(57)【要約】      （修正有）【課題】液相だけでなく気相化状態でも使用でき、金属への腐食作用を伴わず、沈殿物が生じないアルコールを主剤とした薬剤の提供。【解決手段】１．７％の塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）液に、キレート剤としてエチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ−２Ｎａ）を１００ｍＭの濃度になるよう溶解し、１００ｍＭの塩化第二鉄（ＦｅＣｌ３）を溶解する。この溶液と９９．５％エタノールを等量混合し、濃塩酸を加えてｐＨを０．３に調整した溶液に５０ｍＭの濃度になるようヨウ化カリウム（Ｋｌ）を溶解した溶液を加温、加熱、超音波、圧縮、真空などの方法で気体とさせ、再び冷却させることにより得られる液体を調整する。この薬剤は、すでに開発した薬剤よりも金属に対する腐食を極めて低く押えた。また、１０７個の枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）芽胞に対して、水で希釈しても沈殿物を生じることは全くなく、強い抗菌力を示した。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
キレート剤、金属化合物、ハロゲン化合物、塩化ナトリウム、アルコールと水からなる溶液のｐＨを酸性として得られる薬剤群を加温、加熱、超音波、圧縮、真空、減圧又は攪拌のいずれか一つ又は複数の組み合わせにより気体とさせ、それぞれの気体を再び冷却させて得られる薬剤群。
【請求項２】
請求項１に記載の方法で得られる薬剤群の残存液（蒸留した残り）のなかに、再び、キレート剤、金属化合物、ハロゲン化合物、塩化ナトリウム、アルコールの全て又は一部を追加した液体群を、繰り返し蒸留する。
【請求項３】
請求項１に記載の方法で得られる薬剤群を希釈して使用する。
【請求項４】
請求項１に記載の方法で得られる薬剤群を液相で使用する。
【請求項５】
請求項１に記載の方法で得られる薬剤群を複数の温度の組み合わせで気化させて使用する。
【請求項６】
請求項１に記載の方法で得られる薬剤群を物質に吸着、塗装、練り混みで使用する。
【請求項７】
請求項４に記載の方法で気化させて使用する前に湿度を８０％以上に高めてから使用する。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  この出願の発明は、液相及び気相において、微生物のなかで殺菌剤に最も抵抗性を持つ細菌芽胞に対して優れた殺芽胞力を有し、かつ金属腐食能を抑えた殺芽胞剤の製造方法と使用方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】  液相で細菌芽胞を殺す薬剤として、過酢酸、過酸化水素、二酸化塩素、高濃度次亜塩素酸ナトリウム、グルタルアルデヒド、フタラールなどがある。他方、気相で細菌芽胞を殺す殺菌剤として、エチレンオキサイドガスやホルムアルデヒドガスなどがある。いずれも人体に有害であり、過酢酸、過酸化水素、二酸化塩素及び高濃度次亜塩素酸ナトリウムは強い金属腐食能を持つ。【０００３】  本申請者は、キレート剤、金属化合物、ハロゲン化合物、食塩、アルコールの全て又は一部を組み合わせ、酸を加えた低いｐＨを特徴とする殺菌剤について一貫して研究してきた。
【特許文献１】特願平１１−３０９７６９号
【特許文献２】特願２００２−２６９２２１号
【特許文献３】特願２００６−１８２４９５号
【非特許文献１】Ｋｉｄａ，Ｎ．，Ｍｏｃｈｉｚｕｋｉ，Ｙ．，ａｎｄ  Ｔａｇｕｃｈｉ，Ｆ．２００３．Ａｎ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｓｐｏｒｉｃｉｄａｌ  ｒｅａｇｅｎｔ  ａｇａｉｎｓｔ  Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ｓｐｏｒｅｓ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．ｌｍｍｕｎｏｌ．，４７：２７９−２８３．
【非特許文献２】ｋｉｄａ，Ｎ．，Ｍｏｃｈｉｚｕｋｉ．Ｙ．，ａｎｄ  Ｔａｇｕｃｈｉ，Ｆ．２００４．Ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｓｐｏｒｉｃｉｄａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｂｙ  ｕｓｉｎｇ  ｖａｒｉｏｕｓ  ｍｅｔａｌ  ｉｏｎｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ｃｏｍｂｉｎｉｎｇ  ｆｅｒｒｉｃ  ｃｈｌｏｒｉｄｅ．ｅｔｈｙｌｅｎｅｄｉａｍｉｎｅｔｅｔｒａａｃｅｔｉｃ．ａｃｉｄ  ａｎｄ  ｅｔｈａｎｏｌ．Ｂｉｏｃｏｎｔ．Ｓｃｉ．，９：Ｎｏｓ．１，２，２７−３０．
【非特許文献３】Ｋｉｄａ，Ｎ．，Ｍｏｃｈｉｚｕｋｉ，Ｙ．，ａｎｄ  Ｔａｇｕｃｈｉ，Ｆ．２００４．Ａｎ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｉｏｄｉｄｓ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｋｉｌｌｉｎｇ  Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｄ  Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐｏｒｅｓ  ｏｖｅｒ  ａ  ｗｉｄｅ  ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ  ｒａｎｇｅ．Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，９７：４０２−４０９．
【非特許文献４】Ｋｉｄａ，Ｎ．，Ｍｏｃｈｉｚｕｋｉ，Ｙ．，ａｎｄ  Ｔａｇｕｃｈｉ，Ｆ．２００５．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  ｓｔｕｄｙ  ｏｎ  ｓｐｏｒｉｃｉｄａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ａ  ｎｅｗｌｙ  ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ  ａｎｄ  ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ  ｃｈｅｍｉｃａｌ  ｓｐｏｒｉｃｉｄａｌ  ａｇｅｎｔｓ  ａｇａｉｎｓｔ  Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ｓｐｏｒｅｓ．  Ｂｉｏｃｏｎｔ．Ｓｃｉ．，１０：Ｎｏｓ．１，２，７９−８３．
【非特許文献５】Ｋｉｄａ，Ｎ．，Ｎａｋａｎｏ，Ｍ．，Ｍｏｃｈｉｚｕｋｉ，Ｙ．，ａｎｄ  Ｔａｇｕｃｈｉ，Ｆ．２００６．Ｂａｓａｌ  ｓｔｕｄｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｓｐｏｒｉｃｉｄａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＫＭＴ  ｒｅａｇｅｎｔ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｖａｐｏｒ  ｐｈａｓｅ  ａｇａｉｎｓｔ  Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ｓｐｏｒｅｓ．Ｂｏｋｉｎ  Ｂｏｂａｉ．，３４：７６９−７７６（ｉｎ  Ｊａｐａｎｅｓｅ）．
【非特許文献６】Ｋｉｄａ，Ｎ．，Ｍｏｃｈｉｚｕｋｉ．Ｙ．，ａｎｄ  Ｔａｇｕｃｈｉ．Ｆ．２００７．Ｓｐｏｒｉｃｉｄａｌ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＫＭＴ  ｒｅａｇｅｎｔ  ｉｎ  ｉｔｓ  ｖａｐｏｒ−ｐｈａｓｅ  ａｇａｉｎｓｔ  Ｇｅｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｔｅａｒｏｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｓｐｏｒｅｓ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．ｌｍｍｕｎｏｌ．，５１（１）：９９−１０３．
【非特許文献７】Ｋｉｄａ，Ｎ．，Ｍｏｃｈｉｚｕｋｉ，Ｙ．，ａｎｄ  Ｔａｇｕｃｈｉ，Ｆ．２００７．Ｓｔｅｒｉｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｓａｆａｔｙ  ｃａｂｉｎｅｔ  ｂｙ  ｖａｐｏｒｉｚｅｄ  ＫＭＴ  ｒｅａｇｅｎｔ．Ｂｉｏｃｏｎｔｒｏｌ．Ｓｃｉ．，１２（２）：６５−６９．
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】  液相及び気相で細菌芽胞を殺す殺菌剤として、本申請者がこれまで申請した薬剤（特許文献２及び３）がある。この薬剤は、既存の殺芽胞剤と比べ殺芽胞活性において優れた特性を有するだけでなく、ホルムアルデヒドやエチレンオキサイドのような人体への危険性は低い。しかし、この薬剤の欠点として、溶液のｐＨが０．３と強い酸性であるため、金属に対する腐食能を有した。腐食の発生を防ぐため、この薬剤のｐＨをアルカリ薬剤を添加することにより上げることは容易であるが、同時に、そのことは薬剤の殺芽胞活性を失わせることになるため、長年、この強い酸による腐食の課題は解決されないままであった。また、沈殿物が生じるため水による希釈ができないという問題も生じていた。【０００５】  本発明は、この薬剤が有する腐食性の課題を解決しようとするものであり、生体や環境に対してより安全性が高い殺芽胞剤、消毒剤、殺菌剤を開発し、医療、公衆衛生、食品産業など多方面で発生する微生物による危害の発生予防に役立つのみならず、炭疽菌の芽胞をはじめとする微生物を用いたバイオテロに対する危機管理対策にも役立つ殺菌剤群（希釈液を含む）を提供することを目的としている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】  本発明は、上記課題を解決するため、この薬剤を加温、加熱、超音波、圧縮、真空、減圧又は攪拌のいずれか一つ又は複数の組み合わせにより気体とさせ、それぞれの気体を再び冷却させることにより液体成分を得る。また、蒸留した後に残る液体（残存液）の中に、キレート剤、金属化合物、ハロゲン化合物、食塩、アルコールを追加し、再び蒸留することを繰り返すことにより連続して製造・生産することができる。
【発明の効果】  この手段により、この薬剤の殺芽胞活性を失わせることなくｐＨとアルコール濃度を高めることが可能であり、本剤を液体あるいは気体として暴露させても、金属の種類にもよるが鉄に対する腐食は極めて軽微な段階で抑えることができる。また、ステンレスに対する影響は殆どない。同時に水によって希釈しても沈殿物を生じないという特性も見いだされた。このため、希釈液を容易に製造することができ、微生物の種類、抵抗性に応じて濃度を加減して使用することが可能となった。残存液に再びキレート剤、金属化合物、ハロゲン化合物、食塩、アルコールを追加することにより、追加する酸の量を減らすことが可能となり、循環型の製造・生産システムが構築できる。これにより、大量生産・製造時には酸使用による環境負荷が軽減される。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００７】  以下、本発明の実施の形態について、本剤を液体として用いた実験結果に基づいて説明する。【０００８】  塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）を１．７％の濃度で添加した食塩液に、キレート剤としてエチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ−２Ｎａ）を１００ｍＭの濃度になるよう溶解する。さらに１００ｍＭの濃度になるよう金属化合物として塩化第二鉄（ＦｅＣｌ３）を溶解する。この溶液と９９．５％エタノールを等量混合し、濃塩酸を加えてｐＨを０．３に調整した溶液に５０ｍＭの濃度になるようヨウ化カリウム（Ｋｌ）を溶解した溶液を作る。この液体を加温、加熱、超音波、圧縮、真空、減圧又は攪拌のいずれか一つ又は複数の組み合わせにより気体とさせ、再び冷却させることにより得られる液体（ｐＨ約３）を調整する。この液体に、枯草菌の芽胞（１０９ＦＵ／ｍｌ）１００μｌを加え、２０℃又は３７℃で５、１０、１５、３０分間作用させた後の生残菌数を測定した。その結果、表１に示すように、原液の場合、２０℃では１５分間、３７℃では５分間の暴露で１億分の１以下、すなわち１０８個の芽胞を０個まで減少させた。更に水で１０倍希釈液の場合、２０℃では１５分間、３７℃では５分間の暴露で１億分の１以下、すなわち１０７の芽胞を０個まで減少させた。このことから１０倍希釈による殺芽胞効果の減弱は殆ど認めないことが判明した。また、この原液にメッキ処理した鉄ピンを浸漬して、室温で５時間浸漬した後の腐食の発生を観察したが、腐食の発生は認めなかった。対照とした１５％過酸化水素液、過酢酸液及び二酸化塩素液では腐食の発生を認めた。同様に、この原液にステンレスピンを室温で二ヶ月間浸漬しても腐食の発生は認めなかった。また、表２に示すように、通常の細菌に対しては５００倍まで水で希釈しても強い殺菌力が認められた。
【表１】
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【表２】
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【０００９】  以下、本発明の実施の形態について、本剤を気体として用いた実験結果に基づいて説明する。【００１０】  非吸収性の材料（ポリプロピレン樹脂棒）と吸収性材料（綿棒）に、牛血清を添加又は非添加の枯草菌芽胞１０μｌ（１０８〜９ＣＦＵ／ｍｌ）を加え、一定時間、乾燥させた被滅菌材料（以下、テストキャリアという）。これらのテストキャリアを、容積約９５Ｌ（縦３０ｃｍ×横５３ｃｍ×高さ６０ｃｍ）の合成樹脂製容器（以下、チャンバーという）の内側側壁及び内側天井に、それぞれ、吸収性材料（血清有り綿棒６本、血清なし綿棒６本）、非吸収性材料（血清有りポリプロピレン樹脂棒６本、血清なしポリプロピレン樹脂棒６本）計２４本を取り付ける。また、金属に対する腐食を観察するために、メッキ処理した鉄、ステンレス、アルミの試験片をチャンバー内の側壁、天井に取り付ける。まず、チャンバー内の湿度を高めるため、ホットスタラーの加熱板の上に皿を置き、適当量（約７０ｍｌ）の水を注ぎ入れて、チャンバーをかぶせる。ホットスタラーのスイッチを入れて加熱及び攪拌を開始する。水を蒸発させて、湿度を８０％以上に到達させる。その後、本剤（２５ｍｌ）を皿に入れて、５５℃前後の低い温度で加熱する。本剤は蒸発して約１０分後にはチャンバー内に充満する。本剤の全てが蒸発したら加熱・攪拌を停止し、そのまま放置した状態において、２４本のテストキャリアが、気相化させた本剤の暴露によって何時間後に２４本すべてのテストキャリアが滅菌できるか検討した。その結果、金属に対する腐食を生じさせることなく、本剤は、表２に示すように６時間の暴露で全てのテストキャリアを滅菌することができた。
【表３】
2010043055.tif 000004
【産業上の利用可能性】
【００１１】  以上詳しく説明したように、この出願の発明によれば、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）を１．７％の濃度で添加した食塩液に、キレート剤としてエチレンジアミン四酢酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ−２Ｎａ）を１００ｍＭの濃度になるよう溶解する。さらに１００ｍＭの濃度になるよう金属化合物として塩化第二鉄（ＦｅＣｌ３）を溶解する。この溶液と９９．５％エタノールを等量混合し、濃塩酸を加えてｐＨを０．３に調整した溶液に５０ｍＭの濃度になるようヨウ化カリウム（Ｋｌ）を溶解した溶液を加熱蒸留して得た（ｐＨ約３）を原液のみならず、水で希釈によっても効果を保持する。さらに、気相化させて、１０６〜７個の枯草菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ）芽胞を定着させたテストキャリアに対して、金属腐食をほとんど生じさせることなく、それぞれ６時間暴露によっで滅菌することができた。これらの結果は、物理化学的な刺激に対して最も強い抵抗性を示す芽胞によって汚染された物体または空間の殺菌が可能であることを示すものであり、同時に、溶液のｐＨを高めることに成功したことで、金属に対する腐食が抑えられることにより、医療、公衆衛生、食品製造、流通及び運輸産業の各分野において危害発生の予防に積極的に取り入れていくことが可能であり、海外から輸入される食糧或いは動物の一次汚染並びに運搬用具等からの二次汚染防止のための日常的な管理対策や炭疸菌をはじめとする微生物を用いたバイオテロに対する危機管理対策にも有用となるであろう、また、水で容易に希釈でき、細菌に対しても強い効果が認められたことから、消毒剤や殺菌剤としても使用できる。