(57)【要約】      （修正有）【課題】ヒト肝臓におけるアクチビンEの発現を誘導する、肥満症、動脈硬化症、狭心症、心筋梗塞、脳梗塞、又は閉塞性動脈硬化症などの予防及び／又は治療のための組成物を提供する。【解決手段】牛黄、鹿茸、及び胆汁酸からなる群より選択される有効成分を少なくとも一つ含有する、肥満症、動脈硬化症、狭心症、心筋梗塞、脳梗塞、又は閉塞性動脈硬化症などに優れた予防及び／又は治療効果を示す組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
牛黄、鹿茸、及び胆汁酸からなる群より選択される有効性成分を少なくとも一つ含有する、肥満症、動脈硬化症、狭心症、心筋梗塞、脳梗塞、又は閉塞性動脈硬化症の予防及び／又は治療のための組成物。
【請求項２】
肥満症の予防及び／又は治療のための請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
さらに、蟾酥、人参、羚羊角、真珠、沈香、龍脳、動物胆、麝香、紅参、菟絲子、枸杞子、当帰、防風、センキュウ、甘草、芍薬、サフラン、及び桂皮からなる群より選択される少なくとも一つを有効成分として含有する、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
牛黄が、Bos Taurus Linne var. domesticus Gmelin又はその他同属動物（Bovidae）の胆のうに生じた結石である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
鹿茸が、Cervus nippon Temminck, Cervus elaphus Linne, Cervus canadensis Erxleben、又はその他同属動物（Cervidae）の雄鹿の角化していない幼角である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項６】
胆汁酸が、デオキシコール酸又は動物胆である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項７】
医薬品又は医薬部外品である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
食品である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、牛黄及び／又は鹿茸及び／又は胆汁酸を有効成分として含有する組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
TGF-βスーパーファミリーに属するアクチビンEは、肝臓で特異的に作られる因子の一種として発見されたが、長い間その機能は不明であった。
そこでアクチビンEを肝臓から過剰に分泌する遺伝子改変マウスを作製し、コントロールマウスと比べて、1) 血糖値の低下、2) インスリン感受性の向上、3) 体温上昇、4) エネルギー代謝亢進を見出した。興味深いことに、マウス呼気中のO2/CO2ガスを計測した代謝実験から、アクチビンE高発現マウスが運動量を増やすことなく、脂質代謝が向上する現象が観察された。さらに、このマウスは高脂肪食を与えた場合でも体重増加が抑制されることを確認した。また、白色脂肪組織を詳しく調べてみたところ、褐色脂肪のUcp1（エネルギーを熱に変換する脱共役タンパク質）の発現量が増加することで褐色脂肪を活性化し、白色脂肪組織では寒冷刺激や運動等で出現し熱産生を促すベージュ脂肪細胞も増加していた。すなわち、アクチビンEは、脂肪組織において熱産生を促進し、エネルギー代謝を亢進する新しい抗肥満ホルモンと考えられた（非特許文献1）。
一方、アクチビンE遺伝子(Inhbe)を欠損させたノックアウトマウスでは、寒冷刺激に対する反応が鈍く、白色脂肪組織中のベージュ脂肪細胞の出現減少が原因と考えられる低体温の症状がみられたことから、アクチビンEが実際にエネルギー代謝促進に関わっていることが示唆された（非特許文献1）。
また、肝臓から分泌されるアクチビンEが直接脂肪細胞を活性化できるのか確かめるため、in vitroで褐色脂肪細胞にアクチビンEタンパク質を含む培養上清を作用させたところ、褐色脂肪細胞でUcp1の量がさらに増加し、アクチビンEタンパク質が褐色脂肪細胞の熱産生を直接活性化させる作用があることが確認された（非特許文献1）。
【０００３】
以上の結果から、アクチビンEが肝臓から分泌されるホルモン（ヘパトカイン）として働くこと、褐色脂肪を活性化させ、さらには白色脂肪組織でも熱産生能力を獲得したベージュ脂肪細胞を増加させることでエネルギー代謝を亢進させること、インスリン感受性を上昇させ抗肥満作用を示すことが明らにされた。
このアクチビンEの抗肥満作用は、糖尿病に伴い進行する動脈硬化症や狭心症、心筋梗塞、脳梗塞、閉塞性動脈硬化症などの深刻な病気の予防や治療への応用に期待できる。
【０００４】
ところで、牛黄（ゴオウ）は、ウシBos taurus Linne var. domesticus Gmelin (Bovidae)の胆のう中に生じた結石で（非特許文献2）、主成分は胆汁酸、コール酸、デオキシコール酸、ビリルビン、ビリベルジン、コレステロールである。末梢循環を改善し心臓の働きを助ける。
牛黄は古来熱病による意識障害、熱性けいれん（癲癇）、小児夜啼き、脳卒中、炎症、化膿などの治療や予防に用いられており、末梢の赤血球増加、抗酸化、利胆、血圧降下、強心、鎮静、抗炎症、解熱といった作用が報告され、動悸、息切れ、気つけの効能を有する医薬品、滋養強壮作用を有する医薬品、感應丸や清心丸処方の医薬品、ならびに小児用の医薬品の主成分あるいは原料として使われている（非特許文献３）。
【０００５】
また、鹿茸は、Cervus nippon Temminck, Cervus elaphus Linne, Cervus canadensis Erxleben 又 はその他同属動物 ( Cervidae ) の雄鹿の角化していない幼角である（非特許文献４）。強壮、強精、鎮痛作用を有する。
鹿茸は古来漏下、悪血、寒熱、及び驚癇を治し、気を益し、志を強くし、歯を生じ、老いずといった作用を有するとされ、薬理試験により免疫調節、抗がん、抗疲労、抗骨粗鬆症、抗酸化、抗炎症、創傷治癒促進、抗老化作用などが認められており（非特許文献５）、主に滋養強壮作用を有する医薬品の原料として使われている。
【０００６】
また、胆汁酸は、哺乳類の胆汁に広範に認められるステロイド誘導体でコラン酸骨格を持つ化合物の総称である。胆汁酸の主な役割は、消化管内でミセルの形成を促進し、食物脂肪を吸収しやすくするものである。胆汁酸は、胆汁分泌促進、胆石溶解、脂質消化吸収改善、整腸などの目的に、医薬品として用いられている。
【０００７】
しかし、牛黄、鹿茸、及び胆汁酸に肝臓からのアクチビンEの分泌促進作用があることは、これまで知られていなかった。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Hashimoto O. et al., 2018. Activin E controls energy homeostasis in both brown and white adipose tissues as a hepatokine. Cell Rep. 25 (5): 1193-1203.
【非特許文献２】第17改正日本薬局方
【非特許文献３】池上文雄., 2011.和漢薬No.699: 15-17.
【非特許文献４】日本薬局方外生薬規格2018
【非特許文献５】Zhigang Sui. et al., 2014. Bioactive components of velvet antlers and their pharmacological properties. J. Pharmac. Biomed. Anal. 87: 229-240.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
肥満症や、動脈硬化症、狭心症、心筋梗塞、脳梗塞、及び閉塞性動脈硬化症などの予防や治療は、現代病として急務の課題である。アクチビンEは、これらの疾患の治療や予防に重要な役割を果たすことが明らかになってきたが、アクチビンEそのものを医薬品化することは、現時点では困難である。アクチビンEは、前駆体タンパク質が細胞内で切断され、2量体の活性型となって分泌される。したがって、アクチビンEの組み換タンパク質は、現時点では研究レベルの段階にあり、即座に臨床応用することができない。
【００１０】
一方、ヒト肝臓におけるアクチビンEの発現を誘導すれば、アクチビンEによる抗肥満作用が期待できる。そればかりか、アクチビンEの肝臓での発現を促進する医薬品を開発すれば、アクチビンEを介した肥満症や動脈硬化症、狭心症、心筋梗塞、脳梗塞、及び閉塞性動脈硬化症などの予防や治療が可能となる。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
そこで、本発明者らは、様々な生薬やそこに含まれる成分からアクチビンEの発現を誘導するものを鋭意探索した結果、牛黄、鹿茸、及び胆汁酸にアクチビンEの発現促進作用を見出し、本発明を完成させた。
すなわち、本発明は、牛黄、鹿茸、及び胆汁酸からなる群より選択される有効性成分を少なくとも一つ含有する、肥満症、動脈硬化症、狭心症、心筋梗塞、脳梗塞、又は閉塞性動脈硬化症の予防及び／又は治療のための組成物に関する。
【発明の効果】
【００１２】
本発明によれば、牛黄、鹿茸、及び胆汁酸からなる群より選択される有効性成分を少なくとも一つ含有する、肥満症、動脈硬化症、狭心症、心筋梗塞、脳梗塞、又は閉塞性動脈硬化症などに優れた予防及び／又は治療効果を示す組成物を提供することができる。また、本発明の組成物は、有効成分が天然由来であるので、長期に服用しても副作用などの心配が少なく、安全性も高い。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】アクチビンEプロモーター活性に対する牛黄の効果を示した図である。図中、10%DMSOは10%DMSO含有DMEM/F12培地を示す。また、**はP<0.01を、***はP<0.005を示す。
【図２】アクチビンEプロモーター活性に対する鹿茸の効果を示した図である。図中、**はP<0.05を、***はP<0.005を示す。
【図３】HepG2細胞の生存率に対する牛黄の影響を示した図である。図中、10%DMSOは10%DMSO含有DMEM/F12培地を示す。
【図４】HepG2細胞の生存率に対する鹿茸の影響を示した図である。
【図５】アクチビンEプロモーター活性に対するデオキシコール酸ナトリウムの効果を示した図である。図中、Contはコントロールを示し、×300及び×50はそれぞれ試料を1/300及び1/50に希釈した試料含有無血清培養液を示す。また、**はP<0.001を、***はP<0.0001を示す。
【図６】HepG2-ActEp細胞の生存率に対するデオキシコール酸ナトリウムの影響を示した図である。図中、Contはコントロールを示し、×300及び×50はそれぞれ試料を1/300及び1/50に希釈した試料含有無血清培養液を示す。また、***はP<0.0001を示す。
【図７】アクチビンEプロモーター活性に対する牛黄、鹿茸、及び／又は動物胆を含有する医薬製剤の効果を示した図である。図中、Contはコントロールを示し、×100及び×50はそれぞれ試料を1/100及び1/50に希釈した試料含有無血清培養液を示す。また、*はP<0.05を、**はP<0.01を、***はP<0.005を示す。
【図８】アクチビンEプロモーター活性に対する牛黄、鹿茸、及び／又は動物胆を含有する医薬製剤の効果を示した図である。図中、Contはコントロールを示し、×100及び×50はそれぞれ試料を1/100及び1/50に希釈した試料含有無血清培養液を示す。また、***はP<0.005を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
本発明で使用される牛黄（ゴオウ）は、ウシ、例えば、Bos taurus Linne var. domesticus Gmelin (Bovidae)、又はその他の同属動物（Bovidae）の胆のう中に生じた結石であれば、特に制限されない。
【００１５】
本発明で使用される鹿茸（ロクジョウ）は、雄鹿、例えば、Cervus nippon Temminck、Cervus elaphus Linne、Cervus canadensis Erxleben、又はその他の同属動物（Cervidae）の雄の角化していない幼角であれば、特に制限されない。
【００１６】
本発明の胆汁酸として、コール酸、グリココール酸、タウロコール酸、ケノデオキシコール酸、ヒオコール酸、デオキシコール酸、リトコール酸、ヒオデオキシコール酸、及びウルソデオキシコール酸などが例示される。また、胆汁酸を含有する生薬、例えば、熊胆、牛胆、豚胆、猪胆、及び鶏胆などの動物胆（ドウブツタン）を用いてもよい。
良好なアクチビンEプロモーター活性が得られることから、デオキシコール酸、リトコール酸、ヒオデオキシコール酸、及びウルソデオキシコール酸が好ましく、デオキシコール酸がより好ましい。
【００１７】
本発明の牛黄、鹿茸、及び胆汁酸として、それぞれ、牛黄、鹿茸、及び胆汁酸を含有する生薬（例えば、動物胆）をそのまま使用してもよいが、これらを粉砕して得られた粉末を使用してもよく、あるいは、牛黄、鹿茸、又は胆汁酸を含有する生薬（例えば、動物胆）から、本発明の効果を損なわない限り、水やエタノールなどの医薬品や食品と一般に利用される溶剤にて抽出されたエキスなどを使用してもよい。
【００１８】
本発明の組成物は、牛黄、鹿茸、及び胆汁酸からなる群より選択される有効成分そのものであってもよいが、本発明の効果を損なわない限り、牛黄、鹿茸、及び胆汁酸以外の有効成分を含有又は併用していてもよい。そのような有効成分として、例えば、他のアクチビンEの発現促進作用を有する物質、あるいは肥満症、動脈硬化症、狭心症、心筋梗塞、脳梗塞、又は閉塞性動脈硬化症に対して予防又は治療効果を有する物質、例えば、マジンドール、セチリスタット、ロルカセリン、トピラマート、ナルトレキソン、ブプロピオン、丹参、ビタミン類（例えばCoenzyme Q10）、麻黄、防風通聖散などを含有又は併用してもよい。
【００１９】
あるいは、本発明の組成物は、さらなる有効成分として、牛黄、鹿茸、及び動物胆以外の生薬、例えば、蟾酥（センソ）、人参（ニンジン）〔例えば、ニンジン粗エキス末〕、羚羊角（レイヨウカク）〔特に羚羊角末〕、真珠（シンジュ）、沈香（ジンコウ）、龍脳（リュウノウ）、麝香（ジャコウ）、紅参（コウジン）〔特に紅参乾燥エキス〕、菟絲子（トシシ）〔特に菟絲子乾燥エキス〕、枸杞子（クコシ）〔特に枸杞子末〕、当帰（トウキ）〔特に当帰末〕、防風（ボウフウ）〔特に防風末〕、センキュウ〔特にセンキュウ末〕、甘草（カンゾウ）〔特に甘草末〕、芍薬（シャクヤク）〔特に芍薬末〕、又は桂皮（ケイヒ）〔特に桂皮末〕、サフラン（好ましくはサフラン末）などを含有又は併用してもよい。
【００２０】
好ましくは、本発明の組成物は、有効成分として、蟾酥、牛黄、鹿茸（好ましくは鹿茸末）、人参、羚羊角（好ましくは羚羊角末）、真珠、沈香、龍脳、及び動物胆を含有又は併用してもよい。
好ましくは、本発明の組成物は、有効成分として、牛黄、人参、及びニンジン粗エキス末を含有又は併用してもよい。
好ましくは、本発明の組成物は、有効成分として、鹿茸（好ましくは鹿茸末）及び紅参（好ましくは紅参乾燥エキス）を含有又は併用してもよい。
好ましくは、本発明の組成物は、有効成分として、紅参（好ましくは紅参乾燥エキス）、鹿茸（好ましくは鹿茸末）、菟絲子（好ましくは菟絲子乾燥エキス）、及び枸杞子（好ましくは枸杞子末）を含有又は併用してもよい。
好ましくは、本発明の組成物は、有効成分として、牛黄、紅参（好ましくは紅参乾燥エキス）、当帰（好ましくは当帰末）、防風（好ましくは防風末）、センキュウ（好ましくはセンキュウ末）、甘草（好ましくは甘草末）、芍薬（好ましくは芍薬末）、桂皮（好ましくは桂皮末）、動物胆、及び鹿茸（好ましくは鹿茸末）を含有又は併用してもよい。
好ましくは、本発明の組成物は、有効成分として、蟾酥、牛黄、麝香、人参、沈香、及び動物胆を含有又は併用してもよい。
好ましくは、本発明の組成物は、有効成分として蟾酥、牛黄、鹿茸（好ましくは鹿茸末）、人参、サフラン（好ましくはサフラン末）、真珠、龍脳、及び動物胆を含有又は併用してもよい。
好ましくは、本発明の組成物は、有効成分として蟾酥、牛黄、鹿茸（好ましくは鹿茸末）、人参、羚羊角（好ましくは羚羊角末）、真珠、龍脳、及び動物胆を含有又は併用してもよい。
好ましくは、本発明の組成物は、有効成分として蟾酥、牛黄、鹿茸（好ましくは鹿茸末）、人参、真珠、龍脳、及び動物胆を含有又は併用してもよい。
好ましくは、本発明の組成物は、有効成分として蟾酥、牛黄、鹿茸（好ましくは鹿茸末）、人参、羚羊角（好ましくは羚羊角末）、サフラン（好ましくはサフラン末）、真珠、龍脳、沈香及び動物胆を含有又は併用してもよい。
好ましくは、本発明の組成物は、有効成分として麝香、牛黄、人参、羚羊角（好ましくは羚羊角末）、沈香、龍脳、動物胆、及びウルソデオキシコール酸を含有又は併用してもよい。
【００２１】
本発明の組成物は、前記の有効成分の他に、本発明の効果を損なわない限り、賦形剤、甘味料、酸味料、増粘剤、香料、色素、乳化剤、及びその他に医薬品や食品などで一般に利用されている添加剤や素材を含んでいてもよい。
【００２２】
本発明に係る組成物は、食品又は動物用飼料として、例えば、健康食品、機能性食品、健康補助食品、特定保健用食品、美容食品、栄養補助食品（サプリメント）、又は特定機能性表示食品として使用することができる。これら食品及び動物用飼料は、例えば、お茶及びジュースなどの飲料水；並びにアイスクリーム、ゼリー、あめ、チョコレート、及びチューインガムなどの形態であってもよい。また、液剤、粉剤、粒剤、カプセル剤、又は錠剤の形態であってもよい。ここで、動物用飼料の動物には、ペット動物、畜産動物、又は動物園などで飼育されている動物を含む、疾患の予防又は治療を必要とする全ての動物が含まれる。
【００２３】
本発明に係る組成物は、医薬品又は医薬部外品として使用することができる。これら医薬品又は医薬部外品は、例えば、丸剤、顆粒剤、散剤、錠剤、コーティング錠、糖衣錠、カプセル剤（例えば、硬又は軟ゼラチンカプセル剤）、液剤、乳濁剤、又は懸濁剤の形態で経口的に投与できるが、例えば、坐剤の形態で直腸的に；例えば、注射剤又は輸液の形態で；例えば軟膏、クリーム剤、ゲル剤、又は液剤の形態で局部的又は経皮的に；例えば、点眼液及び洗眼液の形態で眼局所的に；非経口的に投与することもできる。好ましくは経口投与である。
【００２４】
本発明の組成物は、慣用の手法にて、牛黄、鹿茸、若しくは胆汁酸を含有する生薬（例えば、動物胆）又はこれらの生薬の粉末と必要に応じてその他の生薬粉末とを原料として、あるいはそれら生薬の抽出エキス粉末を原料とし、当該原料に賦形剤を加えて、製丸工程により丸剤、カプセル充填によりカプセル剤、又は造粒工程により顆粒剤の形状としてもよい。
【００２５】
本発明の組成物は、肥満症、動脈硬化症、狭心症、心筋梗塞、脳梗塞、又は閉塞性動脈硬化症などの予防及び／又は治療に有用である。
【実施例】
【００２６】
これより本発明を以下の実施例で詳しく説明するが、本発明はこれに限定されない。なお、実施例の試験結果の統計処理は、測定値を平均±標準誤差で表し、ダネットの多重比較検定を用いて、コントロールに対する各群の結果を比較した。統計処理に用いたソフトウェアはPrism5 software（GraphPad Software Inc.)である。
【００２７】
（実施例１）試料の調製
(1)  牛黄の抽出液の調製
牛黄の原末10 mgに、10%DMSO含有DMEM/F12培地 1mlを加えて、室温で30分間超音波をかけて懸濁液を得た。その後、懸濁液を遠心（2500 rpm、5分間）し、上澄みを回収して、0.45 μmフィルターでろ過した。得られたろ液を牛黄の抽出液とし、以下の試験に供した。
(2)  鹿茸の抽出液の調製
鹿茸の原末10 mgに、DMEM/F12培地 1mlを加えて、室温で30分間超音波をかけて懸濁液を得た。その後、懸濁液を遠心（2500 rpm、5分間）し、上澄みを回収して、0.45 μmフィルターでろ過した。得られたろ液を鹿茸の抽出液とし、以下の試験に供した。
【００２８】
（実施例２）アクチビン遺伝子発現に対する効果
Activin E 遺伝子の開始コドン上流1.4 kbpのpromoter配列をPCRで増幅し、pNL2.3 vector (Promega)の制限酵素サイトSacI/XhoIにサブクローニングした。このベクターを制限酵素SalIで消化し直鎖状にした後、HepG2細胞にトランスフェクションし、ハイグロマイシン (450 μg/ml)の入った10%ウシ胎児血清加DME/F12培養液(Thermo Fisher scientific)で安定形質発現株を選択した。この細胞を48-well plateに3ウェルずつ播種して、コンフルエントになるまで1〜2日培養した後、DME/F12培養液で2回洗浄し0.1%ウシ血清アルブミン(BSA)添加DME/F12培養液に交換した (100 μl/well)。その後、当該培養液に、実施例１で調製された牛黄の抽出液又は鹿茸の抽出液を培養液の1/50、1/100、又は1/500量添加して、24時間37℃、5% CO2濃度下で培養した。この培養上清(20 μl)中のルシフェラーゼ活性をNano GLo Luciferase assay (Promega)を用いて測定した。コントロールは、牛黄については10%DMSO含有DMEM/F12培地を、鹿茸についてはDMEM/F12培地を使用した。結果は図１及び２に示した。
その結果、コントロールと比較して牛黄（図１）及び鹿茸（図２）は濃度依存的にアクチビンEプロモーター活性を亢進した。さらに鹿茸の抽出液1/50量は、陽性コントールのインスリンと同程度の活性があることが明らかになった（図２）。
【００２９】
（実施例３）HepG2細胞のレポーター遺伝子安定発現株の生存率に対する影響
牛黄及び鹿茸の細胞生存活性に対する影響を検討するため、実施例２に記載の要領で培養した細胞について、CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay (Promega)を行った。コントロールは、牛黄については10%DMSO含有DMEM/F12培地を、鹿茸についてはDMEM/F12培地を使用した。結果は図３及び４に示した。
その結果、牛黄（図３）及び鹿茸（図４）は細胞の増殖には影響をおよぼしていないことが確認できた。
【００３０】
（実施例４）アクチビンＥプロモーター活性に対する効果
(1)  試料の調製
デオキシコール酸ナトリウム及びドデシル硫酸ナトリウムを、それぞれ、PBSに0.2%の濃度になるように溶解してから、フィルター（0.22 μm）でろ過した。得られたろ液を試料として、以下の試験に供した。
(2)  アクチビンＥプロモーター活性
ActivinE promoter Luc (分泌型luc）を組み込んだHepG2-ActEp細胞を48 well plateに3ウェルずつ播種し、培養後、試料含有無血清培養液（上記で調製された試料を無血清培養液で1/300に希釈したもの。ただし、インスリンだけは1/50に希釈した）を添加した後、24時間インキュベートしてルシフェラーゼ活性を指標にレポーターアッセイを行った（Nano-Glo luciferase assay system, Promega)。コントロールは無血清培養液を使用した。結果は図５に示した。
(3)  細胞の生存活性
上記のアクチビンＥプロモーター活性の試験の要領で、細胞を試料含有無血清培養液で24時間インキュベートした後、細胞の生存活性をプロメガCellTiter 96（登録商標）AQueous OneSolution Cell Proliferation Assay (MTS)により検討した。コントロールは無血清培養液を使用した。結果は図６に示した。
(4)  結果
その結果、細胞の生存活性に影響のない薄い濃度のデオキシコール酸ナトリウムで、アクチビンEプロモーター活性の増加がみられた。
【００３１】
（実施例５）牛黄、鹿茸、及び／又は動物胆を含有する医薬製剤の調製
(1)  製剤例１
大人（15才以上）1日量（6粒）中に以下の表に示す成分を含む丸剤を調製した。
【表１】
2020186223.tif 000002
【００３２】
(2)  製造例２
大人（15才以上）1日量（4カプセル）中に以下の表に示す成分を含むカプセル剤を調製した。
【表２】
2020186223.tif 000003
【００３３】
(3)  製造例３
大人（15才以上）1日量（6カプセル）中に以下の表に示す成分を含むカプセル剤を調製した。
【表３】
2020186223.tif 000004
【００３４】
(4)  製剤例４
大人（15才以上）１日量〔2包（1包1g）〕中に以下の表に示す成分を含む顆粒剤を調製した。
【表４】
2020186223.tif 000005
【００３５】
(5)  製剤例５
大人（15才以上）1日量（12丸）中に以下の表に示す成分を含む丸剤を調製した。
【表５】
2020186223.tif 000006
【００３６】
(6)  製剤例６
大人（15才以上）1日量（9粒）中に以下の表に示す成分を含む丸剤を調製した。
【表６】
2020186223.tif 000007
【００３７】
（7）製剤例７
大人（15才以上）1日量（3カプセル）中に以下の表に示す成分を含むカプセル剤を調製した。
【表７】
2020186223.tif 000008
【００３８】
（8）製剤例８
大人（15才以上）1日量（3錠）中に以下の表に示す成分を含む錠剤を調製した。
【表８】
2020186223.tif 000009
【００３９】
（9）製剤例９
大人（15才以上）1日量（2丸）中に以下の表に示す成分を含む丸剤を調製した。
【表９】
2020186223.tif 000010
【００４０】
（10）製剤例１０
大人（15才以上）1日量（6丸）中に以下の表に示す成分を含む丸剤を調製した。
【表１０】
2020186223.tif 000011
【００４１】
（11）製剤例１１
大人（15才以上）1日量（9粒）中に以下の表に示す成分を含む丸剤を調製した。
【表１１】
2020186223.tif 000012
【００４２】
（実施例６）牛黄、鹿茸、及び／又は動物胆を含有する医薬製剤のアクチビンＥプロモーターに対する効果
(1)  試料の調製
前記実施例５で調製された製剤例１〜５、７、８、及び１１について、その粉末(10 mg)に1 ml のDME/F12を加え撹拌した。4℃、O/Nのインキュベーションの後、遠心処理（スピンダウン）した。得られた上清をフィルター（0.22 μm）にかけて得られたろ液を試料として以下の試験に供した。
(2)  アクチビンＥプロモーター活性
ActivinE promoter Luc (分泌型luc）を組み込んだHepG2-ActEp細胞を48 well plateに3ウェルずつ播種し、培養後、試料含有無血清培養液（上記で調製された試料を無血清培養液で1/100に希釈したもの。ただし、インスリンだけは1/50に希釈した）を添加した後、24時間インキュベートしてルシフェラーゼ活性を指標にレポーターアッセイを行った（Nano-Glo luciferase assay system, Promega)。コントロールは無血清培養液を使用した。結果は図７及び図８に示した。
その結果、前記実施例５で調製された製剤例で、アクチビンEプロモーター活性の増加がみられた。
【産業上の利用可能性】
【００４３】
本発明の組成物は、肥満症、動脈硬化症、狭心症、心筋梗塞、脳梗塞、又は閉塞性動脈硬化症などの予防及び／又は治療に使用することができる。このような目的に、本発明の組成物は、医薬品、あるいは健康食品、健康補助食品、特定保健用食品、栄養補助食品、又は特定機能性表示食品などの食品として利用することができる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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