(57)【要約】【課題】線維性癌の治療のための新規治療剤の提供。【解決手段】この課題は、患者における線維性癌の治療方法又は抗癌治療の効力を改善するための治療剤であって、それを必要とする患者に１種以上の血清アミロイドＰ（ＳＡＰ）アゴニストの治療上有効な量を投与するための治療剤によって解決される。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者における線維性癌の治療方法又は抗癌治療の効力を改善するための方法であって、それを必要とする患者に１種以上の血清アミロイドＰ（ＳＡＰ）アゴニストの治療上有効な量を投与することを含む方法。
【請求項２】
前記ＳＡＰアゴニストが小分子、核酸、又はポリペプチドから選択される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ＳＡＰアゴニストがＳＡＰポリペプチドである、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記ＳＡＰアゴニストがＮ結合オリゴ糖鎖を含むグリコシル化ヒトＳＡＰポリペプチドであり、ここで、該オリゴ糖鎖の少なくとも１個の分岐は、α２，３結合シアル酸部分を末端とする、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項５】
前記オリゴ糖鎖の全ての分岐がα２，３結合シアル酸部分を末端とする、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
前記オリゴ糖鎖がα２，６結合シアル酸部分を実質的に含まない、請求項４に記載の方法。
【請求項７】
前記ポリペプチドが配列番号１に対して少なくとも８５％同一のアミノ酸配列を含む、請求項３〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項８】
前記ポリペプチドが配列番号１に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む、請求項３〜６のいずれかに記載の方法。
【請求項９】
前記ポリペプチドがＳＡＰドメイン及び１種以上の異種ドメインを含む融合タンパク質である、請求項３〜８のいずれかに記載の方法。
【請求項１０】
前記１種以上の異種ドメインが生体内安定性、生体内半減期、取り込み／投与、組織局所化又は分布、タンパク質複合体の形成及び／又は精製のうち一つ以上を増強する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記ポリペプチドが１個以上の修飾アミノ酸残基を含む、請求項３〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１２】
前記１個以上の修飾アミノ酸残基は、ＰＥＧ化アミノ酸、プレニル化アミノ酸、アセチル化アミノ酸、ビオチニル化アミノ酸及び／又は有機誘導体化剤に結合したアミノ酸を含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記ＳＡＰアゴニストが抗ＦｃγＲＩ抗体、抗ＦｃγＲＩＩ抗体、抗ＦｃγＲＩＩＩ抗体、架橋抗ＦｃγＲ抗体、凝集ＩｇＧ抗体、又は架橋ＩｇＧ抗体から選択される、請求項１〜３のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】
前記ＳＡＰアゴニストを、次から選択されるモード：局所、注射、静脈内注射、皮下注射、吸入、デポ若しくはポンプによる連続的放出又はそれらの組み合わせによって投与する、請求項１〜１３のいずれかに記載の方法。
【請求項１５】
前記方法が前記患者に抗癌治療剤を投与することをさらに含む、請求項１〜１４のいずれかに記載の方法。
【請求項１６】
前記抗癌治療剤が化学療法剤、抗体ベースの薬剤、チロシンキナーゼ阻害剤、免疫調節剤、生物学的薬剤及びこれらの組み合わせから選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記化学療法剤が、アクチノマイシンＤ、アルデスロイキン、アリトレチノイン、全トランス型レチノイン酸／ＡＴＲＡ、アルトレタミン、アムサクリン、アスパラギナーゼ、アザシチジン、アザチオプリン、バチルスカルメット・ゲラン／ＢＣＧ、ベンダムスチン塩酸塩、ベキサロテン、ビカルタミド、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブスルファン、カペシタビン、カルボプラチン、カーフィルゾミブ、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン／シスプラチナム、クラドリビン、シクロホスファミド／シトホスファン、シタラビン、ダカルバジン、ダウノルビシン／ダウノマイシン、デニロイキンジフチトクス、デクスラゾキサン、ドセタキセル、ドキソルビシン、エピルビシン、エトポシド、フルダラビン、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、ゲムシタビン、ゴセレリン、ヒドロコルチゾン、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イホスファミド、インターフェロンα、イリノテカンＣＰＴ−１１、ラパチニブ、レナリドマイド、ロイプロリド、メクロレタミン／クロルメチン／ムスチン／ＨＮ２、メルカプトプリン、メトトレキサート、メチルプレドニゾロン、マイトマイシン、ミトタン、ミトキサントロン、オクトレオチド、オプレルベキン、オキサリプラチン、パクリタキセル、パミドロネート、ペガスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ＰＥＧインターフェロン、ペメトレキセド、ペントスタチン、フェニルアラニンマスタード、プリカマイシン／ミトラマイシン、プレドニゾン、プレドニゾロン、プロカルバジン、ラロキシフェン、ロミプロスチム、サルグラモスチム、ストレプトゾシン、タモキシフェン、テモゾロミド、テムシロリムス、テニポシド、サリドマイド、チオグアニン、チオホスホアミド／チオテパ、チオテパ、トポテカン塩酸塩、トレミフェン、トレチノイン、バルルビシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ボリノスタット、ゾレドロン酸及びこれらの組み合わせから選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記抗体ベースの薬剤がアレムツズマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、フレソリムマブ、ゲムツズマブオゾガミシン、イブリツモマブチウキセタン、イピリムマブ、オファツムマブ、パニツムマブ、リツキシマブ、トシツモマブ、トラスツズマブ、トラスツズマブＤＭ１及びこれらの組み合わせから選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
前記チロシンキナーゼ阻害剤がアキシチニブ、バフェチニブ、ボスチニブ、セジラニブ、クリゾチニブ、ダサチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、ネラチニブ、ニロチニブ、パゾパニブ、ポナチニブ、クイザルチニブ、レゴラフェニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、バンデタニブ、バタラニブ及びこれらの組み合わせから選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項２０】
前記免疫調節剤がサリドマイド、レナリドマイド、ポマリドマイド、メトトレキサート、レフルノミド、シクロホスファミド、シクロスポリンＡ、ミノサイクリン、アザチオプリン、タクロリムス、メチルプレドニゾロン、ミコフェノール酸モフェチル、ラパマイシン、ミゾリビン、デオキシスペルグアリン、ブレキナール、５、６−ジメチルキサンテノン−４−酢酸（ＤＭＸＡＡ）、ラクトフェリン、ポリＡＵ、ポリＩ：ポリＣ１２Ｕ、ポリＩＣＬＣ、イミキモド、レシキモド、非メチル化ＣｐＧジヌクレオチド（ＣｐＧ−ＯＤＮ）及びイピリムマブから選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項２１】
前記チロシンキナーゼ阻害剤がＡＣ−４３０、ＡＺＤ１４８０、バリシチニブ、ＢＭＳ−９１１４５３、ＣＥＰ−３３７７９、ＣＹＴ３８７、ＧＬＰＧ−０６３４、ＩＮＣＢ１８４２４、レスタウルチニブ、ＬＹ２７８４５４４、ＮＳ−０１８、パクリチニブ、ルキソリチニブ、ＴＧ１０１３４８（ＳＡＲ３０２５０３）、トファシチニブ、ＶＸ−５０９、Ｒ−３４８、Ｒ７２３及びこれらの組み合わせから選択されるヤヌスキナーゼ阻害剤である、請求項１６に記載の方法。
【請求項２２】
前記生物学的薬剤がＩＬ−２、ＩＬ−３、エリスロポエチン、Ｇ−ＣＳＦ、フィルグラスチム、インターフェロンα、ボルテゾミブ及びそれらの組み合わせから選択される、請求項１６に記載の方法。
【請求項２３】
前記抗癌治療剤がＡＢ００２４、ＡＺＤ１４８０、ＡＴ−９２８３、ＢＭＳ−９１１５４３、ＣＹＴ３８７、エベロリムス、ギビノスタット、イメテルスタット、レスタウルチニブ、ＬＹ２７８４５４４、ＮＳ−０１８、経口ヒ素、パクリチニブ、パノビノスタット、ペグインターフェロンα−２ａ、ポマリドマイド、プラシノスタット、ルキソリチニブ、ＴＡＫ−９０１及びＴＧ１０１４３８（ＳＡＲ３０２５０３）から選択される、請求項１５に記載の方法。
【請求項２４】
前記１種以上の追加の活性剤がルキソリチニブである、請求項１５に記載の方法。
【請求項２５】
前記ＳＡＰアゴニストと前記１種以上の追加の活性薬剤とを共処方する、請求項１５〜２４のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】
前記ＳＡＰアゴニストと前記１種以上の追加の活性薬剤とを同時に投与する、請求項１５〜２４のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
前記ＳＡＰアゴニストと前記１種以上の追加の活性薬剤をそれぞれの時間内に投与して前記患者において重複治療効果を生じさせる、請求項１５〜２４のいずれかに記載の方法。
【請求項２８】
前記癌が骨髄線維症、胃癌、膵臓癌、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、有毛細胞白血病、多発性骨髄腫、髄芽細胞腫、骨髄性白血病、及び急性リンパ性白血病から選択される、請求項１〜２７のいずれかに記載の方法。
【請求項２９】
前記癌が骨髄線維症である、請求項１〜２８のいずれかに記載の方法。
【請求項３０】
前記骨髄線維症が原発性骨髄線維症、真性多血症後骨髄線維症又は本態性血小板血症後骨髄線維症である、請求項２９に記載の方法。
【請求項３１】
前記ＳＡＰアゴニストを単独で又は追加の抗癌治療剤と組み合わせて、脾臓体積をベースラインに対して少なくとも２５％減少させるのに有効な投与計画に従って投与する、請求項２９又は３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記ＳＡＰアゴニストを単独で又は追加の抗癌治療剤と組み合わせて、脾臓体積をベースラインに対して少なくとも５０％減少させるのに有効な投与計画に従って投与する、請求項３１に記載の方法。
【請求項３３】
前記ＳＡＰアゴニストを単独で又は追加の抗癌治療剤と組み合わせて、ＭＰＮ−ＳＡＦ総症状スコアをベースラインに対して少なくとも２５％減少させるのに有効な投与計画に従って投与する、請求項２９〜３２のいずれかに記載の方法。
【請求項３４】
前記ＳＡＰアゴニストを単独で又は追加の抗癌治療剤と組み合わせて、ＭＰＮ−ＳＡＦ総症状スコアをベースラインに対して少なくとも５０％減少させるのに有効な投与計画に従って投与する、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記ＳＡＰアゴニストを単独で又は治療用の追加の抗癌治療剤と組み合わせて、ヘモグロビンレベルをベースラインに対して少なくとも１ｇ／Ｌ増加させるのに有効な投与計画に従って投与する、請求項２９〜３４のいずれかに記載の方法。
【請求項３６】
前記ＳＡＰアゴニストを単独で又は治療用の追加の抗癌治療剤と組み合わせて、ヘモグロビンレベルをベースラインに対して少なくとも１００ｇ／Ｌにまで増加させるのに有効な投与計画に従って投与し、ここで、ヘモグロビンは、ベースラインで１００ｇ／Ｌ未満である、請求項２９〜３５のいずれかに記載の方法。
【請求項３７】
前記ＳＡＰアゴニストを単独で又は追加の抗癌治療剤と組み合わせて、赤血球（ＲＢＣ）輸血をベースラインに対して少なくとも２５％減少させるのに有効な投与計画に従って投与する、請求項２９〜３６のいずれかに記載の方法。
【請求項３８】
前記ＳＡＰアゴニストを単独で又は追加の抗癌治療剤と組み合わせて、赤血球（ＲＢＣ）輸血をベースラインに対して少なくとも５０％減少させるのに有効な投与計画に従って投与する、請求項２９〜３６のいずれかに記載の方法。
【請求項３９】
前記ＳＡＰアゴニストを単独で又は追加の抗癌治療剤と組み合わせて、ＲＢＣ輸血非依存性を達成するのに有効な投与計画に従って投与する、請求項２９〜３６のいずれかに記載の方法。
【請求項４０】
前記ＳＡＰアゴニストを単独で又は追加の抗癌治療剤と組み合わせて、血小板輸血を少なくとも２５％減少させるのに有効な投与計画に従って投与する、請求項２９〜３９のいずれかに記載の方法。
【請求項４１】
前記ＳＡＰアゴニストを単独で又は追加の抗癌治療剤と組み合わせて、血小板輸血を少なくとも５０％減少させるのに有効な投与計画に従って投与する、請求項２９〜３９のいずれかに記載の方法。
【請求項４２】
前記方法が、ＳＡＰアゴニスト及び追加の抗癌治療剤を、１以上の副作用を該追加の抗癌治療剤単独での治療と比較して減少させるような投与レジメンに従って投与することを含む、請求項２８〜４１のいずれかに記載の方法。
【請求項４３】
前記ＳＡＰアゴニストの投与によって、治療関連骨髄抑制が生じない又は誘発されない、請求項２８〜４２のいずれかに記載の方法。
【請求項４４】
前記患者又は前記癌が、該ＳＡＰアゴニストによる治療の開始前に、化学療法に対して非応答性、耐性又は難治性である、請求項１〜４３のいずれかに記載の方法。
【請求項４５】
前記患者又は前記癌が、該ＳＡＰアゴニストによる治療の開始前に、Ｊａｋキナーゼ阻害剤による治療に対して非応答性、耐性又は難治性であり、或いは該Ｊａｋキナーゼ阻害剤の有効性が減少している、請求項１〜４３のいずれかに記載の方法。
【請求項４６】
前記患者は、前記ＳＡＰアゴニストによる治療開始前に、骨髄線維症グレーディングに関する欧州コンセンサスにより評価されるときにグレード３の骨髄線維症を有する、請求項１〜４５のいずれかに記載の方法。
【請求項４７】
前記患者は、前記ＳＡＰアゴニストによる治療開始前に、骨髄線維症グレーディングに関する欧州コンセンサスにより評価されるときにグレード２の骨髄線維症を有する、請求項１〜４５のいずれかに記載の方法。
【請求項４８】
前記癌が膵臓癌である、請求項１〜２８のいずれかに記載の方法。
【請求項４９】
患者における線維性癌を治療する又は抗癌治療の有効性を改善するための方法であって、該それを必要とする患者に、１種以上のＳＡＰアゴニストの治療上有効な量を１種以上の追加の活性剤と組み合わせて投与することを含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１３年１０月８日に出願された米国仮特許出願第６１／８８８２６９号、２０１４年５月１３日に出願された同６１／９９２８０７号、２０１４年５月２９日に出願された同６２／００４８２８号及び２０１４年５月２９日に出願された同６２／００４８３６号の優先権及びその利益を主張する。これらの開示は、その全体を参照により本明細書で援用する。
【０００２】
配列表
本願は、ＡＳＣＩＩフォーマットで電子的に提出された配列表を含み、その全体が参照により本明細書で援用される。２０１４年１０月６日に作成されたＡＳＣＩＩのコピーを１０４１１２−００２２−ＷＯ１＿ＳＬ．ｔｘｔと名付けており、サイズは７６０４バイトである。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
ある種の癌及び増殖状態は、正常組織を置き換える腫瘍内又はその周囲での密性結合組織の増殖によって特徴付けられる。このような線維性の癌は治療が困難である。というのは、化学療法剤が癌細胞を取り囲む密性の線維性間質に浸透することができないからである。骨髄線維症などの他の癌では、線維症により健康な臓器組織が置き換わると、癌の症状に寄与する不適切な臓器機能が生じる。積極的な治療レジメンにもかかわらず、化学療法剤に対する線維性癌の耐性は不良な臨床結果をもたらした。したがって、線維性癌の治療のための新規治療戦略を開発するための要望がある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００４】
発明の概要
所定の態様では、本発明は、線維性癌の治療方法又は患者における抗癌治療の有効性を改善させるための方法であって、血清アミロイドＰ（ＳＡＰ）アゴニストの治療的有効量を、それを必要とする患者に投与することを含む方法を提供する。
【０００５】
所定の態様では、本発明は、線維性癌の治療方法又は患者における抗癌治療の有効性を改善するための方法であって、それを必要とする患者に１種以上のＳＡＰアゴニストの治療上有効な量を１種以上の追加の活性剤と組み合わせて投与することを含む方法を提供する。
【０００６】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、抗ＦｃγＲＩ抗体、抗ＦｃγＲＩＩ抗体、抗ＦｃγＲＩＩＩ抗体、架橋抗ＦｃγＲ抗体、凝集ＩｇＧ抗体、又は架橋ＩｇＧ抗体から選択される。
【０００７】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、小分子、核酸、又はポリペプチドから選択される。
【０００８】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、グリコシル化ヒトＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチドである。一例として、ＳＡＰアゴニストは、グリコシル化ヒトＳＡＰポリペプチド、例えばヒト血清から単離されたＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するグリコシル化ヒトＳＡＰポリペプチド（例えば、Ｎ結合オリゴ糖鎖を含むヒトＳＡＰであって、オリゴ糖鎖の少なくとも１個の分岐がα２，３結合シアル酸部分を末端とするもの）などのＳＡＰポリペプチドを含むことができる。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、組換えヒトＳＡＰ（例えば、ｒｈＳＡＰ）である。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、ＰＲＭ−１５１などの当該技術分野において知られている組換えヒトＳＡＰも含む（Ｄｕｆｆｉｅｌｄ（２０１０）Ｄｒｕｇ  Ｎｅｗｓ  ＆  Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ，２３（５）：３０５−３１５）。任意に、ｒｈＳＡＰは、ＣＨＯ細胞又は他の好適な細胞株中で調製できる。ここで説明する方法のいずれかは、所定の実施形態では、ＰＲＭ−１５１として知られている組換えヒトＳＡＰを投与することを含む。
【０００９】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、Ｎ結合オリゴ糖鎖を含むグリコシル化ヒトＳＡＰポリペプチドであり、ここで、該オリゴ糖鎖の少なくとも１個の分岐は、α２，３結合シアル酸部分を末端とする。いくつかの実施形態では、オリゴ糖鎖の全てのシアリル化分岐はα２，３結合シアル酸部分を末端とする。いくつかの実施形態では、オリゴ糖鎖は、α２，６結合シアル酸部分を実質的に含まない。一例として、ＳＡＰアゴニストは、このようなグリコシル化ヒトＳＡＰポリペプチドを含むことができる。いくつかの実施形態では、グリコシル化ヒトＳＡＰは、Ｄｕｆｆｉｅｌｄ及びＬｕｐｈｅｒ，Ｄｒｕｇ  Ｎｅｗｓ  ＆  Ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ  ２０１０，２３（５）：３０５−３１５に記載されているように、組換えヒトペントラキシン−２（ｈＰＴＸ−２）とも呼ばれる組換えヒトＳＡＰを含む。
【００１０】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチドは、配列番号１に対して少なくとも８５％同一のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチドは、配列番号１に対して少なくとも９５％同一のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチドは、血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するグリコシル化ＳＡＰポリペプチドである。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチドは、５個のポリペプチド鎖を含み、それらのそれぞれは、配列番号１に少なくとも８５％（少なくとも９０％、９５％、９８％又は１００％）同一のアミノ酸配列を含む。
【００１１】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチドは、ＳＡＰドメイン及び１種以上の異種ドメインを含む融合タンパク質である。いくつかの実施形態では、１種以上の異種ドメインは、生体内安定性、生体内半減期、取り込み／投与、組織局所化又は分布、タンパク質複合体の形成及び／又は精製のうち一つ以上を増強する。
【００１２】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチドは、１個以上の修飾アミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、１個以上の修飾アミノ酸残基は、ＰＥＧ化アミノ酸、プレニル化アミノ酸、アセチル化アミノ酸、ビオチニル化アミノ酸及び／又は有機誘導体化剤に結合したアミノ酸を含む。
【００１３】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、次から選択されるモードによって投与される：局所的、注射、静脈内注射、皮下注射、吸入、デポ若しくはポンプによる連続的放出又はそれらの組み合わせ。
【００１４】
いくつかの実施形態では、該方法は、患者に抗癌治療剤（例えば、追加の抗癌治療剤）を投与することを含む。
【００１５】
いくつかの実施形態では、抗癌治療剤は、化学療法剤、抗体ベースの薬剤、チロシンキナーゼ阻害剤、免疫調節剤、生物学的薬剤及びこれらの組み合わせから選択される。単一の追加の薬剤剤若しくは複数の追加の薬剤又は治療モダリティを共投与することができる（同じ時点若しくは異なる時点で及び／又は同一又は異なる投与経路を介して及び／又は同一又は異なる投与計画で）。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストによる治療は、追加の抗癌治療剤をＳＡＰアゴニストの非存在下で投与した場合に経験されるよりも、安全性及び／又は有効性を改善し及び／又は追加の抗癌治療剤１以上の副作用を低減させる。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストの添加前に、患者（治療を必要とする患者）は、無応答性又は耐性又は難治性であり、或いは、患者は、抗癌治療剤による治療から最適以下又は減少した利益しか受けておらず、また、治療レジメンに対するＳＡＰアゴニストの添加は、ＳＡＰアゴニストにより臨床上の利益の増加をもたらし、及び／又は追加の抗癌治療剤の応答性を改善する。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストによる治療は、追加の抗癌治療剤を単独で投与するときに推奨されるのとは異なる用量で追加の抗癌治療剤を投与することができる、例えば抗癌治療剤をより低い用量で又はより高い用量で投与することができる（又はする）というものである。用量におけるこの相違は、特定の患者のレジメンに対して又は推奨用量若しくは用量範囲に対して評価できる。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、グリコシル化ＳＡＰポリペプチド、例えば血清から精製されたヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するグリコシル化ＳＡＰポリペプチドといったＳＡＰポリペプチドを含む。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストと追加の抗癌治療剤との組み合わせは、追加の抗癌治療剤そのものが必要ではない状態、患者の集団又はサブ集団に必要である。
【００１６】
いくつかの実施形態では、化学療法剤は、次のものから選択されるが、これらに限定されない：アクチノマイシンＤ、アルデスロイキン、アリトレチノイン、全トランス型レチノイン酸／ＡＴＲＡ、アルトレタミン、アムサクリン、アスパラギナーゼ、アザシチジン、アザチオプリン、バチルスカルメット・ゲラン／ＢＣＧ、ベンダムスチン塩酸塩、ベキサロテン、ビカルタミド、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブスルファン、カペシタビン、カルボプラチン、カーフィルゾミブ、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン／シスプラチナム、クラドリビン、シクロホスファミド／シトホスファン、シタラビン、ダカルバジン、ダウノルビシン／ダウノマイシン、デニロイキンジフチトクス、デクスラゾキサン、ドセタキセル、ドキソルビシン、エピルビシン、エトポシド、フルダラビン、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、ゲムシタビン、ゴセレリン、ヒドロコルチゾン、ヒドロキシ尿素、イダルビシン、イホスファミド、インターフェロンα、イリノテカンＣＰＴ−１１、ラパチニブ、レナリドマイド、ロイプロリド、メクロレタミン／クロルメチン／ムスチン／ＨＮ２、メルカプトプリン、メトトレキサート、メチルプレドニゾロン、マイトマイシン、ミトタン、ミトキサントロン、オクトレオチド、オプレルベキン、オキサリプラチン、パクリタキセル、パミドロネート、ペガスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ＰＥＧインターフェロン、ペメトレキセド、ペントスタチン、フェニルアラニンマスタード、プリカマイシン／ミトラマイシン、プレドニゾン、プレドニゾロン、プロカルバジン、ラロキシフェン、ロミプロスチム、サルグラモスチム、ストレプトゾシン、タモキシフェン、テモゾロミド、テムシロリムス、テニポシド、サリドマイド、チオグアニン、チオホスホアミド／チオテパ、チオテパ、トポテカン塩酸塩、トレミフェン、トレチノイン、バルルビシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ボリノスタット、ゾレドロン酸及びこれらの組み合わせ。所定の実施形態では、この方法は、ＳＡＰアゴニスト及び追加の抗癌治療剤の投与を含み、該追加の抗癌治療剤は、単一の化学療法剤又は２種以上の化学療法剤の組み合わせなどの化学療法剤である。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、グリコシル化ＳＡＰポリペプチド、例えば血清から精製したヒトＳＡＰは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドといったＳＡＰポリペプチドを含む。所定の実施形態では、治療を必要とする患者は、化学療法剤単独に対して難治性であり、不応答であり又は最適以下で応答する癌を有する患者であり、この方法は、化学療法に対する有効性及び／又は応答性を改善する。所定の実施形態では、治療を必要とする患者は、以前に化学療法単独による治療的利益を経験した患者であるが、ただし化学療法単独による治療の治療上の利益が頭打ちである若しくは実質的に頭打ちであり、又はこのような治療がもはや有効ではない若しくは有効性が減少している患者である。所定の実施形態では、それを必要とする患者は、膵臓癌を有する患者である。
【００１７】
いくつかの実施形態では、抗体ベースの薬剤は、次のものから選択されるが、これらに限定されない：アレムツズマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、フレソリムマブ、ゲムツズマブオゾガミシン、イブリツモマブチウキセタン、イピリムマブ、オファツムマブ、パニツムマブ、リツキシマブ、トシツモマブ、トラスツズマブ、トラスツズマブＤＭ１及びこれらの組み合わせ。所定の実施形態では、該方法は、ＳＡＰアゴニスト及び追加の抗癌治療剤の投与を含み、該追加の抗癌治療剤は、抗体ベースの薬剤である。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、グリコシル化ＳＡＰポリペプチド、例えば血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドといったＳＡＰポリペプチドを含む。所定の実施形態では、治療を必要とする患者は、特定の抗体ベースの薬剤に対して難治性、不応答性又は最適以下の応答性の癌を有する患者であり、この方法は、その薬剤に対する有効性及び／又は応答性を改善する。所定の実施形態では、治療を必要とする患者は、以前に抗体ベース薬剤単独での治療的利益を経験した患者であるが、ただし、抗体ベース薬剤による治療の治療上の利益が頭打ちである若しくは実質的に頭打ちであり、又はこのような治療がもはや有効ではない若しくは有効性が減少している患者である。所定の実施形態では、この組み合わせは、抗体ベース薬剤が必要とはされない患者を治療するために必要である。
【００１８】
いくつかの実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、次のものから選択されるが、これらに限定されない：アキシチニブ、バフェチニブ、ボスチニブ、セジラニブ、クリゾチニブ、ダサチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、ネラチニブ、ニロチニブ、パゾパニブ、ポナチニブ、クイザルチニブ、レゴラフェニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、バンデタニブ、バタラニブ及びこれらの組み合わせ。所定の実施形態では、該方法は、ＳＡＰアゴニスト及び追加の抗癌治療剤の投与を含み、該追加の抗癌治療剤は、チロシンキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、グリコシル化ＳＡＰポリペプチド、例えば血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドといったＳＡＰポリペプチドを含む。所定の実施形態では、治療を必要とする患者は、特定のチロシンキナーゼ阻害剤に対して難治性、不応答性又は最適以下の応答性の癌を有する患者であり、この方法は、該薬剤の有効性及び／又は応答性を改善する。所定の実施形態では、治療を必要とする患者は、以前にチロシンキナーゼ阻害剤単独での治療的利益を経験した患者であるが、ただし、チロシンキナーゼ阻害剤単独による治療の治療上の利益が頭打ちである若しくは実質的に頭打ちであり、又はこのような治療がもはや有効ではない若しくは有効性が減少している患者である。所定の実施形態では、この組み合わせは、チロシンキナーゼ阻害剤自体が必要とされない患者を治療するために必要である。
【００１９】
いくつかの実施形態では、免疫調節剤は、次のものから選択されるが、これらに限定されない：サリドマイド、レナリドマイド、ポマリドマイド、メトトレキサート、レフルノミド、シクロホスファミド、シクロスポリンＡ、ミノサイクリン、アザチオプリン、タクロリムス、メチルプレドニゾロン、ミコフェノール酸モフェチル、ラパマイシン、ミゾリビン、デオキシスペルグアリン、ブレキナール、５、６−ジメチルキサンテノン−４−酢酸（ＤＭＸＡＡ）、ラクトフェリン、ポリＡＵ、ポリＩ：ポリＣ１２Ｕ、ポリＩＣＬＣ、イミキモド、レシキモド、非メチル化ＣｐＧジヌクレオチド（ＣｐＧ−ＯＤＮ）及びイピリムマブ。所定の実施形態では、該方法は、ＳＡＰアゴニスト及び追加の抗癌治療剤の投与を含み、該追加の抗癌治療薬は免疫調節剤である。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、グリコシル化ＳＡＰポリペプチド、例えば血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドといったＳＡＰポリペプチドを含む。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、グリコシル化ＳＡＰポリペプチド、例えば血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドといったＳＡＰポリペプチドを含む。所定の実施形態では、治療を必要とする患者は、特定のチロシンキナーゼ阻害剤に対して不応性、不応答性又は最適以下の応答性の癌を有する患者であり、この方法は、その薬剤の有効性及び／又は応答性を改善する。所定の実施形態では、治療を必要とする患者は、以前に免疫調節剤単独での治療的利益を経験した患者であるが、ただし、免疫調節剤単独での治療の治療上の利益が頭打ちである若しくは実質的に頭打ちであり、又はこのような治療がもはや有効ではない若しくは有効性が減少している患者である。所定の実施形態では、この組み合わせは、免疫調節剤自体が必要とされない患者を治療するために必要である。
【００２０】
いくつかの実施形態では、チロシンキナーゼ阻害剤は、次のものから選択されるヤヌスキナーゼ阻害剤であるが、これらに限定されない：ＡＣ−４３０、ＡＺＤ１４８０、バリシチニブ、ＢＭＳ−９１１４５３、ＣＥＰ−３３７７９、ＣＹＴ３８７、ＧＬＰＧ−０６３４、ＩＮＣＢ１８４２４、レスタウルチニブ、ＬＹ２７８４５４４、ＮＳ−０１８、パクリチニブ、ルキソリチニブ、ＴＧ１０１３４８（ＳＡＲ３０２５０３）、トファシチニブ、ＶＸ−５０９、Ｒ−３４８、Ｒ７２３及びこれらの組み合わせ。所定の実施形態では、該方法は、ＳＡＰアゴニスト及び追加の抗癌治療剤の投与を含み、該追加の抗癌治療剤は、ヤヌスキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、グリコシル化ＳＡＰポリペプチド、例えば血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドといったＳＡＰポリペプチドを含む。所定の実施形態では、ヤヌスキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストはＳＡＰポリペプチドを含み、ヤヌスキナーゼ阻害剤はルキソリチニブを含む。所定の実施形態では、治療を必要とする患者は、特定のヤヌスキナーゼ阻害剤に対して難治性、不応答性又は最適以下の応答性の癌を有する患者であり、この方法は、その薬剤の有効性及び／又は応答性を改善する。所定の実施形態では、治療を必要とする患者は、以前にヤヌスキナーゼ阻害剤単独での治療的利益を経験した患者であるが、ただしヤヌスキナーゼ阻害剤単独による治療の治療上の利益が頭打ちである若しくは実質的に頭打ちであり、又はこのような治療がもはや有効ではない若しくは有効性が減少している患者である。所定の実施形態では、この組み合わせは、ヤヌスキナーゼ阻害剤そのものが必要とはされない患者を治療するために必要である。所定の実施形態では、癌は骨髄線維症である。
【００２１】
いくつかの実施形態では、生物学的薬剤は、次のものから選択されるが、これらに限定されない：ＩＬ−２、ＩＬ−３、エリスロポエチン、Ｇ−ＣＳＦ、フィルグラスチム、インターフェロンα、ボルテゾミブ及びそれらの組み合わせ。
【００２２】
いくつかの実施形態では、抗癌治療剤は、次のものから選択されるが、これらに限定されない：ＡＢ００２４、ＡＺＤ１４８０、ＡＴ−９２８３、ＢＭＳ−９１１５４３、ＣＹＴ３８７、エベロリムス、ギビノスタット、イメテルスタット、レスタウルチニブ、ＬＹ２７８４５４４、ＮＳ−０１８、経口ヒ素、パクリチニブ、パノビノスタット、ペグインターフェロンα−２ａ、ポマリドマイド、プラシノスタット、ルキソリチニブ、ＴＡＫ−９０１及びＴＧ１０１４３８（ＳＡＲ３０２５０３）。
【００２３】
いくつかの実施形態では、抗癌治療剤はルキソリチニブである。
【００２４】
所定の実施形態では、治療を必要とする患者は、未処置であり、ＳＡＰアゴニストによる治療の開始前に予め別の抗癌治療による治療を受けていない。治療が開始されたら、所定の実施形態ではＳＡＰアゴニストによる単剤療法であり、他の実施形態では１種以上の追加の抗癌治療剤との併用療法である。
【００２５】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰアゴニストと１種以上の追加の活性薬剤（例えば、追加の抗癌治療剤）とを共処方する。いくつかの実施形態では、ＳＡＰアゴニストと１種以上の追加の活性薬剤とを同時に投与する。いくつかの実施形態では、ＳＡＰアゴニストと１種以上の追加の活性薬剤とをそれぞれの時間内に投与して患者において重複治療効果を生じさせる。ＳＡＰアゴニストと１種以上の追加の活性薬剤とを同時に投与して又はそれぞれの時間内に投与して重複治療効果を生じさせる場合には、これらの薬剤を同一又は異なる投与経路（例えば経口対注入）によって投与することができる。
【００２６】
いくつかの実施形態では、癌は、骨髄線維症、胃癌、膵臓癌、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、有毛細胞白血病、多発性骨髄腫、髄芽細胞腫、骨髄性白血病、及び急性リンパ性白血病から選択されるが、これらに限定されない。
【００２７】
いくつかの実施形態では、癌は、骨髄線維症である。いくつかの実施形態では、骨髄線維症は、原発性骨髄線維症、真性多血症後骨髄線維症又は本態性血小板血症後骨髄線維症である。
【００２８】
いくつかの実施形態では、癌は膵臓癌である。
【００２９】
所定の実施形態では、上記又は下記のいずれか（例えば、上記又は下記の癌のいずれか）の治療は、ここで説明するようにＳＡＰ単剤療法である。他の実施形態では、上記又は下記のいずれか（例えば、上記又は下記の癌のいずれか）の治療は、ここで説明するようにＳＡＰアゴニスト及び追加の抗癌剤を含む併用療法である。所定の実施形態では、治療を必要とする被験体は、治療未経験であり、ＳＡＰポリペプチドを含むＳＡＰアゴニストなどのＳＡＰアゴニスト単独又は追加の抗癌剤との併用による治療が、受けた最初の抗癌療法である。他の実施形態では、治療を必要とする被験体は、1回以上の非ＳＡＰ治療による治療を１回以上予め受けている。所定の実施形態では、被験体は、１回以上の非ＳＡＰ治療を予め受け、かつ、（ｉ）応答に失敗している、又は（ｉｉ）最初に応答したが、すでに応答していない、又は（ｉｉｉ）最初に応答した後に、現時点で応答性を低下している。被験体が追加の抗癌剤に応答しなくなったかどうかにかかわらず、所定の実施形態では、本発明は、その抗癌剤をここで記載するＳＡＰアゴニストなどのＳＡＰアゴニストと共に継続して投与することを意図する。
【００３０】
所定の実施形態では、当該方法は、治療関連骨髄抑制を誘発する又は生じさせることなく、線維性癌を治療すること、例えば本明細書に記載の癌のいずれかを治療することを含む。言い換えれば、所定の実施形態では、本発明の方法は、骨髄抑制の悪化を、例えば治療の開始前に観察されたそれと比較して誘発しない又はもたらさない。骨髄抑制は、有害事象共通用語基準（ＣＴＣＡＥ）に従ってグレード０〜グレード５のスケールで評価できる（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃｏｍｍｏｎ  Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｆｏｒ  Ａｄｖｅｒｓｅ  Ｅｖｅｎｔｓ  ｖ４．０，ＮＣＩ，ＮＩＨ，ＤＨＨＳ．Ｍａｙ  ２９，２００９  ＮＩＨ  ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ＃０９−７４７３参照）。いくつかの実施形態では、貧血などの骨髄抑制の１以上の基準は、治療の結果として悪化しない（例えば、グレード３〜グレード４の有害事象；グレード２〜グレード３の有害事象）。
【００３１】
所定の実施形態では、本発明のＳＡＰアゴニストによる治療は、単剤療法又は併用療法としての使用をサポートする安全性プロフィールを有する。
【００３２】
所定の実施形態では、治療は、投与計画、例えばここで説明する投与計画のいずれかに従ってＳＡＰアゴニストを投与することを含む。所定の実施形態では、投与及び／又は治療上有効な量とは、当該技術分野において、臨床試験プロトコール、完全な処方情報、研究者のパンフレットにおいて又はそれぞれの疾患を有する患者に有益であると当該分野の専門家によって一般に理解される基準の改善により定義されるような治療効果を生じさせるのに有効な用量及び投与計画に従って投与することを含むものと解される。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、単独で投与されるか又は併用療法の一部として投与されるかにかかわらず、週１回未満の投与を与える投与計画に従って投与できる。所定の実施形態では、このような投与頻度は、初期負荷段階後に行い、その際、例えば、治療サイクルの第１週の間に、ＳＡＰアゴニストを複数回投与する。
【００３３】
所定の実施形態では、治療は、臓器機能を改善する（例えば、治療効力は、臓器機能の改善を含む；ＳＡＰアゴニストは、単独で又は組み合わせて投与され、かつ、臓器機能を改善する）。所定の実施形態では、臓器は骨髄であり、臓器機能の改善はヘモグロビン及び／又は血小板の改善を評価することによって評価される（例えば、これらの測定基準の一方又は両方の改善は臓器機能の改善を表す；血小板の場合には、血小板の改善とは、低い血小板レベルに苦しむ被験体における血小板の増加をいう；ヘモグロビンの場合には、ヘモグロビンの改善とは、低ヘモグロビン値に苦しむ被験体中におけるヘモグロビンの増加をいう）。所定の実施形態では、治療は、線維症を減少させることなどによって正常組織を回復させる（例えば、治療効力は正常組織の回復を含む）。所定の実施形態では、回復する正常組織は、骨髄線維症を評価することによって評価される。
【００３４】
本発明は、本明細書に記載の態様及び実施形態の任意の組合せといった本発明の特徴のいずれかの全ての適切な組み合わせを意図する。例えば、本発明は、上記態様及び実施形態のいずれかを互いに組み合わせることができ及び／又は本明細書に開示された実施形態のいずれかと組み合わせることを意図する。例えば、機能的及び／又は構造的特徴の任意の組み合わせを使用してここで説明されたＳＡＰアゴニストを単独で使用し又はここで説明する方法のいずれかにおける併用療法で使用して、ここに記載した症状、患者集団、又は患者亜集団のいずれかを治療することができる。
【図面の簡単な説明】
【００３５】
【図１】図１は、Ｃ６Ｄ２９（サイクル６、２９日目）後又は試験の最後時における触知可能な脾臓を有する被験体における脾臓サイズの変化率を描いたウォーターフォールプロットである。Ｙ軸は、ベースラインからの脾臓の大きさの変化率を示す。評価された被験体をＸ軸に示す。図１から明らかなように、この期間であっても、各治療群からの少なくとも一人の患者においてベースラインからの脾臓サイズの減少が観察された（例えば、２つの異なる投与計画での単剤及び併用療法）。
【図２】図２は、Ｃ６Ｄ２９（サイクル６、２９日目）後又は試験終了時における被験体におけるＭＰＮ−ＳＡＦ総症状スコア（ＴＳＳ）の変化率を描いたウォーターフォールプロットである。Ｙ軸はベースラインからのＭＰＮ−ＳＡＦ  ＴＳＳの変化率を示す。評価を受けた被験体をＸ軸に示す。図２から明らかなように、この期間であっても、各治療群からの少なくとも一人の患者においてベースラインからの臨床評価における改善が観察された（例えば、２つの異なる投与計画での単剤及び併用療法）。
【図３】図３は、単剤療法としてのＰＲＭ−１５１による治療の２４〜３０週間にわたる患者１０１〜００５における（Ａ）ヘモグロビン応答、（Ｂ）血小板応答、（Ｃ）ＭＰＮ−ＳＡＦ総症状スコア（ＴＳＳ）応答、及び（Ｄ）脾臓サイズ応答を描くトレンドラインを有する散布図を示す。治療期間にわたって、この患者は、示された期間にわたって評価されたときに、ヘモグロビン及び血小板の増加及びＭＰＮ−ＳＡＦ  ＴＳＳスコア及び脾臓サイズの減少を経験した。
【図４】図４Ａは、患者１０１〜００５からのベースライン時（図４Ａの左側のパネル）及び単剤療法としてのＰＲＭ−１５１による治療の３ヶ月後（図４Ａの右側のパネル）の骨髄生検のレチクリン染色を示す。治療期間にわたって、この患者は、これらの２つの時点で評価されるときに、グレード２からグレード０への骨髄線維症の減少を経験した。図４Ｂは、患者１０８〜００３からのベースライン時（図４Ｂの左側のパネル）、ＰＲＭ−１５１による治療の３ヶ月後（図４Ｂの中央のパネル）及びＰＲＭ−１５１による治療の６ヶ月後（図４Ｂの右側のパネル）での骨髄生検のレチクリン染色を示す。治療期間にわたって、この患者は、これら３時点で評価されるときに、グレード３からグレード２、その後グレード２からグレード１への骨髄線維症の減少を経験した。
【発明を実施するための形態】
【００３６】
発明の詳細な説明
概要
本発明は、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを単剤として又は抗癌治療剤と組み合わせて使用して線維性癌及び癌関連線維症を治療するための新規治療法を提供する。
【００３７】
本発明は、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストが単剤としていくつかの線維性の癌を効果的に治療することができ、戦略の組み合わせがいくつかの線維性癌を治療することを確実することができるという発見に基づくものである。様々な癌及び増殖性状態は、高密度の線維性組織の存在によって特徴付けられる。本発明は、戦略の組み合わせが線維症、癌及び癌関連線維症を治療するのを確実にすることができるという発見に基づくものである。治療的介入の目標一つは、抗癌治療剤が癌細胞にアクセスするのを可能にするために線維性組織の過剰な蓄積を防止し又は減少させることである。治療的介入の別の目的は、過剰な線維性組織を防止する又は減少させることにより正常な臓器機能を回復させることである。
【００３８】
線維症に至る事象の調節は、少なくとも２つの主要な事象を伴う。一つは、線維細胞の増殖及び分化である。線維細胞は、組織の損傷部位に正常に侵入して血管形成及び創傷治癒を促進する末梢血単球に由来する線維芽細胞様細胞の別個の集団である。線維細胞は、腫瘍、特に腫瘍における間質組織の形成に重要である。線維細胞は、ＣＤ１４＋末梢血単核球から分化し、そして他のＰＢＭＣ細胞から分化することができる。ＳＡＰ、ＩＬ−１２、ラミニン−１、抗ＦｃγＲ抗体、架橋ＩｇＧ及び／又は凝集ＩｇＧの存在は、このプロセスを阻害し、又はこのプロセスを少なくとも部分的に遅延させることができる。
【００３９】
第２の主要な事象は、線維性組織の形成及び維持である。線維性組織は、単球から線維細胞、線維芽細胞、マクロファージ又は筋線維芽細胞への分化、線維芽細胞の動員及び増殖、新たな細胞外マトリックスの形成及び新たな血管組織の増殖によって形成及び維持できる。次の慢性炎症、傷害、悪性腫瘍又は特発性線維症といった病理学的線維症では、組織の損傷及び破壊をもたらす可能性があるのは、この過剰線維性組織である。
【００４０】
近年、血清アミロイドＰ（ＳＡＰ）又はペントラキシン−２（ＰＴＸ−２）を治療剤として使用して様々な障害、例えば線維症関連障害、過敏性疾患、自己免疫疾患、粘膜炎及び炎症性疾患、例えば微生物感染によって引き起こされるものを治療することができることが示唆された。例えば、米国特許第８２４７３７０号及び同８４９７２４３号並びに米国特許出願公開第１２／７２０８４５号及び同１２／７２０８４７号を参照されたい。ＦｃγＲに結合するＳＡＰは、線維細胞、線維細胞前駆体、筋線維芽細胞前駆体及び／又は造血単球前駆体の分化に対して阻害シグナルを与える。線維症のための治療的処置としてＳＡＰ及びＳＡＰアゴニストを使用することは、米国特許第７７６３２５６号及び同８２４７３７０号に記載されている。これらの文献を参照により本明細書で援用する。ここに記載される方法のいずれかの所定の実施形態では、当該方法は、ＳＡＰポリペプチドを含むＳＡＰなどのＳＡＰの投与を含む（実施例を参照）。所定の実施形態では、ＳＡＰは、ＣＨＯ細胞内で産生された組換えヒトＳＡＰなどの組換えヒトペントラキシン−２とも呼ばれる組換えヒトＳＡＰである。所定の実施形態では、ＳＡＰポリペプチドは、ヒト血清から精製されたＳＡＰのグリコシル化とは異なるグリコシル化を有するヒトＳＡＰポリペプチドといったヒトＳＡＰポリペプチドを含む。
【００４１】
本発明は、線維性癌又は癌関連線維症を治療するための方法を提供する。この方法は、一般に、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストなどの抗線維化剤の有効量を単剤として又は抗癌治療剤の有効量と組み合わせて投与することを含む。ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニスト及び抗癌治療剤は、異なる細胞集団を標的とすることができる。例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、線維化の調節に関与する細胞を標的とすることができるのに対し、抗癌治療剤は癌細胞を標的とする。選択された実施形態では、これらの成分は、組み合わせ組成物として処方又は投与でき、或いは別個及び／又は独立して、例えば、全身的に又は標的位置に投与できる。この方法は、癌関連線維症又は線維性癌（例えば、骨髄線維症などの線維性癌、子宮筋腫、線維腫、線維腺腫及び線維肉腫を含めた乳房、子宮、膵臓又は結腸の癌）を治療する方法を含む。
【００４２】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストの有効量は、単独で又は併用療法で投与したときに、線維症を、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストによる治療の前の個体における線維化度と比較して少なくとも約１０％、より好ましくは少なくとも約１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％或いは少なくとも約５０％以上軽減するのに有効な量である。所定の実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、ＳＡＰポリペプチドを含むＳＡＰであり、かつ、投与計画に従って投与され、また、単独又は併用療法で投与される場合には、線維症を、ＳＡＰによる治療の前の個体における線維化度と比較して少なくとも約１０％、より好ましくは少なくとも約１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、又はさらには少なくとも５０％以上軽減するのに有効である。
【００４３】
他の実施形態では、本発明は、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストと抗癌治療剤との相乗的組み合わせを投与することを含む方法を提供する。本明細書で使用するときに、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストと抗癌治療剤の「相乗的組み合わせ」とは、（ｉ）単剤療法として同じ投与量で投与したときのＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストの治療的又は予防的利益と、（ｉｉ）単剤療法として同じ投与量で投与されたときの抗癌剤の治療的又は予防的利益との単なる付加的組み合わせから予測又は予想できる治療結果の漸進的な改善よりも治療的又は予防的処置における効果が大きい複合投与量のことである。
【００４４】
ここで、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニスト、一例では、グリコシル化ＳＡＰポリペプチドを含むＳＡＰアゴニスト（例えば、グリコシル化ＳＡＰポリペプチドを含むＳＡＰ、例えばヒト血清から精製されたＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するグリコシル化ＳＡＰポリペプチド；組換えヒトＳＡＰ、例えば組換えヒトペントラキシン−２又はＰＲＭ−１５１）を投与すると、治療開始時のベースラインレベルと比較して、線維性癌（例えば、骨髄線維症）症状、身体所見及び貧血、血小板減少症、血小板増加、白血球増加などの血球数の異常が改善したことが示される。また、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニスト、例えばグリコシル化ＳＡＰポリペプチドを含むＳＡＰアゴニスト（例えば、グリコシル化ＳＡＰポリペプチドを含むＳＡＰ、例えばヒト血清から精製されたＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するグリコシル化ＳＡＰポリペプチド；組換えヒトＳＡＰ、例えば組換えヒトペントラキシン−２又はＰＲＭ−１５１）と、抗癌治療剤（例えばルキソリチニブなどのＪａｋキナーゼ阻害剤）との組み合わせを投与すると、ベースラインレベルと比較して線維性癌（例えば、骨髄線維症）症状、脾腫及び貧血、血小板減少、血小板増加、白血球増加などの血球数の異常が改善することも示される。また、本発明の方法は、本発明のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストが、ＳＡＰ治療によって誘発される又はそれに関連する臨床的に有意な骨髄抑制の証拠なしに（例えば、治療関連骨髄抑制の証拠なしに）単独で又は別の抗癌治療剤と組み合わせて十分に許容されたという知見に基づくものである。実際に、所定の実施形態では、貧血などの骨髄抑制を示す基準の改善が治療後に達成された。併用療法の有効性のみならず、追加の抗癌治療剤単独の効果が弱まり始めた患者にとって適している場合もある。さらに、併用療法は、抗癌治療剤単独による治療を受けた患者が経験する場合の多い副作用のいくつかを改善させた。この場合、その治療計画に対してＳＡＰを添加する前にルキソリチニブ（ヤヌスキナーゼ阻害剤）単独での治療を受けた患者について、本発明者は、ＳＡＰの添加前にこれらの患者が経験した副作用と比較して（例えばヤヌスキナーゼ阻害剤単独による治療と比較して）、ヘモグロビンレベル及び血小板数の増加によって評価されるときの貧血及び血小板減少症の改善を観察した。これらの結果は、線維性癌のための単剤療法として又は併用療法としてのＳＡＰの有効性を実証するのみならず、ＳＡＰを使用して治療範囲及び他の治療剤に対する患者集団を拡大して、利用可能な治療が失敗した又は不十分である患者のための治療モダリティ及び患者の亜集団を与え、そして利用可能な治療法の安全性プロファイルを改善すると共に、それ自体が治療効果を有することも実証するものである。さらに、ここで、ＳＡＰポリペプチド又はグリコシル化ＳＡＰポリペプチドを含むＳＡＰなどのＳＡＰアゴニストを単剤として又は併用療法の一部として投与すると、臓器線維症が減少し、臓器の機能の回復及び線維性癌症状の改善につながることが示される。根本の線維性病変を正確に標的とするＳＡＰの能力は、広範囲の線維癌における線維症を治療しかつ逆転させるその広範な可能性を有効にする。
【００４５】
定義
特に定義しない限り、ここで使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。一般に、本明細書で使用される用語と、細胞培養、分子遺伝学、有機化学及び核酸化学並びにハイブリダイゼーションにおける実験手順とは周知であり、当該技術分野において一般的に使用されている。標準的な技術を核酸及びペプチド合成のために使用する。技術及び手順は、一般に、当該技術分野及び様々な一般的参考文献における従来の方法に従って実施され（例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ外，１９８９，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，第２版．Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．）、これらは、本明細書を通じて提供される。
【００４６】
ここで使用するときに、冠詞「ａ」及び「ａｎ」とは、冠詞の文法上の目的語の１又は複数（すなわち、少なくとも１）をいう。一例として、「ａｎ  ｅｌｅｍｅｎｔ」とは、１の要素又は複数の要素を意味する。
【００４７】
ここで使用するときに、用語「約」とは、使用されている数の数値のプラス又はマイナス１０％を意味する。したがって、約５０％とは、４５％〜５５％の範囲を意味する。
【００４８】
ここで使用するときに、用語「実質的に」とは、特定されるものの大部分であるが全体ではないことを意味する。例えば、ヌクレオチド配列に関して、用語「実質的に類似」とは、その配列が同一のタンパク質又はペプチドについて報告された別の配列と大部分が同一であることを示す；ただし、そのヌクレオチド配列は、得られるタンパク質の構造や機能に影響を与えない任意の数の変種又は変異を包含することができる。
【００４９】
治療剤に関連して使用されるときに、「投与する」とは、標的組織に若しくは標的組織上に治療剤を直接投与し又は患者に治療剤を投与し、それによって治療剤が、標的とされる組織に正の影響を与えることをいう。したがって、ここで使用ときに、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストに関連して使用される場合の用語「投与する」には、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを被験体に全身的に、例えば静脈内注射（例えば、これは静脈内点滴とすることができる）によって与え、それによって治療剤が標的組織に到達することが包含されるが、これに限定されない。組成物を「投与する」ことは、例えば、静脈内、皮下、筋肉内若しくは病巣内注射、経口投与、局所投与又は他の既知の技術と組み合わせたこれらの方法によって達成できる。このような組み合わせ技術は、加熱、放射線、超音波及び送達物質の使用を含む。複数の異なる治療剤を投与する場合には、それらの薬剤は、同一又は異なる投与経路によって及び／又は同じ若しくは異なる時間に投与できる。当該技術分野で理解されているように、薬剤は投与計画に従って投与できる。
【００５０】
治療剤に関連して使用されるときに、「与える」とは、標的組織に又は標的組織上に直接治療剤を投与し又は患者に治療剤を投与し、それによって、治療剤が標的組織に正の影響を与えることをいう。
【００５１】
用語「改善する」は、本発明が、与えられる、適用される又は投与される組織の特性及び／又は物理的属性を変更することを伝えるために使用される。また、用語「改善する」は、疾患状態が「改善」されたときに、症状又は疾患状態に関連した物理的特性が低下し、低減し又はなくなるような疾患状態に関連して使用することもできる。
【００５２】
ここで使用するときに、「単離された」とは、人間の介入を通して天然の状態から変更される又は取り出されることを意味する。例えば、生きている動物において自然に存在するＳＡＰは、「単離された」ものではないが、合成ＳＡＰポリペプチド又はその天然状態の共存する材料から部分的に又は完全に分離されたＳＡＰポリペプチドは、「単離された」ものである。単離されたＳＡＰポリペプチドは、実質的に精製された形態で存在することができ、又は例えば、ＳＡＰポリペプチドが送達された細胞などの非天然環境で存在することができる。
【００５３】
「ミメティック」、「ペプチド模倣物」及び「ペプチドミメティック」は、ここでは区別なく使用され、一般的に選択された天然ペプチド又はタンパク質機能ドメイン（例えば、結合モチーフ又は活性部位）の三次結合構造又は活性を模倣するペプチド、部分ペプチド又は非ペプチド分子をいう。これらのペプチド模倣物としては、組換えにより又は化学的に修飾されたペプチドのみならず、以下でさらに説明するような小分子薬剤模倣物などの非ペプチド薬剤が挙げられる。
【００５４】
ここで使用するときに、用語「核酸」とは、デオキシリボ核酸（ＤＮＡ）及び適切な場合にはリボ核酸（ＲＮＡ）などのポリヌクレオチドをいう。また、この用語は、均等物としてヌクレオチドアナログから作製されたＲＮＡ又はＤＮＡ、及び、説明される実施形態に該当する場合には、一本鎖（例えばセンス又はアンチセンス）及び二本鎖ポリヌクレオチドのアナログを包含するものと解すべきである。
【００５５】
「任意の」又は「任意に」とは、それに続いて記載される事象又は状況が生じても生じなくてもよいことを意味し、この記載は、その事象が生じる事例と、その事象が生じない事例とを包含する。
【００５６】
用語「ペプチド」、「タンパク質」及び「ポリペプチド」は、本明細書では区別無く使用する。用語「精製タンパク質」とは、好ましくは細胞又は細胞溶解液中のタンパク質に通常関連する他のタンパク質から単離された又はそうでなければ該他の蛋白質を実質的に含まない１種以上のタンパク質の調製物をいう。用語「他の細胞タンパク質を実質的に含まない」又は「他の混在タンパク質を実質的に含まない」とは、（乾燥重量基準で）２０％未満の混在タンパク質、好ましくは５％未満の混在タンパク質を含むタンパク質のそれぞれ個別の調製物を包含するものと定義される。タンパク質のそれぞれの機能形態は、当該技術分野で知られているようにクローン化遺伝子を使用することによって精製調製物として調製できる。「精製（された）」とは、示された分子が他の生物学的高分子、例えば他のタンパク質（特に、精製調製物としての又は対象の再構成混合物中のそれらの機能におけるタンパク質の特性を実質的にマスクし、減らし、混乱させ又は変化させることができる他のタンパク質）の実質的非存在下で存在することを意味する。ここで使用するときに、用語「精製（された）」とは、好ましくは、存在する同じタイプの生体高分子の少なくとも８０乾燥重量％、より好ましくは８５重量％、より好ましくは９５％〜９９重量％、最も好ましくは少なくとも９９．８重量％を意味する（ただし、水、緩衝液及び他の小分子、特に５０００未満の分子量を有する分子が存在することができる）。ここで使用するときに、用語「純粋な」とは、すぐ上の「精製（された）」と同じ数値範囲を有する。
【００５７】
「薬学的に許容される」、「生理学的に許容できる」及びその文法上の変形は、それらが組成物、キャリア、希釈剤及び試薬又は処方物の他の成分をいう場合には区別なく使用され、かつ、これらの材料がそのレシピエントに対して吐き気、めまい、発疹、胃の不調又は他の有害作用などの望ましくない生理学的影響を生じさせることなく投与することが可能であることを示す。
【００５８】
「薬学的に許容される塩」には、酸付加塩と塩基付加塩の両方が含まれる。「薬学的に許容される酸付加塩」とは、遊離塩基の生物学的有効性及び特性を保持し、かつ、生物学的その他の点で望ましくなくはなく、かつ、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、炭酸、リン酸等の無機酸により形成される塩をいう。有機酸は、有機酸の脂肪族、脂環式、芳香族、芳香脂肪族、複素環式、カルボン酸及びスルホン酸の部類、例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、アスパラギン酸、アスコルビン酸、グルタミン酸、アントラニル酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、エンボン酸、フェニル酢酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、サリチル酸などから選択できる。
【００５９】
ここで使用するときに、用語「薬学的に許容される塩、エステル、アミド及びプロドラッグ」とは、確実な医学的判断の範囲内において、過度の毒性、刺激、アレルギー反応などなしに患者の組織との接触に使用するのに適し、合理的な利益／リスク比に見合い、そしてそれらの使用目的に有効な化合物のカルボン酸塩、アミノ酸付加塩、エステル、アミド及びプロドラッグ並びに可能であれば本発明の化合物の双性イオンの形態をいう。
【００６０】
ここで使用するときに、用語「治療剤」とは、患者の望ましくない状態又は疾患を治療し、それと戦い、寛解させ、予防し又は改善するために使用される薬剤を意味する。一部、本発明の実施形態は、癌、骨髄増殖性疾患又は細胞の異常増殖の治療に関する。
【００６１】
組成物の「治療上有効な量」又は「有効量」とは、所望の結果を達成するように計算された所定の量のことである。本発明の方法によって企図される活性は、適宜、医学的治療及び／又は予防的処置を含む。治療及び／又は予防効果を得るために本発明に従って投与される化合物の特定の用量は、もちろん、例えば投与される化合物、投与経路及び治療される状態を含めた実情を取り巻く特定の状況によって決定される。本発明の化合物の治療上有効な量は、典型的には、これが生理学的に許容される賦形剤組成物で投与されるときに、それが十分であるような量である。治療上有効な量は、投与計画に従って投与できる。
【００６２】
「Ｎ結合」オリゴ糖とは、アスパラギン−Ｎ−アセチルグルコサミン結合によりアスパラギンを介してペプチド骨格に結合したオリゴ糖のことである。Ｎ結合オリゴ糖は「Ｎ−グリカン」とも呼ばれる。天然に生じるＮ−結合型オリゴ糖は、Ｍａｎ［（α１，６−）−（Ｍａｎ（α１，３）］−Ｍａｎ（β１，４）−ＧｌｃＮＡｃ（β１，４）−ＧｌｃＮＡｃ（β１，Ｎ）の共通の五糖コアを有する。これらのものは、Ｎ−アセチルグルコサミン、ガラクトース、Ｎ−アセチルガラクトサミン、フコース及びシアル酸などの周囲の糖の分岐の存在及び分岐数（アンテナとも呼ばれる）の点で相違する。任意に、この構造は、コアフコース分子及び／又はキシロース分子を含むこともできる。
【００６３】
用語「シアル酸」とは、９個の炭素のカルボキシル化糖ファミリーの任意のメンバーを意味する。シアル酸ファミリーの最も一般的なメンバーは、Ｎ−アセチルノイラミン酸である（Ｎｅｕ５Ａｃ、ＮｅｕＡｃ又はＮＡＮＡと省略される場合が多い）。このファミリーの第２のメンバーは、Ｎ−グリコリルノイラミン酸（Ｎｅｕ５Ｇｃ又はＮｅｕＧｃ）である（ここで、ＮｅｕＡｃのＮ−アセチル基はヒドロキシル化されている）。第３のシアル酸ファミリーのメンバーは、２−ケト−３−デオキシ−ノヌロソン酸（ＫＤＮ）である（Ｎａｄａｎｏ外（１９８６）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６１：１１５５０−１１５５７；Ｋａｎａｍｏｒｉ外，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６５：２１８１１−２１８１９（１９９０））。挙げられるのは、９置換シアル酸、例えば９−Ｏ−ラクチル−Ｎｅｕ５Ａｃなどの９−Ｏ−Ｃ1Ｃ6−アシル−Ｎｅｕ５Ａｃ又は９−Ｏ−アセチルＮｅｕ５Ａｃ、９−デオキシ−９−フルオロ−Ｎｅｕ５Ａｃ及び９−アジド−９−デオキシ−Ｎｅｕ５Ａｃである。シアル酸ファミリーの総説については、例えば、Ｖａｒｋｉ，Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ  ２：２５−４０（１９９２）；Ｓｉａｌｉｃ  Ａｃｉｄｓ：Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ  ａｎｄ  Ｆｕｎｃｔｉｏｎ，Ｒ．Ｓｃｈａｕｅｒ著（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９２））を参照されたい。
【００６４】
「遺伝子操作」又は「組換え」細胞は、その細胞の遺伝物質に１以上の修飾を有する細胞である。このような修飾としては、遺伝物質の挿入、遺伝物質の欠失及び遺伝物質の複数の挿入であるが、これらに限定されず、これらは、このような物質が安定に維持されているか否かを問わず染色体外である。
【００６５】
ここで使用するときに、用語「修飾糖」とは、本発明のプロセスにおいてペプチドのアミノ酸又はグリコシル残基に酵素的に付加された天然又は非天然炭水化物をいう。修飾糖は、多数の酵素基質から選択され、糖ヌクレオチド（モノ−、ジ−及びトリホスフェート）、活性化糖（例えば、ハロゲン化グリコシル、メシル酸グリコシル）及び活性化されておらずヌクレオチドでもない糖が挙げられるが、これらに限定されない。「修飾糖」は、「修飾基」で共有結合的に官能化されていてよい。有用な修飾基としては、水溶性及び水不溶性重合体、治療部分、診断部分及び生体分子が挙げられるが、これらに限定されない。修飾基による官能化の部位は、「修飾糖」がペプチ又はペプチドのグリコシル残基に酵素的に付加されることのないように選択される。
【００６６】
ＳＡＰポリペプチド及びＳＡＰアゴニスト
本発明の一態様は、線維性癌及び癌関連線維症の治療に有用なＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを提供する。ＳＡＰアゴニストは、ＳＡＰ活性を増加させる化合物を含め、内因性ＳＡＰシグナル伝達を増加させ又はそうでなければ模倣する全ての化合物及び組成物を包含する。本開示を通して、「ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニスト」或いは「本発明のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニスト」という。特に断りのない限り、このような言及は、本明細書に開示されたＳＡＰアゴニストのいずれかの使用、例えばヒトＳＡＰを含むＳＡＰポリペプチドを含む５量体ＳＡＰなどの組換えＳＡＰの使用を意図し、該ＳＡＰポリペプチドは、ヒト血清から単離されたＳＡＰとは異なるグリコシル化を有する。本発明は、ここに記載される方法のいずれかにおいてここに開示されるＳＡＰポリペプチド及びＳＡＰアゴニストのいずれかの使用（単剤又は併用療法としての使用を含む）を意図する。
【００６７】
ＳＡＰ
ＳＡＰ又はペントラキシン−２は、円盤状複合体に非共有結合的に会合する５個の同一のサブユニット又はプロトマーから構成される、哺乳動物において天然に存在する血清タンパク質である。ＳＡＰは、タンパク質のペントラキシンスーパーファミリーに属し、これはこの環状５量体構造によって特徴づけられる。従来の短鎖ペントラキシンは、ＳＡＰのみならずＣ反応性タンパク質を含む（Ｏｓｍａｎｄ，Ａ．Ｐ．外，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，７４：７３９−７４３，１９９７）。長鎖ペントラキシンとしてはペントラキシン−３が挙げられる。ＳＡＰは、通常は肝臓で合成され、２４時間の生理学的半減期を有する。ヒトＳＡＰ（ｈＳＡＰ）は、ホモ５量体として血漿中において約２０〜４０μｇ／ｍｌで循環する。ヒトＳＡＰサブユニットの配列は配列番号１に開示されており、これは、ＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号ＮＰ＿００１６３０の２０〜２２３アミノ酸に相当する（シグナル配列は示されていない）。
【００６８】
以前の研究から、ＳＡＰは、免疫応答の開始及び消散段階の両方において重要な役割を果たすことが実証されている。ｈＳＡＰは、微生物に対する先天的な耐性及び細胞破片の除去と食作用の機能を果たし、かつ、創傷治癒及び線維症の調節に所定の役割を果たしているように思われる。これらの機能は、（ｉ）上記特定の微生物及び細胞破片に関連したリガンド及びＣａ2+依存性の態様での様々な細胞外マトリックスタンパク質への結合、（ｉｉ）Ｃ３ｂ及びびｉＣ３ｂでのオプソニン化の促進による補体活性化のためのＣ１ｑへの結合、（ｉｉｉ）Ｆｃγ受容体に結合して直接オプソニン化及びその後の食作用又はエンドサイトーシスを開始すること、及び（ｉｖ）後の単球機能及び分化の調節に関与することができる。したがって、ｈＳＡＰ分子は、損傷及び修復の部位に局在化し、かつ、これらの分子を結合することによってこれらの部位で標的化及び／又は集中することがある。
【００６９】
ｈＳＡＰの三次元構造は、Ｘ線結晶法によって決定され、異なるリガンドと複合体を形成したいくつかの結晶構造も報告されている。ｈＳＡＰの５量体構造は、５倍の回転対称性を有し、孔についてかなり剛性である。ｈＳＡＰ５量体の直径は約１００Åであり、その中央孔は、２０Åの直径及び３５Åの深さである。各プロトマーは、ゼリーロールトポロジーを有する疎水性コアを持つ２枚のシート状に配置された逆平行β鎖から構成される。ｈＳＡＰ５量体は、２つの面、すなわち、５個のαヘリックスを有し、各プロトマー上にある一方のＡ面と、二重のカルシウム結合部位の５セットを有するＢ面とを有する。Ｂ面は、カルシウム依存性リガンド結合面を与えると考えられ、そしてホスホリルエタノールアミン、ＤＮＡ、ヘパランスルフェート、デルマタンスルフェート及びデキストランスルフェート、ラミニン及びコラーゲンＩＶを含めてＢ面に結合するいくつかのカルシウム依存性リガンドが同定されている。また、ＨＳＡＰのＡ面は、Ｃ１ｑなどの分子を結合するとも考えられ、かつ、Ｆｃγ受容体への結合により食作用を仲介することができる。各プロトマーは、Ａｓｎ３２で、すなわち単一部位でグリコシル化できる。
【００７０】
Ｎ末端及びＣ末端は、溶媒露出性であり、かつ、各プロトマー分子の内縁に配置されている。Ｎ末端は、各プロトマーの外縁及び５個のプロトマーによって形成された環の周囲に位置する。Ｃ末端は、さらに５量体環の内周及び孔の方に位置しているが、Ａ面に向かって外側に向けられている。１個のプロトマー内のＮ末端とＣ末端は、約２５Å離れている。これらの末端は、サブユニット相互作用に関与すると思われず、これらのものはＡｓｎ３２に結合したグリカン鎖からは離れている。ｈＳＡＰのサブユニットは一緒になって非共有結合的に保持され、各サブユニットの表面の約１５％がこれらの相互作用に関与する。これらの広範な相互作用は、ｈＳＡＰ５量体のかなりの安定性の原因となる。
【００７１】
ここに記載された実施形態に包含されるＳＡＰは、例えばヒトＳＡＰ又は他の脊椎動物若しくは哺乳動物源からの異性体若しくはアナログなどの任意の供給源からのＳＡＰを含む。さらに、ＳＡＰは、例えば部位特異的突然変異誘発によって導入された天然ＰＴＸ−２のアミノ酸配列からの修飾を有するＳＡＰ分子を包含する。このような修飾は、この分子の一般的な５量体ペントラキシンの性質を保持しつつ、この分子の特定のアミノ酸及び／又は他の機能を変更することができる。「ＳＡＰ」は、ＳＡＰ５量体とＳＡＰプロトマーの両方を包含するように使用できる。「ＳＡＰ５量体」又は「５量体ＳＡＰ」とは、少なくとも５個のＳＡＰプロトマーを含むタンパク質複合体をいい、「ＳＡＰプロトマー」とは、ＳＡＰ５量体の個々のタンパク質単位をいう。本発明の態様及び実施形態のいずれかの所定の実施形態では、本発明は、ＳＡＰアゴニストの投与を含み、ここで、該ＳＡＰアゴニストは、配列番号１で示されるアミノ酸配列を含むＳＡＰポリペプチドを含むＳＡＰ５量体を含む。所定の実施形態では、ＳＡＰポリペプチドは、組換えヒトＳＡＰを含む。典型的な組換えヒトＳＡＰはＰＲＭ−１５１を含む。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは組換えＳＡＰを含む。タンパク質を一般に及びヒトペントラキシン−２を特異的に、組換え的に作製する方法は、当該技術分野において知られている。昆虫又は哺乳動物細胞などの組換え発現に適した細胞を選択することができる。
【００７２】
ヒトＳＡＰポリペプチド上についてのグリカン構造の修飾は、ヒト血清から単離された野生型ＳＡＰの対応するサンプルと比較してＳＡＰポリペプチドの生物学的活性を増大させることができる。ヒト血清から単離されたＳＡＰは、α２，６−結合シアル酸残基のみを含む。これに対し、ＣＨＯ細胞で産生された組換えヒトＳＡＰ（ｒｈＳＡＰ）は、α２，３−結合シアル酸残基のみを含む。試験管内細胞ベースバイオアッセイでは、α２，３−結合シアル酸ＳＡＰポリペプチドは、ヒト血清から単離された野生型ＳＡＰ（すなわち、α２，６−結合シアル酸）よりも一貫して高い活性を示す。本発明の変異ＳＡＰポリペプチドは、それらの増大した生物学的効力のため、治療剤としてより効果的であろう。例えば、より強力なＳＡＰ変異体は、ヒト血清から単離された野生型のＳＡＰと比較して低い用量及び／又は少ない投与頻度しか必要とされない場合がある。本発明は、変異ヒトＳＡＰポリペプチド及びその作製方法の両方を提供する。特に、本発明は、糖残基を試験管内及び生体内付加、欠失又は修飾させて所望のグリコシル化パターンを有するヒトＳＡＰポリペプチドを産生させるための方法及び組成物を含む。
【００７３】
変異ＳＡＰポリペプチド
一部、本発明は、線維性癌及び癌関連線維症の治療に使用するための変異血清アミロイドＰ（ＳＡＰ）ポリペプチドを提供する。特に、本発明のＳＡＰ変異体は、それぞれ独立してα２，３−結合シアル酸部分を末端とする１、２、３、４又は５個の分岐を有する１個以上のＮ結合又はＯ結合オリゴ糖鎖を有するグリコシル化ヒトＳＡＰポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｎ結合又はＯ結合オリゴ糖鎖の全てのシアル化分岐は、α２，３−結合部分を末端とする。本発明の他のＳＡＰ変異体は、ヒト血清由来の野生型ＳＡＰポリペプチドよりも少なくとも２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７５％、８０％、８５％又はさらに少なくとも９５％少ないα２，６−結合シアル酸部分を有するＮ結合又はＯ結合オリゴ糖鎖を含有するグリコシル化ヒトＳＡＰポリペプチドを含む。いくつかの実施形態では、Ｎ結合又はＯ結合オリゴ糖鎖は、α２，６−結合シアル酸部分を実質的に含まない。本発明のグリコ変異ＳＡＰポリペプチドは、１個以上の分岐を有する（例えば、２分岐、３分岐、４分岐、５分岐などの構造を有する）Ｎ−結合オリゴ糖又はＯ−結合鎖を含むことができる。所定の実施形態では、本発明のＳＡＰポリペプチドは、Ｎ結合又はＯ結合オリゴ糖鎖を含み、ここで、該オリゴ糖鎖の１、２、３、４又は５個の分岐は、ガラクトース及びＮ−アセチルグルコサミンを実質的に含まない。本発明の所定のＳＡＰポリペプチドは、ガラクトース及びＮ−アセチルグルコサミンを実質的に含まないＮ結合又はＯ結合オリゴ糖鎖を有する。いくつかの実施形態では、本発明のＳＡＰポリペプチドは、Ｎ結合又はＯ結合オリゴ糖鎖を含み、ここで、該オリゴ糖鎖の１、２、３、４又は５個の分岐は、１個以上のマンノース残基を含む。所定の実施形態では、本発明のＳＡＰポリペプチドは、Ｍａｎ［（（α１，６）−（Ｍａｎ（α１，３）］−Ｍａｎ（β１，４）−ＧｌｃＮＡｃ（β１，４）−ＧｌｃＮＡｃ（β１，Ｎ）−Ａｓｎの五糖コアを有するＮ−結合オリゴ糖を含む。この五糖コアは、１個以上のフコース又はキシロース残基を含むことができる。所定の実施形態では、本発明のＳＡＰポリペプチドは、Ｎ結合オリゴ糖鎖を含み、ここで、該オリゴ糖鎖の１、２、３、４又は５個の分岐構造ＮｅｕＮＡｃ２α３Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃβ２Ｍａｎα６を有する。また、本発明のＳＡＰポリペプチドは、Ｎ結合オリゴ糖鎖を含むことができ、ここで、全ての分岐は、構造ＮｅｕＮＡｃ２α３Ｇａｌβ４ＧｌｃＮＡｃβ２Ｍａｎα６を有する。
【００７４】
本発明の変異ＳＡＰポリペプチドは、１個以上の「修飾」糖残基を含むことができる。修飾糖は、修飾部分又は修飾基の結合を可能にする任意の位置で置換されているが、それでもなお該糖が修飾糖をペプチドに結合させるために使用される酵素のための基質として機能することが可能である。修飾基は、酵素的手段、化学的手段又はそれらの組み合わせにより糖部分に結合でき、それによって修飾糖、例えば、修飾ガラクトース、フコース又はシアル酸を生成することができる。本発明で使用するのに好適な修飾基並びにこれらの修飾基を糖残基に結合させるための方法は、以下の節で説明する。
【００７５】
いくつかの実施形態では、本発明のＳＡＰポリペプチドは、Ｂｒｕｔｌａｇ外（Ｃｏｍｐ．Ａｐｐ．Ｂｉｏｓｃｉ．，６：２３７−２４５（１９９０））のアルゴリズムに基づくＦＡＳＴＤＢコンピュータプログラムを使用して決定されるときに、配列番号１のアミノ酸配列と少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％又は１００％同一であるアミノ酸配列を含むことができる。特定の実施形態では、アミノ酸アラインメントの同一性パーセント及び類似性を計算するために使用されるパラメータは、Ｍａｔｒｉｘ＝ＰＡＭ  １５０、ｋ−ｔｕｐｌｅ＝２、Ｍｉｓｍａｔｃｈ  Ｐｅｎａｌｔｙ＝１、Ｊｏｉｎｉｎｇ  Ｐｅｎａｌｔｙ＝２０、Ｒａｎｄｏｍｉｚａｔｉｏｎ  Ｇｒｏｕｐ  Ｌｅｎｇｔｈ＝０、Ｃｕｔｏｆｆ  Ｓｃｏｒｅ＝１、Ｇａｐ  Ｐｅｎａｌｔｙ＝５及びＧａｐ  Ｓｉｚｅ  Ｐｅｎａｌｔｙ＝０．０５を含む。
【００７６】
配列番号１と少なくとも９５％の同一性を共有するポリペプチドは、これらの発散領域内における保存的置換を有するポリペプチドを含むことができる。用語「ＳＡＰポリペプチド」は、前記のいずれかを含む機能的断片及び融合タンパク質を包含する。一般に、ＳＡＰポリペプチドは、生物学的に関連する温度、ｐＨレベル及び浸透圧の水溶液に可溶である。互いに非共有結合的に会合して５量体ＳＡＰ複合体を形成するＳＡＰプロトマーは、同一のアミノ酸配列及び／又は翻訳後修飾を有することができ、或いは、単一の複合体内の個々のＳＡＰプロトマーは、異なる配列及び／又は修飾を有することができる。用語ＳＡＰポリペプチドには、任意の天然型ＳＡＰポリペプチド並びに任意の変異体（突然変異、断片及び融合体を含む）を含むポリペプチドが含まれる。本発明のＳＡＰポリペプチドは、組換えポリペプチドとすることができる。好ましい実施形態では、本発明のＳＡＰポリペプチドはヒトＳＡＰポリペプチドである。
【００７７】
いくつかの実施形態では、本発明の変異ＳＡＰポリペプチド又はその機能的断片を含む医薬組成物が提供される。いくつかの態様では、ＳＡＰ変異体のアミノ酸配列は、１以上の保存的又は非保存的置換によって配列番号１とは異なることができる。他の態様では、ＳＡＰ変異体のアミノ酸配列は、１以上の保存的置換によって配列番号１とは異なることができる。本明細書で使用するときに、「保存的置換」は、対応する基準残基と物理的又は機能的に同様の残基である、すなわち、保存的置換及びその基準残基は、類似のサイズ、形状、電荷、共有結合又は水素結合を形成する能力などを含めた化学的特性を有する。好ましい保存的置換は、Ｄａｙｈｏｆｆ外，Ａｔｌａｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｓｅｑｕｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ５：３４５−３５２（１９７８＆Ｓｕｐｐ．）における受容点変異のために定義された基準を満たすものである。保存的置換の例は、次の群内の置換である：（ａ）バリン、グリシン；（ｂ）グリシン、アラニン；（ｃ）バリン、イソロイシン、ロイシン；（ｄ）アスパラギン酸、グルタミン酸；（ｅ）アスパラギン、グルタミン；（ｆ）セリン、トレオニン；（ｇ）リジン、アルギニン、メチオニン；及び（ｈ）フェニルアラニン、チロシン。アミノ酸変化が表現型としてサイレントである可能性が高いものに関するさらなるガイダンスは、Ｂｏｗｉｅ外，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４７：１３０６−１３１０（１９９０）にある。
【００７８】
変異ＳＡＰポリペプチド及び生物学的機能を保持するその断片は、ここに記載の医薬組成物及び方法において有用である。いくつかの実施形態では、変異ＳＡＰポリペプチド又はその断片は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＡ及び／又はＦｃγＲＩＩＩＢは特異的に結合する。いくつかの実施形態では、変異ＳＡＰポリペプチド又はその断片は、線維細胞、線維細胞前駆体、筋線維芽細胞前駆体及び／又は造血単球前駆体分化の一つ以上を阻害する。ＳＡＰ変異体は、治療効果又は安定性を高めるなどの目的（例えば、生体外での貯蔵寿命及び生体内でのタンパク質分解に対する耐性）のためにＳＡＰポリペプチドの構造を修飾することによって生成できる。
【００７９】
所定の態様では、本発明の変異ＳＡＰポリペプチドは、ＳＡＰポリペプチド中に天然に存在する任意のものの他に、翻訳後修飾をさらに含むことができる。このような修飾としては、アセチル化、カルボキシル化、グリコシル化（例えば、Ｏ結合オリゴ糖、Ｎ結合オリゴ糖など）、リン酸化、脂質化及びアシル化が挙げられるが、これらに限定されない。結果として、修飾ＳＡＰポリペプチドは、ポリエチレングリコール、脂質、多糖類又は単糖類、及びリン酸エステルなどの非アミノ酸要素を含むことができる。
【００８０】
改変Ｎ−グリコシル化を有する変異ｈＳＡＰポリペプチドを産生する方法は、米国特許出願第１２／７９４１３２号に記載されている。この文献を参照により本明細書で援用する。
【００８１】
所定の態様では、ここに記載のＳＡＰポリペプチドに対する１以上の修飾は、ＳＡＰポリペプチドの安定性を高めることができる。例えば、このような修飾は、ＳＡＰポリペプチドの生体内半減期を増強する又はＳＡＰポリペプチドのタンパク質分解を減少させることができる。
【００８２】
特定の態様では、本発明の変異ＳＡＰポリペプチドは、ヒトＳＡＰポリペプチドの少なくとも一部及び１以上の融合ドメイン又は異種部分を有する融合タンパク質を含む。このような融合ドメインの周知例としては、ポリヒスチジン、Ｇｌｕ−Ｇｌｕ、グルタミン酸、グルタチオンＳトランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、チオレドキシン、プロテインＡ、プロテインＧ及び免疫グロブリン重鎖定常領域（Ｆｃ）、マルトース結合タンパク質（ＭＢＰ）、又はヒト血清アルブミンが挙げられるが、これらに限定されない。所望の特性を付与するように融合ドメインを選択することができる。例えば、いくつかの融合ドメインは、アフィニティークロマトグラフィーによる融合タンパク質の単離に特に有用である。アフィニティー精製の目的のために、グルタチオン−、アミラーゼ−、及びニッケル−、又はコバルト−結合樹脂などのアフィニティークロマトグラフィーに関連するマトリックスが使用される。別の例として、ＳＡＰポリペプチドの検出を容易にするように融合ドメインを選択することができる。このような検出ドメインの例としては、様々な蛍光タンパク質（例えば、ＧＦＰ）並びに特異的抗体が利用可能な通常は短鎖ペプチド配列である「エピトープタグ」が挙げられる。特異的モノクローナル抗体が容易に利用可能である周知のエピトープタグとしては、ＦＬＡＧ、インフルエンザウイルス赤血球凝集素（ＨＡ）及びｃ−ｍｙｃタグが挙げられる。場合によっては、融合ドメインは、関連するプロテアーゼが融合タンパク質を部分的に消化し、それによってそこから組換えタンパク質を遊離させることを可能にするプロテアーゼ切断部位を有する。遊離したタンパク質は、その後のクロマトグラフィー分離によって融合ドメインから単離できる。場合によっては、ＳＡＰポリペプチドは、生体内でＳＡＰポリペプチドを安定化させる異種ドメインに融合できる。「安定化」とは、血清半減期を増加させるものを意味し、それが肝臓及び／又は腎臓による破壊の減少、クリアランスの減少又は他の薬物動態学的効果によるものかどうかを問わない。免疫グロブリン及び血清アルブミンのＦｃ部分との融合は安定性の増大を付与することが知られている。
【００８３】
融合タンパク質の異なる要素は、所望の機能性と一致する任意の方法で配置できると解される。例えば、ＳＡＰポリペプチドは異種ドメインに対してＣ末端に配置でき、あるいは異種ドメインはＳＡＰポリペプチドに対してＣ末端に配置できる。ＳＡＰポリペプチド及び異種ドメインは、融合タンパク質に隣接する必要はなく、また、追加のドメイン又はアミノ酸配列（例えば、リンカー配列）がドメインに対してＣ末端若しくはＮ末端又はドメイン間に含まれていてよい。
【００８４】
本発明のＳＡＰポリペプチドは、１個以上の「修飾」糖残基を含むことができる。修飾基は、酵素的手段、化学的手段又はそれらの組み合わせにより糖部分に結合でき、それによって修飾糖、例えば、修飾ガラクトース、フコース又はシアル酸を生成することができる。修飾シアル酸を使用する場合には、シアリルトランスフェラーゼ又はトランスシアリダーゼのいずれかをこれらの方法で使用することができる。糖は、修飾部分の結合を可能にするが、それでもなお該糖が修飾糖をペプチドに結合させるために使用される酵素のための基質として機能することを可能にする任意の位置で置換されていてもよい。
【００８５】
一般に、糖部分及び修飾基は、反応性基の使用により一緒になって結合されるが、これは、典型的には、結合プロセスによって新たな有機官能基又は非反応種に変換される。糖反応性官能基は、糖部分上の任意の位置に配置できる。本発明を実施する際に有用な反応性基及び反応の種類は、一般に、バイオコンジュゲート化学の技術分野において知られているものである。反応性糖部分で利用可能な現在のところ好ましい反応の種類は、比較的穏やかな条件下で進行するものである。これらのものとしては、求核置換（例えば、アミン及びアルコールとハロゲン化アシル、活性エステルとの反応）、求電子置換（例えば、エナミン反応）及び炭素−炭素及び炭素−ヘテロ原子多重結合への付加（例えば、マイケル反応、ディールス・アルダー付加）が挙げられるが、これらに限定されない。これら及び他の有用な反応は、例えば、Ｓｍｉｔｈ及びＭａｒｃｈ，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，第５版，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ著，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，２００１；Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，１９９６；及びＦｅｅｎｅｙ外，Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ；Ａｄｖａｎｃｅｓ  ｉｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｓｅｒｉｅｓ，Ｖｏｌ．１９８，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，１９８２に記載されている。
【００８６】
糖核又は修飾基から懸垂する有用な反応性官能基としては、次のものが挙げられるが、これらに限定されない：（ａ）カルボキシル基及びそれらの様々な誘導体（例えば、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドエステル、Ｎ−ヒドロキシベンゾトリアゾールエステル、酸ハロゲン化物、アシルイミダゾール、チオエステル、ｐ−ニトロフェニルエステル、アルキル、アルケニル、アルキニル及び芳香族エステル）；（ｂ）例えば、エステル、エーテル、アルデヒドなどに変換できるヒドロキシル基；（ｃ）ハロゲン化基が後で例えばアミン、カルボン酸陰イオン、チオール陰イオン、カルバニオン又はアルコキシドイオンなどの求核基で置換され、それによって、ハロゲン原子の官能基で新たな基の共有結合が生じることのできるハロアルキル基；（ｄ）ディールス・アルダー反応に関与することのできるジエノフィル基、例えばマレイミド基など；（ｅ）後の誘導体化が例えばイミン、ヒドラゾン、セミカルバゾン又はオキシムなどのカルボニル誘導体の形成により又はグリニャール付加又はアルキルリチウム付加などの機構を介して可能であるようなアルデヒド又はケトン基；（ｆ）後にアミンと反応して、例えばスルホンアミドを形成するためのハロゲン化スルホニル基；（ｅ）例えばジスルフィドに変換できる又はアルキル及びアシルハロゲン化物と反応できるチオール基；（ｈ）例えばアシル化、アルキル化又は酸化できるアミン又はスルフヒドリル基；（ｉ）例えば付加環化、アシル化、マイケル付加、メタセシス、ヘック反応などを受けることができるアルケン；（Ｊ）例えばアミン及びヒドロキシル化合物と反応することができるエポキシド。
【００８７】
反応性官能基は、これらのものが反応性糖核又は修飾基を組み立てるのに必要な反応に関与しない又は該反応を妨害しないように選択できる。あるいは、反応性官能基は、保護基の存在により反応への関与から保護できる。当業者であれば、反応条件の選択されたセットを妨害しないように特定の官能基を保護する方法を理解する。有用な保護基の例については、例えば、Ｇｒｅｅｎｅ外，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９９１を参照されたい。
【００８８】
いくつかの実施形態では、修飾糖は活性化糖である。本発明において有用な活性化修飾糖は、典型的には、活性化された脱離基を含むように化学的に改変された配糖体である。ここで使用するときに、用語「活性化脱離基」とは、酵素調節求核置換反応で容易に置換される部分をいう。多くの活性化糖が当該分野で知られている。例えば、Ｖｏｃａｄｌｏ外，Ｉｎ  Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２，Ｅｒｎｓｔ外著，Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ  Ｖｅｒｌａｇ：Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ，２０００；Ｋｏｄａｍａ外，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ  Ｌｅｔｔ．３４：６４１９（１９９３）；Ｌｏｕｇｈｅｅｄ外，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：３７７１７（１９９９））を参照されたい。このような脱離基の例としては、フルオロ、クロロ、ブロモ、トシレート、メシレート、トリフレートなどが挙げられる。本発明で使用するのに好ましい活性化脱離基は、グリコシドのアクセプターへの酵素的転移を立体的に有意に妨げないものである。したがって、活性化グリコシド誘導体の好ましい実施形態は、グリコシルフッ化物及びグリコシルメシレートを含み、フッ化グリコシルが特に好ましい。フッ化グリコシルのなかでは、フッ化α−ガラクトシル、フッ化α−マンノシル、フッ化α−グルコシル、フッ化α−フコシル、フッ化α−キシロシル、フッ化α−シアリル、フッ化α−Ｎ−アセチル、フッ化α−Ｎアセチルガラクトサミニル、フッ化β−ガラクトシ、フッ化β−マンノシル、フッ化β−グルコシル、フッ化β−フコシル、フッ化β−キシロシル、フッ化β−シアリル、フッ化β−Ｎ−アセチル及びフッ化β−Ｎ−アセチルガラクトサミニルが最も好ましい。
【００８９】
特定の態様では、修飾糖残基は、１種以上の水溶性重合体に結合する。多くの水溶性ポリマーが当業者に知られており、本発明を実施するのに有用である。用語「水溶性重合体」は、糖類（例えば、デキストラン、アミロース、ヒアルロン酸、ポリ（シアル酸）、ヘパラン、ヘパリンなど）；ポリ（アミノ酸）；核酸；合成重合体（例えば、ポリ（アクリル酸）、ポリ（エーテル）、例えば、ポリ（エチレングリコール））；ペプチド、タンパク質などを包含する。本発明は、任意の水溶性重合体により、その重合体が結合体の残りの部分を結合することができる箇所を含まなければならないという唯一の制限で実施できる。
【００９０】
水溶性重合体及び糖の活性化のための方法及び化学並びに糖及び重合体を様々な種に結合させるための方法は文献に記載されている。重合体の活性化のために一般に使用される方法としては、臭化シアン、ペリオデート、グルタルアルデヒド、ビエポキシド、エピクロロヒドリン、ジビニルスルホン、カルボジイミド、ハロゲン化スルホニル、トリクロロトリアジンなどによる官能基の活性化が挙げられる（Ｒ．Ｆ．Ｔａｙｌｏｒ，（１９９１），Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｉｍｍｏｂｉｌｉｓａｔｉｏｎ，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎ．Ｙ．；Ｓ．Ｓ．Ｗｏｎｇ，（１９９２），Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｏｎｊｕｇａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｉｎｇ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ  Ｒａｔｏｎ；Ｇ．Ｔ．Ｈｅｒｍａｎｓｏｎ外，（１９９３），Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ  Ａｆｆｉｎｉｔｙ  Ｌｉｇａｎｄ  Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．；Ｄｕｎｎ，Ｒ．Ｌ．外著．Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  Ｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＡＣＳ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ  Ｖｏｌ．４６９，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．１９９１）。
【００９１】
特定の態様では、修飾糖残基は、１種以上の水不溶性重合体に結合する。いくつかの実施形態では、水不溶性重合体への結合を使用して制御された方法で治療用ペプチドを送達することができる。重合体薬物送達系は、当該分野において知られている。例えば、Ｄｕｎｎ  外著．Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ  ｄｒｕｇｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＡＣＳ  Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ  Ｖｏｌ．４６９，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．１９９１を参照されたい。当業者であれば、実質的に任意の既知の薬物送達系が本発明の結合体に適用できることが分かるであろう。
【００９２】
代表的な水不溶性重合体としては、ポリホスファジン、ポリ（ビニルアルコール）、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリアルキレン、ポリアクリルアミド、ポリアルキレングリコール、ポリアルキレンオキシド、ポリアルキレンテレフタレート、ポリビニルエーテル、ポリビニルエステル、ポリハロゲン化ビニル、ポリビニルピロリドン、ポリグリコリド、ポリシロキサン、ポリウレタン、ポリ（メタクリル酸メチル）、ポリ（メタクリル酸エチル）、ポリ（メタクリル酸ブチル）、ポリ（メタクリル酸イソブチル）、ポリ（メタクリル酸ヘキシル）、ポリ（メタクリル酸イソデシル）、ポリ（メタクリル酸ラウリル）、ポリ（メタクリル酸フェニル）、ポリ（アクリル酸メチル）、ポリ（アクリル酸イソプロピル）、ポリ（アクリル酸イソブチル）、ポリ（アクリル酸オクタデシル）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（エチレンテレフタレート）、ポリ（酢酸ビニル）、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリビニルピロリドン、プルロニック及びポリビニルフェノール並びにこれらの共重合体が挙げられるが、これらに限定されない。
【００９３】
これら及びここに記載された他の重合体は、Ｓｉｇｍａ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ社（米国ミズーリ州セントルイス）、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ社（米国ペンシルバニア州ウォレントン）、Ａｌｄｒｉｃｈ  社（米国ウィスコンシン州ミルウォーキー）、Ｆｌｕｋａ（米国ニューヨーク州ロンコンコマ）及びＢｉｏＲａｄ社（米国カリフォルニア州リッチモンド）などの商業的供給源から容易に得ることができ、或いは他の標準的な技術を使用してこれらの供給業者から入手した単量体から合成できる。本発明の結合体に有用な代表的な生分解性重合体としては、ポリポリラクチド、ポリグリコリド及びそれらの共重合体（エチレンテレフタレート）、ポリ（酪酸）、ポリ（吉草酸）、ポリ（ラクチド−コ−カプロラクトン）、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）、ポリ無水物、ポリオルトエステル、それらのブレンド及び共重合体が挙げられるが、これらに限定されない。特に有用なのは、ゲルを形成する組成物、例えばコラーゲン及びプルロニックを含むものである。
【００９４】
好ましい実施形態では、１個以上の修飾糖残基が１個以上のＰＥＧ分子に結合する。
【００９５】
特定の態様では、修飾糖は生体分子に結合している。本発明の生体分子としては、機能性タンパク質、酵素、抗原、抗体、ペプチド、核酸（例えば、単一ヌクレオチド又はヌクレオシド、オリゴヌクレオチド、ポリヌクレオチド及び単鎖及びそれよりも多い鎖の核酸）、レクチン、受容体又はそれらの組み合わせを挙げることができるが、これらに限定されない。
【００９６】
いくつかの好ましい生体分子は、本質的に非蛍光性であり、又はそれらがアッセイにおける蛍光マーカーとして使用するには不適切であるような最小量の蛍光を放出する。他の生体分子は蛍光性であることができる。
【００９７】
いくつかの実施形態では、生体分子は標的化部分である。ここで使用するときに、「標的化部分」及び「標的化剤」とは、身体の特定の組織又は領域に選択的に局在することになる種をいう。いくつかの実施形態では、生体分子は、本発明のＳＡＰポリペプチドを特定の細胞内区画に誘導するように選択され、それによって組織に送達される非誘導体化ペプチドの量と比較して該細胞内区画へのペプチドの送達を向上させる。局在化は、分子決定因子の特異的認識、標的化剤又は結合体の分子サイズ、イオン相互作用、疎水性相互作用などによって仲介される。所定の因子を特定の組織又は領域に標的化する他の機構は、当業者に周知である。
【００９８】
いくつかの実施形態では、修飾糖は治療部分を含む。当業者であれば、治療部分と生体分子のカテゴリー間に重複があること、つまり、多くの生体分子が治療特性又は能力を有するが分かるであろう。
【００９９】
有用な治療部分の部類としては、例えば、非ステロイド性抗炎症薬；ステロイド性抗炎症薬；アジュバント；抗ヒスタミン薬；鎮咳薬；かゆみ止め薬；抗コリン薬；抗嘔吐と制嘔吐剤薬；拒食症薬；中枢神経刺激薬；抗不整脈薬；βアドレナリン遮断薬；強心薬；降圧薬；利尿薬；血管拡張薬；血管収縮薬；抗潰瘍薬；麻酔薬；抗うつ薬；精神安定剤及び鎮静薬；抗精神病薬；及び抗菌薬が挙げられる。
【０１００】
本発明を実施するのに有用な他の薬剤部分としては、抗腫瘍薬、細胞破壊剤、抗エストロゲン及び代謝拮抗物質が挙げられる。また、この部類に含まれるのは、診断（例えば、イメージング）及び治療用の放射性同位体系の薬剤並びに共役毒素である。
【０１０１】
また、治療部分は、ホルモン、筋弛緩剤、抗痙攣、骨活性化剤、内分泌調節剤、糖尿病の調節剤、アンドロゲン、抗利尿剤又はカルシトニン薬であることができる。
【０１０２】
他の有用な修飾基としては、免疫調節薬、免疫抑制剤などが挙げられる。スリンダク、エトドラク、ケトプロフェン及びケトロラクなどの抗炎症活性を有する基も使用される。本発明と組み合わせて使用する他の薬剤は、当業者には明らかであろう。
【０１０３】
本発明の方法によって産生される改変Ｎ−グリコシル化ＳＡＰポリペプチドは、均質（すなわち、ＳＡＰポリペプチドのサンプルは、特定のＮ−グリカン構造が均一である）又は実質的に均質であることができる。「実質的に均質」とは、ＳＡＰポリペプチドの少なくとも約２５％（例えば、少なくとも約２７％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、又は少なくとも約９５％又は少なくとも約９９％）が、同じ特定のＮ−グリカン構造を含有することを意味する。
【０１０４】
いくつかの実施形態では、本発明の変異ＳＡＰポリペプチドは、試験管内で単球から線維細胞への分化を阻害するために、ヒト血清から単離された野生型ＳＡＰの対応するサンプルの１／２未満、１／３未満、１／４未満、１／１０未満又は１／１００未満のＩＣ50を有する。いくつかの実施形態では、本発明の変異ＳＡＰポリペプチドは、試験管内で単球から線維細胞への分化を阻害するために、ヒト血清から単離された野生型のＳＡＰの対応するサンプルの半分未満のＩＣ50を有する。線維細胞分化のためにＳＡＰに対する末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）又は単球細胞の応答性を決定するためによく特徴づけられた多くの方法がある。これらの方法を使用してヒト血清由来のＳＡＰ、他のＳＡＰ変異ポリペプチド又は他の線維細胞抑制剤又は活性化剤のサンプルと比較した本発明のＳＡＰ変異ポリペプチドの任意の相対的効力を決定することができる。これらの方法での使用に適したＰＢＭＣ又は単球は、様々な組織培養株から得ることができる。あるいは、線維細胞分化アッセイに好適な細胞は、ＰＢＭＣ又は単球細胞を含有する任意の生物学的サンプルから得ることができる。生物学的サンプルは、血清、血漿、健常組織又は線維性組織から得ることができる。一般に、線維細胞分化アッセイを、ＳＡＰポリペプチドの様々な濃度を有する培地中でＰＢＭＣ単球又は単球細胞をインキュベートすることにより実施して線維細胞分化の程度を決定する。ＳＡＰの濃度は、０．０００１μｇ／ｍＬ〜１ｍｇ／ｍＬの範囲であることができ、いくつかの実施形態では、０．００１μｇ／ｍＬ、１．０μｇ／ｍＬ、５μｇ／ｍＬ、１０μｇ／ｍＬ、１５μｇ／ｍＬ、２０μｇ／ｍＬ、２５μｇ／ｍＬ、３０μｇ／ｍＬ、３５μｇ／ｍＬ、４０μｇ／ｍＬ、４５μｇ／ｍＬ、５０μｇ／ｍＬ、１００μｇ／ｍＬ、２００μｇ／ｍＬ、３００μｇ／ｍＬ、又は５００μｇ／ｍＬである。いくつかのアッセイでは、培地は、１〜１００ｎｇ／ｍＬのｈＭＣＳＦを補充することができる；ｈＭＣＳＦの好ましい濃度は２５ｎｇ／ｍＬである。ＰＢＭＣ及び単球が線維細胞に分化したことの指標は、当業者によって決定できる。一般に、線維細胞は、細長い紡錘形及び楕円形の核の存在を有する接着細胞であると形態学的には定義されている。いくつかのアッセイでは、細胞を固定され、Ｈｅｍａ３で染色してから、例えば倒立顕微鏡を使用した直接計数によって線維細胞を数える。線維細胞分化の量は、ＳＡＰに対する細胞の応答性の指標として当業者によって解釈される。本発明の実施例で示されるように、線維細胞分化のより大きな抑制は、より大きなＳＡＰ応答度を示す。線維細胞分化を測定する別の方法は、線維細胞特異的細胞表面マーカー又は分泌因子（例えばサイトカイン（ＩＬ−１ｒａ、ＥＮＡ−７８／ＣＸＣＬ−５、ＰＡＩ−１など）、フィブロネクチン、コラーゲン１）の発現を決定することを含む。細胞表面マーカー又は分泌因子を検出及び／又は定量する方法は、当該技術分野において周知であり、１以上の線維細胞特異的マーカーに対する免疫反応抗体を用いた様々なＥＬＩＳＡ及びＦＡＣＳベースの技術が挙げられるが、これに限定されない。本明細書の実施例に記載されるように、マクロファージ由来ケモカイン（ＭＤＣ）の発���を測定することが線維細胞分化を決定する効果的な方法である。
【０１０５】
ＳＡＰポリペプチドのＮ−グリコシル化（例えば、改変Ｎ−グリコシル化）を検出し及び／又は特徴付けるための方法としては、ＤＮＡシーケンサー支援（ＤＳＡ）、フルオロフォア支援炭水化物電気泳動法（ＦＡＣＥ）又は表面増強レーザー脱離／イオン化飛行時間型質量分析法（ＳＥＬＤＩ−ＴＯＦ  ＭＳ）が挙げられる。例えば、分析はＤＳＡ−ＦＡＣＥを利用することができ、その際、例えば、糖タンパク質を変性させ、その後例えば膜に固定化させる。その後、糖タンパク質をジチオスレイトール（ＤＴＴ）又はβ−メルカプトエタノールなどの好適な還元剤で還元することができる。タンパク質のスルフヒドリル基は、ヨード酢酸などの酸を使用してカルボキシル化できる。次に、Ｎ−グリカンを、Ｎ−グリコシダーゼＦなどの酵素を使用してタンパク質から放出させることができる。任意に、Ｎ−グリカンを再構成し、そして還元的アミノ化によって誘導体化することができる。その後、誘導体化されたＮ−グリカンを濃縮することができる。Ｎ−グリカン分析に好適な計器としては、例えば、ＡＢＩ  ＰＲＩＳＭ（登録商標）３７７  ＤＮＡシーケンサー（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社）が挙げられる。データ分析は、例えば、ＧｅｎｅＳｃａｎ（登録商標）３．１ソフトウェア（Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して実施できる。任意に、単離されたマンノプロテインを１種以上の酵素でさらに処理してそれらのＮ−グリカンの状態を確認することができる。酵素の例としては、例えば、αマンノシダーゼ又はα−１，２−マンノシダーゼが挙げられる。Ｎ−グリカン分析のさらなる方法としては、例えば、質量分析（例えば、ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ）、順相、逆相及びイオン交換クロマトグラフィーでの高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）（例えば、グリカン標識されない場合にはパルスアンペロメトリック検出で、またグリカンが適切に標識される場合にはＵＶ吸収又は蛍光で）が挙げられる。また、Ｃａｌｌｅｗａｅｒｔ外（２００１）Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ  １１（４）：２７５−２８１及びＦｒｅｉｒｅ外（２００６）Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇ．Ｃｈｅｍ．１７（２）：５５９−５６４も参照されたい。これらのそれぞれの開示は、その全体が参照により本明細書で援用される。
【０１０６】
ＳＡＰアゴニストとしての抗ＦｃγＲ抗体
本発明の一態様では、ＳＡＰシグナル伝達を模倣する１種以上の化合物が提供される。いくつかの実施形態では、ＳＡＰシグナル伝達アゴニストは、抗ＦｃγＲ抗体であり、ここで、該抗体は、それぞれＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩＡ又はＦｃγＲＩＩＩのいずれかに結合することができる抗ＦｃγＲＩ抗体、抗ＦｃγＲＩＩＡ抗体及び抗ＦｃγＲＩＩＩ抗体のクラスから選択される。抗ＦｃγＲ抗体は、ＩｇＧ抗体のＦｃ部分（ＦｃγＲ）に対する受容体に結合するＩｇＧ抗体である。抗ＦｃγＲ抗体は、それらの可変領域を介して結合するが、それらの定常（Ｆｃ）領域を介しては結合しない。抗ＦｃγＲ抗体は、抗体の任意のアイソタイプを含むことができる。抗ＦｃγＲ抗体は、追加の抗体又は他の手段により又はそれなしで架橋又は凝集できる。このプロセスは、ＦｃγＲ活性化と一致する細胞内シグナル伝達事象を開始させる。いくつかの実施形態では、ＳＡＰシグナル伝達アゴニストは、架橋ＦｃγＲとすることができる。
【０１０７】
凝集Ｆｃドメイン及びＦｃ含有抗体
いくつかの実施形態では、ＳＡＰシグナル伝達アゴニストは、架橋又は凝集ＩｇＧである。架橋又は凝集ＩｇＧは、そのＦｃ領域を介して標的ＦｃγＲに結合することができる任意のＩｇＧを含むことができるが、ただし、このようなＩｇＧ抗体の少なくとも２つは、互いに物理的に結合していることを条件とする。
【０１０８】
架橋又は凝集ＩｇＧは、全抗体又はその一部、好ましくは線維性疾患を抑制する機能の部分を含むことができる。例えば、これらのものは、ＦｃγＲを架橋することができる任意の抗体部分を含むことができる。これは、凝集若しくは架橋抗体又はそれらの断片、例えば凝集又は架橋全抗体、Ｆ（ａｂ’）2断片、さらに可能なＦｃ断片を含むことができる。
【０１０９】
抗体の凝集又は架橋は、熱的又は化学的凝集などの任意の既知の方法によって達成できる。任意のレベルの凝集又は架橋で十分な場合があるが、凝集の増加により、線維性疾患の抑制が増大することがある。抗体は、ポリクローナル又はモノクローナル、例えばハイブリドーマ細胞から産生された抗体とすることができる。組成物及び方法は、抗体の混合物、例えば複数のモノクローナル抗体の混合物を使用することができ、これらは同様又は異なる抗体に架橋又は凝集できる。
【０１１０】
ＳＡＰペプチドミメティック
所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストはペプチドミメティックを含む。ここで使用するときに、用語「ペプチド」には、非天然型アミノ酸、ペプトイドなどを含む化学的に修飾されたペプチド及びペプチド様分子が含まれる。ペプチドミメティックを同定するための方法は、当該技術分野において周知であり、潜在的なペプチドミメティックのライブラリーを収容するデータベースのスクリーニングを含む。例えば、ケンブリッジ構造データベースは、既知の結晶構造を有する３００，０００種の化合物を超えるコレクションを収容する（Ａｌｌｅｎ外，Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ．Ｓｅｃｔｉｏｎ  Ｂ，３５：２３３１（１９７９））。標的分子の結晶構造が利用可能でない場合には、構造は、例えばプログラムＣＯＮＣＯＲＤｗｏ使用して生成することができる（Ｒｕｓｉｎｋｏ外，Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｆ．Ｃｏｍｐｕｔ．Ｓｃｉ．２９：２５１（１９８９））。別のデータベースであるｔｈｅ  Ａｖａｉｌａｂｌｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ  Ｄｉｒｅｃｔｏｒｙ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｓｉｇｎ  Ｌｉｍｉｔｅｄ，Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ  Ｓｙｓｔｅｍｓ；米国カリフォルニア州サンリアンドロ）は、市販の約１００，０００の化合物を収容しており、また、これらを検索してＳＡＰポリペプチドの潜在的なペプチドミメティックを同定することもできる。
【０１１１】
ＳＡＰ活性の増加
いくつかの実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、ＳＡＰ活性を増加させる。ＳＡＰ活性は、例えばＳＡＰ転写を増加させる、翻訳を増加させる、ＳＡＰ分泌を増加させる、ＳＡＰのＲＮＡの安定性を増加させる、ＳＡＰタンパク質安定性を増加させる又はＳＡＰタンパク質分解を減少させることによってＳＡＰの濃度を増加させることで増加できる。また、ＳＡＰ活性は、ＳＡＰの「遊離濃度」を特に増加させることで、又はむしろ、例えばＳＡＰの内因性結合相手を減少させることによって非結合形態を増加させることで増加できる。
【０１１２】
ＦｃγＲ架橋剤
いくつかの実施形態では、フィブロネクチンベースの足場ドメインタンパク質をＳＡＰアゴニストとして使用してＦｃγＲを架橋することができる。フィブロネクチンベースの足場ドメインタンパク質は、フィブロネクチンＩＩＩ型ドメイン（Ｆｎ３）、特にフィブロネクチンＩＩＩ型第１０ドメイン（10Ｆｎ３）を含むことができる。
【０１１３】
ＦｃγＲを架橋するために、ＦｃγＲ結合Ｆｎ３ドメインの多量体を米国特許第７１１５３９６号に記載されるように生成することができる。
【０１１４】
フィブロネクチンＩＩＩ型（Ｆｎ３）ドメインは、Ｎ末端からＣ末端の順に、β又はβ様ストランドＡ；ループＡＢ；β又はβ様ストランドＢ；ループＢＣ；β又はβ様ストランドＣ；ループＣＤ；β又はβ様ストランドＤ；ループＤＥ；β又はβ様ストランドＥ；ループＥＦ；β又はβ様ストランドＦ；ループＦＧ；及びベータ又はβ様ストランドＧを含む。ＢＣ、ＤＥ、及びＦＧループは、免疫グロブリンのＦｎ３ドメインからの相補性決定領域（ＣＤＲ）に構造的及び機能的に類似し、ＢＣ、ＤＥ及びＦＧループの一つ以上の配列を変更することによってほぼ全ての化合物を結合するように設計できる。特定の結合剤を生成するための方法は、高親和性ＴＮＦα結合剤を開示する米国特許第７１１５３９６号、及び高親和性ＶＥＧＦＲ２結合剤を開示する米国特許出願公開第２００７／０１４８１２６号に記載されている。フィブロネクチンベースの足場タンパク質の例は、アドネクチン（商標）（Ａｄｎｅｘｕｓ、Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｒ＆Ｄ  Ｃｏｍｐａｎｙ）である。
【０１１５】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰアゴニストはアプタマーである。ＦｃγＲを架橋するために、ＦｃγＲ結合アプタマーの多量体を生成することができる。
【０１１６】
アプタマーは、タンパク質又は代謝物などの特定の標的分子に結合する、合成又は天然であることができるオリゴヌクレオチドである。一般に、結合は、従来のワトソン・クリック塩基対形成以外の相互作用による。アプタマーは、現在、前臨床及び臨床開発中の治療薬の有望な部類に相当する。生物製剤、例えば、ペプチド又はモノクローナル抗体と同様に、アプタマーは、分子標的に特異的に結合し、そして結合を介して、標的機能を阻害することができる。典型的なアプタマーは、１０〜１５ｋＤａのサイズ（すなわち、３０〜４５ヌクレオチド）であり、ナノモル以下の親和性でその標的に結合し、そして密接に関連した標的を区別する（例えば、典型的には、同じ遺伝子ファミリーからの他のタンパク質を結合させない）（Ｇｒｉｆｆｉｎ外（１９９３），Ｇｅｎｅ  １３７（１）：２５−３１；Ｊｅｎｉｓｏｎ外（１９９８），Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．８（４）：２６５−７９；Ｂｅｌｌ外（１９９９），Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ  Ｃｅｌｌ．Ｄｅｖ．Ｂｉｏｌ．Ａｎｉｍ  ３５（９）：５３３−４２；Ｗａｔｓｏｎ外（２０００），Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．１０（２）：６３−７５；Ｄａｎｉｅｌｓ外（２００２），Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．３０５（２）：２１４−２６；Ｃｈｅｎ外（２００３），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．１００（１６）：９２２６−３１；Ｋｈａｔｉ外（２００３），Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７７（２３）：１２６９２−８；Ｖａｉｓｈ外（２００３），Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４２（２９）：８８４２−５１）。
【０１１７】
アプタマーは、治療薬としての使用のための多数の魅力的な特性を有する。高い標的親和性及び特異性に加えて、アプタマーは、標準的なアッセイにおいてほとんど又は全く毒性や免疫原性を示さなかった（Ｗｌｏｔｚｋａ外（２００２），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９９（１３）：８８９８−９０２）。実際に、いくつかの治療アプタマーは、薬物動態解析、細胞及び動物疾患モデルにおける生物学的有効性のキャラクタリゼーション並びに予備的な安全性薬理評価を含めた予備臨床試験の様々な段階を経て最適化及び進歩してきた（Ｒｅｙｄｅｒｍａｎ及びｔａｖｃｈａｎｓｋｙ（１９９８），Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １５（６）：９０４−１０；Ｔｕｃｋｅｒ外，（１９９９），Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ  Ｂ．７３２：２０３−２１２；Ｗａｔｓｏｎ外（２０００），Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｖ．１０（２）：６３−７５）。
【０１１８】
目的の標的に対するアプタマーを生成するための好適な方法は、「Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ  Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｌｉｇａｎｄｓ  ｂｙ  ＥＸｐｏｎｅｎｔｉａｌ  Ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ」（「ＳＥＬＥＸ（商標）」）と題したプロセスである。ＳＥＬＥＸ（商標）プロセスは、標的分子に高度に特異的に結合する核酸分子の試験管内進化のための方法であり、例えば、１９９０年６月１１日に出願された米国特許出願公開第０７／５３６４２８号（現在は放棄されている）、「Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｌｉｇａｎｄｓ」という名称の米国特許第５４７５０９６号及び「Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄ  Ｌｉｇａｎｄｓ」という名称の米国特許第５２７０１６３号（ＷＯ９１／１９８１３号も参照のこと）の記載されている。各ＳＥＬＥＸ（商標）単離核酸リガンドは、所与の標的化合物又は分子の特異的リガンドである。ＳＥＬＥＸ（商標）プロセスは、核酸が様々な二次元及び三次元構造を形成することができ、かつ、単量体であるか重合体であるかを問わず実質的にあらゆる化合物とのリガンドとして作用する（特異的結合対を形成する）のに十分な、それらの単量体内で利用可能な化学的多用途性を有するという知見に基づくものである。任意のサイズ又は組成の分子が標的として作用することができる。高親和性結合の用途に適用されるＳＥＬＥＸ（商標）法は、結合親和性及び選択性の実質的にあらゆる所望の基準を達成するために、同一の一般的選択スキームを使用して、候補オリゴヌクレオチドの混合物から選択し、結合、分割及び増幅を段階的に反復することを含む。好ましくはランダム化配列のセグメントを含む核酸の混合物から出発して、ＳＥＬＥＸ（商標）方法は、次の工程を含む：結合のために好ましい条件下で該混合物と標的とを接触させ、標的分子に特異的に結合した核酸から未結合の核酸を分離し、核酸・標的複合体を解離させ、核酸・標的複合体から解離された核酸を増幅して核酸のリガンド富化混合物を得、その後、標的分子に対する高特異的高親和性核酸リガンドを得ることが必要な数のサイクルを通して結合、分離、解離及び増幅の工程を反復すること。ＳＥＬＥＸ（商標）は、例えば、米国特許第５４７５０９６号及び同５２７０１６３号、並びにＰＣＴ／  ＵＳ９１／０４０７８に記載されるように、任意の所望の標的に対する核酸リガンドを作製するための方法である。これらの文献にそれぞれは、参照により本明細書で援用される。
【０１１９】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰアゴニストはＮａｎｏｂｏｄｉｅｓ（登録商標）である。Ｎａｎｏｂｏｄｉｅｓ（登録商標）は、天然型重鎖抗体の独特の構造的及び機能的特性を有する抗体由来治療タンパク質である。Ｎａｎｏｂｏｄｙ（登録商標）技術は、もともと、ラクダ科（ラクダ及びラマ）が軽鎖を欠失する完全機能抗体を有するという発見後に開発された。これらの重鎖抗体は、単一の可変ドメイン（ＶＨＨ）及び２個の定常ドメイン（ＣＨ２及びＣＨ３）を含む。重要なことに、クローニングされかつ単離されたＶＨＨドメインは、元の重鎖抗体の完全な抗原結合能を保有する安定なポリペプチドである。独特の構造的及び機能的特性を有するこれらのＶＨＨドメインは、治療用抗体の新世代の基礎となる。
【０１２０】
癌関連線維症
多数の癌が線維症の存在によって特徴付けられる。一部、本発明のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを単独で又は抗癌治療剤と組み合わせて使用して、このような線維症によって特徴付けられる癌を治療する（例えば、線維性癌、例えば骨髄線維症、胃癌、膵臓癌、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、有毛細胞白血病、多発性骨髄腫、髄芽細胞腫、骨髄性白血病、急性リンパ性白血病並びに子宮筋腫、線維腫、線維腺腫及び線維肉腫を含めて乳房、子宮、又は結腸の癌）。他の実施形態では、ＳＡＰポリペプチド（グリコシル化ＳＡＰポリペプチドなどの組換えヒトＳＡＰポリペプチドなど）などの本発明のＳＡＰアゴニストは、単剤療法として使用される。
【０１２１】
所定の実施形態では、本発明のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニスト（例えば、グリコシル化ＳＡＰポリペプチドを含むＳＡＰアゴニスト；グリコシル化ＳＡＰポリペプチドを含むＳＡＰ；組換えヒトＳＡＰなど）を単独で又は抗癌治療剤と組み合わせて使用して、線維性癌（例えば、線維性癌、例えば骨髄線維症、胃癌、膵臓癌、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、有毛細胞白血病、多発性骨髄腫、髄芽細胞腫、骨髄性白血病、急性リンパ性白血病並びに子宮筋腫、線維腫、線維腺腫及び線維肉腫を含めて乳房、子宮又は結腸の癌）を、線維症を低減させることによって治療して、器官の機能を回復させる。ここで、ＳＡＰポリペプチド又は本発明のＳＡＰアゴニストを単剤として又は併用療法の一部として投与すると、臓器線維症（例えば、骨髄線維症）が低減し、臓器機能の回復及び／又は及び改善と線維性癌の症状の改善（例えば、完全な血球数（ＣＢＣ）の改善）につながることが示される。臓器機能の改善は、例えば、治療の過程にわたって、例えば治療の１２、２０、２４週間又は２４週間を超えて被験体における血小板レベル及び／又はヘモグロビンの改善を評価することによって評価できる。いくつかの実施形態では、臓器は骨髄であり、治療は、臓器線維症を減少させ及び／又は臓器機能を改善する。いくつかの実施形態では、線維性器官は、肺、胃、膵臓、結腸、肝臓、腎臓、膀胱、乳房、子宮、子宮頸部、卵巣又は脳である。いくつかの実施形態では、線維性癌は骨髄線維症である。
【０１２２】
ここで説明するように、所定の実施形態では、治療レジメンへのＳＡＰの添加は、治療（ＳＡＰの不在下での）に対して非応答性、耐性若しくはそうでなければ不応性である又は治療の効果が弱い若しくは弱くなった被験体において使用される。所定の実施形態では、ＳＡＰの添加を使用して他の治療剤による治療が適切な患者集団を拡大させる（例えば、ＳＡＰは、別の薬物ついての治療範囲又は患者集団を拡大する）。一例として、所定の癌は、化学療法に応答しないことが知られている。理論に束縛されるものではないが、線維症は、腫瘍に対する薬物の効果的なアクセスを妨げる場合がある。
【０１２３】
特定の実施形態では、ここで説明するように、治療レジメンへのＳＡＰの添加を使用して、追加の抗癌治療単独での治療を受けた被験体において観察される１以上の副作用を減少させることによって治療の安全性を改善する。
【０１２４】
所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニスト又はＳＡＰポリペプチドは、単剤療法として使用され及び／又は未処置患者を治療するために使用される。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニスト又はＳＡＰポリペプチドは、疾患が所定の線維化スコア、例えば、骨髄線維症の等級付けに関する欧州コンセンサスにより評価されるときにグレード２又はグレード３の骨髄線維症を有する患者に使用される。
【０１２５】
特定の態様では、本発明は、骨髄線維症の治療のための、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストの単剤として又は別の薬剤との組み合わせでの使用を包含する。骨髄線維症（「ＭＦ」）は、デノボ（一次）を示す又は真性多血症（「ＰＶ」）若しくは本態性血小板血症（「ＥＴ」）に先行することができるＢＣＲ−ＡＢＬ１陰性骨髄増殖性腫瘍（「ＭＰＮ」）である。原発性骨髄線維症（ＰＭＦ）（文献では特発性骨髄様化生及び原発性骨髄線維症とも呼ばれる）は、単球系統の多能造血前駆細胞のクローン性疾患である（Ａｂｄｅｌ−Ｗａｈａｂ，Ｏ．外（２００９）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．６０：２３３−４５；Ｖａｒｉｃｃｈｉｏ，Ｌ．外（２００９）Ｅｘｐｅｒｔ  Ｒｅｖ．Ｈｅｍａｔｏｌ．２（３）：３１５−３３４；Ａｇｒａｗａｌ，Ｍ．外（２０１１）Ｃａｎｃｅｒ  １１７（４）：６６２−７６で検討されている）。この疾患は、貧血、脾腫及び髄外造血によって特徴付けられ、かつ、進行性骨髄線維症及び非定型巨核球過形成によって示される。ＣＤ３４＋幹細胞／前駆細胞は、末梢血中に異常に輸送され、多臓器骨髄外赤血球生成が、特に脾臓及び肝臓における疾患の特徴である。骨髄構造は、進行性線維症、血管新生及び骨沈着の増加のため変化する。生存期間中央値は、現在特定されている予後因子に基づいて２年未満〜１５年以上の範囲である（Ｃｅｒｖａｎｔｅｓ外，Ｂｌｏｏｄ  １１３：２８９５−２９０１，２００９；Ｈｕｓｓｅｉｎ  Ｋ外Ｂｌｏｏｄ  １１５：４９６−４９９，２０１０；Ｐａｔｎａｉｋ  Ｍ  Ｍ外，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｈａｅｍａｔｏｌ  ８４：１０５−１０８，２０１０）。ＰＭＦ患者のかなりの割合は、異常巨核球増殖及び分化をもたらす造血を調節する遺伝子において機能獲得型突然変異を有する（例えばヤヌスキナーゼ２（ＪＡＫ２）（約５０％）（例えば、ＪＡＫ２  Ｖ６１７Ｆ）又はトロンボポエチン受容体（ＭＰＬ）（５〜１０％））。研究から、クローン性造血障害は、線維芽細胞の二次細胞増殖及び過剰コラーゲン沈着につながることが示唆された。骨髄線維症の低減は、貧血、血小板減少、白血球減少症及び脾腫を含めた臨床徴候及び症状を改善することができる。
【０１２６】
文献においては、ＪＡＫ２阻害剤が骨髄増殖性疾患の治療及び／又は予防に有用であることが知られている。例えば、Ｔｅｆｆｅｒｉ，Ａ．及びＧｉｌｌｉｌａｎｄ，Ｄ．Ｇ．Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎ．Ｐｒｏｃ．８０（７）：９４７−９５８（２００５）；Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ−Ｌｕｎａ，Ｊ．Ｌ．外Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ  ８３（２）：９７−９８（１９９８）；Ｈａｒｒｉｓｏｎ，Ｃ．Ｎ．Ｂｒ．Ｊ．Ｈａｅｍａｔｏｌ．１３０（２）：１５３−１６５（２００５）；Ｌｅｕｋｅｍｉａ（２００５）１９，１８４３−１８４４；並びにＴｅｆｆｅｒｉ，Ａ．及びＢａｒｂｕｉ，Ｔ．Ｍａｙｏ  Ｃｌｉｎ．Ｐｒｏｃ．８０（９）：１２２０−１２３２（２００５）を参照されたい。しかし、ＭＦの管理選択肢は、今のところ、全ての患者のニーズを満たすのに不十分である。したがって、ＭＦ患者のための付加的な治療選択肢を提供する必要がある。
【０１２７】
ここで提供される方法のいくつかの実施形態では、被験体は、原発性骨髄線維症を有する。ここで提供される組成物及び方法のいくつかの実施形態では、被験体は、真性多血症後骨髄線維症（ＰＶ後ＭＦ）を有する。いくつかの実施形態では、被験体は、本態性血小板血症後骨髄線維症（ＥＴ後ＭＦ）を有する。いくつかの実施形態では、被験体は高リスク骨髄線維症を有する。いくつかの実施形態では、被験体は、中間リスク骨髄線維症を有する（中間リスクレベル１又は中間リスクレベル２など）。いくつかの実施形態では、被験体は、低リスク骨髄線維症を有する。いくつかの実施形態では、被験体は、線維症なしのＰＶ又はＥＴを有する。いくつかの実施形態では、被験体は、ヒトヤヌスキナーゼ２（ＪＡＫ２）のフェニルアラニン変異に対してバリン６１７について陽性であり又はヒトＪＡＫ２のフェニルアラニンに対するバリン６１７に相当する変異に対して陽性である。いくつかの実施形態では、被験体は、ヒトヤヌスキナーゼ２（ＪＡＫ２）のフェニルアラニン変異に対してバリン６１７に陰性である又はヒトＪＡＫ２のフェニルアラニン変異に対してバリン６１７に相当する変異について陰性である。いくつかの実施形態では、本発明のＳＡＰアゴニスト又はＳＡＰポリペプチドによる治療の開始前に、被験体は骨髄線維症を有し、該線維症は、骨髄線維症の等級付けに関する欧州コンセンサスの等級付けシステムにしたがって測定可能である。いくつかの実施形態では、本発明のＳＡＰアゴニスト又はＳＡＰポリペプチドによる治療の開始前に、被験体は、グレード２以上の骨髄線維症を有する。他の実施形態では、本発明のＳＡＰアゴニスト又はＳＡＰポリペプチドによる治療の開始前に、被験体は、グレード３の骨髄線維症を有する。
【０１２８】
所定の態様では、線維性癌は、膵臓癌及び／又は神経内分泌腫瘍などの線維形成性腫瘍である。膵臓癌は、突起線維形成反応、すなわち化学療法剤に対する周知の耐性に寄与する膵臓癌の主要な組織病理学的な特徴によって特徴付けられる。この膵臓癌の特徴は、現在、膵臓癌の別の治療標的であると考えられている。本発明のＳＡＰポリペプチド及びＳＡＰアゴニストは、線維形成性間質及び／又は線維症を枯渇又は減少させ、腫瘍を化学療法によりアクセスしやすくするのに有効であると考えられる。
【０１２９】
特定の態様では、癌関連線維症は骨髄線維症である。特定の実施形態では、骨髄の線維症状態は、原発性骨髄線維症などの骨髄の慢性骨髄増殖性腫瘍の固有の特徴である。他の実施形態では、骨髄線維症は、悪性状態又はクローン性増殖性疾患や血液学的障害、例えば有毛細胞白血病、リンパ腫（例えば、ホジキン又は非ホジキンリンパ腫）、多発性骨髄腫又は慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）など（これらに限定されない）によって引き起こされる状態と関連がある。さらに他の実施形態では、骨髄線維症は、骨髄への固形腫瘍転移と関連がある。
【０１３０】
いくつかの実施形態では、線維症は、次のものを含めた癌に関連があるが、これらに限定されない：胆管癌（例えば胆管癌）、膀胱癌、乳癌（例えば、乳房の腺癌、乳房の炎症性腫、乳房の乳頭癌、乳癌の髄様癌）、脳腫瘍（例えば、髄膜腫、神経膠腫、例えば、星状細胞腫、乏突起膠腫、髄芽細胞腫）、子宮頸癌（例えば、子宮頸部の扁平上皮癌、子宮頸部腺癌）、結腸直腸癌（例えば、結腸癌、直腸癌、結腸直腸腺癌）、食道癌、胃癌、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、頭頸部癌（例えば、頭頸部扁平上皮癌、口腔癌（例えば、口腔扁平上皮癌（ＯＳＣＣ））、ケロイド、腎臓癌（例えば、腎芽細胞腫別名ウィルムス腫瘍、腎細胞癌）、肝臓癌（例えば、肝細胞癌（ＨＣＣ）、悪性肝癌）、肺癌（例えば、気管支癌、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、肺の腺癌）、白血病（例えば、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ））、リンパ腫（例えば、ホジキンリンパ腫（ＨＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、例えば限定されないが、濾胞性リンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ））、髄芽腫、多発性骨髄腫（ＭＭ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖性疾患（ＭＰＤ）（例えば、真性多血症（ＰＶ）、本態性血小板血症（ＥＴ）、原発性骨髄線維症（ＡＭＭ）別名原発性骨髄線維症（ＰＭＦ）、慢性好中球性白血病（ＣＮＬ）、好酸球増多症候群（ＨＥＳ））、神経芽細胞腫、神経線維腫（例えば、神経線維腫症（ＮＦ））１又は２型、神経鞘腫症）、神経内分泌癌（例えば、胃腸神経内分泌腫瘍（ＧＥＰ−ＮＥＴ）、カルチノイド腫瘍）、骨肉腫、卵巣癌（例えば、嚢胞腺癌、卵巣胎児性癌、卵巣腺癌）、膵臓癌（例えば、膵臓腺癌、膵管内乳頭粘液性腫瘍（ＩＰＭＮ））、前立腺癌（例えば、前立腺癌）、皮膚癌（例えば、扁平上皮癌（ＳＣＣ）、角化棘細胞腫（ＫＡ）、メラノーマ、基底細胞癌（ＢＣＣ）、皮膚線維腫）、軟部組織腫瘍（例えば、血管脂肪腫、血管平滑筋腫、悪性線維組織球腫（ＭＦＨ）、脂肪肉腫、悪性末梢神経鞘腫瘍（ＭＰＮＳＴ）、軟骨肉腫、線維肉腫、粘液肉腫、骨肉腫）、及び線維形成に関連する任意の他の腫瘍。このような実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、線維症を低減させるため、薬物送達及び／又は生存を改善する。
【０１３１】
治療方法
一態様では、本発明は、患者における線維性癌又は癌関連線維症を、本発明のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストの治療有効量を単剤として又は抗癌治療剤と組み合わせてそれを必要とする患者に投与することによって治療するための方法を提供する。用量及び治療の頻度は、当業者によって決定でき、かつ、患者の症状、年齢及び体重並びに治療又は予防される疾患の性質及び重症度に応じて変動するであろう。本発明は、骨髄線維症を治療するのに有効な投与計画を特定した。
【０１３２】
ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを単独で又は別の抗癌治療剤と組み合わせて毎週投与計画又はそれよりも少ない頻度の投与計画（例えば、毎週未満、例えば４週間ごと）のいずれかに応じて投与すると、線維性癌症状が有意に改善した。さらに、本発明の方法は、ＳＡＰ治療によって誘発される臨床的に有意な骨髄抑制、例えば治療関連骨髄抑制の証拠なしに、本発明のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストが単独及び別の抗癌治療剤の組み合わせの両方で許容されたという知見に基づくものである。
【０１３３】
特定の態様では、本発明は、本発明のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストをそれを必要とする患者に単剤として又は抗癌治療と組み合わせて罹患器官の機能を改善するのに有効な量で投与することにより、患者における線維性癌又は癌関連線維症を治療するための方法を提供する。機能の改善は、例えば、臓器線維症の減少、血小板レベルの改善及び／又はヘモグロビンの増加を評価することによって評価できる。いくつかの実施形態では、線維性器官は骨髄である。いくつかの実施形態では、線維性癌は骨髄線維症である。いくつかの実施形態では、線維性器官は、肺、胃、膵臓、結腸、肝臓、腎臓、膀胱、乳房、子宮、子宮頸部、卵巣又は脳である。
【０１３４】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、患者に１日１回又は２回、週に１回又は２回、月に１回又は２回或いは症状の発症時直前又は発症時に投与される。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを、依然として線維症を発症していないＰＶ又はＥＴを有する患者に投与して線維症の発症を予防する。
【０１３５】
用量は、当業者に知られている技術又はここで教示するとおりに決定できる。ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストの毒性及び治療効力は、実験動物での標準的な薬学的手順によって決定でき、例えばＬＤ50及びＥＤ50を決定することによって決定できる。ＥＤ50（有効量50）とは、動物集団の５０％に特定の効果を生じさせるのに必要な薬物の量のことである。ＬＤ50（致死量５０）とは、サンプル集団の５０％を死滅させる薬物の用量のことである。
【０１３６】
所定の態様では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、被験体における線維性癌又は癌関連線維症を治療するために単剤として投与される。所定の態様では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニスト（例えば、本発明の変異ＳＡＰポリペプチド）と抗癌治療剤（例えば、化学療法剤又はチロシンキナーゼ阻害剤）との組み合わせを投与すると、被験体において線維性癌、例えば骨髄線維症又は膵臓癌を治療するための相乗効果が得られる。このようなアプローチ、すなわち２種類の薬剤の組み合せ又は共投与は、現在利用可能な治療法に応答しない又は耐性のある、線維性癌に罹患した個体を治療するのに有用であり得る。また、ここで提供される併用療法は、このような療法に応答しない個体のために現在利用可能な癌治療の有効性を改善する及び／又はその副作用を低減させるためにも有用である。
【０１３７】
試験した併用療法は、ＳＡＰによる治療開始前に、Ｊａｋキナーゼ阻害剤単独での治療を受けていた患者において観察される負の副作用（例えば、貧血及び血小板減少症）の改善をもたらした。
【０１３８】
特定の実施形態では、本発明は、骨髄線維症を治療する方法であって、それを必要とする被験体にＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を投与レジメン（例えば、用量及び投与計画）及び／又は骨髄線維症の１以上の症状を改善するのに有効な投与計画に従って投与することを含み、ここで、該それを必要とする被験体は、ＪＡＫキナーゼ阻害剤による治療を予め受けており、かつ、該ＪＡＫキナーゼ阻害剤による治療に応答しなくなっている。これは、同様に、他の線維性癌を有する及び／又は他の抗癌治療剤での治療を受けている患者に対してもより広く適用可能である。
【０１３９】
特定の実施形態では、本発明は、骨髄線維症を治療する方法であって、それを必要とする被験体にＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を投与レジメン（例えば、用量及び投与計画）及び／又は骨髄線維症の１以上の症状を改善するのに有効な投与計画に従って投与することを含み、ここで、該それを必要とする被験体は、現在ＪＡＫキナーゼ阻害剤による治療を受けている。したがって、本発明は、一部、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストをＪＡＫキナーゼ阻害剤と併用して、ＪＡＫキナーゼ阻害剤単独により骨髄線維症患者を治療するときに観察されるよりも骨髄線維症の１以上の症状を改善する点で大きな治療効果を達成することができる方法を提供する。いくつかの実施形態では、本発明の方法は、治療関連骨髄抑制を誘導しない（例えば、ＳＡＰアゴニストは、臨床的に有意な骨髄抑制を誘導しない）及び／又はベースラインで存在する骨髄抑制を増大させない（また、さらに減少させることができる）。換言すれば、所定の実施形態では、本発明の方法は、治療の開始前に観察された場合と比較して、骨髄抑制の悪化を誘導しない又はそれをもたらさない。骨髄抑制は、有害事象共通用語規準（ＣＴＣＡＥ）に従ってグレード０〜グレード５のスケールで評価できる（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  Ｃｏｍｍｏｎ  Ｔｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｆｏｒ  Ａｄｖｅｒｓｅ  Ｅｖｅｎｔｓ  ｖ４．０，ＮＣＩ，ＮＩＨ，ＤＨＨＳ．  Ｍａｙ  ２９，  ２００９  ＮＩＨ  ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ  ＃  ０９−７４７３参照）。いくつかの実施形態では、貧血などの骨髄抑制の１以上の基準は、治療の結果として悪化しない（例えばグレード２〜グレード３の有害事象；グレード３〜グレード４の有害事象）。
【０１４０】
「治療に応答しなくなった」とは、被験体がもはや治療に対するいかなる応答もないこと又は治療に対する応答性を減少していること、例えば用量の増加を必要とする又は利益の低下を受入れていることを意味する。所定の実施形態では、それを必要とする被験体は、ルキソリチニブ又は別のＪａｋキナーゼ阻害剤による治療を予め受けており、かつ、それによる治療に応答しなくなった。所定の実施形態では、この方法は、追加の抗癌治療を施すことをさらに含む。所定の実施形態では、追加の抗癌治療は、被験体が以前に応答しなくなったのと同じ治療である。
【０１４１】
一態様では、本発明は、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを抗癌治療剤と組み合わせて投与することによって癌関連線維症又は線維性癌を治療する方法を提供する。ここで使用するときに、「と組み合わせて」又は「併用投与」とは、第２の化合物が依然として体内において有効である（例えば、２種の化合物が患者において同時に有効であり、該２種の化合物の相乗効果を含むことができる）ような任意の投与形態をいう。有効性は、血液、血清又は血漿中の薬剤の測定可能な濃度に相関しない場合がある。例えば、異なる治療化合物を、同じ製剤又は別個の製剤で同時に又は連続的に及び異なるスケジュールで投与することができる。したがって、このような治療を受ける個体は、異なる治療薬の複合効果の利益を得ることができる。ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、１種以上の他の追加の薬剤と同時に、その前に又はその後に投与できる。
【０１４２】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、安定な抗癌治療をすでに受けている患者に投与される。いくつかの実施形態では、患者は、少なくとも３ヶ月間にわたって安定な抗癌治療を受けている。いくつかの実施形態では、患者は、３ヶ月未満にわたって安定な抗癌治療を受けている。いくつかの実施形態では、患者は、少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１０ヶ月、少なくとも１１ヶ月、又は少なくとも１年間安定な抗癌治療を受けている。所定の実施形態では、安定な抗癌治療は、ルキソリチニブなどのＪＡＫキナーゼ阻害剤である。
【０１４３】
一般に、それぞれの治療剤は、該特定の薬剤について決定された用量及び／又はタイムスケジュールで投与される。レジメンで使用するための特定の組み合わせは、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストと薬剤との相溶性及び／又は達成すべき所望の治療効果を考慮する。
【０１４４】
本発明の抗癌治療剤としては、化学療法剤、抗体ベースの薬剤、チロシンキナーゼ阻害剤、免疫調節剤及び生物学的薬剤又はそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。化学療法剤としては、次のものが挙げられるが、これらに限定されるものではない：アクチノマイシンＤ、アルデスロイキン、アリトレチノイン、全トランス型レチノイン酸／ＡＴＲＡ、アルトレタミン、アムサクリン、アスパラギナーゼ、アザシチジン、アザチオプリン、バチルスカルメットゲラン／ＢＣＧ、ベンダムスチン塩酸塩、ベキサロテン、ビカルタミド、ブレオマイシン、ボルテゾミブ、ブスルファン、カペシタビン、カルボプラチン、カーフィルゾミブ、カルムスチン、クロラムブシル、シスプラチン／シスプラチナム、クラドリビン、シクロホスファミド／シトホスファン、シタバリン、ダカルバジン、ダウノルビシン／ダウノマイシン、デニロイキンジフチトクス、デクスラゾキサン、ドセタキセル、ドキソルビシン、エピルビシン、エトポシド、フルダラビン、フルオロウラシル（５−ＦＵ）、ゲムシタビン、ゴセレリン、ヒドロコルチゾン、ヒドロキシウレア、イダルビシン、イホスファミド、インターフェロンα、イリノテカンＣＰＴ−１１、ラパチニブ、レナリドマイド、ロイプロリド、メクロレタミン／クロルメチン／ムスチン／ＨＮ２、メルカプトプリン、メトトレキサート、メチルプレドニゾロン、マイトマイシン、ミトタン、ミトキサントロン、オクトレオチド、オプレルベキン、オキサリプラチン、パクリタキセル、パミドロネート、パゾパニブ、ペガスパルガーゼ、ペグフィルグラスチム、ＰＥＧインターフェロン、ペメトレキセド、ペントスタチン、フェニルアラニンマスタード、プリカマイシン／ミトラマイシン、プレドニゾン、プレドニゾロン、プロカルバジン、ラロキシフェン、ロミプロスチム、サルグラモスチム、ストレプトゾシン、タモキシフェン、テモゾロミド、テムシロリムス、テニポシド、サリドマイド、チオグアニン、チオホスホアミド／チオテパ、チオテパ、トポテカン塩酸塩、トレミフェン、トレチノイン、バルルビシン、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシン、ビノレルビン、ボリノスタット、ゾレドロン酸又はそれらの組み合わせ。抗体ベースの薬剤としては、アレムツズマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、フレソリムマブ、ゲムツズマブ・オゾガミシン、イブリツモマブチウキセタン、オファツムマブ、パニツムマブ、リツキシマブ、トシツモマブ、トラスツズマブ、トラスツズマブＤＭ１及びこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。免疫調節化合物としては、ＴＮＦα、ＬＰＳ誘導単球ＩＬ１β、ＩＬ１２及びＩＬ６の産生を阻害する分子有機小分子が挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、免疫調節化合物としては、メトトレキサート、レフルノミド、シクロホスファミド、シクロスポリンＡ、ミノサイクリン、アザチオプリン、抗生物質（例えば、タクロリムス）、メチルプレドニゾロン、コルチコステロイド、ステロイド、ミコフェノール酸モフェチル、ラパマイシン、ミゾリビン、デオキシスパガリン、ブレキナル、Ｔ細胞受容体修飾因子又はサイトカイン受容体修飾因子及びＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニストが挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、免疫調節化合物としては、５，６−ジメチルキサンテノン−４−酢酸（ＤＭＸＡＡ）、サリドマイド、レナリドマイド、ポマリドマイド、ラクトフェリン、ポリアデノシン−ポリウリジル酸（ポリＡＵ）、リンタトリモド（ポリＩ：ｐｏｌｙＣ１２Ｕ；Ｈｅｍｉｓｐｈｅｒｘ  Ｂｉｏｐｈａｒｍａ社）、ポリ−Ｌ−リジン及びカルボキシメチルセルロースで安定化されたポリイノシン酸・ポリシチジル酸（ポリ−ＩＣＬＣ、Ｈｉｌｔｏｎｏｌ（登録商標））、イミキモド（３Ｍ）及びレシキモド（３Ｍ；Ｒ８４８）、非メチル化ＣｐＧジヌクレオチド（ＣｐＧ−ＯＤＮ）及びイピリムマブが挙げられる。生物学的薬剤としては、モノクローナル抗体（ＭＡＢ）、ＣＳＦ、インターフェロン及びインターロイキンが挙げられる。いくつかの実施形態では、生物学的薬剤は、ＩＬ−２、ＩＬ−３、エリスロポエチン、Ｇ−ＣＳＦ、フィルグラスチム、インターフェロンα、アレムツズマブ、ベバシズマブ、セツキシマブ、ゲムツズマブ・オゾガミシン、イブリツモマブチウキセタン、オファツムマブ、パニツムマブ、リツキシマブ、トシツモマブ又はトラスツズマブが挙げられる。
【０１４５】
チロシンキナーゼ阻害剤としては、アキシチニブ、バフェチニブ、ボスチニブ、セジラニブ、クリゾチニブ、ダサチニブ、エルロチニブ、ゲフィチニブ、イマチニブ、ラパチニブ、ネラチニブ、ニロチニブ、ポナチニブ、クイザルチニブ、レゴラフェニブ、ソラフェニブ、スニチニブ、バンデタニブ、バタラニブ及びそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４６】
いくつかの実施形態では、抗癌治療剤は、ＪＡＫキナーゼ阻害剤、例えばＡＣ−４３０、ＡＺＤ１４８０、バリシチニブ、ＢＭＳ−９１１４５３、ＣＥＰ−３３７７９、ＣＹＴ３８７、ＧＬＰＧ−０６３４、レスタウルチニブ、ＬＹ２７８４５４４、ＮＳ−０１８、パクリチニブ、Ｒ−３４８、Ｒ７２３、ルキソリチニブ、ＴＧ１０１３４８（ＳＡＲ３０２５０３）、トファシチニブ、及びＶＸ−５０９であるが、これらに限定されない。
【０１４７】
所定の実施形態では、抗癌治療剤としては、抗代謝物（例えば、５−フルオロウラシル、シタラビン、メトトレキサート、フルダラビンなど）、微小管阻害薬（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチンなどのビンカアルカロイド；パクリタキセル及びドセタキセルなどのタキサン）、アルキル化剤（例えば、シクロホスファミド、メルファラン、カルムスチン、ニトロソ尿素、例えばビスクロロエチルニトロソ尿素及びヒドロキシ尿素）、白金剤（例えば、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、サトラプラチン及びＣＩ−９７３）、アントラサイクリン（例えば、ドキソルビシン及びダウノルビシン）、抗腫瘍抗生物質（例えば、マイトマイシン、イダルビシン、アドリアマイシン及びダウノマイシン）  、トポイソメラーゼ阻害剤（例えば、エトポシド及びカンプトテシン）、抗血管新生剤（例えば、スニチニブ、ソラフェニブ及びベバシズマブ）又は任意の他の細胞毒性剤（例えば、リン酸エストラムスチン、プレドニムスチン）、ホルモン又はホルモンアゴニスト、アンタゴニスト、部分アゴニスト又は部分アンタゴニスト、キナーゼ阻害剤（イマチニブなど）及び放射線治療が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１４８】
適宜又は必要に応じて、本発明の任意の治療方法を繰り返すことができる。例えば、治療は定期的に行うことができる。治療を施す頻度は、当業者によって決定できる。例えば、治療は、数週間の期間にわたって１週間に１回又は所定期間にわたって１週間複数回投与できる（例えば、治療の第１週にわたって３回）。いくつかの実施形態では、初期の負荷投与期間後に、維持用量とする。いくつかの実施形態では、負荷用量を周期的に繰り返す。いくつかの実施形態では、初期負荷投与期間は、１週間につき治療を複数回施すことを含む（例えば、治療の第１週にわたって３回）。いくつかの実施形態では、負荷用量は、隔週、毎月、隔月、３ヶ月ごと、又は６ヶ月毎に繰り返すことができ、或いは適宜負荷用量間に継続した定期的な投薬と共に又はそれなしで繰り返すことができる。一般に、癌関連線維症の改善は、ある程度の期間、好ましくは少なくとも数ヶ月持続するが、抗線維化作用の維持及び／又は線維症の再発予防は、時間無制限の期間にわたってＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストの定期的な投薬を続けることが必要な場合がある。時間経過につれて、患者は、症状の再発を経験する場合があるが、その時点で治療を繰り返すことができる。
【０１４９】
所定の態様では、ここで、被験体において骨髄線維症を治療し、その発症を遅延させ及び／又は予防するための方法であって、その被験体にＳＡＰポリペプチド若しくはＳＡＰアゴニスト又はその薬学的に許容される塩の有効量を単独で又は抗癌治療剤と組み合わせて投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態では、被験体は骨髄線維症を有する。いくつかの実施形態では、被験体は骨髄線維症を発症する危険性がある。いくつかの実施形態では、被験体はヒト被験体である。ここに記載のカプセル又は単位投薬形態などの製剤のいずれか一つを使用して、骨髄線維症を有する被験者を治療することができる。
【０１５０】
ここに記載の方法によって治療できる骨髄線維症としては、原発性骨髄線維症（ＰＭＦ）及び続発性骨髄線維症（例えば、前駆真性多血症（ＰＶ後ＭＦ）又は本態性血小板血症（ＥＴ後ＭＦ）から生じる骨髄線維症）が挙げられる。ここに記載される方法によって治療できる骨髄線維症としては、高リスク、中リスク、例えば中間リスクレベル１又は中間リスクレベル２、及び低リスクの骨髄線維症が挙げられる。様々な種類の骨髄線維症を診断するための方法が当該技術分野において知られている。例えば、Ｃｅｒｖａｎｔｅｓ外，Ｂｌｏｏｄ  ２００９，１１３（１３）：２８９５−９０１を参照されたい。いくつかの実施形態では、診断後のリスクプロファイルに対する変更を説明するダイナミック予後モデルが有用であろう。例えば、Ｐａｓｓａｍｏｎｔｉ外，Ｂｌｏｏｄ  ２０１０，１１５：１７０３−１７０８を参照されたい。いくつかの実施形態では、被験体は明白な脾腫を有する。いくつかの実施形態では、骨髄線維症を有する被験者は、触診によって測定されたときに、肋骨縁の下に少なくとも５ｃｍの脾臓を有する。いくつかの実施形態では、被験体は、貧血及び／又は血小板減少症及び／又は白血球減少症を有する。いくつかの実施形態では、被験体は、貧血又は血小板減少症又は白血球減少症を有しない。いくつかの実施形態では、被験体は、輸血依存性である。いくつかの実施形態では、被験体は輸血依存性ではない。いくつかの実施形態では、被験体は、ＩＷＧ−ＭＲＴダイナミック国際予後スコアリングシステムに従って中間−１、中間−２又は高リスク疾患を有する少なくともグレード２骨髄線維症を含めてＷＨＯ診断基準又はＥＴ／ＰＶ後ＭＦについての病理学的に確認されたＰＭＦ診断を有する。いくつかの実施形態では、被験体は、グレード０又は１の骨髄線維症及びＩＷＧ−ＭＲＴダイナミック国際予後スコアリングシステムに従って低リスク、中間−１、中間−２、高リスク又は低リスク疾患を有する、ＷＨＯ診断基準又はＥＴ／ＰＶ後ＭＦに関する病理学的に確定したＰＭＦ診断を有する。いくつかの実施形態では、被験体は「前繊維性」骨髄線維症を有する。いくつかの実施形態では、被験体は、ＰＶ又はＥＴを有し、かつ、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを受容して骨髄線維症の発症を予防する。
【０１５１】
いくつかの実施形態では、被験体は、被験体がヒトである場合にはヤヌスキナーゼ２（ＪＡＫ２キナーゼ）（ＪＡＫ２Ｖ６１７Ｆ）においてバリン６１７からフェニルアラニンに点変異を有し、又は被験体がヒトではない場合にはヤヌスキナーゼ２（ＪＡＫ２キナーゼ）においてフェニルアラニンに対してバリン６１７に相当する点突然変異を有する。いくつかの実施形態では、被験体は、被験体がヒトである場合にはＪＡＫ２のフェニルアラニン変異に対してバリン６１７について陰性であり、又は被験体がヒトでない場合にはヤヌスキナーゼ２（ＪＡＫ２キナーゼ）におけるフェニルアラニンに対してバリン６１７に相当する突然変異について陰性である。被験者がＪＡＫ２Ｖ６１７Ｆに対して陽性であるか陰性であるかどうかは、骨髄細胞又は血液細胞（例えば、全血白血球）からのゲノムＤＮＡを使用してポリメラーゼ連鎖反応（「ＰＣＲ」）分析により決定できる。ＰＣＲ分析は、対立遺伝子特異的ＰＣＲ（例えば、対立遺伝子特異的定量的ＰＣＲ）又はＰＣＲシークエンシングであることができる。Ｋｉｔｔｕｒ  Ｊ外，Ｃａｎｃｅｒ  ２００７，１０９（１１）：２２７９−８４及びＭｃＬｏｒｎａｎ  Ｄ外，Ｕｌｓｔｅｒ  Ｍｅｄ  Ｊ．２００６，７５（２）：１１２−９を参照されたい。これらの文献のそれぞれは、参照により本明細書で援用する。
【０１５２】
いくつかの実施形態では、ここに記載の方法で治療された被験体は、別の骨髄線維症の治療若しくは処置を以前に受けており又は現在受けている。いくつかの実施形態では、被験体は、他の骨髄線維症の治療に対する非応答者であり、又は他の骨髄線維症の治療を受けた後に再発している。以前の治療は、ＪＡＫ２の阻害剤（例えば、ＩＮＣＢ０１８４２４（Ｉｎｃｙｔｅ社製のルキソリチニブとしても知られている）、ＣＥＰ−７０１（Ｃｅｐｈａｌｏｎ社製のレスタウルチニブ）若しくはＸＬ０１９（Ｅｘｅｌｉｘｉｓ社製））（Ｖｅｒｓｔｏｖｓｅｋ  Ｓ．，Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｈｅｍａｔｏｌ  Ｅｄｕｃ  Ｐｒｏｇｒａｍ．２００９：６３６−４２を参照）又は非ＪＡＫ２阻害剤（ヒドロキシウレアなど）であることができる。いくつかの実施形態では、以前の治療は、ＪＡＫキナーゼ阻害剤、例えば限定されないが、ＡＣ−４３０、ＡＺＤ１４８０、バリシチニブ、ＢＭＳ−９１１４５３、ＣＥＰ−３３７７９、ＣＹＴ３８７、ＧＬＰＧ−０６３４、ＩＮＣＢ１８４２４、レスタウルチニブ、ＬＹ２７８４５４４、ＮＳ−０１８、パクリチニブ、ルキソリチニブ、ＴＧ１０１３４８（ＳＡＲ３０２５０３）、トファシチニブ、ＶＸ−５０９、Ｒ−３４８  、又はＲ７２３であることができる。いくつかの実施形態では、被験体は、少なくとも３ヶ月間にわたって、原発性骨髄線維症、真性多血症後骨髄線維症（ＰＶ後ＭＦ）、本態性血小板血症後骨髄線維症（ＥＴ後ＭＦ）、真性多血症又は本態性血小板血症に対してルキソリチニブ治療を受けている。いくつかの実施形態では、被験体は、３ヶ月未満にわたって、原発性骨髄線維症、真性多血症後骨髄線維症（ＰＶ後ＭＦ）、本態性血小板血症後骨髄線維症（ＥＴ後ＭＦ）、真性多血症又は本態性血小板血症に対してルキソリチニブ治療を受けている。いくつかの実施形態では、被験体は、少なくとも３ヶ月間にわたって、原発性骨髄線維症、真性多血症後骨髄線維症（ＰＶ後ＭＦ）、本態性血小板血症後骨髄線維症（ＥＴ後ＭＦ）、真性多血症又は本態性血小板血症に対してルキソリチニブ治療を受けている。いくつかの実施形態では、少なくとも１以上の症状が継続ルキソリチニブ治療に関して改善しなくなっている。いくつかの実施形態では、被験体は、もはやルキソリチニブに応答していない。いくつかの実施形態では、被験体は、以前に、少なくとも６ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも１ヶ月、少なくとも３週間、又は少なくとも２週間にわたって別の骨髄線維症の治療を受けている。いくつかの実施形態では、被験体は、他の骨髄線維症の治療に対してもはや応答していない。いくつかの実施形態では、以前の治療は、ここに記載の抗癌治療剤であり、以前の治療は、被験体からの血清中におけるアミラーゼ、リパーゼ、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）及び／又はクレアチニンの１以上の上昇レベルの指標及び／又は貧血、血小板減少及び好中球減少症よりなる群から選択される血液学的状態の指標に基づき中止されている、或いは治療を行う医師の決定又は患者の要求に基づく他の理由のために中止されて���る。いくつかの実施形態では、第２の治療における化合物の用量は、以前の治療の用量と同じか低い。いくつかの実施形態では、被験体は、輸血以外の治療を受けていない。いくつかの実施形態では、被験体は、任意の前治療を受けていない。
【０１５３】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、ＪＡＫキナーゼ阻害剤、例えば限定されないが、ＡＣ−４３０、ＡＺＤ１４８０、バリシチニブ、ＢＭＳ−９１１４５３、ＣＥＰ−３３７７９、ＣＹＴ３８７、ＧＬＰＧ−０６３４、ＩＮＣＢ１８４２４、レスタウルチニブ、ＬＹ２７８４５４４、ＮＳ−０１８、パクリチニブ、ルキソリチニブ、ＴＧ１０１３４８（ＳＡＲ３０２５０３）、トファシチニブ、ＶＸ−５０９、Ｒ−３４８、又はＲ７２３と組み合わせて投与される（Ｋｏｎｔｚｉａｓ外Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０１２，１２（４）：４６４−４７０）。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、骨髄線維症の症状を軽減することが知られている薬剤、例えば限定されないが、ＡＢ００２４、ＡＺＤ１４８０、ＡＴ−９２８３、ＢＭＳ−９１１５４３、ＣＹＴ３８７、エベロリムス、ギビノスタット、イメテルスタット、レスタウルチニブ、ＬＹ２７８４５４４、経口ヒ素、ＮＳ−０１８、パクリチニブ、パノビノスタット、ペグインターフェロンα−２ａ、ポマリドマイド、プラシノスタット、ルキソリチニブ、ＴＡＫ−９０１及びＴＧ１０１４３８（ＳＡＲ３０２５０３）と組み合わせて投与される（Ｍｅｓａ，Ｌｅｕｋ  Ｌｙｍｐｈｏｍａ  ２０１３，５４（２）：２４２−２５１；Ｇｕｐｔａ外２０１２，２（３）：１７０−１８６；Ｋｕｃｉｎｅ及びＬｅｖｉｎｅ  ２０１１，２（４）：２０３−２１１）。
【０１５４】
被験体（ヒトなどの）は、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することによって治療できる。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、化合物は、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．７ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、０．９ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１２ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、１８ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ又は４０ｍｇ／ｋｇのほぼ任意の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、約０．１−０．３、０．３−０．５、０．５−０．８、０．８−１、１−５、５−１０、１０−１５、１５−２０、２０−２５、２５−３０、３０−３５又は３５−４０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。化合物は、ここで説明するカプセル及び／又は単位剤形とすることができる。いくつかの実施形態では、化合物は、静脈内（ＩＶ）で投与される。いくつかの実施形態では、化合物は、注射によって（例えばＳｕｂＱ、ＩＭ、ＩＰ）、吸入若しくはガス注入（口又は鼻から）によって投与され、又は、投与は、経口、頬側、舌下、経皮、経鼻、非経口又は直腸である。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストは、静脈内注入によって投与される。所定の実施形態では、各用量について、点滴は約１時間にわたる。しかし、それよりも長い又は短い点滴期間を使用することができる（例えば、３０分、４０分、４５分、５０分、５５分、１時間、１０分、１時間、１５分、９０分など）。この方法が追加の抗癌治療剤を投与することを含む場合には、その治療剤は、同じ投与経路又は異なる投与経路で投与できる。所定の実施形態では、追加の抗癌治療剤を経口投与する。
【０１５５】
また、ここで提供するのは、骨髄線維症に関連する１以上の徴候又は症状を改善するための方法である。例えば、ここに記載の方法を使用した治療は、脾臓のサイズを減少させ、全身症状を改善し（初期の満腹感、疲労、寝汗、咳及び掻痒など）、ＭＰＮ−ＳＡＦ総症状スコアを減少させ、白血球を減少させ、血小板を減少させ、貧血を改善し、血小板減少症を改善し、白血球減少症を改善し、輸血依存性を低減させ、ＪＡＫ２Ｖ６１７Ｆ対立遺伝子負担を低減させ、末梢血芽球を減少させ、骨髄芽球を減少させ、骨髄線維症を低減させ、掻痒を改善し、悪液質を改善し、及び／又は骨髄細胞充実性を減少若しくは増大させるのに効果的である。低減、減少、向上又は改善は、ここで提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して少なくとも５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０又は９０％であることができる。いくつかの実施形態では、骨髄線維症は、治療後の被験体において低減する。いくつかの実施形態では、骨髄線維症は、治療後にグレード０になる。いくつかの実施形態では、骨髄線維症は、治療後にグレード１になる。いくつかの実施形態では、脾臓は、治療後の被験体において触診不能となる。いくつかの実施形態では、被験体は、治療後に白血球及び／又は血小板の完全な分割を有する。いくつかの実施形態では、被験体は、治療後に貧血、血小板減少症及び／又は白血球減少症の完全な消散を有する。いくつかの実施形態では、被験体は、治療後に輸血非依存性となる。いくつかの実施形態では、被験体は、治療後にそう痒の完全な消散を有する。いくつかの実施形態では、治療の有効性は、応答として少なくとも１のグレードによる骨髄線維症の改善を伴う安定な疾患を包含するように修正された国際ワーキンググループ（ＩＷＧ）基準に従って分類された全応答率（ＯＲＲ）を評価することによって評価される。いくつかの実施形態では、治療の有効性は、骨髄線維症のグレーディングに関する欧州コンセンサスに従う少なくとも１のグレードによって骨髄線維症スコアの改善を評価することによって評価される。いくつかの実施形態では、治療の有効性は、循環血漿サイトカイン（例えばＣＲＰ、ＩＬ−１Ｒａ、ＭＩＰ−１β、ＴＮＦα、ＩＬ−６及びＶＥＧＦが挙げられるが、これらに限定されない）レベルのレベル変化を評価することにより評価される。いくつかの実施形態では、治療の有効性は、ＰＢＭＣのｍＲＮＡ及びｍｉＲＮＡ発現レベルのレベル変化を評価することにより評価される。いくつかの実施形態では、治療の有効性は、ＰＶ又はＥＴから骨髄線維症への進行がないことによって評価される。いくつかの実施形態では、治療の有効性は、少なくとも１のグレードによる骨髄線維症の増加の欠如によって評価される。
【０１５６】
いくつかの実施形態では、ここに記載する方法による治療（例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニスト使用した単剤又は併用療法）は、ここで提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して（例えば、ベースラインと比較して）、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、又は少なくとも７０％脾臓体積を減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、脾臓体積を少なくとも２５％減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、脾臓体積を少なくとも５０％減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、脾臓体積を約２０％〜７０％、約２０％〜６０％、約２５％〜６０％、約２５〜５５％又は約２５％〜５０％減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、脾臓体積は、触診により測定できる。当業者であれば、磁気共鳴イメージングによる測定などの脾臓体積を測定するための他の既知の方法を使用することができることが分かるであろう。所定の実施形態では、本発明は、脾臓体積を、それを必要とする患者において減少させるための方法であって、該それを必要とする患者は骨髄線維症を有し、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を単独で又は追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤）と組み合わせて、脾臓体積を少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、又は少なくとも５５％減少させるのに有効な投与計画に従って投与することを含む方法を提供する。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。所定の実施形態では、脾臓体積は、約２５〜５５％、約２５〜５０％、又は約２５〜４０％減少する。
【０１５７】
いくつかの実施形態では、ここに記載する方法による治療（例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを使用した単剤又は併用療法）は、骨髄増殖性腫瘍症状評価フォーム（ＭＰＮ−ＳＡＦ）総症状スコアを、ここで提供される方法による治療を開始する前のスコアと比較して少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、又は少なくとも７０％減少させるのに有効である。骨髄増殖性腫瘍症状評価フォーム総症状スコアの説明及び議論については、Ｅｍａｎｕｅｌ外，２０１２，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，ｖｏｌｕｍｅ  ３０，  ｎｕｍｂｅｒ  ３３，ｐａｇｅｓ  ４０９８−４０１３を参照されたい。いくつかの実施形態では、治療は、ＭＰＮ−ＳＡＦ総症状スコアを少なくとも２５％減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、ＭＰＮ−ＳＡＦ総症状スコアを少なくとも５０％減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、症状は、ＭＰＮ−ＳＡＦ患者報告結果ツールを使用して評価した（Ｅｍａｎｕｅｌ外２０１２，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ３０（３３）：  ４０９８−４１０３）。所定の実施形態では、本発明は、ＭＰＮ−ＳＡＦ総症状スコアをそれを必要とする患者において減少させるための方法であって、該それを必要とする患者が骨髄線維症を有し、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を単独で又は追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤）と組み合わせてＭＰＮ−ＳＡＦ総症状スコアを少なくとも約２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも５５％又は少なくとも６０％減少させるのに有効な投与計画に従って投与することを含む方法を提供する。特定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療剤はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。所定の実施形態では、ＭＰＮ−ＳＡＦ総症状スコアは、約２５％〜６０％、約２５〜５５％又は２５〜５０％減少する。
【０１５８】
いくつかの実施形態では、ここで説明する方法を使用した治療（例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを使用した単剤又は併用療法）は、ヘモグロビンレベルを、ここで提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して（例えば、ベースラインと比較して）少なくとも約５００ｍｇ／Ｌ、１ｇ／Ｌ、２ｇ／Ｌ、３ｇ／Ｌ、又は５ｇ／Ｌ増加させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、ヘモグロビンレベルを、ここで提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して（例えば、ベースラインと比較して）５００〜１０００ｍｇ／Ｌ、１〜２ｇＬ、２〜３ｇ／Ｌ又は３〜５ｇ／Ｌ増加させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、ヘモグロビンレベルを１ｇ／Ｌ増加させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、ヘモグロビンレベルを少なくとも８０ｇ／Ｌ、９０ｇ／Ｌ、少なくとも１００ｇ／Ｌ、少なくとも１１０ｇ／Ｌ、少なくとも１２０ｇ／Ｌ、少なくとも１３０ｇ／Ｌ、又は少なくとも１４０ｇ／Ｌまで増加させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、ヘモグロビンレベルを少なくとも１００ｇ／Ｌ増加させるのに有効である。いくつかの実施形態では、ヘモグロビンレベルは、通常の全血球計算（ＣＢＣ）の一部として測定される。当業者であれば、ヘモグロビンレベルを測定するための他の既知の方法も使用できることが分かるであろう。所定の実施形態では、本発明は、ヘモグロビンレベルを、それを必要とする患者において増加させるための方法であって、該それを必要とする患者は骨髄線維症を有し、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を単独で又は治療用の追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤）と組み合わせてヘモグロビンレベルを少なくとも約５００ｍｇ／Ｌ、１ｇ／Ｌ、２ｇ／Ｌ、３ｇ／Ｌ又は５ｇ／Ｌにまで増加させるのに有効な投与計画に従って投与することを含む方法を提供する。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療剤はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。所定の実施形態では、ヘモグロビンレベルは、約５００〜１０００ｍｇ／Ｌ、１〜２ｇ／Ｌ、２〜３ｇ／Ｌ、又は３〜５ｇ／Ｌ増加する。所定の実施形態では、ヘモグロビンレベルは、少なくとも約８０ｇ／Ｌ、９０ｇ／Ｌ、１００ｇ／Ｌ、１１０ｇ／Ｌ、１２０ｇ／Ｌ、１３０ｇ／Ｌ又は１４０ｇ／Ｌにまで増加する。
【０１５９】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載する方法を使用する治療（例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニスト用いた単剤又は併用療法）は、赤血球（ＲＢＣ）輸血を、ここで提供される方法による治療を開始する前レベルと比較して少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、又は少なくとも６０％低減するのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、ＲＢＣ輸血を少なくとも２５％低減するのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、ＲＢＣ輸血を少なくとも５０％低減するのに有効である。
【０１６０】
いくつかの実施形態では、治療は、ＲＢＣ輸血非依存性を達成するのに有効である。所定の実施形態では、本発明は、ＲＢＣ輸血を、それを必要とする患者において低減させるための方法であって、該それを必要とする患者は骨髄線維症を有し、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を単独で又は追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤）と組み合わせてＲＢＣ輸血を少なくとも約２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、又は少なくとも６０％減少させるのに有効な投与計画に従って投与することを含む方法を提供する。特定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療剤はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。所定の実施形態では、ＲＢＣ輸血を約２５％〜６０％、約２５〜５５％又は２５〜５０％低減させる。所定の実施形態では、患者は、治療後に輸血非依存性状態になる。
【０１６１】
いくつかの実施形態では、ここに記載される方法を用いた治療（例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを使用した単剤又は併用療法）は、存在する場合には血小板減少症を改善するのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、血小板を、ここで提供する方法による治療を開始する前のレベルと比較して少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は少なくとも１００％増加させる。いくつかの実施形態では、この治療は、血小板を、ここで提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して少なくとも２０％〜３０％、少なくとも３０％〜４０％、少なくとも４０％〜５０％、少なくとも５０％〜６０％、少なくとも６０％〜７０％、少なくとも７０％〜８０％、少なくとも８０％〜９０％又は少なくとも９０％〜１００％増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、血小板を少なくとも１００％増加させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、血小板を少なくとも４０×１０9／Ｌ、５０×１０9／Ｌ、６０×１０9／Ｌ、７０×１０9／Ｌ、８０×１０9／Ｌ、９０×１０9／Ｌ又は１００×１０9／Ｌにまで増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、血小板を少なくとも５０〜７５×１０9／Ｌ、７５〜１００×１０9／Ｌ、又は１００〜１５０×１０9／Ｌにまで増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、血小板を５０×１０9／Ｌにまで増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、血小板を１００×１０9／Ｌにまで増加させる。いくつかの態様では、血小板は、通常の全血球計数（ＣＢＣ）の一部として測定される。当業者であれば、血小板を使用するための他の既知の方法も使用できることが分かるであろう。所定の実施形態では、本発明は、血小板をそれを必要とする患者において増加させるための方法であって、該それを必要とする患者が骨髄線維症を有し、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を単独で又は追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤）と組み合わせて血小板を少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は少なくとも１００％増加させるのに有効な投与計画に従って投与することを含む方法を提供する。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療剤はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。所定の実施形態では、血小板は、約５０％〜６０％、６０％〜７０％、７０％〜８０％、８０％〜９０％、又は９０％〜１００％増加する。
【０１６２】
いくつかの実施形態では、ここに記載する方法を使用する治療（例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニスト使用した単剤又は併用療法）は、血小板輸血をここで提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して少なくとも２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７５％又は１００％減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、血小板輸血を少なくとも５０％減少させる。所定の実施形態では、本発明は、血小板輸血をそれを必要とする患者において減少させるための方法であって、該それを必要とする患者は骨髄線維症を有し、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を単独で又は追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤）と組み合わせて血小板輸血を少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％又は少なくとも７０％減少させるのに有効な投与計画に従って投与することを含む。特定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療剤はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。所定の実施形態では、血小板輸血は、約２５％〜４０％、２５％〜５０％、５０％〜７０％、又は７０％〜１００％減少する。
【０１６３】
いくつかの実施形態では、ここに記載される方法を使用する治療（例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを用いた単剤又は併用療法）は、存在する場合には血小板増加症を改善するのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、血小板を、ここで提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、又は少なくとも５０％減少させる。いくつかの実施形態では、治療は血小板を２５％減少させる。いくつかの実施形態では、治療は、血小板を正常レベルにまで減少させる。いくつかの実施形態では、血小板は、通常の全血球計算（ＣＢＣ）の一部として測定される。当業者であれば、血小板を測定するための他の既知の方法も使用できることが分かるであろう。所定の実施形態では、本発明は、血小板をそれを必要とする患者において減少させるための方法であって、該それを必要とする患者は骨髄線維症を有し、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を単独で又は追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤）と組み合わせて血小板を少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、又は少なくとも５０％減少させるのに有効な投与計画に従って投与することを含む方法を提供する。特定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療剤はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。所定の実施形態では、血小板は、約１０％〜１５％、少なくとも１５％〜２５％又は少なくとも２５％〜３５％減少する。
【０１６４】
いくつかの実施形態では、ここに記載される方法を使用する治療（例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを用いた単剤又は併用療法）は、存在する場合には好中球減少症の改善に効果的である。いくつかの実施形態では、治療は、絶対好中球数（ＡＮＣ）を、ここで提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は少なくとも１００％増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、ＡＮＣを、ここで提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して少なくとも２０％〜３０％、少なくとも３０％〜４０％、少なくとも４０％〜５０％、少なくとも５０％〜６０％、少なくとも６０％〜７０％、少なくとも７０％〜８０％、少なくとも８０％〜９０％又は少なくとも９０％〜１００％増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、ＡＮＣを少なくとも５０％増加させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、ＡＮＣを少なくとも１０００／μＬ、少なくとも１２５０／μＬ、少なくとも１５００／μＬ、少なくとも１７５０／μＬ又は少なくとも２０００／μＬ増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、ＡＮＣを少なくとも１５００〜１２５０／μＬ、少なくとも１５００〜１７５０／μＬ、又は少なくとも１７５０〜２０００／μＬ増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、ＡＮＣを少なくとも１５００／μＬ増加させる。いくつかの実施形態では、ＡＮＣは、通常の全血球計算（ＣＢＣ）の一部として測定される。当業者であれば、ＡＮＣを測定するための他の既知の方法も使用することができることが分かるであろう。所定の実施形態では、本発明は、ＡＮＣをそれを必要とする患者において増加させるための方法であって、該それを必要とする患者が骨髄線維症を有し、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を単独で又は追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤）と組み合わせてＡＮＣを少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は少なくとも１００％増加させるのに有効な投与計画に従って投与することを含む。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療剤はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。所定の実施形態では、ＡＮＣが約２０％〜３０％、少なくとも３０％〜４０％、少なくとも４０％〜５０％、少なくとも５０％〜６０％、少なくとも６０％〜７０％、少なくとも７０％〜８０％、少なくとも８０％〜９０％、又は少なくとも９０％〜１００％増加する。
【０１６５】
いくつかの実施形態では、ここに記載される方法を使用する治療（例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを用いた単剤又は併用療法）は、存在する場合には白血球減少症を改善するのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、白血球（ＷＢＣ）を、ここで提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％又は少なくとも１００％増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、ＷＢＣをここで提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して少なくとも２０％〜３０％、少なくとも３０％〜４０％、少なくとも４０％〜５０％、少なくとも５０％〜６０％、少なくとも６０％〜７０％、少なくとも７０％〜８０％、少なくとも８０％〜９０％、又は少なくとも９０％〜１００％増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、ＷＢＣを少なくとも５０％増加させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、ＷＢＣを少なくとも４×１０9／Ｌ、５×１０9／Ｌ、７．５×１０9／Ｌ又は１０×１０9／Ｌに増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、ＷＢＣを１０×１０9／Ｌに増加させる。いくつかの実施形態では、治療は、ＷＢＣを正常範囲にまで増加させる。いくつかの実施形態では、ＷＢＣは、通常の全血球計算（ＣＢＣ）の一部として測定される。当業者であれば、ＷＢＣを測定するための他の既知の方法も使用できることが分かるであろう。特定の実施形態では、本発明は、ＷＢＣをそれを必要とする患者において増加させるための方法であって、該それを必要とする患者は骨髄線維症を有し、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を単独で又は追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤）と組み合わせてＷＢＣを少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、又は少なくとも１００％増加させるのに有効な投与計画に従って投与することを含む方法を提供する。特定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療剤はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。所定の実施形態では、ＷＢＣは約２０％〜３０％、少なくとも３０％〜４０％、少なくとも４０％〜５０％、少なくとも５０％〜６０％、少なくとも６０％〜７０％、少なくとも７０％〜８０％、少なくとも８０％〜９０％、又は少なくとも９０％〜１００％増加する。
【０１６６】
いくつかの実施形態では、ここに記載される方法を使用する治療（例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを用いた単剤又は併用療法）は、存在する場合には白血球を改善するのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、ＡＮＣを１５００／μＬ未満に低下させることなく、ＡＮＣを、ここに提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％又は少なくとも７０％減少させる。いくつかの実施形態では、治療はＡＮＣを２５％減少させる。いくつかの実施形態では、治療は、ＡＮＣを５０％減少させる。いくつかの実施形態では、治療は、ＡＮＣを正常レベルにまで減少させる。いくつかの実施形態では、治療は、白血球（ＷＢＣ）を、ここに提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、又は少なくとも７０％減少させるが、ＷＢＣを正常下限値未満に低下させない。いくつかの実施形態では、治療は、ＷＢＣを２５％減少させる。いくつかの実施形態では、治療はＷＢＣを５０％減少させる。いくつかの実施形態では、治療は、ＷＢＣを＜３５×１０9／Ｌ、＜３０×１０9／Ｌ、＜２５×１０9／Ｌ、＜２０×１０9／Ｌ、又は＜１５×１０9／Ｌまで減少させる。いくつかの実施形態では、治療は、白血球を＜２５×１０9／Ｌ減少させる。いくつかの実施形態では、治療は、ＷＢＣを正常範囲まで減少させる。いくつかの実施形態では、ＡＮＣ及びＷＢＣを通常の全血球計算（ＣＢＣ）の一部として測定する。当業者であれば、ＡＮＣ又はＷＢＣを測定するための他の公知の方法も使用できることが分かるであろう。所定の実施形態では、本発明は、ＡＮＣ又はＷＢＣをそれを必要とする患者において減少させるための方法であって、該それを必要とする患者が骨髄線維症を有し、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を単独で又は追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤）と組み合わせてＡＮＣ又はＷＢＣを少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％又は少なくとも７０％減少させるのに効果的な投与計画に従って、ＷＢＣを正常の下限値未満に低下させることなく投与することを含む方法を提供する。特定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療剤はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。所定の実施形態では、ＡＮＣ又はＷＢＣは、ＷＢＣを正常の下限値未満に低下させることなく、約２０％〜３０％、少なくとも３０％〜４０％、少なくとも４０％〜５０％、少なくとも５０％〜６０％又は少なくとも６０％〜７０％減少する。
【０１６７】
いくつかの実施形態では、ここに記載の方法を使用する治療（例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニスト使用した単剤又は併用療法）は、末梢血芽球を、ここで提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、又は少なくとも７０％減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、末梢血芽球を少なくとも５０％減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、末梢血芽球を≧１〜＜１に減少させるのに有効である。当業者であれば、末梢血芽球を測定するための当該技術分野で既知の方法のいずれかも使用することができることが分かるであろう。特定の実施形態では、本発明は、末梢血芽球をそれを必要とする患者において減少させるための方法であって、該それを必要とする患者が骨髄線維症を有し、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量単独で又は追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤）と組み合わせて末梢血芽球を少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％又は少なくとも７０％減少させるのに効果的な投与計画に従って投与することを含む方法を提供する。特定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療剤はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。所定の実施形態では、末梢血の芽球は、約２０％〜３０％、少なくとも３０％〜４０％、少なくとも４０％〜５０％、少なくとも５０％〜６０％又は少なくとも６０％〜７０％減少する。所定の実施形態では、末梢血芽球≧１〜＜１に減少する。
【０１６８】
いくつかの実施形態では、ここに記載する方法を使用する治療（例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニスト使用する単剤又は併用療法）は、骨髄線維症をグレード３からグレード２に減少させるのに有効である（例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを使用した単剤又は併用療法）。いくつかの実施形態では、治療は、骨髄線維症をグレード３からグレード１に減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、骨髄線維症をグレード３からグレード０に減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、骨髄線維症をグレード２からグレード１に減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、骨髄線維症をグレード２からグレード０に減少させるのに有効である。いくつかの実施形態では、治療は、骨髄線維症をここで提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して少なくとも５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０又は９０％減少させるのに有効である。当業者であれば、骨髄線維症を評価するための当該技術分野で既知の方法のいずれかを使用することができることが分かるであろう。所定の実施形態では、本発明は、骨髄線維症をそれを必要とする患者において減少させるための方法であって、該それを必要とする患者はその骨髄線維症を有し、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を単独で又は追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤）と組み合わせて骨髄線維症を少なくとも５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０又は９０％減少させるのに有効な投与計画に従って投与することを含む。特定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療剤はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。所定の実施形態では、骨髄線維症を約２０％〜３０％、少なくとも３０％〜４０％、少なくとも４０％〜５０％、少なくとも５０％〜６０％又は少なくとも６０％〜７０％減少させる。
【０１６９】
いくつかの実施形態では、ここに記載される方法を使用する治療（例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを用いた単剤又は併用療法）は、骨髄芽球を≧５％から＜５％に減少させるのに有効である。当業者であれば、骨髄芽球を測定するための当該技術分野で既知の方法のいずれかを使用することもできることが分かるであろう。所定の実施形態では、本発明は、骨髄芽球をそれを必要とする患者において減少させる方法であって、該それを必要とする患者は骨髄線維症を有し、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を単独で又は追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤）と組み合わせて骨髄芽球を少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％又は少なくとも７０％減少させるのに有効な投与計画に従って投与することを含む。特定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療剤はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。所定の実施形態では、骨髄芽球を約２０％〜３０％、少なくとも３０％〜４０％、少なくとも４０％〜５０％、少なくとも５０％〜６０％又は少なくとも６０％〜７０％減少させる。
【０１７０】
いくつかの実施形態では、治療は、骨髄細胞充実性の改善に有効である。改善は、ここで提供される方法による治療を開始する前のレベルと比較して少なくとも２０、３０、４０、５０、６０又は７０％であることができる。所定の実施形態では、本発明は、骨髄細胞充実性をそれを必要とする患者において改善するための方法であって、それを必要とする患者が骨髄線維症を有し、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を単独で又は追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤）と組み合わせて骨髄細胞充実性を少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％又は少なくとも７０％改善させるのに有効な投与計画に従って投与することを含む方法を提供する。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、血清から精製したヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療剤はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。所定の実施形態では、骨髄細胞充実性は、約２０％〜３０％、少なくとも３０％〜４０％、少なくとも４０％〜５０％、少なくとも５０％〜６０％又は少なくとも６０％〜７０％改善する。
【０１７１】
所定の実施形態では、ここに記載の方法を使用する治療（例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを使用する単剤又は併用療法）は、ここに記載の効果の少なくとも１つをもたらす（例えば脾臓体積の減少、ＭＰＮ−ＳＡＦ総症状スコアの減少、ヘモグロビンの増加、ＲＢＣ輸血の減少、血小板減少症の改善、血小板輸血の減少、血小板増加症の改善、好中球減少症の改善、白血球の改善、末梢血芽球の減少、骨髄線維症の減少、骨髄芽球の減少又は骨髄細胞性の改善）。いくつかの実施形態では、ここに記載された方法を使用する治療は、ここに記載された効果の少なくとも２つをもたらす。いくつかの実施形態では、上記の方法を使用する治療は、ここに記載の効果の少なくとも３、４、５、６、７、８、９又は１０をもたらす。前記いずれかの所定の実施形態では、所定の症状の改善度又は治療効果が達成されたかどうかの評価は、１以上の経時点、例えば、治療の少なくとも１２、１８、２０若しくは少なくとも２４週間後又は治療のより２４週を超えた後に評価される。
【０１７２】
いくつかの実施形態では、ここに記載される方法の１以上を使用する治療（例えば、本発明のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを用いた単剤又は併用療法）は、臨床的に有意な骨髄抑制を生じさせる又は誘導することなく、ここに記載の効果の少なくとも１つをもたらす（例えば、脾臓体積の減少、ＭＰＮ−ＳＡＦ総症状スコアの減少、ヘモグロビンの増加、ＲＢＣ輸血の減少、輸血非依存性の達成、血小板減少症の改善、血小板輸血の減少、血小板増加症の改善、好中球減少症の改善、白血球の改善、末梢血芽球の減少、骨髄線維症の減少、骨髄芽球の減少又は骨髄細胞性の改善）。いくつかの実施形態では、ここに記載された方法の１つ以上を使用する治療は、臨床的に有意な骨髄抑制を生じさせる又は誘導することなく、ここに記載された効果の少なくとも２つをもたらす。いくつかの実施形態では、上記の方法の一つ以上を使用する治療は、臨床的に有意な骨髄抑制を生じさせる又は誘導することなく、ここに記載された効果の少なくとも３、４、５、６、７、８、９又は１０をもたらす。いくつかの実施形態では、ここに記載した方法の一つ以上を使用する治療は、骨髄抑制をもたらさない。所定の実施形態では、前記の方法のいずれかは、ヒト血清から精製されたＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドを含むＳＡＰ、例えば組換えヒトＳＡＰ（例えば、ＣＨＯ細胞中で産生された組換えヒトペントラキシン２）を投与することを含む。特定の実施形態では、上記の方法のいずれかは、ＳＡＰアゴニスト又はＳＡＰポリペプチドを投与計画に従って投与することを含み、ここで、上記治療効果のいずれかが投与計画に従って投与した後に達成される。所定の実施形態では、上記治療効果の１つ以上は、投薬計画に従って投与した後に達成される（例えば、投与は、投薬計画に従って投与することを含む）。上記パラメータのいずれかにおける改善（例えば、症状の減少）は、治療中の１以上の時点で、例えば、治療の少なくとも１２週、少なくとも１８週、少なくとも２０週、少なくとも２４週又は２４週を超えた後に評価される。
【０１７３】
１以上の症状の改善などの患者における改善の上記例のいずれかについて、所定の実施形態では、本発明は、治療が、ＳＡＰアゴニスト又はＳＡＰポリペプチドを、治療効果をもたらすのに有効な用量及び投与計画で投与することを含むことを提供する。所定の実施形態では、その用量及び投与計画は、別の抗癌療法で経験する１以上の副作用も減少させる。
【０１７４】
他の実施形態では、治療は、その代わりに又はそれに加えて、線維性癌の１以上の他の症状を改善する。所定の実施形態では、治療は、疼痛を減少させ、腫瘍サイズを減少させ、体重損失を減少させ、体重増加を改善し、無増悪生存期間を増加させ又はそうでなければ患者の生活の質を改善する。
【０１７５】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを、２８日サイクルの少なくとも１サイクル、少なくとも２サイクル、少なくとも３サイクル、少なくとも４サイクル、少なくとも５サイクル、少なくとも６サイクル、少なくとも７サイクル又は少なくとも８サイクルについて１週間に少なくとも１回投与することを含む投与計画で被験体に投与される。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、２８日サイクルの少なくとも６サイクル、２８日サイクルの少なくとも８サイクル、２８日サイクルの少なくとも１０サイクル、２８日サイクルの少なくとも１２サイクル、２８日サイクルの少なくとも１５サイクル、２８日サイクルの少なくとも１８サイクル又は２８日サイクルの少なくとも２４サイクルについて１週間に少なくとも１回被験体に投与される。いくつかの実施形態では、化合物は、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも１年又は少なくとも２年にわたって１週間に１回被験体に投与される。さらなる実施形態では、化合物は、治療の第１週において１日おきに投与される。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを４週間又は２８日サイクルの少なくとも１サイクル、少なくとも２サイクル、少なくとも３サイクル、少なくとも４サイクル、少なくとも５サイクル、少なくとも６サイクル、少なくとも７サイクル又は少なくとも８サイクルにわたって４週間毎に投与することを含む投与計画で投与される。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、２８日サイクルの少なくとも６サイクル、２８日サイクルの少なくとも８サイクル、２８日サイクルの少なくとも１０サイクル、２８日サイクルの少なくとも１２サイクル、２８日サイクルの少なくとも１５サイクル、２８日サイクルの少なくとも１８サイクル又は２８日サイクルの少なくとも２４サイクルにわたって４週ごとに１回被験体に投与される。いくつかの実施形態では、化合物は、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも８ヶ月間、少なくとも１年又は少なくとも２年にわたって４週ごとに１回被験体に投与され、場合によっては患者の寿命にわたって慢性的に投与される。さらなる実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、治療の第１週において１日おきに投与される。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、２８日サイクルの少なくとも６サイクル、２８日サイクルの少なくとも８サイクル、２８日サイクルの少なくとも１０サイクル、２８日サイクルの少なくとも１２サイクル、２８日サイクルの少なくとも１５サイクル、２８日サイクルの少なくとも１８サイクル又は２８日サイクルの少なくとも２４サイクルにわたって４週間毎に数日（例えば、１、３及び５日）投与される。いくつかの実施形態では、化合物は、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも１年又は少なくとも２年にわたって４週間毎に数日間（例えば、１、３、５日）にわたって被験体に投与され、またおそらく患者の寿命にわたって慢性的に投与される。特定の実施形態では、投与計画は、ここに記載された効果の１つ以上をもたらす（例えば、１以上の症状又はパラメータの改善）（例えば、脾臓容積の減少、ＭＰＮ−ＳＡＦ総症状スコアの減少、ヘモグロビンの増加、ＲＢＣ輸血の減少、輸血非依存性の達成、血小板減少症の改善、血小板輸血の減少、血小板増加症の改善、好中球減少症の改善、白血球の改善、末梢血芽球の減少、骨髄線維症の減少、骨髄芽球の減少又は骨髄細胞性の改善）。いくつかの実施形態では、投与計画は、ここに記載の効果の少なくとも２つをもたらす。いくつかの実施形態では、投与計画は、ここに記載の効果の少なくとも３、４、５、６、７、８、９又は１０をもたらす。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは組換えヒトＳＡＰを含む。
【０１７６】
特定の実施形態では、本発明は、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を単独で又は追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤又は化学療法剤）と組み合わせて、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを投与することを含む投与計画に従って、血清から精製されたヒトＳＡＰとは異なるグリコシル化を有するＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰポリペプチド１０ｍｇ／ｋｇを、サイクル１の１、３、５、８、１５及び２２日目、その後の各２８日サイクルの１、８、１５及び２２日目に投与することを含む投与レジメンを使用して投与するための方法を提供する。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストはＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療剤はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。
【０１７７】
所定の実施形態では、本発明は、ＳＡＰポリペプチドなどのＳＡＰアゴニストの所定量を単独で又は追加の抗癌治療剤（例えば、ＪＡＫキナーゼ阻害剤）と組み合わせて、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを投与することを含む投与計画に従って、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニスト１０ｍｇ／ｋｇをサイクル１の１、３及び５日目、その後各２８日サイクルの１日目に投与することを含む投与レジメンを使用して投与するための方法を提供する。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストはＳＡＰポリペプチドを含み、追加の抗癌治療剤はＪＡＫキナーゼ阻害剤である。所定の実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。
【０１７８】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、第１週の間に複数回投与され（例えば、１、３及び５日目）、その後、毎週、２週間毎、３週間毎又は４週間毎に投与される。いくつかの実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、隔週毎、３週間毎、毎月、隔月、３ヶ月毎、半年毎に又は適宜複数回投与される。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、ＩＶ注射によって投与される。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、ここに記載の用量のいずれかで投与される。いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、抗癌治療剤と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、被験体は、少なくとも６ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも１ヶ月、少なくとも３週間又は少なくとも２週間にわたって抗癌治療の安定の用量である。いくつかの実施形態では、被験体は、少なくとも３ヶ月間にわたって抗癌治療の安定用量である。いくつかの実施形態では、被験体は、抗癌療法による治療を受けたときに少なくとも２週間、少なくとも３週間、少なくとも１ヶ月、少なくとも２ヶ月、少なくとも３ヶ月、少なくとも４ヶ月、少なくとも５ヶ月、少なくとも６ヶ月間にわたって１以上の症状の任意の改善を示しさない。いくつかの実施形態では、抗癌治療剤は、ここに記載されるようなＪＡＫキナーゼ阻害剤である。いくつかの実施形態では、ＪＡＫキナーゼ阻害剤はルキソリチニブである。いくつかの実施形態では、抗癌治療は、有効であること予め判断された用量で施される。いくつかの実施形態では、投与レジメンを適宜調節して、ここに記載の治療結果の一つを達成する。
【０１７９】
いくつかの実施形態では、ここに記載の方法は、初期応答を達成した後にＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストの１以上の追加の用量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、後の応答は、被験体において初期応答を達成した後にＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストの１以上の追加の用量を投与した後に達成される。後の応答は、追加の応答（例えば、ここに記載の応答のいずれかが最初には観察されない）、初期応答の維持又は初期応答に関する改善であることができる。いくつかの実施形態では、１以上の追加用量の投与は、初期応答を実質的に維持する。いくつかの実施形態では、１以上の追加の用量の投与は、初期応答のさらなる改善を与える。いくつかの実施形態では、１以上の追加の用量の投与は、最初には観察されなかった１以上の追加の応答を与える。所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは、組換えヒトＳＡＰなどのＳＡＰポリペプチドを含む。
【０１８０】
いくつかの実施形態では、ヒト被験者などの被験体にＳＡＰポリペプチド若しくはＳＡＰアゴニスト又はその薬学的に許容される塩を投与すると、化合物のＣmax（最大薬物濃度）が、投与後約０．５〜約５時間、約１．５〜約４．５時間、約２〜約４時間又は約２．５〜約３．５時間以内に達成される。いくつかの実施形態では、化合物をヒト被験者に投与したときに、化合物の排泄半減期は、約１１〜１１０時間、２０〜７２時間、１２〜約４０時間、約１６〜約３４時間又は約２０〜約４０時間である。いくつかの実施形態では、化合物の平均ＡＵＣは、１ｋｇ当たり約０．１ｍｇ〜約４０ｍｇの範囲の用量を増加させることに比例して増加する。いくつかの実施形態では、化合物の蓄積は、化合物が週１回投与されたときに定常状態で約１．１倍〜約５、約１．２５〜約４．０倍、約１．５〜約３．５倍、約２〜約３倍である。いくつかの実施形態では、毎週投与した場合には化合物は蓄積しない。
【０１８１】
また、本発明は、１種以上のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを含む、線維性癌又は癌関連線維症を治療するためのキットを提供する。いくつかの実施形態では、キットは、１種以上のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストと共同投与される、ここに記載される抗癌治療剤を含むことができる。ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニスト及び抗癌治療薬は、共同投与されるように処方できる。キットの活性薬剤は、別々に又は組み合わせ製剤で投与できる。活性薬剤は、同時に又は異なる投与計画で投与できる。上記のいずれかの所定の実施形態では、ＳＡＰアゴニストは組換えヒトＳＡＰを含む。
【０１８２】
医薬製剤及び処方物
特定の実施形態では、ここに記載の方法は、被験体に治療剤として本発明の少なくとも１種のＳＡＰアゴニスト（例えば、変異ＳＡＰポリペプチド）を投与することを含む。本発明の治療剤は、１種以上の生理学的に許容されるキャリア又は賦形剤を使用して従来の方法で処方できる。例えば、治療剤並びにそれらの生理学的に許容される塩及び溶媒和物は、例えば静脈内注入（ＩＶ）、注射（例えばＳｕｂＱ、ＩＭ、ＩＰ）、吸入若しくは注入（口又は鼻のいずれかを通して）又は経口、口腔、舌下、経皮、経鼻、非経口又は直腸投与による投与のために処方できる。所定の実施形態では、治療剤は、標的細胞が存在する部位に、すなわち、特定の組織、器官、又は体液（例えば、血液、脳脊髄液、腫瘤など）中に局所的に投与できる。
【０１８３】
さらに、本発明は、本発明の任意のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストの、ここに記載されるような患者における疾患又は状態の治療又は予防のための医薬の製造における使用、例えば、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストの、ここに記載の疾患又は状態の治療のための医薬の製造における使用を提供する。いくつかの態様では、本発明のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを使用して、ここに記載の疾患又は状態を治療又は予防する際の使用のための医薬製剤を製造することができる。
【０１８４】
治療剤は、全身及び局所又は局所化投与を含めた様々な投与様式のために処方できる。一般にＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  Ｍｅａｄｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡに技術及び処方物を見出すことができる。非経口投与については、筋肉内、静脈内、腹腔内及び皮下を含めて注射が好ましい。注射については、化合物を液体溶液中、好ましくはハンクス液又はリンゲル液などの生理学的に適合性の緩衝液中で処方できる。さらに、化合物は、固体形態で処方でき、かつ、使用直前に再溶解又は懸濁できる。また、凍結乾燥形態も含まれる。いくつかの実施形態では、治療剤は、当業者に知られている様々な方法によって細胞に投与でき、例えば、リポソームへの封入、イオン導入又は他のビヒクルへの取り込み、例えばヒドロゲル、シクロデキストリン、生分解性ナノカプセル、及び生体接着性ミクロスフェアなどが挙げられるが、これらに限定されない。
【０１８５】
経口投与について、医薬組成物は、例えば、結合剤（例えば、アルファ化トウモロコシデンプン、ポリビニルピロリドン又はヒドロキシプロピルメチルセルロース）；充填剤（例えば、ラクトース、微結晶性セルロース又はリン酸水素カルシウム）；滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク又はシリカ）；崩壊剤（例えば、バレイショデンプン又はグリコール酸ナトリウムデンプン）；又は湿潤剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウム）といった薬学的に許容される賦形剤により従来の手段によって調製された錠剤、トローチ、又はカプセルの形態をとることができる。錠剤は、当技術分野において周知の方法によりコーティングできる。経口投与用の液体製剤は、例えば溶液、シロップ又は懸濁液の形態を取ることができ、又はこれらのものは使用前に水又は他の適切なビヒクルで構成するための乾燥製品として提供できる。このような液体製剤は、懸濁化剤（例えば、ソルビトールシロップ、セルロース誘導体又は水素化食用脂）；乳化剤（例えば、レシチン又はアカシア）；非水性ビヒクル（例えば、アーモンド油、油性エステル、エチルアルコール又は分画植物油）；及び防腐剤（例えば、メチル又はプロピル−ｐ−ヒドロキシベンゾエート又はソルビン酸）といった薬学的に許容される添加剤を用いた従来の手段によって調製できる。また、製剤は、適宜緩衝塩、香料、着色剤及び甘味剤を含むこともできる。経口投与用製剤を適切に処方して活性化合物の制御放出を与えることができる。
【０１８６】
吸入による投与（例えば肺送達）について、治療剤は、好都合には、好適な噴射剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素又は他の適切なガスを用いた加圧パック又はネブライザーからのエアロゾルスプレー提示の形態で送達できる。加圧エアロゾルの場合には、用量単位は、計量された量を送達するためのバルブを設けることによって決定できる。吸入器又は注入器で使用するための例えばゼラチンのカプセル及びカートリッジは、化合物とラクトースやデンプンなどの好適な粉末基との粉末混合物を含有させて処方できる。
【０１８７】
本発明の方法では、医薬化合物は、ガス注入、粉末及びエアロゾル製剤を含めた鼻腔内又は気管支内経路によっても投与できる（ステロイド吸入剤の例については、Ｒｏｈａｔａｇｉ（１９９５）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３５：１１８７−１１９３；Ｔｊｗａ（１９９５）Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ  Ａｓｔｈｍａ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．７５：１０７−１１１を参照されたい）。例えば、エアロゾル製剤を、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素などの許容される加圧噴射剤に入れることができる。また、これらのものは、ネブライザー又はアトマイザーなどの非加圧製剤用の医薬としても処方できる。典型的には、このような投与は、薬理学的に許容される水性緩衝液である。
【０１８８】
ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストの呼吸送達（例えば、鼻腔内、吸入など）に適した医薬組成物は、固体又は液体の形態で調製できる。
【０１８９】
本発明のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、注射、例えばボーラス注射又は連続注入による非経口投与のために処方できる。注射用処方物は、単位剤形、例えば防腐剤を添加したアンプル又は複数用量容器で提供できる。組成物は、油性又は水性ビヒクルへの懸濁液、溶液又はエマルジョンのような形態をとることができ、かつ、懸濁化剤、安定化剤及び／又は分散剤などの処方剤を含有することができる。あるいは、活性成分は、使用前に適切なビヒクル、例えば発熱物質を含まない滅菌水で構成するための粉末形態であることができる。
【０１９０】
さらに、本発明のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、デポー製剤としても処方できる。このような長時間作用型製剤は、移植（例えば、皮下若しくは筋肉内）又は筋肉内注射によって投与できる。したがって、例えば、治療剤は、適切な重合体又は疎水性材料（例えば許容される油へのエマルジョンとして）又はイオン交換樹脂と共に処方できる、あるいは難溶性誘導体として、例えば、難溶性塩として処方できる。また、放出制御処方物としてはパッチも挙げられる。
【０１９１】
所定の実施形態では、ここに記載の化合物は、中枢神経系（ＣＮＳ）への送達のために処方できる（Ｂｅｇｌｅｙ，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ＆  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ  １０４：２９−４５  （２００４）で再検討）。ＣＮＳへの薬物送達のための従来の方法としては、脳神経外科戦略（例えば、脳内注射又は脳室内注入）；薬剤の分子操作（例えば、血液脳関門の内因性輸送経路の一つを利用する試みにおいて自身が血液脳関門を横断することができない薬剤と組み合わせた、内皮細胞表面分子に対する親和性を有する輸送ペプチドを含むキメラ融合タンパク質の産生）；薬剤の脂溶性を増加させるように設計された薬理学的戦略（例えば、脂質又はコレステロールキャリアに対する水溶性薬剤の結合）；及び高浸透圧破壊によるＢＢＢの完全性の一時的な破壊（マンニトール溶液の頸動脈への注入又はアンジオテンシンペプチドなどの生物学的に活性な薬剤の使用により生じる）が挙げられる。
【０１９２】
所定の実施形態では、本発明のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、一般に局所薬物投与に適した局所用キャリアを含有し、かつ、当該技術分野において知られている任意の材料を含む局所用処方物に取り入れられる。局所用キャリアは、例えば軟膏、ローション、クリーム、マイクロエマルジョン、ゲル、油、溶液などの所望の形態の組成物を与えるように選択でき、かつ、天然又は合成起源の材料から構成できる。選択されたキャリアは、局所用処方物の活性剤又は他の成分に悪影響を及ぼさないことが好ましい。ここで、使用に適した局所用キャリアの例としては、水、アルコール及び他の非毒性有機溶媒、グリセリン、鉱油、シリコーン、ワセリン、ラノリン、脂肪酸、植物油、パラベン、ワックスなどが挙げられる。
【０１９３】
医薬組成物（化粧品製剤を含む）は、ここに記載のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストの１種以上を約０．００００１〜１００％、例えば０．００１〜１０重量％又は０．１重量％〜５重量％含むことができる。所定の局所処方物では、活性剤は、処方物の約０．２５重量％〜７５重量％の範囲、好ましくは処方物の約０．２５重量％〜３０重量％の範囲、より好ましくは処方物の約０．５重量％〜１５重量％の範囲、最も好ましくは処方物の約１．０重量％〜１０重量％の範囲の量で存在する。
【０１９４】
眼の状態は、例えば、治療剤の全身、局所、眼内注射によって又は治療剤を放出する徐放性装置の挿入によって治療又は予防できる。本発明のＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、化合物が眼の角膜及び内部領域、例えば前房、結膜、房、硝子体、房水、硝子体液、角膜、虹彩／毛様体、水晶体、脈絡膜／網膜及び強膜に浸透するのに十分な時間にわたって化合物が眼表面と接触した状態に保持されるように薬学的に許容される眼科用ビヒクルで送達できる。薬学的に許容される眼科用ビヒクルは、例えば、軟膏、植物油又は封入材料とすることができる。あるいは、化合物は、硝子体液及び房水に直接注射できる。さらなる変形例では、化合物は、眼の治療のために、例えば静脈内注入又は注射により全身的に投与できる。
【０１９５】
ここに記載の治療剤は、当該技術分野における方法に従って無酸素環境で保存できる。
【０１９６】
典型的な組成物は、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストを１種以上の薬学的に許容されるキャリア及び任意に他の治療成分と共に含む。キャリアは、組成物の他の成分と相溶性があり、かつ、被験体において許容できない有害な作用を誘発しないという意味で「薬学的に許容される」ものでなければならない。このようなキャリアは、本明細書に記載されており又はそうでなければ薬理学の当業者に周知である。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、発熱物質を含まず、かつ、ヒト患者への投与に適している。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、刺激性がなく、かつ、ヒト患者への投与に適している。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、アレルゲンフリーであり、かつ、ヒト患者への投与に適している。組成物は、薬学の分野において周知の方法のいずれかによって調製できる。
【０１９７】
いくつかの実施形態では、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、経時放出処方物、例えば徐放性重合体を含む組成物で投与される。ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストは、急速な放出から保護するキャリアと共に調製できる。例としては、制御放出ビヒクル、例えば重合体、マイクロカプセル化送達システム又は生体接着性ゲルが挙げられる。あるいは、ＳＡＰポリペプチド又はＳＡＰアゴニストの長期送達は、吸収を遅延させる組成物薬剤中に、例えばモノステアリン酸アルミニウムヒドロゲル及びゼラチンを含ませることによって達成できる。
【０１９８】
核酸化合物を送達するための方法は、当該技術分野において知られている（Ａｋｈｔａｒ外，１９９２，Ｔｒｅｎｄｓ  Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏ．，２，１３９；及びＤｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ  ｆｏｒ  Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ  Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ａｋｈｔａｒ著，１９９５；Ｓｕｌｌｉｖａｎ外，ＰＣＴ公開第ＷＯ９４／０２５９５号）。これらのプロトコールは、事実上任意の核酸化合物の送達のために利用できる。核酸化合物は、当業者に知られている様々な方法、例えばリポソームへの封入、イオン導入又はヒドロゲル、シクロデキストリン、生分解性ナノカプセル及び生体接着性マイクロスフェアなどの他のビヒクルへの取り込みによって細胞に投与できる。あるいは、核酸／ビヒクルの組み合わせは、直接注入又は注入ポンプの使用によって局所的に送達される。他の送達経路としては、経口（錠剤又は丸剤の形態）及び／又は髄腔内送達が挙げられる（Ｇｏｌｄ，１９９７，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ，７６，１１５３−１１５８）。他のアプローチとしては、様々な輸送及びキャリア系の使用、例えば結合体及び生分解性重合体の使用が挙げられる。薬物送達戦略に関する包括的なレビューについては、Ｈｏ外，１９９９，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．，１，３３６−３４３及びＪａｉｎ，Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ：Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ａｎｄ  Ｃｏｍｍｅｒｃｉａｌ  Ｏｐｐｏｒｔｕｎｉｔｉｅｓ，Ｄｅｃｉｓｉｏｎ  Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ，１９９８及びＧｒｏｏｔｈｕｉｓ外，１９９７，Ｊ．ＮｅｕｒｏＶｉｒｏｌ．，３，３８７−４００を参照されたい。核酸送達及び投与のより詳細な説明は、Ｓｕｌｌｉｖａｎ外，前出、Ｄｒａｐｅｒ外，ＰＣＴ  ＷＯ９３／２３５６９、Ｂｅｉｇｅｌｍａｎ外，ＰＣＴパンフレット第ＷＯ９９／０５０９４号及びＫｌｉｍｕｋ外，ＰＣＴパンフレット第ＷＯ９９／０４８１９号に提供されている。
【０１９９】
次の実施例は、上記本発明を使用する方法をさらに完全に説明するのみならず、本発明の様々な態様を実施するための最良の形態を説明するのに役立つ。これらの実施例は、本発明の真の範囲を決して限定するものではなく、むしろ例示の目的で提示されると理解すべきである。
【実施例】
【０２００】
例１：α２，３シアル酸含有ＳＡＰ単独及びルキソリチニブとの組み合わせによる骨髄線維症の治療：１２週間での段階１の結果
組換えヒトＳＡＰ（この場合にはＰＲＭ−１５１として知られている組換えヒトＳＡＰ）を骨髄線維症（ＭＦ）患者に単独及びルキソリチニブ（ＲＵＸ）との組み合わせで投与して、骨髄線維症（ＢＭＦ）を治療する際の安全性及び有効性を評価した。中間−１、中間−２又はグレード≧２のＢＭＦの高リスクＭＦを有し、治療を受けていない又はＲＵＸの安定用量の患者がこの研究に適格であった。
【０２０１】
２０名の患者を、単剤療法として又は併用療法の一部としてＰＲＭ−１５１の投与に基づく４つのコホートの１つに割り当てた。コホート１：（ｉ）少なくとも２週間以内にＭＦの治療を受けておらず、（ｉｉ）１、３及び５日目に静脈内注入（〜１時間の注入）によって１０ｍｇ／ｋｇでのＳＡＰの初期負荷用量を投与し及び（ｉｉｉ）その後４週間ごとに静脈内注入（〜１時間の注入）により１０ｍｇ／ｋｇでのＳＡＰの用量を投与した患者。コホート２：（ｉ）少なくとも２週間以内にＭＦの治療を受けておらず、（ｉｉ）１、３及び５日目に静脈内注入（〜１時間の注入）による１０ｍｇ／ｋｇでのＳＡＰの初期負荷用量を投与し、及び（ｉｉｉ）その後静脈内注入（〜１時間の注入）により１０ｍｇ／ｋｇでの毎週ＳＡＰ用量を投与した患者。コホート３：（ｉ）少なくとも１２週間にわたるルキソリチニブの安定用量（例えば任意の用量の変更なしで少なくとも３ヶ月間にわたるルキソリチニブ）で、過去４週間の間に脾臓における改善なし、（ｉｉ）１、３及び５日目に静脈内注入（〜１時間点滴）によって１０ｍｇ／ｋｇでのＳＡＰ初期負荷用量を投与し、（ｉｉｉ）その後静脈内注入（〜１時間の注入）によって１０ｍｇ／ｋｇのＳＡＰの用量を毎週投与し、及び（ｉｖ）研究に入った時点での用量でＲＵＸを経口投与した患者。コホート４：（ｉ）少なくとも１２週間にわたるルキソリチニブの安定用量（例えば、任意の用量の変更なしで少なくとも３ヶ月間にわたるルキソリチニブ）で、過去４週間に脾臓における改善なし、（ｉｉ）１、３及び５日目に静脈内注入（〜１時間点滴）によって１０ｍｇ／ｋｇのＳＡＰ初期負荷用量を投与し、（ｉｉｉ）その後静脈内注入（〜１時間の注入）によって１０ｍｇ／ｋｇのＳＡＰ用量を４週間ごとに投与し、及び（ｉｖ）研究に入った時点での用量でＲＵＸを経口投与した患者。
【０２０２】
各コホートの患者を、ＢＭＦの改善並びに例えばＭＰＮ−ＳＡＦによって評価されるときの異常な血液細胞パラメータ、脾腫及び症状を含めた他のＭＦ関連合併症について監視した。特に、患者を、骨髄様化生を有する骨髄線維症における治療応答のための国際ワーキンググループコンセンサス基準に従って全応答率を監視した（Ｔｅｆｆｅｒｉ  Ａ，Ｃｅｒｖａｎｔｅｓ  Ｆ，Ｍｅｓａ  Ｒ外，Ｒｅｖｉｓｅｄ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｃｒｉｔｅｒｉａ  ｆｏｒ  ｍｙｅｌｏｆｉｂｒｏｓｉｓ：Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｗｏｒｋｉｎｇ  Ｇｒｏｕｐ  −Ｍｙｅｌｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  Ｎｅｏｐｌａｓｍｓ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ（ＩＷＧ−ＭＲＴ）  ａｎｄ  Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ＬｅｕｋｅｍｉａＮｅｔ（ＥＬＮ）  ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ  ｒｅｐｏｒｔ．Ｂｌｏｏｄ．２０１３；１２２：１３９５−１３９８）。また、患者を、有害事象の発生率、グレーディング骨髄線維症の欧州コンセンサスに従う骨髄線維症の変化（Ｔｈｉｅｌｅ  Ｊ，Ｋｖａｓｎｉｃｋａ  ＨＭ，Ｆａｃｃｈｅｔｔｉ  Ｆ外，Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ  ｏｎ  ｇｒａｄｉｎｇ  ｂｏｎｅ  ｍａｒｒｏｗ  ｆｉｂｒｏｓｉｓ  ａｎｄ  ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｅｌｌｕｌａｒｉｔｙ．  Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ  ２００５；９０：１１２８−１１３２．）、修正骨髄増殖性新生物症状査定フォーム（ＭＰＮ−ＳＡＦ）スコアの変化（Ｅｍａｎｕｅｌ外２０１２，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  ３０（３３）：４０９８−  ４１０３）、並びに例えば最大薬物濃度（Ｃｍａｘ）、最大濃度までの時間（Ｔｍａｘ）、曲線下面積（ＡＵＣ）、クリアランス及び分布容積を含めた薬物動態パラメータについて監視した。
【０２０３】
治療の２４週間後に、明確な治療関連骨髄抑制は無く、関連性にかかわらず≧２の被験者で生じるグレード≧２の有害事象を以下の表１にまとめる。グレードの下の各欄に示された数字は、有害事象が報告された患者の数を示す。空白のセルは、有害事象がそのコホートにおける被験者のいずれにおいても観察されなかったことを示す。
【０２０４】
【表１】
2020059752.tif 000002
【０２０５】
骨髄生検を、ベースライン及び治療の３ヶ月後に得、そして検討した。ＢＭＦの改善が試験した２７名のうちの５名の被験者で観察された。具体的には、ＳＡＰによる治療を毎週受けた１名の患者（コホート２の患者）は、治療の１２週間後にグレード３からグレード２に改善することが観察され、ＳＡＰによる治療を４週間ごとに受けた１名の患者（コホート１の患者）は、治療の１２週間後にグレード２からグレード０に改善することが観察され、１１回の前骨髄生検でグレード３の線維化を示す、ルキソリチニブに加えてＳＡＰによる治療を４週間毎に受けた１名の患者（コホート４の患者）は、１２週目にグレード３からグレード１及び２４週目にグレード２に改善することが観察され、ルキソリチニブに加えて４週間ごとにＳＡＰによる治療を受けた１名の患者（コホート４の患者）は、１２週目にグレード３からグレード２に改善し及び２４週目にグレード２からグレード１に改善することが観察された。したがって、ＭＦ患者はＳＡＰ単独及びＲＵＸとの組み合わせの両方に対する良好な忍容性を示す。このデータは、組換えヒトＳＡＰの単剤療法及びＲＵＸとの同時治療の両方としての投与を使用してＭＦ患者におけるＢＭＦを改善することができることをさらに示す。以下で詳細に説明するように、ＢＭＦにおけるこれらの改善は、さらなる治療期間にわたるデータのさらなる分析で裏付けられた。これらの結果は、ＭＦにおいて骨髄線維症を減少させる際にＳＡＰを使用することを支持するのみならず、線維症を減少させかつ他の線維性癌において正常な組織機能を回復する際にＳＡＰを使用するためのより一般的な支持も与える。
【０２０６】
併用療法が有効であったのみならず、追加の抗癌治療単独の利益が衰え始めた患者にとっても好適な場合がある。さらに、併用療法は、抗癌治療単独による治療を受けた患者が経験する場合の多い副作用のいくつかを改善した。この場合には、治療レジメンに対するＳＡＰ添加前にルキソリチニブ（ヤヌスキナーゼ阻害剤）単独の治療を受けた患者について、本発明者は、ＳＡＰの添加前の患者が経験した副作用と比較して（例えば、ヤヌスキナーゼ阻害剤単独による治療と比較して）ヘモグロビンレベル及び血小板数の増加によって評価されるときの貧血及び血小板減少症の改善を観察した。代表的なデータを例３に示す。また、本発明者は、ルキソリチニブ単独での状態と比較して、ＳＡＰ及びルキソリチニブについて患者における症状スコア及び脾臓の大きさの改善を観察した。これらの結果は、線維性癌のための単剤療法又は併用療法としてのＳＡＰの有効性のみならず、ＳＡＰを使用して他の治療剤の治療範囲及び患者集団を拡大し、利用可能な治療が失敗したか不十分である患者のための治療モダリティ及び患者亜集団を与え、そして利用可能な治療法の安全性プロファイルを改善すると共に、それ自体が治療効果を有することを実証するものである。
【０２０７】
例２：ＰＲＭ−１５１単独及びルキソリチニブとの組み合わせによる骨髄線維症の治療：２４週目でのステージ１の結果
例１で上記した研究の４つの治療群に登録された２７名の患者の人口統計データを以下の表２にまとめる。研究に参加した患者は、ダイナミック国際予後スコアリングシステム（ＤＩＰＳＳ）に従って中間−１、中間−２又は高リスクＭＦとして分類される原発性骨髄線維症（ＰＭＦ）、真性多血症後骨髄線維症（ＰＶ後ＭＦ）又は本態性血小板血症後骨髄線維症（ＥＴ後ＭＦ）を有する者を包含した。２７名の患者のうち１５名は、現在の研究の前にＪＡＫ阻害剤による治療を受けていた。この研究に登録しかつ治療を開始した２７名の患者のうち、１８名の患者が２４週を終え、評価は２４週間のマークに達していなかった３名の患者について継続した。患者コホートは上記のとおりである。
【０２０８】
【表２】
2020059752.tif 000003
【０２０９】
脾臓サイズ、ＭＰＮ−ＳＡＦ及びＣＢＣの評価を含めた臨床反応の評価を４週間ごとに実施した。ＢＭ生検を、ベースライン、１２週及び２４週目に実施した。この研究の２４週目に観察されたＩＷＧ−ＭＲＴの症状及び骨髄応答を以下の表３にまとめる。１以上のＩＷＧ−ＭＲＴ症状応答が４つの治療群のそれぞれで生じ、合計５名がこの２４週間分析日時でのＩＷＧ−ＭＲＴ症状応答を確認した。本発明者は、ＩＷＧ−ＭＲＴを確認したときの応答をスコアするのに必要な応答の大きさが非常に高く（症状スコアの５０％の減少が少なくとも１２週間持続する）、６名の追加の患者が意味のある１以上のパラメータの改善を達成したが、この特定の閾値を達成しなかったことに注目する。この実験で設定した高閾値にもかかわらず、応答速度は、他の癌治療について達成されたものと一致しており、かつ、患者の臨床的に意味のある割合にわたって治療効果を示す。また、評価した患者の全ては、治療時点で有意な疾患を有しており、また全て（ただし２名をのぞく）は少なくとも１回の前治療を受け、かつ、それに失敗していた。この状況において、達成された応答性のレベルは特に注目に値する。
【０２１０】
５名の患者では、骨髄線維症における≧１グレードの減少が観察された。１以上の骨髄応答、すなわち、骨髄線維症における少なくとも１グレードの減少が４つの治療群外の３名で観察された。例えば、２つの骨髄応答がそれぞれ４週間毎に組換えヒトＳＡＰによる治療を受けた群（コホート１）及びルキソリチニブに加えて４週間毎に組換えヒトＳＡＰによる治療を受けた群（コホート４）に見られた。脾臓体積の≧２０％の減少が５名の患者において観察され、組換えヒトＳＡＰによる治療を毎週受けた群（コホート２）において１名について５０％の減少が８週間続いた。
【０２１１】
【表３】
2020059752.tif 000004
ステージ１：２７名の患者；ステージ２への移行のための基準＝≧１応答
【０２１２】
図１は、Ｃ６Ｄ２９（サイクル６、２９日目）又はその後に触知可能な脾臓を有する被験者における脾臓サイズの変化率を示す。評価された患者のほとんど（全４つの治療群からの１３人の患者のうち１０名）は、ベースラインと比較して、脾臓サイズの減少を示した。脾臓サイズの測定可能な減少を示した１０名の患者のうち、２名の患者は、ｒｈＳＡＰによる治療を毎週受けた群（コホート２）からのものであり、３名の患者は、ｒｈＳＡＰによる治療を４週間毎に受けた群（コホート１）からのものであり、１名の患者はｒｈＳＡＰとルキソリチニブとの組み合わせによる治療を毎週受けた群（コホート３）からのものであり、４名の患者は、ｒｈＳＡＰとルキソリチニブとの組み合わせによる治療を４週間ごとに受けた群（コホート４）からのものであった。コホート３及び４の患者は、研究前の少なくとも１２週間にわたってルキソリチニブの安定用量（例えば、用量の変更なしに少なくとも３ヶ月間にわたるルキソリチニブ）であり、そしてＳＡＰ治療の開始前の最後の４週間前において脾臓サイズの改善を示さなくなった。したがって、コホート３及び４における応答性の患者（１０１〜０１２、１０３〜００１、１０１〜０１０、１０１〜００２及び１０３〜００４）は、以前にすでに前治療（ルキソリチニブ）での最大応答を達成していたものの、それでもルキソリチニブと組み合わせて使用されるＳＡＰ療法による治療の際に症状のさらなる改善を示したことに留意すべきである。実際に、患者１０１〜０１２、１０３〜００１及び１０１〜０１０は、併用療法で脾臓サイズの≧２０％の改善を経験した。
【０２１３】
図２は、Ｃ６Ｄ２９（サイクル６、２９日目）後、研究の終了時又はその後の被験者におけるＭＰＮ−ＳＡＦ総症状スコアの変化率（ＴＳＳ）を示す。評価された患者の大多数（全４つの治療群からの１８名の患者のうち１０名）は、ベースラインと比較してＴＳＳの減少を示し、総症状スコアにおける≧５０％の減少がサイクル６の２９日目にこれらの患者の５名について観察された。２つ追加の被験者は≧８週間続く症状スコアの５０％の減少があったが、サイクル６の２９日には５０％未満であった。測定可能な症状の応答を示した１０名の患者のうち、１名の患者はｒｈＳＡＰによる治療を毎週受けた群からのものであり（コホート２）、４名の患者は、ｒｈＳＡＰによる治療を４週間毎に受けた群からのものであり（コホート１）、３名の患者は、ｒｈＳＡＰとルキソリチニブとの組み合わせによる治療を毎週受けた群からのものであり（コホート３）、２名の患者は、ｒｈＳＡＰとルキソリチニブとの組み合わせによる治療を４週間毎に受けた群からのものであった（コホート４）。上記のように、コホート３及び４（１０８〜００２、１０１〜０１１、１０８〜００１、１０１〜０１０及び１０３〜００１）における応答患者は、以前にすでに前治療（ルキソリチニブ）について最大の応答を達成していたが、それにもかかわらず、ルキソリチニブに加えてＳＡＰで治療すると症状のさらなる改善を示した。実際、コホート３及び４からの患者１０８〜００２及び１０１〜０１０は、それぞれ、ＴＳＳにおいて≧５０％の改善を示した患者群内にあった。
【０２１４】
ヘモグロビン及び血小板レベルの改善、赤血球輸血の減少及び骨髄線維症の減少が４つ治療群全てにおける多数の患者について観察された。骨髄線維症の≧１グレード減少が１２若しくは２４週目又はその両方で５名の患者において観察された。
【０２１５】
２４週間後の結果の分析から、ｒｈＳＡＰの単独又は別の抗癌剤との組み合わせによる治療効果が非常に良好な安全性プロファイルと共に示される。これらの結果は、毎週及び４週間の投与計画で、骨髄線維症、ヘモグロビン、血小板、症状及び脾臓体積を含めた臨床関連基準にわたる改善により骨髄線維症患者における生物学的活性を実証するものである。評価された患者における疾患の重症度にもかかわらず、研究の初期段階であっても、また確認応答を評価するための高閾値を使用した場合であっても正の応答が４治療群全てで観察された。ｒｈＳＡＰによる治療は、他の治療法（例えば、治療関連骨髄抑制）で一般に観察されるように、臨床的に有意な骨髄抑制の証拠を生じることなく又はＳＡＰ療法の結果として安全で、かつ、単独及びルキソリチニブとの組み合わせでよく忍容した。認められた応答率は、他の癌治療剤で認められる効果と一致していた。１種以上のＪＡＫ阻害剤で治療した後に進行した又はルキソリチニブの安定用量によるさらなる利益が得られなかった患者において改善が認められた。ＳＡＰを受けた患者における線維症の病態の逆転は、このタンパク質の中枢機構を実証し、かつ、他の線維性癌にわたるＳＡＰアゴニストの使用を裏付けるものである。
【０２１６】
さらに、３の骨髄応答がｒｈＳＡＰ療法の３６週目に評価された１０名の追加の患者において観察され、また、１２又は２４週間段階で治療に応答性であることが確認されたこれらの患者は、治療の３６週間後に応答し続けた。これは、長期ｒｈＳＡＰ単剤又は別の抗癌剤との併用療法は、永続的な応答を生じさせる（例えば、有益な効果を付与し続ける）という追加の実証を与える。さらに、より長い患者が治療及び観察され、より多くの陽性応答が認められる：治療の２４週間後の観察に基づいて推定されるよりもさらに高い応答率を示す。
【０２１７】
例３：代表的な個々の患者データ
ここで、１名の応答性患者からの応答データの代表例を示す。患者１０１〜００５について２４週間にわたるｒｈＳＡＰによる治療に対するヘモグロビン、血小板、ＭＰＮ−ＳＡＦ  ＴＳＳ及び脾臓応答の傾向を図３Ａ〜Ｄに示す。患者１０１〜００５をＳＡＰにより４週間毎に治療した（コホート１）。患者の特性を以下の表４にまとめる。
【０２１８】
【表４】
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【０２１９】
図３から分かるように、患者１０１〜００５は、治療の過程でヘモグロビン及び血小板のレベルの改善、ＭＰＮ−ＳＡＦ  ＴＳＳの減少及び脾臓サイズの減少を示した。さらに、患者１０１〜００５は、１２週目でグレード２からグレード０への骨髄線維症の減少を示した（図４）。
【０２２０】
例４：代表的な骨髄線維症のデータ
骨髄線維症の≧１グレードの減少が５名の患者において観察された。患者１０１〜００５及び１０８〜００３からの代表的なレチクリン染色データをそれぞれ図４Ａ及び図４Ｂに示す。患者１０１〜００５及び１０８〜００３は、それぞれ、コホート１及び４に属していた。骨髄生検をベースライン時並びに治療の３ヶ月及び６ヶ月後に得た。ベースライン時及び治療の３ヶ月後に患者１０１〜００５において骨髄線維症を評価するためのレチクリン染色の結果を図４Ａに示す。図４Ａから分かるように、３ヶ月目でのグレード２からグレード０への骨髄線維症の減少が患者１０１〜００５において観察された。ベースライン時、治療の３ヶ月後及び治療の６ヶ月後に患者１０８〜００３において骨髄線維症を評価するためレチクリン染色の結果を図４Ｂに示す。図４Ｂから分かるように、３ヶ月でのグレード３からのグレード２への骨髄線維症の減少及び６ヶ月でのグレード２からグレード１へのさらなる減少が患者１０８〜００３において観察された。線維症は、修復又は反応過程での器官又は線維における過剰な線維性結合組織の形成である。線維症の主成分はコラーゲンである。コラーゲンは、標準的なヘマトキシリン及びエオシン病理学においてピンク色のアモルファス組織として見える。レチクリン染色は、３型コラーゲンの繊維を黒色ストランドとして示し、これを使用して病理学者が全ての器官における線維症の存在を同定する。レチクリン染色は、骨髄線維症の等級のコア要素である（Ｔｈｉｅｌｅ外，Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ  ２００５；９０：１１２８−１１３２。いくつかのレチクリン染色は、正常の骨髄、特に血管壁中に存在する。
【０２２１】
観察された骨髄線維症の反転（例えば減少）は、臓器機能、この場合には骨髄機能の回復及び／又は改善の指標である。骨髄機能の回復は、これ及び他の患者の全血球計算値（ＣＢＣ）の改善によりさらに証明される。
【０２２２】
例５：組換えヒトＳＡＰ（ｒｈＳＡＰ）及びルキソリチニブ併用療法による骨髄線維症の治療
ＰＭＦ、ＰＶ後ＭＦ又はＥＴ後−ＭＦを含めた骨髄線維症を有すると診断され、かつ、脾臓の改善なしで少なくとも３ヶ月間にわたるルキソリチニブの安定用量の患者は、ＣＨＯ細胞において組換えにより発現されたヒトα２，３シアル酸含有ＳＡＰ（ＣＨＯ細胞において発現するｒｈＳＡＰ；少なくとも１つのα２，３結合を含み、かつ、ヒト血清に由来するＳＡＰのグリコシル化の点で異なるＳＡＰ）を、ルキソリチニブと組み合わせて受ける。有効性は、応答としての少なくとも１グレードによる骨髄線維症の改善に伴う安定な疾患を含むように修正された国際ワーキンググループ（ＩＷＧ）基準に従って分類される全体的な応答率（ＯＲＲ）の評価によって評価される。治療に応答する被験者は、利益がある限りそれを受け続ける。
【０２２３】
例６：組換えヒトＳＡＰ（ｒｈＳＡＰ）による骨髄線維症の治療
ＰＭＦ、ＰＶ後ＭＦ又はＥＴ後−ＭＦを含めた骨髄線維症を有すると診断された患者は、ＣＨＯ細胞において組換えにより発現されたヒトα２，３シアル酸含有ＳＡＰ（ＣＨＯ細胞において発現するｒｈＳＡＰ；少なくとも１つのα２，３結合を含み、かつ、ヒト血清に由来するＳＡＰのグリコシル化の点で異なるＳＡＰ）を受ける。有効性は、応答としての少なくとも１グレードによる骨髄線維症の改善に伴う安定な疾患を含むように修正された国際ワーキンググループ（ＩＷＧ）基準に従って分類される全体的な応答率（ＯＲＲ）の評価によって評価される。治療に応答する被験者は、利益がある限りそれを受け続ける。
【０２２４】
参照による援用
ここで言及された全ての刊行物及び特許は、それぞれの刊行物又は特許が参照によって援用されるように具体的かつ個別に示されたかのように、その全体が参考として援用される。主題の特定の実施形態を議論してきたが、上記明細書は例示であって限定ではない。当業者であれば、本明細書及び特許請求の範囲を検討することにより多数の変形が明らかであろう。本発明の全範囲は、特許請求の範囲を均等の全範囲と共に、及び明細書をこのような変形と共に参照することによって決定すべきである。
【０２２５】
配列表
配列番号１：ヒト血清アミロイドタンパク質Ｐ
ＨＴＤＬＳＧＫＶＦＶＦＰＲＥＳＶＴＤＨＶＮＬＩＴＰＬＥＫＰＬＱＮＦＴＬＣＦＲＡＹＳＤＬＳＲＡＹＳＬＦＳＹＮＴＱＧＲＤＮＥＬＬＶＹＫＥＲＶＧＥＹＳＬＹＩＧＲＨＫＶＴＳＫＶＩＥＫＦＰＡＰＶＨＩＣＶＳＷＥＳＳＳＧＩＡＥＦＷＩＮＧＴＰＬＶＫＫＧＬＲＱＧＹＦＶＥＡＱＰＫＩＶＬＧＱＥＱＤＳＹＧＧＫＦＤＲＳＱＳＦＶＧＥＩＧＤＬＹＭＷＤＳＶＬＰＰＥＮＩＬＳＡＹＱＧＴＰＬＰＡＮＩＬＤＷＱＡＬＮＹＥＩＲＧＹＶＩＩＫＰＬＶＷＶ
【０２２６】
配列番号２：Ｇａｌｌｕｓ ｇａｌｌｕｓ血清アミロイドタンパク質Ｐ
ＱＥＤＬＹＲＫＶＦＶＦＲＥＤＰＳＤＡＹＶＬＬＱＶＱＬＥＲＰＬＬＮＦＴＶＣＬＲＳＹＴＤＬＴＲＰＨＳＬＦＳＹＡＴＫＡＱＤＮＥＩＬＬＦＫＰＫＰＧＥＹＲＦＹＶＧＧＫＹＶＴＦＲＶＰＥＮＲＧＥＷＥＨＶＣＡＳＷＥＳＧＳＧＩＡＥＦＷＬＮＧＲＰＷＰＲＫＧＬＱＫＧＹＥＶＧＮＥＡＶＶＭＬＧＱＥＱＤＡＹＧＧＧＦＤＶＹＮＳＦＴＧＥＭＡＤＶＨＬＷＤＡＧＬＳＰＤＫＭＲＳＡＹＬＡＬＲＬＰＰＡＰＬＡＷＧＲＬＲＹＥＡＫＧＤＶＶＶＫＰＲＬＲＥＡＬＧＡ
【０２２７】
配列番号３：Ｂｏｓ ｔａｕｒｕｓ血清アミロイドタンパク質Ｐ
ＱＴＤＬＲＧＫＶＦＶＦＰＲＥＳＳＴＤＨＶＴＬＩＴＫＬＥＫＰＬＫＮＬＴＬＣＬＲＡＹＳＤＬＳＲＧＹＳＬＦＳＹＮＩＨＳＫＤＮＥＬＬＶＦＫＮＧＩＧＥＹＳＬＹＩＧＫＴＫＶＴＶＲＡＴＥＫＦＰＳＰＶＨＩＣＴＳＷＥＳＳＴＧＩＡＥＦＷＩＮＧＫＰＬＶＫＲＧＬＫＱＧＹＡＶＧＡＨＰＫＩＶＬＧＱＥＱＤＳＹＧＧＧＦＤＫＮＱＳＦＭＧＥＩＧＤＬＹＭＷＤＳＶＬＳＰＥＥＩＬＬＶＹＱＧＳＳＳＩＳＰＴＩＬＤＷＱＡＬＫＹＥＩＫＧＹＶＩＶＫＰＭＶＷＧ    
【０２２８】
配列番号４：Ｃｒｉｃｅｔｕｌｕｓ ｍｉｇｒａｔｏｒｉｕｓ血清アミロイドタンパク質Ｐ
ＱＴＤＬＴＧＫＶＦＶＦＰＲＥＳＥＳＤＹＶＫＬＩＰＲＬＥＫＰＬＥＮＦＴＬＣＦＲＴＹＴＤＬＳＲＰＨＳＬＦＳＹＮＴＫＮＫＤＮＥＬＬＩＹＫＥＲＭＧＥＹＧＬＹＩＥＮＶＧＡＩＶＲＧＶＥＥＦＡＳＰＶＨＦＣＴＳＷＥＳＳＳＧＩＡＤＦＷＶＮＧＩＰＷＶＫＫＧＬＫＫＧＹＴＶＫＴＱＰＳＩＩＬＧＱＥＱＤＮＹＧＧＧＦＤＫＳＱＳＦＶＧＥＭＧＤＬＮＭＷＤＳＶＬＴＰＥＥＩＫＳＶＹＥＧＳＷＬＥＰＮＩＬＤＷＲＡＬＮＹＥＭＳＧＹＡＶＩＲＰＲＶＷＨ
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【配列表】
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