(57)【要約】      （修正有）【課題】マイクロＲＮＡによる、対象ががんである可能性を検査する方法の提供。【解決手段】マイクロＲＮＡが細胞外小胞に含まれる、または、前記マイクロＲＮＡが細胞外小胞から抽出されている、尿の抽出物の使用。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
データＳ１または表２に記載のいずれかのマイクロＲＮＡを含む、尿の抽出物。
【請求項２】
細胞外小胞を含み、前記マイクロＲＮＡが細胞外小胞に含まれる、または、前記マイクロＲＮＡが細胞外小胞から抽出されている、請求項１に記載の尿の抽出物。
【請求項３】
前記ＲＮＡが、遊離マイクロＲＮＡの形態である、請求項１に記載の尿の抽出物。
【請求項４】
マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−３１１７−５ｐ、ｍｉＲ−３１１８、ｍｉＲ−３１２１−３ｐ、ｍｉＲ−３１２１−５ｐ、ｍｉＲ−３１２６−５ｐ、ｍｉＲ−３１２８、ｍｉＲ−３１３３、ｍｉＲ−３１３４、ｍｉＲ−３１３６−３ｐ、ｍｉＲ−３１３６−５ｐ、ｍｉＲ−３１３９、ｍｉＲ−３１４２、ｍｉＲ−３１４３、ｍｉＲ−３１４５−３ｐ、ｍｉＲ−３１６３、ｍｉＲ−３１６６、ｍｉＲ−３１６７、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５２５−５ｐ、ｍｉＲ−５５１ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−５５８、ｍｉＲ−９２１、ｍｉＲ−９４２−３ｐ、ｍｉＲ−３１２６−３ｐ、ｍｉＲ−３１２７−５ｐ、ｍｉＲ−３１２９−５ｐ、ｍｉＲ−３１４４−５ｐ、ｍｉＲ−３１５０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５２−５ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３１５７−３ｐ、ｍｉＲ−３１５９、ｍｉＲ−３１６５、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４３２１、ｍｉＲ−４５２１、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−４９９９−５ｐ、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−６８７４−５ｐ、ｍｉＲ−３１２７−３ｐ、ｍｉＲ−３１３０−５ｐ、ｍｉＲ−３１３１、ｍｉＲ−３１４１、ｍｉＲ−３１５０ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５１−３ｐ、ｍｉＲ−３１５１−５ｐ、ｍｉＲ−３１５４、ｍｉＲ−３１６０−３ｐ、ｍｉＲ−３１６０−５ｐ、ｍｉＲ−３７８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−５２６ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−３１５０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３１６２−５ｐ、及びｍｉＲ−４２５４からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の尿の抽出物。
【請求項５】
マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−３１６３、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５５８、ｍｉＲ−３１２７−５ｐ、及びｍｉＲ−４５２１からなる群から選択される少なくとも１種のマイクロＲＮＡまたは全てのマイクロＲＮＡである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の尿の抽出物。
【請求項６】
マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−３７８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、及びｍｉＲ−５２６ｂ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種のマイクロＲＮＡまたは全てのマイクロＲＮＡである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の尿の抽出物。
【請求項７】
尿が、肺がんを有する対象の尿である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の尿の抽出物。
【請求項８】
マイクロＲＮＡが、ｌｅｔ−７ｉ−３ｐ、ｍｉＲ−１８３−５ｐ、ｍｉＲ−２０２−５ｐ、ｍｉＲ−４０９−５ｐ、ｍｉＲ−４６６１−５ｐ、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−５５８７−５ｐ、ｍｉＲ−３７２−３ｐ、ｍｉＲ−３７８ｂ、ｍｉＲ−５２０ｂ、ｍｉＲ−１２６６−３ｐ、ｍｉＲ−３６０５−５ｐ、ｍｉＲ−３６１２、ｍｉＲ−４６４５−３ｐ、ｍｉＲ−４６９４−３ｐ、ｍｉＲ−４７５２、ｍｉＲ−６８１６−３ｐ、ｍｉＲ−８０８７、ｌｅｔ−７ｆ−２−３ｐ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−２０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−３４ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−９３−５ｐ、ｍｉＲ−１３０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−１８５−５ｐ、ｍｉＲ−２０３ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３０２ｄ−５ｐ、ｍｉＲ−３３７−３ｐ、ｍｉＲ−３７８ｃ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−４４９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−４８３−５ｐ、ｍｉＲ−５０６−３ｐ、ｍｉＲ−５１１−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−６５４−３ｐ、ｍｉＲ−６６８−５ｐ、ｍｉＲ−６７０−５ｐ、ｍｉＲ−６７１−３ｐ、ｍｉＲ−７４４−３ｐ、ｍｉＲ−１１７８−３ｐ、ｍｉＲ−１２５４、ｍｉＲ−１２８４、ｍｉＲ−１３２３、ｍｉＲ−２１１６−５ｐ、ｍｉＲ−２３５５−３ｐ、ｍｉＲ−３１３２、ｍｉＲ−３１３８、ｍｉＲ−３１６４、ｍｉＲ−３１８６−３ｐ、ｍｉＲ−３１８９−３ｐ、ｍｉＲ−３１９８、ｍｉＲ−３２００−５ｐ、ｍｉＲ−３６５７、ｍｉＲ−３６６７−５ｐ、ｍｉＲ−３６８０−５ｐ、ｍｉＲ−３６９２−５ｐ、ｍｉＲ−３７１３、ｍｉＲ−３９２１、ｍｉＲ−３９３６、ｍｉＲ−４２７３、ｍｉＲ−４２９９、ｍｉＲ−４３０６、ｍｉＲ−４３１６、ｍｉＲ−４３１９、ｍｉＲ−４４２１、ｍｉＲ−４４２９、ｍｉＲ−４４３５、ｍｉＲ−４４４１、ｍｉＲ−４４７３、ｍｉＲ−４５０６、ｍｉＲ−４６３３−５ｐ、ｍｉＲ−４６５８、ｍｉＲ−４７３３−５ｐ、ｍｉＲ−４７３３−３ｐ、ｍｉＲ−５００４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９４、ｍｉＲ−５１９７−５ｐ、ｍｉＲ−５５７１−５ｐ、ｍｉＲ−６０８３、ｍｉＲ−６７１７−５ｐ、ｍｉＲ−６７２０−５ｐ、ｍｉＲ−６７６７−３ｐ、ｍｉＲ−６７８１−３ｐ、ｍｉＲ−６８１１−３ｐ、ｍｉＲ−６８２１−３ｐ、ｍｉＲ−６８２８−５ｐ、ｍｉＲ−６８３２−５ｐ、ｍｉＲ−６８３７−３ｐ、ｍｉＲ−６８４１−５ｐ、ｍｉＲ−６８５３−５ｐ、ｍｉＲ−６８７１−３ｐ、ｍｉＲ−６８７５−５ｐ、ｍｉＲ−６８７８−５ｐ、ｍｉＲ−７１１２−３ｐ、ｍｉＲ−７７０３、ｍｉＲ−７８４８−３ｐ、及びｍｉＲ−７８５６−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の尿の抽出物。
【請求項９】
マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−１８３−５ｐ、ｍｉＲ−２０２−５ｐ、及びｍｉＲ−４０９−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、請求項８に記載の尿の抽出物。
【請求項１０】
マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−３７２−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｂ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３４ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１８５−５ｐ、ｍｉＲ−３３７−３ｐ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５０６−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−１２８４、ｍｉＲ−１３２３、及びｍｉＲ−４２７３からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、請求項８に記載の尿の抽出物。
【請求項１１】
尿が、膵がんを有する対象の尿である、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の尿の抽出物。
【請求項１２】
マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−４５２１、ｌｅｔ−７ｃ−３ｐ、ｌｅｔ−７ｉ−５ｐ、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２６ａ−１−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−２００ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−２１９ａ−２−３ｐ、ｍｉＲ−２９７、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−３３０−３ｐ、ｍｉＲ−３７４ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４３１−５ｐ、ｍｉＲ−４５４−５ｐ、ｍｉＲ−５１３ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５４８ａｘ、ｍｉＲ−５９３−５ｐ、ｍｉＲ−６２３、ｍｉＲ−６６４ａ−５ｐ、ｍｉＲ−９４２−３ｐ、ｍｉＲ−１２０５、ｍｉＲ−１２７６、ｍｉＲ−１２８８−３ｐ、ｍｉＲ−１２９７、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４２９５、ｍｉＲ−４４３９、ｍｉＲ−４５２４ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４７０３−３ｐ、ｍｉＲ−４７６８−５ｐ、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−５６９６、ｍｉＲ−７１６１−５ｐ、ｌｅｔ−７ｉ−２−３ｐ、及びｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の尿の抽出物。
【請求項１３】
マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−２９７、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−３３０−３ｐ、ｍｉＲ−４５４−５ｐ、ｍｉＲ−１２９７、及びｍｉＲ−４２９５からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、請求項１２に記載の尿の抽出物。
【請求項１４】
マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐである、請求項１２に記載の尿の抽出物。
【請求項１５】
尿が、肝がんを有する対象の尿である、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の尿の抽出物。
【請求項１６】
マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−９２ａ−２−５ｐ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−１９６ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−２９９−３ｐ、ｍｉＲ−４９２、ｍｉＲ−５１３ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６０１、ｍｉＲ−６１９−５ｐ、ｍｉＲ−１２８５−３ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３１６２−５ｐ、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４２９５、ｍｉＲ−４３１１、ｍｉＲ−４５３１、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｌｅｔ−７ｆ−２−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、及びｍｉＲ−４７８３−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の尿の抽出物。
【請求項１７】
マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−２９９−３ｐ、及びｍｉＲ−４２９５からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、請求項１６に記載の尿の抽出物。
【請求項１８】
マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐである、請求項１６に記載の尿の抽出物。
【請求項１９】
尿が、膀胱がんを有する対象の尿である、請求項１６〜１８のいずれか一項に記載の尿の抽出物。
【請求項２０】
マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−４５３１、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０３ａ−２−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１２４−３ｐ、ｍｉＲ−１５１ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１５１ｂ、ｍｉＲ−２００ａ−５ｐ、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５５１ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６１７、ｍｉＲ−８７３−３ｐ、ｍｉＲ−９２１、ｍｉＲ−１２８８−３ｐ、ｍｉＲ−３１２４−５ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３９１７、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４７２７−３ｐ、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−６０７４、ｍｉＲ−６８７４−５ｐ、ｍｉＲ−６８９２−５ｐ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−１３５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−４７８３−５ｐ、及びｍｉＲ−７８４９−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の尿の抽出物。
【請求項２１】
マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１２４−３ｐ、ｍｉＲ−１５１ａ−５ｐ、及びｍｉＲ−３００からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、請求項２０に記載の尿の抽出物。
【請求項２２】
マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ及びｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、請求項２０に記載の尿の抽出物。
【請求項２３】
尿が、前立腺がんを有する対象の尿である、請求項２０〜２２のいずれか一項に記載の尿の抽出物。
【請求項２４】
尿が、健常者の尿である、請求項１〜６、８〜１０、１２〜１４、１６〜１８、及び２０〜２２のいずれか一項に記載の尿の抽出物。
【請求項２５】
対象ががんである可能性を検査する方法であって、
以下（ａ）〜（ｅ）からなる群から選択される１以上を含む、方法：
（ａ）対象から得られる尿または尿の抽出物においてｍｉＲ−３１６３、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５５８、ｍｉＲ−３１２７−５ｐ、及びｍｉＲ−４５２１からなる群から選択される少なくとも１種のマイクロＲＮＡまたは全てのマイクロＲＮＡを検出すること、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも高い場合には、対象が肺がんである可能性があることを示す；
（ｂ）対象から得られる尿または尿の抽出物において、ｍｉＲ−１８３−５ｐ、ｍｉＲ−２０２−５ｐ、及びｍｉＲ−４０９−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを検出すること、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも高い場合には、対象が膵がんである可能性があることを示す；
（ｃ）対象から得られる尿または尿の抽出物において、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−２９７、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−３３０−３ｐ、ｍｉＲ−４５４−５ｐ、ｍｉＲ−１２９７、及びｍｉＲ−４２９５からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを検出すること、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも高い場合には、対象が肝がんである可能性があることを示す；
（ｄ）対象から得られる尿または尿の抽出物において、、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−２９９−３ｐ、及びｍｉＲ−４２９５からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを検出すること、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも高い場合には、対象が膀胱がんである可能性があることを示す；
（ｅ）対象から得られる尿または尿の抽出物においてｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１２４−３ｐ、ｍｉＲ−１５１ａ−５ｐ、及びｍｉＲ−３００からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを検出すること、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも高い場合には、対象が前立腺がんである可能性があることを示す。
【請求項２６】
請求項２５に記載の方法であって、
（Ａ）〜（Ｅ）からなる群から選択される１以上を含む、方法：
（Ａ）前記（ａ）において対象から得られる尿または尿の抽出物において、ｍｉＲ−３７８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、及びｍｉＲ−５２６ｂ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種のマイクロＲＮＡまたは全てのマイクロＲＮＡをさらに検出することと、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも低い場合には、対象が肺がんである可能性があることを示す；
（Ｂ）前記（ｂ）において対象から得られる尿または尿の抽出物において、ｍｉＲ−３７２−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｂ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３４ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１８５−５ｐ、ｍｉＲ−３３７−３ｐ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５０６−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−１２８４、ｍｉＲ−１３２３、及びｍｉＲ−４２７３からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡをさらに検出することと、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも低い場合には、対象が膵がんである可能性があることを示す；
（Ｃ）前記（ｃ）において対象から得られる尿または尿の抽出物において、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐをさらに検出することと、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも低い場合には、対象が肝がんである可能性があることを示す；
（Ｄ）前記（ｄ）において対象から得られる尿または尿の抽出物において、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐをさらに検出することと、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも低い場合には、対象が膀胱がんである可能性があることを示す；
（Ｅ）前記（ｅ）において対象から得られる尿または尿の抽出物において、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ及びｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡをさらに検出することと、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも低い場合には、対象が前立腺がんである可能性があることを示す。
【請求項２７】
対象ががんである可能性を検査する方法であって、
（ｉ）ｍｉＲ−３１１７−５ｐ、ｍｉＲ−３１１８、ｍｉＲ−３１２１−３ｐ、ｍｉＲ−３１２１−５ｐ、ｍｉＲ−３１２６−５ｐ、ｍｉＲ−３１２８、ｍｉＲ−３１３３、ｍｉＲ−３１３４、ｍｉＲ−３１３６−３ｐ、ｍｉＲ−３１３６−５ｐ、ｍｉＲ−３１３９、ｍｉＲ−３１４２、ｍｉＲ−３１４３、ｍｉＲ−３１４５−３ｐ、ｍｉＲ−３１６３、ｍｉＲ−３１６６、ｍｉＲ−３１６７、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５２５−５ｐ、ｍｉＲ−５５１ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−５５８、ｍｉＲ−９２１、ｍｉＲ−９４２−３ｐ、ｍｉＲ−３１２６−３ｐ、ｍｉＲ−３１２７−５ｐ、ｍｉＲ−３１２９−５ｐ、ｍｉＲ−３１４４−５ｐ、ｍｉＲ−３１５０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５２−５ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３１５７−３ｐ、ｍｉＲ−３１５９、ｍｉＲ−３１６５、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４３２１、ｍｉＲ−４５２１、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−４９９９−５ｐ、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−６８７４−５ｐ、ｍｉＲ−３１２７−３ｐ、ｍｉＲ−３１３０−５ｐ、ｍｉＲ−３１３１、ｍｉＲ−３１４１、ｍｉＲ−３１５０ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５１−３ｐ、ｍｉＲ−３１５１−５ｐ、ｍｉＲ−３１５４、ｍｉＲ−３１６０−３ｐ、ｍｉＲ−３１６０−５ｐ、ｍｉＲ−３７８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−５２６ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−３１５０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３１６２−５ｐ、及びｍｉＲ−４２５４からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡの発現量とがんとの関連性データ；
（ｉｉ）ｌｅｔ−７ｉ−３ｐ、ｍｉＲ−１８３−５ｐ、ｍｉＲ−２０２−５ｐ、ｍｉＲ−４０９−５ｐ、ｍｉＲ−４６６１−５ｐ、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−５５８７−５ｐ、ｍｉＲ−３７２−３ｐ、ｍｉＲ−３７８ｂ、ｍｉＲ−５２０ｂ、ｍｉＲ−１２６６−３ｐ、ｍｉＲ−３６０５−５ｐ、ｍｉＲ−３６１２、ｍｉＲ−４６４５−３ｐ、ｍｉＲ−４６９４−３ｐ、ｍｉＲ−４７５２、ｍｉＲ−６８１６−３ｐ、ｍｉＲ−８０８７、ｌｅｔ−７ｆ−２−３ｐ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−２０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−３４ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−９３−５ｐ、ｍｉＲ−１３０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−１８５−５ｐ、ｍｉＲ−２０３ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３０２ｄ−５ｐ、ｍｉＲ−３３７−３ｐ、ｍｉＲ−３７８ｃ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−４４９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−４８３−５ｐ、ｍｉＲ−５０６−３ｐ、ｍｉＲ−５１１−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−６５４−３ｐ、ｍｉＲ−６６８−５ｐ、ｍｉＲ−６７０−５ｐ、ｍｉＲ−６７１−３ｐ、ｍｉＲ−７４４−３ｐ、ｍｉＲ−１１７８−３ｐ、ｍｉＲ−１２５４、ｍｉＲ−１２８４、ｍｉＲ−１３２３、ｍｉＲ−２１１６−５ｐ、ｍｉＲ−２３５５−３ｐ、ｍｉＲ−３１３２、ｍｉＲ−３１３８、ｍｉＲ−３１６４、ｍｉＲ−３１８６−３ｐ、ｍｉＲ−３１８９−３ｐ、ｍｉＲ−３１９８、ｍｉＲ−３２００−５ｐ、ｍｉＲ−３６５７、ｍｉＲ−３６６７−５ｐ、ｍｉＲ−３６８０−５ｐ、ｍｉＲ−３６９２−５ｐ、ｍｉＲ−３７１３、ｍｉＲ−３９２１、ｍｉＲ−３９３６、ｍｉＲ−４２７３、ｍｉＲ−４２９９、ｍｉＲ−４３０６、ｍｉＲ−４３１６、ｍｉＲ−４３１９、ｍｉＲ−４４２１、ｍｉＲ−４４２９、ｍｉＲ−４４３５、ｍｉＲ−４４４１、ｍｉＲ−４４７３、ｍｉＲ−４５０６、ｍｉＲ−４６３３−５ｐ、ｍｉＲ−４６５８、ｍｉＲ−４７３３−５ｐ、ｍｉＲ−４７３３−３ｐ、ｍｉＲ−５００４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９４、ｍｉＲ−５１９７−５ｐ、ｍｉＲ−５５７１−５ｐ、ｍｉＲ−６０８３、ｍｉＲ−６７１７−５ｐ、ｍｉＲ−６７２０−５ｐ、ｍｉＲ−６７６７−３ｐ、ｍｉＲ−６７８１−３ｐ、ｍｉＲ−６８１１−３ｐ、ｍｉＲ−６８２１−３ｐ、ｍｉＲ−６８２８−５ｐ、ｍｉＲ−６８３２−５ｐ、ｍｉＲ−６８３７−３ｐ、ｍｉＲ−６８４１−５ｐ、ｍｉＲ−６８５３−５ｐ、ｍｉＲ−６８７１−３ｐ、ｍｉＲ−６８７５−５ｐ、ｍｉＲ−６８７８−５ｐ、ｍｉＲ−７１１２−３ｐ、ｍｉＲ−７７０３、ｍｉＲ−７８４８−３ｐ、及びｍｉＲ−７８５６−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡの発現量とがんとの関連性データ；
（ｉｉｉ）ｍｉＲ−４５２１、ｌｅｔ−７ｃ−３ｐ、ｌｅｔ−７ｉ−５ｐ、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２６ａ−１−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−２００ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−２１９ａ−２−３ｐ、ｍｉＲ−２９７、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−３３０−３ｐ、ｍｉＲ−３７４ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４３１−５ｐ、ｍｉＲ−４５４−５ｐ、ｍｉＲ−５１３ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５４８ａｘ、ｍｉＲ−５９３−５ｐ、ｍｉＲ−６２３、ｍｉＲ−６６４ａ−５ｐ、ｍｉＲ−９４２−３ｐ、ｍｉＲ−１２０５、ｍｉＲ−１２７６、ｍｉＲ−１２８８−３ｐ、ｍｉＲ−１２９７、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４２９５、ｍｉＲ−４４３９、ｍｉＲ−４５２４ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４７０３−３ｐ、ｍｉＲ−４７６８−５ｐ、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−５６９６、ｍｉＲ−７１６１−５ｐ、ｌｅｔ−７ｉ−２−３ｐ、及びｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡの発現量とがんとの関連性データ；
（ｉｖ）ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−９２ａ−２−５ｐ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−１９６ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−２９９−３ｐ、ｍｉＲ−４９２、ｍｉＲ−５１３ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６０１、ｍｉＲ−６１９−５ｐ、ｍｉＲ−１２８５−３ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３１６２−５ｐ、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４２９５、ｍｉＲ−４３１１、ｍｉＲ−４５３１、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｌｅｔ−７ｆ−２−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、及びｍｉＲ−４７８３−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡの発現量とがんとの関連性データ；または
（ｖ）ｍｉＲ−４５３１、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０３ａ−２−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１２４−３ｐ、ｍｉＲ−１５１ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１５１ｂ、ｍｉＲ−２００ａ−５ｐ、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５５１ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６１７、ｍｉＲ−８７３−３ｐ、ｍｉＲ−９２１、ｍｉＲ−１２８８−３ｐ、ｍｉＲ−３１２４−５ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３９１７、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４７２７−３ｐ、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−６０７４、ｍｉＲ−６８７４−５ｐ、ｍｉＲ−６８９２−５ｐ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−１３５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−４７８３−５ｐ、及びｍｉＲ−７８４９−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡの発現量とがんとの関連性データ
と、対象の体液試料中の上記少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡの発現量に基づいて、対象ががんである可能性を決定することを含む、方法。
【請求項２８】
酸化亜鉛からなる表面を有するナノワイヤと尿とを接触させ、前記ナノワイヤに結合した構成成分を抽出して得られる、尿の抽出物。
【請求項２９】
データＳ１または表２に記載のいずれかのマイクロＲＮＡを含む、請求項２８に記載の尿の抽出物。
【請求項３０】
尿中に含まれる細胞外小胞の２０％以上の小胞を含む、請求項２８に記載の尿の抽出物。
【請求項３１】
濃縮された前記マイクロＲＮＡを含む、請求項１に記載の尿の抽出物。
【請求項３２】
尿中に存在するマイクロＲＮＡを５００種類以上含む、尿の抽出物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】  本開示は、マイクロＲＮＡを含む体液抽出物に関する。
【背景技術】
【０００２】  エクソソーム、マイクロベシクル、およびアポトーシス小体などの細胞外小胞（以下、単に「ＥＶ」ということがある）（非特許文献１〜４）の内部にマイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）が含まれていることが、健常者および疾患患者を含む様々な体液において見出されている（非特許文献６〜２０）。ヒトの２群間でのＥＶ内包ｍｉＲＮＡの相違は、様々な疾患を警告するサインとなり得る（非特許文献２０）。ｍｉＲＮＡのＥＶへの内包はＲＮＡ分解に対するリボヌクレアーゼの効果を低減することができるという利点があると考えられ（非特許文献２１）、ＥＶ中のｍｉＲＮＡは、遊離した浮遊ｍｉＲＮＡよりも安定であると考えられる。【０００３】  これまで、ＥＶの回収には、３つの手法：超遠心分離法または分画遠心法、免疫親和性に基づく捕捉、およびサイズ排除クロマトグラフィが用いられてきた（非特許文献４）。ポリマー沈殿法（非特許文献２２）、マイクロ流体に基づくプラットフォーム（非特許文献２３〜２６）、サイズに基づくろ過法（非特許文献２７）などの期待できる代替法が報告されてきた。しかしながら、これらの現存するＥＶ内包ｍｉＲＮＡの回収方法は、とても低い濃度（＜０．０１体積％）でＥＶを含む尿からのＥＶの回収には十分ではなかった（非特許文献２８）。例えば、超遠心法は尿のＥＶの回収のために最もよく用いられている方法であるが、超遠心法によって尿中に２００〜３００種類のｍｉＲＮＡが同定されている（非特許文献２９〜３１）。ヒトｍｉＲＮＡは２，０００種類を超えるとされており、残りの９０％が果たして尿に存在するのかしないのかが明らかではなかった。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Ｇ．Ｒａｐｏｓｏ，Ｗ．Ｓｔｏｏｒｖｏｇｅｌ，Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．２００，３７３−３８３（２０１３）．
【非特許文献２】Ｉ．Ｅｖａｎｓ−Ｏｓｓｅｓ，Ｌ．Ｈ．Ｒｅｉｃｈｅｍｂａｃｈ，Ｍ．Ｉ．，Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．Ｒｅｓ．１１４，３５６７−３５７５（２０１５）．
【非特許文献３】Ｐ．Ｍａ，Ｙ．ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｈｅｍａｔｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．１０，５７（２０１７）．
【非特許文献４】Ｒ．Ｓｚａｔａｎｅｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．３６，１１−１７（２０１５）．
【非特許文献５】Ｄ．Ｋ．Ｊｅｐｐｅｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｔｒａｃｅｌｌ．Ｖｅｓｉｃｌｅｓ  ３，２５０１１（２０１４）．
【非特許文献６】Ｊ．Ａ．Ｗｅｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．５６，１７３３−１７４１（２０１０）．
【非特許文献７】Ｌ．−Ｌ．Ｌｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｓｃｉ．９，１０２１−１０３１（２０１３）．
【非特許文献８】Ｍ．Ｌ．Ａｌｖａｒｅｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．８２，１０２４−１０３２（２０１２）．
【非特許文献９】Ｊ．Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  １３，１７−２４（２０１５）．
【非特許文献１０】Ｎ．Ｋｏｓａｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ．１０１，２０８７−２０９２（２０１０）．
【非特許文献１１】Ｍ．Ｉｅｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｉｆｆｅｒ．１５，８０−８８（２００８）．
【非特許文献１２】Ｄ．Ｄ．Ｔａｙｌｏｒ，Ｃ．Ｇｅｒｃｅｌ−Ｔａｙｌｏｒ，Ｇｙｎｅｃｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．１１０，１３−２１（２００８）．
【非特許文献１３】Ｋ．Ａｌ−Ｎｅｄａｗｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１０，６１９−６２４（２００８）．
【非特許文献１４】Ｙ．Ｙｏｓｈｉｏｋａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｃｏｍｍｕｎ．５，３５９１（２０１４）．
【非特許文献１５】Ｈ．Ｐｅｉｎａｄｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．１８，８８３−８９１（２０１２）．
【非特許文献１６】Ｃ．Ｙ．Ｃｈｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．５２４，２２５−２４１（２０１３）．
【非特許文献１７】Ｊ．Ｗｅｂｂｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．７０，９６２１−９６３０（２０１０）．
【非特許文献１８】Ｊ．Ｓｋｏｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１０，１４７０−１４７６（２００８）．
【非特許文献１９】Ａ．Ｖ．Ｖｌａｓｓｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ  １８２０，９４０−９４８（２０１２）．
【非特許文献２０】Ｃ．Ｈ．Ａｒｎａｕｄ，Ｃｈｅｍ．Ｅｎｇ．Ｎｅｗｓ  ９３，３０−３２（２０１５）．
【非特許文献２１】Ｍ．Ｂ．Ｋｉｒｓｃｈｎｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．Ｇｅｎｅｔ．４，９４（２０１３）．
【非特許文献２２】Ｄ．Ｄ．Ｔａｙｌｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．７２８，２３５−２４６（２０１１）．
【非特許文献２３】Ｓ．Ｊｅｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＣＳ  Ｎａｎｏ  １０，１８０２−１８０９（２０１６）．
【非特許文献２４】Ｖ．Ｓｕｎｋａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌｙｓｔ  １４１，３７１−３８１（２０１６）．
【非特許文献２５】Ｐ．Ｚｈａｎｇ，Ｍ．Ｈｅ，Ｙ．Ｚｅｎｇ，Ｌａｂ  Ｃｈｉｐ  １６，３０３３−３０４２（２０１６）．
【非特許文献２６】Ｂ．Ｈ．Ｗｕｎｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌ．１１，９３６−９４０（２０１６）．
【非特許文献２７】Ｈ．−Ｋ．Ｗｏｏ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＣＳ  Ｎａｎｏ  １１，１３６０−１３７０（２０１７）．
【非特許文献２８】Ｆ．Ｂａｒｕｔｔａ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ  ８，ｅ７３７９８（２０１３）．
【非特許文献２９】
2020092688.tif 000002
【非特許文献３０】Ｋ．Ｅ．Ｐｅｔｅｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｎａｌ．Ｂｉｏａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．４０６，
【発明の概要】
【０００５】  本開示は、マイクロＲＮＡを含む体液抽出物を提供する。
【０００６】  本発明者らは、溶液中（特に尿のｐＨ）において正の荷電を有するナノワイヤ（ナノロッド）と細胞外小胞（ＥＶ）を含む溶液とを接触させると、ＥＶを効率的にナノワイヤ上に捕捉できることを見出した。本発明者らは、尿と当該ナノワイヤとを接触させることによって、尿中のＥＶおよびｍｉＲＮＡを効果的に捕捉することができること、およびこれにより従来手法では抽出することができなかった種類のｍｉＲＮＡを含む尿抽出物を得ることができることを見出した。
本開示はこのような知見に基づく。
【０００７】  本開示によれば、以下の産業上利用可能な発明が提供され得る。
（１）データＳ１または表２に記載のいずれかのマイクロＲＮＡを含む、尿の抽出物。
（２）細胞外小胞を含み、前記マイクロＲＮＡが細胞外小胞に含まれる、または、前記マイクロＲＮＡが細胞外小胞から抽出されている、上記（１）に記載の尿の抽出物。
（３）前記ＲＮＡが、遊離マイクロＲＮＡの形態である、上記（１）に記載の尿の抽出物。
（４）マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−３１１７−５ｐ、ｍｉＲ−３１１８、ｍｉＲ−３１２１−３ｐ、ｍｉＲ−３１２１−５ｐ、ｍｉＲ−３１２６−５ｐ、ｍｉＲ−３１２８、ｍｉＲ−３１３３、ｍｉＲ−３１３４、ｍｉＲ−３１３６−３ｐ、ｍｉＲ−３１３６−５ｐ、ｍｉＲ−３１３９、ｍｉＲ−３１４２、ｍｉＲ−３１４３、ｍｉＲ−３１４５−３ｐ、ｍｉＲ−３１６３、ｍｉＲ−３１６６、ｍｉＲ−３１６７、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５２５−５ｐ、ｍｉＲ−５５１ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−５５８、ｍｉＲ−９２１、ｍｉＲ−９４２−３ｐ、ｍｉＲ−３１２６−３ｐ、ｍｉＲ−３１２７−５ｐ、ｍｉＲ−３１２９−５ｐ、ｍｉＲ−３１４４−５ｐ、ｍｉＲ−３１５０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５２−５ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３１５７−３ｐ、ｍｉＲ−３１５９、ｍｉＲ−３１６５、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４３２１、ｍｉＲ−４５２１、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−４９９９−５ｐ、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−６８７４−５ｐ、ｍｉＲ−３１２７−３ｐ、ｍｉＲ−３１３０−５ｐ、ｍｉＲ−３１３１、ｍｉＲ−３１４１、ｍｉＲ−３１５０ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５１−３ｐ、ｍｉＲ−３１５１−５ｐ、ｍｉＲ−３１５４、ｍｉＲ−３１６０−３ｐ、ｍｉＲ−３１６０−５ｐ、ｍｉＲ−３７８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−５２６ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−３１５０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３１６２−５ｐ、及びｍｉＲ−４２５４からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、上記（１）〜（３）のいずれかに記載の尿の抽出物。
（５）マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−３１６３、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５５８、ｍｉＲ−３１２７−５ｐ、及びｍｉＲ−４５２１からなる群から選択される少なくとも１種のマイクロＲＮＡまたは全てのマイクロＲＮＡである、上記（１）〜（４）のいずれかに記載の尿の抽出物。
（６）マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−３７８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、及びｍｉＲ−５２６ｂ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種のマイクロＲＮＡまたは全てのマイクロＲＮＡである、上記（１）〜（４）のいずれかに記載の尿の抽出物。
（７）尿が、肺がんを有する対象の尿である、上記（１）〜（６）のいずれかに記載の尿の抽出物。
（８）マイクロＲＮＡが、ｌｅｔ−７ｉ−３ｐ、ｍｉＲ−１８３−５ｐ、ｍｉＲ−２０２−５ｐ、ｍｉＲ−４０９−５ｐ、ｍｉＲ−４６６１−５ｐ、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−５５８７−５ｐ、ｍｉＲ−３７２−３ｐ、ｍｉＲ−３７８ｂ、ｍｉＲ−５２０ｂ、ｍｉＲ−１２６６−３ｐ、ｍｉＲ−３６０５−５ｐ、ｍｉＲ−３６１２、ｍｉＲ−４６４５−３ｐ、ｍｉＲ−４６９４−３ｐ、ｍｉＲ−４７５２、ｍｉＲ−６８１６−３ｐ、ｍｉＲ−８０８７、ｌｅｔ−７ｆ−２−３ｐ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−２０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−３４ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−９３−５ｐ、ｍｉＲ−１３０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−１８５−５ｐ、ｍｉＲ−２０３ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３０２ｄ−５ｐ、ｍｉＲ−３３７−３ｐ、ｍｉＲ−３７８ｃ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−４４９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−４８３−５ｐ、ｍｉＲ−５０６−３ｐ、ｍｉＲ−５１１−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−６５４−３ｐ、ｍｉＲ−６６８−５ｐ、ｍｉＲ−６７０−５ｐ、ｍｉＲ−６７１−３ｐ、ｍｉＲ−７４４−３ｐ、ｍｉＲ−１１７８−３ｐ、ｍｉＲ−１２５４、ｍｉＲ−１２８４、ｍｉＲ−１３２３、ｍｉＲ−２１１６−５ｐ、ｍｉＲ−２３５５−３ｐ、ｍｉＲ−３１３２、ｍｉＲ−３１３８、ｍｉＲ−３１６４、ｍｉＲ−３１８６−３ｐ、ｍｉＲ−３１８９−３ｐ、ｍｉＲ−３１９８、ｍｉＲ−３２００−５ｐ、ｍｉＲ−３６５７、ｍｉＲ−３６６７−５ｐ、ｍｉＲ−３６８０−５ｐ、ｍｉＲ−３６９２−５ｐ、ｍｉＲ−３７１３、ｍｉＲ−３９２１、ｍｉＲ−３９３６、ｍｉＲ−４２７３、ｍｉＲ−４２９９、ｍｉＲ−４３０６、ｍｉＲ−４３１６、ｍｉＲ−４３１９、ｍｉＲ−４４２１、ｍｉＲ−４４２９、ｍｉＲ−４４３５、ｍｉＲ−４４４１、ｍｉＲ−４４７３、ｍｉＲ−４５０６、ｍｉＲ−４６３３−５ｐ、ｍｉＲ−４６５８、ｍｉＲ−４７３３−５ｐ、ｍｉＲ−４７３３−３ｐ、ｍｉＲ−５００４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９４、ｍｉＲ−５１９７−５ｐ、ｍｉＲ−５５７１−５ｐ、ｍｉＲ−６０８３、ｍｉＲ−６７１７−５ｐ、ｍｉＲ−６７２０−５ｐ、ｍｉＲ−６７６７−３ｐ、ｍｉＲ−６７８１−３ｐ、ｍｉＲ−６８１１−３ｐ、ｍｉＲ−６８２１−３ｐ、ｍｉＲ−６８２８−５ｐ、ｍｉＲ−６８３２−５ｐ、ｍｉＲ−６８３７−３ｐ、ｍｉＲ−６８４１−５ｐ、ｍｉＲ−６８５３−５ｐ、ｍｉＲ−６８７１−３ｐ、ｍｉＲ−６８７５−５ｐ、ｍｉＲ−６８７８−５ｐ、ｍｉＲ−７１１２−３ｐ、ｍｉＲ−７７０３、ｍｉＲ−７８４８−３ｐ、及びｍｉＲ−７８５６−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、上記（１）〜（３）のいずれかに記載の尿の抽出物。
（９）マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−１８３−５ｐ、ｍｉＲ−２０２−５ｐ、及びｍｉＲ−４０９−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、上記（８）に記載の尿の抽出物。
（１０）マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−３７２−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｂ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３４ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１８５−５ｐ、ｍｉＲ−３３７−３ｐ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５０６−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−１２８４、ｍｉＲ−１３２３、及びｍｉＲ−４２７３からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、上記（８）に記載の尿の抽出物。
（１１）尿が、膵がんを有する対象の尿である、上記（８）〜（１０）のいずれかに記載の尿の抽出物。
（１２）マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−４５２１、ｌｅｔ−７ｃ−３ｐ、ｌｅｔ−７ｉ−５ｐ、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２６ａ−１−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−２００ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−２１９ａ−２−３ｐ、ｍｉＲ−２９７、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−３３０−３ｐ、ｍｉＲ−３７４ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４３１−５ｐ、ｍｉＲ−４５４−５ｐ、ｍｉＲ−５１３ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５４８ａｘ、ｍｉＲ−５９３−５ｐ、ｍｉＲ−６２３、ｍｉＲ−６６４ａ−５ｐ、ｍｉＲ−９４２−３ｐ、ｍｉＲ−１２０５、ｍｉＲ−１２７６、ｍｉＲ−１２８８−３ｐ、ｍｉＲ−１２９７、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４２９５、ｍｉＲ−４４３９、ｍｉＲ−４５２４ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４７０３−３ｐ、ｍｉＲ−４７６８−５ｐ、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−５６９６、ｍｉＲ−７１６１−５ｐ、ｌｅｔ−７ｉ−２−３ｐ、及びｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、上記（１）〜（３）のいずれかに記載の尿の抽出物。
（１３）マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−２９７、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−３３０−３ｐ、ｍｉＲ−４５４−５ｐ、ｍｉＲ−１２９７、及びｍｉＲ−４２９５からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、上記（１２）に記載の尿の抽出物。
（１４）マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐである、上記（１２）に記載の尿の抽出物。
（１５）尿が、肝がんを有する対象の尿である、上記（１２）〜（１４）のいずれかに記載の尿の抽出物。
（１６）マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−９２ａ−２−５ｐ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−１９６ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−２９９−３ｐ、ｍｉＲ−４９２、ｍｉＲ−５１３ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６０１、ｍｉＲ−６１９−５ｐ、ｍｉＲ−１２８５−３ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３１６２−５ｐ、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４２９５、ｍｉＲ−４３１１、ｍｉＲ−４５３１、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｌｅｔ−７ｆ−２−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、及びｍｉＲ−４７８３−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、上記（１）〜（３）のいずれかに記載の尿の抽出物。
（１７）マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−２９９−３ｐ、及びｍｉＲ−４２９５からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、上記（１６）に記載の尿の抽出物。
（１８）マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐである、上記（１６）に記載の尿の抽出物。
（１９）尿が、膀胱がんを有する対象の尿である、上記（１６）〜（１８）のいずれかに記載の尿の抽出物。
（２０）マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−４５３１、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０３ａ−２−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１２４−３ｐ、ｍｉＲ−１５１ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１５１ｂ、ｍｉＲ−２００ａ−５ｐ、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５５１ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６１７、ｍｉＲ−８７３−３ｐ、ｍｉＲ−９２１、ｍｉＲ−１２８８−３ｐ、ｍｉＲ−３１２４−５ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３９１７、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４７２７−３ｐ、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−６０７４、ｍｉＲ−６８７４−５ｐ、ｍｉＲ−６８９２−５ｐ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−１３５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−４７８３−５ｐ、及びｍｉＲ−７８４９−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、上記（１）〜（３）のいずれかに記載の尿の抽出物。
（２１）マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１２４−３ｐ、ｍｉＲ−１５１ａ−５ｐ、及びｍｉＲ−３００からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、上記（２０）に記載の尿の抽出物。
（２２）マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ及びｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡである、上記（２０）に記載の尿の抽出物。
（２３）尿が、前立腺がんを有する対象の尿である、上記（２０）〜（２２）のいずれかに記載の尿の抽出物。
（２４）尿が、健常者の尿である、上記（１）〜（６）、（８）〜（１０）、（１２）〜（１４）、（１６〜（１８）、及び（２０）〜（２２）のいずれかに記載の尿の抽出物。
（２５）対象ががんである可能性を検査する方法であって、
以下（ａ）〜（ｅ）からなる群から選択される１以上を含む、方法：
（ａ）対象から得られる尿または尿の抽出物においてｍｉＲ−３１６３、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５５８、ｍｉＲ−３１２７−５ｐ、及びｍｉＲ−４５２１からなる群から選択される少なくとも１種のマイクロＲＮＡまたは全てのマイクロＲＮＡを検出すること、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも高い場合には、対象が肺がんである可能性があることを示す；
（ｂ）対象から得られる尿または尿の抽出物において、ｍｉＲ−１８３−５ｐ、ｍｉＲ−２０２−５ｐ、及びｍｉＲ−４０９−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを検出すること、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも高い場合には、対象が膵がんである可能性があることを示す；
（ｃ）対象から得られる尿または尿の抽出物において、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−２９７、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−３３０−３ｐ、ｍｉＲ−４５４−５ｐ、ｍｉＲ−１２９７、及びｍｉＲ−４２９５からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを検出すること、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも高い場合には、対象が肝がんである可能性があることを示す；
（ｄ）対象から得られる尿または尿の抽出物において、、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−２９９−３ｐ、及びｍｉＲ−４２９５からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを検出すること、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも高い場合には、対象が膀胱がんである可能性があることを示す；
（ｅ）対象から得られる尿または尿の抽出物においてｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１２４−３ｐ、ｍｉＲ−１５１ａ−５ｐ、及びｍｉＲ−３００からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを検出すること、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも高い場合には、対象が前立腺がんである可能性があることを示す。
（２６）上記（２５）に記載の方法であって、
（Ａ）〜（Ｅ）からなる群から選択される１以上を含む、方法：
（Ａ）前記（ａ）において対象から得られる尿または尿の抽出物において、ｍｉＲ−３７８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、及びｍｉＲ−５２６ｂ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種のマイクロＲＮＡまたは全てのマイクロＲＮＡをさらに検出することと、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも低い場合には、対象が肺がんである可能性があることを示す；
（Ｂ）前記（ｂ）において対象から得られる尿または尿の抽出物において、ｍｉＲ−３７２−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｂ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３４ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１８５−５ｐ、ｍｉＲ−３３７−３ｐ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５０６−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−１２８４、ｍｉＲ−１３２３、及びｍｉＲ−４２７３からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡをさらに検出することと、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも低い場合には、対象が膵がんである可能性があることを示す；
（Ｃ）前記（ｃ）において対象から得られる尿または尿の抽出物において、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐをさらに検出することと、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも低い場合には、対象が肝がんである可能性があることを示す；
（Ｄ）前記（ｄ）において対象から得られる尿または尿の抽出物において、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐをさらに検出することと、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも低い場合には、対象が膀胱がんである可能性があることを示す；
（Ｅ）前記（ｅ）において対象から得られる尿または尿の抽出物において、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ及びｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡをさらに検出することと、ここで、マイクロＲＮＡの量が所定の値よりも低い場合には、対象が前立腺がんである可能性があることを示す。
（２７）ナノワイヤと尿とを接触させ、前記ナノワイヤに結合した構成成分を抽出して得られる、尿の抽出物。
（２７ａ）ナノワイヤと接触させる尿のｐＨは、２、３、４、または５を下限値とし、１１、１０、９、８、７、６、または５を上限値とする数値範囲である、上記（２７）に記載の尿の抽出物。
（２７ｂ）ナノワイヤが、金属酸化物のナノワイヤであるか、または、金属酸化物で表面が被覆されたナノワイヤである、上記（２７）または（２７ａ）に記載の尿の抽出物。
（２７ｃ）金属酸化物が、遷移金属の酸化物である、上記（２７ｂ）に記載の尿の抽出物。
（２７ｄ）ナノワイヤが、酸化亜鉛のナノワイヤであるか、または、酸化亜鉛で表現が被覆されたナノワイヤである、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）または（２７ｃ）に記載の尿の抽出物。
（２７ｅ）ナノワイヤと尿とを、中性のｐＨ条件下で接触させる、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２８）データＳ１または表２に記載のいずれかのマイクロＲＮＡを含む、上記（２７）に記載の尿の抽出物。
（２９）尿中に含まれる細胞外小胞の２０％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９’）尿中に含まれる細胞外小胞の２５％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ａ）尿中に含まれる細胞外小胞の３０％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ａ’）尿中に含まれる細胞外小胞の３５％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ｂ）尿中に含まれる細胞外小胞の４０％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ｂ’）尿中に含まれる細胞外小胞の４５％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ｃ）尿中に含まれる細胞外小胞の５０％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ｃ’）尿中に含まれる細胞外小胞の５５％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ｄ）尿中に含まれる細胞外小胞の６０％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ｄ’）尿中に含まれる細胞外小胞の６５％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ｅ）尿中に含まれる細胞外小胞の７０％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ｅ’）尿中に含まれる細胞外小胞の７５％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ｆ）尿中に含まれる細胞外小胞の８０％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ｆ’）尿中に含まれる細胞外小胞の８５％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ｇ）尿中に含まれる細胞外小胞の９０％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ｈ）尿中に含まれる細胞外小胞の９５％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ｉ）尿中に含まれる細胞外小胞の９７％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（２９ｊ）尿中に含まれる細胞外小胞の９９％以上の小胞を含む、上記（２７）、（２７ａ）、（２７ｂ）、（２７ｃ）、（２７ｄ）または（２７ｅ）に記載の尿の抽出物。
（３０）濃縮された前記マイクロＲＮＡを含む、上記（１）に記載の尿の抽出物。
（３１）尿中に存在するマイクロＲＮＡを５００種類以上含む、尿の抽出物。
（３１Ａ）尿中に存在するマイクロＲＮＡを５００種類以上含む、上記（１）または（３１）に記載の尿の抽出物。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】図１は、尿中ＥＶのナノワイヤによる静電的回収とそれに続くＥＶ内包ｍｉＲＮＡのｉｎ  ｓｉｔｕ抽出に関する。図１Ａでは、ナノワイヤ組み込みマイクロデバイスを用いた尿中のＥＶの回収（捕捉）とＥＶ内包ｍｉＲＮＡのｉｎ  ｓｉｔｕ抽出に関する模式図である。図１Ｂは、ＰＤＭＳの注ぎ込み、硬化および剥離の後の埋め込まれたナノワイヤと、埋め込まれたナノワイヤの鉛直断面ＦＥＳＥＭ像の模式図（ロッドで示されるナノワイヤ、透明の領域で示されるＰＤＭＳ）と切断面像を示す左下の模式的挿入図を示す。黄色（グレースケール明るい部分）がナノワイヤを示し、青がＰＤＭＳを示し、白の点線はＰＤＭＳの縁を示す。スケールバーは、１μｍを示す。図１Ｃは、埋め込まれたナノワイヤ（ナノワイヤ組み込みＰＤＭＳ）からのナノワイヤの成長に関する切断面像を示す模式図と左下の模式的挿入図およびナノワイヤ組み込みＰＤＭＳの鉛直切断面像である。スケールバーは、１μｍを示す。図１Ｄは、ナノワイヤ組み込みＰＤＭＳのマイクロ流体へリングボーン構造を有するＰＤＭＳ基板に接着することに関する切断面像模式図と左下の模式的挿入図と、導入口と導出口のためのポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）チューブを備えたナノワイヤ組み込みマイクロ流体デバイス（ナノワイヤ組み込みＰＤＭＳとマイクロ流体へリングボーン構造のＰＤＭＳ基板とを接着したもの）の写真と、ＰＤＭＳ基板上のマイクロ流体へリングボーン構造のレーザー顕微鏡像を示す。スケールバーは、１μｍを示す。図１Ｅは、溶解緩衝液への暴露後のナノワイヤ組み込みデバイスの模式図とナノワイヤ組み込みＰＤＭＳの上面からのＦＥＳＥＭ像を示す。スケールバーは、１μｍを示す。図１Ｆは、Ｓｉ基板上のナノワイヤの模式図と、溶解緩衝液への暴露後のＳｉ基板上のナノワイヤの上面からのＦＥＳＥＭ像を示す。
【図２】図２は、ナノワイヤ組み込みマイクロ流体デバイスを用いたｍｉＲＮＡのｉｎ  ｓｉｔｕ抽出に関する。図２Ａは、本開示のナノワイヤ組み込みデバイスと超遠心法によって回収したＥＶから抽出されたｍｉＲＮＡの正規化した強度の散布図を示す。図２Ｂは、本開示のナノワイヤ組み込みデバイスを用いた方法と超遠心法により抽出できたｍｉＲＮＡ種のヒストグラムを示す（ｎ＝３）。図２Ｃは、本開示のナノワイヤ組み込みデバイスと市販のキットによって回収したＥＶから抽出されたｍｉＲＮＡの正規化した強度の散布図を示す。図２Ｄは、本開示のナノワイヤ組み込みデバイスを用いた方法と超遠心法により抽出できたｍｉＲＮＡ種のヒストグラムを示す（ｎ＝３）。エラーバーは、測定（ｎ＝３）のＳＤを示す。「ａ．ｕ．」は、任意単位（ａｒｂｉｔｒａｒｙ  ｕｎｉｔ）を示す。
【図３】図３は、ナノワイヤ上へのＥＶの回収に関する。図３Ａは、実験工程と回収効率の算出に関する模式図である。図３Ｂは、未処理の尿中における尿の遊離浮遊物のサイズ分布を示す。エラーバーは、測定（ｎ＝３）に対するＳＤを示す。図３Ｃは、本開示のナノワイヤ組み込みデバイスによって処理された尿のフロースルー分画と超遠心された尿における、尿の遊離浮遊物のサイズ分布を示すエラーバーは、測定（ｎ＝３）に対するＳＤを示す。図３Ｄは、ナノワイヤで回収され、蛍光（ＲＫＨ２６）標識されたＥＶを示す。図中では、ナノワイヤ上のＰＫＨ２６標識ＥＶが示されている。スケールバーは、５００μｍを示す。図３Ｅは、ＰＫＨ２６標識ＥＶの導入後のナノワイヤのＦＥＳＥＭ像を示す。白い矢印は、回収されたＥＶを示す。スケールバーは、２００ｎｍを示す。図３Ｆは、ＣＤ６３またはＣＤ８１に対する抗体を用いてナノワイヤ上および９６穴プレート上のＥＶを検出した結果を示す。尿中の遊離浮遊物の測定濃度は、１．４×１０８ｍｌ−１であった。「Ｎ．Ｄ．」は、蛍光が観察されなかったことを示す。点線は、バックグラウンドの上の３ＳＤのシグナルレベルを示す。エラーバーは、測定（ナノワイヤでｎ＝２４；９６穴プレートでｎ＝３）に対するＳＤを示す。
【図４】図４は、ナノワイヤ組み込みデバイスを用いたがん関連ｍｉＲＮＡのｉｎ  ｓｉｔｕ抽出の結果を示す。図４では、非がんのドナー、肺がんのドナー、肝がんのドナー、膀胱がんのドナーおよび前立腺がんのドナーの尿サンプルそれぞれに対するｍｉＲＮＡ発現アレイのヒートマップが示されている。各ｍｉＲＮＡの発現や各群間の比較を直観的に理解するためにシグナル強度に基づいて色のグラデーションが用いられている。対数シグナル強度が５である場合が黒；２以下が青；８以上が黄色である。ヒートマップの各カラムは、ｍｉＲＮＡの対数シグナル強度を表す（具体的な数値はデータＳ１に示される）。
【図５】図５は、非がんのドナーと各種がんのドナーとの間での図４から抜き出されたｍｉＲＮＡの下方制御と過剰発現を示す。抜き出されたｍｉＲＮＡは、一方の群の２番目に大きい対数シグナル強度よりも、他方の群の２番目に小さい対数シグナル強度が大きいものとした。記号「−」および「＋」はそれぞれ、非がんのドナーおよびがんのドナーを示す。左の線が二重になっている部分は、一方の最も小さな対数シグナル強度が他方の最大の対数シグナル強度よりも大きかったことを示す。それ以外は、一方の対数シグナル強度が他方の対数シグナル強度よりも高いまたは低い場合を示す。
【図６】図６は、ＰＤＭＳ中に組み込まれたナノワイヤの作製プロセスの模式図を示す。図６ａ〜ｇは、リソグラフィとＰＤＭＳ硬化プロセスによりＰＤＭＳ中にナノワイヤが組み込まれる。構成要素は、Ｓｉ基板とＯＦＰＲ８６００フォトレジスト、Ｃｒ層、ナノワイヤ、およびＰＤＭＳを含む。図６ａでｓｉ基板を用意し、図６ｂでフォトレジストを積層する。図６ｃでＣｒ層をさらに積層し、図６ｄでフォトレジストを除去し、図６ｅでＣｒ層からナノワイヤを成長させる。図６ｆでＰＤＭＳを注ぎ込み、硬化させる。図６ｇで硬化させたＰＤＭＳ層を基板から剥離する。図６ｈは、ＰＤＭＳの注ぎ込み、硬化および剥離後の埋め込まれたナノワイヤの模式図を示す。図６ｉは、埋め込まれたナノワイヤからナノワイヤを成長させるプロセスの模式図を示す。図６ｊは、ナノワイヤ組み込みＰＤＭＳ基板をマイクロ流体ヘリングボーン構造のＰＤＭＳ基板に貼り合わせるプロセスの模式図を示す。
【図７】図７は、ＰＤＭＳ中へのナノワイヤの組み込みに関する。図７ａは、ナノワイヤの上面からのＦＥＳＥＭ像である。スケールバーは、１μｍである。図７ｂは、ナノワイヤの直径分布を示す。ナノワイヤの平均直径は１５０ｎｍであった。図７ｃは、ナノワイヤ間のスペースの分布を示す。スペースは、２つのナノワイヤ間の最も短い距離として定義し、切断面のＳＥＭ像から決定した。ナノワイヤ間の平均スペースは、２００ｎｍであった。
【図８】図８は、ナノワイヤ無しのＰＤＭＳ基板、埋め込まれたナノワイヤを有するＰＤＭＳ基板、およびナノワイヤ組み込みＰＤＭＳ基板それぞれのＦＥＳＥＭ像とそれに対応するＥＤＳ元素マッピングに関する。図８ａ〜ｃは、ナノワイヤ無しのＰＤＭＳ基板、埋め込まれたナノワイヤを有するＰＤＭＳ基板、およびナノワイヤ組み込みＰＤＭＳ基板それぞれの鉛直切断面のＦＥＳＥＭ像である。図８ｄ〜ｆは、図８ａ〜ｃの切断面のＦＥＳＥＭ像に対応する元素マッピングを示す。ＳｉおよびＺｎはそれぞれ、青（暗い部分）および緑（矢じりで示される部分および明るい部分）で表されている。図８ｅでは、ＰＤＭＳ基板（青）の表面にわずかにナノワイヤ（緑）が露出している様子が認められた。また、図８ｆでは、ナノワイヤの厚みが増している様子が認められた。図８ｇは、埋め込まれたナノワイヤを有するＰＤＭＳの上面からのＦＥＳＥＭ像である。図８ｈは、図８ｇの上面からのＦＥＳＥＭ像に対応するＥＤＳ元素マッピングを示す。ＳｉおよびＺｎはそれぞれ、青および緑（グレースケールでは点在する明るい部分）で表されている。
【図９】図９は、組み込まれたナノワイヤと組み込まれていないナノワイヤの機械的安定性に関する。図９ａおよびｂは、溶解緩衝液中への暴露前のＰＤＭＳに組み込まれたナノワイヤとＳｉ基板上のナノワイヤの模式図である。構成要素は、ナノワイヤ、ＰＤＭＳ、Ｓｉ基板、およびＣｒ層を含む。組み込まれていないナノワイヤは、Ｓｉ基板上の熱酸化処理クロム層の上に作製された。図９ｃおよびｄはそれぞれ、ＰＤＭＳに組み込まれたナノワイヤとＳｉ基板上のナノワイヤの上面からのＦＥＳＥＭ像である。スケールバーは、１μｍを示す。図９ｅおよびｆはそれぞれ、溶解緩衝液中に暴露したときのＰＤＭＳに組み込まれたナノワイヤとＳｉ基板上のナノワイヤの条件からのＦＥＳＥＭ像である。スケールバーは、１μｍを示す。溶解緩衝液中への暴露後は、Ｓｉ基板上のナノワイヤは剥離したのに対して、ＰＤＭＳに組み込まれたナノワイヤは剥離しなかった。
【図１０】図１０は、ナノワイヤ組み込みデバイス、超遠心、および市販のキットを用いる尿中ｍｉＲＮＡの抽出プロセスの一例を示す。図１０ａは、ｍｉＲＮＡの発現のマイクロアレイ分析の実験手順を示す。図１０ｂは、Ｑｕｂｉｔ（商標）ｍｉｃｒｏＲＮＡ  ａｓｓａｙ  ｋｉｔ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いた小分子ＲＮＡの定量の実験手順を示す。各種手法によってｍｉＲＮＡを抽出した後に、ＲＮＡ生成と小分子ＲＮＡの定量を行った。図１０ｃは、各種方法を用いた小分子ＲＮＡの定量を示す。Ｑｕｂｉｔ（商標）ｍｉｃｒｏＲＮＡ  ａｓｓａｙ  ｋｉｔ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）では、ｍｉＲＮＡのみならず小分子ＲＮＡ（〜２０ヌクレオチドまたは塩基対）の定量が可能であるため、Ｙ軸には小分子ＲＮＡの濃度を設定した。これらのデータによれば、洗浄工程はＲＮＡ回収効率に影響しなかった。エラーバーは、測定（Ｎ≧３）に対するＳＤを示す。
【図１１】図１１は、１本のナノワイヤのＦＥＳＥＭ像とＳＴＥＭ像のＥＤＳ元素マッピングを示す。Ｚｎ、Ｏ、およびＡｌはそれぞれ、緑、赤、およびオレンジで示された。図１１ａは、ＺｎＯ単独のナノワイヤを示す。スケールバーは、５００ｎｍを示す。図１１ｂは、ＺｎＯ／Ａｌ２Ｏ３コア−シェルナノワイヤを示す。スケールバーは、５００ｎｍを示す。図１１ｂでは、ＡｌがＺｎのコアを覆う様子が認められた。図１１ｃは、ＺｎＯ／Ａｌ２Ｏ３コア−シェルナノワイヤを示す。スケールバーは、１００ｎｍを示す。図１１ｂでは、ＡｌがＺｎのコアを覆う様子が認められ、ＯがＡｌとＺｎと重なり合う様子が認められた。
【図１２】図１２は、ＺｎＯナノワイヤ、ＺｎＯ／Ａｌ２Ｏ３コア−シェルナノワイヤ、およびナノワイヤ無しの表面上のＥＶの抗ＣＤ９抗体による検出に関する。点線は、バックグラウンドの上の３ＳＤのシグナル強度を示す。エラーバーは、ＺｎＯナノワイヤ、ＺｎＯ／Ａｌ２Ｏ３コア−シェルナノワイヤ、およびナノワイヤ無しの表面の測定（それぞれ、ｎ＝４０、２４、および２４）に対する標準偏差（ＳＤ）である。グラフ上の点は、１０９／ｍＬの場合と１０１０／ｍＬのＥＶ濃度を有する試料に対してＺｎＯナノワイヤ、ＺｎＯ／Ａｌ２Ｏ３コア−シェルナノワイヤ、およびナノワイヤ無しの表面でｍｉＲＮＡを抽出した結果のシグナル強度を示す。ＥＶを導入後、これらの３つのデバイスに対してＰＢＳを灌流して回収できなかったＥＶを除去した。第１のデバイスは、ＺｎＯナノワイヤを有し、第２のデバイスは、ＺｎＯ／Ａｌ２Ｏ３コア−シェルナノワイヤを有し、かつ、第３のデバイスは、ナノワイヤを有しなかった。これらのデバイスに１％ＢＳＡ溶液を導入し、１５分間静置した。ＰＢＳでこれらのデバイスを洗浄した後にマウス抗ヒトＣＤ９抗体（１０μｇ／ｍＬ、Ａｂｃａｍ，Ｐｌｃ．）を各デバイスに導入し、その後、デバイスを１５分間静置した。ＣＤ９はエクソソーム上に発現する膜タンパク質として知られている。加えて、それぞれのデバイスをＰＢＳを用いて洗浄し、各デバイスにＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ４８８標識したヤギポリクローナル抗マウスＩｇＧ抗体（５μｇ／ｍＬ、Ａｂｃａｍ，Ｐｌｃ．）を導入し、その後、デバイスを１５分間静置した。最後に、ＰＢＳで各デバイスを洗浄し、蛍光顕微鏡（Ｏｌｙｍｐｕｓ，Ｃｏ．Ｌｔｄ．）で蛍光強度を観察した。ＺｎＯナノワイヤは、ＥＶを効果的に回収でいたのに対して、ＺｎＯ／Ａｌ２Ｏ３コア−シェルナノワイヤでは、ＥＶを僅かにしか回収できなかった。これにより、ナノワイヤの表面電荷の重要性が示唆された。
【図１３】図１３は、尿中のＥＶのゼータ電位を示す。ＥＶのゼータ電位は、動的光散乱装置（Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ  Ｎａｎｏ−ＺＳ，Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｌｔｄ．）を用いて測定した。ＥＶの平均ゼータ電位は、−２８ｍＶであった。
【図１４】図１４は、超遠心法で回収されたＥＶのサイズ分布を示す。図１４はまた、ナノワイヤ上に回収されたＥＶフリーのｍｉＲＮＡの存在を示す。図１４ａでは、回収されたＥＶの濃度は１．６×１０９ｍＬ−１であった。エラーバーは、測定（ｎ＝３）に対する標準偏差を示す。図１４ｂは、定量的逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ｑＲＴ−ＰＣＲ）による回収されたｍｉＲＮＡおよび放出されたｍｉＲＮＡの量を示す。ＥＶフリーのｍｉＲＮＡとして、１００ｎＭ  ｍｉＲＮＡ（配列：ｍｉＲＮＡ（ｓｅｑｕｅｎｃｅ，ｕｕｇｃａｕａｇｕｃａｃａａａａｇｕｇａｕｃ）を用いた。「未処理」は、１００ｎＭ  ｍｉＲＮＡの量を示す。ナノワイヤを備えたまたは備えていないマイクロチャンネルの回収率はそれぞれ、１００％および２３％であった。
【図１５】図１５は、尿の遊離浮遊物のサイズ分布を示す。尿の遊離浮遊物のサイズ分布と濃度は、１００ｎｍ  ｎａｎｏｐｏｒｅ  ｍｅｍｂｒａｎｅ（ＮＰ１００，Ｍｅｉｗａｆｏｓｉｓ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）を備えたｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ  ｄｅｔｅｃｔｏｒ（ｑＮａｎｏ，Ｍｅｉｗａｆｏｓｉｓ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．）を用いて測定した。図１５ａは、未処理の尿の遊離浮遊物に関するデータであり、濃度は、１．４×１０１２ｍＬ−１であった。図１５ｂは、ナノワイヤ組み込みデバイスによって処理された尿のフロースルー分画における遊離浮遊物に関するデータであり、濃度は、２．４×１０１０ｍＬ−１であった（捕捉効率は９９％）。図１５ｃは、ヘリングボーン構造を有しないナノワイヤ組み込みデバイスで処理した尿のフロースルー分画における遊離浮遊物に関するデータであり、濃度は、４．３×１０１１ｍＬ−１であった（捕捉効率は６１％）。
【発明の具体的な説明】
【０００９】  本明細書では「対象」とは、尿検査の被検者を意味する。対象は、動物であり得る。対象は、爬虫類、哺乳類、両生類であってもよい。哺乳類はイヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、ハムスター、ネズミ、リス、およびサル、ゴリラ、チンパンジー、ボノボ、ヒトなどの霊長類であってもよい。
【００１０】  本明細書では、「尿」とは、腎臓により生産される液体状の排泄物を意味する。尿は、尿道を介して対外に排出されたもの、及び膀胱内で蓄積されたもののいずれであってもよい。尿は、体内から注射器などの抽出器を用いて抽出又は収集・採集されてもよい。本明細書では、尿は、特に限定されないが例えば、爬虫類、哺乳類、両生類の尿であってもよい。哺乳類はイヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ブタ、ハムスター、ネズミ、リス、およびサル、ゴリラ、チンパンジー、ボノボ、ヒトなどの霊長類であってもよい。「尿」は、健常対象の尿であってもよいし、特定の疾患（例えば、肺がん、肝臓がん、すい臓がん、膀胱がん、および前立腺がんなどのがんから選択されるがんなど）の対象の尿であってもよいし、特定の疾患に罹患している疑いのある対象の尿であってもよい。「尿」は、原液のままで使用されてもよく、または、原液を希釈若しくは濃縮された液体であってもよい。「尿」は、尿検体に添加剤を加えたものであってもよい。添加剤は例えば、安定化剤やｐＨ調整剤を加えたものでであってもあってもよい。「尿」は、凍結状態の尿であってもよい。
【００１１】  本明細書では、「マイクロＲＮＡ」（「ｍｉＲＮＡ」ともいう）とは、タンパク質をコードしないと考えられているノンコーディングＲＮＡ（ｎｃＲＮＡ）の一種である。マイクロＲＮＡは、その前駆体からプロセッシングを受けて成熟体となる。成熟体となったマイクロＲＮＡは、２０〜２５塩基程度の長さを有することが知られている。ヒトのマイクロＲＮＡは、ｈｓａの名称が付される。前駆体は、ｍｉｒが付され、成熟体にはｍｉＲが付される。同定された順番に番号が付与されており、類似した配列に関しては、番号の後ろに小文字のアルファベットが付記される。ある前駆体の５’末端に由来するものと３’末端に由来するものとが存在する場合には、５’末端に由来するマイクロＲＮＡには５ｐが付され、３’末端に由来するものには３ｐが付される。そして、これらの記号および数字はハイフンによって連結される。成熟したマイクロＲＮＡは、二本鎖であり得る。
【００１２】  本明細書では、「細胞外小胞」（「ＥＶ」ともいう）は、細胞から放出される小胞であり、アポトーシスの過程で細胞から放出されるもの、および健康な細胞から放出されるものが挙げられる。細胞外小胞は、大きさおよび表面マーカーによって、エクソソーム（ｅｘｏｓｏｍｅ）、マイクロベシクル（ｍｉｃｒｏ  ｖｅｓｉｃｌｅ；ＭＶ）、およびアポトーシス小体（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｂｏｄｙ）に大別される。エクソソームは、通常、４０〜１２０ｎｍの直径を有し、Ａｌｉｘ、Ｔｓｇ１０１、ＣＤ９、ＣＤ６３、ＣＤ８１、及びフロチリンからなる群から選択される１以上または全ての分子を発現し得る。マイクロベシクルは、通常、５０〜１，０００ｎｍの直径を有し、インテグリン、セレクチン、及びＣＤ４０からなる群から選択される１以上または全ての分子を発現し得る。アポトーシス小体は、通常、５００〜２，０００ｎｍの直径を有し、アネキシンＶおよびホスファチジルセリンからなる群から選択される１以上の分子を発現し得る。エクソソームには、タンパク質や核酸（例えば、ｍＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｎｃＲＮＡ）が含まれ得る。マイクロベシクルには、タンパク質や核酸（例えば、ｍＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、ｎｃＲＮＡ）が含まれ得る。アポトーシス小体には、断片化された核やオルガネラが含まれると考えられている。
【００１３】  本明細書では、「抽出物」とは、抽出された物であって、かつ、特定の成分が抽出前よりも濃縮されている物を意味する。本明細書では、「尿の抽出物」とは、尿から抽出された物であって、特定の成分（特にマイクロＲＮＡ）が抽出前の尿におけるよりも濃縮されている物を意味する。尿の抽出物は、水溶液（溶液または懸濁液）であり得、または、それらを乾燥して得られる固形物であり得る。尿の抽出物において、尿中の細胞外小胞および核酸以外の構成成分が実質的に除去された抽出物は、尿の精製物とも呼ばれることがある。尿の抽出物は、界面活性剤（好ましくは非イオン性界面活性剤）を含んでいてもよい。尿の抽出物は、界面活性剤と細胞外小胞（例えば、エクソソームおよび／またはマイクロベシクル）の破片（ｄｅｂｒｉｓ）を含んでいてもよい。尿の抽出物は、界面活性剤と細胞外小胞（例えば、エクソソームおよび／またはマイクロベシクル）の破片（ｄｅｂｒｉｓ）からなる群から選択される１以上を含まない、または実質的に含まないものであってよい。尿の抽出物は、安定化剤（例えば、核酸の安定化剤）および／またはｐＨ調整剤（例えば、緩衝剤）をさらに含んでいてもよい。尿の抽出物は、塩を含んでいてもよい。尿の抽出物は、尿成分、例えば、尿素、クレアチニン、尿酸、アンモニア、ウロビリン、リボフラビン、尿タンパク質、糖および尿のホルモン（例えば、絨毛性ゴナドトロピン）からなる群から選択される１以上の尿成分を含んでいてもよい。尿抽出物のｐＨは、２、３、４、または５などの値より大きくてもそれ以上であってもよい。尿抽出物のｐＨは、１０、９、８、７、６、または５などの値より小さくてもそれ以下であってもよい。本開示では、尿抽出物は、マイクロＲＮＡを含む。本開示では、尿抽出物は、濃縮されたマイクロＲＮＡ又はその群を含み得る。本開示では、尿抽出物は、本明細書で記載される抽出方法によって抽出されたマイクロＲＮＡを含み得る。本開示では、尿抽出物は、データＳ１（または、データＳ１を開示する表３）にリストされるマイクロＲＮＡの少なくとも１つまたは全てを含み得る。本開示では、尿抽出物は、尿のｐＨ環境下において正電荷の表面を有するナノワイヤ（例えば、ＺｎＯ、ＳｉＯ２、Ｌｉ２Ｏ、ＭｇＯ、Ａｌ２Ｏ３、ＣａＯ、ＴｉＯ２、Ｍｎ２Ｏ３、Ｆｅ２Ｏ３、ＣｏＯ、ＮｉＯ、ＣｕＯ、Ｇａ２Ｏ３、ＳｒＯ、Ｉｎ２Ｏ３、ＳｎＯ２、Ｓｍ２Ｏ３、およびＥｕＯからなる群から選択される少なくとも１種の表面を有するナノワイヤ）と尿を接触させ、その後、必要に応じて洗浄してから、非イオン性界面活性剤等を含む緩衝液で抽出して得られる物であり得る（このようにして得られる尿抽出物を「本開示の尿の抽出物」ということがある）。尿はまた、尿と上記ナノワイヤを接触させる際（前、後、または接触中）には、上記ナノワイヤの表面電荷が正となるようにｐＨを調整され得る。
【００１４】  本明細書では、「ｉｎ  ｓｉｔｕ抽出」とは、ナノワイヤ組み込みマイクロ流体デバイスを用いてナノワイヤ上に捕捉したＥＶを破壊して“その場で”小分子ＲＮＡ（例えば、マイクロＲＮＡ）を抽出すること、またはナノワイヤ上に捕捉した小分子ＲＮＡ（例えば、マイクロＲＮＡ）をナノワイヤから溶液中に抽出することを意味する。
【００１５】  本明細書では、「遊離」とは、尿中におけるマイクロＲＮＡの存在形態の文脈で用いられる場合には、マイクロＲＮＡが細胞外小胞に内包されておらず、また、細胞外小胞と会合していない状態で存在していることを意味する。本明細書では、「内包」とは、尿中におけるマイクロＲＮＡの存在形態の文脈で用いられる場合には、マイクロＲＮＡが細胞外小胞に組み込まれている（完全に内包されている場合、一部が部分的に内包されている場合のいずれであってもよい）ことを意味する。
【００１６】  本明細書では、「ナノワイヤ」は、ナノメートルオーダーの断面形状や直径などのサイズ（例えば、直径１〜数百ナノメートルの直径）を有する棒状の構造体を意味する。ナノワイヤのサイズは、特に限定されないが例えば、１ｎｍ、５ｎｍ、１０ｎｍ、１５ｎｍ、２０ｎｍ、２５ｎｍ、３０ｎｍ、４０ｎｍ、５０ｎｍ、６０ｎｍ、７０ｎｍ、８０ｎｍ、９０ｎｍ、１００ｎｍ、１０５ｎｍ、１１０ｎｍ、１１５ｎｍ、１２０ｎｍ、１２５ｎｍ、１３０ｎｍ、１３５ｎｍ、１４０ｎｍ、１４５ｎｍ、１５０ｎｍ、１５５ｎｍ、１６０ｎｍ、１６５ｎｍ、１７０ｎｍ、１７５ｎｍ、１８０ｎｍ、１８５ｎｍ、１９０ｎｍ、１９５ｎｍ、２００ｎｍ、２１０ｎｍ、２２０ｎｍ、２３０ｎｍ、２４０ｎｍ、２５０ｎｍ、２６０ｎｍ、２７０ｎｍ、２８０ｎｍ、２９０ｎｍ、３００ｎｍ、３１０ｎｍ、３２０ｎｍ、３３０ｎｍ、３４０ｎｍ、３５０ｎｍ、３６０ｎｍ、３７０ｎｍ、３８０ｎｍ、３９０ｎｍ、４００ｎｍ、４１０ｎｍ、４２０ｎｍ、４３０ｎｍ、４４０ｎｍ、４５０ｎｍ、４６０ｎｍ、４７０ｎｍ、４８０ｎｍ、または４９０ｎｍであるか、前記数値群から選択される１つの下限値よりも大きくてもよい。ナノワイヤのサイズはまた、特に限定されないが例えば、１０００ｎｍ、９９０ｎｍ、９８０ｎｍ、９７０ｎｍ、９６０ｎｍ、９５０ｎｍ、９４０ｎｍ、９３０ｎｍ、９２０ｎｍ、９１０ｎｍ、９００ｎｍ、８９０ｎｍ、８８０ｎｍ、８７０ｎｍ、８６０ｎｍ、８５０ｎｍ、８４０ｎｍ、８３０ｎｍ、８２０ｎｍ、８１０ｎｍ、８００ｎｍ、７９０ｎｍ、７８０ｎｍ、７７０ｎｍ、７６０ｎｍ、７５０ｎｍ、７４０ｎｍ、７３０ｎｍ、７２０ｎｍ、７１０ｎｍ、７００ｎｍ、６９０ｎｍ、６８０ｎｍ、６７０ｎｍ、６６０ｎｍ、６５０ｎｍ、６４０ｎｍ、６３０ｎｍ、６２０ｎｍ、６１０ｎｍ、６００ｎｍ、５９０ｎｍ、５８０ｎｍ、５７０ｎｍ、５６０ｎｍ、５５０ｎｍ、５４０ｎｍ．５３０ｎｍ、５２０ｎｍ、５１０ｎｍ、５００ｎｍであるか、前記数値群から選択される１つの下限値よりも小さくてもよい。ナノワイヤのサイズは、特に限定されないが例えば、上記上限値と下限値の間の任意のサイズであり得る。本開示のデバイスにおいては、ナノワイヤを用いることで表面積を増加させることができ、これによりＥＶの回収キャパシティーが増大し得る。また、ナノワイヤの長さは、特に限定されないが、例えば、５００ｎｍ、６００ｎｍ、７００ｎｍ、８００ｎｍ、９００ｎｍ、１μｍ、２μｍ、３μｍ、４μｍ、５μｍ、６μｍ、７μｍ、８μｍ、９μｍ、および１０μｍから選択される２つの値の間の任意の長さであり得る。ナノワイヤの長さおよび直径は、ナノワイヤの物理的強度や表面積に影響を与え得る。その使用環境に合わせて長さと直径を調整することができよう。
【００１７】  本明細書では、「フリー」とは、この用語の直前に記載された成分と組み合わせて用いられるときには、当該成分を実質的に含まない、または含まないことを意味する。ここで、「実質的に含まない」とは、抽出物中において除去できないレベルの当該成分を含むことを除外しない。
【００１８】  本発明者らは、ｐＨ６〜８の環境下において正に荷電する表面（例えば、酸化亜鉛（ＺｎＯ）の表面）を有するナノワイヤと対象の尿とを接触させることにより、尿中の細胞外小胞（ＥＶ）（及び遊離ｍｉＲＮＡ）が効率良く、かつ破壊されることなくナノワイヤに吸着することを見出した。本発明者らはまた、ナノワイヤに吸着したＥＶおよびｍｉＲＮＡを界面活性剤によって効果的に回収することができることを見出した。
【００１９】  本開示によれば、データＳ１（または表３）に記載のいずれか１以上のマイクロＲＮＡを含む尿の抽出物が提供される。本開示によれば、データＳ１（または表３）に記載のすべてのマイクロＲＮＡを含む尿の抽出物が提供される。本開示によれば、表２に記載のいずれか１以上のマイクロＲＮＡを含む尿の抽出物が提供される。本開示によれば、表２に記載のすべてのマイクロＲＮＡを含む尿の抽出物が提供される。
本開示のある態様では、データＳ１（または表３）に記載のいずれか１以上、または全てのマイクロＲＮＡを含む尿の抽出物は、マイクロＲＮＡ（特に、尿中に存在するマイクロＲＮＡ）を５００種類以上、６００種類以上、７００種類以上、８００種類以上、９００種類以上、１０００種類以上、または１１００種類以上含み得る。ある態様では、データＳ１（または表３）に記載のいずれか１以上、または全てのマイクロＲＮＡを含む尿の抽出物は、マイクロＲＮＡ（特に、尿中に存在するマイクロＲＮＡ）を７４９種類以上、８２２種類以上、または１１１１種類以上含み得る。
本開示のある態様では、尿中に存在するマイクロＲＮＡを５００種類以上、６００種類以上、７００種類以上、８００種類以上、９００種類以上、１０００種類以上、または１１００種類以上含み得る。いくつかの実施形態では、尿に含まれるマイクロＲＮＡの種類の数は、実際に含まれるマイクロＲＮＡの種類の数であってもよい。いくつかの実施形態では、尿に含まれるマイクロＲＮＡの種類の数は、マイクロＲＮＡの検出方法又は検出技術によって定義されてもよい。例えば、尿に含まれるマイクロＲＮＡの種類の数は、マイクロＲＮＡの検出方法の検出限界に依存し得るものである。本発明の開示のある態様では、好ましくは、本開示のナノワイヤ組み込みデバイスを用いて尿から調製され得る。
本開示のある態様では、マイクロＲＮＡは、データＳ１（または表３）に記載の数値（バックグラウンドの強度が控除された後にｌｏｇ２変換された数値）において１以上、２以上、３以上、４以上、５以上、６以上、７以上、８以上、９以上、１０以上、１１以上、１２以上、１３以上、１４以上、１５以上、および１６以上を示すマイクロＲＮＡからなる群から選択されるマイクロＲＮＡの少なくとも１つまたは全てを含み得る。本開示のある態様では、マイクロＲＮＡは、データＳ１（または表３）に記載の数値（バックグラウンドの強度が控除された後にｌｏｇ２変換された数値）において１以上２未満、２以上３未満、３以上４未満、４以上５未満、５以上６未満、６以上７未満、７以上８未満、８以上９未満、９以上１０未満、１０以上１１未満、１１以上１２未満、１２以上１３未満、１３以上１４未満、１４以上１５未満、および１６以上を示すマイクロＲＮＡからなる群から選択されるマイクロＲＮＡの少なくとも１つまたは全てを含み得る。この態様では、上記数値は、非がんドナー（例えば、健常者）における数値であり得、肺がん患者における数値であり得、膵がん患者における数値であり得、肝臓がん患者における数値であり得、膀胱がん患者における数値であり得、および／または、前立腺患者における数値であり得る。
【００２０】  本開示によれば、ｍｉＲ−３１１７−５ｐ、ｍｉＲ−３１１８、ｍｉＲ−３１２１−３ｐ、ｍｉＲ−３１２１−５ｐ、ｍｉＲ−３１２６−５ｐ、ｍｉＲ−３１２８、ｍｉＲ−３１３３、ｍｉＲ−３１３４、ｍｉＲ−３１３６−３ｐ、ｍｉＲ−３１３６−５ｐ、ｍｉＲ−３１３９、ｍｉＲ−３１４２、ｍｉＲ−３１４３、ｍｉＲ−３１４５−３ｐ、ｍｉＲ−３１６３、ｍｉＲ−３１６６、ｍｉＲ−３１６７、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５２５−５ｐ、ｍｉＲ−５５１ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−５５８、ｍｉＲ−９２１、ｍｉＲ−９４２−３ｐ、ｍｉＲ−３１２６−３ｐ、ｍｉＲ−３１２７−５ｐ、ｍｉＲ−３１２９−５ｐ、ｍｉＲ−３１４４−５ｐ、ｍｉＲ−３１５０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５２−５ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３１５７−３ｐ、ｍｉＲ−３１５９、ｍｉＲ−３１６５、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４３２１、ｍｉＲ−４５２１、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−４９９９−５ｐ、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−６８７４−５ｐ、ｍｉＲ−３１２７−３ｐ、ｍｉＲ−３１３０−５ｐ、ｍｉＲ−３１３１、ｍｉＲ−３１４１、ｍｉＲ−３１５０ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５１−３ｐ、ｍｉＲ−３１５１−５ｐ、ｍｉＲ−３１５４、ｍｉＲ−３１６０−３ｐ、ｍｉＲ−３１６０−５ｐ、ｍｉＲ−３７８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−５２６ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−３１５０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３１６２−５ｐ、及びｍｉＲ−４２５４からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを含む、尿の抽出物が提供される。本開示によれば、ｍｉＲ−３１６３、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５５８、ｍｉＲ−３１２７−５ｐ、及びｍｉＲ−４５２１からなる群から選択される少なくとも１種のマイクロＲＮＡまたは全てのマイクロＲＮＡを含む、尿の抽出物が提供される。本開示によれば、ｍｉＲ−３７８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、及びｍｉＲ−５２６ｂ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種のマイクロＲＮＡまたは全てのマイクロＲＮＡを含む、尿の抽出物が提供される。これらのマイクロＲＮＡは、肺がん患者の尿において検出され得る。従って、本開示によれば、尿は、肺がんを有する対象の尿であり得る。
【００２１】  本開示によれば、ｌｅｔ−７ｉ−３ｐ、ｍｉＲ−１８３−５ｐ、ｍｉＲ−２０２−５ｐ、ｍｉＲ−４０９−５ｐ、ｍｉＲ−４６６１−５ｐ、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−５５８７−５ｐ、ｍｉＲ−３７２−３ｐ、ｍｉＲ−３７８ｂ、ｍｉＲ−５２０ｂ、ｍｉＲ−１２６６−３ｐ、ｍｉＲ−３６０５−５ｐ、ｍｉＲ−３６１２、ｍｉＲ−４６４５−３ｐ、ｍｉＲ−４６９４−３ｐ、ｍｉＲ−４７５２、ｍｉＲ−６８１６−３ｐ、ｍｉＲ−８０８７、ｌｅｔ−７ｆ−２−３ｐ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−２０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−３４ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−９３−５ｐ、ｍｉＲ−１３０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−１８５−５ｐ、ｍｉＲ−２０３ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３０２ｄ−５ｐ、ｍｉＲ−３３７−３ｐ、ｍｉＲ−３７８ｃ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−４４９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−４８３−５ｐ、ｍｉＲ−５０６−３ｐ、ｍｉＲ−５１１−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−６５４−３ｐ、ｍｉＲ−６６８−５ｐ、ｍｉＲ−６７０−５ｐ、ｍｉＲ−６７１−３ｐ、ｍｉＲ−７４４−３ｐ、ｍｉＲ−１１７８−３ｐ、ｍｉＲ−１２５４、ｍｉＲ−１２８４、ｍｉＲ−１３２３、ｍｉＲ−２１１６−５ｐ、ｍｉＲ−２３５５−３ｐ、ｍｉＲ−３１３２、ｍｉＲ−３１３８、ｍｉＲ−３１６４、ｍｉＲ−３１８６−３ｐ、ｍｉＲ−３１８９−３ｐ、ｍｉＲ−３１９８、ｍｉＲ−３２００−５ｐ、ｍｉＲ−３６５７、ｍｉＲ−３６６７−５ｐ、ｍｉＲ−３６８０−５ｐ、ｍｉＲ−３６９２−５ｐ、ｍｉＲ−３７１３、ｍｉＲ−３９２１、ｍｉＲ−３９３６、ｍｉＲ−４２７３、ｍｉＲ−４２９９、ｍｉＲ−４３０６、ｍｉＲ−４３１６、ｍｉＲ−４３１９、ｍｉＲ−４４２１、ｍｉＲ−４４２９、ｍｉＲ−４４３５、ｍｉＲ−４４４１、ｍｉＲ−４４７３、ｍｉＲ−４５０６、ｍｉＲ−４６３３−５ｐ、ｍｉＲ−４６５８、ｍｉＲ−４７３３−５ｐ、ｍｉＲ−４７３３−３ｐ、ｍｉＲ−５００４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９４、ｍｉＲ−５１９７−５ｐ、ｍｉＲ−５５７１−５ｐ、ｍｉＲ−６０８３、ｍｉＲ−６７１７−５ｐ、ｍｉＲ−６７２０−５ｐ、ｍｉＲ−６７６７−３ｐ、ｍｉＲ−６７８１−３ｐ、ｍｉＲ−６８１１−３ｐ、ｍｉＲ−６８２１−３ｐ、ｍｉＲ−６８２８−５ｐ、ｍｉＲ−６８３２−５ｐ、ｍｉＲ−６８３７−３ｐ、ｍｉＲ−６８４１−５ｐ、ｍｉＲ−６８５３−５ｐ、ｍｉＲ−６８７１−３ｐ、ｍｉＲ−６８７５−５ｐ、ｍｉＲ−６８７８−５ｐ、ｍｉＲ−７１１２−３ｐ、ｍｉＲ−７７０３、ｍｉＲ−７８４８−３ｐ、及びｍｉＲ−７８５６−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを含む、尿の抽出物が提供される。本開示によれば、ｍｉＲ−１８３−５ｐ、ｍｉＲ−２０２−５ｐ、及びｍｉＲ−４０９−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを含む、尿の抽出物が提供される。本開示によれば、ｍｉＲ−３７２−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｂ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３４ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１８５−５ｐ、ｍｉＲ−３３７−３ｐ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５０６−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−���２８４、ｍｉＲ−１３２３、及びｍｉＲ−４２７３からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを含む、尿の抽出物が提供される。これらのマイクロＲＮＡは、膵がん患者の尿において検出され得る。従って、本開示によれば、尿は、膵がんを有する対象の尿であり得る。
【００２２】  本開示によれば、ｍｉＲ−４５２１、ｌｅｔ−７ｃ−３ｐ、ｌｅｔ−７ｉ−５ｐ、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２６ａ−１−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−２００ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−２１９ａ−２−３ｐ、ｍｉＲ−２９７、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−３３０−３ｐ、ｍｉＲ−３７４ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４３１−５ｐ、ｍｉＲ−４５４−５ｐ、ｍｉＲ−５１３ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５４８ａｘ、ｍｉＲ−５９３−５ｐ、ｍｉＲ−６２３、ｍｉＲ−６６４ａ−５ｐ、ｍｉＲ−９４２−３ｐ、ｍｉＲ−１２０５、ｍｉＲ−１２７６、ｍｉＲ−１２８８−３ｐ、ｍｉＲ−１２９７、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４２９５、ｍｉＲ−４４３９、ｍｉＲ−４５２４ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４７０３−３ｐ、ｍｉＲ−４７６８−５ｐ、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−５６９６、ｍｉＲ−７１６１−５ｐ、ｌｅｔ−７ｉ−２−３ｐ、及びｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを含む、尿の抽出物が提供される。本開示によれば、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−２９７、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−３３０−３ｐ、ｍｉＲ−４５４−５ｐ、ｍｉＲ−１２９７、及びｍｉＲ−４２９５からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを含む、尿の抽出物が提供される。本開示によれば、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐを含む、尿の抽出物が提供される。これらのマイクロＲＮＡは、肝がんを有する対象の尿において検出され得る。従って、尿は、肝がんを有する対象の尿であり得る。
【００２３】  本開示によれば、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−９２ａ−２−５ｐ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−１９６ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−２９９−３ｐ、ｍｉＲ−４９２、ｍｉＲ−５１３ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６０１、ｍｉＲ−６１９−５ｐ、ｍｉＲ−１２８５−３ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３１６２−５ｐ、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４２９５、ｍｉＲ−４３１１、ｍｉＲ−４５３１、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｌｅｔ−７ｆ−２−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、及びｍｉＲ−４７８３−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを含む、尿の抽出物が提供される。本開示によれば、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−２９９−３ｐ、及びｍｉＲ−４２９５からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを含む、尿の抽出物が提供される。本開示によれば、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐを含む、尿の抽出物が提供される。これらのマイクロＲＮＡは、膀胱がんを有する態様において検出され得る。従って、本開示では、尿は、膀胱がんを有する対象の尿であり得る。
【００２４】  本開示によれば、ｍｉＲ−４５３１、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０３ａ−２−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１２４−３ｐ、ｍｉＲ−１５１ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１５１ｂ、ｍｉＲ−２００ａ−５ｐ、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５５１ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６１７、ｍｉＲ−８７３−３ｐ、ｍｉＲ−９２１、ｍｉＲ−１２８８−３ｐ、ｍｉＲ−３１２４−５ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３９１７、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４７２７−３ｐ、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−６０７４、ｍｉＲ−６８７４−５ｐ、ｍｉＲ−６８９２−５ｐ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−１３５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−４７８３−５ｐ、及びｍｉＲ−７８４９−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを含む、尿の抽出物が提供される。本開示によれば、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１２４−３ｐ、ｍｉＲ−１５１ａ−５ｐ、及びｍｉＲ−３００からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを含む、尿の抽出物が提供される。本開示によれば、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ及びｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡを含む、尿の抽出物が提供される。これらのマイクロＲＮＡは、前立腺がんを有する態様において検出され得る。従って、本開示では、尿は、前立腺がんを有する対象の尿であり得る。
【００２５】  本開示の別の側面では、対象ががんである可能性を検査する方法が提供される。がんである可能性を検査する方法は、がんであるかを診断する方法、がんであるかを診断するための予備的情報を取得する方法、対象の体内にがん細胞が存在するか否かを決定する方法、または対象ががんである可能性を判定する方法に読み替えることができる。本開示においては、対象ががんである可能性を検査する方法によって対象ががんである可能性があると決定された場合には、その後、医師等により確定診断をすることができる。本開示においては、本開示の方法によれば、がんであると診断することと、がんであると診断された患者に対して抗がん治療を行うこととを含む、方法が提供される。
【００２６】  本開示において、対象ががんである可能性は、体液試料におけるデータＳ１（または表３）に記載のマイクロＲＮＡのいずれかの発現レベルを指標として決定することができる。
【００２７】  本開示のある態様では、体液試料とは、対象から得られる体液または当該体液に由来する試料を意味する。体液試料とは血液、血清、血漿、リンパ液であってもよく、組織間液、細胞間液、間質液などの組織液であってもよく、体腔液、漿膜腔液、胸水、腹水、心嚢液、脳脊髄液（髄液）、関節液（滑液）、眼房水（房水）であってもよい。体液は、唾液、胃液、胆汁、膵液、腸液などの消化液であってもよく、汗、涙、鼻水、尿、精液、膣液、羊水、乳汁であってもよい。体液は、動物の体液であってもよく、ヒトの体液であってもよい。本開示では好ましくは、体液試料としては、尿またはその抽出物が好ましく用いられ得る。本開示では好ましくは、尿の抽出物は、本開示の尿の抽出物であり得る。
【００２８】  がんは、特に限定されないが例えば、固形がんおよび造血器腫瘍等から選択される１以上のがんであり得る。がんとしては、例えば、肺がん、膵臓がん、肝がん、膀胱がん、および前立腺がんからなる群から選択される１以上が挙げられる。
【００２９】  対象ががんである可能性は、対象の体液試料のマイクロＲＮＡレベルを指標として評価することができる。例えば、データＳ１（または表３）において、がんである対象において非がんである対象よりも高い発現を示したマイクロＲＮＡに対しては、対象の体液試料のマイクロＲＮＡレベルが所定の値（以下、「閾値」ということがある）よりも高いことを指標として、対象ががんである可能性が高いと決定することができる。上記において、データＳ１（または表３）において、例えば、がんである対象３人において非がんである対象３人のいずれよりも高い発現を示したマイクロＲＮＡに対しては、対象の体液試料のマイクロＲＮＡレベルが所定の値（以下、「閾値」ということがある）よりも高いことを指標として、対象ががんである可能性が高いと決定することができる。
また例えば、データＳ１（または表３）において、がんである対象において非がんである対象よりも高い発現を示したマイクロＲＮＡ（例えば、２倍以上、３倍以上、４以上、５以上、６以上、７以上、８以上、９以上、または１０以上）に対しては、対象の体液試料のマイクロＲＮＡレベルが所定の値（以下、「閾値」ということがある）よりも低いことを指標として、対象ががんである可能性が低いと決定することができる。上記において、データＳ１（または表３）において、例えば、がんである対象３人において非がんである対象３人のいずれよりも低い発現を示したマイクロＲＮＡ（例えば、２倍以上、３倍以上、４以上、５以上、６以上、７以上、８以上、９以上、または１０以上）に対しては、対象の体液試料のマイクロＲＮＡレベルが所定の値（以下、「閾値」ということがある）よりも低いことを指標として、対象ががんである可能性が低いと決定することができる。
これらの場合に、所定の値は、特に限定されないが例えば、がんである対象群における当該マイクロＲＮＡレベルの平均値、中央値、第３四分位値、第１四分位値、及び最低値からなる群から選択される２つの値（統計値又は指標値）の間の任意の数値であり得る。また例えば、所定の値は、特に限定されないが例えば、非がんである対象群における当該マイクロＲＮＡレベルの最大値、第３四分位値、平均値、中央値、及び第１子分位値からなる群から選択される２つの値の間の任意の数値であり得る。
本開示では、対象の体液試料のマイクロＲＮＡのうち、測定するマイクロＲＮＡの種類および／またはがんの可能性の指標となるマイクロＲＮＡの種類を、例えば、１以上、２以上、３以上、４以上、５以上、６以上、７以上、８以上、９以上、１０以上、２０以上、３０以上、４０以上、５０以上、６０以上、７０以上、８０以上、９０以上、１００以上、２００以上、３００以上、４００以上、５００以上、６００以上、７００以上、８００以上、９００以上、１０００以上、または１１００以上とすることができる。対象の体液試料のマイクロＲＮＡのうち、測定するマイクロＲＮＡの種類および／またはがんの可能性の指標となるマイクロＲＮＡの種類を、例えば、２０００以下、１９００以下、１８００以下、１７００以下、１６００以下、１５００以下、１４００以下、１３００以下、１２００以下、１１００以下、１０００以下、９００以下、８００以下、７００以下、６００以下、５００以下、４００以下、３００以下、２００以下、１００以下、９０以下、８０以下、７０以下、６０以下、５０以下、４０以下、３０以下、２０以下、または１０以下とすることができる。マイクロＲＮＡをがんの可能性の指標にする方法は、本明細書に開示される通りである。
【００３０】  また例えば、データＳ１（または表３）において、がんである対象において非がんである対象よりも低い発現を示したマイクロＲＮＡに対しては、対象の体液試料のマイクロＲＮＡレベルが所定の値よりも低いことを指標として、対象ががんである可能性が高いと決定することができる。上記において、データＳ１（または表３）において、例えば、がんである対象３人において非がんである対象３人のいずれよりも低い発現を示したマイクロＲＮＡ（例えば、２倍以上、３倍以上、４以上、５以上、６以上、７以上、８以上、９以上、または１０以上）に対しては、対象の体液試料のマイクロＲＮＡレベルが所定の値（以下、「閾値」ということがある）よりも低いことを指標として、対象ががんである可能性が高いと決定することができる。
また例えば、データＳ１（または表３）において、がんである対象において非がんである対象よりも低い発現を示したマイクロＲＮＡに対しては、対象の体液試料のマイクロＲＮＡレベルが所定の値よりも高いことを指標として、対象ががんである可能性が低いと決定することができる。上記において、データＳ１（または表３）において、例えば、がんである対象３人において非がんである対象３人のいずれよりも低い発現を示したマイクロＲＮＡ（例えば、２倍以上、３倍以上、４以上、５以上、６以上、７以上、８以上、９以上、または１０以上）に対しては、対象の体液試料のマイクロＲＮＡレベルが所定の値（以下、「閾値」ということがある）よりも高いことを指標として、対象ががんである可能性が低いと決定することができる。
これらの場合に、所定の値は、特に限定されないが例えば、がんである対象群における当該マイクロＲＮＡレベルの平均値、中央値、第３四分位値、第１四分位値、及び最低値からなる群から選択される２つの値の間の任意の数値であり得る。また例えば、所定の値は、特に限定されないが例えば、非がんである対象群における当該マイクロＲＮＡレベルの最大値、第３四分位値、平均値、中央値、及び第１子分位値からなる群から選択される２つの値の間の任意の数値であり得る。
【００３１】  本開示によれば、対象が肺がんである可能性を検査する方法が提供される。本開示によれば、対象が肺がんである可能性を検査する方法は、当該対象の体液試料中における、データＳ１（または表３）から選択されるいずれか１以上のマイクロＲＮＡレベルを指標として対象が肺がんである可能性を検査することができる。本開示によれば、当該対象の体液試料中における、ｍｉＲ−３１１７−５ｐ、ｍｉＲ−３１１８、ｍｉＲ−３１２１−３ｐ、ｍｉＲ−３１２１−５ｐ、ｍｉＲ−３１２６−５ｐ、ｍｉＲ−３１２８、ｍｉＲ−３１３３、ｍｉＲ−３１３４、ｍｉＲ−３１３６−３ｐ、ｍｉＲ−３１３６−５ｐ、ｍｉＲ−３１３９、ｍｉＲ−３１４２、ｍｉＲ−３１４３、ｍｉＲ−３１４５−３ｐ、ｍｉＲ−３１６３、ｍｉＲ−３１６６、ｍｉＲ−３１６７、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５２５−５ｐ、ｍｉＲ−５５１ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−５５８、ｍｉＲ−９２１、ｍｉＲ−９４２−３ｐ、ｍｉＲ−３１２６−３ｐ、ｍｉＲ−３１２７−５ｐ、ｍｉＲ−３１２９−５ｐ、ｍｉＲ−３１４４−５ｐ、ｍｉＲ−３１５０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５２−５ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３１５７−３ｐ、ｍｉＲ−３１５９、ｍｉＲ−３１６５、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４３２１、ｍｉＲ−４５２１、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−４９９９−５ｐ、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−６８７４−５ｐ、ｍｉＲ−３１２７−３ｐ、ｍｉＲ−３１３０−５ｐ、ｍｉＲ−３１３１、ｍｉＲ−３１４１、ｍｉＲ−３１５０ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５１−３ｐ、ｍｉＲ−３１５１−５ｐ、ｍｉＲ−３１５４、ｍｉＲ−３１６０−３ｐ、ｍｉＲ−３１６０−５ｐ、ｍｉＲ−３７８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−５２６ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−３１５０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３１６２−５ｐ、及びｍｉＲ−４２５４からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルを指標として、対象が肺がんである可能性を検査することができる。
本開示によればまた、対象の体液試料中における、ｍｉＲ−３１６３、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５５８、ｍｉＲ−３１２７−５ｐ、及びｍｉＲ−４５２１からなる群から選択される少なくとも１種のマイクロＲＮＡまたは全てのマイクロＲＮＡレベルを指標として、当該対象が肺がんである可能性を検査することができる。体液試料中において、ｍｉＲ−３１６３、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５５８、ｍｉＲ−３１２７−５ｐ、及びｍｉＲ−４５２１からなる群から選択される少なくとも１種のマイクロＲＮＡまたは全てのマイクロＲＮＡレベルが所定の値よりも高い場合、当該対象は肺がんである可能性を有すると決定し得る（および／または、所定の値よりも低い場合、当該対象は肺がんでない可能性を有すると決定しうる）。
本開示によればまた、対象の体液試料中における、ｍｉＲ−３７８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、及びｍｉＲ−５２６ｂ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種のマイクロＲＮＡまたは全てのマイクロＲＮＡレベルを指標として、当該対象が肺がんである可能性を検査することができる。体液試料中において、ｍｉＲ−３７８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、及びｍｉＲ−５２６ｂ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種のマイクロＲＮＡまたは全てのマイクロＲＮＡが所定の値よりも低い場合、当該対象は肺がんである可能性を有すると決定し得る（および／または、所定の値よりも高い場合、当該対象は肺がんでない可能性を有すると決定しうる）。
本開示によればまた、肺がんの指標となる尿中のマイクロＲＮＡは、ｍｉＲ−３１２７−３ｐ、ｍｉＲ−３１３０−５ｐ、ｍｉＲ−３１３１、ｍｉＲ−３１４１、ｍｉＲ−３１５０ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５１−３ｐ、ｍｉＲ−３１５１−５ｐ、ｍｉＲ−３１５４、ｍｉＲ−３１６０−３ｐ、及びｍｉＲ−３１６０−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てであり得る。
本開示によれば、肺がんの指標となる尿中のマイクロＲＮＡは、ｍｉＲ−３１１７−５ｐ、ｍｉＲ−３１１８、ｍｉＲ−３１２１−３ｐ、ｍｉＲ−３１２１−５ｐ、ｍｉＲ−３１２６−５ｐ、ｍｉＲ−３１２８、ｍｉＲ−３１３３、ｍｉＲ−３１３４、ｍｉＲ−３１３６−３ｐ、ｍｉＲ−３１３６−５ｐ、ｍｉＲ−３１３９、ｍｉＲ−３１４２、ｍｉＲ−３１４３、ｍｉＲ−３１４５−３ｐ、ｍｉＲ−３１６３、ｍｉＲ−３１６６、及びｍｉＲ−３１６７からなる群から選択される少なくとも１種または全てであり得る。
【００３２】  本開示によれば、対象が膵臓がんである可能性を検査する方法が提供される。本開示によれば、対象が膵臓がんである可能性を検査する方法は、当該対象の体液試料中における、データＳ１（または表３）から選択されるいずれか１以上のマイクロＲＮＡレベルを指標として対象が膵臓がんである可能性を検査することができる。本開示によれば、当該対象の体液試料中における、ｌｅｔ−７ｉ−３ｐ、ｍｉＲ−１８３−５ｐ、ｍｉＲ−２０２−５ｐ、ｍｉＲ−４０９−５ｐ、ｍｉＲ−４６６１−５ｐ、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−５５８７−５ｐ、ｍｉＲ−３７２−３ｐ、ｍｉＲ−３７８ｂ、ｍｉＲ−５２０ｂ、ｍｉＲ−１２６６−３ｐ、ｍｉＲ−３６０５−５ｐ、ｍｉＲ−３６１２、ｍｉＲ−４６４５−３ｐ、ｍｉＲ−４６９４−３ｐ、ｍｉＲ−４７５２、ｍｉＲ−６８１６−３ｐ、ｍｉＲ−８０８７、ｌｅｔ−７ｆ−２−３ｐ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−２０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−３４ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−９３−５ｐ、ｍｉＲ−１３０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−１８５−５ｐ、ｍｉＲ−２０３ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３０２ｄ−５ｐ、ｍｉＲ−３３７−３ｐ、ｍｉＲ−３７８ｃ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−４４９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−４８３−５ｐ、ｍｉＲ−５０６−３ｐ、ｍｉＲ−５１１−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−６５４−３ｐ、ｍｉＲ−６６８−５ｐ、ｍｉＲ−６７０−５ｐ、ｍｉＲ−６７１−３ｐ、ｍｉＲ−７４４−３ｐ、ｍｉＲ−１１７８−３ｐ、ｍｉＲ−１２５４、ｍｉＲ−１２８４、ｍｉＲ−１３２３、ｍｉＲ−２１１６−５ｐ、ｍｉＲ−２３５５−３ｐ、ｍｉＲ−３１３２、ｍｉＲ−３１３８、ｍｉＲ−３１６４、ｍｉＲ−３１８６−３ｐ、ｍｉＲ−３１８９−３ｐ、ｍｉＲ−３１９８、ｍｉＲ−３２００−５ｐ、ｍｉＲ−３６５７、ｍｉＲ−３６６７−５ｐ、ｍｉＲ−３６８０−５ｐ、ｍｉＲ−３６９２−５ｐ、ｍｉＲ−３７１３、ｍｉＲ−３９２１、ｍｉＲ−３９３６、ｍｉＲ−４２７３、ｍｉＲ−４２９９、ｍｉＲ−４３０６、ｍｉＲ−４３１６、ｍｉＲ−４３１９、ｍｉＲ−４４２１、ｍｉＲ−４４２９、ｍｉＲ−４４３５、ｍｉＲ−４４４１、ｍｉＲ−４４７３、ｍｉＲ−４５０６、ｍｉＲ−４６３３−５ｐ、ｍｉＲ−４６５８、ｍｉＲ−４７３３−５ｐ、ｍｉＲ−４７３３−３ｐ、ｍｉＲ−５００４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９４、ｍｉＲ−５１９７−５ｐ、ｍｉＲ−５５７１−５ｐ、ｍｉＲ−６０８３、ｍｉＲ−６７１７−５ｐ、ｍｉＲ−６７２０−５ｐ、ｍｉＲ−６７６７−３ｐ、ｍｉＲ−６７８１−３ｐ、ｍｉＲ−６８１１−３ｐ、ｍｉＲ−６８２１−３ｐ、ｍｉＲ−６８２８−５ｐ、ｍｉＲ−６８３２−５ｐ、ｍｉＲ−６８３７−３ｐ、ｍｉＲ−６８４１−５ｐ、ｍｉＲ−６８５３−５ｐ、ｍｉＲ−６８７１−３ｐ、ｍｉＲ−６８７５−５ｐ、ｍｉＲ−６８７８−５ｐ、ｍｉＲ−７１１２−３ｐ、ｍｉＲ−７７０３、ｍｉＲ−７８４８−３ｐ、及びｍｉＲ−７８５６−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルを指標として、対象が膵臓がんである可能性を検査することができる。
本開示によればまた、対象の体液試料中における、ｍｉＲ−１８３−５ｐ、ｍｉＲ−２０２−５ｐ、及びｍｉＲ−４０９−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルを指標として、対象が膵臓がんである可能性を検査することができる。体液試料中において、ｍｉＲ−１８３−５ｐ、ｍｉＲ−２０２−５ｐ、及びｍｉＲ−４０９−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルが所定の値よりも高い場合、当該対象が膵臓がんである可能性を有すると決定し得る（および／または低い場合、当該対象が膵臓がんではない可能性を有すると決定し得る）。
本開示によればまた、ｍｉＲ−３７２−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｂ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３４ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１８５−５ｐ、ｍｉＲ−３３７−３ｐ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５０６−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−１２８４、ｍｉＲ−１３２３、及びｍｉＲ−４２７３からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルを指標として、対象が膵臓がんである可能性を検査することができる。体液試料中において、ｍｉＲ−３７２−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｂ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３４ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１８５−５ｐ、ｍｉＲ−３３７−３ｐ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−５０６−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−１２８４、ｍｉＲ−１３２３、及びｍｉＲ−４２７３からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルが所定の値よりも低い場合、当該対象が膵臓がんである可能性を有すると決定し得る（および／または、高い場合、当該対象が膵臓がんではない可能性を有すると決定し得る）。
本開示によればまた、膵臓がんの指標となる尿中のマイクロＲＮＡは、ｍｉＲ−３７２−３ｐ、ｍｉＲ−３７８ｂ、ｍｉＲ−５２０ｂ、ｍｉＲ−１２６６−３ｐ、ｍｉＲ−３６０５−５ｐ、ｍｉＲ−３６１２、ｍｉＲ−４６４５−３ｐ、ｍｉＲ−４６９４−３ｐ、ｍｉＲ−４７５２、ｍｉＲ−６８１６−３ｐ、及びｍｉＲ−８０８７からなる群から選択される少なくとも１種または全てであり得る。
【００３３】  本開示によれば、対象が肝臓がんである可能性を検査する方法が提供される。本開示によれば、対象が肝臓がんである可能性を検査する方法は、当該対象の体液試料中における、データＳ１（または表３）から選択されるいずれか１以上のマイクロＲＮＡレベルを指標として対象が肝臓がんである可能性を検査することができる。本開示によれば、ｍｉＲ−４５２１、ｌｅｔ−７ｃ−３ｐ、ｌｅｔ−７ｉ−５ｐ、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２６ａ−１−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−２００ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−２１９ａ−２−３ｐ、ｍｉＲ−２９７、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−３３０−３ｐ、ｍｉＲ−３７４ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４３１−５ｐ、ｍｉＲ−４５４−５ｐ、ｍｉＲ−５１３ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５４８ａｘ、ｍｉＲ−５９３−５ｐ、ｍｉＲ−６２３、ｍｉＲ−６６４ａ−５ｐ、ｍｉＲ−９４２−３ｐ、ｍｉＲ−１２０５、ｍｉＲ−１２７６、ｍｉＲ−１２８８−３ｐ、ｍｉＲ−１２９７、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４２９５、ｍｉＲ−４４３９、ｍｉＲ−４５２４ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４７０３−３ｐ、ｍｉＲ−４７６８−５ｐ、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−５６９６、ｍｉＲ−７１６１−５ｐ、ｌｅｔ−７ｉ−２−３ｐ、及びｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルを指標として、対象が肝臓がんである可能性を検査することができる。
本開示では、ｍｉＲ−４５２１、ｌｅｔ−７ｃ−３ｐ、ｌｅｔ−７ｉ−５ｐ、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２６ａ−１−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−２００ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−２１９ａ−２−３ｐ、ｍｉＲ−２９７、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−３３０−３ｐ、ｍｉＲ−３７４ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４３１−５ｐ、ｍｉＲ−４５４−５ｐ、ｍｉＲ−５１３ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５４８ａｘ、ｍｉＲ−５９３−５ｐ、ｍｉＲ−６２３、ｍｉＲ−６６４ａ−５ｐ、ｍｉＲ−９４２−３ｐ、ｍｉＲ−１２０５、ｍｉＲ−１２７６、ｍｉＲ−１２８８−３ｐ、ｍｉＲ−１２９７、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４２９５、ｍｉＲ−４４３９、ｍｉＲ−４５２４ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４７０３−３ｐ、ｍｉＲ−４７６８−５ｐ、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−５６９６、ｍｉＲ−７１６１−５ｐ、ｌｅｔ−７ｉ−２−３ｐ、及びｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルを指標として、対象が肝臓がんである可能性を検査することができる。体液試料中において、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−２９７、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−３３０−３ｐ、ｍｉＲ−４５４−５ｐ、ｍｉＲ−１２９７、及びｍｉＲ−４２９５からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルが所定の値よりも高い場合、当該対象が肝臓がんである可能性を有すると決定することができる（および／または、低い場合、当該対象が肝臓がんでない可能性を有すると決定することができる）。
本開示では、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐのレベルを指標として、対象が肝臓がんである可能性を検査することができる。体液試料中において、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐのレベルが所定の値よりも低い場合、当該対象が肝臓がんである可能性を有すると決定することができる（および／または、高い場合、当該対象が肝臓がんでない可能性を有すると決定することができる）。
本開示によればまた、肝臓がんの指標となる尿中のマイクロＲＮＡは、ｍｉＲ−４５２１であり得る。
【００３４】  本開示によれば、対象が膀胱がんである可能性を検査する方法が提供される。本開示によれば、対象が膀胱がんである可能性を検査する方法は、当該対象の体液試料中における、データＳ１（または表３）から選択されるいずれか１以上のマイクロＲＮＡレベルを指標として対象が膀胱がんである可能性を検査することができる。本開示によれば、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−９２ａ−２−５ｐ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−１９６ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−２９９−３ｐ、ｍｉＲ−４９２、ｍｉＲ−５１３ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６０１、ｍｉＲ−６１９−５ｐ、ｍｉＲ−１２８５−３ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３１６２−５ｐ、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４２９５、ｍｉＲ−４３１１、ｍｉＲ−４５３１、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｌｅｔ−７ｆ−２−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、及びｍｉＲ−４７８３−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルを指標として、当該対象が膀胱がんである可能性を検査することができる。
本開示では、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−２９９−３ｐ、及びｍｉＲ−４２９５からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルを指標として、対象が膀胱がんである可能性を検査することができる。体液試料中において、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−２９９−３ｐ、及びｍｉＲ−４２９５からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルが所定の値よりも高い場合、当該対象が膀胱がんである可能性を有すると決定し得る（および／または、低い場合、当該対象が膀胱がんでない可能性を有すると決定し得る）。
本開示では、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐレベルを指標として、対象が膀胱がんである可能性を検査することができる。体液試料中において、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐレベルが所定の値よりも低い場合、当該対象が膀胱がんである可能性を有すると決定し得る（および／または、高い場合、当該対象が膀胱がんでない可能性を有すると決定し得る）。
【００３５】  本開示によれば、対象が前立腺がんである可能性を検査する方法が提供される。本開示によれば、対象が前立腺がんである可能性を検査する方法は、当該対象の体液試料中における、データＳ１（または表３）から選択されるいずれか１以上のマイクロＲＮＡレベルを指標として対象が前立腺がんである可能性を検査することができる。本開示によれば、ｍｉＲ−４５３１、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０３ａ−２−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１２４−３ｐ、ｍｉＲ−１５１ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１５１ｂ、ｍｉＲ−２００ａ−５ｐ、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５５１ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６１７、ｍｉＲ−８７３−３ｐ、ｍｉＲ−９２１、ｍｉＲ−１２８８−３ｐ、ｍｉＲ−３１２４−５ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３９１７、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４７２７−３ｐ、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−６０７４、ｍｉＲ−６８７４−５ｐ、ｍｉＲ−６８９２−５ｐ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−１３５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−４７８３−５ｐ、及びｍｉＲ−７８４９−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルを指標として対象が前立腺がんである可能性を検査することができる。
本開示では、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１２４−３ｐ、ｍｉＲ−１５１ａ−５ｐ、及びｍｉＲ−３００からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルを指標として対象が前立腺がんである可能性を検査することができる。体液試料中において、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１２４−３ｐ、ｍｉＲ−１５１ａ−５ｐ、及びｍｉＲ−３００からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルが所定の値よりも高い場合、対象が前立腺がんである可能性を有すると決定し得る（および／または、低い場合、対象が前立腺がんではない可能性を有すると決定し得る）。
本開示では、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ及びｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルを指標として、対象が肝臓がんである可能性を検査することができる。体液試料中において、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ及びｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡレベルが所定の値よりも低い場合、当該対象が前立腺がんである可能性を有すると決定することができる（および／または、高い場合、当該対象が前立腺がんでない可能性を有すると決定することができる）。
本開示によればまた、前立腺がんの指標となる尿中のマイクロＲＮＡは、ｍｉＲ−４５３１であり得る。
【００３６】  本開示では、複数のマイクロＲＮＡを指標として対象ががんまたは特定のがんである可能性を検査する場合には、いくつかの実施形態では、複数のマイクロＲＮＡレベルをそれぞれ所定の値と比較してもよいし、または、いくつかの実施形態では、複数のマイクロＲＮＡレベルを重み付けして得られるスコアに対して、同様に重み付けして得られる所定の値と比較してもよい。複数のマイクロＲＮＡレベルをそれぞれ所定の値と比較する場合には、がんである可能性を示唆するマイクロＲＮＡの数とがんではない可能性を示唆するマイクロＲＮＡの数を対比させて、がんである可能性が高いのか、がんではない可能性が高いのかを決定することができる。本開示ではまた、複数のマイクロＲＮＡレベルを重み付けしてスコアを得る場合（例えば、マイクロＲＮＡシグネチャーをスコア化する場合）には、各マイクロＲＮＡレベルを正規化し、その上で、重み付けをして、若しくは重み付けせずに、正規化した数値を加算または乗算してスコア化することができる（例えば、Ｚ−スコアを得ることができる）。このようにして得られたマイクロＲＮＡスコアは、同様にして得られる所定の値（すなわち、がん患者または非がんの対象から同様に得られるスコア等）と対比させて、がんである可能性が高いのか、がんではない可能性が高いのかを決定することができる。重み付けは、非がんの対象の体液試料と比較して、がんの対象の体液試料において量が多いものは、プラスとし、量の少ない物はマイナスとする（またはその逆）ことができる。重み付けはまた、がんの対象と非がんの対象とで差が大きいもの、または相関が大きいものに対して、より大きな数値を乗算することによって行うことができる。
いくつかの実施形態では、機械学習されたコンピュータ又は人工知能を用いて複数のマイクロＲＮＡレベルから疾病の有無の判定、疾病の特定やその疾病が発症する確率の算出を行わせてもよい。この際、機械学習又は人工知能では、例えば複数のマイクロＲＮＡレベルを疾病の有無の判定、疾病の特定やその疾病が発症する確率と関連付けて学習させることによって機械（コンピュータ）又は人工知能（ＡＩ）を学習させることができる。ここで、機械学習又は人工知能に対する学習は、
（ｉ）ｍｉＲ−３１１７−５ｐ、ｍｉＲ−３１１８、ｍｉＲ−３１２１−３ｐ、ｍｉＲ−３１２１−５ｐ、ｍｉＲ−３１２６−５ｐ、ｍｉＲ−３１２８、ｍｉＲ−３１３３、ｍｉＲ−３１３４、ｍｉＲ−３１３６−３ｐ、ｍｉＲ−３１３６−５ｐ、ｍｉＲ−３１３９、ｍｉＲ−３１４２、ｍｉＲ−３１４３、ｍｉＲ−３１４５−３ｐ、ｍｉＲ−３１６３、ｍｉＲ−３１６６、ｍｉＲ−３１６７、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５２５−５ｐ、ｍｉＲ−５５１ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−５５８、ｍｉＲ−９２１、ｍｉＲ−９４２−３ｐ、ｍｉＲ−３１２６−３ｐ、ｍｉＲ−３１２７−５ｐ、ｍｉＲ−３１２９−５ｐ、ｍｉＲ−３１４４−５ｐ、ｍｉＲ−３１５０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５２−５ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３１５７−３ｐ、ｍｉＲ−３１５９、ｍｉＲ−３１６５、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４３２１、ｍｉＲ−４５２１、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−４９９９−５ｐ、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−６８７４−５ｐ、ｍｉＲ−３１２７−３ｐ、ｍｉＲ−３１３０−５ｐ、ｍｉＲ−３１３１、ｍｉＲ−３１４１、ｍｉＲ−３１５０ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５１−３ｐ、ｍｉＲ−３１５１−５ｐ、ｍｉＲ−３１５４、ｍｉＲ−３１６０−３ｐ、ｍｉＲ−３１６０−５ｐ、ｍｉＲ−３７８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−５２６ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−３１５０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３１６２−５ｐ、及びｍｉＲ−４２５４からなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡの発現量とがんとの関連性データ；
（ｉｉ）ｌｅｔ−７ｉ−３ｐ、ｍｉＲ−１８３−５ｐ、ｍｉＲ−２０２−５ｐ、ｍｉＲ−４０９−５ｐ、ｍｉＲ−４６６１−５ｐ、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−５５８７−５ｐ、ｍｉＲ−３７２−３ｐ、ｍｉＲ−３７８ｂ、ｍｉＲ−５２０ｂ、ｍｉＲ−１２６６−３ｐ、ｍｉＲ−３６０５−５ｐ、ｍｉＲ−３６１２、ｍｉＲ−４６４５−３ｐ、ｍｉＲ−４６９４−３ｐ、ｍｉＲ−４７５２、ｍｉＲ−６８１６−３ｐ、ｍｉＲ−８０８７、ｌｅｔ−７ｆ−２−３ｐ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−２０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−３４ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−９３−５ｐ、ｍｉＲ−１３０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１３５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−１８５−５ｐ、ｍｉＲ−２０３ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３０２ｄ−５ｐ、ｍｉＲ−３３７−３ｐ、ｍｉＲ−３７８ｃ、ｍｉＲ−４２２ａ、ｍｉＲ−４４９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−４８３−５ｐ、ｍｉＲ−５０６−３ｐ、ｍｉＲ−５１１−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−６５４−３ｐ、ｍｉＲ−６６８−５ｐ、ｍｉＲ−６７０−５ｐ、ｍｉＲ−６７１−３ｐ、ｍｉＲ−７４４−３ｐ、ｍｉＲ−１１７８−３ｐ、ｍｉＲ−１２５４、ｍｉＲ−１２８４、ｍｉＲ−１３２３、ｍｉＲ−２１１６−５ｐ、ｍｉＲ−２３５５−３ｐ、ｍｉＲ−３１３２、ｍｉＲ−３１３８、ｍｉＲ−３１６４、ｍｉＲ−３１８６−３ｐ、ｍｉＲ−３１８９−３ｐ、ｍｉＲ−３１９８、ｍｉＲ−３２００−５ｐ、ｍｉＲ−３６５７、ｍｉＲ−３６６７−５ｐ、ｍｉＲ−３６８０−５ｐ、ｍｉＲ−３６９２−５ｐ、ｍｉＲ−３７１３、ｍｉＲ−３９２１、ｍｉＲ−３９３６、ｍｉＲ−４２７３、ｍｉＲ−４２９９、ｍｉＲ−４３０６、ｍｉＲ−４３１６、ｍｉＲ−４３１９、ｍｉＲ−４４２１、ｍｉＲ−４４２９、ｍｉＲ−４４３５、ｍｉＲ−４４４１、ｍｉＲ−４４７３、ｍｉＲ−４５０６、ｍｉＲ−４６３３−５ｐ、ｍｉＲ−４６５８、ｍｉＲ−４７３３−５ｐ、ｍｉＲ−４７３３−３ｐ、ｍｉＲ−５００４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９４、ｍｉＲ−５１９７−５ｐ、ｍｉＲ−５５７１−５ｐ、ｍｉＲ−６０８３、ｍｉＲ−６７１７−５ｐ、ｍｉＲ−６７２０−５ｐ、ｍｉＲ−６７６７−３ｐ、ｍｉＲ−６７８１−３ｐ、ｍｉＲ−６８１１−３ｐ、ｍｉＲ−６８２１−３ｐ、ｍｉＲ−６８２８−５ｐ、ｍｉＲ−６８３２−５ｐ、ｍｉＲ−６８３７−３ｐ、ｍｉＲ−６８４１−５ｐ、ｍｉＲ−６８５３−５ｐ、ｍｉＲ−６８７１−３ｐ、ｍｉＲ−６８７５−５ｐ、ｍｉＲ−６８７８−５ｐ、ｍｉＲ−７１１２−３ｐ、ｍｉＲ−７７０３、ｍｉＲ−７８４８−３ｐ、及びｍｉＲ−７８５６−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡの発現量とがんとの関連性データ；
（ｉｉｉ）ｍｉＲ−４５２１、ｌｅｔ−７ｃ−３ｐ、ｌｅｔ−７ｉ−５ｐ、ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２６ａ−１−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−２００ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−２１９ａ−２−３ｐ、ｍｉＲ−２９７、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−３３０−３ｐ、ｍｉＲ−３７４ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４３１−５ｐ、ｍｉＲ−４５４−５ｐ、ｍｉＲ−５１３ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５４８ａｘ、ｍｉＲ−５９３−５ｐ、ｍｉＲ−６２３、ｍｉＲ−６６４ａ−５ｐ、ｍｉＲ−９４２−３ｐ、ｍｉＲ−１２０５、ｍｉＲ−１２７６、ｍｉＲ−１２８８−３ｐ、ｍｉＲ−１２９７、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４２９５、ｍｉＲ−４４３９、ｍｉＲ−４５２４ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４７０３−３ｐ、ｍｉＲ−４７６８−５ｐ、ｍｉＲ−４８００−３ｐ、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−５６９６、ｍｉＲ−７１６１−５ｐ、ｌｅｔ−７ｉ−２−３ｐ、及びｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡの発現量とがんとの関連性データ；
（ｉｖ）ｍｉＲ−１６−１−３ｐ、ｍｉＲ−２３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−９２ａ−２−５ｐ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１９５−３ｐ、ｍｉＲ−１９６ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−２９９−３ｐ、ｍｉＲ−４９２、ｍｉＲ−５１３ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６０１、ｍｉＲ−６１９−５ｐ、ｍｉＲ−１２８５−３ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３１６２−５ｐ、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４２９５、ｍｉＲ−４３１１、ｍｉＲ−４５３１、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｌｅｔ−７ｆ−２−３ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、及びｍｉＲ−４７８３−５ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡの発現量とがんとの関連性データ；または
（ｖ）ｍｉＲ−４５３１、ｍｉＲ−２８−５ｐ、ｍｉＲ−１０３ａ−２−５ｐ、ｍｉＲ−１０５−５ｐ、ｍｉＲ−１２４−３ｐ、ｍｉＲ−１５１ａ−５ｐ、ｍｉＲ−１５１ｂ、ｍｉＲ−２００ａ−５ｐ、ｍｉＲ−３００、ｍｉＲ−４２４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５５１ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６１７、ｍｉＲ−８７３−３ｐ、ｍｉＲ−９２１、ｍｉＲ−１２８８−３ｐ、ｍｉＲ−３１２４−５ｐ、ｍｉＲ−３１５５ａ、ｍｉＲ−３９１７、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−４７２７−３ｐ、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−５１８７−５ｐ、ｍｉＲ−６０７４、ｍｉＲ−６８７４−５ｐ、ｍｉＲ−６８９２−５ｐ、ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−１３５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−４７８３−５ｐ、及びｍｉＲ−７８４９−３ｐからなる群から選択される少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡの発現量とがんとの関連性データを用いて行うことができる。学習されたコンピュータまたは人工知能は、上記（ｉ）から（ｖ）からなる群から選択される１以上のデータを記録したメモリ（ＲＯＭ、ＲＡＭ、ハードディスク、ＳＳＤ等の磁気的記録媒体および当該磁気的記録媒体を含むコンピュータを含む）を備え得る、または当該メモリと電子通信回路を介して接続され得る。学習されたコンピュータまたは人工知能は、上記（ｉ）から（ｖ）からなる群から選択される１以上のデータによりさらに学習され得る｛この場合、学習に用いたデータは前記メモリにさらに追記されてもよい｝。学習されたコンピュータまたは人工知能は、上記少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡの発現量とがんとの関連性データと、対象の体液試料中の上記少なくとも１種または全てのマイクロＲＮＡの発現量とに基づいて、対象ががんである可能性を決定することができる。上記関連性データによるコンピュータまたは人工知能の学習は、複数の上記関連性データを教師データとして用いて、非評価データを評価し、例えば、がんの検出の感度および／または特異度が所定の値を超えるまで、異なる上記関連性データを繰り返し学習させることによって行うことができる。所定の値は、感度および／または特異度への要求によって変わり得るが、例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、または９０％以上とすることができる。一般的に、感度を高めると擬陽性が増え、感度を低くすると偽陰性が増える。従って、感度は、その検査の目的に応じて設定することが好ましい。また、一般に特異度を高めると偽陰性が増え、感度を低くすると擬陽性が増える。従って、特異度は、その検査の目的に応じて設定することが望ましい。
【００３７】  本開示では、がんの可能性を検査した後に、がんを有する可能性があること、および／またはがんを有しない可能性があることを示すデータを、電子媒体または紙等の媒体に出力することができる。出力されたデータは、医師および／または患者（またはその家族や親族等）に提示されていてもよく、その後の治療計画を検討することや、その後の更なる精密検査を検討することに（例えば、検査の選択に）用いることができる。がんの可能性を検査した後には、化学療法、放射線療法、および外科手術などの抗がん治療（例えば、有する可能性があると決定された特定のがんに対する抗がん治療）によって患者を処置することができる。
【００３８】  本開示では、対象の尿または尿抽出物中のマイクロＲＮＡを検出する方法であって、
データＳ１（または表３）において、例えば、がんである対象３人において非がんである対象３人のいずれよりも高い発現を示したマイクロＲＮＡ群から選択される１つ以上を検出する方法が提供される。この態様において検出されるマイクロＲＮＡは、例えば、がんである対象において非がんである対象よりも高い発現を示したマイクロＲＮＡ（例えば、２倍以上、３倍以上、４以上、５以上、６以上、７以上、８以上、９以上、または１０以上）の群からされる１つ以上であり得る。そのようなマイクロＲＮＡとしては、例えば、ｍｉＲ−３１１７−５ｐ、ｍｉＲ−３１１８、ｍｉＲ−３１２１−３ｐ、ｍｉＲ−３１２１−５ｐ、ｍｉＲ−３１２６−５ｐ、ｍｉＲ−３１２８、ｍｉＲ−３１３３、ｍｉＲ−３１３４、ｍｉＲ−３１３６−３ｐ、ｍｉＲ−３１３６−５ｐ、ｍｉＲ−３１３９、ｍｉＲ−３１４２、ｍｉＲ−３１４３、ｍｉＲ−３１４５−３ｐ、ｍｉＲ−３１６３、ｍｉＲ−３１６６、ｍｉＲ−３１６７、ｍｉＲ−０５５８、ｍｉＲ−３１２６−３ｐ、ｍｉＲ−３１２９−５ｐ、ｍｉＲ−３１４４−５ｐ、ｍｉＲ−３１５０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５２−５ｐ、ｍｉＲ−３１５７−３ｐ、ｍｉＲ−３１５９、ｍｉＲ−４５２１、ｍｉＲ−００２９ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−００３０ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−０１０６ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−０３２０ｃ、ｍｉＲ−０４９４−３ｐ、ｍｉＲ−０５６６、ｍｉＲ−０５７２、ｍｉＲ−０６４５、ｍｉＲ−０９３９−３ｐ、ｍｉＲ−０９４３、ｍｉＲ−１９７２、ｍｉＲ−３１２９−３ｐ、ｍｉＲ−３１３２、ｍｉＲ−３１４０−３ｐ、ｍｉＲ−３１４４−３ｐ、ｍｉＲ−３１９９、ｍｉＲ−３６１３−３ｐ、ｍｉＲ−４３０４、ｍｉＲ−４４５４、ｍｉＲ−４４９１、ｍｉＲ−４５０６、ｍｉＲ−４５１９、ｍｉＲ−５００６−５ｐ、ｍｉＲ−６０６８、ｍｉＲ−６０８４、ｍｉＲ−６７２６−５ｐ、ｍｉＲ−６８６２−５ｐ、ｍｉＲ−６８７１−５ｐ、ｍｉＲ−６８７７−５ｐ、ｍｉＲ−４６６１−５ｐ、ｍｉＲ−５５８７−５ｐ、ｍｉＲ−０１５０−３ｐ、ｍｉＲ−０７１８、ｍｉＲ−０７７０−５ｐ、ｍｉＲ−４５１５、ｍｉＲ−４５２０−３ｐ、ｍｉＲ−４６５５−３ｐ、ｍｉＲ−４６８４−５ｐ、ｍｉＲ−６７２３−５ｐ、ｍｉＲ−６７６２−５ｐ、ｍｉＲ−８０５９、ｍｉＲ−８０６３、ｌｅｔ−７ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−００２６ａ−１−３ｐ、ｍｉＲ−０１０５−５ｐ、ｍｉＲ−０１９５−３ｐ、ｍｉＲ−０２１９ａ−２−３ｐ、ｍｉＲ−０４３１−５ｐ、ｍｉＲ−０４５４−５ｐ、ｍｉＲ−０５４８ａｘ、ｍｉＲ−０５９３−５ｐ、ｍｉＲ−０６２３、ｍｉＲ−０６６４ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０９４２−３ｐ、ｍｉＲ−１２０５、ｍｉＲ−１２９７、ｍｉＲ−３６７８−３ｐ、ｍｉＲ−４２８３、ｍｉＲ−７１６１−５ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−３ｐ、ｌｅｔ−７ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−００１８ａ−３ｐ、ｍｉＲ−００１８ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−００２１−３ｐ、ｍｉＲ−００２４−２−５ｐ、ｍｉＲ−００２５−３ｐ、ｍｉＲ−００２５−５ｐ、ｍｉＲ−００２６ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−００３０ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−００３０ｄ−５ｐ、ｍｉＲ−００３０ｅ−３ｐ、ｍｉＲ−００３３ａ−３ｐ、ｍｉＲ−００３３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−００３４ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−００９２ａ−３ｐ、ｍｉＲ−００９２ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−００９３−５ｐ、ｍｉＲ−００９８−３ｐ、ｍｉＲ−００９９ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−０１２５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−０１２８−２−５ｐ、ｍｉＲ−０１２９−２−３ｐ、ｍｉＲ−０１３０ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−０１３２−３ｐ、ｍｉＲ−０１３３ａ−３ｐ、ｍｉＲ−０１３３ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０１３３ｂ、ｍｉＲ−０１５０−５ｐ、ｍｉＲ−０１８１ａ−２−３ｐ、ｍｉＲ−０１８８−５ｐ、ｍｉＲ−０１９１−３ｐ、ｍｉＲ−０１９２−５ｐ、ｍｉＲ−０１９３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−０１９４−３ｐ、ｍｉＲ−０１９７−３ｐ、ｍｉＲ−０１９９ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０１９９ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−０２００ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０２０２−３ｐ、ｍｉＲ−０２０３ａ−３ｐ、ｍｉＲ−０２０４−５ｐ、ｍｉＲ−０２０５−５ｐ、ｍｉＲ−０２１０−５ｐ、ｍｉＲ−０２１２−３ｐ、ｍｉＲ−０２１６ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−０２２３−３ｐ、ｍｉＲ−０２２３−５ｐ、ｍｉＲ−０２２４−３ｐ、ｍｉＲ−０２９６−５ｐ、ｍｉＲ−０２９９−５ｐ、ｍｉＲ−０３２０ａ、ｍｉＲ−０３２０ｂ、ｍｉＲ−０３２０ｅ、ｍｉＲ−０３２６、ｍｉＲ−０３２８−３ｐ、ｍｉＲ−０３３７−３ｐ、ｍｉＲ−０３３８−３ｐ、ｍｉＲ−０３３９−５ｐ、ｍｉＲ−０３４０−３ｐ、ｍｉＲ−０３４２−５ｐ、ｍｉＲ−０３４６、ｍｉＲ−０３６１−３ｐ、ｍｉＲ−０３６２−３ｐ、ｍｉＲ−０３６５ａ−３ｐ，ｍｉＲ−３６５ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−０３７１ａ−３ｐ、ｍｉＲ−０３７１ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−０３７７−５ｐ、ｍｉＲ−０３７８ｄ、ｍｉＲ−０３８３−３ｐ、ｍｉＲ−０４０９−３ｐ、ｍｉＲ−０４１１−３ｐ、ｍｉＲ−０４２２ａ、ｍｉＲ−０４２３−５ｐ、ｍｉＲ−０４３１−３ｐ、ｍｉＲ−０４４９ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−０４８３−３ｐ、ｍｉＲ−０４８４、ｍｉＲ−０４８５−３ｐ、ｍｉＲ−０４８５−５ｐ、ｍｉＲ−０４８６−５ｐ、ｍｉＲ−０４９１−３ｐ、ｍｉＲ−０５０１−５ｐ、ｍｉＲ−０５０３−３ｐ、ｍｉＲ−０５０４−５ｐ、ｍｉＲ−０５０６−３ｐ、ｍｉＲ−０５０８−５ｐ、ｍｉＲ−０５０９−５ｐ、ｍｉＲ−０５１０−５ｐ、ｍｉＲ−０５１２−５ｐ、ｍｉＲ−０５１４ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−０５１６ｂ−３ｐ，ｍｉＲ−５１６ａ−３ｐ、ｍｉＲ−０５１８ｂ、ｍｉＲ−０５１８ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−０５１９ｄ−３ｐ、ｍｉＲ−０５１９ｅ−３ｐ、ｍｉＲ−０５２０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−０５２０ｇ−３ｐ、ｍｉＲ−０５５０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−０５５０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０５５２−５ｐ、ｍｉＲ−０５５７、ｍｉＲ−０５７４−３ｐ、ｍｉＲ−０５７４−５ｐ、ｍｉＲ−０５７５、ｍｉＲ−０５８０−３ｐ、ｍｉＲ−０５８４−５ｐ、ｍｉＲ−０５８９−３ｐ、ｍｉＲ−０５８９−５ｐ、ｍｉＲ−０６０１、ｍｉＲ−０６０５−５ｐ、ｍｉＲ−０６１０、ｍｉＲ−０６１２、ｍｉＲ−０６１５−３ｐ、ｍｉＲ−０６２５−３ｐ、ｍｉＲ−０６２８−３ｐ、ｍｉＲ−０６３０、ｍｉＲ−０６３４、ｍｉＲ−０６３５、ｍｉＲ−０６３６、ｍｉＲ−０６４２ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０６５０、ｍｉＲ−０６５６−５ｐ、ｍｉＲ−０６５７、ｍｉＲ−０６５９−５ｐ、ｍｉＲ−０６６３ｂ、ｍｉＲ−０６６４ａ−３ｐ、ｍｉＲ−０６６４ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−０６７１−３ｐ、ｍｉＲ−０７６４、ｍｉＲ−０７６６−３ｐ、ｍｉＲ−０８７４−３ｐ、ｍｉＲ−０８７７−３ｐ、ｍｉＲ−０８７７−５ｐ、ｍｉＲ−０８８８−５ｐ、ｍｉＲ−０９３５、ｍｉＲ−０９３７−３ｐ、ｍｉＲ−０９３８、ｍｉＲ−０９４０、ｍｉＲ−１１８１、ｍｉＲ−１１８２、ｍｉＲ−１２００、ｍｉＲ−１２０４、ｍｉＲ−１２０７−３ｐ、ｍｉＲ−１２２４−３ｐ、ｍｉＲ−１２２５−３ｐ、ｍｉＲ−１２２８−３ｐ、ｍｉＲ−１２３４−３ｐ、ｍｉＲ−１２３８−３ｐ、ｍｉＲ−１２３８−５ｐ、ｍｉＲ−１２４７−５ｐ、ｍｉＲ−１２４９−３ｐ、ｍｉＲ−１２５０−３ｐ、ｍｉＲ−１２５０−５ｐ、ｍｉＲ−１２５５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−１２６０ａ、ｍｉＲ−１２６０ｂ、ｍｉＲ−１２６６−５ｐ、ｍｉＲ−１２７３ｈ−３ｐ、ｍｉＲ−１２８１、ｍｉＲ−１２８６、ｍｉＲ−１２９２−３ｐ、ｍｉＲ−１２９５ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−１２９６−３ｐ、ｍｉＲ−１２９６−５ｐ、ｍｉＲ−１３０４−３ｐ、ｍｉＲ−１３０６−５ｐ、ｍｉＲ−１３４３−３ｐ、ｍｉＲ−１４７０、ｍｉＲ−１５３８、ｍｉＲ−１５３９、ｍｉＲ−１８２５、ｍｉＲ−１９０９−５ｐ、ｍｉＲ−１９１０−５ｐ、ｍｉＲ−１９１１−３ｐ、ｍｉＲ−１９１１−５ｐ、ｍｉＲ−１９１３、ｍｉＲ−１９１４−５ｐ、ｍｉＲ−１９７６、ｍｉＲ−２１１０、ｍｉＲ−２３５５−５ｐ、ｍｉＲ−２９０９、ｍｉＲ−３０６４−５ｐ、ｍｉＲ−３０７４−３ｐ、ｍｉＲ−３１２７−３ｐ、ｍｉＲ−３１３０−５ｐ、ｍｉＲ−３１４１、ｍｉＲ−３１４７、ｍｉＲ−３１５０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３１５０ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５１−３ｐ、ｍｉＲ−３１６０−３ｐ、ｍｉＲ−３１８０−５ｐ、ｍｉＲ−３１８４−３ｐ、ｍｉＲ−３１８６−３ｐ、ｍｉＲ−３１８９−５ｐ、ｍｉＲ−３１９０−５ｐ、ｍｉＲ−３１９１−３ｐ、ｍｉＲ−３１９２−３ｐ、ｍｉＲ−３１９４−５ｐ、ｍｉＲ−３１９５、ｍｉＲ−３２００−３ｐ、ｍｉＲ−３２００−５ｐ、ｍｉＲ−３６１４−５ｐ、ｍｉＲ−３６１５、ｍｉＲ−３６１９−５ｐ、ｍｉＲ−３６２０−３ｐ、ｍｉＲ−３６２２ａ−３ｐ、ｍｉＲ−３６２２ａ−５ｐ、ｍｉＲ−３６２２ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−３６４６、ｍｉＲ−３６５９、ｍｉＲ−３６７０、ｍｉＲ−３６７５−３ｐ、ｍｉＲ−３６７９−３ｐ、ｍｉＲ−３６８９ｄ、ｍｉＲ−３６９０、ｍｉＲ−３９０９、ｍｉＲ−３９１８、ｍｉＲ−３９２１、ｍｉＲ−３９２２−３ｐ、ｍｉＲ−３９４０−３ｐ、ｍｉＲ−３９４３、ｍｉＲ−４２５３、ｍｉＲ−４２６０、ｍｉＲ−４２６７、ｍｉＲ−４２６８、ｍｉＲ−４２６９、ｍｉＲ−４２７４、ｍｉＲ−４２７８、ｍｉＲ−４２７９、ｍｉＲ−４２８０、ｍｉＲ−４２８４、ｍｉＲ−４２８６、ｍｉＲ−４２８９、ｍｉＲ−４２９０、ｍｉＲ−４２９２、ｍｉＲ−４３１０、ｍｉＲ−４３１２、ｍｉＲ−４３１３、ｍｉＲ−４３１７、ｍｉＲ−４３１８、ｍｉＲ−４３１９、ｍｉＲ−４３２３、ｍｉＲ−４３２９、ｍｉＲ−４４３３ａ−５ｐ、ｍｉＲ−４４３３ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４４３６ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−４４４７、ｍｉＲ−４４５５、ｍｉＲ−４４６３、ｍｉＲ−４４９４、ｍｉＲ−４６３２−３ｐ、ｍｉＲ−４６３８−３ｐ、ｍｉＲ−４６４０−３ｐ、ｍｉＲ−４６４２、ｍｉＲ−４６４６−５ｐ、ｍｉＲ−４６４９−３ｐ、ｍｉＲ−４６４９−５ｐ、ｍｉＲ−４６５２−３ｐ、ｍｉＲ−４６５２−５ｐ、ｍｉＲ−４６５３−５ｐ、ｍｉＲ−４６６４−３ｐ、ｍｉＲ−４６６５−３ｐ、ｍｉＲ−４６６７−３ｐ、ｍｉＲ−４６７５、ｍｉＲ−４６７６−３ｐ、ｍｉＲ−４６８５−３ｐ、ｍｉＲ−４６８７−５ｐ、ｍｉＲ−４６９０−５ｐ、ｍｉＲ−４６９１−５ｐ、ｍｉＲ−４６９７−３ｐ、ｍｉＲ−４６９７−５ｐ、ｍｉＲ−４７００−３ｐ、ｍｉＲ−４７０１−５ｐ、ｍｉＲ−４７０６、ｍｉＲ−４７０７−３ｐ、ｍｉＲ−４７０８−３ｐ、ｍｉＲ−４７１２−３ｐ、ｍｉＲ−４７１３−５ｐ、ｍｉＲ−４７１４−５ｐ、ｍｉＲ−４７１６−５ｐ、ｍｉＲ−４７１７−５ｐ、ｍｉＲ−４７１８、ｍｉＲ−４７１９、ｍｉＲ−４７２２−５ｐ、ｍｉＲ−４７２３−３ｐ、ｍｉＲ−４７２５−５ｐ、ｍｉＲ−４７２６−３ｐ、ｍｉＲ−４７２７−３ｐ、ｍｉＲ−４７２８−３ｐ、ｍｉＲ−４７３１−３ｐ、ｍｉＲ−４７３３−３ｐ、ｍｉＲ−４７４０−５ｐ、ｍｉＲ−４７４９−５ｐ、ｍｉＲ−４７５８−３ｐ、ｍｉＲ−４７６１−３ｐ、ｍｉＲ−４７６３−５ｐ、ｍｉＲ−４７６９−３ｐ、ｍｉＲ−４７８０、ｍｉＲ−４７８３−３ｐ、ｍｉＲ−４７８７−３ｐ、ｍｉＲ−４７９３−５ｐ、ｍｉＲ−４７９４、ｍｉＲ−４８０４−３ｐ、ｍｉＲ−５００８−３ｐ、ｍｉＲ−５００８−５ｐ、ｍｉＲ−５０９１、ｍｉＲ−５１９０、ｍｉＲ−５１９６−３ｐ、ｍｉＲ−５５８７−３ｐ、ｍｉＲ−５５８８−５ｐ、ｍｉＲ−５６９３、ｍｉＲ−５６９９−５ｐ、ｍｉＲ−５７０５、ｍｉＲ−６０８６、ｍｉＲ−６０８８、ｍｉＲ−６１２４、ｍｉＲ−６１６５、ｍｉＲ−６５０１−５ｐ、ｍｉＲ−６５０５−５ｐ、ｍｉＲ−６５０８−５ｐ、ｍｉＲ−６５１３−３ｐ、ｍｉＲ−６５１５−３ｐ、ｍｉＲ−６７２２−５ｐ、ｍｉＲ−６７２６−３ｐ、ｍｉＲ−６７２７−３ｐ、ｍｉＲ−６７２８−３ｐ、ｍｉＲ−６７２９−３ｐ、ｍｉＲ−６７３０−３ｐ、ｍｉＲ−６７３１−３ｐ、ｍｉＲ−６７３２−３ｐ、ｍｉＲ−６７３５−３ｐ、ｍｉＲ−６７３５−５ｐ、ｍｉＲ−６７３７−３ｐ、ｍｉＲ−６７３８−５ｐ、ｍｉＲ−６７４３−３ｐ、ｍｉＲ−６７４６−３ｐ、ｍｉＲ−６７４９−３ｐ、ｍｉＲ−６７５２−３ｐ、ｍｉＲ−６７５３−５ｐ、ｍｉＲ−６７５９−３ｐ、ｍｉＲ−６７６０−３ｐ、ｍｉＲ−６７６３−３ｐ、ｍｉＲ−６７６５−３ｐ、ｍｉＲ−６７６５−５ｐ、ｍｉＲ−６７６８−５ｐ、ｍｉＲ−６７６９ａ−３ｐ、ｍｉＲ−６７６９ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−６７７０−５ｐ、ｍｉＲ−６７７５−３ｐ、ｍｉＲ−６７７７−３ｐ、ｍｉＲ−６７８４−３ｐ、ｍｉＲ−６７８５−３ｐ、ｍｉＲ−６７８５−５ｐ、ｍｉＲ−６７８７−３ｐ、ｍｉＲ−６７８８−３ｐ、ｍｉＲ−６７８８−５ｐ、ｍｉＲ−６７９０−３ｐ、ｍｉＲ−６７９１−３ｐ、ｍｉＲ−６７９２−３ｐ、ｍｉＲ−６７９２−５ｐ、ｍｉＲ−６７９３−３ｐ、ｍｉＲ−６７９４−３ｐ、ｍｉＲ−６７９５−３ｐ、ｍｉＲ−６７９９−３ｐ、ｍｉＲ−６８００−３ｐ、ｍｉＲ−６８０１−３ｐ、ｍｉＲ−６８０２−３ｐ、ｍｉＲ−６８０３−３ｐ、ｍｉＲ−６８０６−５ｐ、ｍｉＲ−６８０７−３ｐ、ｍｉＲ−６８０８−５ｐ、ｍｉＲ−６８１０−３ｐ、ｍｉＲ−６８１１−３ｐ、ｍｉＲ−６８１２−３ｐ、ｍｉＲ−６８１３−３ｐ、ｍｉＲ−６８１６−３ｐ、ｍｉＲ−６８１９−３ｐ、ｍｉＲ−６８２０−３ｐ、ｍｉＲ−６８２３−３ｐ、ｍｉＲ−６８２４−３ｐ、ｍｉＲ−６８２５−３ｐ、ｍｉＲ−６８２６−３ｐ、ｍｉＲ−６８２８−３ｐ、ｍｉＲ−６８２８−５ｐ、ｍｉＲ−６８２９−３ｐ、ｍｉＲ−６８４０−５ｐ、ｍｉＲ−６８４５−３ｐ、ｍｉＲ−６８４６−３ｐ、ｍｉＲ−６８４８−３ｐ、ｍｉＲ−６８４９−３ｐ、ｍｉＲ−６８５１−３ｐ、ｍｉＲ−６８５２−３ｐ、ｍｉＲ−６８５７−３ｐ、ｍｉＲ−６８５８−３ｐ、ｍｉＲ−６８５９−３ｐ、ｍｉＲ−６８６０、ｍｉＲ−６８６１−３ｐ、ｍｉＲ−６８６５−３ｐ、ｍｉＲ−６８６５−５ｐ、ｍｉＲ−６８６７−３ｐ、ｍｉＲ−６８７０−３ｐ、ｍｉＲ−６８７１−３ｐ、ｍｉＲ−６８７３−３ｐ、ｍｉＲ−６８７４−３ｐ、ｍｉＲ−６８７７−３ｐ、ｍｉＲ−６８７９−３ｐ、ｍｉＲ−６８８０−３ｐ、ｍｉＲ−６８８４−３ｐ、ｍｉＲ−６８８５−３ｐ、ｍｉＲ−６８８７−３ｐ、ｍｉＲ−６８８９−３ｐ、ｍｉＲ−６８９０−３ｐ、ｍｉＲ−６８９１−３ｐ、ｍｉＲ−６８９５−３ｐ、ｍｉＲ−７１０６−３ｐ、ｍｉＲ−７１０９−３ｐ、ｍｉＲ−７１１１−３ｐ、ｍｉＲ−７１１３−３ｐ、ｍｉＲ−７１１４−３ｐ、ｍｉＲ−７８５３−５ｐ、ｍｉＲ−８０６０、ｍｉＲ−８０７８、ｍｉＲ−８４８５、ｍｉＲ−０５１３ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−０６１９−５ｐ、ｍｉＲ−１２８５−３ｐ、ｍｉＲ−３１６２−５ｐ、ｍｉＲ−４３１１、ｍｉＲ−４５３１、ｍｉＲ−５０９６、ｍｉＲ−００１６−２−３ｐ、ｍｉＲ−００３０ｃ−１−３ｐ、ｍｉＲ−０１２５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０１２５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−０１８３−３ｐ、ｍｉＲ−０１８４、ｍｉＲ−０１９３ａ−３ｐ、ｍｉＲ−０２１１−３ｐ、ｍｉＲ−０３２４−３ｐ、ｍｉＲ−０４３２−５ｐ、ｍｉＲ−０４３３−３ｐ、ｍｉＲ−０４８３−５ｐ、ｍｉＲ−０４９３−３ｐ、ｍｉＲ−０５０５−５ｐ、ｍｉＲ−０６４２ａ−３ｐ、ｍｉＲ−０６４２ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−０６４２ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−０６５２−５ｐ、ｍｉＲ−０６５８、ｍｉＲ−０６６３ａ、ｍｉＲ−０７６０、ｍｉＲ−０７６５、ｍｉＲ−０８７３−３ｐ、ｍｉＲ−０８８５−３ｐ、ｍｉＲ−０９３７−５ｐ、ｍｉＲ−１２０２、ｍｉＲ−１２２４−５ｐ、ｍｉＲ−１２２９−５ｐ、ｍｉＲ−１２４９−５ｐ、ｍｉＲ−１２５１−３ｐ、ｍｉＲ−１２７３ｅ、ｍｉＲ−１２７３ｇ−３ｐ、ｍｉＲ−１９０８−５ｐ、ｍｉＲ−２３９２、ｍｉＲ−２４６７−３ｐ、ｍｉＲ−３１２４−５ｐ、ｍｉＲ−３１３８、ｍｉＲ−３１５６−３ｐ、ｍｉＲ−３１５８−５ｐ、ｍｉＲ−３１７５、ｍｉＲ−３１９０−３ｐ、ｍｉＲ−３１９８、ｍｉＲ−３６１２、ｍｉＲ−３６１９−３ｐ、ｍｉＲ−３６４９、ｍｉＲ−３６５３−３ｐ、ｍｉＲ−３６５５、ｍｉＲ−３６５７、ｍｉＲ−３６６７−５ｐ、ｍｉＲ−３６７９−５ｐ、ｍｉＲ−３６８２−３ｐ、ｍｉＲ−３９１７、ｍｉＲ−３９４５、ｍｉＲ−４２５５、ｍｉＲ−４２９４、ｍｉＲ−４３０７、ｍｉＲ−４３２１、ｍｉＲ−４４１９ａ、ｍｉＲ−４４４８、ｍｉＲ−４４９６、ｍｉＲ−４５２４ａ−５ｐ、ｍｉＲ−４５３０、ｍｉＲ−４６３８−５ｐ、ｍｉＲ−４７２５−３ｐ、ｍｉＲ−４７２６−５ｐ、ｍｉＲ−４７４８、ｍｉＲ−４７５４、ｍｉＲ−４７６９−５ｐ、ｍｉＲ−４７８６−５ｐ、ｍｉＲ−４８００−５ｐ、ｍｉＲ−５００６−３ｐ、ｍｉＲ−５０８８−３ｐ、ｍｉＲ−５０８９−３ｐ、ｍｉＲ−５０９３、ｍｉＲ−５１９６−５ｐ、ｍｉＲ−５５８５−３ｐ、ｍｉＲ−５６９８、ｍｉＲ−６０７７、ｍｉＲ−６７１６−５ｐ、ｍｉＲ−６７１８−５ｐ、ｍｉＲ−６７４０−５ｐ、ｍｉＲ−６７５１−３ｐ、ｍｉＲ−６７５６−３ｐ、ｍｉＲ−６７６６−５ｐ、ｍｉＲ−６７６９ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６７７８−５ｐ、ｍｉＲ−６７８０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−６７８０ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６７９４−５ｐ、ｍｉＲ−６７９９−５ｐ、ｍｉＲ−６８１２−５ｐ、ｍｉＲ−６８２４−５ｐ、ｍｉＲ−６８２５−５ｐ、ｍｉＲ−６８３０−３ｐ、ｍｉＲ−６８３１−３ｐ、ｍｉＲ−６８３１−５ｐ、ｍｉＲ−６８３３−５ｐ、ｍｉＲ−６８３９−５ｐ、ｍｉＲ−６８５５−３ｐ、ｍｉＲ−６８６１−５ｐ、ｍｉＲ−６８７０−５ｐ、ｍｉＲ−６８７９−５ｐ、ｍｉＲ−６８９２−５ｐ、ｍｉＲ−６８９４−５ｐ、ｍｉＲ−７１０９−５ｐ、ｍｉＲ−７１５０、ｍｉＲ−７１５４−３ｐ、ｍｉＲ−８０８５、ｍｉＲ−８０８７、ｍｉＲ−０１０３ａ−２−５ｐ、ｍｉＲ−０１５１ｂ、ｍｉＲ−０５１９ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−５２３−５ｐ、ｍｉＲ−５１８ｅ−５ｐ、ｍｉＲ−５２２−５ｐ、  ｍｉＲ−５１９ａ−５ｐ、  ｍｉＲ−５１９ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−０６１７、ｍｉＲ−０９２１、ｍｉＲ−６８７４−５ｐ、ｍｉＲ−００３０ｃ−２−３ｐ、ｍｉＲ−００３４ａ−５ｐ、ｍｉＲ−００９２ａ−２−５ｐ、ｍｉＲ−０１２９−１−３ｐ、ｍｉＲ−０１３４−３ｐ、ｍｉＲ−０１８１ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０１８５−５ｐ、ｍｉＲ−０２０４−３ｐ、ｍｉＲ−０３０２ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−０３２４−５ｐ、ｍｉＲ−０３３８−５ｐ、ｍｉＲ−０３７０−３ｐ、ｍｉＲ−０３８２−５ｐ、ｍｉＲ−０４２１、ｍｉＲ−０４５０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０４９１−５ｐ、ｍｉＲ−０５１８ｆ−３ｐ、ｍｉＲ−０５１８ｆ−５ｐ、ｍｉＲ−０５２０ｂ、ｍｉＲ−０５２０ｄ−５ｐ、ｍｉＲ−０５２０ｅ、ｍｉＲ−０５２７，ｍｉＲ−５１８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０５４１−３ｐ、ｍｉＲ−０５５０ｂ−２−５ｐ、ｍｉＲ−０６２２、ｍｉＲ−０６６８−５ｐ、ｍｉＲ−０７０８−５ｐ、ｍｉＲ−０７６６−５ｐ、ｍｉＲ−０７６７−３ｐ、ｍｉＲ−０９２０、ｍｉＲ−１１８４、ｍｉＲ−１１８５−１−３ｐ、ｍｉＲ−１１８５−２−３ｐ、ｍｉＲ−１２２７−３ｐ、ｍｉＲ−１２３７−３ｐ、ｍｉＲ−１２６５、ｍｉＲ−１２６７、ｍｉＲ−１２７３ｈ−５ｐ、ｍｉＲ−１３０１−３ｐ、ｍｉＲ−２１１６−５ｐ、ｍｉＲ−３１１６、ｍｉＲ−３１３７、ｍｉＲ−３１５１−５ｐ、ｍｉＲ−３１５６−５ｐ、ｍｉＲ−３１５７−５ｐ、ｍｉＲ−３１６４、ｍｉＲ−３１７７−３ｐ、ｍｉＲ−３１８９−３ｐ、ｍｉＲ−３２０２、ｍｉＲ−３６２２ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−３６５１、ｍｉＲ−３９２５−５ｐ、ｍｉＲ−３９２８−３ｐ、ｍｉＲ−３９７５、ｍｉＲ−４２５７、ｍｉＲ−４２６１、ｍｉＲ−４２９６、ｍｉＲ−４３００、ｍｉＲ−４３０６、ｍｉＲ−４３１６、ｍｉＲ−４４３１、ｍｉ��−４４４３、ｍｉＲ−４４４４、ｍｉＲ−４４５３、ｍｉＲ−４４５９、ｍｉＲ−４４６５、ｍｉＲ−４４８２−３ｐ、ｍｉＲ−４４８９、ｍｉＲ−４４９９、ｍｉＲ−４５１４、ｍｉＲ−４６５７、ｍｉＲ−４６６４−５ｐ、ｍｉＲ−４６６９、ｍｉＲ−４６９８、ｍｉＲ−４７４９−３ｐ、ｍｉＲ−４７５０−３ｐ、ｍｉＲ−４７５３−５ｐ、ｍｉＲ−４７５６−３ｐ、ｍｉＲ−５０００−５ｐ、ｍｉＲ−５００１−５ｐ、ｍｉＲ−５０１０−５ｐ、ｍｉＲ−５５７１−３ｐ、ｍｉＲ−６０７６、ｍｉＲ−６１２７、ｍｉＲ−６５００−３ｐ、ｍｉＲ−６５０３−５ｐ、ｍｉＲ−６５０７−３ｐ、ｍｉＲ−６５０７−５ｐ、ｍｉＲ−６５１１ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６５１５−５ｐ、ｍｉＲ−６５１６−５ｐ、ｍｉＲ−６７１７−５ｐ、ｍｉＲ−６７２８−５ｐ、ｍｉＲ−６７３４−５ｐ、ｍｉＲ−６７４１−５ｐ、ｍｉＲ−６７４２−３ｐ、ｍｉＲ−６７４２−５ｐ、ｍｉＲ−６７４５、ｍｉＲ−６７４６−５ｐ、ｍｉＲ−６７４７−５ｐ、ｍｉＲ−６７４８−５ｐ、ｍｉＲ−６７５６−５ｐ、ｍｉＲ−６７６０−５ｐ、ｍｉＲ−６７６６−３ｐ、ｍｉＲ−６７７１−３ｐ、ｍｉＲ−６７７６−５ｐ、ｍｉＲ−６７８２−３ｐ、ｍｉＲ−６７９５−５ｐ、ｍｉＲ−６７９６−３ｐ、ｍｉＲ−６８１５−５ｐ、ｍｉＲ−６８２３−５ｐ、ｍｉＲ−６８２７−５ｐ、ｍｉＲ−６８２９−５ｐ、ｍｉＲ−６８３０−５ｐ、ｍｉＲ−６８３４−５ｐ、ｍｉＲ−６８４１−３ｐ、ｍｉＲ−６８４２−５ｐ、ｍｉＲ−６８４９−５ｐ、ｍｉＲ−６８５３−５ｐ、ｍｉＲ−６８７２−５ｐ、ｍｉＲ−６８８７−５ｐ、ｍｉＲ−６８９１−５ｐ、ｍｉＲ−７１０６−５ｐ、ｍｉＲ−７１０７−５ｐ、ｍｉＲ−７１０８−３ｐ、ｍｉＲ−７１１１−５ｐ、ｍｉＲ−７８４６−３ｐ、ｍｉＲ−７８５５−５ｐ、ｍｉＲ−８０６２、ｍｉＲ−８０７１、及びｍｉＲ−８０８２が挙げられ、これらからなる群から選択される１以上のマイクロＲＮＡ（好ましくは、ヒトのマイクロＲＮＡ）を検出することができる。
本開示ではまた、対象の尿または尿抽出物中のマイクロＲＮＡを検出する方法であって、
データＳ１（または表３）において、例えば、がんである対象３人において非がんである対象３人のいずれよりも低い発現を示したマイクロＲＮＡ群から選択される１つ以上を検出する方法が提供される。この態様において検出されるマイクロＲＮＡは、例えば、がんである対象３人において非がんである対象３人のいずれよりも低い発現を示したマイクロＲＮＡ（例えば、２倍以上、３倍以上、４以上、５以上、６以上、７以上、８以上、９以上、または１０以上）のマイクロＲＮＡの群からされる１つ以上であり得る。そのようなマイクロＲＮＡとしては、例えば、ｍｉＲ−３１２７−３ｐ、ｍｉＲ−３１３０−５ｐ、ｍｉＲ−３１３１、ｍｉＲ−３１４１、ｍｉＲ−３１５０ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−３１５１−３ｐ、ｍｉＲ−３１５１−５ｐ、ｍｉＲ−３１５４、ｍｉＲ−３１６０−３ｐ、ｍｉＲ−３１６０−５ｐ、ｍｉＲ−３１６２−５ｐ、ｍｉＲ−００１５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−００３４ｃ−５ｐ、ｍｉＲ−００９３−５ｐ、ｍｉＲ−０１２８−２−５ｐ、ｍｉＲ−０１３５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０１４９−３ｐ、ｍｉＲ−０２１４−５ｐ、ｍｉＲ−０３２０ａ、ｍｉＲ−０３３９−５ｐ、ｍｉＲ−０３６５ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０３７２−３ｐ、ｍｉＲ−０３７８ｂ、ｍｉＲ−０４２４−５ｐ、ｍｉＲ−０４８８−５ｐ、ｍｉＲ−０４９８、ｍｉＲ−０５１２−３ｐ、ｍｉＲ−０５１２−５ｐ、ｍｉＲ−０５８０−３ｐ、ｍｉＲ−０６７０−５ｐ、ｍｉＲ−０６７１−５ｐ、ｍｉＲ−０７５８−５ｐ、ｍｉＲ−０９３３、ｍｉＲ−０９３７−３ｐ、ｍｉＲ−０９４２−５ｐ、ｍｉＲ−１１７８−３ｐ、ｍｉＲ−１２０７−３ｐ、ｍｉＲ−１２２４−３ｐ、ｍｉＲ−１２３３−３ｐ、ｍｉＲ−１２３３−５ｐ、ｍｉＲ−１２４９−５ｐ、ｍｉＲ−１２６６−３ｐ、ｍｉＲ−２２７７−３ｐ、ｍｉＲ−２２７７−５ｐ、ｍｉＲ−３０６５−５ｐ、ｍｉＲ−３１２２、ｍｉＲ−３１３５ｂ、ｍｉＲ−３１５３、ｍｉＲ−３１５６−３ｐ、ｍｉＲ−３１５８−５ｐ、ｍｉＲ−３１６２−３ｐ、ｍｉＲ−３１７４、ｍｉＲ−３１８０、ｍｉＲ−３５２９−５ｐ、ｍｉＲ−３６８０−３ｐ、ｍｉＲ−３６８９ｆ、ｍｉＲ−４２６６、ｍｉＲ−４２７３、ｍｉＲ−４２８１、ｍｉＲ−４３２７、ｍｉＲ−４５２６、ｍｉＲ−４６４３、ｍｉＲ−４６４６−３ｐ、ｍｉＲ−４６７５、ｍｉＲ−４６９８、ｍｉＲ−４７０６、ｍｉＲ−４７１８、ｍｉＲ−４７２８−３ｐ、ｍｉＲ−４７５２、ｍｉＲ−４７５３−３ｐ、ｍｉＲ−４８０１、ｍｉＲ−５１９２、ｍｉＲ−５１９５−５ｐ、ｍｉＲ−５７０４、ｍｉＲ−６０６９、ｍｉＲ−６０８８、ｍｉＲ−６１３２、ｍｉＲ−６５０２−５ｐ、ｍｉＲ−６５０５−３ｐ、ｍｉＲ−６５１０−５ｐ、ｍｉＲ−６５１１ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−６５１６−５ｐ、ｍｉＲ−６７４４−５ｐ、ｍｉＲ−６７４９−３ｐ、ｍｉＲ−６７５４−５ｐ、ｍｉＲ−６７５７−３ｐ、ｍｉＲ−６７５７−５ｐ、ｍｉＲ−６７６５−５ｐ、ｍｉＲ−６７７１−３ｐ、ｍｉＲ−６７７５−５ｐ、ｍｉＲ−６７８１−３ｐ、ｍｉＲ−６８００−５ｐ、ｍｉＲ−６８０７−５ｐ、ｍｉＲ−６８１１−３ｐ、ｍｉＲ−６８１３−５ｐ、ｍｉＲ−６８２２−５ｐ、ｍｉＲ−６８２９−５ｐ、ｍｉＲ−６８３２−３ｐ、ｍｉＲ−６８４１−３ｐ、ｍｉＲ−６８４５−３ｐ、ｍｉＲ−６８６４−３ｐ、ｍｉＲ−６８６５−５ｐ、ｍｉＲ−６８７３−５ｐ、ｍｉＲ−６８７７−３ｐ、ｍｉＲ−６８７８−５ｐ、ｍｉＲ−６８８１−５ｐ、ｍｉＲ−６８８５−５ｐ、ｍｉＲ−６８８６−５ｐ、ｍｉＲ−７１０６−５ｐ、ｍｉＲ−７１１１−３ｐ、ｍｉＲ−７１５３−３ｐ、ｍｉＲ−７８４８−３ｐ、ｍｉＲ−７９７８、ｍｉＲ−８０５９、ｍｉＲ−０５２０ｂ、ｍｉＲ−３６０５−５ｐ、ｍｉＲ−３６１２、ｍｉＲ−４６４５−３ｐ、ｍｉＲ−４６９４−３ｐ、ｍｉＲ−６８１６−３ｐ、ｍｉＲ−８０８７、ｍｉＲ−００１５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−０１３５ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−０１８５−５ｐ、ｍｉＲ−０３０２ｄ−５ｐ、ｍｉＲ−０４８３−５ｐ、ｍｉＲ−０６７１−３ｐ、ｍｉＲ−１２５４、ｍｉＲ−１２８４、ｍｉＲ−１３２３、ｍｉＲ−３１３８、ｍｉＲ−３１６４、ｍｉＲ−３１８９−３ｐ、ｍｉＲ−３２００−５ｐ、ｍｉＲ−３６５７、ｍｉＲ−３６６７−５ｐ、ｍｉＲ−３６９２−５ｐ、ｍｉＲ−３７１３、ｍｉＲ−４２９９、ｍｉＲ−４３０６、ｍｉＲ−４３１６、ｍｉＲ−４３１９、ｍｉＲ−４４４１、ｍｉＲ−４６５８、ｍｉＲ−５００４−３ｐ、ｍｉＲ−５１９４、ｍｉＲ−６０８３、ｍｉＲ−６７２０−５ｐ、ｍｉＲ−６８２１−３ｐ、ｍｉＲ−６８３２−５ｐ、ｍｉＲ−６８７５−５ｐ、ｍｉＲ−０００１−５ｐ、ｍｉＲ−０００７−２−３ｐ、ｍｉＲ−００２５−５ｐ、ｍｉＲ−００３０ｃ−１−３ｐ、ｍｉＲ−００３０ｃ−２−３ｐ、ｍｉＲ−０１２５ａ−３ｐ、ｍｉＲ−０１３４−５ｐ、ｍｉＲ−０１４６ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０１８３−３ｐ、ｍｉＲ−０１９３ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０１９３ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−０１９７−５ｐ、ｍｉＲ−０１９８、ｍｉＲ−０２１２−５ｐ、ｍｉＲ−０２２１−３ｐ、ｍｉＲ−０２９９−５ｐ、ｍｉＲ−０３２６、ｍｉＲ−０３２８−５ｐ、ｍｉＲ−０３７４ｃ−３ｐ、ｍｉＲ−０４２３−５ｐ、ｍｉＲ−０４３２−５ｐ、ｍｉＲ−０４３３−５ｐ、ｍｉＲ−０４８３−３ｐ、ｍｉＲ−０５０５−５ｐ、ｍｉＲ−０５１３ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０５２１、ｍｉＲ−０５３２−３ｐ、ｍｉＲ−０５５０ａ−３−５ｐ、ｍｉＲ−０５５０ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０５５０ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−０５５１ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−０５８９−３ｐ、ｍｉＲ−０５９１、ｍｉＲ−０６１５−３ｐ、ｍｉＲ−０６４２ａ−３ｐ、ｍｉＲ−０６４２ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−０６５０、ｍｉＲ−０６５２−５ｐ、ｍｉＲ−０６６４ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−０６６８−３ｐ、ｍｉＲ−０６７５−５ｐ、ｍｉＲ−０７１１、ｍｉＲ−０７４４−５ｐ、ｍｉＲ−０７６４、ｍｉＲ−０９３９−３ｐ、ｍｉＲ−１１８０−３ｐ、ｍｉＲ−１１８５−１−３ｐ、ｍｉＲ−１１８５−２−３ｐ、ｍｉＲ−１１９３、ｍｉＲ−１１９９−３ｐ、ｍｉＲ−１２０２、ｍｉＲ−１２０７−５ｐ、ｍｉＲ−１２２８−５ｐ、ｍｉＲ−１２２９−５ｐ、ｍｉＲ−１２３８−５ｐ、ｍｉＲ−１２７３ｈ−５ｐ、ｍｉＲ−１２７５、ｍｉＲ−１９１１−３ｐ、ｍｉＲ−２２７６−３ｐ、ｍｉＲ−２２７８、ｍｉＲ−２３５５−５ｐ、ｍｉＲ−２８６１、ｍｉＲ−３０７４−５ｐ、ｍｉＲ−３１３７、ｍｉＲ−３１４４−５ｐ、ｍｉＲ−３１４７、ｍｉＲ−３１８４−５ｐ、ｍｉＲ−３１８８、ｍｉＲ−３１９０−３ｐ、ｍｉＲ−３２０２、ｍｉＲ−３６１０、ｍｉＲ−３６２２ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−３６６６、ｍｉＲ−３６７９−５ｐ、ｍｉＲ−３６８９ｄ、ｍｉＲ−３９１１、ｍｉＲ−３９１８、ｍｉＲ−３９１９、ｍｉＲ−３９２７−５ｐ、ｍｉＲ−３９２８−３ｐ、ｍｉＲ−４２５１、ｍｉＲ−４２５９、ｍｉＲ−４２６５、ｍｉＲ−４２７１、ｍｉＲ−４２７９、ｍｉＲ−４２８８、ｍｉＲ−４２９０、ｍｉＲ−４２９４、ｍｉＲ−４２９８、ｍｉＲ−４３０１、ｍｉＲ−４３２２、ｍｉＲ−４３２９、ｍｉＲ−４４１９ａ、ｍｉＲ−４４１９ｂ、ｍｉＲ−４４４７、ｍｉＲ−４４６２、ｍｉＲ−４４７２、ｍｉＲ−４４７６、ｍｉＲ−４４８３、ｍｉＲ−４４８４、ｍｉＲ−４４９２、ｍｉＲ−４４９６、ｍｉＲ−４４９９、ｍｉＲ−４５１３、ｍｉＲ−４５２３、ｍｉＲ−４６３２−５ｐ、ｍｉＲ−４６４６−５ｐ、ｍｉＲ−４６５５−５ｐ、ｍｉＲ−４６５６、ｍｉＲ−４６６７−５ｐ、ｍｉＲ−４６８５−５ｐ、ｍｉＲ−４６８７−３ｐ、ｍｉＲ−４６９７−５ｐ、ｍｉＲ−４７０９−３ｐ、ｍｉＲ−４７２２−３ｐ、ｍｉＲ−４７２３−５ｐ、ｍｉＲ−４７２６−３ｐ、ｍｉＲ−４７２６−５ｐ、ｍｉＲ−４７２８−５ｐ、ｍｉＲ−４７３２−５ｐ、ｍｉＲ−４７３９、ｍｉＲ−４７４３−５ｐ、ｍｉＲ−４７４７−５ｐ、ｍｉＲ−４７４８、ｍｉＲ−４７５１、ｍｉＲ−４７５６−５ｐ、ｍｉＲ−４７８３−３ｐ、ｍｉＲ−４７８８、ｍｉＲ−４８００−５ｐ、ｍｉＲ−５０８８−３ｐ、ｍｉＲ−５６９８、ｍｉＲ−５７０２、ｍｉＲ−５７３９、ｍｉＲ−６０８５、ｍｉＲ−６０８６、ｍｉＲ−６０８７、ｍｉＲ−６１２４、ｍｉＲ−６１３３、ｍｉＲ−６５０１−５ｐ、ｍｉＲ−６５０４−５ｐ、ｍｉＲ−６５１３−３ｐ、ｍｉＲ−６７１６−５ｐ、ｍｉＲ−６７２７−３ｐ、ｍｉＲ−６７３０−５ｐ、ｍｉＲ−６７３３−３ｐ、ｍｉＲ−６７３４−５ｐ、ｍｉＲ−６７３５−３ｐ、ｍｉＲ−６７３５−５ｐ、ｍｉＲ−６７４１−５ｐ、ｍｉＲ−６７４４−３ｐ、ｍｉＲ−６７４５、ｍｉＲ−６７４６−５ｐ、ｍｉＲ−６７４９−５ｐ、ｍｉＲ−６７５０−５ｐ、ｍｉＲ−６７６０−５ｐ、ｍｉＲ−６７６９ａ−５ｐ、ｍｉＲ−６７６９ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−６７７４−５ｐ、ｍｉＲ−６７７６−３ｐ、ｍｉＲ−６７７９−５ｐ、ｍｉＲ−６７８７−５ｐ、ｍｉＲ−６７８８−３ｐ、ｍｉＲ−６７９０−５ｐ、ｍｉＲ−６７９２−５ｐ、ｍｉＲ−６７９４−５ｐ、ｍｉＲ−６７９７−５ｐ、ｍｉＲ−６７９９−５ｐ、ｍｉＲ−６８０３−５ｐ、ｍｉＲ−６８０６−５ｐ、ｍｉＲ−６８１２−５ｐ、ｍｉＲ−６８１４−５ｐ、ｍｉＲ−６８１５−５ｐ、ｍｉＲ−６８１９−５ｐ、ｍｉＲ−６８２２−３ｐ、ｍｉＲ−６８２３−５ｐ、ｍｉＲ−６８２４−５ｐ、ｍｉＲ−６８２７−５ｐ、ｍｉＲ−６８３０−５ｐ、ｍｉＲ−６８３１−３ｐ、ｍｉＲ−６８３１−５ｐ、ｍｉＲ−６８３３−５ｐ、ｍｉＲ−６８４２−５ｐ、ｍｉＲ−６８５１−５ｐ、ｍｉＲ−６８５８−５ｐ、ｍｉＲ−６８６２−５ｐ、ｍｉＲ−６８６６−３ｐ、ｍｉＲ−６８７０−５ｐ、ｍｉＲ−６８７２−５ｐ、ｍｉＲ−６８７９−５ｐ、ｍｉＲ−６８８３−５ｐ、ｍｉＲ−６８８４−３ｐ、ｍｉＲ−６８９１−５ｐ、ｍｉＲ−６８９４−５ｐ、ｍｉＲ−７１０７−５ｐ、ｍｉＲ−７１０９−５ｐ、ｍｉＲ−７１１０−３ｐ、ｍｉＲ−７１１１−５ｐ、ｍｉＲ−７１１２−５ｐ、ｍｉＲ−７１５０、ｍｉＲ−７１５２−３ｐ、ｍｉＲ−７１５４−３ｐ、ｍｉＲ−７１５５−３ｐ、ｍｉＲ−７７０６、ｍｉＲ−７８４３−５ｐ、ｍｉＲ−７８４５−５ｐ、ｍｉＲ−７８４６−３ｐ、ｍｉＲ−７８４７−３ｐ、ｍｉＲ−７９７３、ｍｉＲ−８０５２、ｍｉＲ−８０５８、ｍｉＲ−８０７４、ｍｉＲ−８０８９、ｍｉＲ−０３７８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−４４８９、ｍｉＲ−６５１１ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−０１８７−５ｐ、ｍｉＲ−０２０８ａ−５ｐ、ｍｉＲ−０４８６−３ｐ、ｍｉＲ−０５１１−５ｐ、ｍｉＲ−０５８５−５ｐ、ｍｉＲ−０６４３、ｍｉＲ−０６６３ｂ、ｍｉＲ−１２３１、ｍｉＲ−３１８７−５ｐ、ｍｉＲ−３６６５、ｍｉＲ−４４４６−３ｐ、ｍｉＲ−４４６６、ｍｉＲ−４５２５、ｍｉＲ−４６３４、ｍｉＲ−４６７４、ｍｉＲ−４７３４、ｍｉＲ−４７８５、ｍｉＲ−４７８７−５ｐ、ｍｉＲ−４７９４、ｍｉＲ−５００８−５ｐ、ｍｉＲ−６４９９−５ｐ、ｍｉＲ−６５１０−３ｐ、ｍｉＲ−６７２７−５ｐ、ｍｉＲ−６８１４−３ｐ、ｍｉＲ−６８３６−３ｐ、ｍｉＲ−７７０４、ｍｉＲ−８０６９、ｍｉＲ−７８４９−３ｐ、ｍｉＲ−００２５−３ｐ、ｍｉＲ−００９２ａ−３ｐ、ｍｉＲ−００９２ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−００９９ｂ−５ｐ、ｍｉＲ−０１２８−１−５ｐ、ｍｉＲ−０１３９−３ｐ、ｍｉＲ−０１４９−５ｐ、ｍｉＲ−０１９２−５ｐ、ｍｉＲ−０２０５−５ｐ、ｍｉＲ−０２１６ｂ−３ｐ、ｍｉＲ−０２２３−５ｐ、ｍｉＲ−０３４６、ｍｉＲ−０３７１ａ−３ｐ、ｍｉＲ−０３７８ｃ、ｍｉＲ−０４２５−３ｐ、ｍｉＲ−０５０３−３ｐ、ｍｉＲ−０５２０ａ−３ｐ、ｍｉＲ−０５２０ｈ、ｍｉＲ−０５４８ａｙ−３ｐ、ｍｉＲ−０５４８ｑ、ｍｉＲ−０５５７、ｍｉＲ−０６３１、ｍｉＲ−０６３６、ｍｉＲ−０６３８、ｍｉＲ−０６５９−３ｐ、ｍｉＲ−０７６２、ｍｉＲ−０９３５、ｍｉＲ−１２０３、ｍｉＲ−１２２５−５ｐ、ｍｉＲ−１２３７−５ｐ、ｍｉＲ−１２６８ａ、ｍｉＲ−１４６９、ｍｉＲ−１５３９、ｍｉＲ−１９０９−３ｐ、ｍｉＲ−１９１０−５ｐ、ｍｉＲ−１９１４−５ｐ、ｍｉＲ−２６８２−３ｐ、ｍｉＲ−３０６４−５ｐ、ｍｉＲ−３０６５−３ｐ、ｍｉＲ−３１３０−３ｐ、ｍｉＲ−３１７３−３ｐ、ｍｉＲ−３１７８、ｍｉＲ−３１８０−３ｐ、ｍｉＲ−３１９６、ｍｉＲ−３９３５、ｍｉＲ−３９３７、ｍｉＲ−３９４０−５ｐ、ｍｉＲ−３９６０、ｍｉＲ−４２７０、ｍｉＲ−４２７６、ｍｉＲ−４４４２、ｍｉＲ−４４８５−５ｐ、ｍｉＲ−４４８８、ｍｉＲ−４５０５、ｍｉＲ−４５０８、ｍｉＲ−４６３２−３ｐ、ｍｉＲ−４６４９−５ｐ、ｍｉＲ−４６７６−３ｐ、ｍｉＲ−４６８８、ｍｉＲ−４７０７−５ｐ、ｍｉＲ−４７０８−５ｐ、ｍｉＲ−４７２２−５ｐ、ｍｉＲ−４７３０、ｍｉＲ−４７３８−３ｐ、ｍｉＲ−４７４７−３ｐ、ｍｉＲ−４７６１−３ｐ、ｍｉＲ−４７６３−３ｐ、ｍｉＲ−４７７３、ｍｉＲ−５１９６−３ｐ、ｍｉＲ−５５８４−３ｐ、ｍｉＲ−５７８７、ｍｉＲ−６０８９、ｍｉＲ−６０９０、ｍｉＲ−６５０８−５ｐ、ｍｉＲ−６７２１−５ｐ、ｍｉＲ−６７２２−５ｐ、ｍｉＲ−６７２６−３ｐ、ｍｉＲ−６７２９−５ｐ、ｍｉＲ−６７３７−５ｐ、ｍｉＲ−６７３８−５ｐ、ｍｉＲ−６７４６−３ｐ、ｍｉＲ−６７６７−３ｐ、ｍｉＲ−６７７１−５ｐ、ｍｉＲ−６７８４−５ｐ、ｍｉＲ−６７８５−５ｐ、ｍｉＲ−６７８６−５ｐ、ｍｉＲ−６７８９−３ｐ、ｍｉＲ−６７８９−５ｐ、ｍｉＲ−６８０５−５ｐ、ｍｉＲ−６８１６−５ｐ、ｍｉＲ−６８２５−３ｐ、ｍｉＲ−６８３３−３ｐ、ｍｉＲ−６８３７−３ｐ、ｍｉＲ−６８４７−３ｐ、ｍｉＲ−６８４８−５ｐ、ｍｉＲ−６８５０−５ｐ、ｍｉＲ−６８６９−５ｐ、ｍｉＲ−６８７１−３ｐ、ｍｉＲ−６８９５−３ｐ、ｍｉＲ−７１５５−５ｐ、ｍｉＲ−７８４４−５ｐ、ｍｉＲ−８０７２、ｍｉＲ−８４８５、およびｍｉＲ−９５００が挙げられ、これらからなる群から選択される１以上のマイクロＲＮＡ（好ましくは、ヒトのマイクロＲＮＡ）を検出することができる。
これらの態様において、検出されるマイクロＲＮＡの種類および指標として用いられるマイクロＲＮＡの種類は、それぞれ独立して、例えば、１以上、２以上、３以上、４以上、５以上、６以上、７以上、８以上、９以上、１０以上、２０以上、３０以上、４０以上、５０以上、６０以上、７０以上、８０以上、９０以上、１００以上、２００以上、３００以上、４００以上、５００以上、６００以上、７００以上、８００以上、９００以上、１０００以上、または１１００以上とすることができる。これらの態様において、検出されるマイクロＲＮＡの種類および指標として用いられるマイクロＲＮＡの種類は、それぞれ独立して、例えば、２０００以下、１９００以下、１８００以下、１７００以下、１６００以下、１５００以下、１４００以下、１３００以下、１２００以下、１１００以下、１０００以下、９００以下、８００以下、７００以下、６００以下、５００以下、４００以下、３００以下、２００以下、１００以下、９０以下、８０以下、７０以下、６０以下、５０以下、４０以下、３０以下、２０以下、または１０以下とすることができる。検出されるマイクロＲＮＡの種類および指標として用いられるマイクロＲＮＡの種類は、完全に同一であり得るが、または検出されるマイクロＲＮＡの一部を指標として用い得る。
検出した後は、当該マイクロＲＮＡの発現量や存在の有無を指標として本開示の通りにがんの診断を行い得る。がんである可能性を有すると診断された患者に対しては、治療（例えば、化学療法、抗がん剤療法、外科手術、免疫療法、及び放射線療法などのがん療法）を行い得る。
【００３９】  マイクロＲＮＡは、体液中では、遊離形態および／またはＥＶ内包型形態で存在し得る。従って、本開示によれば、マイクロＲＮＡは、尿および尿の抽出物中では、遊離形態および／またはＥＶ（特にエクソソームおよび／またはマイクロベシクル）内包型形態で存在し得る。
【００４０】  マイクロＲＮＡの回収は、体液と本開示のナノワイヤ組み込みデバイスのナノワイヤとを接触させることによって行うことができる。マイクロＲＮＡの回収は、ナノワイヤが正の表面電荷を有する条件下で行われ得る。例えば、ナノワイヤが正の表面電荷を有するｐＨ条件下で体液とナノワイヤを接触させることによって、遊離形態およびＥＶ内包形態のマイクロＲＮＡはナノワイヤ上に捕捉することができる。従って、体液は、ナノワイヤが正の表面電荷を有するようにｐＨを調整されていてもよい。あるいは、体液のｐＨに適合するように、当該体液中で正の表面電荷を有する材質でナノワイヤが作られていてもよい。本開示のある態様では、体液のｐＨを調整することと、体液と本開示のナノワイヤ組み込みデバイスのナノワイヤとを接触させることを含む。体液のｐＨは、ナノワイヤと接触させる前、後、または接触中に、調整することができる。本開示のある実施形態では、体液のｐＨは、２、３、４、または５などの値より大きくてもそれ以上になるように調整されてもよい。体液のｐＨは、１０、９、８、７、６、または５などの値より小さくてもそれ以下になるように調整されてもよい。本開示のある実施形態では、尿のｐＨは、６〜８に調整されてもよい。本発明のある実施形態では、体液は尿であり、そのｐＨは６〜８であるか、またはｐＨ６〜８に調整された尿である。本発明のある実施形態では、ナノワイヤは、酸化亜鉛のナノワイヤであるか、または酸化亜鉛で被覆されたナノワイヤであり得る。
【００４１】  本開示のある態様では／いくつかの実施形態では、実質的にナノワイヤは基板上に直接成長していてもよく（すわなち、組み込まれていなくてもよく）、および、基板内にその一部が組み込まれていてもよい。基板の素材は特に制限はなくポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ塩化ビニル、ポリ塩化ビニリデン、ポリスチレン、ポリ酢酸ビニル、ポリテトラフルオロエチレン、ＡＢＳ（アクリロニトリルブタジエンスチレン）樹脂、ＡＳ（アクリロニトリルスチレン）樹脂、アクリル樹脂（ＰＭＭＡ）等の熱可塑性樹脂；フェノール樹脂、エポキシ樹脂、メラミン樹脂、尿素樹脂、不飽和ポリエステル樹脂、アルキド樹脂、ポリウレタン、ポリイミド、シリコーンゴム、ポリメチルメタクリレート（ＰＭＭＡ）、およびポリカーボネート（ＰＣ）から選択される素材であってもよい。
【００４２】  本開示のある態様では／いくつかの実施形態では、ナノワイヤのシード層（触媒層）として、金属および金属酸化物、例えばプラチナ、アルミニウム、銅、鉄、コバルト、銀、錫、インジウム、亜鉛、ガリウム、クロム、および、それらの酸化物を用いることができる。シード層からナノワイヤを成長させ、その後、上記基板の素材（液体形態である）をナノワイヤ上に注いで硬化させ、ナノワイヤを基板の素材中に組込むことができる。その後、基板から露出したナノワイヤからさらにナノワイヤを成長させることにより、基板に組込まれたナノワイヤを調製することができる。ナノワイヤが基板から露出していない場合には、適宜、切断及び／又は研磨することによりナノワイヤを露出させることができる。そのようにして得られるナノワイヤ組み込み基板は、本開示のデバイスにおいて、ナノワイヤを固定化した基板として用いることができ、物理化学的耐性が高く、有用であり得る。
【００４３】  ナノワイヤと体液試料とを接触させることによって、ナノワイヤ上にＥＶや遊離形態の小分子ＲＮＡが捕捉される。捕捉されたＥＶ中に含まれる小分子ＲＮＡや遊離形態の小分子ＲＮＡは、緩衝液によってナノワイヤから解離させることにより取得することができる。ナノワイヤから小分子ＲＮＡを取得する際には、例えば、非イオン性界面活性剤を含む緩衝液を用いることができる。緩衝液には、ＲＮａｓｅの阻害剤が含まれていてもよい。
【００４４】  本開示によれば、データＳ１（または表３）および表２のいずれか１以上のまたは全てのマイクロＲＮＡを含む尿の抽出物は、検査液に溶液置換されていてもよく、検査液の溶液組成を有していてもよい。
【００４５】  マイクロＲＮＡの検査液は、マイクロＲＮＡ等のｎｃＲＮＡの存在や存在量を確認するための検査に適した溶液組成を有し得る。検査液は、例えば、界面活性剤（例えば、非イオン性界面活性剤）、塩（例えば、ナトリウム、およびカリウムなど）、核酸の安定化剤（例えば、ＲＮＡ分解酵素の阻害剤等）、ｐＨ調整剤（例えば、緩衝剤）および水からなる群から選択される１以上または全てを含んでいてもよい。
【００４６】  マイクロＲＮＡの検出は、定量的ＰＣＲ法、ｍｉＲＮＡ検出用のマイクロアレイ、ＲＮＡ−Ｓｅｑ法、およびマルチプレックスｍｉＲＮＡプロファイリング法などの当業者に周知のｍｉＲＮＡの検出方法を用いて行うことができる。本開示では、本開示のデバイスでマイクロＲＮＡを抽出することにより得られる尿抽出物は、例えば、５００種類以上のｍｉＲＮＡを含み得る。そのため、これら全てのｍｉＲＮＡの発現を確認するには、例えば、ｍｉＲＮＡ検出用のマイクロアレイ、ＲＮＡ−Ｓｅｑ法、およびマルチプレックスｍｉＲＮＡプロファイリング法などを用いることができる。また、尿抽出物中の特定のｍｉＲＮＡの１つまたはいくつかを検出するには、定量的ＰＣＲ法やマルチプレックスｍｉＲＮＡプロファイリング法などを用いることができる。
マイクロアレイによるｍｉＲＮＡの検出と分析は、ｍｉＲＮＡを標識すること（例えば、標識として蛍光標識を用い得る）と、バイダイゼーション用の溶液を調製することと、試料中のｍｉＲＮＡとマイクロアレイ上の核酸等のｍｉＲＮＡ検出試薬とをハイブリダイゼーションすることと、マイクロアレイを洗浄することと、その後、標識量（例えば、蛍光量）を測定することとを含みうる。抽出したＲＮＡサンプルは、例えば、当業者に周知の方法または市販の装置及びキット｛例えば、アジレント・テクノロジー株式会社製のＡｇｉｌｅｎｔ  ２１００  ＢｉｏａｎａｌｙｚｅｒとＲＮＡ  ＬａｂＣｈｉｐ｝を使用して２０〜３０ヌクレオチドのサイズにピークが現れることを指標として、ＲＮＡサンプルの品質を確認してもよい。ｍｉＲＮＡの標識は、例えば、当業者に周知の方法や市販のキット｛例えば、３Ｄ−Ｇｅｎｅ（商標）ｍｉＲＮＡ  ｌａｂｅｌｉｎｇ  ｋｉｔ（東レ株式会社製）｝を用いて行うことができる。また例えば、マイクロアレイによるｍｉＲＮＡの分析は、東レ株式会社製の３Ｄ−Ｇｅｎｅ（商標）Ｈｕｍａｎ／Ｍｏｕｓｅ／Ｒａｔ／４ａｎｉｍａｌ  ｍｉＲＮＡ  Ｏｌｉｃｏ  ｃｈｉｐ‐４ｐｌｅｘを用いて、当該製品の製造者取扱説明書に従って行うことができる。
マイクロＲＮＡを検出するためのマイクロアレイとしては、
データＳ１（または表３）において、例えば、がんである対象３人において非がんである対象３人のいずれよりも高い発現を示したマイクロＲＮＡ群から選択される１つ以上に対するプローブを含むマイクロアレイ；
データＳ１（または表３）において、例えば、がんである対象において非がんである対象よりも高い発現を示したマイクロＲＮＡ（例えば、２倍以上、３倍以上、４以上、５以上、６以上、７以上、８以上、９以上、または１０以上）の群からされる１つ以上に対するプローブを含むマイクロアレイ；
データＳ１（または表３）において、例えば、がんである対象３人において非がんである対象３人のいずれよりも低い発現を示したマイクロＲＮＡ群から選択される１つ以上に対するプローブを含むマイクロアレイ；
データＳ１（または表３）において、例えば、がんである対象３人において非がんである対象３人のいずれよりも低い発現を示したマイクロＲＮＡ（例えば、２倍以上、３倍以上、４以上、５以上、６以上、７以上、８以上、９以上、または１０以上）のマイクロＲＮＡの群からされる１つ以上に対するプローブを含むマイクロアレイが上げられる。この態様において、検出されるマイクロＲＮＡの種類（すなわち、マイクロアレイが搭載するプローブの種類）は、例えば、１以上、２以上、３以上、４以上、５以上、６以上、７以上、８以上、９以上、１０以上、２０以上、３０以上、４０以上、５０以上、６０以上、７０以上、８０以上、９０以上、１００以上、２００以上、３００以上、４００以上、５００以上、６００以上、７００以上、８００以上、９００以上、１０００以上、または１１００以上とすることができる。これらの態様において、検出されるマイクロＲＮＡの種類（すなわち、マイクロアレイが搭載するプローブの種類）は、例えば、２０００以下、１９００以下、１８００以下、１７００以下、１６００以下、１５００以下、１４００以下、１３００以下、１２００以下、１１００以下、１０００以下、９００以下、８００以下、７００以下、６００以下、５００以下、４００以下、３００以下、２００以下、１００以下、９０以下、８０以下、７０以下、６０以下、５０以下、４０以下、３０以下、２０以下、または１０以下とすることができる。マイクロアレイにおけるマイクロＲＮＡに対するプローブは、当該マイクロＲＮＡに対してハイブリダイズすることができる核酸およびその誘導体とすることができ、当業者であれば適宜設計することができる。
【実施例】
【００４７】実施例１：ポリジメチルシロキサン（ＰＤＭＳ）上に固定されたナノワイヤの作製
Ｓｉ（１００）基板（Ａｄｖａｎｔｅｃｈ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．）を洗浄した後に（図６ａ参照）、正フォトレジスト（ＯＦＰＲ８６００，Ｔｏｋｙｏ  Ｏｈｋａ  Ｋｏｇｙｏ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．）でＳｉ基板上を被覆し、次いで、フォトリソグラフィによってチャンネルパターンを形成した（図６ｂ参照）。スパッタリングによってその基板上に１４０ｎｍ厚のＣｒ層（触媒層）を堆積させた（図６ｂ参照）。フォトレジストの除去後に（図６ｄ参照）、Ｃｒ層を４００℃で２時間、熱酸化処理した。このＣｒ層は、ＺｎＯナノワイヤの成長のためのシード層とした。ＺｎＯナノワイヤは、得られた基板を１５ｍＭヘキサメチレンテトラミン（ＨＭＴＡ；Ｗａｋｏ  Ｐｕｒｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ  Ｌｔｄ．）と１５ｍＭ硝酸亜鉛６水和物（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｃ．）の混合溶液中に９５℃で３時間浸漬することによって成長させた（図６ｅ参照）。基板上で成長したナノワイヤは、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ水を用いて洗浄し、真空デシケーター中で一晩空気乾燥させた。その後、ＰＤＭＳ（Ｓｉｌｐｏｔ  １８４，Ｄｏｗ  Ｃｏｒｎｉｎｇ  Ｃｏｒｐ．）をナノワイヤが成長した基板上に注ぎ、硬化させた（図６ｆ参照）。基板からＰＤＭＳを剥がすと、ナノワイヤは、基板からＰＤＭＳに転写された。転写されたなのワイヤは、頭部を僅かに露出させつつ、ＰＤＭＳに均一に深く埋め込まれており（図６ｈ参照）（この埋め込まれた状態を本明細書では「組み込み」と述べることがある）、その頭部は、二次的ナノワイヤのための成長点を提供した。二次的ナノワイヤの成長は、１５ｍＭ  ＨＭＴＡと１５ｍＭ硝酸亜鉛６水和物の混合溶液中で、得られたＰＤＭＳを９５℃で３時間浸漬することにより行った（図６ｉ参照）。ナノワイヤを埋め込んだＰＤＭＳ基板をＭｉｌｌｉｐｏｒｅ水で洗浄した後に、真空デシケーター中で空気乾燥させ、ナノワイヤの直径とナノワイヤ間の間隔を電界放出型走査型電子顕微鏡（ＦＥＳＥＭ）（ＳＵＰＲＡ  ４０ＶＰ，Ｃａｒｌ  Ｚｅｉｓｓ）を用いて測定した。【００４８】尿の細胞外小胞（ＥＶ）内包タイプのｍｉＲＮＡのｉｎ  ｓｉｔｕ抽出が可能なナノワイヤ組み込みマイクロ流体デバイス
尿のＥＶ内包タイプのｍｉＲＮＡのｉｎ  ｓｉｔｕ抽出のためのナノワイヤ組み込みマイクロ流体デバイスは、ナノワイヤ組み込みＰＤＭＳ基板とヘリングボーン構造のＰＤＭＳ基板とを接着させることによって作製した。ヘリンボン構造のＰＤＭＳ基板は、１２μｍの高さのヘリングボーン構造を伴うマイクロチャンネル（幅、２ｍｍ；長さ、２ｃｍ；及び高さ、５０μｍ）を有した。ナノワイヤ組み込みＰＤＭＳ基板とヘリングボーン構造のＰＤＭＳ基板の表面をプラズマエッチング装置（Ｍｅｉｗａｆｏｓｉｓ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．）で処理し、接着させた。この接着デバイスは、１８０℃で３分間加熱し、強い接着を達成させた（図６Ｊ参照）。次に、ヘリングボーン構造のＰＤＭＳを注入口および出口に関してポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）チューブ［０．５ｍｍ（外径）×０．２６ｍｍ（内径）；長さ、１０ｃｍ；Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．］に連結させた。このようにして表題のｉｎ  ｓｉｔｕ抽出が可能なナノワイヤ組み込みマイクロ流体デバイス（以下、単に「ナノワイヤ組み込みデバイス」または「本開示のデバイス」ともいう）を得た。マイクロ流体ヘリングボーン構造は、回収効率の向上に寄与した（図１５参照）。【００４９】断面ＦＥＳＥＭ像のＥＤＳ元素マッピング
ナノワイヤを有しないＰＤＭＳ、ナノワイヤが埋没したＰＤＭＳ（すなわち、ナノワイヤが露出していないＰＤＭＳ）、及びＺｎＯナノワイヤ組み込みＰＤＭＳの元素マッピングは、ＥＤＳ機能を備えたＦＥＳＥＭ（ＪＳＭ−７６１０Ｆ，Ｊｅｏｌ）によって得た。上面視像及び断面像に対しては、それぞれ５ｋｅＶ及び３０ｋｅＶの加速電圧条件を用いた。像は、５１２×３８４ピクセルであり、各ピクセルの遅延時間は０．１秒であった。像は、１００サイクルに対して統合された。Ｓｉ  Ｋα（１．７３９ｋｅＶ）及びＺｎ  Ｌα（１．０１２ｋｅＶ）のピークを選択して、元素マッピング像を構築した。ＺｎＯ−Ａｌ２Ｏ３のコア−シェルナノワイヤの元素マッピングは、３０ｋｅＶの加速電圧条件でＥＤＳ機能を備えたＦＥＳＥＭによって実施した。走査透過電子顕微鏡（ＳＴＥＭ）試料の調製のために、通常の切断刀を用いて基板からナノワイヤを切り取り、回収して密着法によってＴＥＭグリッド（炭素マイクログリッドを備えたＣｕメッシュ，ＪＥＯＬ）上に載せ替えた。ＳＴＥＭ像は、５１２×３８４ピクセルであり、各ピクセルの遅延時間は０．１ｍｓであった。像は、１００サイクルに対して統合された。Ｚｎ  Ｋα（８．６３０ｋｅＶ）、Ｏ  Ｋα（０．５２５ｋｅＶ）、およびＡｌ  Ｋα（１．４８６ｋｅＶ）のピークを選択して、元素マッピング像を構築した。【００５０】ナノワイヤ組み込みマイクロ流体デバイスを用いた尿のＥＶ内包型ｍｉＲＮＡのｉｎ  ｓｉｔｕ抽出
市販の尿（単一ドナーのヒト尿、Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｃ．）を使用前に遠心分離（１５分、４℃、３０００ｇ）し、アポトーシス小体を除去した（文献５参照）。その後、１ｍＬ尿サンプルをシリンジポンプ（ＫＤＳ−２００，ＫＤ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｃ．）を用いて５０μＬ／分の流速でナノワイヤ組み込みデバイスに導入した。ナノワイヤ上に回収されたＥＶからのｍｉＲＮＡの抽出は、細胞溶解緩衝液Ｍ［２０ｍＭ  ｔｒｉｓ−ＨＣｌ（ｐＨ７．４），２００ｍＭ塩化ナトリウム，２．５ｍＭ塩化マグネシウム，および０．０５ｗ／ｖ％  ＮＰ−４０；Ｗａｋｏ  Ｐｕｒｅ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ  Ｌｔｄ．］をシリンジポンプを用いて５０μＬ／分の流速でナノワイヤ組み込みデバイスに導入することによって実施した。ナノワイヤの剥離を研究する実験においても同じ溶解緩衝液を５０μＬ／分の流速で使用した（図１Ｉ〜Ｋ、および図９）。【００５１】ＥＶ回収と超遠心を用いた尿中ｍｉＲＮＡの抽出（超遠心法）
市販の尿（単一ドナーのヒト尿）を使用前に遠心分離（１５分、４℃、３０００ｇ）し、アポトーシス小体を除去した（文献５参照）。その後、尿を遠心分離（１５分、４℃、１２０００ｇ）して細胞の残骸を除去した（文献２９参照）。次に、２０ｍＬの尿サンプルを超遠心（２時間、４℃、１１０，０００ｇ）した（文献２９参照）。上清を取り除き、回収されたＥＶに対して０．２２μｍフィルタでろ過したリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ；Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｃ．）を２０ｍＬ添加して、さらに超遠心した（７０分、４℃、１１０，０００ｇ）。上清を取り除き、回収されたＥＶに対して０．２２μｍフィルタでろ過したリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ；Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  Ｉｎｃ．）を２０ｍＬ添加して、３度目の超遠心（７０分、４℃、１１０，０００ｇ）を行った。最後に、上清を除去し、溶解緩衝液を加えてｍｉＲＮＡを抽出した。【００５２】ＥＶ回収と市販のキットを用いたｍｉＲＮＡの抽出（ポリマー沈殿法）
市販の尿（単一ドナーのヒト尿）を使用前に遠心分離（１５分、４℃、３０００ｇ）し、アポトーシス小体を除去した。ＥＶをキット（ＥｘｏＱｕｉｃｋ−ＴＣ，Ｓｙｓｔｅｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．）の製造者取扱説明書に従って、１ｍＬの尿サンプルから回収した。最後に、溶解緩衝液を添加してｍｉＲＮＡを抽出した。【００５３】ｍｉＲＮＡの発現のマイクロアレイ分析
ｍｉＲＮＡの発現プロファイルは、東レ社の３Ｄ−Ｇｅｎｅ（Ｔｏｒａｙ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ）ヒトｍｉＲＮＡチップを用いた。溶解緩衝液で抽出されたｍｉＲＮＡは、ＳｅｒａＭｉｒ  Ｅｘｏｓｏｍｅ  ＲＮＡ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  Ｃｏｌ−ｕｍｎ  Ｋｉｔ（Ｓｙｓｔｅｍ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ  Ｉｎｃ．）を用いてその製造者取扱説明書に従って精製した。１５μＬの精製ｍｉＲＮＡを３Ｄ−Ｇｅｎｅ  Ｈｕｍａｎ  ｍｉＲＮＡ  Ｏｌｉｇｏ  ｃｈｉｐ  ｖｅｒ．２１（Ｔｏｒａｙ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ）を用いたｍｉＲＮＡのプロファイリングのために分析した。ｍｉＲＮＡの発現のマイクロアレイ分析では、シグナル強度それぞれが一種のｍｉＲＮＡに対応する。各ｍｉＲＮＡの発現レベルは、各マイクロアレイにおけるすべてのｍｉＲＮＡのシグナル強度（バックグラウンドを控除したもの）として表現される。同一の尿のｍｉＲＮＡサンプルにおけるナノワイヤ組み込みデバイスを用いた抽出と遠心分離または市販のキットを用いた抽出とによるｍｉＲＮＡ間の発現レベルの対比においては、シグナル強度は全体を通して標準化された。全体を通して標準化され、１０以上の強度（ナノワイヤ組み込みデバイスを用いた抽出による強度／超遠心または市販のキットを用いた抽出による強度）を示したものに対して散布図を作成した。従って、散布図上の各点は、標準化された強度である。同一の尿のｍｉＲＮＡサンプルにおけるナノワイヤ組み込みデバイスを用いた抽出と遠心分離または市販のキットを用いた抽出とによるｍｉＲＮＡ間の発現レベルの対比に関しては、シグナル強度がｌｏｇ２変換された。がんドナーのおよび非がんドナーの尿サンプル間でのｍｉＲＮＡの比較に関しては、各サンプルの全体を通して標準化された強度がｌｏｇ２変換された。標準化された強度は、ヒートマップ上では黒（強度＝５）、青（強度≦２）および黄（強度≧８）で示された。【００５４】ＥＶのゼータ電位
超遠心工程の後で、ＥＶのゼータ電位を動的光散乱装置（Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ  Ｎａｎｏ  ＺＳ，Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｌｔｄ．）を用いて測定した。【００５５】尿の遊離浮遊物のサイズ分布と濃度
尿の遊離浮遊物のサイズ分布と濃度は、ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ  ａｎａｌｙｚｉｎｇ  ｓｙｓｔｅｍ（ＮａｎｏＳｉｇｈｔ，Ｍａｌｖｅｒｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ  Ｌｔｄ．）を用いて測定した。未処理の尿における、ナノワイヤ組み込みデバイスで処理された尿のフロースルー分画における、および超遠心後の尿における尿の遊離浮遊物の濃度は、それぞれ２．６×１０１２ｍｌ−１、５．８×１０９ｍｌ−１、および３．５×１０９ｍｌ−１であった。尿の遊離浮遊物のサイズ分布および濃度は、１００−ｎｍ  ｎａｎｏｐｏｒｅ  ｍｅｍｂｒａｎｅ（ＮＰ１００，Ｍｅｉｗａｆｏｓｉｓ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．）を装着したｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅ  ｄｅｔｅｃｔｏｒ（ｑＮａｎｏ，Ｍｅｉｗａｆｏｓｉｓ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．）を用いて測定した。未処理の尿における、ナノワイヤ組み込みデバイスで処理された尿のフロースルー分画における、および超遠心後の尿における尿の遊離浮遊物の濃度は、それぞれ１．４×１０１２ｍｌ−１、２．４×１０１０ｍｌ−１、および２．５×１０１０ｍｌ−１であった。【００５６】ＥＶの蛍光分子標識
ＥＶの脂質二重層に透過することができる蛍光分子であるＰＫＨ２６（励起光／蛍光＝５５１／５６７ｎｍ；Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏ．ＬＬＣ）を用いてＥＶを標識した。０．２２−μｍフィルタにてろ過したＭｉｌｌｉｐｏｒｅ水（２４０μＬ）中で、１．５×１０８ｍｌ−１のＥＶに対してＰＫＨ２６を５ｍｇ添加した。ＰＫＨ２６で標識されたＥＶは、シリンジポンプを用いて１０μｌ／分の流速でナノワイヤ組み込みデバイスに導入され、次いで、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ水を同じ流速でナノワイヤ組み込みデバイスに導入して、未回収のＥＶ（ナノワイヤに結合しなかったＥＶ）を除去した。最後に、蛍光顕微鏡（ＡＺ１００，Ｎｉｋｏｎ  Ｃｏｒｐ．）を用いてＥＶの蛍光を観察した。その後、ナノワイヤ組み込みデバイスを剥離し、ＦＥＳＥＭ（ＳＵＰＲＡ  ４０ＶＰ，Ｃａｒｌ  Ｚｅｉｓｓ）を用いてＥＶを回収したナノワイヤを観察した。【００５７】膜タンパク質の検出
ナノワイヤ組み込みデバイスにＥＶを導入した後にＰＢＳを導入して未回収のＥＶを除去した。その後、当該デバイスに１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）溶液（Ｋｉｒｋｅｇａａｒｄ  ＆  Ｐｅｒｒｙ  Ｌａｂｏｒａ−ｔｏｒｉｅｓ  Ｉｎｃ．）を導入して１５分間静置した。ＰＢＳを用いて当該デバイスを洗浄し、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ４８８標識したマウス抗ヒトＣＤ６３モノクローナル抗体（１０μｇ／ｍｌ；Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｃ．）またはマウス抗ヒトＣＤ８１モノクローナル抗体（１０μｇ／ｍｌ；Ａｂｃａｍ  ＰＬＣ）を当該デバイスに導入し、１５分間静置した。ＣＤ８１の検出においては、当該デバイスを洗浄した後にＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ４８８標識のヤギ抗マウスＩｇＧポリクローナル抗体を二次抗体として当該デバイスに導入し、その後１５分間静置した。最後に、ＰＢＳで当該デバイスを洗浄し、蛍光顕微鏡（Ｏｌｙｍｐｕｓ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．）下で蛍光強度を観察した。バックグラウンドの値を得るために、ＥＶサンプルの代わりにＰＢＳを用いた。９６穴プレート（Ｎｕｎｃ  Ｃｏ．Ｌｔｄ．）を用いた検出に関しては、プレートの穴にＥＶサンプルを注入し、６時間静置し、その後、穴をＰＢＳで洗浄した。プレートの穴に１％ＢＳＡ溶液を導入し、９０分間静置した。その後、ＰＢＳで穴を洗浄し、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ４８８標識したマウス抗ヒトＣＤ６３モノクローナル抗体（１０μｇ／ｍｌ）またはマウス抗ヒトＣＤ８１抗体（１０μｇ／ｍｌ）をプレートの穴に導入し、４５分間静置した。ＣＤ８１の検出ではこれに加えて、ＰＢＳでプレートの穴を洗浄した後に、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ４８８標識のヤギ抗マウスＩｇＧポリクローナル抗体（５μｇ／ｍｌ）を二次抗体としてプレートの穴に導入し、その後４５分間静置した。最後に、ＰＢＳでプレートの穴を洗浄し、プレートリーダー（ＰＯＬＡＲｓｔａｒ  ＯＰＴＩＭＡ，ＢＭＧ  Ｌａｂｔｅｃｈ  Ｊａｐａｎ  Ｌｔｄ．）を用いて蛍光強度観察を行った。バックグラウンドの値を得るため、ＥＶサンプルの代わりにＰＢＳを用いた。【００５８】ＺｎＯ−Ａｌ２Ｏ３のコア−シェルナノワイヤの作製
ＺｎＯナノワイヤの作製の後に、原子層堆積装置（Ｓａｖａｎｎａｈ  Ｇ２，Ｕｌｔｒａｔｅｃｈ  Ｉｎｃ．）を用いてなのワイヤを被覆した。Ａｌ２Ｏ３の積層に関しては、トリメチルアルミニウムとＨ２Ｏ前駆体を原子層堆積装置内のナノワイヤを含むチャンバーに流入させ１５０℃で反応させるサイクルを１００サイクル繰り返すことによって行った。【００５９】尿サンプルの情報とナノワイヤ組み込みデバイスを用いたＥＶ内包みｍｉＲＮＡのｉｎ  ｓｉｔｕ抽出
以下の尿サンプル（ＢｉｏｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎＩＶＴ）を用いた：非がん患者（５３歳、６０歳、および５０歳）、肺がん患者（６８歳、ステージ２ｂ；５４歳、ステージ３ａ；５０歳、ステージ３ｂ）、膵臓がん患者（５６歳、ステージ２ａ；６１歳、ステージ２ａ；７４歳、ステージ３）、肝がん患者（４９歳、ステージ３；６４歳、ステージ３ａ；１８歳、ステージ３ｃ）、膀胱がん患者（６３歳、ステージ１；６５歳、ステージ１；６７歳、ステージ０ａ）、および、前立腺がん（５８歳、ステージ４；５７歳、ステージ２ａ；５４歳、ステージ２ｂ）の尿サンプル。これらの尿サンプルは、使用前に、遠心分離（１５分、４℃、３０００ｇ）し、アポトーシス小体を除去した。１ｍｌの尿サンプルをナノワイヤ組み込みデバイスにシリンジポンプを用いて５０μｌ／分の流速で導入した。ナノワイヤ上に回収されたＥＶからのｍｉＲＮＡの抽出は、当該デバイスにシリンジポンプを用いて５０ｍｌ／分の流速で溶解緩衝液を導入することによってｉｎ  ｓｉｔｕで行った。【００６０】がんのバイオマーカーとしての尿中ｍｉＲＮＡの同定
Ｚスコア１．９６（９５％信頼水準および５％有意水準）および東レ社により提供されたｌｏｇ２（強度）に対する変動変数（ＣＶ）（具体的数値を有しない）の関係に従って、９５％信頼区間は、（平均）±１．９６×（平均×ＣＶ／１００）を用いて計算した。ｌｏｇ２（強度）＝３である関係においてＣＶに対してＸ％を用いると、信頼区間の上限は、８＋０．１６Ｘであった。ｌｏｇ２（強度）＝５または６におけるＣＶ値は、その関係から０．７Ｘ％および０．５Ｘ％であった。５％有意水準を考慮すると、各事例に対するＣＶは、４０および７１％未満であった。図５では、７０％を超えるＣＶ値を合理的であるとはせず、統計学的に有意な閾値に対して３つの対数強度の相違を決定した。【００６１】結果
ＥＶ内包ｍｉＲＮＡを回収する方法論を確立するために、マイクロ流体基板に組み込まれたナノワイヤを開発した。これらのナノワイヤは、ＥＶの静電的回収のための固相として、その後は、ＥＶ内包ｍｉＲＮＡのｉｎ  ｓｉｔｕ抽出において重要な機能を果たすものである（図１Ａ参照）。【００６２】ナノワイヤ組み込みＰＤＭＳ基板
ナノワイヤ組み込みＰＤＭＳ基板は、４つの工程により作製した（文献４０および図６参照）。第１の工程で、Ｓｉ基板上の熱酸化処理したクロム層からナノワイヤを成長させた；第２の工程で、成長しているナノワイヤ上に硬化していないＰＤＭＳを注いだ；第３の工程で、ナノワイヤを備えたＰＤＭＳを硬化させ、剥離して、ナノワイヤを埋め込んだＰＤＭＳを得た（図１Ｂ参照）；第４の工程で、埋め込まれたナノワイヤからナノワイヤを成長させた（図１Ｃ参照）。ここで得られたナノワイヤ組み込みＰＤＭＳ基板と呼ぶ。組み込まれたナノワイヤの鉛直断面の電界放出型走査型電子顕微鏡（ＦＥＳＥＭ）像は、ナノワイヤがその頭部を少しだけ露出させながらＰＤＭＳに均一にかつ深く埋め込まれていることを示し（図１Ｂ参照）、頭部は二次的ナノワイヤの成長起点を提供した（図１Ｃおよび図７参照）。ナノワイヤ無しのＰＤＭＳの断面ＦＥＳＥＭ像のエネルギー分散型Ｘ線分析（ＥＤＳ）による元素マッピングをナノワイヤ組み込みＰＤＭＳと比較し（図８参照）、ナノワイヤ組み込みＰＤＭＳにおいてＺｎＯナノワイヤがＰＤＭＳに埋め込まれていることを確認した。加えて、鉛直断面と全体ＦＥＳＥＭ像および、断面ＦＥＳＥＭ像のＥＳＤ元素マッピングは、二次的ナノワイヤの成長が埋め込まれたナノワイヤ上で生じることを示した。このようにして、ナノワイヤ組み込みＰＤＭＳ基板を作製することに成功した。ナノワイヤとＥＶとの接触を促進し、圧力降下を防ぐために、ナノワイヤ組み込みＰＤＭＳ基板のカバーとしてナノワイヤ長（２μｍ）より大きなチャンネル高（５０μｍ）を備えたマイクロ流体ヘリングボーン構造を有するＰＤＭＳ基板（当該ヘリングボーン構造は溶液の良好な対流と分散を保証する）（文献４１参照）を用いた（図１Ｄ参照）。尿中のＥＶ内包ｍｉＲＮＡを抽出するナノワイヤ組み込みデバイスは、ナノワイヤ組み込みＰＤＭＳ基板をマイクロ流体ヘリングボーン構造を有するＰＤＭＳ基板に接着させ、尿サンプルを導入し、および回収するためのポリエーテルエーテルケトン（ＰＥＥＫ）チューブに接続することによって完成させた（図１Ｄ参照）。ＰＤＭＳ基板に組み込まれたナノワイヤは、溶解緩衝液への暴露に対して機械的安定性を示し、ＰＤＭＳに組み込まれていないナノワイヤに対して生じるような基板からのナノワイヤの剥離を防ぐことができた（図１ＥおよびＦ、並びに図９参照）。【００６３】ｍｉＲＮＡ発現のマイクロアレイ分析
ｍｉＲＮＡ発現のマイクロアレイ分析（２５６５種類）は、ナノワイヤ組み込みデバイスによる抽出が、従来の超遠心法や市販のキットを用いたポリマー沈殿法による抽出と比較して大きな多様性を有するｍｉＲＮＡ種（約１，０００種）の抽出を可能とすることが明らかとなった（図２および図１０Ａ参照）。尿中のＥＶ内包ｍｉＲＮＡが４０分間（吸着に２０分間、および抽出に２０分間）以内で完了することは、デバイスに尿サンプル（１ｍｌ）を導入してから溶解緩衝液（１ｍｌ）を導入することによって実証された。これに対して、超遠心法によるＥＶからのｍｉＲＮＡの抽出では、２０ｍｌの尿が必要となり、かつ、吸着と抽出に５時間以上を要することが明らかとなった。本研究で用いた市販のキットは小分子ＲＮＡの収率に関して他のＥＶ単離方法よりも優れていることが報告されている（図１０のＢおよびＣ参照）（文献２２参照）ため、上記キットを用いて１ｍｌの尿から回収したＥＶを１ｍｌの溶解緩衝液で懸濁することによってｍｉＲＮＡの抽出を行ったところ、この作業には、回収と抽出に１４時間以上が必要とされることが明らかとなった。超遠心法によるｍｉＲＮＡの抽出よりも２０倍以下の尿の消費量であったにもかかわらず、本開示のナノワイヤ組み込みデバイスで抽出されたｍｉＲＮＡの発現レベルは、超遠心法により得られるｍｉＲＮＡよりもはるかに高いことが散布図およびヒストグラムから明らかとなった（図２ＡおよびＢ参照）。普通に考えれば、２０倍量以上の尿を用いたのであるから、超遠心法で得られたｍｉＲＮＡの量は、本開示のデバイスで得られるｍｉＲＮＡの量よりも高くなるはずであるが、結果は逆であった。超遠心法と比較して、本開示のデバイスは、５倍高いｍｉＲＮＡ量をもたらし（図２Ａ参照）、かつ、抽出可能なｍｉＲＮＡの種類も多様であった（本開示のデバイスによるｍｉＲＮＡの抽出量：７４９，８２２、種類：１，１１１種類；遠心法によるｍｉＲＮＡの抽出量：１７１  ２６１、種類：３５２種類）（図２Ｂ参照）。加えて、散布図とヒストグラムによれば、本開示のデバイスを用いて抽出されるｍｉＲＮＡの量は、消費した尿サンプルの容量は同じであったにもかかわらず、上記キットによって得られるｍｉＲＮＡの量よりもはるかに高かった（図２ＣおよびＤ参照）。上記キットと比較して、本開示のデバイスは、４倍高いｍｉＲＮＡ量をもたらし（図２Ｃ参照）、かつ、抽出可能なｍｉＲＮＡの種類も多様であった（本開示のデバイスによるｍｉＲＮＡの抽出量：７４９，８２２、種類：１，１１１種類；遠心法によるｍｉＲＮＡの抽出量：３３７，３５５、種類：４９１種類）（図２Ｄ参照）。従って、本開示のデバイスは、従来法（超遠心法やポリマー沈降法）と比較して、ｍｉＲＮＡの抽出効率（図２参照）、抽出時間（図１０ＡおよびＢ参照）、および小分子ＲＮＡの抽出効率（図１０Ｃ参照）に関して優れていることが結論付けられた。【００６４】ＥＶ回収能力
本開示のデバイスがＥＶを回収する能力を確認すると、本開示のデバイスは、効率良くＥＶを回収することができることが明らかとなった（図３参照）。具体的には、未処理の尿において、本開示のデバイスで処理された尿のフロースルー分画（投入量：１ｍｌ）において、および超遠心法で処理された尿（投入量：２０ｍｌ）において、尿の遊離浮遊物の総量が、それぞれ３．４μｌ、８．８ｎｌ、および１１．１ｎｌであることを考慮すると、本開示のデバイスによる浮遊物の回収効率は９９％以上であると見積もられ、超遠心法により得られる用量よりも大きな容量を回収することができた（図３Ａ〜３Ｃ参照）（回収されたＥＶの容量は、未処理の尿の容量から処理された尿の容量を控除することによって計算された）。蛍光標識ＥＶを観察した後で、マイクロ流体ヘリングボーン構造を有するＰＤＭＳ基板からナノワイヤ組み込みＰＤＭＳを剥離してそのＦＥＳＥＭ像を取得した。これにより、ナノワイヤによって回収される遊離浮遊物がＥＶを含むことが明らかとなった（図３Ｃおよび３Ｄ参照）。ナノワイヤによって回収される遊離浮遊物がＥＶを含むことをさらに確認するために、ＥＶ上に発現する膜タンパク質であり、エクソソームの膜上に発現することが知られるＣＤ６３およびＣＤ８１を検出した（文献２および４２〜４４参照）。ナノワイヤ上（または９６穴プレートのウェル）に回収された尿中のＥＶの蛍光強度（濃度：１．４×１０８ｍｌ−１）は、ナノワイヤだけがこれらの膜タンパク質を回収することができることを示した（図３Ｅ参照）。このことは、本開示のデバイスにおいてナノワイヤ上でＥＶが効率的に回収できることを示す。次に、ＺｎＯナノワイヤに代えて、ＺｎＯのコアが１０ｎｍ厚のＡｌ２Ｏ３層によって完全に被覆されたＺｎＯ−Ａｌ２Ｏ３のコア−シェルナノワイヤを調製した（図１１参照）。ＺｎＯ−Ａｌ２Ｏ３のコア−シェルナノワイヤは、Ａｌ２Ｏ３の等電点が約７．５であることから、ｐＨ６〜８において電荷的にほぼ中性（若干陽性または若干陰性であり得る）の表面を有することとなる（文献４５および４６参照）。そこで、ＺｎＯ−Ａｌ２Ｏ３のコア−シェルナノワイヤを用いることによって、ＥＶの回収に対してナノワイヤの表面の荷電状態が優勢な効果を有するのかを確認した（図１２参照）。ＺｎＯナノワイヤは、ＺｎＯの等電点が約９．５であることから、ｐＨ６〜８では正に荷電した表面を有するのに対して、尿中のＥＶはｐＨ６〜８では負に荷電した表面を有することから、ＺｎＯナノワイヤが効率的なＥＶの回収を可能とすることが理解できる（文献４７および４８参照）。これらの結果から、ＺｎＯナノワイヤがＥＶなどの２００ｎｍまでの直径を有する尿の遊離浮遊物を９９％以上の回収効率で回収することができることが一層明らかになった。【００６５】ナノワイヤによるＥＶの回収のメリット
超遠心法により回収できた物（すなわち、エクソソーム（９．０ｎｌ；図１４Ａ参照））の量を、回収されなかった物（１１．１ｎｌ；図３Ｃ）に加算して得られる数値は、未処理の尿に含まれる浮遊物の容量３．４μｌと一致しない（図３Ｂ）。未だエクソソームとマイクロベシクルとは完全に区別することは容易ではないが、このことは、超遠心法では、主にエクソソームが回収されていることが示唆される（文献４、５、及び２９参照）。また、超遠心法でＥＶを回収すると、ＥＶは超遠心チューブの内壁に対して押しつけられることによって、多くが融合および崩壊する可能性があり、また、この過程でマイクロベシクルに内包されたｍｉＲＮＡが周辺に放出されてしまう可能性がある。超遠心によるＥＶの回収の仕組みは、回収される物に負荷される力と密度のバランスに基づくものである。従って、超遠心の実験的条件は、放出されたｍｉＲＮＡの回収には適しないと考えられる。【００６６】  他方で、ナノワイヤによるＥＶ回収の仕組みは、正に荷電したナノワイヤと負に荷電した物との静電的相互作用に基づくものであると考えられ、これによりナノワイヤは、エクソソームおよびマイクロベシクルを回収することができると考えられる。また、ｍｉＲＮＡなどの核酸は、ｐＨ６〜８では負に荷電する表面特性を有するので、ナノワイヤではＥＶ−フリーのｍｉＲＮＡ（遊離ｍｉＲＮＡ）を回収できると考えられる。しかし、遊離ｍｉＲＮＡの回収は、超遠心法やポリマー沈降法では不可能であると考えられる。また、溶解緩衝液を導入することによるナノワイヤからのｍｉＲＮＡの回収効率はほぼ１００％であった（図１４Ｂ参照）。正に荷電した表面を有するナノワイヤは、エクソソーム、マイクロベシクル、及び遊離ｍｉＲＮＡなどの尿中の負に荷電した物質を回収する際に顕著な利益をもたらすであろう。回収効率、得られる物の選択性、及び尿中ｍｉＲＮＡを回収できる能力などの特性（表１参照）を考慮すると、超遠心法は回収効率が高く、得られる物の選択性が高く（エクソソームのみしか回収できない）、かつ回収能力が低いのに対して、本開示のデバイスは、高い回収効率、低い選択性（エクソソーム、マイクロベシクル、及び遊離ｍｉＲＮＡを広く回収できる）、及び高い回収能力を有する。また、ポリマー沈殿法を用いるキットでは、これらの特性において中途半端である。また、ＥＶのプロタミン沈降法がプロタミン／ポリエチレングリコールを用いて４℃で一晩インキュベートする（ＥｘｏＱｕｉｃｋと同様である）ことによって達成されるのであるが、そのようなＥＶの電荷に基づく単離手法（文献４９参照）と比較しても、本開示のデバイスによるＥＶ内包ｍｉＲＮＡの抽出においては、室温で４０分（回収または吸着に２０分および抽出に２０分）が必要されるのみであるとの利点がある。加えて、ｐＨ６．３以下で正に荷電した表面を生じるアミン基を有するキトサンポリマーを用いる遊離核酸のための荷電に基づく単離手法（文献５０参照）と比較して、本開示のデバイスによるＥＶ内包ｍｉＲＮＡの抽出においては、ｐＨ６〜８の尿においてナノワイヤが正に荷電することが保証されているという利点を有する。そしてこれらの知見から、ＺｎＯナノワイヤへのＥＶ（及び��離ｍｉＲＮＡ）の静電相互作用による回収と、溶解緩衝液のアプライ中におけるＰＤＭＳに組み込まれたナノワイヤの機械的安定性は、重要な機構であり、尿のｍｉＲＮＡの分析に基づいて疾患の早期診断や適時の健康診断が可能となると期待される。【００６７】
【表１】
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【００６８】様々ながん患者ドナーの尿サンプル由来ｍｉＲＮＡの同定
次に、様々ながん患者ドナーの尿から未だ発見されたことのないｍｉＲＮＡを同定することができるかについて検討した（図４参照）。この検討において、がん患者ドナーと健常者（非がんドナー）の尿サンプルから本開示のデバイスでｍｉＲＮＡを抽出し、ヒートマップ上で比較した。図４に示されるように、がんに関連して発現量が変わる様々なｍｉＲＮＡの存在を観察することができた。がん患者ドナーと非がんドナーとの比較により、尿中でがんと関連して減少しているｍｉＲＮＡと増加しているｍｉＲＮＡとが明らかになった（図５および表２参照）。ヒートマップにより、減少しているｍｉＲＮＡと増加しているｍｉＲＮＡそれぞれががんの新しい指標となること、およびこれらの組合せが、がんの新しい指標となり得ることが示唆された。【００６９】
【表２】
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【００７０】  公表された結果（文献５２〜９５参照）との比較に基づいて、統計学的に有意に減少したｍｉＲＮＡと増加したｍｉＲＮＡを明確化する試みを行った。その結果、本開示のデバイスで抽出されたｍｉＲＮＡには、２つのｍｉＲＮＡの群：生理学的機能が不明なｍｉＲＮＡの群および生理学的機能が報告されているｍｉＲＮＡの群が含まれていた。生理学的機能が不明なｍｉＲＮＡの群は、さらに２つのサブグループ：がんに関連するｍｉＲＮＡの群および遊離ｍｉＲＮＡに由来するアーティファクトの群に大別されうる。生理学的機能が報告されているｍｉＲＮＡの群にも２つのサググループ：ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ（がん抑制因子であり、全てのがん患者由来の尿中で減少していたｍｉＲＮＡ）などの疾患の転帰と正に相関するｍｉＲＮＡの群（文献５３〜５７参照）およびｍｉＲ−１６−１−３ｐ（胃がん細胞の浸潤と転移を抑制するｍｉＲＮＡであり、肝がん患者および膀胱癌患者由来の尿において過剰発現していたｍｉＲＮＡ）などの機能と疾患との反直観的な相関を示すｍｉＲＮＡの群とに大別された（文献６０参照）。反直観的な事例においては、以下の３つの可能性が考えられた：第１の可能性は、患者が対応するリスクを有する；第２の可能性は、本研究ではｍｉＲＮＡとがんの種類との関係をカバーできていない；第３の可能性として、ｍｉＲＮＡがアーティファクトに帰される。膀胱がん患者由来の４ｍｌの尿から市販のキットで抽出したこれまでに報告された尿のｍｉＲＮＡ（細胞フリーおよびエクソソーム由来の増加したｍｉＲＮＡの上位２５個として示された）（文献９６参照）と本開示のデバイスで取得した過剰発現したｍｉＲＮＡとを比較すると、ｍｉＲ−４４５４を含む２０種のｍｉＲＮＡが本研究により見出された（データＳ１または表３参照）。しかし、文献９６で開示されたｍｉＲＮＡは、本開示においては、がんの指標の候補として同定されたものではない。理由は、本開示においては、これらの文献９６で開示されたｍｉＲＮＡが非がんドナーの尿においても見出されたためであり、非がんドナーと膀胱がん患者の尿とで対数の蛍光強度に有意差は認められなかったためである。【００７１】関連文献リスト（以下、文献番号と共に示す）
１．    Ｇ．Ｒａｐｏｓｏ，Ｗ．Ｓｔｏｏｒｖｏｇｅｌ，Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｖｅｓｉｃｌｅｓ：Ｅｘｏｓｏｍｅｓ，ｍｉｃｒｏｖｅｓｉｃｌｅｓ，ａｎｄ  ｆｒｉｅｎｄｓ．Ｊ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．２００，３７３−３８３（２０１３）．
２．    Ｉ．Ｅｖａｎｓ−Ｏｓｓｅｓ，Ｌ．Ｈ．Ｒｅｉｃｈｅｍｂａｃｈ，Ｍ．Ｉ．Ｒａｍｉｒｅｚ，Ｅｘｏｓｏｍｅｓ  ｏｒ  ｍｉｃｒｏｖｅｓｉｃｌｅｓ？Ｔｗｏ  ｋｉｎｄｓ  ｏｆ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｖｅｓｉｃｌｅｓ  ｗｉｔｈ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｒｏｕｔｅｓ  ｔｏ  ｍｏｄｉｆｙ  ｐｒｏｔｏｚｏａｎ−ｈｏｓｔ  ｃｅｌｌ  ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ．Ｐａｒａｓｉｔｏｌ．Ｒｅｓ．１１４，３５６７−３５７５（２０１５）．
３．    Ｐ．Ｍａ，Ｙ．Ｐａｎ，Ｗ．Ｌｉ，Ｃ．Ｓｕｎ，Ｊ．Ｌｉｕ，Ｔ．Ｘｕ，Ｙ．Ｓｈｕ，Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｖｅｓｉｃｌｅｓ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｎｏｎｃｏｄｉｎｇ  ＲＮＡｓ  ｔｒａｎｓｆｅｒ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ．Ｊ．Ｈｅｍａｔｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．１０，５７（２０１７）．
４．    Ｒ．Ｓｚａｔａｎｅｋ，Ｊ．Ｂａｒａｎ，Ｍ．Ｓｉｅｄｌａｒ，Ｍ．Ｂａｊ−Ｋｒｚｙｗｏｒｚｅｋａ，Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｖｅｓｉｃｌｅｓ：Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ  ｔｈｅ  ｃｏｒｒｅｃｔ  ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｒｅｖｉｅｗ）．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．３６，１１−１７（２０１５）．
５．    Ｄ．Ｋ．Ｊｅｐｐｅｓｅｎ，Ｍ．Ｌ．Ｈｖａｍ，Ｂ．Ｐｒｉｍｄａｈｌ−Ｂｅｎｇｔｓｏｎ，Ａ．Ｔ．Ｂｏｙｓｅｎ，Ｂ．
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Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｄｉｓｃｒｅｔｅ  ｅｘｏｓｏｍｅ  ｆｒａｃｔｉｏｎｓ  ｏｂｔａｉｎｅｄ  ｂｙ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｔｉｏｎ．Ｊ．Ｅｘｔｒａｃｅｌｌ．Ｖｅｓｉｃｌｅｓ  ３，２５０１１（２０１４）．
６．    Ｊ．Ａ．Ｗｅｂｅｒ，Ｄ．Ｈ．Ｂａｘｔｅｒ，Ｓ．Ｚｈａｎｇ，Ｄ．Ｙ．Ｈｕａｎｇ，Ｋ．Ｈ．Ｈｕａｎｇ，Ｍ．Ｊ．Ｌｅｅ，Ｄ．Ｊ．Ｇａｌａｓ，Ｋ．Ｗａｎｇ，Ｔｈｅ  ｍｉｃｒｏＲＮＡ  ｓｐｅｃｔｒｕｍ  ｉｎ  １２  ｂｏｄｙ  ｆｌｕｉｄｓ．Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．５６，１７３３−１７４１（２０１０）．
７．    Ｌ．−Ｌ．Ｌｖ，Ｙ．Ｃａｏ，Ｄ．Ｌｉｕ，Ｍ．Ｘｕ，Ｈ．Ｌｉｕ，Ｒ．−Ｎ．Ｔａｎｇ，Ｋ．−Ｌ．Ｍａ，Ｂ．−Ｃ．Ｌｉｕ，Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ  ｆｒｏｍ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｅｘｏｓｏｍｅｓ／ｍｉｃｒｏｖｅｓｉｃｌｅｓ  ｆｏｒ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｓｃｉ．９，１０２１−１０３１（２０１３）．
８．    Ｍ．Ｌ．Ａｌｖａｒｅｚ，Ｍ．Ｋｈｏｓｒｏｈｅｉｄａｒｉ，Ｒ．Ｋ．Ｒａｖｉ，Ｊ．Ｋ．ＤｉＳｔｅｆａｎｏ，Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ  ｏｆ  ｐｒｏｔｅｉｎ，ｍｉｃｒｏＲＮＡ，ａｎｄ  ｍＲＮＡ  ｙｉｅｌｄｓ  ｕｓｉｎｇ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｍｅｔｈｏｄｓ  ｏｆ  ｕｒｉｎａｒｙ  ｅｘｏｓｏｍｅ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ｏｆ  ｋｉｄｎｅｙ  ｄｉｓｅａｓｅ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ．Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．８２，１０２４−１０３２（２０１２）．
９．    Ｊ．Ｚｈａｎｇ，Ｓ．Ｌｉ，Ｌ．Ｌｉ，Ｍ．Ｌｉ，Ｃ．Ｇｕｏ，Ｊ．Ｙａｏ，Ｓ．Ｍｉ，Ｅｘｏｓｏｍｅ  ａｎｄ  ｅｘｏｓｏｍａｌ  ｍｉｃｒｏＲＮＡ：Ｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ，ｓｏｒｔｉｎｇ，ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ  １３，１７−２４（２０１５）．
１０．    Ｎ．Ｋｏｓａｋａ，Ｈ．Ｉｇｕｃｈｉ，Ｔ．Ｏｃｈｉｙａ，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ  ｍｉｃｒｏＲＮＡ  ｉｎ  ｂｏｄｙ  ｆｌｕｉｄ：Ａ  ｎｅｗ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ．１０１，２０８７−２０９２（２０１０）．
１１．    Ｍ．Ｉｅｒｏ，Ｒ．Ｖａｌｅｎｔｉ，Ｖ．Ｈｕｂｅｒ，Ｐ．Ｆｉｌｉｐａｚｚｉ，Ｇ．Ｐａｒｍｉａｎｉ，Ｓ．Ｆａｉｓ，Ｌ．Ｒｉｖｏｌｔｉｎｉ，Ｔｕｍｏｕｒ−ｒｅｌｅａｓｅｄ  ｅｘｏｓｏｍｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ．Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｉｆｆｅｒ．１５，８０−８８（２００８）．
１２．    Ｄ．Ｄ．Ｔａｙｌｏｒ，Ｃ．Ｇｅｒｃｅｌ−Ｔａｙｌｏｒ，ＭｉｃｒｏＲＮＡ  ｓｉｇｎａｔｕｒｅｓ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｅｘｏｓｏｍｅｓ  ａｓ  ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  ｏｆ  ｏｖａｒｉａｎ  ｃａｎｃｅｒ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．Ｏｎｃｏｌ．１１０，１３−２１（２００８）．
１３．    Ｋ．Ａｌ−Ｎｅｄａｗｉ，Ｂ．Ｍｅｅｈａｎ，Ｊ．Ｍｉｃａｌｌｅｆ，Ｖ．Ｌｈｏｔａｋ，Ｌ．Ｍａｙ，Ａ．Ｇｕｈａ，Ｊ．Ｒａｋ，Ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ  ｔｒａｎｓｆｅｒ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ  ＥＧＦＲｖＩＩＩ  ｂｙ  ｍｉｃｒｏｖｅｓｉｃｌｅｓ  ｄｅｒｉｖｅｄ  ｆｒｏｍ  ｔｕｍｏｕｒ  ｃｅｌｌｓ．Ｎａｔ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１０，６１９−６２４（２００８）．
１４．    Ｙ．Ｙｏｓｈｉｏｋａ，Ｎ．Ｋｏｓａｋａ，Ｙ．Ｋｏｎｉｓｈｉ，Ｈ．Ｏｈｔａ，Ｈ．Ｏｋａｍｏｔｏ，Ｈ．Ｓｏｎｏｄａ，Ｒ．Ｎｏｎａｋａ，Ｈ．Ｙａｍａｍｏｔｏ，Ｈ．Ｉｓｈｉｉ，Ｍ．Ｍｏｒｉ，Ｋ．Ｆｕｒｕｔａ，Ｔ．Ｎａｋａｊｉｍａ，Ｈ．Ｈａｙａｓｈｉ，Ｈ．Ｓｕｇｉｓａｋｉ，Ｈ．Ｈｉｇａｓｈｉｍｏｔｏ，Ｔ．Ｋａｔｏ，Ｆ．Ｔａｋｅｓｈｉｔａ，Ｔ．Ｏｃｈｉｙａ，Ｕｌｔｒａ−ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  ｌｉｑｕｉｄ  ｂｉｏｐｓｙ  ｏｆ  ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｖｅｓｉｃｌｅｓ  ｕｓｉｎｇ  ＥｘｏＳｃｒｅｅｎ．Ｎａｔ．Ｃｏｍｍｕｎ．５，３５９１（２０１４）．
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Ａ．Ｎｉｔａｄｏｒｉ−Ｈｏｓｈｉｎｏ，Ｃ．Ｈｏｆｆｍａｎ，Ｋ．Ｂａｄａｌ，Ｂ．Ａ．Ｇａｒｃｉａ，Ｍ．Ｋ．Ｃａｌｌａｈａｎ，Ｊ．Ｙｕａｎ，Ｖ．Ｒ．Ｍａｒｔｉｎｓ，Ｊ．Ｓｋｏｇ，Ｒ．Ｎ．Ｋａｐｌａｎ，Ｍ．Ｓ．Ｂｒａｄｙ，Ｊ．Ｄ．Ｗｏｌｃｈｏｋ，Ｐ．Ｂ．Ｃｈａｐｍａｎ，Ｙ．Ｋａｎｇ，Ｊ．Ｂｒｏｍｂｅｒｇ，Ｄ．Ｌｙｄｅｎ，Ｍｅｌａｎｏｍａ  ｅｘｏｓｏｍｅｓ  ｅｄｕｃａｔｅ  ｂｏｎｅ  ｍａｒｒｏｗ  ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  ｃｅｌｌｓ  ｔｏｗａｒｄ  ａ  ｐｒｏ−ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ＭＥＴ．Ｎａｔ．Ｍｅｄ．１８，８８３−８９１（２０１２）．
１６．    Ｃ．Ｙ．Ｃｈｅｎ，Ｍ．Ｃ．Ｈｏｇａｎ，Ｃ．Ｊ．Ｗａｒｄ，Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｘｏｓｏｍｅ−ｌｉｋｅ  ｖｅｓｉｃｌｅｓ  ｆｒｏｍ  ｕｒｉｎｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．５２４，２２５−２４１（２０１３）．
１７．    Ｊ．Ｗｅｂｂｅｒ，Ｒ．Ｓｔｅａｄｍａｎ，Ｍ．Ｄ．Ｍａｓｏｎ，Ｚ．Ｔａｂｉ，Ａ．Ｃｌａｙｔｏｎ，Ｃａｎｃｅｒ  ｅｘｏｓｏｍｅｓ  ｔｒｉｇｇｅｒ  ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｔｏ  ｍｙｏｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．７０，９６２１−９６３０（２０１０）．
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Ｃｕｒｒｙ  Ｊｒ．，Ｂ．Ｓ．Ｃａｒｔｅｒ，Ａ．Ｍ．Ｋｒｉｃｈｅｖｓｋｙ，Ｘ．Ｏ．Ｂｒｅａｋｅｆｉｅｌｄ，Ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｍｉｃｒｏｖｅｓｉｃｌｅｓ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ＲＮＡ  ａｎｄ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｔｈａｔ  ｐｒｏｍｏｔｅ  ｔｕｍｏｕｒ  ｇｒｏｗｔｈ  ａｎｄ  ｐｒｏｖｉｄｅ  ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ．Ｎａｔ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．１０，１４７０−１４７６（２００８）．
１９．    Ａ．Ｖ．Ｖｌａｓｓｏｖ，Ｓ．Ｍａｇｄａｌｅｎｏ，Ｒ．Ｓｅｔｔｅｒｑｕｉｓｔ，Ｒ．Ｃｏｎｒａｄ，Ｅｘｏｓｏｍｅｓ：Ｃｕｒｒｅｎｔ  ｋｎｏｗｌｅｄｇｅ  ｏｆ  ｔｈｅｉｒ  ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ，ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ，ａｎｄ  ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  ａｎｄ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌｓ．Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ  １８２０，９４０−９４８（２０１２）．
２０．    Ｃ．Ｈ．Ａｒｎａｕｄ，Ｓｅｅｋｉｎｇ  ｔｉｎｙ  ｖｅｓｉｃｌｅｓ  ｆｏｒ  ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ．Ｃｈｅｍ．Ｅｎｇ．Ｎｅｗｓ  ９３，３０−３２（２０１５）．
２１．    Ｍ．Ｂ．Ｋｉｒｓｃｈｎｅｒ，Ｊ．Ｊ．Ｂ．Ｅｄｅｌｍａｎ，Ｓ．Ｃ．−Ｈ．Ｋａｏ，Ｍ．Ｐ．Ｖａｌｌｅｌｙ，Ｎ．ｖａｎ  Ｚａｎｄｗｉｊｋ，Ｇ．Ｒｅｉｄ，Ｔｈｅ  ｉｍｐａｃｔ  ｏｆ  ｈｅｍｏｌｙｓｉｓ  ｏｎ  ｃｅｌｌ−ｆｒｅｅ  ｍｉｃｒｏＲＮＡ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ．Ｆｒｏｎｔ．Ｇｅｎｅｔ．４，９４（２０１３）．
２２．    Ｄ．Ｄ．Ｔａｙｌｏｒ，Ｗ．Ｚａｃｈａｒｉａｓ，Ｃ．Ｇｅｒｃｅｌ−Ｔａｙｌｏｒ，Ｅｘｏｓｏｍｅ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  ｐｒｏｔｅｏｍｉｃ  ａｎａｌｙｓｅｓ  ａｎｄ  ＲＮＡ  ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．７２８，２３５−２４６（２０１１）．
２３．    Ｓ．Ｊｅｏｎｇ，Ｊ．Ｐａｒｋ，Ｄ．Ｐａｔｈａｎｉａ，Ｃ．Ｍ．Ｃａｓｔｒｏ，Ｒ．Ｗｅｉｓｓｌｅｄｅｒ，Ｈ．Ｌｅｅ，Ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  ｍａｇｎｅｔｏ−  ｅｌｅｃｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ  ｓｅｎｓｏｒ  ｆｏｒ  ｅｘｏｓｏｍｅ  ａｎａｌｙｓｉｓ．ＡＣＳ  Ｎａｎｏ  １０，１８０２−１８０９（２０１６）．
２４．    Ｖ．Ｓｕｎｋａｒａ，Ｈ．−Ｋ．Ｗｏｏ，Ｙ．−Ｋ．Ｃｈｏ，Ｅｍｅｒｇｉｎｇ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｖｅｓｉｃｌｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｒｏｌｅｓ  ｉｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ  ａｎｄ  ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃｓ．Ａｎａｌｙｓｔ  １４１，３７１−３８１（２０１６）．
２５．    Ｐ．Ｚｈａｎｇ，Ｍ．Ｈｅ，Ｙ．Ｚｅｎｇ，Ｕｌｔｒａｓｅｎｓｉｔｉｖｅ  ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ  ｅｘｏｓｏｍｅｓ  ｕｓｉｎｇ  ａ  ｎａｎｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄ  ｇｒａｐｈｅｎｅ  ｏｘｉｄｅ／ｐｏｌｙｄｏｐａｍｉｎｅ  ｃｏａｔｉｎｇ．Ｌａｂ  Ｃｈｉｐ  １６，３０３３−３０４２（２０１６）．
２６．    Ｂ．Ｈ．Ｗｕｎｓｃｈ，Ｊ．Ｔ．Ｓｍｉｔｈ，Ｓ．Ｍ．Ｇｉｆｆｏｒｄ，Ｃ．Ｗａｎｇ，Ｍ．Ｂｒｉｎｋ，Ｒ．Ｌ．Ｂｒｕｃｅ，Ｒ．Ｈ．Ａｕｓｔｉｎ，Ｇ．Ｓｔｏｌｏｖｉｔｚｋｙ，Ｙ．Ａｓｔｉｅｒ，Ｎａｎｏｓｃａｌｅ  ｌａｔｅｒａｌ  ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔ  ａｒｒａｙｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｘｏｓｏｍｅｓ  ａｎｄ  ｃｏｌｌｏｉｄｓ  ｄｏｗｎ  ｔｏ  ２０  ｎｍ．Ｎａｔ．Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌ．１１，９３６−９４０（２０１６）．
２７．    Ｈ．−Ｋ．Ｗｏｏ，Ｖ．Ｓｕｎｋａｒａ，Ｊ．Ｐａｒｋ，Ｔ．−Ｈ．Ｋｉｍ，Ｊ．−Ｒ．Ｈａｎ，Ｃ．−Ｊ．Ｋｉｍ，Ｈ．−Ｉ．Ｃｈｏｉ，Ｙ．−Ｋ．Ｋｉｍ，Ｙ．−Ｋ．Ｃｈｏ，Ｅｘｏｄｉｓｃ  ｆｏｒ  ｒａｐｉｄ，ｓｉｚｅ−ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ，ａｎｄ  ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｎａｎｏｓｃａｌｅ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｖｅｓｉｃｌｅｓ  ｆｒｏｍ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｓａｍｐｌｅｓ．ＡＣＳ  Ｎａｎｏ  １１，１３６０−１３７０（２０１７）．
２８．    Ｆ．Ｂａｒｕｔｔａ，Ｍ．Ｔｒｉｃａｒｉｃｏ，Ａ．Ｃｏｒｂｅｌｌｉ，Ｌ．Ａｎｎａｒａｔｏｎｅ，Ｓ．Ｐｉｎａｃｈ，Ｓ．Ｇｒｉｍａｌｄｉ，Ｇ．Ｂｒｕｎｏ，Ｄ．Ｃｉｍｉｎｏ，Ｄ．Ｔａｖｅｒｎａ，Ｍ．Ｃ．Ｄｅｒｅｇｉｂｕｓ，Ｍ．Ｐ．Ｒａｓｔａｌｄｉ，Ｐ．Ｃ．Ｐｅｒｉｎ，Ｇ．Ｇｒｕｄｅｎ，Ｕｒｉｎａｒｙ  ｅｘｏｓｏｍａｌ  ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ  ｉｎ  ｉｎｃｉｐｉｅｎｔ  ｄｉａｂｅｔｉｃ  ｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ．ＰＬＯＳ  ＯＮＥ  ８，ｅ７３７９８（２０１３）．
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ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｘｏｓｏｍｅｓ  ｆｒｏｍ  ｃｅｌｌ  ｃｕｌｔｕｒｅ  ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔｓ  ａｎｄ  ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  ｆｌｕｉｄｓ．Ｃｕｒｒ．Ｐｒｏｔｏｃ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．Ｃｈａｐｔｅｒ  ３，Ｕｎｉｔ  ３．２２（２００６）．
３０．    Ｋ．Ｅ．Ｐｅｔｅｒｓｅｎ，Ｅ．Ｍａｎａｎｇｏｎ，Ｊ．Ｌ．Ｈｏｏｄ，Ｓ．Ａ．Ｗｉｃｋｌｉｎｅ，Ｄ．Ｐ．Ｆｅｒｎａｎｄｅｚ，Ｗ．Ｐ．Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ｂ．Ｋ．Ｇａｌｅ，Ａ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｅｘｏｓｏｍｅ  ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｂ１６−Ｆ１０  ｍｏｕｓｅ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｅｘｏｓｏｍｅｓ  ｗｉｔｈ  ＡＦ４−ＵＶ−ＭＡＬＳ−ＤＬＳ−ＴＥＭ．Ａｎａｌ．Ｂｉｏａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．４０６，７８５５−７８６６（２０１４）．
３１．    Ｌ．Ｃｈｅｎｇ，Ｘ．Ｓｕｎ，Ｂ．Ｊ．Ｓｃｉｃｌｕｎａ，Ｂ．Ｍ．Ｃｏｌｅｍａｎ，Ａ．Ｆ．Ｈｉｌｌ，Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｄｅｅｐ  ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ  ａｎａｌｙｓｉｓ  ｏｆ  ｅｘｏｓｏｍａｌ  ａｎｄ  ｎｏｎ−ｅｘｏｓｏｍａｌ  ｍｉＲＮＡ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｕｒｉｎｅ．Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．８６，４３３−４４４（２０１４）．
３２．    Ｘ．Ｄｕａｎ，Ｒ．Ｇａｏ，Ｐ．Ｘｉｅ，Ｔ．Ｃｏｈｅｎ−Ｋａｒｎｉ，Ｑ．Ｑｉｎｇ，Ｈ．Ｓ．Ｃｈｏｅ，Ｂ．Ｔｉａｎ，Ｘ．Ｊｉａｎｇ，Ｃ．Ｍ．Ｌｉｅｂｅｒ，Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｒｅｃｏｒｄｉｎｇｓ  ｏｆ  ａｃｔｉｏｎ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌｓ  ｂｙ  ａｎ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｎａｎｏｓｃａｌｅ  ｆｉｅｌｄ−ｅｆｆｅｃｔ  ｔｒａｎｓｉｓｔｏｒ．Ｎａｔ．Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌ．７，１７４−１７９（２０１２）．
３３．    Ｒ．Ｙａｎ，Ｊ．−Ｈ．Ｐａｒｋ，Ｙ．Ｃｈｏｉ，Ｃ．−Ｊ．Ｈｅｏ，Ｓ．−Ｍ．Ｙａｎｇ，Ｌ．Ｐ．Ｌｅｅ，Ｐ．Ｙａｎｇ，Ｎａｎｏｗｉｒｅ−ｂａｓｅｄ  ｓｉｎｇｌｅ−  ｃｅｌｌ  ｅｎｄｏｓｃｏｐｙ．Ｎａｔ．Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌ．７，１９１−１９６（２０１２）．
３４．    Ｔ．Ｙａｓｕｉ，Ｓ．Ｒａｈｏｎｇ，Ｋ．Ｍｏｔｏｙａｍａ，Ｔ．Ｙａｎａｇｉｄａ，Ｑ．Ｗｕ，Ｎ．Ｋａｊｉ，Ｍ．Ｋａｎａｉ，Ｋ．Ｄｏｉ，Ｋ．Ｎａｇａｓｈｉｍａ，Ｍ．Ｔｏｋｅｓｈｉ，Ｍ．Ｔａｎｉｇｕｃｈｉ，Ｓ．Ｋａｗａｎｏ，Ｔ．Ｋａｗａｉ，Ｙ．Ｂａｂａ，ＤＮＡ  ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｓｕｂｌｉｔｈｏｇｒａｐｈｉｃ−ｓｃａｌｅ  ｎａｎｏｗｉｒｅ  ａｒｒａｙ．ＡＣＳ  Ｎａｎｏ  ７，３０２９−３０３５（２０１３）．
３５．    Ｈ．Ｓｏ，Ｋ．Ｌｅｅ，Ｎ．Ｍｕｒｔｈｙ，Ａ．Ｐ．Ｐｉｓａｎｏ，Ａｌｌ−ｉｎ−ｏｎｅ  ｎａｎｏｗｉｒｅ−ｄｅｃｏｒａｔｅｄ  ｍｕｌｔｉｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｍｅｍｂｒａｎｅ  ｆｏｒ  ｒａｐｉｄ  ｃｅｌｌ  ｌｙｓｉｓ  ａｎｄ  ｄｉｒｅｃｔ  ＤＮＡ  ｉｓｏｌａｔｉｏｎ．ＡＣＳ  Ａｐｐｌ．Ｍａｔｅｒ．Ｉｎｔｅｒｆａｃｅｓ  ６，２０６９３−２０６９９（２０１４）．
３６．    Ｊ．Ｌｉｕ，Ｔ．−Ｍ．Ｆｕ，Ｚ．Ｃｈｅｎｇ，Ｇ．Ｈｏｎｇ，Ｔ．Ｚｈｏｕ，Ｌ．Ｊｉｎ，Ｍ．Ｄｕｖｖｕｒｉ，Ｚ．Ｊｉａｎｇ，Ｐ．Ｋｒｕｓｋａｌ，Ｃ．Ｘｉｅ，Ｚ．Ｓｕｏ，Ｙ．Ｆａｎｇ，Ｃ．Ｍ．Ｌｉｅｂｅｒ，Ｓｙｒｉｎｇｅ−ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ  ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃｓ．Ｎａｔ．Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌ．１０，６２９−６３６（２０１５）．
３７．    Ｑ．Ｓｈｅｎ，Ｌ．Ｘｕ，Ｌ．Ｚｈａｏ，Ｄ．Ｗｕ，Ｙ．Ｆａｎ，Ｙ．Ｚｈｏｕ，Ｗ．−Ｈ．ＯｕＹａｎｇ，Ｘ．Ｘｕ，Ｚ．Ｚｈａｎｇ，Ｍ．Ｓｏｎｇ，Ｔ．Ｌｅｅ，Ｍ．Ａ．Ｇａｒｃｉａ，Ｂ．Ｘｉｏｎｇ，Ｓ．Ｈｏｕ，Ｈ．−Ｒ．Ｔｓｅｎｇ，Ｘ．Ｆａｎｇ，Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｃａｐｔｕｒｅ  ａｎｄ  ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌｓ  ｕｓｉｎｇ  ａｐｔａｍｅｒ−ｍｏｄｉｆｉｅｄ  ｎａｎｏｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ．Ａｄｖ．Ｍａｔｅｒ．２５，２３６８−２３７３（２０１３）．
３８．    Ｊ．Ｋｉｍ，Ｊ．Ｗ．Ｈｏｎｇ，Ｄ．Ｐ．Ｋｉｍ，Ｊ．Ｈ．Ｓｈｉｎ，Ｉ．Ｐａｒｋ，Ｎａｎｏｗｉｒｅ−ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ  ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃ  ｄｅｖｉｃｅｓ  ｆｏｒ  ｆａｃｉｌｅ  ａｎｄ  ｒｅａｇｅｎｔ−ｆｒｅｅ  ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ  ｃｅｌｌ  ｌｙｓｉｓ．Ｌａｂ  Ｃｈｉｐ  １２，２９１４−２９２１（２０１２）．
３９．    Ｓ．Ｒａｈｏｎｇ，Ｔ．Ｙａｓｕｉ，Ｎ．Ｋａｊｉ，Ｙ．Ｂａｂａ，Ｒｅｃｅｎｔ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ  ｉｎ  ｎａｎｏｗｉｒｅｓ  ｆｏｒ  ｂｉｏ−  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ  ｆｒｏｍ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｔｏ  ｃｅｌｌｕｌａｒ  ｌｅｖｅｌｓ．Ｌａｂ  Ｃｈｉｐ  １６，１１２６−１１３８（２０１６）．
４０．    Ｓ．Ｚｈａｎｇ，Ｙ．Ｓｈｅｎ，Ｈ．Ｆａｎｇ，Ｓ．Ｘｕ，Ｊ．Ｓｏｎｇ，Ｚ．Ｌ．Ｗａｎｇ，Ｇｒｏｗｔｈ  ａｎｄ  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｏｒｄｅｒｅｄ  ＺｎＯ  ｎａｎｏｗｉｒｅ  ａｒｒａｙｓ  ｏｎ  ｇｅｎｅｒａｌ  ｆｌｅｘｉｂｌｅ  ｓｕｂｓｔｒａｔｅｓ．Ｊ．Ｍａｔｅｒ．Ｃｈｅｍ．２０，１０６０６−１０６１０（２０１０）．
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Ｍ．Ｗｈｉｔｅｓｉｄｅｓ，Ｃｈａｏｔｉｃ  ｍｉｘｅｒ  ｆｏｒ  ｍｉｃｒｏｃｈａｎｎｅｌｓ．Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２９５，６４７−６５１（２００２）．
４２．    Ｄ．Ｘｉａｏ，Ｊ．Ｏｈｌｅｎｄｏｒｆ，Ｙ．Ｃｈｅｎ，Ｄ．Ｄ．Ｔａｙｌｏｒ，Ｓ．Ｎ．Ｒａｉ，Ｓ．Ｗａｉｇｅｌ，Ｗ．Ｚａｃｈａｒｉａｓ，Ｈ．Ｈａｏ，Ｋ．Ｍ．ＭｃＭａｓｔｅｒｓ，Ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ  ｍＲＮＡ，ｍｉｃｒｏＲＮＡ  ａｎｄ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ｐｒｏｆｉｌｅｓ  ｏｆ  ｍｅｌａｎｏｍａ  ｅｘｏｓｏｍｅｓ．ＰＬＯＳ  ＯＮＥ  ７，ｅ４６８７４（２０１２）．
４３．    Ｄ．−Ｓ．Ｃｈｏｉ，Ｄ．−Ｙ．Ｃｈｏｉ，Ｂ．Ｓ．Ｈｏｎｇ，Ｓ．Ｃ．Ｊａｎｇ，Ｄ．−Ｋ．Ｋｉｍ，Ｊ．Ｌｅｅ，Ｙ．−Ｋ．Ｋｉｍ，Ｋ．Ｐ．Ｋｉｍ，Ｙ．Ｓ．Ｇｈｏ，Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  ｏｆ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｖｅｓｉｃｌｅｓ  ｄｅｒｉｖｅｄ  ｆｒｏｍ  ｈｕｍａｎ  ｐｒｉｍａｒｙ  ａｎｄ  ｍｅｔａｓｔａｔｉｃ  ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ．Ｊ．Ｅｘｔｒａｃｅｌｌ．Ｖｅｓｉｃｌｅｓ  １，１８７０４（２０１２）．
４４．    Ｊ．Ｒ．Ｅｄｇａｒ，Ｑ＆Ａ：Ｗｈａｔ  ａｒｅ  ｅｘｏｓｏｍｅｓ，ｅｘａｃｔｌｙ？  ＢＭＣ  Ｂｉｏｌ．１４，４６（２０１６）．
４５．    Ｊ．Ｗ．Ｅｌａｍ，Ｓ．Ｍ．Ｇｅｏｒｇｅ，Ｇｒｏｗｔｈ  ｏｆ  ＺｎＯ／Ａｌ２Ｏ３  ａｌｌｏｙ  ｆｉｌｍｓ  ｕｓｉｎｇ  ａｔｏｍｉｃ  ｌａｙｅｒ  ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ  ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ．Ｃｈｅｍ．Ｍａｔｅｒ．１５，１０２０−１０２８（２００３）．
４６．    Ｂ．Ｌｉｕ，Ｒ．Ｈｕ，Ｊ．Ｄｅｎｇ，Ｓｔｕｄｉｅｓ  ｏｎ  ａ  ｐｏｔｅｎｔｉｏｍｅｔｒｉｃ  ｕｒｅａ  ｂｉｏｓｅｎｓｏｒ  ｂａｓｅｄ  ｏｎ  ａｎ  ａｍｍｏｎｉａ  ｅｌｅｃｔｒｏｄｅ  ａｎｄ  ｕｒｅａｓｅ：Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚｅｄ  ｏｎ  ａ  ｇ−ａｌｕｍｉｎｕｍ  ｏｘｉｄｅ  ｍａｔｒｉｘ．Ａｎａｌ．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ  ３４１，１６１−１６９（１９９７）．
４７．    Ｓ．Ｘｕ，Ｚ．Ｌ．Ｗａｎｇ，Ｏｎｅ−ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌ  ＺｎＯ  ｎａｎｏｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ：Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  ｇｒｏｗｔｈ  ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ．Ｎａｎｏ  Ｒｅｓ．４，１０１３−１０９８（２０１１）．
４８．    Ｊ．Ｚａｎｇ，Ｃ．Ｍ．Ｌｉ，Ｘ．Ｃｕｉ，Ｊ．Ｗａｎｇ，Ｘ．Ｓｕｎ，Ｈ．Ｄｏｎｇ，Ｃ．Ｑ．Ｓｕｎ，Ｔａｉｌｏｒｉｎｇ  ｚｉｎｃ  ｏｘｉｄｅ  ｎａｎｏｗｉｒｅｓ  ｆｏｒ  ｈｉｇｈ  ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ  ａｍｐｅｒｏｍｅｔｒｉｃ  ｇｌｕｃｏｓｅ  ｓｅｎｓｏｒ．Ｅｌｅｃｔｒｏａｎａｌｙｓｉｓ  １９，１００８−１０１４（２００７）．
４９．    Ｍ．Ｃ．Ｄｅｒｅｇｉｂｕｓ，Ｆ．Ｆｉｇｌｉｏｌｉｎｉ，Ｓ．Ｄ’  Ａｎｔｉｃｏ，Ｐ．Ｍ．Ｍａｎｚｉｎｉ，Ｃ．Ｐａｓｑｕｉｎｏ，Ｍ．Ｄｅ  Ｌｅｎａ，Ｃ．Ｔｅｔｔａ，Ｍ．Ｆ．Ｂｒｉｚｚｉ，Ｇ．Ｃａｍｕｓｓｉ，Ｃｈａｒｇｅ−ｂａｓｅｄ  ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｖｅｓｉｃｌｅｓ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．３８，１３５９−１３６６（２０１６）．
５０．    Ｔ．Ｓ．Ｓｃｈｌａｐｐｉ，Ｓ．Ｅ．ＭｃＣａｌｌａ，Ｎ．Ｇ．Ｓｃｈｏｅｐｐ，Ｒ．Ｆ．Ｉｓｍａｇｉｌｏｖ，Ｆｌｏｗ−ｔｈｒｏｕｇｈ  ｃａｐｔｕｒｅ  ａｎｄ  ｉｎ  ｓｉｔｕ  ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｃａｎ  ｅｎａｂｌｅ  ｒａｐｉｄ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｆｅｗ  ｓｉｎｇｌｅ  ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ  ｏｆ  ｎｕｃｌｅｉｃ  ａｃｉｄｓ  ｆｒｏｍ  ｓｅｖｅｒａｌ  ｍｉｌｌｉｌｉｔｅｒｓ  ｏｆ  ｓｏｌｕｔｉｏｎ．Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．８８，７６４７−７６５３（２０１６）．
５１．    Ｊ．Ａ．Ｈａｎｌｅｙ，Ｂ．Ｊ．ＭｃＮｅｉｌ，Ｔｈｅ  ｍｅａｎｉｎｇ  ａｎｄ  ｕｓｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｒｅａ  ｕｎｄｅｒ  ａ  ｒｅｃｅｉｖｅｒ  ｏｐｅｒａｔｉｎｇ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ（ＲＯＣ）ｃｕｒｖｅ．Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ  １４３，２９−３６（１９８２）．
５２．    Ｚ．Ｗａｎｇ，Ｂ．Ｍａ，Ｘ．Ｊｉ，Ｙ．Ｄｅｎｇ，Ｔ．Ｚｈａｎｇ，Ｘ．Ｚｈａｎｇ，Ｈ．Ｇａｏ，Ｈ．Ｓｕｎ，Ｈ．Ｗｕ，Ｘ．Ｃｈｅｎ，Ｒ．Ｚｈａｏ，ＭｉｃｒｏＲＮＡ−３７８−５ｐ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＢＲＡＦ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ  Ｉｎｔ．１５，４０（２０１５）．
５３．    Ｈ．−Ｌ．Ｍｉａｏ，Ｃ．−Ｊ．Ｌｅｉ，Ｚ．−Ｄ．Ｑｉｕ，Ｚ．−Ｋ．Ｌｉｕ，Ｒ．Ｌｉ，Ｓ．−Ｔ．Ｂａｏ，Ｍ．−Ｙ．Ｌｉ，ＭｉｃｒｏＲＮＡ−５２０ｃ−３ｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎｖａｓｉｏｎ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｅｌｌ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｂｙ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｇｌｙｐｉｃａｎ−３．Ｈｅｐａｔｏｌ．Ｒｅｓ．４４，３３８−３４８（２０１４）．
５４．    Ｓ．Ｌｕ，Ｑ．Ｚｈｕ，Ｙ．Ｚｈａｎｇ，Ｗ．Ｓｏｎｇ，Ｍ．Ｊ．Ｗｉｌｓｏｎ，Ｐ．Ｌｉｕ，Ｄｕａｌ−ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ｏｆ  ｍｉＲ−３７３  ａｎｄ  ｍｉＲ−  ５２０ｃ  ｂｙ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｙ  ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ  ｔｈｅ  ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ＭＭＰ２  ａｎｄ  ＭＭＰ９．Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２３０，１８６２−１８７０（２０１５）．
５５．    Ｋ．Ｍａｚａｎ−Ｍａｍｃｚａｒｚ，Ｘ．Ｆ．Ｚｈａｏ，Ｂ．Ｄａｉ．Ｊ．Ｊ．Ｓｔｅｉｎｈａｒｄｔ，Ｒ．Ｊ．Ｐｅｒｏｕｔｋａ，Ｋ．Ｌ．Ｂｅｒｋ，Ａ．Ｌ．Ｌａｎｄｏｎ，Ｍ．Ｓａｄｏｗｓｋａ，Ｙ．Ｚｈａｎｇ，Ｅ．Ｌｅｈｒｍａｎｎ，Ｋ．Ｇ．Ｂｅｃｋｅｒ，Ｒ．Ｓｈａｋｎｏｖｉｃｈ，Ｚ．Ｌｉｕ，Ｒ．Ｂ．Ｇａｒｔｅｎｈａｕｓ，Ｄｏｗｎ−ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｅＩＦ４ＧＩＩ  ｂｙ  ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ  ｒｅｐｒｅｓｓｅｓ  ｄｉｆｆｕｓｅ  ｌａｒｇｅ  Ｂ  ｃｅｌｌ  ｌｙｍｐｈｏｍａ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．ＰＬＯＳ  Ｇｅｎｅｔ．１０，ｅ１００４１０５（２０１４）．
５６．    Ｃ．−Ｊ．Ｌｅｉ，Ｃ．Ｙａｏ，Ｄ．−Ｋ．Ｌｉ，Ｚ．−Ｘ．Ｌｏｎｇ，Ｙ．Ｌｉ，Ｄ．Ｔａｏ，Ｙ．−Ｐ．Ｌｉｏｕ，Ｊ．−Ｚ．Ｚｈａｎｇ，Ｎ．Ｌｉｕ，Ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｃｏ−ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｉＲ−５２０ｃ−３ｐ  ａｎｄ  ｍｉＲ−１３２  ｏｎ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｏｆ  ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  Ｈｕｈ７．Ａｓｉａｎ  Ｐａｃ．Ｊ．Ｔｒｏｐ．Ｍｅｄ．９，８９８−９０２（２０１６）．
５７．    Ｇ．Ｍｕｄｄｕｌｕｒｕ，Ｋ．Ｉｌｍ，Ｓ．Ｆｕｃｈｓ，Ｕ．Ｓｔｅｉｎ，Ｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃ  ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ  ｏｆ  ｍｉＲ−５２０ｃ  ｌｅａｄｓ  ｔｏ  ｉｎｄｕｃｅｄ  Ｓ１００Ａ４  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ｃａｎｃｅｒ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ  ８，２１０８１−２１０９４（２０１７）．
５８．    Ｒ．Ｚｈａｎｇ，Ｊ．Ｚｈａｏ，Ｊ．Ｘｕ，Ｊ．Ｗａｎｇ，Ｊ．Ｊｉａ，ｍｉＲ−５２６ｂ−３ｐ  ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ａｓ  ａ  ｔｕｍｏｒ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ  ｉｎ  ｃｏｌｏｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｂｙ  ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ  ＨＩＦ−１ａ．Ａｍ．Ｊ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｒｅｓ．８，２７８３−２７８９（２０１６）．
５９．    Ｌ．Ｓｕ，Ｄ．Ｈａｎ，Ｊ．Ｗｕ，Ｘ．Ｈｕｏ，Ｓｋｐ２  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ｎｏｎ−ｓｍａｌｌ  ｃｅｌｌ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｂｙ  Ｍｅｇ３  ａｎｄ  ｍｉＲ−３１６３．Ｔｕｍｏｕｒ  Ｂｉｏｌ．３７，３９２５−３９３１（２０１６）．
６０．    Ｔ．Ｗａｎｇ，Ｊ．Ｈｏｕ，Ｚ．Ｌｉ，Ｚ．Ｚｈｅｎｇ，Ｊ．Ｗｅｉ，Ｄ．Ｓｏｎｇ，Ｔ．Ｈｕ，Ｑ．Ｗｕ，Ｊ．Ｙ．Ｙａｎｇ，Ｊ．−ｃ．Ｃａｉ，ｍｉＲ−１５ａ−  ３ｐ  ａｎｄ  ｍｉＲ−１６−１−３ｐ  ｎｅｇａｔｉｖｅｌｙ  ｒｅｇｕｌａｔｅ  Ｔｗｉｓｔ１  ｔｏ  ｒｅｐｒｅｓｓ  ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌ  ｉｎｖａｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｓｃｉ．１３，１２２−１３４（２０１７）．
６１．    Ｑ．−ｙ．Ｃｈｅｎ，Ｄ．−ｍ．Ｊｉａｏ，Ｌ．Ｙａｎ，Ｙ．−ｑ．Ｗｕ，Ｈ．−ｚ．Ｈｕ，Ｊ．Ｓｏｎｇ，Ｊ．Ｙａｎ，Ｌ．−ｊ．Ｗｕ，Ｌ．−ｑ．Ｘｕ，Ｊ．−ｇ．Ｓｈｉ，Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ  ｇｅｎｅ  ａｎｄ  ｍｉｃｒｏＲＮＡ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ  ｒｅｖｅａｌｓ  ｍｉＲ−２０６  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ＭＥＴ  ｉｎ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｓｙｓｔ．１１，２２９０−２３０２（２０１５）．
６２．    Ｌ．Ｚｈｅｎｇ，Ｗ．Ｊｉａｏ，Ｈ．Ｓｏｎｇ，Ｈ．Ｑｕ，Ｄ．Ｌｉ，Ｈ．Ｍｅｉ，Ｙ．Ｃｈｅｎ，Ｆ．Ｙａｎｇ，Ｈ．Ｌｉ，Ｋ．Ｈｕａｎｇ，Ｑ．Ｔｏｎｇ，ｍｉＲＮＡ−５５８  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ  ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ａｔｔｅｎｕａｔｉｎｇ  Ｓｍａｄ４−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｒｅｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｈｅｐａｒａｎａｓｅ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｉｓ．７，ｅ２３８２（２０１６）．
６３．    Ｙ．Ｓｕｎ，Ｃ．Ｃｈｅｎ，Ｐ．Ｚｈａｎｇ，Ｈ．Ｘｉｅ，Ｌ．Ｈｏｕ，Ｚ．Ｈｕｉ，Ｙ．Ｘｕ，Ｑ．Ｄｕ，Ｘ．Ｚｈｏｕ，Ｂ．Ｓｕ，Ｗ．Ｇａｏ，Ｒｅｄｕｃｅｄ  ｍｉＲ−３１２７−５ｐ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ＮＳＣＬＣ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ／ｉｎｖａｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ  ｔｏ  ｄａｓａｔｉｎｉｂ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ｖｉａ  ｔｈｅ  ｃ−Ａｂｌ／Ｒａｓ／ＥＲＫ  ｐａｔｈｗａｙ．Ｓｃｉ．Ｒｅｐ．４，６５２７（２０１４）．
６４．    Ｙ．Ｆａｎｇ，Ｊ．Ｘｉａｎｇ，Ｚ．Ｃｈｅｎ，Ｘ．Ｇｕ，Ｚ．Ｌｉ，Ｆ．Ｔａｎｇ，Ｚ．Ｚｈｏｕ，ｍｉＲＮＡ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｐｒｏｆｉｌｅ  ｏｆ  ｃｏｌｏｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ  ｃｏｍｐａｒｅｄ  ｔｏ  ｎｏｎ−ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ  ｕｓｉｎｇ  ｔｈｅ  ＳＷ１１１６  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ．Ｏｎｃｏｌ．Ｒｅｐ．２８，２１１５−２１２４（２０１２）．
６５．    Ｘ．Ｈｕａｎｇ，Ｍ．Ｈｕａｎｇ，Ｌ．Ｋｏｎｇ，Ｙ．Ｌｉ，ｍｉＲ−３７２  ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  ｔｕｍｏｕｒ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎｖａｓｉｏｎ  ｂｙ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＩＧＦ２ＢＰ１  ｉｎ  ｒｅｎａｌ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆ．４８，５９３−５９９（２０１５）．
６６．    Ｙ．−Ｃ．Ｌｕ，Ａ．−Ｊ．Ｃｈｅｎｇ，Ｌ．−Ｙ．Ｌｅｅ，Ｇ．−Ｒ．Ｙｏｕ，Ｙ．−Ｌ．Ｌｉ，Ｈ．−Ｙ．Ｃｈｅｎ，Ｊ．Ｔ．Ｃｈａｎｇ，ＭｉＲ−５２０ｂ  ａｓ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｔａｒｇｅｔ  ｆｏｒ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇ  ｓｔｅｍｎｅｓｓ  ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ  ｏｆ  ｈｅａｄ−ｎｅｃｋ  ｃａｎｃｅｒ  ｂｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ  ＣＤ４４．Ｓｃｉ．Ｒｅｐ．７，２０４２（２０１７）．
６７．    Ａ．Ｄｒｕｚ，Ｙ．−Ｃ．Ｃｈｅｎ，Ｒ．Ｇｕｈａ，Ｍ．Ｂｅｔｅｎｂａｕｇｈ，Ｓ．Ｅ．Ｍａｒｔｉｎ，Ｊ．Ｓｈｉｌｏａｃｈ，Ｌａｒｇｅ−ｓｃａｌｅ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ  ａ  ｎｏｖｅｌ  ｍｉｃｒｏＲＮＡ，ｍｉＲ−１５ａ−３ｐ，ｗｈｉｃｈ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅｓ．ＲＮＡ  Ｂｉｏｌ．１０，２８７−３００（２０１３）．
６８．    Ｚ．Ｗｕ，Ｙ．Ｗｕ，Ｙ．Ｔｉａｎ，Ｘ．Ｓｕｎ，Ｊ．Ｌｉｕ，Ｈ．Ｒｅｎ，Ｃ．Ｌｉａｎｇ，Ｌ．Ｓｏｎｇ，Ｈ．Ｈｕ，Ｌ．Ｗａｎｇ，Ｂ．Ｊｉａｏ，Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｅｆｆｅｃｔｓ  ｏｆ  ｍｉＲ−３４ｃ−３ｐ  ａｎｄ  ｍｉＲ−３４ｃ−５ｐ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ａｎｄ  ｉｎｖａｓｉｏｎ  ｏｆ  ｇｌｉｏｍａ  ｃｅｌｌｓ．Ｏｎｃｏｌ．Ｌｅｔｔ．６，１４４７−１４５２（２０１３）．
６９．    Ｚ．Ｃｈｅｎｇ，Ｆ．Ｌｉｕ，Ｈ．Ｚｈａｎｇ，Ｘ．Ｌｉ，Ｙ．Ｌｉ，Ｊ．Ｌｉ，Ｆ．Ｌｉｕ，Ｙ．Ｃａｏ，Ｌ．Ｃａｏ，Ｆ．Ｌｉ，ｍｉＲ−１３５ａ  ｉｎｈｉｂｉｔｓ  ｔｕｍｏｒ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  ａｎｄ  ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ  ｂｙ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＦＡＫ  ｐａｔｈｗａｙ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ  ８，３１１５３−３１１６８（２０１７）．
７０．    Ｃ．Ｌｉｕ，Ｇ．Ｌｉ，Ｓ．Ｒｅｎ，Ｚ．Ｓｕ，Ｙ．Ｗａｎｇ，Ｙ．Ｔｉａｎ，Ｙ．Ｌｉｕ，Ｙ．Ｑｉｕ，ｍｉＲ−１８５−３ｐ  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ｔｈｅ  ｉｎｖａｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  ｏｆ  ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｂｙ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＷＮＴ２Ｂ  ｉｎ  ｖｉｔｒｏ．Ｏｎｃｏｌ．Ｌｅｔｔ．１３，２６３１−２６３６（２０１７）．
７１．    Ｒ．Ｚｈａｎｇ，Ｈ．Ｌｅｎｇ，Ｊ．Ｈｕａｎｇ，Ｙ．Ｄｕ，Ｙ．Ｗａｎｇ，Ｗ．Ｚａｎｇ，Ｘ．Ｃｈｅｎ，Ｇ．Ｚｈａｏ，ｍｉＲ−３３７  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ｔｈｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎｖａｓｉｏｎ  ｉｎ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｄｕｃｔａｌ  ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｂｙ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＨＯＸＢ７．Ｄｉａｇｎ．Ｐａｔｈｏｌ．９，１７１（２０１４）．
７２．    Ｍ．Ｌｕ，Ｘ．Ｚｈｏｕ，Ｃ．−Ｇ．Ｚｈｅｎｇ，Ｆ．−Ｊ．Ｌｉｕ，Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ  ｏｆ  ｍｉＲ−９６，ｍｉＲ−５８４  ａｎｄ  ｍｉＲ−  ４２２ａ  ｉｎ  ｃｏｌｏｎ  ｃａｎｃｅｒ  ａｎｄ  ｔｈｅｉｒ  ｐｏｔｅｎｔｉａｌ  ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ  ｉｎ  ｃｏｌｏｎ  ｃａｎｃｅｒ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｔｒｏｐ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１５，２５３５−２５４２（２０１６）．
７３．    Ｚ．Ｚｈａｏ，Ｘ．Ｍａ，Ｔ．−Ｈ．Ｈｓｉａｏ，Ｇ．Ｌｉｎ，Ａ．Ｋｏｓｔｉ，Ｘ．Ｙｕ，Ｕ．Ｓｕｒｅｓｈ，Ｙ．Ｃｈｅｎ，Ｇ．Ｅ．Ｔｏｍｌｉｎｓｏｎ，Ａ．Ｐｅｒｔｓｅｍｌｉｄｉｓ，Ｌ．Ｄｕ，Ａ  ｈｉｇｈ−ｃｏｎｔｅｎｔ  ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ  ｓｃｒｅｅｎ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｓ  ｎｏｖｅｌ  ｍｉｃｒｏＲＮＡｓ  ｔｈａｔ  ｒｅｇｕｌａｔｅ  ｎｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｃｅｌｌ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ  ５，２４９９−２５１２（２０１４）．
７４．    Ｗ．Ｃｈｅｎ，Ｚ．Ｔａｎｇ，Ｙ．Ｓｕｎ，Ｙ．Ｚｈａｎｇ，Ｘ．Ｗａｎｇ，Ｚ．Ｓｈｅｎ，Ｆ．Ｌｉｕ，Ｘ．Ｑｉｎ，ｍｉＲＮＡ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｐｒｏｆｉｌｅ  ｉｎ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒｓ  ａｎｄ  ｐａｉｒｅｄ  ｌｙｍｐｈ  ｎｏｄｅ  ｍｅｔａｓｔａｓｅｓ  ｉｎｄｉｃａｔｅｓ  ｔｈａｔ  ｍｉＲ−  １０ａ  ｐｌａｙｓ  ａ  ｒｏｌｅ  ｉｎ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  ｆｒｏｍ  ｐｒｉｍａｒｙ  ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｏ  ｌｙｍｐｈ  ｎｏｄｅｓ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．Ｍｅｄ．３，３５１−３５６（２０１２）．
７５．    Ｙ．Ｌｉ，Ｗ．Ｈａｎ，Ｔ．−Ｔ．Ｎｉ，Ｌ．Ｌｕ，Ｍ．Ｈｕａｎｇ，Ｙ．Ｚｈａｎｇ，Ｈ．Ｃａｏ，Ｈ．−Ｑ．Ｚｈａｎｇ，Ｗ．Ｌｕｏ，Ｈ．Ｌｉ，Ｋｎｏｃｋｄｏｗｎ  ｏｆ  ｍｉｃｒｏＲＮＡ−１３２３  ｒｅｓｔｏｒｅｓ  ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ  ｔｏ  ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ＰＲＫＤＣ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｒａｄｉａｔｉｏｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ．Ｏｎｃｏｌ．Ｒｅｐ．３３，２８２１−２８２８（２０１５）．
７６．    Ａ．Ｒ．Ｌｅｅ，Ｊ．Ｐａｒｋ，Ｋ．Ｊ．Ｊｕｎｇ，Ｓ．Ｈ．Ｊｅｅ，Ｓ．Ｊ．Ｋｉｍ−Ｙｏｏｎ，Ｇｅｎｅｔｉｃ  ｖａｒｉａｔｉｏｎ  ｒｓ７９３０  ｉｎ  ｔｈｅ  ｍｉＲ−４２７３−５ｐ  ｔａｒｇｅｔ  ｓｉｔｅ  ｉｓ  ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ａ  ｒｉｓｋ  ｏｆ  ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ｃａｎｃｅｒ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔｓ  Ｔｈｅｒ．９，６８８５−６８９５（２０１６）．
７７．    Ｆ．Ｍｉａｏ，Ｊ．Ｚｈｕ，Ｙ．Ｃｈｅｎ，Ｎ．Ｔａｎｇ，Ｘ．Ｗａｎｇ，Ｘ．Ｌｉ，ＭｉｃｒｏＲＮＡ−１８３−５ｐ  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ｔｈｅ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｉｎｖａｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｃｅｌｌｓ．Ｏｎｃｏｌ．Ｌｅｔｔ．１１，１３４−１４０（２０１６）．
７８．    Ｈ．Ｒ．Ｍｏｄｙ，Ｓ．Ｗ．Ｈｕｎｇ，Ｒ．Ｋ．Ｐａｔｈａｋ，Ｊ．Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ｚ．Ｃｒｕｚ−Ｍｏｎｓｅｒｒａｔｅ，Ｒ．Ｇｏｖｉｎｄａｒａｊａｎ，ｍｉＲ−２０２  ｄｉｍｉｎｉｓｈｅｓ  ＴＧＦｂ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ  ａｎｄ  ａｔｔｅｎｕａｔｅｓ  ＴＧＦｂ１−ｉｎｄｕｃｅｄ  ＥＭＴ  ｉｎ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｃａｎｃｅｒ．Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．１５，１０２９−１０３９（２０１７）．
７９．    Ｓ．Ｊｏｓｓｏｎ，Ｍ．Ｇｕｒｕｒａｊａｎ，Ｐ．Ｈｕ，Ｃ．Ｓｈａｏ，Ｇ．Ｃ．−Ｙ．Ｃｈｕ，Ｈ．Ｅ．Ｚｈａｕ，Ｃ．Ｌｉｕ，Ｋ．Ｌａｏ，Ｃ．−Ｌ．Ｌｕ，Ｙ．−Ｔ．Ｌｕ，Ｊ．Ｌｉｃｈｔｅｒｍａｎ，Ｓ．Ｎａｎｄａｎａ，Ｑ．Ｌｉ，Ａ．Ｒｏｇａｔｋｏ，Ｄ．Ｂｅｒｅｌ，Ｅ．Ｍ．Ｐｏｓａｄａｓ，Ｌ．Ｆａｚｌｉ，Ｄ．Ｓａｒｅｅｎ，Ｌ．Ｗ．Ｋ．Ｃｈｕｎｇ，ｍｉＲ−４０９−３ｐ／−５ｐ  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ，ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ−ｔｏ−ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ  ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ，ａｎｄ  ｂｏｎｅ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ．Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０，４６３６−４６４６（２０１４）．
８０．    Ｘ．Ｓｈｉ，Ｆ．Ｔｅｎｇ，Ｄｏｗｎ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｍｉＲ−２８−５ｐ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  ｔｕｍｏｒ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｍｉｇｒａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｉｎｓｕｌｉｎ−ｌｉｋｅ  ｇｒｏｗｔｈ  ｆａｃｔｏｒ−１（ＩＧＦ−１）．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．４０８，２８３−２９３（２０１５）．
８１．    Ｙ．Ｓｕｎ，Ｊ．Ｚｈａｏ，Ｘ．Ｙｉｎ，Ｘ．Ｙｕａｎ，Ｊ．Ｇｕｏ，Ｊ．Ｂｉ，ｍｉＲ−２９７  ａｃｔｓ  ａｓ  ａｎ  ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ｂｙ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＧＰＣ５  ｉｎ  ｌｕｎｇ  ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｃｅｌｌ  Ｐｒｏｌｉｆ．４９，６３６−６４３（２０１６）．
８２．    Ｈ．−ｑ．Ｌｉａｎｇ，Ｒ．−ｊ．Ｗａｎｇ，Ｃ．−ｆ．Ｄｉａｏ，Ｊ．−ｗ．Ｌｉ，Ｊ．−ｌ．Ｓｕ，Ｓ．Ｚｈａｎｇ，Ｔｈｅ  ＰＴＴＧ１−ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｍｉＲＮＡｓ  ｍｉＲ−３２９，ｍｉＲ−３００，ｍｉＲ−３８１，ａｎｄ  ｍｉＲ−６５５  ｉｎｈｉｂｉｔ  ｐｉｔｕｉｔａｒｙ  ｔｕｍｏｒ  ｃｅｌｌ  ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｅｓｉｓ  ａｎｄ  ａｒｅ  ｉｎｖｏｌｖｅｄ  ｉｎ  ａ  ｐ５３／ＰＴＴＧ１  ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｆｅｅｄｂａｃｋ  ｌｏｏｐ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ  ６，２９４１３−２９４２７（２０１５）．
８３．    Ａ．Ｍｅｓｃｉ，Ｘ．Ｈｕａｎｇ，Ｓ．Ｔａｅｂ，Ｓ．Ｊａｈａｎｇｉｒｉ，Ｙ．Ｋｉｍ，Ｅ．Ｆｏｋａｓ，Ｊ．Ｂｒｕｃｅ，Ｈ．Ｓ．Ｌｅｏｎｇ，Ｓ．Ｋ．Ｌｉｕ，Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ＣＣＢＥ１  ｂｙ  ｍｉＲ−３３０−３ｐ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ．Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ  １１６，１３５０−１３５７（２０１７）．
８４．    Ｌ．Ｙｕ，Ｘ．Ｇｏｎｇ，Ｌ．Ｓｕｎ，Ｈ．Ｙａｏ，Ｂ．Ｌｕ，Ｌ．Ｚｈｕ，ｍｉＲ−４５４  ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ  ａｓ  ａｎ  ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ｂｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ  ＣＨＤ５  ｉｎ  ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ  ６，３９２２５−３９２３４（２０１５）．
８５．    Ｃ．Ｌｉｕ，Ｃ．Ｗａｎｇ，Ｊ．Ｗａｎｇ，Ｈ．Ｈｕａｎｇ，ｍｉＲ−１２９７  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ｂｙ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ  ＲＢ１  ｉｎ  ｌｉｖｅｒ  ｃａｎｃｅｒ．Ｏｎｃｏｌ．Ｌｅｔｔ．１２，５１７７−５１８２（２０１６）．
８６．    Ｍ．Ｓｈａｏ，Ｙ．Ｇｅｎｇ，Ｐ．Ｌｕ，Ｙ．Ｘｉ，Ｓ．Ｗｅｉ，Ｌ．Ｗａｎｇ，Ｑ．Ｆａｎ，Ｗ．Ｍａ，ｍｉＲ−４２９５  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎｖａｓｉｏｎ  ｉｎ  ａｎａｐｌａｓｔｉｃ  ｔｈｙｒｏｉｄ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｖｉａ  ＣＤＫＮ１Ａ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．４６４，１３０９−１３１３（２０１５）．
８７．    Ｙ．Ａｎ，Ｚ．Ｚｈａｎｇ，Ｙ．Ｓｈａｎｇ，Ｘ．Ｊｉａｎｇ，Ｊ．Ｄｏｎｇ，Ｐ．Ｙｕ，Ｙ．Ｎｉｅ，Ｑ．Ｚｈａｏ，ｍｉＲ−２３ｂ−３ｐ  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ｔｈｅ  ｃｈｅｍｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｏｆ  ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＡＴＧ１２  ａｎｄ  ＨＭＧＢ２．Ｃｅｌｌ  Ｄｅａｔｈ  Ｄｉｓ．６，ｅ１７６６（２０１５）．
８８．    Ｃ．Ｔ．Ｄ．Ｄｉｃｋｍａｎ，Ｊ．Ｌａｗｓｏｎ，Ｊ．Ｊａｂａｌｅｅ，Ｓ．Ａ．ＭａｃＬｅｌｌａｎ，Ｎ．Ｅ．ＬｅＰａｒｄ，Ｋ．Ｌ．Ｂｅｎｎｅｗｉｔｈ，Ｃ．Ｇａｒｎｉｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｖｅｓｉｃｌｅ  ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ  ｏｆ  ｍｉＲ−１４２−３ｐ  ｂｙ  ｏｒａｌ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ｂｏｔｈ  ｉｎｔｅｒｎａｌ  ａｎｄ  ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ  ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ．Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ  ８，１５２５２−１５２６６（２０１７）．
８９．    Ｌ．Ｊｉｎ，Ｘ．Ｌｉ，Ｙ．Ｌｉ，Ｚ．Ｚｈａｎｇ，Ｔ．Ｈｅ，Ｊ．Ｈｕ，Ｊ．Ｌｉｕ，Ｍ．Ｃｈｅｎ，Ｍ．Ｓｈｉ，Ｚ．Ｊｉａｎｇ，Ｙ．Ｇｕｉ．Ｓ．Ｙａｎｇ，Ｘ．Ｍａｏ，Ｙ．Ｌａｉ，Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍｉＲ−１９５−３ｐ  ａｓ  ａｎ  ｏｎｃｏｇｅｎｅ  ｉｎ  ＲＣＣ．Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．Ｒｅｐ．１５，１９１６−１９２４（２０１７）．
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ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｏｃｔ４  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ａｎｄ  ｃａｕｓｅｓ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．ＰＬＯＳ  ＯＮＥ  １２，ｅ０１７４９１２（２０１７）．
９１．    Ｙ．−Ｈ．Ｎａｎ，Ｊ．Ｗａｎｇ，Ｙ．Ｗａｎｇ，Ｐ．−Ｈ．Ｓｕｎ，Ｙ．−Ｐ．Ｈａｎ，Ｌ．Ｆａｎ，Ｋ．−Ｃ．Ｗａｎｇ，Ｆ．−Ｊ．Ｓｈｅｎ，Ｗ．−Ｈ．Ｗａｎｇ，ＭｉＲ−４２９５  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ｃｅｌｌ  ｇｒｏｗｔｈ  ｉｎ  ｂｌａｄｄｅｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｂｙ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＢＴＧ１．Ａｍ．Ｊ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｒｅｓ．９，１９６０（２０１７）．
９２．    Ｎ．Ｎａｂａｖｉ，Ｎ．Ｒ．Ｎ．Ｓａｉｄｙ，Ｅ．Ｖｅｎａｌａｉｎｅｎ，Ａ．Ｈａｅｇｅｒｔ，Ａ．Ｐａｒｏｌｉａ，Ｈ．Ｘｕｅ，Ｙ．Ｗａｎｇ，Ｒ．Ｗｕ，Ｘ．Ｄｏｎｇ，Ｃ．Ｃｏｌｌｉｎｓ，Ｆ．Ｃｒｅａ，Ｙ．Ｗａｎｇ，ｍｉＲ−１００−５ｐ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｉｎｄｕｃｅｓ  ａｐｏｐｔｏｓｉｓ  ｉｎ  ｄｏｒｍａｎｔ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ  ａｎｄ  ｐｒｅｖｅｎｔｓ  ｔｈｅ  ｅｍｅｒｇｅｎｃｅ  ｏｆ  ｃａｓｔｒａｔｉｏｎ−ｒｅｓｉｓｔａｎｔ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ．Ｓｃｉ．Ｒｅｐ．７，４０７９（２０１７）．
９３．    Ｄ．Ｄｅｎｇ，Ｌ．Ｗａｎｇ，Ｙ．Ｃｈｅｎ，Ｂ．Ｌｉ，Ｌ．Ｘｕｅ，Ｎ．Ｓｈａｏ，Ｑ．Ｗａｎｇ，Ｘ．Ｘｉａ，Ｙ．Ｙａｎｇ，Ｆ．Ｚｈｉ，ＭｉｃｒｏＲＮＡ−１２４−３ｐ  ｒｅｇｕｌａｔｅｓ  ｃｅｌｌ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ，ｉｎｖａｓｉｏｎ，ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，ａｎｄ  ｂｉｏｅｎｅｒｇｅｔｉｃｓ  ｂｙ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＰＩＭ１  ｉｎ  ａｓｔｒｏｃｙｔｏｍａ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｓｃｉ．１０７，８９９−９０７（２０１６）．
９４．    Ｔ．Ｃｈｉｙｏｍａｒｕ，Ｓ．Ｙａｍａｍｕｒａ，Ｍ．Ｓ．Ｚａｍａｎ，Ｓ．Ｍａｊｉｄ，Ｇ．Ｄｅｎｇ，Ｖ．Ｓｈａｈｒｙａｒｉ，Ｓ．Ｓａｉｎｉ，Ｈ．Ｈｉｒａｔａ，Ｋ．Ｕｅｎｏ，Ｉ．Ｃｈａｎｇ，Ｙ．Ｔａｎａｋａ，Ｚ．Ｌ．Ｔａｂａｔａｂａｉ，Ｈ．Ｅｎｏｋｉｄａ，Ｍ．Ｎａｋａｇａｗａ，Ｒ．Ｄａｈｉｙａ，Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｇｒｏｗｔｈ  ｔｈｒｏｕｇｈ  ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ  ｏｆ  ｏｎｃｏｇｅｎｉｃ  ｍｉｃｒｏＲＮＡ−１５１．ＰＬＯＳ  ＯＮＥ  ７，ｅ４３８１２（２０１２）．
９５．    Ｚ．Ｘｕｅ，Ｊ．Ｚｈａｏ，Ｌ．Ｎｉｕ，Ｇ．Ａｎ，Ｙ．Ｇｕｏ，Ｌ．Ｎｉ，Ｕｐ−ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ＭｉＲ−３００  ｐｒｏｍｏｔｅｓ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｉｎｖａｓｉｏｎ  ｏｆ  ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ  ｂｙ  ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ＢＲＤ７．ＰＬＯＳ  ＯＮＥ  １０，ｅ０１２７６８２（２０１５）．
９６．    Ｄ．Ａ．Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ，Ｂ．Ｂ．Ｇｒｅｅｎ，Ｊ．Ｄ．Ｓｅｉｇｎｅ，Ａ．Ｒ．Ｓｃｈｎｅｄ，Ｃ．Ｊ．Ｍａｒｓｉｔ，ＭｉｃｒｏＲＮＡ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ  ｆｒｏｍ  ｍａｔｃｈｅｄ  ｔｕｍｏｒ  ａｎｄ  ｂｉｏ−ｆｌｕｉｄｓ  ｉｎ  ｂｌａｄｄｅｒ  ｃａｎｃｅｒ．Ｍｏｌ．Ｃａｎｃｅｒ  １４，１９４（２０１５）．【００７２】
【表３】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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