(57)【要約】      （修正有）【課題】自己免疫疾患または炎症性疾患を有する対象における自己免疫または炎症性疾患の症候を軽減する一方で再生を促進するためのキットの提供。【解決手段】第１の所定期間、対象に提供する断食もどき食であって、１００グラム未満の炭水化物を、１日あたり３０ｇ未満の糖および１日あたり２８ｇ未満のタンパク質／アミノ酸と共に提供する断食もどき食と、第１の所定期間に続いて第２の所定期間、対象に投与する非断食食であって、標準的なカロリー摂取量を提供する非断食食と、を具えるキット。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
自己免疫疾患または炎症性疾患を有する対象における自己免疫または炎症性疾患の症候を軽減する一方で再生を促進するためのキットにおいて、
第１の所定期間、前記対象に提供する断食もどき食であって、１００グラム未満の炭水化物を、１日あたり３０ｇ未満の糖および１日あたり ２８ｇ未満のタンパク質／アミノ酸と共に提供する断食もどき食と、
前記第１の所定期間に続いて第２の所定期間、前記対象に投与する非断食食であって、標準的なカロリー摂取量を提供する非断食食と、
を具えることを特徴とするキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１４年４月２日出願の米国仮特許出願第６１／９７４，１８９号明細書の利益を主張する。この開示は、その全体が引用を以って本明細書中に組み込まれる。
【０００２】
連邦政府による資金提供を受けた研究開発の記載
本発明は、国立衛生研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ）／国立老化研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ  ｏｆ  Ａｇｉｎｇ）によって授与された契約番号ＰＯ１ＡＧＴ０３４９０６の下に、政府支援を受けてなされた。政府は、本発明に対して、一定の権利を有する。
【０００３】
少なくとも１つの態様において、本発明は、多発性硬化症、Ｉ型糖尿病、および他の自己免疫疾患／炎症性疾患を処置し、かつ回復に向かわせる（ｒｅｖｅｒｓｉｎｇ）ための、そして自己免疫および炎症を緩和する、予防する、または回復に向かわせること、かつ病変部位での再生を促進することによって、疾患の再発を部分的に予防するための食事処方（ｄｉｅｔａｒｙ  ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ）および方法の同定に関する。
【背景技術】
【０００４】
自己免疫疾患は、正常な組織が異常な免疫応答によって損傷を受ける病気のクラスである。Ｔリンパ球集団が、多くの自己免疫疾患／慢性炎症性疾患の免疫病因において重大な役割を果たす。反応性ＣＤ４＋Ｔ細胞と細胞障害性ＣＤ８＋Ｔ細胞の双方、および関連するサイトカインが、重要なことに、多発性硬化症、１型糖尿病、ＨＩＶ、慢性関節リウマチ、アトピー性皮膚炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、乾癬、パーキンソン病、過敏性大腸症候群、喘息、および肝炎が挙げられる主要な自己免疫疾患／慢性炎症性疾患の病因に寄与することが示されてきた。
【０００５】
これらの自己免疫疾患／炎症性疾患は、多くの場合、対象自身の細胞型のＴ細胞介在性の攻撃によって生じるが、細胞、組織および臓器に損傷を直接引き起こし得る、ＴＮＦおよびインターロイキンが挙げられる種々のサイトカインも関与することがある。自己免疫を調節し得る抗体、ワクチン、サイトカイン、化学物質、および幹細胞移植が、Ｔ細胞介在性の自己免疫疾患および慢性炎症性疾患を処置するための潜在的治療法として考えられてきた。しかしながら、従来の治療に関連した、静脈内（ＩＶ）投与の不便、ならびに高いコストおよび有害な事象（貧血、好中球減少、および血小板減少が挙げられる）は、第一選択薬（ｆｉｒｓｔ−ｌｉｎｅ  ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎ）としてのそれらの広い利用を妨げている。
【０００６】
多発性硬化症は、異常な炎症反応、慢性的な脱ミエリン化、および軸索喪失を伴う中心神経系（ＣＮＳ）の自己免疫疾患である。ＭＳ病変は、内在性乏突起膠細胞前駆細胞（ＯＰＣ）によって修復され得るが、殆どの場合、ミエリン再形成が起こらない、または不十分であり、慢性的な身体障害の原因となる。現在のＭＳ処置は、殆どの場合、ＣＮＳミエリンの再生における、そして、疾患症候および損傷作用の回復における効果が微小である免疫抑制薬である。したがって、免疫抑制効果だけでなくミエリン再形成も促進する治療法の開発が、ＭＳ処置において、また、免疫細胞またはサイトカインが特異的な組織の損傷に関与する、１型糖尿病、ＨＩＶ、慢性関節リウマチ、アトピー性皮膚炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、乾癬、パーキンソン病、過敏性大腸症候群、喘息、および肝炎が挙げられる種々の自己免疫疾患および炎症性疾患において、重要な進歩を表すであろう。
【０００７】
したがって、自己免疫疾患および炎症性疾患、特に多発性硬化症を処置する方法の向上が必要である。
【発明の概要】
【０００８】
本発明は、少なくとも１つの実施形態において、自己免疫および炎症を部分的に緩和する／予防する／回復に向かわせることによって、かつ再生を部分的に促進することによって、自己免疫疾患の症候を軽減し、かつ／または自己免疫疾患を処置する方法を提供することによって、先行技術の１つまたは複数の問題を解決する。本方法は、自己免疫疾患または炎症性疾患を有する対象を同定するステップを含む。断食もどき食（ｆａｓｔｉｎｇ  ｍｉｍｉｃｋｉｎｇ  ｄｉｅｔ）が、第１の所定期間、対象に投与される。断食もどき食は、カロリー制限食および／またはケトジェニック食であり、典型的にはタンパク質／アミノ酸および炭水化物が制限されるが、別のやり方で高い微量栄養素を提供するものである。非断食食が、第１の期間に続いて第２の期間、対象に投与される。非断食食は、正常かつ健康な体重に戻るのに必須の標準的な、またはなお一層高められたカロリー摂取量を、対象に提供する。
【０００９】
別の実施形態において、多発性硬化症もしくは別の自己免疫疾患／炎症性疾患の症候を軽減し、かつ／または多発性硬化症もしくは別の自己免疫疾患／炎症性疾患を処置する方法が提供される。本方法は、多発性硬化症または別の自己免疫疾患／炎症性疾患を有する対象を同定するステップを含む。断食もどき食が、第１の所定期間、対象に投与される、断食もどき食。断食もどき食は、カロリー制限食および／またはケトジェニック食であり、典型的にはタンパク質および炭水化物が制限される。非断食食が、第１の期間に続いて第２の期間、対象に投与される。非断食食は、正常かつ健康な体重に戻るのに必須の標準的な、またはなお一層高められたカロリー摂取量を、対象に提供する。
【００１０】
さらに別の実施形態において、Ｔ細胞もしくはサイトカイン介在性疾患の症候を軽減し、かつ／またはＴ細胞もしくはサイトカイン介在性疾患を処置する方法が提供される。本方法は、Ｔ細胞またはサイトカイン介在性疾患を有する対象を同定するステップを含む。断食もどき食が、第１の所定期間、対象に投与される。断食もどき食は、カロリー制限食および／またはケトジェニック食であり、典型的には、タンパク質／アミノ酸および炭水化物が制限されるが、別のやり方で高い微量栄養素を提供するものである。非断食食が、第１の期間に続いて第２の期間、対象に投与される。非断食食は、正常かつ健康な体重に戻るのに必須の標準的な、またはなお一層高められたカロリー摂取量を、対象に提供する。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】図１は、主要な自己免疫疾患および慢性炎症性疾患を処置するための治療標的としてのＦＭＤ改変Ｔ細胞集団およびサイトカインを示す表１を提供する。
【図２】図２は、ＭＯＧ３５〜５５誘導ＥＡＥ  ＭＳマウスモデルの断食もどき食（ＦＭＤ）処置済みマウスの平均臨床ＥＡＥ重篤度スコアを示す棒グラフである。
【図３】図３は、膵臓組織の蛍光染色を示し、膵臓浸潤Ｔ細胞（ＣＤ３＋）がＦＭＤのサイクルによって非常に減らされることが観察されたことを実証している。
【図４】図４は、ＦＭＤが、パイロットヒト試験において、循環Ｃ反応性タンパク質のレベルを引き下げる（＊ｐ＜０．０５；ｎ＝５）ことを示す棒グラフである。
【図５】図５は、ＦＭＤが、パイロットヒト試験において、循環コルチゾールのレベルを増大させる（＊ｐ＜０．０５；ｎ＝５）ことを示す棒グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
次に、本発明の現在好ましい組成物、実施形態および方法に詳細に言及することとする。図は、必ずしも一定の比率であるわけではない。開示される実施形態は単に、種々の、そして代替の形態で実現されてもよい、本発明の例示である。したがって、本明細書中に開示される具体的な詳細は、限定として解釈されるべきでなく、単に、本発明の任意の態様についての代表的なベースとして、かつ／または本発明を様々に使用する当業者に教示するための代表的なベースとして解釈されるべきである。
【００１３】
例示を除き、または特に明示的に示されない限り、材料の量、または反応および／もしくは使用の条件を示す本記載における全ての数値量が、本発明の最も広い範囲を記載する際の文言「約」によって修飾されると理解されるべきである。述べられる数的限界内での実行が概して好ましい。また、明示的に矛盾して述べられない限り：パーセント、「の部」、および比率の値は、重量による；本発明に関連する所与の目的に適切な、または好ましい材料のグループまたはクラスの記載は、グループまたはクラスのメンバーの何れか２つ以上の混合物が、等しく適切である、または好ましいことを意味する；化学用語における成分の記載は、記載において特定されるあらゆる組合せへの付加時の成分に言及するが、一旦混合された混合物の成分間の化学相互作用を必ずしも排除するわけではない；頭字語または他の略語の最初の定義は、同じ略語の本明細書中の以降の全ての使用に当てはまり、そして、必要な修正をして、最初に定義された略語の標準的な文法上の変形に当てはまる；そして、明示的に矛盾して述べられない限り、性質の測定値は、同じ性質について以前に、または後に引用されるのと同じ技術によって判定される。
【００１４】
勿論、特定の構成要素および／または条件が変化してよいので、本発明は、以下に記載される特定の実施形態および方法に限定されない。さらに、本明細書中で用いられる専門用語は、本発明の特定の実施形態を説明する目的で用いられるだけであり、いかなる形であれ限定することは意図されない。
【００１５】
本明細書および添付の特許請求の範囲において用いられる単数形「ａ」、「ａｎ」、および「ｔｈｅ」は、文脈上明らかな別段の指示がない限り、複数の指示物を含む。例えば、単数の構成要素への言及は、複数の構成要素を含むことが意図される。
【００１６】
用語「キロカロリー」（ｋｃａｌ）および「大カロリー（Ｃａｌｏｒｉｅ）」は、食物カロリーを指す。用語「カロリー（ｃａｌｏｒｉｅ）」は、いわゆる小カロリーを指す。
【００１７】
用語「対象」は、ヒト、または全ての哺乳類、例えば霊長類（特により高等な霊長類）、ヒツジ、イヌ、齧歯類（例えば、マウスまたはラット）、モルモット、ヤギ、ブタ、ネコ、ウサギ、およびウシが挙げられる動物を指す。
【００１８】
「断食もどき食」は、カロリー制限食を対象に提供する食事を意味し、断食によって引き起こされる変化に類似する、グルコース、ケトン体、ＩＧＦ−１、およびＩＧＦＢＰ１の変化を生じさせるように処方されるが、高栄養を提供して飢えを最小にすることが可能である。
【００１９】
略語：
「ＡＬ」はアドリブを意味する。
「ＤＡＰＩ」は、蛍光染色である４’，６−ジアミジノ−２−フェニルインドールを意味する。
「ＥＡＥ」は、実験的自己免疫性脳脊髄炎を意味する。
「ＦＭＤ」は、断食もどき食を意味する。
「ＫＢ」は、ケトン体を意味する。
「ＫＤ」は、ケトジェニック食を意味する。
「ＭＯＧ３５〜５５」は、ミエリン乏突起膠細胞糖タンパク質を意味する。
「ＭＳ」は、多発性硬化症を意味する。
「ＳＴＺ」は、ストレプトゾトシンを意味する。
【００２０】
実施形態として、自己免疫および炎症を部分的に緩和する／予防する／回復に向かわせることによって、かつ再生を部分的に促進することによって、自己免疫疾患または炎症性疾患の症候を軽減する方法が提供される。本方法は、自己免疫疾患または炎症性疾患を有する対象を同定するステップを含む。断食もどき食が、第１の所定期間、対象に投与される。一変形において、ＦＭＤ食は、対象のＩＧＦ−Ｉの血清中濃度を２５〜９０％、そして血中グルコース濃度を２５〜７５％引き下げる。本発明において用いられ得るＦＭＤ食の例が、米国特許出願第１４／０６０４９４号明細書および米国特許出願第１４／１７８９５３号明細書において見出される；これらの全開示は、引用を以って本明細書中に組み込まれる。一改良において、断食もどき食は、対象の標準的なカロリー摂取量の６０％未満を提供し、タンパク質／アミノ酸および炭水化物が制限される。一改良において、断食もどき食は、１日あたり１００グラム未満の炭水化物および３０ｇ未満の糖、ならびに１日あたり２８ｇ未満のタンパク質／アミノ酸を提供する。別の改良において、断食もどき食は、本明細書中に説明されるように、カロリー制限の有無に拘らないケトジェニック食である。有用なケトジェニック食は、１日の総カロリー摂取量のうち、脂肪を５２．４〜８２．４％、炭水化物を１０〜１６．６％、そしてタンパク質を８〜１５％提供することとなる。
【００２１】
変形において、非断食食は、以下に説明されるように、第１の期間の後、第２の期間、対象に投与される。一部の改良において、非断食食は、正常かつ健康な体重に戻るのに必須の標準的な、またはなお一層高められたカロリー摂取量を、対象に提供する。本発明の方法は、自己免疫疾患で苦しむあらゆる対象、特にヒトおよび他の哺乳類を処置するのに有用である。標準的なカロリー摂取量は、対象が対象の体重を維持するために消費するカロリー数である。典型的には、標準的なカロリー摂取量は、１日あたり約１６００〜２４００大カロリー（すなわち、キロカロリー）である。改良において、標準的なカロリー摂取量は、１８００〜２２００キロカロリーである。
【００２２】
変形において、本発明の方法は、対象において、自己免疫疾患および慢性炎症性疾患が挙げられるＴ細胞介在性疾患を処置するために用いられる。この変形において、本方法は、Ｔ細胞介在性疾患を有する対象を同定するステップを含む。断食もどき食が、第１の所定期間、対象に投与され、断食もどき食は、対象の標準的なカロリー摂取量の６０％未満を提供し、タンパク質および炭水化物が制限される。改良において、断食もどき食は、１００グラム未満の炭水化物を提供し、１日あたりの糖が３０ｇ未満、そして１日あたりのタンパク質／アミノ酸が２８ｇ未満である。更なる改良において、断食もどき食は、１日あたり２０ｇ未満の糖を提供する。これらの改良のそれぞれにおいて、カロリーの収支は、脂肪由来である。変形において、非断食食が、以下でより詳細に説明されるように、第１の期間に続いて第２の期間、対象に投与される。改良において、本方法は、病原性Ｔ細胞の数および循環サイトカインのレベルを変更して、自己免疫傷害の重篤度を軽減し、かつ、ＥＡＥ誘導多発性硬化症（ＭＳ）が挙げられる炎症性疾患と非常に関連するマーカーを、そしてＳＴＺ誘導１型糖尿病（Ｔ１Ｄ）マウスモデルにおけるマーカーを引き下げる。例えば、本方法は、ＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＤ８＋Ｔ細胞の数を少なくとも２０パーセント、そして循環サイトカインのレベルを少なくとも２０重量パーセント減少させることができる。一部の改良において、本方法は、ＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＤ８＋Ｔ細胞の数を少なくとも３０パーセント、４０パーセント、または５０パーセント減少させることができる。他の改良において、本方法は、循環サイトカインのレベルを少なくとも３０重量パーセント、４０重量パーセント、または５０重量パーセント減少させることができる。さらに、本方法の少なくとも一部の変形が、炎症性Ｔ細胞によって失われた、または攻撃された未分化前駆細胞および分化機能細胞の再生を刺激する。
【００２３】
ＦＭＤのサイクルが、循環Ｔリンパ球の数、および病原性Ｔ細胞によって引き起こされる傷害を部分的に引き下げることによって、多発性硬化症および１型糖尿病等の自己免疫疾患／炎症性疾患を軽減する。ＦＭＤは、炎症性疾患と関連するマーカー、すなわちＴＮＦアルファ、Ｔ細胞、およびＣ反応性タンパク質を減らす。初期要件が最小であり、かつ安全性／利益が長期にわたる、Ｔ細胞集団および炎症性マーカーに及ぼすこの高い効率、広い効果により、本発明の方法は、生物学的療法および薬物療法に関わる治療法が挙げられる、種々のタイプの治療法に組み込まれ得る。全体として、ＦＭＤは、自己免疫疾患／炎症性疾患の予防と処置の双方における大きな潜在性を提示する（ここで示される様々な、しかし類似の疾患：１型糖尿病、多発性硬化症、および炎症性皮膚炎でここに実証される）；したがって、ＦＭＤ処置は、他の自己免疫疾患／炎症性疾患の処置に広く適用可能である。ＦＭＤ処置は、侵襲的アプローチを必要とせずに、Ｔ細胞集団を直接的に調節して、かつ／またはサイトカインを間接的に変えて、炎症性自己免疫傷害を改善し得るようにして、従来の免疫調節アプローチに利益をもたらし得る。ここで、発明者らは、断食を模倣する一方で栄養失調を予防することが可能な特異的な栄養分の制限の、集中的であるが短い形態としての断食もどき食（ＦＭＤ）が、大多数の自己免疫の重要な治療標的であるＴ細胞集団の数値的プロフィールおよび機能的プロフィール、ならびに循環サイトカインのレベルを変更することができ、かつ炎症性疾患と関連するマーカーを引き下げることを示す（表１）。表１は、本発明の方法で処置され得る疾患および症状の例を提供する。また、ＦＭＤは、ＭＳおよびＩ型糖尿病モデルにおける乏突起膠細胞の再生を促進することも実証される。ＦＭＤのサイクルがまた、前駆細胞（乏突起膠細胞前駆細胞）の、機能細胞型（乏突起膠細胞）の増大に至る分化を促進することによって、ＭＳにおける乏突起膠細胞の再生を増大させる。ＦＭＤは、１２０時間の断食に好ましい。なぜなら、遵守の低さおよび栄養失調の副作用により、ヒト対象が首尾よく断食することが極めて困難であるからである。好都合にも、本発明は代用食を用い、これは、免疫系を再調節して再生を促進する際に、断食条件の有益な効果に干渉することなく、微量栄養素を最大にする。
【００２４】
少なくとも１つの実施形態において、多発性硬化症（ＭＳ）の症候の再発を処置し、軽減し、かつ予防する方法が提供される。本方法は、多発性硬化症の診断がされた、または多発性硬化症の１つもしくは複数の症候を示す対象を同定するステップを含む。多発性硬化症の症候の例として、限定されないが、神経機能障害（例えば、自律神経機能障害、視力障害、運動機能障害、および感覚機能障害）、筋力低下、筋痙攣、鬱病、気分変動、神経系の病変（例えば、強膜（ｓｃｌｅｒａ））、脱ミエリン化その他が挙げられる。対象は、本明細書中で説明されるように、多発性硬化症の症候を処置または軽減するために、断食もどき食（ＦＭＤ）が周期的に投与される。例えば、改良において、断食もどき食は、対象の標準的なカロリー摂取量の６０％未満を提供し、タンパク質／アミノ酸および炭水化物が制限される。更なる改良において、断食もどき食は、１日あたり１００グラム未満の炭水化物および３０ｇ未満の糖、ならびに１日あたり２８ｇ未満のタンパク質／アミノ酸を提供する。別の改良において、断食もどき食は、本明細書中で説明されるように、カロリー制限の有無に拘らないケトジェニック食である。有用なケトジェニック食は、１日の総カロリー摂取量のうち、５２．４〜８２．４％の脂肪、１０〜１６．６％の炭水化物、および８〜１５％のタンパク質を提供することとなる。
【００２５】
先に説明される本方法の変形において、断食もどき食は、対象の標準的なカロリー摂取量の８０パーセント、７０パーセント、６０パーセント、５０パーセント、４５パーセント、４０パーセント、または３５パーセント未満を対象に提供する。さらに他の改良において、断食もどき食は、好ましさの増す順に、対象の標準的なカロリー摂取量の１０％、２０％、２５％、または３０％超を対象に提供する。改良において、ＦＭＤは、第１の所定期間投与される。典型的には、断食もどき食は、１日あたり３０ｇ未満の糖、１日あたり２８ｇ未満のタンパク質、１日あたり２０〜３０グラムの一価不飽和脂肪、１日あたり６〜１０ｇの多価不飽和脂肪、および１日あたり２〜１２ｇの飽和脂肪を対象に提供する。改良において、断食もどき食は、２５ｇ未満の糖、２３ｇ未満のタンパク質、１６〜２５グラムの一価不飽和脂肪、４．８〜８ｇの多価不飽和脂肪、および１〜１０ｇの飽和脂肪を提供する。別の改良において、断食もどき食は、１日あたり２０ｇ未満の糖、１日あたり１８ｇ未満のタンパク質、１日あたり１０〜１５ｇの一価不飽和脂肪、１日あたり３〜５ｇの多価不飽和脂肪、および１日あたり１〜６グラムの飽和脂肪を対象に提供する。さらに別の改良において、断食もどき食は、１６ｇ未満の糖、１５ｇ未満のタンパク質、８〜１２ｇの一価不飽和脂肪、ならびに２〜４ｇの多価不飽和脂肪および１〜６グラムの飽和脂肪を提供する。典型的には、断食もどき食は、ビタミン、ミネラル、および必須脂肪酸について、１日あたり推奨栄養所要量（ＲＤ）の１００％を提供する。
【００２６】
先に説明される方法の変形において、第１の期間は、３から３０日である。先に説明される方法の別の変形において、第１の期間は、３から７日である。改良において、第１の期間は、約１、２、３、４、５、６、または７日である。先に説明される方法の別の変形において、第１の期間は、３から７日である。改良において、第１の期間は、約１、２、３、４、５、６、または７日である。更なる改良において、第１の期間は、約５日である。典型的には、断食もどき食は、対象に周期的に投与される。一変形において、断食もどき食は、４〜１６週の時間間隔で、対象に投与される。別の変形において、断食もどき食は、２〜４週の時間間隔で、対象に投与されてよい。変形において、対象は、断食もどき食の１日目に、対象の１ポンドあたり４．５〜７キロカロリーが提供される。改良において、対象は、断食もどき食の１日目に、対象の１ポンドあたり３．５〜５キロカロリーが提供される。この変形の断食もどき食の２〜５日間に、対象は、対象の体重の１ポンドあたり３〜５キロカロリーが提供される。１４。断食もどき食が４日間投与される場合の変形において、断食もどき食は、２〜４日間で、対象の１ポンドあたり２．４から４キロカロリーを提供する。
【００２７】
先に説明される方法の変形において、ＦＭＤは、対象が正常な体重を取り戻すことができるように、非断食食（非ＦＤ）と交替する。典型的には、非ＦＤは、ＦＭＤのサイクルの完了後日に投与される。改良において、非ＦＤは、ＦＭＤのサイクルの完了１〜７日（例えば、１、２、３、４、５、６、または７日）後に投与される。非ＦＤ食は、標準的なカロリー摂取量を対象に提供する。非ＦＤは、第２の期間投与される。典型的には、第２の期間は、１日から５５日である。改良において、第２の期間は、好ましさの増す順に、１日、３日、７日、１４日、または２０日以上である。別の改良において、第２の期間は、１日から５５日である。改良において、第２の期間は、好ましさの増す順に、６０日、５０日、４０日、３０日、または２５日以下である。変形において、ＦＭＤおよび非ＦＤは、処置の期間にわたって、２〜４週毎に対象に投与される。別の変形において、ＦＭＤおよび非ＦＤは、処置の期間にわたって、２〜８週毎に対象に投与される。処置の期間は、典型的には、１ヵ月から数年、または対象の寿命の間である。
【００２８】
以下の断食もどき食（ＦＭＤ）および方法は、効果的に多発性硬化症を処置し、かつ多発性硬化症の再発を予防する−寛解するのに必要とされるであろう。これらは、標準的な／アドリブの摂取量ならびに多量養素および微量養素組成と比較した（標準組成と比較した）カロリー摂取量に基づいて、マウスの食事（図参照）から推測することによって、かつ、マウスの食事に類似するグルコース、ケトン体、ＩＧＦ−ＩレベルおよびＩＧＦＢＰ−１レベルの濃度の倍変化レンジ（ｆｏｌｄ  ｃｈａｎｇｅ  ｒａｎｇｅ）に達し、そして抗炎症コルチコステロイドおよび炎症性マーカーに影響を及ぼす、継続中の臨床試験由来のヒトデータを用いることによって、開発された。
【００２９】
以下の例は、本発明の種々の実施形態を示す。当業者であれば、本発明の精神および特許請求の範囲内にある多くの変形物を理解するであろう。
【００３０】
代用食を、以下に説明する実験において、マウス用にスケーリングする。自己免疫疾患／炎症性疾患を処置し、かつ回復に向かわせるために、食事１または食事２の何れかを対象に与えてよく、サイクルの頻度は、正常な体重を取り戻す対象の能力および／または健康な体重（少なくとも１８以上のＢＭＩ）とすべき医師の推奨に基づいて、決定するべきである。
【００３１】
ＦＭＤサイクルが、グルコースおよび血清ＩＧＦ−１レベルを減少させることが示された。血清ＩＧＦ−１レベルの減少が、マウスおよびヒト中の造血幹細胞における、再生効果、ならびに幹細胞および／または前駆細胞の増大を示すバイオマーカーの１つであることが示されている（Ｃｈｅｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，２０１４  Ｃｅｌｌ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ；特許出願中）。１０週齢の雌Ｃ５７Ｂ１／６マウスにおいて、ＦＭＤの１サイクルが、コントロールと比較して、体重を１８％引き下げ、そしてグルコースレベルおよび血清ＩＧＦ−１レベルを有意に引き下げた。再給餌直後に、ＦＭＤは正常な体重に回復させた。同様にして、ヒトでの進行中の臨床試験もまた、類似のＦＭＤ（ヒトに特異的な体重および他の要件について調整した）の単回サイクルが、血液グルコースレベルおよび血清ＩＧＦ−Ｉレベルの引下げを示すことを示した。さらに、結合してＩＧＦ−１の生物学的利用能を引き下げるＩＧＦＢＰ−１が、単回ＦＭＤサイクル直後に有意に増大して、ＩＧＦ−Ｉシグナリングの阻害にさらに寄与する。
【００３２】
実験マウスＦＭＤは、成分を同定した栄養スクリーンに基づき、これが低カロリー消費の期間中の高栄養を可能とする。マウスＦＭＤ食は、１日目の食事と２〜３日目の食事をそれぞれこの順に給餌するように指定した２つの異なる構成要素からなる。１日目の食事は、７．８７ｋＪ／ｇに相当し、２〜３日目の食事は、全ての給餌日で同じであり、１．５１ｋＪ／ｇに相当する。１日目および２〜３日目の食事は、２週おきにアドリブコントロール群の平均摂取量（約４ｇ）をＦＭＤコホートに供給した。平均で、マウスはＦＭＤレジメンの各日について、１１．０７ｋＪ（植物ベースのタンパク質０．７５ｋＪ、炭水化物５．３２ｋＪ、脂肪５ｋＪ）を消費した。ＭＳおよびＴ１Ｄモデルの双方において、発明者らは、２〜３日目の食事の終了後、４〜７日間、アドリブでＴＤ．７９１２食を供給した。ＦＭＤの持続期間およびＴＤ．７９１２による再給餌の持続期間を、体重減少（≦２０％）および回復（≧９５％）によって調整してよい。ＭＳモデルの場合、再給餌期間を４日に限定した。ＦＭＤ食を供給する前に、動物を、フレッシュなケージ中に移して、残留食および糞食での給餌を回避した。実験マウスＫＤは、０．３４ｋｃａｌ／ｇｍのタンパク質、６．７６ｋｃａｌ／ｇｍの脂肪、および０．１３ｋｃａｌ／ｇｍの炭水化物に相当する。
【００３３】
改変ヒト断食もどき食１：ＦＭＤは、対象の標準的な食事を、対象の疾患症状のタイプおよび重篤度、ならびに次のサイクルを開始する前に体重を取り戻す患者の能力に応じて、４〜１６週おきに５から７日の期間（下記参照）、代用することとする。体重を取り戻すことが可能な、症候がより重篤な患者は、４週おきに食事を受けることとなり、疾患がより穏やかな形態である患者は、８〜１６週おきに食事を受けることとなる。ＦＭＤは、一般に安全と認められる（ＲＧＡＳ：Ｇｅｎｅｒａｌｌｙ  Ｒｅｇａｒｄｅｄ  Ａｓ  Ｓａｆｅ）成分からなる。カロリーは、対象の体重に従って消費される。１日目の間の総カロリー消費は、１ポンドあたり１８．８〜２９．２ｋＪ（４．５〜７ｋｃａｌ）（または１キログラムあたり４２〜６７ｋＪ）である。１日の食事は、１００グラム未満の炭水化物を、３０ｇ未満の糖、２８ｇ未満のタンパク質／アミノ酸、２０〜３０グラムの一価不飽和脂肪、６〜１０ｇの多価不飽和脂肪、および２〜１２ｇの飽和脂肪と共に含有するべきである。２〜５または２〜７日間の総カロリー消費は、１ポンドあたり１２．５〜２０．９ｋＪ（３〜５ｋｃａｌ）（または１キログラムあたり２９〜４６ｋＪ）である。食事は、１００グラム未満の炭水化物を、２０ｇ未満の糖、１８ｇ未満のタンパク質／アミノ酸、１０〜１５ｇの一価不飽和脂肪、３〜５ｇのポリ不飽和脂肪、および１〜６グラムの飽和脂肪と共に含有するべきである。食事はまた、ビタミン、ミネラル＋必須脂肪酸のＲＤＡの１００％を含有する高栄養であるべきである。
【００３４】
改変ヒト断食もどき食２：ＦＭＤは、対象の標準的な食事を、対象の疾患症状のタイプおよび重篤度、ならびに次のサイクルを開始する前に体重を取り戻す患者の能力に応じて、４〜１６週おきに４日の期間（下記参照）、代用することとなる。体重を取り戻すことが可能な、症候がより重篤な患者は、２週おきに食事を受けることとなり、疾患がより穏やかな形態である患者は、４週おきに食事を受けることとなる。ＦＭＤは、一般に安全と認められる（ＲＧＡＳ）成分からなる。カロリーは、対象の体重に従って消費される。１日目の間の総カロリー消費は、１ポンドあたり１８．８〜２９．２ｋＪ（４．５〜７ｋｃａｌ）（または１キログラムあたり４２〜６７ｋＪ）である。１日の食事は、１００グラム未満の炭水化物を、２５ｇ未満の糖、２３ｇ未満のタンパク質／アミノ酸、１６〜２５グラムの一価不飽和脂肪、４．８〜８ｇの多価不飽和脂肪、および１〜１０ｇの飽和脂肪と共に含有するべきである。２〜４日間の総カロリー消費は、１ポンドあたり１０〜１６．７ｋＪ（２．４〜４ｋｃａｌ）（または１キログラムあたり２２．２〜３６．８ｋＪ）である。食事は、１００グラム未満の炭水化物を、１６ｇ未満の糖、１５ｇ未満のタンパク質／アミノ酸、８〜１２ｇの一価不飽和脂肪、ならびに２〜４ｇの多価不飽和脂肪および１〜６グラムの飽和脂肪と共に含有するべきである。食事はまた、ビタミン、ミネラル＋必須脂肪酸のＲＤＡの１００％を含有する高栄養であるべきである。
【００３５】
改変ヒトケトジェニック食：ＫＤは、対象の疾患症状が残存するまで、対象の標準的な食事を連続的に代用することとなる。ケトジェニック食は、大多数が一価−多価不飽和脂肪および飽和脂肪に由来する食物源を含有するべきである。簡潔に、ケトジェニック食は、１日の総カロリー摂取量のうち、脂肪を５２．４〜８２．４％、炭水化物を１０〜１６．６％、そしてタンパク質を８〜１５％含有するべきである。食事はまた、ビタミン、ミネラル、および必須脂肪酸のＲＤＡの１００％を含有する高栄養であるべきである。
【００３６】
図２は、ＭＯＧ３５〜５５誘導ＥＡＥ  ＭＳマウスモデルの断食もどき食（ＦＭＤ）処置済みマウスの平均臨床ＥＡＥ重篤度スコアを示す棒グラフを提供する。実験的自己免疫性脳脊髄炎は、ヒト多発性硬化症に最も一般的に使用される齧歯類実験モデルである。断食もどき食（ＦＭＤ）の周期的サイクル（１週あたり３日のＦＭＤおよび４日のアドリブ）は、多発性硬化症のＭＯＧ３５〜５５誘導ＥＡＥ  Ｃ５７Ｂｌ／６マウスモデル、ならびに自己免疫の緩和および疾患の再発の予防に治療効果を有することが示される。断食もどき食（ＦＭＤ）の週毎のサイクルは、コントロール食（ＣＴＲＬ）と比較して、ＥＡＥ重篤度スコア（０−症候が観察可能でない、そして５−瀕死）を有意に引き下げる。連続的なケトジェニック食（ＫＤ）は、コントロールと比較して、ＦＭＤの範囲までではないがＥＡＥ重篤度の引下げを示した。
【００３７】
代用食のサイクルは、自己免疫疾患の症候に関連するＴ細胞集団およびサイトカインを減らし、そして、多発性硬化症（ＭＳ）および１型糖尿病（Ｔ１Ｄ）のマウスモデルにおける症候をインビボで軽減した。表２は、ＦＭＤが、３日のＦＭＤの終了後、ＭＳのマウスモデル中の脾臓ＣＤ４＋Ｔ細胞およびＣＤ８＋Ｔ細胞を減らすことを示す結果を提供する。
【００３８】
表３．ＦＭＤは、脾臓ＣＤ４＋  ＣＤ８＋Ｔ細胞を減らす。＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜０．０１。ＦＭＤは、３日のＦＭＤの終了後。
【００３９】
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【００４０】
表３は、ＦＭＤが、ＭＳのマウスモデルの脊髄病変にて、乏突起膠細胞前駆体を促進して乏突起膠細胞を分化させたことを示す。ＮＧ２を、未分化乏突起膠細胞前駆細胞のマーカーとして用いる。ＢｒｄＵを、増殖のマーカーとして用いる。ＧＳＴπを、分化乏突起膠細胞のマーカーとして用いる。ＢｒｄＵ＋  ＧＳＴπ＋細胞は、再生のマーカーとして、ミエリン形成機能乏突起膠細胞に分化する、新たに増殖した前駆細胞を示す。ＦＭＤ処置は、脊髄病変におけるＮＧ２＋乏突起膠細胞前駆細胞およびＧＳＴπ＋成熟乏突起膠細胞の増大を示す。前駆乏突起膠細胞および分化乏突起膠細胞の、ＦＭＤが介在した増大は、成熟乏突起膠細胞（ＢｒｄＵ＋  ＧＳＴπ＋）に首尾よく分化した増殖（ＢｒｄＵ＋細胞）の増大によるものである。これらの変化は、病変部位での再生を実証する。
【００４１】
表３．ＦＭＤは、乏突起膠細胞前駆体、および分化乏突起膠細胞を促進する。
【００４２】
2020096620.tif 000003
【００４３】
図３は、膵臓組織の蛍光染色を示す。膵臓浸潤Ｔ細胞（ＣＤ３＋）が、ＦＭＤのサイクルによって非常に減らされることが観察された。表４は、ＦＭＤが、ＳＴＺ誘導Ｉ型糖尿病において、病原性自己免疫反応を軽減することを実証する。表４は、ＦＭＤが、β細胞傷害と関連する循環サイトカインのレベルを引き下げることを示す。
【００４４】
表４．ＦＭＤは、循環細胞障害性ＣＤ８＋Ｔ細胞を減らす。＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜０．００５。ＦＭＤは、４日のＦＭＤの終了時；ポストＦＭＤは、再給餌の３日後。
【００４５】
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【００４６】
表４．ＦＭＤは、循環サイトカインのレベルを引き下げる。＊ｐ＜０．０５、＊＊＊ｐ＜０．００５。ＦＭＤは、４日のＦＭＤの終了時。
【００４７】
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【００４８】
図４は、ＦＭＤが、ヒト試験において、血清ＣＲＰレベルを引き下げ、かつコルチゾールレベルを増大させることを示す棒グラフである。ＣＲＰは、炎症性疾患の主なマーカーの１つであることが知られている。ＦＭＤ処置が、ヒト臨床試験におけるＣＲＰレベルの３倍の減少を示す。
【００４９】
図５は、ＦＭＤが、ヒト臨床試験において、循環コルチゾールのレベルを増大させることを示す。（＊ｐ＜０．０５；ｎ＝５）。コルチゾールは、Ｔ細胞増殖および活性化に干渉し、かつＴＮＦアルファが挙げられる多種多様な細胞障害性サイトカインを減少させることによって、抗炎症性であることが知られているグルココルチコイドのクラスにある。ＦＭＤ処置は、ヒト臨床試験において、コントロールと比較して、コルチゾールレベルの２倍近い増大を示す。
【００５０】
代用食のサイクルは、表５に要約されるように、野生型Ｃ５７Ｂｌ／６マウスにおける皮膚炎発生率の２倍の減少（コントロールコホートにおける２０％対ＦＭＤコホートにおける１０％）を示した。
【００５１】
表５．ＦＭＤは、自然皮膚炎発生率を引き下げる。＊ｐ＜０．０５。
【００５２】
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【００５３】
表６は、疾患誘導マウスのパーセンテージが、１型糖尿病ＳＴＺ自己免疫モデルおよびＭＳ  ＥＡＥ自己免疫モデルから回復した／改善を示したことを示す。
【００５４】
表６．ＦＭＤ食で処置したマウスにおける１型糖尿病および多発性硬化症の症候の５０〜１００％の改善。
【００５５】
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【００５６】
例示的な実施形態が上記されているが、これらの実施形態が、本発明の考えられる全ての形態を記載することは意図されない。むしろ、本明細書において用いられる文言は、限定ではなく説明のための文言であり、種々の変更が本発明の精神および範囲から逸脱することなくなされてよいことが理解される。加えて、種々の実施形態の特徴は、本発明の更なる実施形態を形成するために組み合わされてよい。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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