(57)【要約】【課題】ＴｒｋＡ活性を抑制するペプチドを用いた、毒性の低い腫瘍治療薬を提供すること。【解決手段】式（Ｉ）：Ｘ−Ｌ−Ｙ（式中、Ｘは細胞膜透過性を促進する機能を有するペプチド残基であり、Ｌはリンカー又はペプチド結合であり、ＹはＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性を抑制する機能を有するペプチド残基である）で表されるペプチド化合物又は薬理学的に許容されるその塩を含む腫瘍治療薬。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ｉ）：
Ｘ−Ｌ−Ｙ
（式中、Ｘは細胞膜透過性を促進する機能を有するペプチド残基であり、Ｌはリンカー又はペプチド結合であり、ＹはＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性を抑制する機能を有し、且つ配列番号１で表されるアミノ酸配列又は少なくとも５アミノ酸長のその部分配列を有するペプチド残基である）で表されるペプチド化合物又は薬理学的に許容されるその塩を含む腫瘍治療薬。
【請求項２】
Ｙが配列番号２で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチド残基である、請求項１記載の腫瘍治療薬。
【請求項３】
Ｘが配列番号３〜８で表されるアミノ酸配列のいずれかを有するポリペプチド残基である、請求項１又は２記載の腫瘍治療薬。
【請求項４】
Ｌがε-アミノカプロン酸リンカーである、請求項１〜３のいずれか１項記載の腫瘍治療薬。
【請求項５】
ペプチド化合物が、式（ＩＩ）：
ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ−ａｃｐ−ＳＲＤＩＹＳＴＤＹＹＲ−ＮＨ２
（式中、ａｃｐはε−アミノカプロン酸リンカーを示す）で表される化合物である、請求項１〜４のいずれか１項記載の腫瘍治療薬。
【請求項６】
褐色細胞腫、神経芽細胞腫、甲状腺癌、肺癌、前立腺癌、尿管癌、膀胱癌、乳癌、膵臓癌、メラノーマ、ウィルムス腫瘍またはホジキンリンパ腫の治療薬である請求項１〜５のいずれか１項記載の腫瘍治療薬。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、神経成長因子（nerve growth factor；ＮＧＦ）の高親和性受容体であるＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性を抑制するペプチドを用いた腫瘍治療薬に関する。  
【背景技術】
【０００２】
インスリン受容体やＴｒｋＡ等の、インスリン受容体ファミリーと呼ばれる細胞膜受容体型チロシンキナーゼは、その酵素活性の中心部に活性化ループを有する。この活性化ループ中のアミノ酸配列を含む合成ポリペプチドは、インスリン受容体やＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性を抑制することが知られている（非特許文献１、非特許文献２）。
一方、褐色細胞腫、神経芽細胞腫、甲状腺癌、肺癌、前立腺癌、尿管癌、膀胱癌、乳癌、膵臓癌、メラノーマ、ウィルムス腫瘍、ホジキンリンパ腫などは、ＴｒｋＡを発現し、ＮＧＦが、ＴｒｋＡを介して腫瘍細胞の増殖に関与することが知られている。
従って、ＮＧＦの他に、ＴｒｋＡも腫瘍細胞の増殖に関与する可能性が伺えるが、ＴｒｋＡが腫瘍細胞の増殖にどのように関与するのか不明であり、例えばＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性を抑制すると腫瘍細胞の増殖および転移を抑制し得るのか不明である。また、ＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性の抑制が腫瘍細胞の増殖および転移の抑制につながる場合に、具体的に、どのようなアミノ酸配列を有するペプチドが、腫瘍細胞の増殖を抑制するのか、アミノ酸配列と腫瘍細胞の増殖との関係について何の知見も得られていない。
また、ＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性の抑制薬としては、Ｋ２５２ａが知られているが、Ｋ２５２ａは、ＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性以外のプロティンキナーゼＣ活性をも抑制する作用があるため、腫瘍治療薬として臨床応用するには毒性が高いという問題がある。しかし、これまでのところＫ２５２ａ以外に有効な治療薬は存在していない。
【０００３】
【非特許文献１】Munetaka Hirose et al.，J Pharmacol Sci 106，107-113，2008
【非特許文献２】Munetaka Hirose et al.，British Journal of Pharmacology 142，222-228，2004
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
上記事情に鑑み、本発明は、ＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性を抑制するペプチドを用いた、毒性の低い腫瘍治療薬を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者らは、ＴｒｋＡ活性化ループのアミノ酸配列と腫瘍細胞の増殖との関係について研究を行った。その結果、ＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性を抑制すると、腫瘍細胞の増殖を抑制できることが判明した。またＴｒｋＡ活性化ループのアミノ酸配列（６６４−ＧＭＳＲＤＩＹＳＴＤＹＹＲＶＧＧＲ−６８０）の部分配列を有するペプチドを、細胞膜透過性を促進する機能を有するペプチドを利用して腫瘍細胞内へ導入すると、腫瘍細胞の増殖や転移が抑制されることが判明した。本発明者らは、上記の知見を基に、さらに検討を重ね、本発明を完成するに至ったものである。
【０００６】
すなわち、本発明は以下のとおりである。
（１）  式（Ｉ）：Ｘ−Ｌ−Ｙ
（式中、Ｘは細胞膜透過性を促進する機能を有するペプチド残基であり、Ｌはリンカー又はペプチド結合であり、ＹはＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性を抑制する機能を有し、且つ配列番号１で表されるアミノ酸配列又は少なくとも５アミノ酸長のその部分配列を有するペプチド残基である）で表されるペプチド化合物又は薬理学的に許容されるその塩を含む腫瘍治療薬。
（２）  Ｙが配列番号２で表されるアミノ酸配列を有するポリペプチド残基である、（１）記載の腫瘍治療薬。
（３）  Ｘが配列番号３〜８で表されるアミノ酸配列のいずれかを有するポリペプチド残基である、（１）又は（２）記載の腫瘍治療薬。
（４）  Ｌがε-アミノカプロン酸リンカーである、（１）〜（３）のいずれかに記載の腫瘍治療薬。
（５）  ペプチド化合物が、式（ＩＩ）：
ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ−ａｃｐ−ＳＲＤＩＹＳＴＤＹＹＲ−ＮＨ２
（式中、ａｃｐはε−アミノカプロン酸リンカーを示す）で表される化合物である、（１）〜（４）のいずれかに記載の腫瘍治療薬。
（６）  褐色細胞腫、神経芽細胞腫、甲状腺癌、肺癌、前立腺癌、尿管癌、膀胱癌、乳癌、膵臓癌、メラノーマ、ウィルムス腫瘍またはホジキンリンパ腫の治療薬である（１）〜（５）のいずれかに記載の腫瘍治療薬。
【発明の効果】
【０００７】
本発明によれば、毒性が低く、腫瘍細胞の増殖および転移を抑制する、ペプチド化合物を含む腫瘍治療薬を提供することができる。
【発明を実施するための最良の形態】
【０００８】
本発明は、式（Ｉ）：
Ｘ−Ｌ−Ｙ
（式中、Ｘは細胞膜透過性を促進する機能を有するペプチド残基であり、Ｌはリンカー又はペプチド結合であり、ＹはＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性を抑制する機能を有し、且つ配列番号１で表されるアミノ酸配列又はその部分配列を有するペプチド残基である）で表されるペプチド化合物又はその医薬として許容される塩を含む腫瘍治療薬を提供するものである。
【０００９】
Ｙで表されるペプチド残基は、ＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性を抑制する機能を有する。
【００１０】
ＴｒｋＡは、神経成長因子（ＮＧＦ）の高親和性受容体として知られる公知のタンパク質である。ＴｒｋＡは、その細胞内ドメインにチロシンキナーゼ活性を有しており、ＮＧＦがＴｒｋＡに結合すると、該チロシンキナーゼ活性によりＴｒｋＡの細胞内ドメインに含まれる５つのチロシン残基が自己リン酸化され、下流の細胞内情報伝達系へ情報伝達を行う。「ＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性の抑制」とは、このＴｒｋＡの自己リン酸化の抑制および下流の細胞内情報伝達系への情報伝達の抑制を意味する。
【００１１】
Ｙで表されるペプチド残基は、配列番号１で表されるアミノ酸配列又はその部分配列を有する。配列番号１で表されるアミノ酸配列は、ヒトＴｒｋＡの活性化ループ部位に相当する。該部分配列の長さは、Ｙで表されるペプチド残基がＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性の抑制を有し、且つ式（Ｉ）で表されるペプチド化合物が腫瘍細胞の増殖や転移を抑制する機能を発揮し得る限り特に限定されないが、十分な強さのＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性抑制機能を確保する観点から、該部分配列の長さは通常５アミノ酸長以上、好ましくは８アミノ酸長以上、より好ましくは１１アミノ酸長以上である。式（Ｉ）で表されるペプチド化合物が腫瘍細胞の増殖や転移を効果的に抑制する観点から、Ｙで表されるペプチド残基は、少なくとも配列番号２で表されるアミノ酸配列を含むことが好ましい。
【００１２】
Ｙで表されるペプチド残基の全長は、Ｙで表されるペプチド残基がＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性の抑制を有し、且つ式（Ｉ）で表されるペプチド化合物が腫瘍細胞の増殖や転移を抑制する機能を発揮し得る限り特に限定されないが、十分な強さのＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性抑制機能を確保する観点から、Ｙで表されるペプチド残基の全長は通常５アミノ酸長以上、好ましくは８アミノ酸長以上、より好ましくは１１アミノ酸長以上である。一方、該ペプチド残基が長すぎると、式（Ｉ）で表されるペプチド化合物の腫瘍細胞内への導入効率が低下するおそれがある。従って、腫瘍細胞内への高い導入効率を達成する観点から、Ｙで表されるペプチド残基の全長は、通常２０アミノ酸長以下、好ましくは１７アミノ酸長以下、より好ましくは１３アミノ酸長以下である。
【００１３】
最も好ましくは、Ｙで表されるペプチド残基は、配列番号２で表されるアミノ酸配列からなる。
【００１４】
Ｘで表されるペプチド残基は、細胞膜透過性を促進する機能を有するアミノ酸配列を含む。「細胞透過性を促進する機能」とは、細胞外から細胞内への化合物の透過を促進する機能を意味する。式（Ｉ）で表されるペプチド化合物がこのＸで表されるペプチド残基を有することにより、末梢から該ペプチド化合物を投与しても体内のあらゆる部位の腫瘍細胞に到達し、腫瘍細胞の増殖や転移を抑制することができる。
【００１５】
細胞膜透過性を促進する機能を有するアミノ酸配列としては、公知のものを用いることが出来る。例えば、配列番号３〜８で表されるアミノ酸配列を好適なものとして挙げることが出来る。このうち、配列番号３で表されるアミノ酸配列は、ヒト免疫不全ウィルスタイプ１のＴａｔ（転写のトランス活性化因子）に由来するペプチド（４７−ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ−５７）に相当する。
【００１６】
Ｘで表されるペプチド残基の長さは、細胞膜透過性を促進する機能を発揮し得る限り特に限定されないが、式（Ｉ）の化合物の腫瘍細胞内への高い導入効率を達成する観点から通常４〜１５アミノ酸長、好ましくは５〜１１アミノ酸長である。
【００１７】
最も好ましくは、Ｘで表されるペプチド残基は、配列番号３で表されるアミノ酸配列からなる。
【００１８】
Ｌはリンカー又はペプチド結合を示す。リンカーとは、共有結合を介して２つの分子を連結する分子をいう。リンカーとしては、ＸおよびＹが、それぞれＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性抑制機能および細胞膜透過性促進機能を発揮し得る限り特にその種類は限定されない。リンカーとしては、細胞外においては切断され難く、高い可動性を有するものが好適に用いられる。好適なリンカーとしては、ε−アミノカプロン酸リンカーを挙げることができる。
【００１９】
Ｌがペプチド結合である場合、Ｘで表されるペプチド残基のカルボン酸末端にＹで表されるペプチド残基がペプチド結合を介して直接結合することにより、式（Ｉ）の化合物は、ひとつながりのペプチドとなる。
【００２０】
最も好ましくは、Ｌはε−アミノカプロン酸リンカーである。
【００２１】
また、式（Ｉ）のペプチド化合物は修飾されていてもよい。該修飾としては、アミド化、脂質鎖の付加（脂肪族アシル化（パルミトイル化、ミリストイル化等）、プレニル化（ファルネシル化、ゲラニルゲラニル化等）等）、リン酸化（セリン残基、スレオニン残基、チロシン残基等におけるリン酸化）、アセチル化、糖鎖の付加（Ｎ−グリコシル化、Ｏ−グリコシル化）等を挙げることが出来る。
【００２２】
また、式（Ｉ）のペプチド化合物のもっとも好適な例としては、例えば式（ＩＩ）：
ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ−ａｃｐ−ＳＲＤＩＹＳＴＤＹＹＲ−ＮＨ２
（式中、ａｃｐはε−アミノカプロン酸リンカーを示す）で表される化合物を挙げることが出来る。式（ＩＩ）に含まれる「ＮＨ２」は、該ペプチド化合物のカルボン酸末端がアミド化されていることを意味する。
【００２３】
また、式（Ｉ）のペプチド化合物の薬理学的に許容される塩としては薬理学的に許容される酸（例：無機酸、有機酸）や塩基（例：アルカリ金属塩）などとの塩が用いられ、とりわけ薬理学的に許容される酸付加塩が好ましい。この様な塩としては、例えば、無機酸（例えば、塩酸、リン酸、臭化水素酸、硫酸）との塩、あるいは有機酸（例えば、酢酸、ギ酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、クエン酸、リンゴ酸、蓚酸、安息香酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸）との塩などが挙げられる。
【００２４】
また、式（Ｉ）のペプチド化合物の製造方法については特に制限はなく、公知のペプチド合成法に従って製造することができる。ペプチド合成法は、例えば、固相合成法、液相合成法のいずれであってもよい。ペプチド化合物を構成し得る部分ペプチドもしくはアミノ酸と残余部分とを縮合し、生成物が保護基を有する場合は保護基を脱離することにより目的とするペプチド化合物を製造することができる。
【００２５】
また、リンカーによるペプチド同士の連結も、自体公知の方法により行うことができる。例えば、ε−アミノカプロン酸リンカーを用いる場合には、ケミカル・ファーマシューティカル・ブルテン（Chem．Pharm．Bull．)，2005年，第53巻，1131-1135頁に記載された方法を参照することにより、Ｘで表されるペプチドのカルボン酸末端にε−アミノカプロン酸リンカーを介してＹで表されるペプチドのアミノ酸末端を連結することが出来る。
【００２６】
式（Ｉ）のペプチド化合物は、良性又は悪性の腫瘍細胞内に取り込まれ、ＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性を抑制することにより、該腫瘍細胞の増殖や転移を強力に抑制し得る。式（Ｉ）のペプチド化合物の有効量を哺乳動物に投与することにより、該哺乳動物における腫瘍を治療することができる。褐色細胞腫、神経芽細胞腫、甲状腺癌、肺癌、前立腺癌、尿管癌、膀胱癌、乳癌、膵臓癌、メラノーマ、ウィルムス腫瘍及びホジキンリンパ腫においてはＮＧＦがＴｒｋＡを介してその増殖に関与することから、本発明の腫瘍治療薬は、褐色細胞腫、神経芽細胞腫、甲状腺癌、肺癌、前立腺癌、尿管癌、膀胱癌、乳癌、膵臓癌、メラノーマ、ウィルムス腫瘍またはホジキンリンパ腫の治療に好ましく使用可能である。本発明の腫瘍治療薬は、とりわけ褐色細胞腫の治療に効果的である。
【００２７】
遺伝子治療によりＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性を抑制し得るアミノ酸配列を有するペプチドを細胞内で発現させる場合は、正常細胞におけるＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性のコントロールができなくなる可能性がある。またＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性の、長期間の持続的な抑制は、免疫反応の低下やアルツハイマー病などの発症を促進する危険性がある。しかし、本発明の腫瘍治療薬は、ペプチド化合物を使用するため、不必要な分は体内のプロティナーゼにより分解され、このような合併症を来たす危険性は少ない。
【００２８】
本発明の腫瘍治療薬は、活性成分として式（Ｉ）のペプチド化合物単独で、あるいは任意の他の治療のための有効成分との混合物として含有することができる。また、腫瘍治療薬は、活性成分を薬理学的に許容される一種もしくはそれ以上の担体と一緒に混合し、製剤学の技術分野においてよく知られている任意の方法により製造される。
【００２９】
薬理学的に許容される担体としては、製剤素材として慣用の各種有機あるいは無機担体物質が用いられ、その具体例としては、固形製剤における賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤などが挙げられる。製剤化の際には、必要に応じて、防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤などの製剤添加剤を用いてもよい。
【００３０】
賦形剤の好適な例としては、乳糖、白糖、Ｄ−マンニトール、Ｄ−ソルビトール、デンプン、α化デンプン、デキストリン、結晶セルロース、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、アラビアゴム、プルラン、軟質無水ケイ酸、合成ケイ酸アルミニウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、キシリトール、ソルビトール、エリスリトールなどが挙げられる。
滑沢剤の好適な例としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク、コロイドシリカ、ポリエチレングリコール６０００などが挙げられる。
結合剤の好適な例としては、α化デンプン、ショ糖、ゼラチン、アラビアゴム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、結晶セルロース、白糖、Ｄ−マンニトール、トレハロース、デキストリン、プルラン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。
崩壊剤の好適な例としては、乳糖、白糖、デンプン、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、カルボキシメチルスターチナトリウム、低置換ヒドロキシプロピルセルロース、軟質無水ケイ酸、炭酸カルシウムなどが挙げられる。
【００３１】
溶剤の好適な例としては、注射用水、生理食塩水、リンゲル液、アルコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ゴマ油、トウモロコシ油、オリーブ油、綿実油などが挙げられる。
溶解補助剤の好適な例としては、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、Ｄ−マンニトール、トレハロース、安息香酸ベンジル、エタノール、トリスアミノメタン、コレステロール、トリエタノールアミン、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、サリチル酸ナトリウム、酢酸ナトリウムなどが挙げられる。
懸濁化剤の好適な例としては、例えば、ステアリルトリエタノールアミン、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリルアミノプロピオン酸、レシチン、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、モノステアリン酸グリセリンなどの界面活性剤；例えば、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースなどの親水性高分子；ポリソルベート類、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油などが挙げられる。
等張化剤の好適な例としては、塩化ナトリウム、グリセリン、Ｄ−マンニトール、Ｄ−ソルビトール、ブドウ糖、キシリトール、果糖などが挙げられる。
緩衝剤の好適な例としては、リン酸塩、酢酸塩、炭酸塩、クエン酸塩などの緩衝液などが挙げられる。
無痛化剤の好適な例としては、プロピレングリコール、塩酸リドカイン、ベンジルアルコールなどが挙げられる。
防腐剤の好適な例としては、パラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、ベンジルアルコール、フェネチルアルコール、デヒドロ酢酸、ソルビン酸などが挙げられる。
抗酸化剤の好適な例としては、亜硫酸塩、アスコルビン酸塩などが挙げられる。
着色剤の好適な例としては、水溶性着色タール色素（例、食用赤色２号および３号、食用黄色４号および５号、食用青色１号および２号などの食用色素）、不溶性レーキ色素（例、前記水溶性食用タール色素のアルミニウム塩）、天然色素（例、β−カロチン、クロロフィル、ベンガラ）などが挙げられる。
甘味剤の好適な例としては、サッカリンナトリウム、グリチルリチン酸二カリウム、アスパルテーム、ステビアなどが挙げられる。
【００３２】
また、投与経路は、治療に際し最も効果的なものを使用するのが望ましく、経口製剤、注射剤または経皮製剤で投与可能である。経口製剤としては、錠剤（舌下錠、口腔内崩壊剤を含む）、カプセル剤（ソフトカプセル、マイクロカプセルを含む）、散剤、顆粒剤、トローチ剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤などが挙げられる。また、注射剤としては、皮内注射、皮下注射、静脈内注射、筋肉内注射、脊髄腔内注射、硬膜外注射、局所注射などが挙げられる。また、経皮製剤としては、貼付剤、軟膏剤、散布剤などが挙げられる。これらの製剤は、速放性製剤または除放性製剤などの放出制御製剤（例、除放性マイクロカプセル）であってもよい。
【００３３】
本発明の腫瘍治療薬中の式（Ｉ）のペプチド化合物の含有量は、例えば、０．１〜１００重量％である。
【００３４】
次に経口製剤の製造法について説明する。経口製剤は、活性成分に、例えば、賦形剤、崩壊剤、結合剤または滑沢剤などを添加して圧縮形成することにより製造される。
さらに、味のマスキング、腸溶化あるいは除放化を目的として、自体公知の方法により、経口製剤にコーティングを行ってもよい。コーティング剤としては、例えば、腸溶性ポリマー（例、酢酸フタル酸セルロース、メタアクリル酸コポリマーＬ、メタアクリル酸コポリマーＬＤ、メタアクリル酸コポリマーＳ、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、カルボキシメチルエチルセルロース）、胃溶性ポリマー（例、ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、アミノアルキルメタアクリレートコポリマーＥ）、水溶性ポリマー（例、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）、水不溶性ポリマー（例、エチルセルロース、アミノアルキルメタアクリレートコポリマーＲＳ、アクリル酸エチル・メタアクリル酸メチル共重合体）、ワックスなどが用いられる。コーティングを行う場合、前記コーティング剤とともに、ポリエチレングリコール等の可塑剤；酸化チタン、三二酸化鉄等の遮光剤を用いてもよい。
【００３５】
また、注射剤は、活性成分を分散剤（例、ツィーン（Tween）８０（アトラスパウダー社製、米国）、ＨＣＯ ６０（日光ケミカルズ社製）、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム）、保存剤（例、メチルパラベン、プロピルパラベン、ベンジルアルコール、クロロブタノール、フェノール）、等張化剤などと共に、水性溶剤（例、蒸留水、生理的食塩水、リンゲル液）あるいは油性溶剤（例、オリーブ油、ゴマ油、綿実油、コーン油などの植物油；プロピレングリコール、マクロゴール、トリカプリリン）などに溶解、懸濁あるいは乳化することにより製造される。この際、所望により溶解補助剤、懸濁化剤、緩衝剤、安定剤（例、ヒト血清アルブミン）、無痛化剤、防腐剤等の添加剤を用いてもよい。
【００３６】
また、経皮製剤は、活性成分を固状、半固状または液状の組成物とすることにより製造される。例えば固状の組成物は、活性成分をそのまま、あるいは賦形剤、増粘剤などを添加、混合して粉状とすることにより製造される。液状の組成物は、注射剤の場合とほとんど同様にして製造される。半固状の組成物は、水性または油性のゲル剤あるいは軟膏状のものがよい。また、これらの組成物は、いずれもｐＨ調整剤、防腐剤などを含んでいてもよい。
【００３７】
本発明の腫瘍治療薬の投与量および投与回数は、投与形態、患者の年齢、体重、治療すべき症状の性質もしくは重篤度により異なるが、通常、静脈内投与の場合、成人一人当たり約１０ｍｇ〜１ｇを一日一回ないし数回投与する。より好ましくは、注射剤による静脈内投与で、成人一人当たり３０ｍｇ〜０．３ｇを一日１〜３回で１〜２週間の継続投与を１クールとし、これを３〜４クール繰り返す。なお、これら投与量および投与回数に関しては、前述の種々の条件により変動する。
【実施例】
【００３８】
以下、本発明について、実施例を挙げてさらに具体的に説明する。本発明はこれらにより何ら限定されるものではない。
【００３９】
実施例１
ラット褐色細胞腫の細胞株であるＰＣ１２細胞を、１０％馬血清および５％仔牛血清を含む培地で、３７℃、５％炭酸ガスの環境下で培養した。得られたＰＣ１２細胞を播種した細胞培養ディッシュを２０枚用意し、株式会社ペプチド研究所（大阪）より入手したペプチド化合物（ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ−ａｃｐ−ＳＲＤＩＹＳＴＤＹＹＲ−ＮＨ２）を、該ディッシュ４枚ずつに、各々０，６，３０，６０，３００ μＭ添加し２日間放置した。その後、該ディッシュをpropidium iodide （１μｇ／ｍＬ）で染色して蛍光顕微鏡で観察した。図１は、ペプチド化合物によるＰＣ１２細胞の壊死作用を示す図である。ここで、ＰＩ（propidium iodide）陽性細胞％は、ペプチド化合物を添加して２日間経過後の１ディッシュ中の１００個のＰＣ１２細胞の中で、ＰＩに染色された細胞数の割合を、ペプチド化合物の濃度毎に算出した（４枚のディッシュの平均）。
図１より、ラット褐色細胞腫の細胞株であるＰＣ１２細胞において、ペプチド化合物（ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲ−ａｃｐ−ＳＲＤＩＹＳＴＤＹＹＲ−ＮＨ２）濃度が３０μＭ以上で、ＰＩ陽性細胞が有意に増加したことがわかる。
【産業上の利用可能性】
【００４０】
ＴｒｋＡのチロシンキナーゼ活性を抑制するペプチドを用いた、毒性の低い腫瘍治療薬に関し、特に褐色細胞腫、神経芽細胞腫、甲状腺癌、肺癌、前立腺癌、尿管癌、膀胱癌、乳癌、膵臓癌、メラノーマ、ウィルムス腫瘍またはホジキンリンパ腫の治療に有用である。
【図面の簡単な説明】
【００４１】
【図１】ペプチド化合物による褐色細胞腫における壊死作用を示す図である。
【図１】
2010006731.tif 000002
【配列表】
2010006731000001.app