(57)【要約】【課題】安全性の高い天然抽出物を有効成分とする抗酸化剤及び抗肥満剤、並びに当該天然抽出物を配合した皮膚化粧料及び飲食品を提供する。【解決手段】抗酸化剤又は抗肥満剤に、零香草（Lysimachia foenum-graecum Hance）からの抽出物を有効成分として含有せしめ、皮膚化粧料又は飲食品に、零香草からの抽出物（Lysimachia foenum-graecum Hance）を配合する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
零香草からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする抗酸化剤。
【請求項２】
前記抽出物が、活性酸素消去作用、ラジカル消去作用及び過酸化水素消去作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を有することを特徴とする請求項１に記載の抗酸化剤。
【請求項３】
零香草からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする抗肥満剤。
【請求項４】
前記抽出物が、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用及び／又は脂肪分解促進作用を有することを特徴とする請求項３に記載の抗肥満剤。
【請求項５】
零香草からの抽出物を配合したことを特徴とする皮膚化粧料。
【請求項６】
零香草からの抽出物を配合したことを特徴とする飲食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、抗酸化剤、抗肥満剤、皮膚化粧料及び飲食品に関する。
【背景技術】
【０００２】
活性酸素は、生体細胞内のエネルギー代謝過程で生じるものであり、スーパーオキサイド〔即ち、酸素分子の一電子還元で生じるスーパーオキシドアニオン（・Ｏ２−）〕、過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）、ヒドロキシラジカル（・ＯＨ）、一重項酸素（１Ｏ２）等がある。これら活性酸素は食細胞の殺菌機構にとって必須であり、ウイルスや癌細胞の除去に重要な働きを果たしている。しかしながら、活性酸素の過剰な生成は生体内の膜や組織を構成する生体内分子を攻撃し、各種疾患を誘発する。通常、生体内で生産され他の活性酸素の出発物質ともなっているスーパーオキサイドは、細胞内に含まれているスーパーオキサイドジスムターゼ（ＳＯＤ）の触媒作用により逐次消去されているが、スーパーオキサイドの産生が過剰である場合、あるいはＳＯＤの作用が低下している場合においては、消去が不十分になってスーパーオキサイド濃度が高くなり、これが関節リウマチやベーチェット病などの組織障害や心筋梗塞、脳卒中、白内障、しわ、糖尿病、動脈硬化、肩凝り、冷え性などを起こす。
【０００３】
特に皮膚は紫外線など環境因子の刺激を直接受けるため、スーパーオキサイドが生成し易い器官であるから、スーパーオキサイド濃度の上昇により、例えば、コラーゲン等の生体組織を分解、変性あるいは架橋したり、油脂類を酸化して細胞に障害を与える過酸化脂質を生成したりして、皮膚のしわを形成したり、皮膚の弾力性低下等の老化、炎症、肌の色素沈着を引き起こすという問題がある（非特許文献１参照）。
【０００４】
また、皮膚においてメラニンは、紫外線から生体を保護する役目も果たしているが、過剰生成や不均一な蓄積は、皮膚の黒化、シミ、ソバカス等の色素沈着の原因となる。一般にメラニンは、色素細胞（メラノサイト）の中で生合成される酵素チロシナーゼの働きによって、チロシンからドーパ、ドーパからドーパキノンに変化し、ついで５，６−ジヒドロキシインドフェノール等の中間体を経て形成されるものとされている。
【０００５】
このようなメラニン生成過程においては、皮膚に紫外線が照射されることによって皮膚の表皮細胞において発生する活性酸素が関与していることが示唆されている。すなわち、活性酸素によってメラノサイトが活性化されるとともに、チロシナーゼが活性化され、結果としてメラニンが生成される。したがって、メラニンの生成を抑制し、皮膚の黒化、シミ、ソバカス等の色素沈着を予防・改善するためには、表皮細胞における活性酸素を消去することが有効であると考えられている。
【０００６】
そこで、活性酸素消去物質、ラジカル消去物質、過酸化水素消去物質等を安全性の点で有利な天然物から得る試みがなされており、アブラナ科ブラシカ属植物の抽出物（特許文献１参照）、ベンケイソウ科リュウキュウベンケイ属植物の抽出物（特許文献２参照）、タマコチョウの抽出物（特許文献３参照）、スイオウの抽出物（特許文献４参照）等が知られている。
【０００７】
体内の脂肪は消費エネルギーに対し摂取エネルギーが過剰である場合、その過剰分が白色脂肪細胞の中性脂肪として蓄積して生じる物である。体脂肪の蓄積によって生じる肥満は美容上好ましくないばかりでなく、動脈硬化、糖尿病等の様々な疾病を引き起こす。昨今は飽食の時代であり、過食、運動不足、ストレスなどによる肥満が増加し、美容の観点からも男女を問わず大きな問題となっている。したがって、皮下脂肪等の蓄積は、健康上も好ましくなく、皮下脂肪等の減少・分解、あるいは蓄積の防止が重要な問題となっている。生体内の脂肪を分解するためには、サイクリックＡＭＰの役割が重要となる。
【０００８】
サイクリックＡＭＰは、生体内に存在するトリグリセリドリパーゼを活性化し、活性化されたリパーゼによって脂肪が脂肪酸とグリセロールとに分解される。しかし、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼが活性化されるとサイクリックＡＭＰの分解が誘発され、リパーゼの活性化が阻害される。
【０００９】
そのため、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼの活性を阻害することにより細胞内におけるサイクリックＡＭＰが増量し、脂肪の分解を促進することができるものと考えられる。すなわち、サイクリックＡＭＰ分解酵素であるサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼの活性を阻害してサイクリックＡＭＰの濃度低下を防止すれば、生体内に蓄積された脂肪をエネルギーとしてさらに利用できるはずである。
【００１０】
このような考えに基づき、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用を有するものとしては、例えば、独脚金、小良姜及びサイコの抽出物（特許文献５参照）、ピーナツ渋皮抽出物（特許文献６参照）、ショウガ科マンゴージンジャーの抽出物（特許文献７参照）等が知られている。また、脂肪分解促進作用を有するものとしては、例えば、カバノキ科シラカバの抽出物及びイネ科クマザサの抽出物（特許文献８参照）等が知られている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】特開２００３−０８１８４８号公報
【特許文献２】特開２００５−０２９４８３号公報
【特許文献３】特開２００６−３２１７３０号公報
【特許文献４】特開２００７−００８９０２号公報
【特許文献５】特開２００３−２６１４５７号公報
【特許文献６】特開２００４−２６７１９号公報
【特許文献７】特開２００５−１０４８８６号公報
【特許文献８】特開２００６−４５１２０号公報
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】「フレグランスジャーナル臨時増刊」，1995年，No.14，p.156
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明は、安全性の高い天然抽出物を有効成分とする抗酸化剤及び抗肥満剤、並びに当該天然抽出物を配合した皮膚化粧料及び飲食品を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
上記課題を解決するため、本発明者らが鋭意検討を行った結果、零香草からの抽出物が、優れた抗酸化作用（活性酸素消去作用、ラジカル消去作用、過酸化水素消去作用等）、抗肥満作用（サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用、脂肪分解促進作用等）を有し、抗酸化剤及び抗肥満剤として有効であることを知見した。
【００１５】
上記知見に基づいて、本発明の抗酸化剤又は抗肥満剤は、零香草からの抽出物を有効成分として含有することを特徴とする。また、本発明の皮膚化粧料又は飲食品は、零香草からの抽出物を配合したことを特徴とする。
【００１６】
本発明の抗酸化剤においては、零香草からの抽出物が、活性酸素消去作用、ラジカル消去作用及び過酸化水素消去作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を有することが好ましく、本発明の抗肥満剤においては、零香草からの抽出物が、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用及び／又は脂肪分解促進作用を有することが好ましい。
【発明の効果】
【００１７】
本発明によれば、安全性が高く、原料の入手が容易な天然由来の抗酸化剤、抗肥満剤、皮膚化粧料及び飲食物を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
以下、本発明について説明する。
〔抗酸化剤、抗肥満剤〕
本発明の抗酸化剤又は抗肥満剤は、零香草からの抽出物を有効成分として含有する。
【００１９】
ここで、本発明において「抽出物」には、零香草（学名：Lysimachia foenum-graecum Hance）を抽出原料として得られる抽出液、当該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００２０】
本発明において使用する抽出原料は、零香草（Lysimachia foenum-graecum Hance）である。
【００２１】
零香草（学名：Lysimachia foenum-graecum Hance，別名：零稜香）は、四川、雲南、湖北、広東、広西等、中国各省に野生するサクラソウ科に属する多年生草本であり、これらの地域から容易に入手することができる。零香草は全草に風邪・邪寒を去り、気をめぐらし、鎮痛・回虫駆除作用があることが知られているが、零香草からの抽出物が、優れた活性酸素消去作用、ラジカル消去作用、過酸化水素消去作用、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用又は脂肪分解促進作用を有し、抗酸化剤及び抗肥満剤として有用であることはまったく知られておらず、このことは、本発明者らによる新知見である。
【００２２】
抽出原料として使用し得る零香草の構成部位としては、例えば、葉部、茎部、種子部、果実部、花部、地上部、根部又はこれらの部位の混合物等が挙げられるが、好ましくは地上部である。
【００２３】
零香草からの抽出物が有する活性酸素消去作用、ラジカル消去作用、過酸化水素消去作用、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用又は脂肪分解促進作用を有する物質の詳細は不明であるが、植物の抽出に一般に用いられている抽出方法によって、零香草からこれらの作用を有する抽出物を得ることができる。
【００２４】
例えば、上記植物を乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用いて粉砕し、抽出溶媒による抽出に供することにより、活性酸素消去作用、ラジカル消去作用、過酸化水素消去作用、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用又は脂肪分解促進作用を有する抽出物を得ることができる。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。また、ヘキサン等の非極性溶媒によって脱脂等の前処理を施してから抽出原料として使用してもよい。脱脂等の前処理を行うことにより、零香草の極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００２５】
抽出溶媒としては、極性溶媒を使用するのが好ましく、例えば、水、親水性有機溶媒等が挙げられ、これらを単独で又は２種以上を組み合わせて、室温又は溶媒の沸点以下の温度で使用することが好ましい。
【００２６】
抽出溶媒として使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本発明において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００２７】
抽出溶媒として使用し得る親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられる。
【００２８】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族アルコール１〜９０容量部を混合することが好ましく、水と低級脂肪族ケトンとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して低級脂肪族ケトン１〜４０容量部を混合することが好ましく、水と多価アルコールとの混合液を使用する場合には、水１０容量部に対して多価アルコール１０〜９０容量部を混合することが好ましい。
【００２９】
抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定はされず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の５〜１５倍量（質量比）の抽出溶媒に、抽出原料を浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るために、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製等の処理を施してもよい。
【００３０】
精製は、例えば、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等により行うことができる。得られた抽出液はそのままでも抗酸化剤又は抗肥満剤の有効成分として使用することができるが、濃縮液又は乾燥物としたものの方が使用しやすい。
【００３１】
零香草からの抽出物は特有の匂いを有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、皮膚化粧料や飲食品等に配合する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。
【００３２】
以上のようにして得られる零香草からの抽出物は、抗酸化作用又は抗肥満作用を有するため、これらの作用を利用して抗酸化剤又は抗肥満剤の有効成分として使用することができる。
【００３３】
ここで、零香草からの抽出物が有する抗酸化作用は、例えば、活性酸素消去作用、ラジカル消去作用及び過酸化水素消去作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用に基づいて発揮される。ただし、零香草からの抽出物が有する抗酸化作用は、上記作用に基づいて発揮される抗酸化作用に限定されるものではない。なお、零香草からの抽出物は、活性酸素消去作用、ラジカル消去作用又は過酸化水素消去作用を有するため、それらの作用を利用して、活性酸素消去剤、ラジカル消去剤又は過酸化水素消去剤の有効成分として利用することもできる。また、零香草の抽出物は、その活性酸素消去作用（抗酸化作用）を利用して、皮膚において過剰に生成された活性酸素による皮膚のしわの形成や皮膚の弾力性の低下を抑制するための抗老化剤、又は皮膚において過剰に生成された活性酸素に起因してメラノサイトにおいてメラニンが生成されるのを抑制するための美白剤若しくはメラニン産生抑制剤の有効成分として利用することもできる。
【００３４】
また、零香草からの抽出物が有する抗肥満作用は、例えば、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用及び／又は脂肪分解促進作用に基づいて発揮される。ただし、零香草からの抽出物が有する抗肥満作用は、上記作用に基づいて発揮される抗肥満作用に限定されるものではない。なお、零香草からの抽出物は、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用又は脂肪分解促進作用を有するため、それらの作用を利用して、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害剤又は脂肪分解促進剤の有効成分として利用することもできる。
【００３５】
零香草からの抽出物は、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、錠剤状、液状等の任意の剤形に製剤化することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯臭剤等を用いることができる。零香草からの抽出物は、他の組成物（例えば、後述する皮膚化粧料、飲食品等）に配合して使用することができるほか、軟膏剤、外用液剤、貼付剤等として使用することができる。
【００３６】
なお、本発明の抗酸化剤又は抗肥満剤は、必要に応じて、抗酸化作用（活性酸素消去作用、ラジカル消去作用、過酸化水素消去作用等）、又は抗肥満作用（サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用、脂肪分解促進作用等）を有する他の天然抽出物を配合して有効成分として用いることができる。
【００３７】
本発明の抗酸化剤又は抗肥満剤の投与方法としては、一般に経皮投与、経口投与等が挙げられるが、疾患の種類に応じて、その予防・治療等に好適な方法を適宜選択すればよい。また、本発明の抗酸化剤又は抗肥満剤の投与量も、疾患の種類、重症度、患者の個人差、投与方法、投与期間等によって適宜増減すればよい。
【００３８】
本発明の抗酸化剤は、零香草からの抽出物が有する活性酸素消去作用、ラジカル消去作用及び過酸化水素消去作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を通じて、しわ形成や弾力低下等の皮膚の老化、しみ、関節リウマチやベーチェット病等の組織障害、心筋梗塞、脳卒中、白内障、糖尿病、動脈硬化、肩凝り、冷え性等の活性酸素が関与する各種障害を予防、治療又は改善することができる。ただし、本発明の抗酸化剤は、これらの用途以外にも活性酸素消去作用、ラジカル消去作用及び過酸化水素消去作用からなる群より選ばれる１種又は２種以上の作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００３９】
本発明の抗肥満剤は、零香草からの抽出物が有するサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用及び／又は脂肪分解促進作用を通じて、肥満症、それに伴う動脈硬化、糖尿病、メタボリック症候群等の様々な疾病を予防、治療又は改善することができる。ただし、本発明の抗肥満剤は、これらの用途以外にもサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用及び／又は脂肪分解促進作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００４０】
〔皮膚化粧料〕
零香草からの抽出物は、活性酸素消去作用、ラジカル消去作用、過酸化水素消去作用、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用又は脂肪分解促進作用を有しており、皮膚に適用した場合の使用感と安全性とに優れているため、皮膚化粧料に配合するのに好適である。
【００４１】
この場合、皮膚化粧料には、零香草からの抽出物を配合してもよいし、零香草からの抽出物から製剤化された抗酸化剤又は抗肥満剤を配合してもよい。
【００４２】
零香草からの抽出物、又はそれから製剤化された抗酸化剤若しくは抗肥満剤を皮膚化粧料に配合することによって、皮膚化粧料に活性酸素消去作用、ラジカル消去作用、過酸化水素消去作用、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用又は脂肪分解促進作用を付与することができる。
【００４３】
零香草からの抽出物を配合し得る皮膚化粧料の種類は、特に限定されるものではなく、例えば、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、ゼリー、ファンデーション、リップクリーム、口紅、入浴剤等が挙げられる。
【００４４】
零香草からの抽出物を皮膚化粧料に配合する場合、その配合量は、皮膚化粧料の種類に応じて適宜調整することができるが、好適な配合率は、標準的な抽出物に換算して約０．０００１〜１０質量％であり、特に好適な配合率は、標準的な抽出物に換算して約０．００１〜１質量％である。
【００４５】
本発明の皮膚化粧料は、零香草からの抽出物が有する活性酸素消去作用、ラジカル消去作用、過酸化水素消去作用、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用又は脂肪分解促進作用を妨げない限り、通常の皮膚化粧料の製造に用いられる主剤、助剤又はその他の成分、例えば、収斂剤、殺菌・抗菌剤、美白剤、紫外線吸収剤、保湿剤、細胞賦活剤、消炎・抗アレルギー剤、抗酸化・活性酸素除去剤、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、香料等を併用することができる。このように併用することで、より一般性のある製品となり、また、併用された上記成分との間の相乗作用が通常期待される以上の優れた効果をもたらすことがある。
【００４６】
〔飲食品〕
零香草からの抽出物は、活性酸素消去作用、ラジカル消去作用、過酸化水素消去作用、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用又は脂肪分解促進作用を有しており、消化管で消化されるようなものではないことが確認されており、安全性にも優れているため、飲食品に配合するのに好適である。
【００４７】
この場合に、飲食品には、零香草からの抽出物をそのまま配合してもよいし、零香草からの抽出物から製剤化された抗酸化剤又は抗肥満剤を配合してもよい。
【００４８】
上記零香草からの抽出物、又はそれから製剤化された抗酸化剤若しくは抗肥満剤を飲食品に配合する場合、それらにおける有効成分の配合量は、使用目的、症状、性別等を考慮して適宜変更することができるが、添加対象飲食品の一般的な摂取量を考慮して、成人１日あたりの抽出物摂取量が約１〜１０００ｍｇになるようにするのが好ましく、具体的には、添加対象飲食品に対する零香草からの抽出物の添加割合が、０．００１〜５０質量％であるのが好ましく、０．０１〜２０質量％であるのがより好ましい。また、添加対象飲食品が顆粒、錠剤又はカプセル形態の飲食品である場合には、０．０１〜１００質量％であるのが好ましく、５〜１００質量％であるのがより好ましい。
【００４９】
本発明の飲食品は、零香草からの抽出物をその活性を妨げないような任意の飲食品に配合したものであってもよいし、零香草からの抽出物を主成分とする栄養補助食品であってもよい。
【００５０】
本発明の飲食品を製造する際には、例えば、デキストリン、デンプン等の糖類；ゼラチン、大豆タンパク、トウモロコシタンパク等のタンパク質；アラニン、グルタミン、イソロイシン等のアミノ酸類；セルロース、アラビアゴム等の多糖類；大豆油、中鎖脂肪酸トリグリセリド等の油脂類などの任意の助剤を添加して任意の形状の飲食品にすることができる。
【００５１】
零香草からの抽出物を配合し得る飲食品は特に限定されないが、その具体例としては、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料（これらの飲料の濃縮原液及び調整用粉末を含む）；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓；そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、しゅうまいの皮、中華麺、即席麺等の麺類；飴、チューインガム、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳等の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品；ソース、たれ等の調味料；スープ、シチュー、サラダ、惣菜、漬物；その他種々の形態の健康・栄養補助食品；錠剤、カプセル剤、ドリンク剤などが挙げられ、これらの飲食品に上記零香草からの抽出物を配合するときに、通常用いられる補助的な原料や添加物を併用することができる。
【００５２】
なお、本発明の抗酸化剤、抗肥満剤、皮膚化粧料又は飲食品は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。
【実施例】
【００５３】
以下、製造例、試験例及び配合例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の各例に何ら制限されるものではない。
【００５４】
〔製造例１〕零香草地上部抽出物の製造
零香草の地上部の粗粉砕物それぞれ１０３ｇを抽出溶媒１０００ｍＬに投入し、穏やかに攪拌しながら２時間、８０℃に保ち、熱時濾過した。得られた抽出液を４０℃で減圧下にて濃縮し、さらに減圧乾燥機で乾燥させ、零香草地上部抽出物を得た。抽出溶媒として水、５０容量％エタノール（水とエタノールとの容量比＝１：１）又は８０容量％エタノール（水とエタノールとの容量比＝１：４）を用いたときの各抽出物の収率を表１に示す。
【００５５】
【表１】
2010184874.tif 000002
【００５６】
〔試験例１〕スーパーオキサイド消去作用試験
実施例１で得られた零香草地上部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにしてスーパーオキサイド消去作用を試験した。
【００５７】
試験管に、０．０５ＭのＮａ２ＣＯ３緩衝液（ｐＨ１０．２）を２．４ｍＬ、並びに３ｍＭのキサンチン、３ｍＭのＥＤＴＡ、ウシ血清アルブミン溶液及び０．７５ｍＭのＮＢＴ（nitroblue tetrazolium）を０．１ｍＬずつ加え、これに試料溶液（試料１〜３）０．１ｍＬを添加し、２５℃で１０分間放置した。次いで、酵素溶液としてのキサンチンオキシダーゼ溶液を加えて素早く攪拌し、２５℃で２０分間静置した。その後、６ｍＭの塩化銅０．１ｍLを加えて反応を停止させて、波長５６０ｎｍにおける吸光度を測定した。
【００５８】
酵素溶液を添加しない場合についても、同様の操作と吸光度の測定を行い、さらに、試料溶液を添加せずに蒸留水を添加した場合についても同様の測定を行った。得られた結果から、下記式によりスーパーオキサイド消去率（％）を算出した。
【００５９】
スーパーオキサイド消去率(％)＝{１−(Ａ−Ｂ)／(Ｃ−Ｄ)}×１００
式中、Ａは「酵素溶液添加・試料溶液添加時の吸光度」を表し、Ｂは「酵素溶液無添加・試料溶液添加時の吸光度」を表し、Ｃは「酵素溶液添加・試料溶液無添加時の吸光度」を表し、Ｄは「酵素溶液無添加・試料溶液無添加時の吸光度」を表す。
【００６０】
次に、試料濃度を段階的に減少させて上記スーパーオキサイド消去率の測定を行い、スーパーオキサイド消去率が５０％になる試料濃度ＩＣ５０（μｇ／ｍＬ）を内挿法により求めた。
結果を表２に示す。
【００６１】
【表２】
2010184874.tif 000003
【００６２】
表２に示すように、零香草地上部抽出物は、優れたスーパーオキサイド消去作用を有することが確認された。また、スーパーオキサイド消去作用の程度は、零香草地上部抽出物の濃度によって調節できることが確認された。
【００６３】
〔試験例２〕ラジカル消去作用試験
実施例１で得られた零香草地上部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにしてラジカル消去作用を試験した。
【００６４】
１．５×１０−４ＭのＤＰＰＨ（diphenyl-p-picrylhydrazyl）エタノール溶液３ｍＬに、試料溶液（試料１〜３）３ｍＬを加え、直ちに容器を密栓して振り混ぜ、３０分間静置した後、波長５２０ｎｍの吸光度を測定した。
【００６５】
コントロールとして、試料溶液の代わりに試料を溶解した溶媒のみを用いて同様の操作をして、波長５２０ｎｍの吸光度を測定した。また、ブランクとして、エタノールに試料溶液３ｍＬを加えた後、直ちに波長５２０ｎｍの吸光度を測定した。得られた結果から、下記式によりラジカル消去率（％）を算出した。
【００６６】
ラジカル消去率(％)＝{１−(Ｂ−Ｃ)／Ａ}×１００
式中、Ａは「コントロールの吸光度」を表し、Ｂは「試料溶液添加時の吸光度」を表し、Ｃは「ブランクの吸光度」を表す。
【００６７】
次に、試料濃度を段階的に減少させて上記ラジカル消去率の測定を行い、ラジカルの消去率が５０％になる試料濃度ＩＣ５０（μｇ／ｍＬ）を内挿法により求めた。
結果を表３に示す。
【００６８】
【表３】
2010184874.tif 000004
【００６９】
表３に示すように、零香草地上部抽出物は優れたラジカル消去作用を有することが確認された。また、ラジカル消去作用の程度は、零香草地上部抽出物の濃度によって調節できることが確認された。
【００７０】
〔試験例３〕過酸化水素消去作用試験
実施例１で得られた零香草地上部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにして過酸化水素消去作用を試験した。
【００７１】
過酸化水素の標準溶液（濃度：１．５ｍＭ）１０μＬに試料溶液（試料１〜３）１０μＬを加え、３７℃で２０分間インキュベーションした後、発色試薬（１０ｍＭのＤＡ−６４（和光純薬社製）、トライトンＸ-１００を０．５％含む０．１ＭのＰＩＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．０）に１００ｕｎｉｔ／ｍＬのペルオキシダーゼ溶液（和光純薬社製）１ｍＬを加え、全量を１００ｍＬに調整したもの）２．９８ｍＬを添加し、３７℃で５分間インキュベーションした後、波長７２７ｎｍにおける吸光度を測定した。
【００７２】
過酸化水素の標準溶液を添加していない場合についても、同様の操作と吸光度測定を行い、さらに、試料溶液を添加せずに蒸留水を添加した場合についても同様の測定を行った。得られた結果から、下記式により過酸化水素消去率（％）を算出した。
【００７３】
過酸化水素消去率(％)＝{１−(Ａ−Ｂ)／(Ｃ−Ｄ)}×１００
式中、Ａは「過酸化水素標準溶液添加・試料溶液添加時の吸光度」を表し、Ｂは「過酸化水素標準溶液無添加・試料溶液添加時の吸光度」を表し、Ｃは「過酸化水素標準溶液添加・試料溶液無添加時の吸光度」を表し、Ｄは「過酸化水素標準溶液無添加・試料溶液無添加時の吸光度」を表す。
【００７４】
次に、試料濃度を段階的に減少させて上記過酸化水素消去率の測定を行い、過酸化水素消去率が５０％になる試料濃度ＩＣ５０（μｇ／ｍＬ）を内挿法により求めた。
結果を表４に示す。
【００７５】
【表４】
2010184874.tif 000005
【００７６】
表４に示すように、零香草地上部抽出物は優れた過酸化水素消去作用を有することが確認された。また、過酸化水素消去作用の程度は、零香草地上部抽出物の濃度によって調節できることが確認された。
【００７７】
〔試験例４〕サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用試験
実施例１で得られた零香草地上部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにしてサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用を試験した。
【００７８】
５ｍＭの塩化マグネシウムを含有するトリス塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）０．２ｍＬに胎児血清アルブミン溶液０．１ｍＬ及びサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ溶液０．１ｍＬを加え、さらに５０％ＤＭＳＯを用いて所定濃度で溶解した試料溶液（試料１〜３）０．０５ｍＬを加え、３７℃で５分間プレインキュベーションした。
【００７９】
次いで、サイクリックＡＭＰ溶液０．０５ｍＬを加え、３７℃で６０分間インキュベーションした。３分間沸騰水浴上で煮沸することにより反応を停止させ、これを遠心（２２６０×ｇ，１０分間，４℃）し、上清中の反応基質・５’−ＡＭＰを下記の条件で高速液体クロマトグラフィーを用いて分析した。また、試料溶液を添加せずに同様の方法で空試験を行った。
【００８０】
＜高速液体クロマトグラフィー条件＞
製品名：Chromatocorder 12（SYSTEM INSTRUMENTS社製）
固定相：Wakosil 5C18（和光純薬工業社製）
カラム径：４．６ｍｍ
カラム長：２５０ｍｍ
移動相：1mM TBAP in 25mM KH2PO4:CH3CN＝90:10
移動相流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ
検出：ＵＶ，２６０ｎｍ
【００８１】
次に、サイクリックＡＭＰ標準品のピーク面積（Ａ）、試料無添加時におけるサイクリックＡＭＰ標準品とサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼとの反応溶液の上清のピーク面積（Ｂ１）及び試料添加時におけるサイクリックＡＭＰ標準品とサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼとの反応溶液の上清のピーク面積（Ｂ２）を求めた。得られた結果から、下記式により試料無添加時のサイクリックＡＭＰ標準品の分解率（Ｃ）及び試料添加時のサイクリックＡＭＰ標準品の分解率（Ｄ）を算出した。
【００８２】
試料無添加時の標準品分解率(Ｃ，％)＝(１−Ｂ１／Ａ)×１００
試料添加時の標準品の分解率(Ｄ，％)＝(１−Ｂ２／Ａ)×１００
【００８３】
その後、上記式により算出した各分解率（Ｃ，Ｄ）に基づいて、下記式によりサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害率（％）を算出した。
サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害率(％)＝(１−Ｄ／Ｃ)×１００
【００８４】
試料溶液の濃度を段階的に減少させて、上記サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害率を算出し、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害率が５０％になる試料濃度ＩＣ５０（μｇ／ｍＬ）を内挿法により求めた。
結果を表５に示す。
【００８５】
【表５】
2010184874.tif 000006
【００８６】
表５に示すように、零香草地上部抽出物は優れたサイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用を有することが確認された。また、サイクリックＡＭＰホスホジエステラーゼ活性阻害作用の程度は、零香草地上部抽出物の濃度によって調節できることが確認された。
【００８７】
〔試験例５〕脂肪分解促進作用試験
実施例１で得られた零香草地上部抽出物（試料１〜３）について、以下のようにして脂肪分解促進作用を試験した。
【００８８】
ロッドベルの方法（Rodbell M., J. Biol. Chem., 239, 375(1964)）により、ウィスター系雄性ラット（体重１５０〜２００ｇ）の副睾丸脂肪組織からコラゲナーゼ溶液を用いて遊離脂肪細胞を調製した。得られた遊離脂肪細胞の懸濁液９０μＬに、最終試料濃度が４００μｇ／ｍＬとなるように５０％ＤＭＳＯで調製した試料溶液（試料１〜３）１０μＬを加え、３７℃にて９０分間反応した。反応後、反応液中に遊離した脂肪酸量をＮＥＦＡ−Ｃ−テストワコー（和光純薬工業社製）を用いて測定した。同様にして、試料を添加しない場合についても測定した。得られた結果から、下記式により脂肪分解促進率（％）を算出した。
【００８９】
脂肪分解促進率(％)＝Ａ／Ｂ×１００
式中、Ａは「試料添加時の遊離脂肪酸量」を表し、Ｂは「試料無添加時の遊離脂肪酸量」を表す。
結果を表６に示す。
【００９０】
【表６】
2010184874.tif 000007
【００９１】
表６に示すように、零香草地上部抽出物は、優れた脂肪分解促進作用を有することが確認された。
【００９２】
〔配合例１〕
下記組成に従い、乳液を常法により製造した。
零香草地上部抽出物（製造例１，試料１〜３のいずれか１種）  ０．１０ｇ
ホホバオイル                                              ４．００ｇ
１，３−ブチレングリコール                                ３．００ｇ
アルブチン                                                ３．００ｇ
ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．）          ２．５０ｇ
オリーブオイル                                            ２．００ｇ
スクワラン                                                ２．００ｇ
セタノール                                                ２．００ｇ
モノステアリン酸グリセリル                                ２．００ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．）    ２．００ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                  ０．１５ｇ
グリチルリチン酸ステアリル                                ０．１０ｇ
黄杞エキス                                                ０．１０ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム                                ０．１０ｇ
イチョウ葉エキス                                          ０．１０ｇ
コンキオリン                                              ０．１０ｇ
オウバクエキス                                            ０．１０ｇ
カミツレエキス                                            ０．１０ｇ
香料                                                      ０．０５ｇ
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【００９３】
〔配合例２〕
下記組成に従い、化粧水を常法により製造した。
零香草地上部抽出物（製造例１，試料１〜３のいずれか１種）  ０．１０ｇ
グリセリン                                                ３．００ｇ
１，３−ブチレングリコール                                ３．００ｇ
アスコルビン酸グルコシド                                  ２．００ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．）    ２．００ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                  ０．１５ｇ
グリチルリチン酸二カリウム                                ０．１０ｇ
クエン酸                                                  ０．１０ｇ
クエン酸ソーダ                                            ０．１０ｇ
油溶性甘草エキス                                          ０．１０ｇ
海藻エキス                                                ０．１０ｇ
クジンエキス                                              ０．１０ｇ
キシロビオースミクスチャー                                ０．０５ｇ
香料                                                      ０．０５ｇ
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【００９４】
〔配合例３〕
下記組成に従い、クリームを常法により製造した。
零香草地上部抽出物（製造例１，試料１〜３のいずれか１種）  ０．１０ｇ
スクワラン                                              １０．００ｇ
１，３−ブチレングリコール                                ６．００ｇ
流動パラフィン                                            ５．００ｇ
サラシミツロウ                                            ４．００ｇ
セタノール                                                ３．００ｇ
モノステアリン酸グリセリル                                ３．００ｇ
ラノリン                                                  ２．００ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（２０Ｅ．Ｏ．）    １．５０ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                  １．５０ｇ
ステアリン酸                                              １．００ｇ
アルコルビン酸リン酸マグネシウム                          ０．１０ｇ
グリチルレチン酸                                          ０．１０ｇ
酵母抽出液                                                ０．１０ｇ
シソ抽出液                                                ０．１０ｇ
シナノキ抽出液                                            ０．１０ｇ
ジユ抽出液                                                ０．１０ｇ
香料                                                      ０．１０ｇ
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【００９５】
〔配合例４〕
下記組成に従い、パックを常法により製造した。
零香草地上部抽出物（製造例１，試料１〜３のいずれか１種）  ０．２０ｇ
ポリビニルアルコール                                    １５．００ｇ
エタノール                                              １０．００ｇ
プロピレングリコール                                      ７．００ｇ
ポリエチレングリコール                                    ３．００ｇ
セージ抽出液                                              ０．１０ｇ
トウキ抽出液                                              ０．１０ｇ
ニンジン抽出液                                            ０．１０ｇ
パラオキシ安息香酸エチル                                  ０．０５ｇ
香料                                                      ０．０５ｇ
精製水                                    残部（全量を１００ｇとする）
【００９６】
〔配合例５〕
下記組成の錠剤状栄養補助食品を常法により製造した。
零香草地上部抽出物（製造例１，試料１〜３のいずれか１種）      ３０ｇ
粉糖（ショ糖）                                              １７８ｇ
ソルビット                                                    １０ｇ
グリセリン脂肪酸エステル                                      １２ｇ
【００９７】
〔配合例６〕
下記組成の顆粒状栄養補助食品を常法により製造した。
零香草地上部抽出物（製造例１，試料１〜３のいずれか１種）      ２０ｇ
ビートオリゴ糖                                            １０００ｇ
ビタミンＣ                                                  １６７ｇ
ステビア抽出物                                                １０ｇ
【産業上の利用可能性】
【００９８】
本発明の抗酸化剤は、活性酸素が関与する各種障害の予防、治療又は改善に、本発明の抗肥満剤は、肥満や、それに伴う動脈硬化、糖尿病、メタボリック症候群等の様々な疾病等の予防、治療又は改善に大きく貢献できる。