(57)【要約】【課題】優れた保存安定性と保存後の良好な再溶解性を有し、抗腫瘍剤として臨床上有用なフェナンスリジン誘導体を含有する注射用医薬製剤となる凍結乾燥製剤が求められていた。【解決手段】フェナンスリジン誘導体、並びに、キシリトール、ブドウ糖、乳糖、マルトース、トレハロース及びソルビトールからなる群から選ばれる１種類以上の糖類を含有する凍結乾燥製剤を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ａ）
【化１】
2010006704.tif 000007
［式中、Ｒ１は低級アルキル基を示し、Ｒは炭素数２から６の脂肪族炭化水素鎖を示し、Ｘ−は酸残基または水素酸残基を示す。］
で表されるフェナンスリジン誘導体、並びに、キシリトール、ブドウ糖、乳糖、マルトース、トレハロース及びソルビトールからなる群から選ばれる１種類以上の糖類を含有する凍結乾燥製剤。
【請求項２】
一般式（Ｂ）
【化２】
2010006704.tif 000008
［式中、Ｒ１は低級アルキル基を示し、Ｒは炭素数２から６の脂肪族炭化水素鎖を示す。］
で表されるフェナンスリジン誘導体、並びに、キシリトール、ブドウ糖、乳糖、マルトース、トレハロース及びソルビトールからなる群から選ばれる１種類以上の糖類を含有する凍結乾燥製剤。
【請求項３】
一般式（Ａ）のＲ１がメチル基、Ｒがトリメチレン基、Ｘ−が塩化物イオンである請求項１記載の凍結乾燥製剤。
【請求項４】
一般式（Ｂ）のＲ１がメチル基、Ｒがトリメチレン基である請求項２記載の凍結乾燥製剤。
【請求項５】
糖類がソルビトール、ブドウ糖またはトレハロースである請求項１〜４のいずれか一項に記載の凍結乾燥製剤。
【請求項６】
糖類がブドウ糖である請求項１〜５のいずれか一項に記載の凍結乾燥製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は抗腫瘍剤として有用な一般式（Ａ）または一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体を含有してなる凍結乾燥製剤、特に、該フェナンスリジン誘導体と特定の糖類を含有してなる凍結乾燥製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
一般式（Ａ）または一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体は各種腫瘍細胞株に対して優れた抗腫瘍効果を示すことが特許文献１に記載されている。しかしながら、糖類を用いた凍結乾燥製剤について具体的な記載はない。
【０００３】
【特許文献１】国際公開第１９９８／２３６１４号パンフレット
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
一般式（Ａ）または一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体は水溶液中で不安定であり、そのまま注射用医薬製剤として用いるのは困難であった。また、一般式（Ａ）または一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体を単に水に溶解し、凍結乾燥することは可能であったが、該凍結乾燥製剤は保存安定性が低く、また、再溶解性が悪く、それを注射用医薬製剤として用いるのは困難であった。そのため、一般式（Ａ）または一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体の注射用医薬製剤として使用可能な凍結乾燥製剤が求められていた。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者等は前記課題を解決すべく鋭意研究の結果、特定の糖類を添加して得られる凍結乾燥製剤が安定で再溶解性に優れた注射用医薬製剤となることを見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００６】
即ち、本発明は以下の（１）〜（６）に関する。
（１）一般式（Ａ）
【化１】
2010006704.tif 000002
［式中、Ｒ１は低級アルキル基を示し、Ｒは炭素数２から６の脂肪族炭化水素鎖を示し、Ｘ−は酸残基または水素酸残基を示す。］
で表されるフェナンスリジン誘導体、並びに、キシリトール、ブドウ糖、乳糖、マルトース、トレハロース及びソルビトールからなる群から選ばれる１種類以上の糖類を含有する凍結乾燥製剤。
【０００７】
（２）一般式（Ｂ）
【化２】
2010006704.tif 000003
［式中、Ｒ１は低級アルキル基を示し、Ｒは炭素数２から６の脂肪族炭化水素鎖を示す。］
で表されるフェナンスリジン誘導体、並びに、キシリトール、ブドウ糖、乳糖、マルトース、トレハロース及びソルビトールからなる群から選ばれる１種類以上の糖類を含有する凍結乾燥製剤。
【０００８】
（３）一般式（Ａ）のＲ１がメチル基、Ｒがトリメチレン基、Ｘ−が塩化物イオンである上記（１）記載の凍結乾燥製剤。
（４）一般式（Ｂ）のＲ１がメチル基、Ｒがトリメチレン基である上記（２）記載の凍結乾燥製剤。
（５）糖類がソルビトール、ブドウ糖またはトレハロースである上記（１）〜（４）のいずれか一項に記載の凍結乾燥製剤。
（６）糖類がブドウ糖である上記（１）〜（５）のいずれか一項に記載の凍結乾燥製剤。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の一般式（Ａ）または一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体と特定の糖類を含有する凍結乾燥製剤は、優れた保存安定性、再溶解性を有し、抗腫瘍剤として臨床的にも有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００１０】
以下に本発明の内容を詳細に説明する。
本発明の凍結乾燥製剤は、一般式（Ａ）［式中、Ｒ１は低級アルキル基を示し、Ｒは炭素数２から６の脂肪族炭化水素鎖を示し、Ｘ−は酸残基または水素酸残基を示す。］で表されるフェナンスリジン誘導体、または一般式（Ｂ）［式中、Ｒ１は低級アルキル基を示し、Ｒは炭素数２から６の脂肪族炭化水素鎖を示す。］で表されるフェナンスリジン誘導体、並びに、キシリトール、ブドウ糖、乳糖、マルトース、トレハロース及びソルビトールからなる群から選ばれる１種類以上の糖類を含有する。
【００１１】
本発明の凍結乾燥製剤に含有される一般式（Ａ）または一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体における低級アルキル基としては、炭素数１〜５のアルキル基が挙げられ、例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ｎ−ペンチル基等が挙げられる。
【００１２】
本発明の凍結乾燥製剤に含有される一般式（Ａ）または一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体における炭素数２から６の脂肪族炭化水素鎖としては、例えば、炭素数２から６のポリメチレン鎖が好ましい。
【００１３】
炭素数２から６の脂肪族炭化水素鎖としては、例えば、−ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）ＣＨ２−、−ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−等が挙げられる。特に、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−、−ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２−等の炭素数３から４のポリメチレン鎖が好ましい。
【００１４】
本発明の凍結乾燥製剤に含有される一般式（Ａ）で表されるフェナンスリジン誘導体におけるＸ−の酸残基とは、正塩をつくる酸残基、例えば、Ｘ−として塩化物イオン、臭化物イオン、ヨウ化物イオン、フッ化物イオン等のハロゲン化物イオンや、硫酸イオン、硝酸イオン、ｐ−トルエンスルホン酸イオン等が挙げられる。また、水素酸残基とは水素塩をつくる酸残基であり、１または２個の水素原子をもち、例えば、硫酸水素イオン、リン酸二水素イオン等が挙げられる。中でも、特に塩化物イオンが好ましい。
【００１５】
本発明の凍結乾燥製剤に使用する一般式（Ａ）で表されるフェナンスリジン誘導体において、Ｒ１がメチル基、Ｒがトリメチレン基、Ｘ−が塩化物イオンである化合物が好ましく、また、一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体において、Ｒ１がメチル基、Ｒがトリメチレン基である化合物が好ましい。
本発明の凍結乾燥製剤に使用する一般式（Ａ）または一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体は特許文献１に記載の方法により製造することができるが、該製造方法に限定されない。
【００１６】
一般式（Ａ）で表されるフェナンスリジン誘導体は、塩基処理により容易に分子内から酸１等量を放出し一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体の構造をとることが可能であり、逆に、一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体を酸処理することにより容易に一般式（Ａ）で表されるフェナンスリジン誘導体とすることが可能である。また、条件によっては一般式（Ａ）で表されるフェナンスリジン誘導体と一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体が混合した状態で存在することもある。
【００１７】
本発明の凍結乾燥製剤に含有される糖類としては、一般式（Ａ）または一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体を含有する凍結乾燥製剤の安定性と再溶解性を向上させれば特に限定されないが、キシリトール、ブドウ糖、乳糖、マルトース、トレハロースまたはソルビトール等から選ばれる１種以上の糖類が挙げられ、中でもブドウ糖、トレハロースまたはソルビトールが好ましく、一般式（Ａ）のＲ１がメチル基、Ｒがトリメチレン基、Ｘ−が塩化物イオンであるフェナンスリジン誘導体または一般式（Ｂ）のＲ１がメチル基、Ｒがトリメチレン基であるフェナンスリジン誘導体の凍結乾燥製剤の場合、医薬製剤の添加物として使用実績のあるブドウ糖が特に好ましい。本発明において糖類にはその水和物も含む。
該糖類の使用量としては、凍結乾燥製剤に含有されるフェナンスリジン誘導体１重量部に対して、凡そ０．８〜４重量部の範囲が好ましく、凡そ１〜２重量部の範囲が特に好ましい。
【００１８】
一般式（Ａ）または一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体、並びに、キシリトール、ブドウ糖、乳糖、マルトース、トレハロースまたはソルビトール等からなる群から選ばれる１種以上の糖類を含有する凍結乾燥製剤におけるそれぞれの含有割合としては、フェナンスリジン誘導体１５〜５５重量％、糖類４５〜８０重量％が好ましく、フェナンスリジン誘導体２５〜５０重量％、糖類５０〜６７重量％が特に好ましい。
【００１９】
本発明の凍結乾燥製剤は、例えば、一般式（Ａ）または一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体と糖類とを注射用水等に溶解し、無菌ろ過後、バイアル瓶等に充填し、凍結させて減圧下で水を昇華させる真空凍結乾燥に付し，次いでバイアル中を窒素置換後、ゴム栓封栓し、アルミキャップにて巻き締めて得られる。
必要に応じて、通常の医薬品に用いられる種々の補助剤、即ち、防腐剤、無痛化剤、乳化剤等の助剤や担体を添加してもよい。
【００２０】
このようにして得られる凍結乾燥製剤は、室温でもこのまま長期保存することができ、用時に注射用水や５％ブドウ糖液等を溶解液として再溶解して用いる。なお、溶解液には必要に応じて、製薬上許容され得る溶剤（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）、溶解補助剤（エタノール、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油６０等）、緩衝剤（クエン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム等）、ｐＨ調整剤（塩酸、水酸化ナトリウム等）等を加えてもよい。
本発明の凍結乾燥製剤の溶液１ｍＬ中における一般式（Ａ）または一般式（Ｂ）で表されるフェナンスリジン誘導体の含有量としては特に限定されないが、０．１ｍｇ〜５０ｍｇ程度が好ましく、１ｍｇ〜３０ｍｇ程度が特に好ましい。
【実施例】
【００２１】
以下、実施例により本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらにより何ら限定されるものではない。実施例において部は重量部を、％は重量％をそれぞれ意味する。
【００２２】
実施例１
注射用水に２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物（一般式（Ａ）のＲ１がメチル基、Ｒがトリメチレン基、Ｘ−が塩化物イオンであるフェナンスリジン誘導体）２００ｍｇ及び２００ｍｇのキシリトールを加えて加熱溶解させる。注射用水を加えて全量を１０ｍＬとし、この溶液を無菌ろ過後ガラスバイアルに２ｍＬずつ充填し、常法に従い凍結乾燥し、得られた試料バイアル中を窒素置換してゴム栓封栓をし、アルミキャップにて巻き締め、２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物の凍結乾燥製剤を得る。
【００２３】
実施例２
注射用水に２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物２００ｍｇ及び２００ｍｇのブドウ糖を加えて加熱溶解させる。注射用水を加えて全量を１０ｍＬとし、この溶液を無菌ろ過後ガラスバイアルに２ｍＬずつ充填し、常法に従い凍結乾燥し、得られた試料バイアル中を窒素置換してゴム栓封栓をし、アルミキャップにて巻き締め、２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物の凍結乾燥製剤を得る。
【００２４】
実施例３
注射用水に２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物２００ｍｇ及び２００ｍｇの乳糖を加えて加熱溶解させる。注射用水を加えて全量を１０ｍＬとし、この溶液を無菌ろ過後ガラスバイアルに２ｍＬずつ充填し、常法に従い凍結乾燥し、得られた試料バイアル中を窒素置換してゴム栓封栓をし、アルミキャップにて巻き締め、２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物の凍結乾燥製剤を得る。
【００２５】
実施例４
注射用水に２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物２００ｍｇ及び２００ｍｇのマルトースを加えて加熱溶解させる。注射用水を加えて全量を１０ｍＬとし、この溶液を無菌ろ過後ガラスバイアルに２ｍＬずつ充填し、常法に従い凍結乾燥し、得られた試料バイアル中を窒素置換してゴム栓封栓をし、アルミキャップにて巻き締め、２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物の凍結乾燥製剤を得る。
【００２６】
実施例５
注射用水に２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物２００ｍｇ及び２００ｍｇのトレハロースを加えて加熱溶解させる。注射用水を加えて全量を１０ｍＬとし、この溶液を無菌ろ過後ガラスバイアルに２ｍＬずつ充填し、常法に従い凍結乾燥し、得られた試料バイアル中を窒素置換してゴム栓封栓をし、アルミキャップにて巻き締め、２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物の凍結乾燥製剤を得る。
【００２７】
実施例６
注射用水に２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物２００ｍｇ及び２００ｍｇのソルビトールを加えて加熱溶解させる。注射用水を加えて全量を１０ｍＬとし、この溶液を無菌ろ過後ガラスバイアルに２ｍＬずつ充填し、常法に従い凍結乾燥し、得られた試料バイアル中を窒素置換してゴム栓封栓をし、アルミキャップにて巻き締め、２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物の凍結乾燥製剤を得る。
【００２８】
比較例１
注射用水に２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物４００ｍｇを加えて加熱溶解させる。注射用水を加えて全量を２０ｍＬとし、この溶液を無菌ろ過後ガラスバイアルに２ｍＬずつ充填し、常法に従い凍結乾燥し、得られた試料バイアル中を窒素置換してゴム栓封栓をし、アルミキャップにて巻き締め、２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物の凍結乾燥製剤を得る。
【００２９】
比較例２
注射用水に２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物２００ｍｇ及び２００ｍｇのマンニトールを加えて加熱溶解させる。注射用水を加えて全量を１０ｍＬとし、この溶液を無菌ろ過後ガラスバイアルに２ｍＬずつ充填し、常法に従い凍結乾燥し、得られた試料バイアル中を窒素置換してゴム栓封栓をし、アルミキャップにて巻き締め、２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物の凍結乾燥製剤を得る。
【００３０】
比較例３
注射用水に２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物２００ｍｇ及び２００ｍｇのイノシトールを加えて加熱溶解させる。注射用水を加えて全量を１０ｍＬとし、この溶液を無菌ろ過後ガラスバイアルに２ｍＬずつ充填し、常法に従い凍結乾燥し、得られた試料バイアル中を窒素置換してゴム栓封栓をし、アルミキャップにて巻き締め、２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物の凍結乾燥製剤を得る。
【００３１】
試験例１
実施例１〜５と比較例１〜３で得られた凍結乾燥製剤を４０℃で６ヶ月保存し、保存後の再構成時の溶解性とＨＰＬＣ測定による不純物の量（ピーク面積比）を測定した。溶解性は、注射用水２ｍＬを加えて振り混ぜた時の溶解に要する時間（秒）である。６０秒振っても溶けないものは不溶とした。結果を以下の表１に示す。
【００３２】
【表１】
2010006704.tif 000004
上記結果から明らかなように、本発明の凍結乾燥製剤は比較製剤と比べて保存後の溶解性も良好で、不純物の増加も抑制することができた。
【００３３】
試験例２
実施例２、５、６と比較例１〜３で得られた凍結乾燥製剤を６０℃で４週間保存し、保存後の再構成時の溶解性とＨＰＬＣ測定による不純物の量（ピーク面積比）を測定した。結果を以下の表２に示す。
【００３４】
【表２】
2010006704.tif 000005
上記結果から明らかなように、本発明の凍結乾燥製剤は比較製剤と比べて保存後の溶解性も良好で、不純物の増加も抑制することができた。
【００３５】
実施例７
注射用水に２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物４００ｍｇ及び４００ｍｇのブドウ糖を加えて加熱溶解させる。注射用水を加えて全量を２０ｍＬとし、この溶液を無菌ろ過後ガラスバイアルに２．５ｍＬずつ充填し、常法に従い凍結乾燥し、得られた試料バイアル中を窒素置換してゴム栓封栓をし、アルミキャップにて巻き締め、２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物の凍結乾燥製剤を得る。
【００３６】
実施例８
実施例７の４００ｍｇのブドウ糖の替わりに８００ｍｇのブドウ糖を添加し、同様にして２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物の凍結乾燥製剤を得る。
【００３７】
実施例９
実施例７の４００ｍｇのブドウ糖の替わりに２０００ｍｇのブドウ糖を添加し、同様にして２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物の凍結乾燥製剤を得る。
【００３８】
比較例４
注射用水に２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物４００ｍｇを加えて加熱溶解させる。注射用水を加えて全量を２０ｍＬとし、この溶液を無菌ろ過後ガラスバイアルに２．５ｍＬずつ充填し、常法に従い凍結乾燥し、得られた試料バイアル中を窒素置換してゴム栓封栓をし、アルミキャップにて巻き締め、２，３−メチレンジオキシ−７−ヒドロキシ−８−メトキシ−５，６−プロパノベンゾ［ｃ］フェナンスリジニウム塩化物の凍結乾燥製剤を得る。
【００３９】
試験例３
実施例７〜９と比較例４で得られた凍結乾燥製剤を６０℃で２ヶ月保存し、保存後の再構成時の溶解性とＨＰＬＣ測定による不純物の量（ピーク面積比）を測定し、保存前後の色差を比較した。色差は色彩色差計ＣＲ−３２１（ミノルタ（株）製）を用いてＪＩＳ  Ｚ  ８７３０で規定されたＬａｂ表色系で側色を行い、保存前後での色の変化ΔＥを算出した。ΔＥが小さい程色の変化が小さいことを示す。結果を以下の表３に示す。
【００４０】
【表３】
2010006704.tif 000006
上記結果から、ブドウ糖をフェナンスリジニウム塩化物の１〜２重量部添加した実施例７及び８では保存後の溶解性も良好であり、不純物の増加も見られない。ブドウ糖を５重量部添加した実施例９では溶解性が若干低下し、変色が見られた。ブドウ糖を添加していない比較例４では溶解性も悪く、不純物の増加も大きかった。