(57)【要約】【課題】アミグダリンの減少が抑制され、アミグダリンの含量の高い抽出物、及び、その製造方法を提供する。【解決手段】アミグダリンを含有する植物を、水蒸気雰囲気下で加熱処理する水蒸気加熱処理工程の後、溶媒抽出して抽出液を得る抽出工程を含むアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法等である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アミグダリンを含有する植物を、水蒸気雰囲気下で加熱処理する水蒸気加熱処理工程の後、溶媒抽出して抽出液を得る抽出工程を含むことを特徴とするアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法。
【請求項２】
前記アミグダリンを含有する植物が、バラ科植物の種子である請求項１に記載のアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法。
【請求項３】
前記水蒸気加熱処理工程を１０〜４０分間行う請求項１または２に記載のアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項記載のアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法で製造したことを特徴とするアミグダリンを含有する植物の抽出液またはその乾燥物。
【請求項５】
請求項１〜３のいずれか一項記載の製造方法によりアミグダリンを含有する植物の抽出液を製造する工程を含むことを特徴とする、医薬品、医薬部外品または化粧品の製造方法。
【請求項６】
ベンズアルデヒドの濃度が、質量換算でＤ−アミグダリンの濃度の５０分の１以下であることを特徴とするアミグダリンを含有する植物の抽出液またはその乾燥物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法に関する。
【０００２】
青酸配糖体のアミグダリン（ａｍｙｇｄａｌｉｎ）は自然界に広く分布し、特にアンズ、ウメ、モモ等のバラ科植物の種子に多く含有されることが知られている。
【０００３】
アミグダリンはアミグダリンを含有する植物試料を抽出することで、精製することができる。しかしながら多くの場合、アミグダリンを含有する植物はアミグダリン分解酵素を有し、この酵素による分解反応は非常に速く進行するため、植物試料を溶媒へ浸漬させたとき、多くのアミグダリンが分解されてしまう。従って、アミグダリン含量が安定した抽出物を製造することは難しかった。
【０００４】
さらに、アミグダリンを含有する植物試料の抽出液を医薬部外品または化粧品に用いる場合、含水エタノール抽出液として用いられることが多く、例えば、外原規キョウニンエキスは「３０ｗｔ％エタノール抽出液」と規定されている。ここで、含水割合の高いエタノール溶液はキョウニンを浸漬させた時、酵素分解によるアミグダリンの減少が進行し易い抽出溶媒であり（特許文献１）、医薬部外品または化粧品用途に適した、キョウニンエキスを製造することは従来、困難であった。
【０００５】
以上のことから、アミグダリンの減少を抑制し、高効率な抽出を行なうためには、アミグダリン分解酵素を失活させるような、植物試料の抽出前処理方法の確立が必要とされてきた。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０１３−５１９４９号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
そこで本発明の目的は、アミグダリンの減少が抑制され、アミグダリンの含量の高い抽出物、及び、その製造方法を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者は、アミグダリンの減少を抑制し、高効率な抽出を行なうために、アミグダリン分解酵素を失活させるような処理を行うこと、及び、抽出工程の前にアミグダリンを含有する植物を加熱する前処理を行うことによって、アミグダリン分解酵素を失活させることに着眼した。しかしながら、漢方の伝統的な生薬処理技術である「湯通し」による加熱処理では、処理過程において流亡により、試料中のアミグダリンが減少してしまうという問題があることがわかった。
【０００９】
一方、「焙煎」「乾熱（オーブン等による加熱）」「電子レンジ加熱」等の方法では、アミグダリン分解酵素を完全に失活させることが難しく、アミグダリン量の減少を抑えることは困難であり、また、長時間の処理によって植物試料に焦げを生じ、発火の恐れがあった。
【００１０】
そこで、本発明者は上記課題を解決すべくさらに鋭意検討した結果、アミグダリンを含有する植物を水蒸気雰囲気下で加熱処理することによって、上記課題を解決しうることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１１】
即ち、本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法は、アミグダリンを含有する植物を、水蒸気雰囲気下で加熱処理する水蒸気加熱処理工程の後、溶媒抽出して抽出液を得る抽出工程を含むことを特徴とするものである。
【００１２】
本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法は、前記アミグダリンを含有する植物が、バラ科植物の種子であることが好ましい。
【００１３】
本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法は、前記水蒸気加熱処理工程を１０〜４０分間行うことが好ましい。
【００１４】
本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液またはその乾燥物は、前記アミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法で製造したことを特徴とするものである。
【００１５】
本発明の医薬品、医薬部外品または化粧品の製造方法は、前記製造方法によりアミグダリンを含有する植物の抽出液を製造する工程を含むことを特徴とするものである。
【００１６】
本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液またはその乾燥物は、ベンズアルデヒドの濃度が、質量換算でＤ−アミグダリンの濃度の５０分の１以下であることを特徴とするものである。
【発明の効果】
【００１７】
本発明によれば、アミグダリンの減少が抑制され、アミグダリンの含量の高い抽出物、及び、その製造方法を提供することが可能となる。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法で製造した抽出液またはその乾燥物は、他の製造方法で製造した場合と比べてベンズアルデヒドの濃度が低い傾向にある。これは、本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法では、アミグダリン分解酵素が失活し、アミグダリンの分解によって生じるベンズアルデヒドが減少したからだと考えられる。
【００１９】
本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法によれば、Ｄ−アミグダリンの含量の高い抽出物を好適に製造することができる。アミグダリンは光学活性を有する化合物でＤ体とＬ体の別があり、天然では大部分がＤ体として存在する。アミグダリンの薬理作用に関する研究では、Ｄ体は抗ガン活性を有する一方、Ｌ体は同活性を示さないことが報告されており（例えば、Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．３２，７７８−７８１（１９８４））、アミグダリンを薬学的用途に用いる場合は、その光学異性体を適切に区別して用いることが重要である。天然では大部分がＤ体として存在するが、加熱やｐＨの変化によって、異性化（Ｄ体→Ｌ体）の進行により、Ｄ−アミグダリンの減少が生じるが、上記のとおり、本発明によれば、Ｄ−アミグダリンの含量の高い抽出物を製造できる。
【００２０】
一方、アミグダリンは高濃度で生体に取り込まれた場合、青酸中毒を引き起こすことが知られていることから、アミグダリンを薬学的用途に用いる場合には、アミグダリンが適切な用量になるよう、抽出物中の含有量を適切にコントロールすることが重要である。上記のとおり、本発明によれば、抽出中、または抽出後のアミグダリンの減少を抑制することで、アミグダリン含量の安定した抽出物を製造できる。
【００２１】
以下、本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法について詳述する。
【００２２】
［アミグダリンを含有する植物］
本発明において用いるアミグダリンを含有する植物は特に限定されず、アンズ（杏）、ウメ（梅）、モモ（桃）、ビワ（枇杷）等のバラ科の植物が挙げられる。植物の部位は特に限定されず、目的に合わせて選択すればよく、例えば、種子、果実、葉を用いることが好ましい。中でも、アミグダリンを特に多く含有することが知られているバラ科植物の種子を用いることが好ましい。
【００２３】
アミグダリンを含有する植物は、水蒸気加熱処理工程の前に前処理が施されていてもよい。前処理としては、加熱、乾燥等が挙げられる。また、例えば切除等によって植物の部位を選抜しもよい。また、従来、生薬として用いられているものを用いてもよく、例えば、アンズ、ウメ、モモ、ビワの種子としてそれぞれキョウニン、バイニン、トウニン、ビワニンを用いてもよい。
【００２４】
［水蒸気加熱処理工程］
水蒸気加熱処理工程は、アミグダリンを含有する植物を、水蒸気雰囲気下で加熱処理（以下、「水蒸気加熱処理」ともいう）する工程である。前記水蒸気雰囲気下で加熱処理する方法は特に限定されないが、例えば、密閉型又は半密閉型の容器に植物と水とを接触しないように入れて、水の沸騰によって生じた水蒸気中で植物を加熱する方法を用いることが好ましい。また、密閉型又は半密閉型の容器に植物を入れて加熱し、植物中に含まれる水分に由来して生じた水蒸気中で植物を加熱する方法を用いてもよい。
【００２５】
ここで、密閉空間を形成する容器は、水蒸気や気体を通さない性質の素材から成り、かつ熱および加熱により容器内部に生じた圧力に耐え得るものであれば特に形状等に限定されることなく使用することができる。例えば、レトルト袋や缶、瓶、密閉機構を備えた加熱装置などを用いることができる。半密閉空間を形成する容器としては、水蒸気や気体を通さない性質の素材から成り、かつ加熱により容器内部に生じた圧力を適宜逃がすことで内圧を常圧に保つような機構を備えたものであれば特に形状等に限定されることなく使用することができる。例えば１〜数ｍｍ径の穴を１〜数箇所開けたレトルト袋や缶、蓋に蒸気口のついた鍋や缶、圧力開放弁のついた容器や加熱装置などを用いることができる。また、蓋のついた鍋や缶の蓋を緩くしめて、半密閉空間を形成する容器として用いてもよい。
【００２６】
前記水蒸気加熱処理は、半密閉型の容器で行うことがより好ましい。また、密閉型の容器は、加熱により容器内部に生じた圧力を逃すことができないため、加熱前に減圧を行なうか、耐圧容器を用いる必要があるため製造工程のスケールアップが難しい点から、常圧下、半密閉型の容器で行うことが好ましい。
【００２７】
前記水蒸気加熱処理における加熱温度は、４０〜１５０℃であることが好ましく、７０〜１２０℃であることがより好ましく、１００℃付近であることがさらに好ましい。また、常圧下において加熱を行う場合は、飽和蒸気圧１，０００ｈＰａ付近で加熱することが好ましい。７０℃以下では処理に長時間を要し、１２０℃以上の温度では焦げを生じる可能性がある。
【００２８】
前記水蒸気加熱処理における加熱時間は、３分以上であることが好ましく、３〜９０分であることがより好ましい。さらに、抽出後のアミグダリン量がより増加することから、また、Ｄ体のアミグダリンの割合が増加することから、８〜５０分であることがさらに好ましく、１０〜４０分であることが特に好ましい。
【００２９】
前記水蒸気加熱処理における容器中の気相における水蒸気量は、加熱温度における飽和水蒸気量の２０％以上であることが好ましく、５０％以上であることがより好ましく、７０％以上であることがさらに好ましい。例として、常圧下、１００℃のとき１２０〜６００ｇ／ｍ３であることが好ましく、３００〜６００ｇ／ｍ３であることがより好ましく、４２０〜６００ｇ／ｍ３であることがさらに好ましい。水蒸気量が低いと処理に要する時間が長くなることにより非効率であるほか、植物の吸湿による変性およびアミグダリン量の減少の原因となる。
【００３０】
前記水蒸気加熱処理において、アミグダリンを含有する植物と水が直接触れることのないように配置する場合、配置の仕方は特に限定されないが、具体的な一例としては、例えば、ステン缶に水を少量入れて、沸騰するまで加熱した後、金ザルにアミグダリンを含有する植物を載せて、水と直接触れないように、ステン缶中に配置して、緩く蓋をし、加熱する方法等が挙げられる。
【００３１】
［抽出工程］
抽出工程は、水蒸気加熱処理工程で加熱処理したアミグダリンを含有する植物を溶媒抽出する工程である。水蒸気加熱処理工程で加熱処理したアミグダリンを含有する植物は、必要に応じて、抽出工程の前に前処理を施してもよい。しかしながら、粉砕等を行うと、抽出物が白濁エマルジョンとなり、抽出液を濾過する場合に目詰まりが生じやすいため、原形のまま抽出を行うことが好ましい。
【００３２】
抽出工程における溶媒抽出の方法は特に限定されず、公知慣用の方法によって溶媒抽出すればよい。例えば、加熱還流抽出や室温浸漬抽出が挙げられるが、加熱還流抽出はスケールアップが難しいところ、本発明によれば、室温浸漬抽出でも高いアミグダリン濃度の抽出液を製造することが可能である。
【００３３】
抽出溶媒は特に限定されず、水、有機溶媒または水と有機溶媒との混合溶媒を用いて抽出すればよい。抽出溶媒としては、例えば、水、メタノール、エタノール等の低級アルコール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール等の液状多価アルコール、酢酸エチル等の低級アルキルエステル、ベンゼン、ヘキサン等の炭化水素、ジエチルエーテル、アセトン等の公知の溶媒が挙げられる。これらの溶媒は、１種を単独で用いてもよく、２種以上を組み合わせて用いてもよい。溶媒の中でも、水、エタノール、水とエタノールとの混合溶媒が好ましく、水とエタノールとの混合溶媒がより好ましい。
【００３４】
抽出工程におけるアミグダリンを含有する植物と抽出溶媒との比は特に限定されないが、植物を十分に浸漬されるため、１：１．５以上の質量比であることが好ましい。
【００３５】
抽出温度は特に限定されないが、抽出を効率的に行うため、５℃以上であることが好ましく、室温以上であることがより好ましい。
【００３６】
抽出時間は特に限定されないが、十分な抽出効率を得るための抽出時間は抽出温度によって適宜、定められることが好ましい。室温にて抽出する場合は１２時間以上であることが好ましく、２４時間以上であることがより好ましい。
【００３７】
抽出工程後には、固液分離、濾過、濃縮、希釈、蒸発乾固等の後処理を行ってもよい。
【００３８】
本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法で製造された抽出液を乾燥して、エキス末等の乾燥物として用いてもよい。また、乾燥物を溶解して用いてもよい。
【００３９】
本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法で製造された抽出液またはその乾燥物の用途は特に限定されず、例えば、医薬品、医薬部外品および化粧品に配合してもよい。医薬品、医薬部外品および化粧品の具体例としては、例えば、抗ガン剤等が挙げられる。
【００４０】
医薬品、医薬部外品および化粧品の形状は特に限定されず、例えば、適当な基剤、薬剤などと混合した皮膚外用剤や頭髪化粧料等の外用形態とすることができる。具体的には、ローション、乳液、軟膏、クリーム、しっぷ、ジェル、オイル、パック、シャンプー、リンス、コンディショナー、トリートメント、ヘアカラー、ヘアミスト、ヘアートニック、ヘアーリキッド、エアゾール、ムース等の形態を採ることができる。さらに上記のような外用剤の他にも、例えば、石鹸、入浴剤といったものに配合して用いてもよい。
【００４１】
医薬品、医薬部外品および化粧品には、医薬品、医薬部外品および化粧品等に一般に用いられている添加成分、例えば、保湿剤、油性成分、界面活性剤、ビタミン類、蛋白分解酵素、増粘剤、防腐剤、粉体、酸化防止剤、紫外線吸収剤、乳化剤、アルコール類、色素、水性成分、脂肪酸類、香料、清涼化剤、キレート剤、ｐＨ調整剤、精製水等を配合することができる。
【００４２】
［アミグダリンを含有する植物の抽出液またはその乾燥物］
本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液またはその乾燥物は、ベンズアルデヒドの濃度が、質量換算でＤ−アミグダリンの濃度の５０分の１以下である。好ましくは７５分の１以下、より好ましくは１００分の１以下である。また、本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法で製造された抽出液を乾燥してから溶媒に溶解した溶解液を、本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液として用いてもよい。本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液またはその乾燥物は、本発明の製造方法を用いて容易に製造することが可能である。また、本発明の製造方法によって製造された抽出液はアミグダリン濃度が高く、かつ安定しているため、濃縮や希釈等の後処理によって、使用目的に適った、任意のアミグダリン濃度の抽出物を得ることができる。
【００４３】
また、上記のとおり、本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液の製造方法によれば、Ｄ−アミグダリンの含量が高い抽出液またはその乾燥物を製造することも可能である。本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液またはその乾燥物は、アミグダリン合計量（Ｄ体＋Ｌ体）に占めるＤ−アミグダリンの割合が好ましくは７５質量％、より好ましくは８０質量％以上、さらに好ましくは８５質量％以上である。本発明のアミグダリンを含有する植物の抽出液は、Ｄ−アミグダリンの濃度が、好ましくは０．５０質量％以上、より好ましくは０．５５質量％以上、さらに好ましくは０．６０質量％以上、またさらに好ましくは０．６５質量％以上、特に好ましくは０．７０質量％以上である。
【実施例】
【００４４】
以下、実施例及び比較例により本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例および比較例により何ら制限されるものではない。なお、特に断りがない限り、「部」は質量部を、「％」は質量％を意味する。
【００４５】
下記の方法でＤ−アミグダリンを含有する植物試料の抽出液を調製した。
＜試料＞
試料：  アンズの種子（生薬名：キョウニン）
形状：  外殻を除いた種子（仁）の原形
Ｄ−アミグダリン含量：  ５％（ＨＰＬＣ法による）
【００４６】
（実施例１〜５：水蒸気加熱処理試料）
常圧下、２０Ｌ容ステン缶に１Ｌの水を入れ、緩く蓋をした後、水が沸騰するまで加熱した。沸騰後、金ザルに試料（キョウニン・原形）を載せて、水と直接触れないように前記ステン缶内に設置し、緩く蓋をして半密閉の容器とし、容器内の水が枯れないように注意しつつ、引き続き加熱しながら水を沸騰させて生じた水蒸気で５〜６０分、試料を加熱処理した。
この処理済みのキョウニン１．０ｋｇを５Ｌの３０ｗｔ％ＥｔＯＨで１０日間、室温浸漬抽出し、得られた抽出液のＤ−アミグダリン量とＬ−アミグダリン量とをＨＰＬＣ法により測定した。また、アミグダリンが酵素分解して生じるベンズアルデヒドについても、ＨＰＬＣ法により測定した。結果を表１に示す。
【００４７】
（比較例１〜１２：オーブン加熱処理試料）
乾熱オーブンに試料（キョウニン・原形）を設置し、８０℃にて５分〜２４時間または１００℃にて５分〜２４時間、加熱処理した。
この処理済みのキョウニン１．０ｋｇを５Ｌの３０ｗｔ％ＥｔＯＨで１０日間、室温浸漬抽出し、得られた抽出液のＤ−アミグダリン量とＬ−アミグダリン量とをＨＰＬＣ法により測定した。また、アミグダリンが酵素分解して生じるベンズアルデヒドについても、ＨＰＬＣ法により測定した。結果を表１に示す。
【００４８】
（比較例１３〜２１：電子レンジ加熱処理試料）
電子レンジに試料（キョウニン・原形）を設置し、２００Ｗにて０．５〜５分または６００Ｗにて０．５〜２分、加熱処理した。
この処理済みのキョウニン１．０ｋｇを５Ｌの３０ｗｔ％ＥｔＯＨで１０日間、室温浸漬抽出し、得られた抽出液のＤ−アミグダリン量とＬ−アミグダリン量とをＨＰＬＣ法により測定した。また、アミグダリンが酵素分解して生じるベンズアルデヒドについても、ＨＰＬＣ法により測定した。結果を表１に示す。
【００４９】
＜トウニン試料＞
試料：  モモの種子（生薬名：トウニン）
形状：  外殻を除いた種子（仁）の原形
Ｄ−アミグダリン含量：  ３％（ＨＰＬＣ法による）
【００５０】
（実施例６：水蒸気加熱処理試料）
常圧下、２０Ｌ容ステン缶に１Ｌの水を入れ、緩く蓋をした後、沸騰するまで加熱した。沸騰後、金ザルに試料（トウニン・原形）を載せて、水と直接触れないように前記ステン缶内に設置し、緩く蓋をして半密閉の容器とし、容器内の水が枯れないように注意しつつ、引き続き加熱しながら水を沸騰させて生じた水蒸気で２０分、試料を加熱処理した。
この処理済みのトウニン１．０ｋｇを５Ｌの３０ｗｔ％ＥｔＯＨで１０日間、室温浸漬抽出し、得られた抽出液のＤ−アミグダリン量とＬ−アミグダリン量とをＨＰＬＣ法により測定した。また、アミグダリンが酵素分解して生じるベンズアルデヒドについても、ＨＰＬＣ法により測定した。結果を表２に示す。
【００５１】
（比較例２２、２３：オーブン加熱処理試料）
乾熱オーブンに試料（トウニン・原形）を設置し、８０℃にて２０分間または１００℃にて２０分間、加熱処理した。
この処理済みのトウニン１．０ｋｇを５Ｌの３０ｗｔ％ＥｔＯＨで１０日間、室温浸漬抽出し、得られた抽出液のＤ−アミグダリン量とＬ−アミグダリン量とをＨＰＬＣ法により測定した。また、アミグダリンが酵素分解して生じるベンズアルデヒドについても、ＨＰＬＣ法により測定した。結果を表２に示す。
【００５２】
【表１】
2020132548.tif 000002
【００５３】
【表２】
2020132548.tif 000003
【００５４】
上記表中に示す比較例の結果から、オーブン加熱処理や電子レンジ加熱処理ではアミグダリンの合計量（Ｄ体＋Ｌ体）の減少の抑制が十分ではない上、長時間の処理で試料に焦げが生じてしまうことから、試料の処理方法として適切ではないことが分かる。
水蒸気加熱処理に関しては、少なくとも実施例に示す条件においては試料の焦げは認められず、また、比較例の加熱処理方法と比べて、アミグダリンの含量の多い抽出液を製造できることが分かる。さらに、１０分以上の処理でアミグダリンの合計量（Ｄ体＋Ｌ体）の減少が認められなくなることから、１０分以上の水蒸気加熱処理により、アミグダリン分解酵素を完全に失活できることが明らかになった。このとき、ベンズアルデヒドの含量はアミグダリンの合計量（Ｄ体＋Ｌ体）と負の相関が認められた。以上の結果から、水蒸気加熱処理することで、アミグダリンの減少を抑制できることが分かる。
また、水蒸気加熱処理の時間が長くなるほど、Ｄ体の割合が減少し、Ｌ体の割合が増加するが、処理時間が適切な範囲であれば、アミグダリン合計量（Ｄ体＋Ｌ体）に占めるＤ体の割合を８５％以上とすることができ、Ｄ−アミグダリンを高効率に得ることができた。