(57)【要約】【課題】  ２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンの、比較的高収率の合成方法を提供する。【解決手段】  ２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンの合成方法であって、ａ）２−クロロ−６−置換プリンのアニオン体（ここで、２−クロロ−６−置換プリンの６位の置換基はアミノ基、及び、保護されたアミノ基から成る群から選ばれる）と、保護され、且つ、活性化された２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノースを反応させ、次に、ｂ）アンモニアと反応させて２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンを得ることを特徴とする合成方法。【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンの合成方法であって、
ａ）２−クロロ−６−置換プリンのアニオン体（ここで、２−クロロ−６−置換プリンの６位の置換基はアミノ基、及び、保護されたアミノ基から成る群から選ばれる）と、保護され、且つ、活性化された２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノースを反応させ、次に、
ｂ）アンモニアと反応させて２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンを得ることを特徴とする合成方法。
【請求項２】
２−クロロ−６−置換プリンの６位の置換基がアミノ基であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項３】
アニオン体がアルカリ金属の塩又は有機アミンの塩であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項４】
アニオン体がアルカリ金属の塩であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項５】
アルカリ金属がナトリウムであることを特徴とする請求項４に記載の方法。
【請求項６】
アニオン体が有機アミンの塩であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項７】
有機アミンの塩は１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデス−７−エンの塩であることを特徴とする請求項６に記載の方法。
【請求項８】
２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノースの３位及び５位の水酸基の保護基が、アシル基、エーテル基、及び、それらの組み合わせから成る基から選ばれ、且つ、２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノースのＣ−１の活性基がハロ基、アルキルスルフォニロキシ基、又は、アリールスルフォニル基から成る群から選ばれることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項９】
２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノースが２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−アラビノフラノシルブロマイドであることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
二極性の非プロトン性溶媒の存在下、２−クロロ−６−置換プリンと２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノースの反応が行なわれることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１１】
前記溶媒がアセトン、アセトニトリル、ジメチルホルムアミドジメチルスルホキシド、スルホラン、ジメチルアセトアミド及びエーテルから成る群から選ばれることを特徴とする請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
溶媒の存在下、ステップ（ｂ）の反応が行なわれることを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１３】
前記溶媒がアルコールであることを特徴とする請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
アンモニアがアルコール溶液として存在することを特徴とする請求項１に記載の方法。
【請求項１５】
アルコール溶液がメタノール又はエタノールの溶液であることを特徴とする請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンの合成方法であって、
ａ）２−クロロ−６−置換プリンのアニオン体（ここで、６位の置換基はアミノ基、又は、保護されたアミノ基である）と、保護され、且つ、活性化された２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノースを反応させ、その後、ｂ）塩基と反応させて、２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンを得ることを特徴とする合成方法。
【請求項１７】
前記塩基がアルカリ金属アルコキシドであることを特徴とする請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンの合成方法であって、
ａ）２−クロロ−６−アジドプリンのアニオン体と、保護され、且つ、活性化された２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノースを反応させ、ｂ）還元剤と反応させ、そして、（ｃ）塩基と反応させて２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンを得ることを特徴とする合成方法。
【請求項１９】
前記塩基がアンモニアであることを特徴とする請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記塩基がアルカリ金属のアルコキシドであることを特徴とする請求項１８に記載の方法。
【請求項２１】
２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−二保護−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン。
【請求項２２】
２−クロロ−６−アジド−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−二保護−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン。
【請求項２３】
２−クロロ−６−保護アミノ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−二保護−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン。  
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
・関連する適用への相互参照 
この出願は、２０００年２月１８日に申請された米国特許出願暫定番号６０／１８３，４２２の優先権申請日を主張する。
【０００２】
・連邦委託調査及び研究に関する主張
この発明は、国立癌研究所によって与えられた米国政府承諾番号Ｐ０１ＣＡ  ３４２００の支持のもとに成された。米国政府は本発明中の非商業的な権利を有する。 
【０００３】
本発明は、一般に様々な悪性腫瘍の治療において有用な、化学療法剤の合成方法に関する。より具体的には、この発明は、２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンの改良された合成方法であって、２−クロロ−６−置換−プリンを、保護され、且つ、活性化された２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノースと反応させ、その後、アンモニアのような適当な塩基と反応させ、２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンを得る方法に関する。本発明は、２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンを合成するのに使用される、 ２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−６−アルコキシ−９Ｈ−プリン類及び２−クロロ−６−置換−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−二保護−β−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン類のような新規中間体にも関する。
【背景技術】
【０００４】
クロファラビン［２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン］は、Ｐ３８８白血病を接種させたハツカネズミで細胞障害性を示した。非特許文献１に報告されたように、クロファラビンによりＰ３８８白血病を接種させたハツカネズミの寿命は見事に増加した。２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンは試験を行なった系のうち最も効果的な化合物だった。
さらに、この化合物はフルダラビンに比べてグリコシド結合のｉｎ  ｖｉｖｏでの開裂が減少することを示した。 
【０００５】
しかしながら、報告された２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンの合成方法は３−Ｏ−アセチル−５−Ｏ−ベンゾイル−２−デオキシ−２−フルオロ−アラビノフラノシルブロマイドを２，６−ジクロロプリンとのカップリングのために使用し、次に、アミノ化／脱保護のシーケンスを行なうものである。
(非特許文献２、及び、非特許文献１を参照。）
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙら、「 ９−β−Ｄ−アラビノフラノシルアデニンの２’−フルオロ−２−ハロ誘導体の合成及び生物活性」、Ｊｏｕｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１９９２年、第３５巻、第２号、ｐ．３９７−４０１
【非特許文献２】Ｍｏｎｔｏｇｏｍｅｒｙら、「９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）グアニン)：２’−Ｄ−デオキシグアノシンの代謝的に安定した細胞毒性類似体」、Ｊｏｕｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、１９８６年、第２９巻、第１１号、ｐ．２３８９−２３９２
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、報告されている２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンの合成方法は生成物の全収率が低く、具体的には約１３％の範囲に終わった。所望の９−β中間体の原料である、ヌクレオシドの混合物を生産する記述のカップリング反応は、注意深くクロマトグラフィーを行なっても３２％の収率でしか得られなかった。
この材料の直接アミノ化／脱保護化によって所望の２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンを得、さらに要求があれば塩基で処理を行なうことにより部分的にベンゾイル化された２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンを得る。
純粋な２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンは塩類及び残留ベンズアミドを除去するために数回再結晶を行なうことにより得られた。
【０００８】
そのような非効率的な反応では、２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンを工業的に生産するのは不可能であろう。従って、収率を増加させ及び／又は少ない工程数で行なえる２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンを合成する改良法が必要とされている。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の１つは、２−クロロ−６−置換プリンのアニオンと、保護され、且つ、活性化された２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノースを反応させ、２−クロロ−６−アルコキシルプリンヌクレオシドを得る工程を含む、２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンの、比較的高収率の合成方法を提供することである。その生成物は次にアルコキシドと反応させて、２−クロロ−６−アルコキシ−プリンヌクレオシドとする。その後、その化合物はアンモニアと反応させ、２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンを得る。
【００１０】
本発明のもう一つは、２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンの合成方法であって、２−クロロ−６−置換プリンを保護され、且つ、活性化された２−フルオロ−２−デオキシ−Ｄ−アラビノフルノースと反応させてプリンヌクレオチドを含む反応生成物を得、続いて、上記プリンヌクレオチドをアンモニアのような適当な塩基でと反応させ、２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン得る方法に関する。  
【００１１】
本発明は、さらに、２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンを合成するのに使用される新規中間体に関する。これらの中間体は２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ―β−Ｄ−アラビノフラノシル）−６−アルコキシ−９Ｈ−プリン類及び２−クロロ−６−置換−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−二置換−β−（Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン類を含み、そのうち６位の置換基はアミノ基、保護されたアミノ基、アジド基、そしてアルコキシ基から選択された群から選ばれる。
【００１２】
他の特徴と目的及び本発明の利点は下記の記述の解釈から明白になるだろう。 
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミンを高収率で得ることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】本発明の合成法を含む反応の１つの実施形態のスキーム図である。
【図２】本発明による別の合成法の代替実施形態のスキーム図である。
【図３】本発明による更に別の合成法の代替実施形態のスキーム図である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
図１の参照例は、本発明に記載の合成法のうちの１つを示す。 図１の中で示されるこの化学反応は、２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５）を３ステップで調製し、約４４％の全収率が得られる便利な工程を提供する。
【００１６】
最初のステップに関し、保護され、且つ、活性化された２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノース （２）を、２−クロロ−６−置換−プリン（１）と反応させ、９位が置換されたプリンヌクレオシド（３）を含む反応生成物を得る。
本発明の実施形態では、６位の置換基として好ましい基はハロゲンである。
【００１７】
アニオンの状態でこの反応スキームで用いられている２−クロロ−６−置換プリンとして好ましいのは、２，６−ジクロロプリンである。
好ましいアニオン状態の例は例えばアルカリ金属の塩類及び有機アミンの塩類等である。 アルカリ金属塩類としては例えばナトリウム塩類、カリウム塩類及びリチウム塩類等である。
金属塩類は、ＮａＨ、ＫＨ及びＬｉＨ等の金属水素化物、又は、ＮａＯＣＨ３とＫＯＣＨ３等のアルコキシドから得ることができる。
【００１８】
アミン塩類を形成するための有機塩基は、ＤＢＵ（１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデス−７−エン）、 ＤＢＮ（１，５−ジアザビシクロ［４．３．０］ノン−５−エン）、Ｄａｂｃｏ（１，４−ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン)、 及び、Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン等の強ヒンダードアミン基剤が含まれる。
【００１９】
アニオン状態はナトリウム塩であることが好ましい。所望のカップリング反応を達成するためにアニオン状態であることが必要である。
【００２０】
２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノースは、３位及び５位の水酸基の保護基及びＣ−１位に活性基を含んでいる。 
【００２１】
従来公知の水酸基の保護基は、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・ケミストリー（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ），ＭｃＯｍｉｅ  Ｅｄ，Ｐｌｅｎｔｕｍ  Ｐｒｅｓｓ，ニューヨーク（１９７３）の第３章、及び、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス（Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ），グリーン，Ｔ．，ジョン・ウィリー・アンド・サンズ，ニューヨーク（１９８１及び１９９９年）の第２章に記載されており、これらの開示は参照によって組み込まれる。水酸基に好適な保護基は、エステルを形成する基、炭酸エステル、アルキルエーテル、アリールエーテル、シリルエーテル及び炭酸エステル等である。
好適なエステルの例は、ホルミルエステル、アセチルエステル、置換アセチルエステル、プロピオニルエステル、ブチニルエステル、ピバロイルエステル、２−クロロアセチルエステル、ベンゾイルエステル、置換ベンゾイルエステル、フェノキシカルボニルエステル、メトキシアセチルエステル及びトルイルエステルである。
【００２２】
炭酸エステルの誘導体の例はフェノキシカルボニル、エトキシカルボニル、ブトキシカルボニル、ビニロキシカルボニル、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル及びベンジロキシカルボニルである。
【００２３】
アルキルエーテル及びアリールエーテルを形成している基の例はベンジル基、ｐ−クロロベンジル基、ジフェニルメチル基、トリフェニルメチル基、ｔ−ブチル基、メトキシメチル基、テトラヒドロピラニル基、アリル基、テトラヒドロチエニル基、２−メトキシエトキシメチル基である。
【００２４】
シリルエーテルを形成している基の例はトリアルキルシリル基、トリメチルシリル基、イソプロピルジアルキルシリル基、アルキルジイソプロピルシリル基、トリイソプロピルシリル基、ｔ−ブチルジアルキルシリル基及び１，１，３，３−テトライソプロピルジシロキサニル基である。
【００２５】
カーバメートの例はＮ−フェニルカーバメート及びＮ−イミダゾイルカーバメートである。 
【００２６】
所望であれば保護基の混合物を使用することができる。 例えば、２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノース （２）は、２つのアシル基、２つのエーテル基、又は、アシル基とエーテル基の組み合わせのいずれを有していてもよい。
【００２７】
炭水化物のＣ−１の活性基の例としては、Ｃｌ、Ｂｒ及びＦのようなハロゲン、アルキルスルフォニロキシ基、置換アルキルスルフォニロキシ基、アリールスルフォニロキシ基、又は、アリールスルフォニロキシ基等がある。
【００２８】
アルキル基の置換基は１から８の炭素原子を含んでいることが好ましく、より具体的には、メチル基、エチル基、及び、プロピル基のような炭素数１から４のアルキル基の置換基である。アリール基はフェニル基を含んでいる基が好ましい。
【００２９】
アルキルスルフォニロキシ基、及び、置換アルキルスルフォニロキシ基の例はメタンスルフォニロキシ基及び２−クロロエタンスルフォニロキシ基である。
【００３０】
アリールスルフォニロキシ基、及び、置換アリールスルフォニロキシ基の例はベンゼンスルフォニロキシ基、トルエンスルフォニロキシ基、及びｐ−ニトロベンゼンスルフォニロキシ基、及び、ｐ−ブロモベンゼンスルフォニロキシ基であるが、
最も好ましいのは、メタンスルフォニロキシ基である。 
【００３１】
好ましい保護基はベンゾイル基であり、また、好ましい活性基は臭素である。糖化合物（２）として使用してもよい特定の化合物は２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−ジ−O−ベンゾイル−α−Ｄ−アラビノフラノシルブロマイド（Ｃ．Ｈ．Ｔａｎｎら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．， １９８５、５０、３６４４−３６４７の方法等によって調製される）である。この開示は参照によって組込まれる。  
【００３２】
プリン及び活性化された炭水化物誘導体は、典型的にはほぼ等量、あるいはプリンの過剰の状態で使用され、より具体的にはプリンと活性化された炭水化物誘導体の比がおよそ１：１からおよそ３：１、好ましくはおよそ１：１からおよそ１．５：１、より好ましくは、およそ１：１からおよそ１．２：１で使用される。
【００３３】
工程のうちこのステップは典型的には０℃から１００℃、より具体的にはおよそ２０℃からおよそ７０℃、好ましくはおよそ２０℃からおよそ４０℃の温度で、且つ、常気圧で行なわれる。
しかしながら、所望であればより高圧及び低圧で行なうこともできる。工程のうちこのステップは典型的には完了まで約３時間から約２４５時間かかる。 
【００３４】
上述のプリン化合物（１）とアラビノフラノース糖（２）の反応は、溶媒の存在下で行なうことが好ましい。 そのような溶媒として及びジメトキシエタンのような、アセトン、アセトニトリル、ジメチルフォルムアミド、ジメチルスルホキシド、スルフォラン、ジメチルアセトアミド等の二極性の非プロトン性溶媒、及び、テトラヒドロフラン、ジオキサン、ジメトキシエタン等のエーテル類が使用できる。  
【００３５】
プリン（１）とアラビノフラノース糖（２）の反応が完結した時、反応混合物をろ過してもよいし、泡状体が得られるまで溶媒を蒸発させてもよい。また、泡状体は溶離剤として酢酸イソプロピル／ヘキサンあるいは他の適切な溶液を使用して、フラッシュシリカで生成してもよい。所望の９−β異性体を含んでいる画分は、寄せ集めて溶媒を蒸発させて残渣を得、その後、エタノールで結晶化して所望の９−置換プリンヌクレオシド（３）を得てもよい。
【００３６】
次のステップとして、９−置換プリンヌクレオシド（３）をアルコキシドと反応させて、対応する２−クロロ−６−アルコキシ−プリンヌクレオシド（４）を得る。アルコキシドは好ましくはアルカリ金属アルコキシドであり、そして最も好ましくはナトリウムメトキシドである。
【００３７】
工程中のこのステップは典型的には０℃から１００℃、より具体的には２０℃から４０℃の温度で、常気圧で行なわれる、もし望むならば、より高圧及びより低圧で行なうこともできる。工程中のこのステップは典型的には約３から約２４時間かけて完結させる。
【００３８】
さらに、工程中のこのステップは、好ましくは溶媒の存在下で行なわれ、より好ましい溶媒は反応中に使用されるアルコキシドに相当するアルコールである。
反応完結に際し、反応混合物をイオン交換樹脂で処理し、ろ過し、溶媒を蒸発させて残渣を得てもよい。この目的に有用であることがわかった工業上利用可能なイオン交換樹脂の１つは、Ｄｏｗｅｘ  ５０ＷＸ８−４００イオン交換樹脂である。
【００３９】
所望の６−アルコキシプリンヌクレオシド（４）は、残渣をヘキサンで数回粉砕し、続いて表面に浮かぶ液体のデカンテーションをすることによりこのステップで得られた残渣に由来するものでもよい。このようにして得られた残渣は、その後、再結晶してもよいし、再結晶の代わりの冷イソプロピルアルコール中でスラリー化して、６−アルコキシプリンヌクレオシド（４）を得てもよい。
【００４０】
最後に２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ―β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５）は、６−アルコキシプリンヌクレオシド（４）及びアンモニアを反応させることにより得てもよい。
【００４１】
工程中のこのステップは典型的には２０℃から１２０℃、より具体的には７０℃から１００℃の温度で、且つ、典型的には上記の温度で、密封した容器中で生成する圧力で行なわれる。工程中のこのステップは具体的には約１２から約２４時間かけて完結させる。
【００４２】
工程中のこのステップは、メタノール若しくはエタノールのようなアルコール系溶媒がある状態で、又は、溶媒がない状態で行なうことができる。
【００４３】
アンモニアは典型的には、メタノールあるいはエタノール (典型的には５℃で飽和したもの)のようなのアルコール中の溶液として存在する。 好ましい実施形態としては、この反応が８０℃（６５ｐｓｉ）でステンレス鋼噴射容器の中で行なわれる。 反応完結時に、溶媒を除去し、残渣を還流メタノールに溶解してもよく、また好ましくは熱濾過してもよい。冷却し、粗生成物である２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ―β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５）を濾過によって単離してもよい。高品質の２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ―β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５）を得るために、生成物をメタノールで再結晶してもよい。更に必要であれば、溶媒を蒸発させた画分の、メタノールによる再結晶化を行なって、残りの２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ―β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５）を得る。
【００４４】
図２への例は、２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ―β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５）を合成するための本発明の別の反応スキームを例示している。
【００４５】
初めに、保護され活性化された２−デオキシ−２−フルオロ−アラビノフラノース（２）を２−クロロ−６−置換プリン（１）のアニオン体と反応させ、９−置換プリンヌクレオシド（３）を含む反応生成物を得る。６位の好適な置換基の例としては、アミノ基、保護されたアミノ基、アジド基、及び、アルコキシ基のような基が挙げられるが、好ましくはアミノ基である。好適なアルコキシ基はメトキシ基及びエトキシ基である。
【００４６】
好適なアミノ基の保護基はアシル基、イミノ基、及び、カーバメート基である。 好適なアシル基はアセチル基、ベンゾイル基、ｐ−メトキシベンゾイル基、２−メチルブチル基、又は、ピバロイル基である。
【００４７】
適切なイミノ基はジメチルアミノメチレン基である。 
【００４８】
適切なカーバメート基はイソブチルカーバメート、ｔ−ブチルカーバメート、ベンジルカーバメート、ｐ−メトキシベンジルカーバメートである。
【００４９】
好ましいプリンは２−クロロ−６−アミノプリンのアニオン体である。 好適なアニオン体の例には、本発明の第1の実施形態で上述されるようなアルカリ金属塩類及び有機のアミン塩類が含まれる。 好ましいアニオン体はＤＢＵのようなナトリウム塩及びアミン塩類である。
【００５０】
２−デオキシ−２−フルオロ−Ｄ−アラビノフラノシルの部分は、Ｃ−１位に３位及び５位の水酸基の保護基及び活性基を含んでいる。
【００５１】
好適な保護基と活性化基の例は、本発明の第１の実施形態のために上記で議論されたものである。
【００５２】
好ましい保護基はベンゾイル基であり、また、好ましい活性化基は臭素である。 
【００５３】
糖反応体（２）として使用してもよい具体的な化合物は２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−ジ−０−ベンゾイル−２−α−Ｄ−アラビノフラノシルブロマイドである。 
【００５４】
プリン及び活性化された炭水化物誘導体は、典型的にはほぼ等量、あるいはプリンの過剰の状態で使用され、より具体的にはプリンと活性化された炭水化物誘導体の比がおよそ１：１からおよそ３：１、好ましくはおよそ１：１からおよそ１．５：１、より好ましくは、およそ１：１からおよそ１．２：１で使用される。
【００５５】
工程中のこのステップは典型的には０℃から１００℃、より具体的には２０℃から７０℃の温度で、常気圧で行なわれる。もし望むならば、より高圧及びより低圧で行なうこともできる。工程中のこのステップは典型的には約３から約９６時間かけて完結させる。
【００５６】
上述のプリン化合物１とアラビノフラノース糖（２）の反応は、好ましくは溶媒の存在下で行なわれる。
そのような溶媒としてアセトン、アセトニトリル、ジメチルフォルムアミド、ジメチルスルホキシド、スルフォラン、ジメチルアセトアミドのような二極性の非プロトン性溶媒、並びに、テトラヒドロフラン、ジオキサン、及び、ジメトキシエタンのようなエーテル類等が挙げられる。
【００５７】
プリン（１）及びアラビノフラノース糖（２）の反応完結時に、反応混合物をろ過し、溶媒を蒸発させて泡状体を得てもよい。泡状体は、溶離剤として酢酸イソプロピル／ヘキサンあるいは他の好適な溶液を使用して、フラッシュシリカで生成してもよい。
所望の９−β異性体を含んでいる画分は、寄せ集めて溶媒を蒸発させて残渣を得、その後、エタノールで結晶化して所望の９−置換プリンヌクレオシド（３）を得てもよい。
【００５８】
６位の基がアミノ基か、あるいは保護されたアミノ基である場合、所望の２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５）はプリンヌクレオシド（３）とアンモニア等の塩基、及び／又は、ナトリウムメトキシド等のアルカリ金属アルコキシド、炭酸ナトリウムのようなアルカリ金属炭酸エステル、及び、水酸化リチウムのようなアルカリ金属水酸化物を反応させることにより得ることもできる。これらの基を用いた工程中のこのステップは典型的には−２０℃から８０℃、より具体的には０℃から５０℃の温度で、且つ、典型的には上記の温度で、密封した容器中で生成する圧力で行なわれる。工程中のこのステップは具体的には約１から約２４時間かけて完結させる。
【００５９】
６位の基がアジド基である場合は、所望の２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５）は、水素化剤等の還元剤とプリンヌクレオシド（３Ａ）を反応させてアジド基をアミノ基にし、次に、上記で議論されたような（図３を参照）塩基で反応させることにより得てもよい。例えば、上記還元反応は、白金又はパラジウム等の水素化触媒の存在下、水素と反応させることにより行なうことができる。典型的には工程中のこのステップは、通常の室温及び約１から約３気圧で行なわれる。
さらに、６位の基がアジドである場合、反応ステップの順序を逆にすることができる。 具体的には、プリンヌクレオシド（３）を上述の塩基と反応させ、次に、還元剤と反応させてアジド基をアミノ基に還元し、所望の２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５）を得てもよい。
【００６０】
６位の基がアルコキシ基の場合、所望の２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５）はプリンヌクレオシド（３）をアンモニアと反応させることにより得てもよい。
【００６１】
工程中のこのステップは典型的には通常の室温から１２０℃、より具体的には７０℃から１００℃の温度で、且つ、典型的には上記の温度で、密封した容器中で生成する圧力で行なわれる。工程中のこのステップは具体的には約１２から約２４時間かけて完結させる。
【００６２】
工程中のこのステップは、好ましくはメタノールまたはエタノール等のアルコールの溶媒の存在下、又は、溶媒がない状態で行なわれる。
【００６３】
（３）から（５）へ変換するための好ましい実施形態には、アンモニア又はナトリウムメトキシドが使用されることが含まれる。 置換基（図２の中の（３）のＲ）がアミノ基、アシルアミノ基若しくはイミノ基等の保護されたアミノ基、又は、カーバメート基である例において、1つの好ましい実施形態は、０℃から通常の室温の温度でナトリウムメトキシドを使用することである、代わりに、アンモニアを使用することもできる。   
【００６４】
アンモニアは、使用される際、典型的には、メタノール又はエタノール等のアルコールの溶液（典型的には５℃で飽和したもの）のとして存在する。好ましい実施形態としては、この反応が８０℃（６５ｐｓｉ）でステンレス鋼噴射容器の中で行なわれる。反応完結時に、溶媒を除去し、残渣を還流メタノールに溶解してもよく、また好ましくは熱濾過してもよい。冷却し、粗生成物である２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５）は濾過によって単離してもよい。高品質の２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５）を得るために、生成物はメタノールから再結晶してもよい。更に必要であれば、溶媒を蒸発させた画分の、メタノールによる再結晶化を行なって、残りの２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５）を得る。
【００６５】
通常の当業者であれば、上述の本発明の好ましい実施形態の改変が行なわれてもよいことは容易にわかるだろう。 更に、本発明の例示は下記の例で述べられており、それらはどの方法も本発明を制限することはない。実施例においては、上述の発明のプロセスの個々のステップを例示する。
【実施例】
【００６６】
実施例１
２，６−ジクロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン（３）（図１、Ｒ１＝Ｃｌ）
室温の無水アセトニトリル（１３０ｍｌ）中の２，６−ジクロロプリン（４．０ｇ、２１．２ｍｍｏｌ）の懸濁液を、ＮａＨ（９１６ｍｇ／６０％油状液体中、ヘプタンで洗浄した、２２．９ｍｍｏｌ）で処理し、混合物をアルゴン下で１５分攪拌した。この攪拌された懸濁液に、２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−アラビノフラノシルブロマイド（Ｃ．Ｈ．Ｔａｎｎら、Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，１９８５、５０，３６４４−３６４７；９ｇ、２１．３ｍｍｏｌ）のアセトニトリル溶液（２９ｍｌ）を、滴下して加え、混合物を室温で夜通し攪拌した。不溶性物質を濾過によって除去し、アセトニトリルとクロロホルムで洗浄した。集めた濾液及び洗液を、ほぼガラス状になるまで溶媒を蒸発させた。残留物のクロロホルム溶液を、シリカゲル６０（７０−２３０メッシュ、Ｅ・メルク）を含んでいるフラッシュカラムにアプライした。クロロホルムで溶出させることにより集められた純粋な画分が得られ、沸騰エタノールから結晶化することにより、１．６ｇ（１４％）の純粋な生成物（ＨＰＬＣ使用、９−β体が１００％）を得た。純度の劣る画分を用いて、５℃でクロロホルムから結晶化することにより、６．３ｇ（５６％）（ＨＰＬ使用、９−β体が９７％、９−αが３％）の原料を得た。１Ｈ  ＮＭＲによる構造確認の後、この原料を次のステップの中で直接使用した。
【００６７】
実施例２
２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ―β−Ｄ−アラビノフラノシル）−６−メトキシ−９Ｈ−プリン（４）
実施例１で調製された２，６−ジクロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン（３）（４．７ｇ、８．８５ｍｍｏｌ）を、無水メタノール（２００ｍｌ）中に室温で懸濁させた。この混合物に、メタノール（２．２３ｍｌ、９．７５ｍｍｏｌ）中の２５ｗｔ％ナトリウムメトキシド溶液を、１回で加えた。１．５時間攪拌した後、反応は透明溶液になった。２０時間後、反応液を強カチオン交換樹脂（Ｄｏｗｅｘ５０Ｘ４［Ｈ＋］）で中和し、１５分後に集めて、メタノールで洗浄した。集めた濾液の溶媒を蒸発させ、３０〜６０℃の石油エーテルを２回注ぎ加えて粉砕することによりゴム状物が得られた。残りの原料を、(ろ過されて透明になった)熱２−プロパノール（３０ｍｌ）に溶解させ、その溶液は室温下で結晶を沈澱させた後、一晩冷蔵した（５℃）。生成物を氷冷２−プロパノールで洗浄し、真空中で乾燥させて１．７ｇの（６０％）表題の化合物（融点１９９−２００℃、純度９８％（ＨＰＬＣ））を得た。９５：５のクロロホルム−メタノール混合物を溶媒として用いて、溶媒を蒸発させたろ液のフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、７０−２３０メッシュ、Ｅ・メルク６０)を行なって、追加でさらに０．５５ｇ（２０％）の原料（融点１９６−１９７℃、純度９６％（ＨＰＬＣ））を得た。
【００６８】
実施例３
２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（５）
（０℃で）無水アンモニアが飽和した３００ｍｌのエタノールが入ったステンレス鋼圧力容器に、実施例２で調製された２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ―β−Ｄ−アラビノフラノシル）−６−メトキシ−９Ｈ−プリン（４）（６．２ｇ、１９．５ｍｍｏｌ）を加えた。密封した容器を、８０℃で１６時間加熱した。エタノール性のアンモニア（３０ｍｌ）を、反応がまだ完結していない反応混合物にさらに加えて、加熱を４時間継続した。原料を痕跡量しか含んでいない反応溶液の溶媒を蒸発させ、熱メタノール（７５ｍｌ）から結晶して、５．１ｇの白い泡状体を得た。この比較的純粋な原料を還流メタノール（１１０ｍｌ）に溶解させ、ろ過して、室温まで冷却して、冷蔵した。純粋な表題化合物は２回に渡って得られ、計４．６ｇ（７８％）、ｍｐ  ２３１℃、純度９９％（ＨＰＬＣ）であった。
【００６９】
実施例４
２−クロロ−９−（２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−β−Ｄ−アラビノフラノシル）−９Ｈ−プリン−６−アミン（３）（図２、Ｒ＝アミノ基）
室温の無水のアセトニトリル（２．５ｍｌ）中の２−クロロアデニン（２１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）の懸濁液に、９８％のＤＢＵ（１８μｌ、０．１２ｍｍｏｌ）を滴下し、混合物をアルゴン下で２５分間攪拌した。この攪拌した懸濁液に、アセトニトリル（０．８ｍｌ）中の２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−アラビノフラノシルブロマイド（２）（４８ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）溶液を滴下して加えた。混合物は、室温で２−デオキシ−２−フルオロ−３，５−ジ−Ｏ−ベンゾイル−α−Ｄ−アラビノフラノシルブロマイド（２）が消費されるまで攪拌した。９６時間後に不溶性物質を濾過によって除去し、ＣＨＣｌ３で洗浄した。集めたろ液の溶媒を蒸発させ、残渣をＣＨＣｌ３に溶解させた。この溶液を分取層シリカゲルプレート（Ａｎａｌｔｅｃｈ、１０ｘ２０ｃｍ、１,０００ミクロン）にアプライして、９７：３  ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ中で２度展開した。生成物のバンドは１：１  ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨで抽出し、抽出物の溶媒を蒸発させて、１６ｍｇ（２８％、９−β体が１００％（ＨＰＬＣ））、及び、２０ｍｇ（３４％、９−α体が９７％（ＨＰＬＣ））の白色固体を得た。
【００７０】
本発明の上記の記述及び実施例は、制限することを意図するものではない。また、当業者がこの記述の変形法を容易に識別するであろうことが認識され、それは、発明の精神及び範囲内に含まれることを意図している。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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