(57)【要約】【課題】本発明の目的は、安全に摂取可能な抗酸化剤を提供することである。本発明のさらなる目的は、特定の原料を組み合わせて含むことにより相乗的に抗酸化効果を発揮する抗酸化剤を提供することである。【解決手段】本発明により、蜂の子を含む抗酸化剤、蜂の子およびプロポリスを含む抗酸化剤、ならびに蜂の子、プロポリス、およびローヤルゼリーを含む抗酸化剤が提供される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
蜂の子を含む抗酸化剤。
【請求項２】
さらにプロポリスを含む、請求項１に記載の抗酸化剤。
【請求項３】
さらにローヤルゼリーを含む、請求項２に記載の抗酸化剤。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか１項に記載の抗酸化剤を含む、経口摂取用組成物。
【請求項５】
プロポリスに蜂の子を加えることを特徴とする、プロポリスの抗酸化活性の増強方法。
【請求項６】
さらにローヤルゼリーを加えることを特徴とする、請求項５に記載のプロポリスの抗酸化活性の増強方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、有効成分として蜂の子を含む抗酸化剤、蜂の子およびプロポリスを含む抗酸化剤、蜂の子、プロポリスおよびローヤルゼリーを含む抗酸化剤、ならびに当該抗酸化剤を含む経口摂取用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
一般に酸素は、生命体にとって必須のものであるが、一方で生体に害を及ぼすことも知られている。特に、ヒドロキシラジカルなどの活性酸素および脂質などが酸化されて生じる過酸化物は、生体に大きな障害をもたらすことが指摘されている。近年、生活慣習病として位置づけられている血栓症や脳循環関連の疾患の発症にも酸化ストレス、特に血管内皮細胞の酸化ストレスが関与していることが知られている。さらに、酸化ストレスは、老化促進に関与し、皮膚のしわ、シミ、くすみなどを誘発することも知られている。このため、生体において有害な酸化反応を制御することは、健康の維持および美容にとって大変有用なことであり、種々の抗酸化剤が注目されている。
【０００３】
また、食品などの経口摂取用組成物の品質低下に酸化が関与することが知られている。特に、油脂類の酸化は、色や風味の悪化、栄養価の低下を引き起こし、場合によっては、酸化により生じた過酸化物が消化障害を引き起こすこともある。経口摂取用組成物の酸化を防止する抗酸化剤としては、アスコルビン酸、トコフェロール、カテキン、ジブチルヒドロキシトルエンなどが使用されている。
【０００４】
従来、日本の一部の地域では、蜂の幼虫または蛹を「蜂の子」として食用に供している。蜂の子は、特定のアミノ酸組成を有する食品であり、疲労回復効果などを有すると報告がなされている（特許文献１〜３）。
【０００５】
蜂の巣の材料となる粘着性物質であるプロポリスは、蜂が野外から採取した植物の樹液などを成分として含み、抗酸化作用を含む種々の生理活性を有することが知られている（特許文献４〜７）。そのため、プロポリスは健康食品の原料として利用されている。
【０００６】
ローヤルゼリーは、働き蜂の頭部の分泌腺（咽頭腺）から分泌される乳白色のクリーム状の物質で、ミツバチの女王蜂の餌となる物質である。ローヤルゼリーは滋養強壮を目的とした健康食品に多く用いられており、化粧品、医薬部外品などの皮膚外用剤の成分としても使用されている（特許文献８〜１１）。
【特許文献１】特開２００２−１７２９６号公報
【特許文献２】特開２００６−１９７９１１号公報
【特許文献３】特開２００１−２０４４２１号公報
【特許文献４】特開２０００−４４４７９号公報
【特許文献５】特開２００２−２３５０８４号公報
【特許文献６】特開２００２−３０６０９２号公報
【特許文献７】特開２００５−２２００８７号公報
【特許文献８】特開２００１−２９２７１２号公報
【特許文献９】特開２００２−２０２２６号公報
【特許文献１０】特開２００３−２１９８１６号公報
【特許文献１１】特開２００６−２８０２４９号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
酸化ストレスから体を守るために、また、経口摂用組成物の酸化を防ぐために、日常的に摂取可能であり、かつ安全な抗酸化剤が求められている。本発明の目的は、安全に摂取可能な抗酸化剤を提供することである。本発明のさらなる目的は、特定の原料を組み合わせて含むことにより相乗的に抗酸化効果を発揮する抗酸化剤を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、上記の課題解決のために鋭意研究を進めたところ、蜂の子を含む組成物に良好な抗酸化効果およびアンチエイジング効果を見いだし、本発明を完成させた。
本発明の一つの側面によれば、蜂の子を含む抗酸化剤が提供される。
【０００９】
本発明で使用される蜂の子は、食用に供せられている蜂の幼虫または蛹であれば特に限定されず、例えば、ミツバチ科の蜂（例えば、セイヨウミツバチ（Ａｐｉｓ  ｍｅｌｌｉｆｅｒａ）、トウヨウミツバチ（Ａｐｉｓ  ｃｅｒａｎａ）、サバミツバチ（Ａｐｉｓ  ｋｏｓｃｈｅｖｎｉｋｏｖｉ）、キナバルヤマミツバチ（Ａｐｉｓ  ｎｕｌｕｅｎｓｉｓｉ）、クロオビミツバチ（Ａｐｉｓ  ｎｉｇｒｏｃｉｎｃｔａ）、オオミツバチ（Ａｐｉｓ  ｄｏｒｓａｔａ）、ヒマラヤオオミツバチ（Ａｐｉｓ  ｌａｂｏｒｉｏｓａ）、コミツバチ（Ａｐｉｓ  ｆｌｏｒｅａ）、クロコミツバチ（Ａｐｉｓ  ａｎｄｒｅｎｉｆｏｒｍｉｓ））；スズメバチ科の蜂（例えば、オオスズメバチ（Ｖｅｓｐａ  ｍａｎｄａｒｉｎｉａ  ｊａｐｏｎｉｃａ）、ヒメスズメバチ（Ｖｅｓｐａ  ｄｕｃａｌｉｓ）、キイロスズメバチ（Ｖｅｓｐａ  ｓｉｍｉｌｌｉｍａ  ｘａｎｔｈｏｐｔｅｒａ）、コガタスズメバチ（Ｖｅｓｐａ  ａｎａｌｉｓ）、モンスズメバチ（Ｖｅｓｐａ  ｃｒａｂｒｏ）、チャイロスズメバチ（Ｖｅｓｐａ  ｄｙｂｏｗｓｋｉｉ）、クロスズメバチ（Ｖｅｓｐｕｌａ  ｆｌａｖｉｃｅｐｓ）、キオビホオナガスズメバチ（Ｄｏｌｉｃｈｏｖｅｓｐｕｌａ  ｍｅｄｉａ）、ヤミスズメバチ（Ｐｒｏｖｅｓｐａ属））；およびアシナガバチ科の蜂（例えば、セグロアシナガバチ（Ｐｏｌｉｓｔｅｓ  ｊａｄｗｉｇａｅ）、キアシナガバチ（Ｐｏｌｉｓｔｅｓ  ｒｏｔｈｎｅｙｉ）、フタモンアシナガバチ（Ｐｏｌｉｓｔｅｓ  ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）、コアシナガバチ（Ｐｏｌｉｓｔｅｓ  ｓｎｅｌｌｅｎｉ）、キボシアシナガバチ（Ｐｏｌｉｓｔｅｓ  ｍａｎｄａｒｉｎｕｓ））などの幼虫または蛹を使用することができる。本発明では、例えば、ミツバチ科の蜂（特に、セイヨウミツバチ）、オオスズメバチ、キイロスズメバチまたはクロスズメバチの蜂の子を、好ましくはセイヨウミツバチの蜂の子を使用することができる。
【００１０】
蜂の子は、例えば、女王蜂、働き蜂および雄蜂、好ましくはオス蜂の幼虫または蛹を使用することができ、抗酸化効果に優れることから、例えば、孵化後１０〜２４日後、好ましくは２０〜２２日後の蛹を使用することができる。
【００１１】
採取した蜂の子は、例えば、乾燥、粉砕し、粉末状にして使用することができ、例えば、特開２００２−１７２９６号公報（段落番号［０００７］）に開示された蜂の子の粉末を本発明に用いてもよい。本発明の１つの態様においては、採取後に−８０〜−５℃で冷凍した蜂の子を使用前に自然解凍し、攪拌機で混合後、得られた混合物を１０〜２０分間煮沸殺菌し、凍結乾燥の後に篩分（１０〜２００メッシュ）して得られた粉末を使用することができる。
【００１２】
また、本発明においては、前記蜂の子粉末から、例えば、低級アルコール（例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノールなど）および／または水を抽出溶媒として用いて得られる蜂の子抽出物を使用することができる。
【００１３】
また、本発明においては、前記蜂の子粉末を、例えば、プロテアーゼ、セルラーゼ、アミラーゼなどの酵素により分解して得られる酵素分解物を使用することができる。
本発明の１つの態様において、蜂の子に水を加え、撹拌しながら２５〜５０℃で３０分〜３時間加熱抽出し、室温まで冷却後、濾過して得られた溶液（蜂の子抽出液）に任意で賦形剤を加え、その後噴霧乾燥し、造粒・篩分して得られる粉末を本発明の蜂の子として使用することができる。
【００１４】
本発明において、蜂の子抽出液に賦形剤を加えることで製造における取り扱いを容易にすることができる。本発明で使用できる賦形剤としては、医薬または食品に利用可能な賦形剤、例えば、デキストリン、コーンスターチ、米粉、乳糖、バレイショデンプン、還元澱粉糖化物、二酸化ケイ素などを使用することができる。
【００１５】
本発明の抗酸化剤中の蜂の子の配合量は、特に制限されないが、好ましくは５０重量％以上、より好ましくは６０重量％以上、さらに好ましくは７０重量％以上、とくに好ましくは８０重量％以上含有されることが好ましい。
【００１６】
本発明のさらなる側面によれば、蜂の子およびプロポリスを含む抗酸化剤が提供される。
本発明で使用されるプロポリスは、食品に通常使用されるプロポリスであれば特に限定されず、ミツバチ科の蜂、例えば、セイヨウミツバチおよびその亜種（Ａｐｉｓ  ｍｅｌｌｉｆｅｒａ、Ａｐｉｓ  ｍｅｌｌｉｆｅｒａ  ａｄａｎｓｏｎｉｉ、Ａｐｉｓ  ｍｅｌｌｉｆｅｒａ  ｓｃｕｔｅｌｌａｔａ）から採取されるプロポリスを使用することができる。プロポリスの起源植物も特には限定されず、例えば、バッカス、ポプラ、サンザシ、ユーカリなどの植物を起源とするプロポリスを使用することができる。
【００１７】
プロポリスとしては、例えば、プロポリス原塊を粉末化したもの、またはプロポリス原塊から適当な抽出方法により得られるプロポリス抽出物を使用することができ、例えば、低級アルコール（例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノールなど）および／または水を抽出溶媒として用いて得られるプロポリス抽出物を使用することができる。例えば、エタノールによるプロポリス抽出物、および特開２００２−３０６０９２号公報に記載の方法により得られるプロポリス抽出物を本発明に使用することができる。プロポリス抽出物としては、例えば、森川健康堂株式会社、アルテクノ工業株式会社、日新蜂蜜株株式会社から商業的に入手可能なものを本発明に使用することができる。
【００１８】
また、本発明においては、前記プロポリス抽出物を、例えば、プロテアーゼ、セルラーゼ、アミラーゼなどの酵素により分解して得られるプロポリス酵素分解物を使用することができる。
【００１９】
本発明の１つの態様において、プロポリス原塊にエタノールを加え、攪拌しながら３０〜７０℃で１〜３時間加熱し、室温まで冷却後、濾過して得られた溶液を濃縮して蝋状の固体物を得た。当該固体物（プロポリス抽出物）に任意で賦形剤を加え、その後噴霧乾燥し、造粒・篩分して得られる粉末を本発明のプロポリスとして使用することができる。
【００２０】
本発明において、プロポリス抽出物に賦形剤を加えることで製造における取り扱いを容易にすることができる。本発明で使用できる賦形剤としては、医薬または食品に利用可能な賦形剤、例えば、デキストリン、コーンスターチ、米粉、乳糖、バレイショデンプン、還元澱粉糖化物、二酸化ケイ素などを使用することができる。
【００２１】
本発明の蜂の子およびプロポリスを含む抗酸化剤は、その配合比率は特に制限されないが、プロポリス１重量部に対して蜂の子が２４重量部以上であることが好ましく、４０重量部以上であることがより好ましく、６０重量部以上であることがさらに好ましい。また、プロポリス１重量部に対して蜂の子が２４０重量部以下であることが好ましく、１２０重量部以下であることがより好ましい。この範囲であれば、優れた抗酸化効果を奏する抗酸化剤とすることができる。
【００２２】
本発明の抗酸化剤中の蜂の子およびプロポリスの配合量は、特に制限されないが、好ましくは合計で５０重量％以上、より好ましくは合計で６０重量％以上、さらに好ましくは合計で７０重量％以上、とくに好ましくは合計で８０重量％以上含有されることが好ましい。
【００２３】
本発明のさらなる側面において、蜂の子、プロポリスおよびローヤルゼリーを含む抗酸化剤が提供される。
本発明で使用されるローヤルゼリーは、食用に供せられているローヤルゼリーであれば特に限定されず、例えば、「ローヤルゼリーの表示に関する公正競争規約」（社団法人全国ローヤルゼリー公正取引協議会により作成）に記載されている「生ローヤルゼリー」、「乾燥ローヤルゼリー」および「調製ローヤルゼリー」を使用することができ、いずれも、例えば、ミツバチ科の蜂（特に、セイヨウミツバチおよびその亜種（Ａｐｉｓ  ｍｅｌｌｉｆｅｒａ、Ａｐｉｓ  ｍｅｌｌｉｆｅｒａ  ａｄａｎｓｏｎｉｉ、Ａｐｉｓ  ｍｅｌｌｉｆｅｒａ  ｓｃｕｔｅｌｌａｔａ））から採取されるローヤルゼリー、好ましくはセイヨウミツバチから採取されるローヤルゼリーを使用することができる。本発明では、例えば、セイヨウミツバチから採取されるローヤルゼリーを乾燥して得られる粉末を使用することが好ましい。
【００２４】
本発明の１つの態様において、採取後に−８０〜−５℃で冷凍したローヤルゼリーの原液を凍結乾燥の後に攪拌機で粉砕し、篩分（１０〜２００メッシュ）して得られた粉末を本発明のローヤルゼリーとして使用することができる。
【００２５】
本発明においては、前記ローヤルゼリー粉末から、例えば、低級アルコール（例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、ブタノールなど）および／または水を抽出溶媒として用いて得られるローヤルゼリー抽出物を使用することができる。
【００２６】
本発明においては、前記ローヤルゼリー粉末、およびローヤルゼリー抽出物を、例えば、プロテアーゼ、セルラーゼ、アミラーゼなどの酵素により分解して得られる酵素分解物を使用することができる。
【００２７】
本発明の１つの態様において、ローヤルゼリーに水を加え、撹拌しながら２５〜５０℃で３０分〜３時間加熱抽出し、室温まで冷却後、濾過して得られた溶液（ローヤルゼリー抽出液）に任意で賦形剤を加え、その後噴霧乾燥し、造粒・篩分して得られる粉末を本発明のローヤルゼリーとして使用することができる。
【００２８】
本発明において、ローヤルゼリー抽出液に賦形剤を加えることで製造における取り扱いを容易にすることができる。本発明で使用できる賦形剤としては、医薬または食品に利用可能な賦形剤、例えば、デキストリン、コーンスターチ、米粉、乳糖、バレイショデンプン、還元澱粉糖化物、二酸化ケイ素などを使用することができる。
【００２９】
本発明の蜂の子、プロポリスおよびローヤルゼリーを含む抗酸化剤は、その配合比率はとくに制限されないが、プロポリス１重量部に対して蜂の子が６重量部以上であることが好ましく、１２重量部以上であることがより好ましく、１６重量部以上であることがさらに好ましく、２４重量部以上であることが特に好ましい。また、プロポリス１重量部に対して蜂の子が２４０重量部以下であることが好ましく、１２０重量部以下であることがより好ましい。さらに、ローヤルゼリー１重量部に対して蜂の子が０．３重量部以上であることが好ましく、０．６重量部以上であることがより好ましく、０．８６重量部以上であることがさらに好ましい。また、ローヤルゼリー１重量部に対して蜂の子が６０重量部以下であることが好ましく、２重量部以下であることがより好ましい。この範囲内であれば、優れた抗酸化効果を奏する抗酸化剤とすることができる。
【００３０】
本発明の抗酸化剤中の蜂の子、プロポリスおよびローヤルゼリーの配合量は、特に制限されないが、好ましくは合計で５０重量％以上、より好ましくは合計で６０重量％以上、さらに好ましくは合計で７０重量％以上、とくに好ましくは合計で８０重量％以上含有されることが好ましい。
【００３１】
本発明において使用される各原料には、それぞれの原料に特有の成分が含まれている。
蜂の子に特有の成分としては、蛹や成虫の外殻成分であるキチンが挙げられ、蜂の子の乾燥粉末に１〜１０重量％含まれている。
【００３２】
プロポリスに特有の成分としては、ｐ−クマル酸が挙げられ、プロポリス抽出物５０重量％の粉末に０．５〜５重量％含まれている。
ローヤルゼリーに特有の成分としては、デセン酸が挙げられ、ローヤルゼリー乾燥粉末に２〜１０重量％含まれている。
【００３３】
本発明の一つの態様において、本発明の抗酸化剤に含まれる蜂の子由来のキチンの量は、例えば０．０００５重量％以上、特に０．００１重量％以上であり、例えば０．１重量％以下、特に０．０５重量％以下である。また、本発明の抗酸化剤に含まれるプロポリス由来のｐ−クマル酸の量は、例えば０．００００１重量％以上、特に０．００００４重量％以上であり、例えば０．００５重量％以下、特に０．００２重量％以下である。さらに、本発明の抗酸化剤に含まれるローヤルゼリー由来のデセン酸の量は、例えば０．００１５重量％以上、特に０．００３重量％以上であり、例えば０．３重量％以下、特に０．０８重量％以下である。
【００３４】
なお、本発明の抗酸化剤における各成分は、それぞれ当業者に周知の方法によって測定することができ、その測定値に基づいて配合量を算出することができる。
本発明の抗酸化剤は、優れた抗酸化効果を奏することから、そのまま又は経口摂取用組成物に配合して用いることができる。例えば、本発明の抗酸化剤を経口摂取用組成物に配合して用いた場合、活性酸素に起因して生じる各種障害などの治療、改善および／または予防用としてだけではなく、当該経口摂取用組成物自体の酸化防止剤としても有効に使用できる。本発明の経口摂取用組成物中の抗酸化剤の配合量は特に制限されないが、優れた抗酸化効果を得るために、アスコルビン酸当量０．０００３重量％以上であることが好ましい。ここで、経口摂取用組成物には、例えば、食品組成物、医薬組成物などが含まれる。
【００３５】
本発明の食品組成物は、抗酸化作用を有する健康食品（栄養機能食品、特定保健用食品、サプリメントなど）、病者用食品などとすることができる。
本発明の食品組成物は、本発明の抗酸化剤（好ましくはアスコルビン酸当量として０．０００３重量％以上）を含み、アスコルビン酸やトコフェロールなどの公知の酸化防止剤を含まなくとも非常に優れた抗酸化効果を奏し、安全であり、色、風味、栄養価などの点で長期安定性に優れる。また、本発明の食品組成物は、高い抗酸化活性を有するので、当該食品組成物の摂取により、生体内に存在する活性酸素に起因して生じる各種障害（心筋梗塞、動脈硬化、糖尿病、癌、脳卒中、白内障、肩こり、冷え性、高血圧、老人性痴呆症、シミ、ソバカス、しわ、肝斑、くすみ、その他の肌の衰えなど）の改善および／または予防用、ならびに肌のハリ、肌のつや、化粧ののり、肌のかさつき、肌のきめ、肌のくすみ、肌の吹き出物・にきび、肌の弾力性の改善および／または予防用として摂取することができる。
【００３６】
本発明の医薬組成物は、本発明の抗酸化剤を（好ましくはアスコルビン酸当量として０．０００３重量％以上）を含み、非常に優れた抗酸化活性を有するので、当該医薬組成物の摂取により、生体内に存在する活性酸素に起因して生じる各種障害（心筋梗塞、動脈硬化、糖尿病、癌、脳卒中、白内障、肩こり、冷え性、高血圧、老人性痴呆症、シミ、ソバカス、しわ、肝斑、くすみ、その他の肌の衰えなど）の治療、改善および／または予防用、ならびに肌のハリ、肌のつや、化粧ののり、肌のかさつき、肌のきめ、肌のくすみ、肌の吹き出物・にきび、肌の弾力性の治療、改善および／または予防用として摂取することができる。また、本発明の医薬組成物はそれ自体も酸化されにくく、本発明の抗酸化剤以外の有効成分の酸化や変色などを長期間防ぐことができる。
【００３７】
本発明の経口摂取用組成物は、必要に応じ、本発明の効果を損なわない範囲で従来公知の着色剤、保存剤、香料、風味剤、コーティング剤等の成分を配合することもできる。
また、本発明の経口摂取用組成物は、本発明の効果を損なわない範囲で、上記抗酸化剤に加えて、さらに植物の加工物、機能性成分、または薬効成分を配合することができる。なお、これらの成分は、１種単独で上記抗酸化剤と組み合わせて使用してもよいし、また、２種以上を任意に組み合わせて上記抗酸化剤と併用することもできる。
【００３８】
併用できる植物の例としては、本発明で使用する抗酸化剤と同様に、抗酸化作用などを有する植物抽出物（例えば、アカメガシワ、カキノキ、クワ、セイヨウオトギリソウ、ツボクサ、サクヨウガレーガ、ヤーバサンタ、ローズヒップ、アスナロ、アセンヤク、イタドリ、イチヤクソウ、アンズ、ケイカンカ、ハクカユマトウ、シラカバ、セイヨウサンザシ、セイヨウノコギリソウ、タラヨウ、ドクダミ、トルメンチラ、バクモンドウ、ヒバ、ブドウ、ムクロジ、モッカ、レイシ、ローマカツミレなどの抽出物）；ヒアルロニダーゼ阻害作用を有する植物抽出物（例えば、ブドウの種子、ひじき、モロヘイヤ、ハマスゲ、穀類（例えば、豆，米および麦など）、ハーブ類（例えば、ミルラ、バジル、タイムなど）、カカオエキス、コーヒーエキス、梅肉エキス、サンザシエキス、およびクロレラなどの抽出物）；女性ホルモン様作用を有する大豆抽出物やブラックコホシュエキス；血圧降下作用および精神安定を有する米胚芽抽出物などを挙げることができる。
【００３９】
また、本発明の経口摂取用組成物の栄養面を向上させる成分の例としては、フィチン酸、黒ニンニク、黒酢、ローヤルゼリー、黒胡椒、エゾウコギ、トンカットアリ、パフィア、ムイラプアマ、タヒボ、田七人参、紅景天、羅漢果、レイシ、ニガウリ、カイアポ、ヤーコン、マテ茶、スギナ、トナカイの角などを挙げることができる。
【００４０】
機能性成分の例としては、抗酸化剤、血糖降下剤、抗コレステロール剤、免疫賦活剤などを挙げることができる。
ここで、抗酸化剤の例としては、制限されないが、乾燥酵母、グルタチオン、リポ酸、ケルセチン、カテキン、コエンザイムＱ１０、エンゾジノール、プロアントシアニジン類、アントシアニジン、アントシアニン、カロチン類、リコピン、フラボノイド、リザベラトロール、イソフラボン類、亜鉛、イチョウ葉、月桃葉、ハイビスカス、メラトニンを挙げることができる。
【００４１】
血糖降下剤の例としては、制限されないが、難消化性デキストリン、グアバ葉、小麦アルブミン、Ｌ−アラビノース、豆鼓エキス、桑葉、しょうが、サラシア、α−リノレン酸、アマチャヅル、オオムギ、キダチアロエ、セイヨウタンポポ、ダイダイ、チョウセンアザミ、ニンニク、ハトムギ、バナバ、ビルベリー、ブラックコホシュ、マコモ、コタラヒム、杜仲葉を挙げることができる。
【００４２】
抗コレステロール剤の例としては、制限されないが、大豆タンパク質、リン脂質結合大豆ペプチド、キトサン、植物ステロールエステル、植物ステロール、植物スタノールエステル、難消化性デキストリン、アルギン酸ナトリウム、サイリウム種皮、アスタキサンチン、イノシトール、コエンザイムＡ、カルシウム、マグネシウム、カルニチン、シルクプロテイン、タウリン、メチオニン、α−リノレン酸、グアガム、コンドロイチン硫酸、アマチャヅル、アルファルファ、イチョウ、オオバコ、オオムギ、オーツ麦、オリーブ、ガジュツ、ギムネマ、キャッツクロー、クコ、クロレラ、スピルリナ、西洋サンザシ、大豆サポニン、唐辛子、ニンニク、ビルベリー、ベニバナ、ユッカ、ラフマ、アガリクス、紅麹を挙げることができる。
【００４３】
免疫賦活剤の例としては、アガリクス、ラクトフェリン、冬虫夏草、アルギニン、トリプトファン、バリン、ロイシン、キチン、キトサン、アロエ、キダチアロエ、エキナセア、オウギ、キャッツクロー、クコ、スピルリナ、ハトムギ、紅花、マカ、マコモ、ラフマを挙げることができる。
【００４４】
薬効成分の例としては、ビタミン、アミノ酸、ペプチド、タンパク質、ミネラル分（鉄、亜鉛、マグネシム、ヨードなど）、脂肪酸（ＥＰＡ、ＤＨＡなど）を挙げることができる。
【００４５】
ここでビタミンの例としては、ビタミンＡ群に属するビタミン〔例えば、レチナール、レチノール、レチノイン酸、カロチン、デヒドロレチナール、リコピン及びそれらの薬理学的に許容される塩類（例えば、酢酸レチノール、パルミチン酸レチノールなど）など〕、ビタミンＢ群に属するビタミン〔例えば、チアミン、チアミンジスルフィド、ジセチアミン、オクトチアミン、シコチアミン、ビスイブチアミン、ビスベンチアミン、プロスルチアミン、ベンフォチアミン、フルスルチアミン、リボフラビン、フラビンアデニンジヌクレオチド、ピリドキシン、ピリドキサール、ヒドロキソコバラミン、シアノコバラミン、メチルコバラミン、デオキシアデノコバラミン、葉酸、テトラヒドロ葉酸、ジヒドロ葉酸、ニコチン酸、ニコチン酸アミド、ニコチニックアルコール、パントテン酸、パンテノール、ビオチン、コリン、イノシトール、パンガミン酸及びそれらの薬理学的に許容されるこれらの塩類（例えば、塩酸チアミン、硝酸チアミン、塩酸ジセチアミン、塩酸フルスルチアミン、酪酸リボフラビン、フラビンアデニンジヌクレオチドナトリウム、塩酸ピリドキシン、リン酸ピリドキサール、リン酸ピリドキサールカルシウム、塩酸ヒドロキソコバラミン、酢酸ヒドロキソコバラミン、パントテン酸カルシウム、パントテン酸ナトリウムなど）など〕、ビタミンＣ群に属するビタミン〔アスコルビン酸及びその誘導体、エリソルビン酸及びその誘導体及びそれらの薬理学的に許容される塩類（例えば、アスコルビン酸ナトリウム、エリソルビン酸ナトリウムなど）など〕、ビタミンＤ群に属するビタミン〔例えば、エルゴカルシフェロール、コレカルシフェロール、ヒドロキシコレカルシフェロール、ジヒドロキシコレカルシフェロール、ジヒドロタキステロール及びそれらの薬理学的に許容される塩類など〕、ビタミンＥ群に属するビタミン〔例えば、トコフェロール及びその誘導体、ユビキノン誘導体及びそれらの薬理学的に許容される塩類（酢酸トコフェロール、ニコチン酸トコフェロール、コハク酸トコフェロール、コハク酸トコフェロールカルシウムなど）など〕、その他のビタミン〔例えば、カルニチン、フェルラ酸、γ−オリザノール、オロチン酸、ルチン（ビタミンＰ）、エリオシトリン、ヘスペリジン及びそれらの薬理学的に許容される塩類（塩化カルニチンなど）など〕を挙げることができる。
【００４６】
またアミノ酸の例としては、ロイシン、イソイロイシン、バリン、メチオニン、トレオニン、アラニン、フェニルアラニン、トリプトファン、リジン、グリシン、アスパラギン、アスパラギン酸、セリン、グルタミン、グルタミン酸、プロリン、チロシン、システイン、ヒスチジン、オルニチン、ヒドロキシプロリン、ヒドロキシリジン、グリシルグリシン、アミノエチルスルホン酸（タウリン）、シスチンまたはこれらの薬理学的に許容される塩類（例えばアスパラギン酸カリウム、アスパラギン酸マグネシウム、塩酸システインなど）などを挙げることができる。好ましい例は、バリン、ロイシンおよびイソロイシン等の分岐鎖アミノ酸、グルタチオン、システイン、グルタミン酸、グリシン、セリン、トリプトファン、チロシン、フェニルアラニン、ヒスチジン、メチオニン、スレオニン、リジン、シスチン、アルギニン、アラニン、アスパラギン酸、プロリン、アミノエチルスルホン酸である。
【００４７】
また、本発明の経口摂取用組成物は、上記の抗酸化剤をそのまま経口摂取用組成物として使用してもよいし、継続的な摂取が行いやすいように、例えば顆粒剤（ドライシロップを含む）、カプセル剤（軟カプセル剤、硬カプセル剤）、錠剤（チュアブル剤などを含む）、散剤（粉末剤）、丸剤などの各種の固形製剤、または内服用液剤（液剤、懸濁剤、シロップ剤を含む）などの液状製剤等の形態で調製することが望ましく、なかでもカプセル剤、錠剤の形態が各成分の安定性や摂取の簡便さの点からは好ましいが、特に限定されるものではない。
【００４８】
カプセル剤、錠剤形態の本発明の経口摂取用組成物は、薬学的に許容される公知の担体を用いることができ、医薬や食品（特にサプリメント）の分野で採用されている通常の製剤化手法を適用することができる。例えば、錠剤は、各成分を処方に従って添加配合し、粉砕、造粒、乾燥、整粒および混合を行い、得られた調製混合物を打錠することによって調製することができる。
【００４９】
さらに、必要に応じて、製剤化のための添加物、例えば、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、流動化剤、分散剤、湿潤剤、防腐剤、粘稠剤、ｐＨ調整剤、着色剤、矯味矯臭剤、界面活性剤、溶解補助剤などを配合することができる。また、液剤の形態にする場合は、ペクチン、キサンタンガム、グアガムなどの増粘剤を配合することができる。これにより、蜂の子など水に溶けにくい成分を多く配合した場合であっても液剤中に首尾よく分散させることができ、また安定性も向上させることができる。また、コーティング剤を用いてコーティング錠剤にしたり、ペースト状の膠剤とすることもできる。さらに、他の形態に調製する場合であっても、従来の方法に従えばよい。
【００５０】
さらに、顆粒状、粉末状、液状等の形態の本発明の経口摂取用組成物は、例えば、飲料、菓子類、パン類、スープ類等の各種飲食品；ドッグフード、キャットフード等の各種ペットフード等に添加して各種飲食品として調製される。これらの飲食品の製造方法は、本発明の効果を損なわないものであれば特に限定されず、各用途で当業者によって使用されている方法に従えばよい。
【００５１】
本発明の経口摂取用組成物の投与量は、対象の体型、年齢、体調、重篤度等により、適宜選択することができ、例えば、体重６０ｋｇの成人を基準として、本発明の抗酸化剤が１００〜３０００ｍｇ／日、好ましくは３００〜２０００ｍｇ／日、さらに好ましくは５００〜１０００ｍｇ／日の用量で使用される。当該経口摂取用組成物の投与は、単回投与または複数回投与であってもよく、たとえば他の抗酸化剤などの他の薬剤と組み合わせて使用することもできる。
【００５２】
本発明のさらなる別の側面において、プロポリスに蜂の子を加えることを特徴とするプロポリスの抗酸化増強方法ならびにプロポリスに蜂の子およびローヤルゼリーを加えることを特徴とするプロポリスの抗酸化増強方法を提供する。
【００５３】
本発明のプロポリスの抗酸化増強方法において使用できる蜂の子、プロポリスおよびローヤルゼリーは前述のとおりのものを使用できる。また、本発明のプロポリスの抗酸化増強方法において、プロポリスと蜂の子との配合比率およびプロポリスとローヤルゼリーとの配合比率は、とくに制限されないが、好ましくは前述のとおりである。
【発明の効果】
【００５４】
本発明の抗酸化剤は優れた抗酸化作用を有する。これにより、（１）当該抗酸化剤を含む経口摂取用組成物の変色、風味の悪化、および栄養価の低下を防止し、ならびに当該経口摂取用組成物に含まれる有効成分の効果を長期間安定化することができる、（２）当該抗酸化剤を含む経口摂取用組成物を摂取することで、生体内に存在する活性酸素に起因して生じる各種障害（心筋梗塞、動脈硬化、糖尿病、癌、脳卒中、白内障、肩こり、冷え性、高血圧、老人性痴呆症、シミ、ソバカス、しわ、肝斑、くすみ、その他の肌の衰えなど）の治療、改善および／または予防、ならびに肌のハリ、肌のつや、化粧ののり、肌のかさつき、肌のきめ、肌のくすみ、肌の吹き出物・にきび、肌の弾力性などを改善および／または予防することができる。
【実施例】
【００５５】
以下、本発明の好適な実施例についてさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。なお、本明細書において示されるパーセンテージは特に言及がなければ重量％を意味する。
【００５６】
各試料の調製
試験に使用した蜂の子、プロポリス、およびローヤルゼリーは以下の方法で調製した。
［蜂の子］
セイヨウミツバチの孵化後２０〜２２日の蛹を採取後に−１８℃で冷凍した。その後使用前に自然解凍した蜂の子を攪拌機で混合後、得られた混合物を６０分間煮沸殺菌した。その後、凍結乾燥して篩分（５０メッシュ）し、蜂の子粉末を得た。当該蜂の子粉末を以下の試験（「抗酸化活性測定試験」、「ヒトにおける有効性確認試験」および「マウス皮膚層厚測定試験」）において使用した。
【００５７】
また、得られた蜂の子粉末のキチン含量をキチン・キトサン実験マニュアル（キチン・キトサン研究会編  技報堂出版）の「第５章  キチン，キトサンの分析」に従って測定した結果、キチン含有率は５．０重量％（乾燥粉末重量あたり）であった。
【００５８】
［プロポリス］
蜂の巣から採取したプロポリス原塊にエタノールを加えて攪拌しながら５０℃で２時間過熱し、室温まで冷却後、ろ過して得られた溶液を濃縮して蝋状の固体物を得た（プロポリス抽出物）。得られた固体物に当該固体物と同重量のデキストリンを添加してプロポリス粉末を得た。当該プロポリス粉末を以下の試験において使用した。
【００５９】
また、得られたプロポリス粉末を高速液体クロマトグラフィー法（高速液体クロマトグラフィーハンドブック（改定２版）、日本分析化学学会関東支部編参照）に供し、ｐ−クマル酸の含有率を測定した結果、ｐ−クマル酸の含有率は２．１重量％（プロポリス抽出物５０％の粉末重量あたり）であった。
【００６０】
また、以下の「抗酸化活性測定試験」の表２〜６におけるプロポリス量は、当該プロポリス粉末（プロポリス抽出物含有率５０重量％）に含まれるプロポリス抽出物の量を示す。なお、賦形剤に使用したデキストリンには抗酸化活性がないことを確認している。
【００６１】
［ローヤルゼリー］
採取後に−１８℃で冷凍したローヤルゼリーの原液を凍結乾燥して得られた固体を粉砕機で粉砕し、篩分（５０メッシュ）して得られた粉末をローヤルゼリーとして使用した。また、得られたローヤルゼリー粉末を高速液体クロマトグラフィー法（高速液体クロマトグラフィーハンドブック（改定２版）、日本分析化学学会関東支部編参照）に供し、デセン酸含有率を測定した結果、デセン酸の含有率は５．９重量％（乾燥粉末重量あたり）であった。
【００６２】
［試験例１］抗酸化活性測定試験
［試料溶液の調製］
以下表１〜６に従い、所定の濃度となるように調製した各試料の粉末のジメチルスルホキシド溶液から１００μＬを取り、遠心分離（５０００ｒｐｍ×５分）の後に、上澄み液から１０μＬを採取し試料溶液とした。
【００６３】
［測定方法］
ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル（以下、ＤＰＰＨと称する；ナカライテスク、＃１３９３３−６１）をエタノール（Ｗａｋｏ、特級）に溶解させ、２００μＭのＤＰＰＨ／エタノール溶液を調製した。９６ウェルマイクロプレートの各ウェルに、ＤＰＰＨ溶液（１９０μＬ）および試料溶液（１０μＬ）を加え、５分間撹拌後、３０分間室温にて放置し、その後マイクロプレートリーダー（テカンジャパン株式会社製、製品名：ＧＥＮｉｏｓ）にて５３０〜５５０ｎｍの波長の吸光度を測定した。
【００６４】
［検量線の作成］
まず、試料溶液としてＬ−アスコルビン酸を用いて濃度と吸光度の変化を測定した。その結果を表１に示す。表中、ＡｓｃはＬ−アスコルビン酸の濃度（重量％）、Ａｂｓは試料の５５０ｎｍにおける吸光度の測定値、（Ｂｌａ−Ａｂｓ（５５０ｎｍ））は（ブランク吸光度測定値−試料吸光度測定値）を示す。また、表１より検量線を作成し、以下の式を得て、各試料の抗酸化活性をＬ−アスコルビン酸当量（Ａｓｃ（％）［ＥＱ］）で示した。
（ブランク吸光度測定値−試料吸光度測定値）＝24.566×（Ｌ−アスコルビン酸濃度）＋0.0029
【００６５】
【表１】
2010037234.tif 000002
【００６６】
蜂の子の抗酸化活性
蜂の子粉末を試料溶液として抗酸化活性を測定し、Ｌ−アスコルビン酸当量を算出した。結果を表２に示す。
【００６７】
【表２】
2010037234.tif 000003
【００６８】
上記結果より、蜂の子が抗酸化活性を有することが確認された。
ここで、飲食品や化粧品およびその原材料の酸化防止剤として一般的に使用されているアスコルビン酸は、例えば、酸化防止剤として食品素材に注入または配合される場合の使用量は、０．０００３〜０．０００５重量％程度である（食品添加物公定書解説書（第８版）、谷村顕雄著、廣川書店、２００７年参照）。本試験の結果、蜂の子０．０５重量％において、Ｌ−アスコルビン酸０．０００３重量％と同等の抗酸化活性が得られていることから、蜂の子は抗酸化剤として優れていることが分かった。
【００６９】
プロポリスおよびローヤルゼリーの抗酸化活性測定試験
プロポリス粉末およびローヤルゼリー粉末のそれぞれを試料溶液として抗酸化活性を測定し、Ｌ−アスコルビン酸当量を算出した。結果を表３に示す。
【００７０】
【表３】
2010037234.tif 000004
【００７１】
プロポリスには抗酸化効果が確認されたが、ローヤルゼリーの抗酸化効果は非常に低く、単独での抗酸化剤として使用するには不十分であった。
蜂の子とプロポリスの混合物の抗酸化活性測定試験
蜂の子粉末とプロポリス粉末の混合物試料溶液として抗酸化活性を測定した。その結果を表４に示す。表中の理論値は、蜂の子およびプロポリスを各濃度で単独で使用した場合のＡｓｃ（％）［ＥＱ］測定値（表２および表３）の和であり、相乗効果は、混合物のＡｓｃ（％）［ＥＱ］測定値と理論値の比である。
【００７２】
【表４】
2010037234.tif 000005
【００７３】
表４では、プロポリス１重量部に対して蜂の子を２４〜２４０重量部を含む混合物において、理論値を上回る抗酸化効果を確認した。この結果より、蜂の子およびプロポリスを混合することにより抗酸化活性が相乗的に高まることが確認された。
【００７４】
蜂の子、プロポリス、およびローヤルゼリーの混合物の抗酸化活性測定試験
以下の表５に蜂の子粉末、プロポリス粉末、およびローヤルゼリー粉末の混合物を試料溶液としての抗酸化活性測定を行った。結果を表５に示す。表中の理論値は、蜂の子、プロポリス、およびローヤルゼリーを各濃度で単独で使用した場合のＡｓｃ（％）［ＥＱ］測定値（表２および表３）の和であり、相乗効果は、混合物のＡｓｃ（％）［ＥＱ］測定値と当該理論値の比である。
【００７５】
【表５】
2010037234.tif 000006
【００７６】
表５では、蜂の子、プロポリス、およびローヤルゼリーを含む混合物において、プロポリス１重量部に対して蜂の子を６〜２４０重量部含む場合、またはローヤルゼリー１重量部に対して蜂の子を０．３〜６０重量部含む場合において理論値を上回る抗酸化効果を確認した。さらに、表５の結果と表４の結果を比較すると、蜂の子、プロポリス、およびローヤルゼリーの３種を混合することにより、２種の混合物よりもさらに高い抗酸化活性が得られることがわかる。
【００７７】
［試験例２］ヒトにおける有効性確認試験
抗酸化剤は、当該抗酸化剤を摂取した動物において、酸化に起因する種々の障害を治療、改善および／または予防する。そこで、本発明の経口摂取用組成物の有効性を確認するために、ヒトモニターを使った摂取試験を行い、肌への影響を調べた。
【００７８】
［錠剤の調製］
表６に示す処方の錠剤を慣用法に従って作成した。具体的には、各成分を処方に従って配合し、粉砕、造粒、乾燥、整粒および混合を行い、それを定法により打錠して錠剤の形態にした。蜂の子粉末、プロポリス粉末、およびローヤルゼリー粉末としては、前述のとおり調製したものを使用した。また、各成分の配合比率は、プロポリス抽出物１重量部に対して蜂の子粉末が６５．６重量部、ローヤルゼリー粉末１重量部に対して蜂の子粉末が１．３重量部である。
【００７９】
【表６】
2010037234.tif 000007
【００８０】
アンケートによる肌の評価
前記錠剤を１日５粒ずつ１ヶ月間摂取した、２０〜４０歳の女性モニター１９名に、摂取開始時および摂取開始後１ヶ月時点で主観的な顔の肌状態についてアンケートを行った。その結果を表７に示す。
【００８１】
【表７】
2010037234.tif 000008
【００８２】
表７の結果から、摂取開始時に比べ摂取開始１ヵ月時では、肌のハリ、肌のつや、化粧ののり、肌のかさつき、肌のきめ、肌のくすみ、肌の吹き出物・にきびの全ての項目において、評価が高まる傾向が認められた。
【００８３】
肌の弾力性および水分量の変化の測定
客観的な肌状態の変化を測定するために、１１名のモニターについては、投与開始時および開始後１ヶ月時に、顔の皮膚（頬骨の部分）の弾力性および水分量を測定した。
【００８４】
［測定方法］
測定は洗顔後、湿度６０％、温度２５℃に調整された部屋で２０分馴化した後に行い、弾力値はＣｕｔｏｍｅｔｅｒ  ＭＰＡ５８０（Ｃｏｕｒａｇｅ  ＋  Ｋｈａｚａｋａ  ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ社製）を用い、添付のマニュアルに従ってＵｆ値を測定した。肌の弾力性が高いほどＵｆ値は高くなる。水分値はＳｋｉｃｏｎ２００ＥＸ（アイ・ビイ・エス株式会社製）を用い、添付のマニュアルに従い、電気伝導度（μＳ）として測定した。肌表面の水分含量が多いほど電気伝導度は高くなる。
【００８５】
結果を図１および図２に示す。肌の弾力値は摂取開始時に比較して、摂取開始１ヶ月時に有意な向上が確認された（ｐ＜０．０５）。水分値については、有意差は確認されなかったが、増加傾向が確認された。
【００８６】
上記試験から、本発明の経口摂取用組成物が美容効果を有することが明らかとなった。
［試験例３］マウス皮膚層厚測定試験
本発明の抗酸化剤の肌組織への影響をより詳細に調べるために、マウスを用いて以下の給餌試験を行った。
【００８７】
［試料の調製］
下記の表８に示す試料を調製した。蜂の子粉末、ローヤルゼリー粉末およびプロポリス粉末は、前述のとおり調製したものを６：５：０.３（プロポリス抽出物として０．１５）の重量比で混合したものを使用した。ビタミンＭｉｘおよびミネラルＭｉｘは日本クレア株式会社製のＣＬＥＡ精製用を使用した。使用したミルクカゼインはタンパク質を８６．２重量％、コーンスターチは炭水化物８６．３重量％、コーンオイルは脂質重量の１００重量％含有しており、飼料１〜３は全てタンパク質含有量が２０重量％となるように調製した。
【００８８】
【表８】
2010037234.tif 000009
【００８９】
［試験方法］
ヘアレスマウス（日本エルエスシー株式会社：ＢＡＬＢ／ｃ  Ｓｌｃ−ｎｕ／ｎｕ（ＳＰＦ）３週齢）をＡ〜Ｅ群（各群ｎ＝６）に分け、上記表８に示した飼料を表９の給餌スケジュールに従って給餌した。具体的には、各群に低タンパク飼料（６％タンパク質含有）を３週間与えて馴化させ、その後Ａ群には飼料１を、Ｂ群には飼料２を、Ｃ群には飼料３を与え、Ｄ群には低タンパク飼料を引き続き与えた。Ｅ群は対照群として３週間後に屠殺し皮膚層厚を測定した。
【００９０】
【表９】
2010037234.tif 000010
【００９１】
試験開始７週間経過後にＡ〜Ｄ群のマウスを屠殺し、皮膚層厚（真皮層の厚み）を測定した。具体的には、背中中央の脊柱線から右側部分の皮膚約１ｃｍ四方を切り取り、ホルマリンにて固定後、エラスチカ・ワンギ−ソン（ＥＶＧ）染色標本作製を施し、標本の顕微鏡写真（図３）を撮影した。真皮層の厚さは、写真上で濃紫色に染色された真皮層部分の任意の１０箇所の距離を測定し、その平均値を顕微鏡の拡大倍率で割ることによって求めた。
【００９２】
測定結果を図４に示す。蜂の子粉末、ローヤルゼリー粉末およびプロポリス粉末の混合物を含む飼料１を与えたＡ群のマウスの真皮層の厚みは、同量のタンパク質を含有する飼料を与えたＢ群およびＣ群のマウスと比べて有意に増加した（図３および図４）。
【００９３】
［処方例］
処方例１〜２６（錠剤）
表１０に記載する処方からなる組成物を（処方例１〜２６）を、慣用法に従って錠剤として調製した。具体的には、各成分を処方に従って配合し、粉砕、造粒、乾燥、整粒および混合を行い、それを定法に従って打錠して錠剤の形態に調製した。
【００９４】
【表１０】
2010037234.tif 000011
【００９５】
処方例２７〜４１（顆粒剤）
表１１に記載する処方からなる組成物（処方例２７〜４１）を、慣用法に従って顆粒剤として調製した。具体的には、各成分を処方に従って配合し、定法に従って混合、造粒、乾燥および整粒して顆粒剤の形態にした。
【００９６】
【表１１】
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【００９７】
処方例４２〜５３（液剤）
表１２に記載する処方からなる組成物（処方例４２〜５３）を、慣用法に従って液剤として調製した。具体的には、各成分を処方に従って配合し、定法に従って混合して液剤の形態にした。
【００９８】
【表１２】
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【図面の簡単な説明】
【００９９】
【図１】本発明の組成物の投与による顔の皮膚弾力値の変化に関する試験結果を示すグラフである。図中のアスタリスク（＊）は有意差ｐ＜０．０５を示す。
【図２】本発明の組成物の投与による顔の皮膚水分値の変化に関する試験結果を示すグラフである。
【図３】表１２のＡ〜Ｅ群マウスの皮膚組織断面の顕微鏡写真の一例である。スケールバーは２００μｍを示す。
【図４】本発明の組成物の投与したマウスの皮膚層厚（真皮層の厚み）に関する試験結果を示すグラフである。図中のアスタリスク（＊＊）は、有意差ｐ＜０．０１を、（＊＊＊）は、有意差ｐ＜０．００１を示す。
【図１】
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【図２】
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【図４】
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【図３】
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