(57)【要約】【課題】糖尿病の症状、または障害それ自体、および糖尿病に関連する健康上のリスクを緩和する、防ぐまたは治療する方法を提供すること。【解決手段】本発明は、糖尿病を治療する方法、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）の活性を変調する方法、および糖尿病特異的な様式でホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ（ＰＥＰＣＫ）の活性を変調する方法において有用な、ヨモギ属植物種のような植物材料の極性が小さな流体抽出物に関係する材料および方法を提供する。該抽出物は一般に非毒性かつ非変異原性であり、血中グルコースのレベルに有益な効果を伴って糖尿病患者に投与することができる。該抽出物は、有害な影響なしに非糖尿病患者にも投与することができる。植物は最低限の時間、労働およびコストにて容易に成長する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
（発明の分野）
本発明は、植物を用いて障害を処置するための材料および方法に関する。さらに具体的には、本発明は、ヨモギ属植物の抽出物を用いて障害を処置するための材料および方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
（背景）
糖尿病は、それを処置するまたは予防するのにかかるコストにも影響を与えることが多数の人々によって立証されているように、主要な健康上の関心事である。米国糖尿病協会によれば、糖尿病に罹患する人は１５７０万人または全米人口の５．９％である。これらの人々のうち約１０３０万人だけがその疾患であると診断されている。自分がこの慢性の状態を有していることに気づかないおよそ５４０万人も含めると、糖尿病は全米で７番目の死因にランクされている。この状態を処置および／または予防するための取り組みに関連するコストは、米国および世界中の双方で冒された人々の数に比例する。
【０００３】
糖尿病は、炭水化物、脂肪およびタンパク質の代謝に影響を及ぼす障害を伴った、最も一般的には、血中グルコース濃度の上昇によって定義される複雑な状態または疾患である。障害は、例えば、インスリンの不十分なレベルまたは活性による血中グルコースレベルのコントロール不能の結果生じる。グルコースレベルの上昇は、次々に、追加の処置を必要とする副次的な健康上の問題を招くことが多い。糖尿病に関連する主な健康上のリスクの一部には、高血糖症、動脈硬化症、糖尿病性網膜症（失明につながる可能性がある）、白内障、腎症、感染症のリスクの増加、高血圧、神経障害、切断のリスク、性的不能、糖尿病性ケトアシドーシスおよび痴呆が含まれる。これらの健康上のリスクは糖尿病と関連しているが、それらは、それだけでは糖尿病の有用な指標ではない。例えば、高血圧は、糖尿病であろうとなかろうと生じる可能性がある（例えば、遺伝的素因または高塩分食による）。
【０００４】
それぞれ多数の異形を伴うが、糖尿病には２つの主な型がある。１型糖尿病は一般に小児期に生じ、身体のインスリン産生不能に起因する。２型糖尿病は、さらに蔓延した型であり、インスリン不足またはさらに一般的にはインスリン耐性のいずれかに起因する。糖尿病患者の中には、制限食だけで健常な血中グルコース濃度を維持できるものもあるが、ほとんどが経口の血糖降下薬および／または注射によるインスリン代替療法の助けを必要とする。しかしながら、薬物療法は、必ずしも満足の行く血糖コントロールを達成するとは限らず、インスリンの使用は低血糖を助長することが多い。さらに、これら従来の治療は、望ましくない体重増加に寄与する脂肪細胞を含む多数の細胞によるグルコースの非選択的取り込みを促進することによって、血糖グルコースを下げることが多い。したがって、継続的な処置の変更および監視がしばしば必要である。さらにインスリン注射のような従来の処置は高価であり、投与するのに痛みが伴い得る。
【０００５】
インスリン注射または市販薬（ｏｖｅｒ−ｔｈｅ−ｃｏｕｎｔｅｒ  ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ）に頼った従来の処置に加えて、聞くところによれば、植物材料を含む天然生産物が、糖尿病のような状態の代替治療で試されている。世界中の多種多様な植物を考えると、これは恐らく驚くべきことではない。伝統的な薬物として、植物は多様な現実のまたは仮想の病気に使用されてきており、同一の植物が、関連のない状態を「処置」するのに頻繁に使用されている。伝統的な薬草療法で使用される多数の植物の系統群の１つは、４００を超える種があるヨモギ属系統群である。
【０００６】
ヨモギ属（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ）の一種、タラゴン（非特許文献１）は、高脂肪食で飼育したラットで抗高脂血症効果を示す、アルコール系抽出物を産出することが報告されている。しかしながら、この研究の著者らは、突然変異原または毒素の存在を調べず、そのような抽出物の高脂血症以外の障害、疾患または状態の処置のための使用を探らなかった。タラゴン（Ａ．ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ）およびもう１つのヨモギ属、ホワイトマグワート（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｈｅｒｂａ−ａｌｂａ）は、聞くところによれば、例えば中東の文化では頭痛および目眩の処置に使われてきた（非特許文献２）。さらに、ホモジナイズした植物材料を標準の食事に混合して治療を調製したという説明に、非特許文献３を引用して、非特許文献４は、糖尿病の処置におけるタラゴン（ｔａｒｒａｇｏｎ）混合物の使用を開示した。タラゴンから抽出物が調製されたことはなかった。Ｓｗａｎｓｔｏｎ−Ｆｌａｔｔら（１９９１）は、タラゴンは、聞くところによれば、体重、煩渇多飲および過食を軽減することが示されているが、血中グルコース濃度は有意に低下させないことを報告した。
しかしながら、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｓｐｐの報告された医学的効果と共に、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｓｐｐから調製された粗抽出物は、従来のアメス変異原性試験で調べると陽性の変異誘発性効果を有するという観察がある。特許文献１は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｊｕｄａｉｃａの水性（すなわち、水）抽出物を、インスリン模倣性の抗糖尿病効果を有するとして記載しているが、しかし、この粗抽出物のヒトのような哺乳類への投与を不適当にする有害な突然変異原の存在にも注目している。特許文献１は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｊｕｄａｉｃａからの２つの異なった製剤が変異原性についてアメス試験で陽性であったことを報告した。したがって、ヨモギ属植物のすべてというわけではなく、例えば、Ａ．ｊｕｄａｉｃａではないものは、糖尿病のような障害を有する哺乳類を処置するための抽出物での使用に適切であると思われる。
したがって、糖尿病の症状、または障害それ自体、および糖尿病に関連する健康上のリスクを緩和する、防ぐまたは治療する方法、好ましくは植物または植物の一部のような容易に利用可能であり、かつ安価に製造される天然材料の使用に基づいた方法を開発するニーズが当該技術分野には依然として存在する。該方法は、保証されていない毒性および／または変異原性のリスクをもたらすことなく、有効でかつ安価とすべきである。哺乳類に見い出される様々な障害および疾患に関与する糖尿病および非糖尿病の症状の抑制を促進するためにグルコース代謝に関与する酵素を変調する方法を開発するニーズもある。さらに、植物または植物の一部から、糖尿病または糖尿病の症状を処置するのに有用な材料を抽出する有効な方法を開発するニーズも依然として存在する。さらに、当該技術分野には、例えば、糖尿病療法と共に体重を制御する方法に対するニーズもある。糖尿病患者、スポーツ選手およびその他にとって、細胞、例えば筋肉細胞またはニューロンで利用可能なエネルギー貯蔵を高めるニーズがあることも明らかである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】国際公開第９７／３５５９８号パンフレット
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ、Ｙａｚｄａｎｐａｒａｓｔら、Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｌｅｔｔｅｒｓ  ５９：１３７−１４１，１９９９
【非特許文献２】Ａｌ−Ｗａｉｌｉら、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  １３：５６９−５７３，（１９８６）
【非特許文献３】Ｓｗａｎｓｔｏｎ−Ｆｌａｔｔら、Ａｃｔａ  Ｄｉａｂｅｔｏｌ．Ｌａｔ．２６：５１−５５，（１９８９）
【非特許文献４】Ｓｗａｎｓｔｏｎ−Ｆｌａｔｔら、Ｐｒｏｃ．Ｎｕｔｒ．Ｓｏｃ．５０：６４１−６５１（１９９１）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００９】
（発明の要旨）
本発明は、ヨモギ属の一員のような植物の抽出物を得る便利な方法を提供することによって、当該技術分野における前述のニーズの１つまたはそれより多くを満たす。本発明はまた、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）の活性を変調することにより血中グルコースレベルを制御するための有効な方法を含む、血中グルコースレベルを変調することおよび炭水化物代謝に関与するタンパク質活性を変調することにおける、ヨモギ属抽出物のような植物抽出物の使用のための安全で有効な方法も提供する。筋肉細胞やニューロンのような哺乳類の非脂肪細胞においてグルコース取り込みを増やす方法も提供する。また、インスリン受容体基質２（ＩＲＳ−２）を変調する方法、インスリン刺激性のグルコース取り込みを変調する方法、肝グルコース産出量（ｏｕｔｐｕｔ）およびホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ（ＰＥＰＣＫ）活性の糖尿病特異的変調の方法、インスリン耐性を下げる方法、２型糖尿病の処置方法、水性（すなわち、水のような極性の大きい）およびヨモギ属微極性抽出物の調製方法、体重増加を制御する方法、細胞におけるエネルギー貯蔵（例えば、筋肉細胞やニューロンのような非脂肪細胞に利用可能な細胞内グルコース）を高める方法、および有効用量のヨモギ属抽出物を含む薬学的組成物も意図する。
【００１０】
本発明は、ヨモギ属のアルコール系抽出物の有効用量の投与を含む、哺乳類におけるグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）活性を変調する方法を提供する。ＧＬＰ−１はプログルカゴン遺伝子にコードされ、胃内容排出を阻害し、食物摂取を制御し、インスリンの生合成および分泌を刺激し、グルカゴンの分泌を阻害し、膵島の増殖を誘発し、回腸ブレーキを促進し、視床下部−下垂体機能を調節することが知られている。好ましくは、ＧＬＰ−１活性を高めるか、または増強する。天然の受容体へのＧＬＰ−１の親和性を高めることによってＧＬＰ−１活性を高めてもよく、それは、例えば、胃内容排出を阻害し、食物摂取を抑制し、インスリンの生合成および分泌を刺激し、グルカゴンの分泌を阻害し、膵島の増殖を誘発し、回腸ブレーキを促進することのような、血中グルコースを下げるのを助けることが知られているＧＬＰ−１の種々の活性を高める。変調することができる好ましいＧＬＰ−１活性は、食物の摂取または満腹を制御することである。変調することができるもう１つの好ましいＧＬＰ−１活性は、胃分泌および膵分泌を阻害するとともに胃内容物排出を妨げる回腸ブレーキの促進である。抽出物の投与を受けることが意図された哺乳類は、ヒト、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジおよびそのほかの哺乳類を含む。抽出物の投与を受ける好ましい哺乳類はヒトである。患者に抽出物を送達するには、注射（例えば、静脈内、筋肉内、および皮下）、舌下投与、経口投与、局所投与、および吸入を含む、種々の投与経路を使用することができる。好ましくは、投与経路は、経口であり、例えば摂取のためのボーラスまたは溶液である。経鼻胃管を介した送達も好ましい。
【００１１】
ヨモギ属の種（例えば、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ）のような植物から有効な材料を抽出するのに、メタノール、エタノールおよびイソプロパノールを含むアルコールのような種々の微極性の流体を使用することができる。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓから有効な材料を抽出するのに使用される好ましいアルコールは、エタノールであり、それによってエタノール系抽出物を製造する。好ましくは、抽出物は変異原性活性および／または毒素を欠く。抽出物は、タラゴン（ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ）、オウシュウヨモギ（ｖｕｌｇａｒｉｓ）、ａｂｙｓｉｎｉｃａ、ａｂｓｙｎｔｈｉｃｕｍ、ａｆｔｒａ、ｃａｎｎａｒｉｅｎｓｉｓ、ヒトツバヨモギ（ｓｃｏｐａｒｉａ）およびその他を含む多数のヨモギ属の種の１種に由来し得る。好ましくは、抽出物は、Ａ．ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓに由来する。
【００１２】
本発明はさらに、哺乳類において血中グルコースレベルを変調する方法であって、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓのような植物の有効用量のアルコール系抽出物の投与を含み、このアルコール系抽出物は、アメス試験（Ａｍｅｓら、Ｍｕｔａｔｉｏｎ
Ｒｅｓ．３１：３４７（１９７５））を用いてアッセイしたとき変異原性活性を欠く、方法を提供する。アメス試験は、細菌を用いて物質の変異原性特性を測定するのに使用される試験として当該技術分野において周知である。そのような方法において、好ましいアルコール系抽出物は、哺乳類の体重キログラム当たり５０００ミリグラム（ｍｇ／ｋｇ）までの抽出物の投与量において急性の経口毒性を有さない。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓから有効な材料を抽出するのに、メタノール、エタノールおよびイソプロパノールを含む、種々のアルコールを使用することができる。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓから有効な材料を抽出するのに使用される好ましいアルコールはエタノールである。好ましくは、血中グルコースレベルは低下されるか、または減少される。抽出物の投与を受けることが意図された哺乳類は、ヒト、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ブタ、およびヒツジを含み、ヒトが好ましい。患者に抽出物を送達するには、注射（例えば、静脈内、筋肉内、および皮下）、経鼻胃管を介した投与、舌下投与、経口投与、局所投与、および吸入を含む、種々の投与経路を使用することができる。好ましくは、投与経路は、経口であり、例えば摂取のためのボーラスまたは溶液である。また、経鼻胃管を介した送達も好ましい。
【００１３】
１つの局面では、本発明は、哺乳類において血中グルコースレベルを変調する方法であって、ヨモギ属のような植物からの微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法を提供する。好ましくは、血中グルコースレベルが減少される。
【００１４】
別の局面では、本発明は、哺乳類においてＧＬＰ−１活性を変調する方法であって、ヨモギ属のような植物からの微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法を提供する。好ましくは、ＧＬＰ−１活性が増大される。
【００１５】
本発明の別の局面は、ヨモギ属のような植物からの微極性抽出物の有効用量を投与することを含む、哺乳類の食欲を変える方法を提供する。
【００１６】
本発明のさらなる局面は、哺乳類において回腸ブレーキを促進する方法であって、ヨモギ属のような植物からの微極性抽出物の有効用量を投与することを包含する、方法を提供する。
【００１７】
別の局面では、本発明は、哺乳類においてＧＬＰ−１とＧＬＰ−１受容体との間の結合を変調する方法であって、ヨモギ属のような植物からの微極性抽出物の有効用量を投与することを包含する、方法を提供する。好ましくは、その受容体へのＧＬＰ−１の結合が増大される。
【００１８】
本発明のさらなる局面は、哺乳類においてα−グルコシダーゼ活性を変調する方法であって、ヨモギ属のような植物からの微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法を提供する。好ましくは、α−グルコシダーゼ活性が減少される。
【００１９】
別の局面では、本発明は、哺乳類においてインスリン耐性を変調する方法であって、ヨモギ属のような植物のアルコール系抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法を提供する。好ましくは、インスリン耐性が低減される。
【００２０】
さらなる局面は、ヨモギ属のような植物からの微極性抽出物の有効用量を投与することを含む、哺乳類においてグルコースのグリコーゲンへのインビボ変換を変調する方法である。好ましくは、グルコースのグリコーゲンへのインビボ変換が増大される。
【００２１】
別の局面では、本発明は、哺乳類においてインスリン受容体基質−２（ＩＲＳ−２）ポリペプチドの発現を変調する方法であって、ヨモギ属のような植物からの微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法を提供する。好ましくは、ＩＲＳ−２ポリペプチドの発現が増大される。
【００２２】
本発明のさらなる局面は、哺乳類においてインスリン刺激性のグルコース取り込みを変調する方法であって、ヨモギ属のような植物からの微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法を提供する。好ましくは、インスリン刺激性のグルコース取り込みが増大される。
【００２３】
本発明の別の局面は、哺乳類において肝グルコース産出量を変調する方法であって、ヨモギ属のような植物からの微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法を提供する。好ましくは、肝グルコース産出量が減少される。当該抽出物がホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ（ＰＥＰＣＫ）の発現低下をもたらすことも好ましい。
【００２４】
別の局面では、本発明は、哺乳類において２型糖尿病を処置する方法であって、ヨモギ属のような植物からの微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法を提供する。
【００２５】
方法に関する、本発明の上述の局面のそれぞれについて、ヨモギ属における好ましい植物は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓである。また、適切な微極性流体は、アルコールであり、エタノールが好ましい。好ましい抽出物は、哺乳類の体重キログラム当たり５０００ミリグラムまでの植物材料の投与量にて、検出可能なレベルの突然変異原および／または急性経口毒性がない。抽出物、またはそのような抽出物を含む薬学的組成物を投与する、例示的な哺乳類はヒトである。好ましい投与経路は、経鼻胃管による送達を含み；別の好ましい投与経路は経口送達である。
【００２６】
本発明はまた、非脂肪細胞（筋肉細胞およびニューロンを含むがこれらに限定されない）において細胞エネルギーの増大を促進する方法であって、ヨモギ属の微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含し、細胞エネルギーの増大が、少なくとも以下の利点：筋肉細胞の強度の増加、筋肉細胞の耐久性の増大、生理的苦痛の防止または軽減、疲労の防止または軽減、および栄養欠損の防止または軽減のうち少なくとも１つを提供する、方法も開示する。
【００２７】
さらに、ヨモギ属のような植物の微極性抽出物を調製する方法であって、植物（例えば、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ）をエリシター（ｅｌｉｃｉｔｏｒ）に接触させる工程、および微極性流体（例えば、アルコール系溶液）でヨモギ属を抽出する工程を包含する、方法が開示される。上記のように、ヨモギ属のうち好ましい植物は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓである。接触工程で意図されるエリシターには、当該技術分野で一般に既知のものが含まれる。接触工程で使用されるエリシターとしては、キトサン、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ種（好ましくは、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｈａｒｚｉａｎｕｍ）、酢酸、サリチル酸メチル、ジャスモン酸メチルおよびＰｌａｎｔＳｈｉｅｌｄ（Ｂｉｏｗｏｒｋｓ，Ｉｎｃ．、ニューヨーク州ジェニーバ）が挙げられる。適切なエリシターとしては、０．８ｍＭのサリチル酸メチル、０．１ｍＭのジャスモン酸メチル、およびＰｌａｎｔＳｈｉｅｌｄ（１００ガロン当たり５〜１２オンス）が挙げられる。好ましくは、エリシターは、０．１％のキトサンまたはＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｈａｒｚｉａｎｕｍである。ヨモギ属から有効な材料を抽出するのに、メタノール、エタノールおよびイソプロパノールを含む様々なアルコールを使用することができる。ヨモギ属から有効な材料を抽出するのに使用される好ましいアルコールは、エタノールである。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓのアルコール系抽出物を調製するさらに別の好ましい方法では、アルコール系溶液は、少なくとも約６０％のエタノールを含む。アルコール系抽出物を調製する好ましい方法は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓを粉砕する工程をさらに包含する。粉砕工程は、例えば、乳鉢と乳棒、またはミル装置を用いて、ヨモギ属を粉砕することによって、結果として植物の細胞壁および膜の統合性を喪失させる、当該技術分野で公知のいかなる方法によっても行うことができる。アルコール系抽出物を調製するもう１つの方法は、高い温度にて抽出物を乾燥して、それによりメチルオイゲノールの濃度を低下させる工程をさらに包含する。好ましくは、抽出物は、キャピラリシン、テトラヒドロキシ−メトキシフラバノン、ウンベリフェロンおよびその誘導体、サクラニンおよびその誘導体、トリヒドロキシ−メトキシフラバノンおよびトリヒドロキシフラバノンより成る群から選択される、有効用量の化合物を含む。
【００２８】
上記のようなヨモギ属の微極性抽出物、および１つまたはそれより多くの薬学上許容可能な処方剤を含む薬学的組成物もまた、本発明によって包含される。治療上有効量の、本発明のヨモギ属（例えば、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ）の微極性抽出物を提供する、薬学的組成物が用いられる。本発明はまた、膜に内包された抽出物を投与するためのデバイスを提供する。
【００２９】
キャピラリシン、テトラヒドロキシ−メトキシフラバノン、ウンベリフェロンおよびその誘導体、サクラニンおよびその誘導体、トリヒドロキシ−メトキシフラバノンおよびトリヒドロキシフラバノンより成る群から選択される化合物の有効用量を含む薬学的組成物も、本発明によって包含される。
【００３０】
哺乳類においてグルコースレベルを変調すること、哺乳類の食欲を変更すること、回腸ブレーキを促進すること、ＧＬＰ−１とＧＬＰ−１受容体との間の結合を変調すること、哺乳類においてα−グルコシダーゼ活性を変調すること、哺乳類においてインスリン耐性を変調すること、哺乳類においてグルコースのグリコーゲンへのインビボ変換を変調すること、哺乳類においてインスリン受容体基質−２（ＩＲＳ−２）ポリペプチドの発現を変調すること、哺乳類においてインスリン刺激性のグルコース取り込みを変調すること、哺乳類において肝グルコースレベルを変調すること、哺乳類において２型糖尿病を処置すること、および非脂肪細胞における細胞エネルギーの増大を促進することより成る群から選択される、薬学的組成物の使用もまた、本発明によって包含される。
【００３１】
本発明は、哺乳類において糖尿病を処置するための処方物であって、ヨモギ属抽出物、ならびにギムネマ・シルベスタ（ｇｙｍｎｅｍａ  ｓｙｌｖｅｓｔｒｅ）、コロハ、ビターメロン（ｂｉｔｔｅｒ  ｍｅｌｏｎ）、αリポ酸、αリポ酸塩、コロソリン酸、ウルソール酸、Ｄ−ピニトール、アロエベラ、ピコリン酸クロム、バナバ葉、ヤコウ根（ｙａｃｏｕ  ｒｏｏｔ）、ニガウリ（ｍｏｍｏｒｄｉｃａ  ｃｈａｒａｎｔｉａ）、オリーブ葉抽出物、シタン（ｐｔｅｒｏｃａｒｐｕｓ  ｍａｒｓｕｐｉｕｍ）、サラシア・レティキュラータ（ｓａｌａｃｉａ  ｒｅｔｉｃｕｌａｔａ）、ニンニク、セイヨウサンザシ、ホスファチジルセリン、ω３脂肪酸および抵抗性デンプン（ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｓｔａｒｃｈ）より成る群から選択される少なくとも１種の化合物を含む、処方物を意図する。
【００３２】
さらに、本発明は、哺乳類において体重を制御するための処方物であって、ヨモギ属抽出物、ならびにピルビン酸、ピルビン酸塩、Ｌ−カルニチン、ヒドロキシクエン酸、エフェドリン、カフェイン、共役リノール酸、アスピリン、αリポ酸およびαリポ酸塩より成る群から選択される少なくとも１種の化合物を含む、処方物を意図する。
【００３３】
本発明はさらに、哺乳類において非脂肪細胞での細胞エネルギーの増大を促進するための処方物であって、ヨモギ属抽出物、ならびにクレアチン、クレアチン一水塩、クレアチン塩、クエン酸クレアチン、ピルビン酸クレアチン、ホスホクレアチン、カフェイン、αリポ酸、グルコサミン、コンドロイチン、加水分解コラーゲン、メチルスルホニル−メタン、乳清タンパク質、Ｌ−グルタミン、ホスファチジルコリン、コリン、コリン塩、ホスファチジルセリン、β−ヒドロキシ−β−メチルブチレート、ピルビン酸、ピルビン酸塩、Ｌ−カルニチン、Ｄ−リボース、従来のまたは標準のアミノ酸、分枝鎖アミノ酸、Ｓ−アデノシルメチオニン、タウリン、共役リノール酸、αリポ酸、αリポ酸塩、およびグリセリンより成る群から選択される少なくとも１種の化合物を含む、処方物を意図する。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
哺乳類において血中グルコースレベルを変調する方法であって、ヨモギ属の微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法。
（項目２）
前記血中グルコースレベルが減少される、項目１に記載の方法。
（項目３）
哺乳類においてグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）活性を変調する方法であって、ヨモギ属の微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法。
（項目４）
前記ＧＬＰ−１活性が増大される、項目３に記載の方法。
（項目５）
哺乳類の食欲を変える方法であって、ヨモギ属の微極性抽出物の有効用量を該哺乳類に投与する工程を包含する、方法。
（項目６）
回腸ブレーキを促進する方法であって、ヨモギ属の微極性抽出物の有効用量を哺乳類に投与する工程を包含する、方法。
（項目７）
ＧＬＰ−１とＧＬＰ−１受容体との間の結合を変調する方法であって、ヨモギ属の微極性抽出物の有効用量を哺乳類に投与する工程を包含する、方法。
（項目８）
哺乳類においてα−グルコシダーゼ活性を変調する方法であって、ヨモギ属の微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法。
（項目９）
哺乳類においてインスリン耐性を変調する方法であって、ヨモギ属の微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法。
（項目１０）
前記インスリン耐性が減少される、項目９に記載の方法。
（項目１１）
哺乳類においてグルコースのグリコーゲンへのインビボ変換を変調する方法であって、ヨモギ属の微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法。
（項目１２）
前記グルコースのグリコーゲンへのインビボ変換が増大される、項目１１に記載の方法。
（項目１３）
哺乳類においてインスリン受容体基質−２（ＩＲＳ−２）ポリペプチドの発現を変調する方法であって、ヨモギ属の微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法。
（項目１４）
前記ＩＲＳ−２ポリペプチドの発現が増大される、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
哺乳類においてインスリン刺激性のグルコース取り込みを変調する方法であって、ヨモギ属の微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法。
（項目１６）
前記インスリン刺激性のグルコース取り込みが増大される、項目１５に記載の方法。
（項目１７）
哺乳類において肝グルコース産出量を変調する方法であって、ヨモギ属の微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法。
（項目１８）
前記肝グルコース産出量が減少される、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記微極性抽出物が、ホスホエノールピルビン酸カルボキシキナーゼ（ＰＥＰＣＫ）の発現低下を招くアルコール系抽出物である、項目１７に記載の方法。
（項目２０）
哺乳類において２型糖尿病を処置する方法であって、ヨモギ属の微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法。
（項目２１）
非脂肪細胞において細胞エネルギーの増大を促進する方法であって、ヨモギ属の微極性抽出物の有効用量を投与する工程を包含する、方法。
（項目２２）
前記細胞エネルギーの増大が、筋肉細胞の強度の増加を提供する、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
前記細胞エネルギーの増大が、筋肉細胞の耐久性の高まりを提供する、項目２１に記載の方法。
（項目２４）
前記細胞エネルギーの増大が、生理的苦痛を防止または軽減する、項目２１に記載の方法。
（項目２５）
前記細胞エネルギーの増大が、疲労を防止または軽減する、項目２１に記載の方法。
（項目２６）
前記細胞エネルギーの増大が、栄養欠損を防止または軽減する、項目２１に記載の方法。
（項目２７）
前記非脂肪細胞が、筋肉細胞およびニューロンより成る群から選択される、項目２１に記載の方法。
（項目２８）
ヨモギ属の微極性抽出物を調製する方法であって、以下：
（ａ）ヨモギ属をエリシターに接触させる工程、および
（ｂ）微極性流体でヨモギ属を抽出する工程、
を包含する、方法。
（項目２９）
前記微極性流体が、少なくとも約６０％のエタノールを含む、項目２８に記載の方法。
（項目３０）
前記ヨモギ属が、少なくとも１．０の茎：葉バイオマス比を含む、項目２８に記載の方法。
（項目３１）
ヨモギ属を粉砕する工程をさらに含む、項目２８に記載の方法。
（項目３２）
前記ヨモギ属が未成熟である、項目２８に記載の方法。
（項目３３）
前記抽出物が、キャピラリシン、テトラヒドロキシ−メトキシフラバノン、ウンベリフェロン、サクラニン、トリヒドロキシ−メトキシフラバノンおよびトリヒドロキシフラバノンより成る群から選択される化合物を含む、項目２８に記載の方法。
（項目３４）
前記エリシターが、キトサンおよびＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａより成る群から選択される、項目２８に記載の方法。
（項目３５）
前記エリシターが約０．１％のキトサンである、項目２８に記載の方法。
（項目３６）
前記エリシターが、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｈａｒｚｉａｎｕｍである、項目２８に記載の方法。
（項目３７）
高い温度にて抽出物を乾燥して、それによりメチルオイゲノールの濃度を減少させる工程をさらに包含する、項目２８に記載の方法。
（項目３８）
前記ヨモギ属がＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓである、項目１、３、５、６、７、８、９、１１、１３、１５、１７、２０、２１または２８に記載の方法。
（項目３９）
前記微極性抽出物がアルコール系抽出物である、項目１、３、５、６、７、８、９、１１、１３、１５、１７、２０、２１または２８に記載の方法。
（項目４０）
前記アルコール系抽出物がエタノール系抽出物である、項目３９に記載の方法。
（項目４１）
前記抽出物が、検出可能な変異原性活性を欠く、項目１、３、５、６、７、８、９、１１、１３、１５、１７、２０、２１または２８に記載の方法。
（項目４２）
前記哺乳類がヒトである、項目１、３、５、６、７、８、９、１１、１３、１５、１７、２０、２１または２８に記載の方法。
（項目４３）
前記投与が経口送達を含む、項目１、３、５、６、７、８、９、１１、１３、１５、１７、２０、２１または２８に記載の方法。
（項目４４）
前記抽出物が、哺乳類の体重キログラム当たり５０００ミリグラムまでの植物材料の投与量にて、急性経口毒性を有さない、項目１、３、５、６、７、８、９、１１、１３、１５、１７、２０、２１または２８に記載の方法。
（項目４５）
ヨモギ属の微極性抽出物の有効用量を含む薬学的組成物。
（項目４６）
前記ヨモギ属がＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓである、項目４５に記載の組成物。
（項目４７）
前記微極性抽出物がアルコール系抽出物である、項目４５に記載の組成物。
（項目４８）
前記アルコール系抽出物がエタノール系抽出物である、項目４７に記載の組成物。
（項目４９）
前記抽出物が、検出可能な変異原性活性を欠く、項目４５に記載の組成物。
（項目５０）
キャピラリシン、テトラヒドロキシ−メトキシフラバノン、ウンベリフェロン、サクラニン、トリヒドロキシ−メトキシフラバノンおよびトリヒドロキシフラバノンより成る群から選択される化合物の有効用量を含む薬学的組成物。
（項目５１）
項目４９に記載の組成物の使用であって、該使用が、哺乳類においてグルコースレベルを変調すること、哺乳類の食欲を変更すること、回腸ブレーキを促進すること、ＧＬＰ−１とＧＬＰ−１受容体との間の結合を変調すること、哺乳類においてα−グルコシダーゼ活性を変調すること、哺乳類においてインスリン耐性を変調すること、哺乳類においてグルコースのグリコーゲンへのインビボ変換を変調すること、哺乳類においてインスリン受容体基質−２（ＩＲＳ−２）ポリペプチドの発現を変調すること、哺乳類においてインスリン刺激性のグルコース取り込みを変調すること、哺乳類において肝グルコースレベルを変調すること、哺乳類において２型糖尿病を処置すること、および非脂肪細胞における細胞エネルギーの増大を促進することより成る群から選択される、使用。
（項目５２）
哺乳類において糖尿病を処置するための処方物であって、該処方物は、ヨモギ属抽出物、ならびにギムネマ・シルベスタ、コロハ、ビターメロン、αリポ酸、αリポ酸塩、コロソリン酸、ウルソール酸、Ｄ−ピニトール、アロエベラ、ピコリン酸クロム、バナバ葉、ヤコウ（ヤコウ）根、ニガウリ（ｍｏｍｏｒｄｉｃａ  ｃｈａｒａｎｔｉａ）、オリーブ葉抽出物、プテロカルプス  マルスピウム（ｐｔｅｒｏｃａｒｐｕｓ  ｍａｒｓｕｐｉｕｍ）、サラシア・レティキュラータ（ｓａｌａｃｉａ  ｒｅｔｉｃｕｌａｔａ）、ニンニク、セイヨウサンザシ、ホスファチジルセリン、ω３脂肪酸および抵抗性デンプンより成る群から選択される少なくとも１種の化合物を含む、処方物。
（項目５３）
哺乳類における体重制御のための処方物であって、該処方物は、ヨモギ属抽出物、ならびにピルビン酸、ピルビン酸塩、Ｌ−カルニチン、ヒドロキシクエン酸、エフェドリン、カフェイン、共役リノール酸、アスピリン、αリポ酸およびαリポ酸塩より成る群から選択される少なくとも１種の化合物を含む、処方物。
（項目５４）
哺乳類において非脂肪細胞での細胞エネルギーの増大を促進するための処方物であって、ヨモギ属抽出物、ならびにクレアチン、クレアチン一水塩、クレアチン塩、クエン酸クレアチン、ピルビン酸クレアチン、ホスホクレアチン、カフェイン、αリポ酸、グルコサミン、コンドロイチン、加水分解コラーゲン、メチルスルホニル−メタン、乳清タンパク質、Ｌ−グルタミン、ホスファチジルコリン、コリン、コリン塩、ホスファチジルセリン、β−ヒドロキシ−βメチルブチレート、ピルビン酸、ピルビン酸塩、Ｌ−カルニチン、Ｄ−リボース、アミノ酸、分枝鎖アミノ酸、Ｓ−アデノシルメチオニン、タウリン、共役リノール酸、αリポ酸、αリポ酸塩およびグリセリンより成る群から選択される少なくとも１種の化合物を含む、処方物。
本発明の好ましい実施形態を記載するのであって、発明の範囲を限定することを意味するものではない以下の詳細な説明を考慮すれば、本発明の多数のその他の局面および利点は明らかであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３４】
【図１】Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の潜在的長期毒性試験に関与した８〜９週齢の雄雌ラットの体重増加および平均体重を示すヒストグラムを示す。
【図２】肥満Ｚｕｃｋｅｒラット由来の骨格筋細胞の初代培養におけるインスリン刺激性のグルコース取り込みに対するＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の効果を示すヒストグラムを示す。
【図３】ヒト骨格筋細胞培養におけるインスリン刺激性のグルコース取り込みに対するＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の効果を示すヒストグラムを示す。
【図４】インスリンおよびＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物で処理したヒト骨格筋細胞培養におけるインスリン受容体基質１（ＩＲＳ−１）およびインスリン受容体基質２（ＩＲＳ−２）のタンパク質の含有量を示す。
【図５】Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）画分におけるＧＬＰ−１結合活性を示す。各画分は、同一濃度で試験した連続した５分間の画分を表した（仮定分子量３００で１０μＭ）。
【図６】図５における調製用ＨＰＬＣ画分８〜１０［８（上のパネル）、９（真ん中のパネル）、および１０（下のパネル）］に相当するＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の生化学的プロフィールを示す液体クロマトグラフィ−質量分光光度計（ＬＣ−ＭＳ）のクロマトグラムを示す。
【図７】種々の齢［芽生え（約１４日齢）大型の水耕に移した（０日）後７日間隔］におけるＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの生化学的プロフィールを示す一連のＬＣ−ＭＳのクロマトグラムを示す。６つのパネルは、０日と指定した後のそれぞれ、上から下に７日目、１４日目、２１日目、２８日目、３５日目、および４２日目に相当する。
【図８】Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの茎（上のパネル）および葉（下のパネル）の生化学的プロフィールを示すＬＣ−ＭＳのクロマトグラムを示す。
【図９】凍結乾燥（上のパネル）または風乾（下のパネル）したＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の生化学的プロフィールを示すＬＣ−ＭＳのクロマトグラムを示す。
【図１０】凍結材料（左）または新鮮材料（右）の浸漬していないＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の生化学的プロフィールを示すＬＣ−ＭＳのクロマトグラムを示す。
【図１１】種々の条件下に維持したＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の生化学的プロフィールを示すＬＣ−ＭＳのクロマトグラムを示す。上から下に、条件は、−２０℃のフリーザー、２２℃の開放容器、２２℃のデシケータおよび３７℃の開放オーブンであった。
【図１２】ＵＶクロマトグラム（２５４ｎｍ）（パネルＡ）および質量スペクトル総イオンクロマトグラム（パネルＢ）によりＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物を分析した結果を示す。パネルＢにおけるピークの主要成分の推定上の正体は、示した番号に相当する。プロフィールＢのピークの同定：１）キャピラリシンまたはテトラヒドロメトキシフラバノンのいずれかとウンベリフェロン誘導体との混合物、２）ジテルペン、３）サクラニン誘導体またはトリヒドロキシメトキシフラバノン、４）ジテルペン、および５）少なくとも３種の成分を有する複合ピークにおいて主としてトリヒドロキシフラバノン。
【図１３】エストラゴールおよびメチルオイゲノールについてＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物を分析した結果を示す。パネルＡは、各化合物についての質量スペクトル断片化を伴った、エストラゴール（１）およびメチルオイゲノール（２）の標準の総イオンクロマトグラムである。パネルＢは、主要ピークの成分の推定上の同定を伴った、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物のバッチの総イオンクロマトグラムである。パネルＢのピークの同定：（１）エストラゴール検出不能、かつ示されていない）、２）メチルオイゲノール、３）１，２，３−トリメトキシ−５−（２−プロフェニル）ベンゼン、４）トランスイソエレミシン、５）メチルウンベリフェロン、６）フィトール、および７）４，５−ジヒドロキシ−７−メトキシフラバノン。
【発明を実施するための形態】
【００３５】
（発明の詳細な説明）
本発明は、望ましくない副作用のリスクを伴わない、天然でありかつ安価な物質を用いて、炭水化物代謝に関連した様々な病状、障害および状態を処置するのに有用な、ヨモギ属、特にＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓのような植物からの有効な材料を製造し（抽出するか、または浸出物を得ることによって）、それを回収するための方法を提供する。さらに、この有効な材料は、部分的または完全に容易に取り除く（例えば、乾燥）ことができる単純でかつ安価な溶媒によって抽出され、この有効な材料の濃縮した形態（例えば、粉末）が得られる。
本明細書で使用する場合の用語「有効用量」は、血中グルコースレベルの測定可能な変化またはＧＬＰ−１のその天然の受容体への結合親和性の測定可能な変化を引き起こすことができる、ヨモギ属のような植物の抽出物を含む用量を意味する。有効用量の正確な値は、各患者の感受性および大きさに基づいて変化し、有効用量の慣用的な投与のための従来の手順を用いて当業者によって容易に決定可能である。好ましくは、植物抽出物の有効用量は、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約１０，０００ｍｇ／ｋｇの間である。好ましくは、有効用量は約１０００ｍｇ／日である。
【００３６】
本明細書で使用する場合の用語「有効な材料」は、有益な生理学的反応を引き出すために哺乳類に投与可能であるように、本明細書に記載された抽出流体または溶液に懸濁可能である、または好ましくは溶解可能である、植物材料を言う。例えば、有効な材料を哺乳類に投与すると、結果として血中グルコースレベルを下げる生理学的反応が引き起こされる。
【００３７】
本明細書で使用する場合の用語「ビヒクル」は、一緒に哺乳類に投与される植物（例えば、ヨモギ属）の抽出物と共に使用されるキャリアまたは希釈剤を意味する。ビヒクルとして役立つ材料は、哺乳類による注射または摂取に安全な材料であり、一般に非変異原性で、非毒性であり、アレルギー反応を起こさない。ビヒクルとして有用な材料の例は、生理食塩水（すなわち、０．９％ＮａＣｌ）、２％ツイーン８０（蒸留水中）、または液体もしくは固形の食材である。
【００３８】
「微極性（Ｍｉｌｄｌｙ  ｐｏｌａｒ）」流体は、当該技術分野で理解されているように、わずかに極性〜中程度に極性である流体を意味する。本明細書で使用する場合の「微極性」とは、弱い〜平均程度の親水性であることにより特徴付けられる、中程度に不規則な電子分布を意味する。微極性流体としては、追加の化学基が流体の極性を破壊せず、流体の極性を水のレベル（これは、微極性流体の定義から明確に除外される）まで高めないことを条件に、すべての直鎖および分枝鎖の第１級アルコールおよびそれらの化学的誘導体が挙げられる。好ましい微極性流体は、低分子量の直鎖第１級アルコール（例えば、エタノール）のような液体である。水は、微極性流体ではなく、高度に極性のある水性流体である。しかしながら、水と微極性流体（例えば、エタノール）との混合物は、それ自体、微極性流体である。後者の流体の一例は、６０％エタノールである。
【００３９】
本明細書で使用する場合の用語「哺乳類の食欲」は、参照時間枠に関した、哺乳類による栄養摂取の受入能力を意味する。哺乳類の食欲は、定められた時間の範囲にわたって哺乳類によって消費された栄養物の量を単に量ることによって測定することができる。哺乳類の食欲の変化は、同一時間にわたって、同一種類の栄養物にさらすことにより、処置をした哺乳類の食欲を、処置しなかった類似の哺乳類の食欲とともに測定することによって、決定される。哺乳類によって摂取された栄養物の量における増加または減少は、それぞれ、哺乳類の食欲の増加または減少を意味する。
【００４０】
「障害」は、ヒトのような哺乳類の望ましくない状態または疾患を意味する。高脂血症の状態は、本明細書で使用する場合の「障害」または「疾患」の定義から特に除外される。
【００４１】
タンパク質グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）は、胃内容排出を阻害すること、食物摂取を制御すること、インスリンの生合成および分泌を刺激すること、グルカゴンの分泌を阻害すること、膵島の増殖を誘発すること、回腸ブレーキを促進すること、ならびに視床下部−下垂体機能を調節することを含む、複数の機能を有するとして、当該技術分野で公知である。食後高血糖を招き得る胃内容排出速度は、遠位小腸における回腸ブレーキの刺激によって阻害することができる。ＧＬＰ−１の種々の生理的活性のうち、例えば、視床下部−下垂体機能の調節のように、必ずしもすべてが糖尿病に関係しているわけではない。
【００４２】
本明細書で使用する場合の用語「回腸ブレーキ」とは、正常な消化過程を妨害する下部小腸の生理的状態を意味する。具体的には、それは、下部小腸（回腸）の内容物（例えば栄養物）が、例えば、胃分泌および膵分泌を減らすことや胃内容排出を妨害することによって、上部消化管の活動に影響を及ぼす、内分泌誘導の腸の変化である。本発明の抽出物（例えば、アルコール系抽出物）は、回腸ブレーキを引き起こし得る有効な材料を含み得る。
【００４３】
本明細書で使用する場合の用語「変調する」は、グルコースのような物質、またはポリペプチドのような生体分子の量、活性または能力を変化させることを含む、生物、組織、細胞または分子の特性を変更する、調整するまたは変動させることを意味する。
【００４４】
本明細書で使用する場合の用語「抽出物」は、物質または組成物が、植物に対して外部で見い出される（すなわち、浸出物）か、植物または植物の一部内であるがその細胞に対して外部で見い出されるか、または植物の細胞内で見い出されるかどうかに関わりなく、植物または植物の一部の供給源から得られる物質または組成物を意味する。当該技術分野で理解されているように、植物または植物の一部から物質または組成物を得るために、化学的および／または物理的作用が必要とされ得る。
【００４５】
本明細書で使用する場合の用語「検出可能なレベル」は、特に指示されない限り、当該技術分野で公知の手段を用いて感知され得るレベルである。例えば、突然変異原の検出可能なレベルは、当該技術分野で公知であるように、アメス変異原性試験を用いて感知できるレベルである。
【００４６】
本明細書で使用する場合の用語「急性経口毒性」は、経口投与（例えば、摂取または胃管栄養法）の際に短期間で毒性効果を有するという、当該技術分野における意味を与えられる。
【００４７】
ヒト患者のような哺乳類にヨモギ属抽出物を送達するのに使用するために、当該技術分野で公知のあらゆる方式を含む、種々の投与方式が、意図される。植物（例えば、ヨモギ属）の抽出物を投与する好ましい方式としては、注射（例えば、静脈内、筋肉内および皮下）、吸入、舌下投与、経口投与、経鼻胃管による投与、直腸投与（例えば、座薬による）、および局所投与が挙げられる。好ましくは、投与の方式は、経口または経鼻胃管である。
【００４８】
本明細書で使用する場合の用語「薬学上許容可能なキャリア」または「生理学上許容可能なキャリア」は、薬学的組成物としてのＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの抽出物の送達を達成するか、または促進するのに適切な１つまたはそれより多くの処方材料を言う。
【００４９】
本明細書で開示されるヨモギ属抽出物は、さらなる分画、例えば、突然変異原または毒素の量をなくすか、または低減すること、を必要としないアルコール系溶液のような微極性流体を用いて抽出される。血中グルコースのレベルを変調することができる有効用量で、哺乳類にこの抽出物を投与することができる。別に、ＧＬＰ−１活性を変調することができる有効用量で、哺乳類にこの抽出物を投与することができる。本発明の抽出物のその他の使用としては、栄養、特にスポーツ用の栄養を改善するため、または哺乳類の体重を制御するための有効用量の投与が挙げられる。さらに、糖尿病の処置またはその症状の改善、栄養（例えば、スポーツ用の栄養）の改善、または体重制御に有用な多種多様な物質と併用して、ヨモギ属の抽出物、好ましくはヨモギ属の微極性抽出物を投与することができる。ヨモギ属抽出物の有効用量は、アメス試験を用いて決定される有意な変異原性活性とは関係なく、毒素にも関係ない。したがって、開示されたヨモギ属抽出物は、変異原性および／または毒性を懸念することなく、有効に血中グルコースのレベルを変調し、ＧＬＰ−１活性を変調するために使用され得る。
【００５０】
上で述べたように、ヨモギ属抽出物は、糖尿病を処置するか、またはその症状を改善する方法において、様々な物質と組み合わせてもよい。例えば、有効用量のヨモギ属抽出物を、有効用量の以下の天然に存在する（例えば、植物系の）物質または化学的化合物：ギムネマ・シルベスタ、コロハ、ビターメロン、αリポ酸、バナバ葉、ヤコウ根、ニガウリ、オリーブ葉抽出物、シタン、サラシア・レティキュラータ、ニンニク、セイヨウサンザシ、コロソリン酸、ウルソール酸、Ｄ−ピニトール、アロエベラ、ピコリン酸クロム、ホスファチジルセリン、ω３脂肪酸、抵抗性デンプン、ニチニチソウ（ｃａｔｈａｒａｎｔｈｕｓ  ｒｏｓｅｕｓ）、カシューナッツ（ａｎａｃａｒｄｉｕｍ  ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｅ）、ムラサキフトモモ（ｓｙｚｙｇｉｕｍ  ｃｕｍｉｎｉ）、ユーカリ（ｅｕｃａｌｙｐｔｕｓ  ｇｌｏｂｕｌｅｓ）、ルーピン（ｌｕｐｉｎｕｓ  ａｌｂｕｓ）、タマネギ（ａｌｌｉｕｍ  ｃｅｐａ）、ニンニク（ａｌｌｉｕｍ  ｓａｔｉｖａ）、イエローベル（ｔｅｃｏｍａ  ｓｔａｎｓ）、セイヨウイラクサ（ｕｒｔｉｃａ  ｄｉｏｉｃａ）、セイヨウタンポポ（ｔａｒａｘａｃｕｍ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ）、オオヒメクグ（ｋｙｌｌｉｎｇａ  ｍｏｎｏｃｅｐｈａｌａ）、ユカン（ｐｈｙｌｌａｎｔｈｕｓ  ｅｍｂｌｉｃａ）、チャンカピエドラ（ｐｈｙｌｌａｎｔｈｕｓ  ｎｉｒｕｒｉ）、インドセンダン（ａｚａｄｉｒａｃｈｔａ  ｉｎｄｉｃａ）、モルブス・アルバ（ｍｏｒｂｕｓ  ａｌｂａ）、ポテリウム・アンシストロイデス（ｐｏｔｅｒｉｕｍ  ａｎｃｉｓｔｒｏｉｄｅｓ）およびニンジン（ｄａｕｃｕｓ  ｃａｒｏｔａ）の任意の一種と組み合わせてもよい。糖尿病を処置するか、または糖尿病の症状を改善する方法において使用するための物質のこれらの組み合わせは、各成分（すなわち、ヨモギ属抽出物および投与のために併用される物質）に起因する利益を提供する。
【００５１】
また上述したように、ヨモギ属抽出物は、スポーツ用栄養物のような栄養物を改善する方法において様々な物質と組み合わせてもよい。そのような方法では、有効用量のヨモギ属抽出物は、有効用量の以下の天然に存在する（例えば、植物系の）物質または化学的化合物：クレアチン、クレアチン一水塩、クレアチンの塩（例えば、クエン酸クレアチン、ピルビン酸クレアチン）、クレアチン誘導体およびその塩、ホスホクレアチン、カフェイン、αリポ酸、グルコサミン、コンドロイチン、加水分解コラーゲン、メチルスルホニル−メタン、乳清タンパク質、Ｌ−グルタミン、ホスファチジルコリン、コリン、コリン塩、ホスファチジルセリン、β−ヒドロキシ−β−メチルブチレート、ピルベート（ｐｙｒｕｖａｔｅ）、Ｌ−カルニチン、Ｄ−リボース、アミノ酸（従来のアミノ酸）、分枝鎖アミノ酸、Ｓ−アデノシルメチオニン、タウリン、共役リノール酸、αリポ酸、αリポ酸塩およびグリセリンの任意の一種と組み合わせられる。種々の化合物の塩を参照するにおいて、本発明は、化合物および任意の適切な塩形成性の対イオン（例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオン、ハロゲンイオン、有機カチオン、有機イオン、錯体イオン、および当該技術分野で公知のその他の任意の対イオン（好ましくは、ナトリウム））を意図する。スポーツ用栄養物のような栄養物を改善する方法において使用するための物質のこれらの組み合わせも、各成分（すなわち、ヨモギ属抽出物、および投与のために併用される物質）に起因する利益を提供する。
【００５２】
さらに、上記のように体重を制御するための方法において様々な物質とヨモギ属抽出物を組み合わせてもよい。そのような方法では、有効用量のヨモギ属抽出物を有効用量の以下の天然（例えば、植物系）物質または化学的化合物：ピルベート、Ｌ−カルニチン、ヒドロキシクエン酸、エフェドリン、カフェイン、および共役リノール酸（ＣＬＡ）の任意の一種と組み合わせてもよい。スポーツ用栄養物のような栄養物を改善する方法において使用するための物質のこれらの組み合わせも、各成分（すなわち、ヨモギ属抽出物、および投与のために併用される物質）に起因する利益を提供する。物質の同一の組み合わせが１つよりも多くの方法において有用であってもよいが、にもかかわらず、方法は目的に基づいて区別可能である。
【００５３】
以下の実施例は本発明の実施形態を説明する。実施例１は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの抽出物の調製を記載する。実施例２は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓのアルコール系抽出物の有効性を開示する。実施例３は、非糖尿病マウスにおけるアルコール系抽出物の血糖降下活性を記載する。実施例４は、ラットの精巣上体の脂肪組織を用いた炭水化物代謝におけるアルコール系抽出物の影響を開示する。実施例５は、炭水化物代謝に関与するタンパク質におけるアルコール系抽出物の影響を示す。実施例６は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の毒性を記載する。実施例７は、インスリン刺激性のグルコース取り込みにおけるＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの抽出物の影響を示す。実施例８は、ＰＥＰＣＫ発現および肝グルコース産出量におけるＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの抽出物の影響を開示する。実施例９は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物におけるエストラゴールおよびメチルオイゲノールの量について考察する。実施例１０は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの栽培を記載する。実施例１１は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ
ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物を抽出し、かつ保存する方法を開示する。実施例１２は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の液体クロマトグラフィ−質量分光光度計（ＬＣ−ＭＳ）およびガスクロマトグラフィ−質量分光光度計（ＧＣ−ＭＳ）による分析を記載する。実施例１３は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の組成物および投与を考察する。
【実施例】
【００５４】
（実施例１：抽出物の調製）
Ｇｒｏｄａｎのロックウール製キューブ（幅３．４ｃｍ×深さ３．４ｃｍ×高さ３．７ｃｍ）の内部に０．９ｃｍの深さのウェル中にＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ種子（Ｒｉｃｈｔｅｒｓ  Ｓｅｅｄｓ）を発芽させた。１週間後、苗木を、栄養溶液（６０リットルの水中で５ｇのＮＨ４ＮＯ３および９０ｇのＣａ（ＮＯ３）２を補完した１２０ｇのＨｙｄｒｏ−Ｓｏｌ［Ｓｃｏｔｔｓ−Ｓｉｅｒｒａ  Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ  Ｃｏｍｐ．，Ｍａｒｙｓｖｉｌｌｅ，ＯＨ，ＵＳＡ］）を有する水耕システム中に配置した。深い水耕（すなわち、４ｃｍより深い水中での連続した浸漬）に対して約１００ｍｌ／分の流速で水耕栄養溶液を介して圧縮ガスをバブリングさせることにより空気混和を行った。あるいは、栄養溶液が連続的に流れている浅い溝の水耕システムに苗木を入れた。収穫２４時間前に、水耕溶液中にて０．１％のキトサンで植物を誘導した。植物の誘導のためのキトサンの使用は、未処理の植物、または酢酸、サリチル酸およびジャスモン酸メチルのようなその他のエリシターで処理した植物よりも高い血糖降下（すなわち、血中グルコース低下）活性を提供した。
【００５５】
４〜６週間の成長の後、根冠から上の植物全体を収穫し、凍結乾燥した。次いで、２ｍｍメッシュのふるいが付いた実験室用ミルで、乾燥した植物材料を微粉末に粉砕し、６０％エタノール溶液で抽出した。最初の抽出では、粉末化したヨモギ属の質量よりも１０倍多い質量の溶媒を用いた。７０℃にて１〜４時間、混合物を加熱した。遠心により固形部分を取り出し、ペレットのおよその質量の２〜４倍に等しい量の６０％エタノールですすいだ。ペレットのすすぎを３回繰り返した。次いで回転エバポレータにより真空下で溶液からエタノールを除き、出発容積の５０％未満の容積にした。残った水を凍結乾燥によって除いた。凍結乾燥後に残っている緑がかった粉末が、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の一形態だった。
【００５６】
（実施例２）
（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓのアルコール系抽出物の有効性）
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の有効性をストレプトゾトシン（ＳＴＺ）処置したマウスで評価した。ＳＴＺは、全部ではないにしろほとんどの膵臓β細胞を破壊し、インスリン産生がほとんどないまたはインスリン産生が全くない動物にし、重篤な高血糖にすることによって糖尿病を誘発する（Ｈｉｓａｓｈｉら、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，８７：２３７−２４３（１９８３））。これは、抗糖尿病の有効性に対する厳しいアッセイであり、現在処方されている薬物の多数は有意な活性を示さない。Ｈｉｓａｓｈｉら、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，８７：２３７−２４３（１９８３）に記載されたように、ＳＴＺでマウスを処置した。ＳＴＺ処置したマウスに７日間、経口胃管栄養法によって、５００ｍｇ／ｋｇ用量のＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物を毎日投与した。さらに、インスリンの用量（１ＩＵ／ｋｇ）をＳＴＺ処置したマウスに皮下投与したが、対照として、２０ｍｌ／ｋｇのビヒクルのみ（蒸留水中０．９％のＮａＣｌまたは２％のツイーン８０）をＳＴＺ処置したマウスに投与した。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物で処置したマウスは、約２０％の血中グルコース濃度の減少を示したが、それは注射したインスリンによって生じる活性（４２％の低下）のおよそ半分である。理論に束縛されることを望まないが、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、インスリン欠損動物において活性であるのだから、作用様式はたぶんインスリン産生の刺激に関与しないだろうと思われる。しかしながら、メカニズムに如何を問わず、結果は、Ａ．ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの微極性エタノール系抽出物のような植物抽出物が、血中グルコースレベルを下げるのに有効な用量で経口投与することができることを立証している。さらに、これらの結果は、１型または２型のいずれかの糖尿病を処置すること、またはその症状を改善することにおける本発明の植物抽出物の有効性を立証している。
【００５７】
（ＫＫ−Ａｙ糖尿病マウス）
また、治療スクリーンにおいて有用な糖尿病の信頼できる、予測的なインビボモデルであるＫＫ−Ａｙ遺伝的糖尿病マウスにおいて、抗糖尿病剤として、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物を評価した。ＫＫ−Ａｙマウスは、成熟するにつれて自然に重篤な糖尿病を発症し、インスリン耐性の結果として高い血中グルコース濃度を有する（Ｓｕｔｏら、Ｅｕｒｏ．Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎ．，１３９：６５４−６６１（１９８８）；Ｓｈｉｍｕｒａら、Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ  （１９９７））。これらのマウスはまた、血中グルコースを下げるには無効である非常に高い血中インスリン濃度も有する。実施例１に記載したように調製したＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物に、成熟ＫＫ−Ａｙマウスを曝した。経口胃管栄養法によって抽出物をマウスに投与した。信頼できるデータを得るために、対照マウスには、経口胃管栄養法によって、ビヒクルのみを与えた。比較する目的で、一部のマウスは、２つの公知の血糖降下薬（トログリタゾンまたはメトフォルミン）のいずれかで処置した。給餌投薬計画を７日間継続し、次いで、当該技術分野で公知の従来の技術、すなわち、Ｇｌｕｃｏｓｅ  ＨＡ  Ａｓｓａｙキット（日本、和光）を用いたグルコースＨＡアッセイ、およびＥＬＩＳＡ  Ｉｎｓｕｌｉｎ  Ａｓｓａｙキット（フランス、ＳＰＩ  ｂｉｏ）を用いたＥＬＩＳＡインスリンアッセイを用いて、インスリンおよび血中グルコースのレベルを測定した。
【００５８】
以下の表１はＫＫ−Ａｙマウスから得た結果を示す。表１に示されるように、ＫＫ−Ａｙマウスにおいて、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、血糖降下薬に類似するような有効性で、血中グルコースの濃度を有意に減少させた。ビヒクル群と試験群との間での比較のために、不対スチューデントｔ検定を適用し、Ｐ＜０．０１のレベルでの有意性が算出された。血中グルコースを下げる上でのその有効性のゆえに、このアッセイで参照薬として使用したトログリタゾンは、肝毒性のために現在は市販されていない（Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ  Ｄｅｓｋ  Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ，ＰＤＲ，Ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ  Ｌｉｂｒａｒｙ，Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｅｃｏｎｏｍｉｃｓ  Ｇｒｏｕｐ，Ｉｎｃ．，Ｍｏｎｔｖａｌｅ，ＮＪ  （２００１））。メトフォルミンは長い使用歴のある有効な薬剤であるが、文書で十分に立証された多数の副作用を有する（ＰＤＲ、２００１年）。血中グルコース濃度を下げることに加えて、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、経口血糖降下薬に類似して、ＫＫ−Ａｙマウスの上昇している血中インスリンのレベルの減少を誘導した。ここでもまた、理論に束縛されることを望まないが、これらの結果は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物およびこれらの薬物には潜在的に類似した作用様式があり、それは濃度ではなくインスリンの感受性の上昇に関与することを示唆している。
【００５９】
（表１．７日間給餌後の遺伝学的糖尿病ＫＫ−ＡｙマウスにおけるＡｒｔｅｍｉｓｉａ
ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物および合成抗糖尿病薬の活性）
【００６０】
【表１】
2010018637.tif 000002
（毒性）
ヨモギ属に関する文献は、毒性の懸念は、ヨモギ属の摂取に伴うことを示唆している。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓのアルコール系抽出物の急性経口毒性の可能性を評価するために、アルコール系抽出物を用い、ラットにおいて給餌試験を行った。
【００６１】
１０匹の健康なラットに、経口胃管栄養法により、体重ｋｇ当たり５，０００ｍｇの量でアルコール系抽出物を投与した。１日少なくとも１回、１４日間、死亡、肉眼的毒性の兆候、および行動的変化について動物を観察した。動物はすべて生き残り、体重は増加し、活動的かつ健康に見えた。最後に殺した被験ラットの肉眼的検死には目立ったところはなかった。結果は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物が、適用可能なＦＤＡ規定下で試験するのに命じられた最大投与量である５０００ｍｇ／ｋｇにおいて急性経口毒性を有さなかったことを示している。
【００６２】
（変異原性）
植物抽出物における別の主要な懸念は、そのような調製物が、変異原性のための標準アメス試験を用いた陽性反応によって示されるような突然変異原を含有していることが多いということである（Ａｍｅｓら、Ｍｕｔａｔｉｏｎ  Ｒｅｓ．，３１：３４７（１９７５）を参照のこと）。アメス変異原性試験の背景で使用されるとき「陽性反応」は、アメス試験の評価とともに、さらに容易に理解される。アメス試験は、５つのＨＩＳ−ネズミチフス菌（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ  ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）株のコレクションを潜在的な突然変異原にさらし、ＨＩＳ＋への復帰について選抜する。ＨＩＳ−であることに加えて、これら５つの株は突然変異原に対してさらに感受性であるように操作されている。アメス試験の陽性反応は、対照（すなわち、潜在的な変異原にさらしていない同一株（複数可））に比したＨＩＳ＋への復帰の頻度の検出可能な上昇である。代謝誘導体としてインビボで単に活性である突然変異原を説明するために、代謝の活性化がある場合とない場合の両方で各株を調べる。アメス試験によりＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓのアルコール系抽出物の完全な変異原性試験を行った。アメス試験の結果は、代謝の活性化があろうとなかろうと、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、検出可能な変異原性の効果を誘導せず、したがって業界基準のアメス変異原性試験を用いて非変異原性であるとみなされることを示した。
【００６３】
有効性および毒性の評価は、薬理試験会社であるＭＤＳ  Ｐｈａｒｍａ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ  Ｃｏ．（１１８０４  Ｎｏｒｔｈ  Ｃｒｅｅｋ  Ｐａｒｋｗａｙ，Ｓｏｕｔｈ  Ｂｏｔｈｅｌｌ，ＷＡ  ９８０１１）により行われた。経口急性毒性試験は、ＰＳＬ（Ｐｒｏｄｕｃｔ  Ｓａｆｅｔｙ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，７２５  Ｃｒａｎｂｕｒｙ  Ｒｏａｄ，Ｅａｓｔ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ，ＮＪ）、ＥＮｉ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｃ．の一部門（２３９４  Ｒｏｕｔｅ  １３０  Ｄａｙｔｏｎ，ＮＪ  ０８８１０）により行われた。これらの試験はすべて、米国連邦規則第２１条５８章に定義されるような医薬品安全性に関する非臨床試験の実施の基準；米国ＦＤＡの医薬品安全性に関する非臨床試験の実施の基準（ＦＤＡ  Ｇｏｏｄ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  Ｓｔａｎｄａｒｄｓ）；ＯＥＣＤ（経済協力開発機構）の医薬品安全性に関する非臨床試験の実施の基準の原則、Ｃ（９７）１８６／最終に準拠し、健康影響試験のガイドライン（Ｈｅａｌｔｈ  Ｅｆｆｅｃｔｓ  Ｔｅｓｔ  Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ）、ＯＰＰＴＳ８７０．１１００（１９９８年）に従って準拠した。ＭＤＳ  Ｐｈａｒｍａ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ  Ｃｏ．およびＰＳＬにより使用されたプロトコールを本明細書に記載する。
【００６４】
（実施例３：非糖尿病マウスにおけるアルコール系抽出物の血糖降下活性）
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の血糖降下活性の可能性を非糖尿病マウスで調べた。実施例１で記載した調製されたＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物にマウスを暴露した（食物へのコーティングの形態でマウスに経口投与した）。信頼できるデータを得るために、対照マウスにビヒクルをコーティングした食物を与えた。ビヒクルは蒸留水中の０．９％ＮａＣｌまたは２％ツイーン８０だった。給餌投薬計画を７日間継続し、次いで、当該技術分野に公知の技術（ＥＬＩＳＡ  Ｉｎｓｕｌｉｎ  Ａｓｓａｙキット（フランス、ＳＰＩ  ｂｉｏ）；Ｇｌｕｃｏｓｅ−ＨＡ  Ａｓｓａｙキット（日本、和光））を用いて、インスリンおよび血中グルコースのレベルを測定した。ビヒクル（１０ｍｌ／ｋｇ）で飼育したマウスを、対照として供した。５００ｍｇ／ｋｇの投与量レベルにてＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、非糖尿病動物の血中グルコース濃度に統計的に有意ではない減少を引き起こした；抽出物で飼育したマウスにおけるインスリン濃度の変化は、対照のそれとほぼ同一であり、血中グルコースレベルは抽出物で飼育したマウスの方が、対照よりも１８％さらに減少した。ビヒクル群と試験群との間を比較するために、不対スチューデントｔ検定を適用し、Ｐ＜０．０５のレベルでの有意性が達成されなかった。このことは、減少が有意ではなかったことを示している。したがって、本発明の方法は、糖尿病患者のみしか処置を受けられないという深刻な関心を持つことなく、ヒトまたは非ヒト哺乳類を処置するために使用され得る。当該方法は、例えば、哺乳類の群れ（例えば、ウシ、ヒツジまたはブタの群れ）の処置のために、よく適している。
【００６５】
（実施例４：炭水化物代謝に対するアルコール系抽出物の影響）
ヨモギ属抽出物が高血糖を矯正する手段として血液からグルコースを身体に取り込むのに直接影響を与えるかどうかを確定するために、細胞グルコース取り込みアッセイを使用した。このアッセイでは、グルコース取り込みのインスリン刺激に極めて敏感であるグルコース代謝のモデルとして、摘出したラット精巣上体の脂肪組織を用い（Ｒｏｄｂｅｌｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２３９：３７５（１９６４））、標準的かつ周知のプロトコールを用いて、ＭＤＳ  Ｐｈａｒｍａ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓによって行われた。雄ラットの精巣上体の脂肪を細かく刻み、放射性標識した０．１ｍＭのグルコースを含有する溶液中で分解した。組織から脂質への放射性標識のＤ−［３−３Ｈ］グルコース（０．０５μＣｉ）の取り込みをシンチレーション計数で測定し、インスリン刺激性のグルコース代謝の指標を提供した。試験物質がインスリン受容体のアゴニスト活性を高めた指標として、インスリンの反応に比して試験物質の存在下で５０％より大きい細胞内グルコースの増加を用いた。試験物質によるインスリン誘導のグルコース取り込みの５０％より大きい阻害は、試験物質がインスリン受容体活性を下げることを示した。メトフォルミンおよびギルベンクラミドを含む多数の現在使用されている処方薬は、細胞によるグルコース取り込みに影響を及ぼす。広い範囲の濃度にわたるＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の脂肪細胞によるグルコース取り込みに対する影響を表２に示す。
【００６６】
（表２．ラットの精巣上体の脂肪組織を用いた細胞グルコース取り込みアッセイにおけるＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の活性）
【００６７】
【表２】
2010018637.tif 000003
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、脂肪組織におけるグルコース取り込みを促進も、阻害もしなかった（広い範囲のグルコース濃度にわたって、グルコース取り込みの％上昇および％低下は有意ではなかった）。このことは、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の作用様式が、脂肪細胞へのグルコース取り込みの刺激には関与しないことを示唆している。これは、その他の細胞型（例えば、筋肉細胞およびニューロン（実施例７で考察））によるグルコース取り込みに対してこれら抽出物が有する影響とは著しく違っている。これらの知見はまた、ヨモギ属抽出物が、体重増加を起こさずに、糖尿病患者における血中グルコースレベルを変調し得ることも示している。
【００６８】
（実施例５：炭水化物代謝に関与するタンパク質に対するアルコール系抽出物の影響）
炭水化物代謝に関与するタンパク質であるＧＬＰ−１は、インスリン分泌の増強、プロインスリン遺伝子発現の刺激、ならびにグルカゴン分泌および胃内容排出の抑制を含む複数の機能を有する（Ｄｒｕｃｋｅｒ，Ｄｉａｂｅｔｅｓ，４７：１５９−１６９（１９９８）；Ｆｅｈｍａｎｎら、Ｅｎｄｏｃｒ．Ｒｅｖ．，１６：３９０−４１０（１９９５）］。ＧＬＰ−１はまた膵臓β細胞の増殖を刺激するとともにインスリンの感受性を高める（Ｓａｎｄｈｕら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ，４８：１０４５−１０５３（１９９９）；Ｗａｎｇら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１４０：４９０４−４９０７（１９９９））。
【００６９】
抽出物が酵素活性および／またはホルモン−受容体の結合に影響を及ぼすかどうかを評価するために、インビトロアッセイを行って、以下を測定した：１）腸管刷子縁（ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｂｒｕｓｈ  ｂｏｒｄｅｒ）のα−グルコシダーゼの酵素活性；２）ヒトグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）のその受容体への結合：および３）インスリンのその受容体への結合。結果を以下の表３に示す。
【００７０】
例えば、アカルボース、プレコースおよびグリセットのような一部の糖尿病治療薬は聞くところによれば、スクロースおよびデンプンからのグルコースの放出に関与する腸管刷子縁α−グルコシダーゼ酵素を阻害する（Ｌｕｎａら、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｆａｍｉｌｙ
Ｐｈｙｓｉｃｉａｎ  ６３（９）：１７４７−５６（２００１））。α−グルコシダーゼによる複合炭水化物の加水分解は、糖尿病患者で食後高血糖を招く。コメ由来のα−グルコシダーゼに関与する薬物発見のための標準アッセイを用いて、潜在的なα−グルコシダーゼインヒビターとして、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物を評価した（Ｐｉｌｌａｒら、Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａ  Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ  Ａｃｔａ  １２９２：１９７−２０５（１９９６））。
【００７１】
ｐＨ６．３のＭＥＳ緩衝液中で抽出物とともに（実験条件）または抽出物なしで（対照）およびｐ−ニトロフェニルα−Ｄ−グルコピラノシドとともにα−グルコシダーゼ酵素を７０℃にて９０分間インキュベートした。１Ｍの炭酸ナトリウムで反応を停止し、４０５ｎｍにて分光光度計で吸光度を測定した。吸光度の変化は、ｐ−ニトロフェノールの放出に比例しており、それを用いて抽出物に起因するα−グルコシダーゼ活性におけるパーセント増減を算出した。
【００７２】
表３に示すように、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物はα−グルコシダーゼ活性を阻害せず（負の％阻害は刺激または活性化を示す）、むしろ、用量依存的様式にて活性の増加を促進した。したがって、α−グルコシダーゼ活性の変化したレベルは、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の血糖降下効果を説明していない。理論に束縛されることを望まないが、この結果は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓのアルコール系抽出物がグルコース代謝のその他の局面に影響を及ぼす可能性があることを示唆している。
【００７３】
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、ヒトグルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）のその受容体への結合に有意に影響を及ぼすことが判明した（表３に示される）。ヒトＧＬＰ−１受容体をコードするプラスミドにより安定的にトランスフェクトした細胞の膜を［１２５Ｉ］ＧＬＰ−１（７〜３６）、アミド（２０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ；Ａｍｅｒｓｈａｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，ＮＪ）と共に３７℃にて９０分間インキュベートした。次いで膜を洗浄し、放射活性を計測して特異的に結合した［１２５Ｉ］ＧＬＰ−１（７〜３６）、アミドの量を決定した。抽出物の存在による結合の相対的なパーセント増減を算出した。
【００７４】
ＧＬＰ−１結合アッセイの結果は、ＧＬＰ−１結合の負の阻害または増強は有意であり、用量依存性であることを示した。したがって、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、糖尿病において暗示される活性も含めて、ＧＬＰ−１のその受容体への結合を高めた（表３に示す）。この結果は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓのアルコール系抽出物が糖尿病患者においてグルコース代謝に影響を及ぼす１つの方法が、ＧＬＰ−１のその受容体への結合を高めることによるものであり得ることを示唆している。
【００７５】
同様に、抽出物がインスリン模倣性の活性またはインスリンを強化する活性を有するかどうかを確定するために、インスリンのその受容体への結合を直接妨害するＡ．ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の能力を測定した（表３に示す）。インスリン結合アッセイを用いて、インスリンのその受容体への結合に競合する試験化合物の能力を評価した。Ｋｏｃｈら、Ｈｏｐｐｅ−Ｓｅｙｌｅｒ’ｓ  Ｚ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，３６２：Ｓ．３４７−３５１（１９８１）に記載されている、薬物発見およびインスリン安定性試験に現在使用されている標準のインスリン結合アッセイを用いた。
【００７６】
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物を用いて、Ｋｏｃｈらが記載したようにインスリン結合アッセイを行った。雄ラットの肝臓の膜を［１２５Ｉ］インスリンと共に４℃にて１６時間インキュベートした。次いで膜を洗浄し、放射活性について計数して、特異的に結合した［１２５Ｉ］インスリンの量を決定した。次いでインスリンの受容体（膜）への結合を増減させる抽出物の能力を算出した。
【００７７】
このアッセイでは、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物はインスリンのその受容体への結合に有意な影響を有さなかった。この結果は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓのアルコール系抽出物が、インスリンの結合に影響を与えることによってその効果を発揮しないものであり得ることを示唆している。
【００７８】
（表３．酵素阻害アッセイおよび結合アッセイにおけるＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物のインビトロ活性）
【００７９】
【表３】
2010018637.tif 000004
したがって、本発明の別の局面は、ＧＬＰ−１活性を変調する方法に関する。好ましくは変調は刺激性の変化である。これらの方法は、糖尿病、特に２型糖尿病、またはそのような疾患または障害に関連する少なくとも１つの症状を処置するのに有用である。好ましくは、ＧＬＰ−１が誘導する食後高血糖を軽減または回避することなく、方法はこの有益な効果を達成する。本発明の関連する局面は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物のような、本発明に係る植物抽出物を含むＧＬＰ−１活性の変調剤である。
【００８０】
（実施例６：抽出物の毒性）
８〜９週令の雄雌ラットにおいて、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物による９０日間の慢性毒性試験を行った。処置濃度にかかわりなく、どの動物においても眼に見える毒性の兆候は認められなかった。肉眼的検死を行い、血液試料を集め、組織試料を組織学的評価に供した。いかなる処置ラットの体重増加も、処置しなかったラットと比べて明らかな差異はなかった（図１を参照のこと）。処置ラットと対照ラットとの間で、血中グルコースおよびインスリンの濃度に明らかな差異はなかった。理論に束縛されるこはを望まないが、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、体重も血中グルコースおよびインスリンの濃度も有意には変えないと思われる。したがって、組織学的検査は、本発明の抽出物において検出可能な毒性が存在しないことを確認することが予測される。これらの知見は、ヨモギ属抽出物が体重増加を起こすことなく、糖尿病患者において血中グルコースレベルを変調することを示す実施例４で提示されたデータに基づいた観察を裏付けている。
【００８１】
（実施例７：インスリン刺激性のグルコース取り込みに対するＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの影響）
骨格筋細胞は、インスリン刺激された全身のグルコースの処分の主要部位としての役目を果たす。インスリン刺激の条件下、筋肉細胞によるグルコース取り込みの効率性は、２型糖尿病に関連するインスリン耐性の発生によって低下する。骨格筋細胞の初代培養における基底のグルコース取り込みおよびインスリン刺激したグルコース取り込みを測定することにより、炭水化物代謝における好ましい効果を有するＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の能力の可能性を評価した。具体的には、インスリン耐性の動物モデル、すなわち、肥満のＺｕｃｋｅｒラットから筋肉細胞を取り出し、組織培養で増殖させた。細胞がおよそ７５％の集密性に増殖した後、細胞を広い範囲の濃度（０〜１０，０００ｎｇ／ｍｌ；図２を参照のこと）のＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物と共にインキュベートした。次いで、基底条件下（インスリンなし）またはインスリンの刺激後（１００ｎＭ）のグルコース取り込み［ｎＭグルコース／ｍｇ筋肉タンパク質（Ｂｒａｄｆｏｒｄタンパク質アッセイにより測定）］を測定した。ヒストグラムにおける棒の上の数は、相当するインスリン処理しなかった細胞に対するグルコース取り込みのパーセント増加を示す。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の最も高い濃度は、処理しなかった対照と比べて４０％までのインスリン刺激性グルコース取り込みの増加と関係した。この効果は用量依存性であると思われる。抽出物は、インスリン非存在下（基底条件）では有意な効果を有さなかった。したがって、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、インスリン耐性を低下させることによってインスリン刺激性のグルコース取り込みの有効性を高めていると思われる。
【００８２】
このアッセイはまた、ヒトの骨格筋細胞の培養でも行った。当該技術分野はこのインビトロの系が、インビボの系の予測的なものであると認識する（Ｈｅｎｒｙら、１９９５）ので、これは、ヒトの有効用量を決定するのに用いることができる。肥満Ｚｕｃｋｅｒラット培養と同様に、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、用量依存性の様式で、ヒト骨格筋細胞におけるインスリン刺激性のグルコース取り込みを有意に高めた（図３を参照のこと）。インスリン刺激性のグルコース取り込みにおける全体の増加は、肥満ラット細胞よりもヒト骨格筋細胞において低かった。しかしながら、ヒト骨格筋細胞は、糖尿病や肥満を起源としていなかったが、肥満起源の細胞やインスリン耐性の細胞とは代謝的に区別される。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物はインスリン非存在下ではグルコース取り込みを促進しなかったので、いかなる血糖降下効果をも有しそうにない。
【００８３】
インスリンの反応は複雑であり、受容体結合、多数の細胞内カスケード、グルコース輸送体の転位、および輸送されたグルコースのグリコーゲンへの変換に関与している。グルコース取り込みに加えて、骨格筋細胞培養における検討によって、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、グルコースのグリコーゲンへの変換を高め、それによってインスリン耐性の持続的な低下を支えることが示された（データは示さず）。
【００８４】
インスリン受容体基質（ＩＲＳ−１およびＩＲＳ−２）は、このインスリンシグナル伝達カスケードの鍵となるメッセンジャーである。したがって、抗ＩＲＳ−１抗体および抗ＩＲＳ−２抗体とデンシトメトリーによるウエスタンブロット解析を用いて、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物での処理後に、これらの重要なタンパク質の濃度を定量した。インスリンと共におよびインスリンなしの双方にて、濃度範囲（０〜１００ｎｇ／ｍＬ）にわたるＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物による処理に反応したヒト骨格筋細胞において、ＩＲＳ−１およびＩＲＳ−２を測定した（図４を参照のこと）。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物で処理した後、ＩＲＳ−２タンパク質のレベルに有意な増加があった。
【００８５】
理論に束縛されることは望まないが、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、いかなる血糖降下効果も有さないと思われる。しかしながら、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、インスリン耐性を下げ、ＩＲＳ−２タンパク質の発現を高めることを示唆する証拠がある。
【００８６】
したがって、ヨモギ属の一員（例えば、タラゴン（ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ））のような植物の微極性抽出物は、糖尿病を処置するのに、またはそれに関連する症状の少なくとも１つを改善するのに有用である。特に、そのような抽出物は、特に２型糖尿病患者の血中グルコースレベルを下げるのに有用である。本発明の好ましい抽出物は、２型糖尿病に関連するインスリン耐性を低下させる。本発明の好ましい抽出物は、ＩＲＳ−２の発現を増加させる。さらに、抽出物は、インスリンとは独立した細胞性のグルコース取り込みを誘導するようではないので、抽出物のこれら有益な使用は、糖尿病患者（例えば、２型糖尿病患者）に対する方法に狭く誂えることなく実現され得る。
【００８７】
（実施例８：ＰＥＰＣＫの発現および肝グルコース産出量に対するＡｒｔｅｍｉｓｉａ
ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの影響）
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、血中グルコース濃度の調節に関係する活性を持つ数種の化合物を可能性として含有する複雑な混合物である。糖尿病患者における高血糖の主な誘因の１つは、糖尿病でない場合に生じるような肝グルコース産出量を減らすシグナルとして、インスリンが存在しないかまたは無効であることによって、肝グルコース産出量が上昇することである。潜在的な作用様式としてのＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の肝グルコース産出量に対する影響を確定するために、表４に示すように、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物で処置したＳＴＺ糖尿病ラットおよびそれらの非糖尿病の対照（コントロール）における肝グルコース産出量の指標として、ＰＥＰＣＫのｍＲＮＡの発現を測定した。ＰＥＰＣＫは、肝臓におけるグルコースの産生と放出につながる主要代謝経路である糖新生の鍵となる酵素である。ＰＥＰＣＫのｍＲＮＡの発現は、糖尿病動物では大きく上昇していたが、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物で処置した糖尿病動物では有意に低下した。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、糖尿病ではない動物のＰＥＰＣＫのｍＲＮＡの発現には影響を与えなかったので、糖尿病状態に特異的であると思われる（表４を参照のこと）。
【００８８】
（表４．ラット肝におけるＰＥＰＣＫ  ｍＲＮＡ発現に対するＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの影響）
【００８９】
【表４】
2010018637.tif 000005
結果は、５匹の動物の平均値±ＳＥＭとして提供し、＊はＰ＜０．０５で有意であるとみなされる。
【００９０】
理論に束縛されることは望まないが、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓは、糖尿病患者においてＰＥＰＣＫのｍＲＮＡの発現を阻害するので肝グルコース産出量を低下させると思われる。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓはその他の手段によっても同様に肝グルコース産出量を低下させ得る。
【００９１】
したがって、本発明のもう１つの局面は、糖尿病の生物においてＰＥＰＣＫの発現を減少させる（例えば、阻害する）方法である。好ましい抽出物は、糖尿病の症状を呈する哺乳類において特異的にＰＥＰＣＫの発現を低下させる。
【００９２】
（実施例９：Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物におけるエストラゴールおよびメチルオイゲノール）
エストラゴールおよびメチルオイゲノールは、薬草およびそれらの精油の共通成分である。エストラゴールは、特にタラゴンの精油に共通しており、タラゴンのアニス様の味覚に関与する化合物である。１９６５年以来、エストラゴールは、一般に安全であると認識されていたが、現在では、食品に関する欧州科学委員会（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ  ｏｎ  Ｆｏｏｄ）によって、遺伝毒性があり、発癌性があるとみなされている。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物のエストラゴールの含有量は、ガスクロマトグラフィ−質量分光光度計（ＧＣ−ＭＳ）による検出限界より低い（０．００１％より低い）と測定された。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓは、エストラゴールを含有しているが、エストラゴールは、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の調製中に除かれる揮発性の化合物である。メチルオイゲノールも遺伝毒性があり、発癌性があるとみなされているが、普通の食物成分であり、バジルやその他の薬草において極めて高い濃度で見い出される。メチルオイゲノールは、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物中で検出され、その濃度は０．１７％未満であると測定された。高い温度で抽出物を乾燥することによって、抽出物のメチルオイゲノール含有量はさらに４０倍低下した。メチルオイゲノールの食物供給源は、１日当たり体重ｋｇ当たり０．１９〜０．５３ｍｇの摂取に寄与すると推定された。したがって、１０００ｍｇ／日の推定の毎日摂取量に基づいたＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物からのメチルオイゲノールの量は、１日当たり体重ｋｇ当たり０．０２ｍｇであろう。したがって、個体により受容されるＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物のメチルオイゲノールは、その他の食物供給源から受け取るよりもはるかに少ないだろう。したがって、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物におけるエストラゴールおよびメチルオイゲノールの含有量は、それらが存在しない（エストラゴール）または極めて低レベルで存在する（メチルオイゲノール）かのいずれかなので、比較的問題にならない。
【００９３】
したがって、これらの検討は、本発明の材料および方法の安全性をさらに立証している。安全性に問題のあるこれらの化合物（例えば、エストラゴールおよびメチルオイゲノール）は、Ａ．ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの好ましい抽出物において存在しないかまたは問題に成らないレベルで存在することが示された。
【００９４】
（実施例１０）
（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの栽培）
先行する実施例は、本発明の材料および方法の有効性および安全性を立証してきた。本発明のその他の利点には、低コストおよび供給源の植物材料を容易に作り出すことが挙げられる。連続フロー型の市販の水耕温室においてＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの大規模栽培を達成することができる。Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｈｅｒｚｉａｎｕｍの天然調製物を水耕培地に加えて病害を防止し、エリシターとして供した。Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａは、植物の防御系を刺激する有益な微生物である。液体クロマトグラフィ−質量分光光度計（ＬＣ−ＭＳ）生化学プロフィールを用いて、研究用温室で生育させた植物が、商業的に生育させた植物に類似していることを確認した。
【００９５】
（化合物の分離および分析）
調製用：  抽出物を６０％エタノールに溶解し、調製用ＨＰＬＣによる分離および分画に供した。Ｗ６００ポンプコントローラを伴ったＷ６００調製用ポンプ、２．５ｍｌのシリンジが付いたＷ７１７プラス自動試料採取器、調製用フローセルの付いたＷ４９０Ｅプログラム可能の多波長検出器を含む、Ｗａｔｅｒｓ（マサチューセッツ州、ミルフォード）のＨＰＬＣ装置を用いた。ＷａｔｅｒｓのＭｉｌｌｅｎｎｉｕｍ  ｖ．２．１０ソフトウエアを用いて、データを回収し、保存した。Ｗａｔｅｒｓ  Ｇｕａｒｄ−ＰａｋＴＭプレカラムを装備したＷａｔｅｒｓのＳｙｍｍｅｔｒｙＰｒｅｐＴＭ逆相Ｃ−８カラム（粒径７μｍ）（３００×１９ｍｍ）で抽出物を分離した。移動相は、２つの成分：２回蒸留脱イオン水中の０．５％ＡＣＳ等級の酢酸、ｐＨ３〜３．５（溶媒Ａ）およびアセトニトリル（溶媒Ｂ）から成った。移動相の流速を８．０ｍｌ／分に調整し、一般に最初の分離にはすべて、勾配モードを以下のように用いた：０〜３５分、９５％Ａ−５％Ａ；３５〜４０分、５％Ａ；４０〜４５分、５％Ａ−９５％Ａ。
【００９６】
分析用：  個々の分画を６０％エタノールに溶解し、Ｗ６１６ポンプとＷ６００Ｓコントローラ、Ｗ７１７プラス自動試料採取器、Ｗ９９６ＰＤＡ検出器およびウォーターズのＴＭＤ  ＴｈｅｒｍａｂｅａｍＴＭ電子衝撃質量検出器を含む溶媒送達システムから成るＷａｔｅｒｓ（マサチューセッツ州、ミルフォード）のＬＣ−ＭＳ  ＩｎｔｅｇｒｉｔｙＴＭシステムによって分析した。２００，５００の化合物の２２９，１１９のスペクトルを含むＷｉｌｅｙ  Ｒｅｇｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒａｌ  Ｄａｔａの第６版に接続したＷａｔｅｒｓ  Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ（登録商標）ｖ．３．２ソフトウエアでデータを回収し、解析した。Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）ＳｅｃｕｒｉｔｙＧｕａｒｄＴＭプレカラムを装備したＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）Ｌｕｎａ  Ｃ−８逆相カラム（カラムサイズ、１５０×２ｍｍ；粒径、３μｍ；孔サイズ１００オングストローム）で物質を分離した。移動相は、２つの成分：溶媒Ａ（２回蒸留脱イオン水中の０．５％ＡＣＳ等級の酢酸、ｐＨ３〜３．５）および溶媒Ｂ（１００％アセトニトリル）から成った。移動相の流速を０．２５ｍｌ／分に調整し、一般にすべての分析に勾配モードを用いた。調製用システムと分析用システムとの間の再現性を最大化するために、各システムの保持時間は異なっていたが、ＬＣ−ＭＳ分析には同一の勾配プロフィールを用いた。
【００９７】
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の活性を指針とする分画には、ＧＬＰ−１結合アッセイを用いた（図５を参照のこと）。抽出物を６０％のエタノールに溶解し、調製用高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）を用いて、各５分間の１０画分に分離した。次いで、各画分を乾燥するまで減らし、１０μｇ／ｍｌの濃度で調べた。負のパーセント阻害における上昇によって明らかにされるように、ＧＬＰ−１結合活性はＨＰＬＣ画分８および１０で上昇した（図５を参照のこと）。
【００９８】
調製用ＨＰＬＣ画分８〜１０は、図６〜１３で示すＬＣ−ＭＳクロマトグラムにおける２０〜４０分の保持時間ウインドウに相当した。したがって、この検討は、２０〜４０分のＬＣ−ＭＳクロマトグラムにおけるピークが、抽出物の活性において特に重要であり得ることを示唆した。ピークを変えることによりＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの活性成分の候補が同定されるが、抽出物の有用な特徴はまた、その全体プロフィールである。この時間の間（２０〜４０分）に幾つかの目立ったピークが見い出されることに注目のこと（図６を参照のこと）。しかしながら、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物のプロフィールにおけるピークはすべて、抽出物の生物学的機能における抽出物のＬＣ−ＭＳのプロフィールまたはフィンガープリントに寄与する。
【００９９】
ＧＬＰ−１結合活性および哺乳類において血中グルコースを下げる能力に対する効果について、各ＨＰＬＣ画分の活性をインビボで評価する。次いで、活性を有する抽出物における活性化合物を同定するために、活性を有する画分をさらに個々の成分に分離する。この情報を受けて、当業者は、比較検討のための不活性の抽出物の相当するプロフィールを容易に獲得し、さらにプロフィールの特性を特徴づけることができる。
【０１００】
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ植物の成長および成熟の間の抽出物のプロフィールを調べるために、ＬＣ−ＭＳによる分析用に試料を７日間隔で採取した（図７）。苗木（約１４日齢）を大規模水耕に移した（０日）後、それぞれ７、１４、２１、２８、３５および４２日目の植物の抽出物から、図７に示す一連のクロマトグラムを作成した。当業者は、５分より前に出現するピークは、一般にカラムの空隙容量を通って来る抽出物中の糖および／または分解産物であるとみなされることを認識するであろう。植物が特定の日齢に成熟すると（すなわち、およそ３０〜６０日齢）、抽出物の質が上昇した。成熟植物（すなわち、およそ３０〜６０日齢）は未成熟植物に比べて、得られた抽出物において増加した活性と同様に増加した質量を提供する。
【０１０１】
さらに、植物は成熟するにつれて、葉が優勢なバイオマスから茎が優勢なバイオマスへの全体的変化を示す。植物部に特異的な生化学的プロフィールを展開するために、別々に加工した茎および葉から、抽出物を調製した。好ましい抽出物のプロフィールは、ヨモギ属の茎よりむしろ葉から得られると思われる（図８を参照のこと）。
【０１０２】
要約すると、このデータは、時の経った植物が全体としてさらに大きな集団になるにしても、より若い植物集団は大部分が葉で構成されるので、成熟したが、より若い齢の植物を加工することがさらに有利であり得ることを示している。植物は、苗木段階の後、ある程度の成熟に達すると（およそ２８日齢）、好ましい生化学的プロフィールを呈した。若く成熟した植物または古い植物での新しい成長部分が、抽出物の調製に好ましい。しかしながら、このことは、任意の齢の植物からＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物を加工することができないということを意味するものではない。また、本発明の抽出物における使用のために、そのほかの植物（例えば、ヨモギ属のそのほかの種）も意図される。
【０１０３】
（実施例１１：Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの抽出）
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物を調製する手順を１つ設計し、様々な植物または植物処理を比較する一貫した方法を提供した。要約形態では、その手順は、以下の工程を含む：（１）植物材料を凍結乾燥し、微粉末に製粉する；（２）６０％エタノールで粉末を抽出する；（３）遠心して固形物を除去する；（４）ロータリーエバポレーションにより抽出物からエタノールを除去する；および（５）凍結乾燥により抽出物から水を除去する。
【０１０４】
当業者は、方法を適宜、例えば、小さな規模または実験室規模から商業的規模の方法に移行してもよいことを実感するであろう。抽出目的では、乾燥工程は不要である。新鮮な植物材料は、凍結乾燥の追加コストを除いて、凍結乾燥した材料と同じ生化学的プロフィールを提供した。しかしながら、乾燥した植物材料は、作物の輸送および保存という点で利点を提供した。凍結乾燥のコストが高く、薬草は温かいオーブンで風乾されていることが多いので、凍結乾燥した植物と風乾した植物の両方の抽出物プロフィールを測定した（図９を参照のこと）。得られたプロフィールは、風乾プロフィールにおける分解産物の増加（５分より前のピークを参照のこと）ならびに凍結乾燥プロフィールと比べたときの風乾プロフィールのピークの数および高さ（ＡＵ）の全体的な低下によって判るように、風乾植物からの抽出物の活性が凍結乾燥抽出物の活性よりも低い物であり得ることを示唆している。
【０１０５】
抽出の高い効率を達成するためのアプローチの１つは、乾燥した植物材料を粉末に製粉することである。製粉は、高価な加工工程ではないが、加工の全体的なコストを上げることになる。新鮮な材料の水分含有によって製粉は相対的に難しく、かつ効果的ではなくなるが、それが抽出される流体または溶媒中で新鮮な材料を直接柔らかくすることができる。あるいは、抽出時間の延長（特に高い温度での）によって、柔らかくしたおよび柔らかくしていない植物材料（例えば、ヨモギ属材料）から匹敵する収量が提供され得る。市販のほとんどの処理装置は、抽出過程の間に溶剤を濾過する能力も有しており、結果として抽出物における植物材料（例えば、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ）の高い収量を生じる傾向がある。したがって、製粉は必要な加工工程ではない。
【０１０６】
植物抽出物（例えば、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物）の調製（すなわち、加工）のために新鮮な植物材料を使用する場合、輸送および保存を考慮しなければならない。近接した近傍範囲内に栽培装置と処理装置を有することに利点がある。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓのような作物の水耕温室からの収穫を、商業施設での植物材料のバッチ加工と調和させることが可能である。別の手段は、輸送および保存のために作物を凍結することである。凍結は、凍結植物材料の抽出が、新鮮な植物材料よりも有効であるという点で、もう１つの利点を提供する。得られたＬＣクロマトグラムおよびＭＳクロマトグラムのプロフィールによって示されるように、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の活性は、凍結植物材料からの方が、新鮮材料からよりも高いものであり得る（図１０を参照のこと）。図１０の左のパネルにおけるＬＣクロマトグラムのプロフィールは、フォトダイオードアレイによって検出し、図１０の右のパネルにおけるクロマトグラフィープロフィールは質量分光光度計（ＭＳ：総イオンクロマトグラフィ）によって検出した。
【０１０７】
様々な異なった保存条件下にてＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の安定性を調べた（図１１を参照のこと）。図１１に示すクロマトグラムは、４つの部分に分割したＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の試料を表しており、各部分は以下の次に続く処理：−２０℃で保存（フリーザーの中）、開放容器にて２２℃（室温）で保存、デシケータ中にて２２℃（室温）で保存、または開放容器にて３７℃（高い温度）で保存のうち１つを受けた。少量の酸素および湿気に試験物質を曝す閉鎖容器における検討を行うことによる安定性評価のために条件はすべてきちんと制御した。これらのクロマトグラムは保存７ヵ月後に得られたものであり、すべて検討の開始時の試料から得たクロマトグラムと同一であると思われる。これら実験は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物が、様々な実験的保存条件のもと長い間にわたって極めて安定であることを実証した。
【０１０８】
（実施例１２：Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物のＬＣ−ＭＳおよびＧＣ−ＭＳによる解析）
Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物を調製し、ＬＣ−ＭＳおよびＧＣ−ＭＳの双方により品質、一貫性および安全性について調べた。典型的なＬＣ−ＭＳクロマトグラムを作成し、解析し、相当する数と共に記入した主要なピークの推定上の正体（ｉｄｅｎｔｉｔｙ）を決定した（図１２を参照のこと）。主要ピークの正体は、質量スペクトルのＷｉｌｅｙ  Ｌｉｂｒａｒｙとのスペクトルの一致によって決定したものであり、絶対的な正体とみなすことはできない。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物において同定された推定上の化合物は、以下のように同定された：１）キャピラリシンまたはテトラヒドロキシメトキシフラバノンのいずれかとウンベリフェロン誘導体との混合物；２）ジテルペン；３）サクラニン誘導体またはトリヒドロキシメトキシフラバノン；４）ジテルペン；および５）主としてトリヒドロキシフラバノン。ジテルペンと同定されたピークは、いくつかのジテルペン様化合物と一致する。
【０１０９】
毒性そのものが存在しないことを保証する、主として安全性という理由で、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物のＧＣ−ＭＳ解析を行った。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物を調製する方法は、植物の揮発性そのものを保持するようには設計しなかったので、ＧＣ−ＭＳ解析に存在する化合物のほとんどは少量で存在した（図１３におけるＧＣ−ＭＳクロマトグラムを参照のこと）。総イオンクロマトグラム（図１３のパネルＡを参照のこと）は、エストラゴール（１）およびメチルオイゲノール（２）の混合標準物から成っており、各化合物の質量スペクトル断片化もまた図中に提供した。Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物の総イオンクロマトグラム（図１３のパネルＢを参照のこと）は、主要ピークにおける以下の推定上の化合物を同定した：（１）エストラゴール標準は検出不能であり、かつ示されなかった）；２）メチルオイゲノール；３）１，２，３−トリメトキシ−５−（２−プロフェニル）ベンゼン；４）トランスイソエレミシン；５）メチルウンベリフェロン；６）フィトール；および７）４，５−ジヒドロキシ−７−メトキシフラバノン。エストラゴールは、このクロマトグラムに存在せず、メチルオイゲノールは存在したがごく少量であった（生の抽出物より２５倍低下）。
【０１１０】
ＬＣ−ＭＳおよびＧＣ−ＭＳの双方のクロマトグラムの解析から、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ
ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓ抽出物は、その一部が上記のように同定された、数種の異なる化合物から成ることは明らかである。
【０１１１】
（実施例１３：抽出物の薬学的組成物および投与）
治療用薬学的組成物は、本発明の範囲内である。そのような薬学的組成物は、投与の形態で好適性について選択された薬学上または生理学上許容可能な処方剤と混合して、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの微極性抽出物のような、植物抽出物の有効用量を含み得る。例示となる薬学的組成物は、投与の形態との好適性について選択された薬学上または生理学上許容可能な処方剤と混合して、１またはそれより多くのＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓの微極性抽出物のような、１またはそれより多くの植物抽出物の有効用量を含み得る。許容可能な処方材料は、好ましくは、用いられる投与量および濃度にて受容者に非毒性である。
【０１１２】
薬学的組成物は、例えば、組成物のｐＨ、浸透圧、粘度、透明性、色、等張性、匂い、無菌性、安定性、溶解または放出の速度、吸収または浸透を改変する、維持するまたは保存するための処方材料を含有し得る。好適な処方材料としては、アミノ酸（例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、またはリジン）；抗菌剤；抗酸化剤（例えば、アスコルビン酸、亜硫酸ナトリウムまたは亜硫酸水素ナトリウム）；緩衝液（例えば、ホウ酸、重炭酸、トリス−ＨＣｌ、クエン酸、リン酸、そのほかの有機酸およびそれらの塩）；増量剤（例えば、マンニトールまたはグリシン）、キレート剤（例えば、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ））；錯化剤（例えば、カフェイン、ポリビニルピロリドン、β−シクロデキストリンまたはヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン）；充填剤；単糖類、二糖類およびそのほかの炭水化物（例えば、グルコース、マンノースまたはデキストリン）；タンパク質（例えば、血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリン）；着色剤；嬌味嬌臭剤および／または希釈剤；乳化剤；親水性ポリマー（例えば、ポリビニルピロリドン）；低分子量ポリペプチド；塩形成性対イオン（例えば、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオン、ハロゲンイオン、有機カチオン、有機イオン、錯体イオン、およびそのほかの当該分野で公知の任意の対イオン（好ましくは、ナトリウム））；防腐剤（例えば、塩化ベンザルコニウム、安息香酸、サリチル酸、チメロサール、フェネチルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン、クロルヘキシジン、ソルビン酸または過酸化水素）；溶媒（例えば、グリセリン、プロピレングリコールまたはポリエチレングリコール）；糖アルコール類（例えば、マンニトールまたはソルビトール）；懸濁剤；界面活性剤または湿潤剤（例えば、プルロニクス、ＰＥＧ、ソルビタンエステルまたはポリソルベート類（例えば、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０）、トリトン、トロメタミン、レシチン、コレステロール、チロキサパール）；安定性増強剤（スクロースまたはソルビトール）；張度増強剤［例えば、アルカリ金属ハロゲン化合物（好ましくは、塩化ナトリウムまたは塩化カリウム）、マンニトールまたはソルビトール］；送達ビヒクル；希釈剤；賦形剤および／または医薬用アジュバントが挙げられるが、これらに限定されない（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版、Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ編、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９０年）。
【０１１３】
例えば、意図する投与経路、送達形式、および所望の投与量によって当業者が最適な薬学的組成物を決定する。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓを参照のこと。そのような組成物は、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓなどの植物の微極性抽出物のような植物抽出物の物理的状態、安定性、インビボでの放出速度、およびインビボでのクリアランス速度に影響を与え得る。
【０１１４】
薬学的組成物における主要なビヒクルまたはキャリアは、天然に水性または非水性のいずれかである。例えば、好適なビヒクルまたはキャリアは、注射用水、生理食塩水または人工脳脊髄液であり、おそらく非経口投与用の組成物に共通するそのほかの材料が補完される。中性の緩衝化生理食塩水または血清アルブミンと混合した生理食塩水は、さらなる例示ビヒクルである。そのほかの例示となる薬学的組成物としては、ｐＨがおよそ７．０〜８．５のトリス緩衝液またはｐＨがおよそ４．０〜５．５の酢酸緩衝液が挙げられ、これらは、ソルビトールまたはその好適な代用品をさらに含んでもよい。本発明の一部の実施形態では、凍結乾燥した塊または水性溶液の形態で、所望の純度を有する選択された組成物を最適な処方剤と混合することによって（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、保存のために、微極性植物抽出物組成物を調製してもよい。さらに、スクロースのような適当な賦形剤を用いて、抽出生成物を凍結乾燥品として製剤化してもよい。
【０１１５】
非経口送達のために微極性抽出物の薬学的組成物を選択してもよい。あるいは、経口でまたは経鼻胃管を介してのように、気道または消化管を介した送達のために、組成物を選択してもよい。そのような薬学上許容可能な組成物の調製は、当業者の範囲内である。
【０１１６】
処方成分は、投与部位に許容可能な濃度で存在する。例えば、緩衝液を用いて、生理的ｐＨまたはやや低いｐＨ、代表的には約５〜約８の範囲のｐＨ範囲内で組成物を維持する。
【０１１７】
非経口投与が意図される場合、本発明で使用される治療用組成物は、薬学上許容可能なビヒクル中に所望の植物抽出物を含む、発熱物質なしの非経口的に許容可能な水溶液の形態であってもよい。非経口の注射に特に好適なビヒクルは、抽出物が無菌の等張溶液として処方され、適正に保存された無菌の蒸留水である。さらにもう１つの調製物には、注射用ミクロスフェア、生物侵食性粒子、ポリマー化合物（ポリ乳酸、ポリグリコール酸）、ビーズまたはリポソームのような因子との所望の分子の処方を含み得、これは、製品の制御放出および／または持続放出を提供し、次いでデポ注射を介して送達され得る。ヒアルロン酸も用いてもよいし、これは、循環系で持続する持続時間を助長する効果を有し得る。所望の分子を導入するためのそのほかの好適な手段には、埋め込み型薬物送達デバイスが挙げられる。
【０１１８】
上で述べたように、特定の製剤形態を経口で投与してもよいことが意図される。本発明の一部の実施形態では、錠剤やカプセルのような固形投与形態を調合するのに通例用いられるキャリアと共に、またはキャリアなしで、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓのような植物の微極性抽出物を経口送達のために処方してもよい。例えば、生物利用性が最大化され、全身性になる前の分解が最も小さい消化管の地点にて製剤の活性部分を放出するように、カプセルを設計してもよい。微極性植物抽出物の吸収を促進するさらなる因子が含んでもよい。希釈剤、嬌味嬌臭剤、低融点ワックス、植物油、潤滑剤、懸濁剤、錠剤崩壊剤、および結合剤を採用してもよい。
【０１１９】
別の薬学的組成物には、錠剤を製造するのに好適である非毒性の賦形剤と混合して、Ａｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓのような植物の抽出物の有効量を含めてもよい。無菌水またはそのほかの適当なビヒクルに錠剤を溶解することによって、単位用量形態で、溶液を調製することができる。好適な賦形剤としては、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム若しくは重炭酸ナトリウム、ラクトース、またはリン酸カルシウム等のような不活性の希釈剤；またはデンプン、ゼラチン若しくはアカシア等のような結合剤；またはステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸若しくはタルク等のような潤滑剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１２０】
持続送達処方物または制御送達処方物中にＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓのような植物の抽出物を含む処方物含む、さらなる薬学的組成物は当業者に明らかであろう。そのほかの種々の持続するまたは制御された送達組成物を処方するための製品としては、リポソームキャリア、生物侵食性の微粒子または多孔性ビーズ、およびデポ注射、およびその他が挙げられ、これらすべては当業者に公知である。例えば、薬学的組成物を送達するための多孔性ポリマー微粒子の制御放出を記載しているＰＣＴ／ＵＳ９３／００８２９を参照のこと。持続放出製剤の追加の例には、例えばフィルムまたはマイクロカプセルのような成形品の形態における半透過性のポリマーマトリクスが挙げられる。持続放出マトリクスには、ポリエステル類、ヒドロゲル類、ポリラクチド類（ＵＳ  ３，７７３，９１９、ＥＰ  ５８，４８１）、Ｌ−グルタミン酸とガンマエチル−Ｌ−グルタミン酸とのコポリマー類（Ｓｉｄｍａｎら、Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ，２２：５４７−５５６，１９８３）、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）（Ｌａｎｇｅｒら、Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ．，１５：１６７−２７７，１９８１  およびｌａｎｇｅｒら、Ｃｈｅｍ  Ｔｅｃｈ．，１２：９８−１０５，１９８２）、エチレン酢酸ビニル（上記、ｌａｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．）またはポリ−Ｄ（−）−３−ヒドロキシ酪酸（ＥＰ  １３３，９８８）が挙げられ得る。当該分野で公知の数種の方法のいずれによってリポソームを調製してもよい。例えば、Ｅｐｐｓｔｅｉｎら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８２：３６８８−３６９２，１９８５、ＥＰ  ３６，６７６、ＥＰ
８８，０４６、ＥＰ  １４３，９４９を参照のこと。
【０１２１】
インビボ投与に使用されるべきＡｒｔｅｍｉｓｉａ  ｄｒａｃｕｎｃｕｌｕｓのような植物の抽出物の薬学的組成物は通常、無菌でなければならない。無菌のろ過膜を介したろ過によってこれを達成してもよい。組成物を凍結乾燥する場合、この方法を用いた滅菌は、凍結乾燥および再構築の前または後のいずれで行ってもよい。非経口投与のための組成物は、凍結乾燥した形態または溶液中で保存してもよい。さらに、非経口組成物は一般に、例えば、静脈注射用溶液のバッグまたは皮下注射用針で突き刺すことが可能な栓を有するバイアルのような無菌のアクセス端子を有する容器に入れられる。
【０１２２】
いったん薬学的組成物を処方したら、例えば、溶液、懸濁液、ゲル、エマルジョン、固形物または脱水したもしくは凍結乾燥した粉末として無菌のバイアル中にそれを保存してもよい。そのような製剤形態をすぐ使用できる形態または投与に先立って再構築する必要がある形態（例えば、凍結乾燥された）のいずれで保存してもよい。
【０１２３】
上記教示に鑑みて、本発明の多数の改変および変形が可能であり、それらは本発明の範囲内である。本明細書で引用した出版物すべての開示全体を本願に参照により援用する。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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