(57)【要約】【課題】安全性の高い天然抽出物を有効成分とする抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤及びサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤、並びに当該天然抽出物を配合した皮膚化粧料、頭髪化粧料及び飲食品を提供する。【解決手段】本発明の抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤に、羅漢果の花部からの抽出物を含有せしめる。また、本発明の皮膚化粧料、頭髪化粧料又は飲食品に、羅漢果の花部からの抽出物を配合する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
羅漢果の花部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする抗酸化剤。
【請求項２】
前記羅漢果の花部からの抽出物が、活性酸素消去作用、過酸化水素消去作用及びラジカル消去作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を有することを特徴とする請求項１に記載の抗酸化剤。
【請求項３】
羅漢果の花部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする美白剤。
【請求項４】
羅漢果の花部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする抗炎症剤。
【請求項５】
前記羅漢果の花部からの抽出物が、一酸化窒素産生抑制作用、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）産生抑制作用、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用及び血小板凝集抑制作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を有することを特徴とする請求項４に記載の抗炎症剤。
【請求項６】
羅漢果の花部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする抗老化剤。
【請求項７】
前記羅漢果の花部からの抽出物が、エラスターゼ活性阻害作用、エストロゲン様作用、コラーゲン産生促進作用、ヒアルロン酸合成促進作用、表皮角化細胞増殖促進作用及び紫外線照射によるダメージ回復作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を有することを特徴とする請求項６に記載の抗老化剤。
【請求項８】
羅漢果の花部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする育毛剤。
【請求項９】
羅漢果の花部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする抗男性ホルモン剤。
【請求項１０】
羅漢果の花部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするアンドロゲン受容体結合阻害剤。
【請求項１１】
羅漢果の花部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする抗肥満剤。
【請求項１２】
羅漢果の花部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とするサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤。
【請求項１３】
羅漢果の花部からの抽出物を配合したことを特徴とする皮膚化粧料。
【請求項１４】
羅漢果の花部からの抽出物を配合したことを特徴とする頭髪化粧料。
【請求項１５】
羅漢果の花部からの抽出物を配合したことを特徴とする飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤及びサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤、並びに皮膚化粧料、頭髪化粧料及び飲食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、特に生体成分を酸化させる要因として、活性酸素が注目されており、その生体への悪影響が問題となっている。活性酸素は、生体細胞内のエネルギー代謝過程で生じるものであり、活性酸素としては、スーパーオキサイド（すなわち酸素分子の一電子還元で生じるスーパーオキシドアニオン：・Ｏ２−）、過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）、ヒドロキシラジカル（・ＯＨ）及び一重項酸素（１Ｏ２）等が挙げられる。これらの活性酸素は、食細胞の殺菌機構にとって必須であり、ウィルスや癌細胞の除去に重要な働きを果たしている。
【０００３】
しかしながら、活性酸素の過剰な生成は、生体内の膜や組織を構成する生体内分子を攻撃し、各種疾患を誘発する。通常、生体内で生産され、他の活性酸素の出発物質ともなっているスーパーオキサイドは、細胞内に含まれているスーパーオキサイドジスムターゼ（ＳＯＤ）の触媒作用により逐次消去されているが、スーパーオキサイドの産生が過剰である場合、又はＳＯＤの作用が低下している場合には、スーパーオキサイドの消去が不十分となり、スーパーオキサイド濃度が高くなり、これが関節リウマチやベーチェット病等の組織障害、心筋梗塞、脳卒中、白内障、しわ、糖尿病、動脈硬化、肩凝り、冷え性等を引き起こす。
【０００４】
特に、皮膚は、紫外線等の環境因子の刺激を直接受けることから、スーパーオキサイドが生成しやすい器官であるため、スーパーオキサイド濃度の上昇により、例えば、コラーゲン等の生体組織を分解し、変性し又は架橋したり、油脂類を酸化して細胞に障害を与える過酸化脂質を生成したりすると考えられており、活性酸素によって引き起こされる障害が、皮膚のしわ形成や皮膚の弾力低下等の老化の原因になるものと考えられている（非特許文献１参照）。したがって、活性酸素や生体内ラジカルの生成を阻害・抑制することにより、しわ形成や弾力低下等の皮膚の老化や、関節リウマチやベーチェット病等の組織障害、心筋梗塞、脳卒中、白内障、糖尿病、動脈硬化、肩凝り、冷え性等の活性酸素が関与する各種障害を予防、治療又は改善できるものと考えられる。
【０００５】
また、皮膚においてメラニンは、紫外線から生体を保護する役目も果たしているが、過剰生成や不均一な蓄積は、皮膚の黒化、シミ、ソバカス等の色素沈着の原因となる。一般にメラニンは、色素細胞（メラノサイト）の中で生合成される酵素チロシナーゼの働きによって、チロシンからドーパ、ドーパからドーパキノンに変化し、ついで５，６−ジヒドロキシインドフェノール等の中間体を経て形成されるものとされている。
【０００６】
このようなメラニン生成過程においては、皮膚に紫外線が照射されることによって皮膚の表皮細胞において発生する活性酸素が関与していることが示唆されている。すなわち、活性酸素によってメラノサイトが活性化されるとともに、チロシナーゼが活性化され、結果としてメラニンが生成される。したがって、メラニンの生成を抑制し、皮膚の黒化、シミ、ソバカス等の色素沈着を予防・改善するためには、表皮細胞における活性酸素を消去することが有効であると考えられている。
【０００７】
そこで、活性酸素消去物質、ラジカル消去物質等を安全性の点で有利な天然物から得る試みがなされており、このような作用を有するものとして、アブラナ科ブラシカ属植物からの抽出物（特許文献１参照）等が知られている。
【０００８】
一酸化窒素（ＮＯ）は、大気汚染、酸性雨等の要因となる窒素酸化物であるが、近年、この一酸化窒素が、血管内皮由来弛緩因子（ＥＤＲＦ）、神経伝達物質、生体防御における微生物・腫瘍細胞の障害因子等、生体内で多彩な機能を示す生理活性物質であることが見出されている。生体防御においては、特にマクロファージから産生される一酸化窒素が、細菌やウィルスの感染を防御している。
【０００９】
しかし、一酸化窒素が大量に生合成されると、生体にとって無毒ではなく、自己組織の破壊を引き起こし、炎症の悪化、リューマチ、糖尿病等の病態の原因となっている。また、大量に生合成された一酸化窒素が血管平滑筋の弛緩と過剰な透過性の増大をもたらし、著しい血圧の低下によってエンドトキシン・ショックを引き起こすことも知られている。
【００１０】
したがって、炎症性疾患においては、一酸化窒素の過剰な産生を抑制することが重要となる。一酸化窒素の産生抑制作用を有するものとして、例えば、ローズマリー抽出液、カルノソール、カルノシン酸、コーヒー豆の抽出液、サクラダソウ抽出液、オウレン抽出液、オウバク抽出液、カンゾウ抽出液、イヌノイバラ抽出液、センキュウ抽出液、トウニン抽出液、シャクヤク抽出液、ヨクイニン抽出液、アカブドウ抽出液（特許文献２参照）；唐独活、タラ根皮、和続断、車前子、遠子、茜草根、半枝連、槐花、花椒（非特許文献２参照）等が知られている。
【００１１】
また、炎症性の疾患、例えば、接触性皮膚炎（かぶれ）、乾癬、尋常性天疱瘡、その他肌荒れを伴う各種皮膚疾患等の原因や発症機構は多種多様であるが、その原因の一つとして、主にマクロファージから産生される腫瘍壊死因子（以下「ＴＮＦ−α」という）、ヒスタミン遊離、血小板凝集等によるものが知られている。
【００１２】
ＴＮＦ−αは、腫瘍を壊死させる因子として見出されたが、最近では腫瘍に対してだけでなく、正常細胞の機能を調節するメディエーター的な役割を担うサイトカインであると考えられている。ＴＮＦ−αは炎症の初発から終息までの過程において重要な役割を担っているが、その持続的かつ過剰な産生は、皮膚を含めた組織の障害を引き起こし、全身的には発熱やカケクシアの原因となり、炎症の悪化を引き起こす。そのような炎症としては、例えば、関節リューマチ、変形性関節症などの慢性炎症性疾患が代表的である。したがって、病的な炎症においてはＴＮＦ−αの過剰な産生を抑制することが重要となる。ＴＮＦ−α産生抑制作用を有するものとしては、ヒルガオ科ヨウサイからの抽出物等が知られている（特許文献３参照）。
【００１３】
また、ヒスタミンが遊離されると同時に、ヘキソサミニダーゼも遊離されることから、ヘキソサミニダーゼの遊離を指標にヒスタミン遊離抑制作用を評価することができる。したがって、ヘキソサミニダーゼの遊離を抑制することにより、同時にヒスタミンの遊離も抑制でき、これにより炎症性疾患等の予防、治療又は改善に効果があるものと考えられる。ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用を有する植物抽出物としては、藤茶からの抽出物（特許文献４参照）等が知られている。
【００１４】
血小板は、凝集して活性化することにより、生理的には止血、病理的には血栓形成を生じる他、血小板の凝集は、動脈硬化の進展、がん転移、炎症等に関与していると考えられている。したがって、血小板の凝集を抑制することにより、上記疾患の予防、治療又は改善が期待できる。血小板凝集抑制作用を有する植物抽出物としては、地衣類雪茶からの抽出物（特許文献５参照）等が知られている。
【００１５】
皮膚の真皮・表皮は、表皮細胞、線維芽細胞及びこれらの細胞の外にあって皮膚構造を支持するエラスチン、コラーゲン、ヒアルロン酸等の真皮細胞外マトリックスによって構成されており、若い皮膚においてはこれらの皮膚組織が恒常性を維持することにより水分保持、柔軟性、弾力性等が確保され、肌は外見的にも張りや艶があってみずみずしい状態に維持される。ところが、紫外線の照射、空気の著しい乾燥、過度の皮膚洗浄等、ある種の外的因子の影響があったり、加齢が進んだりすることによって、真皮細胞外マトリックスの主要構成成分であるエラスチン、コラーゲン、ヒアルロン酸等の産生量が減少するとともに、変性や分解を引き起こす。その結果、角質は異常剥離を始め、肌は張りや艶を失い、肌荒れやシワ等の老化症状を呈するようになる。このように、皮膚の老化に伴う変化、すなわち、シワの形成、張りの消失、弾力性の低下等には、エラスチン、コラーゲン、ヒアルロン酸等の真皮細胞外マトリックス成分の減少、変性が関与している。そのため、皮膚の老化を予防・改善するためには、これらのエラスチン、コラーゲン、ヒアルロン酸等の真皮細胞外マトリックス成分の産生量を増加させることが重要となる。
【００１６】
エラスチンは、皮膚組織に弾力性を与える線維であり、加齢等に伴ってエラスチンが分解されると皮膚の張りが失われるとともに、弾力性が低下する。エラスチンを分解する酵素であるエラスターゼは、紫外線の照射により活性化され、これによりエラスチンの分解が加速し、皮膚の張りが失われるとともに、弾力性が低下する。そのため、エラスターゼの活性を阻害することによりエラスチンの分解が抑制され、張りの消失、弾力性の低下等の皮膚の老化症状を予防・改善できると考えられる。従来、エラスターゼ阻害作用を有する生薬として、スターフルーツ果実抽出物が知られている（特許文献６参照）。
【００１７】
また、従来、コラーゲン産生促進作用を有するものとしては、加水分解カゼイン、ブナの芽、エリスリナ、可溶性卵殻膜、カッコン、西洋キヅタよりなる群から選ばれる植物及び動物由来の抽出物等が知られている（特許文献７参照）。
【００１８】
加齢に伴う皮膚老化の一因は、女性ホルモンの一種であるエストロゲンの分泌が減退することにある。すなわち、エストロゲンは成人女性の健康維持に深く関わっており、その分泌不足は種々の内科的疾患を招くほか、肌の過敏症、弾力性の低下、潤いの減少等、好ましくない肌の変化の原因となったり、閉経後の女性等におけるエストロゲンの欠乏は、冠動脈性心臓疾患や骨粗鬆症の原因となったりすることが知られている。
【００１９】
そこで、エストロゲンの分泌が衰える更年期以降の女性に対して、エストロゲンと同様の作用を有する物質を配合した薬剤を、経皮的又は経口的に投与することが行われている。このようなエストロゲン様作用を有するものとしては、例えば、フロリジン及びフロレチン（特許文献８参照）等が知られている。
【００２０】
角質層は皮膚の最外殻に存在しており、外界からの刺激に対する物理的なバリアとしての役割を果たしている。皮膚ではこのバリア機能を持たせるため、角化細胞が基底層で産生されてから垢となって剥がれ落ちるまでのサイクル（角化）を通常４週間の周期で繰り返し、表皮の新陳代謝を行っている。しかしながら、この角質層も加齢によって新陳代謝機能が衰え、こじわ、くすみ、色素沈着、肌荒れ等の皮膚トラブルを発生することになる。そのため、角化細胞の増殖を促進し、肌の新陳代謝機能を回復させることにより、こじわ、くすみ、色素沈着等の皮膚の老化を改善できるものと考えられる。このような考えに基づき、表皮角化細胞増殖促進作用を有するものとして、ハス胚芽抽出物（特許文献９参照）等が知られている。
【００２１】
皮膚に紫外線が照射されると、皮膚の細胞は障害を受けたり、細胞死が引き起こされたりし、肌は張りや弾力を失い、肌荒れ、シワ等の老化症状を呈するようになる。したがって、紫外線の照射によるダメージ（例えば、細胞障害、細胞死等）を抑制・回復することによって、皮膚の老化の予防・改善が期待できる。紫外線照射によるダメージ回復作用を有するものとして、例えば、油溶性甘草抽出物（特許文献１０参照）等が知られている。
【００２２】
多くのステロイドホルモンは産生臓器から分泌された分子型で受容体と結合してその作用を発現するが、アンドロゲンと総称される男性ホルモンの場合、例えば、テストステロンは標的臓器の細胞内に入ってテストステロン５α−レダクターゼにより５α−ジヒドロテストステロン（５α−ＤＨＴ）に還元されてから受容体と結合し、アンドロゲンとしての作用を発現する。
【００２３】
アンドロゲンは重要なホルモンであるが、それが過度に作用すると、男性型脱毛症、多毛症、脂漏症、座瘡（ニキビ等）、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等、さまざまな好ましくない症状を誘発する。そこで、従来から、これらの各種症状を改善するために過剰のアンドロゲンの作用を抑制する方法、具体的には、テストステロンから生じた５α−ＤＨＴが受容体と結合するのを阻害することによりアンドロゲン活性を発現させない方法等が知られている。
【００２４】
従来、アンドロゲン受容体結合阻害作用を有するものとしては、例えば、マジト及び／又はカチュアの抽出物（特許文献１１参照）等が知られている。
【００２５】
近年、飽食や運動不足等の生活習慣が原因となって体脂肪が増加し、肥満が増えている。このような肥満の増加は、人間ばかりでなく、ペットや家畜においても見られる。肥満は、高脂血症や動脈硬化等の成人病の原因になるため、美容の面で問題となるばかりでなく、健康の面でも大きな問題となる。
【００２６】
生体内の脂肪を分解するためには、サイクリックＡＭＰの役割が重要となる。サイクリックＡＭＰは生体内に存在するリパーゼを活性化し、活性化されたリパーゼによって脂肪が脂肪酸とグリセロールとに分解される。しかし、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼが活性化されるとサイクリックＡＭＰの分解が誘発され、リパーゼの活性化が阻害される。そのため、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼの活性を阻害することにより細胞内におけるサイクリックＡＭＰが増量し、脂肪の分解を促進することができるものと考えられる。このようなサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用を有するものとして、ピーナッツ渋皮抽出物（特許文献１２参照）等が知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００２７】
【特許文献１】特開２００３−８１８４８号公報
【特許文献２】特開２００２−８７９７５号公報
【特許文献３】特開２００４−２５０３４４号公報
【特許文献４】特開２００３−１２５３２号公報
【特許文献５】特開２００５−８２５３２号公報
【特許文献６】特開２００３−３００８９３号公報
【特許文献７】特開２００４−１８４７１号公報
【特許文献８】特開２００７−１０６７１２号公報
【特許文献９】特開２００２−６８９９３号公報
【特許文献１０】特開２００４−２５０３６８号公報
【特許文献１１】特開２００２−２４１２９７号公報
【特許文献１２】特開２００４−２６７１９号公報
【非特許文献】
【００２８】
【非特許文献１】「フレグランスジャーナル臨時増刊」，1995年，No.14，p.156
【非特許文献２】「和漢医薬学雑誌」，1998年，Vol.15，p.302-303
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２９】
本発明は、安全性の高い天然抽出物及び／又は天然抽出物由来成分を有効成分とする抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤及びサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤、並びに当該天然抽出物及び／又は当該天然抽出物由来成分を配合した皮膚化粧料、頭髪化粧料及び飲食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００３０】
上記目的を達成するために、本発明の抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤は、羅漢果の花部からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。
【００３１】
また、本発明の皮膚化粧料、頭髪化粧料又は飲食品は、羅漢果の花部からの抽出物を配合したことを特徴とする。
【００３２】
本発明の抗酸化剤においては、前記羅漢果の花部からの抽出物が、活性酸素消去作用、過酸化水素消去作用及びラジカル消去作用からなる群より選択される１種又は２種以上の作用を有するのが好ましい。
【００３３】
また、本発明の抗炎症剤においては、前記羅漢果の花部からの抽出物が、一酸化窒素産生抑制作用、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）産生抑制作用、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用及び血小板凝集抑制作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を有するのが好ましい。
【００３４】
さらに、本発明の抗老化剤においては、前記羅漢果の花部からの抽出物が、エラスターゼ活性阻害作用、エストロゲン様作用、コラーゲン産生促進作用、ヒアルロン酸合成促進作用、表皮角化細胞増殖促進作用及び紫外線照射によるダメージ回復作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を有するのが好ましい。
【００３５】
ここで、本発明において「アンドロゲン受容体結合阻害」とは、５α−ＤＨＴとアンドロゲン受容体との結合の阻害を意味し、その阻害様式は特に限定されるものではなく、例えば、競合的拮抗薬、非競合的拮抗薬といったアンタゴニストとしての阻害が考えられる。
【発明の効果】
【００３６】
本発明によれば、天然物である羅漢果の花部からの抽出物を有効成分として含有し、安全性の高い抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤、皮膚化粧料、頭髪化粧料及び飲食品を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００３７】
以下、本発明の一実施形態について説明する。
〔抗酸化剤，美白剤，抗炎症剤，抗老化剤，育毛剤，抗男性ホルモン剤，アンドロゲン受容体結合阻害剤，抗肥満剤，サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤〕
本実施形態の抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤は、羅漢果の花部からの抽出物を有効成分として含有する。
【００３８】
ここで、本実施形態において「抽出物」には、羅漢果（学名：Momordica grosvenorii）の花部を抽出原料として得られる抽出液、当該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００３９】
羅漢果（Momordica grosvenorii）は、ウリ科に属するつる性の多年草であって、中国の江西地方、広西地方、広東地方等に分布しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用する羅漢果の構成部位は花部である。ここで、「花」とは、一般に、種子植物の有性生殖にかかわる器官の総体をいい、葉の変形である花葉と茎の変形である花軸とから構成され、花葉には、萼、花弁、雄しべ、心皮等の器官が含まれる。本実施形態において抽出原料として使用する「花部」には、種子植物の有性生殖にかかわる器官の総体の他、その一部、例えば、花葉、花被（萼と花冠）、花冠、花弁等も含まれる。
【００４０】
羅漢果の花部からの抽出物は、抽出原料を乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用いて粉砕し、抽出溶媒による抽出に供することにより得ることができる。この際、抽出原料の乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機により行ってもよい。また、ヘキサン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、抽出原料の極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００４１】
抽出溶媒としては、極性溶媒を使用するのが好ましく、例えば、水、親水性有機溶媒等が挙げられ、これらを単独で又は２種以上を組み合わせて、室温又は溶媒の沸点以下の温度で使用することが好ましい。
【００４２】
抽出溶媒として使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本実施形態において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００４３】
抽出溶媒として使用し得る親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられる。
【００４４】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族アルコール１〜９０容量部を混合することが好ましく、水と低級脂肪族ケトンとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族ケトン１〜４０容量部を混合することが好ましく、水と多価アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して多価アルコール１０〜９０容量部を混合することが好ましい。
【００４５】
抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定はされず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）の抽出溶媒に、抽出原料を浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。
【００４６】
精製は、例えば、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等により行うことができる。得られた抽出液はそのままでも抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤の有効成分として使用することができるが、濃縮液又は乾燥物としたものの方が使用しやすい。
【００４７】
羅漢果の花部からの抽出物は、特有の匂いを有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、皮膚化粧料、頭髪化粧料又は飲食品に配合する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。
【００４８】
上記のようにして得られる羅漢果の花部からの抽出物は、抗酸化作用、美白作用、抗炎症作用、抗老化作用、育毛作用、抗男性ホルモン作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、抗肥満作用又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用を有しているため、それぞれの作用を利用して抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤の有効成分として用いることができる。
【００４９】
羅漢果の花部からの抽出物が有する抗酸化作用は、例えば、活性酸素消去作用、過酸化水素消去作用及びラジカル消去作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用に基づいて発揮される。ただし、羅漢果の花部からの抽出物が有する抗酸化作用は、これらの作用に基づいて発揮される抗酸化作用に限定されるものではない。
【００５０】
羅漢果の花部からの抽出物が有する美白作用は、例えば、活性酸素消去作用に基づいて発揮される。ただし、羅漢果の花部からの抽出物が有する美白作用は、この作用に基づいて発揮される美白作用に限定されるものではない。
【００５１】
羅漢果の花部からの抽出物が有する抗炎症作用は、例えば、一酸化窒素産生抑制作用、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）産生抑制作用、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用及び血小板凝集抑制作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用に基づいて発揮される。ただし、羅漢果の花部からの抽出物が有する抗炎症作用は、これらの作用に基づいて発揮される抗炎症作用に限定されるものではない。
【００５２】
羅漢果の花部からの抽出物が有する抗老化作用は、例えば、エラスターゼ活性阻害作用、エストロゲン様作用、コラーゲン産生促進作用、ヒアルロン酸合成促進作用、表皮角化細胞増殖促進作用及び紫外線照射によるダメージ回復作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用に基づいて発揮される。ただし、羅漢果の花部からの抽出物が有する抗老化作用は、これらの作用に基づいて発揮される抗老化作用に限定されるものではない。
【００５３】
羅漢果の花部からの抽出物が有する育毛作用又は抗男性ホルモン作用は、例えば、アンドロゲン受容体結合阻害作用に基づいて発揮される。ただし、羅漢果の花部からの抽出物が有する育毛作用又は抗男性ホルモン作用は、この作用に基づいて発揮される育毛作用又は抗男性ホルモン作用に限定されるものではない。
【００５４】
羅漢果の花部からの抽出物が有する抗肥満作用は、例えば、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用に基づいて発揮される。ただし、羅漢果の花部からの抽出物が有する抗肥満作用は、この作用に基づいて発揮される抗肥満作用に限定されるものではない。
【００５５】
なお、羅漢果の花部からの抽出物は、活性酸素消去作用、過酸化水素消去作用、ラジカル消去作用、一酸化窒素産生抑制作用、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）産生抑制作用、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用、血小板凝集抑制作用、エラスターゼ活性阻害作用、エストロゲン様作用、コラーゲン産生促進作用、ヒアルロン酸合成促進作用、表皮角化細胞増殖促進作用又は紫外線照射によるダメージ回復作用を有するため、それらの作用を利用して、活性酸素消去剤、過酸化水素消去剤、ラジカル消去剤、一酸化窒素産生抑制剤、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）産生抑制剤、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制剤、血小板凝集抑制剤、エラスターゼ活性阻害剤、エストロゲン様作用剤、コラーゲン産生促進剤、ヒアルロン酸合成促進剤、表皮角化細胞増殖促進剤又は紫外線照射によるダメージ回復作用剤の有効成分として使用してもよい。
【００５６】
本実施形態の抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤は、羅漢果の花部からの抽出物のみからなるものであってもよいし、羅漢果の花部からの抽出物を製剤化したものであってもよい。
【００５７】
羅漢果の花部からの抽出物は、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、錠剤状、液状等の任意の剤形に製剤化することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯臭剤等を用いることができる。また、羅漢果の花部からの抽出物は、他の組成物（例えば、皮膚化粧料、頭髪化粧料、飲食品等）に配合して使用することができる。
【００５８】
なお、本実施形態の抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤は、必要に応じて、抗酸化作用、美白作用、抗炎症作用、抗老化作用、育毛作用、抗男性ホルモン作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、抗肥満作用又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用を有する他の天然抽出物等を配合して有効成分として用いることができる。
【００５９】
本実施形態の抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤の投与方法としては、一般に経皮投与、経口投与等が挙げられるが、疾患の種類に応じて、その予防・治療等に好適な方法を適宜選択すればよい。
【００６０】
また、本実施形態の抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤の投与量も、疾患の種類、重症度、患者の個人差、投与方法、投与期間等によって適宜増減すればよい。
【００６１】
本実施形態の抗酸化剤は、羅漢果の花部からの抽出物が有する活性酸素消去作用、過酸化水素消去作用及びラジカル消去作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を通じて、しわ形成や弾力低下等の皮膚の老化や、関節リウマチやベーチェット病等の組織障害、心筋梗塞、脳卒中、白内障、糖尿病、動脈硬化、肩凝り、冷え性等の活性酸素が関与する各種障害を予防・改善することができる。ただし、本実施形態の抗酸化剤は、これらの用途以外にも活性酸素消去作用、過酸化水素消去作用及びラジカル消去作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００６２】
本実施形態の美白剤は、羅漢果の花部からの抽出物が有する活性酸素消去作用を通じて、皮膚の黒化、シミ、ソバカス等の色素沈着を予防・改善することができる。ただし、本実施形態の美白剤は、これらの用途以外にも活性酸素消去作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００６３】
本実施形態の抗炎症剤は、羅漢果の花部からの抽出物が有する一酸化窒素産生抑制作用、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）産生抑制作用、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用及び血小板凝集抑制作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を通じて、接触性皮膚炎（かぶれ）、乾癬、尋常性天疱瘡、その他肌荒れを伴う各種炎症性皮膚疾患等を予防・改善することができる。ただし、本実施形態の抗炎症剤は、これらの用途以外にも一酸化窒素産生抑制作用、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α）産生抑制作用、ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用及び血小板凝集抑制作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００６４】
本実施形態の抗老化剤は、羅漢果の花部からの抽出物が有するエラスターゼ活性阻害作用、エストロゲン様作用、コラーゲン産生促進作用、ヒアルロン酸合成促進作用、表皮角化細胞増殖促進作用及び紫外線照射によるダメージ回復作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を通じて、皮膚の老化症状等を予防・改善することができる。ただし、本実施形態の抗老化剤は、これらの用途以外にもエラスターゼ活性阻害作用、エストロゲン様作用、コラーゲン産生促進作用、ヒアルロン酸合成促進作用、表皮角化細胞増殖促進作用及び紫外線照射によるダメージ回復作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００６５】
本実施形態の育毛剤は、羅漢果の花部からの抽出物が有するアンドロゲン受容体結合阻害作用を通じて、男性型脱毛症、多毛症、脂漏症、座瘡（ニキビ等）、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等を予防、治療又は改善することができ、特に男性型脱毛症の予防、治療又は改善に好適である。ただし、本実施形態の育毛剤は、これらの用途以外にもアンドロゲン受容体結合阻害作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００６６】
本実施形態の抗男性ホルモン剤は、羅漢果の花部からの抽出物が有するアンドロゲン受容体結合阻害作用を通じて、男性ホルモンが関与する疾患、例えば、男性型脱毛症、多毛症、脂漏症、座瘡（ニキビ等）、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等を予防、治療又は改善することができる。ただし、本実施形態の抗男性ホルモン剤は、これらの用途以外にもアンドロゲン受容体結合阻害作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００６７】
本実施形態のアンドロゲン受容体結合阻害剤は、羅漢果の花部からの抽出物が有するアンドロゲン受容体結合阻害作用を通じて、男性型脱毛症、多毛症、脂漏症、座瘡（ニキビ等）、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等を予防、治療又は改善することができる。ただし、本実施形態のアンドロゲン受容体結合阻害剤は、これらの用途以外にもアンドロゲン受容体結合阻害作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００６８】
本実施形態の抗肥満剤は、羅漢果の花部からの抽出物が有するサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用を通じて、サイクリックＡＭＰの産生を促進し、脂肪細胞の分解をすることができ、この結果、肥満症、それに伴う動脈硬化、糖尿病、メタボリック症候群等の様々な疾病を予防・改善することができる。ただし、本実施形態の抗肥満剤は、これらの用途以外にもサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００６９】
本実施形態のサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤は、羅漢果の花部からの抽出物が有するサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用を通じて、サイクリックＡＭＰの産生を促進し、脂肪細胞の分解を促進することができ、この結果、肥満症、それに伴う動脈硬化、糖尿病、メタボリック症候群等の様々な疾病を予防・改善することができる。ただし、本実施形態のサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害剤は、これらの用途以外にもサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ阻害作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００７０】
〔皮膚化粧料，頭髪化粧料〕
羅漢果の花部からの抽出物は、抗酸化作用、美白作用、抗炎症作用、抗老化作用、育毛作用、抗男性ホルモン作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、抗肥満作用又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用を有しており、皮膚又は頭髪（頭皮）に適用した場合の使用感又は安全性に優れているため、皮膚化粧料又は頭髪化粧料に配合するのに好適である。
【００７１】
この場合において、皮膚化粧料又は頭髪化粧料には、羅漢果の花部からの抽出物をそのまま配合してもよいし、羅漢果の花部からの抽出物から製剤化した抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤を配合してもよい。
【００７２】
羅漢果の花部からの抽出物、又は当該羅漢果の花部からの抽出物から製剤化した抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤若しくはサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤を配合することにより、皮膚化粧料又は頭髪化粧料に抗酸化作用、美白作用、抗炎症作用、抗老化作用、育毛作用、抗男性ホルモン作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、抗肥満作用又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用を付与することができる。
【００７３】
羅漢果の花部からの抽出物を配合し得る皮膚化粧料又は頭髪化粧料の種類は特に限定されるものではなく、皮膚化粧料としては、例えば、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、ファンデーション等が挙げられ、また、頭髪化粧料としては、例えば、ヘアトニック、ヘアクリーム、ヘアリキッド、シャンプー、ポマード、リンス等が挙げられる。
【００７４】
羅漢果の花部からの抽出物を皮膚化粧料又は頭髪化粧料に配合する場合、その配合量は、皮膚化粧料又は頭髪化粧料の種類に応じて適宜調整することができるが、好適な配合率は、標準的な抽出物に換算して約０．０００１〜１０質量％であり、特に好適な配合率は、標準的な抽出物に換算して約０．００１〜１質量％である。
【００７５】
本実施形態の皮膚化粧料又は頭髪化粧料は、羅漢果の花部からの抽出物が有する抗酸化作用、美白作用、抗炎症作用、抗老化作用、育毛作用、抗男性ホルモン作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、抗肥満作用又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用を妨げない限り、通常の皮膚化粧料又は頭髪化粧料の製造に用いられる主剤、助剤又はその他の成分、例えば、収斂剤、殺菌・抗菌剤、紫外線吸収剤、保湿剤、細胞賦活剤、消炎・抗アレルギー剤、抗酸化・活性酸素除去剤、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、香料等を併用することができる。このように併用することで、より一般性のある製品となり、また、併用された上記成分との間の相乗作用が通常期待される以上の優れた使用効果をもたらすことがある。
【００７６】
本実施形態の皮膚化粧料は、高い安全性を有しており、かつ抗酸化作用、美白作用、抗炎症作用、抗老化作用、抗男性ホルモン作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、抗肥満作用及びサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を通じて、しわ形成や弾力低下等の皮膚の老化や、関節リウマチやベーチェット病等の組織障害、心筋梗塞、脳卒中、白内障、糖尿病、動脈硬化、肩凝り、冷え性等の活性酸素が関与する各種障害；皮膚の黒化、シミ、ソバカス等の色素沈着；接触性皮膚炎（かぶれ）、乾癬、尋常性天疱瘡、その他肌荒れを伴う各種炎症性皮膚疾患；皮膚の老化症状；脂漏症、座瘡（ニキビ等）、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟；肥満症、肥満症に伴う動脈硬化、糖尿病、メタボリック症候群等を予防、治療又は改善することができる。また、本実施形態の頭髪化粧料は、高い安全性を有しており、かつ育毛作用、抗男性ホルモン作用及びアンドロゲン受容体結合阻害作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を通じて、男性型脱毛症等を予防、治療又は改善することができる。
【００７７】
〔飲食品〕
羅漢果の花部からの抽出物は、抗酸化作用、美白作用、抗炎症作用、抗老化作用、育毛作用、抗男性ホルモン作用、アンドロゲン受容体結合阻害作用、抗肥満作用又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用を有しており、消化管で消化されるようなものではないことが確認されており、安全性にも優れているため、飲食品に配合するのに好適である。
【００７８】
この場合に、羅漢果の花部からの抽出物をそのまま配合してもよいし、羅漢果の花部からの抽出物から製剤化した抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤を配合してもよい。
【００７９】
羅漢果の花部からの抽出物、又は羅漢果の花部からの抽出物から製剤化した抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤若しくはサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤を飲食品に配合する場合、それらにおける有効成分の配合量は、使用目的、症状、性別等を考慮して適宜変更することができるが、添加対象飲食品の一般的な摂取量を考慮して、成人１日あたりの抽出物摂取量が約１〜１０００ｍｇになるようにするのが好ましい。
【００８０】
本実施形態の飲食品は、羅漢果の花部からの抽出物をその活性を妨げないような任意の飲食品に配合したものであってもよいし、羅漢果の花部からの抽出物を主成分とする栄養補助食品であってもよい。
【００８１】
本実施形態の飲食品を製造する際には、例えば、デキストリン、デンプン等の糖類；ゼラチン、大豆タンパク、トウモロコシタンパク等のタンパク質；アラニン、グルタミン、イソロイシン等のアミノ酸類；セルロース、アラビアゴム等の多糖類；大豆油、中鎖脂肪酸トリグリセリド等の油脂類などの任意の助剤を添加して任意の形状の飲食品にすることができる。
【００８２】
羅漢果の花部からの抽出物を配合し得る飲食品は特に限定されないが、その具体例としては、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料（これらの飲料の濃縮原液及び調整用粉末を含む）；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓；そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、しゅうまいの皮、中華麺、即席麺等の麺類；飴、チューインガム、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳等の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品；ソース、たれ等の調味料；スープ、シチュー、サラダ、惣菜、漬物；その他種々の形態の健康・栄養補助食品；錠剤、カプセル剤、ドリンク剤などが挙げられ、これらの飲食品に羅漢果の花部からの抽出物を配合するときに、通常用いられる補助的な原料や添加物を併用することができる。
【００８３】
なお、本実施形態の抗酸化剤、美白剤、抗炎症剤、抗老化剤、育毛剤、抗男性ホルモン剤、アンドロゲン受容体結合阻害剤、抗肥満剤、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤、皮膚化粧料、頭髪化粧料又は飲食品は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。
【実施例】
【００８４】
以下、製造例、試験例及び配合例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の各例に何ら制限されるものではない。
【００８５】
〔製造例１〕羅漢果花部水抽出物の製造
羅漢果の花部の乾燥物１０１ｇに水１０００ｍＬを加え、還流抽出器で８０℃にて３時間加熱抽出し、熱時濾過した。残渣についてさらに同様の抽出処理をした。得られた抽出液を合わせて減圧下で濃縮し、さらに乾燥して羅漢果花部水抽出物３５．６ｇを得た（試料１）。
【００８６】
〔製造例２〕羅漢果花部５０％エタノール抽出物の製造
羅漢果の花部の乾燥物を１１６ｇ使用するとともに、抽出溶媒として５０容量％エタノール（水とエタノールとの容量比＝１：１）を使用した以外は製造例１と同様にして、羅漢果花部５０％エタノール抽出物３１．２ｇを得た（試料２）。
【００８７】
〔製造例３〕羅漢果花部８０％エタノール抽出物の製造
羅漢果の花部の乾燥物を１１１ｇ使用するとともに、抽出溶媒として８０容量％エタノール（水とエタノールとの容量比＝１：４）を使用した以外は製造例１と同様にして、羅漢果花部８０％エタノール抽出物２３．３ｇを得た（試料３）。
【００８８】
〔試験例１〕スーパーオキサイド消去作用試験（ＮＢＴ法）
製造例１〜３により得られた羅漢果花部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにしてスーパーオキサイド消去作用を試験した。
【００８９】
試験管に、０．０５ＭのＮａ２ＣＯ３緩衝液（ｐＨ１０．２）を２．４ｍＬ、並びに３ｍＭのキサンチン、３ｍＭのＥＤＴＡ、ウシ血清アルブミン溶液及び０．７５ｍＭのＮＢＴ（nitroblue tetrazolium）を０．１ｍＬずつ加え、これに試料溶液（試料１〜３，試料濃度は下記表１を参照）０．１ｍＬを添加し、２５℃で１０分間放置した。放置後、酵素溶液としてのキサンチンオキシダーゼ溶液を加えて素早く攪拌し、２５℃で２０分間反応させた。その後、６ｍＭの塩化銅０．１ｍＬを加えて反応を停止させて、波長５６０ｎｍにおける吸光度を測定した。
【００９０】
酵素溶液を添加しない場合についても、同様の操作と吸光度の測定を行い、さらに、試料溶液を添加せずに蒸留水を添加した場合についても同様の測定を行った。得られた結果から、下記式によりスーパーオキサイド消去率（％）を算出した。
【００９１】
スーパーオキサイド消去率(％)＝{１−(Ａ−Ｂ)／(Ｃ−Ｄ)}×１００
式中、Ａは「酵素溶液添加・試料溶液添加時の吸光度」を表し、Ｂは「酵素溶液無添加・試料溶液添加時の吸光度」を表し、Ｃは「酵素溶液添加・試料溶液無添加時の吸光度」を表し、Ｄは「酵素溶液無添加・試料溶液無添加時の吸光度」を表す。
結果を表１に示す。
【００９２】
【表１】
2010184873.tif 000002
【００９３】
表１に示すように、羅漢果花部抽出物（試料１〜３）は、優れたスーパーオキサイド消去作用（活性酸素消去作用）を有することが確認された。特に、羅漢果花部５０％エタノール抽出物（試料２）は、優れたスーパーオキサイド消去作用（活性酸素消去作用）を有することが確認された。
【００９４】
〔試験例２〕過酸化水素消去作用試験
製造例１〜３により得られた羅漢果花部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにして過酸化水素消去作用を試験した。
【００９５】
１．５ｍＭの過酸化水素溶液１０μＬに試料溶液（試料１〜３）１０μＬを加え、３７℃で２０分間反応させた後、発色溶液（１００ｍＭのＤＡ−６４（和光純薬社製）、０．５質量％トライトンＸ−１００を含有する０．１ＭのＰＩＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．０）１００ｍＬに１００ｕｎｉｔｓ／ｍＬのペルオキシダーゼ１ｍＬを添加し、全量を１００ｍＬに調整したもの）２．９８ｍＬを添加し、３７℃で５分間インキュベートした。その後、波長７２７ｎｍにおける吸光度を測定した。
【００９６】
過酸化水素の標準溶液を添加していない場合についても、同様の操作と吸光度測定を行い、さらに、試料溶液を添加せずに蒸留水を添加した場合についても同様の測定を行った。得られた結果から、下記式により過酸化水素消去率（％）を算出した。次に、試料濃度を段階的に減少させて、上記過酸化水素消去率（％）を算出し、過酸化水素の消去率が５０％になる試料濃度ＩＣ５０（μｇ／ｍＬ）を内挿法により求めた。
【００９７】
過酸化水素消去率(％)＝{１−(Ａ−Ｂ)／(Ｃ−Ｄ)}×１００
上記式において、Ａは「過酸化水素標準溶液添加・試料溶液添加時の吸光度」を、Ｂは「過酸化水素標準溶液無添加・試料溶液添加時の吸光度」を、Ｃは「過酸化水素標準溶液添加・試料溶液無添加時の吸光度」を表し、Ｄは「過酸化水素標準溶液無添加・試料溶液無添加時の吸光度」を表す。
結果を表２に示す。
【００９８】
【表２】
2010184873.tif 000003
【００９９】
表２に示すように、羅漢果花部抽出物（試料１〜３）は、優れた過酸化水素消去作用を有することが確認された。特に、羅漢果花部５０％エタノール抽出物（試料２）は、優れた過酸化水素消去作用を有することが確認された。また、過酸化水素消去作用の程度は、羅漢果花部抽出物の濃度によって調節できることが確認された。
【０１００】
〔試験例３〕ラジカル消去作用試験
製造例１〜３により得られた羅漢果花部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにしてラジカル消去作用を試験した。
【０１０１】
１．５×１０−４ＭのＤＰＰＨ（diphenyl-p-picrylhydrazyl）エタノール溶液３ｍＬに試料溶液（試料１〜３）３ｍＬを加え密栓した後、振り混ぜて３０分間放置した。放置後、波長５２０ｎｍにおける吸光度を測定した。コントロールとして、試料溶液の代わりに試料を溶解した溶媒のみを用いて同様の操作をして、波長５２０ｎｍの吸光度を測定した。また、ブランクとして、エタノールに試料溶液３ｍＬを加えた後、直ちに波長５２０ｎｍの吸光度を測定した。得られた結果から、下記式によりラジカル消去率（％）を算出した。次に、試料濃度を段階的に減少させて、上記ラジカル消去率（％）を算出し、ラジカルの消去率が５０％になる試料濃度ＩＣ５０（μｇ／ｍＬ）を内挿法により求めた。
【０１０２】
ラジカル消去率(％)＝{１−(Ｂ−Ｃ)／Ａ}×１００
式中、Ａは「コントロールの吸光度」を表し、Ｂは「試料溶液添加時の吸光度」を表し、Ｃは「ブランクの吸光度」を表す。
結果を表３に示す。
【０１０３】
【表３】
2010184873.tif 000004
【０１０４】
表３に示すように、羅漢果花部抽出物（試料１〜３）は、優れたラジカル消去作用を有することが確認された。特に、羅漢果花部５０％エタノール抽出物（試料２）は、優れたラジカル消去作用を有することが確認された。また、ラジカル消去作用の程度は、羅漢果花部抽出物の濃度によって調節できることが確認された。
【０１０５】
〔試験例４〕一酸化窒素産生抑制作用試験
製造例１〜３により得られた羅漢果花部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにして一酸化窒素産生抑制作用を試験した。
【０１０６】
マウスマクロファージ細胞（ＲＡＷ２６４．７細胞，大日本製薬社製）を、１０％ＦＢＳを添加したＤＭＥＭ培地（日水製薬社製）にて前培養後、セルスクレーパーにより細胞を回収した。回収した細胞を３．０×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度になるように１０％ＦＢＳを含有しフェノールレッドを含有しないＤ−ＭＥＭで希釈した後、９６ウェルプレートに１ウェルあたり１００μＬずつ播種し、４時間培養した。
【０１０７】
培養終了後、培地を抜き、終濃度２％のＤＭＳＯを含む１０％ＦＢＳを含有しフェノールレッドを含有しないＤ−ＭＥＭで溶解した試料溶液（試料１〜３，試料濃度は下記表４を参照）を各ウェルに１００μＬ添加し、１０％ＦＢＳを含有しフェノールレッドを含有しないＤ−ＭＥＭに溶解したリポポリサッカライド（ＬＰＳ，終濃度１μｇ／ｍＬ，E.coli0111:B4，DIFCO社製）を１００μＬ加え、４８時間培養した。
【０１０８】
一酸化窒素（ＮＯ）産生量は、亜硝酸イオン（ＮＯ２−）量を指標に測定した。培養終了後、各ウェルの培養液に、培養上清と同量のグリス試薬（１質量％のスルファニルアミド，０．１％N-1-naphthyl ethylendiamine dihydrochlpride in ５％リン酸溶液）を添加し、１０分間室温にて反応させた。反応後、波長５４０ｎｍにおける吸光度を測定した。一酸化窒素（ＮＯ）産生抑制率（％）は、試料無添加時（コントロール）の一酸化窒素（ＮＯ）産生量を基に、下記式により算出した。
【０１０９】
ＮＯ産生抑制率(％)＝{１−(Ｃ−Ｄ)／(Ａ−Ｂ)}×１００
式中、Ａは「試料無添加時の吸光度」を表し、Ｂは「試料無添加時のブランクの吸光度」を表し、Ｃは「試料添加時の吸光度」を表し、Ｄは「試料添加時のブランクの吸光度」を表す。
結果を表４に示す。
【０１１０】
【表４】
2010184873.tif 000005
【０１１１】
表４に示すように、羅漢果花部抽出物（試料１〜３）は、優れた一酸化窒素産生抑制作用を有することが確認された。特に、羅漢果花部５０％エタノール抽出物（試料２）は、低濃度の試料濃度であっても優れた一酸化窒素産生抑制作用を有することが確認された。
【０１１２】
〔試験例５〕ＴＮＦ−α産生抑制作用試験
製造例１〜３により得られた羅漢果花部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにしてＴＮＦ−α産生抑制作用を試験した。
【０１１３】
マウスマクロファージ細胞（ＲＡＷ２６４．７）を、１０％ＦＢＳ含有ダルベッコＭＥＭ培地を用いて培養した後、セルスクレーパーにより細胞を回収した。回収した細胞を１．０×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度になるように１０％ＦＢＳ含有ダルベッコＭＥＭ培地で希釈した後、９６ウェルプレートに１ウェル当たり１００μＬずつ播種し、４時間培養した。
【０１１４】
培養終了後、培地を抜き、終濃度２％ＤＭＳＯを含む１０％ＦＢＳ含有ダルベッコＭＥＭで溶解した試料溶液（試料１〜３，試料濃度は下記表５を参照）を各ウェルに１００μＬずつ添加し、終濃度１μｇ／ｍＬで１０％ＦＢＳ含有ダルベッコＭＥＭに溶解したリポポリサッカライド（LPS，E.coli0111;B4，DIFCO社製）を１００μＬ加え、２４時間培養した。培養終了後、各ウェルの培養上清中のＴＮＦ−α量を、サンドイッチＥＬＩＳＡ法を用いて測定し、測定結果から下記式によりＴＮＦ−α産生抑制率（％）を算出した。
【０１１５】
ＴＮＦ−α産生抑制率(％)＝{(Ｂ−Ａ)／Ｂ}×１００
式中、Ａは「試料溶液添加時のＴＮＦ−α量」を表し、Ｂは「試料溶液無添加時のＴＮＦ−α量」を表す。
結果を表５に示す。
【０１１６】
【表５】
2010184873.tif 000006
【０１１７】
表５に示すように、羅漢果花部抽出物（試料１〜３）は、優れたＴＮＦ−α産生抑制作用を有することが確認された。特に、羅漢果花部５０％エタノール抽出物（試料２）は、優れたＴＮＦ−α産生抑制作用を有することが確認された。
【０１１８】
〔試験例６〕ヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用試験
製造例１〜３により得られた羅漢果花部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにしてヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用を試験した。
【０１１９】
ラット好塩基球白血病細胞（ＲＢＬ−２Ｈ３）を１５％ＦＢＳ添加Ｓ−ＭＥＭ培地を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を４．０×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度に希釈し、終濃度０．５μｇ／ｍＬとなるようにDNP-specific IgEを添加した後、９６ウェルプレートに１ウェルあたり１００μＬずつ播種し、一晩培養した。
【０１２０】
培養終了後、培地を抜き、シリガリアン緩衝液５００μＬにて洗浄を２回行った。次に、同緩衝液３０μＬ及び同緩衝液にて調製した試料溶液１０μＬ（試料１〜３，試料濃度は下記表６を参照）を加え、３７℃にて１０分間静置した。その後、１００ｎｇ／ｍＬのＤＮＰ−ＢＳＡ溶液１０μＬを加え、３７℃にて１５分間静置し、ヘキソサミニダーゼを遊離させた。
【０１２１】
その後、９６ウェルプレートを氷上に静置することにより遊離を停止した。各ウェルの細胞上清１０μＬ及び１ｍｍｏｌ／Ｌのｐ−ＮＡＧ（ｐ−ニトロフェニル−Ｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコサイド）溶液１０μＬを、新たな９６ウェルプレートに添加し、３７℃で１時間反応させた。
【０１２２】
反応終了後、各ウェルに０．１ｍｏｌ／ＬのＮａ２ＣＯ３／ＮａＨＣＯ３２５０μＬを加え、波長４１５ｎｍにおける吸光度を測定した。また、空試験として、細胞上清１０μＬと、０．１ｍｏｌ／ＬのＮａ２ＣＯ３／ＮａＨＣＯ３２５０μＬとの混合液の波長４１５ｎｍにおける吸光度を測定し、補正した。得られた測定結果から、下記式によりヘキソサミニダーゼ遊離抑制率（％）を算出した。
【０１２３】
ヘキソサミニダーゼ遊離抑制率(％)＝{１−(Ｂ−Ｃ)／Ａ}×１００
式中、Ａは「試料無添加での波長４１５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｂは「試料添加での波長４１５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｃは「試料添加・ｐ−ＮＡＧ無添加での波長４１５ｎｍにおける吸光度」を表す。
結果を表６に示す。
【０１２４】
【表６】
2010184873.tif 000007
【０１２５】
表６に示す結果から、羅漢果花部抽出物（試料１〜３）は、優れたヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用を有することが確認された。特に、羅漢果花部５０％エタノール抽出物（試料２）は、優れたヘキソサミニダーゼ遊離抑制作用を有することが確認された。
【０１２６】
〔試験例７〕血小板凝集抑制作用試験
製造例１〜３により得られた羅漢果花部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにして血小板凝集抑制作用を試験した。
【０１２７】
採血したウサギの血液に日本薬局方ヘパリンナトリウム注射液を１／１０量加えて遠心分離（１８０×ｇ、１０分、室温）し、血小板浮遊液（Platelet Rich Plasma；Ｐ．Ｒ．Ｐ．）を得た。
【０１２８】
次に、血小板浮遊液（Ｐ．Ｒ．Ｐ．）２２３μＬに２００ｍｍｏｌ／Ｌの塩化カルシウム溶液１μＬを加え、３７℃で１分間反応した。これに試料溶液（試料１〜３，試料濃度は下記表７を参照）１μＬを加え、さらに２分間反応し、撹拌子を入れて１分間撹拌した後、コラーゲン溶液を２５μＬ添加して３７℃で１０分間の血小板凝集率を測定した。別に、コントロールとして、試料溶液の代わりに試料溶液の溶媒を添加した以外は、上記と同様に操作して血小板凝集率を測定した。得られた測定結果から、下記式により血小板凝集抑制率（％）を算出した。
【０１２９】
血小板凝集抑制率(％)＝{(Ａ−Ｂ)／Ａ}×１００
式中、Ａは「コントロールの血小板凝集率」を表し、Ｂは「試料溶液添加時の血小板凝集率」を表す。
結果を表７に示す。
【０１３０】
【表７】
2010184873.tif 000008
【０１３１】
表７に示す結果から、羅漢果花部抽出物（試料１〜３）は、優れた血小板凝集抑制作用を有することが確認された。特に、羅漢果花部５０％エタノール抽出物（試料２）は、優れた血小板凝集抑制作用を有することが確認された。
【０１３２】
〔試験例８〕エラスターゼ活性阻害作用試験
製造例１〜３により得られた羅漢果花部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにしてエラスターゼ活性阻害作用を試験した。
【０１３３】
９６ウェルプレートにて、０．２ｍｏｌ／Ｌのトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）で調製した試料溶液（試料１〜３，試料濃度は下記表８を参照）５０μＬ及び２０μｇ／ｍＬのエラスターゼ・タイプIII溶液５０μＬを混合した。その後、上記緩衝液で調製した０．４５１４ｍｇ／ｍＬのN-succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide１００μＬを添加して、２５℃で１５分反応させた。
【０１３４】
反応終了後、波長４１５ｎｍにおける吸光度を測定した。同様の方法で空試験を行い補正した。得られた結果から、下記式によりエラスターゼ活性阻害率（％）を算出した。
【０１３５】
エラスターゼ活性阻害率(％)＝{１−(Ｃ−Ｄ)／(Ａ−Ｂ)}×１００
式中、Ａは「試料無添加・酵素添加時の波長４１５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｂは「試料無添加・酵素無添加時の波長４１５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｃは「試料添加・酵素添加時の波長４１５ｎｍにおける吸光度」を表し、Ｄは「試料添加・酵素無添加時の波長４１５ｎｍにおける吸光度」を表す。
結果を表８に示す。
【０１３６】
【表８】
2010184873.tif 000009
【０１３７】
表８に示すように、羅漢果花部抽出物（試料１）は、優れたエラスターゼ活性阻害作用を有することが確認された。特に、羅漢果花部５０％エタノール抽出物（試料２）は、優れたエラスターゼ活性阻害作用を有することが確認された。
【０１３８】
〔試験例９〕エストロゲン様作用試験
製造例１〜３により得られた羅漢果花部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにしてエストロゲン様作用を試験した。
【０１３９】
ヒト乳癌由来細胞（ＭＣＦ−７）を１０％ＦＢＳ、１％ＮＥＡＡ及び１ｍｍｏｌ／Ｌのピルビン酸ナトリウムを含有するＭＥＭ培地を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を、活性炭処理した１０％ＦＢＳ、１％ＮＥＡＡ及び１ｍｍｏｌ／Ｌのピルビン酸ナトリウムを含有しフェノールレッドを含有しないＭＥＭ培地（Ｔ−ＭＥＭ培地）を用いて、３．３×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度に調整した後、４８ウェルプレートに１ウェルあたり４５０μＬずつ播種し、細胞を定着させるため培養した。６時間後（０日目）にＴ−ＭＥＭ培地で終濃度の１０倍に調整した試料溶液（試料１〜３，試料濃度は下記表９を参照）を各ウェルに５０μＬずつ添加し培養を続けた。３日目に培地を抜き、Ｔ−ＭＥＭ培地で終濃度に調整した試料溶液（試料１〜３）を各ウェルに０．５ｍＬずつ添加し、さらに培養を続けた。
【０１４０】
エストロゲン様作用は、ＭＴＴアッセイ法を用いて測定した。培養終了後、培地を抜き、１％ＮＥＡＡ及び１ｍｍｏｌ／Ｌのピルビン酸ナトリウムを含有するＭＥＭ培地に終濃度０．４ｍｇ／ｍＬで溶解したＭＴＴを各ウェルに２００μＬずつ添加した。２時間培養した後に、細胞内に生成したブルーホルマザンを２−プロパノール２００μＬで抽出した。抽出後、波長５７０ｎｍにおける吸光度を測定した。同時に濁度として波長６５０ｎｍにおける吸光度を測定し、両者の差をもってブルーホルマザン生成量とした。ポジティブコントロールとして、１×１０−９Ｍのエストラジオールを使用した。得られた結果から、下記式によりエストロゲン様作用率（％）を算出した。
【０１４１】
エストロゲン様作用率(％)＝Ａ／Ｂ×１００
式中、Ａは「試料溶液添加時の吸光度」を表し、Ｂは「試料溶液無添加時の吸光度」を表す。
結果を表９に示す。
【０１４２】
【表９】
2010184873.tif 000010
【０１４３】
表９に示すように、羅漢果花部抽出物（試料１〜３）は、優れたエストロゲン様作用を有することが確認された。特に、羅漢果花部５０％エタノール抽出物（試料２）は、低濃度の試料濃度であっても優れたエストロゲン様作用を有することが確認された。
【０１４４】
〔試験例１０〕コラーゲン産生促進作用試験
製造例１〜３により得られた羅漢果花部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにしてコラーゲン産生促進作用を試験した。
【０１４５】
ヒト正常線維芽細胞（Detroit 551）を１０％ＦＢＳ、１％ＮＥＡＡ及び１ｍｍｏｌ／Ｌのピルビン酸ナトリウムを含有するＭＥＭ培地を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を２×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度になるように上記ＭＥＭ培地で希釈した後、９６ウェルマイクロプレートに１ウェルあたり１００μＬずつ播種し、一晩培養した。培養終了後、培地を抜き、０．５％ＦＢＳ含有ＭＥＭ培地に試料を溶解した試料溶液（試料１〜３，試料濃度は下記表１０を参照）を各ウェルに１５０μＬずつ添加し、３日間培養した。培養終了後、各ウェルの培地中のコラーゲン量をＥＬＩＳＡ法により測定した。同様にして試料溶液を添加せずにコラーゲン量を測定した。得られた結果から、下記式により試料溶液添加時のコラーゲン産生促進率を算出した。
【０１４６】
コラーゲン産生促進率(％)＝Ａ／Ｂ×１００
式中、Ａは「試料溶液添加時のコラーゲン量」を、Ｂは「試料溶液無添加時のコラーゲン量」を示す。
結果を表１０に示す。
【０１４７】
【表１０】
2010184873.tif 000011
【０１４８】
表１０に示すように、羅漢果花部抽出物（試料１〜３）は、優れたコラーゲン産生促進作用を有することが確認された。特に、羅漢果花部５０％エタノール抽出物（試料２）は、優れたコラーゲン産生促進作用を有することが確認された。
【０１４９】
〔試験例１１〕ヒアルロン酸合成促進作用試験
製造例１〜３により得られた羅漢果花部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにしてヒアルロン酸合成促進作用を試験した。
【０１５０】
ヒト正常皮膚線維芽細胞（ＮＢ１ＲＧＢ）を、１０％ＦＢＳ含有α−ＭＥＭ培地を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を２．２×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度になるように０．５％ＦＢＳ含有α−ＭＥＭで希釈した後、９６ウェルプレートに１ウェルあたり１００μＬずつ播種し、一晩培養した。
【０１５１】
培養終了後、０．５％ＦＢＳ含有α−ＭＥＭに溶解した試料溶液（試料１〜３，試料濃度は下記表１１を参照）を各ウェルに１００μＬずつ添加し、３日間培養した。培養後、各ウェルの培地中のヒアルロン酸量を間接的ＥＬＩＳＡ法により測定した。測定結果から、下記式によりヒアルロン酸合成促進率（％）を算出した。
【０１５２】
ヒアルロン酸合成促進率(％)＝Ａ／Ｂ×１００
式中、Ａは「試料添加時のヒアルロン酸量」を表し、Ｂは「試料添加時のヒアルロン酸量」を表す。
結果を表１１に示す。
【０１５３】
【表１１】
2010184873.tif 000012
【０１５４】
表１１に示すように、羅漢果花部抽出物（試料１〜３）は、優れたヒアルロン酸合成促進作用を有することが確認された。特に、羅漢果花部５０％エタノール抽出物（試料２）は、優れたヒアルロン酸合成促進作用を有することが確認された。
【０１５５】
〔試験例１２〕表皮角化細胞増殖促進作用試験
製造例１〜３により得られた羅漢果花部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにして表皮角化細胞増殖促進作用を試験した。
【０１５６】
正常ヒト新生児包皮表皮角化細胞（ＮＨＥＫ）を、正常ヒト表皮角化細胞長期培養用増殖培地（EpiLife-KG2）を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を１．５×１０４ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度となるようにEpiLife-KG2で希釈した後、コラーゲンコートした９６ウェルプレートに１ウェルあたり１００μＬずつ播種し、一晩培養した。培養終了後、EpiLife-KG2に溶解した試料溶液（試料１〜３，試料濃度は下記表１２を参照）を各ウェルに１００μＬずつ添加し、３日間培養した。
【０１５７】
表皮角化細胞増殖促進作用は、ＭＴＴアッセイ法を用いて測定した。培養終了後、培地を抜き、終濃度０．４ｍｇ／ｍＬでＰＢＳ（−）に溶解したＭＴＴを各ウェルに１００μＬずつ添加した。２時間培養した後、細胞内に生成したブルーホルマザンを２−プロパノール１００μＬで抽出した。抽出後、波長５７０ｎｍにおける吸光度を測定した。同時に濁度として波長６５０ｎｍにおける吸光度を測定し、両者の差をもってブルーホルマザン生成量とした。測定された各吸光度から、下記式により表皮角化細胞増殖促進率（％）を算出した。
【０１５８】
表皮角化細胞増殖促進率(％)＝Ｓｔ／Ｃｔ×１００
式中、Ｓｔは「試料溶液添加時の吸光度」を表し、Ｃｔは「試料溶液無添加時の吸光度」を表す。
結果を表１２に示す。
【０１５９】
【表１２】
2010184873.tif 000013
【０１６０】
表１２に示すように、羅漢果花部抽出物（試料１〜３）は、優れた表皮角化細胞増殖促進作用を有することが確認された。特に、羅漢果花部５０％エタノール抽出物（試料２）は、優れた表皮角化細胞増殖促進作用を有することが確認された。
【０１６１】
〔試験例１３〕紫外線（ＵＶ−Ｂ）照射によるダメージ回復作用試験
製造例１〜３により得られた羅漢果花部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにして紫外線（ＵＶ−Ｂ）照射によるダメージ回復作用を試験した。
【０１６２】
ヒト正常皮膚線維芽細胞（ＮＢ１ＲＧＢ）を、１０％ＦＢＳ含有α−ＭＥＭ培地を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を２．０×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍＬの細胞密度になるようにα−ＭＥＭ培地を用いて希釈した後、４８ウェルプレートに１ウェルあたり２００μＬずつ播種した。２４時間培養後、培地を１００μＬのＰＢＳ（−）へ交換し、１．０Ｊ／ｃｍ２のＵＶ−Ｂを照射した。照射後、直ちに、ＰＢＳ（−）を抜き、１０％ＦＢＳ含有Ｄ−ＭＥＭに溶解した試料溶液（試料１〜３，試料濃度は下記表１３に参照）を各ウェルに４００μＬずつ添加し、２４時間培養した。
【０１６３】
紫外線（ＵＶ−Ｂ）照射によるダメージ回復作用は、ＭＴＴアッセイを用いて測定した。培養終了後、培地を抜き、終濃度０．４ｍｇ／ｍＬで溶解したＭＴＴを各ウェルに２００μＬずつ添加した。２時間培養した後に、細胞内に生成したブルーホルマザンを２−プロパノール２００μＬで抽出し、抽出後、波長５７０ｎｍにおける吸光度を測定した。同時に濁度として波長６５０ｎｍにおける吸光度を測定し、両者の差をもってブルーホルマザン生成量とした。また、同様に細胞を播種した後、ＵＶ−Ｂを照射しない細胞及びＵＶ−Ｂを照射し試料溶液を添加しない細胞についても同様に測定し、それぞれ非照射群及び照射群とした。得られた結果から、下記式により紫外線（ＵＶ−Ｂ）照射によるダメージ回復率（％）を算出した。
【０１６４】
ダメージ回復率(％)＝{(Ｎｔ−Ｃ)−(Ｎｔ−Ｓａ)}／(Ｎｔ−Ｃ)×１００
式中、Ｎｔは「ＵＶ−Ｂを照射していない細胞での吸光度」を表し、Ｃは「ＵＶ−Ｂを照射し試料溶液を添加していない細胞での吸光度」を表し、Ｓａは「ＵＶ−Ｂを照射し試料溶液を添加した細胞での吸光度」を表す。
結果を表１３に示す。
【０１６５】
【表１３】
2010184873.tif 000014
【０１６６】
表１３に示すように、羅漢果花部抽出物（試料１〜３）は、優れた紫外線（ＵＶ−Ｂ）照射によるダメージ回復作用を有することが確認された。特に、羅漢果花部５０％エタノール抽出物（試料２）は、優れた紫外線（ＵＶ−Ｂ）照射によるダメージ回復作用を有することが確認された。
【０１６７】
〔試験例１４〕アンドロゲン受容体結合阻害作用試験
製造例１〜３により得られた羅漢果花部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにしてアンドロゲン受容体結合阻害作用を試験した。
【０１６８】
マウス自然発生乳癌（シオノギ癌；ＳＣ１１５）よりクローニングされたアンドロゲン依存性マウス乳癌細胞（ＳＣ−３細胞）を、２％ＤＣＣ−ＦＢＳ及び１０−８ｍｏｌ／Ｌのテストステロンを含有するＭＥＭ培地（以下、ＭＥＭ−２という。）を用いて培養した後、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を１．０×１０５ｃｅｌｌｓ／μＬの細胞密度になるようにＭＥＭ−２培地で希釈し、９６ウェルプレートに１ウェルあたり１００μＬずつ播種し、３７℃、５％ＣＯ２−９５％ａｉｒの条件下で培養した。
【０１６９】
２４時間後、試料（試料１〜３，試料濃度は下記表１４を参照）及び１．０×１０−９ｍｏｌ／ＬのＤＨＴを添加した０．５％ＢＳＡ含有ＨａｍＦ１２＋ＭＥＭ培地（以下、ＨＭＢ培地という。）に培地を交換して４８時間培養した。
【０１７０】
その後、培地を０．９７ｍｍｏｌ／ＬのＭＴＴを含むＭＥＭ−２培地に交換し、２時間培養後、培地をイソプロパノールに交換して細胞内に生成したブルーホルマザンを抽出した。溶出したブルーホルマザンを含有するイソプロパノールについて、ブルーホルマザンの吸収極大点がある５７０ｎｍの吸光度を測定した。
【０１７１】
なお、付着細胞の影響を補正するため、同時に６５０ｎｍの吸光度も測定し、両吸光度の差をもってブルーホルマザンの生成量に比例する値とした（下記結合阻害率の計算式における吸光度はこの補正済み吸光度である）。上記と並行して、試料単独でＳＣ−３細胞に及ぼす影響をみるため、ＨＭＢ培地にＤＨＴを添加せず試料のみを添加して、同様の培養と測定とを行った。
【０１７２】
さらに、コントロールとして、試料及びＤＨＴを添加しないＨＭＢ培地で培養した場合、並びに試料を添加せずＤＨＴのみを添加したＨＭＢ培地で培養した場合についても同様の測定を行った。測定結果から、下記式によりアンドロゲン受容体結合阻害率（％）を算出した。
【０１７３】
アンドロゲン受容体結合阻害率(％)＝{１−(Ａ−Ｂ)／(Ｃ−Ｄ)}×１００
式中、Ａは「ＤＨＴ添加・試料添加の場合の吸光度」を表し、Ｂは「ＤＨＴ無添加・試料添加の場合の吸光度」を表し、Ｃは「ＤＨＴ添加・試料無添加の場合の吸光度」を表し、Ｄは「ＤＨＴ無添加・試料無添加の場合の吸光度」を表す。
結果を表１４に示す。
【０１７４】
【表１４】
2010184873.tif 000015
【０１７５】
表１４に示すように、羅漢果花部抽出物（試料１〜３）は、優れたアンドロゲン受容体結合阻害作用を有することが確認された。特に、羅漢果花部５０％エタノール抽出物（試料２）は、優れたアンドロゲン受容体結合阻害作用を有することが確認された。
【０１７６】
〔試験例１５〕サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用試験
製造例１〜３により得られた羅漢果花部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにしてサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用を試験した。
【０１７７】
５ｍＭの塩化マグネシウムを含有する５０ｍＭのトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）０．２ｍＬに、２．５ｍｇ／ｍＬのウシ血清アルブミン溶液０．１ｍＬ、０．１ｍｇ／ｍＬのサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ溶液０．１ｍＬ及び５０％ＤＭＳＯに溶解した試料溶液（試料１〜３，試料濃度：２００μｇ／ｍＬ）０．０５ｍＬを加え、３７℃の温度条件下で５分間インキュベーションした。
【０１７８】
この反応溶液に、０．５ｍｇ／ｍＬのサイクリックＡＭＰ溶液０．０５ｍＬを加え、３７℃の温度条件下で６０分間インキュベーションした。３分間沸騰水浴上で煮沸することにより反応を停止させ、これを遠心（２２６０×ｇ，１０分間，４℃）し、上清中の反応基質であるサイクリックＡＭＰを、下記の条件で高速液体クロマトグラフィーを用いて分析した。また、試料溶液を添加せずに同様の方法で空試験を行った。
【０１７９】
＜高速液体クロマトグラフィー条件＞
製品名：Chromatocorder 12（SYSTEM INSTRUMENTS社製）
固定相：Wakosil 5C18（和光純薬工業社製）
カラム径：４．６ｍｍ
カラム長：２５０ｍｍ
移動相：1mM TBAP in 25mM KH2PO4:CH3CN＝90:10
移動相流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
検出：ＵＶ，２６０ｎｍ
【０１８０】
次に、サイクリックＡＭＰ標準品のピーク面積（Ａ）、試料無添加時におけるサイクリックＡＭＰ標準品とサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼとの反応溶液の上清のピーク面積（Ｂ１）及び試料添加時におけるサイクリックＡＭＰ標準品とサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼとの反応溶液の上清のピーク面積（Ｂ２）を求めた。得られた結果から、下記式により試料無添加時のサイクリックＡＭＰ標準品の分解率（Ｃ）及び試料添加時のサイクリックＡＭＰ標準品の分解率（Ｄ）を算出した。
【０１８１】
試料無添加時の標準品分解率(Ｃ，％)＝(１−Ｂ１／Ａ)×１００
試料添加時の標準品の分解率(Ｄ，％)＝(１−Ｂ２／Ａ)×１００
【０１８２】
その後、上記式により算出した各分解率（Ｃ，Ｄ）に基づいて、下記式によりサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害率（％）を算出した。
阻害率(％)＝(１−Ｄ／Ｃ)×１００
結果を表１５に示す。
【０１８３】
【表１５】
2010184873.tif 000016
【０１８４】
表１５に示すように、羅漢果花部抽出物（試料１〜３）は、優れたサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用を有することが確認された。特に、羅漢果花部５０％エタノール抽出物（試料２）は、優れたサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用を有することが確認された。
【０１８５】
〔配合例１〕
下記組成の乳液を常法により製造した。
羅漢果花部水抽出物（製造例１）                          ０．１ｇ
ホホバオイル                                            ４．０ｇ
オリーブオイル                                          ２．０ｇ
スクワラン                                              ２．０ｇ
セタノール                                              ２．０ｇ
モノステアリン酸グリセリル                              ２．０ｇ
ポリオキシエチレンセチルエーテル（20E.O.）              ２．５ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.）        ２．０ｇ
黄杞エキス                                              ０．１ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム                              ０．１ｇ
イチョウ葉エキス                                        ０．１ｇ
コンキオリン                                            ０．１ｇ
オウバクエキス                                          ０．１ｇ
カミツレエキス                                          ０．１ｇ
１，３−ブチレングリコール                              ３．０ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                ０．１５ｇ
香料                                                    ０．０５ｇ
精製水                                  残部（全量を１００ｇとする）
【０１８６】
〔配合例２〕
下記組成の化粧水を常法により製造した。
羅漢果花部５０％エタノール抽出物（製造例２）            ０．１ｇ
グリセリン                                              ３．０ｇ
１，３−ブチレングリコール                              ３．０ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.）        ０．５ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                ０．１５ｇ
クエン酸                                                ０．１ｇ
クエン酸ソーダ                                          ０．１ｇ
油溶性甘草エキス                                        ０．１ｇ
海藻エキス                                              ０．１ｇ
キシロビオースミクスチャー                              ０．５ｇ
クジンエキス                                            ０．１ｇ
香料                                                    ０．０５ｇ
精製水                                  残部（全量を１００ｇとする）
【０１８７】
〔配合例３〕
下記組成の養毛ヘアトニックを常法により製造した。
羅漢果花部８０％エタノール抽出物（製造例３）            ０．２ｇ
塩酸ピリドキシン                                        ０．１ｇ
レゾルシン                                              ０．０１ｇ
Ｄ−パントテニルアルコール                              ０．１ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム                              ０．１ｇ
Ｌ−メントール                                          ０．０５ｇ
１，３−ブチレングリコール                              ４．０ｇ
ニンジンエキス                                          ０．５ｇ
エタノール                                            ２５．０ｇ
香料                                                    ０．０１ｇ
精製水                                  残部（全量を１００ｇとする）
【０１８８】
〔配合例４〕
下記組成のシャンプー（クリームシャンプー）を常法により製造した。
羅漢果花部水抽出物（製造例１）                          ０．２ｇ
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸ナトリウム      ３０．０ｇ
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸アンモニウム    ２０．０ｇ
ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン                      ６．０ｇ
ヤシ油脂肪酸モジエタノールアミド                        ４．０ｇ
ジステアリン酸エチレングリコール                        ２．０ｇ
防腐剤（パラオキシ安息香酸メチル）                      ０．１５ｇ
ムクロジエキス                                          ０．２ｇ
黄杞エキス                                              ０．５ｇ
オウバクエキス                                          ０．３ｇ
ローズマリーエキス                                      ０．５ｇ
１，３−ブチレングリコール                              ３．０ｇ
香料                                                    ０．０１ｇ
精製水                                  残部（全量を１００ｇとする）
【０１８９】
〔配合例５〕
下記の混合物を打錠して、錠剤状の栄養補助食品を製造した。
羅漢果花部５０％エタノール抽出物（製造例２）          ５０質量部
粉糖（ショ糖）                                      １８８質量部
グリセリン脂肪酸エステル                              １２質量部
【０１９０】
〔配合例６〕
下記の混合物を顆粒状にして、栄養補助食品を製造した。
羅漢果花部８０％エタノール抽出物（製造例３）          ５０質量部
ビートオリゴ糖                                    １０００質量部
ビタミンＣ                                          １６７質量部
ステビア抽出物                                        １０質量部
【産業上の利用可能性】
【０１９１】
本発明の抗酸化剤は、活性酸素種に起因する各種障害の予防・改善に、本発明の美白剤は、皮膚の色素沈着等の予防・改善に、本発明の抗炎症剤は、各種炎症性疾患の予防・改善に、本発明の抗老化剤は、皮膚の老化の予防・改善に、本発明の育毛剤、抗男性ホルモン剤又はアンドロゲン受容体結合阻害剤は、男性型脱毛症、多毛症、脂漏症、座瘡（ニキビ等）、前立腺肥大症、前立腺腫瘍、男児性早熟等の予防・改善に、本発明の抗肥満剤又はサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤は、肥満症の予防・改善に大きく貢献することができる。