(57)【要約】【課題】アピゲニン含有植物の抽出物からアピゲニン高濃度含有エキスを製造する方法の提供。【解決手段】アピゲニン含有植物の抽出物を吸着担体に吸着させ、これを水又は２０容量％以下のエタノール水溶液で洗浄し、次いで、４０〜９９．５容量％のエタノール水溶液を用いて吸着物からアピゲニンを溶出させる、アピゲニン高濃度含有エキスの製造方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アピゲニン含有植物の抽出物を吸着担体に吸着させ、これを水又は２０容量％以下のエタノール水溶液で洗浄し、次いで、４０〜９９．５容量％のエタノール水溶液を用いて吸着物からアピゲニンを溶出させる、アピゲニン高濃度含有エキスの製造方法。
【請求項２】
アピゲニン含有植物の抽出物がアピゲニン含有植物を５〜９９．５容量％のエタノール水溶液で抽出したものである請求項１記載の製造方法。
【請求項３】
アピゲニン含有植物がカミツレ及びローマカミツレから選ばれる植物である請求項１又は２記載の製造方法。
【請求項４】
吸着担体が粉末セルロース、ラジオライト及びセライトから選ばれる担体である請求項１〜３のいずれか１項記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アピゲニンを高濃度含有するエキスの製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
アピゲニンは、カミツレ（Matricaria recutita L.）、ローマカミツレ（Anthemis nobilis L.）、ダリア（Dahlia pinnata）、フジモドキ（Daphne genkwa）、コウリョウ(Sorghum nervosum Bess)等の植物に含まれているフラボノイドであり、ウレアーゼ活性阻害作用（特許文献１）、抗酸化作用（特許文献２）及びメラニン生成促進作用（特許文献３）等を有するため、化粧品、医薬品及び医薬部外品の成分として有用である。
【０００３】
ところで、医薬部外品原料規格（外原規）には、ローマカミツレのブチレングリコール溶液及びプロピレングリコール溶液が記載されているが（非特許文献１）、当該外原規相当の市販のアピゲニン含有エキスのアピゲニン含有量は５０ｐｐｍ程度であり、エキス蒸発残分中の純度は高々１％程度にすぎない。従って、アピゲニンの薬理作用をより有効に発揮し得るアピゲニン高濃度含有エキスが求められていた。
【０００４】
一方、アピゲニンに代表されるフラボノイドを含有するエキスの製造方法としては、柑橘類の果皮をアセトン中に液浸し、粗フラボノイド抽出液を得た後、オクタデシルシリカゲルを担体とする逆相系カラムで精製する方法（特許文献４）、柑橘類の果皮を９０（ｖ／ｖ）％エタノールで抽出した後、酢酸エチル−水で分液し、酢酸エチル層を減圧濃縮する方法（特許文献５）、多孔性吸着樹脂により濃縮する方法（特許文献６）が知られている。しかしながら、これらの製造方法では、アピゲニン高濃度含有エキスを製造することができなかった。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００４−９１３３８号公報
【特許文献２】特開２００５−２８９８８０号公報
【特許文献３】特開平９−２６３５３４号公報
【特許文献４】特開２０００−８００３５号公報
【特許文献５】特開２００２−６０３４０号公報
【特許文献６】特開２００５−１４５８２４号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】医薬部外品原料規格ｐ.１８３４
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、アピゲニン含有植物の抽出物からアピゲニン高濃度含有エキスを製造する方法に関する。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、アピゲニン含有エキスの製造方法について検討を行った結果、アピゲニン含有植物の抽出物を吸着担体に吸着させ、これを水又は２０容量％以下のエタノール水溶液で洗浄した後、吸着物からアピゲニンを溶出させることにより、アピゲニンを高濃度含有するエキスを製造できることを見出した。
【０００９】
すなわち、本発明は、アピゲニン含有植物の抽出物を吸着担体に吸着させ、これを水又は２０容量％以下のエタノール水溶液で洗浄し、次いで、４０〜９９．５容量％のエタノール水溶液を用いて吸着物からアピゲニンを溶出させる、アピゲニン高濃度含有エキスの製造方法に係るものである。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、選択的にアピゲニンのみを担体に保持させたまま、その他のものを洗浄できる。従って、簡便かつ効率よくアピゲニン高濃度含有エキスを製造することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明において「アピゲニン含有植物」としては、アピゲニンを含有する植物であれば良く、例えば、カミツレ、ローマカミツレ、ダリア、フジモドキ、コウリョウ等が挙げられる。
【００１２】
ここで、カミツレとは、キク科のMatricaria recutita L.を意味し、ジャーマン・カモミール、ジャーマン・カミツレとも称される。また、ローマカミツレとは、キク科のAnthemis nobilis L.を意味し、ダリアとは、キク科のDahlia pinnataを意味する。
また、フジモドキとは、ジンチョウゲ科のDaphne genkwaを意味し、コウリョウとは、イネ科のSorghum nervosum Bessを意味する。
これらアピゲニン含有植物のうち、キク科植物が好ましく、高濃度のアピゲニン含有エキスを得る点で、カミツレ及びローマカミツレがより好ましく、ローマカミツレがさらに好ましい。
【００１３】
上記植物は、アピゲニン含有植物の全草、葉、茎、芽、花、蕾、木質部、樹皮、地衣体、根、根茎、仮球茎、球茎、塊茎、種子、果実、菌核及び樹脂等をそのまま、粉砕して、切断して又は乾燥して使用できるが、カミツレ及びローマカミツレについては花又は蕾を使用するのが好ましい。
【００１４】
本発明において「アピゲニン含有植物の抽出物」とは、常法により得られる各種溶剤抽出液、又はその希釈液、その濃縮液、その乾燥末若しくはその活性炭処理したものを意味し、このうち各種溶媒抽出液が好ましい。当該抽出方法の具体例としては、抽出原料の５〜４０倍量（質量比）の抽出溶媒に植物を浸漬し、常温又は還流加熱下で１日から１ヶ月抽出した後、濾過して残渣を除去する方法が挙げられる。
【００１５】
また、上記抽出溶剤としては、極性溶剤、非極性溶剤のいずれをも使用することができる。当該抽出溶剤の具体例としては、例えば、水；メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール等のアルコール類；プロピレングリコール、ブチレングリコール等の多価アルコール類；アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類；酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類；テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル等の鎖状及び環状エーテル類；ポリエチレングリコール等のポリエーテル類；スクワラン、ヘキサン、シクロヘキサン、石油エーテル等の炭化水素類；トルエン等の芳香族炭化水素類；ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素類；及び二酸化炭素等が挙げられ、これらは混合物として用いることができる。これらのうち、好適な具体例としては、エタノール水溶液、ブタンジオール水溶液、プロピレングリコール水溶液が挙げられ、エタノール水溶液、ブタンジオール水溶液がより好ましく、エタノール水溶液がさらに好ましい。当該エタノール水溶液としては、５〜９９．５容量％のエタノール水溶液が好ましく、１０〜８０容量％のエタノール水溶液がより好ましい。カミツレを使用するときは５〜５５容量％のエタノール水溶液が好ましく、１０〜５０容量％のエタノール水溶液がより好ましい。ローマカミツレを使用するときは３０〜９９．５容量％のエタノール水溶液が好ましく、４０〜８０容量％のエタノール水溶液がより好ましい。当該溶媒の使用量は、１０〜４０倍程度である。抽出時間としては、１日〜１ヶ月が好ましく、抽出温度としては、５〜８０℃が好ましい。
【００１６】
本発明のアピゲニン高濃度含有エキスの製造方法は、１）吸着工程、２）洗浄工程、３）溶出工程の３工程によって行われる。
１）吸着工程
上記アピゲニン含有植物の抽出物の吸着担体への吸着は、例えば、上記抽出物に吸着担体を接触又は接触混合することにより吸着物を得る工程である。
【００１７】
本発明において「吸着担体」としては、アピゲニンを吸着するものであればよいが、吸着担体をろ過する際の操作性の点で、ろ過助剤として用いられているものが好ましい。ろ過助剤の好適な具体例としては、粉末セルロース、ラジオライト、セライト等が挙げられ、粉末セルロース及びラジオライトがより好ましい。これらのうち１種類又は２種類以上を使用することができる。
また、吸着担体は、アピゲニン回収率の点で、抽出液２００ｍＬあたり、２．５ｇ〜１０ｇ程度用いるのが好ましい。
【００１８】
また、アピゲニンの吸着担体への吸着を強化する点で、上記添加等させた後に、アピゲニン含有植物の抽出物を濃縮するのが好ましい。当該濃縮は常法に従い行えばよいが、具体的手段としては減圧濃縮等が挙げられる。
【００１９】
２）洗浄工程
洗浄は、前工程で得られた吸着物に水又は２０容量％以下のエタノール水溶液を接触させることにより行われる。
洗浄の具体的手段としては、例えば、ろ過、デカンテーションが挙げられるが、ろ過が好ましい。当該ろ過としては、ろ紙やろ布等を使用した常圧ろ過；フィルタープレス、加圧ろ紙ろ過機、リーフフィルター、ロータリープレス等を使用した加圧式ろ過；回転ドラム式連続ろ過機、真空フィルター等を使用した減圧ろ過等が挙げられるが、簡便性の点で、常圧ろ過が好ましい。
ろ過により洗浄する場合、アピゲニンは吸着担体中に保持され、その他のものはろ液として分離される。
【００２０】
２０容量％以下のエタノール水溶液としては、１０容量％以下のエタノール水溶液が好ましく、３容量％以下のエタノール水溶液がより好ましく、０．００１〜３容量％のエタノール水溶液がさらに好ましい。
【００２１】
水には、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等の他、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、滅菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化等が含まれる。
水又は２０容量％以下のエタノール水溶液としては、水が好ましい。
【００２２】
洗浄は、例えば、吸着物に対して２〜１０倍容量の水又は２０容量％以下のエタノール水溶液を用いて行えばよい。洗浄温度は５℃〜４０℃程度であり、洗浄時間は１０分〜３時間程度である。
【００２３】
３）溶出工程
溶出は、洗浄された吸着物に、４０〜９９．５容量％のエタノール水溶液を接触させることにより行われる。溶出の具体的手段としては、上記洗浄と同様のものが挙げられる。
ろ過により溶出する場合、アピゲニンはろ液として吸着担体から分離される。
【００２４】
４０〜９９．５容量％のエタノール水溶液としては、５０〜９９．５容量％のエタノール水溶液が好ましく、７５〜９９．５容量％のエタノール水溶液がより好ましい。
溶出は、例えば、吸着物に対して２〜１０倍容量の５０〜９９．５容量％のエタノール水溶液を用いて行えばよい。溶出温度は５〜４０程度であり、溶出時間は１０分〜１日程度である。
【００２５】
上記のアピゲニンを高濃度含有するエキスは、そのまま用いることもできるが、当該エキスを希釈、濃縮若しくは凍結乾燥した後、粉末又はペースト状に調製して用いることもできる。
【００２６】
また、上記のアピゲニンを高濃度含有するエキスは、クロマトグラフィー、液々分配等の分離技術により、上記エキスから不活性な夾雑物を除去して用いることもできる。
【００２７】
本発明によれば、蒸発残分あたりアピゲニンを１０〜３０重量％、好ましくは１５〜２５重量％含有するアピゲニン高濃度含有エキスが得られる。
【実施例】
【００２８】
以下、参考例、実施例及び比較例に基づき本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの内容に限定されるものではない。なお、以下の比較例及び実施例において、「％」は容量％を表す。
【００２９】
参考例１
【００３０】
カミツレ（Matricaria recutita L.）の花２０ｇをエタノール水溶液２００ｍＬで室温にて、７日間抽出した後、ろ過し、抽出液を得た。また、ローマカミツレ（Anthemis nobilis L.）についても、花を用いて同様に抽出を行った。結果を下表に示す。
【００３１】
【表１】
2010163363.tif 000002
【００３２】
カミツレに関しては、１０〜５０容量％のエタノール水溶液を用いたときに、高濃度のアピゲニン抽出液が得られ、ローマカミツレに関しては、４０〜８０容量％のエタノール水溶液を用いたときに、高濃度のアピゲニン抽出液が得られた。
【００３３】
参考例２
ローマカミツレ８０ｇを６０％ブタンジオール１．６Ｌで、４０度、２４時間抽出した後、ろ過し、抽出液１５２０ｍＬを得た。抽出液１ｍＬ当りの蒸発残分は１２．５ｍｇ、アピゲニン量は４６０ｐｐｍであった。蒸発残分中のアピゲニン純度は３．７％であった。
【００３４】
実施例１
カミツレ（Matricaria recutita L.）の、花４００ｇを５０％エタノール８Ｌで、室温にて、２０日間抽出した後、ろ過し、抽出液６．３Ｌを得た。抽出液１ｍＬ当りの蒸発残分は１４．９ｍｇ、アピゲニン量は２８０ｐｐｍであった。蒸発残分中のアピゲニン純度は１．９％であった。
得られた抽出液２００ｍＬに下記表２に示すろ過助剤を添加し、吸着させ、溶媒を濃縮した。これに下記表２の溶媒Ａを２００ｍＬ添加し、ろ過し、ろ液Ａを得た。得られたろ液Ａ中のアピゲニン量及び蒸発残分を測定し、アピゲニンの回収率及び純度を算出した。
そして、得られた残渣に溶出溶媒Ｂを２００ｍＬ添加し、ろ過し、ろ液Ｂを得た。得られたろ液Ｂ中のアピゲニン量、蒸発残分を測定し、アピゲニンの回収率及び純度を算出した。結果を下表に示す。
【００３５】
【表２】
2010163363.tif 000003
【００３６】
上記より、上記吸着、洗浄及び溶出を経て得られたアピゲニンエキスは、アピゲニン純度が２０％程度に向上することがわかる。
【００３７】
比較例１  外原規の方法
ローマカミツレ２０ｇを４０％ブタンジオール４００ｍＬで、室温、７時間抽出した後、ろ過し、抽出液３４０ｍＬを得た。抽出液１ｍＬ当りの蒸発残分は１０．０ｍｇ、アピゲニン量は９０ｐｐｍであった。蒸発残分中のアピゲニン純度は０．９％であった。
【００３８】
比較例２  市販品の分析
一丸ファルコス社一丸ファルコレックス  ローマカミツレＢを分析した結果、エキス１ｍＬ当りの蒸発残分は５．０ｍｇ、アピゲニン量は５０ｐｐｍであった。蒸発残分中のアピゲニン純度は１．０％であった。
【００３９】
比較例３  市販品の分析
一丸ファルコス社カミツレリキッド（原料生薬：ジャーマンカミツレ）を分析した結果、エキス１ｍＬ当りの蒸発残分は１０．５ｍｇ、アピゲニン量は１７ｐｐｍであった。蒸発残分中のアピゲニン純度は０．１６％であった。
【００４０】
上記実施例１及び比較例１〜３より、実施例１の操作によれば、高濃度のアピゲニン含有エキスが得られることがわかる。