(57)【要約】【課題】本発明の目的は、以下を包含する：（１）一連の新規レフルノミド類似体を合成する工程；（２）インビボでの研究を行い、この類似体の効力を評価すること；および（３）慢性関節リウマチを処置するために使用され得るレフルノミド類似体を選択する工程。【解決手段】新規レフルノミド類似体を合成し、インビボで評価した。このインビボでの研究に基づくと、これらの類似体は、慢性関節リウマチを処置するのに驚くほど効果がある。本発明は、慢性関節リウマチを処置するための一連の新規レフルノミド類似体の合成を包含する。発明者らの知識の限りでは、これらの類似体は、他の当業者により開示されていない。インビボでの動物実験から、これらのレフルノミド類似体は、レフルノミドよりも並はずれて効果があることが示される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
本願明細書または図面に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（関連出願）
この国際出願は、２００２年７月１５日に出願された米国非仮特許出願続き番号１０／１９５，８２４に対する優先権を主張する。
【背景技術】
【０００２】
（技術背景）
慢性関節リウマチ（本明細書中以後、ＲＡとして示す）は、関節および関節近くの領域に炎症を起こす慢性疾患である。関節に加え、他の組織もまたＲＡによって冒され得る。ＲＡを有する患者は、通常過剰活性なＴ細胞を有する。それゆえ、ＲＡは、自己免疫疾患に分類され得る。
【０００３】
レフルノミド、Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−４−カルボキサミジル−５−メチルイソキサゾールは、近年市場に導入された、ＲＡを処置するための薬物である。レフルノミドおよびその主な代謝物、マロノニトリルアミド（ＭＮＡ）は、Ｈｏｅｃｈｓｔ  Ｍａｒｉｏｎ  Ｒｏｕｓｓｅｌによって、初めて作られた。
【０００４】
【化９】
2010168402.tif 000002
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、後述するとおりの特徴を達成することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明によれば、詳細に後述するとおりの構成を採用することにより、上記課題が解決される。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、後述するとおりの効果が達成される。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】図１は、示された薬物による処置後、カラゲナン誘発性の左足浮腫の浮腫パーセンテージのプロットを示す。
【図２】図２は、示された薬物による処置後、カラゲナン誘発性の左足浮腫の浮腫パーセンテージのプロットを示す。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
（詳細な説明）
本発明の目的は、以下を包含する：（１）一連の新規レフルノミド類似体を合成する工程；（２）インビボでの研究を行い、この類似体の効力を評価すること；および（３）慢性関節リウマチを処置するために使用され得るレフルノミド類似体を選択する工程。
【００１０】
本発明は、慢性関節リウマチを処置するための一連の新規レフルノミド類似体の合成を包含する。発明者らの知識の限りでは、これらの類似体は、他の当業者により開示されていない。インビボでの動物実験から、これらのレフルノミド類似体は、レフルノミドよりも並はずれて効果があることが示される。
【００１１】
代表的な合成およびインビボでの動物実験は、以下のように記載される：
（Ａ．合成方法）
【００１２】
【化１０】
2010168402.tif 000003
ここで、ＤＣＣは、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミドであり、ＴＥＡは、トリエチルアミンである。
【００１３】
【表１−１】
2010168402.tif 000004
【００１４】
【表１−２】
2010168402.tif 000005
方法１：
５−メチルイソキサゾール−３−カルボン酸（１ｇ）を量り；反応器中で、クロロホルム（１０ｍｌ）にこれを溶解する。この反応器を氷浴に置き、チオニルクロライド（１．２ｍｌ）を加える。徐々に、トリエチルアミン（１ｍｌ）を加える。反応が完結した後、減圧下で容量を減少させる。ジクロロメタン（１０ｍｌ）を加え、次いで所望の置換アニリン（上記の表を参照のこと）を加え、氷浴で冷やしながら完全に混合する。トリエチルアミン（１ｍｌ）を加え、約３０分間これを反応させ、薄層クロマトグラフィーによって、反応をモニターする。反応が完了するまで待ち、減圧下で濃縮する。分液漏斗を使用して、有機層および水層を分離する。この有機層を維持し、無水硫酸マグネシウムを加え、約３０分間放置した；マグネシウム塩を濾去、濾過された有機液体を保持し；この有機液体を乾燥して、粗生成物を得る；完全なアルコール中で再結晶をして、生成物５ａおよび５ｂを得る。
【００１５】
【表２】
2010168402.tif 000006
方法２：
５−メチルイソキサゾール−３−カルボン酸（２ｇ）、Ｎ−ヒドロキシスシンイミド（２ｇ）およびカップリング剤Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（３．６ｇ）を量り；所望の置換アニリンを加え、完全なアルコール中で結晶化して、５ａ〜５ｋを作る。
【００１６】
【表３】
2010168402.tif 000007
（Ｂ．合成の結果）
合成の結果およびレフルノミド類似体の特性を以下に示す：
（［化合物５ａ］Ｎ−（フェニル）−３−カルボキサミジル−５−メチルイソキサゾール）
【００１７】
【化１１】
2010168402.tif 000008
（［化合物５ｂ］Ｎ−（２−クロロフェニル）−３−カルボキサミジル−５−メチルイソキサゾール）
【００１８】
【化１２】
2010168402.tif 000009
（［化合物５ｃ］Ｎ−（３−クロロフェニル）−３−カルボキサミジル−５−メチルイソキサゾール）
【００１９】
【化１３】
2010168402.tif 000010
（［化合物５ｄ］Ｎ−（４−クロロフェニル）−３−カルボキサミジル−５−メチルイソキサゾール）
【００２０】
【化１４】
2010168402.tif 000011
（［化合物５ｅ］Ｎ−（３−トリフルオロメチル）−３−カルボキサミジル−５−メチルイソキサゾール）
【００２１】
【化１５】
2010168402.tif 000012
（［化合物５ｆ］Ｎ−（４−トリフルオロメチルフェニル）−３−カルボキサミジル−５−メチルイソキサゾール）
【００２２】
【化１６】
2010168402.tif 000013
（［化合物５ｇ］Ｎ−（２，４−ジクロロフェニル）−３−カルボキサミジル−５−メチルイソキサゾール）
【００２３】
【化１７】
2010168402.tif 000014
（［化合物５ｈ］Ｎ−（４−メトキシフェニル）−３−カルボキサミジル−５−メチルイソキサゾール）
【００２４】
【化１８−１】
2010168402.tif 000015
【００２５】
【化１８−２】
2010168402.tif 000016
（［化合物５ｉ］Ｎ−（３，４，５−トリメトキシフェニル）−３−カルボキサミジル−５−メチルイソキサゾール）
【００２６】
【化１９−１】
2010168402.tif 000017
【００２７】
【化１９−２】
2010168402.tif 000018
（［化合物５ｊ］４−［（５−メチルイソキサゾール−３−カルボニル）−アミノ］安息香酸
【００２８】
【化２０−１】
2010168402.tif 000019
【００２９】
【化２０−２】
2010168402.tif 000020
（［化合物５ｋ］Ｎ−（４−フルオロフェニル）−３−カルボキサミジル−５−メチルイソキサゾール）
【００３０】
【化２１】
2010168402.tif 000021
（Ｃ．インビボでの実験）
（Ｃ−１．使用された動物）
１００〜１５０ｇの体重を有する生後４〜６週間のウィスターシロネズミが、本研究に使用された。
【００３１】
（Ｃ−２．試薬の調製）
１．１％カラゲナン溶液
λ−カラゲナン（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）粉末（３０ｍｇ）を量り；生理食塩水（３ｍｌ）を加えて、１％カラゲナン溶液を作る。
【００３２】
２．ＣＭＣ（カルボキシメチルセルロース）溶液
ＣＭＣ粉末（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ）（５ｇ）を量り；ＤＩ水（５００ｍｌ）を加えて、１％ＣＭＣ溶液を作る。
【００３３】
３．デキサメタゾン懸濁液
デキサメトン（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．ＵＳＡ）（７．５ｍｇ）を量り、１％ＣＭＣ溶液（５ｍＬ）を加え、振盪して、１．５ｍｇ／ｍＬデキサメタゾン懸濁液を作る。
【００３４】
４．イブプロフェン懸濁液
イブプロフェン（Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．ＵＳＡ）（１０ｍｇ）を量り、１％ＣＭＣ溶液（１０ｍＬ）を加え、振盪して、１ｍｇ／ｍＬイブプロフェン懸濁液を作る。
【００３５】
５．試験化合物の懸濁液
それぞれの試験化合物（１０ｍｇ）を個々に量り；１％ＣＭＣ溶液（１０ｍＬ）を加え、振とうして、懸濁液を作る。
【００３６】
６．炎症を測定するために使用された溶液
ＮａＣｌ（０．４〜０．５ｇ）を量り；界面活性剤、潤滑剤ＩＭＢＩＢＮＴＥＢＢＣ９７（Ｃｈｉｍｉｆｏｔｏ  ｏｒｎａｎｏ  Ｓ．Ｐ．Ａ．Ｉｔａｌｙ）（５ｍＬ）を加え；脱イオン化水を加えて１Ｌ作った。
（Ｃ−３．効力および結果）
本発明において、ネズミの左後足の足蹠における炎症を刺激するためにカラゲナンを使用した。それぞれのネズミの左足における炎症を、処置したネズミおよび処置しないネズミについて測定した。処置には、レフルノミド類似体、デキサメタゾン、イブプロフェンおよびマロノニトリルアミド（ＭＮＡ）が挙げられる。予め決定された時点で、炎症の測定を行った。
【００３７】
ネズミの体重を測定し、３つのグループに分けた：（１）コントロールグループ、（２）試験グループ、および（３）比較グループである。それぞれの化合物について、５匹のネズミを使用し、それらの尾にマークした。カラゲナンを注入する前に、それぞれの左足蹠の容積（Ｖ０）を測定した。それぞれのネズミは、以下のように背中に注入された。
【００３８】
（１）コントロールグループ：コントロールグループについて１％ＣＭＣ、
（２）試験グループ：１％ＣＭＣ中に、試験化合物（各１０ｍｇ／ｋｇ）、および
（３）比較グループ：デキサメタゾン（１％ＣＭＣ中１．５ｍｇ／ｋｇ）、イブプロフェン（１％ＣＭＣ中１０ｍｇ／ｋｇ）、１％ＣＭＣ中のＭＮＡ。
【００３９】
１時間後、炎症を開始させるために、１％カラゲナン（０．０５ｍＬ）を各ネズミの後足の足蹠に注入した。左後足の足蹠の容積（Ｖｔ）を、０．５時間、１時間、２時間、３時間、４時間および５時間で測定した。
【００４０】
浮腫比率（Ｅ％）および阻害比率（Ｉ％）を以下のように算出し、インビボでの研究の結果を表１および表２にまとめた。
【００４１】
Ｅ％＝（Ｖｔ−Ｖ０）／Ｖ０×１００％
Ｉ％＝（Ｅｃ−Ｅｔ）／Ｅｃ×１００％
Ｖ０＝カラゲナン注入前の左後足の足蹠の容積（ｍＬ）
Ｖｔ＝カラゲナン注入後の「ｔ」時間での左後足の足蹠の容積（ｍＬ）
Ｅｃ＝コントロールグループの浮腫比率
Ｅｔ＝試験グループおよび比較グループの浮腫比率
（表１  デキサメタゾン、イブプロフェン、レフルノミドおよびマロノニトリルアミドの効力）
【００４２】
【表４】
2010168402.tif 000022
ａ各値は、５匹の動物の平均±標準偏差．を表わす。
【００４３】
ｂ丸カッコ内の数字は、阻害比率のパーセンテージ（Ｉ％）を示す。
【００４４】
【化２２】
2010168402.tif 000023
（表２  Ｎ−（置換フェニル）−３−カルボキサミジル−５−メチルイソキサゾールの効力）
【００４５】
【表５−１】
2010168402.tif 000024
【００４６】
【表５−２】
2010168402.tif 000025
ａ各値は、５匹の動物の平均±標準偏差を表わす。
【００４７】
ｂ丸カッコ内の数字は、阻害比率のパーセンテージ（Ｉ％）を示す。
【００４８】
本発明において、以下の一般式（Ｉ）を有する化合物を開示し、
【００４９】
【化２３】
2010168402.tif 000026
ここで、Ｒは、
【００５０】
【化２４】
2010168402.tif 000027
である。
【００５１】
式（Ｉ）の化合物の生理学的に許容可能な塩もまた、開示される。
【００５２】
本発明はまた、薬学的に適切な賦形剤、添加剤および／または活性化合物ならびに補助剤に加えて、少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物および／または式（Ｉ）の化合物の生理学的に許容可能な塩の有効量を含有する、薬学的組成物に関する。
【００５３】
この薬学的組成物の適した形態の例は、錠剤、被包錠剤、注射用溶液、懸濁剤、乳剤、散剤、顆粒剤、（微小）カプセル、坐剤およびシロップである。
【００５４】
本発明において、上記の薬学的組成物の有効量を、患者に投与することによって慢性関節リウマチを処置することを包含する方法もまた、開示される。
【００５５】
薬学的組成物およびデキサメタゾン、イブプロフェン、レフルノミド、マロノニトリルアミド、ジクロフェナクナトリウム、ジクロフェナクカリウム、ナプロキセンまたはナプロキセンナトリウムを含有する、リウマチを処置するためにすでに使用される市販の薬物の１つを患者に投与することを包含する、慢性関節リウマチを処置する方法もまた、開示される。
【００５６】
結論として、本発明は、慢性関節リウマチを処置するために、一連の新規レフルノミド類似体を提供する。動物実験の結果は、これらの類似体が、慢性関節リウマチを処置するのに、驚くほど効果があることを示す。本発明において、この類似体を含有する薬学的組成物の治療的有効量を患者に投与することを包含する、慢性関節リウマチを処置する方法もまた、開示される。
【００５７】
上記は、多くの特異性を含むが、これらは、本発明の範囲を制限するとして解釈されるべきではなく、単に、本発明の現在好ましい実施形態のいくつかの説明を、提供するとして解釈されるべきである。従って本発明の範囲は、与えられた例によってではなく、添付の特許請求項の範囲およびそれらの法的に等価なものによって、決定されるべきである。
【産業上の利用可能性】
【００５８】
本発明の好ましい実施形態によれば、以下の化合物などが提供される。
（項１）
式（Ｉ）の化合物
【化１】
2010168402.tif 000028
または、該式（Ｉ）の化合物の生理学的に許容可能な塩であり、Ｒが、
【化２】
2010168402.tif 000029
である、化合物。
（項２）
式（Ｉ）
【化３】
2010168402.tif 000030
の化合物または、該式（Ｉ）の化合物の生理学に許容可能な塩を含む、薬学的組成物であり、Ｒが、
【化４−１】
2010168402.tif 000031
【化４−２】
2010168402.tif 000032
である、薬学的組成物。
（項３）
式（Ｉ）
【化５】
2010168402.tif 000033
の化合物または、該式（Ｉ）の化合物の生理学的に許容可能な塩を含有する、薬学的組成物の有効量を患者に投与することを包含する、慢性関節リウマチを処置する方法であって、Ｒが、
【化６】
2010168402.tif 000034
である、方法。
（項４）
式（Ｉ）
【化７】
2010168402.tif 000035
の化合物または、該式（Ｉ）の化合物の生理学的に許容可能な塩を含有する組成物の治療的有効量ならびにデキサメタゾン、イブプロフェン、レフルノミド、マロノニトリルアミド、ジクロフェナクナトリウム、ジクロフェナクカリウム、ナプロキセン、ナプロキセンナトリウムおよびそれらの組み合わせから選択される薬物を、患者に投与することを包含する、慢性関節リウマチを処置する方法であって、Ｒが、
【化８】
2010168402.tif 000036
である、方法。
（項５）
上記項１に記載の化合物であって、Ｒが、Ｈ、２−Ｃｌ、３−Ｃｌ、４−Ｃｌ、３−ＣＦ３、４−ＣＦ３、２，４−（Ｃｌ）２、４−ＯＣＨ３、３，４，５−（ＯＣＨ３）３、４−ＣＯＯＨまたは４−Ｆである、化合物。
（項６）
上記項１に記載の化合物であって、Ｒが、Ｈ、２−Ｃｌ、３−Ｃｌ、４−Ｃｌ、４−ＣＦ３、２，４−（Ｃｌ）２、４−ＣＯＯＨまたは４−Ｆである、化合物。
（項７）
上記項１に記載の化合物であって、Ｒが、２−Ｃｌ、４−Ｃｌまたは２，４−（Ｃｌ）２である、化合物。
（項８）
上記項１に記載の化合物であって、Ｒが、２−Ｃｌである、化合物。
（項９）
上記項１に記載の化合物であって、Ｒが、４−Ｃｌである、化合物。
（項１０）
上記項１に記載の化合物であって、Ｒが、２，４−（Ｃｌ）２である、化合物。
（項１１）
上記項２に記載の薬学的組成物であって、Ｒが、Ｈ、２−Ｃｌ、３−Ｃｌ、４−Ｃｌ、３−ＣＦ３、４−ＣＦ３、２，４−（Ｃｌ）２、４−ＯＣＨ３、３，４，５−（ＯＣＨ３）３、４−ＣＯＯＨまたは４−Ｆである、薬学的組成物。
（項１２）
上記項２に記載の薬学的組成物であって、Ｒが、Ｈ、２−Ｃｌ、３−Ｃｌ、４−Ｃｌ、４−ＣＦ３、２，４−（Ｃｌ）２、４−ＣＯＯＨまたは４−Ｆである、薬学的組成物。
（項１３）
上記項２に記載の薬学的組成物であって、Ｒが、２−Ｃｌ、４−Ｃｌまたは２，４−（Ｃｌ）２である、薬学的組成物。
（項１４）
上記項２に記載の薬学的組成物であって、Ｒが、２−Ｃｌである、薬学的組成物。
（項１５）
上記項２に記載の薬学的組成物であって、Ｒが、４−Ｃｌである、薬学的組成物。
（項１６）
上記項２に記載の薬学的組成物であって、Ｒが、２，４−（Ｃｌ）２である、薬学的組成物。
（項１７）
上記項３に記載の方法であって、Ｒが、Ｈ、２−Ｃｌ、３−Ｃｌ、４−Ｃｌ、３−ＣＦ３、４−ＣＦ３、２，４−（Ｃｌ）２、４−ＯＣＨ３、３，４，５−（ＯＣＨ３）３、４−ＣＯＯＨまたは４−Ｆである、方法。
（項１８）
上記項３に記載の方法であって、Ｒが、Ｈ、２−Ｃｌ、３−Ｃｌ、４−Ｃｌ、４−ＣＦ３、２，４−（Ｃｌ）２、４−ＣＯＯＨまたは４−Ｆである、方法。
（項１９）
上記項３に記載の方法であって、Ｒが、２−Ｃｌ、４−Ｃｌまたは２，４−（Ｃｌ）２である、方法。
（項２０）
上記項３に記載の方法であって、Ｒが、２−Ｃｌである、方法。
（項２１）
上記項３に記載の方法であって、Ｒが、４−Ｃｌである、方法。
（項２２）
上記項３に記載の方法であって、Ｒが、２，４−（Ｃｌ）２である、方法。
（項２３）
上記項４に記載の方法であって、Ｒが、Ｈ、２−Ｃｌ、３−Ｃｌ、４−Ｃｌ、３−ＣＦ３、４−ＣＦ３、２，４−（Ｃｌ）２、４−ＯＣＨ３、３，４，５−（ＯＣＨ３）３、４−ＣＯＯＨまたは４−Ｆである、方法。
（項２４）
上記項４に記載の方法であって、Ｒが、Ｈ、２−Ｃｌ、３−Ｃｌ、４−Ｃｌ、４−ＣＦ３、２，４−（Ｃｌ）２、４−ＣＯＯＨまたは４−Ｆである、方法。
（項２５）
上記項４に記載の方法であって、Ｒが、２−Ｃｌ、４−Ｃｌまたは２，４−（Ｃｌ）２である、方法。
（項２６）
上記項４に記載の方法であって、Ｒが、２−Ｃｌである、方法。
（項２７）
上記項４に記載の方法であって、Ｒが、４−Ｃｌである、方法。
（項２８）
上記項４に記載の方法であって、Ｒが、２，４−（Ｃｌ）２である、方法。
【図１】
2010168402.tif 000037
【図２】
2010168402.tif 000038