(57)【要約】      （修正有）【課題】還元型ＣｏＱ１０−シクロデキストリン（ＣＤ）包接体の製造方法および当該方法によって得られる還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体を提供する。【解決手段】ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体と抗酸化剤とを混合した後、１０〜１００℃、湿度０〜１００％の雰囲気下で保存することによる還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体の製造方法であり、抗酸化剤がビタミンＣ（ＶＣ）、ＶＣ誘導体、グルタチオン、還元型グルタチオンなどから選択される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
コエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）−シクロデキストリン（ＣＤ）包接体と抗酸化剤とを混合することによる還元型コエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）−シクロデキストリン（ＣＤ）包接体の製造方法。
【請求項２】
コエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）−シクロデキストリン（ＣＤ）包接体と抗酸化剤とを混合した後、１０〜１００℃、湿度０〜１００％の雰囲気下で保存することによる還元型コエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）−シクロデキストリン（ＣＤ）包接体の製造方法。
【請求項３】
コエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）−シクロデキストリン（ＣＤ）包接体に含まれるＣｏＱ１０と抗酸化剤との混合比率（モル比）が１：１〜１：５００である請求項１または２に記載の製造方法。
【請求項４】
コエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）−シクロデキストリン（ＣＤ）包接体がコエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）−アルファシクロデキストリン（αＣＤ）包接体、コエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）−ベータシクロデキストリン（βＣＤ）包接体またはコエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）−ガンマシクロデキストリン（γＣＤ）包接体の一種以上である請求項１〜３のいずれかに記載の製造方法。
【請求項５】
コエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）−シクロデキストリン（ＣＤ）包接体がコエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）−ガンマシクロデキストリン（γＣＤ）包接体である請求項４に記載の製造方法。
【請求項６】
抗酸化剤がビタミンＣ（ＶＣ）、ビタミンＣ（ＶＣ）誘導体、グルタチオン、還元型グルタチオン、チオ硫酸ナトリウム、Ｌ−システイン、リボフラビンおよびスーパーオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ）から選択される一種以上である請求項１〜５のいずれかに記載の製造法。
【請求項７】
抗酸化剤がビタミンＣ（ＶＣ）である請求項６に記載の製造法。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれかに記載の製造方法によって製造された還元型コエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）−シクロデキストリン（ＣＤ）包接体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は還元型コエンザイムＱ１０（以下、還元型ＣｏＱ１０とする）−シクロデキストリン（以下、ＣＤとする）包接体の製造方法に関する。更に詳しくは、コエンザイムＱ１０（以下、ＣｏＱ１０とする）−ＣＤ包接体と抗酸化剤とを混合することによる還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＣｏＱ１０は、ミトコンドリア内の電子伝達系に関与する重要な補酵素であり、体内においては酸化型から還元型に変換されることで、強力な抗酸化作用を有することが知られている。
還元型ＣｏＱ１０は、この強力な抗酸化作用に加えて、酸化型ＣｏＱ１０と比較して体内での吸収性が高いことから、医薬品、医薬部外品、機能性食品や化粧品等の有効成分として注目が集まっている。しかし、還元型ＣｏＱ１０は酸化型ＣｏＱ１０に比べて安定性が極めて低く、高価であるため、容易に利用できないという問題があった。
【０００３】
近年、還元型ＣｏＱ１０を安定的に保つ方法として、γＣＤと還元型ＣｏＱ１０とを水に溶解した後、ホモジナイザーで攪拌して混合し、還元型ＣｏＱ１０をγＣＤに包接させる方法が開発されている（例えば、特許文献１参照）。
しかし、この方法でγＣＤに包接している還元型ＣｏＱ１０は、合成、発酵、天然物からの抽出等によって得られたＣｏＱ１０から、クロマトグラフィー等によって還元型ＣｏＱ１０区分を分離し、濃縮して得たものであるため、やはり高価なものである。
そのため、還元型ＣｏＱ１０を安価で容易に利用できるような方法の提供が望まれている。
【特許文献１】国際公開第０２００５／０４１９４５号
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体の製造方法の提供を課題とする。更に当該方法によって得られる還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体の提供を課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは前記課題を解決するために鋭意研究を行った結果、ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体と抗酸化剤とを混合することにより、高い生成比率で還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体が得られることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００６】
すなわち、本発明は次の（１）〜（８）に記載の還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体の製造方法等に関する。
（１）ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体と抗酸化剤とを混合することによる還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体の製造方法。
（２）ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体と抗酸化剤とを混合した後、１０〜１００℃、湿度０〜１００％の雰囲気下で保存することによる還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体の製造方法。
（３）ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体に含まれるＣｏＱ１０と抗酸化剤との混合比率（モル比）が１：１〜１：５００である上記（１）または（２）に記載の製造方法。
（４）ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体がＣｏＱ１０−アルファシクロデキストリン（以下、αＣＤとする）包接体、ＣｏＱ１０−ベータシクロデキストリン（以下、βＣＤとする）包接体またはＣｏＱ１０−ガンマシクロデキストリン（以下、γＣＤとする）包接体の一種以上である上記（１）〜（３）のいずれかに記載の製造方法。
（５）ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体がＣｏＱ１０−γＣＤ包接体である上記（４）に記載の製造方法。
（６）抗酸化剤がビタミンＣ（以下、ＶＣとする）、ＶＣ誘導体、グルタチオン、還元型グルタチオン、チオ硫酸ナトリウム、Ｌ−システイン、リボフラビンおよびスーパーオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ）から選択される一種以上である上記（１）〜（５）のいずれかに記載の製造法。
（７）抗酸化剤がＶＣである上記（６）に記載の製造法。
（８）上記（１）〜（７）のいずれかに記載の製造方法によって製造された還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体。
【発明の効果】
【０００７】
本発明の還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体の製造方法によって、還元型ＣｏＱ１０を安定した状態、かつ高い比率で含有する還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体を製造することができる。本発明で得られた還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体は、従来の方法で製造された還元型ＣｏＱ１０と同等の活性を有することから、医薬品、医薬部外品、機能性食品または化粧品等の有効成分として用いることができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明の「ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体」とは、酸化型ＣｏＱ１０がＣＤに包接されているもののことをいう。
また、本発明の「還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体」とは、還元型ＣｏＱ１０のみ、または包接体に含まれる全ＣｏＱ１０に対して２０％以上の還元型ＣｏＱ１０と酸化型ＣｏＱ１０とを含むＣｏＱ１０がＣＤに包接されているもののことをいう。
【０００９】
本発明の「製造方法」には、ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体と抗酸化剤とを混合することにより、「ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体」に含まれるＣｏＱ１０が、高い生成比率で還元型ＣｏＱ１０となり、「還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体」が製造できる方法であれば、いずれの製造方法も含まれる。ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体と抗酸化剤とを混合する方法としては、ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体と抗酸化剤とを乳鉢等に入れ、粉末の状態で混ぜ合わせる方法や、ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体と抗酸化剤とを水等の溶媒に加え、攪拌する方法等が挙げられる。
【００１０】
本発明の「製造方法」は、さらにＣｏＱ１０−ＣＤ包接体と抗酸化剤とを混合した後、一定温度および湿度の雰囲気下で保存することによる還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体の製造方法であることが好ましい。
この保存においては温度が１０〜１００℃で、湿度が０〜１００％の雰囲気下であれば可能であるが、温度は１０〜７０℃であることが好ましく、特に６０℃、７５％の雰囲気下であることがさらに好ましい。また、保存する時間は、「還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体」が生成される時間であればいずれでもよい。
【００１１】
本発明の「製造方法」において、ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体に含まれるＣｏＱ１０と抗酸化剤との混合比率は、「還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体」が高い比率で生成し得る混合比率であれ、いずれの混合比率であってもよい。例えば、ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体に含まれるＣｏＱ１０に対して抗酸化剤が１：１〜１：５００（モル比）等の混合比率が挙げられる。好ましくは１：２〜１：５０（モル比）が挙げられる。
【００１２】
本発明の「製造方法」に用いるＣｏＱ１０−ＣＤ包接体は、ＣｏＱ１０−αＣＤ包接体、ＣｏＱ１０−βＣＤ包接体またはＣｏＱ１０−γＣＤ包接体の１つ以上であることが好ましく、これらを組み合わせても用いることもできる。
これらのＣｏＱ１０−ＣＤ包接体は、例えば酸化型ＣｏＱ１０とγＣＤが１：２．５（モル比）の割合で含まれる「コエンザイムＱ１０Ｗ」（シクロケム）等の市販されているものを用いることもできる。また、ＣｏＱ１０とＣＤを混合し、噴霧乾燥、凍結乾燥法、飽和水溶液法、混錬法、混合粉砕法等の一般的な包接体の製造方法（参考文献参照）を用いて、独自に製造したものを用いることもできる。
参考文献：特開２００６−２４９０５０号公報
【００１３】
本発明の「製造方法」に用いる抗酸化剤は、還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体が製造できる抗酸化剤であればいかなる化合物でも使用できる。例えば、ビタミンＣ、ビタミンＣ誘導体、グルタチオン、還元型グルタチオン、チオ硫酸ナトリウム、Ｌ−システイン、リボフラビンおよびスーパーオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ）等が挙げられる。また、これらの抗酸化剤を組合せて用いても良い。これらの抗酸化剤のうち、特にＶＣを用いることが好ましく、例えばＬ（＋）−アスコルビン酸（和光純薬工業）を用いることが出来るが、食品用として市販されているＶＣを用いることが好ましい。
以下、本発明の詳細を実施例等で説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【実施例】
【００１４】
＜還元型ＣｏＱ１０の製造＞
１．試料
１）ＣｏＱ１０−γＣＤ包接体：コエンザイムＱ１０Ｗ（シクロケム社）
２）抗酸化剤：Ｌ（＋）−アスコルビン酸（和光純薬工業社）
【００１５】
２．還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体の製造方法
上記１．１）のＣｏＱ１０−γＣＤ包接体に含まれるＣｏＱ１０と上記１．２）の抗酸化剤とのモル比が１：５、１：１０、１：２５、１：５０となるように乳鉢に入れ、それぞれ混合した。その後、６０℃、湿度７５％の雰囲気下で０、７、１４、６０日間保存することで還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体の製造を行い、ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体に含まれていたＣｏＱ１０から還元型ＣｏＱ１０が生成したことをＨＰＬＣ分析で確認した。また、還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体の生成比率を下記の式によって求めた。
［ＨＰＬＣ分析条件］
カラム：Ｌｕｎａ  ５ｕ  Ｃ１８（２）  １００Ａ  （４．６ｍｍ  Ｉ．Ｄ．×１５０ｍｍ）、移動相（Ｍｏｂｉｌｅ  Ｐｈａｓｅ）：１００％ＤＭＦ、流速（Ｆｌｏｗ  ｒａｔｅ）：０．８ｍＬ／ｍｉｎ、温度：４０℃、検出：ＵＶ２８０ｎｍ、注入量：１０μＬ
【００１６】
［式］
還元型ＣｏＱ１０の生成比率＝
還元型ＣｏＱ１０濃度／（酸化型ＣｏＱ１０濃度＋還元型ＣｏＱ１０濃度）×１００
【００１７】
［比較例］
比較としてＣｏＱ１０−γＣＤ包接体の代わりにＣｏＱ１０を用いて、上記と同様の方法で還元型ＣｏＱ１０の製造を試みた。また、抗酸化剤を全く混合しないで、ＣｏＱ１０またはＣｏＱ１０−γＣＤ包接体のみを上記と同じ雰囲気下で同じ時間保存を行い、還元型ＣｏＱ１０または還元型ＣｏＱ１０−γＣＤ包接体の製造を試みた。
【００１８】
＜結果＞
図１に示したように、ＣｏＱ１０−γＣＤ包接体と抗酸化剤を混合した本発明の製造方法によって、ＣｏＱ１０−γＣＤ包接体に含まれるＣｏＱ１０から還元型ＣｏＱ１０が生成することにより、還元型ＣｏＱ１０−γＣＤ包接体が得られることが確認できた。
また、図２に示したように、ＣｏＱ１０−γＣＤ包接体を抗酸化剤と混合した製造方法において、保存日数の経過に伴い、高い生成比率で還元型ＣｏＱ１０−γＣＤ包接体が得られる傾向があることが示された。また、抗酸化剤とのモル比が高いものほど、高い生成比率で還元型ＣｏＱ１０−γＣＤ包接体が得られる傾向があることも示された。
これに対し、ＣｏＱ１０を抗酸化剤と混合したものでは、還元型ＣｏＱ１０の生成比率が低かった。また、抗酸化剤を全く混合しないで、ＣｏＱ１０−γＣＤ包接体のみを保存した場合においては、還元型ＣｏＱ１０−γＣＤ包接体の生成比率が低かった。
従って、この結果より、本発明の還元型ＣｏＱ１０−γＣＤ包接体の製造方法により、高い生成比率の還元型ＣｏＱ１０−γＣＤ包接体が得られることが確認できた。
【００１９】
本発明の還元型ＣｏＱ１０−γＣＤ包接体の製造方法により製造された還元型ＣｏＱ１０−γＣＤ包接体について、ＤＰＰＨラジカル消去活性を調べたところ、ＣｏＱ１０（１モル）に対し、２モル以上のＤＰＰＨラジカルを消去することが確認された。従って、本発明の製造方法によって製造される還元型ＣｏＱ１０−γＣＤ包接体に含まれる還元型ＣｏＱ１０は、従来の方法によって製造されている還元型ＣｏＱ１０と同様に高い活性を有することが確認できた。
【産業上の利用可能性】
【００２０】
本発明の還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体の製造方法によって得られる還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体は、安定性が高く、還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体に含まれる還元型ＣｏＱ１０は従来の方法で製造された還元型ＣｏＱ１０と同等の活性を有することから、医薬品、医薬部外品、機能性食品または化粧品等の有効成分として用いることができる。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】本発明の製造方法によって還元型ＣｏＱ１０−ＣＤ包接体が得られたことを示した図である（実施例）。
【図２】ＣｏＱ１０またはＣｏＱ１０−ＣＤ包接体における還元型ＣｏＱ１０の生成比率を示した図である（実施例）。
【図１】
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【図２】
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