(57)【要約】      （修正有）【課題】優れた薬理効果を有する新規チオフェンカルボキサミド誘導体を提供すること。【解決手段】式（Ｉ）2010111683.tif 000011のチオフェンカルボキサミド誘導体、その製造において用いる方法および中間体。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式(Ｉ)の化合物：
【化１】
2010111683.tif 000010
[式中：
Ｒ１はＮＨ２を表すかまたはＲ１はＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｓ(Ｏ)ｖＣＨ３およびＮＲ４Ｒ５から独立に選択される１または複数の基によって任意に置換されていてもよいメチル基を表す；
ＸはＯまたはＳを表す；
Ｒ２は水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、−ＮＲ６Ｒ７、−ＣＯＮＲ６Ｒ７、−ＣＯＯＲ６、−ＮＲ６ＣＯＲ７、−Ｓ(Ｏ)ｍＲ６、−ＳＯ２ＮＲ６Ｒ７、−ＮＲ６ＳＯ２Ｒ７、Ｃ１−Ｃ２アルキル、トリフルオロメチル、Ｃ２−Ｃ３アルケニル、Ｃ２−Ｃ３アルキニル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ２アルコキシまたはＣ１−Ｃ２アルカノイルを表す；
Ａは縮合二環式環系を表し、ここで一方の環はフェニル環またはＯ、ＮおよびＳから独立に選択される１から３のヘテロ原子を含む５−から７−員環複素芳香族環であり；他方の環は縮合フェニル環またはＯ、ＮおよびＳから独立に選択される１から３のヘテロ原子を含む縮合５−から７−員環複素芳香族環あるいは任意に酸素、窒素および硫黄から独立に選択される１から３のヘテロ原子を含んでいてもよい縮合５−から７−員環飽和環である；該縮合二環式環系は任意にハロゲン、シアノ、ニトロ、−ＮＲ８ＣＯＲ９、−Ｓ(Ｏ)ｓＲ８、−ＳＯ２ＮＲ８Ｒ９、−ＮＲ８ＳＯ２Ｒ９およびＣ１−Ｃ６アルキルから独立に選択される１または複数の置換基によって置換されていてもよい；
ｎは０、１または２の整数を表し、ｎが２の場合、それぞれのＲ３基は独立に選択されてよい；
Ｒ３は基−Ｗ−Ｙ−Ｚを表し、ここで：
ＷはＯ、Ｓ(Ｏ)ｒ、ＮＲ１３、ＣＨ２、−ＣＨ２−Ｏ−または結合手を表す；
Ｙは結合手を表すか、またはＹは基−(ＣＨ２)ｐ−Ｘ−(ＣＨ２)ｑ−を表し、ここでｐおよびｑは独立に整数０、１または２を表す；そして、
ＸはＯ、−ＣＯ−またはＣＲ１４Ｒ１５を表す；
Ｒ１４およびＲ１５は独立にＨ、ＣＨ３またはＦを表すか、あるいはＲ１４はＨまたはＣＨ３を表し、Ｒ１５はヒドロキシルまたはＯＣＨ３を表す；あるいは基ＣＲ１４Ｒ１５はともにＣ３−Ｃ６シクロアルキル環を表す；
Ｚは以下の(ａ)〜(ｃ)のいずれかを表す：
(ａ) フェニル環またはＯ、ＮおよびＳから独立に選択される１から３のヘテロ原子を含む５−または６−員環複素芳香族環；該フェニルまたは複素芳香族環は任意にハロゲン、シアノ、−ＮＲ１６Ｒ１７、−ＣＯＮＲ１６Ｒ１７、−ＣＯＯＲ１６、−ＣＯＲ１６、−ＮＲ１６ＣＯＲ１７、−Ｓ(Ｏ)ｕＲ１６、−ＳＯ２ＮＲ１６Ｒ１７、−ＮＲ１６ＳＯ２Ｒ１７、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルおよびＣ１−Ｃ６アルコキシから独立に選択される１または複数の置換基によって置換されていてもよい；該アルキルまたはアルコキシ基は任意にさらにハロゲン、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシおよびＮＲ１８Ｒ１９から選択される１または複数の基によって置換されていてもよい；または、
(ｂ) 任意にＯ、ＮおよびＳから独立に選択される１または２のヘテロ原子を含んでいてもよく、任意にカルボニル基を含んでいてもよい飽和３−から７−員環であり；該飽和環は任意にハロゲン、シアノ、−ＮＲ１６Ｒ１７、−ＣＯＮＲ１６Ｒ１７、−ＣＯＯＲ１６、−ＣＯＲ１６、−ＮＲ１６ＣＯＲ１７、−Ｓ(Ｏ)ｕＲ１６、−ＳＯ２ＮＲ１６Ｒ１７、−ＮＲ１６ＳＯ２Ｒ１７、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルおよびＣ１−Ｃ６アルコキシから独立に選択される１または複数の置換基によって置換されていてもよい；該アルキルまたはアルコキシ基はハロゲン、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシおよびＮＲ１８Ｒ１９から選択される１または複数の基によってさらに任意に置換されていてもよい；または、
(ｃ) Ｚはヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ＣＦ３、ＣＨＦ２、ＣＨ２ＦまたはＮＲ２０Ｒ２１を表し、ここでＲ２０およびＲ２１は独立に水素またはＣ１−Ｃ４アルコキシによって任意に置換されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキルである；
Ｒ４およびＲ５は独立にＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルを表す；あるいは基ＮＲ４Ｒ５はＯ、ＳまたはＮＲ２３基を任意にさらに含んでいてもよい５−または６−員環飽和アザ環式環を表す；ここでＲ２３は水素またはＣ１−Ｃ４アルキルである；
Ｒ６およびＲ７は独立にＨまたはＣ１−Ｃ２アルキルを表す；
Ｒ８およびＲ９は独立にＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す；
Ｒ１３はＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルを表す；
Ｒ１６およびＲ１７は独立にＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す；あるいは基ＮＲ１６Ｒ１７は任意にさらにＯ、ＳまたはＮＲ２４基を含んでいてもよい５−または６−員環飽和アザ環式環を表す；ここでＲ２４は水素またはＣ１−Ｃ６アルキルである；
Ｒ１８およびＲ１９は独立にＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルを表す；あるいは基ＮＲ１８Ｒ１９は任意にさらにＯ、ＳまたはＮＲ２５基を含んでいてもよい５−または６−員環飽和アザ環式環を表す；ここでＲ２５は水素またはＣ１−Ｃ４アルキルである；
ｍ、ｒ、ｓ、ｕおよびｖは独立に整数０、１または２を表す]
またはその医薬上許容される塩。
【請求項２】
Ｘが酸素を表す、請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物。
【請求項３】
Ｒ１がＮＨ２を表す、請求項１または２に記載の式(Ｉ)の化合物。
【請求項４】
Ｒ２がＨまたはメチルを表す、請求項１から３のいずれかに記載の式(Ｉ)の化合物。
【請求項５】
以下から選択される、請求項１に記載の式(Ｉ)の化合物：
２−[(アミノカルボニル)アミノ]−５−(２−ベンゾフラニル)−３−チオフェンカルボキサミド；
２−[(アミノカルボニル)アミノ]−５−(３−キノリニル)−３−チオフェンカルボキサミド；
２−[(アミノカルボニル)アミノ]−５−(８−キノリニル)−３−チオフェンカルボキサミド；
２−[(アミノカルボニル)アミノ]−５−(２−ベンゾチオフェニル)−３−チオフェンカルボキサミド；
２−[(アミノカルボニル)アミノ]−５−(３−ベンゾチオフェニル)−３−チオフェンカルボキサミド；
２−[(アミノカルボニル)アミノ]−５−(５−インドリル)−３−チオフェンカルボキサミド；
２−[(アミノカルボニル)アミノ]−４−メチル−５−(１,４−ベンゾジオキサン−６−イル)−３−チオフェンカルボキサミド；
２−[(アミノカルボニル)アミノ]−４−メチル−５−(３−インドリル)−３−チオフェンカルボキサミド；
２−[(アミノカルボニル)アミノ]−４−メチル−５−(１,３−ベンゾジオキソ−５−イル)−３−チオフェンカルボキサミド；
２−[(アミノカルボニル)アミノ]−５−(１Ｈ−インドール−２−イル)チオフェン−３−カルボキサミド；
３−[(アミノカルボニル)アミノ]−５−(１−ベンゾチエン−３−イル)チオフェン−２−カルボキサミド；
２−[(アミノカルボニル)アミノ]−５−(２−モルホリン−４−イルメチルベンゾ[ｂ]チオフェン−５−イル)チオフェン−３−カルボキサミド；
２−[(アミノカルボニル)アミノ]−５−[４−(２−モルホリン−４−イルエトキシ)−１−ベンゾチエン−２−イル]−３−チオフェンカルボキサミド；
２−[(アミノカルボニル)アミノ]−５−{２−[４−メチルフェニルスルホニル]−１,２,３,４−テトラヒドロイソキノリン−６−イル}チオフェン−３−カルボキサミド；
３−[(アミノカルボニル)アミノ]−５−(１−ベンゾチエン−２−イル)チオフェン−２−カルボキサミド；
およびこれらの医薬上許容される塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、チオフェンカルボキサミド誘導体、その調製に用いられる方法および中間体、それを含有する医薬組成物、およびその治療における使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
ＮＦ−κＢ（核因子κＢ）ファミリーは、転写因子のＲｅｌファミリーのホモ−およびヘテロダイマーから構成される。これら転写因子の主な役割は、サイトカイン、ケモカイン、インターフェロン、ＭＨＣタンパク質、増殖因子および細胞接着分子を含む広範な炎症誘発性遺伝子の発現を誘導および調整することである（概説として、Verma et. al.、Genes Dev. 9:2723-35、1995; Siebenlist et. al.、Ann. Rev. Cell. Biol. 10:405-455、1994; Bauerleおよび Henkel、Ann. Rev. Immunol.、12:141-179、1994; Barnes and Karin、New Engl. J. Med.、336:1066-1071、1997を参照されたい）。
【０００３】
最も一般的にみられるＲｅｌファミリーダイマー複合体は、ｐ５０ＮＦｋＢとｐ６５ＲｅｌＡから構成される（Baeuerle and Baltimore、Cell 53:211-217、1988; Baeuerle and Baltimore、Genes Dev. 3:1689-1698、1989）。静止条件下では、ＮＦ−κＢダイマーは、阻害タンパク質であるＩκＢファミリーのメンバーによって細胞質内に保持される（Beg et. al.、Genes Dev.、7:2064-2070、1993; Gilmore and Morin、Trends Genet. 9:427-433、1993; Haskil et. al.、Cell 65:1281-1289、1991）。しかし種々のサイトカインまたはその他の外部刺激によって細胞が活性化されると、ＩκＢタンパク質は２つの必須セリン残基がリン酸化され（Traenckner et. al.、EMBO J.、14:2876、1995）、そしてユビキチン化とプロテオソーム−媒介分解の標的となる（Chen、Z.J. et. al.、Genes and Dev. 9:1586-1597、1995; Scherer、D.C. et. al.、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92:11259-11263、1996; Alkalay、I. et. al.、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92:10599-10603、1995）。放出されたＮＦ−κＢは次いで核へと移動し、遺伝子転写を活性化することができる（Beg et.al.、Genes Dev.、6:1899-1913、1992）。
【０００４】
広範な外部刺激がＮＦ−κＢを活性化することができることが示された（Baeuerle、P.A.、and Baichwal、V.R.、Adv. Immunol.、65:111-136、1997）。ＮＦ−κＢ活性化因子の大部分は、ＩκＢリン酸化を導くが、この重要な事象を導く複数の経路があることは明らかである。受容体−媒介ＮＦ−κＢ活性化は、受容体およびアダプター／シグナル伝達分子（例えば、ＴＲＡＤＤ、ＲＩＰ、ＴＲＡＦ、ＭｙＤ８８）および関連キナーゼ（ＩＲＡＫ、ＮＩＫ）の間の特異的相互作用に依存している（Song et. al.、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94:9792-9796、1997; Natoli et. al.、JBC 272:26079-26082、1997）。ＵＶ光およびγ−照射などの環境ストレスは、代わりとなる、よく解明されていない機構によってＮＦ−κＢを刺激するようである。
【０００５】
最近の刊行物によると、部分的にＮＦ−κＢ活性化が解明されている。この研究により、特異的ＩκＢ／ＮＦ−κＢ相互作用を調節する３つの鍵となる酵素が同定された：ＮＦ−κＢ誘導性キナーゼ（ＮＩＫ）（Boldin et. al.、Cell 85:803-815、1996）、ＩκＢキナーゼ−１（ＩＫＫ−１）（Didonato et. al.、Nature 388:548、1997; Regnier at. al.、Cell 90:373 1997）およびＩκＢキナーゼ−２（ＩＫＫ−２）（Woronicz et. al.、Science 278:866、1997; Zandi et. al.、Cell 91:243、1997）である。
【０００６】
ＮＩＫは、腫瘍壊死因子とインターロイキン−１によってトリガーされるＮＦ−κＢシグナル伝達カスケード共通のメディエーターであり、ＩκＢリン酸化の強力な誘導物質であるようである。しかしＮＩＫはＩκＢを直接リン酸化することはできない。
【０００７】
ＩＫＫ−１とＩＫＫ−２はＮＩＫのすぐ下流にあり、３つのすべてのＩκＢサブタイプを直接リン酸化することができると考えられている。ＩＫＫ−１とＩＫＫ−２はアミノ酸レベルで５２％同一であるが、類似の基質特異性を有しているようである；しかし、酵素活性は異なるようである：ＩＫＫ−２はＩＫＫ−１よりも数倍強力である。発現データと、突然変異誘発研究により、ＩＫＫ−１とＩＫＫ−２はそのＣ−末端ロイシンジッパーモチーフによってホモ−およびヘテロダイマーを形成することができ、ヘテロダイマー形態が優性であることが示唆された（Mercurio et. al.、Mol. Cell Biol.、19:1526、1999; Zandi et. al.、Science; 281:1360、1998; Lee et. al、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:9319、1998）。
【０００８】
ＮＩＫ、ＩＫＫ−１およびＩＫＫ−２はすべてセリン／トレオニンキナーゼである。最近のデータにより、チロシンキナーゼもＮＦ−κＢも活性化の調節に役割を果たしていることが示された。多くのグループによりＴＮＦ−αに誘導されるＮＦ−κＢ活性化がタンパク質チロシンホスファターゼ（ＰＴＰ）およびチロシンキナーゼにより制御され得ることが示された（Amer et. al.、JBC 273:29417-29423、1998; Hu et. al.、JBC 273:33561-33565、1998; Kaekawa et. al.、Biochem. J. 337:179-184、1999; Singh et. al.、JBC 271 31049-31054、1996）。これらの酵素の作用機構はＩκＢのリン酸化状態の調節にあるようである。例えば、ＰＴＰ１Ｂおよび未同定のチロシンキナーゼが直接ＩκＢ−αのリジン残基（Ｋ４２）のリン酸化を制御しているようであり、これは、ＩＫＫによるリン酸化の標的としての隣接セリン残基の接触性に重要な影響を及ぼす。
【０００９】
複数のグループによりＩＫＫ−１とＩＫＫ−２がＩＫＡＰ（Cohen et. al.、Nature 395:292-296、1998; Rothwarf et. al.、Nature 395:297-300、1998）、ＭＥＫＫ−１、推定ＭＡＰキナーゼホスファターゼ（Lee et. al.、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:9319-9324、1998）、そしてＮＩＫおよびＩκＢを含むその他のタンパク質とともに「シグナロソーム」構造の一部を形成することが示された。現在明らかになっているデータにより、ＩＫＫ−１とＩＫＫ−２はともにＮＩＫに結合するが、それらの活性化は異なり、それゆえ一連のＮＦ−κＢを活性化するシグナルの重要な統合点として存在する可能性があることが示唆されている。重要なことに、ＭＥＫＫ−１（推定シグナロソームの成分の１つであり、ＵＶ光、ＬＰＳ誘導性シグナル伝達分子および小ＧＴＰａｓｅの標的である）がＩＫＫ−２を活性化するがＩＫＫ−１は活性化しないことが判明した。同様に、ＩＫＫ−１のＮＩＫリン酸化の結果、ＩＫＫ−１活性が劇的に上昇するが、ＩＫＫ−２にはあまり影響がない（概説として、Mercurio、F.、and Manning、A.M.、Current Opinion in Cell Biology、11:226-232、1999を参照されたい）。
【００１０】
ＮＦ−κＢ活性化の阻害はおそらく炎症性疾患の治療において広範な有用性を有する。
【００１１】
ＮＦ−κＢシグナル伝達が癌と転移の進展において重要な役割を有するという証拠が増えつつある。ｃ−Ｒｅｌ、ＮＦ−κＢ２またはＩκＢαの異常な発現が、多数の腫瘍型および腫瘍細胞系について報告されており、現在のデータによるとＩＫＫ２を介する構成的ＮＦ−κＢシグナル伝達が広範な腫瘍細胞系において起こっていることが示されている。この活性は増殖因子シグナル伝達における様々な上流の欠陥と関連している。欠陥とは例えば自己分泌ループの確立、または癌遺伝子産物、例えばＲａｓ、ＡＫＴ、Ｈｅｒ２の存在であり、これは、ＩＫＫ複合体の活性化に関与している。構成的ＮＦ−κＢ活性は、一連の抗アポトーシス遺伝子、例えばＡ１／Ｂｆｉ−１、ＩＥＸ−１、ＸＩＡＰの活性化による発癌に寄与していると考えられており、これによって細胞死の経路が抑制され、細胞増殖を促進するサイクリンＤ１の転写が上方制御される。別のデータによると、この経路は、細胞接着および細胞表面プロテアーゼの調節にも関与している可能性があることが示されている。これにより、転移の発達におけるＮＦ−κＢ活性の可能性のあるさらなる役割が示唆される。発癌におけるＮＦ−κＢ活性の関与を確認する証拠には、修飾形態のＩκＢα（サプレッサーＩκＢα）の発現によるインビトロおよびインビボでの腫瘍細胞増殖の阻害が含まれる。
【００１２】
多くの腫瘍型において観察される構成的ＮＦ−κＢシグナル伝達に加えて、ＮＦ−κＢは特定のタイプの化学療法に応答して活性化されることが報告された。サプレッサー形態のＩκＢαの発現によるＮＦ−κＢ活性化の阻害と化学療法処理を並用することで異種移植片モデルにおける化学療法の抗腫瘍効果が増強されることが示された。ＮＦ−κＢ活性はそれゆえ誘導性化学物質耐性にも関与している。
【発明の概要】
【００１３】
（発明の開示）
本発明によると、式（Ｉ）の化合物：
【化１】
2010111683.tif 000002
［式中：
Ｒ１はＮＨ２を表すかまたはＲ１はＣ１−Ｃ４アルキル、Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル、ハロゲン、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシ、Ｓ（Ｏ）ｖＣＨ３およびＮＲ４Ｒ５から独立に選択される１または複数の基によって任意に置換されていてもよいメチル基を表す；
ＸはＯまたはＳを表す；
Ｒ２は水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、−ＮＲ６Ｒ７、−ＣＯＮＲ６Ｒ７、−ＣＯＯＲ６、−ＮＲ６ＣＯＲ７、−Ｓ（Ｏ）ｍＲ６、−ＳＯ２ＮＲ６Ｒ７、−ＮＲ６ＳＯ２Ｒ７、Ｃ１−Ｃ２アルキル、トリフルオロメチル、Ｃ２−Ｃ３アルケニル、Ｃ２−Ｃ３アルキニル、トリフルオロメトキシ、Ｃ１−Ｃ２アルコキシまたはＣ１−Ｃ２アルカノイルを表す；
Ａは縮合二環式環系を表し、ここで一方の環はフェニル環またはＯ、ＮおよびＳから独立に選択される１から３のヘテロ原子を含む５−から７−員環複素芳香族環であり；他方の環は縮合フェニル環またはＯ、ＮおよびＳから独立に選択される１から３のヘテロ原子を含む縮合５−から７−員環複素芳香族環あるいは任意に酸素、窒素および硫黄から独立に選択される１から３のヘテロ原子を含んでいてもよい縮合５−から７−員環飽和環である；該縮合二環式環系は任意にハロゲン、シアノ、ニトロ、−ＮＲ８ＣＯＲ９、−Ｓ（Ｏ）ｓＲ８、−ＳＯ２ＮＲ８Ｒ９、−ＮＲ８ＳＯ２Ｒ９およびＣ１−Ｃ６アルキルから独立に選択される１または複数の置換基によって置換されていてもよい；
ｎは０、１または２の整数を表し、ｎが２の場合、それぞれのＲ３基は独立に選択されてよい；
Ｒ３は基−Ｗ−Ｙ−Ｚを表し、ここで：
ＷはＯ、Ｓ（Ｏ）ｒ、ＮＲ１３、ＣＨ２、−ＣＨ２−Ｏ−または結合手を表す；
Ｙは結合手を表すか、またはＹは基−（ＣＨ２）ｐ−Ｘ−（ＣＨ２）ｑ−を表し、ここでｐおよびｑは独立に整数０、１または２を表す；そして、
ＸはＯ、−ＣＯ−またはＣＲ１４Ｒ１５を表す；
Ｒ１４およびＲ１５は独立にＨ、ＣＨ３またはＦを表すか、あるいはＲ１４はＨまたはＣＨ３を表し、Ｒ１５はヒドロキシルまたはＯＣＨ３を表す；あるいは基ＣＲ１４Ｒ１５はともにＣ３−Ｃ６シクロアルキル環を表す；
Ｚは以下の（ａ）〜（ｃ）のいずれかを表す：
（ａ）フェニル環またはＯ、ＮおよびＳから独立に選択される１から３のヘテロ原子を含む５−または６−員環複素芳香族環；該フェニルまたは複素芳香族環は任意にハロゲン、シアノ、−ＮＲ１６Ｒ１７、−ＣＯＮＲ１６Ｒ１７、−ＣＯＯＲ１６、−ＣＯＲ１６、−ＮＲ１６ＣＯＲ１７、−Ｓ（Ｏ）ｕＲ１６、−ＳＯ２ＮＲ１６Ｒ１７、−ＮＲ１６ＳＯ２Ｒ１７、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルおよびＣ１−Ｃ６アルコキシから独立に選択される１または複数の置換基によって置換されていてもよい；該アルキルまたはアルコキシ基は任意にさらにハロゲン、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシおよびＮＲ１８Ｒ１９から選択される１または複数の基によって置換されていてもよい；または、
（ｂ）任意にＯ、ＮおよびＳから独立に選択される１または２のヘテロ原子を含んでいてもよく、任意にカルボニル基を含んでいてもよい飽和３−から７−員環であり；該飽和環は任意にハロゲン、シアノ、−ＮＲ１６Ｒ１７、−ＣＯＮＲ１６Ｒ１７、−ＣＯＯＲ１６、−ＣＯＲ１６、−ＮＲ１６ＣＯＲ１７、−Ｓ（Ｏ）ｕＲ１６、−ＳＯ２ＮＲ１６Ｒ１７、−ＮＲ１６ＳＯ２Ｒ１７、ヒドロキシル、Ｃ２−Ｃ６アルケニル、Ｃ２−Ｃ６アルキニル、Ｃ１−Ｃ６アルキルおよびＣ１−Ｃ６アルコキシから独立に選択される１または複数の置換基によって置換されていてもよい；該アルキルまたはアルコキシ基はさらに任意にハロゲン、シアノ、ヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ４アルコキシおよびＮＲ１８Ｒ１９から選択される１または複数の基によって置換されていてもよい；または、
（ｃ）Ｚはヒドロキシル、Ｃ１−Ｃ６アルコキシ、ＣＦ３、ＣＨＦ２、ＣＨ２ＦまたはＮＲ２０Ｒ２１を表し、ここでＲ２０およびＲ２１は独立に水素またはＣ１−Ｃ４アルコキシによって任意に置換されていてもよいＣ１−Ｃ６アルキルである；
Ｒ４およびＲ５は独立にＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルを表す；あるいは基ＮＲ４Ｒ５は任意にさらにＯ、ＳまたはＮＲ２３基を含んでいてもよい５−または６−員環飽和アザ環式環を表す；ここでＲ２３は水素またはＣ１−Ｃ４アルキルである；
Ｒ６およびＲ７は独立にＨまたはＣ１−Ｃ２アルキルを表す；
Ｒ８およびＲ９は独立にＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す；
Ｒ１３はＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルを表す；
Ｒ１６およびＲ１７は独立にＨまたはＣ１−Ｃ６アルキルを表す；あるいは基ＮＲ１６Ｒ１７は任意にさらにＯ、ＳまたはＮＲ２４基を含んでいてもよい５−または６−員環飽和アザ環式環を表す；ここでＲ２４は水素またはＣ１−Ｃ６アルキルである；
Ｒ１８およびＲ１９は独立にＨまたはＣ１−Ｃ４アルキルを表す；あるいは基ＮＲ１８Ｒ１９は任意にさらにＯ、ＳまたはＮＲ２５基を含んでいてもよい５−または６−員環飽和アザ環式環を表す；ここでＲ２５は水素またはＣ１−Ｃ４アルキルである；
ｍ、ｒ、ｓ、ｕおよびｖは独立に整数０、１または２を表す］
およびその医薬上許容される塩が提供される。
【００１４】
特定の式（Ｉ）の化合物は、立体異性形態で存在し得る。本発明は式（Ｉ）の化合物のすべての幾何異性体および光学異性体およびラセミ体を含むその混合物を含むことが理解されよう。互変異性体およびその混合物も本発明の態様を形成する。
【００１５】
１つの態様において、Ｘは酸素を表す。
【００１６】
別の態様において、Ｒ１はＣＨ３またはＮＨ２を表す。さらに特別の態様において、Ｒ１はＮＨ２を表す。
【００１７】
式（Ｉ）の化合物およびその医薬上許容される塩は、酵素ＩＫＫ２の阻害剤であるという利点を有する。
【００１８】
本発明はさらに式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩、鏡像異性体あるいはラセミ体の調製方法を提供する。
【００１９】
本発明によると、薬物としての使用のための式（Ｉ）の化合物、またはその医薬上許容される塩も提供される。
【００２０】
本発明の別の態様は、ＩＫＫ２活性の阻害が望ましい疾患または症状の治療または予防のための薬物の製造における式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩の使用を提供する。
【００２１】
本発明の別の態様は、炎症性疾患の治療または予防のための薬物の製造における式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩の使用を提供する。
【００２２】
本発明によると、ＩＫＫ２活性の阻害が望ましい疾患または症状の治療方法またはかかる疾患または症状の危険を減少させる方法も提供され、該方法は、該疾患または症状を患うかその危険にある対象に、治療有効量の式（Ｉ）の化合物、またはその医薬上許容される塩を投与することを含む。
【００２３】
また、炎症性疾患を患うかその危険にある対象の炎症性疾患の治療方法またはその危険を減少させる方法も提供され、ここで該方法は、該対象に治療有効量の式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩を投与することを含む。
【００２４】
特別の態様において縮合二環式環系Ａは、任意に置換されていてもよいキノリン、インドール、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、テトラヒドロイソキノリン、１，３−ベンゾジオキソラン（メチレンジオキシフェニル）および１，４−ベンゾジオキサン（エチレンジオキシフェニル）を表す。
【００２５】
１つの態様において、式（Ｉ）における基Ｒ２はＨ、ハロゲンまたはＣ１−Ｃ２アルキルを表す。別の態様において、基Ｒ２はＨまたはメチルを表す。さらに別の態様において、式（Ｉ）における基Ｒ２はＨを表す。
【００２６】
特別の本発明の化合物には以下に例示するものが含まれる：
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（２−ベンゾフラニル）−３−チオフェンカルボキサミド；
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（３−キノリニル）−３−チオフェンカルボキサミド；
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（８−キノリニル）−３−チオフェンカルボキサミド；
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（２−ベンゾチオフェニル）−３−チオフェンカルボキサミド；
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（３−ベンゾチオフェニル）−３−チオフェンカルボキサミド；
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（５−インドリル）−３−チオフェンカルボキサミド；
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−４−メチル−５−（１，４−ベンゾジオキサン−６−イル）−３−チオフェンカルボキサミド；
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−４−メチル−５−（３−インドリル）−３−チオフェンカルボキサミド；
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−４−メチル−５−（１，３−ベンゾジオキソ−５−イル）−３−チオフェンカルボキサミド；
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（１Ｈ−インドール−２−イル）チオフェン−３−カルボキサミド；
３−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（１−ベンゾチエン−３−イル）チオフェン−２−カルボキサミド；
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（２−モルホリン−４−イルメチルベンゾ［ｂ］チオフェン−５−イル）チオフェン−３−カルボキサミド；
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−［４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−１−ベンゾチエン−２−イル］−３−チオフェンカルボキサミド；
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−｛２−［４−メチルフェニルスルホニル］−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−６−イル｝チオフェン−３−カルボキサミド；
３−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（１−ベンゾチエン−２−イル）チオフェン−２−カルボキサミド；
およびこれらの医薬上許容される塩。
【００２７】
特にことわりのない限り、本明細書中の「Ｃ１−Ｃ６アルキル」の語は、１から６の炭素原子を有する直鎖状または分子鎖状アルキル基を示す。かかる基の例としては、メチル、エチル、ｎ−プロピル、ｉ−プロピル、ｎ−ブチル、ｉ−ブチルおよびｔ−ブチルが含まれる。「Ｃ１−Ｃ２アルキル」および「Ｃ１−Ｃ４アルキル」の語も同様に解釈される。
【００２８】
特にことわりのない限り、本明細書中の「Ｃ２−Ｃ３アルケニル」の語は、２または３の炭素原子を有し、少なくとも１つの炭素−炭素二重結合を有する直鎖状または分子鎖状アルキル基を意味する。かかる基の例としては、エテニルおよびプロペニルが含まれる。「Ｃ２−Ｃ６アルケニル」の語も同様に解釈される。
【００２９】
特にことわりのない限り、本明細書中の「Ｃ２−Ｃ３アルキニル」の語は、２または３の炭素原子を有し、１つの炭素−炭素三重結合を有する直鎖状アルキル基を示す。かかる基の例としては、エチニルおよびプロピニルが含まれる。「Ｃ２−Ｃ６アルキニル」の語も同様に解釈される。
【００３０】
特にことわりのない限り、本明細書中の「Ｃ３−Ｃ６シクロアルキル」の語は、３から６の炭素原子を有する飽和炭素環式環を意味する。かかる基の例としては、シクロプロピル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルが含まれる。
【００３１】
特にことわりのない限り、本明細書中の「Ｃ１−Ｃ４アルコキシ」の語は、１から４の炭素原子を有する直鎖状または分子鎖状アルコキシ基を意味する。かかる基の例としては、メトキシ、エトキシおよびイソプロポキシが含まれる。「Ｃ１−Ｃ２アルコキシ」および「Ｃ１−Ｃ６アルコキシ」の語も同様に解釈される。
【００３２】
特にことわりのない限り、本明細書中の「Ｃ１−Ｃ２アルカノイル」の語は、ホルミルまたはアセチル基を意味する。
【００３３】
特にことわりのない限り、本明細書中の「ハロゲン」の語は、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを意味する。
【００３４】
Ｏ、ＮおよびＳから独立に選択される１から３のヘテロ原子を含有する５−から７−員環複素芳香族環の例には、フラン、チオフェン、ピロール、オキサゾール、イソキサゾール、チアゾール、イソチアゾール、イミダゾール、ピラゾール、トリアゾール、ピリジン、ピリダジン、ピリミジンおよびピラジンが含まれる。「Ｏ、ＮおよびＳから独立に選択される１から３のヘテロ原子を含有する５−または６−員環複素芳香族環」の語も同様に解釈される。
【００３５】
Ｏ、ＮおよびＳから独立に選択される１から３のヘテロ原子を任意に含んでいてもよい飽和５−から７−員環の例には、シクロペンチル、シクロヘキシル、テトラヒドロフラン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジンおよびモルホリンが含まれる。
【００３６】
縮合二環式環系であって一方の環がフェニル環またはＯ、ＮおよびＳから独立に選択される１から３のヘテロ原子を含む５−から７−員環複素芳香族環であって他方の環が縮合フェニル環またはＯ、ＮおよびＳから独立に選択される１から３のヘテロ原子を含む縮合５−から７−員環複素芳香族環あるいは、酸素、窒素および硫黄から独立に選択される１から３のヘテロ原子を任意に含んでいてもよい縮合５−から７−員環飽和環であるものの例には、ナフチル、キノリン、イソキノリン、テトラヒドロイソキノリン、インドール、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、ベンゾイミダゾール、１，３−ベンゾジオキソラン（メチレンジオキシフェニル）および１，４−ベンゾジオキサン（エチレンジオキシフェニル）が含まれる。
【００３７】
任意にさらにＯ、ＳまたはＮＲ基を含んでいてもよい５−または６−員環飽和アザ環式環の例には、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジンおよびモルホリンが含まれる。
【００３８】
任意にＯ、ＮおよびＳから独立に選択される１または２のヘテロ原子を含んでいてもよく、任意にカルボニル基を含んでいてもよい飽和３−から７−員環の例には、シクロプロピル、シクロヘキシル、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、テトラヒドロフラン、ピペリジン−２−オンおよびピペリジン−４−オンが含まれる。
【００３９】
本発明によると、式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩、鏡像異性体あるいはラセミ体の調製方法が提供され、該方法は以下を含む：
（ａ）式（ＩＩ）の化合物：
【化２】
2010111683.tif 000003
［式中、Ａ、Ｒ２、Ｒ３およびｎは式（Ｉ）において定義した通りである］
とイソシアネートまたはイソチオシアネートまたはアシル誘導体、Ｒ１−ＣＯ−Ｌ（ここでＬは離脱基）との反応
；または、
（ｂ）式（ＩＩＩ）の化合物
【化３】
2010111683.tif 000004
［式中、Ｒ３、ｎおよびＡは式（Ｉ）において定義した通りである］
と式（ＩＶ）の化合物
【化４】
2010111683.tif 000005
［式中、Ｘ、Ｒ１およびＲ２は式（Ｉ）において定義した通りであり、ＬＧは離脱基を表す］
との反応
；あるいは
（ｃ）式（Ｖ）の化合物
【化５】
2010111683.tif 000006
［式中、Ｒ３、ｎおよびＡは式（Ｉ）において定義した通りであり、ＬＧは離脱基を表す］
と式（ＶＩ）の化合物
【化６】
2010111683.tif 000007
［式中、Ｘ、Ｒ１およびＲ２は式（Ｉ）において定義した通りである］
との反応、および；
所望により、結果として得られる式（Ｉ）の化合物、またはその他のその塩を、その医薬上許容される塩に変換すること；
あるいは結果として得られる式（Ｉ）の化合物を更に別の式（Ｉ）の化合物に変換すること；そして、
所望により結果として得られる式（Ｉ）の化合物をその光学異性体へと変換すること。
【００４０】
方法（ａ）において、好適なイソシアネート試薬にはトリメチルシリルイソシアネート、トリメチルシリルイソチオシアネート、クロロスルホニルイソシアネート、トリクロロアセチルイソシアネートおよびナトリウムイソシアネートが含まれる。トリメチルシリルイソシアネートまたはトリメチルシリルイソチオシアネートとの反応はジクロロメタン／ジメチルホルムアミドなどの溶媒中で好適な加熱温度下で例えば反応混合物の還流温度において行なうとよい。クロロスルホニルイソシアネートとの反応はトルエンなどの溶媒中で周囲温度で行なうとよい。ナトリウムイソシアネートとの反応は、酢酸水溶液などの好適な溶媒系において周囲温度にて行なうとよい。トリクロロアセチルイソシアネート反応はアセトニトリルなどの好適な溶媒系で周囲温度で行ない、その後混合物をアンモニアで処理すると一般式（Ｉ）の化合物が得られる。式Ｒ１−ＣＯ−Ｌの好適なアシル誘導体にはハロゲン化アシル、特に塩化アシル、および酸無水物が含まれる。かかるアシル誘導体との反応は一般に周囲温度でピリジンなどの好適な溶媒中、あるいはジクロロメタンなどの溶媒中で、トリエチルアミンまたはピリジンなどの好適な塩基の存在下で行なえばよい。式（Ｉ）の化合物であって、ＸがＯを表すものは次いで対応する式（Ｉ）の化合物であってＸがＳを表すものへと、例えばロウソン（Lawesson）試薬との反応によって変換するとよい。
【００４１】
方法（ｂ）および（ｃ）において、式（ＩＩＩ）および（ＩＶ）の化合物または式（Ｖ）および（ＶＩ）の化合物をパラジウムまたはニッケルなどの遷移金属の複合体によって提供される触媒の存在下でともに反応させる。式（ＩＩＩ）および（ＶＩ）の化合物において、適当な条件下で、「金属」は金属であってもセミ金属であってもよく、例えばマグネシウム、亜鉛、銅、スズ、ケイ素、ジルコニウム、アルミニウムまたはホウ素が含まれる。好適な離脱基には、ヨード、ブロモ、クロロ、トリフレートまたはホスホネートが含まれる。
【００４２】
当業者であれば本発明の方法において、開始試薬または中間体化合物における特定の官能基、例えばヒドロキシルまたはアミノ基は保護基によって保護する必要がある場合があることが理解されよう。したがって、式（Ｉ）の化合物の調製には、適当な段階で１または複数の保護基の付加および除去を伴うことがある。
【００４３】
官能基の保護および脱保護は、「Protective Groups in Organic Chemistry」、編集J. W. F. McOmie、Plenum Press (1973）および「Protective Groups in Organic Synthesis」、3rd edition、T. W. Greene & P. G. M. Wuts、Wiley-Interscience (1999)において詳細に記載されている。
【００４４】
本発明は塩の形態、特に酸付加塩の形態における式（Ｉ）の化合物を含む。好適な塩には有機酸および無機酸によって形成されるものがともに含まれる。かかる酸付加塩は通常医薬上許容されるものであるが、医薬上許容されない酸との塩も目的の化合物の調製および精製において利用することができる。したがって好適な塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、クエン酸、酒石酸、乳酸、ピルビン酸、酢酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、メタンスルホン酸およびベンゼンスルホン酸から形成されるものが含まれる。
【００４５】
式（Ｉ）の化合物の塩は、遊離塩基、またはその塩、鏡像異性体あるいはラセミ体と１または複数の当量の好適な酸を反応させることによって形成させることができる。反応は塩がそれに不溶な溶媒または媒体中、あるいはそれに塩が可溶な溶媒中で行なえばよく、例えば、水、ジオキサン、エタノール、テトラヒドロフランまたはジエチルエーテル、あるいは溶媒混合物であって、真空又は凍結乾燥によって除去できるものが含まれる。反応はまた複分解方法であってもよく、あるいはイオン交換樹脂において行なってもよい。
【００４６】
式（ＩＩ）の化合物は文献（例えば、J. Het. Chem. 36、333 (1999)）に記載の標準的化学合成によって調製することができ、あるいは式（ＶＩＩ）の化合物：
【化７】
2010111683.tif 000008
［式中Ａ、Ｒ２、Ｒ３およびｎは式（Ｉ）において定義した通りであり、Ｌは離脱基を表す］
と、アンモニアとの反応によって調製することもできる。好適な基Ｌには、ハロゲン、特にクロロが含まれる。
【００４７】
Ｌがハロである式（ＶＩＩ）の化合物は、対応する式（ＶＩＩＩ）の化合物から、ハロゲン化試薬、例えば塩化チオニルで処理することによって調製することができる：
【化８】
2010111683.tif 000009
［式中Ａ、Ｒ２、Ｒ３およびｎは式（Ｉ）において定義した通りである］。
【００４８】
式（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）および（ＶＩＩＩ）の化合物は市販のものでもよいし、本明細書に例示しているような標準的化学合成を用いて調製してもよい。
【００４９】
特定の新規中間体化合物は本発明のさらなる態様を形成する。
【００５０】
式（Ｉ）の化合物は医薬としての活性、特にＩＫＫ２酵素阻害剤としての活性を有し、ＩＫＫ２の阻害が望ましいヒトおよび非ヒト動物における症状／疾患の治療（治療又は予防）において使用され得る。かかる症状／疾患の例には、炎症性疾患または炎症性要素を含む疾患が含まれる。具体的な疾患には、関節リウマチ、骨関節炎、脊椎炎、ライター症候群、乾癬性関節炎、狼瘡および骨吸収疾患を含む炎症性関節炎；多発性硬化症、クローン病を含む炎症性腸疾患；喘息、慢性閉塞性肺疾患、気腫、鼻炎、重症筋無力症、グラーベ病、同種移植拒絶反応、乾癬、皮膚炎、アレルギー性疾患、免疫複合体病、悪液質、ＡＲＤＳ、毒素性ショック、心不全、心筋梗塞、アテローム性動脈硬化症、再潅流傷害、ＡＩＤＳ、癌およびインシュリン抵抗性によって特徴付けられる障害、例えば、糖尿病、高血糖症、高インシュリン症、脂質不良症（dyslipidemia）、肥満、多嚢胞卵巣、高血圧、循環器疾患および症候群Ｘが含まれる。
【００５１】
発癌および化学物質耐性の両方におけるＮＦ−κＢの報告されている役割から、ＩＫＫ２阻害剤、例えば小分子ＩＫＫ２阻害剤の使用によるこの経路の阻害により、新規な癌の単一療法および／または重要な化学耐性腫瘍の治療のためのアジュバント療法が提供されうることが示唆される。
【００５２】
本発明者らは特に喘息、関節リウマチ、乾癬、クローン病を含む炎症性腸疾患、多発性硬化症、慢性閉塞性肺疾患、骨吸収疾患、骨関節炎、糖尿病／血糖コントロールおよび癌から選択される疾患に興味を有する。
【００５３】
したがって、本発明は治療における使用のための上記のように定義される式（Ｉ）の化合物、またはその医薬上許容される塩を提供する。
【００５４】
さらなる態様において、本発明は、上記のように定義した式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩の、治療に使用の薬物の製造における使用を提供する。
【００５５】
さらなる態様において、本発明は上記のように定義した式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩の、ＩＫＫ２酵素活性の調節が望まれる疾患または症状の治療用薬物の製造における使用を提供する。
【００５６】
本明細書において、「治療」の語には、特にことわりのない限り「予防」の意味も含まれる。「治療の」および「治療的」なる語も同様に解釈する。
【００５７】
予防とは、問題の疾患又は症状の、症状が以前にみられたまたはその危険が高いと考えられている対象の処置に特に関すると考えられる。特定の疾患又は症状の発症の危険にある対象には一般に、疾患又は症状の家族病歴があるもの、または、疾患又は症状を発症する可能性が特に高いと遺伝的試験またはスクリーニングによって同定されたものが含まれる。
【００５８】
本発明はさらにＩＫＫ２媒介疾患の治療方法も提供し、該方法は、患者に治療有効量の上記に定義した式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩を投与する工程を含む。
【００５９】
本発明はまた、炎症性疾患、特に、喘息、関節リウマチまたは多発性硬化症を患うかその危険にある患者における該疾患の治療方法も提供し、該方法は、治療有効量の上記に定義した式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩を患者に投与することを含む。
【００６０】
上述の治療用途において投与される用量はもちろん使用する化合物、投与方法、所望の治療および目的の障害によって異なる。
【００６１】
式（Ｉ）の化合物およびその医薬上許容される塩はそのものを用いてもよいが、一般的には医薬組成物の形態で投与され、ここで式（Ｉ）の化合物／塩（活性成分）は医薬上許容されるアジュバント、希釈剤または担体と組合される。投与形態に応じて、医薬組成物は好ましくは０．０５から９９％ｗ（重量％）、より好ましくは０．０５から８０％ｗ、さらに好ましくは０．１０から７０％ｗ、とりわけ０．１０から５０％ｗの活性成分を含み、これらパーセンテージはすべて組成物全体の重量に基く。
【００６２】
本発明はまた、上記に定義した式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩を医薬上許容されるアジュバント、希釈剤または担体と組合せて含む医薬組成物を提供する。
【００６３】
本発明はさらに本発明の医薬組成物の調製方法も提供し、該方法は、上記に定義した式（Ｉ）の化合物またはその医薬上許容される塩と、医薬上許容されるアジュバント、希釈剤または担体を混合することを含む。
【００６４】
医薬組成物は、溶液、懸濁液、ヘプタフルオロアルカンエアロゾルおよび乾燥粉末製剤の形態で局所投与してもよく（例えば肺および／または気道または皮膚）；あるいは全身投与してもよい。後者には例えば錠剤、カプセル、シロップ、散剤または顆粒の形態の経口投与が挙げられる。また溶液又は懸濁液の形態で非経口投与してもよく、皮下投与してもよく、坐薬の形態で直腸投与してもよく、経皮投与してもよい。好適な医薬製剤の選択および調製についての常套の方法は、例えば、「Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs」、M. E. Aulton、Churchill Livingstone、1988に記載されている。
【００６５】
本発明を以下の実施例によって例示的に説明するがこれは本発明を限定するものではない。
【実施例１】
【００６６】
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（２−ベンゾフラニル）−３−チオフェンカルボキサミド
ａ）２−アミノ−３−チオフェンカルボキサミド
表題の化合物をBull.Soc.Chim.France 2804 (1974)に記載の方法を用いて以下のように合成した。
エタノール（１２０ｍｌ）中の２，５−ジヒドロキシ−１，４−ジチアン（２５ｇ）およびシアノアセトアミド（１９．３ｇ）の懸濁液を攪拌し、５０℃に加熱した。トリエチルアミン（９．２ｍｌ）を１５分かけて添加し、混合物を５０℃でさらに２時間攪拌した。氷中で冷却した後、固体をろ過し乾燥させた（２１．４ｇ）。
ＭＳ（ＥＳ）１４３（Ｍ＋Ｈ）＋
【００６７】
ｂ）２−［（アミノカルボニル）アミノ］−３−チオフェンカルボキサミド
２−アミノ−３−チオフェンカルボキサミド（０．４４ｇ）をアセトニトリル（２５ｍｌ）中に懸濁し、トリクロロアセチルイソシアネート（０．２ｍｌ）を１０分間攪拌しながら滴下した。攪拌をさらに３時間室温で続け、そしてメタノール中のアンモニア溶液（２Ｍ溶液、１０ｍｌ）を添加し、攪拌をさらに２時間続けた。溶媒を蒸発させ、残渣を水で処理した。その結果得られた固体をろ過し、多量の水で洗浄した。エーテルでの粉砕により表題のウレアを得た（０．２ｇ）。
ＭＳ（ＥＳ）１８６（Ｍ＋Ｈ）＋
【００６８】
ｃ）２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−ブロモ−３−チオフェンカルボキサミド
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−３−チオフェンカルボキサミド（１．０ｇ）を酢酸（２０ｍｌ）に溶解し、酢酸（５ｍｌ）中の臭素（０．３５ｍｌ）溶液を迅速に攪拌しながら５分間かけて添加した。混合物を９０分間攪拌し、水（５０ｍｌ）に添加した。生成物をろ過し、水で洗浄し、真空下で乾燥させた（０．５５ｇ）。
ＭＳ（ＥＳ）２６２／２６４（Ｍ−Ｈ）−
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）７．１５（ｍ、１Ｈ）、７．３５（ｍ、１Ｈ）、７．８（ｓ、１Ｈ）、７．９（ｍ、１Ｈ）、１０．６３（ｂｒｓ、１Ｈ）
【００６９】
ｄ）２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（２−ベンゾフラニル）−３−チオフェンカルボキサミド
ジメトキシエタン（６０ｍｌ）および水（２ｍｌ）中の２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−ブロモ−３−チオフェンカルボキサミド（０．２６ｇ）、炭酸ナトリウム（０．２３ｇ）およびベンゾフラン−２−ボロン酸（０．３２ｇ）の溶液をアルゴンで１０分間パージした。テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０．２ｇ）を次いで添加し、混合物を攪拌しながら７時間還流した。冷却後、混合物を選別し(screened)、蒸発させた。残渣を酢酸エチルと３Ｎ炭酸ナトリウム溶液に分配し、固体界面層をろ過した（０．２ｇ）。
ＭＳ（ＥＳ）３００（Ｍ−Ｈ）−
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）６．９（ｓ、１Ｈ）、７．０５（ｍ、２Ｈ）、７．２（ｍ、２Ｈ）、７．３（ｍ、１Ｈ）、７．６（ｍ、３Ｈ）、７．８（ｍ、２Ｈ）、１１．１５（ｂｒｓ、１Ｈ）．
【実施例２】
【００７０】
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（３−キノリニル）−３−チオフェンカルボキサミド
実施例１（ｄ）の方法により、ただし、キノリン−３−ボロン酸を用いて調製した。
ＭＳ（ＥＳ）３１１（Ｍ−Ｈ）−
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）７．０（ｍ、２Ｈ）、７．４（ｍ、１Ｈ）、７．６（ｍ、２Ｈ）、７．６５（ｍ、２Ｈ）、８．０（ｍ、２Ｈ）、８．４（ｓ、１Ｈ）、９．１５（ｓ、１Ｈ）、１１．０６（ｂｒｓ、１Ｈ）
【実施例３】
【００７１】
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（８−キノリニル）−３−チオフェンカルボキサミド
実施例１（ｄ）の方法によって、ただし、キノリン−８−ボロン酸を用いて調製した。
ＭＳ（ＥＳ）３１１（Ｍ−Ｈ）−
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）６．９（ｍ、２Ｈ）、７．２（ｍ、１Ｈ）、７．６（ｍ、２Ｈ）、７．７（ｍ、１Ｈ）、７．８（ｄ、１Ｈ）、８．１（ｍ、２Ｈ）、８．４（ｄ、１Ｈ）、９．０（ｍ、１Ｈ）、１１．０１（ｂｒｓ、１Ｈ）
【実施例４】
【００７２】
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（２−ベンゾチオフェニル）−３−チオフェンカルボキサミド
実施例１（ｄ）の方法によって、ただし、ベンゾチオフェン−２−ボロン酸を用いて調製した。
ＭＳ（ＥＳ）３１６（Ｍ−Ｈ）−
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）７．０（ｍ、２Ｈ）、７．３５（ｍ、３Ｈ）、７．４（ｓ、１Ｈ）、７．６（ｓ、１Ｈ）、７．８（ｄ、１Ｈ）、７．８５（ｍ、１Ｈ）、７．９（ｄ、１Ｈ）、１１．０９（ｓ、１Ｈ）
【実施例５】
【００７３】
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（３−ベンゾチオフェニル）−３−チオフェンカルボキサミド
実施例１（ｄ）の方法によって、ただし、ベンゾチオフェン−３−ボロン酸を用いて調製した。
ＭＳ（ＥＳ）３１６（Ｍ−Ｈ）−
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）６．９５（ｍ、２Ｈ）、７．２５（ｍ、１Ｈ）、７．４（ｍ、２Ｈ）、７．６５（ｓ、１Ｈ）、７．７（ｓ、１Ｈ）、７．８（ｍ、１Ｈ）、８．０（ｄ、１Ｈ）、８．２（ｄ、１Ｈ）、１１．０８（ｂｒｓ、１Ｈ）
【実施例６】
【００７４】
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（５−インドリル）−３−チオフェンカルボキサミド
実施例１（ｄ）の方法によって、ただし、インドール−５−ボロン酸を用いて調製した。
ＭＳ（ＥＳ）２９９（Ｍ−Ｈ）−
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）６．４（ｓ、１Ｈ）、６．８（ｍ、２Ｈ）、７．２（ｍ、１Ｈ）、７．３（ｍ、３Ｈ）、７．６（ｓ、１Ｈ）、７．６５（ｍ、１Ｈ）、７．７（ｓ、１Ｈ）、１０．９１（ｓ、１Ｈ）、１１．０（ｂｒｓ、１Ｈ）
【実施例７】
【００７５】
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−４−メチル−５−（１，４−ベンゾジオキサン−６−イル）−３−チオフェンカルボキサミド
ａ）２−アミノ−４−メチル−５−（１，４−ベンゾジオキサン−６−イル）−３−チオフェンカルボキサミド
エタノール（５ｍｌ）中の１，４−ベンゾジオキサン−６−イルアセトン（１．７ｇ）、シアノアセトアミド（０．８４ｇ）、硫黄（０．３６ｇ）およびモルホリン（１ｍｌ）を攪拌し、５５℃に６時間加熱した。反応混合物を冷却し、少量の不溶物から選別し、水（１５０ｍｌ）に添加した。沈殿した固体をろ過し、水で洗浄し、乾燥させた。生成物を次いでエーテルで粉砕して回収した（１．０ｇ）。
ＭＳ（ＥＩ）２６６（Ｍ）＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）７．４（２Ｈ、ｄ）、７．３（２Ｈ、ｄ）、６．９（２Ｈ、ｓ）、６．８（２Ｈ、ｓ）、２．２（３Ｈ、ｓ）
【００７６】
ｂ）２−［（アミノカルボニル）アミノ］−４−メチル−５−（１，４−ベンゾジオキサン−６−イル）−３−チオフェンカルボキサミド
２−アミノ−４−メチル−５−（１，４−ベンゾジオキサン−６−イル）−３−チオフェンカルボキサミド（０．４４ｇ）をテトラヒドロフラン（１０ｍｌ）に溶解し、０℃に冷却し、トリクロロアセチルイソシアネート（０．１１ｍｌ）を攪拌しながら滴下した。攪拌をさらに３０分間室温で続け、次いでメタノール中のアンモニア溶液（８ｍｌ、１０％溶液）を添加し、攪拌をさらに３時間続けた。溶媒を蒸発させ、残渣を酢酸エチルで処理し、生成物をろ過した。
ＭＳ（ＥＳ）３３２（Ｍ−Ｈ）−
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）２．２（ｓ、３Ｈ）、４．２５（ｓ、４Ｈ）、６．７（ｍ、２Ｈ）、６．８（ｍ、２Ｈ）、６．９（ｍ、１Ｈ）、７．２（ｂｒ、１Ｈ）、１０．０１（ｂｒｓ、１Ｈ）
【実施例８】
【００７７】
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−４−メチル−５−（３−インドリル）−３−チオフェンカルボキサミド
実施例７の方法によって、ただしインドール−３−アセトンを用いて調製した。
ＭＳ（ＥＳ）３１３（Ｍ−Ｈ）−
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）２．２（ｓ、３Ｈ）、６．６５（ｂｒｓ、２Ｈ）、７．０５（ｍ、１Ｈ）、７．１（ｍ、１Ｈ）、７．２（ｍ、２Ｈ）、７．４（ｍ、１Ｈ）、７．４５（ｄ、１Ｈ）、７．５５（ｄ、１Ｈ）、１０．１４（ｂｒｓ、１Ｈ）、１１．３（ｍ、１Ｈ）
【実施例９】
【００７８】
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−４−メチル−５−（１，３−ベンゾジオキソラン−５−イル）−３−チオフェンカルボキサミド
実施例７の方法によって、ただし１，３−ベンゾジオキソラン−５−アセトンを用いて調製した。
ＭＳ（ＥＳ）３１８（Ｍ−Ｈ）−
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）２．２（ｓ、３Ｈ）、６．０５（ｓ、２Ｈ）、６．８（ｍ、１Ｈ）、６．９（ｍ、１Ｈ）、６．９５（ｍ、１Ｈ）、７．１（ｍ、２Ｈ）、７．２（ｍ、２Ｈ）
【実施例１０】
【００７９】
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（１Ｈ−インドール−２−イル）チオフェン−３−カルボキサミド
ａ）２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（１Ｈ−１−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルインドール−２−イル）チオフェン−３−カルボキサミドを９０％トリフルオロ酢酸／１０％水の混合物で周囲温度で４時間処理して表題の化合物を調製した。蒸発により固体（２５０ｍｇ）を得、これを水で洗浄した。
ＭＳ（ＥＳ）３０１（Ｍ＋Ｈ）＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）６．５（ｓ、１Ｈ）、６．９５（ｍ、４Ｈ）、７．３５（ｍ、２Ｈ）、７．４５（ｄ、１Ｈ）、７．６（ｓ、１Ｈ）、７．６２（ｂｒｓ、１Ｈ）、１０．９（ｓ、１Ｈ）、１１．３２（ｂｒｓ、１Ｈ）
【００８０】
ｂ）２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（１Ｈ−１−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカルボニルインドール−２−イル）チオフェン−３−カルボキサミド
表題の化合物（５００ｍｇ）を１Ｈ−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）インドール−２−イルボロン酸から実施例１（ｄ）と同様にして調製した。ただし、生成物は反応混合物のろ過により固体として得、これを２Ｎ水酸化ナトリウム溶液、水およびメタノールで続けて洗浄した。
ＭＳ（ＥＳ）４０１（Ｍ＋Ｈ）＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）１．４（ｓ、９Ｈ）、６．７（ｍ、１Ｈ）、６．９５（ｂｒｓ、２Ｈ）、７．２（ｍ、３Ｈ）、７．４（ｍ、１Ｈ）、７．６（ｓ、１Ｈ）、７．６５（ｂｒｓ、１Ｈ）、８．０（ｍ、１Ｈ）、１１．０４（ｂｒｓ、１Ｈ）
【実施例１１】
【００８１】
３−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（１−ベンゾチエン−３−イル）チオフェン−２−カルボキサミド
ａ）２−ブロモチオフェン−４−カルボン酸
J. Am. Chem. Soc.、1954、76、2445に記載の方法にしたがって調製した。
ＭＳ（ＥＳ）２０５（Ｍ−Ｈ）−
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）７．４５（ｓ、１Ｈ）、８．２２（ｓ、１Ｈ）、１２．９４（ｂｒｓ、１Ｈ）
【００８２】
ｂ）２−ブロモ−４−（Ｎ−ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノチオフェン
２−ブロモチオフェン−４−カルボン酸（３ｇ）を乾燥温ｔ−ブタノール（２４ｍｌ）に溶解した。トリエチルアミン（２．０２ｍｌ）を添加し、次いでジフェニルホスホリルアジド（３．１２ｍｌ）を添加した。溶液を徐々に加熱して還流し、加熱を還流しながら一晩続けた。反応混合物を次いで放冷し、水（１５０ｍｌ）に注ぎ、酢酸エチル（３ｘ１００ｍｌ）で抽出した。混合抽出物を乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、蒸発させた。粗生成物をカラムクロマトグラフィーで精製した。溶出は、ヘキサン中の５％酢酸エチルで行ない、白色固体（１．６９ｇ）を得た。
ＭＳ（ＥＳ）２７６（Ｍ−Ｈ）−
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）１．４４（ｓ、９Ｈ）、７．０３（ｓ、１Ｈ）、７．５１（ｓ、１Ｈ）、９．６５（ｓ、１Ｈ）
【００８３】
ｃ）５−ブロモ−３−［（ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノ］チオフェン−２−カルボン酸
２−ブロモ−４−（Ｎ−ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノチオフェン（１．６８ｇ）をアルゴン下で乾燥ＴＨＦ（４５ｍｌ）中で攪拌し、溶液を−７８℃に冷却した。リチウムジイソプロピルアミド（７．５５ｍｌ、２Ｍ溶液）を滴下し、攪拌を３．５時間続けた。粉末ＣＯ２（過剰量）を添加し、混合物をさらに１０分間攪拌し、室温まで昇温させた。水（５０ｍｌ）を添加し、ＴＨＦを真空下で除去し、水相を酢酸エチル（３ｘ４０ｍｌ）で抽出した。混合抽出物を１Ｍ  ＨＣｌ溶液（５０ｍｌ）、水（５０ｍｌ）および塩水（５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、ろ過し、溶媒を蒸発させた。残渣をジクロロメタンで粉砕し、そして生成物を淡黄色固体（１．５７ｇ）としてろ過によって回収した。
ＭＳ（ＥＳ）３２０（Ｍ−Ｈ）−
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）９．３８（ｓ、１Ｈ）、７．７９（ｓ、１Ｈ）、１．４２（ｓ、９Ｈ）
【００８４】
ｄ）５−ブロモ−３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノチオフェン−２−カルボキサミド
５−ブロモ−３−［（ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノ］チオフェン−２−カルボン酸（０．８０ｇ）をアセトニトリル（８０ｍｌ）中で攪拌した。ヒドロキシベンゾトリアゾール（１．４１ｇ）および１−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド塩酸塩（２．６２ｇ）を添加し、攪拌を室温で１０分間続けた。濃アンモニア水溶液（８ｍｌ）を添加し、反応混合物を加熱して１時間還流した。アセトニトリルを蒸発によって除去した。水（１００ｍｌ）を添加し、混合物を超音波処理して粉砕した。その結果得られたオフホワイトの固体を次いでろ過により回収し、水で洗浄し、真空下で乾燥させた（０．７６３ｇ）。
ＭＳ（ＥＳ）３１９（Ｍ−Ｈ）−
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）１．４５（ｓ、９Ｈ）、７．６３（ｂｒｓ、２Ｈ）、７．７８（ｓ、１Ｈ）、１０．４０（ｓ、１Ｈ）
【００８５】
ｅ）３−アミノ−５−ブロモチオフェン−２−カルボキサミド
５−ブロモ−３−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）アミノチオフェン−２−カルボキサミド（０．７６ｇ）をジクロロメタン（３０ｍｌ）中で攪拌した。トリフルオロ酢酸（５ｍｌ）を添加し、溶液を室温で１時間攪拌し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２００ｍｌ）に注ぎ、ジクロロメタン（３ｘ１００ｍｌ）で抽出した。混合抽出物を塩水（１５０ｍｌ）で洗浄し、乾燥させ（硫酸マグネシウム）、ろ過し、蒸発させて黄色固体（０．５１１ｇ）を得た。
ＭＳ（ＥＳ）２２１（Ｍ＋Ｈ）＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）６．５０（ｂｒｓ、２Ｈ）、６．６９（ｓ、１Ｈ）、６．８７（ｂｒｓ、２Ｈ）
【００８６】
ｆ）３−［（アミノカルボニル）アミノ−５−ブロモチオフェン−２−カルボキサミド
表題の化合物を３−アミノ−５−ブロモチオフェン−２−カルボキサミドから実施例１（ｂ）と同様にして調製した。
ＭＳ（ＥＳ）２６４（Ｍ＋Ｈ）＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）６．６３（ｂｒｓ、２Ｈ）、７．４１（ｂｒｓ、２Ｈ）、７．９７（ｓ、１Ｈ）、１０．０２（ｓ、１Ｈ）
【００８７】
ｇ）３−［（アミノカルボニル）アミノ−５−（１−ベンゾチエン−３−イル）チオフェン−２−カルボキサミド
３−［（アミノカルボニル）アミノ−５−ブロモチオフェン−２−カルボキサミド（０．２２２ｇ）および１−ベンゾチエン−３−イルボロン酸（０．４４９ｇ）を１，２−ジメトキシエタン（１５ｍｌ）および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３．５ｍｌ）中で超音波処理し、アルゴンでパージした。テトラキス（トリフェニルホスフィン）−パラジウム（９５ｍｇ）を添加し、混合物を還流下で攪拌しながら４．５時間加熱し、次いで放冷して、室温で一晩攪拌した。溶液をろ過し１，２−ジメトキシエタンおよび水で洗浄した。ろ液を真空下で濃縮し、ジクロロメタン（２０ｍｌ）および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（２０ｍｌ）中で処理した。固体生成物をろ過によって回収し、ジクロロメタン、水、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥させた（２２６ｍｇ）。
ＭＳ（ＥＳ）３１８（Ｍ＋Ｈ）＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）６．６０（ｂｒｓ、２Ｈ）、７．３５−７．５６（ｍ、４Ｈ）、８．０４（ｓ、１Ｈ）、８．１０（ｔ、２Ｈ）、８．２５（ｓ、１Ｈ）、１０．０８（ｓ、１Ｈ）
【実施例１２】
【００８８】
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（２−モルホリン−４−イルメチルベンゾ［ｂ］チオフェン−５−イル）チオフェン−３−カルボキサミド
乾燥ＴＨＦ中の４−（５−ブロモベンゾ［ｂ］チオフェン−２−イルメチル）モルホリン（Beilstein Reg. No. 1115497）（２３０ｍｇ）をホウ酸トリイソプロピル（２９１ｍｇ）で処理し、攪拌しながらアルゴン下で＜−７０℃に冷却した。ｎ−ブチルリチウム（０．９２１ｍｌ、ヘキサン中１．６Ｍ）の滴下後、反応を室温まで昇温させた。溶媒を蒸発させ、ジメトキシエタン（２０ｍｌ）および飽和炭酸水素ナトリウム水（９ｍｌ）の混合物と置換した。この混合物にアルゴン下で２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−ブロモチオフェン−３−カルボキサミド（９８ｍｇ）およびテトラキス−トリフェニルホスフィンパラジウム（０）（２５ｍｇ）を添加し、反応を９０℃に１．５時間加熱した。反応混合物を蒸発させて大量の有機物を除去し、残渣を２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（３０ｍｌ）とジクロロメタンとに分配した。ろ過後、有機相を分離し、さらなる容量の水酸化ナトリウム溶液（１０ｍｌ）で抽出した。混合水性抽出物をｐＨ８まで酸性化し、ろ過した。乾燥後、固体をジエチルエーテルで粉砕し、乾燥させて粉末を得た（２７ｍｇ）。
ＬＣＭＳ  ４１７（Ｍ＋Ｈ）＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）２．４７（ｍ、４Ｈ）、３．６５（ｍ、４Ｈ）、３．８０（ｓ、２Ｈ）、６．９５（ｂｒｓ、２Ｈ）、７．３（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．３３（ｓ、１Ｈ）、７．５（ｍ、１Ｈ）、７．６９（ｂｒｓ、１Ｈ）、７．７５（ｓ、１Ｈ）、７．９１（ｍ、２Ｈ）、１１．０（ｓ、１Ｈ）
【実施例１３】
【００８９】
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−［４−（２−モルホリン−４−イルエトキシ）−１−ベンゾチエン−２−イル］−３−チオフェンカルボキサミド
ａ）表題の化合物を４−［２−（１−ベンゾチエン−４−イルオキシ）エチル］モルホリンから実施例１２と同様にして調製した。ただし、反応混合物を４時間９０℃に加熱した。溶媒を真空下で除去した後、残渣を３Ｍ炭酸ナトリウム／ジクロロメタンで処理し、固体を界面からろ過した。分取ＨＰＬＣによる精製により生成物を得た。
ＭＳ（ＥＳ）４４７（Ｍ＋Ｈ）＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）２．５（ｍ、４Ｈ）、２．８（ｔ、２Ｈ）、３．５５（ｍ、４Ｈ）、４．２５（ｔ、２Ｈ）、７．０（ｍ、３Ｈ）、７．１５（ｍ、２Ｈ）、７．３５（ｍ、３Ｈ）、７．８（ｍ、１Ｈ）、１１．０５（ｂｒｓ、１Ｈ）
【００９０】
ｂ）４−［２−［（１−ベンゾチエン−４−イルオキシ）エチル］モルホリン
ジメチルホルムアミド（１５ｍｌ）中の４−（２−クロロエチル）モルホリン塩酸塩（０．７４ｇ）、１−ベンゾチオフェン−４−オール（０．５ｇ）および炭酸カリウム（１．１ｇ）を加熱し８０℃で６時間攪拌した。冷却後、混合物を水に注ぎ、酢酸エチルで２回抽出した。混合溶媒相を塩水で２回洗浄し、乾燥させ（硫酸マグネシウム）、蒸発させて生成物（０．７ｇ）を得た。
ＭＳ（ＥＳ）２６４（Ｍ＋Ｈ）＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）２．５（ｍ、４Ｈ）、２．８（ｔ、２Ｈ）、３．５５（ｍ、４Ｈ）、４．２５（ｔ、２Ｈ）、６．９（ｄ、１Ｈ）、７．２５（ｔ、１Ｈ）、７．４（ｄ、１Ｈ）、７．５５（ｄ、１Ｈ）、７．６（ｄ、１Ｈ）
【００９１】
ｃ）１−ベンゾチオフェン−４−オール
化合物をJ.Amer.Chem.Soc.、1955、77、5939に記載のように調製した。
【実施例１４】
【００９２】
２−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−｛２−［４−メチルフェニルスルホニル］−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン−６−イル｝チオフェン−３−カルボキサミド
ａ）表題の化合物を６−ブロモ−２−［４−メチルフェニルスルホニル］−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリンから実施例１３と同様にして調製した。ただし、反応混合物を８０℃に１８時間加熱した。溶媒を真空下で除去した後、残渣を２Ｍ水酸化ナトリウムとジクロロメタンで処理し、分離した水相を３６％塩酸を用いてｐＨ８に調整した。粗生成物を分取ＨＰＬＣによって精製した。
ＭＳ（ＥＳ）４７１（Ｍ＋Ｈ）＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）２．４（ｓ、３Ｈ）、２．８（ｍ、２Ｈ）、３．２（ｍ、２Ｈ）、４．１（ｓ、２Ｈ）、６．９（ｂｒ、２Ｈ）、７．１５（ｍ、１Ｈ）、７．３（ｍ、１Ｈ）、７．４（ｍ、２Ｈ），７．５（ｍ、１Ｈ）、７．７−７．９（ｍ、５Ｈ）、１１．０（ｓ、１Ｈ）
【００９３】
ｂ）６−ブロモ−２−［４−メチルフェニルスルホニル］−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン
２−［３−ブロモフェニル］−Ｎ−（４−メチルフェニルスルホニル）エチルアミン（７．４４ｇ）をアルゴン下で５℃でクロロホルム（１００ｍｌ）中で攪拌しつつ、順次３７−４０％ホルムアルデヒド（３．５ｍｌ）およびオキシ塩化リン（３０ｍｌ）を添加した。混合物を次いで３時間還流し、冷却し、ジクロロメタン（２５０ｍｌ）／飽和重炭酸ナトリウム（３００ｍｌ）に注ぎ、固体重炭酸ナトリウム（１６０ｇ）を一部ずつ５℃で注意深く添加した。水相をさらにジクロロメタンで抽出し、混合有機相を飽和重炭酸ナトリウムおよび水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ４）、蒸発させて油を得、これをイソヘキサン／トルエンから結晶化させて生成物を得た（３．４８ｇ）。
ＭＳ（ＥＳ）３６５（Ｍ）＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）２．４３（ｓ、３Ｈ）、２．８９（ｔ、２Ｈ）、３．３４（ｔ、２Ｈ）、４．１８（ｓ、２Ｈ）、６．８９（ｄ、１Ｈ）、７．２３−７．３０（ｍ、２Ｈ不明瞭）、７．３３（ｄ、２Ｈ）、７．７２（ｄ、２Ｈ）
【００９４】
ｃ）２−［３−ブロモフェニル］−Ｎ−（４−メチルフェニルスルホニル）エチルアミン
３−ブロモフェニルエチルアミン塩酸塩（９．４４ｇ）をトリエチルアミン（１２．２４ｍｌ）を含有するＴＨＦ（６０ｍｌ）に添加し、アルゴン下で５℃で攪拌しつつ、１５分間４−メチルフェニルスルホニルクロリド（１１．４４ｇ）を一部ずつ添加した。スラリーをＴＨＦ（５０ｍｌ）で希釈し、１６時間攪拌した。固体をろ過し、ＴＨＦで洗浄し、ろ液を蒸発させた。残渣を酢酸エチルに溶解し、１Ｎ塩酸、水、塩水で洗浄し、乾燥させた（ＭｇＳＯ４）。イソヘキサン中の０から２５％の酢酸エチルで溶出を行なうフラッシュシリカでのクロマトグラフィーにより生成物を得た（９．６７ｇ）。
ＭＳ（ＥＳ）３５２（Ｍ−Ｈ）−
１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）２．４４（ｓ、３Ｈ）、２．７４（ｔ、２Ｈ）、３．２３（ｑ、２Ｈ）、４．３６（ｔ、１Ｈ）、７．０３（ｄ、１Ｈ）、７．１４（ｔ、１Ｈ）、７．１７（ｍ、１Ｈ）、７．３０（ｄ、２Ｈ）、７．３５（ｄｄ、１Ｈ）、７．６９（ｄｄ、２Ｈ）
【００９５】
ｄ）３−ブロモフェニルエチルアミン塩酸塩
表題の化合物の遊離塩基は、CAS登録番号58971-11-2であり、Beilstein登録番号2716071である。
【実施例１５】
【００９６】
３−［（アミノカルボニル）アミノ］−５−（１−ベンゾチエン−２−イル）チオフェン−２−カルボキサミド
表題の化合物を３−［（アミノカルボニル）アミノ−５−ブロモチオフェン−２−カルボキサミドおよび１−ベンゾチエン−２−イルボロン酸から実施例１１（ｇ）と同様にして調製した。
ＭＳ（ＥＳ）３１８（Ｍ＋Ｈ）＋
１Ｈ  ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ６）６．６４（ｂｒｓ、２Ｈ）、７．３３−７．４７（ｍ、２Ｈ）、７．４９（ｂｒｓ、２Ｈ）、７．７１（ｓ、１Ｈ）、７．８０−７．９０（ｍ、１Ｈ）、７．９０−８．０２（ｍ、１Ｈ）、８．２３（ｓ、１Ｈ）、１０．０５（ｓ、１Ｈ）
【００９７】
化合物の薬理評価
ＩＫＫ２フィルターキナーゼアッセイ
化合物をＩＫＫ２の阻害についてフィルターキナーゼアッセイを用いて試験した。被験化合物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中、１０ｍＭとなるように溶解した。化合物を次いでキナーゼバッファー（０．１ｍＭ  ＥＧＴＡ、０．１ｍＭオルトバナジン酸ナトリウムおよび０．１％β−メルカプトエタノールを含有する５０ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ７．４）中、４０分の１に希釈した。３分の１の連続希釈をこの溶液とキナーゼバッファー中の２．５％ＤＭＳＯから作成した。２０μｌの化合物希釈液を９６ウェルプレートのウェルに二連で添加した。化合物の代わりにキナーゼバッファー中の２０μｌの２．５％ＤＭＳＯを対照ウェルに添加した（０％阻害）。２０μｌの０．５Ｍ  ＥＤＴＡを化合物の代わりにバックグラウンドウェルに添加した（１００％阻害）。
【００９８】
最終濃度が１０ｍＭ酢酸マグネシウム、１μＭ  ＡＴＰおよび０．１μＣｉ３３Ｐ  ＡＴＰとなるように、酢酸マグネシウム、非標識化ＡＴＰ、および３３Ｐ−標識化ＡＴＰの１０μｌの混合物を各ウェルに添加した。２０μｌのＩＫＫ２（０．１５μｇ／ウェル）、１−５３ＧＳＴ−ＩκＢ（０．５μｇ／ウェル）およびウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）（８．５μｇ／ウェル）の混合物を各ウェルに添加して反応を開始させた。最終反応容積は５０μｌとした。
【００９９】
キナーゼ反応を２１℃で８０分間インキュベートし、反応を等量（５０μｌ）の２０％トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）の添加によりタンパク質を沈降させて停止させた。１０分間沈殿を形成させ、ＧＦ／Ｃユニフィルター９６ウェルプレートでろ過した。各フィルターをおよそ１ｍｌの２％ＴＣＡで２回洗浄した。フィルタープレートを３０−４０℃で６０分間乾燥させ、２０μｌのシンチラント（scintillant）を各ウェルに添加し、プレートを密封して放射能をPackard Topcountマイクロプレートシンチレーションカウンターでカウントした。
【０１００】
上記アッセイで試験した場合、実施例１から１５の化合物は１０μＭ未満のＩＣ５０値を示し、これらが有用な治療活性を有することが示された。
【０１０１】
ＩＫＫ１フィルターキナーゼアッセイ
化合物の選択性をフィルターキナーゼアッセイを用いてＩＫＫ１の阻害についてそれらを試験することにより評価した。アッセイ条件は、ＩＫＫ１（０．２５μｇ／ウェル）と１−５３ＧＳＴＩκＢ（９μｇ／ウェル）の混合物を各ウェルに添加して反応を開始させる以外は、ＩＫＫ２フィルターキナーゼアッセイと同じとした。
【０１０２】
ＰＢＭＣによるＬＰＳ−誘導性ＴＮＦα産生の阻害
細胞における核因子カッパＢ（ＮＦκＢ）活性化に対する被験化合物の効果を、細菌リポ多糖（ＬＰＳ）により刺激されたヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）による腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦα）の産生の阻害を測定することによって評価した。
【０１０３】
ヘパリンで抗凝固処理したヒト血液（２５０ｍｌ）を、健康なボランティアから集めた。血液のアリコット（２５ｍｌ）を５０ｍｌのポリプロピレン遠心管中で２０ｍｌのLymphoprep (Nycomed)上に層にした。遠心管を２，５００ｒｐｍで３０分間遠心した（Sorval RT600B）。ＰＢＭＣを含有する濁った層を先細のパスツールピペットで回収し、８本の新しいポリプロピレン遠心管（遠心管当たりおよそ１０ｍｌ）に移し、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）で５０ｍｌに希釈した。これらの遠心管を２，０００ｒｐｍで８分間遠心した。ＰＢＳ（１０ｍｌ）を各細胞ペレットに添加し、細胞を穏やかに再懸濁した。細胞を４本の遠心管にプールし、ＰＢＳを各遠心管に添加し、容積を５０ｍｌとし、遠心管を１，４００ｒｐｍで８分間遠心した。細胞ペレットを再び１０ｍｌのＰＢＳに再懸濁し、２本の遠心管にプールし、容積をＰＢＳで５０ｍｌとし、そして遠心管を９００ｒｐｍで１０分間遠心した。
【０１０４】
最終的な細胞ペレットをおだやかに１０ｍｌの組織培養培地（１％熱不活性化ヒト血清、Ｌ−グルタミンおよびペニシリンおよびストレプトマイシンを含有するＲＰＭＩ）に再懸濁し、１本の遠心管中に混合し、ＲＰＭＩ培地で容積を３０ｍｌとした。細胞を計数し、細胞懸濁液を希釈して２．６ｘ１０６細胞／ｍｌとした。
【０１０５】
被験化合物をＤＭＳＯに溶解して１０ｍＭとし、ＲＰＭＩ培地で２５０分の１に希釈した（４０μＭ）。化合物を次いでＲＰＭＩ培地中の０．４％ＤＭＳＯで３分の１に連続希釈した。被験化合物希釈液のアリコット（５０μｌ）を９６−ウェルプレートのウェルに移した。対照ウェルは化合物の代わりにＲＰＭＩ中の０．４％ＤＭＳＯを含むものとした。
【０１０６】
細胞懸濁液のアリコット（１００μｌ）を各ウェルに添加し、プレートを３７℃で３０分間インキュベートした。５０μｌの４０μｇ／ｍｌ  ＬＰＳ（Sigma、L-4130）をウェルに添加して細胞によるＴＮＦα産生を刺激し、プレートを３７℃で一晩インキュベートした。ＬＰＳの代わりにＲＰＭＩ培地（５０μｌ）を陰性対照ウェルに添加した。最終インキュベーション容積を２００μｌとした。
【０１０７】
プレートを１，２００ｒｐｍで４分間遠心し、上清を取り出してＴＮＦα濃度を測定した。残りの細胞ペレットの生存度をＷＳＴ−１試薬（Boehringer Mannheim、1044807）を用いて測定した。１０μｌのＷＳＴ−１試薬を含有する１００μｌのＲＰＭＩ培地を各ウェルに添加し、プレートを０．５から３時間インキュベートした。４５０ｎｍにおける吸光度を９６−ウェルプレート分光光度計を用いて測定した。
【０１０８】
上清中のＴＮＦα（新たに収集したものあるいは−２０℃で冷凍保存したもの）を固相酵素免疫検定法（ＥＬＩＳＡ）を用いて測定した。ＥＬＩＳＡプレートは、９６ウェルプレートのウェルをヒツジ抗−ヒトＴＮＦαモノクローナル抗体（コーティングバッファー（０．２ｇ／ｌナトリウムアジドを含有する０．５Ｍ炭酸／重炭酸バッファー、ｐＨ９．６）で希釈した１μｇ／ｍｌの抗体１００μｌ）でコーティングし、４℃で一晩インキュベートすることによって調製した。ブランクのウェルはコーティングしなかった。ウェルを０．０５％Ｔｗｅｅｎを含有するＰＢＳ（ＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ）中の０．１％ＢＳＡで１回洗浄し、次いでコーティングバッファー中の１％ＢＳＡ（２００μｌ）とともに室温で１時間インキュベートした。ウェルをＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ中の０．１％ＢＳＡで３回洗浄した。
【０１０９】
ＰＢＭＣインキュベーションからの上清のサンプルをＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ中の１％ＢＳＡで３分の１に希釈した。１００μｌのこれらの希釈液のアリコットをＥＬＩＳＡプレートに添加した。その他のウェルは１００μｌＴＮＦαスタンダード（１０、３．３、１．１、０．３７、０．１２、０．０４、０．０１４および０ｎｇ／ｍｌ）を含むものとした。ＥＬＩＳＡプレートを室温で２時間インキュベートし、ウェルをＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ中の０．１％ＢＳＡで３回洗浄した。ウサギ抗−ヒトＴＮＦα抗体（２．５μｇ／ｍｌ溶液を１００μｌ）を各ウェルに添加し、プレートを室温で１．５時間インキュベートした。ウェルを次いでＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ中の０．１％ＢＳＡで３回洗浄した。ヤギ抗−ウサギＩｇＧ−西洋わさびペルオキシダーゼコンジャゲート（ＩＣＮ、６７４３７１；１０，０００分の１希釈液を１００μｌ）を各ウェルに添加し、プレートを室温で１．５時間インキュベートした。ウェルをＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ中の０．１％ＢＳＡで３回洗浄した。
【０１１０】
ペルオキシダーゼ基質を１００μｌのＤＭＳＯ（１００μｌ）中に１ｍｇのＴＭＢタブレット（Sigma、T-5525）を溶解し、これと３６μｌのＵＨＰＯ（BDH、30559；１ｇのタブレットを２５ｍｌの滅菌水に溶解したもの）を１０ｍｌの０．１Ｍクエン酸／酢酸バッファー、ｐＨ６に添加することによって調製した。１００μｌの基質を各ウェルに添加し、プレートを暗条件下で室温でおよそ３０分間インキュベートした。反応を各ウェルに２５μｌの２Ｍ硫酸を添加することによって停止させた。４５０ｎｍでの吸光度を９６ウェルプレート分光光度計で測定した。