(57)【要約】  【課題】基質にそのまま分散させても高度なエステル交換又はエステル化活性を示す、安定なリパーゼ粉末製剤及びその製造方法を提供する。  【解決手段】リパーゼ、卵由来蛋白、及び油脂を含有することを特徴とするリパーゼ粉末製剤、及び、卵由来蛋白、油脂及び水の乳化物にリパーゼを添加し乾燥することを特徴とするリパーゼ粉末製剤の製造法。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
リパーゼ、卵由来蛋白、及び油脂を含有することを特徴とするリパーゼ粉末製剤。
【請求項２】
エステル交換高活性である請求項１記載のリパーゼ粉末製剤。
【請求項３】
リパーゼ、卵由来蛋白、及び油脂の複合体を含有する請求項１記載のリパーゼ粉末製剤。
【請求項４】
卵由来蛋白が乾燥全卵である請求項１記載のリパーゼ粉末製剤。
【請求項５】
油脂が卵の内在性の油脂を含む請求項１記載のリパーゼ粉末製剤。
【請求項６】
卵由来蛋白、油脂及び水を乳化し、該乳化物にリパーゼを添加し、乾燥することを特徴とするリパーゼ粉末製剤の製造法。
【請求項７】
リパーゼ、卵由来蛋白、油脂及び水を乳化し、該乳化物にリパーゼを添加し、乾燥することを特徴とするリパーゼ粉末製剤の製造法。
【請求項８】
請求項１記載のリパーゼ粉末製剤を用いて、脂肪酸エステル、脂肪酸、及びアルコールから選ばれる１種以上にエステル交換反応又はエステル化反応を行うことを特徴とする、エステル交換物又はエステル化物の製造法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、粉末状態で高度なエステル交換又はエステル化活性を有する安定なリパーゼ粉末製剤及びその製造法に関する。
【背景技術】
【０００２】
リパーゼはエステル分解活性のみならずエステル交換活性やエステル化活性も示し、多岐にわたる反応に利用できる工業的に重要な酵素である。特にリパーゼを用いたエステル交換反応は油脂の改質において重要な技術であり、エステル化反応もステロールエステルやモノグリセリド、ジグリセリドの合成等に利用されてきた。
このリパーゼは本来水溶性であり水の存在により活性を発現するが、他方、基質の一つである脂質は水に不溶であるため、リパーゼは水と脂質の界面で作用すると考えられている。
そのため、通常リパーゼの粉末を水の非存在下でそのまま油脂に添加し分散させて、エステル交換反応に用いようとしてもエステル交換活性が十分に発現しない。また水溶性のリパーゼを油脂中に均一に分散させることは困難である。
【０００３】
上記理由により、従来リパーゼは特にその産業上の利用において、リパーゼを保持しうる担体に固定化し、固定化酵素として用いる方法が普及していた。固定化のための担体としては一般に多孔質の樹脂が用いられ、反応器容積の低減のため、その多孔空隙（細孔）に高密度にリパーゼを充填しようという試みがなされてきた（特許文献１：特開昭５９−１７９０９１号公報）。その際、その細孔径が重要であり、小さすぎると酵素の入る余地がなくなってしまい、基質の出入りが困難になる反面、大きすぎると空隙表面積が減少し、保持できるリパーゼの量が低下してしまう問題があった。また固定化処理にはリパーゼ活性の損失を伴ったり、多孔性担体を用いた場合には細孔に原料や生成物が詰まったり、結果としてエステル交換率の低下を招く場合があった。
【０００４】
こうした中で、固定化をしないリパーゼ粉末を用いたエステル交換技術が各種開発されている。例えば、エステルを含有する原料にリパーゼ粉末を分散させ、反応時に分散リパーゼ粉末粒子の９０％以上を１〜１００μｍの範囲に保ちつつエステル交換を行う技術（特許文献２：特開平７−７９７８９号公報）がある。しかしながら、さらにリパーゼ活性及び安定性が向上したリパーゼ粉末製剤が求められている。
【０００５】
（参考文献）
【特許文献１】特開昭５９−１７９０９１号公報
【特許文献２】特開平７−７９７８９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、基質にそのまま分散させても高度なエステル交換又はエステル化活性を示し、安定なリパーゼ粉末製剤及びその製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題に鑑み、本発明者はリパーゼを卵由来蛋白、及び油脂と共に含有させたリパーゼ粉末製剤とすること、そしてこれを用いてエステル交換又はエステル化を行うことにより、前記課題を解決できるという知見を得、本発明の技術思想を完成するに到った。
【０００８】
すなわち本発明は、
（１）リパーゼ、卵由来蛋白、及び油脂を含有することを特徴とするリパーゼ粉末製剤、
（２）エステル交換高活性である前記（１）記載のリパーゼ粉末製剤、
（３）リパーゼ、卵由来蛋白、及び油脂の複合体を含有する前記（１）記載のリパーゼ粉末製剤、
（４）卵由来蛋白が乾燥全卵である前記（１）記載のリパーゼ粉末製剤、
（５）油脂が卵の内在性の油脂を含む前記（１）記載のリパーゼ粉末製剤、
（６）卵由来蛋白、油脂及び水を乳化し、該乳化物にリパーゼを添加し、乾燥することを特徴とするリパーゼ粉末製剤の製造法、
（７）リパーゼ、卵由来蛋白、油脂及び水を乳化し、該乳化物にリパーゼを添加し、乾燥することを特徴とするリパーゼ粉末製剤の製造法、
（８）前記（１）記載のリパーゼ粉末製剤を用いて、脂肪酸エステル、脂肪酸、及びアルコールから選ばれる１種以上にエステル交換反応又はエステル化反応を行うことを特徴とする、エステル交換物又はエステル化物の製造法、などを提供する。
【発明の効果】
【０００９】
本発明により、油脂等の基質にそのまま均一に分散させることができ、高度なエステル交換又はエステル化活性を示すリパーゼ粉末製剤を提供することが可能となる。さらに該製剤は反応への繰り返し使用にも耐えることのできる高度な安定性も併せ持つものである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
本発明が提供するリパーゼ粉末製剤は、リパーゼ、卵由来蛋白、及び油脂を含有することを特徴とするものである。以下、本発明の具体的な実施形態について詳細に説明する。
【００１１】
（リパーゼ）
本発明のリパーゼ粉末製剤に用いることのできるリパーゼは、細菌、酵母、糸状菌、放線菌等の微生物由来のリパーゼの他、膵臓、肝臓、乳、唾液等の動物由来のリパーゼ、米糠、ヒマシ、エン麦、小麦、菜種、落花生等の植物由来のリパーゼなど、アシル基転移能を有する酵素であれば適用可能である。なお、上述のリパーゼは精製されたものの他、これらのリパーゼを含む粗酵素でもよく、例えば微生物由来の酵素の場合は微生物を培養した培地成分を含むリパーゼ含有水溶液、またそれを乾燥したものも含む。
【００１２】
微生物由来のリパーゼの場合、例えば、アスペルギルス（Aspergillus）属、キャンディダ（Candida）属、サッカロマイコプシス（Saccharomycopsis）属、ジオトリカム（Geotrichum）属、スクレロティニア（Sclerotinia）属、トルロプシス（Torulopsis）属ノカルディア（Nocardia）属、フザリウム（Fuzarium）属、ファイコマイセス（Phycomyces）属、フミコラ（Humicola）属、ペニシリウム（Penicillium）属、ムコール（Mucor）属、リゾプス（Rhizopus）属、リゾムコール（Rhizomucor）属等の糸状菌や酵母由来のリパーゼや、アクロモバクター（Achromobacter）属、アルカリゲネス（Alcaligenes）属、アルスロバクター（arthrobacter）属、エシェリヒア（Escherichia）属、キサントモナス（Xanthomonas）属、クロストリジウム（Clostridium）属、クロモバクテリウム（Chromobacterium）属、サーモマイセス（Thermomyces）属、シュードモナス（Pseudomonas）属、スタフィロコッカス（Staphylococcus）属、ストレプトマイセス（Streptomyces）属、バチルス（Bacillus）属、プチニア（Puccinia）属、プロピオニバクテリウム（Propionibacterium）属、マイコトルラ（Micotorula）属、ラクトバチルス（Lactobacillus）属等の細菌由来のリパーゼが挙げられる。
そのうち、１，３−特異性リパーゼはエステル交換によるカカオ脂代用脂（SOS）の製造に利用でき、そのようなリパーゼの起源としては、リゾムコール属のリゾムコール・ミエハイ（Rizomucor miehei）、サーモマイセス属のサーモマイセス・ラヌギノサス（Thermomyces lanuginosus）、リゾプス属のリゾプス・デレマー（Rhizopus delemar）、リゾプス・ジャポニカス（Rhizopus japonicus）、リゾプス・ニベウス（Rhizopus niveus）、リゾプス・ジャバニカス（Rhizopus javanicus）、リゾプス・アーヒザス（Rhizopus arrhizus）、リゾプス・オリゼー（Rhizopus oryzae）が好ましい。
本発明のリパーゼは、リパーゼ製剤の固形分当たりの脂質分解活性を高めるために、例えば一般的な酵素精製法、あるいは、リパーゼを高分泌生産させることによって、リパーゼの純度、精製度を高めたものを用いることが好ましい。本発明のリパーゼ粉末製剤中に含まれるリパーゼの量は、用いるリパーゼによって力価が異なるため加水分解活性（ＩＵ）として表すと、加水分解活性が高い方が反応に用いるリパーゼ粉末製剤の添加量が少なくて済むため好ましく、具体的にはリパーゼ粉末製剤中、２００００〜２０００００ＩＵ／ｇであることが好ましい。
【００１３】
（卵由来蛋白）
本発明のリパーゼ粉末製剤で用いられる卵由来蛋白は、鶏卵等の鳥類の卵等の動物由来の卵に由来する蛋白質をいい、本発明のリパーゼ粉末製剤に添加する原料としては卵由来蛋白の精製品又はこれを含む原料を使用することができる。例えば、市販のリゾチーム、卵アルブミン等の卵由来蛋白の精製品を使用できるほか、全卵、卵白、卵黄等も使用することができる。またこれらは液体品だけでなく乾燥品を使用することもできる。これらのうち、使用した際に活性が高いこと、またその入手のし易さやコスト等の理由から、乾燥全卵がより好ましい。
【００１４】
（油脂）
本発明のリパーゼ粉末製剤で用いられる油脂としては、卵由来蛋白と共に卵に内在する油脂、あるいは卵由来蛋白とは別途に添加する油脂が挙げられる。別途に添加する油脂としては、例えば大豆油、ナタネ油、ヒマワリ油、コーン油、綿実油、紅花油、オリーブ油、パーム油、ヤシ油、パーム核油、カカオ脂、シア脂、サル脂、イリッペ脂、魚油、豚脂、牛脂、卵黄油などが挙げられる。油脂は先に挙げた油脂の調合品、分別品、その他様々な油脂加工技術により物性を改変させたものでもよい。また、油脂の構成成分、油脂の分解物である、ジグリセリド、モノグリセリドなどでもよい。これらのうち、卵由来蛋白と共に卵に内在する卵黄油を用いる場合は、卵由来蛋白とは別途に油脂を添加することは必須ではない。すなわち、全卵や卵黄を添加するだけでも卵由来蛋白、及び油脂（卵黄油）を含有させることができる。また、内在性の卵黄油と、これとは別途の油脂を併用することも可能であり、この場合はよりリパーゼ粉末製剤のエステル交換活性が高まる傾向にある。
本発明のリパーゼ粉末製剤中に含まれる卵由来蛋白と油脂の固形分含量比は、４０：６０〜０．５：９９．５であるのが好ましく、３０：７０〜５：９５であるのがより好ましい。
【００１５】
（複合体）
本発明のリパーゼ粉末製剤に含まれるリパーゼ、卵由来蛋白、及び油脂は複合体として含まれるのがより好ましい。本発明における「複合体」の意味は、リパーゼ粉末製剤に用いる原料を一旦水系下に均一に分散させ、乾燥させることによって一体となった状態のものをいう。したがって、例えば卵由来蛋白が水に溶解していない状態でリパーゼ、油脂と単に混合しただけの状態のものや、油脂が水と乳化していない状態でリパーゼ、卵由来蛋白を加えたものは複合体とはいえない。
このようにリパーゼ粉末製剤中にリパーゼ、卵由来蛋白、及び油脂が複合体化していることより、リパーゼがよりエステル交換活性又はエステル化活性を発揮するに好ましい状態となる。ただしこれらの原料全てが複合体化している必要はない。
このような複合体となすには卵由来蛋白、油脂及び水を混合し、乳化させて乳化物を調製し、これにリパーゼを添加して均一に混合した後に、水を除去する方法や、卵由来蛋白、油脂、水及びリパーゼを混合し、乳化させて乳化物を調製し、水を除去する方法が好ましい。なお、ここで乳化物とは、水溶液中に油脂が細かな油滴として分散して存在している状態を示しているものを指す。乳化物中の油滴のサイズは０．１〜１００μｍ程度であり、一般に粒子径が小さいほどより安定な乳化系である。乳化手段としては、高圧ホモゲナイザー等の均質化装置や超音波発生装置などの一般に使用されている乳化装置を用いることができる。
なお水と油の界面には、両親媒性を有する物質を存在させることでさらに安定な乳化状態を形成させることができる。両親媒性を有する物質としては、各種乳化剤、例えばシュガーエステル、グリセリン脂肪酸エステルやレシチンなどいずれを用いてもよく、あるいは蛋白質や多糖類等で乳化能を有するものであれば、いずれでもよい。
【００１６】
（リパーゼ粉末製剤）
本発明のリパーゼ粉末製剤は、上記のリパーゼ、卵由来蛋白、油脂及び水を含む混合液、好ましくは乳化物を噴霧乾燥等の気流乾燥、凍結乾燥、溶剤沈殿等の乾燥法で乾燥して水を除去することによって製造することができる。すなわち、保持可能な担体にリパーゼを固定化した固定化酵素製剤と異なり、非固定化製剤とも称すべきものである。噴霧乾燥は、ノズル向流式、ディスク向流式等のいずれの噴霧乾燥機を用いてもよく、乾燥条件は酵素の耐熱性に応じて適切に設定すればよいが、例えば入口温度を１００〜２００℃、好ましくは１００〜１３０℃以下、出口温度を４０〜１００℃、好ましくは４０〜７０℃以下とする。乾燥温度が高すぎると酵素の失活を招く恐れがあるので留意が必要である。凍結乾燥は棚段式凍結乾燥機が好ましい。溶剤沈殿による乾燥は、用いる溶剤としてエタノール、アセトン、メタノール、その他いずれの水溶性、非水溶性の溶剤でもよく、エタノール又はアセトンが好ましい。酵素の失活を防ぐために、０．１〜５℃付近の低温下で溶剤を徐々に添加して沈殿物を生成させ、得られた沈殿物を遠心分離機を用いて遠心分離し沈殿を回収した後、減圧乾燥する。
【００１７】
本発明のリパーゼ粉末製剤は、水分含量が１０質量％以下であるのが好ましく、特に、１〜８質量％であるのが好ましい。本発明のリパーゼ粉末の粒子径は任意であるが、リパーゼ粉末の平均粒子径が１００μｍ以下であるのが好ましい。なお平均粒子径の測定には、レーザ回折式粒度分布測定装置「ＳＡＬＤ−２０００Ａ」（(株)島津製作所製）などを用いることができる。以上により得られるリパーゼ粉末製剤は特にエステル交換活性又はエステル化活性が高いものである。エステル交換活性は具体的な数値としてKa値であらわすことができ、エステル化活性もこのKa値を指標とすることができる。Ka値の算出は以下の実施例に準ずるものとする。本発明のリパーゼ粉末製剤のKa値は少なくとも100以上であり、350以上がより好ましい。
【００１８】
（エステル交換反応、エステル化反応）
次に、本発明のリパーゼ粉末製剤を用いてエステル交換反応又はエステル化反応を行い、エステル交換物又はエステル化物を製造する方法について説明する。
【００１９】
ここで、エステルとは広義に解釈し、カルボン酸とアルコールとのエステルをいうものとする。
カルボン酸としては、例えば飽和又は不飽和で、直鎖状又は側鎖状の脂肪族一塩基酸である脂肪酸や、脂肪族二塩基酸や脂肪族三塩基酸が挙げられる。脂肪酸としては酢酸、酪酸、カプロン酸、カプリル酸、イソオクチル酸、イソノナン酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、パルミトオレイン酸、ヘプタデカン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、エライジン酸、１０−ヒドロキシステアリン酸、１２−ヒドロキシステアリン酸、リシノール酸、リノール酸、リノレン酸、エルシン酸、ベヘン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、セロチン酸、モンタン酸、ノナコサン酸、メリシン酸等を例示でき、脂肪族二塩基酸としてはコハク酸、リンゴ酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、グルタル酸、アゼライン酸、セバシン酸、１，１２−ドデカジカルボン酸、１，２４−テトラコサジカルボン酸等を例示でき、また脂肪族三塩基酸としてはクエン酸等を例示できる。
【００２０】
また、アルコールとしては、例えば飽和又は不飽和で、直鎖状又は側鎖状の脂肪族一価アルコール、および二価〜六価の多価アルコールが挙げられる。具体的には、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ヘキサノール、イソオクタノール、イソノナノール、ラウリルアルコール、セタノール、ステアリルアルコール、イソステアリルアルコール、オレイルアルコール、ベヘニルアルコール、オクタコサノール等の一価アルコール、エチレングリコール、ジエチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ブチレングリコール、１，８−オクタンジオール、１，１０−デカンジオール等の二価アルコール、グリセリン、ジグリセリン、トリグリセリン、ポリグリセリン、ペンタエリスリトール、ネオペンチルグリコール、トリメチロールエタン、トリメチロールプロパン、ソルビトール等の三価以上のアルコールを挙げることができる。
【００２１】
本発明のリパーゼ粉末製剤を使用して行うことのできるエステル交換反応は、主に一方の基質を油脂もしくは脂肪酸エステル等のカルボン酸エステルとし、他方の基質をカルボン酸エステル、カルボン酸又はアルコールとする反応である。例えば、油脂と油脂との反応、油脂と脂肪酸エステルとの反応、アルコリシスやアシドリシスによる反応が挙げられる。
また、本発明のリパーゼ粉末製剤を使用して行うことのできるエステル化反応は、主に一方の基質を一価アルコール又は多価アルコールとし、他方の基質を脂肪酸とする反応であり、多価アルコールはその部分エステルでもよい。例えば、グリセリンと脂肪酸との反応や、モノグリセリドもしくはジグリセリド及び脂肪酸との反応が挙げられる。
本発明のリパーゼ粉末製剤を用いたエステル交換反応やエステル化反応の条件については、特に限定されるものではなく、常法により行うことができる。
【００２２】
エステル交換反応あるいはエステル化反応を行った後においても、反応液中の本発明のリパーゼ粉末製剤は残存活性が高く安定なため、遠心分離等の固液分離手段により回収し、反応に再利用することが可能である。
【実施例】
【００２３】
以下実施例により、本発明の実施形態を更に詳細に説明する。
【００２４】
（実施例１）
油脂としてパームオレイン（商品名：「ユニバー１００」、不二製油（株）製）０．４５５ｇ、卵由来蛋白として卵アルブミン（キシダ化学（株）製）０．１９５ｇ、蒸留水４．３５ｇを混合し、超音波発生装置（Autochaser 300 C-5281、19.5kHz、（株）カイジョー製）を用いて、ダマ、油の分離がなくなるまで乳化物を調製した。この乳化物にリゾプス属由来の粗リパーゼ水溶液（加水分解活性20000IU/ml）５ｍｌを加え、ボルテックスミキサー（AUTOMATIC LABO-MIXER NS-8）（Pasolina製）により混合した後、凍結乾燥を行って、リパーゼ粉末製剤を得た。
【００２５】
（実施例２）
実施例１で使用した卵アルブミンを、乾燥卵白「乾燥卵白Ｋタイプ」（キューピータマゴ（株）製、脂質含量０．２％）０．１９５ｇに置き換え、実施例１と同様にリパーゼ粉末製剤を得た。
【００２６】
（実施例３）
実施例１で使用した卵アルブミンを、乾燥卵黄「乾燥卵黄Ｄ−１」（キューピータマゴ（株）製、脂質含量６５．２％）０．１９５ｇに置き換え、実施例１と同様にリパーゼ粉末製剤を得た。
【００２７】
（実施例４）
実施例１で使用した卵アルブミンを、乾燥全卵「乾燥全卵Ｄ−１」（キューピータマゴ（株）製、脂質含量４３．４％）０．１９５ｇに置き換え、実施例１と同様にリパーゼ粉末製剤を得た。
【００２８】
（比較例１）
実施例１と同様にして乾燥卵白０．６５ｇ、水４．３５ｇを混合し、超音波発生装置を用いて、ダマがなくなるまで混合した。これにリゾプス属由来の粗リパーゼ水溶液５ｍｌを混合し、凍結乾燥を行って、油脂を含まないリパーゼ粉末製剤を得た。
【００２９】
（実施例５）
比較例１で使用した乾燥卵白を、実施例３と同じ乾燥卵黄０．１９５ｇに置き換え、比較例１と同様にリパーゼ粉末製剤を得た。
【００３０】
（実施例６）
比較例１で使用した乾燥卵白を、実施例４と同じ乾燥全卵０．１９５ｇに置き換え、比較例１と同様にリパーゼ粉末製剤を得た。
【００３１】
（参考例）
リゾプス属由来の粗リパーゼ水溶液（加水分解活性２００００ＩＵ／ｍｌ）５ｍｌと、牛乳「おいしい牛乳」（明治乳業（株）製）５ｍｌを混合し、凍結乾燥を行って、乳由来蛋白及び乳脂を含むリパーゼ粉末製剤を得た。
【００３２】
（比較例２）
リゾプス属由来の粗リパーゼ水溶液（加水分解活性２００００ＩＵ／ｍｌ）５ｍｌと、パームオレイン（商品名：「ユニバー１００」、不二製油（株）製）０．６５ｇ、蒸留水４．３５ｇを混合し、凍結乾燥を行って、卵由来蛋白を含まないリパーゼ粉末製剤を得た。
【００３３】
（比較例３）
リゾプス属由来の粗リパーゼ水溶液（加水分解活性２００００ＩＵ／ｍｌ）５ｍｌと、蒸留水５ｍｌを混合し、凍結乾燥を行って、卵由来蛋白も油脂も含まないリパーゼ粉末製剤を得た。
【００３４】
（評価）各種リパーゼ粉末製剤のエステル交換活性
実施例１〜６、参考例及び比較例１〜３で得られた各リパーゼ粉末製剤のエステル交換活性を以下の方法により測定し、酵素製剤としての品質を評価した。
エステル交換反応の基質として、パーム中融点部とステアリン酸エチルとの等重量混合物３０ｇを、油中水分量０．０１％に調整し、１００ｍｌ三角フラスコに仕込んだ。これに各リパーゼ粉末製剤を０．３％添加して、２００ｒｐｍで撹拌しながら４０℃で２４時間反応し、反応後の試料をガスクロマトグラフィーで脂肪酸エチルエステル画分を分析した。
活性の評価法は、エチルエステル画分中のパルミチン酸エチルエステルの割合について、
完全に反応した状態の値をａ、時間ｔ＝１日における値をｂとして、反応率ｘ＝ｂ／ａとし、エステル交換活性Ｋａ＝（基質量）／（酵素剤量）×１／ｔ｛ｌｎ（１／（１−ｘ））｝とする。
各々のリパーゼ粉末製剤について、エステル交換活性（Ｋａ）を算出し、結果を表１及び図１に示した。
【００３５】
【表１】
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【００３６】
表１及び図１に示した結果の通り、乾燥卵白のみを含有する比較例１、油脂のみを含有する比較例２、リパーゼをそのまま乾燥し、リパーゼ粉末製剤とした比較例３に比べ、リパーゼ、卵由来蛋白、及び油脂を含有する実施例１〜６では、高いエステル交換活性を有していた。また製剤に含有する油脂は、実施例１〜３のように卵由来蛋白とは別に加えた場合と、実施例５、６のように乾燥卵黄や乾燥全卵に含まれる内在性のものを用いた場合の何れにおいても高いエステル交換活性を示した。特に、実施例１〜４におけるエステル交換活性の値が実施例５，６や参考例に比べても高い傾向にあった。また、実施例２において作製したリパーゼ粉末製剤を、先の評価法に基づき活性を測定した後、遠心によって基質と分離、回収し、新たな基質に添加、活性を評価したところ、その活性は１度目の反応の活性と同程度を維持しており、活性は極めて安定であった。
【図面の簡単な説明】
【００３７】
【図１】実施例１〜６、参考例及び比較例１〜３で調製した各リパーゼ粉末製剤のエステル交換活性（Ka）を示すグラフである。
【図１】
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