(57)【要約】      （修正有）【課題】新規なコラゲナーゼ活性阻害剤を提供する。【解決手段】ジャガイモ抽出物がコラゲナーゼ活性阻害作用を有することを見出し、ジャガイモ抽出物を含むことを特徴とするコラゲナーゼ活性阻害剤を完成させ、前記ジャガイモ抽出物は好ましくは、分子量１万以上の画分を抽出した。コラゲナーゼ活性阻害剤は、ジャガイモ抽出物をそのまま、または種々の添加成分を加えて、飲食品類、化粧品類として用いることができる。【選択図】図１
2010208952.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ジャガイモ抽出物を含むことを特徴とする、コラゲナーゼ活性阻害剤。
【請求項２】
請求項１記載のジャガイモ抽出物が、分子量１万以上の画分を抽出したものであることを特徴とする、コラゲナーゼ活性阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ジャガイモ抽出物を含むことを特徴とする、新規なコラゲナーゼ活性阻害剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
コラーゲンは皮膚の主成分であり、弾力性のある繊維状のタンパク質である。コラーゲン産生量が正常ならば、しみやくすみのない滑らかな肌となり、弾力のある血管が形成され動脈硬化などが起こりにくくなる。しかしながら、コラーゲンは、体内でコラゲナーゼの作用により分解してしまう。そのため、コラーゲンの分解を抑制し、皮膚の老化を防止するコラゲナーゼ活性阻害剤となり得る種々の物質が研究されている。
【０００３】
現在までに、コラゲナーゼ活性阻害剤の代表的なものとして、コーヒー酸またはその塩（特許文献１）、グアバの葉（特許文献２）、ハマメリス抽出物（特許文献３）、コケモモ、シラカバ、ハマスゲ、ボダイジュ、緑茶（特許文献４）、シモツケソウ、ヤドリギ、ホホバ葉、蓮葉、レッドクローバー（特許文献５）、松樹皮抽出物（特許文献６）、ケール（特許文献７）、カムカム種子の抽出物（特許文献８）、アセロラ種子の抽出物（特許文献９）などが知られている。
【０００４】
さらに、加水分解したジャガイモタンパクが、コラゲナーゼ活性阻害作用を有することは知られている。（特許文献１０）
【０００５】
しかしながら、加水分解したジャガイモタンパクに関するものを除いて、ジャガイモ抽出物について、コラゲナーゼ活性阻害についての研究は進んでいなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開平５−１１７１４５号公報
【特許文献２】特開平７−２９１８７３号公報
【特許文献３】特開平８−２８３１３３号公報
【特許文献４】特開２００３−１２５３１号公報
【特許文献５】特開２００３−４８８４６号公報
【特許文献６】特開２００３−２３８４２６号公報
【特許文献７】特開２００３−２３８４２６号公報
【特許文献８】特許第３６３５０８１号公報
【特許文献９】特開２００７−３１４５５２号公報
【特許文献１０】特開２００５−２６３６８９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は新規なコラゲナーゼ活性阻害剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
そこで、本発明者らは、鋭意研究を重ねた結果、ジャガイモ抽出物が顕著にコラゲナーゼ活性を阻害することを見出し、本発明を完成させた。好ましくは、前記ジャガイモ抽出物は分子量１万以上の画分を抽出したものである。
【０００９】
すなわち本発明は、ジャガイモ抽出物を含むことを特徴とする新規なコラゲナーゼ活性阻害剤を提供するものである。さらには、前記ジャガイモ抽出物が、分子量１万以上の画分を抽出したものであることを特徴とする、コラゲナーゼ活性阻害剤を提供するものである。
【発明の効果】
【００１０】
本発明に関するジャガイモ抽出物を含むコラゲナーゼ活性阻害剤を用いると、コラゲナーゼによるコラーゲンの分解を抑制できる。本発明の形態に関しては特に限定されるものではなく、ジャガイモ抽出物をそのまま、または種々の成分を加えて、飲食品類、化粧品類として用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】ジャガイモ抽出物のコラゲナーゼ活性阻害試験の結果を示した図である。横軸がジャガイモ抽出物の濃度で、縦軸が阻害率である。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下、本発明の実施形態について説明する。なお、本発明は、下記の実施形態に限定して解釈すべきではなく、特許請求の範囲における記載の範囲内で種々の変更が可能である。
【００１３】
本発明で使用するジャガイモ抽出物のジャガイモの品種は特に限定されず、例えば男爵薯、メークイン、キタアカリ、とうや、トヨシロ、インカのめざめ、デジマ、十勝こがねなどを用いることができる。ジャガイモの産地については特に限定されないが、北海道産のジャガイモが好ましい。
【００１４】
本発明で使用するジャガイモ抽出物の製造方法としては特段の制限はなく、通常食品の製造において使用可能な抽出方法、抽出溶媒、製造助剤などの添加を行うことができる。抽出方法としては搾汁により搾汁液を回収する方法であってもよい。また、得られた抽出液を常法により乾燥して使用することができる。乾燥方法としては賦型剤を添加しスプレードライなどにより乾燥する方法であってもよい。
【００１５】
本願発明に用いるジャガイモ抽出物は、エキス、エキスの乾燥粉末などであれば良く、特段の制限をされるものではない。
【００１６】
本発明の形態に関しては特に限定されるものではなく、ジャガイモ抽出物をそのまま、または種々の成分を加えて、飲食品類、化粧品類として経口または経皮で用いることができる。
【００１７】
飲食品類としては、ジャガイモ抽出物をそのまま、または種々の栄養成分を加えて、食用に適した形態、例えば、粉末状・粒状・顆粒状・液状・ペースト状・クリーム状・タブレット状・カプセル状・カプレット状・ソフトカプセル状・錠剤状・棒状・板状・ブロック状・丸薬状・固形状・ゲル状・ゼリー状・グミ状・ウエハース状・ビスケット状・飴状・チュアブル状・シロップ状・スティック状などに成形して食品素材として提供することができる。また、水、牛乳、豆乳、果汁飲料、乳清飲料、清涼飲料、青汁、ヨーグルトなどに添加して使用してもよい。
【００１８】
化粧品類としては、例えば、化粧水、化粧クリーム、乳液、クリーム、パック、ヘアトニック、ヘアクリーム、シャンプー、ヘアリンス、トリートメント、ボディシャンプー、洗顔剤、石鹸、ファンデーション、整髪料などの形態で化粧品素材として使用できる。
【００１９】
本発明のコラゲナーゼ活性阻害剤に含まれるジャガイモ抽出物の配合量としては、乾燥重量として０．０００１〜５０質量％が好ましく、０．０１〜１０質量％がさらに好ましいが、用いる剤型、使用対象等の様々の条件に応じて、広範囲でその配合量を適宜設定できる。本発明のコラゲナーゼ活性阻害剤に含まれるジャガイモ抽出物の分子量は、好ましくは１万以上の画分を抽出したものである。
【実施例】
【００２０】
以下に実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明がこの実施例により制限されないことはいうまでもない。
【００２１】
（ジャガイモ抽出物の製造）
生のジャガイモを粉砕、搾汁し、ジャガイモエキスを得た。ジャガイモエキスがｐＨ４を示すように塩酸を用いてｐＨ調整し、８０℃に加熱後、中和しフィルターろ過を行った。得られたエキスを膜処理し、分子量１万以上の画分を抽出、抽出物にデキスリンを添加して乾燥しジャガイモ抽出物を得た。
【００２２】
（サンプル溶液の調製）
ダルベッコＰＢＳ（Phosphate
buffered saline）（−）を用いて、ジャガイモ抽出物を調製し、サンプル溶液とした。
【００２３】
（酵素溶液の調製）
コラゲナーゼＢ（ロッシュ製：Ｃａｔ Ｎｏ．１０８８ ８０７）を０．１％ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）含有ダルベッコＰＢＳ（−）を用いて１０μｇ／ｍｌとなるように調製し、酵素溶液とした。
【００２４】
（蛍光基質溶液の調製）
DMSOで溶解した蛍光基質（ペプチド研究所製：Ｃｏｄｅ
３１６３ｖ）を０．１％ＢＳＡ含有ダルベッコＰＢＳ（−）を用いて５μＭとなるように調製し、蛍光基質溶液とした。
【００２５】
（被験溶液の調製）
９６ウェルブラックプレートにサンプル溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加した。その後、酵素溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、蛍光基質溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で６０分間インキュベートを行った後、３２０nmで励起し４０５ｎｍにおける蛍光強度を測定した。
【００２６】
（被験溶液ｂｌａｎｋの調製）
９６ウェルブラックプレートにサンプル溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加した。その後、酵素溶液の代わりに０．１％ＢＳＡ含有ダルベッコＰＢＳ（−）を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、蛍光基質溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で６０分間インキュベートを行った後、３２０nmで励起し４０５ｎｍにおける蛍光強度を測定した。
【００２７】
（対照溶液の調製）
９６ウェルブラックプレートにダルベッコＰＢＳ（−）を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加を行った。その後、酵素溶液を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、蛍光基質溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で６０分間インキュベートを行った後、３２０nmで励起し４０５ｎｍにおける蛍光強度を測定した。
【００２８】
（対照溶液ｂｌａｎｋの調製）
９６ウェルブラックプレートに０．１％ＢＳＡ含有ダルベッコＰＢＳ（−）を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加した。その後、０．１％ＢＳＡ含有ダルベッコＰＢＳ（−）を１００μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で１０分間インキュベートを行った。さらに、蛍光基質溶液を５０μｌ／ｗｅｌｌで添加し、３７℃で６０分間インキュベートを行った後、４０５ｎｍにおける蛍光強度を測定した。
【００２９】
（コラゲナーゼ活性の測定）
コラゲナーゼ阻害活性は次の式から求められる阻害率で表した。
(数１)  阻害率（％）＝１００−［（Ａ−Ｂ）／（Ｃ−Ｄ）］× １００
Ａ：被験溶液の４０５ｎｍにおける蛍光強度。
Ｂ：被験溶液ｂｌａｎｋの４０５ｎｍにおける蛍光強度。
Ｃ：対照溶液の４０５ｎｍにおける蛍光強度。
Ｄ：対照溶液ｂｌａｎｋの４０５ｎｍにおける蛍光強度。
【００３０】
さらに、濃度と活性の回帰分析から、ＩＣ５０（５０％阻害濃度）を算出した。
【００３１】
［実施例］
ジャガイモ抽出物を被験溶液とし、コラゲナーゼ活性阻害率を算出した。
【００３２】
コラゲナーゼ活性阻害率について、ＩＣ５０値を表１に示す。
【００３３】
【表１】
2010208952.tif 000003
【００３４】
以上の結果より、ジャガイモ抽出物がコラゲナーゼ活性阻害を示すことが明らかとなった。
【産業上の利用可能性】
【００３５】
本発明者らはジャガイモ抽出物がコラゲナーゼ活性阻害作用を有することを見出し、ジャガイモ抽出物を含むことを特徴とするコラゲナーゼ活性阻害剤を完成させた。前記ジャガイモ抽出物は好ましくは、分子量１万以上の画分を抽出したものである。本発明に関するジャガイモ抽出物を含むコラゲナーゼ活性阻害剤を用いると、コラゲナーゼによるコラーゲンの分解を抑制できる。本発明に用いるコラゲナーゼ活性阻害剤は、ジャガイモ抽出物をそのまま、または種々の成分を加えて、飲食品類、化粧品類として経口または経皮で用いることができる。
【図１】
2010208952.tif 000004