(57)【要約】【課題】透明でかつその物性を制御でき、ゲルの硬さ、及びある温度下でのゾルの流動性を変化させることによりその眼組織の適した物性有する眼科器官置換用材料を提供する。【解決手段】（式１）で表される片末端を長鎖アルキル基で修飾されたポリエチレングリコール、（式２）で表される両末端を長鎖アルキル基で修飾されたポリエチレングリコール、および溶媒を含有するゲル化能を有する眼科用組成物。      R1-O-（CH2CH2O-）n1-R2    （式1）式中、R1 は炭素数１〜４のアルキル基、R2 は炭素数１６〜２２のアルキル基、オキシエチレン基の平均付加モル数 n1 は４５〜４５０の範囲である。      R3-O-（-CH2CH2O-）n2-R4   （式2）式中、R3 およびR4は、独立に炭素数１６〜２２のアルキル基、オキシエチレン基の平均付加モル数 n2 は４５〜４５０の範囲である。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
（式１）で表される片末端を長鎖アルキル基で修飾されたポリエチレングリコール、（式２）で表される両末端を長鎖アルキル基で修飾されたポリエチレングリコール、および溶媒を含有するゲル化能を有する眼科用組成物。
【化１】
2010104632.tif 000008
式中、
R1 は炭素数１〜４のアルキル基であり、
R2 は炭素数１６〜２２のアルキル基であり、
オキシエチレン基の平均付加モル数 n1 は４５〜４５０の範囲である。
【化２】
2010104632.tif 000009
式中、
R3 およびR4は、独立に炭素数１６〜２２のアルキル基であり、
オキシエチレン基の平均付加モル数 n2 は４５〜４５０の範囲である。
【請求項２】
（式１）で表されるポリエチレングリコールと（式２）で表されるポリエチレングリコールの質量比は、50〜99：50〜1の範囲である請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
溶媒が水又は生理食塩水である請求項１〜２に記載の組成物。
【請求項４】
（式１）で表されるポリエチレングリコールと（式２）で表されるポリエチレングリコールの合計含有量が10〜40質量%の範囲である請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
ｐＨ調整剤をさらに含有する請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
蛍光性染料及び／または着色剤をさらに含有する請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
人工硝子体として用いられる請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
人工水晶体として用いられる請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、修飾されたポリエチレングリコールを含むゲル化能を有する眼科用組成物に関する。特に、本発明の組成物は、硝子体置換物、特にタンポナーデ効果を持つ人工硝子体及び硝子体置換物として有用な眼科器官置換用の組成物である。
【背景技術】
【０００２】
硝子体は眼球のposterior cavityをうめるコラーゲンとヒアルロン酸ナトリウムから構成されるゲル状の物質である。硝子体はその光学的特性、力学的特性ばかりでなく、周辺の組織、あるいは全眼の状態、疾病に対して影響を与える重要な眼内物質である。また視覚は人間にとって重要な情報収集の手段である。そのため様々な治療法が開発され、例えばこれまで治療できないと思われた増殖性糖尿病網膜症、巨大裂子源性網膜剥離などの治療が可能になってきた。これらの治療として観血性手術が第一選択で硝子体を切除するために、その置換材料及びタンポナーデ効果を有する材料が研究開発され臨床応用が検討されてきた。
【０００３】
それら硝子体置換材料としてポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、コラーゲン、ヒアルロン酸ナトリウム、アクリル酸合成高分子材料などが検討されてきた。しかし、ポリビニルアルコールは結晶性高分子であるため再結晶化のための容積変化、複屈折による曇化などの理由により実際の臨床応用されていない。また、コラーゲン、ヒアルロン酸ナトリウムは生物/微生物由来のため高価でありまたその粘度の制御が困難であり注入時の取り扱いが難しいなどの理由により実際には臨床応用されていない。アクリル酸合成高分子はそのモノマー成分の毒性などの理由により実際の臨床応用されていない。また人眼の温度付近においてゾル−ゲル転移点を持つ、グリセロール誘導体である低分子量の親油性薬学的インプラント組成物が開示されているが、低分子量であるがため、眼内に移殖された場合、眼組織を通じ輸送され眼内より排出されてしまい、長期間にわたって埋殖する置換材料及びタンポナーデ効果を有する材料としては不適であった。（特許文献１）
【０００４】
タンポナーデ効果を有する一時的硝子体置換物としてはシリコーンオイル、パーフルオロカーボンなどが現在臨床応用されている。しかし、シリコーンオイルは眼組織への毒性、網膜前増殖膜の再増殖の促進による膜除去のための再手術、品質によっては乳化白濁等の理由により使用が難しく現在は難治網膜剥離例対策として利用されている。（特許文献２、３）
【０００５】
現在は一時的なタンポナーデとして液体パーフルオロカーボン、ガスタンポナーデとして空気、膨張ガスとして６フッ化硫黄（SF6）、８フッ化プロパンなどが使用されている。液体パーフルオロカーボンはその比重によりタンポナーデ効果を発揮する。しかし、そのため網膜下への浸入、無水晶体眼、偽水晶体眼での前眼房への迷入などの問題があり、ガスタンポナーデは眼内での気体の吸収によりその効果は１日〜１週間である。また、ガス圧が上昇した場合、高眼圧による緑内障等、ガスであるため後嚢の曇り等により術後の眼底の透見の困難さ、眼組織への毒性、眼圧の上昇の懸念のもある。（特許文献３）
【０００６】
以上のように、現在使用されている空気、ヒアルロナン、シリコーンオイル、パーフルオロカーボンなどは、その生体適合性、寿命、取り扱いなどの問題で完全なものではなかった。
【特許文献１】特表2006-500328号公報
【特許文献２】WO 2004/026953
【特許文献３】特開平06-154263号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、上記の現状に鑑み、透明でかつその物性を制御できる新たな材料、特に、ゲルの硬さ、及びある温度下でのゾルの流動性を変化させることによりその眼組織の適した物性有する眼科器官置換用材料を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記課題解決のため種々検討した結果、両末端を長鎖アルキル基で修飾されたポリエチレングリコール（以下、ジ−PEG）と片末端を長鎖アルキル基で修飾されたPEG（以下モノ−PEG）の混合物の溶液は、ジ−PEGとモノ−PEGの配合比を調整することにより、ゲルの硬さ、及びある温度下でのゾルの流動性を変化させることができ、その結果、眼組織の適した物性とすることができることから、眼科器官置換に適した材料であることを見いだして、本発明を完成させた。
【０００９】
本発明は、（式１）で表される片末端を長鎖アルキル基で修飾されたポリエチレングリコール、（式２）で表される両末端を長鎖アルキル基で修飾されたポリエチレングリコール、および溶媒を含有するゲル化能を有する眼科用組成物に関する。
【化１】
2010104632.tif 000003
式中、
R1 は炭素数１〜４のアルキル基であり、
R2 は炭素数１６〜２２のアルキル基であり、
オキシエチレン基の平均付加モル数 n1 は４５〜４５０の範囲である。
【化２】
2010104632.tif 000004
式中、
R3 およびR4は、独立に炭素数１６〜２２のアルキル基であり、
オキシエチレン基の平均付加モル数 n2 は４５〜４５０の範囲である。
【００１０】
上記本発明の組成物においては、
（式１）で表されるポリエチレングリコールと（式２）で表されるポリエチレングリコールの質量比は、50〜99：50〜1の範囲であること、
溶媒が水又は生理食塩水であること、
（式１）で表されるポリエチレングリコールと（式２）で表されるポリエチレングリコールの合計含有量が10〜40質量%の範囲であること、
ｐＨ調整剤をさらに含有すること、または
蛍光性染料及び／または着色剤をさらに含有すること、
ができる。
【００１１】
さらに本発明の組成物は、人工硝子体として、または人工水晶体として用いることができる。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、ゲルの硬さ、及びある温度下でのゾルの流動性を変化させることによりその眼組織の適した物性有する眼科器官置換用材料を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１３】
本発明は、片末端を長鎖アルキル基で修飾されたポリエチレングリコール、両末端を長鎖アルキル基で修飾されたポリエチレングリコール、および溶媒を含有するゲル化能を有する眼科用組成物に関する。
【００１４】
本発明のゲル化能を有する眼科用組成物に含まれる、片末端を長鎖アルキル基で修飾したポリエチレングリコール（PEG）は、以下の（式1）で示されるものである。以下、（式1）で示されるポリエチレングリコールをモノ−PEGと表記することがある。
【００１５】
【化３】
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【００１６】
式中、R1 は炭素数１〜４のアルキル基であり、
R2 は炭素数１６〜２２のアルキル基であり、
オキシエチレン基の平均付加モル数 n1 は４５〜４５０の整数である。
【００１７】
（式1）で示されるPEGは、分子内に親水部と疎水部を併せ持つ両親媒性ポリマーであり、この両親媒性ポリマーは、水中で疎水基が水分子との接触を避けるように凝縮し、親水基は疎水基の表面を覆うかたちで自己組織化する。この状態がゲルと呼ばれる特定の溶媒に不溶の三次元網目構造を持ち、その溶媒を多量に含んだまま流動性を失った相である。またこのゲルになる前の流動性を持った相をゾルといい、ゾルからゲルに転移することをゾル−ゲル転移と言う。この両親媒性ポリマーは溶媒中で、ある臨界濃度を超えると親水性のPEG鎖が物理架橋を引き起こしゾル−ゲル転移を起こす。また、ゲル状態の両親媒性ポリマーは、その各濃度に対して特定温度範囲でゾル−ゲル転移を起こす。本発明では、この性質を利用して、注入可能で、硝子体腔内でゲル化する置換物を提供する。
【００１８】
オキシエチレン基の平均付加モル数 n1 は、４５〜４５０の範囲であることが適当である。即ち、（式1）で表されるポリエチレングリコールのオキシエチレン基の平均付加モル数 n1 は、４５未満では、得られるゲルが硬くなり過ぎ、一方、４５０を超えると、製造が容易でなくなる。オキシエチレン基の平均付加モル数 n1 は、好ましくは６０〜３４０の範囲であり、より好ましくは７０〜１８０の範囲である。
【００１９】
短鎖アルキル基 R1 は炭素数が４を超えると、本発明の組成物がゲル化した場合、硬すぎて眼内への注入等の取り扱いが困難になるので炭素数４以下とすることが適当である。R1 で表される炭素数１〜４の整数のアルキル基は、具体的には、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔ−ブチル基等であることができる。最適なアルキル基 R1 は、炭素数１のメチル基である。
【００２０】
長鎖アルキル基 R2 は炭素数１６未満では本発明の組成物がゲル化せず、また炭素数２２を超えると本発明の組成物がゲル化した場合、硬すぎて眼内への注入等の取り扱いが困難になるので、炭素数１６〜２２の範囲とすることが適当である。R2 で表される炭素数１６〜２２のアルキル基は、直鎖状でも分岐していてもよく、具体的には、ヘキサデシル基、オクタデシル基、エイコシル基、ドコシル基、イソステアリル基などが挙げられる。最適なアルキル基 R2 は、炭素数１８のオクタデシル基である。
【００２１】
また、本発明のゲル化能を有する眼科用組成物に含まれる、両末端を長鎖アルキル基で修飾されたPEGは、両末端を長鎖アルキル基で修飾されたPEG（式2）である。以下、（式2）で示されるPEGをジ−PEGと表記することがある。
【００２２】
【化４】
2010104632.tif 000006
【００２３】
式中、R3 およびR4は、独立に炭素数１６〜２２のアルキル基である。
オキシエチレン基の平均付加モル数 n2 は４５〜４５０の整数である。
【００２４】
（式2）で示されるジ−PEGと（式1）で示されるモノ−PEGの配合比により、本発明の組成物が形成するゲルの硬さ、およびある温度下でのゾルの流動性を変化させることができ、それにより、眼組織に適した物性有する眼科器官置換用材料を提供することができる。
【００２５】
オキシエチレン基の平均付加モル数 n2 は、４５〜４５０の範囲であることが適当である。（式2）で表されるポリエチレングリコールのオキシエチレン基の平均付加モル数 n2 は、４５未満では、得られるゲルが硬くなり過ぎ、一方、４５０を超えると、製造が容易でなくなる。オキシエチレン基の平均付加モル数 n2 は、好ましくは６０〜３４０の範囲であり、より好ましくは１４０〜３２０の範囲である。
【００２６】
長鎖アルキル基 R3 およびR4は炭素数１６未満では、本発明の組成物がゲル化せずまた炭素数２２を超えると本発明の組成物がゲル化した場合、硬すぎて眼内への注入等の取り扱いが困難になるので、炭素数１６〜２２の範囲とすることが適当である。R3 およびR4 で表される炭素数１６〜２２のアルキル基は、直鎖状でも分岐していてもよく、具体的には、ヘキサデシル基、オクタデシル基、エイコシル基、ドコシル基、イソステアリル基などが挙げられる。R3 およびR4 は、同一または異なることができ、好ましくは、R3 およびR4ともにオクタデシル基である。
【００２７】
上記（式1）で示されるモノ−PEGおよび（式2）で示されるジ−PEGは、ポリエチレングリコールの両末端にアルキル基を導入することで、合成することができる。この合成方法としては、公知の方法を適宜用いることができる。また、原料として用いられるポリエチレングリコールも公知の製造方法で製造され、通常はアルカリ触媒の存在下、４０〜２５０℃、加圧反応装置においてエチレンオキシドを滴下することで、上記範囲の平均付加モル数または分子量を有する末端修飾ポリエチレングリコールの原料となり得るポリエチレングリコールが得られる。
【００２８】
本発明の組成物において、（式1）で示されるモノ−PEGと（式2）で示されるジ−PEGの質量比は、50〜99:50〜1の範囲であることが好ましい。この範囲にあることで、眼組織に適した物性(例えば、ゲルの硬さ、流動性、ハンドリング性等)を有する組成物とすることができる。但し、ゲルの硬さ、流動性、ハンドリング性等の物性は、モノ−PEGおよびジ−PEGが有するアルキル基の種類や、モノ−PEGおよびジ−PEGのオキシエチレン基の平均付加モル数あるいは分子量、さらには、本発明の組成物中のモノ−PEGおよびジ−PEGの合計含有量によっても変化する。従って、上記質量比は、これらのことを勘案して、目的とする眼組織に適した物性を有するように、適宜選択することができる。例えば、実施例に示した、ｎ１；約１１０、Ｒ１；メチル基、Ｒ２；オクタデシル基であるモノ−PEGと、ｎ２；約２５０、Ｒ３；オクタデシル基、Ｒ４；オクタデシル基であるジ−PEGの混合物の場合、上記質量比は、80〜95:20〜5の範囲であることが、ゲルの硬さ、流動性、ハンドリング性等の物性の観点から好ましい。
【００２９】
本発明の組成物は、（式1）で示されるモノ−PEGおよび（式2）で示されるジ−PEGに加えて、溶媒を含む。溶媒としては、例えば、水または生理食塩水を使用することが出来る。生理食塩水が含む等張化剤としては、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウムなどを使用できる。さらに、本発明の組成物は、ｐＨ調整剤としてリン酸、ホウ酸、EDTA（エチレンジアミン四酢酸）などの酸のアルカリ金属塩類を含ませることもでき、本発明の組成物にｐＨ緩衝作用を持たせることもできる。
【００３０】
本発明の組成物において、モノ−PEGおよびジ−PEGの合計含有量は、10〜40質量%の範囲であることが適当である。モノ−PEGおよびジ−PEGの合計含有量が、40質量%超えると転移温度が安定せず、また本発明の組成物が形成するゲルが硬すぎて眼内への注入等の取り扱いが困難になる傾向がある。一方、モノ−PEGおよびジ−PEGの合計含有量が10質量%未満では、ゲル化が困難になる傾向がある。但し、ジ−PEGの含有量(モノ−PEGとの質量比)によって、本発明の組成物のゲル化能は変化する。モノ−PEGおよびジ−PEGの合計含有量は、15〜30質量%の範囲であることが好ましく、20〜25質量%の範囲であることがより好ましい。20〜25質量%の範囲であれば、人眼の温度（体温）に近い、３５℃から４０℃においてゲル状態を維持できる。尚、モノ−PEGおよびジ−PEGの合計含有量を本明細書では、ゲル濃度と呼ぶことがある。
【００３１】
また、本発明の組成物は、蛍光性の染料及び着色剤を含有させることができる。蛍光性の染料及び着色剤を含有させることにより眼内での視認性を付与するためことが出来る。使用される蛍光性染料及び着色剤は、例えば、ピレン、フルオロセイン、ウラニン等の比較的分子量の大きいものが体内への取り込み等の安全性の観点より好ましい。
【００３２】
○架橋成分含有量によるゲルの物性評価
モノ−PEGにジ−PEGの混合物の質量を１００とした場合にジ−PEG含有量（質量％）が所定量になるように調合し、生理食塩水でゲル濃度２０％になるようにφ１６mmｘ１２５mmねじ口付耐熱試験管中に溶液を調製した。調製した溶液は試験管にフタをし、７０℃に設定したヤマト科学株式会社製真空低温乾燥器ＤＰ３２ 内に静置し、１晩（約16時間程度）加熱し、ゾル状態である溶液とした。また７０℃で溶解しない場合、８０℃まで加熱し、ゾル状態である溶液とした。作製した溶液を３７℃に設定のクールインキュベーター ヤマト科学株式会社製 恒温恒湿器ＩＷ２４０内に静置し、３７℃の状態でゲル化したことを確認し、物性測定用のゲルとした。ゲルの物性は３７℃（体温付近）でのゲルの硬さ、透明性、注射器への充填性を考慮した７０℃での流動性、７０℃または８０℃で溶解させたゾル状溶液が３７℃でゲル化に要する時間（分）、屈折率、３７℃(体温付近)での２１ゲージの注射針の注射器を用いゲルを射出する際の感触（ハンドリング）による各試験を行なった。その結果及び評価方法を表1に示す。
【００３３】
本発明の組成物は、モノ−PEGおよびジ−PEGの合計含有量、並びにモノ−PEGとジ−PEGの質量比に応じて、0〜70℃の範囲の温度においてゾル−ゲル転移点を有し、ジ−PEGの含有量が多くなるとゲル状物の場合、ジャム状のゲルになるが、ゲル状態でも注射器等の注入手段により眼内に注入可能である。ゲルの流動性、硬さ、ハンドリングにおいてはジ−PEGの含有量２０質量％以下が好ましく、２０質量％を超えるとジャム状に脆さを伴う傾向が高くなる。本発明の組成物は、ゾル−ゲル転移点を持つため、硬い高ゲル濃度のもの、即ち、ジ−PEG高含有量のものであっても、７０℃以上に加温すればゾル状態での注射器充填が可能である。硬く脆さを伴うもののジャム状のゲルであるため、体温近く(37℃)まで温度を下げて極小の挿入孔から眼球に対して低侵襲にかつ容易に注入することが可能となる。ジ−PEGの含有量の好ましい範囲としては、注入可能であるという観点からは１.０〜５０％の範囲が好ましく、さらにハンドリングおよび充填性の観点からは１.０〜２０％の範囲がより好ましく、３５〜４０℃体温付近にゾル-ゲル転移点を持ち、ハンドリング、充填性も良好であるという観点から５〜１０％の範囲が最も好ましい。
【００３４】
このような物性を有する本発明の眼科用組成物は、人工硝子体および人工水晶体として用いることができる。本発明の眼科用組成物は、硝子体置換物、特にタンポナーデ効果を持つ人工硝子体及び硝子体置換物として有用な眼科器官置換用の組成物である。しかし、それに限定されることなく、眼球組織である角膜、水晶体、強膜、網膜等の組織の移殖物及び補綴物の材料としても有用であり、また、他部位の生体組織のゲル状組織の置換物または移殖物及び補綴物の材料としても使用することが出来る。
【実施例】
【００３５】
以下に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、これらの実施例は本発明の範囲を限定するものではない。
【００３６】
（式１）および（式２）で示されるポリエチレングリコール誘導体は、当該分野で公知の方法によって作製することができる。以下にこれらの合成例を示す。
【００３７】
（式１）で示されるポリエチレングリコール誘導体 モノ−PEG の合成例
[ｎ１；約１１０、Ｒ１；メチル基、Ｒ２；オクタデシル基]
オキシエチレン基の平均付加モル数が約１１０のポリエチレングリコールモノメチルエーテル（日本油脂（株）製）５００ｇとトルエン３０００ｍＬを窒素導入管を備えた四つ口フラスコへ仕込み、乾燥窒素を導入しながら加熱溶解させた後、水浴中で水素化ナトリウム２０ｇを加えて窒素雰囲気中で撹拌下、室温にて６時間反応させた。続いて、１−ブロモオクタデカン（和光純薬（株）製、試薬特級）１８０ｇ添加し、窒素雰囲気中で撹拌下６０℃にて１２時間反応させた。反応後、水浴中で撹拌しながら水５００ｍＬを１時間かけて添加し、３時間静置してから下層の水層を除去した。そして、アルカリ価を測定し、算出された中和に必要とされる量の希塩酸を添加して中和を行い、６．７ＫＰａ（５０ｍｍＨｇ）にて１１０℃でトルエンを留去させた後、ろ過して粗反応生成物を得た。粗反応生成物を加熱溶解し、石油エーテル中に撹拌しながら添加して沈殿させ、沈殿物をろ別後、減圧乾燥させて目的生成物を得た。
【００３８】
（式２）で示されるポリエチレングリコール誘導体 ジ−PEG の合成例
[ｎ２；約２５０、Ｒ３；オクタデシル基、Ｒ４；オクタデシル基]
オキシエチレン基の平均付加モル数が約２５０のポリエチレングリコール（日本油脂（株）製）５００ｇおよびトルエン３０００ｍＬを窒素導入管を備えた四つ口フラスコへ仕込み、乾燥窒素を導入しながら加熱溶解させた後、水浴中で水素化ナトリウム４０ｇを加えて窒素雰囲気中で撹拌下、室温にて６時間反応させた。続いて、１−ブロモオクタデカン（和光純薬（株）製、試薬特級）３６０ｇ添加し、窒素雰囲気中で撹拌下６０℃にて１２時間反応させた。反応後、水浴中で撹拌しながら水１０００ｍＬを１時間かけて添加し、３時間静置してから下層の水層を除去した。そして、アルカリ価を測定し、算出された中和に必要とされる量の希塩酸を添加して中和を行い、６．７ＫＰａ（５０ｍｍＨｇ）にて１１０℃でトルエン及び水を留去させた後にろ過して粗反応生成物を得た。粗反応生成物を加熱溶解し、石油エーテル中に撹拌しながら添加して沈殿させ、沈殿物をろ別後、減圧乾燥させて目的生成物を得た。
【００３９】
○ゾル-ゲル転移点の測定
大塚製薬株式会社社製  日本薬局方生理食塩液大塚生食注（以下 生理食塩水）を使用し、溶液を作製した。溶液はゲル濃度5％、10％、12％、14％、16％、18％、20％、22％、24％、26％、28％、30％、35％、40％、50％の15種類とした。サンプルの作製は、5mLバイアル瓶にジ−PEG含有量 ５.４質量％のモノ−PEG、ジ−PEG混合物を所定濃度になるようにを正確に秤量し、生理食塩水を加え、調製した。調製した溶液は常圧、80℃に設定したヤマト科学株式会社製  真空低温乾燥器 DP３２内で１晩（約16時間程度）加熱した。得られた溶液は3日間室温（25℃程度）で静置し、測定に使用した。測定には恒温水槽 ヤマト科学株式会社製 精密低温温水器 BH301を用い、水槽内にバイアル瓶を1時間浸漬させ、状態変化の観察を行った。測定温度は5℃、10℃、15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃、75℃、80℃の16点で行い、低温から加温する方法で行った。観察方法はバイアル瓶を逆さにし、流動性の有無を目視にて観察し、その状態をプロットすることにより各濃度におけるゾル-ゲル転移点の図1とした。図1中のプロットは白抜きがゾル状態、グレーはゾルとゲルが混在した状態、黒はゲル状態である。
【００４０】
○ゾル-ゲル転移点の測定結果
濃度の上昇に伴い、ゾル-ゲル転移温度が高温となり、また、ゲル濃度４０％は75℃に転移温度を持ち、人眼の温度（体温）に近い、35℃から40℃においてゲル状態を維持できる最適ゲル濃度は、20〜22％であった。
【００４１】
【表１】
2010104632.tif 000007
【００４２】
※1）：３７℃（体温付近）でのゲルの硬さを5段階にて評価
1：液状のためタンポナーデ効果はない。
2：流動性はあるがゲル状でありタンポナーデ効果期待できる。
3：流動性が低く、ゲル状でありタンポナーデ効果あり。
4：流動性低く脆さあるがタンポナーデ効果あり。
5：脆さと硬さがあり、そのためタンポナーデ効果期待できない。
※2）：室温にて目視でゲルの透明性を観察、3段階にて評価
（○：透明，△：やや不透明，×：不透明）
※3）：70℃での流動性を5段階にて評価（注射器への充填性）
1：流れる
2：やや粘調性があり流動性あり,
3：粘調性および流動性あり
4：粘調性が高く流動性低い
5：硬く流動性なし
※4）：70℃(サンプル1〜10)または80℃(サンプル11〜14)にて
溶解させたサンプルが37℃でゲル化する時間
注射器への充填性及び体温付近でのゲル化に要する時間
※5）：注射針（２１ゲージ）による注入容易性
（容易、やや難、難）
【００４３】
○ゲルの物性評価結果
ジ−PEG含有量の変化によりタンポナーデ効果を期待できる液状より流動性が無い状態である硬さの状態とゲルのハンドリング（射出容易性）、注射器への充填性より７０℃での流動性、射出後のゲル化に要する時間よりゲルの物性評価を行なった。ジ−PEG含有量が上昇するにしたがってゲルは糸を引くような状態より徐々に硬くなり、ジ−PEG含有量が２０質量％を超えると、ゲルは硬く脆いゼリー状になり流動性も変化することが確認された。さらに３０質量％を超えると70℃では溶解せず、ゾル-ゲル転移温度が上昇していることが確認された。また、ジ−PEG含有量が４.１質量％ではゲルが柔らかすぎて水晶体、硝子体等の眼科器官置換物として不向きであり、またハンドリング等においても流動性が高すぎて取り扱いにやや難点があり、ジ−PEG含有量が３０質量％、４０質量％のものは流動性、ハンドリングにおいてゲルは硬く、脆いゼリー状であり注射器への充填及び注射針からの射出にやや困難であったが、約７０℃以上のゾル-ゲル転移点に加温することによりゾル化し容易に注射器に充填可能であり、ゲル化までの時間はジ−PEG含有量２０質量％以下のものと同等であった。
【００４４】
○ゲルの光線透過率
次にジ−PEG含有量５.４質量％のゲル濃度２０％のゲルの光線透過率を（株）日立製作所製 日立自記分光光度計 U-3000型で測定し、人眼硝子体の光線透過率曲線（Boettner & Wolter,Invest．OｐＨthal.1.776(1962)）と比較した(図2参照)。
【００４５】
透明度に関しては各ジ−PEG含有量のものも曇りは無く、また屈折率も1.35〜１.36で正常眼硝子体の 1.336と大きな差異はなく、光線透過率のグラフからは人間の硝子体とほぼ同等の光透過性を示し、ほぼ全ての紫外光をカットしていることがわかり、光学特性としては十分実用に耐えうるものであった。
【００４６】
○病理学的観察
本発明のゲル化能を有する組成物の眼組織に対しする安全性の確認を行なうためにジ−PEG含有量5.4質量%のモノ−PEG・ジ−PEG混合物をゲル濃度20％なるように調整し、オートクレーブ121℃、20分で滅菌し家兎眼用注入用サンプルとし、家兎眼での病理学的観察を行なった。有色家兎5羽5眼の硝子体切除後ゲルを十分に２１ゲージ注射針より注入した。術後1週、4週、3ヶ月目に眼圧、前房蛋白濃度、前眼部、眼底検査を行った。網膜電図は術前と術後3ヶ月に測定しa波とb波の振幅を比較した。対照は硝子体切除のみを行った有色家兎3羽3眼である。術後3ヶ月目に眼球摘出を行い病理学的検索を行い、その結果全例で前眼部、眼底に異常所見を認めなかった。眼圧は1眼のみ術後1週で軽度上昇が見られたがそれ以外は術前とほぼ同じ眼圧を保った。前房蛋白濃度は術後1週で全例軽度上昇が見られたがすべての症例で対照と変わらず術後1ヶ月で術前の値に復した。網膜電図での振幅の比較では全例術前と比べて80％以上であり網膜機能は低下していないと考えられた。光学顕微鏡での網膜、硝子体との界面では問題となる所見を全例で認めなかった。以上のことより家兎眼での病理学的観察において本発明の眼科器官置換用材料PEGは各観察において問題となる所見は無く、眼組織に対して細胞毒性が無く、また網膜機能に対しても影響の無いものであった。
【産業上の利用可能性】
【００４７】
本発明の眼科用組成物は、細胞毒性が無く、透明であり、安定な構造を持ち、温度を変えることで注入除去が速やかに行え、タンポナーデ効果のある眼組織に適した物性を有し、眼科器官置換用材料として有用である。
【図面の簡単な説明】
【００４８】
【図１】ゾル-ゲル転移点を示す。
【図２】光線透過率と人眼硝子体（文献）の比較。
【図２】
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【図１】
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