(57)【要約】【課題】植物性原料を有効利用し、日常的に連用が可能で、安価で安全性に優れた肝機能障害改善剤の提供。【解決手段】ラクトバチルス・ペントーサス  ＹＩＴ１０３１３株（ＦＥＲＭ  ＡＰ−２１７５５）を用いて、麦汁を発酵して得られる麦汁発酵物を有効成分として含有する肝機能障害改善剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ラクトバチルス・ペントーサスＹＩＴ１０３１３株（ＦＥＲＭ  ＡＰ−２１７５５）を用いて、麦汁を発酵して得られる麦汁発酵物を有効成分として含有する肝機能障害改善剤。
【請求項２】
ラクトバチルス・ペントーサスＹＩＴ１０３１３株（ＦＥＲＭ  ＡＰ−２１７５５）を用いて、麦汁を発酵して得られる麦汁発酵物を有効成分として含有する抗酸化剤。
【請求項３】
ラクトバチルス・ペントーサスＹＩＴ１０３１３株（ＦＥＲＭ  ＡＰ−２１７５５）を用いて、麦汁を発酵して得られる麦汁発酵物を有効成分として含有する抗炎症剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物性原料を用いた肝機能障害改善剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
肝臓は、三大栄養素である炭水化物（糖質）、蛋白質及び脂質の代謝調節・貯蔵、不要物質の分解・解毒、食物の消化を助ける胆汁の生成・分泌など、生体にとって不可欠な様々な機能を担っている。また、肝臓は、予備力が強いため、沈黙の臓器とも言われており、倦怠感や黄疸、浮腫、腹水等の症状が表れ難く、その障害の発見が遅れがちになることが多い。
【０００３】
通常、肝機能の検査は、血漿又は血清中のＡＬＴ（アラニントランスアミナーゼ）とＡＳＴ（アスパラギン酸アミノ基転移酵素）が肝臓細胞懐死の程度を鋭敏に反映することから、これらの値を指標として実施される。
【０００４】
近年、食生活の欧米化、栄養バランスの偏り、アルコールの過剰摂取、ストレス、喫煙などによる肝臓への負担はますます大きくなっており、肝障害の患者も増加している。肝障害は、肝細胞の年余に渡る破壊と再生の繰り返しにより、肝組織の線維化が進行し、肝硬変や肝細胞癌等の重篤な疾患を引き起こす。また肝障害の原因には、各種肝炎ウイルス感染、薬物による副作用等もあり、肝障害の初期の段階では、肝炎、すなわち、肝臓に炎症が生じている。肝臓に炎症が生じている段階では、ＩＬ−１０、ＡＳＴ、ＡＬＴ、ＴＮＦ−αなどの各種炎症性マーカーの異常低下や異常亢進が発生している。また、肝細胞の障害には、ラジカル反応も関与していると言われている。
【０００５】
現在、肝障害に対する特効薬はなく、食事療法や安静療法を中心とする治療が主流となっているが、慢性肝疾患に対して、強力ネオミノファーゲンＣ（登録商標；ミノファーゲン社製）等のグリチルリチン製剤が使用されることが知られている。しかしながら、この薬剤は、静脈内投与で用いられることから、苦痛を伴い、また、高血圧や低カリウム血症等の副作用を生じることが報告されているため、その使用には様々な制約をうける。しかも高価であるため、長期に渡って常用するには経済的にも困難である。
また、肝硬変、肝不全等の肝疾患に伴う肝性脳症や低アルブミン血症の改善などを目的として種々のアミノ酸製剤を使用することも知られているが、その目的は、肝疾患による栄養障害の改善である。
【０００６】
そこで、副作用が少なく、日常的に摂取することができる天然物由来の成分により、肝機能障害を改善しようとする方法が提案されている。例えば、ウコン、マリアアザミ、ゴマリグナン、牡蠣エキス、レバーエキスなどを使用する方法を挙げることができる（非特許文献１）。また、これ以外にもラクトパーオキシダーゼ及び／又はラクトフェリンを使用する方法（特許文献１）、ホエーを使用する方法（特許文献２）、甘茶のアルコール又は含水アルコール抽出物を使用する方法（特許文献３）、穀物又は豆類由来のセルロースおよびヘミセルロース等の食物繊維質を使用する方法（特許文献４）等を例示することができる。
【０００７】
一方で、麦汁は、麦芽（モルトともいう）を糖化させて調製され、主にビールやウイスキー等の酒類の製造用原料として利用されていることは良く知られている。また、麦汁を、整腸作用や免疫賦活作用等の生体にとって有益な生理機能を有する乳酸菌を用いて発酵することも古くから行われている。例えば、抗アレルギー活性を有する乳酸菌による乳酸発酵を行った後、アルコール発酵を行う発酵麦芽飲料の製造方法（特許文献５）を例示することができる。
【０００８】
しかしながら、これまでに報告されている乳酸菌を用いた麦汁の発酵は、アルコール発酵を伴うものであり、アルコール発酵を伴わない麦汁の乳酸菌発酵物についての報告はほとんどなく、その機能性についての検討もほとんど行われていない。
【特許文献１】特開２００１−２２６２８９号公報
【特許文献２】国際公開第２００５／０９４８４８号パンフレット
【特許文献３】特許第４１０４８５３号
【特許文献４】特公平７−１２１８６７号公報
【特許文献５】特開２００６−５０９７９号公報
【非特許文献１】ＦＯＯＤ  Ｓｔｙｌｅ  ２１，２巻１２号、１９９８年、食品化学新聞社
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明の目的は、植物性原料を有効利用し、日常的に連用が可能で、安価で安全性に優れた肝機能障害改善剤を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者等は、前記課題を解決するために鋭意検討を重ねた結果、麦汁に生理活性を有する植物起源の特定の乳酸菌を接種・培養して得られる麦汁発酵物が、優れた抗酸化作用及び抗炎症作用を有し、肝機能障害を改善し得ることを見出し、本発明を完成した。
【００１１】
すなわち、本発明は、ラクトバチルス・ペントーサスＹＩＴ１０３１３株（ＦＥＲＭ  ＡＰ−２１７５５）を用いて、麦汁を発酵して得られる麦汁発酵物を有効成分として含有する肝機能障害改善剤、抗酸化剤及び抗炎症剤を提供するものである。
【発明の効果】
【００１２】
本発明に用いる麦汁発酵物は、優れた抗酸化作用、抗炎症作用、肝機能障害を改善および治療する効果を有し、安全性に優れた日常的にも連用可能であることから、医薬品として、またこれを利用することで健康増進を志向とした各種の飲食品を提供することが可能となる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明の肝機能障害改善剤は、ラクトバチルスに属する乳酸菌、具体的には、ラクトバチルス・ペントーサスＹＩＴ１０３１３株を用いて、麦汁を発酵することにより得られる麦汁発酵物を有効成分として含有するものである。
この麦汁発酵物の調製に用いるラクトバチルス・ペントーサスＹＩＴ１０３１３株は、発酵茶から常法に従って単離したものである。具体的には、試料（発酵茶）に０．８５％のＮａＣｌ溶液を加えて懸濁し、１０倍段階希釈液とした。この希釈液を０．５％炭酸カルシウム溶液とアジ化ナトリウムとシクロヘキシミドとをそれぞれ１０ｐｐｍとなるように加えたＭＲＳ寒天に広げ、３０℃で２日間、嫌気条件下で培養することにより、菌株を単離した。
【００１４】
この菌は、麦汁中で良好に生育し、１０℃で１ヶ月（４週間）保存した場合でも高い生残性を有する。また、酸や胆汁酸に対する耐性を有し、免疫細胞におけるサイトカイン産生能や脂質ミセル不溶化活性を有することが確認されており、ＦＥＲＭ  ＡＰ−２１７５５として、平成２０年１２月２５日付けで独立行政法人産業技術総合研究所  特許生物寄託センター（郵便番号３０５−８５６６  日本国茨城県つくば市東１丁目１番地１中央第６）に寄託した。
【００１５】
なお、このＹＩＴ１０３１３株の菌学的性質については以下に示すとおりである。
Ａ）形態的性質
（１）細菌の形；  桿菌
（２）細菌の大きさ；  １μｍ
（３）細菌の多形性；  無し
（４）運動性；  無し
（５）胞子；  無し
Ｂ）培養的性質（生育状態）
（１）ＭＲＳ寒天平板培養；  良好
（２）ＭＲＳ液体培養；  良好
Ｃ）生理学的性質
（１）グラム染色性；  陽性
（２）カタラーゼ反応；  陰性
【００１６】
また、前記ラクトバチルス・ペントーサスＹＩＴ１０３１３株（ＦＥＲＭ  ＡＰ−２１７５５）を用いて発酵する麦汁とは、周知の通り、大麦等の麦類に水を加えて発芽させ、乾燥したもの（麦芽又はモルトともいう）に、温水を加えて一定の条件下で処理することにより、麦芽に含まれる酵素の働きでデンプン質を分解（糖化）して得られる一般的なものである。
【００１７】
本発明においては、常法に従って調製した麦汁であれば、特に制限されることなく好適に使用することができるが、麦汁には、糖質、アミノ酸、β−グルカン、ポリフェノール等の成分が含まれており、これらの成分含有比率が乳酸菌の発酵性に影響を与える場合があるため、乳酸菌の発酵性に有益な成分含有比率となるように、麦汁を調製する際の条件（糖化条件）を適宜設定することがより好ましい。
【００１８】
具体的には、麦汁を調製する際、麦芽由来の酵素による糖化を６０℃〜６５℃で、およそ１時間程度行い、その後７５℃〜８０℃で、１０分程度で処理することが好ましい。この場合において、糖化処理を６５℃よりも高い温度下で行うと、乳酸菌発酵に必要な資化性糖やアミノ酸等を十分確保できない場合があるため好ましくない。なお、糖化処理に要する時間は、麦汁の成分含有比率に影響を与えないことを確認しているので、作業性などを考慮して設定すれば良い。
【００１９】
また、本発明の麦汁の調製においては、原料となる麦芽の一部にカラメル麦芽を使用することもできる。カラメル麦芽とは、麦芽調製の際の乾燥温度を１００℃以上（通常は８０〜８５℃程度）で行って、カラメル化反応（糖分が加熱されて褐色化する反応）を生起させて得られる甘く香ばしい焙煎香を有する麦芽（色麦芽ともいう）のことをいう。このカラメル麦芽を用いることにより、麦汁に独特の風味や香味を付与することができ、麦汁発酵物の嗜好性を高めることができる。本発明において、カラメル麦芽の使用量は適宜設定すればよく、特に制限されるものではない。
【００２０】
また更に、本発明においては、前記した麦汁以外に、発酵麦芽飲料用に市販されている麦芽（モルト）エキスをそのまま或いは前記麦汁と適宜混合して利用することも可能である。本発明で使用することができる麦芽エキスとしては、例えば、ＭＡＬＴ  ＥＸＴＲＡＣＴ  ＰＡＳＴＥ  （ＤＩＡＭＡＬＴＥＲＩＡ  ＩＴＡＬＩＡＮＡ  Ｓ．ｒ．ｌ社製）などを挙げることができる。
【００２１】
本発明の麦汁発酵物の調製は、乳酸菌を用いた発酵食品等と同様に、通常の製造法で行えばよく、特に制限されるものではない。すなわち、上記により調製した麦汁に、ラクトバチルス・ペントーサスＹＩＴ１０３１３株（ＦＥＲＭ  ＡＰ−２１７５５）を接種して、常法に従って培養することにより行うことができる。
【００２２】
このとき、麦汁は、適宜殺菌処理を施して、乳酸菌の発酵基質とすればよく、殺菌条件等も特に制限されない。麦汁濃度としては、固形分換算で８〜３０％が発酵性等の点から好ましい。また、麦汁は、それだけで乳酸菌発酵に必要な充分量の栄養源を含有しているため、そのまま発酵基質とすればよいが、更に発酵性を高めることを目的として、一般的に乳酸菌発酵時に副次的に用いられる成分を配合することができる。このような成分としては、例えば、酵母エキス、クロレラエキス、ビタミンＡ、ビタミンＢ類、ビタミンＣ、ビタミンＥ等のビタミン類や、各種のペプチド類を含むタンパク分解物、アミノ酸類、カリウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン等の塩類を挙げることができる。なお、これら別途配合する成分の使用量は、特に制限されず、目的に応じて使用すればよい。
【００２３】
また、ラクトバチルス・ペントーサスＹＩＴ１０３１３株（ＦＥＲＭ  ＡＰ−２１７５５）は、予め前培養して調製した前培養液として麦汁に接種することが好ましい。この前培養液は、ラクトバチルス・ペントーサスに属する乳酸菌が増殖し得る可食性培地、例えば、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｉ  ＭＲＳ  ブロス（Ｄｉｆｃｏ社製）等を用いて、３０℃〜３７℃で、１６時間〜２４時間程度培養することにより調製したものをいう。
そして、この前培養液を、麦汁に対して、およそ０．０１重量％〜１．０重量％程度接種し、培養する。このときの培養条件は、特に制限されるわけではなく、一般的な乳酸菌の培養条件に従って行えばよい。例えば、培養条件としては、培養温度が、２５℃〜４０℃、好ましくは、３０℃〜３７℃であり、培養時間が、１６時間〜５０時間、好ましくは、１８時間〜３６時間程度とすればよい。また、培養方法としては、静置培養、攪拌培養、振盪培養、通気培養などからラクトバチルス・ペントーサスに属する乳酸菌の培養に適した方法を適宜選択すればよい。
【００２４】
また、本発明の麦汁発酵物の調製においては、ラクトバチルス・ペントーサスＹＩＴ１０３１３株（ＦＥＲＭ  ＡＰ−２１７５５）の発酵性や麦汁発酵物の機能性等に影響を与えない範囲であれば、腸内環境の改善等、生体に有益な他の動植物性由来の乳酸菌を併用することもできる。このような乳酸菌としては、例えば、ラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・プランタラム、ラクトバチルス・ブレビス、ラクトバチルス・ファーメンタム等を挙げることができる。
【００２５】
前記の麦汁発酵物は、後記実施例に示すように、優れた抗酸化作用、抗炎症作用及び肝機能障害改善作用を有することから、各種の原因による肝機能低下を改善するための医薬品、食品等として有用である。ここで、肝機能障害には、ウイルス性肝炎、脂肪肝、アルコール性肝炎、非アルコール性脂肪肝、薬物性肝障害、疲労やストレス等により肝機能が障害又は低下している状態が含まれる。肝機能が低下している又は障害されているか否かは、肝疾患マーカーである血漿又は血清中のＡＬＴ、ＡＳＴ、直接ビリルビン、間接ビリルビン、ＡＬＰ、γ-ＧＴＰ、コリンエステラーゼ（ＣＨＥ）、血清アルブミン値（ＡＬＢ）等によって判定できるが、ＡＬＴ、ＡＳＴで判定するのが好ましい。また肝炎によって変動するＩＬ−１０、ＴＮＦ−α、ＩＮＦ−γ、ＳＴ６ＧａｌＩ等によって判定してもよい。
【００２６】
本発明の抗酸化剤、抗炎症剤及び肝機能障害改善剤（以下、肝機能障害改善剤等と云う）は、上記して得られる麦汁発酵物を医薬や食品等の適宜な形態或いは液状、ペースト状、固形状等の適宜な形状とすることにより調製される。また、前記の麦汁発酵物は、安全性に優れ日常的に連用することが可能であることから、これをそのまま或いはその処理物を乳酸菌が生きたまま含まれる状態で利用することができる他、加熱殺菌処理を施したものや、濾過・遠心分離等により発酵物から菌体を除去したもの、更には、凍結乾燥、噴霧乾燥、熱風乾燥またはスプレードライ等の既存の方法により粉末化したものを利用することができる。
【００２７】
例えば、本発明の肝機能障害改善剤等は、そのまま或いは加熱殺菌や凍結乾燥等の処理を適宜施した加工処理物を薬理学的に許容され得る担体と混合して、慣用の医薬品製剤の形態として投与することができる。このような製剤としては、例えば、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等の固形剤；溶液剤、懸濁剤、乳剤などの液剤；凍結乾燥製剤などが挙げられる。これらの製剤は、製剤上の常套手段により調製することができる。医薬用無毒性担体としては、グルコース、乳糖、ショ糖、デンプン、マンニトール、デキストリン、脂肪酸グリセリド、ポリエチレングリコール、ヒドロキシエチルデンプン、エチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、アミノ酸、ゼラチン、アルブミン、水、生理食塩水などが挙げられる。また、必要に応じて、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、結合剤、等張化剤等の慣用の添加剤を適宜添加することもできる。
【００２８】
また、本発明の肝機能障害改善剤等は、上記した医薬品製剤として用いるだけではなく、飲食品等として摂取することもできる。この場合には、前記麦汁発酵物或いは加熱殺菌や粉末化等した加工処理物をそのまま、或いは各種の食品中に含有せしめて、肝機能障害の改善に有用な食品素材又は保健用食品として摂取することができる。例えば、種々の食品、ハム、ソーセージなどの食肉加工食品；かまぼこ、ちくわなどの水産加工食品；パン、菓子、バター、粉乳、発酵乳製品に添加して使用したり、水、果汁、牛乳、清涼飲料等の飲料に添加して使用してもよい。
【００２９】
更には、前記麦汁発酵物そのまま或いはその加工処理物に、各種の食品素材を配合して、消費者の嗜好に合わせた飲料やタブレット等の飲食品の形態として摂取することもできる。これらの飲食品は、通常の方法により製造することができる。
この場合に配合できる食品素材としては、ショ糖、グルコース、フルクトース、パラチノース、トレハロース、ラクトース、キシロース、麦芽糖、ブドウ糖果糖液糖、蜂蜜等の各種糖質、ソルビトール、キシリトール、エリスリトール、ラクチトール、パラチニット、還元水飴、還元麦芽糖水飴等の各種糖アルコール、アスパルテーム、スクラロース、アセスルファムＫ等の各種高甘味度甘味料、甘草、ステビア、グリチルリチン酸配糖体等の各種天然甘味料、ショ糖脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、レシチン等の各種乳化剤、寒天、ゼラチン、カラギナン、グァガム、キサンタンガム、ペクチン、ローカストビーンガム、ジェランガム、カルボキシメチルセルロース、大豆多糖類、アルギン酸プロピレングリコール等の各種増粘（安定）剤、ポリデキストロース、β−グルカン、マンナン、ガラクタン、アラビノガラクタン、グルコマンナン、ガラクトマンナン、小麦ファイバー、コーンファイバー、リンゴファイバー、パインファイバー等の各種食物繊維或いはそれらの加水分解物、オレンジ果汁、レモン果汁、ブドウ果汁、グレープフルーツ果汁、リンゴ果汁、パイナップル果汁等の各種果汁、クエン酸、乳酸、酢酸、リンゴ酸、酒石酸、グルコン酸等の各種酸味剤、ビタミンＡ、ビタミンＢ類、ビタミンＣ、ビタミンＥ類等の各種ビタミン類、カルシウム、マグネシウム、亜鉛、鉄、マンガン等の各種ミネラル分、
ベリー系、オレンジ系、シトラス系、アップル系、ミント系、グレープ系等の各種フレーバー類を挙げることができる。
【００３０】
また、本発明において、所望の抗酸化効果、抗炎症効果、肝機能障害改善効果を得るために必要な麦汁発酵物の使用（摂取）量には厳格な制限はないが、乾燥固形分として、一日当たり５ｇ〜３０ｇ、好ましくは１０ｇ〜２０ｇである。
【実施例】
【００３１】
以下、実施例、試験例及び参考例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明は、これらに何ら制約されるものではない。
【００３２】
（実施例１）
＜麦汁発酵物の調製＞
常法に従って調製した麦汁から遠心分離（８，０００ｒｐｍ、１０分）を用いて不純物を除去した後、１２１℃で１５分間オートクレーブ滅菌した。この麦汁（１２°Ｂｘ）１Ｌに、予めＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｉ  ＭＲＳ  ブロス（Ｄｉｆｃｏ社製）を用いて前培養して調製したラクトバチルス・ペントーサスＹＩＴ１０３１３株（ＦＥＲＭ  ＡＰ−２１７５５）前培養液を１％接種し、３７℃で４８時間培養し、麦汁発酵物（実施品１）を得た。また、ラクトバチルス・プランタラムＹＩＴ０１０２株、ラクトバチルス・プランタラムＹＩＴ１１２０１株およびラクトバチルス・プランタラムＹＩＴ１１２０３株を用いて前記と同様の方法により、麦汁発酵物（試料１〜３）を調製した。
【００３３】
（試験例１）
＜抗酸化能の検討＞
実施例１で調製した麦汁発酵物（実施品１及び試料１〜３）をプレートに０、２，４、６、８、１０、２０、４０、６０、８０、１００μＬ入れ、更に全量が１００μＬとなる様に５０％エタノールを添加した。このサンプル溶液に、０．１Ｍ  ＭＥＳ  バッファー（ｐＨ６．０）と、０．１ｍＭ  １，１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）とを５０μＬずつ加えて暗所室温に放置して反応させた。反応開始から３０分後、プレートリーダーにて５１５ｎｍにおける吸光度を測定し、減少率が５０％になる時のサンプル溶液の添加量を求めた。その結果を図１に示す。
なお、図１中、抗酸化活性値は、３４μＭ、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）の活性に相当するサンプル溶液の添加量で表す。
【００３４】
図１から、麦汁発酵物は、麦汁に比べてＤＰＰＨラジカル消去活性が高く、ラクトバチルス・ペントーサスＹＩＴ１０３１３株（ＦＥＲＭ  ＡＰ−２１７５５）を用いた麦汁発酵物は、特に高い活性を有することが確認された。
【００３５】
（試験例２）
＜抗炎症能の検討＞
ＢＡＬＢ／ｃ（♂、７〜８週齢）マウスの腹腔内に４％（ｗ／ｖ）チオグリコレート培地（Ｔｈｉｏｇｌｉｃｏｌｌａｔｅ）溶液を２ｍＬ投与し、４日後に腹腔内に誘導されてくる細胞を、ハンクス溶液５ｍＬを用いて回収し、腹腔内マクロファージとした。腹腔内マクロファージはハンクス溶液で洗浄後、ＲＰＭＩ  １６４０培地（１０％ＦＢＳ（Ｆｅａｔａｌ  Ｂｏｖｉｎｅ  Ｓｅｒｕｍ）、１％ペニシリン／ストレプトマイシン、０．０５ｍＭ  ２−Ｍｅｒｃａｐｔｏｅｔｈａｎｏｌ）に懸濁した。９６ウェル培養プレートに腹腔マクロファージ５×１０5ｃｅｌｌｓ／ｍＬを播き、実施例１で調製した麦汁発酵物（実施品１及び試料１〜３）を１０％になるように添加して、３７℃で培養した。２４時間後に培養上清を回収して遠心分離（１８００ｒｐｍ×５分）し、ＩＬ−１０及びＴＮＦαの濃度をＥＬＩＳＡ法により定量した。その結果を表１に示す。
【００３６】
＜ＥＬＩＳＡ法＞
ＥＬＩＳＡ法は、ｅＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ社のキット（Ｍｏｕｓｅ  ＴＮＦα  ＥＬＩＳＡ  Ｒｅａｄｙ−ＳＥＴ−Ｇｏ！）を用い、説明書に準じて測定した。
【００３７】
【表１】
2010155789.tif 000002
【００３８】
表１から、ラクトバチルス・ペントーサスＹＩＴ１０３１３株（ＦＥＲＭ  ＡＰ−２１７５５）を用いた麦汁発酵物は、他の麦汁発酵物に比べてＴＮＦαの産生能は低く、ＩＬ−１０産生能が高いことが確認され、抗炎症作用を有していることが示された。
【００３９】
（実施例２）
＜肝機能障害改善効果の検討１＞
５週齢のＣ５７ＢＬ／６Ｎマウス（♂）を２週間馴化した後、表２で示す組成の飼料を用いて８週間飼育し、ブランク群（ｎ＝１０）、コントロール群（ｎ＝１０）、麦汁発酵物投与群（ｎ＝１０）に分けた。飼育後２４時間絶食させ、絶食開始８時間後に、表３の通りサンプルを投与し、１６時間後にエーテル麻酔下で解剖し、腹部大動脈より全採血し、遠心分離（３，０００ｒｐｍ、２０ｍｉｎ）して血清を調製した。血清ＡＳＴ及びＡＬＴ活性測定には、トランスアミナーゼＣＩＩテストワコー（和光純薬）を用いた。その結果を表４に示す。
【００４０】
【表２】
2010155789.tif 000003
【００４１】
【表３】
2010155789.tif 000004
【００４２】
【表４】
2010155789.tif 000005
【００４３】
表４から、血清ＡＳＴ及びＡＬＴ活性は、ブランクと比較してコントロール群では上昇しており、四塩化炭素によって肝障害が起こっていることが確認された。そして、麦汁発酵物を投与することにより、コントロール群と比較してＡＳＴは有意傾向（Ｐ＝０．０８）、ＡＬＴは有意（Ｐ＝０．０４）に低い値を示し、肝機能障害を改善することが確認された。
【００４４】
（実施例３）
＜肝機能障害改善効果の検討２＞
６週齢のＷｉｓｔａｒラット（♂）を２週間馴化し、コントロール群（ｎ＝８）と麦汁発酵物投与群（ｎ＝７）に分けた。それぞれの群に、表５に示す組成の飼料を与えて１０日間飼育した。その後、ＧａｌＮ（Ｄ−ガラクトサミン）を体重１ｋｇ当り５００ｍｇ、ＬＰＳを体重１ｋｇ当り２０μｇの割合でラットの腹腔内に注射し、肝障害を惹起させた。その２４時間後にエーテル麻酔下で解剖し、腹部大動脈より全採血し、遠心分離（３，０００ｒｐｍ、２０ｍｉｎ）して血清を調製した。血清ＡＳＴ及びＡＬＴ活性測定には、トランスアミナーゼＣＩＩテストワコー（和光純薬）を用いた。その結果を表６に示す。
【００４５】
【表５】
2010155789.tif 000006
【００４６】
【表６】
2010155789.tif 000007
【００４７】
表６から、麦汁発酵物の投与により、ガラクトサミンとＬＰＳにより生じる肝障害が改善された。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】麦汁発酵物によるＤＰＰＨラジカル消去活性を示す図である。
【図１】
2010155789.tif 000008