(57)【要約】【課題】麹菌発酵抽出物を有効成分とした人の肌の美容に関与する遺伝子の発現を促進する新規の美肌用遺伝子発現促進剤を提供する。【解決手段】美肌用遺伝子発現促進剤は、黄麹菌Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅの発酵抽出物を有効成分とし、人の肌の美容に関与するＢＭＰ−２、ＴＧＦＢ１、ＣＬＤＮ７、ＨＢ−ＥＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＬＣＥ３Ｄ及びＰＰＡＲ−Ｄの少なくとも１つ以上の美肌用遺伝子を発現させるものである。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
麹菌発酵抽出物を有効成分とし、人の肌の美容に関与するＢＭＰ−２、ＴＧＦＢ１、ＣＬＤＮ７、ＨＢ−ＥＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＬＣＥ３Ｄ及びＰＰＡＲ−Ｄの少なくとも１つ以上の美肌用遺伝子を発現させる発現促進剤を含有する美容組成物。
【請求項２】
請求項１に記載の美容組成物において、
前記麹菌発酵抽出物は蒸した米を原料にして麹菌で発酵させた後に水抽出により抽出されたことを特徴とする美容組成物。
【請求項３】
請求項１または２に記載の美容組成物において、
前記麹菌は黄麹菌であり、さらに好ましくは黄麹菌Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅである美容組成物。
【請求項４】
請求項１〜３の何れか１項に記載の美容組成物に、界面活性剤、金コロイド、グルコサミン誘導体及びビタミンＢ誘導体の少なくとも１つを混合したことを特徴とする化粧料組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、麹菌発酵抽出物を有効成分とし、人の肌の美容に関与する美肌用遺伝子を発現させる発現促進剤を含んだ美容組成物及びこの美容組成物を含む化粧料組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
米麹は、発酵する過程において、アミノ酸やセラミドなどの天然保湿因子やメラニン生成を抑制するコウジ酸を生成することが明らかになっており、すでに保湿剤や美白剤として広く様々な商品に活用されている。近年、麹はこれらの成分以外にも新たな機能性成分を有していることが明らかになってきており、特許文献１には皮膚バリア機能を改善させ、肌の保湿及び外部から生体内の異物の侵入を阻止する美容組成物が白麹菌発酵抽出物に含まれていることが開示されている。この美容組成物は皮膚バリア機能を改善するために、タイトジャンクション形成の促進に関与する遺伝子ＣＬＤＮ１及びＯＣＬＮの発現を促進し、表面角化の促進に関与する遺伝子ＴＧＭ１及びＩＶＬの発現を促進し、セラミド産生の促進に関与する遺伝子ＳＰＴＬＣ２、ＵＧＣＧ及びＧＢＡの発現を促進するものである。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２０１５−０２７９８５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
特許文献１には白麹菌の発酵抽出物に美容組成物が含まれていることが開示されており、この美容組成物は、皮膚バリア機能を改善するために、タイトジャンクション形成の促進に関与する遺伝子ＣＬＤＮ１及びＯＣＬＮの発現を促進し、表面角化の促進に関与する遺伝子ＴＧＭ１及びＩＶＬの発現を促進し、セラミド産生の促進に関与する遺伝子ＳＰＴＬＣ２、ＵＧＣＧ及びＧＢＡの発現を促進するものである。本願出願人は他の麹菌にも人の肌の美容に関与する上記以外の遺伝子を発現させる他の美容組成物が含まれている可能性があると考えた。本発明は、麹菌発酵抽出物を有効成分とした人の肌の美容に関与する遺伝子の発現を促進する新規の美容組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は上記課題を解決するため、麹菌発酵抽出物を有効成分とし、人の肌の美容に関与するＢＭＰ−２、ＴＧＦＢ１、ＣＬＤＮ７、ＨＢ−ＥＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＬＣＥ３Ｄ及びＰＰＡＲ−Ｄの少なくとも１つ以上の美肌用遺伝子を発現させる美容組成物を提供するものである。
【０００６】
上記のように構成した美容組成物は、麹菌発酵抽出物を有効成分とし、人の肌の美容に関与するＢＭＰ−２、ＴＧＦＢ１、ＣＬＤＮ７、ＨＢ−ＥＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＬＣＥ３Ｄ及びＰＰＡＲ−Ｄの少なくとも１つ以上の美肌用遺伝子を発現させる発現促進剤を含有している。麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用組成物によりＢＭＰ−２やＴＧＦＢ１の発現を促進させたときには、皮膚表皮ケラチノサイトの分化を制御し、ターンオーバーを適切な状態に保つことにより、肌のバリア機能を向上させることができる。麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用組成物によりＣＬＤＮ７の発現を促進させたときには、タイトジャンクションの形成を促進することにより皮膚バリアの機能を向上させることができる。麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用組成物によりＨＢ−ＥＧＦの発現を促進させたときには、表皮細胞の増殖を促進することにより創傷治癒の機能を向上させることができる。麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用組成物によりＶＥＧＦ−Ａの発現を促進させたときには、血管内皮細胞の増殖を促進することにより血管新生を促し創傷治癒の機能を向上させることができる。麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用組成物によりＬＣＥ３Ｄの発現を促進させたときには、上皮細胞である皮膚表皮ケラチノサイトにおいて上皮角質層の角化膜を形成する機能を向上させることができる。麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用組成物によりＰＰＡＲ−Ｄの発現を促進させたときには、表皮細胞の分化や脂質合成を促進することにより皮膚のバリア機能を改善することができる。
【０００７】
上記のように構成した麹菌発酵抽出物は蒸した米を原料にして麹菌で発酵させた後に水抽出により抽出されるのが好ましい。また、麹菌は黄麹菌であり、さらに好ましくは黄麹菌Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅであるのが好ましい。さらに、本発明は上記の美容組成物に、界面活性剤、金コロイド、グルコサミン誘導体及びビタミンＢ誘導体の少なくとも１つを混合して化粧料組成物を提供するものである。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】麹菌発酵抽出物の細胞毒性の有無を評価したグラフである。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
以下に、本発明による美容組成物及び化粧料組成物について説明する。本発明の美容組成物は麹菌発酵抽出物を有効成分とし、人の肌の美容に関与する美肌用遺伝子の発現促進剤を含有している。本発明の美容組成物に含まれる麹菌発酵抽出物は、蒸した米（蒸米）で特に玄米（蒸玄米）を原料として黄麹菌Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅにより発酵させて麹菌発酵生成物を製造し、製造した麹菌発酵生成物を水に抽出したものである。なお、麹菌発酵抽出物は、玄米を原料としたものに限られるものでなく、玄米を精白した精白米を用いたものであってもよい。
【００１０】
麹菌発酵生成物は次に示す（１）及び（２）の製造工程によって製造され、麹菌発酵抽出物は、（１）及び（２）で製造された麹菌発酵生成物から（３）の製造工程によって抽出して製造される。
（１）発酵の原料となる米の前処理工程
（２）麹菌を米で発酵させて麹菌発酵生成物を生成する麹菌発酵工程
（３）麹菌発酵生成物から水によって麹菌発酵抽出物を抽出する抽出工程
【００１１】
（原料となる米の前処理工程）
発酵の原料となる米の前処理工程では、米を洗浄する洗浄処理と、洗浄した米を水に浸漬して吸水する浸漬処理と、米の表面に付着している水を取り除く水切り処理と、吸水させた米を蒸煮する蒸煮処理と、蒸煮した米に麹菌を植菌する植菌処理を備えている。洗浄処理は原料となる米に付着した汚れやぬか成分を水を使って洗い流すことを目的としたものである。浸漬処理は洗米処理後の米を水に浸漬して吸水させることを目的とするものである。水切り処理は、吸水後に米の表面に付着している水が残らないように水切りをすることを目的とするものである。蒸煮処理は、浸漬・水切り処理後の米に含まれるデンプンをα化させるとともに米の殺菌を目的とするものである。浸漬・水切り工程によって吸水させた米を蒸気によって蒸煮して蒸米とする。蒸煮工程では、蒸煮されている米の温度を８５℃以上で蒸煮時間を２０〜７５分に維持する。なお、蒸煮されている米の温度を９０℃以上、さらに好ましくは９５℃とし、蒸煮時間を３０〜４５分とするのが好ましい。植菌処理は、蒸米を３７℃以下まで冷却した後に粉末状の麹菌胞子を散布して蒸米に麹菌を植え付けることを目的とするものである。蒸米の水分含有量は麹菌を植菌するのに適した２５〜５０％としてあるのがよく、更に好ましくは３０〜４０％とするのが好ましい。蒸米の表面に偏りなく麹菌胞子を散布するために、粉末状の麹菌胞子にデンプンや米粉等の賦形剤を混合した種麹を使用してもよい。
【００１２】
（麹菌発酵工程）
麹菌発酵工程は、植菌した麹菌を蒸米上で繁殖させることにより蒸米から麹菌によって麹菌発酵生成物を生成させることを目的とするものである。麹菌発酵工程に適した温度は蒸米の温度を２０〜４５℃に維持すればよく、さらに好ましくは３０〜４０℃に維持するのが好ましい。発酵工程に適した二酸化炭素濃度は１０％以下に維持すればよく、さらに好ましくは５％以下に維持するのが好ましい。発酵工程では高湿条件であるのが望ましく、発酵工程に適した湿度は４０〜１００％に維持すればよく、６０〜１００％、さらに好ましくは８０〜１００％に維持するのが好ましい。発酵時間は、麹菌の菌糸が蒸米の表面全体を覆う状態まで麹を生育させるのが好ましく、具体的には、上記の発酵温度、二酸化炭素濃度及び発酵湿度等の発酵条件下で４０〜１２０時間で麹を生育させ、さらに好ましくは８０〜１２０時間で麹を生育させるのが好ましい。
【００１３】
麹菌発酵工程では、発酵処理後の麹に含まれる水分含有量を低減させ、抽出工程を行うまでの保存性を良好とするために乾燥処理をすることも可能である。乾燥処理では、発酵後の麹に温風を吹きかけることによって麹に含まれる水分を蒸発させている。麹に吹きかける温風の温度は２５〜５０℃、さらに３０〜４５℃とするのが好ましく、乾燥後の麹に含まれる水分が１０％以下、さらに好ましくは５％以下となるまで麹を温風によって乾燥させる。なお、発酵工程後に直ぐに抽出工程を行うときには、この乾燥工程を省略することも可能である。
【００１４】
（抽出工程）
抽出工程は、麹に含まれる発酵生成物を抽出することを目的としたものである。この実施形態では、麹菌が米を発酵する過程で生成された麹菌発酵生成物に含まれる種々の成分を水に抽出し、麹菌発酵抽出物を抽出するものである。
【００１５】
（１）〜（３）の製造工程によって生成された麹菌発酵抽出物には人の肌の美容に関与する美肌用遺伝子を発現させる発現促進剤を含有しており、麹菌発酵抽出物を有効成分とした美容組成物とすることができる。ここで、麹菌発酵抽出物に含まれる発現促進剤によって発現される美肌用遺伝子は、ＢＭＰ−２、ＴＧＦＢ１、ＣＬＤＮ７、ＨＢ−ＥＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＬＣＥ３Ｄ及びＰＰＡＲ−Ｄであり、ＢＭＰ−２、ＴＧＦＢ１、ＣＬＤＮ７、ＨＢ−ＥＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＬＣＥ３Ｄ及びＰＰＡＲ−Ｄの少なくとも１つであればよい。
【００１６】
麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用組成物によりＢＭＰ−２やＴＧＦＢ１の発現を促進させたときには、皮膚表皮ケラチノサイトの分化を制御し、ターンオーバーを適切な状態に保つことにより、肌のバリア機能を向上させる。麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用組成物によりＣＬＤＮ７の発現を促進させたときには、タイトジャンクションの形成を促進することにより皮膚バリアの機能を向上させる。麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用組成物によりＨＢ−ＥＧＦの発現を促進させたときには、表皮細胞の増殖を促進することにより創傷治癒の機能を向上させることができる。
【００１７】
麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用組成物によりＶＥＧＦ−Ａの発現を促進させたときには、血管内皮細胞の増殖を促進することにより血管新生を促し創傷治癒の機能を向上させることができる。麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用組成物によりＬＣＥ３Ｄの発現を促進させたときには、上皮細胞である皮膚表皮ケラチノサイトにおいて上皮角質層の角化膜を形成する機能を向上させることができる。麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用組成物によりＰＰＡＲ−Ｄの発現を促進させたときには、表皮細胞の分化や脂質合成を促進することにより皮膚のバリア機能を改善することができる。
【００１８】
麹菌発酵抽出物は人の肌の美容に関与する上記の美肌用遺伝子を発現させる発現促進剤を含有しており、この麹菌発酵抽出物を有効成分とした美容組成物に界面活性剤、金コロイド、グルコサミン誘導体及びビタミンＢ誘導体の少なくとも１つを混合して化粧料組成物を製造することができる。化粧料組成物は具体的には、美容液、化粧クリーム、化粧水、ボディージェル、乳液等とすることができる。
【実施例】
【００１９】
以下に、本発明の一実施例を具体的に説明する。
（原料となる米の前処理工程）
原料となる米の前処理工程では、先ず洗浄処理として、原料となる米１０ｋｇを水によって洗浄し、米の表面に付着している汚れやぬか成分を洗い流す。次に、吸水・浸漬処理として、洗浄した米を水に６時間浸漬させたあとで、浸漬した米をざる等の水切り器を用いて１２時間水切りをする。次に、水切り後の米を蒸し器を用いて９５℃以上の品温（米の温度）を維持した状態で４５分間蒸煮処理行い、それによって得た米を蒸米とする。最後に、蒸米を４０℃まで放冷した後で、植菌処理として、麹菌である黄麹菌Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅの胞子を放冷後の蒸米に植え付ける。粉末状の麹菌胞子を散布器を用いて蒸米の表面に偏りなく散布し、蒸米に散布した麹菌胞子がさらに偏らないようにかき混ぜる。
【００２０】
（麹菌発酵工程）
麹菌発酵工程では、温度管理を適切に行うために自動製麹装置を用いて麹を製造する。発酵開始から２５時間までは品温が３７℃となるように温度制御し、発酵開始から２５時間以後は品温が３５℃となるように温度制御した。また、発酵させているときに自動製麹装置内の湿度が常に６０〜１００％となるように湿度制御するとともに、自動製麹装置内の二酸化炭素濃度が１０％以下となるように制御する。なお、蒸米の表面全体が麹菌の菌糸に覆われたときに麹菌発酵工程が終了する。麹菌発酵工程により製造された米麹（麹菌発酵生成物）から直ぐに麹菌発酵抽出物を抽出しないときには、米麹を温風によって水分含有量を低減させるように乾燥させる。
【００２１】
（抽出工程）
麹菌発酵生成物である米麹１００ｇに対して精製水４００ｍｌを加えて３時間連続的に撹拌することによって米麹に含まれる水溶性の成分を水抽出する。抽出液はろ紙（ADVANTEC社：定性ろ紙NO.2丸型）により粗濾過を行い、さらにろ液をメンブレンフィルター（メルク社：Millex-HVフィルター、最大孔径０．４５μｍ、親水性ＰＶＤＦ（ポリフッ化ビニリデン））で精密濾過することによって麹菌発酵抽出物を含む麹菌発酵抽出液を回収する。
【００２２】
（麹菌発酵抽出液の細胞毒性の試験法について）
麹菌発酵抽出物が細胞毒性を有するか否かをヒト皮膚表皮３次元培養モデルを用いたＭＴＴアッセイにより判定する。先ず、麹菌発酵抽出液をダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）を用いて、０．１, １，５，１０％，２０及び４０％の各濃度に調整する。上記で調整した各濃度の麹菌発酵抽出液２５μＬをそれぞれ細胞表面に塗布する。なお、ネガティブコントロール（ＮＣ）は１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００を１００μＬ塗布し、ポジティブコントロール（ＰＣ）は細胞表面にサンプルを全く塗布しない条件とする。試験サンプルを塗布した細胞は、炭酸ガスインキュベータを使用し５％ＣＯ２ ・３７℃条件下で２４時間培養する。２４時間後にＤＰＢＳを用いて各細胞の表面に付着した試験サンプルを洗い流す。上記で処理を行った培養細胞を２４穴プレートに移し、１ｍｇ/ｍｌ のＭＴＴ粉末を含むＭＴＴ培地を３００μＬ加え、炭酸ガスインキュベータを使用し、５％ＣＯ２ ・３７℃の条件３時間静置する。各穴の培養細胞をＤＰＢＳ溶液で軽く洗浄後に別の２４穴プレートの各穴に移す。移した後の２４穴プレートの各穴に２ｍｌの１００％イソプロピルアルコールを入れ、振盪しながら室温で２時間抽出を行う。この抽出液を９６穴プレートの各穴に２００μＬずつ入れ、マイクロプレートリーダで５７０ｎｍの吸光度を測定する。
【００２３】
（麹菌発酵抽出液の細胞毒性結果について）
下記の計算式の通り生存率を算出する。
生存率（％）＝（各試験群処理時のＡ５７０／未処理時のＡ５７０）×１００
各濃度の麹菌発酵抽出液で処理した際の細胞生存率の結果を図１に示す。図１の０．１％ＴＭ〜４０％ＴＭに示したように、細胞生存率は８５〜９４％であり、有意差検定をした結果から有意差は認められなかった。これにより、麹菌発酵抽出液に含まれる麹菌発酵抽出物は細胞毒性を有してない、すなわち、麹菌発酵抽出液から得られる美肌用遺伝子の発現促進は細胞死から生じるものでないことが明らかとなった。
【００２４】
（麹菌発酵抽出液の美肌用遺伝子の発現促進に対する評価）
２４穴プレート上にセットしたヒト皮膚３次元培養モデルの表面にダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）を用いて希釈を行った麹菌発酵抽出液の１％溶液と、麹菌発酵抽出液の４０％溶液をそれぞれ２５μＬずつ塗布する。炭酸ガスインキュベータにて５％ＣＯ２ ・３７℃の条件で２４時間培養する。各穴の培養細胞をＤＰＢＳ溶液で軽く洗浄後に別の２４穴プレートの各穴に移す。回収した細胞に細胞内のＲＮＡ、ＤＮＡ及びタンパク質を安定化して、分解から保護する水溶液であるＲＮＡlater を加え、４℃で４日間インキュベートを行い各組織からｍＲＮＡを抽出する。抽出したｍＲＮＡは逆転写酵素Ｈｉｇｈ  Ｃａｐａｃｉｔｙ  ｃＤＮＡ  ＳｙｎｔｈｅｓｉｓＫｉｔを使用し、ＲＴ−ＰＣＲ法によりｃＤＮＡを合成する。得られたｃＤＮＡを鋳型にし、リアルタイムＰＣＲを行いＢＭＰ−２、ＴＧＦＢ１、ＣＬＤＮ７、ＨＢ−ＥＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＬＣＥ３Ｄ及びＰＰＡＲ−ＤのＤＮＡ量を定量化する。
【００２５】
表１に示したように、細胞培養液に麹菌発酵抽出液の１％溶液を添加したときには、ＢＭＰ−２の発現が１３０％促進され、ＶＥＧＦ−Ａの発現が３０％促進され、ＬＣＥ３Ｄの発現が４９％促進され、ＴＧＦＢ１の発現が２０％促進された。また、細胞培養液に麹菌発酵抽出液の４０％溶液を添加したときには、ＢＭＰ−２の発現が２７０％促進され、ＴＧＦＢ１の発現が２９％促進され、ＣＬＤＮ７の発現が７８％促進され、ＨＢ−ＥＧＦの発現が９３％促進され、ＶＥＧＦ−Ａの発現が７８％、ＬＣＥ３Ｄの発現が１０６％促進され、ＰＰＡＲ−Ｄの発現が５３％促進された。これらから、麹菌発酵抽出液に含まれている麹菌発酵抽出物は人の肌の美容に関与する美肌用遺伝子の発現促進剤を含有していることが明らかになった。この麹菌発酵抽出物を有効成分とした美容組成物を人の肌に用いることで、安価でかつ安全に人の肌の美容に寄与させることができる。
【００２６】
【表１】
2020186173.tif 000002
【図１】
2020186173.tif 000003
【手続補正書】
【提出日】令和2年1月27日(2020.1.27)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
黄麹菌Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅの発酵抽出物を有効成分とし、人の肌の美容に関与するＢＭＰ−２、ＴＧＦＢ１、ＣＬＤＮ７、ＨＢ−ＥＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＬＣＥ３Ｄ及びＰＰＡＲ−Ｄの少なくとも１つ以上の美肌用遺伝子を発現させる美肌用遺伝子発現促進剤。
【請求項２】
請求項１に記載の美肌用遺伝子発現促進剤において、
前記発酵抽出物は蒸した米を原料にして前記黄麹菌Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅで発酵させた後に水抽出により抽出されたことを特徴とする美肌用遺伝子発現促進剤。
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００１】
本発明は、黄麹菌Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅの発酵抽出物を有効成分とし、人の肌の美容に関与する美肌用遺伝子を発現させる美肌用遺伝子発現促進剤に関する。
【手続補正４】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００４
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００４】
特許文献１には白麹菌の発酵抽出物に美容組成物が含まれていることが開示されており、この美容組成物は、皮膚バリア機能を改善するために、タイトジャンクション形成の促進に関与する遺伝子ＣＬＤＮ１及びＯＣＬＮの発現を促進し、表面角化の促進に関与する遺伝子ＴＧＭ１及びＩＶＬの発現を促進し、セラミド産生の促進に関与する遺伝子ＳＰＴＬＣ２、ＵＧＣＧ及びＧＢＡの発現を促進するものである。本願出願人は他の麹菌にも人の肌の美容に関与する上記以外の遺伝子を発現させる他の組成物が含まれている可能性があると考えた。本発明は、麹菌発酵抽出物を有効成分とした人の肌の美容に関与する遺伝子の発現を促進する新規の美肌用遺伝子発現促進剤を提供することを目的とする。
【手続補正５】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００５】
本発明は上記課題を解決するため、黄麹菌Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅの発酵抽出物を有効成分とし、人の肌の美容に関与するＢＭＰ−２、ＴＧＦＢ１、ＣＬＤＮ７、ＨＢ−ＥＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＬＣＥ３Ｄ及びＰＰＡＲ−Ｄの少なくとも１つ以上の美肌用遺伝子を発現させる美肌用遺伝子発現促進剤を提供するものである。
【手続補正６】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００６】
上記のように構成した美肌用遺伝子発現促進剤は、黄麹菌Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅの発酵抽出物を有効成分とし、人の肌の美容に関与するＢＭＰ−２、ＴＧＦＢ１、ＣＬＤＮ７、ＨＢ−ＥＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＬＣＥ３Ｄ及びＰＰＡＲ−Ｄの少なくとも１つ以上の美肌用遺伝子を発現させることができる。美肌用遺伝子発現促進剤によりＢＭＰ−２やＴＧＦＢ１の発現を促進させたときには、皮膚表皮ケラチノサイトの分化を制御し、ターンオーバーを適切な状態に保つことにより、肌のバリア機能を向上させることができる。美肌用遺伝子発現促進剤によりＣＬＤＮ７の発現を促進させたときには、タイトジャンクションの形成を促進することにより皮膚バリアの機能を向上させることができる。美肌用遺伝子発現促進剤によりＨＢ−ＥＧＦの発現を促進させたときには、表皮細胞の増殖を促進することにより創傷治癒の機能を向上させることができる。美肌用遺伝子発現促進剤によりＶＥＧＦ−Ａの発現を促進させたときには、血管内皮細胞の増殖を促進することにより血管新生を促し創傷治癒の機能を向上させることができる。美肌用遺伝子発現促進剤によりＬＣＥ３Ｄの発現を促進させたときには、上皮細胞である皮膚表皮ケラチノサイトにおいて上皮角質層の角化膜を形成する機能を向上させることができる。美肌用遺伝子発現促進剤によりＰＰＡＲ−Ｄの発現を促進させたときには、表皮細胞の分化や脂質合成を促進することにより皮膚のバリア機能を改善することができる。
【手続補正７】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００７】
上記のように構成した美肌用遺伝子発現促進剤においては、黄麹菌Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅの発酵抽出物は蒸した米を原料にして麹菌で発酵させた後に水抽出により抽出されるのが好ましい。
【手続補正８】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０００９
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０００９】
以下に、本発明による美肌用遺伝子発現促進剤について説明する。本発明の美肌用遺伝子発現促進剤は麹菌発酵抽出物を有効成分とし、人の肌の美容に関与する美肌用遺伝子の発現を促進するものである。本発明の美肌用遺伝子発現促進剤が含まれる麹菌発酵抽出物は、蒸した米（蒸米）で特に玄米（蒸玄米）を原料として黄麹菌Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅにより発酵させて麹菌発酵生成物を製造し、製造した麹菌発酵生成物を水に抽出したものである。なお、麹菌発酵抽出物は、玄米を原料としたものに限られるものでなく、玄米を精白した精白米を用いたものであってもよい。
【手続補正９】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１５
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１５】
（１）〜（３）の製造工程によって生成された麹菌発酵抽出物には人の肌の美容に関与する美肌用遺伝子を発現させる美肌用遺伝子発現促進剤を含有しており、麹菌発酵抽出物を有効成分とした美肌用遺伝子発現促進剤とすることができる。ここで、麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用遺伝子発現促進剤によって発現される美肌用遺伝子は、ＢＭＰ−２、ＴＧＦＢ１、ＣＬＤＮ７、ＨＢ−ＥＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＬＣＥ３Ｄ及びＰＰＡＲ−Ｄであり、ＢＭＰ−２、ＴＧＦＢ１、ＣＬＤＮ７、ＨＢ−ＥＧＦ、ＶＥＧＦ−Ａ、ＬＣＥ３Ｄ及びＰＰＡＲ−Ｄの少なくとも１つであればよい。
【手続補正１０】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１６
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１６】
麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用遺伝子発現促進剤によりＢＭＰ−２やＴＧＦＢ１の発現を促進させたときには、皮膚表皮ケラチノサイトの分化を制御し、ターンオーバーを適切な状態に保つことにより、肌のバリア機能を向上させる。麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用遺伝子発現促進剤によりＣＬＤＮ７の発現を促進させたときには、タイトジャンクションの形成を促進することにより皮膚バリアの機能を向上させる。麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用遺伝子発現促進剤によりＨＢ−ＥＧＦの発現を促進させたときには、表皮細胞の増殖を促進することにより創傷治癒の機能を向上させることができる。
【手続補正１１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１７】
麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用遺伝子発現促進剤によりＶＥＧＦ−Ａの発現を促進させたときには、血管内皮細胞の増殖を促進することにより血管新生を促し創傷治癒の機能を向上させることができる。麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用遺伝子発現促進剤によりＬＣＥ３Ｄの発現を促進させたときには、上皮細胞である皮膚表皮ケラチノサイトにおいて上皮角質層の角化膜を形成する機能を向上させることができる。麹菌発酵抽出物に含まれる美肌用遺伝子発現促進剤によりＰＰＡＲ−Ｄの発現を促進させたときには、表皮細胞の分化や脂質合成を促進することにより皮膚のバリア機能を改善することができる。
【手続補正１２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００１８
【補正方法】変更
【補正の内容】
【００１８】
麹菌発酵抽出物は人の肌の美容に関与する上記の美肌用遺伝子を発現させる美肌用遺伝子発現促進剤を含有しており、この美肌用遺伝子発現促進剤を含有する麹菌発酵抽出物を有効成分とした美容組成物に界面活性剤、金コロイド、グルコサミン誘導体及びビタミンＢ誘導体の少なくとも１つを混合して化粧料組成物を製造することができる。化粧料組成物は具体的には、美容液、化粧クリーム、化粧水、ボディージェル、乳液等とすることができる。