(57)【要約】      （修正有）【課題】改善された安定性に加えて持続的作用特性を有する新規の改変グルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド（ＧＩＰ）類似体の提供。【解決手段】特定のアミノ酸配列を有するＧＩＰ類似体の誘導体において、修飾基が位置２４にあるリジンのイプシロンアミノ基の側鎖に共有結合しており、修飾基がＡ−Ｂ−Ｃ−により定義され、Ａ−が遠位端に陰性荷電部分を有する親油性部分であり、Ｂ−Ｃ−がリンカーであり、特定のアミノ酸配列を有するｈＧＩＰ（１−３１）と比較して、最大８つのアミノ酸置換を有する、誘導体、またはその薬学的に許容される塩もしくはアミド。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＧＩＰ類似体の誘導体であって、前記ＧＩＰ類似体が式Ｉ（配列番号３）を含み、
Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ                         （Ｉ）、
式中、修飾基が位置２４にあるリジンのイプシロンアミノ基の側鎖に共有結合しており、前記修飾基がＡ−Ｂ−Ｃ−により定義され、Ａ−が遠位端に陰性荷電部分を有する親油性部分であり、Ｂ−Ｃ−がリンカーであり、
前記ＧＩＰ類似体がｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号２）と比較して、最大８つのアミノ酸置換を有する、誘導体、
またはその薬学的に許容される塩もしくはアミド。
【請求項２】
式ＩＩ（配列番号４８）を含む、請求項１に記載の誘導体であって、
Ｘ１−Ｘ２−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｘ１４−Ａｓｐ−Ｘ１６−Ｉｌｅ−Ｘ１８−Ｇｌｎ−Ｘ２０−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ｌｙｓ−Ｘ３１                           （ＩＩ）、
式ＩＩが位置Ｘ１、Ｘ２、Ｘ１４、Ｘ１６、Ｘ１８、Ｘ２０、および／またはＸ３１に任意のアミノ酸を含み、
前記ＧＩＰ類似体がｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号２）と比較して、最大８つのアミノ酸置換を有する、誘導体。
【請求項３】
請求項１〜２のいずれか一項に記載の誘導体であって、位置Ｘ１、Ｘ２、Ｘ１４、Ｘ１６、Ｘ１８、Ｘ２０、および／またはＸ３１のアミノ酸が、
Ｘ１がＴｙｒまたはＤ−Ｔｙｒであり、
Ｘ２がＡｉｂ、Ａｌａ、またはＤ−Ａｌａであり、
Ｘ１４がＬｅｕ、Ｎｌｅ、ＡｓｐまたはＭｅｔであり、
Ｘ１６がＬｙｓまたはＡｌａであり、
Ｘ１８がＡｒｇまたはＨｉｓであり、
Ｘ２０がＧｌｎ、ＧｌｕまたはＡｉｂであり、
Ｘ３１はＧｌｙまたはＰｒｏであるアミノ酸から選択される、誘導体。
【請求項４】
Ａ−が化学式１であり、
【化１】
2020125311.tif 000135
ｐが１４〜２０の範囲の整数であり、
＊がＡ−とＢ−を接続しているアミド結合の位置を示す、請求項１〜３のいずれか一項に記載の誘導体。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項に記載の誘導体であって、
Ｂ−が化学式２であり、
【化２】
2020125311.tif 000136
ｑが０〜１の範囲の整数であり、
ｒが１〜３の範囲の整数であり、
＊がＡ−とＢ−を接続しているアミド結合の位置を示し、＊＊がＢ−とＣ−を接続しているアミド結合の位置を示す、誘導体。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか一項に記載の誘導体であって、
Ｃ−が化学式３および化学式４から選択され、
【化３】
2020125311.tif 000137
【化４】
2020125311.tif 000138
ｓが１〜３の範囲の整数であり、
ｔが１〜４の範囲の整数であり、
ｕが１〜３の範囲の整数であり、
＊＊がＢ−とＣ−を接続しているアミド結合の位置を示し、＊＊＊がＣ−と、位置２４のリジンのイプシロンアミノ基を接続しているアミド結合の位置を示す、誘導体。
【請求項７】
以下から選択される、請求項１〜６のいずれか一項に記載の誘導体。
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１；配列番号６）
【化５】
2020125311.tif 000139
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物２；配列番号７）
【化６】
2020125311.tif 000140
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物３；配列番号８）
【化７】
2020125311.tif 000141
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物４；配列番号９）
【化８】
2020125311.tif 000142
Ｎ｛１｝−アセチル，  Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物５；配列番号１０）
【化９】
2020125311.tif 000143
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物６；配列番号１１）
【化１０】
2020125311.tif 000144
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物７；配列番号１２）
【化１１】
2020125311.tif 000145
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）  （化合物８；配列番号１３）
【化１２】
2020125311.tif 000146
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物９；配列番号１４）  
【化１３】
2020125311.tif 000147
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１０；配列番号１５）
【化１４】
2020125311.tif 000148
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ａｉｂ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１１；配列番号１６）
【化１５】
2020125311.tif 000149
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ａｉｂ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１２；配列番号１７）
【化１６】
2020125311.tif 000150
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｌａ１６，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１３；配列番号１８）
【化１７】
2020125311.tif 000151
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｌａ１６，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１４；配列番号１９）
【化１８】
2020125311.tif 000152
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１５；配列番号２０）  
【化１９】
2020125311.tif 000153
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシ−ヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１６；配列番号２１）
【化２０】
2020125311.tif 000154
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１７；配列番号２２）  
【化２１】
2020125311.tif 000155
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１８；配列番号２３）
【化２２】
2020125311.tif 000156
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｓｐ１４，Ａｒｇ１８，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１９；配列番号２４）
【化２３】
2020125311.tif 000157
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物２０；配列番号２５）
【化２４】
2020125311.tif 000158
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］−アミノ］ブタノイル］−アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物２１；配列番号２６）
【化２５】
2020125311.tif 000159
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］−アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物２２；配列番号２７）  
【化２６】
2020125311.tif 000160
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］−アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物２３；配列番号２８）
【化２７】
2020125311.tif 000161
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］−アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｉｂ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物２４；配列番号２９）
【化２８】
2020125311.tif 000162
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］−アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ａｉｂ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物２５；配列番号３０）
【化２９】
2020125311.tif 000163
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）  アミド（化合物２６；配列番号３１）
【化３０】
2020125311.tif 000164
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物２７；配列番号３２）
【化３１】
2020125311.tif 000165
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］−アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物２８、配列番号３３）
【化３２】
2020125311.tif 000166
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］−アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物２９；配列番号３４）
【化３３】
2020125311.tif 000167
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］−アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物３０；配列番号３５）
【化３４】
2020125311.tif 000168
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］−アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物３１；配列番号３６）
【化３５】
2020125311.tif 000169
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］−アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物３２；配列番号３７）
【化３６】
2020125311.tif 000170
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３］−ｈＧＩＰ（化合物３３；配列番号３８）
【化３７】
2020125311.tif 000171
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３］−ｈＧＩＰ（化合物３４；配列番号３９）
【化３８】
2020125311.tif 000172
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ（化合物３５；配列番号４０）
【化３９】
2020125311.tif 000173
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ａｓｐ３４］−ｈＧＩＰ（化合物３６；配列番号４１）
【化４０】
2020125311.tif 000174
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ（化合物３７；配列番号４２）
【化４１】
2020125311.tif 000175
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ（化合物３８；配列番号４３）
【化４２】
2020125311.tif 000176
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ａｓｐ３４］−ｈＧＩＰ（化合物３９；配列番号４４）
【化４３】
2020125311.tif 000177
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ（化合物４０；配列番号４５）
【化４４】
2020125311.tif 000178
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ（化合物４１；配列番号４６）
【化４５】
2020125311.tif 000179
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ（化合物４２；配列番号４７）
【化４６】
2020125311.tif 000180
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ａｉｂ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物４３、配列番号５９）  
【化４７】
2020125311.tif 000181
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物４４、配列番号６０）
【化４８】
2020125311.tif 000182
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｌｅｕ１４，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（化合物４５、配列番号６１）  
【化４９】
2020125311.tif 000183
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物４６、配列番号６２）  
【化５０】
2020125311.tif 000184
【請求項８】
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物５、配列番号１０）
【化５１】
2020125311.tif 000185
である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の誘導体。
【請求項９】
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］−アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ａｉｂ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物２５；配列番号３０）
【化５２】
2020125311.tif 000186
である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の誘導体。
【請求項１０】
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物３１；配列番号３６）
【化５３】
2020125311.tif 000187
である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の誘導体。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか一項に記載の誘導体、および少なくとも一つの薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【請求項１２】
ＧＬＰ−１受容体アゴニストまたはＧＬＰ−１／グルカゴン受容体コアゴニストをさらに含む、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
薬剤として使用するための、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の誘導体。
【請求項１４】
体重管理、肥満および肥満に関連する障害の治療および／または予防に使用するための、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の誘導体。
【請求項１５】
例えば、２型糖尿病などの糖尿病のすべての形態、および糖尿病に関連する障害の治療および／または予防に使用するための、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の誘導体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、溶液中の改善された物理的安定性および持続的作用特性を有するグルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド（ＧＩＰ）類似体の誘導体である新規ペプチド、ならびにＧＩＰ誘導体の医薬用途に関する。
【０００２】
配列表の参照による組み込み
「１８００１６配列表＿ＳＴ２５」と題される配列表は、５８．６６９バイトであり、２０１９年４月０９日に作成され、参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００３】
グルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド（ＧＩＰ、胃抑制ペプチドとしても知られる）は、二つの内在性インクレチンの一つであり、食物摂取後に腸管Ｋ細胞から放出される４２アミノ酸ペプチドホルモンである。ＧＩＰおよびその他のインクレチン、グルカゴン様ペプチド−１（ＧＬＰ−１）は、インクレチン効果の原因となる腸管内分泌細胞由来のホルモンであり、これは経口ブドウ糖負荷試験に対する総インスリン反応の７０％以上を占めると推測される。
【０００４】
インクレチン効果のため、ＧＩＰ受容体は、単剤として、ＧＬＰ−１受容体アゴニストとの組み合わせで、またはＧＬＰ−１／グルカゴン受容体コアゴニストとの組み合わせで、ＧＩＰ受容体アゴニストによる肥満および糖尿病などの代謝疾患の治療において魅力的な薬物標的となっている。ＧＩＰ自体は、ジペプチジルペプチダーゼ−４（ＤＰＰ−ＩＶ）を介した不活性化による短い血漿半減期、および溶液中でフィブリルを形成する傾向が高いことを原因とする不良な物理的安定性を有する。
【０００５】
異なるＧＩＰ受容体アゴニストおよび／またはそれらの潜在的な医学的使用を開示する特許出願が記述されており、例えば、ＷＯ  ２０１６／０６６７４４号、ＷＯ  ２０１６／０３４１８６号、ＷＯ  ２０１２／０５５７７０号、およびＷＯ  ２０１２／１６７７４４号に開示されている。またＧＩＰ／ＧＬＰ−１受容体コアゴニストおよびそれらの医学的使用が、例えば、ＷＯ  ２０１３／１６４４８３号およびＷＯ  ２０１４／１９２２８４号で検討されている。
【０００６】
本発明の誘導体は、改善された安定性に加えて持続的作用特性を有する新規の改変ＧＩＰ類似体を提供する。
【発明の概要】
【０００７】
本発明は、ｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号３）の位置２４に対応する位置にリジンを有するＧＩＰ類似体の誘導体に関する。
【０００８】
一部の実施形態において、誘導体は、ｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号３）の位置２４に対応する位置にあるリジンと、前記リジンのイプシロンアミノ基に結合している陰性荷電修飾基とを有するＧＩＰ類似体を含む。
【０００９】
一部の実施形態において、誘導体は、ｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号３）の位置２４に対応する位置にリジンと、前記リジンのイプシロンアミノ基に結合している陰性荷電修飾基とを有するＧＩＰ類似体を含み、最大で７つのさらなるアミノ酸置換（すなわち、ｈＧＩＰ（１−３１）と比較して最大８つの置換としても説明される）を含みうる。
【００１０】
一部の実施形態において、誘導体は、ｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号３）の位置２４に対応する位置にリジンと、前記リジンのイプシロンアミノ基に結合している陰性荷電修飾基とを有するＧＩＰ類似体を含み、最大で７つのさらなるアミノ酸置換を含んでもよく、置換は式Ｉの位置１、２、１４、１６、１８、２０および／または３１に対応する一つまたは複数の位置にある。
【００１１】
本発明はさらに、ＧＩＰ類似体のこのような誘導体および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物、ならびに前記誘導体の医学的使用にも関する。
【００１２】
第一の態様において、本発明は、ＧＩＰ受容体を活性化することができるＧＩＰ類似体の誘導体に関する。さらなる態様において、ＧＩＰ類似体の誘導体は、ヒトＧＬＰ−１受容体およびヒトグルカゴン受容体よりもヒトＧＩＰ受容体の活性化において選択的である。
【００１３】
また、あるいは代替的に、第二の態様では、本発明は、インビボでのみ、またはＧＬＰ−１受容体アゴニストとの組み合わせで活性なＧＩＰ類似体の誘導体に関する。
【００１４】
また、あるいは代替的に、第三の態様では、本発明は、改善された薬物動態特性を有するＧＩＰ類似体の誘導体に関する。
【００１５】
また、あるいは代替的に、第四の態様では、本発明は、改善された物理的安定性を有するＧＩＰ類似体の誘導体に関する。
【００１６】
また、あるいは代替的に、第五の態様では、本発明は、改善された化学的安定性を有するＧＩＰ類似体の誘導体に関する。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本発明は、ｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号３）の位置２４に対応する位置にリジンを有するＧＩＰ類似体の誘導体に関する。一態様において、本発明の誘導体は、ｈＧＩＰ（１−３１）（式Ｉ、配列番号３）の位置２４に対応する位置にあるリジンと、前記リジンのイプシロンアミノ基に結合している陰性荷電修飾基とを含む。
【００１８】
別の態様において、本発明の誘導体は、ｈＧＩＰ（１−３１）（式Ｉ、配列番号３）の位置２４に対応する位置にあるリジンと、前記リジンのイプシロンアミノ基に結合している陰性荷電修飾基とを含み、式Ｉは、最大で７つのさらなるアミノ酸置換（ｈＧＩＰ（１−３１）と比較して最大８つの置換としても説明される）を含みうる。
【００１９】
別の態様において、本発明の誘導体は、ｈＧＩＰ（１−３１）（式Ｉ、配列番号３）の位置２４に対応する位置にあるリジンと、前記リジンのイプシロンアミノ基に結合している陰性荷電修飾基とを含み、式Ｉは、最大で７つのさらなるアミノ酸置を含んでもよく、置換は式Ｉの位置１、２、１４、１６、１８、２０および／または３１に対応する一つまたは複数の位置にある。
【００２０】
加えて、本発明は、ＧＩＰ類似体のこのような誘導体および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物、ならびに前記誘導体の医学的使用にも関する。
【００２１】
一態様において、本発明は、ＧＩＰ受容体を活性化することができるＧＩＰ類似体の誘導体に関する。さらなる態様において、ＧＩＰ類似体の誘導体は、ヒトＧＬＰ−１受容体およびヒトグルカゴン受容体よりもヒトＧＩＰ受容体の活性化において選択的である。ＧＬＰ−１受容体およびグルカゴン受容体よりも、ＧＩＰ受容体に対して「選択的」という用語は、ＣＲＥルシフェラーゼ機能的効力アッセイなどの、受容体機能の効力アッセイにおいてインビトロで測定し、ＥＣ５０値で比較した場合、ＧＬＰ−１受容体およびグルカゴン受容体よりも、ＧＩＰ受容体に対して、少なくとも５０倍、少なくとも５００倍、または少なくとも１０００倍など、少なくとも１０倍高い効力を示す誘導体を指す。
【００２２】
また、あるいは代替的に、本発明は、インビボでのみ、またはＧＬＰ−１受容体アゴニストとの組み合わせで活性なＧＩＰ類似体の誘導体に関する。
【００２３】
また、あるいは代替的に、一態様では、本発明は、改善された薬物動態特性を有するＧＩＰ類似体の誘導体に関する。
【００２４】
また、あるいは代替的に、一態様では、本発明は、改善された物理的安定性を有するＧＩＰ類似体の誘導体に関する。
【００２５】
また、あるいは代替的に、一態様では、本発明は、改善された化学的安定性を有するＧＩＰ類似体の誘導体に関する。
【００２６】
下文において、ギリシャ文字は、その記号または対応する名称、たとえば：α＝アルファ、β＝ベータ、ε＝イプシロン、γ＝ガンマ、ω＝オメガなどによって表されうる。また、μのギリシャ文字は、「ｕ」によって表されてもよく、例えばμｌ＝ｕｌまたはμＭ＝ｕＭである。
【００２７】
本明細書に別途示されていない限り、単数形で示した用語は、複数の状態も含む。
【００２８】
本明細書にはまた、誘導体、ＧＩＰ類似体の誘導体、医薬組成物およびその使用が記述されており、「含む」および「含んだ」のような非限定的な用語は、「から成る」、「から成った」などの排他的用語と置き換えられる。 
【００２９】
化合物／製品 
ＧＩＰ受容体アゴニスト
受容体アゴニストは、受容体と結合し、天然リガンドで典型的な応答を引き出す化合物と定義されうる（例えば、“Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ”，  ＡＬ  Ｌｅｈｎｉｎｇｅｒ，  ＤＬ  Ｎｅｌｓｏｎ，  ＭＭ  Ｃｏｘ，  Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｗｏｒｔｈ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，  １９９３，  ｐａｇｅ  ７６３を参照）。
【００３０】
本明細書で記述する「ＧＩＰ受容体アゴニスト」は、ＧＩＰ受容体を活性化することができる化合物として定義されうる。 
【００３１】
ＧＩＰ類似体
本明細書で使用される「ｈＧＩＰ（１−４２）」という用語は、ヒトグルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチドを指し、その配列は配列表に配列番号  １として含まれている。配列番号１の配列を有するペプチドは、天然ｈＧＩＰまたはｈＧＩＰとも呼ばれる場合がある。
【００３２】
本明細書で使用される「ｈＧＩＰ（１−３１）」という用語は、ｈＧＩＰ（１−４２）のアミノ酸１〜３１を含む、ｈＧＩＰ（１−４２）の切断型を指し、ｈＧＩＰ（１−３１）の配列は配列表に配列番号  ２として含まれている。
【００３３】
本明細書で使用される「ＧＩＰ類似体」という用語は、ｈＧＩＰ（１−３１）の変異体であるペプチド、または化合物を指す。「変異体」という用語は、ｈＧＩＰ（１−３１）と比較して少なくとも一つのアミノ酸置換を含み、ＧＩＰ受容体を活性化することができるペプチドに対して使用される。
【００３４】
本明細書で使用される「置換」という用語は、ペプチドの骨格において一つのアミノ酸が別のアミノ酸で置き換えられることを指す。一態様では、アミノ酸は、保存的置換によって置換されうる。本明細書で使用する場合、「保存的置換」という用語は、一つ以上のアミノ酸を別の生物学的に類似した残基で置換することを意味する。例としては、アミノ酸残基を類似する特徴物（ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ）、例えば、小さなアミノ酸、酸性アミノ酸、極性アミノ酸、塩基性アミノ酸、疎水性アミノ酸、および芳香族アミノ酸で置換することが挙げられる。一態様では、本発明の誘導体のＧＩＰ類似体は、一つまたは複数の非天然アミノ酸および／または非アミノ酸（例えばアミノ酸模倣体）のＧＩＰ類似体の配列中への置換を含みうる。
【００３５】
本発明の誘導体のＧＩＰ類似体は、ｉ）変化したアミノ酸残基に対応するｈＧＩＰ（１−３１）またはｈＧＩＰ（１−４２）におけるアミノ酸残基の数（すなわち、ｈＧＩＰ（１−３１）またはｈＧＩＰ（１−４２）における対応する位置）、およびｉｉ）実際の変化を参照することによって記述されうる。例えば、［Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）は、ｈＧＩＰ（１−３１）の位置２４がリジンで置き換えられたＧＩＰ類似体を指す。
【００３６】
一態様において、本発明の誘導体のＧＩＰ類似体は、ｈＧＩＰ（１−３１）の位置２４に対応する位置にリジン残基を含み、これは式Ｉ：Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙで示される。式Ｉは配列表に配列番号３として含まれており、［Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）とも示されうる。
【００３７】
また、あるいは代替的に、一態様では、本発明の誘導体のＧＩＰ類似体は、ｈＧＩＰ（１−３１）と比較して最大８つのアミノ酸置換を含み、位置２４は常にリジンで一つの置換を説明し、位置２４以外の位置に最大で７つのさらなる置換がある。さらなる態様において、本発明の誘導体のＧＩＰ類似体は、ｈＧＩＰ（１−３１）と比較して、最大で７つ、６つ、５つ、４つ、３つ、２つ、または１つのアミノ酸置換を含む。一態様において、前記置換は、式Ｉの位置１、２、１４、１６、１８、２０および３１の位置に対応する位置の一つまたは複数に存在し、本明細書では式ＩＩ：Ｘ１−Ｘ２−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｘ１４−Ａｓｐ−Ｘ１６−Ｉｌｅ−Ｘ１８−Ｇｌｎ−Ｘ２０−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ｌｙｓ−Ｘ３１で示される。式ＩＩは配列表に配列番号  ４８として含まれている。一態様において、本発明の誘導体のＧＩＰ類似体は、Ｃ末端カルボン酸またはアミドの形態でありうる。
【００３８】
また、あるいは代替的に、一態様では、本発明の誘導体のＧＩＰ類似体は、式Ｉまたは式ＩＩへのＣ末端伸長を含む。さらなる態様において、本発明の誘導体のＧＩＰ類似体は、式ＩＩＩ：Ｌｙｓ−Ｘ３３−Ｘ３４−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎで示されるＣ末端伸長を含み、式中、Ｘ３３はＬｙｓまたはＧｌｕであり、Ｘ３４はＡｓｎ、ＧｌｕまたはＡｓｐである。Ｃ末端伸長は、式１または式ＩＩのＣ末端カルボン酸から式ＩＩＩのＮ末端アミノ基までのアミド結合を介して、式Ｉまたは式ＩＩに結合している。式ＩＩＩは配列表に配列番号  ５１として含まれている。
【００３９】
以下は、適切な類似体命名法の非限定的な例である。
【００４０】
例として、［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）は、ｈＧＩＰ（１−３１）と比較して４つの置換を含む。さらなる例として、［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）は、ｈＧＩＰ（１−３１）と比較して６つの置換を含む。同様に、［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミドは置換の数が骨格を示すように、ｈＧＩＰ（１−３１）と比較して６つの置換を含む。
【００４１】
ある特定の変化を「含む」類似体は、それぞれの式と比較したときに、さらなる変化を含みうる。特定の実施形態において、類似体は、特定の変化を「有する」。
【００４２】
上記の例から明らかなように、アミノ酸残基は、その完全な名称、１文字コードおよび／または３文字コードによって同定されうる。これら三つの方法は、完全に同等である。
【００４３】
「〜と同等の位置」または「〜に対応する位置」という表現は、例えば、ｈＧＩＰ（１−３１）またはｈＧＩＰ（１−４２）などの所与の配列を参照することによって、変異体ＧＩＰ配列の変化部位を特徴付けるために使用されうる。
【００４４】
「ペプチド」という用語は、例えば本発明の誘導体のＧＩＰ類似体の文脈で使用される場合、アミド（またはペプチド）結合によって相互接続された一連のアミノ酸を含む化合物を指す。
【００４５】
アミノ酸は、アミノ基およびカルボン酸基、ならびに任意選択に、側鎖と呼ばれることの多い一つまたは複数の追加的な基を含む分子である。
【００４６】
「アミノ酸」という用語は、タンパク質構成（またはコード化または天然）アミノ酸（２０の標準アミノ酸中）、ならびに非タンパク質構成（または非コード化または非天然）アミノ酸を含む。タンパク質構成アミノ酸は、天然においてタンパク質に組み込まれるものである。標準アミノ酸は、遺伝子コードによってコードされるアミノ酸である。非タンパク質構成アミノ酸は、タンパク質内に見出されないか、標準的な細胞機構によって産生されない（たとえば、これらは、翻訳後修飾に供されない）。非タンパク質構成アミノ酸の非限定的な例は、Ａｉｂ（α−アミノイソ酪酸）、Ｎｌｅ（ノルロイシン）、ならびにタンパク質構成アミノ酸のＤ−異性体である。タンパク質構成アミノ酸のＤ−異性体の非限定的な例は、チロシンまたはアラニンのＤ−異性体であり、これはそれぞれＤ−ＴｙｒまたはＤ−Ａｌａと書くことができる。
【００４７】
下文において、光学異性体が明言されていない本発明の誘導体のＧＩＰ類似体のすべてのアミノ酸は、（別段の指定がない限り）Ｌ−異性体を意味すると理解されるべきである。 
【００４８】
ＧＩＰ誘導体
ＧＩＰ類似体の文脈で「誘導体」という用語が本明細書で使用される場合、一つまたは複数の置換基がペプチド骨格に共有結合している化学修飾ＧＩＰ類似体を意味する。
【００４９】
本発明の一態様において、置換基はＮ末端置換基でありうる。
【００５０】
また、あるいは代替的に、一態様では、置換基は修飾基であるか、あるいは伸長部分またはアルブミン結合部分と呼ばれうる。
【００５１】
「Ｎ末端置換基」または「修飾基」という用語は本明細書で使用する場合、化学的部分または水素原子を置き換える基を意味する。
【００５２】
一態様において、ＧＩＰ類似体の誘導体は、類似体のＮ末端にあるアミノ酸残基のα−アミノ基に共有結合した置換基を含む。一態様において、Ｎ末端置換基はアルカノイル基またはアシル基である。特定の態様において、Ｎ末端置換基はアセチル基である。Ｎ末端置換アミノ酸の例は、位置１にあるＡｃ−Ｔｙｒである。ＧＩＰ類似体のアミノ酸が天然Ｔｙｒである（例えば、Ｎ｛１｝−アセチル−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）はｈＧＩＰ（１−３１）と比較して４つの置換を含む）ため、このようなアセチル化は、ｈＧＩＰ（１−３１）と比較したペプチド骨格の置換としては数えられない。
【００５３】
または、あるいは代替的に、一態様では、ＧＩＰ類似体は、ｈＧＩＰ（１−３１）またはｈＧＩＰ（１−４２）の位置２４に対応するアミノ酸残基に共有結合した修飾基を含む。さらなる態様において、修飾基はタンパク質（例えば、アルブミン）と非共有結合抱合体を形成する能力があり、それによって誘導体の血流内での循環を促進し、またＧＩＰ誘導体とアルブミンの抱合体は緩慢にのみ分解されて有効活性成分を放出するという事実により、誘導体の作用時間を延長させる効果を有する。
【００５４】
修飾基は、アシル化によって、すなわち、修飾基のカルボン酸基と前記リジン基のイプシロンアミノ基との間に形成されたアミド結合を介して、ＧＩＰ類似体のリジン残基に共有結合されうる。リジンのアミノ基はまた、還元的アミノ化によって修飾基のアルデヒドに結合しうる。
【００５５】
一態様において、修飾基は、アシル化によって、すなわち、修飾基のカルボン酸基とリジン基のイプシロンアミノ基との間に形成されたアミド結合を介して、ｈＧＩＰ（１−３１）またはｈＧＩＰ（１−４２）の位置２４に対応する位置にあるリジン残基に共有結合している。
【００５６】
一実施形態において、修飾基はＡ−Ｂ−Ｃ−で定義され、Ａ−は、遠位端に陰性荷電部分を有する親油性部分であり、Ｂ−Ｃ−はリンカーである。一実施形態において、修飾基はＡ−Ｂ−Ｃ−で定義され、Ａ−は、遠位端に陰性荷電部分を有する親油性部分であり、Ｂ−Ｃ−は少なくとも一つの陰性荷電部分を含むリンカーである。
【００５７】
本明細書で使用される「親油性部分」という用語は、８〜３０個の炭素原子、好ましくは１０〜２８個の炭素元素、より好ましくは１２〜２４個の炭素原子、さらにより好ましくは１４〜２０個の炭素原子、最も好ましくは１６〜１８個の炭素原子の脂肪族炭化水素鎖を意味し、前記炭化水素は追加的置換基を含んでもよい。
【００５８】
本明細書で使用される「陰性荷電部分」という用語は、生理的ｐＨ（７．４）で陰性に荷電した陰性荷電可能な化学的部分を意味する。陰性荷電部分の例は、カルボン酸類またはそのアイソスター（スルホン酸類もしくはテトラゾール類）である。好ましい実施形態において、陰性荷電部分はカルボン酸部分である。
【００５９】
本明細書で使用される「遠位」という用語は、Ａ−のＢ−への結合点から最も遠い（末端）ことを意味する。
【００６０】
本発明の誘導体は、同じ分子式および結合原子の配列を有するが、空間内におけるそれらの原子の三次元配向においてのみ異なる、異なる立体異性の形態で存在してもよい。本発明の例証された誘導体の立体異性は、標準的な命名法を使用して、実験セクションにおいて、名前ならびに構造において示されている。別段の記載のない限り、本発明は特許請求される誘導体のすべての立体異性の形態に関する。
【００６１】
本発明の誘導体はＧＩＰ活性を有する。この用語は、ＧＩＰ受容体に結合してシグナル伝達経路を開始し、当該技術分野で周知のようにインスリン分泌作用またはその他の生理的作用をもたらす能力を指す。例えば、本発明の誘導体は、本明細書の実施例１〜６に記述されたアッセイを使用してＧＩＰ活性または安定性を試験することができる。
【００６２】
薬学的に許容される塩、アミド、またはエステル
本発明の誘導体は、薬学的に許容される塩、またはアミドの形態でありうる。
【００６３】
塩は、例えば、塩基と酸の化学反応によって形成される。例：２ＮＨ３  ＋  Ｈ２ＳＯ４  →  （ＮＨ４）２ＳＯ４。
【００６４】
塩は塩基性塩、酸性塩である場合があり、またはどちらでもない場合もある（すなわち、中性塩）。塩基性塩は、水中で水酸化イオンを、酸性塩はヒドロニウムイオンを生成する。
【００６５】
本発明の誘導体の塩は、陰イオン基と陽イオン基の間で、それぞれ追加的な陽イオンまたは陰イオンと共に形成されうる。これらの基は、本発明の誘導体のペプチド部分にある、および／または修飾基にあってもよい。
【００６６】
本発明の誘導体の陰イオン基の非限定的な例には、存在する場合、側鎖中ならびにペプチド部分の遊離カルボキシル基が含まれる。ペプチド部分はしばしば、Ｃ末端に遊離カルボン酸基を含み、またＡｓｐおよびＧｌｕなどの内部酸性アミノ酸残基に遊離カルボキシル基を含んでもよい。
【００６７】
ペプチド部分の陽イオン基の非限定的な例には、存在する場合、Ｎ末端の遊離アミノ基、ならびにＨｉｓ、ＡｒｇおよびＬｙｓなどの内部塩基アミノ酸残基の任意の遊離アミノ基が含まれる。
【００６８】
本発明の誘導体のアミドは、例えば、遊離カルボン酸基とアミンまたは置換アミンの反応によって、または遊離または置換アミノ基とカルボン酸の反応によって形成されうる。
【００６９】
アミド形成には、ペプチドのＣ末端にある遊離カルボキシル基、側鎖の任意の遊離カルボキシル基、ペプチドのＮ末端にある遊離アミノ基、ならびに／またはペプチドおよび／もしくは側鎖のペプチドの遊離もしくは置換アミノ基が関与しうる。
【００７０】
一態様において、本発明の誘導体は、薬学的に許容される塩の形態であり、ナトリウム塩の形態であることが好ましい。また、あるいは代替的に、一態様では、本発明の誘導体は、薬学的に許容されるアミドであり、ペプチドのＣ末端にアミド基を有することが好ましい。
【００７１】
機能特性
第一の機能的態様において、本発明の誘導体は、ＧＩＰ受容体において良好な効力を有する。それらは、ＧＩＰ受容体を活性化する能力によって反映されるように、強力なＧＩＰ受容体アゴニストであることが好ましい。また、あるいは代替的に、第二の機能的態様において、それらは、体重、食物摂取および耐糖能両方へのインビボ効果を、単独およびＧＬＰ−１受容体アゴニストとの組み合わせで有する。また、あるいは代替的に、第三の機能的態様において、それらは改善された薬物動態特性を有する。また、あるいは代替的に、第四の機能的態様において、本発明の誘導体は物理的に安定である。また、あるいは代替的に、第五の機能的態様において、本発明の誘導体は化学的に安定である。
【００７２】
生物活性  -  インビトロ効力
第一の機能的態様によると、本発明の誘導体、ならびに［Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）などの構成ＧＩＰ類似体またはその類似体は、ヒトＧＩＰ受容体において生理学的に活性である、または効力を有する。
【００７３】
一実施形態において、効力および／または活性とは、インビトロ効力、すなわち、機能的ＧＩＰ受容体アッセイにおける性能、さらに具体的にはヒトＧＩＰ受容体を活性化する能力を指す。
【００７４】
インビトロ効力は、例えば、ヒトＧＩＰ受容体を発現している膜を含有する媒体中、および／またはヒトＧＩＰ受容体を発現している全細胞を用いたアッセイで決定されうる。
【００７５】
例えば、ヒトＧＩＰ受容体の反応は、受容体遺伝子アッセイで、例えば、ヒトＧＩＰ受容体を発現し、かつホタルルシフェラーゼ（ＣＲＥルシフェラーゼ）に対するプロモーターおよび遺伝子と結合したｃＡＭＰ応答配列（ＣＲＥ）のＤＮＡを含有するＢＨＫ安定発現細胞株中で測定しうる。ｃＡＭＰがＧＩＰ受容体の活性化の結果として生成されるとき、これは次にルシフェラーゼの発現をもたらす。ルシフェラーゼは、ルシフェリンを追加することによって決定することができ、これは酵素によってオキシルシフェリンに変換されて生物発光を生じ、これが測定されて、インビトロ効力の尺度となる。このようなアッセイの一つの非限定的な例を、本明細書の実施例２に記述する。
【００７６】
５０％効果濃度（ＥＣ５０）は一般的に、用量反応曲線を参照することにより、ベースラインと最大の中間の反応を誘発する濃度を指す。ＥＣ５０は、化合物の効力の尺度として使用され、その最大効果の５０％が観察される濃度を表す。
【００７７】
本発明の誘導体のインビトロ効力は、上述のように決定することができ、対象の誘導体のＥＣ５０が決定される。ＥＣ５０値がより低いほど、効力がより良好である。
【００７８】
さらなる特定の実施形態において、本発明の誘導体は、実施例２の方法を使用して決定したとき、５０００  ｐＭ以下のＥＣ５０に対応するインビトロ効力を有し、９００  ｐＭ未満であることがより好ましく、５００  ｐＭ未満であることがさらにより好ましく、２００  ｐＭ未満であることが最も好ましい。
【００７９】
さらなる特定の実施形態において、本発明の誘導体は、ヒトＧＬＰ−１受容体およびヒトグルカゴン受容体よりも選択的にＧＩＰ受容体を活性化することができる。ＧＬＰ−１受容体およびグルカゴン受容体と比較して、ＧＩＰ受容体の活性化に関して使用するとき、「選択的に」という用語は、ＣＲＥルシフェラーゼ機能的効力アッセイなどの受容体機能の効力アッセイにおいてインビトロで測定し、ＥＣ５０値で比較した場合、ＧＬＰ−１受容体およびグルカゴン受容体よりも、ＧＩＰ受容体に対して、少なくとも５０倍、少なくとも５００倍、または少なくとも１０００倍など、少なくとも１０倍良好な効力を示す誘導体を指す。ＧＬＰ−１受容体およびグルカゴン受容体よりもＧＩＰ受容体における本発明の誘導体の「より良好な効力」という用語は、それぞれＧＬＰ−１受容体対ＧＩＰ受容体、またはグルカゴン受容体対ＧＩＰ受容体のＥＣ５０値の比によって決定される。
【００８０】
生物活性  -  インビボ薬理学
第二の機能的態様によると、本発明のＧＩＰ誘導体、ならびに  ［Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）などの構成ＧＩＰ類似体またはその類似体は、インビボで効力を有するが、これは当該技術分野で周知のように、任意の適切な動物モデルならびに臨床試験で決定しうる。
【００８１】
食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）マウスは適切な動物モデルの一例であり、体重、食物摂取および耐糖能への効果を、このモデルの亜慢性投薬中に評価することができる。本発明のＧＩＰ誘導体の体重、食物摂取および耐糖能への効果は、例えば本明細書の実施例６に記述するように、このようなマウスのインビボで決定しうる。食物摂取は、動物を単独収容し、１日あたり摂取した食物を計量することによって評価することができる。またこのモデルを使用して、経口または腹腔内ブドウ糖負荷試験（ＯＧＴＴまたはＩＰＧＴＴ）を実施することにより、耐糖能への効果を評価することができる。これらの試験は、半絶食した動物に糖負荷を経口または腹腔内投与し、その後３時間まで血糖を測定することにより実施される。
【００８２】
薬物動態プロファイル
第三の機能的態様によると、本発明の誘導体は、終末相半減期の増加など、改善された薬物動態特性を有する。
【００８３】
終末相半減期の増加は、対象の化合物がよりゆっくりと体から排出されることを意味する。本発明の誘導体について、これは薬理効果の期間延長を必然的に伴う。
【００８４】
本発明の誘導体の薬物動態特性は、薬物動態（ＰＫ）研究においてインビボで適切に決定されうる。このような研究は、医薬品が体内でどのように吸収、分布および排出され、これらの過程が経時的に体内の化合物の濃度にどのように影響するかを評価するために実施される。
【００８５】
医薬品開発の発見および前臨床段階において、マウス、ラット、サル、イヌ、またはブタなどの動物モデルを使用してこの特徴付けを実施しうる。これらのモデルのどれでも、本発明の誘導体の薬物動態特性を試験するために使用することができる。
【００８６】
このような研究において、動物は典型的に、薬物の単一用量を妥当な製剤で、静脈内（ｉ．ｖ．）、皮下（ｓ．ｃ．）または経口（ｐ．ｏ．）投与される。血液試料を投与後の所定の時点で採取し、薬剤の濃度について試料を妥当な定量アッセイで分析する。これらの測定値に基づいて、試験化合物の時間−血漿濃度プロファイルをプロットし、データのいわゆるノンコンパートメント薬物動態速度論解析を実施する。
【００８７】
大部分の化合物について、血漿濃度プロファイルの終末部分は、片対数プロットしたときに直線的となり、初期吸収および分布後、薬剤が一定の分画速度で体内から除去されることを反映している。この速度（ラムダＺまたはλｚ）は、プロットの終末部分の傾きのマイナスに等しい。この速度から、終末相半減期も、ｔ１／２＝  ｌｎ（２）  ／  λｚとして計算しうる（例えば、Ｊｏｈａｎ  Ｇａｂｒｉｅｌｓｓｏｎ  ａｎｄ  Ｄａｎｉｅｌ  Ｗｅｉｎｅｒ：  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ  ａｎｄ  Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃ  Ｄａｔａ  Ａｎａｌｙｓｉｓ．  Ｃｏｎｃｅｐｔｓ  ＆  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，  ３ｒｄ  Ｅｄ．，  Ｓｗｅｄｉｓｈ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ，  Ｓｔｏｃｋｈｏｌｍ  （２０００）を参照）。
【００８８】
クリアランスは、静脈内投与後に決定することができ、用量（Ｄ）を、血漿濃度対時間プロファイルの曲線下面積（ＡＵＣ）で割ったものとして定義される（Ｒｏｗｌａｎｄ，  Ｍ  ａｎｄ  Ｔｏｚｅｒ  ＴＮ：  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ：  Ｃｏｎｃｅｐｔｓ  ａｎｄ  Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，  ３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，  １９９５  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  Ｗｉｌｋｉｎｓ）。
【００８９】
終末相半減期および／またはクリアランスの推定は、投与レジメンの評価に関連し、薬剤開発、新しい医薬品の評価において重要なパラメータである。
【００９０】
薬物動態プロファイル  -  ミニブタにおけるインビボ半減期
第三の機能的態様によると、本発明の誘導体は、改善された薬物動態特性を有する。
【００９１】
特定の実施形態において、薬物動態特性は、例えば、本明細書の実施例３に記述されるように、静脈内投与後のミニブタにおけるインビボの終末相半減期（ｔ１／２）として決定されうる。
【００９２】
特定の実施形態において、ミニブタの終末相半減期は少なくとも２４時間であり、少なくとも４０時間であることが好ましく、少なくとも６０時間であることがさらにより好ましい。
【００９３】
物理的特性
第四の機能的態様によると、本発明の誘導体は、溶液中で改善した物理的安定性を有する。「物理的安定性」という用語は、生物学的に不活性および／または不溶性の凝集体（例えば、アミロイド線維またはゲル）を形成するポリペプチドの傾向を指す。
【００９４】
特定の実施形態において、改善された物理的安定性は、例えば、本明細書の実施例４に記述されるように、チオフラビンＴ（ＴｈＴ）細線維化アッセイのラグタイムおよび／または回収率を測定することにより決定しうる。
【００９５】
さらなる特定の実施形態において、本発明の誘導体は、本明細書に記述された実施例４に示すものなど、ＴｈＴ細線維化アッセイにおいて７０パーセントを超える回収率を有し、９０パーセントを超える回収率が好ましく、９５パーセントを超える回収率がさらにより好ましく、９８パーセントを超える回収率が最も好ましい。
【００９６】
さらなる特定の実施形態において、本発明の誘導体は、本明細書に記述された実施例４に示すものなど、ＴｈＴ細線維化アッセイにおいて１０時間を超えるラグタイムを有し、２０時間を超えることが好ましく、４５時間を超えることがさらにより好ましい。
【００９７】
特定の実施形態において、改善された物理的安定性は、例えば本明細書の実施例４に記述されるように、動的光散乱安定性指標（ＤＬＳ−ＳＩ）アッセイによって決定しうる。
【００９８】
さらなる特定の実施形態において、本発明の誘導体は、本明細書の実施例４に示されるものなど、ＤＬＳ−ＳＩアッセイにおいて低いＤＬＳ−ＳＩ値を有し、７未満であることが好ましく、２未満であることがより好ましい。
【００９９】
さらなる特定の実施形態において、本発明の誘導体は、本明細書の実施例４に示すものなど、ＤＬＳ−ＳＩアッセイにおいて沈殿を全くまたはほとんど示さず、沈殿が全くないことが好ましい。
【０１００】
化学的特性
第五の機能的態様によると、本発明の誘導体は、改善された化学的安定性を有する。「化学的安定性」という用語は、インタクトなポリペプチドと比較して、低減した生物学的効力、および／または増加した免疫原性効果を潜在的に有する、高分子タンパク質（ＨＭＷＰ）、脱アミド、異性化および加水分解産物など、化学分解産物の形成をもたらすポリペプチド構造の化学的（特に共有結合の）変化を指す。
【０１０１】
特定の実施形態において、改善された化学的安定性は、例えば本明細書の実施例５に記述されるように、異なる環境条件への曝露後、様々な時点で化学的分解産物の量を、例えばＳＥＣ−ＨＰＬＣおよび／またはＬＣＭＳで測定することにより、ＨＭＷＰの含量および／または純度損失を測定することによって決定しうる。
【０１０２】
さらなる特定の実施形態において、本発明の誘導体は、本明細書に記述される実施例５に示すものなど、１カ月あたりの純度損失が３５パーセント未満であり、１５パーセント未満であることが好ましく、７パーセント未満であることがより好ましい。
【０１０３】
さらなる特定の実施形態において、本発明の誘導体は、本明細書に記述される実施例５に示すものなど、１カ月あたりのＨＭＷＰ形成が４パーセント未満であり、２パーセント未満であることが好ましく、１パーセント未満であることがより好ましい。
【０１０４】
本発明の誘導体の追加的な特定の実施形態を、「特定の実施形態」と題する節に記述する。
【０１０５】
生成プロセス
ｈＧＩＰ（１−３１）およびｈＧＩＰ類似体などのペプチドの生成は当該技術分野で周知である。
【０１０６】
［Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）または類似体またはその断片など、本発明の二環式誘導体のＧＩＰ類似体（またはその断片）は、例えば、ｔ−Ｂｏｃ化学もしくはＦｍｏｃ化学または他の確立された技術を用いた固相ペプチド合成など、伝統的ペプチド合成により生成されてもよく、例えば、Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｗｕｔｓ，  “Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”、Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，  １９９９，  Ｆｌｏｒｅｎｃｉｏ  Ｚａｒａｇｏｚａ  Ｄｏｒｗａｌｄ，  “Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｎ  ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ”、Ｗｉｌｅｙ−ＶＣＨ  Ｖｅｒｌａｇ  ＧｍｂＨ，  ２０００，  ａｎｄ  “Ｆｍｏｃ  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，  Ｅｄｉｔｅｄ  ｂｙ  Ｗ．Ｃ．  Ｃｈａｎ  ａｎｄ  Ｐ．Ｄ．  Ｗｈｉｔｅ，  Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，  ２０００を参照されたい。
【０１０７】
また、あるいは代替的に、それらは、遺伝子組換え方法により、すなわち、類似体をコードしているＤＮＡ配列を含み、かつペプチドの発現を許す条件下で、適切な栄養培地でペプチドを発現することができる宿主細胞を培養することによって、生成してもよい。これらのペプチドの発現に適した宿主細胞の非限定的な例は、大腸菌、出芽酵母、ならびに哺乳類ＢＨＫまたはＣＨＯ細胞株である。
【０１０８】
非天然アミノ酸および／または共有結合したＮ末端モノまたはジペプチド模倣物を含む、本発明のこれらの誘導体は、例えば、実験部分に記述されたように生成しうる。または、例えば、Ｈｏｄｇｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ：  “Ｔｈｅ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ｎｏｎ−ｎａｔｕｒａｌ  ａｍｉｎｏ  ａｃｉｄｓ”，  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｓｏｃｉｅｔｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，  ｖｏｌ．  ３３，  ｎｏ．  ７  （２００４），  ｐ．  ４２２−４３０を参照のこと。
【０１０９】
本発明の多数の誘導体を調製する方法の特定の例が、実験部分に含まれている。
【０１１０】
医薬組成物
本発明の誘導体を含む注射可能な組成物は、望ましい最終製品を与えるために、必要に応じて成分の溶解および混合を伴う製薬業界の従来技術を使用して調製することができる。このため、一つの手順によると、本発明の誘導体を、沈殿が最小化または回避されるように、適切なｐＨの適切な緩衝液に溶解する。注射可能な組成物は、例えば、除菌ろ過によって無菌化される。
【０１１１】
本発明の誘導体またはその薬学的に許容される塩、またはアミド、および薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物は、当該技術分野で周知のように調製されうる。
【０１１２】
「賦形剤」という用語は、活性治療的成分以外の任意の成分を広く指す。賦形剤は、非活性物質、不活性物質および／または医薬的に活性でない物質でありうる。
【０１１３】
様々な賦形剤を伴った薬学的活性成分の製剤は、当該技術分野で周知であり、例えばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：      Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（たとえば、第１９版（１９９５）および任意のその後の版）を参照されたい。
【０１１４】
組成物は安定化された製剤でもよい。「安定化された製剤」という用語は、物理的安定性および／または化学的安定性が増加した、好ましくはこの両方が増加した製剤を指す。概して、製剤は、有効期限に到達するまで、（推奨される使用条件および保管条件に準拠した）使用中および保管中において安定していなければならない。
【０１１５】
本発明による誘導体を使用した治療はまた、例えば、ＧＬＰ−１受容体アゴニスト、またはＧＬＰ−１／グルカゴン受容体コアゴニストから選択される、一つまたは複数の追加的薬理活性物質と組み合わせてもよい。
【０１１６】
本発明の一態様において、本発明の誘導体は、ＧＬＰ−１受容体アゴニストと組み合わされる。化合物は、単一剤形が両方の化合物を含有する単一剤形で、または第一の単位剤形として本発明の誘導体の調剤および第二の単位投薬形態としてＧＬＰ−１受容体アゴニストの調剤を含む部品のキットの形態で供給されうる。
【０１１７】
本発明の誘導体と組み合わされるＧＬＰ−１受容体アゴニストの非限定的な例は、リラグルチド、セマグルチド、エキセナチド、デュラグルチド、リキシセナチド、タスポグルチド、およびアルビグルチドである。セマグルチドは、ＷＯ２００６／０９７５３７号、実施例４に記述されるように調製されうるＧＬＰ−１受容体アゴニストであり、Ｎ６，２６−｛１８−［Ｎ−（１７−カルボキシヘプタデカノイル）−Ｌ−γ−グルタミル］−１０−オキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９，１８−ジアザオクタデカノイル｝−［８−（２−アミノ−２−プロパン酸），３４−Ｌ−アルギニン］ヒトグルカゴン様ペプチド１（７−３７）としても知られる。ＷＨＯ  Ｄｒｕｇ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ  Ｖｏｌ．  ２４，  Ｎｏ．  １，  ２０１０  （配列番号５７）を参照。
【０１１８】
ＧＬＰ−１／グルカゴン受容体コアゴニストの非限定的な例は、ＷＯ  ２０１４／１７０４９６号に記述されている。例えば、現在の配列番号５２、５３、５４、５５または５６を参照。
【０１１９】
医薬品の適応症
本発明はまた、薬剤用のＧＩＰ類似体の誘導体に関する。
【０１２０】
特定の実施形態では、本発明の誘導体は、以下の医学的治療に使用されうる：
（ｉ）高血糖症、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、非インスリン依存性糖尿病、ＭＯＤＹ（若年発症成人型糖尿病）、妊娠糖尿病などのすべての形態の糖尿病の予防および／もしくは治療、ならびに／またはＨｂＡ１Ｃの低減、
（ｉｉ）２型糖尿病の進行などの糖尿病疾患の進行の遅延または予防、耐糖能障害（ＩＧＴ）からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、インスリン耐性の遅延または予防、および／またはインスリンを必要としない２型糖尿病からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、
（ｉｉｉ）例えば、食事量の減少、体重減少、食欲の抑制、満腹感の誘発による、肥満などの摂食障害の予防および／もしくは治療；過食性障害、神経性大食症、および／もしくは抗精神病薬もしくはステロイドの投与によって誘発された肥満の治療もしくは予防、胃内容排出の遅延、身体的可動性の増加、ならびに／または骨関節炎および／もしくは尿失禁などの肥満の共存疾患の予防および／もしくは治療、
（ｉｖ）（薬剤誘発性または食事と運動による）減量成功後の体重維持‐すなわち、減量成功後の体重増加の予防。
（ｖ）脂肪肝、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝臓炎または脂肪肝などの肝臓障害の予防および／または治療。
【０１２１】
特定の実施形態において、適応症は２型糖尿病および／または肥満である。
【０１２２】
いくつかの実施形態で、本発明は、体重管理の方法に関する。いくつかの実施形態で、本発明は、食欲を低下させるための方法に関する。いくつかの実施形態で、本発明は、食物摂取量を減少させるための方法に関する。
【０１２３】
一般に、肥満を患っているすべての対象は、過体重も患っていると考えられる。いくつかの実施形態で、本発明は、肥満を治療または予防するための方法に関する。いくつかの実施形態で、本発明は、肥満を治療または予防するための本発明の誘導体の使用に関する。いくつかの実施形態では、肥満を患っている対象者は、成人のヒトまたは小児（ｐａｅｄｉａｔｒｉｃ）のヒト（幼児、小児（ｃｈｉｌｄｒｅｎ）、青年を含む）などのヒトである。ボディマス指数（ＢＭＩ）は、身長および体重に基づく体脂肪の尺度である。計算式は、ＢＭＩ＝体重（キログラム）／身長（メートル）２である。肥満を患っているヒト対象は３０以上のＢＭＩを有することがあり、この対象は肥満とも呼ばれる場合がある。いくつかの実施形態において、肥満を患っているヒト対象は、３５以上のＢＭＩを有するか、または３０以上４０未満の範囲のＢＭＩを有する。いくつかの実施形態において、肥満は、ヒト対象が４０以上のＢＭＩを有する重度の肥満または病的肥満である。
【０１２４】
いくつかの実施形態において、本発明は、任意選択で少なくとも一つの体重に関連する併存疾患の存在下での過体重の治療または予防のための方法に関する。いくつかの実施形態において、本発明は、任意選択で少なくとも一つの体重に関連する併存疾患の存在下での過体重の治療または予防のためのＧＩＰ類似体の誘導体の使用に関する。いくつかの実施形態では、過体重を患っている対象は、成人のヒトまたは小児のヒト（幼児、小児、および青年を含む）などのヒトである。いくつかの実施形態において、過体重を患っているヒト対象は、２５以上のＢＭＩ（２７以上のＢＭＩなど）を有する。いくつかの実施形態では、過体重を患っているヒト対象は、２５〜３０未満の範囲または２７〜３０未満の範囲のＢＭＩを有する。いくつかの実施形態では、体重関連の併存疾患は、高血圧、糖尿病（２型糖尿病など）、脂質異常症、高コレステロール、および閉塞性睡眠時無呼吸からなる群から選択される。
【０１２５】
いくつかの実施形態では、本発明は、体重を低下させるための方法に関する。いくつかの実施形態では、本発明は、体重を低下させるためのＧＩＰ類似体の誘導体の使用に関する。本発明による体重の減少を享受するヒトは、２５以上のＢＭＩ（２７以上のＢＭＩまたは３０以上のＢＭＩなど）を有しうる。いくつかの実施形態では、本発明による体重の減少を享受するヒトは、３５以上のＢＭＩまたは４０以上のＢＭＩを有しうる。「体重の減少」という用語は、肥満および／または過体重の治療または予防を含みうる。
【０１２６】
特定の実施形態
本発明は、以下の非限定的実施形態によってさらに説明されうる：
【０１２７】
1.        式Ｉ（配列番号３）を含むＧＩＰ類似体の誘導体：
Ｔｙｒ−Ａｌａ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｍｅｔ−Ａｓｐ−Ｌｙｓ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｎ−Ｇｌｎ−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ｌｙｓ−Ｇｌｙ                         （Ｉ）、
式中、修飾基は位置２４にあるリジンのイプシロンアミノ基の側鎖に共有結合しており、修飾基はＡ−Ｂ−Ｃ−により定義され、Ａ−は遠位端に陰性荷電部分を有する親油性部分であり、Ｂ−Ｃ−はリンカーであり、
ＧＩＰ類似体はｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号２）と比較して、最大８つのアミノ酸置換を有する、誘導体
または薬学的に許容される塩、またはそのアミド。
【０１２８】
2.        式ＩＩ（配列番号４８）を含む実施形態１に記載の誘導体：
Ｘ１−Ｘ２−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｉｌｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｔｙｒ−Ｓｅｒ−Ｉｌｅ−Ａｌａ−Ｘ１４−Ａｓｐ−Ｘ１６−Ｉｌｅ−Ｘ１８−Ｇｌｎ−Ｘ２０−Ａｓｐ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ｌｙｓ−Ｔｒｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ−Ｇｌｎ−Ｌｙｓ−Ｘ３１                           （ＩＩ）、
式ＩＩは位置Ｘ１、Ｘ２、Ｘ１４、Ｘ１６、Ｘ１８、Ｘ２０、および／またはＸ３１に任意のアミノ酸を含み、
ＧＩＰ類似体はｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号２）と比較して、最大８つのアミノ酸置換を有する。
【０１２９】
3.        式ＩＩを含む実施形態１〜２のいずれか一つに記載の誘導体であり、式中、位置Ｘ１、Ｘ２、Ｘ１４、Ｘ１６、Ｘ１８、Ｘ２０、および／またはＸ３１のアミノ酸は（配列番号４９）から選択され、
Ｘ１はＴｙｒまたはＤ−Ｔｙｒであり、
Ｘ２はＡｉｂ、Ａｌａ、またはＤ−Ａｌａであり、
Ｘ１４はＬｅｕ、Ｎｌｅ、ＡｓｐまたはＭｅｔであり、
Ｘ１６はＬｙｓまたはＡｌａであり、
Ｘ１８はＡｒｇまたはＨｉｓであり、
Ｘ２０はＧｌｎ、ＧｌｕまたはＡｉｂであり、
Ｘ３１はＧｌｙまたはＰｒｏである。
【０１３０】
4.        式ＩＩを含む先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体であり、式中、位置Ｘ１、Ｘ２、Ｘ１４、Ｘ１６、Ｘ１８、Ｘ２０、および／またはＸ３１のアミノ酸は（配列番号６４）から選択され、
Ｘ１はＴｙｒまたはＤ−Ｔｙｒであり、
Ｘ２はＡｉｂ、Ａｌａ、またはＤ−Ａｌａであり、
Ｘ１４はＬｅｕ、Ｎｌｅ、またはＭｅｔであり、
Ｘ１６はＬｙｓまたはＡｌａであり、
Ｘ１８はＡｒｇまたはＨｉｓであり、
Ｘ２０はＧｌｎ、ＧｌｕまたはＡｉｂであり、
Ｘ３１はＧｌｙまたはＰｒｏである。
【０１３１】
5.        式ＩＩを含む先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体であり、式中、位置Ｘ１、Ｘ２、Ｘ１４、Ｘ１６、Ｘ１８、Ｘ２０、および／またはＸ３１のアミノ酸は（配列番号６３）から選択され、
Ｘ１はＴｙｒまたはＤ−Ｔｙｒであり、
Ｘ２はＡｉｂまたはＡｌａであり、
Ｘ１４はＮｌｅ、ＡｓｐまたはＬｅｕであり、
Ｘ１６はＬｙｓまたはＡｌａであり、
Ｘ１８はＡｒｇまたはＨｉｓであり、
Ｘ２０はＧｌｎ、ＧｌｕまたはＡｉｂであり、
Ｘ３１はＧｌｙまたはＰｒｏである。
【０１３２】
6.        式ＩＩを含む先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体であり、式中、位置Ｘ１、Ｘ２、Ｘ１４、Ｘ１６、Ｘ１８、Ｘ２０、および／またはＸ３１のアミノ酸（配列番号５０）から選択され、
Ｘ１はＴｙｒまたはＤ−Ｔｙｒであり、
Ｘ２はＡｉｂまたはＡｌａであり、
Ｘ１４はＮｌｅであり、
Ｘ１６はＬｙｓまたはＡｌａであり、
Ｘ１８はＡｒｇまたはＨｉｓであり、
Ｘ２０はＧｌｎ、ＧｌｕまたはＡｉｂであり、
Ｘ３１はＧｌｙまたはＰｒｏである。
【０１３３】
7.        誘導体が式ＩＩによって示される、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体であって、式中、位置Ｘ１、Ｘ２、Ｘ１４、Ｘ１６、Ｘ１８、Ｘ２０、および／またはＸ３１のアミノ酸は（配列番号６５）から選択され、
Ｘ１はＴｙｒ、Ａｃ−Ｔｙｒ、Ｄ−ＴｙｒまたはＡｃ−Ｄ−Ｔｙｒであり、
Ｘ２はＡｉｂ、Ａｌａ、またはＤ−Ａｌａであり、
Ｘ１４はＬｅｕ、Ｎｌｅ、ＡｓｐまたはＭｅｔであり、
Ｘ１６はＬｙｓまたはＡｌａであり、
Ｘ１８は  ＡｒｇまたはＨｉｓであり、
Ｘ２０はＧｌｎ、ＧｌｕまたはＡｉｂであり、
Ｘ３１はＧｌｙまたはＰｒｏである、
またはその薬学的に許容される塩、アミドである。
【０１３４】
8.        ＧＩＰ類似体が、ｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号２）と比較して最大７つのアミノ酸置換を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１３５】
9.        ＧＩＰ類似体が、ｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号２）と比較して最大６つのアミノ酸置換を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１３６】
10.       ＧＩＰ類似体が、ｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号２）と比較して最大５つのアミノ酸置換を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１３７】
11.       ＧＩＰ類似体が、ｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号２）と比較して最大４つのアミノ酸置換を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１３８】
12.       ＧＩＰ類似体が、ｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号２）と比較して最大３つのアミノ酸置換を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１３９】
13.       ＧＩＰ類似体が、ｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号２）と比較して最大２つのアミノ酸置換を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１４０】
14.       ＧＩＰ類似体が、ｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号２）と比較して最大１つのアミノ酸置換を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１４１】
15.       ＧＩＰ類似体が、ｈＧＩＰ（１−３１）（配列番号２）と比較して３〜６つのアミノ酸置換を有する、実施形態１〜１２のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１４２】
16.       修飾基がＡ−Ｂ−Ｃ−で定義され、Ａ−が、遠位端に陰性荷電部分を有する親油性部分であり、Ｂ−Ｃ−が少なくとも一つの陰性荷電部分を含むリンカーである、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１４３】
17.       リンカーＢ−Ｃ−が１〜６つの陰性荷電部分を含む、先行する実施形態の一つに記載の誘導体。
【０１４４】
18.       リンカーＢ−Ｃ−が１〜４つの陰性荷電部分を含む、先行する実施形態の一つに記載の誘導体。
【０１４５】
19.       リンカーＢ−Ｃ−の少なくとも一つの陰性荷電部分がガンマ−Ｇｌｕおよび／またはＡｓｐから選択される、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１４６】
20.       リンカーＢ−Ｃ−の少なくとも一つの陰性荷電部分がガンマ−Ｇｌｕである、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１４７】
21.       Ａ−が化学式１である、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【化１】
2020125311.tif 000002
ｐは１４〜２０の範囲の整数であり、
＊はＡ−とＢ−を接続しているアミド結合の位置を示す。
【０１４８】
22.       Ｂ−が化学式２である、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【化２】
2020125311.tif 000003
ｑは０〜１の範囲の整数であり、
ｒは１〜３の範囲の整数であり、
＊はＡ−とＢ−を接続しているアミド結合の位置を示し、＊＊はＢ−とＣ−を接続しているアミド結合の位置を示す。
【０１４９】
23.       Ｃ−が化学式３および化学式４から選択される、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【化３】
2020125311.tif 000004
【化４】
2020125311.tif 000005
ｓは１〜３の範囲の整数であり、
ｔは１〜４の範囲の整数であり、
ｕは１〜３の範囲の整数であり、
＊＊はＢ−とＣ−を接続しているアミド結合の位置を示し、＊＊＊はＣ−と、位置２４のリジンのイプシロンアミノ基を接続しているアミド結合の位置を示す。
【０１５０】
24.       修飾基がＡ−Ｂ−Ｃ−により定義され、
Ａ−が化学式１である、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【化５】
2020125311.tif 000006
ｐは、１４〜２０の範囲の整数であり、
＊はＡ−とＢ−を接続しているアミド結合の位置を示し、
Ｂ−は化学式２である。
【化６】
2020125311.tif 000007
ｑは０〜１の範囲の整数であり、
ｒは１〜３の範囲の整数であり、
＊はＡ−とＢ−を接続しているアミド結合の位置を示し、＊＊はＢ−とＣ−を接続しているアミド結合の位置を示し、
Ｃ−は化学式３および化学式４から選択される。
【化７】
2020125311.tif 000008
【化８】
2020125311.tif 000009
ｓは１〜３の範囲の整数であり、
ｔは１〜４の範囲の整数であり、
ｕは１〜３の範囲の整数であり、
＊＊はＢ−とＣ−を接続しているアミド結合の位置を示し、＊＊＊はＣ−と、位置２４のリジンのイプシロンアミノ基を接続しているアミド結合の位置を示す。
【０１５１】
25.       Ａ−が化学式１であり、ｐが１６〜１８である、実施形態２１または２４のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１５２】
26.       Ｂ−が化学式２であり、ｑが０〜１であり、ｒが２である、実施形態２２または２４のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１５３】
27.       Ｃ−が化学式３である、実施形態２３〜２４のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１５４】
28.       Ｃ−が化学式３であり、ｓが２である、実施形態２７に記載の誘導体。
【０１５５】
29.       Ｃ−が化学式３であり、ｔが２〜３である、実施形態２７〜２８のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１５６】
30.       Ｃ−が化学式４である、実施形態２３〜２４のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１５７】
31.       Ｃ−が化学式４であり、ｕが２である、実施形態３０に記載の誘導体。
【０１５８】
32.       修飾基Ａ−Ｂ−Ｃ−が、化学式５〜化学式１８から選択される、実施形態１〜２４のいずれか一つに記載の誘導体：
【化９】
2020125311.tif 000010
【化１０】
2020125311.tif 000011
【化１１】
2020125311.tif 000012
【化１２】
2020125311.tif 000013
【化１３】
2020125311.tif 000014
【化１４】
2020125311.tif 000015
【化１５】
2020125311.tif 000016
【化１６】
2020125311.tif 000017
【化１７】
2020125311.tif 000018
【化１８】
2020125311.tif 000019
【化１９】
2020125311.tif 000020
【化２０】
2020125311.tif 000021
【化２１】
2020125311.tif 000022
【化２２】
2020125311.tif 000023
【０１５９】
33.       Ｘ１がＴｙｒである、実施形態２〜３２のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１６０】
34.       Ｘ１がＤ-Ｔｙｒである、実施形態２〜３２のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１６１】
35.       Ｘ２がＡｉｂである、実施形態２〜３４のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１６２】
36.       Ｘ２がＡｌａである、実施形態２〜３４のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１６３】
37.       Ｘ２がＤ-Ａｌａである、実施形態２〜３４のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１６４】
38.       Ｘ１４がＬｅｕである、実施形態２〜３７のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１６５】
39.       Ｘ１４がＮｌｅである、実施形態２〜３７のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１６６】
40.       Ｘ１４がＡｓｐである、実施形態２〜３７のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１６７】
41.       Ｘ１４がＭｅｔである、実施形態２〜３７のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１６８】
42.       Ｘ１６がＬｙｓである、実施形態２〜４１のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１６９】
43.       Ｘ１６がＡｌａである、実施形態２〜４１のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１７０】
44.       Ｘ１８がＡｒｇである、実施形態２〜４３のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１７１】
45.       Ｘ１８がＨｉｓである、実施形態２〜４３のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１７２】
46.       Ｘ２０がＧｌｎである、実施形態２〜４５のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１７３】
47.       Ｘ２０がＧｌｕである、実施形態２〜４５のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１７４】
48.       Ｘ２０がＡｉｂである、実施形態２〜４５のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１７５】
49.       Ｘ３１がＧｌｙである、実施形態２〜４８のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１７６】
50.       Ｘ３１がＰｒｏである、実施形態２〜４８のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１７７】
51.       式ＩＩＩ（配列番号５１）によって定義されるペプチドが、式Ｉまたは式ＩＩのＣ末端カルボン酸基から式ＩＩＩのＮ末端アミノ基のアミド結合を介して、式Ｉまたは式ＩＩのＣ末端に結合されている、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体：
Ｌｙｓ−Ｘ３３−Ｘ３４−Ａｓｐ−Ｔｒｐ−Ｌｙｓ−Ｈｉｓ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ                           （ＩＩＩ）、
式中、
Ｘ３３はＬｙｓ、Ｇｌｕであり、
Ｘ３４はＡｓｎ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐである。
【０１７８】
52.       Ｘ３３がＬｙｓである、実施形態５１に記載の誘導体。
【０１７９】
53.       Ｘ３３がＧｌｕである、実施形態５１に記載の誘導体。
【０１８０】
54.       Ｘ３４がＡｓｎである、実施形態５１〜５３のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１８１】
55.       Ｘ３４がＧｌｕである、実施形態５１〜５３のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１８２】
56.       Ｘ３４がＡｓｐである、実施形態５１〜５３のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１８３】
57.       Ｎ末端アミノ酸がアシル化されている、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１８４】
58.       Ｎ末端アミノ酸がアセチル化されている、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１８５】
59.       Ｘ１がＡｃ-Ｔｙｒである、実施形態２〜３３、３５〜５８のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１８６】
60.       Ｘ１がＡｃ−Ｄ−Ｔｙｒである、実施形態２〜３２、３４〜５８のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１８７】
61.       ＧＩＰ類似体がＣ末端カルボン酸またはＣ末端アミドである、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１８８】
62.       ＧＩＰ類似体がＣ末端カルボン酸である、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１８９】
63.       Ｘ３１がＧｌｙ-ＯＨである、実施形態２〜４９、５７〜６２のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１９０】
64.       Ｘ３１がＰｒｏ−ＯＨである、実施形態２〜４８、５０、５７〜６２のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１９１】
65.       ＧＩＰ類似体がＣ末端アミドである、実施形態１〜６１のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１９２】
66.       Ｘ３１がＧｌｙ−ＮＨ２である、実施形態２〜４９、５７〜６１、６５のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１９３】
67.       Ｘ３１がＰｒｏ-ＮＨ２である、実施形態２〜４８、５０、５７〜６１、６５のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１９４】
68.       以下から選択される、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１、配列番号６）
【化２３】
2020125311.tif 000024
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物２、配列番号７）
【化２４】
2020125311.tif 000025
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物３、配列番号８）
【化２５】
2020125311.tif 000026
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物４、配列番号９）
【化２６】
2020125311.tif 000027
Ｎ｛１｝−アセチル，  Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物５、配列番号１０）
【化２７】
2020125311.tif 000028
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物６、配列番号１１）
【化２８】
2020125311.tif 000029
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物７、配列番号１２）
【化２９】
2020125311.tif 000030
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物８、配列番号１３）
【化３０】
2020125311.tif 000031
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物９、配列番号１４）
【化３１】
2020125311.tif 000032
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１０、配列番号１５）
【化３２】
2020125311.tif 000033
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ａｉｂ２０Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１１、配列番号１６）
【化３３】
2020125311.tif 000034
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ａｉｂ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１２、配列番号１７）
【化３４】
2020125311.tif 000035
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｌａ１６，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１３、配列番号１８）
【化３５】
2020125311.tif 000036
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｌａ１６，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１４、配列番号１９）
【化３６】
2020125311.tif 000037
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１５、配列番号２０）
【化３７】
2020125311.tif 000038
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１６、配列番号２１）
【化３８】
2020125311.tif 000039
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１７、配列番号２２）
【化３９】
2020125311.tif 000040
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１８、配列番号２３）
【化４０】
2020125311.tif 000041
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｓｐ１４，Ａｒｇ１８，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物１９、配列番号２４）
【化４１】
2020125311.tif 000042
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物２０、配列番号２５）
【化４２】
2020125311.tif 000043
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］−アミノ］ブタノイル］−アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物２１、配列番号２６）
【化４３】
2020125311.tif 000044
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物２２、配列番号２７）
【化４４】
2020125311.tif 000045
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物２３、配列番号２８）
【化４５】
2020125311.tif 000046
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｉｂ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物２４、配列番号２９）
【化４６】
2020125311.tif 000047
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ａｉｂ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物２５、配列番号３０）
【化４７】
2020125311.tif 000048
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物２６、配列番号３１）
【化４８】
2020125311.tif 000049
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物２７、配列番号３２）
【化４９】
2020125311.tif 000050
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物２８、配列番号３３）
【化５０】
2020125311.tif 000051
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物２９、配列番号３４）
【化５１】
2020125311.tif 000052
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物３０、配列番号３５）
【化５２】
2020125311.tif 000053
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物３１、配列番号３６）
【化５３】
2020125311.tif 000054
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物３２、配列番号３７）
【化５４】
2020125311.tif 000055
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３］−ｈＧＩＰ（化合物３３、配列番号３８）
【化５５】
2020125311.tif 000056
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３］−ｈＧＩＰ（化合物３４、配列番号３９）
【化５６】
2020125311.tif 000057
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ（化合物３５、配列番号４０）
【化５７】
2020125311.tif 000058
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ａｓｐ３４］−ｈＧＩＰ（化合物３６、配列番号４１）
【化５８】
2020125311.tif 000059
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ（化合物３７、配列番号４２）
【化５９】
2020125311.tif 000060
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ（化合物３８、配列番号４３）
【化６０】
2020125311.tif 000061
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ａｓｐ３４］−ｈＧＩＰ（化合物３９、配列番号４４）
【化６１】
2020125311.tif 000062
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ（化合物４０、配列番号４５）
【化６２】
2020125311.tif 000063
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノンデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ（化合物４１、配列番号４６）
【化６３】
2020125311.tif 000064
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ（化合物４２、配列番号４７）
【化６４】
2020125311.tif 000065
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ａｉｂ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）（化合物４３、配列番号５９）  
【化６５】
2020125311.tif 000066
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物４４、配列番号６０）
【化６６】
2020125311.tif 000067
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｌｅｕ１４，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（化合物４５、配列番号６１）  
【化６７】
2020125311.tif 000068
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド（化合物４６、配列番号６２）  
【化６８】
2020125311.tif 000069
【０１９５】
69.       化合物番号１〜３２、４３〜４４、４６から選択される、実施形態６８に記載の誘導体。
【０１９６】
70.       化合物番号１〜２５、３０、４３から選択される、実施形態６８〜６９のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１９７】
71.       化合物番号５である、実施形態６８〜７０のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１９８】
72.       化合物番号２５である、実施形態６８〜７０のいずれか一つに記載の誘導体。
【０１９９】
73.       化合物番号２６〜２９、３１〜３２、４４、４６から選択される、実施形態６８〜６９のいずれか一つに記載の誘導体。  
【０２００】
74.       化合物番号３１である、実施形態６８〜６９、７３のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２０１】
75.       化合物番号３３〜４２、４５から選択される、実施形態６８に記載の誘導体。
【０２０２】
76.       ヒトＧＩＰ受容体でのアゴニストである、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２０３】
77.       ヒトＧＩＰ受容体を活性化することができる、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２０４】
78.       ヒトＧＩＰ受容体を発現している全細胞を用いたアッセイでヒトＧＩＰ受容体を活性化することができる、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２０５】
79.       本明細書に記述された実施例２などの、ＣＲＥルシフェラーゼアッセイでヒトＧＩＰ受容体を活性化することができる、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２０６】
80.       本明細書に記述された実施例２で決定されるものなど、９００  ｐＭ以下のＥＣ５０を有する、ヒトＧＩＰ受容体でのアゴニストである、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２０７】
81.       本明細書に記述された実施例２で決定されるものなど、５００  ｐＭ以下のＥＣ５０を有する、ヒトＧＩＰ受容体でのアゴニストである、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２０８】
82.       本明細書に記述された実施例２で決定されるものなど、２００  ｐＭ以下のＥＣ５０を有する、ヒトＧＩＰ受容体でのアゴニストである、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２０９】
83.       ヒトＧＬＰ−１受容体およびヒトグルカゴン受容体よりもヒトＧＩＰ受容体に対して選択的である、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２１０】
84.       ヒトＧＬＰ−１受容体およびヒトグルカゴン受容体におけるよりもヒトＧＩＰ受容体においてより低いＥＣ５０を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２１１】
85.       本明細書に記述された実施例２で決定されるものなど、ＣＲＥルシフェラーゼアッセイでヒトＧＬＰ−１受容体において１０００００  ｐＭを超えるＥＣ５０を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２１２】
86.       本明細書に記述された実施例２で決定されるものなど、ＣＲＥルシフェラーゼアッセイでヒトＧＬＰ−１受容体において１００００  ｐＭを超えるＥＣ５０を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２１３】
87.       本明細書に記述された実施例２など、ＣＲＥルシフェラーゼアッセイでヒトグルカゴン受容体において１０００００  ｐＭを超えるＥＣ５０を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２１４】
88.       改善された薬物動態特性を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２１５】
89.       増加した半減期を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２１６】
90.       ミニブタで決定されるとき、増加した半減期を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２１７】
91.       改善された物理的安定性を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２１８】
92.       本明細書に記述された実施例４で決定されるものなど、ＴｈＴ細線維化アッセイで９５パーセントを超える回収率を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２１９】
93.       本明細書に記述された実施例４で決定されるものなど、ＴｈＴ細線維化アッセイで４５時間を超えるラグタイムを有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２２０】
94.       低いＤＬＳ−ＳＩ値を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２２１】
95.       本明細書に記述された実施例４で決定されるものなど、７未満、好ましくは２未満のＤＬＳ−ＳＩ値を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２２２】
96.       本明細書に記述された実施例４で決定されるものなど、ＤＬＳ−ＳＩアッセイで沈殿を示さない、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２２３】
97.       改善された化学的安定性を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２２４】
98.       本明細書に記述された実施例５で決定されるものなど、１カ月あたり２パーセント以下のＨＭＷＰの形成を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２２５】
99.       本明細書に記述された実施例５で決定されるものなど、１カ月あたり３５パーセント以下の純度損失を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２２６】
100.      本明細書に記述された実施例５で決定されるものなど、１カ月あたり６パーセント以下の純度損失を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２２７】
101.      本明細書に記述された実施例６など、ＤＩＤマウスの亜慢性試験で決定される食物摂取減少のインビボ効果を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２２８】
102.      本明細書に記述された実施例６など、ＤＩＤマウスの亜慢性試験で決定される体重減少誘発のインビボ効果を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２２９】
103.      本明細書に記述された実施例６など、ＤＩＤマウスの亜慢性試験で決定されるインビボの耐糖能改善効果を有する、先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２３０】
104.      先行する実施形態のいずれか一つに記載の誘導体、および少なくとも一つの薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【０２３１】
105.      実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体、ＧＬＰ−１受容体アゴニスト、および少なくとも一つの薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【０２３２】
106.      実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体、ＧＬＰ−１／グルカゴン受容体コアゴニスト、および少なくとも一つの薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
【０２３３】
107.      ＧＬＰ−１受容体アゴニストがリラグルチドである、実施形態１０５に記載の医薬組成物。
【０２３４】
108.      ＧＬＰ−１受容体アゴニストがセマグルチド（配列番号５７）である、実施形態１０５に記載の医薬組成物。
【０２３５】
109.      ＧＬＰ−１／グルカゴン受容体コアゴニストが、Ｎ｛イプシロン−２８｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］  エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｃｂ２，Ｌｅｕ１０，Ｌｅｕ１６，Ａｒｇ２０，Ｌｅｕ２７，Ｌｙｓ２８］−グルカゴンアミド（配列番号５２）である、実施形態１０６に記載の医薬組成物：
【化６９】
2020125311.tif 000070
【０２３６】
110.      ＧＬＰ−１／グルカゴン受容体コアゴニストが、Ｎ｛イプシロン−２８｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（２Ｓ）−２−［［（２Ｓ）−４−カルボキシ−２−［［（２Ｓ）−２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］  アミノ］−３−ヒドロキシプロパノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−３−ヒドロキシプロパノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｌｅｕ１０，Ｇｌｕ１５，Ｌｙｓ１７，Ａｒｇ２０，Ｇｌｕ２１，Ｌｅｕ２７，Ｌｙｓ２８］−グルカゴンアミド（配列番号５３）である、実施形態１０６に記載の医薬組成物：
【化７０】
2020125311.tif 000071
【０２３７】
111.      ＧＬＰ−１／グルカゴン受容体コアゴニストが、Ｎ｛イプシロン−２８｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］  エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｃｂ２，Ｌｅｕ１０，Ｇｌｕ１５，Ａｒｇ２０，Ｇｌｕ２１，Ｌｅｕ２７，Ｌｙｓ２８］−グルカゴンアミド（配列番号５４）である、実施形態１０６に記載の医薬組成物：
【化７１】
2020125311.tif 000072
【０２３８】
112.      ＧＬＰ−１／グルカゴン受容体コアゴニストが、Ｎ｛イプシロン−２８｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］  エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｃｂ２，Ｌｅｕ１０，Ｌｅｕ１６，Ｌｙｓ１７，Ａｒｇ２０，Ｇｌｕ２１，Ｌｅｕ２７，Ｌｙｓ２８］−グルカゴンアミド（配列番号５５）である、実施形態１０６に記載の医薬組成物：
【化７２】
2020125311.tif 000073
【０２３９】
113.      ＧＬＰ−１／グルカゴン受容体コアゴニストが、Ｎ｛イプシロン−２８｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）  ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｌｅｕ１０，Ａｌａ１６，Ａｒｇ２０，Ｌｅｕ２７，Ｌｙｓ２８］−グルカゴンアミド（配列番号５６）である、実施形態１０６に記載の医薬組成物：
【化７３】
2020125311.tif 000074
【０２４０】
114.      誘導体が配列番号１０である、実施形態１０４〜１１３のいずれか一つに記載の医薬組成物。
【０２４１】
115.      誘導体が配列番号３０である、実施形態１０４〜１１３のいずれか一つに記載の医薬組成物。
【０２４２】
116.      誘導体が配列番号３６である、実施形態１０４〜１１３のいずれか一つに記載の医薬組成物。
【０２４３】
117.      薬剤として使用するための、実施形態１０４〜１１６のいずれか一つに記載の医薬組成物。
【０２４４】
118.      薬剤として使用するための、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２４５】
119.      （ｉ）高血糖症、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、非インスリン依存性糖尿病、ＭＯＤＹ（若年発症成人型糖尿病）、妊娠糖尿病などすべての形態の糖尿病の予防および／もしくは治療、ならびに／またはＨｂＡ１Ｃの低減、
（ｉｉ）２型糖尿病の進行などの糖尿病疾患の進行の遅延または予防、耐糖能障害（ＩＧＴ）からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、インスリン耐性の遅延または予防、および／またはインスリンを必要としない２型糖尿病からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、
（ｉｉｉ）例えば、食事量の減少、体重減少、食欲の抑制、満腹感の誘発による、肥満などの摂食障害の予防および／もしくは治療；過食性障害、神経性大食症、および／もしくは抗精神病薬もしくはステロイドの投与によって誘発された肥満の治療もしくは予防；胃内容排出の遅延；身体的可動性の増加；ならびに／または骨関節炎および／もしくは尿失禁などの肥満の共存疾患の予防および／もしくは治療、
（ｉｖ）（薬剤誘発性または食事と運動による）減量成功後の体重維持‐すなわち、減量成功後の体重増加の予防、
（ｖ）脂肪肝、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝臓炎または脂肪肝などの肝臓障害の予防および／または治療、の治療に使用するための実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２４６】
120.      高血糖症、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、非インスリン依存性糖尿病、ＭＯＤＹ（若年発症成人型糖尿病）、妊娠糖尿病などのすべての形態の糖尿病の予防および／もしくは治療、ならびに／またはＨｂＡ１Ｃの低減に使用するための、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２４７】
121.      ２型糖尿病の進行などの糖尿病疾患の進行の遅延または予防、耐糖能障害（ＩＧＴ）からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、インスリン耐性の遅延または予防、および／またはインスリンを必要としない２型糖尿病からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延に使用するための、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２４８】
122.      例えば、食事量の減少、体重減少、食欲の抑制、満腹感の誘発による、肥満などの摂食障害の予防および／もしくは治療；過食性障害、神経性大食症、および／もしくは抗精神病薬もしくはステロイドの投与によって誘発された肥満の治療もしくは予防；胃内容排出の遅延；身体的可動性の増加；ならびに／または骨関節炎および／もしくは尿失禁などの肥満の共存疾患の予防および／もしくは治療に使用するための、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２４９】
123.      （薬剤誘発性または食事と運動による）減量成功後の体重維持‐すなわち、減量成功後の体重増加の予防に使用するための、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２５０】
124.      脂肪肝、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝臓炎または脂肪肝などの肝臓障害の予防および／または治療に使用するための、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２５１】
125.      体重管理、肥満および肥満に関連する障害の治療および／または予防に使用するための、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２５２】
126.      例えば、２型糖尿病などの糖尿病のすべての形態、および糖尿病に関連する障害の治療および／または予防に使用するための、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体。
【０２５３】
127.      （ｉ）高血糖症、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、非インスリン依存性糖尿病、ＭＯＤＹ（若年発症成人型糖尿病）、妊娠糖尿病などすべての形態の糖尿病の予防および／もしくは治療、ならびに／またはＨｂＡ１Ｃの低減、
（ｉｉ）２型糖尿病の進行などの糖尿病疾患の進行の遅延または予防、耐糖能障害（ＩＧＴ）からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、インスリン耐性の遅延または予防、および／またはインスリンを必要としない２型糖尿病からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、
（ｉｉｉ）例えば、食事量の減少、体重減少、食欲の抑制、満腹感の誘発による、肥満などの摂食障害の予防および／もしくは治療；過食性障害、神経性大食症、および／もしくは抗精神病薬もしくはステロイドの投与によって誘発された肥満の治療もしくは予防；胃内容排出の遅延；身体的可動性の増加；ならびに／または骨関節炎および／もしくは尿失禁などの肥満の共存疾患の予防および／もしくは治療、
（ｉｖ）（薬剤誘発性または食事と運動による）減量成功後の体重維持‐すなわち、減量成功後の体重増加の予防、
（ｖ）脂肪肝、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝臓炎または脂肪肝などの肝臓障害の予防および／または治療のための薬剤の製造を目的とする、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体の使用。
【０２５４】
128.      高血糖症、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、非インスリン依存性糖尿病、ＭＯＤＹ（若年発症成人型糖尿病）、妊娠糖尿病などのすべての形態の糖尿病の予防および／もしくは治療、ならびに／またはＨｂＡ１Ｃの低減のための薬剤の製造を目的とする、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体の使用。
【０２５５】
129.      ２型糖尿病の進行などの糖尿病疾患の進行の遅延または予防、耐糖能障害（ＩＧＴ）からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、インスリン耐性の遅延または予防、および／またはインスリンを必要としない２型糖尿病からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延のための薬剤の製造を目的とする、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体の使用。
【０２５６】
130.      例えば、食事量の減少、体重減少、食欲の抑制、満腹感の誘発による、肥満などの摂食障害の予防および／もしくは治療；過食性障害、神経性大食症、および／もしくは抗精神病薬もしくはステロイドの投与によって誘発された肥満の治療もしくは予防；胃内容排出の遅延；身体的可動性の増加；ならびに／または骨関節炎および／もしくは尿失禁などの肥満の共存疾患の予防および／もしくは治療のための薬剤の製造を目的とする、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体の使用。
【０２５７】
131.      （薬剤誘発性または食事と運動による）減量成功後の体重維持‐すなわち、減量成功後の体重増加の予防のための薬剤の製造を目的とする、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体の使用。
【０２５８】
132.      脂肪肝、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝臓炎または脂肪肝などの肝臓障害の予防および／または治療のための薬剤の製造を目的とする、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体の使用。
【０２５９】
133.      体重管理、肥満および肥満に関連する障害の治療および／または予防のための薬剤の製造を目的とする、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体の使用。
【０２６０】
134.      例えば、２型糖尿病などの糖尿病のすべての形態、および糖尿病に関連する障害の治療および／または予防のための薬剤の製造を目的とする、実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体の使用。
【０２６１】
135.      実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体の薬学的に活性な量を投与する工程を含む、高血糖症、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、非インスリン依存性糖尿病、ＭＯＤＹ（若年発症成人型糖尿病）、妊娠糖尿病などのすべての形態の糖尿病の予防および／もしくは治療、ならびに／またはＨｂＡ１Ｃの低減のための方法。
【０２６２】
136.      実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体の薬学的に活性な量を投与する工程を含む、２型糖尿病の進行などの糖尿病疾患の進行の遅延または予防、耐糖能障害（ＩＧＴ）からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、インスリン耐性の遅延または予防、および／またはインスリンを必要としない２型糖尿病からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延の方法。
【０２６３】
137.      実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体の薬学的に活性な量を投与する工程を含む、例えば、食事量の減少、体重減少、食欲の抑制、満腹感の誘発による、肥満などの摂食障害の予防および／もしくは治療；過食性障害、神経性大食症、および／もしくは抗精神病薬もしくはステロイドの投与によって誘発された肥満の治療もしくは予防；胃内容排出の遅延；身体的可動性の増加；ならびに／または骨関節炎および／もしくは尿失禁などの肥満の共存疾患の予防および／もしくは治療の方法。
【０２６４】
138.      実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体の薬学的に活性な量を投与する工程を含む、（薬剤誘発性または食事と運動による）減量成功後の体重維持‐すなわち、減量成功後の体重増加の予防の方法。
【０２６５】
139.      実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体の薬学的に活性な量を投与する工程を含む、脂肪肝、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝臓炎または脂肪肝などの肝臓障害の予防および／または治療の方法。
【０２６６】
140.      実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体の薬学的に活性な量を投与する工程を含む、体重管理、肥満および肥満に関連する障害の治療および／または予防の方法。
【０２６７】
141.      実施形態１〜１０３のいずれか一つに記載の誘導体の薬学的に活性な量を投与する工程を含む、例えば、２型糖尿病などの糖尿病のすべての形態、および糖尿病に関連する障害の治療および／または予防の方法。
【実施例】
【０２６８】
この実験部分は、略語のリストで始まり、その後に本発明の類似体および誘導体を合成および特徴付けるための一般的な方法を含む節が続く。次に、本発明の特定の誘導体の調製に関連する多数の実施例が続き、最後にこれらの類似体および誘導体の活性および特性に関連して多数の実施例が含まれている（薬理学的方法という見出しの節）。
【０２６９】
実施例は、本発明を例証する役割を果たす。
材料および方法
略語リスト
【０２７０】
以下の略語はアルファベット順であり、以下で使用される：
Ａｃ：              アセチル
Ａｄｏ：            ８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸
Ａｉｂ：            アルファ−アミノイソ酪酸
ＡＵＣ：            曲線下面積
ＢＨＫ：            ベビーハムスター腎臓
Ｂｏｃ：            ｔ−ブチルオキシカルボニル
ＢＷ：              体重
ＤＣＣ：            ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＣＭ：            ジクロロメタン
ＤＩＣ：            ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＯ：            食餌誘発性肥満
ＤＩＰＥＡ：        Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンまたはヒューニッヒ塩基
ＤＬＳ−ＳＩ：      動的光散乱安定性指標
ＤＭＥＭ：                    ダルベッコ改変イーグル培地
ＤＭＦ：            ジメチルホルムアミド
ＤＯＤＴ：                    ３，６−ジオキサ−１，８−オクタンジチオール
ＥＤＴＡ：                    エチレン−ジアミン−テトラ酢酸
ＥＬＩＳＡ：        酵素結合免疫吸着測定法
ＦＢＳ：            ウシ胎児血清
Ｆｍｏｃ：                    ９−フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＧＩＰ：            グルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド
ＧＬＰ−１：        グルカゴン様ペプチド１
ＨＦＩＰ：                    １，１，１，３，３，３−ヘキサフルオロ−２−プロパノールまたはヘキサフルオロイソプロパノール
ＨＭＷＰ：                    高分子量タンパク質
ＨＯＢｔ：                    １−ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ：                    高速液体クロマトグラフィー
ＨＳＡ：            ヒト血清アルブミン
ｉ．ｐ．：                    腹腔内
ＩＰＧＴＴ：        腹腔内ブドウ糖負荷試験
ｉ．ｖ．：                    静脈内  
ｋｃａｌ：                    キロカロリー
ｋｇ：              キログラム
ＬＣＭＳ：                    液体クロマトグラフィー質量分析
ＭｅＣＮ：                    アセトニトリル
ｍＭ：              ミリモル濃度
Ｍｔｔ：            ４−メチルトリチル
Ｎｌｅ：            ノルロイシン
ＮＭＰ：            Ｎ−メチルピロリドン
Ｏｘｙｍａ  Ｐｕｒｅ（登録商標）：  シアノ−ヒドロキシイミノ−酢酸エチルエステル
ＰＢＳ：            リン酸緩衝生理食塩水
ＰＫ：              薬物動態学的
ｐＭ：              ピコモル濃度
ＱＴｏｆ：                    定量的飛行時間法
Ｒｈ：              ストークス半径
ｓ．ｃ．：                    皮下  
ＳＤ：              標準偏差
ＳＥＣ−ＨＰＬＣ：            サイズ排除高圧液体クロマトグラフィー
ＳＥＣ−ＭＳ：      サイズ排除クロマトグラフィー質量分析法
ＳＥＭ：            平均値の標準誤差  
ｔＢｕ：            ｔ−ブチル
ＴＦＡ：            トリフルオロ酢酸
ＴｈＴ：            チオフラビンＴ
ＴＩＣ：            トリイソプロピルシラン
Ｔｒｔ：            トリフェニルメチル（トリチル）
Ｔｒｘ：            トラネキサム酸  
ＵＰＬＣ：                    超高速液体クロマトグラフィー
【０２７１】
調製の一般的な方法
この節は、固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ法、アミノ酸の脱保護方法、樹脂からのペプチドを切断する方法、およびその精製方法を含む）ならびに結果的に得られるペプチドを検出して特徴付ける方法（ＬＣＭＳ方法）に関連する。
【０２７２】
Ｃ末端ペプチドアミドの調製に用いられた樹脂は、ＰＡＬ  Ａｍｉｄｅ  ＡＭ樹脂（例えば、０．６  ｍｍｏｌ／ｇ負荷）またはＨ−Ｒｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ−ＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ樹脂（例えば、０．５  ｍｍｏｌ／ｇ負荷）またはＲｉｎｋ  Ａｍｉｄｅ  ＡＭポリスチレン樹脂（例えば、０．３〜０．７  ｍｍｏｌ／ｇ負荷）であった。Ｃ末端ペプチドグリシル酸の調製に用いられた樹脂は、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−Ｗａｎｇポリスチレン樹脂（例えば、０．３〜０．７  ｍｍｏｌ／ｇ負荷）であった。
【０２７３】
別段の記載がない限り、使用されたＦｍｏｃ保護アミノ酸誘導体は、推奨される標準品であった：  Ｆｍｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（Ｐｂｆ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｉｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｅｕ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｍｅｔ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｈｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｐｒｏ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｓｅｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｈｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）−ＯＨ（方法ＳＰＰＳおよびＳＰＰＳ＿Ｄの場合）またはＦｍｏｃ−Ｔｒｐ−ＯＨ（方法ＳＰＰＳ＿ＢおよびＳＰＰＳ＿Ｃの場合）、Ｆｍｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｖａｌ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｍｔｔ）−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ａｉｂ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｎｌｅ−ＯＨ、Ｆｍｏｃ−Ｄ−Ｔｙｒ−（ｔＢｕ）−ＯＨなどで、例えばＡＡＰＰＴＥＣ，  Ａｎａｓｐｅｃ，  Ｂａｃｈｅｍ、ＣｈｅｍＩｍｐｅｘ、Ｉｒｉｓ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｍｉｄｗｅｓｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｇｙｒｏｓ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓまたはＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍから提供された。他に何も指定されていない場合、アミノ酸の天然Ｌ型が使用される。Ｎ末端アミノ酸がアセチル化されていなかった場合、Ｎ末端アミノ酸は、Ｂｏｃ基を事前導入した試薬（例えば、Ｎ末端にＴｙｒを有するペプチドに対してはＢｏｃ−Ｔｙｒ（ｔＢｕ）−ＯＨ）を使用することにより、またはペプチドＮ末端のアミノ酸導入後、Ｎ末端Ｆｍｏｃ保護基をＢｏｃ保護基と交換することにより、アルファアミノ基においてＢｏｃ保護された。
【０２７４】
ＳＰＰＳを使用したモジュラーアルブミン結合部分付加の場合、Ｆｍｏｃ−８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｄｏ−ＯＨ）、Ｆｍｏｃ−トラネキサム酸（Ｆｍｏｃ−Ｔｒｘ−ＯＨ）、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ、オクタデカン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル、ノナデカン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル、エイコサン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル、テトラデカン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル、または４−（９−カルボキシノニロキシ）安息香酸ｔｅｒｔ−ブチルエステルなどであるが、これらに限定されない、適切な保護ビルディングブロックを使用した。以下に記載するすべての操作は、１００〜４５０  μｍｏｌ合成スケール範囲内で実施した。
【０２７５】
樹脂に結合した保護骨格の合成
方法：ＳＰＰＳ＿Ａ  
ＳＰＰＳは、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（米国アリゾナ州ツーソン８５７１４）製のＳｙｍｐｈｏｎｙＸ  Ｓｏｌｉｄ  Ｐｈａｓｅ  Ｐｅｐｔｉｄｅ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｒ（ＳｙｍｐｈｏｎｙＸ固相ペプチド合成装置）上でのＦｍｏｃベースの化学を使用して実施した。Ｆｍｏｃ脱保護は、０．１ＭのＯｘｙｍａ  Ｐｕｒｅ（登録商標）を含有する２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液で達成した。ペプチドカップリングは、ＤＩＣ／Ｏｘｙｍａ  Ｐｕｒｅ（登録商標）を使用して実施した。アミノ酸／Ｏｘｙｍａ  Ｐｕｒｅ（登録商標）溶液（４〜８倍モル過剰の０．３Ｍ／０．３Ｍ  ＤＭＦ溶液）を樹脂に加え、その後、同じモル当量のＤＩＣ（１．５ＭのＤＭＦ溶液）およびコリジン（１．５ＭのＤＭＦ溶液）を加えた。段階的な構築は以下の工程を使用して行った：１）ＤＣＭおよびＤＭＦを使用した樹脂の予備膨潤、２）０．１Ｍ  Ｏｘｙｍａ  Ｐｕｒｅ（登録商標）を含有する２０％ピペリジンのＤＭＦ溶液の使用によるＦｍｏｃ脱保護（それぞれ１０分間の処理を２回）、３）ピペリジンを除去するためのＤＭＦ洗浄、４）０．３Ｍ  Ｏｘｙｍａ  Ｐｕｒｅ（登録商標）のＤＭＦ溶液中の０．３Ｍ溶液としてのＦｍｏｃ−アミノ酸４〜８当量を、当モル容量のＤＩＣおよびコリジンと１〜２時間混合することによるＦｍｏｃ−アミノ酸のカップリング、５）過剰試薬を除去するためのＤＭＦ洗浄、６）構築完了時のＤＣＭを使用した最終洗浄。Ｎ末端アセチル化を有するペプチドについては、Ｆｍｏｃ脱保護ぺプチジル樹脂をＤＭＦ中１Ｍ無水酢酸で３０〜６０分間処理し、その後ＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。
【０２７６】
方法：ＳＰＰＳ＿Ｂ  
保護されたぺプチジル樹脂は、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ４３１Ａ固相ペプチド合成装置上で、製造業者から支給された一般的なＦｍｏｃプロトコルを使用し、Ｆｍｏｃ方法に従って合成した。混合は、ボルテックスおよび時折の窒素バブリングで達成した。段階的な構築は以下の工程を使用して行った：１）２０％ピペリジンのＮＭＰ溶液の使用によるＦｍｏｃ脱保護（３分間の処理１回に続いて１５分間の処理１回）、２）ピペリジンを除去するためのＮＭＰ洗浄、３）Ｆｍｏｃ−アミノ酸の５〜１０当量、ＤＩＣ、およびＨＯＢｔのＮＭＰ溶液を、４５〜９０分混合することによるＦｍｏｃ−アミノ酸のカップリング、４）過剰試薬を除去するためのＮＭＰ洗浄、５）構築完了時のＤＣＭを使用した最終洗浄。上記の標準的保護アミノ酸誘導体は、事前計量カートリッジで（例えば、Ｍｉｄｗｅｓｔ  Ｂｉｏｔｅｃｈから）供給され、非標準的誘導体は手動計量した。立体障害型アミノ酸（例えば、Ａｉｂ）の次に続くアミノ酸などであるが、これらに限定されない一部のアミノ酸は、反応完了を確実にするために「二重カップリング」した、つまり最初のカップリング（例えば、４５分）後、樹脂を排出し、さらなる試薬を追加して（Ｆｍｏｃ−アミノ酸、ＤＩＣ、ＨＯＢｔ）、混合物を再び反応させた（例えば、４５分）。Ｎ末端アセチル化を有するペプチドについては、Ｆｍｏｃ脱保護ぺプチジル樹脂を合成装置から取り出し、手動でＤＭＦ中１０％（ｖ／ｖ）無水酢酸／１０％（ｖ／ｖ）ピリジンで３０〜６０分間処理し、その後ＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。
【０２７７】
方法：ＳＰＰＳ＿Ｃ  
保護ぺプチジル樹脂は、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＳｙｍｐｈｏｎｙＸ固相ペプチド合成装置上で、製造業者から支給されたプロトコルをわずかに変更し、Ｆｍｏｃ方法に従って合成した。段階的な構築は、次の工程を使用して０．２  ｍｍｏｌベースで行った：１）ＤＭＦ中の樹脂の予備膨潤（３ｘ８  ｍＬをそれぞれ１５分）、２）２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンのＤＭＦ溶液を使用したＦｍｏｃ脱保護（２ｘ８  ｍＬをそれぞれ１０分）、３）ピペリジンを除去するためのＤＭＦ洗浄（５ｘ６  ｍＬ）、４）Ｆｍｏｃ−アミノ酸（１２当量、２．４  ｍｍｏｌ）および０．６  ＭのＤＭＦ溶液（４  ｍＬ）としてのＯｘｙｍａ  Ｐｕｒｅ（登録商標）（１２当量、２．４  ｍｍｏｌ）の混合物を追加し、その後１．２ＭのＤＭＦ溶液（２  ｍＬ）としてのＤＩＣ（１２当量、２．４  ｍｍｏｌ）の追加、および追加的ＤＭＦ（２ｍＬ）の追加を行い、次に０．５〜４時間混合、４）過剰試薬を除去するためのＤＭＦ洗浄（３ｘ６  ｍＬ）、５）構築完了時のＤＣＭを使用した最終洗浄。立体障害型アミノ酸（例えば、Ａｉｂ）の次に続くアミノ酸などであるが、これらに限定されない一部のアミノ酸は、反応の完了を確実にするために長時間の反応時間（例えば、４時間）でカップリングを行った。Ｎ末端アセチル化を有するペプチド、または側鎖の構築（例えば、Ｂｏｃを保護する基のＦｍｏｃの交換）前にＮ末端を保護する基を導入する必要があるペプチドについては、上記の工程２に記述するように、２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンのＤＭＦ溶液との反応によって、Ｎ末端Ｆｍｏｃ基を除去した。次に、ぺプチジル樹脂を合成装置から取り出し、手動でＤＭＦ中１０％（ｖ／ｖ）無水酢酸／１０％（ｖ／ｖ）ＤＩＰＥＡで３０〜６０分間処理し、その後ＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。
【０２７８】
方法：ＳＰＰＳ＿Ｄ  
保護ぺプチジル樹脂は、Ｐｒｅｌｕｄｅ固相ペプチド合成装置（Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、米国、ツーソン）上で、製造業者から支給されたプロトコルを使用し、Ｆｍｏｃ方法に従って合成した。カップリングは、ＮＭＰ中、ＤＣＣおよびＯｘｙｍａ  Ｐｕｒｅ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ，  Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ、スイス）を用いたカップリングを使用して行った。Ｆｍｏｃ−アミノ酸のカップリングは上述のように、樹脂置換（４〜８当量）に対して４〜８倍過剰のアミノ酸を使用して行った。カップリング時間は１〜６時間の範囲であった。Ｆｍｏｃ−Ａｒｇ（ｐｂｆ）−ＯＨは、二重カップリング手順（１時間＋１時間）を使用してカップリングした。Ｐｒｅｌｕｄｅ上の段階的な固相構築は、次の工程を使用して行った：１）２５％ピペリジンのＮＭＰ溶液を使用した脱保護（Ｆｍｏｃの除去）（２ｘ４分）、工程２）ＮＭＰおよびＤＣＭでの洗浄（ピペリジンの除去）工程３）１／１０容量の３ＭＤＣＣのＮＭＰ溶液および１／１０容量のコリジンのＮＭＰ溶液の追加によりカップリングを開始し、４〜８当量過剰で１〜４時間反応を行う、Ｆｍｏｃ−アミノ酸のカップリング（０．３ＭのＯｘｙｍａ  Ｐｕｒｅ（登録商標）ＮＭＰ溶液中０．３ＭのＦｍｏｃ−アミノ酸）。混合は時折の窒素バブリングにより行った、工程４）洗浄（ＮＭＰおよびＤＣＭの使用による過剰アミノ酸および試薬の除去）。最後の工程は、修飾基のリジン側鎖への付加のために樹脂を準備する、ＤＣＭでの洗浄を含む。
【０２７９】
樹脂結合保護ペプチド骨格への側鎖の付加
方法：ＳＣ＿Ａ
Ｎ−イプシロン−リジンＭｔｔ保護基は、樹脂をピペリジン、ＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄する前に、ＨＦＩＰ／ＴＩＳ／ＤＣＭ（７５：２．５：２２．５、ｖ／ｖ／ｖ）で洗浄（１ｘ５分および２ｘ２０分）することにより除去した。
【０２８０】
アシル化は、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社（米国アリゾナ州ツーソン８５７１４）製のＳｙｍｐｈｏｎｙＸ固相ペプチド合成装置上で、方法ＳＰＰＳ＿Ａに記述したように、Ｆｍｏｃ−８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｄｏ−ＯＨ）、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ、Ｆｍｏｃ−トラネキサム酸（Ｆｍｏｃ−Ｔｒｘ−ＯＨ）などであるが、これらに限定されないビルディングブロックの段階的追加を使用して実施した。脂肪酸部分の導入は、方法ＳＰＰＳ＿Ａおよび、オクタデカン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチル−エステルまたはエイコサン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルなどであるが、これらに限定されない適切なビルディングブロックを使用して達成した。
【０２８１】
方法：ＳＣ＿Ｂ  
Ｎ−イプシロン−リジン保護Ｍｔｔ保護基は、３０％ＨＦＩＰのＤＣＭ溶液で樹脂を２回、それぞれ４５分間洗浄した後、ＤＣＭおよびＤＭＦで洗浄することにより除去した。
アシル化は、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ  ４３１Ａ固相ペプチド合成装置上で、方法ＳＰＰＳ＿Ｂに記述されたプロトコルを使用し、Ｆｍｏｃ−８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸、Ｆｍｏｃ−トラネキサム酸、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ、オクタデカン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル、エイコサン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルなどであるが、これらに限定されないビルディングブロックの段階的追加を使用して実施した。
【０２８２】
方法：ＳＣ＿Ｃ    
Ｎ−イプシロン−リジンＭｔｔ保護基は、３０％（ｖ／ｖ）ＨＦＩＰのＤＣＭ溶液で樹脂を２回、それぞれ１時間洗浄した後、ＤＣＭおよびＤＭＦで洗浄することにより除去した。
アシル化は、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社（米国アリゾナ州ツーソン８５７１４）製のＳｙｍｐｈｏｎｙＸ固相ペプチド合成装置上で、４時間のカップリング時間を用いた方法ＳＰＰＳ＿Ｃに記述したように、Ｆｍｏｃ−８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｄｏ−ＯＨ）、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ、Ｆｍｏｃ−トラネキサム酸（Ｆｍｏｃ−Ｔｒｘ−ＯＨ）などであるが、これらに限定されないビルディングブロックの段階的追加を使用して実施した。脂肪酸部分の導入は、４時間の時間を用いる方法ＳＰＰＳ＿Ｃおよび、オクタデカン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチル−エステルまたはエイコサン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルなどであるが、これらに限定されない適切なビルディングブロックを使用して達成した。ビルディングブロックがＤＭＦ中０．６Ｍの保存濃度に適さない特定の場合（例えば、Ｆｍｏｃ−Ｔｒｘ−ＯＨおよびエイコサン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル）、０．３  Ｍの原液濃度を調製し、追加容量を２倍にした。
【０２８３】
方法：ＳＣ＿Ｄ
Ｎ−イプシロン−リジン保護Ｍｔｔ保護基は、樹脂を７０％  ＨＦＩＰ  ＋  ３％  ＴＩＳのＤＣＭ溶液で２回、それぞれ１５分間洗浄した後、ＤＣＭおよびＮＭＰで洗浄することにより除去した。
【０２８４】
アシル化は、Ｐｒｅｌｕｄｅ固相合成装置上、方法ＳＰＰＳ＿Ｄに記述されたプロトコルを使用して、Ｆｍｏｃ−８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸、Ｆｍｏｃ−トラネキサム酸、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ、オクタデカン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル、エイコサン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルなどであるが、これらに限定されないビルディングブロックの段階的追加を使用して実施した。
【０２８５】
方法：ＳＣ＿Ｅ
Ｎ−イプシロン−リジンＭｔｔ保護基は、樹脂をＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄する前に、ＨＦＩＰ／ＴＩＳ／ＤＣＭ（７５：５：２０、ｖ／ｖ／ｖ）で洗浄（２ｘ５分および２ｘ３０分）することにより除去した。
【０２８６】
アシル化は、Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社（米国アリゾナ州ツーソン８５７１４）製のＳｙｍｐｈｏｎｙＸ固相ペプチド合成装置上で、方法ＳＰＰＳ＿Ａに記述したように、Ｆｍｏｃ−８−アミノ−３，６−ジオキサオクタン酸（Ｆｍｏｃ−Ａｄｏ−ＯＨ）、Ｆｍｏｃ−Ｇｌｕ−ＯｔＢｕ、Ｆｍｏｃ−トラネキサム酸（Ｆｍｏｃ−Ｔｒｘ−ＯＨ）などであるが、これらに限定されないビルディングブロックの段階的追加を使用して実施した。脂肪酸部分の導入は、方法ＳＰＰＳ＿Ａおよび、オクタデカン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチル−エステルまたはエイコサン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルなどであるが、これらに限定されない適切なビルディングブロックを使用して達成した。
【０２８７】
樹脂結合ペプチドの切断および精製
方法：ＣＰ＿Ａ
合成後、樹脂をＤＣＭで洗浄し、ぺプチジル樹脂をＴＦＡ／ＴＩＳ／水（９５：２．５：２．５、ｖ／ｖ／ｖ）を用いて１．５〜３時間処理し、その後ジエチルエーテルで沈殿させた。沈殿物をジエチルエーテルで洗浄し、水、酢酸および／またはＭｅＣＮの適切な混合物に溶解した。粗ペプチド溶液を逆相分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  Ｄｅｌｔａｐｒｅｐ  ４０００）のＣ１８シリカゲル含有カラムで精製した。溶出は、０．１％ＴＦＡを含有するＭｅＣＮ水溶液のグラジエントを増加させて実施した。関連する分画は、分析ＵＰＬＣによってチェックした。純粋な標的ペプチドを含む分画を集め、凍結乾燥した。
【０２８８】
さらなる精製が必要な場合、単離された上記の凍結乾燥ペプチドＴＦＡ塩を、リン酸水素二ナトリウムなどであるがこれに限定されない一般的な塩をベースとする中性水性緩衝液に溶解し、逆相分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  Ｄｅｌｔａｐｒｅｐ  ４０００）のＣ１８シリカゲル含有カラムで精製した。溶出は、ＭｅＣＮリン酸ナトリウム水溶液（９０  ｍＭ、ｐＨ  ７．４）のグラジエントを増加させて実施した。関連する分画は、分析ＵＰＬＣによってチェックした。純粋な標的ペプチドを含む分画を集め、水で希釈した後、第二の逆相分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  Ｄｅｌｔａｐｒｅｐ  ４０００）のＣ１８シリカゲル含有カラムに適用した。溶出は、０．１％ＴＦＡを含有するＭｅＣＮ水溶液のグラジエントを増加させて実施した。関連する分画を集めて凍結乾燥し、標的ペプチドのＴＦＡ塩を得た。
【０２８９】
方法：ＣＰ＿Ｂ
側鎖合成の完了後、ぺプチジル樹脂をＤＣＭで洗浄して乾燥し、次にＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９２．５：５：２．５  ｖ／ｖ／ｖ、１０  ｍＬ）で２時間処理し、その後ジエチルエーテルで沈殿させた。沈殿物をジエチルエーテルで洗浄し、ペプチドの完全溶解のために必要な場合、溶液ｐＨの調整をして、適切な溶媒に溶解した（例えば、２：１  水／ＭｅＣＮまたは４：１  ２５  ｍＭ  ＮＨ４ＨＣＯ３／ＭｅＣＮ水溶液）。精製は、逆相分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  ２５４５バイナリグラジエントモジュール、Ｗａｔｅｒｓ  ２４８９  ＵＶ／可視検出器、ＷａｔｅｒｓフラクションコレクターＩＩＩ）のＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｌｕｎａ  Ｃ８（２）カラム（粒径１０μＭ、孔径１００Å、寸法２５０ｘ２１．２  ｍｍ）で実施した。不純物および生成物溶出の分離は、０．１％ＴＦＡを含有するＭｅＣＮ水溶液のグラジエント増加を使用して達成した。関連する分画は、分析ＬＣＭＳによってチェックした。純粋な標的ペプチドを含む分画を集めて凍結乾燥し、標的ペプチドのＴＦＡ塩を得た。
【０２９０】
方法：ＣＰ＿Ｃ
合成後、樹脂をＤＣＭで洗浄し、ぺプチジル樹脂をＴＦＡ／ＴＩＳ／水／アニソール／ＤＯＤＴ（９０：２．５：２．５：２．５：２．５、ｖ／ｖ／ｖ／ｖ）を用いて１．５〜３時間処理し、その後ジエチルエーテルで沈殿させた。沈殿物をジエチルエーテルで洗浄し、炭酸水素アンモニウム水溶液（例えば、５０ｍＭの濃度）に溶解して、ボルテックスした。これにＭｅＣＮを加えて透明黄色溶液を得た。次にこの溶液を０．２２ｕｍ  Ｓｔｅｒｉｃｕｐでろ過してから、逆相分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ：  ２５４５ポンプ、２４８９  ＵＶ−可視、フラクションコレクターＩＩＩ）のＣ１８シリカゲル含有カラムで精製した。溶出は、０．１％ＴＦＡを含有するＭｅＣＮ水溶液のグラジエントを増加させて実施した。関連する分画は、分析ＵＰＬＣによってチェックした。純粋な標的ペプチドを含む分画を集め、凍結乾燥した。
【０２９１】
塩交換−ナトリウム塩の形成。
方法：ＳＸ＿Ａ：
方法ＣＰ＿Ａ、ＣＰ＿Ｂ、またはＣＰ＿Ｃから単離した凍結乾燥ペプチドを、中性〜わずかに塩基性（ｐＨ  ７〜８．５）のナトリウム含有水性緩衝液（例えば、０．１〜０．２Ｍの酢酸ナトリウムまたは炭酸水素ナトリウム緩衝液）に溶解した。ペプチドを含有する緩衝化溶液を、Ｓｅｐ−Ｐａｋ  Ｃ１８カートリッジ（１〜５ｇ）を使用して塩交換した。カートリッジをまず、４カラム容量のイソプロパノールで平衡化し、次に４カラム容量のＭｅＣＮ、その後８カラム容量の水で平衡化した。ペプチド溶液をカートリッジに適用し、ペプチドの完全保持を確実にするために通過画分を再適用した。カートリッジを２〜４カラム容量の水、その後４〜１５カラム容量のナトリウム塩含有緩衝溶液（例えば、ｐＨ  ７．５）（ＮａＨＣＯ３、ＮａＯＡｃ、Ｎａ２ＨＰＯ４などであるがこれらに限定されない）で洗浄した。ペプチドは、５〜１０カラム容量の５０〜８０％のＭｅＣＮ水溶液で溶出し、凍結乾燥して、白色固体としてペプチドナトリウム塩を得て、これをこのように使用した。
【０２９２】
方法：ＳＸ＿Ｂ：
Ｈ２Ｏ／ＭｅＣＮ／ＴＦＡ中のペプチド溶液を、ＮａＯＨでｐＨ  ７〜８に調節し、最大ＭｅＣＮ含量は２０％であった。次に混合物を逆相分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ  Ｄｅｌｔａｐｒｅｐ  ４０００）のＣ１８シリカゲル含有カラムに適用した。まず、〜４カラム容量の０．１Ｍ  ＮａＯＡｃで平衡化を行い、その後、２カラム容量の水でフラッシュした。溶出は、ＭｅＣＮ水溶液のグラジエントを増加して実施した。関連する分画は分析ＵＰＬＣでチェックした。純粋な標的ペプチドナトリウム塩を含む分画を集め、凍結乾燥した。
【０２９３】
全般的な検出および特徴付けの方法
ＬＣＭＳ法：
方法：ＬＣＭＳ＿３４：
ＬＣＭＳ＿３４は、Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  Ｈ  ＣｌａｓｓシステムおよびＷａｔｅｒｓ  Ｘｅｖｏ  Ｇ２−ＸＳ  ＱＴｏｆから成るセットアップで実施した。溶離液：Ａ：  ＭＱ水中の０．１％ギ酸；Ｂ：  ＭｅＣＮ中の０．１％ギ酸。
【０２９４】
分析は、ＡおよびＢのグラジエントで溶出されたカラムに適切な量の試料を注入することによって、ＲＴ（カラム温度４０Ｃ）で実施した。ＵＰＬＣの条件、検出器の設定、質量分析計の設定は以下のとおりである。カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＢＥＨ、Ｃ−１８、１．７μｍ、２．１ｍｍ  ｘ  ５０ｍｍ。グラジエント：０．４  ｍｌ／分で４．０分間、線形５％〜９５％のＢ。検出：ＭＳ分解能モード、イオン化法：ＥＳ。スキャン：５０〜４０００  ａｍｕ。
【０２９５】
方法：ＬＣＭＳ＿２７：
ＬＣＭＳ＿２７は、Ａｇｉｌｅｎｔ  １２９０インフィニティシリーズＵＰＬＣシステムおよびＡｇｉｌｅｎｔ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ  ＬＣ／ＭＳＤ  ＴＯＦ  ６２３０（Ｇ６２３０Ａ）から成るセットアップで実施した。溶離液：Ａ：０．０２％ＴＦＡ水溶液：Ｂ：  ０．０２％ＴＦＡのＭｅＣＮ溶液。
【０２９６】
分析は、ＡおよびＢのグラジエントで溶出されたカラムに適切な量の試料を注入することによって、ＲＴ（カラム温度４０Ｃ）で実施した。カラム：Ｅｃｌｉｐｓｅ  Ｃ１８＋、１．８  μｍ、２．１ｍｍｘ５０  ｍｍ。グラジエント実行時間：流速０．４０  ｍｌ／分で、線形５〜９５％Ｂを４．５分、その後９５％Ｂを０．５分、９５〜５％Ｂを０．５分、５％Ｂを０．５分。検出：リニアリフレクターモード（正）；イオン化法：Ａｇｉｌｅｎｔ  Ｊｅｔ  Ｓｔｒｅａｍ源。スキャン：１００〜３２００（ｍ／ｚ）。
【０２９７】
方法：ＬＣＭＳ＿０１
ＬＣＭＳ＿０１は、Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣシステムおよびＬＣＴＰｒｅｍｉｅｒ  ＸＥ質量分析計（Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ製）から構成されるセットアップで実施された。溶離液：Ａ：０．１％ギ酸ＭＱ水溶液、Ｂ：  ０．１％ギ酸ＭｅＣＮ溶液。分析は、ＡおよびＢのグラジエントで溶出されたカラムに適切な量の試料を注入することによって、ＲＴ（カラム温度４０Ｃ）で実施した。ＵＰＬＣの条件、検出器の設定、質量分析計の設定は以下のとおりである。カラム：Ｗａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＵＰＬＣ  ＢＥＨ、Ｃ−１８、１．７μｍ、２．１ｍｍ×５０ｍｍ  グラジエント：流速０．４ｍｌ／分で、線形５％〜９５％Ｂを４．０分。検出：２１４ｎｍ（ＴＵＶからのアナログ出力（調整可能ＵＶ検出器））ＭＳイオン化モード：ＡＰＩ−ＥＳ。スキャン：５００〜２０００  ａｍｕ。
【０２９８】
［実施例１］
ＧＩＰ誘導体の合成
本発明の誘導体は、上述のように調製の一般的方法に従って合成した。
ｈＧＩＰ（１−４２）；（配列番号１）：
【化７４】
2020125311.tif 000075
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９８３．５３ｇ／ｍｏｌ
ＬＣＭＳ０１：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １２４６．１７
ｈＧＩＰ（１−３１）；（配列番号２）：
【化７５】
2020125311.tif 000076
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：３５８９．９８ｇ／ｍｏｌ
ＬＣＭＳ０１：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １１９７．６１
化合物１（配列番号６）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化７６】
2020125311.tif 000077
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４３０２．８７ｇ／ｍｏｌ
ＬＣＭＳ＿３４：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １０７６．８２
化合物２（配列番号７）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化７７】
2020125311.tif 000078
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４２８３．８２ｇ／ｍｏｌ
ＬＣＭＳ＿３４：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １０７１．８２
化合物３（配列番号８）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化７８】
2020125311.tif 000079
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４５０２．２０ｇ／ｍｏｌ
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １５０１．５０
化合物４（配列番号９）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化７９】
2020125311.tif 000080
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４４７０．１２ｇ／ｍｏｌ
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １１１８．１１
化合物５（配列番号１０）：
Ｎ｛１｝−アセチル，  Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化８０】
2020125311.tif 000081
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４３４４．９１ｇ／ｍｏｌ
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４４９．１０
化合物６（配列番号１１）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化８１】
2020125311.tif 000082
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ｂ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４５１２．１６ｇ／ｍｏｌ
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １５０４．７９
化合物７（配列番号１２）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化８２】
2020125311.tif 000083
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ｂ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４３３０．８８ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４４４．４１
化合物８（配列番号１３）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化８３】
2020125311.tif 000084
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ｂ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４４９８．１３ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １５００．１２
化合物９（配列番号１４）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化８４】
2020125311.tif 000085
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ｂ
計算分子量（平均）：４３０３．８６ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４３５．０８
化合物１０（配列番号１５）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化８５】
2020125311.tif 000086
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ｂ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４４７１．１０ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４９０．７９
化合物１１（配列番号１６）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ａｉｂ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化８６】
2020125311.tif 000087
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｃ、ＳＣ＿Ｃ、ＣＰ＿Ｃ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４２５９．８５ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４２０．７４
化合物１２（配列番号１７）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ａｉｂ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化８７】
2020125311.tif 000088
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｃ、ＳＣ＿Ｃ、ＣＰ＿Ｃ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４４２７．０９ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋１４７６．４５
化合物１３（配列番号１８）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｌａ１６，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化８８】
2020125311.tif 000089
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｃ、ＳＣ＿Ｃ、ＣＰ＿Ｃ
計算分子量（平均）：４２４５．７８ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４１６．０６
化合物１４（配列番号１９）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｌａ１６，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化８９】
2020125311.tif 000090
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｃ、ＳＣ＿Ｃ、ＣＰ＿Ｃ
計算分子量（平均）：４４１３．０２ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４７１．７７
化合物１５（配列番号２０）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化９０】
2020125311.tif 000091
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ｂ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４３６２．９７ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４５５．０９
化合物１６（配列番号２１）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシ−ヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化９１】
2020125311.tif 000092
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｃ、ＳＣ＿Ｃ、ＣＰ＿Ｃ
計算分子量（平均）：４３６３．９５ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４５５．４２
化合物１７（配列番号２２）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化９２】
2020125311.tif 000093
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ｂ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４６２１．１９ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １５４１．１２
化合物１８（配列番号２３）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化９３】
2020125311.tif 000094
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｃ、ＳＣ＿Ｃ、ＣＰ＿Ｃ
計算分子量（平均）：４３３０．８８ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４４４．４０
化合物１９（配列番号２４）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｓｐ１４，Ａｒｇ１８，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化９４】
2020125311.tif 000095
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｃ、ＳＣ＿Ｃ、ＣＰ＿Ｃ
計算分子量（平均）：４３６５．８８ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋１４５６．０７
化合物２０（配列番号２５）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化９５】
2020125311.tif 000096
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４４１３．９２ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４７２．０７
化合物２１（配列番号２６）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］−アミノ］ブタノイル］−アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化９６】
2020125311.tif 000097
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４５８１．１７ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １５２７．７８
化合物２２（配列番号２７）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化９７】
2020125311.tif 000098
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４４８０．０７ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４９４．１３
化合物２３（配列番号２８）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｇｌｕ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化９８】
2020125311.tif 000099
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４４９９．１１ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １５００．４７
化合物２４（配列番号２９）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｉｂ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化９９】
2020125311.tif 000100
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４４３６．０６ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４７９．４６
化合物２５（配列番号３０）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ａｉｂ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化１００】
2020125311.tif 000101
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４４５５．１０ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４８５．８１
化合物２６（配列番号３１）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド
【化１０１】
2020125311.tif 000102
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４５０９．２０ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １５０３．８４
化合物２７（配列番号３２）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド
【化１０２】
2020125311.tif 000103
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４４９０．１５ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４９７．４９
化合物２８（配列番号３３）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド
【化１０３】
2020125311.tif 000104
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４５３７．２１ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿３４：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １１３５．１３
化合物２９（配列番号３４）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド
【化１０４】
2020125311.tif 000105
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４５１８．１６ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿３４：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １１３０．３７
化合物３０（配列番号３５）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）
【化１０５】
2020125311.tif 000106
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４６２７．２４ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿３４：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １１３０．３７
化合物３１（配列番号３６）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド
【化１０６】
2020125311.tif 000107
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４５５１．２３ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １５１７．８１
化合物３２（配列番号３７）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］−ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド
【化１０７】
2020125311.tif 000108
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｃ、ＳＣ＿Ｃ、ＣＰ＿Ｃ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４５３２．１９ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １５１１．４４
化合物３３（配列番号３８）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３］−ｈＧＩＰ
【化１０８】
2020125311.tif 000109
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：５６７８．３２ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １４２０．５４
化合物３４（配列番号３９）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３］−ｈＧＩＰ
【化１０９】
2020125311.tif 000110
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：５６９７．３６ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １４２５．２９
化合物３５（配列番号４０）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ
【化１１０】
2020125311.tif 000111
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５７２５．４１ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １４３２．２５
化合物３６（配列番号４１）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ａｓｐ３４］−ｈＧＩＰ
【化１１１】
2020125311.tif 000112
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５７１１．３９ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １４２８．７５
化合物３７（配列番号４２）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ
【化１１２】
2020125311.tif 000113
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５７４４．４６ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １４３７．０３
化合物３８（配列番号４３）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ
【化１１３】
2020125311.tif 000114
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５６９３．３３ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １４２４．２４
化合物３９（配列番号４４）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ａｓｐ３４］−ｈＧＩＰ
【化１１４】
2020125311.tif 000115
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５６７９．３０ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １４２０．７９
化合物４０（配列番号４５）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ
【化１１５】
2020125311.tif 000116
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５７１２．３７ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １４２９．００
化合物４１（配列番号４６）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノンデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ
【化１１６】
2020125311.tif 000117
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５９１１．７１ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １４７８．８１
化合物４２（配列番号４７）：
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｇｌｕ３３，Ｇｌｕ３４］−ｈＧＩＰ
【化１１７】
2020125311.tif 000118
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５８７９．６２ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿２７：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １４７０．８１
化合物４３（配列番号５９）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ａｉｂ２０，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ（１−３１）  
【化１１８】
2020125311.tif 000119
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｅ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４３５８．０８ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿３４：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４５２．８２
化合物４４（配列番号６０）：
Ｎ｛１｝−アセチル，Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［４−［（１９−カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４，Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド
【化１１９】
2020125311.tif 000120
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｅ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４４５４．２１ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿３４：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４８４．８３
化合物４５（配列番号６１）
Ｎ｛イプシロン−２４｝−［２−［２−［２−［［２−［２−［２−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］−［Ａｉｂ２，Ｌｅｕ１４，Ｌｙｓ２４］−ｈＧＩＰ
【化１２０】
2020125311.tif 000121
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ｄ、ＳＣ＿Ｄ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５７０９．４６ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿３４：実測値（Ｍ  ＋  ４Ｈ）４＋  １４２８．３６
化合物４６（配列番号６２）
Ｎ｛１｝−アセチル，  Ｎ｛イプシロン−２４｝−［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−［［（４Ｓ）−４−カルボキシ−４−（１７−カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］−［Ｄ−Ｔｙｒ１，Ａｉｂ２，Ｎｌｅ１４，Ａｒｇ１８，Ｌｙｓ２４Ｐｒｏ３１］−ｈＧＩＰ（１−３１）アミド
【化１２１】
2020125311.tif 000122
使用した一般的方法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ｂ
計算分子量（平均）：４３８３．９９ｇ／ｍｏｌ  
ＬＣＭＳ＿３４：実測値（Ｍ  ＋  ３Ｈ）３＋  １４６１．９９
【０２９９】
薬理学的方法
ヒトなどの哺乳類の体重増加の低減および肥満の治療、ならびに糖尿病およびＮＡＳＨの治療のための薬理活性剤としての本発明の誘導体の効用は、従来のアッセイならびに以下に記述するインビトロおよびインビボアッセイにおけるアゴニストの活性によって実証されうる。
【０３００】
このようなアッセイはまた、本発明の誘導体の活性を既知の化合物の活性と比較しうる手段を提供する。
【０３０１】
［実施例２］
インビトロ効力（ＣＲＥルシフェラーゼ、全細胞）
この実施例の目的は、誘導体の活性または効力を、ヒトＧＩＰ受容体ならびにヒトＧＬＰ−１受容体およびヒトグルカゴン受容体においてインビトロで試験することである。インビトロ効力は、全細胞アッセイにおけるヒトＧＩＰ、ＧＬＰ−１またはグルカゴン受容体それぞれの尺度である。
【０３０２】
実施例１の誘導体の効力は、以下に記述するように決定した。ｈＧＩＰおよびＣ末端切断ｈＧＩＰ（１−３１）ならびにｈＧＬＰ−１（７−３７）（配列番号４（およびヒトグルカゴン（ｈＧｃｇ）（配列番号５）を比較に含めた。
【０３０３】
原理：
インビトロ効力は、個別細胞株のレポーター遺伝子アッセイにおける、ヒトＧＩＰ、ＧＬＰ−１またはグルカゴン受容体の応答を測定することにより決定された。アッセイは、ヒトＧＩＰ受容体、ヒトＧＬＰ−１受容体またはヒトグルカゴン受容体のいずれかを発現し、かつそれぞれが、ホタルルシフェラーゼ（ＣＲＥルシフェラーゼ）に対するプロモーターおよび遺伝子と結合したｃＡＭＰ応答配列（ＣＲＥ）のＤＮＡを含有する、安定にトランスフェクトされたＢＨＫ細胞株で実施した。それぞれの受容体が活性化されると、ｃＡＭＰの生成をもたらし、これは次に、ルシフェラーゼタンパク質が発現されるという結果になる。アッセイインキュベーションが完了した時に、ルシフェラーゼ基質（ルシフェリン）を追加し、酵素がルシフェリンをオキシルシフェリンに変換して、生物発光を生じる。発光はアッセイの読み取り値として測定される。
【０３０４】
細胞培養および調製
このアッセイに使用した細胞（ＢＨＫ  ＣＲＥ  ｌｕｃ２Ｐ  ｈＧＩＰＲクローン＃５、ＢＨＫ  ＣＲＥ  ｌｕｃ２Ｐ  ｈＧＬＰ−１Ｒクローン＃６、ＢＨＫ  ＣＲＥ  ｌｕｃ２Ｐ  ｈＧＣＧＲクローン＃１８）は、ＢＨＫＴＳ１３を親細胞株とするＢＨＫ細胞であった。細胞は、ＣＲＥルシフェラーゼを含有するクローンから由来し、それぞれの受容体とさらにトランスフェクトすることにより確立され、現在のクローンを得た。
【０３０５】
細胞は、細胞培養培地中、５％ＣＯ２で培養した。それらをアリコートし、液体窒素中で保管した。細胞を継代培養し、各アッセイの前日に播種した。
【０３０６】
材料
以下の化学物質をアッセイで使用した：Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８（１０％）（Ｇｉｂｃｏ  ２４０４）、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）（Ｓｉｇｍａ  Ａ９５１１）、１０％ＦＢＳ（ウシ胎児血清；  Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  １６１４０−０７１）、胎児オボアルブミン（Ｓｉｇｍａ  Ａ５５０３）、フェノールレッド不含有ＤＭＥＭ  （Ｇｉｂｃｏ  １１８８０−０２８）、１Ｍ  Ｈｅｐｅｓ（Ｇｉｂｃｏ  １５６３０）、Ｇｌｕｔａｍａｘ  １００ｘ（Ｇｉｂｃｏ  ３５０５０）、Ｇ４１８（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  １０１３１−０２７）、ハイグロマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  １０６８７−０１０）、１％  ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ（ペニシリン／ストレプトマイシン；Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ  １５１４０−１２２）およびｓｔｅａｄｙｌｉｔｅ  ｐｌｕｓ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ  ６０１６７５７）。
【０３０７】
緩衝液
ＤＭＥＭ培地ならびに１０％  ＦＢＳ、１ｍｇ／ｍｌ  Ｇ４１８、１ｍｇ／ｍｌハイグロマイシンおよび１％  ｐｅｎ／ｓｔｒｅｐ（ペニシリン／ストレプトマイシン１５１４０−１２２）から成る細胞培養培地。
【０３０８】
フェノールレッド不含有ＤＭＥＭ、１０ｍＭ  Ｈｅｐｅｓおよび１ｘ  Ｇｌｕｔａｍａｘから成るアッセイ培地。アッセイ培地中の１％オボアルブミンおよび０．１％  Ｐｌｕｒｏｎｉｃ  Ｆ−６８に、適応濃度の２倍のヒト血清アルブミンを添加したものから成るアッセイ緩衝液。アッセイ培地は、アッセイ緩衝液中の化合物の等容量と１：１で混合し、血清アルブミンの最終アッセイ濃度を得た。
【０３０９】
手順
１）細胞は、５０００細胞／ウェルでプレートに蒔き、一晩インキュベーションした。
２）細胞をＰＢＳで３回洗浄した。
３）血清アルブミンを含むまたは含まないアッセイ培地（５０  μｌアリコート）を、アッセイプレートの各ウェルに加えた。
４）試験化合物および基準化合物の原液を、アッセイ緩衝液中０．２  μＭの濃度まで希釈した。化合物を１０倍希釈して次の濃度を得た：２ｘ１０−７  Ｍ、２ｘ１０−８  Ｍ、２ｘ１０−９  Ｍ、２ｘ１０−１０  Ｍ、２ｘ１０−１１  Ｍ、２ｘ１０−１２  Ｍ、２ｘ１０−１３  Ｍ、および  ２ｘ１０−１４  Ｍ。
５）化合物またはブランクの５０μｌアリコートを希釈プレートからアッセイプレートに移した。化合物は次の濃度で試験した：１ｘ１０−７  Ｍ、１ｘ１０−８  Ｍ、１ｘ１０−９  Ｍ、１ｘ１０−１０  Ｍ、１ｘ１０−１１  Ｍ、１ｘ１０−１２  Ｍ、１ｘ１０−１３  Ｍ、および１ｘ１０−１４  Ｍ。
６）アッセイプレートを５％  ＣＯ２のインキュベーター中、３７℃で３時間インキュベートした。
７）アッセイプレートをインキュベーターから取り出し、室温で１５分間放置した。
８）細胞を、ＰＢＳ＋各ウェルの一部の液体で３回洗浄した。
９）ｓｔｅａｄｙｌｉｔｅの１００μｌアリコート＋試薬をアッセイプレートの各ウェルに加えた（試薬は感光性であった）。
１０）各アッセイプレートをアルミホイルで覆って遮光し、室温で３０分間振盪した。
１１）各アッセイプレートをマイクロタイタープレートリーダーで読み取った。
【０３１０】
計算および結果
マイクロタイタープレートリーダーからのデータを、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアに転送した。ソフトウェアは、非線形回帰を実施する（ログ（アゴニスト）対  応答）。ソフトウェアによって計算され、ｐＭで報告されたＥＣ５０を以下の表１に示す。
【０３１１】
各試料について、最低２つの複製を測定した。報告値は複製の平均である。
【表１Ａ】
2020125311.tif 000123
【表１Ｂ】
2020125311.tif 000124
【０３１２】
本発明の誘導体は、与えられた条件下ですべて良好なＧＩＰ効力を示し、ヒトＧＬＰ−１受容体およびヒトグルカゴン受容体においては実質的に活性を示さない、または測定可能な活性を示さない。
【０３１３】
［実施例３］
ミニブタにおける薬物動態研究
本研究の目的は、ミニブタへの静脈内投与後の本発明の誘導体のインビボでの半減期、すなわち体内での該誘導体の時間の長期化、およびそれによる該誘導体の作用時間の延長を決定することである。これは薬物動態（ＰＫ）研究において行われ、問題の誘導体の終末相半減期が決定される。終末相半減期は、一般に、初期分布相の後に測定される、ある特定の血漿濃度を半減するのにかかる期間を意味する。
【０３１４】
研究：
雌のＧｏｔｔｉｎｇｅｎミニブタをＥｌｌｅｇａａｒｄ  Ｇｏｔｔｉｎｇｅｎ  Ｍｉｎｉｐｉｇｓ（デンマーク、Ｄａｌｍｏｓｅ）から取得し、月齢およそ７〜１４ヵ月でかつ体重がおよそ１６〜３５ｋｇのものを研究で使用した。ミニブタは単独収容され、ＳＤＳミニブタ飼料（Ｓｐｅｃｉａｌ  Ｄｉｅｔｓ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、英国、エセックス）を１日１回、限定的に与えられた。
【０３１５】
３週間の順化後、二つの永久中心静脈カテーテルを、各ミニブタの大静脈尾部に移植した。ミニブタを手術後１週間回復させ、次いで、連続的な誘導体投与の間に適切なウオッシュ・アウト期間を伴う反復薬物動態研究に使用した。
【０３１６】
ミニブタは投与前およそ１８時間、および投与後０〜４時間の間絶食させたが、全期間の間、水には自由にアクセスできた。
【０３１７】
実施例１のＧＩＰ誘導体を、２３６  ｍＭプロピレングリコールを含有する８  ｍＭリン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ  ７．８に溶解し、濃度５０  ｎｍｏｌ／ｍｌとした。化合物の静脈内注射（通常は５  ｎｍｏｌ／ｋｇに対応する容積、例えば、０．１  ｍｌ／ｋｇ）を一つのカテーテルを通して与え、投与後１３日までの所定の時点で（好ましくは他のカテーテルを通して）血液試料を採取した。血液試料（例えば、０．８  ｍｌ）をＥＤＴＡ緩衝液（８  ｍＭ）に採取し、次いで４℃および１９４２Ｇで１０分間遠心分離した。
【０３１８】
サンプリングおよび分析：
血漿をドライアイス上のＭｉｃｒｏｎｉｃチューブの中にピペットで入れ、ＥＬＩＳＡまたは類似の抗体ベースアッセイまたはＬＣＭＳを使用してそれぞれのＧＩＰペプチド誘導体の血漿濃度について分析するまで−２０℃で保持した。個別の血漿の濃度・時間プロファイルを、Ｐｈｏｅｎｉｘ  ＷｉｎＮｏｎＬｉｎバージョン  ６．４（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ  Ｉｎｃ．、米国カリフォルニア州、マウンテンビュー）の非コンパートメントモデルで分析し、結果として生じる終末相半減期（調和平均）を決定した。
【０３１９】
結果：
【表２】
2020125311.tif 000125
【０３２０】
試験したＧＩＰ誘導体は、ヒトで測定されたｈＧＩＰ（１−４２）の半減期が約５分［Ｍｅｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｄｉａｂｅｔｅｓ，  Ｖｏｌ．  ５９，  ２００４，  ６５４−６６２］または７分［Ｄｅａｃｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．  ＆  Ｍｅｔａｂ．，  Ｖｏｌ．  ８５，  Ｎｏ．  １０，  ２０００，  ３５７５−３５８１］であるのに比べて、非常に長い半減期を有する。
【０３２１】
［実施例４］
ペプチド組成物の物理的安定性（ＴｈＴ細線維化アッセイおよびＤＬＳ＿ＳＩ）
本研究の目的は、以下に説明するようにＴｈＴアッセイおよびＤＬＳ−ＳＩアッセイで、水溶液中における本発明の誘導体の物理的安定性を評価することである。
【０３２２】
ＴｈＴアッセイ：
チオフラビンＴアッセイは、Ｓｃｈｌｅｉｎ  （２０１７），  ＡＡＰＳ  Ｊ，  １９（２），  ３９７−４０８に概説されるように実施した。
【０３２３】
ペプチドの低い物理的安定性はアミロイド線維形成につながる可能性があり、これは試料中に秩序正しい糸のような高分子構造として観察され、やがてはゲル形成につながりうる。これは慣例的には、試料の目視試験によって測定されてきた。しかし、そのような測定は非常に扱いにくく、観察者に依存する。従って、小分子インジケータプローブ（ｓｍａｌｌ  ｍｏｌｅｃｕｌｅ  ｉｎｄｉｃａｔｏｒ  ｐｒｏｂｅ）の適用がはるかに有利である。チオフラビンＴ（ＴｈＴ）はこのようなプローブであり、線維に結合した時、明確な蛍光シグネチャを有する［Ｎａｉｋｉ  ｅｔ  ａｌ．  （１９８９）  Ａｎａｌ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  １７７，  ２４４−２４９；  ＬｅＶｉｎｅ  （１９９９）  Ｍｅｔｈｏｄｓ．  Ｅｎｚｙｍｏｌ．  ３０９，  ２７４−２８４］。
【０３２４】
線維形成の時間経過は、以下の式のＳ字状曲線で表すことができる［Ｎｉｅｌｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．  （２００１）  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４０，  ６０３６−６０４６］：
【数１】
2020125311.tif 000126
式中、Ｆは時間ｔでのＴｈＴ蛍光である。定数ｔ０は、最大蛍光の５０％に達するために必要な時間である。線維形成を説明する２つの重要なパラメータは、ｔ０−２τで計算されるラグタイムおよび見かけ上の速度定数カッパ１／τである。
【０３２５】
細線維化の一般的開始機構として、ペプチドの部分的に折り畳まれた中間物の形成が示唆されている。これらの中間物のうち、その上にさらなる中間物が集まり、細線維化が進むテンプレートを形成するために核となるものはほとんどない。ラグタイムは、核の限界質量が高まる間隔に相当し、見かけ上の速度定数は、線維自体が形成される速度である。
【０３２６】
試料は各アッセイの前に新たに調製する。原薬を、８  ｍＭリン酸塩、１４  ｍｇ／ｍＬプロピレングリコール、５８  ｍＭフェノール、ｐＨ７．４中、２５０  μＭのＧＩＰ誘導体と共に溶解した。試料のｐＨは、適切な量の濃ＮａＯＨおよびＨＣｌを使用して、望ましい値に調整した。チオフラビンＴを、Ｈ２Ｏ中の原液から試料に加えて、最終濃度１μＭとした。
【０３２７】
２００μｌの試料アリコートを９６ウェルマイクロタイタープレート（Ｐａｃｋａｒｄ  ＯｐｔｉＰｌａｔｅＴＭ−９６、白色ポリスチレン）の各ウェルに入れた。各試料の４つの複製（１回の試験条件に相当）をウェルのカラム１つに入れた。プレートはＳｃｏｔｃｈ  Ｐａｄ（Ｑｉａｇｅｎ）で密封した。
【０３２８】
インキュベーション、振盪およびＴｈＴ蛍光発光の測定は、Ｆｌｕｏｒｏｓｋａｎ  Ａｓｃｅｎｔ  ＦＬ蛍光プレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｌａｂｓｙｓｔｅｍｓ）で行った。プレートは、１  ｍｍ振幅で９６０  ｒｐｍに調整した軌道振盪をしながら、３７℃でインキュベートした。蛍光測定は、４４４  ｎｍフィルターを通した励起、および４８５  ｎｍフィルターを通した発光測定を使用して行った。アッセイは４５時間のインキュベーション後に完了した。
【０３２９】
各実行は、プレートをアッセイ温度で１０分間インキュベートすることにより開始した。プレートは２０分ごとに、望ましい時間の間測定した。測定と測定の間、プレートは記述したように振盪および加熱した。
【０３３０】
ＴｈＴアッセイの完了後、各試料の複製を集め、２００００  ｒｐｍおよび１８℃で３０分間遠心分離した。上清を０．２２  μｍフィルターでろ過し、アリコートをＨＰＬＣバイアルに移した。初期試料に対するろ過した試料の濃度（パーセント）を回収率として報告した。
【０３３１】
測定点はさらなる処理のためにＭｉｃｒｏｓｏｆｔ  Ｅｘｃｅｌフォーマットで保存し、曲線の描画および近似はＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍを使用して実施した。線維がない場合のＴｈＴからのバックグラウンド発光は無視できた。データ点は複製４つの平均であり、標準偏差誤差のバーとともに示した。同じ実験で得られたデータのみ（すなわち、同じプレート上の試料）を同じグラフに表し、実験間の細線維化の相対的測定を確実にした。
【０３３２】
データセットは方程式  （１）に近似されうる。しかし、本明細書で報告した細線維化前のラグタイムは、ＴｈＴ蛍光がバックグラウンドレベルよりも顕著に上の時点を特定する曲線の目視検査により決定された。４５時間のラグタイムとして、アッセイ中のＴｈＴ蛍光の増加は報告されなかった。
【０３３３】
溶液中のペプチドの物理的安定性の評価のための動的光散乱安定性指標（ＤＬＳ−ＳＩ）：
溶液中のペプチドの流体力学半径（Ｒｈ、同義語：ストークス半径）は、溶液中の生体分子のサイズおよびオリゴマー状態の指標であり、動的光散乱法（ＤＬＳ）で測定できる。経時的な流体力学半径（Ｒｈ）の変化は、サイズおよびオリゴマー状態の変化の指標となりうるため、溶液中のペプチドの物理的不安定性の指標となりうる。
【０３３４】
試料は各アッセイの前に新たに調製した。原薬を、８  ｍＭリン酸塩、１４  ｍｇ／ｍＬプロピレングリコール、５８  ｍＭフェノール、ｐＨ  ７．４中、２５０  μＭのＧＩＰ誘導体と共に溶解した。試料のｐＨは、適切な量の濃ＮａＯＨおよびＨＣｌを使用して、望ましい値に調整した。
【０３３５】
新たに調製した各試料の４００  μＬを、孔径０．０２  μｍの非滅菌Ｗｈａｔｍａｎ（登録商標）  Ａｎｏｔｏｐ（登録商標）１０シリンジフィルターを通してろ過し、それによって最初の２滴を廃棄した。３８４ウェルマイクロタイタープレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ（登録商標）３５４０ポリスチレン、黒色で平らで透明な底部のウェルあたり２５  μＬのろ過試料を入れ、各試料を３つの複製として分析した。各ウェルの試料を、１５  μＬのシリコンオイル（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、２５℃の粘度２０ｃＳｔ）で覆った。プレートを１２００  ｒｐｍで５分間遠心分離し（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ（登録商標）遠心機５４３０、ローターＡ  ２  ＭＴＰ）、試料温度を２５℃に平衡化するためにＷｙａｔｔ  ＤｙｎａＰｒｏ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ  ＩＩに３０分間配置してから測定を行った。Ｗｙａｔｔ  ＤｙｎａＰｒｏ  Ｐｌａｔｅ  Ｒｅａｄｅｒ  ＩＩは８３０  ｎｍレーザーおよびソフトウェアＤｙｎａｍｉｃｓ  ｖ７．５を備えていた。各ウェルのそれぞれの試料を、データ取得間隔５秒および試料あたりの取得数４０で分析した。測定後、プレートをマイクロプレート用粘着フィルム（ＶＷＲポリプロピレン耐熱フィルム）で覆い、２５℃で４週間インキュベートした。試料は、１、２および４週間後に同じパラメータを使用してＤＬＳにより再測定した。
【０３３６】
測定後、各試料のデータは最初にＤｙｎａｍｉｃｓソフトウェアｖ７．５でフィルターした（最小振幅：０．０３、最大振幅：１、ベースライン限度（１＋／−）：０．００５および最大ＳＯＳ：１００）。その後、各測定試料の時間自己相関関数をピアレビューしてから、方程式  （２）に従ってＤＬＳ-ＳＩを計算した。
【０３３７】
ＤＬＳ-ＳＩアッセイで、キュムラントＲｈの変化は、次式のように時間に依存する安定性指標として定義され、
【数２】
2020125311.tif 000127
ＤＬＳ-ＳＩは時間（ｔ）に依存する安定性指標であり、安定性調査の開始時（ｔ０）と終了時（ｔ）の間のキュムラント流体力学半径Ｒｈの差を統計的に有意な変動性２σで正規化する。このような条件下でＲｈ測定値の分析変動性を包括的に調査したところ、結果はσ  ＝  ０．３  ｎｍであった。１より大きなＤＬＳ-ＳＩ値は、Ｒｈの統計的に有意な変化を表す。ＤＬＳ-ＳＩ値が大きいほど、経時的なＲｈの変化が大きい。
【０３３８】
結果：
【表３】
2020125311.tif 000128
【０３３９】
ＴｈＴアッセイで試験されたＧＩＰ誘導体は、４５時間（ラグタイム）後に線維形成を示さず、回収率は非常に高かった（すなわち、ｈＧＩＰ（１−４２）およびｈＧＩＰ（１−３１）の初期濃度に対する、アッセイ後に回収されたＧＩＰ誘導体の濃度）。さらに、ｈＧＩＰ（１−４２）およびｈＧＩＰ（１−３１）が溶液中で線維を形成する傾向を示す。
【０３４０】
ＤＬＳ−ＳＩデータは、ｈＧＩＰ（１-４２）および本発明のＧＩＰ誘導体に対して流体力学半径の増加は全くないかまたはほんのわずかであることを示しており、沈殿は目に見えなかった。Ｒｈの経時的変化は、ｈＧＩＰ（１-３１）について顕著であり、大きな凝集体の形成はＤＬＳ法において沈殿として見えるようになった。
【０３４１】
よって、本発明のＧＩＰ誘導体は、ｈＧＩＰ（１−４２）およびｈＧＩＰ（１−３１）と比較して高い物理的安定性を有する。
【０３４２】
［実施例５］
ＧＩＰ誘導体組成物の化学的安定性
本研究の目的は、ＧＩＰ誘導体組成物の化学的安定性を決定することである。ＧＩＰ誘導体組成物の安定性の尺度として、時間の関数としての高分子量ペプチド形成の形成（％ＨＭＷＰ）をサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ−ＭＳ）で分析した。さらに、ＧＩＰ誘導体組成物の純度損失はＬＣＭＳで測定した。
【０３４３】
製剤：
化学的安定性アッセイ用の試料は、各アッセイ前に新たに調製した。原薬を、８  ｍＭリン酸塩、１４  ｍｇ／ｍＬプロピレングリコール、５８  ｍＭフェノール、ｐＨ  ７．４中、２５０  μＭのＧＩＰ誘導体と共に溶解した。試料のｐＨは、適切な量の濃ＮａＯＨおよびＨＣｌを使用して、望ましい値に調整した。
【０３４４】
インキュベーション：
それぞれのＧＩＰ誘導体の製剤を３７℃のインキュベーター中に４週間保存した後、ＨＭＷＰ形成および純度損失について以下に記述するように試験した。
【０３４５】
ＨＭＷＰ形成分析：
共有結合オリゴマー（ＨＭＷＰ）の形成をＳＥＣ−ＭＳ法で分析し特定した。Ａｃｑｕｉｔｙ  ＢＥＨ２００  ＳＥＣカラム（４．６  ｍｍｘ１５０  ｍｍ、粒径１．７  μｍおよび孔径２００  Å）を備えたＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ｉ−クラスＵＰＬＣ。５５％ＭｅＣＮ中の０．０５％ＴＦＡを使用し、カラム温度４５度および流速０．２  ｍｌ／分で定組成溶離を実施した。ＬＣシステムは、２１５  ｎｍ、１０Ｈｚで作動するＴＵＶ検出器、および陽イオンモードで作動しｍ／ｚ範囲１００〜４０００、通常分解能設定の高分解能ＱＴｏＦ質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ製、Ｓｙｎａｐｔ  Ｇ２Ｓ）の両方に接続されていた。ロイシン−エンケファリンに対するロックマスコレクションは３１秒ごとに行った。スペクトルはＭａｓｓＬｙｎｘバージョン４．１で処理し、ＭａｘＥｎｔデコンボリューションした。結果を表５に示す。
【０３４６】
ＬＣＭＳによる純度分析：
加速化学的安定性試験について、関連試料を、純度および不純物特定および特徴付けのために、Ｗａｔｅｒｓ  Ｓｙｎａｐｔ  Ｇ２Ｓ高分解能ＱＴｏＦ質量分析システムに接続したＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  Ｉ−クラスＵＰＬＣシステムで分析した。ＵＰＬＣシステムにＷａｔｅｒｓ  Ａｃｑｕｉｔｙ  ＣＳＨ  Ｃ１８カラム（粒径１．７μｍ、内径１  ｍｍおよび長さ１５０  ｍｍ）を取り付けた。カラムオーブンは５５℃に保持した。使用した溶媒は、Ｔｈｅｒｍｏ（Ｏｐｔｉｍａ  ＬＳ１１８−１）から予め混合された０．１％ギ酸水溶液（溶離液Ａ）であり、Ｂ溶離液はこれもＴｈｅｒｍｏ  （Ｏｐｔｉｍａ  ＬＳ１２０−１）から予め混合された０．１％ギ酸のＭｅＣＮ溶液であった。溶媒はバイナリソルベントマネジャーシステムからポンプで吸い出され、５０  μｌの容量のミキサーの高圧側で混合された。グラジエントおよび流速は表４に示される：
【０３４７】
【表４】
2020125311.tif 000129
【０３４８】
８℃のフロースルーニードル自動サンプラーを使用し、各試料の１  μｌを注入した。流出液は、２１５ｎｍに調整した波長可変ＵＶ検出器（ＴＵＶ）を通過した。ＵＵＶ検出器からの出口は、質量分析計のエレクトロスプレー源になった。キャピラリーは３  ｋＶに保持し、乾燥窒素ガスを７５０  Ｌ／時間の流量および２５０℃の温度でパージした。ソースブロックは１２０℃に保持し、大きなボアコーンは５０  Ｌ／時間の窒素でフラッシュし、機器の残りは標準電極電位であった。質量分析計は公称分解能３５０００の高分解能モードで操作した。ＴｏＦアナライザは、１００〜２０００のｍ／ｚウィンドウのＡＤＣモードで操作した。トラップＴ−ｗａｖｅ領域のより高い衝突エネルギーの第二の機能を、３２〜５２Ｖの電圧を有する高エネルギーランプのＭＳＥタイプの実験のために使用した。
【０３４９】
結果：
【表５】
2020125311.tif 000130
【０３５０】
表５に見られるように、本発明のＧＩＰ誘導体はＨＭＷＰの低い形成を示し、月あたりの低い純度損失を有する。よって、それらは溶液中で化学的に安定であると見なされる。
【０３５１】
［実施例６］
肥満マウスの亜慢性インビボ研究
本実施例の目的は、本発明のＧＩＰ誘導体のみ、およびＧＬＰ−１受容体アゴニストとの組み合わせの、食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）マウスの食物摂取、体重、および耐糖能に対するインビボ効果を評価することである。本実施例に使用したＧＬＰ−１受容体アゴニストは、セマグルチドと同じ薬理学的特性を有するが、わずかに異なる構造を有するセマグルチド様分子であった。化合物は、例えば、本明細書の実施例１の方法により記述されたもの、またはＷＯ  ２００６／０９７５３７号、実施例４に記述されたものなど、当該技術分野で周知の方法を使用して合成してもよい。
【０３５２】
セマグルチド様分子（化合物番号４７；配列番号５８）：
Ｎ６，２６−｛１８−［Ｎ−（１７−カルボキシヘプタデカノイル）−Ｄ−γ−グルタミル］−１０−オキソ−３，６，１２，１５−テトラオキサ−９，１８−ジアザオクタデカノイル｝−［８−（２−アミノ−２−プロパン酸），３４−Ｌ−アルギニン］ヒトグルカゴン様ペプチド１（７−３７）
【化１２２】
2020125311.tif 000131
【０３５３】
動物をＧＬＰ−１受容体アゴニスト（化合物番号４７）および／または化合物番号５、２５および３１により例示される本発明のＧＩＰ誘導体で１日１回治療し、体重減少、有効性および耐糖能を評価した。
【０３５４】
動物および飼料
すべての動物実施計画書は、Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋの施設内動物管理委員会および倫理審査委員会による承認を受けた。動物は、Ｎｏｖｏ  Ｎｏｒｄｉｓｋの齧歯類飼育基準に従って収容され、制御照明下で食品および水に対する適宜な自由なアクセスが与えられた（１２時間：１２時間の明／暗サイクル、照明オフ：１８：００〜０６：００）、温度（２３±２℃）および相対湿度（５０±２０％）。高脂肪の飼料（４５％  ｋｃａｌ脂肪、ＲＤ１２４５１、Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｄｉｅｔｓ、米国ニュージャージー州ニューブランズウィック）で２２週間にわたり維持された、ＤＩＯ雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスは、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ（フランス）から入手した。到着時、マウスは単独収容（ケージ当たりマウス１匹）され、治療開始前の２週間にわたり、その新しい環境に対して順応させた。
【０３５５】
グループの割り当ておよび投与
試験の開始前に、動物は単独収容され、７日間にわたり取扱いに順応させた。ＤＩＯマウスは、体脂肪量および体重の平均および標準偏差の統計的変化が群間で最小化されるように、群（ｎ＝８／群）に配分された。動物は１日１回、溶媒または化合物のいずれかの皮下投与を受けた。
【０３５６】
製剤緩衝液
試験のすべての化合物は、次の緩衝液中で処方された：５０  ｍＭリン酸塩、７０  ｍＭ塩化ナトリウム、０．０５％ポリソルベート８０、ｐＨ  ７．４。投薬溶液はガラスバイアル中で処方し、２〜８℃で保存した。投薬溶液は、投薬前に室温まで戻し、投薬後は２〜８℃に戻した。
【０３５７】
体重および食物摂取量
体重（ＢＷ）および食物摂取量は、毎日投与する直前に測定した。治療開始前のマウスの平均開始体重は４５．２±０．２グラムであった。結果を表６〜８に示す。
【０３５８】
ＩＰＧＴＴ（腹腔内ブドウ糖負荷試験）
ブドウ糖負荷試験の当日（１５日目）に、動物を４時間絶食させた。食物を取り除き、動物を新たなケージに移した。動物は水にはアクセスできたが、食物にはアクセスできなかった。尾の血糖値を測定し、マウスに２ｇ／ｋｇの腹腔内（ｉ．ｐ．）糖負荷を注入した（ｔ＝０）（２００ｍｇ／ｍｌグルコース溶液、用量容積１０  ｍｌ／ｋｇ）。尾の血糖値を、腹腔内糖負荷後、０、１５、３０、６０、９０、１２０分時点で測定した。ＩＰＧＴＴ中の動物の層別化は、例えば、グループ１からのマウス２匹、次にグループ２、３、４からのマウス２匹に投与した後、グループ１、２、３などからの次の２匹を取り扱うように行われた。これは、すべてのグループにわたり「時刻」の公平な分配を可能にするためであった。
【０３５９】
結果：
【表６】
2020125311.tif 000132
【０３６０】
【表７】
2020125311.tif 000133
【０３６１】
【表８】
2020125311.tif 000134
【０３６２】
表６〜８から、ＧＬＰ−１受容体アゴニスト化合物番号４７（２  ｎｍｏｌ／ｋｇ）を使用した単剤療法は、食物摂取量の減少を誘発し、体重減少および耐糖能の改善をもたらしたことが分かる。本発明のＧＩＰ誘導体（化合物５、２５、３１；３０  ｎｍｏｌ／ｋｇ）を使用した単剤療法は、食物摂取量に軽微な効果を有し、化合物４７よりも小さな体重減少をもたらした。ＧＩＰ誘導体５、２５、３１を使用した単剤療法はすべて耐糖能を改善した。化合物４７（２  ｎｍｏｌ／ｋｇ）とＧＩＰ誘導体５、２５、３１（３０  ｎｍｏｌ／ｋｇ）のそれぞれとの併用療法は、単剤療法と比較して、添加物よりも大きな効果で、食物摂取量の減少および体重減少を増強させた。併用療法の耐糖能は、ＧＩＰ誘導体の単剤療法で達成されたものを超えて改善することはなかった（表６〜８）。
【０３６３】
本発明のある特定の特徴を本明細書において例示および説明してきたが、数多くの修正、置換、変更および均等物が当業者には思い浮かぶであろう。したがって、添付の特許請求の範囲が、本発明の真の趣旨の範囲内にあるそのようなすべての修正および変更を網羅することを意図していることが理解されるべきである。
【配列表】
2020125311000001.app
【外国語明細書】
2020125311000001.pdf