(57)【要約】【課題】  透明な生物細胞などの被観察物を容易に観察する。【解決手段】  観察対象となる被観察物からの光を結像する結像光学系と、結像光学系により結像される像を撮像する撮像手段と、被観察物の主走査方向に延びる明部と主走査方向と直交する方向である副走査方向にて明部を挟み込む暗部とからなり、明部が結像光学系の光軸に対して副走査方向にずれて配置された照明手段と、から構成される画像取得部と、画像取得部又は被観察物を副走査方向に移動させて、画像取得部及び被観察物の相対位置を変化させる移動機構と、を備えたことを特徴とする。照明手段の明部は、結像光学系の光軸に対して、結像光学系の入射側の有効口径、結像光学系から被観察物までの距離及び照明手段から被観察物までの距離から求められる間隔を副走査方向にずらして配置されることが好ましい。【選択図】    図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
観察対象となる被観察物からの光を結像する結像光学系と、前記結像光学系により結像される像を撮像する撮像手段と、前記被観察物の主走査方向に延びる明部と前記主走査方向と直交する方向である副走査方向にて前記明部を挟み込む暗部とからなり、前記明部が前記結像光学系の光軸に対して前記副走査方向にずれて配置された照明手段と、から構成される画像取得部と、
前記画像取得部又は前記被観察物を前記副走査方向に移動させて、前記画像取得部及び前記被観察物の相対位置を変化させる移動機構と、
を備えたことを特徴とする観察装置。
【請求項２】
請求項１に記載の観察装置において、
前記照明手段の前記明部は、前記結像光学系の光軸に対して、前記結像光学系の入射側の有効口径、前記結像光学系から前記被観察物までの距離及び前記照明手段から前記被観察物までの距離から求められる間隔を前記副走査方向にずらして配置されることを特徴とする観察装置。
【請求項３】
請求項１又は２に記載の観察装置において、
前記照明手段における前記明部の幅を変更することで、前記被観察物に照射される光が前記被観察物を透過したときに散乱する光の強弱を調整する調整手段を、さらに備えていることを特徴とする観察装置。
【請求項４】
請求項１又は２に記載の観察装置において、
前記明部からの光の強度を変更することで、前記被観察物に照射される光が前記被観察物を透過したときに散乱する光の強弱を調整する調整手段を、さらに備えていることを特徴とする観察装置。
【請求項５】
請求項１又は２に記載の観察装置において、
前記明部から出射される光の角度を変更することで、前記被観察物に照射される光が前記被観察物を透過したときに散乱する光の強弱を調整する調整手段を、さらに備えていることを特徴とする観察装置。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の観察装置において、
前記撮像手段は、前記画像取得部及び前記被観察物の相対位置の変化に基づいて複数の画像を取得するとともに、
前記撮像手段により取得された複数の画像から、前記被観察物全域の画像を生成する画像生成手段を、さらに備えていることを特徴とする観察装置。
【請求項７】
請求項６に記載の観察装置において、
前記撮像手段は、前記被観察物において散乱する光に基づく像と、前記照明手段における前記明部及び前記暗部に基づく像とが重畳された画像を取得し、
前記画像生成手段は、前記被観察物において散乱する光に基づく像が前記暗部に基づく像に重畳された範囲を前記複数の画像のそれぞれから切り出し、切り出された画像を合成することで、前記被観察物全域の画像を生成することを特徴とする観察装置。
【請求項８】
請求項７に記載の観察装置において、
前記画像生成手段によって生成された被観察物全域の画像における画質を調整する画質調整手段を、さらに備えていることを特徴とする観察装置。
【請求項９】
請求項８に記載の観察装置において、
前記画質調整手段により画質調整された前記被観察物全域の画像から、前記被観察物の位置又は大きさを示す情報を取得する情報取得手段をさらに備えていることを特徴とする観察装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、透明な被観察物を観察する観察装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
生物細胞などの透明試料を被観察物とする観察方法として、例えば屈折率分布を可視化することのできる位相差観察が挙げられる。この位相差観察を用いて培養容器の全域を一度に観察する場合には、一般に位相差観察に用いられる光学系の視野範囲よりも広い視野範囲となる光学系や、被観察物を広範囲に亘って照明できる照明装置などを用いる必要があることから、観察装置が大型化してしまう。そこで、明部と暗部とを交互に配置したストライプ状の面光源によって照明される被観察物を撮像し、撮像により得られる画像から被観察物の全域を観察する手法が提案されている（特許文献１参照）。
【特許文献１】特開２００７−１７８４２６号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００３】
しかしながら、このようなストライプ状の面光源を採用した場合、観察による被観察物の検出性能は、面光源の大きさや、撮像素子などの検出器の画素数により制約されてしまうことから、撮像素子により取り込まれる画像を高解像度の画像とするためには、観察装置を大型化しなければならない。
【０００４】
本発明は、装置自体を大型化しなくとも、透明な生物細胞などの被観察物を容易に観察できるようにした観察装置を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
第１の発明の観察装置は、観察対象となる被観察物からの光を結像する結像光学系と、前記結像光学系により結像される像を撮像する撮像手段と、前記被観察物の主走査方向に延びる明部と前記主走査方向と直交する方向である副走査方向にて前記明部を挟み込む暗部とからなり、前記明部が前記結像光学系の光軸に対して前記副走査方向にずれて配置された照明手段と、から構成される画像取得部と、前記画像取得部又は前記被観察物を前記副走査方向に移動させて、前記画像取得部及び前記被観察物の相対位置を変化させる移動機構と、を備えたことを特徴とする。
【０００６】
第２の発明は、第１の発明において、前記照明手段の前記明部は、前記結像光学系の光軸に対して、前記結像光学系の入射側の有効口径、前記結像光学系から前記被観察物までの距離及び前記照明手段から前記被観察物までの距離から求められる間隔を前記副走査方向にずらして配置されることを特徴とする。
【０００７】
第３の発明は、第１の発明又は第２の発明において、前記照明手段における前記明部の幅を変更することで、前記被観察物に照射される光が前記被観察物を透過したときに散乱する光の強弱を調整する調整手段を、さらに備えていることを特徴とする。
【０００８】
第４の発明は、第１の発明又は第２の発明において、前記明部からの光の強度を変更することで、前記被観察物に照射される光が前記被観察物を透過したときに散乱する光の強弱を調整する調整手段を、さらに備えていることを特徴とする。
【０００９】
第５の発明は、第１の発明又は第２の発明において、前記明部から出射される光の角度を変更することで、前記被観察物に照射される光が前記被観察物を透過したときに散乱する光の強弱を調整する調整手段を、さらに備えていることを特徴とする。
【００１０】
第６の発明は、第１の発明から第５の発明のいずれかにおいて、前記撮像手段は、前記画像取得部及び前記被観察物の相対位置の変化に基づいて複数の画像を取得するとともに、前記撮像手段により取得された複数の画像から、前記被観察物全域の画像を生成する画像生成手段を、さらに備えていることを特徴とする。
【００１１】
第７の発明は、第６の発明において、前記撮像手段は、前記被観察物において散乱する光に基づく像と、前記照明手段における前記明部及び前記暗部に基づく像とが重畳された画像を取得し、前記画像生成手段は、前記被観察物において散乱する光に基づく像が前記暗部に基づく像に重畳された範囲を前記複数の画像のそれぞれから切り出し、切り出された画像を合成することで、前記被観察物全域の画像を生成する。
【００１２】
第８の発明は、第７の発明において、前記画像生成手段によって生成された被観察物全域の画像における画質を調整する画質調整手段を、さらに備えていることを特徴とする。
【００１３】
第９の発明は、第８の発明において、前記画質調整手段により画質が調整された前記被観察物全域の画像から、前記被観察物の位置又は大きさを示す情報を取得する情報取得手段をさらに備えていることを特徴とする。
【発明の効果】
【００１４】
本発明によれば、結像光学系や照明手段を大型にしなくとも、透明な被観察物を広視野で観察するのに適した観察装置を実現することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１５】
図１は、本発明を用いた観察装置について説明する。本発明の観察装置１０は、被観察物１５をＸ方向に移動させながら観察する。以下、Ｘ方向を副走査方向、Ｙ方向を主走査方向として説明する。観察装置１０は、照明部２１、ステージ２２、移動機構２３、結像光学系２４、撮像素子２５、コントローラ２６及びコンピュータ（以下、ＰＣと称する）２７などから構成される。なお、照明部２１、結像光学系２４及び撮像素子２５は、画像取得部として機能する。
【００１６】
照明部２１は、ステージ２２に載置される被観察物１５を下方から照明するために設けられる。この照明部２１としては、例えばバックライト付きの透過型液晶パネル３０が挙げられる。透過型液晶パネル３０は、その表示領域３０ａに種々のパターンを形成することが可能であり、上述したバックライトの点灯時には、表示領域３０ａに形成されたパターンに基づいた照明光が被観察物１５に照射される。表示領域３０ａに形成されるパターンとしては、主走査方向に延びる明部３５と、副走査方向において明部３５を挟み込むように配置される暗部３６，３７とからなるパターンが挙げられる。なお、図１及び図２においては、暗部３６，３７の副走査方向における幅を、明部３５の幅よりも広くしているが、明部の幅と同一幅としても良いし、明部の幅よりも狭くすることも可能である。符号４０はドライバであり、透過型液晶パネル３０における表示や、バックライトの点灯／消灯など、照明部２１を駆動する。
【００１７】
ステージ２２は、被観察物１５が載置される。被観察物１５としては、例えば無染色の細胞が培養された透明な培養容器が挙げられる。なお、照明部２１からの照射光を被観察物１５の下方から照射させることから、ステージ２２としては、ガラスなどの透明部材から形成される。なお、ステージ２２を透明部材から形成する他に、載置される被観察物１５の部分が開口されたステージ２２であってもよい。
【００１８】
移動機構２３は、例えば不図示のモータや複数のギヤなどから構成される。この移動機構２３は、被観察物１５の観察時に、被観察物１５が載置されたステージ２２をＸ方向に移動させる。なお、モータとしてステッピングモータが挙げられる。
【００１９】
結像光学系２４は、被観察物１５の全域から出射される光を撮像素子２５の撮像面上に結像する。なお、この結像光学系２４の光軸ＬはＺ方向となる。撮像素子２５は、例えばＣＣＤやＣＭＯＳなどから構成される。この撮像素子２５は、結像光学系２４によって撮像面上に結像された光を取り込むことで、画像信号（画像データ）を取得する。符号４１は、ドライバであり、撮像素子２５を駆動する。なお、被観察物１５の全域から出射される光は、撮像素子２５の撮像面上に結像されるとしているが、後述する画像切出範囲６０のみが必要であれば、被観察物１５の全域から出射される光のうち、画像切出範囲６０に対応する光を撮像素子２５の撮像面上に結像させることも可能である。このような場合には、主走査方向を長手方向とするライン状の撮像素子を用いればよい。
【００２０】
コントローラ２６は、照明部２１、移動機構２３、撮像素子２５などを制御する。また、コントローラ２６は、撮像素子２５によって取得された画像データをＰＣ２７に出力する。なお、コントローラ２６による照明部２１、移動機構２３、撮像素子２５などの制御は、ＰＣ２７側で設定された観察条件に基づいて実行される。
【００２１】
ＰＣ２７は、ＰＣ側コントローラ５１、画像生成部５２、画質調整部５３、モニタ５４及び操作部５５などから構成される。ＰＣ側コントローラ５１は、ＰＣ２７の各部を統括的に制御する。
【００２２】
画像生成部５２は、撮像素子２５により取得される複数の画像から、被観察物１５の全域の画像ＣＩを生成する。上述したように、観察装置１０においては、ステージ２２を移動させながら撮像素子２５による被観察物１５の撮像を行うことから、被観察物１５の観察時には複数の画像ＰＩが取得される。画像生成部５２は、これら複数の画像ＰＩのそれぞれから後述する予め設定した領域を切り出した後、切り出された画像を撮像順序に並べて合成することで、被観察物１５の全域の画像ＣＩを生成する。以下、複数の画像ＰＩのそれぞれから切り出す範囲を画像切出範囲６０として説明する。
【００２３】
上述したように、結像光学系２４は、被観察物１５の全域から出射される光を撮像素子２５の撮像面上に結像することから、被観察物１５を撮像素子２５によって撮像することで得られる画像ＰＩは、透過型液晶パネル３０の表示領域３０ａに形成されるパターンに基づく像と、被観察物１５を透過する際に生じる散乱光により生成される像とが重畳された画像からなる。なお、図３においては、図の煩雑さを防止するために、被観察物１５を観察していないときに撮像された画像ＰＩを示している。
【００２４】
詳細は後述するが、被観察物１５は照明部２１からの照射光により、被観察物１５を透過する光Ｌａと、被観察物１５の内部で散乱する光（散乱光）Ｌｂ，Ｌｃとに分けられる。照明部２１によって被観察物１５は遮光照明されることから、散乱光Ｌｂ，Ｌｃによる像は、透過型液晶パネル３０の表示領域３０ａに形成されるパターンの暗部３６，３７の像に重畳される。ところで、結像光学系２４は、被観察物１５の全域から出射される光を結像することから、結像光学系２４のフォーカスナンバー（以下、Ｆ値と称す）は小さい。このため、取得される画像ＰＩは、表示領域３０ａの明部３５の像と暗部３６の像との境界、明部３５の像と暗部３７の像との境界がそれぞれぼけ、暗い背景に明るい被観察物１５が現れた画像となる。
【００２５】
画像生成部５２は、取得される画像ＰＩのうち、パターンの暗部３６，３７の像の一部を画像切出範囲６０として切り出す。つまり、散乱光Ｌｂ，Ｌｃに基づく像と、パターンに基づく像とが重畳される画像ＰＩからコントラストが高くなりやすい範囲を画像切出範囲６０として切り出す。本実施形態では、パターンの暗部３６に基づく像の内部に画像切出範囲６０を設けているが、これに限定する必要はなく、パターンの暗部３７に基づく像の内部に画像切出範囲６０を設けてもよい。なお、散乱光が届く範囲であれば、画像切出範囲６０はパターンの暗部３６に基づく像の内部のいずれの領域を用いてもよい。
【００２６】
画質調整部５３は、画像生成部５２にて生成された被観察物１５の全域の画像ＣＩの画質を調整する。画質としては、解像度やＳＮ比などが挙げられるが、ここでは、解像度を挙げて説明する。撮像素子２５における撮像においては、主走査方向（Ｙ方向）を一括して撮像することからＹ方向の解像度は一定であることから、ここで述べる「画像の解像度を調整する」とは副走査方向（Ｘ方向）における解像度を調整することが該当する。
【００２７】
画像切出範囲６０に写り込む被観察物１５の範囲は、画像切出範囲６０が固定であることから、１回の撮像から次の撮像までのステージ２２の移動量に依存する。つまり、画像切出範囲６０を時系列的に並べて合成される画像ＣＩにおける被観察物１５の像の縦横比を、実際の被観察物１５の縦横比に一致させるのであれば、１回の撮像から次の撮像までのステージ２２の移動量は、画像切出範囲６０の幅と一致させる必要がある。しかしながら、観察物の観察時においては、１回の撮像から次の撮像までのステージ２２の移動量を、画像切出範囲６０の幅よりも短くして（又は長くして）観察する場合もある。
【００２８】
例えば、１回の撮像から次の撮像までのステージ２２の移動量を画像切出範囲６０の幅よりも短くした場合には、画像切出範囲６０に写り込む被観察物１５の範囲は、合成時に隣り合う画像切出範囲６０に写り込む被観察物１５の範囲と重畳される。画像生成部５２は、画像切出範囲６０として切り出された画像を時系列に並べるときには、隣り合う画像を重畳しない。つまり、被観察物１５の全域の画像ＣＩにおけるＸ方向の解像度は、実際の被観察物のＸ方向の解像度よりも高くなる。このような場合には、画質調整部５３は、例えば被観察物１５の全域の画像ＣＩに対して、該画像ＣＩのＸ方向を間引き処理して、Ｘ方向の解像度を調整する。この調整により、被観察物１５の全域の画像ＣＩの縦横比が、実際の被観察物１５の縦横比となる。
【００２９】
一方、１回の撮像から次の撮像までのステージ２２の移動量を、画像切出範囲６０の幅よりも長くした場合には、画像切出範囲６０に写り込む被観察物１５の範囲は重複される部分が無く、また、非連続的となる。この場合、画像生成部５２によって生成される被観察物１５の全域の画像ＣＩにおけるＸ方向の解像度は、実際の被観察物１５のＸ方向の解像度よりも低くなる。このような場合には、画質調整部５３は、例えば被観察物１５の全域の画像ＣＩに対して、該画像のＸ方向を補間処理して、Ｘ方向の解像度を調整する。この調整により、被観察物１５の全域の画像ＣＩの縦横比が、実際の被観察物１５の縦横比となる。
【００３０】
なお、１回の撮像から次の撮像までのステージ２２の移動量が異なる場合について説明しているが、例えば移動機構２３としてステッピングモータを用いる場合には、ステージ２２の移動量は、１ステップ当たりの移動量や、ステージ２２の移動時のステップ数に依存することから、解像度の調整は、１ステップ当たりの移動量や、ステージ２２の移動時のステップ数に基づいて調整すればよい。
【００３１】
モニタ５４は、観察装置１０における各種設定を行う際の設定画面を表示する他に、撮像素子２５によって取得された画像ＰＩや、画像生成部５２によって生成された被観察物１５の全域の画像ＣＩを表示する。操作部５５は、キーボードやマウスなどからなり、新たに観察する場合の観察条件を設定する場合や、既に決定された観察条件を変更する場合等に操作される。
【００３２】
次に、照明部２１の一例である透過型液晶パネル３０に表示されるパターンと、結像光学系２４の光軸Ｌとの位置関係について説明する。上述したように、透過型液晶パネル３０の表示領域３０ａに形成されるパターンは、主走査方向に延びる明部３５と、副走査方向において明部３５を挟み込むように配置される暗部３６，３７とからなるパターンからなる。
【００３３】
例えば明部３５を結像光学系２４の光軸Ｌ上に配置した場合には、撮像素子２５によって取得される画像においては、表示領域３０ａの明部３５に基づく像と、被観察物１５によって散乱する光に基づく像とが重畳されやすく、被観察物１５内の細胞などを観察（検出）しにくくなる。一方、明部３５を結像光学系２４の光軸Ｌから外れた位置に配置した場合には、撮像素子２５によって取得される画像において、表示領域３０ａの暗部３６、３７に基づく像と、被観察物１５によって散乱する光に基づく像とが重畳されやすくなる。このような理由から、明部３５は、結像光学系２４の光軸Ｌ上に配置せずに、光軸Ｌ上から外れた位置に、つまり光軸Ｌから間隔Ｔ離して配置する。なお、結像光学系２４の光軸Ｌからパターンの明部３５までの間隔Ｔは、以下のように求められる。
【００３４】
図４に示すように、結像光学系２４を構成するレンズのうち、入射側のレンズ６１から被観察物１５までの距離をＣ１、被検査物１５から透過型液晶パネル３０までの距離をＣ２、結像光学系２４の有効口径をＤ１とすると、Ｆ値は、Ｆ＝Ｃ１／Ｄ１で求められる。また、結像光学系２４の光軸Ｌと結像光学系２４の入射側のレンズ４５の有効口径とがなす角度をθとすると、
ｔａｎθ＝Ｄ１／（２×Ｃ１）＝１／（２×Ｆ）・・（１）
で表される。
【００３５】
一方、有効口径Ｄ１に対応する透過型液晶パネル３０上の領域の直径をＤ２とした場合、直径Ｄ２を角度θを用いて表すと、
ｔａｎθ＝Ｄ２／（２×Ｃ２）・・（２）
つまり、（１）及び（２）式から、直径Ｄ２は、
Ｄ２＝Ｃ２／Ｆ＝Ｃ２／Ｃ１×Ｄ１
となる。つまり、結像光学系２４の光軸Ｌから表示領域３０ａに形成される明部３５までの間隔Ｔは、少なくとも間隔Ｄ２／２空ければよい。
【００３６】
なお、図２においては、透過型液晶パネル３０の表示領域３０ａの中心が結像光学系２４の光軸Ｌ上となるように配置した場合について説明するため、明部３５を表示領域３０ａの中心から外れた位置に形成しているが、これに限定する必要はなく、表示領域３０ａの中心に明部３５を形成することも可能である。この場合、表示領域３０ａの中心、つまり、明部３５が結像光学系２４の光軸Ｌ上から間隔Ｔを空けた位置となるように、透過型液晶パネル３０及び結像光学系２４のそれぞれを配置すればよい。
【００３７】
図５は、１回の撮像時における照明部２１から撮像素子２５までの光の電波状態を示す図である。照明部２１による被観察物１５の照明時には、透過型液晶表示パネル３０の表示領域３０ａには明部３５と、暗部３６，３７とからなるパターンが表示されることから、明部３５からのみ光が出射される。つまり、部分領域１５ａが遮光照明される。
【００３８】
部分領域１５ａが遮光照明されると、部分領域１５ａをそのまま透過する透過光Ｌａと、部分領域１５ａ内の屈折率の違いから散乱する散乱光Ｌｂ、Ｌｃとが生じる。これら光のうち、透過光Ｌａは結像光学系２４に入射せず、散乱光Ｌｂ，Ｌｃのみが結像光学系２４に入射する。
【００３９】
つまり、撮像素子２５において得られる画像は、透過型液晶パネル３０の表示領域３０ａに基づく像と、散乱光Ｌｂ，Ｌｃに基づく像とが重畳された画像となる。上述したように、パターンの明部３５と結像光学系２４の光軸Ｌとを間隔Ｔ離して配置していることから、撮像素子２５によって取得される画像は、散乱光Ｌｂ、Ｌｃに基づく像は表示領域３０ａに形成されるに明部３５に基づく像には重畳されず、暗部３６，３７に基づく像に重畳される。これが１回の撮像時における照明光の伝播状態である。
【００４０】
本実施形態の観察装置１０は、以下に示す手順によって被観察物１５の観察が実行される。
【００４１】
手順１：ステージ２２を被観察物１５の観察を開始する位置まで移動させる。なお、予めステージ２２が被観察物１５の観察を開始する位置にある場合には、この手順１の処理は省略される。
【００４２】
手順２：ステージ２２を移動させながら、被観察物１５の撮像を行う処理である。この手順２においては、ステージ２２を主走査方向に所定量移動させた後一旦停止させ、つまりステージ２２を間歇送りしながら、照明部２１の点灯、及び撮像素子２５による被観察物１５の撮像を行う一連の動作を複数回繰り返し行う方法と、ステージ２２をＸ方向に一定速度で移動させながら、照明部２１の点灯、及び撮像素子２５による被観察物１５の撮像を一定間隔で行う方法との、いずれかの方法を用いて良いものとする。なお、被観察物の観察時に解像度が設定される場合には、設定された解像度と、画像切出範囲６０の副走査方向の幅に基づいてステージ２２の移動量や移動速度が決定される。この手順２で取得された画像の基になる画像データは、ＰＣ２７に出力される。
【００４３】
手順３：手順２で得られた複数の画像ＰＩから被観察物１５の全域の画像ＣＩを生成する。
【００４４】
この手順３は、手順２で得られた複数の画像ＰＩから画像切出範囲６０となる領域を切り出す処理と、切り出された領域を時系列に並べて合成する処理とから構成される。
【００４５】
図６に示すように、例えば３つの画像ＰＩ１、ＰＩ２、ＰＩ３が取得された場合には、手順３が実行されることで、画像切出範囲６０に該当する領域が画像ＰＩ１、ＰＩ２、ＰＩ３から切り出される。なお、図６においては、それぞれの画像から切り出された画像をＰＩ１’、ＰＩ２’、ＰＩ３’で示している。この画像の切り出しの後、手順４が実行されることで、切り出された画像ＰＩ１’、ＰＩ２’、ＰＩ３’が時系列的に並べて合成する。これにより、被観察物１５の全域の画像ＣＩが生成される。被観察物１５の全域の画像ＣＩは、暗い背景に細胞が現れた画像となる。なお、生成された被観察物１５の全域の画像ＣＩの基になる画像データは、図示しないメモリに記録される。
【００４６】
なお、本実施形態の観察装置１０が理想的な装置であれば、複数の画像から切り出される画像をそのまま時系列的に並べて合成すればよいが、実際には、観察装置１０の各部の組付け精度や、被観察物１５の観察時のステージ２２の移動時にずれが生じ、画像切出範囲６０に写り込む被観察物１５の範囲が主走査方向や副走査方向にずれる場合もある。このような場合には、予め画像切出範囲６０よりも大きく設定しておき、切り出した画像の合成時に位置調整を行えばよい。この場合、隣り合う画像同士が重畳されることになるが、この場合には、隣り合う画像の一方の画像に対して、重畳される範囲を切り取るなどの処理を行えばよい。
【００４７】
手順４：手順３により生成された画像をモニタ５４に表示する。生成された画像ＣＩは、暗い背景に被観察物１５の全域が現れた画像となる。例えば被観察物１５が無染色の細胞が培養された培養容器であれば、暗い背景に培養容器内の細胞が明るく現れる。したがって、ユーザは、被観察物１５の全域を観察することができる。
【００４８】
なお、上記手順においては、被観察物１５の観察までの手順を述べているが、実際には、被観察物１５が無染色の細胞が培養された培養容器であれば、得られた画像から、細胞の位置や大きさを求める処理が実行される。このような場合には、上述した手順の後に、以下の手順が実行される。
【００４９】
手順５：手順３により生成された画像の解像度を調整する。被観察物１５の観察時におけるステージ２２の移動量によっては、生成される被観察物１５の全域の画像ＣＩは、実際の被観察物１５の縦横比と異なる場合がある。このような場合には、画質調整部５３は、被観察物１５の像の縦横比が実際の被観察物１５の縦横比となるように、被観察物１５の全域の画像ＣＩの解像度を調整する。なお、被観察物１５の全域の画像ＣＩにおける被観察物１５の縦横比が実際の被観察物１５の縦横比と一致する場合には、この手順６の処理を行う必要はない。以下、縦横比が調整された画像をＣＩ’と称する。
【００５０】
手順６：手順５により解像度が調整された画像から、被観察物１５における細胞の位置や大きさを求める。ＰＣ側コントローラ５１は、被観察物１５の全域の画像ＣＩ、或いは縦横比が調整された画像ＣＩ’を用いて、細胞の位置や大きさを算出する。なお、細胞の位置や大きさはステップ数等を用いることで算出される。さらに、ＰＣ側コントローラ５１は、被観察物１５の全域の画像ＣＩ、或いは縦横比が調整された画像ＣＩ’から細胞に該当する領域（画素）の輝度値を算出する。例えば、細胞の厚みによって散乱光の輝度値が変化することから、細胞に該当する領域の輝度値を算出することによって細胞の厚みを算出することが可能となる。これにより、被観察物１５内の細胞の位置や大きさなどの情報を取得することが可能となる。なお、これら情報は、不図示のメモリに記録される。
【００５１】
本実施形態の観察装置は、被観察物１５にて散乱される光を利用して、被観察物１５の全域の画像を取得しているが、散乱光の光量が低い又は高い場合など、被観察物１５にて散乱される光の強弱を調整する必要がある。このような場合には、例えば照明部２１における光の強度（明部からの光の強度）を調整する、明部３５の副走査方向の幅を調整する、或いは、明部３５から出射される光の傾きを調整すればよい。なお、これら調整は、コントローラ２６にて実行されればよい。
【００５２】
本実施形態では、照明部２１として、バックライト付きの透過型液晶パネルを用いているが、これに限定する必要はなく、例えば面光源と、面光源の前面に設けられ、主走査方向に延びるスリットが設けられたスリット板とから構成してもよい。
【００５３】
本実施形態では、ステージ２２を移動させているが、これに限定される必要はなく、例えば照明部２１、結像光学系２４及び撮像素子２５を副走査方向に移動させることも可能である。
【００５４】
本実施形態では、照明部２１、結像光学系２４及び撮像素子２５を１つ設けた場合について説明しているが、これら構成を複数設けることも可能である。
【００５５】
本実施形態では、観察装置１０についての構成や被観察物全域の観察する手順について説明しているが、例えば細胞を培養し、培養している過程の細胞を観察する細胞培養観察装置に、本発明の観察装置を用いることも可能である。図７に示すように、細胞培養観察装置７０は、インキュベータ部７１、容器格納部７２，７３とから構成される。インキュベータ部７１は、その内部が、一定の環境条件となるように保持される。このインキュベータ部７１の内部に、本発明の観察装置１０を構成する照明部２１、ステージ２２、移動機構２３、結像光学系２４及び撮像素子２５が組み込まれる。また、インキュベータ部７１の内部には、これら構成の他に、蓋保持部７４及び容器搬送部７５等が設けられる。なお、このような細胞培養観察装置７０においては、容器格納部７２から細胞が培養された培養容器８０をインキュベータ部７１の内部に搬入したり、観察後の培養容器８０をインキュベータ部７１の内部から容器格納部７３に搬出することから、インキュベータ部７１には、これら動作を可能とする搬入扉７１ａや搬出扉７１ｂなどが設けられる。なお、蓋保持部７４は、培養容器の蓋８０ａを吸引して培養容器８０から取り外す、或いは観察後の培養容器８０に蓋８０ａを取り付けるために設けられる。また、容器搬送部７５は、インキュベータ部７１の内部にある培養容器８０をインキュベータ部７１の各部に搬送するために設けられる。なお、図７においては、細胞観察培養装置７１の各部を制御する制御部については、図の煩雑さを防止するために省略している。
【００５６】
さらに、このような細胞観察培養容器７０においては、複数の培養容器８０を識別できるように、それぞれの容器にバーコードなどの識別子が取り付けられている。このような培養容器８０を用いる場合には、例えばインキュベータ部７１の内部に培養容器８０に貼付されたバーコードを読み取り可能なバーコードリーダー８１を設けるようにしても良い。
【図面の簡単な説明】
【００５７】
【図１】本発明の観察装置の概略を示す図である。
【図２】透過型液晶パネルに表示されるパターンの一例を示す図である。
【図３】取得された画像における画像切出範囲を示す図である。
【図４】結像光学系と、透過型液晶パネルに表示されるパターンにおける明部との位置関係を示す図である。
【図５】照明部における光の伝播状態を示す図である。
【図６】取得された画像から、被観察物の全域の画像を生成する処理の流れを示す図である。
【図７】本発明の観察装置を、細胞培養観察装置に適用した場合の概略を示す図である。
【符号の説明】
【００５８】
１０…観察装置、１５…被観察物、２１…照明部、２４…結像光学系、２５…撮像素子、２６…コントローラ、２７…コンピュータ（ＰＣ）、３０…透過型液晶パネル、３５…明部、３６，３７…暗部、５２…画像生成部、５３…画質調整部
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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