(57)【要約】【課題】機能性ペプチドの消化酵素による分解を抑えるために、これらを可食性の基材に内包した、咀嚼によることなく嚥下可能な微粒子状の食品を提供すること。【解決手段】本発明の、機能性ペプチドを内包する、平均直径が１０〜３００μｍのマイクロカプセル微粒子の製造方法は、機能性ペプチド溶液とカプセル材溶液とを同軸多重管微小ノズルの先端から同時に吐出させ、微粒子形成媒体中に滴下させる工程を含み、該ノズルは、同軸の複数の管からなり、該ノズルの先端での最内管および最外管の内径は、それぞれ２５〜４００μｍおよび８０〜５００μｍであり、該機能性ペプチド溶液は、該カプセル材溶液が供給される管よりも内側の管に供給され、そして該カプセル材溶液は、該機能性ペプチド溶液が供給される管よりも外側の管に供給される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
機能性ペプチドを内包する、平均直径が１０〜３００μｍのマイクロカプセル微粒子の製造方法であって、
機能性ペプチド溶液とカプセル材溶液とを同軸多重管微小ノズルの先端から同時に吐出させ、微粒子形成媒体中に滴下させる工程を含み、
該ノズルが、同軸の複数の管からなり、
該ノズルの先端での最内管および最外管の内径が、それぞれ２５〜４００μｍおよび８０〜５００μｍであり、
該機能性ペプチド溶液が、該カプセル材溶液が供給される管よりも内側の管に供給され、そして該カプセル材溶液が、該機能性ペプチド溶液が供給される管よりも外側の管に供給される、方法。
【請求項２】
前記同軸多重管微小ノズルが、同軸二重管微小ノズルである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記機能性ペプチドが、大豆ペプチドである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記機能性ペプチド溶液が、前記機能性ペプチドを０．０００１〜２０質量％の濃度で含む、請求項１から３のいずれかの項に記載の方法。
【請求項５】
前記カプセル材溶液が、アルギン酸溶液である、請求項１から４のいずれかの項に記載の方法。
【請求項６】
前記アルギン酸溶液が、アルギン酸を１〜６質量％の濃度で含む、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
前記アルギン酸溶液が、アルギン酸ナトリウム水溶液である、請求項５または６に記載の方法。
【請求項８】
前記カプセル材溶液が、可食性アクリル系樹脂溶液である、請求項１から４のいずれかの項に記載の方法。
【請求項９】
前記微粒子形成媒体が、カルシウム溶液である、請求項１から７のいずれかの項に記載の方法。
【請求項１０】
前記カルシウム溶液が、カルシウムイオンを１〜８質量％の濃度で含む、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記カルシウム溶液が、塩化カルシウム水溶液である、請求項９または１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記機能性ペプチド溶液および前記カプセル材溶液が、それぞれ１×１０−６〜０．０１μＬ／秒および１×１０−５〜０．１μＬ／秒の速度で吐出される、請求項１から１１のいずれかの項に記載の方法。
【請求項１３】
請求項１から１２のいずれかの項に記載の方法により製造された機能性ペプチドを内包するマイクロカプセル微粒子。
【請求項１４】
前記機能性ペプチドを、０．００１〜２００ｍｇ／ｍＬの濃度で内包する、請求項１３に記載のマイクロカプセル微粒子。
【請求項１５】
請求項１３または１４に記載のマイクロカプセル微粒子を含むアンジオテンシン変換酵素阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、機能性ペプチドを内包するマイクロカプセル微粒子およびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
機能性ペプチドは、大豆、ゴマ、アジ、イワシ、カツオなどの食材に由来する蛋白質をペプシンなどの消化酵素により分解して得られるペプチドである。大豆ペプチド、ゴマペプチド、アジペプチド、イワシペプチド、カツオペプチドなどは、経口摂取により、栄養補給のほか、脂質代謝促進、疲労回復促進、基礎代謝促進、筋肉増強、食事誘導性熱代謝促進など種々健康増進作用を発揮する。特に、レニン−アンジオテンシン系を阻害することにより高血圧抑制効果が期待できる。このため、これらの機能性ペプチドを含む機能性食品の開発が行われている。
【０００３】
しかし、機能性ペプチドは、そのまま経口摂取されると、膵臓から分泌されるトリプシンなどの消化酵素により大部分がアミノ酸に分解される。このため、機能性ペプチドの健康増進作用を発揮させるためには、機能性ペプチドの消化酵素による分解を抑え、機能性ペプチドの小腸での吸収を高める必要がある。そこで、機能性ペプチドの消化酵素による分解を抑えるために、これらを何らかの基材に内包した食品が有効である。
【０００４】
特許文献１には、二重構造のノズルの内側からカプセル内容液および外側からカプセル皮膜液を吐出し、この吐出液を一定間隔で切断し、この切断部を直径０．３ｍｍ〜２０ｍｍの球状のソフトカプセルとする方法が開示され、ソフトカプセルの皮膜は、易溶解性・可食性の高分子物質、ゲル化剤などからなること、および得られるソフトカプセルは、安全性の高い食品および医薬品用ソフトカプセルとして用いられることが記載されている。また、特許文献２には、水分、色素および味覚成分を含む原料液を被包剤で被包した被包粒が、食品母材中に分散混合している食品が開示され、被包剤は、ゼラチン、寒天、アラビアゴム、アルギン酸塩などのゲル化剤を主成分とすることが記載されている。
【０００５】
しかし、特許文献１に記載のソフトカプセルは、直径が０．３ｍｍ〜２０ｍｍであり、特許文献２に記載の被包剤は、直径が約６ｍｍであるため、これらを食品として摂取すると、どうしても咀嚼（噛み砕くこと）して嚥下（飲み込むこと）することになり、カプセルや被包剤の内容物が露出し、内容物を消化酵素などから保護することは困難である。
【０００６】
ところで、特許文献３には、平均粒径が０．０１〜５００μｍの微粒子とフッ素系高分子化合物および／またはシリコーン系高分子化合物との複合化粒子の製造法が開示され、この方法は、超臨界二酸化炭素または液化二酸化炭素の存在下に、微粒子とフッ素系高分子化合物および／またはシリコーン系高分子化合物とを接触させた後、得られた混合物を減圧膨張させる工程を含むことが記載されている。
【０００７】
しかし、特許文献３に記載の方法では、微粒子を内包する基材として、超臨界二酸化炭素などに易溶解性のフッ素系やシリコーン系の高分子しか利用することができず、食品・医療への利用が困難である。
【０００８】
このように、機能性ペプチドの消化酵素による分解を抑えるために、これらを可食性の基材に内包した、咀嚼によることなく嚥下可能な微粒子状の食品が求められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開平７−１９６４７８号公報
【特許文献２】特開平９−２２００５６号公報
【特許文献３】特許第３４６９２２３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、機能性ペプチドの消化酵素による分解を抑えるために、これらを可食性の基材に内包した、咀嚼によることなく嚥下可能な微粒子状の食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討を重ねた結果、機能性ペプチド溶液とカプセル材溶液とを同軸多重管微小ノズルの先端から同時に吐出させて微粒子を製造する方法において、ノズルの先端での最外管の内径を８０μｍ〜５００μｍとすることによって、機能性ペプチドを内包する、平均直径が１０〜３００μｍのほぼ球状である、咀嚼によることなく嚥下可能な大きさのマイクロカプセル微粒子が得られることを見出し、本発明の完成に至った。
【００１２】
本発明は、機能性ペプチドを内包する、平均直径が１０〜３００μｍのマイクロカプセル微粒子の製造方法を提供し、該方法は、機能性ペプチド溶液とカプセル材溶液とを同軸多重管微小ノズルの先端から同時に吐出させ、微粒子形成媒体中に滴下させる工程を含み、該ノズルは、同軸の複数の管からなり、該ノズルの先端での最内管および最外管の内径は、それぞれ２５〜４００μｍおよび８０〜５００μｍであり、該機能性ペプチド溶液は、該カプセル材溶液が供給される管よりも内側の管に供給され、そして該カプセル材溶液は、該機能性ペプチド溶液が供給される管よりも外側の管に供給される。
【００１３】
１つの実施態様では、上記同軸多重管微小ノズルは、同軸二重管微小ノズルである。
【００１４】
１つの実施態様では、上記機能性ペプチドは、大豆ペプチドである。
【００１５】
別の実施態様では、上記機能性ペプチド溶液は、上記機能性ペプチドを０．０００１〜２０質量％の濃度で含む。
【００１６】
１つの実施態様では、上記カプセル材溶液は、アルギン酸溶液である。
【００１７】
１つの実施態様では、上記アルギン酸溶液は、アルギン酸を１〜６質量％の濃度で含む。
【００１８】
ある実施態様では、上記アルギン酸溶液は、アルギン酸ナトリウム水溶液である。
【００１９】
１つの実施態様では、上記カプセル材溶液は、可食性アクリル系樹脂溶液である。
【００２０】
１つの実施態様では、上記微粒子形成媒体は、カルシウム溶液である。
【００２１】
１つの実施態様では、上記カルシウム溶液は、カルシウムイオンを１〜８質量％の濃度で含む。
【００２２】
ある実施態様では、上記カルシウム溶液は、塩化カルシウム水溶液である。
【００２３】
別の実施態様では、上記機能性ペプチド溶液および上記カプセル材溶液は、それぞれ１×１０−６〜０．０１μＬ／秒および１×１０−５〜０．１μＬ／秒の速度で吐出される。
【００２４】
本発明はまた、上記方法により製造された機能性ペプチドを内包するマイクロカプセル微粒子を提供する。
【００２５】
別の実施態様では、上記マイクロカプセル微粒子は、上記機能性ペプチドを、０．００１〜２００ｍｇ／ｍＬの濃度で内包する。
【００２６】
本発明はさらに、上記マイクロカプセル微粒子を含むアンジオテンシン変換酵素阻害剤を提供する。
【発明の効果】
【００２７】
本発明により提供される、機能性ペプチドを内包するマイクロカプセル微粒子は、咀嚼によることなく嚥下可能である。したがって、マイクロカプセルが、膵臓から分泌されるトリプシンなどの消化酵素に対するバリアとして機能し、機能性ペプチドの小腸での吸収を高めることができる。
【図面の簡単な説明】
【００２８】
【図１】同軸二重管微小ノズルの模式図を示す。
【図２】実施例１で得られたマイクロカプセル微粒子の走査型電子顕微鏡写真を示す。
【図３】実施例１で得られたマイクロカプセル微粒子の内容物のＨＰＬＣ分析による組成分析結果を示す。
【図４】実施例２で得られたマイクロカプセル微粒子の内容物のＨＰＬＣ分析による組成分析結果を示す。
【図５】実施例１で得られた大豆ペプチド原液のアンジオテンシン変換酵素阻害活性を示す。
【図６】実施例２で得られた大豆ペプチド原液のアンジオテンシン変換酵素阻害活性を示す。
【図７】実施例２で得られた豆乳溶液のアンジオテンシン変換酵素阻害活性を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２９】
本発明の機能性ペプチドを内包するマイクロカプセル微粒子の製造方法は、機能性ペプチド溶液とカプセル材溶液とを同軸多重管微小ノズルの先端から同時に吐出させ、微粒子形成媒体中に滴下させる工程を含み、該ノズルは、同軸の複数の管からなり、該機能性ペプチド溶液は、該カプセル材溶液が供給される管よりも内側の管に供給され、そして該アルギン酸溶液は、該機能性ペプチド溶液が供給される管よりも外側の管に供給される。
【００３０】
本発明の方法に用いられる機能性ペプチドは、健康増進作用を発揮するペプチドであり、例えば、２〜３０個のアミノ酸からなり、好ましくは２〜４個のアミノ酸からなる。機能性ペプチドとしては、例えば、大豆、ゴマ、イワシなどの食材に由来する蛋白質をペプシンなどの消化酵素により分解して得られる、大豆ペプチド、ゴマペプチド、イワシペプチドなどが挙げられる。
【００３１】
本発明の方法に用いられる大豆ペプチドは、脱脂豆乳や分離大豆蛋白質を酵素分解して得られる。大豆ペプチドとしては、市販されているものも用いることができ、例えば、商品名「ハイニュートＤＣ７」（不二製油株式会社製）、商品名「ハイニュートＤＣ６」（不二製油株式会社製）、商品名「ＳＥ７０Ｍ」（ＤＭＶ社製）などが挙げられる。
【００３２】
本発明の方法に用いられるゴマペプチドとしては、例えば、商品名「ゴマペプチドＫＭ−２０」（ＫＩＳＣＯ株式会社製）などが挙げられる。本発明の方法に用いられるイワシペプチドとしては、例えば、商品名「サーデンペプチドＹ−２」（仙味エキス株式会社製）などが挙げられる。
【００３３】
本発明の方法に用いられる機能性ペプチド溶液は、機能性ペプチドを通常０．０００１〜２０質量％の濃度で含み、好ましくは０．００１〜１５質量％、より好ましくは０．０５〜５質量％の濃度で含む。
【００３４】
本発明の方法に用いられる機能性ペプチド溶液は、さらに豆乳を含んでもよく、好ましくは豆乳を１〜８０質量％の濃度で含み、より好ましくは３０〜６０質量％の濃度で含む。豆乳としては、各種市販されているものを用いることができる。
【００３５】
本発明の方法に用いられるカプセル材溶液としては、例えば、アルギン酸溶液、可食性アクリル系樹脂溶液、寒天溶液、ゼラチン溶液などが挙げられる。
【００３６】
本発明の方法に用いられるアルギン酸溶液は、アルギン酸を通常１〜６質量％の濃度で含み、好ましくは２〜４質量％の濃度で含む。アルギン酸溶液としては、例えば、アルギン酸ナトリウム水溶液、アルギン酸カリウム水溶液などが挙げられる。
【００３７】
本発明の方法に用いられる可食性アクリル系樹脂溶液としては、ポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）、ポリグリシジルメタクリレート（ＰＧＭＡ）およびそれらを含む共重合体などが挙げられる。アクリル系樹脂溶液は、アクリル系樹脂が、例えば、超臨界二酸化炭素流体中に溶解され、可塑化されている。
【００３８】
本発明の方法に用いられる微粒子形成媒体としては、例えば、カルシウム溶液などの各種溶液、大気などが挙げられる。微粒子形成媒体は、カプセル材に応じて適宜選択される。
【００３９】
本発明の方法に用いられるカルシウム溶液は、カルシウムイオンを通常１〜８質量％の濃度で含み、好ましくは１〜３質量％の濃度で含む。カルシウム溶液としては、例えば、塩化カルシウム水溶液、酢酸カルシウム水溶液などが挙げられる。
【００４０】
本発明の方法に用いられる同軸多重管微小ノズルは、同軸の複数の管からなり、好ましくは横断面の形状は円形であり、ノズルの先端での最内管および最外管の内径は、それぞれ２５〜４００μｍおよび８０〜５００μｍであり、好ましくはそれぞれ６５〜１００μｍおよび１００〜２８０μｍである。ノズルの先端での最内管および最外管の内径が、それぞれ４００μｍおよび５００μｍを超える場合、得られるマイクロカプセル微粒子は、咀嚼によることなく嚥下することが困難となる。一方、ノズルの先端での最内管および最外管の内径が、それぞれ２５μｍおよび８０μｍ未満の場合、ノズルの閉塞が頻繁におこるため、マイクロカプセル微粒子の工業的な連続生産が困難となる。同軸多重管微小ノズルとしては、同軸二重管微小ノズル、同軸三重管微小ノズルなどが挙げられる。
【００４１】
本発明の方法では、機能性ペプチド溶液は、同軸多重管微小ノズルのカプセル材溶液が供給される管よりも内側の管に供給され、そしてカプセル材溶液は、同軸多重管微小ノズルの機能性ペプチド溶液が供給される管よりも外側の管に供給され、ともに同軸多重管微小ノズルの先端から同時に吐出され、微粒子形成媒体中に滴下される。機能性ペプチド溶液およびカプセル材溶液は、それぞれ複数の異なる溶液を用いてもよく、各溶液は、同軸多重管微小ノズルの異なる管に供給され得る。ノズルの先端で、内側の管から吐出される機能性ペプチド液が球状の液滴を形成し、その周りを外側の管から吐出されるカプセル材溶液が層状に覆うことにより、多層構造の球状の液滴が形成される。同軸多重管微小ノズルの最内径および最外径、ならびに機能性ペプチド溶液およびカプセル材溶液の吐出速度は、多層構造の球状の液滴が形成されるか否か、および最終的に得られる多層構造のマイクロカプセル微粒子の直径および各層の厚みに影響を及ぼすため、所望の大きさ・形状の微粒子を製造するために適宜調節される。
【００４２】
カプセル材溶液がアルギン酸溶液の場合、微粒子形成媒体としてはカルシウム溶液を用いる。ノズルの先端から吐出された液滴は、カルシウム溶液中に滴下されると、液滴の外側の層のアルギン酸がカルシウムイオンと接触することにより、外側の層にアルギン酸カルシウムのゲルを形成する。
【００４３】
カプセル材溶液が可食性アクリル系樹脂の場合、微粒子形成媒体としては大気または水を用いる。ノズルの先端から吐出された液滴は、大気中または水に滴下されると、液滴の外側の層のアクリル系樹脂の可塑性が失われることにより、外側の層にアクリル系樹脂の被膜を形成する。
【００４４】
本発明の方法では、機能性ペプチド溶液およびカプセル材溶液は、それぞれ１×１０−６〜０．０１μＬ／秒および１×１０−５〜０．１μＬ／秒の速度で同軸多重管微小ノズルの先端から吐出され、好ましくはそれぞれ１×１０−４〜０．００５μＬ／秒および１×１０−４〜０．０５μＬ／秒の速度で同軸多重管微小ノズルの先端から吐出される。
【００４５】
本発明の方法に用いられる、同軸多重管微小ノズルを備えるマイクロカプセル微粒子製造装置は、機能性ペプチド溶液、カプセル材溶液および微粒子形成媒体をそれぞれ供給する３つの供給部と、同軸多重管微小ノズルと、ノズル先端の真下に位置するマイクロカプセル微粒子形成部とを備える。機能性ペプチド溶液の供給部は、同軸多重管微小ノズルのカプセル材溶液が供給される管よりも内側の管に機能性ペプチド溶液を供給し、カプセル材溶液の供給部は、同軸多重管微小ノズルの機能性ペプチド溶液が供給される管よりも外側の管にカプセル材溶液を供給し、そして微粒子形成媒体の供給部は、マイクロカプセル微粒子形成部に微粒子形成媒体を供給する。同軸多重管微小ノズル先端からの溶液の吐出速度は、例えば、シリコーンチューブなどの軟質の樹脂製チューブを介して、各供給部と同軸多重管微小ノズルの各管とが連結されている場合には、ペリスタポンプを用いて制御することができる。あるいは、機能性ペプチド溶液およびカプセル材溶液の供給部を加圧することにより制御することができる。
【００４６】
各供給部と同軸多重管微小ノズルの各管とを連結する配管の途中には、空気などを同軸多重管微小ノズルへ導入するための配管が設けられていてもよい。この場合には、空気などを供給する配管に設置したバルブの断続的な開閉などにより、ノズルの先端での液滴の形成を制御することができる。
【００４７】
また、本発明の方法に用いられる同軸多重管微小ノズルは、ノズルの先端が自由振動できるように構成されていてもよい。同軸多重管微小ノズルに供給する機能性ペプチド溶液およびカプセル材溶液の振動、または超音波発生装置などによる外部振動を利用してノズルの先端に振動を発生させることによって、ノズルの先端での液滴の形成が容易になる。特に、機能性ペプチド溶液またはカプセル材溶液のノズルの先端からの吐出線速度が３ｍ／秒未満では、外部振動を利用することが好ましい。
【００４８】
本発明の方法で得られるマイクロカプセル微粒子を微粒子形成媒体からろ過によって回収し、必要に応じて、洗浄などの処理に供する。本発明の方法で得られるマイクロカプセル微粒子は、カプセル材で構成される外側の層と、外側の層に内包された内側の層とからなり、内側の層は機能性ペプチドを含む。マイクロカプセル微粒子は、直径が１０〜３００μｍであり、好ましくは５０〜２００μｍである。マイクロカプセル微粒子は、機能性ペプチドを０．００１〜２００ｍｇ／ｍＬの濃度で内包し、好ましくは０．０１〜１００ｍｇ／ｍＬの濃度で内包する。本発明で得られるマイクロカプセル微粒子は、機能性食品などとして利用することが可能である。マイクロカプセル微粒子の外側の層がアルギン酸カルシウムのゲルで構成される場合、このゲルは中性付近のｐＨで溶解するため、内包された機能性ペプチドは、中性付近のｐＨを示す小腸で吸収可能となる。
【実施例】
【００４９】
実施例１
（大豆ペプチドを内包するマイクロカプセル微粒子の製造１）
福岡県産の大豆（品種：フクユタカ）より常法に従って製造した大豆おから１０ｇ、キモトリプシン（フナコシ株式会社製、ブタ膵臓由来Ｃｈｙｍｏｔｒｙｐｓｉｎ）０．５ｇ、および蒸留水３０ｍＬを混合し、攪拌下、４０℃にて４時間保持して、キモトリプシンを大豆おからに反応させた。反応液を７０℃に加熱してキモトリプシンを失活させ、次いでろ過フィルター（日本ミリポア株式会社製、デュラポアメンブレン、ＰＶＤＦ、親水性、０．４５μｍ）に通しておから残滓などの不溶物を除去し、ろ液を大豆ペプチド原液とした。大豆ペプチド原液中の大豆ペプチドの濃度をＨＰＬＣ（東ソー株式会社製、ＨＰＬＣ２００システム、カラム：ＯＤＳ−８０Ｔｓ、カラム温度：４０℃、検出器：ＵＶ（２８０ｎｍ）、溶離液：アセトニトリル／水＝０／１(v/v)（０分）〜１／０(v/v)（３０分））により測定したところ、５ｍｇ／ｍＬであった。福岡県産の大豆（品種：フクユタカ）より常法に従って製造した豆乳１００ｇと上記大豆ペプチド原液とを１０：１の体積比で混合し、大豆ペプチド溶液を調製した。
【００５０】
アルギン酸ナトリウム（和光純薬工業株式会社製、低粘度）を蒸留水に溶解し、アルギン酸を２質量％の濃度で含むアルギン酸ナトリウム水溶液を調製した。
【００５１】
塩化カルシウム（和光純薬工業株式会社製、試薬特級）を蒸留水に溶解し、カルシウムイオンを２質量％の濃度で含む塩化カルシウム水溶液を調製した。
【００５２】
本実施例で用いた装置は、図１に示すように同軸二重管微小ノズルを備え、ノズルの先端での内管および外管の内径は、それぞれ５０μｍおよび５００μｍであった。図１の２で示すノズル内管には、キャピラリーピークチューブ（ジーエルサイエンス株式会社製１／１６）の先端の外周を切削して外径を３００μｍ以下としたものを用いた。１で示すノズル外管には、ステンレス管（ジーエルサイエンス株式会社製１／１６）の先端の内周を切削して内径を５００μｍとしたものを用いた。外管は、継ぎ手３内で配管５（ステンレス管１／１６）と接続する。内管の途中には、継ぎ手４が設けられ、内管は、継ぎ手４内で配管６（ステンレス管１／１６）と接続する。配管６には、１／１６配管用ストップバルブ（ジーエルサイエンス株式会社製２Ｗａｙ  Ｖａｌｖｅ０２−０１２０）７が設置されている。継ぎ手３および４には、ジーエルサイエンス株式会社製オールチューブティ１／１６を用いた。継ぎ手３には、超音波振動子（ＳｏｎｉｃＡｎｄＭａｔｅｒｉａｌｓ社製の超音波発生装置モデルＶＣ５０５の超音波発生用セル）８が設置されている。
【００５３】
この装置のノズル内管に通ずる供給部に上記大豆ペプチド溶液を供給し、ノズル外管に通ずる供給部に上記アルギン酸ナトリウム水溶液を供給し、そしてノズル真下のマイクロカプセル微粒子形成部に通ずる供給部に上記塩化カルシウム水溶液を供給した。次いで、上記装置を運転し、大豆ペプチド溶液を０．００１μＬ／秒の速度で、そしてアルギン酸ナトリウム水溶液を０．００５μＬ／秒の速度でノズルの先端から同時に吐出させ、上記塩化カルシウム水溶液中に滴下させた。大豆ペプチド溶液を間欠的に相液するために、吐出速度に応じて、バルブ７を０．５〜５秒間隔で開閉した。また、吐出線速度が３ｍ／秒以下の場合、ノズルの先端に振動を与えるために、超音波発生用電源（図示せず）を２０ｋＨｚ、出力２００Ｗで運転し、超音波振動子８に超音波を発生させた。
【００５４】
上記塩化カルシウム水溶液中に形成されたマイクロカプセル微粒子をろ過（フィルター：日本ミリポア株式会社製、デュラポアメンブレン、ＰＶＤＦ、親水性、０．４５μｍ）によって回収し、減圧乾燥機を用いて１２時間乾燥後、マイクロカプセル微粒子の大きさを走査型電子顕微鏡（日本電子株式会社製、ＪＳＭ６０６０）にて評価した。結果を図２に示す。
【００５５】
また、マイクロカプセル微粒子を０．０１モル／Ｌの水酸化ナトリウム水溶液に溶解し（６０℃で４時間攪拌）、この溶液を０．０１モル／Ｌの塩酸水溶液で中和した後、溶液の内容物の組成をＨＰＬＣ（東ソー株式会社製、ＨＰＬＣ２００システム、カラム：ＯＤＳ−８０Ｔｓ、カラム温度：４０℃、検出器：ＵＶ（２８０ｎｍ）、溶離液：アセトニトリル／水＝０／１(v/v)（０分）〜１／０(v/v)（３０分））にて分析した。比較のため、キモトリプシンを加えなかったこと以外、上記と同様にして得られた大豆おから溶液（上記の大豆ペプチド原液に対応）について、上記と同様にして内容物の組成をＨＰＬＣにて分析した。結果を図３に示す。
【００５６】
図２より、直径が２０〜１２０μｍ、平均直径が８０μｍのほぼ球状のマイクロカプセル微粒子が得られたことがわかった。また、図３より、得られたマイクロカプセル微粒子は、大豆ジペプチドを２〜８ｍｇ／ｍＬの濃度で含んでいることがわかった。キモトリプシン分解によりジペプチドが生成したことがわかる。
【００５７】
実施例２
（大豆ペプチドを内包するマイクロカプセル微粒子の製造２）
福岡県産の大豆（品種：フクユタカ）より常法に従って製造した大豆豆乳１０ｇ、トリプシン（フナコシ株式会社製、ブタ膵臓由来Ｔｒｙｐｓｉｎ）０．５ｇ、および蒸留水３０ｍＬを混合し、攪拌下、４０℃にて４時間保持して、トリプシンを大豆豆乳に反応させた。反応液を７０℃に加熱してトリプシンを失活させ、次いでろ過フィルター（日本ミリポア株式会社製、デュラポアメンブレン、ＰＶＤＦ、親水性、０．４５μｍ）に通して豆乳残滓などの不溶物を除去し、ろ液を大豆ペプチド原液とした。大豆ペプチド原液中の大豆ペプチドの濃度をＨＰＬＣにより測定したところ、０．２ｍｇ／ｍＬであった。上記豆乳１００ｇと上記大豆ペプチド原液とを１０：１の体積比で混合し、大豆ペプチド溶液を調製した。この大豆ペプチド溶液を用いて、実施例１と同様にして、マイクロカプセル微粒子を調製した。
【００５８】
得られたマイクロカプセル微粒子の大きさを実施例１と同様にして評価したところ、実施例１と同様の結果が得られた。また、得られたマイクロカプセル微粒子を溶解した溶液の内容物の組成を実施例１と同様にして分析した。比較のため、トリプシンを加えなかったこと以外、上記と同様にして得られた豆乳溶液（上記の大豆ペプチド原液に対応）について、上記と同様にして内容物の組成をＨＰＬＣにて分析した。結果を図４に示す。
【００５９】
図４より、得られたマイクロカプセル微粒子は、大豆ジペプチドを０．０２〜０．８ｍｇ／ｍＬの濃度で含んでいることがわかった。トリプシン分解によりジペプチドが生成したことがわかる。
【００６０】
実施例３
（大豆ペプチドの活性測定）
実施例１および２のキモトリプシンおよびトリプシン分解によりそれぞれ生成したジペプチドのアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害活性を、検査キット（渡辺化学工業株式会社製ＡＣＥ０１）を用いて測定した。キットの酵素（ＡＣＥ）を０．０２５ｕｎｉｔ／ｍＬの濃度で含む１００μＬの溶液に、それぞれ濃度の異なる大豆ペプチド溶液（実施例１および２で得られた大豆ペプチド原液を水で希釈して濃度を変えたもの）１００μＬを添加して混合し、次いでこの混合液にさらにキットの試薬を添加して得られた最終溶液の３６０ｎｍにおける蛍光強度を蛍光マイクロプレートリーダー（ＢｉｏＴｅｋ社製ＦＬｘ８００）により経時的に測定した。測定値をそれぞれ図５および６に示す。図５および６の縦軸は、大豆ペプチド原液の最終溶液に対する質量百分率である。比較のため、実施例２で得られた豆乳溶液（酵素処理なし）についても、同様にＡＣＥ阻害活性を測定した。結果を図７に示す。
【００６１】
図５、６および７より、ＡＣＥ活性を示す蛍光強度が、大豆ペプチド原液または豆乳溶液の質量百分率が大きいほど小さくなること、ならびにキモトリプシンおよびトリプシン分解を行った大豆ペプチド原液（図５および６）の方が、酵素処理を行っていない豆乳溶液（図７）よりも蛍光強度が小さいことがわかる。したがって、キモトリプシンおよびトリプシン分解により生成したジペプチドはＡＣＥ阻害活性を有することがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００６２】
本発明により提供される、機能性ペプチドを内包するマイクロカプセル微粒子は、咀嚼によることなく嚥下可能である。したがって、マイクロカプセルが、膵臓から分泌されるトリプシンなどの消化酵素に対するバリアとして機能し、機能性ペプチドの小腸での吸収を高めることができる。本発明の機能性ペプチドを内包するマイクロカプセル微粒子は、健康増進効果を有する機能性食品として利用することができる。特に、ＡＣＥ阻害活性により高血圧抑制剤として利用することができる。
【符号の説明】
【００６３】
１    ノズル外管
２    ノズル内管
３    継ぎ手
４    継ぎ手
５    ノズル外管に接続する配管
６    ノズル内管に接続する配管
７    ストップバルブ
８    超音波振動子
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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