(57)【要約】【課題】本発明は、皮膚外用剤製剤として好適な、フラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合した安定性に優れた化粧品組成物などを提供することにある。さらに、当該化粧品組成物を含む化粧品組成物、医薬部外品組成物 、医療用品組成物、衛生用品組成物、医薬品組成物や、当該組成物を含む化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品を提供することである。【解決手段】バイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合することを特徴とする化粧品組成物を提供する。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
バイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合することを特徴とする化粧品組成物。
【請求項２】
バイオサーファクタントが、マンノース骨格を有することを特徴とする請求項１に記載の化粧品組成物。
【請求項３】
バイオサーファクタントが、マンノース骨格の１位の水酸基に糖アルコールがグリコシド結合していることを特徴とする請求項１または２に記載の化粧品組成物。
【請求項４】
マンノース骨格を有するバイオサーファクタントがマンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）、マンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）、マンノシルソルビトールリピッド（ＭＳＬ）、マンノシルアラビトールリピッド（ＭＡｒａＬ）及びマンノシルリビトールリピッド（ＭＲＬ）からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする請求項３に記載の化粧品組成物。
【請求項５】
ＭＥＬが、マンノシルエリスリトールリピッドＡ（ＭＥＬ−Ａ）、マンノシルエリスリトールリピッドＢ（ＭＥＬ−Ｂ）、マンノシルエリスリトールリピッドＣ（ＭＥＬ−Ｃ）、マンノシルエリスリトールリピッドＤ（ＭＥＬ−Ｄ）、ＭＥＬ−Ａのトリアシル体、ＭＥＬ−Ｂのトリアシル体、ＭＥＬ−Ｃのトリアシル体及びＭＥＬ−Ｄのトリアシル体からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする請求項４に記載の化粧品組成物。
【請求項６】
バイオサーファクタントが、飽和脂肪酸及び／又は不飽和脂肪酸を含有していることを特徴とする請求項１〜５のいずれかに記載の化粧品組成物。
【請求項７】
バイオサーファクタントが、ラメラ構造及び／又はリポソームを形成していることを特徴とする請求項１〜６のいずれかに記載の化粧品組成物。
【請求項８】
バイオサーファクタントが形成するラメラ構造及び／又はリポソームの内部に、共存する有効成分が包埋されることを特徴とする請求項７に記載の化粧品組成物。
【請求項９】
フラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物が、モミジガサ、わさび、コスモス、小麦胚芽及び大豆胚芽から選ばれた１種以上の植物からの抽出物であることを特徴とする請求項１〜８のいずれかに記載の化粧品組成物。
【請求項１０】
化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品または医薬品として利用されるものである請求項１〜９のいずれかに記載の化粧品組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、バイオサーファクタントを可溶化剤として用いたフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合した化粧品組成物に関するものであり、フラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物が、モミジガサ、わさび、西洋わさび、コスモス、ナンキョウ、ニンニクから選ばれる植物からの抽出物である化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品に関するものである。より詳しくは、バイオサーファクタントがマンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）あるいはエリスリトール以外のアルジトールを含むマンノシルアルジトールリピッド（ＭＡＬ）（ＭＡＬにはマンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）、マンノシルソルビトールリピッド（ＭＳＬ）、マンノシルアラビトールリピッド（ＭＡｒａＬ）、マンノシルリビトールリピッド（ＭＲＬ）が含まれる）であることを特徴とする化粧料に関する。
【背景技術】
【０００２】
最近、植物中に存在する二次代謝物の生体機能調整作用が注目され、植物の中から様々な有用成分が同定され、生理機能との関連が調べられている。植物の二次代謝物はその構造から、イソプレン構造を基本単位とするテルペノイド類、フェノール化合物類、様々な構造からなる含窒素有機塩基類のアルカロイド類、の３つに分けられる。その代表的成分としては、テルペノイド類は、精油、サポニン、強心配糖体、フェノール化合物類はポリフェノール、またアルカロイド類には化学構造が多種多様であり顕著な薬理作用を有するものが多く医薬品として利用されているものも少なくない。
二次代謝物の中で最近注目されているもにポリフェノールなどが挙げられる。ポリフェノールは４０００とも５０００種類とも言われており、フラボノイド骨格あるいは非フラボノイド骨格を有するものからなり、分子量の大きさからは低分子ポリフェノールと高分子ポリフェノール（タンニン類）に分けられる。高分子ポリフェノールにはカテキンが重合した縮合型タンニンであるプロアントシアニジンとポリフェノールカルボン酸とグルコースがエステル結合した加水分解型タンニンがある。高分子ポリフェノールは、高分子量で構造が複雑であり、複合系で一部伝統薬として用いられてきた。その中でも縮合型タンニンであるプロアントシアニジンなどが市場に出ている。それら植物中のポリフェノールの生理作用に関しては、抗酸化作用、を中心に美白作用、抗炎症作用など種々の作用が知られている（非特許文献１）。
【０００３】
一方、個体老化やこれに伴って発生する各種の疾患などは、分裂するすべての細胞の老化（分裂速度の低下、細胞機能の低下）と深く関わっている。例えば皮膚は、表皮細胞、繊維芽細胞、およびこれら細胞外の皮膚構造を支持するエラスチン、コラーゲン等の細胞外マトリックスによって構成されている。若い皮膚においては、これらの皮膚組織の相互作用が恒常性を保つことによって水分保持、柔軟性、弾力性が確保され、肌は外観的にも張りと艶があり、みずみずしい状態に維持される。ところが、加齢や紫外線、乾燥、ストレスなどによって特に細胞外マトリックスや繊維芽細胞の機能低下が引き起こされ、その結果、皮膚の柔軟性、保湿機能は低下し、肌は張りや艶を失い、荒れ、しわ、くすみなどの老化症状が発生する。
【０００４】
抗老化剤の開発を目的に、細胞レベルで抗酸化剤等の探索が行われている。例えば植物としては、モミジガサ（特許文献１）、コスモス、大豆胚芽（特許文献２）、小麦胚芽（特許文献２）等の抽出物が知られている。
【０００５】
紫外線は細胞DNAに損傷を誘発する。紫外線による色素沈着の原因の一つとしてDNAの損傷とその修復が上げられる。すなわち、DNA損傷で生じたチミジンダイマーなどの物質がメラノサイトを刺激し、チロシナーゼ活性を亢進させる。また、チミジンダイマー類似物質をモルモット皮膚にと賦しても色素沈着が生じることが報告されていることからも明らかである。
【０００６】
また、植物からの美白剤も探索されており、たとえば、西洋わさびなどが考えられるが、抗変異原性を有する物質を含む西洋わさびの抽出物が美白作用や抗変異原作用を示すことが報告されている。
【０００７】
沢わさびやブロッコリーの抽出物がメチルスルフィニルタイプのイソチオシアネートを含みそれが化学発ガン抑制作用を有することや（非特許文献２、３、４）、大根がメイルチオアルキルイソチオシアネートを含み紫外線誘発の変異を修復する作用や（非特許文献５）、京野菜抽出物にもそのような作用があることが報告されている（非特許文献６、７、８）。一方、西洋わさびのフェネチルイソチオシアネートについては、化学発ガンに対する抑制作用（非特許文献９）、紫外線障害に対する防御作用が報告されている（特許文献３）。
【０００８】
さらに、非フラボノイド系の植物二次代謝物として、「カカロール」は代表的なモミジガサ抽出物成分の一つであり、５，６，７，８−テトラハイドロ−３，４，５−トリメチルナフト［２，３−ｂ］フラン−９−オール構造を有する。
【０００９】
モミジガサは、別名、シドケ、シドキ、シドキナ、シンドキ、キノシタ、トウキチ、トウキチナ、スドケ、シトギ、スドケと呼ばれており、キク科の植物で国内に広く分布し山菜として食されている。モミジガサ抽出物には美白作用が知られている（特許文献４）。モミジガサ抽出物の主成分の一つにカカロールが存在しており、カカロールは脂質過酸化を抑制する優れた抗酸化能を有していることが知られている（非特許文献１０）。カカロール類の生理作用としては、抗菌作用（非特許文献１１）、血糖低下作用（非特許文献１２）が報告されている。このようにカカロールを含むモミジガサ抽出物は美白剤、抗老化剤など様々な用途が期待される。
【００１０】
このように植物抽出物はフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有し、有用な生理作用を発現するにも関わらず、フラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物には水溶性が低いものが多く、化粧料中で不溶化し、それが製品の安定性の低下、すなわちオリの原因となっている。
【００１１】
一方、バイオサーファクタントは微生物によって菌対外に生産される両親媒性脂質である。近年、バイオテクノロジーの発展による植物資源の増産や、分離技術の進歩によるダウンストリームプロセスの低コスト化などを背景として、こうした微生物由来の新しい素材に多くの関心が集まっている。バイオサーファクタントの一種であるマンノシルエリスリトールリピッド(ＭＥＬ)は酵母が作る天然系の界面活性剤であり種々の生理作用が報告されている（非特許文献１３）。また最近ではエリスリトールがマンニトールに代わったマンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）が見出されている（特許文献５）。外用剤や化粧品としての用途としては、抗炎症剤および抗アレルギー剤（特許文献６）、養毛・育毛剤（特許文献７）としての有用性や、抗菌作用（特許文献８）や表面張力低下作用（特許文献９）が知られている。また、ＭＥＬがセラミドの代替として作用し、肌荒れを改善する効果（特許文献１０）も報告されている。
【００１２】
ＭＥＬには糖骨格のエリスリトールの光学異性体として、以下の式（１）に示されるような４−Ｏ−β−Ｄ−マンノピラノシル−ｍｅｓｏ−エリスリトール構造と１−Ｏ−β−Ｄ−マンノピラノシル−ｍｅｓｏ−エリスリトール構造（下記式（２））が存在する。
【００１３】
【化１】
2010018559.tif 000002
【００１４】
【化２】
2010018559.tif 000003
【００１５】
しかし、それらＭＥＬとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を共存させることで、安定で自由度の高いフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物配合皮膚外用剤が得られる技術は知られていなかった。
【非特許文献１】ＦＦＩジャーナル、２１２、９１，２００７
【非特許文献２】ＦＦＩジャーナル、１９２，２７，２００１
【非特許文献３】Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳ．，  ９１，  ３１４７，  １９９４
【非特許文献４】Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳ．，  ９９，  ７６１０，  ２００２
【非特許文献５】Ｊ．  Ａｇｒｉｃ．  Ｆｏｏｄ  Ｃｈｅｍ．，  ４９，  ５７５５，  ２００１
【非特許文献６】Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｕｔａｇｅｎ  Ｒｅｓ．，  ２６，  ２５９，  ２００４
【非特許文献７】Ｂｉｏｓｃｉ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．，  ６４，  ２５７５，  ２０００
【非特許文献８】Ｂｉｏｓｃｉ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．，  ６２，  １１６１，  １９９８
【非特許文献９】Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ，  ２１，  ２２８７，  ２０００
【非特許文献１０】Ｂｉｏｓｃｉ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．， ６８, １３９３，２００４
【非特許文献１１】Ｊ．Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄ．, ６４, ４３２，２００１
【非特許文献１２】Ｊ．Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄ．, ６２, １０８８，１９９９
【非特許文献１３】Ｊ．Ｂｉｏｓｃｉ．  Ｂｉｏｅｎｇ．，９４，１８７，２００２
【特許文献１】特開２００７−２１７３０５
【特許文献２】特開２００７−２９１０２７
【特許文献３】特開２００７−３１３１６
【特許文献４】特開開平０５−３４５７０５号公報
【特許文献５】特開２００５−１０４８３７号公報
【特許文献６】特開２００５−６８０１５号公報
【特許文献７】特開２００３−２６１４２４号公報
【特許文献８】特開昭５７−１４５８９６号公報
【特許文献９】特開昭６１−２０５４５０号公報
【特許文献１０】ＷＯ２００７／０６０９５６
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【００１６】
植物抽出物はフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有し、有用な生理作用を発現するにも関わらず、フラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物には水溶性が低いものが多く、化粧料中で不溶化し、それが製品の安定性の低下、すなわちオリの原因となっている。本発明は、このオリを防止し、製品の外観の安定性低下を防ぐための可溶化剤の開発が課題とし、皮膚外用剤製剤として好適な、安定なフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合した化粧品組成物などを提供することにある。
さらに、当該化粧品組成物を含む化粧品組成物、医薬部外品組成物 、医療用品組成物、衛生用品組成物、医薬品組成物や、当該組成物を含む化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明者らは上記の目的を達成すべく鋭意努力した結果、安定なフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合した化粧品組成物を求めて、バイオサーファクタント、特にＭＥＬ、エリスリトール以外のアルジトールを含むＭＡＬ（ＭＡＬにはマンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）、マンノシルソルビトールリピッド（ＭＳＬ）、マンノシルアラビトールリピッド（ＭＡｒａＬ）、マンノシルリビトールリピッド（ＭＲＬ）が含まれる）、トリアシルＭＥＬおよびトリアシルＭＡＬを含むことが有効であることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は、以下の発明を包含する。
（１）  バイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合することを特徴とする化粧品組成物。
（２）バイオサーファクタントが、マンノース骨格を有することを特徴とする（１）に記載の化粧品組成物。
（３）バイオサーファクタントが、マンノース骨格の１位の水酸基に糖アルコールがグリコシド結合していることを特徴とする（１）または（２）に記載の化粧品組成物。
（４）マンノース骨格を有するバイオサーファクタントがマンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）、マンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）、マンノシルソルビトールリピッド（ＭＳＬ）、マンノシルアラビトールリピッド（ＭＡｒａＬ）及びマンノシルリビトールリピッド（ＭＲＬ）からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする（３）に記載の化粧品組成物。
（５）ＭＥＬが、マンノシルエリスリトールリピッドＡ（ＭＥＬ−Ａ）、マンノシルエリスリトールリピッドＢ（ＭＥＬ−Ｂ）、マンノシルエリスリトールリピッドＣ（ＭＥＬ−Ｃ）、マンノシルエリスリトールリピッドＤ（ＭＥＬ−Ｄ）、ＭＥＬ−Ａのトリアシル体、ＭＥＬ−Ｂのトリアシル体、ＭＥＬ−Ｃのトリアシル体及びＭＥＬ−Ｄのトリアシル体からなる群より選ばれた１種以上の化合物であることを特徴とする（４）に記載の化粧品組成物。
（６）バイオサーファクタントが、飽和脂肪酸及び／又は不飽和脂肪酸を含有していることを特徴とする（１）〜（５）のいずれかに記載の化粧品組成物。
（７）バイオサーファクタントが、ラメラ構造及び／又はリポソームを形成していることを特徴とする（１）〜（６）のいずれかに記載の化粧品組成物。
（８）バイオサーファクタントが形成するラメラ構造及び／又はリポソームの内部に、共存する有効成分が包埋されることを特徴とする（７）に記載の化粧品組成物。
（９）フラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物が、モミジガサ、わさび、コスモス、小麦胚芽及び大豆胚芽から選ばれた１種以上の植物からの抽出物であることを特徴とする（１）〜（８）のいずれかに記載の化粧品組成物。
（１０）化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品または医薬品として利用されるものである（１）〜（９）のいずれかに記載の化粧品組成物。
【発明の効果】
【００１８】
本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物により、安定なフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合した化粧品組成物を提供でき、化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品を提供することできる。また、バイオサーファクタントは生物由来の天然界面活性剤であるため安全性に優れており、本発明に係る化粧品組成物は長期にわたる使用に十分に耐え得るという効果を奏する。さらに、バイオサーファクタントは、微生物の培養により製造できるため原料コストが安価であり、大量生産可能である。したがって、本発明係る化粧品組成物は低価格で提供できるという効果を奏する。バイオサーファクタントは、プレミックス品として使用してもよい。
【００１９】
バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、洗浄性と、保湿作用、コラーゲン生成促進作用、細胞賦活作用、抗老化作用、育毛作用及び肌荒れ改善作用及びベシクル形成・液晶形性能などを併せ持つので、洗浄用化粧料の配合成分としても有用である。
【発明を実施するための最良の形態】
【００２０】
（バイオサーファクタント）
「バイオサーファクタント」とは生物によって生み出される界面活性能力や乳化能力を有する物質の総称であり、優れた界面活性や、高い生分解性を示すばかりでなく、様々な生理作用を有していることから合成界面活性剤とは異なる挙動・機能を発現する可能性がある。なお、バイオサーファクタントは微生物の培養により大量に製造可能であり、プレミックス品として使用してもよい。
【００２１】
「プレミックス品」とは機能性の素材の他に、分散剤などを添加したり、溶媒で化粧品製造時に使いやすいように希釈したりしたものである。
【００２２】
バイオサーファクタントとしては、マンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）、マンノシルアルジトールリピッド（ＭＡＬ）（ＭＡＬにはマンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）、マンノシルソルビトールリピッド（ＭＳＬ）、マンノシルアラビトールリピッド（ＭＡｒａＬ）、マンノシルリビトールリピッド（ＭＲＬ）が含まれる）、トレハロースリピッド、ラムノリピッド、ソホロリピッド、サーファクチン、スピクルスポル酸、エマルザンなどが挙げられ、いずれも本発明に係る賦活化剤に使用できる。なかでも、ラメラ構造を形成するバイオサーファクタントを利用するのが好ましく、ＭＥＬ、ＭＡＬが特に好ましい。これらバイオサーファクタントは発酵物の混合物でも精製物でもラメラ構造を有すればどちらでも良い。
【００２３】
（ＭＥＬ)
ＭＥＬは、マンノースの４位及び６位のアセチル基の有無から分類すると、ＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ、ＭＥＬ−Ｃ及びＭＥＬ−Ｄの４種類が知られている。式（３）にＭＥＬ−Ａの構造を示す。式（３）中、Ｒ１及びＲ２は炭化水素基を示す。すなわち、ＭＥＬ−Ａは、式（３）中、マンノースの２位、３位に炭素数６〜２０のアルカノイル基を有し、マンノースの４位、６位にアセチル基を有する化合物である。なお、ＭＥＬ−Ｂは式（３）においてマンノースの４位のアセチル基（ＣＨ３ＣＯ）がＨであり、ＭＥＬ−Ｃは式（３）においてマンノースの６位のアセチル基（ＣＨ３ＣＯ）がＨであり、ＭＥＬ−Ｄは式（３）においてマンノースの４位及び６位のアセチル基（ＣＨ３ＣＯ）がいずれもＨである。
【００２４】
【化３】
2010018559.tif 000004
【００２５】
〔Ｒ１、Ｒ２は同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜１８、好ましくは炭素数２〜１６、より好ましくは炭素数４〜１２の直鎖又は分枝を有するアルキル基、あるいは、炭素数２〜１８、好ましくは炭素数２〜１６、より好ましくは炭素数２〜１４の直鎖又は分枝を有するアルケニル基もしくはアルカジエニル基もしくはアルカトリエニル基を表す。〕
【００２６】
式（３）に対応させれば、ＭＥＬはマンノースの２位、３位に炭素数１〜１９、好ましくは炭素数１〜１７、より好ましくは炭素数１〜１５の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有し、マンノースの４位、６位がアセチル基である化合物である（マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）。なお、2位と3位のアルカノイル基の合計の炭素数は好ましくは１０〜３８、より好ましくは１４〜３０である。
【００２７】
R1、R2の好ましい基としては、CH3(CH2)6、CH3(CH2)8、CH3(CH2)10などのC7〜C11のアルキル基が挙げられる。R1、R2がC7〜C11のアルキル基である式(３)のＭＥＬ−Ａは、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸またはそのエステル(モノアルキルエステル、モノ−、ジ−、トリ−グリセライド、或いはこれらの飽和またはモノ不飽和脂肪酸を含む油脂等)などの原料を培地に添加することにより得ることができる。同様に、R1、R2がアルケニル基、アルカジエニル基もしくはアルカトリエニル基である式(３)のＭＥＬ-Aは、原料として二重結合を２個以上有するリノール酸、リノレン酸、アラキドン酸またはそのエステル(モノアルキルエステル、モノ−、ジ−、トリ−グリセライド、或いはこれらの高度不飽和脂肪酸を含む油脂等)などの原料を培地に添加することにより得ることができる。R1、R2で表される好ましいアルカノイル基は、C7H14、C9H18、C11H22などのC7〜C11のアルケニル基が挙げられる。R1、R2で表される好ましいアルカジエニル基は、C7H12、C9H16、C11H20などのC7〜C11のアルカジエニル基が挙げられる。R1、R2で表される好ましいアルカトリエニル基は、C7H10、C9H14、C11H18などのC7〜C11のアルカトリエニル基が挙げられる。
【００２８】
ＭＥＬ以外のＭＡＬの構造は式(４)に示す（式中、マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）。エリスリトール以外の糖アルコール（アルジトール）としては、マンニトール、アラビトール、リビトール、ソルビトールが付加している(n=４：マンニトール、ソルビトール、n=２：アラビトール、リビトール)。式（４）に対応させれば、ＭＡＬはマンノースの２位、３位に炭素数２〜２０、好ましくは炭素数４〜１８、より好ましくは炭素数６〜１４の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有し、マンノースの４位、６位がアセチル基である化合物である（式中、マンノースの４位、６位のアセチル基のどちらか一方、あるいは両方が水酸基になっていてもよい。）
【００２９】
【化４】
2010018559.tif 000005
【００３０】
〔Ｒ１、Ｒ２は同一又は異なって、水素原子又は炭素数１〜１８、好ましくは炭素数２〜１６、より好ましくは炭素数４〜１２の直鎖又は分枝を有するアルキル基、あるいは、炭素数２〜１８、好ましくは炭素数２〜１６、より好ましくは炭素数２〜１４の直鎖又は分枝を有するアルケニル基もしくはアルカジエニル基もしくはアルカトリエニル基を表す。〕  
【００３１】
（トリアシル体）
本発明に用いられるバイオサーファクタントは、ＭＥＬのトリアシル体及びＭＥＬ以外のＭＡＬ のトリアシル体でもよい。トリアシル体のバイオサーファクタントは、ＭＥＬやＭＥＬ以外のＭＡＬよりもさらに高い疎水性を有するバイオサーファクタントである。例えば、ＭＥＬ生産菌の培養液にも存在するし、大量に得る時は、酵素を用いてＭＥＬを種々の植物油と反応することによって製造することもできる。
【００３２】
ＭＥＬのトリアシル体、すなわちトリアシルマンノシルエリスリトールリピッド（トリアシルＭＥＬと称することがある）は、式（５）のような構造を示す。
【００３３】
【化５】
2010018559.tif 000006
【００３４】
式（５）中、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３はそれぞれ独立して炭化水素基または酸素原子含有炭化水素基を示し、マンノースの４位及び６位の水酸基のいずれか一方、あるいは両方の水素原子がアセチル基に置換されていてもよい。炭化水素基は飽和結合のみを有していてもよく、不飽和結合を有していてもよい。不飽和結合を有している場合、複数の二重結合を有していてもよい。炭素鎖は直鎖状であってもよく分岐鎖状であってもよい。また、酸素原子含有炭化水素基の場合、含まれる酸素原子の数及び位置は限定されない。
【００３５】
式（５）中、Ｒ１、Ｒ２は炭素数が１〜１８であることが好ましく、脂肪族アシル基（ＲＣＯ−）としてマンノースの２位及び３位の水酸基とエステル結合をしており、残りの水酸基にはアセチル基がエステル結合していてもよい。Ｒ３は炭素数が２〜２０の脂肪族アシル基であることが好ましく、脂肪族アシル基（ＲＣＯ−）としてエリスリトールの一級水酸基とエステル結合をしている。
【００３６】
トリアシルＭＥＬは脂肪酸エステルが付加した構造であり高い疎水性を有することからエモリエント剤として従来のＭＥＬと比べても種々のオイル成分と馴染みやすい点で優れている。
【００３７】
これらのバイオサーファクタントは、単独で使用してもよいが、２種以上のバイオサーファクタントを併用することもできる。
【００３８】
（バイオサーファクタントの製造方法）
バイオサーファクタントの製造方法は特に制限されるものはないが、微生物を用いた発酵方法を任意に選択して行えば良い。例えばＭＥＬ (ＭＥＬ-Ａ, ＭＥＬ-Ｂ, ＭＥＬ-Ｃ)の培養生産は常法に従って、Pseudozyma antarctica NBRC 10736により生産することができ、微生物としてはPseudozyma  antarctica、Pseudozyma  sp.、等を用いることができる。いずれの微生物でも容易にＭＥＬ混合物が得られることは周知の事実である。ＭＥＬ混合物はシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精製し、ＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ及びＭＥＬ−Ｃを単離することが出来る。また、ＭＥＬ−Ｂを生産する菌としては、Pseudozyma antarctica 、およびPseudozyma tsukubaensis, Kurzmanomycesspが知られており、その菌を用いてもよい。ＭＥＬ−Ｃを生産する菌としては、Pseudozyma hubeiensis、Pseudozyma graminicolaが知られており、その菌を用いてもよい。ＭＥＬを生産する能力を有する微生物としては特に限定するものではなく、目的に応じて適宜使用することができる。
【００３９】
バイオサーファクタントを生産するときの発酵培地は、酵母エキス、ペプトン等のＮ源、グルコース、フルクトース等のＣ源、および硝酸ナトリウム、リン酸水素二カリウム、硫酸マグネシウム７水塩等の無機塩類からなる一般的な組成の培地を用いることができ、これにオリーブ油、ダイズ油、ヒマワリ油、トウモロコシ油、キャノーラ油、ココナッツ油等の油脂類、並びに、流動パラフィン、テトラデカン等の炭化水素等の非水溶性基質の単独或いは２種以上を添加したものを使用することができる。
【００４０】
ｐＨや温度等の発酵条件や培養時間等は任意に設定でき、発酵後の培養液をそのまま本発明のバイオサーファクタントとして使用することが可能である。また、発酵後の培養液を必要に応じて濾過、遠心分離、抽出、精製、滅菌等の任意の操作を適宜加えることも可能であり、得られたエキスを希釈、濃縮、乾燥することもできる。
【００４１】
原料とする油脂類としては植物油脂が好ましい。植物油脂は特に限定されず、目的に応じて適宜選定することができる。例えば、大豆油、菜種油、コーン油、ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、パーム油などが挙げられ、これらの中でも、大豆油、オリーブ油がバイオサーファクタント（特にＭＥＬ）の生産効率（生産量、生産速度、および収率）を向上させることができる点で特に好ましい。これらは、１種を単独で、または２種以上を併用しても構わない。
【００４２】
無機窒素源としては特に制限はなく、目的に応じて適宜選定することができるが、例えば、硝酸アンモニウム、尿素、硝酸ナトリウム、塩化アンモニウム、硫安等が挙げられる。
【００４３】
バイオサーファクタントの回収、精製方法には特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。例えば、培養液を遠心分離して油分を回収し、酢酸エチル等の有機溶媒で抽出濃縮することにより回収することができる。
【００４４】
抽出溶媒としては、水、アルコール類（例えば、メタノール、無水エタノール、エタノールなどの低級アルコール、またはプロピレングリコール、１，３-ブチレングリコール
などの多価アルコール）、アセトンなどのケトン類、ジエチルエーテル、ジオキサン、アセトニトリル、酢酸エチルなどのエステル類、キシレン、ベンゼン、クロロホルムなどの有機溶媒を、単独であるいは２種類以上の混液を任意に組み合わせて使用することができ、また、各々の溶媒抽出物が組み合わされたものでも使用することができる。
【００４５】
抽出方法は特に制限されるものはないが、通常、常温から常圧下での溶媒の沸点の範囲であればよく、抽出後は濾過またはイオン交換樹脂を用い、吸着・脱色・精製して溶液状、ペースト状、ゲル状、粉末状とすればよい。多くの場合は、そのままの状態で利用できるが、必要であれば、その効力に影響のない範囲でさらに脱臭、脱色などの精製処理を加えてもよい。脱臭・脱色等の精製処理手段としては、活性炭カラムなどを用いればよく、抽出物質により一般的に適用される通常の手段を任意に選択して行えばよい。必要に応じて、シリカゲルカラムを用いて精製することにより、純度の高いバイオサーファクタントを得ることができる。
【００４６】
（トリアシル体製造方法）
バイオサーファクタントのトリアシル体を得る方法を、ＭＥＬのトリアシル体を製造する方法を例として説明するが、本発明に用いられるバイオサーファクタントのトリアシル体はトリアシルＭＥＬに限定されない。
【００４７】
例えば、トリアシルＭＥＬを得るためには、上記のようにして微生物を発酵して製造した培養液からトリアシルＭＥＬ画分を精製して得ることができる。また、大量に得るためには、ＭＥＬを有機溶媒に溶かし、植物油などの脂肪酸誘導体を添加、加水分解酵素の存在下でエステル化反応またはエステル交換反応を行う。
【００４８】
ＭＥＬのエリスリトール部に導入される脂肪酸は長鎖炭化水素の1価のカルボン酸であればよい。また、飽和脂肪酸であっても不飽和脂肪酸であってもよい。不飽和脂肪酸の場合、複数の二重結合を有していてもよい。炭素鎖は直鎖状であってもよく分岐鎖状であってもよい。さらに、脂肪酸の誘導体である脂肪酸誘導体を本発明に使用してもよいし、脂肪酸と脂肪酸誘導体の混合物を本発明に使用してもよい。ＭＥＬのエリスリトール部に導入される脂肪酸または脂肪酸誘導体は、油類、高級脂肪酸、合成エステル由来であることが好ましい。
【００４９】
「油類」としては、植物油、動物油、鉱物油およびその硬化油であればよい。具体的には、アボカド油、オリーブ油、ゴマ油、ツバキ油、月見草油、タートル油、マカデミアンナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、ナタネ油、卵黄油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、キリ油、ホホバ油、カカオ脂、ヤシ油、馬油、パーム油、パーム核油、牛脂、羊脂、豚脂、ラノリン、鯨ロウ、ミツロウ、カルナウバロウ、モクロウ、キャンデリラロウ、スクワラン等の動植物油およびその硬化油。流動パラフィン、ワセリン等の鉱物油、トリパルミチン酸グリセリン等の合成トリグリセリンが挙げられる。好ましくはアボカド油、オリーブ油、ゴマ油、ツバキ油、月見草油、タートル油、マカデミアンナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、ナタネ油、卵黄油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、より好ましくはオリーブ油、大豆油である。
【００５０】
「高級脂肪酸」としては、例えばカプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、１２−ヒドロキシステアリン酸、イソステアリン酸、ウンデシン酸、トール酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸などが挙げられる。好ましくはラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸、ウンデシレン酸、より好ましくはオレイン酸、リノール酸、ウンデシレン酸である。
【００５１】
「合成エステル」としては、例えば、カプロン酸メチル、カプリル酸メチル、カプリン酸メチル、ラウリン酸メチル、ミリスチン酸メチル、パルミチン酸メチル、オレイン酸メチル、リノール酸メチル、リノレン酸メチル、ステアリン酸メチル、ウンデシン酸メチル、カプロン酸エチル、カプリル酸エチル、カプリン酸エチル、ラウリン酸エチル、ミリスチン酸エチル、パルミチン酸エチル、オレイン酸エチル、リノール酸エチル、リノレン酸エチル、ステアリン酸エチル、ウンデシン酸エチル、カプロン酸ビニル、カプリル酸ビニル、カプリン酸ビニル、ラウリン酸ビニル、ミリスチン酸ビニル、パルミチン酸ビニル、オレイン酸ビニル、リノール酸ビニル、リノレン酸ビニル、ステアリン酸ビニル、ウンデシン酸ビニル、オクタン酸セチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、オレンイ酸デシル、ジメチルオクタン酸、乳酸セチル、乳酸ミリスチル等が挙げられる。好ましくはラウリン酸メチル、ミリスチン酸メチル、パルミチン酸メチル、オレイン酸メチル、リノール酸メチル、リノレン酸メチル、ステアリン酸メチル、ウンデシレン酸メチル、より好ましくはオレイン酸メチル、リノール酸メチル、ウンデシレン酸メチルである。
【００５２】
トリアシルＭＥＬは、上述のようにＭＥＬを有機溶媒に溶解して反応させることにより生産することができる。有機溶媒としては、ＭＥＬを可溶化できるものであれば限定されない。全部を可溶化できなくても一部を可溶化できるものであればよい。また、有機溶媒は複数の有機溶媒の混合物でもよい。具体的には、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、アセトン、プロパノン、ブタノン、ペンタン−２−オン、１，２−エタンジオール、２，３−ブタンジオール、ジオキサン、アセトニトリル、２−メチル−ブタン−２−オール、第３級ブタノール、２−メチルプロパノール、４−ヒドロキシ−２−メチルペンタノン、テトラヒドロフラン、ヘキサン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ピリジン、メチルエチルケトンなどを挙げることができる。好ましくはアセトン、テトラヒドロフラン、第３級ブタノール、アセトニトリル、ジオキサン、より好ましくはアセトンである。
【００５３】
加水分解酵素としては、リパーゼ、プロテアーゼ、エステラーゼが挙げられる。これらの中から選択される少なくとも１種を用いることが好ましく、複数の加水分解酵素を用いてもよい。好ましくはリパーゼ、エステラーゼ、より好ましくはリパーゼである。
【００５４】
具体的には、例えば、ＭＥＬ生産微生物の培養液から精製したＭＥＬを有機溶媒（例えば、アセトン）に溶解し、これに市販のリパーゼ（例えば、ノボザイム４３５（ノボザイムズ社製）など）および植物油脂を添加する。
【００５５】
この製造方法の場合、反応温度は１０〜１００℃、好ましくは２０〜５０℃、より好ましくは２５〜４０℃で、１日〜７日間攪拌すればよい。また、反応液にモレキュラーシーブスを添加してもよい。この製造方法により、材料として添加したＭＥＬがほぼ定量的にトリアシル体となる。
【００５６】
トリアシルＭＥＬの精製は、上述のＭＥＬの精製に準じて行うことができる。
【００５７】
（飽和脂肪酸側鎖有するＭＥＬの製造方法）
飽和側鎖有するＭＥＬの製造は、上述のバイオサーファクタントの製造方法に準じて行うことができる。その際、原料とする油脂類としては、オリーブ油、飽和脂肪酸あるいはそのエステル体、流動パラフィン、テトラデカン等の炭化水素等の非水溶性基質の単独あるいは２種以上を添加することにより行う。
飽和側鎖有するＭＥＬの精製は、上述のＭＥＬの精製に準じて行うことができる。
【００５８】
（ＭＭＬ等のＭＡＬの製造方法）
ＭＭＬ等のエリスリトール以外のアルジトールを有するＭＡＬの製造は、上述のバイオサーファクタントの製造方法に準じて行うことができる。その際、原料としては、マンニトール、アラビトール、リビトール、ソルビトール等のアルジトールの単独あるいは２種以上を添加することにより行う。
ＭＭＬ等のエリスリトール以外のアルジトールを有するＭＡＬの精製は、上述のＭＥＬの精製に準じて行うことができる。
【００５９】
（リポソームを得る方法）
バイオサーファクタントは、油溶性基剤、或いは油溶性成分に溶解して化粧料に配合してもよく、リポソームの形態で化粧料、特に化粧水、保湿液などの水系の化粧料に好ましく配合される。リポソームに配合されたバイオサーファクタントは、皮膚細胞と融合して吸収性が向上するために好ましい。リポソームの調整法としては公知の調製法のいずれを採用してもよく、特に限定されないが、例えばエタノール注入法、バンガム法を例示することができる。
【００６０】
例えば、エタノール注入法によるＭＥＬ−Ｂリポソーム溶液の調製は次の通りに行えばよい。すなわち、ＭＥＬ−Ｂ１０ｍｇをエタノール０．５ｍｌに溶解し、あらかじめ70℃前後に温めておいた蒸留水１ｍｌを加え、軽く振り混ぜた後、残存しているエタノールをロータリーエバポレーターで留去する。これを水浴型超音波装置(W-220R、本多電子株式会社)を用い約５分間超音波処理した後、蒸留水でメスアップすればよい。
【００６１】
例えば、バンガム法によるＭＥＬ−Ｂリポソーム溶液の調製は次の通りに行えばよい。すなわち、ＭＥＬ−Ｂ１０ｍｇをクロロホルム１ｍｌに溶解し、ロータリーエバポレーターで溶媒を留去し薄膜を作成すればよい。そこに蒸留水１ｍｌを加え水浴型超音波装置(W-220R、本多電子株式会社)を用い約５分間超音波処理すればよい。
【００６２】
（バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物の製造方法）
化粧品組成物中のバイオサーファクタントの添加量は、バイオサーファクタントが安定なフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を安定化させる作用を損なわない範囲で添加すれば良く、通常０．００１〜５０質量％が好ましく、０．０１〜２５質量％がより好ましく、０．０５〜１５質量％がさらに好ましく０．０１〜１０質量％が特に好ましい。ここで、化粧品組成物に添加する前記バイオサーファクタントの使用形態は任意である。例えば、バイオサーファクタントを培養液からの抽出物のまま、あるいは精製した高純度品、もしくは水に懸濁し、あるいはエタノール等の有機溶媒に溶かした後使用してもよい。
【００６３】
バイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物としては、ダイズ胚芽抽出物、コムギ胚芽抽出物、コスモス抽出物、モミジガサ抽出物、西洋わさび（葉及び根茎）抽出物、アセロラエキス、エイジツエキス、火辣エキス、カミツレエキス，カミツレ花エキス・（尿素）、キウイエキス、ウワウルシエキス、アルニカエキス、オウゴンエキス、ソウハクヒエキス、サイコエキス、ボウフウエキス、マンネンタケ菌糸体培養物またはその抽出物、シナノキエキス、モモ葉エキス、エイジツエキス、クジンエキス、ジユエキス、トウキエキス、ヨクイニンエキス、カキ葉エキス、ダイオウエキス、ボタンピエキス、ハマメリスエキス、マロニエエキス、オトギリソウエキス、油溶性カンゾウエキス、ウイキョウエキス、オランダカラシエキス、サフランエキス、ショウキョウエキス、タイソウエキス、カロットエキス、センキュウエキス、チンピエキス、トウキ根エキス、ドダミエキス、ボタンエキス、レイシエキス、メリロートエキス、センキュウエキス、ゲンノショコエキス、アルニカエキス、アルニカ花エキス、オウレンエキス、オドリコソウエキス、ガマ穂エキス、カミツレエキス、カラミン、カワラヨモギエキス、甘草エキス、クチナシエキス、クマザサエキス、ゲンチアナエキス、紅茶エキス、コンフリーエキス、コンフリー葉エキス、シコンエキス，ムラサキ根エキス、シソエキス、シソ葉エキス、シモツケソウエキス、シャクヤクエキス、スイカズラエキス、セージエキス、セイヨウキズタエキス、セイヨウニワトコエキス、セイヨウノコギリソウエキス、センブリエキス、ソウハクヒエキス、トウキンセンカエキス、ビワ葉エキス、フユボダイジュエキス、モモ果実エキス、ヤグルマギクエキス、ユキノシタエキス、ヨモギエキス、レタスエキス、ローマカミツレエキス、ワレモコウエキス、ビロウドアオイエキス、ジオウエキス、タイソウエキス、カイソウエキス、キダチアロエエキス、ゴボウエキス、マンネンロウエキス、アルニカエキス、アスパラガスエキス、アシタバエキス、アマチヤエキス、アルテアエキス、アロエベラエキス、オイスタエキス、オオムギバクガエキス、褐藻エキス、カリンエキス、キイチゴエキス、キュウリエキス、キュウリ果実エキス、グアバ菓エキス、クインスシードエキス、グレープフルーツエキス、グレープフルーツ果実エキス、クレマティスエキス、サンザシエキス、シイタケエキス、スギナエキス、ゼニアオイエキス、トマトエキス、ノバラエキス、フクノエキス、ヘチマエキス、ユリエキス、リンゴエキス、レンゲソウエキス。生薬の抽出物やエキスとしては、アセンヤク（阿仙薬）、アルテア、アルニカ、アボカド、アマチャ（甘茶）、イラクサ、イチョウ（銀杏葉、銀杏）、ウスバサイシン（細辛）、ウメ（烏梅）、ウラジロガシ、ウワウルシ、ノイバラ（営実）、ヒキオコシ（延命草）、オウギ（黄耆）、ヤマザクラ（桜皮）、キハダ（黄柏）、オウレン（黄連）、オタネニンジン（人参）、オトギリソウ（弟切草）、オドリコソウ、オランダガラシ、オレンジ、イトヒメハギ（遠志）、ウツボグサ（夏枯草）、ツルドクダミ（何首烏）、エンジュ（槐花）、ガジュツ（莪朮）、クズ（葛根）、カノコソウ（吉草根）、カミツレ、キカラスウリ（瓜呂根）、フキタンポポ（款冬花、款冬葉）、キイチゴ、キキョウ（桔梗）、キク（菊花）、キササゲ（梓実）、ミカン属植物果実（枳実）、タチバナ(橘皮)、ウドまたはシシウド（羌活、独活）、アンズ（杏仁）、クコ（地骨皮、枸杞子、枸杞葉）、クララ（苦参）、クスノキ、クマザサ、ニッケイ（桂皮）、ケイガイ（ケイガイ）、エビスグサ（決明子）、マルバアサガオまたはアサガオ（ケン牛子）、ベニバナ（紅花）、ゴバイシ（五倍子）、コンフリー、コパイバ、クチナシ（山梔子）、ゲンチアナ、ホオノキ（厚朴）、ヒナタイノコズチ（牛膝）、ゴシュユ（呉茱萸）、チョウセンゴミシ（五味子）、米、米ぬか、ミシマサイコ（柴胡）、サフラン、サボンソウ、サンショウ（山椒）、サルビア、サンシチニンジン（三七人参）、シイタケ（椎茸）、シクンシ（使君子）、ムラサキ(紫根)、カキ（柿蒂）、シャクヤク（芍薬）、オオバコ（車前子、車前草）、ショウガ（生姜）、ショウブ（菖蒲）、トウネズミモチ（女貞子）、シモツケソウ、シラカバ、スイカズラ（金銀花、忍冬）、セイヨウキヅタ、セイヨウノコギリソウ、セイヨウニワトコ、アズキ（赤小豆）、ニワトコ（接骨木）、ゼニアオイ、センキュウ（川キュウ）、センブリ（当薬）、クワ（桑白皮、桑葉）、ナツメ（大棗）、ダイズ、タラノキ、チクセツニンジン（竹節人参）、ハナスゲ（知母）、ワレモコウ（地楡）、ドクダミ（十薬）、フユムシナツクサタケ（冬虫夏草）、トウガラシ、ホオズキ（登呂根）、タチジャコウソウ、リョクチャ（緑茶）、コウチャ（紅茶）、チョウジ（丁子）、ウンシュウミカン（陳皮）、ツバキ、ツボクサ、トウキンセンカ、ダイダイ（橙皮）、ワレモコウ（地楡）、トウモロコシ（南蛮毛）、トチュウ（杜仲、杜仲葉）、ナンテン（南天実）、ニンニク（大サン）、ハクセン（白蘚皮）、ジャノヒゲ（麦門冬）、パセリ、バタタ、ハッカ（薄荷）、ハマメリス、バラ、ビワ葉（枇杷葉）、マツホド（茯リョウ）、ブドウまたはその葉、ボダイジュ、ホップ、マイカイ（マイ瑰花）、松葉、マロニエ、マンネンロウ、ムクロジ、メリッサ、メリロート、ボケ（木瓜）、モヤシ、ヒオウギ（射干）、ビンロウジュ（檳ロウ子）、メハジキ（益母草）、ヤグルマギク、ユキノシタ（虎耳草）、ヤマモモ（楊梅皮）、ヤシャブシ（矢車）、モウコヨモギ、ヤマヨモギ、ラベンダー、リンゴ果実、マンネンタケ（霊芝）、レモン果実、レンギョウ（連翹）、レンゲソウ、ゲンノショウコ（老鸛草）、ハシリドコロ（ロート根）、などが挙げられる。
【００６４】
植物抽出物の添加量は、通常０．０００１〜１０質量％が好ましく、０．００１〜５質量％がより好ましく、０．０１〜１質量％がさらに好ましく、０．０５〜０．５質量％が特に好ましい。ここで、化粧品組成物に添加する植物抽出物の使用形態は任意である。例えば、溶液状や粉末状で使用してもよい。
【００６５】
（バイオサーファクタントを含有する化粧品組成物の利用方法）
バイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合することを特徴とする化粧品組成物の形態は特に制限されない。したがって、固体、液体、ペースト、ゼリー、粉末などのいずれの状態をとるものであってもよい。このような状態を形成するために、例えばゲル化剤を用いて固化したり、液体を用いて分散状態にしたりすることができる。また、溶媒を添加して溶液にしたり、噴霧乾燥して粉末状にしたりすることもできる。
【００６６】
本発明のバイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合することを特徴とする化粧品組成物は、優れた保湿効果と肌荒れ防止効果等を有しており、皮膚表面に適度な潤いを与え平滑性を保つこと、及びベシクル形成・液晶形性能が確認されている。すなわち、本発明のバイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合することを特徴とする化粧品組成物はポリフェノール等の難溶性物質のオリを防止した安定性の高い皮膚外用製剤などを提供することにある。したがって、本発明のバイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合することを特徴とする化粧品組成物は、肌荒れ改善、角質改善または肌の保護が必要とされる場合に極めて効果的に使用することができる。
【００６７】
例えば、本発明のバイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合することを特徴とする化粧品組成物は化粧品として使用することができる。例えば、化粧石鹸、シャンプー、洗顔料、リンス、アイクリーム、アイシャドウ、クリーム・乳液、化粧水、香水、おしろい、化粧油、頭髪用化粧品、染毛料、練香水、パウダー、パック、クレンジングクリーム、ひげそり用クリーム、びげそり用ローション、日焼けオイル、日焼け止めオイル、日焼けローション、日焼け止めローション、日焼けクリーム、日焼け止めクリーム、ファンデーション、粉末香水、ほお紅、マスカラ、眉墨、爪クリーム、美爪エナメル、美爪エナメル除去液、洗毛料、浴用化粧品、口紅、リップクリーム、アイライナー、歯磨き、デオドラント剤、オーデコロン、養毛剤および育毛剤などとして使用することができる。また、本発明のバイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合することを特徴とする化粧品組成物は、軟膏剤や湿布剤などとして使用することもできる。
【００６８】
本発明のバイオサーファクタントを可溶化剤として用いたフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合した化粧品組成物には、使用目的に応じて美白剤、抗老化剤、保湿剤、紫外線吸収剤、抗菌剤等のさまざまな成分をさらに添加させておくことができる。
【００６９】
（美白剤）
美白剤は、メラニン生成抑制剤および／またはチロシナーゼ活性阻害剤であってもよい。
【００７０】
例えば、美白剤として、Ｌ−アスコルビン酸及びその誘導体、ハイドロキノン及びその誘導体、ルシノール、エデト酸及びその誘導体、並びに胎盤抽出物、t-AMCHA、等が例示される。
【００７１】
これらの美白剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００７２】
（抗老化剤）
抗老化剤は、抗炎症剤および／または抗酸化剤であってもよい。
【００７３】
例えば、抗老化剤として抗炎症剤と抗酸化剤が用いられ、抗炎症剤としては、グリチルリチン酸及びその塩、グリチルレチン酸及びその塩、イソプロピルアミノカプロン酸及びその塩、アラントイン、塩化リゾチーム、グアイアズレン、サリチル酸メチル、γ−オリザノール、抗酸化剤としては、αカロチン、βカロチン、γカロチン、リコピン、クリプトキサンチン、ルテイン、ゼアキサンチン、イソゼアキサンチン、ロドキサンチン、カプサンチン、クロセチン等のカロチノイド；１，４−ジアザシクロオクタン、２，５−ジメチルフラン、２−メチルフラン、２，５−ジフェニルフラン、１，３−ジフェニルイソベンゾフラン、αトコフェロール、βトコフェロール、γトコフェロール、ｄトコフェロール、ヒスチジン、トリプトファン、メチオニン、アラニン又はそのアルキルエステル；ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、アスコルビン酸、タンニン酸、エピカテキン、エピカロカテキン、エピカテキンガレート、エピカロカテキンガレート等のタンニン類、ルチン等のフラボノイド、その他没食子酸プロピル、アスタキサンチン、カロチン、トコフエロール、アスコルビン酸、エデト酸四ナトリウム、エリソルビン酸、酢酸トコフェロール、酢酸レチノール、ジビチルヒドロキシトルエン、ステアリン酸アスコルビル、パルミチン酸アスコルビル、メチルシラノールジオレイルトコフェロール・無水ケイ酸混合物、ニコチン酸ベンジル、感光素４０１号、アスパラギン酸、アデノシン三リン酸2Na 、アミノ酪酸、カフェイン、クロレラエキス、葉酸、レチノール、パルミチン酸レチノール、イノシトール、ウコンエキス、オリザノール、カロチン、エルゴカルシフェロール、ジカプリル酸ピリドキシン、バチルアルコール、ステアリン酸グリチルレチニル、グリチルリチン酸、グリチルレチン酸、塩酸ジフェンヒドラミン、塩化リゾチーム、アミノカプロン酸、グリチルリチン酸2K、グリチルレチン酸ステアリル、サリチル酸メチル、酸化亜鉛、等が例示される。
【００７４】
これらの抗老化剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００７５】
（保湿剤）
保湿剤としては、親水性保湿剤および／または親油性保湿剤であればよく、親水性保湿剤として、アミノ酸，ペプチド，蛋白質，高級アルコール及びこれらの誘導体，親油性保湿剤として、リン脂質 ，糖 脂質 ，ステロイド類を用いてもよい。
【００７６】
保湿剤として、ピリドンカルボン酸ナトリウム、グリコール、グリセリン、グルコース、マルトース、マルチトール、ショ糖、フラクトース、キシリトール、ソルビトール、マルトトリオース、スレイトール、エリスリトール、デンプン分解糖還元アルコール、ソルビトール、多価アルコール類としては、エチレングリコール、１，４−ブチレングリコール、ジグリセリン、トリグリセリン、テトラグリセリン、１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ポリエチレングリコール、１，３−プロパンジオール、その他セリン、グリシン、スレオニン、アラニン、コラーゲン、加水分解コラーゲン、ヒドロネクチン、フィブロネクチン、ケラチン、エラスチン、ローヤルゼリー、コンドロイチン硫酸ヘパリン、グリセロリン脂質、グリセロ糖脂質、スフィンゴリン脂質、スフィンゴ糖脂質、リノール酸またはそのエステル類、エイコサペンタエン酸またはそのエステル類、ペクチン、ビフィズス菌発酵物、乳酸発酵物、酵母抽出物、レイシ菌糸体培養物またはその抽出物、ダイズリン脂質、γ−オリザノール、ピロリドンカルボン酸、ツバキ油、大豆リン脂質、ヒアルロン酸、トレオニン、グリコール酸アンモニウム、アルギン酸メチルシラノール、ヨクイニン、DNA−Na、PCA−Na、RNA-Na、アスパラギン酸、アラニン、アルギニン、アルギン酸Na、加水分解ケラチン、加水分解コラーゲン、加水分解コンキオリン、加水分解卵殻膜、加水分解卵白、加水分解シルク、加水分解ダイズタンパク、キシリトール、キトサン、グリシン、グリセリン、グルコース、コンドロイチン硫酸Na、魚コラ一ゲノ、グリセリン、シスチン、システイン、セリン、ソルビトール、ダイズタンパク、トマトエキス、乳酸Na、乳酸桿菌、尿素仰／ノバラエキス・アーモンド浬、コーン油、ハチミツ、ヒアルロン酸Na、ベタイン、ヘチマエキス、マルチトール、マルトース、マンニトール、ラクトフェリン、リシン、ローヤルゼリー、ラノリン脂肪酸ポリエチレングリコール1000、ラノリン脂肪酸イソプロピル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸イソブチル、ヘキシルデカノール、乳酸ミリスチル、ラノリン脂肪酸、トリカプリルグリセリル、オレイルアルコール、オレイン酸オクチルドデシル、オレイン酸デシル、還元ラノリン、オクチルドデカノール、アーモンド油、アボカド油、オリーブ油、オレイン酸、オレンジラフイー油、カカオ脂、カロットエキス、ゴマ油、サザンカ油、サフラワー油、ジヒドロコレステロール、スクワラン、ステアリン酸コレステリル、セラミド2、月見草油、ヒマシ油、ヒマワリ油、セフニド3、ヒマワリ種子油ハイブリッドヒマワリ油、フィトスフィンゴシン、ブドウ種子油、ホホバ油、ホホバ種子油、ミネラルオイル、ミンク油、マカデミアナッツ油、メドウフォーム油、ユーリ油、ユーカリ葉油、ラノリン、リノール酸、ローズヒップ油、ワセリン及びポリグルタミン酸等が例示される。
【００７７】
これらの保湿剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００７８】
（紫外線吸収剤）
紫外線吸収剤 としては、安息香酸系紫外線吸収剤、アントラニル酸系紫外線吸収剤 、サリチル酸系紫外線吸収剤 、ケイ皮酸系紫外線吸収剤 、トリアジン系紫外線吸収剤、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤などを使用しても良い。
【００７９】
例えば紫外線吸収剤 として、紫外線吸収剤が安息香酸アミル、パラアミノ安息香酸オクチル、サリチル酸エチレングリコール、サリチル酸フェニル、サリチル酸オクチル、サリチル酸ベンジル、サリチル酸ブチルフェニル、サリチル酸ホモメンチル、ケイ皮酸ベンジル、パラメトキシケイ皮酸２−エトキシエチル、パラメトキシケイ皮酸オクチル、ジパラメトキシケイ皮酸モノ２−エチルヘキサン酸グリセリル、パラメトキシケイ皮酸イソプロピル、ジイソプロピル・ジイソプロピルケイ皮酸エステル混合物、ウロカニン酸、ウロカニン酸エチル、ヒドロキシメトキシベンゾフェノン、ヒドロキシメトキシベンゾフェノンスルホン酸およびその塩、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノン、ジヒドロキシメトキシベンゾフェノンジスルフォン酸ナトリウム、ジヒドロキシベンゾフェノン、テトラヒドロキシベンゾフェノン、４−ｔｅｒｔ−ブチル−４’−メトキシ−ジベンゾイルメタン、２、４、６−トリアニリノ−ｐ−（カルボ−２’−エチルヘキシル−１’−オキシ）−１、３、５−トリアジン、2-(2-ヒドロキシ-5-メチルフェニル）ベンゾトリアゾール、パラジメチルアミノ安息香酸2-エチルヘキシル、パラアミノ安息香酸エチル、トプチルメトキシジペンゾイルメタン、オキシベンゾン-1、グアイアズレンスルホン酸エチル、酸化亜鉛、シノキサート、アントラニル酸系紫外線吸収剤 としては、例えば、ホモメンチル−Ｎ− アセチルアントラニレートなどが例示される。
【００８０】
これらの紫外線吸収剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００８１】
（抗菌剤）
抗菌剤が、有機系抗菌剤および／または無機系抗菌剤であってもよい。
【００８２】
例えば抗菌剤として、オウバク抽出液、ハロカルバン、クロロフェネシン、塩化リゾチーム、塩酸アルキルジアミノエチルグリシン、イソプロピルメチルフェノール、チモール、ヘキサクロロフェン、ベルベリン、チオキソロン、サリチル酸およびそれらの誘導体、安息香酸、安息香酸ナトリウム、パラオキシ安息香酸エステル、パラクロルメタクレゾール、塩化ベンザルコニウム、フェノキシエタノール、イソプロピルメチルフェノール、石炭酸、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、ヘキサクロロフェン、塩化クロルヘキシジン、トリクロロカルバニリド、感光素、ビス（２−ピリジルチオ−１−オキシド）亜鉛、チアントール、ヒノキチオール、トリクロサン、トリクロロヒドロキシジフェニルエーテル、クロルヘキシジングルコン酸塩、フェノキシエタノール、レゾルシン、アズレン、サリチル酸、ジンクピリチオン、モノニトログアヤコールナトリウム、ウイキョウエキス、サンショウエキス、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンゼトニウム及びウンデシレン酸誘導体などが例示される。
【００８３】
これらの抗菌剤は、１種を単独で、若しくは２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００８４】
本発明のバイオサーファクタントを可溶化剤として用いたフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合した化粧品組成物には、使用目的に応じてバイオサーファクタント、美白剤、抗老化剤、保湿剤、紫外線吸収剤、抗菌剤以外のさまざまな成分をさらに添加させておくことができる。
【００８５】
例えば、バイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合することを特徴とする化粧品組成物において、界面活性剤や低級アルコール、多価アルコール、あるいはオリーブ油、スクワラン、脂肪酸などの天然油脂とともに溶解して用いてもよい。
【００８６】
例えば、界面活性剤としては、アニオン界面活性剤（カルボン酸塩、スルホン酸塩、硫酸エステル塩、リン酸エステル塩）、カチオン界面活性剤（アミン塩、四級アンモニウム塩）、両性界面活性剤（カルボン酸型両性界面活性剤、硫酸エステル型両性界面活性剤、スルホン酸型両性界面活性剤、リン酸エステル型両性界面活性剤）、非イオン界面活性剤（エーテル型非イオン界面活性剤、エーテルエステル型非イオン界面活性剤、エステル型非イオン界面活性剤、ブロックポリマー型非イオン界面活性剤、含窒素型非イオン界面活性剤）、その他の界面活性剤（天然界面活性剤、タンパク質加水分解物の誘導体、高分子界面活性剤、チタン・ケイ素を含む界面活性剤、フッ化炭素系界面活性剤などが挙げられる。
【００８７】
非イオン界面活性剤としては、例えば、ソルビタン脂肪酸エステル類（例えば、ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノイソステアレート、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノパルミテート、ソルビタンモノステアレート、ソルビタンセスキオレエート、ソルビタントリオレエート、ペンタ−２−エチルヘキシル酸ジグリセロールソルビタン、テトラ−２−エチルヘキシル酸ジグリセロールソルビタン等）；グリセリンポリグリセリン脂肪酸類（例えば、モノ綿実油脂肪酸グリセリン、モノエルカ酸グリセリン、セスキオレイン酸グリセリン、モノステアリン酸グリセリン、α，α’−オレイン酸ピログルタミン酸グリセリン、モノステアリン酸グリセリンリンゴ酸等）；プロピレングリコール脂肪酸エステル類（例えば、モノステアリン酸プロピレングリコール等）；硬化ヒマシ油誘導体；グリセリンアルキルエーテル等が挙げられる。
【００８８】
ＰＯＥ系の親水性非イオン界面活性剤としては、例えば、ＰＯＥ−ソルビタン脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−ソルビタンモノオレエート、ＰＯＥ−ソルビタンモノステアレート、ＰＯＥ−ソルビタンモノオレエート、ＰＯＥ−ソルビタンテトラオレエート等）；ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−ソルビットモノラウレート、ＰＯＥ−ソルビットモノオレエート、ＰＯＥ−ソルビットペンタオレエート、ＰＯＥ−ソルビットモノステアレート等）；ＰＯＥ−グリセリン脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−グリセリンモノステアレート、ＰＯＥ−グリセリンモノイソステアレート、ＰＯＥ−グリセリントリイソステアレート等のＰＯＥ−モノオレエート等）；ＰＯＥ−脂肪酸エステル類（例えば、ＰＯＥ−ジステアレート、ＰＯＥ−モノジオレエート、ジステアリン酸エチレングリコール等）；ＰＯＥ−アルキルエーテル類（例えば、ＰＯＥ−ラウリルエーテル、ＰＯＥ−オレイルエーテル、ＰＯＥ−ステアリルエーテル、ＰＯＥ−ベヘニルエーテル、ＰＯＥ−２−オクチルドデシルエーテル、ＰＯＥ−コレスタノールエーテル等）；プルロニック型類（例えば、プルロニック等）；ＰＯＥ・ＰＯＰ−アルキルエーテル類（例えば、ＰＯＥ・ＰＯＰ−セチルエーテル、ＰＯＥ・ＰＯＰ−２−デシルテトラデシルエーテル、ＰＯＥ・ＰＯＰ−モノブチルエーテル、ＰＯＥ・ＰＯＰ−水添ラノリン、ＰＯＥ・ＰＯＰ−グリセリンエーテル等）；テトラＰＯＥ・テトラＰＯＰ−エチレンジアミン縮合物類（例えば、テトロニック等）；ＰＯＥ−ヒマシ油硬化ヒマシ油誘導体（例えば、ＰＯＥ−ヒマシ油、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油モノイソステアレート、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油トリイソステアレート、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油モノピログルタミン酸モノイソステアリン酸ジエステル、ＰＯＥ−硬化ヒマシ油マレイン酸等）；ＰＯＥ−ミツロウ・ラノリン誘導体（例えば、ＰＯＥ−ソルビットミツロウ等）；アルカノールアミド（例えば、ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド、ラウリン酸モノエタノールアミド、脂肪酸イソプロパノールアミド等）；ＰＯＥ−プロピレングリコール脂肪酸エステル；ＰＯＥ−アルキルアミン；ＰＯＥ−脂肪酸アミド；ショ糖脂肪酸エステル；アルキルエトキシジメチルアミンオキシド；トリオレイルリン酸等が挙げられる。
【００８９】
低級アルコールとしては、例えば、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、イソブチルアルコール、ｔ−ブチルアルコール等が挙げられる。
【００９０】
多価アルコールとしては、例えば、２価のアルコール（例えば、エチレングリコール、プロピレングリコール、トリメチレングリコール、１，２−ブチレングリコール、１，３−ブチレングリコール、テトラメチレングリコール、２，３−ブチレングリコール、ペンタメチレングリコール、２−ブテン−１，４−ジオール、ヘキシレングリコール、オクチレングリコール等）；３価のアルコール（例えば、グリセリン、トリメチロールプロパン等）；４価アルコール（例えば、１，２，６−ヘキサントリオール等のペンタエリスリトール等）；５価アルコール（例えば、キシリトール等）；６価アルコール（例えば、ソルビトール、マンニトール等）；多価アルコール重合体（例えば、ジエチレングリコール、ジプロピレングリコール、トリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、テトラエチレングリコール、ジグリセリン、ポリエチレングリコール、トリグリセリン、テトラグリセリン、ポリグリセリン等）；２価のアルコールアルキルエーテル類（例えば、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールモノブチルエーテル、エチレングリコールモノフェニルエーテル、エチレングリコールモノヘキシルエーテル、エチレングリコールモノ２−メチルヘキシルエーテル、エチレングリコールイソアミルエーテル、エチレングリコールベンジルエーテル、エチレングリコールイソプロピルエーテル、エチレングリコールジメチルエーテル、エチレングリコールジエチルエーテル、エチレングリコールジブチルエーテル等）；２価アルコールアルキルエーテル類（例えば、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジエチレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールジメチルエーテル、ジエチレングリコールジエチルエーテル、ジエチレングリコールブチルエーテル、ジエチレングリコールメチルエチルエーテル、トリエチレングリコールモノメチルエーテル、トリエチレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールモノメチルエーテル、プロピレングリコールモノエチルエーテル、プロピレングリコールモノブチルエーテル、プロピレングリコールイソプロピルエーテル、ジプロピレングリコールメチルエーテル、ジプロピレングリコールエチルエーテル、ジプロピレングリコールブチルエーテル等）；２価アルコールエーテルエステル（例えば、エチレングリコールモノメチルエーテルアセテート、エチレングリコールモノエチルエーテルアセテート、エチレングリコールモノブチルエーテルアセテート、エチレングリコールモノフェニルエーテルアセテート、エチレングリコールジアジベート、エチレングリコールジサクシネート、ジエチレングリコールモノエチルエーテルアセテート、ジエチレングリコールモノブチルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノメチルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノエチルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノプロピルエーテルアセテート、プロピレングリコールモノフェニルエーテルアセテート等）；グリセリンモノアルキルエーテル（例えば、キミルアルコール、セラキルアルコール、バチルアルコール等）；糖アルコール（例えば、ソルビトール、マルチトール、マルトトリオース、マンニトール、ショ糖、エリトリトール、グルコース、フルクトース、デンプン分解糖、マルトース、キシリトース、デンプン分解糖還元アルコール等）；グリソリッド；テトラハイドロフルフリルアルコール；ＰＯＥ−テトラハイドロフルフリルアルコール；ＰＯＰ−ブチルエーテル；ＰＯＰ・ＰＯＥ−ブチルエーテル；トリポリオキシプロピレングリセリンエーテル；ＰＯＰ−グリセリンエーテル；ＰＯＰ−グリセリンエーテルリン酸；ＰＯＰ・ＰＯＥ−ペンタンエリスリトールエーテル、ポリグリセリン等が挙げられる。  
【００９１】
油類としては、アボカド油、オリーブ油、ゴマ油、ツバキ油、月見草油、タートル油、マカデミアンナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、ナタネ油、卵黄油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、キリ油、ホホバ油、カカオ脂、ヤシ油、馬油、パーム油、パーム核油、牛脂、羊脂、豚脂、ラノリン、鯨ロウ、ミツロウ、カルナウバロウ、モクロウ、キャンデリラロウ、スクワラン等の動植物油およびその硬化油。流動パラフィン、ワセリン等の鉱物油、トリパルミチン酸グリセリン等の合成トリグリセリンがある。
【００９２】
高級脂肪酸としては、例えばラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、１２−ヒドロキシステアリン酸、イソステアリン酸、ウンデシン酸、トール酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸などがある。高級アルコールとしては、例えば、ラウリルアルコール、セチルアルコール、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、ミリスチルアルコール、オレイルアルコール、セトステアリルアルコール、ホホバアルコール、ラノリンアルコール、バチルアルコール、２−デシルテトラテセシノール、コレステロール、フィトステロール、イソステアリルアルコール等がある。合成エステルとしては、例えば、オクタン酸セチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、オレンイ酸デシル、ジメチルオクタン酸、乳酸セチル、乳酸ミリスチル等がある。シリコーンとしては、例えば、ジメチルポリシロキサン、メチルフェニルポリシロキサン等の鎖状ポリシロキサン、デカメチルシクロポリシロキサン等の環状ポリシロキサン、シリコーン樹脂等の三次元網目構造のもの等がある。
【００９３】
上述のように、本発明にバイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合することを特徴とする化粧品組成物は、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品に配合して実施することが好ましい。
【００９４】
本発明に係るバイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合することを特徴とする化粧品組成物を、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品の形態で実施する場合、剤形は限定されず、アンプル、カプセル、粉末、顆粒、丸剤、錠剤、固形剤、液剤、ゲル、気泡、乳液、クリーム、軟膏、シート、ムース、浴用剤など多様なものとすることができる。
【００９５】
具体的には、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品としては、例えば内用・外用薬用製剤、化粧水、乳液、クリーム、軟膏、ローション、オイル、パックなどの基礎化粧料、洗顔料や皮膚洗浄料、シャンプー、リンス、ヘアートリートメント、ヘアクリーム、ポマード、ヘアスプレー、整髪料、パーマ剤、ヘアートニック、染毛料、育毛・養毛料などの頭髪化粧料、ファンデーション、白粉、おしろい、口紅、頬紅、アイシャドウ、アイライナー、マスカラ、眉墨、まつ毛などのメークアップ化粧料、美爪料などの仕上げ用化粧料、香水類、浴用剤、その他、歯磨き類、口中清涼剤・含嗽剤、液臭・防臭防止剤、衛生用品、衛生綿類、ウエットティシュなどが挙げられる。より具体的には、化粧石鹸、シャンプー、洗顔料、リンス、アイクリーム、アイシャドウ、クリーム・乳液、化粧水、香水、おしろい、化粧油、頭髪用化粧品、染毛料、練香水、パウダー、パック、クレンジングクリーム、ひげそり用クリーム、髭そり用ローション、日焼けオイル、日焼け止めオイル、日焼けローション、日焼け止めローション、日焼けクリーム、日焼け止めクリーム、ファンデーション、粉末香水、ほお紅、マスカラ、眉墨、爪クリーム、美爪エナメル、美爪エナメル除去液、洗毛料、浴用化粧品、口紅、リップクリーム、アイライナー、歯磨き、デオドラント剤、オーデコロン、養毛剤および育毛剤などとして使用することができる。また、本発明のバイオサーファクタントを含有する化粧品組成物は、軟膏剤や湿布剤などとして使用することもできる。
【００９６】
本発明に係るバイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合することを特徴とする化粧品組成物はヒトに対して好適に適用されるものであるが、それぞれの作用効果が期待できる限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。
【００９７】
本発明に係るバイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合することを特徴とする化粧品組成物は、必要に応じて本発明の効果を損なわない範囲内で、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品に使用される成分や添加剤を併用して配合することができる。
【００９８】
例えば、ロウ類としては、ミツロウ、カルナバロウ、鯨ロウ、ラノリン、液状ラノリン、還元ラノリン、硬質ラノリン、カンデリラロウ、モンタンロウ、セラックロウなどが挙げられる。
【００９９】
例えば、鉱物油としては、流動パラフィン、ワセリン、パラフィン、オゾケライド、セレシン、マイクロクリスタンワックス、ポリエチレン末、スクワレン、スクワラン、プリスタンなどが挙げられる。
【０１００】
例えば、脂肪酸類としては、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘン酸、オレイン酸、１２-ヒドロキシステアリン酸、ウンデシレン酸、トール油、
ラノリン脂肪酸などの天然脂肪酸、イソノナン酸、カプロン酸、２−エチルブタン酸、イソペンタン酸、２−メチルペンタン酸、２−エチルヘキサン酸、イソペンタン酸などの合成脂肪酸が挙げられる。
【０１０１】
例えば、アルコール類としては、エタノール、イソピロパノール、ラウリルアルコール、セタノール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、ラノリンアルコール、コレステロール、フィトステロールなどの天然アルコール、２−ヘキシルデカノール、イソステアリルアルコール、２−オクチルドデカノールなどの合成アルコール、酸化エチレン、エチレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、エチレングリコールモノエチルエーテル、エチレングリコールモノブチルエーテル、ジエチレングリコールモノメチルエーテル、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ポリエチレングリコール、酸化プロピレン、プロピレングリコール、ポリプロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、グリセリン、バチルアルコール、ペンタエリトリトール、ソルビトール、マンニトール、ブドウ糖、ショ糖などの多価アルコール類などが挙げられる。
【０１０２】
例えば、エステル類としては、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、ミリスチン酸ミリスチル、オレイン酸オレイル、オレイン酸デシル、ミリスチン酸オクチルドデシル、ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル、乳酸セチル、乳酸ミリスチル、フタル酸ジエチル、フタル酸ジブチル、酢酸ラノリン、モノステアリン酸エチレングリコール、モノステアリン酸プロピレングリコール、ジオレイン酸プロピレングリコールなどが挙げられる。
【０１０３】
例えば、金属セッケンとしては、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸亜鉛、ステアリン酸カルシウム、パルミチン酸亜鉛、ミリスチン酸マグネシウム、ラウリン酸亜鉛、ウンデシレン酸亜鉛などが挙げられる。
【０１０４】
例えば、ガム質および水溶性高分子化合物としては、アラビアゴム、ベンゾインゴム、ダンマルゴム、グアヤク脂、アイルランド苔、カラヤゴム、トラガントゴム、キャロブゴム、クインシード、寒天、カゼイン、デキストリン、ゼラチン、ペクチン、デンプン、カラギーナン、カルボキシアルキルキチン、キトサン、ヒドロキシアルキルキチン、低分子キトサン、キトサン塩、硫酸化キチン、リン酸化キチン、アルギン酸およびその塩、ヒアルロン酸およびその塩、コンドロイチン硫酸、ヘパリン、エチルセルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、カルボキシエチルセルロースナトリウム、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ニトロセルロース、結晶セルロース、ポリビニルアルコール、ポリビニルメチルエーテル、ポリビニルピロリドン、ポリビニルメタアクリレート、ポリアクリル酸塩、ポリエチレンオキサイドやポリプロピレンオキサイド等のポリアルキレンオキサイドまたはその架橋重合物、カルボキシビニルポリマー、ポリエチレンイミンなどが挙げられる。
【０１０５】
例えば、ビタミン類としては、ビタミンＡ群ではレチノール、レチナール（ビタミンＡ1）、デヒドロレチナール（ビタミンＡ2）、カロチン、リコピン（プロビタミンＡ）、ビタミンＢ群では、チアミン塩酸塩、チアミン硫酸塩（ビタミンＢ1）、リボフラビン（ビタミンＢ2）、ピリドキシン（ビタミンＢ6）、シアノコバラミン（ビタミンＢ12）、葉酸類、ニコチン酸類、パントテン酸類、ビオチン類、コリン、イノシトール類、ビタミンＣ群では、アスコルビン酸およびその誘導体、ビタミンＤ群では、エルゴカルシフェロール（ビタミンＤ2）、コレカルシフェロール（ビタミンＤ3）、ジヒドロタキステロール、ビタミンＥ群では、トコフェロールおよびその誘導体、ユビキノン類、ビタミンＫ群では、フィトナジオン（ビタミンＫ1）、メナキノン（ビタミンＫ2）、メナジオン（ビタミンＫ3）、メナジオール（ビタミンＫ4）などが挙げられる。
【０１０６】
例えば、アミノ酸としては、バリン、ロイシン、イソロイシン、トレオニン、メチオニン、フェニルアラニン、トリプトファン、リジン、グリシン、アラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、システイン、シスチン、チロシン、プロリン、ヒドロキシプロリン、アスパラギン酸、グルタミン酸、ヒドロキシリジン、アルギニン、オルニチン、ヒスチジンなどや、それらの硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、クエン酸塩、あるいはピロリドンカルボン酸の如きアミノ酸誘導体などが挙げられる。
【０１０７】
例えば、微生物培養代謝物としては、酵母エキス、亜鉛含有酵母エキス、ゲルマニウム含有酵母エキス、セレン含有酵母エキス、マグネシウム含有酵母エキス、米醗酵エキス、ユーグレナ抽出物、脱脂粉乳の乳酸発酵物などが挙げられる。
【０１０８】
例えば、α−ヒドロキシ酸としては、グリコール酸、クエン酸、リンゴ酸、酒石酸、乳酸などが挙げられる。
【０１０９】
例えば、無機顔料としては、無水ケイ酸、ケイ酸マグネシウム、タルク、カオリン、ベントナイト、マイカ、雲母チタン、オキシ塩化ビスマス、酸化ジルコニウム、酸化マグネシウム、酸化亜鉛、酸化チタン、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、黄酸化鉄、ベンガラ、黒酸化鉄、グンジョウ、酸化クロム、水酸化クロム、カーボンブラック、カラミンなどが挙げられる。
【０１１０】
例えば、収斂剤としては、乳酸、酒石酸、コハク酸、クエン酸、アラントイン、塩化亜鉛、硫酸亜鉛、酸化亜鉛、カラミン、ｐ−フェノールスルホン酸亜鉛、硫酸アルミニウムカリウム、レソルシン、塩化第二鉄、タンニン酸などが挙げられる。
【０１１１】
例えば、殺菌・消毒薬としては、アクリノール、イオウ、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化メチルロザニリン、クレゾール、グルコン酸カルシウム、グルコン酸クロルヘキシジン、スルファミン、マーキュロクロム、ラクトフェリンまたはその加水分解物などが挙げられる。
【０１１２】
例えば、頭髪用剤としては、二硫化セレン、臭化アルキルイソキノリニウム液、ジンクピリチオン、ビフェナミン、チアントール、カスタリチンキ、ショウキョウチンキ、トウガラシチンキ、塩酸キニーネ、強アンモニア水、臭素酸カリウム、臭素酸ナトリウム、チオグリコール酸などが挙げられる。
【０１１３】
例えば、香料としては、ジャコウ、シベット、カストリウム、アンバーグリスなどの天然動物性香料、アニス精油、アンゲリカ精油、イラン精油、イリス精油、ウイキョウ精油、オレンジ精油、カナンガ精油、カラウェー精油、カルダモン精油、グアヤクウッド精油、クミン精油、黒文字精油、ケイ皮精油、シンナモン精油、ゲラニウム精油、コパイババルサム精油、コリアンデル精油、シソ精油、シダーウッド精油、シトロネラ精油、ジャスミン精油、ジンジャーグラス精油、杉精油、スペアミント精油、西洋ハッカ精油、大茴香精油、チュベローズ精油、丁字精油、橙花精油、冬緑精油、トルーバルサム精油、バチュリー精油、バラ精油、パルマローザ精油、檜精油、ヒバ精油、白檀精油、プチグレン精油、ベイ精油、ベチバ精油、ベルガモット精油、ペルーバルサム精油、ボアドローズ精油、芳樟精油、マンダリン精油、ユーカリ精油、ライム精油、ラベンダー精油、リナロエ精油、レモングラス精油、レモン精油、ローズマリー精油、和種ハッカ精油などの植物性香料、その他合成香料などが挙げられる。
【０１１４】
例えば、色素・着色剤としては、赤キャベツ色素、赤米色素、アカネ色素、アナトー色素、イカスミ色素、ウコン色素、エンジュ色素、オキアミ色素、柿色素、カラメル、金、銀、クチナシ色素、コーン色素、タマネギ色素、タマリンド色素、スピルリナ色素、ソバ全草色素、チェリー色素、海苔色素、ハイビスカス色素、ブドウ果汁色素、マリーゴールド色素、紫イモ色素、紫ヤマイモ色素、ラック色素、ルチンなどが挙げられる。
【０１１５】
例えば、甘味料としては、砂糖、甘茶、果糖、アラビノース、ガラクトース、キシロース、マンノース、麦芽糖、蜂蜜、ブドウ糖、ミラクリン、モネリンなどが挙げられる。
【０１１６】
例えば、栄養強化剤としては、貝殻焼成カルシウム、シアノコラバミン、酵母、小麦胚芽、大豆胚芽、卵黄粉末、ヘミセルロース、ヘム鉄などが挙げられる。
【０１１７】
その他、ホルモン類、金属イオン封鎖剤、ｐＨ調整剤、キレート剤、防腐・防バイ剤、清涼剤、安定化剤、乳化剤、動・植物性蛋白質およびその分解物、動・植物性多糖類およびその分解物、動・植物性糖蛋白質およびその分解物、血流促進剤、消炎剤・抗アレルギー剤、細胞賦活剤、角質溶解剤、創傷治療剤、増泡剤、増粘剤、口腔用剤、消臭・脱臭剤、苦味料、調味料、酵素などが挙げられる。
【０１１８】
本発明のバイオサーファクタントを可溶化剤として用いたフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合した化粧品組成物は、保湿効果、コラーゲン生成促進効果、細胞賦活効果、抗老化効果、育毛効果及び肌荒れ改善効果などが必要とされる場合に広く使用することができる。使用量は、所期の保湿効果、コラーゲン生成促進効果、細胞賦活効果、抗老化効果、育毛効果及び肌荒れ改善効果などを十分に奏する範囲内で決定する。
【実施例】
【０１１９】
以下の実施例により、本発明を更に詳細に説明するが、本発明は、これらに何ら限定されるものではない。
【０１２０】
実施例１  ＭＥＬ−ＡおよびトリアシルＭＥＬ−Ａの製造
種菌培養はP.antarcticaNBRC 10736を種培地(20ml/500ml坂口フラスコ×４本)に植菌して実施した。30℃にて一晩培養した。得られた培養液を種菌とした。種培地組成は4% Glucose、0.3% NaNO3、0.02% MgSO4・７H2O、0.02% KH2PO4、0.1% yeast extractであった。培養は上記種菌75mlを生産培地1.5L（5L-jar）に植菌し、30℃、300rpm（攪拌回転）、0.5L/min（Air）の条件で5L-jarを用いて培養した。生産培地組成は、3% ダイズ油、0.02% MgSO4・７H2O、0.02% KH2PO4、0.1% yeast extractであった。培養液250mlを遠心（6500rpm、30min）し、上清を取り除き、沈殿（菌体）を回収した。沈殿に、50mlの酢酸エチルを加え、十分攪拌後、遠心(8500rpm、30min)し、沈殿と上清に分け、上清をエバポーレーターで濃縮した。シリカゲルを用いて、ヘキサン：アセトン＝５：１、ヘキサン：アセトン＝１：２で溶出しＭＥＬ−ＡおよびトリアシルＭＥＬ−Ａ画分を得た。
【０１２１】
実施例２  ＭＥＬ−ＢおよびトリアシルＭＥＬ−Ｂの製造
0.2mlのP.tsukubaensis  NBRC1940を20mlの種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種菌とした。種培地組成は4% Glucose、0.3% NaNO3、0.02% MgSO4・7H2O、0.02% KH2PO4、0.1% yeast extract であった。20mlの種菌を2Lの生産培地/5L Jarに植菌し、26℃  300rpm（１／４VVM、0.5L air /min）で８日間培養した。培養液を7,900rpm 60min 4℃で遠心し、菌体（ＭＥＬ-Bを含む）と上清に分離した。菌体画分にそれぞれ80mlの酢酸エチルを加え、菌体が十分懸濁するように上下に攪拌した後、7,900rpm  30min  4℃で遠心した。得られた上清に等量の飽和食塩水を加え攪拌し酢酸エチル層を得た。酢酸エチル層に無水硫酸Naを適量加え、３０分間精置させた後、エバポレートしＭＥＬ-B粗精製品を得た。得られたＭＥＬ-B粗精製品はシリカゲルカラムを用いて、ヘキサン：アセトンで溶出しＭＥＬ−ＢおよびトリアシルＭＥＬ−Ｂ画分精製品を得た。
【０１２２】
実施例３  ＭＥＬ−ＣおよびトリアシルＭＥＬ−Ｃの製造
0.2mlのP.hubeiensisフローズンストックを20mlの種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種菌とした。種培地組成は4% Glucose、0.3% NaNO3、0.02% MgSO4・7H2O、0.02% KH2PO4、0.1% yeast extract であった。20mlの種菌を2Lの生産培地/5L Jarに植菌し、26℃  300rpm（１／４VVM、0.5L air /min）で８日間培養した。培養液を7,900rpm 60min 4℃で遠心し、菌体（ＭＥＬ-Cを含む）と上清に分離した。菌体画分にそれぞれ80mlの酢酸エチルを加え、菌体が十分懸濁するように上下に攪拌した後、7,900rpm  30min  4℃で遠心した。得られた上清に等量の飽和食塩水を加え攪拌し酢酸エチル層を得た。酢酸エチル層に無水硫酸Naを適量加え、３０分間精置させた後、エバポレートしＭＥＬ-B粗精製品を得た。得られたＭＥＬ-C粗精製品はシリカゲルカラムを用いて、ヘキサン：アセトンで溶出しＭＥＬ−ＣおよびトリアシルＭＥＬ−Ｃ画分精製品を得た。
【０１２３】
実施例４
実施例１におけるＭＥＬの製造では、生産原料にダイズ油を用いたが、その代わりにオリーブ油を用いて実施例１と同様の方法で培養しＭＥＬ-A、ＭＥＬ-B、ＭＥＬ-Cを単離精製する。この時得られるＭＥＬ画分を、実施例１のＭＥＬと区別するためＭＥＬ-A(OL)、ＭＥＬ-B(OL)、ＭＥＬ-C(OL)と呼ぶ。
【０１２４】
実施例５  マンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）の製造
シュードザイマ・パラアンタクティカ（Pseudozymaparantarctica）JCM 11752株の培養を行った。すなわち、保存培地（麦芽エキス３ｇ／Ｌ、酵母エキス３ｇ／Ｌ、ペプトン５ｇ／Ｌグルコース１０ｇ／Ｌ、寒天３０ｇ／Ｌ）に保存しておいたシュードザイマ・パラアンタクティカ（Pseudozyma parantarctica）JCM 11752株を、グルコース２０ｇ／Ｌ、酵母エキス１ｇ／Ｌ、硝酸ナトリウム３ｇ／Ｌ、リン酸２水素カリウム０．３ｇ／Ｌ、及び硫酸マグネシウム０．３ｇ／Ｌの組成の液体培地２ｍＬが入った試験管に１白金耳接種し、３０℃で１日間振とう培養を行った。続いて、得られた菌体培養液を、植物油脂としてオリーブ油５０ｇ／Ｌ、糖アルコールとしてマンニトール１００ｇ／Ｌ、酵母エキス１ｇ／Ｌ、硝酸ナトリウム３ｇ／Ｌ、リン酸２水素カリウム０．３ｇ／Ｌ、及び硫酸マグネシウム０．３ｇ／Ｌの組成の液体培地３０ｍＬの入った坂口フラスコに接種して、３４℃で７日間培養を行った。上記の培養液を採取し、培養液中のマンノシルアルジトールリピッドを酢酸エチルで抽出し、シリカゲルクロマトで精製後、13C NMR と1H NMRで生産物の構造解析を行った
【０１２５】
実施例６  マンノシルアラビトールリピッド（ＭＡｒａＬ）の製造
実施例５の培養を糖アルコールとしてアラビトール１００ｇ／Ｌを含む培地で行う以外は、実施例５と同様に培養しＭＡｒａＬを製造した。
【０１２６】
実施例７  マンノシルソルビトールリピッド（ＭＳＬ）の製造
実施例５の培養を糖アルコールとしてソルビトール１００ｇ／Ｌを含む培地で行う以外は、実施例５と同様に培養しＭＳＬを製造した。
【０１２７】
実施例８  マンノシルリビトールリピッド（ＭＲＬ）の製造
実施例５の培養を糖アルコールとしてリビトール１００ｇ／Ｌを含む培地で行う以外は、実施例５と同様に培養しＭＲＬを製造した。
【０１２８】
実施例９  ダイズ胚芽抽出物の調製
１００ｇのダイズ胚芽（フォーユー社製）に希釈内部標準液（１，７−ｄｉａｍｉｎｏｈｅｐｔａｎｅ、内部標準量＝１２００ｎｍｏｌ）、５００ｍｌの５％過塩素酸水溶液を加えて室温下で１時間放置した。その後、ポリフェノール吸着剤であるポリクラールＶＴ（ＩＳＰ社製）を１６ｇ添加し、ブレンダーミキサーでダイズ胚芽を十分に破砕後、室温下で３０分間放置して酸性条件下で抽出した。破砕物を２℃・２２，０００×ｇで２０分間遠心分離して液体画分を採取し、３０％の水酸化ナトリウム溶液で中和して本液を植物抽出物（ダイズ胚芽抽出物）とした。植物抽出物中にはポリアミンとしてプトレシンが２３．５ｍｇ、スペルミジンが２４．０ｍｇ、スペルミンが９．６ｍｇ含まれており、合計で５７．１ｍｇであった。さらに回収した植物抽出物を陽イオン交換樹脂（AG 50W-X4, 200-400mesh, H＋型, バイオラッド社製）で充填したカラムに通し、ポリアミンを樹脂に吸着させた。０．７Ｎ ＮａＣｌ／０．１Ｍリン酸ナトリウム溶液（ｐＨ８．０）、水、１Ｎ塩酸を順次流してカラムを洗浄した。不純物を除去した後に、６Ｎ塩酸でポリアミンを溶出して３０％の水酸化ナトリウムで中和して本液を精製植物抽出物（精製ダイズ胚芽抽出物）とした。精製植物抽出物中にはポリアミンとしてプトレシンが２０．４ｍｇ、スペルミジンが２２．３ｍｇ、スペルミンが７．７ｍｇ含まれており、合計で５０．４ｍｇであった。植物抽出物（ダイズ胚芽抽出物）と精製植物抽出物（精製ダイズ胚芽抽出物）は電気透析装置（アシライザー, アストム社製）により脱塩を行い、凍結乾燥により濃縮して種々の評価に用いた。
【０１２９】
１ｋｇのダイズ胚芽（フォーユー社製）に希釈内部標準液（１，７−ｄｉａｍｉｎｏｈｅｐｔａｎｅ、内部標準量＝１０μｍｏｌ）、５Ｌの１Ｎ塩酸溶液を加えて室温下で１時間放置した。その後、ポリフェノール吸着剤であるポリクラールＶＴ（ＩＳＰ社製）を８０ｇ添加し、ホモジナイザーでダイズ胚芽を十分に破砕後、室温下で１時間放置して酸性条件下で抽出した。破砕物を２℃・２２，０００×ｇで３０分間遠心分離して液体画分を採取し、３０％の水酸化ナトリウム溶液で中和して本液を植物抽出物（ダイズ胚芽抽出物）とした。植物抽出物中にはポリアミンとしてプトレシンが２３５．１ｍｇ、スペルミジンが２４１．８ｍｇ、スペルミンが８０．１ｍｇ含まれており、合計で５５７．０ｍｇであった。プトレシン（検出時間：10.925分）、スペルミジン（検出時間：15.898分）、スペルミン（検出時間：20.025分）のシャープな単一ピークが検出された。13.002分の単一ピークは希釈内部標準液（１，７−ｄｉａｍｉｎｏｈｅｐｔａｎｅ）である。各ポリアミンのシャープな単一ピークが植物抽出物で検出され、ポリアミンが主成分であることが確認された。植物抽出物が高純度である理由は、胚芽（胚）部分のみを用いることで種子タンパク質等の混入が低いことと、ポリフェノール吸着剤を添加し、酸条件下で抽出することで種子タンパク質などの不純物を変性及び吸着除去していることが大きく影響している。植物抽出物（ダイズ胚芽抽出物）は電気透析装置（アシライザー, アストム社製）により脱塩を行い、凍結乾燥により濃縮して種々の評価に用いた。
【０１３０】
実施例１０  コムギ胚芽抽出物の調製
１００ｇのコムギ胚芽（培焼・ローストタイプ，日清ファルマ社製）に希釈内部標準液（１，７−ｄｉａｍｉｎｏｈｅｐｔａｎｅ、内部標準量＝１２００ｎｍｏｌ）、５００ｍｌの５％過塩素酸水溶液を加えて室温下で１時間放置した。その後、ポリフェノール吸着剤であるポリクラールＶＴ（ＩＳＰ社製）を１６ｇ添加し、ブレンダーミキサーでダイズ胚芽を十分に破砕後、室温下で３０分間放置して酸性条件下で抽出した。破砕物を２℃・２２，０００×ｇで２０分間遠心分離して液体画分を採取し、３０％の水酸化ナトリウム溶液で中和して本液を植物抽出物（コムギ胚芽抽出物）とした。植物抽出物中にはポリアミンとしてプトレシンが６．４ｍｇ、スペルミジンが２３．９ｍｇ、スペルミンが１４．３ｍｇ含まれており、合計で４４．６ｍｇであった。さらに回収した植物抽出物を陽イオン交換樹脂（AG 50W-X4, 200-400mesh, H＋型, バイオラッド社製）で充填したカラムに通し、ポリアミンを樹脂に吸着させた。０．７Ｎ ＮａＣｌ／０．１Ｍリン酸ナトリウム溶液（ｐＨ８．０）、水、１Ｎ塩酸を順次流してカラムを洗浄した。不純物を除去した後に、６Ｎ塩酸でポリアミンを溶出して３０％の水酸化ナトリウムで中和して本液を精製植物抽出物（精製コムギ胚芽抽出物）とした。精製植物抽出物中にはポリアミンとしてプトレシンが５．７ｍｇ、スペルミジンが２１．５ｍｇ、スペルミンが１２．９ｍｇ含まれており、合計で４０．１ｍｇであった。植物抽出物（コムギ胚芽抽出物）と精製植物抽出物（精製コムギ胚芽抽出物）は電気透析装置（アシライザー, アストム社製）により脱塩を行い、凍結乾燥により濃縮して種々の評価に用いた。
【０１３１】
１ｋｇのコムギ胚芽（培焼・ローストタイプ，日清ファルマ社製）に希釈内部標準液（１，７−ｄｉａｍｉｎｏｈｅｐｔａｎｅ、内部標準量＝１０μｍｏｌ）、５Ｌの１Ｎ塩酸溶液を加えて室温下で１時間放置した。その後、ポリフェノール吸着剤であるポリクラールＶＴ（ＩＳＰ社製）を８０ｇ添加し、ホモジナイザーでコムギ胚芽を十分に破砕後、室温下で１時間放置して酸性条件下で抽出した。破砕物を２℃・２２，０００×ｇで３０分間遠心分離して液体画分を採取し、３０％の水酸化ナトリウム溶液で中和して本液を植物抽出物（コムギ胚芽抽出物）とした。植物抽出物中にはポリアミンとしてプトレシンが７５．１ｍｇ、スペルミジンが２９４．０ｍｇ、スペルミンが１１９．４ｍｇ含まれており、合計で４８８．５ｍｇであった。プトレシン（検出時間：10.110分）、スペルミジン（検出時間：15.892分）、スペルミン（検出時間：20.019分）のシャープな単一ピークがそれぞれ検出された。12.994分の単一ピークは希釈内部標準液（１，７−ｄｉａｍｉｎｏｈｅｐｔａｎｅ）である。各ポリアミンのシャープな単一ピークが植物抽出物で検出され、ポリアミンが主成分であることが確認された。植物抽出物が高純度である理由は、胚芽（胚）部分を用いることで種子タンパク質等の混入が低いことと、ポリフェノール吸着剤を添加し、酸条件下で抽出することでタンパク質などの不純物を変性又は吸着除去していることが大きく影響している。植物抽出物（コムギ胚芽抽出物）は電気透析装置（アシライザー, アストム社製）により脱塩を行い、凍結乾燥により濃縮して種々の評価に用いた。
【０１３２】
実施例１１  コスモス抽出物の調製
キバナコスモス花７８．２ｇを細かく裁断し、２昼夜凍結乾燥した。これをミキサーで粉砕し、粉末とした後、ジクロロメタンーメタノール（１：１）の溶液１Lを加え、室温で１時間、撹拌抽出した。その後、吸引ろ過により溶媒を留去し、共存する油脂とステロール類を除くためにヘキサン沈殿を行った。溶媒を減圧下濃縮し、1.63ｇの抽出物を得た。
【０１３３】
実施例１２  モミジガサ抽出物の調製
モミジガサの葉２Kgを凍結乾燥し、ミキサーで撹拌して粉末２１２ｇを得た。この粉末にエタノール４Lを加え１２時間撹拌し、濾過して不溶物を除去後、濃縮し緑色の一次抽出物１６ｇを得た。この一次抽出物に６０％エタノール５００ｍｌを添加し、超音波処理１５分後、冷蔵庫で一晩静置した。７０００ｒｐｍで１５分間遠心分離し、沈殿物を分離した後の上清を濃縮し乾固物８ｇを得た。上清および沈殿物中のカカロール含量とクロロフィル含量を測定したところ、上清中にはカカロール１１３２ｍｇ、クロロフィル３ｍｇ、沈殿物中にはカカロール２９４ｍｇ、クロロフィル７１８ｍｇとなり、上清乾固物を回収することでクロロフィル含量を低めたカカロール抽出物を得ることができることが分かった。ついで、得られた６０％エタノール抽出上清の乾固物に２０％エタノール５００ｍｌを添加し、超音波処理後、冷蔵庫で一晩静置した。７０００ｒｐｍで１５分間遠心分離し、沈殿物１．５ｇを得た。上清および沈殿物中のカカロール含量とクロロフィル含量を測定したところ、上清中にはカカロール６７ｍｇ、クロロフィル０．１ｍｇ、沈殿物中にはカカロール７２８ｍｇ、クロロフィル３ｍｇとなり、極性物質を除去したカカロール抽出物を得ることができた。
抽出物中のカカロールの濃度は、以下に示す条件でHPLC分析により実施した。カラム：XterraMSC18、流速：1ml/min、溶媒：５％アセトニトリル２０ｍMリン酸（A）から９５％アセトニトリル２０ｍMリン酸（B）へのグラジエント、検出：ダイオードアレイデテクター200-700nm、カラム温度：室温、インジェクション量：２０μｌ。クロロフィルの濃度は、抽出物をアセトンに溶解し、660nmと642.5nmの吸光度を測定することにより、全クロロフィル量(mg/l)＝7.12D660＋D642.5に従ってクロロフィル量をもとめた。
【０１３４】
実施例１３  西洋わさび（葉及び根茎）抽出物の調製
西洋わさび葉及び根茎それぞれ１００ｇずつを細かく裁断し、エタノール１０００ｍｌを加えて室温下、２４時間抽出し抽出液を濾別した。残渣はさらにエタノール２００ｍｌを加えて、同様に再抽出した。抽出液を集めて減圧濃縮し、溶媒を留去した後、水20ｍｌおよび酢酸エチル80ｍｌを加え、これを分液ロートに移して激しく振とうした後静置して２層に分離し、上層の酢酸エチル層を集めた。これを無水硫酸ナトリウムで乾燥した後減圧濃縮し、西洋わさび葉抽出物１．３６７ｇ及び根茎抽出物0.2ｇを得た。
【０１３５】
実施例１４  配合試験及び性能試験
表１、２、３、４に示す原料と配合割合でそれぞれ実施例１〜８で得られたバイオサーファクタントを用いて実施例９〜１３で得られたフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合した安定性に優れた化粧品組成物を試作した。
【０１３６】
また、表５に比較例として、バイオサーファクタント未添加の化粧品組成物を試作した場合を示す。表１、２，３、４、５における配合は質量％で表され、「−」は無配合を意味する。
【０１３７】
【表１】
2010018559.tif 000007
【０１３８】
【表２】
2010018559.tif 000008
【０１３９】
【表３】
2010018559.tif 000009
【０１４０】
【表４】
2010018559.tif 000010
【０１４１】
【表５】
2010018559.tif 000011
【０１４２】
具体的な製造方法は、実施例、比較例とも、まずＡ相の各原料とＢ相の各原料とを別個にそれぞれ混合し、Ａ相を７０℃に加温して溶解混合し、Ｂ相の溶液を加えて５０℃に加温したものをホモミキサーで乳化して化粧品組成物を作製した。
【０１４３】
＜肌へのなじみ良さ感＞
パネル（評価者）５名に使用させ、使用感を以下のように点数をつけ、総和を評価点として求めた。それを基に以下の基準で判定した。
《点数》
２点：塗布時はさっぱりとしており、塗布後はなじみ感がある。
１点：塗布時にべたつきがあり、塗布後はなじみ感がある。
０点：塗布時、塗擦後ともにべたつき感がある。
《判定基準》
◎：総和１０〜９点 …大変良い
○：総和８〜７点 …良い
△：総和６〜５点 …良い
×：総和４点以下 …悪い
＜経時安定性＞
経時安定性経時安定性は、５０℃で１ヶ月間保存した状態のものについて、目視で判断し、以下の基準で判断した。
◎：外観上、変化がなかったもの
○：外観上多少の変化はあるが、離油、離水、沈殿物などが生じなかったもの
△：外観上多少の変化があり、離油、離水、沈殿物などが生じたもの 
×：外観上著しい変化があり、離油、離水、沈殿物などが生じたもの
【０１４４】
（経時安定性試験結果）
保存試験終了後２０℃に戻した状態で、ＭＥＬを添加した配合例１〜２５は振とう後一様に分散し、５０℃保存で品質の低下はないことが確認された。又、比較例１〜６は一部オリの析出も認められた。これより、本発明の皮膚外用剤は安定に植物抽出物を配合できることが明確になった。
【０１４５】
（使用感試験結果）
ＭＥＬを添加した配合例１〜２５と比較例１〜６の使用性を比較した結果、ＭＥＬ添加により肌へのなじみが良くなることが明確になった。
【０１４６】
表１、２、３，４に示すいずれの配合割合においても、本発明のバイオサーファクタントとフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合することを特徴とする化粧品組成物は、所期の肌へのなじみやすさに加えて、オリを防止し植物抽出物を含む化粧水の安定性を高める効果が確認された。
【産業上の利用可能性】
【０１４７】
本発明のバイオサーファクタントを用いてフラボノイドあるいは非フラボノイド系の二次代謝物を含有する植物抽出物を配合した安定性に優れた化粧品組成物を提供することができる。さらに、当該化粧品組成物を含む化粧品組成物、医薬部外品組成物 、医療用品組成物、衛生用品組成物、医薬品組成物や、当該組成物を含む化粧品、医薬部外品 、医療用品、衛生用品、医薬品を提供することである。