(57)【要約】      （修正有）【課題】新規な合成２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエート、その調製およびその塩を活性成分として含有する医薬組成物、及び、心臓虚血、脳虚血および心臓または脳の動脈閉塞（閉塞）などの予防および治療のための該化合物の使用。【解決手段】式（Ｉ）：2010189418.tif 000013（Ｍは一価金属イオン、二価金属イオン、または、アニリニウム基、ベンジルアンモニウム基、モルホリニウム基およびジエチルアンモニウム基からなる群より選ばれる有機塩基基であり、ｎは１または２である）の化合物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）：
【化１】
2010189418.tif 000012
（式中、Ｍは一価金属イオン、二価金属イオン、または、アニリニウム基、ベンジルアンモニウム基、モルホリニウム基およびジエチルアンモニウム基からなる群より選ばれる有機塩基基であり、ｎは１または２である）の化合物。
【請求項２】
前記式中、Ｍが、カリウムイオン、ナトリウムイオンまたはリチウムイオンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
前記式中、Ｍが、カルシウムイオン、マグネシウムイオンまたは亜鉛イオンである、請求項１に記載の化合物。
【請求項４】
請求項１に記載の一般式（Ｉ）の式中のＭがアルカリ金属イオンである化合物の調製方法であって、ラセミ体３−ｎ−ブチル−イソベンゾフラン−１−（３Ｈ）−オンを、加水分解および開環反応用溶媒媒質中に溶解し、等当量またはわずかに過剰量のアルカリ金属塩基を添加し、１０〜１００℃の温度条件下で０．５〜６時間加水分解および開環反応を行なって前記一般式（Ｉ）の式中のＭがアルカリ金属イオンである２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを得ることを含み、前記加水分解および開環反応用溶媒媒質がメタノール、エタノール、アセトン、イソプロパノール、水または水／アルコール（ケトン）混合物である調製方法。
【請求項５】
アルカリ金属塩基を添加する工程が、実質的に等当量のアルカリ金属塩基を添加することからなる請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記アルカリ金属塩基が、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムおよび水酸化リチウムからなる群より選ばれる無機塩基であるか、またはナトリウムメトキシド、カリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドおよびカリウムエトキシドからなる群より選ばれる有機塩基である請求項４に記載の方法。
【請求項７】
請求項１に記載の一般式（Ｉ）の式中のＭがアルカリ土類金属イオンである化合物の調製方法であって、前記一般式（Ｉ）の式中のＭがアルカリ金属イオンである２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを反応溶媒媒質中に溶解し、等当量またはわずかに過剰量のアルカリ土類金属塩を添加し、そして１０〜１００℃の温度条件下でイオン交換反応を行なって該一般式（Ｉ）の式中のＭがアルカリ土類金属イオンである２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを得ることを含む調製方法。
【請求項８】
前記反応溶媒媒質が、メタノール、エタノール、アセトン、イソプロパノール、水または水／アルコール（ケトン）混合物のいずれか１つであり、前記アルカリ土類金属塩が、塩化カルシウムである、請求項７に記載の調製方法。
【請求項９】
請求項１に記載の一般式（Ｉ）の式中のＭがアルカリ金属、アルカリ土類金属または有機アミンのイオンである化合物の調製方法であって、
（１）前記一般式（Ｉ）の式中のＭが生成物と異なるアルカリ金属イオンである２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを溶媒中に溶解し、得られた溶液に無機酸を添加してｐＨ値を６．０〜２．０に調整し、−２０〜２０℃温度で該２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを該酸と反応させて２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸を得ること、
（２）このようにして得た該安息香酸溶液に有機抽出溶媒を添加し、遊離の２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸を抽出して２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸を含有する有機溶液を得、該溶液を−２０〜１０℃温度下で後の使用のために保存すること、および
（３）等当量またはわずかに過剰量の、対応するアルカリ金属の塩基（Ｍは出発物質のＭと異なる）を含む溶液を、前記工程で得られた該２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸溶液に−１０〜０℃の温度下で添加して該一般式（Ｉ）の式中のＭがアルカリ金属イオンである２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを得ること、または
等当量またはわずかに過剰量のアルカリ土類金属のイオンを含む塩基を含む溶液またはアルカリ土類金属の塩を、工程（２）で得られた該２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸溶液に−１０〜０℃の温度下で添加して該一般式（Ｉ）の式中のＭが二価金属イオンである２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを得ること、または
等当量またはわずかに過剰量の、アニリノ基、ベンジルアミノ基、モルホリニル基およびジエチルアミノ基からなる群より選ばれる基に対応する有機塩基を含む溶液を、工程（２）で得られた該２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸溶液に−１０〜０℃の温度下で添加して該一般式（Ｉ）の式中のＭがアニリニウム基、ベンジルアンモニウム基、モルホリニウム基およびジエチルアンモニウム基からなる群より選ばれる有機塩基基である２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを得ること、
を含む調製方法。
【請求項１０】
工程（１）における反応を行なうための温度および工程（２）における溶液を保存するための温度が−２０〜０℃である請求項９に記載の調製方法。
【請求項１１】
工程（１）の反応のために、前記酸性化反応で使用する前記酸が、濃塩酸または濃硫酸もしくは希塩酸または希硫酸が使用され；
工程（２）での２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸を抽出するための前記有機抽出溶媒として、エーテル、酢酸エチル、クロロホルム、ジクロロメタン、ベンゼン、トルエン、石油エーテル、ｎ−ヘキサンおよびシクロへキサンからなる群より選択される溶媒が使用され；
工程（３）におけるアルカリ金属塩基が、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、ナトリウムメトキシド、カリウムメトキシド、ナトリウムエトキシドおよびカリウムエトキシドからなる群より選ばれる塩基であり；
工程（３）におけるアルカリ土類金属無機金属塩またはアルカリ土類金属塩基が、塩化マグネシウム、炭酸マグネシウム、塩化カルシウム、炭酸カルシウム、塩化亜鉛、炭酸亜鉛、硫酸マグネシウム、水酸化マグネシウムおよび水酸化カルシウムからなる群より選ばれ；
工程（１）における溶媒が、メタノール、エタノール、アセトン、イソプロパノール、水もしくは水／アルコール混合物エーテル、酢酸アセチル、クロロホルム、ジクロロメタン、ベンゼン、トルエン、石油エーテル、ｎ−ヘキサンおよびシクロへキサンからなる群より選ばれる、請求項１０に記載の調製方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、化学合成した新規な２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエート、その調製および該塩を活性成分として含有する医薬組成物に関する。本発明はまた、心臓虚血、脳虚血、心臓および脳の動脈閉塞などの疾患の予防および治療における該化合物の使用に関する。
【０００２】
［発明の背景］
急性虚血性脳卒中は、よくみられる疾患であり、発症率が高く（１万人あたり１２〜１８例）、死亡率も高く（１万人あたり６〜１２例）、人の健康をかなり危険にさらす。助かった患者には、しばしば後遺症が残り、患者の家族および社会に大きな負担がかかる。したがって、この疾患の予防および治療のための薬剤を開発することに非常に価値がある。１９８０年代から、数多くの研究者らがこの疾患（急性虚血性脳卒中）のメカニズムを研究しており、有効性が高くかつ毒性の低い薬剤を開発する目的で、エネルギー代謝、興奮毒、酸化損傷、カルシウム過負荷などの理論および他の多くの理論を提案している。しかしながら、理想的な治療剤は、まだ開発には至っていない。カルシウム拮抗剤、興奮性レセプター拮抗剤、フリーラジカルスカベンジャーなどの薬剤は、臨床的に使用されているが、有効性は不確かである。急性虚血性脳卒中を治療するためにｔ−ＰＡなどの血栓溶解剤が使用され（発症から６時間以内）、効果はあるが、出血する危険性は解決されていない。そのため、虚血性脳卒中を治療するための新規な薬剤の開発は、なお関心の的である。
【０００３】
冠動脈性心疾患もまた、人の健康を害する重篤な疾患である。冠動脈アテローム性動脈硬化および血栓の形成のため、虚血性心筋損傷が誘起される。このため、冠動脈アテローム性動脈硬化を予防および治療するため、血栓形成を予防するため、および冠動脈を拡張するための新規薬剤の開発が主要な研究となっている。
【０００４】
［発明の概要］
本発明の目的は、血小板凝集を有意に阻害し、かつ脳の微小循環を改善することができ、心臓虚血、脳虚血、心臓および脳の動脈閉塞に有効な新規な２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを提供することである。
【０００５】
本発明の別の目的は、２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートの合成方法を提供することである。
【０００６】
本発明のさらに別の目的は、心臓虚血、脳虚血、心臓および脳の動脈閉塞を予防および治療し得る医薬組成物を提供することである。
【０００７】
本発明の第４の目的は、心臓虚血、脳虚血、心臓および脳の動脈閉塞の予防および治療ならびに脳の微小循環の改善における上記化合物および医薬組成物の使用を提供することである。
【０００８】
本発明は、下記一般式（Ｉ）：
【０００９】
【化２】
2010189418.tif 000002
【００１０】
（式中、ｎ＝１、２；Ｍは、Ｋ＋、Ｎａ＋、Ｌｉ＋などの一価金属イオン、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋、Ｚｎ２＋などの二価金属イオン、またはアニリノ、ベンジルアミノ、モルホリニルもしくはジエチルアミノなどの有機塩基基である）の化合物を提供する。
【００１１】
本発明の製造方法は、以下の通りである。
【００１２】
１．一般式（Ｉ）の式中のＭが一価金属イオンである２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートの調製
等当量ラセミ体３−ｎ−ブチル−イソベンゾフラン１−（３Ｈ）−オンを、加水分解および開環反応用溶媒媒質中に溶解し、等当量またはわずかに過剰量の一価塩基を添加する。その後、１０〜１００℃の温度下で加水分解および開環反応を０．５〜６時間行ない、一般式（Ｉ）の式中のＭが一価金属イオンである２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを得る。
【００１３】
加水分解および開環反応用溶媒は、メタノール、エタノール、アセトン、イソプロパノール、水またはＨ２Ｏ／アルコール（またはケトン）混合物のいずれか１つであり得る。
【００１４】
結晶化溶媒は、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、アセトン、酢酸アセチル、クロロホルム、エーテル、ジクロロメタン、ベンゼン、トルエン、石油エーテル、または上記溶媒の２または３種類の異なる比率の混合物のいずれか１つであり得る。一価塩基は、化学的に純粋な無機塩基などの無機塩基（例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムまたは水酸化リチウムなど）または化学的に純粋な有機塩基（ナトリウム（もしくはカリウム）メトキシド、ナトリウム（もしくはカリウム）エトキシドなど）であり得る。
【００１５】
２．一般式（Ｉ）の式中のＭが二価金属イオンである２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートの調製
一般式（Ｉ）の式中のＭが一価金属イオン（例えば、ナトリウムまたはカリウム）である２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを溶媒に溶解し、次いで、等当量またはわずかに過剰量の化学的に純粋な二価金属塩を添加し、１０〜１００℃の温度下で０．５〜１０時間イオン交換反応を行ない、一般式（Ｉ）の式中のＭが二価金属イオンである２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを得る。
【００１６】
反応溶媒媒質は、メタノール、エタノール、アセトン、イソプロパノール、水または水／アルコール（またはケトン）混合物であり、二価金属塩は、塩化マグネシウム、塩化カルシウムまたは塩化亜鉛であることができ、結晶化溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノール、酢酸アセチル、クロロホルム、エーテル、ジクロロメタン、または上記溶媒の２または３種類の異なる比率の混合物であり得る。
【００１７】
３．一般式（Ｉ）の式中のＭが有機塩基である２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートの調製
（１）一般式（Ｉ）の式中のＭが一価金属イオン（例えば、ナトリウムまたはカリウム）である２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを溶媒中に溶解し、次いで、この溶液に−２０〜２０℃、好ましくは−２０〜０℃の温度で無機酸を添加してｐＨ値を６．０〜２．０に調整して該２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを酸性化し、２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸を得る。
（２）反応が完了した後、溶液に有機抽出溶媒を添加し、遊離酸２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸を一般的な抽出法により−２０〜０℃の温度で抽出する。２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸を含有する有機溶液を得、該溶液を−２０〜１０℃、好ましくは−２０〜０℃の温度下で使用のために保存する。
（３）上記工程で得られた溶液に、２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸と等当量またはわずかに過剰量の一価塩基を含む溶液、例えば水酸化カリウムのアルコール溶液を、−１０〜０℃の温度で添加し、本発明の式中のＭがカリウムなどの一価金属イオンである２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを得る。反応を充分行なった後、調製方法１と同じ精製方法で、本発明の化合物、すなわち式中のＭが一価金属イオンである２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを得る。
（４）上記工程（２）で得られた溶液に、該２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸と等当量またはわずかに過剰量の二価塩基または二価金属塩を含む溶液、例えば水酸化カルシウムのアルコール溶液を、−１０〜０℃の温度下で添加し、本発明の式中のＭが二価金属イオン、例えばカルシウムである２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを得る。反応を充分行なった後、調製方法２と同じ精製方法で、本発明の化合物、すなわち式中のＭが二価金属イオンである２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを得る。
（５）上記工程（２）で得られた溶液に、２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸と等当量またはわずかに過剰量の有機塩基を含む溶液、例えば化学的に純粋なアニリンを、−１０〜０℃の温度下で添加し、本発明の式中のＭがアニリンなどの有機塩基である２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを得る。反応を充分行なった後、調製方法２と同じ精製方法で、本発明の化合物、すなわち式中のＭが二価金属イオンである２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを得る。
【００１８】
酸性化反応で使用される酸は、濃塩酸もしくは希塩酸または硫酸のいずれか１つであることができ、温度は−２０〜＋２０℃の範囲内に制御されるべきであり、２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸を抽出するための有機溶媒は、エーテル、酢酸エチル、クロロホルム、ジクロロメタン、ベンゼン、トルエン、石油エーテル、ｎ−ヘキサンまたはシクロへキサンのいずれか１つであることができ、一価塩基は、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、ナトリウム（もしくはカリウム）メトキシドまたはナトリウム（もしくはカリウム）エトキシドから選択され、二価無機金属塩または二価無機塩基は、ＭｇＣｌ２、ＭｇＣＯ３、ＣａＣｌ２、ＣａＣＯ３、ＺｎＣｌ２、ＺｎＣＯ３、ＭｇＳＯ２、Ｚｎ（ＯＨ）２、Ｍｇ（ＯＨ）２またはＣａ（ＯＨ）２から選択され、有機塩基は、アニリン、ベンジルアミン、モルホリンまたはジエチルアミンから選択され、式中のＭが一価金属塩である２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートを溶解するための溶媒は、Ｈ２Ｏ、ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、ＥｔＯＨ／Ｈ２Ｏ、アセトン／Ｈ２Ｏ、イソプロパノール／Ｈ２Ｏのいずれか１つであり得る。
【００１９】
本発明の化合物は、心臓虚血および脳虚血の予防および治療に対して良好な効果を示すこと、さらに、本発明の化合物はまた、抗血小板凝集の薬理効果、心臓および脳の動脈閉塞治療効果、および脳の微小循環の改善効果などを有することがわかった。
【００２０】
本発明の化合物は、動物実験から、心臓の虚血性損傷の保護、抗血小板凝集および脳動脈閉塞による損傷の緩和に対して優れた効果が示され、さらに、興奮または出血などの副作用は認められていない。
【００２１】
本発明の医薬組成物は、活性成分として本発明の化合物の治療有効量、および薬学的に許容可能な担体を含有する。
【００２２】
本発明の化合物および医薬組成物は、心臓虚血および脳虚血、心臓および大脳の動脈閉塞を予防および治療し、心臓／脳の微小循環を改善し得る薬剤の調製に使用することができる。
【００２３】
上記「薬学的に許容可能な担体」は、デンプン、糖などの希釈剤、賦形剤、増量剤；セルロース誘導体、アルギン酸塩、ゼラチンおよびポリビニルピロリドンなどの結合剤；グリセリンなどの湿潤剤；寒天、炭酸カルシウムおよび重炭酸ナトリウムなどの崩壊剤；第四級アンモニウム化合物などの吸収促進剤、セチルアルコールなどの界面活性剤、カオリンおよびベントナイトなどの吸着担体；タルク、ステアリン酸カルシウムまたはステアリン酸マグネシウムなどの滑剤ならびにポリエチレングリコールなどの通常の薬剤用担体を意味し、さらに香味剤および甘味剤などの他の添加剤を添加してもよい。
【００２４】
本発明の化合物は、前述のような治療を必要としている患者に対し、医薬製剤の形態で経口または静脈内投与され得る。経口投与される場合、該化合物は、タブレット、粒剤またはカプセルの剤形で投与され得る。また、該化合物は、液剤または注射用油／水懸濁液の形態であり得る。好ましい剤形は、タブレット、カプセルおよび注射剤である。
【００２５】
本発明の医薬組成物の剤形は、当該技術分野でよく知られた手法により調製することができる。例えば、本発明の化合物を１つまたは複数の担体と混合し、所望の剤形に形成する。
【００２６】
本発明の医薬組成物は、好ましくは、３：２、最も好ましくは１：１の重量比で活性成分を含有する。
【００２７】
本発明の化合物の投与量は、投与経路、治療対象の患者の年齢、体重、疾患の種類および疾患の重篤度に基づいて変わり得る。典型的な１日の投与量は、５０ｍｇ〜６００ｍｇ／日、好ましくは１００ｍｇ〜２００ｍｇ／日であり、これを一度にまたは複数回で投与してもよい。
【００２８】
［発明の詳細な説明］
以下の実施例は単に例示であって、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。
【実施例１】
【００２９】
実施例１  ラセミ体２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸カリウム（以下、ｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸カリウムまたはｄｌ−ＰＨＰＢともいう）の調製
ｄｌ−３−ｎ−ブチル−イソベンゾフラン−１−（３Ｈ）−オン（８．５ｇ、０．０４５ｍｏｌ）をメタノール２０ｍｌに溶解し、ＫＯＨ（２．６ｇ、０．０４６ｍｏｌ）のメタノール溶液１０ｍｌを添加した。反応溶液を還流下で１時間攪拌した。その後、ＴＬＣ解析（石油エーテル／アセトン＝１０：１）およびＩ２蒸気の呈色により、出発物質は消失していることが示された。反応溶液を減圧下で濃縮し、粘着性の黄色残渣を得て、これにクロロホルム２０ｍｌを添加した後、冷蔵庫にて結晶化させた。粗生成物をＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３中で再結晶化させ、白色の粒状結晶（１０．０７ｇ、収率＝９１．５０％）を得た。
【実施例２】
【００３０】
実施例２  ｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸カリウムの調製
ｄｌ−３−ｎ−ブチル−イソベンゾフラン−１−（３Ｈ）−オン（０．６３ｇ、３．３ｍｍｏｌ）をメタノール１０ｍｌに溶解し、ＫＯＨ（０．１９ｇ、３．４ｍｍｏｌ）のメタノール溶液１０ｍｌを添加した。反応溶液を還流下で１時間攪拌した。その後、ＴＬＣ解析（石油エーテル／アセトン＝１０：１）およびＩ２蒸気の呈色により、出発物質は消失していることが示された。反応溶液を減圧下で濃縮し、粘着性の黄色残渣を得て、これにクロロホルム５ｍｌを添加した後、冷蔵庫にて結晶化させた。粗生成物をＭｅＯＨ／ＣＨＣｌ３中で再結晶化させ、白色の粒状結晶（０．６ｇ、収率＝７３．５６％）を得た。
【実施例３】
【００３１】
実施例３  ｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸カリウムの調製
ｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸ナトリウム（１．９６ｇ、８．５ｍｍｏｌ）を１０ｍｌのＨ２Ｏに溶解し、溶液を氷塩浴中で約０℃まで冷却した。ｐＨを１Ｎ  ＨＣｌで２．０〜３．０に調整し、溶液を冷エーテル（３×２０ｍｌ）で手早く抽出した。エーテル抽出物を合わせ、無水Ｎａ２ＳＯ４で低温にて３時間乾燥させた後、同じ温度の低温下で手早く濾過した。濾液に無水Ｋ２ＣＯ３（０．５８ｇ、４．２ｍｍｏｌ）のメタノール溶液２０ｍｌを添加し、混合物を高速で攪拌して室温にした。エーテル溶液中に白色固体が現われ、溶液を２４時間以上放置した後、白色固体を濾過し、乾燥させた（１．４ｇ、収率＝６６．６７％）。
【実施例４】
【００３２】
実施例４  ｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸カリウムの調製
ｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸ナトリウム（１．７８ｇ、７．７ｍｍｏｌ）を約１０ｍｌのＨ２Ｏに溶解し、溶液を氷塩浴中で約０℃まで冷却した。ｐＨを１Ｎ  ＨＣｌで２．０〜３．０に調整し、溶液を冷エーテル（３×２０ｍｌ）で手早く抽出した。エーテル層を合わせ、無水Ｎａ２ＳＯ４で低温にて２時間乾燥させた後、同じ温度の低温下で手早く濾過した。濾液にＫＯＨ（０．４３ｇ、７．７ｍｍｏｌ）のメタノール溶液１０ｍｌを滴下し、混合物を氷塩浴で放置して室温にした。残渣を減圧下で濃縮した後、ＭｅＯＨ／エーテル中で再結晶化させた。白色固体（１．３ｇ、収率＝６８．４２％）を得た。
【００３３】
上記実施例１〜４の手順で調製したｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸カリウムは、白色の粒状結晶である。
融点  １５１〜１５２℃
ＩＲ（ＫＢｒ）
３１９８ｃｍ−１（νＯＨ）、２９３３ｃｍ−１（νＣＨ３）、１５７７、１５６１（νＣＯＯ）
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ（ｐｐｍ）
７．６５（ｄｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，２．７Ｈｚ，１Ｈ）、７．１７〜７．０５（ｍ，３Ｈ）、４．３２（ｔ，１Ｈ）、３．４０（ｓ，１Ｈ）、１．８０〜１．５５（ｍ，２Ｈ）、１．３８〜１．０４（ｍ，４Ｈ）、０．８１（ｔ，３Ｈ）
元素分析Ｃ１２Ｈ１５Ｏ３Ｋ（ＦＷ２４６．３５）
Ｃ（％）      Ｈ（％）      Ｋ（％）
計算値  ５８．５１    ６．１４      １５．８７
測定値  ５８．２４    ６．０１    １５．８４
【００３４】
【化３】
2010189418.tif 000003
【実施例５】
【００３５】
実施例５  ｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸ナトリウムの調製
ｄｌ−３−ｎ−ブチル−イソベンゾフラン−１−（３Ｈ）−オン（４．６ｇ、０．０２４ｍｏｌ）をメタノール２０ｍｌに溶解し、ＮａＯＨ（０．８６ｇ、０．０２２ｍｏｌ）の水溶液１０ｍｌを添加した。反応溶液を還流下で２時間攪拌した。その後、ＴＬＣ解析（石油エーテル／アセトン＝１０：１）およびＩ２蒸気の呈色により、出発物質は消失していることが示された。反応溶液を減圧下で濃縮し、粘着性の黄色残渣を得て、これは、クロロホルム、アセトン、エーテルまたはメタノールなどの溶媒中で結晶化しなかった。少量の残渣をエーテル／酢酸エチル（１０：１）で固化し、白色固体を得り、これは、非常に吸湿性があり、濾過の際に粘着性が高い状態になった。黄色残渣をエーテルで数回洗浄し、無水ベンゼンで水分除去し、減圧下で乾燥し、白色の泡沫状固体（３．６７ｇ、収率＝６５．９１％）を得た。
【実施例６】
【００３６】
実施例６  ｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸ナトリウムの調製
ｄｌ−３−ｎ−ブチル−イソベンゾフラン−１−（３Ｈ）−オン（７．６ｇ、０．０４ｍｏｌ）をメタノール２０ｍｌに溶解し、ナトリウムメトキシド（０．９２ｇ、ナトリウム０．０４ｍｏｌ）の新しいメタノール水溶液（２０ｍｌ）を添加した。反応溶液を還流下で２時間攪拌した。その後、ＴＬＣ解析（石油エーテル／アセトン＝１０：１）およびＩ２蒸気の呈色により、出発物質は消失していることが示された。反応溶液を減圧下で濃縮し、粘着性の黄色残渣（これは、クロロホルム、アセトン、エーテルまたはメタノールなどの溶媒中で結晶化しなかった）を得た。この黄色残渣をエーテルで数回洗浄し、無水ベンゼンで水分を除去し、減圧下で乾燥し、白色の泡沫状固体（６．４ｇ、収率＝６９．５６％）を得た。
【実施例７】
【００３７】
実施例７  ｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸ナトリウムの調製
ｄｌ−ＰＨＰＢ（１．０ｇ、０．００４ｍｏｌ）を１０ｍｌのＨ２Ｏに溶解し、溶液を氷塩浴中で約０℃まで冷却した。ｐＨを１Ｎ  ＨＣｌで２．０〜３．０に調整し、溶液を冷エーテル（３×２０ｍｌ）で手早く抽出した。エーテル抽出物を合わせ、無水Ｎａ２ＳＯ４で低温にて２時間乾燥させた後、同じ温度の低温下で手早く濾過した。濾液に無水Ｎａ２ＣＯ３（０．５８ｇ、４．２ｍｍｏｌ）のメタノール溶液２０ｍｌを添加すると、溶液が濁り、氷塩浴中に３時間放置すると透明になった。反応溶液を減圧下で濃縮し、粘着性の黄色残渣を得て、これをエーテルで数回洗浄し、無水ベンゼンで水分を除去し、減圧下で乾燥し、白色の泡沫状固体（０．４ｇ、収率＝４２．７８％）を得た。
【実施例８】
【００３８】
実施例８  ｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸ナトリウムの調製
ｄｌ−ＰＨＰＢ（２．４ｇ、０．０１ｍｏｌ）を２０ｍｌのＨ２Ｏに溶解し、溶液を氷塩浴中で約０℃まで冷却した。ｐＨを１Ｎ  ＨＣｌで２．０〜３．０に調整し、溶液を冷エーテル（３×２０ｍｌ）で手早く抽出した。エーテル抽出物を合わせた後、ＮａＯＨ（０．３９ｇ、０．０１ｍｏｌ）のメタノール溶液２０ｍｌを合わせ、得られた溶液を氷塩浴中に一晩放置した。減圧下での濃縮後、粘着性の黄色残渣を得て、これを上記のようにして処理し、白色の泡沫状固体（１．２ｇ、収率＝５３．４８％）を得た。
【００３９】
上記実施例５〜８の手順で調製したｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸ナトリウムは、白色の泡沫状固体である。
ＩＲ（膜）
３３９８ｃｍ−１（νＯＨ）、２９６９ｃｍ−１（νＣＨ３）、１５５８、１３９４ｃｍ−１（νＣＯＯ）
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ（ｐｐｍ）
７．７０（ｄｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１．８Ｈｚ，１Ｈ）、７．１７〜７．０７（ｍ，３Ｈ）、４．３９（ｔ，１Ｈ）、１．６５〜１．４８（ｍ，２Ｈ）、１．３９〜１．１０（ｍ，４Ｈ）、０．８３（ｔ，３Ｈ）
【実施例９】
【００４０】
実施例９  ｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸リチウムの調製
ｄｌ−３−ｎ−ブチル−イソベンゾフラン−１−（３Ｈ）−オン（１．２ｇ、０．００６ｍｏｌ）をメタノール１５ｍｌに溶解し、ＬｉＯＨ・Ｈ２Ｏ（０．２６ｇ、０．００６ｍｏｌ）を添加した。反応溶液を還流下で２時間攪拌した。その後、ＴＬＣ解析（石油エーテル／アセトン＝１０：１）およびＩ２蒸気の呈色により、出発物質は消失していることが示された。反応溶液を減圧下で濃縮し、白色の結晶（１．１ｇ、収率＝８１．３８％）を得た。
融点  １３４〜１３６℃
ＩＲ（ＫＢｒ）
３３２３ｃｍ−１（νＯＨ）、２９３１ｃｍ−１（νＣＨ３）、１６０４、１４１４ｃｍ−１（νＣＯＯ）
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ（ｐｐｍ）
７．６６（ｄｄ，１Ｈ）、７．１７〜７．１６（ｍ，３Ｈ）、４．３２（ｔ，１Ｈ）、１．７８〜１．５４（ｍ，２Ｈ）、１．２７〜１．０２（ｍ，４Ｈ）、０．８４（ｔ，３Ｈ）。
元素分析Ｃ１２Ｈ１５Ｏ３Ｌｉ（ＦＷ２１４．１９）
Ｃ（％）      Ｈ（％）      Ｌｉ（％）
計算値  ６７．２９    ７．０６      ３．２４
測定値  ６７．３４    ６．８７      ３．２６
【実施例１０】
【００４１】
実施例１０  ｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸カルシウムの調製
ｄｌ−３−ｎ−ブチル−イソベンゾフラン−１−（３Ｈ）−オン（１．４ｇ、７．１ｍｍｏｌ）をメタノール１５ｍｌに溶解し、ＮａＯＨ（０．２８ｇ、７．０ｍｍｏｌ）の水溶液２０ｍｌを添加した。反応溶液を還流下で２時間攪拌した。その後、ＴＬＣ解析（石油エーテル／アセトン＝１０：１）およびＩ２蒸気の呈色により、出発物質は消失していることが示された。塩化カルシウム（０．４ｇ、４．５ｍｍｏｌ）を４０ｍｌのＨ２Ｏに溶解し、溶液を上記反応溶液に滴下した。反応は、６０℃の水浴中で２時間行ない、ｐＨを１Ｎ  ＨＣｌで約７に調整した後、反応溶液を濾過した。濾液を減圧下で１０ｍｌに濃縮すると、白色固体が現われた。現われた白色固体を含む溶液を３０分間放置した後、濾過した。濾過ケークを水およびＨ２Ｏ／ＭｅＯＨ（１：１）でそれぞれ数回、塩化物イオンが検出されなくなるまで洗浄した。濾過ケークを加熱して乾燥させ、白色固体（１．０８ｇ、収率＝３３．２３％）を得た。
【実施例１１】
【００４２】
実施例１１  ｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸カルシウムの調製
ｄｌ−３−ｎ−ブチル−イソベンゾフラン−１−（３Ｈ）−オン（１．１ｇ、５．８ｍｍｏｌ）を無水エタノール２０ｍｌに溶解し、ＮａＯＨ（０．３９ｇ、９．８ｍｍｏｌ）の水溶液１０ｍｌを添加した。反応溶液を還流下で２時間攪拌した。その後、ＴＬＣ解析（石油エーテル／アセトン＝１０：１）およびＩ２蒸気の呈色により、出発物質は消失していることが示された。反応溶液を氷塩浴中で約０℃まで冷却し、１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ５．０〜６．０に酸性化し、さらにエタノール２０ｍｌを添加して析出している白色固体を溶解した。炭酸カルシウム粉末（０．３３ｇ、３．３ｍｍｏｌ）を添加し、反応溶液を低温で激しく攪拌し、一晩放置した。反応溶液から白色固体が現われ、反応溶液を濾過した。濾過ケークをＨ２Ｏ／ＭｅＯＨで数回洗浄した。濾過ケークを加熱して乾燥させ、白色固体（０．６５ｇ、収率＝２４．７３％）を得た。
【実施例１２】
【００４３】
実施例１２  ｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸カルシウムの調製
塩化カルシウム（０．１２ｇ、０．００２ｍｍｏｌ）を２０ｍｌのＨ２Ｏに溶解し、約６０℃まで加熱した。この溶液にｄｌ−ＰＨＰＢ（０．５ｇ、０．００１ｍｏｌ）の水溶液１０ｍｌを添加した。しばらくすると、白色固体が現われ、反応をさらに３時間継続した。その後、反応溶液を濾過し、濾過ケークを熱水で洗浄し、加熱下で乾燥させ、白色固体（０．２１ｇ）を得た。濾液を減圧下で濃縮し、熱水で洗浄し、加熱して乾燥させ、さらに０．１５ｇの白色固体を得た。合わせた白色固体は合計０．３６ｇであった（収率＝７８．０２％）。
【００４４】
上記実施例９〜１２の手順で調製したｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸カルシウムは、白色固体であり、２５２℃を超える温度で分解する。
ＩＲ（ＫＢｒ）
３３２３ｃｍ−１（νＯＨ）、２９３１ｃｍ−１（νＣＨ３）、１６０４、１４０１ｃｍ−１（νＣＯＯ）
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ（ｐｐｍ）
７．５６（ｄ，１Ｈ）、７．２４〜７．０５（ｍ，３Ｈ）、４．５５（ｔ，１Ｈ）、１．７１〜１．５２（ｍ，２Ｈ）、１．２６〜１．０４（ｍ，４Ｈ）、０．８０（ｔ，３Ｈ）
元素分析Ｃ２４Ｈ３０Ｏ６Ｃａ（ＦＷ４５４．５７）
Ｃ（％）      Ｈ（％）      Ｃａ（％）
計算値  ６３．４１    ６．６５      ８．８２
測定値  ６３．２０    ６．６１      ９．０２
【実施例１３】
【００４５】
実施例１３  ｄｌ−２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸ベンジルアミン塩の調製
ｄｌ−３−ｎ−ブチル−イソベンゾフラン−１−（３Ｈ）−オン（１．４ｇ、７．１ｍｍｏｌ）をメタノール１５ｍｌに溶解し、ＮａＯＨ（０．２８ｇ、７．０ｍｍｏｌ）の水溶液２０ｍｌを添加した。反応溶液を還流下で２時間連続的に攪拌した。その後、ＴＬＣ解析（石油エーテル／アセトン＝１０：１）およびＩ２蒸気の呈色により、出発物質は消失していることが示された。反応溶液を氷塩浴中で約０℃まで冷却し、１Ｎ  ＨＣｌでｐＨ３．０〜４．０に酸性化し、溶液を冷エーテル（３×２０ｍｌ）で手早く抽出した。エーテル抽出物を合わせ、無水Ｎａ２ＳＯ４で低温にて乾燥させた後、濾過した。ベンジルアミン（０．９ｍｌ、８．２４ｍｍｏｌ）を反応溶液に添加し、反応溶液を氷塩浴中に一晩放置した。減圧下での濃縮後、粘着性の黄色残渣を得て、石油エーテル／エーテルの添加で白色固体（１．０７ｇ）を分離し、これを酢酸エチル中で再結晶化させ、白色結晶（０．６１ｇ、収率＝２６．２８％）を得た。
融点  ８６〜８８℃
ＩＲ（ＫＢｒ）  ３３９６ｃｍ−１（νＮＨ）、２９２７ｃｍ−１（ｂｒ，νＯＨ）、１６３７ｃｍ−１（νＣ＝Ｃ）、１５１５ｃｍ−１（νＣＯＯ）
１ＨＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ）δ（ｐｐｍ）
７．６５〜７．１３（ｍ，９Ｈ）、４．６７（ｔ，１Ｈ，ＣＨ）、３．９５（ｄ，２Ｈ，ＣＨ２）、１．５８〜１．６６（ｍ，２Ｈ，ＣＨ２）、１．１４〜１．３４（ｍ，４Ｈ，ＣＨ２ＣＨ２）、０．８２（ｔ，３Ｈ，ＣＨ３）
元素分析Ｃ１９Ｈ２５ＮＯ３（ＦＷ３１５．４１）
Ｃ（％）      Ｈ（％）      Ｎ（％）
計算値  ７２．３５    ７．９９      ４．４４
測定値  ７２．３２    ７．９８      ４．７６
【００４６】
【化４】
2010189418.tif 000004
【実施例１４】
【００４７】
実施例１４  医薬組成物の調製
【００４８】
【表１】
2010189418.tif 000005
【００４９】
活性成分、スターチ、マイクロクリスタリン・セルロースおよびカルボキシメチル・セルロース・ナトリウムを粉砕し、混合した。混合物を均一に湿らせ、粉末状にし、次いで、これを篩にかけ、乾燥した後、再度篩にかけた。ステアリン酸マグネシウムおよびタルクを上記混合物と混合し、その混合物を圧縮してタブレットとし、このタブレットをフィルムコーティング（これは、ヒドロキシプロピルメチル・セルロースなどであり得る）でコーティングした。各タブレットは、５０〜２００ｍｇの活性成分を含む。
【実施例１５】
【００５０】
実施例１５  医薬組成物の調製
【００５１】
【表２】
2010189418.tif 000006
【００５２】
活性成分および賦形剤を混合し、篩にかけた。このようにして得られた混合物を胃溶性硬質カプセル内に所定量で充填した。各カプセルは、５０〜２００ｍｇの活性成分を含む。
【実施例１６】
【００５３】
実施例１６  医薬組成物の調製
【００５４】
【表３】
2010189418.tif 000007
【００５５】
活性成分を適量の注射用の水または等張生理的食塩水に溶解した後、濾過した。適量のＮａＯＨでｐＨを１０．５（これは、９．０〜１０．５の間で変動し得る）に調整した。静脈注射用の溶液を滅菌条件下で瓶(ボトル)に充填した。
【実施例１７】
【００５６】
実施例１７  医薬組成物の調製
【００５７】
【表４】
2010189418.tif 000008
【００５８】
活性成分を適量の注射用の水に溶解し、ＮａＯＨでｐＨを９．０〜１０．０に調整した。溶液を濾過し、凍結乾燥してケークまたは粉末を得た。凍結乾燥注射剤は、注射用０．９％ＮａＣｌ溶液または５％ブドウ糖注射液に溶解した後、静脈内に注射または点滴することができる。
【００５９】
試験例１：  ラットにおける局所脳虚血後の梗塞面積に対する本発明の化合物の効果
（１）材料および方法
動物：雄ウィスター・ラット（２５０〜２８０ｇ）、中国医学専門学校(Chinese Academy of Medical Sciences)の動物センター(Animal Center)提供。
薬剤：
ｄｌ−ＰＨＰＢを二回蒸留水に溶解した。
塩化２，３，５−トリフェニルテトラゾリウム（ＴＴＣ）は、北京化学工場(Beijing Chemical Plant)から購入した。
方法：中大脳動脈閉塞（ＭＣＡＯ）：ラットをトリクロロアセトアルデヒド一水和物（３５０ｍｇ／ｋｇ、ｉｐ）で麻酔した。首中央の切開により左ＣＣＡを露出させ、周囲の神経を除いて注意深く解剖した。ＩＣＡおよびＥＣＡを摘出した。次いで、長さ４ｃｍ直径０．２６ｍｍのナイロン縫合糸を、近位ＥＣＡを通ってＩＣＡ内に、分岐部から２．０ｍｍの長さまで挿入した。傷口を縫合し、ラットを解放した。試験中、室温は２４〜２５℃に維持した。
群：
動物を２群に分けた。１）投与群：ｄｌ−ＰＨＰＢ（２００ｍｇ／ｋｇ）およびＨＣｌ（ｐＨ１．６）０．５ｍｌ（ヒトの胃の模擬的酸性状態）を、虚血の３０分前に経口投与（ｐ．ｏ）した。２）対照群：二回蒸留水およびＨＣｌ（ｐＨ１．６）０．５ｍｌを虚血の３０分前に経口投与（ｐ．ｏ）した。
梗塞形成の測定：
ＭＣＡＯの２４時間後、麻酔した動物を断頭した。各脳を速やかに取り出し、氷冷生理的食塩水（０〜４℃）内に維持した。１０分後、嗅球、小脳および低位脳幹を除去した後、冠状断面を５個の薄片に切り分けた。切断の際、第１切片は、大脳の前極と視交差の結合線の中心点のところ、第２切片は視交叉部位のところ、第３切片は、漏斗茎部位のところ、そして第４切片は、漏斗茎と後葉の尾極との間のところとした。脳切片をＴＴＣ溶液（４％）およびＫ２ＨＰＯ４（１Ｍ）の溶液５ｍｌ中に維持し、遮光し、３７℃で３０分間インキュベートした。インキュベーション中、切片を７〜８分毎に裏返した。染色後、正常な脳組織は紅色で示されたが、梗塞形成組織は、白色で示された。梗塞形成組織を正常組織から摘出し、重量を測定した。梗塞形成面積を、全脳組織に対する梗塞形成組織の重量割合から計算する。
（２）結果：
永久性ＭＣＡＯのラットにおける脳梗塞面積に対するｄｌ−ＰＨＰＢの効果
表１は梗塞形成面積を示し、ｄｌ−ＰＨＰＢ処置群の面積は１９．８３±３．５３％であり、対照群の面積は２６．９９±３．５１％である。梗塞形成は、対照と比較すると、処置群において有意に低減される（Ｐ＜０．０１）。
【００６０】
【表５】
2010189418.tif 000009
【００６１】
（３）結論：
２−（α−ヒドロキシペンチル）安息香酸カリウム（ｄｌ−ＰＨＰＢ）は、ＭＣＡＯにより誘起された脳組織損傷を有意に低減し、梗塞形成面積を有意に減少させた。
【００６２】
試験例２：  血小板凝集に対する本発明の化合物の効果
（１）材料および方法
動物：雄ウィスター・ラット（２６０〜２８０ｇ）、中国医学専門学校の動物センター提供。
薬剤：
２−（１−ヒドロキシペンチル）安息香酸カリウム（ｄｌ−ＰＨＰＢ）
ＡＤＰ、Shanghai Institute of Biochemistry, Acedemia Sinica から入手。
装置：血小板凝集測定器（ＰＡＴ−４Ａ型、目黒区、東京、日本）
群：動物を４群に分けた。
１）対照群：二回蒸留水（４００ｍｇ／ｋｇ）を、血液サンプル採取の３０分前に経口投与（ｐ．ｏ）した。
２）ｄｌ−ＰＨＰＢ（４００ｍｇ／ｋｇ）を、血液サンプル採取の３０分前に経口投与（ｐ．ｏ）した。
３）ｄｌ−ＰＨＰＢ（４００ｍｇ／ｋｇ）を、血液サンプル採取の６０分前に経口投与（ｐ．ｏ）した。
４）ｄｌ−ＰＨＰＢ（２００ｍｇ／ｋｇ）を、血液サンプル採取の３０分前に経口投与（ｐ．ｏ）した。
方法：
ｄｌ−ＰＨＰＢの経口投与後、ラットの頸動脈から、それぞれ３０分および６０分の時点で採血した。富血小板血漿（ＰＲＰ）および貧血小板血漿（ＰＰＰ）を一般的な手順により調製した。Bornにより記載された方法にしたがって、ＰＲＰ（２００μｌ）を血小板凝集測定器に入れ、３７℃で５分間プレインキュベートし、次いで、ＡＤＰを終末濃度５μｍｏｌ／Ｌで添加し、血小板凝集を誘発させた。最大凝集は、ＡＤＰの添加の５分後に測定された。
（２）結果
表２は、ＡＤＰにより誘発された血小板凝集に対する阻害効果を示す。
【００６３】
【表６】
2010189418.tif 000010
【００６４】
（３）結論：
２−（１−ヒドロキシペンチル）安息香酸カリウム（ｄｌ−ＰＨＰＢ）は、対照群と比較すると、血小板凝集を有意に阻害する。
【００６５】
試験例３：ラットの摘出した心臓における虚血再灌流により誘発された心臓不整脈に対するｄｌ−ＰＨＰＢの保護効果
（１）材料および方法
動物：雄ウィスター・ラット、２５０〜３００ｇ、中国医学専門学校の動物センター提供、無作為にグループ化。
薬剤：
ｄｌ−ＰＨＰＢ
ＮａＣｌ、北京化学試薬第２工場から入手(Beijing Chemical Reagent Factory No.2)
ＫＣｌおよびＭｇＳＯ４、北京シャンガン化学試薬工場(Beijing Shuanghuan Chemical Reagents Factory)
ＫＨ２ＰＯ４、北京ユリ精製化学薬品株式会社(Beijing Yuli Fine Chemicals Co., Ltd.)
ＮａＨＣＯ３、北京化学試薬社(Beijing Chemical Reagents Company)
グルコース、北京グゥオファ化学試薬工場(Beijing Guohua Chemical Reagents Factory)
ＣａＣｌ２、シグマ社
装置：
Langendoff灌流システム；
ＸＤ−７１００ＥＣＧ、上海医療用電子装置工場(Shanghai Medical Electronic Devices Factory)
方法：
（１）ラットを断頭後、速やかにラットの心臓を取り出し、４℃のＫ−Ｈ溶液中に入れ、大動脈を灌流システムに固定し、
（２）心臓をＫ−Ｈ溶液で、６〜８ｍｌ／分、３７±０．５℃で、約６０ｍｍＨ２Ｏの圧力下で灌流し、
（３）２つの銅電極を心尖部、右心房底部に接続し、心電図を記録し、
（４）冠動脈の左前下行枝３／０ラインに穿孔し、
（５）心臓を１０分間灌流し、正常心電図を記録し、
（６）冠動脈の左前下行枝を結紮し、１５分間心筋虚血状態にし、
（７）ラインを挟み、灌流を再開し、心電図の変化を３０分間（主に、ＶＦおよび痙攣性ＶＴに関して）記録し、
（８）ｄｌ−ＰＨＰＢをｐＨ１．５で所望の濃度まで溶解し、これをＫ−Ｈ溶液に添加して実験を行なう。
（２）結果：
表３は、摘出したラットの心臓における虚血再灌流により誘発された心臓不整脈に対するｄｌ−ＰＨＰＢの保護効果を示す。
【００６６】
【表７】
2010189418.tif 000011
【００６７】
（３）結論：
ｄｌ−ＰＨＰＢは、１０−４ｍｏｌ／Ｌの濃度で、ラットの摘出した心臓における虚血再灌流により誘導された不整脈およびＶＴの持続時間を有意に短縮することができ、痙攣性心室頻拍の発生率を減少させ、心臓の虚血性傷害に対して有意な保護を示す。
【００６８】
［産業上の利用可能性］
この新規な２−（α−ヒドロキシペンチル）ベンゾエートは、心臓虚血、脳虚血、心臓および脳の動脈閉塞（閉塞）などの疾患の予防および治療に使用される医薬組成物の調製のために使用することができる。