(57)【要約】      （修正有）【課題】５−ＨＴ２Ｂ受容体拮抗作用を有する化合物を有効成分として含有する医薬または医薬組成物を提供する。また、同受容体に対して高い選択的親和性を示し、さらに拮抗化合物として他の受容体への関与を低減させることで、当該受容体が関与する様々な好ましくない作用やＱＴ延長などの毒性を軽減する医薬または医薬組成物を提供する。【解決手段】下記、一般式（Ｉ）で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩。2010155802.tif 000037【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記、一般式（Ｉ）で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【化１】
2010155802.tif 000035
［式中、
Ｒ１、Ｒ１Ａ、Ｒ１Ｂは、それぞれ独立に炭素数１から６の直鎖状、分岐状、もしくは環状の低級アルキル基、または炭素数１から６の直鎖状、分岐状、もしくは環状のハロアルキル基；
Ｒ２は炭素数１から６の直鎖状、分岐状、もしくは環状の低級アルキル基、炭素数１から６の直鎖状、分岐状、もしくは環状のハロアルキル基、ＯＨ、ＯＲ１Ａ、ハロゲン、−（ＣＨ２）ａＯＨ、ＣＯ２Ｈ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ１Ａ、ＣＯＮＲ１ＡＲ１Ａ、ＣＮ、ＣＯＲ１Ａ、ＮＨ２、ＮＨＲ１Ａ、ＮＲ１ＡＲ１Ａ、ＮＨＣＯＲ１Ａ、ＳＲ１Ａ、ＳＯＲ１Ａ、ＳＯ２Ｒ１Ａ、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＲ１Ａ、ＳＯ２ＮＲ１ＡＲ１Ａ、またはＮＨＳＯ２Ｒ１Ａであり、ｍが複数の場合、Ｒ２は同一でも異なってもよい。また、Ｒ２がＲ１Ａを２個有する場合、それらは同一でも異なってもよく、場合によってはＲ１Ａと他のＲ１Ａとの間での結合も可能である；
Ｒ３は水素原子またはハロゲン原子；
Ｒ４、Ｒ５は炭素数１から６の直鎖状、分岐状、もしくは環状の低級アルキル基であり、Ｒ４とＲ５は互いに結合して、１つまたは２つ以上のヘテロ原子を含む飽和複素環を形成してもよく、当該飽和複素環はｐ個のＲ６で置換されてもよい；
Ｒ６は−（ＣＨ２）ａＯＨ、−（ＣＨ２）ａＯＲ１Ｂ、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＲ１ＢＲ１Ｂ、ＣＯＲ１Ｂ、ＳＯ２Ｒ１Ｂ、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＲ１ＢＲ１Ｂであり、ｐが複数の場合、Ｒ６は同一でも異なってもよく、Ｒ６と他のＲ６との間での結合も可能である；
ａは０、１、または２；
ｍは０、１、２、または３；
ｎは１、または２；
ｐは０、１、２、３、４、または５；
Ｃｙは、ヘテロ原子を含んでもよい単環または二環性の飽和もしくは不飽和の環状構造を表す。]
【請求項２】
Ｒ２が炭素数１から６の直鎖状、分岐状、もしくは環状の低級アルキル基、ＯＨ、ＯＲ１Ａ（Ｒ１Ａは前述と同意義、以下同じ）、ＳＯ２Ｒ１Ａ、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ１Ａ、ＣＯＮＲ１ＡＲ１Ａ、ＮＨＲ１Ａ、または、ＮＲ１ＡＲ１Ａを表す請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項３】
一般式（Ｉ）で示される化合物が、
５−［２−（２−クロロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（３−メトキシフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２−シアノフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（３−シアノフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２−エチルフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−５−｛２−［２−（トリフルオロメトキシ）フェニル］エチニル｝−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−｛２−［２−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチニル｝−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−｛２−［２−（ジメチルカルバモイル）フェニル］エチニル｝−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（６−メチルピリジン−２−イル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（５−メチルピリジン−２−イル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（４−メチルピリジン−２−イル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（３−メチルピリジン−２−イル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（６−メトキシピリジン−２−イル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−５−［２−（チオフェン−２−イル）エチニル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−５−［２−（１，３−チアゾール−２−イル）エチニル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−｛２−［２−（メチルスルファニル）フェニル］エチニル｝−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２−メタンスルホニルフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−５−［２−（ナフタレン−１−イル）エチニル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（２−メチルフェニル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（３−メチルフェニル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（４−メチルフェニル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（３−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２，４−ジフルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（３−クロロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（４−クロロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２−メトキシフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（３，５−ジフルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（４−フルオロ−３−メチルフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−５−｛２−［２−（トリフルオロメチル）フェニル］エチニル｝−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−５−｛２−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］エチニル｝−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−（２−シクロヘキシルエチニル）−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド
５−［２−（４−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（４−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（ピペリジン−１−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２−メトキシフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（ピペリジン−１−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（４−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（ピロリジン−１−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
Ｎ−［２−（ジエチルアミノ）エチル］−５−［２−（４−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２−メトキシフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（ピロリジン−１−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
および
Ｎ−［２−（ジエチルアミノ）エチル］−５−［２−（２−メトキシフェニル）エチニル］−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド
からなる群より選択される請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【請求項４】
一般式（ＩＸ）で示される前記［１］に記載の化合物の中間体。
【化２】
2010155802.tif 000036
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は、一般式（Ｉ）で定義されたものと同じであり、カルボン酸のＯＨは、離脱可能な置換基で置き換えてもよい。］
【請求項５】
請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分とする、５−ＨＴ２Ｂ受容体に関係する疾患の治療または予防剤。
【請求項６】
請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物、またはそれらの薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項７】
哺乳類対象において５−ＨＴ２Ｂ受容体によって媒介される疾患状態の治療または予防のための医薬組成物であって、有効量の請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
【請求項８】
請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物と別異の薬理学的活性剤との組合せを含む医薬組成物。
【請求項９】
５−ＨＴ２Ｂ受容体によって媒介される疾患状態の予防または治療における使用のための、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１０】
５−ＨＴ２Ｂ受容体によって媒介される疾患状態の予防または治療のための医薬を製造するための、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用。
【請求項１１】
請求項１に記載の化合物、またはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれを含む医薬組成物の有効量をヒトまたは哺乳動物に投与することを特徴とする偏頭痛、炎症性痛覚、侵害受容性疼痛、線維筋痛症、慢性腰痛、内臓痛、胃食道逆流性疾患（ＧＥＲＤ）、便秘、下痢、機能性胃腸疾患、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、喘息、変形性関節炎、リウマチ性関節炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、糸球体腎炎、腎炎、皮膚炎、肝臓炎、血管炎、腎虚血、脳卒中、心筋梗塞、脳虚血、アルツハイマー症、可逆的気道閉塞、成人呼吸器系統症候群、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺高血圧症（ＰＨ）、突発性間質性肺炎、気管支炎、肝線維症、多肺線維症、発性硬化症、抑うつ症、不安神経症、悪性腫瘍、もしくは肥満の予防または治療方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、５−ＨＴ２Ｂ受容体拮抗活性を有する新規５−エチニルピラゾール−３−カルボキサミド誘導体に関する。本発明の化合物は、５−ＨＴ２Ｂ受容体の選択的拮抗剤として有用な化合物であり、本受容体が関与する多種な疾患の予防または治療に有用である。また、本発明は、前記化合物を含む医薬組成物にも関する。
【背景技術】
【０００２】
セロトニン（５−ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ）は１９４８年に最初に発見された神経伝達物質の一種で、視床下部や大脳基底核、延髄の縫線核などに高濃度に分布しているトリプタミン誘導体の一種である。セロトニンは、ヒトを含む動植物に一般的に含まれる化学物質で、トリプトファンから生合成される。人体中には約１０ミリグラムのセロトニンが存在しており、そのうちの大部分は小腸の粘膜にあるクロム親和細胞に存在する。ここで合成されたセロトニンは腸などの筋肉に作用し、消化管の運動に大きく関係している。また、セロトニンは中枢神経系にも存在し、人間の精神活動にも大きく影響している。日常生活から、うつ病や神経症などの精神疾患に至るまでセロトニンの影響が注目されている。近年、セロトニンに作用する薬物を用いることで、これらの疾病の治療薬が開発されている。
【０００３】
一方、セロトニン受容体とは主に中枢神経系にあるＧタンパク質結合受容体の一種である。セロトニン（５−ＨＴ）受容体は、５−ＨＴ１から５−ＨＴ７の７つのファミリーに分類され、合計１４個のサブタイプが認知されている。それぞれのサブタイプについて薬理学的研究が進められている（非特許文献１）が、中でも、５−ＨＴ２ファミリーには、５−ＨＴ２Ａ、５−ＨＴ２Ｂ、５−ＨＴ２Ｃの三種類のサブタイプが存在することが知られている。さらに、５−ＨＴ２Ｂ受容体に関しては、様々な薬理作用が報告され、多種の疾患治療または予防に有用であることが報告されている。
【０００４】
すなわち、５−ＨＴ２Ｂ受容体拮抗化合物は偏頭痛、炎症性痛覚、侵害受容性疼痛、線維筋痛症、慢性腰痛、内臓痛、胃食道逆流性疾患（ＧＥＲＤ）、便秘、下痢、機能性胃腸疾患、過敏性腸症候群（以下、ＩＢＳと略す）、喘息、変形性関節炎、リウマチ性関節炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、糸球体腎炎、腎炎、皮膚炎、肝臓炎、血管炎、腎虚血、脳卒中、心筋梗塞、脳虚血、アルツハイマー症、可逆的気道閉塞、成人呼吸器系統症候群、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺高血圧症（ＰＨ）、突発性間質性肺炎、気管支炎、肝線維症、多肺線維症、発性硬化症、抑うつ症、不安神経症、悪性腫瘍、もしくは肥満を含む、多種の疾患の治療または予防に有用であることが知られている（非特許文献２〜６）。
【０００５】
また、５−ＨＴ２Ｂ受容体に関しては、５−ＨＴ２Ｂ選択的拮抗化合物を用いた実験から、当該受容体と消化器、肺動脈血管との関係が知られている。
消化器での役割に関しては、電気刺激によるヒト腸管組織の収縮を抑制したことから、５−ＨＴ２Ｂ拮抗化合物が過敏性腸症候群に有用であることが示されている（特許文献１）。セロトニン刺激によるラット腸管組織の収縮を抑制したことから、５−ＨＴ２Ｂ拮抗化合物が機能性腸障害の治療に有効であるとの記載がある（特許文献２）。また、２，４，６−トリニトロベンゼンスルホン酸（以下ＴＮＢＳと略す）処置ラットでは、結腸伸展刺激に対する痛覚閾値が低下することが報告されており、ＩＢＳにおける内臓知覚過敏モデルとされている。（非特許文献７）。
その他、一般的にＩＢＳモデルと考えられているラットストレス誘発排便モデルにおいて、ストレス負荷による排便重量の増加を５−ＨＴ２Ｂ拮抗化合物が抑制し、下痢型ＩＢＳに有用であることが確認できる。さらに、ラットにストレス負荷を与えると、結腸伸展刺激に対する痛覚反応が増加し、５−ＨＴ２Ｂ拮抗化合物はその痛覚反応の増加を抑制する。
【０００６】
また、肺動脈血管での役割に関しては、肺性高血圧の慢性低酸素マウスモデルの改善に５−ＨＴ２Ｂ受容体が関与し、５−ＨＴ２Ｂ拮抗化合物が肺性高血圧症の治療に有効であるとの記載がある（非特許文献８）また、５−ＨＴ２Ｂ選択的拮抗化合物は、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）に伴う肺高血圧を有する患者を対象にしたプラセボ対照二重盲検初期第２相試験で有意な血圧低下作用を示したとの報告があり（非特許文献９）、ヒトでの安全性と有用性が確認されている。
【特許文献１】国際公開第０２／０５６０１０号パンフレット
【特許文献２】特表平９−５１０２１６号公報
【非特許文献１】Phamacol.Rev.1994,46,157-203
【非特許文献２】Johnson KWCephalalgia23(2):117-23(2003)
【非特許文献３】Allman JM et al, TRENDS In Cognitive Sciences9(8):367-373(2005)
【非特許文献４】Borman RA et al, Br J Pharmacol. 135 (5):1144-51(2002)
【非特許文献５】Beattie DT et al,Br J Pharmacol.143(5):549-60(2004)
【非特許文献６】Kubera M et al, Psychiatry Res.30;134(3):251-8(2005)
【非特許文献７】The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics, Vol.302, No.3, 1013-1022 (2002); 2) Pharmacology (2008), 81(2), 144-150))
【非特許文献８】Nature Medicine, 8(10):1129-1135,2002
【非特許文献９】PRX-08066:EPIX Pharmaceuticals
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明の課題は、５−ＨＴ２Ｂ受容体刺激によって介在される疾病状態の治療または予防のために有用な５−ＨＴ２Ｂ受容体拮抗作用を有する化合物を有効成分として含有する医薬または医薬組成物を提供することである。また、５−ＨＴ２Ｂ受容体に対して高い選択的親和性を示し、さらに拮抗化合物として他の受容体への関与を低減させることで、当該受容体が関与する様々な好ましくない作用を軽減することも課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の発明者らは、前記の課題を解決すべく鋭意研究を重ね、特定のユニークな化学構造を有する新規５−エチニルピラゾール−３−カルボキサミド誘導体が、セロトニン受容体サブタイプの内、５−ＨＴ２Ｂ受容体に選択的かつ強い拮抗作用を有することを見出した。加えて、本発明の新規５−エチニルピラゾール−３−カルボキサミド誘導体が、ラットＴＮＢＳ誘発ＩＢＳモデルにおいて内臓痛閾値を有意に改善することを確認した。したがって、本発明の新規５−エチニルピラゾール−３−カルボキサミド誘導体は、前述の５−ＨＴ２Ｂ受容体刺激によって介在される偏頭痛、炎症性痛覚、侵害受容性疼痛、線維筋痛症、慢性腰痛、内臓痛、胃食道逆流性疾患（ＧＥＲＤ）、便秘、下痢、機能性胃腸疾患、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、喘息、変形性関節炎、リウマチ性関節炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、糸球体腎炎、腎炎、皮膚炎、肝臓炎、血管炎、腎虚血、脳卒中、心筋梗塞、脳虚血、アルツハイマー症、可逆的気道閉塞、成人呼吸器系統症候群、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺高血圧症（ＰＨ）、突発性間質性肺炎および気管支炎、肝線維症、多発性硬化症、抑うつ症、不安神経症、悪性腫瘍、および肥満のような疾病状態の治療または予防に有用である。
本発明は、上記知見に基づき完成されたものであり、以下の化合物、またはその薬学的に許容される塩、当該化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする５−ＨＴ２Ｂ受容体に関係する疾患の治療または予防剤、当該化合物またはその薬理学的に許容される塩を含む医薬組成物、または当該化合物またはその薬理学的に許容される塩の使用方法を提供する。また、吸収、分布、代謝、排泄、など優れた薬物動態特性を有する５−ＨＴ２Ｂ受容体拮抗作用を有する化合物を提供する。すなわち、本発明は５−ＨＴ２Ｂ受容体拮抗活性を有する新規５−エチニルピラゾール−３−カルボキサミド誘導体に関し、以下の発明を包含する。
【０００９】
［１］下記、一般式（Ｉ）で示される化合物、またはその薬学的に許容される塩。
【化１】
2010155802.tif 000002
［式中、
Ｒ１、Ｒ１Ａ、Ｒ１Ｂは、それぞれ独立に炭素数１から６の直鎖状、分岐状、もしくは環状の低級アルキル基、または炭素数１から６の直鎖状、分岐状、もしくは環状のハロアルキル基；
Ｒ２は炭素数１から６の直鎖状、分岐状、もしくは環状の低級アルキル基、炭素数１から６の直鎖状、分岐状、もしくは環状のハロアルキル基、ＯＨ、ＯＲ１Ａ、ハロゲン、−（ＣＨ２）ａＯＨ、ＣＯ２Ｈ、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ１Ａ、ＣＯＮＲ１ＡＲ１Ａ、ＣＮ、ＣＯＲ１Ａ、ＮＨ２、ＮＨＲ１Ａ、ＮＲ１ＡＲ１Ａ、ＮＨＣＯＲ１Ａ、ＳＲ１Ａ、ＳＯＲ１Ａ、ＳＯ２Ｒ１Ａ、ＳＯ２ＮＨ２、ＳＯ２ＮＨＲ１Ａ、ＳＯ２ＮＲ１ＡＲ１Ａ、またはＮＨＳＯ２Ｒ１Ａであり、ｍが複数の場合、Ｒ２は同一でも異なってもよい。また、Ｒ２がＲ１Ａを２個有する場合、それらは同一でも異なってもよく、場合によってはＲ１Ａと他のＲ１Ａとの間での結合も可能である；
Ｒ３は水素原子またはハロゲン原子；
Ｒ４、Ｒ５は炭素数１から６の直鎖状、分岐状、もしくは環状の低級アルキル基であり、Ｒ４とＲ５は互いに結合して、１つまたは2つ以上のヘテロ原子を含む飽和複素環を形成してもよく、当該飽和複素環はｐ個のＲ６で置換されてもよい；
Ｒ６は−（ＣＨ２）ａＯＨ、−（ＣＨ２）ａＯＲ１Ｂ、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＲ１ＢＲ１Ｂ、ＣＯＲ１Ｂ、ＳＯ２Ｒ１Ｂ、−ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＲ１ＢＲ１Ｂであり、ｐが複数の場合、Ｒ６は同一でも異なってもよく、Ｒ６と他のＲ６との間での結合も可能である；
ａは０、１、または２；
ｍは０、１、２、または３；
ｎは１、または２；
ｐは０、１、２、３、４、または５；
Ｃｙは、ヘテロ原子を含んでもよい単環または二環性の飽和もしくは不飽和の環状構造を表す。]
［２］Ｒ２が炭素数１から６の直鎖状、分岐状、もしくは環状の低級アルキル基、ＯＨ、ＯＲ１Ａ（Ｒ１Ａは前述と同意義、以下同じ）、ＳＯ２Ｒ１Ａ、ハロゲン、ＣＯＮＨ２、ＣＯＮＨＲ１Ａ、ＣＯＮＲ１ＡＲ１Ａ、ＮＨＲ１Ａ、または、ＮＲ１ＡＲ１Ａを表す前記［１］に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
［３］一般式（Ｉ）で示される化合物が、
５−［２−（２−クロロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（３−メトキシフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２−シアノフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（３−シアノフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２−エチルフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−５−｛２−［２−（トリフルオロメトキシ）フェニル］エチニル｝−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−｛２−［２−（ヒドロキシメチル）フェニル］エチニル｝−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−｛２−［２−（ジメチルカルバモイル）フェニル］エチニル｝−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（６−メチルピリジン−２−イル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（５−メチルピリジン−２−イル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（４−メチルピリジン−２−イル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（３−メチルピリジン−２−イル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（６−メトキシピリジン−２−イル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−５−［２−（チオフェン−２−イル）エチニル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−５−［２−（１，３−チアゾール−２−イル）エチニル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（２−メチル−１，３−チアゾール−４−イル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−｛２−［２−（メチルスルファニル）フェニル］エチニル｝−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２−メタンスルホニルフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−５−［２−（ナフタレン−１−イル）エチニル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（２−メチルフェニル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（３−メチルフェニル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−５−［２−（４−メチルフェニル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（３−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２，４−ジフルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（３−クロロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（４−クロロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２−メトキシフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（３，５−ジフルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（４−フルオロ−３−メチルフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−５−｛２−［２−（トリフルオロメチル）フェニル］エチニル｝−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−５−｛２−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］エチニル｝−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−（２−シクロヘキシルエチニル）−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド
５−［２−（４−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（４−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（ピペリジン−１−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２−メトキシフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（ピペリジン−１−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（４−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（ピロリジン−１−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
Ｎ−［２−（ジエチルアミノ）エチル］−５−［２−（４−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
５−［２−（２−メトキシフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（ピロリジン−１−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド；
および
Ｎ−［２−（ジエチルアミノ）エチル］−５−［２−（２−メトキシフェニル）エチニル］−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミド
からなる群より選択される前記［１］に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
［４］一般式（ＩＸ）で示される前記［１］に記載の化合物の中間体。
【化２】
2010155802.tif 000003
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３は、一般式（Ｉ）で定義されたものと同じであり、カルボン酸のＯＨは、離脱可能な置換基で置き換えてもよい。］
［５］一般式（Ｖ）で示される前記［１］に記載の化合物の中間体。
【化３】
2010155802.tif 000004
［式中、Ｒ１、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５は、一般式（Ｉ）で定義されたものと同じである。］
［６］前記［１］に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分とする、５−ＨＴ２Ｂ受容体に関係する疾患の治療または予防剤。
［７］前記［１］から［３］のいずれかに記載の化合物、またはそれらの薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
［８］哺乳類対象において５−ＨＴ２Ｂ受容体によって媒介される疾患状態の治療または予防のための医薬組成物であって、有効量の前記［１］から［３］のいずれかに記載の化合物、またはその薬学的に許容できる塩、および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物。
［９］前記［１］から［３］のいずれかに記載の化合物と別異の薬理学的活性剤との組合せを含む医薬組成物。
［１０］５−ＨＴ２Ｂ受容体によって媒介される疾患状態の予防または治療における使用のための、前記［１］に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用。
［１１］５−ＨＴ２Ｂ受容体によって媒介される疾患状態の予防または治療のための医薬を製造するための、前記［１］に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩の使用。
［１２］前記［１］に記載の化合物、またはそれらの薬学的に許容される塩、またはそれを含む医薬組成物の有効量をヒトまたは哺乳動物に投与することを特徴とする偏頭痛、炎症性痛覚、侵害受容性疼痛、線維筋痛症、慢性腰痛、内臓痛、胃食道逆流性疾患（ＧＥＲＤ）、便秘、下痢、機能性胃腸疾患、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、喘息、変形性関節炎、リウマチ性関節炎、クローン病、潰瘍性大腸炎、糸球体腎炎、腎炎、皮膚炎、肝臓炎、血管炎、腎虚血、脳卒中、心筋梗塞、脳虚血、アルツハイマー症、可逆的気道閉塞、成人呼吸器系統症候群、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺高血圧症（ＰＨ）、突発性間質性肺炎、気管支炎、肝線維症、多肺線維症、発性硬化症、抑うつ症、不安神経症、悪性腫瘍、もしくは肥満の予防または治療方法。
【発明の効果】
【００１０】
本発明医薬の有効成分である５−エチニルピラゾール−３−カルボキサミド誘導体は、新規骨格を有し、強力かつ選択的に５−ＨＴ２Ｂ受容体の機能を阻害する。本発明医薬の強い５−ＨＴ２Ｂ受容体拮抗作用は、優れた薬理効果に基づく治療効果を示すものである。また、本発明医薬の高い選択性は、５−ＨＴ２Ｂ受容体以外の他の受容体への作用に起因する広範な副作用も軽減することから、安全性の高い治療薬または予防薬として有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１１】
本発明の化合物は５−ＨＴ２Ｂ受容体への特異的な結合活性を有することを特徴とする。本発明の化合物は５−ＨＴ２Ｂ受容体へ拮抗的に結合することにより、５−ＨＴ２Ｂの拮抗剤として５−ＨＴ２Ｂ受容体の活性を選択的に阻害し、当該受容体が関わる哺乳動物の疾患の治療または予防に有用である。
【００１２】
「拮抗剤」とはアンタゴニストとも呼ばれ、作動薬（アゴニスト）に対して拮抗的に作用してその作用を減弱させる薬剤を言う。これらの拮抗剤や作動薬が受容体の一部に結合することができる能力は結合親和性と呼ばれ、この結合親和性の評価は、後述の実施例のようにｉｎ  ｖｉｔｒｏにおける受容体への結合試験により算出されるＫＩ値、場合により同じ条件下で行われた受容体への結合試験におけるＩＣ５０値を比較することにより行われる。なお、受容体への結合試験において、一定の濃度で十分な阻害作用を示さずＩＣ５０値を算出できない場合には、その化合物のＩＣ５０値を当該濃度以上とみなすことがある。
本発明の化合物は、５−ＨＴ２Ｂ受容体への結合親和性を有し、セロトニンが５−ＨＴ２Ｂ受容体へ結合する作用を阻害する活性（阻害活性）を表すＩＣ５０値が、好ましくは１０００ｎＭ以下、より好ましくは１００ｎＭ以下、さらにより好ましくは１０ｎＭ以下、もっとも好ましくは１ｎＭ以下である。
【００１３】
本発明の化合物またはその薬理学的に許容される塩は受容体への阻害活性が他の受容体と比較して「選択的」であるのが好ましい。選択的であるとは、当該受容体への阻害活性が「他の受容体」への阻害活性と比較して高いことを意味する。本発明において「選択的」とは、当該受容体への阻害活性を示すＩＣ５０値が、「他の受容体」のＩＣ５０値と比較して１０分の１以下である場合、好ましくはこの値が１００分の１以下、より好ましくは１０００分の１以下であることを意味する。
ここで、「他の受容体」とは、既存の非選択的セロトニン拮抗剤において報告される他の受容体であって、ことに好ましくない作用に関与する受容体である。特に、５−ＨＴ２Ｂ選択的拮抗化合物として５−ＨＴ２Ａ、５−ＨＴ２Ｃに対しての選択性を評価した後、代表的な化合物について、既存受容体および酵素への影響を評価することが好ましい。
【００１４】
本発明における５−ＨＴ２Ｂ選択的拮抗化合物の受容体阻害活性、若しくは受容体拮抗作用は後述に示す公知技術によって容易に評価が可能である。
【００１５】
本明細書中の一般式の定義において「低級アルキル」なる用語は、特に断らない限り、炭素数が１〜６（以下、Ｃ１−６と略す）の直鎖、分岐、または環状の炭素鎖を意味する。従って「低級アルキル」とは炭素数Ｃ１−６のアルキルであり、中でもメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、またはｔｅｒｔ−ブチルが好ましい。「ハロゲン」とは周期表の第１７族元素を意味し、中でもフッ素、塩素、臭素またはヨウ素が好ましい。「ハロアルキル」とは、ハロゲン数１〜５で置換された低級アルキルを意味する。「（ヘテロ）アリール」とは芳香族炭化水素の芳香環から水素をひとつ取り去った部位から結合する置換基を意味し、一般式（Ａｒ）で示されるものが好ましい。
【００１６】
「Ｒ１Ａと他のＲ１Ａとの間での結合も可能」とは、当該結合によってＮＲ１ＡＲ１ＡやＣＯＮＲ１ＡＲ１ＡおよびＳＯ２ＮＲ１ＡＲ１ＡなどのＮＲ１ＡＲ１Ａが炭素数３から１３員環状基（ｒは１から１２）を示すことが可能であることを意味する。中でも、炭素数３から８員環基（ｒは１から６）が好ましい。具体的にはＲ２に含まれるＣＯＮＲ１ＡＲ１ＡまたはＮＲ１ＡＲ１Ａは、下記式（ＩＩａ）のように表記可能である。しかしながら、結合様式は下記式に限定するものではない。「Ｒ１Ｂと他のＲ１Ｂとの間での結合も可能」とは、上記と同意義で、Ｒ１ＡをＲ１Ｂと読み替える。
離脱可能な置換基とは、例えば、エトキシ、フェノキシ、ハロゲン、アルコキシカルボニルオキシ、アリルオキシカルボニルオキシ、イミダゾール-１−イル、４−ニトロフェノキシ基等をさすが、これらに限定されるものではない。
【００１７】
【化４】
2010155802.tif 000005
【００１８】
「Ｒ４とＲ５は互いに結合して、１つまたは2つ以上のヘテロ原子を含む飽和複素環を形成してもよく、当該飽和複素環はｐ個のＲ６で置換されてもよい」における飽和複素環とは、４員環から７員環までの飽和複素環を表す。例えば、アゼチジン、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、チオモルホリン、ピペラジン、アゼパンなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００１９】
「Ｃｙは、ヘテロ原子を含んでもよい単環または二環性の飽和もしくは不飽和の環状構造」における環状構造とは、５個から６個の構成原子からなる単環構造、もしくは、９個から１０個の構成原子からなる縮環構造を表す。単環構造としては、例えば、ベンゼン、ピリジン、チアゾール、チオフェン、フランなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。縮環構造としては、例えば、ナフタレン、キノリン、イソキノリン、キナゾリン、インドール、ベンズイミダゾール、ベンゾチアゾールなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００２０】
一般式（Ｉ）で示される化合物の塩としては、製薬学的に許容される塩であり、それらの酸付加塩および塩基付加塩（２酸化付加塩、２塩基付加塩を含む）を含む。
通常、酸付加塩は、非毒性塩を形成する酸から形成される。酸付加塩として具体的には、例えば酢酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、重炭酸塩もしくは炭酸塩、重硫酸塩もしくは硫酸塩、ホウ酸塩、カンシル酸塩、クエン酸塩、エジシル酸塩、エシル酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グリコヘプトン酸塩、グルコン酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩、ヒベンズ酸、塩酸塩、臭化水素塩、ヨウ化水素塩、イセチオン酸塩、乳酸、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、ナフチル酸塩、２−ナプシル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オロチン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、リン酸塩、リン酸水素塩もしくはリン酸二水素塩、糖酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トシル酸塩、トリフルオロ酢酸塩等が挙げられる。
また、塩基付加塩は、非毒性塩を形成する塩基から形成される。塩基付加塩として具体的には、アルミニウム、アルギニン、ベンザチン、カルシウム、コリン、ジエチルアミン、ジオールアミン、グリシン、リジン、マグネシウム、メグルミン、オラミン、カリウム、ナトリウム、トロメタミンおよび亜鉛塩等が挙げられる（必要であれば、ＳｔａｈｌおよびＷｅｒｍｕｔｈによる「Ｈａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ  Ｕｓｅ」（Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ，２００２）を参照）。
【００２１】
一般式（Ｉ）の化合物の薬学的に許容できる塩は、一般式（Ｉ）の化合物およびそれぞれに見合った望ましい酸または塩基の溶液を混ぜ合わせることによって容易に調製することができる。塩は、溶液から沈殿させて濾過によって集めるか、あるいは溶媒の蒸発によって回収することができる。塩におけるイオン化の程度は、完全なイオン化からほぼ非イオン化まで変わることがある。
【００２２】
本発明の化合物は、非溶媒和と溶媒和の両形態で存在することができる。本明細書において、用語「溶媒和物」は、本発明の化合物および１種または複数の薬学的に許容できる溶媒分子、例えばエタノールを含む分子錯体について記載するために使用される。用語「水和物」は、前記溶媒が水である場合に用いられる。
【００２３】
本発明による薬学的に許容できる溶媒和物には、結晶化の溶媒が同位体置換されている、例えばＤ２Ｏ、ｄ６−アセトン、ｄ６−ジメチルスルホキシドであってよい溶媒和物を含む。
【００２４】
前述の溶媒和物と対照的に、薬物およびホストが化学量論的または非化学量論的な量で存在するクラスレート、薬物−ホスト包接錯体などの錯体は、本発明の範囲内に含まれる。化学量論的または非化学量論的な量であってよい２種以上の有機および／または無機成分を含有する薬物の錯体も含まれる。得られる錯体は、イオン化、部分的イオン化、または非イオン化であってよい（必要であれば、ＨａｌｅｂｌｉａｎによるＪ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ，６４（８），１２６９−１２８８（１９７５年８月号）を参照）。
【００２５】
以下、一般式（Ｉ）の化合物へのすべての言及は、それらの塩、溶媒和物および錯体ならびにそれらの塩の溶媒和物および錯体への言及を含む。
本発明の化合物には、本明細書において前に定義されている一般式（Ｉ）の化合物、多形体、プロドラッグ、ならびに本明細書において後で定義されるそれらの異性体（光学異性体、幾何異性体および互変異性体を含む）ならびに一般式（Ｉ）の同位体標識化合物を含む。
【００２６】
一般式（Ｉ）の化合物もしくはその塩のいわゆる「プロドラッグ」も本発明の範囲内にある。すなわち、それら自体が薬理学的活性をほとんど、またはまったく有さない一般式（Ｉ）の化合物の特定の誘導体は、体内または体表に投与された場合、例えば生理条件下で酵素や胃酸等での加水分解により、望ましい活性を有する一般式（Ｉ）の化合物もしくはその塩に変換されることがある。そのような誘導体は、「プロドラッグ」と呼ばれる。プロドラッグの使用に関するそれ以上の情報は、Ｐｒｏ−ｄｒｕｇｓ  ａｓ  Ｎｏｖｅｌ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，  Ｖｏｌ．  １４，  ＡＣＳ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ  （Ｔ．Ｈｉｇｕｃｈｉ  ａｎｄ  Ｗ．Ｓｔｅｌｌａ）  とＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，  １９８７  （ｅｄ．  Ｅ  Ｂ  Ｒｏｃｈｅ，  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）中に見いだすことができる。
本発明によるプロドラッグは、例えば、一般式（Ｉ）の化合物中に存在する適切な官能基を、例えば、Ｈ．Ｂｕｎｄｇａａｒｄによる「Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ」（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５）に記載の「プロモエティ（ｐｒｏ−ｍｏｉｅｔｉｅｓ）」として当業者に知られている特定の部分で置き換えることによって製造することができる。
【００２７】
本発明によるプロドラッグのいくつかの例には、一般式（Ｉ）の化合物もしくはその塩がカルボン酸官能基（−ＣＯＯＨ）を含む場合はそのエステル化、アミド化された化合物（例えば、エチルエステル化、フェニルエステル化、カルボキシメチルエステル化、ジメチルアミノメチルエステル化、ピバロイルオキシメチルエステル化、エトキシカルボニルオキシエチルエステル化、フタリジルエステル化、（５−メチル−２−オキソ−１，３−ジオキソレン−４−イル）メチルエステル化、１−（シクロヘキシルオキシカルボニルオキシ）エチルエステル化、メチルアミド化された化合物）等；一般式（Ｉ）の化合物もしくはその塩がアルコール官能基（−ＯＨ）を含む場合は、水酸基がアシル化、アルキル化、リン酸化、ホウ酸化された化合物（たとえば、アセチル化、パルミトイル化、ポロパノイル化、ピバロイル化、サクシニル化、アラニル化、ジメチルアミノメチルカルボニル化された化合物等）；一般式（Ｉ）の化合物もしくはその塩がアミノ官能基を含む場合は、アミノ基がアシル化、アルキル化、リン酸化された化合物（例えば、アミノ基がエイコサノイル化、アラニル化、ペンチルアミノカルボニル化、（５−メチル−２−オキソ−１，３−ジオキソレン−４−イル）メトキシカルボニル化、テトラヒドロフラニル化、ピロリジルメチル化、ピバロイルオキシメチル化、ｔｅｒｔ−ブチル化された化合物等）が挙げられる。また置換基の種類によっては、Ｎ−オキシドを形成する場合もあり、これらＮ−オキシドも包含される。
上記の例および他のプロドラッグタイプの例による置換基の他の例は、上述の参考文献中に見いだすことができる。最後に、一般式（Ｉ）の特定の化合物は、薬理作用は減弱されているが、それら自体で一般式（Ｉ）の他の化合物のプロドラッグとしての役割を果たすことができる場合がある。
【００２８】
１個または複数の不斉炭素原子を含む一般式（Ｉ）の化合物は、２種以上の立体異性体として存在することがある。一般式（Ｉ）の化合物がアルケニルまたはアルケニレン基を含む場合、幾何学的なシス／トランス（すなわちＺ／Ｅ）異性体が可能である。化合物が、例えば、ケトもしくはオキシム基または芳香族部分を含む場合、互変異性の異性化（「互変異性」）が存在することがある。その結果、単一の化合物が２種以上のタイプの異性を示すことがある。
２種以上のタイプの異性を示す化合物、およびそれらの１個または複数の混合物を含む一般式（Ｉ）の化合物のすべての立体異性体、幾何異性体および互変異性体は、本発明の範囲内に含まれる。対イオンが光学活性である、例えば、Ｄ−乳酸塩またはＬ−リジン塩であるか、あるいはラセミである、例えば、ＤＬ−酒石酸塩またはＤＬ−アルギニン塩である酸付加塩または塩基塩も本発明に含まれる。
【００２９】
シス／トランス異性体は、当業者によく知られている従来技法、例えば、クロマトグラフィーおよび分別結晶によって分離することができる。個々の鏡像異性体を調製／分離するための従来技法には、適当な光学的に純粋な前駆体からのキラル合成、または、例えば、キラル高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いるラセミ化合物（または塩もしくは誘導体のラセミ化合物）の分割を含む。
あるいは、ラセミ化合物（またはラセミ前駆体）を、適当な光学活性化合物、例えばアルコール、または、一般式（Ｉ）の化合物が酸性または塩基性部分を含む場合には、酒石酸または１−フェニルエチルアミンなどの酸または塩基と反応させることができる。得られるジアステレオマー混合物は、クロマトグラフィーおよび／または分別結晶によって分離することができ、ジアステレオ異性体の一方または双方は、当業者によく知られている手段によって対応する純粋な１個または複数の鏡像異性体に変換することができる。
【００３０】
本発明のキラル化合物（およびそのキラル前駆体）は、０〜５０（ｗ／ｗ）％のイソプロパノール、通常は２〜２０（ｗ／ｗ）％、および０〜５（ｗ／ｗ）％のアルキルアミン、通常は０．１（ｗ／ｗ）％のジエチルアミンを含有する炭化水素、通常はヘプタンまたはヘキサンからなる移動層による不斉樹脂上のクロマトグラフィー、通常はＨＰＬＣを用い、鏡像異性的に付加された形態で得ることができる。溶出液の濃縮により、付加された混合物が得られる。
立体異性の集合体は、当業者に知られている従来技法によって分離することができる（必要であれば、Ｅ  Ｌ  Ｅｌｉｅｌによる「Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」（Ｗｉｌｅｙ，  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９９４．）を参照）。
【００３１】
本発明には、１個または複数の原子が、同じ原子番号であるが、自然に通常見いだされる原子量または質量数と異なる原子量または質量数を有する原子によって置き換えられている薬学的に許容できる一般式（Ｉ）の同位体標識化合物がすべて含まれる。
本発明の化合物中に含めるのに適当な同位体の例には、２Ｈおよび３Ｈなどの水素、１１Ｃ、１３Ｃおよび１４Ｃなどの炭素、３６Ｃｌなどの塩素、１８Ｆなどのフッ素、１２３Ｉおよび１２５Ｉなどのヨウ素、１３Ｎおよび１５Ｎなどの窒素、１５Ｏ、１７Ｏおよび１８Ｏなどの酸素、３２Ｐなどのリン、および３５Ｓなどのイオウの同位体を含む。
重水素、すなわち２Ｈなどのより重い同位体による置換は、より大きな代謝安定性に由来する特定の治療上の利点、例えば、ｉｎ  ｖｉｖｏ半減期の増加または用量要件の軽減を提供することがあるため、１Ｈの通常化合物と目的によって使い分けることができる。
１１Ｃ、１８Ｆ、１５Ｏおよび１３Ｎなどのポジトロン放出同位体による置換は、基質受容体占有を調べるためのポジトロン放出断層撮影（ＰＥＴ）研究において有用である。
一般式（Ｉ）の特定の同位体標識化合物、例えば、放射性同位体を組み入れた同位体標識化合物は、薬物および／または基質の組織分布研究において有用である。放射性同位体であるトリチウム、すなわち３Ｈ、および炭素−１４、すなわち１４Ｃは、組み入れの容易さおよび敏速な検出手段に鑑みてこの目的に特に有用である。
【００３２】
一般式（Ｉ）で表される化合物は、下記に示す一般法に記載された手段や、実施例項目等で記載された特定手段、それに関しての通常、常套、または所定の改善によって調製することができる。本発明は、さらに一般式（Ｉ）の化合物だけでなく、これらに関して使用される新規な中間体の調製のための一つ以上のプロセスを包含する。
本発明の一般式（Ｉ）の化合物は、自体公知の調製方法、または下記の反応スキームにおいて図示される一般的な手順もしくは調製方法に従って調製することができる。他に指示がない限り、続く反応スキームおよび考察におけるＲ１〜Ｒ５は、上記で定義されている通りである。以下に使用する用語「保護基」は、Ｔ．Ｗ．  Ｇｒｅｅｎｅ他によって編集されたＰｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｐｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  （Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  １９９９）に記載の典型的なヒドロキシ、アセチレンまたはアミノ保護基から選択されるヒドロキシまたはアミノ保護基を意味する。さらに一般反応式に記載された各化合物は、反応を阻害しないのであれば、塩を形成していてもよく、かかる塩としては化合物（Ｉ）の塩と同様の塩等である。また、本発明化合物のプロドラッグは上記保護基と同様、原料および中間体の段階で特定の基を導入、或いは得られた化合物を用いて反応を行うことで調製できる。反応は通常のエステル化、アミド化、脱水等、当業者により公知の方法を適用することにより行うことができる。
【００３３】
式ＩＩから工程１〜５を経由する式Ｉの合成（方法１）、および式Ｖから工程６を経由する式Ｉの合成（方法２）を以下に示す。
【００３４】
【化５】
2010155802.tif 000006
【００３５】
合成方法１
工程  １
このステップにおいて、カルボン酸化合物は、反応溶媒中での式ＩＩのエステル化合物の加水分解によって調製することができる。
加水分解は、従来公知の手順によって行うことができる。典型的な手順において、加水分解は、塩基性条件下、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムまたは水酸化リチウムの存在下で行うことができる。適当な溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、２−メトキシエタノール、またはエチレングリコールなどのアルコール；テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、１，２−ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、または１，４−ジオキサンなどのエーテル類；Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）またはヘキサメチルリン酸トリアミドなどのアミド類；ならびにジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などのスルホキシド、または水などが挙げられる。この反応時間は、３０分〜４８時間程度であり、一般的に、６０分〜３０時間程度である。反応温度は、−２０℃〜１００℃程度であり、一般的に、２０℃〜７５℃程度である。
【００３６】
また、加水分解は、酸性条件下、例えば、塩化水素または臭化水素などのハロゲン化水素；ｐ−トルエンスルホン酸またはベンゼンスルホン酸などのスルホン酸；Ｐ−トルエンスルホン酸ピリジウム；ならびに酢酸またはトリフルオロ酢酸などのカルボン酸の存在下で行うことができる。適当な溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、２−メトキシエタノール、またはエチレングリコールなどのアルコール；テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、１，２−ジメトキシエタン（ＤＭＥ）、または１，４−ジオキサンなどのエーテル類；ジクロロメタン、または１，２−ジクロロエタンなどのハロゲン化炭化水素、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）またはヘキサメチルリン酸トリアミドなどのアミド類；ならびにジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）などのスルホキシド、または水などが挙げられる。この反応時間は、３０分〜２４時間程度であり、一般的には６０分〜１０時間程度である。反応温度は、−２０℃〜１００℃程度であり、一般的には０℃〜６５℃程度である。上記の反応スキームにおいてＭｅはメチル基を意味する（以下も同じ）。
【００３７】
工程  ２
このステップにおいて、式Ｖのアミド化合物は、不活性溶媒中、カップリング剤の存在下または非存在下でのアミン化合物（式ＩＶ）とカルボン酸化合物（式ＩＩＩ）とのカップリング反応によって調製することができる。また、この反応は、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＯＢｔ）または１−ヒドロキシアザベンゾトリアゾールなどの添加剤の存在下または非存在下でも行うことができる。適当な溶媒の例としては、例えばアセトン、ニトロメタン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、スルホラン、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、１−メチル−２−ピロリジノン（ＮＭＰ）、２−ブタノン、アセトニトリル；ジクロロメタン、１，２−ジクロロエタン、クロロホルムなどのハロゲン化炭化水素類；ならびにテトラヒドロフランおよび１，４−ジオキサンなどのエーテル類が挙げられる。この反応時間は、５分〜１週間程度であり、一般的には３０分〜２４時間程度である。反応温度は、−２０℃〜１００℃程度であり、一般的には０℃〜６０℃程度である。適当なカップリング試薬としては、ペプチド合成で通常使用される試薬であれば制限されないが、例えば、ジイミド（例えば、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、水溶性カルボジイミド（ＷＳＣ）、ヘキサフルオロリン酸Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウム（ＨＢＴＵ）、２−エトキシ−Ｎ−エトキシカルボニル−１，２−ジヒドロキノリン、テトラフルオロホウ酸２−ブロモ−１−エチルピリジニウム（ＢＥＰ）、塩化２−クロロ−１，３−ジメチルイミダゾリニウム、ヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ−トリス（ジメチルアミノ）ホスホニウム（ＢＯＰ）、アゾジカルボン酸ジエチル−トリフェニルホスフィン、シアノリン酸ジエチル、ジエチルホスホリルアジド、ヨウ化  ２−クロロ−１−メチルピリジニウム、Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール、ベンゾトリアゾール−１−イルジエチルホスフェート、クロロギ酸エチルまたはクロロギ酸イソブチルが挙げられる。また、反応は、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ−メチルモルホリン、４−（ジメチルアミノ）ピリジンまたはトリエチルアミンなどの塩基の存在下で行うことが望ましい。式Ｖのアミド化合物は、塩化オキサリル、オキシ塩化リンまたは塩化チオニルなどのハロゲン化剤との反応によって得ることができるハロゲン化アシルを介して調製することもできる。得られるハロゲン化アシルで、このステップに記載の縮合剤試薬を用いることなく、式ＩＶのアミン化合物を処理することにより、対応するアミド化合物（式Ｖ）に変換することができる。
【００３８】
工程  ３
このステップにおいて、式ＶＩの化合物は、上記の工程２で調製された化合物（式Ｖ）と適当な遷移金属触媒と塩基の存在下（または塩基の非存在下）、トリメチルシリルアセチレンとのカップリング反応を用いて調製することができる。より具体的には、式ＶＩの化合物は、触媒量のパラジウム試薬と銅（Ｉ）塩または、触媒量のパラジウム試薬とホスフィンリガンドの存在下で、塩基を含む適当な反応溶液中、または塩基のみを反応溶媒として用いた条件下で、上記の工程２で調製された化合物（式Ｖ）と、トリメチルシリルアセチレンとのクロスカップリング反応を用いて調製することができる。パラジウム試薬の例としては、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムとビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライドなどが好ましく挙げられる。銅（Ｉ）塩の例としては、ヨウ化銅（Ｉ）と臭化銅（Ｉ）などが好ましく挙げられる。ホスフィンリガンドとしては、ビス（ジフェニルホスフィノ）ブタン（ＤＰＰＢ）などが好ましく挙げられる。塩基の例としては、例えば、ジエチルアミン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、炭酸カリウムまたは炭酸ナトリウムなどが挙げられる。また、反応溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル、酢酸エチル、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエンなどの炭化水素、ジエチルエーテルなどが挙げられる。反応時間は、５分〜９６時間程度であり、一般的には３０分〜２４時間程度である。反応温度は、−７８℃〜２００℃程度であり、一般的には−２０℃〜８０℃程度である。また、反応時に、マイクロ波反応装置を用いて反応を行う場合もある。
【００３９】
工程  ４
このステップにおいて、式ＶＩＩのカルボン酸化合物は、反応溶媒中での式ＶＩのトリメチルシリル基の脱保護によって調製することができる。
脱保護は、従来公知の手順によって行うことができる。式ＶＩの化合物は、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ著のＰｒｏｔｅｃｔｉｎｇ  Ｇｒｐｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９９９）に記載されている方法など、一般的に知られている通常の方法を用いて、トリアルキルシリル基を脱保護することによって調製することができる。通常の方法として、脱保護は炭酸カリウム、炭酸ナトリウムなどの塩基存在下で、メチルアルコールやエチルアルコールなどのアルコール溶媒中にて脱保護することができる。この反応時間は、３０分〜４８時間程度であり、一般的に、６０分〜３０時間程度である。反応温度は、−２０℃〜１００℃程度であり、一般的に、２０℃〜７５℃程度である。
【００４０】
工程  ５
このステップにおいて、式Ｉの化合物は、触媒量のパラジウム試薬と銅（Ｉ）塩または、触媒量のパラジウム試薬とホスフィンリガンドの存在下で、塩基を含む適当な反応溶液中、または塩基のみを反応溶媒として用いた条件下で、式ＶＩＩＩと、ＶＩＩの式で示されるアセチレンとのクロスカップリング反応を用いて調製することができる。パラジウム試薬の例としては、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウムとビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライドなどが好ましく挙げられる。銅（Ｉ）塩の例としては、ヨウ化銅（Ｉ）と臭化銅（Ｉ）などが好ましく挙げられる。ホスフィンリガンドとしては、ビス（ジフェニルホスフィノ）ブタン（ＤＰＰＢ）などが好ましく挙げられる。塩基の例としては、例えば、ジエチルアミン、トリエチルアミン、ジイソプロピルエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、炭酸カリウムまたは炭酸ナトリウムなどが挙げられる。また、反応溶媒としては、例えば、テトラヒドロフラン、１，４−ジオキサン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル、酢酸エチル、ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエンなどの炭化水素、ジエチルエーテルなどが挙げられる。反応時間は、５分〜９６時間程度であり、一般的には３０分〜２４時間程度である。反応温度は、−７８℃〜２００℃程度であり、一般的には−２０℃〜８０℃程度である。また、反応時に、マイクロ波反応装置を用いて反応を行う場合もある。
【００４１】
合成方法２
工程  ６
このステップにおいて、式Ｉの化合物は、工程３と同様の方法により、式Ｖの化合物と式ＩＸの化合物のカップリングによって製造できる。
【００４２】
式ＩＩから工程７〜９を経由する式Ｉの合成（方法３）を以下に示す。
【００４３】
【化６】
2010155802.tif 000007
【００４４】
合成方法３
工程  ７
このステップにおいて、式ＶＩＩＩの化合物は、工程３と同様の方法により、式ＩＩの化合物と式ＩＸの化合物のカップリング反応によって製造できる。
【００４５】
工程  ８
このステップにおいて、式ＩＸの化合物は、工程１と同様の方法により、式ＶＩＩＩの化合物の加水分解反応によって製造できる。
【００４６】
工程  ９
このステップにおいて、式Ｉの化合物は、工程２と同様の方法により、式ＩＸの化合物と式ＩＶの化合物とのアミド化反応によって製造できる。
【００４７】
一般式（Ｖ）で示される中間体は、本発明の化合物を製造するために有用である。例えば、上記合成方法１のＶで示される中間体であり、本発明の化合物を製造するために有効に利用される。
一般式（ＩＸ）で示される中間体は、本発明の化合物を製造するために有用である。たとえば、上記合成方法３のＩＸで示される中間体であり、本発明の化合物を製造するために有効に利用される。
【００４８】
本発明の化合物の５−ＨＴ２Ｂ拮抗薬としての薬理効果を、慢性低酸素暴露動物（ラット・マウス）モデルを用いて、肺の血圧上昇に対する改善効果を測定することで評価できる。比較対照化合物としては、既存の肺性高血圧治療薬（シルデナフィル、プロスタグランジン製剤など）や、５−ＨＴ２Ｂ選択的拮抗薬として既知であるＲＳ−１２７４４５を用いることができる。
また、本発明の化合物の５−ＨＴ２Ｂ拮抗薬としての他の薬理効果を、薬物やストレス処置した動物（ラット・マウス）モデルを用いて、下痢に対する改善効果を測定することで評価できる。比較対照化合物としては、既存の下痢治療薬（ロペラミド、ベルベリンなど）５−ＨＴ２Ｂ選択的拮抗薬として既知であるＲＳ−１２７４４５を用いることができる。
【００４９】
このようにして製造された化合物は、遊離なまま、または常法による塩形成処理を施し、その塩として単離、精製することができる。単離または精製方法は特に限定されないが、例えば、抽出、濃縮、留去、結晶化、ろ過、再結晶、または各種クロマトグラフィー等の通常の化学操作が挙げられる。
製造された化合物の各種の異性体は異性体間の物理化学的な性質の差を利用して常法により単離できる。例えば、光学異性体は、ラセミ化合物を光学活性な酒石酸等の有機酸とのジアステレオマー塩に導いた後に分別再結晶する方法、或いは、キラル充填材を用いたカラムクロマトグラフィー等の手法により、各々分離または精製することができる。また、光学活性化合物は適当な光学活性化合物を原料として用いることにより製造することもできる。なお、ジアステレオマーの混合物は、分別再結晶化またはクロマトグラフィー等によりそれぞれの異性体に分離することができる。
【００５０】
経口投与
本発明の化合物は、経口的に投与することができる。経口投与とは、化合物が胃腸管に入るように嚥下することを意味し、口腔内または舌下投与を用いた場合には、化合物は口から直接血流に入る。
経口投与に適している製剤には、錠剤、微粒子を含有するカプセル剤、液剤、散剤、トローチ剤（液体入りを含む）、咀嚼剤（ｃｈｅｗｓ）多粒子、ナノ粒子、ゲル剤、固溶体、リポソーム、フィルム剤（粘膜付着剤を含む）、噴霧剤などの固形製剤ならびに液状製剤を含む。
液状製剤としては、例えば、懸濁剤、液剤、シロップ剤およびエリキシル剤などが挙げられる。このような製剤は、軟質または硬質カプセル剤における充填剤として用いることができ、一般的には、担体として、例えば、水、エタノール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、メチルセルロース、または適当な油、ならびに１種または複数の乳化剤および／または懸濁化剤などが用いられる。また、液状製剤は、固体状の、例えば、分包された薬剤を水等に溶かすことによっても調製することができる。
本発明の化合物は、ＬｉａｎｇおよびＣｈｅｎによるＥｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎｉｏｎ  ｉｎ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｐａｔｅｎｔｓ，  １１（６），  ９８１−９８６（２００１）に記載された剤形など、速溶または速崩壊剤形においても使用することができる。
【００５１】
錠剤の場合、有効成分としての薬物の含有量は、投与対象の年齢や性別、症状の度合いによっても異なるが、錠剤全体に対して１重量％〜８０重量％程度が好ましく、５重量％〜６０重量％程度がより好ましい。
錠剤は、有効成分としての薬物の他に崩壊剤を含有することができる。崩壊剤としては、例えば、デンプングリコール酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、微結晶性セルロース、低級アルキル置換ヒドロキシプロピルセルロース、デンプン、アルファ化デンプンおよびアルギン酸ナトリウム等が挙げられる。崩壊剤の含有量は、錠剤全体に対して１重量％〜２５重量％程度が好ましく、５重量％〜２０重量％程度がより好ましい。
錠剤は、有効成分としての薬物の他に結合剤を含有することができる。結合剤としては、例えば、微結晶性セルロース、ゼラチン、ラクトース（一水和物、噴霧乾燥一水和物、無水など）、マンニトール、キシリトール、ブドウ糖、スクロース、ソルビトール、、ポリエチレングリコール、天然または合成ゴム、ポリビニルピロリドン、デンプン、アルファ化デンプン、ヒドロキシプロピルセルロース、第二リン酸カルシウム二水和物等、またはヒドロキシプロピルメチルセルロース等が挙げられる。
また、錠剤は、ラウリル硫酸ナトリウムおよびポリソルベート８０などの界面活性剤、ならびに二酸化ケイ素およびタルクなどの流動促進剤を含んでいてもよい。界面活性剤の含有量は、錠剤全体に対して０．２重量％〜５重量％程度が好ましく、流動促進剤の含有量は、錠剤全体に対して０．２重量％〜１重量％程度が好ましい。
また、錠剤は、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリルフマル酸ナトリウム、およびステアリン酸マグネシウムとラウリル硫酸ナトリウムとの混合物などの滑沢剤を含有しても良い。滑沢剤の含有量は、錠剤全体に対して０．２５重量％〜１０重量％程度が好ましく、０．５重量％〜３重量％程度がより好ましい。
他の配合可能な成分としては、例えば、抗酸化剤、着色剤、矯味剤、保存剤または味覚マスキング剤等が挙げられる。
【００５２】
例示的錠剤としては、有効成分としての薬物が約８０重量％まで、結合剤約１０重量％〜約９０重量％、希釈剤約０重量％〜約８５重量％、崩壊剤約２重量％〜約１０重量％、および滑沢剤約０．２５重量％〜約１０重量％を含有する錠剤が挙げられる。
錠剤の製造方法としては、特に制限されないが、一般的な錠剤の製造方法を適宜使用して製造することが出来る。例えば、錠剤ブレンドを直接、またはローラーにより圧縮し、錠剤を作製することができる。あるいは、錠剤ブレンドまたはブレンドの一部を、打錠前に湿式、乾式、または融解式造粒するか、あるいは融解式凝結させるか、あるいは押し出すことによっても製造できる。最終製剤は、１つまたは複数の層を含み、コーティングされていてもされていなくてもよく、カプセル化されてもよい。
錠剤の製剤化については、Ｈ．ＬｉｅｂｅｒｍａｎおよびＬ．Ｌａｃｈｍａｎによる「Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ：Ｔ  Ｔａｂｌｅｔｓ，Ｖｏｌ．１」、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８０（ＩＳＢＮ０−８２４７−６９１８−Ｘ）．に記載の内容を参考にすることができる。
【００５３】
経口投与のための固形製剤は、即時放出および／または改良制御放出であるように製剤化することができる。改良放出製剤としては、例えば、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出またはプログラム放出等が挙げられる。
本発明の目的に適している改良放出製剤については、米国特許第６，１０６，８６４号に記載されている。高エネルギー分散および浸透圧およびコーティングした粒子などの他の適当な放出技術の詳細は、Ｖｅｒｍａ他、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｏｎ−ｌｉｎｅ，２５（２），１−１４（２００１）に記載されている。制御放出を実現するためのチューインガムの使用については、国際公開第００／３５２９８号に記載されている。
【００５４】
非経口投与
本発明の化合物は、血流中、筋肉中、または内臓中に直接投与することもできる。非経口投与に適している手段としては、例えば、静脈内、動脈内、腹腔内、くも膜下腔内、脳室内、尿道内、膣内、肛門内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内または皮下投与等が挙げられる。非経口投与に適している装置としては、例えば、針（極微針を含む）注射器、無針注射器または注入技法等が挙げられる。
非経口投与製剤は、塩、炭水化物または緩衝剤（ｐＨ３〜９が好ましい）などの添加剤を含有してもよい。非経口投与製剤は生理食塩水等の適当な溶媒に薬剤等を溶解させた水溶液でもよいが、滅菌非水溶液として、または乾燥形態の粉末として製剤化して、用時に滅菌した発熱物質を含まない水などの適当なビヒクルと併せて使用することがより好ましい。
【００５５】
非経口投与製剤の調製は、当業者によく知られている標準的製薬技法、例えば、無菌条件下での凍結乾燥等を用いて容易に行うことができる。
非経口投与液剤の調製において使用される一般式（Ｉ）の化合物の溶解性は、溶解性促進剤の組み入れなどの適切な製剤技法の使用によって高めることができる。
非経口投与製剤は、即時放出および／または改良制御放出であるように製剤化することができる。改良放出製剤としては、例えば、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御放出、標的放出またはプログラム放出等が挙げられる。また、本発明の化合物は、活性化合物の改良放出を提供する埋込型デポー剤として投与するための固体、半固体、またはチクソトロピックな液体として製剤化することも可能である。そのような製剤としては、例えば、薬物をコーティングしたステントまたはＰＧＬＡミクロスフェアなどが含まれる。
【００５６】
局所投与
本発明の化合物は、皮膚または粘膜へ、すなわち経皮的（ｄｅｒｍａｌｌｙ）あるいは経皮的（ｔｒａｎｓｄｅｒｍａｌｌｙ）に、局所的に投与することもできる。局所投与製剤としては、例えば、座剤、ゲル剤、ヒドロゲル剤、ローション剤、液剤、クリーム剤、軟膏剤、散布剤、包帯剤、フォーム剤、フィルム剤、皮膚用パッチ剤、ウエハー剤、埋込剤、スポンジ剤、ファイバー剤、絆創膏剤、またはマイクロエマルジョン剤等が挙げられ、また、リポソームも使用することができる。担体としては、例えば、アルコール、水、鉱油、流動ワセリン、白色ワセリン、グリセリン、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、または水等が挙げられる。局所投与製剤には、例えば、ＦｉｎｎｉｎおよびＭｏｒｇａｎによるＪ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，８８（１０），９５５−９５８（Ｏｃｔ．１９９９）に記載の透過促進剤を組み入れることもできる。
局所投与に用いられる手段としては、例えば、エレクトロポレーション、イオントフォレーシス、フォノフォレーシス、ソノフォレーシスおよび極微針または無針（例えば、Ｐｏｗｄｅｒｊｅｃｔ（商標）、Ｂｉｏｊｅｃｔ（商標）など）注射による送達等が挙げられる。
局所投与のための製剤は、即時放出および／または改良制御放出であるように製剤化することができる。改良放出製剤としては、例えば、遅延放出、持続放出、パルス放出、制御二重放出、標的放出およびプログラム放出等が挙げられる。
【００５７】
その他の技術
本発明の化合物は、シクロデキストリンおよび適当なその誘導体またはポリエチレングリコール含有ポリマーなどの可溶性高分子と混ぜ合わせ、前述の投与方法等において使用するために、それらの溶解性、溶出速度、味覚マスキング、生物学的利用能および／または安定性を改善することができる。
例えば、薬物−シクロデキストリン錯体は、大部分の剤形および投与経路にとって一般的に有用であることが判明している。包接錯体と非包接錯体の双方を使用することができる。薬物との直接錯体化の代替法としては、シクロデキストリンを補助的な添加剤、すなわち担体、希釈剤、または可溶化剤として使用することができる。これらの目的のためにα−、β−およびγ−シクロデキストリンが最も一般的に使用され、その例は、国際公開第９１／１１１７２号、国際公開第９４／０２５１８号、および国際公開第９８／５５１４８号に記載されている。
【００５８】
複数の構成部材からなるキット
本発明による化合物を含有する２つ以上の医薬組成物を、例えば、組成物の同時投与用など、組合せて投与する場合に適しているキットの形態で組み合わせることも、本発明の範囲に含まれる。
すなわち、本発明によるキットは、少なくとも１つは本発明による一般式（Ｉ）の化合物を含有する２つ以上の別々の医薬組成物および容器、分かれたボトル、または分かれたホイルパケットなどの前記組成物を別々に保持するための手段を含む。そのようなキットとしては、例えば、錠剤、カプセル剤などの包装に使用されるブリスターパック等が挙げられる。
本発明のキットは、様々な剤形を、例えば、経口および非経口で投与するのに、様々な投与間隔で別々の組成物を投与するのに、または、お互いに対して別々の組成物を増量するのに特に適している。コンプライアンスを補助するため、通常、キットは投与説明書を含み、いわゆる記憶補助が提供されている。
【００５９】
用量
ヒト患者への投与の場合、本発明の化合物の１日当たりの総投与量は、約６５〜７０ｋｇの体重を有する平均的なヒトを対象とした場合で、０．０５ｍｇ〜１０００ｍｇ程度が好ましく、０．１ｍｇ〜１００ｍｇ程度がより好ましく、０．５ｍｇ〜２０ｍｇ程度がさらに好ましい。投与方法に左右されることは言うまでもなく、例えば、経口投与の場合は、１日当たりの総投与量が１ｍｇ〜５００ｍｇ程度が好ましく、静脈内投与の場合は０．５ｍｇ〜２５０ｍｇ程度が好ましい。１日当たりの総投与量は、単一投与量であっても分割投与量であってもよい。これらの用量は、対象となるヒトの性別や年齢、または、症状の程度によって適宜変更することが可能である。
【００６０】
上記で記述されたように、本発明の化合物は５−ＨＴ２Ｂ拮抗活性を示す。本発明の５−ＨＴ２Ｂ拮抗化合物は、特に、癌、炎症疾患、免疫調節疾患と胃腸障害において（例えば、消化管での運動異常や感覚過敏、または肺動脈での血圧調整および動脈修復など）一種または二種以上の薬理学的活性剤と組み合わせて使用することも出来る。
例えば、５−ＨＴ２Ｂ拮抗剤、特に一般式（Ｉ）の化合物、または、上記で定義されている薬学的に許容できる塩は、以下のリスト１から選ばれる１つまたはそれ以上の薬剤と組み合わせて使用することが可能であり、同時、連続的、または別々に投与することができる。
【００６１】
[リスト１]
緩化薬：Ｒｅｇｕｌａｎ（登録商標）、Ｃｅｌｅｖａｃ（登録商標）などが挙げられる。
抗痙攣因子：平滑筋弛緩作用を有するメベベリン、ピナベリウム、ｏｔｉｌｏｎｉｕｍ  ｂｒｏｍｉｄｅ、トリメブチン；抗ムスカリン様作用を有するジシクロベリン、ヒヨスチアミン、シメトロピウムなどが挙げられる。
オピオイド／中枢性作動薬：ＭＯＲ作動薬であるロペラミド、ナルトレキソン、メチルナルトレキソン、ｍｏｄｕｌｏｎ（登録商標）、アルビモパン；ＫＯＲ作動薬であるｆｅｄｏｔｏｚｉｎｅ、アシマドリン；低用量三環性抗うつ薬であるイミプラミン、アミトリプチンクロミプラミン、デシプラミン、ロフェプラミン；選択的セロトニン再吸収阻害剤であるセルトラリン、パロキセチン、フルオキセチン、シタロプラム、エスシタロプラム；セロトニン−ノルアドレナリン再吸収阻害剤であるベンラファキシン、デュロキセチン；可逆的モノアミンオキシダーゼ阻害剤であるモクロベミド；ベンゾジアゼピン作動薬であるジアゼパム、プラゼパム、クロナゼパム、ｄｅｘｔｏｆｉｓｏｐａｍ；中枢作用性鎮痛剤であるオキシモルフォンＥＲ、トラマゾール；モノアミンオキシダーゼ阻害剤であるイソカルボキサジド、フェネルジン、ｔｒａｎｙｃｙｐｒｏｍａｉｎ、セレジリンなどが挙げられる。
セロトニン作動性受容体調節因子：５−ＨＴ３アンタゴニストであるアロセトロン、オンダンセトロン、トロピセトロン、パロノセトロン、ラモセトロン、ミルタザピン、インジセトロン、シランセトロン、グラニセトロン、ドラセトロン；５−ＨＴ４作動薬であるテガセロッド、モサプリド；５−ＨＴ３作動薬であるＭＫＣ−７３３；５−ＨＴ４作動薬／５−ＨＴ３アンタゴニストであるレンザプリド；５−ＨＴ３／５−ＨＴ４アンタゴニストであるインジセトロン；５−ＨＴ７アンタゴニストであるＤＲ−４００４、ＳＢ−２６９９７０、ＳＢ−２５８７１９、ＳＢ−２５８７４１；５−ＨＴ１Ａ作動薬またはアンタゴニストであるブスピロン、ゲピロン；５−ＨＴ１Ａ／１Ｂ／Ｄ作動薬であるブスピロン；片頭痛薬であるエルゴタミン、スマトリプタン、リザトリプタンなどが挙げられる。
消化器運動因子：ＮＫ１アンタゴニストであるマロピタント、アプレピタント、エズロピタント；ＮＫ２アンタゴニストであるｎｅｐａｄｕｔａｎｔ、ｓａｒｅｄｕｔａｎｔ；ＮＫ３アンタゴニストであるタルネタント；ＣＲＦ１受容体アンタゴニストであるＣＰ−１５４５２６、ＮＢＩ−３５９６５、ＣＲＡ−１０００；ＣＣＫ−Ａ受容体アンタゴニストであるｄｅｘｉｏｘｉｇｉｌｕｍｉｄｅ、デクスロキシグルミド；モチリン作動薬であるミナムシナール、ＰＦ−４５４８０４３；クロライドチャンネル作動薬（タイプ２）であるルビプロストン；グアニル酸シクラーゼ作動薬であるリナクロチド；グルカゴン様ペプタイド−１作動薬であるＧＴＰ−０１０；グレリン受容体作動薬であるイブタモレン、カプロモレリンなどが挙げられる。
抗生物質：スルファセタミド、エリスロマイシン、リファキシミン、トブラマイシン、シプロフロキサシンなどが挙げられる。
プロバイオティクス細菌：ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ、Ｎｏｎｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ、ｉｎｆａｎｔｉｓ  ３５６２４、Ｅ．ｃｏｌｉなどが挙げられる。
抗鎮痛因子：α２−アドレナリン作動薬であるクロニジン、メデトミジン、ｌｏｆｅｘｉｄｉｎｅ、デクスメデトミジン、ＡＧＮ−２−３８１８；β３−アドレナリン作動薬であるｓｏｌａｂｅｇｒｏｎ；カンナビノイド１または２作動薬であるＧＲＣ−１０６２２、ＧＷ８４２１６６、Ｓ−７７７４６９；選択的ＣＯＸ−２阻害剤であるセレコキシブ、ロフェコキシブ、バルデコキシブ、エトリコキシブ、ルミラコキシブ；非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）であるピロキシカム、ナプロキセン、イブプロフェン、ジクロフェナック、インドメタシン；ＮＭＤＡアンタゴニストであるジゾシルピン；ＴＲＰｓ  ｍｏｇｕｌａｔｏｒｓ（Ｖ１、Ｖ３、Ｖ４、Ｍ８、Ａ１  ｓｕｂｔｙｐｅｓ）であるレジニフェラトキシン、カプサゼピン；α−２−δリガンドであるガバペンチン、プレガバリン、３−メチルガバペンチン；ＧＡＢＡ作動薬であるトピラマート、ｃｉｎｏｌａｚｅｐａｍ、クロナゼパムなどが挙げられる。
抗炎症因子：合成副腎皮質ホルモンであるデキサメタゾン、プレゾニドロン、シクレソニド、ブデソニド；インターロイキン由来治療剤であるアナキンラ、アトリズマブ、メポリズマブなどが挙げられる。
抗アレルギー因子：ロイコトリエンアンタゴニストであるモンテルカスト、ザフィルルカスト、プランルカスト；β２作動薬であるアルブテロール、レバルブテロール、サルメテロール、ホルモテロール、アルホルモテロール１；喘息及び／又は慢性閉塞性肺疾患薬であるロフルミラスト、チオトロピウム、イスラパファントなどが挙げられる。
その他の薬剤として：ポリフル（登録商標）、Ｍｅｔａｍｕｃｉｌ（登録商標）、クロフェレマー、サイリウムーハスクなどが挙げられる。
肺性高血圧症関連：プロスタグランジン誘導隊であるベラプロスト、ＰＤＥ５阻害剤であるシルデナフィル、エンドセリン−１アンタゴニストであるボセンタンなどが挙げられる。
【実施例】
【００６２】
以下、実施例によって本発明を更に詳述するが、下記実施例は本発明を制限するものではなく、本発明の趣旨を逸脱しない範囲で適宜変更が可能である。また、本発明の趣旨を逸脱しない範囲で適宜変更したものも本発明の技術範囲に包含される。
【００６３】
本発明の試験化合物の製造方法を下記の非限定的実施例で説明する。特に明記しない限り、すべての操作は、室温または周囲温度、すなわち１８〜２５℃の範囲で行い、溶媒の蒸発は、６０℃までの浴温で減圧下、ロータリーエバポレーターを用いて行い、反応は、薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）によりモニターし、示される融点（ｍ．ｐ．）は未補正であり（結晶多形では、異なる融点を生じるかもしれない）、すべての単離した試験化合物の構造および純度は、下記の技法、すなわち、ＴＬＣ（Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０Ｆ２５４プレコートＴＬＣプレートまたはＭｅｒｃｋ  ＮＨ２プレコートＨＴＬＣプレート）、質量分析法、核磁気共鳴スペクトル（ＮＭＲ）、赤外吸収スペクトル（ＩＲ）、または微量分析のうちの少なくとも１つによって保証した。収率は、例示的目的のためにのみ示す。フラッシュカラムクロマトグラフィーは、和光シリカゲル３００ＨＧ（４０〜６０μｍ、Ｆｕｊｉ  Ｓｉｌｙｓｉａ  Ｃｈｒｏｍａｔｏｒｅｘ（登録商標）：ＤＵ３０５０（アミンタイプ、３０〜５０μｍ）、Ｂｉｏｔａｇｅシリカゲル（３２−６３ｍｍ、ＫＰ−Ｓｉｌ）またはＢｉｏｔａｇｅ  ａｍｉｎｏ  ｂｏｕｎｄｅｄ  ｓｉｌｉｃａ（アミンをコーティングしたシリカゲル、３５−７５μｍ、ＫＰ−ＮＨ）を用いて行った。
【００６４】
反応で使用されたマイクロ波装置は、Ｐｅｒｓｏｎａｌ  ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ社製Ｅｍｒｙｓ  ｏｐｔｉｍｚｅかＢｉｏｔａｇｅ社製のＩｎｉｔｉａｔｏｒ（登録商標）：Ｓｉｘｔｙである。反応で使用された超音波装置は、アズワン社製Ｕｌｔｒａ  Ｓｏｎｉｃ  Ｃｌｅａｎｅｒ  ＳＩＮＧＬＥ  Ｆｒｅｑｕｅｎｃｙである。反応溶媒に関する略語は以下のように示す。テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）。
【００６５】
実施例化合物最終体におけるＨＰＬＣを用いる精製は、次の装置と条件で実施した。
装置：Ｗａｔｅｒｓ  ＭＳ−ｔｒｉｇｇｅｒ  ＡｕｔｏＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎＴＭｓｙｓｔｅｍ（以下、精製装置Ａと略す）
カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ  Ｃ１８，１９×５０ｍｍ，５μｍ  ｐａｒｔｉｃｌｅ
方法Ａ：メタノールまたはアセトニトリル／０．０５％（ｖ／ｖ）ギ酸水溶液
方法Ｂ：メタノールまたはアセトニトリル／０．０１％（ｖ／ｖ）アンモニア水
上記精製装置Ａを用いた精製法での化合物の化学純度確認は以下の装置と条件で実施した。
装置：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｕｌｔｒａ  Ｐａｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ＬＣ  ｏｎ  ＴＵＶ  Ｄｅｔｅｃｔｏｒ  ａｎｄ  ＺＱ  ｍａｓｓ  ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｅｒ
カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＡＣＱＵＩＴＹ  Ｃ１８，  ２．１×５０ｍｍ，  １．７μｍ  ｐａｒｔｉｃｌｅ
カラム温度：６０℃、流速：１．０ｍＬ／分、ＵＶ検出：２１０ｎｍ
ＭＳ検出：ＥＳＩ  ｐｏｓｉモード、メソッド名：ＱＣ＿ｎｅｕｔｒａｌ＿ｆｕｌｌ＿１ｐｔ５ｍｉｎ
溶離液：アセトニトリル／１０ｍＭ酢酸アンモニウム水溶液
勾配：５％（０−０．１分）、５−９５％（０．１−０．８分）、９５％（０．８−１分）、分析時間：１．５分
【００６６】
ＨＰＬＣを用いる精製は、次の装置と条件で実施することもできる。
装置：ＵＶ−ｔｒｉｇｇｅｒ  ｐｒｅｐａｒａｔｉｖｅ  ＨＰＬＣ  ｓｙｓｔｅｍ（Ｗａｔｅｒｓ社製）（以下、精製装置Ｂと略す）
カラム：ＸＴｅｒｒａ  ＭＳ  Ｃ１８．５μｍ、１９×５０ｍｍもしくは３０×５０ｍｍ
検出器：ＵＶ  ２５４ｎｍ
条件：アセトニトリル／０．０５％（ｖ／ｖ）ギ酸水溶液、または、アセトニトリル／０．０１％（ｖ／ｖ）アンモニア水溶液を用いて、室温で流速２０ｍＬ／分（１９×５０ｍｍ）か４０ｍＬ／分（３０×５０ｍｍ）
低分解能マススペクトルデーター（ＥＩ）は、Ｉｎｔｅｇｒｉｔｙマススペクトル（Ｗａｔｅｒｓ社製）か、Ａｕｔｏｍａｓｓ１２０マススペクトル（日本電子社製）か、６８９０ＧＣ／５７９３ＭＳＤ（ＧＣ−ＭＳ  Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製）で得た。
低分解能マススペクトルデーター（ＥＳＩ）は、次の装置と条件で得た。
装置：ＺＱまたはＺＭＤマススペクトロメーターとＵＶ検出器付きＷａｔｅｒｓ  Ａｌｌｉａｎｃｅ  ＨＰＬＣ  ｓｙｓｔｅｍ
カラム：Ｗａｔｅｒｓ  ＸＴｅｒｒａ  Ｃ１８、２．１×３０ｍｍ、３．５μｍ粒子
勾配：４−９６％（０−２分）、９６％（２−４分）、流速；０．５ｍＬ／分
ＵＶ検出：２５４ｎｍ、ＭＳ検出：ＥＳＩ  ｐｏｓｉ／ｎｅｇａモード
溶離液：アセトニトリル／０．０２５％（ｖ／ｖ）ギ酸アンモニウム水溶液（Ｎｅｕｔｒａｌ  ｆｕｌｌ  ｒａｎｇｅ）、アセトニトリル／０．０５％（ｖ／ｖ）ギ酸水溶液（Ａｃｉｄｉｃ  ｆｕｌｌ  ｒａｎｇｅ）、アセトニトリル／０．０１％（ｖ／ｖ）アンモニア水溶液（Ｂａｓｉｃ  ｆｕｌｌ  ｒａｎｇｅ）
【００６７】
ＮＭＲデータは、特に明示しない限り、溶媒として重水素化クロロホルム（９９．８％Ｄ）またはジメチルスルホキシド（９９．９％Ｄ）を用いて２７０ＭＨｚ（ＪＥＯＬ  ＪＮＭ−ＬＡ  ２７０分光計）、３００ＭＨｚ（ＪＥＯＬ  ＪＮＭ−ＬＡ３００分光計）で測定し、データは、内部標準としてのテトラメチルシラン（ＴＭＳ）からのｐｐｍ（ｐａｒｔｓ  ｐｅｒ  ｍｉｌｌｉｏｎ）で示した。
使用する慣用略語は、ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｍ＝多重線、ｂｒ．＝幅広などである。ＩＲスペクトルは、赤外分光計（ＩＲ−４７０：島津製作所製）により測定した。旋光度は、ＪＡＳＣＯ  ＤＩＰ−３７０デジタル偏光計（日本分光社製）を用いて測定した。化学記号は、通常の意味、すなわち、ｂ．ｐ．（沸点）、ｍ．ｐ．（融点）、Ｌ（リットル）、ｍＬ（ミリリットル）、ｇ（グラム）、ｍｇ（ミリグラム）、ｍｏｌ（モル）、ｍｍｏｌ（ミリモル）である。
【００６８】
実施例化合物１
５−［２−（２−クロロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミドの合成
【化７】
2010155802.tif 000008
【００６９】
中間体２：メチル  ３−シアノ−２−ナトリウムオキシ−２−プロペノエートの合成
【化８】
2010155802.tif 000009
【００７０】
金属ナトリウム（７５．８７ｇ、２．７９ｍｏｌ）を、氷冷下メタノ−ル（１．２Ｌ）に小片を数回に分けて加えた。金属ナトリウム片の消失後、シュウ酸ジメチル（３００ｇ、２．５４１ｍｏｌ）とアセトニトリル（１１４．７２ｇ、２．７９ｍｏｌ）のメタノール混合液を、上記調製されたナトリウムメトキシドのメタノ−ル溶液へ滴下した。生じた反応混合液を６時間還流した。その後、混合物を減圧下で濃縮して、黄色固体状の中間体２（３７７．４ｇ、収率９９．５％）を得た。この中間体は、さらに精製することなく次の反応で直接使用した。
【００７１】
中間体３：メチルヒドラジン硫酸塩の合成
【化９】
2010155802.tif 000010
【００７２】
４０（ｗ／ｗ）％メチルヒドラジン水溶液（２５ｇ、０．２１７ｍｏｌ）に、氷冷下で硫酸（２３．４ｇ，０．２３８ｍｏｌ）を滴下で加えた。全て加えた後、反応混合物を４時間、室温で攪拌した。混合物を凍結乾燥によって乾燥させて中間体３（３０．５ｇ、収率９６％）を得た。
【００７３】
中間体４：メチル  ５−アミノ−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレートの合成
【化１０】
2010155802.tif 000011
【００７４】
中間体２（２６３．３９ｇ、１．７７ｍｏｌ）のメタノ−ル懸濁液（１．５Ｌ）に、室温で中間体３（２８０ｇ、１．９４ ｍｏｌ）を加えた。生じた混合物を４８時間、室温で攪拌した。その後、反応液に２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（２００ｍＬ）とジクロロメタン（１Ｌ）を加え、有機層を分離した。得られた有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。乾燥剤をろ過後、得られたろ液を、減圧下で濃縮して、黄色結晶状の粗中間体４（８２．２０ｇ、収率３０％）を得た。
この中間体は、さらに精製することなく次の反応で直接使用した。
【００７５】
中間体５：メチル  ５−ヨード−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレートの合成
【化１１】
2010155802.tif 000012
【００７６】
０℃に冷やした中間体４（３２．０ｇ、０．２０６ｍｏｌ）とヨウ化カリウム（３４２．４ｇ、２．０６ｍｏｌ）の酢酸−水混合溶液（３／１（ｖ／ｖ）、３００ｍＬ）に、亜硝酸ナトリウム（１７．０６ｇ、０．２４７ｍｏｌ）水溶液（５０ｍＬ）を注意深く滴下で加えた。滴下終了後、反応溶液を、０℃で３時間攪拌した。中間体４が完全に消費されたことをＴＬＣ（酢酸エチル：ヘキサン＝１：４（ｖ／ｖ））で確認した後、生じた混合液を、固体重曹を加えながら徐々に、ｐＨ１０〜１１に調整した。水溶液層は、酢酸エチル１００ｍＬで３回抽出し、集められた有機層は、無水硫酸ナトリウムで乾燥、ろ過後、減圧下で濃縮して茶色シロップ状の粗中間体５を得た。さらに、得られた粗中間体５を、シリカゲルを用いるカラムクロマトグラフィー（酢酸―石油エ−テル（０〜３０（ｖ／ｖ）％））により精製して、白色結晶の中間体５（１６．４ｇ、収率３０％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ６．９８（ｓ，１Ｈ），４．０１（ｓ，３Ｈ），３．９２（ｓ，３Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋２６６．９４
【００７７】
中間体６：５−ヨ−ド−１−メチル−１Ｈ−ピラゾ−ル−３−カルボン酸の合成
【化１２】
2010155802.tif 000013
【００７８】
中間体５（６．０ｇ、２２．６ｍｍｏｌ）のメタノ−ル溶液（１００ｍＬ）に、２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（５６．４ｍｍｏｌ、２８．２ｍＬ）を加えて５０℃まで加温した。２時間後、メタノ−ル溶媒を減圧下留去し、残った水溶液を氷冷しながら２Ｍ塩酸水溶液を用いてｐＨ２〜３に調整した。得られた析出結晶は酢酸エチルで溶解後、有機層を分離、さらに水溶液層は酢酸エチルで抽出操作を２度繰り返した。合わせた有機抽出層を、飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウムで乾燥、ろ過後、減圧下で濃縮して淡黄色固体状の粗中間体６（５．６８ｇ、定量的）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．８１（ｂｒ．ｓ，１Ｈ），６．８９（ｓ，１Ｈ），３．９２（ｓ，３Ｈ）
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ；［Ｍ＋Ｈ］＋２５２．９７，［Ｍ＋Ｈ］−２５０．９９
【００７９】
中間体７：５−ヨ−ド−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾ−ル−３−カルボキサミドの合成
【化１３】
2010155802.tif 000014
【００８０】
中間体６（７．３ｇ、２９．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン溶液（１５０ｍＬ）に、４−（２−アミノエチル）モルホリン（４．１５ｇ、３１．９ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１２．１ｍＬ、８６．９ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール・１水和物（８．９ｇ、５７．９ｍｍｏｌ）とＮ−（３−ジメチルアミノプロピル）−Ｎ’−エチルカルボジイミド塩酸塩（１１．１ｇ、５７．９ｍｍｏｌ）を室温で順次加えた。室温で２０時間攪拌後、反応溶液に飽和重曹水溶液を添加し、続いて水溶液層をジクロロメタンで抽出した。得られた有機抽出層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過後、減圧下で濃縮を行い粗中間体７を単離した。シリカゲルを用いるカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル／メタノ−ル＝９／１（ｖ／ｖ））で精製し、白色結晶状の中間体１７（９．８ｇ、収率９３％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：６．９５（ｓ，１Ｈ），３．９５（ｓ，３Ｈ），３．８０−３．６４（ｍ，４Ｈ），３．６２−３．４０（ｍ，２Ｈ），２．５７（ｔ，Ｊ＝６．２６Ｈｚ，２Ｈ），２．５４−２．３７（ｍ，４Ｈ）．ＮＨに起因するシグナルは観察されなかった。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ；［Ｍ＋Ｈ］＋３６４．９１.
【００８１】
中間体８：１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン４−イル）エチル］−５−［２−（トリメチルシリル）エチニル］−１Ｈ−ピラゾ−ル−３−カルボキサミドの合成
【化１４】
2010155802.tif 000015
【００８２】
中間体７（４．００ｇ、１０．９８ｍｍｏｌ）、ヨウ化銅（Ｉ）（２０９ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）、トリメチルシリルアセチレン（２．３３ｍＬ、１６．５ｍｍｏｌ）とビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（７７０ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）のＴＨＦ溶液（４５ｍＬ）にトリエチルアミン（６．１２ｍＬ、４３．９ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で加え、反応溶液を室温で２時間攪拌した。その後、混合液をセライトでろ過し、得られたろ液を減圧下で濃縮した。残渣を、シリカゲルを用いるカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノ−ル＝３０／１（ｖ／ｖ））により精製して、黄褐色の固体である中間体８（３．６７ｇ、収率１００％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．２２−７．１４（ｂｒｓ、１Ｈ），６．９０（ｓ，１Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），３．７８−３．７０（ｍ，４Ｈ），３．５８−３．４８（ｍ，２Ｈ），２．６２−２．４５（ｍ，６Ｈ）,０．２８（ｓ，９Ｈ）.ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ；［Ｍ＋Ｈ］＋３３５．２７.?
【００８３】
中間体９：５−エチニル１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾ−ル−３−カルボキサミドの合成
【化１５】
2010155802.tif 000016
【００８４】
中間体８（３．４３ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）と炭酸カリウム（２．１３ｇ、１５．４ｍｍｏｌ）のメタノール溶液（６０ｍＬ）を、室温で１．５時間攪拌した。その後、反応混合液をセライトでろ過し、得られたろ液を減圧下で濃縮した。残渣を、飽和食塩水−水（１／１（ｖ／ｖ））（４０ｍＬ）とジクロロメタン（２００ｍＬ）で希釈し、抽出操作後に有機層を分離した。得られた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、乾燥剤をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルを用いたカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール（３０／１−２０／１）（ｖ／ｖ））により精製して、淡褐色な固体の中間体９（２．２３ｇ、収率８３％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（２７０ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ７．２０（ｂｒｓ，１Ｈ），６．９６（ｓ，１Ｈ），３．９６（ｓ，３Ｈ），３．７７−３．７０（ｍ、４Ｈ），３．５８−３．４８（ｍ，３Ｈ），２．６２−２．４６（ｍ，６Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ；［Ｍ＋Ｈ］＋２６３.２２.
【００８５】
実施例化合物１：５−［２−（２−クロロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミドの合成
【化１６】
2010155802.tif 000017
【００８６】
中間体９（３０ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ），１−クロロ−２−ヨードベンゼン（３１ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ），ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（７．７ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）とヨウ化銅（Ｉ）（２．１ｍｇ、０．０１１ｍｍｏｌ）のテトラヒドロロフラン溶液（１ｍＬ）にトリエチルアミン（４４ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で加え、その後、反応溶液を６０℃で２時間攪拌した。反応溶液をシリカゲルを用いたカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）で粗精製した。さらにＳＣＸ（ＢＡＫＥＲＢＯＮＤ  ｓｐｅＴＭ  ７１２１−０６）に充填後、メタノール（１０ｍＬ）で洗浄し、最後にアンモニア−メタノール（１Ｍ、８ｍＬ）で溶出した。濃縮して得られた粗生成物は、分取ＨＰＬＣ（〔実施例〕冒頭説明に記載の精製装置Ａ）を用いて精製した。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋３７３．
【００８７】
上記と同様の反応を利用して合成した実施例化合物を以下の表１に示す。
【表１】
2010155802.tif 000018
【００８８】
【表２】
2010155802.tif 000019
【００８９】
【表３】
2010155802.tif 000020
【００９０】
実施例化合物２０：１−メチル−５−［２−（２−メチルフェニル）エチニル］−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミドの合成
【化１７】
2010155802.tif 000021
【００９１】
中間体７（３０ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）、２−エチニルトルエン（１２ｍｇ、０．０９９ｍｍｏｌ）、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（５．８ｍｇ、０．００８２ｍｍｏｌ）とヨウ化銅（Ｉ）（１．６ｍｇ、０．００８２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロロフラン溶液（１ｍＬ）にトリエチルアミン（３３ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で加え、反応溶液を室温で１時間攪拌した。反応溶液を、シリカゲルを用いたカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル）で粗精製した。さらにＳＣＸ（ＢＡＫＥＲＢＯＮＤ  ｓｐｅＴＭ  ７１２１−０６）に充填後、メタノール（１０ｍＬ）で洗浄し、最後にアンモニア−メタノール（１Ｍ、８ｍＬ）で溶出した。濃縮して得られた粗生成物は、分取ＨＰＬＣ（〔実施例〕冒頭説明に記載の精製装置Ａ）を用いて精製した。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋３５３．
【００９２】
上記と同様の反応条件を利用して合成した実施例化合物を以下の表２に示す。
【００９３】
【表４】
2010155802.tif 000022
【００９４】
【表５】
2010155802.tif 000023
【００９５】
実施例化合物３４：５−［２−（４−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（モルホリン−４−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミドの合成
【化１８】
2010155802.tif 000024
【００９６】
中間体７（３００ｍｇ、０．８２４ｍｍｏｌ），１−エチニル−４−フルオロベンゼン（９９ｍｇ、０．８２４ｍｍｏｌ），ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（５８ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）とヨウ化銅（Ｉ）（１６ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）のテトラヒドロロフラン溶液（６ｍＬ）にトリエチルアミン（０．４６ｍＬ、３.３０ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で加え、反応溶液を室温で２時間攪拌した。反応溶液を減圧濃縮した後、残渣を、シリカゲルを用いたカラムクロマトグラフィー（ジクロロメタン／メタノール（２０／１）（ｖ／ｖ））により精製し、粗生成物３３を得た。その後、その粗生成物をイソプロピルエーテルで再結晶し、白色固体の実施例化合物３３（１７８ｍｇ、収率６１％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．５５−７．５１（ｍ、２Ｈ），７．２８−７．１８（ｍ、１Ｈ），７．１２−７．０６（ｍ、２Ｈ），６．９７（ｓ，１Ｈ），４．００（ｓ，３Ｈ），３．７８−３．７２（ｍ，４Ｈ），３．５７−３．５１（ｍ，２Ｈ），２．６０−２．４９（ｍ，６Ｈ）.
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋３５７．
【００９７】
実施例化合物３５：５−［２−（４−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（ピペリジン−１−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミドの合成
【化１９】
2010155802.tif 000025
【００９８】
中間体１０：メチル  ５−［２−（４−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレートの合成
【化２０】
2010155802.tif 000026
【００９９】
中間体５（３００ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ），１−エチニル−４−フルオロベンゼン（１３５ｍｇ、１．１３ｍｍｏｌ），ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）クロライド（７９ｍｇ、０．１１３ｍｍｏｌ）とヨウ化銅（Ｉ）（２１ｍｇ、０．１１３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロロフラン溶液（６ｍＬ）にトリエチルアミン（４５６ｍｇ、４．５１ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で加え、反応溶液を室温で３時間攪拌した。反応溶液を酢酸エチルで希釈した後、水で洗浄した。得られた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、乾燥剤をろ過し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルを用いたカラムクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル（２／１）（ｖ／ｖ））により精製して、黄色な固体の中間体１０（２５８ｍｇ、収率８９％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．５７−７．５０（ｍ、２Ｈ），７．１３−７．０５（ｍ、２Ｈ），７．００ａｎｄ６．９７（ｅａｃｈｓ、ｔｏｔａｌ  １Ｈ），４．０５ａｎｄ４．０１（ｅａｃｈｓ、ｔｏｔａｌ  ３Ｈ），３．９４ａｎｄ３．９２（ｅａｃｈｓ、ｔｏｔａｌ  ３Ｈ）.
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ；［Ｍ＋Ｈ］＋２５９．?
【０１００】
中間体１１：５−［２−（４−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸の合成
【化２１】
2010155802.tif 000027
【０１０１】
中間体１０（２５８ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）のメタノ−ル（２ｍＬ）およびテトラヒドロフラン（１ｍＬ）の混合溶液に、２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１ｍＬ）を加えて室温で2時間攪拌した。その後反応溶液を、０．５Ｍ塩酸水溶液を用いてｐＨ２〜３に調整し、酢酸エチルで抽出した。その有機抽出層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、ろ過後、減圧下で濃縮して淡黄色固体状の中間体１１（２４０ｍｇ、収率９８％）を得た。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：７．７５−７．７０（ｍ、２Ｈ），７．３７−７．３１（ｍ、２Ｈ），７．０２（ｓ，１Ｈ），４．０１（ｓ，３Ｈ）.
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ；［Ｍ＋Ｈ］＋２４５，［Ｍ＋Ｈ］−２４３．カルボン酸に起因するシグナルは観測されなかった。
【０１０２】
実施例化合物３５：５−［２−（４−フルオロフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（ピペリジン−１−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミドの合成
【化２２】
2010155802.tif 000028
【０１０３】
中間体化合物１１（２０ｍｇ）、アミン体（１．１等量）（２−（ピペリジン−１−イル）エタン−１−アミンとして１１ｍｇ）、トリエチルアミン（３５μＬ，３等量）のアセトニトリル溶液（０．５ｍＬ）に室温でＨＢＴＵ（４７ｍｇ、１．５等量）のアセトニトリル溶液（０．５ｍＬ）を加えた。反応溶液は５０℃で２時間攪拌した。反応溶液に１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（０．５ｍＬ）を加え、酢酸エチル（１ｍＬ）で２度抽出操作を行った。合わせた有機層を減圧下で濃縮した後、残渣をＳＣＸ（ＢＡＫＥＲＢＯＮＤ  ｓｐｅＴＭ  ７１２１−０６）に充填後、メタノール（１０ｍＬ）で洗浄し、最後にアンモニア−メタノール（１Ｍ、８ｍＬ）で溶出した。濃縮して得られた粗生成物は、分取ＨＰＬＣ（〔実施例〕冒頭説明に記載の精製装置Ａ）を用いて精製した。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋３５５．
【０１０４】
実施例化合物３６：５−［２−（２−メトキシフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（ピペリジン−１−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミドの合成
【化２３】
2010155802.tif 000029
【０１０５】
中間体１２：メチル  ５−［２−（２−メトキシフェニル）エチニル］−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキシレートの合成
【化２４】
2010155802.tif 000030
先に示した中間体１０と同様の方法に従い、１−エチニル−２−メトキシベンゼンと中間体５（３００ｍｇ，１．１３ｍｍｏｌ）から収率９１％で中間体１２（２７６ｍｇ、収率９１％）を合成した。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ：７．５０−７．４７（ｍ、１Ｈ），７．４１−７．３５（ｍ、１Ｈ），６．９９−６．９２（ｍ、３Ｈ），４．０８（ｓ，３Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），３．９２（ｓ，３Ｈ）.
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ；［Ｍ＋Ｈ］＋  ２７１．?
【０１０６】
中間体１３：５−［２−（２−メトキシフェニル）エチニル］−１−メチル−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸の合成
【化２５】
2010155802.tif 000031
【０１０７】
先に示した中間体１１と同様の方法に従い、中間体１２（２５８ｍｇ，０．９６ｍｍｏｌ）から定量的にで中間体１３（２４５ｍｇ、定量的）を合成した。
１Ｈ−ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ：７．５７−７．４４（ｍ，２Ｈ），７．１４（ｄ，Ｊ＝８．０７Ｈｚ，１Ｈ），７．０５−６．９８（ｍ，２Ｈ），４．０１（ｓ，３Ｈ）, ３．８８（ｓ，３Ｈ）. カルボン酸に起因するシグナルは観測されなかった。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ；［Ｍ＋Ｈ］＋  ２５７，［Ｍ＋Ｈ］− ２５５．
【０１０８】
実施例化合物３６：５−［２−（２−メトキシフェニル）エチニル］−１−メチル−Ｎ−［２−（ピペリジン−１−イル）エチル］−１Ｈ−ピラゾール−３−カルボキサミドの合成
【化２６】
2010155802.tif 000032
先に示した実施例化合物３４と同様の方法に従い、中間体１３（２０ｍｇ，０．０７８ｍｍｏｌ）から粗生成物を得て、分取ＨＰＬＣ（〔実施例〕冒頭説明に記載の精製装置Ａ）を用いて精製した。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：［Ｍ＋Ｈ］＋３６７．
【０１０９】
上記と同様の反応を利用して合成した実施例化合物を以下の表３に示す。
【０１１０】
【表６】
2010155802.tif 000033
【０１１１】
実施例化合物を合成するための中間体リストを以下に示す。
【０１１２】
【表７】
2010155802.tif 000034
【０１１３】
［ヒト５−ＨＴ２Ｂ受容体結合実験］
本発明化合物の５−ＨＴ２Ｂ受容体への結合親和性を次の方法によって決定した。
ヒトの５−ＨＴ２Ｂ受容体を導入したＣＨＯ−Ｋ１細胞を、ユーロスクリーン社（カタログ番号；ＥＳ−３１４−Ｆ）より購入し培養した。培養後、回収した細胞は、タンパク質分解酵素阻害剤カクテル（ＳＩＧＭＡ社製、１：１００の割合で倍希）、および１ｍＭ  ＥＤＴＡを添加した５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）に懸濁し、氷中において、ポリトロン破砕機ＰＴ１２００を用い、最高出力で３０秒間ホモジナイズした。懸濁液は遠心処理（１，０００ｒｐｍ、４℃、５分）を行い、上清を−８０℃で１０分間冷凍した。凍結させた上清を５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）に再び懸濁して、ホモジナイズし、同様な遠心処理を行った。得られた上清をさらに、遠心処理（２５，０００ｒｐｍ、４℃、６０分）して、沈殿を５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）に再び懸濁し、ホモジナイズした後に小分けし、使用するまで−８０℃で保存した。一部の膜標品は、タンパク質濃度を求めるために使用した（ＢＣＡタンパク質測定キット（ＰＩＥＲＣＥ）およびプレートリーダー：Ｗａｌｌａｃ  ＡＲＶＯｓｘを使用）。
【０１１４】
受容体結合試験においては、前述で得られた全ての実施例化合物各２０μＬと１００μＬの［Ｈ３］−ｍｅｓｕｌｅｒｇｉｎｅ（ＧＥ  ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、１０ｎＭ）とを８０μＬの膜標品（２０μｇタンパク質含有）と共に室温で１２０分間インキュベーションした。非特異的結合は、最終濃度が１０μＬのｍｉａｎｓｅｒｉｎ（ＳＩＧＭＡ社製）存在下で求めた。全てのインキュベーションは、Ｆｉｌｔｅｒｍａｔｅ  ｈａｒｖｅｓｔｅｒ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社製）を用いて０．２（ｖ／ｖ）％のＰＥＩ溶液に浸したグラスフィルター上で急速減圧濾過することで終わらせ、続いて５０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．４）を用いて５回洗浄した。受容体に結合した放射活性は液体シンチレーションカウンター（ＴｏｐＣｏｕｎｔ：ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ社製）によって測定した。
実験の結果、全ての実施例化合物はヒトの５−ＨＴ２Ｂ受容体へ結合した。
【０１１５】
［ヒト５−ＨＴ２Ｂ受容体導入ＣＨＯ−Ｋ１細胞を使用したカルシウム流入試験］
本発明化合物の５−ＨＴ２Ｂ受容体への拮抗活性を次の方法によって決定した。
ヒト５−ＨＴ２Ｂ受容体を導入したＣＨＯ−Ｋ１細胞を、ユーロスクリーン社より購入し、培養した。細胞はＧ４１８（４００μｇ／ｍＬ）、ゼオシン（２５０μｇ／ｍＬ）、ペニシリン（１００Ｕ／ｍＬ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍＬ）、および透析した１％（ｖ／ｖ）ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ）を添加したＵｌｔｒａＣＨＯ培地（Ｃａｍｂｒｅｘ社製）を用いて３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。６０−８０％コンフルエントまで培養した後、細胞培養液を５μＭ  Ｆｕｒａ−２  ＡＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）を含有するＫＲＨ緩衝液（ＣａＣｌ２：１．８ｍＭ、ＭｇＳＯ４：１ｍＭ、ＮａＣｌ：１１５ｍＭ、ＫＣｌ：５．４ｍＭ、Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ：１１ｍＭ、ＮａＨ２ＰＯ４：０．９６ｍＭ、ＨＥＰＥＳ：２５ｍＭ、ｐＨはＮａＯＨでｐＨ７．４に調整）と置換した。細胞は室温で１２０分間インキュベーションした。インキュベーション後、細胞を０．０５％（ｗ／ｗ）Ｔｒｙｐｓｉｎ／１ｍＭ  ＥＤＴＡで剥がし、ＰＢＳで洗浄した。細胞は１．０×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍＬとなるように、ＫＲＨ緩衝液に懸濁した。
【０１１６】
本発明の試験化合物を３８４ウェルプレートにウェルあたり５０μＬ分注した。次いで、３４μＬの細胞懸濁液（３．４×１０４ｃｅｌｌｓ）を透明な底を持つ３８４ウェル黒色アッセイプレート（透明ボトム）に分注した。アッセイプレートをＦＤＳＳ６０００（浜松ホトニクス（株）製）に固定し、シグナル測定を開始した。３０秒後に６μＬの希釈した試験化合物を自動的に各ウェルに添加し、さらに４分３０秒間ＦＤＳＳ６０００による測定を続けることで、試験化合物の拮抗活性を求めた。次に細胞を暗下にて１０分間、室温でインキュベーションした。アッセイプレートを再びＦＤＳＳ６０００に固定してシグナル測定を開始した。３０秒後に２０μＬの９ｎＭ  ５−ＨＴを自動的に各ウェルに添加し、さらに４分間半ＦＤＳＳ６０００による測定を続けることで試験化合物のＩＣ５０値を求めた。この実験についてはＢｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１９９９  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ；１２８（１）：１３−２０．を参考にした。
５−ＨＴ２Ｂ受容体拮抗活性に関しては、実施例１の化合物はＩＣ５０値０．９ｎＭを示した。本明細書に記載する４０種類の全ての試験化合物は、いずれもＩＣ５０値１００ｎＭ以下の５−ＨＴ２Ｂ受容体拮抗活性を示した。
【０１１７】
［ヒト５−ＨＴ２Ａ受容体導入３Ｔ３細胞を使用したカルシウム流入試験］
本発明化合物の５−ＨＴ２Ａ受容体への拮抗活性を次の方法によって決定した。
ヒト５−ＨＴ２Ａ受容体を導入した３Ｔ３細胞を作製し培養した。細胞はＧ４１８（４００μｇ／ｍＬ）、ペニシリン（１００Ｕ／ｍＬ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍＬ）、および１０％（ｖ／ｖ）ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ）を添加したＤＭＥＭ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）を用いて３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。６０−８０％コンフルエントまで培養した後、細胞培養液を５μＭ  Ｆｕｒａ−２  ＡＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）を含有するＫＲＨ緩衝液（ＣａＣｌ２：１．８ｍＭ、ＭｇＳＯ４：１ｍＭ、ＮａＣｌ：１１５ｍＭ、ＫＣｌ：５．４ｍＭ、Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ：１１ｍＭ、ＮａＨ２ＰＯ４：０．９６ｍＭ、ＨＥＰＥＳ：２５ｍＭ、ｐＨはＮａＯＨでｐＨ７．４に調整）と置換した。細胞は室温で１２０分間インキュベーションした。インキュベーション後、細胞を０．０５％Ｔｒｙｐｓｉｎ／１ｍＭ  ＥＤＴＡで剥がし、ＰＢＳで洗浄した。細胞は０．３×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍＬとなるように、ＫＲＨ緩衝液に懸濁した。
【０１１８】
本発明の試験化合物を３８４ウェルプレートにウェルあたり５０μＬ分注した。次いで、３４μＬの細胞懸濁液（１．０×１０４ｃｅｌｌｓ）を透明な底を持つ３８４ウェル黒色アッセイプレート（透明ボトム）に分注した。アッセイプレートをＦＤＳＳ６０００（浜松ホトニクス（株）製）に固定し、シグナル測定を開始した。３０秒後に６μＬの希釈した試験化合物を自動的に各ウェルに添加し、さらに４分３０秒間ＦＤＳＳ６０００による測定を続けることで、試験化合物の拮抗活性を求めた。次に細胞を暗下にて１０分間、室温でインキュベーションした。アッセイプレートを再びＦＤＳＳ６０００に固定してシグナル測定を開始した。３０秒後に２０μＬの９０ｎＭ  ５−ＨＴを自動的に各ウェルに添加し、さらに４分間半ＦＤＳＳ６０００による測定を続けることで試験化合物のＩＣ５０値を求めた。この実験についてはＢｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１９９９  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ；１２８（１）：１３−２０．を参考にした。
【０１１９】
［ヒト５−ＨＴ２Ｃ受容体導入３Ｔ３細胞を使用したカルシウム流入試験］
本発明化合物の５−ＨＴ２ｃ受容体への拮抗活性を次の方法によって決定した。
ヒト５−ＨＴ２ｃ受容体を導入した３Ｔ３細胞を作製し培養した。細胞はＧ４１８（２０μｇ／ｍＬ）、ペニシリン（１００Ｕ／ｍＬ）、ストレプトマイシン（１００μｇ／ｍＬ）、および１０％（ｖ／ｖ）ＦＢＳ（ｆｅｔａｌ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ）を添加したＤＭＥＭ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）を用いて３７℃、５％ＣＯ２の条件下で培養した。６０−８０％コンフルエントまで培養した後、細胞培養液を５μＭ  Ｆｕｒａ−２  ＡＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社製）を含有するＫＲＨ緩衝液（ＣａＣｌ２：１．８ｍＭ、ＭｇＳＯ４：１ｍＭ、ＮａＣｌ：１１５ｍＭ、ＫＣｌ：５．４ｍＭ、Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ：１１ｍＭ、ＮａＨ２ＰＯ４：０．９６ｍＭ、ＨＥＰＥＳ：２５ｍＭ、ｐＨはＮａＯＨでｐＨ７．４に調整）と置換した。細胞は室温で１２０分間インキュベーションした。インキュベーション後、細胞を０．０５％Ｔｒｙｐｓｉｎ／１ｍＭ  ＥＤＴＡで剥がし、ＰＢＳで洗浄した。細胞は０．４５×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍＬとなるように、ＫＲＨ緩衝液に懸濁した。
【０１２０】
本発明の試験化合物を３８４ウェルプレートにウェルあたり５０μＬ分注した。次いで、３４μＬの細胞懸濁液（１．５×１０４ｃｅｌｌｓ）を透明な底を持つ３８４ウェル黒色アッセイプレート（透明ボトム）に分注した。アッセイプレートをＦＤＳＳ６０００（浜松ホトニクス（株）製）に固定し、シグナル測定を開始した。３０秒後に６μＬの希釈した試験化合物を自動的に各ウェルに添加し、さらに４分３０秒間ＦＤＳＳ６０００による測定を続けることで、試験化合物の拮抗活性を求めた。次に細胞を暗下にて１０分間、室温でインキュベーションした。アッセイプレートを再びＦＤＳＳ６０００に固定してシグナル測定を開始した。３０秒後に２０μＬの３ｎＭ  ５−ＨＴを自動的に各ウェルに添加し、さらに４分間半ＦＤＳＳ６０００による測定を続けることで試験化合物のＩＣ５０値を求めた。この実験についてはＢｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１９９９  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ；１２８（１）：１３−２０．を参考にした。
【０１２１】
［ラットを使用したＩＢＳ治療効果の評価］
本発明における試験化合物の薬理効果を、ラットＴＮＢＳ誘発ＩＢＳモデルを用いて、結腸伸展刺激時の痛覚閾値低下に対する改善効果を測定することで評価した。比較対照化合物としては、５−ＨＴ２Ｂ選択的拮抗薬として既知であるＲＳ−１２７４４５を用いた。この評価についてはＫａｔｓｕｙｏ  Ｏｈａｓｈｉら著作のＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ８１（２）：１４４−１５０（２００８）あるいは、大橋雅津代（２００８），過敏性腸症候群モデル動物における内臓痛覚過敏に関する研究，博士論文，東京大学を参考にした。
【０１２２】
試験法
動物（２４０〜２７０ｇで購入したＳＤ系雄性ラット）を麻酔下で正中切開し、結腸起始部にＴＮＢＳ溶液（５０ｍｇ／ｋｇ：３０％エタノール含有）を処置した。その後、盲腸を腹腔内に戻し切開部を縫合した。手術後の動物は通常環境で飼育し、術後７日目以降に薬物評価に使用した。試験化合物の評価は結腸伸展刺激法を用いた（Ｄｉｏｐ  Ｌ．ら著作のＪ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ．３０２（３）：１０１３−２２（２００２））。大腸伸展刺激は長さ５ｃｍのバルーンを肛門より挿入し、その先端が肛門から１０ｃｍのところに位置するよう留置して、バロスタット（Ｂａｒｏｓｔａｔ  ＤＩＳＴＥＮＤＥＲ  ＩＩ  Ｒ，Ｇ＆Ｊ，ＣＡＮＡＤＡ）を用いてバルーン内圧を０から５ｍｍＨｇずつ最大で７０ｍｍＨｇまで段階的に負荷した。ラットが腹筋収縮（ａｂｄｏｍｉｎａｌ  ｃｒａｍｐ：Ｗｅｓｓｅｌｍａｎｎ  Ｕら著作のＮｅｕｒｏｓｃｉ  Ｌｅｔｔ．２４；２４６（２）：７３−６）を示したバルーン内圧（ｍｍＨｇ）を痛覚閾値として評価した。
【０１２３】
５−ＨＴ２Ｂ選択的拮抗薬として既知であるＲＳ−１２７４４５を本モデルに適用すると、ＴＮＢＳで誘発した痛覚閾値の低下に対して、１０ｍｇ／ｋｇおよび３０ｍｇ／ｋｇの経口投与で有意な改善効果を示した。したがって、本発明の５−ＨＴ２Ｂ受容体拮抗活性を有する新規５−エチニルピラゾール−３−カルボキサミド誘導体もＩＢＳの治療に有用であることが示された。