(57)【要約】【課題】皮膚浸透性の高い平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有ナノ粒子、及びそれを複合化して成る複合粒子の簡便且つ低コストな製造方法を提供する。【解決手段】トラネキサム酸を溶解させた水溶液と、生体適合性高分子を有機溶媒に混合した溶液とを混合し、トラネキサム酸が生体適合性高分子中に封入されたトラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液とする。次に、トラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液から有機溶媒を留去する。これにより、化粧料や外用薬の原料として好適な皮膚浸透性の高いトラネキサム酸含有ナノ粒子を製造可能となる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
トラネキサム酸を溶解させた水溶液に、生体適合性高分子を有機溶媒に溶解させた溶液を加えて、トラネキサム酸が内包および表面に担持されたトラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液を生成するナノ粒子形成工程と、
前記トラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液から有機溶媒を留去する溶媒留去工程と、
を有するトラネキサム酸含有ナノ粒子の製造方法。
【請求項２】
前記生体適合性高分子が、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかであることを特徴とする請求項１に記載のナノ粒子の製造方法。
【請求項３】
前記生体適合性高分子が乳酸・グリコール酸共重合体であり、トラネキサム酸と乳酸・グリコール酸共重合体との重量比が１：２〜４：１であることを特徴とする請求項２に記載のナノ粒子の製造方法。
【請求項４】
トラネキサム酸を溶解させた水溶液にトラネキサム酸との重量比が１：１以下となるようにポリビニルアルコールを配合することを特徴とする請求項１乃至請求項３のいずれか１項に記載のナノ粒子の製造方法。
【請求項５】
前記生体適合性高分子を有機溶媒に溶解させた溶液に他の生理活性成分を添加することを特徴とする請求項１乃至請求項４のいずれか１項に記載のナノ粒子の製造方法。
【請求項６】
請求項１乃至請求項５のいずれか１項に記載の製造方法により製造されたトラネキサム酸含有ナノ粒子を複合化する複合化工程を有し、該複合化工程の前に、前記トラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液に保護剤を添加することを特徴とするトラネキサム酸含有複合粒子の製造方法。
【請求項７】
前記複合化工程が凍結乾燥工程であることを特徴とする請求項６に記載の複合粒子の製造方法。
【請求項８】
前記保護剤が、トレハロースであることを特徴とする請求項７に記載の複合粒子の製造方法。
【請求項９】
前記トレハロースの生体適合性高分子に対する重量比が２倍以上であることを特徴とする請求項８に記載の複合粒子の製造方法。
【請求項１０】
前記保護剤と共に、さらにトラネキサム酸を添加することを特徴とする請求項７乃至請求項９のいずれか１項に記載の複合粒子の製造方法。
【請求項１１】
前記保護剤と共に、他の生理活性成分を添加することを特徴とする請求項７乃至請求項１０のいずれか１項に記載の複合粒子の製造方法。
【請求項１２】
請求項１乃至請求項５のいずれか１項に記載の製造方法により製造された、平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有ナノ粒子。
【請求項１３】
請求項６乃至請求項１１のいずれか１項に記載の製造方法により製造された、再分散後の平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有複合粒子。
【請求項１４】
請求項１２又は請求項１３に記載のトラネキサム酸含有ナノ粒子又は複合粒子を配合して成る化粧料。
【請求項１５】
請求項１２又は請求項１３に記載のトラネキサム酸含有ナノ粒子又は複合粒子を配合して成る外用医薬製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体適合性の高分子にトラネキサム酸を担持させたトラネキサム酸含有ナノ粒子及び複合粒子の製造方法、及び該製造方法により製造されたナノ粒子及び複合粒子、並びにそれらを配合して成る化粧料、外用医薬製剤に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
トラネキサム酸は、人工的に合成されたアミノ酸の一種である。このトラネキサム酸は血中でフィブリンに拮抗してプラスミノーゲンに結合し、フィブリンの分解による出血を抑制するため止血剤として用いられるほか、表皮中でプラスミンに結合して活性化を阻害することによりメラニンの産生を抑制することが知られている。そのため、美白効果を有する化粧料や肝斑等のシミを治療する医薬品の原料として用いられている。
【０００３】
トラネキサム酸を用いてメラニンの産生を効果的に抑制するためには、必要十分量のトラネキサム酸を目標部位（皮膚深部）に到達させる必要がある。しかしながら、経口投与により十分な量のトラネキサム酸を目標部位に到達させるには体内の消化酵素による分解を考慮して多量の投与が必要となるため、副作用が懸念される。また、トラネキサム酸の皮膚浸透性は低く、経皮投与では表皮の内側にまで十分浸透させることができない。そのため、トラネキサム酸を皮膚深部まで十分に送達可能な製剤はほとんど実用化されていないのが現状である。
【０００４】
そこで、薬物が患部に到達するまで吸収・分解されないようにして、効果的に薬物を投与する技術、いわゆるDrug Delivery System（以下、ＤＤＳという）を用いてトラネキサム酸を目標部位に供給する方法が考えられる。
【０００５】
ＤＤＳにおいて中心となる技術の一つは、微量の薬物を生体適合性の高分子の内部または表面に担持させ、細胞への薬物導入効率の高い数十から数百ナノメートル程度のナノ粒子とする技術である。この薬物含有ナノ粒子は、目標とする患部まで薬物を安定して確実に運搬するとともに、高分子の種類や投与後の経過時間で薬物の放出速度（徐放性）をコントロールすることにより、患部に到達した時点で薬物を放出することができ、注射剤や経口剤としての用途の他、従来、皮膚深部まで十分浸透させることが困難であった外用薬にも高い効果を発揮する。
【０００６】
トラネキサム酸を用いたＤＤＳとして、例えば特許文献１には、末端がエステル化された生分解性α−ヒドロキシカルボン酸ポリマーのナノ粒子と薬物とを混合し、圧縮成型した長期徐放性製剤が開示されており、ナノ粒子と混合する薬物の一例としてトラネキサム酸が記載されている。
【０００７】
しかしながら、特許文献１の方法ではナノ粒子と薬物とを圧縮成型製剤とするため、皮膚浸透性を必要とする化粧料や外用薬への適用は困難であった。また、ナノ粒子とトラネキサム酸とを液中に分散させて皮膚に塗布することで、ナノ粒子と共にトラネキサム酸を皮膚深部まで浸透させる方法も試みられているが、ナノ粒子の皮膚浸透効果は粒子径と密接な関係を有しており、特許文献１の実施例に記載されているような平均粒子径が１００〜数百ｎｍのナノ粒子では皮膚浸透効果が十分ではなかった。
【０００８】
また、特許文献２には、ナノ粒子内に生理活性成分を内包した経皮吸収剤が開示されており、生理活性成分の一例としてトラネキサム酸が記載されている。一方、平均粒子径が１００ｎｍ未満である小径のナノ粒子を調製する方法として、特許文献３、４には乳酸・グリコール酸共重合体（以下、ＰＬＧＡともいう）で形成されるナノ粒子の粒子径を制御する方法が開示されており、特許文献５にはＰＬＧＡを用いた平均粒子径が約５０ｎｍのアスタキサンチン、トコフェノール含有ナノ粒子の製造例が開示されている。
【０００９】
さらに、親水性物質であるトラネキサム酸をＰＬＧＡで形成されるナノ粒子内に封入することは困難であるところ、特許文献６には、ナノ粒子を形成するポリマーとして、親水性ポリマーブロックがポリエチレングリコール（ＰＥＧ）で構成され、疎水性ポリマーブロックがＰＬＧＡで構成されたＰＥＧ−ＰＬＧＡブロック共重合体を用いることにより、親水性の生物活性成分を高封入率でナノ粒子内に封入する方法が開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１０】
【特許文献１】特開２００１−１８７７４９号公報
【特許文献２】特開２００２−３０８７２８号公報
【特許文献３】特開２００６−１３１５７７号公報
【特許文献４】特開２００８−１７４４９０号公報
【特許文献５】特開２００８−１１０９２６号公報
【特許文献６】特開２００６−３２１７６３号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
特許文献２の方法では、皮膚浸透性が高い平均粒子径５０〜８０ｎｍのナノ粒子の製造例が記載されているものの、ホモミキサによる一次乳化処理後、マイクロフルイダイザで複数回処理するか、或いはナノ粒子形成工程において有機溶媒の８０倍以上という多量の精製水を使用する必要があり、ナノ粒子を簡便に且つ効率良く製造できなかった。
【００１２】
また、特許文献３〜５の方法においても、ナノ粒子を小径化するために反応液中のアセトン濃度やＰＬＧＡ濃度を調整したり、ナノ粒子懸濁液にアセトンや水を加える操作を繰り返し行ったりする必要があり、製造工程数や溶媒使用量が増加するという問題点があった。さらに、特許文献２〜５には生理活性成分としてトラネキサム酸を担持したナノ粒子の製造例は全く記載されておらず、平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有ナノ粒子の製造にそのまま適用できるものではなかった。
【００１３】
一方、特許文献６の方法を用いた場合、親水性のトラネキサム酸をナノ粒子内に高封入率で封入できると予想されるものの、平均粒子径が１００ｎｍ未満である小径のナノ粒子を安定して製造することは困難であった。また、ＰＬＧＡに代えてＰＥＧ−ＰＬＧＡブロック共重合体を使用する必要があるため、コスト面においても不利となっていた。
【００１４】
本発明は、上記問題点に鑑み、皮膚浸透性の高い平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有ナノ粒子、及びそれを複合化して成る複合粒子の簡便且つ低コストな製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
上記目的を達成するために本発明の第１の構成は、トラネキサム酸を溶解させた水溶液に、生体適合性高分子を有機溶媒に溶解させた溶液を加えて、トラネキサム酸が内部及び表面に担持されたトラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液を生成するナノ粒子形成工程と、前記トラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液から有機溶媒を留去する溶媒留去工程と、を有するトラネキサム酸含有ナノ粒子の製造方法である。
【００１６】
また本発明の第２の構成は、上記構成のナノ粒子の製造方法において、前記生体適合性高分子が、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかであることを特徴としている。
【００１７】
また本発明の第３の構成は、上記構成のナノ粒子の製造方法において、前記生体適合性高分子が乳酸・グリコール酸共重合体であり、トラネキサム酸と乳酸・グリコール酸共重合体との重量比が１：２〜４：１であることを特徴としている。
【００１８】
また本発明の第４の構成は、上記構成のナノ粒子の製造方法において、トラネキサム酸を溶解させた水溶液にトラネキサム酸との重量比が１：１以下となるようにポリビニルアルコールを配合することを特徴としている。
【００１９】
また本発明の第５の構成は、上記構成のナノ粒子の製造方法において、前記生体適合性高分子を有機溶媒に溶解させた溶液に他の生理活性成分を添加することを特徴としている。
【００２０】
また本発明の第６の構成は、上記構成のナノ粒子の製造方法により製造されたトラネキサム酸含有ナノ粒子を複合化する複合化工程を有し、該複合化工程の前に、前記トラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液に保護剤を添加するトラネキサム酸含有複合粒子の製造方法である。
【００２１】
また本発明の第７の構成は、上記構成の複合粒子の製造方法において、前記複合化工程が凍結乾燥工程であることを特徴としている。
【００２２】
また本発明の第８の構成は、上記構成の複合粒子の製造方法において、前記保護剤が、トレハロースであることを特徴としている。
【００２３】
また本発明の第９の構成は、上記構成の複合粒子の製造方法において、前記トレハロースの生体適合性高分子に対する重量比が２倍以上であることを特徴としている。
【００２４】
また本発明の第１０の構成は、上記構成の複合粒子の製造方法において、前記保護剤と共に、さらにトラネキサム酸を添加することを特徴としている。
【００２５】
また本発明の第１１の構成は、上記構成の複合粒子の製造方法において、前記保護剤と共に、他の生理活性成分を添加することを特徴としている。
【００２６】
また本発明の第１２の構成は、上記構成のナノ粒子の製造方法において製造された、平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有ナノ粒子である。
【００２７】
また本発明の第１３の構成は、上記構成の複合粒子の製造方法において製造された、再分散後の平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有複合粒子である。
【００２８】
また本発明の第１４の構成は、上記構成のトラネキサム酸含有ナノ粒子又は複合粒子を配合して成る化粧料である。
【００２９】
また本発明の第１５の構成は、上記構成のトラネキサム酸含有ナノ粒子又は複合粒子を配合して成る外用医薬製剤である。
【発明の効果】
【００３０】
本発明の第１の構成によれば、トラネキサム酸を溶解させた水溶液に、生体適合性高分子を有機溶媒に溶解させた溶液を加えることで、従来の球形晶析法では製造が困難であった平均粒子径が１００ｎｍ未満である小径のトラネキサム酸含有ナノ粒子を簡便且つ効率的に製造することができる。
【００３１】
また、本発明の第２の構成によれば、上記第１の構成のナノ粒子の製造方法において、生体適合性高分子として、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸・グリコール酸共重合体のいずれかを用いることにより、生体への刺激・毒性が低くトラネキサム酸を内包及び表面担持可能であり、且つトラネキサム酸の効力を保持したまま長期間保存できるナノ粒子を製造することができる。
【００３２】
また、本発明の第３の構成によれば、上記第２の構成のナノ粒子の製造方法において、生体適合性高分子として乳酸・グリコール酸共重合体を用い、トラネキサム酸と乳酸・グリコール酸共重合体との重量比を１：２〜４：１とすることにより、粒子の凝集や反応容器への付着を引き起こすことなく、微細な粒径のナノ粒子を効率的に製造可能となる。また、乳酸・グリコール酸共重合体の分子量や共重合体中の乳酸及びグリコール酸の含有量を選択することで、調製されたナノ粒子の皮膚浸透性やトラネキサム酸の放出速度を制御することができる。
【００３３】
また、本発明の第４の構成によれば、上記第１乃至第３のいずれかの構成のナノ粒子の製造方法において、トラネキサム酸を溶解させた水溶液にトラネキサム酸との重量比が１：１以下となるようにポリビニルアルコールを配合することにより、溶媒留去工程におけるナノ粒子の凝集を抑制するとともに、溶媒留去後のトラネキサム酸含有ナノ粒子の平均粒子径をより微小化することができる。
【００３４】
また、本発明の第５の構成によれば、上記第１乃至第４のいずれかの構成のナノ粒子の製造方法において、生体適合性高分子を有機溶媒に溶解させた溶液に他の生理活性成分を添加することにより、ナノ粒子中に他の生理活性成分を内包したトラネキサム酸含有ナノ粒子を製造することができる。
【００３５】
また、本発明の第６の構成によれば、上記第１乃至第５のいずれかの方法によって製造されたトラネキサム酸含有ナノ粒子を複合化する複合化工程を設け、複合化工程の前にトラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液に保護剤を添加することにより、使用前までは取り扱いが容易で、使用時には再分散可能な複合粒子を製造することができる。また、熱に弱いナノ粒子に耐熱性を付与することができ、ナノ粒子を安定して保存できる。さらに、複合粒子の再分散性が向上し、皮膚深部にまで十分に浸透できるようになる。
【００３６】
また、本発明の第７の構成によれば、上記第６の構成の複合粒子の製造方法において、複合化工程を凍結乾燥によって行うことにより、ナノ粒子の複合化を良好に且つ効率よく行うことができる。
【００３７】
また、本発明の第８の構成によれば、上記第７の構成の複合粒子の製造方法において、保護剤としてトレハロースを用いることにより、凍結乾燥後における複合粒子の再分散性を高めることができる。
【００３８】
また、本発明の第９の構成によれば、上記第８の構成の複合粒子の製造方法において、トレハロースの生体適合性高分子に対する重量比を２倍以上とすることにより、複合粒子を再分散させた後のナノ粒子の粒子径を溶媒留去後と同程度に維持することができる。
【００３９】
また、本発明の第１０の構成によれば、上記第７乃至第９のいずれかの構成の複合粒子の製造方法において、保護剤と共に、さらにトラネキサム酸を添加することにより、トラネキサム酸のトータルでの含有率を高めることができる。従って、目的及び用途に応じた所望のトラネキサム酸含有量の複合粒子を簡単に得ることができる。
【００４０】
また、本発明の第１１の構成によれば、上記第７乃至第１０のいずれかの構成のナノ粒子の製造方法において、保護剤と共に、他の生理活性成分を添加することにより、表面に他の生理活性成分を付着させた複合粒子を得ることができる。
【００４１】
また、本発明の第１２の構成によれば、上記第１乃至第５のいずれかの構成のナノ粒子の製造方法により製造された平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有ナノ粒子であるため、化粧料や外用薬に配合した場合に皮膚浸透性が非常に高いトラネキサム酸含有ナノ粒子となる。
【００４２】
また、本発明の第１３の構成によれば、上記第６乃至第１１のいずれかの構成の複合粒子の製造方法により製造された再分散後の平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有複合粒子であるため、使用前までは取り扱いが容易で、化粧料や外用薬に配合した場合に皮膚浸透性が非常に高いトラネキサム酸含有ナノ粒子に再分散可能なトラネキサム酸含有複合粒子となる。
【００４３】
また、本発明の第１４の構成によれば、上記第１２又は第１３の構成のトラネキサム酸含有ナノ粒子又は複合粒子を配合することにより、トラネキサム酸含有ナノ粒子を皮膚深部まで浸透させ、粒子内部或いは表面に担持されたトラネキサム酸を放出させて美白効果を有効に発現できる化粧料が提供される。
【００４４】
また、本発明の第１５の構成によれば、上記第１２又は第１３の構成のトラネキサム酸含有ナノ粒子又は複合粒子を配合することにより、トラネキサム酸含有ナノ粒子を皮膚深部まで浸透させ、粒子内部或いは表面に担持されたトラネキサム酸を放出させてシミ治療効果を有効に発現できる外用医薬製剤が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００４５】
【図１】本発明の製造方法により製造されたトラネキサム酸含有ナノ粒子の構造を示す模式図
【図２】保護剤と共に複合化されたトラネキサム酸含有複合粒子の構造を示す模式図
【図３】試験例１におけるトラネキサム酸の添加量と懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径との関係を示すグラフ
【図４】試験例２におけるトラネキサム酸の添加量と懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径との関係を示すグラフ
【図５】試験例３における保護剤の種類と再分散後のナノ粒子の平均粒子径との関係を示すグラフ
【図６】試験例４におけるトレハロースの添加量と再分散後のナノ粒子の平均粒子径との関係を示すグラフ
【図７】試験例４におけるスクロースの添加量と再分散後のナノ粒子の平均粒子径との関係を示すグラフ
【発明を実施するための形態】
【００４６】
本発明のトラネキサム酸含有ナノ粒子の製造方法は、薬物および生体適合性高分子をｎｍ（ナノメートル）単位の大きさの粒子（ナノ粒子）に加工することができる球形晶析法を用いて、ナノ粒子表面にトラネキサム酸を物理的に吸着担持させるものである。球形晶析法は、化合物合成の最終プロセスにおける結晶の生成・成長プロセスを制御することで、球状の結晶粒子を設計し、その物性を直接制御して加工することができる方法である。本発明では、特に球形晶析法の一つであるエマルション溶媒拡散法（ＥＳＤ法）を用いている。
【００４７】
ＥＳＤ法には、基剤ポリマーとなる生体適合性高分子を溶解する良溶媒と、これとは逆に生体適合性高分子を溶解しない貧溶媒の二種類の溶媒が用いられる。この良溶媒には、生体適合性高分子を溶解し、且つ貧溶媒へ混和するアセトン等の有機溶媒を用いる。そして、貧溶媒には、通常、水または界面活性剤を添加した水溶液等を用いる。
【００４８】
本発明に用いられる生体適合性高分子は、生体への刺激・毒性が低く、投与後分解して代謝される生体内分解性のものが望ましい。このような素材としては、特に乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＬＧＡ）を好適に用いることができる。ＰＬＧＡの平均分子量は、５，０００〜２００，０００の範囲内であることが好ましく、ナノ粒子の調製の容易さや調製されたナノ粒子の皮膚浸透性、及び皮膚内部での分解性を考慮すれば１５，０００〜２５，０００の範囲内であることがより好ましい。乳酸とグリコール酸との組成比は１：９９〜９９：１であればよいが、乳酸１に対しグリコール酸１／３であることが好ましい。
【００４９】
生体適合性高分子としては他に、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ポリアスパラギン酸等が挙げられる。また、これらのコポリマーであるアスパラギン酸・乳酸共重合体（ＰＡＬ）やアスパラギン酸・乳酸・グリコール酸共重合体（ＰＡＬＧ）を用いても良く、アミノ酸のような荷電基あるいは官能基化し得る基を有していてもよい。
【００５０】
以下、生体適合性高分子としてＰＬＧＡを用いた場合のトラネキサム酸含有ナノ粒子の調製手順について詳述する。まず、ＰＬＧＡを良溶媒中に溶解後、トラネキサム酸を溶解した貧溶媒中に攪拌下、滴下すると、混合液中の良溶媒（有機溶媒）が貧溶媒中へ急速に拡散移行する。その結果、貧溶媒中で良溶媒の自己乳化が起き（マランゴニ効果）、サブミクロンサイズの良溶媒のエマルション滴が形成される。さらに、良溶媒と貧溶媒の相互拡散により、エマルション内から有機溶媒が貧溶媒へと継続的に拡散していくので、エマルション滴内のＰＬＧＡの溶解度が低下し、球状の結晶粒子となって析出する。このとき貧溶媒中のトラネキサム酸が粒子に内包および粒子表面を被覆することにより、最終的にトラネキサム酸を含有したＰＬＧＡナノ粒子が生成する（ナノ粒子形成工程）。
【００５１】
上記球形晶析法では、物理化学的な手法でナノ粒子を形成でき、しかも得られるナノ粒子が略球形であるため、均質なナノ粒子を、触媒や原料化合物の残留といった問題を考慮することなく、容易に形成することができる。その後、良溶媒である有機溶媒を減圧留去し（溶媒留去工程）、乾燥することで、ナノ粒子粉末を得る。
【００５２】
従来のＥＳＤ法においては、通常、薬物と高分子とを溶解させた良溶媒を、界面活性剤を溶解させた貧溶媒中に滴下することにより薬物を内包した状態で球状の結晶粒子を析出させて薬物含有ナノ粒子を製造していた。しかし、有機溶媒に対するトラネキサム酸の溶解度は非常に小さいため、従来法ではナノ粒子中のトラネキサム酸の含有率を高めることが困難であった。また、従来法において製造されたナノ粒子の平均粒子径は１００〜数百ｎｍであり、平均粒子径が１００ｎｍ未満の微細なトラネキサム酸含有ナノ粒子を製造できなかった。
【００５３】
そこで、本発明の製造方法においては、予めトラネキサム酸を貧溶媒中へ溶解させておき、これに生体適合性高分子を溶解させた良溶媒を滴下することとした。図１は、本発明の製造方法により製造されたトラネキサム酸含有ナノ粒子の構造を示す模式図である。トラネキサム酸含有ナノ粒子１は、生体適合性高分子２が多数凝集して形成されており、粒子表面がトラネキサム酸３で被覆されている。また、ここでは図示しないが、生体適合性高分子２のマトリクス中にもトラネキサム酸が一部内包されている。
【００５４】
上述した製造方法によれば、有機溶媒に対する溶解度の小さいトラネキサム酸を高濃度で含有するトラネキサム酸含有ナノ粒子を製造することができる。また、従来法のようにポリエチレングリコール（ＰＥＧ）によるＰＬＧＡ表面の修飾やマイクロフルイダイザによる複数回の処理を行うことなく１００ｎｍ未満の平均粒子径を有するトラネキサム酸含有ナノ粒子を製造することができ、製造工程数及び溶媒使用量の削減も可能となる。
【００５５】
本発明の製造方法によってトラネキサム酸含有ナノ粒子の平均粒子径が小径化されるメカニズムについては明らかではないが、貧溶媒中で良溶媒が拡散しＰＬＧＡが凝集してミセルを形成する際、親水性部分（アミノ基及びカルボキシル基）及び親油性部分（六員環部分）を有するトラネキサム酸が界面活性剤のようにミセルと貧溶媒との界面に介在し、物理的作用によりミセル表面に吸着してＰＬＧＡの必要以上の凝集を抑制するためであると推定される。
【００５６】
上記ナノ粒子形成工程において使用する良溶媒および貧溶媒の種類は特に限定されるものではないが、人体に対して安全性が高く、且つ環境負荷の少ないものを用いる必要がある。このような貧溶媒としては、例えば精製水が好適に用いられる。良溶媒としては、低沸点の有機溶媒であるハロゲン化アルカン類、アセトン、メタノール、エタノール、エチルアセテート、ジエチルエーテル、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエン等が挙げられるが、例えば、厚生労働省通知「医薬品の残留溶媒ガイドラインについて（平成１０年３月３０日  医薬審第３０７号）」でクラス３に分類されるアセトンのみ、若しくはアセトンとエタノールの混合液が好適に用いられる。
【００５７】
ナノ粒子形成時に貧溶媒に混合するトラネキサム酸量は、ナノ粒子を形成する生体適合性高分子の種類及び分子量、良溶媒中への配合量等により調整可能であるが、生体適合性高分子としてＰＬＧＡを用いる場合、ＰＬＧＡに対する重量比を１：２〜４：１とすることが好ましい。ＰＬＧＡに対する重量比が１／２未満の場合、トラネキサム酸の濃度が低すぎてナノ粒子の小径化効果が低くなる。一方、ＰＬＧＡに対する重量比が４倍を超えると、製造容器壁面への凝集が発生してナノ粒子の形成が阻害される。
【００５８】
また、トラネキサム酸と共に精製水中に界面活性剤を添加して貧溶媒としても良い。界面活性剤としては、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）が好適に用いられる。ポリビニルアルコールの濃度についても、生体適合性高分子やトラネキサム酸の濃度等に応じて適宜決定すればよいが、ポリビニルアルコール水溶液の濃度が必要以上に高くなると、製造容器壁面への凝集が発生してナノ粒子の歩留まりが低下する。一方、ポリビニルアルコール水溶液の濃度が所定以下になると、貧溶媒中での分散性に悪影響を与える。そのため、ポリビニルアルコールの重合度やけん化度によっても異なるが、トラネキサム酸に対する重量比で１：１以下が好ましい。
【００５９】
ポリビニルアルコール以外の界面活性剤としては、ポリエチレングリコール、シクロデキストリン、レシチン、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース等が挙げられる。
【００６０】
また、良溶媒中に他の生理活性成分を溶解させておくことにより、ナノ粒子中に他の生理活性成分を内包したトラネキサム酸含有ナノ粒子を製造することもできる。例えばトラネキサム酸と作用機序の異なるビタミンやプロビタミン等の美白成分を内包しておけば、トラネキサム酸とビタミンやプロビタミンとの相乗効果により美白効果の促進が期待できる。
【００６１】
このようにして得られたナノ粒子をそのまま用いるか、或いは必要に応じて複合化する（複合化工程）。この複合化により、使用前まではナノ粒子が集まった取り扱いの容易な複合粒子（ナノコンポジット）となっており、使用時に水分に触れることでナノ粒子に戻って高反応性等の特性を復元可能となる。
【００６２】
ナノ粒子の複合化方法としては、凍結乾燥法（例えば、乾燥棚式の凍結乾燥機（宝製作所社製）やナウタミキサＮＸＶ（ホソカワミクロン社製）を用いて真空凍結乾燥を行うこと）が好適に用いられる。また、流動層乾燥造粒法（例えば、アグロマスタ（ホソカワミクロン社製）を使用して流動造粒を行うこと）または乾式機械的粒子複合化法（例えば、メカノフュージョンシステムＡＭＳ（ホソカワミクロン社製）を使用して圧縮力および剪断力を加えること）により複合化しても良い。特に、粒子化する材料を含む混合物を流動ガス中に噴霧する流動層乾燥造粒法を用いた場合、時間と手間のかかる凍結乾燥工程を省略可能となり、複合粒子を容易に且つ短時間で製造できるため工業化にも有利となる。
【００６３】
なお、溶媒留去後のトラネキサム酸含有ナノ粒子の懸濁液をそのまま凍結乾燥により複合化すると、粒子の凝集が発生して複合粒子の再分散性が低下する。また、トラネキサム酸は水溶性であるため、一旦ナノ粒子表面へ吸着されたトラネキサム酸が漏出すると、周囲に存在する水に再溶解する。
【００６４】
そこで、有機または無機の物質を保護剤として再分散可能に複合化させ、トラネキサム酸の溶解した水を除去せずにそのままナノ粒子と共に凍結乾燥させることが好ましい。例えば、糖アルコールやショ糖を適用することにより、含有率のばらつきを効果的に防止するとともに、糖アルコール等が賦形剤となりナノ粒子の再分散性を維持することができる。また、容器への充填時におけるナノ粒子の取り扱い性を高めることができる。
【００６５】
このような複合粒子の構造を図２に示す。複合粒子４は、トラネキサム酸含有ナノ粒子１を保護剤５により複合化して成り、トラネキサム酸３はナノ粒子１の表面に吸着されるのみでなく、ナノ粒子１の表面から再溶解したトラネキサム酸３が複合化の際に保護剤５で形成されたナノ粒子１の外層にも封入されている。
【００６６】
保護剤として使用可能なものには、マンニトール、エリスリトール、ソルビトール、キシリトール等の糖アルコールやトレハロース、スクロース等の糖類、アクリル系ポリマーやエチルセルロース等の高分子化合物粉末が挙げられる。中でも、トレハロースやスクロース等の糖類は高い保水力を有し、凍結乾燥保護剤として頻用される。
【００６７】
トレハロースの添加量が少ない場合、凍結乾燥後の粒子の再分散性が低下して溶媒留去後の粒子径を維持できなくなり、再分散後の粒子径が１００ｎｍを超えてしまう。従って、トレハロースの添加量は生体適合性高分子に対する重量比で２倍以上とすることが好ましい。
【００６８】
また、糖アルコールの中でマンニトールは、超急速冷却により固化した場合においても非晶質化することがなく、保存安定性の高い凍結乾燥保護剤として使用されている。特に、噴霧乾燥式流動層造粒法においては、保護剤として結晶性の弱い糖アルコールを用いると、複合化の際にアモルファス化してしまい良好に粒子化できなくなるため、結晶性の強いマンニトールを用いることが好ましい。
【００６９】
また、複合化の際に、保護剤と共にさらにトラネキサム酸を添加することにより、トラネキサム酸のトータルでの含有率を高めることができる。従って、目的及び用途に応じた所望のトラネキサム酸含有量の複合粒子を簡単に得ることができる。また、保護剤に封入されたトラネキサム酸、ナノ粒子表面に吸着されたトラネキサム酸、ナノ粒子に内包されたトラネキサム酸の順に放出されるため、トラネキサム酸の放出速度を３段階に制御可能となる。
【００７０】
このようにして製造した、トラネキサム酸含有ナノ粒子若しくは複合粒子を化粧料或いは外用医薬製剤（以下、外用薬という）の原料として使用することで、有効な美白効果やシミ治療効果を得ることができる。一般に、皮膚細胞の大きさは１５，０００ｎｍ程度であり、皮膚細胞間隔は皮膚の浅い所と深い所でバラツキがあるが、７０ｎｍ程度である。また、細胞の脈動により皮膚細胞間隔は広がると考えられる。そのため、トラネキサム酸含有ナノ粒子の平均粒子径を１００ｎｍ未満とすることで、細胞間隙ルート（皮膚角質細胞間隙）を通してナノ粒子の表皮や真皮への浸透が促進され、トラネキサム酸を皮膚深部へ効果的に送達させることができる。
【００７１】
化粧料の剤型としては、パウダーファンデーション等の粉末でも良いし、乳液、化粧水、スキンクリーム等のスキンケア化粧料としても良い。外用薬の剤型としては、粉末剤の他、ワセリン、ラノリン、パラフィン、ろう、硬膏剤、樹脂、プラスチック、高級アルコール類、グリコール類、グリセリン等の基剤と共に、必要に応じて水や乳化剤、懸濁化剤等を配合して混合した、軟膏、クリーム剤、ローション、ゲル剤等が挙げられる。化粧料或いは外用薬中へのナノ粒子若しくは複合粒子の配合割合は、要求される効果や剤型等に応じて任意に設定することができる。
【００７２】
また、化粧料或いは外用薬中に機能性成分、表面改質剤、感触改良剤、吸着剤、防腐剤、酸化防止剤、紫外線吸収剤等の他の固形成分を配合しても良い。機能性成分としては、リン酸Ｌ−アスコルビルマグネシウム（プロビタミンＣ）、トコフェロール、エラグ酸、アルブチン、ホエイ等が挙げられる。
【００７３】
表面改質剤としては、タルク、メチコン等が挙げられる。感触改良剤としては、シリカ（無水ケイ酸）、シリコン、ラウロイルグルタミン酸ジヘキシルデシル、ポリオキシエチレンメチルグルコシド、ヒドロキシエチルセルロース、プルラン等が挙げられる。吸着剤としては、シリカ、デキストリン、コーンスターチ、ベントナイト、結晶セルロース、ケイ酸カルシウム等が挙げられる。防腐剤としては、パラオキシ安息香酸エチル、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、フェルラ酸、フェノキシエタノールなどが挙げられる。酸化防止剤としては、アスコルビン酸、システイン、アセチルシステイン、トコフェロール、酢酸トコフェロール等が挙げられる。上記各成分は列挙したものに限られるものではなく他の成分を配合しても良い。
【００７４】
なお、ＰＬＧＡは水分と長時間触れると加水分解されてしまい、ナノ粒子の運搬性能が失われてしまう。そこで、乳液や化粧水等の化粧料、或いはローションタイプの外用薬として使用する場合は、ナノ粒子粉末とそれを分散させる液体（以下、分散液という）とを別々の容器に充填して保存しておき、使用直前にナノ粒子粉末と分散液とを所定量混合して使用することが好ましい。
【００７５】
このようにして得られた化粧料或いは外用薬を皮膚に塗布すると、ナノ粒子は毛穴や皮膚表面から皮膚深部まで効率よく浸透する。即ち、皮膚表面に塗布されたナノ粒子を含有する液滴は、ナノ粒子により表面張力が低下しているため界面エネルギーが下がる方向（皮膚内部へ浸透する方向）に移動し易くなる。さらに、液滴内のナノ粒子又は水に対し皮膚内部からの吸着も起こるため、ナノ粒子は皮膚深部へと効率よく送達されることとなる。結果、ナノ粒子に吸着担持されたトラネキサム酸が皮膚内部において投与直後から所定期間に亘って徐放される。
【００７６】
なお、保護剤と共にトラネキサム酸を添加した複合粒子を分散液中に再分散させて使用する場合、保護剤から溶出したトラネキサム酸が再分散したナノ粒子表面に付着し、ナノ粒子と共に皮膚深部まで到達する。その結果、皮膚深部に送達可能なトラネキサム酸量を多くすることができる。また、皮膚深部へのトラネキサム酸の供給量を増やすために、分散液中にさらにトラネキサム酸を配合しても良いし、ナノ粒子粉末を分散させる際にトラネキサム酸の粉末を分散液中に溶解させても良い。
【００７７】
さらに、複合化の際に保護剤と共にビタミンやプロビタミン等の他の美白成分を添加することにより、複合粒子の表面に生理活性成分を付着させることもできる。これにより、ナノ粒子から放出されるトラネキサム酸とは別に、複合粒子表面から溶け出す即効性の美白成分をナノ粒子表面に吸着させて皮膚深部へ浸透させることができる。また、分散液中に他の美白成分を配合しておくことで、保護剤と共に添加する場合と同様の効果を得ることができる。
【００７８】
その他、本発明の化粧料には、マイカ、セリサイト、酸化チタン、カオリン、酸化亜鉛、雲母チタン、酸化鉄等の無機粉末、ポリエステル、ポリエチレン、ポリスチレン、ポリウレタン、アクリル酸樹脂、フェノール樹脂、フッ素樹脂、ジビニルベンゼン、スチレン共重合体等の各種樹脂粉体或いはそれらの２種以上から成る共重合樹脂粉体、アセチルセルロース、多糖類、タンパク質等の有機粉末、赤色２０２号、赤色２２６号、黄色２０５号、黄色４０１号、青色１号、青色２０４号、青色４０４号等の顔料粉末、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸マグネシウム、パルミチン酸亜鉛等の金属石鹸、ジメチコン、シクロメチコン、ポリエーテル変性シリコン、フッ素変性シリコン等のシリコン化合物、アロエ、ベニバナ等の天然系原料、ビタミンＡ、ビタミンＢ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＦ、ビタミンＫ、ビタミンＰ、ビタミンＵ、酢酸ｄｌ−α−トコフェロール、ニコチン酸−α−トコフェロール、コハク酸−α−トコフェロール等のビタミンまたはビタミン誘導体等の、任意の無機又は有機原料、或いは通常化粧料に配合される任意の成分、例えばエタノールや多価アルコール等のアルコール類、界面活性剤、保湿剤、着色料、香料等を、本発明の効果を妨げない範囲で配合することができる。
【００７９】
また、本発明は上述した実施形態に限定されるものではなく、本発明の趣旨を逸脱しない範囲で種々の変更が可能である。以下、実施例により本発明のナノ粒子の製造方法について具体的に説明する。
［トラネキサム酸含有ＰＬＧＡナノ粒子の調製］
【実施例１】
【００８０】
１重量％のトラネキサム酸（Sigma-aldrich社製）水溶液１００ｍＬを貧溶媒とした。また、乳酸・グリコール酸共重合体（平均分子量２０，０００、重合比７５：２５、和光純薬工業社製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇをアセトン４０ｍＬ、エタノール２０ｍＬの混合液に溶解させて良溶媒とした。
【００８１】
貧溶媒を４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で良溶媒を滴下し、滴下終了後５分間攪拌したところ、良溶媒の貧溶媒中への拡散によりＰＬＧＡナノ粒子が晶析して半透明の懸濁液となった。その後、減圧下２００ｒｐｍで攪拌しながら２時間で有機溶媒を留去し、ナノ粒子懸濁液を調製した。次に、得られたナノ粒子懸濁液に保護剤としてトレハロース（林原社製）を１０ｇ添加し、約１日かけて凍結乾燥を行いトラネキサム酸含有ＰＬＧＡ複合粒子の凍結乾燥粉末１．１ｇを得た。懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径を動的光散乱法（測定装置：ＭＩＣＲＯＴＲＡＣ  ＵＰＡ（商品名）、HONEYWELL社製）により測定したところ２２ｎｍであった。
【００８２】
また、凍結乾燥粉末をアセトニトリル−水系溶媒により溶解し、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）を用いて粒子内部及び表面のトラネキサム酸量（ＴＡ１）を定量した。同様に凍結乾燥粉末を水系溶媒のみで溶解し、粒子表面のみのトラネキサム酸量（ＴＡ２）を定量した。
【００８３】
ＨＰＬＣの操作条件としては、移動相（無水リン酸二水素ナトリウム１１．０ｇを水５００ｍＬに溶かし、トリエチルアミン１０ｍＬ及びラウリル硫酸ナトリウム１．４ｇを加える。リン酸でｐＨを２．５に調整した後、６００ｍＬまで精製水でメスアップし、メタノール４００ｍＬを添加し全量１Ｌとする。）を、２５℃に設定したカラム（ＧＬサイエンス社製、ＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳ−３）内を流速２．０ｍＬ／分で流し、検出器（島津製作所製、ＳＰＤ−６ＡＶ）を用いて検出波長２２０ｎｍでトラネキサム酸のピークを検出した。そして、ＴＡ１−ＴＡ２により粒子内部のトラネキサム酸量を算出したところ、処方したトラネキサム酸の約２％が粒子内部に存在することが確認された。
【実施例２】
【００８４】
トラネキサム酸（Sigma-aldrich社製）０．５ｇ、及びポリビニルアルコール（ＥＧ−０５、日本合成工業社製）０．１ｇを精製水８０ｍＬに溶解させて貧溶媒とした。また、乳酸・グリコール酸共重合体（和光純薬工業社製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇをアセトン４０ｍＬ、エタノール２０ｍＬの混合液に溶解させて良溶媒とした。
【００８５】
貧溶媒を４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で良溶媒を滴下した。滴下終了後５分間攪拌したところ、良溶媒の貧溶媒中への拡散によりＰＬＧＡナノ粒子が晶析して半透明の懸濁液となった。その後、減圧下２００ｒｐｍで攪拌しながら２時間で有機溶媒を留去した。次に、得られたナノ粒子懸濁液に保護剤としてトレハロース（林原社製）を１０ｇ添加し、約１日かけて凍結乾燥を行いトラネキサム酸含有ＰＬＧＡ複合粒子の凍結乾燥粉末１．１ｇを得た。精製水に再分散させた懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径を動的光散乱法により測定したところ６５ｎｍであった。また、実施例１と同様の方法により粒子内部のトラネキサム酸量を算出したところ、処方したトラネキサム酸の約２％が粒子内部に存在することが確認された。
【実施例３】
【００８６】
ポリビニルアルコールの添加量を０．５ｇとした以外は実施例２と同様の手順により、トラネキサム酸含有ＰＬＧＡ複合粒子の凍結乾燥粉末１．１ｇを得た。精製水に再分散させた懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径を動的光散乱法により測定したところ４９ｎｍであった。
【実施例４】
【００８７】
トラネキサム酸（Sigma-aldrich社製）０．５ｇ、及びポリビニルアルコール（ＥＧ−０５、日本合成工業社製）０．１ｇを精製水８０ｍＬに溶解させて貧溶媒とした。また、乳酸・グリコール酸共重合体（和光純薬工業社製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇ、及びプロビタミンＣである脂溶性テトラへキシルデカン酸アスコルビル（ＶＣ−ＩＰ：日光ケミカル社製）０．１５ｇをアセトン４０ｍＬ、エタノール２０ｍＬの混合液に溶解させて良溶媒とした。
【００８８】
貧溶媒を４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で良溶媒を滴下した。滴下終了後５分間攪拌したところ、良溶媒の貧溶媒中への拡散によりＰＬＧＡナノ粒子が晶析して半透明の懸濁液となった。その後、減圧下２００ｒｐｍで攪拌しながら２時間で有機溶媒を留去した。次に、得られたナノ粒子懸濁液に保護剤としてトレハロース（林原社製）を１０ｇ添加し、約１日かけて凍結乾燥を行いトラネキサム酸・ＶＣ−ＩＰ含有ＰＬＧＡ複合粒子の凍結乾燥粉末１．２ｇを得た。精製水に再分散させた懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径を動的光散乱法により測定したところ７０ｎｍであった。
【００８９】
また、実施例１と同様の方法により粒子内部のトラネキサム酸量を算出したところ、処方したトラネキサム酸の約２％が粒子内部に存在することが確認された。さらに、ＨＰＬＣにより粒子内のＶＣ−ＩＰ封入率（ＰＬＧＡ重量に対するＶＣ−ＩＰの重量パーセント）を定量したところ８．６％であった。
【比較例１】
【００９０】
貧溶媒中にトラネキサム酸を溶解しなかった以外は実施例４と同様の手順により、ＶＣ−ＩＰ含有ＰＬＧＡ複合粒子の凍結乾燥粉末１．２ｇを得た。精製水に再分散させた懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径を動的光散乱法により測定したところ２２０ｎｍであった。
［トラネキサム酸の添加量とナノ粒子の平均粒子径との関係］
【試験例１】
【００９１】
貧溶媒中へのトラネキサム酸の添加量を０ｇ、０．１ｇとして、実施例２と同様の操作によりＰＬＧＡナノ粒子の懸濁液を得た。懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径を動的光散乱法により測定した結果を実施例２の結果と併せて図３に示す。
【試験例２】
【００９２】
貧溶媒中へのトラネキサム酸の添加量を０ｇ、１ｇ、２ｇとして、実施例３と同様の操作によりＰＬＧＡナノ粒子の懸濁液を得た。懸濁液中のナノ粒子の平均粒子径を動的光散乱法により測定した。測定結果を実施例３の結果と併せて図４に示す。
【００９３】
図３及び図４から明らかなように、トラネキサム酸を添加しなかった場合は溶媒留去後のナノ粒子の平均粒子径が１００ｎｍ以上であったのに対し、貧溶媒中にトラネキサム酸を添加すると、ナノ粒子の平均粒子径が１００ｎｍ未満となった。また、トラネキサム酸の添加量が増加するにつれてナノ粒子の平均粒子径は小さくなるが、トラネキサム酸の添加によるナノ粒子の小径化効果には閾値が存在し、ＰＬＧＡに対する重量比で２倍程度であることがわかった。
【００９４】
また、図３から、０．１ｇのポリビニルアルコールと０．５ｇのトラネキサム酸を添加した場合の平均粒子径が６５ｎｍであるのに対し、図４から、０．５ｇのポリビニルアルコールと０．５ｇのトラネキサム酸を添加した場合の平均粒子径は４９ｎｍであった。この結果より、ポリビニルアルコールの配合量をトラネキサム酸に対する重量比で１：１程度とすれば、ナノ粒子の小径化により効果的であることが確認された。
［保護剤の種類とナノ粒子の再分散性との関係］
【試験例３】
【００９５】
トラネキサム酸（Sigma-aldrich社製）０．５ｇ、及びポリビニルアルコール（ＥＧ−０５、日本合成工業社製）０．１ｇを精製水８０ｍＬに溶解させて貧溶媒とした。また、乳酸・グリコール酸共重合体（和光純薬工業社製ＰＬＧＡ７５２０）１ｇをアセトン４０ｍＬ、エタノール２０ｍＬの混合液に溶解させて良溶媒とした。
【００９６】
貧溶媒を４０℃、４００ｒｐｍで攪拌下、一定速度（４ｍＬ／分）で良溶媒を滴下した。滴下終了後５分間攪拌したのち、減圧下２００ｒｐｍで攪拌しながら２時間で有機溶媒を留去した。その後、得られたナノ粒子懸濁液に、保護剤としてトレハロース（林原社製）を１０ｇ添加し、約１日かけて凍結乾燥を行いトラネキサム酸含有ＰＬＧＡ複合粒子の凍結乾燥粉末１．１ｇを得た。得られたナノ粒子粉末を水中へ再分散させた際の平均粒子径を動的光散乱法により測定した。また、トレハロースに代えて、スクロース（キシダ化学社製）、マンニトール（東和化成工業社製）を１０ｇ添加した場合、及び保護剤を添加しなかった場合の平均粒子径についても同様に測定した。測定結果を図５に示す。
【００９７】
図５から明らかなように、保護剤としてトレハロース又はスクロースを添加した場合は複合粒子を水中へ再分散させたときの平均粒子径は７０〜８０ｎｍであり、溶媒留去後（複合化前）の平均粒子径とほとんど変わらなかった。また、保護剤としてマンニトールを添加した場合は複合粒子を水中へ再分散させたときの平均粒子径が２７０ｎｍ程度となり、溶媒留去後の平均粒子径よりも大きくなった。一方、保護剤を添加しなかった場合は再分散性が著しく低下し、粒子がμｍオーダーに凝集した。
【００９８】
この結果より、凍結乾燥後の複合粒子の再分散性を高めるためには保護剤としてトレハロース或いはスクロースを添加することが好適であることが確認された。
［保護剤の添加量とナノ粒子の再分散性との関係］
【試験例４】
【００９９】
ナノ粒子懸濁液へのトレハロースの添加量を０ｇ、１ｇ、２ｇ、４ｇ、６．６ｇ、及び１０ｇとして、試験例３と同様の方法によりトラネキサム酸含有ＰＬＧＡナノ粒子の凍結乾燥粉末を調製した。得られたナノ粒子粉末を水中へ再分散させた際の平均粒子径を動的光散乱法により測定した。また、トレハロースに代えて、スクロースを０ｇ、１ｇ、４ｇ、６．６ｇ、及び１０ｇ添加した場合の平均粒子径についても同様に測定した。測定結果を溶媒留去後（複合化前）の平均粒子径と合わせて図６及び図７に示す。
【０１００】
図６及び図７から明らかなように、ＰＬＧＡに対する重量比で２倍以上のトレハロースを添加することにより、複合粒子を水中へ再分散させたときの平均粒子径を１００μｍ未満とすることができた。また、ＰＬＧＡに対する重量比で４倍以上のトレハロース或いはスクロースを添加することにより、複合粒子を水中へ再分散させたときの平均粒子径を溶媒留去後の平均粒子径と同程度に維持できた。なお、保護剤としてスクロースを用いた場合は、凍結乾燥後にナノ粒子の一部がμｍオーダーに凝集することが確認されており、トレハロースとスクロースとの比較ではトレハロースの方が保護剤としてより好ましいと考えられる。
【試験例５】
【０１０１】
実施例４で作成したトラネキサム酸・ＶＣ−ＩＰ含有ＰＬＧＡ複合粒子５０重量部に、リン酸アスコルビルマグネシウム５重量部、フェノキシエタノール０．２重量部、トコフェロール０．０１重量部、及びタルク、シリコーンを適量混合して１００重量部とし、本発明の化粧料を製造した。また、比較対照として、トラネキサム酸・ＶＣ−ＩＰ含有ＰＬＧＡ複合粒子に代えてタルクを配合した以外は同様の処方で化粧料を製造した。
【０１０２】
上記２種類の化粧料を、それぞれ無作為で選出した２０〜４０歳の健常者１０名に使用してもらい、肌触り、及び使用感について満足度を１０点満点で評価した。その結果、比較対照の化粧料では平均７．６点であったのに対し、本発明の化粧料では平均９．２点であり、肌触り及び使用感が著しく改善されることが認められた。
【産業上の利用可能性】
【０１０３】
本発明のナノ粒子の製造方法によれば、従来の球形晶析法では製造が困難であった平均粒子径が１００ｎｍ未満のトラネキサム酸含有ナノ粒子を簡便且つ低コストで製造することができる。また、トラネキサム酸含有ナノ粒子を形成する材料として、生体への刺激・毒性が低く、投与後分解して代謝されるＰＧＡ、ＰＬＡ、及びＰＬＧＡのいずれかを用いるので、人体への高い安全性を確保することができる。
【０１０４】
特に、生体適合性高分子として乳酸・グリコール酸共重合体を用い、トラネキサム酸と乳酸・グリコール酸共重合体との重量比を１：２〜４：１としたので、粒子の凝集や反応容器への付着を引き起こすことなく微細な粒径のナノ粒子を効率的に製造可能となり、粒子径の制御も容易となる。また、貧溶媒中にトラネキサム酸との重量比が１：１以下となるようにポリビニルアルコールを配合したので、溶媒留去工程におけるナノ粒子の凝集を抑制するとともに、ナノ粒子の平均粒子径をより微小化することができる。
【０１０５】
また、良溶媒中に他の生理活性成分を添加することで、他の生理活性成分を内包したトラネキサム酸含有ナノ粒子を製造することができる。特に、トラネキサム酸と効能や作用機序の異なる生理活性成分を内包したナノ粒子を化粧料や医薬品の原料として用いた場合、トラネキサム酸と生理活性成分との相乗効果が期待できる。
【０１０６】
また、トラネキサム酸含有ナノ粒子を複合する複合化工程を設けることで、使用前までは取り扱いが容易で、使用時には再分散可能な複合粒子を製造することができる。このとき、複合化工程の前に糖アルコール等の保護剤を添加しておけば、熱に弱いナノ粒子に耐熱性を付与することができ、ナノ粒子を安定して保存できる。さらに、複合粒子の再分散性も向上する。特に、凍結乾燥工程により複合化する場合は、生体適合性高分子に対する重量比で２倍以上のトレハロースを保護剤として添加することで複合粒子の凝集を効果的に抑制できる。
【０１０７】
また、保護剤と共に、さらにトラネキサム酸或いは他の生理活性成分を添加すれば、目的及び用途に応じてトラネキサム酸のトータルでの含有率を高めたり、他の生理活性成分を付着させたりすることができる。
【０１０８】
そして、本発明により製造されたトラネキサム酸含有ナノ粒子或いは複合粒子は、皮膚浸透性が非常に高く、製造が容易で取り扱い性にも優れるため、化粧料や外用薬の原料として特に有用である。
【符号の説明】
【０１０９】
１      トラネキサム酸含有ナノ粒子
２      生体適合性高分子
３      トラネキサム酸
４      複合粒子
５      保護剤
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
2010180145.tif 000007
【図７】
2010180145.tif 000008