(57)【要約】【課題】主成分中に含まれる分子中の含有水酸基数の異なる不純物を削減し、高純度かつ高分子量であるポリオキシアルキレン誘導体を製造する。【解決手段】分子量8800〜100000の特定のポリオキシアルキレン誘導体から、水酸基数の異なる不純物を分離する精製方法であって、工程（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）および（Ｄ）を有する。（Ａ）ポリオキシアルキレン誘導体の5重量倍以上の非プロトン性有機溶剤を使用し、ポリオキシアルキレン誘導体を溶解して溶液とする工程：（Ｂ）アルミニウムとケイ素との少なくとも一方を含む酸化物からなる吸着剤を溶液に対してポリオキシアルキレン誘導体の0.5〜5重量倍添加することで、スラリーを生成させる工程：（Ｃ）２５℃以上でスラリーを攪拌する工程：（Ｄ）スラリーからポリオキシアルキレン誘導体を回収する工程【選択図】            図１
2010254978.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式[１]で示される分子量8800〜100000のポリオキシアルキレン誘導体から、水酸基数の異なる不純物を分離する精製方法であって、以下の工程（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）および（Ｄ）を有することを特徴とする、ポリオキシアルキレン誘導体の精製方法。
【化８】
2010254978.tif 000022
（式中、
Ｚは、２〜８個の活性水素を持つ化合物の残基であり、
Y1及びY2は、エーテル結合、チオエーテル結合、エステル結合、ウレタン結合、アミド結合、カーボネート結合、２級アミノ基、またはこれらを含むアルキレン基を示し、
Polymer1及びPolymer2は、直鎖もしくは分岐の炭素数２〜４のポリオキシアルキレン鎖を示し、
Ｒは、炭素数1〜７の炭化水素基または炭素数３〜９のアセタール基を示し、
Xはアミノ基、保護アミノ基、保護カルボキシル基、アルデヒド基、保護アルデヒド基、水酸基、保護水酸基、チオール基、保護チオール基、スルホニル基、ビニル基、アリル基、シアノ基、またはこれらを含むアルキレン基、または水素原子を示し、
ｍ及びｎは、ｍ＝1または０、ｎ＝1または０、かつ1≦ｍ＋ｎであり
a及びbは、０≦ａ≦８、０≦ｂ≦８、かつ２≦ａ＋ｂ≦８を満たす整数であり、
a及びbが2以上の整数の場合、Y1及びY2、Polymer1及びPolymer2、Ｒ、X、ｍ、ｎは分子中で同一または異なっても良い）
（Ａ）  前記ポリオキシアルキレン誘導体の5重量倍以上の非プロトン性有機溶剤を使用し、上記ポリオキシアルキレン誘導体を溶解して溶液とする工程
（Ｂ）  アルミニウムとケイ素との少なくとも一方を含む酸化物からなる無機系吸着剤を前記溶液に対して前記ポリオキシアルキレン誘導体の0.5〜5重量倍添加することで、スラリーを生成させる工程
（Ｃ）  ２５℃以上で前記スラリーを攪拌する工程
（Ｄ）  このスラリーから前記ポリオキシアルキレン誘導体を回収する工程
【請求項２】
前記工程（Ｄ）において、前記スラリーをろ過後、ろ液から前記ポリオキシアルキレン誘導体を回収する、請求項１記載の方法。
【請求項３】
前記一般式[1]において、Ｚがエチレングリコールの脱水酸基残基であり、Y1及びY2がエーテル結合であり、Polymer1が直鎖のポリオキシエチレン鎖であり、Ｒが炭素数1〜７の炭化水素基または炭素数３〜９のアセタール基であり、Xが水素原子であり、ｍ及びｎがそれぞれm＝1、ｎ＝０であり、ａ及びｂがそれぞれ、ａ＝１、ｂ＝1である、請求項２記載の方法。
【請求項４】
前記一般式[1]において、Ｒがメチル基である、請求項３記載の方法。
【請求項５】
前記一般式[1]において、Ｚが多価アルコールまたはアミノ酸やペプチドの残基であり、Y1及びY2がエーテル結合、チオエーテル結合、エステル結合、ウレタン結合、アミド結合、カーボネート結合、２級アミノ基またはこれらを含むアルキレン基であり、Polymer1及びPolymer2が直鎖もしくは分岐のポリオキシエチレン鎖であり、Ｒが炭素数1〜７の炭化水素基または炭素数３〜９のアセタール基であり、Xが保護アミノ基、保護カルボキシル基、保護アルデヒド基、保護水酸基、保護チオール基、シアノ基またはこれらを含むアルキレン基であり、ｍ及びｎがそれぞれ、m＝1または０、ｎ＝１であり、ａ及びｂがそれぞれ、０≦ａ≦８、０≦ｂ≦８、かつ２≦ａ＋ｂ≦８を満たす整数であり、a及びbが2以上の整数の場合、Y1及びY2、Polymer1及びPolymer2、Ｒ、X、ｍ、ｎは分子中で同一または異なっても良い、請求項２記載の方法。
【請求項６】
一般式[1]において、Ｚが多価アルコールの脱水酸基残基であり、Y1及びY2がエーテル結合であり、Polymer1及びPolymer2が直鎖もしくは分岐のポリオキシエチレン鎖であり、Ｒが炭素数1〜７の炭化水素基または炭素数３〜９のアセタール基であり、Xが保護アミノ基、保護カルボキシル基、保護アルデヒド基、保護水酸基、保護チオール基、シアノ基またはこれらを含むアルキレン基であり、ｍ及びｎがそれぞれ、1または０、かつ1≦ｍ＋ｎであり、ａ及びｂがそれぞれ、０≦ａ≦８、０≦ｂ≦８、かつ２≦ａ＋ｂ≦８を満たす整数であり、a及びbが2以上の整数の場合、Y1及びY2、Polymer1及びPolymer2、Ｒ、X、ｍは分子中で同一または異なっても良い、請求項２記載の方法。
【請求項７】
前記工程（Ｄ）において、スラリー溶液をろ過後、ろ過ケーキからポリオキシアルキレン誘導体を回収する、請求項1記載の方法。
【請求項８】
一般式[1]で示されるポリオキシアルキレン誘導体において、Ｚが多価アルコールの脱水酸基残基であり、Y1及びY2がエーテル結合であり、Polymer2が直鎖もしくは分岐のポリオキシエチレン鎖であり、Ｒが炭素数1〜７の炭化水素基または炭素数３〜９のアセタール基であり、Xが水素原子であり、ｍ及びｎがそれぞれ、m＝０、ｎ＝１であり、ａ及びｂがそれぞれ、a＝０または１、２≦ｂ≦８、かつ３≦ａ＋ｂ≦８を満たす整数であり、bが２以上の整数の場合、Polymer2、Xは分子中で同一または異なっても良い、請求項７記載の方法。
【請求項９】
一般式[1]において、Ｚが多価アルコール、アミノ酸またはペプチドの残基であり、Y1及びY2がエーテル結合、アミド結合、エステル結合、カーボネート結合、２級アミノ基またはこれらを含むアルキレン基であり、Polymer1及びPolymer2が直鎖もしくは分岐のポリオキシエチレン鎖であり、Ｒが炭素数1〜７の炭化水素基または炭素数３〜９のアセタール基であり、Xがアミノ基、保護アミノ基、保護カルボキシル基、アルデヒド基、保護アルデヒド基、水酸基、保護水酸基、チオール基、保護チオール基、シアノ基またはこれらを含むアルキレン基または水素原子であり、ｍ及びｎがそれぞれ、m＝1または０、ｎ＝1または0、かつ1≦ｍ＋ｎであり、ａ及びｂがそれぞれ、０≦ａ≦８、０≦ｂ≦８、かつ２≦ａ＋ｂ≦８を満たす整数であり、a及びbが２以上の整数の場合、Y1及びY2、Polymer1及びPolymer2、Ｒ、X、ｍ、ｎは分子中で同一または異なっても良い、請求項７記載の方法。
【請求項１０】
一般式[1]で示されるポリオキシアルキレン誘導体の分子量が１００００以上である、請求項１〜９のいずれか一つの請求項に記載の方法。
【請求項１１】
一般式[1]で示されるポリオキシアルキレン誘導体の分子量が３００００以上である、請求項１０記載の方法。
【請求項１２】
前記無機系吸着剤が、酸化アルミニウムと酸化ケイ素との少なくとも一方を成分とすることを特徴とする、請求項１〜１１のいずれか一つの請求項に記載の方法。
【請求項１３】
前記吸着剤の量がポリオキシアルキレン誘導体の１〜３重量倍である、請求項１〜１２のいずれか一つの請求項に記載の方法。
【請求項１４】
前記非プロトン性溶剤が、トルエン、キシレン、ベンゼン、酢酸エチル、酢酸ブチル、クロロホルム、ジクロロメタン、アセトン、アセトニトリルおよびテトラヒドロフランからなる群より選ばれた一種以上である、請求項１〜１３のいずれか一つの請求項に記載の方法。
【請求項１５】
前記非プロトン性溶剤がトルエンである、請求項１４記載の方法。
【請求項１６】
前記非プロトン性溶剤の量が前記ポリオキシアルキレン誘導体の１０〜２０重量倍である、請求項１〜１５のいずれか一つの請求項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、高分子量のポリオキシアルキレン誘導体の精製方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、ポリペプチド、酵素、抗体や遺伝子、オリゴ核酸などを含む核酸化合物、核酸医薬やその他の生理活性物質に血中滞溜性や標的部位へのターゲティング機能などを付加する素材として、ポリオキシアルキレン誘導体は非常に多く使用されている。これはその立体反発効果のために他の生体成分との相互作用が低いためであり、ポリオキシアルキレン誘導体で修飾した生理活性物質、またはリポソームなどをポリオキシアルキレン誘導体で修飾したドラッグキャリアは、非修飾のものより体内での長い血中滞溜性を発揮することが知られている。また、この効果は高分子量のポリオキシアルキレン誘導体である程、大きいことが報告されている。さらに、このポリオキシアルキレン誘導体の末端に活性基や抗体を結合させることで、ターゲティング機能の付加も可能であり、ポリオキシアルキレン誘導体はドラッグデリバリーシステムの分野において非常に有用で欠かすことのできない素材となっている。そのため、これを使用して製造される薬物の性能や安全性の観点から、ポリオキシアルキレン誘導体はより高純度で、不純物の少ないものが求められている。現在、ポリオキシアルキレン誘導体には様々な骨格を持つものが開発されており、その製造方法により副生する不純物は様々である。以下にその例を示す。
【０００３】
（ケースA：  片末端封鎖直鎖型ポリオキシアルキレン誘導体中のジオール不純物）
まず、ポリオキシアルキレン誘導体でも最も汎用される直鎖で水酸基を1個有するポリオキシアルキレン誘導体中に含まれる両末端が水酸基のポリオキシアルキレン誘導体であるジオール体と呼ばれる不純物が挙げられる。
【０００４】
通常、水酸基を1個有するポリオキシアルキレン誘導体を製造する際には、開始剤として相当するアルコールとアルカリ触媒を用い、アルキレンオキシドを付加重合して得ることができる。このとき、開始剤であるアルコール類や反応槽内に混入または残存した水、開始剤が分解してできた両末端水酸基を持つ不純物にアルキレンオキシドが付加重合すると、両末端にアルキレンオキシドが付加重合し、主成分の倍の分子量をもつジオール体が副生する。高分子量のポリオキシアルキレン誘導体を製造する場合、大量のアルキレンオキシドを付加重合させるため、開始剤量が反応容器に対して少量となる。その結果、系中の水分モル数が開始剤に対して多くなるため、ジオール含有量が高分子量のポリオキシアルキレンでは多くなってしまう。また、ポリオキシアルキレン誘導体は高分子量になるほど融解時の粘性が増大することから、アルキレンオキシドの付加重合の途中で溶剤を加えて粘性を低下させたり、反応速度を上げるために触媒を追加する場合がある。それらに含まれる微量の水にアルキレンオキシドが付加重合したものもあり、そのジオール体の分子量は製造方法によって様々であり、主成分の分子量より同程度かそれより小さなジオール体が生成する場合もある。
【０００５】
このようにジオール体はごく微量の水分であっても生成してしまうことから、その副生を完全に抑制することは困難である。特にドラッグキャリアの分野で効果があるとされる高分子量のポリオキシアルキレン誘導体の製造においては更に困難である。この不純物ジオール体は、薬物の修飾を行った際の薬物の二量化の原因となる。ジオール体は目的物と同じポリエーテル化合物であり、分離精製は困難である。このため、ポリオキシアルキレン誘導体中のジオール体を低減する精製技術が強く望まれている。
【０００６】
（ケースBおよびE：  後付けによる分岐型ポリオキシアルキレン誘導体中の不純物）
ポリオキシアルキレン鎖を2以上の整数本もつ分岐型のポリオキシアルキレン誘導体の製造方法の1つとして、反応性ポリオキシアルキレン誘導体を骨格となる活性水素基を持つ化合物に化学的に結合させる方法がある。
【０００７】
この方法の場合に副生する不純物は、反応性ポリオキシアルキレン誘導体とそれが加水分解により反応性部位が水酸基に戻ったポリオキシアルキレン誘導体、未反応の原料、及び原料に1本だけポリオキシアルキレン鎖が導入された反応中間体があり、更には反応性ポリオキシアルキレン誘導体に当初から含まれるジオール体も挙げられ、この方法による分岐型のポリオキシアルキレン誘導体の合成は、多様な官能基、分子量の不純物が複製し、特に精製が困難である。このような分岐のポリオキシアルキレン誘導体は生理活性物質を少ない結合点で修飾し、直鎖と変わらない血中滞溜性を発揮する。結合点が少ないことから、生理活性物質自身の活性の低下を防ぐ目的でのこの分岐のポリオキシアルキレン誘導体は非常に有効であり、そのため、直鎖のポリオキシアルキレン誘導体の除去、精製技術が求めれられていた。
【０００８】
（ケースD：  多分岐型ポリオキシアルキレン誘導体中のジオール不純物）
また、例えばグリセリンやジグリセリンのような多価アルコールを開始剤としてアルキレンオキシドを付加重合して得られる水酸基末端ポリオキシアルキレン鎖を3本以上有する分岐型のポリオキシアルキレン誘導体については、１つの水酸基を持つ直鎖のポリオキシアルキレン誘導体と同様に、開始剤に含まれる水由来のジオール体と、開始剤によっては固体のものや粘性の高いものは予め有機溶剤に溶解させて反応を行うため、溶剤中の水分由来のジオール体が挙げられる。また、同様に反応途中での溶剤の添加や触媒の追加などにより副生するジオール体もある。主成分の多価アルコールの方が水酸基を多く持ちモル当たりのアルキレンオキシド付加モル数が多くなるため、これらの副生するジオール体の分子量は同等かそれより小さくなる。このような多官能ポリオキシアルキレン誘導体は、医薬分野において、外科手術等で使用される止血剤やシーリング剤などのゲル化剤原料として用いられている。これにジオール体由来の不純物が混入すると、分子量や架橋点の異なる不純物が混入することになり、所望のゲル強度を得ることができない。ケースA同様、合成段階での水分の除去は非常に困難であり、ポリオキシアルキレン誘導体中のジオール体を低減する精製技術が強く望まれている。
【０００９】
（ケースC：  官能基変換時に生じる反応残水酸基不純物）
上記方法により合成したポリオキシアルキレン誘導体は、その後、末端の水酸基を様々な官能基へ化学変性させる。通常、ポリオキシアルキレン誘導体の分子量が大きくなるほど粘性が上昇し、分子中の反応部位濃度が低下し反応率が悪化するため、水酸基が少量残存する。また、ケースDのような、分子中の水酸基数が多いポリオキシアルキレン誘導体では化学変性時に未反応の水酸基数の異なる不純物が2以上の整数生成してしまう。純度向上、また歩留向上から、未反応の水酸基を持つポリオキシアルキレン誘導体の削減が重要となっている。
【００１０】
このように未反応の水酸基が残存すると、ポリオキシアルキレン誘導体の純度が低下し、得られる薬剤の純度も低下する。このためにポリオキシアルキレン誘導体の精製技術が求められていた。
【００１１】
以上のように、ポリオキシアルキレン誘導体の合成においては、様々な不純物が副生するが、その精製方法については、様々な提案がなされている。特に水酸基を1個有するポリオキシアルキレン誘導体からのジオール体の精製については、以下の方法が示されている。
【００１２】
(片末端ＯＨの精製方法の例-アルキレンオキシド付加時の水分コントロール)
一つは、アルキレンオキシドを付加重合させる際の製法として、特許文献１（特開平11-335460号）や特許文献２（US2006/0074200）に示されているように、アルコール化合物を出発物質としたエチレンオキシド付加反応において系内の水分をppmオーダーで制御することにより、より高分子量の不純物であるジオール体の原因となる水分子の影響を最小限に抑え、ジオール体の生成を抑制している。しかしながら、高分子量のポリオキシアルキレン誘導体を製造する場合、大量のアルキレンオキシドを付加重合させるため、開始剤量が反応容器に対して少量となる。その結果、系中の水分モル数が開始剤に対して多くなるため、ジオール含有量が高分子量のポリオキシアルキレンでは多くなってしまうため、ジオール体の副生は避けられない。
【００１３】
(片末端ＯＨの精製方法の例-クロマトグラフィー精製)
また、生成したジオール体を除去する方法として示されているものに、非特許文献１（Maｃromol.Chem., 189, 1809-1817(1988)  Leonardら）の透析によるメトキシポリエチレングリコールの精製実験のような分子量の大きさによって精製分離する方法がある。しかしながら、主成分と同等か近い分子量を持つジオール体の分離は、透析による精製では困難である。
【００１４】
非特許文献２（J. Bioactive  Compatible Polymers, 16,206-220(2001) Lapienisら）のシリカゲルでのカラムクロマトグラフィーによるメトキシポリエチレングリコールの精製実験で、数10g程度の実験室レベルでの分子量5000以下のものでメトキシポリエチレングリコール中のジオール体の除去を行っている。しかしながら、精製するメトキシポリエチレングリコールに対して使用するシリカゲル量、溶剤量共に非常に大量であり、工業的なスケールでの製造は困難である。また、分子量が大きくなると1分子あたりの極性が低下するため分離が困難となる。更に分子量によって溶離速度も変わり、分離能に関わってくるため、カラムクロマトグラフィーで目的物を単離するためには、その不純物の種類と含量によって充填剤、溶離液の選択が必要であり、更には展開時の条件の最適化も必要となる。上述したようにカラムクロマトグラフィーでの精製は、使用する吸着剤量、溶剤量共に大量であり、さらに操作が非常に煩雑であり、目的のポリオキシアルキレン誘導体の分子量やそれに含有する不純物によってはこの方法での精製は不可能である。
【００１５】
更に、特許文献３（US5,298,410）や特許文献４（特表2008-514693）はメトキシポリエチレングリコールの水酸基をジメチルトリチル基や酢酸エステル基またはフタル酸エステル基にて修飾することにより、極性の違いを増幅してカラムクロマトグラフィーによって分取する方法が示されている。しかしながら、この製法は、末端水酸基を一旦化学修飾し、これを用いてカラム精製後脱保護し、その後、もう一度水酸基に戻す必要があるため工程が非常に煩雑であることと、化学修飾を施しているために新たな化学種の不純物を生じさせる問題がある。また、特に高分子量になると、末端の極性の差が小さくなり、分離が困難になると考えられる。
【００１６】
(片末端ＯＨの精製方法の例-イオン交換樹脂を使用したバッチ処理)
一方、特許文献５（WO2006/028745）においては、ポリカルボン酸からなるイオン交換樹脂に対して化学修飾なしにメトキシポリエチレングリコールを作用させ、ジオール体を吸着させ除去を行なう例が示されている。この技術は分子量30,000の高分子量体においても有効な精製方法であることが示されている。しかしながら、この吸着の原理はポリエチレングリコール分子内のエーテル酸素と樹脂中のカルボン酸との相互作用を利用した、やはり分子量の大きさの差による分離であるために、ジオール体の分子量がメトキシポリエチレングリコールの分子量と同等や近い場合には適応できない。
【００１７】
以上より、高分子量の片末端に水酸基を持つポリオキシアルキレン誘導体から、高分子量のジオール体を除去するのは困難であり、更には主成分の分子量以下の分子量を持つジオール体の除去については技術的に困難である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１８】
【特許文献１】特開平11-335460号
【特許文献２】US2006/0074200
【特許文献３】US5,298,410
【特許文献４】特表2008-514693
【特許文献５】WO2006/028745
【非特許文献】
【００１９】
【非特許文献１】Maｃromol. Chem., 189,1809-1817(1988)  Leonardら
【非特許文献２】J. BioactiveCompatible Polymers, 16,206-220(2001) Lapienisら
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００２０】
本発明の目的は、主成分中に含まれる分子中の含有水酸基数の異なる不純物を削減し、高純度かつ高分子量であるポリオキシアルキレン誘導体を製造する方法である。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
本発明者らは、上記の課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、高分子量のポリオキシアルキレン誘導体を非プロトン性有機溶剤中で、アルミニウムとケイ素との少なくとも一方を含む酸化物からなる無機系吸着剤を用いて吸着操作を行うことにより、分子内の含有水酸基数の違いにより、その分子量に関らず分離し、高純度かつ高分子量のポリオキシアルキレン誘導体を得ることができる精製方法である。本発明によるとカラムクロマトグラフィーを行うことなく、吸着剤をろ過助剤のように始めからポリオキシアルキレン誘導体を溶解させた溶液中に混合させてろ過する形態のみで、非常に簡便に精製することが出来る方法である。
【発明の効果】
【００２２】
本発明によれば目的物の分子量、不純物の分子量、また、構造やそれに含まれる官能基に関らず、水酸基の数の差で高純度に精製が可能である。更には、本発明は操作が容易であるため、工業的な製造までスケールアップによる再現性も良く、非常に適した精製方法といえる。本発明の精製方法で得られた高分子量のポリオキシアルキレン誘導体は、不純物含量が少なく高純度である。また、本発明の製造方法で製造することにより、高純度のものが容易に得られる。本発明の高分子量のポリオキシアルキレン誘導体を用いて修飾した生体関連物質は、不純物が少なく安全性、安定性に優れており、有用である。
【図面の簡単な説明】
【００２３】
【図１】処理前の試料、実施例６の処理後の試料Ａ、および比較例２の処理後の試料Ｂの各分析結果を示すチャートである。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２４】
本発明の詳細は、一般式[１]で示される分子量8,800〜100,000からなるポリオキシアルキレン誘導体を、以下の操作を含む吸着処理工程により精製する方法である。
【００２５】
【化１】
2010254978.tif 000003
【００２６】
Ｚは、２〜８個の活性水素を持つ化合物の残基であり、具体的な化合物としては、エチレングリコール、プロピレングリコール、トリメチレングリコール、イソプロピレングリコール、ブチレングリコール、テトラメチレングリコール、トリメチロールプロパン、グリセリン、ジグリセリン、トリグリセリン、テトラグリセリン、ペンタグリセリン、ヘキサグリセリン、ペンタエリスリトール、ジペンタエリスリトール、キシリトールなどの多価アルコール類、またはリジンやグルタミン酸など、アミノ基、カルボキシル基、またはチオール基を持つアミノ酸やペプチド、または有機アミン、有機カルボン酸などの化合物が挙げられる。ここで残基とは、水酸基、及びカルボキシル基の場合は、脱水酸基残基であり、アミノ基、2級アミノ基、チオール基の場合は脱水素残基のことを言う。
【００２７】
Y1及びY2は、Zとポリオキシアルキレン鎖との間の結合基であり、共有結合であれば特に制限はないが、好ましくは、エーテル結合、チオエーテル結合、エステル結合、ウレタン結合、アミド結合、カーボネート結合、２級アミノ基、及びそれらを含むアルキレン基が挙げられる。前記アルキレン基部分として好ましいものはメチレン基、エチレン基、プロピレン基、イソプロピレン基、ブチレン基、イソブチレン基、ペンチレン基、イソペンチレン基、へキシレン基などが挙げられ、これらは分岐していてもよい。より好ましくは、メチレン基、エチレン基、プロピレン基である。具体的な結合基としては、Zの活性水素基によって異なり、より好ましいY1及びY2の例を以下に示す。
【００２８】
Zの水酸基にポリオキシアルキレン誘導体を結合する場合、
-O-、  -OCONH(CH2)2or3O-、  -O(CH2)2or3NHCO(CH2)1〜5O-、
-O(CH2)2or3NHCOO-、
【００２９】
Zのアミノ基にポリオキシアルキレン誘導体を結合する場合、
-CO(CH2)1〜5O-、  -COO-、-CO-、  
【００３０】
Zのカルボキシル基にポリオキシアルキレン誘導体を結合する場合、
-O-、  -NH(CH2)2or3O-
【００３１】
Zのチオール基にポリオキシアルキレン誘導体を結合する場合、
-S-
【００３２】
Polymer1及びPolymer2は、直鎖もしくは分岐の炭素数２〜４のポリオキシアルキレン鎖である。具体的なポリオキシアルキレン鎖としては、ポリオキシエチレン、ポリオキシ−１−エチルエチレン、ポリオキシ−１、２−ジメチルエチレン、ポリオキシプロピレン、ポリオキシトリメチレン、及びそれらのブロック共重合体、またはランダム共重合体が挙げられる。医薬用途においては、血液中に薬物を溶解させる必要があるため、その修飾剤としてのポリオキシアルキレン誘導体は水溶性の高いものが望まれる。そのため、好ましいポリオキシアルキレン鎖としては、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレンであり、より好ましくはポリオキシエチレンである。分岐のポリオキシアルキレン鎖とは途中にリンカーを介し、2鎖またはそれ以上に分岐しているポリオキシアルキレン鎖であり、分岐点は複数あっても良い。例としては、下記式（i）に示すようなグリセリンなどの多価アルコールを分岐点とし、２鎖、またはそれ以上に分岐しているポリオキシアルキレン鎖である。
【００３３】
【化２】
2010254978.tif 000004
（ただし、ｎ１は１〜２３００であり、好ましくは２０〜１０００であり、更に好ましくは１００〜１０００である。ｎ２は１〜１２００であり、好ましくは２０〜１０００であり、より好ましくは１００〜１０００である。）
【００３４】
Ｒは、炭素数1〜７の炭化水素基、または炭素数３〜９のアセタール基であり、具体的な炭化水素基、アセタール基としてはメチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、ｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、シクロペンチル基、ヘキシル基、２−ヘキシル基、３−ヘキシル基、シクロヘキシル基、フェニル基、ベンジル基、ジエチルアセタール基、ジメチルアセタール基、ジイソプロピルアセタール基、１，３−ジオキソランなどが挙げられ、好ましい炭化水素基としては、メチル基、ｔ−ブチル基、ベンジル基であり、好ましいアセタール基としては、ジエチルアセタール基である。
【００３５】
Xはアミノ基、保護アミノ基、保護カルボキシル基、アルデヒド基、保護アルデヒド基、水酸基、保護水酸基、チオール基、保護チオール基、スルホニル基、ビニル基、アリル基、シアノ基、及びそれらを含むアルキレン基、または水素原子である。アルキレン基としては具体的にはメチレン基、エチレン基、プロピレン基、イソプロピレン基、ブチレン基、イソブチレン基、ペンチレン基、イソペンチレン基、へキシレン基などが挙げられ、好ましくは、メチレン基、エチレン基、プロピレン基、より好ましくはエチレン基である。Xについて、後述のｎがn＝１でPolymer2がある場合、Xはポリオキシアルキレン鎖末端の官能基となり、ｎ＝０でPolymer2がなく、結合基であるYに直接連結する場合、XはZに結合した前記官能基または前記官能基を含むアルキレン基となる。Xが水素原子であれば、Zのポリオキシアルキレン鎖の結合に関与しない活性水素基を表す。
【００３６】
ｍ及びｎは、1または０、かつ1≦ｍ＋ｎであり、
a及びbは、０≦ａ≦８、０≦ｂ≦８、かつ２≦ａ＋ｂ≦８を満たす整数であり、
a及びbが2以上の整数の場合、Y1及びY2、Polymer1及びPolymer2、Ｒ、X、ｍ、ｎは分子中で同一または異なっても良い。
【００３７】
以下、各工程を詳細に説明する。
（Ａ）  一般式[1]で示されるポリオキシアルキレン誘導体の５重量倍以上の非プロトン性有機溶剤を使用し、上記ポリオキシアルキレン誘導体を溶解する工程
【００３８】
溶剤としては、非プロトン性溶剤でありかつ極性が低く、さらに、ポリオキシアルキレン誘導体の溶解性が高い溶剤が望ましい。非プロトン性有機溶剤としては、トルエン、キシレン、ベンゼン、酢酸エチル、酢酸ブチル、クロロホルム、ジクロロメタン、アセトン、アセトニトリル、テトラヒドロフランなどが挙げられ、好ましい非プロトン性有機溶剤はトルエン、酢酸エチルであり、より好ましくはトルエンである。プロトン性の溶剤では、ポリオキシアルキレン誘導体と吸着剤との相互作用を阻害してしまうため好ましくない。
【００３９】
溶剤量は、一般式[1]で示されるポリオキシアルキレン誘導体に対して５重量倍以上が望ましい。５重量倍未満だと溶液の粘性が高く精製効率が悪くなり、更には歩留も悪くなるため、５重量倍以上とすることが製造上有利である。溶剤量を３０重量倍以上としても、精製効率は変化せず良好であるが、その後のろ過操作において、処理容量が多くなり、工数が増加し収量が少なくなり、コストの面で不利となる。これらの理由から、好ましい溶剤量は５〜３０重量倍であり、より好ましくは１０〜２０倍である。
【００４０】
上記溶剤を用いて、ポリオキシアルキレン誘導体の溶解を行う。処理容器へ仕込む順番はポリオキシアルキレン誘導体、非プロトン性有機溶剤のどちらからでも良い。ポリオキシアルキレン誘導体の分子量によっては加温が必要な場合があり、その方法については特に制限はないが、一般的には３０℃以上に加温することで溶解することができる。
【００４１】
（Ｂ）  アルミニウムとケイ素との少なくとも一方を含む酸化物からなる無機系吸着剤を前記ポリオキシアルキレン誘導体の0.5〜5重量倍添加することで、スラリーを生成させる工程
【００４２】
アルミニウムとケイ素との少なくとも一方を含む酸化物からなる無機系吸着剤とは、酸化物中にアルミニウム原子とケイ素原子との一方または双方を含む酸化物である。具体的には、酸化アルミニウム、二酸化ケイ素、酸化アルミニウムと二酸化ケイ素との複合酸化物、酸化アルミニウムと他の金属との複合酸化物、二酸化ケイ素と他の金属との複合酸化物が挙げられる。ここで言う他の金属としては、ナトリウム、マグネシウム、カルシウムの酸化物が挙げられる。
上記吸着剤は単独、または複合して使用してもよい。
本発明は、分子中の水酸基数により分離する方法であるため、水酸基との相互作用のある吸着剤が有利であり、好ましい無機系吸着剤は、酸化アルミニウム(Al2O3)、二酸化ケイ素(SiO2)、アルミニウムとケイ素からなる複合酸化物であり、更に好ましくは(Al2O3) 、(SiO2)
、(Al2O3・H2O)
、(Al2O3・9SiO2・H2O)であり、特に好ましくは、(Al2O3)
、(SiO2) 、(Al2O3・H2O) であり、最も好ましくは(Al2O3・H2O)である。
具体的な例としては、活性アルミナ(Al2O3)、シリカゲル(SiO2)、協和化学工業(株)製のキョーワードシリーズのキョーワード200B(Al2O3・H2O)、キョーワード700(Al2O3・9SiO2・H2O)、キョーワード２０００（Ｍｇ０．７Ａｌ０．３Ｏ１．１５）、キョーワード３００(2.5MgO・Al2O3・XH2O) （xは９≦x≦１１）が挙げられる。
【００４３】
吸着剤量は、一般式[1]で示されるポリオキシアルキレン誘導体に対して０．５〜５重量倍の範囲が望ましい。0.5未満だと十分な精製効果が得られず、５重量倍より多くなると、処理量が多く歩留低下し、工数が増加する。これらの理由から、ケースA,B,Cの場合は、吸着剤量は１〜３重量倍が好ましく、より好ましくは2重量倍であり、ケースＤ、Ｅの場合、吸着剤量は２〜５重量倍が好ましく、より好ましくは３重量倍である。
【００４４】
（Ｃ）  ２５℃以上で前記スラリーを攪拌する工程
この工程は、工程(B)の溶液に吸着剤を加えて吸着剤のスラリーとし、吸着処理する工程である。処理温度は２５〜８０℃が好ましい。２５℃より低温では、溶液の粘性が高く精製効率が悪くなる。また、ポリオキシアルキレン誘導体の構造や分子量によっては結晶が析出してしまうため、２５℃以上が望ましい。好ましい温度範囲としては、４０〜１００℃であり、より好ましくは４０〜６０℃である。上記温度範囲にてスラリーを不活性ガス雰囲気下または吹き込みながら３０分以上攪拌を行い、吸着処理を行う。この操作により、分子中の水酸基数の多いポリオキシアルキレン誘導体が吸着剤に吸着される。
【００４５】
（Ｄ）前記スラリーから前記ポリオキシアルキレン誘導体を回収する工程
この工程は、上記工程（Ｃ）の吸着処理溶液から吸着剤と溶剤の除去を行い目的のポリオキシアルキレン誘導体を単離する工程である。吸着剤の除去方法は特に制限はないが、一般的には、減圧濾過、または加圧ろ過によって除去を行う。この際、ろ過時の温度の低下による結晶の析出を予防する目的で予めろ過器を工程（Ｃ）の処理温度と同じに加温しておくことが望ましい。ろ過後、目的のポリオキシアルキレン誘導体は、不純物ポリオキシアルキレンより水酸基が少ない場合はろ液に含有され、水酸基が多い場合はろ過ケーキに含有される。ろ液、ろ過ケーキからの目的のポリオキシアルキレンの単離方法は異なっており、ろ液から単離する場合、不純物よりも溶剤の除去は、特に制限はないが、減圧留去による方法、若しくは再沈殿による方法が好ましい。ろ過ケーキから単離する場合、ろ過ケーキに有機溶剤を添加して、再度前記方法により吸着剤を除去し、更に前記方法にて溶剤の除去を行う。
【００４６】
それぞれの場合について、以下に説明する。
工程（Ｄ）において、目的物のポリオキシアルキレン誘導体が不純物のポリオキシアルキレン誘導体よりも水酸基が少ない場合、吸着剤との相互作用が不純物よりも小さいため、ろ液中に目的物が存在し、不純物は吸着剤に残存する。そのため、工程(Ｄ)において、ろ過後のろ液から減圧留去による方法、若しくは再沈殿による方法により、目的物を単離する。
この方法に該当する代表的なポリオキシアルキレン誘導体を以下に挙げる。
【００４７】
（ケースＡの水酸基を１個有する直鎖のポリオキシアルキレン誘導体において、水由来の不純物ジオール体を除去する場合）
一般式[１]において、
ａ及びｂがそれぞれ、ａ＝１、ｂ＝１であり、ｍ及びｎがそれぞれ、ｍ＝１、ｎ＝０である。
Ｚは、２個の水酸基を持つ化合物の脱水酸基残基である。具体的な化合物としては、エチレングリコールが挙げられる。
Y1及びY2は、Zとポリオキシアルキレン鎖との間の結合基であり、エーテル結合である。
Polymer1は、炭素数２〜４の直鎖のポリオキシプロピレン鎖であり、好ましいポリオキシアルキレン鎖としてはポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレンであり、より好ましくはポリオキシエチレンである。
Ｒは、炭素数1〜７の炭化水素基、３〜９個の炭素原子を含むアセタール基であり、好ましくはメチル基、ｔ−ブチル基、ベンジル基、ジエチルアセタール基であり、より好ましくはメチル基、ジエチルアセタール基、更に好ましくはメチル基である。
Xは水素原子である。
【００４８】
（ケースＢの分岐型のポリオキシアルキレン誘導体において、直鎖または分岐型のポリオキシアルキレン誘導体で水酸基を有する不純物ポリオキシアルキレン誘導体を除去する場合）
一般式[１]において、
ａ及びｂがそれぞれ、０≦ａ≦８、０≦ｂ≦８、かつ２≦ａ＋ｂ≦８を満たす整数であり、ｍ及びｎがそれぞれ、m＝1または０、ｎ＝１である。
Ｚは、多価アルコール類、またはアミノ酸やペプチドの残基であり、好ましい多価アルコールとしては、グリセリン、ペンタエリスリトール、より好ましくはグリセリンである。好ましいアミノ酸としては、リジン、グルタミン酸である。
Y1及びY2は、Zとポリオキシアルキレン鎖との間の結合基であり、共有結合であれば特に制限はないが、好ましくは、エーテル結合、チオエーテル結合、エステル結合、ウレタン結合、アミド結合、カーボネート結合、２級アミノ基、及びそれらを含むアルキレン基が挙げられる。アルキレン基として好ましいものはメチレン基、エチレン基、プロピレン基、イソプロピレン基、ブチレン基、イソブチレン基、ペンチレン基、イソペンチレン基、へキシレン基などが挙げられ、より好ましくは、メチレン基、エチレン基、プロピレン基である。具体的な結合基としては、Zの活性水素基によって異なり、好ましいY1及びY2の例を以下に示す。
【００４９】
Zの水酸基にポリオキシアルキレン誘導体を結合する場合、
-O-、  -OCONH(CH2)2or3O-、  -O(CH2)2or3NHCO(CH2)1〜5O-、
-O(CH2)2or3NHCOO-、
【００５０】
Zのアミノ基にポリオキシアルキレン誘導体を結合する場合、
-CO(CH2)1〜5O-、  -COO-、-CO-、
【００５１】
Zのカルボキシル基にポリオキシアルキレン誘導体を結合する場合、
-O-、  -NH(CH2)2or3O-
【００５２】
Zのチオール基にポリオキシアルキレン誘導体を結合する場合、
-S-
【００５３】
Polymer1及びPolymer2は、直鎖、もしくは分岐の炭素数２〜４のポリオキシアルキレン鎖であり、好ましいポリオキシアルキレン鎖としては、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレンであり、より好ましくはポリオキシエチレンである。
【００５４】
Ｒは、炭素数1〜７の炭化水素基、または炭素数３〜９のアセタール基であり、好ましくは、メチル基、ｔ−ブチル基、ベンジル基、ジエチルアセタール基であり、より好ましくはメチル基である。
【００５５】
Xは保護アミノ基、保護カルボキシル基、保護アルデヒド基、保護水酸基、保護チオール基、シアノ基、及びそれらを含むアルキレン基である。アルキレン基は、好ましくは、メチレン基、エチレン基、プロピレン基、より好ましくはエチレン基である。
【００５６】
好ましいXとしては下記(ii)、(iii)、(iv)、(v)に示すものである。
【００５７】
【化３】
2010254978.tif 000005
【００５８】
さらにａ及びｂが２以上の整数の場合、上記記載のY1及びY2、Polymer1及びPolymer2、Ｒ、X、ｍ、ｎは分子中で同一または異なっても良い。
ケースＢにおける具体的な形態の例として表１に示す。
【００５９】
【表１】
2010254978.tif 000006
【００６０】
（ケースＣのポリオキシアルキレン誘導体において、末端水酸基をメトキシ基などの炭化水素基やアセタール基またアミノ基の前駆体であるシアノ基やアミノ基の保護基などに変性させた際に残存する、未反応の水酸基を有する不純物ポリオキシアルキレン誘導体を除去する場合）
【００６１】
一般式[１]において、
ａ及びｂがそれぞれ、０≦ａ≦８、０≦ｂ≦８、かつ２≦ａ＋ｂ≦８を満たす整数であり、ｍ及びｎがそれぞれ、1または０、かつ1≦ｍ＋ｎである。
Ｚは、多価アルコール類の脱水酸基残基であり、好ましい多価アルコールとしては、エチレングリコール、プロピレングリコール、トリメチロールプロパン、トリメチレングリコール、グリセリン、ジグリセリン、トリグリセリン、テトラグリセリン、ペンタグリセリン、ヘキサグリセリン、ペンタエリスリトール、ジペンタエリスリトール、キシリトールである。
Y1及びY2は、Zとポリオキシアルキレン鎖との間の結合基であり、エーテル結合である。
【００６２】
Polymer1及びPolymer2は、直鎖、もしくは分岐の炭素数２〜４のポリオキシアルキレン鎖であり、好ましいポリオキシアルキレン鎖としては、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレンであり、より好ましくはポリオキシエチレンである。
【００６３】
Ｒは、炭素数1〜７の炭化水素基、または炭素数３〜９のアセタール基であり、好ましくは、メチル基、ｔ−ブチル基、ベンジル基、ジエチルアセタール基であり、より好ましくはメチル基である。
【００６４】
Xは保護アミノ基、保護カルボキシル基、保護アルデヒド基、保護水酸基、保護チオール基、シアノ基、及びそれらを含むアルキレン基である。アルキレン基は、好ましくは、メチレン基、エチレン基、プロピレン基、より好ましくはエチレン基である。
【００６５】
好ましいXとしては下記(iii)、(iv)、(v)に示すものである。
【化４】
2010254978.tif 000007
【００６６】
さらにａ及びｂが２以上の整数の場合、上記記載のY1及びY2、Polymer1及びPolymer2、Ｒ、X、ｍ、ｎは分子中で同一または異なっても良い。
【００６７】
ケースＣにおける具体的な形態の例として表２、３に示す。
【表２】
2010254978.tif 000008
【表３】
2010254978.tif 000009
【００６８】
工程(Ｄ)において、目的物のポリオキシアルキレン誘導体が不純物のポリオキシアルキレン誘導体よりも水酸基が多い場合、目的物の水酸基数が多いために吸着剤との相互作用が不純物よりも大きく、工程（C）において、ろ液中に不純物が存在し、目的物は吸着剤に残存することとなるため、工程(Ｄ)の後に更に以下に示す工程(E)が必要となる。
【００６９】
（Ｅ）スラリー溶液をろ過、ろ過ケーキより式(1)の化合物を回収する工程
【００７０】
この工程は、工程（Ｃ）の後、ろ過ケーキ回収し有機溶剤を添加し、再度ろ過を行う工程である。使用する有機溶剤は極性溶剤が有利であり、メタノール、またはエタノールなどのプロトン性溶剤が好ましく、より好ましくはエタノールである。溶剤量については特に制限はないが、上記ポリオキシアルキレン誘導体に対して５重量倍以上が望ましい。処理温度は４０℃以上が好ましい。ろ過による吸着剤の除去は特に制限はないが、一般的には、減圧濾過、または加圧ろ過によって除去を行う。この際、ろ過時の温度の低下による結晶の析出を予防する目的で予めろ過器を処理温度と同じ温度に加温しておくことが望ましい。また、ろ過後に予め処理温度と同じ温度に加温したメタノール、またはエタノールを用いてろ過ケーキを洗浄することにより、歩留の向上が望まれる。回収したろ液からの溶剤の除去は、特に制限はないが、減圧留去による方法、若しくは再沈殿による方法が好ましい。
【００７１】
この方法に該当するポリオキシアルキレン誘導体を以下に挙げる。
（ケースＤの水酸基を３個以上有する分岐型のポリオキシアルキレン誘導体で水由来のジオール体を除去する場合）
一般式[１]において、
ａ及びｂがそれぞれ、ａ＝０または１、２≦ｂ≦８、かつ３≦ａ＋ｂ≦８を満たす整数であり、ｍ及びｎがそれぞれ、m＝０、ｎ＝１である。
Ｚは、多価アルコール類の脱水酸基残基であり、好ましい多価アルコールとしては、トリメチロールプロパン、グリセリン、ジグリセリン、トリグリセリン、テトラグリセリン、ペンタグリセリン、ヘキサグリセリン、ペンタエリスリトール、ジペンタエリスリトール、キシリトールであり、より好ましくはグリセリン、ジグリセリン、ペンタエリスリトールである。
Y1及びY2は、Zとポリオキシアルキレン鎖との間の結合基であり、エーテル結合である。
Polymer1及びPolymer2は、直鎖、もしくは分岐の炭素数２〜４のポリオキシアルキレン鎖であり、好ましいポリオキシアルキレン鎖としては、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレンであり、より好ましくはポリオキシエチレンである。
Ｒは、炭素数1〜７の炭化水素基、または炭素数３〜９のアセタール基であり、好ましくは、メチル基、ｔ−ブチル基、ベンジル基、ジエチルアセタール基であり、より好ましくはベンジル基である。
Xは水酸基を含むアルキレン基であり、好ましいアルキレン基としては、エチレン基、プロピレン基であり、より好ましくはエチレン基である。
【００７２】
（ケースEの分岐型のポリオキシアルキレン誘導体において、未反応の片末端が水酸基である直鎖のポリオキシアルキレン誘導体を除去する場合）
一般式[１]において、
ａ及びｂがそれぞれ、０≦ａ≦８、０≦ｂ≦８、かつ２≦ａ＋ｂ≦８を満たす整数であり、ｍ及びｎがそれぞれ、1または０、かつ1≦ｍ＋ｎである。
Ｚは、多価アルコール類、またはアミノ酸やペプチドなどの化合物であり、好ましい多価アルコール、アミノ酸としては、エチレングリコール、グリセリン、リジン、グルタミン酸である。
Y1及びY2は、Zとポリオキシアルキレン鎖との間の結合基であり、好ましくは、エーテル結合、チオエーテル結合、エステル結合、ウレタン結合、アミド結合、カーボネート結合、２級アミノ基、及びそれらを含むアルキレン基が挙げられる。アルキレン基として好ましいものはメチレン基、エチレン基、プロピレン基、イソプロピレン基、ブチレン基、イソブチレン基、ペンチレン基、イソペンチレン基、へキシレン基などが挙げられ、より好ましくは、メチレン基、エチレン基、プロピレン基である。具体的な結合基としては、Zの活性水素基によって異なり、好ましいY1及びY2の例を以下に示す。
【００７３】
Zの水酸基にポリオキシアルキレン誘導体を結合する場合、
-O-、  -OCONH(CH2)2or3O-、  -O(CH2)2or3NHCO(CH2)1〜5O-、
-O(CH2)2or3NHCOO-、
【００７４】
Zのアミノ基にポリオキシアルキレン誘導体を結合する場合、
-CO(CH2)1〜5O-、  -COO-、-CO-、
【００７５】
Zのカルボキシル基にポリオキシアルキレン誘導体を結合する場合、
-O-、  -NH(CH2)2or3O-
【００７６】
Zのチオール基にポリオキシアルキレン誘導体を結合する場合、
-S-
【００７７】
Polymer1及びPolymer2は、直鎖、もしくは分岐の炭素数２〜４のポリオキシアルキレン鎖であり、好ましいポリオキシアルキレン鎖としては、ポリオキシエチレン、ポリオキシプロピレンであり、より好ましくはポリオキシエチレンである。
Ｒは、炭素数1〜７の炭化水素基、または炭素数３〜９のアセタール基であり、好ましくは、メチル基、ｔ−ブチル基、ベンジル基、ジエチルアセタール基であり、より好ましくはメチル基である。
Xは、アミノ基、保護アミノ基、保護カルボキシル基、アルデヒド基、保護アルデヒド基、水酸基、保護水酸基、チオール基、保護チオール基、シアノ基、及びそれらを含むアルキレン基、または水素原子である。アルキレン基として好ましいものはメチレン基、エチレン基、プロピレン基、イソプロピレン基、ブチレン基、イソブチレン基、ペンチレン基、イソペンチレン基、へキシレン基などが挙げられる。好ましいXは、水酸基を含むアルキレン基、または水素原子である。
さらにａ及びｂが２以上の整数の場合、上記記載のY1及びY2、Polymer1及びPolymer2、Ｒ、X、ｍ、ｎは分子中で同一または異なっても良い。
【００７８】
ケースＥにおける具体的な形態の例として表４に示す。
【表４】
2010254978.tif 000010
【００７９】
ケースＡからＥにおけるポリオキシアルキレン誘導体の分子量は8,800〜100,000であるが、近年の医療用途におけるポリオキシアルキレン誘導体はその血中滞溜性の向上と共に生理活性物質の活性を低下を防ぐため、所望されるポリオキシアルキレンの分子量は増大傾向にある。そのため、好ましいポリオキシアルキレン誘導体の分子量は10,000〜100,000であり、より好ましくは20,000〜100,000、更に好ましくは30,000〜100,000である。
【００８０】
上記記載の工程（Ａ）〜（Ｄ）または（Ａ）〜（Ｅ）の操作は繰り返し行ってもよく、特に不純物が多い場合には繰り返し行うことによって純度を向上することができる。
【実施例】
【００８１】
以下に、実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明する。
また、得られるポリオキシアルキレン誘導体の純度に関して、高分子の分子量分布をゲル浸透クロマトグラフィー（GPC）により測定を行った。以下にその測定法を記載する。
【００８２】
GPCシステムとしてはSHODEX  GPC  SYSTEM  -11を用い、
展開溶媒：テトラヒドロフラン、流速：１ｍｌ/ｍｉｎ、カラム：SHODEX  KF-801,KF-803, KF-804 ( 8mmI..D X  30cm )、カラム温度： ４０℃、検出器： R I X  8、サンプル量：1mg/g、注入量：100ul
GPC測定値には、高分子量不純物と低分子量不純物を、メインピークとの溶出曲線の変曲点からベースラインに対して垂直に分割し、得られた各ピークの面積値から各ピークの面積百分率を算出する。
【００８３】
（実施例1-1）
メトキシポリエチレングリコール（以降ｍPEGと表す）（分子量：30,000、ジオール含量：2.81%)：100gとトルエン：1500g(1700mL)を5L四つ口フラスコに仕込み、スリーワンモーター、冷却管、窒素吹き込み管を取り付け、マントルヒーターを使用して、55℃で溶解した。これにキョーワード２００B(協和化学工業)200g添加し、55℃で1時間攪拌を行った。5Aのろ紙を引いたヌッチェを用意し、吸引ろ過を行い、ろ液を回収した。回収したろ液にヘキサン1000gを加えて晶析、析出した結晶をろ別し、真空乾燥を行い、試料を回収した(50g)。
GPC分析の結果、試料のジオール体含量は0.3%であった。
【００８４】
実施例1-2〜24について、メトキシポリエチレングリコールの分子量、溶剤種、溶剤量、吸着剤種、吸着剤量の条件を変更し、実施例１の操作に準じて実験を行った結果を以下の表5〜11に示す。
【００８５】
（実施例1-1〜1-7：溶剤種を変更した例）
ｍPEG（分子量：30,000、ジオール含量：2.81%)：100gを以下の表記載の溶剤：1700ｍLを5L四つ口フラスコに仕込み、スリーワンモーター、冷却管、窒素吹き込み管を取り付け、マントルヒーターを使用して、40℃前後で溶解した。これにキョーワード２００B(協和化学工業)200g添加し、40℃〜55℃の溶剤の沸点以下の温度で1時間攪拌を行った。5Aのろ紙を引いたヌッチェを用意し、吸引ろ過を行いろ液を回収した。回収したろ液にヘキサン1000gを加えて晶析、析出した結晶をろ別し、真空乾燥を行い、試料を回収した。また、クロロホルム、アセトン、テトラヒドロフラン、ジクロロメタンに関しては、ろ液をエバポレーターにて濃縮後、酢酸エチル1000ｇに再溶解後、ヘキサン1000gを加えて晶析、析出した結晶をろ別し、真空乾燥を行い、試料を回収した。
【００８６】
【表５】
2010254978.tif 000011
【００８７】
以上の結果より、非極性非プロトン性でもトルエンや酢酸エチルなど極性が低いほど効果が大きい。
【００８８】
（比較例1-1〜1-2：溶剤種を変更した例）
実施例1-1〜1-7の方法で、溶剤にプロトン性溶剤であるエタノールと非プロトン性溶剤では有るが極性の高いDMFを用いて操作を行った。結果を以下の表６に示す。
【００８９】
【表６】
2010254978.tif 000012
以上の結果より、プロトン性溶剤や極性の高い溶剤では精製効果が無かった。
【００９０】
（実施例1-8〜1-13：溶剤量を変更した例）
ｍPEG（分子量：30,000、ジオール含量：2.81%)：100gとトルエン：(量は表記載)を5L四つ口フラスコに仕込み、スリーワンモーター、冷却管、窒素吹き込み管を取り付け、マントルヒーターを使用して、55℃で溶解した。これにキョーワード２００B(協和化学工業)200g添加し、55℃で1時間攪拌を行った。5Aのろ紙を引いたヌッチェを用意し、吸引ろ過を行い、ろ液を回収した。回収したろ液にヘキサン1000gを加えて晶析、析出した結晶をろ別し、真空乾燥を行い、試料を回収した。
【００９１】
【表７】
2010254978.tif 000013
【００９２】
以上の結果より、溶剤量が少ないと精製効率及び歩留が悪く、溶剤量を増加させると精製効率、歩留は向上するが、20倍を超えると、殆ど精製効果は変わらない。
【００９３】
（実施例1-14〜1-18：吸着剤種を変更した例）
ｍPEG（分子量：30,000、ジオール含量：2.81%)：100gとトルエン：1500gを5L四つ口フラスコに仕込み、スリーワンモーター、冷却管、窒素吹き込み管を取り付け、マントルヒーターを使用して、55℃で溶解した。これに以下の表記載の吸着剤200g添加し、55℃で1時間攪拌を行った。5Aのろ紙を引いたヌッチェを用意し、吸引ろ過を行い、ろ液を回収した。回収したろ液にヘキサン1000gを加えて晶析、析出した結晶をろ別し、真空乾燥を行い、試料を回収した。
【００９４】
【表８】
2010254978.tif 000014
【００９５】
以上の結果より、アルミニウムとケイ素との少なくとも一方を含む酸化物からなる無機系吸着剤では効果があった。
【００９６】
（比較例1-3〜1-6：吸着剤種を変更した例）
実施例1-8〜1-13の方法で、吸着剤にアルミニウム、ケイ素の酸化物を含まない金属塩、または金属酸化物を用いて操作を行った。結果を以下の表９に示す。
【００９７】
【表９】
2010254978.tif 000015
【００９８】
以上の結果より、アルミニウム、ケイ素の酸化物を含まないその他の金属酸化物や塩では精製効果が無かった。
【００９９】
（実施例1-19〜1-22：吸着剤量を変更した例）
ｍPEG（分子量：30,000、ジオール含量：2.81%)：100gとトルエン：1500gを5L四つ口フラスコに仕込み、スリーワンモーター、冷却管、窒素吹き込み管を取り付け、マントルヒーターを使用して、55℃で溶解した。これにキョーワード２００B(協和化学工業)：(量は表記載)を添加し、55℃で1時間攪拌を行った。5Aのろ紙を引いたヌッチェを用意し、吸引ろ過を行いろ液を回収した。回収したろ液にヘキサン1000gを加えて晶析、析出した結晶をろ別し、真空乾燥を行い、試料を回収した。
【０１００】
【表１０】
2010254978.tif 000016
【０１０１】
以上の結果より、吸着剤量が0.5倍でも十分な精製効果が見られるが、吸着剤量が多いほど精製効率は上がる。しかしながらそれに伴い歩留が悪化した。
【０１０２】
（実施例1-23〜1-24：メトキシポリエチレングリコールの分子量を変更した例）
ｍPEG（表記載)：100gとトルエン：1500gを5L四つ口フラスコに仕込み、スリーワンモーター、冷却管、窒素吹き込み管を取り付け、マントルヒーターを使用して、55℃で溶解した。これにキョーワード２００B(協和化学工業)：200gを添加し、55℃で1時間攪拌を行った。5Aのろ紙を引いたヌッチェを用意し、吸引ろ過を行いろ液を回収した。回収したろ液にヘキサン1000gを加えて晶析、析出した結晶をろ別し、真空乾燥を行い、試料を回収した。
【０１０３】
【表１１】
2010254978.tif 000017
【０１０４】
以上の結果より、メトキシポリエチレングリコールの分子量が変わっても十分な精製効果があった。
【０１０５】
（実施例2）
ｍPEG（分子量：30,000、高分子量不純物量：2.81%)：5kgとKW-200B：10kgを200Lのガラス反応釜に仕込みトルエン75ｋgを仕込んで55℃まで昇温後1時間攪拌した。これを５A相当のろ紙を敷いたろ過器を用いて加圧ろ過を行った。これを5回繰り返した。得られたろ液を60℃まで加温して、100kg程度トルエンを減圧留去した。その後、ヘキサン75kgを加えて晶析、析出した結晶をろ別を行い、真空乾燥後、試料12kgを回収した。
GPC分析の結果、試料の高分子量不純物量は0.3%であった。
【０１０６】
（実施例3-1）
下記(a)に示すα-(3,3-ジエトキシプロピル)-,ω-ヒドロキシ-ポリオキシエチレン(分子量：20,000、ジオール体：2.88%)：100gとトルエン1600gを3L四つ口フラスコに仕込み、スリーワンモーター、冷却管、検水管、窒素吹き込み管を取り付け、マントルヒーターを使用して、110℃まで加温し、含有する水分をトルエンと共沸させ還流脱水を行った。100ｇトルエンを留去した後、50℃まで冷却を行った。これにキョーワード２００B(協和化学工業)200g添加し、55℃で1時間攪拌を行った。5Aのろ紙を引いたヌッチェを用意し、吸引ろ過を行い、ろ液を回収した。回収したろ液にヘキサンを加えて晶析、析出した結晶をろ別し、真空乾燥を行い、試料を回収した(50g)。
GPC分析の結果、試料のジオール体は0.15%であった。
【０１０７】
【化５】
2010254978.tif 000018
【０１０８】
（実施例3-2）
α-(3,3-ジエトキシプロピル)-,ω-ヒドロキシ-ポリオキシエチレン(分子量：10,000、ジオール体：3.13%)：252gとトルエン3753gを5L四つ口フラスコに仕込み、スリーワンモーター、冷却管、検水管、窒素吹き込み管を取り付け、マントルヒーターを使用して、110℃まで加温し、含有する水分をトルエンと共沸させ還流脱水を行った。100ｇトルエンを留去した後、50℃まで冷却を行った。これにキョーワード２００B(協和化学工業)500g添加し、55℃で1時間攪拌を行った。5Aのろ紙を引いたヌッチェを用意し、吸引ろ過を行い、ろ液を回収した。回収したろ液にヘキサンを加えて晶析、析出した結晶をろ別し、真空乾燥を行い、試料を回収した(116g)。
GPC分析の結果、試料のジオール体はN.D.であった。
【０１０９】
（実施例4-1）
下記(b)に示すα-(tert-ブチル)-,ω-ヒドロキシ-ポリオキシエチレン（分子量：40,000、ジオール含量：6.54%)：121gとトルエン:6000gを10Lガラス反応槽に仕込み、スリーワンモーター、冷却管、窒素吹き込み管を取り付け、マントルヒーターを使用して、55℃で溶解した。これにキョーワード２００B(協和化学工業)244g添加し、55℃で1時間攪拌を行った。5Aのろ紙を引いたヌッチェを用意し、吸引ろ過を行い、ろ液を回収した。回収したろ液にヘキサンを加えて晶析、析出した結晶をろ別し、真空乾燥を行い、試料を回収した(65g)。
GPC分析の結果、試料のジオール体含量は1.05%であった。
【０１１０】
【化６】
2010254978.tif 000019
【０１１１】
（実施例4-2）
α-(tert-ブチル)-,ω-ヒドロキシ-ポリオキシエチレン（分子量：10,000、ジオール含量：2.99%)：202gとトルエン:6004gを10Lガラス反応槽に仕込み、スリーワンモーター、冷却管、窒素吹き込み管を取り付け、マントルヒーターを使用して、55℃で溶解した。これにキョーワード２００B(協和化学工業)244g添加し、55℃で1時間攪拌を行った。5Aのろ紙を引いたヌッチェを用意し、吸引ろ過を行いろ液を回収した。回収したろ液を1200gになるまで濃縮した後、ヘキサンを加えて晶析、析出した結晶をろ別し、真空乾燥を行い、試料を回収した(105.2g)。
GPC分析の結果、試料のジオール体含量はN.Dであった。
【０１１２】
（実施例5）
ケースBでの精製が可能であることを証明するため、下記(c)に示すグリセリン骨格に２本のポリオキシエチレン鎖を有する分岐型のポリオキシエチレン誘導体（分子量：40,000）に分子量20,000のメトキシポリエチレングリコールを添加したサンプル（分子量20,000のｍPEG含量：11.9%）を調製し、精製を行った。調製したサンプル：2.25gとトルエン:40gを100ｍL四つ口フラスコに仕込み、スリーワンモーター、冷却管、窒素吹き込み管を取り付け、マントルヒーターを使用して、55℃で溶解した。これにキョーワード２００B(協和化学工業)5g添加し、55℃で1時間攪拌を行った。5Aのろ紙を引いたヌッチェを用意し、吸引ろ過を行いろ液を回収した。回収したろ液にヘキサンを加えて晶析、析出した結晶をろ別し、乾燥を行い、試料を回収した(1.22g)。GPC分析の結果、試料の分子量20,000のメトキシポリエチレングリコール不純物含量は9.1%であった。更にこの操作を繰り返した結果、GPC分析では試料の分子量20,000のメトキシポリエチレングリコール不純物含量は5.1%まで低減できた。
【０１１３】
【化７】
2010254978.tif 000020
【０１１４】
（実施例６および比較例２)
本発明が分子量に関わらずジオール体の除去が可能であることを証明するため、主成分の倍の分子量を持つジオール体と主成分の半分の分子量を持つジオール体をそれぞれ3〜4％含むｍPEGサンプルを調整し、本発明の処理を行った。この際、比較として、このサンプルを用いて特許文献５（WO2006/028745）に記載の方法で処理を行った。以下に詳細を示す。
【０１１５】
ｍPEGサンプル（分子量：40,000、ジオール含量：分子量80,000：2.98%、分子量20,000：3.91%)：10gとトルエン:150gを300mL四つ口フラスコに仕込み、スリーワンモーター、冷却管、窒素吹き込み管を取り付け、マントルヒーターを使用して、55℃で溶解した。これにキョーワード２００B(協和化学工業)20g添加し、55℃で1時間攪拌を行った。5Aのろ紙を引いたヌッチェを用意し、吸引ろ過を行いろ液を回収した。回収したろ液にヘキサンを加えて晶析、析出した結晶をろ別し、真空乾燥を行い、試料Aを回収した(5g)。
【０１１６】
ｍPEGサンプル（分子量：40,000、ジオール含量：分子量80,000：2.98%、分子量20,000：3.91%)：10gとイオン交換水1000gを2L四つ口フラスコに仕込み、スリーワンモーター、冷却管、窒素吹き込み管を取り付け、マントルヒーターを使用して、60℃で溶解した。これにDOWEX（DOW
Chemical社）(ポリアクリル酸樹脂)30g添加し、60℃で3時間攪拌を行った。5Aのろ紙を引いたヌッチェを用意し、吸引ろ過を行いろ液を回収した。クロロホルム1kgを加えて抽出を行い、これを2回繰り返した。クロロホルム層を濃縮し、その後、酢酸エチル200gを加えて再度溶解し、硫酸マグネシウム10gを加えて脱水を行った。5Aのろ紙を引いたヌッチェを用意し、吸引ろ過を行いろ液を回収した。回収したろ液にヘキサンを加えて晶析、析出した結晶をろ別し、真空乾燥を行い、試料Bを回収した(5g)。
表１２および図１に結果を示す。
【０１１７】
【表１２】
2010254978.tif 000021
【０１１８】
上記結果のように特許文献５（WO2006/028745）に記載の方法では高分子量のジオール体は除けたものの、低分子量のジオール体は殆ど除去されず、低分子量のジオール体不純物を含む場合適応できないのに対し、本発明ではジオール体を分子量に関らず同時に除去が可能であることが判った。
【図１】
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