(57)【要約】【課題】嗜好の高級化あるいは美観に劣るということで廃棄される規格外品、完熟品、さらには加工副産物などや、食されず多くは廃棄される柿の果皮から有効成分を取出し、それらを有効利用することを目的とする。【解決手段】  細断又は粉砕した柿の果実および／または果皮を、酢酸が存在する水性液中に均一分散した後、固液分離して固体物および液状物を得、得られた固体物および液状物にさらにアルコールを添加して固液分離し、アルコール可溶分からなる機能性組成物を取得する。さらに、前記アルコール可溶分に酢酸エチルを添加し、酢酸エチルに不溶な成分を除去すること、さらには、遠赤外線を照射した柿を用いることによって、医薬や健康食品の原料として利用される、機能性に優れた組成物を取得し、柿、特に廃棄処分されていた柿に新しい用途を付与する。【選択図】      図１５
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
細断又は粉砕した柿の果実又は柿の果皮を、酢酸が存在する水性液中に均一分散させたのち、固液分離して固体物および液状物を取得し、
得た固体物および液状物にそれぞれアルコールを加え、さらに固液分離して取得したアルコール可溶分からなること
特徴とする機能性組成物。
【請求項２】
前記均一分散が、
ホモジネート状態であること
を特徴とする請求項１に記載の機能性組成物。
【請求項３】
前記アルコール可溶分が、
さらに、酢酸エチルの添加によって、酢酸エチルに不溶な成分が除去されていること
を特徴とする請求項１又は２に記載の機能性組成物。
【請求項４】
前記アルコールが、
メチルアルコール又はエチルアルコールであること
を特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の機能性組成物。
【請求項５】
前記アルコールが、
５０％濃度のエチルアルコールであること
を特徴とする請求項１〜３のいずれかに記載の機能性組成物。
【請求項６】
前記柿の果実又は果皮が、
遠赤外線処理の施されたものであること
を特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の機能性組成物。
【請求項７】
前記アルコール可溶分が、
抗酸化活性、ラジカル捕捉活性および酵素阻害作用を有すること
を特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の機能性組成物。
【請求項８】
前記酵素阻害作用が、
α−グルコシターゼおよびリパーゼに対する阻害作用であること
を特徴とする請求項７に記載の機能性組成物。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれかに記載の機能性組成物を含有すること
を特徴とする医薬。
【請求項１０】
請求項１〜８のいずれかに記載の機能性組成物を含有すること
を特徴とする健康食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この発明は、柿の果実および／またはその果皮から抽出される、抗酸化活性、ラジカル捕捉活性および酵素阻害作用を有する機能性組成物に関するものであって、植物からの有効成分抽出技術に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
日本人に昔から親しまれている柿は、生の果実として、あるいは干し柿として、その甘みの故に、大量に消費されてきているものである。
この柿は、ビタミンＣおよびカロチンを含み、多くの生理機能、例えば、皮膚内側の細胞組織の健全化、毛細血管の再生、細菌に対する抵抗力の強化、赤血球の再生、血圧の調節等に有効で、血管関連疾病（動脈硬化、高血圧、心臓病）の予防と治療に有効とされている。
さらには、抗酸化能力を有し、発癌物質から細胞を守る効果を有しているとされているものである。
【０００３】
したがって、前記した柿の特性を有効利用する観点から、柿の成分を取出して、積極的にかつ有効に利用しようとする提案が多くなされている。
【０００４】
例えば、特開２００５−８９３８６号公報（特許文献１）においては、極性の低い溶媒から極性の高い溶媒を段階的に使用して、柿の果実の表皮から、抗酸化活性を有する活性酸素消去剤が得られることが報告されている。
【０００５】
また、特表２００２−５２８５６０公報（特許文献２）においては、柿などの天然素材から得られた抽出物には、天然フラボノイドおよび／または天然フェノールおよび／またはポリフェノール系化合物などが存在し、酸化防止効果、すなわち抗酸化活性や耐熱性に優れ、プラスチック材料の安定剤として用いられることが提案されている。
【０００６】
さらに、特開２００４−３３１５２８号公報（特許文献３）では、カロテノイドの１種であって、抗発癌プロモータ機能、過剰な活性酸素の消去機能等を有し、細胞内での情報伝達にも関与する抗癌性物質と知られているβ−クリプトキサンチンを、柿などの果実や果皮から有機溶媒により抽出取得できることが報告されている。
【０００７】
また、このβ−クリプトキサンチンを含有する組成物を、皮膚外用剤、化粧料、浴用剤や洗剤などに用いられる美肌用組成物とすることが、特開２００８−２９７２１５号公報（特許文献４）に提案されている。
【０００８】
一方、特開２００８−３０１８０１号公報（特許文献５）においては、収穫後の脱渋されていない渋柿に、７０〜９０℃の温・熱風を２４〜４８時間当てて加熱乾燥・除菌殺菌することによって、他の乾燥果実と比べ著しく高いポリフェノール含量およびラジカル捕捉活性（抗酸化力）を有する皮付き、又は剥皮乾燥脱渋柿が得られることが報告されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開２００５−  ８９３８６号公報（特許請求の範囲）
【特許文献２】特表２００２−５２８５６０号公報（特許請求の範囲）
【特許文献３】特開２００４−３３１５２８号公報（特許請求の範囲）
【特許文献４】特開２００８−２９７２１５号公報（特許請求の範囲，段落０００１）
【特許文献５】特開２００８−３０１８０１号公報（特許請求の範囲）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
上記のように、柿は多くの機能を有し、それらの機能を発揮する成分を含んでいるにもかかわらず、嗜好の高級化あるいは美観に劣るということで廃棄されている。
かかる現状に鑑み、発明者等は、規格外品、完熟品、さらには加工副産物など、さらには食されず、その殆どが捨てられる果皮を、産業廃棄物とすることなく、有効利用するため、鋭意研究の結果、精白ハトムギ粉末やタデから機能性組成物を作出する際に用いた、酢酸による抽出処理が、柿の有効成分の抽出にも有効であることを見出し、柿から新規な機能を有する成分を抽出し、さらに、それらを健康食品や医薬の原料としてより効率的に用いるべく検討を行った。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
すなわち、この発明の請求項１に記載の機能性組成物は、
細断又は粉砕した柿の果実又は柿の果皮を、酢酸が存在する水性液中に均一分散させたのち、固液分離して固体物および液状物を取得し、
得た固体物および液状物にそれぞれアルコールを加え、さらに固液分離して取得したアルコール可溶分からなること
特徴とするものである。
【００１２】
また、この発明の請求項２に記載の発明は、
請求項１に記載の機能性組成物において、
前記均一分散が、
ホモジネート状態であること
を特徴とするものである。
【００１３】
また、この発明の請求項３に記載の発明は、
請求項１又は２に記載の機能性組成物において、
前記アルコール可溶分が、
さらに、酢酸エチルの添加によって、酢酸エチルに不溶な成分が除去されていること
を特徴とするものである。
【００１４】
また、この発明の請求項４に記載の発明は、
請求項１〜３のいずれかに記載の機能性組成物において、
前記アルコールが、
メチルアルコール又はエチルアルコールであること
を特徴とするものである。
【００１５】
また、この発明の請求項５に記載の発明は、
請求項１〜３のいずれかに記載の機能性組成物において、
前記アルコールが、
５０％濃度のエチルアルコールであること
を特徴とするものである。
【００１６】
また、この発明の請求項６に記載の発明は、
請求項１〜５のいずれかに記載の機能性組成物において、
前記柿の果実又は果皮が、
遠赤外線処理の施されたものであること
を特徴とするものである。
【００１７】
また、この発明の請求項７に記載の発明は、
請求項１〜６のいずれかに記載の機能性組成物において、
前記アルコール可溶分が、
抗酸化活性、ラジカル捕捉活性および酵素阻害作用を有すること
を特徴とする機能性組成物である。
【００１８】
また、この発明の請求項８に記載の発明は、
請求項７に記載の機能性組成物において、
前記酵素阻害作用が、
α−グルコシターゼおよびリパーゼに対する阻害作用であること
を特徴とするものである。
【００１９】
また、この発明の請求項９に記載の発明は、
請求項１〜８のいずれかに記載の機能性組成物を含有すること
を特徴とする医薬である。
【００２０】
また、この発明の請求項１０に記載の発明は、
請求項１〜８のいずれかに記載の機能性組成物を含有すること
を特徴とする健康食品である。
【発明の効果】
【００２１】
この発明の機能性組成物は、以下のような優れた医学的効果を奏するもので、健康食品の素材として、また医薬の原料として、有効に利用されるものである。
１．抗酸化活性
２．ラジカル捕捉活性
３．α−グルコシターゼ阻害活性
４．リパーゼ阻害活性
【００２２】
また、この発明の機能性組成物は、粉末状態でも、アルコール（エタノール）溶液としても使用することができるため、上記のような効果を発現させるために、健康食品や医薬として利用する際に、効率的にまた効果的に活用することを可能とするものである。
【００２３】
また、この発明の機能性組成物によれば、廃棄されていた果実や果皮を含め、柿をさらに有効に活用することができる、産業廃棄物を減少させるという優れた効果を奏するのである。
【図面の簡単な説明】
【００２４】
【図１】細断富有柿から抽出された酢酸不溶・アルコール可溶の、機能性組成物のＨＰＬＣのチャート図である。
【図２】細断富有柿から抽出された酢酸可溶・アルコール可溶の、機能性組成物のＨＰＬＣのチャート図である。
【図３】細断富有柿から抽出された酢酸可溶・アルコール可溶の、機能性組成物のゲルクロマトグラフィー溶出パターンを示す図である。
【図４】細断富有柿から抽出された酢酸可溶・アルコール可溶の、機能性組成物のゲルクロマトグラフィーによる分画物の特性測定結果を示す図である。
【図５】甘柿の果皮から抽出された酢酸不溶・アルコール可溶の、機能性組成物のＨＰＬＣのチャート図である。
【図６】甘柿の果皮から抽出された酢酸可溶・アルコール可溶の、機能性組成物のＨＰＬＣのチャート図である。
【図７】甘柿の果実から抽出された酢酸不溶・アルコール可溶の、機能性組成物のＨＰＬＣのチャート図である。
【図８】甘柿の果実から抽出された酢酸・アルコール・酢酸エチル可溶の、機能性組成物のＨＰＬＣのチャート図である。
【図９】渋柿の果皮から抽出された酢酸不溶・アルコール可溶の、機能性組成物のＨＰＬＣのチャート図である。
【図１０】渋柿の果皮から抽出された酢酸可溶・アルコール・酢酸エチル可溶の、機能性組成物のＨＰＬＣのチャート図である。
【図１１】渋柿の果実から抽出された酢酸不溶・アルコール可溶の、機能性組成物のＨＰＬＣのチャート図である。
【図１２】渋柿の果実から抽出された酢酸可溶・アルコール・酢酸エチル可溶の、機能性組成物のＨＰＬＣのチャート図である。
【図１３】遠赤外線照射処理の施された渋柿の果実から抽出された酢酸不溶・アルコール可溶の、機能性組成物のＨＰＬＣのチャート図である。
【図１４】遠赤外線照射処理の施された渋柿の果実から抽出された酢酸可溶・アルコール・酢酸エチル可溶の、機能性組成物のＨＰＬＣのチャート図である。
【図１５】遠赤外線照射処理の施された渋柿の果皮から抽出された酢酸不溶・アルコール可溶の、機能性組成物のＨＰＬＣのチャート図である。
【図１６】遠赤外線照射処理の施された渋柿の果皮から抽出された酢酸可溶・アルコール・酢酸エチル可溶の、機能性組成物のＨＰＬＣのチャート図である。
【発明を実施するための形態】
【００２５】
この発明の機能性組成物は、柿の果実又は柿の果皮から分離・抽出されたものである。
使用する柿は、富有柿や次郎柿などの甘柿、八珍柿や西條柿などの渋柿のいずれでもよく、またそれらの果皮でもよい。
特に、この発明にとり好ましいのは、渋柿を干し柿にするために乾燥機として使用される遠赤外線乾燥器によって、遠赤外線照射処理の施された柿が好ましい。
前記遠赤外線乾燥器によって遠赤外線照射処理の施された柿からは、機能の著しく高められた組成物が得られる。
【００２６】
柿の遠赤外線照射処理は、干し柿を作成する条件と同じである。
具体的には、遠赤外線を４〜７日間、照射された柿の温度が上昇しないように、乾燥空気を送りながら、照射により器内温度が５０℃以上に上昇しないように行われる。
【００２７】
使用する柿は、生の果実であっても、干し柿状態になったものでもよい。
また、冷凍保存しておいてものの解凍品などでもよく、細断ないし粉砕された状態で、この発明に使用される。
【００２８】
この発明における機能性組成物の分離・抽出は、下記の工程で行なわれる。
まず、酢酸存在下の水性媒体中に、細断又は粉砕した柿の果実、もしくは柿の果皮を、均一に分散させ、特にはホモジネート状態とすることにより行われる。
用いられる酢酸としては、合成酢酸や醸造酢を濃縮した濃厚酢酸など９０％濃度の酢酸を初めに用いる。
ついで、水により酢酸を希釈しながら均一分散ないしホモジネートするのが好ましく、最終的に、均一分散状態における酢酸濃度を４．５％程度とするのが好ましい。
【００２９】
柿の果実および／または柿の果皮を、酢酸存在下の水性媒体中に均一分散ないしホモジネートするのは、酢酸水溶液による、有効組成物の分離・抽出のためである。
その際の条件としては、温度１０〜５０℃で０．５〜２時間で、攪拌しながら行うことが好ましく、それにより、目的とする抽出物が得られる。
【００３０】
このようにして均一分散ないしホモジネートされたものは、この発明の組成物を含め種々の成分からなる混合物であって、液状物と固形物からなるものである。
【００３１】
この発明においては、これら液状物と固形物とを遠心分離により分別したのち、得た液状物，固形物それぞれから、メチルアルコール又はエチルアルコールなどのアルコール、好ましくはエチルアルコール可溶分、より好ましくは５０％エチルアルコール可溶分を抽出分離し、この発明の機能性組成物とするものである。
【００３２】
アルコールによる可溶分の抽出・分離、さらには、そこから酢酸エチルに不溶な成分を分離除去の条件は、上記と同様に、温度１０〜５０℃で０．５〜２時間である。
【００３３】
上記の方法によって柿の果実および／または柿の果皮から得られた組成物について、高速液体クロマトグラフィーのチャート図を求めるとともに、下記の方法により、その特性を測定した。
【００３４】
＜抗酸化活性の測定方法＞
上記で得られた各組成物の抗酸化活性を、リノ−ル酸の酸化物がβ−カロチンを退色させる作用を利用したＭｉｌｌｅｒらの方法に準じ、以下の方法で測定した。
試料を分注した分光光度計用試験管セルに、リノ−ル酸−β−カロチン溶液を加えて攪拌し、温度５０℃の恒温槽で、２０分間反応させた場合のβ−カロチンの退色度を４７０ｎｍの吸光度によって求め、合成抗酸化剤ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）による吸光度の減少量を測定し、試料と同じ減少量を与えるＢＨＡの濃度によって、試料の抗酸化活性を表した。
【００３５】
＜ラジカル捕捉活性測定法＞
試料溶液に、等量のＤＰＰＨ（１，１−ジフェニル−２−ピクリルヒドラジル）溶液、ＭＥＳ緩衝液、２０％エタノールを加え、室温で２０分間反応させた後、５２０ｎｍでの吸光度を測定した。
その活性は、同様にして行ったアスコルビン酸（ＡｓＡ）で、ＤＰＰＨラジカル捕捉活性の検量線を作成し、試料ｇ当たりのラジカル捕捉活性を、ＡｓＡ当量（μｍｏｌ／ｇ又はｍｍｏｌ／ｇ）で表した。
【００３６】
＜酵素阻害活性測定方法＞
試薬溶液５０μｌ又は２５μｌに、小腸α−グルコシダーゼ溶液又は膵リパーゼ溶液２５μｌを加え、温度３７℃で１０分間インキュベートしたのち、４−メチルウンベリフェロンのα−D−グルコース又はオレイン酸エステル（基質）溶液２５μｌ又は５０μｌを添加してインキュベートした。
０．２モル濃度のNａ２  ＣＯ3  溶液又は０．１モル濃度のクエン酸緩衝液（ｐＨ４．２）を加えて反応を停止したのち、生成した４−メチルウンベリフェロンの蛍光度を４５０ｎｍで測定して阻害率を算出した。
【実施例１】
【００３７】
富有柿を水洗し、ヘタと種を除去して細断して得た細断柿実１ｋｇに、９０％酢酸２５０ｍｌを加え、水を加えながらホモゲナイズし、４ｌのホモジネートを得た。
さらに、このホモジネートを３０分間攪拌したのち、遠心分離（８，０００ｒｐｍ×１０分）して、沈殿物（固形物）と上清液（液状物）に分離した。
３５０ｇの沈殿物に、沈殿物中の水分を考慮してエタノール３００ｍｌと５０％エタノールを加え、均一に分散させ３０分間攪拌し、再度遠心分離を行ない、得られた上清液を減圧濃縮して、１１．４５ｇの抽出物（機能性組成物１ａ）を得た。
【００３８】
一方、前記ホモジネートされた上清液は、５００ｍｌまで減圧濃縮し、攪拌しながらエタノール５００ｍｌを加え、析出した沈殿を遠心分離で除去し、減圧濃縮により１３７．２ｇ（１５０ｍｌ）の抽出物（機能性組成物２ａ）を得た。
【００３９】
得られた機能性組成物１ａのＨＰＬＣのチャートは、図１に示される通りである。
その抗酸化活性は、ＢＨＡ相当量で３．２４ｍｇ／ｇ、ＤＰＰＨラジカル捕捉活性は、ＡｓＡ相当量で２１２μｍｏｌ／ｇであった。
【００４０】
同じく機能性組成物２ａのＨＰＬＣのチャートは、図２に示される通りである。
この機能性組成物２ｍｌを、Ｂｉｏ ＧｅｌＰ−１０カラム（２×２７．５ｃｍ）に供し、１％酢酸水溶液で展開したときの溶出パターンは図３に示される通りであった。
図３に示される画分５（収量５．３ｍｇ）、画分６（収量１．３ｍｇ）、画分７（収量０．８ｍｇ）、画分８（収量３．７ｍｇ）、画分９（収量０．７ｍｇ）および画分１０（収量１．２ｍｇ）の抗酸化活性およびＤＰＰＨラジカル捕捉活性は図４の通りであった。
【実施例２】
【００４１】
凍結乾燥した甘柿２個を少し温めたのち、包丁で剥いた皮６２．５ｇを用いた以外は、実施例１と同様に操作して、沈殿物からの５０％エタノールに可溶成分としての機能性組成物１ｂと、上清液からの５０％エタノールに可溶成分としての機能性組成物２ｂを、それぞれ収率０．５５６％、１５．４４％で得た。
前記機能性組成物１ｂ，機能性組成物２ｂのＨＰＬＣのチャートは、図５、図６に示される通りである。
抗酸化活性およびＤＰＰＨラジカル捕捉活性は、それぞれＢＨＡ相当量で１９．２と１８・９ｍｇ／ｇ、およびＡｓＡ相当量で３１７６と２８３μｍｏｌ／ｇであった。
【実施例３】
【００４２】
皮、種、ヘタを除去して細断した富有柿４６１ｇを用いた以外は、実施例１と同様に操作して、沈殿物からの５０％エタノールに可溶成分としての機能性組成物３ａと、上清液からの５０％エタノールに可溶成分としての機能性組成物３ｂを、それぞれ４０ｍｌのアルコール溶液、７５ｍｌの水溶液として得た。
【００４３】
前記機能性組成物３ｂ（７５ｍｌ）のうち１５ｍｌを、約８ｍｌの酢酸エチルを用いて４回抽出を行ない、それらを合わせて減圧濃縮して、酢酸エチルにより抽出して、酢酸エチル不溶分を除いた１．４ｍｇの機能性組成物３ｃを得た。
【００４４】
前記機能性組成物３ａおよび３ｃのＨＰＬＣのチャートは、図７，図８に示される通りで、機能性組成物３ａと機能性組成物３ｃの特性は、表１に示される通りである。
【実施例４】
【００４５】
下記の試料を用いた以外は、実施例３と同様に操作して、沈殿物からの５０％エタノールに可溶成分としての機能性組成物と、上清液からの５０％エタノールに可溶成分から酢酸エチル不溶分を除いた機能性組成物を得た。
試料１：渋柿の粉砕生皮
試料２：渋柿果実細断物
試料３：遠赤外線照射渋柿果実細断物
試料４：遠赤外線照射渋柿果皮粉砕物
抗酸化活性およびＤＰＰＨラジカル捕捉活性は、
なお、遠赤外線照射は、遠赤外線乾燥器で器内の温度が５０℃以下に保持されるように乾燥空気を流通させながら、１２０時間照射したものである。
【００４６】
前記試料１から得られた機能性組成物を、機能性組成物４ａと機能性組成物４ｃとし、
同様に試料２から得られたものを、機能性組成物５ａと機能性組成物５ｃ、
試料３から得られたものを、機能性組成物６ａと機能性組成物６ｃ、
試料４から得られたものを、機能性組成物７ａと機能性組成物７ｃ
とした。
それぞれのＨＰＬＣのチャートは、図９〜図１６に示される通りで、機能性組成物の収量と特性は、表１に示される通りである。
【００４７】
【表１】
2010184909.tif 000003
【産業上の利用可能性】
【００４８】
この発明の機能性組成物は、前記のような優れた特性を有し、かつ粉末ないし酢酸、又はエタノールの無毒の溶媒溶液として供給可能なため、健康食品産業や医薬業界で広く利用される可能性の高いものである。
【符号の説明】
【００４９】
なし
【図１】
2010184909.tif 000004
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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