(57)【要約】      （修正有）【課題】選択された抗原に対する脊椎動物宿主中での免疫応答を高めるためのサイトカイン、リンホカイン類似物の提供。【解決手段】顆粒球マクロファージコロニー刺激因子もしくはインターロイキン−１２のようなサイトカインもしくはリンホカインと組合わさったアミノアルキルグルコサミンリン酸化合物またはその誘導体もしくは類似物の使用は、脊椎動物宿主での選択された抗原に対する免疫応答を高めるための抗原組成物中のアジュバントの組合せ物として有用である。【選択図】図３
2010001304.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
宿主から産生されたことを表す分子又はその部分からの、アミロイド前駆体タンパク質由来のポリペプチド、ペプチドもしくはフラグメントである選択された抗原、および有効なアジュバント作用量の：（１）アミノアルキルグルコサミンリン酸化合物および（２）ＧＭＣＳＦの組合せ物、を含む抗原組成物。
【請求項２】
選択された抗原が、Ａβペプチド、もしくはＡβペプチドのフラグメントである、請求項１に記載の抗原組成物。
【請求項３】
選択された抗原が、アミノ酸配列：
Ａｓｐ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｐｈｅ  Ａｒｇ  Ｈｉｓ  Ａｓｐ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｔｙｒ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｈｉｓ  Ｈｉｓ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ａｓｐ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｖａｌ  Ｖａｌ  Ｉｌｅ  Ａｌａ（配列番号６）
を有するＡβペプチドである、請求項２に記載の抗原組成物。
【請求項４】
脊椎動物宿主中でのアミロイド沈着を特徴とする疾患を予防もしくは治療する抗原組成物の能力を増大するための抗原組成物であって、アミロイド前駆体タンパク質由来のポリペプチド、ペプチドもしくはフラグメント、ならびに有効なアジュバント作用量の：（１）アミノアルキルグルコサミンリン酸化合物および（２）ＧＭＣＳＦの組合せ物、を含んで成る上記抗原組成物。
【請求項５】
選択された抗原が、Ａβペプチド、もしくはＡβペプチドのフラグメントである、請求項４記載の抗原組成物。
【請求項６】
選択された抗原が、アミノ酸配列：
Ａｓｐ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｐｈｅ  Ａｒｇ  Ｈｉｓ  Ａｓｐ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｔｙｒ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｈｉｓ  Ｈｉｓ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ａｓｐ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｖａｌ  Ｖａｌ  Ｉｌｅ  Ａｌａ（配列番号６）
を有するＡβペプチドである、請求項５記載の抗原組成物。
【請求項７】
アミノアルキルグルコサミンリン酸化合物が、安定な水中油型エマルションの形態で使用される、請求項１または４のいずれか１に記載の抗原組成物。
【請求項８】
アミノアルキルグルコサミンリン酸化合物が：
２−［（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］エチル２−デオキシ−４−Ｏ−ホスホノ−３−Ｏ−［（Ｒ）−３−テトラデカノイオキシテトラデカノイル］−２−［（Ｒ）−３−テトラデカノイオキシテトラデカノイルアミノ］−β−Ｄ−グルコピラノシド
である、請求項１または４のいずれか１に記載の抗原組成物。
【請求項９】
希釈剤もしくは担体をさらに含んで成る、請求項１または４のいずれか１に記載の抗原組成物。
【請求項１０】
アミロイド前駆体タンパク質由来のポリペプチド、ペプチドもしくはフラグメントである選択された抗原に対する脊椎動物宿主における免疫応答を高めるための医薬の製造にお
ける、請求項１または４のいずれか１に記載の抗原組成物の使用。
【請求項１１】
アルツハイマー病、アミロイドーシスもしくはアミロイド原性疾患の治療または予防ための医薬の製造における、請求項１または４のいずれか１に記載の抗原組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、選択された抗原に対する脊椎動物宿主中での免疫応答を高めるための抗原もしくは免疫原組成物中のアジュバント製剤としての、サイトカインもしくはリンホカイン、とりわけ顆粒球マクロファージコロニー刺激因子もしくはインターロイキン−１２と組合せの、アミノアルキルグルコサミンリン酸化合物、またはその誘導体もしくは類似物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
免疫系は病原体を攻撃するために多様な機構を使用する。しかしながら、これらの機構の全部が必ずしも免疫感作後に活性化されるわけでない。免疫感作により誘導される保護免疫は、病原体に抵抗もしくはそれを排除するための適切な免疫応答を導き出す免疫原組成物の能力に依存する。病原体に依存して、これは、細胞媒介性かつ／もしくは体液性の免疫応答を必要とするかもしれない。
【０００３】
免疫応答におけるヘルパーＴ細胞の役割についての現在の規範は、Ｔ細胞はそれらが産生するサイトカインに基づきサブセットに分離することができること、および、これらの細胞で観察される明確なサイトカインプロフィルがそれらの機能を決定することである。このＴ細胞モデルは、２つの主要なサブセット、すなわち、細胞性および体液性（抗体）免疫応答双方を増大させるインターロイキン−２（ＩＬ−２）およびインターフェロンγを産生するＴＨ−１細胞；ならびに、体液性免疫応答を増大させるインターロイキン−４、インターロイキン−５およびインターロイキン−１０（それぞれＩＬ−４、ＩＬ−５およびＩＬ−１０）を産生するＴＨ−２細胞を包含する（非特許文献１）。
【０００４】
免疫化されている生物体中のより強い免疫応答を得、そして抗原を担持する病原体に対する宿主抵抗性を強めるために、抗原の免疫原能を高めることがしばしば望ましい。いくつかの状況では、免疫応答を、主として体液性の（ＴＨ−２）応答からより均衡のとれた細胞性（ＴＨ−１）および体液性（ＴＨ−２）応答に移動させることが望ましい。
【０００５】
細胞性応答はＣＤ８＋  ＣＴＬ（細胞傷害性Ｔリンパ球）応答の生成を必要とする。こうした応答は、細胞内病原体に対する免疫原組成物の開発に望ましい。多様な病原体に対する保護は、強い粘膜応答、高い血清力価、ＣＴＬの誘導および活発な細胞応答を必要とする。これらの応答は、慣習的なサブユニット免疫原組成物を包含する大部分の抗原製剤により提供されていない。こうした病原体のひとつはヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）である。
【０００６】
従って、脊椎動物宿主中で体液性および細胞性双方の免疫応答を生成させることが可能である抗原組成物製剤を開発する必要性が存在する。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｍｏｓｍａｎｎ，Ｔ．Ｒ．，ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３６，２３４８−２３５７（１９８６）
【発明の概要】
【０００８】
従って、サイトカインもしくはリンホカイン、とりわけ顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）もしくはインターロイキン−１２（ＩＬ−１２）、または前記サイトカインもしくはリンホカインに対するアゴニストもしくはアンタゴニストと組合せ
られた、アミノアルキルグルコサミンリン酸化合物（ＡＧＰ）、またはその誘導体もしくは類似物を含有する抗原組成物中のアジュバント組合せ製剤を利用することが、本発明の一目的である。とりわけ、ＡＧＰは、５２９（以前はＲＣ５２９として知られた）としてもまた既知である、２−［（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］エチル２−デオキシ−４−Ｏ−ホスホノ−３−Ｏ−［（Ｒ）−３−テトラデカノイオキシテトラデカノイル］−２−［（Ｒ）−３−テトラデカノイオキシテトラデカノイルアミノ］−β−Ｄ−グルコピラノシドである。
【０００９】
アジュバントは、免疫原もしくは抗原と一緒に投与される場合に免疫応答を高める物質である。本発明のアジュバント製剤は、抗原もしくは免疫原組成物中で選択された抗原と一緒に投与される。本発明の抗原組成物は、その選択された抗原に対する脊椎動物宿主中での免疫応答を高める。該選択された抗原は、脊椎動物宿主中での、（１）病原性のウイルス、細菌、真菌もしくは寄生虫から、または（２）癌細胞もしくは腫瘍細胞から、または（３）アレルゲンに対するアレルギー応答を和らげるようにＩｇＥの産生を妨害するようなアレルゲンから、または（４）アミロイド沈着を特徴とする疾患を予防もしくは治療するようにアミロイド前駆体タンパク質から、誘導されたポリペプチド、ペプチドもしくはフラグメントであることができる。本発明の一態様において、選択された抗原はＨＩＶからである。選択されたＨＩＶ抗原は、ＨＩＶタンパク質、前記タンパク質由来のポリペプチド、ペプチドもしくはフラグメントであってよい。本発明の特定の一態様において、ＨＩＶ抗原は特定の一ペプチドである。本発明の別の態様において、選択された抗原はβ−アミロイドペプチド（Ａβペプチドともまた称される）であり、これは、βおよびγ分泌酵素によるアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）のプロセシングにより生成されるＡＰＰの内的な３９−４３アミノ酸のフラグメントである。
【００１０】
ＡＧＰは、水性溶液として、もしくは安定化された水中油型エマルション（安定エマルションもしくはＳＥ）として存在することができる。本発明の好ましい一態様において、水中油型エマルションは、スクアレン、グリセロールおよびホスファチジルコリンを含有する。ＳＥ製剤中で、ＡＣＧは投与前に抗原組成物を形成するためにサイトカインもしくはリンホカインと混合される。サイトカインもしくはリンホカインはエマルションに入ることを必要とされない。本発明の好ましい一態様において、ＡＧＰはＳＥの形態にある。抗原組成物は希釈剤もしくは担体をさらに含んでよい。
【００１１】
本発明はまた、有効なアジュバント作用（ａｄｊｕｖａｎｔｉｎｇ）量のサイトカインもしくはリンホカインの組合せ、とりわけＧＭ−ＣＳＦもしくはＩＬ−１２または前記サイトカインもしくはリンホカインに対するアゴニストもしくはアンタゴニストを伴うＡＧＰを包含することによる、（１）脊椎動物宿主の免疫応答を導き出す、病原性のウイルス、細菌、真菌もしくは寄生虫から、または（２）脊椎動物宿主中で治療的もしくは予防的抗癌効果を導き出す、癌細胞もしくは腫瘍細胞からの癌抗原もしくは腫瘍関連抗原から、または（３）アレルゲンに対するアレルギー応答を和らげるようにＩｇＥの産生を妨害するような、アレルゲンから、または（４）こうした望ましくない影響を低下させるように、ある分子または望ましくない様式、量もしくは位置で宿主により産生されるもの（自己分子）を表すその部分から、の選択された抗原を含有する抗原組成物の能力の増大方法にも向けられる。
【００１２】
本発明はさらに、有効なアジュバント作用量のサイトカインもしくはリンホカインの組合せ、とりわけＧＭ−ＣＳＦもしくはＩＬ−１２または前記サイトカインもしくはリンホカインに対するアゴニストもしくはアンタゴニストを伴うＡＧＰを包含することによる、脊椎動物宿主中で細胞傷害性Ｔリンパ球を導き出す、病原性のウイルス、細菌、真菌もしくは寄生虫からの選択された抗原を含有する抗原組成物の能力の増大方法に向けられる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】発明にかかる、以下、すなわち群１−Ａβ１−４２ペプチドおよびＰＢＳ（示されない）；群２−Ａβ１−４２ペプチドおよびＭＰＬ（商標）ＳＥ（四角）；群３−Ａβ１−４２ペプチドならびにＭＰＬ（商標）およびＧＭ−ＳＣＦ（三角）；群４−Ａβ１−４２ペプチドならびに５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦ（逆三角）のとおり免疫化されたトランスジェニックマウスでのＡβ１−４２ペプチドに対する抗体の幾何平均力価を描く。
【図２】発明にかかる、図１について記述される４群で免疫化されたトランスジェニックマウスの全Ａβの皮質レベルを描く。
【図３】発明にかかる、図１について記述される４群で免疫化されたトランスジェニックマウスのＡβ１−４２ペプチドの皮質レベルを描く。
【図４】発明にかかる、図１について記述される４群で免疫化されたトランスジェニックマウスの前頭皮質のアミロイド負荷を描く。
【図５】発明にかかる、図１について記述される４群で免疫化されたトランスジェニックマウスの前頭皮質の神経炎性負荷を描く。
【図６】発明にかかる、図１について記述される４群で免疫化されたトランスジェニックマウスの膨大後部皮質の星状細胞増加のレベルを描く。
【図７】発明にかかる、２群のマカク（ｃｙｎｏｍｏｌｏｇｏｕｓ  ｍａｃａｑｕｅｓ）（１群あたり４匹の動物）での血清中のＨＩＶ  Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6Pペプチド特異的ＩｇＧの幾何平均抗体力価を描く。群１の動物はＣ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6Pペプチド単独で鼻内に免疫化した。群２の動物は５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦとともに処方されたＣ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6Pペプチドで筋肉内に免疫化した。矢印は第０、４、８、１８および２３週の免疫感作を示す。
【図８】発明にかかる、図７について記述される同一の動物の膣頚管洗浄サンプル中の幾何平均抗体力価を描く。
【図９】発明にかかる、図７について記述される同一の動物の鼻洗浄液サンプル中の幾何平均抗体力価を描く。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
アジュバント、サイトカインおよびリンホカインは、それら自身は乏しい免疫原性である、多様な抗原に対する免疫応答の発生およびプロフィルを高めかつ操縦する能力を有する免疫調節化合物である。アジュバント、サイトカインおよびリンホカインの適切な選択は、アジュバント、サイトカインもしくはリンホカインの非存在下で発生しないことができる、良好な体液性および細胞性免疫応答を誘導することができる。とりわけ、アジュバント、サイトカインおよびリンホカインは、免疫原組成物中のサブユニットおよびペプチド抗原に対する免疫応答の増強において有意の効果を有する。それらの刺激活性は、タンパク質抗原に対し向けられる抗原特異的免疫応答の発生にもまた有益である。強い粘膜応答、高い血清力価、ＣＴＬの誘導および活発な細胞応答を必要とする多様な抗原について、アジュバントおよびサイトカイン／リンホカインの組合せは、大部分の抗原製剤により提供されない刺激を提供する。
【００１５】
多数の研究が動物モデルで多様なアジュバント製剤を評価しているが、しかし、ミョウ
バン（水酸化アルミニウムもしくはリン酸アルミニウム）が、現在、ヒトでの広まった使用に認可されている唯一のアジュバントである。別のアジュバントはスティミュロン［Ｓｔｉｍｕｌｏｎ］（商標）ＱＳ−２１（ＱＳ−２１）（アンチジェニックス  インク（Ａｎｔｉｇｅｎｉｃｓ  Ｉｎｃ．）、マサチューセッツ州フラミンガム（２））である。一群のアジュバント、すなわち多様な油中水もしくは水中油の組合せよりなる安定エマルションは、それらの免疫増強能力についてかなりの注意を受領している。これらの製剤は一般に、注入の部位で抗原を安定化しかつ置く（ｄｅｐｏｔ）よう作用する代謝可能なもしくは不活性の油の多様な組合せよりなる。１つのこうしたアジュバントはフロイントの不完全アジュバント（ＩＦＡ）であり、鉱物油、水および乳化剤を包含する。フロイントの完全アジュバント（ＣＦＡ）はＩＦＡおよび熱で殺されたミコバクテリアである。これらの型のアジュバントの使用における特定の一懸念は、注入部位に関連した刺激（しばしば肉芽腫性傷害を引き起こす単核細胞浸潤の結果）であった。従って、他の化合物および製剤が潜在的アジュバントとして検討されている。
【００１６】
こうした化合物の一群は、米国特許第６，１１３，９１８号明細書（これにより引用することにより組み込まれる（３））中、例えば段落２第４行〜段落３第３８行に記述されるアミノアルキルグルコサミンリン酸化合物（ＡＧＰ）である。ＡＧＰは、２−デオキシ−２−アミノ−α−Ｄ−グルコピラノース（グルコサミン）にグリコシド結合されて基礎構造を形成するアミノアルキル（アグリコン）基を有する。さらなる置換基は、グルコサミン環上の４もしくは６の炭素のリン酸化および３個の３−アルカノイルオキシアルカノイル残基を包含する。
【００１７】
１種のこうしたＡＧＰは、コリキサ（Ｃｏｒｉｘａ）（モンタナ州ハミルトン）により製造される、５２９と呼称される化合物（その完全な化学名は２−［（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］エチル２−デオキシ−４−Ｏ−ホスホノ−３−Ｏ−［（Ｒ）−３−テトラデカノイオキシテトラデカノイル］−２−［（Ｒ）−３−テトラデカノイオキシテトラデカノイルアミノ］−β−Ｄ−グルコピラノシドである）である。
【００１８】
コリキサ（Ｃｏｒｉｘａ）はまた、５２９と組合せられる場合に５２９  ＳＥと呼称される安定化エマルションの形成をもたらす代謝可能な水中油型製剤も処方している。該安定化エマルションは、スクアレン油、グリセロールおよびホスファチジルコリンとの５２９の微小流動化により生成される。現在の製剤はＧＭＰ品質の微小流動化エマルションである。１％の油（とは言え他の濃度も使用してよい）を含有するエマルションが下の実験で記述される。
【００１９】
５２９  ＳＥは、Ｂａｌｂ／ｃもしくはスイス−ウェブスター（Ｓｗｉｓｓ−Ｗｅｂｓｔｅｒ）マウスに皮下で投与される場合に認識可能な巨視的組織病変をもたらさなかった。同一の成分を含有するがしかし５２９を含まない安定化エマルションもまた比較の目的上生成させた。とりわけ、それぞれアジュバント５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦの組合せとともに処方された、４０アミノ酸のＨＩＶペプチドＴ１ＳＰ１０ＭＮ（Ａ）のシステイン欠失された３９アミノ酸のバージョン（−３）（４０アミノ酸ペプチド（＋Ｃｙｓ）のアミノ酸番号１７のシステイン残基を欠く）、もしくはＡβ１−４２（ＡＰＰの内的な４２アミノ酸のフラグメント）での皮下免疫感作は、認識可能な炎症、発赤、腫張もしくは硬結をもたらさなかった。
【００２０】
５２９および他のＡＧＰの誘導体および類似物もまた本発明の範囲内にある。こうした化合物は、限定されるものでないが米国特許第６，１１３，９１８号明細書（３）に記述される化合物を挙げることができる。
【００２１】
免疫原組成物中へのサイトカインおよびリンホカインの組み込みは、免疫原組成物の能力の拡張および増強に有望と示されている（４）。サイトカイン、インターロイキン−１２（ＩＬ−１２）は、Ｔｈ１サイトカインプロフィルに向かう（すなわちマウスモデルにおいてＩｇＧ２サブクラスへの）Ｔヘルパー細胞サブセットの拡張の移動により、細胞媒介性免疫を惹起しかつ高めることを立証した（５−７）。マウスにおいて、組換えマウスＩＬ−１２は、Ｔｈ１に支配される免疫応答プロフィルを高めることが示されている（４）。
【００２２】
ＩＬ−１２は、多様な抗原提示細胞、主としてマクロファージおよび単球により産生される。それは、投薬を受けたことのないＴ細胞からのＴＨ１細胞の誘導において決定的に重要な要素である。ＩＬ−１２の産生、もしくはそれに応答する能力は、例えば寄生虫感染、最も顕著にはリーシュマニア症（８）の間の保護的ＴＨ１様応答の発生、ならびに、病原性の細菌もしくはウイルス（９）または癌細胞（１０）からの抗原に対する細胞媒介性免疫応答を高めることにおいて決定的に重要であることが示されている。ＩＬ−１２の効果は、大部分が、ＮＫ細胞およびＴヘルパー細胞により産生されるインターフェロンγにより媒介される。インターフェロンγは、Ｔ依存性タンパク質抗原に対するＩｇＧ２ａ抗体（１１）、およびＴ非依存性抗原に対するＩｇＧ３応答（１２）の誘導に決定的に重要である。元はナチュラルキラー細胞刺激因子と呼ばれたＩＬ−１２はヘテロ二量体サイトカインである（１３）。組換え宿主細胞中でのＩＬ−１２タンパク質の発現および単離は、国際特許出願公開第ＷＯ  ９０／０５１４７号明細書（１４）に記述される。
【００２３】
アジュバントとして潜在的有望性を保持する別のサイトカインはＧＭ−ＣＳＦである。ＧＭ−ＣＳＦは特定の型のコロニー刺激因子（ＣＳＦ）である。ＣＳＦは、骨髄中で見出される前駆細胞が特定の型の成熟血液細胞に分化することを誘導するリンホカインの一ファミリーである。米国特許第５，０７８，９９６号明細書（１５）（これにより引用することにより組み込まれる）に記述されるとおり、ＧＭ−ＣＳＦは、非特異的殺腫瘍活性を媒介するようにマクロファージもしくは前駆体単球を活性化する。ヒトＧＭ−ＣＳＦ遺伝子をコードするヌクレオチド配列は記述されている（１５）。ＧＭ−ＣＳＦ  ｃＤＮＡを含有するプラスミドが大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）に形質転換され、そして受託番号３９９００でアメリカン  タイプ  カルチャー  コレクション（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ）（ＡＴＣＣ）、１０８０１  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｂｏｕｌｖａｒｄ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ，２０１１０−２２０９に寄託されている。米国特許第５，２２９，４９６号明細書（１６）（これにより引用することにより組み込まれる）に記述されるとおり、ＧＭ−ＣＳＦ遺伝子はまた、酵母発現プラスミドにも挿入されかつ受託番号５３１５７でＡＴＣＣに寄託されている。さらに、米国特許第５，０７３，６２７号明細書（１７）（これにより引用することにより組み込まれる）に記述されるとおり、グリコシル化部位を除去されているＧＭ−ＣＳＦをコードするＤＮＡ配列が、受託番号６７２３１でＡＴＣＣに寄託された。
【００２４】
ＧＭ−ＣＳＦは、免疫応答を高め（１８）かつソーターで精製された（ｓｏｒｔ−ｐｕｒｉｆｉｅｄ）マウスＢ細胞中のＩｇ分泌に影響を及ぼす（１９）ことが既知の抗原提示細胞上のタンパク質分子をアップレギュレートすることが示されている。ＧＭ−ＣＳＦはまた、免疫原組成物のアジュバントとしても記述されている（２０）。
【００２５】
限定されるものでないがインターロイキン１−α、１−β、２、４、５、６、７、８、１０、１３、１４、１５、１６、１７および１８、インターフェロン−α、βおよびγ、顆粒球コロニー刺激因子、ならびに腫瘍壊死因子αおよびβを挙げることができる、他のサイトカインもしくはリンホカインが、免疫調節活性を有することが示されている。
【００２６】
サイトカインもしくはリンホカイン活性に関連する生物学的結果が、いかなるサイトカ
インもしくはリンホカインの全身投与に関しても懸念される。加えて、抗原特異的免疫応答の発生に関するサイトカインもしくはリンホカインの効果は、サイトカインもしくはリンホカインの局所濃度が維持される場合に高められるはずである。
【００２７】
ＧＭ−ＣＳＦもしくはＩＬ−１２との３−Ｏ−デアシル化モノホスホリルリピドＡもしくはモノホスホリルリピドＡの組合せ物が評価されており；多様な免疫応答パラメータの増強が観察された（２１）。
【００２８】
本明細書に記述される本発明は、抗原、選択されたサイトカインもしくはリンホカインアジュバント、および第二のアジュバントＡＧＰの（好ましくは安定な代謝可能なエマルションでの）組合せ物により、該抗原に特異的な免疫応答が高められることを立証する。
【００２９】
本発明の抗原組成物中への包含に選択される抗原は、タンパク質由来のペプチドもしくはポリペプチド、タンパク質、ならびに以下、すなわち糖、タンパク質、ポリもしくはオリゴヌクレオチド、または他の巨大分子成分のいずれかのフラグメントを含んで成る。本明細書で使用されるところの「ペプチド」は、一連の最低３個のアミノ酸を含んで成りかつ最低１個の抗原決定基もしくはエピトープを含有する一方、「ポリペプチド」はペプチドより長い分子であるがしかし完全長のタンパク質を構成しない。こうしたペプチド、ポリペプチドもしくはタンパク質は、破傷風トキソイドもしくはジフテリアトキソイドのような関係のないタンパク質に結合してよい。本明細書で使用されるところの「フラグメント」は、糖、タンパク質、ポリもしくはオリゴヌクレオチド、または他の巨大分子成分の一部分しかし全部未満を含んで成る。ＨＩＶの場合、本発明の抗原組成物は完全長のＨＩＶタンパク質をさらに含んで成る。
【００３０】
本発明は、ＨＩＶ由来のペプチド抗原を使用するモデル系で最初に例示する。これらのペプチドは、米国特許第５，０１３，５４８号（２２）および同第５，０１９，３８７号明細書（これにより引用することにより組み込まれる）に記述されるかもしくはそれらに由来し、そして今や要約される。これらのペプチドは、それに対し中和抗体およびＴ細胞応答が生じられる、ＨＩＶエンベロープタンパク質の一領域に対応するアミノ酸配列を含んで成る。
【００３１】
ＨＩＶは、後天的免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）の原因病原体であるヒトレトロウイルスである。ＨＩＶは、その外的エンベロープ糖タンパク質をＴリンパ球の表面上のＣＤ４（Ｔ４）分子に結合して、従ってＣＤ４（Ｔ４）分子を受容体として使用してＴ細胞に進入しかつこれを感染させることにより免疫系のＴリンパ球を感染させる。免疫感作によりＨＩＶ感染に特異的な保護免疫応答を誘導する試みは、非常に限られた成功と遭遇している。多数のアプローチが、現在、免疫原組成物の開発のための有効かつ保護的な戦略を決定する試みにおいて追求されている。これらは、ＨＩＶからの抗原エピトープを発現する減弱および組換え細菌ベクター（２４）、組換えアデノウイルス（２５）もしくはワクシニアウイルスベクター（２６）、ＤＮＡ免疫感作（２７）、ならびにＨＩＶの多様なＴおよびＢ細胞エピトープを含有する合成ペプチド（２８）を使用することを包含する。
【００３２】
ＨＩＶの外的エンベロープ糖タンパク質ｇｐ１２０は、人間で中和抗体を誘導することが可能であることが示されている。ｇｐ１２０分子全体のおよそ１／３をコードする組換えタンパク質ＰＢ１が、中和抗体の形成を誘導するエンベロープタンパク質の部分を包含することが示されている。しかしながら、チンパンジーでの研究は、無傷のｇｐ１２０もＰＢ１も高力価の中和抗体の産生を誘導することが可能でないことを立証した。
【００３３】
ｇｐ１２０の抗原決定基に対応し、かつ、該ウイルスを中和しかつ該ウイルスに対するＴヘルパーおよびＣＴＬ応答を誘導するｇｐ１２０に対する抗体応答を生成させる短いペ
プチドが、慣習的方法により合成された。
【００３４】
１つのこうしたペプチドは、Ｔ１ＳＰ１０ＭＮ（Ａ）（＋Ｃｙｓ）と呼称されるＣ４／Ｖ３多エピトープ含有ＨＩＶ−１MNペプチド、およびシステイン欠失変異体Ｔ１ＳＰ１０ＭＮ（Ａ）（−Ｃｙｓ）である。これらのペプチドは、Ｔｈ、ＴCTLおよびＢのエピトープを包含するが、しかしＣＤ４結合を妨害する抗体を誘導しない。以前に、これらのＣ４／Ｖ３  ＨＩＶペプチドが、ＣＦＡもしくはＣＦＡ様アジュバントとともに投与される場合に免疫応答の誘導のための有望な候補であることが立証された（２９−３４）。これらのペプチドは、マウスおよびヒト双方でＣＤ４＋  Ｔｈ細胞応答を惹起することが以前に示されているエピトープを含有し、また、それは、主要な中和決定基、ならびにＢａｌｂ／ｃマウスおよびＨＬＡ  Ｂ７＋であるヒト双方でＣＤ８＋  ＣＴＬにより認識される部位の双方を含有する。３９アミノ酸のペプチドが、ＨＩＶに感染した患者での免疫原性および安全性の双方を最近立証している（２８）。
【００３５】
Ｔ１ＳＰ１０ＭＮ（Ａ）（＋Ｃｙｓ）は、４０アミノ酸の以下の配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｈｉｓ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ（３１）（配列番号１）
を有する。
【００３６】
Ｔ１ＳＰ１０ＭＮ（Ａ）（−Ｃｙｓ）は位置１７のシステインを伴わずに合成され、そして３９アミノ酸の以下の配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｈｉｓ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ（配列番号２）
を有する。
【００３７】
このシステイン残基は、Ｔｈ細胞、ＣＴＬもしくはＢ細胞により認識される機能的エピトープの外側に配置される。該ウイルスゲノムの多様な領域からの他のＨＩＶペプチドは、米国特許第５，８６１，２４３号（３５）、同第５，９３２，２１８号（３６）、同第５，９３９，０７４号（３７）、同第５，９９３，８１９号（３８）、同第６，０３７，１３５号明細書（３９）、欧州特許出願公開第６７１，９４７号明細書（４０）、および米国特許第６，０２４，９６５号明細書（４１）（これらもまた引用することにより組み込まれる）に記述される。
【００３８】
ＳＴ１／ｐ１１Ｃと呼称される２８アミノ酸のペプチド複合物（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）もまた使用される。該複合物は、ｐ１１Ｃと呼称される１２アミノ酸のＳＩＶ  ｍａｃ  ２５１  Ｇａｇペプチド（Ｇａｇのアミノ酸１７９−１９０）に複合された、ＳＴ−１と呼称される１６アミノ酸のＳＩＶ  ｅｎｖ由来のＴヘルパーペプチドよりなる（４２）。四量体の形態のｐ１１Ｃペプチドは、ＳＩＶ  ｍａｃに感染したＭａｍｕ−Ａ*０１アカゲザルでＣＴＬ活性を立証した（４３）。ＳＴ１−ｐ１１Ｃペプチド複合物は、以下のアミノ酸配列：
Ａｒｇ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ｔｒｐ  Ｈｉｓ  Ｌｙｓ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｓｎ  Ｖａｌ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｇｌｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｐｒｏ  Ｔｙｒ  Ａｓｐ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ  Ｍｅｔ  Ｌｅｕ（配列番号３）
を有し；
Ｃ４−Ｖ３89.6Pと呼称される３９アミノ酸のペプチド複合物（４４）もまた使用される。このペプチド複合物のＣ４領域（１６アミノ酸）は、ＨＩＶ−１エンベロープタンパク質の第四の定常領域由来であり、そして普遍的Ｔヘルパーエピトープを表す。該ペプチドのＶ３部分（２３アミノ酸）は、ＨＩＶ−１エンベロープタンパク質の第三の超可変領域由来であり、そして決定的に重要な中和決定基を表す。Ｃ４−Ｖ３89.6P複合物は、以下のアミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号４）
を有する。
【００３９】
ＨＩＶ抗原は、タンパク質、前記タンパク質由来のポリペプチド、ペプチドもしくはフラグメントであってよい。タンパク質は、ｇｐ４１、ｇｐ１２０もしくはｇｐ１６０のような糖タンパク質であってよい。あるいは、タンパク質は、ｇａｇ、ｐｏｌ、ｖｉｆ、ｒｅｖ、ｖｐｒ、ｔａｔ、ｎｅｆもしくはｅｎｖのような遺伝子によりコードされるタンパク質であってよい。こうしたタンパク質由来のペプチドは、長さが最低６アミノ酸の最低１個の抗原決定基（エピトープ）を含有することができる。
【００４０】
ＨＩＶペプチドに対する免疫応答は、製薬学的に許容できる担体分子にペプチドを共有結合する（ｌｉｎｋｉｎｇ）（結合する（ｃｏｎｊｕｇａｔｉｎｇ））ことにより高められるかもしれない。適する担体分子の例は、破傷風トキソイド、ジフテリアトキソイド、キーホールリンペットヘモシアニン、およびＨＩＶ  ｇｐ１２０糖タンパク質のＴ細胞エピトープに対応する他のペプチドを包含する。
【００４１】
ＨＩＶに対する免疫感作の成功裏の戦略は、ＨＩＶに対する粘膜免疫ならびに良好なＣＴＬ応答を導き出すことが必要であることができると現在は考えられている。Ｔ１ＳＰ１０ＭＮ（Ａ）多エピトープペプチドおよび粘膜アジュバントコレラトキシンを使用する最近のマウスの研究において、鼻内免疫感作が中和血清ＩｇＧ１抗体を誘導したことが示された（４５）。またＨＩＶ−Ｖ３ループペプチドを使用するその後の研究は、粘膜で合成されたＩｇＡ抗体、およびペプチド特異的ＣＴＬを包含する強い細胞媒介性応答の誘導を立証した（４６）。ＨＩＶに感染した個体の予防もしくは安定化における高力価の全身的および中和抗体の機能的役割は未知であるが、とは言え高力価のウイルス特異的抗体はウイルスの蔓延の予防において重要であると考えられている。
【００４２】
本発明の好ましい一態様において、この場合サイトカインＩＬ−１２もしくはＧＭ−ＣＳＦと混合される５２９を含有する安定な水中油型エマルションが処方される。下に提示されるデータは、５２９およびＧＭ−ＣＳＦの組合せが高力価のＨＩＶ中和血清抗体をもたらすことを立証する。５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦの組合せは、免疫化された雌性マウスの膣円蓋でＩｇＧ１およびＩｇＧ２ａ双方のサブクラスを包含する高力価の抗原特異的ＩｇＧ抗体を誘導する。５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦとともに処方されたＴ１ＳＰ１０ＭＮ（Ａ）（−Ｃｙｓ）ペプチドでのマウスの免疫感作は、高められた抗原特異的細胞増殖およびサイトカインの培養物中への分泌、ならびにペプチド特異的ＣＴＬ応答の誘導により決定されるような強い細胞性免疫応答を誘導した。類似の結果が、５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦとともにＡＰＰからのＡβ１−４２ペプチドでマウスを免疫化した場合にみられた。
【００４３】
一般に、ＧＭ−ＣＳＦもしくはＩＬ−１２と組合せられた５２９もしくは５２９  ＳＥおよび最適のタンパク質もしくはペプチドの抗原／アジュバント製剤は、インビトロの抗
原刺激に応答して、高力価の抗原特異的かつウイルスを中和する抗体、補体を固定するＩｇＧ抗体（マウスにおいてＩｇＧ２ａに有利）のより大きな比率へのＩｇＧサブクラス比の有意の移動、サイトカインの上昇された産生、および単核細胞からの細胞増殖を誘導する。これらの特性は、ＧＭ−ＣＳＦもしくはいＬ−１２を伴いもしくは伴わずのいずれでも、５２９の非存在下の抗原およびＳＥの製剤で観察されなかった。本発明の製剤は、ＣＴＬの誘導により決定されるような良好な細胞性応答もまた誘導する。
【００４４】
５２９  ＳＥの利益は、該製剤が注入の部位で肉芽腫性の蓄積および炎症を誘発しないことであり；こうした注入部位反応は、典型的には、油中水もしくは水中油型のアジュバント製剤により誘発される。
【００４５】
５２９  ＳＥ単独、もしくは５２９  ＳＥおよびＩＬ−１２、もしくは５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦとともにのＨＩＶペプチドＴ１ＳＰ１０ＭＮ（Ａ）（−Ｃｙｓ）の投与を比較するための実験を実施した。
【００４６】
この実験において（下の表１）、５２９ＳＥとともに処方されたＨＩＶペプチドＴ１ＳＰ１０ＭＮ（Ａ）（−Ｃｙｓ）で皮下に免疫化されたＢａｌｂ／ｃマウスは、わずか２回の注入後にペプチド特異的な血清ＩｇＧ力価を導き出した。ＩｇＧ１およびＩｇＧ２サブクラスの力価もまた導き出された。第二のアジュバント（ＧＭ−ＣＳＦもしくはＩＬ−１２のいずれか）の包含は、ＩｇＧの総力価、ならびにＩｇＧ１サブクラスの力価を高めた。ＩＬ−１２の添加はＩｇＧ２ａサブクラスの力価を高め；ＧＭ−ＣＳＦの添加はＩｇＧ２ａサブクラスの力価を高めなかった。
【００４７】
別の実験において、機能的細胞媒介性免疫の尺度として、多エピトープペプチドＴ１ＳＰ１０ＭＮ（Ａ）（−Ｃｙｓ）と一緒に処方された５２９  ＳＥ、もしくは５２９  ＳＥおよびＩＬ−１２、もしくは５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦで免疫化されたマウスからの脾細胞のＨＩＶMN特異的ＣＴＬ応答を生成させる能力を評価した。
【００４８】
表２に示されるとおり、アジュバントのいずれかとともに免疫化されたマウスからの脾細胞は、標識されなかったかもしくは無関係のＩＩＩＢ  ＣＴＬエピトープでパルス標識されたかのいずれかの標的細胞に対する低い活性を立証した。ＨＩＶMN特異的ＣＴＬに媒介される標的細胞の溶解は、５２９  ＳＥおよびＩＬ−１２を投与した場合に、５２９  ＳＥ単独に比較して顕著に高められ、また、５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦを投与した場合になおさらに高められた（表２）。
【００４９】
なお別の実験において、アカゲザルを、ＳＴ１−ｐ１１ＣもしくはＣ４−Ｖ３89.6Pペプチド、ならびにＩＦＡもしくは５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦで免疫化した（表１５に示される群）。分析の結果を表１６−２２に示し、そして今や要約する。
【００５０】
ＳＴ１−ｐ１１Ｃペプチド製剤それ自身は、試験された全部の動物で良好に寛容されると思われた。しかしながら、有意の注入部位の反応性がアジュバントＩＦＡで示された。加えて、アジュバント製剤５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦの可能な小さな副作用が最終免疫感作直後にみられた。ＩＦＡを含有するＳＴ１−ｐ１１Ｃペプチド製剤は、試験された２匹のＭａｍｕ−Ａ*０１陽性アカゲザルのうち１匹で強力なｐ１１Ｃ特異的細胞性免疫応答を誘導することが可能であった。５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦを含有するＳＴ１−ｐ１１Ｃペプチド製剤もまた、試験された２匹のＭａｍｕ−Ａ*０１陽性アカゲザルのうち１匹でｐ１１Ｃ特異的細胞性免疫応答を誘導することが可能であった。
【００５１】
ＩＦＡを含有するＣ４−Ｖ３89.6Pペプチド製剤は、１：２５，６００〜１：１０２，４００の範囲のピーク血漿ＥＬＩＳＡ抗体力価、ならびにＳＨＩＶ89.6およびＳＨＩＶ89
.6Pに対する血清中和抗体力価を生成させることが可能であった。５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦを含有するＣ４−Ｖ３89.6Pペプチド製剤は、１：６，４００〜１：１２，８００の範囲のピーク血漿ＥＬＩＳＡ抗体力価、およびＳＨＩＶ89.6に対する低レベルの中和抗体応答を生成させることが可能であったが、しかしＳＨＩＶ89.6Pに対しては可能でなかった。
【００５２】
群あたりの動物の少ない数（２匹）を考えれば具体的な結論を引き出すことは困難である。しかしながら、５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦを含有する双方のペプチド製剤により生成された体液性および細胞性双方の免疫応答のレベルは、ＩＦＡで補助された動物でみられる免疫応答より質的により低かった。ＩＦＡはヒトでの商業的使用のための組成物中の承認された成分でないことに常に注意しなければならない。加えて、応答する細胞の機能的特性および表現型（すなわちサイトカインプロフィル）は使用されるアジュバント製剤に依存して異なるかもしれないという若干の制限された証拠が存在する。
【００５３】
なお別の実験において、第二の霊長類種からの動物すなわちマカク（ｃｙｎｏｍｏｌｏｇｏｕｓ  ｍａｃａｑｕｅｓ）を、アミノ酸残基９のグルタミン酸をバリンに変えることにより改変されていたＣ４−Ｖ３89.6Pペプチドで免疫化した。Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6Pと呼称される、結果として生じるペプチド複合物は以下の配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｖａｌ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号５）
を有する。
動物を、アジュバントを伴わないかもしくは５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦの組合せを伴うかのいずれかのＣ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6Pペプチドで免疫化した。
【００５４】
結果は、Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6Pペプチドは、５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦと組合せで筋肉内注入により投与される場合に、アジュバントを伴わずに鼻内に投与された同一量のＣ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6Pペプチドよりも血清中で有意により高いペプチド特異的ＩｇＧ力価を導き出すことを示す（図７−９）。この実験からの結果は、ＨＩＶペプチド免疫原が、アジュバントの適切な組合せとともに投与される場合に、全身性の体液性免疫を導き出すことが可能であることをはっきりと立証する。
【００５５】
本発明のアジュバントの組合せを含有する、脊椎動物宿主でのアミロイド沈着（自己分子）を特徴とする疾患を予防もしくは治療するための望ましい免疫原組成物は、βアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の部分を含有するものを包含する。この疾患は、アルツハイマー病、アミロイドーシスもしくはアミロイド原性疾患と多様に称される。β−アミロイドペプチド（Ａβペプチドともまた称される）は、βおよびγ分泌酵素によるＡＰＰのプロセシングにより生成されるＡＰＰの内的な３９−４３アミノ酸のフラグメントである。Ａβ１−４２ペプチドは、以下の配列：
Ａｓｐ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｐｈｅ  Ａｒｇ  Ｈｉｓ  Ａｓｐ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｔｙｒ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｈｉｓ  Ｈｉｓ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ａｓｐ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｖａｌ  Ｖａｌ  Ｉｌｅ  Ａｌａ（配列番号６）
を有する。
【００５６】
若干の患者においては、アミロイド沈着物は凝集されたＡβペプチドの形態をとる。驚くべきことに、単離されたＡβペプチドの投与が、脊椎動物宿主においてアミロイド沈着
物のＡβペプチド成分に対する免疫応答を誘導することが今や見出された（４７）。従って、本発明の免疫原組成物は、本発明のアジュバントの組合せ、ならびに、Ａβペプチド、ならびにＡβペプチドのフラグメント、誘導体もしくは改変体（ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ）、およびＡβペプチドまたはそのフラグメント、誘導体もしくは改変体に対する抗体を包含する。Ａβペプチドの１種のこうしたフラグメントは、以下の配列（４８）：
Ａｓｐ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｐｈｅ  Ａｒｇ  Ｈｉｓ  Ａｓｐ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｔｙｒ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｈｉｓ  Ｈｉｓ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ａｓｐ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ（配列番号７）
を有する２８アミノ酸のペプチドである。
【００５７】
興味深いＡβペプチドの他のフラグメントは、限定されるものでないがアミノ酸１−１０、１−７、１−６、１−５、３−７、１−３および１−４を挙げることができ、それらは複合されない形態で、もしくは関係のないタンパク質に複合されて投与してよい。
【００５８】
一連の研究はＡβ１−４２ペプチドおよび多様なアジュバントを用いて実施した。結果の要約を今や提示することができる。
【００５９】
第一の実験において、Ａβ１−４２ペプチドで臀部で皮下に免疫化されたスイス−ウェブスター（Ｓｗｉｓｓ−Ｗｅｂｓｔｅｒ）マウスは、ペプチド特異的抗体ＩｇＧ、ＩｇＧ１およびＩｇＧ２ａ力価を生成させ、Ａβ１−４２ペプチドが実現可能な候補抗原であることを立証した。５２９  ＳＥおよびＡβ１−４２ペプチドへのＧＭ−ＣＳＦの添加は、５２９  ＳＥおよびＡβ１−４２ペプチドのレシピエントに比較して上昇された血清抗体ＩｇＧ、ＩｇＧ１およびＩｇＧ２ａ力価をもたらした（表３−８を参照されたい）。５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦの組合せを受領する個々のマウスからの血清抗体は、より多い例で上昇され、また、５２９  ＳＥ単独を受領する個々のマウスより迅速に上昇した（データは示されない）。この第一の実験をより高齢のスイス−ウェブスター（Ｓｗｉｓｓ−Ｗｅｂｓｔｅｒ）マウス（３月齢未満の代わりに６〜８月齢）を用いて反復した場合に、表３−８中のものに類似の結果がみられた（データは示されない）。
【００６０】
第二の実験において、スイス−ウェブスター（Ｓｗｉｓｓ−Ｗｅｂｓｔｅｒ）マウスを、変動する量のＧＭ−ＣＳＦを伴うＡβ１−４２ペプチドおよび５２９  ＳＥで臀部で皮下に免疫化した。ＩｇＧの終点力価は、ＧＭ−ＣＳＦの量が（０．１から１ないし１０μｇまで）増大した際に用量依存性の様式で増大した（表９）。５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦの全部の組合せについてのＩｇＧ力価は、単独でもしくはＧＭ−ＣＳＦとともにの別のアジュバントＱＳ−２１を受領する群についてより高かった。ＩｇＧ１サブクラスの力価もまた、第一の用量の５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦ、ならびに第二の用量の５２９  ＳＥ単独を受領した群に比較して、多様な５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦ群について増大した（表１０）。ＩｇＧ２ａサブクラスの力価もまた、多様な５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦ群について、５２９  ＳＥ単独群に比較して用量依存性の様式で増大した（表１１）。
【００６１】
第三の実験において、スイス−ウェブスター（Ｓｗｉｓｓ−Ｗｅｂｓｔｅｒ）マウスを、変動する量のＧＭ−ＣＳＦとともにもしくは伴わないＡβ１−４２ペプチドおよび５２９  ＳＥで臀部で皮下に免疫化した。ＩｇＧの終点力価は、多様な５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦ群（０．５ないし２ないし５ないし１０μｇ）について増大したとは言え、用量依存性の様式でではなかった（表１２）。ＩｇＧ１およびＩｇＧ２ａ双方のサブクラスの力価もまた、５２９  ＳＥ単独群に比較して、多様な５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦ群について増大したとは言え、用量依存性の様式でではなかった（表１３［ＩｇＧ１］および１４［ＩｇＧ２ａ］）。
【００６２】
第四の実験においては、残基７１７の突然変異（バリンがフェニルアラニンにより置換される）を有するβ−アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の変異体を発現するトランスジェニックマウスを使用した（４９）。この突然変異はヒトにおける家族性アルツハイマー病と関連する。これらのトランスジェニックマウス（ＰＤＡＰＰマウスと呼称される）は、Ａβ沈着物、神経炎性局面および星状細胞増加を包含するアルツハイマー病の病理学的な顕著な特徴の多くを前進的に発生させ、そして従ってヒトアルツハイマー病の動物モデルとしてはたらく。
【００６３】
この第四の実験において、ＰＤＡＰＰマウスを、多様なアジュバントとともにもしくは伴わないＡβ１−４２ペプチドで、かつ、表Ａに示される投薬量で皮下で免疫化した。とりわけ、群１のマウスは、陽性対照として安定エマルションの形態（ＳＥ）でＭＰＬ（商標）（コリキサ（Ｃｏｒｉｘａ）、モンタナ州ハミルトン）とともにＡβ１−４２ペプチドを受領し；群２のマウスはＭＰＬ（商標）ＳＥおよびマウスＧＭ−ＣＳＦとともにＡβ１−４２ペプチドを受領し；群３のマウスは５２９  ＳＥおよびマウスＧＭ−ＣＳＦとともにＡβ１−４２ペプチドを受領し；群４のマウスは陰性対照としてＰＢＳを受領した。群２および３は、群１もしくは４よりも、抗Ａβ１−４２抗体力価値のより迅速な増大、ならびにより高いピーク力価を表した。しかしながら、群２および３の力価は、２〜３ヶ月以内に群１の陽性対照の同等な力価に後退した（図Ａ）。群１、２および３は、群４の陰性対照に比較した場合に、ＥＬＩＳＡにより測定されるところの脳Ａβレベルの有意の低下（表Ｂ−Ｃおよび図Ｂ−Ｃ）、より低いアミロイド負荷（表Ｄおよび図Ｄ）ならびにより少ない神経炎性ジストロフィー（表Ｅおよび図Ｅ）を示した。群２および３は、群１の陽性対照に比較して、星状細胞増加の有意の低下を有した（図Ｆ）。
【００６４】
従って、５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦもしくはＩＬ−１２の補助特性は、一緒に処方される場合に相乗的であるようである。
【００６５】
本発明の抗原組成物は、病原性のウイルス、細菌、真菌もしくは寄生虫からの選択された抗原、および有効なアジュバント作用量の、サイトカインもしくはリンホカイン、とりわけＧＭ−ＣＳＦもしくはＩＬ−１２と組み合わせられた５２９（水性もしくは安定エマルションの形態の）のようなＡＧＰを含んで成る抗原組成物の投与後に、脊椎動物宿主の抗体応答および細胞媒介性免疫を改善することにより、免疫応答を調節する。限定されるものでないがインターロイキン１−α、１−β、２、４、５、６、７、８、１０、１３、１４、１５、１６、１７および１８、インターフェロン−α、βおよびγ、顆粒球コロニー刺激因子、ならびに腫瘍壊死因子αおよびβを挙げることができる他のサイトカインもしくはリンホカインが、免疫調節活性を有することが示されている。
【００６６】
ある種のサイトカインもしくはリンホカインのアゴニストもしくはそれらに対するアンタゴニストもまた本発明の範囲内にある。本明細書で使用されるところの「アゴニスト」という用語は、前記サイトカインもしくはリンホカインの活性もしくはそれと同じ方法で機能を高める分子を意味する。こうしたアゴニストの一例は、前記サイトカインもしくはリンホカインの模倣物である。本明細書で使用されるところの「アンタゴニスト」という用語は、前記サイトカインもしくはリンホカインの活性を阻害もしくは予防する分子を意味する。こうしたアンタゴニストの例は、可溶性ＩＬ−４受容体および可溶性ＴＮＦ受容体である。
【００６７】
本明細書で使用されるところの「有効なアジュバント作用量」という用語は、本明細書に記述されるアジュバントの組合せ物の非存在下である選択された抗原を受領する宿主に比較して、脊椎動物宿主中でその選択された抗原に対する増大された免疫応答を導き出すのに適する、該アジュバントの組合せ物の用量を意味する。特定の投薬量は、部分的に、宿主の齢、体重および医学的状態、ならびに投与の方法および抗原に依存することができ
る。好ましい一態様において、アジュバントの組合せ物では０．１〜５００μｇ／用量の範囲の５２９を利用することができ；より好ましい一態様において、該範囲は１〜１００μｇ／用量である。適する用量は当業者により容易に決定される。本発明の抗原組成物はまた、免疫学的に許容できる希釈剤もしくは担体と慣習的様式で混合して、注入可能な液体の溶液もしくは懸濁剤を製造してもよい。
【００６８】
本発明の抗原もしくは免疫原組成物は、限定されるものでないが鼻内、経口、膣、直腸、非経口、皮内、経皮（例えば国際特許出願第ＷＯ  ９８／２０７３４号明細書（５０）（これにより引用することにより組み込まれる）を参照されたい）、筋肉内、腹腔内、皮下、静脈内および動脈内を挙げることができる多様な経路により、ヒトもしくは非ヒト脊椎動物に投与する。抗原組成物の抗原成分（１種もしくは複数）の量は、部分的に、抗原の正体、ならびに宿主の齢、体重および医学的状態、ならびに投与の方法に依存して変動することができる。再度、適する用量は当業者により容易に決定される。抗原、およびアジュバントの組合せを同時に投与することが好ましいとは言え、必要とされない。該抗原組成物の用量の数および投薬レジメンもまた当業者により容易に決定される。いくつかの例においては、アジュバントの組合せのアジュバント作用特性が、必要とされる用量の数もしくは投薬レジメンの時間経過を減少させるかもしれない。
【００６９】
本発明のアジュバントの組合せは、限定されるものでないが、ヒトおよび非ヒト脊椎動物を感染させるウイルス、細菌、真菌もしくは寄生虫微生物からのものを挙げることができる広範な病原性微生物、または癌細胞もしくは腫瘍細胞からの広範な抗原を含有する抗原もしくは免疫原組成物中での使用に適する。抗原は、タンパク質由来のペプチドもしくはポリペプチド、ならびに以下、すなわち糖、タンパク質、ポリもしくはオリゴヌクレオチド、癌もしくは腫瘍細胞、アレルゲン、自己分子（アミロイド前駆体タンパク質のような）、または他の巨大分子成分のいずれかのフラグメントを含んでよい。いくつかの例においては、１種以上の抗原を抗原組成物中に包含する。
【００７０】
本発明のアジュバントの組合せ物を含有する望ましいウイルス免疫原組成物は、制限なしに、ヒト免疫不全ウイルス、サル免疫不全ウイルス、ＲＳウイルス、パラインフルエンザウイルスタイプ１−３、インフルエンザウイルス、単純疱疹ウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ヒトパピローマウイルス、ポリオウイルス、ロタウイルス、カリチウイルス、麻疹ウイルス、流行性耳下腺炎ウイルス、風疹ウイルス、アデノウイルス、狂犬病ウイルス、イヌジステンパーウイルス、牛疫ウイルス、ヒト肺炎後ウイルス、トリ肺炎ウイルス（以前はシチメンチョウ鼻気管炎ウイルス）、ヘンドラウイルス、ニパーウイルス、コロナウイルス、パルボウイルス、感染性鼻気管炎ウイルス、ネコ白血病ウイルス、ネコ感染性腹膜炎ウイルス、トリ感染性滑液嚢疾患ウイルス、ニューカッスル病ウイルス、マレック病ウイルス、ブタ呼吸傷害・繁殖症候群ウイルス、ウマ動脈炎ウイルスおよび多様な脳炎ウイルスにより引き起こされる疾患の予防および／もしくは治療に向けられるものを包含する。
【００７１】
本発明のアジュバントの組合せを含有する望ましい細菌免疫原組成物は、限定されるものではないが、インフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）（型分類可能および型分類不可能の双方）、ヘモフィルス  ソムヌス（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｓｏｍｎｕｓ）、モラクセラ  カタラリス（Ｍｏｒａｘｅｌｌａ  ｃａｔａｒｒｈａｌｉｓ）、肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、化膿連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｒｏｇｅｎｅｓ）、ストレプトコックス
アガラクチエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅ）、糞便連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ）、ヘリコバクター  ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ）、髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、トラコーマクラ
ミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）、クラミジア肺炎病原体（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、オウム病クラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｓｉｔｔａｃｉ）、百日咳菌（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、アロイオコックス  オティディティス（Ａｌｌｏｉｏｃｏｃｃｕｓ  ｏｔｉｄｉｔｉｓ）、腸チフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉ）、ネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ
ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）、サルモネラ  コレレシウス（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｃｈｏｌｅｒａｅｓｉｕｓ）、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）、赤痢菌属（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）、コレラ菌（Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ）、ジフテリア菌（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、ヒト結核菌（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、トリ結核菌群（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ａｖｉｕｍ−Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅ  ｃｏｍｐｌｅｘ）、プロテウス  ミラビリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｍｉｒａｂｉｌｉｓ）、プロテウス  ブルガリス（Ｐｒｏｔｅｕｓ  ｖｕｌｇａｒｉｓ）、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、表皮ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ
ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ）、破傷風菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ）、レプトスピラ  インテロガンス（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ  ｉｎｔｅｒｒｏｇａｎｓ）、ボレリア  ブルグドルフェリ（Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ）、パスツレラ  ヘモリチカ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃａ）、パスツレラ  マルトシダ（Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ  ｍｕｌｔｏｃｉｄａ）、アクチノバチラス  プルロニューモニエ（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｌｅｕｒｏｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）およびマイコプラスマ  ガリセプチクム（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｇａｌｌｉｓｅｐｔｉｃｕｍ）により引き起こされる疾患の予防および／もしくは治療に向けられるものを包含する。
【００７２】
本発明のアジュバントの組合せを含有する真菌病原体に対する望ましい免疫原組成物は、限定されるものでないが、アスペルギルス属（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｉｓ）、ブラストミセス属（Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ）、カンジダ属（Ｃａｎｄｉｄａ）、コクシジオデス属（Ｃｏｃｃｉｄｉｏｄｅｓ）、クリプトコックス属（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）およびヒストプラスマ属（Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ）により引き起こされる疾患の予防および／もしくは治療に向けられるものを包含する。
【００７３】
本発明のアジュバントの組合せ物を含有する寄生虫に対する望ましい免疫原組成物は、限定されるものでないが、森林型熱帯リーシュマニア（Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ  ｍａｊｏｒ）、回虫属（Ａｓｃａｒｉｓ）、鞭虫属（Ｔｒｉｃｈｕｒｉｓ）、ジアルジア属（Ｇｉａｒｄｉａ）、住吸血虫属（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ）、クリプトスポリジウム属（Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ）、トリコモナス属（Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ）、トキソプラスマ（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎｄｉｉ）およびニューモシスティス  カリニ（Ｐｎｅｕｍｏｃｙｓｔｉｓ  ｃａｒｉｎｉｉ）により引き起こされる疾患の予防および／もしくは治療に向けられるものを包含する。
【００７４】
本発明のアジュバントの組合せを含有する、脊椎動物宿主中で治療的もしくは予防的抗癌効果を導き出すための望ましい免疫原組成物は、限定されるものでないが、前立腺特異的抗原、癌胎児性抗原、ＭＵＣ−１、Ｈｅｒ２、ＣＡ−１２５およびＭＡＧＥ−３を包含する癌抗原もしくは腫瘍関連抗原を利用するものを包含する。
【００７５】
本発明のアジュバントの組合せを含有する、脊椎動物宿主中でのアレルゲンに対する応答を和らげるための望ましい免疫原組成物は、アレルゲンもしくはそのフラグメントを含有するものを包含する。こうしたアレルゲンの例は、米国特許第５，８３０，８７７号明細書（５１）および国際特許出願公開第ＷＯ  ９９／５１２５９号明細書（５２）（これにより引用することにより組み込まれる）に記述され、また、花粉、昆虫毒、動物の鱗屑、真菌の胞子および薬物（ペニシリンのような）を包含する。該免疫原組成物はＩｇＥ抗
体（アレルギー反応の既知の一原因）の産生を妨害する。
【００７６】
本発明のアジュバントの組合せ物を含有する、脊椎動物宿主中での自己分子に対する応答を和らげるための望ましい免疫原組成物は、自己分子もしくはそのフラグメントを含有するものを包含する。こうした自己分子の例は、上述されたＡβ１−４２ペプチドに加えて、糖尿病に関与するβ鎖インスリン、胃食道逆流疾患に関与するＧ１７分子、ならびに多発性硬化症、狼瘡および慢性関節リウマチのような疾患において自己免疫応答をダウンレギュレートする抗原を包含する。
【００７７】
ＨＩＶおよびＳＩＶの場合、抗原組成物は、最低１種のタンパク質、前記タンパク質由来のポリペプチド、ペプチドもしくはフラグメントを含んで成る。いくつかの場合には、複数のＨＩＶもしくはＳＩＶタンパク質、ポリペプチド、ペプチドおよび／もしくはフラグメントが抗原組成物に包含される。
【００７８】
本発明のアジュバントの組合せ製剤は、ポリヌクレオチド免疫原組成物（ＤＮＡ免疫原組成物としてもまた知られる）中のアジュバントとしての包含にもまた適する。こうした免疫原組成物は、ブピバカインのような促進剤をさらに包含してよい（米国特許第５，５９３，９７２号明細書（５３）（これにより引用することにより組み込まれる）を参照されたい）。
【００７９】
本発明をより良好に理解することができるために、以下の実施例を示す。該実施例は具体的説明の目的上のみであり、そして本発明の範囲を制限するものとして解釈されるべきでない。
【実施例】
【００８０】
実施例１
材料および方法
以下の材料および方法を、下の実施例２〜７に報告される実験で利用した。
【００８１】
動物
雌性Ｂａｌｂ／ｃマウス（７〜９週齢）はタコニック  ファームズ  インク（Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｆａｒｍｓ，Ｉｎｃ．）（ニューヨーク州ジャーマンタウン）から購入した。雌性スイス−ウェブスター（Ｓｗｉｓｓ−Ｗｅｂｓｔｅｒ）マウス（７〜９週齢）もまたタコニック  ファームズ  インク（Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｆａｒｍｓ，Ｉｎｃ．）から購入した。全部のマウスは、アメリカ実験動物認定基準（ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ａｃｃｒｅｄｉｔａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ）により承認された施設に収容した。マウスは、試験の開始前１週間、収容施設に順応させた。
【００８２】
抗原
下の実施例２〜３のＨＩＶ実験においては、２種の異なる合成ペプチドを使用した。多エピトープＨＩＶ−１−MNペプチドＴ１ＳＰ１０ＭＮ（Ａ）（−Ｃｙｓ）（本明細書でＭＮ−１０ともまた称される）の配列は以下のとおりである：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｈｉｓ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ（配列番号２）。このペプチドは以前に記述され（３３，３４）、そして、主たる中和決定基すなわちマウスおよびヒト双方でＣＤ４+  Ｔｈ細胞応答を惹起するＨＩＶ−１  ｇｐ１２０MNからの配列、ならびにＢａｌｂ／ｃマウスでＣＤ８+  ＣＴＬにより認識される部位を含
有する。該ペプチドはＲ．Ｓｃｅａｒｃｅ博士（デューク大学、ノースカロライナ州ダラム）により提供された。ＣＴＬ分析のために、ＩＩＩＢと呼称される無関係のペプチドを比較の目的上使用した。このペプチドはＨＩＶ−１−IIIBのＶ３ループ内のＣＴＬエピトープに対応し（Ａｒｇ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｖａｌ  Ｔｈｒ  Ｉｌｅ（配列番号８））、そしてジェノシス  バイオテクノロジーズ  インク（Ｇｅｎｏｓｙｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｉｎｃ．）（テキサス州ウッドランズ）から購入した。ペプチドを滅菌水に可溶化し、そして使用前に適切な緩衝液もしくは細胞培地で希釈した。
【００８３】
下の実施例４−６および８のアミロイド実験においては、Ａβ１−４２と呼称されるペプチドを使用した。Ａβ１−４２の配列は以下のとおりである：
Ａｓｐ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｐｈｅ  Ａｒｇ  Ｈｉｓ  Ａｓｐ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｔｙｒ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｈｉｓ  Ｈｉｓ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ａｓｐ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｖａｌ  Ｖａｌ  Ｉｌｅ  Ａｌａ（配列番号６）。
【００８４】
このペプチドは以前に記述され（４７）、そしてアミロイド前駆体タンパク質の内的な４２アミノ酸のフラグメントに対応する。Ａβ１−４２はエラン  ファーマシューティカルズ（Ｅｌａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）（カリフォルニア州サウスサンフランシスコ）により提供された。該ペプチドを滅菌水に可溶化し、そして使用前に適切な緩衝液もしくは細胞培地で希釈した。
【００８５】
アジュバント
全部の５２９含有アジュバント製剤はコリキサ（Ｃｏｒｉｘａ）（モンタナ州ハミルトン）から得た。５２９  ＳＥは、（０〜５０μｇ／ｍｌ）からの範囲にわたる５２９濃度を有する、予め処方されたスクアレンに基づく水中油型（０．８〜２．５％油）エマルションとして製造した。リン酸アルミニウムは自家製造した。フロイントの完全アジュバント（ＣＦＡ）および不完全アジュバント（ＩＦＡ）は、ディフコ  ラボラトリーズ（Ｄｉｆｃｏ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）、ミシガン州デトロイトから購入した。Ｔ１ＳＰ１０ＭＮ（Ａ）ペプチドおよびフロイントのアジュバントを、２個の連結されたシリンジを使用して１：１の比で乳化した。組換え的に発現されたマウスＩＬ−１２はジェネティックス  インスティテュート（Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ）（マサチューセッツ州ケンブリッジ）により提供された。組換えマウスＧＭ−ＣＳＦは、バイオソース  インターナショナル（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ）（カリフォルニア州カマリロ）から担体を含まない凍結乾燥粉末として購入した。スティミュロン［Ｓｔｉｍｕｌｏｎ］（商標）ＱＳ−２１はアンチジェニックス  インク（Ａｎｔｉｇｅｎｉｃｓ  Ｉｎｃ．）（マサチューセッツ州フラミンガム）から購入した。
【００８６】
免疫感作
マウスは、臀部の各側で等しく分割された０．２ｍｌの総容量で臀部に皮下で免疫化した。免疫感作は下に示されるとおり変動する時間間隔で投与した。抗原およびサイトカインは、リン酸緩衝生理的食塩水で適切な濃度に希釈し、そして滅菌条件下で免疫感作前１６時間未満にアジュバントとともに処方した。免疫原組成物を穏やかな攪拌により混合し、そして４℃で保存した。製剤は免疫感作直前にボルテックスにより混合した。
【００８７】
酵素免疫測定法を使用する血清の分析
動物を初期免疫感作前および示された時間点で採血した。血清の分析は個々の力価の幾何平均としてであった。ＨＩＶペプチド特異的抗体およびサブクラス分布の分析のために、ペプチドを炭酸緩衝液（１５ｍＭ  Ｎａ2ＣＯ3、３５ｍＭ  ＮａＨＣＯ3、ｐＨ９．６
）もしくはＰＢＳのいずれかに１μｇ／ｍｌの濃度で懸濁し、そして１００：１の容量で９６穴マイクロタイタープレート（ヌンク（Ｎｕｎｃ））にプレート培養した。３７℃での一夜インキュベーション後にプレートを洗浄し、そして室温で２〜４時間ブロッキング（０．１％ゼラチン／ＰＢＳ）した。ＥＬＩＳＡプレートは、順次希釈された血清（ＰＢＳ、０．１％ゼラチン、０．０５％トゥイーン［Ｔｗｅｅｎ］（商標）２０、０．０２％アジ化ナトリウム）の添加前に、洗浄緩衝液（ＰＢＳ、０．１％トゥイーン［Ｔｗｅｅｎ］（商標）２０）で洗浄した。４時間のインキュベーション後にウェルを洗浄し、そしてビオチニル化抗アイソタイプ／サブクラス抗体の適切な希釈物を、４℃で一夜インキュベーションのため添加した。ウェルを洗浄しかつストレプトアビジン結合ワサビペルオキシダーゼとともにインキュベートした。インキュベーション後にウェルを洗浄し、そしてＡＢＴＳで発色させた。ウェルを４０５ｎｍで読み取った。対照血清を使用して力価を標準化した。
【００８８】
Ａβ１−４２ペプチド特異的抗体およびサブクラス分布の分析について、マイクロタイタープレートあたり０．３μｇ／ｍｌの濃度を使用したことを除いて同一のプロトコルに従った。
【００８９】
細胞調製物
増殖アッセイおよびインビトロサイトカイン分析のために、脾細胞をマウスから示された時点で得た。単一細胞懸濁物を３〜５匹のマウスのプールから調製した。増殖およびサイトカイン分析のため、細胞を、ＨＩＶペプチド抗原、対照タンパク質もしくはＲＰＭＩ−１０のみで一夜前被覆された丸底９６穴培養プレート中で懸濁した。脾細胞は、２×補充物（ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）を有する培地を使用して細胞５×１０5個／ウェルで添加した。細胞培養上清を、培養開始後３もしくは６日にサイトカイン分析のため三重のウェルから収穫した。上清収穫直後に、培養物に3Ｈ−チミジンを１８〜２４時間適用し、そして細胞増殖を定量するために収穫した。
【００９０】
実施例２
逆数の（ｒｅｃｉｐｒｏｃａｌ）抗Ｔ１ＳＰ１０ＭＮ（Ａ）（−Ｃｙｓ）ＩｇＧの終点の総およびサブクラス力価
逆数の終点ＩｇＧサブクラス力価を、初期免疫感作後５週間、二次免疫感作後２週間に、合わせられた血清（ｎ＝５のＢａｌｂ／ｃ）から測定した。マウスは、第０週および第３週に、各側の２個の０．１ｍｌ注入に等しく分割された合計０．２ｍｌを用いて、２５μｇのＴ１ＳＰ１０ＭＮ（Ａ）（−Ｃｙｓ）で臀部に皮下で免疫化した。５２９  ＳＥを希釈して、用量あたり１．２５％スクアレン油および２５μｇの５２９を含有するエマルションを創製した。ＳＥは、スクアレン、グリセロールおよび乳化剤よりなる水中油型エマルションベヒクルである。組換えマウスＩＬ−１２はマウスあたり４０ｎｇで送達した。組換えマウスＧＭ−ＣＳＦはマウスあたり２５μｇで送達した。結果は、各群の力価の幾何平均および標準誤差とともに表１に示す。
【００９１】
【表１】
2010001304.tif 000003
【００９２】
実施例３
Ｂａｌｂ／ｃマウスでのＣＴＬ分析
実施例２のプロトコルに、マウスの免疫感作に関して従った。二次免疫感作後１４日のマウスから単離された脾細胞のＣＴＬ活性を評価した。５２９  ＳＥは、１０μｇのＧＭ−ＣＳＦもしくは４０ｎｇのＩＬ−１２を含みもしくは含まない１．２５％油、および２５μｇのＴ１ＳＰ１０ＭＮ（Ａ）（−Ｃｙｓ）を含有する２５μｇの５２９  ＳＥで処方した。
【００９３】
ＣＴＬ分析のため、脾細胞を二次免疫感作後１４日の免疫化されたマウスから取り出した。以前に記述されたプロトコル（３９）に本質的に従った。簡潔には、群あたり３匹のマウスからの赤血球枯渇脾細胞を合わせた。脾エフェクター細胞（４×１０6個／ｍｌ）を、１μｇ／ｍｌの「ＭＮ−１０」ペプチド、「ＩＩＩＢ」１０ｍｅｒ  ＣＴＬエピトープペプチド、もしくはＨＩＶペプチドなしのいずれかとともに、１．５〜２ｍｌの容量中、２４穴培養プレート中で７日間再刺激した。双方のＣＴＬエピトープはＨ−２Ｄdに制限した。培養物は、培養の最後の５日間、１０Ｕ／ｍｌの組換えマウスＩＬ−２（バイオソース（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ））で補充した。細胞傷害活性の分析のために、Ｐ８１５細胞をＣｒ51で標識しかつ５μｇ／ｍｌのペプチド（ＩＩＩＢもしくはＭＮ−１０）を４時間適用し、そして培養された脾エフェクター細胞に添加した。ＨＩＶペプチドを使用しなかった場合は、その組の標的細胞は適用しなかった。３倍希釈のエフェクター細胞対標的細胞比（「Ｅ：Ｔ」）を、３０：１から１．１：１まで使用した。ＣＴＬ活性のパーセントを、（（特異的クロム放出−自発的クロム放出）／（最大クロム放出−自発的クロム放出））×１００を使用して、クロム放出のパーセンテージとして計算した。クロム放出は６時間のインキュベーション期間後に評価した。クロムの自発的放出の平均は、常に、最大放出の１５％未満であった。第２８日からのデータの結果を表２に示す。
【００９４】
【表２】
2010001304.tif 000004
【００９５】
実施例４
逆数の抗Ａβ１−４２ＩｇＧの終点の総およびサブクラス力価
異系交配スイス−ウェブスター（Ｓｗｉｓｓ−Ｗｅｂｓｔｅｒ）マウスをそれぞれ１０匹のマウスの群に分割した。各群は３０μｇのＡβ１−４２ペプチド（ＡＰＰの内的な４２アミノ酸長の領域に対応する）を受領した。第一の群はアジュバントを受領せず；第二の群は２．５％油を含有する５０μｇの５２９  ＳＥを受領し；第三の群は２．５％油および１０μｇのＧＭ−ＣＳＦを含有する５０μｇの５２９  ＳＥを受領し；第四の群は１０μｇのＧＭ−ＣＳＦを受領し；第五の群は１．２５％油を含有するＳＥを受領し；第六の群は１．２５％油および１０μｇのＧＭ−ＣＳＦを含有するＳＥを受領し；第七の群は５０μｇのＱＳ−２１を受領した。マウスに、尾／臀部の基部の２部位のそれぞれに等しく分割された総容量０．２ｍｌを用いて臀部で皮下で免疫化した。免疫感作は第０週および第３週に投与した。
【００９６】
マウスを第０、２０、３５および７０日に採血した。個々のマウスからの血清を分析した。逆数の終点の抗Ａβ１−４２ペプチドＩｇＧ終点のクラス全体およびサブクラスの力価を、第５週および第１０週に個々の血清（ｎ＝１０のスイス−ウェブスター（Ｓｗｉｓｓ−Ｗｅｂｓｔｅｒ））から測定した。ＩｇＧの終点の結果を表３（第５週）および４（第１０週）に示す。ＩｇＧ１サブクラスの結果は表５（第５週；アジュバントもしくはＱＳ−２１を受領しない群は測定しなかった）および６（第１０週）に示す。ＩｇＧ２ａサブクラスの結果は表７（第５週；アジュバントもしくはＱＳ−２１を受領しない群は測定しなかった）および８（第１０週）に示す。
【００９７】
【表３】
2010001304.tif 000005
【００９８】
【表４】
2010001304.tif 000006
【００９９】
【表５】
2010001304.tif 000007
【０１００】
【表６】
2010001304.tif 000008
【０１０１】
【表７】
2010001304.tif 000009
【０１０２】
【表８】
2010001304.tif 000010
【０１０３】
実施例５
変動する量のＧＭ−ＣＳＦを伴う、逆数の抗Ａβ１−４２の終点の総およびサブクラス力価
異系交配スイス−ウェブスター（Ｓｗｉｓｓ−Ｗｅｂｓｔｅｒ）マウスをそれぞれ１０匹のマウスの群に分割した。各群は、第０週および第３週に３０μｇのＡβ１−４２ペプチドの２回の免疫感作を受領した。第一の群は２５μｇの５２９  ＳＥおよび１０μｇのＧＭ−ＣＳＦを受領し；第二の群は２５μｇの５２９  ＳＥおよび１μｇのＧＭ−ＣＳＦを受領し；第三の群は２５μｇの５２９  ＳＥおよび０．１μｇのＧＭ−ＣＳＦを受領し；第四の群はプライミング用量で２５μｇの５２９  ＳＥおよび１０μｇのＧＭ−ＣＳＦ、次いで第二の用量で２５μｇの５２９  ＳＥのみを受領し；第五の群は２５μｇのＱＳ−２１を受領し；第六の群は２５μｇのＱＳ−２１および１０μｇのＧＭ−ＣＳＦを受領した。マウスは、尾／臀部の基部の２部位のそれぞれに等しく分割された総容量０．２ｍｌで臀部で皮下に免疫化した。
【０１０４】
マウスを第０、２１および４２日に採血した。逆数の終点抗Ａβ１−４２ペプチドＩｇＧのクラスおよびサブクラス力価を、第６週に個々の血清（ｎ＝１０）から測定した。ＩｇＧ終点の結果を表９に示す。ＩｇＧ１サブクラスの結果を表１０に示す。ＩｇＧ２ａサブクラスの結果を表１１に示す。
【０１０５】
【表９】
2010001304.tif 000011
【０１０６】
【表１０】
2010001304.tif 000012
【０１０７】
【表１１】
2010001304.tif 000013
【０１０８】
実施例６
変動する量のＧＭ−ＣＳＦを伴う、逆数の抗Ａβ１−４２終点の総およびサブクラス力価
異系交配スイス−ウェブスター（Ｓｗｉｓｓ−Ｗｅｂｓｔｅｒ）マウスをそれぞれ１０匹のマウスの群に分割した。各群は、第０週および第３週に各時３０μｇのＡβ１−４２ペプチドでの免疫感作を受領した。第０週の免疫感作において、第一の群は５０μｇの５２９  ＳＥを受領し；第二の群は５０μｇの５２９  ＳＥおよび１０μｇのＧＭ−ＣＳＦを受領し；第三の群は５０μｇの５２９  ＳＥおよび５μｇのＧＭ−ＣＳＦを受領し；第四の群は５０μｇの５２９  ＳＥおよび２μｇのＧＭ−ＣＳＦを受領し；第五の群は５０μｇの５２９  ＳＥおよび０．５μｇのＧＭ−ＣＳＦを受領し；第六の群は１％ＳＥを受領した。第３週の免疫感作において、第一から第五の群は、５２９  ＳＥが５０から２５μｇに減少されたことを除き第０週の免疫感作と同一用量を受領した。第六の群により受領されたＳＥの量は、第０週の免疫感作での１％から第３週の免疫感作で１．２％に増大された。マウスは、尾／臀部の基部で２部位のそれぞれに等しく分割された総容量０．２ｍｌで、臀部に皮下で免疫化した。
【０１０９】
マウスを第２、２０および３５日に採血した。逆数の終点抗Ａβ１−４２ペプチドＩｇＧクラスおよびサブクラスの力価を、第５週の個々の血清（ｎ＝１０）から測定した。ＩｇＧの終点の結果を表１２に示す。ＩｇＧ１サブクラスの結果を表１３に示す。ＩｇＧ２ａサブクラスの結果を表１４に示す。
【０１１０】
【表１２】
2010001304.tif 000014
【０１１１】
【表１３】
2010001304.tif 000015
【０１１２】
【表１４】
2010001304.tif 000016
【０１１３】
実施例７
アカゲザルのＴｈ−ＣＴＬおよびＣ４−Ｖ３ペプチド免疫感作
以下の実験は、ヒト臨床試験に進むための潜在的なペプチド／アジュバントの組合せを同定するために、霊長類種（アカゲザル）で多数のペプチドおよびアジュバントの組合せ製剤を直接比較するように設計した。とりわけ、ヒトＧＭ−ＣＳＦを含むアジュバント製剤５２９  ＳＥを、（１）以下の配列：
Ａｒｇ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ｔｒｐ  Ｈｉｓ  Ｌｙｓ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｓｎ  Ｖａｌ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｇｌｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｐｒｏ  Ｔｙｒ  Ａｓｐ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ  Ｍｅｔ  Ｌｅｕ（配列番号３）
を有するＳＩＶ  ｅｎｖ由来Ｔヘルパー／ＳＩＶ  ｇａｇ  ＣＴＬペプチド複合物（ＳＴ１−ｐ１１Ｃ）；
もしくは、（２）以下の配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号４）
を有するＨＩＶ−１由来Ｃ４−Ｖ３ペプチド複合物（Ｃ４−Ｖ３89.6P）と組合せのフロイントの不完全アジュバント（ＩＦＡ）との比較で評価した。
【０１１４】
試験の設計：合計で８匹の動物（表１５に記述されるとおり４匹のＭａｍｕ−Ａ*０１＋および４匹のＭａｍｕ−Ａ*０１−）を試験に使用した。
【０１１５】
【表１５】
2010001304.tif 000017
【０１１６】
群１の動物は、１．０ｍｌの総容量中に０．５ｍｌのＩＦＡを含む油中水型エマルション中のＴｈ−ＣＴＬペプチドＳＴ１−ｐ１１Ｃ（１．０ｍｇ／ｍｌ）０．５ｍｌを受領した。群２の動物は、１．０ｍｌの総容量中に、２５０μｇのヒトＧＭ−ＣＳＦ、１％の最終油濃度を伴う５０μｇの５２９  ＳＥと組合せられたＳＴ１−ｐ１１Ｃ（１．０ｍｇ／ｍｌ）０．５ｍｌを受領した。群３の動物は、０．５ｍｌのＩＦＡを含む油中水型エマルション中のＣ４−Ｖ３89.6Pペプチド（２．０ｍｇ／ｍｌ）０．５ｍｌを受領した（１．０ｍｌの最終容量）。最後に、群４の動物は、１．０ｍｌの総容量中に、２５０μｇのヒトＧＭ−ＣＳＦ、１％の最終油濃度を伴う５０μｇの５２９  ＳＥと組合せられたＣ４−Ｖ３89.6Pペプチド（２．０ｍｇ／ｍｌ）０．５ｍｌを受領した。
【０１１７】
全部の動物は、０、４および８週間の予定で筋肉内注入により免疫化した。末梢血サンプルを、各免疫感作の直前および１もしくは２週間後に採取して、四量体染色によるＣＴＬ誘導、ｐ１１Ｃ（Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｐｒｏ  Ｔｙｒ  Ａｓｐ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ
Ｍｅｔ；配列番号３、アミノ酸１９−２７）特異的ＥＬＩＳＰＯＴ応答ならびに大量培養物のＣＴＬ応答（群１および２）、ならびにペプチド特異的抗体応答（群１〜４）についてモニターした。
【０１１８】
安全性および寛容性
ＳＴ１−ｐ１１Ｃ＋ＩＦＡ：群１の動物に単一部位で３回の筋肉内注入により投与したＳＴ１−ｐ１１Ｃ＋ＩＦＡ製剤は、有意の注入部位の反応性を伴った。一方の動物（９３ｘ０２１）は、第二の免疫感作の２週間後に、注入部位に１．５ｃｍの大きさの膿瘍を発生した。他方の動物（９５ｘ００９）もまた、第三の免疫感作の２週間後に注入部位に２．０ｃｍの大きさの膿瘍を発生し、これは皮膚を破り、そして包帯を必要とした。
【０１１９】
ＳＴ１−ｐ１１Ｃ＋５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦ：群２の動物に単一部位で３回の筋肉内注入により投与したＳＴ１−ｐ１１Ｃ＋５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦ製剤は、小さな副作用を伴った。群２の動物の双方は、第８週に第三の免疫感作を受領した直後に嘔吐した。他の副作用は示されなかった。
【０１２０】
Ｃ４−Ｖ３89.6P＋ＩＦＡ：群３の動物に単一部位で３回の筋肉内注入により投与したＣ４−Ｖ３89.6P＋ＩＦＡ製剤は、有意の注入部位の反応性を伴った。一方の動物（９８ｎ０１３）は、第二の免疫感作の１週間後に注入部位に１．０ｃｍの大きさの膿瘍を発生した。他方の動物（９８ｎ００７）もまた、第二の免疫感作の１週間後に注入部位に１．
５ｃｍの大きさの膿瘍を発生した。この動物の膿瘍は４週間後に排膿および包帯を必要とした。
【０１２１】
Ｃ４−Ｖ３89.6P＋５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦ：群４の動物に単一部位で３回の筋肉内注入により投与したＣ４−Ｖ３89.6P＋５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦ製剤は、１件の小さな副作用を伴った。群４の動物の一方（９５ｘ０１１）は第８週の第三の免疫感作を受領した直後に嘔吐した。他の副作用は示されなかった。
【０１２２】
動物がアジュバントとしてＩＦＡを受領した群１および群３の動物の全部において、有意の注入部位の反応性がみられた。これらの結果は、０．５ｍｌのＩＦＡは、単一注入部位での筋肉内注入により投与される場合に乏しく寛容されることを示す。第８週にアジュバントとして５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦを受領した４匹の動物のうち３匹が免疫化された直後に嘔吐したこともまた注目するに値する。使用された麻酔薬（ケタミン）は嘔吐を伴うことが既知である一方、他の場合の動物の嘔吐は試験の経過にわたって報告されなかった。この時点で、動物の嘔吐を５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦに関連するいずれかの副作用に帰するための不十分な証拠が存在する。
【０１２３】
結果：細胞性免疫応答の誘導（群１および２）
新鮮血のｐ１１Ｃ四量体染色：免疫感作前、ならびに免疫感作１および２週間後に、全部のＭａｍｕ−Ａ*０１陽性動物（群１および２）からの新たに単離された末梢血を、可溶性ＭＨＣクラスＩ四量体染色によりｐ１１Ｃ特異的ＣＤ３+ＣＤ８+  Ｔリンパ球の存在についてスクリーニングした。表１６に示されるとおり、ＩＦＡと組合せでＳＴ１−ｐ１１Ｃペプチドを受領した１匹の動物（９３ｘ０２１）のみが、刺激されない末梢血中での免疫感作に誘導される細胞性免疫応答の証拠を示した。
【０１２４】
【表１６】
2010001304.tif 000018
【０１２５】
ｐ１１Ｃ特異的ＥＬＩＳＰＯＴ応答：群１および２の動物における細胞性免疫応答の誘導をさらに評価するために、新たに単離された末梢血リンパ球を、ＥＬＩＳＰＯＴ分析によりｐ１１Ｃ特異的ＣＤ３+ＣＤ８+  Ｔリンパ球の存在についてスクリーニングした。表１６に示されるとおり、新鮮血四量体分析により検出可能なレベルのｐ１１Ｃ特異的ＣＤ８+  リンパ球を立証した動物９３ｘ０２１のみが、ＥＬＩＳＰＯＴ分析により、検出可能なｐ１１Ｃ特異的ＣＤ８+  Ｔリンパ球を有した。すべての場合で、ｐ１１Ｃ四量体分析による陽性の応答が、陽性のｐ１１Ｃ特異的ＥＬＩＳＰＯＴ応答により確証された。
【０１２６】
インビトロのペプチドｐ１１Ｃ刺激後のｐ１１Ｃ特異的細胞性免疫応答：ｐ１１Ｃ特異的細胞の数を分析前に増大させる試みにおいて、新たに単離された末梢血リンパ球を、ペプチドｐ１１ＣおよびｒｈＩＬ−２でインビトロで刺激した。１４日後、生じるエフェクター細胞を、標準的クロム放出ＣＴＬアッセイにて、ｐ１１Ｃ四量体結合ならびに機能的ｐ１１Ｃ特異的溶解活性についてスクリーニングした。ｐ１１Ｃ四量体分析および機能的ＣＴＬアッセイの結果を表１７に示す。新たに単離されたリンパ球中でｐ１１Ｃ特異的免疫応答を一貫して示した動物９３ｘ０２１は、第二の免疫感作１週間後に、非常に高レベルの四量体結合および機能的ＣＴＬ活性を立証した。これは、非常に強力なｐ１１Ｃ特異
的細胞性免疫応答の誘導を示す。新たに単離されたリンパ球でみられた結果と対照的に、群２からの１匹の動物（９８ｎ００８、ＳＴ１−ｐ１１Ｃ＋５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦ）は、第二の免疫感作２週間後に、ｐ１１Ｃ特異的細胞性免疫応答の証拠を示し始めた。しかしながら、該群２の動物でみられたｐ１１Ｃ特異的免疫応答は、群１からの応答する動物で見られたものより有意により低い大きさのものであった。
【０１２７】
【表１７】
2010001304.tif 000019
【０１２８】
細胞内サイトカイン分析：免疫原に誘導されるペプチドｐ１１Ｃ特異的リンパ球の機能および表現型の特性をさらに特徴づけするため、Ｔｈ１型サイトカインＩＮＦ−γ、ＴＮＦα、ＩＬ−２およびＴｈ２型サイトカインＩＬ−４の細胞内発現をモニターした。細胞内サイトカイン発現は、１０μＭのペプチドｐ１１ＣおよびｒｈＩＬ−２の存在下での最初のインビトロ刺激後の末梢血リンパ球中でモニターした。その後、培養物を４０Ｕ／ｍｌのＩＬ−２とともに１４日間維持した。２週間後に、培養された細胞を培地単独、もしくは１０μＭのペプチドｐ１１Ｃ＋抗ヒトＣＤ２８および抗ヒトＣＤ４９ｄのいずれかで１時間刺激した。１時間後に細胞をブレフェルジンＡで追加の５時間処理して、小胞体中に細胞内サイトカインを濃縮させた。その後、細胞内サイトカイン発現をフローサイトメ
トリーにより定量した（表１８および１９）。
【０１２９】
表１８に示されるとおり、インビトロのペプチドｐ１１Ｃ刺激の２週間後に、群１の動物９３ｘ０２１（ＳＴ１−ｐ１１Ｃ＋ＩＦＡ）からのＣＤ３+  末梢血リンパ球は低レベルのＴｈ１型サイトカイン発現を立証し、全細胞の１．５％未満がＩＮＦ−γ、ＴＮＦαもしくはＩＬ−２を活発に分泌した。全ＣＤ３+  リンパ球のおよそ８％が、インビトロのペプチドｐ１１Ｃ刺激後にＴｈ２型サイトカインＩＬ−４を活発に分泌しており、そして、ＩＬ−４分泌細胞はＣＤ３+ＣＤ４+  リンパ球サブセットに制限されることが見出された。ペプチドｐ１１Ｃへの短い再曝露後に、ｐ１１Ｃ四量体+およびＣＤ３+ＣＤ８+  リンパ球サブセットは、Ｔｈ１型サイトカインＩＮＦ−γおよびＴＮＦαを活発に分泌していたが、しかし、有意に増大されたレベルのＩＬ−２を分泌するように誘導することができなかった。ペプチドｐ１１Ｃ再曝露後に、Ｔｈ２型サイトカインＩＬ−４の分泌は影響を及ぼされなかった。
【０１３０】
【表１８】
2010001304.tif 000020
【０１３１】
【表１９】
2010001304.tif 000021
【０１３２】
表１９に示されるとおり、インビトロのペプチドｐ１１Ｃ刺激の２週間後に、群２の動物９８ｎ００８（ＳＴ１−ｐ１１Ｃ＋５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦ）からのＣＤ３+  末梢血リンパ球は、低レベルのＴｈ１型サイトカインの発現を立証し、全細胞の１．０％未満がＩＮＦ−γ、ＴＮＦαもしくはＩＬ−２を活発に分泌した。興味深いことに、全ＣＤ３+  リンパ球のおよそ２０％が、Ｔｈ２型サイトカインＩＬ−４を活発に分泌した（群１の動物に比較してＩＬ−４産生細胞の数の２．５倍の増大）。群１の動物で真実であったとおり、ＩＬ−４分泌細胞はＣＤ３+ＣＤ４+  リンパ球サブセットに制限されることが見出された。ペプチドｐ１１Ｃへの短い再曝露後に、群２の動物からのｐ１１Ｃ四量体+かつＣＤ３+ＣＤ８+  リンパ球サブセットはＴＮＦαを分泌するよう刺激することができたが、しかしＩＮＦ−γはできなかった。群１の動物と対照的に、ペプチド再曝露後に、ＣＤ３+ＣＤ８+  細胞によるＩＬ−２発現の有意の増大を立証することができた。群１の動物で真実であったように、ペプチドｐ１１Ｃへの再曝露後に、Ｔｈ２型サイトカインＩＬ−４の分泌は変えられなかった。
【０１３３】
結果：免疫原に誘導される体液性免疫応答（群１および２）：
免疫原特異的体液性免疫応答の誘導を評価するため、抗ＳＴ１−ｐ１１Ｃ  ＥＬＩＳＡ抗体力価を、免疫感作直前、ならびに第二および第三の免疫感作１および２週間後に、群１および２の動物の血清中で測定した。結果を表２０に要約する。
【０１３４】
【表２０】
2010001304.tif 000022
【０１３５】
免疫原に誘導される体液性免疫応答（群３および４）：
免疫原特異的かつアジュバント特異的な体液性抗体応答の誘導を評価するために、抗Ｃ４−Ｖ３89.6Pおよび抗ＧＭ−ＣＳＦ  ＥＬＩＳＡ抗体力価を、免疫感作直前、ならびに第二および第三の免疫感作１および２週間後に、群３および４の動物の血漿中で測定した。結果を表２１に要約する。該結果は、ピーク血漿Ｃ４−Ｖ３89.6P抗体力価が、試験された全動物で第二の免疫感作後１週間で生成されたことを示す。群３の動物（Ｃ４−Ｖ３89.6P＋ＩＦＡ）中でのピーク血漿抗体力価は、群４（Ｃ４−Ｖ３89.6P＋５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦ）でみられるピーク血漿抗体力価より数桁より高かった。群４の動物は、低いがしかし検出可能なレベルの抗ＧＭ−ＣＳＦ抗体力価を立証し、これは第三の免疫感作１週間後に最高に達した。
【０１３６】
【表２１】
2010001304.tif 000023
【０１３７】
群３および４の動物での中和抗体の誘導もまたモニターし；結果を表２２に要約する。該結果は、双方の群３の動物および双方の群４の動物が、インビトロでＳＨＩＶ89.6ウイルスを中和することが可能であった中和抗体を発生していたことを示す。群３の動物でみられたＳＨＩＶ89.6中和抗体力価は、一般に、群４の動物でみられたものより高かった。加えて、最終免疫感作後に、群３の動物からの血清は、中和することが困難であった、ＳＨＩＶ89.6P株のウイルスに対する低レベルの中和活性を立証した。
【０１３８】
【表２２】
2010001304.tif 000024
【０１３９】
実施例８
Ａβ１−４２およびアジュバント（１種もしくは複数）で処理されたＰＤＡＰＰトランスジェニックマウスの治療的有効性試験
以下の実験は、ＰＤＡＰＰトランスジェニックマウスで多数のアジュバントの組合せ製剤を比較してＡβ１−４２ペプチドの治療的有効性を試験するように設計した。
【０１４０】
試験の設計：１０．５ないし１２．５月齢のＰＤＡＰＰトランスジェニックマウス（雄性および雌性）を、各群を齢、性別およびトランスジェニックの親について可能な限り緊密に相互に合致させたように分類された４０匹のマウスの４群に分割した。群は表２３に記述されるとおりであった：
【０１４１】
【表２３】
2010001304.tif 000025
【０１４２】
Ａβ１−４２ペプチドはエラン  ファーマシューティカルズ（Ｅｌａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）からであり、５２９  ＳＥおよびＭＰＬ（商標）ＳＥはコリキサ（Ｃｏｒｉｘａ）からであり、そしてマウスＧＭ−ＣＳＦはバイオソース（Ｂｉｏｓｏｕｒｃｅ）からであった。全マウスは第０、２、４、８、１２、１６、２０および２４週に注入を受領した。マウスは、第二の注入後に開始して注入後５〜７日に採血した。群１、２および３は２００μｌの容量で皮下に注入した一方、群４は２５０μｌの皮下投与を受領した。動物を試験の第２５週に殺した。力価は、最大の光学密度の示度の５０％の値を示す希釈を使用して得た。
【０１４３】
結果
免疫原性および抗体応答：全群が、第二（ＲＣ５２９＋ＧＭ−ＣＳＦ）もしくは第三（ＭＰＬ（商標）ＳＥ、ＭＰＬ（商標）ＳＥ＋ＧＭ−ＣＳＦ）いずれかの採血で、Ａβ１−４２ペプチドに対する抗体のそれらのピークの幾何平均力価（ＧＭＴ）に達した（図１を参照されたい）。ピークＧＭＴで、ＭＰＬ（商標）ＳＥ＋ＧＭ−ＣＳＦは１６，４００であった一方、５２９  ＳＥ＋ＧＭ−ＣＳＦは１３，４００、もしくは９，７００のＭＰＬ（商標）ＳＥ対照のおよそ１．５倍であった。しかしながら、２種のＧＭ−ＣＳＦ含有製剤（群２および３）での力価は、ＭＰＬ（商標）ＳＥ対照のおおよそのレベルに後退し、ＭＰＬ（商標）ＳＥの最終ＧＭＴ＝４，６００、ＭＰＬ（商標）ＳＥ＋ＧＭ−ＣＳＦ＝５３５０、５２９  ＳＥ＋ＧＭ−ＣＳＦ＝４６５０であった。
【０１４４】
２種のＧＭ−ＣＳＦ含有製剤の力価の結果として起こりうる減少が抗ＧＭ−ＣＳＦ抗体応答によったかどうかを決定するために、ＥＬＩＳＡを使用して、抗ＧＭ−ＣＳＦ抗体が免疫感作の経過にわたって形成されていたかどうかを決定した。ＧＭ−ＣＳＦを受領する全動物からの血清を、この実験を通じて使用されたマウスＧＭ−ＣＳＦに対して力価測定した。抗ＧＭ−ＣＳＦ抗体の証拠は、処理された動物のいずれでも見出されなかった（データは示されない）。
【０１４５】
脳Ａβ１−４２レベル：全３種の処理群は、ＰＤＡＰＰマウス脳の皮質領域で、全Ａβペプチド（図２−個々の結果；表２４−合わせられた結果）およびＡβ１−４２（図３−個々の結果；表２５−合わせられた結果）双方の蓄積を有意に低下した。ＡβのＥＬＩＳＡ（全体および１−４２の形態）を、グアニジン可溶化脳ホモジェネートを使用して、以前に記述された（５４）とおり実施した。統計学的比較はＭａｎｎ−Ｗｈｉｔｎｅｙの有意差検定を使用した。
【０１４６】
【表２４】
2010001304.tif 000026
【０１４７】
【表２５】
2010001304.tif 000027
【０１４８】
アミロイド負荷：アミロイドーシスの程度を、以前に記述されたところの（５５）免疫組織化学的方法を使用して前頭皮質で定量した。全３種の処理群は、アミロイド負荷の有意の減少を示した（図４−個々の結果；表２６−合わせられた結果）。
【０１４９】
【表２６】
2010001304.tif 000028
【０１５０】
神経炎性負荷：前頭皮質での神経炎性ジストロフィーの発生に対する処理の効果を、以前に記述された（５５）とおり免疫組織化学的に評価した。全３種の処理群は、ＰＢＳ対照に関して、神経炎性負荷の程度を有意に低下させた（図５−個々の結果；表２７−合わせられた結果）。
【０１５１】
【表２７】
2010001304.tif 000029
【０１５２】
星状細胞増加：後膨大部皮質中の星状細胞増加の程度を、以前に記述された（５５）とおり定量した。ＧＭ−ＣＳＦを含有する処理群は、有意に減少された星状細胞増加を示した（図６）。
【０１５３】
実施例９
マカク（Ｃｙｎｏｍｏｌｏｇｏｕｓ  Ｍａｃａｑｕｅ）のＣ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6Pペプチド免疫感作
本実験の目的は、別の霊長類種、マカク（Ｍａｃａｃａ  ｆａｓｃｉｃｕｌａｒｉｓ）で、本発明のアジュバントの組合せ製剤とともにもしくは伴わずに投与されたＨＩＶ−１
Ｅｎｖ由来ペプチド複合物Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6Pの免疫原性を評価することであった。実施例７に記述されるＣ４−Ｖ３89.6Pペプチドを、アミノ酸残基９のグルタミン酸をバリンに変えることにより改変した。Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6Pと呼称される、結果として生じるペプチド複合物を使用し、そして以下の配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｖａｌ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号５）
を有する。
該ペプチドのＣ４領域内のグルタミン酸からバリンへの置換（Ｅ９Ｖ）は、マウスモデルにおいて、該ペプチドの免疫原性を、改変されない配列のものより上に増大させる。
【０１５４】
本ＨＩＶ−１  Ｅｎｖ由来ペプチドは、マウスで体液性免疫応答を導き出すことが可能である。しかしながら、マウスの結果をヒトに外挿することの困難により、フェーズＩヒト臨床試験に進行する前に非ヒト霊長類で潜在的ＨＩＶ−１免疫原組成物を試験することが必要である。本実験において、筋肉内（ＩＭ）および鼻内（ＩＮ）双方の投与経路を評価した。動物は第０、４、８、１８および２３週に５回免疫化した。第２５週まで毎週、血液サンプル、ならびに膣頚管および粘膜洗浄液を収集し、そして該免疫原組成物に対する抗体の存在について分析した。
【０１５５】
実験の設計：合計８匹のマカク（１群あたり４匹の動物（表２８））を実験に使用した。群１はアジュバントを受領せず；群２はアジュバント製剤５２９  ＳＥおよびＧＭ−ＣＳＦを受領した。動物は、動物保護施設で収容かつ評価している。
【０１５６】
【表２８】
2010001304.tif 000030
【０１５７】
免疫感作：全部の鼻内免疫感作は、１００μｌの定量鼻噴霧装置を用いて送達した。全部の筋肉内注入は、針およびシリンジを用いて大腿四頭筋に投与した。全動物は、第０、４、８、１８および２３週の予定で免疫化した。
【０１５８】
製剤：
群１：滅菌の通常生理的食塩水中の１０００μｇのＣ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6Pペプチド、最終容量２００μｌ（各鼻孔１００μｌ）。
群２：１０００μｇのＣ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6Pペプチド、５０μｇの５２９  ＳＥ、および２５０μｇのヒトＧＭ−ＣＳＦ、最終油濃度１％、最終容量１．０ｍｌ（ＩＭ注入により各大腿四頭筋５００μｌ）。
【０１５９】
免疫原に誘導される免疫応答をモニターするためのアッセイ：
免疫感作の直前および直後に、全動物を、以下のアッセイ：
（１）ＥＬＩＳＡによる血清抗Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6PペプチドＩｇＧ血清抗体力価。
（２）ＥＬＩＳＡによる粘膜（膣頚管、鼻）抗Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6PペプチドＩｇＧ抗体力価。
により、免疫原に誘導される体液性免疫応答について緊密にモニターした。
【０１６０】
結果：
免疫原の安全性および寛容性：
Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6Pペプチドは、単独でもしくはアジュバント５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦと組合せで投与される場合に、極めて良好に寛容された。針およびシリンジを使用する筋肉内経路により免疫化された動物について、有害な注入部位の反応性は示されなかった。全動物を、免疫原の各投与直後２４時間の間、体温の変化について緊密にモニターした。試験の間のいずれの時点でも、動物のいずれも異常に上昇された体温示度を立証しなかった（データは示されない）。
【０１６１】
免疫原特異的血清抗体応答：
全動物からの血清サンプルを、各免疫感作（２５週まで）の直前ならびに１および２週間後に得た。最終免疫感作後２週間に、全血清サンプルを、抗Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３ペプチドＩｇＧ抗体の存在について分析した。鼻内で免疫化された群１の動物（Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6Pペプチド単独）は、免疫前レベルより高い血清抗Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6P  ＩｇＧ抗体力価を立証することに失敗した（図７）。対照的に、群２の動物（Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6P＋５２９  ＳＥ／ＧＭ−ＣＳＦのＩＭ投与）は、有意のレベルの血
清Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３特異的ＩｇＧ抗体を発生した（図７）。報告された幾何平均終点力価は、同一の希釈の合わせられた投与を受けたことのない血清についての示度を３倍上回る、各個々の動物からの最低の力価を使用して計算する。
【０１６２】
群１の動物（アジュバントを伴わない）は、第四の免疫感作後にのみ免疫前レベルより高かったがしかしその後減少した、膣頚管洗浄サンプル中の抗Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6P  ＩｇＧ抗体力価を有した（図８）。対照的に、群２の動物（アジュバントを伴う）は、第一の免疫感作後に免疫前レベルより高くかつ各その後の免疫感作後に増大した、膣頚管洗浄サンプル中の抗Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6P  ＩｇＧ抗体力価を有した（とは言え各場合で若干の後の下落が存在した）（図８）。
【０１６３】
群１の動物（アジュバントを伴わない）は、免疫前レベルより高かった鼻洗浄液中の抗Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6P  ＩｇＧ抗体力価を立証することに失敗した（図９）。対照的に、群２の動物（アジュバントを伴う）は、鼻洗浄液サンプル中の有意のレベルの抗Ｃ４（Ｅ９Ｖ）−Ｖ３89.6P  ＩｇＧ抗体力価を発生した（図９）。
【０１６４】
【表２９】
2010001304.tif 000031
【０１６５】
【表３０】
2010001304.tif 000032
【０１６６】
【表３１】
2010001304.tif 000033
【０１６７】
以下に本発明の主な特徴と態様を列挙する。
【０１６８】
１．病原性のウイルス、細菌、真菌もしくは寄生虫から、または癌細胞もしくは腫瘍細胞から、またはアレルゲンから、または自己分子から選択された抗原、ならびに、有効なアジュバント作用量の：（１）アミノアルキルグルコサミンリン酸化合物（ＡＧＰ）またはその誘導体もしくは類似物と、（２）サイトカインまたはリンホカイン、または前記サイトカインもしくはリンホカインに対するアゴニストの組合せ物（ここで、アジュバントの組合せ物が前記抗原に対する脊椎動物宿主における免疫応答を高めるものである。）を含んで成る抗原組成物。
【０１６９】
２．選択された抗原が、タンパク質由来のポリペプチド、ペプチドもしくはフラグメントである、１．記載の抗原組成物。
【０１７０】
３．ＡＧＰが安定な水中油型エマルションの形態で使用される、１．記載の抗原組成物。
【０１７１】
４．サイトカインもしくはリンホカインが、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子およびインターロイキン−１２よりなる群から選択される、１．記載の抗原組成物。
【０１７２】
５．サイトカインもしくはリンホカインが顆粒球マクロファージコロニー刺激因子である、４．記載の抗原組成物。
【０１７３】
６．ＡＧＰが安定な水中油型エマルションの形態で使用される、５．記載の抗原組成物。
【０１７４】
７．サイトカインもしくはリンホカインがインターロイキン−１２である、４．記載の抗原組成物。
【０１７５】
８．ＡＧＰが安定な水中油型エマルションの形態で使用される、７．記載の抗原組成物。
【０１７６】
９．希釈剤もしくは担体をさらに含んで成る、１．記載の抗原組成物。
【０１７７】
１０．ＡＧＰが安定な水中油型エマルションの形態で使用される、９．記載の抗原組成物。
【０１７８】
１１．ＡＧＰが：
２−［（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイルアミノ］エチル２−デオキシ−４−Ｏ−ホスホノ−３−Ｏ−［（Ｒ）−３−テトラデカノイオキシテトラデカノイル］−２−［（Ｒ）−３−テトラデカノイオキシテトラデカノイルアミノ］−β−Ｄ−グルコピラノシド（５２９）
である、１．記載の抗原組成物。
【０１７９】
１２．選択された抗原がヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）由来である、１．記載の抗原組成物。
【０１８０】
１３．選択されたＨＩＶ抗原が、ＨＩＶのタンパク質、前記タンパク質由来のポリペプチド、ペプチドもしくはフラグメントである、１２．記載の抗原組成物。
【０１８１】
１４．選択された抗原が、アミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｈｉｓ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ（配列番号１）；
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｈｉｓ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ（配列番号２）；
Ａｒｇ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ｔｒｐ  Ｈｉｓ  Ｌｙｓ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｓｎ  Ｖａｌ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｇｌｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｐｒｏ  Ｔｙｒ  Ａｓｐ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ  Ｍｅｔ  Ｌｅｕ（配列番号３）；
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号４）；および
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｖａｌ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号５）
を有するペプチドよりなる群から選択されるＨＩＶペプチドである、１３．記載の抗原組成物。
【０１８２】
１５．ＨＩＶペプチドが、アミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｈｉｓ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ（配列番号１）
を有するペプチドである、１４．記載の抗原組成物。
【０１８３】
１６．ＨＩＶペプチドが、アミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｈｉｓ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ（配列番号２）
を有するペプチドである、１４．記載の抗原組成物。
【０１８４】
１７．ＨＩＶペプチドが、アミノ酸配列：
Ａｒｇ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ｔｒｐ  Ｈｉｓ  Ｌｙｓ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｓｎ  Ｖａｌ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｇｌｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｐｒｏ  Ｔｙｒ  Ａｓｐ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ  Ｍｅｔ  Ｌｅｕ（配列番号３）
を有するペプチドである、１４．記載の抗原組成物。
【０１８５】
１８．ＨＩＶペプチドが、アミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号４）
を有するペプチドである、１４．記載の抗原組成物。
【０１８６】
１９．ＨＩＶペプチドが、アミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｖａｌ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号５）
を有するペプチドである、１４．記載の抗原組成物。
【０１８７】
２０．ＡＧＰが安定な水中油型エマルションの形態で使用される、１２．記載の抗原組成物。
【０１８８】
２１．サイトカインもしくはリンホカインが、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子およびインターロイキン−１２よりなる群から選択される、１２．記載の抗原組成物。
【０１８９】
２２．サイトカインもしくはリンホカインが顆粒球マクロファージコロニー刺激因子である、２１．記載の抗原組成物。
【０１９０】
２３．ＡＧＰが安定な水中油型エマルションの形態で使用される、２２．記載の抗原組成物。
【０１９１】
２４．サイトカインもしくはリンホカインがインターロイキン−１２である、２１．記載の抗原組成物。
【０１９２】
２５．ＡＧＰが安定な水中油型エマルションの形態で使用される、２４．記載の抗原組成物。
【０１９３】
２６．希釈剤もしくは担体をさらに含んで成る、１２．記載の抗原組成物。
【０１９４】
２７．ＡＧＰが安定な水中油型エマルションの形態で使用される、２６．記載の抗原組成物。
【０１９５】
２８．ＡＧＰが５２９である、１２．記載の抗原組成物。
【０１９６】
２９．１．記載の抗原組成物を脊椎動物宿主に投与することを含んで成る、病原性のウイルス、細菌、真菌もしくは寄生虫からの選択された抗原を含有する抗原組成物の、前記宿主の免疫応答を導き出す能力の増大方法。
【０１９７】
３０．９．記載の抗原組成物を脊椎動物宿主に投与することを含んで成る、病原性のウイルス、細菌、真菌もしくは寄生虫からの選択された抗原を含有する抗原組成物の、前記宿主の免疫応答を導き出す能力の増大方法。
【０１９８】
３１．１２．記載の抗原組成物を脊椎動物宿主に投与することを含んで成る、ＨＩＶ抗原を含有する抗原組成物の前記宿主の免疫応答を導き出す能力の増大方法。
【０１９９】
３２．２６．記載の抗原組成物を脊椎動物宿主に投与することを含んで成る、ＨＩＶ抗原を含有する抗原組成物の前記宿主の免疫応答を導き出す能力の増大方法。
【０２００】
３３．選択された抗原が、アミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｈｉｓ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ（配列番号１）；
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｈｉｓ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ（配列番号２）；
Ａｒｇ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ｔｒｐ  Ｈｉｓ  Ｌｙｓ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｓｎ  Ｖａｌ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｇｌｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｐｒｏ  Ｔｙｒ  Ａｓｐ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ  Ｍｅｔ  Ｌｅｕ（配列番号３）；
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号４）；および
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｖａｌ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号
５）
を有するペプチドよりなる群から選択されるＨＩＶペプチドである、３２．記載の方法。
【０２０１】
３４．ＨＩＶペプチドが、アミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｈｉｓ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ（配列番号１）
を有するペプチドである、３３．記載の方法。
【０２０２】
３５．ＨＩＶペプチドが、アミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｈｉｓ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ（配列番号２）
を有するペプチドである、３３．記載の方法。
【０２０３】
３６．ＨＩＶペプチドが、アミノ酸配列：
Ａｒｇ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ｔｒｐ  Ｈｉｓ  Ｌｙｓ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｓｎ  Ｖａｌ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｇｌｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｐｒｏ  Ｔｙｒ  Ａｓｐ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ  Ｍｅｔ  Ｌｅｕ（配列番号３）
を有するペプチドである、３３．記載の方法。
【０２０４】
３７．ＨＩＶペプチドが、アミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号４）
を有するペプチドである、３３．記載の方法。
【０２０５】
３８．ＨＩＶペプチドが、アミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｖａｌ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号５）
を有するペプチドである、３３．記載の方法。
【０２０６】
３９．１．記載の抗原組成物を脊椎動物宿主に投与することを含んで成る、病原性のウイルス、細菌、真菌もしくは寄生虫からの選択された抗原を含有する抗原組成物の、前記宿主中で細胞傷害性Ｔリンパ球を導き出す能力の増大方法。
【０２０７】
４０．９．記載の抗原組成物を脊椎動物宿主に投与することを含んで成る、病原性のウイルス、細菌、真菌もしくは寄生虫からの選択された抗原を含有する抗原組成物の、前記宿主中で細胞傷害性Ｔリンパ球を導き出す能力の増大方法。
【０２０８】
４１．１２．記載の抗原組成物を脊椎動物宿主に投与することを含んで成る、ＨＩＶ抗原
を含有する抗原組成物の前記宿主中で細胞傷害性Ｔリンパ球を導き出す能力の増大方法。
【０２０９】
４２．２６．記載の抗原組成物を脊椎動物宿主に投与することを含んで成る、ＨＩＶ抗原を含有する抗原組成物の前記宿主中で細胞傷害性Ｔリンパ球を導き出す能力の増大方法。
【０２１０】
４３．選択された抗原が、アミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｈｉｓ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ（配列番号１）；
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｈｉｓ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ（配列番号２）；
Ａｒｇ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ｔｒｐ  Ｈｉｓ  Ｌｙｓ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｓｎ  Ｖａｌ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｇｌｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｐｒｏ  Ｔｙｒ  Ａｓｐ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ  Ｍｅｔ  Ｌｅｕ（配列番号３）；
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号４）；および
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｖａｌ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号５）
を有するペプチドよりなる群から選択されるＨＩＶペプチドである、４２．記載の方法。
【０２１１】
４４．ＨＩＶペプチドが、アミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｈｉｓ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ（配列番号１）
を有するペプチドである、４３．記載の方法。
【０２１２】
４５．ＨＩＶペプチドが、アミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ａｓｎ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｌｙｓ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｈｉｓ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｌｙｓ（配列番号２）
を有するペプチドである、４３．記載の方法。
【０２１３】
４６．ＨＩＶペプチドが、アミノ酸配列：
Ａｒｇ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ｔｒｐ  Ｈｉｓ  Ｌｙｓ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｓｎ  Ｖａｌ  Ｔｙｒ  Ｌｅｕ  Ｇｌｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  
Ｐｒｏ  Ｔｙｒ  Ａｓｐ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ  Ｍｅｔ  Ｌｅｕ（配列番号３）
を有するペプチドである、４３．記載の方法。
【０２１４】
４７．ＨＩＶペプチドが、アミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号４）
を有するペプチドである、４３．記載の方法。
【０２１５】
４８．ＨＩＶペプチドが、アミノ酸配列：
Ｌｙｓ  Ｇｌｎ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ｔｒｐ  Ｇｌｎ  Ｖａｌ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｍｅｔ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ａｒｇ  Ｇｌｕ  Ａｒｇ  Ｌｅｕ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｒｇ（配列番号５）
を有するペプチドである、４３．記載の方法。
【０２１６】
４９．癌細胞もしくは腫瘍細胞からの選択された癌抗原もしくは腫瘍関連抗原、ならびに有効なアジュバント作用量の：（１）ＡＧＰ、またはその誘導体もしくは類似物、および（２）サイトカインもしくはリンホカイン、または前記サイトカインもしくはリンホカインに対するアゴニストの組合せ物、を含んで成る抗原組成物を脊椎動物宿主に投与することを含んで成る、癌細胞もしくは腫瘍細胞例からの前記選択された癌抗原もしくは腫瘍関連抗原を含有する抗原組成物の、前記宿主中で治療的もしくは予防的抗癌効果を導き出す能力の増大方法。
【０２１７】
５０．選択されたアレルゲン、ならびに有効なアジュバント作用量の：（１）ＡＧＰ、またはその誘導体もしくは類似物、および（２）サイトカインもしくはリンホカイン、または前記サイトカインもしくはリンホカインに対するアゴニストの組合せ、を含んで成る抗原組成物を脊椎動物宿主に投与することを含んで成る、前記アレルゲンを含有する抗原組成物の前記宿主でのアレルギー応答を和らげる能力の増大方法。
【０２１８】
５１．有効なアジュバント作用量の：（１）ＡＧＰ、またはその誘導体もしくは類似物、および（２）サイトカインもしくはリンホカイン、または前記サイトカインもしくはリンホカインに対するアゴニストの組合せ物、を包含することにより、こうした望ましくない影響を低下させるように、ある分子、または望ましくない様式、量もしくは位置で宿主により産生されるものを表すその部分からの選択された抗原を含有する抗原組成物。
【０２１９】
５２．選択された抗原が、アミロイド前駆体タンパク質由来のポリペプチド、ペプチドもしくはフラグメント、またはそれらに対する抗体である、５１．記載の抗原組成物。
【０２２０】
５３．選択された抗原が、アミロイド前駆体タンパク質の内的な３９−４３アミノ酸のフラグメントであるＡβペプチド、もしくはＡβペプチドのフラグメントである、５２．記載の抗原組成物。
【０２２１】
５４．選択された抗原が、アミノ酸配列：
Ａｓｐ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｐｈｅ  Ａｒｇ  Ｈｉｓ  Ａｓｐ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  
Ｔｙｒ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｈｉｓ  Ｈｉｓ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  
Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ａｓｐ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  
Ｌｙｓ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ  Ｖａｌ  
Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｖａｌ  Ｖａｌ  Ｉｌｅ  Ａｌａ（配列番号６）
を有するＡβペプチドである、５３．記載の抗原組成物。
【０２２２】
５５．ＡＧＰが５２９である、５４．記載の抗原組成物。
【０２２３】
５６．有効なアジュバント作用量の：（１）ＡＧＰ、またはその誘導体もしくは類似物、および（２）サイトカインもしくはリンホカイン、または前記サイトカインもしくはリンホカインに対するアゴニストの組合せ物、を包含することにより、こうした望ましくない影響を低下させるように、ある分子、または望ましくない様式、量もしくは位置で宿主により産生されるものを表すその部分からの選択された抗原を含有する抗原組成物の能力の増大方法。
【０２２４】
５７．アミロイド前駆体タンパク質由来のポリペプチド、ペプチドもしくはフラグメント、またはそれらに対する抗体、ならびに有効なアジュバント作用量の：（１）ＡＧＰ、またはその誘導体もしくは類似物、および（２）サイトカインもしくはリンホカイン、または前記サイトカインもしくはリンホカインに対するアゴニストの組合せ物、を脊椎動物宿主に投与することを含んで成る、前記宿主中でのアミロイド沈着を特徴とする疾患を予防もしくは治療する抗原組成物の能力の増大方法。
【０２２５】
５８．選択された抗原が、アミロイド前駆体タンパク質の内的な３９−４３アミノ酸のフラグメントであるＡβペプチド、もしくはＡβペプチドのフラグメントである、５７．記載の方法。
【０２２６】
５９．選択された抗原が、アミノ酸配列：
Ａｓｐ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｐｈｅ  Ａｒｇ  Ｈｉｓ  Ａｓｐ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  
Ｔｙｒ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｈｉｓ  Ｈｉｓ  Ｇｌｎ  Ｌｙｓ  Ｌｅｕ  Ｖａｌ  
Ｐｈｅ  Ｐｈｅ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ａｓｐ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  
Ｌｙｓ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｍｅｔ  Ｖａｌ  
Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ｖａｌ  Ｖａｌ  Ｉｌｅ  Ａｌａ（配列番号６）
を有するＡβペプチドである、５８．記載の方法。
【０２２７】
６０．ＡＧＰが５２９である、５９．記載の方法。
【０２２８】
６１．（１）アミノアルキルグルコサミンリン酸化合物（ＡＧＰ）またはその誘導体もしくは類似物、および（２）サイトカインもしくはリンホカイン、または前記サイトカインもしくはリンホカインに対するアゴニストの組合せ物を含んで成るアジュバント製剤。
【０２２９】
６２．ＡＧＰが安定な水中油型エマルションの形態で使用される、６１．記載のアジュバント製剤。
【０２３０】
６３．サイトカインもしくはリンホカインが、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子およびインターロイキン−１２よりなる群から選択される、６１．記載のアジュバント製剤。
【０２３１】
６４．希釈剤もしくは担体をさらに含んで成る、６１．記載のアジュバント製剤。
【０２３２】
６５．サイトカインもしくはリンホカインが顆粒球マクロファージコロニー刺激因子である、６１．記載のアジュバント製剤。
【０２３３】
６６．サイトカインもしくはリンホカインがインターロイキン−１２である、６１．記載のアジュバント製剤。
【０２３４】
６７．ＡＧＰが５２９である、６１．記載のアジュバント製剤。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
2010001304.tif 000040
【図８】
2010001304.tif 000041
【図９】
2010001304.tif 000042
【配列表】
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