(57)【要約】【課題】  分離カラムにおける、モノリスロッドへの負荷を低減する。【解決手段】  本発明の分離カラムは、多孔質体で円柱形状に成形され、官能基を化学結合したモノリスロッド１と、前記モノリスロッドの外周に設けられた樹脂被覆材２と、樹脂被覆材２の外周に充填された、充填材３と、試料および移動相を、モノリスロッド１へ流入させ、かつ、充填材３への流入を防止する流路と、を備えている。これにより、モノリスロッド１の材料の熱膨張率と、充填材３の材料の熱膨張率とを近づけることができ、充填材３からモノリスロット１への負荷を低減することができる。【選択図】図１
2010008301.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
多孔質体で円柱形状に成形され、官能基を化学結合したモノリスロッドと、
前記モノリスロッドの外周に設けられた樹脂被覆材と、
前記樹脂被覆材の外周に充填された、充填材と、
試料および移動相を、前記モノリスロッドへ流入させ、かつ、前記充填材への流入を防止する流路と、を備えていることを特徴とする、分離カラム。
【請求項２】
請求項１に記載の分離カラムにおいて、
前記充填材は、球状のビーズであることを特徴とする、分離カラム。
【請求項３】
請求項１に記載の分離カラムにおいて、
前記充填材は、破砕型のビーズであることを特徴とする、分離カラム。
【請求項４】
請求項１に記載の分離カラムにおいて、
前記充填材は端面が封止されていることを特徴とする、分離カラム。
【請求項５】
請求項４に記載の分離カラムにおいて、
前記樹脂被覆材は外側へ折れ曲がって前記充填材の端面を封止していることを特徴とする、分離カラム。
【請求項６】
請求項４に記載の分離カラムにおいて、
内側からシール部、前記樹脂被覆材、シール受部の順に配置されて、試料及び移動相が前記モノリスロッドへ導かれる構造となっており、
前記シール部は、前記モノリスロッドから離れるほど外側へ広がって、前記樹脂被覆材および前記シール受部を外側へ押し広げており、
前記充填材の端面は、前記シール受部により封止されていることを特徴とする、分離カラム。
【請求項７】
請求項６に記載の分離カラムにおいて、
前記樹脂被覆材の長さは、前記モノリスロッドの長さよりも長いことを特徴とする、分離カラム。
【請求項８】
請求項１に記載の分離カラムにおいて、
試料及び移動相を前記モノリスロッドへ導く流路部品を備えており、前記流路部品と前記モノリスロッドとが互いに密着していることを特徴とする分離カラム。
【請求項９】
請求項８に記載の分離カラムにおいて、
前記流路部品を固定するフェラルと、フェラルを変形させるテーパ部と、を備えており、
前記フェラルは先端をモノリスロッド側へ向けて位置しており、前記フェラルが前記モノリスロッド側へ移動することにより前記流路部品を締め付けることを特徴とする、分離カラム。
【請求項１０】
請求項８に記載の分離カラムにおいて、
前記流路部品を固定するフェラルと、フェラルを変形させるテーパ部と、を備えており、
前記フェラルは先端をモノリスロッドとは反対側へ向けて位置しており、テーパ部が前記モノリスロッド側へ移動することにより前記流路部品を締め付けることを特徴とする、分離カラム。
【請求項１１】
請求項８に記載の分離カラムにおいて、
前記樹脂被覆材の長さは、前記モノリスロッドの長さよりも長いことを特徴とする、分離カラム。
【請求項１２】
請求項１に記載の分離カラムにおいて、
前記モノリスロッドは、直径が１.２〜２.８mmであり、長さが３０〜２００ｎｍであることを特徴とする、分離カラム。
【請求項１３】
請求項１に記載の分離カラムにおいて、
前記充填材は、シリカ，ステンレス，テフロン（登録商標），ダイフロン（登録商標），ジルコニア，セラミック，ＰＥＥＫ，べスペル（登録商標），サファイア，ルビー，ダイアモンド，アルミナ，ガラス，石英，チタン，およびＵＨＭＷポリエチレンのうちいずれか１または複数から成ることを特徴とする分離カラム。
【請求項１４】
請求項１に記載の分離カラムにおいて、
前記充填材の大きさは１〜５μｍであることを特徴とする分離カラム。
【請求項１５】
請求項１に記載の分離カラムを備えた、液体クロマトグラフ。
【請求項１６】
多孔質体で円柱形状に成形され、官能基を化学結合したモノリスロッドと、
前記モノリスロッドの外周に設けられた樹脂被覆材と、
前記樹脂被覆材の外周に充填された充填材とを備え、
試料および移動相の前記充填材への流入が防止されていることを特徴とする、分離カラム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、分離カラム及び液体クロマトグラフに関する。例えば、高速液体クロマトグラフ等に使用される液体試料中の成分を分離する分離カラムに関し、特に高耐圧性を有するものに好適に用いることができる。
【背景技術】
【０００２】
従来の高速液体クロマトグラフ等において、一般に使用されている粒子充填型カラムで分析時間を短縮するためには、単位時間当たりの送液量を増やす必要があるが、従来同様の分離性能を維持するためには、充填する粒子径を小さくし粒子表面積を増やす必要がある。すなわち、内径４mm程度の円筒容器に直径５μｍ程度の粒子を充填した従来のカラムに対して、粒子直径を２μｍ程度に変更することで分析時間を１０分の１に短縮できる。
【０００３】
しかし、粒子径を小さくすることで流動抵抗が増加し、高圧での送液が必要となるため、分析装置本体の高耐圧化が課題である。
【０００４】
この課題を解決するため、粒子充填型カラムと異なり三次元ネットワーク状の骨格とその空隙（流路，マクロポア，スルーポア）が一体となった構造を持つモノリスカラムを使用することで、表面積は増加するが、空隙率が大きく流動抵抗が増加させないカラムが可能となり、例えば、細管内に多孔質体（モノリスロッド，モノリシックシリカロッド）を組み込んだモノリス型シリカカラムで高性能化が図られている。
【０００５】
また、多孔質体は、その外径の均一性，一様性を高精度に成形することが困難であるため、細管と多孔質体との間に隙間を生じやすく、カラム側面からの移動相の漏出を防止するため、多孔質体の外周面に樹脂被覆材を設けることが知られ、例えば特許文献１に記載されている。また、多孔質体の外周面に多孔質体と類似材料である溶融ガラスを被覆する方法もある。
【０００６】
この特許文献１は、「多孔質体の外周面に樹脂被覆材を設けた場合、材料同士の接着力で多孔質体を支持体に支持しているので、互いに接着しやすい材料を選択する制約があり、構造的に高圧力に不向きな構成になっている。また、多孔質体の外周面に溶融ガラスを設けた場合、溶融ガラス接着時に加える高温が多孔質体を修飾する官能基を破壊し、多孔質体の分離性能を劣化させる。」という問題がある。
【０００７】
この問題の解決手法として特許文献２が開示されている。より具体的には、特許文献２には、次のような分離カラムが開示されている。この分離カラムは、モノリスロッドの外周に被覆された被覆材と、被覆材で被覆されたモノリスロッドが挿入された支持体と、被覆材と支持体との間に装着あるいは充填されたロッド固定材とを備え、組み立てられた状態で流入側端部となるロッド固定材の上端面が封止されている。
【０００８】
【特許文献１】特開平１１−６４３１４号公報（平成１１年３月５日  公開）
【特許文献２】特開２００８−１０７１７６号公報（平成２０年５月８日  公開）
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
しかしながら、上記の特許文献２に記載の分離カラムは、次の点で改善の余地がある。特許文献２では、モノリスロッドの周りにロッド固定材を配置しており、このロッド固定材としては、シリコンゴム、流動性のゴムや樹脂、熱硬化性樹脂あるいはガラスや金属を用いている。そのため、モノリスロッドと熱膨張性が異なり、分離カラムの温度変化によりモノリスロッドに対して負荷がかかるという課題がある。
【００１０】
本発明は、上記の課題に鑑みてなされたものであり、モノリスロッドに対する負荷を減らした分離カラムを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
上記の課題を解決するために、本発明の分離カラムは、多孔質体で円柱形状に成形され、官能基を化学結合したモノリスロッドと、前記モノリスロッドの外周に設けられた樹脂被覆材と、前記樹脂被覆材の外周に充填された、充填材と、試料および移動相を、前記モノリスロッドへ流入させ、かつ、前記充填材への流入を防止する流路と、を備えていることを特徴としている。
【００１２】
上記構成によれば、モノリスロッドの周りに、充填材を配置している。そのため、モノリスロッドの材料（シリカ）と熱膨張率が近い材料を充填材として用いることができる。それゆえ、モノリスロッドと充填材との熱膨張率を、（モノリスロッドと特許文献２に記載のロッド固定材との熱膨張率よりも）近づけることができ、モノリスロッドへの負荷を低減することができる。
【００１３】
さらに、上記構成によれば、分離カラムは、試料および移動相をモノリスロッドへ流入させ、かつ、充填材への流入を防止する流路を備えている。そのため、充填材への試料および移動相の流入を防止することができる。したがって、次の２つの効果がある。（ａ）モノリスロッドに対する充填材の体積がクロマトグラムに与える影響が無く、充填材の充填量を予め低減しておく必要が無い。それゆえ、充填材の充填量の制限が無く、充填材の充填作業が容易になる。（ｂ）試料および移動相がモノリスロッドのみに流入し、充填材へは流入しないため、充填材の再配置や流出が起きない。それゆえ、分離カラムの両端に充填材の流出を防ぐフリットが不要であり、デッドボリュームが低減でき、良好なクロマトグラムを得ることができる。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、モノリスロッドへの負荷を低減した分離カラムを提供することができる、という効果を奏する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
〔実施例１〕
図１は、本発明の第１の実施例である、分離カラム（モノリス型の分離カラム）の構造を示す図である。図１において、分離カラムは、中央の円筒形状の分離カラム部と、分離カラム部の上流側の上流接続部と、分離カラム部の下流の下流接続部と、から構成されている。
【００１６】
分離カラム部は、外周側から、支持体４と、充填材３と、樹脂被覆材２と、多孔質材で柱状に成形されたモノリスロッド（モノリシックシリカロッド）１と、が同心状（同心円状）に配置されている。
【００１７】
モノリスロッド１は、オクタデシル基などの官能基を化学結合したものである。このモノリスロッド１は、例えば、直径が１.２〜２.８mmであり、長さが３０〜２００ｎｍのものを用いることができる。
【００１８】
樹脂被覆材２は、モノリスロッド１の外周を被覆しており、厚さはモノリスロッド１の直径の１０％以下である。モノリスロッド１の樹脂被覆処理は、１００℃〜１５０℃程度で行われるため、被覆処理によるモノリスロッド１の官能基破壊は発生しない。樹脂被覆材２の長さはモノリスロッド１よりも両端が長い。また、樹脂被覆材２の寸法は、支持体４の内径の半径とモノリスロッド１の半径の差分の長さを超え、支持体４の外径の半径とモノリスロッド１の半径との差分の長さを超えない寸法である。
【００１９】
充填材３は、支持体４の内部に、樹脂被覆材２で被覆されたモノリスロッド１が挿入された状態で、支持体４と被覆材２の隙間にパッカーを用いて、圧力を徐々に上げながら充填されたものである。充填材３は、粒子径が数マイクロメートルのビーズであり、シリカ、ガラス、石英等の圧縮強度が高く収縮性の低い材質で成っている。充填材３として、球状または破砕型のビーズを用いることができる。また、充填材として、例えばシリカ，ステンレス，テフロン（登録商標），ダイフロン（登録商標），ジルコニア，セラミック，ＰＥＥＫ，べスペル（登録商標），サファイア，ルビー，ダイアモンド，アルミナ，ガラス，石英，チタン，およびＵＨＭＷポリエチレンのうちいずれか１または複数から成るものを用いることができる。さらに、充填材の大きさとして、例えば１〜５μｍのものを用いることができる。
【００２０】
充填された充填材３は、充填圧力により下流側へ押されながら充填密度を上げ、樹脂被覆材２をモノリスロッド１に押し付ける。モノリスロッド１は外周全体から樹脂被覆材２を経て均等に充填材３に押し付けられる力により支持体４内に固定される。
【００２１】
本実施例では、このように充填材３（例えば、球状のビーズや破砕型のビーズ）をモノリスロッド１の周りに配している。このため、モノリスロッドの材料（シリカ）の熱膨張率と、充填材３の材料の熱膨張率とを近づけることができ、モノリスロッドへの負荷を低減することができる。支持体４は、円筒状であり、ステンレス材によって形成されている。
【００２２】
なお、樹脂被覆材２内面のモノリスロッド１との接着面をエッチング処理により凹凸加工するとモノリスロッド１と樹脂被覆材２との固定力を上げることができる。
【００２３】
充填材３の充填後、樹脂被覆材２の両端を広げ、固定部品５で固定する。このように、樹脂被覆材２が外側へ折れ曲がり、充填材３の端面を封止しているような構成となる。
【００２４】
固定部品５内側と支持体４外側には、両者を互いに固定するためのねじ部６があり、固定部品５はねじ部６により支持体４を両端から締め付け、樹脂被覆材２の両端を押し潰して充填材３を密閉し、充填終了時の配置を固定する。固定部品５には試料及び移動相を分離カラム部へ案内する配管接続部７が設けられている。
【００２５】
本実施例では、分析時に分離カラム入口から送液される試料及び移動相は、樹脂被覆材２の形成する隔壁により、モノリスロッド１にのみ流入する。そのため、樹脂被覆材２はモノリスロッド１に流入した移動相が持つ送液圧力によって外側へ押されるが、送液圧力が充填材３の充填圧力を超えない限り充填材３は再配置せず、樹脂被覆材２を押し戻す。従って、樹脂被覆材２は変形せず、移動相はモノリスロッド１内を一様に通過し、良好なクロマトグラムを得ることができる。
【００２６】
また、樹脂被覆材２は充填材３の押す力によってモノリスロッド１に密着するため、モノリスロッド１と樹脂被覆材２の接着力は分離カラムの耐圧に影響を及ぼさない。従って、樹脂被覆材２の材料選択肢が広がる。
【００２７】
また、試料及び移動相の充填材３への流入が無いため、モノリスロッド１に対する充填材３の体積がクロマトグラムに与える影響が無く、充填材３の充填量を低減する必要が無い。従って、充填材３の充填量制限が無く、充填作業が容易になる。
【００２８】
また、試料及び移動相がモノリスロッド１にのみ流入するため、分離カラムから充填材３の再配置や流出が起きない。従って、分離カラムの両端に充填材３の流出を防ぐフリットが不要でありデッドボリュームが低減するため、良好なクロマトグラムを得ることができる。
【００２９】
以下、その他の実施例について説明する。説明の便宜上、上記の実施例と異なる点について説明し、同一の箇所についてはその説明を省略する。
【００３０】
〔実施例２〕
図２は、本発明の第２の実施例である、分離カラムの構造を示す図である。本実施例は、実施例１の分離カラムの端部に試料及び移動相の流路を備えたシール部品８とシール受部品９を設け、実施例１よりも充填材３の密閉性を向上させた例である。
【００３１】
実施例１と同様に充填材３を充填した後、シール部品８が樹脂被覆材２の内部に固定部品５により固定される。より詳細には、シール部品８は、モノリスロッド１から離れるほど外側に広がるテーパ形状をしており、樹脂被覆材２をシール受部品９へ押し当てつつ外側へ押し広げ、モノリスロッド１の方へ固定部品５のねじ部６の締め付けによって押し込まれている。このように、樹脂被覆材２は、シール部品８とシール受部品９との間に挟まれた構造となる。さらに、このシール部品８は、外側から固定部品５により押圧され、固定されている。
【００３２】
繰り返しになるが、シール部品８は、固定部品５のねじ部６の締め付けによって、樹脂被覆材２外部のシール受部品９のテーパに沿って樹脂被覆材２内部をモノリスロッド１方向へ浸入し、樹脂被覆材２を押し広げる。また、シール受部品９は支持体４に押し付けられ、充填材３を密閉して固定する。
【００３３】
シール受部品９が充填材３を密閉する（封止する）ため、実施例１のように樹脂被覆材２が充填材３面を覆う必要が無く、樹脂被覆材２として伸張性が低いものを使用することができる。従って、分析時の送液圧力によって樹脂被覆材２が伸びて、モノリスロッド１と樹脂被覆材２との間に空隙が生じることも無く、実施例１よりも分離カラムの耐高圧性を向上させることができる。
【００３４】
さらに、本実施例では、実施例１とは異なり、試料および移動相の充填材３への流れ込みを、端面を覆うシール受部品９だけではなく、モノリスロッド１よりも長く、外側へ押し広げられた樹脂被覆材２によっても防止している。そのため、実施例１よりもより強固に試料および移動相の充填材３への流れ込みを防止することができる。
【００３５】
また、本実施例は、内側からシール部、樹脂被覆材、シール受部の順に配置されて、試料および移動相がモノリスロッドへ導かれる構造となっており、シール部は、モノリスロッドから離れるほど外側へ広がって樹脂被覆材およびシール受部を外側へ押し広げており、シール受部が充填材の端面を封止していると表現することもできる。
【００３６】
〔実施例３〕
図３は、本発明の第３の実施例である、分離カラムの構造を示す。
【００３７】
本実施例は、実施例１の分離カラムの端部に試料及び移動相流路を備えた流路部品１０と、流路部品１０を固定するフェラル１１と、フェラル１１を変形させるテーパ部品１２とを内側からこの順に設けており、モノリスロッド１に近い方から順にテーパ部品１２，フェラル１１を設けており、これらを固定する固定部品５がフェラル１１に直接接触するようにしている。
【００３８】
この構成により、後述するように、実施例１および２よりもモノリスロッド１両端の空隙体積の低減が可能な例である。
【００３９】
本実施例では、流路部品１０とモノリスロッド１端面との密着を保持しながら固定部品５のねじ部６を締め付ける。固定部品５のねじ部６が締まるにつれ、テーパ部品１２のテーパに沿ってフェラル１１が変形する共に、樹脂被覆材２と面接触しているフェラル１１が下方へ押され、フェラル１１が樹脂被覆材２およびテーパ部品１２へ押し当てられ、樹脂被覆材２の外周から流路部品１０を締め付けて固定する。固定の際に流路部品１０とモノリスロッド１の端面と間に空隙が発生しないため、実施例１および２とは異なり両者の間にデッドボリュームが無くなり良好なクロマトグラムを得ることができる。
【００４０】
本実施例に示す分離カラムは、流路部品１０を固定するフェラル１１と、フェラル１１を変形させるテーパ部品と、を備えており、フェラル１１は先端をモノリスロッド１側へ向けて位置しており、フェラル１１がモノリスロッド１側へ移動することにより流路部品１０を締め付けていると表現することができる。ここで、フェラル１１の先端とは、フェラル１１における先が細い側をいう。
【００４１】
本実施例では、テーパ部品１２が充填材３の端面を封止しており、実施例１，２と同様に、試料および移動相の充填材３への流入を防止することができる。さらに、樹脂被覆材２がモノリスロッド１よりも長くなっているため、実施例２と同様に相乗的に試料および移動相の充填材３への流入を防止することができる。
【００４２】
〔実施例４〕
図４は、本発明の第４の実施例である、分離カラムの構造を示す図である。
【００４３】
本実施例は、実施例３の分離カラム両端の流路部品１０はそのままに、流路部品１０を固定するフェラル１１と、フェラル１１を変形させるテーパ部品１２の配置を逆にした例である。より詳細には、テーパ部品１２が固定部品５と直接接触し、テーパ部品１２が固定部品５により直接下方へ押される構成となっている。
【００４４】
本実施例の配置により、固定部品５のねじ部６が締まるにつれてフェラル１１は変形するが、支持体４の端面とフェラル１１の変形部分１３との距離は変化しない。つまり、固定部品５とねじ部６との締め付けによりモノリスロッド１側へ移動するのはテーパ部品１２であり、図４に示すように、樹脂被覆材２と面接触しているフェラル１１は、モノリスロッド１の方へ移動しない。そのため、本実施例では、実施例３の効果に加えて、樹脂被覆材２にシワが生じず、デッドボリュームが無くなり良好なクロマトグラムを得ることができる。
【００４５】
本実施例に示す分離カラムは、流路部品１０を固定するフェラル１１と、フェラル１１を変形させるテーパ部１２と、を備えており、フェラル１１は先端をモノリスロッド１とは反対側へ向けて位置しており、テーパ部１２がモノリスロッド１側へ移動することにより流路部品１０を締め付けていると表現することができる。
【００４６】
本実施例では、フェラル１１が充填材３の端面を封止しており、実施例１，２と同様に、試料および移動相の充填材３への流入を防止することができる。さらに、樹脂被覆材２がモノリスロッド１よりも長くなっているため、実施例２と同様に相乗的に試料および移動相の充填材３への流入を防止することができる。
【００４７】
〔付記説明〕
上記実施例１〜４における充填材３は全て、直径が数マイクロメートル（例えば、１〜５μｍ）程度の球形あるいは破砕形のビーズであり、特許文献２に記載されているロッド固定材とは異なる。また、以上の実施例における充填材３は材質がシリカであるが、石英，アルミナ，ガラス，ジルコニアなども考えられる。
【００４８】
また、以上の実施例の構造は、分離カラムの移動相流入側と流出側のいずれにも適用することができる。
【００４９】
さらに、実施例３および４では、実施例１および２とは異なり、流路部品１０とモノリスロッド１との密着により、試料および移動相の充填材３への流れ込みを防止している。さらに、実施例３および４では、必須の構成ではないが、図３に示すように、テーパ部品１２が充填材３の端面を封止しており、また、図４に示すように、フェラル１１が充填材３の端面を封止しているため、いずれの実施例においても試料および移動相の充填材３への流れ込みを相乗的に防止することができる。
【００５０】
なお、実施例３および４と、実施例１および２との他の構成上の相違点として、実施例１では樹脂被覆材２が外側へ折れ曲がっており、実施例２では樹脂被覆材２が外側へ押し広げられているが、本実施例では、樹脂被覆材２はモノリスロッド１に沿った、一直線のものとなっている。
【００５１】
実施例１〜４に記載の分離カラムは、いずれも試料および移動相を、モノリスロッドへ流入させ、かつ、前記充填材への流入を防止する流路を備えている、と表現することができる。
【００５２】
なお、実施例１では、モノリスロッドの長さよりも樹脂被覆材の長さの方が長いことが必須であるが、実施例２〜４では必ずしも必須ではない。これらの実施例では、上述の通り、モノリスロッドの長さが樹脂被覆材の長さよりも長くなくても充填材への試料および移動相の流入を防止することができるためである。
【００５３】
本発明は、樹脂被覆材料選択の制限を低減して耐圧性能と分離性能を向上し、高速分離分析ができる分離カラムを実現することにある、ということもできる。ここで、上記の分離性能には、樹脂被覆材料からの不純物成分の溶出防止も含まれる。
【００５４】
また、本発明は、多孔質体で円柱形状に成形され、官能基を化学結合したモノリスロッドと、前記モノリスロッドの外周に設けられた樹脂被覆材と、前記樹脂被覆材の外周に充填された充填材とを備え、試料および移動相の前記充填材への流入が防止されているということもできる。
【００５５】
また、本発明によれば、試料及び移動相がモノリスロッドにのみ流入する高耐圧性分離カラムの提供が可能になる。また、モノリスロッドを支持する充填材に試料及び移動相が流入しないため、充填材の使用量に制限が無く、充填材の充填が容易である。また、モノリスロッドの官能基が破壊されずにモノリスロッドの被覆が可能であり、分離性能の高いカラムの提供が可能になる。また、充填材の分離カラムからの流出を防ぐフリットが不要であるため、デッドボリュームが低減し、分離カラムの分離性能が向上する。
【産業上の利用可能性】
【００５６】
本発明の分離カラムは、液体クロマトグラフに用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００５７】
【図１】本発明の第１の実施例を示す分離カラムの構成図である。
【図２】本発明の第２の実施例を示す分離カラムの構成図である。
【図３】本発明の第３の実施例を示す分離カラムの構成図である。
【図４】本発明の第４の実施例を示す分離カラムの構成図である。
【符号の説明】
【００５８】
１  モノリスロッド（モノリシックシリカロッド）
２  樹脂被覆材
３  充填材
４  支持体
５  固定部品
６  ねじ部
７  配管接続部
８  シール部品（シール部）
９  シール受部品（シール受部）
１０  流路部品
１１  フェラル
１２  テーパ部品（テーパ部）
【図１】
2010008301.tif 000003
【図２】
2010008301.tif 000004
【図３】
2010008301.tif 000005
【図４】
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