(57)【要約】【課題】  ミカン科ミカン属植物の葉の抽出物が示すチロシナーゼ活性抑制作用が、抽出温度を高めた場合に低下する現象が見られるため、高い抽出温度の採用による生産効率の向上が困難である現状に鑑み、すぐれたチロシナーゼ活性抑制作用を有する当該葉の抽出物を高い生産効率を以て製造し得る方法を見出し、提供すること、並びにかかる方法によって製造され、すぐれたチロシナーゼ活性抑制作用を奏するミカン科ミカン属植物の葉の抽出物を、化粧料配合成分として用いることにより、シミ・ソバカスなど皮膚の色素沈着に対してすぐれた予防並びに症状改善効果を発揮し、皮膚を若々しく健全な状態に保持し改善し得る化粧料を提供すること。【解決手段】  ミカン科ミカン属植物の葉の抽出物を活性炭等の吸着剤で処理し、吸着成分の除去された抽出エキスを得ること、並びにかかる抽出エキスを化粧料に配合すること。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ミカン科ミカン属（Rutaceae Citrus）植物の葉を水又は含水有機溶媒で抽出して得られる抽出物を、活性炭及び非イオン性多孔性樹脂吸着剤から選ばれた１種又は２種以上の吸着剤で処理し、吸着物を除去することを特徴とするミカン科ミカン属植物の葉の抽出エキスの製造方法。
【請求項２】
抽出を６０℃以上溶媒の沸点以下で行う請求項１に記載の製造方法。
【請求項３】
吸着剤として活性炭を用いる請求項１に記載の製造方法。
【請求項４】
吸着剤として、比表面積が３００〜１０００ｍ２／ｇ、細孔容積が０．５〜１．５ｍｌ／ｇの範囲にある非イオン性多孔性樹脂吸着剤を用いる請求項１に記載の製造方法。
【請求項５】
ミカン科ミカン属（Rutaceae Citrus）植物の葉の水又は含水有機溶媒による抽出物を、活性炭及び非イオン性多孔性合成樹脂吸着剤から選ばれた１種又は２種以上の吸着剤で処理し、吸着物を除去して得られるミカン科ミカン属植物の葉の抽出エキスを配合してなる化粧料。
【請求項６】
ミカン科ミカン属植物がウンシュウミカン（Citrus unshiu Marc.）である請求項５に記載の化粧料。
【請求項７】
美白用である請求項５又は６に記載の化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、植物の葉から高いチロシナーゼ活性抑制作用を有する抽出エキスを高効率で製造する方法、並びに該抽出エキスが配合されてなり、皮膚に対してすぐれた美白・美肌化作用を示す化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
日焼け或いは加齢に伴って生ずる色素沈着、特にシミ、ソバカスを予防或いは改善し、皮膚を若々しく健全な状態に保持することを目的として、従来より種々の美白剤が提案され、それらを配合した化粧料が上市されている。しかしながら、それら従来の美白剤によっては、美白・美肌化効果と皮膚安全性の双方を十分満足せしめることは困難であり、かかる点の改善された新規美白剤並びにこれを含む化粧料が求められている。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
本発明者らは、かかる従来技術の問題点に鑑み、皮膚安全性の観点から天然物由来の新たな美白有効成分を見出すべく鋭意研究を行った結果、ミカン科ミカン属に属する植物の葉の抽出物が顕著なチロシナーゼ活性抑制作用を示し、これによって美白・美肌化効果と皮膚安全性にすぐれた化粧料の提供が可能となることを見出した。
【０００４】
しかしながら、当該化粧料で有効成分として用いるウンシュウミカンなどのミカン属植物の葉の抽出物は、その抽出温度を６０℃程度以下の中・低温としたときには実用上十分満足し得るチロシナーゼ活性抑制作用を示すものの、抽出温度をさらに高温とすると活性が低下する傾向がみられ、又この抽出温度と活性との逆相関関係は中・低温領域に於いても同様に認められるため、ミカン属植物の葉の抽出物の製造に当たっては、抽出温度を高めることによる抽出効率の向上と高い活性を有する抽出物の取得とを両立せしめることが困難であるという問題点があり、かかる技術的課題の解決が求められている。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、ミカン属植物の葉の抽出物を製造する際に見られるかかる技術的課題を解決し、高い活性を有するミカン属植物の葉の抽出物を高効率で製造する方法を提供すべく鋭意研究、検討を重ねた結果、ミカン属植物の葉の抽出物を活性炭や非イオン性多孔性樹脂などの吸着剤で処理することにより、当該抽出物のチロシナーゼ活性抑制作用が著しく増強されることを見出し、本発明を完成するに至った。
即ち本発明は、ミカン科ミカン属植物の葉の水又は含水有機溶媒による抽出物を、活性炭及び非イオン性多孔性樹脂から選ばれた１種又は２種以上の吸着剤と接触せしめ吸着物を除去することを特徴とするミカン科ミカン属植物の葉の抽出エキスの製造方法に関するものである。
又本発明は、上記本発明の製造方法によって得られるミカン科ミカン属植物の葉の抽出エキスを配合してなる化粧料に関する。
ここで抽出エキスとは、ミカン属植物の葉の抽出物から吸着剤処理によって吸着物を除いた後の非吸着画分を言い、液状物或いはこれから溶媒を留去して得られる固形状物などを含み、その性状或いは形状の如何を問わない。
又、化粧料との文言は、いわゆる化粧料の他に医薬部外品をも含む広義で用いる。
【０００６】
植物抽出物を活性炭や多孔性樹脂などの吸着剤で処理することは、以下の特許文献１〜４に示す通り、従来より抽出物の脱色や脱臭或いは抽出物中の特定の成分の分取又は除去等を目的として汎用されている。
しかしながら、当該処理を植物抽出物の有する活性の改善に用いた例は殆どなく、僅かに後述の特許文献５に、甘草の水性媒体抽出液を活性炭でろ過して該抽出液中の懸濁物質を除去し、透明な抽出液とすると、抽出液のメラニン色素沈着抑制作用が安定して発揮されるようになること、及び当該安定化は、抽出液中に懸濁物として存在し、活性成分に対して阻害作用を示す競合成分や不作用成分がろ過によって除去されることに基づくものと考えられることが開示されているが、特許文献５の発明の場合と違って、ミカン属植物の葉の抽出物の活性増強に係る本発明の場合にあっては、後に試験例１に示す通り、単にろ過によって抽出物から懸濁物を除去し、清澄な液としたのみ（比較試料３）では、活性の増強効果は殆ど認められないことから、本発明のミカン属植物の抽出物の活性増強には、特許文献５の発明とは異なる機序が関与しているものと推察される。
【０００７】
【特許文献１】特開２０００−３４４６４２号公報
【特許文献２】特開２００４−２１０６８２号公報
【特許文献３】特開２００４−２４８５９２号公報
【特許文献４】特開２００７−１４３４１３号公報
【特許文献５】特開２００３−１８３１２３号公報
【発明の効果】
【０００８】
抽出物に吸着剤処理を施すことからなる本発明の方法によりミカン科ミカン属に属する植物の葉の抽出エキスを製造した場合、抽出温度を６０℃以上の高温としても高いチロシナーゼ抑制作用を示す抽出エキスを製造することが可能であり、高活性を有する抽出エキスを高効率で製造することができる。又本発明の方法によれば、中・低温の条件下で抽出され、それ自身実用上満足し得るチロシナーゼ抑制作用を有する抽出物についても、その作用をさらに増強せしめることが可能であり、かかる目的に用いても有用である。
さらに、本発明の方法によって得られるミカン科ミカン属植物の葉の抽出エキスを配合した化粧料は、これを皮膚に適用したとき、上記抽出エキスの有する高いチロシナーゼ活性抑制作用に基づき、すぐれた美白・美肌化効果を奏する。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００９】
以下、本発明について詳細に説明する。
本発明で用いるミカン科ミカン属に属する植物としては、例えばイヨカン(Citrus iyo Hort. ex Tanaka：伊予柑）、ウンシュウミカン（Citrus unshiu Marc.：温州蜜柑）、オオベニミカン（Citrus tangerina Tanaka）、オレンジ（Citrus sinensis Osbeck）、カボス(Citrus sphaerocarpa Hort. ex Tanaka：臭橙)、キシュウミカン(Citrus kinokuni Hort. ex Tanaka：紀州蜜柑）、キズ（Citrus kisu Tanaka）、キンコウジ(Citrus obovoidea Hort. ex Takahashi ）、グレープフルーツ（Citrus paradisi Macf.）、ケラジ(Citrus keraji Hort. ex Tanaka）、サツマキコク(Citrus neoaurantium Hort. ex Tanaka）、ザボン（Citrus grandis Osbeck：文旦）、サンキ（Citrus sunki Sakurai）、サンボウカン（Citrus sulcata Hort. ex Takahashi）、シークヮーサー（Citrus Depressa Hayata）、シトロン（Citrus medica）、シュンコウカン(Citurs shunkokan Hort. ex Tanaka）、スダチ（Citrus sudachi Hort. ex Shirai：酢橘）、ダイダイ(Citrus aurantium L.：橙）、タチバナ(Citrus tachibana Tanaka：橘）、タンカン（Citrus tankan Hayata）、ダンシータンゼリン(Citrus tangerina Hort. ex Tanaka）、チチュウカイマンダリン(Citrus deliciosa Tenore）、トウキンカン（Citrus mitis Lour.）、ナオシチ(Citrustakuma sudachi Hort. ex Tanaka）、ナツミカン(Citrus natsudaidai Hayata：夏蜜柑）、ネーブル（Citrus sinensis Osbeck var. brasiliensis Tanaka）、ハッサク(Citrus hassaku Hort. ex Tanaka：八朔）、ハナユ（Citrus hanayu Hort. ex Shirai）、ヒュウガナツ（Citrus tamurana Hort. ex Tanaka：日向夏）、フクレミカン(Citrus tumida Hort. ex Tanaka）、ブッシュカン（Citrus  medica  var. sarcodactylis）、フナドコ(Citrus funadoko Hort. ex Y. Tanaka）、ベルガモット（Citrus bergamia Risso et Poit.）、ポンカン（Citrus reticulata Blanco：椪柑）、ポンキ（Citrus ponki Tanaka）、マルブシュカン（Citrus medica L.）、マンキツ(Citrus tardiferax Hort. ex Tanaka）、ユコウ(Citurs yuko Hort. ex Tanaka）、ユズ(Citrus junos Sieb. ex Tanaka：柚子）、ライム（Citrus aurantifolia Swingle）、レモン（Citrus limon Burm.：檸檬）などが挙げられる。
それらのうちでも、得られる抽出エキスのチロシナーゼ活性抑制作用の観点、さらには原料入手の容易さ等の点からウンシュウミカン（Citrus unshiu Marc.）の葉の使用が最も好ましい。又、用いるミカン科ミカン属植物の葉の産地等に限定はなく、採取時期についても特に限定されないものであるが、４月から果実採取後１ヶ月間までの期間に採取されたものであることがより望ましい。
【００１０】
ミカン科ミカン属植物の葉としては、葉身又は葉片と呼ばれる部位と葉柄のいずれか一方を用いてもよく、又それらの両方を用いてもよい。
【００１１】
本発明の方法により上記ミカン属植物の葉の抽出エキスを製造するに当たっては、まず当該植物の葉を溶媒で抽出して抽出物を調製する。この抽出工程は、上記植物の葉を必要ならば予め水洗して異物を除いた後、そのままもしくは乾燥した上、必要に応じて細切或いは粉砕し、浸漬法、向流抽出法など常法に従って抽出溶媒と接触せしめることによって行うことができる。
【００１２】
ここで抽出溶媒としては、水、もしくは水と親水性有機溶媒とを混合してなる含水有機溶媒が用いられる。親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロパノールなどの低級アルコール類、エチレングリコール、プロピレングリコール、１、３−ブチレングリコール、グリセリンなどの多価アルコール類、酢酸エチル、酢酸ブチル、プロピオン酸メチルなどのエステル類、アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類等が挙げられる。
【００１３】
それら抽出溶媒のうちでも、得られる抽出エキスのチロシナーゼ活性抑制作用の観点から、また化粧料への幅広い適用が可能であるという点からも、本発明に於いては水、もしくは水と低級アルコール類（特にエタノール）又は多価アルコール類（特に１，３−ブチレングリコールもしくはプロピレングリコール）とを混合してなる含水有機溶媒の使用が好ましく、なかでも水の単独使用が最も好ましい。
【００１４】
含水有機溶媒を用いる場合に於ける水と親水性有機溶媒との混合比は、例えば水とエタノール、水と１，３−ブチレングリコール、或いは水とプロピレングリコールからなる含水有機溶媒の場合であれば、いずれも重量比で１：１〜１０：１程度の範囲とすることが好ましい。
【００１５】
抽出物の調製に際して、抽出溶媒のｐＨに特に限定はないが、一般には４〜８の範囲とすることが好ましく、かかる意味で、必要ならば前記の抽出溶媒に、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化カリウムなどのアルカリ性調整剤や、クエン酸、塩酸、リン酸、硫酸などの酸性調整剤等を配合し、所望のｐＨとなるように調整してもよい。
【００１６】
抽出温度については、本発明の方法によれば、ミカン属植物の葉を６０℃を上回る高温で抽出した場合であっても、抽出工程に続いて行う吸着剤処理によって、高いチロシナーゼ活性抑制作用を有する抽出エキスを得ることが可能であり、又一方室温乃至４０℃程度の中・低温で抽出を行ったとしても、同じく吸着剤処理を行うことによりチロシナーゼ活性抑制作用が増強されることから、必ずしも抽出温度に限定はなく、一般には１℃程度の低温から用いた抽出溶媒の沸点迄の範囲の任意の条件を用いることができるが、抽出工程の効率化の観点からは、好適には４０℃以上、より好ましくは５０℃以上、特に好ましくは６０℃を越える温度で抽出を行うのがよく、かかる高温抽出を採用した場合に本発明の製造方法の特長、利点が最も顕著に発揮される。
【００１７】
抽出時間、浴比等の抽出条件は、用いる溶媒の種類やｐＨ、或いは葉の細切度等によっても異なるが、例えば水を抽出溶媒として用いる浸漬法の場合であれば、抽出時間は、室温抽出の場合で６時間〜７日間、特に２４時間〜４日間、４０℃の中温抽出の場合で２〜１７時間、特に３〜８時間、６０℃の高温抽出の場合で３０分〜１０時間、特に１〜５時間、８０℃の極高温抽出の場合で１５分〜  ６時間、特に３０分〜４時間の範囲である。
浴比は、浸漬法の場合、重量比で、被抽出物の葉に対して溶媒が一般に５〜５０倍量、好ましくは１０〜３０倍量の範囲となるようにするのがよい。
【００１８】
以上の抽出工程が終わったならば、次にここに得られるミカン属植物の葉の抽出物に活性炭等の吸着剤を用いた吸着剤処理を施す。
前記の抽出工程に於いて、抽出を６０℃程度以下、特に４０℃程度以下で行った場合には、得られる抽出物はそのままでも実用上十分満足できるチロシナーゼ活性抑制作用を示すが、これにさらに第二工程の吸着剤処理を施すことにより、その作用を一層高めることができる。一方、抽出工程に於いて抽出温度を６０℃を越える高温とした場合には、得られる抽出物のチロシナーゼ活性抑制作用は抽出温度が高まるほど低下するが、これに吸着剤処理を施した場合、当該抑制作用は顕著に増強され、低・中温抽出による抽出物と同等或いはそれ以上に強い抑制作用を有する抽出エキスを得ることも容易である。
【００１９】
この吸着剤処理の方法としては、前記抽出工程で得られるミカン属植物の葉の抽出物、一般には抽出液を、吸着剤と接触させて該抽出物中に含まれる吸着成分を除去できる方法であればいずれでもよく特に制限はないが、好適には、抽出液をバッチ法により吸着剤と混和し、接触させた後、吸着剤をろ別する方法、或いは抽出液を吸着剤を充填したカラムに通し、流下液を採取する方法などを用いることができる。
【００２０】
吸着剤としては、活性炭もしくは非イオン性多孔性樹脂吸着剤が用いられる。活性炭としては、松などの木、竹、椰子殻、胡桃殻などの植物質のほか、石炭質、石油質などを原材料として、それらの原材料に水蒸気や二酸化炭素、空気などのガスを使う高温炭化法などの物理的な方法や塩化亜鉛などの化学薬品を使って処理した上で加熱し、多孔質にする化学的な方法による活性化処理を施して得られる活性炭など何れを用いても良い。好ましくは松などの木、竹、椰子殻、胡桃殻などの植物質を原材料にしたものを物理的な方法で活性化した活性炭が挙げられる。
【００２１】
又、非イオン性多孔性樹脂吸着剤としては、スチレン／ジビニルベンゼン共重合体、メタクリル酸エステル重合体などの非イオン性樹脂からなり、比表面積が一般に１００〜２０００ｍ２／ｇ、好ましくは３００〜１０００ｍ２／ｇ、細孔容積が一般に０．１〜３．０ｍｌ／ｇ、好ましくは０．５〜１．５ｍｌ／ｇの範囲にある多孔性吸着剤が用いられる。  かかる非イオン性多孔性樹脂吸着剤としては、例えばスチレン／ジビニルベンゼン系のダイヤイオンＨＰ１０、同２０、同２１、セパビーズＳＰ８００、同ＳＰ８５０、同ＳＰ７００、同ＳＰ２０７（以上、三菱化学（株））、アンバーライトＸＡＤ４、同１６、デュオライトＳ８７４、同８７７（ローム・アンド・ハース社）、メタクリル酸エステル系のダイヤイオンＨＰ１ＭＧ、同２ＭＧ（三菱化学（株））、アンバーライトＸＡＤ７（ローム・アンド・ハース社）などが挙げられる。
【００２２】
吸着剤処理の条件としては、バッチ式、連続式のどちらでもよい。例えばバッチ式であれば、抽出物の固形分１００重量部に対して１０〜１０００重量部の吸着剤を加えて、４℃〜８０℃、好ましくは２０℃〜４０℃で吸着させることができる。また、吸着処理を行う時間としては、１０分〜２４時間、好ましくは３０分〜３時間処理を行う。連続式の場合は、抽出物の固形分１００重量部に対して１０〜１０００重量部の吸着剤をカラムなどに充填し、３０分〜３時間かけてエキスの溶液を通道することで吸着処理することができる。
【００２３】
以上の如き構成からなる本発明のミカン属植物の葉の抽出エキスの製造方法によれば、抽出温度が６０℃を越える高温に設定されたとしても高いチロシナーゼ活性抑制作用を示す抽出エキスを得ることが可能であって、抽出工程の著しい効率化、ひいては全工程を通じての製造効率化が達せられる。又、低温から中温領域で抽出して得られる抽出物についても、本発明の吸着剤処理を施すことによってそのチロシナーゼ活性抑制作用を一層向上せしめることが可能である。
【００２４】
以上の如くして調製される本発明のミカン科ミカン属植物の葉の抽出エキスは、後に試験例に示す通り、顕著な細胞内チロシナーゼ活性阻害作用を有すると共に、皮膚に対する刺激性が少なく生体安全性にもすぐれ、シミやソバカスの発生を予防し或いはそれらの症状を改善して肌を若々しく健全な状態に維持することを目的として化粧料に配合して極めて有用なものである。  従って、本発明によればかかるミカン科ミカン属植物の葉の抽出エキスを含有する美白、美肌化化粧料が提供される。
【００２５】
本発明のミカン属植物の葉の抽出エキスを化粧料に配合する場合、前記吸着剤処理によって得られる液状のエキスを、一般かつ好適にはｐＨを４〜８に調整した上、これをそのまま化粧料配合剤として使用してもよく、又必要ならば減圧濃縮等により適宜の濃度として用いてもよい。さらに場合によっては、スプレードライ法、凍結乾燥法など常法に従って粉末化して、粉末状のエキスとすることもできる。
【００２６】
本発明のミカン科ミカン属植物の葉の抽出エキスを含む化粧料としては、例えば乳液、クリーム、ローション、エッセンス、パックなどの基礎化粧料、口紅、ファンデーション、リクイドファンデーション、メイクアッププレスパウダー、ほほ紅、白粉などのメイクアップ化粧料、洗顔料、ボディーシャンプー、石けんなどの清浄用化粧料、さらには浴剤等が挙げられるが、勿論これらに限定されるものではない。
【００２７】
本発明の化粧料に於けるミカン科ミカン属植物の葉の抽出エキスの配合量は、抽出エキスの固形分として、基礎化粧料の場合は、一般に０．００２〜１．０重量％、好ましくは０．０２〜０．２重量％の範囲、メイクアップ化粧料の場合は、一般に０．００２〜１．０重量％、好ましくは０．０２〜０．２重量％の範囲、又清浄用化粧料の場合は、一般に０．００２〜１０．０重量％、好ましくは０．０２〜７．０重量％の範囲である。
【００２８】
本発明の化粧料には、必須成分のミカン科ミカン属植物の葉のエキスのほかに、通常化粧料に用いられる成分、例えば油性成分、界面活性剤（合成系、天然物系）、保湿剤、増粘剤、防腐・殺菌剤、粉体成分、紫外線吸収剤、抗酸化剤、色素、香料等を必要に応じて適宜配合することができる。又、本発明のミカン科ミカン属植物の葉の抽出物の有効性、特長を損なわない限り、他の生理活性成分を組み合わせ化粧料に配合することも何ら差し支えない。
【００２９】
ここで、油性成分としては、例えばオリーブ油、ホホバ油、ヒマシ油、大豆油、米油、米胚芽油、ヤシ油、パーム油、カカオ油、メドウフォーム油、シアーバター、ティーツリー油、アボガド油、マカデミアナッツ油、植物由来スクワランなどの植物由来の油脂類；ミンク油、タートル油などの動物由来の油脂類；ミツロウ、カルナウバロウ、ライスワックス、ラノリンなどのロウ類；流動パラフィン、ワセリン、パラフィンワックス、スクワランなどの炭化水素類；ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、イソステアリン酸、ｃｉｓ−１１−エイコセン酸などの脂肪酸類；ラウリルアルコール、セタノール、ステアリルアルコールなどの高級アルコール類；ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、オレイン酸ブチル、２−エチルヘキシルグリセライド、高級脂肪酸オクチルドデシル（ステアリン酸オクチルドデシル等）などの合成エステル類及び合成トリグリセライド類等が挙げられる。
【００３０】
界面活性剤としては，例えばポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステルなどの非イオン界面活性剤；脂肪酸塩、アルキル硫酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、ポリオキシエチレン脂肪アミン硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル燐酸塩、α−スルホン化脂肪酸アルキルエステル塩、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル燐酸塩などのアニオン界面活性剤；第四級アンモニウム塩、第一級〜第三級脂肪アミン塩、トリアルキルベンジルアンモニウム塩、アルキルピリジニウム塩、２−アルキル−１−アルキル−１−ヒドロキシエチルイミダゾリニウム塩、Ｎ，Ｎ−ジアルキルモルフォルニウム塩、ポリエチレンポリアミン脂肪酸アミド塩などのカチオン界面活性剤；Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−アルキル−Ｎ−カルボキシメチルアンモニオベタイン、Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリアルキル−Ｎ−アルキレンアンモニオカルボキシベタイン、Ｎ−アシルアミドプロピル−Ｎ′，Ｎ′−ジメチル−Ｎ′−β−ヒドロキシプロピルアンモニオスルホベタインなどの両性界面活性剤等を使用することができる。
又、乳化剤乃至乳化助剤として、酵素処理ステビアなどのステビア誘導体、レシチン及びその誘導体、乳酸菌醗酵米、乳酸菌醗酵発芽米、乳酸菌醗酵穀類（麦類、豆類、雑穀など）、ジュアゼイロ（Zizyphus joazeiro)抽出物等を配合することもできる。
【００３１】
保湿剤としては、例えばグリセリン、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール、キシリトール、ピロリドンカルボン酸ナトリウム等があり、さらにトレハロース等の糖類、乳酸菌醗酵米、ムコ多糖類（例えば、ヒアルロン酸及びその誘導体、コンドロイチン及びその誘導体、ヘパリン及びその誘導体など）、エラスチン及びその誘導体、コラーゲン及びその誘導体、ＮＭＦ関連物質、乳酸、尿素、高級脂肪酸オクチルドデシル、海藻抽出物、ビャッキュウ抽出物、魚介類由来コラーゲン及びその誘導体、各種アミノ酸及びそれらの誘導体が挙げられる。
【００３２】
増粘剤としては、例えばアルギン酸、寒天、カラギーナン、フコイダン等の褐藻、緑藻或いは紅藻由来成分、ビャッキュウ抽出物、ペクチン、ローカストビーンガム、アロエ多糖体等の多糖類、キサンタンガム、トラガントガム、グアーガム等のガム類、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース等のセルロース誘導体、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、アクリル酸・メタクリル酸共重合体等の合成高分子類；ヒアルロン酸及びその誘導体、ポリグルタミン酸及びその誘導体等が挙げられる。
【００３３】
防腐・殺菌剤としては、例えば尿素；パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸ブチルなどのパラオキシ安息香酸エステル類；フェノキシエタノール、ジクロロフェン、ヘキサクロロフェン、塩酸クロルヘキシジン、塩化ベンザルコニウム、サリチル酸、エタノール、ウンデシレン酸、フェノール類、ジャマール（イミダゾデイニールウレア）、１，２−ペンタンジオール、各種精油類、樹皮乾留物等がある。
【００３４】
粉体成分としては、例えばセリサイト、酸化チタン、タルク、カオリン、ベントナイト、酸化亜鉛、炭酸マグネシウム、酸化マグネシウム、酸化ジルコニウム、硫酸バリウム、無水ケイ酸、雲母、ナイロンパウダー、ポリエチレンパウダー、シルクパウダー、セルロース系パウダー、穀類（米、麦、トウモロコシ、キビなど）のパウダー、豆類（大豆、小豆など）のパウダー等がある。
【００３５】
紫外線吸収剤としては、例えばパラアミノ安息香酸エチル、パラジメチルアミノ安息香酸エチルヘキシル、サリチル酸アミル及びその誘導体、パラメトキシ桂皮酸２−エチルヘキシル、桂皮酸オクチル、オキシベンゾン、２，４−ジヒドロキシベンゾフェノン、２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノン−５−スルホン酸塩、４−ターシャリーブチル−４−メトキシベンゾイルメタン、２−（２−ヒドロキシ−５−メチルフェニル）ベンゾトリアゾール、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、アロエ抽出物等がある。
【００３６】
抗酸化剤としては、例えばブチルヒドロキシアニソール、ブチルヒドロキシトルエン、没食子酸プロピル、ビタミンＥ及びその誘導体、ビャッキュウ抽出物、イネ抽出物等がある。
【００３７】
生理活性成分としては、例えば美白成分として、ｔ−シクロアミノ酸誘導体、コウジ酸及びその誘導体、アスコルビン酸及びその誘導体、ハイドロキノン誘導体、エラグ酸及びその誘導体、レゾルシノール誘導体、胎盤抽出物、ソウハクヒ抽出物、ユキノシタ抽出物、米糠抽出物、米糠抽出物加水分解物、乳酸菌醗酵米、乳酸菌醗酵発芽米、乳酸菌醗酵穀類（麦類、豆類、雑穀類）、白芥子加水分解抽出物、ムラサキシキブ抽出物、パンダヌス・アマリリフォリウス(Pandanus Amaryllifolius Roxb.)抽出物、アルカンジェリシア・フラバ（Arcangelicia flava Merrilli）抽出物、カミツレ抽出物（商品名：カモミラET）、コンブ等の海藻の抽出物、アマモ等の海草の抽出物、リノール酸及びその誘導体もしくは加工物（例えばリポソーム化リノール酸など）、２，５−ジヒドロキシ安息香酸誘導体等が、又皮膚老化防止・美肌化成分として、動物又は魚由来のコラーゲン及びその誘導体、エラスチン及びその誘導体、ニコチン酸及びその誘導体、グリチルリチン酸及びその誘導体（ジカリウム塩等）、ｔ−シクロアミノ酸誘導体、ビタミンＡ及びその誘導体、ビタミンＥ及びその誘導体、アラントイン、α−ヒドロキシ酸類、ジイソプロピルアミンジクロロアセテート、γ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸、ゲンチアナエキス、甘草エキス、ハトムギエキス、カミツレエキス、ニンジンエキス、アロエエキスなどの生薬抽出エキス、米抽出物加水分解物、米糠抽出物加水分解物、米醗酵エキス、ミツイシコンブ抽出物、アナアオサ抽出物、アマモ等の海草の抽出物、ソウハクヒエキス、ジュアゼイロ（Zizyphus joazeiro)抽出物等がある。
【００３８】
上記のコウジ酸誘導体としては、例えばコウジ酸モノブチレート、コウジ酸モノカプレート、コウジ酸モノパルミテート、コウジ酸ジブチレートなどのコウジ酸エステル類、コウジ酸エーテル類、コウジ酸グルコシドなどのコウジ酸糖誘導体等が、アスコルビン酸誘導体としては、例えばＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム、Ｌ−アスコルビン酸−２−硫酸エステルナトリウム、Ｌ−アスコルビン酸−２−硫酸エステルマグネシウムなどのアスコルビン酸エステル塩類、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド（２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸）、Ｌ−アスコルビン酸−５−グルコシド（５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸）、３−Ｏ-エチルアスコルビン酸などのアスコルビン酸糖誘導体、それらアスコルビン酸糖誘導体の６位アシル化物（アシル基は、ヘキサノイル基、オクタノイル基、デカノイル基など）、Ｌ−アスコルビン酸テトライソパルミチン酸エステル、Ｌ−アスコルビン酸テトララウリン酸エステルなどのＬ−アスコルビン酸テトラ脂肪酸エステル類、３−Ｏ−エチルアスコルビン酸、Ｌ−アスコルビン酸−２−リン酸−６−Ｏ−パルミテートナトリウム等が、ハイドロキノン誘導体としては、アルブチン（ハイドロキノン−β−Ｄ−グルコピラノシド）、α−アルブチン（ハイドロキノン−α−Ｄ−グルコピラノシド）等が、レゾルシノール誘導体としては、例えば４−ｎ−ブチルレゾルシノール、４−イソアミルレゾルシノール等が、２，５−ジヒドロキシ安息香酸誘導体としては、例えば２，５−ジアセトキシ安息香酸、２−アセトキシ−５−ヒドロキシ安息香酸、２−ヒドロキシ−５−プロピオニルオキシ安息香酸等が、ニコチン酸誘導体としては、例えばニコチン酸アミド、ニコチン酸ベンジル等が、ビタミンＥ誘導体としては、例えばビタミンＥニコチネート、ビタミンＥリノレート等が、α−ヒドロキシ酸としては、例えば乳酸、リンゴ酸、コハク酸、クエン酸、α−ヒドロキシオクタン酸等がある。
【００３９】
次に、実施例、処方例及び試験例によって本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はそれらに限定されるものではない。なお、以下に於いて、部はすべて重量部を、また％はすべて重量％を意味する。
【００４０】
実施例１．
ミカン属植物のウンシュウミカン（Citrus unshiu Marc.）の葉を乾燥、粉砕して得られた粉砕物２００ｇに精製水４０００ｇを混合し、８０℃で攪拌しながら２時間抽出を行った後メンブランフィルター（セルロースアセテート：０．２μｍ。以下各実施例に於いて同じ。）でろ過し、ウンシュウミカンの葉の清澄抽出液３５００ｇ（固形分１．６２％）を得た。
得られたウンシュウミカンの葉の抽出液に対して重量比で０．５％（１７．５ｇ）の活性炭（和光純薬）を加え、室温にて１時間処理を行った。活性炭処理をしたウンシュウミカンの葉の抽出液からろ過にて活性炭を除き、ウンシュウミカンの葉の抽出エキス３３００ｇ（１．４２％）を得た。
【００４１】
実施例２．    
ミカン属植物のウンシュウミカン（Citrus unshiu Marc.）の葉を乾燥、粉砕して得られた粉砕物１００ｇに精製水１０００ｇを混合し、８０℃で攪拌しながら３時間抽出を行った後メンブランフィルターでろ過し、ウンシュウミカンの葉の清澄抽出液７２０ｇ（固形分１．８２％）を得た。
得られたウンシュウミカンの葉の抽出液に対して重量比で１．０％（７．２ｇ）の活性炭（梅蜂印活性炭素；太平化学産業）を加え、４０℃にて２時間処理を行った。活性炭処理をしたウンシュウミカンの葉の抽出液からろ過にて活性炭を除き、ウンシュウミカンの葉の抽出エキス６８０ｇ（１．６８％）を得た。
【００４２】
実施例３． 
ミカン属植物のウンシュウミカン（Citrus unshiu Marc.）の葉を乾燥、粉砕して得た粉砕物２００ｇに精製水４０００ｇを混合し、８０℃で攪拌しながら１時間抽出を行った後メンブランフィルターでろ過し、ウンシュウミカンの葉の清澄抽出液３３８０ｇ（固形分１．５２％）を得た。
得られたウンシュウミカンの葉の抽出液に対して重量比で２．０％（６７．２ｇ）の吸着樹脂（ダイヤイオンＨＰ２０；三菱化学）を加え、４０℃にて１時間処理を行った。吸着処理をしたウンシュウミカンの葉の抽出液からろ過にて吸着樹脂を除き、ウンシュウミカンの葉の抽出エキス３２００ｇ（１．３８％）を得た。
【００４３】
実施例４．  
ミカン属植物のウンシュウミカン（Citrus unshiu Marc.）の葉を乾燥し、その細切物５０ｇに精製水とエタノールの８：２（重量比）混液１０００ｇを混合し、６０℃で４時間抽出を行った後メンブランフィルターでろ過し、ウンシュウミカンの葉の清澄抽出液８３０ｇ（固形分１．９２％）を得た。
得られたウンシュウミカンの葉の抽出液に対して重量比で１．０％（８．３ｇ）の活性炭（和光純薬）を加え、４０℃にて３時間処理を行った。活性炭処理をしたウンシュウミカンの葉の抽出液からろ過にて活性炭を除き、ウンシュウミカンの葉の抽出エキス７１０ｇ（１．６６％）を得た。
【００４４】
実施例５． 
ミカン属植物のウンシュウミカン（Citrus unshiu Marc.）の葉を乾燥、粉砕して得られた粉砕物１００ｇに精製水と１，３−ブチレングリコールの９：１（重量比）混液１５００ｇを混合し、７０℃で２時間抽出を行った後メンブランフィルターでろ過し、ウンシュウミカンの葉の清澄抽出液１３２０ｇ（固形分１．７２％）を得た。
得られたウンシュウミカンの葉の抽出液に対して重量比で１．０％（１３．２ｇ）の吸着樹脂（セパビーズＳＰ８５０；三菱化学）を加え、室温にて２時間処理を行った。吸着処理をしたウンシュウミカンの葉の抽出液からろ過にて吸着樹脂を除き、ウンシュウミカンの葉の抽出エキス１１１０ｇ（固形分１．４３％）を得た。
【００４５】
実施例６． 
ミカン属植物のウンシュウミカン（Citrus unshiu Marc.）の葉を乾燥、粉砕して得た粉砕物２００ｇに精製水３０００ｇを混合し、５０℃で攪拌しながら５時間抽出を行った後メンブランフィルターでろ過し、ウンシュウミカンの葉の清澄抽出液２５４０ｇ（固形分１．２０％）を得た。
得られたウンシュウミカンの葉の抽出液に対して重量比で０．５％（１２．７ｇ）の活性炭（梅蜂印活性炭素；太平化学産業）を加え、４０℃にて３時間処理を行った。活性炭処理をしたウンシュウミカンの葉の抽出液からろ過にて活性炭を除き、ウンシュウミカンの葉の抽出エキス２２８０ｇ（０．９８％）を得た。
【００４６】
実施例７．  
実施例１のウンシュウミカンの葉に代えてダイダイ(Citrus aurantium L.：橙)の葉を用いるほかは実施例１と同様にして抽出及び活性炭による吸着処理を行い、ダイダイの葉の抽出エキス３２５０ｇ（１．２１％）を得た。
【００４７】
実施例８． 
実施例１と同様にして調製したウンシュウミカン（Citrus unshiu Marc.）の葉の抽出エキス２００ｇを凍結乾燥した後粉砕し、黄褐色粉末状のウンシュウミカンの葉の抽出エキス２．８ｇを得た。
【００４８】
処方例１．クリーム
［Ａ成分］                                                        部
流動パラフィン                                                ５．０
ヘキサラン    （注１）                                        ４．０
パラフィン                                                    ５．０
グリセリルモノステアレート                                    ２．０
ポリオキシエチレン（20）ソルビタンモノステアレート            ６．０
ブチルパラベン                                                ０．１
（注１）株式会社テクノーブル製 トリオクタン酸グリセリル        
［Ｂ成分］
実施例１の抽出エキス                                          ５．０
グリセリン                                                    ５．０
カルボキシメチルモノステアレート                              ０．１
モイストン・Ｃ    （注２）                                    １．０
精製水                                        全量が１００部となる量
（注２）株式会社テクノーブル製 ＮＭＦ成分 
［Ｃ成分］
香料                                                             適量 上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合してクリームを得た。
【００４９】
処方例２．クリーム
処方例１のＢ成分中実施例１の抽出エキスに代えて実施例２の抽出エキスを用いるほかは処方例１と同様にしてクリームを得た。
【００５０】
処方例３．クリーム
処方例１のＢ成分中実施例１の抽出エキスに代えて実施例３の抽出エキスを用いるほかは処方例１と同様にしてクリームを得た。
【００５１】
処方例４．乳液
［Ａ成分］                                                          部
流動パラフィン                                              ６．０
ヘキサラン                                                  ４．０
ホホバ油                                                    １．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート        ２．０
大豆レシチン                                                １．５
メチルパラベン                                              ０．１５
エチルパラベン                                              ０．０３
［Ｂ成分］
実施例１の抽出エキス                                        ５．０
グリセリン                                                  ３．０
１、３−ブチレングリコール                                  ２．０
カルボキシメチルセルロース                                  ０．３
ヒアルロン酸ナトリウム                                      ０．０１
精製水                                       全量が１００部となる量 
［Ｃ成分］
香料                                                           適量 
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
【００５２】
処方例５．ローション
［成分］                                                            部
実施例３の抽出エキス                                          ５．０
エタノール                                                  １０．０
グリセリン                                                    ３．０
１、３−ブチレングリコール                                    ２．０
メチルパラベン                                                ０．２
クエン酸                                                      ０．１
クエン酸ナトリウム                                            ０．３
カルボキシビニルポリマー                                      ０．１
香料                                                           適量 
水酸化カリウム                                                 適量
精製水                                       全量が１００部となる量 
上記の成分を混合してローションを得た。
【００５３】
処方例６．化粧水
［Ａ成分］                                                          部
オリーブ油                                                    １．０
ポリオキシエチレン（５．５）セチルアルコール                  ５．０
ブチルパラベン                                                ０．１
［Ｂ成分］
実施例４の抽出エキス                                          ５．０
エタノール                                                    ５．０
グリセリン                                                    ５．０
１，３−ブチレングリコール                                    ５．０
メチルパラベン                                                ０．１
水酸化カリウム                                                  適量
精製水                                        全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
香料                                                            適量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加温後、Ａ成分にＢ成分を加えて攪拌し、さらにヒスコトロン（５０００ｒｐｍ）で２分間ホモジナイズを行った。
これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えて攪拌混合し、さらに３０℃以下まで冷却して化粧水を得た。
【００５４】
処方例７．乳液
処方例４のＢ成分中、実施例１の抽出エキスに代えて実施例２の抽出エキスを用いるほかは処方例４と同様にして乳液を得た。
【００５５】
処方例８．乳液
処方例４のＢ成分中、実施例１の抽出エキスに代えて実施例３の抽出エキスを用いるほかは処方例４と同様にして乳液を得た。
【００５６】
処方例９．乳液
処方例４のＢ成分中、実施例１の抽出エキスに代えて実施例４の抽出エキスを用いるほかは処方例４と同様にして乳液を得た。
【００５７】
処方例１０．乳液
処方例４のＢ成分中、実施例１の抽出エキスに代えて実施例５の抽出エキスを用いるほかは処方例４と同様にして乳液を得た。
【００５８】
処方例１１．乳液
処方例４のＢ成分中、実施例１の抽出エキスに代えて実施例６の抽出エキスを用いるほかは処方例４と同様にして乳液を得た。
【００５９】
処方例１２．乳液
処方例４のＢ成分中、実施例１の抽出エキスに代えて実施例７の抽出エキスを用いるほかは処方例４と同様にして乳液を得た。
【００６０】
処方例１３．乳液
［Ａ成分］                                                          部
流動パラフィン                                                ６．０
ヘキサラン                                                    ４．０
ホホバ油                                                      １．０
ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート          ２．０
大豆レシチン                                                  １．５
メチルパラベン                                               ０．１５
エチルパラベン                                               ０．０３
［Ｂ成分］
実施例１の抽出エキス                                          ５．０
Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド                            ２．０
水酸化カリウム                                                ０．５
グリセリン                                                    ３．０
１、３−ブチレングリコール                                    ２．０
カルボキシメチルセルロース                                    ０．３
ヒアルロン酸ナトリウム                                       ０．０１
精製水                                         全量が１００部となる量 ［Ｃ成分］
香料                                                             適量 
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ８０℃以上に加熱した後、攪拌混合した。これを５０℃まで冷却した後、Ｃ成分を加えてさらに攪拌混合して乳液を得た。
【００６１】
処方例１４．乳液
処方例１３のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルマグネシウム２．０部を用いるほかは処方例１３と同様にして乳液を得た。
【００６２】
処方例１５．乳液
処方例１３のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてＬ−アスコルビン酸−２−リン酸エステルナトリウム２．０部を用いるほかは処方例１３と同様にして乳液を得た。
【００６３】
処方例１６．乳液
処方例１３のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてアルブチン２．０部を用いるほかは処方例１３と同様にして乳液を得た。
【００６４】
処方例１７．乳液
処方例１３のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えて米糠抽出物加水分解物（株式会社テクノーブル製、商品名「グレイスノウ＊雪＊ＨＰ」、固形分濃度3.5％）５．０部を用いるほかは処方例１３と同様にして乳液を得た。
【００６５】
処方例１８．乳液
処方例１３のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えて白芥子抽出物（株式会社テクノーブル製、商品名「シナブランカ−ＷＨ」、固形分濃度1.0％）５．０部を用いるほかは処方例１３と同様にして乳液を得た。
【００６６】
処方例１９．乳液
処方例１３のＢ成分中、Ｌ−アスコルビン酸−２−グルコシド２．０部及び水酸化カリウム０．５部に代えてγ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸１．０部を用いるほかは処方例１３と同様にして乳液を得た。
【００６７】
処方例２０．プレストパウダー
［Ａ成分］                                                        部
ベンガラ                                                      ０．５
黄酸化鉄                                                      １．５
黒酸化鉄                                                      ０．１
酸化チタン                                                  １０．０
ナイロンパウダー                                              ４．０
セリサイト                                    全量が１００部となる量
マイカ                                                      ２３．０
タルク                                                      ２５．０
実施例８の抽出エキス粉末                                      ０．１
［Ｂ成分］
スクワラン                                                    １．０
メチルポリシロキサン                                          ４．０
プロピルパラベン                                              ０．１
デヒドロ酢酸                                                  ０．１
流動パラフィン                                                ２．０
香料                                                           適量 
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ混合攪拌し混合した後、２００メッシュのタイラーメッシュの篩にかけ、得られた混合粉末を金型に打型してプレストパウダーを得た。
【００６８】
処方例２１．リクイドファンデーション
［Ａ成分］                                                        部
ステアリン酸                                                  ２．４
モノステアリン酸プロピレングリコール                          ２．０
セトステアリルアルコール                                      ０．２
液状ラノリン                                                  ２．０
流動パラフィン                                                ３．０
ミリスチン酸イソプロピル                                      ８．５
プロピルパラベン                                             ０．０５
［Ｂ成分］
実施例１の抽出エキス                                          ５．０
カルボキシメチルセルロースナトリウム                          ０．２
ベントナイト                                                  ０．５
プロピレングリコール                                          ４．０
トリエタノールアミン                                          １．１
メチルパラベン                                                ０．１
精製水                                        全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
酸化チタン                                                    ８．０
タルク                                                        ４．０
着色顔料                                                        適量
上記のＡ成分とＢ成分をそれぞれ加温した後混合攪拌した。これを再加温し、上記のＣ成分を添加して型に流し込み、室温になるまで攪拌してリクイドファンデーションを得た。
【００６９】
処方例２２．クリームファンデーション
［Ａ成分］                                                          部
ステアリン酸                                                ５．０
セタノール                                                  ２．０
モノステアリン酸グリセリル                                  ３．０
流動パラフィン                                              ５．０
スクワラン                                                  ３．０
ミリスチン酸イソプロピル                                    ８．０
ポリオキシエチレン（２０）モノステアリン酸グリセリル        ２．０
プロピルパラベン                                            ０．１
［Ｂ成分］
実施例４の抽出エキス                                        ５．０
ソルビトール                                                ３．０
１，３−ブチレングリコール                                  ５．０
トリエタノールアミン                                        １．５
メチルパラベン                                              ０．１
精製水                                      全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
酸化チタン                                                  ８．０
タルク                                                      ２．０
カオリン                                                    ５．０
ベントナイト                                                １．０
着色顔料                                                    適  量
［Ｄ成分］
香料                                                        ０．３
Ｃ成分を混合し、粉砕機で粉砕した。Ｂ成分を混合し、これに粉砕したＣ成分を加え、コロイドミルで均一分散させた。Ａ成分及び均一分散させたＢ、Ｃ成分をそれぞれ８０℃に加温後、Ｂ、Ｃ成分にＡ成分を攪拌しながら加え、さらにヒスコトロン（５０００ｒｐｍ）で２分間ホモジナイズを行った。これを５０℃まで冷却した後、Ｄ成分を加えて攪拌混合し、さらに攪拌しながら３０℃以下まで冷却してクリームファンデーションを得た。
【００７０】
処方例２３．ボディシャンプー
［Ａ成分］                                                          部
Ｎ−ラウロイルメチルアラニンナトリウム                    ２５．０
ヤシ油脂肪酸カリウム液（４０％）                          ２６．０
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド                              ３．０
メチルパラベン                                              ０．１
［Ｂ成分］
実施例５の抽出エキス                                        ５．０
１，３−ブチレングリコール                                  ２．０
精製水                                      全量が１００部となる量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃に加温して均一に溶解した後、Ａ成分にＢ成分を加え、攪拌を続けて室温まで冷却してボディシャンプーを得た。
【００７１】
処方例２４．石けん
［Ａ成分］                                                          部
硬化ヒマシ油                                              ２６．０
ヤシ油                                                    １０．０
オリーブ油                                                  ４．０
［Ｂ成分］
水酸化ナトリウム                                            ６．０
砂糖                                                      １０．０
グリセリン                                                  ５．０
実施例８の抽出エキス粉末                                    ０．１
精製水                                      全量が１００部となる量
［Ｃ成分］
エタノール                                                ２０．０
香料                                                          適量
Ａ成分及びＢ成分をそれぞれ８０℃に加温して均一に溶解した後、Ａ成分にＢ成分を加えてケン化した。これを攪拌しながら５０℃まで冷却し、Ｃ成分を加えた。これを型に流し込み冷却した後、室温下で数日間乾燥させ、充分に乾燥したものを型から取りだして石けんを得た。
【００７２】
試験例１．細胞内チロシナーゼ活性抑制作用
［試料］
本発明試料１：実施例１の抽出エキス
本発明試料２：実施例６の抽出エキス
本発明試料３：実施例３の抽出エキス
比較試料１  ：実施例１の抽出工程で得られた抽出物（ろ過前の懸濁液）
比較試料２  ：実施例６の抽出工程で得られた抽出物（ろ過前の懸濁液）
比較試料３  ：実施例１の抽出工程で得られた抽出物のろ過後の清澄液
［試験方法］
培養Ｂ１６マウスメラノーマ細胞を、９６穴マイクロプレートに８×１０３個／穴播種し、１０％仔牛血清（ＦＢＳ）含有イーグル最少必須培地（ＭＥＭ）中、３７℃、５％ＣＯ２の条件下に１日間予備培養した後、１０％ＦＢＳ含有イーグルＭＥＭ培地で試料を２．５％又は５．０％の濃度（溶液として）となるように希釈した液に置換し、同条件で２日間培養した。
次に培養液を除去し、０．３ｍｇ／ｍｌのＭＴＴ溶液を添加するか、もしくは界面活性剤（Triton X-100）と５ｍＭのＬ−ドーパ溶液を添加して３７℃で反応を行った後、マイクロプレートリーダー（Model 450、バイオラッド社製）を用い、波長５７０−６３０ｎｍで細胞活性値を、又波長４９０ｎｍでチロシナーゼ活性値をそれぞれ測定した。
なお、比較のため、試料の代わりに、精製水を添加した場合（ブランク）についても、同様の試験を行った。
【００７３】
［結果］
試験例１で得られた細胞活性値を図１に、またチロシナーゼ活性値を図２に示した。図１及び図２の結果から、本発明のミカン科ミカン属植物の葉の抽出エキスが、細胞活性の低下を伴うことなく、細胞内チロシナーゼ活性を有意に抑制することが認められた。
又図２の結果から、ミカン属植物の葉を８０℃で抽出して得られる抽出物ろ過物（比較試料１）に比べて、当該抽出物ろ過物にさらに吸着処理を施して得られる本発明の抽出エキス（本発明試料１）の方が、遙かに強いチロシナーゼ活性抑制作用を示すこと、又５０℃の中温抽出の場合にあっても、抽出物ろ過物（比較試料２）のチロシナーゼ活性抑制作用が、本発明の吸着処理によって増強されること（本発明試料２）が判る。
なお上記の通り、ミカン属植物の葉の高温抽出液を吸着剤処理して得られた本発明試料１が高いチロシナーゼ活性抑制作用を示すのに対して、実施例１の高温抽出液の非吸着性ろ過材によるろ過清澄液（比較試料３）が、ろ過前の懸濁液と変わらぬ低いチロシナーゼ活性抑制作用しか示さないことから、本発明の吸着剤処理による作用効果の増強と前記特許文献５に開示の清澄化処理による作用効果の安定化とが、互いに異なる機序に基づくものであることが明らかである。
【図面の簡単な説明】
【００７４】
【図１】は、試験例１の各試料の細胞活性値を示すグラフである（縦軸：細胞活性値）。
【図２】は、試験例１の各試料のチロシナーゼ活性値を示すグラフである（縦軸：チロシナーゼ活性値）。
【符号の説明】
【００７５】
Ａ：ブランク（精製水）
Ｂ：本発明試料１の２．５％溶液
Ｃ：本発明試料１の５．０％溶液
Ｄ：本発明試料２の２．５％溶液
Ｅ：本発明試料２の５．０％溶液
Ｆ：本発明試料３の２．５％溶液
Ｇ：本発明試料３の５．０％溶液
Ｈ：比較試料１の２．５％溶液
Ｉ：比較試料１の５．０％溶液
Ｊ：比較試料２の２．５％溶液
Ｋ：比較試料２の５．０％溶液
Ｌ：比較試料３の２．５％溶液
Ｍ：比較試料３の５．０％溶液
【図１】
2010106000.tif 000002
【図２】
2010106000.tif 000003