(57)【要約】【課題】  発酵茶の調製条件、原料茶葉による含有成分の変化等について検討し、新規な有効成分により、茶葉を更に幅広く活用する手段を提供することを課題とする。【解決手段】  黒麹を用いた発酵により、原料茶葉、特には二番茶を好気発酵で、３〜１０日間発酵させることによって、没食子酸起因化合物を発生させて含有せしめて発酵茶とし、さらには、前記没食子酸起因化合物を抽出し利用することにより、茶葉を更に幅広く活用することを可能とした。【選択図】      図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
黒麹を用いた発酵により、原料茶葉には確認されない没食子酸起因化合物を産生させて含有せしめたこと
を特徴とする発酵茶。
【請求項２】
前記発酵は、
好気発酵であって、発酵期間が３〜１０日間であること
を特徴とする請求項１に記載の発酵茶。
【請求項３】
前記原料茶葉は、
二番茶であること
を特徴とする請求項１又は２に記載の発酵茶。
【請求項４】
黒麹を用いた茶葉の発酵により生成した没食子酸起因化合物を含有すること
を特徴とする薬効性組成物。
【請求項５】
前記没食子酸起因化合物は、
請求項１〜３のいずれかに記載の発酵茶から、水又は希酢酸を用いた抽出により取得されたものであること
を特徴とする請求項４に記載の薬効性組成物。
【請求項６】
前記没食子酸起因化合物は、
前記発酵茶から、水又は希酢酸を用いた抽出により取得されたものから分離精製されものを含有すること
を特徴とする請求項５に記載の薬効性組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、発酵によって特定の化合物を産生させた発酵茶、および、前記化合物を含有する薬効性を有する組成物に関するものである。
特に、この発明は、風味において優れ、健康により貢献するお茶、さらには、そのお茶から抽出・分離された各種疾病の予防、又は治療用の医薬として使用される可能性のある薬効性組成物に関するもので、製茶技術、健康食品調製技術および医薬調製技術に属するものである。
【背景技術】
【０００２】
嗜好品としてのお茶は、非常に古くから、また全世界的に愛用されている。
その多くは、茶葉に湯を注いで、その浸出液を飲むというものである。
前記浸出液には、茶葉から抽出された種々の成分が含まれているため、独特の香と味とを有し、また、特有の機能を有するものである。
そのため、茶葉の成分に関しての研究が幅広く行われ、その成分に関しても、以下のようなことが知られている。
【０００３】
すなわち、茶の特徴的な成分は、カフェインとタンニン系の物質のカテキンである。
このカフェインは、人に興奮作用を与え、苦味を呈し、利尿作用も有する。
また、カテキンは、茶の成分としては一番量の多いもので、茶の渋味の成分である。
さらに、それら以外にも、テアニンに代表されるアミノ酸、ビタミンＣに代表されるビタミン類、クロロフィル類、カリウムやカルシウムなどの無機成分、ジメチルスルフィド、青葉アルコール、テルペンアルコールなどの香料成分など幅広く知られている。
【０００４】
そして、これらの成分が茶葉からの製茶の段階で、変化することも知られている。
例えば、釜炒茶、ほうじ茶では、ピラジン、ピロール等の含窒素化合物が多くなり、発酵茶では、花香を持つテルペンアルコールが、非常に多くなることが知られている（平凡社発行：世界大百科事典参照）。
【０００５】
このように茶葉には、各種の有用な成分が多く含まれているため、その成分を効率よく抽出することや、茶葉を加工して有効成分を多く取得する試みが、古くから多くなされている。
特に、発酵茶に関するものでは、例えば、特開２００２−３７００９４号公報（特許文献１）においては、黒茶、すなわち、黒麹菌等による後発酵法により長期熟成した黒茶から、熱水抽出により血糖値抑制物質が得られたことが開示されている。
【０００６】
また、特開２００５−３４１８７６号公報（特許文献２）においては、茶葉に麹菌又は麹を加え、これを発酵させることによって、マルターゼ阻害効果を有する茶が得られることが開示されている。
【０００７】
一方、本願の発明者らは、先に酢酸による抽出で、発酵茶葉から肝機能の悪化の防止等が図れる薬効性組成物が得られることを見出して、特許出願を行なった。
その内容は、特開２００７−２３８５８４号公報（特許文献３）に開示されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２００２−３７００９４号公報（特許請求の範囲）
【特許文献２】特開２００５−３４１８７６号公報（特許請求の範囲）
【特許文献３】特開２００７−２３８５８４号公報（特許請求の範囲）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
前記特許文献３に記載の発明は、茶葉の持つ特性を有効に活用するために、茶葉における有効成分を抽出し、健康食品や医薬の原料として用い、より効率的に茶葉を、しかも製茶に利用できない茶葉（刈捨葉）も利用できる、薬効性の高い組成物を提供することを目的としたもので、粉末状態でも、酢酸あるいは水又はエタノール溶液としても使用することができ、使用されていなかった刈捨葉からでも調製されるため、環境にやさしく、エコロジカルな面でも優れたものである。
【００１０】
特に、この薬効性組成物は、肝機能（ＡＳＴ、ＡＬＴ）の悪化の防止、ＨＤＬコレステロール（善玉コレステロール）の増大、血糖値の上昇防止、血小板の減少防止、酸化ストレスによる赤血球変形能の低下の防止など優れた医学的効果を奏するものである。
【００１１】
かかる状況において、発明者らは、さらに発酵茶（後発酵茶・黒茶）の有する各種成分の特性をより深く追求するとともに、発酵茶の調製条件、原料茶葉による含有成分の変化等について検討し、幅広く利用されている茶葉を、さらに有効活用するために、茶葉における有効成分について、また、その発酵条件による変化について鋭意検討を行なった。
【００１２】
その結果、発明者らは、黒麹を用いて発酵させた茶葉には、発酵条件によるが、未だ構造は解明されていないが、没食子酸起因化合物が生成して存在すること、この化合物の存在した茶葉は風味がよいこと、また、この化合物は、水、特には熱水や冷水さらには希酢酸による抽出により分離され、それらが薬効性を有することを見出し、この発明を完成させたものである。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
すなわち、この発明の請求項１に記載の発明は、
黒麹を用いた発酵によって、原料茶葉には確認されない没食子酸起因化合物を産生させて含有せしめたこと
を特徴とする発酵茶である。
【００１４】
また、この発明の請求項２に記載の発明は、
請求項１に記載の発酵茶において、
前記発酵は、
好気発酵であって、発酵期間が３〜１０日間であること
を特徴とするものである。
【００１５】
また、この発明の請求項３に記載の発明は、
請求項１又は２に記載の発酵茶において、
前記原料茶葉は、
二番茶であること
を特徴とするものである。
【００１６】
また、この発明の請求項４に記載の発明は、
黒麹を用いた茶葉の発酵により生成した没食子酸起因化合物を含有すること
を特徴とする薬効性組成物である。
【００１７】
また、この発明の請求項５に記載の発明は、
請求項４に記載の薬効性組成物において、
前記没食子酸起因化合物は、
請求項１〜３のいずれかに記載の発酵茶から、水又は希酢酸を用いた抽出により取得されたものであること
を特徴とするものである。
【００１８】
また、この発明の請求項６に記載の発明は、
請求項５に記載の薬効性組成物において、
前記没食子酸起因化合物は、
前記発酵茶から、水又は希酢酸を用いた抽出により取得されたものから分離精製されたものを含有すること
を特徴とするものである。
【発明の効果】
【００１９】
この発明にかかる発酵茶は、没食子酸起因化合物の存在により、赤血球変形能に及ぼす効果が大きいものである。
したがって、健康維持のためのお茶として有効なばかりでなく、その風味は、玉露から調製された発酵茶を凌ぐものであって、風味の高い健康飲料として、茶葉のさらなる活用が図れるものである。
【００２０】
また、この発明にかかる発酵茶は、各種の機能を有する没食子酸起因化合物を含んでいるので、当該発酵茶からの抽出液、さらには精製された没食子酸起因化合物は、以下のような優れた薬効性を奏するもので、健康食品の素材として、医薬の原料として、有効に利用される可能性の高いものである。
１．赤血球変形能低下防止
２．抗酸化活性、ラジカル捕捉活性
３．α−グルコシダーゼ／リパーゼ阻害活性
【００２１】
また、この発明にかかる薬効性組成物は、粉末状態でも、酢酸あるいは水またはエタノール溶液としても使用することができるため、上記のような効果を発現させるために、健康食品や医薬として利用する際に、効率的にまた効果的に活用することを可能とするものである。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】発酵処理１日後の、発酵茶サンプルの抽出液のＨＰＬＣチャートである。
【図２】発酵処理３日後の、発酵茶サンプルの抽出液のＨＰＬＣチャートである。
【図３】発酵処理期間による抽出液の成分の変化を示す図である。
【図４】カテキンの蛍光検出法による抽出液の検出結果を示す図である。
【図５】７０％アセトンを用いる重合カテキンの検出法による抽出液の検出結果を示す図である。
【図６】加チオール分解でのＸ成分の検出結果を示す図である。
【図７】発酵茶の４．５％酢酸抽出物のＨＰＬＣ分析の結果を示す図である。
【図８】図７の各ピークの紫外吸収スペクトルである。
【図９】発酵茶の４．５％酢酸抽出物のＢｉｏ−Ｇｅｌカラムによる分画図である。
【図１０】発酵茶酢酸抽出物からの酢酸エチル抽出物のＢｉｏ−Ｇｅｌカラムによる分画図である。
【図１１】図１３の３画分のＨＰＬＣチャートである。
【図１２】図１３画分５のＳｅｐｈｄｅｘ  ＬＨカラム（２×２７ｃｍ）による吸着クロマトの図である。
【図１３】図１５のＸ成分を含む画分のＨＰＬＣチャートである。
【図１４】画分５のＨＰＬＣで精製したＸ成分のＨＰＬＣチャートである。
【図１５】画分５のＨＰＬＣで精製したＸ成分の紫外吸収スペクトルである。
【図１６】Ｘ成分の結晶写真である。
【図１７】Ｘ成分の赤血球変形能低下抑制効果を示す図である。
【図１８】Ｘ成分の抗酸化活性を示す図である。
【図１９】Ｘ成分のＤＨＨＰラジカル捕捉活性を示す図である。
【図２０】Ｘ成分の酵素阻害活性を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
この発明の発酵茶は、従来公知の黒麹を用いた発酵方法で調製されるものである。
その方法自体には、格別新規な条件は存在しないが、今回、発明者らが見出した、没食子酸起因化合物が産生し、発酵茶が、没食子酸起因化合物を含有する状態を維持することが必要である。
【００２４】
前記発酵茶が、没食子酸起因化合物を含有する状態を維持する発酵条件として、一番重要な条件は、発酵期間である。
優れた黒茶の製造には、長い場合には数ヶ月要するとされ、特許文献２においても好ましくは３週間程度（段落００３０）とされているが、上記条件を満たすための期間として、この発明にとり好ましい発酵期間は、３〜１０日間である。
また、発酵は、好気発酵が採用される。
【００２５】
この発明に使用される原料茶葉としては、得られる発酵茶の風味の点から、二番茶、すなわち、５月頃に収穫した一番茶の後に出てくる芽を６月頃に収穫した茶葉を用いるのが好ましい。
この二番茶を用いた発酵茶は、玉露、一番茶、三番茶、秋冬番茶を用いた発酵茶に比べて、優れた風味を有するものとなる。
【００２６】
その他の発酵条件、すなわち、原料黒麹、発酵中の温度（通常３０〜４５℃）、発酵中の水分（通常２５〜３５％）など、一般に、黒麹を用いて発酵茶を調製する条件に従って行なうことによって、目的とする発酵茶および没食子酸起因化合物を得ることができる。
【実施例】
【００２７】
以下、この発明にかかる発酵茶および薬効性組成物を実施例に基づいて、より詳細に説明する。
【００２８】
＜発酵茶の調製＞
原料茶葉として、玉露、一番茶、二番茶、三番茶、秋冬番茶を用い、以下の工程で発酵茶を調製した。
【００２９】
原料茶葉（荒茶）２４０ｋｇをドラム回転式自動製麹装置に投入し、ドラムの回転により攪拌しながら水２１０ｋｇを加えて、原料茶葉を膨潤させた。
別途、原料茶葉（粉茶）３０ｋｇと黒麹により調製した種麹２１０ｇ混和したものを、膨潤させた原料茶葉に添加し、攪拌しながら設定温度３５℃で６日間発酵させた。
発酵時の温度上昇は、空冷ファンを用いて抑え、設定温度を維持するように努めた。
発酵した茶葉は、温度１００℃の蒸煮殺菌と、温度５５℃の乾燥を経て製品としての発酵茶とした。
【００３０】
＜発酵茶の官能試験＞
各原料から得られた発酵茶について、男女各５名による風味試験を、５点法（５：良い、３：普通、１：悪い）で行ったところ、下記表１に示される結果が得られた。
表１から明らかなように、原料茶葉（荒茶）においては、玉露が一番高く評価され、次いで一番茶である。
上記条件で調整された発酵茶においては、玉露の評価が大きく落ち、それに変わって二番茶を原料とする発酵茶が最も風味が良いという結果になっている。
【００３１】
【表１】
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【００３２】
＜発酵茶の赤血球変形能低下抑制＞
上記の発酵茶のうち、原料を、玉露、二番茶、秋冬番茶とするものについて、その原料、発酵茶および当該発酵茶を、さらに、通常の発酵条件で１５日間嫌気発酵させた二次発酵茶について、その熱湯抽出液に関する、下記に示す方法で測定した赤血球変形能低下抑制効果を表２に示した。
なお、表中の数字は、赤血球変形能を低下させる酸化剤ＡＡＰＨ添加時（Ｂ）と、ＡＡＰＨと試料液添加時（Ｃ）との相対変化（％）で表したものである。
【００３３】
【表２】
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【００３４】
＜赤血球変形能測定方法＞
３．８％クエン酸ソーダ溶液１．０ｍｌを含む採血管に、採血した血液１０．０ｍｌを２５００ｒｐｍ×１０分遠心分離して赤血球を沈殿させたのち、洗浄し、ＨＥＰＥＳを加え、６．０％赤血球浮遊液を調製した。
この６．０％赤血球浮遊液３．０ｍｌに、ＨＥＰＥＳを（（Ａ）３．０ｍｌ，（Ｂ）２．４０ｍｌ，（Ｃ）：２．３４ｍｌ）加え、温度３７．０℃で予備インキュベートしたのち、前記（Ｂ）には、５００ｍＭのＡＡＰＨ溶液０．６ｍｌを、前記（Ｃ）には、５００ｍＭのＡＡＰＨ溶液０．６ｍｌと発酵茶の抽出物溶液０．０６ｍｌ（１０ｍｇ／２ｍｌ）を添加し、温度３７．０℃で４５分インキュベートした。
その後、測定するまで氷冷し、測定は、温度２５．０℃で７分、再度インキュベートしてから行なった。
なお、前記（Ａ）は、コントロールである。
【００３５】
前記測定は、垂直に立てたガラス管（ｖｅｒｔｉｃａｌ ｔｕｂｅ）に、タイゴンチューブを介してニッケルメッシュホルダーを接続し、通常１５ｃｍの高さ（ｈｅｉｇｈｔ：ｈ）より、ＨＥＰＥＳバッファーで調整した生理食塩水を用いて作成した赤血球浮遊液を濾過させて行なう。
前記ガラス管の周囲は、恒温水を還流させて、試料を定温に保っている。
また、ガラス管のゼロレベルに設置した圧力（ｐｒｅｓｓｕｒｅ：Ｐ）トランスデューサーで、試料を濾過中の圧力降下を連続的に検出し、これを増幅器とＡＤ変換器を介してパソコンに取り込み、流量（ｆｌｏｗｒａｔｅ：Ｑ）を計算する。
流量は、圧力を高さに変換し（Ｐ＝ρｇｈ）、高さ−時間（ｈ−ｔ）曲線の微分値（ｄｈ／ｄｔ）を取って、これにガラス管の断面積（ａ）を乗じて得られる（Ｑ＝ｄｈ／ｄｔ・ａ）。
【００３６】
血球を含まないコントロールｘ（ＨＥＰＥＳバッファー調整生食水：ニュートン流体）の圧−流量曲線を対照として、赤血球浮遊液の圧−流量曲線を検討し、ある一定圧（通常１００ｍｍ・Ｈ２  Ｏ）での、対照液の流量に対する赤血球浮遊液の流量(％)をもって赤血球変形能を評価した。
【００３７】
＜発酵茶抽出液の成分変化＞
二番茶に基づく発酵茶の調製時に、１日毎にサンプリングした茶葉について、熱湯抽出を行ない、得られた抽出物をＨＰＬＣにより分析した。
図１は、１日後のサンプルの抽出液、図２は、３日後のサンプルの抽出液のＨＰＬＣチャートである。
それらの結果に基づいて、得られた抽出液の成分の変化を図３に示した。
なお、図中の略号は、以下の化合物を示すものである。
ＧＡ    ；没食子酸
ＥＣ    ；エピカテイン
ＥＣＧ  ；エピカテインガレート
ＥＧＣ  ；エピガロカテイン
ＥＧＣＧ；エピガロカテインガレート
Ｘ、Ｙ、Ｚはポリフェノールとも思われるが、現状不明成分であり、なかでもＸ成分の量が飛びぬけて多いものである。
それらの抽出液の赤血球変形能は、以下の表３のとおりであった。
なお、表には表されていないが、発酵後に行われる蒸煮処理によっても、香味の向上や赤血球変形能低下抑制効果が向上し、例えば、４日間発酵させたもので３７％を示したものは、蒸煮処理後に７９％と上昇していた。
【００３８】
【表３】
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【００３９】
＜Ｘ成分の同定＞
図３から明らかなように、図中、Ｘ成分を除いて、他の成分の殆どは、発酵開始1日乃至２日後に最大値を有し、その後減少傾向にある。
これに対し、Ｘ成分は、１日目には存在が認められなかったのに対し、２日目から顕著に増加し、５日目において最大値を有しており、表３に示された赤血球変形能との関連が強い化合物であると推定された。
【００４０】
現在のところ、Ｘ成分の同定はなされていないが、下記のデータから、没食子酸起因化合物であると推定された。
１）カテキンの蛍光検出法（２８０ｎｍＥｘ，３１０ｎｍＥｍ）では、図４に示されるように、抽出液に、カテキンの存在は認められない。
２）７０％アセトンを用いる重合カテキンの検出法では、図５に認められるように重合カテキンは検出されない。
３）図６に示されるように、Ｘ成分の加チオール分解でカテキンが検出されない。
また、没食子酸起因化合物が加水分解型タンニンであることも考慮されるが、４Ｍ塩酸を用い、８５℃で５時間、Ｘ成分を加水分解したところ、分解により生じたものはいくつかのフェノール酸であり、加水分解型タンニンではないことが確認された。
【００４１】
＜Ｘ成分の抽出・精製＞
Ｘ成分の抽出・精製を以下の手順で行なった。
まず、２００ｇの発酵茶を用い、抽出媒体として４．５％酢酸を用い、減圧濃縮・凍結乾燥によって、７２．６ｇの抽出物（収率：３６．３％）を得た。
図７に、この抽出物のＨＰＬＣ分析の結果を、図８に、各ピークの紫外吸収スペクトルを示す。
図７中ピークａ〜ｃは、その溶出位置と吸収スペクトルから、それぞれＥＧＣ、Ｃａｆｆｅｉｎ、ＥＣであり、ピークｄは図１の条件下でＸ成分と同一溶出位置を示し、Ｘ成分であることがわかった。
【００４２】
前記抽出物を、Ｂｉｏ−Ｇｅｌ Ｐ−１０カラム（２×２８ｃｍ）を用い、１％酢酸水溶液を展開液として分画した結果を、図９および表４に示す。
各画分をＨＰＬＣで分析した結果、Ｘ成分は画分５に、褐色のカテキン重合体と一緒に含まれることがわかった。
【００４３】
【表４】
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【００４４】
上記分画により得られた、Ｘ成分を含有する画分５について、酢酸エチルによる抽出を行なったところ、Ｘ成分は酢酸エチル層に抽出され、カテキン重合体は水層に残ることが確認され、Ｘ成分含有酢酸エチルを濃縮した後脱イオン水を加えて希釈した溶液を、Ｂｉｏ−ＧｅｌＰ−１０カラム（３×３０ｃｍ）に供し、１％酢酸水溶液で展開したときの溶出パターンを図１０に示す。その画分４〜６についてＨＰＬＣ分析を行った結果、図１1に示すように、いずれもＸ成分を含むことがわかった。
【００４５】
凍結乾燥した画分５にメタノールを加えて攪拌、遠心分離して得られた上清を、予めメタノールで平衡化したＳｅｐｈａｄｅｘ  ＬＨカラム（２×２７ｃｍ）に供し、メタノールで展開した。その溶出パターンを図１２に、３００ｎｍに吸収を持つ画分のＨＰＬＣパターンを図１３に示す。
【００４６】
この画分をＴＦＡ−ＭｅＣＮ系のＨＰＬＣで精製したところ、図１４に示されるように、精製されたＸ成分が得られた。
その紫外吸収スペクトルは、図１５に示す通りであった。
また、この画分を減圧乾固し、脱イオン水を加え、暖めて溶解した後、冷却した結果、図１６のような結晶が得られた。
【００４７】
得られたＸ成分の機能を測定し、その結果を図１７〜２０に示した。
なお、図１７〜２０の内容は、以下のとおりである。
−図１７：赤血球変形能低下抑制効果
−図１８：抗酸化活性
−図１９：ＤＨＨＰラジカル捕捉活性
−図２０：酵素阻害活性
赤血球変形能以外の測定法は、以下のとおりである。
【００４８】
＜抗酸化活性の測定方法＞
前記で得られた各組成物の抗酸化活性を、リノ−ル酸の酸化物がβ−カロチンを退色させる作用を利用したＭｉｌｌｅｒらの方法に準じ、以下の方法で測定した。
試料を分注した分光光度計用試験管セルに、リノ−ル酸−β−カロチン溶液を加えて攪拌し、温度５０℃の恒温槽で、２０分間反応させた場合のβ−カロチンの退色度を４７０ｎｍの吸光度によって求め、合成抗酸化剤ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）による吸光度の減少量を測定し、試料と同じ減少量を与えるＢＨＡの濃度によって、試料の抗酸化活性を表した。
【００４９】
＜ラジカル捕捉活性測定法＞
試料溶液に、等量のＤＰＰＨ（１，１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル）溶液、ＭＥＳ緩衝液、２０％エタノールを加え、室温で２０分間反応させた後、５２０ｎｍでの吸光度を測定した。
その活性は、同様にして行ったアスコルビン酸（ＡｓＡ）で、ＤＰＰＨラジカル捕捉活性の検量線を作成し、試料ｇ当たりのラジカル捕捉活性を、ＡｓＡ当量（μｍｏｌ／ｇ又はｍｍｏｌ／ｇ）で表した。
【００５０】
＜酵素阻害活性測定方法＞
試薬溶液５０μｌ又は２５μｌに、小腸α−グルコシダーゼ溶液又は膵リパーゼ溶液２５μｌを加え、温度３７℃で１０分間インキュベートしたのち、４−メチルウンベリフェロンのα−D−グルコース又はオレイン酸エステル（基質）溶液２５μｌ又は５０μｌを添加してインキュベートした。
０．２モル濃度のNａ２  ＣＯ3  溶液又は０．１モル濃度のクエン酸緩衝液（ｐＨ４．２）を加えて反応を停止したのち、生成した４−メチルウンベリフェロンの蛍光度を４５０ｎｍで測定して阻害率を算出した。
【産業上の利用可能性】
【００５１】
この発明の発酵茶および薬効性組成物は、前記のような優れた特性を有し、かつ薬効性組成物や生成された没食子酸起因化合物は、粉末ないし水、酢酸またはエタノールの無毒の溶媒溶液として供給可能なものであるため、この発明は製茶業界を始めとして、健康食品産業や医薬業界で広く利用される可能性の高いものである。
【図３】
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【図１】
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【図２】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【手続補正書】
【提出日】平成22年3月30日(2010.3.30)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００３７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００３７】
＜発酵茶抽出液の成分変化＞
二番茶に基づく発酵茶の調製時に、１日毎にサンプリングした茶葉について、熱湯抽出を行ない、得られた抽出物をＨＰＬＣにより分析した。
図１は、１日後のサンプルの抽出液、図２は、３日後のサンプルの抽出液のＨＰＬＣチャートである。
それらの結果に基づいて、得られた抽出液の成分の変化を図３に示した。
なお、図中の略号は、以下の化合物を示すものである。
ＧＡ      没食子酸
ＥＣ      エピカテキン
ＥＣＧ    エピカテキンガレート
ＥＧＣ    エピガロカテキン
ＥＧＣＧ  エピガロカテキンガレート
Ｘ、Ｙ、Ｚはポリフェノールとも思われるが、現状不明成分であり、なかでもＸ成分の量が飛びぬけて多いものである。
それらの抽出液の赤血球変形能は、以下の表３のとおりであった。
なお、表には表されていないが、発酵後に行われる蒸煮処理によっても、香味の向上や赤血球変形能低下抑制効果が向上し、例えば、４日間発酵させたもので３７％を示したものは、蒸煮処理後に７９％と上昇していた。