(57)【要約】【課題】ペメトレキセドまたはその塩を含む安定性が向上された薬学的な組成物およびその製造方法の提供。【解決手段】本発明はペメトレキセドの安定性を確保するために、最適な物質の選定とともに、最適な濃度の範囲を設定することにより、流通および保管中に十分な安定性を確保することができるペメトレキセドを含有する液状形の注射剤を供給する。本発明は商業的に製造が容易であり、凍結乾燥または再構成の際に伴う微生物の汚染を防止することができ、投薬の便利性および安定性が向上されたペメトレキセド製剤を提供することができる。【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性成分としてペメトレキセドまたはその薬剤学的に許容可能な塩と抗酸化剤で０．５ｍｇ／ｍＬないし１．２５ｍｇ／ｍＬのモノチオグリセロールを含む組成物。
【請求項２】
抗酸化剤でモノチオグリセロールを０．５０ないし１．００ｍｇ／ｍＬの含量を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
抗酸化剤でモノチオグリセロールを０．５０ないし０．８０ｍｇ／ｍＬの含量を含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項４】
活性成分としてペメトレキセドまたはその薬剤学的に許容可能な塩と抗酸化剤でモノチオグリセロールを含有し、上記の活性成分とモノチオグリセロールが約２０：１ないし５０：１の比率で含まれる組成物。
【請求項５】
上記の活性成分とモノチオグリセロールが約２５：１ないし５０：１の比率で含まれる、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
上記の活性成分を２０ないし１００ｍｇ／ｍＬの含量で含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項７】
上記の活性成分がペメトレキセド二ナトリウム２．５水和物である、請求項１または４に記載の組成物。
【請求項８】
上記の活性成分がペメトレキセド二ナトリウム７水和物である、請求項１または４に記載の組成物。
【請求項９】
請求項１または４に記載の組成物を液状状態で含む液状製剤。
【請求項１０】
上記の液状状態の溶存酸素量が０．５ｐｐｍ以下である、請求項９に記載の液状製剤。
【請求項１１】
上記の液状のｐＨが６．０ないし８．０である、請求項９に記載の液状製剤。
【請求項１２】
液状製剤が密封容器に包装され、密封容器の上部のガスに含有される酸素の濃度が１．５％ｖ／ｖ以下である、請求項９に記載の液状製剤。
【請求項１３】
密封容器の上部のガスに含有される酸素の濃度が１．０％ｖ／ｖ以下である、請求項１２に記載の液状製剤。
【請求項１４】
４０℃、７５％相対湿度の環境で３ヶ月以上個々 不純物が０．２４％以下、総 不純物が１．５０％以下に維持される、請求項９に記載の液状製剤。
【請求項１５】
６０℃の環境で３ヶ月以上個々 不純物が０．２４％以下、総 不純物が１．５０％以下に維持される、請求項９に記載の液状製剤。
【請求項１６】
ペメトレキセドまたはその薬剤学的に許容可能な塩、及び０．５０ないし１．２５ｍｇ／ｍＬのモノチオグリセロールを注射用水に溶解させるステップ；および
密閉容器の上部のガスの酸素濃度が１．５％ｖ／ｖ以下になるように調節するステップを含めて、製造される液状製剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はペメトレキセドまたはその塩を含む安定性が向上された薬学的組成物およびその製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
ペメトレキセド（Ｐｅｍｅｔｒｅｘｅｄ）またはその塩（例えば、 二ナトリウム塩）は中皮腫（ｍｅｓｏｔｈｅｌｉｏｍａ）と非小細胞肺がん（ｎｏｎ−ｓｍａｌｌ  ｃｅｌｌ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ）をはじめとする様々ながん種で葉酸（ｆｏｌａｔｅ）の代謝過程に関与する代謝物質の活性を抑制し、抗がん効能を示す。マルチターゲット抗葉酸剤（ｍｕｌｔｉｔａｒｇｅｔｅｄ  ａｎｔｉｆｏｌａｔｅ）であるペメトレキセドは葉酸の細胞内の主要な移動通路である還元型葉酸キャリア（ｒｅｄｕｃｅｄ  ｆｏｌａｔｅ  ｃａｒｒｉｅｒ、ＲＦＣ ）を通じて、細胞内に流入された後、ホリルポリグルタミン酸シンテターゼ（ｆｏｌｙｌｐｏｌｙｇｌｕｔａｍａｔｅ  ｓｙｎｔｈｅｔａｓｅ、ＦＰＧＳ）によりポリグルタメート（ｐｏｌｙｇｌｕｔａｍａｔｅ）誘導体として活性され、チミジル酸シンターゼ（ｔｈｙｍｉｄｙｌａｔｅ  ｓｙｎｔｈａｓｅ、ＴＳ）とジヒドロ葉酸レダクターゼ（ｄｉｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ  ｒｅｄｕｃｔａｓｅ、ＤＨＦＲ）を標的とすることで知られている（Ｃｈａｔｔｏｐａｄｈｙａｙ，  Ｓ．  ｅｔ  ａｌ．２００７．  Ｐｅｍｅｔｒｅｘｅｄ：  ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ａｎｄ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ，  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．  Ｍｏｌ．  Ｃａｎｃｅｒ  Ｔｈｅｒ．  ６，４０４−４１７）。
【０００３】
ペメトレキセドの化学名はＮ−［４−［２−（２−アミノ−４，７−ジヒドロ−４−オキソ−１Ｈ−ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン−５−イル）エチル］ベンゾイル］−Ｌ−グルタミン酸であり、下記の化学式を有する（米国特許第５，３４４，９３２号参考）。
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ペメトレキセドは現在アリムタ（商標）いう商品名で開発され、国内では化学療法を受けたことのない、手術が不可能な悪性胸膜中皮腫患者にシスプラチンと併用して用いたり、以前の化学療法の実施後、局所進行性乳がんと非小細胞肺がんの単独療法剤で２００７年に発売されて使われている。
アリムタ（商標）は投与の前に再構成されなければならない凍結乾燥製剤の形態、すなわち、患者に投与する際に、０．９％の塩化ナトリウム溶液で再構成し、最終的に０．９％の塩化ナトリウム溶液で希釈（０．２５ｍｇ／ｍｌの最終濃度）されなければならない凍結粉末（１００または５００ｍｇ）の形態の剤形で市販されている。
上記の凍結乾燥剤形の注射剤は水溶液状で薬物の不安定性により凍結乾燥粉末の形態で製造して、これを患者に投薬する前に生理食塩水や注射用水などで再建して用いている。しかし、このような再建過程は必要な量を測定し、凍結乾燥剤バイアルに投入しなければならない煩わしさがあり、再建過程で微生物の汚染の危険があって、再建の後、一定時間内に使用しなければならない制限もある。そして、このような凍結乾燥剤形は凍結乾燥の過程で長い乾燥サイクルにより多くの時間が消費され、生産コストが高くなって、製造工程も複雑な問題点がある。これに、製造の際の経済性の面やユーザーの利便性などを考慮すると、安定性が確保されたすぐに使用可能な（ｒｅａｄｙ−ｔｏ−ｕｓｅ）液状組成物の必要性が台頭された。
多くの場合、液状製剤に対する問題点は、保存期間中の不安定性である。このような不安定性により多数の注射剤が注射の直前に溶解させ用いる凍結乾燥製剤の形態で用いられる。上記のペメトレキセドは水溶液内で、急速な酸化を起こし、様々な 不純物を生成する代表的な薬物である。
【０００４】
液状製剤の安定性を向上させるために抗酸化剤を用いる方法としては、米国登録特許第６，６８６，３６５号（大韓民国公開特許第２００２−００８１２９３号）には、有効治療量のペメトレキセド、有効量の抗酸化剤および薬剤学上に許容される賦形剤を含む安定したペメトレキセド溶液製剤としてモノチオグリセロール、Ｌ−システインおよびチオグリコール酸からなる群より選ばれる抗酸化剤を含むペメトレキセド液状製剤が公知されている。上記の特許の実施例では抗酸化剤として２．４ｍｇ／ｍＬのモノチオグリセロール、０．０３％のＬ−システインとチオグリコール酸を用いる組成物を記載したが、安定性の評価のような具体的な実験例を通じた安定性の向上の程度を提示していない。さらに、最適の抗酸化剤の種類および濃度を具体的な実施例を通じて選定していなかった。また、実際に本発明者らが上記の特許の実施例を再現して安定性を評価した結果、これらのすべてが加速（４０℃、７５％ＲＨ）条件で安定性試験の行う際に保管４週内に変色などの性状の変化、 不純物の増加などの結果を示した。したがって、本発明者らは流通および保管過程で十分な安定性を有するペメトレキセドを含有する液状剤形の供給のためには、より具体的かつ進歩された技術開発の必要性を認識して、本発明に対する研究を始めるようになった。
また、大韓民国登録特許第１２６０６３６号では、ペメトレキセドに抗酸化剤で アセチルシステイン、緩衝剤でクエン酸を用いて安定性を高めた製剤を公開していて、大韓民国公開特許第２０１３−０１２２０６５号では抗酸化剤として硫化ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ｓｕｌｆｉｄｅ）または亜硫酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ｓｕｌｆｉｔｅ）から選ばれた１種以上の安定化剤を含むことにより、安定性を向上させた組成物の提供を試みた。本発明者らが上記の特許の実施例により製造した液状形態の安定性を評価した結果、６０℃で４週以内に変色などの性状の変化、 不純物の増加などで十分な安定性を示すことができなくて用意に再現可能な技術にすることができなかった。さらに、明細書には、安定性を６０℃で４週間だけ観察した結果が記載されており、それ以上の期間の安定性に対しては全く言及していない。したがって、本発明者らは６０℃以上で３ヶ月以上、望ましくは６ヶ月の十分な期間の間に安定しながら、容易に再現できる技術を提供しようとした。
【０００５】
本発明者らは様々な抗酸化剤を探索する過程を通じて、当業界で用いられる抗酸化剤の中で、モノチオグリセロールが顕著にペメトレキセドの安定性を向上させることを発見した。一般的に酸化による薬理活性物質の分解と 不純物の増加を抑制するために抗酸化剤を用いる場合、一定濃度以上に含有してその投入量に比例して安定性が向上されるという事実が一般的に広く知られている。しかし、本発明者らは先行特許発明に記載されたものとは異なり、驚くほどモノチオグリセロールが１．５０ｍｇ／ｍＬ以上の濃度ではむしろペメトレキセドの安定性に否定的な影響があることを発見した。したがって、本発明者らはペメトレキセドの安定性の確保に最適な物質の選定とともに、最適な濃度の範囲を設定することにより、流通および保管中に十分な安定性を確保することができ、６０℃で３ヶ月以上、望ましくは６ヶ月以上安定したペメトレキセドを含有する液状形態の注射剤を提供することができた。結果的に、高温で長期間安定性を維持することができるペメトレキセド液状製剤を供給することができるようになった。
また、酸化機序により分解される薬物の安定性の確保のために、酸素との接触を最小化しなければならない。したがって、酸素との接触によるペメトレキセドの分解を減少させるために液状に存在する溶存酸素量とバイアルの上部の酸素含量を調節することが必要である。本発明者らは様々な試みを通じ、本発明で提供する液状の組成物でバイアルの上部の酸素含量を約１．５％以下、望ましくは１．０％以下に管理する場合、十分な安定性を確保することができることを確認した。この際に、バイアルの上部に隔離体である不活性ガス（例えば、窒素またはアルゴン）を充填する方法を用いる。
結論として、最適の抗酸化剤の選定と最適の濃度設定、およびバイアルの上部の酸素含量の基準を設定することによって、公知技術に比べて顕著な安定性を有しながら、安定的に市販することができるペメトレキセドを含有する液状剤形を提供することができた。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明者らは上記の問題点を考慮してペメトレキセドまたはその塩を含有する注射用の溶液形態の薬学的組成物の安定性を改善するために様々な研究を行った。本発明者らは様々な抗酸化剤をスクリーニングする過程を通じて、モノチオグリセロールが優れた抗酸化効果を有し、特異的に１．５０ｍｇ／ｍＬ以上の濃度ではむしろ抗酸化効果が減少することを発見した。また、本発明を構成する組成物での溶存酸素およびバイアルの上部の酸素含量に対する基準を設定することによって安定性をさらに向上させた。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
溶液上でペメトレキセドの安定性を確保するために、本発明はペメトレキセドまたはその薬剤学的に許容可能な塩を水性溶媒に溶解させ、抗酸化剤でモノチオグリセロールを０．５０ないし１．２５ｍｇ／ｍＬの濃度で含有して、薬液の充填の後、バイアルの上部の酸素を１．５％以下、望ましくは１．０％以下になるように調節することを含むペメトレキセドを含有する注射用の液状製剤を提供する。
本発明で、上記のペメトレキセドまたはこれの薬剤学的に許容可能な塩の濃度は約１−１００ｍｇ／ｍＬであり、望ましくは２０−１００ｍｇ／ｍＬであって、もっとも望ましくは２５ｍｇ／ｍＬである。
米国登録特許第６，６８６，３６５号（大韓民国公開特許第２００２−００８１２９３号）では液状でペメトレキセドの安定性を確保する方案として、モノチオグリセロールを抗酸化剤で用いながら、実施例で２．４ｍｇ／ｍＬのモノチオグリセロールを含有する液状製剤を開示するだけであり、安定性に対する具体的な実験結果を提供していない。むしろ、上記の濃度では抗酸化効果を有していない点を本発明の過程で確認した。また、一定濃度以上のモノチオグリセロールを含有する際に抗酸化効果を有することで開示している。
【０００８】
本発明者らは１．２５ｍｇ／ｍＬ以下のモノチオグリセロールを含有する際、最適の抗酸化効果を有し、これより高い濃度のモノチオグリセロールを含有する際、抗酸化効果が顕著に減少することを長い時間にわたる複数の濃度の範囲での実験を通じて確認した。また、抗酸化剤の含量が少ないほど、液状製剤の人体に対する副作用が減少し、製造の際にコストを節減することができるため、優れた抗酸化効果を維持しながら、このようなメリトを維持することができるために少なくとも０．５０ｍｇ／ｍＬ以上のモノチオグリセロールを含有する必要がある点を発見した。結果的に、０．５ｍｇ／ｍＬないし１．２５ｍｇ／ｍＬ、望ましくは０．５０ないし１．００ｍｇ／ｍＬ、もっとも望ましくは０．５０ないし０．８０ｍｇ／ｍＬの濃度でモノチオグリセロールを含有した液状組成物でペメトレキセドの安定性が顕著に向上されることを発見した。
また、活性成分としてペメトレキセドまたはその薬剤学的に許容可能な塩と抗酸化剤でモノチオグリセロールが約２０：１ないし５０：１の比率で、望ましくは約２５：１ないし５０：１の比率で含まれる液状組成物でペメトレキセドの安定性が顕著に向上される。酸素との接触によるペメトレキセドの分解を最小化させるための方案で、液状状態の溶存酸素量を０．５ｐｐｍ以下で設定し、バイアルの上部の酸素含量を約１．５％以下、望ましくは１．０％以下に設定して、流通および保管中に十分な安定性を有するペメトレキセドを含有する液状形態の注射剤を供給することができた。
本発明で提供する製剤は過酷（６０℃）安定性条件で３ヶ月以上、望ましくは６ヶ月間変色を含む分解産物の増加において、従来の固体形態の注射剤形と等しい安定性を有することを品質管理基準による評価を通じて確認した。
本発明のペメトレキセド製剤は活性成分として、ペメトレキセドまたはその薬剤学的に許容可能な塩を含む。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
本発明で「ペメトレキセド（Ｐｅｍｅｔｒｅｘｅｄ）」は５−置換ピロロ［２，３−ｄ］ピリミジン化合物で、具体的に下記の化学式１で示され、非小細胞肺がん、悪性胸膜中皮腫をはじめとする様々ながん種で抗がん効能を示すマルチターゲット抗葉酸剤を意味する。
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本発明で、「薬剤学的に許容可能な塩」は当該技術分野で通常的な方法により製造された塩を意味する。具体的に、上記の薬剤学的に許容可能な塩は薬剤学的に許容される無機酸と有機酸、および塩基から誘導される塩を含むが、これに限定されない。特に、ペメトレキセドの薬剤学的に許容可能な塩は現在市販中であるペメトレキセド二ナトリウムであることができるが、これに制限されない。
本発明で、「ペメトレキセドまたはその薬剤学的に許容可能な塩」はペメトレキセドまたはその薬剤学的に許容可能な塩の水和物を含む概念であり、すべての形態の水和物、例えば、２．５水和物、７水和物などを含むが、これらに制限されない。
本発明で、上記のペメトレキセド製剤は薬剤学的に許容可能な担体およびｐＨ調節剤を含むことができる。
【００１０】
本発明で、上記のペメトレキセド製剤は望ましく溶液の状態で保存可能な液状製剤であることができ、より望ましくにすぐ使用可能な（ｒｅａｄｙ−ｔｏ−ｕｓｅ）密封された容器に入れられた注射用の液状製剤である。
本発明で、上記のペメトレキセド製剤が注射用の液状製剤である場合、薬剤学的に許容可能な担体は注射用水である。
本発明の製剤を製造する際に、脱気により注射用の溶液中の溶存酸素を除去するために窒素またはアルゴンなどの不活性ガスを用いることができる。上記の脱気方法はお互いに組み合わせて用いることができ、例えば、真空脱気とＮ2バブリング脱気、真空脱気と膜脱気、または真空脱気と触媒樹脂脱気などを組み合わせて用いることができる。または、上記の脱気方法は１回以上実施されることができる。
本発明で、ペメトレキセド注射用の液状製剤のｐＨは望ましくに約６．０ないし８．０、より望ましくに約７．２ないし７．８であることができる。溶液のｐＨは塩酸などの酸、または水酸化ナトリウムのような塩基を用いて調節することが可能である。
本発明のペメトレキセド製剤は上記のようなモノチオグリセロール以外に他の添加剤を含まなくても良いが、薬剤学的に許容可能な賦形剤を追加的に含むことができる。薬剤学的に許容可能な賦形剤として、ラクトース、デキストロース、シクロデキストリン及びその誘導体、スクロース、グリセロール、炭酸ナトリウムなど公知の添加剤を例で挙げることができ、望ましい賦形剤としては、塩化ナトリウム及びマンニトールなどが挙げられるが、これに制限されない。
本発明の安定化されたペメトレキセド含有の注射用の溶液はこの技術分野で知られた適切な容器に包装されることができる。例えば、適切な容器は、ガラスバイアル、ガラス瓶、カートリッジ、プレフィルドシリンジ及びこれに類似するものであることができ、望ましくはガラスバイアルである。
製剤を予め洗浄滅菌した容器に入れて分配し、栓の表面が上記の容器に適して、ペメトレキセド水性溶液に非活性であるテフロン（登録商標）栓で密封する。クリンパー（ｃｒｉｍｐｅｒ）を用いて栓を付着させる。
【００１１】
発明の効果
本発明は商業的に製造が容易であり、凍結乾燥または再構成の際に伴う微生物の汚染を防止することができ、投薬の利便性および安定性が向上されたペメトレキセド製剤を提供することができる。具体的には、溶液の中でペメトレキセドの安定性を極大化させることができるように最適の抗酸化剤の選定とこれに対する最適の濃度の設定とともにバイアル上部の酸素濃度の管理を通じて、従来の公知された技術に比べて顕著に安定性を向上させた。最終的に本発明を用いて流通および保管中に十分な安定性を有して、６０℃で３ヶ月以上、望ましくは６ヶ月間安定したペメトレキセドを含有する液状形態の注射剤を供給することができる。
【００１２】
発明を実施するための最善の形態
実施例を通じて、本発明をより具体的に説明する。しかし、これらの実施例は本発明に関する理解を助けるために例示の目的のみで提供されただけで、本発明の範囲が下記の実施例により制限されるものではない。
【実施例】
【００１３】
［実施例１ないし４、および比較例１および２：抗酸化剤の濃度によるペメトレキセド含有の注射用の溶液の製造］
注射用水１，０００ｍＬにＤ−マンニトール２５ｇを溶解させた後、下記の表１の濃度でモノチオグリセロールを添加して完全に溶解させた。ここにペメトレキセド二ナトリウム２．５水和物３０．２０６ｇ（ペメトレキセドとして２５ｇ）を徐々に添加して透明になるまで攪拌した。この溶液を滅菌された０．２２μｍ メンブレンフィルターで無菌ろ過した後、溶液の溶存酸素濃度を窒素パージを通じて約０．５ｐｐｍに調節した。実施例１ないし４、及び比較例１及び２により調剤された溶液のｐＨはすべて７．６で測定された。上記で得られた溶液をバイアルに充填し、窒素を用いてバイアルの上部の酸素濃度を調節した後、ゴム栓で密封し、アルミキャップでキャッピングして、それぞれの実施例１ないし４、および比較例１および２にした。
【表１】
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【００１４】
［実施例３、５および６、および比較例３および４：バイアルの上部空間の酸素濃度によるペメトレキセド含有の注射用の溶液の製造］
下記の表２のようにバイアルの上部の酸素濃度により、上記の実施例３と同一な方法でペメトレキセド含有の注射用の溶液の製造した。
【表２】
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【００１５】
［比較例５ないし１０：抗酸化剤の種類によるペメトレキセド含有の注射用の溶液の製造］
下記の表３の組成および含量で、上記の実施例３と同一な方法でペメトレキセド含有の注射用の溶液を製造した。比較例５は抗酸化剤を加えなく脱気された注射用水のみを溶媒として用いた溶液に製造した。
【表３】
2020125359.tif 000006
【００１６】
［安定性テスト］
上記の本発明による実施例１ないし６と、比較例１ないし１０で収得された組成物に対して、加速条件（４０℃、７５％ＲＨ）および過酷条件（６０℃）で６ヶ月間安定性試験を実施した。安定性評価は水溶液の性状観察に加え、水溶液中に残存する 不純物の量を、以下の方法に基づいて分析、測定した。
不純物ＨＰＬＣ液体クロマトグラフ法の条件
−検出機：紫外可視分吸光光度計（測定波長：２５０ｎｍ）
− カラム：Ｚｏｒｂａｘ  ＳＢ−Ｃ８（４．６ｍｍ×1５ｃｍ、３．５μｍ）またはこれと同等なカラム
−注入量：２０μＬ
−流量：１．０ｍＬ／分
−カラムの温度：３５℃
−検液の温度：２〜８℃付近の一定温度
−移動相Ａ−酢酸緩衝液注1)：アセトニトリルの混液（９７：３）
−移動相Ｂ−酢酸緩衝液注1)：アセトニトリルの混液（８７．５：１２．５）
【表４】
2020125359.tif 000007
＊注１）酢酸緩衝液（０．０３ｍｏｌ／Ｌ、ｐＨ５．５）：水２Ｌ当たり酢酸３．４ｍＬを加えてよく混ぜた後、５０％水酸化ナトリウムでｐＨ５．５に調整した液
【００１７】
［試験例１．加速安定性テスト（４０℃、７５％ＲＨ、６ヶ月の安定性評価）］
上記のように、実施例１ないし６と、比較例１ないし１０で収得された組成物に対して、加速安定性試験（４０℃、７５％ＲＨ）を６ヶ月間行った結果を表５ないし７に示した。安定性試験の評価基準は性状は無色ないし薄い微黄色を維持、従来に酸化によって発生されると知られた 不純物管理基準と同一に総 不純物は１．５％以下、個々の 不純物は０．２４％以下に設定した。
【表５】
2020125359.tif 000008
【００１８】
上記の表５の結果から確認することができるように、抗酸化剤として約０．５０なし１．２５ｍｇ／ｍＬのモノチオグリセロールを含有する場合、加速安定性試験６ヶ月間個々 不純物（基準：０．２４％以下）、総 不純物（基準：１．５％以下）が基準以下に維持され、優れた安定性を示した（実施例１ないし４）。モノチオグリセロールの濃度が０．１０ｍｇ／ｍＬ（比較例２）以下であるか、１．５０ｍｇ／ｍＬ（比較例１）以上の範囲に属する場合には、性状変化（変色）と一緒に個々 不純物が基準を超えていることを確認することができた。
【表６】
2020125359.tif 000009
【００１９】
上記の表６の結果から確認することができるように、バイアルの上部の酸素濃度が１．５％ｖ／ｖ以下である場合、加速安定性試験６ヶ月間個々 不純物（基準：０．２４％以下）、総 不純物（基準１．５％以下）が基準以下に維持され、優れた安定性を示したが（実施例３、５および６）、バイアルの上部の酸素濃度がこれより高い場合（比較例３および４）、性状変化（変色）と一緒に 不純物が基準を大きく超えることを確認することができる。
【表７】
2020125359.tif 000010
【００２０】
上記の表７の結果から確認することができるように、抗酸化剤を含まない、あるいは従来に一般的に用いられる抗酸化剤を含有する場合、加速安定性試験１ヶ月以降性状の変化（変色）が示されたり、個々 不純物、総 不純物の量が基準を超えており、保管３ヶ月ぶりに濃い黄色に変色して、以降の観察を中断した。すなわち、ペメトレキセドを含む注射溶液の組成物の製造の際、モノチオグリセロールを用いる場合がＬ−システイン、亜硫酸ナトリウム、硫化ナトリウムなどを用いる場合に比べて顕著に安定していることを確認することができた。
【００２１】
［試験例２．過酷安定性テスト（６０℃、６ヶ月の安定性評価）］
上記のように、実施例１ないし６、および比較例１ないし４で収得された組成物に対して過酷安定性試験（６０℃）を６ヶ月間行った結果を表８および９に示した。安定性試験の評価基準は性状は無色ないし薄い微黄色を維持、従来に酸化により発生されることに知られた 不純物の管理基準と同一に総 不純物は１．５％以下、個々の 不純物は０．２４％以下に設定した。
【表８】
2020125359.tif 000011
【００２２】
上記の表８の結果から確認することができるように、抗酸化剤として約０．５０ないし１．２５ｍｇ／ｍＬのモノチオグリセロールを含有する場合、過酷６ヶ月間個々 不純物（基準：０．２４％以下）、総 不純物（基準：１．５％以下）が基準以下に維持され、優れた安定性を示したが（実施例１ないし４）、モノチオグリセロールの濃度が０．１０ｍｇ／ｍＬ（比較例２）以下であるか、１．５０ｍｇ／ｍＬ（比較例１）以上の範囲に属する場合には保管６ヶ月後、濃い黄色に変色して、 不純物量の測定を中断した。
【表９】
2020125359.tif 000012
【００２３】
上記の表９の結果から確認することができるように、バイアルの上部の酸素濃度が１．５％ｖ／ｖ以下である場合、過酷６ヶ月間個々 不純物（基準：０．２４％以下）、総 不純物（基準１．５％以下）が基準以下に維持され、優れた安定性を示したが（実施例３、５、および６）、バイアルの上部の酸素濃度がこれより高い場合（比較例３および４）、性状の変化（変色）が示され、 不純物が過酷保管３ヶ月以内の基準に大きく超過されることが確認できた。
バイアルの上部の酸素濃度が２．０％（比較例３）、５．０％（比較例４）の場合、それぞれの保管６ヶ月、３ヶ月以降に濃い黄色に変色され、 不純物量の測定を中断した。
したがって、ペメトレキセドおよびその塩を含む注射用溶液の製造の際、抗酸化剤としてモノチオグリセロールを特定濃度範囲で含有し、バイアルの上部の酸素濃度を１．５％以下に管理する場合、一般的な常温の条件だけでなく６０℃の過酷な保管条件でも画期的に安定性が改善された剤形を収得できることを知ることができる。
【手続補正書】
【提出日】令和2年6月26日(2020.6.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
活性成分としてペメトレキセドまたはその薬剤学的に許容可能な塩、抗酸化剤として０．５ｍｇ／ｍＬないし１．２５ｍｇ／ｍＬのモノチオグリセロール及びｐＨ調節剤を含む、すぐに使用可能な液状製剤。
【請求項２】
抗酸化剤としてモノチオグリセロールを０．５０ないし１．００ｍｇ／ｍＬの量で含む、請求項１に記載のすぐに使用可能な液状製剤。
【請求項３】
抗酸化剤としてモノチオグリセロールを０．５０ないし０．８０ｍｇ／ｍＬの量で含む、請求項２に記載のすぐに使用可能な液状製剤。
【請求項４】
活性成分としてペメトレキセドまたはその薬剤学的に許容可能な塩と抗酸化剤としてモノチオグリセロールを含有し、上記の活性成分とモノチオグリセロールが約２０：１ないし５０：１の比率で含まれるすぐに使用可能な液状製剤。
【請求項５】
上記の活性成分とモノチオグリセロールが約２５：１ないし５０：１の比率で含まれる、請求項４に記載のすぐに使用可能な液状製剤。
【請求項６】
上記の活性成分を２０ないし１００ｍｇ／ｍＬの量で含む、請求項１に記載のすぐに使用可能な液状製剤。
【請求項７】
上記の活性成分がペメトレキセド二ナトリウム２．５水和物である、請求項１または４に記載のすぐに使用可能な液状製剤。
【請求項８】
上記の活性成分がペメトレキセド二ナトリウム７水和物である、請求項１または４に記載のすぐに使用可能な液状製剤。
【請求項９】
溶存酸素量が０．５ｐｐｍ以下である、請求項１又は４に記載のすぐに使用可能な液状製剤。
【請求項１０】
ｐＨが６．０ないし８．０である、請求項１又は４に記載のすぐに使用可能な液状製剤。
【請求項１１】
液状製剤が密封容器に包装され、密封容器の上部のガスに含有される酸素の濃度が１．５％ｖ／ｖ以下である、請求項１又は４に記載のすぐに使用可能な液状製剤。
【請求項１２】
密封容器の上部のガスに含有される酸素の濃度が１．０％ｖ／ｖ以下である、請求項１１に記載のすぐに使用可能な液状製剤。
【請求項１３】
４０℃、７５％相対湿度の環境で３ヶ月以上個々の不純物が０．２４％以下に維持され、総不純物が１．５０％以下に維持される、請求項１又は４に記載のすぐに使用可能な液状製剤。
【請求項１４】
６０℃の環境で３ヶ月以上個々の不純物が０．２４％以下に維持され、総不純物が１．５０％以下に維持される、請求項１又は４に記載のすぐに使用可能な液状製剤。
【請求項１５】
ペメトレキセドまたはその薬剤学的に許容可能な塩、及び０．５０ないし１．２５ｍｇ／ｍＬのモノチオグリセロールを注射用水に溶解させるステップ；および
密閉容器の上部のガスの酸素濃度が１．５％ｖ／ｖ以下になるように調節するステップを含めて、製造されるすぐに使用可能な液状製剤。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００２３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００２３】
上記の表９の結果から確認することができるように、バイアルの上部の酸素濃度が１．５％ｖ／ｖ以下である場合、過酷６ヶ月間個々 不純物（基準：０．２４％以下）、総 不純物（基準１．５％以下）が基準以下に維持され、優れた安定性を示したが（実施例３、５、および６）、バイアルの上部の酸素濃度がこれより高い場合（比較例３および４）、性状の変化（変色）が示され、 不純物が過酷保管３ヶ月以内の基準に大きく超過されることが確認できた。
バイアルの上部の酸素濃度が２．０％（比較例３）、５．０％（比較例４）の場合、それぞれの保管６ヶ月、３ヶ月以降に濃い黄色に変色され、 不純物量の測定を中断した。
したがって、ペメトレキセドおよびその塩を含む注射用溶液の製造の際、抗酸化剤としてモノチオグリセロールを特定濃度範囲で含有し、バイアルの上部の酸素濃度を１．５％以下に管理する場合、一般的な常温の条件だけでなく６０℃の過酷な保管条件でも画期的に安定性が改善された剤形を収得できることを知ることができる。
本発明のまた別の態様は、以下のとおりであってもよい。
〔１〕活性成分としてペメトレキセドまたはその薬剤学的に許容可能な塩と抗酸化剤で０．５ｍｇ／ｍＬないし１．２５ｍｇ／ｍＬのモノチオグリセロールを含む組成物。
〔２〕抗酸化剤でモノチオグリセロールを０．５０ないし１．００ｍｇ／ｍＬの含量を含む、前記〔１〕に記載の組成物。
〔３〕抗酸化剤でモノチオグリセロールを０．５０ないし０．８０ｍｇ／ｍＬの含量を含む、前記〔２〕に記載の組成物。
〔４〕活性成分としてペメトレキセドまたはその薬剤学的に許容可能な塩と抗酸化剤でモノチオグリセロールを含有し、上記の活性成分とモノチオグリセロールが約２０：１ないし５０：１の比率で含まれる組成物。
〔５〕上記の活性成分とモノチオグリセロールが約２５：１ないし５０：１の比率で含まれる、前記〔４〕に記載の組成物。
〔６〕上記の活性成分を２０ないし１００ｍｇ／ｍＬの含量で含む、前記〔１〕に記載の組成物。
〔７〕上記の活性成分がペメトレキセド二ナトリウム２．５水和物である、前記〔１〕または〔４〕に記載の組成物。
〔８〕上記の活性成分がペメトレキセド二ナトリウム７水和物である、前記〔１〕または〔４〕に記載の組成物。
〔９〕前記〔１〕または〔４〕に記載の組成物を液状状態で含む液状製剤。
〔１０〕上記の液状状態の溶存酸素量が０．５ｐｐｍ以下である、前記〔９〕に記載の液状製剤。
〔１１〕上記の液状のｐＨが６．０ないし８．０である、前記〔９〕に記載の液状製剤。
〔１２〕液状製剤が密封容器に包装され、密封容器の上部のガスに含有される酸素の濃度が１．５％ｖ／ｖ以下である、前記〔９〕に記載の液状製剤。
〔１３〕密封容器の上部のガスに含有される酸素の濃度が１．０％ｖ／ｖ以下である、前記〔１２〕に記載の液状製剤。
〔１４〕４０℃、７５％相対湿度の環境で３ヶ月以上個々 不純物が０．２４％以下、総 不純物が１．５０％以下に維持される、前記〔９〕に記載の液状製剤。
〔１５〕６０℃の環境で３ヶ月以上個々 不純物が０．２４％以下、総 不純物が１．５０％以下に維持される、前記〔９〕に記載の液状製剤。
〔１６〕ペメトレキセドまたはその薬剤学的に許容可能な塩、及び０．５０ないし１．２５ｍｇ／ｍＬのモノチオグリセロールを注射用水に溶解させるステップ；および
密閉容器の上部のガスの酸素濃度が１．５％ｖ／ｖ以下になるように調節するステップを含めて、製造される液状製剤。