(57)【要約】【課題】  優れた皮膚再生促進作用を示すとともに副作用が少なく、かつ、製剤安定性に優れたレチノイン酸を含有する皮膚外用組成物を提供すること。【解決手段】  レチノイン酸が封入された２価金属無機酸塩微粒子をリオトロピック液晶に配合してなることを特徴とする。【選択図】  図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
レチノイン酸が封入された２価金属無機酸塩微粒子をリオトロピック液晶に配合してなることを特徴とする皮膚外用組成物。
【請求項２】
２価金属がマグネシウム、カルシウム、亜鉛から選択される少なくとも１種であることを特徴とする請求項１記載の皮膚外用組成物。
【請求項３】
２価金属無機酸塩が２価金属炭酸塩であることを特徴とする請求項１記載の皮膚外用組成物。
【請求項４】
請求項１記載の皮膚外用組成物からなることを特徴とする皮膚再生促進剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、優れた皮膚再生促進作用を示すとともに副作用が少なく、かつ、製剤安定性に優れたレチノイン酸を含有する皮膚外用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
シミ・しわ・にきびの予防や治療に、皮膚再生に必要なビタミンＡの生理活性物質であるレチノイン酸が有効であることは当業者によく知られた事実である。しかしながら、レチノイン酸は分子構造に酸の部分を有するため、皮膚角質層へ透過されにくいといった性質を持ち、また、発赤・痛み・痒みなどの反応性皮膚炎を副作用として発症するという問題があるため、皮膚外用剤の有効成分として使用しづらいということも当業者によく知られた事実である。そこで、本発明者らは、レチノイン酸を炭酸マグネシウムや炭酸カルシウムなどの２価金属無機酸塩からなるナノメートルオーダーの微粒子に封入することで、その皮膚透過性の低さの問題や副作用の問題を改善し、皮膚外用剤の有効成分としての利用価値を高める方法を提案している（特許文献１）。
【特許文献１】特開２００４−１６１７３９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
上記の方法は、本発明者らが提唱するＮＡＮＯＥＧＧ（登録商標）技術として当業者から一定の評価を得るに至っている注目に値するものである。しかしながら、より薬効や副作用の点で優れるとともに、優れた製剤安定性を有する皮膚外用剤が望まれている。
そこで本発明は、優れた皮膚再生促進作用を示すとともに副作用が少なく、かつ、製剤安定性に優れたレチノイン酸を含有する皮膚外用組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００４】
本発明者らは上記の点に鑑みて鋭意研究を行った結果、レチノイン酸が封入された２価金属無機酸塩微粒子をリオトロピック液晶に配合することで、レチノイン酸が優れた皮膚再生促進作用を発揮する一方で副作用が少なく、また、得られる組成物は製剤安定性に優れることを見出した。
【０００５】
上記の知見をもとになされた本発明の皮膚外用組成物は、請求項１記載の通り、レチノイン酸が封入された２価金属無機酸塩微粒子をリオトロピック液晶に配合してなることを特徴とする。
また、請求項２記載の皮膚外用組成物は、請求項１記載の皮膚外用組成物において、２価金属がマグネシウム、カルシウム、亜鉛から選択される少なくとも１種であることを特徴とする。
また、請求項３記載の皮膚外用組成物は、請求項１記載の皮膚外用組成物において、２価金属無機酸塩が２価金属炭酸塩であることを特徴とする。
また、本発明の皮膚再生促進剤は、請求項４記載の通り、請求項１記載の皮膚外用組成物からなることを特徴とする。
【発明の効果】
【０００６】
本発明によれば、優れた皮膚再生促進作用を示すとともに副作用が少なく、かつ、製剤安定性に優れたレチノイン酸を含有する皮膚外用組成物を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】
本発明の皮膚外用組成物は、レチノイン酸が封入された２価金属無機酸塩微粒子をリオトロピック液晶に配合してなることを特徴とするものである。本発明において、レチノイン酸が封入された２価金属無機酸塩微粒子は、それ自体は公知のものである（必要であれば例えば特許文献１を参照のこと）。レチノイン酸としては、全トランス−レチノイン酸、９−シス−レチノイン酸、１１−シス−レチノイン酸、１３−シス−レチノイン酸などが例示される。２価金属無機酸塩としては、炭酸マグネシウムや炭酸カルシウムや炭酸亜鉛などが例示される。レチノイン酸が封入された直径が１０〜１０００ｎｍ程度の２価金属無機酸塩微粒子の調製は、例えば、レチノイン酸をアルコールなどの極性有機溶媒に分散させ、これをアルカリを含む水（好適な水は精製水である。以下同じ）に溶解させ、ここに水、グリセリンなどの多価アルコール、非イオン性界面活性剤などの界面活性剤を順次添加することより得られる混合ミセルに、塩化マグネシウムや塩化カルシウムや塩化亜鉛などの２価金属塩化物の水溶液を添加し、さらに炭酸水素ナトリウムや炭酸ナトリウムなどの水溶液を添加することで行うことができる。レチノイン酸が封入された２価金属無機酸塩微粒子を調製するために使用する各成分量としては、レチノイン酸１重量部に対し、極性有機溶媒２〜４重量部、アルカリを含む水（例えば２〜５％水酸化ナトリウム水溶液）３〜５重量部、界面活性剤３〜４０重量部、多価アルコール３〜１００重量部、水１０〜３００重量部、１〜１０Ｍの２価金属塩化物の水溶液０．３〜１重量部、０．１〜１Ｍの炭酸水素ナトリウムや炭酸ナトリウムなどの水溶液０．３〜１重量部が例示される。
【０００８】
本発明において、リオトロピック液晶（ｌｙｏｔｒｏｐｉｃ  ｌｉｑｕｉｄ  ｃｒｙｓｔａｌ）とは、界面活性剤（分子内に親水性部分と疎水性（親油性）部分を有する両親媒性分子）と水との共存系において、両者の混合比率と温度によって液晶状態（結晶のようにその分子配列に一定の規則性を保ちながら液体のような流動性を兼ね備えた状態）を形成するものを意味する。リオトロピック液晶は、原理的には、疎水性部分（アルキル基などの疎水性基）同士を向け合った結晶構造をとる固体状態の界面活性剤に所定の温度範囲で水を加えていくと、当該部分が熱運動により規則性を失って液体状態となるが、今度は親水性部分が水素結合により作用しあって長周期を維持して会合構造（ヘキサゴナル構造やラメラ構造など）をとるものと理解することができる（必要であれば「鈴木敏幸、液晶、第２巻、１９４頁−２０１頁、１９９８年」を参照のこと）。
【０００９】
リオトロピック液晶は、その構成成分となる界面活性剤や水を、所定の温度において所定の比率で混合することにより調製することができる。必要に応じて構成成分を混合前や混合後に一時的に加温するといった操作を行ってもよい。
【００１０】
リオトロピック液晶の構成成分となる界面活性剤は、水との共存系において、水との混合比率と温度によって液晶状態（とりわけ面間隔が１０ｎｍ〜８００ｎｍの周期構造が望ましい）を形成することができるものであれば特段制限されるものではなく、非イオン性タイプ、アニオン性タイプ、カチオン性タイプ、両性タイプのいずれのタイプの界面活性剤であってもよく、また、レシチン（卵黄レシチンや大豆レシチンなど）やサポニンなどの天然由来の界面活性剤であってもよい。さらに、天然レシチンに酸化に対する安定性を高めるために水素を添加した水素添加レシチンなどであってもよい。界面活性剤は単一のものを単独で使用してもよいし、複数種類を混合して使用してもよい。
【００１１】
非イオン性界面活性剤としては、例えば、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェノールエーテル、アルキルグルコシド、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、脂肪酸アルカノールアミド、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油などが挙げられる。アニオン性界面活性剤としては、セッケン（脂肪酸のナトリウム塩やカリウム塩など）、アルキルベンゼンスルホン酸塩（ナトリウム塩など）、高級アルコール硫酸エステル塩（ナトリウム塩など）、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩（ナトリウム塩など）、α−スルホ脂肪酸エステル、α−オレフィンスルホン酸塩（ナトリウム塩など）、モノアルキルリン酸エステル塩（ナトリウム塩など）、アルカンスルホン酸塩（ナトリウム塩など）などが挙げられる。カチオン性界面活性剤としては、アルキルトリメチルアンモニウム塩（クロリドなど）、ジアルキルジメチルアンモニウム塩（クロリドなど）、アルキルジメチルベンジルアンモニウム塩（クロリドなど）、アミン塩（酢酸塩や塩酸塩など）などが挙げられる。両性界面活性剤としては、アルキルアミノ脂肪酸塩（ナトリウム塩など）、アルキルベタイン、アルキルアミンオキシドなどが挙げられる。
【００１２】
リオトロピック液晶の構成成分となる水としては、例えば、精製水などを使用することができる。水には水と相溶性のあるエタノールやイソプロパノールなどの極性有機溶媒が含まれていてもよい。
【００１３】
リオトロピック液晶は、界面活性剤と水の他に油分を含んでもよい。油分を含むことで液晶構造は角質層の細胞間脂質が形成するラメラ構造に近似したものとなり、皮膚表面に塗付した際に細胞間脂質構造の相転移を起こさせやすくし、この結果として優れた活性成分に対する経皮吸収促進作用を発揮する。油分としては、例えば、小麦胚芽油やトウモロコシ油やヒマワリ油やヒマシ油や大豆油などの植物油、シリコーン油、イソプロピルミリステートやグリセリルトリオクタノエートやジエチレングリコールモノプロピレンペンタエリスリトールエーテルやペンタエリスリチルテトラオクタノエートなどのエステル油、スクワランやスクワレンや流動パラフィンやポリブテンなどの炭化水素油などが挙げられる。油分は単一のものを単独で使用してもよいし、複数種類を混合して使用してもよい。
【００１４】
また、リオトロピック液晶は、多価アルコールを含んでもよい。多価アルコールを含むことで液晶構造の形成容易化（相領域の拡大）や安定化を図ることができる。多価アルコールとしては、例えば、ポリエチレングリコールやポリアルキレングリコールなどのポリアルキレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、１，３−プロパンジオール、２−ブテン−１，４−ジオール、ペンタン−１，５−ジオール、２，２−ジメチルプロパン−１，３−ジオール、３−メチルペンタン−１，５−ジオール、ペンタン−１，２−ジオール、２，２，４−トリメチルペンタン−１，３−ジオール、２−メチルプロパン−１，３−ジオール、ヘキシレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ジプロピレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコールなどが挙げられる。多価アルコールは単一のものを単独で使用してもよいし、複数種類を混合して使用してもよい。
【００１５】
また、リオトロピック液晶は、コレステロールなどを補助界面活性剤として含んでもよい。補助界面活性剤を含むことで多種多様の界面活性剤を使用した場合でも界面膜曲率の低減化を図ることができ、よって、液晶構造の形成容易化や安定化を図ることができる。
【００１６】
本発明の皮膚外用組成物の製造は、例えば、リオトロピック液晶の調製過程で、レチノイン酸が封入された２価金属無機酸塩微粒子を添加することで行うことができる。レチノイン酸が封入された２価金属無機酸塩微粒子を調製するために使用する成分の中で、界面活性剤と多価アルコールと水の少なくとも一部は、レチノイン酸が封入された２価金属無機酸塩微粒子をリオトロピック液晶に配合した後、リオトロピック液晶の構成成分として機能すると考えられる。従って、リオトロピック液晶を調製するために使用する各成分量は、レチノイン酸が封入された２価金属無機酸塩微粒子を配合した後のリオトロピック液晶に占める割合で捉えることが望ましく、その捉え方によれば、リオトロピック液晶に占める界面活性剤の割合は５〜８０重量％が望ましく、７〜７０重量％がより望ましく、１０〜６５重量％がさらに望ましい（レチノイン酸封入２価金属無機酸塩微粒子を調製するための使用量を含む）。リオトロピック液晶に占める水の割合は５〜８０重量％が望ましく、１０〜６０重量％がより望ましく、１３〜５０重量％がさらに望ましい（レチノイン酸封入２価金属無機酸塩微粒子を調製するための使用量を含む）。リオトロピック液晶に占める油分の割合は１重量％〜８０重量％が望ましく、５重量％〜７０重量％がより望ましく、１０重量％〜６５重量％がさらに望ましい。リオトロピック液晶に占める多価アルコールの割合は１〜５５重量％が望ましく、３〜５２重量％がより望ましく、５〜５０重量％がさらに望ましい（レチノイン酸封入２価金属無機酸塩微粒子を調製するための使用量を含む）。リオトロピック液晶に占める補助界面活性剤の割合は０．０１〜１０重量％が望ましい。リオトロピック液晶を調製する際に、界面活性剤としてのレシチンと、補助界面活性剤を使用する場合、前者と後者を重量比で１０：３〜１０：５となるように使用することで、２価金属無機酸塩微粒子を配合したリオトロピック液晶を構成する個々の２分子膜をフラットな構造とし、これにより安定な積層構造を有するリオトロピック液晶を得ることができる。
【００１７】
なお、本発明の皮膚外用組成物におけるレチノイン酸の含有量は、０．００１〜１重量％が望ましい。
【００１８】
また、本発明の皮膚外用組成物には、上記の成分の他に、例えば、ジブチルヒドロキシトルエンなどの酸化防止剤を０．００１〜１重量％、パラオキシ安息香酸メチルやパラオキシ安息香酸プロピルなどの防腐剤を０．０１〜０．３重量％、セタノールなどの粘稠剤を０．１〜２重量％含有せしめることが望ましい。
【００１９】
本発明の皮膚外用組成物は、皮膚の表面に塗布することで、レチノイン酸が角化細胞（ケラチノサイト）の分化・増殖を効果的に促進させて皮膚再生を促進させる一方で、副作用としての反応性皮膚炎の発症が少なく、また、製剤安定性に優れているので、シミ・しわ・にきびの予防や治療に有用である。
【実施例】
【００２０】
以下、本発明を実施例にて詳細に説明するが、本発明は以下の記載に何ら限定して解釈されるものではない。
【００２１】
実施例１：本発明の皮膚外用組成物の製造（その１）
下記の表１に示す５種類の処方からなる本発明の皮膚外用組成物を製造した。
【００２２】
【表１】
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【００２３】
（工程１）
レチノイン酸（全トランス−レチノイン酸）が封入された２価金属無機酸塩微粒子を以下のようにして調製した。
ビーカーにレチノイン酸を量り入れ、エタノール、次いで４％水酸化ナトリウム水溶液を入れ、レチノイン酸を均一に溶解させた。続いて、精製水を添加して約１０分間攪拌し、次いでグリセリンとポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０を添加し、約１時間攪拌した。その後、２．５Ｍ塩化マグネシウム水溶液（塩化マグネシウム６水和物を使用して調製したもの）を添加して約１０分間攪拌を続けた。最後に、０．５Ｍ炭酸水素ナトリウム水溶液を添加して約１０分間攪拌し、レチノイン酸が封入された直径が１０ｎｍ〜１０００ｎｍの炭酸マグネシウム微粒子（ナノ粒子）を含む水溶液を得た。
【００２４】
（工程２）
ビーカーにスクワラン、水素添加大豆リン脂質とポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０、コレステロールを量り入れ、約８０℃に加熱してこれらを溶解させた。場合によっては、ここにセタノールを加え、一緒に溶解させた。これを６０℃以下に冷却した後、グリセリンを添加し、均一になるまで攪拌した。さらに、工程１で調製したレチノイン酸封入炭酸マグネシウム微粒子を含む水溶液と精製水（処方１〜処方３）を添加し、よく攪拌することによって、レチノイン酸封入炭酸マグネシウム微粒子を含有するリオトロピック液晶を形成せしめ、本発明の皮膚外用組成物を得た。なお、工程１と工程２の操作は、全て遮光下で行った。ジブチルヒドロキシトルエンは工程２で、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸プロピルは工程１または工程２のいずれかで添加した。
【００２５】
実施例２：本発明の皮膚外用組成物の製造（その２）
実施例１に準じて、下記の表２に示す２種類の処方からなる本発明の皮膚外用組成物を製造した。
【００２６】
【表２】
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【００２７】
薬理試験１：
（実験方法）
マウス（ｄｄＹ、雄、５週齢、日本エスエルシー社より購入）の背部皮膚をバリカンで剃毛し（２ｃｍ×２ｃｍ、１箇所）、当該部分に被験対象とするサンプルを１日１回４日間塗布し（３０ｍｇ／ｓｉｔｅ）、その１日後の表皮の厚さを測定することで、レチノイン酸の皮膚再生促進作用を肥厚厚さで評価した（ｎ＝６）。対照群は、サンプルを塗付しないこと以外は前記と同様の操作を行ったものとした。また、あわせて、４項目の炎症所見（痂皮形成、表皮における好酸性物質の沈着、真皮への炎症性細胞浸潤、表皮の剥離）について、光学顕微鏡による観察によりスコアリングを行った。スコアリングは、それぞれの項目について、所見なし：０、軽度の所見：１、中程度の所見：２の３段階に分け、対照群と比較しながら行った（スコア合計は最小が０で最大が８、ｎ＝６）。なお、被験サンプルは以下の通りである。
・  下記の表３に示す処方からなるレチノイン酸を含有しないリオトロピック液晶組成物（比較処方１）
・  実施例１の処方２の皮膚外用組成物
・  同、処方３の皮膚外用組成物
・  下記の表４に示す処方からなるレチノイン酸を含有しないリオトロピック液晶組成物（比較処方２）
・  実施例２の処方６の皮膚外用組成物
・  同、処方７の皮膚外用組成物
・  下記の表５に示す処方からなるレチノイン酸を含有するクリーム製剤（比較処方３）
【００２８】
【表３】
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【００２９】
なお、上記の表３に示す処方からなるレチノイン酸を含有しないリオトロピック液晶組成物（比較処方１）は、ビーカーにエタノール、４％水酸化ナトリウム水溶液、精製水（ビヒクル分）を量り入れ、次いでグリセリンとポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０を添加し、約１時間攪拌し、その後、２．５Ｍ塩化マグネシウム水溶液（塩化マグネシウム６水和物を使用して調製したもの）を添加して約１０分間攪拌を続け、最後に、０．５Ｍ炭酸水素ナトリウム水溶液を添加して約１０分間攪拌して得た水溶液を、実施例１の工程２において、実施例１の工程１で調製したレチノイン酸封入炭酸マグネシウム微粒子を含む溶液のかわりに添加すること以外は、実施例１の工程２と同様にして得た。
【００３０】
【表４】
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【００３１】
なお、上記の表４に示す処方からなるレチノイン酸を含有しないリオトロピック液晶組成物（比較処方２）は、比較処方１と同様にして得た。
【００３２】
【表５】
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【００３３】
なお、上記の表５に示す処方からなるレチノイン酸を含有するクリーム製剤（比較処方３）は、ビーカーにレチノイン酸、中鎖脂肪酸トリグリセリド、ベンジルアルコール、セタノール、ステアリン酸、ステアリルアルコール、ポリオキシエチレンステアリルエーテル、ジブチルヒドロキシトルエン、パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸プロピルを量り入れて約８０℃に加温し、ここに別に約８０℃に加温しておいた水を徐々に添加して乳化し、さらに、攪拌しながら２％キサンタンガムとＥＤＴＡ・２Ｎａを加え、攪拌しながら冷却することで得た。
【００３４】
（実験結果）
図１に示す。図１から明らかなように、本発明の皮膚外用組成物（処方２，処方３，処方６，処方７）は、レチノイン酸の皮膚再生促進作用に基づいて、肥厚厚さがレチノイン酸を含有しないリオトロピック液晶組成物（比較処方１，比較処方２）に比べて厚いにもかかわらず、炎症スコアがレチノイン酸を含有するクリーム製剤（比較処方３）に比べて遥かに低く、皮膚再生促進作用が優れるとともに副作用が少ないことがわかった。
【００３５】
製剤安定性試験１：
実施例１の処方２の皮膚外用組成物に対し、そのレチノイン酸の保存安定性を確認するため、２５℃、４０℃、５０℃における保存後の対開始時含量（％）を求めた。結果を図２に示す。図２から明らかなように、本発明の皮膚外用組成物は、試験開始から１ヶ月が経過してもレチノイン酸の分解は起こらないかほとんど起こらず、製剤安定性に優れることがわかった。
【００３６】
一方、レチノイン酸封入炭酸マグネシウム微粒子をレチノイン酸の含量が０．０５重量％になるように配合したプラスチベース製剤と親水軟膏製剤とマクロゴール製剤に対し、上記と同様の安定性試験を行ったところ、試験開始から３週間が経過した時点で、いずれの製剤もレチノイン酸の対開始時含量が９０％を下回り、製剤安定性に劣ることがわかった。なお、それぞれの製剤の調製は以下ようにして行った。
【００３７】
（レチノイン酸封入炭酸マグネシウム微粒子配合プラスチベース製剤）
実施例１の工程１と同様にして、下記の表６に示す処方からなるレチノイン酸封入炭酸マグネシウム微粒子を含む水溶液を得、これをレチノイン酸の含量が０．０５重量％になるようにプラスチベースに配合することで得た。
【００３８】
【表６】
2010001218.tif 000008
【００３９】
（レチノイン酸封入炭酸マグネシウム微粒子配合親水軟膏製剤）
上記の表６に示す処方からなるレチノイン酸封入炭酸マグネシウム微粒子を含む水溶液を、親水性軟膏基剤の調製過程で添加し、下記の表７に示す処方からなる製剤を得た。
【００４０】
【表７】
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【００４１】
（レチノイン酸封入炭酸マグネシウム微粒子配合マクロゴール製剤）
上記の表６に示す処方からなるレチノイン酸封入炭酸マグネシウム微粒子を含む水溶液をレチノイン酸の含量が０．０５重量％になるようにマクロゴールに配合することで得た。
【００４２】
製剤安定性試験２：
実施例１の処方３の皮膚外用組成物、実施例１の処方３の皮膚外用組成物を得るために調製したレチノイン酸封入炭酸マグネシウム微粒子を含む水溶液をレチノイン酸の含量が０．１０重量％になるようにワセリンに配合した組成物（比較例１）、レチノイン酸をその含量が０．１０重量％になるようにワセリンに配合した組成物（比較例２）の３種類の組成物に対し、そのレチノイン酸の保存安定性を確認するため、４０℃における保存後の対開始時含量（％）を求めた。結果を図３に示す。図３から明らかなように、本発明の皮膚外用組成物は、試験開始から２ヶ月が経過してもレチノイン酸の分解はほとんど起こらず、製剤安定性に優れることがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
本発明は、優れた皮膚再生促進作用を示すとともに副作用が少なく、かつ、製剤安定性に優れたレチノイン酸を含有する皮膚外用組成物を提供することができる点において産業上の利用可能性を有する。
【図面の簡単な説明】
【００４４】
【図１】実施例における薬理試験の結果を示すグラフである。
【図２】同、製剤安定性試験１の結果を示すグラフである。
【図３】同、製剤安定性試験２の結果を示すグラフである。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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