(57)【要約】【課題】本発明の目的は、マスト細胞の脱顆粒促進活性を有する化合物、および当該化合物を使用するマスト細胞脱顆粒阻害剤のアッセイ方法を提供することである。さらに本発明は前記化合物およびその誘導体の製造方法、およびその方法で使用する合成中間体を提供することである。【解決手段】本発明は、式（Ｉ）： 2010184867.tif 000046［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ、およびＹは、本明細書において定義したとおりである］で表される化合物、またはその塩、および当該化合物またはその塩を使用する、マスト細胞の脱顆粒阻害活性を有する化合物のスクリーニング方法に関する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
【化１】
2010184867.tif 000044
［式中、Ｒ１は、Ｃ１−３０アルキル、Ｃ２−３０アルケニル、またはＣ２−３０アルキニルであり；
Ｒ２は、水素原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ７−１４アラルキル、またはＣ１−６アルコキシＣ１−６アルキルであり；
Ｒ３は、水素原子またはＣ１−６アルキルであり；
Ｒ４およびＲ５は、独立に、水素原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ７−１４アラルキル、ホルミル、Ｃ１−６アルキルカルボニル、アリールカルボニル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、およびＣ７−１４アラルキルオキシカルボニルから選択され；
Ｒ６は、水素原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、またはＣ７−１４アラルキルであり；
Ｘは、−（ＣＨＲ１１）ｎ−であり；
Ｙは、−ＣＨＲ１２−または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
ｎは、１〜７から選択される整数であり；
Ｒ１１およびＲ１２は、独立に、水素原子およびＣ１−６アルキルから選択される］
で表される化合物、またはその塩。
【請求項２】
Ｒ３が、水素原子またはＣ１−２アルキルである、請求項１に記載の化合物、またはその塩。
【請求項３】
Ｒ１１およびＲ１２が、水素原子である、請求項１またはに記載の化合物、またはその塩。
【請求項４】
Ｒ１が、Ｃ１０−２０アルキルまたはＣ１０−２０アルケニルである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項５】
式（Ｉａ）：
【化２】
2010184867.tif 000045
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ、およびＹは、請求項１において定義したとおりである］
で表される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物、またはその塩。
【請求項６】
トリフルオロ酢酸塩、酢酸塩、トシル酸塩、塩酸塩、リン酸塩、または酒石酸塩である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物の塩。
【請求項７】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩を使用する、マスト細胞の脱顆粒阻害活性を有する化合物のスクリーニング方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、マスト細胞の脱顆粒促進活性を有するリゾホスファチジルスレオニン誘導体、および当該化合物を使用するマスト細胞脱顆粒阻害剤のアッセイ方法に関する。さらに本発明は前記リゾホスファチジルスレオニン誘導体の製造方法、ならびにその方法で使用する合成中間体に関する。
【背景技術】
【０００２】
グリセロリン脂質の一つの脂肪酸エステルが加水分解された構造を有するリゾリン脂質は、種々の生理作用を有することが報告されている（非特許文献１）。リゾリン脂質の一種であるリゾホスファチジルセリンはマスト細胞（肥満細胞）の脱顆粒に起因する急性炎症に関与することが知られている。すなわち、マスト細胞の表面に存在するＩｇＥ受容体（ＦｃεＲＩ）にＩｇＥが結合し、それが多価抗原により架橋された時にマスト細胞において脱顆粒が起こり、ヒスタミンやセロトニンなどの生理活性物質を放出して即時型アレルギーが引き起こされる。一方、ラット腹腔内のマスト細胞での脱顆粒はリゾホスファチジルセリンの共存下でのみ起こることが知られている（非特許文献２および３）。リゾホスファチジルセリンはマスト細胞上に存在するリゾホスファチジルセリン受容体と結合し、細胞内のカルシウム濃度の上昇を引き起こし脱顆粒を促進すると考えられている。リゾホスファチジルセリンの特異的受容体の候補が最近発表された（非特許文献４）。また、リゾホスファチジルスレオニン誘導体、例えば下式：
【０００３】
【化１】
2010184867.tif 000002
【０００４】
の化合物が、リゾホスファチジルセリンと同様のマスト細胞の脱顆粒促進活性を示すことが報告されている（特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００７−２８４４０２号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｊ．Ａｏｋｉ、Ｙ．Ｎａｇａｉ、Ｈ．Ｈｏｓｏｎｏ、Ｋ．Ｉｎｏｕｅ、およびＨ．Ａｒａｉ、Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ  ｅｔ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ、第１５８２巻、第２６−３２頁（２００２年）
【非特許文献２】Ｍａｒｔｉｎ，Ｔ．Ｗ．、およびＬａｇｕｎｏｆｆ，Ｄ．Ｎａｔｕｒｅ、第２７９巻、第２５０−２５２頁（１９７９年）
【非特許文献３】Ｓｍｉｔｈ，Ｇ．Ａ．、Ｈｅｓｋｅｔｈ，Ｔ．Ｒ．、Ｐｌｕｍｂ，Ｒ．Ｗ．およびＭｅｔｃａｌｆｅ，Ｊ．Ｃ．  ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．第１０５巻、第５８−６２頁（１９７９年）
【非特許文献４】Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｒｅｓ  Ｃｏｍｍｕｎ．；第３４１巻（４）：第１０７８−８７頁（２００６年）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
マスト細胞の脱顆粒阻害を作用機作とする抗炎症剤を探索するためのアッセイ方法を構築する上でリゾホスファチジルセリンが必要となる。天然に存在するリゾホスファチジルセリンはグリセロール水酸基上のアシル基が種々の脂肪酸に由来する混合物であるが、マスト細胞の脱顆粒阻害を作用機作とする抗炎症剤を探索するためのアッセイにおいては、単一の化合物、特に容易に合成することができる化合物を使用して試験系を構築することが望まれる。リゾホスファチジルセリンのマスト細胞の脱顆粒活性はマイクロモルの濃度が必要であるため、マスト細胞の脱顆粒化阻害を作用機作とする抗炎症剤を探索するアッセイにおいてリゾホスファチジルセリンより高活性な化合物が求められていた。
【０００８】
本発明の目的は、マスト細胞の脱顆粒促進活性を有する化合物、および当該化合物を使用するマスト細胞脱顆粒阻害剤のアッセイ方法を提供することである。さらに本発明は前記化合物およびその誘導体の製造方法、およびその方法で使用する合成中間体を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者は、上記課題を達成するために鋭意研究を進めたところ、マスト細胞の脱顆粒促進活性を有する新規な化合物を見出し、本発明を完成させた。
本発明の１つの側面によれば、式（Ｉ）：
【００１０】
【化２】
2010184867.tif 000003
【００１１】
［式中、Ｒ１は、Ｃ１−３０アルキル、Ｃ２−３０アルケニル、またはＣ２−３０アルキニルであり；
Ｒ２は、水素原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ７−１４アラルキル、またはＣ１−６アルコキシＣ１−６アルキルであり； 
Ｒ３は、水素原子またはＣ１−６アルキルであり； 
Ｒ４およびＲ５は、独立に、水素原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ７−１４アラルキル、ホルミル、Ｃ１−６アルキルカルボニル、アリールカルボニル、Ｃ１−６アルコキシカルボニル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル、およびＣ７−１４アラルキルオキシカルボニルから選択され；
Ｒ６は、水素原子、Ｃ１−６アルキル、Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキルまたはＣ７−１４アラルキルであり；
Ｘは、−（ＣＨＲ１１）ｎ−であり；
Ｙは、−ＣＨＲ１２−、または−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
ｎは、１〜７から選択される整数であり；
Ｒ１１およびＲ１２は、独立に、水素原子およびＣ１−６アルキルから選択される］
で表される化合物、またはその塩が提供される。
【００１２】
本発明の１つの態様において、Ｒ１は、Ｃ７−２０アルキルまたはＣ７−２０アルケニルである。また、Ｒ３は、例えば、水素原子またはＣ１−２アルキルであり、好ましくは、水素原子またはメチルである。
【００１３】
本発明の１つの態様において、Ｒ１１およびＲ１２は、水素原子である。また、Ｒ２、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１１および／またはＲ１２は、例えば、水素原子である。また、ｎは、例えば、２〜４から選択される整数である。
【００１４】
本発明の１つの側面によれば、式（Ｉａ）：
【００１５】
【化３】
2010184867.tif 000004
【００１６】
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ、およびＹは、本明細書において定義したとおりである］
の化合物、またはその塩が提供される。
【００１７】
本発明の１つの側面によれば、式（Ｉ）または（Ｉａ）の化合物のトリフルオロ酢酸塩、酢酸塩、トシル酸塩、塩酸塩、リン酸塩、または酒石酸塩が提供される。
本発明の化合物に含まれる原子（例えば、水素原子、炭素原子、酸素原子、窒素原子、硫黄原子およびリン原子など）は、それぞれの天然に最も多く存在する同位体以外の同位体原子であってもよく、当該同位体原子は放射性導体原子であってもよい。すなわち、本発明の１つの側面によれば、同位体原子で標識化された本明細書で既に定義された式（Ｉ）または（Ｉａ）の化合物、またはその塩が提供される。ここで、同位体原子による標識化は、例えば、放射性同位体による標識化（３Ｈ、１４Ｃ、３２Ｐなど）であってもよく、化合物の調製の容易さの側面からは、３Ｈによる標識化が好ましい。本発明の３Ｈ標識化化合物は、例えば、３Ｈ標識化された脂肪酸またはその誘導体を使用することにより合成することができる。
【００１８】
本発明のさらに別の側面によれば、本明細書に既に記載の化合物またはその塩を使用する、マスト細胞の脱顆粒阻害活性を有する化合物のスクリーニング方法が提供される。当該マスト細胞脱顆粒阻害活性測定方法は、本発明の化合物および試験化合物を含む試験系中におけるマスト細胞の脱顆粒の程度を観察することにより行われる。試験化合物は、特には限定されないが、例えば、リゾホスファチジルセリン受容体またはリゾホスファチジルスレオニン受容体などに対するアンタゴニスト活性を有しているものであってもよく、またはそれ以外（例えば、ＩｇＥ受容体など）に対するアンタゴニスト活性を有しているものであってもよい。この側面における１つの態様において、放射標識化した本発明の化合物を作製し、マスト細胞の膜画分から調製したマスト細胞膜への結合を阻害する試験化合物、またはマスト細胞膜上の受容体に結合した放射標識化した本発明の化合物を追い出す化合物をスクリーニングすることによりホスファチジルセリン受容体またはリゾホスファチジルスレオニン受容体などに結合する化合物をスクリーニングすることが可能となる。さらに必要であれば、上記のスクリーニングで得られた活性化合物を，マスト細胞にｌｙｓｏＰＳとコンカナバリンＡで刺激する際に共存させ，阻害活性を検討してもよい。
【００１９】
本発明のスクリーニング方法は、特には限定されないが、例えば以下のような具体的な操作手順により実施されうる。すなわち、Ｗｉｓｔａｒラットから腹腔マスト細胞を採取し、２回洗浄後、ＨＥＰＥＳ緩衝タイロード液に懸濁する。１×１０４個のマスト細胞に、試験化合物(アンタゴニスト活性を測定したい化合物)を添加して、３７℃で１５分間インキュベーションした後、この細胞を本発明化合物（０．０１〜１００μＭ、例えば１μＭ）存在下１００μｇ／ｍＬのコンカナバリンＡで刺激する。また、ラット腹腔マスト細胞を本発明化合物（０．０１〜１００μＭ、例えば１μＭ)存在下１００μｇ／ｍＬのコンカナバリンＡで刺激したものをネガティブコントロールとする。１５分後、反応を停止するために氷冷したＨＥＰＥＳ緩衝タイロード液を加え、反応混合物を８００ｘｇで５分間４℃で遠心分離する。上澄み液中のヒスタミンの濃度を、Ｓｈｏｒｅらの蛍光アッセイにより決定する（Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．第１２７巻、第１８２〜１８６頁（１９５９年））。
【発明の効果】
【００２０】
本発明により、マスト細胞の脱顆粒に起因する急性炎症に関する研究においてリサーチツールとして使用することができる脱顆粒促進活性を有する化合物が提供される。さらに本発明により、当該化合物を使用するマスト細胞の脱顆粒阻害活性を有する化合物のアッセイ方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１】本発明の化合物のラット腹腔マスト細胞の脱顆粒促進活性を示す試験結果の一例である。
【図２】本発明の化合物のマウスの全身アナフィラキシー誘発活性を示す試験結果の一例であり、グラフの縦軸は温度、横軸は経過時間を表す。
【発明の実施の形態】
【００２２】
以下、本発明を更に具体的に説明する。
本明細書において「Ｃ１−６アルキル」とは、炭素数１〜６の直鎖状または分岐鎖状のアルキル基を意味し、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｓ−ブチル、ｉ−ブチル、ｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、３−メチルブチル、２−メチルブチル、１−メチルブチル、１−エチルプロピル、ｎ−ヘキシル、４−メチルペンチル、３−メチルペンチル、２−メチルペンチル、１−メチルペンチル、３−エチルブチル、および２−エチルブチルなどが含まれ、例えば、Ｃ１−４アルキルおよびＣ１−３アルキルなども含まれる。
【００２３】
本明細書において「Ｃ１−３０アルキル」とは、炭素数１〜３０の直鎖状または分岐鎖状のアルキル基を意味し、例えば、Ｃ１−６アルキルとして既に例示したアルキル基のほか、Ｃ７Ｈ１５、Ｃ８Ｈ１７、Ｃ９Ｈ１９、Ｃ１０Ｈ２１、Ｃ１１Ｈ２３、Ｃ１２Ｈ２５、Ｃ１３Ｈ２７、Ｃ１４Ｈ２９、Ｃ１５Ｈ３１、Ｃ１６Ｈ３３、Ｃ１７Ｈ３５、Ｃ１８Ｈ３７、Ｃ１９Ｈ３９、Ｃ２０Ｈ４１、Ｃ２１Ｈ４３、Ｃ２２Ｈ４５、Ｃ２３Ｈ４７、Ｃ２４Ｈ４９、Ｃ２５Ｈ５１、Ｃ２６Ｈ５３、Ｃ２７Ｈ５５、Ｃ２８Ｈ５７、Ｃ２９Ｈ５９、およびＣ３０Ｈ６１などで表される、直鎖状または分岐鎖状のアルキル基が含まれる。
【００２４】
本明細書において「Ｃ２−３０アルケニル」とは、炭素数２〜３０の直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基を意味し、例えば、ビニル、１−プロペニル、２−プロペニル（アリル）、１−メチルビニル、シクロペンテニル、およびシクロヘキセニルなど、Ｃ７Ｈ１３、Ｃ８Ｈ１５、Ｃ９Ｈ１７、Ｃ１０Ｈ１９、Ｃ１１Ｈ２１、Ｃ１２Ｈ２３、Ｃ１３Ｈ２５、Ｃ１４Ｈ２７、Ｃ１５Ｈ２９、Ｃ１６Ｈ３１、Ｃ１７Ｈ３３、Ｃ１８Ｈ３５、Ｃ１９Ｈ３７、Ｃ２０Ｈ３９、Ｃ２１Ｈ４１、Ｃ２２Ｈ４３、Ｃ２３Ｈ４５、Ｃ２４Ｈ４７、Ｃ２５Ｈ４９、Ｃ２６Ｈ５１、Ｃ２７Ｈ５３、Ｃ２８Ｈ５５、Ｃ２９Ｈ５７、およびＣ３０Ｈ５９で表される、１つの二重結合を含む直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基（例えば、９−オクタデセニルなど）が含まれる。当該用語にはさらに、２つの二重結合を含む直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基（例えば、９，１２−オクタデカジエニルなど）、３つの二重結合を含む直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基（例えば、９，１２，１５−オクタデカトリエニルなど）、４つの二重結合を含む直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基（例えば、５，８，１１，１４−エイコサテトラエニルなど）、および５以上の二重結合を含む直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基（例えば、４，７，１０，１３，１６，１９−ドコサヘキサエニルなど）が含まれる。
【００２５】
本明細書において「Ｃ２−３０アルキニル」とは、炭素数２〜３０の直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基を意味し、例えば、エチニル、１−プロピニル、２−プロピニル（プロパルギル）、２−シクロプロピルエチニルなどのほか、Ｃ７Ｈ１１、Ｃ８Ｈ１３、Ｃ９Ｈ１５、Ｃ１０Ｈ１７、Ｃ１１Ｈ１９、Ｃ１２Ｈ２１、Ｃ１３Ｈ２３、Ｃ１４Ｈ２５、Ｃ１５Ｈ２７、Ｃ１６Ｈ２９、Ｃ１７Ｈ３１、Ｃ１８Ｈ３３、Ｃ１９Ｈ３５、Ｃ２０Ｈ３７、Ｃ２１Ｈ３９、Ｃ２２Ｈ４１、Ｃ２３Ｈ４３、Ｃ２４Ｈ４５、Ｃ２５Ｈ４７、Ｃ２６Ｈ４９、Ｃ２７Ｈ５１、Ｃ２８Ｈ５３、Ｃ２９Ｈ５５、およびＣ３０Ｈ５７で表される、１つの三重結合を含む直鎖状または分岐鎖状のアルキニル基、および２以上の三重結合を含む直鎖状または分岐鎖状のアルキニル基が含まれる。
【００２６】
本明細書において「Ｃ７−２０アルキル」とは、炭素数７〜２０の直鎖状または分岐鎖状のアルキル基を意味し、例えば、Ｃ７Ｈ１５、Ｃ８Ｈ１７、Ｃ９Ｈ１９、Ｃ１０Ｈ２１、Ｃ１１Ｈ２３、Ｃ１２Ｈ２５、Ｃ１３Ｈ２７、Ｃ１４Ｈ２９、Ｃ１５Ｈ３１、Ｃ１６Ｈ３３、Ｃ１７Ｈ３５、Ｃ１８Ｈ３７、Ｃ１９Ｈ３９、Ｃ２０Ｈ４１で表される、直鎖状または分岐鎖状のアルキル基が含まれる。
【００２７】
本明細書において「Ｃ７−２０アルケニル」とは、炭素数７〜２０の直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基を意味し、例えば、Ｃ７Ｈ１３、Ｃ８Ｈ１５、Ｃ９Ｈ１７、Ｃ１０Ｈ１９、Ｃ１１Ｈ２１、Ｃ１２Ｈ２３、Ｃ１３Ｈ２５、Ｃ１４Ｈ２７、Ｃ１５Ｈ２９、Ｃ１６Ｈ３１、Ｃ１７Ｈ３３、Ｃ１８Ｈ３５、Ｃ１９Ｈ３７、Ｃ２０Ｈ３９で表される、直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基が含まれる。当該用語にはさらに、２つの二重結合を含む直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基（例えば、９，１２−オクタデカジエニルなど）、３つの二重結合を含む直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基（例えば、９，１２，１５−オクタデカトリエニルなど）、４つの二重結合を含む直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基（例えば、５，８，１１，１４−エイコサテトラエニルなど）、および５以上の二重結合を含む直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基が含まれる。
【００２８】
本明細書において「Ｃ７−２０アルキニル」とは、炭素数７〜２０の直鎖状または分岐鎖状のアルケニル基を意味し、例えば、Ｃ７Ｈ１１、Ｃ８Ｈ１３、Ｃ９Ｈ１５、Ｃ１０Ｈ１７、Ｃ１１Ｈ１９、Ｃ１２Ｈ２１、Ｃ１３Ｈ２３、Ｃ１４Ｈ２５、Ｃ１５Ｈ２７、Ｃ１６Ｈ２９、Ｃ１７Ｈ３１、Ｃ１８Ｈ３３、Ｃ１９Ｈ３５、Ｃ２０Ｈ３７で表される、１つの三重結合を含む直鎖状または分岐鎖状のアルキニル基、および２以上の三重結合を含む直鎖状または分岐鎖状のアルキニル基が含まれる。
【００２９】
本明細書において「Ｃ１−６アルキルカルボニル」とは、アルキル部分として既に定義したＣ１−６アルキル基を有するアルキルカルボニル基を意味し、例えばＣ１−４アルキルカルボニルが含まれる。
【００３０】
本明細書において「Ｃ１−６アルコキシ」とは、アルキル部分として既に定義した炭素数１〜６のアルキル基を有するアルキルオキシ基を意味し、例えば、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、ｉ−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｓ−ブトキシ、ｉ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、ｎ−ペントキシ、３−メチルブトキシ、２−メチルブトキシ、１−メチルブトキシ、１−エチルプロポキシ、ｎ−ヘキシルオキシ、４−メチルペントキシ、３−メチルペントキシ、２−メチルペントキシ、１−メチルペントキシ、３−エチルブトキシ、シクロペンチルオキシ、シクロヘキシルオキシ、シクロプロピルメチルオキシなどが含まれ、例えば、Ｃ１−４アルコキシおよびＣ１−３アルコキシなども含まれる。また、本明細書において「Ｃ１−４アルコキシ」には、例えばＣ１−３アルコキシなども含まれる。
【００３１】
本明細書において「Ｃ１−６アルコキシカルボニル」とは、アルコキシ部分として既に定義したＣ１−６アルコキシ基を有するアルコキシカルボニル基を意味し、例えばＣ１−３アルコキシカルボニルが含まれる。
【００３２】
本明細書における「アリール」とは、例えば、炭素数が６〜１４の芳香族炭素環基であり、例えばフェニル、ナフチル、アントラセニルなどが含まれる。
本明細書において「アリールカルボニル」とは、アリール部分として既に定義したアリール基を有する基を意味し、例えばベンゾイルなどが含まれる。
【００３３】
本明細書において「Ｃ７−１４アラルキル」とはアリール基を含む炭素数が７〜１４のアリールアルキル基を意味し、例えば、ベンジル、１−フェネチル、２−フェネチル、１−ナフチルメチル、２−ナフチルメチルなどが含まれる。
【００３４】
本明細書における「Ｃ７−１４アラルキルオキシ」には、例えばベンジルオキシ、１−フェネチルオキシ、２−フェネチルオキシ、１−ナフチルメトキシ、２−ナフチルメトキシなどが含まれる。
【００３５】
本明細書における「Ｃ７−１４アラルキルオキシカルボニル」には、例えばベンジルオキシカルボニル、１−フェネチルオキシカルボニル、２−フェネチルオキシカルボニル、１−ナフチルメトキシカルボニル、２−ナフチルメトキシカルボニルなどが含まれる。
【００３６】
本明細書における「Ｃ１−６アルコキシＣ１−６アルキル」には、例えばメトキシメチル、エトキシメチル、２−メトキシエチル、１−メトキシエチルなどが含まれる。
本明細書における「５〜７員含窒素ヘテロ環」には、例えばピロール、ピラゾール、イミダゾール、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、ホモピペリジンなどが含まれる。
【００３７】
上記式（Ｉ）または（Ｉａ）で表される化合物に関する本発明には、互変異性体、幾何異性体、光学異性体等の各種の立体異性体、およびそれらの混合物が含まれる。
本発明の化合物の塩とは、有機化学において通常使用されうる塩であれば特に限定されない。本発明化合物が塩基と形成する塩としては、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、アルミニウム等の無機塩基との塩；メチルアミン、エチルアミン、エタノールアミン等の有機塩基との塩などが挙げられる。当該塩は、酸付加塩であってもよく、かかる塩としては、具体的には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の鉱酸；および、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸等の有機酸酸との酸付加塩が挙げられる。本発明の化合物の塩は、精製に利用することができ、また溶媒（例えば、ジメチルスルホキシドなど）への溶解性が高い点において有用である。本発明化合物の塩としては、酸付加塩、例えば、トリフルオロ酢酸塩、酢酸塩、トシル酸塩、塩酸塩、リン酸塩、または酒石酸塩が挙げられ、好ましくはトリフルオロ酢酸塩が挙げられる。
【００３８】
更に、本発明化合物には、水和物、各種溶媒和物や結晶多形等も含まれる。
本発明に係る式（Ｉ）の化合物は、例えば、以下のスキームに示す工程により合成することができる。
【００３９】
【化４】
2010184867.tif 000005
【００４０】
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ、およびＹは、本明細書において定義したとおりであり；Ｒ２１およびＲ２２は、独立に、水素原子、Ｃ１−６アルキル、アリールおよびＣ７−１４アラルキルから選択され；またはＲ２１およびＲ２２は、それらが結合する窒素原子と一緒になって、５〜７員含窒素ヘテロ環を形成する］
本発明の化合物は、化合物１−１と化合物１−２を縮合した後に酸化することにより調製することができる。第１段階の縮合反応は例えば塩化メチレン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド、トルエン、ジエチルエーテル、１，４−ジオキサンなどの適当な溶媒中で、適当な反応促進剤（例えば１Ｈ−テトラゾールなど）の存在下で行うことができる。この工程は、特に限定はされないが、例えば０〜７０℃、好ましくは１５〜３０℃の反応温度、および例えば１０分〜２日、好ましくは１〜２時間の反応時間で行うことができる。また、本工程においては化合物１−１と化合物１−２を適当な溶媒に溶解し、混合した後にトルエンやベンゼンなどの溶媒により共沸処理を施すことが望ましい。
【００４１】
第２段階の酸化工程は、例えば塩化メチレン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド、トルエン、ジエチルエーテル、１，４−ジオキサンなどの適当な溶媒中で、適当な酸化剤（例えばｔ−ブチルヒドロペルオキシド、メタクロロ過安息香酸、ヨウ素−ピリジン−水等）を使用して行うことができる。この工程は、特に限定はされないが、例えば０〜７０℃、好ましくは１５〜３０℃の反応温度、および例えば５分〜１日、好ましくは３０分〜１時間の反応時間で行うことができる。第２段階の酸化反応は、第１段階の縮合反応を後処理して得られた生成物に対して行うこともできるが、第１段階の後処理を行うことなしにワンポット反応として行ってもよい。
【００４２】
得られる化合物１−３が保護基を有する場合は、適切な脱保護条件に付すことにより、および／または、さらに置換基変換を行うことにより、目的の式（Ｉ）の化合物を得ることができる。
【００４３】
【化５】
2010184867.tif 000006
【００４４】
［式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６、Ｘ、およびＹは、本明細書において定義したとおりであり；Ｒ２４およびＲ２５は、独立に、水素原子、Ｃ１−６アルキル、アリールおよびＣ７−１４アラルキルから選択され；またはＲ２３およびＲ２４は、それらが結合する窒素原子と一緒になって、５〜７員含窒素ヘテロ環を形成する］
本発明の化合物は、化合物２−１と化合物２−２を縮合した後に酸化することにより調製することができる。第１段階の縮合反応は例えば塩化メチレン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド、トルエン、ジエチルエーテル、１，４−ジオキサンなどの適当な溶媒中で、適当な反応促進剤（例えば１Ｈ−テトラゾールなど）の存在下で行うことができる。この工程は、特に限定はされないが、例えば０〜７０℃、好ましくは１５〜３０℃の反応温度、および例えば１０分〜２日の反応時間で行うことができる。
【００４５】
第２段階の酸化工程は、例えば塩化メチレン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド、トルエン、ジエチルエーテル、１，４−ジオキサンなどの適当な溶媒中で、適当な酸化剤（例えばｔ−ブチルヒドロペルオキシド、メタクロロ過安息香酸、ヨウ素−ピリジン−水など）を使用して行うことができる。この工程は、特に限定はされないが、例えば０〜７０℃、好ましくは１５〜３０℃の反応温度、および例えば５分〜１日、好ましくは３０分〜１時間の反応時間で行うことができる。第２段階の酸化反応は、第１段階の縮合反応を後処理して得られた生成物に対して行うこともできるが、第１段階の後処理を行うことなしにワンポット反応として行ってもよい。
【００４６】
得られる化合物２−３が保護基を有する場合は、適切な脱保護条件に付すことにより、および／または、さらに置換基変換を行うことにより、目的の式（Ｉ）の化合物を得ることができる。
【実施例】
【００４７】
以下、本発明の好適な実施例についてさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
試薬およびデータ測定
試薬はＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｃｏ．、東京化成工業、和光純薬、関東化学などから購入したものをさらに精製することなく使用した。１Ｈ−および１３Ｃ−ＮＭＲは、Ｂｒｕｋｅｒ  Ａｖａｎｃｅ  ４００（４００ＭＨｚ）を使用して測定した。質量分析はｍｉｃｒｏＴＯＦ−０５（ＥＳＩ−ＴＯＦ）（Ｂｒｕｋｅｒ製），ＡＸＩＭＡ−ＴＯＦ２（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）（Ｓｈｉｍａｄｚｕ製）で測定した。
［製造例１］４−ヒドロキシ酪酸ヘキサデシルエステル
【００４８】
【化６】
2010184867.tif 000007
【００４９】
（工程１）４−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−１−ブタノール
【００５０】
【化７】
2010184867.tif 000008
【００５１】
無水のＴＨＦ（３０ｍＬ）中の１，４−ブタンジオール（１．６４５ｇ、１８．２５ｍｍｏｌ）の溶液に、アルゴン雰囲気下−７８℃で、ｎ−ＢｕＬｉ（１．６Ｍヘキサン溶液、１１．５ｍＬ、１８．２５ｍｍｏｌ）を加えた。その後、ｔ−ブチルジフェニルシリルクロリド（４．７５ｍＬ、１８．２７ｍｍｏｌ）を加え、−７８℃で１５分間撹拌した。反応混合物を室温に昇温して３０分間撹拌し、さらに還流下で３時間攪拌した。その後減圧下で溶媒を留去し、得られた白色の残渣をクロロホルムに溶解させ、飽和塩化アンモニウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝２／１）により精製し、標題の化合物を得た（５．７４４ｇ、９６％、無色の油状物）。
【００５２】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝７．６８３−７．６６０（ｍ，４Ｈ），７．４３２−７．３６４（ｍ，６Ｈ），３．７１１−３．６５８（ｍ，４Ｈ），２．０３７（ｂｒ，１Ｈ），１．７０７−１．５８８（ｍ，４Ｈ），１．０５１（ｓ，９Ｈ）。
【００５３】
（工程２）４−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−ブタナール
【００５４】
【化８】
2010184867.tif 000009
【００５５】
無水ジクロロエタン（２４ｍｌ）中の４−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−１−ブタノール（４．７４ｇ、１４．４４ｍｍｏｌ）の溶液に、ジメチルスルホキシド（３０ｍｌ）およびトリエチルアミン（１０．００ｍＬ、７１．７４ｍｍｏｌ）を加えた。そこにＳＯ３・ピリジン（１１．５０ｇ、７１．７４ｍｍｏｌ）を少しずつ加え、室温で１時間攪拌した。反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝１／９）により精製し、標題の化合物を得た（４．８１９ｇ、定量的、無色の油状物）。
【００５６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝９．７９２（ｔ，１Ｈ，Ｊ＝５．６Ｈｚ），７．６４３（ｍ，４Ｈ），７．４３１−７．３６７（ｍ，６Ｈ），３．６８６（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），２．５５１（ｍ，２Ｈ），１．８８８（ｍ，２Ｈ），１．２５９（ｍ，２Ｈ），１．０４１（ｓ，９Ｈ）。
【００５７】
（工程３）４−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）酪酸
【００５８】
【化９】
2010184867.tif 000010
【００５９】
ｔ−ブタノール（６０ｍｌ）および水（１６ｍｌ）中の４−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）−ブタナール（４．８１９ｇ、１４．７６ｍｍｏｌ）の溶液に、２−メチル−２−ブテン（６．９０ｍｌ、６５．１３ｍｍｏｌ）およびＮａＨ２ＰＯ４／２Ｈ２Ｏ（２．３００ｇ、１４．７４ｍｍｏｌ）を加えた。そこに、ＮａＣｌＯ２（４．６７０ｇ、５１．６４ｍｍｏｌ）をゆっくりと加え、室温で２時間攪拌した。反応混合物に塩酸（１Ｎ）を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝１：４）により精製し、標題の化合物を得た（５．００８ｇ、９９％）。
【００６０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝９．７９８（ｓ，１Ｈ），７．６５３−７．６２９（ｍ，４Ｈ），７．４４０−７．３５３（ｍ，６Ｈ），４．００３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），２．６０４−２．５６９（ｍ，２Ｈ），１．０２１（ｓ，９Ｈ）。
【００６１】
（工程４）４−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）酪酸ヘキサデシルエステル
【００６２】
【化１０】
2010184867.tif 000011
【００６３】
ジクロロメタン（１５ｍｌ）中の４−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）酪酸（３４３．６ｍｇ、１．００３ｍｍｏｌ）の溶液に、１−ヘキサデカノール（４８４．９ｍｇ、２．００ｍｍｏｌ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（７６８ｍｇ、４．００ｍｍｏｌ）、および４−（ジメチルアミノ）ピリジン（４８９ｍｇ、４．００ｍｍｏｌ）を加え、室温で１５時間撹拌した。反応混合物に水を加え、ジクロロメタンで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝１／９）により精製し、標題の化合物を得た（４１５．５ｍｇ、７３％、無色の油状物）。
【００６４】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝４．０６７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．６９３（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝５．７２Ｈｚ），２．４３７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．１２Ｈｚ），１．９０４−１．８６９（ｍ，２Ｈ），１．６５０−１．５９６（ｍ，３Ｈ），１．２９８−１．２４８（ｍ，２６Ｈ），０．８７３（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８０Ｈｚ）。
【００６５】
（工程５）４−ヒドロキシ酪酸ヘキサデシルエステル
【００６６】
【化１１】
2010184867.tif 000012
【００６７】
ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の４−（ｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）酪酸ヘキサデシルエステル（４１５．５ｇ、０．７３３ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で、テトラブチルアンモニウムフルオリド（ＴＨＦ溶液、１．０Ｍ、１．００ｍＬ、１．００ｍｍｏｌ）を加え、０℃で２．５時間攪拌した。反応混合物に水を加え、酢酸エチルで抽出した。得られた有機層を水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝１／３）で精製し、標題の化合物を得た（２２４ｍｇ、９３％、白色固体）。
【００６８】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝４．０６７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．７８Ｈｚ），３．６９３（ｑ，２Ｈ，Ｊ＝５．７２Ｈｚ），２．４３７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．１２Ｈｚ），１．９０４−１．８６９（ｍ，２Ｈ），１．６５０−１．５９６（ｍ，３Ｈ），１．２９８−１．２４８（ｍ，２６Ｈ），０．８７３（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８０Ｈｚ）。
【００６９】
対応する出発物質を使用して製造例１と同様の手法により、以下の化合物を調製した。
［製造例２］４−ヒドロキシ酪酸ペンタデシルエステル
【００７０】
【化１２】
2010184867.tif 000013
【００７１】
白色固体、１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝４．０７２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ），３．６９２（ｍ，２Ｈ），２．４４２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．８９１（ｍ，２Ｈ），１．６５５（ｍ，２Ｈ），１．５８５（ｂｒ，２４Ｈ），０．８７９（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）。
【００７２】
［製造例３］４−ヒドロキシ酪酸テトラデシルエステル
【００７３】
【化１３】
2010184867.tif 000014
【００７４】
白色固体、１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝４．０９５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．７１９（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），２．４６３（ｔ，２Ｈ，７．０Ｈｚ），１．９２８（ｍ，２Ｈ），１．６６５（ｍ，２Ｈ），１．２７９（ｂｒ，２２Ｈ），０．９０２（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）。
【００７５】
［製造例４］５−ヒドロキシペンタン酸オクタデシルエステル
【００７６】
【化１４】
2010184867.tif 000015
【００７７】
白色固体、１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝４．０６１（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．６５０（ｍ，２Ｈ），２．３４８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．６Ｈｚ），１．７２４（ｍ，２Ｈ），１．６２２（ｍ，４Ｈ），１．３０２（ｂｒ，３０Ｈ），０．８９４（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）。
【００７８】
［製造例５］５−ヒドロキシペンタン酸ヘキサデシルエステル
【００７９】
【化１５】
2010184867.tif 000016
【００８０】
白色固体、１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝４．０６０（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．６５５（ｍ，２Ｈ），２．３４７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．７２３（ｍ，２Ｈ），１．６２２（ｍ，４Ｈ），１．２３９（ｂｒ，２６Ｈ），０．８７６（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）。
【００８１】
［製造例６］（２Ｓ，３Ｒ）−３−［（ジイソプロピルアミノ）−ベンジルオキシホスフィノオキシ］−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）酪酸ベンジルエステル
【００８２】
【化１６】
2010184867.tif 000017
【００８３】
（工程１）（２Ｓ，３Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ヒドロキシ酪酸ベンジルエステル
【００８４】
【化１７】
2010184867.tif 000018
【００８５】
Ｌ−スレオニン（３．１ｇ、２６ｍｍｏｌ）を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液（１００ｍｌ）に溶解させ、０℃で撹拌した。ＴＨＦ（１００ｍｌ）中のベンジルオキシカルボニルクロリド（５．３ｇ、３１ｍｍｏｌ）の溶液を当該溶液に加え、０℃で１時間攪拌した。反応混合物を酢酸エチルで抽出し、有機層をＨＣｌ水溶液（３Ｎ）および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をＴＨＦ（１００ｍｌ）に溶解させ、テトラブチルアンモニウムヨージド（ＴＢＡＩ、２．５ｇ、６．７ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（７．１ｍｌ、５．２ｇ、５１ｍｍｏｌ）を加えた。当該溶液に、室温でベンジルブロミド（６．１ｍｌ、８．８ｇ、５１ｍｍｏｌ）を加え、２０時間攪拌した。反応混合物をジエチルエーテルで希釈し、ＨＣｌ水溶液（３Ｎ）、飽和ＮａＨＣＯ３水溶液および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝２／３）により精製し、標題の化合物を得た（５．８ｇ、６６％、１７ｍｍｏｌ、無色固体）。当該化合物をジクロロメタン／ヘキサンからの再結晶によりさらに精製した。
【００８６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝７．３３（ｍ，１０Ｈ），５．３３（ｍ，１Ｈ），５．１９（ｍ，２Ｈ），５．１１（ｍ，２Ｈ），４．３６（ｍ，２Ｈ），１．８０（ｂｓ，１Ｈ），１．２２（ｄ，３Ｈ，Ｊ＝６．３Ｈｚ）。
【００８７】
（工程２）（２Ｓ，３Ｒ）−３−［（ジイソプロピルアミノ）−ベンジルオキシホスフィノオキシ］−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）酪酸ベンジルエステル
【００８８】
【化１８】
2010184867.tif 000019
【００８９】
ジエチルエーテル（１５０ｍｌ）中のビス（ジイソプロピルアミノ）クロロホスフィン（５ｇ、１９ｍｍｏｌ）の溶液に、０℃で、ジエチルエーテル（１５０ｍｌ）中のベンジルアルコール（２．４ｍｌ、２．５ｇ、２３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（５．２ｍｌ、３．８ｇ、３８ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して加え、０℃で２時間攪拌した。反応混合物を濾過し、ろ液を濃縮した。得られた残渣および（２Ｓ，３Ｒ）−２−ベンジルオキシカルボニルアミノ−３−ヒドロキシ酪酸ベンジルエステル（６．４ｇ、１９ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（８０ｍｌ）に溶解させ、トルエンを加えて濃縮した。得られた残渣をアルゴン雰囲気下でジクロロメタン（５０ｍｌ）に溶解させ、ＴＨＦ（２０ｍｌ）中の１Ｈ−テトラゾール（１．３１ｇ、１９ｍｍｏｌ）の溶液を室温で加えたところ、数分後に白色固体が析出した。反応混合物を室温で２時間攪拌し、その後酢酸エチルで希釈した。濾過した後に、ろ液を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。トリエチルアミンで不活性化したシリカゲルを用いるカラムクロマトグラフィー（溶離液：ヘキサン／酢酸エチル／トリエチルアミン＝１００：０：３→８０：２０：３）により、得られた残渣を精製し、標題の化合物を得た（５．８８ｇ、５４％、無色油状物）。
【００９０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ２Ｃｌ２）：δ＝７．３３（ｍ，１５Ｈ），５．５８（ｄ，１／２Ｈ，Ｊ＝９．２Ｈｚ），５．４８（ｄ，１／２Ｈ．Ｊ＝９．２Ｈｚ），５．０９（ｍ，４Ｈ），４．６７（ｍ，１Ｈ），４．５７（ｍ，２Ｈ），４．３３（ｍ，１Ｈ），３．５７（ｍ，２Ｈ），１．２８（ｍ，３Ｈ），１．１４（ｍ，１２Ｈ）。
【００９１】
［実施例１］（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−［（３−（ヘキサデシルオキシカルボニル）プロポキシ）−ヒドロキシホスホリルオキシ］酪酸
【００９２】
【化１９】
2010184867.tif 000020
【００９３】
（工程１）（２Ｓ，３Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−［（３−（ヘキサデシルオキシカルボニル）プロポキシ）−ベンジルオキシホスホリルオキシ］酪酸ベンジルエステル
【００９４】
【化２０】
2010184867.tif 000021
【００９５】
（２Ｓ，３Ｒ）−３−［（ジイソプロピルアミノ）−ベンジルオキシホスフィノオキシ］−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）酪酸ベンジルエステル（２３２ｍｇ、０．４００ｍｍｏｌ）および４−ヒドロキシ酪酸ヘキサデシルエステル（３２９ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）に溶解させ、トルエンを加えて濃縮した。得られた残渣をアルゴン雰囲気下でジクロロメタン（２ｍｌ）に溶解させ、室温で、ＴＨＦ（３ｍｌ）中の１Ｈ−テトラゾール（１０５ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。数分後に白色の固体が析出した。反応混合物を室温で２時間攪拌し、その後、ｔ−ブチルヒドロペルオキシド（デカン溶液、０．３ｍｌ、１．８ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。反応混合物に炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液を加えて反応をクエンチし、食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝１／４）で精製し、標題の化合物を得た（３９６．５ｍｇ、０．４８１ｍｍｏｌ、７０％、無色の油状物）。
【００９６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝７．３６−７．３２（ｍ，１５Ｈ），５．６５（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，１Ｈ），５．２８−４．９３（ｍ，７Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），４．０５−３．９３（ｍ，４Ｈ），２．３４（ｍ，２Ｈ），１．８９（ｍ，２Ｈ），１．５７（ｍ，２Ｈ），１．４２−１．３５（ｍ，３１Ｈ），０．８９（ｍ，３Ｈ）。
【００９７】
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）計算値（［Ｍ＋Ｎａ］＋）８４６．４３２２、実測値８４６．４３４９。
（工程２）（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−［（３−（ヘキサデシルオキシカルボニル）プロポキシ）−ヒドロキシホスホリルオキシ］酪酸
【００９８】
【化２１】
2010184867.tif 000022
【００９９】
メタノール（２．０ｍｌ）および酢酸（１．０ｍｌ）中の（２Ｓ，３Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−［（３−（ヘキサデシルオキシカルボニル）プロポキシ）−ベンジルオキシホスホリルオキシ］酪酸ベンジルエステル（８９．２ｍｇ、０．１０８ｍｍｏｌ）の溶液にＰｄ−Ｃ（１０％、２．０ｍｇ）を加え、水素雰囲気下で２時間攪拌した。反応混合物を濾過し、濃縮した。得られた粗生成物をメタノールで洗浄することにより精製して標題の化合物を得た（５２．８ｍｇ、０．１０４ｍｍｏｌ、９６％、白色粉末）。得られた固体をトリフルオロ酢酸に溶かし、減圧下溶媒を留去した。この操作を２〜３回繰り返し、残渣を標題化合物のトリフルオロ酢酸塩として得た。
【０１００】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＴＦＡ−ｄ＝４：１）：δ＝４．７８（ｂｒ，１Ｈ），４．７０（ｂｒ，１Ｈ），３．９４（ｂｒ，２Ｈ），３．８２（ｂｒ，２Ｈ），２．３０（ｂｒ，２Ｈ），２．０８（ｂｒ，２Ｈ），１．４９（ｂｒ，２Ｈ），１．３５（ｂｒ，２Ｈ），１．１４（ｂｒ，２７Ｈ），０．７５（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，３Ｈ）
３１Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＴＦＡ−ｄ＝４：１）：δ＝−２．０９
ＨＲＭＳ（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）計算値５３２．３０１５（［Ｍ＋Ｎａ］＋）、実測値５３２．３０２３。
【０１０１】
［実施例２］（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−［（３−（ペンタデシルオキシカルボニル）プロポキシ）−ヒドロキシホスホリルオキシ］酪酸
【０１０２】
【化２２】
2010184867.tif 000023
【０１０３】
（工程１）（２Ｓ，３Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−［（３−（ペンタデシルオキシカルボニル）プロポキシ）−ベンジルオキシホスホリルオキシ］酪酸ベンジルエステル
【０１０４】
【化２３】
2010184867.tif 000024
【０１０５】
（２Ｓ，３Ｒ）−３−［（ジイソプロピルアミノ）−ベンジルオキシホスフィノオキシ］−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）酪酸ベンジルエステル（２００ｍｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）および４−ヒドロキシ酪酸ペンタデシルエステル（１０８ｍｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）に溶解させ、トルエンを加えて濃縮した。得られた残渣をアルゴン雰囲気下でジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解させ、室温で、ＴＨＦ（３ｍｌ）中の１Ｈ−テトラゾール（７０ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。数分後に白色の固体が析出した。反応混合物を室温で２時間攪拌し、その後、ｔ−ブチルヒドロペルオキシド（デカン溶液、０．５ｍｌ，３ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。反応混合物に炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液を加えて反応をクエンチし、食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝１／４）で精製し、標題の化合物を得た（１７０ｍｇ、０．２１０ｍｍｏｌ、６１％、無色の油状物）。
【０１０６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝７．３６１−７．３３６（ｍ，１５Ｈ），５．６２４（ｍ，１Ｈ），５．２４５−４．９８４（ｍ，７Ｈ），４．４８５（ｍ，１Ｈ），４．０２８（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．９３３（ｍ，２Ｈ），２．３２３（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），１．８８０（ｍ，２Ｈ），１．５７７（ｍ，２Ｈ），１．３５７−１．２５２（ｍ，３１Ｈ），０．８７９（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）
３１Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ＝−１．８８，−１．９６
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）計算値８３２．４１６６（［Ｍ＋Ｎａ］＋）、実測値８３２．４１２２。
【０１０７】
（工程２）（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−［（３−（ペンタデシルオキシカルボニル）プロポキシ）−ヒドロキシホスホリルオキシ］酪酸
【０１０８】
【化２４】
2010184867.tif 000025
【０１０９】
メタノール（２．０ｍｌ）および酢酸（１．０ｍｌ）中の（２Ｓ，３Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−［（３−（ペンタデシルオキシカルボニル）プロポキシ）−ベンジルオキシホスホリルオキシ］酪酸ベンジルエステル（１５９．２ｍｇ、０．１９７ｍｍｏｌ）の溶液にＰｄ−Ｃ（１０％、１．０ｍｇ）を加え、水素雰囲気下で２時間攪拌した。反応混合物を濾過し、濃縮した。得られた粗生成物をメタノールで洗浄することにより精製して標題の化合物を得た（９８．０ｍｇ、０．１９８ｍｍｏｌ、定量的、白色粉末）。得られた固体をトリフルオロ酢酸に溶かし、減圧下溶媒を留去した。この操作を２〜３回繰り返し、残渣を標題化合物のトリフルオロ酢酸塩として得た。
【０１１０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＴＦＡ−ｄ＝４：１）：δ＝５．１３（ｂｒ，１Ｈ），４．３３（ｂｒ，１Ｈ），４．１５（ｂｒ，４Ｈ），２．５４（ｂｒ，２Ｈ），２．０５（ｂｒ，２Ｈ），１．６４（ｂｒ，４Ｈ），１．２６（ｂｒ，２５Ｈ），０．８８（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）
３１Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＴＦＡ−ｄ＝４：１）δ＝−２．１８
ＨＲＭＳ（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）計算値５１８．２８５９（［Ｍ＋Ｎａ］＋）、実測値５１８．２８６１。
【０１１１】
［実施例３］（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−［（３−（テトラデシルオキシカルボニル）プロポキシ）−ヒドロキシホスホリルオキシ］酪酸
【０１１２】
【化２５】
2010184867.tif 000026
【０１１３】
（工程１）（２Ｓ，３Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−［（３−（テトラデシルオキシカルボニル）プロポキシ）−ベンジルオキシホスホリルオキシ］酪酸ベンジルエステル
【０１１４】
【化２６】
2010184867.tif 000027
【０１１５】
（２Ｓ，３Ｒ）−３−［（ジイソプロピルアミノ）−ベンジルオキシホスフィノオキシ］−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）酪酸ベンジルエステル（２００ｍｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）および４−ヒドロキシ酪酸テトラデシルエステル（１０４ｍｇ、０．３４４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）に溶解させ、トルエンを加えて濃縮した。得られた残渣をアルゴン雰囲気下でジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解させ、室温で、ＴＨＦ（３ｍｌ）中の１Ｈ−テトラゾール（７０ｍｇ、１．００ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。数分後に白色の固体が析出した。反応混合物を室温で２時間攪拌し、その後、ｔ−ブチルヒドロペルオキシド（デカン溶液、０．５ｍｌ，３ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。反応混合物に炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液を加えて反応をクエンチし、食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝１／４）で精製し、標題の化合物を得た（１５４ｍｇ、０．１９３ｍｍｏｌ、５６％、無色の油状物）。
【０１１６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝７．３６１−７．３３２（ｍ，１５Ｈ），５．６２１（ｍ，１Ｈ），５．２４４−４．８９１（ｍ，７Ｈ），４．４８７（ｍ，１Ｈ），４．０２７（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ），３．９４２（ｍ，２Ｈ），２．３２３（ｍ，２Ｈ），１．８８２（ｍ，２Ｈ），１．２５２（ｍ，３１Ｈ），０．８７８（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）
３１Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ＝−１．８７，−１．９６
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）計算値８１８．４００９（［Ｍ＋Ｎａ］＋）、実測値８１８．３９８７。
【０１１７】
（工程２）（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−［（３−（テトラデシルオキシカルボニル）プロポキシ）−ヒドロキシホスホリルオキシ］酪酸
【０１１８】
【化２７】
2010184867.tif 000028
【０１１９】
メタノール（２．０ｍｌ）および酢酸（１．０ｍｌ）中の（２Ｓ，３Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−［（３−（テトラデシルオキシカルボニル）ブトキシ）−ベンジルオキシホスホリルオキシ］酪酸ベンジルエステル（１４７．４ｍｇ、０．１８５ｍｍｏｌ）の溶液にＰｄ−Ｃ（１０％、１．０ｍｇ）を加え、水素雰囲気下で２時間攪拌した。反応混合物を濾過し、濃縮した。得られた粗生成物をメタノールで洗浄することにより精製して標題の化合物を得た（９０．５ｍｇ、０．１８８ｍｍｏｌ、定量的、白色粉末）。得られた固体をトリフルオロ酢酸に溶かし、減圧下溶媒を留去した。この操作を２〜３回繰り返し、残渣を標題化合物のトリフルオロ酢酸塩として得た。
【０１２０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＴＦＡ−ｄ＝４：１）：δ＝５．２６（ｂｒ，１Ｈ），５．１９（ｂｒ，１Ｈ），４．１５（ｂｒ，４Ｈ），２．５３（ｂｒ，２Ｈ），２．０６（ｂｒ，２Ｈ），１．６６（ｂｒ，４Ｈ），１．２６（ｂｒ，２３Ｈ），０．８８（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．４Ｈｚ）
３１Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＴＦＡ−ｄ＝４：１）δ＝−１．７６
ＨＲＭＳ（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）計算値５０４．２７０２（［Ｍ＋Ｎａ］＋）、実測値５０４．２６６５。
【０１２１】
［実施例４］（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−［（４−（オクタデシルオキシカルボニル）ブトキシキシ）−ヒドロキシホスホリルオキシ］酪酸
【０１２２】
【化２８】
2010184867.tif 000029
【０１２３】
（工程１）（２Ｓ，３Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−［（４−（オクタデシルオキシカルボニル）ブトキシ）−ベンジルオキシホスホリルオキシ］酪酸ベンジルエステル
【０１２４】
【化２９】
2010184867.tif 000030
【０１２５】
（２Ｓ，３Ｒ）−３−［（ジイソプロピルアミノ）−ベンジルオキシホスフィノオキシ］−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）酪酸ベンジルエステル（４３６ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）および５−ヒドロキシペンタン酸オクタデシルエステル（１８５ｍｇ、０．５００ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）に溶解させ、トルエンを加えて濃縮した。得られた残渣をアルゴン雰囲気下でジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解させ、室温で、ＴＨＦ（３ｍｌ）中の１Ｈ−テトラゾール（１０５ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。数分後に白色の固体が析出した。反応混合物を室温で２時間攪拌し、その後、ｔ−ブチルヒドロペルオキシド（デカン溶液、０．５ｍｌ，３ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。反応混合物に炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液を加えて反応をクエンチし、食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝１／４）で精製し、標題の化合物を得た（２３５ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ、５４％、無色の油状物）。
【０１２６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝７．３６０−７．３１９（ｍ，１５Ｈ），５．５８８（ｍ，１Ｈ），５．２５１−４．８７９（ｍ，７Ｈ），４．４８４（ｍ，１Ｈ），４．０３２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝７．２Ｈｚ），３．８８９（ｍ，２Ｈ），２．２６９（ｍ，２Ｈ），１．６１７（ｍ，６Ｈ），１．４３０−１．２５１（ｍ，３３Ｈ），０．８９４（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）
３１Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ＝−１．８５
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）計算値８８８．４７９２（［Ｍ＋Ｎａ］＋）、実測値８８８．４７７３。
【０１２７】
（工程２）（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−［（４−（オクタデシルオキシカルボニル）ブトキシ）−ヒドロキシホスホリルオキシ］酪酸
【０１２８】
【化３０】
2010184867.tif 000031
【０１２９】
メタノール（２．０ｍｌ）および酢酸（１．０ｍｌ）中の（２Ｓ，３Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−［（４−（オクタデシルオキシカルボニル）ブトキシ）−ベンジルオキシホスホリルオキシ］酪酸ベンジルエステル（６８．６ｍｇ、０．０７９ｍｍｏｌ）の溶液にＰｄ−Ｃ（１０％、２．０ｍｇ）を加え、水素雰囲気下２時間攪拌した。反応混合物を濾過し、濃縮した。得られた粗生成物をメタノールで洗浄することにより精製して標題の化合物を得た（２５．６ｍｇ、０．０４６４ｍｍｏｌ、５９％、白色粉末）。得られた固体をトリフルオロ酢酸に溶かし、減圧下溶媒を留去した。この操作を２〜３回繰り返し、残渣を標題化合物のトリフルオロ酢酸塩として得た。
【０１３０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＴＦＡ−ｄ＝４：１）：δ＝５．２４（ｂｒ，１Ｈ），４．３８（ｂｒ，１Ｈ），４．１５（ｂｒ，４Ｈ），２．４８（ｂｒ，２Ｈ），１．７５−１．６６（ｍ，６Ｈ），１．５０−１．２７（ｍ，３３Ｈ），０．８７９（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）
３１Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＴＦＡ−ｄ＝４：１）δ＝−１．９１
ＨＲＭＳ（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）計算値５７４．３４８５（［Ｍ＋Ｎａ］＋）、実測値５７４．３４４２。
【０１３１】
［実施例５］（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−［（４−（ヘキサデシルオキシカルボニル）ブトキシ）−ヒドロキシホスホリルオキシ］酪酸
【０１３２】
【化３１】
2010184867.tif 000032
【０１３３】
（工程１）（２Ｓ，３Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−［（４−（ヘキサデシルオキシカルボニル）ブトキシ）−ベンジルオキシホスホリルオキシ］酪酸ベンジルエステル
【０１３４】
【化３２】
2010184867.tif 000033
【０１３５】
（２Ｓ，３Ｒ）−３−［（ジイソプロピルアミノ）−ベンジルオキシホスフィノオキシ］−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）酪酸ベンジルエステル（４３６ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）および５−ヒドロキシペンタン酸ヘキサデシルエステル（１７１ｍｇ、０．５００ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）に溶解させ、トルエンを加えて濃縮した。得られた残渣をアルゴン雰囲気下でジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解させ、室温で、ＴＨＦ（３ｍｌ）中の１Ｈ−テトラゾール（１０５ｍｇ、１．５ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。数分後に白色の固体が析出した。反応混合物を室温で２時間攪拌し、その後、ｔ−ブチルヒドロペルオキシド（デカン溶液、０．５ｍｌ，３ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。反応混合物に炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液を加えて反応をクエンチし、食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝１／４）で精製し、標題の化合物を得た（２９９ｍｇ、０．３５６ｍｍｏｌ、７１％、無色の油状物）。
【０１３６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝７．３６２−７．３２１（ｍ，１５Ｈ），５．５８７（ｍ，１Ｈ），５．２９８−４．８９４（ｍ，７Ｈ），４．４８４（ｍ，１Ｈ），４．０３２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ），３．９０９（ｍ，２Ｈ），２．２６９（ｍ，２Ｈ），１．６０１（ｍ，６Ｈ），１．４１３−１．２５３（ｍ，２９Ｈ），０．８７９（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）
３１Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ＝−１．８３，−１．９０
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）計算値８６０．４４７９（［Ｍ＋Ｎａ］＋）、実測値８６０．４４８３。
【０１３７】
（工程２）（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−［（４−（ヘキサデシルオキシカルボニル）ブトキシ）−ヒドロキシホスホリルオキシ］酪酸
【０１３８】
【化３３】
2010184867.tif 000034
【０１３９】
メタノール（２．０ｍｌ）および酢酸（１．０ｍｌ）中の（２Ｓ，３Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−［（４−（ヘキサデシルオキシカルボニル）ブトキシ）−ベンジルオキシホスホリルオキシ］酪酸ベンジルエステル（１７８．６ｍｇ、０．２１３ｍｍｏｌ）の溶液にＰｄ−Ｃ（１０％、３．０ｍｇ）を加え、水素雰囲気下２時間攪拌した。反応混合物を濾過し、濃縮した。得られた粗生成物をメタノールで洗浄することにより精製して標題の化合物を得た（８８．２ｍｇ、０．１６８ｍｍｏｌ、７９％、白色粉末）。得られた固体をトリフルオロ酢酸に溶かし、減圧下溶媒を留去した。この操作を２〜３回繰り返し、残渣を標題化合物のトリフルオロ酢酸塩として得た。
【０１４０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＴＦＡ−ｄ＝４：１）：δ＝５．２９（ｂｒ，１Ｈ），４．４８（ｂｒ，１Ｈ），４．１７（ｂｒ，４Ｈ），２．３４（ｂｒ，２Ｈ），１．７６−１．６８（ｍ，６Ｈ），１．５１−１．２８（ｍ，２９Ｈ），０．８８（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）
３１Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＴＦＡ−ｄ＝４：１）δ＝−１．８９
ＨＲＭＳ（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）計算値５４６．３１７２（［Ｍ＋Ｎａ］＋）、実測値５４６．３１７５。
【０１４１】
［実施例６］（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−［（４−（オクタデシルオキシ）ブトキシ）−ヒドロキシホスホリルオキシ］酪酸
【０１４２】
【化３４】
2010184867.tif 000035
【０１４３】
（工程１）４−（オクタデシルオキシ）ブタン−１−オール
【０１４４】
【化３５】
2010184867.tif 000036
【０１４５】
ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の水素化ナトリウム（鉱油中の分散物（６０重量％）、０．４００ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）の懸濁液を０℃で撹拌し、そこにＴＨＦ（１０ｍｌ）中の１，４−ブタンジオール（１．８０ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して加え、０℃で１時間攪拌した。当該懸濁液にＤＭＦ（１０ｍｌ）中のオクタデシルブロミド（３．３３３ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して加え、室温で１０時間攪拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝１／４）により精製し、標題の化合物を得た（１．８８ｇ、５５％、白色固体）。
【０１４６】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝３．６６５（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝５．５Ｈｚ），３．４６６（ｍ，４Ｈ），２．６２３（ｂｒ，１Ｈ），１．６４５（ｍ，６Ｈ），１．２７５（ｂｒ，３０Ｈ），０．９０１（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）。
【０１４７】
（工程２）（２Ｓ，３Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−［（４−（オクタデシルオキシ）ブトキシ）−ベンジルオキシホスホリルオキシ］酪酸ベンジルエステル
【０１４８】
【化３６】
2010184867.tif 000037
【０１４９】
（２Ｓ，３Ｒ）−３−［（ジイソプロピルアミノ）−ベンジルオキシホスフィノオキシ］−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）酪酸ベンジルエステル（４２５ｍｇ、０．７３２ｍｍｏｌ）および４−（オクタデシルオキシ）ブタン−１−オール（２５０ｍｇ、０．７３２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）に溶解させ、トルエンを加えて濃縮した。得られた残渣をアルゴン雰囲気下でジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解させ、室温で、ＴＨＦ（３ｍｌ）中の１Ｈ−テトラゾール（１４０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。数分後に白色の固体が析出した。反応混合物を室温で２時間攪拌し、その後、ｔ−ブチルヒドロペルオキシド（デカン溶液、０．５ｍｌ，３ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。反応混合物に炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液を加えて反応をクエンチし、食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝１／４）で精製し、標題の化合物を得た（２１７ｍｇ、０．２５９ｍｍｏｌ、３５％、無色の油状物）。
【０１５０】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝７．３７１−７．３１９（ｍ，１５Ｈ），５．５５０（ｍ，１Ｈ），５．２３８−４．８９２（ｍ，７Ｈ），４．４８５（ｍ，１Ｈ），３．９４６（ｍ，２Ｈ），３．３７８−３．．３３２（ｍ，４Ｈ），１．６９２−１．５０９（ｍ，６Ｈ），１．４０９−１．２５０（ｍ，３３Ｈ），０．８７８（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）
３１Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ＝−１．８４，−１．８８
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）計算値８６０．４８４２（［Ｍ＋Ｎａ］＋）、実測値８６０．４８３１。
【０１５１】
（工程３）（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−［（４−（オクタデシルオキシ）ブトキシ）−ヒドロキシホスホリルオキシ］酪酸
【０１５２】
【化３７】
2010184867.tif 000038
【０１５３】
メタノール（２．０ｍｌ）および酢酸（１．０ｍｌ）中の（２Ｓ，３Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−［（４−（オクタデシルオキシ）ブトキシ）−ベンジルオキシホスホリルオキシ］酪酸ベンジルエステル（２０３．４ｍｇ、０．２４３ｍｍｏｌ）の溶液にＰｄ−Ｃ（１０％、１．０ｍｇ）を加え、水素雰囲気下で２時間攪拌した。反応混合物を濾過し、濃縮した。得られた粗生成物をメタノールで洗浄することにより精製して標題の化合物を得た（１３９．９ｍｇ、０．２６７ｍｍｏｌ、定量的、白色粉末）。得られた固体をトリフルオロ酢酸に溶かし、減圧下溶媒を留去した。この操作を２〜３回繰り返し、残渣を標題化合物のトリフルオロ酢酸塩として得た。
【０１５４】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＴＦＡ−ｄ＝４：１）：δ＝５．２７（ｍ，１Ｈ），４．４３（ｍ，１Ｈ），４．２０（ｍ，２Ｈ），３．６８（ｍ，４Ｈ），１．７９（ｍ，４Ｈ），１．６５（ｍ，４Ｈ），１．２８（ｂｒ，３１Ｈ），０．８８（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）。
【０１５５】
３１Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＴＦＡ−ｄ＝４：１）：δ＝−１．４９
ＨＲＭＳ（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）計算値５４６．３５３６（［Ｍ＋Ｎａ］＋）、実測値５４６．３５００。
【０１５６】
［実施例７］（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−［（４−（ヘキサデシルオキシ）ブトキシ）−ヒドロキシホスホリルオキシ］酪酸
【０１５７】
【化３８】
2010184867.tif 000039
【０１５８】
（工程１）４−（ヘキサデシルオキシ）ブタン−１−オール
【０１５９】
【化３９】
2010184867.tif 000040
【０１６０】
ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の水素化ナトリウム（鉱油中の分散物（６０重量％）、０．４００ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）の懸濁液を０℃で撹拌し、そこにＴＨＦ（１０ｍｌ）中の１，４−ブタンジオール（１．８０ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して加え、０℃で１時間攪拌した。当該懸濁液にＤＭＦ（１０ｍｌ）中のヘキサデシルブロミド（３．０５ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液を滴下して加え、室温で１０時間攪拌した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝１／４）により精製し、標題の化合物を得た（１．６７４ｇ、５３％、白色粉末）。
【０１６１】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝３．６６２（ｔ，２Ｈ，Ｊ＝６．０Ｈｚ），３．４６４（ｍ，４Ｈ），２．６５８（ｂｒ，１Ｈ），１．７２５−１．５７５（ｍ，６Ｈ），１．２７５（ｂｒ，２６Ｈ），０．８９９（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）。
【０１６２】
（工程２）（２Ｓ，３Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−［（４−（ヘキサデシルオキシ）ブトキシ）−ベンジルオキシホスホリルオキシ］酪酸ベンジルエステル
【０１６３】
【化４０】
2010184867.tif 000041
【０１６４】
（２Ｓ，３Ｒ）−３−［（ジイソプロピルアミノ）−ベンジルオキシホスフィノオキシ］−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）酪酸ベンジルエステル（４３６ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）および４−（ヘキサデシルオキシ）ブタン−１−オール（２３６ｍｇ、７．５０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３ｍｌ）に溶解させ、トルエンを加えて濃縮した。得られた残渣をアルゴン雰囲気下でジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解させ、室温で、ＴＨＦ（３ｍｌ）中の１Ｈ−テトラゾール（１４０ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液を加えた。数分後に白色の固体が析出した。反応混合物を室温で２時間攪拌し、その後、ｔ−ブチルヒドロペルオキシド（デカン溶液、０．５ｍｌ，３ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。反応混合物に炭酸水素ナトリウムの飽和水溶液を加えて反応をクエンチし、食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮した。得られた残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィー（溶離液：酢酸エチル／ヘキサン＝１／４）で精製し、標題の化合物を得た（３７８ｍｇ、０．４６７ｍｍｏｌ、６２％、無色の油状物）。
【０１６５】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ＝７．３６２−７．３２１（ｍ，１５Ｈ），５．５７（ｍ，１Ｈ），５．２０８−４．９４２（ｍ，７Ｈ），４．０５（ｍ，１Ｈ），３．９４７（ｍ，２Ｈ），３．３５４（ｍ，４Ｈ），１．６９２−１．５２７（ｍ，６Ｈ），１．４１０−１．３４７（ｍ，２９Ｈ），０．８７９（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．８Ｈｚ）
３１Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ＝−１．８４，−１．８８
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）計算値８３２．４５２９（［Ｍ＋Ｎａ］＋）、実測値８３２．４５０８。
【０１６６】
（工程３）（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−［（４−（ヘキサデシルオキシ）ブトキシ）−ヒドロキシホスホリルオキシ］酪酸
【０１６７】
【化４１】
2010184867.tif 000042
【０１６８】
メタノール（２．０ｍｌ）および酢酸（１．０ｍｌ）中の（２Ｓ，３Ｒ）−２−（ベンジルオキシカルボニルアミノ）−３−［（４−（ヘキサデシルオキシ）ブトキシ）−ベンジルオキシホスホリルオキシ］酪酸ベンジルエステル（３３５．３ｍｇ、０．４１４ｍｍｏｌ）の溶液にＰｄ−Ｃ（１０％、１．０ｍｇ）を加え、水素雰囲気下２時間攪拌した。反応混合物を濾過し、濃縮した。得られた粗生成物をメタノールで洗浄することにより精製して標題の化合物を得た（２１１．２ｍｇ、０．４２６ｍｍｏｌ、定量的、白色粉末）。
【０１６９】
１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＴＦＡ−ｄ＝４：１）：δ＝５．２６（ｂｒ，１Ｈ），４．３７（ｂｒ，１Ｈ），４．１７（ｂｒ，２Ｈ），３．．６８（ｍ，４Ｈ），１．７９（ｂｒ，４Ｈ），１．６５（ｂｒ，４Ｈ），１．２８（ｂｒ，２７Ｈ），０．８８（ｔ，３Ｈ，Ｊ＝６．６Ｈｚ）。得られた固体をトリフルオロ酢酸に溶かし、減圧下溶媒を留去した。この操作を２〜３回繰り返し、残渣を標題化合物のトリフルオロ酢酸塩として得た。
【０１７０】
３１Ｐ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３／ＴＦＡ−ｄ＝４：１）δ＝−１．４９
ＨＲＭＳ（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）計算値５１８．３２２３（［Ｍ＋Ｎａ］＋）、実測値５１８．３１９６。
【０１７１】
［試験例１］ラット腹腔マスト細胞の脱顆粒促進活性の評価
ラット腹腔マスト細胞（以下、ＲＰＭＣとも称する）をＷｉｓｔａｒラット（雄、体重２００〜２５０ｇ）の腹腔から採取し、２回洗浄し、１×１０５個／ｍＬの細胞密度でＨＥＰＥＳ緩衝タイロード液（１３７ｍＭ  ＮａＣｌ、２．７ｍＭＫＣｌ、１２ｍＭ  ＨＥＰＥＳ、１ｍＭ  ＭｇＣｌ２、２ｍＭ  ＣａＣｌ２、５．６ｍＭデキストロースおよび０．０１％  ウシ血清アルブミン、ｐＨ７．４）に懸濁させた。試験化合物の存在下、３７℃で、細胞を、ＦｃεＲＩ受容体にアゴニスト活性を有することが知られている１００μｇ／ｍＬのコンカナバリンＡ（Ｃｏｎ  Ａ）で刺激した。１５分後、反応を停止するために氷冷したＨＥＰＥＳ緩衝タイロード液を加え、反応混合物を８００ｘｇで５分間４℃で遠心分離した。上澄み液中のヒスタミンの濃度は、Ｓｈｏｒｅらの蛍光アッセイにより決定された（Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．第１２７巻、第１８２〜１８６頁（１９５９年））。ヒスタミンの放出量を全細胞の量のパーセンテージとして計算した。測定値は、保存した細胞を使用して数回の反復実験（ｎ≧３）を行い、平均値±標準誤差として示した。下式：
【０１７２】
【化４２】
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【０１７３】
の化合物（特開２００７−２８４４０２号公報を参照）をポジティブコントロールとして用いた。
上記実施例で調製した化合物のうち、実施例１、４、５、６および７の化合物（トリフルオロ酢酸塩）の試験結果を図１に示す。本発明の化合物は、対照の化合物と同等の活性またはそれを上回る親和性を有し、本発明の化合物がマスト細胞膜の結合を検出することができるプローブとして使用されうることが確認された。
【０１７４】
［試験例２］マウスの全身アナフィラキシー誘発活性の評価
微量天秤を用いて試験化合物（実施例７、トリフルオロ酢酸塩）を遠沈管にとり、０．０１％ＢＳＡ（実質的に脂肪酸フリー、Ｓｉｇｍａ、＃Ａ６００３，）を含むＰＢＳを、濃度が１００μｇ／ｍｌとなるように加え、バスタイプのソニケーターで２分処理を２〜３回行った。マウスはＣ５７ＢＬ／６（８ｗｅｅｋｓ、雄性、体重２０〜２５ｇ、日本ＳＬＣ）を使用した。サーモメーター（ＢＡＴ−１２、Ｐｈｙｓｉｔｅｍｐ）を用いて処理前の直腸温を測定した後、軽いエーテル麻酔下、２７Ｇマイジェクター（＃ＳＳ−１０Ｍ２７１３、テルモ）で試験化合物の上記の溶液（１００μｌ）を眼静注した（１匹あたり１０μｇの投与）。投与直後から１０分おきに経時的に直腸温を測定した。対照として、上記のＬＰＴ（１６：０）を使用した。
【０１７５】
試験結果を図２に示す。本発明の化合物の投与により体温の低下が観察され、本発明の化合物により全身アナフィラキシーが生じることが確認された。
【図１】
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【図２】
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