(57)【要約】【課題】  細胞の剥離や試薬の追加などの処理を複数の培養皿毎に行うことを可能とする細胞培養容器及び細胞培養装置を提供する。【解決手段】  細胞培養容器２００は、細胞及び培地を少なくとも含む細胞懸濁液を収容する容器である。細胞培養容器２００は、複数の培養皿２１０と、複数の培養皿２１０を回動可能に支持する支持体２２０とを備える。複数の培養皿２１０は、支持体２２０の長手方向に沿って積層されている。複数の培養皿２１０のそれぞれは、支持体２２０の内側に形成された流路に連通する。【選択図】  図２
2010142143.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞及び培地を少なくとも含む細胞懸濁液を収容する細胞培養容器であって、
複数の培養皿と、
前記複数の培養皿を個別に回動可能に支持する支持体とを備え、
前記複数の培養皿は、前記支持体の長手方向に沿って積層されており、
前記複数の培養皿のそれぞれは、前記支持体の長手方向に沿って前記支持体の内側に形成された流路に連通することを特徴とする細胞培養容器。
【請求項２】
前記複数の培養皿のいずれかである第１培養皿を、前記第１培養皿に隣接する第２培養皿によって封止するように構成された封止手段をさらに備えることを特徴とする請求項１に記載の細胞培養容器。
【請求項３】
前記流路内に設けられており、前記複数の培養皿のそれぞれに試薬を導くリブ部材をさらに備えることを特徴とする請求項１に記載の細胞培養容器。
【請求項４】
前記リブ部材は、前記リブ部材の底面を形成する底リブと、前記リブ部材の側面を形成する側壁リブとを有しており、
前記底リブ上には、前記支持体の長手方向に沿ってスライドする底上げ部材が設けられていることを特徴とする請求項３に記載の細胞培養容器。
【請求項５】
前記支持体は、筒状の第１支持体と、前記第１支持体の内側に設けられた筒状の第２支持体とを有しており、
前記第１支持体は、前記第１支持体の側壁を貫通しており、前記複数の培養皿のそれぞれに対応する位置に設けられた複数の第１貫通窓を有しており、
前記第２支持体は、前記第２支持体の側壁を貫通しており、前記複数の培養皿のそれぞれに対応する位置に設けられた複数の第２貫通窓を有しており、
前記第１支持体は、前記第２支持体の側壁外面に沿って回動し、或いは、前記第２支持体は、前記第１支持体の側壁内面に沿って回動することを特徴とする請求項１に記載の細胞培養容器。
【請求項６】
細胞及び培地を少なくとも含む細胞懸濁液を収容し、前記培地によって前記細胞を培養する細胞培養装置であって、
複数の培養皿と、
前記複数の培養皿を個別に回動可能に支持する支持体と、
前記支持体の長手方向に沿って前記支持体の内側に形成された流路に試薬を供給する供給配管と、
前記供給配管を流れる試薬の量を調整するバルブと、
前記複数の培養皿を全体として回動する回動機構とを備え、
前記複数の培養皿は、前記支持体の長手方向に沿って積層されており、
前記複数の培養皿のそれぞれは、前記支持体の長手方向に沿って前記支持体の内側に形成された流路に連通することを特徴とする細胞培養装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞及び培地を少なくとも含む細胞懸濁液を収容する細胞培養容器及び細胞培養装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、細胞及び培地を少なくとも含む細胞懸濁液を収容する細胞培養容器として、培養皿やフラスコなどが知られている。
【０００３】
ここで、同種の細胞を多量に培養するためには、広い培養面積を確保する必要がある。広い培養面積を確保するためには、複数の細胞培養容器を用いることが考えられる。
【０００４】
例えば、複数の培養皿が積層されており、複数の培養皿が一体化された細胞培養容器が提案されている（例えば、特許文献１）。
【特許文献１】国際公開第９３／１０２１１号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
複数の培養皿が積層された細胞培養容器では、上述したように、複数の培養皿が一体化されている。従って、細胞の剥離や試薬の追加などの処理を複数の培養皿毎に行うことができない。
【０００６】
そこで、本発明は、上述した課題を解決するためになされたものであり、細胞の剥離や試薬の追加などの処理を複数の培養皿毎に行うことを可能とする細胞培養容器及び細胞培養装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
第１の特徴に係る細胞培養容器は、細胞及び培地を少なくとも含む細胞懸濁液を収容する容器である。細胞培養容器は、複数の培養皿と、前記複数の培養皿を個別に回動可能に支持する支持体とを備える。前記複数の培養皿は、前記支持体の長手方向に沿って積層されている。前記複数の培養皿のそれぞれは、前記支持体の長手方向に沿って前記支持体の内側に形成された流路に連通する。
【０００８】
かかる特徴によれば、複数の培養皿は、支持体によって回動可能に支持される。すなわち、各培養皿を個別に回動することによって、細胞の剥離や試薬の追加などの処理を複数の培養皿毎に行うことができる。また、複数の培養皿のそれぞれは、支持体の内側に形成された流路に連通する。従って、各培養皿において、細胞の播種密度を同程度にすることができる。
【０００９】
第１の特徴において、細胞培養容器は、前記複数の培養皿のいずれかである第１培養皿を、前記第１培養皿に隣接する第２培養皿によって封止するように構成された封止手段をさらに備える。
【００１０】
かかる特徴によれば、第１培養皿に収容された収容物（細胞や培地など）の漏れを抑制することができる。
【００１１】
なお、封止手段は、第１培養皿と第２培養皿との間に設けられており、第１培養皿と第２培養皿との隙間を埋める封止部材（ゴムなど）であってもよい。又は、封止手段は、支持体の長手方向において支持体の一端又は両端に設けられており、第１培養皿と第２培養皿との隙間を縮める封止機構（バネなど）であってもよい。封止手段としては、封止部材及び封止機構のいずれか一方が設けられていてもよく、封止部材及び封止機構の双方が設けられていてもよい。
【００１２】
第１の特徴において、細胞培養容器は、前記流路内に設けられており、前記複数の培養皿のそれぞれに試薬を導くリブ部材をさらに備える。
【００１３】
かかる特徴によれば、各培養皿に試薬を略等量に注入することができる。
【００１４】
第１の特徴において、前記リブ部材は、前記リブ部材の底面を形成する底リブと、前記リブ部材の側面を形成する側壁リブとを有する。前記底リブ上には、前記支持体の長手方向に沿ってスライドする底上げ部材が設けられている。
【００１５】
かかる特徴によれば、底上げ部材のスライドによって、底リブ上に溜まる試薬の量を調整することができる。
【００１６】
なお、複数の培養皿毎に設けられた複数の底上げ部材は、一体として形成されており、支持体の長手方向に沿って連動してスライドしてもよい。複数の培養皿毎に設けられた複数の底上げ部材は、別体として形成されており、支持体の長手方向に沿って個別にスライドしてもよい。
【００１７】
第１の特徴において、前記支持体は、筒状の第１支持体と、前記第１支持体の内側に設けられた筒状の第２支持体とを有する。前記第１支持体は、前記第１支持体の側壁を貫通しており、前記複数の培養皿のそれぞれに対応する位置に設けられた複数の第１貫通窓を有する。前記第２支持体は、前記第２支持体の側壁を貫通しており、前記複数の培養皿のそれぞれに対応する位置に設けられた複数の第２貫通窓を有する。前記第１支持体は、前記第２支持体の側壁外面に沿って回動し、或いは、前記第２支持体は、前記第１支持体の側壁内面に沿って回動する。
【００１８】
かかる特徴によれば、第１支持体又は第２支持体の回動によって、第１貫通窓と第２貫通窓との相対的な位置がシフトするため、培養皿に収容された収容物（細胞や培地など）が支持体の内側に形成された流路に漏れることを抑制することができる。
【００１９】
第２の特徴に係る細胞培養装置は、細胞及び培地を少なくとも含む細胞懸濁液を収容しており、前記培地によって前記細胞を培養する。細胞培養装置は、複数の培養皿と、前記複数の培養皿を個別に回動可能に支持する支持体と、前記支持体の長手方向に沿って前記支持体の内側に形成された流路に試薬を供給する供給配管と、前記供給配管を流れる試薬の量を調整するバルブと、前記複数の培養皿を全体として回動する回動機構とを備える。前記複数の培養皿は、前記支持体の長手方向に沿って積層される。前記複数の培養皿のそれぞれは、前記支持体の長手方向に沿って前記支持体の内側に形成された流路に連通する。
【００２０】
かかる特徴によれば、複数の培養皿は、支持体によって回動可能に支持される。すなわち、各培養皿を個別に回動することによって、細胞の剥離や試薬の追加などの処理を複数の培養皿毎に行うことができる。また、複数の培養皿のそれぞれは、支持体の内側に形成された流路に連通する。従って、各培養皿において、細胞の播種密度を同程度にすることができる。
【発明の効果】
【００２１】
本発明によれば、細胞の剥離や試薬の追加などの処理を複数の培養皿毎に行うことを可能とする細胞培養容器及び細胞培養装置を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２２】
以下において、本発明の実施形態に係る細胞培養容器及び細胞培養装置について、図面を参照しながら説明する。なお、以下の図面の記載において、同一又は類似の部分には、同一又は類似の符号を付している。
【００２３】
ただし、図面は模式的なものであり、各寸法の比率などは現実のものとは異なることに留意すべきである。従って、具体的な寸法などは以下の説明を参酌して判断すべきである。また、図面相互間においても互いの寸法の関係や比率が異なる部分が含まれていることは勿論である。
【００２４】
［実施形態］
実施形態に係る細胞培養容器は、細胞及び培地を少なくとも含む細胞懸濁液を収容する容器である。細胞培養容器は、複数の培養皿と、複数の培養皿を個別に回動可能に支持する支持体とを備える。複数の培養皿は、支持体の長手方向に沿って積層されている。複数の培養皿のそれぞれは、支持体の長手方向に沿って支持体の内側に形成された流路に連通する。
【００２５】
実施形態に係る細胞培養装置は、上述した細胞培養容器に加えて、支持体の内側に形成された流路に試薬を供給する供給配管と、供給配管を流れる試薬の量を調整するバルブと、複数の培養皿のそれぞれを回動する回動機構とを備える。
【００２６】
実施形態では、複数の培養皿は、支持体によって回動可能に支持される。すなわち、各培養皿を個別に回動することによって、細胞の剥離や試薬の追加などの処理を複数の培養皿毎に行うことができる。
【００２７】
実施形態では、複数の培養皿のそれぞれは、支持体の内側に形成された流路に連通する。従って、各培養皿において、細胞の播種密度を同程度にすることができる。
【００２８】
［第１実施形態］
（細胞培養装置の構成）
以下において、第１実施形態に係る細胞培養装置について、図面を参照しながら説明する。図１は、第１実施形態に係る細胞培養装置１００を示す図である。
【００２９】
図１に示すように、細胞培養装置１００は、細胞及び培地を少なくとも含む細胞懸濁液を収容する細胞培養容器２００を有しており、培地によって細胞を培養する装置である。
【００３０】
第１に、細胞培養装置１００は、冷蔵室１０と、恒温室２０と、ＣＯ２制御ユニット３０と、廃液タンク４０とを有する。
【００３１】
冷蔵室１０は、冷蔵温度（例えば、４℃）に保たれている。冷蔵室１０は、試薬容器１１と、試薬容器１２と、培地容器１３と、ＰＢＳ容器１４とを有する。
【００３２】
試薬容器１１及び試薬容器１２は、酵素、タンパク、誘導剤、導入剤などの試薬を収容する容器である。試薬容器１１及び試薬容器１２のそれぞれには、試薬の注入量を調整するバルブ１１Ａ及びバルブ１２Ａが設けられている。
【００３３】
培地容器１３は、細胞を培養するための培地を収容する容器である。培地容器１３には、培地の注入量を調整するバルブ１３Ａが設けられている。なお、培地は試薬の一例である。
【００３４】
ＰＢＳ容器１４は、リン酸緩衝溶液（ＰＢＳ；Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ  Ｂｕｆｆｅｒｅｄ  Ｓａｌｉｎｅ）を収容する容器である。ＰＢＳ容器１４には、リン酸緩衝溶液の注入量を調整するバルブ１４Ａが設けられている。なお、ＰＢＳは試薬の一例である。
【００３５】
恒温室２０は、恒温温度（例えば、３７℃）に保たれている。恒温室２０は、細胞培養容器２００を有する。また、恒温室２０は、ポンプ２１と、バッファ２２と、バルブ２３と、バルブ２４と、バッファ２５と、ポンプ２６と、ハンマ２７と、回動機構２８を有する。
【００３６】
ポンプ２１は、試薬容器１１、試薬容器１２、培地容器１３及びＰＢＳ容器１４から供給される試薬類（試薬、培地、ＰＢＳ等）を細胞培養容器２００に送り込む。同様に、ポンプ２１は、ＣＯ２制御ユニット３０から供給される二酸化炭素（ＣＯ２）を細胞培養容器２００に送り込む。なお、二酸化炭素（ＣＯ２）は、細胞培養容器２００に収容された培地のpHを適正値に保つために用いられる。
【００３７】
バッファ２２は、試薬容器１１、試薬容器１２、培地容器１３及びＰＢＳ容器１４から供給される試薬類を貯留する。
【００３８】
バルブ２３は、バッファ２２に貯留された試薬類を細胞培養容器２００に注入する量（注入量）を調整する。
【００３９】
バルブ２４は、細胞培養容器２００で培養された細胞を培地とともにバッファ２５に排出する量（排出量）を調整する。すなわち、バルブ２４は、細胞懸濁液の排出量を調整する。
【００４０】
バッファ２５は、細胞培養容器２００で培養された細胞を培地とともに貯留する。すなわち、バッファ２５は、細胞懸濁液を貯留する。
【００４１】
ポンプ２６は、細胞及び培地を含む細胞懸濁液以外の不要な混合液（以下、廃液）を廃液タンク４０に送り込む。
【００４２】
ハンマ２７は、細胞培養容器２００に付着した細胞を剥離するための衝撃を細胞培養容器２００に与える。具体的には、ハンマ２７は、細胞培養容器２００に収容された細胞懸濁液の培養面に平行な衝撃を細胞培養容器２００に与える。例えば、ハンマ２７は、モータなどの駆動機構（不図示）によって回動可能に構成される。
【００４３】
回動機構２８は、細胞培養容器２００を全体として回動させる機構である。すなわち、回動機構２８は、細胞培養容器２００で細胞の培養を開始した後において、試薬類を追加する際に、細胞培養容器２００を傾けるために用いられる。また、回動機構２８は、細胞懸濁液を排出する際に、細胞培養容器２００を傾けるために用いられる。なお、回動機構２８は、細胞培養容器２００に付着した細胞を剥離するために、細胞培養容器２００を揺らす目的で用いられてもよい。また、細胞培養容器２００に細胞懸濁液を最初に注入する際には、細胞培養容器２００を傾ける必要がないことに留意すべきである。
【００４４】
細胞培養容器２００は、後述するように、複数の培養皿２１０を有する。各培養皿２１０は、細胞懸濁液を収容しており、細胞を培養するための容器である。なお、細胞培養容器２００の詳細については後述する（図２を参照）。
【００４５】
ＣＯ２制御ユニット３０は、二酸化炭素（ＣＯ２）を収容するＣＯ２タンク３１に接続される。ＣＯ２制御ユニット３０は、二酸化炭素（ＣＯ２）の量を調整する。
【００４６】
廃液タンク４０は、細胞及び培地を含む細胞懸濁液以外の不要な混合液（廃液）を収容する。
【００４７】
第２に、細胞培養装置１００は、バルブ群（バルブ５１〜バルブ５４）と、ポンプ群（ポンプ６１〜ポンプ６２）とを有する。
【００４８】
バルブ５１は、ＣＯ２制御ユニット３０から供給される二酸化炭素（ＣＯ２）の注入量を調整する。バルブ５２は、試薬容器１１、試薬容器１２、培地容器１３及びＰＢＳ容器１４からポンプ６１によって送り込まれる試薬類の注入量を調整する。バルブ５３は、ポンプ２６によってバッファ２５から送り込まれる廃液の排出量を調整する。バルブ５４は、ポンプ６２によって廃液タンク４０に送り込まれる廃液の排出量を調整する。
【００４９】
ポンプ６１は、試薬容器１１、試薬容器１２、培地容器１３及びＰＢＳ容器１４から供給される試薬類を細胞培養容器２００側に送り込む。ポンプ６２は、バッファ２５から供給される廃液を廃液タンク４０に送り込む。
【００５０】
（細胞培養容器の構成）
以下において、第１実施形態に係る細胞培養容器について、図面を参照しながら説明する。図２は、第１実施形態に係る細胞培養容器２００を示す図である。
【００５１】
図２に示すように、細胞培養容器２００は、複数の培養皿２１０（培養皿２１０Ａ〜培養皿２１０Ｈ）と、複数の支持体２２０（支持体２２０Ａ〜支持体２２０Ｈ）とを有する。なお、支持体２２０Ａ〜支持体２２０Ｈは連なっており、一連の支持体２２０を構成する。
【００５２】
各培養皿２１０は、細胞懸濁液を収容する。各培養皿２１０内において、細胞が培養される。複数の培養皿２１０は、一連の支持体２２０の長手方向に沿って積層される。複数の培養皿２１０のそれぞれは、一連の支持体２２０の長手方向に沿って一連の支持体２２０の内側に形成された流路に連通する。
【００５３】
各支持体２２０は、各培養皿２１０を回動可能に支持する。上述したように、複数の支持体２２０は、一連の支持体２２０を構成する。すなわち、一連の支持体２２０は、各培養皿２１０を個別に回動可能に支持する。例えば、各支持体２２０は、筒状形状を有する。各支持体２２０の内側には、試薬類の流路が形成される。また、各支持体２２０の内側に形成された流路は、細胞や廃液の流路としても機能する。
【００５４】
第１実施形態では、培養皿２１０及び支持体２２０は、一体として形成される。例えば、培養皿２１０Ｅ及び支持体２２０Ｅのように、支持体２２０の回動に伴って、支持体２２０と一体として形成された培養皿２１０が回動する。
【００５５】
なお、細胞培養装置１００の詳細については後述する（図２及び図３を参照）。
【００５６】
（細胞培養容器の詳細）
以下において、第１実施形態に係る細胞培養容器の詳細について、図面を参照しながら説明する。図３及び図４は、第１実施形態に係る細胞培養装置１００の一部の拡大図である。具体的には、図３及び図４は、培養皿２１０Ａ及び支持体２２０Ａ〜培養皿２１０Ｃ及び支持体２２０Ｃを示す図である。
【００５７】
第１に、細胞培養装置１００は、図３に示すように、一の培養皿２１０を他の培養皿２１０によって封止するように構成された封止機構２３０を有する。なお、他の培養皿２１０は、一の培養皿２１０に隣接する培養皿２１０である。
【００５８】
封止機構２３０は、一連の支持体２２０の長手方向において、一連の支持体２２０の上端に設けられる。なお、封止機構２３０は、一連の支持体２２０の長手方向において、一連の支持体２２０の下端に設けられてもよい。
【００５９】
具体的には、封止機構２３０は、一対のバネ２３１（バネ２３１Ａ及びバネ２３１Ｂ）と、ストッパ２３２とを有する。一対のバネ２３１は、支持体２２０Ａとストッパ２３２との間に設けられる。一対のバネ２３１は、一連の支持体２２０の長手方向に沿って、各支持体２２０間の間隔を縮める張力を生じる。すなわち、一対のバネ２３１は、各培養皿２１０の間隔を縮める張力を生じる。
【００６０】
このように、一対のバネ２３１が生じる張力によって、一の培養皿２１０が他の培養皿２１０によって封止される。
【００６１】
第２に、各培養皿２１０は、図３に示すように、封止部材２４０（封止部材２４０Ｂ及び封止部材２４０Ｃ）を有する。封止部材２４０は、各培養皿２１０間の隙間を埋める封止部材（ゴムなど）である。具体的には、封止部材２４０は、一の培養皿２１０又は他の培養皿２１０に設けられており、一の培養皿２１０と他の培養皿２１０との隙間を埋める。なお、他の培養皿２１０は、一の培養皿２１０に隣接する培養皿２１０である。
【００６２】
例えば、図３では、封止部材２４０Ｂは、培養皿２１０Ｂの上端に設けられている。封止部材２４０Ｂは、培養皿２１０Ａの下端と培養皿２１０Ｂの上端との隙間を埋めるように構成される。
【００６３】
第３に、各支持体２２０は、図３に示すように、軸受け機構２５０によって係止されている。軸受け機構２５０は、一の支持体２２０及び他の支持体２２０によって構成されており、一の支持体２２０と他の支持体２２０とを係止する。なお、他の支持体２２０は、一の支持体２２０に隣接する支持体２２０である。
【００６４】
例えば、図３では、軸受け機構２５０Ｂは、支持体２２０Ａの下端と支持体２２０Ｂの上端とによって構成されている。軸受け機構２５０Ｂは、支持体２２０Ａの下端と支持体２２０Ｂの上端とを係止する係止部として機能する。すなわち、支持体２２０Ａ及び支持体２２０Ｂは、一対のバネ２３１の張力によって軸受け機構２５０Ｂで係止される。但し、支持体２２０Ａ及び支持体２２０Ｂは、一対のバネ２３１の張力を除けば、分離可能であることに留意すべきである。
【００６５】
ここで、培養皿２１０を回動する動作について説明する。（１）回動対象の培養皿２１０と一体として形成された回動対象の支持体２２０を解放する。具体的には、回動対象の支持体２２０が軸受け機構２５０によって係止された状態から、一対のバネ２３１の張力に逆らって、回動対象の支持体２２０を長手方向にシフトする。これによって、回動対象の支持体２２０が解放される。（２）回動対象の培養皿２１０を回動する。（３）回動対象の支持体２２０を係止する。具体的には、回動対象の支持体２２０が解放された状態から、一対のバネ２３１の張力に従って、回動対象の支持体２２０が軸受け機構２５０によって係止する。
【００６６】
第４に、支持体２２０の内側に形成された流路２２１には、図４に示すように、培養皿２１０に試薬類を導くリブ部材が設けられる。リブ部材は、上リブ２６０（上リブ２６０Ａ〜上リブ２６０Ｃ）及び下リブ２７０（下リブ２７０Ａ〜下リブ２７０Ｃ）によって構成される。
【００６７】
上リブ２６０の上面は、流路２２１内を流れる試薬類の流れを一時的に堰き止める。続いて、上リブ２６０は、試薬類を下方に導く。
【００６８】
下リブ２７０の上面は、流路２２１内を流れる試薬類の流れを一時的に堰き止める。続いて、下リブ２７０は、試薬類を培養皿２１０に導く。なお、培養皿２１０が試薬類で満たされると、下リブ２７０は、試薬類を下方に導く。
【００６９】
具体的には、下リブ２７０は、図５に示すように、第１側壁リブ２７１と、底リブ２７２と、第２側壁リブ２７３とを有する。
【００７０】
第１側壁リブ２７１は、培養皿２１０と隣接して設けられており、培養皿２１０に満たされる試薬類の高さ（水位）を一次的に規定する。底リブ２７２は、第１側壁リブ２７１の上端に設けられており、下リブ２７０の底面を構成する。第２側壁リブ２７３は、底リブ２７２の上面に設けられており、培養皿２１０に満たされる試薬類の高さ（水位）を二次的に規定する。
【００７１】
このように、下リブ２７０は、培養皿２１０に満たされる試薬類の高さ（水位）が第２側壁リブ２７３の上端を超えると、試薬類を下方に導くように構成されている。
【００７２】
（細胞の排出方法）
以下において、第１実施形態に係る細胞の排出方法について、図面を参照しながら説明する。図６及び図７は、第１実施形態に係る細胞の排出方法を説明するための図である。
【００７３】
第１に、図６に示すように、回動機構２８によって細胞培養容器２００を傾ける。これによって、培養皿２１０で培養されている細胞が支持体２２０側に集まる。
【００７４】
第２に、図７に示すように、回動機構２８によって細胞培養容器２００を元に戻す。これによって、支持体２２０に集まった細胞が下方に導かれる。
【００７５】
なお、試薬類を追加で注入する際において、回動機構２８によって細胞培養容器２００を支持体２２０側に傾けてもよい。これによって、試薬類を追加する容積を確保することができる。
【００７６】
（細胞培養方法）
以下において、第１実施形態に係る細胞培養方法について、図面を参照しながら説明する。図８は、第１実施形態に係る細胞培養方法を示す図である。
【００７７】
図８に示すように、ステップ１０において、各種セッティングが行われる。各種セッティングは、安全キャビネットやアイソレータなどを用いて無菌環境下で行われる。例えば、試薬容器１１、試薬容器１２、培地容器１３及びＰＢＳ容器１４がセットされる。
【００７８】
ステップ１１において、試薬類が細胞培養容器２００（培養皿２１０）に注入される。具体的には、各種バルブ（バルブ１１Ａ〜バルブ１４Ａ、バルブ５２）や各種ポンプ（ポンプ６１、ポンプ２１）によって、試薬類が細胞培養容器２００（培養皿２１０）に注入される。
【００７９】
ステップ１２において、細胞培養容器２００（培養皿２１０）上で細胞の培養が開始する。
【００８０】
ステップ１３において、細胞培養容器２００（培養皿２１０）上で細胞の培養が終了する。
【００８１】
なお、ステップ１２とステップ１３との間において、試薬の追加などの処理が行われてもよいことは勿論である。このような処理では、各培養皿２１０を個別に回動することによって、細胞の培養中であっても、複数の培養皿２１０のそれぞれに試薬を追加することができる。
【００８２】
ステップ１４において、剥離剤が細胞培養容器２００（培養皿２１０）に注入される。具体的には、ＣＯ２制御ユニット３０は、バルブ５１及びポンプ２１によって、剥離剤を細胞培養容器２００（培養皿２１０）に注入する。
【００８３】
ステップ１５において、細胞培養容器２００（培養皿２１０）から細胞を剥離する処理が行われる。具体的には、ハンマ２７は、細胞培養容器２００（培養皿２１０）に衝撃を与える。
【００８４】
ステップ１６において、細胞培養容器２００（培養皿２１０）を傾斜する処理が行われる。具体的には、回動機構２８を用いて、細胞培養容器２００（培養皿２１０）を傾ける。
【００８５】
ステップ１７において、細胞培養容器２００（培養皿２１０）上で培養された細胞を排出する処理が行われる。具体的には、細胞培養容器２００（培養皿２１０）上で培養された細胞がバルブ２４によってバッファ２５に排出される。続いて、細胞及び培地を含む細胞懸濁液以外の不要な混合液（廃液）が各種ポンプ（ポンプ２６、ポンプ６２）によって廃液タンク４０に送り込まれる。
【００８６】
ステップ１８において、バッファ２５が取り出される。これによって、バッファ２５に集められた細胞が取り出される。
【００８７】
（作用及び効果）
第１実施形態では、複数の培養皿２１０は、支持体２２０によって回動可能に支持される。すなわち、各培養皿２１０を個別に回動することによって、細胞の剥離や試薬の追加などの処理を複数の培養皿２１０毎に行うことができる。
【００８８】
第１実施形態では、複数の培養皿２１０のそれぞれは、支持体２２０の内側に形成された流路２２１に連通する。従って、各培養皿２１０において、細胞の播種密度を同程度にすることができる。
【００８９】
［変更例１］
以下において、第１実施形態の変更例１について、図９を参照しながら説明する。以下においては、第１実施形態との相違点について主として説明する。
【００９０】
図９に示すように、細胞培養容器２００は、底上げ部材２８０を有する。底上げ部材２８０は、一連の支持体２２０の長手方向に沿ってスライドするように構成されている。
【００９１】
具体的には、底上げ部材２８０は、底部２８１と、側壁部２８２とを有する。底部２８１は、下リブ２７０の底リブ２７２上に設けられている。側壁部２８２は、培養皿２１０に隣接して設けられており、培養皿２１０に連通する開口を有する。
【００９２】
第１実施形態で示したように、第１側壁リブ２７１は、培養皿２１０に満たされる試薬類の高さ（水位）を一次的に規定する。第２側壁リブ２７３は、培養皿２１０に満たされる試薬類の高さ（水位）を二次的に規定する。従って、培養皿２１０だけではなくて、底リブ２７２上にも試薬類が溜まる。
【００９３】
変更例１では、底上げ部材２８０のスライドによって、底リブ２７２上に溜まる試薬類の量を調整することができる。
【００９４】
［変更例２］
以下において、第１実施形態の変更例２について、図１０を参照しながら説明する。以下においては、第１実施形態との相違点について主として説明する。
【００９５】
図１０及び図１１に示すように、支持体２２０は、筒状の第１支持体３１０と、第１支持体３１０の内側に設けられた筒状の第２支持体３２０とを有しており、
第１支持体３１０は、第１支持体３１０の側壁を貫通しており、培養皿２１０に対応する位置に設けられた第１貫通窓３１１を有する。
【００９６】
第２支持体３２０は、第２支持体３２０の側壁を貫通しており、培養皿２１０に対応する位置に設けられた第２貫通窓３２１を有する。
【００９７】
第１支持体３１０は、第２支持体３２０の側壁外面に沿って回動する。或いは、第２支持体３２０は、第１支持体３１０の側壁内面に沿って回動する。
【００９８】
具体的には、図１２に示すように、第１支持体３１０又は第２支持体３２０の回動によって、第１貫通窓３１１及び第２貫通窓３２１が揃っている状態では、試薬類が培養皿２１０に導かれる。一方で、図１３に示すように、第１支持体３１０又は第２支持体３２０の回動によって、第１貫通窓３１１及び第２貫通窓３２１が揃っていない状態では、試薬類が培養皿２１０に導かれない。
【００９９】
変更例２では、第１支持体３１０又は第２支持体３２０の回動によって、第１貫通窓３１１と第２貫通窓３２１との相対的な位置がシフトするため、培養皿２１０に収容された収容物（細胞や培地など）が流路２２１に漏れることを抑制することができる。また、第１支持体３１０及び第２支持体３２０によって構成される支持体２２０が培養皿２１０毎に設けられているため、試薬類などを注入すべき培養皿２１０を選択的に切り替えることができる。
【０１００】
［その他の実施形態］
本発明は上述した実施形態によって説明したが、この開示の一部をなす論述及び図面は、この発明を限定するものであると理解すべきではない。この開示から当業者には様々な代替実施形態、実施例及び運用技術が明らかとなろう。
【０１０１】
例えば、上リブ２６０及び下リブ２７０は、支持体２２０と一体として形成されていてもよい。また、上リブ２６０及び下リブ２７０は、培養皿２１０と一体として形成されていてもよい。
【０１０２】
複数の培養皿２１０毎に設けられた複数の底部２８１は、側壁部２８２によって一体として形成されていてもよい。すなわち、底上げ部材２８０は、一体として形成されていてもよい。
【０１０３】
底部２８１及び側壁部２８２によって構成される底上げ部材２８０は、複数の培養皿２１０毎に設けられていてもよい。
【０１０４】
なお、複数の培養皿毎に設けられた複数の底上げ部材は、一体として形成されており、支持体の長手方向に沿って連動してスライドしてもよい。複数の培養皿毎に設けられた複数の底上げ部材は、別体として形成されており、支持体の長手方向に沿って個別にスライドしてもよい。
【図面の簡単な説明】
【０１０５】
【図１】第１実施形態に係る細胞培養装置１００を示す図である。
【図２】第１実施形態に係る細胞培養容器２００を示す図である。
【図３】第１実施形態に係る細胞培養装置１００の一部の拡大図である。
【図４】第１実施形態に係る細胞培養装置１００の一部の拡大図である。
【図５】第１実施形態に係る下リブ２７０を示す図である。
【図６】第１実施形態に係る細胞の排出方法を説明するための図である。
【図７】第１実施形態に係る細胞の排出方法を説明するための図である。
【図８】第１実施形態に係る細胞培養方法を示す図である。
【図９】変更例１に係る細胞培養容器２００を示す図である。
【図１０】変更例２に係る支持体２２０を示す図である。
【図１１】変更例２に係る支持体２２０を示す図である。
【図１２】変更例２に係る支持体２２０を示す図である。
【図１３】変更例２に係る支持体２２０を示す図である。
【符号の説明】
【０１０６】
１０…冷蔵室、１１…試薬容器、１１Ａ…バルブ、１２…試薬容器、１２Ａ…バルブ、１３…培地容器、１３Ａ…バルブ、１４…ＰＢＳ容器、１４Ａ…バルブ、２０…恒温室、２１…ポンプ、２２…バッファ、２３…バルブ、２４…バルブ、２５…バッファ、２６…ポンプ、２７…ハンマ、２８…回動機構、３０…制御ユニット、３１…タンク、４０…廃液タンク、５１〜５４…バルブ、６１〜６２…ポンプ、１００…細胞培養装置、２００…細胞培養容器、２１０…培養皿、２２０…支持体、２２１…流路、２３０…封止機構、２３１…バネ、２３２…ストッパ、２４０…封止部材、２５０…軸受け機構、２６０…上リブ、２７０…下リブ、２７１…第１側壁リブ、２７２…底リブ、２７３…第２側壁リブ、２８０…底上げ部材、２８１…底部、２８２…側壁部、３１０…第１支持体、３１１…第１貫通窓、３２０…第２支持体、３２１…第２貫通窓
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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