(57)【要約】      （修正有）【課題】加齢の兆候を抑制する皮膚用組成物の提供。【解決手段】マンノース、ラムノース及びこれらの混合物から選択される少なくとも１つの単糖と、アスコルビン酸、その類似体及びこれらの混合物から選択される少なくとも１つの追加の化合物との組合せを含む、化粧品組成物及び／又は皮膚科学組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
生理学的に許容しうる媒体中に、マンノース、ラムノース及びこれらの混合物から選択される少なくとも１つの単糖と、アスコルビン酸、その類似体及びこれらの混合物から選択される少なくとも１つの追加の化合物との組合せを含み、そしてここで、該単糖の量が、組成物の総重量に対して０．４〜３０重量％の間である組成物の、皮膚又はその外皮の加齢の兆候を軽減及び／又は防止するための化粧的使用。
【請求項２】
肌の色つやを改善するための、しわ及び／若しくは小じわの特徴を軽減及び／若しくは防止するための、皮膚の微細な凹凸を改善及び／若しくは軽減するための、並びに／又は皮膚の機械的性質を改善するための、前記請求項に記載の使用。
【請求項３】
皮膚の密度、その堅さ及び／又は種々のコンパートメントの結合、特に真皮と表皮との結合を改善するための、前記請求項のいずれかに記載の使用。
【請求項４】
しわ及び／若しくは小じわ、並びに／又は紫外線への曝露により引き起こされる皮膚の内部分解を、予防的又は治療的に処置するための、前記請求項のいずれか１項に記載の使用。
【請求項５】
脂質生成を修飾し、そして特にセラミドの合成の上昇を引き起こすことにより、表皮の脂質プロフィールを改善するための、又はテネイシン、コラーゲンVII並びにコラーゲンVI及び／又はXIIの合成を刺激するための、前記請求項１〜４のいずれか１項に記載の使用。
【請求項６】
生理学的に許容しうる媒体中に、マンノース、ラムノース及びこれらの混合物から選択される少なくとも１つの単糖と、少なくとも１つのアスコルビン酸類似体との組合せを含む組成物であって、キシリトールとマンニトールとの組合せを含まない組成物。
【請求項７】
生理学的に許容しうる媒体中に、マンノース、ラムノース及びこれらの混合物から選択される少なくとも１つの単糖と、アスコルビン酸との組合せを含む組成物であって、キシリトールとマンニトールとの組合せを含まず、そしてここで、該単糖の量が、組成物の総重量に対して０．４〜３０重量％の間、特に組成物の総重量に対して０．４〜１０重量％の間、そして更に特に０．４〜６重量％の間である組成物。
【請求項８】
アスコルビン酸が、アスコルビン酸ナトリウム、リン酸アスコルビルナトリウム又はマグネシウム塩のようなアスコルビン酸塩；アスコルビン酸の酢酸エステル、アスコルビン酸の糖エステル、及びホスホリルアスコルビン酸の金属塩、並びにこれらの混合物から選択される、請求項６に記載の組成物。
【請求項９】
アスコルビン酸の糖エステルが、グリコシル、マンノシル、フルクトシル、フコシル、ガラクトシル及びＮ−アセチルグルコサミンアスコルビン酸のようなグリコシル誘導体、又はアスコルビン酸のＮ−アセチルムラミン酸誘導体から選択される、請求項８に記載の組成物。
【請求項１０】
アスコルビン酸の糖エステルが、アスコルビル−２−グルコシド、Ｌ−アスコルビン酸の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル及びＬ−アスコルビン酸の６−Ｏ−Ｄ−ガラクトピラノシル、並びにこれらの混合物から選択される、請求項８に記載の組成物。
【請求項１１】
ホスホリルアスコルビン酸の金属塩が、リン酸アスコルビルナトリウムのようなアルカリ金属リン酸アスコルビル塩、リン酸アスコルビルマグネシウムのようなアルカリ土類金属リン酸アスコルビル塩、及び遷移金属リン酸アスコルビル塩から選択される、請求項８に記載の組成物。
【請求項１２】
アスコルビン酸及び／又はその類似体の量が、組成物の総重量に対して０．００１〜３０重量％の間、そして特に組成物の総重量に対して０．１〜１０重量％の間、そして更に特に０．５〜６重量％の間である、前記請求項６〜１１のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１３】
皮膚又はその外皮への局所投与、経口投与又は皮膚注射に適していることを特徴とする、前記請求項６〜１２のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１４】
マンノース、ラムノース及びこれらの混合物から選択される少なくとも１つの単糖と、アスコルビン酸、その類似体及びこれらの混合物から選択される少なくとも１つの追加の化合物との組合せを少なくとも含む器具であって、表皮内及び／又は真皮内及び／又は皮下注射に適した器具。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生理学的に許容しうる媒体中に、マンノース、ラムノース及びこれらの混合物から選択される少なくとも１つの単糖と、アスコルビン酸、その類似体及びこれらの混合物から選択される少なくとも１つの追加の化合物との組合せを含む組成物、特に化粧品組成物及び／又は皮膚科学組成物に関する。本発明はまた、このような組成物の使用、及びこれを含有する器具に関する。
【背景技術】
【０００２】
ヒトの皮膚は、主として２つの主要な層（即ち、真皮、及び真皮の表面を覆う表皮）からなる。真皮は表皮に固体支持体を提供する。これはまた表皮の栄養要素である。これは主に繊維芽細胞と細胞外マトリックス（主に、コラーゲン、エラスチン、及び基質として知られている物質からなる）から構成される。これらの成分は、繊維芽細胞により合成される。
【０００３】
表皮と真皮との間の結合は、真皮表皮接合部により与えられる。これは、約１００nmの厚さの複雑な領域であり、そして基底ケラチン細胞の基底極、表皮膜及び真皮浅層の基底下帯を含む。構造的観点からは、ケラチン繊維が挿入されたヘミデスモソーム（ヘミデスモソーム−トノフィラメント複合体）が、基底ケラチン細胞の原形質膜上に分布している。これらのヘミデスモソーム−トノフィラメント複合体に、表皮基底膜を横断する係留繊維（anchoring filaments）が面している。この係留繊維は表皮側でラミニンＶに結合している。最後に、係留繊維（anchoring fibril）が基底下ネットワークを構成する。これらは、基底膜の深い面から生じてここで終わる曲線構造体であり、そしてそこにコラーゲンＩ、III及びＶの繊維が絡まる。
【０００４】
これらの係留繊維（電子顕微鏡で完全に見ることができる）は、VII型コラーゲン（以降コラーゲンVIIと呼ぶ）からなる。コラーゲンVIIは、ケラチン細胞及び繊維芽細胞により合成されるが、大体はケラチン細胞により合成される（Aumailley M., Rousselle P. Laminins of the dermoepidermal junction. Matrix Biology, 1999, 18:19-28; Nievers M., Schaapveld R., Sonnenberg A. Biology and function of hemidesmosomes. Matrix Biology, 1999, 18:5-17）。
【０００５】
コラーゲンは皮膚の細胞外マトリックスの主要なタンパク質である。今日まで２０種類のコラーゲンが同定されており、Ｉ〜XXと表されている。表皮全体に主として存在するコラーゲンは、全真皮の細胞外マトリックスを形成するＩ型及びIII型のコラーゲンである（これらのコラーゲンは真皮の乾燥重量の７０〜８０％を占める）。更にコラーゲンは、必ずしも全てが同じタイプの細胞により合成される訳ではない：Ｉ型及びIII型のコラーゲンは基本的に真皮繊維芽細胞により産生されるが、VII型コラーゲンは２種類の細胞（ケラチン細胞及び繊維芽細胞）によって産生される。これらの発現の制御はコラーゲン毎に異なり、例えば、コラーゲンＩ及びVIIは、ある種のサイトカインにより同様には調節されない：具体的には、ＴＮＦ−α及びロイコレグリン（leukoregulin）はコラーゲンVIIを刺激して、コラーゲンＩを負に調節する。特に加齢に関与する他のタイプのコラーゲンの中で、コラーゲンXII及びVIが挙げられる。コラーゲンXIIは、コラーゲンＩの繊維を真皮乳頭層中の他のマトリックス化合物に結合させ、こうして繊維が互いに滑り込むことを促進することにより、皮膚組織の生物機械的性質（コラーゲン繊維の変形及び収縮）を調節する。コラーゲンVIは、プロテオグリカンのように、コラーゲン繊維の３次元構成を促進する。コラーゲンVIの固有の特色は、その作用の多重性である。具体的には、これはインテグリン型の受容体を介して多数の細胞に、及び多くのマトリックス分子（コラーゲンIV、フィブロネクチン、ビグリカン（biglycan）、ＭＡＧＰ−１）に結合する。最後に、全てのコラーゲン分子は、共通の前駆体（これはプロコラーゲンのα鎖である）の変種である。
【０００６】
真皮表皮接合部は、皮膚の表面状態を調整する構造体である。よって完全な係留構造を有する真皮表皮接合部は、折り畳まれて維持され、こうして真皮と表皮との間の接触領域の表面積を増やすことを可能にし、特にこれらの２つの組織間の拡散性因子の交換を促進して、その結合を強化し、そして表皮の外観を改善することを可能にしている。特にコラーゲンVII若しくはテネイシンの合成欠損のために、及び／又は加齢のために、係留構造が障害される場合、これは真皮表皮接合部の平坦化を引き起こす。交換回数が減り、２つの組織の結合が弱くなり、表皮は折り畳まれ、そして皮膚に締まりや張りが無くなるにつれ、しわが現れ、そして機械的攻撃に対する皮膚の脆弱性が増大する。
【０００７】
テネイシンは真皮表皮接合部の主要成分である。これは細胞外マトリックス糖タンパク質であり、テネイシン−Ｃとしても知られている。その基本的機能は、特に胚形成中の上皮間充織相互作用にある。皮膚では、テネイシンは、真皮乳頭層中の表皮下レベル中に存在するが、血管や付属器の周りにも存在する。その発現は、過剰増殖の状態（例えば、乾癬や腫瘍）に大きく上昇するが、瘢痕形成でも上昇する。テネイシンは、皮膚で２つの主要なタイプの細胞（ケラチン細胞及び繊維芽細胞）により産生される。その機能の１つは細胞接着にある。具体的には、瘢痕形成中の遊走性ケラチン細胞におけるテネイシンの強いアップレギュレーションは、良好な真皮表皮結合を保証する、ケラチン細胞の結合組織への接着の基本的な役割を強く示唆している（Crossin KL. テネイシン：発生及び疾患において分布が限定された多機能性細胞外マトリックスタンパク質。J. Cell. Biochem. 1996, 61:592-598; Latijnhouwers M., Bergers M., Ponec M., Dijkman H., Andriessen M., Schlkwijk J. ヒト表皮ケラチン細胞は創傷治癒中のテネイシン−Ｃの供給源である。J. Invest. Dermatol, 1997, 108: 776-783; Steijlen P.M., Maessen E., Kresse H., Van Vlijmen I.M.J.J., Verstraeten A.A., Traupe H., Schalkwijk J. ケラチン化の障害におけるテネイシン、ビグリカン及びデコリンの発現。Br. J. Dermatol., 1994, 130:564-568）。
【０００８】
加齢により、コラーゲンは、薄くなり、組織崩壊して、皮膚細胞の再生が低下し、皮膚の表面にしわが現れ、そして皮膚がくすんで締まりがなくなる。皮膚の加齢は、遺伝的特徴に左右される。更には、幾つかの環境因子（喫煙や、殊に日光への曝露など）がこれを加速させる。こうして皮膚は、日光に曝露された部位（手の甲又は顔など）で加齢が進んだ外観を呈する。よって、これらの他の因子もまた、皮膚の生得のコラーゲンに対して負の影響を与える。
【０００９】
したがって、皮膚の完全性及び機械的タイプの外部攻撃因子に対するその抵抗性におけるコラーゲンの重要な役割を考慮すると、これらのコラーゲン、特にプロコラーゲンＩ、並びにコラーゲンVI、VII及びXIIの合成の刺激は、皮膚の加齢の兆候を克服するための有効な手段と考えられる。
【００１０】
上述の欠点を克服するために、皮膚の外観を改善するために、その機械的性質を改善して、機能不全若しくは細胞欠損、細胞再生の欠損、又は真皮若しくは真皮表皮接合部のある種の化合物の欠損に関連する病態を避けるために、ケラチン細胞増殖を上昇させ、繊維芽細胞の増殖及び代謝を刺激し、そしてコラーゲン合成、特にプロコラーゲンＩ並びにコラーゲンVI、VII及びXIIの合成を刺激し、そしてテネイシンの合成を上昇させることにより、支持体及び栄養要素としての真皮の役割、皮膚の種々の層間の結合、更に特に真皮と表皮との間の結合を強化又は維持することを目指した生成物を開発することが重要であると考えられる。
【００１１】
真皮を覆い、かつ外部環境と直接接触している表皮は、脱水及び外部攻撃から体を防御するという主な役割を有する。天然のヒト表皮は主に３つのタイプの細胞からなる（即ち、大部分を占めるケラチン細胞、メラニン細胞及びランゲルハンス細胞）。これらのタイプの細胞のそれぞれは、細胞固有の機能に基づいて、皮膚が体で果たす基本的な役割、特に外部攻撃因子（気候、紫外線、タバコなど）に対して体を防御する役割（これは「バリア機能」として知られている）に寄与する。
【００１２】
表皮は、９０％がケラチン細胞からなる、角質化した重層扁平上皮である。真皮を表皮から分ける基底膜の細胞の、表皮の表面に向かう漸進的分化は、特に皮膚の表面（ここでケラチン細胞は剥離する）に向かって移動するケラチン細胞の分化を包含する。
【００１３】
表皮の加齢は、主としてその厚さの減少に現れる。表皮の萎縮は、ケラチン細胞増殖の減速の、及び老化ケラチン細胞の蓄積の結果である。角質層はくすみになる。
【００１４】
表皮を構成する細胞は、脂質ドメインにより区切られる。分化の過程で、リン脂質（その役割は、表皮の生きている層の細胞膜の流体構造を生成することにある）は、主に脂肪酸、コレステロール及びセラミド（スフィンゴ脂質）からなる混合物により徐々に置換される。
【００１５】
これらの脂質は、特異的層状構造に組織されるが、これの完全性は、存在する画分の特質のみでなくそれぞれの比率に依存する。表皮の脂質ドメインの脂質の層状構造は、流動性に関与し、そのため皮膚の柔軟性に関与する。脂質はまた、表皮、特に角質層の「バリア」性に関与する。
【００１６】
表皮の脂質は主に、生きている表皮により合成される。これらは主に、リン脂質、スフィンゴ脂質、コレステロール、遊離脂肪酸、トリグリセリド、コレステロールエステル及びアルカンからなる。リン脂質は、細胞膜の構成に必須である。これらは、細胞外シグナルの介在及びエネルギー産生に使用される遊離脂肪族鎖の形成における重要な役割を果たす。これらは、スフィンゴ脂質の構成に必要な、遊離脂肪酸の貯蔵部を構成する。コレステロールは、皮膚の保湿及び表皮の「バリア」機能において根本的な役割を果たす。遊離脂肪酸は、角質層の脂質の層状構造の維持に、そしてまた細胞膜（ここで、これらは膜の流動性に関与するが、受容体又は酵素活性の機能化のような生理学的プロセスにも関与する）の構成においても主要な役割を果たす。
【００１７】
セラミドは、表皮の代謝における主要な役割を果たすその他の脂質であるが、これは、角質細胞間脂質の多層状構造を維持するのに必要である。これはまた、表皮の「バリア」機能に、そして水交換に、特に加齢による保湿の問題の克服に必須である。
【００１８】
特にセラミドの合成が上昇できるように、アスコルビン酸（ビタミンＣ）又はある種のその誘導体のような物質を使用することは、文献より公知の方法である（J. Invest. Dermatol. 109: 348-355, 1997; EP-1,145,706; EP-1,145,710）。またインビトロ試験により独立に、ビタミンＣを培地に加えることによってテネイシン及びコラーゲンVIIの合成を上昇させうることが証明された（EP-1,334,714）。
【００１９】
皮膚の生物学的又は光線性の加齢の兆候と闘うための改良された解決策に対してユーザーからの要求が増え続けていることを考えると、より効率的なケアの方法を開発する必要がある。
【００２０】
このような状況において、本出願人は驚くべきことに、少なくとも１つの特異的単糖とアスコルビン酸若しくはその類似体との組合せにより、表皮の脂質生成（そして更に特に表皮セラミドの合成だけでなく、テネイシン、コラーゲンVI、XII及び／又はVIIの合成及び／又はプロコラーゲンＩの合成の刺激にも）と、ケラチン細胞及び／又は繊維芽細胞増殖の活性化との両方に相乗作用を得ることができることを証明した。よって、この組合せは、真皮、真皮表皮接合部及び表皮中の皮膚の加齢の兆候と効率的に闘うことができる。特に、加齢による表皮及び／又は真皮の萎縮に抵抗し、かつ／又は真皮と表皮との間の結合を強化することができる。
【００２１】
本出願人は、マンノース又はラムノースによる、ケラチン細胞及び繊維芽細胞増殖の活性化、並びにプロコラーゲンＩ合成の刺激を実際に証明した。よってこれらを含有する組成物の使用により、皮膚の加齢、そして特に加齢による真皮及び／又は表皮萎縮の兆候に抵抗することができる。
【００２２】
上に略述される直接生物学的作用のためにこれらの単糖類を使用することは、これまで知られていなかった。特許出願WO 2007/128939は、糖化合物と組合せたテンショニング剤（tensioning agent）の生体力学的作用を介して得られる抗加齢活性（これは、皮膚細胞の機械受容器の発現を上昇させることを可能にする）について記載する。機械受容器発現のこの上昇は、テンショニング剤の作用に応答するための皮膚細胞の感作を上昇させると記載されている。
【００２３】
特許出願WO 2005/063194は、特にマンノース又はラムノースを含む、非常に高い忍容性を有するガレヌス基剤を記載する。このようなガレヌス基剤は、そのガレヌス基剤が単にビヒクルである活性物質と組合せるときのみ機能できると明記されている。開示された皮膚用及び／又は化粧品用ガレヌス基剤は、基本的に２つのポリオール（即ち、マンニトール及びキシリトール）の存在に基づく。
【００２４】
よって本発明は、マンノース、ラムノース及びこれらの混合物から選択される少なくとも１つの単糖と、アスコルビン酸、その類似体及びこれらの混合物から選択される少なくとも１つの追加の化合物とを含む、組成物、特に化粧品組成物及び／又は皮膚科学組成物に関する。
【００２５】
アスコルビン酸（これは、通常天然物から抽出されるため、一般にＬ型である）又はその類似体が使用される。
【００２６】
光、熱及び水性媒体のような幾つかの環境パラメータに対して、これを非常に敏感にさせるその化学構造（α−ケトラクトン）のために、アスコルビン酸は、アスコルビン酸の糖エステルの形で、又はリン酸化アスコルビン酸の金属塩の形で使用することが有利であろう。
【００２７】
本発明で使用できるアスコルビン酸の糖エステルは、特にアスコルビン酸のグリコシル、マンノシル、フルクトシル、フコシル、ガラクトシル、Ｎ−アセチルグルコサミン、Ｎ−アセチルムラミン酸誘導体、及びこれらの混合物であり、そして更に特にアスコルビル−２−グルコシド又はＬ−アスコルビン酸の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル、又はＬ−アスコルビン酸の６−Ｏ−Ｄ−ガラクトピラノシルである。後者の化合物及びその製造方法は、詳しくは文献のEP-A-487,404、EP-A-425,066及びJ-05 213,736に記載されている。
【００２８】
一方、リン酸化アスコルビン酸の金属塩は、アルカリ金属リン酸アスコルビル塩、アルカリ土類金属リン酸アスコルビル塩及び遷移金属リン酸アスコルビル塩から選択することができる。
【００２９】
アスコルビン酸類似体は、更に特にこれらの塩（特に、アスコルビン酸ナトリウム、リン酸アスコルビルナトリウム又はマグネシウムなど）、アスコルビン酸の酢酸エステル、又はこれらの糖（特にグリコシルアスコルビン酸など）である。
【００３０】
必要であれば、酸化に対するアスコルビン酸の安定化は、これを、特許出願EP 1,374,852に記載のように無水マレイン酸誘導体と、又は特許出願FR 2,832,630に記載のようにイミダゾールポリマーと合せることにより得られる。
【００３１】
本発明の１つの好ましい実施態様では、本発明の組成物中に存在する追加の化合物は、パルミチン酸アスコルビルではない。
【００３２】
本発明の１つの特定の実施態様では、本発明の組成物はキシリトールとマンニトールとの組合せを含まない。
【００３３】
マンノースは、グルコースのＣ２エピマーである六炭糖である。ラムノース（又は６−デオキシマンノース）は、正式にはＣ６でのマンノースの脱酸素の生成物を構成する。本発明の単糖類は、Ｄ又はＬ型のマンノース及び／又はラムノース、又はこれらの混合物であり、それぞれの型自体は、α及び／又はβ−アノマーであってよい。本発明で好ましい型は、Ｄ−マンノース又はＬ−ラムノースである。
【００３４】
Ｄ−マンノースは植物、特にクランベリーを包含するある種の果実、又は硬木（ブナ及びカバノキ）中に存在する。ラムノースは天然にはＬ型で存在する。Ｄ−マンノース及びＬ−ラムノースは、例えば、Danisco Sweeteners（登録商標）社及びSymrise社から市販されている。
【００３５】
本発明において、単糖類は好ましくはモノマーとして存在する。
【００３６】
本発明はまた、特に皮膚及び／又は頭皮をケアするための、経口投与、局所投与又は皮膚注射を介して投与される、上記と同義の本発明の組成物の使用、特に化粧的又は皮膚科学的使用に関する。
【００３７】
前記と同義の本発明の組成物は、特に毛髪成長を刺激するための、抜け毛と闘うための、抜け毛を遅らせるための又は毛髪のつやを強化するための、化粧品ヘアケア組成物であってよい。
【００３８】
本発明の別の目的は、少なくとも１つのアスコルビン酸類似体及び／又はアスコルビン酸自体の有効量と組合せた、前記と同義の少なくとも１つの単糖の有効量を、個体、好ましくはヒトに投与することによる、皮膚又はその外皮（毛髪、睫毛、爪など）の加齢の兆候を軽減又は防止するための、処置法、特に化粧的又は治療的方法である。
【００３９】
本発明の組成物又は組合せは、更に特に皮膚の加齢の兆候、例えば、しわを示す個体の体又は顔の部位に適用することを目的とする。
【００４０】
本発明はまた、皮膚及び／又はその外皮の加齢の兆候を軽減又は防止するために、本発明の組成物又は組合せの使用、特に化粧的又は皮膚科学的使用に関する。
【００４１】
ある特定のモードにおいて、本発明に即して使用される組成物は、キシリトールとマンニトールとの組合せを含まない。
【００４２】
本発明の組成物又は組合せはまた、特に皮膚又はその外皮中の表皮細胞及び真皮細胞、特にケラチン細胞及び繊維芽細胞の再生を、特にそれらの増殖を上昇させることにより刺激することを可能にする。したがってこれは、暦年加齢及び／又は光線加齢の兆候と闘うのに特に有効な方法、特に化粧的方法を提供する。
【００４３】
光線加齢の兆候は、紫外線への曝露による皮膚の内部分解（光線性加齢）に対応する。暦年加齢の兆候は、個体の内因性加齢による皮膚の内部分解に対応する。
【００４４】
１つの好ましい実施態様において、本発明の使用は、肌の色つやを改善すること、しわ及び／若しくは小じわの特徴を軽減及び／もしくは防止すること、皮膚の微細な凹凸を改善及び／若しくは軽減すること、並びに／又は皮膚の機械的性質を改善すること、並びに／又は機械的攻撃（擦り、圧力又は摩擦など）に対する皮膚の抵抗性を上昇させること、並びに／又は皮膚の修復を促進することを目的とする。
【００４５】
本発明の別の態様において、本発明の組成物又は組合せの使用は、皮膚の密度、その締まり及び／又は種々のコンパートメントの結合、特に真皮と表皮との結合を改善することを可能にする。
【００４６】
本発明はまた、しわ及び／若しくは小じわ、しわの寄った皮膚、皮膚の弾力性及び／又は張りの欠如、真皮の菲薄化、コラーゲン繊維の分解、たるんだ皮膚、菲薄化皮膚並びに／又は紫外線への曝露により引き起こされる皮膚の内部分解を、予防的又は治療的に処置するための、本発明の組成物又は組合せの使用に関する。
【００４７】
本発明はまた、良好な皮膚（特に表皮及び／又は真皮の）細胞再生（cell renewal）により、皮膚（特に表皮及び／又は真皮）の再生を刺激するための本発明の組成物又は組合せの使用に関する。
【００４８】
真皮表皮接合部に作用し、これを折り畳まれたままに維持し、こうして真皮と表皮の間の接触部の面積を増加させることを可能にして、これらの２つの組織間の交換を促進し、これらの結合を強化し、そして表皮の外観を改善することにより、本発明の組成物は、しわを減らしかつ／又は皮膚を引き締めることを可能にする。
【００４９】
本発明の組成物又は組合せは、脂質生成を修飾し、かつ皮膚脂質の完全性を強化することにより、表皮の脂質プロフィールを改善する効果を有しており、このため皮膚のバリア機能及び／又は皮膚の柔軟性を改良する効果を有する。
【００５０】
本発明の１つの特に好ましい目的は、脂質生成を修飾し、そして特にセラミドの合成の上昇を引き起こすことにより、表皮の脂質プロフィールを改善するための、本発明の組成物又は組合せの使用である。
【００５１】
本発明の別の好ましい目的は、ケラチン細胞及び／又は繊維芽細胞の増殖を上昇させるための、又はコラーゲン合成、特にプロコラーゲンＩ、コラーゲンVII並びにコラーゲンVI及び／又はXIIの合成を刺激するための、本発明の組成物又は組合せの使用である。
【００５２】
本発明の別の特に好ましい目的は、テネイシン及び／又はコラーゲンVIIの合成を上昇させるための、本発明の組成物又は組合せの使用である。
【００５３】
本発明で使用すべき、前記と同義の単糖類並びにアスコルビン酸及び類似体から選択される活性成分の量は、所望の美容効果又は治療効果に依存し、よって広範囲に変動しうる。当業者は、その一般的な知識に基づいて、適量を容易に決定することができる。
【００５４】
即ち、そして１つの好ましい実施態様により、本発明の組成物は、上記と同義の少なくとも１つの単糖を、組成物の総重量に対して０．００１〜３０重量％の間の量、特に組成物の総重量に対して０．１〜１０重量％の間、そして更に特に０．５〜６重量％の間の量で含む。１つの実施態様において、そして特に追加の化合物がアスコルビン酸であるとき、本発明の組成物は、上記と同義の少なくとも１つの単糖を、組成物の総重量に対して０．４〜３０重量％の間の量、特に組成物の総重量に対して０．４〜１０重量％の間、更に特に０．４〜６重量％の間の量で含む。
【００５５】
１つの好ましい実施態様により、本発明の組成物は、ビタミンＣ及び／又は少なくとも１つのその類似体を、組成物の総重量に対して０．００１〜３０重量％の間の量、特に組成物の総重量に対して０．１〜１０重量％の間、そして更に特に０．５〜６重量％の間の量で含む。
【００５６】
本発明の組成物は、特に無菌溶液の形で、皮膚又はその外皮への局所投与、経口投与又は皮膚注射に適している。
【００５７】
好ましくは本発明の局所投与は、クリーム、ゲル、ローション、ミルク、オイル、軟膏、ワックス、ムース、ペースト、セラム、ポマード又はシャンプーの形である。
【００５８】
好ましくはまた、本発明の経口投与は、ゲルカプセル、錠剤又は丸剤の形である。
【００５９】
本発明の単糖及びアスコルビン酸又はその類似体は、更に特に、本発明の組成物中に活性物質（又は活性成分）として、特に唯一の活性物質として存在する。
【００６０】
本発明において、「活性物質」及び「活性成分」という用語は、更に具体的には、個体、特にヒトに投与されると、特に本発明の組成物中に存在する別の化合物の生物学的又は機械的作用を改善することなく、体、特に皮膚又はその外皮に対して直接の生物学的役割を演じる化合物を意味する。
【００６１】
一般に、前記と同義の組成物の活性成分が包含される媒体は、生理学的に許容しうる媒体、特に化粧品として又は医薬的に許容しうる担体であり、そして無水であっても水性であってもよい。よってこれは、少なくとも１つの水相及び／又は少なくとも１つの脂肪相を含んでよい。
【００６２】
本発明の化合物が使用される生理学的に許容しうる媒体、及びまたその成分、それらの量、組成物のガレヌス型、その調製のモード、及びその投与のモードは、当業者であれば、その一般的知識に基づいて、所望のタイプの組成物の関数として選択することができる。
【００６３】
組成物が局所投与用の組成物であるとき、これは有利には、水溶液又は水性アルコール溶液、水中油型（Ｏ／Ｗ）若しくは油中水型（Ｗ／Ｏ）エマルション、又は多成分エマルション（３成分：Ｗ／Ｏ／Ｗ又はＯ／Ｗ／Ｏ）、ナノエマルション、特にＯ／Ｗナノエマルション（ここで液滴のサイズは１００nm未満である）、水性ゲル、あるいは球状体を用いた水相中の脂肪相の分散液［これらの球状体は、ナノスフェア及びナノカプセルのようなポリマーナノ粒子、又は例えば、イオン型及び／又は非イオン型の脂質小胞（リポソーム、ニオソーム又はオレオソーム（FR 2,709,666及びFR 2,725,369に記載されているような））である］の形であってよい。
【００６４】
これらの組成物は常法により調製する。
【００６５】
更に、本発明で使用できる組成物は、大体が液体であって、白色若しくは着色クリーム、ポマード、ミルク、ローション、セラム、ペースト又はムースの外観を有してよい。これらは場合により、エアロゾルの形で皮膚に適用してもよい。これらはまた、固体型、例えば、スティック型であってもよい。
【００６６】
毛髪又は頭皮への局所適用のために、本組成物は、水溶液、アルコール溶液又は水性アルコール溶液の形でも；クリーム、ゲル、エマルション又はムースの形でも；加圧噴射剤をも含むエアロゾルの形であってもよい。
【００６７】
組成物が水性型、特に水性分散液、水性エマルション又は水溶液の形であるとき、これは、水、フローラルウォーター及び／又はミネラルウォーターを含んでよい水相を含んでよい。
【００６８】
組成物がエマルションであるとき、脂肪相の比率は、組成物の総重量に対して約５〜８０重量％、そして好ましくは約２〜５０重量％の範囲であってよい。エマルション型の組成物で使用されるオイル、ワックス、乳化剤及び共乳化剤は、化粧品で従来から使用されているものから選択される。乳化剤及び共乳化剤は、組成物中に、組成物の総重量に対して０．３〜３０重量％、そして好ましくは０．５〜２０重量％の範囲の比率で存在する。エマルションはまた、脂質小胞を含んでよい。
【００６９】
組成物が油性溶液又はゲルであるとき、この脂肪相は組成物の総重量の９０％を超えても良い。
【００７０】
油相はまた、本明細書に後述のように、一般的な任意の脂溶性又は脂質分散性添加剤を含んでよい。
【００７１】
これは特に、ロウ、ペースト状化合物、脂肪アルコール又は脂肪酸のような脂肪性物質を含んでよい。油相は、少なくとも１つの油、更に特に少なくとも１つの化粧品用油を含有する。「油」という用語は、室温（２５℃）で液体である脂肪物質を意味する。
【００７２】
本発明の組成物に使用できる油として、以下の例が挙げられる：
−  動物由来の炭化水素ベースの油（ペルヒドロスクアレンなど）；
−  植物由来の炭化水素ベースの油（４〜１０個の炭素原子を含有する脂肪酸の液体トリグリセリド、例えば、ヘプタン酸若しくはオクタン酸トリグリセリド、又は例えば、ヒマワリ油、コーン油、大豆油、マロー油、ブドウ種子油、ゴマ油、ヘーゼルナッツ油、アンズ油、マカダミア油、アララ油、コエンドロ油、ヒマシ油、アボカド油、カプリル酸／カプリン酸トリグリセリド、例えば、Stearineries Dubois社から販売されているもの、又はDynamit Nobel社により商品名Miglyol 810、812及び818の下で販売されているもの、ホホバ油、シアバター油、及びカプリリルグリコールなど）；
−  合成エステル及びエーテル類、特に脂肪酸のもの、例えば、式：Ｒ１ＣＯＯＲ２及びＲ１ＯＲ２（ここで、Ｒ１は、８〜２９個の炭素原子を含有する脂肪酸又は脂肪アルコール残基を表し、そしてＲ２は、３〜３０個の炭素原子を含有する分岐又は非分岐の炭化水素ベースの鎖を表す）の油、例えば、Purcellin油、ステアリン酸２−オクチルドデシル、エルカ酸２−オクチルドデシル、イソステアリン酸イソステアリル；水酸化エステル類、例えば、乳酸イソステアリル、ヒドロキシステアリン酸オクチル、ヒドロキシステアリン酸オクチルドデシル、リンゴ酸ジイソステアリル又はクエン酸トリイソセチル；ヘプタン酸、オクタン酸又はデカン酸の脂肪族アルコール類；ポリオールエステル類、例えば、ジオクタン酸プロピレングリコール、ジヘプタン酸ネオペンチルグリコール及びジイソノナン酸ジエチレングリコール；並びにペンタエリトリトールエステル類、例えば、テトライソステアリン酸ペンタエリトリトール、又はサルコシン酸イソプロピルラウロイル（特にAjinomoto社により商品名Eldew SL 205の下で販売されている）；
−  鉱物又は合成由来の線状又は分岐炭化水素（揮発性若しくは不揮発性流動パラフィン、及びその誘導体、ワセリン、ポリデセン類、イソヘキサデカン、イソドデカン、水素化ポリイソブテン（Parleam油など）、又はｎ−ウンデカン（Ｃ１１）とｎ−トリデカン（Ｃ１３）との混合物（Cognis社により参照コードCetiol UTの下で販売されている）など）；
−  部分的に炭化水素ベースの及び／又はシリコーンベースのフッ素オイル、例えば、文献JP-A-2 295,912に記載されているもの；
−  シリコーン油、例えば、線状又は環状シリコーン鎖を有する、揮発性又は不揮発性ポリメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）（これらは室温で液体又はペースト状である）、特に揮発性シリコーン油、特にシクロポリジメチルシロキサン（シクロメチコン類）（シクロヘキサジメチルシロキサン及びシクロペンタジメチルシロキサンなど）；アルキル、アルコキシ又はフェニル基を含むポリジメチルシロキサン類（これらはペンダントであるか又はシリコーン鎖の末端にあり、これらの基は２〜２４個の炭素原子を含む）；フェニルシリコーン類、例えば、フェニルトリメチコン類、フェニルジメチコン類、フェニルトリメチルシロキシジフェニルシロキサン類、ジフェニルジメチコン類、ジフェニルメチルジフェニルトリシロキサン類又は２−フェニルエチルトリメチルシロキシケイ酸塩、及びポリメチルフェニルシロキサン類；あるいは
−  これらの混合物。
【００７３】
上述の油のリストにおいて、「炭化水素ベースの油」という用語は、主として炭素原子及び水素原子を含み、そして場合によってエステル、エーテル、フルオロ、カルボン酸及び／又はアルコール基を含んでよい任意の油を意味する。
【００７４】
油相中に存在してもよい他の脂肪物質は、例えば、８〜３０個の炭素原子を含有する脂肪酸、例えば、ステアリン酸、ラウリン酸、パルミチン酸及びオレイン酸；ロウ、例えば、ラノリンロウ、蜜ロウ、カルナウバロウ又はカンデリラロウ、パラフィンロウ、亜炭ワックス又はミクロクリスタリンワックス、セレシン若しくはオゾケライト、及び合成ロウ、例えば、ポリエチレンロウ及びFischer-Tropschロウ；シリコーン樹脂（トリフルオロメチル−Ｃ１〜４−アルキルジメチコン及びトリフルオロプロピルジメチコンなど）；並びにシリコーンエラストマー、例えば、Shin-Etsu社により商品名KSGの下で販売されている製品、Dow Corning社により商品名Trefil、BY29若しくはEPSXの下で販売されている製品、又はGrant Industries社により商品名Gransilの下で販売されている製品である。
【００７５】
これらの脂肪物質は、当業者により種々のやり方で所望の性質（例えば、粘稠度又はテクスチャーに関して）を有する組成物を調製するために選択される。
【００７６】
エマルションは一般に、単独で又は混合物として使用される、両親媒性、陰イオン性、陽イオン性及び非イオン性乳化剤から選択される少なくとも１つの乳化剤を含有し、そして場合により共乳化剤を含有する。乳化剤は、得られるエマルション（Ｗ／Ｏ又はＯ／Ｗ）により、適切なやり方で選択される。乳化剤及び共乳化剤は一般に、組成物の総重量に対して０．３％〜３０重量％、そして好ましくは０．５％〜２０重量％の範囲の比率で組成物中に存在する。
【００７７】
Ｗ／Ｏエマルションについて、挙げられる乳化剤の例には、ジメチコンコポリオール類（Dow Corning社により商品名DC5225Cの下で販売されているシクロメチコンとジメチコンコポリオールとの混合物など）、及びアルキルジメチコンコポリオール類（Dow Corning社により商品名Dow Corning 5200 Formulation Aidの下で販売されているラウリルジメチコンコポリオール、及びGoldschmidt社により商品名Abil EM90（登録商標）の下で販売されているセチルジメチコンコポリオールなど）が含まれる。少なくとも１つのオキシアルキレン基を含む架橋弾性固体オルガノポリシロキサン［特許US-A-5,412,004の実施例３、４及び８、及び特許US-A-5,811,487の実施例の手順にしたがって得られるもの、特に特許US-A-5,412,004の実施例３（合成例）の生成物（Shin-Etsu社により参照コードKSG21の下で販売されている製品など）など］もまた、Ｗ／Ｏエマルション用の界面活性物質として使用することができる。
【００７８】
Ｏ／Ｗエマルションについて、挙げられる乳化剤の例には、非イオン性乳化剤、例えば、グリセロールのオキシアルキレン化（更に特にポリオキシエチレン化）脂肪酸エステル；ソルビタンのオキシアルキレン化脂肪酸エステル；オキシアルキレン化（オキシエチレン化及び／又はオキシプロピレン化）脂肪酸エステル；オキシアルキレン化（オキシエチレン化及び／又はオキシプロピレン化）脂肪アルコールエーテル；ステアリン酸スクロースのような糖エステル；及びこれらの混合物（ステアリン酸グリセリルとステアリン酸ＰＥＧ−４０との混合物など）が含まれる。
【００７９】
これらの組成物はまた、粒子（例えば、特許FR 2,760,641に記載されたポリマー粒子）、又は特許出願FR 2,853,543及びFR 2,819,175に記載されるような、架橋若しくは非架橋両親媒性ポリマーを用いて安定化されるＯ／Ｗエマルションであってもよい。
【００８０】
既知の方法で、化粧品組成物はまた、化粧品で一般的な補助剤、例えば、親水性若しくは親油性ゲル化剤、親水性若しくは親油性活性物質、保存剤、抗酸化剤、溶媒、香料、充填剤、臭気吸収剤及び色素などを含有してもよい。これらの種々の補助剤の量は、化粧品分野で従来から使用されるものであり、例えば、組成物の総重量の約０．０１％〜１０％の範囲である。その性質に応じて、これらの補助剤は、脂肪相、水相及び／又は脂質球状体中に導入することができる。
【００８１】
本発明に使用できる溶媒として、低級アルコール、例えば、エタノール、イソプロパノール、ジプロピレングリコール、ブチレングリコール及びプロピレングリコールが挙げられる。
【００８２】
本発明に使用できる親水性ゲル化剤として、言及できる非限定例には、カルボキシビニルポリマー類（Carbomer（登録商標））、アクリルコポリマー類（アクリレート／アルキルアクリレートコポリマーなど）、ポリアクリルアミド類、ヒドロキシプロピルセルロースのような多糖類、天然ゴム及び粘土が含まれ、そして言及できる親油性ゲル化剤には、ベントンのような改質粘土、脂肪酸の金属塩、例えば、ステアリン酸アルミニウム、疎水性シリカ、エチルセルロース及びポリエチレンが含まれる。
【００８３】
単糖が経口投与されるとき、これを含有する組成物は、有利にはゲルカプセル剤、錠剤又は丸剤の形であってよい。単糖が皮膚注射により投与されるとき、これを含有する組成物は、特に無菌溶液の形であってよい。
【００８４】
本発明の組成物は、他の親水性又は親油性活性物質を含有してもよい。これらの活性物質は特に、抗酸化剤、皮膚弛緩性若しくは皮膚脱収縮性物質、抗加齢剤、抗糖化剤、真皮若しくは表皮の高分子の合成を刺激するための、かつ／又はこれらの分解を防止するための物質、繊維芽細胞若しくはケラチン細胞の増殖及び／又はケラチン細胞の分化を刺激するための物質、角質肥厚膜の成熟を促進するための物質、ＮＯシンターゼインヒビター、及び細胞のエネルギー代謝を刺激するための物質から選択される。これらの活性物質のリストが例証を目的として後述されるが、これらは決して限定と考えてはならない。
【００８５】
抗加齢剤：
加齢の兆候、特に皮膚の加齢と闘うことが知られている活性物質の中で、特に以下が挙げられる：
ビタミンＢ３、補酵素Ｑ１０（又はユビキノン）、ビタミンＢ９、ビタミンＥ、リン酸塩誘導体のようなビタミンＥ誘導体、例えば、Showa Denko社により販売されているTPNA（登録商標）、レスベラトロール又はその誘導体、例えば、Estee Lauder社により販売されているResveratrate（登録商標）、レチノール又はその誘導体、及びこれらの混合物。
【００８６】
抗糖化剤：
「抗糖化剤」という用語は、皮膚タンパク質、特にコラーゲンのような皮膚タンパク質の糖化を防止及び／又は軽減する化合物を意味する。
【００８７】
特に挙げられる抗糖化剤には、ツツジ科の植物エキス［Vaccinium angustifolium又はVaccinium myrtillusエキス、例えば、Cosmetochem社により商品名Blueberry Herbasol Extract PGの下で販売されている製品など］、エルゴチオネイン及びその誘導体、ヒドロキシスチルベン類及びその誘導体［レスベラトロール及び３，３’，５，５’−テトラヒドロキシスチルベン（これらの抗糖化剤は、それぞれ特許出願FR 2,802,425、FR 2,810,548、FR 2,796,278及びFR 2,802,420に記載されている）など］、ジヒドロキシスチルベン類及びその誘導体、アルギニン及びリジンのポリペプチド類［Solabia社により商品名Amadorine（登録商標）の下で販売されている製品など］、塩酸カルシニン（Exsymolにより商品名Alistin（登録商標）の下で販売されている）、Helianthus annuusエキス、例えば、SilabからのAntiglyskin（登録商標）、ワインエキス［Givaudan社により商品名Vin blanc deshydrate 2Fの下で販売されているマルトデキストリン支持体上の粉末白ワインエキスなど］、チオクト酸（又はα−リポ酸）、クマコケモモ（bearberry）と海産グリコーゲン（marine glycogen）エキスの混合物、例えば、Laboratoires SerobiologiquesからのAglycal LS 8777（登録商標）、及び紅茶エキス、例えば、SedermaからのKombuchka（登録商標）、並びにこれらの混合物が含まれる。
【００８８】
挙げ得る好ましい抗糖化剤には、Vaccinium myrtillusエキス及び紅茶エキスが含まれる。
【００８９】
真皮及び／又は表皮の高分子の合成を刺激するための、かつ／あるいはそれらの分解を防止するための物質
真皮の高分子を刺激するか又はそれらの分解を防止するための活性物質の中で、以下のものが挙げられる：
−  コラーゲン合成に作用するもの、例えば、Centella asiaticaエキス、アジアチコシド類及びこれらの誘導体；合成ペプチド［イアミン（iamin）、Sederma社により販売されているバイオペプチドCL又はパルミトイルオリゴペプチドなど］；植物から抽出されるペプチド［Coletica社により商品名Phytokine（登録商標）の下で販売されているダイズ加水分解物など］；米ペプチド［SilabからのNutripeptide（登録商標）など］；マンヌロン酸メチルシラノール［Exsymolにより販売されているAlgisium C（登録商標）など］；植物ホルモン（オーキシン及びリグナンなど）；葉酸；及びMedicago sativa（アルファルファ）エキス［Silabにより商品名Vitanol（登録商標）の下で販売されている製品など］；ヘーゼルナッツのペプチドエキス［Solabia社により商品名Nuteline C（登録商標）の下で販売されている製品など］；及びアルギニン；あるいは
−  コラーゲン分解の阻害に作用するもの、特にメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）、更に特に、ＭＭＰ１、２、３及び９などの阻害に作用する物質。次のものを挙げることができる：レチノイド及び誘導体、Medicago sativaエキス［SilabからのVitanol（登録商標）など］、Atrium Biotechnologiesにより商品名Lanablue（登録商標）の下で販売されているAphanizomenon flos-aquae（藍藻類（Cyanophyceae））のエキス、オリゴペプチド及びリポペプチド、リポアミノ酸、Coletica社により商品名Collalift（登録商標）の下で販売されているモルトエキス；ブルーベリー又はローズマリーのエキス；リコピン；イソフラボン類、これらの誘導体又はこれらを含有する植物エキス、特にダイズエキス（例えば、Ichimaru Pharcos社により商品名Flavosterone SB（登録商標）の下で販売されている）、レッドクローバーエキス、亜麻エキス又は葛根エキス；ライチエキス；SEPPICにより商品名Sepilift DPHP（登録商標）の下で販売されているジパルミトイルヒドロキシプロリン（Dipalmitoyl Hydroxyproline）；Baccharis genistelloides又はSilabにより販売されているBaccharine、モリンガエキス［CognisからのArganyl LS 9781（登録商標）など］；特許出願FR-A-2,812,544に記載のシソ科（Flacksmann社からのSalvia officinalis）からのセージエキス、rhododendronエキス、ブルーベリーエキス、及びVaccinium myrtillusエキス（特許出願FR-A-2,814,950に記載のものなど）；あるいは
−  エラスチン類（エラスチン及びフィブリリン）に属する分子の合成に作用するもの、例えば：レチノール及び誘導体、特にパルミチン酸レチニル；LSN社により商品名Cytovitin（登録商標）の下で販売されているSaccharomyces cerevisiaeエキス；及びSecma社により商品名Kelpadelie（登録商標）の下で販売されている藻類Macrocystis pyriferaエキス；ヘーゼルナッツのペプチドエキス［Solabia社により商品名Nuteline C（登録商標）の下で販売されている製品など］；あるいは
−  エラスチン分解の阻害に作用するもの、例えば、LSN社により商品名Parelastyl（登録商標）の下で販売されているPisum sativumの種子のペプチドエキス；ヘパリン類似物質；及び特許出願WO 01/94381に記載のＮ−アシルアミノアミド化合物［例えば、｛２−［アセチル（３−トリフルオロメチルフェニル）アミノ]−３−メチルブチリルアミノ｝酢酸（またＮ−［Ｎ−アセチル−Ｎ’−（３−トリフルオロメチル）フェニルバリル］グリシン、又はＮ−アセチル−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］バリルグリシン若しくはアセチルトリフルオロメチルフェニルバリルグリシンとしても知られている）又はＣ１−Ｃ６アルコールとのこのエステルなど］；米ペプチドエキス［PentapharmからのColhibin（登録商標）など］、又はPhyllanthus emblicaエキス［RonaからのEmblica（登録商標）など］；あるいは
−  グリコサミノグリカンの合成に作用するもの、例えば、Brooks社により商品名Biomin Yoghurt（登録商標）の下で販売されている、Lactobacillus vulgarisによる発酵乳製品；Alban Mueller社により商品名HSP3（登録商標）の下で販売されている褐藻Padina pavonicaエキス；特にSilab社から商品名Firmalift（登録商標）の下で、又はLSN社から商品名Cytovitin（登録商標）の下で入手可能なSaccharomyces cerevisiaeエキス；Laminaria ochroleucaエキス［SecmaからのLaminaine（登録商標）など］； Lucas MeyerからのMamakuエッセンス、及びCressエキス（SilabからのOdraline（登録商標））；あるいは
−  フィブロネクチンの合成に作用するもの、例えば、Seporga社により商品名GP4G（登録商標）の下で販売されている動物プランクトンのSalinaエキス；特にAlban Mueller社から商品名Drieline（登録商標）の下で入手可能な酵母エキス；及びSederma社から商品名Matrixyl（登録商標）の下で販売されているパルミトイルペンタペプチド。
【００９０】
フィラグリン及びケラチンのような表皮高分子を刺激するための活性物質の中で、特にSilab社により商品名Structurine（登録商標）の下で販売されているルピナス（lupin）エキス；Gattefosse社により商品名Gatuline（登録商標）RCの下で販売されているFagus sylvaticaブナの花芽のエキス；及びSeporga社により商品名GP4G（登録商標）の下で販売されている動物プランクトンSalinaエキス；Procyteからの銅トリペプチド；Voandzeia subterraneaのペプチドエキス［Laboratoires Serobiologiques社により商品名Filladyn LS 9397（登録商標）の下で販売されている製品など］を挙げることができる。
【００９１】
好ましくは、グリコサミノグリカンの合成を刺激する物質、エラスチン分解を阻害する物質、フィブロネクチン合成を刺激する物質、表皮高分子の合成を刺激する物質、及びこれらの混合物から選択される、真皮及び／又は表皮高分子の合成を刺激するか、かつ／又はこれらの分解を防止する活性物質が用いられよう。
【００９２】
更に優先的には、褐藻Padina pavonicaエキス、Saccharomyces cerevisiaeエキス、Laminaria ochroleucaエキス、Mamakuエッセンス、及びカラシナエキス、並びにこれらの混合物から選択される、グリコサミノグリカンの合成を刺激する活性物質が使用されよう。
【００９３】
真皮及び／又は表皮高分子の合成を刺激するための、かつ／又はこれらの分解を防止するための好ましい物質として、次のものを挙げることができる：
合成ペプチド、例えば、イアミン、Sederma社により販売されているバイオプチドCL又はパルミトイルオリゴペプチド；植物から抽出されたペプチド［Coletica社により商品名Phytokine（登録商標）の下で販売されているダイズ加水分解物など］；米ペプチド［SilabからのNutripeptide（登録商標）など］；マンヌロン酸メチルシラノール［Exsymolにより販売されているAlgisium C（登録商標）など］；葉酸； Medicago sativa（アルファルファ）エキス［Silabにより商品名Vitanol（登録商標）の下で販売されている製品など］；ヘーゼルナッツのペプチドエキス［Solabia社により商品名Nuteline C（登録商標）の下で販売されている製品など］；アルギニン；Atrium Biotechnologiesにより商品名Lanablue（登録商標）の下で販売されているAphanizomenon flos-aquae）（藍藻類）エキス、Coletica社により商品名Collalift（登録商標）の下で販売されているモルトエキス、リコピン；ライチエキス；モリンガエキス［CognisからのArganyl LS 9781（登録商標）など］； Vaccinium myrtillusエキス（特許出願FR-A-2,814,950に記載のものなど）；レチノール及びその誘導体、特にパルミチン酸レチニル；LSN社により商品名Cytovitin（登録商標）の下で販売されているSaccharomyces cerevisiaeエキス；ヘーゼルナッツのペプチドエキス［Solabia社により商品名Nuteline C（登録商標）の下で販売されている製品など］；｛２−［アセチル（３−トリフルオロメチルフェニル）アミノ］−３−メチルブチリルアミノ｝酢酸（またＮ−［Ｎ−アセチル−Ｎ’−（３−トリフルオロメチル）フェニルバリル］グリシン、又はＮ−アセチル−Ｎ−［３−（トリフルオロメチル）フェニル］バリルグリシン若しくはアセチルトリフルオロメチルフェニルバリルグリシンとしても知られている）又はＣ１−Ｃ６アルコールとのこのエステル；米ペプチドエキス［PentapharmからのColhibin（登録商標）など］、又はPhyllanthus emblicaエキス［RonaからのEmblica（登録商標）など］；Alban Mueller社により商品名HSP3（登録商標）の下で販売されている褐藻Padina pavonicaエキス；特にSilab社から商品名Firmalift（登録商標）の下で、又はLSN社から商品名Cytovitin（登録商標）の下で入手可能なSaccharomyces cerevisiaeエキス；Laminaria ochroleucaエキス［SecmaからのLaminaine（登録商標）など］；Lucas MeyerからのMamakuのエッセンス、Silab社により商品名Structurine（登録商標）の下で販売されているルピナスエキス；Gattefosse社により商品名Gatuline（登録商標）RCの下で販売されているFagus sylvaticaブナの花芽のエキス。
【００９４】
繊維芽細胞若しくはケラチン細胞の増殖及び／又はケラチン細胞の分化を刺激する物質
本発明の組成物に使用できる繊維芽細胞の増殖を刺激する物質は、例えば、植物タンパク質又はポリペプチド、特にダイズから抽出されたもの（例えば、LSN社により商品名Eleseryl SH−VEG 8（登録商標）の下で販売されているか又はSilab社により商品名Raffermine（登録商標）の下で販売されているダイズエキス）；加水分解されたダイズタンパク質のエキス［SilabからのRidulisse（登録商標）など］；並びにジベレリン及びサイトカイニンのような植物ホルモン；ヘーゼルナッツのペプチドエキス［Solabia社から商品名Nuteline C（登録商標）の下で販売されている製品など］から選択することができる。
【００９５】
好ましくは、ケラチン細胞の増殖及び／又は分化を促進する物質が用いられよう。
【００９６】
本発明の組成物において使用できるケラチン細胞の増殖を刺激する物質には、特にフロログルシノール、Hydrangea macrophyllaの葉のエキス、例えば、Ichimaru PharcosからのAmacha Liquid E（登録商標）、CLRからのStimoderm（登録商標）のような酵母エキス；Larrea divaricataエキス［SedermaからのCapislow（登録商標）など］、パパイア、オリーブの葉及びレモンのエキスの混合物［VincienceからのXyleine（登録商標）など］、Ichimaru PharcosからのAmacha Liquid E（登録商標）のようなアジサイの葉のエキス、レチノール及びそのエステル（パルミチン酸レチニルを包含する）、Gattefosseにより販売されているナッツケーキエキス、並びにSolanum tuberosumエキス［Sedermaにより販売されているDermolectine（登録商標）など］が含まれる。
【００９７】
ケラチン細胞の分化を刺激する物質の中には、例えば、カルシウムのような鉱物；ルピナスのペプチドエキス［Silab社により商品名Structurine（登録商標）の下で販売されている製品など］；β−シトステリル硫酸ナトリウム［Seporga社により商品名Phytocohesine（登録商標）の下で販売されている製品など］；及びトウモロコシの水溶性エキス［Solabia社により商品名Phytovityl（登録商標）の下で販売されている製品など］；Voandzeia substerraneaのペプチドエキス［Laboratoires Serobiologiques社により商品名Filladyn LS 9397（登録商標）の下で販売されている製品など］；及びセコイソラリシレシノール（secoisolariciresinol）のようなリグナン類、並びにレチノール及びそのエステル（パルミチン酸レチニルを包含する）がある。
【００９８】
ケラチン細胞の増殖及び／又は分化を刺激する物質として、エストラジオール及び同族体のようなエストロゲン類又はサイトカイン類も挙げることができる。
【００９９】
繊維芽細胞若しくはケラチン細胞の増殖、及び／又はケラチン細胞の分化を刺激するための好ましい活性物質として、植物タンパク質又はポリペプチド、特にダイズから抽出されたもの（例えば、LSN社により商品名Eleseryl SH−VEG 8（登録商標）の下で販売されているか、又はSilab社により商品名Raffermine（登録商標）の下で販売されているダイズエキス）；加水分解されたダイズタンパク質のエキス［SilabからのRidulisse（登録商標）など］；ヘーゼルナッツのペプチドエキス［Solabia社により商品名Nuteline C（登録商標）の下で販売されている製品など］；フロログルシノール、酵母エキス［CLRからのStimoderm（登録商標）など］；ルピナスのペプチドエキス［Silab社により商品名Structurine（登録商標）の下で販売されている製品など］；水溶性トウモロコシエキス［Solabia社により商品名Phytovityl（登録商標）の下で販売されている製品など］；Voandzeia subterraneaのペプチドエキス［Laboratoires Serobiologiques社により商品名Filladyn LS 9397（登録商標）の下で販売されている製品など］；レチノール及びそのエステル（パルミチン酸レチニルを包含する）を挙げることができる。
【０１００】
角質肥厚膜の成熟を促進する物質
角質肥厚膜（これは、加齢によって損なわれ、トランスグルタミナーゼ活性の低下を招く）の成熟に関与する物質を、本発明の組成物に使用してもよい。挙げることができる例には、尿素及びその誘導体、そして特にNational StarchからのHydrovance（登録商標）及びロレアル（L'Oreal）の特許出願FR 2,877,220に挙げられている他の活性物質が含まれる。
【０１０１】
ＮＯシンターゼ阻害剤
ＮＯシンターゼに対して阻害作用を有する物質は、ＰＣＯ（プロシアニドールオリゴマー）；特にEuromed社により商品名「Leucocyanidines de raisins extra」の下で、又はIndena社により商品名Leucoselect（登録商標）の下で、又は最後にHansen社により商品名「Extrait de marc de raisin」の下で販売されているVitis vinifera種の植物エキス；好ましくはオリーブの木の葉から得られ、そして特にVinyals社からドライエキス状で、又はBiologia & Technologia社により商品名Eurol（登録商標）BTの下で販売されているOlea europaea種の植物エキス；及びGingko biloba種の植物エキス、好ましくはBeaufour社により商品名「Ginkgo biloba extrait standard」の下で販売されているこの植物の水性ドライエキス、並びにこれらの混合物から選択することができる。
【０１０２】
細胞のエネルギー代謝を刺激する物質
細胞のエネルギー代謝を刺激する活性物質は、例えば、ビオチン、Saccharomyces cerevisiaeエキス［SedermaからのPhosphovital（登録商標）など］、ピロリドンカルボン酸のナトリウム、マンガン、亜鉛及びマグネシウム塩の混合物、例えば、SolabiaからのPhysiogenyl（登録商標）、グルコン酸亜鉛、銅及びマグネシウム塩の混合物［SEPPICからのSepitonic M3（登録商標）など］、及びこれらの混合物；Saccharomyces cerevisiaeに由来するβ−グルカン［Mibelle AG Biochemistry社により販売されている製品など］から選択することができる。
【０１０３】
本発明はまた、前記と同義の少なくとも１つの組成物を皮膚に適用することからなる少なくとも１つの工程を含む、皮膚又はその外皮（毛髪、睫毛、爪など）の加齢の兆候を軽減又は防止するための化粧的皮膚処置法に関する。
【０１０４】
本発明の方法は、更に具体的には、その皮膚が前述の皮膚加齢の兆候の少なくとも１つを示す個体の皮膚に、前記と同義の少なくとも１つの組成物を適用することからなる少なくとも１つの工程を含む。
【０１０５】
更に特に、本発明は、老化した、しわのある、ゆるんだ、かつ／又はたるんだ皮膚又は皮膚の部位を有する個体の皮膚に、あるいは弾力性及び／又は堅さ及び／又は張りの欠如を示す体の部位に、前記と同義の組成物を適用することからなる少なくとも１つの工程を含む。
【０１０６】
本発明の組成物は、処置すべき皮膚又はその外皮の一部に、特に顔、体、首、手、毛髪又は頭髪に、好ましくは毎日又は１日数回適用することができる。適用は、例えば、望まれる効果に応じて可変期間（一般的には３〜６週間）毎日繰り返されるが、連続的に延長するか又は継続してもよい。
【０１０７】
代わりに、本発明の組成物は、場合により充填物と合わせて注射によって投与される。具体的には、しわ及び／又は軟組織の容量の消失と闘うために採用される解決策の１つは、充填物（又は充填剤）の使用である。この充填は、ポリアクリルアミドゲル又はポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）粒子のような、再吸収が不可能な生成物を使用することにより達成される。しかしこれらの化合物は、炎症又は過敏症のようなタイプの不耐性反応を引き起こすことがある。
【０１０８】
タンパク質、脂肪、コラーゲン又はヒアルロン酸のような、再吸収可能な成分の使用が好ましい。しかし、これらの化合物は体内で比較的急速に分解されるため、その効力は低下する。これを克服するために、これらの成分の多少費用のかかる架橋を実行しなければならない。現在、薬剤又は医療器具において使用されるヒアルロン酸は、ヒアルロン酸ナトリウムゲルの形である。本発明の単糖又はこれを含有する組成物はまた、メソセラピーにより適用してもよい。メソセラピーは、活性物質、例えば、微量栄養物質、ビタミン類及び／又はヒアルロン酸の表皮内及び／又は真皮内及び／又は皮下注射を介する処置法である。本組成物は、この手法により注射を介して多数の小滴の形で、表皮、真皮表皮接合部及び／又は真皮に、特に皮下層形成を実行するために投与される。メソセラピー法は、特にJacques L Cozにより刊行物"Traite de mesotherapie"（Massonにより発行、2004）に記載されている。顔に行われるメソセラピーはまた、メソリフト（mesolift）又はメソグロー（mesoglow）と呼ばれる。
【０１０９】
よって本発明の別の主題は、前記と同義の少なくとも１つの単糖の有効量を、少なくとも１つのアスコルビン酸類似体又はアスコルビン酸自体の有効量と合わせて含む器具、特に医療器具であってよい。この器具は、表皮内及び／又は真皮内及び／又は皮下注射に適したものであってよい。上記と同義の活性物質の組合せは、無菌媒体に溶解される。前記器具は、少なくとも１つの他の化合物、例えば、少なくとも１つの再吸収可能な又は再吸収不可能な生成物（上述のものなど）を含んでもよいが、これは場合により架橋されている。
【０１１０】
前記器具は、例えば、針の付いたシリンジ又は針のない注射器具［メソセラピーとして知られているケア法で使用されるものなど］であってよい。器具を含むキットもまた企図してよく、前記キットは、器具（特にシリンジ又は注射器具）、並びに上記と同義の活性物質、単糖、及びアスコルビン酸又は類似体の少なくとも１つの組合せを含む。前記キットはまた針を含んでよい。前記器具は、即時使用型、即ち、プレフィルドであっても、又は使用前に充填する必要があってもよい。後者の場合、組成物又は別の器具（バイアルなど）は、該活性物質、単糖、及びアスコルビン酸又は類似体の組合せを、場合により少なくとも１つの他の活性化合物、例えば、少なくとも１つの再吸収可能な又は再吸収不可能な物質（上述の充填物など；これは場合により架橋されている）と合わせて含む。
【０１１１】
本発明の組み合わせの注入は、生理学的に許容しうる支持体中に少なくとも１つの上述のような他の活性物質を含む、別の化粧品組成物又は医薬組成物、好ましくは皮膚用組成物の、皮膚又は外皮への適用と同時に、又はその前若しくは後に実行することができる。
【０１１２】
別の態様において本発明はまた、ｉ）少なくとも１つのコンパートメントを区切る容器（該容器は閉鎖部材により閉じられる）；及びii）該コンパートメント内に入れられた、前記と同義の組成物を含む、化粧品アセンブリーに関する。
【０１１３】
この容器は任意の適切な型であってよい。これは特に、瓶、管、ジャー、ケース、カン、サシェ、又は箱の形であってよい。閉鎖部材は、取り外し可能なストッパー、フタ、カバー、切り取りストリップ又はキャップの形（特に容器に固定された本体と本体に連結したキャップとを含むタイプ）であってよい。これはまた、容器の選択的閉鎖を確実にする部材の形（特に、ポンプ、弁又はクラッパ）の形であってもよい。
【０１１４】
この容器は、アプリケータと組合せてもよい。アプリケータは、例えば特許FR 2,722,380に記載されたような細いブラシの形であってよい。生成物は、直接容器内に、又は間接的に入れられる。一例として、生成物は、特にワイプ若しくはパッドの形で含浸支持体上に配置し、箱又はサシェ中に（個別に又は複数で）配置することができる。生成物を組み込んだこのような支持体は、例えば、特許出願WO 01/03538に記載されている。
【０１１５】
閉鎖部材は、ネジにより容器に連結してもよい。
【０１１６】
あるいは、閉鎖部材と容器との間の連結は、ネジ以外の方法、特に差し込み機構を介して、クリック固定、つかみ、溶接、ボンディング又は磁気引力により行われる。「クリック固定」という用語は、詳細には、特に閉鎖部材の一部の弾性変形による材料のビード又はコードの交差と、これに続く、ビード又はコードの交差後の弾性による拘束のない位置への該一部の戻りとを伴う、任意のシステムを意味する。
【０１１７】
この容器は少なくとも一部は、ポリプロピレン又はポリエチレンのような熱可塑性材料から作ることができる。
【０１１８】
あるいは、この容器は、非熱可塑性材料、特にガラス又は金属（又は合金）から作ることができる。
【０１１９】
この容器は、特に管又は管瓶の形の、剛性の又は変形性の壁を有してもよい。この容器は、組成物の分配を開始又は促進するための手段を含んでよい。一例として、この容器は、容器内の正の圧力（この正の圧力は、容器の壁の弾性（又は非弾性）絞り出しにより生じる）に応じて、組成物を排出させるように、変形性の壁を有してもよい。
【０１２０】
前述の特許又は特許出願の内容は、引用例として本特許出願に取り込まれる。
【０１２１】
１つの特定の態様において、本発明は、以下：
−  アスコルビン酸、その類似体及びこれらの混合物から選択される、少なくとも１つの化合物を含む組成物Ａ、
−  組成物Ａとは別に調整された、マンノース、ラムノース及びこれらの混合物から選択される、少なくとも１つの単糖を含む組成物Ｂ、
を含む化粧品アセンブリーに関する。
【０１２２】
最後に、本発明は、皮膚及び／又はその外皮への組成物Ａの投与（特に局所適用）の少なくとも１つの工程と、皮膚及び／又はその外皮への組成物Ｂの投与（特に局所適用）の少なくとも１つの工程とを含む、化粧的又は皮膚科学的処置法に関する。
【０１２３】
本発明の組成物Ａの投与は、組成物Ｂの投与と同時に、又は前若しくは後に実行することができる。前に特定されたように、組成物Ａ及び組成物Ｂの投与は、局所的に、経口的に又は注射を介して実行することができる。
【０１２４】
１つの代替法では、先ず組成物Ａを投与し、次に組成物Ｂを投与する。別の代替法では、先ず組成物Ｂを投与し、次に組成物Ａを投与する。
【０１２５】
組成物Ａ及びＢは、２つの別の容器によるか又は単一の器具内でのいずれかで形成された、２つのコンパートメント内で別々に調整することができる。「単一の器具」という用語は、これを介して２つのコンパートメントが強固に取り付けられた器具を意味する。このような器具は、特に熱可塑性材料で作られた、２つのコンパートメントの一体成形法により得られる。これはまた、特にボンディング、溶接又は他のクリック固定により、任意の型のアセンブリーに由来してもよい。
【０１２６】
第１の実施態様において、２つの容器は互いに独立である。このような容器は種々の形であってよい。これらは特に、管、瓶又はドラムであってよい。
【０１２７】
容器の一方及び／又はもう一方には、ポンプを作動させ、そして少なくとも１つの供給オリフィスを介して組成物を供給するための押しボタンが搭載された、手動操作ポンプを取り付けてもよい。
【０１２８】
あるいは、容器の一方及び／又はもう一方は、特に噴射剤（特に噴射ガス）を用いて加圧される。この場合、容器には、生成物を供給するためのノズル又は他の拡散手段を取り付けた押しボタンが搭載された弁を装備していてもよい。
【０１２９】
噴射剤は、特に容器内をスライドできるピストンにより、又は中に組成物が入ったバッグの柔軟な壁により、供給又は分離すべき組成物との混合物であってもよい。
【０１３０】
この容器は、種々の材料（プラスチック、ガラス又は金属）で作ることができる。
【０１３１】
あるいはまた、２つのコンパートメントは、管内に形成された２つの同心性コンパートメントから形成され、そしてそこには空気の再取り込みのないポンプが搭載され、そして１つ又は２つの供給オリフィスを有する押しボタンが取り付けられる。管の中にはピストンが備えられており、そしてこれは、組成物が容器内から引き出される限り、ポンプの方向に上がる。このような供給モードは、特に練り歯磨きを供給するのに使用される。
【図面の簡単な説明】
【０１３２】
【図１】対照の存在下で、異なるマーカーの存在下で、成長因子欠損培地中で、及び異なる濃度のＬ−ラムノース（ｘ軸に記載）を添加しての、ケラチン細胞増殖について得られた結果を概略的に表す図である。ｙ軸に記載した値は、対照に対する測定した標識細胞の割合（％）に対応する。
【図２】対照の存在下で、異なるマーカーの存在下で、成長因子欠損培地中で、及び異なる濃度のＤ−マンノース（ｘ軸に記載）を添加しての、ケラチン細胞増殖について得られた結果を概略的に表す図である。ｙ軸に記載した値は、対照に対する測定した標識細胞の割合（％）に対応する。
【図３】左側の未処理の対照の全再構成皮膚と、右側の５mMのラムノースで処置した全再構成皮膚との間で測定した繊維芽細胞の数を表す図である。繊維芽細胞は処理の異なる段階で計数した。よって、各タイプの皮膚について、左側のカラムは４８時間の処理で得られた数に相当し、右側のカラムは１２０時間の処理で得られた数に相当する。
【図４】７μmの厚さの再構成皮膚の凍結切片の写真。蛍光レベルは、白黒写真上の白い点として現れる；これはＩ型プロコラーゲンの量に比例する。対照皮膚は左側であり、１mMのラムノースで処理した皮膚は右側である。
【図５】ラムノース及び／又はビタミンＣの存在下又は非存在下で、皮膚線維芽細胞によって合成されたコラーゲンVI及びXIIの量を表す図である。
【発明を実施するための形態】
【０１３３】
本発明は、以下の実施例で更に詳細に説明するが、これらは本発明の分野の非限定例として示すものである。
【０１３４】
実施例
実施例１
ケラチン細胞の増殖
プロトコール
ケラチン細胞（HaCat系）を２つの条件下で培養した：全成分培地（標準条件）及び成長因子欠損培地。この欠損培地は、細胞増殖の制御された遅延を引き起こす。そしてこれらの条件下では、培地の成長因子の欠損を補い、よって細胞増殖を再開させ、かつ／又は細胞代謝を刺激することができる化合物の作用を測定することが可能である。
【０１３５】
ケラチン細胞増殖は、同じ細胞集団で３つのマーカーを用いて測定した：ＤＮＡレベル（これは細胞の数に比例する）（Cyquantプローブ）、細胞膜の構成極性脂質のレベル（Nile redプローブ）及びミトコンドリア呼吸（これは一般的細胞代謝を反映する）（XTTプローブ）。
【０１３６】
結果
結果を図１及び２に示す。
【０１３７】
ケラチン細胞を、成長因子を枯渇させた培地で培養（これらの細胞増殖を有意に遅延させる培養条件）したとき、ラムノース及びマンノースの２つの単糖は、ケラチン細胞増殖を活性化できることを証明した。
【０１３８】
この２つの化合物による細胞増殖の活性化は、未処理対照と比較して細胞の数が多いことにより明らかになった。
【０１３９】
細胞数の増加は、単糖を１mMで評価するとき、有意に上昇した、ＤＮＡレベル（Cyquant）、極性脂質のレベル（Nile redシグナル）及びミトコンドリア呼吸（XTTシグナル）により現れた。５００μMで２つの分子はすでに効力を示した。よってラムノース及びマンノースの２つの単糖は、ケラチン細胞増殖に影響を及ぼした。これらは、成長因子を枯渇させた培地中で培養したケラチン細胞の増殖を活性化したが、このことは未処理対照と比較して細胞の数が多いことにより明らかになった。
【０１４０】
よってラムノース及びマンノースは、表皮再生を助長し、そして加齢にともなう表皮萎縮と闘うことにより、抗加齢効力を示した。
【０１４１】
実施例２
繊維芽細胞の増殖
プロトコール
皮膚コンパートメントに及ぼす抗加齢効力を測定するために、全再構成皮膚のモデルでラムノースを試験した。
【０１４２】
簡単に述べると、使用した再構成皮膚のモデルは、Bellらにより記載されたものである（Bell E. et al., The reconstitution of living skin, J. Invest. Dermatol., 1983, July; 81）：これは、多層化した表皮がその上に再構成された皮膚同等物を包含する；皮膚同等物は、酸可溶性コラーゲン、血清含有培地及び正常な成人繊維芽細胞から製造した。５日間の収縮後、この同等物にケラチン細胞を接種し、次に浸漬して６日間培養し、そして角質層を有する多層化及び分化した表皮を得るために、外に出して７日間培養した。
【０１４３】
再構成した皮膚は、５mMラムノースにより培地中で２日間及び５日間処理した；処理後、再構成皮膚をTissue Tekに入れることにより、クリオスタットを用いて７μm厚さの凍結切片を作成した。次に作成した切片は、ヨウ化プロピジウムで染色して、繊維芽細胞の核のＤＮＡを計数するために、これらを標識した。各再構成皮膚について、３つの凍結切片をランダムに調製した；各切片について２つの顕微鏡視野（２５×対物レンズ）を蛍光顕微鏡により分析して写真を撮った。こうして真皮繊維芽細胞は、検討した６つの顕微鏡視野である全部で６つの画像上で、各再構成皮膚について計数した。真皮繊維芽細胞の数を、２点の動的段階で対照皮膚及びラムノースで処理した皮膚の間で比較した。
【０１４４】
結果
結果を図３に示す。
【０１４５】
ラムノースは、処理の４８時間以内に再構成皮膚の真皮繊維芽細胞増殖の刺激を誘導することが判ったが、この刺激は、処理１２０時間の時点で３０％〜３５％の間の増加細胞として確認した（図３を参照のこと）。この刺激は、５mM（及び１mMでも）でのプロコラーゲン１合成の刺激（これはまた、細胞外マトリックスのこの主要タンパク質の分泌に関与する繊維芽細胞数の増加にも由来しうる）をともなうことに注目すべきである。
【０１４６】
これらの２つの作用は、真皮コンパートメントの主要な細胞である繊維芽細胞の増殖及び代謝を刺激することにより、表皮コンパートメントで既に測定されたラムノースの抗加齢活性を補完する。
【０１４７】
実施例３
プロコラーゲン１の合成
再構成皮膚の真皮におけるＩ型プロコラーゲンの間接免疫蛍光法による従来法の検出もまた、他のシリーズの凍結切片について実行した［抗procoll 1抗体（MAB 1912 Millipore）＋ＦＩＴＣ−結合複合体（112-095-068 Jackson Immunoresearch）］。切片の顕微鏡検査中に皮膚構造内の相対的位置を取得するために、ケラチン細胞及び繊維芽細胞の細胞核は、上述のようにヨウ化プロピジウムで染色することにより局在化させた。各再構成皮膚について３つの凍結切片をランダムに調製し、そして各切片について、２つの顕微鏡視野（２５×対物レンズ）を蛍光顕微鏡により分析して写真を撮った。Ｉ型プロコラーゲンの量に比例する蛍光レベルを、対照皮膚及びラムノースで処理した皮膚の間で比較した。
【０１４８】
１２０時間の培養時の対照再構成皮膚の切片に相当する画像１（図４）では、真皮繊維芽細胞により合成されたＩ型プロコラーゲンの存在が、画像の下の部分に位置する緑色の蛍光により現れた。多くのケラチン細胞核により視覚化しうる表皮の基底部分（密な細胞組織）は、画像の上の部分に見分けることができた。真皮（あまり密ではない細胞組織）もまた、真皮細胞外マトリックス内の繊維芽細胞のランダムな分布を明らかにした。例えば、１mMラムノースで１２０時間処理した再構成皮膚の切片に相当する画像２（図４）では、対照皮膚（画像１）で観察されたものと比較すると、緑色の蛍光の顕著な上昇に気づき、また蛍光シグナルの分布には、新たに合成されたＩ型プロコラーゲンの繊維性が明瞭に現れた。緑色の蛍光のこの上昇は、ラムノース処理が繊維芽細胞によるＩ型プロコラーゲンの合成を強く刺激したことを示している。
【０１４９】
これらの結果は、ラムノースが繊維芽細胞代謝を刺激できることを明瞭に示しているが、この代謝は、加齢の過程で、その再生よりも細胞外マトリックスの分解の方へとバランスが傾くようになる。
【０１５０】
真皮繊維芽細胞の代謝及び増殖の両方を刺激することにより、ラムノースは明らかに真皮に対してその抗加齢効力を実証しており、この効力は表皮コンパートメントに関して測定されたものを補完している。
【０１５１】
実施例４
ラムノースとアスコルビン酸の組合せ、表皮セラミドの合成に及ぼすビタミンＣとラムノースの相乗作用の証明
【０１５２】
プロトコール
アスコルビン酸単独（ラムノース無し）について：
アスコルビン酸は、Episkin社（Lyons, France）により販売されている皮膚同等物で、これを７日間培養後に試験した。手順及び使用するアスコルビン酸の量は、ラムノースとの組合せについて後に詳述されるプロトコールと同じとした。
【０１５３】
本発明の活性物質の組合せについて：
アスコルビン酸とラムノースの組合せは、Episkin社（Lyons, France）により販売されている皮膚同等物で、これを７日間培養後に試験した。培地及び試験媒体は、供給業者により販売されるキットに含まれるものとした。アスコルビン酸は、１００及び／又は２００μg/mlで、培地中５mMのラムノースと組合せて試験した。再構成表皮の試料は、２４時間処理した。対照は、何の処理にも付していない同じ表皮同等物により構成した。再構成表皮は、１４Ｃ酢酸塩（２μCi/ml）と共に一晩インキュベートすることにより、脂質合成をモニターした。インキュベーションの最後に、表皮同等物をそのコラーゲン支持体から剥がした。
【０１５４】
表皮同等物からの脂質の調製及びＨＰＴＬＣ（高性能薄層クロマトグラフィー）によるその分析は、M. Ponec（1991, Adv. Lipid Res. 24: 83-117）が記載した手法及び緩衝液を用いて行った。
【０１５５】
移動の最後に、モデル1800（Fujiブランド濃度計）を使用してオートラジオグラフィーの濃度分析を行った。対照表皮の試料と、この組合せで処理した試料の間の総表皮脂質の量を比較した。補足的に、特定の分類の脂質（例えば、リン脂質、遊離脂肪酸、セラミド及びセレブロシド、並びにコレステロール）の変動も、更に詳しく分析してもよい。
【０１５６】
結果
再構成表皮の試料をアスコルビン酸とラムノースの組合せで処理した時、アスコルビン酸単独と比較して、多量の表皮脂質の産生を認めた。
【０１５７】
実施例５
ラムノースとアスコルビン酸の組合せ、繊維芽細胞によるコラーゲンVI及びXIIの合成に及ぼすビタミンＣとラムノースの相乗作用の証明
本実施例は、細胞外マトリックスのコラーゲンVI及びXIIのα１−鎖の発現に及ぼすビタミンＣとＬ−ラムノースの組合せの相乗作用を記載した。
【０１５８】
プロトコール
ヒト真皮繊維芽細胞（９代継代を使用）は、乳房又は腹部手術により入手した。使用した培地はＤＭＥＭであって、以下を補足した：
−  ウシ胎仔血清（ＦＣＳ）、１０％、
−  Ｌ−グルタミン、２mM（Invitrogen 25030024）、
−  ペニシリン（５０UI/ml）、ストレプトマイシン（５０μg/mL）、（Invitrogen 15070063）、
−  ピルビン酸ナトリウム（Invitrogen 11360039）、及び
−  非必須アミノ酸（Invitrogen 11140035）。
【０１５９】
繊維芽細胞は、上述のように補足ＤＭＥＭ培地中で培養（Ｄ０）し、３７℃及び５％  ＣＯ２で、水を飽和させた雰囲気中でインキュベートした。細胞の接着（Ｄ１）後、培地を除去し、ビタミンＣ、Ｌ−ラムノース又はこれらの組合せを含有する培地と交換した。異なる刺激条件（ビタミンＣ  ２５μM、５０μM、ラムノース  １mM、及び様々な組合せ）を三重測定で行った（１２ウェルディッシュ）。様々なコラーゲンの発現の試験は、Ｄ３及びＤ５で行った。
【０１６０】
ＲＮＡの抽出及び精製：
各条件と各時点（Ｄ３及びＤ５）について、上清を除去して細胞叢を溶解した。次に全ＲＮＡを抽出して精製した。全てのこれらの操作は、Qiagen no79254キットを使用して行った。
【０１６１】
ＲＮＡの定量及び定性試験：
次にＲＮＡは、Ribogreenプロトコール（Quan-it、Ribogreen RNAアッセイキット、invitrogen R11490）にしたがい、そしてTecan Safireを用いて読みとり、蛍光で定量した。ＲＮＡの特質は、電気泳動プロフィールにしたがって評価した。
【０１６２】
ビタミンＣ、ラムノース及びこれらの組合せの最終試験濃度は以下の通りである：ビタミンＣ  ５０μM、Ｌ−ラムノース  １mM、及び組合せ：ビタミンＣ  ５０μM＋Ｌ−ラムノース  １mM。
【０１６３】
結果
【表１】
2010155837.tif 000002
【０１６４】
上記表は、１００とした対照と比較した、ラムノース、ビタミンＣ又はこれらの組合せの存在下の繊維芽細胞中のコラーゲンVI及びXIIの生合成の強度を示す。
【０１６５】
結果は図５にも表す。これらは、真皮繊維芽細胞によるコラーゲンVI及びXIIをコードする遺伝子の転写の調節における、ラムノースとビタミンＣの相乗作用を実証している。
【０１６６】
実施例６
本発明の化粧品組成物の調製例
【表２】
2010155837.tif 000003
【０１６７】
実施例７
本発明の化粧品組成物の調製例
【表３】
2010155837.tif 000004
【０１６８】
実施例８
本発明の化粧品組成物の調製例
【表４】
2010155837.tif 000005
【０１６９】
実施例９
本発明の化粧品組成物の調製例
抗加齢顔用デイクリーム
フェーズA1：
−  Stearinerie Dubois社から販売されているジステアリン酸スクロース  1.75％
−  ICI社から商品名Tween 61の下で販売されている、４molのエチレンオキシドでオキシエチレン化したステアリン酸ソルビタン                                1.15％
−  ステアリン酸                                                    0.75％
−  ヘプタン酸ステアリル                                            4.00％
−  ワセリン（コーデックス規格）                                    1.50％
−  アボカド油                                                      3.20％
−  ホホバ油                                                        3.00％
−  揮発性シリコーン油                                              2.70％
−  酢酸ビタミンＥ                                                  1.00％
−  ビタミンＦグリセリド                                            3.00％
【０１７０】
フェーズA2：
−  Dow Corningから商品名Q2-1403 Fluidの下で販売されているシリコーンゴム                                                                            3.00％
−  プロピルパラベン                                                0.2％
−  香料                                                            0.3％
フェーズＢ：
−  グリセロール                                                    3.00％
−  ヒドロキシプロリン                                              1.00％
−  Ｄ−パンテノール                                                1.00％
−  トリエタノールアミン                                            0.35％
−  ラムノース                                                      3.00％
−  グリコシルビタミンＣ                                            1.00％
−  メチルパラベン                                                  0.3％
−  脱塩水                                                  適量    100％
フェーズＣ：
−  アンモニウムポリアクリルジメチルタウルアミド（ClariantからのHostacerin AMPS）                                                                    1％
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【外国語明細書】
1. Title of Invention
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2. Detailed Description of Invention
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1.Claims
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1. Abstract
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2. Representative Drawing
None
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