(57)【要約】【課題】猫尿臭を抑制する物質の提供。【解決手段】アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする、猫尿臭抑制剤。アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする、３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールの臭いの抑制剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする、猫尿臭抑制剤。
【請求項２】
前記猫尿臭が３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート及び／又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールに起因する臭いである、請求項１記載の猫尿臭抑制剤。
【請求項３】
アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする、３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールの臭いの抑制剤。
【請求項４】
アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする、ＯＲ２Ｍ３又はそれと同等な機能を有する嗅覚受容体ポリペプチドに対する受容体活性阻害剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、猫尿臭抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
ペット等の排泄物を処理する処理具において、排泄物から生じる臭気が知覚されないようにする目的で、消臭剤を該処理具に配することが行われている。例えば、特許文献１には、特定の化学式で表されるアルミノシリケートを含有するペット用消臭剤が開示されている。また特許文献２には、フェノール性化合物及び／又はメディエータと、それらを酸化することができる酵素とを含む消臭剤を含有する消臭剤含有製品が開示されている。特許文献３には、大環状ケトンを有効成分とするβ-グルクロニダーゼ阻害剤が、尿にβ-グルクロニダーゼが作用することによって生じる揮発性の尿臭成分の生成を抑制し、ヒトや動物の尿臭を抑制することが記載されている。
【０００３】
猫の尿臭（以下、猫尿臭とも言う）は、ヒトや犬の尿臭と比較して臭いことが知られており、猫尿臭に対する消臭効果の向上が求められている。しかし、特許文献１〜３に記載されたペット用消臭剤及び消臭剤含有製品や、β-グルクロニダーゼ阻害剤は、猫尿臭に対する消臭効果が十分であるとは言い難い。猫の尿中に含まれる悪臭成分には、３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート（ＭＭＦ）や３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノール（ＭＭＢ）などの猫尿に特有のチオール類が含まれている（非特許文献１、２）。したがって、猫尿臭を抑えるためにはこれらのチオール系化合物の臭いの抑制が求められる。
【０００４】
ヒト等の哺乳動物においては、匂いは、鼻腔上部の嗅上皮に存在する嗅神経細胞上の嗅覚受容体に匂い分子が結合し、それに対する受容体の応答が中枢神経系へと伝達されることにより認識されている。ヒトの場合、嗅覚受容体は約４００個存在することが報告されており、これらをコードする遺伝子はヒトの全遺伝子の約２％にあたる。一般的に、嗅覚受容体と匂い分子は複数対複数の組み合わせで対応付けられている。すなわち、個々の嗅覚受容体は構造の類似した複数の匂い分子を異なる親和性で受容し、一方で、個々の匂い分子は複数の嗅覚受容体によって受容される。さらに、ある嗅覚受容体を活性化する匂い分子が、別の嗅覚受容体の活性化を阻害するアンタゴニストとして働くことも報告されている。これら複数の嗅覚受容体の応答の組み合わせが、個々の匂いの認識をもたらしている。
【０００５】
したがって、同じ匂い分子が存在する場合でも、同時に他の匂い分子が存在すると、当該他の匂い分子によって受容体応答が阻害され、最終的に認識される匂いが全く異なることがある。このような仕組みを嗅覚受容体のアンタゴニズムと呼ぶ。この受容体アンタゴニズムによる匂いの抑制は、香水や芳香剤等の別の匂いを付加することによる消臭と異なり、特定の悪臭の認識を特異的に失くしてしまうことができ、また芳香剤の匂いによる不快感が生じることもないという利点を有している。
【０００６】
嗅覚受容体アンタゴニズムの考え方に基づき、嗅覚受容体の活性を指標として悪臭抑制物質を同定する方法、及び悪臭抑制剤がこれまでにいくつか開示されている。例えば、特許文献４には、ヘキサン酸やイソ吉草酸の悪臭を抑制する物質を、それらの悪臭物質に特異的に応答する嗅覚受容体の活性を指標として探索することが開示されている。同様に、特許文献５には、スカトール臭を抑制する物質を、特許文献６には、ポリスルフィド化合物の臭いを抑制する物質を、それぞれの悪臭物質に特異的に応答する嗅覚受容体の活性を指標として探索することが開示されている。特許文献７には、アセチルセドレン等の香料に、嗅覚受容体アンタゴニズムに基づいてｐ−クレゾール臭及びこれに起因する尿臭を抑制する作用があることが記載されている。しかしながら、嗅覚受容体アンタゴニズムに基づいて猫尿由来の悪臭、特にチオール臭を抑える技術については、これまで報告がない。
【０００７】
特許文献１には、アルミノシリケートを含有するペット用消臭剤に香料を含有させることでペット臭の消臭効果が高まり、また使用者の快さも向上することが記載されている。特許文献８には、（Ａ）トップノート成分及び／又は（Ｂ）ミドルノート成分及び／又は（Ｃ）ベースノート成分及び／又は（Ｄ）天然香料成分の群から選ばれる少なくとも１種以上の香料を含有する環境用芳香消臭組成物により、アミン臭、アンモニア臭、硫黄臭、酸臭、錆臭、煙草臭、動物臭、又はハロゲン臭などの臭気をマスキングすることが記載されている。特許文献９には、エトキシル化アルキルフェノール、トリエチレングリコール、エタノール、リシノール酸、水、及びクエン酸を含有する悪臭中和のための消臭組成物が、汗臭、腋臭、足臭、頭皮臭等の体臭、及びタバコやペット臭等の生活臭を含む様々な悪臭を蓄積した室内の臭気を中和することが記載されており、また当該組成物が香料を含有していてもよいことが記載されている。上記の文献には、該消臭剤又は組成物に含有され得る香料として他種多様な香料が例示されているが、該香料又はそれを含む該消臭剤若しくは組成物が猫尿由来の悪臭、又はその原因物質であるＭＭＦやＭＭＢ等の特定のチオール類の臭いを抑制する作用を有することは開示されていない。
【０００８】
特許文献１０には、フロルヒドラルを含むアルデヒドが１−ブタンチオールの悪臭を中和する作用を有することが記載され、また、５重量％〜１００重量％のパルミチン酸メチル、ファルネソール、ベチバーアセテート、ウンデシレンアルデヒド、酢酸テルピニル、メチルイソオイゲノール、フェニルアセトアルデヒドジメチルアセタール、パッチワン、及び場合により、ベンゾフェノン、酸化ジフェニル、メロゾーン、酢酸イソノニル、セドリルメチルエーテル、ならびにこれらの混合物からなる群から選択される物質を含む香料混合物と、該アルデヒドとを含む悪臭低減組成物が、１−ブタンチオールの悪臭を中和する作用を有することが記載されている。特許文献１１には、フロルヒドラルを含む揮発性アルデヒドが１−ブタンチオールの悪臭を中和する作用を有することが記載され、また悪臭を低減させるための有効量のベンゾフェノン、パルミチン酸メチル、ファルネソール、ベチバーアセタート、及びウンデシレンアルデヒドを含む香料混合物と、該揮発性アルデヒドとを含む悪臭抑制組成物が、１−ブタンチオールの悪臭を中和し、かつニンニク臭を低減させたことが記載されている。特許文献１２には、フロルヒドラルを含む揮発性アルデヒドと、２５℃で約０．０１〜約１３の蒸気圧を有する酸触媒とを含む悪臭制御組成物によりブタンチオールを中和し、その臭いを減少させることが記載されている。しかし、上記の文献には、該アルデヒド又はそれを含む組成物が猫尿由来の悪臭、又はその原因物質であるＭＭＦやＭＭＢ等の特定のチオール類の臭いを抑制する作用を有することは開示されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開２００７−２２９１５１号公報
【特許文献２】特開２００５−６５７５０号公報
【特許文献３】特開２０１４−１９５６９６号公報
【特許文献４】特開２０１２−０５０４１１号公報
【特許文献５】特開２０１２−２４９６１４号公報
【特許文献６】国際公開公報第２０１６／２０４２１１号
【特許文献７】特開２０１７−１０１２２４号公報
【特許文献８】特開２００３−１９０２６４号公報
【特許文献９】米国特許公開公報第２００６／０２２８２５０号
【特許文献１０】特表２０１５−５２０６１９号公報
【特許文献１１】特表２０１４−５０２５１９号公報
【特許文献１２】特表２０１３−５１３４５７号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ，２００６，１３（１０）：１０７１−１０７９
【非特許文献２】Ｊ  Ｃｈｅｍ  Ｅｃｏｌ，２０１８，４４（４）：３６４−３７３
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、猫尿臭、又はその原因物質による臭いの抑制剤を提供することに関する。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明者は、嗅覚受容体ＯＲ２Ｍ３発現細胞が、３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート（ＭＭＦ）、３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノール（ＭＭＢ）などの、猫尿に含まれ、猫特有の尿臭をもたらすチオール類に応答することを見出した。さらに本発明者は、ＯＲ２Ｍ３発現細胞の応答を抑制する物質が、嗅覚受容体アンタゴニズムによる匂い抑制によってＭＭＦ及び／又はＭＭＢの臭い、ならびにこれに起因する猫尿臭を抑制することができることを見出した。
【００１３】
したがって、本発明は、アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする、猫尿臭抑制剤を提供する。
また本発明は、アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする、３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールの臭いの抑制剤を提供する。
【発明の効果】
【００１４】
本発明により提供される猫尿臭抑制剤、及び３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート（ＭＭＦ）又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノール（ＭＭＢ）の臭いの抑制剤は、嗅覚受容体アンタゴニズムによる匂い抑制により、ＭＭＦ臭及び／又はＭＭＢ臭、ならびにこれに起因する猫尿臭を抑制することができる。したがって、当該抑制剤によれば、従来の消臭剤又は芳香剤を用いる消臭方法において生じていた芳香剤の強い匂いに基づく不快感等の問題を生じることがなく、ＭＭＦ、ＭＭＢ又は猫尿の臭いを消臭することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】ヒト嗅覚受容体の猫尿臭原因物質に対する応答。Ａ：ＭＭＦ、Ｂ：ＭＭＢ。横軸は個々の嗅覚受容体、縦軸は１回の実験における２ウェルの応答強度の平均値を示す。
【図２】種々の濃度の猫尿臭原因物質に対するＯＲ２Ｍ３の応答。Ａ：ＭＭＦに対する応答、Ｂ：ＭＭＢに対する応答。データは平均値±ＳＥ（それぞれｎ＝３）。
【図３】ＯＲ２Ｍ３アンタゴニストによる、ＯＲ２Ｍ３のＭＭＦ（左）及びＭＭＢ（右）に対する応答の抑制。Ａ：アセチルセドレン、Ｂ：γ−メチルイオノン、Ｃ：フロルヒドラル。横軸はアンタゴニスト濃度、縦軸は応答強度。データは平均値±ＳＥ（ｎ＝３）。
【図４】ＯＲ２Ｍ３アンタゴニストによるＭＭＦ臭及びＭＭＢ臭の抑制効果。Ａ：ＭＭＦ臭に対する匂い強度、Ｂ：ＭＭＢ臭に対する匂い強度。ＡＣ：アセチルセドレン、ＭＩＧ：γ−メチルイオノン、Ｆｌｏ：フロルヒドラル。アンタゴニストとして使用する香料はいずれも１％（ｖ／ｖ）の濃度で使用した。白色バーは基準サンプル（ＯＲ２Ｍ３アンタゴニストなし）の臭い強度を示す。データは平均値±ＳＥ（ｎ＝３）。
【図５】実施例４で用いた猫尿処理具１の断面図。
【図６】ＯＲ２Ｍ３アンタゴニストによる猫尿の臭いの抑制効果。ＡＣ：アセチルセドレン、Ｆｌｏ：フロルヒドラル、ＭＩＧ：γ−メチルイオノン、ＣＷＯＴ：シダーウッドオイルテキサス。バーは左から１日後、７日後の結果。縦軸は官能評価による猫尿臭の強度。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本明細書における「嗅覚受容体アンタゴニズムによる匂い抑制」とは、目的の匂い分子と他の匂い分子をともに適用することにより、当該他の匂い分子によって目的の匂い分子に対する受容体応答を阻害し、結果的に個体に認識される匂い（悪臭を含む）を抑制する手段である。嗅覚受容体アンタゴニズムによる匂い抑制は、同様に他の匂い分子を用いる手段であっても、芳香剤等の、目的の匂いを別の強い匂いによって打ち消す手段（いわゆる香りによるマスキング）とは区別される。嗅覚受容体アンタゴニズムによる匂い抑制の一例は、アンタゴニスト等の嗅覚受容体の応答を阻害する物質を使用するケースである。特定の匂いをもたらす匂い分子の受容体にその応答を阻害する物質を適用すれば、当該受容体の当該匂い分子に対する応答が抑制されるため、最終的に個体に知覚される匂いを抑制することができる。
【００１７】
本明細書において「アンタゴニスト」とは、受容体に結合するが、受容体を活性化しないか、又はアゴニストに対する受容体の応答を抑制する（あるいは受容体活性を阻害する）物質をいう。
【００１８】
本発明により抑制される「猫尿臭」は、好ましくは排尿直後の（又は新鮮な）猫尿及び排尿後時間が経過した猫尿が有する特有の尿臭であり、好ましくは、猫尿に含まれるイオウ系化合物（チオール類やスルフィド類）に起因する猫尿臭であり、より好ましくは、３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート（ＭＭＦ）、及び／又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノール（ＭＭＢ）に起因する猫尿臭である。ＭＭＦ及びＭＭＢは、猫尿に含まれるチオール類であり、猫尿の悪臭成分として知られている（非特許文献１、２を参照）。これらチオール類は、猫尿に特有の成分であり、犬やヒトの尿臭と比べて強くかつ独特な臭いを有する猫尿の臭いをもたらす主要成分である（非特許文献１）。一方、ヒトや犬、猫の尿に共通する、排尿から時間が経過した尿から発生する不快臭が存在する。この不快臭は、尿素がウレアーゼによって分解されて生じるアンモニア臭、及び尿中に含まれる菌が持つβ−グルクロニダーゼによる尿中のフェノール類、アミン類などの加水分解により発生するフェノール、ｐ−クレゾール、インドールなどによる臭いを含む。しかし、これらの不快臭は、ヒトや犬の尿からも発生する臭いであり、猫尿を特徴づける臭いではない。またこれらの不快臭は、尿成分の微生物分解により発生した物質を原因とする腐敗臭であるため、排尿から時間が経過した猫尿から発生し、排尿直後の猫尿からは発生しない。一方、上述のチオール類は、猫尿に元々含まれている成分であるため、その臭いは排尿直後から発生し、そのまま時間が経過した猫尿からも発生し続ける。したがって、猫尿臭を効果的に抑えるためには、排尿直後の尿からのＭＭＦ、ＭＭＢなどのチオール類臭を抑える必要がある。
【００１９】
本発明において、「３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート（ＭＭＦ）の臭い（又はＭＭＦ臭）」、及び「３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノール（ＭＭＢ）の臭い（又はＭＭＢ臭）」とは、それぞれ、ＭＭＦ及びＭＭＢによりもたらされる臭いであり得る。本発明における「ＭＭＦ臭」及び「ＭＭＢ臭」は、代表的には、排尿直後の（又は新鮮な）猫尿から発せられる臭いとして表現され得る。
【００２０】
本明細書において、「嗅覚受容体ポリペプチド」とは、嗅覚受容体又はそれと同等の機能を有するポリペプチドをいい、嗅覚受容体と同等の機能を有するポリペプチドとは、嗅覚受容体と同様に、細胞膜上に発現することができ、匂い分子の結合によって活性化し、かつ活性化されると、細胞内のＧαｓと共役してアデニル酸シクラーゼを活性化することで細胞内ｃＡＭＰ量を増加させる機能を有するポリペプチドをいう（Ｎａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．，２００４，５：２６３−２７８）。
【００２１】
本明細書において、ヌクレオチド配列及びアミノ酸配列の同一性は、リップマン−パーソン法（Ｌｉｐｍａｎ−Ｐｅａｒｓｏｎ法；Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８５，２２７：１４３５−４１）によって計算される。具体的には、遺伝情報処理ソフトウェアＧｅｎｅｔｙｘ−Ｗｉｎ（Ｖｅｒ．５．１．１；ソフトウェア開発）のホモロジー解析（Ｓｅａｒｃｈ  ｈｏｍｏｌｏｇｙ）プログラムを用いて、Ｕｎｉｔ  ｓｉｚｅ  ｔｏ  ｃｏｍｐａｒｅ（ｋｔｕｐ）を２として解析を行うことにより算出される。
【００２２】
本明細書において、ヌクレオチド配列及びアミノ酸配列に関する「少なくとも８０％の同一性」とは、８０％以上、好ましくは８５％以上、より好ましくは９０％以上、さらに好ましくは９５％以上、さらにより好ましくは９８％以上、なお好ましくは９９％以上の同一性をいう。
【００２３】
嗅覚受容体ＯＲ２Ｍ３は、ヒト嗅細胞で発現している嗅覚受容体であり、ＧｅｎＢａｎｋにＡｃｃｅｓｓｉｏｎ  ｎｕｍｂｅｒ：ＫＰ２９０１４７として登録されている。ＯＲ２Ｍ３は、配列番号１のヌクレオチド配列を有する遺伝子にコードされる、配列番号２のアミノ酸配列からなるポリペプチドである。図１〜２に示すとおり、本発明者は、嗅覚受容体ＯＲ２Ｍ３が、猫尿臭原因物質であるＭＭＦ及びＭＭＢに対して濃度依存的な活性化を示す、ＭＭＦ及びＭＭＢのそれぞれに対する受容体であることを見出した。
【００２４】
したがって、嗅覚受容体ＯＲ２Ｍ３発現細胞の応答を抑制するＯＲ２Ｍ３アンタゴニストを、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制のために使用することができる。ＯＲ２Ｍ３アンタゴニストは、嗅覚受容体アンタゴニズムによりＭＭＦ及びＭＭＢに対するＯＲ２Ｍ３の活性を抑制することで、個体のＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭、又は猫尿臭の認識に変化を生じさせ、結果として、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭、又は猫尿臭を抑制することができる。
【００２５】
本発明で使用されるＯＲ２Ｍ３アンタゴニストとして、下記の化合物が見出された：
アセチルセドレン（メチルセドリルケトン；［１−［（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−２，６，６，８−ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｔｒｉｃｙｃｌｏ［５．３．１．０1,5］ｕｎｄｅｃ−８−ｅｎ−９−ｙｌ］ｅｔｈａｎｏｎｅ）；
γ−メチルイオノン（α−ｉｓｏ−ｍｅｔｈｙｌｉｏｎｏｎｅ；３−ｍｅｔｈｙｌ−４−（２，６，６−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ−２−ｃｙｃｌｏｈｅｘｅｎ−１−ｙｌ）−３−ｂｕｔｅｎ−２−ｏｎｅ）；及び
フロルヒドラル（β−Ｍｅｔｈｙｌ−３−（１−ｍｅｔｈｙｌｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚｅｎｅｐｒｏｐａｎａｌ）。
したがって、一態様において、本発明は、アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする、猫尿臭抑制剤を提供する。
【００２６】
より詳細には、上記の化合物は、ＯＲ２Ｍ３又はそれと同等な機能を有する嗅覚受容体ポリペプチドに対するアンタゴニストである。ＯＲ２Ｍ３と同等な機能を有する嗅覚受容体ポリペプチドの例としては、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、かつＭＭＦ及び／又はＭＭＢに対する応答性を有する嗅覚受容体ポリペプチドが挙げられる。ＯＲ２Ｍ３と同等な機能を有する嗅覚受容体ポリペプチドのさらなる例としては、ＯＲ２Ｍ３と相同な、他の動物由来の嗅覚受容体が挙げられ、その好ましい例としては、ＭＭＦ及び／又はＭＭＢに対する応答性を有する、ＯＲ２Ｍ３と相同なマウス又はラット由来の嗅覚受容体ポリペプチドが挙げられる。
【００２７】
アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラル（以下、これらを本発明の化合物ともいう）は、これまで香料素材として知られていたが、ＯＲ２Ｍ３に対するアンタゴニスト作用を有することや、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭、又は猫尿臭を選択的に抑制する機能があることは知られていなかった。なお、これらの本発明の化合物は、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭、又は猫尿臭を抑制する機能を有する一方で、香料素材として自身の香りを呈することができるので、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制剤として使用すると同時に香料としても使用することができる。
【００２８】
当該本発明の化合物は、いずれも市販のものを購入することができる。例えば、該本発明の化合物は、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｌａｖｏｒｓ＆Ｆｒａｇｒａｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．やＧｉｖａｕｄａｎ  ＳＡなどから入手することが可能である。あるいは、化学合成によって、該市販品と同一物質又はそれを含む組成物を製造することが可能である。
【００２９】
本発明のＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制剤は、本発明の化合物からなる群より選択される少なくとも１種を有効成分として含有する。例えば、本発明のＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制剤の有効成分は、当該本発明の化合物からなる群より選択される少なくとも１種、例えばいずれか単独又はいずれか２種以上の組み合わせであり得る。本発明のＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制剤は、該本発明の化合物からなる群より選択される少なくとも１種の化合物から本質的に構成され得るが、該本発明の化合物のいずれか１種以上を有効成分とし、さらにその他の成分を含む組成物であってもよい。
【００３０】
本発明の別の一態様において、当該本発明の化合物は、いずれか単独又はいずれか２種以上の組み合わせで、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭、又は猫尿臭を抑制するための有効成分として使用され得る。
【００３１】
一実施形態において、当該本発明の化合物のいずれか１種以上が、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭を抑制するための化合物又は組成物に、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭を抑制するための有効成分として含有され得る。あるいは、該本発明の化合物のいずれか１種以上を、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制剤の製造のため、あるいはＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭を抑制するための化合物又は組成物の製造のために使用することができる。当該ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭を抑制するための化合物又は組成物の例としては、ペット（猫を含む）用品の洗浄剤、猫尿臭の消臭剤などが挙げられる。
【００３２】
一実施形態において、当該本発明の化合物のいずれか１種以上が、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制が所望されるあらゆる化合物又は組成物に対して、あるいはＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制が所望されるあらゆる環境下において、又は該環境に含まれるあらゆる物品に対して、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制のための有効成分として使用され得る。あるいは、当該本発明の化合物のいずれか１種以上を、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制のための有効成分として、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制が所望される化合物又は組成物の製造のために使用することができる。ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制が所望される化合物又は組成物の例としては、猫用のトイレ、ケージ、ハウス又はベッド、ペット（猫を含む）用トイレ、又は該ペット用トイレで用いる砂やシート、ペット（猫を含む）用シーツや紙おむつ、などが挙げられる。また、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制が所望される環境の例としては、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の発生する可能性のある環境、例えば、猫を飼育する室内や施設などが挙げられ、該環境に含まれる物品の例としては、該猫を飼育する室内や施設に備わる床、壁、及び家具、カーテン、カーペット等のインテリア、ペット（猫を含む）用の遊具や、被服、アクセサリー、などが挙げられる。
【００３３】
上述したＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制剤、及びＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭を抑制するための化合物又は組成物は、当該本発明の化合物のいずれか１種以上に加えて、他の消臭効果を有する成分を、その目的に応じて適宜含有していてもよい。当該消臭効果を有する他の成分としては、ウッドチップ等の木材、シリカ、活性炭などが挙げられる。さらに、当該抑制剤、化合物又は組成物は、消臭剤や防臭剤に一般的に添加される任意の成分を含んでいてもよい。
【００３４】
さらなる態様として、本発明は、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭と、当該本発明の化合物からなる群より選択される少なくとも１種とを共存させる工程を含む、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制方法を提供する。
【００３５】
本発明の方法の一実施形態においては、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭、又は猫尿臭の存在下で、対象に、当該本発明の化合物からなる群より選択される少なくとも１種を適用することにより、該ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭と該アンタゴニストとを共存させる。それによって、該対象のＯＲ２Ｍ３と該化合物が結合して、ＭＭＦ及びＭＭＢに対する該対象のＯＲ２Ｍ３の活性化が抑制されるので、嗅覚受容体アンタゴニズムによる匂い抑制に基づいて、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭、又は猫尿臭が抑制される。
【００３６】
本発明の方法において、当該対象の例としては、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制を必要とする対象、好ましくは嗅覚受容体アンタゴニズムによる匂い抑制に基づくＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制を必要とする対象が挙げられる。該対象は、哺乳動物であれば特に限定されないが、好ましくはヒトである。より詳細には、本発明の方法における、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の抑制を必要とする対象の例としては、猫の飼育者、ペットショップの店員や客、その他猫のいる施設における居住者、訪問者、作業者などが挙げられる。
【００３７】
本発明の方法の別の一実施形態において、当該本発明の化合物のいずれか１種以上が、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の発生する可能性のある環境下に予め適用される。それにより、該環境下でＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭が発生した場合、該ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭存在下で、該対象に該本発明の化合物が適用されるので、嗅覚受容体アンタゴニズムによる匂い抑制に基づいてＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭は抑制される。ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の発生する可能性のある環境の例としては、猫を飼育する室内や施設などが挙げられる。本実施形態における該本発明の化合物の適用の例としては、上述した環境、又は該環境に含まれる物品に対して、該本発明の化合物のいずれか１種以上を載置又は噴霧することなどが挙げられる。該環境に含まれる物品の例としては、該猫を飼育する室内や施設に備わる床、壁、及び家具、カーテン、カーペット等のインテリア、ペット（猫を含む）用の遊具や、被服、アクセサリー、などが挙げられる。
【００３８】
本発明の方法の別の一実施形態において、当該本発明の化合物のいずれか１種以上が、ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭を含有するか、又はその可能性のある化合物又は組成物に適用される。これによって、該本発明の化合物が、該化合物又は組成物に含まれるＭＭＦ又はＭＭＢに対するＯＲ２Ｍ３の活性化を抑制して、該対象におけるＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭の認識を抑制し、結果としてＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭を抑制する。ＭＭＦ臭、ＭＭＢ臭又は猫尿臭を含有するか又はその可能性のある化合物又は組成物の例としては、猫用のトイレ、ケージ、ハウス又はベッド、ペット（猫を含む）用トイレ又は該ペット用トイレで用いる砂やシート、ペット（猫を含む）用シーツや紙おむつ、ペット（猫を含む）用の遊具や、被服、アクセサリー、などが挙げられる。本実施形態における該本発明の化合物の適用の例としては、該化合物又は組成物への該本発明の化合物のいずれか１種以上の噴霧、及び該本発明の化合物のいずれか１種以上を予め含有する該化合物又は組成物の提供、などが挙げられる。
【００３９】
本発明の例示的実施形態として、さらに以下の組成物、製造方法、用途あるいは方法を本明細書に開示する。ただし、本発明はこれらの実施形態に限定されない。
【００４０】
〔１〕アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする、猫尿臭抑制剤。
〔２〕好ましくは、前記猫尿臭が３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート及び／又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールに起因する臭いである、〔１〕記載の猫尿臭抑制剤。
〔３〕アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする、３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールの臭いの抑制剤。
〔４〕アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種を有効成分とする、ＯＲ２Ｍ３又はそれと同等な機能を有する嗅覚受容体ポリペプチドに対する受容体活性阻害剤。
〔５〕好ましくは、前記ＯＲ２Ｍ３が、配列番号２のアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、かつ、好ましくは、前記ＯＲ２Ｍ３と同等な機能を有する嗅覚受容体ポリペプチドが、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、かつ３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート及び／又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールに対する応答性を有するポリペプチドである、〔４〕記載の阻害剤。
【００４１】
〔６〕猫尿臭抑制剤の製造のための、アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種の使用。
〔７〕好ましくは、前記猫尿臭が３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート及び／又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールに起因する臭いである、〔６〕記載の使用。
〔８〕３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールの臭いの抑制剤の製造のための、アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種の使用。
〔９〕ＯＲ２Ｍ３又はそれと同等な機能を有する嗅覚受容体ポリペプチドに対する受容体活性阻害剤の製造のための、アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種の使用。
〔１０〕好ましくは、前記ＯＲ２Ｍ３が、配列番号２のアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、かつ、好ましくは、前記ＯＲ２Ｍ３と同等な機能を有する嗅覚受容体ポリペプチドが、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、かつ３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート及び／又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールに対する応答性を有するポリペプチドである、〔９〕記載の使用。
【００４２】
〔１１〕猫尿臭の抑制のための、アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種の使用。
〔１２〕好ましくは、前記猫尿臭が３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート及び／又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールに起因する臭いである、〔１１〕記載の使用。
〔１３〕３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールの臭いの抑制のための、アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種の使用。
〔１４〕ＯＲ２Ｍ３又はそれと同等な機能を有する嗅覚受容体ポリペプチドに対する受容体活性阻害のための、アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種の使用。
〔１５〕好ましくは、前記ＯＲ２Ｍ３が、配列番号２のアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、かつ、好ましくは、前記ＯＲ２Ｍ３と同等な機能を有する嗅覚受容体ポリペプチドが、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、かつ３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート及び／又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールに対する応答性を有するポリペプチドである、〔１４〕記載の使用。
【００４３】
〔１６〕猫尿臭抑制方法であって、それを必要とする対象に、アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種を適用することを含む、方法。
〔１７〕好ましくは、前記猫尿臭が３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート及び／又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールに起因する臭いである、〔１６〕記載の方法。
〔１８〕３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールの臭いの抑制方法であって、それを必要とする対象に、アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種を適用することを含む、方法。
〔１９〕ＯＲ２Ｍ３又はそれと同等な機能を有する嗅覚受容体ポリペプチドに対する受容体活性阻害方法であって、該ＯＲ２Ｍ３又は該嗅覚受容体ポリペプチドに、アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルからなる群より選択される少なくとも１種を適用することを含む、方法。
〔２０〕好ましくは、前記ＯＲ２Ｍ３が、配列番号２のアミノ酸配列からなるポリペプチドであり、かつ、好ましくは、前記ＯＲ２Ｍ３と同等な機能を有する嗅覚受容体ポリペプチドが、配列番号２のアミノ酸配列と少なくとも８０％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、かつ３−メルカプト−３−メチルブチルフォルメート及び／又は３−メルカプト−３−メチル−１−ブタノールに対する応答性を有するポリペプチドである、〔１９〕記載の方法。
【実施例】
【００４４】
以下、実施例を示し、本発明をより具体的に説明する。
【００４５】
猫尿臭原因物質
３−Ｍｅｒｃａｐｔｏ−３−ｍｅｔｈｙｂｕｔｙｌ  Ｆｏｒｍａｔｅ（ＭＭＦ）（Ｓｉｇｍａ  ａｌｄｒｉｃｈ  Ｃｏ．）
３−Ｍｅｒｃａｐｔｏ−３−ｍｅｔｈｙ−１−ｂｕｔａｎｏｌ（ＭＭＢ）（東京化成工業（株））
試験物質
アセチルセドレン（メチルセドリルケトン；［１−［（１Ｓ，２Ｒ，５Ｒ，７Ｓ）−２，６，６，８−ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌｔｒｉｃｙｃｌｏ［５．３．１．０1,5］ｕｎｄｅｃ−８−ｅｎ−９−ｙｌ］ｅｔｈａｎｏｎｅ）；（ＣＡＳ登録番号：３２３８８−５５−９；商品名：Ｖｅｒｔｏｆｉｘ；Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｌａｖｏｒｓ＆Ｆｒａｇｒａｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．）
γ−メチルイオノン（α−ｉｓｏ−ｍｅｔｈｙｌｉｏｎｏｎｅ；３−ｍｅｔｈｙｌ−４−（２，６，６−ｔｒｉｍｅｔｈｙｌ−２−ｃｙｃｌｏｈｅｘｅｎ−１−ｙｌ）−３−ｂｕｔｅｎ−２−ｏｎｅ）；（ＣＡＳ登録番号：１２７−５１−５）（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｆｌａｖｏｒｓ＆Ｆｒａｇｒａｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．）
フロルヒドラル（β−Ｍｅｔｈｙｌ−３−（１−ｍｅｔｈｙｌｅｔｈｙｌ）ｂｅｎｚｅｎｅｐｒｏｐａｎａｌ）；（登録商標（国際登録０５３４８７９））（ＣＡＳ登録番号：１２５１０９−８５−５）（Ｇｉｖａｕｄａｎ  ＳＡ）
【００４６】
実施例１  猫尿臭原因物質に応答する嗅覚受容体の同定
１）ヒト嗅覚受容体遺伝子のクローニング
ＧｅｎＢａｎｋに登録されている配列情報を基に、４１７種のヒト嗅覚受容体（７種のヒト微量アミン関連受容体及び５種のヒト鋤鼻受容体を含む）をそれぞれコードする遺伝子をクローニングした。各遺伝子は、ｈｕｍａｎ  ｇｅｎｏｍｉｃ  ＤＮＡ  ｆｅｍａｌｅ（Ｇ１５２１：Ｐｒｏｍｅｇａ）を鋳型としたＰＣＲによりクローニングした。ＰＣＲにより増幅した各遺伝子をｐＭＥ１８Ｓベクター上のＦｌａｇ−Ｒｈｏタグ配列の下流に組込んだ。
【００４７】
２）ｐＭＥ１８Ｓ−ヒトＲＴＰ１Ｓベクターの作製
ヒトＲＴＰ１Ｓをコードする遺伝子（配列番号３）をｐＭＥ１８ＳベクターのＥｃｏＲＩ、ＸｈｏＩサイトへ組み込んだ。
【００４８】
３）嗅覚受容体発現細胞の作製
ヒト嗅覚受容体４１７種（ヒト微量アミン関連受容体７種及びヒト鋤鼻受容体５種を含む）をそれぞれ発現させたＨＥＫ２９３細胞を作製した。表１に示す組成の反応液を調製しクリーンベンチ内で１５分間静置した。マルチウェルプレート（３８４ウェルプレート、ＢｉｏＣｏａｔ）の各ウェルに反応液４．４μＬを添加し、次いでＨＥＫ２９３細胞（２×１０5細胞／ｃｍ2）４０μＬを添加して細胞を播種した。細胞を３７℃、５％ＣＯ2を保持したインキュベータ内で２４時間培養した。
【００４９】
【表１】
2020110500.tif 000002
【００５０】
４）嗅覚受容体応答のルシフェラーゼアッセイ
ＨＥＫ２９３細胞に発現させた嗅覚受容体は、細胞内在性のＧαｓと共役しアデニル酸シクラーゼを活性化することで、細胞内ｃＡＭＰ量を増加させる。本実施例での猫尿臭原因物質に対する細胞の応答測定には、細胞内ｃＡＭＰ量の増加をホタルルシフェラーゼ遺伝子（ｆｌｕｃ２Ｐ−ＣＲＥ−ｈｙｇｒｏ）由来の発光値としてモニターするルシフェラーゼレポータージーンアッセイを用いた。また、ＣＭＶプロモータ下流にウミシイタケルシフェラーゼ遺伝子を融合させたもの（ｈＲｌｕｃ−ＣＭＶ）を同時に細胞に遺伝子導入し、遺伝子導入効率や細胞数の誤差を補正する内部標準として用いた。ルシフェラーゼの活性測定には、Ｄｕａｌ−ＧｌｏTMｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ  ａｓｓａｙ  ｓｙｓｔｅｍ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いた。３）の操作後、嗅覚受容体発現細胞の培養物から培地を取り除き、各ウェルに猫尿臭原因物質を含む培地又は含まない培地を３０μＬずつ添加した。培地には、３００μＭ  ＣｕＣｌ2を含むＤＭＥＭ溶液を用いた。猫尿臭原因物質としては、ＭＭＦ（最終濃度３０μＭ）又はＭＭＢ（最終濃度１００μＭ）を用いた。猫尿臭原因物質添加の４時間後に、製品の操作マニュアルに従って発光を測定し、ホタルルシフェラーゼ由来の発光値をウミシイタケルシフェラーゼ由来の発光値で除した値［ｆＬｕｃ／ｈＲｌｕｃ］を算出した。猫尿臭原因物質刺激に対する嗅覚受容体の応答性の指標として、下記式に従ってＦｏｌｄ  ｉｎｃｒｅａｓｅを算出した。
Ｆｏｌｄ  ｉｎｃｒｅａｓｅ＝Ｘ／Ｙ
Ｘ：猫尿臭原因物質刺激により誘導されたｆＬｕｃ／ｈＲｌｕｃ
Ｙ：猫尿臭原因物質刺激なしの場合のｆＬｕｃ／ｈＲｌｕｃ
【００５１】
５）結果
ルシフェラーゼアッセイによる解析の結果を図１に示す。４１７種類の嗅覚受容体についてＭＭＦ及びＭＭＢに対する応答を測定した結果、嗅覚受容体ＯＲ２Ｍ３が、ＭＭＦ及びＭＭＢのいずれに対しても高いＦｏｌｄ ｉｎｃｒｅａｓｅ値を示すことが確認された。よって嗅覚受容体ＯＲ２Ｍ３は、ＭＭＦ及びＭＭＢの両方に対して応答を示す受容体であると考えられた。
【００５２】
実施例２  猫尿臭原因物質に対するＯＲ２Ｍ３の濃度依存的応答
実施例１でＭＭＦ及びＭＭＢに対する応答性を示した嗅覚受容体ＯＲ２Ｍ３について、ルシフェラーゼアッセイによりＭＭＦ及びＭＭＢに対する応答の濃度依存性を解析した。まず、ＯＲ２Ｍ３発現ＨＥＫ２９３細胞を作製した。表２に示す組成の反応液を調製し、クリーンベンチ内で１５分間静置した。マルチウェルプレート（９６ウェルプレート、ＢｉｏＣｏａｔ）の各ウェルに反応液１０μＬを添加し、次いでＨＥＫ２９３細胞（２×１０5細胞／ｃｍ2）９０μＬを添加して細胞を播種した。細胞を３７℃、５％ＣＯ2を保持したインキュベータ内で２４時間培養した。対照として、嗅覚受容体を発現させない細胞（ｍｏｃｋ）を用意した。ルシフェラーゼアッセイは実施例１と同様の手順で行った。猫尿臭原因物質を含む又は含まない培地は各ウェルに７５μＬ添加した。ＭＭＦの最終濃度は０．００３〜０．０３ｍＭに調整し、ＭＭＢの最終濃度は０．０１〜０．１ｍＭに調整した。
【００５３】
【表２】
2020110500.tif 000003
【００５４】
結果を図２に示す。ｍｏｃｋにおいてはＭＭＦ及びＭＭＢに対する応答が観察されなかったのに対し、ＯＲ２Ｍ３を発現した細胞においては、ＭＭＦ及びＭＭＢのいずれに対しても濃度依存的な応答が観察された。以上の結果から、ＯＲ２Ｍ３は、猫尿臭の成分であるＭＭＦ及びＭＭＢを認識する嗅覚受容体であることが示された。
【００５５】
実施例３  アセチルセドレン、γ−メチルイオノン、及びフロルヒドラルによるＯＲ２Ｍ３応答の抑制活性
アセチルセドレン、γ−メチルイオノン又はフロルヒドラル存在下でのＭＭＦ又はＭＭＢに対するＯＲ２Ｍ３の応答を測定し、応答強度の変化を調べた。実施例２と同様の手順に従って、ＯＲ２Ｍ３発現ＨＥＫ２９３細胞のルシフェラーゼアッセイを行った。ＭＭＦの最終濃度は０．０３ｍＭ、ＭＭＢの最終濃度は０．１ｍＭに調整した。試験物質にはアセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルの最終濃度は０〜１ｍＭの範囲で調整した。ＭＭＦ又はＭＭＢ単独刺激により誘導されたｆＬｕｃ／ｈＲｌｕｃ値（Ｘ）、ＭＭＦ又はＭＭＢで刺激しなかった細胞でのｆＬｕｃ／ｈＲｌｕｃ値（Ｙ）、及び、ＭＭＦ又はＭＭＢとアセチルセドレン、γ−メチルイオノン又はフロルヒドラルとの共刺激により誘導されたｆＬｕｃ／ｈＲｌｕｃ値（Ｚ）を求めた。下記式により、アセチルセドレン、γ−メチルイオノン又はフロルヒドラル存在下での受容体のＭＭＦ又はＭＭＢに対する応答強度（Ｒｅｓｐｏｎｓｅ（％））を求めた。
Ｒｅｓｐｏｎｓｅ（％）＝（Ｚ−Ｙ）／（Ｘ−Ｙ）×１００
独立した実験を３回行い、各回の実験で得られた応答強度の平均値を求めた。
【００５６】
結果を図３に示す。アセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルのいずれも、濃度依存的にＭＭＦ及びＭＭＢに対するＯＲ２Ｍ３の応答を抑制した。以上の結果から、これら３つの化合物がＯＲ２Ｍ３アンタゴニストであることが確認された。
【００５７】
実施例４  ＯＲ２Ｍ３アンタゴニストの猫尿臭抑制能
１）ＭＭＦ臭及びＭＭＢ臭の抑制能
実施例３で同定したＯＲ２Ｍ３アンタゴニストであるアセチルセドレン、γ−メチルイオノン、及びフロルヒドラルについて、ＭＭＦ臭及びＭＭＢ臭の抑制能を官能試験により評価した。
【００５８】
猫尿臭溶液にはＭＭＦの０．１％（ｖ／ｖ）溶液、又はＭＭＢの１％（ｖ／ｖ）溶液を用いた。アンタゴニスト溶液には、アセチルセドレン、γ−メチルイオノン、及びフロルヒドラルいずれかの１％（ｖ／ｖ）溶液を用いた。全ての溶液で溶媒にはミネラルオイルを用いた。ガラスバイアル（広口規格瓶Ｎｏ.１１ ＃８５−０６１１）に２つの綿球を入れ、一つの綿球には猫尿臭溶液のいずれかを２０μＬ浸み込ませ、もう一つの綿球にはアンタゴニスト溶液のいずれかを２０μＬ浸み込ませた。綿球を入れたガラスバイアルは、蓋をして３７℃で１時間静置後に、試験サンプルとして官能試験に用いた。基準サンプルとして、アンタゴニスト溶液の代わりに、ミネラルオイルを２０μＬ浸み込ませたバイアルを準備した。
【００５９】
官能試験は、３名の評価者により行った。試験サンプルの臭い評価は、Ｖｉｓｕａｌ  Ａｎａｌｏｇｕｅ  Ｓｃａｌｅ（ＶＡＳ）に従って行った。すなわち、評価者は、サンプルの臭いを嗅ぎ、ＭＭＦ又はＭＭＢの臭いの強度を、左端が『Ｎｏ  ｏｄｏｒ』、右端が『Ｓｔｒｏｎｇ  ｏｄｏｒ』である評価軸上の任意の箇所に記入した。評価者は、最初に基準サンプルの臭いを評価し、続いて試験サンプルの臭いを評価した。その後、評価者は、再度基準サンプルの臭いを評価した。各サンプルについての評価軸上の評価箇所から左端までの距離を、各サンプルの臭い強度として算出した。嗅覚の順応による臭い強度の低下を考慮して、基準サンプルの臭い強度は、上記２回の評価結果の平均値を用いた。基準サンプルの臭い強度を１００％として、各試験サンプルの臭い強度の相対値（％）を算出した。
【００６０】
官能試験の結果を図４に示す。実施例３においてＯＲ２Ｍ３応答のアンタゴニスト活性を示したアセチルセドレン、γ−メチルイオノン及びフロルヒドラルは、いずれもＭＭＦ及びＭＭＢの臭いを抑制した。
【００６１】
２）猫尿臭の抑制能
アセチルセドレン、γ−メチルイオノン、及びフロルヒドラルについて、猫尿臭の抑制能を官能試験により評価した。
〔試験例１〕
サンプルとして、図５に示す断面構成を有する、シート状の猫尿処理具１を製造した。猫尿処理具１は、吸液性材料４６と、それに挟まれた高吸収性ポリマー４７からなる吸収体部分４を備える。吸収体部分４は長手方向Ｙ（図示なし）の長さが４ｃｍであり、幅方向Ｘの長さが４ｃｍであり、厚さ方向Ｚの長さが０．２６ｃｍである。吸収体部分４は、表面側及び裏面側からコアラップシート４４ａ及び４４ｂで包まれており、裏面側コアラップシート４４ｂの端部は表面側でコアラップシート４４ａと重なっている。吸収体部分４は、上部を６ｃｍ角の表面シート２、下部を６ｃｍ角の裏面シート３で覆われている。表面シート２と裏面シート３の上下左右の端１ｃｍが接着されて、吸収体部分４をシールしている。猫尿処理具１を構成する各部材としては、以下のものを使用した。アンタゴニスト香料は、表面側のコアラップシート４４ａに、該コアラップシート４４ａの質量に対して７質量％の賦香量となるように賦香した。このようにして製造したサンプルを試験例１とした。
表面シート２                ：ポリオレフィン系不織布２０ｇ／ｍ２
裏面シート３                ：ポリエチレン系シート、２０ｇ／ｍ２
表面側コアラップシート４４ａ：薄葉紙、１６ｇ／ｍ２
裏面側コアラップシート４４ｂ：薄葉紙、１６ｇ／ｍ２
吸液性材料４６              ：パルプ、１００ｇ／ｍ２
高吸収性ポリマー４７        ：ポリアクリル酸ナトリウム架橋体からなる吸水性樹脂、１１７ｇ／ｍ２
アンタゴニスト香料          ：アセチルセドレン
【００６２】
〔試験例２〕
アンタゴニスト香料をフロルヒドラルに変更した以外は試験例１と同様の手順で、試験例２を製造した。
〔試験例３〕
アンタゴニスト香料をγ−メチルイオノンに変更した以外は試験例１と同様の手順で、試験例３を製造した。
【００６３】
〔比較例１〕
アンタゴニスト香料の代わりにシダーウッドオイルテキサス（ＣＡＳ登録番号：９１７２２−６１−１、商品名：ＣＥＤＡＲＷＯＯＤ  ＯＩＬ  ＴＥＸＡＳ（ＴＥＸＡＲＯＭＥ社製））を用いた以外は試験例１と同様の手順で、比較例１を製造した。
【００６４】
〔評価〕
試験例１〜３又は比較例１の入ったビーカーに、新鮮な猫尿を１日毎に１ｃｃ滴下した。尿滴下後のビーカーはユニパック袋で封入した。猫尿の滴下は７日間行った。猫尿の滴下を開始してから１日後及び７日後に、試験例１〜３及び比較例１の猫尿臭を以下の基準により官能評価した。官能評価は専任パネル３人で行い、合議によって臭い強度を決定した。７日後の猫尿臭の臭い強度を５とし、以下の基準で評価した。
５：強烈な臭い
４：強い臭い
３：らくに感知できる臭い
２：何のにおいであるかがわかる弱い臭い
１：やっと感知できる臭い
０：無臭
【００６５】
結果を図６に示す。試験例１、２、３は、比較例１に比して、猫尿の滴下を開始してから１日後、７日後のいずれにおいても猫尿臭が抑制されていた。
【００６６】
以上の結果から、ＯＲ２Ｍ３アンタゴニストであるアセチルセドレン、γ−メチルイオノン、及びフロルヒドラルにより、ＭＭＦやＭＭＢなどによる猫尿臭が抑制されることが示された。
【符号の説明】
【００６７】
１  猫尿処理具
２  表面シート
３  裏面シート
４  吸収体部分
４４  コアラップシート
４６  吸液性材料
４７  高吸収性ポリマー
【図１】
2020110500.tif 000004
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
2020110500.tif 000008
【図６】
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【配列表】
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