(57)【要約】【課題】安全でかつ勃起作用が増強された医薬組成物を提供すること。【解決手段】ホスホジエステラーゼ５阻害剤；及びＬ−カルニチン酸付加体を含有する医薬組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ホスホジエステラーゼ５阻害剤；及びＬ−カルニチン酸付加体を含有する医薬組成物。
【請求項２】
ホスホジエステラーゼ５阻害剤；Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩；及びＬ−カルニチン酸付加体を含有する医薬組成物。
【請求項３】
ホスホジエステラーゼ５阻害剤；Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩；及びＬ−カルニチン酸付加体を含有する陰茎勃起機能不全治療用又は陰茎勃起機能不全改善用医薬組成物。
【請求項４】
ホスホジエステラーゼ５阻害剤投与において得られる陰茎勃起作用を、Ｌ−アルギニン及びＬ−カルニチン酸付加体を含有させることによって増強させるための請求項１−３から選択される１項に記載の医薬組成物。
【請求項５】
ホスホジエステラーゼ５阻害剤が、シルデナフィル、バルデナフィル、タダラフィル及びそれらの薬理上許容される塩からなる群から選択される１である、請求項１−４から選択されるいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項６】
ホスホジエステラーゼ５阻害剤が、シルデナフィルクエン酸塩、バルデナフィル塩酸塩水和物又はタダラフィルである、請求項１−４から選択されるいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項７】
ホスホジエステラーゼ５阻害剤が、シルデナフィルクエン酸塩である、請求項１−４から選択されるいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項８】
Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩が、Ｌ−アルギニン塩酸塩である請求項２−７から選択されるいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
Ｌ−カルニチン酸付加体が、Ｌ−カルニチン塩化物である請求項１−８から選択されるいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項１０】
ホスホジエステラーゼ５阻害剤と、Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩；及びＬ−カルニチン酸付加体を同一の医薬組成物中に含有する請求項１−９から選択されるいずれか１項に記載の医薬組成物の製造方法。
【請求項１１】
陰茎勃起機能不全治療用又は陰茎勃起機能不全改善用医薬組成物を製造するための、ホスホジエステラーゼ５阻害剤；Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩；及びＬ−カルニチン酸付加体の使用。
【請求項１２】
ホスホジエステラーゼ５阻害剤と、Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩；及びＬ−カルニチン酸付加体を同時に、順次又は別個に投与する方法。
【請求項１３】
哺乳動物に請求項１−９から選択されるいずれか１項に記載された医薬組成物の有効量を投与することを特徴とする、陰茎勃起機能不全治療方法又は陰茎勃起機能不全改善方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ホスホジエステラーゼ５阻害剤；及びＬ−カルニチン酸付加体を含有する、主として陰茎勃起機能不全治療用又は改善用医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
ホスホジエステラーゼ（以下、ＰＤＥと称す）は、サイクリックＡＭＰ（以下、ｃＡＭＰと称す）やサイクリックＧＭＰ（以下、ｃＧＭＰと称す）のリン酸エステルを加水分解する酵素であり、これまでに１１種のＰＤＥが存在することが判っている。細胞の機能が損なわれた状態では多くの場合、ＰＤＥ活性が亢進しており、結果的にｃＧＭＰやｃＡＭＰが不足した状態になることが推定され、ＰＤＥを阻害する薬剤はこれらを増加させるのに有用である。
ＰＤＥの１種であるＰＤＥ５については陰茎海綿体や肺組織に豊富に存在する酵素であり、陰茎勃起不全や肺高血圧症に関与することが知られている。勃起の機序については、これまでの公知文献を統合すると、以下のように説明できる。
性的刺激により、陰茎海綿体にある末梢神経の神経型一酸化窒素合成酵素（ｎＮＯＳ）によって生成した一酸化窒素（ＮＯ）が、陰茎海綿体のグアニル酸シクラーゼを活性化してｃＧＭＰが合成される。ｃＧＭＰ濃度上昇とともに陰茎海綿体の平滑筋が弛緩して陰茎動脈から血液が流入してくる。陰茎海綿体への血液流入により陰茎体積・寸法の増大と、内圧上昇による陰茎硬化が惹起される。これに伴い陰茎静脈が圧迫されるようになり陰茎海綿体からの血液流出も抑制され、勃起が完結する。その後、射精の完了又は性的刺激の減弱によってＮＯ供給が途絶えてくると、陰茎海綿体に存在するＰＤＥ５によりｃＧＭＰが分解され、陰茎動脈からの血液流入が止まり、やがて勃起前の状態に戻る。
【０００３】
一方、ストレス等による交感神経の緊張による陰茎動脈収縮による海綿体血液流入の遮断、陰茎海綿体におけるｎＮＯＳ活性低下やグアニル酸シクラーゼ活性の低下、ＰＤＥ５活性の亢進、等のいずれか又はこれらが複合して起こると、陰茎が勃起しなかったり、勃起しても持続しなかったりして、性交が行えなくなる。このような病態を勃起不全、勃起機能障害あるいは勃起障害と言うが、心理的な配慮から、英名Erectile Dysfunctionの略名表示である「ＥＤ」が広く用いられるようになっている。
【０００４】
近年、ＰＤＥ５阻害剤が見いだされ、ＥＤ治療に革命がもたらされた。これは、陰茎海綿体のｃＧＭＰ分解酵素であるＰＤＥ５の活性を阻害し、陰茎の末梢ＮＯ神経によってもたらされる陰茎海綿体内のｃＧＭＰ量を維持・増大させ、陰茎海綿体内圧上昇（勃起）状態を持続させるものである（例えば、非特許文献１参照）。ＰＤＥ５阻害剤がＥＤに悩む患者の大部分を救った。
【０００５】
Ｌ−アルギニンはアミノ酸の一種であり、Ｌ−アルギニンは、尿素回路（オルニチン回路）の中間体で血中アンモニア低下作用があるため、医療用薬では尿素回路異常症用薬（例えば、非特許文献１参照）、ＯＴＣでは一部の滋養強壮剤に配合されている（例えば、非特許文献２参照）。また、Ｌ−アルギニンは一酸化窒素合成酵素（ＮＯＳ）の基質であることから、ＮＯ産生促進作用による勃起機能不全の改善効果を期待して臨床試験が行われたが、有効率が低く開発が中止された（例えば、特許文献１参照）。
【０００６】
Ｌ−カルニチンはアミノ酸の一種であり、その分子中に、４級アンモニウム構造を有するため、各種酸と酸付加体を形成する。例えば、塩酸とイオン結合することによって、酸付加体として、Ｌ−カルニチン塩化物を形成する。
Ｌ−カルニチン塩化物は、医療用薬では消化管運動亢進剤の注射薬（例えば、非特許文献１参照）、ＯＴＣでは健胃剤等として胃腸薬や滋養強壮剤に配合されている（例えば、非特許文献２参照）。また、特許文献３には、勃起障害の治療のためのアルカノイルＬ−カルニチンの単独使用が記載されているが、同文献にはこれを裏付けるデータは一つも開示されていない（特許文献３参照）。
【０００７】
これまでに、（１）シルデナフィルとアセチルＬ−カルニチンの２剤組合せ、（２）シルデナフィルとプロピオニルＬ−カルニチンの２剤組合せ、（３）アセチルＬ−カルニチンとプロピオニルＬ−カルニチンの２剤組合せ（４）シルデナフィル、アセチルＬ−カルニチン及びプロピオニルＬ−カルニチンの３剤組合せが開示されている。（１）と（２）についてはシルデナフィル単剤と有意差のない結果が得られ、（３）については一部有効性が得られ、（４）の３剤併用で優れた効果が得られることが開示されている（特許文献２参照）。なお、同文献には、シルデナフィルとＬ−カルニチン酸付加体の組合せ、及び、その効果については記載されておらず不明である。
【０００８】
これまでに、ＰＤＥ５阻害剤と、Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩の併用についての報告はなく、ＰＤＥ５阻害剤と、Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩；及びＬ−カルニチン酸付加体の３剤併用についは示唆もされていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開２００１−２２０３４９号公報
【特許文献２】特表２００８−５３１４６６号公報
【特許文献３】特表２００５−５１１６５５号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】医療用医薬品集  ２００９年版  ＪＡＰＩＣ  ２００８
【非特許文献２】ＯＴＣハンドブック  学術情報流通センター  ２００２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明の課題は、ＰＤＥ５阻害剤と併用した場合に、安全で、かつ優れた陰茎勃起機能不全治療用又は陰茎勃起機能不全改善用医薬組成物を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者らはかかる課題を解決するために鋭意研究を進めてきた結果、ＰＤＥ５阻害剤に、Ｌ−カルニチン酸付加体を併用すると、さらに優れた勃起作用が発現することを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１３】
すなわち、本発明は、以下に記すとおりである。
（１）
ホスホジエステラーゼ５阻害剤；及びＬ−カルニチン酸付加体を含有する医薬組成物。
【００１４】
また、本発明として、好適には、以下に記すとおりである。
（２）
ホスホジエステラーゼ５阻害剤；Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩；及びＬ−カルニチン酸付加体を含有する医薬組成物。
（３）
ホスホジエステラーゼ５阻害剤；Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩；及びＬ−カルニチン酸付加体を含有する陰茎勃起機能不全治療用又は陰茎勃起機能不全改善用医薬組成物。
（４）
ホスホジエステラーゼ５阻害剤投与において得られる陰茎勃起作用を、Ｌ−アルギニン及びＬ−カルニチン酸付加体を含有させることによって増強させるための（１）−（３）から選択される１項に記載の医薬組成物。
（５）
ホスホジエステラーゼ５阻害剤が、シルデナフィル、バルデナフィル、タダラフィル及びそれらの薬理上許容される塩からなる群から選択される１である、（１）−（４）から選択されるいずれか１項に記載の医薬組成物。
（６）
ホスホジエステラーゼ５阻害剤が、シルデナフィルクエン酸塩、バルデナフィル塩酸塩水和物又はタダラフィルである、（１）−（４）から選択されるいずれか１項に記載の医薬組成物。
（７）
ホスホジエステラーゼ５阻害剤が、シルデナフィルクエン酸塩である、（１）−（４）から選択されるいずれか１項に記載の医薬組成物。
（８）
Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩が、Ｌ−アルギニン塩酸塩である（２）−（７）から選択されるいずれか１項に記載の医薬組成物。
（９）
Ｌ−カルニチン酸付加体が、Ｌ−カルニチン塩化物である（１）−（８）から選択されるいずれか１項に記載の医薬組成物。
【００１５】
さらに、本発明は、以下に記載の発明を包含する。
（１０）
ホスホジエステラーゼ５阻害剤と、Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩；及びＬ−カルニチン酸付加体を同一の医薬組成物中に含有する（１）−（９）から選択されるいずれか１項に記載の医薬組成物の製造方法。
（１１）
陰茎勃起機能不全治療用又は陰茎勃起機能不全改善用医薬組成物を製造するための、ホスホジエステラーゼ５阻害剤；Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩；及びＬ−カルニチン酸付加体の使用。
（１２）
ホスホジエステラーゼ５阻害剤と、Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩；及びＬ−カルニチン酸付加体を同時に、順次又は別個に投与する方法。
（１３）
哺乳動物に（１）−（９）から選択されるいずれか１項に記載された医薬組成物の有効量を投与することを特徴とする、陰茎勃起機能不全治療方法又は陰茎勃起機能不全改善方法。
【００１６】
また、本発明の医薬組成物を投与する際は、それぞれのホスホジエステラーゼ５阻害剤を含有する医薬組成物、Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩を含有する医薬組成物、Ｌ−カルニチン酸付加体を含有する医薬組成物、をそれぞれ同時に又は順次に投与することが出来る。
「同時に」投与するとは、全く同時に投与することの他、薬理学上許される程度に相前後した時間に投与することも含むものである。その投与形態は、ほぼ同じ時間に投与できる投与形態であれば特に限定はないが、単一の医薬組成物であることが好ましい。
「順次に」投与するとは、異なった時間に別々に投与できる投与形態であれば特に限定はないが、例えば、１の組成物を投与し、次いで、決められた時間後に、他の組成物を投与する方法がある。
【００１７】
「治療」とは病気又は症状を治癒させることを意味し、「改善」とは病気又は症状を軽減或いは抑制させることを意味する。
【発明の効果】
【００１８】
本発明により、ＰＤＥ５阻害剤と、Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩；及びＬ−カルニチン酸付加体を含有する医薬組成物を性行為の約１時間前に、ほぼ同時に併用すれば、陰茎勃起作用が著しく増強されかつ安全である。これにより、ＰＤＥ５阻害剤の含有量を減量することが可能となるので有用である。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】図１は、被験薬投与後の各時間における家兎ペニス長さの測定結果を示す。また、横軸は、投与後時間（ｍｉｎ）を示し、縦軸は、ペニスの長さ（ｍｍ）を示す。
【図２】図２は、被験薬投与後の各時間における家兎ペニス長さの測定結果を示す。また、横軸は、投与後時間（ｍｉｎ）を示し、縦軸は、ペニスの長さ（ｍｍ）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
「陰茎勃起機能不全」とは、何らかの原因により、性交に必要とされるほどの陰茎勃起が発現しなかったり、いったん勃起しても持続せず正常な性交渉が行えなかったりする状態を指し、「陰茎勃起機能不全改善」とは、このような状態を改善することをいう。
【００２１】
「ＰＤＥ５阻害剤」とは、ＰＤＥ５を阻害する作用があれば特に限定されないが、具体的には、シルデナフィルクエン酸塩、バルデナフィル塩酸塩、タダラフィル等を指す。
【００２２】
ＰＤＥ５阻害剤として、シルデナフィルクエン酸塩、バルデナフィル塩酸塩、タダラフィルは公知の化合物であり市販されているため入手できる。
【００２３】
Ｌ−アルギニン及びＬ−カルニチンは、アミノ酸であることから、薬理上許容される塩又は酸付加体を形成する。
薬理上許容される塩又は酸付加体として、好適には、フッ化水素酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩のようなハロゲン化水素酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、硫酸塩、リン酸塩等の無機酸塩；メタンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩のような低級アルカンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩のようなアリ−ルスルホン酸塩、酢酸塩、リンゴ酸塩、フマ−ル酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、アスコルビン酸塩、酒石酸塩、蓚酸塩、マレイン酸塩等の有機酸塩であり、より好適には、ハロゲン化水素酸塩又は有機酸塩である。
【００２４】
Ｌ−アルギニン及びＬ−アルギニン塩酸塩は第１５改正日本薬局方に収載されている。また、Ｌ−カルニチン塩化物（塩化カルニチン）は日本薬局方外医薬品規格２００２に収載されている。
【００２５】
本発明の医薬組成物の１日投与量における、ＰＤＥ５阻害剤の含有量は１ｍｇ〜１２０ｍｇであり、好ましくは、５ｍｇ〜７０ｍｇである。
【００２６】
また、Ｌ−アルギニン又はその薬理上許容される塩の含有量は、Ｌ−アルギニンとして０．１ｇ〜２５ｇであり、好ましくは、０．５ｇ〜２０ｇである。この範囲のＬ−アルギニン用量では血圧低下の副作用は発現しない（アルギニン製剤：アルギＵ顆粒添付文書  味の素  第２版  ２００８）。
【００２７】
さらに、Ｌ−カルニチン酸付加体の含有量は、Ｌ−カルニチンとして０．０１ｇ〜５ｇであり、好ましくは、０．１ｇ〜２ｇである。
【００２８】
これらを１日１回、性行為の約１時間前に服用する。また、肺動脈性肺高血圧症の場合は当該量を３回に分けて服用する。
【００２９】
なお、「順次又は別個に」投与する場合には、ＰＤＥ５阻害剤、Ｌ−アルギニン及びＬ−カルニチンを性行為の約１時間前に服用することには変わりないが、どちらかと言えば、Ｌ−カルニチンを先に投与する方が望ましい。
【実施例】
【００３０】
本発明の実施例を以下に記載するが、これらに限定されるものではない。
（実施例）錠剤
（成分）
（表１）
１〜３錠中（ｍｇ）                    ａ        ｂ        ｃ        ｄ
――――――――――――――――――――――――――――――――――――
シルデナフィルクエン酸塩            ２０      ２０        −        −
バルデナフィル塩酸塩                  −        −      １０        −
タダラフィル                          −        −        −      １０
Ｌ−カルニチン                    １５０    １５０    １５０    １５０
Ｌ−アルギニン                        −    ９００    ９００    ９００
結晶セルロース                      ８０      ８０      ８０      ８０
乳糖                                ６０      ６０      ６０      ６０
ステアリン酸マグネシウム              ３        ５        ５        ５
ヒドロキシプロピルセルロース        適量      適量      適量      適量
――――――――――――――――――――――――――――――――――――
（製法）
上記成分および分量をとり、日局製剤総則「錠剤」の項に準じて錠剤を製造する。
（試験例１）陰茎勃起効果確認試験（静脈注射）
（１）被験物質
シルデナフィルクエン酸塩は市販の医療用バイアグラ錠（ファイザー製）を抽出した後、再度クエン酸塩としてから使用した。Ｌ−アルギニン塩酸塩は市販の日局Ｌ−アルギニン塩酸塩注射液（商品名：アルギニン注、味の素製）を使用した。Ｌ−カルニチン塩化物は市販の塩化カルニチン注射液（商品名：エントミン注、マルコ製薬製）を使用した。
【００３１】
シルデナフィルクエン酸塩は１０ｍｇ／ｍＬとなるように溶媒（ＤＭＳＯ：生理食塩水＝３０：７０）に溶解した。Ｌ−アルギニン塩酸塩は１０％濃度（１００ｍｇ／ｍＬ）のアルギニン注「味の素」をそのまま使用した。Ｌ−カルニチン塩化物は１０％濃度（２００ｍｇ／２ｍＬ）のエントミン注をそのまま使用した。
【００３２】
Ｌ−アルギニン塩酸塩、Ｌ−カルニチン塩化物及びシルデナフィルクエン酸塩の合剤は、上記アルギニン注及びエントミン注にシルデナフィルクエン酸塩濃度が１０ｍｇ／ｍＬとなるように添加して作製した。
（２）使用動物
ＪＷ雄性家兎１６週齢を日本ＳＬＣ（株）から購入し、温度２０〜２６℃、湿度３０〜７０％、照明時間６時〜１８時に制御されたウサギ飼育室内でウサギ用ブラケットテーパーケージに入れ、ウサギ飼育用飼料および水フィルターを通した水道水を自由に摂取させた。
（３）試験方法
被験物質は耳静脈内に投与した。いずれの被験物質も投与液量は０．１ｍＬ／Ｋｇである。通常、家兎のペニスは露出しておらず、勃起時に露出してくるので、被験薬投与による勃起作用は、露出した陰茎長さによって評価できる。
【００３３】
被験薬投与後、１、３、５、１０、１５、３０及び６０分の間隔にて、陰茎露出長さ（ｍｍ）をノギスによって測定した。
（４）試験結果
被験薬投与後の各時間における家兎ペニス長さの測定結果を表２および図１に示す。
【００３４】
ここで、Ｓはシルデナフィルクエン酸塩（１ｍｇ／Ｋｇ）、ＡはＬ−アルギニン塩酸塩（５００ｍｇ／Ｋｇ）、ＣはＬ−カルニチン塩化物（１０ｍｇ／Ｋｇ）の各単剤を示す。
【００３５】
Ｓ＋Ｃはシルデナフィルクエン酸塩（１ｍｇ／Ｋｇ）とＬ−カルニチン塩化物（１０ｍｇ／Ｋｇ）の併用、また、３合剤はシルデナフィルクエン酸塩（１ｍｇ／Ｋｇ）、Ｌ−カルニチン塩化物（１０ｍｇ／Ｋｇ）、Ｌ−アルギニン塩酸塩（５００ｍｇ／Ｋｇ）を併用した結果である。
【００３６】
なお、各値とも１群６匹の平均値である。
（表２）ペニス長さ（ｍｍ）
静脈投与後の経過時間（分）
薬剤        １        ３        ５      １０      １５      ３０      ６０
――――――――――――――――――――――――――――――――――――――
Ｓ単剤    ０．６    ２．５    ２．５    ２．５    ３．１    ２．４    ２．１
Ａ単剤    ４．５    ３．１    ３．０    １．２    １．０    ０．４    ０．０
Ｃ単剤    ０．０    ０．０    ０．０    ０．１    ０．０    ０．０    ０．０
Ｓ＋Ｃ    ０．４    ２．５    ３．１    ６．７    ４．７    ５．４    ４．２
３合剤    ８．３    ９．７  １０．９    ９．０    ８．５    ３．８    ２．８
――――――――――――――――――――――――――――――――――――――
表２および図１の結果より、シルデナフィルクエン酸塩単剤（Ｓ単剤）およびＬ−アルギニン塩酸塩（Ａ単剤）の各単剤投与群において勃起作用が確認され、Ｌ−カルニチン塩化物単剤（Ｃ単剤）では確認されなかった。
【００３７】
シルデナフィルクエン酸塩とＬ−カルニチン塩化物の併用では、該併用群（Ｓ＋Ｃ）では勃起増強作用とその持続性が認められた。
【００３８】
シルデナフィルクエン酸塩とＬ−アルギニン塩酸塩及びＬ−カルニチン塩化物の３併用群（３合剤）では、Ｓ＋Ｃ群よりも勃起の早期発現および勃起量の増強作用が発現する。
特に、該３合剤では、投与後、２０分以内に強い勃起作用が確認され、さらに、投与後、１０分以内においても非常に強い勃起作用を示すことが特徴である。該３合剤はＳ＋Ｃよりも若干持続性に劣るものの、例えば、ＡＵＣ（ｍｍ×ｍｉｎ）で評価すると、該Ｓ＋Ｃ群では２８０であるが、該３合剤群では３２８となり総じて優れていることが判明した。
【００３９】
本結果は、該３合剤が、これまでに知られているシルデナフィルクエン酸塩の勃起作用とは異なって、速効性を有する陰茎勃起機能不全治療用又は改善用医薬組成物としての有用性を示すものと考えられる。
（試験例２）陰茎勃起効果確認試験（経口投与）
（１）被験物質
シルデナフィルクエン酸塩は市販の医療用バイアグラ錠５０ｍｇ（ファイザー製）を粉砕して使用した。Ｌ−アルギニン塩酸塩は市販の日局Ｌ−アルギニン塩酸塩注射液（商品名：アルギニン注、味の素製）を使用した。Ｌ−カルニチン塩化物は市販の塩化カルニチン注射液（商品名：エントミン注、マルコ製薬製）を使用した。
【００４０】
シルデナフィルクエン酸塩は２又は４ｍｇ／ｍＬとなるように日本薬局方注射用水を添加して調整した。Ｌ−アルギニン塩酸塩およびＬ−カルニチン塩化物は上記注射液をそのまま使用した。
（２）使用動物
ＪＷ雄性家兎１６週齢を北山ラベス（株）から購入し、温度２０〜２６℃、湿度３０〜７０％、照明時間６時〜１８時に制御されたウサギ飼育室内でウサギ用ブラケットテーパーケージに入れ、ウサギ飼育用飼料および水フィルターを通した水道水を自由に摂取させた。
（３）試験方法
家兎を固定器にて固定し、ネラトンカテーテル１２号にディスポーザブル注射器を装着して経口投与した。通常、家兎のペニスは露出しておらず、勃起時に露出してくるので、被験薬投与による勃起作用は、露出した陰茎長さによって評価できる。
【００４１】
被験薬投与後、５、１５、３０、６０、９０、１２０及び１８０分にて、陰茎露出長さ（ｍｍ）をノギスによって測定した。
（４）試験結果
被験薬投与後の各時間における家兎ペニス長さの測定結果を表３および図２に示す。
【００４２】
ここで、Ｓはシルデナフィルクエン酸塩（１０ｍｇ／Ｋｇ）、Ｃ＋ＡはＬ−カルニチン塩化物（２００ｍｇ／Ｋｇ）とＬ−アルギニン塩酸塩（４００ｍｇ／Ｋｇ）の合剤、３合剤は上記３成分を併用（Ｓ＋Ａ＋Ｃ）した結果である。
【００４３】
なお、各値とも１群３匹の平均値である。
（表３）ペニス長さ（ｍｍ）
経口投与後の経過時間
薬剤        ５    １５    ３０    ４５    ６０    ９０  １２０  １８０
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
Ｓ単剤    ０．０  １．４  ３．５  ５．３  ４．０  ３．４  ２．５  ０．９
Ｃ＋Ａ    ０．０  ０．０  ０．０  ０．０  ０．０  ０．０  ０．０  ０．０
３合剤    ０．０  ４．１  ９．３  ５．８  ５．９  ４．８  ５．０  １．１
―――――――――――――――――――――――――――――――――――――
表３および図２の結果より、シルデナフィルクエン酸塩単剤（Ｓ単剤）および３合剤（Ｓ＋Ａ＋Ｃ）において勃起作用が確認され、Ｌ−カルニチン塩化物とＬ−アルギニン塩酸塩の合剤（Ｃ＋Ａ）では確認されなかった。
【００４４】
シルデナフィルクエン酸塩に、無効であったＬ−カルニチン及びＬ−アルギニン塩酸塩を併用した群（３合剤）では、Ｓ単剤群より勃起量の増強作用が発現する。ＡＵＣ（ｍｍ×ｍｉｎ）で評価すると、Ｓ単剤群では４８１であるが、３合剤群では８１３となり顕著な増強作用であることが判明した。
【図１】
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【図２】
2010222347.tif 000003