(57)【要約】      （修正有）【課題】カリウムイオンチャネル調節剤の調製における漢方薬組成物の使用を提供する。【解決手段】漢方薬組成物は、下記重量部の割合により調製される。黄連２５０〜４５０、カラスビシャク１５０〜３５０、茯苓１５０〜４５０、枳実６５〜２６５、常山１５０〜３５０、蓮子心１０〜７０、苦参１５０〜３５０、青蒿１５０〜３５０、人参６５〜２６５、麦門冬１５０〜３５０、甘草６５〜２６５。【効果】本発明の漢方薬組成物は、心筋細胞の活動電位の持続時間を延長させることによって、心筋電気活動の不応期を延長することができ、当該薬物は興奮リエントリーを抑え、不整脈を抑制する効果があるが、毒性副作用がない。本発明は臨床における心室性、心房性、または上室性の不整脈などの心臓疾患のために、新しい治療薬物を提供し、実用性が高く、操作しやすく、大規模生産に適する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
カリウムイオンチャネル調節剤の調製における漢方薬組成物の使用であって、
前記漢方薬組成物は各原料を下記重量部の割合に混合することにより調製されることを特徴とするカリウムイオンチャネル調節剤の調製における漢方薬組成物の使用。
黄連    ２５０〜４５０  カラスビシャク  １５０〜３５０  茯苓    １５０〜４５０
枳実      ６５〜２６５  常山            １５０〜３５０  蓮子心    １０〜７０
苦参    １５０〜３５０  青蒿            １５０〜３５０  人参      ６５〜２６５
麦門冬  １５０〜３５０  甘草              ６５〜２６５
【請求項２】
カリウムイオンチャネル調節剤の調製における漢方薬組成物の使用であって、
前記漢方薬組成物は各原料を下記重量部の割合に混合することにより調製されることを特徴とするカリウムイオンチャネル調節剤の調製における漢方薬組成物の使用。
黄連    ３３４ｇ        カラスビシャク  ２５０ｇ        茯苓    ２５０ｇ
枳実    １６７ｇ        常山            ２５０ｇ        蓮子心    ４２ｇ
苦参    ２５０ｇ        青蒿            ２５０ｇ        人参    １６７ｇ
麦門冬  ２５０ｇ        甘草            １６７ｇ
【請求項３】
前記漢方薬組成物は下記方法により製造され、該方法は、
（１）青蒿、苦参、甘草、茯苓、黄連、枳実、常山、人参、カラスビシャク、麦門冬、蓮子心の原料から、それぞれ異物、非薬用部位などの不純物を取り除き、予備用とするステップと、
（２）青蒿、苦参、甘草、茯苓、黄連、枳実、常山、人参、カラスビシャクから、それぞれ異物、非薬用部位などの不純物を取り除き、流れる飲料水で洗浄してから薄切りし、流れる飲料水に麦門冬を濡らしてから平らに潰して予備用とするステップと、
（３）ステップ（１）と（２）の原料を７０〜８０℃で乾燥させ、予備用とするステップと、
（４）黄連、枳実、常山、蓮子心、苦参に６０％のアルコールを加え還流させるとともに２回抽出し、第一回は８倍の量を加え、第２回は６倍の量を加え、毎回それぞれ１．５時間行い、抽出液を混ぜて濾過し、濾液を０．０４Ｋｐａに減圧し、７０℃でアルコールを回収し、継続して相対密度１．３８（６０℃で測定）の固練りになるまで濃縮させ、８０℃でドライペーストに乾燥させて、予備用とするステップと、
（５）人参、茯苓、カラスビシャクに７０％のアルコールを加え還流させるとともに２回抽出し、第一回は８倍の量を加え、第２回は６倍の量を加え、それぞれ各２時間行い、抽出液を混ぜて濾過し、濾液を別の容器に収集して、予備用とするステップと、
（６）ステップ（４）の煎じ薬のかすと麦門冬、青蒿、甘草を混ぜ、水を加えて２回煎じ、第一回は１０倍の量を加え、第２回は８倍の量を加え、それぞれ各１時間行い、煎じ液を混ぜて濾過し、濾液を相対密度１．０５〜１．０６（８０℃）の透明なペーストになるまで濃縮させ、アルコール含有量が７０％になるように９５％のアルコールを加え、均一に撹拌し、２４時間静置し、上清を取って濾過し、濾液を収集して、予備用とするステップと、
（７）ステップ（５）の濾液とステップ（６）の濾液を混ぜ、０．０４ＫＰａに減圧し、７０℃でアルコールを回収し、継続して相対密度１．３８（６０℃で測定）の固練りになるまで濃縮させ、８０℃でドライペーストに乾燥して、予備用とするステップと、
（８）ステップ（４）とステップ（７）のドライペーストを混ぜ、１００目の微粉に粉砕し、適量の糊精を加え、均一に混合し、カプセルに充填し、または医薬品添加物と混合して調合剤に製造するステップと、
を含むことを特徴とする請求項１に記載のカリウムイオンチャネル調節剤の調製における漢方薬組成物の使用。
【請求項４】
前記使用は抗不整脈薬の調製における使用である、ことを特徴とする請求項１に記載のカリウムイオンチャネル調節剤の調製における漢方薬組成物の使用。
【請求項５】
前記使用は心室性、心房性、または上室性の抗不整脈薬における使用である、ことを特徴とする請求項１に記載のカリウムイオンチャネル調節剤の調製における漢方薬組成物の使用。
【請求項６】
前記使用は、活動電位持続時間を延長し、カリウムイオンチャネルを調節し、様々なカリウム電流を抑制する薬物における使用である、ことを特徴とする請求項１に記載のカリウムイオンチャネル調節剤の調製における漢方薬組成物の使用。
【請求項７】
前記漢方薬組成物は、錠剤、カプセル、顆粒剤、内服液剤、または丸薬剤である、ことを特徴とする請求項１に記載のカリウムイオンチャネル調節剤の調製における漢方薬組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は漢方薬に関し、具体的には漢方薬組成物に関し、特にカリウムイオンチャネル調節剤の調製における漢方薬組成物の使用に関する。
【背景技術】
【０００２】
心臓疾患に関連する研究検討において、カリウムイオンチャネルに対する研究が日々増えており、カリウムイオンチャネルは発見された亜型が最も多く、作用が最も複雑なチャネルの一種であって、一般的に遅延整流性カリウムチャネル、瞬時外向性一過性外向きカリウムチャネル、内向き整流性カリウムチャネル、アデノシン三リン酸感受性カリウムチャネルおよびアセチルコリン感受性カリウムチャネルの５種類に分けられる。また、これらはいずれも不整脈の発生、発展と密接に関連する。
【０００３】
遅延整流性カリウムチャネルは、急速活性型遅延整流性カリウム電流（Ｉｋｒ）、緩徐活性型遅延整流性カリウム電流（Ｉｋｓ）、超急速活性型遅延整流性カリウム電流（Ｉｋｕｒ）の３種類に分けられる。急速活性型遅延整流性カリウム電流、緩徐活性型遅延整流性カリウム電流は、心筋細胞の活動電位の２相であるプラトー相（ｐｌａｔｅａｕ  ｐｈａｓｅ）の終了と３相である再分極に対して、重要な意味がある。Ｉｋｒ、Ｉｋｓのチャネル異常またはチャネル数の上下変動はいずれも不整脈を起こす恐れがあるため、Ｉｋｒ、Ｉｋｓチャネルは不整脈を起こし、抗不整脈薬が作用する重要なターゲットである。
【０００４】
内向き整流性カリウムチャネル（Ｋｉｒ）の主要機能は細胞膜の静止電位（Ｒｅｓｔｉｎｇ  Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ）を維持することであり、同時に再分極３相の主要電流でもある。内向き整流性カリウムチャネル（Ｋｉｒ）は２回膜貫通型サブユニットの四量体により構成され、正電位の際に、細胞内のＭｇ２とポリアミンにより遮断されることができる。一過性外向きカリウムチャネルは、心筋活動電位再分極に参与する主要膜電流であり、チャネルが開放される際に、一過性外向き電流に表現され、その後閉鎖し、活動電位の１相を形成し、活動電位の持続時間と形態に対して大きく影響する。ＫＡＴＰチャネルの心筋ＫＡＴＰは細胞内生理学的レベルのＡＴＰにより抑制され、細胞代謝と膜電位を連結する。内向き整流メカニズムは細胞内のＭｇとＮａのチャネル開放に対する妨害を含む。
【０００５】
アセチルコリンはＫカリウムチャンネル（ＩＫＡｃｈ）の洞房結節に存在するペースメーカー細胞と心房筋細胞を活性化し、心拍数を調節する。心房ＩＫＡｃｈの密度は心室の約６倍であり、ＩＫＡｃｈの活性化により膜電位が過分極され、洞房結節と房室結節のペースメーカー細胞の自発性を低減し、房室結節の伝導性を弱化させる。
【０００６】
不整脈は、洞房結節の興奮による異常または洞房結節以外で興奮するため発生し、興奮の伝導が遅く、渋滞または異常チャネルを通じて伝導し、つまり、心臓活動の起源と（または）伝導障害により、心臓の拍動頻度と（または）リズムの異常が発生する。不整脈は、心血管疾患における重要な疾患の一つであり、単独で発病することもあり、心血管疾患に伴うこともある。突然発症して突然死することもあり、持続的に心臓が病変して不全となることもある。不整脈は様々な器質性心疾患に発生することがあり、冠状動脈硬化症（冠状動脈性心疾患）、心筋症、心筋炎およびリウマチ性心疾患（ｒｈｅｕｍａｔｉｃ  ｈｅａｒｔ  ｄｉｓｅａｓｅ）が多く、特に心不全または急性心筋梗塞が発生する際、基本的に健康である者または自律神経機能不全の患者に発生する不整脈も珍しくない。不整脈発生の主要原因は、興奮形成異常（異所性リズムの自動性が向上し、後脱分極および誘発活動）、または興奮伝導異常（リエントリー）、または上記両方ともあることである。そのため、不整脈を治療するには、自動性を低下させ、後脱分極を減少し、リエントリーを無くさなければならない。
【０００７】
現在、薬物の主要作用チャネルと電気生理学的特徴に基づき、様々な化学構造の異なる薬物を下記４つの類別に纏めている。Ｉ類：ナトリウムチャネル遮蔽薬；ＩＩ類：βアドレナリン受容体拮抗薬；ＩＩＩ類：活動電位持続時間を延長させる薬（カリウムイオンチャネル遮蔽薬）；ＩＶ類：カルシウムチャネル遮蔽薬。臨床で主に不整脈を治療する薬物には、キニジン、リドカイン、メキシレチン、アミオダロン、ベラパミルなどがあり、一定の治療効果があるが、同時に明らかな不良反応および毒性副作用がある。化学薬品以外に、さらにいくつかの漢方薬を発明している。中国特許出願番号２００３１０１２２２０５．９には、心室性期外収縮（心悸亢進）を治療する漢方薬である心速寧カプセルおよびその調製方法が開示されているが、応用範囲が非常に限定され、該薬物組成物のカリウムイオンチャネルに対する調節作用（活動電位持続時間を延長させる）が開示されていない。本発明は原特許技術をもとに、さらなる研究を通じて、該組成物のカリウムイオンチャネルに対する調節作用（活動電位持続時間を延長させる）を証明し、心室性、心房性、上室性などの不整脈を治療し、血糖値と血圧を下げる薬物として使用することができる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
本発明が解決しようとする技術的課題は、上記の不備を解消し、カリウムイオンチャネルに対する調節作用（活動電位持続時間を延長させる）により、心室性、心房性、上室性などの不整脈を治療することができる漢方薬組成物を研究することである。
【０００９】
本発明は、カリウムイオンチャネル調節剤薬物の調製における漢方薬組成物の使用を提供する。
【００１０】
本発明において、上記漢方薬組成物は、活性成分である漢方薬および医薬品添加物により組成される。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明に係る漢方薬組成物は、各漢方薬原料を、
黄連    ２５０〜４５０  カラスビシャク  １５０〜３５０  茯苓    １５０〜４５０
枳実      ６５〜２６５  常山            １５０〜３５０  蓮子心    １０〜７０
苦参    １５０〜３５０  青蒿            １５０〜３５０  人参      ６５〜２６５
麦門冬  １５０〜３５０  甘草              ６５〜２６５
の重量部比例で混合して製造する。
【００１２】
好ましくは、本発明において、前記漢方薬組成物は、各漢方薬原料を、
黄連    ３３４ｇ        カラスビシャク  ２５０ｇ        茯苓      ２５０ｇ
枳実    １６７ｇ        常山            ２５０ｇ        蓮子心      ４２ｇ
苦参    ２５０ｇ        青蒿            ２５０ｇ        人参      １６７ｇ
麦門冬  ２５０ｇ        甘草            １６７ｇ
の重量部比例で混合して製造する。
【００１３】
本発明に係る漢方薬組成物の作用機序は、活動電位持続時間を延長させ、カリウムイオンチャネルを調節し、様々なカリウム電流を抑えることである。本発明に係る漢方薬組成物は、心筋細胞活動電位の間隔を延長させることにより、心筋電気活動の不応期を延長させることができ、該作用機序は興奮リエントリーにより誘発される不整脈を抑える作用を果たすが、毒性副作用はない。
【００１４】
本発明の漢方薬組成物に対して、心筋細胞電気生理学試験を行った結果、本発明の漢方薬組成物は明らかに心筋細胞活動電位の間隔を延長させ、カリウムイオンチャネルを調節する作用を果たしていることが分かった。試験結果によると、本発明の当該薬品は、明らかに心筋細胞活動電位の間隔を延長させ、カリウムイオンチャネルを調節する作用を果たし、薬物効果と薬物投与量および濃度は関連性を有し、薬物濃度が１ｍｇ／ｍｌである場合、本発明の薬物はカリウムイオンチャネルを調節することにより、心筋細胞の活動電位の間隔を遅延させる効果が明らかでなく、試験と対照を４回繰り返す場合、対照群（ｃｏｎｔｒｏｌ  ｇｒｏｕｐ）と比べて統計学的な意味がない。薬物濃度が２ｍｇ／ｍｌである場合、本発明の薬物は、カリウムイオンチャネルを調節することにより、心筋細胞活動電位の間隔を遅延させる効果が明らかであり、試験と対照を７回繰り返す場合、対照群と比べて有意差（Ｐ＜０．０５）がある。薬物濃度が４ｍｇ／ｍｌである場合、本発明の薬物はカリウムイオンチャネルを調節することにより、心筋細胞活動電位の間隔を遅延させる効果が明らかであり、試験と対照を７回繰り返す場合、対照群と比べて有意差がある。
【００１５】
そのため、本発明の漢方薬組成物はカリウムイオンチャネルの調節剤薬物の調製に用いることができる。
【００１６】
本発明のもう一つの目的は前記漢方薬組成物の調製方法を提供することである。
当該方法は、下記ステップを含む。
（１）青蒿、苦参、甘草、茯苓、黄連、枳実、常山、人参、カラスビシャク、麦門冬、蓮子心の原料からそれぞれ異物、非薬用部位などの不純物を取り除き、予備用とする。
（２）青蒿、苦参、甘草、茯苓、黄連、枳実、常山、人参、カラスビシャクから、それぞれの異物、非薬用部位などの不純物を取り除き、流れる飲料水で洗浄して薄切り、麦門冬は流れる飲料水で濡らした後平らに潰してから、予備用とする。
（３）ステップ（１）と（２）の原料を７０〜８０℃で乾燥し、予備用とする。
（４）黄連、枳実、常山、蓮子心、苦参に６０％アルコールを加えるとともに還流させ２回抽出し、第一回は８倍の量を加え、第２回は６倍の量を加え、毎回それぞれ１．５時間で、抽出液を混ぜて濾過する。濾液（０．０４Ｋｐａ、７０℃）を減圧させてアルコールを回収し、継続して相対密度１．３８（６０℃測定）の固練りになるまで濃縮し、８０℃でドライペーストに乾燥させ、予備用とする。
（５）人参、茯苓、カラスビシャクに７０％のアルコールを加えるとともに還流させ２回抽出し、第一回は８倍の量を加え、第２回は６倍の量を加え、毎回それぞれ２時間、抽出液を混ぜて濾過し、濾液は別の容器で収集して予備用とする。
（６）ステップ（４）の煎じ薬のかすと麦門冬、青蒿、甘草を混合し、水を加えて２回煮るが、第一回は１０倍の量を加え、第２回は８倍の量を加え、毎回それぞれ１時間で、抽出液を混ぜて濾過し、濾液を相対密度１．０５〜１．０６（８０℃）の透明なペーストになるまで濃縮させ、９５％のアルコールを加えてアルコール含有量を７０％にし、均一に撹拌し、２４時間静置し、上清を取り、濾過し、濾液を収集して予備用とする。
（７）ステップ（５）の濾液とステップ（６）の濾液を混ぜるとともに減圧して（０．０４ＫＰａ、７０℃）アルコールを回収し、継続して相対密度１．３８（６０℃）の固練りになるまで濃縮させ、８０℃でドライペーストに乾燥して、予備用とする。
（８）ステップ（４）とステップ（７）のドライペーストを混ぜ、１００目の微粉に粉砕し、適量の糊精を加えて均一に混合し、カプセルに充填、または医薬品添加物と調製して調合剤を得る。
【００１７】
本発明の漢方薬組成物は、一般的な薬物製造方法により製造され、錠剤、カプセル、顆粒剤、内服液剤、丸薬剤などの経口薬剤を含み、調製過程に調剤学で応用される添加物、例えば、充填剤、接着剤、崩壊剤、潤滑剤、矯味剤などを加える。
【００１８】
本発明により提供される漢方薬組成物は、カリウムイオンチャネル調節剤薬物の調製に使用され、上記使用は抗不整脈薬の製造における使用である。
【００１９】
本発明により提供される漢方薬組成物は、カリウムイオンチャネル調節剤薬物の調製に使用され、上記使用は心室性、心房性、または上室性の抗不整脈薬の調製における使用である。
【００２０】
本発明により提供される漢方薬組成物は、カリウムイオンチャネル調節剤薬物の調製に使用され、上記使用は、活動電位持続時間を延長させ、カリウムイオンチャネルを調節し、様々なカリウム電流を抑える薬物の調製における使用である。
【発明の効果】
【００２１】
本発明の漢方薬組成物は、心筋細胞活動電位の間隔を延長させることによって、心筋電気活動の不応期を延長させることができ、当該作用機序は興奮リエントリーによる不整脈を抑える作用を果たすが、毒性副作用がない。本発明は、新しいカリウムイオンチャネル調節剤の漢方薬を提供し、臨床のために心室性、心房性、または上室性の不整脈などの疾患を治療する新しい薬物を提供し、良好な応用見通しがあり、本発明の方法は操作しやすく、大規模生産に適する。
【図面の簡単な説明】
【００２２】
【図１】本発明の薬物２ｍｇ／ｍｌによる活動電位の延長効果と時間図であり、横座標は投薬時間（単位：分）を表示し、縦座標は活動電位の減衰時間（単位：ミリ秒）を表示する。１は本発明の薬物２ｍｇ／ｍｌの投薬時間帯（０．６５分〜１０．１６分）を表示する。
【図２】本発明の漢方薬組成物（２ｍｇ／ｍｌ、４ｍｇ／ｍｌ）の活動電位図であり、横座標は投薬時間（単位：ミリ秒）を表示し、縦座標は活動電位（単位：ミリボルト）を表示する。線分１は対照群の活動電位と時間の関係を表し、線分２は本発明の薬物投与群（２ｍｇ／ｍｌ）の活動電位と時間の関係を表示し、線分３は洗浄細胞回復後の活動電位と時間の関係を表示する。
【図３】本発明の漢方薬組成物の異なる濃度（１ｍｇ／ｍｌ、２ｍｇ／ｍｌ，４ｍｇ／ｍｌ）における活動電位の減衰関係を示す図であり、横座標は異なる濃度薬物投与群を表示し、縦座標は活動電位の減衰量を表示し、棒グラフ１は対照群活動電位の減衰量を表示し、対照群活動電位の減衰量は１に設定され、棒グラフ２は本発明の薬物１ｍｇ／ｍｌの活動電位の減衰量を表示し、棒グラフ３は本発明の薬物２ｍｇ／ｍｌの活動電位の減衰量を表示し、棒グラフ４は本発明の薬物１ｍｇ／ｍｌの活動電位の減衰量を表示する。
【発明を実施するための形態】
【００２３】
本発明の薬物組成物を心筋細胞電気生理学的実験の研究に応用しやすくするために、本発明の薬物組成物を下記の調合割合で、凍結乾燥粉末またはエキス剤に調製する。
実施例に使用される漢方薬の原料は市販品である。
【００２４】
（実施例１）
〔処方〕
黄連    ３３４ｇ        カラスビシャク  ２５０ｇ        茯苓      ２５０ｇ
枳実    １６７ｇ        常山            ２５０ｇ        蓮子心      ４２ｇ
苦参    ２５０ｇ        青蒿            ２５０ｇ        人参      １６７ｇ
麦門冬  ２５０ｇ        甘草            １６７ｇ
【００２５】
１）上記１１種類の原料、青蒿、苦参、甘草、茯苓、黄連、枳実、常山、人参、カラスビシャク、麦門冬、蓮子心からそれぞれ異物、非薬用部位などの不純物を取り除く。
青蒿、苦参、甘草、茯苓、黄連、枳実、常山、人参、カラスビシャクからそれぞれ異物、非薬用部位などの不純物を取り除き、流れる飲料水で（またはスプレー）洗浄し、たっぷり湿らせ（または少し湿らせる）、それぞれ薄切りする。麦門冬を湿らせた後平らに潰す。７０〜８０℃で乾燥する。
【００２６】
２）黄連、枳実、常山、蓮子心、苦参の原料を水道水２０ｋｇで２回洗い流してから、精製水１０ｋｇで２回洗い流し、それから６０％のアルコールで還流させるとともに２回抽出し、第一回は８．４Ｌを加え、第２回は６．３Ｌを加え、毎回それぞれ１．５ｈ行い、抽出液を混ぜて濾過する。濾液からアルコール（０．０４Ｋｐａ、７０℃）をアルコールの臭いがしなくなるまで回収し、固練りに６．３Ｌ注射用水を加え、温度が５０℃〜６０℃になるまで加熱し、十分に溶解するように攪拌し、熱いうちに濾過し、濾液を一晩静置させ、上清を取り、予備用とする。
【００２７】
３）Ｂグループの人参、茯苓、カラスビシャクの原料を水道水１３ｋｇで２回洗い流してから、精製水６．５ｋｇで２回洗い流し、それから７０％のアルコールで還流させるとともに２回抽出し、第一回は５．３Ｌを加え、第２回は４Ｌを加え、毎回それぞれ２ｈ行い、抽出液を混ぜて濾過し、濾液と煎じ薬のかすをそれぞれ予備用とする。
【００２８】
４）Ｃグループの麦門冬、青蒿、甘草の原料を水道水１３ｋｇで２回洗い流してから、精製水６．５ｋｇで２回洗い流し、それから上記Ｂグループの煎じ薬のかすと混ぜ、注射用水を加えて、２回煎じ、第一回は水６．７Ｌを加えて１ｈ煎じ、第２回は水５．３Ｌを加えて１ｈ煎じ、２回の濾液を混ぜ、薬のかすを捨て、濾液を相対密度１．０５〜１．０６（８０℃）の固練りになるまで濃縮させ、アルコール含有量が７０％になるように、９５％のアルコールを加え、均一に撹拌し、２４時間静置し、濾過により上清を取って、上記Ｂグループの予備用濾液と混ぜ、アルコール（０．０４Ｋｐａ、７０℃）をアルコールの臭いがしなくなるまで回収し、固練りに６倍量の４Ｌ注射用水を加え、温度５０℃〜６０℃になるまで加熱し、十分に溶解するように撹拌し、熱いうちに濾過し、濾液を一晩静置させ、濾過により上清を取り、予備用とする。
【００２９】
５）上記ＡグループとＣグループの予備用の上清を混ぜ、薄膜式ロータリーエバポレーターを利用して、６０℃で相対密度１．１０（６０℃）の固練りになるまで減圧濃縮させ、予備用とする。
【００３０】
６）上記相対密度１．１０（６０℃）の予備用固練りを取って、固定トレイに置き、冷凍乾燥し、冷凍乾燥条件は、冷凍温度―４０℃以下、真空度１５ｐａ以下、加熱温度−２０℃〜８０℃であり、２０時間冷凍乾燥した後に取出し、冷凍乾燥の固体を収集し、粉砕し均一に混ぜ、冷凍乾燥粉末５９０ｇを得る。
【００３１】
（実施例２）
〔処方〕
黄連    ３３４ｇ        カラスビシャク  ２５０ｇ        茯苓      ２５０ｇ
枳実    １６７ｇ        常山            ２５０ｇ        蓮子心      ４２ｇ
苦参    ２５０ｇ        青蒿            ２５０ｇ        人参      １６７ｇ
麦門冬  ２５０ｇ        甘草            １６７ｇ
【００３２】
１）以上の１１種類の原料、青蒿、苦参、甘草、茯苓、黄連、枳実、常山、人参、カラスビシャク、麦門冬、蓮子心から、それぞれ異物、非薬用部位などの不純物を取り除き、予備用とする。
青蒿、苦参、甘草、茯苓、黄連、枳実、常山、人参、カラスビシャクからそれぞれ異物と非薬用部位などの不純物を取り除き、流れる飲料水で（またはスプレー）洗浄し、たっぷり湿らせ（または少し湿らせる）、それぞれ薄切りにする。麦門冬をたっぷり湿らせた後、平らに潰し、７０〜８０℃で乾燥し、予備用とする。
【００３３】
２）黄連、枳実、常山、蓮子心、苦参の原料を水道水２０ｋｇで２回洗い流してから、精製水１０ｋｇで２回洗い流し、それから６０％のアルコールを加えて還流させるとともに２回抽出し、第一回は８．４Ｌを加え、第２回は６．３Ｌを加え、毎回それぞれ１．５ｈ行い、抽出液を混ぜて濾過する。濾液からアルコール（０．０４Ｋｐａ、７０℃）をアルコールの臭いがしなくなるまで回収し、固練りに６．３Ｌ注射用水を加え、温度が５０℃〜６０℃になるように加熱し、十分に溶解するように撹拌し、熱いうちに濾過し、濾液を一晩静置し、濾過により上清を取り、予備用とする。
【００３４】
３）Ｂグループの人参、茯苓、カラスビシャクの原料を水道水１３ｋｇで２回洗い流してから、精製水６．５ｋｇで２回洗い流し、それから７０％のアルコールを加えて還流させるとともに２回抽出し、第一回は５．３Ｌを加え、第２回は４Ｌを加え、毎回それぞれ２ｈ行い、抽出液を混ぜて濾過し、濾液と煎じ薬のかすをそれぞれ予備用とする。
【００３５】
４）Ｃグループの麦門冬、青蒿、甘草の原料を水道水１３ｋｇで２回洗い流してから、精製水６．５ｋｇで２回洗い流し、それから上記Ｂグループの予備用煎じ薬のかすと混ぜ、注射用水を加えて２回煎じ、第一回は水６．７Ｌを加えて１ｈ煎じ、第２回は水５．３Ｌを加えて１ｈ煎じ、２回の濾液を混ぜ、煎じ薬のかすを捨て、濾液を相対密度１．０５〜１．０６（８０℃）の固練りになるまで濃縮させ、アルコール含有量が７０％になるように９５％のアルコールを加え、均一に混合して、２４時間静置し、濾過により上清を取って、上記Ｂグループの予備用濾液と混ぜ、アルコール（０．０４Ｋｐａ、７０℃）をアルコールの臭いがしなくなるまで回収し、固練りに６倍量の４Ｌ注射用水を加え、温度が５０℃〜６０℃になるように加熱し、十分に溶解するように撹拌し、熱いうちに濾過し、濾液を一晩静置させ、濾過により上清を取り、予備用とする。
【００３６】
５）上記ＡグループとＣグループの予備用上清を取って混合し、薄膜式ロータリーエバポレーターを利用し、６０℃で相対密度１．１０（６０℃）の固練りになるまで減圧濃縮させ、予備用とする。
【００３７】
６）上記相対密度１．１０（６０℃）の予備用固練りを取って、６５℃の湯煎鍋に置き流動性の固練りがなくなるまで水浴加熱し、均一に混合する。
【００３８】
（実施例３）
黄連    ３３４ｇ        カラスビシャク  ２５０ｇ        茯苓      ２５０ｇ
枳実    １６７ｇ        常山            ２５０ｇ        蓮子心      ４２ｇ
苦参    ２５０ｇ        青蒿            ２５０ｇ        人参      １６７ｇ
麦門冬  ２５０ｇ        甘草            １６７ｇ
【００３９】
１）以上の１１種類の原料、青蒿、苦参、甘草、茯苓、黄連、枳実、常山、人参、カラスビシャク、麦門冬、蓮子心から、それぞれ異物、非薬用部位などの不純物を取り除き、予備用とする。
青蒿、苦参、甘草、茯苓、黄連、枳実、常山、人参、カラスビシャクからそれぞれ異物、非薬用部位などの不純物を取り除き、流れる飲料水で（またはスプレー）洗浄し、たっぷり湿らせ（または少し湿らせる）、それぞれ薄切りにする。麦門冬をたっぷり湿らせた後平らに潰す。７０〜８０℃で乾燥し予備用とする。
【００４０】
２）黄連、枳実、常山、蓮子心、苦参の原料を水道水２０ｋｇで２回洗い流してから、精製水１０ｋｇで２回洗い流し、それから６０％のアルコールを加えて還流させるとともに２回抽出し、第一回は８．４Ｌを加え、第２回は６．３Ｌを加え、毎回それぞれ１．５ｈ行い、抽出液を混ぜて濾過する。濾液からアルコール（０．０４Ｋｐａ、７０℃）をアルコールの臭いがしなくなるまで回収し、固練りに６．３Ｌ注射用水を加え、温度が５０℃〜６０℃になるように加熱し、十分に溶解するように撹拌し、熱いうちに濾過し、濾液を一晩静置させ、濾過により上清を取って、予備用とする。
【００４１】
３）Ｂグループの人参、茯苓、カラスビシャクの原料を水道水１３ｋｇで２回洗い流してから、精製水６．５ｋｇで２回洗い流し、それから７０％のアルコールで還流させるとともに２回抽出し、第一回は５．３Ｌを加え、第２回は４Ｌを加え、毎回それぞれ２ｈ行い、抽出液を混ぜて濾過し、濾液と煎じ薬のかすをそれぞれ予備用とする。
【００４２】
４）Ｃグループの麦門冬、青蒿、甘草の原料を水道水１３ｋｇで２回洗い流してから、精製水６．５ｋｇで２回洗い流し、それから上記Ｂグループの煎じ薬のかすと混ぜ、注射用水を加えて、２回煎じ、第一回は水６．７Ｌを加えて１ｈ煎じ、第２回は水５．３Ｌを加えて１ｈ煎じ、２回の濾液を混ぜて、煎じ薬のかすを捨て、濾液を相対密度１．０５〜１．０６（８０℃）の固練りになるまで濃縮させ、アルコール含有量が７０％になるまで、９５％のアルコールを加え、均一に撹拌し、２４時間静置し、濾過により上清を取って、上記Ｂグループの予備用濾液と混ぜ、アルコール（０．０４Ｋｐａ、７０℃）をアルコールの臭いがしなくなるまで回収し、固練りに６倍量の４Ｌ注射用水を加え、温度が５０℃〜６０℃になるように加熱し、十分に溶解するように撹拌し、熱いうちに濾過し、濾液を一晩静置し、濾過により上清を取り、予備用とする。
【００４３】
５）上記ＡグループとＣグループの予備用の上清を取って混合し、薄膜式ロータリーエバポレーターを利用して、６０℃で相対密度１．１０（６０℃）の固練りになるまで減圧濃縮させ、予備用とする。
【００４４】
６）上記相対密度１．１０（６０℃）の予備用固練りを取って、６５℃の湯煎鍋に置き流動性の固練りがなくなるまで加熱し、８０℃でドライペーストに乾燥させて予備用とし、１００目に粉砕し粉末を均一に混合し、糊精２００ｇを加えて均一に混合し、カプセルに充填する。
【００４５】
（実施例４）
本発明の漢方薬組成物（実施例１により製造された凍結乾燥粉末）を利用して、心筋細胞電気生理学試験を行う。
【００４６】
１、試験原料：
（１）試験動物：
雄性ラット、体重２５０〜５００ｇ、イギリスオックスフォード大学の実験動物センターにより提供される。
【００４７】
（２）薬品と試薬
本発明の試験用散薬（実施例１により製造）。
本発明の試験用散薬を精密に量り取って、細胞外液に溶解させ、その最終濃度をそれぞれ１ｍｇ／ｍｌと２ｍｇ／ｍｌ、４ｍｇ／ｍｌとする。試薬はＳｉｇｍａ社から購買する。
【００４８】
（２）溶液：
１）細胞外液（ｍｍｏｌ／Ｌ）：
ＮａＣｌ  １１２．０、ＫＣｌ  １０、ＫＨ２ＰＯ４  １．２、ＨＥＰＥＳ  １０、ＭｇＳＯ４  ５、ＮａＨＣＯ３  １５、Ｔａｕｒｉｎｅ  ３０、Ｇｌｕｃｏｓｅ  ２０、ＮａＨＣＯ３  ２４．０  （ｐＨ７．４）。連続的に５％のＣＯ２と９５％のＯ２．を注入する
【００４９】
２）電極液（ｍｍｏｌ／Ｌ）：ＫＣｌ  １４０、  ＭｇＣｌ２  １、ＥＧＴＡ  ５．０、Ｈｅｐｅｓ  １０．０、Ｎａ２ＡＴＰ  ２．０  （ｐＨ  ７．２）。
【００５０】
２、研究方法：全細胞電位固定技術を使用して、単一心室筋細胞の活動電位を記録し、連続的灌流方法により本発明の薬物試験用溶液を細胞または洗浄細胞に作用させる。
【００５１】
１）ラットの単一心室筋細胞の分離
単一心室筋細胞は成体ラットの心臓から分離されたものであり、酵素分解法を利用し、ラットの頭を打って気絶させ、頸動脈から瀉血させた後、仰臥位に固定し、迅速に開胸して心臓を取り出し、心臓をランゲンドルフ灌流システムに入れ、酵素液を心臓を通じて灌流し始め、３６℃のカルシウム欠乏溶液に置き、カルシウム欠乏溶液で約５ｍｉｎ連続灌流し、カルシウム欠乏溶液の成分は、塩化ナトリウム１２０、５．４；塩化カリウム；硫酸マグネシウム５；ピルビン酸５ブドウ糖２０；２０；タウリン；ＨＥＰＥＳ１０（ｐＨ６．９６）である。灌流液に４Ｕ／ｍｌのプロティナーゼを加え（ＳｉｇｍａｔｙｐｅＸＸＩＶ）を代替し、上記カルシウム欠乏溶液を注入する。２分間灌流し、２分後灌流液をコラゲナーゼ（ウォージントン２クラス、０．３ミリグラム／ミリリットル）とヒアルロニダーゼ（Ｓｉｇｍａ、０．６ミリグラム／ミリリットル）に切り替える。５〜１０ｍｉｎ継続して注入した後、心臓をカニューレから取り外し、心房を破棄し、心室を切り刻み、高カリウム液に入れる。成分は、ＫＯＨ５；塩化カリウムの３０；ＫＨ２ＰＯ４３０；ＭｇＳＯ４３；；グルタミン酸の５０；タウリンの２０；ＥＧＴＡ０．５；ＨＥＰＥＳ１０、ブドウ糖１０（ｐＨ７．４）である。組織は４重ガーゼにより濾過しなければならず、濾液を１５００ｒｐｍで、２分間遠心分離させる。細胞を沈殿させ、上清を捨て、高カリウム液を加えてから、再度遠心分離し、細胞を高カリウム液に入れて、４℃で保持して、予備用とする。
【００５２】
２）電気生理学技術と統計
分離済みの細胞を温浴槽に入れて、連続的に灌流（２２〜２４℃）させ、細胞膜電位を全細胞電位固定技術を利用して記録する。１つの軸索２００Ｂパッチクランプ電極増幅器、硼珪酸ガラス電極を使用し、電極に導電性液体を加えた後、抵抗は１．５〜３Ωの間である。電流は第９世代のＰＣＬＡＭＰＥＸソフトウェア（米国Ａｘｏｎ会社）で記録し、データ分析はＰＣＬＡＭＰＦＩｔソフトウェア（米国、Ａｘｏｎ会社）を利用し、ｏｒｉｇｉｎソフトウェア（米国、ＯｒｉｇｉｎＬａｂ会社）を利用して製図し、薬物を灌流液に溶解させて、少なくとも３分間灌流させた後に投薬し始め、平均値と基準差を利用してデータを表示する。薬物の効果は対照群と投薬群２群のデータの平均差により評価し、ｔ検定を利用して統計する。
【００５３】
３、研究結果：
（１）試験結果によると、本発明の該薬品は明らかに心筋細胞活動電位の間隔を延長させ、カリウムイオンチャネルを調節する作用がある。対照群は４５．４ｍｓ±４．９であり、本発明の薬物組成物（２ｍｇ／ｍｌ）は５２．２ｍｓ±４．５（Ｐ＜０．０１、ｎ＝７）である。薬物溶出後細胞の活動電位は投薬前の状態に回復する。結果は、図１に示すとおりである。試験結果によると、本発明の該薬品は明らかに心筋細胞活動電位の間隔を延長させ、カリウムイオンチャネルを調節する作用があり、薬物効果と投薬量および濃度は関連性があり、薬物濃度が１ｍｇ／ｍｌである場合、本発明の薬物はカリウムイオンチャネルを調節することにより、心筋細胞活動電位の間隔を遅延する効果が明らかでなく、試験と対照を４回繰り返した結果、対照群に比べて、統計的有意差は認められなかった。薬物濃度が２ｍｇ／ｍｌである場合、本発明の薬物はカリウムイオンチャネルを調節することにより、心筋細胞活動電位の間隔を遅延する効果が明らかで、試験と対照を７回繰り返した結果、対照群に比べて、有意差が（Ｐ＜０．０５）認められた。薬物濃度が４ｍｇ／ｍｌである場合、本発明の薬物はカリウムイオンチャネルを調節することにより、心筋細胞活動電位の間隔を遅延する効果が明らかで、試験と対照を７回繰り返した結果、対照群に比べて、有意差（Ｐ＜０．０５）が認められた。結果は図２、図３に示すとおりである。
【図１】
2020023526.tif 000002
【図２】
2020023526.tif 000003
【図３】
2020023526.tif 000004
【手続補正書】
【提出日】令和1年11月4日(2019.11.4)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
各原料を下記重量部の割合： 
黄連    ２０〜４５０    カラスビシャク  １５０〜３５０  茯苓    １５０〜４５０
枳実      ６５〜２６５  常山            １５０〜３５０  蓮子心    １０〜７０
苦参    １５０〜３５０  青蒿            １５０〜３５０  人参      ６５〜２６５
麦門冬  １５０〜３５０  甘草              ６５〜２６５
に混合することにより調製され、
薬物濃度が、２ｍｇ／ｍｌまたは４ｍｇ／ｍｌである、漢方薬組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の漢方薬組成物から調製される、カリウムイオンチャネル調節剤。
【請求項３】
抗不整脈薬である、請求項２に記載のカリウムイオンチャネル調節剤。
【請求項４】
心室性、心房性、または上室性の抗不整脈薬である、請求項３に記載のカリウムイオンチャネル調節剤。
【請求項５】
（１）青蒿、苦参、甘草、茯苓、黄連、枳実、常山、人参、カラスビシャク、麦門冬、蓮子心の原料から、それぞれ異物、非薬用部位などの不純物を取り除き、予備用とするステップと、
（２）青蒿、苦参、甘草、茯苓、黄連、枳実、常山、人参、カラスビシャクから、それぞれ異物、非薬用部位などの不純物を取り除き、流れる飲料水で洗浄してから薄切りし、流れる飲料水に麦門冬を濡らしてから平らに潰して予備用とするステップと、
（３）ステップ（１）と（２）の原料を７０〜８０℃で乾燥させ、予備用とするステップと、
（４）黄連、枳実、常山、蓮子心、苦参に６０％のアルコールを加え還流させるとともに２回抽出し、第一回は８倍の量を加え、第２回は６倍の量を加え、毎回それぞれ１．５時間行い、抽出液を混ぜて濾過し、濾液を０．０４Ｋｐａに減圧し、７０℃でアルコールを回収し、継続して相対密度１．３８（６０℃で測定）の固練りになるまで濃縮させ、８０℃でドライペーストに乾燥させて、予備用とするステップと、
（５）人参、茯苓、カラスビシャクに７０％のアルコールを加え還流させるとともに２回抽出し、第一回は８倍の量を加え、第２回は６倍の量を加え、それぞれ各２時間行い、抽出液を混ぜて濾過し、濾液を別の容器に収集して、予備用とするステップと、
（６）ステップ（４）の煎じ薬のかすと麦門冬、青蒿、甘草を混ぜ、水を加えて２回煎じ、第一回は１０倍の量を加え、第２回は８倍の量を加え、それぞれ各１時間行い、煎じ液を混ぜて濾過し、濾液を相対密度１．０５〜１．０６（８０℃）の透明なペーストになるまで濃縮させ、アルコール含有量が７０％になるように９５％のアルコールを加え、均一に撹拌し、２４時間静置し、上清を取って濾過し、濾液を収集して、予備用とするステップと、
（７）ステップ（５）の濾液とステップ（６）の濾液を混ぜ、０．０４ＫＰａに減圧し、７０℃でアルコールを回収し、継続して相対密度１．３８（６０℃で測定）の固練りになるまで濃縮させ、８０℃でドライペーストに乾燥して、予備用とするステップと、
（８）ステップ（４）とステップ（７）のドライペーストを混ぜ、１００目の微粉に粉砕し、適量の糊精を加え、均一に混合し、医薬品添加物と混合して調合剤に製造するステップと、
を含むことを特徴とする請求項１に記載の漢方薬組成物の製造方法。