(57)【要約】【課題】様々な生物学的、化学的、及び物理的バリアを経る、多種多様な活性剤のデリバリーを可能にする。【解決手段】所定のカルボン酸及び／またはその塩の形態の化合物を、活性剤のデリバリー剤として使用する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物２６−３５、５８−６１、６３、１１９−１３２、及び１３４−１３５：
【化１Ａ】
2010024236.tif 000010
【化１Ｂ】
2010024236.tif 000011
【化１Ｃ】
2010024236.tif 000012
【化１Ｄ】
2010024236.tif 000013
並びにその塩からなる群より選択される化合物。
【請求項２】
（Ａ）活性剤；及び
（Ｂ）請求項１に記載の化合物；
を含む組成物。
【請求項３】
前記活性剤が、生物学的活性剤、化学的活性剤、及びこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
前記生物学的活性剤が、少なくとも一のタンパク質、ポリペプチド、ペプチド、ホルモン、多糖類、ムコ多糖類、炭水化物、または脂質を含む、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
前記生物学的活性剤が、成長ホルモン、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）、組換えヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）、ウシ成長ホルモン、ブタ成長ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン、インターフェロン、α-インターフェロン、β-インターフェロン、γ-インターフェロン、インターロイキン-１、インターロイキン-２、インスリン、ブタインスリン、ウシインスリン、ヒトインスリン、及びヒト組換えインスリン、インスリン様増殖因子（ＩＧＦ）、ＩＧＦ-ｌ、ヘパリン、未分画ヘパリン、ヘパリノイド、デルマタン、コンドロイチン、低分子量ヘパリン、極低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリン、カルシトニン、サケカルシトニン、ウナギカルシトニン、ヒトカルシトニン；エリトロポエチン（ＥＰＯ）、心房性ナトリウム利尿因子（atrial naturetic factor）、抗原、モノクローナル抗体、ソマトスタチン、プロテアーゼインヒビター、アドレノコルチコトロピン、ゴナドトロピン放出ホルモン、オキシトシン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、卵胞刺激ホルモン、グルコセレブロシダーゼ、トロンボポエチン（thrombopoietin）、フィルグラスチム（filgrastim）、プロスタグランジン、シクロスポリン、バソプレシン、クロモリンナトリウム、クロモグリカートナトリウム、クロモグリカート二ナトリウム、バンコマイシン、デフェロキサミン（ＤＦＯ）、パラチロイドホルモン（ＰＴＨ）、ＰＴＨのフラグメント、抗菌剤、抗真菌剤；これらの化合物の類似物、フラグメント、擬剤（mimetics）及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）変性誘導体；及びこれらのあらゆる組み合わせからなる群より選択される、請求項３に記載の組成物。
【請求項６】
前記生物学的活性剤が、インスリン、未分画ヘパリン、低分子量ヘパリン、極低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリン、カルシトニン、パラチロイドホルモン、エリトロポエチン、ヒト成長ホルモン、及びこれらのあらゆる組み合わせからなる群より選択される、請求項３に記載の組成物。
【請求項７】
（Ａ）請求項２に記載の組成物；及び
（Ｂ）（ａ）賦形剤、
（ｂ）希釈剤、
（ｃ）崩壊剤、
（ｄ）潤滑剤、
（ｅ）可塑剤、
（ｆ）着色剤、
（ｇ）投薬媒体、または
（ｈ）これらのあらゆる組み合わせ；
を含む投薬ユニット形態。
【請求項８】
前記活性剤が、生物学的活性剤、化学的活性剤、及びこれらの組み合わせからなる群より選択される、請求項７に記載の投薬ユニット形態。
【請求項９】
前記生物学的活性剤が、少なくとも一のタンパク質、ポリペプチド、ペプチド、ホルモン、多糖類、ムコ多糖類、炭水化物、または脂質を含む、請求項８に記載の投薬ユニット形態。
【請求項１０】
前記生物学的活性剤が、成長ホルモン、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）、組換えヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）、ウシ成長ホルモン、ブタ成長ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン、インターフェロン、α-インターフェロン、β-インターフェロン、γ-インターフェロン、インターロイキン-１、インターロイキン-２、インスリン、ブタインスリン、ウシインスリン、ヒトインスリン、及びヒト組換えインスリン、インスリン様増殖因子（ＩＧＦ）、ＩＧＦ-ｌ、ヘパリン、未分画ヘパリン、ヘパリノイド、デルマタン、コンドロイチン、低分子量ヘパリン、極低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリン、カルシトニン、サケカルシトニン、ウナギカルシトニン、ヒトカルシトニン；エリトロポエチン（ＥＰＯ）、心房性ナトリウム利尿因子、抗原、モノクローナル抗体、ソマトスタチン、プロテアーゼインヒビター、アドレノコルチコトロピン、ゴナドトロピン放出ホルモン、オキシトシン、黄体形成ホルモン放出ホルモン、卵胞刺激ホルモン、グルコセレブロシダーゼ、トロンボポエチン、フィルグラスチム、プロスタグランジン、シクロスポリン、バソプレシン、クロモリンナトリウム、クロモグリカートナトリウム、クロモグリカート二ナトリウム、バンコマイシン、デフェロキサミン（ＤＦＯ）、パラチロイドホルモン（ＰＴＨ）、ＰＴＨのフラグメント、抗菌剤、抗真菌剤；これらの化合物の類似物、フラグメント、擬剤及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）変性誘導体；及びこれらのあらゆる組み合わせからなる群より選択される、請求項８に記載の投薬ユニット形態。
【請求項１１】
前記生物学的活性剤が、インスリン、未分画ヘパリン、低分子量ヘパリン、極低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリン、カルシトニン、パラチロイドホルモン、エリトロポエチン、ヒト成長ホルモン、またはこれらの組み合わせを含む、請求項８に記載の投薬ユニット形態。
【請求項１２】
投薬ユニット形態が、錠剤、カプセル、粉末、または液体を含む投薬媒体を含む、請求項７に記載の投薬ユニット形態。
【請求項１３】
前記投薬媒体が、水、１，２-プロパンジオール、エタノール、及びこれらのあらゆる組み合わせからなる群より選択される液体である、請求項７に記載の投薬ユニット形態。
【請求項１４】
活性剤を、前記活性剤を必要とする動物に投与する方法であって、前記動物への請求項２に記載の組成物の経口投与を含む方法。
【請求項１５】
（Ａ）少なくとも一の活性剤；
（Ｂ）請求項１の化合物；及び
（Ｃ）任意に投薬媒体；
を混合することを含む、組成物１に記載の調製方法。
【請求項１６】
化合物１０５及びその塩を含む化合物。
【請求項１７】
（Ａ）活性剤；及び
（Ｃ）請求項１６に記載の化合物；
を含む組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生物学的または化学的活性剤等の活性剤をターゲットへデリバリーするための化合物に関する。これらの化合物は、経口、結腸内、あるいは別の経路からの動物への投与のための、活性剤との非共有結合混合物の生成に非常に好適である。こうした組成物の調製及び投与の方法もまた開示する。
【背景技術】
【０００２】
活性剤のデリバリーのための従来の方法は、生物学的、化学的、及び物理的バリアによってしばしば厳しく制限される。典型的には、これらのバリアは、デリバリーが起きる環境、デリバリーのターゲットの環境、及び／またはターゲット自身によって負わされる。生物学的または化学的活性剤は、特にこうしたバリアに対して脆弱である。
【０００３】
生物学的に活性または化学的に活性な薬理及び治療剤の動物へのデリバリーにおいては、バリアは身体によって課される。物理的バリアの例は、所定の活性剤にとっては比較的に非浸透性であるが、循環器系などのターゲットに到達する前には越えねばならない、皮膚、脂質二重層、及び様々な器管の膜である。化学的バリアには、これらに制限されるものではないが、胃腸（ＧＩ）管内におけるｐＨ変化及び分解酵素が含まれる。
【０００４】
これらのバリアは、経口デリバリーシステムの設計において、特に顕著である。生物学的、化学的、及び物理的バリアがないとすれば、多くの生物学的または化学的活性剤の経口デリバリーは、動物への投与のために選択すべき経路となるであろう。典型的には経口投与になじみにくい多数の剤の中には、生物学的または化学的に活性なペプチド、例えばカルシトニン及びインスリン；多糖類、特に限定するものではないがヘパリンを含むムコ多糖類；ヘパリノイド；抗生物質；及び他の有機物質がある。これらの剤は、胃腸管内で、酸加水分解、酵素などによって、迅速に不活性化または破壊される。さらに、巨大分子薬剤のサイズ及び構造は、吸収を妨げうる。
【０００５】
脆弱な薬理剤の経口投与のための初期の方法は、腸壁の透過性を人工的に増大させるための助剤（例えば、レゾルシノール及び非イオン性界面活性剤、例えばポリオキシエチレンオレイルエーテル及びｎ-ヘキサデシルポリエチレンエーテル）の共投与、並びに酵素による分解を抑制するための酵素阻害剤（例えば、膵臓トリプシン阻害剤、ジイソプロピルフルオロホスファート（ＤＦＦ）及びトラシロール（trasylol））の共投与に依存してきた。リポソームがまた、インスリン及びヘパリンのための薬剤デリバリーシステムとして開示されている。例えば、米国特許第４，２３９，７５４号公報；Patel et al. (1976), FEBS Letters, Vol. 62, pg. 60;及びHashimoto et al. (1979), Endocrinology Japan, Vol. 26, pg. 337.を参照のこと。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許第４，２３９，７５４号公報
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Patel et al. (1976), FEBS Letters, Vol. 62, pg. 60
【非特許文献２】Hashimoto et al. (1979), Endocrinology Japan, Vol. 26, pg. 337.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
しかしながら、こうした薬剤デリバリーシステムの多種多様な使用は、不可能である。なぜなら、（１）該システムが、助剤または阻害剤の毒性量を要する；（２）好適な低分子量の貨物、すなわち活性剤が入手できない；（３）該システムが、安定性に乏しく、不適当な貯蔵寿命を呈する；（４）該システムが、製造困難である；（５）該システムが、活性剤（貨物）を保護できない；（６）該システムが、活性剤を不利に変質させる；または（７）該システムが、活性剤を吸収させるまたは活性剤の吸収を促進することができない；ためである。
【０００９】
近年、混合アミノ酸の人口ポリマー（プロテイノイド）のミクロスフィアが、薬理剤のデリバリーに使用されている。例えば、米国特許第４，９２５，６７３号公報には、プロテノイドミクロスフィア担体を含む薬剤並びにその調製法及び使用が開示されている。これらのプロテノイドミクロスフィアは、多数の活性剤のデリバリーに有用である。さらに、所定の変性アミノ酸が、薬理剤のデリバリーに使用されている。例えば、米国特許第５，６２９，０２０号公報；米国特許第５，６４３，９５７号公報；米国特許第５，６５０，３８６号公報；及び米国特許第５，７７６，８８８号公報を参照のこと。
しかしながら、簡便且つ安価で、容易に調製され、広範な活性剤を多様な経路からデリバリー可能なデリバリーシステムが、依然として望まれている。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
活性剤のデリバリーに有用な化合物及び組成物を提供する。該化合物には、下記の化合物またはその塩が含まれる。
【００１１】
【化１Ａ】
2010024236.tif 000002
【化１Ｂ】
2010024236.tif 000003
【化１Ｃ】
2010024236.tif 000004
【化１Ｄ】
2010024236.tif 000005
【００１２】
本発明の組成物は、少なくとも一の活性剤、好ましくは生物学的または化学的活性剤、及び本発明の少なくとも一の化合物またはその塩を含む。こうした組成物の調製及び投与の方法もまた提供する。前記化合物及び前記活性剤を含む組成物は、選択された生物システムへの活性剤のデリバリーにおいて及び、活性剤単独の投与と比較して、活性剤の生物学的利用能を増大または向上させることにおける有用性を有する。
【００１３】
本発明の組成物は、活性剤及びデリバリー剤を含む。これらの組成物は、多様な活性剤を、様々な生物学的、化学的、及び物理的バリアを経てデリバリーするために使用可能であり、特に環境により分解しがちな活性剤のデリバリーに好適である。
本発明の別の利点には、調製が容易で、安価な原料の使用が含まれる。本発明の組成物及び製剤方法は、コスト的に有効であり、簡便に実行でき、商業ベースの製造のための工業スケールアップになじみやすいものであることが含まれる。
【００１４】
（化合物）
当該化合物は、カルボン酸及び／またはその塩の形態であるとよい。塩には、これらに制限するものではないが、有機または無機の塩、例えばナトリウム塩が含まれる。さらに、これらの化合物を一以上含むポリアミノ酸及びペプチドが使用可能である。
【００１５】
アミノ酸は、少なくとも一の遊離のアミン基を有するあらゆるカルボン酸であって、天然産及び合成のアミノ酸を含む。ポリアミノ酸は、ペプチド（ペプチド結合で結合されてなる二以上のアミノ酸）であるか、あるいは結合可能な他の基によって形成される結合、例えばエステル、または酸無水物結合によって結合してなる二以上のアミノ酸である。ペプチドは、アミノ酸が二つのジペプチドから、アミノ酸が数百のポリペプチドまで、長さが様々である。Chambers Biological Dictionary, editor Peter M.B. Waker, Cambridge, England: Chambers Cambridge, 1989, page 215.を参照のこと。アミノ酸またはペプチドユニットの一以上が、アシル化またはスルホン化されていてよい。
【００１６】
ここに記載した化合物の多数が、アミノ酸から誘導可能であり、本開示に基づき、当業者の通常の知識の範囲内の方法、及び国際特許出願９６／３００３６号公報、国際特許出願９７／３６４８０号公報、米国特許第５，６４３，９５７号公報及び米国特許第５，６５０，３８６号公報に記載の方法により、アミノ酸から容易に調製可能である。例えば、該化合物は、単一のアミノ酸を、アミノ酸中に存在する遊離のアミノ部分と反応する、適当なアシル化剤またはアミン変性剤と反応させ、アミドを生成させることによって調製可能である。保護基が、当業者には周知の望ましからぬ副反応を回避するために使用可能である。保護基については、T. W. Greene, Protecting Group in Organic Synthesis, Wiley, New York (1981)が参照されるが、その開示を、参照のためにここに取り込むこととする。 
【００１７】
該化合物は、再結晶、または単独もしくはタンデムに接合した一以上の固体クロマトグラフィー支持体上での分画によって精製可能である。好適な再結晶溶媒システムには、これらに制限されるものではないが、アセトニトリル、メタノール、及びテトラヒドロフランが含まれる。分画は、メタノール／ｎ-プロパノール混合物を溶離液として使用してアルミナなどの適当なクロマトグラフィー支持体にて；トリフルオロ酢酸／アセトニトリル混合物を溶離液として使用して逆相カラム支持体にて；さらに水または好適な緩衝液を溶離液として使用してイオン交換クロマトグラフィーにて；実行可能である。アニオン交換クロマトグラフィーを行う場合には、好ましくは０−５００mMの塩化ナトリウム勾配を採用する。
【００１８】
（活性剤）
本発明における使用に好適な活性剤には、これらに制限されるものではないが、殺虫剤、薬理剤及び治療剤を含む、生理学的及び化学的な活性剤が含まれる。
例えば、本発明における使用に好適な生理学的または化学的な活性剤には、これらに制限されるものではないが、タンパク質；ポリペプチド；ペプチド；ホルモン、特に単独では胃腸粘膜を通過しない（または投与量の一部のみが通過する）、及び／または胃腸管内で酸及び酵素により化学開裂しがちであるホルモン；多糖類、特にムコ多糖類の混合物；炭化水素：脂質；他の有機化合物；またはこれらのあらゆる組み合わせが含まれる。
【００１９】
さらなる例には、これらに制限されるものではないが、合成、天然または組換え由来のものを含む以下のもの：ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）、組換えヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）、ウシ成長ホルモン、及びブタ成長ホルモンを含む成長ホルモン；成長ホルモン放出ホルモン；α、β及びγを含むインターフェロン；インターロイキン-１；インターロイキン-２；ブタ、ウシ、ヒト、及びヒト組換えの、任意にナトリウム、亜鉛、カルシウム及びアンモニウムを含むカウンターイオンを有するインスリン；ＩＧＦ-１を含むインスリン様増殖因子；未分画ヘパリン、ヘパリノイド、デルマタン、コンドロイチン、低分子量ヘパリン、極低分子量ヘパリン、超低分子量ヘパリンを含むヘパリン；サケ、ウナギ及びヒトのカルシトニン；エリトロポエチン；心房性ナトリウム利尿因子；抗原；モノクローナル抗体；ソマトスタチン；プロテアーゼインヒビター；アドレノコルチコトロピン；ゴナドトロピン放出ホルモン；オキシトシン；黄体形成ホルモン放出ホルモン；卵胞刺激ホルモン；グルコセレブロシダーゼ；トロンボポエチン；フィルグラスチム；プロスタグランジン；シクロスポリン；バソプレシン；クロモリンナトリウム（ナトリウムまたは二ナトリウムのクロモグリカート）；バンコマイシン；デフェロキサミン（ＤＦＯ）；そのフラグメントを含むパラチロイドホルモン（ＰＴＨ）；抗真菌剤を含む抗菌剤；これらの化合物の類似物、フラグメント、擬剤及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）変性誘導体；及びこれらのあらゆる組み合わせが含まれる。
【００２０】
（デリバリーシステム）
本発明の組成物は、デリバリー剤及び一以上の活性剤を含有する。
一の実施態様において、一以上のデリバリー剤化合物もしくはこれらの化合物の塩、またはこれらの化合物または塩がその一以上のユニットを形成してなるポリアミノ酸またはペプチドは、デリバリー剤として、投与前に活性剤と混合することによって使用可能である。
【００２１】
投与混合物は、該化合物の水溶液を活性成分の水溶液と、投与の直前に混合することによって調製される。あるいはまた、該化合物と生物学的または化学的活性成分とを、製造工程中に混合することも可能である。
該溶液は、リン酸緩衝液塩、クエン酸、グリコール、または他の分散剤などの添加剤を任意に含有可能である。安定化添加剤は、好ましくは約０．１から２０％（w/v）の濃度で該溶液に導入可能である。
【００２２】
本発明のデリバリー組成物はまた、一以上の酵素インヒビターを含有可能である。こうした酵素インヒビターには、これらに制限されるものではないが、アクチノニンまたはエピアクチノニン及びこれらの誘導体が含まれる。これら化合物の誘導体は、米国特許第５，２０６，３８４号公報に記載されている。他の酵素インヒビターには、これらに制限されるものではないが、アプロチニン（Trasylol）及びBowman-Birkインヒビターが含まれる。
【００２３】
活性剤の量は、ターゲット支持のための個々の活性剤の目的を達成するのに有効な量である。当該組成物中の活性剤の量は、典型的には、薬理学的、生物学的、治療上、または化学的に有効な量である。しかしながら、この量は、該組成物がカプセル、錠剤、粉末、または液体などの投薬ユニット形態で使用される場合には前記の量未満であっても良く、なぜなら、投薬ユニット形態は、複数の化合物／生物学的または化学的活性剤の混合物を含有しても、または薬理学的、生物学的、治療上、または化学的に有効な量を分割して含有してもよい。全有効量を、総計で生物学的または薬理学的な活性剤の薬理学的、生物学的、治療上、または化学的に有効な量を含有する累積ユニットとして投与することも可能である。
【００２４】
使用する活性剤の総量は、当業者に周知の方法によって決定可能である。しかしながら、当該組成物は、従来の組成物よりも有効な活性剤をデリバリー可能であり、依然として同様の血中濃度及び／または治療効果を達成しつつ、従来の投薬ユニット形態において使用されるよりも低量の生物学的または化学的活性剤を被験者に投与可能である。
【００２５】
本発明により開示される化合物は、特に経口、鼻内、舌下、十二指腸内、頬、結腸内、直腸、腟、粘膜、肺、経皮、真皮内、非経口、静脈内、筋内、及び視覚系から、並びに血液脳関門の通過により、生物学的または化学的活性剤をデリバリーする。
【００２６】
投薬ユニット形態はまた、賦形剤、希釈剤、崩壊剤、潤滑剤、可塑剤、着色剤、香料、テイスト・マスキング剤、糖類、甘味料、塩、及びこれらに限定されるものではないが、水、１，２-プロパンジオール、エタノール、オリーブオイル、またはこれらのあらゆる組み合わせを含む投薬媒体をいずれか一つあるいは組み合わせを含有可能である。
【００２７】
懸かる発明の化合物及び組成物は、これらに制限するものではないが、鶏等の鳥；ウシ、ブタ、犬、猫、霊長類、及び特に人間等のほ乳類；及び昆虫への、生物学的または化学的な活性剤の投与に有用である。前記システムは、これによらなければ、ターゲット領域（すなわち、デリバリー組成物の活性剤が放出される領域）に達する前及び投与された動物の身体内で遭遇する条件によって破壊されるか、または効力が低下する、化学的または生物学的な活性剤のデリバリーに特に有利である。本発明の化合物及び組成物はまた、活性剤、特に、特定の経路、特に経口経路によっては通常デリバリー不可能であるもの、または改善されたデリバリーが所望されるもの等の投与において有用である。デリバリーは、一定時間内、または特定の時間内に、より大量の活性剤をデリバリーする（より迅速なデリバリーを行う）ことによって改善可能である。
【００２８】
投与に次いで、当該組成物または投薬ユニット中に存在する活性剤は循環器系に取り込まれる。前記剤の生物学利用能は、血液中の既知の薬理活性、例えば、ヘパリンによって引き起こされる血液凝固時間の増大、またはカルシトニンによって引き起こされる循環カルシウム濃度の低下を測定することによって容易に評価される。あるいはまた、活性剤自体の循環濃度を直接測定することも可能である。
【００２９】
以下の実施例は、本発明を限定なしに詳説する。全ての部は、特記のない限り重量部として表した。
【実施例】
【００３０】
（実施例１：化合物調製）
（方法Ａ：化合物２６の調製）
マグネチック・スターラーを取り付けた１Lの丸底フラスコに、２-アミノ-ｐ-クレゾール（１．７１g、１３．８８mmol、１等量）及び２Ｍの水酸化ナトリウム水溶液（２０ml）を入れた。０℃にて攪拌した該溶液に、メチルアゼロイルクロライド（３．０８g、１３．９６mmol、１．０１等量）を滴々と加えた。添加の後、反応混合物を環境温度に温め、環境温度にて４−５時間攪拌した。溶液のｐＨは、２０％の水酸化ナトリウムの添加によって約１１−１２に維持した。その後、該溶液を酢酸エチルで抽出した（３×３０ml）。混成有機相を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮した。残渣をＴＨＦ（５０ml）に溶解させ、２ＮのＮａＯＨ（２０ml）で処理した。得られた混合物を、室温にて８時間攪拌した。ＴＬＣは、反応が完了したことを示した。該混合物を真空下で濃縮し、酸性化した。得られた固体を回収し、メタノール／アセトン／水から再結晶し、生成物２．５gを得た。
化合物１１−１５、１８−２１、２４、２５、２７−３５、４８−５０、５４−５６、５８、６５−６８、７３、８３、１１０、１２０及び１３１−１３３もまた、この方法により、適当な出発物質を使用して調製した。化合物１２０、１２２及び１２３もまた、ＴＨＦを含有したまま反応を行ったこと以外はこの方法により、適当な出発物質を使用して調製した。
【００３１】
（方法Ｂ：化合物６０の調製）
３-アミノ-４-フルオロヒドロケイ皮酸１．０３g（５．６２mmol）及び塩化メチレン２０mlのスラリーを、塩化トリメチルシリル１．４５ml（１．２４g、１１．４mmol）で処理し、１５０分間加熱還流させた。該反応混合物を０℃に冷却し、トリエチルアミン２．４ml（１．７４g、１７．２mmol）で処理した。５分間攪拌した後、この混合物を滴下漏斗に注入し、Ｏ-アセチルサリチロイルクロライド１．２１g（６．０９mmol）及び塩化メチレン１０mlの０℃溶液にゆっくりと添加した。反応混合物を２５℃に加温し、１８時間攪拌した。３％塩酸（２×２０ml）、水（１×２０ml）及び塩水（１×１５ml）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮することによって、褐色を帯びた黄色固体を得た。該固体を、１５mlの６５％エタノール／水から再結晶し、褐色固体を得た。該固体を、飽和重炭酸水素ナトリウム溶液に溶解させた。酢酸塩が割裂（ＨＰＬＣにて確認）するまで攪拌した後、該溶液を酸性化し、沈殿を進行させた。濾過による単離によって、生成物０．５８g（収率３８％）、融点２０２−４℃を得た。
化合物５９、６１、７４−８１、１０７、１０９及び１１１−１１３もまた、この方法により、適当な出発物質を使用して調製した。化合物３７、４２、４４及び１３４もまた、この方法により、適当な出発物質を使用して調製可能であった。
【００３２】
（方法Ｃ：化合物１の調製）
アルゴンで不活性とし、マグネチック攪拌棒及び冷水コンデンサーを取り付けた２５０mLの丸底フラスコ中で、アセトニトリル（７５ml）に１，４-ベンゾジオキサン-２-オン（４．５０g、３０mmol）を溶解させた。トリエチルアミン（４．１７ml、３．０３g、３０mmol）及び４-（４-アミノフェニル）酪酸（５．３７g、３０mmol）を添加した。反応混合物を２時間加熱還流させ、２５℃にて一晩攪拌し、真空下で濃縮した。褐色の残渣を塩化メチレン中に取り出し、１Ｎの塩酸水溶液で洗浄した（１×１００ml）。生成した固体を濾過によって単離し、１Ｎの塩酸水溶液及び水で洗い流した。得られた固体を真空オーブン中で一晩乾燥させ、黄褐色固体として化合物（９．１９g、収率９３％）を得た。
化合物５３を、ジヒドロクマリン及び８-アミノカプリル酸から出発し、この方法によって合成した。
【００３３】
（方法Ｄ：化合物３６の調製）
８-（Ｎ-３，５-ジニトロサリチロイル）アミノカプリル酸を、３，５-ジニトロサリチル酸及び８-アミノカプリル酸から出発し、方法Ｔを用いて調製した。８-（Ｎ-３，５-ジニトロサリチロイル）アミノカプリル酸０．７g（１．９mmol）及び酢酸エチル４０mlの溶液を、１０％Ｐｄ／Ｃ７０mgで処理し、水素雰囲気下に１８時間おいた。濾過によって触媒を除去した。濾液を真空下で濃縮した。残渣をメタノール／アセトン／水から再結晶し、生成物０．４g（収率６２％）、融点１５６−７℃を得た。
【００３４】
（方法Ｅ：化合物２の調製）
４-（４-（４-ベンジルオキシフェノキシアセチル）アミノ）フェニル）酪酸を、方法Ｃを用いて、４-（４-アミノフェニル）酪酸の４-ベンジルオキシフェノキシアセチルクロライドとの反応によって調製した。
４-（４-（４-ベンジルオキシフェノキシアセチル）アミノ）フェニル）酪酸５．００g（１１．９mmol）及びメチルアルコール１５０mlのスラリーを、約２０分間、アルゴン雰囲気下で攪拌した。白金１０％を担持した炭素の触媒量（０．４g）を一度に添加した。反応容器から脱気した。該反応を、水素雰囲気下、室温にて一晩維持した。その後、パラジウムを担持した炭素を濾過して除去し、濾液を減圧下で濃縮し、白色固体として生成物を得た。
化合物８、９、及び３８もまた、適当な出発物質を使用し、この方法によって調製した。
【００３５】
（方法Ｆ：化合物３９の調製）
５-フルオロイサトン酸無水物（5-fluoroisatoic anhydride）１０．８２g（５９．７mmol）、８-アミノカプリル酸９．５０g、５０重量％Ｋ２ＣＯ３／水１６．８g、及びジオキサン４０mlの懸濁液を加熱還流した。２時間後、反応が完了した（ＨＰＬＣにより測定）。濃紫色の溶液を２５℃に冷却し、３％の塩酸水溶液でｐＨ＝４．００にまで酸性化したところ、暗色の沈殿を生じた。かかる固体を濾過によって単離し、６５％エタノール／水から再結晶して、黄色固体として生成物１１．８６g（収率６７％）、融点１０８−９℃を得た。
化合物３−７、１０、４０及び４３もまた、適当な出発物質を用い、この方法によって調製した。
【００３６】
（方法Ｇ：化合物６２の調製）
４-（４-アミノフェニル）酪酸（１．０等量）及び６Ｎの塩酸水溶液（５．４４等量）の５Ｃ混合物を、温度が５℃未満に保たれるように、３Ｎの硝酸ナトリウム水溶液１．０５等量をゆっくりと添加することによって処理した。２．８Ｎのヨウ化カリウム水溶液（１．０１等量）を添加した。反応物を一晩攪拌した。層が分離した。有機相を、メタノール／塩化メチレンを溶離剤として使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、４-（４-ヨードフェニル）酪酸を得た。
４-（４-ヨードフェニル）酪酸（０．８６M）及びジメチルホルムアミドの溶液を、２等量の炭酸カリウム、１．５等量の２-ヒドロキシチオフェノール及び触媒量の酢酸第二銅（cuperic acetate）（０．０１等量）で処理した。該反応混合物を１８時間還流させ、２５℃に冷却し、酸水溶液で酸性化し、酢酸エチルで抽出した。有機相を濃縮した。残渣を、酢酸エチル／ヘキサンを溶離剤として使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、４-（４-（２-ヒドロキシフェニル）チオフェニル）酪酸を得た。
４-（４-（２-ヒドロキシフェニル）チオフェニル）酪酸及び酢酸エチル／酢酸の０．３３Ｍ溶液を、過酸化水素の９．８Ｍ水溶液で処理した。１２時間攪拌した後、層が分離した。有機相を濃縮した。トルエン／アセトン／ヘキサンを溶離剤として使用するフラッシュクロマトグラフィーによって、残渣を精製し、生成物を得た。
【００３７】
（方法Ｈ：化合物８２の調製）
９-ブロモ-１-ノナノール３．９７g（１７．８mmol）及び塩化メチレンの０℃溶液を、２-ニトロフェニルイソシアナート２．９１g及び塩化メチレン１０mlの溶液で処理した。該反応混合物を２時間加熱還流させ、２５℃にて１６時間攪拌し、真空下で濃縮した。黄色固体が、９-ブロモノニル=Ｎ-（２-ニトロフェニル）カルバマートと同定され、このものとして使用した。
９-ブロモノニル=Ｎ-（２-ニトロフェニル）カルバマート２．９９g（７．７２mmol）、硝酸ナトリウム１．６１g（２３．３mmol）、酢酸４．５０ml（４．７２g、７８．５mmol）、及びジメチルスルホキシド１５mLを、３５℃にて７時間攪拌した。該反応混合物を３％の塩酸水溶液で酸性化し、ジエチルエーテルで抽出した（３×２０ml）。混成有機相を、２Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で抽出した（３×２０ml）。塩基性の水相を、３％の塩酸水溶液で酸性化し、沈殿を生成させた。固体を、濾過によって回収し、化合物０．７９g（収率３０％）、融点９０−１℃を得た。
【００３８】
（方法Ｉ：化合物６４の調製）
イサトン酸無水物及び４-（４アミノフェニル）酪酸から出発し、方法Ｆを用いて、４-（４-（２-アミノベンゾイル）アミノフェニル）酪酸を調製した。
４-（４-（２-アミノベンゾイル）アミノフェニル）酪酸４．７３g（１６．０mmole）及びトリエチルオルトフォルマート４０mlのスラリーを、アルゴン雰囲気下におき、１８時間加熱還流した。該反応物は、還流中により透明になった。該反応混合物を、室温に冷却し、得られた固体を濾過によって回収し、生成物４．４７g（収率８８％）、融点２０１−２０４℃を得た。
【００３９】
（方法Ｊ：化合物６３の調製）
４-（４-（２-ヒドロキシフェニル）チオフェニル）酪酸の、塩化メチレン中０．０５Ｍの溶液を、０℃にてｍ-クロロペル安息香酸４等量で処理した。
該反応混合物を、２５℃に加温し、１２時間攪拌した。溶媒を除去した。残渣を、酢酸エチル／ヘキサン／酢酸を溶離剤として使用するフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、生成物を得た。
【００４０】
（方法Ｋ：化合物８４の調製）
８-Ｎ-（２-アミノベンゾイル）アミノカプリン酸を、イサトン酸無水物及び８-アミノカプリン酸から出発し、方法Ｆを使用して調製した。
８-Ｎ-（２-アミノベンゾイル）アミノカプリン酸６．８８g（２４．７mmol）及び塩化メチレン１００mlのスラリーを、０℃に冷却し、ヘキサメチレンジイソシアナート２．００ml（２．０８g、１２．４mmol）及び塩化メチレン５mlの溶液で処理した。該反応混合物を、２時間加熱還流し、２５℃に冷却し、エタノール２０mlで希釈した。得られた固体を、濾過によって単離し、１／２／１の酢酸エチル／エタノール／水から再結晶し、黄褐色固体として生成物５．１５g（収率５７％）、融点１３８−１４２℃を得た。
化合物１３５もまた、適当な出発物質を用い、この方法によって調製可能であった。
【００４１】
（方法Ｌ：化合物５１の調製）
８-（Ｎ-６-クロロ-２-メトキシベンゾイル）アミノカプリン酸を、２-クロロ-６-メトキシ安息香酸及び８-アミノカプリン酸から出発し、方法Ａを使用して調製した。
塩化メチレン２００ml中、８-（Ｎ-６-クロロ-２-メトキシベンゾイル）アミノカプリン酸１．２７g（３．７２mmol）の懸濁液を、アルゴン雰囲気下で０℃に冷却し、塩化メチレン中１．０Ｍのトリ臭化ホウ素溶液８mlで処理した。６０分間攪拌した後、ＴＬＣは、反応が完了したことを示した。該反応混合物を、水でクエンチし、３０分間攪拌した。層が分離した。水相を、塩化メチレンで抽出した（２×３０ml）。混成有機相を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮した。得られた白色固体を、メタノール／アセトン／水から再結晶させ、生成物０．５g（収率４３％）、融点１５６−７℃を得た。
【００４２】
（方法Ｍ：化合物１７の調製）
ジヒドロクマリン４．２８mL（０．０３４mole）、アセトニトリル７５ml、トリエチルアミン（３．４８g、０．０３４３mole）、及び３-（４-アミノフェニル）プロピオン酸（０．０３４mole）の溶液を、アルゴン雰囲気下で攪拌し、当該フラスコを１８時間加熱還流した。該反応物を室温に冷却し、アセトニトリルを真空下で除去した。残渣を塩化メチレン及び１Ｎの塩酸水溶液中で攪拌し、白色固体を生成させた。該固体を濾過し、水及び塩化メチレンで濯いだ後、５０℃にて真空乾燥させ、生成物９．１７g（収率８６．１％）、融点１６３−１６５℃を得た。
化合物１６もまた、適当な出発物質を使用し、この操作によって調製した。
【００４３】
（方法Ｎ：化合物５２の調製）
キシレン５０ml中、３-ヒドロキシフェニル酢酸１０．０g（６５．８mmol）の溶液を、酢酸無水物６．４５ml（６８．４mmol）で処理した。この混合物を、キシレン及び酢酸副生成物のほとんどが蒸留により除去されるまで、約２．５時間還流させた。オリゴ-（３-ヒドロキシフェニル酢酸）が、褐色オイルとして単離された。
このオイルを、１，４-ジオキサン１５０mlに溶解させた。８-アミノカプリン酸９．９７g（６２．７mmol）及び２ＮのＮａＯＨ溶液３４．５mlの溶液を、該オリゴマー溶液に添加した。反応混合物を一晩加熱還流させた。ジオキサンを真空下で除去した。褐色の残渣を、２ＮのＮａＯＨ中に取り出し、酢酸エチルを１００mlずつ二回用いて抽出した。水相を２Ｎの硫酸溶液で酸性化した後、酢酸エチルを１００mlずつ三回用いて抽出した。混成酢酸エチル層を活性炭で脱色し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。生じた褐色オイルを、溶離液として酢酸エチル：ヘキサン：酢酸（６０：４０：１）を用い、シリカゲルカラムを使用するカラムクロマトグラフィーによって精製した。生じた白色固体を、温水（４０−５０℃）で洗浄し、生成物を白色固体として得た。
化合物４１、４５及び４７もまた、適当な出発物質を用いてこの方法により調製した。
【００４４】
（方法Ｏ：化合物２２の調製）
３（-４-（２アミノベンゾイル）アミノフェニル）プロプリオン（proprionic）３．０g（１１．０mmol）及び塩化メチレン１０mlの溶液。酢酸無水物（１．１２g、１．０４ml、１１．０mmol）を、３０分間に渡り滴々と加えた。酢酸無水物を全て添加したところで、該反応物を室温にて１８時間攪拌した。該反応は、ＨＰＬＣによって測定されるように完了した。生成した固体を濾過により単離した。生成した白色固体を、減圧オーブン中で一晩乾燥させ、生成物を得た。
【００４５】
（方法Ｐ：化合物２３の調製）
２-スルホ安息香酸環状無水物５．１３g（２７．９mmol）、４-（４-アミノフェニル）酪酸５．０g（２７．９mmol）及びアセトニトリル１００mlの混合物を、１８時間攪拌した。乳状の溶液を濃縮した。残渣を冷温の塩酸水溶液５０ml中に取り出し、酢酸エチルで抽出（５×５０ml）し、濃縮した。
残渣を、溶離剤としてアセトニトリルを使用するカラムクロマトグラフィーによって精製し、生成物を得た。
【００４６】
（方法Ｑ：化合物５７の調製）
５-クロロ-２-ヒドロキシベンズアミド（５８．０mmol）、ピリジン（２２ml）、及びアセトニトリル（２５ml）の溶液１０gを、アイスバス中で攪拌した。クロロ蟻酸エチル（６．１ml、０．０６３８mol）を滴々と添加した。淡赤色の溶液を１０℃未満で３０分間攪拌した。アイスバスを、オイルバスと交換した。該反応混合物を９５℃に加熱し、揮発物を蒸留によって除いた（４３ml）。該反応物を室温に冷却したところ、白色固体が生成した。該混合物を水（１００ml）に注ぎ、濃塩酸水溶液で酸性化した。生じた固体を濾過し、高温のエタノールから再結晶して６-クロロ-２Ｈ-１，３-ベンズオキサジン-２，４（３Ｈ）-ジオン９．７７gを得た。
６-クロロ-２Ｈ-１，３-ベンズオキサジン-２，４（３Ｈ）-ジオン９．７７g（５０mmol）及びＤＭＦ６０mlのスラリーを、１，１０-ジブロモデカン（５２．５２g、０．１７５mol）で処理し、ＤＭＦ（６０ml）を添加した。ジイソプロピルエチルアミン（９．６ml、５５mmol）を滴々と添加した。温度計及びコンデンサーを取り付け、当該フラスコをオイルバス中に設置した。該反応物を約３時間、６０℃に加熱し、４７℃に冷却し、ヘキサン（１５０ml）を添加した。該混合物を水（１７５ml）で希釈した。生じた固体を、濾過によって除去した。水相を加温したヘキサンで洗浄した。生じた固体をヘキサン層から濾過により除去し、加温したヘキサンから再結晶させたところ、６-クロロ-（１０-ブロモデシル）-２Ｈ-１，３-ベンズオキサジン-２，４（３Ｈ）-ジオン１０．３９gが得られた。
６-クロロ-（１０-ブロモデシル）-２Ｈ-１，３-ベンズオキサジン-２，４（３Ｈ）-ジオン（１０．３９g、０．０２５mol）、硝酸ナトリウム（５．５２g、０．０８mol）及びＤＭＳＯ（６０ml）の混合物を、アルゴン雰囲気下で攪拌した。酢酸（１４．９ml）を添加し、該反応物を７５℃に６時間加熱した。室温に冷却した後、該反応混合物を酢酸エチルに溶解させ、０．５ＮのＨＣｌ（×２）及び２ＮのＮａＯＨ（×２）で洗浄した。水酸化ナトリウム層を、２時間２０分間攪拌し、該溶液を２ＭのＨ２ＳＯ４で酸性化した。固体を濾過し、塩化メチレン及びヘキサンから再結晶した。収量は３．０gであった。
【００４７】
（方法Ｒ：化合物７１の調製）
モノ-メチルフタラート３．２２g（１８．４mmol）、トリエチルアミン２．９０ml（２．１１g、２０．８mmol）及びアセトン２０mlの溶液をアイス（塩）バス中で冷却し、クロロ蟻酸エチル２．００ml（２．２７g、２０．９mmol）及びアセトン１０mlの溶液を２０分間に渡って滴々と添加して処理した。白色の懸濁溶液を１５分間攪拌し、ナトリウムアジド２．５３g（３８．９mmol）及び水８mlの溶液で処理した。３０分間攪拌した後、依然懸濁した溶液を氷水５０mlに注ぎ、トルエンで抽出した（３×３０ml）。トルエン相を、硫酸ナトリウムで乾燥させ、８０分間加熱還流させた。該反応混合物を０℃に冷却した。３-（４-アミノフェニル）プロピオン酸３．１１g（１８．８mmol）を、数回に分け、５分間に渡って添加した。６４時間攪拌した後、該反応混合物を、３：１のジオキサン／水の溶液８０mlで希釈し、３時間加熱還流した。冷却した混合物を２Ｎ（１×３０ml）及び０．５Ｎ（２×３０ml）の水酸化ナトリウムで抽出した。混成水相を酸性化したところ、白色の固体が形成した。濾過により単離し、酢酸エチルに溶解させ、不溶性の物質を濾過し、濾液を濃縮して、固形生成物１．１３gを得た。
【００４８】
（方法Ｓ：化合物６９の調製）
４-ヒドロキシキノアゾリン３．１７g（２１．７mmol）、ジメチルホルムアミド３滴及び塩化チオニル２０．０mlのスラリーを加熱還流した。１５０分後、黄色透明の溶液を３０℃に冷却した。過剰の塩化チオニルを、５０mmの真空下にて蒸留して除いた。１．０mmの真空下にて１５分後、フラスコの乳白／黄色の内容物を塩化メチレン３０ml中に取り出し、３-（４-アミノフェニル）プロピオン酸３．６１g（２１．９mmol）及びイソプロパノール４０mlのスラリーで処理した。該反応混合物を１８時間攪拌した。明黄色固体が濾過により単離され、これを真空オーブン中で乾燥させて生成物を得た。
遊離のアミンを単離するため、酸性化をｐＨ４．５６にまでしか行わなかったこと以外は、この方法に従い、化合物７０もまた、調製された。
【００４９】
（方法Ｔ：化合物４６の調製）
酢酸無水物（６．４５ml、６．９８g、６８．４mmol）、4-ヒドロキシフェニル酢酸（１０．００g、６５．８mmol）、及びキシレン（５０ml）を、マグネチック攪拌棒、温度計、及びコンデンサーを備えたDean-Starkトラップを取り付けた１００mL三口フラスコに入れた。該フラスコを加熱還流したところ、反応混合物は澄んで約１００℃の黄色溶液となった。揮発性有機物のほとんど（キシレン及び酢酸）が２時間に渡ってDean-Starkトラップ内に蒸留除去された（１３５−１４６℃）。蒸留を更に１時間続け、その間に容器温度を１９０℃にゆっくりと上昇させたところ、留出液は減衰して滴状になった。残渣を高温のままアルミニウムトレイにあけた。冷却すると、褐色のワックス状固体が生成した。
２Ｎの水酸化ナトリウム（３４．４ml、３６g、６８．７mmol）及びアミノカプリン酸（９．９４g、６２．５mmol）の溶液を、オリゴ（４-ヒドロキシフェニル酢酸）（１１．０６g、８１．３mmol）及びジオキサン（１５０ml）の溶液に、５分間に渡って添加した。該反応混合物を９０℃に５．５時間加熱した（ＨＰＬＣによれば、この時間で当該反応は完了したと測定された）。橙色透明の反応混合物を４０℃に冷却した。真空中でジオキサンを除去した。褐色の残渣を、２Ｎの水酸化ナトリウム中に取り出し、酢酸エチルで抽出し（２×１００ml）、酸性化した。酢酸エチルで抽出し（３×１００ml）、炭素で脱色し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で濃縮したところ、褐色のオイルが得られた。温水と共に粉砕した（２度）ところ、黄褐色固体が得られ、これをエタノール／水から二度再結晶させ、黄褐色固体として生成物２．４８gが得られた。
化合物１０６及び１０８もまた、適当な出発物質を使用し、この方法によって調製された。
【００５０】
（方法Ｕ：化合物７２の調製）
４-ヒドロキシクマリン４．１１g（２５．３mmol）、４-（４-アミノフェニル）酪酸４．５４g（２５．３mmol）及び酢酸２０mlの溶液を、７日間加熱還流した。該反応混合物を２５℃に冷却したところ、乳白色固体が生成し、これを濾過により回収した。濾液を水５０mlで希釈したところ、第二固形物が生成し、これもまた濾過によって回収した。二つの固体を混合し、６５％エタノール／水から再結晶し、生成物０．６２gを得た。
【００５１】
（方法Ｖ：化合物８５の調製）
塩化メチレン７０ml中１０-アミノデカン酸５．００g（２６．７mmol）のスラリーを、クロロトリメチルシラン（５．８０g、５３．５mmol）６．７８mlで処理し、１４０分間還流させた。反応混合物を０℃に冷却し、次いでトリエチルアミン（４．１g、４０．１mmol）で処理した。この混合物を約２０分間攪拌した後、塩化メチレン１０ml中にｏ-フルオロベンゾイルクロライド３．９１ml（４．２４g、２６．７mmol）の溶液を、１５分間に渡って当該反応混合物に滴々と添加した。該反応混合物を０℃にて３０分間、その後２５℃にて１８時間攪拌した。真空下で塩化メチレンを除去し、ＮａＯＨ溶液（２Ｎ）１００mlを残渣に添加した。この混合物を、１時間攪拌した後に塩酸水溶液（２Ｍ）でｐＨ＝１に酸性化した。該酸性化混合物を、酢酸エチルで抽出し（２×１００ml）、活性炭で脱色し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。生じた白色固体を、５０％のエタノール／水混合物から再結晶し、白色固体を得、これを真空中２５℃にて２４時間乾燥させた。
生成物の収量は、６．５７g（７９．５％）、ｍｐ＝８５−８６℃であった。
化合物８６−１０１もまた、適当なアミノ酸を適当な酸塩化物と反応させることにより、この方法によって調製した。
【００５２】
（方法Ｗ：化合物１０２の調製）
塩化メチレン１５０ml中のグリシン２０．７２g（０．２７６mol）のスラリーを、クロロトリメチルシラン７０．０６ml（５９．９７g、０．５５２mmol）で処理し、２時間還流させた。該反応混合物を０℃に冷却した後、トリエチルアミン１１５．４１ml（８３．７９g、０．８２８mol）で処理した。この混合物を約２０分間攪拌した後、塩化メチレン７５ml中４-メトキシ-２-アセチルベンゾイルクロライド２０．７２g（０．２７６mol）の溶液（５８．７０g、０．２７６mol）を、１５分間に渡って反応混合物に滴々と添加した。該反応混合物を０℃にて３０分間、２５℃にて１８時間攪拌した。塩化メチレンを真空中で除去し、残渣にＮａＯＨ溶液（２Ｎ）２００mlを添加した。この混合物を数時間攪拌した後、該混合物を塩酸溶液（２Ｍ）でｐＨ＝３に酸性化した。生じた固体を真空中４０℃にて濾過して除去した。該固体を水／エタノール（３／１）から再結晶して固体を得、真空中２５℃にて２４時間乾燥させた。生成物の収量は、２７．３５g（４４％）、融点は１８５．５−１８９℃であった。
上記固体から、加温しつつエタノール１５０ml中に溶解させることによって、ナトリウム塩を合成した。水酸化ナトリウム（水１４．５ml中４．９５g）をエタノール溶液に添加し、室温に冷却した。生じた固体を、濾過を補助し、固体を洗浄するためにヘプタンを使用して濾過して採った。乾燥後、黄褐色の固体が得られた（２７．７３，９２．３７％）。融点２３０℃より高温。ＣＨＮ（Ｃ１０Ｈ１０Ｎ１Ｏ５Ｎａ・０．４０Ｈ２Ｏ：Ｃ，４７．２１；Ｈ，４．２８；Ｎ，５．５１；Ｎａ，９．０４について算出）；実測値：Ｃ，４７．１４；Ｈ，４．３２；Ｎ，５．３６；Ｎａ，８．４５及び水２．８３％。
【００５３】
（方法Ｘ：化合物１０３の調製）
塩化メチレン３００ml中β-アラニン２５．０g（０．２８１mol）のスラリーを、クロロトリメチルシラン７１．３３ml（６１．０６g、０．５６２mol）で処理し、１．５時間還流させた。該反応混合物を０℃に冷却し、トリエチルアミン１１７．５０ml（８５．３０g、０．８４３mol）で処理した。この混合物を約２０分間攪拌した後、塩化メチレン１５０ml中アセチルサリチロイルクロライド（５５．７３g、０．２８１mol）の溶液を１５分間に渡って該反応混合物に滴々と添加した。反応混合物を０℃にて３０分間、次いで２５℃にて１８時間攪拌した。真空下で塩化メチレンを除去し、ＮａＯＨ溶液（２Ｎ）２００mlを残渣に添加した。この混合物を、１時間攪拌した後に硫酸（２Ｍ）でｐＨ＝１に酸性化した。生じたオイルを、酢酸エチルで抽出し（３×２００ml）、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で溶媒を除去した。固形物を酢酸エチル／ヘキサン（１／１）から再結晶して固体を得、これを真空中２５℃にて２４時間乾燥させた。生成物の収量は９．２０g（１６％）であった。ＣＨＮ（Ｃ１０Ｈ１１Ｎ１Ｏ４：Ｃ，５７．０３；Ｈ，５．２７；Ｎ，６．６７について算出）；実測値：Ｃ，５７．４１；Ｈ，５．３０；Ｎ，６．６９。上記固体から、加温しつつエタノール５０ml中に溶解させることによって、ナトリウム塩を合成した。水酸化ナトリウム（水５．２５ml中１．７９g）をエタノール溶液に添加し、室温に冷却した。生じた固体を濾過して採った。乾燥後、固体が得られた（５．８０g）。融点２３１−２３５℃。ＣＨＮ（Ｃ１０Ｈ１０Ｎ１Ｏ４Ｎａ・０．３５Ｈ２Ｏ：Ｃ，５０．５６；Ｈ，４．５４；Ｎ，５．９０；Ｎａ，９．６８について算出）；実測値：Ｃ，５０．３０；Ｈ，４．３７；Ｎ，５．７２；Ｎａ，９．５５及び水２．６８％。
【００５４】
（方法Ｙ：化合物１０４の調製）
４-メトキシサリチル酸（９８．７４g、０．５９mol）を、アイスバス中、塩化メチレン（５００ml）中で攪拌した。トリエチルアミン（１２３．４ml、１．５等量）及び塩化アセチル（４６．２ml、１．１等量）を、それぞれ滴々と添加した。該溶液をアイスバスから取り出し、室温にて二晩攪拌した。該反応経過をＨＰＬＣで追った。反応混合物を０．５ＮのＨＣｌ（２×２００ml）及び水（２×２００ml）で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中で減量させた。生じた固体を塩化メチレン／ヘキサンから再結晶した。収量は、４-メトキシ-２-アセチル安息香酸６１．７２gであった。１Ｈ ＮＭＲによって構造を確認した。
４-メトキシ-２-アセチル安息香酸（２０g、０．１９５mol）及び塩化メチレン（１００ml）の混合物に、塩化チオニル（１３．８ml、２等量）及びＤＭＦ１滴を添加した。該混合物を１．５時間還流させた後、室温に冷却し、真空中で減量させたところオイルを生じた。４-メトキシ-２-アセチルベンゾイルクロライドを、精製せずに使用した。
塩化メチレン（１００ml）中、４-（４-アミノフェニル）酪酸（７．８７g、０．０４４mol）のスラリーを、ＴＭＳクロライド（１１．２ml）で処理し、１．５時間還流させた。該反応混合物を０℃に冷却し、トリエチルアミン（１８．４ml）を滴々と加えて処理した。この混合物を約２０分間攪拌した後、上記の通り調製した４-メトキシ-２-アセチルベンゾイルクロライド（１０g）の塩化メチレン（１０ml）中の溶液を、該反応混合物に１５分間に渡って滴々と添加した。アイスバスを除き、該混合物を室温にて一晩攪拌した。塩化メチレンを真空中で除去し、２ＮのＮａＯＨ溶液（１００ml）を残渣に添加した。この混合物を１時間攪拌した後、該混合物を２ＭのＨＣｌでｐＨ＝１にまで酸性化した。その後、酸性化混合物を、酢酸エチルで抽出し（２×１００ml）、活性炭素で脱色し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。生じた白色固体を、５０％のエタノール／水混合物から抽出し、白色固体を得、これを真空中２５℃にて２４時間乾燥させた。ＣＨＮ（Ｃ１８Ｈ１９ＮＯ５：Ｃ，６５．５４；Ｈ，５．８１；Ｎ，４．２５について算出）；実測値：Ｃ，６５．４９；Ｈ，５．８４；Ｎ，４．２３。７．７６g（５３．６％）、融点＝１７７−１８２℃。
【００５５】
（方法Ｚ：化合物１０５の調製）
４-ブロモ酪酸（２６．１７g、０．１６mol）をメタノール（１５０ml）に加え、硫酸数滴を添加した。この溶液を３・１／４時間還流させた。ＴＬＣ（１：１ＥｔＯＡｃ／Ｈｅｘ）を行い、エステル生成の完了が示された。この混合物を真空中でオイルに減量させた。該オイルを塩化メチレンに溶解させ、水、飽和炭酸ナトリウム及び塩水で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空中でで減量した。構造を１Ｈ ＮＭＲで確認し、メチル（４-ブロモ）ブタノアート２０．２６gを得た。
６-クロロカルサラム（6-Chlorocarsalam）（１２．４g、１．１２等量）、メチル（４-ブロモ）ブタノアート（１０．１３g、１．０等量）及び炭酸ナトリウム１０．１３g（１０．１３g、１．１２等量）を、ＤＭＡ５０ml中で攪拌した。該溶液を、４．５時間還流させた後、一晩室温にまで冷却した。固体を濾過して採り、エタノールで洗浄した。水及び２ＮのＮａＯＨを濾液に添加した。該混合物を２．５時間加熱した。ＨＰＬＣを行い、加水分解の完了を示した。該溶液を濃ＨＣｌでｐＨおよそ１に酸性化した。得られた白色固体を濾過して採り、真空中で一晩Ｐ２Ｏ５を作用させた。固体をメタノール／水中で再結晶させ、濾過し、乾燥させて、化合物７．３５gを得た。ＣＨＮ（Ｃ１１Ｈ１２ＮＯ４Ｃｌ：Ｃ，５１．２８；Ｈ，４．６９；Ｎ，５．４４について算出）；実測値：Ｃ，５０．９２；Ｈ，４．５９；Ｎ，５．４６。融点１３６−１４０℃。この化合物の、同様の方法で調製した別のバッチは、元素分析によって、より純粋な生成物であることが示され、その融点は１５３−１５５℃であった。
【００５６】
（方法ＡＡ：化合物１１８の調製）
炭酸ナトリウム（５．３７g、０．０５０６mol）を、６-クロロカルサラム（１０．０g、０．０５０６mol）及びジメチルアセトアミド（５０ml）を収容してなる２５０mlの三口丸底フラスコに添加した。エチル-５-ブロモへプタノアート（１０．９１g、０．０４６０mol）を、攪拌した反応混合物に一度に加え、該反応混合物の加熱を開始した。反応温度を８０℃に維持し、１６時間加熱した。加熱を中止し、該反応混合物を室温に冷却した。該反応混合物を真空濾過し、濾過ケークをエチルアルコール２０mlで二度洗浄した。橙褐色固体が沈殿したことが確認されるまで、濾液に水を加えた。この固体を、真空濾過にて単離し、まずエチルアルコール２０mlで、次いでヘプタン２０mlで洗浄した。この固体を丸底フラスコに移し、２ＮのＮａＯＨ２００mlを添加した。加熱還流を開始し、１時間継続した。該反応物を２５℃に冷却し、反応混合物を２ＮのＨＣｌ溶液で酸性化した。沈殿してきた白色固体を濾過によって単離し、３０：７０のエチルアルコール：水から再結晶し、真空中で一晩乾燥させた。生成物９．５５g（６３．０％）を単離した。融点：１１５−１１６℃。燃焼分析：％Ｃ：５６．０９（理論値）、５５．９３（実測値）；％Ｈ：６．０１（理論値）、６．０９（実測値）；％Ｎ：４．６７（理論値）、４．６４（実測値）。１Ｈ ＮＭＲ分析：（ｄ６−ＤＭＳＯ）：δ１２．７，ｓ，１Ｈ（ＣＯＯＨ）；δ１２．０，ｓ，１Ｈ（ＯＨ）；δ８．８８，ｔ，１Ｈ（ＮＨ）；δ７．９４，ｄ，１Ｈ（Ｈ、アミドに対してオルト）；δ７．４２，ｄｄ，１Ｈ（Ｈ、アミドに対してパラ）；δ６．９２，ｄ，１Ｈ（Ｈ、ヒドロキシドに対してオルト）；δ３．２７，ｑ，２Ｈ（ＣＨ２、アミドに対してアルファ）；δ２．２０，ｔ，２Ｈ（ＣＨ２、ＣＯＯＨに対してアルファ）；δ１．４０，ｍ，４Ｈ（ＣＨ２、アミドに対してベータ、ＣＨ２、ＣＯＯＨに対してベータ）；δ１．３０，ｍ，４Ｈ（残留脂肪族ＣＨ２）。
化合物１１４、１１６及び１１７もまた、適当な出発物質を使用してこの方法により調製された。
【００５７】
（方法ＢＢ：化合物１２１の調製）
無水トルエン１６０mL中、２-アミノ-４-クロロフェノール（１７．８８g、１２４．５mmol）、８-エトキシ-８-オキソオクタン酸（２５．１９g、１２４．５mmol）、ホウ酸（０．３８５g、６．２３mmol）、及び２-アミノ-５-メチルピリジン（０．６７５g、６．２３mmol）の懸濁液を、窒素雰囲気下で４時間加熱還流（１１０℃）し、その間該反応にて生成した水（２．５mL）は、共沸蒸留によってDean-Stark分離ユニット内へ除去した。シリカゲル上での薄層クロマトグラフィー（溶離剤：ＥｔＯＡｃ／ヘプタン：１／１）により、反応の完了が示された。冷却した反応混合物にＮａＯＨの２Ｎ溶液（１２５mL、２５０mmol）を添加した。該反応物を４時間加熱還流した後、冷却した。冷却した反応混合物を、酢酸エチル（３００mL）及び水（１５０mL）で希釈した。水相を酢酸エチル（２５０mL）で二度洗浄した。注意深く分離した後、水相を冷蔵し、塩酸の１０％溶液（８６．２０mL、２５０mmol）で酸性化したところ固体が生成し、これを濾過し、ヘキサンで洗浄し、真空中で乾燥させた。ジクロロメタンと共に粉砕したところ、所望の酸（８-（５-クロロ-２-ヒドロキシアニリノ）-８-オキソオクタン酸）（２２．３９g、６０％）が乳白色固体として生成した。ＨＰＬＣ（カラム：Higgins Kromasil 100 C18、水／アセトニトリル／酢酸：９５０／５０／１、３mL／分、２２０nm）Ｒｔ５．３８分；融点１２３−１２４℃；
[元素分析データ]
化合物１１９を、適当な出発物質を使用して同様の方法により調製した。化合物１２４−１３０もまた、この方法を適当な出発物質に使用して調製可能であった。
【００５８】
（実施例２：パラチロイドホルモンデリバリー）
デリバリー剤化合物及びパラチロイドホルモン残基１−３４（ＰＴＨ）（化合物１０３を含む溶液には残基１−３８）の経口栄養（ＰＯ）または結腸内（ＩＣ）投薬溶液を調製した。化合物の溶液は、該化合物のナトリウム塩を使用して調製するか、もしくは該化合物の溶液を調製し、攪拌し、１等量の水酸化ナトリウム（１．０Ｎ）を添加し、さらに水（ＰＯ溶液向け）または２５％プロピレングリコール水溶液（ＩＣ向け）で希釈することにより当該遊離酸をそのナトリウム塩に変換することによって調製した。最終投薬溶液は、該化合物溶液をＰＴＨストック溶液（典型的には５mg ＰＴＨ/mlの濃度を有する）と混合し、所望の体積（通常は３．０ml）に希釈することによって調製した。該化合物及びＰＴＨ投薬量は、下記の表１に列挙した。
体重２００−２５０gオスのSprague-Dawleyラットを、２４時間断食させ、投薬の１５分前にケタミン（４４mg/kg）及びクロルプロマジン（１．５mg/kg）を投与した。ラットに、投薬溶液の一つを、ＰＯ向けに１ml/kgで、ＩＣ向けには０．５ml/kgで投与した。血液サンプルを、ＰＴＨ濃度の血清測定のため、尾の動脈から逐次採取した。血清ＰＴＨ濃度は、ＰＴＨ放射免疫測定キット（Peninsula Laboratories, Inc.(San Carlos, CA)製、Kit# RIK 6101）によって定量化した。結果を下記の表１に示した。
【００５９】
【表１】
2010024236.tif 000006
【００６０】
（実施例３：ヘパリンデリバリー）
２５％プロピレングリコール水溶液中にデリバリー剤化合物及びヘパリンナトリウムＵＳＰを含有する結腸内投薬（ＩＣ）組成物を、混合によって調製した。当該化合物のナトリウム塩を使用するか、または遊離酸を、１等量の水酸化ナトリウム（１．０Ｎ）でナトリウム塩に変換した。典型的には、化合物及びヘパリン粉末を混合し、２５％プロピレングリコール水溶液を添加し、ＮａＯＨ溶液を添加し、内容物に超音波処理を施した後、希釈して体積３．０とした。ｐＨをチェックし、必要であればｐＨ＝７−８に調整した。最終的な化合物及びヘパリンの投薬量は、下記の表２に列挙した。
体重２００−２５０gオスのSprague-Dawleyラットを、２４時間断食させ、投薬の１５分前にケタミン（４４mg/kg）及びクロルプロマジン（１．５mg/kg）を投与した。該投薬溶液を、断食させたラットに、１ml/kgの投薬体積で投与した。ケタミン（４４mg/kg）の投与に次いで、血液サンプルを、心臓穿刺により採取した。Henry, J. B., Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods; Philadelphia, PA; W.B. Saunders (1979).の方法に従い、活性化部分トロンボプラスチン時間（ＡＰＴＴ）を利用してヘパリン活性を測定した。結果を下記の表２にまとめた。
【００６１】
【表２】
2010024236.tif 000007
【００６２】
（実施例４：組換えヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）経口デリバリー）
リン酸緩衝液中、デリバリー剤化合物及びｒｈＧＨの経口栄養（ＰＯ）投薬溶液を調製した。該化合物の溶液は、該化合物のナトリウム塩を使用して調製するか、もしくは該化合物の溶液を調製し、攪拌し、１等量の水酸化ナトリウム（１．０Ｎ）を添加し、さらにリン酸緩衝液で希釈することにより当該遊離酸をそのナトリウム塩に変換することによって調製した。最終投薬溶液は、該化合物溶液をｒｈＧＨストック溶液（典型的には１５mg ｒｈＧＨ/mlの濃度を有する）と混合し、所望の体積（通常は３．０ml）に希釈することによって調製した。該化合物及びｒｈＧＨ投薬量は、下記の表３に列挙した。
体重２００−２５０gオスのSprague-Dawleyラットを、２４時間断食させ、投薬の１５分前にケタミン（４４mg/kg）及びクロルプロマジン（１．５mg/kg）を投与した。ラットに、投薬溶液１ml/kgを投与した。血液サンプルを、血清ｒｈＧＨ濃度の測定のため、尾の動脈から逐次採取した。血清ｒｈＧＨ濃度は、ｒｈＧＨ免疫測定テストキット（Genzyme Corporation Inc.(Cambridge, MA)製、Kit# K1F4015）によって定量化した。結果を下記の表３に示した。
【００６３】
【表３】
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【００６４】
（実施例５：サケカルシトニン（ｓＣＴ）デリバリー）
水中、デリバリー剤化合物及びサケカルシトニン（ｓＣＴ）の経口栄養（ＰＯ）投薬組成物を調製した。量は表４にまとめた。化合物４５０mgを水２．０mlに加えた。該化合物のナトリウム塩を使用するか、または、得られた溶液を攪拌して１等量の水酸化ナトリウム（１．０Ｎ）を添加し、更に水で希釈することによって、遊離の酸をナトリウム塩に変換した。ｓＣＴ９０μgを当該溶液に加えた。その後水を加え、全体積を３．０mlとした。該溶液は、１５０mg/mlの最終化合物濃度を有していた。（化合物１１８及び１２３については、当該溶液を６．０mlに希釈し、投薬体積を二倍にした）。総ｓＣＴ濃度は、３０μ/mlであった。（化合物１２３については、異なる量のｓＣＴを使用して、２．０mg/kgを投薬する場合の最終ｓＣＴ投薬を１００μg/kgとした）。
体重２００−２５０gオスのSprague-Dawleyラットを、２４時間断食させ、投薬の１５分前にケタミン（４４mg/kg）及びクロルプロマジン（１．５mg/kg）を投与した。ラットに、投薬溶液１ml/kg（化合物１１８及び１２３については２ml/kg）を投与した。血液サンプルを尾の動脈から逐次採取した。血清ｓＣＴは、ＥＩＡキット（Peninsula Laboratories, Inc.(San Carlos, CA)製、Kit# EIAS-6003）で試験することにより測定した。化合物１４及び１０５については、キットの標準プロトコルを下記の通り変更した：ペプチド抗体５０μlと共に２時間、振盪しつつ暗所にてインキュベートし、プレートを洗浄し、血清及びビオチニル化ペプチドを加え、さらに緩衝液４mlで希釈し、暗所にて一晩振盪した。結果を下記の表４に示す。
【００６５】
【表４】
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【００６６】
上記の特許、特許出願、試験方法、及び文献は、参照のため、ここにその全体を取り込むこととする。
上記詳細な説明に鑑みれば、当業者には、本発明の多数の変形が自ずから示唆される。こうした明白な変形全てが、添付の請求の範囲に完全に包含されることを企図したものである。