(57)【要約】【課題】  セサミンはゴマに含まれる主要なリグナン化合物の一種であり、ゴマ中には０．５−１％程度含まれている。セサミンには多くの生理活性があることが知られ、例えば、抗酸化作用、抗高血圧作用、抗炎症作用等が公知である。また、セサミン類とガンマ−オリザノールとを含有する組成物がセサミンの生理活性を高めるという技術も開示されている。本発明の課題は、セサミンが有する生理活性を顕著に高めた物質およびその製造方法を提供することである。【解決手段】  セサミン類と、該セサミン類を包接する包接化合物とからなる包接体。セサミン類と、該セサミン類を包接する包接化合物とを水中で混合する工程を有する包接体を製造する方法。セサミン類が、リポソームに内包されてなる複合体。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
セサミン類と、該セサミン類を包接する包接化合物とからなる包接体。
【請求項２】
セサミン類と、ビタミンＥと、該セサミン類およびビタミンＥを包接する包接化合物とからなる包接体。
【請求項３】
前記包接化合物が、シクロデキストリン化合物である請求項１または２に記載の包接体。
【請求項４】
セサミン類と、該セサミン類を包接する包接化合物とを水中で混合する工程を有する請求項１に記載の包接体を製造する方法。
【請求項５】
セサミン類と、ビタミンＥと、該セサミン類およびビタミンＥを包接する包接化合物とを水中で混合する工程を有する請求項２に記載の包接体を製造する方法。
【請求項６】
セサミン類が、リポソームに内包されてなる複合体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、包接体およびその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
セサミンはゴマに含まれる主要なリグナン化合物の一種であり、ゴマ中には０．５−１％程度含まれている。セサミンには多くの生理活性があることが知られ、例えば、抗酸化作用、抗高血圧作用、抗炎症作用等が公知である。
一方、特許文献１にはセサミン類とガンマ−オリザノールとを含有する組成物が開示され、ガンマ−オリザノールがセサミンの生理活性を高めるという内容が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２００９−７３７４９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明の目的は、セサミン類が有する生理活性を顕著に高めた物質を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、セサミン類を包接化合物により包接した包接体あるいはセサミン類をリポソームにより内包してなる複合体が、セサミン類のみを用いる場合よりも、顕著に優れた各種生理活性を発現することを見出し、本発明を完成するに至った。なお本発明の包接体において、包接化合物とはホスト分子を意味し、セサミン類、ビタミンＥはゲスト分子である。
【０００６】
請求項１に記載の発明は、セサミン類と、該セサミン類を包接する包接化合物とからなる包接体である。
請求項２に記載の発明は、セサミン類と、ビタミンＥと、該セサミン類およびビタミンＥを包接する包接化合物とからなる包接体である。
請求項３に記載の発明は、前記包接化合物が、シクロデキストリン化合物である請求項１または２に記載の包接体である。
請求項４に記載の発明は、セサミン類と、該セサミン類を包接する包接化合物とを水中で混合する工程を有する請求項１に記載の包接体を製造する方法である。
請求項５に記載の発明は、セサミン類と、ビタミンＥと、該セサミン類およびビタミンＥを包接する包接化合物とを水中で混合する工程を有する請求項２に記載の包接体を製造する方法である。
請求項６に記載の発明は、セサミン類が、リポソームに内包されてなる複合体である。
なお本発明において、「・・・と、・・・とからなる包接体」とは、包接化合物に包接されているゲスト分子が前記「・・・」で示される化合物に限定されることを意図したものではなく、少なくとも「・・・」で示される化合物が包接されていればよく、任意のその他のゲスト分子（例えばＣｏＱ１０等）が包接化合物に包接されていてもよい。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、セサミン類を包接化合物により包接またはリポソームに内包したので、セサミン類のみを用いる場合よりも、セサミン類が有する各種生理活性を飛躍的に高めることができる。
【発明を実施するための形態】
【０００８】
（セサミン類）
本発明に用いることができるセサミン類としては、セサミン及びその類縁体を含むものであり、セサミン類縁体としては、エピセサミンの他、例えば特開平４−９３３１号公報に記載されたジオキサビシクロ〔３．３．０〕オクタン誘導体がある。セサミン類の具体例としては、セサミン、セサミノール、エピセサミノール、セサモリン等を例示できる。なかでも、セサミン及びエピセサミンが好ましい。
【０００９】
なお、セサミン類の代謝体も、本発明の効果を示す限り、本発明のセサミン類に含まれるセサミン類縁体であり、本発明に使用することができる。
本発明に用いるセサミン類は、その形態や製造方法等によって、何ら制限されるものではない。例えば、セサミン類としてセサミンを選択した場合には、通常、ごま油から公知の方法（例えば、特開平４−９３３１号公報に記載された方法）によって抽出したセサミン（セサミン抽出物または精製物という）を用いることができる。
【００１０】
本発明で使用される包接化合物は、とくに制限されないが、シクロデキストリン化合物が好適に用いられる。
シクロデキストリン化合物としては、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン等が挙げられ、中でもγ−シクロデキストリンが好ましい。
【００１１】
セサミン類をシクロデキストリン化合物により包接するには、セサミン類とシクロデキストリン化合物との混合物に水と少なくとも１種以上の有機溶媒を適当割合で配合し、公知の混練法、液相混合法、溶媒蒸発法を利用して包接する方法が挙げられる。該有機溶剤としては、好ましくは粉末化の最終段階で除去しやすいものであり、例えば、メタノール、エタノール、ブタノール、プロパノール等のアルコール類、酢酸エチル等のエステル類、ジクロロメタン、クロロホルム等のハロゲン化炭素水素、アセトン、エーテル等から選ばれる少なくとも１種が挙げられる。セサミン類とシクロデキストリン化合物との割合は、例えばセサミン類１質量部に対し、シクロデキストリン化合物０．５〜１００質量部が挙げられる。また、セサミン類１質量部に対し、前記有機溶媒は０．５〜１０重量部、水は１〜２０重量部が好ましい。
続いて、得られた包接化合物は、洗浄、乾燥工程を経て粉末化することができる。
上記技術は、セサミン類を使用することを除き、例えば特開２００２−３４８２７５号公報に記載されている。
【００１２】
これとは別に、水中において、セサミン類とシクロデキストリン化合物とをホモジナイザーによって混合する方法も挙げられ、本発明では当該方法がとくに好ましい。この方法において、セサミン類とシクロデキストリン化合物との割合は、例えばセサミン類１質量部に対し、シクロデキストリン化合物０．５〜１００質量部であり、水の量は、セサミン類とシクロデキストリン化合物とを良好かつ効率的に混合可能な量であればよく、とくに制限されないが、例えばシクロデキストリン化合物１質量部に対し、１〜１００質量部が好ましい。
ホモジナイズ後に得られた乳化液は、乾燥工程を経て粉末化することができる。
上記技術は、セサミン類を使用することを除き、例えば特開２００８−２９１１５０号公報に記載されている。
【００１３】
また本発明においては、ビタミンＥをさらに包接化合物に包接させてもよい。これにより、セサミン類の有する生理活性向上効果がさらに向上する。
本発明でいうビタミンＥとは、誘導体類も含むものであり、その例としては、アルファ−トコフェロール、ベータ−トコフェロール、ガンマ−トコフェロール、デルタ−トコフェロール、アルファ−トコトリエノール、ベータ−トコトリエノール、ガンマ−トコトリエノール、デルタ−トコトリエノール、酢酸トコフェロール、ニコチン酸トコフェロール等が挙げられる。
ビタミンＥの使用量は、セサミン類を１としたとき（質量基準）、ビタミンＥを０．５〜１．５の割合で配合するのが好ましい。
また、ビタミンＥを使用する形態において、セサミン類およびビタミンＥを包接する工程は、前記のセサミン類をシクロデキストリン化合物により包接する工程と同様であり、そこにビタミンＥを好適には上記使用量でもって添加することができる。
【００１４】
また、セサミン類をリポソームに内包するには、公知の各手段を採用することができ、とくに制限されない。
例えば、構成成分としてはリン脂質、本発明の有効成分および水が挙げられる。リン脂質としては、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、リゾホスファチジルコリン、スフィンゴミエリン、卵黄レシチン、大豆レシチン等の天然リン脂質、ジオレオイルホスファチジルコリン等の合成リン脂質、前記リン脂質の不飽和炭素鎖を水素により飽和とした水素添加リン脂質、あるいはその他大腸菌等の微生物から抽出されるリン脂質等が挙げられる。これらリン脂質は、一種または二種以上を組み合わせて用いることができる。この中で、水素添加卵黄リン脂質、水素添加大豆リン脂質、水素添加ホスファチジルコリン、水素添加ホスファチジルセリンから選ばれる一種またはニ種以上が好ましい。
また、リポソーム調製時には、界面活性剤、防腐剤、油剤、着色剤、水溶性高分子、酸類、塩類等を必要に応じて添加してもよい。
得られたリポソームの粒径は、エクストルーダー、高圧乳化機、超音波等を用いて調整可能であり、例えば１ｎｍ〜１０００ｎｍ、好ましくは５ｎｍ〜５００ｎｍ、さらに好ましくは１０ｎｍ〜２００ｎｍである。
【実施例】
【００１５】
以下、実施例により本発明をさらに説明するが、本発明は下記例に限定されるものではない。
【００１６】
実施例１
セサミン類としては、セサミン（セサミン：エピセサミン＝１：１）を用いた。
ビタミンＥは、アルファ−トコフェロールを使用した。
【００１７】
セサミン ２０ｇを５００ｍＬビーカーへ入れ、そこに脱気した脱イオン水１５０ｍＬを添加した。このビーカーにγ−シクロデキストリン ８５ｇを加え、高速ホモジナイザーを用い、１０，０００−１２，０００ｒｐｍにて３０分間攪拌した。得られた乳化液を凍結乾燥機によって乾燥し、粉末とした。この粉末は、セサミンがγ−シクロデキストリンにより包接された包接体であり、セサミンの含有量は約２％である。これを試料１とする。
【００１８】
セサミン  ２０ｇおよびビタミンＥ  ３ｇを５００ｍＬビーカーへ入れ、そこに脱気した脱イオン水を２００ｍＬ添加した。このビーカーにγ−シクロデキストリン１００ｇを加え、高速ホモジナイザーを用い、１０，０００−１２，０００ｒｐｍにて３０分間攪拌した。得られた乳化液を凍結乾燥機によって乾燥し、粉末とした。この粉末は、セサミンおよびビタミンＥがγ−シクロデキストリンにより包接された包接体であり、セサミンおよびビタミンＥの含有量はそれぞれ約２％である。これを試料２とする。
【００１９】
常法に従い、下記表１に示される各成分をホモジナイザーを用いて攪拌し、粒径約２００ｎｍの、セサミン（本発明の有効成分ともいう）が内包されたリポソームを調製した。これを試料３とする。
【００２０】
【表１】
2010024240.tif 000002
【００２１】
ＳＴＤ ＤＤＹ 雄性マウス（５週齢：各群ｎ＝３〜４）に対し、上記試料１〜３のいずれかを経口摂取させた。
試料１〜３を摂取させた試験区ではいずれも、セサミンの摂取量が５ｍｇ／ｋｇ体重となるように調整した。したがって試料２を摂取させた試験区では、ビタミンＥの摂取量も５ｍｇ／ｋｇ体重となる。なお、コントロール群１のマウスには、オリーブ油のみを摂取させて試験を行った。コントロール群２のマウスには、セサミンをオリーブ油に分散したものを摂取させて試験を行った。
【００２２】
摂取から３０分後に、マウスを深さ８０センチの水槽に入れて、無動に至るまでの時間を計測した。各試験群のマウス（各群ｎ＝３〜４）の無動に至るまでの時間の平均値として、コントロール群１は約１００秒、コントロール群２は約１８０秒であったのに対し、試料１投与群は約３５０秒、試料２投与群は、約４００秒、試料３投与群は約３５０秒であった。
以上から、セサミンをシクロデキストリンで包接した包接体およびセサミンをリポソームで内包した複合体は、セサミンの抗疲労効果を著しく高めていることが判明した。また、この効果はビタミンＥを併用するとさらに高まることも判明した。
【００２３】
実施例２
実施例１の試料１〜３のいずれかを、脳卒中易発症性高血圧自然発症ラット（SHR−SP）に経口投与した。飼料は、一般市販飼料を用いた。試料１〜３の試験区をそれぞれ１〜３区とする。対照区１は、いずれの試料も投与せず、前記一般試料を用いて飼育した。対照区２は、セサミンのみを経口投与した。なお飼料は自由摂取とした。
試験区１〜３ではいずれも、１日につき、セサミンの摂取量を５ｍｇ／ｋｇ体重とした。したがって試験区２では、１日につき、ビタミンＥの摂取量も５ｍｇ／ｋｇ体重となる。なお、対照区２は、１日につき、セサミンの摂取量を５ｍｇ／ｋｇ体重とした。
それぞれの飼料で５週齢の雄性SHR−SPを各区６匹ずつ７週間飼育し、12週齢に達した時の血圧値と体重の変化について調べた。
その結果、下記表２に示すように、セサミンをシクロデキストリンで包接した包接体およびセサミンをリポソームで内包した複合体は、セサミンの血圧低下効果をさらに高めていることが判明した。また、この効果はビタミンＥを併用するとさらに高まることも判明した。
【００２４】
【表２】
2010024240.tif 000003
【００２５】
実施例３
ＳＤ系ラット（２２週齢）メスの卵巣を外科的に取り除き、骨粗鬆症のモデルラットを作成した。卵巣摘出ラットを７匹ずつ５群に分け、３５日間の試験期間中、１日置きに（計１７回）、実施例１の試料１〜３のいずれかを経口摂取させた。飼料はオリエンタル酵母株式会社のマウス・ラット・ハムスター用固形飼料ＣＲＦ−１を用い、給餌および給水方法は自由摂取とした。試験期間中、各群間で、餌の摂取量に差は認められなかった。
試料１〜３を摂取させた試験区をそれぞれ試験区１〜３とする。試験区１〜３ではいずれも、１日につき、セサミンの摂取量を５ｍｇ／ｋｇ体重とした。したがって試験区２では、１日につき、ビタミンＥの摂取量も５ｍｇ／ｋｇ体重となる。
試験開始後３５日目にラットの体重を測定した後、大腿骨を取り出した。大腿骨は、接着組織および筋肉を取り除いて分析に使用した。大腿骨の体積を測定した後、エタノールで３回洗浄し、次にアセトンで３回洗浄したのち、一晩乾燥し、その後、重量を測定して大腿骨の乾燥重量を求めた。体積および乾燥重量から、骨密度（乾燥重量ｇ／体積ｍｍ3 ）を測定した。なお対照実験としては、前記試料１〜３のいずれも投与しないものとした比較例１、セサミンのみを５ｍｇ／ｋｇ体重として投与した比較例２とする。結果を表３に示す。
【００２６】
【表３】
2010024240.tif 000004
【００２７】
表３の結果から、セサミンをシクロデキストリンで包接した包接体およびセサミンをリポソームで内包した複合体は、セサミンの抗骨粗鬆症効果をさらに高めていることが判明した。また、この効果はビタミンＥを併用するとさらに高まることも判明した。
【００２８】
実施例４
体重２０ｇ前後のＩＣＲ系雄性マウス（１群５匹）に、高コレステロール−コール酸食餌（７１．９％標準餌、１５％ショ糖、２％食塩、１０％ココナッツオイル、０．６％コレステロール、０．２％コール酸、０．３％塩化コリン）を試験第１日目から第７日目まで給餌（自由摂取）した。試験第６日目と第７日目に、上記実施例１の試料１〜３のいずれかを５ｍｇ／ｋｇ体重として経口投与した（それぞれ１〜３区とする）。その後、２４時間の絶食を行い、試験第８日目にマウスから血液を採取し、血清を分離した。
【００２９】
また、採取した血清の一部にヘパリンを添加し沈降させ、低比重リポタンパク（ＬＤＬ）としてヘパリン沈降リポタンパクを得た。血清中の総コレステロール値及びＬＤＬ中のコレステロール値を、シー・シー・アライン（Ｃ．Ｃ．Ａｌｌａｉｎ ｅｔ ａｌ．）らの報告（クリニカル ケミストリイ（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、１９７４年、２０巻、４７０−４７５頁）に従って、測定した。
【００３０】
血清中の総コレステロール値からＬＤＬコレステロール値を引いた値を、高比重リポタンパク（ＨＤＬ）コレステロール値として算出した（平均値）。なお対照群１は、上記試料１〜３をいずれも投与していない群であり、対照群２はセサミンのみを５ｍｇ／ｋｇ体重として投与した群である。
その結果を表４に示した。
【００３１】
【表４】
2010024240.tif 000005
【００３２】
表４の結果から、セサミンをシクロデキストリンで包接した包接体およびセサミンをリポソームで内包した複合体は、セサミンのコレステロール低下効果をさらに高めていることが判明した。また、この効果はビタミンＥを併用するとさらに高まることも判明した。