(57)【要約】【課題】睡眠の質の改善に有用な睡眠の質改善剤及び副交感神経活動の亢進に有用な副交感神経活動亢進剤の提供。【解決手段】ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩を有効成分とし、ノンレム睡眠持続時間を延長する、睡眠の質改善剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩を有効成分とし、ノンレム睡眠持続時間を延長する、睡眠の質改善剤。
【請求項２】
ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩を有効成分とし、睡眠を深くする、睡眠の質改善剤。
【請求項３】
ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩を有効成分とする副交感神経活動亢進剤。
【請求項４】
ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩を有効成分とし、ノンレム睡眠持続時間を延長する、睡眠の質改善用食品。
【請求項５】
ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩を有効成分とし、睡眠を深くする、睡眠の質改善用食品。
【請求項６】
ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩を有効成分とする副交感神経活動亢進用食品。
【請求項７】
ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩が、これらのうち少なくとも１つを含む植物又はその抽出物である請求項1〜3のいずれか１項に記載の剤又は請求項4〜6のいずれか１項に記載の食品。
【請求項８】
ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩を、成人（60 kg）1人当たり1日に、ロズマリン酸換算で0.1〜1000 mg経口投与又は摂取させる請求項1〜3のいずれか１項に記載の剤又は請求項4〜6のいずれか１項に記載の食品。
【請求項９】
ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩が、これらのうち少なくとも１つを含む植物又はその抽出物である請求項8に記載の剤又食品。
【請求項１０】
植物又はその抽出物が、赤紫蘇又は赤紫蘇エキスである、請求項7又は9に記載の剤又は食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、睡眠の質改善剤及び副交感神経活動亢進剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
人間は人生の約3分の1を「睡眠」に費やしており、睡眠は人間にとって最も重要な行為と考えられる。しかしながら、現代社会では、生活リズムの乱れやストレス、運動不足等により睡眠不足、不眠等の症状を訴える人が多く存在する。平成27年国民健康・栄養調査報告（厚生労働省，2017.）によれば、日本人の約5人に1人は、自身の睡眠全体の質に対して不満を抱えている。加えて、日本人の平均睡眠時間は、年々短くなっていることが報告されている。
【０００３】
睡眠の質は、加齢に伴い、低下する（非特許文献1）。平成29年版高齢社会白書（内閣府, 2017.）によると、少子高齢化が加速して2050年には日本国の高齢化率が40％に達すると公表されている。これらのことから、今後、高齢者数の増加に伴い、睡眠の質が低下した高齢者数が増加すると予想される。睡眠の質には、身体的要因の他、心理的要因、薬理学的要因、環境要因等の様々な要因が影響し、寝つきが悪い入眠障害、夜中に何度も目が覚める中途覚醒、朝早くに目が覚めてしまう早期覚醒、よく眠った感じがしない熟眠不全等を誘発する。睡眠の質の低下は、心筋梗塞や脳梗塞等の重大な疾患に繋がるだけでなく、日中の眠気や疲労から作業能率が低下し、重大な事故に繋がることから、その改善は重要な課題である。
加えて、自律神経機能についても、加齢に伴って低下することが報告されている（非特許文献2）。睡眠中の自律神経機能の評価指標と睡眠の深さは、同調する傾向を示すことが報告されており（非特許文献3）、睡眠の質と密接に関連のある自律神経機能を改善することも重要な課題である。
【０００４】
睡眠の質の低下に対する治療法としては、ベンゾジアゼピン系や抗ヒスタミン系等の睡眠改善医薬品による薬物療法が挙げられる。これら従来の医薬品は、睡眠改善効果を有するが、精神症状や筋弛緩作用等の副作用がある為、必ずしも十分な解決策とはなっていない。
【０００５】
一方で、食品由来の有効性成分を含有する睡眠改善飲食品は、食経験のある素材で構成されていることから、医薬品のような副作用は少ない。これまでに、睡眠改善効果を有する飲食品成分として、テアニン（特許文献1）、グリシン（特許文献2）、オルニチン（特許文献3）、γ-アミノ酪酸（gamma-Aminobutyric acid, GABA; 特許文献4）、アルギニン（特許文献5）、グルタチオン（特許文献6）、納豆菌等のバシラス・サブチルス（Bacillus subtilis）に属する微生物の菌体破砕物（特許文献7）、清酒酵母（特許文献8）、亜鉛及び糖類又は糖アルコール（特許文献9）、カゼイン加水分解物及びミネラル（特許文献10）、セサミン類（特許文献11）、カボチャ属種子抽出物（特許文献12）、トネリコ属植物若しくはその抽出エキス、シベリアカラマツエキス、ジヒドロケルセチン、ジヒドロケンフェロール又はナリンゲニン（特許文献13）等が開示されている。
【０００６】
しかしながら、これらの睡眠改善用飲食品は、睡眠の質を改善する一定の効果を示すものの、その効果は必ずしも十分とはいえなかった。このことから、睡眠改善用飲食品としてより睡眠の質の改善が可能な技術の開発が望まれている。
【０００７】
ロズマリン酸は、シソ科やムラサキ科、セリ科、アカネ科、オオバコ科等の植物に含まれている（非特許文献4)。ロズマリン酸は、これまでに、抗アレルギー作用や抗炎症作用等を有することが報告されている（非特許文献5）。
【０００８】
マウスにおける検討では、ペントバルビタールでGABA作動性神経が活性化されることによって誘発される睡眠様状態をロズマリン酸が有意に延長することが報告されている（非特許文献6）。しかしながら、当該文献では、ロズマリン酸単独の投与結果が示されていない為、ロズマリン酸によって自然睡眠において深い睡眠が誘発されたかについては明らかになっていない。
【０００９】
一方で、ヒトにおける検討では、認知機能向上の為の経口摂取素材として、ロズマリン酸を含有するスペアミント抽出物が開示されている（特許文献14）。当該文献では、少なくとも45日間、15質量％のロズマリン酸を含有するスペアミント抽出物を、年齢関連記憶障害（age-associated memory impairment: AAMI）を有する被験者に1日当たり600〜900 mg経口摂取することで、認知機能の改善効果を示している。さらに、睡眠に関しては、主観的な評価から、入眠の容易さと目覚めた後の覚醒と行動に改善効果を有することを示しているが、睡眠中における睡眠の質や睡眠からの目覚めの容易さに関しては有意な改善効果は確認されていない。
【００１０】
また、ロズマリン酸を8質量％含有するレモンバーム抽出物600 mgを15日間、不安障害を有する試験参加者に摂取させたところ、主観的な評価で入眠障害や中途・早朝覚醒に改善効果を有することが報告されている（非特許文献7）。しかし、当該文献では、睡眠中において深い眠りが誘発されて持続したかについては明らかになっていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】特許第4961087号公報
【特許文献２】特開2006-333872号公報
【特許文献３】特許第5053535号公報
【特許文献４】特開2007-63236号公報
【特許文献５】特開2007-230954号公報
【特許文献６】特開2008-56628号公報
【特許文献７】特開2008-137941号公報
【特許文献８】特開2015-214518号公報
【特許文献９】国際公開第2015/099102号
【特許文献１０】特開2009-13143号公報
【特許文献１１】特許第5925984号公報
【特許文献１２】特開2012-206943号公報
【特許文献１３】国際公開第2013/051727号
【特許文献１４】特表2017-527591号公報
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】Ohayon et al, Sleep, 27, 1255-1273, 2004.
【非特許文献２】田村 直俊ら, 日本老年医学会雑誌, 19(6), 563-570, 1982.
【非特許文献３】Ako et al, Psychiatry Clin Neurosci, 57, 59-65, 2003.
【非特許文献４】Petersen and Simmonds, Phytochemistry, 62(2), 121-125, 2003.
【非特許文献５】城戸 浩胤, オレオサイエンス, 4(10), 409-415, 2004.
【非特許文献６】Kwon et al, Biomolecules & Therapeutics, 25(2), 105-111, 2017.
【非特許文献７】Cases et al, Med J Nutrition Metab, 4(3), 211-218, 2011.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
本発明は、睡眠の質の改善に有用な睡眠の質改善剤及び副交感神経活動の亢進に有用な副交感神経活動亢進剤を提供することに関する。
【課題を解決するための手段】
【００１４】
本発明者らは、ロズマリン酸を摂取した場合に深い睡眠状態であるノンレム睡眠の持続時間が有意に延長し、睡眠の質が改善されることを見出した。さらに本発明者らは、ロズマリン酸によって副交感神経活動が亢進することを見出した。
【００１５】
すなわち、本発明は、以下の１）〜６）に係るものである。
１）ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩を有効成分とし、ノンレム睡眠持続時間を延長する、睡眠の質改善剤。
２）ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩を有効成分とし、睡眠を深くする、睡眠の質改善剤。
３）ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩を有効成分とする副交感神経活動亢進剤。
４）ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩を有効成分とし、ノンレム睡眠持続時間を延長する、睡眠の質改善用食品。
５）ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩を有効成分とし、睡眠を深くする、睡眠の質改善用食品。
６）ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩を有効成分とする副交感神経活動亢進用食品。
【発明の効果】
【００１６】
本発明の睡眠の質改善剤によれば睡眠中に深い睡眠であるノンレム睡眠の持続時間を延長させることができ、併せて、ノンレム睡眠の中でも深睡眠（Stage N3）を誘発・維持することで、睡眠の維持に対する実効感を得ることができる。また、本発明の副交感神経活動亢進剤によれば、交感神経活動に依らず、副感神経活動を亢進することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】実施例1において、ロズマリン酸の経口投与が副交感神経活動に与える効果を評価した結果を示す。交感神経活動の指標であるLF/HF（Low frequency（0.25-0.75 Hzの低周波領域のパワースペクトル）とHigh frequency（0.75-2.5 Hzの高周波数領域のパワースペクトル）の比）と副交感神経活動の指標であるHF、RMSSD（Root mean square of the successive difference; 連続して隣接する心拍間隔の差の2乗の平均値の平方根）を評価した。測定データ（N=9）は平均値＋標準誤差で表した。図中の*印は対照に対して統計学的に有意（t-検定; *: p<0.05）にHF及びRMSSDが増加したことを示す。
【図２】実施例2において、ロズマリン酸の経口投与が、ノンレム睡眠持続時間及びノンレム睡眠量に与える効果を評価した結果を示す。測定データ（N=10）は平均値＋標準誤差で表した。図中の*、**印は対照に対して統計学的に有意（t-検定; *: p<0.05、**: p<0.01）に、ノンレム睡眠持続時間が延長又はノンレム睡眠量が増加したことを示す。
【図３】実施例3でのロズマリン酸含有赤紫蘇エキス配合カプセルの摂取がヒトの睡眠の質に与える効果を評価した結果を示す。測定データ（図3A, C: N=16, 図3B, D, E: N=20）は平均値±標準偏差で表した。図中の*、**印は対照に対して統計学的に有意（ウィルコクソンの符号順位検定; *: p<0.05、**: p<0.01）に睡眠の深さ、及び睡眠の維持に対して実効感を有したことを示す。また、†印は対照に対して統計学的（t-検定; †: p<0.1）にノンレム睡眠中のδパワーが増強される傾向、及び、第1周期中においてノンレム睡眠の中で最も深い睡眠であるStage N3のノンレム睡眠量が増加する傾向であったことを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本発明で使用するロズマリン酸は、シソ科植物等に多く含まれるポリフェノールの一つで、下記式（1）で表される。
【００１９】
【化１】
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【００２０】
ロズマリン酸には、光学異性体が存在する。本発明のロズマリン酸は、いずれかの光学異性体であっても、光学異性体の混合物であってもよい。生理効果の観点から、好ましくはＲ体又は光学異性体混合物である。
【００２１】
また、ロズマリン酸の配糖体は、生体内で酵素的に加水分解されてロズマリン酸を生じるので、本発明においては、当該配糖体も遊離のロズマリン酸と同様に用いることができる。糖の結合位置はロズマリン酸の水酸基のいずれでもよく、また、糖の結合個数も特に限定されない。ロズマリン酸配糖体を構成する糖としては、例えば、グルコース、フコース、ガラクトース、6-デオキシグルコース、ラムノース等が挙げられる。
【００２２】
本発明のロズマリン酸又はその配糖体の塩としては、薬学的に許容される塩であればよく、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩、あるいは酸付加塩等が挙げられる。
ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩は、溶媒和物であっても無溶媒和物であってもよく、いずれも包含される。溶媒和物の好ましい例としては、水和物、アルコール和物あるいはアセトン和物等が挙げられる。
本発明において、ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩は、各々単独で用いてもよく、いずれか2種類以上を組み合わせて用いてもよい。
【００２３】
本発明において、ロズマリン酸若しくはその配糖体又はそれらの塩（以下、「ロズマリン酸類」とも称する）は、市販品を用いることができる。また、有機合成によって合成すること（Eicher et al, Synthesis, 1996(6), 755-762, 1996., Bogucki and Charlton, Can. J. Chem., 75(12), 1783-1794, 1997.）、或いはこれらを含有する植物体又は培養細胞から抽出・精製することにより取得することができる（特開昭62-32889号公報）。  
【００２４】
本発明において、ロズマリン酸類は、これらのうち少なくとも１つを含む植物又はその抽出物の形態で用いてもよい。
植物としては、例えば、シソ科（Lamiaceae）、ムラサキ科（Boraginaceae）、セリ科（Apiaceae）、アカネ科（Rubiaceae）、オオバコ科（Plantaginaceae）の植物が挙げられる。なかでも、ロズマリン酸類が多く含まれるシソ科植物が好ましい。シソ科植物としては、例えば、具体的にはアカジソ（Perilla  frutescens  var．crispa f．purpurea）、アオジソ（Perilla frutescens var．crispa f．viridis）、ローズマリー（Rosmarinus officinalis）、レモンバーム（Melissa officinalis）、セージ（Salvia officinalis）及びクミスクチン（Orthosiphon aristatus）等が挙げられ、本発明ではアカジソが好ましく用いられる。
植物の使用部位としては、特に限定されるものではなく、例えば、全草、葉、茎、芽、花、枝、根、種子等、並びにこれらの混合物が挙げられ、好ましくは葉である。これら部位は、そのまま又は粉砕、破砕、切断若しくは乾燥して用いることができる。
植物抽出物を得る抽出手段としては、例えば、固液抽出、液液抽出、浸漬、煎出、浸出、水蒸気蒸留、還流抽出、超音波抽出、マイクロ波抽出、撹拌等の任意の手段を用いることができる。  
【００２５】
抽出の為の溶媒には、極性溶媒、非極性溶媒のいずれをも使用することができる。溶媒の具体例としては、例えば、水；１価、２価又は多価のアルコール類；アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類；酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル類；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン等の鎖状又は環状のエーテル類；ポリエチレングリコール等のポリエーテル類；ヘキサン等の飽和又は不飽和の炭化水素類；ベンゼン、トルエン等の芳香族炭化水素類；ジクロロメタン、クロロホルム、ジクロロエタン、四塩化炭素等のハロゲン化炭化水素類；ピリジン類；ジメチルスルホキシド；アセトニトリル；二酸化炭素、超臨界二酸化炭素；油脂、ワックス、その他のオイル類；並びにこれらの混合物が挙げられる。好適には、水、アルコール類及びその水溶液が挙げられ、アルコール類としてはメタノール、エタノール、1,3-ブチレングリコール、n-プロパノール、イソプロパノール、n-ブタノール、イソブタノール、sec-ブタノール、t-ブタノール等が挙げられ、好ましくは水、エタノール及びエタノール水溶液である。
抽出における溶媒の使用量、抽出条件は、十分な抽出が行える条件であれば特に限定されず、適宜調整することができる。
【００２６】
本発明の植物抽出物は、例えば食品や医薬品上許容し得る規格に適合し、本発明の効果を発揮するものであれば粗精製物であってもよい。また、必要に応じて、液々分配、固液分配、濾過膜、活性炭、吸着樹脂、イオン交換樹脂、澱出し等の公知の技術によって不活性な夾雑物の除去、脱臭、脱色等の処理を施すことができる。
また、さらに公知の分離精製方法を適宜組み合わせてこれらの純度を高めてもよい。精製手段としては、有機溶剤沈殿、遠心分離、限界濾過膜、高速液体クロマトグラフやカラムクロマトグラフ等が挙げられる。
【００２７】
また、植物抽出物は、そのまま用いてもよく、適宜な溶媒で希釈した希釈液として用いてもよく、あるいは濃縮エキスや乾燥粉末、ペースト状に調製したものでもよい。また、凍結乾燥し、用時に、通常抽出に用いられる溶剤、例えば水、エタノール、水・エタノール混液等の溶剤で希釈して用いることもできる。また、リポソーム等のベシクルやマイクロカプセル等に内包させて用いることもできる。
【００２８】
本発明の植物又はその抽出物は、ロズマリン酸類が占める割合として、ロズマリン酸換算で、0.1質量％以上が好ましく、より好ましくは1質量％以上、さらに好ましくは10質量％以上含有することが好ましい。ロズマリン酸類は、高速液体クロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー等により定量することができる。
【００２９】
後述する実施例1では、ラットにロズマリン酸（100 mg/kg）を経口投与し、心拍変動の測定及び解析を行い、自律神経機能に与える効果を評価した。結果、ロズマリン酸は、投与直後の3時間で交感神経活動には影響を与えないものの、副交感神経活動の指標であるHFとRMSSDを有意に増加させることを確認した（図1）。すなわち、ロズマリン酸類は、交感神経活動に依らず、副交感神経活動を亢進する効果を発揮する。
【００３０】
また、後述する実施例2では、ラットにロズマリン酸（100 mg/kg）を経口投与し、脳波と筋電の測定結果から、睡眠の質を評価した。結果、ロズマリン酸は、投与直後の3時間で、深い睡眠であるノンレム睡眠の持続時間を延長し、ノンレム睡眠量を有意に増加させることを確認した（図2）。すなわち、ロズマリン酸類は、ノンレム睡眠持続時間を延長する効果、それによってノンレム睡眠量を増加させる効果を発揮する。
【００３１】
また、後述する実施例3では、被験者に就寝前に、ロズマリン酸（100 mg/日）を含有する赤紫蘇エキスを配合したカプセルを継続摂取させ、睡眠中の脳波測定を行い、さらにOSA睡眠調査票（山本 由華吏ら, 脳と精神の医学, 10, 401-409, 1999.）と視覚的評価スケール（VAS）により評価を行った。結果、ロズマリン酸を含有する赤紫蘇エキス配合カプセルを摂取することで、ノンレム睡眠中のδパワーが増強する傾向、及び第1周期中におけるStage N3の深いノンレム睡眠量が増加する傾向にあった（図3A, C）。また、入眠に対する明確な実効感は確認されなかったものの（図3E）、深い睡眠及び睡眠の維持に対して実効感を有した（図3B, D）。すなわち、ロズマリン酸類は、睡眠の深さを深める効果、深睡眠を持続させることで深睡眠量を増加させる効果を発揮する。
【００３２】
従って、ロズマリン酸類は、ノンレム睡眠持続時間を延長する睡眠の質改善剤、睡眠を深くする睡眠の質改善剤、又は副交感神経活動亢進剤となり、またこれを製造する為に使用することができる。また、ロズマリン酸類は、ノンレム睡眠持続時間を延長する睡眠の質改善、睡眠を深くする睡眠の質改善、又は副交感神経活動の亢進の為に使用することができる。ここで、「使用」は、ヒト又は非ヒト動物における使用であり、また治療的使用であっても非治療的使用であってもよい。「非治療的」とは、医療行為を含まない概念、すなわち人間を手術、治療又は診断する方法を含まない概念、より具体的には医師又は医師の指示を受けた者が人間に対して手術、治療又は診断を実施する方法を含まない概念である。
【００３３】
睡眠の質を評価する手法としては、実験動物を用いた場合、実験動物の頭部頭蓋骨上に脳波、筋電を測定する電極を装着して有線ケーブルを用いて測定する手法、体内に送信器を埋め込んで生体内の生理指標の情報を無線で飛ばすテレメトリーシステムを用いる手法等が挙げられる。一方で、ヒトの場合、脳波計等を用いた非侵襲的な測定による客観的な評価方法や、視覚的評価スケール（VAS）やOSA睡眠調査票等のアンケートによる主観的な評価方法が挙げられる。
睡眠判定は、測定脳波の結果から実施する。実験動物であるラット等の齧歯類の場合、覚醒、レム睡眠、ノンレム睡眠に判別される。一方で、ヒトの場合は、覚醒、レム睡眠、浅いノンレム睡眠（Stage N1, N2）、深いノンレム睡眠（Stage N3）に判別される。睡眠判別結果から、各睡眠量や睡眠持続時間、睡眠回数を算出し、睡眠の質を評価することができる。また、睡眠の深さは、ノンレム睡眠中のδパワー値又はノンレム睡眠のStage N3量で評価することができる。
【００３４】
本発明において、副交感神経活動の亢進は、自律神経活動において交感神経活動に依らず副交感神経活動が亢進状態にあることを意味する。一般的に自律神経機能は、心拍変動を解析し、LF（低周波数帯のパワースペクトルで、交感神経と副交感神経の両方の活動を反映する）やHF（高周波帯のパワースペクトルで、副交感神経の活動を反映する）、LF/HF比（交感神経と副交感神経の全体のバランスを表し、高値では交感神経活動優位、低値では副交感神経活動優位であることを示す）、RMSSD（連続して隣接する心拍間隔の差の2乗の平均値の平方根であり、副交感神経活動との関連がある）を調べることによって評価することができる。副交感神経活動の指標はHF、RMSSDであり、HFやRMSSDの増加は副交感神経活動の亢進を意味する。副交感神経活動の亢進により、心拍数の低下や血圧の低下等が誘発される。
副交感神経活動を評価する手法としては、マウスやラット等の実験動物を用いた場合、実験動物の体内に送信器を埋め込んで、心拍変動の情報を無線で飛ばすテレメトリーシステムを用いる手法等が挙げられる。ヒトの場合、心拍変動モニター等による非侵襲的な測定方法が挙げられる。
【００３５】
本発明の睡眠の質改善剤及び副交感神経活動亢進剤は、ヒトを含む動物に投与又は摂取した場合に、ノンレム睡眠持続時間を延長する睡眠の質改善効果、睡眠を深くする睡眠の質改善効果、副交感神経活動亢進効果を発揮する医薬品、医薬部外品又は食品となり、また当該医薬品、医薬部外品又は食品に配合して使用される素材又は製剤となり得る。当該医薬品等は、ロズマリン酸類を、ノンレム睡眠持続時間を延長する睡眠の質を改善する為の、睡眠を深くする睡眠の質を改善する為の、又は副交感神経活動を亢進する為の有効成分として含有する。
当該食品には、ノンレム睡眠持続時間を延長する睡眠の質改善、睡眠を深くする睡眠の質改善、副交感神経活動亢進を訴求とし、必要に応じてその旨の表示が許可された食品（特定保健用食品、機能性表示食品、栄養機能食品、病者用食品）が含まれる。表示の例として、睡眠の質を高める、健康に良い睡眠を維持する、夜間の良質な睡眠をサポートする等が挙げられる。
【００３６】
当該医薬品（医薬部外品も含む）の投与形態としては固形、半固形又は液状であり、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等による経口投与形態；注射剤、坐剤、吸入剤、皮膚外用剤等の非経口投与形態が挙げられる。好ましい形態は経口投与である。
このような種々の剤型の製剤は、常法に従って、ロズマリン酸類を単独で、又は必要に応じて他の薬学的に許容される担体、例えば、賦形剤、結合剤、増量剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、嬌味剤、香料、被膜剤、担体、希釈剤等を適宜組み合わせることにより、調製することができる。
【００３７】
当該食品の形態としては、固形、半固形又は液状であり、飲料を含む。当該食品の例としては、例えば、パン類、ケーキ類、麺類、菓子類、ゼリー類、冷凍食品、アイスクリーム類、乳製品、飲料等の各種食品の他、上述した経口投与形態と同様の形態（錠剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤等）、サプリメントが挙げられる。種々の形態の食品は、常法に従って、ロズマリン酸類を単独で、又は必要に応じて他の食品材料、例えば、溶剤、軟化剤、油、乳化剤、防腐剤、香科、安定剤、着色剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤等を適宜組み合わせることにより調製することができる。
【００３８】
本発明の睡眠の質改善剤、副交感神経活動亢進剤におけるロズマリン酸類の配合量又は含有量は、その使用形態により適宜決定することができる。
例えば、食品若しくは経口投与製剤で且つ錠剤、顆粒剤、丸剤、散剤、グミ剤等の固形の場合は、ロズマリン酸量換算で、0. 1質量％以上が好ましく、0. 5質量％以上がより好ましく、1質量％以上がさらに好ましく、5質量％以上がさらに好ましく、10質量％以上がさらに好ましい。また、100質量％以下が好ましく、95質量％以下がより好ましく、90質量％以下がさらに好ましく、80質量％以下がさらに好ましく、70質量％以下がさらに好ましい。食品若しくは経口投与製剤で且つ液剤、シロップ剤、懸濁剤、乳剤、エリキシル剤、ゼリー剤等の液体の場合は、ロズマリン酸量換算で、0.001質量％以上が好ましく、0.005質量％以上がより好ましく、0.01質量％以上がさらに好ましく、0.05質量％以上がさらに好ましい。また、100質量％未満が好ましく、50質量％以下がより好ましく、30質量％以下がさらに好ましく、20質量％以下がさらに好ましい。
【００３９】
上記食品若しくは製剤の投与量又は摂取量は、個体の状態、体重、性別、年齢又はその他の要因に従って適宜選択、決定できる。例えば、成人（60 kg）１人あたりの1日の経口投与又は摂取量としては、ロズマリン酸量換算で、0.1 mg以上が好ましく、0.5 mg以上がより好ましく、1 mg以上がさらに好ましく、5 mg以上がさらに好ましく、10 mg以上がさらに好ましい。また、1000 mg以下が好ましく、800 mg以下がより好ましく、700 mg以下がさらに好ましく、500 mg以下がさらに好ましい。本発明では斯かる量を１日に１回又は複数回に分けて投与又は摂取するのが好ましい。
【００４０】
また、上記食品若しくは製剤は、任意の計画に従って投与又は摂取される。投与又は摂取期間は特に限定されず、単回でもよく、反復・連続して投与又は摂取してもよい。反復・連続して投与又は摂取する場合は、2日間以上、好ましくは8日間以上、より好ましくは30日間以上連続して投与又は摂取することがより好ましい。
【００４１】
上記食品若しくは製剤の投与又は摂取対象としては、それを必要とする若しくは希望するヒト又は非ヒト動物であれば特に限定されない。好ましくは、睡眠の質が低下している又は低下のおそれがあるヒト又は非ヒト動物、睡眠障害を有するヒト又は非ヒト動物、あるいは、副交感神経活動の低下に伴う自律神経失調症状や不定愁訴症状等を有するヒト又は非ヒト動物、さらに好ましくは中途覚醒を有するヒト又は非ヒト動物、あるいは、睡眠が浅いヒト又は非ヒト動物が挙げられる。
【実施例】
【００４２】
（ラットへの送信機埋め込み）
被験動物として10週齢の雄性ラット（Wistar，SLC Inc）を用いた（n=9-10）。ラットは、室温23±2℃、湿度55±10%、12時間の明暗サイクル下（午前7時に点灯、午後7時に消灯）で飼育した。飼育期間中は、CE-2固形食の自由摂食、水の自由飲水の条件下で飼育した。脳波、筋電、心電測定の為、テレメトリー送信機（TL10M3-F50-EEE, DataSciences International (DSI)）をラットの体内に埋め込み手術を施した。ラットへの電極装着手術は以下のように実施した。まず、腹腔内にテレメトリー送信機を留置し、脳波取得用電線を、ステンレス製ビスを用いてラット頭蓋骨上に固定し、歯科用セメントで頭蓋骨上を被覆した。また、筋電図取得用の2本の電線を左右の僧帽筋上に留置した。その後、心電取得用電線2本を胸部右上側、及び胸部左下側の胸筋上に留置した。手術後、ラットは通常の飼育ケージにおいて、通常食の自由摂食下、及び、水道水の自由飲水下で7日間以上安静にさせた。
【００４３】
実施例1：ロズマリン酸の経口投与がラットの自律神経機能に与える効果
術後安静期間を経たラットを脳波、心電測定専用のケージに移し、環境変化に対する馴化を行った。測定専用ケージ内で馴化させた後、脳波、筋電、心電のデータ測定を開始した。測定データはテレメトリー送信機（TL10M3-F50-EEE, DSI）から受信ボード（RPC-1, DSI）を介して、データ取得解析システム（Dataquest ART, DSI）により取得した。経口投与を実施する前に、経口投与素材であるロズマリン酸（Carbosynth Limited）は、滅菌精製水で溶解させて、ロズマリン酸溶液を調製した。暗期の開始時刻である午後7時の前後15分間のタイミングで、ロズマリン酸溶液を、経口ゾンデを用いて、4 mL/kg体重（ロズマリン酸100 mg/kg体重）の投与量でラットに経口投与した。対照投与群は、滅菌精製水を4 mL/kg体重の投与量で投与した。経口投与後は、少なくとも12時間以上のデータを取得した。当該試験は、クロスオーバー法で実施し、最低1週間のウォッシュアウト期間を経てから異なる投与素材を経口投与した。
【００４４】
得られた心電の結果から、心電図解析ソフト（LabChart v8.0 & HRV v1.4, AD Instruments Co.）を用いて、高速フーリエ変換を用いた周波数領域解析、及び、1分毎に時間領域解析を実施した。この際に、明らかなノイズにより正確な心拍間隔が得られていない区分は解析結果より削除した。周波数領域解析の結果から、交感神経活動の指標である低周波領域と高周波領域のパワースペクトル比（LF/HF）と副交感神経活動の指標である高周波数領域パワースペクトル（HF）、時間領域解析の結果から心臓副交感神経活動の指標である連続した心拍間隔の差の二乗平均平方根（RMSSD）を算出した。測定結果は、平均値＋標準誤差で表した。対照投与群との比較は、対応のないt-検定を実施し、p<0.05を有意差ありとした。
【００４５】
ロズマリン酸を経口投与した群では、経口投与直後の3時間で、交感神経活動に有意な変化は認められなかったものの（図1A）、副交感神経活動の指標であるHFとRMSSDは増加した（図1B, C）。このことから、ロズマリン酸の経口投与は、交感神経活動に依らず、副交感神経活動を亢進させることが確認された。
【００４６】
実施例2：ロズマリン酸の経口投与がラットの睡眠の質に与える効果
実施例1で得られた脳波と筋電の情報から、睡眠の質に与える効果を解析した。
【００４７】
測定した脳波と筋電の結果から、10秒間のデータを1区間とし、各区間の睡眠及び覚醒の状態を判別した。睡眠及び覚醒の状態の判別には、脳波記録ソフトウェア「SleepSign」（キッセイコムテック株式会社）を使用し、脳波と筋電位の周波数成分及び波形から、各区間を覚醒、ノンレム睡眠、レム睡眠のいずれかに研究員自身が目視で判定した。投与直後3時間の脳波と筋電のデータを解析し、投与直後から3時間までのノンレム睡眠持続時間とノンレム睡眠量の平均値を算出した。測定結果は、平均値±標準誤差で表した。対照投与群との比較は、対応のないt-検定を実施し、p<0.05を有意差ありとした。
【００４８】
ロズマリン酸を経口投与した群では、経口投与後で、ノンレム睡眠の持続時間が延長し（図2A）、ノンレム睡眠量が増加した（図2B）。これらの結果より、ロズマリン酸の経口投与は、深い睡眠を自然に誘発させるとともに、深い睡眠を持続させることで、ロズマリン酸による睡眠の質の改善効果をもたらすことが明らかとなった。
【００４９】
（処方例1）カプセル剤の調製
以下に示すカプセル1個あたりの組成で、カプセル剤を調製した。赤紫蘇エキス末（赤紫蘇エキスRA15P; Lot No. 160902, 日農化学工業株式会社）及び澱粉を食用ハードカプセル（2号カラメルカプセル, カプスゲル・ジャパン株式会社）に封入して、カプセル剤とした。ロズマリン酸含有率が22.6質量%の赤紫蘇エキス末（高速液体クロマトグラフィーによる測定）を使用し、1日当たりカプセル剤を3個摂取することで、100 mg相当のロズマリン酸を摂取することができるように調製した。尚、プラセボは、澱粉とセルロースを食用ハードカプセルに封入して調製した。
（表１）
ロズマリン酸含有赤紫蘇エキス末配合カプセル組成
赤紫蘇エキスRA15P（Lot No. 160902, 日農化学工業株式会社）         147.47 mg
STスターチP（日澱化学株式会社）                                    82.53 mg
合計  230.00 mg/個
プラセボカプセル組成
STスターチP（日澱化学株式会社）                                    150.00 mg
セオラスFD-101（旭化成株式会社）                                   100.00 mg
合計  250.00 mg/個
【００５０】
実施例3：ロズマリン酸含有赤紫蘇エキス配合カプセルの摂取がヒトの睡眠の質に与える効果
ヒトにおける有効性試験は、二重盲検クロスオーバー試験により実施した。事前のアンケートより、自身の睡眠の質に不満を抱えていると回答し、且つ試験参加への同意が得られた20〜50歳代の男性20名を被験者として選抜した。当該被験者に就寝30〜60分前のタイミングで、ロズマリン酸（100 mg/日）を含有する赤紫蘇エキス配合カプセル、若しくは、プラセボカプセルを8日間継続摂取させた。摂取前と摂取8日目に、脳波計（脳波センサZA-9, 株式会社プロアシスト）を用いて、被験者の睡眠中の脳波データを取得した。取得した脳波データを、外部機関（キッセイコムテック株式会社）に依頼し、30秒1区切りで睡眠/覚醒を判定した。睡眠/覚醒判定結果を元に、入眠までの時間や睡眠効率、睡眠/覚醒時間、δパワー（総ノンレム睡眠中の1〜4 Hz領域のδ含有量の平均値）を算出した。起床後に、アンケート（OSA睡眠調査票（山本 由華吏ら, 脳と精神の医学, 10, 401-409, 1999.）と視覚的評価スケール（VAS））の記入を依頼した。当該試験では、脳波測定による客観的な評価とアンケートによる主観的な評価より、睡眠の質を評価した。被験カプセルを摂取終了後は、3週間以上のウォッシュアウト期間を経てから、異なる被験カプセルを8日間摂取させて、同様に睡眠の質を評価した。
【００５１】
脳波からの睡眠状態の判定には、被験者20名の内、就床から起床までの睡眠中の脳波データを取得することができた16名分の測定データを用いた。評価結果は、平均値±標準偏差で表した。ロズマリン酸含有赤紫蘇エキス摂取群とプラセボ摂取群との比較は、対応あるt-検定を実施し、p<0.1を有意傾向とした。また、アンケートを用いた主観的評価は被験者20名分の結果を解析に使用し、プラセボ摂取群との比較は、ウィルコクソン符号付順位検定を実施し、p<0.05を有意差ありとした。
【００５２】
ロズマリン酸含有赤紫蘇エキス摂取群では、睡眠の深さの指標であるノンレム睡眠中のδパワーが増強する傾向が確認された（図3A）。また、VASによる主観的な評価の結果から、ロズマリン酸含有赤紫蘇エキス摂取群では、睡眠の深さが有意に深くなることが示された（図3B）。加えて、入眠直後の第1周期中において、ノンレム睡眠の中で最も深い睡眠であるStage N3のノンレム睡眠量が増加する傾向が確認された（図3C）。これらの結果より、ロズマリン酸を摂取することで、入眠直後から持続的な深い睡眠が誘発され、その後起床までの睡眠全体を通して深い睡眠が得られることが明らかとなった。さらに、OSA睡眠調査票の結果から、睡眠の質を評価する「入眠と睡眠の維持」の項目について、被験カプセル摂取前では、日本人男女670名の平均スコア（平均±標準偏差: 21.1±6.8; 山本 由華吏ら, 脳と精神の医学, 10, 401-409, 1999.）よりも低値を示したが（プラセボカプセル摂取前: 15.0±7.1, ロズマリン酸含有赤紫蘇エキス配合カプセル摂取前: 14.0±6.8）、ロズマリン酸含有赤紫蘇エキス配合カプセルを8日間摂取した後では、日本人男女670名の平均スコアと同等レベルまで改善した（ロズマリン酸含有赤紫蘇エキス配合カプセル摂取後: 20.4±5.1, 図3D）。一方で、プラセボカプセルを8日間摂取した後では、「入眠と睡眠の維持」に対して改善効果が確認されなかった（プラセボカプセル摂取後: 16.1±6.0, 図3D）。また、VASによる主観的な評価の結果から、ロズマリン酸含有赤紫蘇エキス配合カプセルを摂取しても、入眠に対する明確な改善効果は確認されなかったことから（図3E）、ロズマリン酸含有赤紫蘇エキス配合カプセルは、特に「睡眠の維持」に対して改善効果を有することが明らかとなった。
【００５３】
以上より、ロズマリン酸は、副交感神経活動を亢進させるとともに、ノンレム睡眠の中でも特に深い睡眠を誘発・維持し、深い睡眠の維持に対して実効感を有することが示された。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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