(57)【要約】【課題】不飽和脂肪酸高含有油脂を含有し、高い保存安定性と嗜好性を具備するペットフードを提供する。【解決手段】次の成分（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）、（Ａ）二重結合を２つ以上含む不飽和脂肪酸が、油脂を構成する脂肪酸中の２０質量％以上である油脂    ６〜５０質量％、（Ｂ）鉄、鉄化合物、銅及び銅化合物から選ばれるミネラル成分    ミネラル換算合計で０．０００５〜１質量％、（Ｃ）クエン酸及び／又はその塩    合計量がクエン酸換算で０．７質量％以上を含有し、ｐＨが３．５〜７．０であるペットフード。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
次の成分（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）、
（Ａ）二重結合を２つ以上含む不飽和脂肪酸が、油脂を構成する脂肪酸中の２０質量％以上である油脂    ６〜５０質量％、
（Ｂ）鉄、鉄化合物、銅及び銅化合物から選ばれるミネラル成分    ミネラル換算合計で０．０００５〜１質量％、
（Ｃ）クエン酸及び／又はその塩    合計量がクエン酸換算で０．７質量％以上
を含有し、ｐＨが３．５〜７．０であるペットフード。
【請求項２】
前記クエン酸の塩がクエン酸アルカリ金属塩である、請求項１記載のペットフード。
【請求項３】
前記成分（Ｃ）が、クエン酸とクエン酸の塩を共に含む、請求項１又は２記載のペットフード。
【請求項４】
前記油脂（Ａ）中に、ジアシルグリセロールを１０〜８５質量％含有する請求項１〜３のいずれか１項記載のペットフード。
【請求項５】
二重結合を２つ以上含む不飽和脂肪酸が、油脂を構成する脂肪酸中の２０質量％以上である油脂と、鉄、鉄化合物、銅及び銅化合物から選ばれるミネラル成分をミネラル換算合計で０．０００５〜１質量％含むペットフードの製造方法であって、クエン酸及びクエン酸のアルカリ金属塩を合計で、クエン酸換算で０．７質量％以上配合することを特徴とするペットフードの製造方法。
【請求項６】
ペットフード中の前記クエン酸／クエン酸アルカリ金属塩（質量比）が１０／１〜１／１０となるように、クエン酸及びクエン酸アルカリ金属塩を添加する、請求項５記載のペットフードの製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、不飽和脂肪酸高含有油脂を含むペットフードに関する。
【背景技術】
【０００２】
ペットブームによりペット飼育数は増大しており、それに伴いペットの高齢化、運動不足、栄養過多等によりペットの肥満、糖尿病、肝臓疾患等のヒトの成人病と同様の疾病が増大している。また、避妊手術後のホルモンバランスの狂いによって肥満する犬や猫が多くなっている。このような肥満や体重増加を防止するためのペットフードが数多く開発されている。例えば、不飽和脂肪酸含有量を高くしたジアシルグリセロール含有油脂を配合したペットフードが提案されている。
【０００３】
このようなペットフードは、不飽和脂肪酸を多く含むため、保存環境によっては酸化され易く、臭い、嗜好性などに影響を与えることがある。そこで本出願人は高ミネラル含有のペットフードにおいて、ビタミンＣ誘導体を配合する技術（特許文献１）や、天然由来の抗酸化剤を含有させると共にペットフード中の鉄イオン及び銅イオンの含有量をコントロールする技術（特許文献２）により、長期保存安定性を改善することを提案してきた。
【特許文献１】特開２００５−２０４６５９号公報
【特許文献２】特開２００７−１１０９１６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
本発明は、不飽和脂肪酸高含有油脂を含有する、更に高い保存安定性と嗜好性を具備するペットフードに関する。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、二重結合を２つ以上有する不飽和脂肪酸含有量が高い油脂を含有し、かつミネラル成分を含有するペットフードについて、金属塩、特に酸化促進作用の強い銅及び鉄を含有するペットフードについて検討を行った結果、クエン酸及び／又はその塩を０．７質量％以上含有し、かつペットフードのｐＨを３．５〜７とすることにより、酸化が著しく抑制されるとともに嗜好性が良好であることを見出した。
【０００６】
すなわち、本発明は、次の成分（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）、
（Ａ）二重結合を２つ以上含む不飽和脂肪酸が、油脂を構成する脂肪酸中の２０質量％以上である油脂    ６〜５０質量％、
（Ｂ）鉄、鉄化合物、銅及び銅化合物から選ばれるミネラル成分    ミネラル換算合計で０．０００５〜１質量％、
（Ｃ）クエン酸及び／又はその塩    合計量がクエン酸換算で０．７質量％以上
を含有し、ｐＨが３．５〜７．０であるペットフードを提供するものである。
また、本発明は、二重結合を２つ以上含む不飽和脂肪酸が、油脂を構成する脂肪酸中の２０質量％以上である油脂と、鉄、鉄化合物、銅及び銅化合物から選ばれるミネラル成分をミネラル換算合計で０．０００５〜１質量％含むペットフードの製造方法であって、クエン酸及びクエン酸のアルカリ金属塩を合計で、クエン酸換算で０．７質量％以上配合することを特徴とするペットフードの製造方法を提供するものである。
【発明の効果】
【０００７】
本発明のペットフードは、抗肥満効果が高いと共に、長期保存安定性に著しく優れており、長期保存しても臭いの変化、嗜好性の低下等が非常に効果的に抑制可能である。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明のペットフードは、（Ａ）油脂を含有し、当該油脂が、その構成脂肪酸中に二重結合を２つ以上含む不飽和脂肪酸（以下、単に高度不飽和脂肪酸ともいう）を２０質量％（以下、単に％で示す）以上含有するものである。構成脂肪酸中の高度不飽和脂肪酸の含量は、抗肥満効果、皮膚及び被毛の健康の点から、更に２０〜９０％、更に２３〜８０％、特に２５〜７０％であることが好ましい。また、構成脂肪酸が高度不飽和脂肪酸である油脂のペットフード中の含量は、２〜４５％が好ましく、２．５〜４０％がより好ましく、３〜３５％が更に好ましい。ここで、高度不飽和脂肪酸としては、炭素数１８〜２４の高度不飽和脂肪酸が挙げられ、リノール酸、リノレン酸、ＥＰＡ、ＤＨＡ、アラキドン酸が好適である。
なお、油脂を構成する脂肪酸としては、高度不飽和脂肪酸以外に、二重結合が１つの不飽和脂肪酸及び飽和脂肪酸を含んでいても良い。ここで、二重結合が１つの不飽和脂肪酸としては炭素数１６〜２４の不飽和脂肪酸が挙げられ、オレイン酸、パルミトオレイン酸等が好ましい。また、飽和脂肪酸としては炭素数１２〜１８の飽和脂肪酸が挙げられ、パルミチン酸、ステアリン酸等が好適である。
【０００９】
本発明のペットフード中の油脂の含有量は、抗肥満効果、ペットフードの不快臭除去の点から６〜５０％であり、６〜４５％が好ましく、６〜４０％が更に好ましく、８〜３０％が特に好ましい。
【００１０】
本発明のペットフードに用いられる上記の油脂としては、サフラワー油、オリーブ油、綿実油、コーン油、ナタネ油、大豆油、パーム油、ひまわり油、亜麻仁油、ごま油、ラード、牛脂、魚油、乳脂等が挙げられるが、油脂として配合したものに限られず、他の植物原料、又は動物原料中に油脂が含有されている場合にはこれも含む。
【００１１】
本発明のペットフードに用いられる油脂には、モノアシルグリセロール（ＭＡＧ）、ジアシルグリセロール(ＤＡＧ)及びトリアシルグリセロール（ＴＡＧ）から1種以上を含有することが可能であるが、この中でＤＡＧを含有することが肥満抑制効果の点から好ましい。ＤＡＧの含有量は肥満防止効果の点から油脂中に１０〜８５％、更に２０〜８０％、特に２５〜５０％が好ましい。また、ＤＡＧはペットフード中に０．５〜４０％、更に１〜３０％、特に１．５〜２５％が同様の観点から好ましい。
【００１２】
ＤＡＧは、その構成脂肪酸の８０〜１００％が不飽和脂肪酸（ＵＦＡ）であることが好ましく、より好ましくは９０〜１００％、更に９３〜１００％、特に９３〜９８％、殊更９４〜９８％であるのが肥満防止効果の点で好ましい。ここで、この不飽和脂肪酸の炭素数は１４〜２４、更に１６〜２２であるのが好ましい。
ＤＡＧを構成する脂肪酸のうち、リノール酸の含有量は１５〜６５％、更に２０〜６０％、また更に３０〜５５％、特に３５〜５０％であるのが肥満防止効果及び摂取性の点で好ましい。更に、酸化安定性、肥満防止効果の点から、ＤＡＧ中のリノール酸／オレイン酸の含有質量比が０．０１〜２．０、更に０．１〜１．８、特に０．３〜１．７であることが好ましい。
ＤＡＧを構成する脂肪酸のうち、リノレン酸の含有量は１５％未満、更に０〜１３％、また更に１〜１０％、特に２〜９％であるのが肥満防止効果、摂取性、及び酸化安定性の点で好ましい。リノレン酸は、異性体としてα−リノレン酸とγ−リノレン酸が知られているが、α−リノレン酸が好ましい。
なお、ＤＡＧが油脂成分中１００％である場合には、脂肪酸組成中にリノール酸とリノレン酸合計量が２０％以上となることが好ましい。
【００１３】
ＤＡＧを構成する脂肪酸のうち、飽和脂肪酸（ＳＦＡ）の含有量は２０％未満であることが好ましく、更に０〜１０％、また更に０〜７％、特に２〜７％、殊更２〜６％であるのが肥満防止効果、摂取性、及び酸化安定性の点で好ましい。ＳＦＡとしては、炭素数１４〜２４、更に１６〜２２のものが好ましく、パルミチン酸、ステアリン酸が特に好ましい。
【００１４】
ＤＡＧを構成する脂肪酸中、炭素数１２以下の脂肪酸の含有量は、風味、摂取性の点で５％以下であるのが好ましく、更に０〜２％、特に０〜１％、実質的に含まないのが殊更好ましい。残余の構成脂肪酸は炭素数１４〜２４、特に１６〜２２であるのが好ましい。
【００１５】
また、肥満防止効果の点から、ＤＡＧ中の１，３−ジアシルグリセロールの割合が５０％以上、更に５２〜１００％、また更に５４〜９０％、特に５６〜８０％であるジアシルグリセロールを用いるのが好ましい。
【００１６】
ＤＡＧは、上述した天然油脂中に含有されるものを含んでいても良いが、ＤＡＧの含有量を調整するために、上述した油脂由来の脂肪酸とグリセリンとのエステル化反応、油脂とグリセリンとのエステル交換反応等により得たものを配合することが好ましい。
【００１７】
なお、ＤＡＧは、例えば（１）構成脂肪酸中に高度不飽和脂肪酸を２０％以上含有する油脂（例、サフラワー油、オリーブ油、綿実油、コーン油、ナタネ油、大豆油、パーム油、ひまわり油、亜麻仁油、ごま油、ラード、牛脂、魚油、乳脂、あるいはそれらの分別油、ランダム化油、硬化油、エステル交換油）から選ばれた油脂とグリセリンとを、アルカリ金属又はアルカリ土類金属の水酸化物の存在下でエステル交換させるか、又は（２）これらの油脂由来の高度不飽和脂肪酸含有量２０％以上の脂肪酸混合物とグリセリンとのエステル化反応により得ることができる。この際２種以上の油脂を混合してもよい。なお、これらの反応は上記のようなアルカリ触媒等を用いた化学反応によっても実施することができるが、１，３位選択的リパーゼ等の酵素を経て温和な条件で反応を行う方が、酸化安定性、嗜好性の点で好ましい。
【００１８】
本発明のペットフードにおける油脂は理想としてはＤＡＧが１００％であることが好ましいが、油脂中には、ＤＡＧを１０〜８５％、好ましくは主たる成分として含有し、さらにＴＡＧが含まれ、また、若干のＭＡＧ、遊離脂肪酸等が含まれていても良い。ここで「主たる成分」とは、油脂中に含まれる最大含有量であるかまたはそれに匹敵する含有量（より具体的には、最大含有量成分の０．７倍以上）の成分であることを意味する。これらは、上記した天然油脂中に含有されるものの他、製造したＤＡＧ含有油脂、配合される植物原料、又は動物原料中に含まれる油脂に含有されるものも含む。特に、油脂中の遊離脂肪酸の含有量は、油脂からの不快臭の発生のしやすさ及び嗜好性の点で２０％以下が好ましく、更に１０％以下、また更に５％以下、特に２％以下、殊更１％以下であるのが好ましい。
【００１９】
本発明のペットフードはまた、成分（Ｂ）として鉄、鉄化合物、銅及び銅化合物から選ばれるミネラル成分を含有する。
鉄化合物としては、硫酸鉄、塩化第二鉄、フマル酸第一鉄、炭酸第一鉄、酸化鉄等が挙げられる。該鉄化合物のペットフード中の含有量は、ペットフードの配合において許容できる範囲、鉄換算で０．００００１〜１％、更に０．００００５〜０．３％、特に０．０００１〜０．１％が好ましい。
【００２０】
銅化合物としては、硫酸銅、塩化銅、酸化銅、炭酸銅、硫化銅、銅クロロフィル等が挙げられる。該銅化合物のペットフード中の含有量は、ペットフードの配合において許容できる範囲、銅換算で０．００００１〜０．１％、更に０．００００５〜０．０３％、特に０．０００１〜０．０１％が好ましい。
【００２１】
これらのミネラル成分のうち、鉄又は鉄化合物と銅又は銅化合物とは併用するのが好ましい。本発明では、これらのミネラル成分の合計の含有量は、ミネラル換算（鉄換算及び銅換算）で０．０００５〜１％であり、０．０００５〜０．５％がより好ましく、０．００１〜０．１％が更に好ましい。
【００２２】
本発明のペットフードには、ミネラル成分として鉄、銅以外に、マンガン、コバルト、カルシウム、リン、ナトリウム、カリウム等を含有してもよい。これらミネラル成分は、例えば、酸化マンガン、炭酸コバルト、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム等として配合される。
【００２３】
本発明のペットフードは、更に成分（Ｃ）として、クエン酸又はその塩を含み、その合計量がクエン酸換算で０．７質量％以上である。ここでクエン酸塩としてはアルカリ金属塩やアルカリ土類金属塩が挙げられ、特にアルカリ金属塩が好ましい。アルカリ金属塩としては、クエン酸の正塩（三アルカリ金属塩）、一水素二アルカリ金属塩及び二水素アルカリ金属塩を意味する。クエン酸のアルカリ金属塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩が挙げられ、特にナトリウム塩であることが好ましい。なお、本明細書において、特に断らない限りは、クエン酸ナトリウムという場合にはクエン酸三ナトリウム塩（二水和塩）を表わす。
【００２４】
また、「クエン酸換算で」とは、成分（Ｃ）としてクエン酸及びクエン酸のアルカリ金属塩（以下、クエン酸類とも言う）が含まれている場合、又は成分（Ｃ）がクエン酸のアルカリ金属塩のみである場合、アルカリ金属分を水素に置き換えてクエン酸分子量とみなして質量を換算することを意味する。
本発明のペットフードは、保存安定性及び嗜好性の点から、クエン酸類をクエン酸換算で０．７質量％以上、更に０．７５質量％以上、特に１．０質量％以上含有していることが好ましい。クエン酸類含有量の上限値としては、嗜好性、保存時の臭いを考慮して３．０質量％、特に２．５質量％が好ましい。
【００２５】
本発明のペットフードはそのｐＨが３．５〜７．０である。当該範囲であると、上記成分（Ｂ）による上記成分（Ａ）の酸化が効果的に抑制され、嗜好性も良好である。当該ｐＨが４．０〜７．０、更に好ましくは４．５〜６．８であると、酸化抑制効果が一層高まるとともに、保存時の臭いが良好になるので好ましい。クエン酸類を含み、かつｐＨがこのような範囲とするには、クエン酸のほかにｐＨ調整剤を加える方法がある。そのような方法の中でも、クエン酸とクエン酸塩を併用する方法がｐＨ調整がし易いとともに、嗜好性も良好で、風味も統一感があるので好ましい。特に、クエン酸塩として上述のクエン酸アルカリ金属塩を用いることが好ましい。
【００２６】
なお、「ペットフードのｐＨ」とは、ペットフードを以下の方法によって測定したときのｐＨのことを意味する。
＜ペットフードのｐＨ測定方法＞
ペットフード１０ｇを４５℃のイオン交換水（好ましくは２５℃における電気伝導度が０．０１ｍＳ／ｍ以下のイオン交換水）６０ｍＬ中に加えて十分に攪拌し、１時間静置した後に定性ろ紙（No.1, Advantec製）を用いてろ過し、濾液を２５℃においてｐＨ測定した。
なお、ペットフードの性状が固形の場合には、乳鉢等を使用して細かく磨り潰した後に上記攪拌操作を行うことが好ましい。
【００２７】
本発明のペットフードには、更に炭水化物を含むことが好ましい。炭水化物源としては、単糖類、オリゴ糖、多糖類、食物繊維、デンプン類等が含まれる。デンプン類としては、ワキシーコーンデンプン、コーンデンプン、小麦デンプン、米デンプン、糯米デンプン、馬鈴薯デンプン、甘露デンプン、タピオカデンプン、サゴデンプン、又はこれらに化学的処理を施したものや化学修飾した加工デンプン等が挙げられる。また、炭水化物は、穀物類として含有させてもよく、穀物類としては、小麦、ライ麦、マイカ、米、ひえ、あわ、アマラサンサス、キヌア等が挙げられる。炭水化物は、ペットフード中に１０〜７０％、更に２０〜６０％、特に３０〜５０％含有するのが、経済的、肥満防止効果、摂取性、便の状態、及び外観を健康的に美しくする点から好ましい。
【００２８】
本発明のペットフードにおいては、更に動物性又は植物性のタンパク質を含むことが、肥満防止効果、摂取性、栄養バランス、及び外観を健康的に美しくする点から好ましいが、摂取性の点から動物性タンパク質が特に好ましい。動物性タンパク質としては、カゼイン等の乳タンパク質も挙げられるが、肥満防止効果及び摂取性の点から、動物性肉類タンパク質が好ましい。このような動物性肉類タンパク質としては、牛、豚、羊、うさぎ、カンガルー等の畜肉及び獣肉、並びにその副生成物及び加工品；鶏、七面鳥、うずら等の鳥肉並びにその副生成物及び家屋品；魚、白身魚等の魚肉並びにその副生成物及び加工品；ミートミール、ミートボーン、チキンミール、フィッシュミート等の上記原料のレタリング等が挙げられる。このうち、肥満防止効果の点で、鶏肉、魚肉が特に好ましい。複数の肉類タンパク質を混合して用いる場合には、鶏肉及び／又は魚肉を肉類中の３０〜１００％、特に５０〜１００％含有させるのが好ましい。
植物性タンパク質としては、大豆タンパク質、小麦タンパク質、小麦グルテン、コーングルテン等が好ましい。
【００２９】
本発明のペットフード中に動物性又は植物性タンパク質は、乾燥減量で５〜７０％、更に１０〜６０％、特に１５〜４０％含有するのが好ましい。
【００３０】
本発明のペットフードには、更に植物ステロールを含有してもよい。植物ステロールは、ペットフード中に、コレステロール低下効果の点で、０．１％以上、更に０．５％以上含有するのが好ましい。また植物ステロール含有量の上限は、０．１〜３０％の範囲であればよい。ここで植物ステロールとしては、例えばα−シトステロール、β−シトステロール、スチグマステロール、カンペステロール、α−シトスタノール、β−シトスタノール、スチグマスタノール、カンペスタノール、シクロアルテノール等のフリー体、及びこれらの脂肪酸エステル、フェルラ酸エステル、桂皮酸エステル等のエステル体が挙げられる。
【００３１】
本発明のペットフードには、更に、ぬか類、粕類、野菜、ビタミン類等を配合することができる。ぬか類としては、米ぬか、ふすま等が、粕類としては、大豆粕等が挙げられる。野菜類としては野菜エキス等が挙げられる。ビタミン類としては、Ａ、Ｂ１、Ｂ２、Ｄ、Ｅ、ナイアシン、パントテン酸、カロチン酸等が挙げられ、０．０５〜１０％含有するのが好ましい。この他、一般的にペットフードに使用されるゲル化剤、保型剤、ｐＨ調整剤、調味料、防腐剤、栄養補強剤等も含有することができる。
【００３２】
次に、本発明におけるペットフードの製造方法（以下、単に「本製造方法」とも言う）について説明する。本製造方法は、二重結合を２つ以上含む不飽和脂肪酸が、油脂を構成する脂肪酸中の２０質量％以上である油脂と、鉄、鉄化合物、銅及び銅化合物から選ばれるミネラル成分をミネラル換算合計で０．０００５〜１質量％含むペットフードの製造方法であって、クエン酸及びクエン酸のアルカリ金属塩を合計で、クエン酸換算で０．７質量％以上配合することを特徴とするペットフードの製造方法である。
【００３３】
本発明製造方法において、クエン酸及びクエン酸アルカリ金属塩は、質量比で、クエン酸／アルカリ金属塩＝１／１０〜１０／１の割合、特に１／５〜５／１の割合で配合するのが好ましい。クエン酸及びクエン酸のアルカリ金属塩を加えるタイミングは適宜選択することが可能であるが、具体的な手順として、以下の手順が挙げられる。すなわち、穀物、肉ミール並びに鉄及び銅等のミネラル成分とともに、クエン酸及びクエン酸のアルカリ金属塩を混合し、十分混合したあとに、水や水蒸気で加水しながらエクストルーダーによって押出成型をする。その後に、（水分を１０％以下になるまで）熱風乾燥させる。二重結合が二つ以上の脂肪酸を多く含む油脂は、熱風乾燥させたあとに、コーディングするのが望ましい。
【００３４】
また、本発明のペットフードとしては、ドライタイプ、ウェットタイプ、セミモイストタイプ、ジャーキータイプ、ビスケットタイプ、ガムタイプ、粒状、粉状、スープ状等いずれの形態であってもよい。
【実施例】
【００３５】
＜試料の調製＞
表１の脂肪酸組成及び表２のグリセリド組成を持つジアシルグリセロール高含有油脂３ｇに、以下に示したキレート剤として用いる試薬を少量の水に溶解したものを添加した。
使用した各キレート剤試薬及びその評価試料中濃度は以下のとおりである。
（金属イオン供給源）
硫酸第一鉄                    ：試薬、和光純薬製  １０００ｐｐｍ
硫酸銅／塩化銅                ：試薬、和光純薬製  １０００ｐｐｍ
（鉄及び銅化合物のキレート剤に用いた試薬）
クエン酸                      ：試薬、和光純薬製  １０００ｐｐｍ
クエン酸ナトリウム（二水和物）：試薬、和光純薬製  １０００ｐｐｍ
グルコン酸ナトリウム          ：試薬、和光純薬製  １０００ｐｐｍ
ポリリン酸ナトリウム          ：試薬、和光純薬製  １０００ｐｐｍ
（鉄化合物のキレート剤に用いた試薬）
リンゴ酸                      ：試薬、和光純薬製  １０００ｐｐｍ
乳酸ナトリウム                ：試薬、和光純薬製  １０００ｐｐｍ
硫酸ナトリウム                ：試薬、和光純薬製  １０００ｐｐｍ
メタリン酸ナトリウム          ：試薬、和光純薬製  １０００ｐｐｍ
（銅化合物のキレート評価に用いた試薬）
アスコルビン酸                ：試薬、和光純薬製  １００ｐｐｍ
Ｌ−アスコルビン酸パルミテート（VCP）：DSMニュートリション製  １００ｐｐｍ
【００３６】
【表１】
2010119329.tif 000002
【００３７】
【表２】
2010119329.tif 000003
【００３８】
＜種々キレート剤の評価方法＞
調製した試料を、自動油脂安定性試験装置（「ランシマット７４３」、メトローム社製）に取り付け、２０ｍＬ／ｍｉｎの条件で空気をバブリングしながら１２０℃に保ち、電気伝導率を測定する。経時時間に対する電気伝導率をプロットし、図１のようにして立ち上がりの時間を求め、安定性の評価とする。これは、酸化により電気伝導率が増加するという原理に基づく評価であり、立ち上がり時間が長いことは酸化に対する耐性が高いことを意味する。
【００３９】
試験例
油脂に対する鉄化合物及び銅化合物の酸化促進作用の抑制効果を種々のキレート剤で評価した結果を表３及び表４に示す。
これらの結果により、鉄化合物及び銅化合物の油脂に対する酸化促進作用は、クエン酸及びクエン酸ナトリウムで最も抑制されることがわかった。
【００４０】
次にクエン酸の塩状態を変化させることで、油脂に対する鉄化合物及び銅化合物の酸化促進作用の抑制効果に及ぼす影響を調べた結果を表５に示す。また。その時のｐＨを示した。
その時の抑制効果を、立ち上がり時間で２時間以上のものを◎、１．５時間以上２時間未満のものを○、１時間以上１．５時間未満のものを△、１時間未満のものを×と表わした。
これらの結果より、ｐＨは低いほど抑制効果が低くなっていることがわかる。
【００４１】
【表３】
2010119329.tif 000004
【００４２】
【表４】
2010119329.tif 000005
【００４３】
【表５】
2010119329.tif 000006
【００４４】
＜試料の調製＞
表６に示す組成の原料を用い、表９に記載の成分を添加し、エクストルーダーで混合押出成型をすることにより、直径１０ｍｍ、長さ約１０ｍｍの円柱状のペットフード（キブル）を製造した。
【００４５】
ペットフードから抽出した油脂の脂肪酸組成を表７に、ペットフードから抽出した油脂のグリセリド組成を表８に示す。
【００４６】
全油脂中の二重結合を２つ以上含む不飽和脂肪酸の含有量は４１．９質量％、全油脂中のジアシルグリセロール含有量は４６．５質量％であった。ペットフードに含まれる全油脂は１１．５質量％、ペットフード中の二重結合を２つ以上含む不飽和脂肪酸の含有量は４．８質量％、ペットフード中のジアシルグリセロール含有量は５．３質量％であった。
【００４７】
【表６】
2010119329.tif 000007
【００４８】
【表７】
2010119329.tif 000008
【００４９】
【表８】
2010119329.tif 000009
【００５０】
（比較例１〜３）
実施例１において、クエン酸及びクエン酸Ｎａの量を表９に示す様に変えた以外は同様にして作成したペットフードについて、同様の評価を行った。なお、比較例３においては比較のためにポリリン酸Ｎａを２．０質量％加えた。
【００５１】
＜油脂の臭いの評価方法＞
温度４０℃、相対湿度７５％の環境下で１６週間保存し、油脂の臭いの変化を５名のヒトによる官能で評価した。気にならない範囲の順から、「変性臭がほとんど感じない」と答えた人数が「４名以上」を○、「２〜３名」を△、「１名以下」を×と表わした。
【００５２】
＜安定性試験方法＞
温度４０℃、相対湿度７５％の環境下で保存を行い、それぞれ０，４，８，１２，１６週間目ごとに取り出し、含有する油脂のＰＯＶ（過酸化物価）の測定を行った。結果を表９に示す。
【００５３】
＜ＰＯＶ（過酸化物価）の測定方法＞
過酸化物価（ＰＯＶ）については、日本油脂化学会制定の「規準油脂分析試験法」の２．４．１２．２−９４「過酸化物価」に従って分析した。
（１）ペットフードからの油脂の抽出
５０ｇのキブルを粉砕し、１ｍｍ目開きのふるいに通し、そのサンプルを円筒ろ紙に充填し、コック付きのオープンカラムにセットした。コックを閉じたまま、上方から滴下ロートで１５０ｍＬのジエチルエーテルを滴下し、滴下終了後カラムのコックを開けてジエチルエーテルを回収した。次に、５０ｍＬジエチルエーテルにて同様の操作を行った。回収したジエチルエーテルをエバポレーターを用いてトッピングすることにより除去し、ペットフードからの抽出油脂を得た。
【００５４】
（２）油脂のＰＯＶ測定
ペットフードから抽出した油脂０．５ｇを２５０ｍＬのトールビーカーに量り取り、酢酸／イソオクタン＝３／２（容積比）の溶液２０ｍＬ溶かした。０．１ｍＬの飽和ヨウ化カリウム溶液をそのトールビーカーに加え、１分間よく振とうした。その後、３０ｍＬの蒸留水を加え滴定サンプルとした。この滴定サンプルを０．０１Ｎチオ硫酸ナトリウムで滴定した。このとき、メトロームシバタ（株）のＰＯＶ自動滴定装置、ＤＭＰティトリーノ７８５型を使用した。
【００５５】
＜クエン酸換算値の測定方法＞
ミキサーで砕いたキブル（３．０ｇ）に５％過塩素酸５ｍＬを加え、１０分間震とうする。震とう後、５０ｍＬのメスフラスコで定容する。１０分間超音波処理を行い、ろ過した溶液を用い高速液体クロマトグラ（ＨＰＬＣ）法で測定する。なお、ＨＰＬＣ測定条件は以下の通りである。
カラム：Shodex Rspak KC-811  ２本、直径８ｍｍ×長さ３００ｍｍ（昭和電工株式会社製）
カラム温度：４０℃
移動相：３ｍｍｏｌ／Ｌ過塩素酸水溶液
反応液：０．２ｍｍｏｌ／Ｌブロムチモールブルー含有１５ｍｍｏｌ／Ｌリン酸水素二ナトリウム水溶液
流量：移動相１．０ｍＬ／分、反応液１．４ｍＬ／分
測定波長：４４５ｎｍ
【００５６】
クエン酸及びクエン酸のアルカリ金属塩を０．７質量％以上を配合することにより、特許文献１及び２のようなクエン酸又はその塩の含有量が０．５％未満の場合（比較例１及び２）に比べて、安定性が著しく向上した。
【００５７】
【表９】
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【図面の簡単な説明】
【００５８】
【図１】試料の電気伝導率の経時変化を示す図である。
【図１】
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