ｂｒｉｎｋｍａｎ  Ｐｏｌｙｔｒｏｎ（ニューヨーク州ウェストベリ；６に設定、１５秒）を用いた２０ｍｌの氷冷５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌにおけるホモジェナイゼーションによって、放射リガンド結合試験用に膜を調製した。ホモジェネートを遠心分離（３９，０００ｇ／１０分）によって２回洗浄し、最終ペレットを、５ｍＭ  ＭｇＣｌ２と０．１％  ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）を含有する５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌに再懸濁させた。アッセイでは、アリコート（０．４ｍｌ）を０．０５ｎＭ［１２５Ｉ］Ｄ−Ｔｒｐ  ＬＨＲＨ（２２００Ｃｉ／ミリモル）とともに、０．０５ｍｌの非標識の競合試験ペプチドを伴って／伴わずにインキュベートした。６０分のインキュベーション（４℃）後、０．５％ポリエチレンイミン／０．１％  ＢＳＡにすでに浸漬しておいたＧＦ／Ｂフィルター（Ｂｒａｎｄｅｌ，メリーランド州ゲイサースブルグ）を通す急速濾過によって、結合した［１２５Ｉ］Ｄ−Ｔｒｐ６  ＬＨＲＨを非結合のものより分離した。次いで、このフィルターを氷冷５０ｍＭ
Ｔｒｉｓ−ＨＣｌの５ｍｌアリコートで３回洗浄し、フィルター上に捕捉された結合放射活性をγ−スペクトロメトリー（Ｗａｌｌａｃ  ＬＫＢ，メリーランド州ゲイサースブルグ）によって計数した。特異結合を「結合した［１２５Ｉ］Ｄ−Ｔｒｐ６  ＬＨＲＨ全体」−「１０００ｎＭ  Ｄ−Ｔｒｐ６  ＬＨＲＨ（Ｂａｃｈｅｍ，カリフォルニア州トーレンス）の存在下で結合したもの」と定義した。
【０４７６】
ボンベシン／ＧＲＰ放射リガンド結合
ネイティブなボンベシン／ＧＲＰ受容体を発現するＡＲ４２Ｊラット膵臓細胞の、Ｂｒｉｎｋｍａｎ  Ｐｏｌｙｔｒｏｎ（ニューヨーク州ウェストベリ；６に設定、１５秒）を用いた２０ｍｌの氷冷５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ中におけるホモジェナイゼーションによって、放射リガンド結合試験用に膜を調製した。ホモジェネートを遠心分離（３９，０００ｇ／１０分）によって２回洗浄し、最終ペレットを、２．５ｍＭ  ＭｇＣｌ２と０．１％  ＢＳＡを含有する５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌに再懸濁させた。アッセイでは、アリコート（０．４ｍｌ）を０．０５ｎＭ［１２５Ｉ−Ｔｙｒ４］ボンベシン（２２００Ｃｉ／ミリモル、Ｎｅｗ  Ｅｎｇｌａｎｄ  Ｎｕｃｌｅａｒ，マサチューセッツ州ボストン）とともに、０．０５ｍｌの非標識の競合試験ペプチドを伴って／伴わずにインキュベートした。３０分のインキュベーション（４℃）後、０．３％ポリエチレンイミンにすでに浸漬しておいたＧＦ／Ｂフィルター（Ｂｒａｎｄｅｌ，メリーランド州ゲイサースブルグ）を通す急速濾過によって、結合した［１２５Ｉ−Ｔｙｒ４］ボンベシンを非結合のものより分離した。次いで、このフィルターを氷冷５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ−ＨＣｌの５ｍｌアリコートで３回洗浄し、フィルター上に捕捉された結合放射活性をγ−スペクトロメトリー（Ｗａｌｌａｃ  ＬＫＢ，メリーランド州ゲイサースブルグ）によって計数した。特異結合を「結合した［１２５Ｉ−Ｔｙｒ４］ボンベシン全体」−「１０００ｎＭボンベシン（Ｂａｃｈｅｍ，カリフォルニア州トーレンス）の存在下で結合したもの」と定義した。
【０４７７】
本発明の化合物のなかには、少なくとも１つの不斉中心を有するものがある。分子の様々な置換基の性質に依存して、分子中に追加の不斉中心が存在する場合がある。それぞれのそのような不斉中心は、２つの光学異性体を産生し、分離、精製、又は部分精製された
光学異性体、そのラセミ混合物又はジアステレオマー混合物のようなすべての光学異性体が本発明の範囲内に含まれると企図される。
【０４７８】
一般に、本発明の化合物は、無機酸及び有機酸を使用することに由来する塩のような、その医薬的に許容される酸付加塩の形態で提供することができる。そのような酸の例は、塩酸、硝酸、硫酸、リン酸、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、マレイン酸、コハク酸、Ｄ−酒石酸、Ｌ−酒石酸、マロン酸、メタンスルホン酸、等である。さらに、カルボキシのような酸性の官能基を含有する特定の化合物をその無機塩の形態で単離することができて、ここでその対イオンは、ナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、等、並びに有機塩基より選択してよい。
【０４７９】
医薬的に許容される塩は、本発明の化合物の約１当量を取って、所望される塩の適切な対応の酸の１当量以上とそれを接触させることによって生成することができる。生じる塩の後処理及び単離は、当業者によく知られている。
【０４８０】
本発明の化合物は、経口、非経口（例、筋肉内、腹腔内、静脈内、又は皮下の注射、又はインプラント）、経鼻、膣、直腸、舌下、又は局所の投与経路によって投与することができて、医薬的に許容される担体とともに製剤化して、それぞれの投与経路に適した剤形を提供することができる。故に、本発明は、本発明の少なくとも１つの化合物を有効成分として医薬的に許容される担体とともに含んでなる医薬組成物を特徴とする。
【０４８１】
経口投与用の固体剤形には、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、及び顆粒剤が含まれる。そのような固体剤形では、ショ糖、乳糖、又はデンプンのような少なくとも１つの不活性な医薬的に許容される担体と活性化合物を混合する。そのような剤形はまた、通常の実践であるが、そのような不活性希釈剤以外の追加物質、例えば、ステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤を含んでよい。カプセル剤、錠剤、及び丸剤の場合、剤形は、緩衝剤も含んでよい。さらに、錠剤及び丸剤は、腸溶コーティング剤とともに調製してよい。
【０４８２】
経口投与用の液体剤形には、当該技術分野で通常使用される水のような不活性希釈剤を含有する、医薬的に許容される乳剤、溶液剤、懸濁液剤、シロップ剤、エリキシル剤が含まれる。そのような不活性希釈剤以外に、組成物には、湿潤剤、乳化及び懸濁剤、並びに甘味剤、芳香及び発香剤のようなアジュバントも含めてよい。
【０４８３】
本発明による非経口投与用の調製物には、無菌の水系又は非水系の溶液剤、懸濁液剤、又は乳剤が含まれる。非水系溶媒又は担体の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油及びトウモロコシ油のような植物油、ゼラチン、及びオレイン酸エチルのような注射可能有機エステルである。そのような剤形は、保存剤、湿潤剤、乳化剤、及び分散剤のようなアジュバントも含有してよい。それらは、例えば、細菌保持フィルターを通した濾過によって、滅菌剤を組成物へ取り込むことによって、組成物を照射することによって、又は組成物を加熱することによって滅菌することができる。それらは、無菌の固体組成物の形態で製造して、使用の直前に滅菌水や他の無菌の注射可能媒体に溶かしてもよい。
【０４８４】
直腸又は膣投与用の組成物は、好ましくは坐剤であり、活性物質に加えて、カカオ脂や坐剤ワックスのような賦形剤を含有する場合がある。
経鼻又は舌下投与用の組成物はまた、当該技術分野でよく知られた標準の賦形剤とともに調製する。
【０４８５】
一般に、本発明の組成物中の有効成分の有効量は変動してよいが、有効成分の量は、好適な剤形が得られるようなものであることが必要である。選択される投与量は、所望され
る治療効果、投与の経路、及び、治療の期間に依存し、これらのいずれも当業者の知識の領域内にある。一般に、１日につき０．０００１〜１００ｍｇ／ｋｇ（体重）の間の投与量レベルをヒトや他の動物、例えば哺乳動物へ投与する。
【０４８６】
好ましい投与量範囲は、体重１ｋｇにつき０．０１〜１０．０ｍｇである。そのような投与量は、例えば、毎日単回用量として投与しても、頻回用量へ分割して投与してもよい。
【０４８７】
他の態様
本発明の記載した方法及び系の様々な修飾及びバリエーションが本発明の範囲及び精神より逸脱することなく当業者に明らかであろう。本発明を特定の望ましい態様と関連して記載したが、特許請求する本発明がそのような特定の態様に不当にも制限されてはならないことを理解されたい。実際、医学、免疫学、薬学、内分泌学の分野や関連分野の当業者に明らかである、本発明を行うために記載した形式の様々な修飾は、本発明の範囲内にあると企図される。
【０４８８】
本明細書において言及したすべての公表文献は、それぞれの独立した公表文献の開示があたかも本明細書に明確に提供されるのと同じ程度で、参照により本明細書に組み込まれる。
【配列表】
2010265271000001.app