(57)【要約】【課題】顕微鏡の照明の汎用性を向上させる。【解決手段】落射照明装置３３の全反射照明用光学系Ｔは、レーザ台１０１から光ファイバ３５を介して導入される全反射照明光を、対物レンズ２８の像側焦点面の所定の範囲に集光することにより、標本２０１を保護するカバーガラス２０４の標本２０１側の面でレーザ光による平行光束を全反射させる。PAU照明光学系Ｐは、光ファイバ３６を介して導入されるPAU照明光を平行光束にして対物レンズ２８に入射することにより、レーザ光を標本２０１に集光させる。また、ミラー１３７を交換したり、矢印Ａ５の方向に動かすことにより、全反射照明光およびPAU照明光の中から、標本２０１に照射する光を１つ以上選択することができる。本発明は、例えば、顕微鏡用の照明装置に適用できる。【選択図】図４
2010243971.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１の光を対物レンズの像側焦点面の所定の範囲に集光することにより、標本を保護するカバーガラスの前記標本側の面で前記第１の光による平行光束を全反射させる全反射照明用光学系と、
第２の光を平行光束にして前記対物レンズに入射することにより、前記第２の光を前記標本に集光させるPAU照明光学系と、
前記第１の光および前記第２の光の中から前記標本に照射する光を１つ以上選択する第１の選択手段と
を備える顕微鏡用照明装置。
【請求項２】
前記第１の光を前記対物レンズの像側焦点面に集光するレンズと、前記対物レンズに入射する前記第２の光を平行光束にするレンズを共用する
請求項１に記載の顕微鏡用照明装置。
【請求項３】
前記第１の光は、第１の光導入手段を介し導入し、前記第２の光は、第２の光導入手段を介し導入し、
複数の光源から射出される波長がそれぞれ異なる複数の光の中から、前記第１の光導入手段および前記第２の光導入手段のうちの少なくとも一方に導入する光を１つ以上選択する第２の選択手段と、
前記第１の光導入手段への光の導入の有無、および、前記第２の光導入手段への光の導入の有無を個別に切替える切替え手段と
をさらに備える請求項１または２に記載の顕微鏡用照明装置。
【請求項４】
前記第１の光および前記第２の光とは異なる照明光を前記対物レンズの像側焦点面に集光することにより、前記照明光による平行光束を前記標本に照射させる落射照明光学系を
さらに備え、
前記第１の選択手段は、前記第１の光、前記第２の光および前記照明光の中から前記標本に照射する光を１つ以上選択する
請求項１乃至３のいずれかに記載の顕微鏡用照明装置。
【請求項５】
前記第１の光および前記第２の光は、レーザ光であり、
前記第１の光導入手段および前記第２の光導入手段は、光ファイバである
請求項３または４に記載の顕微鏡用照明装置。
【請求項６】
第１のファイバを介して導入される第１のレーザ光を対物レンズの像側焦点面の所定の範囲に集光することにより、標本を保護するカバーガラスの前記標本側の面で前記第１のレーザ光による平行光束を全反射させる全反射照明用光学系と、
第２のファイバを介して導入される第２のレーザ光を平行光束にして前記対物レンズに入射することにより、前記第２のレーザ光を前記標本に集光させるPAU照明光学系と、
前記第１のレーザ光および前記第２のレーザ光の中から前記標本に照射する光を１つ以上選択する第１の選択手段と
を備える顕微鏡。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、顕微鏡用照明装置および顕微鏡に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、顕微鏡の照明として、全反射照明（TIRF（Total Internal Reflection Fluorescence）照明）が用いられている（例えば、特許文献１参照）。全反射照明では、対物レンズの像側焦点面（後焦点面、瞳面）の所定の範囲内にレーザ光を集光し、レーザ光による平行光束をカバーガラスと標本の界面において全反射させることにより生じるエバネッセント光により、カバーガラス近傍の標本のごく薄い範囲に光を照射することができる。
【０００３】
また、従来、顕微鏡の照明として、PAU（Photo Activation illuminator Unit）照明が用いられている。PAU照明では、レーザ光を平行光束にして対物レンズに入射し、レーザ光を標本に集光させることにより、標本のごく狭い範囲に光を照射することができる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００７−１０８２２４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ところで、近年、細胞などの標本の観察方法の多様化により、顕微鏡の照明に対する要望も多様化している。例えば、全反射照明とPAU照明を同時に使用したいという要望がある。より具体的には、例えば、全反射照明によりカバーガラス近傍の細胞のごく薄い範囲のみに照明を当て、背景光の少ない観察像を見ながら励起したい部分を探索し、励起したい部分を蛍光試薬により染色し、PAU照明により全反射照明とは異なる波長の光を染色した部分に照射できるようにすることが望まれている。
【０００６】
本発明は、このような状況を鑑みてなされたものであり、顕微鏡の照明の汎用性を向上させるためのものである。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の第１の側面の顕微鏡用照明装置は、第１の光を対物レンズの像側焦点面の所定の範囲に集光することにより、標本を保護するカバーガラスの前記標本側の面で前記第１の光による平行光束を全反射させる全反射照明用光学系と、第２の光を平行光束にして前記対物レンズに入射することにより、前記第２の光を前記標本に集光させるPAU照明光学系と、前記第１の光および前記第２の光の中から、前記標本に照射する光を１つ以上選択する第１の選択手段とを備える。
【０００８】
本発明の第１の側面の顕微鏡用照明装置においては、第１の光による全反射照明および第２の光によるPAU照明の中から１つ以上が選択され、標本に照射される。
【０００９】
本発明の第２の側面の顕微鏡は、第１のファイバを介して導入される第１のレーザ光を対物レンズの像側焦点面の所定の範囲に集光することにより、標本を保護するカバーガラスの前記標本側の面で前記第１のレーザ光による平行光束を全反射させる全反射照明用光学系と、第２のファイバを介して導入される第２のレーザ光を平行光束にして前記対物レンズに入射することにより、前記第２のレーザ光を前記標本に集光させるPAU照明光学系と、前記第１のレーザ光および前記第２のレーザ光の中から前記標本に照射する光を１つ以上選択する第１の選択手段とを備える。
【００１０】
本発明の第２の側面の顕微鏡においては、第１のレーザ光による全反射照明および第２のレーザ光によるPAU照明の中から１つ以上が選択され、標本に照射される。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の第１または第２の側面によれば、顕微鏡の照明の汎用性が向上する。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】本発明を適用した顕微鏡の一実施の形態を示す斜視図である。
【図２】本発明を適用した顕微鏡の一実施の形態を示す左側面図である。
【図３】本発明を適用した顕微鏡の一実施の形態を示す上面図（Ａ矢視図）である。
【図４】本発明を適用した顕微鏡の光学系の構成を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
以下、図を参照して、本発明の実施の形態について説明する。
【００１４】
図１乃至図３は、本発明を適用した顕微鏡の一実施の形態を模式的に表した図である。図１は顕微鏡１１の斜視図、図２は顕微鏡１１の左側面図、および、図３は顕微鏡１１の上面図（Ａ矢視図）である。
【００１５】
なお、以下、顕微鏡１１において、双眼鏡筒３０が設けられている側（図１および図２の右側、図３の上側）を前側あるいは手前側と称し、その反対側（図１および図２の左側、図３の下側）を後側あるいは奥側と称する。また、以下、顕微鏡１１の左右方向をｘ軸方向と称し、前後方向をｙ軸方向と称し、上下方向をｚ軸方向と称する。
【００１６】
顕微鏡１１は、観察対象となる標本（図示せず）がステージ２６に載置され、ステージ２６の下方に配設されている対物レンズ２８を介して、標本を下方から観察する、いわゆる倒立顕微鏡と称される種類のものである。
【００１７】
また、顕微鏡１１は、透過照明、全反射照明、PAU照明、落射照明の４種類の照明を備えている。具体的には、顕微鏡ボディ２１の後端の支柱２１ａの上端には、透過照明用光源２２が設けられている。透過照明用光源２２から発せられる透過照明光が、透過照明用光源２２から手前側に向かって延びる透過照明装置２３により光軸Ｌ１に沿って下方に照射される。光軸Ｌ１上には、支持アーム２１ｂにより支持されているコンデンサターレット２４に装着されているコンデンサレンズ２５が配置されており、透過照明光は、コンデンサレンズ２５を介して、ステージ２６上の標本に照射される。
【００１８】
なお、支持アーム２１ｂは支柱２１ａに沿って上下に動かすことができ、コンデンサターレット２４およびコンデンサレンズ２５の光軸Ｌ１方向の位置を調整することができる。また、コンデンサターレット２４は、コンデンサレンズ２５以外に、例えば、リング絞りなどがセットされた観察用カセット（図示せず）を装着することができ、コンデンサターレット２４を回転させて、光軸Ｌ１上に配置されるリング絞りなどを切替えることができる。
【００１９】
また、顕微鏡ボディ２１の奥には、ブロック２１ｅおよび調整部材２１ｄを貫通するように、落射照明装置３３が装着されている。落射照明装置３３は、図４を参照して後述するように、全反射照明光、PAU照明光および落射照明光の３種類の照明光を射出することが可能である。落射照明装置３３から射出される照明光は、フィルタブロックターレット２９に入射し、対物レンズ２８の方向に反射され、対物レンズ２８を通してステージ２６上の標本に照射される。
【００２０】
そして、標本からの観察光（例えば、標本を透過した光、標本が発した蛍光、標本による反射光など）は、レボルバ２７に装着されている対物レンズ２８、および、フィルタブロックターレット２９に装着されているフィルタブロック（例えば、図４のフィルタブロック１０２）などを通して、顕微鏡ボディ２１の鏡筒部２１ｃに装着されている双眼鏡筒３０、および、ポート３１に装着されているカメラ３２に入射する。そして、ユーザは、観察光による像を、双眼鏡筒３０を介して観察したり、カメラ３２により撮影したりすることができる。
【００２１】
なお、ステージ２６は、図示せぬ駆動機構により、ｘ軸方向およびｙ軸方向に移動させることができ、ステージ２６上の標本の観察位置を調整することができる。また、レボルバ２７は、顕微鏡ボディ２１の調整部材２１ｄにより、光軸Ｌ１に沿ってｚ軸方向に移動させることができ、対物レンズ２８の光軸Ｌ１方向（図４の矢印Ａ７の方向）の位置を調整することができる。さらに、レボルバ２７は、対物レンズ２８以外に、図示しない複数の種類の対物レンズを装着することができ、レボルバ２７を回転させて、光軸Ｌ１上に配置される対物レンズを切替え、複数の種類の対物レンズを使用した観察を行なうことができる。また、フィルタブロックターレット２９は、各種のフィルタブロックを装着することができるとともに、光軸Ｌ１に平行な回転軸を中心に回転可能に構成されおり、その回転軸を中心に回転させて、光軸Ｌ１上に配置されるフィルタブロックを切替えることができる。
【００２２】
ここで、さらに、落射照明装置３３の詳細について説明する。
【００２３】
落射照明装置３３の外観は、全反射照明部３３ａ、PAU照明部３３ｂ、落射照明部３３ｃ、および、共通部３３ｄの４つの部分に大きく分かれる。
【００２４】
全反射照明部３３ａは、共通部３３ｄの上面の後端に、長手方向が共通部３３ｄの上面に対して垂直になるように設けられており、主に全反射照明用光学系のみで使用される光学部品を内部に納めている。
【００２５】
PAU照明部３３ｂは、共通部３３ｄの左側面に設けられ、かつ、全反射照明部３３ａより顕微鏡ボディ２１に近い位置に、長手方向が共通部３３ｄの左側面に対して垂直になるように設けられており、主にPAU照明光学系のみで使用される光学部品を内部に納めている。
【００２６】
落射照明部３３ｃは、共通部３３ｄの右側面のPAU照明部３３ｂより顕微鏡ボディ２１に近い位置に、長手方向が共通部３３ｄの右側面に対して垂直になるように設けられており、主に落射照明光学系のみで使用される光学部品を内部に納めている。
【００２７】
共通部３３ｄは、顕微鏡ボディ２１の後側から、ブロック２１ｅおよび調整部材２１ｄを貫通するように顕微鏡ボディ２１に装着されており、主に全反射照明用光学系、PAU照明光学系および落射照明光学系のうち少なくとも２つの照明光学系で共用される光学部品を内部に納めている。
【００２８】
全反射照明部３３ａの上端には、光導入手段である光ファイバ３５が装着され、光ファイバ３５を介して、落射照明装置３３とレーザ台１０１（図４）とが接続されている。また、全反射照明部３３ａの左側の上端付近には、モータ（図示せず）を内蔵する電動駆動部５１が突出するように設けられている。このモータは、図４を参照して後述するように、全反射照明光のｘ軸方向の照射位置を電動で調整するために用いられる。さらに、全反射照明部３３ａの手前側の上端付近には、マイクロメータねじ５２が設けられている。マイクロメータねじ５２は、図４を参照して後述するように、全反射照明光のｙ軸方向の照射位置を手動で調整するために用いられる。
【００２９】
また、全反射照明部３３ａの中央付近には、フィルタスライダ５３が右側面から挿入されている。フィルタスライダ５３は、波長選択フィルタ１３２（図４）を着脱したり、交換したりするために用いられる。さらに、全反射照明部３３ａの手前側の中央やや下よりには、上下方向に動かすことができる集光位置調整レバー５４が設けられている。集光位置調整レバー５４は、図４を参照して後述するように、全反射照明光の光軸方向の集光位置を調整するために用いられる。
【００３０】
また、PAU照明部３３ｂの左端には、光導入手段である光ファイバ３６が装着され、光ファイバ３６を介して、落射照明装置３３とレーザ台１０１（図４）とが接続されている。さらに、PAU照明部３３ｂの左端には、集光位置調整ダイヤル５５が設けられている。集光位置調整ダイヤル５５は、図４を参照して後述するように、PAU照明光の光軸方向の集光位置を調整するために用いられる。また、PAU照明部３３ｂの左端付近の手前側および上側には、マイクロメータねじ５６，５７が設けられている。マイクロメータねじ５６，５７は、図４を参照して後述するように、PAU照明光のｘ軸方向およびｙ軸方向の照射位置を調整するために用いられる。さらに、PAU照明部３３ｂ中央付近には、フィルタスライダ５８が手前側から挿入されている。フィルタスライダ５８は、波長選択フィルタ１３６（図４）を着脱したり、交換したりするために用いられる。
【００３１】
また、共通部３３ｄの右側面の、PAU照明部３３ｂが設けられている部分と反対側の部分には、ミラー交換用キャップ５９ａが装着されている。ミラー交換用キャップ５９ａは、ミラー１３７（図４）を交換するときに取り外され、ミラー１３７を交換した後、装着される。さらに、共通部３３ｄの左側面の、落射照明部３３ｃが設けられている部分と反対側の部分には、ミラー交換用キャップ５９ｂが装着されている。ミラー交換用キャップ５９ｂは、ミラー１４５（図４）を交換するときに取り外され、ミラー１４５を交換した後、装着される。
【００３２】
また、顕微鏡ボディ２１のブロック２１ｅには、視野絞りユニット３４が左側面から挿入されている。そして、視野絞りユニット３４のレバー７１を回転させることにより、落射照明装置３３の視野絞り１４６（図４）を調整することができる。
【００３３】
図４は、落射照明装置３３を用いて標本２０１の観察を行なう場合の、顕微鏡１１の光学系の構成の例を示している。なお、図４において、全反射照明部３３ａは、実際には紙面に対して垂直な方向に設けられているが、図を分かりやすくするために、右方向に折り曲げて示している。
【００３４】
落射照明装置３３に内蔵されている光学部品のうち、コリメータレンズ１３１、波長選択フィルタ１３２、リレーレンズ１３３、ミラー１３４、ミラー１３７、リレーレンズ１３８、ミラー１４５、視野絞り１４６、および、フィールドレンズ１４７により全反射照明用光学系Ｔが構成され、コリメータレンズ１３５、波長選択フィルタ１３６、ミラー１３７、リレーレンズ１３８、ミラー１４５、視野絞り１４６、および、フィールドレンズ１４７によりPAU照明光学系Ｐが構成され、落射照明用光源１３９、コリメータレンズ１４０、波長選択フィルタ１４１、リレーレンズ１４２、開口絞り１４３、リレーレンズ１４４、ミラー１４５、視野絞り１４６、および、フィールドレンズ１４７により落射照明光学系Ｅが構成される。
【００３５】
また、図４において、標本２０１は、ガラスボトムディッシュ２０２内の溶液２０３内に浸され、カバーガラス２０４により保護されている。また、対物レンズ２８のカバーガラス２０４と接する部分には、オイル２０５が満たされている。
【００３６】
光ファイバ３５，３６の２本の光ファイバを介して落射照明装置３３に接続されているレーザ台１０１は、互いに波長域が異なるレーザ光を射出するレーザ光源１１１ａ乃至１１１ｄを備えている。例えば、レーザ光源１１１ａから射出されるレーザ光Ａの波長域は400nm〜455nmとされ、レーザ光源１１１ｂから射出されるレーザ光Ｂの波長域は455nm〜515nmとされ、レーザ光源１１１ｃから射出されるレーザ光Ｃの波長域は540nm〜595nmとされ、レーザ光源１１１ｄから射出されるレーザ光Ｄの波長域は630nm〜650nmとされる。
【００３７】
レーザ光源１１１ａから射出されたレーザ光Ａは、ミラー１１３ａによりダイクロイックミラー１１３ｂの方向に反射され、ダイクロイックミラー１１３ｂ，１１３ｃを透過し、ダイクロイックミラー１１３ｄによりAOTF（Acousto Optic Tunable Filter）１１４の方向に反射される。レーザ光源１１１ｂから射出されるレーザ光Ｂは、ダイクロイックミラー１１３ｂによりダイクロイックミラー１１３ｃの方向に反射され、ダイクロイックミラー１１３ｃを透過し、ダイクロイックミラー１１３ｄによりAOTF１１４の方向に反射される。レーザ光源１１１ｃから射出されるレーザ光Ｃは、ダイクロイックミラー１１３ｃによりダイクロイックミラー１１３ｄの方向に反射され、ダイクロイックミラー１１３ｄによりAOTF１１４の方向に反射される。レーザ光源１１１ｄから射出されるレーザ光Ｄは、ダイクロイックミラー１１３ｄを透過し、AOTF１１４に入射する。
【００３８】
AOTF１１４は、透過する波長域が可変なフィルタであり、入射したレーザ光のうち設定されている波長成分のみを透過し、それ以外の波長成分を遮断する。AOTF１１４を透過したレーザ光は、ハーフミラー１１５に入射し、集光レンズ１１７ａの方向に反射される光と、ハーフミラー１１５を透過する光に分離される。
【００３９】
集光レンズ１１７ａの方向に反射されたレーザ光は、集光レンズ１１７ａにより集光され、光ファイバ３５に導入され、光ファイバ３５を介して、落射照明装置３３の全反射照明用光学系Ｔに導入される。一方、ハーフミラー１１５を透過したレーザ光は、集光レンズ１１７ｂにより集光され、光ファイバ３６に導入され、光ファイバ３６を介して、落射照明装置３３のPAU照明光学系Ｐに導入される。
【００４０】
なお、レーザ光源１１１ａ乃至１１１ｄの前には、それぞれシャッタ１１２ａ乃至１１２ｄが設けられており、各レーザ光源から射出されるレーザ光を個別に遮断することができる。また、ハーフミラー１１５と集光レンズ１１７ａの間にはシャッタ１１６ａが設けられており、光ファイバ３５に導入するレーザ光を遮断することができる。同様に、ハーフミラー１１５と集光レンズ１１７ｂの間にはシャッタ１１６ｂが設けられており、光ファイバ３６に導入するレーザ光を遮断することができる。
【００４１】
このように、レーザ光Ａ乃至Ｄの中から、光ファイバ３５および光ファイバ３６のうちの少なくとも一方に導入するレーザ光を任意に１つ以上選択することができる。また、光ファイバ３５（全反射照明光学系Ｔ）へのレーザ光の導入の有無、および、光ファイバ３６（PAU照明光学系Ｐ）へのレーザ光の導入の有無を個別に切替えることができる。
【００４２】
従って、レーザ光Ａ乃至Ｄのうち任意の２つ以上を合成して、落射照明装置３３の全反射照明用光学系ＴおよびPAU照明光学系Ｐに導入することができる。また、レーザ光Ａ乃至Ｄのうち任意の１つを選択して、全反射照明用光学系ＴおよびPAU照明光学系Ｐに導入することができる。さらに、全反射照明用光学系ＴおよびPAU照明光学系Ｐの一方のみにレーザ光を導入することができる。
【００４３】
全反射照明用光学系Ｔに導入されたレーザ光（以下、全反射照明光と称する）は、コリメータレンズ１３１により平行光束となり、波長選択フィルタ１３２により所定の波長成分のみが透過され、リレーレンズ１３３を透過し、ミラー１３４によりミラー１３７の方向に反射される。
【００４４】
ミラー１３７は、ハーフミラー、ダイクロイックミラー、フルミラー、ビームスプリッタなどの各種のミラーに交換することが可能である。なお、以下、ダイクロイックミラーによりミラー１３７を構成した場合について説明する。
【００４５】
ミラー１３４によりミラー１３７の方向に反射された全反射照明光は、ミラー１３７を透過し、リレーレンズ１３８により平行光束となり、ミラー１４５に入射する。
【００４６】
ミラー１４５は、ミラー１３７と同様に、ハーフミラー、ダイクロイックミラー、フルミラー、ビームスプリッタなど各種のミラーに交換することが可能である。なお、以下、ダイクロイックミラーによりミラー１４５を構成した場合について説明する。
【００４７】
ミラー１４５に入射した全反射照明光は、ミラー１４５および視野絞り１４６を透過し、フィールドレンズ１４７により集光されつつ、フィルタブロック１０２に設けられているダイクロイックミラー１６２により、対物レンズ２８の方向に反射され、対物レンズ２８に入射する。なお、全反射照明を行なう場合、通常、フィルタブロック１０２内に波長選択フィルタ１６１は設けられない。
【００４８】
このとき、集光位置調整レバー５４を用いて、コリメータレンズ１３１を矢印Ａ２の方向（光軸方向）に移動させることにより、対物レンズ２８に入射する全反射照明光の集光位置を調整することができる。そして、全反射照明光を対物レンズ２８の像側焦点面（後焦点面、瞳面）に集光させることにより、対物レンズ２８を透過した全反射照明光は、平行光束となり、標本２０１に照射される。
【００４９】
また、電動駆動部５１に内蔵されているモータにより、光ファイバ３５の射出口の位置を矢印Ａ１に対して垂直な方向に調整することにより、対物レンズ２８に入射する全反射照明光のｘ軸方向の位置を調整することができる。さらに、マイクロメータねじ５２により、光ファイバ３５の射出口の位置を矢印Ａ１の方向に調整することにより、対物レンズ２８に入射する全反射照明光のｙ軸方向の位置を調整することができる。これにより、対物レンズ２８の像側焦点面に入射する全反射照明光の位置を移動させ、標本２０１への全反射照明光の入射角を変化させることができる。そして、対物レンズ２８の像側焦点面の所定の範囲（カバーガラス２０４と標本２０１の界面において全反射する条件を満たす範囲）内に全反射照明光を集光させ、全反射照明光による平行光束を標本２０１に照射することにより、エバネッセント光により、カバーガラス２０４近傍の標本２０１のごく薄い範囲に光が照射されるようになる。
【００５０】
また、PAU照明光学系Ｐに導入されたレーザ光（以下、PAU照明光と称する）は、コリメータレンズ１３５により平行光束となり、波長選択フィルタ１３６により所定の波長成分のみが透過され、ミラー１３７によりリレーレンズ１３８の方向に反射され、リレーレンズ１３８およびミラー１４５を透過し、フィールドレンズ１４７に入射する。そして、PAU照明光は、フィールドレンズ１４７により再び平行光束となり、ダイクロイックミラー１６２により対物レンズ２８の方向に反射され、対物レンズ２８を透過し、標本２０１付近において集光し、標本２０１のごく狭い範囲に光が照射される。なお、PAU照明を行なう場合、通常、フィルタブロック１０２内に波長選択フィルタ１６１は設けられない。
【００５１】
このとき、集光位置調整ダイヤル５５により光ファイバ３６の射出口の位置を矢印Ａ４の方向（光軸方向）に移動させ、PAU照明光の集光位置を光軸方向に調整することができる。これにより、PAU照明光により標本２０１を照射する面積を調整することができる。
【００５２】
また、マイクロメータねじ５６，５７により、光ファイバ３６の射出口の位置を矢印Ａ３の方向、および、矢印Ａ３に対して垂直な方向（紙面に垂直な方向）に調整し、対物レンズ２８に入射するPAU照明光のｘ軸方向およびｙ軸方向の位置を調整することができる。これにより、PAU照明光により標本２０１を照射する位置を調整することができる。
【００５３】
また、水銀ランプなどにより構成される落射照明用光源１３９から発せられた落射照明光は、コリメータレンズ１４０により平行光束となり、波長選択フィルタ１４１により所定の波長成分のみが透過され、リレーレンズ１４２および開口絞り１４３を透過し、リレーレンズ１４４により再び平行光束となり、ミラー１４５によりフィールドレンズ１４７の方向に反射される。そして、落射照明光は、フィールドレンズ１４７により集光されつつ、波長選択フィルタ１６１により所定の波長成分のみが透過され、ダイクロイックミラー１６２により、対物レンズ２８の方向に反射され、対物レンズ２８に入射する。このとき、落射照明光は、対物レンズ２８の像側焦点面付近において集光し、対物レンズ２８により平行光束となり、標本２０１に照射される。
【００５４】
そして、全反射照明光、PAU照明光または落射照明光による標本２０１からの観察光（例えば、標本２０１が発した蛍光、標本２０１による反射光など）は、対物レンズ２８により集められ、ダイクロイックミラー１６２により、観察に必要な波長成分のみ透過され、不要な波長成分は反射される。そして、ダイクロイックミラー２０７を透過した観察光のうち所定の波長の光が、波長選択フィルタ１６３を透過し、顕微鏡ボディ２１内の結像レンズ１７１に入射する。結像レンズ１７１を透過した観察光は、ビームスプリッタ１７２により、２つの光束に分離され、一方は、カメラ３２の像面IMに結像し、他方は、双眼鏡筒３０などにより構成される観察光学系に入射する。
【００５５】
なお、ミラー１３７は矢印Ａ５に示される方向に動かすことができ、ミラー１３７を全反射照明光の光路から外すことにより、全反射照明光がミラー１３７により減衰されずに標本２０１に照射されるようになるとともに、PAU照明光が標本２０１に照射されなくなる。また、ミラー１３７をフルミラーにすることにより、PAU照明光がミラー１３７により減衰されずに標本２０１に照射されるようになるとともに、全反射照明光が標本２０１に照射されなくなる。
【００５６】
さらに、ミラー１４５は矢印Ａ６に示される方向に動かすことができ、ミラー１４５を全反射照明光およびPAU照明光の光路から外すことにより、全反射照明光およびPAU照明光がミラー１４５により減衰されずに標本２０１に照射されるようになるとともに、落射照明光が標本２０１に照射されなくなる。さらに、ミラー１４５をフルミラーにすることにより、落射照明光がミラー１４５により減衰されずに標本２０１に照射されるようになるとともに、全反射照明光およびPAU照明光が標本２０１に照射されなくなる。
【００５７】
このように、ミラー１３７およびミラー１４５により、レーザ台１０１を操作せずに、全反射照明光、PAU照明光および落射照明光の中から、標本２０１に照射する照明光を任意に１つ以上選択することができる。
【００５８】
また、ミラー１３７の透過率および反射率を変えることにより、標本２０１に照射する全反射照明光とPAU照明光の強さの比率を調整することができる。さらに、ミラー１４５の透過率および反射率を変えることにより、標本２０１に照射する全反射照明光、PAU照明光および落射照明光の強さの比率を調整することができる。
【００５９】
以上のようにして、全反射照明光、PAU照明光および落射照明光の中から１つ以上を任意に選択して、単独で、あるいは、任意の組み合わせで、標本２０１に照射することができる。また、各照明光の強さの比率を調整することができる。
【００６０】
また、PAU照明は、全反射照明と比較して、照射位置や照射面積など照射条件の調整を行なう機会が多い。従って、PAU照明部３３ｂを、ユーザ（顕微鏡１１の正面）から見て顕微鏡ボディ２１に隠れてしまわないように左向きに配設するとともに、全反射照明部３３ａよりユーザに近い位置に配設することにより、PAU照明の調整が行ないやすくなる。さらに、全反射照明部３３ａを垂直方向に折り曲げて配設することにより、例えば、顕微鏡１１の奥に延びるように配設する場合と比較して、全反射照明の調整が行ないやすくなる。
【００６１】
また、全反射照明光を対物レンズ２８の像側焦点面に集光するレンズと、対物レンズ２８に入射するPAU照明光を平行光束にするレンズをフィールドレンズ１４７により共有することにより、部品数を削減し、落射照明装置３３を小型化することができる。
【００６２】
なお、以上の説明では、全反射照明用光学系ＴとPAU照明光学系Ｐとで、同じレーザ台１０１を共用する例を示したが、それぞれ異なるレーザ台を使用するようにしてもよい。
【００６３】
また、使用するレーザ光の種類は、上述した４種類に限定されるものではない。
【００６４】
さらに、全反射照明用の光は、ランプ光源からの光を集光した光でもよい。
【００６５】
なお、本発明の実施の形態は、上述した実施の形態に限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲において種々の変更が可能である。
【符号の説明】
【００６６】
１１  顕微鏡，  ２１  顕微鏡ボディ，  ２６  ステージ，  ２８  対物レンズ，  ３０  双眼鏡筒，  ３２  カメラ，  ３３  落射照明装置，  ３３ａ  全反射照明部，  ３３ｂ  PAU照明部，  ３３ｃ  落射照明部，  ３３ｄ  共通部，  ３５，３６  光ファイバ，  ５１  電動駆動部，  ５２  マイクロメータねじ，  ５３  フィルタスライダ，  ５４  集光位置調整レバー，  ５５  集光位置調整ダイヤル，  ５６，５７  マイクロメータねじ，  ５８  フィルタスライダ，  １０１  レーザ台，  １０２  フィルタブロック，  １１１ａ乃至１１１ｄ  レーザ光源，  １１２ａ乃至１１２ｄ  シャッタ，  １１３ａ  ミラー，  １１３ｂ，１１３ｃ，１１３ｄ  ダイクロイックミラー，  １１４  AOTF，  １１５  ハーフミラー，  １１６ａ，１１６ｂ  シャッタ，  １１７ａ，１１７ｂ  集光レンズ，  １３１  コリメータレンズ，  １３２  波長選択フィルタ，  １３３  リレーレンズ，  １３４  ミラー，  １３５  コリメータレンズ，  １３６  波長選択フィルタ，１３７  ミラー，  １３８  リレーレンズ，  １３９  落射照明用光源，  １４０  コリメータレンズ，  １４１  波長選択フィルタ，  １４２  リレーレンズ，  １４３  開口絞り，  １４４  リレーレンズ，  １４５  ミラー，  １４６  視野絞り，  １４７  フィールドレンズ，  １６１  波長選択フィルタ，  １６２  ダイクロイックミラー，  １６３  波長選択フィルタ，  １７１  結像レンズ，  １７２  ビームスプリッタ，  ２０１  標本，  ２０２  ガラスボトムディッシュ，  ２０４  カバーガラス
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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