(57)【要約】【課題】本発明が解決しようとする課題は、ｉＲＮＡ剤のインビボ送達に有利である、糖質がコンジュゲートされたｉＲＮＡ剤を提供することである。【解決手段】本発明により、向上した純度を有し、かつｉＲＮＡ剤のインビボ送達に有利である、糖質がコンジュゲートされたｉＲＮＡ剤を提供することが可能である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ａ）
【化１】
2020109124.tif 000091
（式中、
Ｘのそれぞれが、水素またはヒドロキシ保護基であり；
Ｙのそれぞれが、アミン保護基（例えば、アセチル）であり；
ｎが０〜２０であり；
ｑ、ｒおよびｓのそれぞれが、独立して、１〜７であり；
Ｌが連結基であり；
Ｒ１がｉＲＮＡ剤である）
の化合物であって；
式（Ａ）の前記化合物が、
（ｉ）金属不純物、
（ｉｉ）以下の２つの尿素副生成物のそれぞれ
【化２】
2020109124.tif 000092
および
（ｉｉｉ）以下の糖化合物のそれぞれ
【化３】
2020109124.tif 000093
のうちの１つ以上を含まないかまたは実質的に含まない化合物。
【請求項２】
式（Ａ）の前記化合物が、０．５％以下の任意の個々の尿素副生成物または糖化合物を含有する、請求項１に記載の化合物。
【請求項３】
式（Ａ）の前記化合物が、０．２％以下の任意の個々の尿素副生成物または糖化合物を含有する、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項４】
式（Ａ）の前記化合物が、１０００ｐｐｍ以下の任意の個々の金属を含有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項５】
式（Ａ）の前記化合物が、１００ｐｐｍ以下の任意の個々の金属を含有する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項６】
式（Ａ）の前記化合物が、１０ｐｐｍ以下の任意の個々の金属を含有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項７】
式（Ａ）の前記化合物が、１ｐｐｍ以下の任意の個々の金属を含有する、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項８】
式（ＶＩ）の化合物を式（ＶＩＩ）の化合物に転化するための方法であって、
【化４】
2020109124.tif 000094
（ｉ）式（ＶＩ）の前記化合物を塩基と反応させるステップと；
（ｉｉ）ステップ（ｉ）の前記生成物を還元するステップと；
（ｉｉｉ）ステップ（ｉｉｉ）の前記生成物を酸と反応させるステップと
を含む方法。
【請求項９】
前記塩基が金属アルコキシドである、請求項８に記載の方法。
【請求項１０】
前記塩基がナトリウムメトキシドであり、ステップ（ｉｉ）が、ステップ（ｉ）の前記生成物を水素化ホウ素ナトリウムと反応させるステップを含み、前記酸が塩酸である、請求項８または９に記載の方法。
【請求項１１】
式（ＶＩＩ）の前記化合物を、請求項１〜７のいずれか一項に記載の式（Ａ）の化合物に転化するステップをさらに含む、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１２】
式（ＶＩＩＩ）：
【化５】
2020109124.tif 000095
（式中、
Ａが、Ｃ６〜Ｃ１４アルキレンリンカーであり；
各Ｒが、独立して、酸保護基であり；
Ｒｘが、酸保護基である）
の化合物を調製するための方法であって；
式（ＩＸ）：
【化６】
2020109124.tif 000096
の化合物を、式（Ｘ）：
【化７】
2020109124.tif 000097
の化合物と反応させて、式（ＶＩＩＩ）、Ｈａｌがハロゲンである、の化合物を得るステップを含む方法。
【請求項１３】
Ｒがｔ−ブチルであり、ＨａｌがＣｌであり、ＡがＣ１０アルキレンリンカーである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記反応が、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下で行われる、請求項１２または１３に記載の方法。
【請求項１５】
式（ＶＩＩＩ）の前記化合物を、請求項１〜７のいずれか一項に記載の式（Ｉ）の化合物に転化するステップをさらに含む、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項１６】
下式：
【化８】
2020109124.tif 000098
（式中、Ｚが酸保護基であり、ｎが０〜２０であり、ｑ、ｒおよびｓのそれぞれが、独立して、１〜７である）の化合物を調製するための方法であって；
式（ＸＩＩ）：
【化９】
2020109124.tif 000099
（式中、Ｐがアミノ保護基である）の化合物をスルホン酸と反応させるステップを含む方法。
【請求項１７】
前記スルホン酸が、ｐ−トルエンスルホン酸またはメタンスルホン酸である、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
式（ＩＩ）の前記化合物を、請求項１〜７のいずれか一項に記載の式（Ａ）の化合物に転化するステップをさらに含む、請求項１６または１７に記載の方法。
【請求項１９】
式（ＸＩＩＩ）：
【化１０】
2020109124.tif 000100
（式中、
Ｘがヒドロキシル保護基であり；
Ｙがアミン保護基であり；
Ｐｒｔがヒドロキシル保護基であり；
ｎが０〜１５であり；
ｑ、ｒおよびｓがそれぞれ、独立して、１〜７である）
の化合物を調製するための方法であって；
第三級アミンの存在下で、式（ＸＩＶ）
【化１１】
2020109124.tif 000101
の化合物を、ジヒドロフラン−２，５−ジオンと反応させるステップを含む方法。
【請求項２０】
前記第三級アミンが、トリエチルアミンまたはピリジンである、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
式（ＸＩＩＩ）の前記化合物を、請求項１に記載の式（Ａ）の化合物に転化するステップをさらに含む、請求項１９または２０に記載の方法。
【請求項２２】
式（Ｉ）：
【化１２】
2020109124.tif 000102
（式中、
Ｘがヒドロキシル保護基であり；
Ｙがアミン保護基であり；
Ｐｒｔがヒドロキシル保護基であり；
ｎが０〜１５であり；
ｑ、ｒおよびｓがそれぞれ、独立して、１〜７であり；
【化１３】
2020109124.tif 000103
が固体担体である）の化合物を調製するための方法であって；
（１）塩基の存在下で、式ＩＩ：
【化１４】
2020109124.tif 000104
の化合物を、式ＩＩＩ：
【化１５】
2020109124.tif 000105
の化合物で処理して、式（ＩＶ）：
【化１６】
2020109124.tif 000106
（式中、Ｚが酸保護基である）の化合物を得るステップと；
（２）式（ＩＶ）の前記化合物中のＺを脱保護した後、式（Ｖ）：
【化１７】
2020109124.tif 000107
のヒドロキシルプロリンと連結するステップと；
（３）ステップ（２）の前記生成物を、無水コハク酸と連結するステップと；
（４）ステップ（３）の前記生成物を固体担体に連結して、式（Ｉ）の化合物を得るステップと
を含む方法。
【請求項２３】
Ｘが、ＢｚまたはＡｃである、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
ＹがＡｃである、請求項２２または２３に記載の方法。
【請求項２５】
ｎが７であり；ｑ、ｒ、およびｓがそれぞれ１である、請求項２２〜２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２６】
Ｐｒｔが４，４’−ジメトキシトリチル保護基である、請求項２２〜２５のいずれか一項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１２年８月６日に出願された米国仮特許出願第６１／６８０，０６９号明細書、および２０１３年３月１５日に出願された同第６１／７９４，１１４号明細書の利益を主張するものであり、これらの仮出願のそれぞれの全体が参照により援用される。
【０００２】
本発明は、糖質コンジュゲートの改良された調製方法に関する。本発明は、向上した純度を有し、かつｉＲＮＡ剤のインビボ送達に有利であるこれらの糖質コンジュゲートを含む糖質がコンジュゲートされたｉＲＮＡ剤にも関する。
【背景技術】
【０００３】
インビボでの細胞への効率的な送達には、特異的な標的化および細胞外環境、特に血清タンパク質からの実質的な保護が必要とされる。特異的な標的化を達成する一方法は、標的化部分をｉＲＮＡ剤にコンジュゲートさせることである。標的化部分は、ｉＲＮＡ剤を、所要の標的部位に標的化するのに役立つ。標的化部分が送達を向上させ得る一方法は、受容体を介したエンドサイトーシス活性によるものである。この取り込み機構は、膜構造の陥入または送達系と細胞膜との融合による、膜によって囲まれた領域の内部への、膜受容体に結合されたｉＲＮＡ剤の移動を伴う。このプロセスは、受容体への特異的リガンドの結合後の細胞表面受容体または膜受容体の活性化によって開始される。ガラクトース、マンノース、マンノース−６−リン酸などの糖類、ペプチドならびにトランスフェリン、アシアロ糖タンパク質、ビタミンＢ１２、インスリンおよび上皮成長因子（ＥＧＦ）などのタンパク質を認識するものを含む、受容体を介した多くのエンドサイトーシス系が、公知であり、研究されている。アシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰ−Ｒ）は、肝細胞に非常に多く存在する高容量受容体である。ＡＳＧＰ−Ｒは、Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトシルアミン（Ｇａｌａｃｔｏｓｙｌａｍｉｎｅ）（ＧａｌＮＡｃ）に対してＤ−Ｇａｌより５０倍高い親和性を示す。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
最近、特定の糖質コンジュゲートが、ｓｉＲＮＡ送達のためのリポソームの代わりに有益な送達であることが示されている。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明は、糖質コンジュゲート、および糖質がコンジュゲートされたｉＲＮＡ剤の改良された調製方法に関する。本明細書に記載される方法は、より少ない不純物（例えば、より少ない金属汚染物質）を含有する糖質コンジュゲート生成物を可能にする。本発明はまた、Ｐｄ炭素などの触媒を用いた高コストの水素化反応の必要性をなくし、薬学的に許容できる生成物を得るための精製ステップの数を減少させる。
【０００６】
本発明の方法、中間体、および生成物は、下式：
【化１】
2020109124.tif 000002
（式中、
Ｘのそれぞれが、ヒドロキシ保護基または水素であり；
Ｙのそれぞれが、アミン保護基（例えば、アセチル）であり；
ｎが０〜２０（例えば、０〜１５または４〜１５、好ましくは７）であり；
ｑ、ｒおよびｓのそれぞれが、独立して、１〜７であり；
Ｌが連結基であり；
Ｒ１がｉＲＮＡ剤である）で表されるものなどの糖質がコンジュゲートされたｉＲＮＡ剤を調製するのに有用である。一実施形態において、Ｘの全てが同じであり、Ｙの全てが同じであり、ｑの全てが同じであり、ｒの全てが同じであり、ｓの全てが同じである。一実施形態において、Ｘのそれぞれが水素である。他の実施形態において、Ｙのそれぞれがアセチルである。一実施形態において、Ｘのそれぞれが水素であり、Ｙのそれぞれがアセチルである。
【０００７】
好ましい一実施形態において、ｎが６であり、ｑが１であり、ｒが１であり、ｓが１である。別の好ましい実施形態において、ｎが７であり、ｑが１であり、ｒが１であり、ｓが１である。糖質がコンジュゲートされたｉＲＮＡ剤は、好ましくは、金属（金属イオンなど）を実質的に含まない。
【０００８】
本発明の一実施形態は、式（Ａ）の化合物であり、ここで、この化合物は、
（ｉ）金属不純物（パラジウム、白金、およびルテニウムなど）、
（ｉｉ）以下の２つの尿素副生成物のそれぞれ
【化２】
2020109124.tif 000003
（ｉｉｉ）以下の糖化合物のそれぞれ
【化３】
2020109124.tif 000004
のうちの１つ以上を含まないかまたは実質的に含まない。
【０００９】
好ましい一実施形態において、式（Ａ）の化合物は、約０．５％以下、またはより好ましくは、約０．２％以下の、上記の任意の個々の尿素副生成物または糖化合物を含有する。例えば、化合物は、約０．１または約０．０５％以下の上記の任意の個々の尿素副生成物または糖化合物を含有し得る。式（Ａ）の化合物は、好ましくは、約１０００ｐｐｍ以下（例えば、約４００、約３００、約２００、約１００、約５０、約１０、約５、または約１ｐｐｍ以下）の任意の個々の金属（パラジウム、白金またはルテニウムなど）も含有する。一実施形態において、式（Ａ）の化合物は、約１０００ｐｐｍ以下（例えば、約４００、約３００、約２００、約１００、約５０、約１０、約５、または約１ｐｐｍ以下）の（ｉ）ルテニウム、（ｉｉ）パラジウム、（ｉｉｉ）白金または（ｉｖ）それらの任意の組合せを含有する。
【００１０】
本発明の一実施形態は、式（ＶＩ）の化合物を式（ＶＩＩ）の化合物に転化するための方法に関する：
【化４】
2020109124.tif 000005
この方法は、
（ｉ）式（ＶＩ）の化合物を、金属アルコキシド塩基（例えば、ＮａＯＭｅ）などの塩基と反応させるステップと；
（ｉｉ）ステップ（ｉ）の生成物（例えば、ＮａＢＨ４で）を還元するステップと；
（ｉｉｉ）ステップ（ｉｉ）の生成物を、酸（例えば、ＨＣｌ）と反応させるステップと
を含み得る。この方法は、単一のポットで、高収率（例えば、＞８０％）で行われ得る。
【００１１】
例えば、一実施形態において、式（ＶＩ）の化合物は、金属アルコキシド（ナトリウムメトキシドなど）と反応される。ステップ（ｉｉ）は、ボロヒドリド、例えば、水素化ホウ素ナトリウムなどの還元剤との反応を含み得る。一実施形態において、ステップ（ｉｉ）は、２〜５当量（例えば、３当量）などの１当量超の還元剤を含む。さらなる実施形態において、ステップ（ｉｉｉ）に使用される酸は、鉱酸、例えば、塩酸である。好ましい実施形態において、ステップ（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）は、同時に行われ、すなわち、この方法は、一ステップ方法である。本発明者らは、化合物（ＶＩＩ）を調製するこの方法が、水素化ステップおよび高コストの試薬（例えば、クロロギ酸ベンジルおよびＰｄ炭素）の使用を省略することを意外にも見出した。得られる生成物は、結晶性であり、式（Ａ）または（Ｉ）の化合物を汚染する合成中に残り得るより少ない量の重金属不純物（パラジウムおよびルテニウムなど）を含有する。（式（Ｉ）の化合物は、以下にさらに示される）。
【００１２】
式（ＶＩＩ）の化合物は、式（Ａ）または（Ｉ）の化合物に転化され得る。
【００１３】
他の実施形態は、式（ＶＩＩＩ）：
【化５】
2020109124.tif 000006
（式中、
Ａが、Ｃ６〜Ｃ１４アルキレンリンカー（例えば、−（ＣＨ２）１０−などのＣ８〜Ｃ１２アルキレンリンカー）であり；
各Ｒが、独立して、酸保護基（例えば、置換または非置換アルキル（例えば、ｔ−ブチル）または置換または非置換アリール）であり；
Ｒｘが、置換または非置換アルキル（例えば、メチル）または置換または非置換アリールなどの酸保護基である。好ましくは、Ｒｘが、全てのＲ基と異なる）
の化合物を調製するための方法に関する。
【００１４】
この方法は、式（ＩＸ）：
【化６】
2020109124.tif 000007
の化合物を、式（Ｘ）：
【化７】
2020109124.tif 000008
の化合物と反応させて、式（ＶＩＩＩ）（ここで、Ｈａｌがハロゲン（例えば、Ｃｌ）である）の化合物を得るステップを含む。
【００１５】
一実施形態において、各Ｒがｔ−ブチルである。他の実施形態において、ＨａｌがＣｌである。さらなる実施形態において、ＡがＣ１０アルキレンリンカーである。好ましい実施形態において、各Ｒがｔ−ブチルであり、ＨａｌがＣｌであり、ＡがＣ１０アルキレンリンカーである。
【００１６】
一実施形態において、式（ＶＩＩＩ）の化合物を調製するための方法は、ＤＩＥＡ（Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン）の存在下で、式（ＩＸ）の化合物を、式（Ｘ）の化合物と反応させるステップを含む。本出願人は、式（Ｘ）の酸ハロゲン化物の使用により、この反応が、ＤＩＥＡ（このようなカップリング反応を促進するのに通常使用される試薬であるジメチルアミノプロピルカルボジイミド（ＥＤＣ）とは対照的に）の存在下で行われるのが可能になり、向上した純度を有する生成物が意外にも得られることを意外にも見出した。生成物は、例えば、より少ない量の置換された尿素副生成物を含有し（または尿素副生成物を含まないかまたは実質的に含まない）、より少ない残留溶媒（例えば、ｔ−ブタノールなどのアルコール）を含有し得る。形成され得る置換された尿素副生成物は、以下に示される。
【化８】
2020109124.tif 000009
【００１７】
他の実施形態において、式（ＶＩＩＩ）の化合物は、式（Ａ）または（Ｉ）の化合物に転化される。
【００１８】
さらに他の実施形態は、下式：
【化９】
2020109124.tif 000010
（式中、Ｚが酸保護基であり、ｎ、ｒおよびｓが上に定義されるとおりである）の化合物を調製するための方法に関する。化合物（ＩＩ）は、存在する対イオン（ＣＦ３ＳＯ３−など）とともに形成され得る。この方法は、式（ＸＩＩ）：
【化１０】
2020109124.tif 000011
（式中、Ｐがアミノ保護基（例えば、Ｂｏｃ）である）の化合物を、スルホン酸（例えば、ｐ−トルエンスルホン酸またはメタンスルホン酸）と反応させるステップを含む。例えば、一実施形態において、式（ＸＩＩ）の化合物は、約３０℃〜約６０℃の温度（例えば、約５０℃）で、アルコール溶媒（例えば、メタノール）中でｐ−トルエンスルホン酸と反応される。
【００１９】
ジクロロメタンなどのハロゲン化溶媒へのトリアミンの部分溶解性は、式（ＸＩＩ）の化合物の不完全な脱保護をもたらし得る。本発明者らは、（メタノールなどのアルコール溶媒中における）スルホン酸の使用が、おそらくアルコールへのトリアミンの向上した溶解性のため、式（ＸＩＩ）の化合物のより高い脱保護を可能にする（すなわち、不完全な脱保護の可能性を低下させる）ことを意外にも見出した。
【００２０】
他の実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、式（Ａ）または（Ｉ）の化合物に転化される。
【００２１】
さらに他の実施形態は、式（ＸＩＩＩ）：
【化１１】
2020109124.tif 000012
（式中、
Ｘ、Ｙ、ｎ、ｑ、ｒ、およびｓが、式（Ａ）に関して上に定義されるとおりであり；
Ｐｒｔがヒドロキシル保護基である）の化合物を調製するための方法に関する。
【００２２】
この方法は、アミン（好ましくは、トリエチルアミンなどの第三級アミン）の存在下で、式（ＸＩＶ）
【化１２】
2020109124.tif 000013
の化合物を、ジヒドロフラン−２，５−ジオンと反応させるステップを含む。本出願人は、スクシニル化反応が、ＤＭＡＰ（ジメチルアミノピリジン）または固定化ＤＭＡＰ（ＰＳ−ＤＭＡＰ、ポリスチレンが結合されたＤＭＡＰの同等物など）などのこの反応に通常使用される高価な触媒なしで行われ、それによって、コストを大幅に削減し得ることを意外にも見出した。さらに、（オリゴマー化反応による）生成物中の潜在的な不純物の数が減少され、重金属（触媒として使用される場合、ＰｄまたはＲｕなど）による汚染の可能性がなくなる。一実施形態において、反応は、塩素化溶媒（例えば、ジクロロメタンまたはジクロロエタン）中で行われる。
【００２３】
他の実施形態において、式（ＸＩＩＩ）の化合物は、式（Ａ）または（Ｉ）の化合物に転化される。
【００２４】
本発明の中間体および生成物のいずれかが、ＧａｌＮＡｃ３部分を含有する、式（Ａ）の糖質がコンジュゲートされたｉＲＮＡ剤へと転化され得る。
【００２５】
さらに他の実施形態は、（ｉ）本明細書に開示される中間体または生成物（例えば、式（Ｉ）の化合物）のいずれかを得て、（ｉｉ）それを、式（Ａ）の糖質がコンジュゲートされたｉＲＮＡ剤に転化することによって、式（Ａ）の糖質がコンジュゲートされたｉＲＮＡ剤を調製する方法である。例えば、この方法は、（ｉ）式（Ｉ）の化合物におけるＰｒｔによって保護されたヒドロキシル基を脱保護するステップと、（ｉｉ）ヒドロキシル基を−Ｌ−Ｒ１（上の式（Ａ）において定義されるような）に転化するステップと、（ｉｉｉ）固体担体およびコハク酸リンカー（固体担体とプロリノール部分のヒドロキシル基との間に位置する）を除去して、式（Ａ）の化合物を得るステップとを含み得る。
【００２６】
一実施形態において、本明細書に記載される中間体および生成物（例えば、式（Ａ）または（Ｉ）の化合物）は、金属（金属イオン、例えば、パラジウム、白金またはルテニウムなど）を実質的に含まない。本明細書において使用される際の「金属を実質的に含まない」は、約８００ｐｐｍ以下、約５００ｐｐｍ以下、約４００ｐｐｍ以下、約３００ｐｐｍ以下、約２００ｐｐｍ以下、約１００ｐｐｍ以下、約５０ｐｐｍ以下、約１０ｐｐｍ以下または約１ｐｐｍ以下の金属などの、約１０００百万分率（ｐｐｍ）以下の金属を含有することを含む。
【００２７】
一実施形態において、本発明は、金属（金属イオンなど）を実質的に含まず、例えば、約８００ｐｐｍ以下、約５００ｐｐｍ以下、約４００ｐｐｍ以下、約３００ｐｐｍ以下、約２００ｐｐｍ以下、約１００ｐｐｍ以下、約５０ｐｐｍ以下、約１０ｐｐｍ以下または約１ｐｐｍ以下の金属などの、約１０００百万分率（ｐｐｍ）以下の金属を含有する式（Ａ）または（Ｉ）の化合物に関する。
【００２８】
他の実施形態において、本明細書に記載される中間体および生成物（例えば、式（Ａ）または（Ｉ）の化合物）は、対イオン（例えば、ＯＳＯ３−）を実質的に含まない。本明細書において使用される際の「対イオンを実質的に含まない」は、約８００ｐｐｍ以下、約５００ｐｐｍ以下、約４００ｐｐｍ以下、約３００ｐｐｍ以下、約２００ｐｐｍ以下、約１００ｐｐｍ以下、約５０ｐｐｍ以下、約１０ｐｐｍ以下または約１０ｐｐｍ以下の対イオンなどの、約１０００百万分率（ｐｐｍ）以下の対イオンを含有することを含む。
【００２９】
さらに他の実施形態は、対イオンを実質的に含まず、例えば、約８００ｐｐｍ以下、約５００ｐｐｍ以下、約４００ｐｐｍ以下、約３００ｐｐｍ以下、約２００ｐｐｍ以下、約１００ｐｐｍ以下、約５０ｐｐｍ以下、約１０ｐｐｍ以下または約１ｐｐｍ以下の対イオンなどの、約１０００百万分率（ｐｐｍ）以下の対イオンを含有する式（Ａ）または（Ｉ）の化合物である。
【００３０】
さらに他の実施形態は、約７．５重量％未満、約５重量％未満、約４重量％未満、約３重量％未満、約２重量％未満、約１重量％未満、約０．５重量％未満または約０．１重量％未満など、約１０重量％未満の、以下の２つの尿素副生成物のそれぞれを含有する式（Ａ）または（Ｉ）の化合物である。
【化１３】
2020109124.tif 000014
【００３１】
さらに他の実施形態は、約７．５％未満、約５％未満、約４％未満、約３％未満、約２％未満、約１％未満、約０．５％未満、または約０．１％未満など、（化合物の１００％の総重量を基準にして）約１０％未満の、以下の化合物の１つ以上を含有する式（Ａ）または（Ｉ）の化合物である。
【化１４】
2020109124.tif 000015
一実施形態において、式（Ａ）または（Ｉ）の化合物は、約０．５％、０．４％、または０．３％以下の、上記の化合物の１つ以上を含有する。他の実施形態において、式（Ａ）または（Ｉ）の化合物は、約０．２％以下の、上記の化合物の１つ以上を含有する。さらに他の実施形態において、式（Ａ）または（Ｉ）の化合物は、約０．１％以下の、上記の化合物の１つ以上を含有する。さらに他の実施形態において、式（Ａ）または（Ｉ）の化合物は、約０．０５％以下の、上記の化合物の１つ以上を含有する。
【００３２】
さらに他の実施形態は、式（Ｉ）：
【化１５】
2020109124.tif 000016
（式中、
Ｘ、Ｙ、ｎ、ｑ、ｒ、およびｓが、上に定義されるとおりであり；
Ｐｒｔがヒドロキシル保護基であり；
【化１６】
2020109124.tif 000017
が固体担体である）の化合物を調製するための方法に関する。Ｐｒｔは、好ましくは、全てのＸヒドロキシル保護基と異なる。
【００３３】
一実施形態において、Ｘの全てが同じであり、Ｙの全てが同じであり、ｑの全てが同じであり、ｒの全てが同じであり、ｓの全てが同じである。この方法は、以下のステップ：
（１）塩基の存在下で、式ＩＩ：
【化１７】
2020109124.tif 000018
の化合物を、式ＩＩＩ：
【化１８】
2020109124.tif 000019
の化合物で処理して、式（ＩＶ）：
【化１９】
2020109124.tif 000020
（式中、Ｚが酸保護基である）の化合物を得るステップ；
（２）式（ＩＶ）の化合物中のＺを脱保護した後、ヒドロキシルプロリン（Ｖ）：
【化２０】
2020109124.tif 000021
と連結するステップ；
（３）ステップ（２）の生成物を、無水コハク酸と連結するステップ；および
（４）ステップ（３）の生成物を固体担体に連結して、式（Ｉ）の化合物を得るステップ
のうちの１つ以上を含む。この方法がステップ（４）を含まない場合、形成される中間体は、その後、式（Ｉ）または（Ａ）の化合物に転化される。式（Ｉ）の化合物は、式（Ａ）のものなどの糖質がコンジュゲートされたｉＲＮＡ剤を調製するのに有用である。
【００３４】
一実施形態において、この方法は、（ｉ）ステップ（２）（ステップ（１）、（３）、および（４）を必ずしも含むとは限らないが）と、（ｉｉ）ステップ（２）において形成されるプロリノール中間体を式（Ａ）または（Ｉ）の化合物に転化するステップとを含む。
【００３５】
一実施形態において、この方法は、ガラクトサミン塩酸塩から２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、または１５以下のステップで行われる。
【００３６】
一実施形態において、この方法は、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンから出発して、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、または１５以下のステップで行われる。
【００３７】
一実施形態において、ステップ（１）は、塩基の存在下で、ペプチドカップリング剤を用いて行われる。任意選択的に、ガラクトサミン部分（例えば、ＸおよびＹ）の保護基の交換は、第１の保護基を脱保護し、次に、新たな保護基を再導入することによって行われる。例えば、ベンゾイル保護基が、アセチル保護基で置換される。
【００３８】
他の実施形態において、ステップ（２）は、まず、Ｚを脱保護した後、塩基の存在下で、ペプチドカップリング剤を用いて、対応する酸を、ヒドロキシルプロリン（Ｖ）
【化２１】
2020109124.tif 000022
と連結することによって行われる。
【００３９】
一例において、Ｚが、アルキル、置換アルキル、アリール、または置換アリールなどの酸保護基である。上記の定義にしたがう例示的なＺ基としては、以下に限定はされないが、メチル、エチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、クロロメチル、ブロモメチル、２−ヨードエチル、２−フルオロプロピル、フェニル、２−ブロモフェニル、４−クロロフェニル、４−メトキシフェニル、ｐ−トリル、ｏ−トリル、４−ベンジルオキシフェニル、３−カルバミルフェニル（ｃａｒｂａｍｙｌｐｈｅｎｙｌ）、４−クロロ−３−シアノフェニル、４−メトキシ−２−トリル、４−トリフルオロメチルフェニル、ベンジル、４−メトキシベンジル、４−ヨードベンジル、３−メタンスルホンアミドベンジル、３−ニトロベンジル、３−クロロ−４−ベンジルオキシベンジル、２−エチルベンジル、フェノキシメチル、４−ブロモフェノキシメチル、２−メトキシフェノキシメチル、４−トリルオキシメチル、４−クロロフェノキシメチル、４−カルバミルフェノキシメチル、３−クロロ−４−エトキシフェノキシメチルなどの基が挙げられる。Ｒ１はまた、２−フリルメチル、２−チエニルメチル、３−チエニルメチル、シクロヘキサジエニルメチル、カルボメトキシ、４−ニトロベンジルオキシカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、およびベンズヒドリルオキシカルボニルであり得る。
【００４０】
一実施形態において、Ｘが、ベンジル（Ｂｚ）またはアセチル（Ａｃ）である。
【００４１】
一実施形態において、ＹがＡｃである。
【００４２】
一実施形態において、ｎが６であり、ｑ、ｒ、およびｓが１である。
【００４３】
他の実施形態において、ｎが７であり、ｑ、ｒ、およびｓが１である。
【００４４】
一実施形態において、本明細書に記載される方法は、金属がない条件下で行われる。
【００４５】
一実施形態において、式（ＩＩ）の化合物から式（Ｉ）の化合物を調製するための方法の全収率は、出発材料としてトリス（ヒドロキシメチル）アミノメタンまたはガラクトサミン塩酸塩を用いて計算して、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、または少なくとも約５０％など、少なくとも約１５％である。
【００４６】
他の実施形態は、本明細書に記載される方法のいずれか１つ、または本明細書に記載される方法に記載される任意の１つ以上のステップを含む方法によって調製される、式（Ｉ）：
【化２２】
2020109124.tif 000023
（式中、Ｘ、Ｙ、Ｐｒｔ、ｎ、ｑ、ｒ、ｓ、および
【化２３】
2020109124.tif 000024
が上に定義されるとおりである）の化合物である。
【００４７】
さらに他の実施形態は、本明細書に記載される方法のいずれか１つ、または本明細書に記載される方法に記載される任意の１つ以上のステップを含む方法によって調製される、式（Ａ）：
【化２４】
2020109124.tif 000025
（式中、Ｌ、Ｒ１、Ｘ、Ｙ、ｎ、ｑ、ｒ、およびｓが、式（Ａ）に関して上に定義されるとおりである）の化合物である。
【００４８】
本発明の一実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、固体担体を用いて、金属試薬を全く用いずに、トリス、ＧａｌＮＡｃ、およびトランス−４−ＯＨ−Ｐｒｏ−ＯＨから調製される。
【００４９】
一実施形態において、本明細書に記載される方法のいずれかが、１キログラムを超える規模などの式（Ｉ）の化合物の大規模な合成に使用される。
【００５０】
一実施形態において、本明細書に記載される方法のいずれかが、例えば、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、ジクロロメタン、メタノール、ピリジン、アセトニトリル、ヘキサン、石油エーテル、ベンゼン、トルエン、キシレン；エーテル（ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン、エチレングリコールジメチルエーテルなど）、およびそれらの混合物などの不活性溶媒中で行われる。
【００５１】
他の態様において、本発明は、式（Ａ）または（Ｉ）の化合物の中間体の生産収率の向上および式（Ａ）または（Ｉ）の化合物の大規模な生成にさらに関する。式（Ｉ）の化合物は、糖質がコンジュゲートされたｉＲＮＡ剤（式（Ａ）など）の合成における特に有用な中間体である。
【発明を実施するための形態】
【００５２】
定義
「連結基」という用語は、ｉＲＮＡ剤をＧａｌＮＡｃ３部分に連結するための任意の好適な基を指す。連結基の例が、国際公開第２００９／０８２６０７号パンフレットおよび米国特許出願公開第２０１２／０１３６０４２号明細書に提供され、これらは両方とも、参照により本明細書に援用される。
【００５３】
「ｉＲＮＡ剤」という用語は、標的遺伝子（例えば、ｓｉＲＮＡ）、好ましくは、内在性または病原体標的ＲＮＡの発現を下方制御することができるＲＮＡ剤（または開裂されてＲＮＡ剤になり得る剤）を指す。理論によって制約されるのを望むものではないが、ｉＲＮＡ剤は、標的ｍＲＮＡ（当該技術分野においてＲＮＡｉと呼ばれる）の転写後開裂、または転写前機序もしくは翻訳前機序を含むいくつかの機序のうちの１つ以上によって作用し得る。ｉＲＮＡ剤は、一本鎖を含むことができ、または二本以上の鎖を含むことができ、例えば、ｉＲＮＡ剤は、二本鎖ｉＲＮＡ剤であり得る。ｉＲＮＡ剤が一本鎖である場合、ｉＲＮＡ剤は、１つ以上のリン酸基またはリン酸基の１つ以上の類似体を含む５’修飾を含み得る。好ましい一実施形態において、ｉＲＮＡ剤は二本鎖である。
【００５４】
ｉＲＮＡ剤は、通常、標的遺伝子と十分に相同な領域を含み、ｉＲＮＡ剤、またはその断片が標的遺伝子の下方制御を媒介し得るように、ヌクレオチドに関して十分な長さのものである。ｉＲＮＡ剤は、少なくとも部分的に、ある実施形態において、完全に、標的ＲＮＡと相補的な領域であるかまたはそのような領域を含む。ｉＲＮＡ剤と標的との間に完全な相補性が存在する必要はないが、ｉＲＮＡ剤、またはその開裂産物が、例えば、標的ＲＮＡ、例えば、ｍＲＮＡのＲＮＡｉ開裂によって、配列特異的サイレンシングを指向することができるほど十分に一致するのが好ましい。
【００５５】
ｉＲＮＡ剤中のヌクレオチドは、修飾されていてもよく（例えば、１つ以上のヌクレオチドが２’−Ｆまたは２’−ＯＣＨ３基を含み得る）、またはヌクレオチドサロゲート（ｓｕｒｒｏｇａｔｅ）であり得る。ｉＲＮＡ剤の一本鎖領域は、修飾されていてもよく、またはヌクレオシドサロゲート、例えば、ヘアピン構造の１つまたは複数の非対合領域、例えば、２つの相補的領域を連結する領域を含んでいてもよく、修飾またはヌクレオシドサロゲートを有し得る。例えば、エクソヌクレアーゼに対して、ｉＲＮＡ剤の１つ以上の３’−または５’−末端を安定化させる修飾。修飾は、Ｃ３（またはＣ６、Ｃ７、Ｃ１２）アミノリンカー、チオールリンカー、カルボキシルリンカー、非ヌクレオチドスペーサ（Ｃ３、Ｃ６、Ｃ９、Ｃ１２、脱塩基、トリエチレングリコール、ヘキサエチレングリコール）、ホスホルアミダイトとして生じ、かつ別のＤＭＴ保護されたヒドロキシル基を有して、ＲＮＡ合成中の複数のカップリングを可能にする特殊なビオチンまたはフルオレセイン試薬を含み得る。修飾は、例えば、リボース糖の２’ＯＨ基における修飾の使用、例えば、リボヌクレオチドの代わりに、デオキシリボヌクレオチド、例えば、デオキシチミジンの使用、およびリン酸基中の修飾、例えば、ホスホロチオエート修飾も含み得る。ある実施形態において、異なる鎖は、異なる修飾を含む。
【００５６】
ある実施形態において、ｉＲＮＡ剤が分子の一端または両端に一本鎖または非対合領域を含むように鎖が選択されるのが好ましい。二本鎖ｉＲＮＡ剤は、オーバーハング、例えば、１つまたは２つの５’または３’オーバーハング（好ましくは、２〜３ヌクレオチドの少なくとも３’オーバーハング）を有するように対合されるその鎖を有するのが好ましい。好ましいｉＲＮＡ剤は、各端に１または好ましくは２もしくは３ヌクレオチド長の、一本鎖オーバーハング、好ましくは、３’オーバーハングを有する。オーバーハングは、一方の鎖が他方より長いことの結果であり得、または同じ長さの２つの鎖が互い違いになっていることの結果であり得る。
【００５７】
ｉＲＮＡ剤の鎖の間の二重領域の好ましい長さは、６〜３０ヌクレオチド長である。好ましい二重領域は、１５〜３０、最も好ましくは、１８、１９、２０、２１、２２、および２３ヌクレオチド長である。他の好ましい二重領域は、６〜２０ヌクレオチド、最も好ましくは、６、７、８、９、１０、１１および１２ヌクレオチド長である。
【００５８】
本明細書において使用される際の「固体担体」という用語は、特に、オリゴヌクレオチドの合成が行われ得る任意の粒子、ビーズ、または表面を表す。本明細書に記載される方法の異なる実施形態に使用され得る固体担体は、例えば、無機担体および有機担体から選択され得る。無機担体は、好ましくは、シリカゲルおよび制御多孔質ガラス（ＣＰＧ）から選択される。有機担体は、好ましくは、高架橋ポリスチレン、Ｔｅｎｔａｇｅｌ（ポリエチレングリコール（ＰＥＧまたはＰＯＥ）がグラフト化される低架橋ポリスチレンマトリックスからなるグラフト化コポリマー）、ポリ酢酸ビニル（ＰＶＡ）、Ｐｏｒｏｓ−ポリスチレン／ジビニルベンゼンのコポリマー、アミノポリエチレングリコールおよびセルロースから選択される。本発明に適した好ましい固体担体は、疎水性の固体担体を含む。本発明の好ましい実施形態は、ポリスチレンベースの固体担体を用いる。多くの他の固体担体が市販されており、本発明に適している。
【００５９】
本明細書において使用される際の「ヒドロキシ保護基」という用語は、合成手順中の望ましくない反応からヒドロキシル基を保護する不安定な化学部分を指す。合成手順の後、ヒドロキシ保護基は、選択的に除去され得る。当該技術分野において公知のヒドロキシ保護基は、Ｔ．Ｈ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９９）に一般に記載されている。ヒドロキシル保護基の例としては、以下に限定はされないが、ベンジルオキシカルボニル、４−ニトロベンジルオキシカルボニル、４−ブロモベンジルオキシカルボニル、４−メトキシベンジルオキシカルボニル、メトキシカルボニル、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル、イソプロポキシカルボニル、ジフェニルメトキシカルボニル、２，２，２−トリクロロエトキシカルボニル、２−（トリメチルシリル）エトキシカルボニル、２−フルフリルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル、アセチル、ホルミル、クロロアセチル、トリフルオロアセチル、メトキシアセチル、フェノキシアセチル、ベンゾイル、メチル、ｔ−ブチル、２，２，２−トリクロロエチル、２−トリメチルシリルエチル、１，１−ジメチル−２−プロペニル、３−メチル−３−ブテニル、アリル、ベンジル、パラ−メトキシベンジルジフェニルメチル、トリフェニルメチル（トリチル）、テトラヒドロフリル、メトキシメチル、メチルチオメチル、ベンジルオキシメチル、２，２，２−トリクロロエトキシメチル、２−（トリメチルシリル）エトキシメチル、メタンスルホニル、パラ−トルエンスルホニル、トリメチルシリル、トリエチルシリル、およびトリイソプロピルシリルが挙げられる。本発明に好ましいヒドロキシル保護基は、アセチル（Ａｃまたは−−Ｃ（Ｏ）ＣＨ３）、ベンゾイル（Ｂｚまたは−−Ｃ（Ｏ）Ｃ６Ｈ５）、およびトリメチルシリル（ＴＭＳまたは−−Ｓｉ（ＣＨ３）３）である。
【００６０】
本明細書において使用される際の「アミノ保護基」という用語は、合成手順中の望ましくない反応からアミノ基を保護する不安定な化学部分を指す。合成手順の後、本明細書に記載されるアミノ保護基は、選択的に除去され得る。当該技術分野において公知のアミノ保護基は、Ｔ．Ｈ．Ｇｒｅｅｎｅ  ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３ｒｄ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９９）に一般に記載されている。アミノ保護基の例としては、以下に限定はされないが、アセチル、ｔ−ブトキシカルボニル、９−フルオレニルメトキシカルボニル、およびベンジルオキシカルボニルが挙げられる。
【００６１】
「カルボン酸保護基」という用語は、化合物の他の官能部位に関与する反応が行われる間、カルボン酸官能基をブロックまたは保護するのに用いられるカルボン酸保護基を指す。このようなカルボキシ保護基は、加水分解方法または水素化分解（ｈｙｄｒｏｇｅｎｏｌｙｔｉｃ）方法による、対応するカルボン酸への開裂しやすさで知られている。カルボン酸エステル保護基の例としては、以下に限定はされないが、メチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ベンジル、４−メトキシベンジル、Ｃ２〜Ｃ６アルカノイルオキシメチル、２−ヨードエチル、４−ニトロベンジル、ジフェニルメチル（ベンズヒドリル）、フェナシル、４−ハロフェナシル、ジメチルアリル、２，２，２−トリクロロエチル、トリ（Ｃ１〜Ｃ３アルキル）シリル、スクシンイミドメチルなどのエステル形成部分が挙げられる。カルボキシ基のエステル保護に加えて、このような基はまた、第三級アミン塩基の存在下で、塩化アセチル、塩化プロピオニル、塩化イソブチリルおよび他の酸塩化物とともに形成されるものなどの混合無水物として保護され得る。Ｅ．Ｈａｓｌａｍ  ｉｎ  Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、上掲、第５章に記載されているものなどの他の公知のカルボキシ保護基が好適である。エステル形成保護基が好ましい。
【００６２】
上記の定義中で、ヒドロキシおよびカルボキシ保護基は、網羅的に定義されているわけではない。このような基の機能は、調製ステップ中に反応性官能基を保護し、次に、分子の残りを分断せずに後のある時点で除去されることである。多くの保護基が、当該技術分野において公知であり、上記で特に言及されていない他の保護基の使用が同様に適用可能である。
【００６３】
好適なペプチドカップリング剤としては、以下に限定はされないが、ＤＣＣ（ジシクロヘキシルカルボジイミド）、ＤＩＣ（ジイソプロピルカルボジイミド）、ジ−ｐ−トルオイルカルボジイミド、ＢＤＰ（１−ベンゾトリアゾールジエチルホスフェート−１−シクロヘキシル−３−（２−モルホリニルエチル）カルボジイミド）、ＥＤＣ（１−（３−ジメチルアミノプロピル−３−エチル−カルボジイミド塩酸塩）、フッ化シアヌル、塩化シアヌル、ＴＦＦＨ（テトラメチルフルオロホルムアミジニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＤＰＰＡ（アジドリン酸ジフェニル）、ＢＯＰ（ベンゾトリアゾール−１−イルオキシトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＨＢＴＵ（Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＴＢＴＵ（Ｏ−ベンゾトリアゾール−１−イル−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート）、ＴＳＴＵ（Ｏ−（Ｎ−スクシンイミジル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレート）、ＨＡＴＵ（Ｎ−［（ジメチルアミノ）−１−Ｈ−１，２，３−トリアゾロ［４，５，６］−ピリジン−１−イルメチレン］−Ｎ−メチルメタンアミニウムヘキサフルオロホスフェートＮ−オキシド）、ＢＯＰ−Ｃｌ（ビス（２−オキソ−３−オキサゾリジニル）ホスフィン酸クロリド）、ＰｙＢＯＰ（（１−Ｈ−１，２，３−ベンゾトリアゾール−１−イルオキシ）−トリス（ピロリジノ）ホスホニウムテトラフルオロホスフェート）、ＢｒＯＰ（ブロモトリス（ジメチルアミノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＤＥＰＢＴ（３−（ジエトキシホスホリルオキシ）−１，２，３−ベンゾトリアジン−４（３Ｈ）−オン）ＰｙＢｒＯＰ（ブロモトリス（ピロリジノ）ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート）が挙げられる。ＥＤＣ、ＨＯＡＴ、ＢＯＰ−ＣｌおよびＰｙＢｒＯＰが、好ましいペプチドカップリング剤である。ペプチドカップリング剤の量は、約１．０〜約１０．０当量の範囲である。アミド結合形成反応に使用され得る任意選択の試薬としては、約１．０〜約１０．０当量の範囲の量の、ＤＭＡＰ（４−ジメチルアミノピリジン）またはＨＯＢＴ（１−ヒドロキシベンゾトリアゾール）、ＨＯＡＴ（ヒドロキシアザベンゾトリアゾール）、ＨＯＳｕ（ヒドロキシスクシンイミド）、ＨＯＮＢ（エンド−Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボルネン−２，３−ジカルボキサミド）などの活性エステル試薬が挙げられる。
【００６４】
「ハロ」という用語は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素のいずれかの基を指す。
【００６５】
「アルキル」という用語は、示される数の炭素原子を含有する、直鎖または分枝鎖であり得る飽和および不飽和非芳香族炭化水素鎖（これらとしては、以下に限定はされないが、プロピル、アリル、またはプロパルギルが挙げられる）を指し、これは、Ｎ、Ｏ、またはＳで任意に介在され得る。例えば、Ｃ１〜Ｃ１０は、基がその中に１〜１０個（１と１０を含む）の炭素原子を有し得ることを示す。「アルキレン」という用語は、二価アルキル（すなわち、−Ｒ−）を指す。
【００６６】
「アルコキシ」という用語は、−Ｏ−アルキル基を指す。
【００６７】
「アルキレンジオキソ」という用語は、構造−Ｏ−Ｒ−Ｏ−（式中、Ｒがアルキレンを表す）の二価種を指す。
【００６８】
「アミノアルキル」という用語は、アミノ基で置換されるアルキルを指す。
【００６９】
「メルカプト」という用語は、−ＳＨ基を指す。
【００７０】
「チオアルコキシ」という用語は、−Ｓ−アルキル基を指す。
【００７１】
「アリール」という用語は、各環の０個、１個、２個、３個、または４個の原子が置換基で置換され得る、６−炭素の単環式または１０−炭素の二環式芳香環系を指す。アリール基の例としては、フェニルおよびナフチルが挙げられる。
【００７２】
「アリールアルキル」および「アラルキル」という用語は、アリールで置換されるアルキルを指す。
【００７３】
「アリールアルコキシ」という用語は、アリールで置換されるアルコキシを指す。
【００７４】
本明細書において用いられる際の「シクロアルキル」という用語は、３〜１２個の炭素、例えば、３〜８個の炭素、例えば、３〜６個の炭素を有する飽和および部分的不飽和の環状炭化水素基を含み、ここで、シクロアルキル基は、さらに、任意に置換され得る。シクロアルキル基としては、以下に限定はされないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、およびシクロオクチルが挙げられる。
【００７５】
「ヘテロアリール」という用語は、単環式である場合１〜３個のヘテロ原子、二環式である場合１〜６個のヘテロ原子、または三環式である場合１〜９個のヘテロ原子を有する、芳香族５〜８員単環式、８〜１２員二環式、または１１〜１４員三環式環系を指し、ここで、ヘテロ原子は、Ｏ、Ｎ、またはＳから選択され（例えば、炭素原子およびそれぞれ単環式、二環式、または三環式である場合、１〜３個、１〜６個、または１〜９個の、Ｎ、Ｏ、またはＳのヘテロ原子）、各環の０個、１個、２個、３個、または４個の原子が、置換基で置換され得る。ヘテロアリール基の例としては、ピリジル、フリルまたはフラニル、イミダゾリル、ベンズイミダゾリル、ピリミジニル、チオフェニルまたはチエニル、キノリニル、インドリル、およびチアゾリルが挙げられる。
【００７６】
「ヘテロアリールアルキル」および「ヘテロアラルキル」という用語は、ヘテロアリールで置換されるアルキルを指す。
【００７７】
「ヘテロアリールアルコキシ」という用語は、ヘテロアリールで置換されるアルコキシを指す。
【００７８】
「ヘテロシクリル」という用語は、単環式である場合１〜３個のヘテロ原子、二環式である場合１〜６個のヘテロ原子、または三環式である場合１〜９個のヘテロ原子を有する、非芳香族５〜８員単環式、８〜１２員二環式、または１１〜１４員三環式環系を指し、ここで、ヘテロ原子は、Ｏ、Ｎ、またはＳから選択され（例えば、炭素原子およびそれぞれ単環式、二環式、または三環式である場合、１〜３個、１〜６個、または１〜９個の、Ｎ、Ｏ、またはＳのヘテロ原子）、各環の０個、１個、２個または３個の原子が、置換基で置換され得る。ヘテロシクリル基の例としては、トリゾリル（ｔｒｉｚｏｌｙｌ）、テトラゾリル、ピペラジニル、ピロリジニル、ジオキサニル、モルホリニル、およびテトラヒドロフラニルが挙げられる。
【００７９】
「オキソ」という用語は、酸素原子を指し、これは、炭素に結合されるとカルボニルを形成し、窒素に結合されるとＮ−オキシドを形成し、硫黄に結合されるとスルホキシドまたはスルホンを形成する。
【００８０】
「アシル」という用語は、アルキルカルボニル、シクロアルキルカルボニル、アリールカルボニル、ヘテロシクリルカルボニル、またはヘテロアリールカルボニル置換基を指し、それらのいずれも、１つ以上の置換基でさらに置換され得る。
【００８１】
「置換」という用語は、所与の構造における、ハロ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、ヘテロシクリル、チオール、アルキルチオ、アリールチオ、アルキルチオアルキル、アリールチオアルキル、アルキルスルホニル、アルキルスルホニルアルキル、アリールスルホニルアルキル、アルコキシ、アリールオキシ、アラルコキシ、アミノカルボニル、アルキルアミノカルボニル、アリールアミノカルボニル、アルコキシカルボニル、アリールオキシカルボニル、ハロアルキル、アミノ、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、アルキルアミノ、アリールアミノ、アルキルアミノアルキル、アリールアミノアルキル、アミノアルキルアミノ、ヒドロキシ、アルコキシアルキル、カルボキシアルキル、アルコキシカルボニルアルキル、アミノカルボニルアルキル、アシル、アラルコキシカルボニル、カルボン酸、スルホン酸、スルホニル、ホスホン酸、アリール、ヘテロアリール、複素環、および脂肪族を含むがこれらに限定されない特定の置換基のラジカルによる１つ以上の水素ラジカルの置換を指す。置換基がさらに置換され得ることが理解される。
【００８２】
反応スキーム
以下のスキーム１〜８のいずれかに示されるように、ＡｃおよびＢｚは、本明細書に記載されるように、任意のヒドロキシ保護基で置換され得る。Ｂｏｃは、本明細書に記載されるように、任意のアミノ保護基で置換され得る。
【００８３】
化合物１から化合物７Ａへの転化
化合物１が、以下のスキーム１に示される一連の反応を介して化合物７Ａに転化され得る。
スキーム１
【化２５】
2020109124.tif 000026
【００８４】
化合物１が、例えば、Ｂｏｃ２Ｏおよびトリエチルアミンとの反応を介して、化合物２Ａなどの窒素保護された化合物に転化される。その後、メチルエステル化合物２Ａは、ＴＨＦなどの極性溶媒中で、例えば、還元剤として水素化ホウ素リチウムを用いて、対応するアルコールへと還元される。３Ａと塩酸との反応により、塩酸塩４Ａが得られる。１〜４Ａのこの３ステップの転化の全収率は約６２％である。
【００８５】
プロリノール化合物４Ａの窒素原子は、トリエチルアミンなどのアミンの存在下における、アセトニトリル中のＣＦ３ＣＯ２Ｅｔとの反応などを介して、例えば、５Ａにあるような−ＣＯＣＦ３基で保護される。化合物５Ａのヒドロキシメチル基は、例えば、ＤＭＡＰおよびピリジンの存在下におけるＤＭＴｒＣｌ（４，４’−ジメトキシトリチルクロリド）との反応を介して、６Ａの−ＣＨ２−ＯＤＭＴｒに転化される。次に、化合物６Ａの窒素原子は、例えば、アルコール（例えば、メタノール）中の塩基（例えば、水酸化カリウム）と６Ａとの反応によって脱保護されて、化合物７Ａが得られる。
【００８６】
スキーム１に記載されるプロセスの利点は、（ｉ）水素化反応が含まれず、それによって、Ｐｄ炭素などの高コストの試薬を使用する必要がなくなること、（ｉｉ）化合物４Ａが結晶性であるため、取り扱いおよび精製がより容易であること、および（ｉｉｉ）重金属汚染物質（Ｐｄなど）が系に導入されないことを含む。
【００８７】
化合物１から化合物４Ａへの代替的な転化
あるいは、化合物１を、ナトリウムメトキシドなどのアルコキシドと反応させ、還元剤（例えば、水素化ホウ素ナトリウム）を加え、次に、塩酸を加えることによって、化合物１が、１ステッププロセスで化合物４Ａに転化され得る。この１ステッププロセスの全収率は８４％である。
【００８８】
化合物８から化合物１３Ａへの転化
化合物８が、以下のスキーム２に示される一連の反応を介して化合物１３Ａに転化され得る。
スキーム２
【化２６】
2020109124.tif 000027
【００８９】
糖化合物８の１位、３位、４位、および６位のヒドロキシル基が、例えば、アセチル（Ａｃ）基で保護され、２位のアミノ基が、例えば、アセチル基で置換されて、化合物９が得られる。例えば、化合物８が、トリエチルアミンの存在下で、Ａｃ２ＯおよびＤＭＡＰと反応されて、化合物９が得られる。次に、１位のヒドロキシル基が、例えば、ジクロロエタン中のＴＭＳＯＴｆとの反応によって化合物９を化合物１０に転化することによって活性化される。化合物１０と化合物１１Ａ（バレロラクトンおよびメタノールから形成され得る）との反応により、化合物１２Ａが得られる。次に、３位、４位、および６位のヒドロキシル基が、例えば、メタノール中のトリエチルアミンとの反応によって脱保護されて、化合物１２Ｂが得られる。アルコール基は、ＤＭＡＰおよびピリジンの存在下におけるＢｚ２Ｏとの反応によって例えば、ベンジル基で再度保護されて、化合物１２Ｃが得られる。次に、化合物１２Ｃ中のメチルエステル基が、例えば、ヨウ化リチウムおよびピリジンとの反応、続いて、トリエチルアミン、塩化ナトリウムおよび水の添加によって、加水分解されて、化合物１３Ａが得られる。
【００９０】
スキーム２に記載されるプロセスの利点は、（ｉ）重金属（ルテニウムなど）の酸化ステップが含まれないこと、および（ｉｉ）化合物１２Ｂおよび１２Ｃが結晶性であるため、取り扱いおよび精製がより容易であることを含む。
【００９１】
化合物１６から化合物１９Ａへの転化
化合物１６が、以下のスキーム３に示される一連の反応を介して化合物１９Ａに転化され得る。
スキーム３
【化２７】
2020109124.tif 000028
【００９２】
化合物１６が、例えば、アクリル酸ｔ−ブチルおよび水酸化ナトリウムとの反応によって、化合物１７Ａに転化される。ペプチドカップリング剤（ＥＤＣなど）、ＨＣｌ、ＤＩＥＡおよびｔ−ブタノールの存在下における化合物１７Ａと化合物１５Ａとの反応により、化合物１８Ａが得られ、これが、例えば、メタン酸との反応によって、トリス−酸１９Ａに転化される。
【００９３】
スキーム３に記載されるプロセスの利点は、（ｉ）クロロギ酸ベンジルの使用が省略されること、（ｉｉ）水素化反応が必要とされないこと（それによって、Ｐｄなどの重金属の導入の可能性が避けられる）、および（ｉｉｉ）化合物１９Ａが結晶性であることを含む。さらに、市販されている化合物１５Ａの使用により、１，１２−ドデカン酸から調製され得る１２−（ベンジルオキシ）−１２−オキソドデカン酸などのモノエステル保護された類似体を調製するための追加の合成ステップが必要とされないため、合成ステップの数が減少される。
【００９４】
化合物１９Ａから化合物２５Ａへの転化
化合物１６が、以下のスキーム４に示される一連の反応を介して化合物１９Ａに転化され得る。
スキーム４
【化２８】
2020109124.tif 000029
【００９５】
ペプチドカップリング剤（ＥＤＣなど）、ＨＣｌ、ＤＩＥＡおよびｔ−ブタノールの存在下における化合物１９Ａと化合物２１との反応により、化合物２４Ａが得られる。化合物２４Ａの末端アミノ基が、例えば、ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）との反応によって脱保護されて、化合物２５Ａが得られる。
【００９６】
あるいは、化合物２４Ａが、アルコール溶媒中のスルホン酸（例えば、ｐ−トルエンスルホン酸またはメタンスルホン酸）との反応によって脱保護され得る。（メタノールなどのアルコール溶媒中の）スルホン酸の使用により、おそらく、アルコールへのトリアミンの向上した溶解性のため、化合物２４Ａの化合物のより高い脱保護が得られる（すなわち、不完全な脱保護の可能性が低下される）。
【００９７】
化合物２５Ａから化合物２６Ａへの転化
化合物２５Ａが、以下のスキーム５に示される一連の反応を介して化合物２６Ａに転化され得る。
スキーム５
【化２９】
2020109124.tif 000030
【００９８】
ペプチドカップリング剤（ＥＤＣなど）、ジメチルホルムアミド中のＤＩＥＡおよびｔ−ブタノールとの化合物２５Ａの反応により、化合物２６Ａが得られる。カップリング剤としてのＥＤＣの使用により、化合物２６Ａのより高い収率が可能になる。
【００９９】
化合物２６Ａから化合物２７Ａへの転化
化合物２６Ａが、以下のスキーム６に示される一連の反応を介して化合物２７Ａに転化され得る。
スキーム６
【化３０】
2020109124.tif 000031
【０１００】
化合物２６Ａ中のカルボン酸末端が脱保護されて、化合物２７Ａが得られる。化合物２６Ａは、（ｉ）アルコール（例えば、メタノール）中のアルコキシド（例えば、ナトリウムメトキシド）、（ｉｉ）水酸化物（例えば、水酸化ナトリウム）および（ｉｉｉ）ピリジン中のＡｃ２Ｏとの反応によって、化合物２７Ａに転化され得る。２６Ａから２７Ａへのこの転化の際に水素化ステップは必要とされない。
【０１０１】
化合物２７Ａから化合物２９Ａへの転化
化合物２７Ａが、以下のスキーム７に示される一連の反応を介して化合物２９Ａに転化され得る。
スキーム７
【化３１】
2020109124.tif 000032
【０１０２】
ペプチドカップリング剤（ＨＢＴＵなど）、ＤＩＥＡおよびｔ−ブタノールの存在下における化合物２７Ａと化合物７Ａ（上述されるように調製され得る）との反応により、化合物２９Ａが得られる。スキーム７に記載されるプロセスの利点は、（ｉ）フッ化物塩（すなわち、フッ化物イオン）の使用が必要とされず、それによって、塩基性フッ化物イオンの存在のため起こり得る可能な副反応による不純物（以下に示される化合物２９−１および２９−２など）の形成がなくなること、および（ｉｉ）ピリジンおよびフッ化水素酸の費用のかかる使用がなくなることを含む。
【化３２】
2020109124.tif 000033
【０１０３】
化合物２９Ａから化合物３１への転化
化合物２９Ａが、以下のスキーム８に示される一連の反応を介して化合物３１に転化され得る。
スキーム８
【化３３】
2020109124.tif 000034
【０１０４】
塩基（例えば、トリエチルアミン）の存在下における化合物２９Ａと無水コハク酸との反応により、化合物３０が得られ、これが、固体担体上に充填されて、化合物３１が得られる。
【０１０５】
スキーム８に示されるプロセスの利点は、（ｉ）ＤＭＡＰ（ジメチルアミノピリジン）または固定化ＤＭＡＰ（ＰＳ−ＤＭＡＰ、ポリスチレンが結合されたＤＭＡＰの同等物など）などのこの反応に通常使用される高価な触媒の使用がなくなること、（ｉｉ）（オリゴマー化反応による）生成物中の潜在的な不純物の数が減少されること、および（ｉｉｉ）重金属（触媒として使用される場合、ＰｄまたはＲｕなどの）による汚染の可能性がなくなることを含む。
【０１０６】
本発明は、以下の実施例によってさらに例示されるが、実施例は、さらなる限定として解釈されるものではない。本出願全体を通して引用される全ての参照文献、係属中の特許出願および公開特許の内容は、参照により本明細書に明示的に援用される。
【実施例】
【０１０７】
実験手順：ＧａｌＮＡｃプロセス
実施例１−化合物２の合成
【化３４】
2020109124.tif 000035
ジエチルエーテルおよびアセトニトリル中のジメチルエステル１（２００ｇ、７７４．６５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＭｅＯＨに溶解されたＫＯＨ（８９１．４ｍｍｏｌ）を、１時間にわたって０〜５℃で滴下して加え、反応混合物を、同じ温度でさらに４８時間撹拌した。焼結式漏斗を用いて白色の固体をろ過した後、それをジエチルエーテル（１００ｍＬ）で洗浄し、３時間吸引乾燥させた。上で得られた白色の固体を、水（５００ｍＬ）に溶解させた後、１ＮのＨＣｌを用いてｐＨ約３〜４まで酸性化し、白色の固体をろ過によって収集した後、それを水（５０ｍＬ×２）で洗浄した。この材料を１日空気乾燥させた後、Ｐ２Ｏ５の存在下で乾燥させたところ、生成物２（１６６ｇ、８８％）が白色の粉末として得られた。
【０１０８】
実施例２−化合物５の合成
【化３５】
2020109124.tif 000036
試薬および条件：（ｉ）［１］．Ｂｏｃ２Ｏ、Ｅｔ３Ｎ、ＤＣＭ、（ｉ）［２］．ＬｉＢＨ４、ＴＨＦおよび（ｉ）［３］．エーテル中のＨＣｌ。（ｉｉ）［１］トリフルオロ酢酸エチル、Ｅｔ３Ｎ；（ｉｉ）［２］ＤＭＴｒ−Ｃｌ／ＰｙまたはＤＭＴｒ−Ｃｌ、ＤＭＡＰ／Ｐｙおよび（ｉｉ）［３］ＫＯＨ水溶液
【０１０９】
化合物４の合成
ステップ（ｉ）［１］：ＤＣＭ（３Ｌ）中のトランスヒドロキシプロリンメチルエステル・ＨＣＬ３（１００ｇ、５５２．３ｍｍｏｌ）およびＢｏｃ２Ｏ（１３２．５ｇ、６０７．５７ｍｍｏｌ）の懸濁液に、Ｅｔ３Ｎを、１時間にわたって約０〜５℃で滴下して加え、一晩、ゆっくりと室温にした。水（５０ｍＬ）を加え、有機溶媒を濃縮した後、溶媒を濃縮したところ、粗材料（約１１５ｇ）が得られ、それを精製せずに次のステップに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．４２、１．４６（ｓ，９Ｈ）、１．７５〜１．７７（ｍ，２Ｈ）、２．０７〜２．１１（ｍ，１Ｈ）、２．２６〜２．３４（ｍ，１Ｈ）、３．４４〜３．６７（ｍ，３Ｈ）、３．７４（ｓ，３Ｈ）、４．４（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ、１Ｈ）、４．４８〜４．５１（ｍ，１Ｈ）。
【０１１０】
ステップ（ｉ）［２］：約０℃で、ＴＨＦ中のＮＢｏｃ保護されたプロリノールメチルエステル（１１５ｇ、４６９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＬｉＢＨ４を１時間にわたって何回かに分けて（ｐｏｒｔｉｏｎ  ｗｉｓｅ）加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。５０ｍＬの１ＮのＮａＯＨ溶液を加え、溶媒を濃縮した後、水および塩水で洗浄しながら、ＤＣＭ（２×５００ｍＬ）で抽出した。有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させた。溶媒の濃縮により、粗ジオール（９２ｇ）が無色油（９２ｇ）として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．４８（ｓ，９Ｈ）、１．７４（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、２．０２〜２．０８（ｍ，１Ｈ）、２．６３（ｂｒ  ｓ，２Ｈ）、３．４２〜３．７５（ｍ，４Ｈ）、４．１１〜４．１７（ｍ，１Ｈ）、４．３８〜４．３９（ｍ，１Ｈ）。
【０１１１】
ステップ（ｉ）［３］：エーテル（１５０ｍＬ）中のＮＢｏｃジオール（５７ｇ、２６２．５２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、エーテル（５０ｍＬ）中のＨＣｌを加え、一晩撹拌した。白色の固体をろ過し、エーテル（５０ｍＬ）で洗浄した。ろ液を６時間にわたって約０℃に保持し、固体をろ過し、エーテル（２５ｍＬ）で洗浄した。両方のバッチを組み合わせて、Ｐ２Ｏ５の存在下で、減圧下で一定重量の４（３１ｇ）が得られるまで乾燥させた。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：１．９４〜２．０１（ｍ，１Ｈ）、２．１４〜２．１９（ｍ，１Ｈ）、３．３０〜３．４８（ｍ，２Ｈ）、３．７１〜３．７６（ｍ，１Ｈ）、３．９３〜４．０８（ｍ，２Ｈ）、４．６７〜４．７５（ｍ，１Ｈ）。
【０１１２】
化合物５の合成
ステップ（ｉｉ）［１］：氷浴上で、オーバーヘッド撹拌機を備えた五つ口の１５Ｌのガラス反応器中で反応を行った。アセトニトリル（８Ｌ）中の４（４５０ｇ、２．９４モル）の撹拌溶液に、Ｅｔ３Ｎ（１Ｌ、７．２モル）およびトリフルオロ酢酸エチル（１０００ｇ、７．０４モル）を加え、室温で一晩撹拌した。白色の固体（Ｅｔ３Ｎ．ＨＣｌ）を焼結式漏斗でろ過し、酢酸エチル（４Ｌ）で洗浄した。有機溶液を濃縮した後、トルエン（２Ｌ×２）と同時蒸発させ、２２Ｌのロータリーエバポレータ中で、減圧下で一晩乾燥させたところ、粗生成物がゴム状の塊（約６００ｇ）として得られた。
【０１１３】
ステップ（ｉｉ）［２］：上で得られた粗化合物（２．９４モル）を、２Ｌの無水ピリジンに溶解させ、四つ口の１５Ｌのフラスコに移した。さらに６Ｌの無水ピリジンを加えた。この溶液を、氷浴を用いて約５℃に冷却した後、ＤＭＴｒ−Ｃｌ（１０００ｇ、２．９５）を、２０分間にわたって窒素雰囲気下で何回かに分けて加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。１２Ｌの水を、撹拌しながら加え、それを６時間静置しておいた。化合物は、褐色がかったゴム状の塊としてフラスコの底に沈降した。水−ピリジン層を、移送ポンプを用いてデカントし、水層を、酢酸エチル（２×５Ｌ）で抽出した。水層をデカントした後、粘着性材料と組み合わされた酢酸エチル抽出物が、反応器中に残った。溶媒の濃縮により、対応する生成物が粘性油として得られ、それを精製せずに次のステップに使用した。
【０１１４】
ステップ（ｉｉ）［３］：ＭｅＯＨ（５Ｌ）中のトリフルオロアセチル化合物（２．９４モル）の撹拌溶液に、水（２Ｌ）に溶解されたＫＯＨ（３３０ｇ、５．８８モル）を、３０分間にわたって滴下して加え、室温で１時間撹拌した。３Ｌの体積になるまで濃縮した後、１５Ｌの水を加え、一晩静置させた。生成物が、赤褐色の粘性油として底に沈降した。移送ポンプを用いて水をデカントした後、６ＬのＤＣＭを加えて溶解させ、５Ｌの水で洗浄し、有機溶媒を分離した。溶媒の濃縮の後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（４Ｋｇのシリカ、溶離剤：ヘキサン／酢酸エチルおよび酢酸エチル／ＭｅＯＨ）精製により、化合物５（１０００ｇ、８１％）が泡状の黄白色の固体として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．３５〜１．４２（ｍ，１Ｈ）、１．６５〜１．７０（ｍ，１Ｈ）、２．３３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、２．５９〜２．６２（ｍ，１Ｈ）、２．７２〜２．７５（ｍ，１Ｈ）、２．８２〜２．９１（ｍ，２Ｈ）、３．３６〜３．４１（ｍ，１Ｈ）、３．７１（ｓ，６Ｈ）、４．１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、４．５２５（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ、１Ｈ）。
【０１１５】
実施例３：化合物３１の合成
【化３６】
2020109124.tif 000037
試薬および条件：（ｉ）［１］．ＥＤＣ．ＨＣｌ、ＤＩＥＡ、ＨＯＢｔ／ＤＣＭ−ＤＭＦまたはＨＢＴＵ、ＤＩＥＡ／ＤＣＭ−ＤＭＦまたはＨＢＴＵ、ＤＩＥＡ、ＨＯＢｔ／ＤＣＭ−ＤＭＦまたはＥＤＣ．ＨＣｌ、ＤＩＥＡ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドまたはＥＤＣ．ＨＣｌ、ＤＩＥＡ、ペンタフルオロフェノールまたはＤＣＣ、ＤＭＡＰ／ＤＣＭ−ＤＭＦまたはアミド化／エステル化のための任意の他のカルボン酸活性剤およびモノメチルドデカン二酸（ｉ）［２］エーテル／ジオキサン／ジオキサン−ＤＭＦまたはＴＦＡ中のＨＣＯＯＨまたはＨＣｌ、（ｉｉ）［１］．ステップ（ｉ）［１］およびモノＢｏｃ１，３−プロパンジアミンおよび（ｉｉ）［２］ＴＨＦ水溶液中のＬｉＯＨまたはＮａＯＨまたはＫＯＨ；（ｉｉｉ）［１］ステップ（ｉ）［１］および化合物５および（ｉｉｉ）［２］．ステップ（ｉ）［２］；（ｉｖ）（ｉ）［１］および化合物９；（ｖ）ＤＭＴｒ−Ｃｌ／ＰｙまたはＤＭＴｒ−Ｃｌ、ＤＭＡＰ／ｐｙ。
【０１１６】
化合物７の合成
ステップ（ｉ）［１］：市販の化合物６（１０８１ｇ、２．１３９ｍｏｌ）、ドデカン酸モノメチルエステル（６５３ｇ、２．６７３モル）およびＨＯＢｔ（４３３．５ｇ、３．２０９ｍｏｌ）を、アルゴン下で、オーバーヘッド撹拌機を備えた１２Ｌの三つ口丸底フラスコ中で、ＤＣＭ（６Ｌ）とＤＭＦ（１Ｌ）との混合物に溶解させた。反応混合物を氷水浴中で冷却し、約１０℃の温度を維持した。ＥＤＡＣ．ＨＣｌ（５３１ｇ、２．６７３ｍｏｌ）を何回かに分けてゆっくりと加えた後、３０分間の期間にわたってＤＩＥＡ（１．１２Ｌ、６．４２ｍｏｌ）を加えた。反応混合物を、アルゴン下で２日間撹拌し続けた。ＫＭｎＯ４染色を用いて２日後にＴＬＣを確認し、ロータリーエバポレータフラスコに移し、揮発物を減圧下で除去した。ジクロロメタンの大部分を除去した後、フラスコをフードに移し、撹拌しながら１５Ｌの水を加え、混合物を一晩沈降させ続けた。上層をデカントし、粘性の底層を、４ＬのＥｔＯＡｃに溶解させ、水（２×４Ｌ）、１０％のクエン酸水溶液（２×３．５Ｌ）、２×４ＬのＮａＨＣＯ３水溶液、続いて、飽和塩水（２．５Ｌ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を除去した。粗生成物を高真空下で一晩乾燥させ、他の精製を伴わずに次の反応に使用した（１６４１ｇ、定量的）。ＬＣ−ＭＳ、Ｃ３８Ｈ６９ＮＯ１２についての計算値、分子量：７３１．４８；実測値７３２．３（Ｍ＋Ｈ）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ  ６．８５（ｓ，１Ｈ）、３．５３（ｄｄ，Ｊ＝１２．９、６．９Ｈｚ、１６Ｈ）、３．３０（ｓ，１Ｈ）、２．４９（ｄｄ，Ｊ＝３．５、１．７Ｈｚ、２Ｈ）、２．３７（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ、７Ｈ）、２．２６（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ、２Ｈ）、２．０２（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ）、１．５６〜１．４４（ｍ，３Ｈ）、１．４４〜１．３４（ｍ，３２Ｈ）、１．２１（ｓ，１３Ｈ）。
【０１１７】
ステップ（ｉ）［２］：ステップ（ｉ）［１］からの上記の化合物（１５６０ｇ、２．１３４モル）を、アルゴン下で、オーバーヘッド撹拌機を備えた２２Ｌの三つ口丸底フラスコに取り込んだ。ギ酸（１０Ｋｇ）を酸に加え、混合物を２４時間撹拌した。ＴＬＣにより、少量の出発材料が残ったことが示された。さらなるギ酸（４Ｌ）を加え、さらに２４時間撹拌し続けた。ＴＬＣおよび質量スペクトルにより、反応の完了が示され、混合物を２０Ｌのロータリーエバポレータに移し、揮発物を減圧下で除去した。ギ酸の除去の後、残渣を、トルエン（４．５Ｌ×２）と同時蒸発させた。上記の残渣に、８Ｌの５０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサンを、ゆっくりと回転させながら加えたところ、白色の固体が、溶液から沈殿し、混合物を２時間撹拌した。混合物をろ過し、４Ｌの５０％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン、続いて、４Ｌの無水エーテルで洗浄した。化合物７を、一定重量（収量１０９６ｇ、９１％）に達するまで４５℃で空気乾燥させた。ＬＣ−ＭＳ  Ｃ２６Ｈ４５ＮＯ１２についての計算値、分子量：５６３．２９；実測値５６４．３（Ｍ＋Ｈ）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ  １２．０８（ｂｓ，３Ｈ）、６．８９（ｓ，１Ｈ）、３．６５〜３．４３（ｍ，７Ｈ）、２．４１（ｄｔ，Ｊ＝１２．７、６．３Ｈｚ、３Ｈ）、２．２６（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．０２（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、１．４４（ｄｄｄ，Ｊ＝１９．５、１３．３、６．７Ｈｚ、２Ｈ）、１．２１（ｓ，５Ｈ）。
【０１１８】
化合物８の合成
ステップ（ｉｉ）［１］：ＤＣＭ／ＤＭＦ（１．５Ｌ／０．５Ｌ）中の７（８９．５ｇ、１５８．７）、ＮＢｏｃプロパンジアミン（１０３．６ｇ、５９５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣ（１１３．７ｇ、５９５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（９６．４ｇ、６３０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＤＩＥＡ（２０７．４ｍＬ、１１９０ｍｍｏｌ）を、１０分間にわたって滴下して加え、室温で１４時間撹拌した。１００ｍＬの水を加え、ＤＣＭを減圧下で蒸発させた。さらに１Ｌの水を加えた後、水層を注意深くデカントし、この手順を２回繰り返した。得られた粘性油をＤＣＭ（５００ｍＬ）に溶解させた後、水（５００ｍＬ）、１０％のクエン酸（５００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（２５０ｍＬ）、塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。溶媒の濃縮により、対応する生成物（１５７ｇ）が無色の粘性油として得られた。ＬＣＭＳ：計算値：１０３１．６７（Ｍ＋）、実測値：１０６６．４（Ｍ＋＋Ｃｌ−）
【０１１９】
ステップ（ｉｉ）［２］：１．５ＬのＴＨＦ中のメチルエステル（１３５ｇ、１３１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＬｉＯＨ水溶液（０．５Ｌの水中の１３ｇ、３０９．５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１４時間撹拌した。溶媒を約１Ｌになるまで蒸発させた後、２Ｌの水を加えた。この水溶液を酢酸エチル（１Ｌ×２）で洗浄した後、２０％のクエン酸を用いて、ｐＨを、２〜３に調整し、ＤＣＭ（１Ｌ×２）で抽出し、塩水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を濃縮したところ、８（１０７ｇ）が無色の粘性油として得られた。化合物８についてのＬＣＭＳ：計算値：１０１７．６６（Ｍ＋）、実測値：１０１６．６（Ｍ＋−１）
【０１２０】
化合物９の合成
ステップ（ｉｉｉ）［１］：ＤＣＭ／ＤＭＦ（２５０ｍＬ／２５０ｍＬ）中の酸８（２８ｇ、２７．５１４ｍｍｏｌ）トランスヒドロキシルプロリノール４（６．３ｇ、４１．２７ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１６．８４ｇ、１１０．０６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＤＩＥＡ（１７．７５ｇ、１３７．５７ｍｍｏｌ）を、室温で５分間にわたって滴下して加え、３０分間撹拌した。上記の溶液に、ＨＢＴＵ（１３．０５、３４．３９ｍｍｏｌ）を、１０分間にわたって何回かに分けて加え、３時間撹拌した。１００ｍＬの水を加えた後、ＤＣＭを蒸発させ、次に、５００ｍＬの水を加え、１時間静置しておいた。濁った溶液をデカントし、粘着性の固体を水（１００ｍＬ×３）ですすいだ。ゴム状の材料をＤＣＭ（５００ｍＬ）中の２０％のＭｅＯＨに溶解させ、濃縮した後、トルエン（１００ｍｌ×２）と同時蒸発させたところ、対応する生成物（３１ｇ）が、黄色がかった泡状の固体として得られた。ＬＣＭＳ：計算値：１１１６．７３（Ｍ＋）、実測値：１１１７．７（Ｍ＋＋１）、１１３９．６（Ｍ＋＋Ｎａ）。
【０１２１】
ステップ（ｉｉｉ）［２］：１５０ｍＬのＭｅＯＨ中の上記の化合物（２９ｇ、２５．９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ジエチルエーテル中の２ＭのＨＣｌを、１０分間にわたって滴下して加え、３時間撹拌した。３００ｍＬの無水ジエチルエーテルを加え、それを３０分間静置しておいた。有機溶媒をデカントし、ジエチルエーテル（２００ｍＬ×２）で洗浄した。ゴム状の材料を減圧下で乾燥させたところ、白色の粉末９（２３．２ｇ）が得られた。化合物９についてのＬＣＭＳ：計算値：８１６．５７（Ｍ＋）、実測値：８１７．４（Ｍ＋＋１）、８３９．３（Ｍ＋＋Ｎａ）
【０１２２】
ステップ（ｉｉｉ）［２］の代替的方法：
（Ａ）上記のＮＢｏｃ化合物（０．４７５ｇ、０．４２５ｍｍｏｌ）を１０ｍＬの９５％のＨＣＯＯＨに溶解させ、３時間撹拌した。有機溶媒を濃縮したところ、対応する生成物が定量的収率で得られた。化合物９についてのＬＣＭＳ：計算値：８１６．５７（Ｍ＋）、実測値：８１７．４（Ｍ＋＋１）、８３９．３（Ｍ＋＋Ｎａ）
（Ｂ）上記のＮＢｏｃ化合物（０．４７５ｇ、０．４２５ｍｍｏｌ）をＤＣＭ中の１０ｍＬの２０％のＴＦＡに溶解させ、３時間撹拌した。有機溶媒を濃縮したところ、対応する生成物が定量的収率で得られた。化合物９についてＬＣＭＳ：計算値：８１６．５７（Ｍ＋）、実測値：８１７．４（Ｍ＋＋１）、８３９．３（Ｍ＋＋Ｎａ）
【０１２３】
化合物３１の合成
ステップ（ｉｖ）：ＤＣＭ（２００ｍＬ）中の２５（１０ｇ、１５．７９）、ＥＤＣ（３．７９ｇ、１９．８４ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（２．２７ｇ、１９．７３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＤＩＥＡ（５．０９ｇ、３９．４６ｍｍｏｌ）を、５分間にわたって滴下して加え、室温で１４時間撹拌した。５０ｍＬの水を加えた後、ＤＣＭ（２×１００ｍＬ）で抽出し、水、１０％のクエン酸（１００ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（２５０ｍＬ）、塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。溶媒の濃縮により、対応する生成物（１２ｇ）が、黄色がかった固体として得られ、それを精製せずに次のステップに使用した。
【０１２４】
ＤＭＦ（５００ｍＬ）中のアミン９（２２ｇ、２３．８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、滴下してＥｔ３ＮおよびＮＨＳ−糖（５５．６ｇ、７６．１６ｍｍｏｌ、上記のステップから得られる）を一回で加え、反応混合物を室温で一晩（１２時間）撹拌した。１Ｌの水を反応混合物に加え、１時間静置しておいた。濁った水／ＤＭＦ溶液をデカントし、水（１００ｍＬ×２）ですすいだ。ゴム状の材料をＤＣＭ（約５００ｍＬ）に溶解させ、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。溶媒の濃縮により、粗材料が得られ、それをカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中０〜２０％のＭｅＯＨ）によって精製したところ、対応する生成物（２７．５ｇ、４８％）が得られた。ＭＡＬＤＩ：計算値：２６６２．２０（Ｍ＋）、実測値：２６８６．０８（Ｍ＋＋Ｎａ）、２７０２．７４（Ｍ＋＋Ｋ）。
【０１２５】
ステップ（ｖ）：乾燥ピリジン（１０ｍＬ）中のアルコール（４２０ｍｇ、０．１５８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、ＤＭＴｒＣｌ（６４ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１０ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加えた。この反応混合物を室温で一晩撹拌した。さらに１０７ｍｇ（０．３２ｍｍｏｌ）のＤＭＴｒＣｌを加え、６時間撹拌した。反応を水（１０ｍＬ）でクエンチした後、１０ｍＬの体積になるまで濃縮した。水層をデカントし、ゴム状の材料を１０ｍＬの水で２回すすいだ。この材料をＤＣＭ（１０ｍＬ）に溶解させ、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を濃縮したところ、粗材料が得られ、それをカラムクロマトグラフィーによって精製したところ、１１（２５０ｍｇ、収率７４％）が得られた。化合物１１についてのＭＡＬＤＩ：計算値：２９６４．３３（Ｍ＋）、実測値：２９８８．８５（Ｍ＋＋Ｎａ）、３００２．７７（Ｍ＋＋Ｋ）。
【０１２６】
実施例４−モノカルボン酸３０の合成
【化３７】
2020109124.tif 000038
試薬および条件：（ｉ）［１］．Ａｃ２Ｏ、ＤＭＡＰ、ＥＴ３Ｎ／Ｐｙおよび（ｉ）［２］．ＴＭＳＯＴｆ／１，２−ジクロロエタン；（ｉｉ）ＭｅＯＨ、Ｅｔ３Ｎ；（ｉｉｉ）［１］．ＴＭＳＯＴｆ／１，２−ジクロロエタンおよび（ｉｉｉ）［２］．ＥＴ３Ｎ／ＭｅＯＨ；（ｉｖ）［１］．Ｂｚ２Ｏ、ＤＭＡＰ／Ｐｙおよび（ｉｖ）［２］．ＬｉＩ／Ｐｙ、Ｒ＝Ｂｚの場合の還流；（ｖ）［１］．ＮａＯＨ水溶液および（ｖ）［２］．Ａｃ２Ｏ、Ｒ＝Ａｃの場合のＤＭＡＰ／Ｐｙ；（ｖｉｉ）［１］．ＥＤＣ．ＨＣｌ、ＤＩＥＡ、ＨＯＢｔ／ＤＣＭ−ＤＭＦまたはＨＢＴＵ、ＤＩＥＡ／ＤＣＭ−ＤＭＦまたはＨＢＴＵ、ＤＩＥＡ、ＨＯＢｔ／ＤＣＭ−ＤＭＦまたはＥＤＣ．ＨＣｌ、ＤＩＥＡ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドまたはＥＤＣ．ＨＣｌ、ＤＩＥＡ、ペンタフルオロフェノールまたはＤＣＣ、ＤＭＡＰ／ＤＣＭ−ＤＭＦまたはアミド化／エステル化のための任意の他のカルボン酸活性剤およびモノＢｏｃ１，３−プロパンジアミン（ｖｉｉ）［２］．ＴＦＡ、アニソール、室温；または６０〜７０℃で、ＨＣｌ／ＭｅＯＨ／ジオキサンまたはｐ−トルエンスルホン酸／ＭｅＯＨ（ｖｉｉｉ）［１］．ステップ（ｖｉｉ）［１］、［２］．ＮａＯＭｅ／ＭｅＯＨ、（ｖｉｉｉ）［３］．ＮａＯＨ水溶液および（ｖｉｉｉ）［４］．Ａｃ２Ｏ／Ｐｙ。
【０１２７】
化合物２１の合成
ステップ（ｉ）［１］：無水ピリジン（７．２Ｌ）を、Ａｒ雰囲気下で、４０Ｌの反応器中で、無水酢酸（５．３Ｌ）中のガラクトサミン．ＨＣｌ２０（１．６３ｋｇ、７．５５ｍｏｌ）の撹拌および（氷浴上で）冷却された懸濁液に加えた。ＤＭＡＰ（７９ｇ）、およびトリエチルアミン（１．０５Ｌ、７．５５ｍｏｌ）を連続して加え、混合物を氷浴上で一晩撹拌し、その間、２０の溶解、続いて、過アセチル化（ｐｅｒａｃｅｔｙｌａｔｅｄ）糖およびトリエチルアミン塩酸塩の結晶化が、最初の２時間の間に３０℃までの発熱効果を伴って起こった。混合物を焼結式ガラスフィルタに通してろ過し、残渣を、トルエン（約４Ｌ×２）、続いて水（約３Ｌ×２）で洗浄した。結晶性残渣をガラスフィルタ上で一晩乾燥させ、乾燥皿に移し、ホットプレート上で、７０℃で２日間にわたって空気中で乾燥させたところ、２．５３ｋｇ（８６％）の純粋な化合物過アセチル化化合物が得られた。
【０１２８】
ステップ（ｉ）［２］：反応をＡｒ雰囲気下で２０Ｌの反応器中で行った。ＴＭＳＯＴｆ（１．４０Ｌ、７．７４ｍｏｌ）を、Ａｒ雰囲気下で、無水ＤＣＥ（４．０Ｌ）中の過アセチル化糖中間体（２．５２ｋｇ、６．４９ｍｏｌ）の撹拌懸濁液にゆっくりと（１０分間）加えた。混合物を室温で一晩撹拌し、移送管路を介して、開放された４０Ｌの反応器中のＮａＨＣＯ３（１．６４ｋｇ、１９．４ｍｏｌ）と、氷（５．５Ｌ）と、水（５．５Ｌ）との激しく撹拌された混合物に移した。４０分間撹拌し続け、有機層を分離し、水層をＤＣＭで（２回）洗浄し、組み合わされた有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。混合物をろ過し、溶媒を蒸発させ、油状の残渣を、ロータリーエバポレータ（３０℃で１５ミリバール）で乾燥させ、無水ＤＣＥ（４．０Ｌ）に再溶解させ、溶媒を再度蒸発させ、ロータリーエバポレータ（３０℃の浴温度で３ミリバール）で乾燥させたところ、２．１４ｋｇの粗製の２１が得られた。ロータリーエバポレータ中の粗化合物を、無水ＤＣＥ（４．０Ｌ）に再溶解させ、得られた溶液を次のステップに使用した。
【０１２９】
ヒドロキシ酸２３の合成
アルゴンをゆっくりと流しながら、２０Ｌの回転蒸発フラスコ中で反応を行った。乾燥メタノール（４Ｌ）中のバレロラクトン２２（９８％の純度（ＴＣＩ）、１．０ｋｇ、１０ｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１４０ｍＬ、１ｍｏｌ）の溶液を室温で１時間撹拌し、その間、わずかな発熱効果（２８℃まで）が観察された。混合物を真空中で濃縮し（２５℃の加熱浴）、乾燥トルエン（４Ｌ）で希釈し、減圧下で蒸発させ、残渣を、４ミリバール／２５℃のロータリーエバポレータで乾燥させた後、高真空（０．４〜０．６トル、室温）下で一晩撹拌したところ、２３が１％未満のトルエンを含有する無色の液体、１．３９ｋｇ（１００％）として得られた。
【０１３０】
化合物２４の合成
ステップ（ｉｉｉ）［１］：Ａｒ雰囲気下で、冷却ジャケットを備えた２０Ｌの反応器中で反応を行った。ＴＭＳＯＴｆ（２５０ｍＬ、１．３８ｍｏｌ）を、無水ＤＣＥ（６．５Ｌ）中の粗製の２１（２．１４ｋｇ、≦６．４９ｍｏｌ）およびヒドロキシエステル２３（０．９４Ｌ、７．１４ｍｏｌ）の撹拌および冷却された（１２℃）溶液に加えた。直後の発熱効果（２３℃まで）が観察され、冷却器をオフにし、混合物を室温で３時間撹拌し、ＮａＨＣＯ３（１６８ｇ、２．０ｍｏｌ）と、水（３Ｌ）と、いくらかの氷との激しく撹拌された混合物を含む２２Ｌの開放されたフラスコに移した。有機相を分離し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を蒸発させ、油状の残渣を、１２ミリバール／３０℃のロータリーエバポレータで乾燥させたところ、３．０９ｋｇの粗生成物が得られ、それをさらに精製せずに次のステップに使用した。
【０１３１】
ステップ（ｉｉｉ）［２］：加熱／冷却ジャケットを備えた２０Ｌのろ過反応器中で反応を行った。前のステップから得られた粗生成物（３．０９ｋｇ、≦６．４９ｍｏｌ）を、Ａｒ雰囲気下で無水メタノール（１０Ｌ）に溶解させ、トリエチルアミン（０．９０Ｌ、６．４９ｍｏｌ）を加えた。混合物を５０℃で２日間加熱し、トルエン（４Ｌ）を加え、溶液を一晩、室温に冷まし、その間にバルク結晶化が起こった。スラリーを０℃に冷却し、一晩撹拌し、ろ過し、固体をトルエン（８．８Ｌ）中の１０％のメタノールで洗浄し、ホットプレート上で、６５℃で、空気中で乾燥させたところ、０．９７ｋｇの２４が得られた。ろ液を、バルク結晶化するまで真空中で濃縮し、乾燥エチルアルコール（４．０Ｌ）を加えた。スラリーを、室温で一晩、ロータリーエバポレータで研和し、ろ過し、固体をトルエン−エタノール混合物（１：１、約２Ｌ）で洗浄したところ、ホットプレート上で、６５℃で、空気中で乾燥させた後、さらに１９１ｇの２４が得られた。全収量：１．１６ｋｇ、９を基準にして５４％、約９５％の純度。
【０１３２】
化合物２５（Ｒ＝Ｂｚ）の合成
ステップ（ｉｖ）［１］：化合物２４（１．０６ｋｇ、３．１５ｍｏｌ、約９５％の純度）およびＤＭＡＰ（３８４ｇ、３．１５ｍｏｌ）を、Ａｒ雰囲気下で、無水ピリジン（９．０Ｌ）に溶解させた。安息香酸無水物（２．４９ｋｇ、１１．０２ｍｏｌ）を加え、混合物を一晩撹拌し、水（２００ｍＬ）を加え、さらに０．５時間撹拌し続けた。ピリジンを蒸発させ、残渣を、３５℃を超える浴温度（結晶化が起こった）で１０ミリバールのロータリーエバポレータで乾燥させた。固体が完全に溶解するまで、残渣をロータリーエバポレータフラスコ中で水（２Ｌ）とＥｔＯＡｃ（４Ｌ）とに分液し、抽出容器に移し、さらなるＥｔＯＡｃ（８Ｌ）および水（５Ｌ）で希釈した。有機層を分離し、水（１０Ｌ）、飽和ＮａＨＣＯ３（５Ｌ×２）、および再度、水（５Ｌ×２）で連続して洗浄した。有機層を分離し、溶媒を、粘性の塊になるまで真空中で蒸発させ、油状の残渣をエタノール（３．８Ｌ）に再溶解させ、溶媒を再度蒸発させ、残渣を、２０ミリバール／３５℃のロータリーエバポレータで乾燥させた。残渣を３５℃でエタノール（１０．６Ｌ）に再溶解させ、加熱／冷却ジャケットを備えた２０Ｌのろ過反応器に移した。水（６．０Ｌ）を何度かに分けて加え、混合物を２２℃に冷まし、生成物のシードを加えた。一晩撹拌した後、バルク結晶化が起こり；混合物を０℃に冷却し、さらに５時間撹拌し、ろ過した。一晩空気を通すことによって沈殿物を予備乾燥させ、乾燥皿に移し、ホットプレート上で、６５℃で２日間にわたって（一定の質量になるまで）空気中で乾燥させたところ、１．７０ｋｇ（８４％）のベンゾイル化生成物（約９７％の純度）が得られた。
【０１３３】
ステップ（ｉｖ）［２］：得られた過ベンゾイル化生成物（６０８ｇ、０．９３８ｍｏｌ）と、無水ＬｉＩ（「超乾燥（ｕｌｔｒａ  ｄｒｙ）」−Ａｌｆａ−Ａｅｓａｒ、５０３ｇ、３．７５ｍｏｌ）と、無水ピリジン（１．６Ｌ）との混合物を、Ａｒ雰囲気下で、穏やかな還流で２４時間にわたって加熱し、室温に冷まし、水（０．５Ｌ）で希釈した。ピリジンを蒸発させ、油状の残渣を、４ミリバール／３０℃のロータリーエバポレータで乾燥させ、冷却された２０％のＨ３ＰＯ４（５Ｌ）と酢酸エチル−ヘキサン混合物（２：１、５Ｌ）とに分液した。有機相を分離し、５％のＮａＣｌ水溶液（２Ｌ）、３％の重亜硫酸ナトリウム水溶液（２Ｌ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。溶液（総体積６Ｌ）を乾燥剤からデカントし、焼結式ガラスフィルタ漏斗上で酢酸エチル−ヘキサン混合物（２：１）中に湿式充填された９００ｇのシリカゲルのプラグに通してろ過した。ろ液中の実質的な量の酸がＴＬＣによって観察されなくなるまで（１８Ｌ）、シリカゲルケーキをＡｃＯＥｔ−ヘキサン２：１混合物で洗浄した。組み合わされたろ液を蒸発させ、泡状の生成物をＡＣＮ（１．６Ｌ）に溶解させ、ＡＣＮを蒸発させた。最後の手順を繰り返し、生成物を０．４トルで１日乾燥させたところ、２５（５８４．３ｇ、９８％）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １．５４（Ｓ，４Ｈ）、１．７１（Ｓ，３Ｈ）、２．２２（ｔ，２Ｈ）、３．５４（ｍ，１Ｈ）、３．８１（ｍ，１Ｈ）、４．３９（ｍ，２Ｈ）、４．４８（ｍ，２Ｈ）、４．７４（ｄ，１Ｈ）、５．３７（ｄｄ，１Ｈ）、５．７６（ｄ，１Ｈ）、７．４０（ｔ，２Ｈ）、７．５０（ｔ，２Ｈ）、７．５８（ｍ，３Ｈ）、７．６５（ｔ，１Ｈ）、７．７３（ｍ，３Ｈ）、７．９２（ｔ，４Ｈ）、８．１１（ｄ，２Ｈ）、１２．１１（ｓ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ２１．０、２２．６、２８．３、３３．２、４９．７、６２．０、６７．９、６８．４、７０．０、７１．８、１００．８、１２８．５、１２８．６、１２８．９、１２９．０、１２９．１、１３３．４、１３３．６、１６４．８、１６５．１、１６９．３、１７４．３。ＬＣ−ＭＳ：６３４（Ｍ＋１）＋。
【０１３４】
化合物２５（Ｒ＝Ａｃ）の合成
ステップ（ｖ）［１］：化合物２４（１２．７０ｇ、３８ｍｍｏｌ）を、メタノール（５０ｍＬ）および水（５ｍＬ）中のＮａＯＨ（１．８８ｇ、４７ｍｍｏｌ）の溶液に溶解させ、混合物を一晩撹拌し、酢酸（０．５１ｍＬ、９ｍｍｏｌ）で中和し、無水エタノール（２００ｍＬ）で希釈し、蒸発させて乾燥させた。０．４トルで一晩乾燥させた後、１５．３８ｇの白色の発泡体が得られ、それを１５０ｍＬの無水ピリジン、続いて、無水酢酸（３０ｍＬ、１５２ｍｍｏｌ）で研和した。混合物を３０℃で一晩撹拌し、０℃に冷却し、水（１４ｍＬ）を加えた。冷却浴を除去し、混合物を室温で１時間撹拌し、溶媒の大部分を真空中で除去し、残渣を、飽和塩水（１５０ｍＬ）と酢酸エチル（１００ｍＬ）とに分液し、有機層を分離し、２０％のリン酸と２０％の塩水との混合物（１：１、２５０ｍＬ）、飽和塩水で３回洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、真空中で蒸発させた。残渣を、ｎ−ブタノール（３回）、続いて、ＡＣＮ（３回）と同時蒸発させたところ、１４．４６ｇ（８３％）の２５が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １．５４（Ｓ，４Ｈ）、１．７１（Ｓ，３Ｈ）、２．２２（ｔ，２Ｈ）、３．５４（ｍ，１Ｈ）、３．８１（ｍ，１Ｈ）、４．３９（ｍ，２Ｈ）、４．４８（ｍ，２Ｈ）、４．７４（ｄ，１Ｈ）、５．３７（ｄｄ，１Ｈ）、５．７６（ｄ，１Ｈ）、７．４０（ｔ，２Ｈ）、７．５０（ｔ，２Ｈ）、７．５８（ｍ，３Ｈ）、７．６５（ｔ，１Ｈ）、７．７３（ｍ，３Ｈ）、７．９２（ｔ，４Ｈ）、８．１１（ｄ，２Ｈ）、１２．１１（ｓ，１Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ２１．０、２２．６、２８．３、３３．２、４９．７、６２．０、６７．９、６８．４、７０．０、７１．８、１００．８、１２８．５、１２８．６、１２８．９、１２９．０、１２９．１、１３３．４、１３３．６、１６４．８、１６５．１、１６９．３、１７４．３。ＬＣ−ＭＳ：６３４（Ｍ＋１）＋。
【０１３５】
化合物２９の合成
ステップ（ｖｉｉ）［１］：化合物７（１０９０ｇ、１．９３６ｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１１７０ｇ、８．６６７ｍｏｌ）を、アルゴン下で、オーバーヘッド撹拌機を備えた２２Ｌのフラスコに取り込んだ。４ＬのＤＣＭおよび２ＬのＤＭＦを、撹拌しながら加え、混合物を氷水混合物中で約１０℃に冷却した。２ＬのＤＣＭ中のモノｂｏｃプロピルアミン２１（１２６５ｇ、７．２６０ｍｏｌ）の溶液を、撹拌しながら上記の溶液に加えた。ゆっくりと全ての試薬を溶液に入れた。４ＬのＤＣＭ中のＥＤＡＣ．ＨＣｌ（１４３９ｇ、７．２６０ｍｏｌ）のスラリーを、約１０℃の温度を維持しながら、反応混合物にゆっくりと加えた。ＤＩＥＡ（２．４０Ｌ、１３．５５ｍｏｌ）を、１．５時間の期間にわたってゆっくりと加えた。反応混合物をアルゴン下で一晩撹拌し続けた。ＴＬＣを確認し、反応混合物をロータリーエバポレータ漏斗に移し、揮発物を減圧下で除去した。フラスコをフードに移し、１０Ｌの水を、撹拌しながら残渣に加え、混合物を一晩沈降させた。２つの層を一晩分離し、上層をデカントした。底層を８ＬのＥｔＯＡｃに溶解させ、分液漏斗に移し、水（２×４Ｌ）、ＮａＨＣＯ３水溶液（２．５Ｌ）および１０％のクエン酸水溶液（２×３．５Ｌ）および水（１×４Ｌ）および飽和塩水（２．５Ｌ）で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、トルエンおよびジクロロメタンと同時蒸発させ、高真空下で乾燥させた（収量２０２６ｇ、定量的）。ＬＣ−ＭＳ  Ｃ５０Ｈ９３Ｎ７Ｏ１５についての計算値、分子量：１０３１．６７；実測値１０３２．６（Ｍ＋Ｈ）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ  ７．７９（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．９４（ｓ，１Ｈ）、６．７２（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．６１〜３．４５（ｍ，５Ｈ）、３．０１（ｄｄ，Ｊ＝１２．８、６．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．８９（ｄｄ，Ｊ＝１２．７、６．５Ｈｚ、２Ｈ）、２．２６（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ、３Ｈ）、２．０３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、１．５５〜１．３８（ｍ，３Ｈ）、１．３６（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ、８Ｈ）、１．２１（ｓ，３Ｈ）。
【０１３６】
ステップ（ｖｉｉ）［２］：ステップ（ｖｉｉ）［１］からの化合物（５２ｇ、５０．４０ｍｍｏｌ）を、２０ｍＬのアニソールとともに１００ｍＬのＤＣＭに溶解させた。上記の混合物に、ＴＦＡ（２００ｍＬ）を加え、混合物を一晩撹拌した。溶媒を除去し、残渣をトルエン（２×１００ｍＬ）と同時蒸発させたところ、ゴム状の液体が得られた。この残渣をＭｅＯＨ（３０ｍＬ）に溶解させ、無水エーテルで沈殿させた。混合物を低温の部屋に一晩入れておき、沈降させ、デカントした。化合物を高真空下で乾燥させたところ、白色のふんわりした固体２９がそのＴＦＡ塩（収量５２．１０ｇ、９６％）として得られた。ＬＣ−  ＭＳ  Ｃ３５Ｈ６９Ｎ７Ｏ９についての計算値、分子量：７３１．５２；実測値７３２．５０（Ｍ＋Ｈ）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ  ８．０４（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．８２（ｓ，３Ｈ）、３．６５〜３．４２（ｍ，５Ｈ）、３．１８〜３．０２（ｍ，２Ｈ）、２．８４〜２．６９（ｍ，２Ｈ）、２．２８（ｄｔ，Ｊ＝１２．２、６．９Ｈｚ、２Ｈ）、２．０３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、１．７８〜１．５７（ｍ，２Ｈ）、１．５６〜１．３５（ｍ，１Ｈ）、１．２１（ｓ，３Ｈ）。
【０１３７】
化合物３０（Ｒ＝Ａｃ）の合成
アセテートのためのステップ（ｖｉｉｉ）［１］：ＤＣＭ（５００ｍＬ）中のＧａｌＮＡｃ酸２５−Ａｃ（５０．６５ｇ、１１３．２７ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（５２ｇ、１３６ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１９ｇ、１３５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＥＡ（５２ｍｌ、１０当量）を加え、混合物を１５℃で１０分間撹拌した。この混合物に、ＤＭＦ（１００ｍＬ）中のアミン２９（３２ｇ、２９．８０ｍｍｏｌ）の溶液を加え、混合物を４時間撹拌した。ＴＬＣを確認し、溶媒を除去した。残渣に水を加え、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を、水（２×２００ｍＬ）、重炭酸塩水溶液（１×２００ｍＬ）および塩水（２００ｍＬ）で洗浄し、有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を除去した。溶離剤としてＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ混合物を用いた短いシリカゲルカラムによって、粗生成物を精製したところ、化合物がオフホワイトの固体２６ａ（収量、４２．３ｇ、７０％）として得られた。ＭＡＬＤＩ−ＭＳ  Ｃ９２Ｈ１５０Ｎ１０Ｏ３９についての計算値  分子量：２０１９．０１；実測値２０４２．１０（Ｍ＋Ｎａ）。
【０１３８】
ベンゾエートのためのステップ（ｖｉｉｉ）［１］：
方法Ａ：ＤＣＭ（２００ｍＬ）中のＧａｌＮＡｃ酸２５−Ｂｚ（３５．８６ｇ、５６．６３ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（２８ｇ、７３．６１ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１１．４８ｇ、８４．９０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＥＡ（２６ｍｌ、１０当量）を加え、混合物を１５℃で１０分間撹拌した。この混合物に、ＤＭＦ（５０ｍＬ）中のアミン２９（１５．７０ｇ、１４．９０ｍｍｏｌ）の溶液を加え、混合物を４時間撹拌した。ＴＬＣを確認し、溶媒を除去した。残渣に水を加え、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を、水（２×１００ｍＬ）、重炭酸塩水溶液（１×１００ｍＬ）および塩水（１５０ｍＬ）で洗浄し、有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を除去した。溶離剤としてＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ混合物を用いた短いシリカゲルカラムによって、粗生成物を精製したところ、化合物がオフホワイトの固体２６ｂ（収量、２５．２０ｇ、６７％）として得られた。ＭＡＬＤＩ−ＭＳ  Ｃ１３７Ｈ１６８Ｎ１０Ｏ３９についての計算値、分子量：２５７７．１５；実測値３０００．１０（Ｍ＋Ｎａ）。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ  ８．０４〜７．８０（ｍ，１Ｈ）、７．７９〜７．３３（ｍ，２Ｈ）、６．９６（ｓ，１Ｈ）、５．７４（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ、１Ｈ）、５．３６（ｄｄ，Ｊ＝１１．１、３．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．７３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．５５〜４．１９（ｍ，１Ｈ）、４．０１（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ、１Ｈ）、３．８６〜３．７３（ｍ，１Ｈ）、３．６４〜３．４５（ｍ，１Ｈ）、３．３１（ｓ，１Ｈ）、３．０２（ｄ，Ｊ＝５．０Ｈｚ、１Ｈ）、２．３６〜２．１５（ｍ，１Ｈ）、２．１３〜１．９９（ｍ，１Ｈ）、１．６９（ｓ，１Ｈ）、１．６１〜１．３５（ｍ，１Ｈ）、１．３１〜１．０２（ｍ，１Ｈ）。
【０１３９】
方法Ｂ：ＤＣＭ／ＤＭＦ（２：１）（２００ｍＬ）中のＧａｌＮＡｃ酸２５−Ｂｚ（３０．７８、４８．６２ｍｍｏｌ）、ＥＤＡＣ．ＨＣｌ（１０．７０ｇ、５４ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（９．１１ｇ、６７．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＥＡ（２４ｍｌ、１０当量）を加え、混合物を１５℃で１５分間撹拌した。この混合物に、ＤＭＦ（１００ｍＬ）中のアミン２９Ａ（１４．５０ｇ、１３．５０ｍｍｏｌ）の溶液を加え、混合物を一晩撹拌した。ＴＬＣを確認し、溶媒を除去した。残渣に水を加えたところ、化合物が沈殿した。沈殿した残渣をＥｔＯＡｃに溶解させ、有機層を、水（２×２００ｍＬ）、重炭酸塩水溶液（１×２００ｍＬ）、５％のリン酸（１×２００ｍＬ）および塩水（１５０ｍＬ）で洗浄し、有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を除去した。溶離剤としてＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ混合物を用いた短いシリカゲルカラムによって、粗生成物を精製したところ、化合物がオフホワイトの固体２６ｂ（収量、３０．１０ｇ、８７％）として得られた。ＭＡＬＤＩ−ＭＳ  Ｃ１３７Ｈ１６８Ｎ１０Ｏ３９についての計算値、分子量：２５７７．１５；実測値３０００．１０（Ｍ＋Ｎａ）。
【０１４０】
ステップ（ｖｉｉｉ）［２−４］：エステル２６ａからの三本鎖（ｔｒｉａｎｔｅｎｎａｒｙ）ＧａｌＮＡｃ酸３０
【化３８】
2020109124.tif 000039
０℃で、無水メタノール（２０ｍＬ）中の三本鎖エステル２６ａ（１０．２ｇ、５ｍｍｏｌ）の溶液に、Ａｒ雰囲気下で、ＮａＯＭｅ（５．７ｍＬ、２５ｍｍｏｌ）の２５重量％の溶液を加えた。混合物を５分間撹拌し、粘性の油状の残渣が得られるまで真空中で蒸発させ、それを１５ｍＬのメタノールおよび２ｍＬの水に再溶解させた。混合物を室温で一晩撹拌し、トリエチルアミン塩酸塩（３．４４ｇ、２５ｍｍｏｌ）で中和し、無水ピリジン（６０ｍＬ）で希釈した。粘性の油状の残渣が得られるまで溶媒を蒸発させ、それをＡｒ雰囲気下で無水ＤＭＦ（３０ｍＬ）に再溶解させ、溶液を、カニューレを介して、ピリジン（３２ｍＬ）と無水酢酸（１８．９ｍＬ、２００ｍｍｏｌ）との激しく撹拌された混合物に移した。混合物を室温で一晩撹拌し、０℃に冷却し、水（１１ｍＬ）を加えた。混合物を室温で０．５時間撹拌し、粘性の油状の残渣が得られるまで４５℃で蒸発させた。残渣を、水（１０ｍＬ×２）、続いて、ｎ−ブタノール（１００ｍＬ×２）と同時蒸発させたところ、１５．０ｇの残渣が得られた。これを酢酸エチル−イソプロパノール（５：１、１５０ｍＬ）に溶解させ、酢酸エチル中の２％のＴＥＡで非活性化されたシリカゲル（４５ｇ）を含むろ過カラムに充填した。ろ過カラムを、１５０ｍＬのそれぞれ：酢酸エチル−イソプロパノール（５：１、×２）、酢酸エチル−メタノール（５：１、×２）、（２：１、×２）、および（１：１、×２）で溶出した。生成物を含有する画分を収集し、真空中で蒸発させ、残渣をＡＣＮ（３０ｍＬ）に再溶解させ、セライトに通してろ過し、蒸発させた。生成物を０．４トルで一晩乾燥させたところ、９．４５ｇ（９４％）の３０−Ａｃが得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ  １．２１〜１．１５（ｍ，１２Ｈ）、１．４９〜１．４６（ｍ，２２Ｈ）、１．７６（ｓ，９Ｈ）、１．８８（ｓ，９Ｈ）、１．９８（ｓ，１２Ｈ）、２．０１（ｍ，９Ｈ）、２．０９（ｓ，９Ｈ）、２．２１（ｔ，２Ｈ）、２．２７（ｔ，６Ｈ）、２．９（ｍ，１Ｈ）、３．０２（ｍ，１４Ｈ）、３．５２（ｍ，１２Ｈ）、３．７０（ｍ，１０Ｈ）、３．８８（ｑ，３Ｈ）、４．０（ｓ，９Ｈ）、４．１（ｍ，１Ｈ）、４．４８（ｄ，３Ｈ）、４．７〜４．５（ｍ，１Ｈ）、４．９８（ｄ，３Ｈ）、５．２１（ｄ，３Ｈ）、６．８４（ｍ，４Ｈ）、７．０２（ｓ，１Ｈ）、７．１７（ｍ，５Ｈ）、７．２８（ｍ，４Ｈ）、７．７９（ｍ，３Ｈ）、７．８８（ｍ，６Ｈ）。ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：２４２９（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０１４１】
ステップ（ｖｉｉｉ）［２−４］：エステル２６ｂからの三本鎖ＧａｌＮＡｃ酸３０
【化３９】
2020109124.tif 000040
０℃で、無水メタノール（６０ｍＬ）中の三本鎖エステル２６ｂ（１３．５ｇ、５．２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ａｒ雰囲気下で、ＮａＯＭｅ（１．２ｍＬ、５．２ｍｍｏｌ）の２５重量％の溶液を加えた。冷却浴を除去し、混合物を室温で１時間撹拌し、トリエチルアミン塩酸塩（０．８５ｇ、６．２ｍｍｏｌ）で中和し、真空中で蒸発させ、残渣を、１％のＮａＣｌ水溶液（７０ｍＬ）と酢酸エチル（４０ｍＬ）とに分液した。水層を分離し、４０ｍＬの酢酸エチルで洗浄し、約６０ｍＬの溶液が残るまでロータリーエバポレータで真空にかけた。ＮａＯＨ（０．６４ｇ、１６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で一晩撹拌し、トリエチルアミン塩酸塩（２．４８ｇ、１８ｍｍｏｌ）で中和し、６０ｍＬのピリジンで希釈し、粘性の油状の残渣が得られるまで溶媒を真空中で蒸発させ、それをさらなる６０ｍＬのピリジンと同時蒸発させ、６０ｍＬのピリジンに再度溶解させた。沈殿物をろ過し、ピリジンで洗浄し、組み合わされたろ液を真空中で蒸発させ、４ミリバール／３０℃で３時間乾燥させたところ、１１．０６ｇの残渣が得られた。それをＡｒ雰囲気下で無水ピリジン（４０ｍＬ）に溶解させ、溶液を、カニューレを介して、ピリジン（５０ｍＬ）と無水酢酸（２５ｍＬ、２６０ｍｍｏｌ）との激しく撹拌された混合物に移した。混合物を室温で一晩撹拌し、０℃に冷却し、水（３０ｍＬ）を加えた。混合物を室温で０．５時間撹拌し、粘性の油状の残渣が得られるまで４５℃で蒸発させ、それを４ミリバール／４５℃で１．５時間乾燥させた。残渣を、酢酸エチル（５０ｍＬ）と、イソプロパノール（１５ｍＬ）と、２５％の塩化ナトリウム（５０ｍＬ）との撹拌された混合物に溶解させ、トリエチルアミンを一定のｐＨ＝７になるまで滴下して加え（８ｍＬ）、液体を、固体ＮａＣｌから分液漏斗へとデカントした。有機層を分離し、２５％のＮａＣｌ（５０ｍＬ）、飽和ＮａＣｌ（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を蒸発させ、残渣を、ＡＣＮと（２回）同時蒸発させ、０．４トルで一晩乾燥させたところ、９．９５ｇ（９６％）の３０が得られた。
【０１４２】
実施例５−固体に担持されたＧａｌＮＡｃモノマー３２の合成
【化４０】
2020109124.tif 000041
試薬および条件：（ｉ）ＥＤＣ．ＨＣｌ、ＤＩＥＡ、ＨＯＢｔ／ＤＣＭ−ＤＭＦまたはＨＢＴＵ、ＤＩＥＡ／ＤＣＭ−ＤＭＦまたはＨＢＴＵ、ＤＩＥＡ、ＨＯＢｔ／ＤＣＭ−ＤＭＦまたはＥＤＣ．ＨＣｌ、ＤＩＥＡ、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドまたはＥＤＣ．ＨＣｌ、ＤＩＥＡ、ペンタフルオロフェノールまたはＤＣＣ、ＤＭＡＰ／ＤＣＭ−ＤＭＦまたはアミド化／エステル化のための任意の他のカルボン酸活性剤；（ｉｉ）（１）．無水コハク酸、ＤＭＡＰまたは無水コハク酸および任意の固体担体に固定されたＤＭＡＰまたは無水コハク酸、ピリジンまたは無水コハク酸およびＤＩＥＡまたは無水コハク酸およびＥＴ３Ｎおよび（ｉｉ）（２）ステップ（ｉ）およびヒドロキシまたはアミノ官能化固体担体（例えば、制御多孔質ガラスまたは任意のポリマー担体）
【０１４３】
三本鎖誘導体３１（Ａｃ）：
ステップ（ｉ）：無水ＤＣＭ（５０ｍＬ）中の三本鎖酸３０（５．００ｇ、２．５ｍｍｏｌ）、ヒドロキシプロリノール誘導体５（１．１７ｇ、２．８ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１．１４ｇ、３．０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１．０１ｇ、７．５ｍｍｏｌ）の撹拌された混合物に、ＤＩＥＡ（１．３ｍＬ、７．５ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を一晩撹拌し、水（６０ｍＬ）でクエンチし、有機層を分離し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、蒸発させたところ、９．２１ｇの残渣が得られた。それを、酢酸エチル（８０ｍＬ）とＤＣＭ（３０ｍＬ）との混合物に溶解させ、酢酸エチル中の２％のＴＥＡで非活性化されたシリカゲル（２０ｇ）を含むろ過カラムに充填した。ろ過カラムを、９０ｍＬのそれぞれ：酢酸エチル−ＴＥＡ（２％）（×６）、酢酸エチル−メタノール（１０：１、×１）、および（３：１、×３）で溶出した。生成物を含有する画分を収集し、真空中で蒸発させ、残渣を、ＡＣＮと（２回）同時蒸発させた。生成物を０．４トルで一晩乾燥させたところ、４．７７ｇ（８０％）の３１（Ａｃ）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ  １．２１〜１．１５（ｍ，１２Ｈ）、１．４９〜１．４６（ｍ，２２Ｈ）、１．７６（ｓ，９Ｈ）、１．８８（ｓ，９Ｈ）、１．９８（ｓ，１２Ｈ）、２．０１（ｍ，９Ｈ）、２．０９（ｓ，９Ｈ）、２．２１（ｔ，２Ｈ）、２．２７（ｔ，６Ｈ）、２．９（ｍ，１Ｈ）、３．０２（ｍ，１４Ｈ）、３．５２（ｍ，１２Ｈ）、３．７０（ｍ，１０Ｈ）、３．８８（ｑ，３Ｈ）、４．０（ｓ，９Ｈ）、４．１（ｍ，１Ｈ）、４．４８（ｄ，３Ｈ）、４．７〜４．５（ｍ，１Ｈ）、４．９８（ｄ，３Ｈ）、５．２１（ｄ，３Ｈ）、６．８４（ｍ，４Ｈ）、７．０２（ｓ，１Ｈ）、７．１７（ｍ，５Ｈ）、７．２８（ｍ，４Ｈ）、７．７９（ｍ，３Ｈ）、７．８８（ｍ，６Ｈ）。ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：２４２９（Ｍ＋Ｎａ）＋。
【０１４４】
ステップ（ｉｉ）［１］−Ａｃ：
【０１４５】
【表１】
2020109124.tif 000042
【０１４６】
ＤＣＭ中のステップ（ｉ）からの化合物の溶液を、周囲温度で、窒素雰囲気下で、２Ｌの丸底フラスコ中で調製した。この溶液に、１０分間の間にトリエチルアミンを加えた。次に、無水コハク酸をそれに加えた後、周囲温度でＰＳ−ＤＭＡＰを加えた。それを周囲温度で１２時間撹拌した（ＴＬＣおよびＨＰＬＣ）。反応塊をセライト床に通してろ過し、ＤＣＭ（５００ｍｌ）で洗浄した。次に、有機層をＤＣＭ（１Ｌ）で希釈し、水（３×４５００ｍｌ）で洗浄した。炭（７．５ｇ）を有機層に加え、１５分間撹拌した。次に、それをセライト床に通してろ過し、ＤＣＭ（５００ｍｌ）で洗浄した。ろ液を無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、３０℃で、減圧下で蒸発させたところ、化合物がオフホワイトの固体１４０ｇ（８６％）として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ  １．２１（ｍ，１２Ｈ）、１．４７〜１．５１（ｍ，２２Ｈ）、１．７８（ｓ，９Ｈ）、１．８９（ｓ，９Ｈ）、１．９９（ｓ，９Ｈ）、２．０５（ｍ，８Ｈ）、２．１０（ｓ，９Ｈ）、２．２９（ｍ，３Ｈ）２．３６（ｍ，６Ｈ）、２．３９（ｑ，２Ｈ）、２．４２（ｑ，２Ｈ）、３．０４（ｍ，１４Ｈ）、３．４２（ｑ，４Ｈ）、３．５３（ｍ，１２Ｈ）、３．７（ｍ，１０Ｈ）、３．８７〜３．９０（ｑ，３Ｈ）、４．０３（ｓ，９Ｈ）、４．２（ｍ，１Ｈ）、４．４９〜４．５２（ｄ，３Ｈ）、４．９７〜４．９９（ｄ，３Ｈ）、５．２２（ｓ，３Ｈ）、５．３５（ｓ，１Ｈ）、６．８７（ｍ，４Ｈ）、７．０２（ｓ，１Ｈ）、７．１７（ｍ，５Ｈ）、７．２８（ｍ，４Ｈ）、７．７９（ｍ，３Ｈ）、７．８８（ｍ，６Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−Ｄ６）：δ  １０．５１、２０４２、２１．８４、２２．７１、２４．４８、２５．３４、２８．５４、２８．８８、２８．９９、２９．２９、２９．７２、３０．３０、３３．１０、３４．０７、３５．０４、３６．０２、３６．２６、３６．３４、４５．３７、４９．３８、５２．３４、５４．９８、５９．４８、６１．４１、６３．２４、６６．６９、６７．３１、６８．２７、６８．６４、６９．８３、７０．５０、７２．５８、８５．２９、１００．９８、１１３．１１、１２６．６１、１２７．５８、１２７．８０、１２９．６１、１３５．７４、１５８．０３、１６９．５０、１６９．６６、１６９．９５，１７０．０２、１７０．２４、１７２．０９、１７２．５１、１７２．６３、１７４．３５。ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：２５２９（Ｍ＋Ｎａ）。
【０１４７】
ステップ（ｉｉ）［１］−Ｂｚ：
【０１４８】
【表２】
2020109124.tif 000043
【０１４９】
ステップ（ｉ）からの化合物−ＢｚをＤＣＭおよびトリエチルアミンに溶解させた。この溶液に無水コハク酸およびＰＳ−ＤＭＡＰを加え、溶液を４８時間撹拌した。混合物をろ過し、水および塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去したところ、化合物がオフホワイトの固体（８９．２３ｇ、９５％）として得られた。ＭＡＬＤＩ−ＭＳ計算値３０６４．３３；実測値３０８７．３０（Ｍ＋Ｎａ）。
【０１５０】
ステップ（ｉｉ）［２］：ＧａｌＮＡｃ固体担体３２（ＡｃまたはＢｚ）−ＣＰＧ、ポリスチレン−アミノ、ポリスチレン−アミノベースの担体）の合成のための一般的な方法。
ポリスチレンアミノベースの担体の例：ステップ（ｉｉ）［ｉ］からのスクシネート（３２．５０ｇ、１２．４６ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル（１０００ｍＬ）に取り込み、それに、ＨＢＴＵ（１１．８０ｇ、３１．１６ｍｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（１０ｍＬ、４当量）を加え、反応混合物を５分間混合した。アミノ末端ポリスチレン担体（１６０ｇ）を加え、混合物を室温で２４時間振とうした。それをろ過し、ＤＣＭ、１０％のＭｅＯＨ／ＤＣＭ、ＤＣＭおよびジエチルエーテルで連続して洗浄した。それを真空下で乾燥させ、充填量を確認した。乾燥された固体担体を、２５％のＡｃ２Ｏ／Ｐｙを用いて３時間キャッピングし、洗浄し、乾燥させたところ、所要の固体担体（１８６ｇ、６７μｍｏｌ／ｇの充填量）が得られた。
【０１５１】
ＧａｌＮＡｃスクシネートステップ（ｉｉ）［１）を異なる固体担体に充填するための反応条件
ステップ（ｉｉ）［２］：
【０１５２】
【表３】
2020109124.tif 000044
【０１５３】
ポリスチレン固体担体を作製するのに３つの異なる条件を試験し、結果を以下に示す。
【０１５４】
ヒドロキシル末端ポリスチレン担体へのＧａｌＮＡｃスクシネートステップ（ｉ）［１）の充填
上述されるのと同じプロトコルにしたがって、異なるヒドロキシル末端ポリマー担体を充填し、結果を以下に示す。
【０１５５】
【表４】
2020109124.tif 000045
【０１５６】
ヒドロキシル末端ポリスチレン担体へのＧａｌＮＡｃスクシネートステップ（ｉ）［１）の充填
上述されるのと同じプロトコルにしたがって、異なるヒドロキシル末端ポリマー担体を充填し、結果を以下に示す。
【０１５７】
【表５】
2020109124.tif 000046
【０１５８】
実施例６−ＤＭＴｒ−プロリノール７Ａの合成
【化４１】
2020109124.tif 000047
ステップ１．トランス−４−ヒドロキシプロリノール塩酸塩４Ａ：
【化４２】
2020109124.tif 000048
【０１５９】
【表６】
2020109124.tif 000049
【０１６０】
手順１：
ガス入口、温度計、還流冷却器および還流冷却器上に設置されたガス出口を備え、バブラーに連結された５Ｌのフラスコ中で反応を行った。ＭｅＯＨ（１６６ｍＬ、０．７２５ｍｏｌ）中のＮａＯＭｅの２５重量％の溶液を、Ａｒ雰囲気下で、無水ＭｅＯＨ（１．３Ｌ）中の１（１３１．６ｇ、０．７２５ｍｏｌ）の冷却（０℃）および撹拌された溶液に加えた後、約１．５時間にわたってＮａＢＨ４（９０．８ｇ、２．３９ｍｏｌ）を何回かに分けて加えた。最初の１／３の分量のボロヒドリドの添加の際に著しい発熱効果が観察され、反応温度を２０〜２５℃未満に維持するように添加の速度を調整した。氷水冷却浴を水道水冷却浴と交換し、水素発生が停止するまで（ガスバブラー監視）、温度を２０〜２５℃未満に維持しながら混合物を一晩撹拌した。反応混合物を０℃に冷却し；ジオキサン（３．２ｍｏｌ、８００ｍＬ）中のＨＣｌの４Ｍの溶液を加え（３０℃までの発熱）、冷却浴を除去し、混合物を室温で２時間撹拌した。反応混合物を微多孔性ガラスフィルタに通してろ過し、バルク結晶化が起こるまでろ液を減圧（８０ミリバール、３０℃）下で蒸発させた（約２Ｌの溶媒が除去された）。乾燥ＭｅＣＮ（１．５Ｌ）を加え、混合物をロータリーエバポレータ（２０℃、２時間）で研和し、ろ過し、結晶性残渣をＭｅＣＮで１回洗浄し、窒素をゆっくりと流しながら、一晩乾燥させたところ、９３．０ｇ（８４％）の純粋な４Ａが得られた。さらなる分量の１１．０ｇ（９％）の４Ａが、母液からゆっくりと沈殿し、これは、ＮＨ４Ｃｌおよび他の少量の不純物で汚染されていた。１Ｈ  ＮＭＲ（Ｄ２Ｏ）：１．９４〜２．０１（ｍ，１Ｈ）、２．１４〜２．１９（ｍ，１Ｈ）、３．３０〜３．４８（ｍ，２Ｈ）、３．７１〜３．７６（ｍ，１Ｈ）、３．９３〜４．０８（ｍ，２Ｈ）、４．６７〜４．７５（ｍ，１Ｈ）。
【０１６１】
手順２：
上記の手順をより大きい規模で最適化するために、１から４Ａへの転化を、３モルの規模で行い、この手順を以下に示す。
【０１６２】
【表７】
2020109124.tif 000050
【０１６３】
トランス−４−ヒドロキシプロリンメチルエステル塩酸塩（１、５４４．８６ｇ、３ｍｏｌ）を、温度計、還流冷却器および固体添加漏斗を備えた２０Ｌのジャケット付きのガラス反応器に加え；固体を、Ａｒ雰囲気下で、無水メタノール（５Ｌ）に溶解させ、溶液を０℃に冷却した。ＭｅＯＨ（２５重量％、６８６ｍＬ、３ｍｏｌ）中のＮａＯＭｅの溶液を、一定の撹拌およびＡｒの一定の流れ下で低温の溶液に加えた後；約１．５時間にわたって固体添加漏斗に通してＮａＢＨ４（３００ｇ、２．６４ｍｏｌ）を何回かに分けて加えた。反応温度を２０〜２５℃未満に維持するように添加の速度を調整した。水素発生が停止するまで（ガスバブラー監視）、温度を２５〜３０℃に維持しながら、反応混合物を一晩撹拌した。混合物を再度５℃に冷却し；ジオキサン（１２ｍｏｌ、３Ｌ）中のＨＣｌの４Ｍの溶液を撹拌しながらゆっくりと加え；微多孔性ガラスフィルタに通してろ過し、ろ液を減圧下で蒸発させた（８Ｌの溶媒が除去され、生成物の初期結晶化が観察された）。無水ＭｅＣＮ（４Ｌ）をスラリーに加え、混合物を室温で撹拌し；ろ過し、結晶性生成物をＭｅＣＮ（１Ｌ）で１回洗浄し、真空オーブン中４０℃で一晩乾燥させたところ、４２３．０ｇ（９２％）の４Ａが得られた。しかしながら、生成物のＮＭＲ分析により、未反応のエステル１（＜５％）の存在が示された。固体生成物を高温のメタノール（８００ｍＬ）に溶解させ、高温でろ過して、非溶解固体（おそらくＮａＣｌ）を除去した。透明のろ液を４ＬのＥｔＯＡｃで希釈し、溶液を氷浴上で冷却した。結晶化された生成物をろ過した後、乾燥したところ、純粋な生成物４Ａ（第１の生成物２７０ｇ＋第２の生成物６１ｇ＝合計３３１ｇ、７２％）が白色の結晶性固体として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ９．４８（ｓ，１Ｈ）、８．７５（ｄ，Ｊ＝１８７．３Ｈｚ、１Ｈ）、５．３４（ｄｄ，Ｊ＝１６．９、１１．７Ｈｚ、２Ｈ）、４．３７（ｓ，１Ｈ）、３．８３〜３．５９（ｍ，２Ｈ）、３．６１〜３．４２（ｍ，１Ｈ）、３．１５（ｔ，Ｊ＝２６．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．０１（ｔ，Ｊ＝２１．２Ｈｚ、１Ｈ）、１．９８〜１．６１（ｍ，２Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１２６ＭＨｚ、ＤＭＳＯ  ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ９４．２７、６８．７７、５９．８９、５９．８６、５９．６８、５２．４２、５２．３５、３５．３９。
【０１６４】
実施例７−化合物５Ａの合成
【化４３】
2020109124.tif 000051
【０１６５】
【表８】
2020109124.tif 000052
【０１６６】
氷浴上でオーバーヘッド撹拌機を備えた五つ口の１５Ｌのガラス反応器中で反応を行った。アセトニトリル（８Ｌ）中の４Ａ（４５０ｇ、２．９４ｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｅｔ３Ｎ（１Ｌ、７．２ｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸エチル（１０００ｇ、７．０４ｍｏｌ）を加え、室温で一晩撹拌した。白色の固体（Ｅｔ３Ｎ．ＨＣｌ）を焼結式漏斗でろ過し、ＥｔＯＡｃ（４Ｌ）で洗浄した。有機溶液を濃縮した後、トルエン（２×２Ｌ）と同時蒸発させ、２２Ｌのロータリーエバポレータ中で、減圧下で一晩乾燥させたところ、粗製の５Ａがゴム状の塊（約６００ｇ）として得られた。このように得られた化合物５Ａは、さらに精製せずに次のステップに使用され得る。
【０１６７】
実施例８−化合物７Ａの合成
【０１６８】
【化４４】
2020109124.tif 000053
【０１６９】
【表９】
2020109124.tif 000054
【０１７０】
氷浴上でオーバーヘッド撹拌機を備えた、窒素下の五つ口の１５Ｌのガラス反応器中で反応を行った。粗化合物５Ａ（２．９４ｍｏｌ）を２Ｌの無水ピリジンに溶解させ、１５Ｌのフラスコに移した。さらに６Ｌの無水ピリジンを加えた。この溶液を氷浴上で約５℃に冷却した後、ＤＭＴｒ−Ｃｌ（１０００ｇ、２．９５ｍｏｌ）を、２０分間にわたって窒素雰囲気下で何回かに分けて加え、反応混合物を室温で一晩撹拌した。反応の完了をＴＬＣによって確認した。水（１２Ｌ）を、撹拌しながら加え、それを６時間静置させた。化合物は、褐色がかったゴム状の塊としてフラスコの底に沈降した。水−ピリジン層を、移送ポンプを用いてデカントし、水層を、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ、２×５Ｌ）で抽出した。水層をデカントした後、粘性の材料と組み合わされたＥｔＯＡｃ抽出物が、反応器中に残った。溶媒の濃縮により、化合物６Ａが粘性油として得られ、それを精製せずに次のステップに使用した。
【０１７１】
反応（ＴＦＡ脱保護）を、オーバーヘッド撹拌機を備えた五つ口の１５Ｌのガラス反応器中で行った。ＭｅＯＨ（５Ｌ）中の６Ａ（２．９４ｍｏｌ）の撹拌溶液に、２Ｌの水中のＫＯＨ（３３０ｇ、５．８８ｍｏｌ）を、３０分間にわたって滴下して加え、室温で１時間撹拌した。反応混合物を減圧下で３Ｌの体積になるまで濃縮し；１５Ｌの水を濃縮物に加え、一晩静置させた。生成物が、赤褐色の粘性油として底に沈降した。移送ポンプを用いて水層をデカントし、６Ｌのジクロロメタン（ＤＣＭ）を加えて、沈降した生成物を溶解させ、５Ｌの水で洗浄し、有機溶媒を分離した。溶媒の濃縮の後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（４Ｋｇのシリカ、溶離剤：ヘキサン／酢酸エチルおよび酢酸エチル／ＭｅＯＨ、詳細については以下の表を参照）精製により、化合物７Ａ（１０００ｇ、化合物４Ａから８１％）が泡状の黄白色の固体として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：１．３５〜１．４２（ｍ，１Ｈ）、１．６５〜１．７０（ｍ，１Ｈ）、２．３３（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、２．５９〜２．６２（ｍ，１Ｈ）、２．７２〜２．７５（ｍ，１Ｈ）、２．８２〜２．９１（ｍ，２Ｈ）、３．３６〜３．４１（ｍ，１Ｈ）、３．７１（ｓ，６Ｈ）、４．１（ｂｒ  ｓ，１Ｈ）、４．５２５（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ、１Ｈ）。
【０１７２】
実施例９−ＢｚＧａｌＮＡｃ  Ｃ５酸１３Ｂの合成
【化４５】
2020109124.tif 000055
ペンタアセチルＤ−（＋）−２−アミノガラクトース（９）
【０１７３】
【化４６】
2020109124.tif 000056
【０１７４】
【表１０】
2020109124.tif 000057
【０１７５】
無水ピリジン（７．２Ｌ）を、Ａｒ雰囲気下で、４０Ｌの反応器中で、無水酢酸（５．３Ｌ）中のＤ−（＋）−ガラクトサミン塩酸塩８（１．６３ｋｇ、７．５５ｍｏｌ）の撹拌および冷却された（氷浴）懸濁液に加えた。ＤＭＡＰ（７９ｇ）、およびトリエチルアミン（１．０５Ｌ、７．５５ｍｏｌ）を連続して加え、混合物を氷浴中で一晩撹拌し、その間、８の溶解の後、９およびトリエチルアミン塩酸塩の結晶化が、最初の２時間にわたって３０℃までの発熱効果を伴って起こった。混合物を焼結式ガラスフィルタに通してろ過し、残渣を、トルエン（約４Ｌ×２）、続いて、水（約３Ｌ×２）で洗浄した。結晶性残渣をガラスフィルタ上で一晩乾燥させ、乾燥皿に移し、２日間にわたって（７０℃のホットプレートで）空気中で乾燥させたところ、２．５３ｋｇ（８６％）の純粋な９が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ  ７．８８（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ、１Ｈ）、５．６３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ、１Ｈ）、５．２６（ｄ，Ｊ＝３．１Ｈｚ、１Ｈ）、５．０５（ｄｄ，Ｊ＝１１．３、３．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．３４〜３．８２（ｍ，４Ｈ）、２．１１（ｓ，３Ｈ）、２．０３（ｓ，３Ｈ）、１．９８（ｓ，３Ｈ）、１．９０（ｓ，３Ｈ）、１．７７（ｓ，３Ｈ）。
【０１７６】
メチル５−ヒドロキシペンタノエート１１Ａ
【０１７７】
【化４７】
2020109124.tif 000058
【０１７８】
【表１１】
2020109124.tif 000059
【０１７９】
アルゴンをゆっくりと流しながら、２０Ｌの回転蒸発フラスコ中で反応を行った。乾燥メタノール（４Ｌ）中のバレロラクトン（９８％の純度、ＴＣＩから購入した、１．０ｋｇ、１０ｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１４０ｍＬ、１ｍｏｌ）の溶液を室温で１時間撹拌し、その間、わずかな発熱効果（２８℃まで）が観察された。混合物を真空中で濃縮し（２５℃の加熱浴）、乾燥トルエン（４Ｌ）で希釈し、減圧下で蒸発させ、残渣を、４ミリバール／２５℃のロータリーエバポレータで乾燥させた後、高真空（０．４〜０．６トル、室温）下で一晩撹拌したところ、１１Ａが１％未満のトルエンを含有する無色の液体、１．３９ｋｇ（１００％）として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ３ＣＮ）δ  ３．６１（ｓ，３Ｈ）、３．４９（ｔ，Ｊ＝６．２Ｈｚ、２Ｈ）、２．５５（ｂｓ，１Ｈ）、２．３１（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ、２Ｈ）、１．６２（ｄｔ，Ｊ＝１４．９、７．１Ｈｚ、２Ｈ）、１．５５〜１．４２（ｍ，２Ｈ）。
【０１８０】
オキサゾリジン中間体１０（粗製）
【０１８１】
【化４８】
2020109124.tif 000060
【０１８２】
【表１２】
2020109124.tif 000061
【０１８３】
Ａｒ雰囲気下で、２０Ｌの反応器中で反応を行った。ＴＭＳＯＴｆ（１．４０Ｌ、７．７４ｍｏｌ）を、Ａｒ雰囲気下で、無水１，２−ジクロロエタン（ＤＣＥ、４．０Ｌ）中の９（２．５２ｋｇ、６．４９ｍｏｌ）の撹拌懸濁液にゆっくりと（１０分間）加えた。混合物を室温で一晩撹拌し、移送管路を介して、開放された４０Ｌの反応器中のＮａＨＣＯ３（１．６４ｋｇ、１９．４ｍｏｌ）と、氷（５．５Ｌ）と、水（５．５Ｌ）との激しく撹拌された混合物に移した。４０分間撹拌し続け、有機層を分離し、水層をジクロロメタン（ＤＣＭ０．５Ｌ×２）で洗浄し、組み合わされた有機抽出物を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。混合物をろ過し、溶媒を蒸発させ、油状の残渣を、ロータリーエバポレータ（３０℃で１５ミリバール）で乾燥させ、無水ＤＣＥ（４．０Ｌ）に再溶解させ、溶媒を再度蒸発させ、残渣をロータリーエバポレータ（３ミリバール、３０℃）で乾燥させたところ、２．１４ｋｇの粗製の１０が得られ、それを無水ＤＣＥ（４．０Ｌ）に再溶解させ、このように得られた溶液を次のステップに使用した。
【０１８４】
過アセチル化ＧａｌＮＡｃグリコシド１２Ａ（粗製）
【０１８５】
【化４９】
2020109124.tif 000062
【０１８６】
【表１３】
2020109124.tif 000063
【０１８７】
Ａｒ雰囲気下で、冷却ジャケットを備えた２０Ｌの反応器中で反応を行った。ＴＭＳＯＴｆ（２５０ｍＬ、１．３８ｍｏｌ）を、無水ＤＣＥ（６．５Ｌ）中の粗製の１０（２．１４ｋｇ、≦６．４９ｍｏｌ）およびメチル５−ヒドロキシペンタノエート（１１Ａ、０．９４Ｌ、７．１４ｍｏｌ）の撹拌および冷却された（１２℃）溶液に加えた。直後の発熱効果（２３℃まで）が観察され、冷却器をオフにし、混合物を室温で３時間撹拌し、ＮａＨＣＯ３（１６８ｇ、２．０ｍｏｌ）と、水（３Ｌ）と、いくらかの氷との激しく撹拌された混合物を含む２２Ｌの開放されたフラスコに移した。有機相を分離し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ；溶媒を蒸発させ、油状の残渣を、１２ミリバール／３０℃のロータリーエバポレータで乾燥させたところ、３．０９ｋｇの粗製の１２Ａが得られ、それをさらに精製せずに次のステップに使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）：δ  ５．７３（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ、１Ｈ）、５．３５（ｄ，Ｊ＝３．１Ｈｚ、１Ｈ）、５．２６（ｄｄ，Ｊ＝１１．２、３．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．６８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．３４（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．２１〜４．０４（ｍ，３Ｈ）、３．９３（ｔｄｄ，Ｊ＝１７．７、１１．１、７．０Ｈｚ、３Ｈ）、３．７２（ｓ，３Ｈ）、３．７０〜３．６２（ｍ，４Ｈ）、３．５７〜３．４１（ｍ，２Ｈ）、２．５５（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ、１Ｈ）、２．３２（ｄｔ，Ｊ＝２３．８、１１．７Ｈｚ、３Ｈ）、２．１８〜２．１１（ｍ，４Ｈ）、２．１１〜１．７８（ｍ，１４Ｈ）、１．７８〜１．４４（ｍ，５Ｈ）。
【０１８８】
脱保護されたＧａｌＮＡｃメチルエステル１２Ｂ
【０１８９】
【化５０】
2020109124.tif 000064
【０１９０】
【表１４】
2020109124.tif 000065
【０１９１】
加熱／冷却ジャケットを備えた２０Ｌのろ過反応器中で反応を行った。粗製の１２Ａ（３．０９ｋｇ、≦６．４９ｍｏｌ）を、Ａｒ雰囲気下で、無水メタノール（１０Ｌ）に溶解させ、トリエチルアミン（０．９０Ｌ、６．４９ｍｏｌ）を溶液に加え、撹拌しながら５０℃で２日間加熱した。反応混合物をトルエン（４Ｌ）で希釈し、溶液を一晩、室温に冷まし、その間にバルク結晶化が起こった。スラリーを０℃に冷却し、一晩撹拌し、ろ過し、固体をトルエン（８．８Ｌ）中の１０％のメタノールで洗浄し、（ホットプレート上で、６５℃で）空気中で乾燥させたところ、０．９７ｋｇの１２Ｂが得られた。バルク沈殿が開始するまで、ろ液を減圧下で濃縮した。乾燥エタノール（４．０Ｌ）を濃縮物に加え、得られたスラリーを、ロータリーエバポレータ上で、室温で一晩研和し、ろ過し、固体をトルエン−エタノール混合物（１：１、約２Ｌ）で洗浄したところ、（ホットプレート上で、６５℃で）空気中で乾燥させた後、さらなる１９１ｇの１２Ｂが得られた。全収量：１．１６ｋｇ、９を基準として５４％、約９５％の純度。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．５８（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ、１Ｈ）、４．６０〜４．４７（ｍ，２Ｈ）、４．４４（ｄ，Ｊ＝４．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．２０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、３．７７〜３．６０（ｍ，３Ｈ）、３．５６（ｓ，３Ｈ）、３．５４〜３．２１（ｍ，６Ｈ）、２．２８（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ、２Ｈ）、１．７８（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ、３Ｈ）、１．５９〜１．３６（ｍ，４Ｈ）。
【０１９２】
過ベンゾイル化ＧａｌＮＡｃグリコシド１２Ｃ
【０１９３】
【化５１】
2020109124.tif 000066
【０１９４】
【表１５】
2020109124.tif 000067
【０１９５】
グリコシド１２Ｂ（１．０６ｋｇ、３．１５ｍｏｌ、約９５％の純度）およびＤＭＡＰ（３８４ｇ、３．１５ｍｏｌ）を、Ａｒ雰囲気下で無水ピリジン（９．０Ｌ）に溶解させた。安息香酸無水物（２．４９ｋｇ、１１．０２ｍｏｌ）を加え、混合物を一晩撹拌し；水（２００ｍＬ）を反応混合物に加え、さらに０．５時間撹拌し続けた。ピリジンを減圧下で反応混合物から除去し、残渣を、１０ミリバール／３５℃のロータリーエバポレータで乾燥させた。固体が完全に溶解するまで、残渣を２０Ｌのロータリーエバポレータフラスコ中で水（２Ｌ）とＥｔＯＡｃ（４Ｌ）とに分液し、抽出容器に移し、さらなるＥｔＯＡｃ（８Ｌ）および水（５Ｌ）で希釈した。有機層を分離し、水（１０Ｌ）、飽和ＮａＨＣＯ３（２×５Ｌ）、および再度、水（２×５Ｌ）で連続して洗浄した。有機層を分離し、溶媒を、粘性の塊になるまで減圧下で蒸発させた。油状の残渣をエタノール（３．８Ｌ）に再溶解させ、減圧下で再度蒸発させた。このように得られた残渣を約２時間にわたって２０ミリバール／３５℃のロータリーエバポレータで乾燥させた。残渣を３５℃でエタノール（１０．６Ｌ）に再溶解させ、加熱／冷却ジャケットを備えた２０Ｌのろ過反応器に移した。水（６．０Ｌ）を３５℃で何度かに分けて加え、混合物を２２℃に冷まし、１２Ｃのシードを溶液に加えた。一晩撹拌した後、バルク結晶化が起こり；混合物を０℃に冷却し、さらに５時間撹拌し、ろ過した。一晩空気を通すことによって沈殿物を予備乾燥させ、乾燥皿に移し、一定の質量になるまで（２日間にわたってホットプレート上で、６５℃で）空気中で乾燥させたところ、１．７０ｋｇ（８４％）の１２Ｃ（約９７％の純度、約３％の対応するメチルグリコシドを含有する）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．０５〜７．８４（ｍ，１Ｈ）、７．７６〜７．３０（ｍ，２Ｈ）、５．７５（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ、１Ｈ）、５．３５（ｄｄ，Ｊ＝１１．１、３．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．７３（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．５４〜４．４１（ｍ，１Ｈ）、４．４１〜４．１８（ｍ，１Ｈ）、３．７９（ｄｄ，Ｊ＝１０．０、４．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．５６（ｓ，１Ｈ）、３．５５〜３．４７（ｍ，１Ｈ）、２．２９（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ、１Ｈ）、１．６９（ｓ，１Ｈ）、１．５５（ｄｄ，Ｊ＝１１．８、９．１Ｈｚ、１Ｈ）。
【０１９６】
ＢｚＧａｌＮＡｃ  Ｃ５酸ナトリウム塩１３Ｂ
【０１９７】
【化５２】
2020109124.tif 000068
【０１９８】
【表１６】
2020109124.tif 000069
【０１９９】
無水ＬｉＩ（「超乾燥（ｕｌｔｒａ−ｄｒｙ）」−Ａｌｆａ−Ａｅｓａｒ、１．４１ｋｇ、１０．５２ｍｏｌ）を、ガス入口、温度計、還流冷却器、および加熱マントルを備えた１２Ｌの四つ口フラスコ中で、Ａｒ雰囲気下で、無水ピリジン（４．５Ｌ）中のメチルエステル１２Ｃ（１．７０ｋｇ、２．６３ｍｏｌ）の撹拌溶液に、約３０分間にわたって何度かに分けて加えた。添加中、７０℃までの発熱効果が観察された。混合物を、穏やかな還流下（フラスコ中１２５℃）で２５時間にわたってさらに加熱し、室温に冷まし、水（１．５Ｌ）で希釈した。ピリジンを蒸発させ；油状の残渣を、１１ミリバール／３５℃のロータリーエバポレータで乾燥させ、再度、水（２Ｌ）で希釈し、蒸発させ、１０ミリバール／３５℃で３時間乾燥させた。残渣（４．８６ｋｇ）を、冷却された２０％のＨ３ＰＯ４（６Ｌ）と、水（２Ｌ）と、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン混合物（２：１、８Ｌ）とに分液した。有機相を分離し、水相を、ＥｔＯＡｃ−ヘキサン混合物（２：１、３×３Ｌ）で再度洗浄した。組み合わされた有機抽出物を、５％のＮａＣｌ水溶液（６Ｌ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。溶液（総体積約２０Ｌ）を乾燥剤からデカントし、２．５ｋｇのシリカゲル（６Ｌの焼結式ガラスフィルタ漏斗上でＥｔＯＡｃ−ヘキサン混合物（２：１）に湿式充填された）のプラグに通してろ過した。ろ液中の実質的な量の酸がＴＬＣによって観察されなくなるまで（４５Ｌ）、シリカゲルケーキをＥｔＯＡｃ−ヘキサン２：１混合物で洗浄した。組み合わされたろ液を蒸発させ、２０ミリバール／３５℃で乾燥させたところ、粗製の酸が軟質の発泡体（１．７８ｋｇ）として得られ、それをＥｔＯＡｃ（４Ｌ）およびヘキサン（２Ｌ）に溶解させた。トリエチルアミン（３８４ｍＬ、２．７６ｍｏｌ）、続いて、５％のＮａＣｌ溶液（２．３Ｌ）を加えた。酸１３Ｂのトリエチルアンモニウム塩を含有する底部の水層を分離し、有機層を、５％のＮａＣｌ（０．５Ｌ×２）で洗浄した後に廃棄した。生成物を組み合わされた水層からＥｔＯＡｃとイソプロパノールとの混合物（５：１、６Ｌ）中に抽出し；有機層を５％のＮａＣｌ（４Ｌ×３）、飽和ＮａＣｌ（１Ｌ×２）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。溶媒を減圧下で蒸発させ；残渣を２０ミリバール／３５℃のロータリーエバポレータで短時間乾燥させ、アセトニトリル（ＡＣＮ、６Ｌ）に溶解させた。溶液を焼結式ガラスフィルタに通して無機沈殿物からろ過し、蒸発させ、２０ミリバール／３０℃のロータリーエバポレータで短時間乾燥させ、ＡＣＮ（６Ｌ）に再溶解させ、再度蒸発させ、高真空下で乾燥させたところ、１．５８ｋｇ（９３％）の純粋なナトリウム塩１３Ｂが得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．５０（ｄ，Ｊ＝９．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．９０（ｄｄ，Ｊ＝１０．９、４．０Ｈｚ、４Ｈ）、７．８２〜７．２８（ｍ，１１Ｈ）、５．７５（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ、１Ｈ）、５．４６〜５．２６（ｍ，１Ｈ）、４．７５（ｄｄ，Ｊ＝３２．１、８．６Ｈｚ、１Ｈ）、４．５３〜４．２０（ｍ，４Ｈ）、３．７４（ｄｔ，Ｊ＝１１．１、５．７Ｈｚ、１Ｈ）、３．５４（ｄｔ，Ｊ＝１０．６、５．５Ｈｚ、１Ｈ）、���．０１〜１．８２（ｍ，２Ｈ）、１．７１（ｓ，３Ｈ）、１．６５〜１．３３（ｍ，４Ｈ）。
【０２００】
実施例９−トリス（ｔｅｒｔ−ブチル）−トリスアミン１７Ａの合成
（ｔｅｒｔ−ブチル−３，３’−（２−アミノ−２−（（３−ｔｅｒｔ−ブトキシ−３−オキソプロポキシ）メチル）プロパン−１，３−ジイル）ビス（オキシ）ジプロパノエート）
【０２０１】
【化５３】
2020109124.tif 000070
【０２０２】
【表１７】
2020109124.tif 000071
【０２０３】
ＴＲＩＳ（５００ｇ）およびＤＭＳＯ（８３０ｍＬ）を、アルゴン下で、氷水浴上で、オーバーヘッド撹拌機を備えた１２Ｌの四つ口フラスコに加えた。反応混合物を約１５℃に冷却し、混合物を約１０分間撹拌して、ＴＲＩＳを完全に溶解させた（または反応混合物が均一な溶液になるまで）。５ＭのＮａＯＨ（８３ｍＬ）を一度に加え、混合物を５分間撹拌した。アクリル酸ｔｅｒｔ−ブチル（２３００ｍＬ）を、１時間の期間にわたって一定の撹拌下でゆっくりと上記の混合物に加え、添加中、反応温度を約１５℃に維持した。混合物を周囲温度にゆっくりと温め、アルゴン下で２４時間撹拌し続けた。２４時間後の反応混合物のＴＬＣ（溶離剤：２％のＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ−塩基性ＫＭｎＯ４染色）および質量分析により、大幅に過剰な二付加生成物（二付加物）の存在（不完全なマイケル付加）が示された。
【０２０４】
反応を完了させるために、さらなる８３ｍＬの５ＭのＮａＯＨを反応混合物に加えた後、１５５０ｍＬのアクリル酸ｔｅｒｔ−ブチルを加えた。さらに２４時間撹拌し続けた。反応混合物をロータリーエバポレータに移し、フラスコを２ＬのＥｔＯＡｃで洗浄した。未反応のアクリル酸ｔｅｒｔ−ブチルを除去し、残渣を、トルエン（２×２Ｌ）と同時蒸発させた。得られた残渣を、ＥｔＯＡｃ（４Ｌ）に溶解させ、等体積の水で洗浄したところ、層は十分に分離せず、２Ｌの飽和塩水を混合物に加えると、有機相および水相を分離した。洗浄プロセスをもう１回繰り返した。第１の水層を２Ｌの酢酸エチルで洗浄し、組み合わされた有機層を、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を真空中で除去し、残渣（２．０２３Ｋｇ、粗重量）を、後述されるように、ろ過シリカゲルカラム、続いて、第２のカラムクロマトグラフィーによって精製した。
【０２０５】
ろ過カラムクロマトグラフィー：ヘキサン中の３Ｋｇのシリカゲルのスラリーを充填し、粗化合物を充填し、ヘキサン（４Ｌ）１：３のＥｔＯＡｃ／ヘキサン（４Ｌ）および１：１のＥｔＯＡｃ／ヘキサン（８Ｌ）およびＥｔＯＡｃ（１２Ｌ）中の２．５％のＭｅＯＨで連続して溶出した。二付加生成物（二付加物）を完全に除去した。所望の化合物１７Ａ（三付加物）を含有する全ての画分をプールし、蒸発させ（１５３０ｇ−粗重量）、第２のカラムクロマトグラフィー精製のために二等分した。
【０２０６】
１７Ａの最終的な精製：ろ過カラムからの残渣を、第２の精製のために二等分した。
【０２０７】
カラム条件：ろ過カラムからの約７６５ｇの粗生成物を、最小量のＥｔＯＡｃ／ヘキサンに溶解させ、ヘキサン中に充填された３Ｋｇのシリカゲル（３Ｋｇ）に充填した。ヘキサン（４Ｌ）、１：３のＥｔＯＡｃ／ヘキサン（４Ｌ）、３：７のＥｔＯＡｃ／ヘキサン（４Ｌ）、３：１のＥｔＯＡｃ／ヘキサン（４Ｌ）；およびＥｔＯＡｃ（１２Ｌ）中の２．５％のＭｅＯＨで連続して溶出した。
【０２０８】
カラムクロマトグラフィーを、同じ条件下で繰り返して、第２の分量から化合物１７Ａを単離した。プールされた純粋な画分を減圧下で蒸発させたところ、純粋な化合物１７Ａが粘性油（１０８７ｇ、５６％）として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ３．５４（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ、６Ｈ）、３．１６（ｓ，６Ｈ）、２．３８（ｔ，Ｊ＝６．０Ｈｚ、６Ｈ）、１．３９（ｓ，２７Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １７１．０６、８０．３０、７３．１３、６７．４６、５６．４２、４０．２１、４０．２１、３９．８９  ３９．５８、３６．５０、２８．４０。
【０２０９】
実施例１０−トリス（ｔｅｒｔ−ブチル）Ｃ１２メチルエステル１８Ａの合成
【０２１０】
【化５４】
2020109124.tif 000072
【０２１１】
【表１８】
2020109124.tif 000073
【０２１２】
化合物１７Ａ（１０８１ｇ、２．１３９ｍｏｌ）、モノメチルエステル１５Ａ（６５３ｇ、２．６７３ｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（４３３．５ｇ、３．２０９ｍｏｌ）を、アルゴン下で、オーバーヘッド撹拌機を備えた１２Ｌの四つ口丸底フラスコ中で、ＤＣＭ（６Ｌ）とＤＭＦ（１Ｌ）との混合物に溶解させた。ＥＤＡＣ．ＨＣｌ（５３１ｇ、２．６７３ｍｏｌ）を、一定の撹拌下で反応混合物に何度かに分けて加えた。反応混合物を１５分間（または反応混合物が均一な溶液になるまで）撹拌し、氷水浴上で約１０℃に冷却した。ＤＩＥＡ（１．１２Ｌ、６．４２ｍｏｌ）を、約１０℃の温度を維持しながら３０分間の期間にわたって加えた。反応混合物を周囲温度にゆっくりと温め、アルゴン下で２日間撹拌した。ＴＬＣ（溶離剤：３５％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン、塩基性ＫＭｎＯ４染色）を確認し、溶液を、２０Ｌのロータリーエバポレータに移し；溶媒および揮発物を減圧下で除去した。ジクロロメタンの大部分を除去した後、フラスコをフードに移し、オーバーヘッド撹拌機を装着した。水（１５Ｌ）を、撹拌しながら加えたところ、ゴム状の液体が分離した。上記の混合物を、周囲温度で一晩沈降させ続けた。上層をデカントし、粘性の底層を、８ＬのＥｔＯＡｃに溶解させ、水（２×４Ｌ）、１０％のクエン酸水溶液（２×３．５Ｌ）、ＮａＨＣＯ３水溶液（２×２．５Ｌ）、続いて、飽和塩水（２．５Ｌ）洗浄液で連続して洗浄した。有機層を分離し、硫酸ナトリウム上で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣を無水トルエン（２Ｌ）と同時蒸発させた。残渣を高真空下で一晩乾燥させたところ、化合物１８Ａが無色の粘性油（１６４１ｇ、定量的収率より７７ｇ多い−同じ量のＨＯＢｔおよびトルエンが存在していた）として得られ、それを精製せずに次の反応に使用した。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ６．８５（ｓ，１Ｈ）、３．５３（ｄｄ，Ｊ＝１２．９、６．９Ｈｚ、１６Ｈ）、３．３０（ｓ，１Ｈ）、２．４９（ｄｄ，Ｊ＝３．５、１．７Ｈｚ、２Ｈ）、２．３７（ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ、７Ｈ）、２．２６（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ、２Ｈ）、２．０２（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ、２Ｈ）、１．５６〜１．４４（ｍ，３Ｈ）、１．４４〜１．３４（ｍ，３２Ｈ）、１．２１（ｓ，１３Ｈ）。ＭＳ  Ｃ３８Ｈ６９ＮＯ１２についての計算値：７３１．４８；実測値７３２．３（Ｍ＋Ｈ）。
【０２１３】
実施例１１−トリカルボン酸Ｃ１２メチルエステル１９Ａの合成
【０２１４】
【化５５】
2020109124.tif 000074
【０２１５】
【表１９】
2020109124.tif 000075
【０２１６】
化合物１８Ａ（１５６０ｇ、２．１３４ｍｏｌ）を、アルゴン下で、オーバーヘッド撹拌機を備えた２２Ｌの四つ口丸底フラスコに投入した。ギ酸（１０Ｋｇ−８．２Ｌ）を反応フラスコに加え、全ての試薬を２０分以内に溶液に入れ、アルゴン下で２４時間撹拌した。ＴＬＣ（溶離剤：３５％のＥｔＯＡｃ／ヘキサン−塩基性ＫＭｎＯ４染色）により、不完全な反応および未反応の１８Ａの存在が示された。さらなる４．１Ｌのギ酸を加え、さらに２４時間撹拌し続けた。ＴＬＣおよび質量スペクトルにより、反応の完了が示され、混合物を２０Ｌのロータリーエバポレータに移し、揮発物を減圧下で除去した。ギ酸の除去の後、残渣を、トルエン（２×４．５Ｌ）と同時蒸発させた。ＥｔＯＡｃとヘキサンとの混合物（１：１、８Ｌ）を、ゆっくりと回転させながらロータリーエバポレータにおける回転フラスコに投入したところ、白色の固体が溶液から沈殿し、混合物を、ロータリーエバポレータでさらに２時間（自由流動性の固体が分離するまで）ゆっくりと回転させた。固体をろ過し、ＥｔＯＡｃ／ヘキサン（１：１、４Ｌ）、続いて、無水エーテル（４Ｌ）で洗浄した。固体をトレーに移し、一定重量に達するまで４５℃で空気乾燥させたところ、化合物１９Ａが白色の粉末（収量１０９６ｇ、９１％として得られた。
【０２１７】
酢酸エチルからの１９Ａの再結晶化により、微量の部分的に脱保護されたｔｅｒｔ−ブチルエステルを含まない生成物が得られた。１９Ａ（５．０ｇ）を還流された酢酸エチル（２５ｍＬ）に溶解させ、高温の透明な溶液を、残留固体を含有するフラスコからデカントした。フラスコを少量の酢酸エチルですすぎ、組み合わされたデカントされた溶液を一晩で室温に冷ました。沈殿物をろ過し、空気乾燥させたところ、４．７５ｇ（９５％）の１９Ａが得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １２．０８（ｂｓ，３Ｈ）、６．８９（ｓ，１Ｈ）、３．６５〜３．４３（ｍ，７Ｈ）、２．４１（ｄｔ，Ｊ＝１２．７、６．３Ｈｚ、３Ｈ）、２．２６（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ、１Ｈ）、２．０２（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、１．４４（ｄｄｄ，Ｊ＝１９．５、１３．３、６．７Ｈｚ、２Ｈ）、１．２１（ｓ，５Ｈ）。１３Ｃ  ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  １７３．４１、１７２．７０、１７２．５６、６８．２１、６６．７５、５９．５７、５１．１８、４０．１３、３９．９２、３９．７１、３９．５１、３９．３０、３９．０９、３８．８８、３５．９４、３４．６７、３３．３３、２８．９９、２８．９４、２８．８９、２８．７５、２８．５７、２８．５５、２５．３５、２４．５１。ＭＳ  Ｃ２６Ｈ４５ＮＯ１２についての計算値：５６３．２９；実測値５６４．３（Ｍ＋Ｈ）。
【０２１８】
実施例１２−トリス（Ｂｏｃアミン）メチルエステル２４Ａの合成
【０２１９】
【化５６】
2020109124.tif 000076
【０２２０】
【表２０】
2020109124.tif 000077
【０２２１】
トリカルボン酸１９Ａ（１０９０ｇ、１．９３６ｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１１７０ｇ、８．６６７ｍｏｌ）を、アルゴン下で、オーバーヘッド撹拌機を備えた２２Ｌの四つ口フラスコに取り込んだ。４ＬのＤＣＭおよび２ＬのＤＭＦを、一定の撹拌を行いながら混合物に加えた。反応混合物を、氷水浴上で約１０℃に冷却した。２ＬのＤＣＭ中のモノＢｏｃプロパンジアミン２１（１２６５ｇ、７．２６０ｍｏｌ）の溶液を、撹拌しながら溶液に加えた。反応物は、１５分間で均一になった。４ＬのＤＣＭ中のＥＤＡＣ．ＨＣｌ（１４４０ｇ、７．２６０ｍｏｌ）のスラリーを、反応混合物にゆっくりと加えた後、ＤＩＥＡ（２．４０Ｌ、１３．５５ｍｏｌ）を、１．５時間の期間にわたって、約１０℃の温度を維持しながら、アルゴン下でフラスコにゆっくりと加えた。溶液の色が薄い黄褐色になり；混合物をゆっくりと周囲温度に温め、アルゴン雰囲気下で一晩撹拌した。ＴＬＣ（溶離剤：１０％のＭｅＯＨ／ＤＣＭ、塩基性ＫＭｎＯ４染色）を確認し、反応混合物を２０Ｌのロータリーエバポレータに移し；ＤＣＭおよび揮発物を減圧下で除去した。フラスコをフードに移し、オーバーヘッド撹拌機を装着した。１０Ｌの水を、撹拌しながら残渣に加えて、乳状の溶液を形成した。混合物を一晩沈降させ続けた。２つの層を一晩分離し、移送ポンプを用いて上層をデカントした。底層を８ＬのＥｔＯＡｃに溶解させ、分液漏斗に移した。ＥｔＯＡｃ層を、水（２×４Ｌの水＋２Ｌの塩水）、ＮａＨＣＯ３水溶液（２．５Ｌ＋１Ｌの塩水）、１０％のクエン酸水溶液（２×３．５Ｌ＋１Ｌの塩水）、水（１×４Ｌ＋２Ｌの塩水）および飽和塩水（２．５Ｌ）で連続して洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を減圧下で除去した。残渣を、トルエン（２．５０Ｌ）およびジクロロメタン（６Ｌ）と連続して同時蒸発させた。残渣を高真空下で一晩乾燥させたところ、化合物２４Ａが淡黄色のゴム状の液体（２０２６ｇ、定量的収率より３０ｇ多い、少量のＨＯＢｔおよび水で汚染された）が得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．７９（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ、１Ｈ）、６．９４（ｓ，１Ｈ）、６．７２（ｔ，Ｊ＝５．３Ｈｚ、１Ｈ）、３．６１〜３．４５（ｍ，５Ｈ）、３．０１（ｄｄ，Ｊ＝１２．８、６．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．８９（ｄｄ，Ｊ＝１２．７、６．５Ｈｚ、２Ｈ）、２．２６（ｔ，Ｊ＝６．３Ｈｚ、３Ｈ）、２．０３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、１．５５〜１．３８（ｍ，３Ｈ）、１．３６（ｄ，Ｊ＝１０．７Ｈｚ、８Ｈ）、１．２１（ｓ，３Ｈ）。ＭＳ  Ｃ５０Ｈ９３Ｎ７Ｏ１５についての計算値：１０３１．６７；実測値１０３２．６（Ｍ＋Ｈ）。
【０２２２】
実施例１３−トリアミントリフルオロ酢酸塩２５Ａの合成
【０２２３】
【化５７】
2020109124.tif 000078
【０２２４】
【表２１】
2020109124.tif 000079
【０２２５】
前のステップからの化合物２４Ａ（１９９０ｇ、ゴム状の液体）を、ロータリーエバポレータフラスコ中で、４ＬのＤＣＭに溶解させた。混合物の重量を測定し、所要の量の溶液を、この反応のために別の２０Ｌのロータリーエバポレータフラスコに移した。ＤＣＭを減圧下で除去し、残渣を高真空下で一晩乾燥させた。一晩乾燥させた後、残渣２４Ａ（７５０ｇ、７２７ｍｍｏｌ）を、無水ＤＣＭ（２Ｌ）に溶解させ、アルゴン下で、オーバーヘッド撹拌機を備えた１２Ｌの四つ口フラスコに移した。ロータリーエバポレータフラスコを５００ｍＬのＤＣＭで洗浄し、その溶液も反応フラスコに移した。アニソール（２５０ｍＬ）を反応混合物に加えた後、撹拌しながらトリフルオロ酢酸（３．５Ｌ）を加えた。トリフルオロ酢酸の添加中、反応からの副生成物であるブチレンガスの遊離により強い発泡が起こった。反応混合物を周囲温度で一晩撹拌した。反応の完了を、ＭＳ分析によって監視した。混合物を２０Ｌのロータリーエバポレータフラスコに移し、揮発物を減圧下に置いた。残渣を無水トルエン（２×２Ｌ）と同時蒸発させたところ、薄茶色のゴム状の液体が得られた。フラスコをフードに移し、オーバーヘッド撹拌機に連結した。残渣を無水ＭｅＯＨ（１Ｌ）に溶解させ；無水エーテル（８Ｌ）を、一定の撹拌下で溶液に加えた。エーテルの添加中、溶液は乳状になり、ゴム状の塊がフラスコの底で分離した。フラスコを低温の部屋（約４℃）に一晩入れておき、生成物全体をフラスコの壁および底に沈降させた。上層をデカントし、残渣を含むフラスコをロータリーエバポレータに移し；残留溶媒を減圧下で蒸発させ、残渣を高真空下で一晩乾燥させたところ、化合物２５Ａが白色のふんわりした固体として得られ、それは、真空除去すると、ゴム状の無色の液体（７８９ｇ、定量的収率より９ｇ多い）になった。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．０６（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ、１Ｈ）、７．８５（ｓ，３Ｈ）、６．９９（ｓ，１Ｈ）、３．６６〜３．４２（ｍ，４Ｈ）、３．２１〜３．００（ｍ，２Ｈ）、２．８９〜２．６８（ｍ，２Ｈ）、２．２８（ｄｔ，Ｊ＝１２．４、６．９Ｈｚ、２Ｈ）、２．０４（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ、１Ｈ）、１．７６〜１．５９（ｍ，２Ｈ）、１．５６〜１．３５（ｍ，１Ｈ）、１．２１（ｓ，３Ｈ）。ＭＳ  Ｃ３５Ｈ６９Ｎ７Ｏ９についての計算値：７３１．５２；実測値７３２．５０（Ｍ＋Ｈ）。
【０２２６】
実施例１４−トリス（ＢｚＧａｌＮＡｃ）−メチルエステル２６Ｂの合成
【０２２７】
【化５８】
2020109124.tif 000080
【０２２８】
【表２２】
2020109124.tif 000081
【０２２９】
トリアミントリフルオロ酢酸塩２５Ａ（７７６ｇ、０．７２２８モル）を、２０Ｌのロータリーエバポレータフラスコ中で、２Ｌの無水ＤＭＦに溶解させた。化合物１３Ｂ（１５７０ｇ、２．４７６モル）およびＨＯＢｔ（４９０ｇ、３．６３０モル）を、アルゴン下で、オーバーヘッド撹拌機を備えた２２Ｌの四つ口フラスコに投入した。上記の混合物に、４ＬのＤＣＭおよび２ＬのＤＭＦを加え、固体の大部分が溶液になるまで撹拌した（３０分間、わずかな濁りが持続した）。フラスコを氷水混合物上で約１０℃に冷却した。２ＬのＤＭＦ中のＥＤＡＣ．ＨＣｌ（５７６ｇ、２．９０４モル）のスラリー、続いて、ＤＩＥＡ（１２６０ｍＬ）を、約１０℃の温度を維持しながら、１５〜２０分間の期間にわたって滴下漏斗を用いて加えた。上記の混合物に、ＤＭＦ中の２５Ａの溶液を、ゆっくりと加え、フラスコを１ＬのＤＭＦですすぎ、この溶液も反応混合物に移した。反応混合物をゆっくりと周囲温度に温め、一晩撹拌し続けた。溶液の色が一晩で淡黄色から薄茶色に変わった。ＴＬＣを確認し、反応混合物を２０Ｌのロータリーエバポレータに移して、揮発物の大部分を除去した。反応混合物をおよそ二等分し、それらの分量のそれぞれに、１２Ｌの氷冷水を激しく撹拌しながら加えた。水の添加中、固体が沈殿し、溶液を低温の部屋に一晩入れておいた。上部に淡黄色の溶液および底部に淡褐色の沈殿物という２つの層が分離した。上層を、移送ポンプを用いてデカントし、残渣をＥｔＯＡｃ（９Ｌ）に溶解させた。この溶液を、５％のＮａＣｌ（５Ｌ）と、２０％のＨ３ＰＯ４（１Ｌ）と、５％のＮａＣｌ（２×６Ｌ）と、飽和ＮａＣｌ（３．５Ｌ）との混合物で連続して洗浄した。有機層を分離し、ＥｔＯＡｃで２０Ｌになるまで希釈し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を、２０Ｌの漏斗中でＥｔＯＡｃが予め湿式充填された７．５ｋｇのシリカゲル（ＥＭＤ、グレード６２、６０〜２００メッシュ）のろ過カラムに直接充填した。カラムを、４０ＬのＥｔＯＡｃ（最初の１２Ｌは純粋な溶媒であり、それを再利用した）、続いて、２０Ｌの２０：１のＥｔＯＡｃ−メタノールおよび６０Ｌの３：１のＥｔＯＡｃ−メタノールで溶出した。生成物を含有するＥｔＯＡｃ−メタノール（３：１）画分を収集し、蒸発させ、残渣を２ミリバール／３５℃で一晩乾燥させたところ、１．５１ｋｇ（８２％）の２６Ｂがオフホワイトの発泡体として得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．００（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ、３Ｈ）、７．９６〜７．８０（ｍ，１５Ｈ）、７．８０〜７．４３（ｍ，３０Ｈ）、７．３７（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ、６Ｈ）、６．９８（ｓ，１Ｈ）、５．７６（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ、３Ｈ）、５．３７（ｄｄ，Ｊ＝１１．１、３．２Ｈｚ、３Ｈ）、４．７４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ、３Ｈ）、４．５５〜４．４０（ｍ，６Ｈ）、４．４０〜４．２０（ｍ，６Ｈ）、４．０１（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ、３Ｈ）、３．８９〜３．７３（ｍ，３Ｈ）、３．６６〜３．４２（ｍ，１８Ｈ）、３．３４（ｓ，２Ｈ）、３．０３（ｓ，１２Ｈ）、２．３５〜２．１７（ｍ，８Ｈ）、２．１３〜２．００（ｍ，８Ｈ）、１．７０（ｓ，９Ｈ）、１．６１〜１．３３（ｍ，２１Ｈ）、���．１６（ｄｄ，Ｊ＝１２．４、５．２Ｈｚ、１５Ｈ）。
【０２３０】
実施例１５−トリス（ＡｃＧａｌＮＡｃ）−酸２７Ａの合成
【０２３１】
【化５９】
2020109124.tif 000082
【０２３２】
【表２３】
2020109124.tif 000083
【０２３３】
ステップ１
無水メタノール（６．５Ｌ）中のトリ−ＧａｌＮＡｃ（Ｂｚ）−メチルエステル２６Ｂ（１．５１ｋｇ、０．５８５ｍｏｌ）の溶液に、Ａｒ雰囲気下で、メタノール（１３５ｍＬ、０．５８５ｍｏｌ）中のＮａＯＭｅの２５重量％の溶液を加えた。混合物を周囲温度で２時間撹拌し、トリエチルアミン塩酸塩（９６．３ｇ、０．７０ｍｏｌ）で中和し、減圧下で蒸発させ、残渣を、分液漏斗中で、１％のＮａＣｌ水溶液（７．０Ｌ）とＥｔＯＡｃ（３．０Ｌ）とに分液して、安息香酸メチル（副生成物）を有機層中に抽出した（脱ベンゾイル化された（ｄｅ−ｂｅｎｚｏｙｌａｔｅｄ）生成物２６Ｂ−１は水への溶解性が高い）。ＥｔＯＡｃ層を分離し、水層をさらなる３．０Ｌの酢酸エチルで洗浄した。ピリジン（２．０Ｌ）を水性抽出物に加え、酢酸エチルの全ての痕跡が除去されるまで（約２時間）、混合物を４０ミリバール／３５℃のロータリーエバポレータで蒸発させた。
【０２３４】
ステップ２
前のステップからの水抽出物を含有するロータリーエバポレータフラスコに、オーバーヘッド撹拌機を装着し、ＮａＯＨ（７０．０ｇ、１．７５ｍｏｌ）を加え、混合物を周囲温度で一晩撹拌し、トリエチルアミン塩酸塩（２４１ｇ、１．７５ｍｏｌ）で中和し、６．０Ｌのピリジンで希釈し、粘性の油状の残渣が得られるまで、溶媒を、２０Ｌのロータリーエバポレータで、１３ミリバール／３５℃で蒸発させた。残渣をピリジン（６．０Ｌ）に再溶解させ、沈殿した塩化ナトリウムをろ過して取り除き、ピリジン（３×５００ｍＬ）で洗浄し、組み合わされたろ液を、粘性の油状の残渣が得られるまで２０ミリバール／４５℃で蒸発させた。
【０２３５】
ステップ３
ステップ２からの残渣を、Ａｒ雰囲気下で、無水ピリジン（６．０Ｌ）に再溶解させ、溶液を、約１．５時間にわたって無水ピリジン（５．６Ｌ）と無水酢酸（２．８Ｌ）との激しく撹拌された混合物にゆっくりと加えた。混合物を周囲温度で一晩撹拌し、氷水浴中で約４℃に冷却し、１．５Ｌの氷冷水を加えた。４０℃までの発熱効果が観察され；混合物を周囲温度に冷まし（約０．５時間）、ロータリーエバポレータに移して、揮発物を除去した。油状の残渣を、一定重量（約１．８２Ｋｇ）になるまで、２ミリバール／４５℃で、真空下で乾燥させた。残渣を、酢酸エチル（５．０Ｌ）とイソプロパノール（１．０Ｌ）との撹拌された混合物に溶解させ、２５％の塩化ナトリウム水溶液（６．０Ｌ）を加えた。トリエチルアミン（１．０２５Ｌ）をゆっくりと加えることによって、水相のｐＨを７に調整した。中和には、固体塩化ナトリウムの沈殿および中間層の分離が伴い、それを０．５Ｌのイソプロパノールの添加によって、有機相に戻した。液体を、移送ポンプを用いて、固体ＮａＣｌから分液漏斗へとデカントした。有機層を分離し、２５％のＮａＣｌ（６．０Ｌ×２）、飽和ＮａＣｌ（３．０Ｌ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させ、溶媒を蒸発させ、泡状の残渣を、無水アセトニトリル（６．０Ｌ×２）と同時蒸発させ、２ミリバール／４０℃で２４時間乾燥させたところ、１．１１ｋｇ（９５％）の２７Ａが得られた。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ８．００（ｄ，Ｊ＝９．３Ｈｚ、３Ｈ）、７．９６〜７．８０（ｍ，１５Ｈ）、７．８０〜７．４３（ｍ，３０Ｈ）、７．３７（ｔ，Ｊ＝７．８Ｈｚ、６Ｈ）、６．９８（ｓ，１Ｈ）、５．７６（ｄ，Ｊ＝３．２Ｈｚ、３Ｈ）、５．３７（ｄｄ，Ｊ＝１１．１、３．２Ｈｚ、３Ｈ）、４．７４（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ、３Ｈ）、４．５５〜４．４０（ｍ，６Ｈ）、４．４０〜４．２０（ｍ，６Ｈ）、４．０１（ｑ，Ｊ＝７．１Ｈｚ、３Ｈ）、３．８９〜３．７３（ｍ，３Ｈ）、３．６６〜３．４２（ｍ，１８Ｈ）、３．３４（ｓ，２Ｈ）、３．０３（ｓ，１２Ｈ）、２．３５〜２．１７（ｍ，８Ｈ）、２．１３〜２．００（ｍ，８Ｈ）、１．７０（ｓ，９Ｈ）、１．６１〜１．３３（ｍ，２１Ｈ）、１．１６（ｄｄ，Ｊ＝１２．４、５．２Ｈｚ、１５Ｈ）。
【０２３６】
実施例１６−Ｈｙｐ−トリス（ＡｃＧａｌＮＡｃ）２９Ａの合成
【０２３７】
【化６０】
2020109124.tif 000084
【０２３８】
【表２４】
2020109124.tif 000085
【０２３９】
四つ口の２２Ｌのフラスコ中で、無水ＤＣＭ（１０．０Ｌ）中の三本鎖ＧａｌＮＡｃ酸２７Ａ（１．１０７ｋｇ、０．５５２ｍｏｌ）の撹拌溶液に、アルゴン雰囲気下で、ヒドロキシプロリノール誘導体７Ａ（２５６ｇ、０．６１ｍｏｌ）、ＨＯＢｔ一水和物（１６８ｇ、１．１ｍｏｌ）およびＨＢＴＵ（２５０ｇ、０．６６ｍｏｌ）を加えた。混合物を周囲温度で１５分間撹拌し、ＤＩＥＡ（２８６ｍＬ、１．６５ｍｏｌ）を加え、さらに３時間撹拌し続けた。ＴＬＣを確認し、混合物を４％のＮａＨＣＯ３水溶液（６．０Ｌ）でクエンチし、有機層を分離し、粘性のゴム状の残渣が残るまで減圧下で濃縮した。これを、酢酸エチル−イソプロパノールの混合物（５：１）（９．６Ｌ）と１％のＮａＣｌ水溶液（８．０Ｌ）とに分液し、有機層を分離し、飽和ＮａＣｌ溶液（３．５Ｌ）で洗浄し、１３Ｌの総体積になるまで、酢酸エチル−イソプロパノール（５：１）混合物で希釈し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。乾燥された溶液を、非活性化され、かつ酢酸エチル中の２％のＴＥＡが予め湿式充填されたシリカゲル（７．２ｋｇ、ＥＭＤ  ６０〜２００メッシュ）のろ過カラムに直接充填した。カラムを、酢酸エチル−イソプロパノール（５：１、３０Ｌ）、続いて、酢酸エチル−メタノール（２：１、４６Ｌ）で溶出した。少量の汚染された画分（６Ｌ）の前に、主な純粋な画分を別個に収集した。純粋な画分を真空中で蒸発させ、泡状の残渣を再溶解させ、無水アセトニトリル（６Ｌ×２）と同時蒸発させた。残渣を２ミリバール／３０℃で一晩乾燥させたところ、１．１４５ｋｇの２９Ａ（８７％）が得られた。汚染された画分を蒸発させ、シリカゲル（３２５ｇ）の小さいろ過カラム上で同様に精製したところ、さらなる４６ｇの材料が得られた。２９Ａの全収量：１．１９ｋｇ、９０％。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．８２（ｄ，Ｊ＝８．９Ｈｚ、２Ｈ）、７．７３（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ、１Ｈ）、７．３７〜７．２４（ｍ，１Ｈ）、７．２４〜７．１１（ｍ，２Ｈ）、６．９７（ｓ，１Ｈ）、６．９３〜６．８０（ｍ，１Ｈ）、５．２０（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ、１Ｈ）、５．０１〜４．８５（ｍ，１Ｈ）、４．４８（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ、１Ｈ）、４．４２〜４．２３（ｍ，１Ｈ）、４．１３（ｄ，Ｊ＝３．８Ｈｚ、１Ｈ）、４．０６〜３．９６（ｍ，３Ｈ）、３．８６（ｄｄ，Ｊ＝１９．９、８．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．７７〜３．６４（ｍ，３Ｈ）、３．６２〜３．４６（ｍ，５Ｈ）、３．４６〜３．２８（ｍ，２Ｈ）、３．１５（ｄｄ，Ｊ＝８．７、５．０Ｈｚ、１Ｈ）、３．１１〜２．９２（ｍ，６Ｈ）、２．３４〜２．１５（ｍ，３Ｈ）、２．０９（ｓ，３Ｈ）、２．０８〜２．００（ｍ，５Ｈ）、１．９８（ｓ，３Ｈ）、１．９１〜１．８５（ｍ，３Ｈ）、１．７６（ｓ，３Ｈ）、１．４８（ｄｄ，Ｊ＝１７．３、１１．４、６．３Ｈｚ、７Ｈ）、１．３０〜１．１１（ｍ，６Ｈ）。
【０２４０】
実施例１７−Ｈｙｐ−トリス（ＡｃＧａｌＮＡｃ）スクシネート３０の合成
【０２４１】
【化６１】
2020109124.tif 000086
【０２４２】
【表２５】
2020109124.tif 000087
【０２４３】
無水コハク酸（９４．８ｇ、０．９４８ｍｏｌ）およびＰＳ−ＤＭＡＰ（充填量：１．５７ｍｍｏｌ／ｇ、６０４ｇ、０．９４８ｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下で、オーバーヘッド撹拌機を備えた１２Ｌの四つ口フラスコ中で、無水ＤＣＭ（６．０Ｌ）中の２９Ａ（１．１４ｋｇ、０．４７４ｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１９８ｍＬ、１．４２ｍｏｌ）の溶液に連続して加えた。２４時間撹拌した後、さらなる無水コハク酸（２４ｇ、０．２４ｍｏｌ）を加えた。混合物をさらに２４時間撹拌し、ＤＣＭに湿式充填されたＣｅｌｉｔｅ（０．５ｋｇ）に通してろ過し、固体をＤＣＭ（合計８Ｌ）で十分に洗浄した。組み合わされたろ液（約１４Ｌ）を、約６Ｌの体積になるまで減圧下で蒸発させた。混合物を分液漏斗に移し、トリエチルアミン（２００ｍＬ）を加えた。組み合わされた溶液を５％のＮａＣｌ水溶液（６Ｌ×２）で洗浄し、有機層を分離し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。軟質の泡状の残渣が得られるまで、溶媒を、２０Ｌのロータリーエバポレータで、減圧下で蒸発させ、それを、１００ｍＬのトリエチルアミンを含有する６Ｌの無水ＤＣＭに再溶解させ、溶媒を再度蒸発させ、このように得られた泡状の残渣を、１ミリバール／２０℃で２日間乾燥させたところ、１．１９ｋｇ（トリエチルアミン塩を基準にして９６％）の３０がガラス質の発泡体として得られた。１Ｈ  ＮＭＲにより、４．３質量％の残留溶媒（ＤＣＭおよび微量のトリエチルアミン）の存在が示された。１Ｈ  ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ  ７．９３〜７．７２（ｍ，１Ｈ）、７．２８（ｄｄ，Ｊ＝１３．３、６．１Ｈｚ、１Ｈ）、７．２４〜７．１２（ｍ，１Ｈ）、６．９９（ｓ，１Ｈ）、６．９４〜６．８０（ｍ，１Ｈ）、５．３３（ｓ，１Ｈ）、５．２０（ｄ，Ｊ＝３．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．９６（ｄｄ，Ｊ＝１１．２、３．３Ｈｚ、１Ｈ）、４．４８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．１８（ｄ，Ｊ＝３．４Ｈｚ、１Ｈ）、４．１０〜３．９５（ｍ，１Ｈ）、３．８６（ｄｄ，Ｊ＝１９．８、８．９Ｈｚ、１Ｈ）、３．７９〜３．６２（ｍ，１Ｈ）、３．６１〜３．４５（ｍ，１Ｈ）、３．４５〜３．３２（ｍ，１Ｈ）、３．２６〜３．１５（ｍ，１Ｈ）、３．１３〜２．９４（ｍ，１Ｈ）、２．４１〜２．１３（ｍ，１Ｈ）、２．０９（ｓ，１Ｈ）、２．０３（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ、１Ｈ）、１．９８（ｓ，１Ｈ）、１．８８（ｓ，１Ｈ）、１．７６（ｓ，１Ｈ）、１．５７〜１．３５（ｍ，２Ｈ）、１．３１〜１．０６（ｍ，２Ｈ）、０．９３（ｔ，Ｊ＝７．１Ｈｚ、１Ｈ）。
【０２４４】
実施例１８−化合物１８Ａを作製する代替的な方法−酸塩化物によるＥＤＣ／ＨＯＢｔカップリングの置換
【化６２】
2020109124.tif 000088
塩化チオニル（低鉄、９９％、１９．７ｍＬ、０．２７ｍｏｌ）を、無水トルエン（２００ｍＬ）中のドデカン二酸−モノメチルエステル１５Ａ（５５．６ｇ、０．２２８ｍｏｌ）の懸濁液に加え、ガス発生が完了するまで（バブラー、３時間）、混合物を６０℃で撹拌した。混合物を室温に冷まし；溶媒および揮発物を減圧下で蒸発させ、蒸発フラスコにアルゴンを補充した。残渣（酸塩化物１５Ｂ）を無水ＤＣＭ（２００ｍＬ）で希釈し、無水ＤＣＭ（５００ｍＬ）中の１７Ａ（１０４．５ｇ、０．２０７ｍｏｌ）およびＤＩＥＡ（４７ｍＬ、０．２７ｍｏｌ）の冷却（０℃）および撹拌された溶液中に、４０分間にわたって、カニューレを介してゆっくりと移した。０℃でさらに３０分間撹拌し続け、混合物を、飽和ＮａＨＣＯ３（４００ｍＬ）の添加によってクエンチした。有機相を分離し、減圧下で濃縮した。残渣を、酢酸エチルとヘキサンとの１：１混合物（６００ｍＬ）に溶解させ、６００ｍＬのそれぞれ：２％のＮａＨＣＯ３水溶液、水、５％のＨＣｌ水溶液、水（×２）（注記２）、飽和ＮａＣｌで連続して洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。溶媒を減圧下で除去し、残渣を０．４トルで一晩撹拌することによって乾燥させたところ、１４３．５ｇ（９５％）の１８Ａが得られた。
【０２４５】
実施例１９−トリアミントシル酸塩２５Ｂの合成
１）対応するトシル酸塩２５Ｂへのトリス（Ｂｏｃアミン）メチルエステル２４Ａのｐ−トルエンスルホン酸（ＰＴＳＡまたはトシル酸）脱保護
【化６３】
2020109124.tif 000089
乾燥メタノール（９０ｍＬ）中のＢｏｃ保護されたアミン２４Ａ（９．３６ｇ、９．１ｍｍｏｌ）およびｐ−トルエンスルホン酸一水和物（トシル酸、６．２３ｇ、３２．８ｍｍｏｌ）の溶液を、防水された（ｍｏｉｓｔｕｒｅ−ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ）フラスコ中で、５０℃で一晩加熱した。反応の完了を、ＭＳ分析によって監視した。混合物を室温に冷まし、過剰なトシル酸を、ＤＩＥＡ（０．９６ｍＬ、５．５ｍｍｏｌ）の添加によって中和し、混合物をトルエン（１８０ｍＬ）で希釈した。溶媒を蒸発させ、得られた泡状の固体残渣を、２時間にわたって８ミリバール／３０℃のロータリーエバポレータで乾燥させたところ、約５．５ｍｍｏｌ（１．６６ｇ）のｐ−ＴＳＡ−ＤＩＥＡ塩および微量の残留トルエンを含有する１３．９５ｇの２５Ｂが得られた。
【０２４６】
２）トリアミントシル酸塩２５Ｂからの三本鎖骨格２６Ａ
無水ＤＭＦ（１００ｍＬ）中のＢｚＧａｌＮＡｃ  Ｃ５酸−ナトリウム塩１３Ａ（２１．５ｇ、３２．８ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ−一水和物（５．５１ｇ、３６ｍｍｏｌ）の冷却（１０℃）および撹拌された溶液に、ＥＤＣ塩酸塩（７．１ｇ、３６ｍｍｏｌ）、続いて、ＤＩＥＡ（１０．０ｍＬ、７３ｍｍｏｌ）を加え、ＥＤＣ塩酸塩の完全な溶解が得られるまで（約１５分間）、混合物を１０℃で撹拌した。同時に、２５Ｂ（１３．９５ｇ、９．１ｍｍｏｌ）を含有する前のステップからの固体を、無水ＤＭＦ（７０ｍＬ）に溶解させ、溶液を、カニューレを介して、上記の混合物に移した。混合物を一晩で室温に温め、０℃に冷却し、水（６００ｍＬ）で希釈した。有機成分を０℃で一晩沈降させた後、水層を粘性の有機残渣からデカントし、これをＥｔＯＡｃ（２００ｍＬ）に取り込み、５％のＮａＣｌ（２００ｍＬ）と、２０％のリン酸（２０ｍＬ）と、５％の塩水（×２）と、飽和塩水との混合物で連続して洗浄し；有機層を、３００ｍＬの総体積になるまでＥｔＯＡｃで希釈し、無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させた。この溶液を、ＥｔＯＡｃ中に予め湿式充填された１００ｇのシリカゲルの短いろ過カラムに直接充填した。カラムを、ＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ×２）、続いて、３；１のＥｔＯＡｃ−メタノール（３００ｍＬ×３）で溶出し、所望の生成物を含有する画分をプールし、蒸発させ、０．４トルで一晩乾燥させたところ、２０．１４ｇ（８６％）の２６Ａが得られた。ＨＰＬＣプロファイル（８７％）は、対照のバッチ（８８％）と同等であった。
【０２４７】
実施例２０−Ｈｙｐ−トリス（ＡｃＧａｌＮＡｃ）スクシネート３０の合成−ＤＭＡＰまたは固定化ＤＭＡＰ（ＰＳ−ＤＭＡＰ）を用いないスクシニル化
【化６４】
2020109124.tif 000090
無水コハク酸（１．１８ｇ、１１．８ｍｍｏｌ）を、Ａｒ雰囲気下で、無水ＤＣＭ（６０ｍＬ）中の２９Ａ（１１．４ｇ、４．７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．９５ｍＬ、１４ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。混合物を室温で２日間撹拌し、その後、ＴＬＣにより、完全な転化が示された。混合物を、５％のＮａＣｌ水溶液で（２回）洗浄し、有機層を無水Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、溶媒を減圧下で蒸発させた。残渣を０．４ミリバール／２０℃で乾燥させたところ、１１．８ｇ（トリエチルアミン塩を基準にして９６％）の３０が得られた。ジエチルアミンも、トリエチルアミンの代わりに使用してもよく、より色の薄い生成物が得られる。
【手続補正書】
【提出日】令和2年4月3日(2020.4.3)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
式（Ａ）
【化１】
2020109124.tif 000108
（式中、
Ｘのそれぞれが、水素またはヒドロキシ保護基であり；
Ｙのそれぞれが、アミン保護基（例えば、アセチル）であり；
ｎが０〜２０であり；
ｑ、ｒおよびｓのそれぞれが、独立して、１〜７であり；
Ｌが連結基であり；
Ｒ１がｉＲＮＡ剤である）
の化合物を調製するための方法であって；
式（Ａ）の前記化合物が、
（ｉ）金属不純物を含まないか、または１０００ｐｐｍ以下の金属不純物を含み、
（ｉｉ）以下の２つの尿素副生成物のそれぞれを含まないか、または０．５重量％以下の前記尿素副生成物のそれぞれを含み、
【化２】
2020109124.tif 000109
および
（ｉｉｉ）以下の糖化合物のそれぞれを含まないか、または０．５重量％以下の前記糖化合物のそれぞれを含み、
【化３】
2020109124.tif 000110
前記方法が、［ａ］式（ＶＩ）の化合物を式（ＶＩＩ）の化合物に転化するステップと［ｂ］式（ＶＩＩ）の化合物の窒素原子を保護するステップとを含み、
【化４】
2020109124.tif 000111
前記［ａ］ステップが、
（１）式（ＶＩ）の前記化合物を塩基と反応させるステップと；
（２）ステップ（１）の前記生成物を還元するステップと；
（３）ステップ（２）の前記生成物を酸と反応させるステップと
を含み、前記（１）〜（３）が単一のポットで行われる、方法。
【外国語明細書】
2020109124000001.pdf