(57)【要約】【課題】Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属細菌、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ属細菌及び大腸菌からなる群から選択される細菌に対して抗菌性を有する抗菌剤の提供。【解決手段】式（１）で示されるイミノ化合物及び／又はその化学的に許容される塩を有効成分として含む抗菌剤。【化１】2020075884.tif 000032（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、各々独立に、水素原子、炭素数１から４のアルキル基、炭素数１から４のアルキルオキシ基、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、又はフェニル基を表す。該フェニル基は、炭素数１から４のアルキル基又はハロゲン原子で置換されていてもよい。Ｘは、アミノ基又は炭素数１から４のアルキルオキシ基を表す。）【選択図】  なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（１）で示されるイミノ化合物及び／又はその化学的に許容される塩を有効成分として含むことを特徴とする抗菌剤。
【化１】
2020075884.tif 000030
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、各々独立に、水素原子、炭素数１から４のアルキル基、炭素数１から４のアルキルオキシ基、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、又はフェニル基を表す。該フェニル基は、炭素数１から４のアルキル基又はハロゲン原子で置換されていてもよい。Ｘは、アミノ基又は炭素数１から４のアルキルオキシ基を表す。）
【請求項２】
一般式（１）において、Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５が各々独立に、水素原子、炭素数１から４のアルキル基、炭素数１から４のアルキルオキシ基、ハロゲン原子、ニトロ基、又はフェニル基であることを特徴とする、請求項１に記載の抗菌剤。
【請求項３】
一般式（１）において、Ｘがアミノ基であることを特徴とする、請求項１又は２に記載の抗菌剤。
【請求項４】
イミノ化合物が下記（１−１）、（１−２）、（１−３）、（１−４）及び（１−５）からなる群より選ばれる少なくとも１種、又はその化学的に許容できる塩である、請求項１に記載の抗菌剤。
【化２】
2020075884.tif 000031
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はイミノ化合物及び／又はその化学的に許容される塩を有効成分として含む抗菌剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
製品の品質保持、衛生的な環境の確保、悪臭防止等の目的で抗菌剤が利用されている。しかしながら、抗菌剤ごとに抗菌性を示す細菌の種類が異なる。また、抗菌剤を継続して用いると、細菌が抗菌剤に対して耐性を獲得し、抗菌効果が低下する傾向がある。そのため、新たな抗菌剤の開発が常に求められている。
【０００３】
非特許文献１及び特許文献１、２には、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属細菌、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ属細菌、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｃｅａｅ科細菌［特に大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）］等は、住環境におけるエアコン、トイレ、台所、浴室等に存在し、悪臭、汚れ等を誘発する旨、開示されている。これらのことから、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属細菌、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ属細菌及び大腸菌は、生活環境の快適性や衛生面に対して悪影響を及ぼすことが懸念され、これらの細菌に対する抗菌剤が望まれている。
【０００４】
非特許文献２には、芳香族アミジン等のイミノ化合物が低い抗菌性を示すことが開示されているが、芳香族アミジン等のイミノ化合物がＭｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属細菌、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ属細菌及び大腸菌に対して抗菌性があることは知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特表２０１７−５０００２５号公報
【特許文献２】特開２０１２−３６１７９号公報
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Ｈａｔａｙａｍａ  ｅｔ  ａｌ．Ａｎｔｏｎｉｅ  ｖａｎ  Ｌｅｅｕｗｅｎｈｏｅｋ，２０１８年，１１１巻，４５−５３頁．
【非特許文献２】Ｍｏｎｔｅ  ｅｔ  ａｌ．Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｂｒａｚｉｌｉａｎ  Ａｃａｄｅｍｙ  ｏｆ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，２０１７年，８９巻，１０５１−１０５９頁．
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属細菌、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ属細菌及び大腸菌からなる群から選択される細菌に対して高い抗菌性を有する抗菌剤を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは鋭意検討を行なった結果、特定のイミノ化合物又はその化学的に許容される塩が、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属細菌、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ属細菌及び大腸菌からなる群から選択される細菌に対して高い抗菌性を有することを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００９】
すなわち、本発明は以下の通りである。
［１］下記一般式（１）で示されるイミノ化合物及び／又はその化学的に許容される塩を有効成分として含むことを特徴とする抗菌剤。
【００１０】
【化１】
2020075884.tif 000002
【００１１】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５は、各々独立に、水素原子、炭素数１から４のアルキル基、炭素数１から４のアルキルオキシ基、ハロゲン原子、シアノ基、ニトロ基、又はフェニル基を表す。該フェニル基は、炭素数１から４のアルキル基又はハロゲン原子で置換されていてもよい。Ｘは、アミノ基又は炭素数１から４のアルキルオキシ基を表す。）
［２］一般式（１）において、Ｒ１が水素原子であり、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５が各々独立に、水素原子、炭素数１から４のアルキル基、炭素数１から４のアルキルオキシ基、ハロゲン原子、ニトロ基、又はフェニル基であることを特徴とする、前記［１］に記載の抗菌剤。
［３］一般式（１）において、Ｘがアミノ基であることを特徴とする、前記［１］又は［２］に記載の抗菌剤。
［４］イミノ化合物が下記（１−１）、（１−２）、（１−３）、（１−４）及び（１−５）からなる群より選ばれる少なくとも１種、又はその化学的に許容される塩である、前記［１］に記載の抗菌剤。
【００１２】
【化２】
2020075884.tif 000003
【発明の効果】
【００１３】
本発明により、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属細菌、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ属細菌及び大腸菌からなる群から選択される細菌に対して抗菌性を有するイミノ化合物又はその化学的に許容される塩を有効成分として含む抗菌剤が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】９６穴マイクロプレートを用いた最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）測定法での被験物質溶液と試験菌の配置（抗菌性評価）
【図２】９６穴マイクロプレートを用いた最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）測定法での被験物質溶液と試験菌の配置（防カビ性評価）
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下、本発明の実施の形態について説明する。
【００１６】
本発明は、下記一般式（１）で示されるイミノ化合物（以下、本発明のイミノ化合物（１）ということがある。）又はその化学的に許容される塩を有効成分として含むことを特徴とする抗菌剤に関する。
【００１７】
【化３】
2020075884.tif 000004
【００１８】
本発明のイミノ化合物（１）におけるＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＸの定義について説明する。
【００１９】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５で表される炭素数１から４のアルキル基は、直鎖状、分岐状又は環状アルキル基のいずれでもよく、特に限定するものではないが、具体的には、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、シクロプロピル基、ブチル基、１−メチルプロピル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、シクロブチル基等を例示することができる。該アルキル基としては、抗菌性に優れる点で、直鎖状アルキル基が好ましく、メチル基がさらに好ましい。
【００２０】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５で表される炭素数１から４のアルキルオキシ基は、直鎖状、分岐状又は環状アルキルオキシ基のいずれでもよく、特に限定するものではないが、具体的には、メトキシ基、エトキシ基、１−メチルエチルオキシ基、１，１−ジメチルエチルオキシ基、プロピルオキシ基、１−メチルプロピルオキシ基、シクロプロピルオキシ基、ブチルオキシ基、シクロブチルオキシ基等を例示することができる。該アルキル基としては、抗菌性に優れる点で、直鎖状アルキルオキシ基が好ましく、メトキシ基がさらに好ましい。
【００２１】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５で表されるハロゲン原子としては、特に限定するものではないが、具体的には、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、又はヨウ素原子を例示することができ、抗菌性に優れる点で、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子が好ましい。
【００２２】
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４及びＲ５で表されるフェニル基は、一つ以上の炭素数１から４のアルキル基又はハロゲン原子で置換されていてもよい。炭素数１から４のアルキル基としては、前述した炭素数１から４のアルキル基と同様のものを例示することができる。ハロゲン原子としては、前述したハロゲン原子と同様のものを例示することができる。
【００２３】
Ｘはアミノ基又は炭素数１から４のアルキルオキシ基を表し、該炭素数１から４のアルキルオキシ基は、直鎖状、分岐状又は環状アルキルオキシ基のいずれでもよく、特に限定するものではないが、具体的には、メトキシ基、エトキシ基、１−メチルエチルオキシ基、１，１−ジメチルエチルオキシ基、プロピルオキシ基、１−メチルプロピルオキシ基、シクロプロピルオキシ基、ブチルオキシ基、シクロブチルオキシ基等を例示することができ、合成が容易である点で、直鎖状アルキルオキシ基が好ましく、エチル基がさらに好ましい。
【００２４】
Ｘは、抗菌性に優れる点で、アミノ基又は直鎖状アルキルオキシ基が好ましく、アミノ基がさらに好ましい。
【００２５】
本発明のイミノ化合物（１）としては、具体的には下記の化学式（１−１）から化学式（１−３３）に示す構造を例示することができるが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２６】
【化４】
2020075884.tif 000005
【００２７】
【化５】
2020075884.tif 000006
【００２８】
【化６】
2020075884.tif 000007
【００２９】
【化７】
2020075884.tif 000008
【００３０】
【化８】
2020075884.tif 000009
【００３１】
【化９】
2020075884.tif 000010
【００３２】
【化１０】
2020075884.tif 000011
【００３３】
本発明のイミノ化合物（１）としては、抗菌性の面から、化学式（１−１）から化学式（１−１６）の構造で示される化合物が好ましく、化学式（１−１）から化学式（１−５）の構造で示される化合物がさらに好ましい。
【００３４】
本発明のイミノ化合物（１）は、その化学的に許容される塩の形態であってもよく、本発明のイミノ化合物（１）の化学的に許容される塩としては、無機酸塩又は有機酸塩のいずれでもよく、無機酸塩としては塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩、リン酸塩、ケイ酸塩、テトラフルオロホウ酸塩、ヘキサフルオロリン酸塩等を、有機酸塩としては、ギ酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、フタル酸塩、シュウ酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、トリフルオロメタンスルホン酸塩、トリフルオロ酢酸塩等を例示することができる。これらのうち、安価である点で無機酸塩が好ましく、塩酸塩がさらに好ましい。
【００３５】
本発明のイミノ化合物（１）又はその化学的に許容される塩は水和物であってもよい。
【００３６】
本発明のイミノ化合物（１）又はその化学的に許容される塩は、当業者の良く知る汎用的な方法で製造することができ、例えば、Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９０年，３３巻，１２３０−１２４１頁、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，２０１４年，７０巻，１６３５−１６４５頁、又は参考例−１から９に開示された方法に従い、製造することができる。また、市販品を用いてもよい。
【００３７】
本発明のイミノ化合物（１）又はその化学的に許容される塩は、そのまま抗菌剤として用いてもよいが、適当な担体及び補助剤、例えば界面活性剤、増粘剤、酸化防止剤等を配合して、常法によって、粉剤、粒剤、水和剤、乳剤、液剤、エアゾル剤、固形剤、塗布剤等の製剤の形態で抗菌剤として提供してもよい。本発明の抗菌剤中の有効成分である本発明のイミノ化合物（１）又はその化学的に許容される塩の含有量は、製剤全体の０．００１重量％から１００重量％である。だだし、１００重量％の場合とは、有効成分である本発明のイミノ化合物（１）又はその化学的に許容される塩をそのまま用いることを意味する。
【００３８】
本発明の抗菌剤に用いることができる担体としては、抗菌剤に含まれる担体として常用されるものであってよく、固体又は液体のいずれでもよく、特定の担体に限定されない。例えば、固体担体としては、プラスチック（ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、ポリカーボネート、ポリスルホン、ポリアミド、ポリフェニレンオキシド等）、鉱物性粉末（カオリン、ベントナイト、クレー、モンモリロナイト、珪藻土、雲母、バーミキュライト、石膏、炭酸カルシウム、リン、石灰、ホワイトカーボン、消石灰、珪砂、硫安、尿素等）、植物性粉末（大豆粉、小麦粉、木粉、澱粉、結晶セルロース等）、アルミナ、珪酸塩、糖重合体、高分散性珪酸、ワックス類等が挙げられる。また、液体担体としては、水、アルコール類（メチルアルコール、エチルアルコール、ｎ−プロピルアルコール、イソプロピルアルコール、エチレングリコール、ベンジルアルコール等）、芳香族炭化水素類（ベンゼン、トルエン、キシレン、エチルベンゼン、クロルベンゼン、クメン、メチルナフタレン等）、ハロゲン化炭化水素類（クロロホルム、四塩化炭素、ジクロロメタン、クロロエチレン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン等）、エーテル類（エチルエーテル、エチレンオキサイド、ジオキサン、テトラヒドロフラン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン、シクロヘキサン、メチルイソブチルケトン等）、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル、エチレングリコールアセテート、ジオクチルフタレート、酢酸アミル等）、ニトリル類（アセトニトリル、プロピオニトリル、ベンゾニトリル、アクリロニトリル等）、スルホキシド類（ジメチルスルホキシド等）、アルコールエーテル類（エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールモノエチルエーテル、１−メトキシ−２−プロパノール等）、アミン類（エチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、イソブチルアミン、トリエチルアミン、ジエチルアミン等）、脂肪族又は脂環族炭化水素類（ｎ−ヘキサン、シクロヘキサン等）、工業用ガソリン（石油エーテル、ソルベントナフサ等）、及び石油留分（パラフィン類、灯油、軽油等）等が挙げられる。
【００３９】
本発明の抗菌剤に用いることができる界面活性剤としては、抗菌剤に含まれる界面活性剤として常用されるものであってよく、特に限定されないが、例えば、非イオン型（ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルエステル、ポリオキシエチレンソルビタンアルキルエステル、ソルビタンアルキルエステル等）、陰イオン型（アルキルベンゼンスルホネート、アルキルスルホサクシネート、アルキルサルフェート、ポリオキシエチレンアルキルサルフェート、アリールスルホネート等）、陽イオン型［アルキルアミン塩（ラウリルアミン、ステアリルトリメチルアンモニウムクロライド、アルキルジメチルベンジルアンモニウムクロライド）等］及び両性型［カルボン酸（ベタイン型）、硫酸エステル等］が挙げられる。
【００４０】
本発明の抗菌剤に用いることができる増粘剤としては、例えば、カルボキシメチルセルロース、キサンタンガム等が挙げられる。
【００４１】
本発明の抗菌剤に用いることができる酸化防止剤としては、抗菌剤に含まれる酸化防止剤として常用されるものであってよく、特に限定されないが、例えば、２，６−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−４−メチルフェノール、２，２’−メチレンビス（４−メチル−６−ｔｅｒｔ−ブチルフェノール）、アルキル化ジフェニルアミン等が挙げられる。
【００４２】
本発明の抗菌剤は、生活環境の快適性や衛生面に対して悪影響を及ぼす細菌、例えば、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属細菌、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ属細菌及び大腸菌からなる群から選択される細菌に対して抗菌性を有する。Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属細菌の具体的な種の例としては、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍを挙げることができる。Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ属細菌の具体的な種の例としては、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ  ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓを挙げることができる。
【００４３】
本発明において抗菌という用語は細菌の増殖を抑制することを意味し、抗菌性という用語は細菌の増殖を抑制する性質を意味し、抗菌剤という用語は細菌の増殖を抑制する薬剤を意味する。
【００４４】
本発明の抗菌剤の用途及び態様は、抗菌を目的とするものであれば特に限定されない。本発明の抗菌剤は、本発明のイミノ化合物（１）又はその化学的に許容される塩以外の既知の抗菌剤、防カビ剤、殺菌剤、消毒剤等と混合して用いてもよく、抗菌、抗菌及び防カビ、抗菌及び殺菌、抗菌及び消毒等の目的で用いることもできる。
【００４５】
本発明において防カビという用語はカビの増殖を抑制すること意味し、防カビ性という用語はカビの増殖を抑制する性質を意味する。本発明において殺菌という用語は、微生物を死滅させることを意味する。本発明において消毒という用語は、病原性微生物を死滅、又は除去させて感染の危険をなくすことを意味する。
【００４６】
また、本発明の抗菌剤の有効成分である本発明のイミノ化合物（１）又はその化学的に許容される塩が、抗菌性以外に防カビ性を有する場合には、既知の防カビ剤との混合の有無に関係なく、本発明の抗菌剤を抗菌及び防カビの目的でも用いることができる。抗菌性以外に防カビ性を有する本発明の抗菌剤としては、具体的に、前記の化学式（１−１）、化学式（１−３）、化学式（１−４）又は化学式（１−１０）で示される本発明のイミノ化合物（１）又はその化学的に許容される塩を有効成分とするものを例示できる。
【００４７】
本発明の抗菌剤の使用方法は特に限定されず、種々の対象物に適用することが可能である。例えば、抗菌処理を施したい対象物に本発明の抗菌剤を塗布する方法、抗菌処理を施したい対象物に本発明の抗菌剤を噴霧する方法、抗菌処理を施したい対象物に本発明の抗菌剤を添加する方法等、通常採用される方法をそのまま用いることができる。抗菌処理を施したい対象物に本発明の抗菌剤を塗布又は噴霧する場合、取り扱いが容易なことから本発明の抗菌剤は製剤の形態であることが好ましく、本発明の抗菌剤中の有効成分である本発明のイミノ化合物（１）又はその化学的に許容される塩の含有量は、抗菌性及び費用の面から製剤全体の０．００１重量％から１０重量％の範囲が好ましく、より好ましくは、０．０１重量％から１重量％の範囲である。また、抗菌処理を施したい対象物に本発明の抗菌剤を添加する場合、本発明の抗菌剤の有効成分である本発明のイミノ化合物（１）又はその化学的に許容される塩の添加量は、抗菌性及び費用の面から抗菌処理を施したい対象物の０．００１重量％から１０重量％の範囲が好ましく、より好ましくは、０．０１重量％から１重量％の範囲である。
【実施例】
【００４８】
以下、本発明の実施の形態について、実施例及び参考例により本発明を詳細に説明するが、本発明の一形態を説明するためのものであり、本発明を限定するものではない。
【００４９】
本発明の一態様にかかるイミノ化合物又はその化学的に許容される塩の同定には、以下の分析方法を用いた。１Ｈ−ＮＭＲには、Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＳＣＥＮＤ  ４００（４００ＭＨｚ）を用いた。１Ｈ−ＮＭＲは、重クロロホルム（ＣＤＣｌ３）、又は重ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ−ｄ６）を測定溶媒とし、内部標準物質としてテトラメチルシラン（ＴＭＳ）を用いて測定した。また、試薬類は市販品を用いた。
【００５０】
実施例１
【００５１】
【化１１】
2020075884.tif 000012
【００５２】
参考例１に記載の方法で得られたビフェニル−４−カルボキサミジン塩酸塩［化学式（１−１ａ）］の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
以下（ａ）及び（ｂ）に記す最小発育阻止濃度（Ｍｉｎｉｍｕｍ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ  ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）（以下、ＭＩＣということがある。）測定法により抗菌性を評価した。なお、ＭＩＣ測定法は、微量液体希釈法によるＭＩＣ測定法（微量液体希釈法）−日本化学療法学会標準法−（日本化学療法学会抗菌薬感受性測定法検討委員会報告．Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，１９９０年，３８巻，１０２−１０５頁）に記載の方法を改変して行った。
【００５３】
十分な抗菌性を発揮する観点から、ＭＩＣは８００μｇ／ｍＬ以下であることが好ましい。
（ａ）被験物質溶液の調製
ビフェニル−４−カルボキサミジン塩酸塩を８０ｍｇ／ｍＬの濃度でジメチルスルホキシドに溶解し、これを被験物質原液とした。この被験物質原液をＲ２Ａ液体培地（表１）で１００倍希釈し、希釈最大濃度（８００μｇ／ｍＬ）の被験物質溶液とした。希釈最大濃度の被験物質溶液を最高濃度として希釈倍率２倍ずつで最高濃度を含め１１段階となるようにＲ２Ａ液体培地で希釈し、被験物質溶液を調製した。
【００５４】
【表１】
2020075884.tif 000013
【００５５】
（ｂ）ＭＩＣ測定
試験菌は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ  ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓ  ＮＢＲＣ１３９３５及びＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＮＢＲＣ３３０１を用いた。これらの試験菌４株はいずれも独立行政法人製品評価技術基盤機構より入手した。Ｒ２Ａ  ａｇａｒ（ＢＤ  Ｄｉｆｃｏ）を用いて３０℃で２日間培養した各試験菌をそれぞれ滅菌水で０．５マクファーランド相当に懸濁し、これらを滅菌水でさらに１０倍希釈して接種用菌液とした。
【００５６】
前記（ａ）の各濃度に希釈した被験物質溶液１００μＬを９６穴マイクロプレート（Ｕ字型ウェル）の各ウェルに分注し、これら各ウェルに前記の各試験菌の接種用菌液５μＬを接種した（図１）。接種用菌液は調製後、１５分以内に接種した。なお、該９６穴マイクロプレートには被験物質不含有Ｒ２Ａ液体培地１００μＬを分注し、各試験菌の接種用菌液５μＬを接種することで試験菌の発育の対照とした。
【００５７】
９６穴マイクロプレートを通気性シート（Ｓｅａｌｅｒ  ＢＲＥＡＴＨｓｅａｌ、Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ  Ｏｎｅ）でシールして、３０℃で４８時間静置培養した。培養後、肉眼的に混濁又は沈殿が認められない場合、沈殿があっても直径が１ｍｍ以下で１個の場合を発育阻止の判定基準とした。対照に用いた被験物質不含有Ｒ２Ａ液体培地での試験菌の発育を確認した後、試験菌の発育が肉眼的に認められないウェルの中、最小の被験物質濃度をもってＭＩＣとした。それぞれの被験物質について２回試験を行った。
（２）抗菌性評価結果
ビフェニル−４−カルボキサミジン塩酸塩は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：１．６μｇ／ｍＬ）、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ  ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓ  ＮＢＲＣ１３９３５（ＭＩＣ：１００μｇ／ｍＬ）及びＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＮＢＲＣ３３０１（ＭＩＣ：１００μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【００５８】
実施例２
【００５９】
【化１２】
2020075884.tif 000014
【００６０】
４−ニトロベンズアミジン塩酸塩［化学式（１−２ａ）］（市販品、東京化成工業）の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。ただし、実施例１の（１）の（ａ）に該当する部分を以下のように改変して評価を行った。
【００６１】
４−ニトロベンズアミジン塩酸塩を２０ｍｇ／ｍＬの濃度でジメチルスルホキシドに溶解し、これを被験物質原液とした。この被験物質原液をＲ２Ａ液体培地で１００倍希釈し、希釈最大濃度（２００μｇ／ｍＬ）の被験物質溶液とした。希釈最大濃度の被験物質溶液を最高濃度として希釈倍率２倍ずつで最高濃度を含め１１段階となるようにＲ２Ａ液体培地で希釈し、被験物質溶液を調製した。
（２）抗菌性評価結果
４−ニトロベンズアミジン塩酸塩は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：５０μｇ／ｍＬ）、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ  ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓ  ＮＢＲＣ１３９３５（ＭＩＣ：２００μｇ／ｍＬ）及びＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＮＢＲＣ３３０１（ＭＩＣ：１００μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【００６２】
実施例３
【００６３】
【化１３】
2020075884.tif 000015
【００６４】
参考例２に記載の方法で得られたビフェニル−３−カルボキサミジン塩酸塩［化学式（１−３ａ）］の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。
（２）抗菌性評価結果
ビフェニル−３−カルボキサミジン塩酸塩は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：５０μｇ／ｍＬ）、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ  ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓ  ＮＢＲＣ１３９３５（ＭＩＣ：１００μｇ／ｍＬ）及びＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＮＢＲＣ３３０１（ＭＩＣ：２００μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【００６５】
実施例４
【００６６】
【化１４】
2020075884.tif 000016
【００６７】
参考例３に記載の方法で得られた３−ブロモ−５−クロロベンゼンカルボキサミジン塩酸塩［化学式（１−４ａ）］の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。
（２）抗菌性評価結果
３−ブロモ−５−クロロベンゼンカルボキサミジン塩酸塩は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：１００μｇ／ｍＬ）、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ  ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓ  ＮＢＲＣ１３９３５（ＭＩＣ：２００μｇ／ｍＬ）及びＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＮＢＲＣ３３０１（ＭＩＣ：８００μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【００６８】
実施例５
【００６９】
【化１５】
2020075884.tif 000017
【００７０】
ベンズアミジン［化学式（１−５）］（市販品、シグマ  アルドリッチ）の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。
（２）抗菌性評価結果
ベンズアミジンは、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：１００μｇ／ｍＬ）、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ  ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓ  ＮＢＲＣ１３９３５（ＭＩＣ：４００μｇ／ｍＬ）Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＮＢＲＣ３３０１（ＭＩＣ：４００μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【００７１】
実施例６
【００７２】
【化１６】
2020075884.tif 000018
【００７３】
参考例４に記載の方法で得られた３−ヨードベンズアミジン塩酸塩［化学式（１−６ａ］の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。ただし、実施例１の（１）の（ａ）に該当する部分を以下のように改変して評価を行った。
【００７４】
３−ヨードベンズアミジン塩酸塩を８ｍｇ／ｍＬの濃度でイオン交換水に溶解し、これをろ過滅菌したものを被験物質原液とした。この被験物質原液をＲ２Ａ液体培地で１０倍希釈し、希釈最大濃度（８００μｇ／ｍＬ）の被験物質溶液とした。希釈最大濃度の被験物質溶液を最高濃度として希釈倍率２倍ずつで最高濃度を含め１１段階となるようにＲ２Ａ液体培地で希釈し、被験物質溶液を調製した。
（２）抗菌性評価結果
３−ヨードベンズアミジン塩酸塩は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：５０μｇ／ｍＬ）及びＳｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ  ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓ  ＮＢＲＣ１３９３５（ＭＩＣ：２００μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【００７５】
実施例７
【００７６】
【化１７】
2020075884.tif 000019
【００７７】
４−メトキシベンズアミジン塩酸塩［化学式（１−７ａ）］（市販品、東京化成工業）の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。
（２）抗菌性評価結果
４−メトキシベンズアミジン塩酸塩は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：１００μｇ／ｍＬ）及びＳｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ  ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓ  ＮＢＲＣ１３９３５（ＭＩＣ：４００μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【００７８】
実施例８
【００７９】
【化１８】
2020075884.tif 000020
【００８０】
４−クロロベンズアミジン塩酸塩［化学式（１−８ａ）］（市販品、東京化成工業）の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。
（２）抗菌性評価結果
４−クロロベンズアミジン塩酸塩は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：１００μｇ／ｍＬ）及びＳｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ  ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓ  ＮＢＲＣ１３９３５（ＭＩＣ：４００μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【００８１】
実施例９
【００８２】
【化１９】
2020075884.tif 000021
【００８３】
４−メチルベンズアミジン塩酸塩［化学式（１−９ａ）］（市販品、東京化成工業）の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。
（２）抗菌性評価結果
４−メチルベンズアミジン塩酸塩は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：１００μｇ／ｍＬ）及びＳｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ  ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓ  ＮＢＲＣ１３９３５（ＭＩＣ：８００μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【００８４】
実施例１０
【００８５】
【化２０】
2020075884.tif 000022
【００８６】
ベンズアミジン塩酸塩［化学式（１−５ａ）］（市販品、東京化成工業）の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。
（２）抗菌性評価結果
ベンズアミジン塩酸塩は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：４００μｇ／ｍＬ）及びＳｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ  ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓ  ＮＢＲＣ１３９３５（ＭＩＣ：８００μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【００８７】
実施例１１
【００８８】
【化２１】
2020075884.tif 000023
【００８９】
参考例５に記載の方法で得られた４−ビフェニリルイミド酸エチル塩酸塩［化学式（１−１０ａ）］の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。ただし、実施例１の（１）の（ａ）に該当する部分を以下のように改変して評価を行った。
【００９０】
４−ビフェニリルイミド酸エチル塩酸塩を２０ｍｇ／ｍＬの濃度でジメチルスルホキシドに溶解し、これを被験物質原液とした。この被験物質原液をＲ２Ａ液体培地で１００倍希釈し、希釈最大濃度（２００μｇ／ｍＬ）の被験物質溶液とした。希釈最大濃度の被験物質溶液を最高濃度として希釈倍率２倍ずつで最高濃度を含め１１段階となるようにＲ２Ａ液体培地で希釈し、被験物質溶液を調製した。
（２）抗菌性評価結果
４−ビフェニリルイミド酸エチル塩酸塩は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：１２．５μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【００９１】
実施例１２
【００９２】
【化２２】
2020075884.tif 000024
【００９３】
４−ブロモベンズアミジン塩酸塩［化学式（１−１１ａ）］（市販品、東京化成工業）の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。ただし、実施例１の（１）の（ａ）に該当する部分を以下のように改変して評価を行った。
【００９４】
４−ブロモベンズアミジン塩酸塩を１０ｍｇ／ｍＬの濃度でジメチルスルホキシドに溶解し、これを被験物質原液とした。この被験物質原液をＲ２Ａ液体培地で１００倍希釈し、希釈最大濃度（１００μｇ／ｍＬ）の被験物質溶液とした。希釈最大濃度の被験物質溶液を最高濃度として希釈倍率２倍ずつで最高濃度を含め１１段階となるようにＲ２Ａ液体培地で希釈し、被験物質溶液を調製した。
（２）抗菌性評価結果
４−ブロモベンズアミジン塩酸塩は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：５０μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【００９５】
実施例１３
【００９６】
【化２３】
2020075884.tif 000025
【００９７】
参考例６に記載の方法で得られた３−ビフェニリルイミド酸エチル塩酸塩［化学式（１−１２ａ）］の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。ただし、実施例１の（１）の（ａ）に該当する部分を以下のように改変して評価を行った。
【００９８】
３−ビフェニリルイミド酸エチル塩酸塩を２０ｍｇ／ｍＬの濃度でジメチルスルホキシドに溶解し、これを被験物質原液とした。この被験物質原液をＲ２Ａ液体培地で１００倍希釈し、希釈最大濃度（２００μｇ／ｍＬ）の被験物質溶液とした。希釈最大濃度の被験物質溶液を最高濃度として希釈倍率２倍ずつで最高濃度を含め１１段階となるようにＲ２Ａ液体培地で希釈し、被験物質溶液を調製した。
（２）抗菌性評価結果
３−ビフェニリルイミド酸エチル塩酸塩は、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ  ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓ  ＮＢＲＣ１３９３５（ＭＩＣ：１００μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【００９９】
実施例１４
【０１００】
【化２４】
2020075884.tif 000026
【０１０１】
４−フルオロベンズアミジン塩酸塩水和物［化学式（１−１３ａ）］（市販品、東京化成工業）の抗菌性を評価した。
（１）４−フルオロベンズアミジン塩酸塩水和物の抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。
（２）４−フルオロベンズアミジン塩酸塩水和物の抗菌性評価結果
４−フルオロベンズアミジン塩酸塩水和物は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：２００μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【０１０２】
実施例１５
【０１０３】
【化２５】
2020075884.tif 000027
【０１０４】
参考例７に記載の方法で得られた３−ヨードベンズイミド酸エチル塩酸塩［化学式（１−１４ａ）］の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。ただし、実施例１の（１）の（ａ）に該当する部分を以下のように改変して評価を行った。
【０１０５】
３−ヨードベンズイミド酸エチル塩酸塩を４０ｍｇ／ｍＬの濃度でジメチルスルホキシドに溶解し、これを被験物質原液とした。この被験物質原液をＲ２Ａ液体培地で１００倍希釈し、希釈最大濃度（４００μｇ／ｍＬ）の被験物質溶液とした。希釈最大濃度の被験物質溶液を最高濃度として希釈倍率２倍ずつで最高濃度を含め１１段階となるようにＲ２Ａ液体培地で希釈し、被験物質溶液を調製した。
（２）抗菌性評価結果
３−ヨードベンズイミド酸エチル塩酸塩は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：４００μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【０１０６】
実施例１６
【０１０７】
【化２６】
2020075884.tif 000028
【０１０８】
参考例８に記載の方法で得られた３−ブロモ−５−クロロベンズイミド酸エチル塩酸塩［化学式（１−１５ａ）］の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。ただし、実施例１の（１）の（ａ）に該当する部分を以下のように改変して評価を行った。
【０１０９】
３−ブロモ−５−クロロベンズイミド酸エチル塩酸塩を４０ｍｇ／ｍＬの濃度でジメチルスルホキシドに溶解し、これを被験物質原液とした。この被験物質原液をＲ２Ａ液体培地で１００倍希釈し、希釈最大濃度（４００μｇ／ｍＬ）の被験物質溶液とした。希釈最大濃度の被験物質溶液を最高濃度として希釈倍率２倍ずつで最高濃度を含め１１段階となるようにＲ２Ａ液体培地で希釈し、被験物質溶液を調製した。
（２）抗菌性評価結果
３−ブロモ−５−クロロベンズイミド酸エチル塩酸塩は、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：４００μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【０１１０】
実施例１７
【０１１１】
【化２７】
2020075884.tif 000029
【０１１２】
参考例９に記載の方法で得られたビフェニル−２−カルボキサミジン［化学式（１−１６）］の抗菌性を評価した。
（１）抗菌性評価方法
実施例１の（１）に記載のＭＩＣ測定法と同様の方法で評価した。
（２）抗菌性評価結果
ビフェニル−２−カルボキサミジンは、Ｍｅｔｈｙｌｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔａｒｄｕｍ  ＮＢＲＣ１０３６３２（ＭＩＣ：４００μｇ／ｍＬ）、Ｓｐｈｉｎｇｏｍｏｎａｓ  ｐａｕｃｉｍｏｂｉｌｉｓ  ＮＢＲＣ１３９３５（ＭＩＣ：４００μｇ／ｍＬ）及びＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  ＮＢＲＣ３３０１（ＭＩＣ：４００μｇ／ｍＬ）に対して抗菌性を示した。
【０１１３】
参考例１
ビフェニル−４−カルボキサミジン塩酸塩［化学式（１−１ａ）］を以下の方法で製造した。
【０１１４】
４−ビフェニリルイミド酸エチル塩酸塩（３０．１ｇ，１１５ｍｍｏｌ）をエタノール（５．０ｍＬ）に懸濁し、ここに２ｍｏｌ／Ｌアンモニア・メタノール溶液（１１５ｍＬ）を加え、室温で１２時間撹拌した。反応後、反応液にジエチルエーテルを加え、析出した固体をろ取し、ジエチルエーテル、次いでヘキサンで洗浄した。得られた固体を減圧乾固し、ビフェニル−４−カルボキサミジン塩酸塩を白色固体として得た（２０ｇ，７６％）。
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ９．３１（ｂｒｓ，２Ｈ），９．０６（ｂｒｓ，２Ｈ），７．９５−７．９０（ｍ，４Ｈ），７．７８（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，２Ｈ），７．５３（ｄｄ，Ｊ＝７．３，７．１Ｈｚ，２Ｈ），７．４７（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）。
【０１１５】
参考例２
ビフェニル−３−カルボキサミジン塩酸塩［化学式（１−３ａ）］を以下の方法で製造した。
【０１１６】
３−ビフェニリルイミド酸エチル塩酸塩（１０．０ｇ、３８ｍｍｏｌ）をエタノール（１．７ｍＬ）に懸濁し、ここに２ｍｏｌ／Ｌアンモニア・メタノール溶液（３８ｍＬ）を加え、室温で１８時間撹拌した。反応後、反応混合物から低沸点物を減圧留去し、得られた固体をヘキサン、次いでジエチルエーテルで洗浄した。得られた固体を減圧乾固し、ビフェニル−３−カルボキサミジン塩酸塩を固体として得た（８．６ｇ，９８％）。
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ９．４８（ｂｒｓ，２Ｈ），９．１６（ｂｒｓ，２Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），８．０３（ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ，１Ｈ），７．７８−７．８１（ｍ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｄｄ，Ｊ＝７．８，７．１Ｈｚ，１Ｈ），７．５２（ｄｄ，Ｊ＝７．８，７．３Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ）。
【０１１７】
参考例３
３−ブロモ−５−クロロベンゼンカルボキサミジン塩酸塩［化学式（１−４ａ）］を以下の方法で製造した。
【０１１８】
３−ブロモ−５−クロロベンズイミド酸エチル塩酸塩（２０．０ｇ、７６ｍｍｏｌ）をエタノール（３．４ｍＬ）に懸濁し、ここに２ｍｏｌ／Ｌアンモニア・メタノール溶液（７６ｍＬ）を加え、室温で２４時間撹拌した。反応後、反応混合物から低沸点物を減圧留去し、得られた固体をヘキサン、ジエチルエーテル、次いで酢酸エチルで洗浄した。得られた固体を減圧乾固し、３−ブロモ−５−クロロベンゼンカルボキサミジン塩酸塩を固体として得た（１７．８ｇ，９９％）。
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ９．０６（ｂｒｓ，４Ｈ），８．１４（ｄｄ，Ｊ＝１．８，１．８Ｈｚ，１Ｈ），８．００（ｍ，１Ｈ），７．９２（ｍ，１Ｈ）。
【０１１９】
参考例４
３−ヨードベンズアミジン塩酸塩［化学式（１−６ａ）］を以下の方法で製造した。
【０１２０】
３−ヨードベンズイミド酸エチル塩酸塩（５．０ｇ、１６ｍｍｏｌ）をエタノール（１．０ｍＬ）に懸濁し、ここに２ｍｏｌ／Ｌアンモニア・メタノール溶液（８．０ｍＬ）を加え、室温で１５時間撹拌した。反応後、反応混合物から析出した塩をろ別し、メタノールで洗浄した。ろ液から低沸点物を減圧留去し、得られたオイル状物質をヘキサン、次いでジエチルエーテルで繰り返し洗浄した。得られた固体を減圧乾固し、３−ヨードベンズアミジン塩酸塩を固体として得た（４．１ｇ，９０％）。
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ９．２７（ｂｒｓ，４Ｈ），８．１４（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４０（ｄｄ，Ｊ＝７．９，７．９Ｈｚ，１Ｈ）．
参考例５
４−ビフェニリルイミド酸エチル塩酸塩［化学式（１−１０ａ）］を以下の方法で製造した。
【０１２１】
アルゴン雰囲気下、４−シアノビフェニル（２５．３ｇ，１４０ｍｍｏｌ）にクロロホルム（２５０ｍＬ）及びエタノール（８０ｍＬ）を加えた。この溶液を０℃に冷却し、塩化水素ガスを通じながら２時間撹拌した後、塩酸ガスを止め、反応混合物を室温にしてさらに１２時間撹拌した。反応後、反応混合物から低沸点物を減圧留去し、得られた固体にジエチルエーテルを加えて固体をろ別した。この固体をジエチルエーテル、次いでヘキサンで洗浄した。得られた固体を減圧乾固し、４−ビフェニリルイミド酸エチル塩酸塩を白色固体として得た（３２ｇ，８７％）。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１２．６３（ｓ，１Ｈ），１１．９３（ｓ，１Ｈ），８．５０（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．７９（ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ，２Ｈ），７．６３（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），７．４９（ｄｄ，Ｊ＝７．３，６．９Ｈｚ，２Ｈ），７．４３（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ），４．９８（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），１．６５（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）．
参考例６
３−ビフェニリルイミド酸エチル塩酸塩［化学式（１−１２ａ）］を以下の方法で製造した。
【０１２２】
アルゴン雰囲気下、３−シアノビフェニル（１０．０ｇ，５６．０ｍｍｏｌ）にクロロホルム（１００ｍＬ）及びエタノール（３３ｍＬ）を加えた。この溶液を０℃に冷却し、塩化水素ガスを通じながら２時間撹拌した後、塩酸ガスを止め、反応混合物を室温にてさらに２１時間撹拌した。反応後、反応混合物から低沸点物を減圧留去し、得られた固体にジエチルエーテルを加えて固体をろ別した。この固体をジエチルエーテルで洗浄した。得られた固体を減圧乾固し、３−ビフェニリルイミド酸エチル塩酸塩を乳白色固体として得た（１４ｇ，９４％）。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１２．８１（ｓ，１Ｈ），１２．００（ｓ，１Ｈ），８．５２（ｓ，１Ｈ），８．３９（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．９２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｄｄ，Ｊ＝７．９，７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．６４（ｄｄ，Ｊ＝７．９，７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．４８（ｄｄ，７．４，７．１Ｈｚ，２Ｈ），７．３９（ｔ，７．４Ｈｚ，１Ｈ），４．９８（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），１．６４（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）．
参考例７
３−ヨードベンズイミド酸エチル塩酸塩［化学式（１−１４ａ）］を以下の方法で製造した。
【０１２３】
アルゴン雰囲気下、３−ヨードベンゾニトリル（５．２ｇ，２２．５ｍｍｏｌ）にクロロホルム（５０ｍＬ）及びエタノール（１３ｍＬ）を加えた。この溶液を０℃に冷却し、塩酸ガスを通じながら２時間撹拌した後、塩化水素ガスを止め、反応混合物を室温にしてさらに１５時間撹拌した。反応後、反応混合物から低沸点物を減圧留去し、得られた固体にジエチルエーテルを加えて固体をろ別した。この固体をジエチルエーテルで洗浄し、得られた固体を減圧乾固し、３−ヨードベンズイミド酸エチル塩酸塩を白色固体として得た（６．９ｇ，９８％）。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１２．８７（ｂｒｓ，１Ｈ），１２．０９（ｂｒｓ，１Ｈ），８．５９（ｄｄｄ，Ｊ＝８．０，１．７，０．８Ｈｚ，１Ｈ），８．５３（ｄｄ，Ｊ＝１．７，１．７Ｈｚ，１Ｈ），８．０３（ｄｄｄ，Ｊ＝８．０，１．７，０．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３３（ｄｄ，Ｊ＝８．０，８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９５（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），１．６３（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）．
参考例８
３−ブロモ−５−クロロベンズイミド酸エチル塩酸塩［化学式（１−１５ａ）］を以下の方法で製造した。
【０１２４】
アルゴン雰囲気下、３−ブロモ−５−クロロベンゾニトリル（５０．０ｇ，２３０ｍｍｏｌ）にクロロホルム（５００ｍＬ）及びエタノール（１３５ｍＬ）を加えた。この溶液を０℃に冷却し、塩化水素ガスを通じながら２時間撹拌した後、塩酸ガスを止めて、反応混合物を室温にしてさらに２０時間撹拌した。反応後、反応混合物から低沸点物を減圧留去し、得られた固体にジエチルエーテルを加えて固体をろ別した。この固体をジエチルエーテルで洗浄した。得られた固体を減圧乾固し、３−ブロモ−５−クロロベンズイミド酸エチル塩酸塩を乳白色固体として得た（４７．６ｇ，６９％）。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）：δ１２．９（ｂｒｓ，１Ｈ），１２．３（ｂｒｓ，１Ｈ），８．４７（ｄｄ，Ｊ＝１．７，１．７Ｈｚ，１Ｈ），８．３９（ｄｄ，Ｊ＝１．７，１．７Ｈｚ，１Ｈ），７．８４（ｄｄ，Ｊ＝１．７，１．７Ｈｚ，１Ｈ），４．９６（ｑ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，２Ｈ），１．６４（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ）．
参考例９
ビフェニル−２−カルボキサミジン［化学式（１−１６）］を以下の方法で製造した。
アルゴン雰囲気下、２−クロロベンゾニトリル（３０．２ｇ，２２０ｍｍｏｌ）、フェニルボロン酸（３２．１ｇ，２６０ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（９８７ｍｇ，４．４ｍｍｏｌ）及び２−ジシクロへキシルホスフィノ−２’，４’，６’−トリイソプロピルビフェニル（４．１９ｇ，８．８ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン（１．３０Ｌ）に懸濁した。この懸濁液に２．０Ｍ−リン酸カリウム水溶液（２７０ｍＬ）を加え、１９時間加熱還流した。放冷後、反応混合物に水及びクロロホルムを加えた。有機層を分離し、ここに乾燥剤を加えた。乾燥剤をろ別し、ろ液を減圧乾固した。得られた粗生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／ヘキサン＝３／１）により精製することで、２−フェニルベンゾニトリルを得た（３９．０ｇ，９９％）。得られた化合物を次工程に用いた。
アルゴン雰囲気下、塩化アンモニウム（２１．４ｇ，４００ｍｍｏｌ）をトルエン（４００ｍＬ）に懸濁し、この懸濁液を０℃に冷却した。そこにトリメチルアルミニウム（２．０Ｍ−トルエン溶液，２００ｍＬ，４００ｍｍｏｌ）を３０分かけて滴下した。この混合物を、徐々に室温まで昇温させながら２時間撹拌した。ここに、２−フェニルベンゾニトリル（２８．６ｇ，１６０ｍｍｏｌ）のトルエン（５０ｍＬ）溶液を加え、反応溶液を１５時間加熱還流した。放冷後、反応溶液をシリカゲルカラムに通し、ジクロロメタン、次いでメタノールで溶出した後、得られた溶液を減圧乾固し、白色固体を得た。得られた固体を２．０Ｍ−塩酸に溶解し、水層を酢酸エチルで洗浄した。この水層を２．０Ｍ−水酸化ナトリウム水溶液を用いて中和した後、クロロホルムを加えた。有機層を分離し、ここに乾燥剤を加えた。乾燥剤をろ別し、ろ液を減圧乾固することで、目的のビフェニル−２−カルボキサミジンを得た（２４．８ｇ，７９％）。
１ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：δ７．４９−７．４７（ｍ，２Ｈ），７．４５−７．３６（ｍ，５Ｈ），７．３５−７．３０（ｍ，２Ｈ），６．０３（ｂｒ，３Ｈ）．
参考例１０
参考例１に記載の方法で得られたビフェニル−４−カルボキサミジン塩酸塩［化学式（１−１ａ）］、参考例２に記載の方法で得られたビフェニル−３−カルボキサミジン塩酸塩［化学式（１−３ａ）］、参考例３に記載の方法で得られた３−ブロモ−５−クロロベンゼンカルボキサミジン塩酸塩［化学式（１−４ａ）］及び参考例５に記載の方法で得られた４−ビフェニリルイミド酸エチル塩酸塩［化学式（１−１０ａ）］の防カビ性を評価した。
（１）防カビ性評価方法
以下（ａ）及び（ｂ）に記すＭＩＣ測定法により防カビ性を評価した。なお、ＭＩＣ測定法は、抗カビ剤の簡易評価法の開発（埼玉県産業技術総合センター研究報告，２０１１年，第９巻）に記載の方法を改変して行った。
（ａ）被験物質溶液の調製
ビフェニル−４−カルボキサミジン塩酸塩、ビフェニル−３−カルボキサミジン塩酸塩及び３−ブロモ−５−クロロベンゼンカルボキサミジン塩酸塩をそれぞれ８０ｍｇ／ｍＬの濃度でジメチルスルホキシドに溶解し、これらを被験物質原液とした。これらの被験物質原液をサブロー液体培地（Ｓａｂｏｕｒａｕｄ  Ｄｅｘｔｒｏｓｅ  Ｂｒｏｔｈ，Ｂａｃｔｏ；ＢＤ  Ｄｉｆｃｏ）でそれぞれ１００倍希釈し、希釈最大濃度（８００μｇ／ｍＬ）の被験物質溶液とした。それぞれ希釈最大濃度の被験物質溶液を最高濃度として希釈倍率２倍ずつで最高濃度を含め１１段階となるようにサブロー液体培地で希釈し、被験物質溶液を調製した。
【０１２５】
４−ビフェニリルイミド酸エチル塩酸塩を４０ｍｇ／ｍＬの濃度でジメチルスルホキシドに溶解し、これを被験物質原液とした。この被験物質原液をサブロー液体培地で１００倍希釈し、希釈最大濃度（４００μｇ／ｍＬ）の被験物質溶液とした。それぞれ希釈最大濃度の被験物質溶液を最高濃度として希釈倍率２倍ずつで最高濃度を含め１１段階となるようにサブロー液体培地で希釈し、被験物質溶液を調製した。
（ｂ）ＭＩＣ測定
カビの試験菌として、Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ  ＮＢＲＣ６３４８を用いた。試験菌は独立行政法人製品評価技術基盤機構より入手した。
【０１２６】
１５ｍＬのサブロー寒天培地［サブロー液体培地の組成にＡｇａｒ（１５ｇ／Ｌ）を添加］をシャーレに分注して固化し、２８℃で３日間乾燥させた。このサブロー寒天培地に試験菌を接種し、２８℃で７日間培養した。培養後、試験菌が生育したシャーレにサブロー液体培地を５ｍＬ入れて、スプレッダーを用いて試験菌を懸濁した。この懸濁液は、滅菌済みキムワイプを詰めたロートを用いてろ過した。ろ液を遠心分離し（２５００ｒｐｍで５分間）、得られた沈殿をサブロー液体培地で懸濁した。再度、遠心分離を行い、得られた沈殿をサブロー液体培地で懸濁した。得られた懸濁液を胞子液とした。胞子液の胞子数は５×１０５ｓｐｏｒｅｓ／ｍＬであった。
【０１２７】
前記（ａ）の各濃度に希釈した被験物質溶液９０μＬを９６穴マイクロプレート（Ｕ字型ウェル）の各ウェルに分注し、これら各ウェルに前記の胞子液１０μＬを接種した（図２）。なお、該９６穴マイクロプレートには被験物質不含有サブロー液体培地９０μＬを分注し、胞子液１０μＬを接種することで試験菌の発育の対照とした。
【０１２８】
９６穴マイクロプレートを通気性シート（Ｓｅａｌｅｒ  ＢＲＥＡＴＨｓｅａｌ、Ｇｒｅｉｎｅｒ  Ｂｉｏ  Ｏｎｅ）でシールし、乾燥を防ぐためにさらに全体をビニール袋で覆い、２８℃で９６時間静置培養した。培養後、肉眼的に混濁又は沈殿が認められない場合を発育阻止の判定基準とした。対照に用いた被験物質不含有サブロー液体培地での試験菌の発育を確認した後、試験菌の発育が肉眼的に認められないウェルの中、最小の被験物質濃度をもってＭＩＣとした。それぞれの被験物質について２回試験を行った。
（２）防カビ性評価結果
ビフェニル−４−カルボキサミジン塩酸塩（ＭＩＣ：２００μｇ／ｍＬ）、ビフェニル−３−カルボキサミジン塩酸塩（ＭＩＣ：８００μｇ／ｍＬ）、３−ブロモ−５−クロロベンゼンカルボキサミジン塩酸塩（ＭＩＣ：８００μｇ／ｍＬ）及び４−ビフェニリルイミド酸エチル塩酸塩（ＭＩＣ：４００μｇ／ｍＬ）は、Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ  ＮＢＲＣ６３４８に対して防カビ性を示した。
【産業上の利用可能性】
【０１２９】
本発明の抗菌剤は、生活環境を汚染する細菌の防除等に有用である。
【図１】
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【図２】
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