(57)【要約】【課題】統計的な裏づけのある客観的な証拠すなわちエビデンスに基づいて、肌のトラブルのリスクを評価する方法を開発する。【解決手段】本発明は、シミのリスク評価方法を提供する。本発明の評価方法は、被験者の血中Ｃペプチド濃度の測定値を指標として被験者の肌におけるシミのリスクを評価するステップを含む。【選択図】図３
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験者の血中Ｃペプチド濃度の測定値を指標として被験者の肌におけるシミのリスクを評価するステップを含むことを特徴とする、シミのリスク評価方法。
【請求項２】
被験者の血中ＩＧＦ−１濃度の測定値を指標として被験者の肌におけるシミのリスクを評価するステップを含むことを特徴とする、シミのリスク評価方法。
【請求項３】
被験者の血中Ｃペプチド濃度及び血中ＩＧＦ−１濃度の測定値を指標として被験者の肌におけるシミのリスクを評価するステップを含むことを特徴とする、シミのリスク評価方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はＣペプチド及び／又はインスリン様成長因子−１（ＩＧＦ−１）の血中濃度を利用する客観的なシミのリスク評価方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
今日のコスメティックビジネスにおいては、顧客の１人１人の肌のコンディションにあわせて最適な化粧品を提案したり、最適な美容ケアソリューションを提供するというような、顧客へのきめ細かな個別対応が求められている。肌のトラブルの評価には視診、専用の肌測定用機器等の手法を利用することが一般的である。しかしこれらの手法は、既に発生した肌のトラブルを評価することはできるが、肌のトラブルが将来発生するリスクを評価することはできない。
【０００３】
肌のトラブルが発生する要因のうち、気温、湿度又は紫外線のような環境要因や、精神的ストレスのような心理的要因は顧客が自覚している。しかし生理学的要因は顧客が直接自覚するものではないため、別途評価を行う意義がある。肌のトラブルの生理学的要因の候補としては、皮膚の血流の物理・化学的特性（組織血流量、組織酸素飽和度等）、ホルモン（プロゲステロン、プロラクチン等）、生体内の抗酸化力（ビタミンＡ、Ｃ等）等の生化学的特性、女性ホルモン（エストラジオール等）、細胞外マトリクス等に関連する生化学的特性が考えられる。これらの特性を含む各種の生理学的指標を用いて肌のトラブルのリスクを評価する試みが行われた例はほとんどない。
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
そこで、肌のトラブルに関する大規模な調査を行って肌のトラブルと各種生理学的指標との関連の有無及びその程度を明らかにし、統計的な裏づけのある客観的な証拠すなわちエビデンスに基づいて、肌のトラブルのリスクを評価する方法を開発する必要がある。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、シミのリスク評価方法を提供する。本発明の評価方法は、（被験者の血中Ｃペプチド濃度の測定値を指標として被験者の肌におけるシミのリスクを評価するステップを含む。
【０００６】
また、本発明の評価方法は、被験者の血中ＩＧＦ−１濃度の測定値を指標として被験者の肌におけるシミのリスクを評価するステップを含む。
【０００７】
また、本発明の評価方法は、被験者の血中Ｃペプチド濃度及び血中ＩＧＦ−１濃度の測定値を指標として被験者の肌におけるシミのリスクを評価するステップを含む。
【０００８】
本明細書において「肌のトラブル」とは、肌の外観状態が正常でない状態を指し、シミ、くすみ、しわ、たるみ等を含む。
【０００９】
本明細書において「シミ」とは、肌のトラブルの一種であって、肌に色素が沈着することにより生じ、肌上の色素が沈着した部位と沈着していない部位との境界が明瞭である程度に色素が沈着した状態を指す。本明細書における「シミ」は、日光性黒子、脂漏性角化症等のようなケラチノサイトの異常によるシミと、肝斑、雀卵斑、紫外線照射後の光線性花弁状色素斑等のようなメラノサイトの異常によるシミと、色素沈着性接触皮膚炎、固定薬疹、外傷後色素沈着等のような炎症後色素沈着症とを含む。本明細書における「シミ」は、後天性真皮メラノサイトーシス、扁平母斑、太田母斑等のような、シミに似たメラノサイトが多いあざも含む場合がある。
【００１０】
本明細書において「くすみ」とは、肌のトラブルの一種であって、肌への色素の沈着、血流の低下、肌表面の凹凸、皮膚の汚れ等により肌が暗く見える部位が生じ、該肌が暗く見える部位は弥漫（びまん）しており、該暗く見える部位と暗く見えない部位との境界が不明瞭である状態を指す。
【００１１】
本明細書において「しわ」とは、肌のトラブルの一種であって、加齢により生じる皮表の線状陥没が作り出す紋様が、特定の領域に集中して、かつ、大きさ及び配列の不規則性をもって存在する状態を指す。
【００１２】
本明細書において「たるみ」とは、肌のトラブルの一種であって、加齢に伴い皮膚の張りが失われて、眼又は口の周囲、頬下等に皮膚の膨らみが観察される状態を指す。
【００１３】
本明細書における用語「肌のトラブルのリスク」は、既に発生している肌のトラブルが継続し、あるいは、増悪する蓋然性と、肌のトラブルが発生する潜在的な蓋然性とを含む。本明細書における用語「肌のトラブルのリスク評価」は、肌のトラブルのリスクの有無についての定性的な評価と、リスクの蓋然性についての定量的な評価とを含む。
【００１４】
本明細書においてＣペプチドは、膵臓においてプロインスリンから成熟インスリンが生成するたんぱく質プロセッシングの過程で切断される３１個のアミノ酸残基からなるペプチドである。血中Ｃペプチド濃度は、インスリン分泌を反映し、糖尿病、腎不全等の指標として使用される場合がある。
【００１５】
本明細書においてインスリン様成長因子−１（ＩＧＦ−１）は、主に肝臓で分泌される、インスリンと類似したアミノ酸配列を有するペプチドホルモンである。インスリンと同様の効果を示すとともに、さまざまな器官の細胞の増殖に影響を及ぼし、幼児の成長や成人における代謝において重要な役割を果たすことが知られる。
【００１６】
以下の実施例で詳しく説明するとおり、本発明は、被験者の血中Ｃペプチド及びＩＧＦ−１の濃度の測定値が高いほど当該被験者がシミを有する蓋然性が高いという発明者らの調査結果に基づいて完成された。
【００１７】
本発明の方法の血中Ｃペプチド及びＩＧＦ−１濃度の測定は、臨床検査の分野の当業者に周知のいかなる検定方法を使用して実施されてもかまわない。
【００１８】
被験者の血中Ｃペプチド濃度の測定値を指標として被験者の肌におけるシミのリスクを評価するための判断基準は、統計学的な手法により設定される場合がある。統計学的な手法により設定される判断基準は、血中Ｃペプチド濃度の測定値と被験者の肌におけるシミの程度とを関連づける判別関数の場合がある。前記判断基準は、血中ＩＧＦ−１濃度の測定値と被験者の肌におけるくすみ及び／又はシミの有無とを関連付ける判別関数をも併用するステップワイズ判別分析の場合がある。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１９】
以下の実施例は例示のために説明するのであり、本発明の特許請求の範囲はこれらの実施例により何ら限定されるものではない。
【実施例１】
【００２０】
１．くすみ、シミ又はしわ・たるみの有無及びその程度と、肌及び全身の所見との関連性の解析
１−１．方法
（被験者の選定）
健康な成人女性１５０名を対象として、後述の皮膚科医による視診、生理学的・医学的測定、肌・身体測定（以下、「視診等」という。）の被験者を選定するためのアンケート調査を実施した。アンケート調査の前に、前記１５０名の成人女性には試験の概要が説明され、アンケート調査への協力について自由意志に基づく書面による同意を得た。このアンケート調査における主な質問項目を表１に示す。アンケート調査の結果から、現在の顔の肌の状態（顔の肌のトラブルを有すること）及び体質（顔の肌のトラブルを発生しやすいこと）についての自覚の有無及び程度を基準として、皮膚科医による視診の対象とする被験者を選定した。顔の肌のトラブルは、くすみ、シミ及びしわ・たるみに分類した。選定の際に、被験者が、くすみ、シミ又はしわ・たるみのうち少なくとも１種類の肌のトラブルのみ自覚があること、並びに、顔の肌の状態及び体質に影響を与える可能性がある他の生活習慣、健康状態等について特に自覚がないことを確認した。
【００２１】
【表１】
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【００２２】
アンケート調査の結果、前記１５０名の成人女性から、くすみに関する顔の肌の状態及び体質について顕著な自覚を有する者１７名と、くすみに関する顔の肌の状態又は体質について自覚をほとんど有しない者８名と、シミに関する顔の肌の状態及び体質について顕著な自覚を有する者１７名と、シミに関する顔の肌の状態又は体質について自覚をほとんど有しない者８名と、しわ・たるみに関する顔の肌の状態及び体質について顕著な自覚を有する者１７名と、しわ・たるみに関する顔の肌の状態又は体質について自覚をほとんど有しない者８名との計７５名の被験者を選定した。
【００２３】
（被験者による同意）
前記アンケート調査の結果として選定された７５名の被験者を対象として、文書に基づいて試験内容等について説明した。その上で、皮膚科医による視診等への参加について被験者の自由意志に基づく文書による同意を得た。
【００２４】
（皮膚科医による視診）
前記アンケート調査の結果として選定された７５名の被験者を対象として、後述の生理学的・医学的測定及び肌・身体測定の被験者を選定するための皮膚科医による視診を実施した。この視診では、資生堂ビューティーソリューション開発センターにおいて肌の状態の視感評価に使用される基準を示した「視感評価マニュアル」に基づき、くすみ、シミ又はしわ・たるみの度合いを評価した。この評価結果を基準として、顕著なくすみ、シミ又はしわ・たるみを有する者と、くすみ、シミ又はしわ・たるみをほとんど有しない者とを、前記皮膚科医の判断で選定した。また視診当日には、体調、精神的ストレス、制限事項の遵守状態等についてアンケート調査を実施し、視診結果に影響を与える可能性のある項目への回答が特異な傾向を示さないことを確認した。この結果として、前記７５名の被験者から、以下に示す計６群、計３０名の被験者を選定した。
・くすみに関する顔の肌の状態及び体質について顕著な自覚を有し、かつ、顕著なくすみを有する被験者（第１群の被験者）７名
・くすみに関する顔の肌の状態又は体質について自覚をほとんど有さず、かつ、くすみをほとんど有しない被験者（第２群の被験者）３名
・シミに関する顔の肌の状態及び体質について顕著な自覚を有し、かつ、顕著なシミを有する被験者（第３群の被験者）７名
・シミに関する顔の肌の状態又は体質について自覚をほとんど有さず、かつ、シミをほとんど有しない被験者（第４群の被験者）３名
・しわ・たるみに関する顔の肌の状態及び体質について顕著な自覚を有し、かつ、顕著なしわ・たるみを有する被験者（第５群の被験者）７名
・しわ・たるみに関する顔の肌の状態又は体質について自覚をほとんど有さず、かつ、しわ・たるみをほとんど有しない被験者（第６群の被験者）３名
前記３０名の被験者を選定する過程で、以下に示す除外基準に抵触する者は除外した。
【００２５】
除外基準
ａ．現在治療目的に通院し、医薬品を服用（使用）している者
ｂ．妊娠している者、授乳中の者、妊娠の予定のある者
ｃ．他の臨床試験に参加中の者
ｄ．その他、試験責任医師あるいは試験担当医師が不適当と判断した者
（生理学的・医学的測定及び肌・身体測定）
前記３０名の被験者を対象として、生理学的・医学的測定及び肌・身体測定を実施した。これらの測定は、測定データの再現性を確認するために、同一の被験者に対し同一の測定項目について冬季（２００７年３月）及び春季（２００７年５−６月）の２回繰り返して実施した。生理学的・医学的測定における測定内容は、血液検査、尿検査、血管硬化度測定、頸動脈内膜中膜複合体肥厚（ＩＭＴ）測定、筋力測定、体組織測定、呼吸機能検査、循環検査、心臓超音波検査、聴力検査、平衡機能検査、声の老化検査、認知症検査及び自律神経バランス検査である。肌・身体測定における測定内容は、角層水分量測定、経表皮水分蒸散量測定、皮脂量測定、肌拡大画像撮影、顔写真撮影、肌粘弾性測定、肌色測定、肌血流測定、肌表面温度測定、総合肌診断、基礎代謝測定及び体温測定であった。また測定当日には、体調、精神的ストレス、制限事項の遵守状態等についてアンケート調査を実施し、測定結果に影響を与える可能性のある項目への回答が特異な傾向を示さないことを確認した。
【００２６】
血液検査は、試験担当医師が被験者の両肘の内側の静脈より真空採血管を用いて採取した血液試料（被験者１人当たり２５ｍＬ）を使用して行った。血液試料は採取後直ちに冷蔵保管した。その後血液試料についてグルタミン酸オキサロ酢酸トランスアミナーゼ（ＧＯＴ）活性、グルタミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ（ＧＰＴ）活性、γ−グルタミルトランスペプチダーゼ（γ−ＧＴＰ）活性、乳酸デヒドロゲナーゼ（ＬＤＨ）活性、コリンエステラーゼ活性、蛋白分画、アルブミン／グロブリン比、アルブミン濃度、クレアチニン濃度、尿酸値、総コレステロール量、ＬＤＬコレステロール量、ＳＤ−ＬＤＬコレステロール量、ＨＤＬ２コレステロール（ＨＤＬ２）量、ＨＤＬ３コレステロール（ＨＤＬ３）量、中性脂肪量、遊離脂肪酸量、リポ蛋白ａ量、レムナント様リポ蛋白ｃ量、血糖値、ヘモグロビンＡ１ｃ量、フルクトサミン濃度、Ｃペプチド濃度、成長ホルモン（インスリン様成長因子−１（ＩＧＦ−１））濃度、甲状腺ホルモン濃度、副腎皮質ホルモン濃度、デヒドロエピアンドロステロンサルフェート（ＤＨＥＡ−ｓ）濃度、フリーテストステロン濃度、プロゲステロン濃度、プロラクチン濃度、エストラジオール濃度、ＮＫ細胞活性、グラニュライシン濃度、インターロイキン−６濃度、インターロイキン−１０濃度、白血球数、赤血球数、ヘモグロビン量、ヘマトクリット値、血小板数、フェリチン量、血清過酸化脂質（血清ＬＰＯ）量、鉄濃度、銅濃度、血清総抗酸化能（ＳＴＡＳ）、ビタミンＣ濃度、葉酸濃度、ビタミンＢ１２濃度、ルテイン量＋ゼアキサンチン量、β−クリプトキサンチン濃度、リコピン濃度、α−カロテン濃度、β−カロテン濃度、ビタミンＡ濃度、α−トコフェロール濃度、δ−トコフェロール濃度、γ−トコフェロール濃度、α−トコフェロール／総トコフェロール比、ユビキノール濃度、ビタミンＢ１濃度、ビタミンＢ２濃度、ビタミンＢ６濃度、高感度検査によるＣ反応性タンパク質（高感度ＣＲＰ）量、総ホモシステイン量、アディポネクチン量、フィブリノゲン量、総プラスミノーゲンアクティベーターインヒビター（総ＰＡＩ−１）量、細胞間接着分子−１（ＩＣＡＭ−１）量、Ｐ−セレクチン量、非対称性ジメチルアルギニン（ＡＤＭＡ）量、単球走化性タンパク質−１（ＭＣＰ−１）量、マトリックスメタロプロテイナーゼ−９（ＭＭＰ−９）量、アポＥフェノタイプ及び脳性ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）量を定法により分析した。
【００２７】
尿検査は、被験者が各自で適当量採取した尿試料を使用して行った。採取した尿試料について、尿中アルブミン濃度、尿中シスタチンＣ濃度、尿中シスタチンＣ／クレアチニン比、尿デオキシピリジノリン量、８−ヒドロキシ−デオキシグアノシン（８ＯＨｄＧ）生成速度、イソプラスタン生成速度及びコエンザイムＱ１０（ＣｏＱ１０）酸化率を定法により分析した。
【００２８】
血管硬化度測定としては、血圧の測定と、動脈硬化度の測定と、血管硬化度の測定と、加速度波の測定と、眼底検査とを実施した。血圧の測定は、自動血圧計ＢＰ２０３ＲＶ−１１（日本コーリン株式会社）を使用して収縮期血圧及び拡張期血圧の測定を実施した。動脈硬化度の測定は、フォルムＰＷＶ（日本コーリン株式会社）及びＶＳ−１０００（フクダ電子株式会社）を使用して脈波伝導速度（ＰＷＶ）を測定することにより実施した。血管硬化度の測定は、ＣＶＭＳ２０００（株式会社オサチ）を使用して足首上腕血圧指数（ＡＢＩ＝下肢血圧／上肢血圧）を測定することにより実施した。加速度波の測定は、アルテット（株式会社ユメディカ）を使用して実施した。眼底検査は、ＣＲ５（キャノン株式会社）を使用して眼底画像を撮影することにより実施した。
【００２９】
頸動脈内膜中膜複合体肥厚（ＩＭＴ）測定としては、ｎｅｍｉｏ５５０（東芝社）を使用して、被験者の頸部にプローブをあて超音波によるＩＭＴの測定を実施した。
【００３０】
筋力測定としては、一般的な握力計により握力を測定した。
【００３１】
体組織測定としては、骨量及び骨密度の測定と、体脂肪率及び四肢筋肉量の評価と、身長及び体重の測定とを実施した。骨量及び骨密度の測定は、ＡＳ−１００（アロカ株式会社）を使用してインピーダンス法により、また、ＰＲＯＤＩＧＹ（ＧＥ横河メディカルシステム株式会社）を使用してＤＸＡ法（二重Ｘ線評価法）により実施した。体脂肪率及び四肢筋肉量の評価は、Ｉｎ  Ｂｏｄｙ（株式会社タニタ）及びＴＢＦ２０２（株式会社タニタ）を使用してインピーダンス法により実施した。身長及び体重の測定は、通常の身長計及び体重計を使用して実施した。身長及び体重の測定結果からボディマス指数（ＢＭＩ）を算出した。
【００３２】
呼吸機能検査としては、肺活量の測定と、酸素飽和度の測定とを実施した。肺活量の測定は、スパイロメーターＨＩ−７０１（日本光電工業株式会社）を使用して実施した。酸素飽和度の測定は、パルスオキシメーター（カシオ計算機株式会社）を使用して実施した。
【００３３】
循環検査としては、生体アンプＥＣＧ９３２１（日本光電工業株式会社）を使用して四肢に装着した電極により心電図を測定した。
【００３４】
心臓超音波検査としては、超音波検査装置ｎｅｍｉｏ５５０（株式会社東芝）を使用して心臓の超音波画像を取得し、開放速度、後退速度、中隔厚、心拍出量、収縮率、大動脈径等を定量的に評価した。
【００３５】
聴力検査としては、一般的な健康診断に用いる機器を使用して、高音域及び低音域それぞれの一般聴力検査を実施した。
【００３６】
平衡機能検査としては、平衡機能検査装置Ｇ１０（アニマ株式会社）を使用して、開眼及び閉眼状態並びに立位状態での身体の重心の動揺を時系列的に記録し平衡機能を評価した。
【００３７】
声の老化検査としては、ＳＵＧＩ  Ｓｐｅｅｃｈ  Ａｎａｌｙｚｅｒ（株式会社アニモ）を使用して、マイクより取り込んだ音声データを解析し、発声音の周波数帯域のスペクトルより老化度を評価した。
【００３８】
認知症検査としては、ＣｏｇＨｅａｌｔｈ（コンピュータ上でのカード判別課題における反応速度を測定し判定するシステム、株式会社ヘルス・ソリューション）を使用して認知症傾向の検査を実施した。
【００３９】
自律神経バランス検査としては、アイリスメーター（アイリステック株式会社）を使用して、光に対する瞳孔反応速度を測定した。
【００４０】
角層水分量測定としては、頬の角層水分量の測定を実施した。被験者を、洗顔後恒温恒湿室内にて４５分間安静にさせた後、頬の角層水分量をｃｏｒｎｅｏｍｅｔｅｒ（Ｃｏｕｒａｇｅ＋Ｋｈａｚａｋａ  ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  ＧｍｂＨ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて測定した。５回測定し平均値を算出した。
【００４１】
経表皮水分蒸散量測定としては、頬の経表皮水分蒸散量の測定を実施した。被験者を、洗顔後恒温恒湿室内にて４５分間安静にさせた後、頬の経表皮水分蒸散量をｖａｐｏｍｅｔｅｒ（Ｄｅｌｆｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  Ｌｔｄ，Ｋｕｏｐｉｏ，Ｆｉｎｌａｎｄ）を用いて測定した。３回測定し平均値を算出した。
【００４２】
皮脂量測定としては、頬及び額の皮脂量の測定を実施した。被験者を、洗顔後恒温恒湿室内にて４５分間安静にさせた後、頬及び額の皮脂量をＳｅｂｕｍｅｔｅｒ（Ｃｏｕｒａｇｅ＋Ｋｈａｚａｋａ  ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  ＧｍｂＨ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて測定した。
【００４３】
肌拡大画像撮影としては、頬の肌拡大画像を撮影した。マイクロスコープ、照明装置及び記録装置から構成される独自開発の機器を使用して、８×６．２ｍｍ角の肌の拡大画像を取得し、キメの状態、角層の剥離状態等の評価を実施した。
【００４４】
顔写真撮影としては、全顔の正面及び左右側面の顔画像を撮影し、顔全体の肌のトラブルの評価を実施した。
【００４５】
肌粘弾性測定としては、頬の肌粘弾性の測定を実施した。被験者を、洗顔後恒温恒湿室内にて４０分間安静にさせた後、頬の肌粘弾性をｃｕｔｏｍｅｔｅｒ（Ｃｏｕｒａｇｅ＋Ｋｈａｚａｋａ  ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  ＧｍｂＨ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いて測定した。ｃｕｔｏｍｅｔｅｒは、頬の肌を吸引（５００ｍｂ、２秒間）した後１秒間開放するサイクルを５回繰り返すよう設定し、表皮の柔軟性と真皮の粘弾性とを評価した。
【００４６】
肌色測定としては、頬の肌色と、眼の下の肌色との測定を実施した。被験者を、洗顔後恒温恒湿室内にて４０分間安静にさせた後、頬の肌色と眼の下約３．５ｃｍ部分の肌色とをＣＭ−２６００ｄ（コニカミノルタセンシング株式会社）を用いて測定した。３回測定し平均値を算出した。
【００４７】
肌血流測定としては、頬の肌血流をオメガモニターＴＲ  ＢＯＭ−Ｌ１ＴＲ  ＳＦ（オメガウエーブ株式会社）を用いて測定した。
【００４８】
肌表面温度測定としては、全顔の表面温度を測定した。被験者を、洗顔後恒温恒湿室内にて４５分間安静にさせた後、全顔の表面温度をサーモグラフィーＴＶＳ−８５０２（日本アビオニクス株式会社）を用いて測定した。
【００４９】
総合肌診断は、スキンビジオムＩＩ（株式会社資生堂）を使用して実施した。
【００５０】
基礎代謝測定は、携帯用カロリーメーターＭＥＴＡＶＩＮＥ  ｍｏｄｅｌ  ＶＭＢ−００５Ｎ（株式会社ヴァイン）を使用して実施した。安静にさせた被験者の３分間の呼気量と呼気中の酸素濃度とを測定し、単位時間当たりの酸素摂取量から消費カロリーを推定した。
【００５１】
体温測定は、仁丹平型体温計（森下仁丹株式会社）を使用して実施した。
【００５２】
上述の一連のアンケート調査、皮膚科医による視診、生理学的・医学的測定及び肌・身体測定は、ヘルシンキ宣言及び疫学研究に関する疫学指針の精神に則り、事前に作成した試験実施計画書を遵守して実施した。
【００５３】
（生理学的・医学的測定及び肌・身体測定の結果の解析）
上述の計６群、計３０名の被験者に対して実施した生理学的・医学的測定及び肌・身体測定により取得された測定データを使用して、顔の肌のトラブル（くすみ、シミ又はしわ・たるみ）の有無と、生理学的・医学的測定及び肌・身体測定の測定値との関連性の解析を行った。先ず、測定項目ごとに、かつ、顔の肌のトラブルごとに、測定値及び解析結果をグラフ化し、視覚的にデータの傾向を把握した。次いで、測定値の再現性を評価するために、各測定項目ごとに、冬季の測定の測定値と春季の測定の測定値との間の積率相関係数を算出した。また、顔の肌のトラブルの有無と、生理学的・医学的測定及び肌・身体測定の測定値との関連性を評価するために、各測定項目ごとに、測定時期（冬季／春季）×くすみの有無（第１群／第２群）と、測定時期（冬季／春季）×シミの有無（第３群／第４群）と、測定時期（冬季／春季）×しわ・たるみの有無（第５群／第６群）とについてそれぞれ２要因の分散分析を実施し、肌のトラブルの有無の要因に関する帰無仮説に対する危険率（ｐ）を算出した。
【００５４】
１−２．結果
前記アンケート調査と皮膚科医による視診との結果選定された６群３０名の被験者に対して生理学的・医学的測定及び肌・身体測定を実施し、測定データを得た。第６群の被験者３名のうち１名については試験期間途中で試験を中止したため、この１名を除く２９名の被験者の測定結果に基づき結果の解析を実施した。
【００５５】
図１に、測定値及び解析結果の表示例として、第１群及び第２群の被験者における一部の測定項目（コリンエステラーゼ活性、クレアチニン濃度、血糖値、ヘモグロビン量及びＣペプチド濃度）についての測定値及び解析結果を示したグラフを示す。それぞれのグラフの横軸は各測定項目の測定値を示す。それぞれのグラフにおけるそれぞれの段は、上から、第１群の被験者の冬季の測定の測定値（１段目）、第１群の被験者の春季の測定の測定値（２段目）、医学的な標準範囲を示す上限値及び下限値（３段目）、第２群の被験者の冬季の測定の測定値（４段目）、第２群の被験者の春季の測定の測定値（５段目）を示す。１、２、４、５段目には、被験者ごとに記号（×、▲、○等）を対応させて示す。原則として各測定項目について同一の記号は同一の被検者であることを表す。各測定項目名の下に記載される小数点以下４桁の数値は、冬季の測定の測定値と春季の測定の測定値との間の積率相関係数を示す。グラフの右側に百分率で示される数値は、２要因の分散分析により算出された肌のトラブルの有無の要因に関する帰無仮説に対する危険率（ｐ）である。図１では、４種類の測定項目のうちＣペプチドのみについての分散分析の結果を示し、危険率（ｐ）は３．０％と算出されたことを示す。このようにして測定項目ごとに、かつ、顔の肌のトラブルごとに、測定値及び解析結果をグラフ化し視覚的にデータの傾向を把握した。その後、測定値の再現性、測定値に影響を及ぼす肌のトラブルの有無の要因等について検討した。
【００５６】
図２−１ないし２−４に、上述の方法により分析した測定項目のうち１０１項目についての、冬季の測定の測定値と春季の測定の測定値との間の積率相関係数と、分散分析により取得した肌のトラブルの有無の要因に関する帰無仮説に対する危険率（ｐ）とを示す。図２及び３では、１０１個の測定項目を、血管の老化度に関連する指標と考えられる１１項目と、血液の老化度に関連する指標と考えられる２２項目と、ホルモンバランスに関連する指標と考えられる５項目と、免疫バランスに関連する指標と考えられる４項目と、一般的な血液検査の項目１５項目と、身体の構成に関連する指標と考えられる１１項目と、酸化ストレスに関連する指標と考えられる２７項目と、その他の６項目とを、１項目に１行を与える形で表示する。各測定項目ごとに、項目の名称と、単位と、基準値（上限値及び下限値）と、２９名の被験者の測定結果から算出された積率相関係数と、分散分析により算出された肌のトラブルの有無の要因に関する危険率（ｐ）とを表示する。危険率（ｐ）については、測定項目ごとの測定値及び解析結果のグラフの検討から肌のトラブルの有無の要因の測定値への影響がありそうだと考えられた項目と、生理学的な仮説等から興味深いと考えられた項目とについての算出結果を表示した。しわ・たるみの有無の要因に関する危険率は、第６群の被験者３名のうち１名については試験を途中で中止したことにより測定データ数が２個となったため、参考値として表示した（図２−１ないし２−４）。
【００５７】
前記１０１個の測定項目のうち、積率相関係数が０．７を超えるものは５７個あり、これらは、冬季の測定の測定値と春季の測定の測定値とを比較したときの測定の再現性が高い測定項目であると考えられた（図２−１ないし２−４）。
【００５８】
有意水準を５％としたときに肌のトラブルの有無の要因による効果が有意であった測定項目は、くすみについては、血小板数（ｐ＝１．８％）、ヘモグロビン量（２．２％）、ヘマトクリット値（２．８％）及びクレアチニン濃度（３．２％）であった。シミについては、右上腕足首脈波伝導速度（ＲｂａＰＷＶ）（２．８％）、左上腕足首脈波伝導速度（ＬｂａＰＷＶ）（３．７％）、収縮期血圧（２．２％）、拡張期血圧（０．８％）、フィブリノゲン量（３．８％）、血小板数（３．９％）、ＮＫ細胞活性（１．１％）、Ｃペプチド濃度（３．０％）、基礎代謝量（４．４％）、ＢＭＩ（４．１％）、体脂肪率（２．２％）、鉄濃度（１．８％）であった。
【００５９】
血中Ｃペプチド濃度は、血中インスリン濃度を反映する指標である。インスリンは主に糖尿病の徴候を把握するために用いられる指標である。糖尿病患者は、頸部を中心とする肌に黒ずみが生じる黒色表皮腫を示す傾向があるといわれる。黒色表皮腫の生成は、シミの生成と同様メラニンの過剰産生が主な要因であると考えられる。これらのことから、今回の解析の結果として見出された血中Ｃペプチド濃度とシミの有無との間の関係は、血中Ｃペプチド濃度の高さが糖尿病の徴候を示すことにより説明される可能性があると考えられた。しかし、今回の解析では、糖尿病の徴候をより直接的に示すと考えられる「血糖値」又は「血中ヘモグロビンＡ１ｃ量」とシミの有無との間には特別な関係は認められなかった（図２−３）。以上より、この試験結果の解析から見出されたのは、血中Ｃペプチド濃度とシミの有無との間に特有の関係であり、また、シミの生成の機構に関係する既存の概念から容易に導き出すことはできない知見であるといえる。
【００６０】
上述の通り血中Ｃペプチド濃度は血中インスリン濃度を反映する指標である。ここで、インスリンと構造が類似し体内でも類似の働きをする血中成分ＩＧＦ−１の測定値と、シミの有無との関係について解析を行った。血中Ｃペプチド濃度の測定値と、シミの有無との関係についても併せて解析を行った。血中Ｃペプチド濃度及び血中ＩＧＦ−１濃度の測定値及び解析結果を図３に示す。血中Ｃペプチド濃度、血中ＩＧＦ−１濃度のいずれについても、シミを有しない被験者（第４群の被験者）と比較してシミを有する被験者（第３群の被験者）の方が、測定値が高い傾向が見出された。測定項目ごとに算出した積率相関係数は、血中Ｃペプチド濃度についてはｒ＝０．８１、血中ＩＧＦ−１濃度についてはｒ＝０．７７であり、測定の再現性が高いことが示された。また、上述の通り分散分析の結果、シミの有無と、血中Ｃペプチド濃度の測定値との関係は有意水準５％で有意であった。以上より、血中Ｃペプチド濃度及び／又は血中ＩＧＦ−１濃度と、シミの有無との間には、被験者におけるその測定値が高いほどその被験者はシミを有する蓋然性が高いという、特有の傾向が存在することが分かった。
【実施例２】
【００６１】
２．測定値を使用した被験者の肌のトラブルの有無についての判定
２−１．方法
血中Ｃペプチド濃度及び／又は血中ＩＧＦ−１濃度について、シミを有する被験者群から取得した測定値と、シミを有しない被験者群から取得した測定値とを使用して判別分析を実施し、各測定項目の測定値を使用した被験者の肌のトラブルの有無についての判定を実施した。具体的には、血中Ｃペプチド濃度又は血中ＩＧＦ−１濃度について、第３群の被験者から取得した測定値（７名×冬春２季＝１４個）と、第４群の被験者から取得した測定値（３名×冬春２季＝６個）とを使用して判別分析を実施し、判別関数（新たな被験者から新たな測定値が得られた際に該新たな測定値を代入することにより前記新たな被験者がシミを有する群又は有しない群のどちらに入るのかを判定するための基準となる関数）を取得した。該判別関数と、各測定項目の測定値とを使用して被験者のシミの有無についての判定を実施した。血中Ｃペプチド濃度及び血中ＩＧＦ−１濃度の測定値を組み合わせて分析する場合は、ステップワイズ判別分析（一方の指標についての判別関数で判断した後に、他方の指標についての判別関数で判断する分析方法）を実施した。
【００６２】
２−２．結果
血中Ｃペプチド濃度の測定値を使用した判別分析により得られた被験者のシミの有無についての判定結果と、実際の試験において皮膚科医による視診、生理学的・医学的測定、肌・身体測定等の結果を踏まえて実施したシミの有無による被験者の分類結果とを比較したところ、総データ数２０個のうち１７個が一致し、一致率（すなわち正答率）は８５％であった。同様の比較を血中ＩＧＦ−１濃度の測定値を使用して行ったところ、総データ数２０個のうち１４個が一致し、一致率は７０％であった。この結果より、血中Ｃペプチド濃度又は血中ＩＧＦ−１濃度の測定値を使用することにより被験者のシミの有無について高精度で判定することができることが分かった。
【００６３】
また、血中Ｃペプチド濃度及び血中インスリン様成長因子−１（ＩＧＦ−１）濃度の測定値を組み合わせてステップワイズ判別分析を実施した場合の一致率は、総データ数２０個のうち１９個が一致し、一致率は９５％であった。上述のように血中Ｃペプチド濃度は血中のインスリンの濃度を反映する指標である。インスリンと構造が類似し体内でも類似の働きをする血中成分であるＩＧＦ−１の測定値を、血中Ｃペプチド濃度の測定値と併せて使用することでシミの有無の判定精度がさらに向上した。以上より、肌のトラブルと高い関連性を有する２種類の指標の測定値を組み合わせて使用することにより、それぞれの指標を単独で使用した場合よりも、高精度の判定の実施が可能となることが分かった。
【図面の簡単な説明】
【００６４】
【図１】測定値及び解析結果の表示例として、第１群及び第２群の被験者における一部の測定項目についての測定値及び解析結果を示したグラフ。
【図２−１】１１個の測定項目についての、冬季の測定の測定値と春季の測定の測定値との間の積率相関係数と、分散分析により取得した肌のトラブルの有無の要因に関する帰無仮説に対する危険率（ｐ）とを示した表。
【図２−２】２２個の測定項目についての、冬季の測定の測定値と春季の測定の測定値との間の積率相関係数と、分散分析により取得した肌のトラブルの有無の要因に関する帰無仮説に対する危険率（ｐ）とを示した表。
【図２−３】２４個の測定項目についての、冬季の測定の測定値と春季の測定の測定値との間の積率相関係数と、分散分析により取得した肌のトラブルの有無の要因に関する帰無仮説に対する危険率（ｐ）とを示した表。
【図２−４】１７個の測定項目についての、冬季の測定の測定値と春季の測定の測定値との間の積率相関係数と、分散分析により取得した肌のトラブルの有無の要因に関する帰無仮説に対する危険率（ｐ）とを示した表。
【図２−５】２７個の測定項目についての、冬季の測定の測定値と春季の測定の測定値との間の積率相関係数と、分散分析により取得した肌のトラブルの有無の要因に関する帰無仮説に対する危険率（ｐ）とを示した表。
【図３】血中Ｃペプチド濃度及び血中ＩＧＦ−１濃度の測定値及び解析結果を示したグラフ。
【図２−１】
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【図２−２】
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【図２−３】
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【図２−４】
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【図２−５】
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【図１】
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【図３】
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