(57)【要約】      （修正有）【課題】メタボリックシンドローム（内臓脂肪の蓄積に起因して高血圧、高脂血症、糖尿病等の生活習慣病が発症した状態）の改善又は予防剤を提供する。【解決手段】重量平均分子量５万〜５０万Ｄａのβ−１，３−１，４−グルカンを有効成分として含有するメタボリックシンドローム改善又は予防剤。肝機能改善剤として使用することもできる。生体に対する安全性が高く、日常的、継続的に摂取可能であり、医薬品、飲食品等の成分として使用することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
重量平均分子量５万〜５０万Ｄａのβ−１，３−１，４−グルカンを有効成分として含有するメタボリックシンドローム改善又は予防剤。
【請求項２】
内臓脂肪蓄積抑制剤として使用される、請求項１に記載のメタボリックシンドローム改善又は予防剤。
【請求項３】
脂肪細胞肥大化抑制剤として使用される、請求項１又は２に記載のメタボリックシンドローム改善又は予防剤。
【請求項４】
肝機能改善剤として使用される、請求項１〜３のいずれか一項に記載のメタボリックシンドローム改善又は予防剤。
【請求項５】
肝臓トリグリセリド蓄積抑制剤として使用される、請求項１〜４のいずれか一項に記載のメタボリックシンドローム改善又は予防剤。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載のメタボリックシンドローム改善又は予防剤を含有する飲食品。
【請求項７】
請求項１〜５のいずれか一項に記載のメタボリックシンドローム改善又は予防剤を含有する飲食品添加物。
【請求項８】
請求項１〜５のいずれか一項に記載のメタボリックシンドローム改善又は予防剤を含有する飼料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、メタボリックシンドローム改善又は予防剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、メタボリックシンドローム（内臓脂肪の蓄積に起因して高血圧、高脂血症、糖尿病等の生活習慣病が発症した状態）は、動脈硬化性疾患（心筋梗塞、脳梗塞等）の発症リスクを高めるものとして広く認知されるようになっている。
【０００３】
メタボリックシンドローム改善又は予防剤としては、例えば、水溶性β−グルカンを最大含有量とする食物繊維集合体を有効成分として含有するものが知られている（特許文献１参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】国際公開第２００７／０７７９２９号パンフレット
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ところで、メタボリックシンドローム改善又は予防剤としては、生体に対する安全性が高く、日常的、継続的に摂取可能なものが望ましい。しかしながら、そのようなメタボリックシンドローム改善又は予防剤に関しては、未だ、消費者の多様な需要を満たすのに十分な選択肢が存在するとはいえないのが実情である。
【０００６】
そこで、本発明は、生体に対する安全性が高く、日常的、継続的に摂取可能な新規のメタボリックシンドローム改善又は予防剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、低分子量のβ−１，３−１，４−グルカンをマウスに投与すると、大麦抽出物に含まれる高分子量のβ−１，３−１，４−グルカンを投与した場合に比べて、内臓脂肪の蓄積を始めとするメタボリックシンドロームの症状が強く抑制されることを見出し、本発明を完成させた。
【０００８】
すなわち、本発明は、重量平均分子量５万〜５０万Ｄａのβ−１，３−１，４−グルカンを有効成分として含有するメタボリックシンドローム改善又は予防剤を提供する。
【０００９】
本発明のメタボリックシンドローム改善又は予防剤は、内臓脂肪の蓄積を抑制し、また、脂肪細胞の肥大化を抑制することを可能とする。そして、そのような作用を介して、内臓脂肪型肥満ないしメタボリックシンドロームを改善（治療、軽減）及び予防することを可能とする。ここで、内臓脂肪の「蓄積の抑制」とは、内臓脂肪の増大を抑制するか、内臓脂肪を低減させることをいうものとする。
【００１０】
本発明のメタボリックシンドローム改善又は予防剤はまた、肝機能を改善し、また、肝臓トリグリセリドの蓄積を抑制することを可能とする。そして、そのような作用を介して、肝障害（脂肪肝、肝炎、肝線維化、肝硬変、肝癌等）を抑制（治療、軽減、予防）することを可能とする。ここで、肝臓トリグリセリドの「蓄積の抑制」とは、肝臓トリグリセリドの増大を抑制するか、肝臓トリグリセリドを低減させることをいうものとする。また、肝機能が改善されたかどうかは、例えば、血漿ＡＳＴ（アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ）が低下したかどうかで判定することができる。
【００１１】
本発明のメタボリックシンドローム改善又は予防剤は、内臓脂肪蓄積抑制作用及び脂肪細胞肥大化抑制作用を有することから、内臓脂肪蓄積抑制剤又は脂肪細胞肥大化抑制剤として使用することもできる。
【００１２】
本発明のメタボリックシンドローム改善又は予防剤はまた、肝機能改善作用、肝臓トリグリセリド蓄積抑制作用及び肝障害抑制作用を有することから、肝機能改善剤、肝臓トリグリセリド蓄積抑制剤又は肝障害抑制剤として使用することもできる。
【００１３】
β−１，３−１，４−グルカンはイネ科植物（特に大麦、オート麦）に多く含有されるものであり、生体に対する安全性が確立されている。そのため、本発明のメタボリックシンドローム改善又は予防剤は、生体に対する安全性が高く、日常的、継続的に摂取可能であり、医薬品、飲食品、飲食品添加物、飼料、飼料添加物等の成分として使用するのに好適である。
【００１４】
また、重量平均分子量５万〜５０万Ｄａのβ−１，３−１，４−グルカンは、高分子量のものに比べて水溶性が高く、また、溶液の粘度が低い。この点でも、本発明のメタボリックシンドローム改善又は予防剤は、医薬品、飲食品、飲食品添加物、飼料、飼料添加物等の成分として使用するのに好適である。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によれば、生体に対する安全性が高く、日常的、継続的に摂取可能な新規のメタボリックシンドローム改善又は予防剤が提供される。また、そのようなメタボリックシンドローム改善又は予防剤を含有する医薬品、飲食品、飲食品添加物、飼料、飼料添加物等が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】β−グルカン粉末中のβ−１，３−１，４−グルカンの分子量分布曲線である。
【図２】β−１，３−１，４−グルカンを投与したマウスの腸間膜脂肪細胞サイズを示すグラフである。
【図３】β−１，３−１，４−グルカンを投与したマウスの副睾丸周辺脂肪細胞サイズを示すグラフである。
【図４】β−１，３−１，４−グルカンを投与したマウスの後腹壁脂肪細胞サイズを示すグラフである。
【図５】β−１，３−１，４−グルカンを投与したマウスの糞中総脂質量を示すグラフである。
【図６】β−１，３−１，４−グルカンを投与したマウスの腸間膜脂肪重量を示すグラフである。
【図７】β−１，３−１，４−グルカンを投与したマウスの副睾丸周辺脂肪重量を示すグラフである。
【図８】β−１，３−１，４−グルカンを投与したマウスの後腹壁脂肪重量を示すグラフである。
【図９】β−１，３−１，４−グルカンを投与したマウスの腹腔内総脂肪重量を示すグラフである。
【図１０】β−１，３−１，４−グルカンを投与したマウスの腸間膜脂肪細胞サイズを示すグラフである。
【図１１】β−１，３−１，４−グルカンを投与したマウスの血漿ＡＳＴを示すグラフである。
【図１２】β−１，３−１，４−グルカンを投与したマウスの肝臓トリグリセリド量を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、本発明の実施形態について詳細に説明する。
【００１８】
本発明のメタボリックシンドローム改善又は予防剤は、重量平均分子量５万〜５０万Ｄａのβ−１，３−１，４−グルカンを有効成分として含有する。
【００１９】
本発明において、「メタボリックシンドローム」とは、内臓脂肪が蓄積され、高血圧、高脂血症、糖尿病等の生活習慣病のいずれかが発症した状態をいうものとする。例えば、日本人の場合は、「ウエスト周囲径：男性≧８５ｃｍ、女性≧９０ｃｍ（男女とも、内臓脂肪面積≧１００ｃｍ２に相当）」という要件を満たし、かつ、下記（１）〜（３）のうちの少なくとも２つの要件を満たせば、メタボリックシンドロームと診断することができる（日本内科学会誌、９４（４）、７９４−８０９、２００５参照）。
（１）リポタンパク異常：  高トリグリセリド血症（トリグリセリド値≧１５０ｍｇ／ｄＬ）及び／又は低ＨＤＬコレステロール血症（ＨＤＬコレステロール値＜４０ｍｇ／ｄＬ）
（２）血圧高値：  収縮期血圧≧１３０ｍｍＨｇ及び／又は拡張期血圧≧８５ｍｍＨｇ
（３）高血糖：  空腹時血糖≧１１０ｍｇ／ｄＬ
【００２０】
本発明において、β−１，３−１，４−グルカンは、β−１，３−グルコシド結合及びβ−１，４−グルコシド結合を有するβ−グルカンであればよく、また、例えば、植物由来であっても、微生物（細菌、担子菌等）由来であってもよい。β−１，３−１，４−グルカンを得る天然物としては、β−１，３−１，４−グルカンの含有量が多い点で、例えば、イネ科植物（大麦、オート麦、ライ麦、はと麦、小麦等）が好適であり、特に大麦及びオート麦が好適である。また、例えば、イネ科植物から得る場合は、種子が好適である（全粒、胚乳、糠等のいずれでもよい）。
【００２１】
重量平均分子量５万〜５０万Ｄａのβ−１，３−１，４−グルカンは、例えば、大麦種子を粉砕し、粉砕物をα−アミラーゼで処理して高分子量β−１，３−１，４−グルカン（重量平均分子量：７０万〜１２０万Ｄａ）を得、更にこれをβ−グルカナーゼで処理することによって得ることができる。ここで、大麦種子粉砕物のα−アミラーゼ処理は、例えば、８０〜９５℃の水中で、４０〜６０分間、粉砕物とα−アミラーゼとを攪拌することによって行うことができる。α−アミラーゼ処理後、固液分離を行い、液層をアルコール（メタノール、エタノール等）で沈殿させて濃縮すれば、高分子量β−１，３−１，４−グルカンを得ることができる。高分子量β−１，３−１，４−グルカンのβ−グルカナーゼ処理は、例えば、５０〜６０℃の水中で、５〜３０分間、高分子量β−１，３−１，４−グルカンとβ−グルカナーゼとを攪拌することによって行うことができる。β−グルカナーゼ処理後、濃縮を行えば、重量平均分子量５万〜５０万Ｄａのβ−１，３−１，４−グルカンを得ることができる。なお、重量平均分子量５万〜５０万Ｄａのβ−１，３−１，４−グルカンは、市販のものがあれば、それを使用してもよい。
【００２２】
本発明において、β−１，３−１，４−グルカンの重量平均分子量は５万〜５０万Ｄａであればよいが、例えば、５万〜３０万Ｄａが好ましく、５万〜２０万Ｄａがより好ましく、５万〜１５万Ｄａが更に好ましい。
【００２３】
β−１，３−１，４−グルカンの重量平均分子量は、公知の方法（例えば、ゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ）、ゲル濾過クロマトグラフィー（ＧＦＣ））により測定することができる。また、重量平均分子量の決定に用いる検量線は、例えばプルランの標準品を用いて作成することができる。
【００２４】
本発明のメタボリックシンドローム改善又は予防剤は、固体（例えば、凍結乾燥させて得られる粉末）、液体（水溶性又は脂溶性の溶液又は懸濁液）、ペースト等のいずれの形状でもよく、また、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤、軟膏剤、硬膏剤等のいずれの剤形をとってもよい。また、本発明のメタボリックシンドローム改善又は予防剤は、重量平均分子量５万〜５０万Ｄａのβ−１，３−１，４−グルカンからなるものであってもよい。
【００２５】
上述の各種製剤は、重量平均分子量５万〜５０万Ｄａのβ−１，３−１，４−グルカンと、薬学的に許容される添加剤（賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、乳化剤、界面活性剤、基剤、溶解補助剤、懸濁化剤等）と、を混和することによって調製することができる。
【００２６】
例えば、賦形剤としては、ラクトース、スクロース、デンプン、デキストリン等が挙げられる。結合剤としては、ポリビニルアルコール、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。滑沢剤としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク等が挙げられる。崩壊剤としては、結晶セルロース、寒天、ゼラチン、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、デキストリン等が挙げられる。乳化剤又は界面活性剤としては、Ｔｗｅｅｎ６０、Ｔｗｅｅｎ８０、Ｓｐａｎ８０、モノステアリン酸グリセリン等が挙げられる。基剤としては、セトステアリルアルコール、ラノリン、ポリエチレングリコール、米糠油、魚油（ＤＨＡ、ＥＰＡ等）、オリーブ油等が挙げられる。溶解補助剤としては、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、Ｔｗｅｅｎ８０等が挙げられる。懸濁化剤としては、上述の界面活性剤の他、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム等が挙げられる。
【００２７】
本発明のメタボリックシンドローム改善又は予防剤は、医薬、飲食品（飲料、食品）、飲食品添加物、飼料、飼料添加物等の成分として使用することができる。例えば、飲料としては、水、清涼飲料水、果汁飲料、乳飲料、アルコール飲料、スポーツドリンク、栄養ドリンク等が挙げられる。食品としては、パン類、麺類、米類、豆腐、乳製品、醤油、味噌、菓子類等が挙げられる。本発明のメタボリックシンドローム改善又は予防剤はまた、特定保健用食品、特別用途食品、栄養補助食品、健康食品、機能性食品、病者用食品等の成分として使用することもできる。
【００２８】
飲料、食品、飼料等におけるメタボリックシンドローム改善又は予防剤（重量平均分子量５万〜５０万Ｄａのβ−１，３−１，４−グルカン）の含有割合は、例えば、０．０１〜２０質量％が好ましく、０．０１〜１０質量％がより好ましく、０．０１〜５質量％が更に好ましい。
【００２９】
飲料、食品、飼料等は、当該分野で通常使用される添加物を更に含有していてもよい。そのような添加物としては、例えば、苦味料、香料、リンゴファイバー、大豆ファイバー、肉エキス、黒酢エキス、ゼラチン、コーンスターチ、蜂蜜、動植物油脂；グルテン等のタンパク質；大豆、エンドウ等の豆類；グルコース、フルクトース等の単糖類；スクロース等の二糖類；デキストロース、デンプン等の多糖類；エリスリトール、キシリトール、ソルビトール、マンニトール等の糖アルコール類；ビタミンＣ等のビタミン類；亜鉛、銅、マグネシウム等のミネラル類；ＣｏＱ１０、α−リポ酸、カルニチン、カプサイシン等の機能性素材、が挙げられる。これらの添加物は、各々を単独で、又は複数種を組み合わせて使用することができる。
【００３０】
本発明のメタボリックシンドローム改善又は予防剤は、ヒトに摂取されても、非ヒト哺乳動物に摂取されてもよい。摂取量及び摂取方法は、個体の状態、年齢等に応じて適宜決定することができる。好適な摂取方法としては、例えば、経口摂取が挙げられる。
【実施例】
【００３１】
以下、実施例に基づいて本発明をより具体的に説明する。但し、本発明は、以下の実施例により限定されるものではない。
【００３２】
［高分子量β−グルカン粉末の調製及び分析］
ステンレス製抽出タンク（２００Ｌ）に張った湯（約４０〜５０℃）約６０Ｌに大麦（ＣＤＣ  Ｆｉｂａｒ）種子の粉砕物６ｋｇ及び耐熱性α−アミラーゼ（クライスターゼＹＣ１５、大和化成）３００ｇを投入し、９５℃で６０分間攪拌した。その後、混合液１０Ｌをポリタンクに分注し、２０℃、８０００ｒｐｍで２０分間遠心分離した。得られた半透明、高粘度の上清約４５Ｌをドラム缶リフト（２５０Ｌ）に投入し、メタノール約１４０Ｌを添加して、十分な攪拌後、１時間静置した。
【００３３】
静置後、混合液をステンレス篩（φ４００）上に流し込んで固形物を分取した。メタノール２０Ｌで洗浄し、防爆用エバポレーターでメタノールを除去した後、ステンレスパット上で固形物を凍結乾燥した。凍結乾燥した固形物をラボミルサー（ＩＦＭ−１５０、岩谷産業）で２分間断続粉砕して、高分子量β−グルカン粉末を得た。
【００３４】
高分子量β−グルカン粉末の０．２％水溶液の粘度は３．４９ｍＰａ・ｓであった。
【００３５】
高分子量β−グルカン粉末中のβ−１，３−１，４−グルカンの分子量分布は図１に示す通りであった。また、高分子量β−グルカン粉末中のβ−１，３−１，４−グルカンの重量平均分子量は約９０万Ｄａであった。分子量分布及び重量平均分子量の測定は、ゲル浸透クロマトグラフィー（ＧＰＣ）により行った。ＧＰＣ条件は下記の通りである。ポンプは２台（ポンプＡ、Ｂ）使用し、ポンプＡ、Ｂには、それぞれ溶離液Ａ、Ｂを流した。分析用サンプルとしては、高分子量β−グルカン粉末１０ｍｇを水１０ｍＬに溶解した溶液を０．４５μｍのフィルターで濾過して得た濾液を使用した。分子量分布及び重量平均分子量は、プルラン標準品（Ｓｈｏｄｅｘ）を用いて作成した検量線に基づいて決定した。
【００３６】
ＧＰＣ条件：
・オーブン温度：４０℃
・カラム：Ｓｈｏｄｅｘ  ＯＨＰａｋ  ＳＢ−８０５ＨＱ（分子量４００万排除）
＋  Ｓｈｏｄｅｘ  ＯＨＰａｋ  ＳＢ−８０４ＨＱ（分子量１００万排除）
＋  Ｓｈｏｄｅｘ  ＯＨＰａｋ  ＳＢ−８０３ＨＱ（分子量１０万排除）
・ミキシングコイル：内径０．５ｍｍ，空寸体積０．５ｍＬのステンレスチューブ
・溶離液Ａ：超純水
流量：１ｍＬ／分
・溶離液Ｂ：カルコフロー溶液
流量：０．５ｍＬ／分
・ＨＰＬＣ装置：島津製作所  ＬＣ−１０  Ｓｅｒｉｅｓ
システムコントローラー：ＳＣＬ−１０Ａｖｐ
ポンプ：ＬＣ−１０ＡＴｖｐ
オーブン：ＣＴＯ−１０ＡＣｖｐ
オートサンプラー：ＳＩＬ−１０ＡＤｖｐ
検出器：ＲＩＤ−１０Ａ，ＲＦ−１０ＡｘＬ
・解析ソフトウェア：Ｃｌａｓｓ−ＶＰ，Ｃｌａｓｓ−ＶＰ用ＧＰＣ解析ソフトウェア
・検出器：示差屈折率（ＲＩ）検出器（温度：４０℃）；蛍光（ＦＬ）検出器（励起波長：３６０ｎｍ；蛍光波長：４２０ｎｍ）
・注入量：１００μＬ
・分析時間：４０分
【００３７】
高分子量β−グルカン粉末の成分組成は表１に示す通りであった。表中、各成分量の単位は質量％である。なお、β−１，３−１，４−グルカン量は、カルコフローを用いたＦＬ分析により測定されたものである。
【００３８】
【表１】
2010241699.tif 000002
【００３９】
［低分子量β−グルカン粉末の調製及び分析］
ステンレス製プラントマイクロ抽出機（２０Ｌ）に水１０Ｌを入れ、８０℃まで昇温後、高分子量β−グルカン粉末３００ｇを投入した。攪拌後、更に水１０Ｌ及び高分子量β−グルカン粉末３００ｇを投入して、８０℃で１時間攪拌した。６２℃まで冷却してβ−グルカナーゼ（新日本化学工業）３００ｍｇを添加した後、再び８０℃まで昇温して１０分間保持した。その後、混合液をステンレスパット上で凍結乾燥し、得られた固形物をラボミルサー（ＩＦＭ−１５０、岩谷産業）で２分間断続粉砕して、低分子量β−グルカン粉末を得た。
【００４０】
低分子量β−グルカン粉末の０．２％水溶液の粘度は１．２０ｍＰａ・ｓであった。
【００４１】
低分子量β−グルカン粉末中のβ−１，３−１，４−グルカンの分子量分布は図１に示す通りであった。また、低分子量β−グルカン粉末中のβ−１，３−１，４−グルカンの重量平均分子量は約１０万Ｄａであった。分子量分布及び重量平均分子量の測定は、高分子量β−グルカン粉末の場合と同様にして行った。
【００４２】
［試験例１］
（マウスの群分け）
一般状態が良好なマウス（４週齢、雄、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス、日本チャールス・リバー）２４頭を、初体重（平均）が群間でバラつかないように各群８頭の３群（セルロース群、高分子量β−グルカン群、低分子量β−グルカン群）に分けた。
【００４３】
（試験飼料の調製）
各群のマウスに投与する試験飼料は、粉末飼料ＡＩＮ９３Ｇをベースにして、表２の組成が得られるように調製した。表中、各成分量の単位はｇ／ｋｇ飼料である。
【００４４】
【表２】
2010241699.tif 000003
【００４５】
（試験飼料の投与）
１週間馴化飼育した後、各群のマウスに所定の試験飼料及び水道水を８週間自由に摂取させた。馴化飼育期間及びその後の試験飼料投与期間を通じて、マウスは、温度２２±３℃、相対湿度５５±２０％、換気回数１２回／時、明暗時間１２時間（明期：８時〜２０時）の条件下で集団飼育した。馴化飼育期間中は、飼料としてＡＩＮ９３Ｇをそのまま使用した。
【００４６】
（脂肪細胞サイズ、糞中総脂質量の測定）
試験飼料投与期間終了後、各群のマウスについて、エーテル麻酔下、心採血、解剖を行い、腸間膜脂肪細胞サイズ、副睾丸周辺脂肪細胞サイズ、後腹壁脂肪細胞サイズ及び糞中総脂質量を測定した。
【００４７】
（結果）
結果（平均±標準偏差）を表３、４及び図２〜５に示す。図２〜４は、それぞれ、各群のマウスの腸間膜脂肪細胞サイズ、副睾丸周辺脂肪細胞サイズ及び後腹壁脂肪細胞サイズを示すグラフである。図５は、各群のマウスの糞中総脂質量を示すグラフである。
【００４８】
【表３】
2010241699.tif 000004
【００４９】
【表４】
2010241699.tif 000005
【００５０】
表３及び図２〜４から明らかなように、腸間膜脂肪細胞サイズ、副睾丸周辺脂肪細胞サイズ及び後腹壁脂肪細胞サイズはいずれも、低分子量β−グルカン群において、セルロース群及び高分子量β−グルカン群に比べて低い値を示し、特にセルロース群に比べて顕著に低い値を示した。また、表４及び図５から明らかなように、糞中総脂質量は、低分子量β−グルカン群において、セルロース群及び高分子量β−グルカン群に比べて高い値を示し、特にセルロース群に比べて顕著に高い値を示した。
【００５１】
［試験例２］
（マウスの群分け）
一般状態が良好なマウス（４週齢、雄、Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス、日本チャールス・リバー）３０頭を、初体重（平均）が群間でバラつかないように各群１０頭の３群（セルロース群、高分子量β−グルカン群、低分子量β−グルカン群）に分けた。
【００５２】
（試験飼料の調製）
各群のマウスに投与する試験飼料は、試験例１と同様にして調製した。
【００５３】
（試験飼料の投与）
１週間馴化飼育した後、各群のマウスに所定の試験飼料及び水道水を８週間自由に摂取させた。馴化飼育期間及びその後の試験飼料投与期間を通じて、マウスは、温度２２±３℃、相対湿度５５±２０％、換気回数１２回／時、明暗時間１２時間（明期：８時〜２０時）の条件下で個別飼育した。馴化飼育期間中は、飼料としてＡＩＮ９３Ｇをそのまま使用した。
【００５４】
（脂肪重量、脂肪細胞サイズ、血漿ＡＳＴ、肝臓トリグリセリド量の測定）
試験飼料投与期間終了後、各群のマウスについて、エーテル麻酔下、心採血、解剖を行い、腸間膜脂肪重量、副睾丸周辺脂肪重量、後腹壁脂肪重量、腸間膜脂肪細胞サイズ、血漿ＡＳＴ及び肝臓トリグリセリド量を測定した。なお、血漿ＡＳＴは、一般に肝機能の指標として用いられる。
【００５５】
肝臓トリグリセリド量は、Ｆｏｌｃｈ法により測定した。具体的には、まず、マウスの肝臓を摘出し、これを凍結乾燥した。凍結乾燥した肝臓０．２ｇをクロロホルム／メタノール（２：１（体積比））２０ｍＬで一晩抽出した後、遠心分離（３０００ｒｐｍ、１０分）を行い、上清を回収した。次いで、遠心分離で得られた沈殿物にクロロホルム／メタノール（２：１（体積比））１０ｍＬを添加、攪拌し、更に遠心分離（３０００ｒｐｍ、１０分）を行い、上清を回収した。得られた全ての上清を合わせて濾紙（Ｎｏ．２）で濾過し、濾液をクロロホルム／メタノール（２：１（体積比））で５０ｍＬに定容して、肝臓脂質抽出液を得た。抽出液５ｍＬを分取し、Ｆｏｌｃｈ水洗用ブランク［クロロホルム／メタノール／水（３：２８：４７（体積比））］で水洗後、溶媒を窒素気流下、６０℃で蒸発、乾固させた。これをイソプロパノール０．５ｍＬに溶解して、検液を得た。検液中のトリグリセリド量を、トリグリセライドＥ−テストワコー（和光純薬工業）を用いて測定した。
【００５６】
（結果）
結果（平均±標準偏差）を表５〜１１及び図６〜１２に示す。図６〜９は、それぞれ、各群のマウスの腸間膜脂肪重量、副睾丸周辺脂肪重量、後腹壁脂肪重量及び腹腔内総脂肪重量を示すグラフである。図６〜９において、（ａ）のグラフは個体当たりの脂肪重量を示し、（ｂ）のグラフは体重１００ｇ当たりの脂肪重量を示す。図１０は、各群のマウスの腸間膜脂肪細胞サイズを示すグラフである。図１１は、各群のマウスの血漿ＡＳＴを示すグラフである。図１２は、各群のマウスの肝臓トリグリセリド量を示すグラフである。なお、腹腔内総脂肪重量は、腸間膜脂肪重量、副睾丸周辺脂肪重量及び後腹壁脂肪重量の合計に相当する。
【００５７】
【表５】
2010241699.tif 000006
【００５８】
【表６】
2010241699.tif 000007
【００５９】
【表７】
2010241699.tif 000008
【００６０】
【表８】
2010241699.tif 000009
【００６１】
【表９】
2010241699.tif 000010
【００６２】
【表１０】
2010241699.tif 000011
【００６３】
【表１１】
2010241699.tif 000012
【００６４】
表５〜１１及び図６〜１２から明らかなように、腸間膜脂肪重量、副睾丸周辺脂肪重量、後腹壁脂肪重量、腹腔内総脂肪重量、腸間膜脂肪細胞サイズ、血漿ＡＳＴ及び肝臓トリグリセリド量はいずれも、低分子量β−グルカン群において、セルロース群及び高分子量β−グルカン群に比べて低い値を示し、特にセルロース群に比べて顕著に低い値を示した。
【００６５】
以上の実施例により、重量平均分子量５万〜５０万Ｄａのβ−１，３−１，４−グルカンは、内臓脂肪蓄積抑制作用、脂肪細胞肥大化抑制作用、肝機能改善作用及び肝臓トリグリセリド蓄積抑制作用を有し、メタボリックシンドローム改善又は予防剤の成分として有用であることが確認された。
【図１】
2010241699.tif 000013
【図２】
2010241699.tif 000014
【図３】
2010241699.tif 000015
【図４】
2010241699.tif 000016
【図５】
2010241699.tif 000017
【図６】
2010241699.tif 000018
【図７】
2010241699.tif 000019
【図８】
2010241699.tif 000020
【図９】
2010241699.tif 000021
【図１０】
2010241699.tif 000022
【図１１】
2010241699.tif 000023
【図１２】
2010241699.tif 000024