(57)【要約】【課題】肌荒れ改善効果を有し、敏感肌、肌のかさつき、乾燥による炎症を防止し得る皮膚外用剤を提供する。【解決の手段】タラノキ及びその類縁植物の粉末もしくは抽出物又は抽出画分及び／又はサポニン画分より選ばれる１種又は２種以上を有効成分として含有することを特徴とする肌荒れ改善皮膚外用剤。本発明の肌荒れ改善皮膚外用剤は、角化細胞内でのアポトーシスを抑制し、炎症反応を伴う敏感肌、肌のかさつき、乾燥を改善することが出来る。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ウコギ科（Ａｒａｌｉａｃｅａｅ）タラノキ（Ａｒａｌｉａ  ｅｌａｔａ）の粉末もしくは抽出物又は抽出成分を含有することを特徴とする、肌荒れ改善皮膚外用剤。
【請求項２】
ウコギ科（Ａｒａｌｉａｃｅａｅ）タラノキ（Ａｒａｌｉａ  ｅｌａｔａ）及びその類縁植物〔リュウキュウタラノキ（Ａｒａｌｉａ  ｒｙｕｋｙｕｅｎｓｉｓ）、ミヤマウド（Ａｒａｌｉａ  ｇｌａｂｒａ）、ウラジロタラノキ（Ａｒａｌｉａ  ｂｉｐｉｎｎａｔａ）、フクリンタラノキ（Ａｒａｌｉａ  ｅｌａｔａ  ｆ．ｖａｒｉｅｇａｔａ）、メダラ（Ａｒａｌｉａ  ｅｌａｔａ  ｆ．ｓｕｂｉｎｅｒｍｉｓ）、キモンタラノキ（Ａｒａｌｉａ  ｅｌａｔａ  ｆ．ａｕｒｅｏｖａｒｉｅｇａｔａ）、オオバウド（Ａｒａｌｉａ  ｃｏｒｄａｔａ  ｆ．ｂｉｔｅｒｎａｔａ）、カラフトウド（Ａｒａｌｉａ  ｃｏｒｄａｔａ  ｖａｒ．ｓａｃｈａｌｉｎｅｎｓｉｓ）、シチトウタラノキ（Ａｒａｌｉａ  ｒｙｕｋｙｕｅｎｓｉｓ  ｖａｒ．ｉｎｅｒｍｉｓ）〕の粉末もしくは抽出物又は抽出成分を含有することを特徴とする、肌荒れ改善皮膚外用剤。
【請求項３】
ウコギ科（Ａｒａｌｉａｃｅａｅ）タラノキ（Ａｒａｌｉａ  ｅｌａｔａ）の粉末もしくは抽出物から調製したサポニン画分からなる組成物を有効成分とする肌荒れ改善皮膚外用剤。
【請求項４】
ウコギ科（Ａｒａｌｉａｃｅａｅ）タラノキ（Ａｒａｌｉａ  ｅｌａｔａ）もしくは請求項２記載の類縁植物の粉末もしくは抽出物から調製したサポニン画分からなる組成物を有効成分とする肌荒れ改善皮膚外用剤。
【請求項５】
タラノキの粉末、抽出物又は抽出画分、請求項２記載の類縁植物の粉末、抽出物又は抽出画分と、サポニン画分の１種または２種以上を含有することを特徴とする、肌荒れ改善外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本発明は、皮膚を構成する細胞のアポトーシス亢進に起因する肌荒れ、炎症、敏感肌、湿疹の予防および／または改善する皮膚外用剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】  プログラムされた細胞死とも言われるアポトーシスは元来形態学的に定義された概念であり、細胞壊死（ネクローシス）と対照的な細胞死の様式である。アポトーシスの誘導メカニズムとしては、細胞障害性Ｔ細胞やＮＫ細胞によるＦａｓ分子とＦａｓリガンド（ＦａｓＬ）の結合を介した経路やパフォーリンおよびグランザイムを介した経路など種々の機構が明らかとなりつつある。［Ｎａｇａｔａ  Ｓ．，Ｃｅｌｌ，８８，３５５−３６５（１９９７）  ；Ａｓｈｋｅｎａｚｉ  Ａ．ａｎｄ  Ｄｉｘｉｔ  Ｖ．Ｍ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８１，１３０５−１３０８（１９９８）  ；Ｎａｇａｔａ  Ｓ．，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，３３，２９−５５（１９９９）  ；Ｐｉｎｋｏｓｋｉ  Ｍ．Ｊ．ａｎｄ  Ｇｒｅｅｎ  Ｄ．Ｒ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｈｅｍａｔｏｌ．，９，４３−４９（２００２）］。【０００３】  アポトーシスに陥った細胞は収縮し、核が凝集して断片化する。断片化した核は細胞膜に包まれたアポトーシス小体を形成し、これは食細胞により処理される。この過程は一連の遺伝子により制御され、エネルギーを消費し能動的に遂行される。ネクローシスと異なり原則的に炎症を惹起しないという性質より、生体内の細胞環境のホメオスターシスを維持する重要なメカニズムであると考えられてきた。しかしながら最近、アポトーシスを司るカスパーゼの一部が炎症をはじめとする病変の発症・進展に関与することが示されている［Ｄａｅｍｅｎ  Ｍ．Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１０４，５４１−５４９（１９９９）  ；Ｍｉｗａ  Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ａｔ．Ｍｏｄ．，４，１２８７，７６１−７６７（１９９８）］。【０００４】  従って、アポトーシスの抑制によりある種の炎症性反応に対して改善効果が期待される。事実、ＦａｓＬ中和抗体が実験的炎症性肺線維症や炎症性腸疾患モデル動物に対して優れた治療効果を有することが報告されており［Ｖｉａ  Ｃ．Ｓ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５７，５３８７−５３９３（１９９６）  ；Ｍｉｗａ  Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１１，９２５−９３１（１９９９）  ；Ｋｕｗａｎｏ  Ｋ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１０４，１３−１９（１９９９）］、アポトーシス抑制剤は各種炎症性疾患での症状、病態、組織障害の予防もしくは治療において優れた効果が期待されている。【０００５】  皮膚においては、急性および慢性炎症時に皮膚に浸潤したリンパ球の産生するＩＦＮ−γの作用により角質細胞上のＦａｓ分子の発現が著明に誘導され、リンパ球の発現するＦａｓＬとの反応によってアポトーシスを引き起こすことが明らかとされている［Ｔｒａｕｔｍａｎｎ  Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．，１０６，２５−３５（２０００）  ；Ｔａｋａｈａｓｈｉ  Ｈ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，１０５，８１０−８１５（１９９５）  ；Ｍｏｅｒｓ  Ｃ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，８０，５６４−５７２（１９９９）］。また、角質細胞は互いにデスモソームと呼ばれる結合装置で強く結合されており、角質細胞のアポトーシスによってスポンジ様の水泡形成を引き起こし、海綿状態（ｓｐｏｎｇｉ���ｓｉｓ）と呼ばれる特徴的な病理変化をもたらして湿疹症状を呈すると考えられる［Ｔｒａｕｔｍａｎｎ  Ａ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１０８，８３９−８４６（２００１）］。【０００６】  こうしたアポトーシスによる表皮のバリア機能傷害は、外界からの様々な刺激物質の生体内への進入を容易にし、さらなる炎症反応を惹起させ症状悪化を招く要因となるものと考えられる。加えて、表皮に傷害を生じると角質細胞のターンオーバーが促進されるが、慢性的炎症状態ではそのターンオーバーの規則性が失われ、未分化な角質層を形成しやすい。このような未分化な角質細胞上では、保湿性の水溶性アミノ酸の産生が低下し皮膚の保湿能が失われやすくなることから乾燥肌傾向を呈すると推測され、知覚異常などの敏感肌になると考えられている［Ｆｒａｇｒａｎｃｅ  Ｊｏｕｒｎａｌ，ｖｏｌ．１０（２００２）  ；田上八郎，皮膚の医学，中公新書（１９９９）］。【０００７】  これらのことから、皮膚角質細胞のＦａｓ介在性アポトーシスの抑制は、角質細胞のターンオーバーを正常化し、炎症症状の抑制とともに乾燥肌や敏感肌等の種々の症状を伴う皮膚異常の予防や改善につながると考えられる。抗アポトーシス物質としては、ＦａｓＬ中和抗体の他、カスパーゼ系を阻害するＺ−ＶＡＤ−ＦＭＫなどのような基質アナログの例が知られ、各種の合成ペプチドが研究用試薬として市販されている。これらは蛋白あるいはペプチド類であるため、安全性、すなわち作用および副作用の観点から問題を有し、人体への投与においては安全な作用を発現するに至らないのが現状である。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】  本発明の目的は、皮膚を構成する細胞の新陳代謝、すなわちアポトーシスと細胞新生のバランスを正常化し、皮膚を構成する細胞のアポトーシスの亢進に起因する皮膚疾患、症状、病態、組織障害の予防もしくは改善する皮膚外用剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００９】  本発明においては、タラノキ及びその類縁植物の粉末もしくは抽出物等及び／又はサポニン画分より選択した１種以上を皮膚外用剤基剤に含有させることにより、上記課題を解決した。以下に、本発明に関して詳細に説明する。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】  本発明の肌荒れ改善皮膚外用剤は、上記したようにタラノキ及びその類縁植物の粉末もしくは抽出物又は抽出成分及び／又はサポニン画分から選択した１種又は２種以上を含有して構成される。【００１１】  本発明において用いるサポニン画分は、タラノキから抽出したものであることが好ましい。抽出物より濃縮、精製したものを用いることもできる。【００１２】    上記生薬の粉末化や抽出は常法によって行うことができる。抽出は、例えば上記生薬を乾燥して刻み、または粉末状にして抽出溶媒を加え、冷浸または加熱することによって行うことが出来る。抽出溶媒としては、水、エタノール、１，３−ブタンジオール、イソプロパノール等の１種又は２種以上の混合溶媒を使用することが出来る。【００１３】  なお、本発明における抽出物とは、抽出液、該抽出液の希釈液もしくは濃縮液、該抽出物を乾燥して得られる乾燥物、または抽出エキスのいずれをも意味するものとする。上記抽出物からのサポニン画分の粗精製および精製は常法によって行えば良く（名取信策、池川信夫、鈴木信言編、天然有機化合物実験法−生理活性物質の抽出と分離、１９７７、講談社）、例えばダイアイオン（ＤＩＡＩＯＮ）ＨＰ−２０などの多孔性ビーズなどの合成樹脂担体を用いた固相抽出法、もしくはセファデックスＬＨ−２０（ＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ−２０）、シリカゲル、アルミナ等の吸着剤による吸着および溶出クロマトグラフィーやその他の各種クロマトグラフィー等を適当に組み合わせて実施することが出来る。【００１４】  以上のようにして得られるタラノキの粉末、抽出物、該抽出物の粗精製物、精製物及び成分は、後述する実施例から明らかなように、肌荒れ改善作用を有するため、肌荒れ改善皮膚外用剤の有効成分として使用することが出来る。本発明の肌荒れ改善皮膚外用剤は、抗アポトーシス効果の試験で細胞毒性を示さず、実施例の使用試験において問題となる皮膚刺激性が認められないことより、安全性が高いと考えられる。【００１５】  本発明の肌荒れ改善皮膚外用剤は、医薬部外品や化粧品として提供して問題ない。配合量は外用剤中の有効濃度や外用剤の安定性等を考慮して１０重量％程度以下が適当である。外用剤の形態としては、ローション、乳剤、クリーム、軟膏等、種々の形態をとる事が出来る。また、化粧水、美容液、乳液等の肌荒れ改善皮膚化粧料としても提供することができる。【００１６】  以下、実施例により本発明を更に具体的に説明するが、本発明の範囲はこれらの実施例に限定されるものではない。なお「％」は特に断らない限り重量％を意味する。
【実施例１】
【００１７】Ｆａｓ／ＦａｓＬ経路を介して誘導したＪｕｒｋａｔ細胞のアポトーシスに対するタラノキ抽出物あるいはサポニン画分及びチクセツサポニンＶの抗アポトーシス活性の評価【００１８】  ４×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍＬになるように調製したＪｕｒｋａｔ細胞（ヒト白血病Ｔリンパ腫由来）を９６穴プレートに分注し、常法より調製したタラノキ抽出物またはサポニン画分またはチクセツサポニンＶ（終濃度：１２．５−５０μｇ／ｍＬ）を添加して１時間培養した後、５ｎｇ／ｍＬのＦａｓＬで刺激してさらに２４時間培養した。対照としてカスパーゼ・ファミリー・インヒビター［Ｚ−ＶＡＤ−ＦＭＫ，Ｃａｓｐａｓｅ  Ｆａｍｉｌｙ  Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ（Ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｈｙｌ  ｋｅｔｏｎｅ），Ｍｅｄｉｃａｌ  ＆  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．］を２μＭとなるように加えた。細胞の生存率はＡｌａｍａｒ  Ｂｌｕｅ法［Ｐａｇｅ，Ｂ．ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｏｎｃｏｌ．３，４７３−４７６（１９９３）］により測定し、アポトーシス抑制率を［（抽出物あるいは生成物およびＦａｓＬを添加した細胞の生存率）−（ＦａｓＬを添加した細胞の生存率）／（未処理の細胞生存率）−（ＦａｓＬを添加した細胞の生存率）］×１００の式より算出して抗アポトーシス活性の評価を行った。その結果を表１に示す。【００１９】
【表１】
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【００２０】  表１はＦａｓ／ＦａｓＬ経路を介して誘導したＪｕｒｋａｔ細胞のアポトーシスに対するタラノキ抽出物あるいはサポニン画分、チクセツサポニンＶの抗アポトーシス活性を示したものである。表中のＺ−ＶＡＤ−ＦＭＫは、抗アポトーシス作用を有する既知のペプチドであり、ポジティブコントロールとして使用した。本検討により、タラノキ抽出物あるいはサポニン画分及びチクセツサポニンＶはＦａｓ分子介在性のＪｕｒｋａｔ細胞のアポトーシスを著明に抑制することが明らかとなった。チクセツサポニンＶ以外のサポニンにも活性のあることも明らかとなった。また、抽出分画液の各濃度において、顕著な細胞毒性は認められなかった。
【実施例２】
【００２１】肌荒れ改善皮膚化粧水の処方を下記表２に示す。【００２２】
【表２】
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【００２３】  表中の（９）に（５）、（６）を加えてそれぞれ膨潤させ、（１）、（２）、（４）、（７）を混合後加熱溶解して８０℃とし、溶解後、４０℃に冷却、（３）、（８）を添加し、混合する。表中（８）のタラノキ抽出分画液は、タラノキ５００ｇを５Ｌの５０％エタノールにて室温で１週間抽出し、調製した。また、表中（８）の替わりに５０％エタノールを配合したものを比較例とした。【００２４】  続いて本発明の実施例および比較例について使用試験を行った。アポトーシスが抑制されると、肌荒れが改善されることが推察されるため、以下の試験を行った。肌荒れを感じているパネラー２５名を１群とし、各群にそれぞれ実施例および比較例をブラインドにて顔面に使用させ、肌荒れについては、「改善」、「変化なし」、「やや悪化」、「悪化」の４段階、水分量については「上昇」、「変化なし」、「やや低下」、「低下」の４段階で評価し、各評価を得たパネラー数は下記表３に示した。【００２５】
【表３】
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【００２６】  上記に示すように、エタノール配合の比較例と比べ、タラノキ抽出分画液を含有する本発明の実施例の使用により、ほとんどのパネラーにおいて肌荒れが改善し、１６例において水分量が顕著に上昇することが認められた。
【発明の効果】
【００２７】  以上詳述したように、本発明に係る肌荒れ改善皮膚外用剤は、皮膚内での炎症によるアポトーシス誘導を抑制し、敏感肌や肌荒れ防止に効果を発揮させることが出来る。また、抗アポトーシスの試験で細胞毒性を示さず、実施例の使用試験において問題となる皮膚刺激性が見られないことより、安全性が高いと考えられ、副作用が比較的少なく、安全性にも優れた皮膚外用剤である。