(57)【要約】      （修正有）【課題】全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）及び皮膚紅斑性狼瘡（ＣＬＥ）を含む狼瘡、Ｉ型糖尿病、乾癬、シェーグレン病、全身性硬化症、関節リウマチ、免疫性血小板減少症（ＩＴＰ）、エカルディ−グチエール症候群（ＡＧＳ）、筋炎、分類不能型免疫不全症（ＣＶＩＤ）、及び自己免疫性甲状腺疾患などのいくつかの免疫媒介炎症性疾患又は自己免疫疾患に有効なインターフェロンアルファ及びオメガ抗体アンタゴニストの提供。【解決手段】ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω）及び少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）サブタイプと結合し、それらの生物活性を中和する、単離されたモノクローナル抗体。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω）及び少なくとも３、４、５、６、７、８、
９、１０、又は１１のヒトインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）サブタイプと結合し
、それらの生物活性を中和する、単離されたモノクローナル抗体。
【請求項２】
前記ヒトＩＦＮ−ω及び前記ヒトＩＦＮ−αサブタイプの前記生物活性が、シグナル伝
達性転写因子２（ＳＴＡＴ２）、インターフェロン調節因子９（ＩＲＦ９）、及びＳＥＡ
Ｐを安定に発現するＨＥＫ２９３細胞におけるインターフェロン誘導性ＩＳＧ５４プロモ
ーター下での前記ヒトＩＦＮ−ω又は前記ヒトＩＦＮ−αサブタイプによって誘導された
分泌胚アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）の発現である、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
前記抗体が、少なくとも約１×１０-9Ｍ以下、約１×１０-10Ｍ以下、約５×１０-11Ｍ
以下、又は約１×１０-11Ｍ以下のＩＣ50で前記ヒトＩＦＮ−ωの前記生物活性を中和す
る、請求項２に記載の抗体。
【請求項４】
前記抗体が、少なくとも約１×１０-10Ｍ以下のＩＣ50値で前記ヒトＩＦＮ−ωの前記
生物活性を中和する、請求項３に記載の抗体。
【請求項５】
前記抗体が、約１×１０-10Ｍ〜約６×１０-12ＭのＩＣ50値で前記ヒトＩＦＮ−ωの前
記活性を中和する、請求項４に記載の抗体。
【請求項６】
前記抗体が、少なくとも約２×１０-10Ｍ以下、約１．５×１０-10Ｍ以下、又は約１×
１０-10Ｍ以下のＩＣ50値で少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１の
ヒトＩＦＮ−αサブタイプを中和する、請求項５に記載の抗体。
【請求項７】
前記ＩＦＮ−αサブタイプが、ＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ
−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＫ
、ＩＦＮ−αＷＡ、及びＩＦＮ−α４ａからなる群から選択される、請求項６に記載の抗
体。
【請求項８】
ａ）配列番号１０９のＨＣＤＲ１アミノ酸配列、
ｂ）配列番号１１１、１１２、又は１１３のＨＣＤＲ２アミノ酸配列、
ｃ）配列番号１１５又は１１６のＨＣＤＲ３アミノ酸配列、
ｄ）配列番号７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、
８７、８８、８９、９０、又は９１のＬＣＤＲ１アミノ酸配列、
ｅ）配列番号９３、９４、又は９５のＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び
ｆ）配列番号９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１
０５、１０６、又は１０７のＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む、請求項６に記載の抗体。
【請求項９】
前記抗体が、それぞれ配列番号１０９、１１３、及び１１６の重鎖相補性決定領域（Ｈ
ＣＤＲ）１（ＨＣＤＲ１）、２（ＨＣＤＲ２）、及び３（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列、
並びにそれぞれ配列番号８２、９４、及び９９の軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１（Ｌ
ＣＤＲ１）、２（ＬＣＤＲ２）、及び３（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む、請求項８
に記載の抗体。
【請求項１０】
前記抗体が、それぞれ配列番号１０９、１１４、及び１２１の重鎖相補性決定領域（Ｈ
ＣＤＲ）１（ＨＣＤＲ１）、２（ＨＣＤＲ２）、及び３（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列、
並びにそれぞれ配列番号１１８、１１９、及び１２０の軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）
１（ＬＣＤＲ１）、２（ＬＣＤＲ２）、及び３（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む、請
求項６に記載の抗体。
【請求項１１】
前記抗体が、ＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−
αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＫ、ＩＦＮ−αＷＡ
、及びＩＦＮ−α４ａからなる群から選択される少なくとも６つのヒトＩＦＮ−αサブタ
イプを中和する、請求項６に記載の抗体。
【請求項１２】
前記抗体が、それぞれ配列番号１０９、１１４、１２１、１５９、１１９、及び１６０
のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のア
ミノ酸配列を含む、請求項１１に記載の抗体。
【請求項１３】
前記抗体が、ＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−
αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＫ、ＩＦＮ−αＷＡ
、及びＩＦＮ−α４ａからなる群から選択される少なくとも１０のヒトＩＦＮ−αサブタ
イプを中和する、請求項６に記載の抗体。
【請求項１４】
前記抗体が、少なくともアミノ酸残基Ｆ２７、Ｌ３０、及びＲ３３において配列番号１
のヒトＩＦＮ−ωと結合する、請求項１３に記載の抗体。
【請求項１５】
前記抗体が、それぞれ配列番号１０９、１１４、１２１、１６１、１１９、及び１６２
のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のア
ミノ酸配列を含む、請求項１４に記載の抗体。
【請求項１６】
前記抗体が、少なくとも前記ヒトＩＦＮ−αサブタイプのＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−αＢ
２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＪ１、及
びＩＦＮ−α４ａを中和する、請求項１５に記載の抗体。
【請求項１７】
前記抗体が、ＩＦＮ−αＩ、ＩＦＮ−αＫ、又はＩＦＮ−αＷＡを更に中和する、請求
項１６に記載の抗体。
【請求項１８】
前記抗体が、
ａ）２５０Ｕ／ｍＬのインターフェロンによって誘導された全血中での白血球インター
フェロンによって誘導されたＩＰ−１０の放出を、１０μｇ／ｍｌの抗体の存在下で前記
抗体の不在下と比較して約５０％以上阻害する、あるいは
ｂ）全血中の全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）免疫複合体によって誘導されたＩＰ−１０の
放出を、１０μｇ／ｍｌの抗体の存在下で前記抗体の不在下と比較して約５０％以上阻害
する、請求項１４に記載の抗体。
【請求項１９】
前記抗体が、配列番号２８と少なくとも９０％、９５％、又は９７％同一の重鎖可変領
域（ＶＨ）アミノ酸配列、及び配列番号１５０と少なくとも９０％、９５％、又は９７％
同一の軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列を含む、請求項５に記載の抗体。
【請求項２０】
配列番号、
ａ）それぞれ１０９、１１３、１１６、７７、９３、及び１０４、
ｂ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８５、９３、及び９６、
ｃ）それぞれ１０９、１１３、１１５、７９、９５、及び１０７、
ｄ）それぞれ１０９、１１３、１１６、７６、９３、及び１０３、
ｅ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８５、９３、及び９６、
ｆ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８９、９５、及び１００、
ｇ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８６、９３、及び１０５、
ｈ）それぞれ１０９、１１３、１１５、７６、９３、及び１０３、
ｉ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８０、９３、及び９７、
ｊ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８４、９３、及び９７、
ｋ）それぞれ１０９、１１３、１１６、９０、９３、及び９７、
ｌ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８８、９３、及び１０２、
ｍ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８７、９３、及び１０５、
ｎ）それぞれ１０９、１１３、１１６、９１、９３、及び１０６、
ｏ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８０、９３、及び９７、
ｐ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８３、９３、及び１０１、
ｑ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８２、９４、及び９８、
ｒ）それぞれ１０９、１１３、１１５、７８、９５、及び１００、
ｓ）それぞれ１０９、１１１、１１６、８１、９３、及び１０６、
ｔ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８２、９４、及び９９、
ｕ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８１、９３、及び１０６、
ｖ）それぞれ１０９、１１２、１１６、８１、９３、及び１０６、あるいは
ｗ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８１、９３、及び１０６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤ
Ｒ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３の配列を含む、請求項１９
に記載の抗体。
【請求項２１】
前記抗体が、ヒト化されている又はヒトである、請求項２０に記載の抗体。
【請求項２２】
前記ヒト抗体重鎖可変領域フレームワークがヒト生殖系列遺伝子ＩＧＨＶ５−５１（配
列番号１５５）由来である、請求項２１に記載の抗体。
【請求項２３】
前記ヒト抗体軽鎖可変領域フレームワークがヒト生殖系列遺伝子ＩＧＫＶ１Ｄ−３９（
配列番号１５６）由来である、請求項２２に記載の抗体。
【請求項２４】
前記抗体が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４サブタイプのものである、
請求項２１に記載の抗体。
【請求項２５】
前記抗体がＦｃ領域内に少なくとも１つの置換を有する、請求項２４に記載の抗体。
【請求項２６】
前記置換が、置換Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ、Ｖ２３４Ａ／Ｇ２３７Ａ／Ｐ
２３８Ｓ／Ｈ２８Ａ／Ｖ３０９Ｌ／Ａ３３０Ｓ／Ｐ３３１Ｓ、又はＰ２３８Ｓ／Ｌ２３４
Ａ／Ｌ２３５Ａを含み、残基の番号付けがＥＵ番号付けに準ずる、請求項２５に記載の抗
体。
【請求項２７】
重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、
ａ）前記ＶＨが配列番号２８、３１、１５７、又は１５８のアミノ酸配列を含む、請求
項１９に記載の抗体。
【請求項２８】
前記ＶＬが配列番号３５、３９、４０、４２、４６、５２、５３、５４、５７、６１、
６２、６８、７１、７３、７５、１３５、又は１５０のアミノ酸配列を含む、請求項２７
に記載の抗体。
【請求項２９】
配列番号、
ａ）それぞれ２８及び４０、
ｂ）それぞれ２８及び３９、
ｃ）それぞれ３１及び６２、
ｄ）それぞれ２８及び５４、
ｅ）それぞれ３１及び３９、
ｆ）それぞれ３１及び６８、
ｇ）それぞれ２８及び４２、
ｈ）それぞれ３１及び５４、
ｉ）それぞれ２８及び５３、
ｊ）それぞれ２８及び７３、
ｋ）それぞれ２８及び７５、
ｌ）それぞれ２８及び５２、
ｍ）それぞれ２８及び３５、
ｎ）それぞれ２８及び１３５、
ｏ）それぞれ３１及び５３、
ｐ）それぞれ２８及び４６、
ｑ）それぞれ２８及び６１、
ｒ）それぞれ３１及び５７、
ｓ）それぞれ１５７及び７１、
ｔ）それぞれ２８及び１５０、
ｕ）それぞれ３１及び７１、
ｖ）それぞれ１５８及び７１、あるいは
ｗ）それぞれ２８及び７１、の前記ＶＨ及び前記ＶＬを含む、請求項２８に記載の抗体
。
【請求項３０】
配列番号２８のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１５０のＶＬアミノ酸配列を含む、請求
項１９に記載の抗体。
【請求項３１】
前記抗体が二重特異性である、請求項１、２０、又は２９に記載の抗体。
【請求項３２】
前記抗体が、ＢＬｙＳ、ＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−６、ＣＤ２７、ＢＤＣＡ２、ＩＬ−１２、
ＩＬ−２３、ＩＦＮ−αＤ、ＩＬ−１７、ＣＤ２０、ＩＬ−１０、ＣＤ２２、ＩＬ−２１
、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳＬ、又はＩＦＮ−γと結合する、請求項３１に記載の抗体。
【請求項３３】
請求項１、２０、又は２９に記載の抗体と、医薬的に許容される担体と、を含む、医薬
組成物。
【請求項３４】
（ｉ）請求項２０若しくは２９に記載の抗体ＶＨ若しくはＶＬ、又は（ｉｉ）請求項２
０若しくは２９に記載の抗体ＶＨ及びＶＬをコードするポリヌクレオチド。
【請求項３５】
請求項３５のポリヌクレオチドを含むベクター。
【請求項３６】
請求項３５のベクターを含む宿主細胞。
【請求項３７】
請求項２０に記載の抗体の生成方法であって、前記抗体が発現する条件下で請求項３６
に記載の宿主細胞を培養することと、前記宿主細胞によって生成された前記抗体を回収す
ることと、を含む、方法。
【請求項３８】
免疫媒介炎症性疾患、自己免疫疾患、又は慢性ウイルス感染症の治療方法であって、請
求項１、２０、又は２９に記載の単離された抗体の治療有効量を、それを必要とする患者
に、前記疾患又は前記感染症を治療するのに十分な時間投与することを含む、方法。
【請求項３９】
前記免疫媒介炎症性疾患又は前記自己免疫疾患とは、狼瘡、乾癬、免疫性血小板減少症
（ＩＴＰ）、エカルディ−グチエール症候群（ＡＧＳ）、全身性硬化症、シェーグレン症
候群、筋炎、分類不能型免疫不全症（ＣＶＩＤ）、自己免疫性甲状腺疾患、Ｉ型糖尿病、
関節リウマチ、移植片拒絶反応、又は移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）である、請求項３８に
記載の方法。
【請求項４０】
狼瘡が、全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）又は皮膚紅斑性狼瘡（ＣＬＥ）である、請求項３
９に記載の方法。
【請求項４１】
前記患者が狼瘡腎炎を有する、請求項４０に記載の方法。
【請求項４２】
前記患者がＩ型インターフェロンシグネチャを示す、請求項３８に記載の方法。
【請求項４３】
前記慢性ウイルス感染症がＨＩＶ又はＣ型肝炎感染症である、請求項３８に記載の方法
。
【請求項４４】
前記抗体が請求項２０又は２９に記載の抗体を含む、請求項３８に記載の方法。
【請求項４５】
前記抗体が、二重特異性抗体である、請求項３８に記載の方法。
【請求項４６】
前記二重特異性抗体が、ＢＬｙＳ、ＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−６、ＣＤ２７、ＢＤＣＡ２、Ｉ
Ｌ−１２、ＩＬ−２３、ＩＦＮ−αＤ、ＩＬ−１７、ＣＤ２０、ＩＬ−１０、ＣＤ２２、
ＩＬ−２１、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳＬ、又はＩＦＮ−γを中和する、請求項４５に記載の方
法。
【請求項４７】
第２の治療薬を更に投与する、請求項３８に記載の方法。
【請求項４８】
前記第２の治療薬が、ＢＬｙＳ、ＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−６、ＣＤ２７、ＢＤＣＡ２、ＩＬ
−１２、ＩＬ−２３、ＩＦＮ−αＤ、ＩＬ−１７、ＣＤ２０、ＩＬ−１０、ＣＤ２２、Ｉ
Ｌ−２１、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳＬ、又はＩＦＮ−γと結合する抗体である、請求項４７に
記載の方法。
【請求項４９】
前記第２の治療薬がコルチコステロイド、抗マラリア剤、免疫抑制剤、細胞毒性剤、又
はＢ細胞調節剤である、請求項４７に記載の方法。
【請求項５０】
前記第２の治療薬がプレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デフラザ
コート、ヒドロキシクロロキン、アザチオプリン、メトトレキサート、シクロホスファミ
ド、ミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）、ミコフェノール酸ナトリウム、シクロスポ
リン、レフルノミド、タクロリムス、リツキシマブ（商標）、又はベリムマブ（商標）で
ある、請求項４９に記載の方法。
【請求項５１】
前記抗体がＩＦＮ−αＤ、ＩＦＮ−α１、及び／又はＩＦＮ−βを中和しない、請求項
１〜３２のいずれか一項に記載の抗体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インターフェロン−α及びインターフェロン−ωを広域に中和する抗体、そ
れらの抗体又は断片をコードするポリヌクレオチド、並びに上記を製造及び使用する方法
に関する。
【背景技術】
【０００２】
Ｉ型インターフェロン（ＩＦＮ）（ＩＦＮ−Ｉ）は、遍在的に発現するヘテロ二量体受
容体であるＩＦＮＡＲ（ＩＦＮＡＲ１とＩＦＮＡＲ２とのヘテロ二量体）を介してシグナ
ルを伝達して、その結果、抗ウイルス、抗増殖、及び免疫調節効果をもたらすサイトカイ
ンのファミリーである。ヒトにおいて、Ｉ型ＩＦＮは、少なくとも１２のＩＦＮ−αタン
パク質サブタイプと、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−ε、ＩＦＮ−κ、及びＩＦＮ−ωのそれぞれ
の１つのサブタイプとで構成されている。ＩＦＮ−Ｉの放出は微生物リガンド及び無菌リ
ガンドの両方に応答して生じる。受容体への結合時に、ＩＦＮ−Ｉは、ＪＡＫ１及びＴＹ
Ｋ２の活性化によってシグナル伝達カスケードを開始し、これによりＳＴＡＴ１〜６を含
むいくつかのＳＴＡＴファミリーメンバーのリン酸化反応がもたらされる。ＳＴＡＴ１及
びＳＴＡＴ２の活性化により、ＩＦＮ調節因子９（ＩＲＦ９）との複合体が形成され、Ｉ
ＦＮ刺激遺伝子因子３（ＩＳＧＦ３）複合体としても知られるこの複合体は、核内でＩＦ
Ｎ刺激応答配列（ＩＳＲＥ）に結合し、その結果、ＩＲＦ７及びＣＸＣＬ１０（ＩＰ−１
０）を含む多くのインターフェロン刺激遺伝子（ＩＳＧ）の転写がもたらされる（Ｇｏｎ
ｚａｌｅｚ−Ｎａｖａｊａｓら、Ｎａｔｕｒｅ  ｒｅｖｉｅｗｓ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ
１２，１２５（Ｆｅｂ，２０１２））。ＩＦＮ−Ｉは、ｖ−ｃｒｋ肉腫ウイルスＣＴ１
０発癌遺伝子相同体（トリ）様（ＣＲＫＬ）、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（
ＭＡＰＫ）、ホスホイノシチド３−キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）を含む他の経路を介し、かつ活
性化Ｂ細胞の核因子κ−軽鎖エンハンサー（ＮＦ−κβ）を介した細胞機能も調節する（
Ｈｅｒｖａｓ−Ｓｔｕｂｂｓら、Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｃａｎｃｅｒ  ｒｅｓｅａｒｃｈ：
ａｎ  ｏｆｆｉｃｉａｌ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ａｓｓｏ
ｃｉａｔｉｏｎ  ｆｏｒ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  １７，２６１９（Ｍａｙ  
１，２０１１））。
【０００３】
全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）及び皮膚紅斑性狼瘡（ＣＬＥ）を含む狼瘡、Ｉ型糖尿病、
乾癬、シェーグレン病、全身性硬化症、関節リウマチ、免疫性血小板減少症（ＩＴＰ）、
エカルディ−グチエール症候群（ＡＧＳ）、筋炎、分類不能型免疫不全症（ＣＶＩＤ）、
及び自己免疫性甲状腺疾患などのいくつかの免疫媒介炎症性疾患又は自己免疫疾患は、患
者の少なくとも部分母集団中において全血及び／又は全組織中に存在する一般にＩＦＮシ
グネチャと呼ばれるＩＦＮ誘導性遺伝子の転写の過剰発現、又はＩＦＮ−Ｉの上昇に関連
している。
【０００４】
ＳＬＥは、病原性自己抗体及び免疫複合体が複数の器官系にわたる組織損傷を引き起こ
す慢性の自己免疫疾患又は免疫媒介炎症性疾患である。この疾患は異質な臨床像を有する
広範な症状を示し、全身性、皮膚性、腎性、筋骨格性、神経性、及び血液性の症状を含む
場合がある。ＳＬＥの重症度には大きなばらつきがあり、また、これは慢性的に寛解又は
再発しながら活動サイクルの拡大を伴い、好転又は軽快までに数週間、数ヶ月、又は数年
の期間を要する場合がある。ＩＦＮ−αは、ＳＬＥ患者において上昇し、自己寛容性の損
失を促進すると考えられている。ＩＦＮ−αは持続的な樹状細胞活性化、ひいては抗原提
示、及びＳＬＥに寄与するＴｒｅｇ機能の抑制に寄与することが示されている。更に、Ｉ
ＦＮ−αは市販のＳＬＥ治療用ＢＥＮＬＹＳＴＡ（商標）の標的であるＢＬｙＳの発現を
誘導する。ＩＦＮ−Ｉの産生又は応答に関連する多くの多型性が特定されており、これら
は確認されているＳＬＥに関連する多形現象の半数超を計上する（Ｇｈｏｄｋｅ−Ｐｕｒ
ａｎｉｋ  ＆  Ｎｉｅｗｏｌｄ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  
ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ  ８，ｄｏｉ：１０．２２１７／ｉｊｒ．
１３．５８（２０１３））。様々なＩＦＮ−αサブタイプを中和する抗体（ｐａｎ−ＩＦ
Ｎ−α抗体）がＳＬＥに対する臨床試験で評価されている（例えば国際公開公報第ＷＯ０
２／０６６６４９号、同第ＷＯ０５／０５９１０６号、同第ＷＯ０６／０８６５８６号、
同第ＷＯ０９／１３５８６１号を参照されたい）。
【０００５】
ＩＦＮ−ωは、ウイルス感染後に産生されたヒト白血球ＩＦＮ調製物における全ＩＦＮ
−Ｉ活性の約１５％を構成する（Ａｄｏｌｆ，Ｖｉｒｏｌｏｇｙ  １７５，４１０（Ａｐ
ｒ，１９９０）。ＩＦＮ−ω遺伝子発現は、ＳＬＥ患者において上昇することが報告され
ており（Ｇｅｎｅｓ  ａｎｄ  ｉｍｍｕｎｉｔｙ  ４，１７７（Ａｐｒ，２００３）（Ｈ
ａｎら）、Ｈｕｍ  Ｇｅｎｏｍｉｃｓ  Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ  ２００９，（２００９）
（Ｙａｏら））、また、ＤＣの分化を誘導するＩＦＮ−ωの能力が報告されている（Ｗａ
ｌｋｅｒ  ａｎｄ  Ｔｏｕｇｈ，Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  ｉｍｍｕｎ
ｏｌｏｇｙ  ３６，１８２７（Ｊｕｌ，２００６））現在臨床試験中の抗ＩＦＮ−α抗体
（シファリムマブ（ＭＥＤＩ−５４５）、ロンタリズマブ、及びＡＧＳ−００９）は、Ｉ
ＦＮ−ωを中和しない。これらの抗体の臨床試験データは、抗ＩＦＮ−α抗体を用いた治
療後の患者におけるＩ型ＩＦＮシグネチャの部分的な低減を示しており（Ａｎｎ  Ｒｈｅ
ｕｍ  Ｄｉｓ７０：１９０５〜１９１３，２０１１（Ｍｅｒｒｉｌｌら）、Ａｒｔｈｒｉ
ｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ  ６０：１７８５〜１７９６，２００９（Ｙａｏら））、ロンタリズ
マブ（ｐａｎ−抗ＩＦＮ−α抗体）でのフェーズ２の試験データでは、インターフェロン
シグネチャメトリック（ＩＳＭ）が低中度から重度に活性な狼瘡被検者の所定のバイオマ
ーカー定義群で、第２４週にＳＬＥの兆候及び症状、フレア率、及びステロイド負担の改
善を示した。ＩＳＭ−Ｈｉｇｈとして予め定義されたより高レベルのＩＦＮ誘導性遺伝子
発現を有する患者においては有効性が認められなかった（Ｋａｌｕｎｉａｎら、２０１２
ＡＣＲ／ＡＲＨＰ  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ；Ａｂｓｔｒａｃｔ＃  ２６２２，
２０１２）。
【０００６】
抗ＩＦＮ抗体に加えて、抗ＩＦＮＡＲ１抗体も狼瘡の治療について調査されている（Ｗ
ａｎｇら、２０１３；Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ＆  Ｔｈｅｒａｐ
ｅｕｔｉｃｓ公認記事プレビュー、１４  Ｆｅｂｒｕａｒｙ  ２０１３；ｄｏｉ：１０．
１０３８／ｃｌｐｔ．２０１３．３５）。ＩＦＮＡＲ１遮断物は、ＩＦＮ−βを含む全て
のＩ型ＩＦＮによって誘導されたＩＦＮシグナル伝達を消失させる可能性がある。ＩＦＮ
−βをコードする遺伝子の特異的欠失が、機能的ＩＦＮ−βを有する同様に曝露されたマ
ウスと比較して、ウイルス宿主に対する実質的な感受性を被るので、ＩＦＮ−βは、抗ウ
イルス防衛においてより重要な役割を果たすことができる（Ｊ  Ｖｉｒｏｌ  ８５：７１
８６〜７１９４（Ｌａｚｅａｒら）、Ｊ  Ｖｉｒｏｌ  ７４（７）：３４０４〜３４０，
２０００（Ｄｅｏｎａｒａｉｎら）、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  １１０：３５４０〜３５
４３，２００４（Ｄｅｏｎａｒａｉｎら）、Ｊ  Ｖｉｒｏｌ  ８０：３４３８〜３４４４
，２００６（Ｇｅｒｌａｃｈら））。したがって、抗ＩＦＮＡＲ１抗体は副作用のリスク
を上昇させ得る。
【０００７】
ＳＬＥに対する現在の標準的治療法としては、コルチコステロイド、抗マラリア剤、免
疫抑制剤、又はＢ細胞調節剤が挙げられる。これらの治療薬は毒性及び他の深刻な副作用
を示す場合があり、全ての狼瘡患者の治療には適さない場合がある。したがって、狼瘡及
び他の免疫媒介炎症性疾患又は自己免疫疾患に対する更なる治療的処置の必要性が存在す
る。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明の一実施形態は、ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω）及び少なくとも３
、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−
α）サブタイプに結合し、それらの生物活性を中和する、単離されたモノクローナル抗体
である。
【０００９】
本発明の別の実施形態は、ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω）及び少なくとも
３、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトインターフェロンアルファ（ＩＦＮ
−α）サブタイプに結合し、それらの活性を中和する、単離されたモノクローナル抗体で
あり、この抗体は、少なくとも約１×１０-9Ｍ以下、約１×１０-10Ｍ以下、約５×１０-
11Ｍ以下、又は約１×１０-11Ｍ以下のＩＣ50でヒトＩＦＮ−ωの生物活性を中和する。
【００１０】
他の実施形態では、本発明の抗体は、少なくとも約２×１０-10Ｍ以下、約１．５×１
０-10Ｍ以下、又は約１×１０-10Ｍ以下のＩＣ50値で少なくとも３、４、５、６、７、８
、９、１０、又は１１のヒトＩＦＮ−αサブタイプの活性を中和する。
【００１１】
他の実施形態では、本抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１４、及び１２１の重鎖相
補性決定領域（ＨＣＤＲ）１（ＨＣＤＲ１）、２（ＨＣＤＲ２）、及び３（ＨＣＤＲ３）
のアミノ酸配列、並びに配列番号１１８、１１９、及び１２０の軽鎖相補性決定領域（Ｌ
ＣＤＲ）１（ＬＣＤＲ１）、２（ＬＣＤＲ２）、及び３（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を
含む。
【００１２】
他の実施形態では、本抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１４、１２１、１５９、１
１９、及び１６０のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及
びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【００１３】
他の実施形態では、本抗体は、ＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ
−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＫ
、ＩＦＮ−αＷＡ、及びＩＦＮ−α４ａからなる群から選択される少なくとも１０のヒト
ＩＦＮ−αサブタイプを中和する。
【００１４】
他の実施形態では、本抗体は、少なくともアミノ酸残基Ｆ２７、Ｌ３０、及びＲ３３に
おいて配列番号１のヒトＩＦＮωに結合する。
【００１５】
他の実施形態では、本抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１４、１２１、１６１、１
１９、及び１６２のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及
びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【００１６】
他の実施形態では、本抗体は、少なくともヒトＩＦＮ−αサブタイプのＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ
−αＪ１、及びＩＦＮ−α４ａを中和する。
【００１７】
他の実施形態では、本抗体は、配列番号２８と少なくとも９０％、９１％、９２％、９
３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一の重鎖可変領域（ＶＨ
）アミノ酸配列、及び配列番号１５０と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９
４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一の軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ
酸配列を含む。
【００１８】
他の実施形態では、本抗体は、本明細書で記載される特定のＨＣＤＲ及びＬＣＤＲ配列
を含む。
【００１９】
他の実施形態では、本抗体は、本明細書で記載される特定のＶＨ及びＶＬ配列を含む。
【００２０】
本発明の別の実施形態は、本発明の抗体と、医薬的に許容される担体とを含む医薬組成
物である。
【００２１】
本発明の別の実施形態は、本発明の抗体ＶＨ及び／又はＶＬをコードするポリヌクレオ
チドである。
【００２２】
本発明の別の実施形態は、本発明のポリヌクレオチドを含むベクターである。
【００２３】
本発明の別の実施形態は、本発明のベクターを含む宿主細胞である。
【００２４】
本発明の別の実施形態は、抗体が発現する条件下で本発明の宿主細胞を培養することと
、宿主細胞によって生成された抗体を回収することとを含む、本発明の抗体の生成方法で
ある。
【００２５】
本発明の別の実施形態は、単離された本発明の抗体の治療有効量を、それを必要とする
患者に、前記疾患を治療又は予防するのに十分な時間投与することを含む、免疫媒介炎症
性疾患又は自己免疫性疾患の治療方法である。
【００２６】
いくつかの実施形態では、免疫媒介炎症性疾患又は自己免疫疾患とは、狼瘡、乾癬、免
疫性血小板減少症（ＩＴＰ）、エカルディ−グチエール症候群（ＡＧＳ）、全身性硬化症
、シェーグレン症候群、筋炎、分類不能型免疫不全症（ＣＶＩＤ）、自己免疫性甲状腺疾
患、Ｉ型糖尿病、関節リウマチ、移植片拒絶反応、又は移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）であ
る。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１Ａ】中国人ＳＬＥ患者の血漿中のＩＦＮ−ω及びＩＦＮ−αの濃度（ｐｇ／ｍｌ）を示す。図の横棒は複製試料の平均ＥＬＩＳＡ値を示し、縦棒は標準偏差（ＳＤ）を示す。
【図１Ｂ】白人ＳＬＥ患者の血清中のＩＦＮ−ω及びＩＦＮ−αの濃度（ｐｇ／ｍｌ）を示す。濃色の実線の円は様々なドナーにわたるＩＦＮ−αの最高濃度を示し、点線の円は様々なドナーにわたるＩＦＮ−ωの最高血漿濃度を示す。図の横棒は複製試料の平均ＥＬＩＳＡ値を示し、縦棒はＳＤを示す。
【図１Ｃ】ＩＳＲＥレポーター遺伝子アッセイを用いて測定した、患者の血清がインターフェロン下流シグナル伝達経路を活性化することを示す。最高量のＩＦＮ−αタンパク質（濃色実線円）及びＩＦＮ−ω（点線円）を示すドナーは、レポーター遺伝子アッセイにおけるＩＳＲＥ誘導の最高濃度も示した。結果は、各血清試料に対して１つのウェルからの読み取り値である。
【図２】抗ＩＦＮ−α抗体のみ濃度を上昇させて（０．４〜１００μｇ／ｍｌ）、又は抗ＩＦＮ−α抗体１００μｇ／ｍｌと抗ＩＦＮ−ω抗体（２０μ／ｍｌ）とを組み合わせた、ＳＬＥ免疫複合体によって誘導されたＩＦＮの阻害を示す。ＳＬＥ免疫複合体（ＳＬＥ  ＩＣ）を、２名の異なるドナーから調製した（ＳＬＥドナー２３２又は２９３）。ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−ωの組み合わせ阻害により、ＩＳＲＥアッセイを用いて測定した、ＳＬＥ  ＩＣによって誘導されたＩＦＮ活性の抑制が強化された。ＨＶ  ＩＣ馴化培地＝健常ドナーからの免疫複合体で刺激したＰＢＭＣからの馴化培地。
【図３】示されるように、ＩＦＮ−αＡ又はＩＦＮ−ωで刺激した６名の健常個人からのＰＢＭＣからのＩＰ−１０分泌の誘導を示す。
【図４Ａ】示されるように、ＩＦＮ−ω、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−ω、及び抗ＩＦＮ−ω抗体、若しくはＩＦＮ及び抗ＩＦＮ−α抗体、又はアイソタイプ対照（ｉｓｏ）の存在下で分化したＤＣの存在下における、ＣＤ４+Ｔ細胞によるＩＦＮ−の分泌を示す。ＩＦＮ−ω又はＩＦＮ−αのいずれかの存在下で分化したＤＣは、同程度にＣＤ４+Ｔ細胞の活性化を誘導したが、抗体を中和する抗ＩＦＮ−ω又は抗ＩＦＮ−αの存在下で分化したＤＣは、ＣＤ４+Ｔ細胞の分化を誘導しなかった。分化したＤＣを、精製したＣＤ４+Ｔ細胞を用いて、ＤＣ：ＣＤ４+Ｔ細胞比１：２０で培養した。分泌されたＩＦＮ−γを６日目に測定した。データは２つの研究を表す。エラーバーはＬｕｍｉｎｅｘ  ３連のＳＤを示す。ＣＯＮＣ：濃度。
【図４Ｂ】図示されるように、ＩＦＮ−ω、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−ω、及び抗ＩＦＮ−ω抗体、若しくはＩＦＮ−α及び抗ＩＦＮ−α抗体、又はアイソタイプ対照（ｉｓｏ）の存在下で分化したＤＣの存在下における、ＣＤ４+Ｔ細胞によるＩＬ−１７の分泌を示す。ＩＦＮ−ω又はＩＦＮ−αのいずれかの存在下で分化したＤＣは、同程度にＣＤ４+Ｔ細胞の活性化を誘導したが、抗体を中和する抗ＩＦＮ−ω又は抗ＩＦＮ−αの存在下で分化したＤＣは、ＣＤ４+Ｔ細胞の分化を誘導しなかった。分化したＤＣを、精製したＣＤ４+Ｔ細胞を用いて、ＤＣ：ＣＤ４+Ｔ細胞比１：２０で培養した。分泌されたＩＬ−１７を６日目に測定した。データは２つの研究を表す。エラーバーはＬｕｍｉｎｅｘ  ３連のＳＤを示す。ＣＯＮＣ：濃度。
【図５Ａ】ＩＦＮ−ωが、ＩＦＮ−αと同程度に、Ｔ細胞に依存しないＢ細胞活性化を誘導することを示す。Ｂ細胞活性化は蛍光標識化抗ＣＤ８６抗体を用いたＣＤ８６表面発現によって評価される。図に示されるように、Ｔ細胞に依存しないＢ細胞の活性化はＣｐＧ（ＯＤＮ２００６）及び／又は抗Ｂ細胞受容体（ａＢＣＲ）抗体によって誘導される。ＩＦＮ−ω又はＩＦＮ−α（ＩＦＮ−αＢ２）を指示された濃度で使用した。平均蛍光度を測定した。Ｂ細胞を１名のドナーから得た。結果を複製試料±ＳＤの平均値として表した。
【図５Ｂ】ＩＦＮ−ωが、ＩＦＮ−αと同程度に、Ｔ細胞に依存しない方法で活性化されたＢ細胞からＩＬ−６の分泌を誘導することを示す。図に示されるように、Ｔ細胞に依存しないＢ細胞の活性化は、ＣｐＧ（ＯＤＮ−２００６）及び／又は抗ＢＣＲ抗体（ａＢＣＲ）によって誘導される。ＩＦＮ−ω又はＩＦＮ−α（ＩＦＮ−α２Ｂ）を指示された濃度で使用した。ＩＬ−６濃度をｐｇ／ｍｌとして示す。Ｂ細胞を１名のドナーから得た。結果を複製試料±ＳＤの平均値として表した。
【図６】ＩＦＮ−ωが、ＩＦＮ−α（ＩＦＮ−αＢ２）と同程度に、ヒトＰＢＭＣからのＢＬｙＳの分泌を誘導することを示す。ＰＢＭＣを刺激するのに用いられるＩＦＮ−ω又はＩＦＮ−αの濃度をＸ軸に示す。ＢＬｙＳ濃度をｐｇ／ｍｌとして示す。結果を複製試料±ＳＤの平均値として表す。
【図７Ａ】ＩＦＮ−ω／Ｆａｂ  ＩＦＷＭ３７１複合体の全分子構造を示す（抗体はＦｖのみを示す）。四角囲み領域を図７Ｂで拡大する。ＩＦＮ−ωＡＢループ（ＡＢ）、ＩＦＮ−ωのＥヘリックス（Ｅ）及びＤヘリックス（Ｄ）を示す。小さい円は水分子を表す。ＶＬ及びＶＨ又はＩＦＷＭ３７１を示す。
【図７Ｂ】ＩＦＮ−ω／Ｆａｂ  ＩＦＷＭ３７１界面で水分子（水錯体（ＷＣ）１、２、及び３）によって媒介される水素結合ネットワークを示す、図７Ａの四角囲み領域の拡大図を示す。
【図８Ａ】ＩＦＮ−ω／Ｆａｂ  ＩＦＷＭ３７１複合体中のエピトープを示す。配列番号１に従うＩＦＮ−ω残基番号付け。
【図８Ｂ】ＩＦＮ−ω／Ｆａｂ  ＩＦＷＭ３７１複合体中のパラトープを示す。残基Ｙ３２，Ｙ９２、Ｔ９４、及びＬ９６はＶＬ中の残基であり、残基Ｗ３３、Ｉ５０、Ｄ５７、Ｔ５８、Ｒ５９、Ｈ９９、Ｐ１００、Ｇ１０１、Ｌ１０２、Ｎ１０３，Ｗ１０４、Ａ１０５、及びＤ１０７はＩＦＮ−ωと接触するＶＨ中の残基である。ＶＬ：配列番号２９、ＶＨ：配列番号２８。Ｔ９４及びＡ１０５は図示していない。
【図８Ｃ】ＩＦＮ−ωとＦａｂ  ＩＦＷＭ３７１との間の２次元相互作用マップを示す。四角囲み内の残基はＶＬパラトープ残基であり、円囲み内の残基はＶＨパラトープ残基である。灰色で強調表示された残基は、ＩＦＮ−ωエピトープ残基である。ＶＬ、ＶＨ、及びＩＦＮ−ω残基の番号付けは、それぞれ配列番号２９、２８、及び１に準ずる。ファンデルワールス（Van der Walls）（ＶＤＷ）相互作用及び疎水性相互作用を実線で示し、静電／Ｈ結合を破線で示し、矢印は主鎖原子を示す矢印との主鎖相互作用を示す。相互作用の大半は３つのＩＦＮ−ωエピトープ残基Ｆ２７、Ｌ３０、及びＲ３３によって形成される。
【図９】ＩＦＮ−ωと様々なＩＦＮ−αサブタイプとのアラインメントを示す。矢印はＩＦＷＭ３７１が結合するエピトープ残基を示す。Ｆ２７、Ｌ３０、及びＲ３３は、ＩＦＷＭ３７１が結合しないＩＦＮ−αＤを除くＩ型ＩＦＮにわたり保存される。残基番号付けは、ヒトＩＦＮ−ω配列番号１（図中のＩＦＮω−０１）に準ずる。ＩＦＮα−０１／Ｄ／１：配列番号１８、ＩＦＮα−０２／Ａ：配列番号５、ＩＦＮα−０４／ａ／ｂ：配列番号１５、ＩＦＮα−０７／Ｊ：配列番号１３、ＩＦＮα−１０／Ｃ：配列番号７、ＩＦＮα−１７／Ｉ：配列番号１２、ＩＦＮα−２１／Ｆ：配列番号９、ＩＦＮα−１４／Ｈ：配列番号１１、ＩＦＮα−１６／ＷＡ：配列番号１６、ＩＦＮ−α−０８／Ｂ２：配列番号６、ＩＦＮα−０５／Ｇ：配列番号１０、ＩＦＮα−０６／Ｋ：配列番号１４。
【図１０】ＩＳＲＥアッセイにおいて、様々なＩ型ＩＦＮに対する選択抗体（select antibodies）のＩＣ50値を示す。
【図１１Ａ】抗ＩＦＮ−α／ω抗体を用いたヒト全血中での白血球ＩＦＮによって誘導されたＩＰ１０放出の中和を示す。白血球ＩＦＮ（Ｌｋ）を用いて、２名の被検者からの健常ドナー全血中でＩＰ−１０の分泌を誘導した。図に示されるように、様々な濃度（１０μｇ／ｍｌ〜１０ｐｇ／ｍｌ）の抗ＩＦＮ−α／ω抗体ＩＦＷＭ３５２２若しくはＩＦＷＭ３５２５を含むか又は含まない白血球インターフェロン（ＬＫ）を用いて全血をインキュベートした。バーは２連ウェルからの平均バー及びエラーバーのＳＤを表す。データは２名の異なるヒトドナーからの全血を用いた２つの独立した実験の結果を表す。
【図１１Ｂ】抗ＩＦＮ−α／ω抗体を用いたヒト全血中での白血球ＩＦＮに誘導されたＩＰ−１０放出の中和を示す。白血球ＩＦＮ（Ｌｋ）を用いて、２名の被検者からの健常ドナー全血中でＩＰ−１０の分泌を誘導した。図に示されるように、様々な濃度（１０μｇ／ｍｌ〜１０ｐｇ／ｍｌ）の抗ＩＦＮ−α／ω抗体ＩＦＷＭ３３９９若しくはアイソタイプ対照を含むか又は含まない白血球インターフェロン（ＬＫ）を用いて全血をインキュベートした。バーは２連ウェルからの平均バー及びエラーバーのＳＤを表す。データは２名の異なるヒトドナーからの全血を用いた２つの独立した実験の結果を表す。
【図１２Ａ】抗ＩＦＮ−α／ω抗体を用いたヒト全血中でのＳＬＥ免疫複合体によって誘導されたＩＰ−１０放出の中和を示す。図に示されるように、様々な濃度（１０μｇ／ｍｌ〜１０ｐｇ／ｍｌ）の抗ＩＦＮ−α／ω抗体ＩＦＷＭ３５２２若しくはＩＦＷＭ３５２５を含むか又は含まないＳＬＥ免疫複合体によって誘導されたインターフェロン調製物を用いて全血をインキュベートし、ＥＬＩＳＡキットを用いて血漿からのＩＰ−１０を分析した。バーは２連ウェルからの平均バー及びエラーバーのＳＤを表す。データは２名の異なるヒトドナーからの全血を用いた４つの独立した実験の結果を表す。
【図１２Ｂ】抗ＩＦＮ−α／ω抗体を用いたヒト全血中でのＳＬＥ免疫複合体によって誘導されたＩＰ−１０放出の中和を示す。図に示されるように、様々な濃度（１０μｇ／ｍｌ〜１０ｐｇ／ｍｌ）の抗ＩＦＮ−α／ω抗体ＩＦＷＭ３３９９若しくはアイソタイプ対照を含むか又は含まないＳＬＥ免疫複合体によって誘導されたインターフェロン調製物を用いて全血をインキュベートし、ＥＬＩＳＡキットを用いて血漿からのＩＰ−１０を分析した。バーは２連ウェルからの平均バー及びエラーバーのＳＤを表す。データは２名の異なるヒトドナーからの全血を用いた４つの独立した実験の結果を表す。
【図１３Ａ】図に示されるように、ＳＬＥ患者の血液を様々な濃度（μｇ／ｍｌ）のＩＦＮ−α／ω抗体ＩＦＷＭ２４２３又はアイソタイプ対照にインビトロで２４時間曝露した後の、血液中のＭＸ１遺伝子発現の正規化を示す。バーは３連ウェルからの平均バー及びエラーバーのＳＤを表す。ＭＸ１遺伝子発現をβ−アクチンに対して正規化した。
【図１３Ｂ】図に示されるように、ＳＬＥ患者の血液を様々な濃度（μｇ／ｍｌ）のＩＦＮ−α／ω抗体ＩＦＷＭ３５２２及びＩＦＷＭ２５２５又はアイソタイプ対照にインビトロで２４時間曝露した後の、血液中のＭＸ１遺伝子発現の正規化を示す。バーは３連ウェルからの平均バー及びエラーバーＳＤを表す。ＭＸ１遺伝子発現をβ−アクチンに対して正規化した。
【図１４Ａ】ＩＦＮ−ω／Ｍ３４１構造の抗体／抗原界面における、エピトープ残基Ｒ３３とＭ３７１のＶＨとの間の水素（Ｈ）結合相互作用、並びに水分子を示す。
【図１４Ｂ】エピトープ残基Ｒ３３とＭ３４２１のＶＨとの間の改変された水素結合相互作用、並びにＩＦＮ−ω／Ｍ３４２１構造中の水分子を示す。
【図１４Ｃ】Ｍ３７１の成熟に伴う配列変化（Ｌ９６Ｉ突然変異）及び構造変化を示す。Ｍ３７１構造においては、２つの代替的コンフォメーションを有するＶＨのＦ１０８が最もよく記述されている。Ｍ３４２１構造においては、これらは１つのコンフォメーションに変換され、これはＶＨとＶＬとの間のより緊密なパッキングを示唆する。更に、ＶＨのＷ４７の側鎖回転異性体フリップが存在する。
【図１４Ｄ】Ｍ３７１の成熟に伴う配列変化及び構造変化を示す。ＶＬ  Ｙ３２をより疎水性のＦ（Ｙ３２Ｆ）に突然変異させて、Ｍ３７１中のＹ３２とＩＦＮ−ωとの間の２つのＨ結合を除去する。ＶＬ  Ａ５０をＦ（Ａ５０Ｆ）に突然変異させた。この残基は抗原と直接接触しないが、抗原と接触するＶＨのＷ１０４に対してスタックする。２つの他の変化（Ｓ３１Ｇ及びＳ３０Ｄ）は抗原の結合に関与しないか、あるいはＡ５０Ｆなどの結合残基に直接の影響を与えない。これらの残基の変化は、局所的な疎水性に影響を与え、かつ溶媒相互作用を最適化する可能性がある。
【図１５】ＩＦＮ−ωとＦａｂ  ＩＦＷＭ３４２１との間の２次元相互作用マップを示す。四角囲み内の残基はＶＬパラトープ残基であり、円囲み内の残基はＶＨパラトープ残基である。灰色で強調表示された残基は、ＩＦＮ−ωエピトープ残基である。ＶＬ、ＶＨ、及びＩＦＮ−ω残基の番号付けは、それぞれ配列番号２８、７１、及び１に準ずる。ファンデルワールス（ＶＤＷ）相互作用及び疎水性相互作用を実線で示し、静電／Ｈ結合を破線で示し、矢印は主鎖原子を示す矢印との主鎖相互作用を示す。相互作用の大半は３つのＩＦＮ−ωエピトープ残基Ｆ２７、Ｌ３０、及びＲ３３によって形成される。
【図１６】ＩＦＮ−ωとＩＦＷＭ３５２５のＦａｂとの間の２次元相互作用マップを示す。四角囲み内の残基はＶＬパラトープ残基であり、円囲み内の残基はＶＨパラトープ残基である。灰色で強調表示された残基は、ＩＦＮ−ωエピトープ残基である。ＶＬ、ＶＨ、及びＩＦＮ−ω残基の番号付けは、それぞれ配列番号２８、７１、及び１に準ずる。ファンデルワールス相互作用（ＶＤＷ）及び疎水性相互作用を実線で示し、静電／Ｈ結合を破線で示し、矢印は主鎖原子を示す矢印との主鎖相互作用を示す。相互作用の大半は３つのＩＦＮ−ωエピトープ残基Ｆ２７、Ｌ３０、及びＲ３３によって形成される。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本明細書に引用される特許及び特許出願を含むが、それらに限定されない全ての刊行物
は、完全に記載されているかのように、参照により本明細書に組み込まれる。
【００２９】
本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を記載する目的でのみ使用され、限定を
意図するものではないと理解すべきである。特に断らないかぎり、本明細書において使用
される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野における当業者によって
一般的に理解されているものと同じ意味を有する。
【００３０】
本明細書に記載されているものと同様又は同等の任意の方法及び材料を、本発明の試験
を実施するために使用することができるが、例示となる材料及び方法が本明細書に記載さ
れる。本発明を説明及び特許請求する上で以下の用語が用いられる。
【００３１】
本明細書で使用される用語「特異的結合」又は「特異的に結合する」又は「結合する」
とは、抗体が抗原又は抗原中のエピトープに他の抗原とよりも高い親和性で結合すること
を指す。典型的には、この抗体は、１×１０-8Ｍ以下（例えば１×１０-9Ｍ以下、１×１
０-10Ｍ以下、１×１０-11Ｍ以下、又は１×１０-12Ｍ以下）の解離定数（ＫD）で抗原又
は抗原中のエピトープに結合し、典型的には、非特異的抗原（例えばＢＳＡ、カゼイン）
に結合する場合のＫDより少なくとも１０倍未満のＫDで結合する。解離定数は標準的手法
を用いて測定することができる。しかしながら、抗原又は抗原中のエピトープに特異的に
結合する抗体は、例えばヒト又はサル（例えばカニクイザル（Macaca fascicularis）（
マカクザル（cynomolgus）、シノ（cyno））又はチンパンジー（Pan troglodytes）（チ
ンパンジー（chimpanzee）、チンプ（chimp））といった他の関連抗原、例えば他の種か
らの同一の抗原（相同体）に対して交差反応性を有し得る。抗原又は抗原中のエピトープ
に特異的に結合する抗体は、少なくとも１つのインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）
サブタイプ及びインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω）などの２つ又は３つ以上の別個の
抗原間で共有されるエピトープに更に結合することができる（即ちＩＦＮ−αサブタイプ
及びＩＦＮ−ωと交差反応する抗体）。
【００３２】
本明細書で使用される用語「中和」若しくは「中和する」又は「中和抗体」若しくは「
抗体アンタゴニスト」とは、組み換えヒトインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω）及び／
又は少なくとも１つの組み換えヒトインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）サブタイプ
の生物活性を部分的に又は完全に阻害する抗体又は抗体断片を指す。中和抗体は、本明細
書に記載するように、ＩＦＮ−α及び／又はＩＦＮ−ωの生物活性のアッセイを用いて特
定することができる。ＩＦＮ−α及び／又はＩＦＮ−ω中和抗体は、測定されるＩＦＮ−
α及び／又はＩＦＮ−ωの生物活性を２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％
、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１０
０％阻害することが可能である。
【００３３】
本明細書で使用される用語「インターフェロン−α」（ＩＦＮ−α）は、ヒトアルファ
インターフェロンの全ての天然のサブタイプを指す。天然のＩＦＮ−αは、構造相同性の
高い別個の遺伝子によってコードされた少なくとも１２の密接に関連するタンパク質サブ
タイプからなる（Ｗｅｉｓｓｍａｎｎ  ａｎｄ  Ｗｅｂｅｒ，Ｐｒｏｇ  Ｎｕｃｌ  Ａｃ
ｉｄ  Ｒｅｓ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．，３３：２５１，１９８６；１８：８０５〜８１６，
１９９８）。ヒトインターフェロンの命名法は以下のウェブサイトに掲載されている。ｈ
ｔｔｐ：／／ｗｗｗ＿ｇｅｎｅｎａｍｅｓ＿ｏｒｇ／ｇｅｎｅｆａｍｉｌｉｅｓ／＿ＩＦ
Ｎ．表４は、他のＩ型ＩＦＮに加えて本明細書で使用されるＩＦＮ−αサブタイプの配列
を示す。
【００３４】
本明細書で使用される用語ＩＦＮ−ωは、ヒトＩＦＮ−ωであって、配列番号１に示さ
れるアミノ酸配列及びＵｎｉＰｒｏｔ受入番号Ｐ０５０００を有するものを指す。ヒトＩ
ＦＮ−ωは、位置８０（Ｔ８０）でのスレオニンからグルタミン酸への置換を有する配列
番号２の変異体を更に含む。
【００３５】
「Ｉ型インターフェロン」又は「ＩＦＮ−Ｉ」は、共通のインターフェロン受容体ＩＦ
ＮＡＲに結合する、ヒトインターフェロン−αの全ての天然のサブタイプ、並びにインタ
ーフェロン−β、インターフェロン−ε、インターフェロン−ω、及びインターフェロン
−κの１つのサブタイプを指す。
【００３６】
本明細書で使用される用語「ＩＦＮＡＲ」は、ヘテロダイマー又はＩＦＮＡＲ１及びＩ
ＦＮＡＲ２である周知のインターフェロン受容体を指す。ＩＦＮＡＲ１及びＩＦＮＡＲ２
のタンパク質配列は、それぞれ配列番号２６及び２７に示される。ＩＦＮＡＲ１の成熟細
胞外ドメインは、配列番号２６の残基２８〜４３６の範囲であり、ＩＦＮＡＲ２の成熟細
胞外ドメインは、配列番号２７の残基２７〜２４３の範囲である。
【００３７】
本明細書で使用される用語「抗体」は広義が意図され、ポリクローナル抗体、ネズミ、
ヒト、ヒト化、及びキメラモノクローナル抗体を含むモノクローナル抗体、抗体断片、少
なくとも２つの無傷の抗体又は抗体断片から形成される二重特異性抗体又は多重特異性抗
体、二量体の、四量体の、若しくは多量体の抗体、一本鎖抗体、ドメイン抗体、並びに必
要な特異性の抗原識別部を含む免疫グロブリン分子の任意の他の修飾された構成を含む免
疫グロブリン分子を含む。
【００３８】
免疫グロブリンは、重鎖の定常領域のアミノ酸配列に応じて、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ
、ＩｇＧ、及びＩｇＭの５つの大きなクラスに割り当てることができる。ＩｇＡ及びＩｇ
Ｇは、アイソタイプＩｇＡ1、ＩｇＡ2、ＩｇＧ1、ＩｇＧ2、ＩｇＧ3及びＩｇＧ4に更に下
位分類される。任意の脊椎動物種の抗体軽鎖は、これらの定常領域のアミノ酸配列に基づ
き、２つの明らかに異なる種類（即ちカッパ（ｋ）及びラムダ（λ））のうちの１つに割
り当てることができる。
【００３９】
用語「抗体断片」とは、例えば、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）１、２、及び３、軽
鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１、２、及び３、重鎖可変領域（ＶＨ）、又は軽鎖可変領
域（ＶＬ）などの重鎖及び／又は軽鎖抗原結合部位を保有する免疫グロブリン分子の一部
を指す。抗体断片としては、周知のＦａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｄ、及びＦｖの断片、並
びに１つのＶＨドメインからなるドメイン抗体（ｄＡｂ）が挙げられる。ＶＨドメイン及
びＶＬドメインは、合成リンカーを介して一緒に連結して様々な種類の一本鎖抗体設計を
形成することができ、ＶＨドメイン及びＶＬドメインが別々の一本鎖抗体構築物で発現さ
れる場合、ＶＨ／ＶＬドメインが分子内又は分子間で対合して、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）
又は二重特異性抗体などの一価の抗原結合部位を形成する。これに関しては、例えば国際
公開公報第ＷＯ１９９８／４４００１号、同第ＷＯ１９８８／０１６４９号、同第ＷＯ１
９９４／１３８０４号、同第ＷＯ１９９２／０１０４７号で説明されている。
【００４０】
抗体可変領域は、３つの「抗原結合部位」で遮られた「フレームワーク」領域からなる
。抗原結合部位は、様々な用語を用いて定義される：（ｉ）相補性決定領域（ＣＤＲ）、
これは、配列変異性に基づいてＶＨ内に３つ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３）、
及びＶＬ内に３つ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）存在する（Ｗｕ及びＫａｂａ
ｔ，Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １３２：２１１〜５０，１９７０、Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅ
ｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅ
ｓｔ，５ｔｈ  Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ
Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．，１９９１）
。（ｉｉ）「超可変領域」、「ＨＶＲ」、又は「ＨＶ」が、ＶＨ内に３つ（Ｈ１、Ｈ２、
Ｈ３）及びＶＬ内に３つ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）存在する。この領域は、抗体可変ドメイン
であり、Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ（Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ，Ｍｏ
ｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１〜１７，１９８７）により定義される構造において超可変
性である。他の用語には、「ＩＭＧＴ−ＣＤＲ」（Ｌｅｆｒａｎｃら、Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ
ａｒａｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２７：５５〜７７，２００３）及び「Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔ
ｙ  Ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ  Ｒｅｓｉｄｕｅ  Ｕｓａｇｅ」（ＳＤＲＵ）（Ａｌｍａｇ
ｒｏ，Ｍｏｌ  Ｒｅｃｏｇｎｉｔ  １７：１３２〜４３，２００４）が含まれる。国際免
疫遺伝情報（ＩＭＧＴ）データベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ＿ｉｍｇｔ＿ｏｒｇ）は、
抗原結合部位の標準化番号付け及び定義を提供している。ＣＤＲ、ＨＶ、及びＩＭＧＴの
表記間の対応については、Ｌｅｆｒａｎｃら、Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐａｒａｔ．Ｉｍｍｕｎｏ
ｌ．２７：５５〜７７，２００３に記載されている。
【００４１】
本明細書で使用される「モノクローナル抗体」は、単一の分子組成を有する均質の抗体
個体群を指す。モノクローナル抗体は非特異性であっても多重特異性であってもよい。
【００４２】
本明細書で使用される「Ｃｈｏｔｈｉａ残基」は、Ａｌ−Ｌａｚｉｋａｎｉ（Ａｌ−Ｌ
ａｚｉｋａｎｉら、Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  ２７３：９２７〜４８，１９９７）に準じて
番号付けされた抗体ＶＬ残基及びＶＨ残基である。
【００４３】
「フレームワーク」又は「フレームワーク配列」は、抗原結合部位として定義されたも
のを除く、可変領域の残りの配列である。抗原結合部位が上記のような様々な用語によっ
て定義され得るため、フレームワークの正確なアミノ酸配列は抗原結合部位がどのように
定義されるかに依存する。
【００４４】
「ヒト化抗体」とは、抗原結合部位が非ヒト種に由来し、かつ可変領域フレームワーク
がヒト免疫グロブリン配列に由来する抗体を指す。ヒト化抗体がフレームワーク領域内に
置換を含む場合があり、それにより、当該フレームワークは、発現したヒト免疫グロブリ
ン又は生殖系列遺伝子配列の正確な複製物でない場合がある。
【００４５】
「ヒト適合」抗体又は「ヒトフレームワーク適合（ＨＦＡ）」抗体とは、米国特許出願
公開第ＵＳ２００９／０１１８１２７号に記載の方法に従って適合されたヒト化抗体を指
す。ヒト適合抗体は、ＣＤＲ１及びＣＤＲ２ループ、並びにＣＤＲ３ループの一部の最大
ＣＤＲとＦＲとの類似性、長さ適合性、及び配列類似性に基づいてアクセプターヒトフレ
ームワークを選択することによりヒト化される。
【００４６】
「ヒト抗体」とは、フレームワーク及び抗原結合部位領域の両方がヒト起源の配列に由
来する重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を有する抗体を指す。抗体が定常領域を含む場合、
定常領域もヒト起源の配列に由来する。
【００４７】
ヒト抗体は、抗体の可変領域がヒト生殖系列免疫グロブリン又は再編成された免疫グロ
ブリン遺伝子を使用する系から得られた場合のヒト起源の配列に「由来する」重鎖可変領
域又は軽鎖可変領域を含む。そのような例示的な系は、ファージ上に提示されるヒト免疫
グロブリン遺伝子ライブラリ、及び本明細書に記載されるヒト免疫グロブリン遺伝子座を
保有するマウスなど、遺伝子組み換え非ヒト動物を含む。「ヒト抗体」は、例えば天然に
存在する体細胞突然変異又は意図的な置換導入により、ヒト生殖系列又は再編成された免
疫グロブリン配列と比較したとき、アミノ酸の相違を含み得る。典型的には、「ヒト抗体
」は、アミノ酸配列において、ヒト生殖系列又は再編成された免疫グロブリン遺伝子によ
ってコードされるアミノ酸配列と、少なくとも約８０％、８１％、８２％、８３％、８４
％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４
％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％同一である。いくつかの場
合では、「ヒト抗体」は、例えばＫｎａｐｐｉｋら（２０００）Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  
２９６：５７〜８６）に記載されるヒトフレームワーク配列分析から得られたコンセンサ
スフレームワーク配列、又は例えばＳｈｉら（２０１０）Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．３９７
：３８５〜９６，２０１０、及び国際公開公報第ＷＯ２００９／０８５４６２号に記載さ
れるファージ上に提示されるヒト免疫グロブリン遺伝子ライブラリに組み込まれた合成Ｈ
ＣＤＲ３を含み得る。
【００４８】
単離されたヒト化抗体は合成である。ヒト抗体は、ヒト免疫グロブリン配列に由来する
が、合成ＣＤＲ及び／若しくは合成フレームワークを組み込むファージディスプレイなど
の系を用いて生成することができるか、又は抗体特性を改善するためにインビトロ突然変
異誘発に供することができ、インビボでヒト抗体生殖系列レパートリー内に天然に存在し
ない抗体をもたらす。
【００４９】
ヒト抗体は、フレームワーク又は抗原結合部位に置換を含む場合があり、それにより、
該ヒト抗体は、発現したヒト免疫グロブリン又は生殖系列遺伝子配列の正確な複製物でな
い場合がある。しかしながら、抗原結合部位が非ヒト種由来である抗体は、「ヒト抗体」
の定義には含まれない。
【００５０】
本明細書で使用される用語「組み換え」とは、組み換え方法によって調製、発現、作製
、又は単離された様々なＩＦＮ−αサブタイプ又はＩＦＮ−ωなどの抗体及び他のタンパ
ク質を含む。
【００５１】
本明細書で使用される用語「エピトープ」とは、抗体が特異的に結合する抗原の一部を
意味する。エピトープは通常、アミノ酸又は多糖類側鎖のような部分の化学的に活性な（
極性、非極性、又は疎水性など）表面基からなり、特定の３次元構造特性及び特定の電荷
特性を有し得る。エピトープは、立体配座空間単位を形成する連続した及び／又は連続し
ていないアミノ酸からなり得る。連続していないエピトープについて、抗原の直鎖配列の
異なる部分からのアミノ酸は、タンパク質分子の折り畳みを通じて、３次元空間において
近接する。
【００５２】
本明細書で使用される「二重特異性」とは、２つの別個の抗原に結合する抗体、又は抗
原内の２つの別個のエピトープに結合する抗体を指す。二重特異性抗体は他の関連抗原と
交差反応性を有してもよく、又は少なくとも１つのＩＦＮ−αサブタイプ及びＩＦＮ−ω
などの２つ若しくは３つ以上の別個の抗原間で共有されるエピトープに結合してもよい。
【００５３】
本明細書で使用される用語「と組み合わせて」は、薬剤又は治療薬が、混合物中で一緒
に、単独薬剤として同時に、又は単独薬剤として順次に任意の順序で、ヒトなどの動物種
に投与され得ることを意味する。
【００５４】
本明細書で使用される用語「ＩＦＮ−αの生物活性」及び「ＩＦＮ−ωの生物活性」と
は、それぞれ、ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−ωがその受容体ＩＦＮＡＲに結合した結果として
生じる任意の活性を指す。ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−ωの１つの生物活性は、シグナル伝達
性転写因子２（ＳＴＡＴ２）、インターフェロン調節因子９（ＩＲＦ９）、及びＳＥＡＰ
を標準的な方法を用いて安定に発現するＨＥＫ２９３細胞におけるＩＳＧ５４などのイン
ターフェロン誘導性プロモーター下で、分泌胚アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）の発
現を誘導するＩＦＮ−α及びＩＦＮ−ωの能力である。別のＩＦＮ−α及びＩＦＮ−ωの
生物活性は、本明細書に記載されるように、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）又は全血からの
ケモカインＩＰ−１０（ＣＸＣＬ１０）の産生の誘導である。
【００５５】
用語「ベクター」は、生物系内で複製されることができる、又はそのような系間で移動
可能である、ポリヌクレオチドを意味する。ベクターポリヌクレオチドは典型的には、生
物系内でこれらのポリヌクレオチドの複製又は維持を促進するように機能する複製起点、
ポリアデニル化シグナル、又は選択マーカーなどの要素を含んでいる。そのような生物系
の例としては、細胞、ウイルス、動物、植物、及びベクターを複製することができる生物
学的成分を利用して再構成された生物系を挙げることができる。ベクターを構成するポリ
ヌクレオチドは、ＤＮＡ若しくはＲＮＡ分子又はこれらのハイブリッド分子であり得る。
【００５６】
用語「発現ベクター」は、発現ベクター中に存在するポリヌクレオチド配列によってコ
ードされるポリペプチドの翻訳を指示するために、生物系又は再構成生物系において利用
することができるベクターを意味する。
【００５７】
用語「ポリヌクレオチド」は、糖−リン酸骨格又は他の同等の共有結合化学作用により
共有結合を介して連結されたヌクレオチド鎖からなる分子を意味する。二本鎖及び一本鎖
ＤＮＡ及びＲＮＡが、ポリヌクレオチドの典型的な例である。
【００５８】
用語「ポリペプチド」又は「タンパク質」は、ペプチド結合により連結されてポリペプ
チドを形成する少なくとも２つのアミノ酸残基を含む分子を意味する。５０アミノ酸未満
の小ポリペプチドを「ペプチド」と呼ぶ場合がある。
【００５９】
本明細書では表１に示すような従来の１文字及び３文字のアミノ酸コードを用いる。
【００６０】
【表１】
2020073499.tif 000002
【００６１】
物質の組成
本発明は、ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω）及び複数のヒトインターフェロ
ンアルファ（ＩＦＮ−α）のサブタイプ（抗ＩＦＮ−α／ω抗体）に結合し、その活性を
中和するモノクローナル抗体を提供する。本発明は、少なくとも部分的に、ＩＦＮ−α単
独の場合と比較して同様の免疫調節効果を有する狼瘡病原におけるＩＮＦ−ωの役割の理
解に基づく。ＩＦＮ−ωが、狼瘡患者の血清中に存在し、かつそこで活性であることが判
明しており、ＩＦＮ−ωが、ＩＦＮ−αと比較して同様のサイトカイン放出プロファイル
及び遺伝子発現プロファイル、樹状細胞分化、並びにＴ細胞に依存しないＢ細胞の活性化
を誘導することが判明しており、これは、ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−ωを中和して治療効果
を最大化する理論的根拠の基礎を提供する。本発明は、少なくとも部分的に、本発明のＩ
ＦＮ−α／ω抗体が結合するＩＦＮ−ωと複数のＩＦＮ−αサブタイプとによって共有さ
れる中和性が最小のエピトープを特定することにも基づく。本発明のＩＦＮ−α／ω抗体
は、ＩＦＮ−ω及び複数のＩＦＮ−αサブタイプを中和し得るため、これらは、複数のＩ
ＦＮ−αサブタイプを中和するがＩＦＮ−ωは中和しない抗体と比較して、Ｉ型ＩＦＮ及
びＩＦＮシグネチャのＳＬＥ関連調製物を中和する上でより効力があり得る。したがって
、本発明の抗体は、狼瘡を含む免疫媒介炎症性疾患又は自己免疫疾患の治療により効果的
であり得る。本発明のＩＦＮ−α／ω抗体はＩＦＮ−βを中和しないため、全てのＩ型Ｉ
ＦＮを遮断することが予測される抗ＩＦＮＡＲ療法と比較して、より好ましい安全性及び
ＰＫプロファイルを有し得る。
【００６２】
本明細書に記載され、かつ以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のいくつか
の実施形態における本発明の一実施形態は、ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω）
及び少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトインターフェロンア
ルファ（ＩＦＮ−α）サブタイプに結合し、それらの生物活性を中和する、単離されたモ
ノクローナル抗体である。
【００６３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、ヒトＩＦＮ−ωの活性が、シグナル伝達性転写因子２
（ＳＴＡＴ２）、インターフェロン調節因子９（ＩＲＦ９）、及びＳＥＡＰ（本明細書で
説明する「ＩＳＲＥアッセイ」）を安定に発現するＨＥＫ２９３細胞におけるインターフ
ェロン誘導性ＩＳＧ５４プロモーター下での分泌胚アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）
のヒトＩＦＮ−ωによって誘導された発現である場合、本発明の抗体は、少なくとも約１
×１０-9Ｍ以下、約１×１０-10Ｍ以下、約５×１０-11Ｍ以下、又は約１×１０-11Ｍ以
下のＩＣ50でヒトＩＦＮ−ωの活性を中和する。
【００６４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ
−αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＫ、ＩＦＮ−αＷＡ、及びＩＦＮ−α４ａからなる
群から選択される少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトインタ
ーフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）サブタイプを中和する。
【００６５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＨ２、及びＩＦＮ−αＫを中和する。
【００６６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、及びＩＦＮ−αＫを中和する。
【００６７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＦ、
ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、及びＩＦＮ−αＫを中和する。
【００６８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、及びＩＦＮ−αＫを中和する。
【００６９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＪ１、及びＩＦＮ−αＫを中
和する。
【００７０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＢ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、及びＩＦＮ−αＫを中和する。
【００７１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＢ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、及びＩＦＮ−αＫを中和
する。
【００７２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＢ、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、及びＩＦＮ−αＫを中和
する。
【００７３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＢ、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、及びＩＦＮ−α４ａを中和
する。
【００７４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＢ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＩ、及びＩＦ
Ｎ−αＫを中和する。
【００７５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＢ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＪ１、及びＩ
ＦＮ−αＫを中和する。
【００７６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＢ、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−
αＪ１、及びＩＦＮ−αＫを中和する。
【００７７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＢ、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−
αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＫ、及びＩＦＮ−α４ａを中和する。
【００７８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＢ、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−
αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＷＡ、及びＩＦＮ−α４ａを中和する。
【００７９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＢ、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−
αＪ１、ＩＦＮ−αＫ、ＩＦＮ−αＷＡ、及びＩＦＮ−α４ａを中和する。
【００８０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−αＡ、
ＩＦＮ−αＢ、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−
αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＫ、ＩＦＮ−αＷＡ、及びＩＦＮ−α４ａを中和する
。
【００８１】
本明細書に記載され、かつ以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のいくつか
の実施形態における本発明の抗体は、ＩＦＮ−ωを中和することに加えて、少なくとも３
、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−
α）サブタイプに結合し、これらを中和し得る。これらのＩＦＮ−αサブタイプ及びＩＦ
Ｎ−ωは、標準的な方法を使用した組み換え発現によって産生することができる。分泌を
指示するために使用され得る例示的なシグナル配列は、配列番号２１〜２５に示される。
【００８２】
本明細書に記載され、かつ以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のいくつか
の実施形態における本発明の抗体のＩＦＮ−α及びＩＦＮ−ωを中和する能力は、インタ
ーフェロン応答性プロモーター下でレポーター遺伝子を発現する細胞株を使用して種々の
ＩＦＮ−αサブタイプ及び／又はＩＦＮ−ωで細胞を刺激するレポーター遺伝子アッセイ
で試験することができる。例えば、完全に活性なＩ型ＩＦＮシグナル伝達経路を発現する
（ＳＴＡＴ２及びＩＲＦ９を安定に発現する）ように設計され、ＩＦＮ−α／β誘導性Ｉ
ＳＧ５４プロモーターの制御下で、ＳＥＡＰレポーター遺伝子でトランスフェクトされた
ＨＥＫ−Ｂｌｕｅ（商標）ＩＦＮ−α／β細胞（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇ
ｏ，ＣＡ）を、本明細書に記載したように使用することができる。周知の方法を用いて、
アルカリホスファターゼからのシグナルは検出可能であり、阻害に関するＩＣ50は計算可
能である。
【００８３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、ヒトＩＦＮ−ωの生物活性が本明細書の実施例１に記
載されるように、アッセイ「ＩＳＲＥレポーター遺伝子アッセイ」を用いて、シグナル伝
達性転写因子２（ＳＴＡＴ２）、インターフェロン調節因子９（ＩＲＦ９）、及びＳＥＡ
Ｐを安定に発現するＨＥＫ２９３細胞におけるインターフェロン誘導性ＩＳＧ５４プロモ
ーター下での分泌胚アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）発現の阻害である場合、本発明
の抗体は、約１×１０-9Ｍ以下、約１×１０-10Ｍ以下、約５×１０-11Ｍ以下、又は約１
×１０-11Ｍ以下のＩＣ50値でヒトＩＦＮ−ωの生物活性を中和する。
【００８４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、ＩＣ50が本明細書に記載の「ＩＳＲＥレポーター遺伝
子アッセイ」で測定されるとき、本発明の抗体は、少なくとも約１×１０-10Ｍ以下のＩ
Ｃ50値でヒトＩＦＮ−ωの生物活性を中和する。
【００８５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、ＩＣ50が本明細書に記載の「ＩＳＲＥレポーター遺伝
子アッセイ」で測定されるとき、本発明の抗体は、約１×１０-10Ｍ〜約６×１０-12Ｍの
ＩＣ50値でヒトＩＦＮ−ωの生物活性を中和する。当業者であれば、ＩＳＲＥレポーター
遺伝子アッセイのアッセイ偏差が、典型的にはおよそ約０．２８（ｌｏｇ（Ｍ））のｐＩ
Ｃ50の範囲内であり得ることを理解するであろう。したがって、用語「約」は、アッセイ
における典型的な標準偏差を表す。例えば、１×１０-9ＭのＩＣ50の典型的なＳＤは、約
０．５３×１０-9〜１．９×１０-9である。
【００８６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、少なくとも約２×１０-10Ｍ以下、
約１．５×１０-10Ｍ以下、又は約１×１０-10Ｍ以下のＩＣ50値で少なくとも３、４、５
、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトＩＦＮ−αサブタイプにおける生物活性を中和
する。
【００８７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、ＩＣ50が本明細書に記載の「ＩＳＲＥレポーター遺伝
子アッセイ」を用いて測定されるとき、本発明の抗体は、少なくとも約１×１０-10Ｍ以
下のＩＣ50値でヒトＩＦＮ−ωの活性、及び約２×１０-10Ｍ以下、約１．５×１０-10Ｍ
以下、又は約１×１０-10Ｍ以下のＩＣ50値で少なくとも６のヒトＩＦＮ−αサブタイプ
の活性を中和する。
【００８８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、ＩＣ50が本明細書に記載の「ＩＳＲＥレポーター遺伝
子アッセイ」を用いて測定されるとき、本発明の抗体は、少なくとも約１×１０-10Ｍ以
下のＩＣ50でヒトＩＦＮ−ωの活性、及び約２×１０-10Ｍ以下、約１．５×１０-10Ｍ以
下、又は約１×１０-10Ｍ以下のＩＣ50値で少なくとも１０のヒトＩＦＮ−αサブタイプ
の活性を中和する。
【００８９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、ＩＣ50が本明細書に記載の「ＩＳＲＥレポーター遺伝
子アッセイ」を用いて測定されるとき、本発明の抗体は、少なくとも約１×１０-10Ｍ以
下のＩＣ50でヒトＩＦＮ−ωの活性、及び約１×１０-10Ｍ以下のＩＣ50値で少なくとも
６のヒトＩＦＮ−αサブタイプの活性を中和する。
【００９０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、ＩＣ50が本明細書に記載の「ＩＳＲＥレポーター遺伝
子アッセイ」を用いて測定されるとき、本発明の抗体は、少なくとも約１×１０-10Ｍ以
下のＩＣ50でヒトＩＦＮ−ωの活性、及び約１×１０-10Ｍ以下のＩＣ50値で少なくとも
１０のヒトＩＦＮ−αサブタイプの活性を中和する。
【００９１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、２５０Ｕ／ｍｌのインターフェロン
によって誘導された全血中の白血球インターフェロンによって誘導されたＩＰ−１０放出
を、１０μｇ／ｍｌの抗体の存在下では抗体の不在下と比較して約５０％以上阻害する。
【００９２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、全血中の全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ
）免疫複合体によって誘導されたＩＰ−１０放出を、１０μｇ／ｍｌの抗体の存在下では
抗体の不在下と比較して約５０％以上阻害する。
【００９３】
本明細書に記載され、かつ以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のいくつか
の実施形態における本発明の抗体は、ＩＦＮによって誘導された末梢血単核細胞（ＰＢＭ
Ｃ）又は全血からのＩＰ−１０放出などのＩＦＮによって誘導されたサイトカイン放出を
阻害する能力を評価することによってその中和能力を試験することができる。例えば、Ｐ
ＢＭＣは、試験されるＩＦＮ及び抗体の予め形成された複合体で処置した標準的なプロト
コルを使用して健常ボランティアからのヘパリン化全血から単離され、ＩＰ−１０の放出
は、Ｍｉｌｌｉｐｌｅｘサイトカイン／ケモカインキット（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、Ｐｒｅ
ｍｉｘｅｄ  ３９  ｐｌｅｘ）のような標準的な方法を使用して測定される。本発明の抗
体は、抗体の不在下でのＩＦＮによって誘導されたＩＰ−１０放出と比較して、ＩＰ−１
０放出を少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、７５％、８０％、８５％
、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、又は１００％阻害することができ
る。
【００９４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、約１×１０-10Ｍ以下、約５×１０-
11Ｍ以下、約１×１０Ｍ-11以下、又は約５×１０-12Ｍ以下の解離定数（ＫD）でヒトＩ
ＦＮ−ωに結合する。
【００９５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＩＦＮ−ω、並びに約５×１０-10
Ｍ以下、約１×１０-10Ｍ以下、約５×１０-11Ｍ以下、約１×１０-11Ｍ以下、又は約５
×１０-12Ｍ以下のＫDを有するＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−
αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＫ、
ＩＦＮ−αＷＡ、及びＩＦＮ−α４ａからなる群から選択される少なくとも３、４、５、
６、７、８、９、１０、又は１１のヒトインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）サブタ
イプに結合する。
【００９６】
ＩＦＮ−ω又は様々なＩＦＮ−αサブタイプに対する抗体の親和性は、任意の好適な方
法を用いて実験により決定することができる。そのような方法では、ＰｒｏｔｅＯｎ  Ｘ
ＰＲ３６、Ｂｉａｃｏｒｅ  ３０００、若しくはＫｉｎＥｘＡ装置、ＥＬＩＳＡ、又は当
業者に周知の競合的結合アッセイを利用することができる。特定の抗原／ＩＦＮ−ω又は
ＩＦＮ−αサブタイプの相互作用の測定された親和力は、異なる条件（例えば、容量オス
モル濃度、ｐＨ）下で測定したときに様々であり得る。したがって、親和性及び他の結合
パラメータ（例えば、ＫD、Ｋon、Ｋoff）の測定は、好ましくは標準化条件及び例えば本
明細書に記載の緩衝液などの標準化緩衝液を用いて行われる。当業者であれば、例えばＢ
ｉａｃｏｒｅ  ３０００又はＰｒｏｔｅＯｎを用いた親和性測定での内部エラー（標準偏
差（ＳＤ）として測定されるもの）が典型的には、典型的な検出範囲内で測定した場合、
５〜３３％の範囲内であり得ることを理解するであろう。したがって、用語「約」は、ア
ッセイにおける典型的な標準偏差を表す。例えば、ＫDが１×１０-9Ｍの場合の典型的な
ＳＤは、最大±０．３３×１０-9Ｍである。
【００９７】
ヒトＩＦＮ−ω及びＩＦＮ−αサブタイプに所望の親和性及び中和特性で結合する抗体
は、ヒトＩＦＮ−ω及び／又はＩＦＮ−αサブタイプでパニングすることによって、かつ
任意に更なる抗体親和性成熟によって、変異体又は断片のライブラリから選択され得る。
一例示的なパニングキャンペーンでは、ファージライブラリを逐次的に、又はチンパンジ
ーＩＦＮ−ω並びにヒトＩＦＮ−αサブタイプのＩＦＮ−α２、ＩＦＮ−α１、ＩＦＮ−
αＨ２、ＩＦＮ−αＧ、及びＩＦＮ−αＦの混合物を用いてパニングしてもよい。あるい
は、本発明の抗体は、チンパンジー及びマカクザル（cynomolgus）ＩＦＮ−ω、ヒトＩＦ
Ｎ−αサブタイプのＩＦＮ−αＤ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＢ２、Ｉ
ＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−α４ａ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−
αＷＡ、及びＩＦＮ−αＩでマウスを免疫して、ＩＦＮ−ω及び様々なＩＦＮ−αサブタ
イプへの結合のためにそのハイブリオーマ（hybriomas）をスクリーニングし、続いて本
明細書で説明する方法を用いて抗体の中和能力を評価することによって生成してもよい。
【００９８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１４、
及び１２１の重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）１（ＨＣＤＲ１）、２（ＨＣＤＲ２）、及
び３（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列、並びに配列番号１１８、１１９、及び１２０の軽鎖
相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１（ＬＣＤＲ１）、２（ＬＣＤＲ２）、及び３（ＬＣＤＲ３
）のアミノ酸配列を含む。
【００９９】
例示的なそのような抗体は、抗体ＩＦＷＭ３３０８、ＩＦＷＭ３３０７、ＩＦＷＭ３４
１０、ＩＦＷＭ３３２２、ＩＦＷＭ３３８５、ＩＦＷＭ３４１６、ＩＦＷＭ３３１０、Ｉ
ＦＷＭ３４００、ＩＦＷＭ３３２１、ＩＦＷＭ３５２２、ＩＦＷＭ３５２４、ＩＦＷＭ３
３２０、ＩＦＷＭ３３０４、ＩＦＷＭ３５２０、ＩＦＷＭ３３９９、ＩＦＷＭ３３１４、
ＩＦＷＭ３３３１、ＩＦＷＭ３４０５、ＩＦＷＭ３４４２、ＩＦＷＭ３５２５、ＩＦＷＭ
３４２３、ＩＦＷＭ３４４４、及びＩＦＷＭ３４２１である。これらの抗体は、約１×１
０-10  Ｍ以下のＩＣ50値でヒトＩＦＮ−ω及び少なくとも３つのＩＦＮ−αサブタイプ
を中和し、ＬＣＤＲ１（配列番号１１８）、ＬＣＤＲ２（配列番号１１９）、ＬＣＤＲ３
（配列番号１２０）、ＨＣＤＲ２（配列番号１１４）、及びＨＣＤＲ３（配列番号１２１
）のコンセンサスアミノ酸配列、並びにＨＣＤＲ１（配列番号１０９）の定常（constant
）アミノ酸配列を含む。少なくとも配列番号２８、３１、１５７、又は１５８のＶＨ残基
位置１０３、配列番号３５、３９、４０、４２、４６、５２、５３、５４、７１、７３、
７５、又は１３５のＶＬ残基位置３０、３１、３２、５０、９１〜９４、又は９６、並び
に配列番号５７、６１、６２、６８、及び１５０のＶＬ残基位置３０、３１、３２、５０
、５１、９２〜９５、又は９７に置換を有する抗体は、親ＩＦＷＭ３７１抗体と比較して
改善された効力を有する抗体をもたらした。
【０１００】
配列番号１１８
ＱＳＩＸ1Ｘ2Ｘ3Ｘ4、［式中、
Ｘ1はＧ、Ｄ、Ａ、Ｒ、Ｅ、Ｓ、又はＮであり、
Ｘ2はＤ、Ｇ、Ｎ、Ｓ、Ｒ、Ｅ、又はＫであり、
Ｘ3はＦ、Ａ、Ｎ、Ｔ、Ｓ、又はＶであり、
Ｘ4はＹ、Ｎであるか、又は欠失している］。
【０１０１】
配列番号１１９
Ｘ5ＡＳ、［式中、
Ｘ5はＦ、Ｗ、又はＧである］。
【０１０２】
配列番号１２０
ＱＱＸ6Ｘ7Ｘ8Ｘ9ＰＸ10Ｔ、［式中、
Ｘ6はＡ、Ｇ、Ｓ、又はＷであり、
Ｘ7はＬ、Ｙ、Ｈ、Ｗ、Ｆ、又はＩであり、
Ｘ8はＤ、又はＳであり、
Ｘ9は、Ｆ、Ｔ、Ｌ、Ｎ、又はＷであり、
Ｘ10はＬ、Ｆ、又はＩである］。
【０１０３】
配列番号１１４
ＩＸ11Ｘ12ＳＤＳＤＴ、［式中、
Ｘ11はＤ、又はＡであり、
Ｘ12はＰ、又はＡである］。
【０１０４】
配列番号１２１
ＡＲＨＰＧＬＸ13ＷＡＰＤＦＤＹ、［式中、
Ｘ13はＡ、又はＮである］。
【０１０５】
配列番号１０９
ＧＹＳＦＴＳＹＷ
【０１０６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１４、
１２１、１５９、１１９、及び１６０のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ
１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１０７】
例示的なそのような抗体は、抗体ＩＦＷＭ３４００、ＩＦＷＭ３３２１、ＩＦＷＭ３５
２２、ＩＦＷＭ３５２４、ＩＦＷＭ３３２０、ＩＦＷＭ３３０４、ＩＦＷＭ３５２０、Ｉ
ＦＷＭ３３９９、ＩＦＷＭ３３１４、ＩＦＷＭ３３３１、ＩＦＷＭ３４０５、ＩＦＷＭ３
４４２、ＩＦＷＭ３５２５、ＩＦＷＭ３４２３、ＩＦＷＭ３４４４、及びＩＦＷＭ３４２
１である。これらの抗体は、約１×１０-10Ｍ以下のＩＣ50値でヒトＩＦＮ−ω及び少な
くとも６つのＩＦＮ−αサブタイプを中和し、ＬＣＤＲ１（配列番号１５９）、ＬＣＤＲ
２（配列番号１１９）、ＬＣＤＲ３（配列番号１６０）、ＨＣＤＲ２（配列番号１１４）
、及びＨＣＤＲ３（配列番号１２１）のコンセンサスアミノ酸配列、並びにＨＣＤＲ１（
配列番号１０９）の定常アミノ酸配列を含む。
【０１０８】
配列番号１５９
ＱＳＩＸ14Ｘ15Ｘ16Ｘ17、［式中、
Ｘ14はＧ、Ｄ、Ａ、Ｅ、Ｓ、又はＮであり、
Ｘ15はＤ、Ｇ、Ｎ、Ｓ、Ｒ、又はＲであり、
Ｘ16はＦ、Ａ、Ｎ、Ｓ、又はＶであり、
Ｘ17はＹ、Ｎであるか、又は欠失している］。
【０１０９】
配列番号１６０
ＱＱＸ18Ｘ19Ｘ20Ｘ21ＰＸ22Ｔ、［式中、
Ｘ18はＡ、Ｇ、又はＳであり、
Ｘ19は、Ｙ、Ｈ、Ｗ、又はＦであり、
Ｘ20はＤ、又はＳであり、
Ｘ21は、Ｆ、Ｔ、Ｌ、又はＷであり、
Ｘ22はＬ、Ｆ、又はＩである］。
【０１１０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１４、
１２１、１６１、１１９、及び１６２のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ
１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１１１】
例示的なそのような抗体は、抗体ＩＦＷＭ３４０５、ＩＦＷＭ３４４２、ＩＦＷＭ３５
２５、ＩＦＷＭ３４２３、ＩＦＷＭ３４４４、及びＩＦＷＭ３４２１である。これらの抗
体は、少なくとも約２×１０-10Ｍ以下、約１．５×１０-10Ｍ以下、又は約１×１０-10
Ｍ以下のＩＣ50値でヒトＩＦＮ−ω及び少なくとも１０のＩＦＮ−αサブタイプを中和し
、ＬＣＤＲ１（配列番号１６１）、ＬＣＤＲ２（配列番号１１９）、ＬＣＤＲ３（配列番
号１６２）、ＨＣＤＲ２（配列番号１１４）、及びＨＣＤＲ３（配列番号１２１）のコン
センサス配列、並びにＨＣＤＲ１（配列番号１０９）の一定のアミノ酸配列を含む。
【０１１２】
配列番号１６１
ＱＳＩＸ23Ｘ24Ｘ25Ｘ26、［式中、
Ｘ23はＡ、又はＤであり、
Ｘ24はＮ、又はＧであり、
Ｘ25はＦ、Ｎ、又はＳであり、
Ｘ26はＹ、Ｎであるか、又は欠失している］。
【０１１３】
配列番号１６２
ＱＱＸ27Ｘ28Ｘ29Ｘ30ＰＸ31Ｔ、［式中、
Ｘ27はＧ、又はＳであり、
Ｘ28は、Ｙであり、
Ｘ29はＤであり、
Ｘ30はＦ、Ｔ、又はＬであり、
Ｘ31はＬ、Ｆ、又はＩである］。
【０１１４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ヒトＩＦＮ−ω、並びにＩＦＮ−α
Ａ、ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、Ｉ
ＦＮ−αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＫ、ＩＦＮ−αＷＡ、及びＩＦＮ−α４ａから
なる群から選択される少なくとも１０のヒトＩＦＮ−αサブタイプを中和する。
【０１１５】
本明細書に記載の本発明のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた
実施形態の各々のいくつかの実施形態では、本抗体は、ヒトＩＦＮ−ω、並びに少なくと
もヒトＩＦＮ−αサブタイプのＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−
αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＪ１、及びＩＦＮ−α４ａを中和する
。
【０１１６】
本明細書に記載の本発明のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた
実施形態の各々のいくつかの実施形態では、本抗体は、ＩＦＮ−αＤ又はＩＦＮ−α１に
結合せず、又はこれを中和しない。
【０１１７】
本明細書に記載の本発明のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた
実施形態の各々のいくつかの実施形態では、本抗体は、ＩＦＮ−βに結合せず、又はこれ
を中和しない。
【０１１８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、
配列番号１０９のＨＣＤＲ１アミノ酸配列、
配列番号１１１、１１２、又は１１３のＨＣＤＲ２アミノ酸配列、
配列番号１１５、又は１１６のＨＣＤＲ３アミノ酸配列、
配列番号７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７
、８８、８９、９０、又は９１のＬＣＤＲ１アミノ酸配列、
配列番号９３、９４、又は９５のＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び
配列番号９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５
、１０６、又は１０７のＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む。
【０１１９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号
ａ）それぞれ１０９、１１３、１１６、７７、９３、及び１０４、
ｂ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８５、９３、及び９６、
ｃ）それぞれ１０９、１１３、１１５、７９、９５、及び１０７、
ｄ）それぞれ１０９、１１３、１１６、７６、９３、及び１０３、
ｅ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８５、９３、及び９６、
ｆ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８９、９５、及び１００、
ｇ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８６、９３、及び１０５、
ｈ）それぞれ１０９、１１３、１１５、７６、９３、及び１０３、
ｉ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８０、９３、及び９７、
ｊ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８４、９３、及び９７、
ｋ）それぞれ１０９、１１３、１１６、９０、９３、及び９７、
ｌ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８８、９３、及び１０２、
ｍ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８７、９３、及び１０５、
ｎ）それぞれ１０９、１１３、１１６、９１、９３、及び１０６、
ｏ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８０、９３、及び９７、
ｐ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８３、９３、及び１０１、
ｑ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８２、９４、及び９８、
ｒ）それぞれ１０９、１１３、１１５、７８、９５、及び１００、
ｓ）それぞれ１０９、１１１、１１６、８１、９３、及び１０６、
ｔ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８２、９４、及び９９、
ｕ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８１、９３、及び１０６、
ｖ）それぞれ１０９、１１２、１１６、８１、９３、及び１０６、又は
ｗ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８１、９３、及び１０６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤ
Ｒ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む。
【０１２０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１６、７７、９３、及び１０４のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、
ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１２１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１６、８５、９３、及び９６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、Ｌ
ＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１２２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１５、７９、９５、及び１０７のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、
ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１２３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１６、７６、９３、及び１０３のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、
ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１２４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１５、８５、９３、及び９６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、Ｌ
ＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１２５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１５、８９、９５、及び１００のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、
ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１２６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１６、８６、９３、及び１０５のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、
ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１２７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１５、７６、９３、及び１０３のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、
ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１２８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１６、８０、９３、及び９７のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、Ｌ
ＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１２９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１６、８４、９３、及び９７のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、Ｌ
ＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１３０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１６、９０、９３、及び９７のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、Ｌ
ＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１３１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１６、８８、９３、及び１０２のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、
ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１３２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１６、８７、９３、及び１０５のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、
ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１３３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１６、９１、９３、及び１０６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、
ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１３４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１５、８０、９３、及び９７のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、Ｌ
ＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１３５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１６、８３、９３、及び１０１のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、
ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１３６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１６、８２、９４、及び９８のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、Ｌ
ＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１３７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１５、７８、９５、及び１００のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、
ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１３８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１１、
１１６、８１、９３、及び１０６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、
ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１３９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１６、８２、９４、及び９９のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、Ｌ
ＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１４０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１５、８１、９３、及び１０６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、
ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１４１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１２、
１１６、８１、９３、及び１０６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、
ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１４２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、それぞれ配列番号１０９、１１３、
１１６、８１、９３、及び１０６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、
ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。
【０１４３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、このＶＨは、配列番
号２８、３１、１５７、又は１５８のアミノ酸配列を含む。
【０１４４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、このＶＬは、配列番
号３５、３９、４０、４２、４６、５２、５３、５４、５７、６１、６２、６８、７１、
７３、７５、１３５、又は１５０のアミノ酸配列を含む。
【０１４５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本抗体は、配列番号２８、３１、１５７、又は１５８
のＶＨ、及び配列番号３５、３９、４０、４２、４６、５２、５３、５４、５７、６１、
６２、６８、７１、７３、７５、１３５、又は１５０のＶＬを含む。
【０１４６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８及び４０、２８及び３
９、３１及び６２、２８及び５４、３１及び３９、３１及び６８、２８及び４２、３１及
び５４、２８及び５３、２８及び７３、２８及び７５、２８及び５２、２８及び３５、２
８及び１３５、３１及び５３、２８及び４６、２８及び６１、３１及び５７、１５７及び
７１、２８及び１５０、３１及び７１、１５８及び７１、又は２８及び７１のＶＨ及びＶ
Ｌを含む。
【０１４７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、このＶＨは、配列番
号２８、３０、３１、１５７、又は１５８のアミノ酸配列を含む。
【０１４８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本抗体は、配列番号２８、３０、３１、１５７、又は
１５８のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３アミノ酸配列、並びに配列番号２９、
３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４
５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８
、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、
７３、７４、７５、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、１３０
、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、１４０
、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、７４、１４８、１４９、
１５０、１５１、１５２、又は１５３のＶＬのＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３
アミノ酸配列を含み、これらのＣＤＲは、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、及び／又はＩＭ
ＧＴに従って定義される。
【０１４９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、このＶＬは、配列番
号２９、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、
４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５
７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０
、７１、７３、７４、７５、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９
、１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９
、１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、７４、１４８、
１４９、１５０、１５１、１５２、又は１５３のアミノ酸配列を含む。
【０１５０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ＶＨ及びＶＬを含み、このＶＨは、
配列番号２８、３０、３１、１５７、又は１５８のアミノ酸配列を含み、ＶＬは配列番号
２９、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４
４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７
、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、
７１、７３、７４、７５、１２３、１２４、１２５、１２６、１２７、１２８、１２９、
１３０、１３１、１３２、１３３、１３４、１３５、１３６、１３７、１３８、１３９、
１４０、１４１、１４２、１４３、１４４、１４５、１４６、１４７、７４、１４８、１
４９、１５０、１５１、１５２、又は１５３のアミノ酸配列を含む。
【０１５１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号２
９のＶＬを含む。
【０１５２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号３
２のＶＬを含む。
【０１５３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号３
３のＶＬを含む。
【０１５４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号３
４のＶＬを含む。
【０１５５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号３
５のＶＬを含む。
【０１５６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号３
６のＶＬを含む。
【０１５７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号３
７のＶＬを含む。
【０１５８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号３
８のＶＬを含む。
【０１５９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号３
９のＶＬを含む。
【０１６０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号４
０のＶＬを含む。
【０１６１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号４
１のＶＬを含む。
【０１６２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号４
２のＶＬを含む。
【０１６３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号４
３のＶＬを含む。
【０１６４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号４
４のＶＬを含む。
【０１６５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号４
５のＶＬを含む。
【０１６６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号４
６のＶＬを含む。
【０１６７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号４
７のＶＬを含む。
【０１６８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号４
８のＶＬを含む。
【０１６９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号４
９のＶＬを含む。
【０１７０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号５
０のＶＬを含む。
【０１７１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号５
１のＶＬを含む。
【０１７２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号５
２のＶＬを含む。
【０１７３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号５
３のＶＬを含む。
【０１７４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号５
４のＶＬを含む。
【０１７５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号５
５のＶＬを含む。
【０１７６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号５
６のＶＬを含む。
【０１７７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号５
７のＶＬを含む。
【０１７８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号５
８のＶＬを含む。
【０１７９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号５
９のＶＬを含む。
【０１８０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号６
０のＶＬを含む。
【０１８１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号６
１のＶＬを含む。
【０１８２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号６
２のＶＬを含む。
【０１８３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号６
３のＶＬを含む。
【０１８４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号６
４のＶＬを含む。
【０１８５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号６
５のＶＬを含む。
【０１８６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号６
６のＶＬを含む。
【０１８７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号６
７のＶＬを含む。
【０１８８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号６
８のＶＬを含む。
【０１８９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号６
９のＶＬを含む。
【０１９０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号３
２のＶＬを含む。
【０１９１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号３
３のＶＬを含む。
【０１９２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号３
４のＶＬを含む。
【０１９３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号３
５のＶＬを含む。
【０１９４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号３
６のＶＬを含む。
【０１９５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号３
７のＶＬを含む。
【０１９６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号３
８のＶＬを含む。
【０１９７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号３
９のＶＬを含む。
【０１９８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号４
０のＶＬを含む。
【０１９９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号４
１のＶＬを含む。
【０２００】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号４
２のＶＬを含む。
【０２０１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号４
３のＶＬを含む。
【０２０２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号４
４のＶＬを含む。
【０２０３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号４
５のＶＬを含む。
【０２０４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号４
６のＶＬを含む。
【０２０５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号４
７のＶＬを含む。
【０２０６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号４
８のＶＬを含む。
【０２０７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号４
９のＶＬを含む。
【０２０８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号５
０のＶＬを含む。
【０２０９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号５
１のＶＬを含む。
【０２１０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号５
２のＶＬを含む。
【０２１１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号５
３のＶＬを含む。
【０２１２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号５
４のＶＬを含む。
【０２１３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号５
６のＶＬを含む。
【０２１４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号５
７のＶＬを含む。
【０２１５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号５
８のＶＬを含む。
【０２１６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号５
９のＶＬを含む。
【０２１７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号６
０のＶＬを含む。
【０２１８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号６
１のＶＬを含む。
【０２１９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号６
２のＶＬを含む。
【０２２０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号６
３のＶＬを含む。
【０２２１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号６
４のＶＬを含む。
【０２２２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号６
５のＶＬを含む。
【０２２３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号６
６のＶＬを含む。
【０２２４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号６
７のＶＬを含む。
【０２２５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号６
８のＶＬを含む。
【０２２６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号６
９のＶＬを含む。
【０２２７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号３
２のＶＬを含む。
【０２２８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号３
３のＶＬを含む。
【０２２９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号３
４のＶＬを含む。
【０２３０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号３
５のＶＬを含む。
【０２３１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号３
６のＶＬを含む。
【０２３２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号３
７のＶＬを含む。
【０２３３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号３
８のＶＬを含む。
【０２３４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号３
９のＶＬを含む。
【０２３５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号４
０のＶＬを含む。
【０２３６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号４
１のＶＬを含む。
【０２３７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号４
２のＶＬを含む。
【０２３８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号４
３のＶＬを含む。
【０２３９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号４
４のＶＬを含む。
【０２４０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号４
５のＶＬを含む。
【０２４１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号４
６のＶＬを含む。
【０２４２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号４
７のＶＬを含む。
【０２４３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号４
８のＶＬを含む。
【０２４４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号４
９のＶＬを含む。
【０２４５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号５
０のＶＬを含む。
【０２４６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号５
１のＶＬを含む。
【０２４７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号５
２のＶＬを含む。
【０２４８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号５
３のＶＬを含む。
【０２４９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号５
４のＶＬを含む。
【０２５０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号５
６のＶＬを含む。
【０２５１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号５
７のＶＬを含む。
【０２５２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号５
８のＶＬを含む。
【０２５３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号５
９のＶＬを含む。
【０２５４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号６
０のＶＬを含む。
【０２５５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号６
１のＶＬを含む。
【０２５６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号６
２のＶＬを含む。
【０２５７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号６
３のＶＬを含む。
【０２５８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号６
５のＶＬを含む。
【０２５９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号６
６のＶＬを含む。
【０２６０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号６
７のＶＬを含む。
【０２６１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号６
８のＶＬを含む。
【０２６２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号６
９のＶＬを含む。
【０２６３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号７
０のＶＬを含む。
【０２６４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号７
０のＶＬを含む。
【０２６５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３０のＶＨ及び配列番号７
０のＶＬを含む。
【０２６６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号７
１のＶＬを含む。
【０２６７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号３１のＶＨ及び配列番号７
１のＶＬを含む。
【０２６８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
２３のＶＬを含む。
【０２６９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
２４のＶＬを含む。
【０２７０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
２５のＶＬを含む。
【０２７１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
２６のＶＬを含む。
【０２７２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
２７のＶＬを含む。
【０２７３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
２８のＶＬを含む。
【０２７４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
２９のＶＬを含む。
【０２７５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
３０のＶＬを含む。
【０２７６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
３１のＶＬを含む。
【０２７７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
３２のＶＬを含む。
【０２７８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
３３のＶＬを含む。
【０２７９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
３４のＶＬを含む。
【０２８０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
３５のＶＬを含む。
【０２８１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
３６のＶＬを含む。
【０２８２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
３７のＶＬを含む。
【０２８３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
３８のＶＬを含む。
【０２８４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
３９のＶＬを含む。
【０２８５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
４０のＶＬを含む。
【０２８６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
４１のＶＬを含む。
【０２８７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号７
３のＶＬを含む。
【０２８８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
４２のＶＬを含む。
【０２８９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
４３のＶＬを含む。
【０２９０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号７
４のＶＬを含む。
【０２９１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号７
５のＶＬを含む。
【０２９２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
４４のＶＬを含む。
【０２９３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
４５のＶＬを含む。
【０２９４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
４６のＶＬを含む。
【０２９５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
４７のＶＬを含む。
【０２９６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
４８のＶＬを含む。
【０２９７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
４９のＶＬを含む。
【０２９８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
５０のＶＬを含む。
【０２９９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
５１のＶＬを含む。
【０３００】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
５２のＶＬを含む。
【０３０１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号２８のＶＨ及び配列番号１
５３のＶＬを含む。
【０３０２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号１５７のＶＨ及び配列番号
７１のＶＬを含む。
【０３０３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、配列番号１５８のＶＨ及び配列番号
７１のＶＬを含む。
【０３０４】
表９、表１３、表１５、表１７、表１９、及び表２１に示すＶＨ又はＶＬアミノ酸配列
を含む本発明の抗ＩＦＮ−ω／ａ抗体の変異体は、本発明の範囲内である。例えば、変異
体は、ＶＨ及び／又はＶＬ中に抗体の特性に悪影響を及ぼさない１、２、３、４、５、６
、７、８、９、１０、又は１１のアミノ酸置換を含み得る。いくつかの実施形態では、配
列同一性は、本発明のＶＨ又はＶＬアミノ酸配列の約９０％、９１％、９２％、９３％、
９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％であり得る。同一性パーセントは
、例えばペアワイズアライメントによって、Ｖｅｃｔｏｒ  ＮＴＩ．９．０．０（Ｉｎｖ
ｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｓｌｂａｄ、ＣＡ）のＡｌｉｇｎＸモジュールのデフォルト設定
を用いて決定することができる。例示的な修飾は、例えば、抗体の特性に不利な改変を加
えることのない、抗原結合部位又はフレームワーク内での保存的アミノ酸置換である。保
存的置換は、例えば安定性又は親和性といった抗体の特性を向上させるためにも行われ得
る。保存的置換とは、それらの側鎖が関連するアミノ酸ファミリー内で起こる置換である
。遺伝的にコードされるアミノ酸は、４つのファミリーに分類することができる：（１）
酸性（アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩）；（２）塩基性（リジン、アルギニン、ヒス
チジン）；（３）非極性（アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェ
ニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）；及び（４）非荷電極性（グリシン、アス
パラギン、グルタミン、システイン、セリン、トレオニン、チロシン）。フェニルアラニ
ン、トリプトファン、及びチロシンは、時に、芳香族アミノ酸として共に分類される。あ
るいは、アミノ酸のレパートリーを、（１）酸性（アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩）
；（２）塩基性（リジン、アルギニン、ヒスチジン）、（３）脂肪族（グリシン、アラニ
ン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン）、ただしセリン及びトレオ
ニンは、任意に脂肪族−ヒドロキシルとして個別にグループ分けされる；（４）芳香族（
フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン）；（５）アミド（アスパラギン、グルタ
ミン）；及び（６）イオウ含有（システイン及びメチオニン）（Ｓｔｒｙｅｒ（ｅｄ．）
，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２ｎｄ  ｅｄ，ＷＨ  Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏ．，
１９８１）としてグループ分けすることができる。更に、ポリペプチド中のいずれの天然
残基も、アラニンスキャニング突然変異誘発法に関して上述したように、アラニンと置換
することができる（ＭａｃＬｅｎｎａｎら、（１９９８）Ａｃｔａ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｓ
ｃａｎｄ．Ｓｕｐｐｌ．６４３：５５〜６７、Ｓａｓａｋｉら、（１９９８）Ａｄｖ．Ｂ
ｉｏｐｈｙｓ．３５：１〜２４）。当業者であれば、所望のアミノ酸置換を、そのような
置換が望ましい時点で決定することができる。結果として得られた抗体変異体は、本明細
書に記載するアッセイを用いてその特性を試験することができる。
【０３０５】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、配列番号２８と少
なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、
又は９９％同一の重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列、及び配列番号７１と少なくとも９
０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％
同一の軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列を含む。
【０３０６】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、配列番号２８と少
なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、
又は９９％同一の重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列、及び配列番号１５０と少なくとも
９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９
％同一の軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列を含む。
【０３０７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、配列番号２８と少
なくとも９５％同一の重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列、及び配列番号７１と少なくと
も９５％同一の軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列を含む。
【０３０８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、配列番号２８と少
なくとも９５％同一の重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列、及び配列番号１５０と少なく
とも９５％同一の軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列を含む。
【０３０９】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、配列番号２８と少
なくとも９７％同一の重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列、及び配列番号７１と少なくと
も９７％同一の軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列を含む。
【０３１０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、配列番号２８と少
なくとも９７％同一の重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列、及び配列番号１５０と少なく
とも９７％同一の軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列を含む。
【０３１１】
アミノ酸置換は、例えばＰＣＲ突然変異誘発（米国特許第４，６８３，１９５号）によ
って行うことができる。あるいは、変異体のライブラリは、既知の方法、例えば、ランダ
ムコドン（ＮＮＫ）又は非ランダムコドン、例えば１１個のアミノ酸（Ａｌａ、Ｃｙｓ、
Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｓｅｒ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ）をコード
するＤＶＫコドンを用いて、続いて所望の特性を有する変異体のライブラリをスクリーニ
ングすることによって生成することができる。
【０３１２】
実施例で説明する実施形態は、１つが重鎖に由来し、１つが軽鎖に由来する１対の可変
領域を有しているが、当業者であれば、代替的な実施形態が、１つの重鎖又は軽鎖の可変
領域を有してもよいとことを認識するであろう。単一の可変領域を用いて、例えばヒトＩ
ＦＮ−ω又は様々なヒトＩＦＮ−αサブタイプに結合することができる２ドメイン特異的
抗原結合断片を形成することができる可変ドメインをスクリーニングすることができる。
このスクリーニングは、例えば、国際公開公報第ＷＯ９２／０１０４７号に開示される階
層的二重コンビナトリアルアプローチを用いたファージディスプレイスクリーニング法に
よって実現され得る。このアプローチでは、Ｈ鎖クローン又はＬ鎖クローンのいずれかを
含む個別のコロニーを用いて、他方の鎖（Ｌ又はＨ）をコードするクローンの完全なライ
ブラリに感染させ、結果として得られた２鎖特異的抗原結合ドメインを記載されるような
ファージディスプレイ法に基づいて選択する。したがって、個別のＶＨ及びＶＬポリペプ
チド鎖は、国際公開公報第ＷＯ９２／０１０４７号に開示される方法を用いて、ヒトＩＦ
Ｎ−ω又は様々なＩＦＮ−αサブタイプに特異的に結合する追加の抗体を特定するのに有
用である。
【０３１３】
本発明の抗体は、抗体を生成するための様々な技術を用いて作製することができる。例
えば、Ｋｏｈｌｅｒ及びＭｉｌｓｔｅｉｎのハイブリドーマ法（Ｎａｔｕｒｅ  ２５６：
４９５，１９７５）を用いてモノクローナル抗体を生成することができる。ハイブリドー
マ法においては、マウス又はハムスター、ラット、若しくはサルなどの他の宿主動物を、
ヒトＩＦＮ−ω及び／又は様々なＩＦＮ−αサブタイプ若しくはこれらのタンパク質の断
片で免疫化し、続いて標準的な方法を用いて免役化した動物からの脾臓細胞と骨髄腫細胞
とを融合させてハイブリドーマ細胞を形成する（Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  
Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，ｐｐ．５９
〜１０３（Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｒｅｓｓ，１９８６））。１個の不死化したハイブリド
ーマ細胞から発生したコロニーを、結合特異性、交差反応性又はその欠如、及び抗原の親
和性などの所望の特性を有する抗体の生成についてスクリーニングする。
【０３１４】
様々な宿主動物を用いて、本発明のＩＦＮ−α／ω抗体を生成することができる。例え
ば、Ｂａｌｂ／ｃマウスを用いて、マウス抗ヒトＩＦＮ−α／ω抗体を生成することがで
きる。Ｂａｌｂ／ｃマウス及び他の非ヒト動物において作製された抗体は、よりヒト様の
配列を生成するために、様々な技術を用いてヒト化することができる。ヒトアクセプター
フレームワークの選択を含む例示的なヒト化技術は当業者に既知であり、これにはＣＤＲ
グラフト法（米国特許第５，２２５，５３９号）、ＳＤＲグラフト法（米国特許第６，８
１８，７４９号）、リサーフェーシング法（Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  ２
８：４８９〜４９９，１９９１）、特異性決定残基リサーフェーシング法（米国特許出願
公開第２０１００２６１６２０号）、ヒト適合（又はヒトフレームワーク適合）（米国特
許公開第ＵＳ２００９／０１１８１２７号）、超ヒト化（米国特許第７，７０９，２２６
号）、及びガイド選択法（Ｏｓｂｏｕｒｎら、（２００５）Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：６１
〜６８，２００５；Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．５，５６５，３３２）が含まれる。
【０３１５】
ヒト化抗体は、国際公開公報第ＷＯ９０／００７８６１号及び国際公開公報第ＷＯ９２
／２２６５３号で説明される開示などの技術により、結合親和性を維持するために改変し
たフレームワーク支持残基を組み込むことによって（逆突然変異）、所望の抗原に対する
それらの選択性又は親和性を向上させるように更に最適化することができる。
【０３１６】
それらのゲノムにヒト免疫グロブリン遺伝子座を保有するトランスジェニックマウスを
使用して、標的タンパク質に対してヒト抗体を生成することができ、これは例えば、国際
公開公報第ＷＯ９０／０４０３６号、米国特許第６１５０５８４号、国際公開公報第ＷＯ
９９／４５９６２号、国際公開公報第ＷＯ０２／０６６６３０号、国際公開公報第ＷＯ０
２／４３４７８号、Ｌｏｎｂｅｒｇら、Ｎａｔｕｒｅ  ３６８：８５６〜９，１９９４、
Ｇｒｅｅｎら（１９９４）Ｎａｔｕｒｅ  Ｇｅｎｅｔ．７：１３〜２１；Ｇｒｅｅｎ  ＆
Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ（１９９８）Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１８８：４８３〜９５；Ｌｏｎｂ
ｅｒｇ  ａｎｄ  Ｈｕｓｚａｒ（１９９５）Ｉｎｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６
５〜９３；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎら（１９９１）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２１：１
３２３〜１３２６；Ｆｉｓｈｗｉｌｄら（１９９６）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１
４：８４５〜８５１；Ｍｅｎｄｅｚら（１９９７）Ｎａｔ．Ｇｅｎｅｔ．１５：１４６〜
１５６；Ｇｒｅｅｎ（１９９９）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ  ２３１：１１〜
２３；Ｙａｎｇら（１９９９）Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．５９：１２３６〜１２４３；Ｂｒ
ｕｇｇｅｍａｎｎ及びＴａｕｓｓｉｇ（１９９７）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈ
ｎｏｌ．８：４５５〜４５８；国際公開公報第ＷＯ０２／０４３４７８号）に記載される
。そのようなマウスにおける内因性免疫グロブリン遺伝子座は、破壊又は欠失されてもよ
く、相同又は非相同組み換え、導入染色体、又はミニ遺伝子を使用して、少なくとも１つ
の完全な又は部分的なヒト免疫グロブリン遺伝子座をマウスゲノム内に挿入することがで
きる。Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ（ｈｔｔｐ：／／＿ｗｗｗ＿ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ＿ｃｏｍ）、
Ｈａｒｂｏｕｒ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（ｈｔｔｐ：／／＿ｗｗｗ＿ｈａｒｂｏｕｒａｎ
ｔｉｂｏｄｉｅｓ＿ｃｏｍ）、Ｏｐｅｎ  Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
，Ｉｎｃ．（ＯＭＴ）（ｈｔｔｐ：／／＿ｗｗｗ＿ｏｍｔｉｎｃ＿ｎｅｔ）、ＫｙＭａｂ
（ｈｔｔｐ：／／＿ｗｗｗ＿ｋｙｍａｂ＿ｃｏｍ）、Ｔｒｉａｎｎｉ（ｈｔｔｐ：／／＿
ｗｗｗ．ｔｒｉａｎｎｉ＿ｃｏｍ）、及びＡｂｌｅｘｉｓ（ｈｔｔｐ：／／＿ｗｗｗ＿ａ
ｂｌｅｘｉｓ＿ｃｏｍ）などの企業が、上記の技術を用いて選択された抗原に指向するヒ
ト抗体の提供に取り組み得る。
【０３１７】
ヒト抗体は、ファージがヒト免疫グロブリン又はその一部（Ｆａｂ、一本鎖抗体（ｓｃ
Ｆｖ）、又は非対合若しくは対合抗体可変領域など）を発現するように操作されるファー
ジディスプレイライブラリから選択され得る（Ｋｎａｐｐｉｋら（２０００）Ｊ．Ｍｏｌ
Ｂｉｏｌ．２９６：５７〜８６；Ｋｒｅｂｓら（２００１）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅ
ｔｈ．２５４：６７〜８４；Ｖａｕｇｈａｎら（１９９６）Ｎａｔｕｒｅ  Ｂｉｏｔｅｃ
ｈｎｏｌｏｇｙ  １４：３０９〜３１４；Ｓｈｅｅｔｓら（１９９８）ＰＩＴＡＳ（ＵＳ
Ａ）９５：６１５７〜６１６２；Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ及びＷｉｎｔｅｒ（１９９１）Ｊ
．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２７：３８１；Ｍａｒｋｓら（１９９１）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ
．２２２：５８１）。本発明の抗体は、例えば、Ｓｈｉら（２０１０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉ
ｏｌ．３９７：３８５〜９６及び国際公開公報第ＷＯ０９／０８５４６２号に記載される
バクテリオファージｐＩＸ外被タンパク質との融合タンパク質として抗体の重鎖及び軽鎖
可変領域を発現するファージディスプレイライブラリから単離され得る。ライブラリをヒ
トＩＦＮ−ω及びＩＦＮ−αのファージ結合に関してスクリーニングしてもよく、得られ
た陽性クローンを更に特徴付けし、Ｆａｂはクローンライセートから単離して全長ＩｇＧ
として発現させてもよい。ヒト抗体を単離するためのそのようなファージディスプレイ法
は、例えば米国特許第５，２２３，４０９号、同第５，４０３，４８４号、及び第５，５
７１，６９８号（Ｌａｄｎｅｒら）、Ｄｏｗｅｒらの米国特許第５，４２７，９０８号、
及び第５，５８０，７１７号、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙらの米国特許第５，９６９，１０８
号及び第６，１７２，１９７号、並びにＧｒｉｆｆｉｔｈｓらの米国特許第５，８８５，
７９３号、第６，５２１，４０４号、第６，５４４，７３１号、第６，５５５，３１３号
、第６，５８２，９１５号及び第６，５９３，０８１号に説明されている。
【０３１８】
免疫原性抗原の調製及びモノクローナル抗体の生成は、組み換えタンパク質生成などの
任意の好適な技術を用いて実施してもよい。免疫原性抗原は、精製タンパク質、又は全細
胞若しくは細胞若しくは組織抽出物を含むタンパク質混合物の形態で動物に投与されても
よく、あるいは抗原は、動物の身体内で、前記抗原又はその一部をコードする核酸から新
たに形成されてもよい。
【０３１９】
一例示的方法では、ファージディスプレイライブラリをビオチン化ヒトＩＦＮ−α２又
はビオチン化ヒトＩＦＮ−αＧに対してパニングしてもよい。３回のパニングの後、抗原
としてヒトＩＦＮ−α２、ＩＦＮ−αＧ、及びＩＦＮ−ωを用いたポリクローナルファー
ジＥＬＩＳＡ法を実施して、各パニング実験の特異的富化を検出することができる。ＩＦ
Ｎ−α２、ＩＦＮ−αＧ、及びＩＦＮ−ωに対する結合剤の富化を示すファージを回収し
て、標準ＥＬＩＳＡアッセイにてＦａｂフォーマットにおける追加のＩＦＮ−αサブタイ
プに対する結合に関して更にスクリーニングしてもよい。特定されたＦａｂクローンは完
全長の抗体にクローニングされ、本明細書で説明するＰｒｏｔｅＯｎ及びＩＳＲＥレポー
ター遺伝子アッセイを用いてヒトＩＦＮ−ω及び様々なＩＦＮ−αサブタイプの親和性及
び中和能力に関して更に特徴付けされてもよい。
【０３２０】
本発明の抗体は、ヒト又はヒト化されてもよい。
【０３２１】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明のＩＦＮ−α／ω抗体は、ヒト生殖系列遺伝因
子ＩＧＨＶ５−５１（配列番号１５５）由来のＶＨフレームワークを含む。
【０３２２】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明のＩＦＮ−α／ω抗体は、ヒト生殖系列遺伝因
子ＩＧＫＶ１Ｄ−３９（配列番号１５６）由来のＶＬフレームワークを含む。
【０３２３】
本明細書で説明され、以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のいくつかの実
施形態における本発明の抗体は、ＩｇＡ型、ＩｇＤ型、ＩｇＥ型、ＩｇＧ型、又はＩｇＭ
型のものであってもよい。本発明の抗体は、ＩｇＧ１型、ＩｇＧ２型、ＩｇＧ３型、Ｉｇ
Ｇ４型のものであってもよい。
【０３２４】
本発明の抗体の免疫エフェクターの特性は、当業者に既知の技術により、Ｆｃ修飾によ
って強化又はサイレンシングすることが可能である。例えば、Ｃ１ｑ結合、補体依存性細
胞傷害（ＣＤＣ）、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＡＤＣＣ）、貧食、細胞表面受容体
（例えば、Ｂ細胞受容体（ＢＣＲ））の下方調節などのＦｃエフェクター機能は、これら
の活性に関与するＦｃの残基を修飾することによって提供及び／又は制御され得る。本発
明の抗体の薬物動態特性は、抗体の半減期を延長するＦｃドメインの残基を突然変異させ
ることによって強化することができる（Ｓｔｒｏｈｌ（２００９）Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  
Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  ２０：６８５〜９１）。例示的なＦｃ修飾は、ＩｇＧ４  Ｓ２２
８Ｐ／Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ、ＩｇＧ２  Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ（Ｄａ
ｌｌ’Ａｃｑｕａら（２００６）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８１：２３５１４〜２４；
又は米国特許第６，７３７，０５６号に記載されるもののＩｇＧ２のＶ２３４Ａ／Ｇ２３
７Ａ／Ｐ２３８Ｓ、Ｖ２３４Ａ／Ｇ２３７Ａ／Ｈ２６８Ｑ、Ｈ２６８Ａ／Ｖ３０９Ｌ／Ａ
３３０Ｓ／Ｐ３３１、若しくはＩｇＧ２のＶ２３４Ａ／Ｇ２３７Ａ／Ｐ２３８Ｓ／Ｈ２６
８Ａ／Ｖ３０９Ｌ／Ａ３３０Ｓ／Ｐ３３１Ｓ（国際公開公報第ＷＯ１１／０６６５０１号
）（ＥＵ番号付けに準ずる残基番号付け）である。
【０３２５】
更に、本明細書に記載され、かつ以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のい
くつかの実施形態における本発明の抗体は、グリコシル化、異性化、脱グリコシル化など
のプロセスによって、又はポリエチレングリコール部分の付加（ペグ化）及び脂質化など
の天然には存在しない共有結合修飾によって翻訳後修飾してもよい。そのような修飾は、
インビボあるいはインビトロで生じ得る。例えば、本発明の抗体は、ポリエチレングリコ
ールと接合（ＰＥＧ化）することによって薬物動態プロファイルを改善することができる
。接合は当業者に既知の技術によって実施され得る。治療用抗体のＰＥＧとの接合によっ
て、機能を妨害せずに薬力学的動態が強化されることが示されている（Ｋｎｉｇｈら（２
００４）Ｐｌａｔｅｌｅｔｓ  １５：４０９〜１８、Ｌｅｏｎｇら（２００１）Ｃｙｔｏ
ｋｉｎｅ  １６：１０６〜１９、Ｙａｎｇら（２００３）Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｅｎｇ．１６
：７６１〜７０）。
【０３２６】
安定性、選択性、交差反応性、親和性、免疫原性、又は他の望ましい生物学的若しくは
生物物理学的特性を改善するように修飾された本発明の抗体又はその断片は、発明の範囲
内である。抗体の安定性は、（１）内在的な安定性に影響を及ぼす個々のドメインのコア
パッキング、（２）ＨＣとＬＣとの対合により影響を受けるタンパク質／タンパク質の界
面相互作用、（３）極性及び荷電残基の埋め込み、（４）極性及び荷電残基のためのＨ結
合ネットワーク、並びに（５）他の分子内及び分子間力の間の表面電荷及び極性残基の分
布、を含むいくつかの因子によって影響を受ける（（Ｗｏｒｎら（２００１）Ｊ．Ｍｏｌ
．Ｂｉｏｌ．３０５：９８９〜１０１０）。構造を不安定にする可能性のある残基は、抗
体の結晶構造に基づいて、あるいは場合によっては分子モデリングによって特定すること
が可能であり、また、抗体の安定性に対するこれらの残基の作用は、特定された残基に変
異を含む変異体を生成及び評価することにより試験することができる。抗体安定性を改善
する方法の１つは、示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）で測定した場合の熱転移中点温度（Ｔ
m）を上昇させることである。一般に、タンパク質のＴmは、その安定性と相関性を示すが
、溶液中でのそのアンフォールディングし易さ及び改変し易さ、並びにそのタンパク質の
アンフォールディングし易さに応じた分解プロセスとは負の相関性を示す（Ｒｅｍｍｅｌ
ｅら（２０００）Ｂｉｏｐｈａｒｍ  １３：３６〜４６，）。多くの研究で、ＤＳＣによ
って熱安定性として測定された薬剤の物理的安定性のランク付けと他の方法で測定された
物理的安定性との間に相関性があることが判明している（Ｇｕｐｔａら（２００３）ＡＡ
ＰＳ  ＰｈａｒｍＳｃｉ  ５Ｅ８、Ｚｈａｎｇら（２００４）Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．
９３：３０７６〜８９、Ｍａａら（１９９６）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．１４０：１５５
〜６８、Ｂｅｄｕ−Ａｄｄｏら（２００４）Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．２１：１３５３〜６１
、Ｒｅｍｍｅｌｅら（１９９７）Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１５：２００〜８）。これらの薬
剤の研究は、ＦａｂのＴmが対応するｍＡｂの長期の物理的安定性と密接な関係があるこ
とを示唆している。フレームワーク又はＣＤＲ内のいずれかにおけるアミノ酸の相違は、
Ｆａｂドメインの熱安定性に有意な作用を有し得る（Ｙａｓｕｉら（１９９４）ＦＥＢＳ
Ｌｅｔｔ．３５３：１４３〜６）。
【０３２７】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ヒトＩＦＮ−ωへの結合に関して配
列番号２８のＶＨ及び配列番号７１のＶＬを含む単離された抗体と競合する。
【０３２８】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ヒトＩＦＮ−ωへの結合に関して配
列番号２８のＶＨ及び配列番号１５０のＶＬを含む単離された抗体と競合する。
【０３２９】
特定のＶＨ及びＶＬ配列を含む本発明の抗体とのヒトＩＦＮ−ωへの特異的結合間の競
合は、周知の方法を用いてインビトロでアッセイすることができる。例えば、非標識抗体
の存在下での、ＭＳＤ  Ｓｕｌｆｏタグ（商標）ＮＨＳ−エステル標識抗体の、ヒトＩＦ
Ｎ−ωへの結合は、ＥＬＩＳＡ法によって評価することができ、さもなければＢｉｏａｃ
ｏｒｅ分析法若しくはフローサイトメトリーを用いて本発明の抗体との競合を示すことも
可能である。
【０３３０】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦ
Ｎ−ω）及び少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトインターフ
ェロンアルファ（ＩＦＮ−α）サブタイプに結合し、それらの生物活性を中和し、この抗
体は、少なくとも残基Ｆ２７、Ｌ３０、及びＲ３３において配列番号１のＩＦＮ−ωに結
合する。
【０３３１】
残基Ｆ２７、Ｌ３０、及びＲ３３  ＩＦＮ−ωは、本発明のＩＦＮ−α／ω抗体の広域
中和活性に必要な最小のエピトープを規定する。いくつかの抗体／ＩＦＮ−α複合体又は
抗体／ＩＦＮ−ω複合体の結晶構造は、それらの３つの残基が抗体結合に対して主に寄与
することを明らかにした。Ｆ２７残基は、本発明の抗体が結合しないＩＦＮ−αＤ（α１
）を除く全てのヒトＩＦＮ−αに保存される。Ｌ３０及びＲ３３はどちらも全てのヒトＩ
ＦＮ−α及びヒトＩＦＮ−ωに保存される。Ｆ２７のエピトープへの寄与の更なる確証は
、様々なカニクイザルＩＦＮ−αサブタイプに関する結合研究から明らかである。本発明
の抗体は、ヒトヒトＩＦＮ−αＤと同様に位置２７（Ｓ２７）にセリンを有するカニクイ
ザルＩＦＮ−α１３に結合しない。
【０３３２】
本明細書に記載の別の実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態の各々
のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、少なくとも残基Ｓ２５、Ｐ２６、Ｆ２７、
Ｌ２８、Ｌ３０、Ｋ３１、Ｒ３３、Ｒ３４、及びＤ３５において配列番号１のヒトＩＦＮ
−ωに結合する。
【０３３３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦ
Ｎ−ω）及び少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトインターフ
ェロンアルファ（ＩＦＮ−α）サブタイプに結合し、それらの生物活性を中和し、この抗
体は、残基Ｆ２７を含む１つ又は２つ以上の残基において配列番号１のＩＦＮ−ωに結合
する。
【０３３４】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体は、ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦ
Ｎ−ω）及び少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトインターフ
ェロンアルファ（ＩＦＮ−α）サブタイプに結合し、それらの生物活性を中和し、かつＢ
ＬｙＳ、ＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−６、ＣＤ２７、ＢＤＣＡ２、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３、ＩＦ
Ｎ−αＤ、ＩＬ−１７、ＣＤ２０、ＩＬ−１０、ＣＤ２２、ＩＬ−２１、ＩＣＯＳ、ＩＣ
ＯＳＬ、又はＩＦＮ−γに結合する二重特異性抗体である。
【０３３５】
ＳＬＥ患者において上昇するＩＦＮ−ωの存在、及びインビトロＰＢＭＣにおけるＩＦ
Ｎ−ωのＢＬｙＳ分泌物誘導の実証を考慮すると、ＳＬＥ患者におけるＩＦＮ−α／ωの
複合遮断は、抗ＩＦＮ−α特異的アプローチと比較してＢＬｙＳ濃度の低減により効果的
であり得る。ＳＬＥ患者におけるＩＦＮシグネチャ及びＩＦＮ活性の程度は、可溶性ＢＬ
ｙＳ濃度と相関するものと思われる。
【０３３６】
本明細書に記載され、かつ以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のいくつか
の実施形態における本発明のＩＦＮ−α／ω抗体を遺伝子操作して、本発明の範囲に更に
包含される二重特異性抗体にすることができる。本発明の抗体のＶＬ領域及び／又はＶＨ
領域を、公開された方法を用いて遺伝子操作して、ＴａｎｄＡｂ（登録商標）デザインな
どの構造として一本鎖二重特異性抗体（国際公開公報第ＷＯ９９／５７１５０号、米国特
許公開第ＵＳ２０１１／０２０６６７２号）、又は米国特許第ＵＳ５８６９６２０号、国
際公開公報第ＷＯ９５／１５３８８号、同第ＷＯ９７／１４７１９号、若しくは同ＷＯ１
１／０３６４６０号で開示されるもののような構造としての二重特異性ｓｃＦＶにするこ
とができる。
【０３３７】
本発明の抗体のＶＬ領域及び／又はＶＨ領域を、二重特異性完全長抗体に遺伝子操作す
ることもでき、ここで各抗体のアームは別個の抗原又はエピトープに結合する。そのよう
な二重特異性抗体は、典型的には、米国特許第７，６９５，９３６号、国際公開公報第Ｗ
Ｏ０４／１１１２３３号、米国特許出願公開第２０１０／００１５１３３号、米国特許出
願公開第２００７／０２８７１７０号、国際公開公報第ＷＯ２００８／１１９３５３号、
米国特許出願公開第２００９／０１８２１２７号、米国特許出願公開第２０１０／０２８
６３７４号、米国特許出願公開第２０１１／０１２３５３２号、国際公開公報第ＷＯ２０
１１／１３１７４６号、国際公開公報第ＷＯ２０１１／１４３５４５号、又は米国特許出
願公開第２０１２／０１４９８７６号、に記載されるものなどの技術を用いて、２つの抗
体重鎖間のＣＨ３相互作用を調節して二重特異性抗体を形成することによって作製される
。
【０３３８】
例えば、本発明の二重特異性抗体は、２つの単一特異性ホモ二量体抗体のＣＨ３領域で
非対称突然変異を導入して、還元条件下で２つの親単一特異性ホモ二量体抗体から二重特
異性ヘテロ二量体抗体を形成して、国際公開公報第ＷＯ２０１１／１３１７４６号に記載
の方法に従って二硫化結合異性化を実現することによって、インビトロの無細胞環境下で
生成することができる。これらの方法では、第１の単一特異性二価抗体（例えば本発明の
抗ＩＦＮ−α／ω抗体）及び第２の単一特異性二価抗体（例えば抗ＢＬｙＳ抗体、抗ＣＤ
４０Ｌ抗体、抗ＩＬ−６抗体、抗ＣＤ２７抗体、抗ＢＤＣＡ２抗体、抗ＩＬ−１２抗体、
抗ＩＬ−２３抗体、抗ＩＦＮ−αＤ抗体、抗ＩＬ−１７抗体、抗ＣＤ２０抗体、抗ＩＬ−
１０抗体、抗ＣＤ２２抗体、抗ＩＬ−２１抗体、抗ＩＣＯＳ抗体、抗ＩＣＯＳＬ抗体、又
は抗ＩＦＮ−γ抗体）を、ヘテロ二量体の安定性を促進する特定の置換をＣＨ３ドメイン
に有するように遺伝子操作して、ヒンジ領域中のシステインをジスルフィド結合異性化さ
せるのに十分な還元条件下で抗体を一緒にインキュベートして、それにより、Ｆａｂアー
ム交換によって二重特異性抗体を生成する。インキュベーション条件は、最適に非還元条
件へと戻してもよい。用いられ得る例示的な還元剤は、２−メルカプトエチルアミン（２
−ＭＥＡ）、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）、ジチオエリスリトール（ＤＴＥ）、グルタ
チオン、トリス（２−カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）、Ｌ−システイン、及
びβ−メルカプトエタノールであり、２−メルカプトエチルアミン、ジチオスレイトール
、及びトリス（２−カルボキシエチル）ホスフィンからなる群から選択される還元剤が好
ましい。例えば、ｐＨ５〜８、例えばｐＨ７．０又は７．４で、少なくとも２５ｍＭの２
−ＭＥＡの存在下又は少なくとも０．５ｍＭのジチオスレイトールの存在下で、少なくと
も２０℃で、少なくとも９０分のインキュベーションを用いてもよい。
【０３３９】
二重特異性抗体の第１の重鎖及び第２の重鎖で用いられ得る例示的なＣＨ３突然変異は
、Ｋ４０９Ｒ及び／又はＦ４０５Ｌである。
【０３４０】
本発明の抗体のＶＬ領域及び／又はＶＨ領域が組み込まれ得る追加の二重特異性構造は
、例えば、二重可変ドメイン免疫グロブリン（ＤＶＤ）（国際公開公報第ＷＯ２００９／
１３４７７６号）、又は異なる特異性を有する２つの抗体アームを接続する様々な二量体
化ドメインを含む構造（国際公開公報第ＷＯ２０１２／０２２８１１号、米国特許第５，
９３２，４４８号、同第６，８３３，４４１号）である。ＤＶＤは、構造ＶＨ１−リンカ
ー−ＶＨ２−ＣＨを有する重鎖、及び構造ＶＬ１−リンカー−ＶＬ２−ＣＬを有する軽鎖
を含む完全長抗体であり、リンカーは任意である。
【０３４１】
二重特異性抗ＩＦＮ−α／ω抗体に組み込まれるＢＬｙＳ、ＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−６、Ｃ
Ｄ２７、ＢＤＣＡ２、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３、ＩＦＮ−αＤ、ＩＬ−１７、ＣＤ２０、
ＩＬ−１０、ＣＤ２２、ＩＬ−２１、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳＬ、又はＩＦＮ−γに結合する
ＶＨ及びＶＬは、本明細書に記載の方法を用いて新たに生成してもよく、あるいは既存の
単一特異性抗体を遺伝子操作して生成してもよい。本発明の二重特異性抗体を生成するた
めに用いられ得る例示的な抗ＢＬｙＳ抗体は、ＢＥＮＬＹＳＴＡ（登録商標）である。使
用し得る例示的なＣＤ４０Ｌ抗体は、米国特許第５，４７４，７７１号、同第５，７４７
，０３７号、国際公開公報第ＷＯ０１／６８８６０号、同第ＷＯ０６／０３３７０２号、
又は同第ＷＯ０８／１１８３５６号に記載されるものである。使用し得る例示的な抗ＩＬ
−６抗体は、国際公開公報第ＷＯ０６／１１９１１５号、同第ＷＯ１０／０５６９４８号
、同第ＷＯ１０／０８８４４４号、又は同第ＷＯ０７／０７６９２７号に記載されるもの
である。使用し得る例示的な抗ＣＤ２７抗体は、国際公開公報第ＷＯ１３／１３８５８６
号、同第ＷＯ１１／１３０４３４号、又は同第ＷＯ１２／００４３６７号に記載されるも
のである。使用し得る例示的なＩＬ−１２及びＩＬ−２３抗体はＳＴＥＬＡＲＡ（登録商
標）であり、使用し得る例示的なＩＬ−２３抗体は、国際公開公報第ＷＯ０７／００５９
５５号、同第ＷＯ０７／０２７７１４号、同第ＷＯ０８／１０３４３２号、同第ＷＯ０７
／１０６７６９号、同第ＷＯ０７／１４７０１９号、又は同第ＷＯ０８／１３４６５９号
に記載されるものである。使用し得る例示的なＩＬ−１７抗体は、国際公開公報ＷＯ０６
／０１３１０７号、同第ＷＯ０６／０５４０５９号、同第ＷＯ０７／０７０７５０号、同
第ＷＯ０８／１３４６５９号、同第ＷＯ０７／１４９０３２号、同第ＷＯ０８／０２１１
５６号、同第ＷＯ０８／０４７１３４号、同第ＷＯ０９／１３０４５９号、同第ＷＯ１０
／０２５４００号、同第ＷＯ１１／０５３７６３、及びＷＯ１２／０９５６６２号に記載
されるものである。
【０３４２】
本明細書に記載され、かつ以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のいくつか
の実施形態における本発明の別の実施形態は、ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω
）及び特定のＶＨ及びＶＬ配列を有する少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、
又は１１のヒトインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）サブタイプに結合し、それらの
生物活性を中和する、単離された抗体であり、ここで抗体ＶＨは第１のポリヌクレオチド
によってコードされ、抗体ＶＬは第２の合成ポリヌクレオチドによってコードされる。ポ
リヌクレオチドは相補的デオキシ核酸（deoxynucleic acid）（ｃＤＮＡ）であってもよ
く、また好適な宿主内で発現するために最適化されたコドンであってもよい。コドン最適
化は周知の技術である。
【０３４３】
本明細書に記載のいくつかの実施形態、及び以下に列記される番号付けされた実施形態
の各々のいくつかの実施形態では、本発明の抗体ＶＨ又はＶＬをコードするポリヌクレオ
チドは、配列番号７２、９２、１０８、１１０、１１７、又は１２２の配列を含む。
【０３４４】
本発明の別の実施形態は、本発明の抗体の重鎖可変領域及び／又は抗体軽鎖可変領域の
うちのいずれかをコードする単離されたポリヌクレオチドである。特定の例示的なポリヌ
クレオチドが本明細書に開示されるが、遺伝コードの縮重又は所与の発現系におけるコド
ンの好ましさを考慮すると、本発明の抗体をコードする他のポリヌクレオチドも本発明の
範囲内に含まれる。例示的なポリヌクレオチドは、例えば配列番号７２、９２、１０８、
１１０、１１７、又は１２２に示す配列を有するポリヌクレオチドである。本発明の抗体
のＶＨ若しくはＶＬ又はそれらの断片をコードするポリヌクレオチド配列は、意図される
宿主細胞におけるヌクレオチド配列の発現を可能にする、プロモーター又はエンハンサー
などの１つ又は２つ以上の調節因子に操作可能に連結され得る。ポリヌクレオチドはｃＤ
ＮＡであってもよい。
【０３４５】
本発明の別の実施形態は、本発明のポリヌクレオチドを含むベクターである。そのよう
なベクターは、プラスミドベクター、ウイルスベクター、バキュロウイルス発現ベクター
、トランスポゾン系ベクター、又は任意の手段によって所与の生物又は遺伝的背景に本発
明の合成ポリヌクレオチドを導入するのに適した任意の他のベクターであってもよい。例
えば、任意に定常領域に連結される本発明の抗体の軽鎖及び／又は重鎖可変領域をコード
するポリヌクレオチドが、発現ベクターに挿入される。軽鎖及び／又は重鎖は、同じ又は
異なる発現ベクターにクローニングされ得る。免疫グロブリン鎖をコードするＤＮＡセグ
メントは、免疫グロブリンポリペプチドの発現を確実にする発現ベクター中の制御配列に
操作可能に連結されてもよい。そのような制御配列は、シグナル配列、プロモーター（例
えば、天然に会合する又は異種プロモーター）、エンハンサー因子、及び転写終結配列を
含み、抗体を発現するように選択された宿主細胞と適合性があるように選択される。ベク
ターが適切な宿主内に組み込まれると、宿主は、組み込まれたポリヌクレオチドによって
コードされたタンパク質の高レベル発現に適した条件下で維持される。
【０３４６】
好適な発現ベクターは典型的には、エピソーム又は宿主染色体ＤＮＡの不可欠な部分の
いずれかとして宿主生物において複製可能である。通常、発現ベクターは、所望のＤＮＡ
配列で形質転換されたこれらの細胞の検出を可能にするように、アンピシリン耐性、ヒグ
ロマイシン耐性、テトラサイクリン耐性、カナマイシン耐性、又はネオマイシン耐性など
の選択マーカーを含む。
【０３４７】
好適なプロモーター及びエンハンサー因子は当該技術分野において既知である。細菌細
胞における発現の場合、例示的なプロモーターとしては、ｌａｃｌ、ｌａｃＺ、Ｔ３、Ｔ
７、ｇｐｔ、ｌａｍｂｄａ  Ｐ、及びｔｒｃが挙げられる。真核細胞における発現の場合
、例示的なプロモーターとしては、軽鎖及び／又は重鎖免疫グロブリン遺伝子プロモータ
ー及びエンハンサー因子、サイトメガロウイルス即時初期プロモーター、単純ヘルペスウ
イルスチミジンキナーゼプロモーター、初期及び後期ＳＶ４０プロモーター、レトロウイ
ルスからの長鎖末端反復配列に存在するプロモーター、マウスメタロチオネイン−Ｉプロ
モーター、及び様々な当該技術分野に既知の組織特異的プロモーターが挙げられる。酵母
細胞における発現の場合、例示的なプロモーターは、ＡＤＨ１プロモーター、ＰＧＫ１プ
ロモーター、ＥＮＯプロモーター、ＰＹＫ１プロモーター等の構成的プロモーター、又は
ＧＡＬ１プロモーター、ＧＡＬ１０プロモーター、ＡＤＨ２プロモーター、ＰＨ０５プロ
モーター、ＣＵＰ１プロモーター、ＧＡＬ７プロモーター、ＭＥＴ２５プロモーター、Ｍ
ＥＴ３プロモーター、ＣＹＣ１プロモーター、ＨＩＳ３プロモーター、ＡＤＨ１プロモー
ター、ＰＧＫプロモーター、ＧＡＰＤＨプロモーター、ＡＤＣ１プロモーター、ＴＲＰ１
プロモーター、ＵＲＡ３プロモーター、ＬＥＵ２プロモーター、ＥＮＯプロモーター、Ｔ
Ｐ１プロモーター、及びＡＯＸ１などの調節可能プロモーター（例えばピキアにおいて使
用するため）である。適切なベクター及びプロモーターの選択は、十分に当業者のレベル
内である。
【０３４８】
多くの好適なベクター及びプロモーターが当業者に既知であり、多くは、対象組み換え
構築物を生成するために市販されている。例として以下のベクターを提供する。細菌性：
ｐＢｓ、ｐｈａｇｅｓｃｒｉｐｔ、ＰｓｉＸ１７４、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ  ＳＫ、ｐ
Ｂｓ  ＫＳ、ｐＮＨ８ａ、ｐＮＨ１６ａ、ｐＮＨ１８ａ、ｐＮＨ４６ａ（Ｓｔｒａｔａｇ
ｅｎｅ，Ｌａ  Ｊｏｌｌａ，Ｃａｌｉｆ．，ＵＳＡ）；ｐＴｒｃ９９Ａ、ｐＫＫ２２３−
３、ｐＫＫ２３３−３、ｐＤＲ５４０、及びｐＲＩＴ５（Ｐｈａｒｍａｃｉａ，Ｕｐｐｓ
ａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）。真核：ｐＷＬｎｅｏ、ｐＳＶ２ｃａｔ、ｐＯＧ４４、ＰＸＲ１
、ｐＳＧ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）ｐＳＶＫ３、ｐＢＰＶ、ｐＭＳＧ、及びｐＳＶＬ（Ｐ
ｈａｒｍａｃｉａ）。
【０３４９】
本発明の別の実施形態は、本発明の１つ又は２つ以上のベクターを含む宿主細胞である
。用語「宿主細胞」は、ベクターが導入される細胞を指す。用語「宿主細胞」は、特定の
対象細胞だけでなく、そのような細胞の後代、及び特定の対象細胞から生成された安定し
た細胞株も指すように意図されることを理解されたい。変異又は環境の影響のどちらかに
より、特定の修飾が後の世代に起こる可能性があるため、そのような後代は親細胞と同一
ではない可能性があるが、本明細書で使用される用語「宿主細胞」の範囲内に依然として
含まれる。そのような宿主細胞は、真核細胞、原核細胞、植物細胞、又は古細菌（archea
l）細胞であってもよい。
【０３５０】
原核宿主細胞の例は、大腸菌、バチルス・ズブチルスなどの桿菌、及びサルモネラ、セ
ラチア、及び様々なシュードモナス種などの他の腸内細菌科である。酵母などの他の微生
物も発現に有用である。好適な酵母宿主細胞の例は、サッカロマイセス（例えばＳ．セレ
ビジアエ）及びピチアである。例示的な真核細胞は、哺乳類、昆虫類、鳥類、又は他の動
物由来の真核細胞であり得る。哺乳類真核細胞には、不死化細胞株、例えばハイブリドー
マ、又は骨髄腫細胞株、例えばＳＰ２／０（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒ
ｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）、Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ、ＣＲＬ−１５８１）
、ＮＳ０（Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｃｅｌｌ  Ｃｕｌｔｕｒｅ
ｓ（ＥＣＡＣＣ）、Ｓａｌｉｓｂｕｒｙ，Ｗｉｌｔｓｈｉｒｅ，ＵＫ、ＥＣＡＣＣ  Ｎｏ
．８５１１０５０３）、ＦＯ（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１６４６）及びＡｇ６５３（ＡＴＣＣ
ＣＲＬ−１５８０）マウス細胞株が含まれる。ヒト骨髄腫細胞株の一例は、Ｕ２６６（
ＡＴＴＣ  ＣＲＬ−ＴＩＢ−１９６）である。他の有用な細胞系としては、ＣＨＯ−Ｋ１
ＳＶ（Ｌｏｎｚａ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ（Ｗａｌｋｅｒｓｖｉｌｌｅ，ＭＤ））、ＣＨＯ
−Ｋ１（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−６１）、又はＤＧ４４などの、チャイニーズハムスターの卵
巣（ＣＨＯ）細胞に由来するものが挙げられる。
【０３５１】
本発明の別の実施形態は、抗体が発現する条件下で本発明の宿主細胞を培養することと
、宿主細胞によって生成された抗体を回収することとを含む、本発明の抗体の生成方法で
ある。抗体を作成及び精製する方法は当該技術分野において周知である。合成されると（
化学的又は組み換えのいずれかで）、全ての抗体、それらの二量体、個々の軽鎖及び／若
しくは重鎖、又はＶＨ及び／若しくはＶＬなどの他の抗体断片は、硫酸アンモニウム沈殿
法、親和性カラム法、カラムクロマトグラフィー法、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰ
ＬＣ）精製法、ゲル電気泳動法などを含む標準的な手順により精製することができる（概
要はＳｃｏｐｅｓ，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ（Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖ
ｅｒｌａｇ，Ｎ．Ｙ．，（１９８２）を参照）。対象抗体は、実質的に純粋、例えば、対
象抗体等以外の細胞残屑、巨大分子などの汚染物を含まない、例えば、少なくとも約８０
％〜８５％純粋、少なくとも約８５％〜９０％純粋、少なくとも約９０％〜９５％純粋、
又は少なくとも約９８％〜９９％以上純粋であり得る。
【０３５２】
本発明の別の実施形態は、ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω）及び少なくとも
３、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトインターフェロンアルファ（ＩＦＮ
−α）に結合し、それらの生物活性を中和する抗体の生成方法であり、この方法は、
抗体のＶＨをコードする第１のポリヌクレオチド及び抗体のＶＬをコードする第２のポ
リヌクレオチドを発現ベクターに組み込むことと、
発現ベクターを用いて宿主細胞を転換することと、
ＶＬ及びＶＨが発現して抗体を形成する条件下の培地内で宿主細胞を培養することと、
宿主細胞又は培地から抗体を回収することと、を含む。
【０３５３】
本発明の特定のＶＨ配列又はＶＬ配列をコードするポリヌクレオチドは、標準的な分子
生物学法を用いてベクター内に組み込まれる。宿主細胞の形質転換、培養、抗体発現、及
び精製は、周知の方法を用いて行われる。
【０３５４】
治療方法
本発明のＩＦＮ−α／ω抗体は、全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）若しくは皮膚紅斑性狼瘡
（ＣＬＥ）を含む狼瘡などの免疫媒介炎症性疾患若しくは自己免疫疾患、又は乾癬、免疫
性血小板減少症（ＩＴＰ）、エカルディ−グチエール症候群（ＡＧＳ）、全身性硬化症、
シェーグレン症候群、筋炎、分類不能型免疫不全症（ＣＶＩＤ）、自己免疫性甲状腺疾患
、Ｉ型糖尿病、関節リウマチ、移植片拒絶反応、若しくは移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）な
どの免疫媒介炎症性疾患の治療に利用され得る。これらの疾患は、ＩＦＮ−α及び／若し
くはＩＦＮ−ω、又はＩ型ＩＦＮシグネチャの生成の増加に関連し得る。
【０３５５】
本発明の一実施形態は、ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω）及び少なくとも３
、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−
α）サブタイプに結合し、それらの生物活性を中和する、単離された抗体の治療有効量を
、それを必要とする患者に、免疫媒介炎症性疾患又は自己免疫疾患を治療するのに十分な
時間投与することを含む、免疫媒介炎症性疾患又は自己免疫疾患の治療方法である。
【０３５６】
本発明の別の実施形態は、ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω）及び少なくとも
３、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトインターフェロンアルファ（ＩＦＮ
−α）サブタイプに結合し、それらの生物活性を中和する、単離された抗体の治療有効量
を、それを必要とする患者に、狼瘡を治療するのに十分な時間投与することを含む、狼瘡
の治療方法である。
【０３５７】
いくつかの実施形態では、狼瘡は、全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）又は皮膚紅斑性狼瘡（
ＣＬＥ）である。
【０３５８】
いくつかの実施形態では、患者は、狼瘡腎炎を有する。
【０３５９】
いくつかの実施形態では、免疫媒介炎症性疾患又は自己免疫疾患とは、乾癬、免疫性血
小板減少症（ＩＴＰ）、エカルディ−グチエール症候群（ＡＧＳ）、全身性硬化症、シェ
ーグレン症候群、筋炎、分類不能型免疫不全症（ＣＶＩＤ）、自己免疫性甲状腺疾患、Ｉ
型糖尿病、関節リウマチ、移植片拒絶反応、又は移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）である。
【０３６０】
本発明の別の実施形態は、ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω）及び少なくとも
３、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトインターフェロンアルファ（ＩＦＮ
−α）サブタイプに結合し、それらの生物活性を中和する、単離された抗体の治療有効量
を、それを必要とする患者に、慢性ウイルス感染症を治療するのに十分な時間投与するこ
とを含む、慢性ウイルス感染症の治療方法である。
【０３６１】
ＩＦＮ−Ｉは急性ウイルス感染症において保護的な役割を有することが周知である。近
年、ＩＦＮ−Ｉは、慢性ウイルス感染症において、少なくとも部分的にＩＬ−１０及びプ
ログラム細胞死１リガンド１（ＰＤＬ１）によって媒介される機構を通じて免疫抑制的役
割を有することが実証された（Ｔｅｉｊａｒｏら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３４０，２０７〜２
１１，（２０１３）、Ｗｉｌｓｏｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ  ３４０，２０２〜２０７，２０
１３）。複数のＩＦＮ−αサブタイプ及びＩＦＮ−ωの複合遮断は、ウイルス存続を助長
する免疫抑制環境を下方調節することによってＨＩＶ及びＣ型肝炎を含む慢性ウイルス感
染症を有する患者に薬効を提供し得る。
【０３６２】
いくつかの実施形態では、慢性ウイルス感染症は、ＨＩＶ又はＣ型肝炎である。
【０３６３】
「治療」又は「治療する」とは、治療的処置を意味する。治療され得る患者には、その
障害を有する傾向があるか、又はその障害にかかりやすい患者、その障害が予防されるべ
き患者も含まれる。治療を必要とする個人としては、その障害又はその障害の症状を既に
有している者が挙げられる。有益な又は望ましい臨床結果としては、感知可能又は感知不
可能にかかわらず、症状の緩和、疾患程度の減少、病状の安定化（即ち悪化しない）、疾
患進行の遅延又は緩徐化、病状の改善又は一時的緩和、及び寛解（部分的又は全体的にか
かわらず）が挙げられる。「治療」は、治療を受けなかった場合に予期される生存と比較
して、生存をより長引かせることも意味し得る。
【０３６４】
本発明の方法で用いられ得る例示的な抗体は、表９、１３、１５、１７、１９、２１、
２２、２３、２４、２５、２６、又は２７に示すＶＨ、ＶＬ、ＨＣＤＲ、及び／又はＬＣ
ＤＲ領域、並びに抗体ＩＦＷＭ３３０８、ＩＦＷＭ３３０７、ＩＦＷＭ３４１０、ＩＦＷ
Ｍ３３２２、ＩＦＷＭ３３８５、ＩＦＷＭ３４１６、ＩＦＷＭ３３１０、ＩＦＷＭ３４０
０、ＩＦＷＭ３３２１、ＩＦＷＭ３５２２、ＩＦＷＭ３５２４、ＩＦＷＭ３３２０、ＩＦ
ＷＭ３３０４、ＩＦＷＭ３５２０、ＩＦＷＭ３３９９、ＩＦＷＭ３３１４、ＩＦＷＭ３３
３１、ＩＦＷＭ３４０５、ＩＦＷＭ３４４２、ＩＦＷＭ３５２５、ＩＦＷＭ３４２３、Ｉ
ＦＷＭ３４４４、及びＩＦＷＭ３４２１を含む。
【０３６５】
本明細書で説明され、かつ以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のいくつか
の実施形態における本発明の方法に用いられ得る他の例示的抗体は、ヒトインターフェロ
ンオメガ（ＩＦＮ−ω）及び少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１の
ヒトインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）サブタイプに結合し、それらの生物活性を
中和する抗体であり、この抗体は、少なくとも残基Ｆ２７、Ｌ３０、及びＲ３３において
配列番号１のＩＦＮ−ωに結合する。
【０３６６】
本明細書で説明され、かつ以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のいくつか
の実施形態における本発明の方法に用いられ得る他の例示的抗体は、少なくとも残基Ｓ２
５、Ｐ２６、Ｆ２７、Ｌ２８、Ｌ３０、Ｋ３１、Ｒ３３、Ｒ３４、及びＤ３５において配
列番号１のヒトＩＦＮ−ωに結合する抗体である。
【０３６７】
本発明の方法を用いて、任意の分類に属する動物患者を治療することができる。そのよ
うな動物の例としては、ヒト、齧歯類、イヌ、ネコ、及び家畜などの哺乳動物が挙げられ
る。
【０３６８】
本発明の抗体は、かかる治療のための薬剤の調製において有用であり得、薬剤は、本明
細書で定める投薬量で投与するために調製される。ＳＬＥは、遺伝因子及び環境因子の両
方がその発生に寄与する慢性の多臓器自己免疫疾患である。
【０３６９】
ＳＬＥは、複数の臓器にわたる組織損傷をもたらす病原性自己抗体の生成、及び免疫複
合体の組織沈着を特徴とする。皮膚性、筋骨格性、血液性、神経性、及び腎性合併症の組
み合わせは患者に見られ、これは拡大及び寛解の期間を経る。狼瘡腎炎は、ＳＬＥの症例
として定義され、腎炎、蛋白尿、血尿、及び／又は腎不全の診断を伴う。狼瘡腎炎患者に
おいては、腎障害は蛋白尿（＞０．５ｇ／２４時間）及び／又は尿検体中の赤血球若しく
は円柱を特徴とする。
【０３７０】
いかなる特定の理論による束縛も意図しないが、自己抗体免疫複合体といったＳＬＥト
リガが、ＩＦＮ−α、及びＩＦＮ−ωとは関連するが、ＩＦＮ−βとは関連しないＩ型Ｉ
ＦＮ応答を引き起こすことが示唆されている。したがって、本発明のＩＦＮ−α／ω抗体
は、狼瘡及び他の免疫媒介炎症性疾患に対し、ＩＦＮ−ω及び複数のＩＦＮ−αサブタイ
プを広域に阻害し、同時に抗ウイルス防御により重要な役割を果たし得、またその分子が
狼瘡中で生物学的関連（releavance）を全く有さない場合があるＩＦＮ−βの機能を留保
する（spare）より効果的な治療を提供し得る。例えば、抗ＩＦＮ−β抗体は、ＳＬＥ及
びＡＧＳ患者のいずれの患者血清活性の中和にも失敗しており、疾患はＩＦＮ−Ｉ活性及
びＩＦＮシグネチャの上昇にも関連していた（Ｈｏｏｋｓら、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎ
ｄ  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  ２５：３９６〜４００，１９８２、Ｈｕａら、Ａｒｔｈｒｉ
ｔｉｓ  ａｎｄ  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  ５４：１９０６（Ｊｕｎ，２００６）、Ｒｉｃ
ｅら、Ｌａｎｃｅｔ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  ｄｏｉ：１０．１０１６／Ｓ１４７４〜４４
２２（１３）７０２５８〜８（２０１３））。
【０３７１】
ＳＬＥに加えて狼瘡の他のタイプとしては、皮膚紅斑性狼瘡（ＣＬＥ）及び小児狼瘡が
挙げられる。
【０３７２】
狼瘡に関連する症状としては、関節の痛み及びこわばり、非びらん性関節炎、筋肉痛、
疼痛、衰弱、発熱、倦怠、口腔組織の潰瘍、皮膚症状（例えば鼻及び頬全体の蝶形発疹、
太陽光により誘発された皮膚発赤）、異常な体重減少若しくは体重増加、貧血症、リンパ
球及び／若しくは血小板数の低下、神経学的若しくは神経精神病学的症状（例えば思考障
害、記憶障害、錯乱、抑うつ、頭痛、癲癇発作、卒中）、腎臓障害（例えば腎炎（例えば
糸球体腎炎））、太陽若しくは光過敏症、脱毛、ストレス若しくは寒さによる指の紫化若
しくは蒼白化、血管病変若しくは他の血管症状、又は心膜炎若しくは胸膜炎などの心肺症
状が挙げられる。インターロイキン上昇レベルＩＬ−１、ＩＬ−６、ＩＬ−１０、Ｉｌ−
１２、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−５、及びＩＬ−１６、ＴＮＦ−α又はＩ型インタ
ーフェロン、並びにＩＦＮ誘導性遺伝子の過剰発現が狼瘡患者において立証されている。
患者は、二本鎖ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）、リボ核タンパク質（ＲＮＰ）、ＳＳ−ａ／Ｒｏ、
ＳＳ−ｂ／Ｌａ、リン脂質、ヒストン、又はカルジオリピンといった、核及び細胞成分に
対する自己抗体の高い濃度を有し得る。患者は、少なくとも１つの組織中に免疫複合体の
堆積を有し得る。
【０３７３】
ＳＬＥは、例えばＡｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇ
ｙ（ＡＣＲ）の推奨する方法を使用して、あるいはＣｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ
Ｓｙｓｔｅｍｉｃ  Ｌｕｐｕｓ  ＥｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓのためのＳｙｓｔｅｍｉ
ｃ  Ｌｕｐｕｓ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｎｇ  Ｃｌｉｎ
ｉｃｓ  Ｃｒｉｔｅｒｉａ（ＳＬＩＣＣ）によって、診断又は分類することができる。例
えば、２０１２  ＳＬＩＣＣ基準は、１１の基準のうちの少なくとも４つ（うち少なくと
も１つの臨床的基準及び１つの免疫学的基準）、又は抗ＤＮＡ抗体（ＡＤＡ）若しくは抗
核酸抗体（ＡＮＡ）の存在下における生検で実証された狼瘡腎炎を患者に要求している。
臨床的基準とは、急性皮膚狼瘡、慢性皮膚狼瘡、口若しくは鼻潰瘍、非瘢痕性脱毛症、関
節炎、漿膜炎、腎症状、神経症状、溶血性貧血、白血球減少症、又は血小板減少症（＜１
００，０００／ｍｍ3）である。免疫学的基準としては、ＡＮＡ、ＡＤＡ、抗Ｓｍ、抗リ
ン脂質抗体、低補体（Ｃ３、Ｃ４、又はＣＨ５０）、又は直接クームス試験（溶血性貧血
の存在には含めない）（Ｐｅｔｒｅら、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  Ｒｈｅｕｍａｔｉ
ｓｍ  Ａｕｇ  ２０１２）が挙げられる。活動性疾患は、１つのＢｒｉｔｉｓｈ  Ｉｓｌ
ｅｓ  Ｌｕｐｕｓ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ｇｒｏｕｐの「Ａ」基準、又は２つのＢＩＬＡＧ
「Ｂ」基準、ＳＬＥ  Ｄｉｓｅａｓｅ  Ａｃｔｉｖｉｔｙ  Ｉｎｄｅｘ（ＳＬＥＤＡＩ）
、又はＦｕｒｉｅらのＡｒｔｈｒｉｔｉｓ  Ｒｈｅｕｍ  ６１（９）：１１４３〜５１（
２００９）で説明される全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）レスポンダ指数（ＳＲＩ）によって
定義することができる。
【０３７４】
ＳＬＥ重症度及び疾患活動性は、ＳＬＥの専門技術を有する医師によりＢＩＬＡＧスコ
アによって定義することができる。ＢＩＬＡＧ  ２００４指数は、ＢＩＬＡＧスコアを決
定するのに用いられる（ＹｅｅらのＡｒｔｈｒｉｔｉｓ  ＆  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  ５
４：３３００〜３３０５，２００６、ＩｓｅｎｂｅｒｇらのＲｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ  
４４：９０２〜９０６；２００５を参照されたい）。ＢＩＬＡＧ  ２００４指数は、９つ
の器官系領域（全身、皮膚粘膜、神経精神、筋骨格、心肺、胃腸、眼、腎臓、及び血液）
にわたる９７の臨床的兆候、症状、及び検査値を評価する。９７の症状を、前月（４週間
の）重症度に関して、また前検査からのあらゆる変化（新規、改善、安定、悪化、非存在
）に関して評価する。続いて各器官系カテゴリーの検査結果から９つの各領域に対して単
一のアルファベットスコア（Ａ〜Ｅ）を導く。表２にＢＩＬＡＧカテゴリーを示す。
【０３７５】
【表２】
2020073499.tif 000003
【０３７６】
ＣＬＥは、臨床的特徴並びに皮膚の病変、検査所見の異常、及び皮膚生検の組織構造の
変化の発現に応じて、急性（ＡＣＬＥ）、亜急性（ＳＣＬＥ）、慢性（ＣＣＬＥ）、又は
間欠性（ＩＣＬＥ）ＣＬＥに更に分類される。様々なＣＬＥ形態の分類及び臨床症状は、
Ｋｕｈｎ及びＬａｎｄｍａｎｎのＪ  Ａｕｔｉｏｍｍｕｎｉｔｙ  ４８〜４９：１４〜１
９，２０１４で考察されている。
【０３７７】
Ｉ型ＩＦＮの遺伝子シグネチャは、狼瘡の臨床的特徴及び血清学的特徴の両方と正に相
関することが報告されている（ＫａｒａｇｅｏｒｇａｓらのＪ  Ｂｉｏｍｅｄ  Ｂｉｏｔ
ｅｃｈｎｏｌ  ２７３９０７，２０１１、ＢａｅｃｈｌｅｒらのＰｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａ
ｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ  １００：２６１０〜２６１５，２００３、Ｂｅｎｎｅｔｔらの
Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ  １９７：７１１〜７２３，２００３、Ｄａｌｌ’ｅｒａらのＡｎｎ
Ｒｈｅｕｍ  Ｄｉｓ  ６４：１６９２〜１６９７，２００５、ＮｉｅｗｏｌｄらのＧｅ
ｎｅｓ  Ｉｍｍｕｎ  ８：４９２〜５０２，２００７）。そのクリアランス障害と関連し
た自己抗体の優勢によってＩＦＮ生成のフィードバックサイクルがもたらされ、Ｆｃ受容
体に依存する免疫複合体から形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）への内在化によって、ＩＦＮ
の増量、ひいてはＩＦＮシグネチャの確立がもたらされる。臨床試験では、ＩＦＮシグネ
チャを示す患者の大部分において、ＳＬＥ患者における抗ＩＦＮ−α抗体は、Ｉ型ＩＦＮ
シグネチャの部分的な低下、及び予備分析においてわずかな有効性を示した（Ｐｅｔｒｉ
らのＡｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  ６５，１０１１（Ａｐｒ，２
０１３）、Ｍｅｒｒｉｌｌ  ＪらのＡｎｎａｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｒｈｅｕｍａｔｉｃ  
ｄｉｓｅａｓｅｓ  ７０，３１４（２０１１）、ＫｅｎｎｅｄｙらのＴｈｅ  １０ｔｈ  
Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｏｎｇｒｅｓｓ  ｏｎ  ＳＬＥ，Ｂｕｅｎｏｓ  Ａｉｒ
ｅｓ，Ａｒｇｅｎｔｉｎａ  Ｏｒａｌ  Ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ  ５，０２２，（Ａｐ
ｒｉｌ  ２０ｔｈ，２０１３））。
【０３７８】
狼瘡管理における治療標準は、現行の承認済み臨床パターン、リウマチ学界（例えばＡ
ｍｅｒｉｃａｎ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ、Ｅｕｒｏｐｅａｎ
Ｌｅａｇｕｅ  Ａｇａｉｎｓｔ  Ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ）により作成された認可済み指
針書、及び治療を実践する医師の選択に基づく。狼瘡患者は、診断が下された後に適切な
管理を施してもなお長期に渡り疾患活動性を継続して有し、多くの場合、新たな器官系又
は特定の器官系の損傷を伴う。狼瘡の疾患活動性には、フレア（又は疾患活動性の寛解・
再発）、慢性活動性疾患、及び長期静止状態の３つのパターンがある。これらの疾患パタ
ーンは、体系的臨床的評価、定期的な実験室試験、疾患活動性の標準化指標、並びにこれ
らの評価と健康状態及び生活の質に対する患者自身の認識との統合を用いて特徴付けされ
る。患者のフレアの兆候及び症状が持続又は悪化すれば、医師は薬剤及び／又は用量の変
更が正当であることを見出し得る。狼瘡の制御に用いられる薬剤としては、（１）例えば
ナプロキセン（Ａｌｅｖｅ）、及びイブプロフェン（Ａｄｖｉｌ、Ｍｏｔｒｉｎ、他のも
の）などの市販のＮＳＡＩＤ、並びに処方により入手可能なより強力なＮＳＡＩＤを含む
ＮＳＡＩＤ、（２）例えばヒドロキシクロロキン（Ｐｌａｑｕｅｎｉｌ）などの抗マラリ
ア剤、（３）例えばＰｒｅｄｎｉｓｏｎｅ及び他の種類のコルチコステロイドなどのコル
チコステロイド、並びに（４）例えばシクロホスファミド（Ｃｙｔｏｘａｎ）、アザチオ
プリン（Ｉｍｕｒａｎ、Ａｚａｓａｎ）、ミコフェノール酸塩（Ｃｅｌｌｃｅｐｔ）、レ
フルノミド（Ａｒａｖａ）、及びメトトレキサート（Ｔｒｅｘａｌｌ）などの免疫抑制剤
が挙げられるが、こられに限定されない。
【０３７９】
本発明の抗体は、疾患関連ＩＦＮ調製物を用いて、インビトロの疾患関連細胞における
その有効性を試験してもよい。そのようなインビトロ試験は、例えば、全血中のＳＬＥ患
者の免疫複合体によって誘導されたＩＦＮ産生の阻害の評価、あるいは本明細書に記載さ
れる全血中のＩＦＮシグネチャを低下する抗体の能力の評価であり得る。糸球体腎炎を含
むヒト狼瘡のいくつかの特徴を有する時間依存性かつ雌バイアスの疾患を示すＮＺＢ／Ｎ
ＺＷ  Ｆ１マウスなどの狼瘡の動物モデルを更に用いてもよい。しかしながら、マウスは
ＩＦＮ−ωを産生しないため、本発明の抗体の有効性を評価するためのこれらのモデルと
しての利用はより制限される。
【０３８０】
いくつかの実施形態では、患者はＩ型インターフェロンシグネチャを示す。本明細書で
使用される「Ｉ型インターフェロンシグネチャ」又は「インターフェロンシグネチャ」は
、ＩＦＮ−Ｉによって誘導された遺伝子のサブセットの上方調節を意味する。３〜２７遺
伝子の範囲の様々なＩ型ＩＦＮシグネチャが既知である。これらのシグネチャは、例えば
、ＳＬＥの治療のため、かつＳＬＥ患者の層別化を目的としたＩ型ＩＦＮ阻害剤の標的結
合を評価するための薬力学的マーカーとして利用され得る。
【０３８１】
ＹａｏらのＡｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  ６０，１７８５（Ｊ
ｕｎ，２００９）で説明される２１の上方調節された（upreguated）遺伝子からなる例示
的なＩ型インターフェロンシグネチャを表３に示す。他の例示的なＩ型インターフェロン
シグネチャは、Ｔｃｈｅｒｅｐａｎｏｖａ，ＩらのＡｎｎａｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｒｈｅ
ｕｍａｔｉｃ  ｄｉｓｅａｓｅｓ  ７１（Ｓｕｐｐｌ３）（２０１２）、及びＲｉｃｈａ
ｒｄｓｏｎ，ＢらのＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  Ａ  Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ  Ｐ
ＣＲ  Ｍｅｔｈｏｄ  ｔｏ  Ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ  Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ  Ｓｉｇｎａｔ
ｕｒｅ  Ｍｅｔｒｉｃ  Ｓｔａｔｕｓ  ｉｎ  ＳＬＥ  Ｐａｔｉｅｎｔｓ：Ｄｉｓｔｒｉ
ｂｕｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ＆  Ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉ
ａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｔｗｏ  Ｌｕｐｕｓ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｔｒｉａｌｓ  ＡＣＲ／
ＡＲＨＰ  ２０１２  Ａｎｎｕａｌ  Ｍｅｅｔｉｎｇ  Ａｂｓｔｒａｃｔ  ６２０（２０
１２）で説明されている。
【０３８２】
いくつかの方法では、抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、二重特異性抗体である。
【０３８３】
いくつかの方法では、抗ＩＦＮ−α／ω二重特異性抗体は、ＢＬｙＳ、ＣＤ４０Ｌ、Ｉ
Ｌ−６、ＣＤ２７、ＢＤＣＡ２、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３、ＩＦＮ−αＤ、ＩＬ−１７、
又はＣＤ２０を中和する。
【０３８４】
【表３】
2020073499.tif 000004
【０３８５】
投与／医薬組成物
本発明は、本明細書で説明する本発明の抗ＩＦＮ−α／ω抗体を含む医薬組成物を提供
し、以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のいくつかの実施形態では、医薬的
に許容される担体を提供する。治療上の使用では、本発明の抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、医
薬的に許容される担体内の活性成分として、有効量の抗ＩＦＮ−α／ω抗体を含有する医
薬組成物として調製することができる。用語「担体」は、活性化合物と共に投与される希
釈剤、補助剤、賦形剤、又はビヒクルを指す。そのようなビヒクルは、水、及び落花生油
、大豆油、鉱物油、ゴマ油等の、石油、動物、植物、又は合成物起源のものを含む油等の
液体であってもよい。例えば、０．４％生理食塩水及び０．３％グリシンを用いることが
できる。これらの溶液は滅菌され、一般には粒子状物質を含まない。これらは、通常の周
知の滅菌技術（例えば、濾過）によって滅菌することができる。この組成物は、生理学的
状態に近づける場合に必要な、ｐＨ調整剤及び緩衝剤、安定剤、増粘剤、平滑剤並びに着
色剤等の医薬的に許容される補助物質を含有することができる。そのような医薬製剤中の
本発明の分子又は抗体の濃度は幅広く変化してもよく、即ち約０．５重量％未満、通常は
少なくとも約１重量％から最大で１５若しくは２０重量％、２５重量％、３０重量％、３
５重量％、４０重量％、４５重量％、又は５０重量％までであってもよく、また、選択さ
れる特定の投与方法に従って、主として必要とされる用量、液体の体積、粘度等に基づい
て選択される。好適なビヒクル及び製剤（他のヒトタンパク質、例えばヒト血清アルブミ
ンを含む）は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａ
ｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１st  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｔｒｏｙ，Ｄ．Ｂ．ｅ
ｄ．，Ｌｉｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ａｎｄ  Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄ
ｅｌｐｈｉａ，ＰＡ  ２００６，Ｐａｒｔ  ５，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｍａｎ
ｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ  ｐｐ  ６９１〜１０９２に記載され、特にｐｐ．９５８〜９８９
を参照されたい。
【０３８６】
本明細書で説明され、かつ以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のいくつか
の実施形態における本発明の方法における抗ＩＦＮ−α／ω抗体の投与方法は、例えば、
皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、又は皮下、肺、経粘膜（経口、経鼻、膣内、直腸）など
の非経口的投与、又は当該技術分野において周知の当業者に理解される他の手法などの任
意の好適な経路であってもよい。
【０３８７】
本明細書で説明され、かつ以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のいくつか
の実施形態における本発明の方法における抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、例えば静脈内（ｉ．
ｖ．）注射、又は筋肉内若しくは皮下若しくは腹腔内ボーラス注入などの任意の好適な経
路によって患者に投与してもよい。ｉ．ｖ．注射は、例えば１５、３０、６０、９０、１
２０、１８０、又は２４０分間、又は１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１
、又は１２時間にわたって与えられてもよい。
【０３８８】
狼瘡などの免疫媒介炎症性疾患又は自己免疫疾患を有する患者に与える用量は、治療さ
れる疾患を緩和する、又は少なくとも部分的に阻止するのに十分な量（「治療有効量」）
であり、場合によっては０．００５ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ（例えば約０．０５
ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇ、若しくは約０．１ｍｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇ、若し
くは約１ｍｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇ、若しくは約４ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ、約１６ｍ
ｇ／ｋｇ、又は約２４ｍｇ／ｋｇ、又は例えば約１、２、３、４、５、６、７、８、９、
若しくは１０ｍｇ／ｋｇ）であってもよいが、例えば約１５、１６、１７、１８、１９、
２０、２１、２２、２３、２４、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、又
は１００ｍｇ／ｋｇなどのように更に高くてもよい。
【０３８９】
例えば、５０、１００、２００、５００、若しくは１０００ｍｇの固定単位用量が与え
られてもよく、又はこの用量は、例えば５００、４００、３００、２５０、２００、若し
くは１００ｍｇ／ｍ2など、患者の表面積に基づいてもよい。狼瘡などの免疫媒介炎症性
疾患の治療には通常１〜８用量（例えば１、２、３、４、５、６、７、又は８用量）を投
与してもよいが、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、
２０用量、又はそれ以上の用量を投与してもよい。
【０３９０】
本発明の方法における、かつ以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のいくつ
かの実施形態における抗ＩＦＮ−α／ω抗体の投与は、１日、２日、３日、４日、５日、
６日、１週間、２週間、３週間、１ヶ月、５週間、６週間、７週間、２ヶ月、３ヶ月、４
ヶ月、５ヶ月、６ヶ月以上後に繰り返すことができる。長期にわたる投与の場合、治療過
程を繰り返すことも可能である。繰り返し投与は、同一用量であっても異なる用量であっ
てもよい。例えば、本発明の方法における抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、静脈内注射により、
１週間間隔で０．１ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、又は１６
ｍｇ／ｋｇを８週間投与し、続いて２週間毎に８ｍｇ／ｋｇ又は１６ｍｇ／ｋｇを更に１
６週間投与し、続いて４週間毎に８ｍｇ／ｋｇ又は１６ｍｇ／ｋｇを投与してもよい。
【０３９１】
抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、本発明及び以下に列記される番号付けされた実施形態の各々
のいくつかの実施形態における方法で、例えば６ヶ月以上の期間で週１回などの維持療法
によって投与してもよい。
【０３９２】
例えば、本発明及び以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のいくつかの実施
形態における方法における抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、治療開始後第１、２、３、４、５、
６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０
、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、
３４、３５、３６、３７、３８、３９、若しくは４０日目のうちの少なくとも１日に、若
しくは１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１
６、１７、１８、１９、若しくは２０週目のうちの少なくとも１週に、又はこれらの任意
の組み合わせで、単回投与、若しくは２４、１２、８、６、４、若しくは２時間毎の分割
投与、又はこれらの任意の組み合わせを用いて、１日に例えば０．５、０．９、１．０、
１．１、１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１
５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８
、２９、３０、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、又は１００ｍｇ／ｋｇ／日
などの約０．１〜１００ｍｇ／ｋｇの用量で提供してもよい。
【０３９３】
本発明及び以下に列記される番号付けされた実施形態の各々のいくつかの実施形態にお
ける方法における抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、狼瘡などの免疫媒介炎症性疾患若しくは自己
免疫疾患の発生リスクを低減させるために、自己免疫疾患の免疫媒介炎症性疾患の発症を
遅延させるために、かつ／又は、狼瘡などの免疫媒介炎症性疾患若しくは自己免疫疾患が
寛解中の再発リスクを低減させるために、予防的に投与することもできる。
【０３９４】
したがって、筋肉内注射用の本発明の医薬組成物は、１ｍＬの滅菌緩衝水、及び約１ｎ
ｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、例えば約５０ｎｇ〜約３０ｍｇ／ｋｇ、又はより好ましくは約
５ｍｇ〜約２５ｍｇ／ｋｇの本発明の抗ＩＦＮ−α／ω抗体を含むように調製することが
できる。
【０３９５】
例えば、本明細書で説明される本発明の方法、及び以下に列記される番号付けされた実
施形態の各々のいくつかの実施形態における静脈内注射用の抗ＩＦＮ−α／ω抗体を含む
静脈内注射用医薬組成物は、８０ｋｇの患者に投与するためには、最大で約２００ｍｌの
滅菌リンガー液及び約８ｍｇ〜約２４００ｍｇ、約４００ｍｇ〜約１６００ｍｇ、又は約
４００ｍｇ〜約８００ｍｇの抗ＩＮＦ−α／ω抗体を含むように作製してもよい。非経口
投与可能な組成物を調製する方法は周知であり、例えば、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐ
ｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ」（１５ｔｈ  ｅｄ．，Ｍａｃｋ  Ｐｕｂ
ｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）に、より詳細に記載されている
。
【０３９６】
免疫媒介炎症性疾患又は自己免疫疾患の治療に有効な本発明のＩＦＮ−α／ω抗体は、
標準的な研究技術によって決定することができる。例えば、インビトロアッセイを用いて
最適な用量範囲の特定に役立てることができる。任意に、ＳＬＥを含む狼瘡などの免疫媒
介炎症性疾患又は自己免疫疾患の治療において有効であり得る本発明のＩＦＮ−α／ω抗
体は、当該技術分野で周知の適切な動物モデルにＩＦＮ−α／ω抗体を投与することによ
って決定することができる。特定の有効用量の選択は、当業者であればいくつかの因子の
考慮に基づいて（例えば臨床試験によって）決定することができる。そのような因子には
、治療又は予防しようとする疾患、疾患症状、患者の体重、患者の免疫状態、及び当業者
に既知の他の因子が含まれる。製剤に用いられる正確な用量は、投与経路、及び疾患の重
篤度にも依存し、医師の判断及び各患者の状況に基づいて決定されなければならない。有
効量は、インビトロ又は動物モデル試験系から導出される用量反応曲線から推定すること
ができる。本発明の抗体の有効性及び有効量について、本明細書に記載したモデルのうち
のいずれかを用いて試験することができる。
【０３９７】
本明細書で説明される本発明の方法、及び以下に列記される番号付けされた実施形態の
各々のいくつかの実施形態における抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、貯蔵のために凍結乾燥した
後に、使用前に好適な担体中で再構成することができる。この技術は、従来のタンパク質
調製物に関して有効であることが示されており、既知の凍結乾燥法及び還元技術を用いる
ことができる。
【０３９８】
本明細書で説明される本発明の方法、及び以下に列記される番号付けされた実施形態の
各々のいくつかの実施形態における抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、第２の治療薬と併せて、同
時に、逐次に、又は別個に投与することができる。
【０３９９】
第２の治療薬は、コルチコステロイド、抗マラリア剤、免疫抑制剤、細胞毒性剤、又は
Ｂ細胞調節剤であってもよい。
【０４００】
いくつかの実施形態では、第２の治療薬はプレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレ
ドニゾロン、デフラザコート（deflazcort）、ヒドロキシクロロキン、アザチオプリン、
メトトレキサート、シクロホスファミド、ミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）、ミコ
フェノール酸ナトリウム、シクロスポリン、レフルノミド、タクロリムス、リツキシマブ
（商標）、又はベリムマブ（商標）である。
【０４０１】
発明の更なる実施形態
以下に、本明細書の他の箇所に記載した開示に従った本発明の更なる特定の実施形態を
列挙する。本明細書に開示される本発明に関連するものとして説明される上記の本発明の
実施形態の特徴は、これらの番号付けされた更なる実施形態の各々及び全てにも関する。
【０４０２】
１）ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω）及び少なくとも３、４、５、６、７、
８、９、１０、又は１１のヒトインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）サブタイプと結
合し、それらの生物活性を中和する、単離されたモノクローナル抗体。
２）前記ヒトＩＦＮ−ω及び前記ヒトＩＦＮ−αサブタイプの前記生物活性が、シグナ
ル伝達性転写因子２（ＳＴＡＴ２）、インターフェロン調節因子９（ＩＲＦ９）、及びＳ
ＥＡＰを安定に発現するＨＥＫ２９３細胞におけるインターフェロン誘導性ＩＳＧ５４プ
ロモーター下でのヒトＩＦＮ−ω又はヒトＩＦＮ−αサブタイプに誘導された分泌胚アル
カリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）の発現である、実施形態１に記載の抗体。
３）前記抗体が、少なくとも約１×１０-9Ｍ以下、約１×１０-10以下、約５×１０-11
以下、又は約１×１０-11Ｍ以下のＩＣ50でヒトＩＦＮ−ωの生物活性を中和する、実施
形態１又は２に記載の抗体。
４）前記抗体が、少なくとも約１×１０-10Ｍ以下のＩＣ50値で前記ヒトＩＦＮ−ωの
前記生物活性を中和する、実施形態１〜３のいずれか一項に記載の抗体。
５）前記抗体が、約１×１０-10Ｍ〜約６×１０-12ＭのＩＣ50値で前記ヒトＩＦＮ−ω
の前記活性を中和する、実施形態１〜４のいずれか一項に記載の抗体。
６）前記抗体が、少なくとも約１×１０-10Ｍ以下のＩＣ50値で少なくとも３、４、５
、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトＩＦＮ−αサブタイプの前記活性を中和する、
実施形態１〜５のいずれか一項に記載の抗体。
７）前記ＩＦＮ−αサブタイプが、ＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、Ｉ
ＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−
αＫ、ＩＦＮ−αＷＡ、及びＩＦＮ−α４ａからなる群から選択される、実施形態６に記
載の抗体。
８）前記抗体が、それぞれ配列番号１０９、１１４、及び１２１の重鎖相補性決定領域
（ＨＣＤＲ）１（ＨＣＤＲ１）、２（ＨＣＤＲ２）、及び３（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配
列、並びに配列番号１１８、１１９、及び１２０の軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１（
ＬＣＤＲ１）、２（ＬＣＤＲ２）、及び３（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む、実施形
態７に記載の抗体。
９）前記抗体が、ＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦ
Ｎ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＫ、ＩＦＮ−α
ＷＡ、及びＩＦＮ−α４ａからなる群から選択される少なくとも６つのヒトＩＦＮ−αサ
ブタイプを中和する、実施形態１〜５のいずれか一項に記載の抗体。
１０）前記抗体が、それぞれ配列番号１０９、１１４、１２１、１５９、１１９、及び
１６０のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ
３のアミノ酸配列を含む、実施形態９に記載の抗体。
１１）前記抗体が、ＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、Ｉ
ＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＫ、ＩＦＮ−
αＷＡ、及びＩＦＮ−α４ａからなる群から選択される少なくとも１０のヒトＩＦＮ−α
サブタイプを中和する、実施形態１〜５のいずれか一項に記載の抗体。
１２）前記抗体が、少なくともアミノ酸残基Ｆ２７、Ｌ３０、及びＲ３３において配列
番号１のヒトＩＦＮ−ωと結合する、実施形態１１に記載の抗体。
１３）前記抗体が、それぞれ配列番号１０９、１１４、１２１、１６１、１１９、及び
１６２のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ
３のアミノ酸配列を含む、実施形態１〜５のいずれか一項に記載の抗体。
１４）前記抗体が、少なくとも前記ヒトＩＦＮ−αサブタイプのＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ
−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＪ
１、及びＩＦＮ−α４ａを中和する、実施形態１１〜１３のいずれか一項に記載の抗体。
１５）前記抗体が、ＩＦＮ−αＩ、ＩＦＮ−αＫ、又はＩＦＮ−αＷＡを更に中和する
、実施形態１４に記載の抗体。
１６）前記抗体が、
ａ）２５０Ｕ／ｍＬのインターフェロンによって誘導された全血中での白血球インタ
ーフェロン誘導性ＩＰ−１０放出を、１０μｇ／ｍｌの抗体の存在下で約５０％以上阻害
するか、又は
ｂ）全血中の全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）免疫複合体によって誘導されたＩＰ−１０
の放出を、１０μｇ／ｍｌの抗体の存在下で約５０％以上阻害する、実施形態１〜１５の
いずれか一項に記載の抗体。
１７）前記抗体が、配列番号２８と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４
％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一の重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸
配列、及び配列番号１５０と少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５
％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一の軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列を含
む、実施形態１〜１６のいずれか一項に記載の抗体。
１８）
ａ）配列番号１０９のＨＣＤＲ１のアミノ酸配列、
ｂ）配列番号１１１、１１２、又は１１３のＨＣＤＲ２のアミノ酸配列、
ｃ）配列番号１１５又は１１６のＨＣＤＲ３のアミノ酸配列、
ｄ）配列番号７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６
、８７、８８、８９、９０、又は９１のＬＣＤＲ１のアミノ酸配列、
ｅ）配列番号９３、９４、又は９５のＬＣＤＲ２のアミノ酸配列、及び
ｆ）配列番号９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、
１０５、１０６、又は１０７のＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む、実施形態１〜１７のい
ずれか一項に記載の抗体。
１９）配列番号、
ａ）それぞれ１０９、１１３、１１６、７７、９３、及び１０４、
ｂ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８５、９３、及び９６、
ｃ）それぞれ１０９、１１３、１１５、７９、９５、及び１０７、
ｄ）それぞれ１０９、１１３、１１６、７６、９３、及び１０３、
ｅ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８５、９３、及び９６、
ｆ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８９、９５、及び１００、
ｇ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８６、９３、及び１０５、
ｈ）それぞれ１０９、１１３、１１５、７６、９３、及び１０３、
ｉ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８０、９３、及び９７、
ｊ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８４、９３、及び９７、
ｋ）それぞれ１０９、１１３、１１６、９０、９３、及び９７、
ｌ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８８、９３、及び１０２、
ｍ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８７、９３、及び１０５、
ｎ）それぞれ１０９、１１３、１１６、９１、９３、及び１０６、
ｏ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８０、９３、及び９７、
ｐ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８３、９３、及び１０１、
ｑ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８２、９４、及び９８、
ｒ）それぞれ１０９、１１３、１１５、７８、９５、及び１００、
ｓ）それぞれ１０９、１１１、１１６、８１、９３、及び１０６、
ｔ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８２、９４、及び９９、
ｕ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８１、９３、及び１０６、
ｖ）それぞれ１０９、１１２、１１６、８１、９３、及び１０６、又は
ｗ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８１、９３、及び１０６のＨＣＤＲ１、ＨＣ
ＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３の配列を含む、実施形態
１８に記載の抗体。
２０）前記抗体が、ヒト化されている又はヒトである、実施形態１〜１９のいずれか一
項に記載の抗体。
２１）前記ヒト抗体重鎖可変領域フレームワークがヒト生殖系列遺伝子ＩＧＨＶ５−５
１（配列番号１５５）由来である、実施形態２０に記載の抗体。
２２）前記ヒト抗体軽鎖可変領域フレームワークがヒト生殖系列遺伝子ＩＧＫＶ１Ｄ−
３９（配列番号１５６）由来である、実施形態２１に記載の抗体。
２３）前記抗体が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４サブタイプのもので
ある、実施形態１〜２２のいずれか一項に記載の抗体。
２４）前記抗体がＦｃ領域内に少なくとも１つの置換を有する、実施形態２３に記載の
抗体。
２５）前記置換が、置換Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ、Ｖ２３４Ａ／Ｇ２３７
Ａ／Ｐ２３８Ｓ／Ｈ２８Ａ／Ｖ３０９Ｌ／Ａ３３０Ｓ／Ｐ３３１Ｓ又はＰ２３８Ｓ／Ｌ２
３４Ａ／Ｌ２３５Ａを含み、残基の番号付けがＥＵ番号付けに準ずる、実施形態２４に記
載の抗体。
２６）重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、
ａ）ＶＨが配列番号２８、３１、１５７、又は１５８のアミノ酸配列を含む、実施形
態１〜２６のいずれか一項に記載の抗体。
２７）前記ＶＬが配列番号３５、３９、４０、４２、４６、５２、５３、５４、５７、
６１、６２、６８、７１、７３、７５、１３５、又は１５０のアミノ酸配列を含む、実施
形態２６に記載の抗体。
２８）配列番号、
ａ）それぞれ２８及び４０、
ｂ）それぞれ２８及び３９、
ｃ）それぞれ３１及び６２、
ｄ）それぞれ２８及び５４、
ｅ）それぞれ３１及び３９、
ｆ）それぞれ３１及び６８、
ｇ）それぞれ２８及び４２、
ｈ）それぞれ３１及び５４、
ｉ）それぞれ２８及び５３、
ｊ）それぞれ２８及び７３、
ｋ）それぞれ２８及び７５、
ｌ）それぞれ２８及び５２、
ｍ）それぞれ２８及び３５、
ｎ）それぞれ２８及び１３５、
ｏ）それぞれ３１及び５３、
ｐ）それぞれ２８及び４６、
ｑ）それぞれ２８及び６１、
ｒ）それぞれ３１及び５７、
ｓ）それぞれ１５７及び７１、
ｔ）それぞれ２８及び１５０、
ｕ）それぞれ３１及び７１、
ｖ）それぞれ１５８及び７１、又は
ｗ）それぞれ２８及び７１、の前記ＶＨ及び前記ＶＬを含む、実施形態２７に記載の
抗体。
２９）前記抗体が二重特異性である、実施形態１〜２８のいずれか一項に記載の抗体。
３０）前記抗体が、ＢＬｙＳ、ＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−６、ＣＤ２７、ＢＤＣＡ２、ＩＬ−
１２、ＩＬ−２３、ＩＦＮ−αＤ、ＩＬ−１７、ＣＤ２０、ＩＬ−１０、ＣＤ２２、ＩＬ
−２１、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳＬ、又はＩＦＮ−γと結合する、実施形態２９に記載の抗体
。
３１）実施形態１〜３０のいずれか一項に記載の抗体と、医薬的に許容される担体と、
を含む、医薬組成物。
３２）前記抗体ＶＨ若しくはＶＬ、又は実施形態１〜２８のいずれか一項に記載の抗体
ＶＨ及びＶＬをコードするポリヌクレオチド。
３３）実施形態３２に記載のポリヌクレオチドを含むベクター。
３４）実施形態３３に記載のベクターを含む宿主細胞。
３５）実施形態１９に記載の抗体の生成方法であって、前記抗体が発現する条件下で実
施形態３３に記載の宿主細胞を培養することと、前記宿主細胞によって生成された抗体を
回収することとを含む、方法。
３６）免疫媒介炎症性疾患又は自己免疫疾患の治療に使用するための、実施形態１〜３
０のいずれか一項に記載の抗体。
３７）
ａ）前記免疫媒介炎症性疾患又は前記自己免疫疾患であって、任意選択的に狼瘡、乾
癬、免疫性血小板減少症（ＩＴＰ）、エカルディ−グチエール症候群（ＡＧＳ）、全身性
硬化症、シェーグレン症候群、筋炎、分類不能型免疫不全症（ＣＶＩＤ）、自己免疫性甲
状腺疾患、Ｉ型糖尿病、関節リウマチ、移植片拒絶反応、又は移植片対宿主病（ＧＶＨＤ
）である、前記免疫媒介炎症性疾患又は前記自己免疫疾患、
ｂ）慢性ウイルス感染症であって、任意にＨＩＶ又はＣ型肝炎感染症である、慢性ウ
イルス感染症に使用するための、実施形態３６に記載の抗体。
３８）狼瘡の治療に使用するための、実施形態１〜３０のいずれか一項に記載の抗体。
３９）狼瘡が全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）又は皮膚紅斑性狼瘡（ＣＬＥ）である、狼瘡
に使用するための、実施形態３８に記載の抗体。
４０）治療される患者が、
ａ）狼瘡腎炎を有するか、又は
ｂ）Ｉ型インターフェロンシグネチャを示す、免疫媒介炎症性疾患又は狼瘡の治療に
使用するための、実施形態１〜３０のいずれか一項に記載の抗体。
４１）第２の治療薬と組み合わせて実施形態３７〜４０に従って使用するための、実施
形態１〜３０のいずれか一項に記載の抗体。
４２）前記第２の治療薬が、
ａ）ＢＬｙＳ、ＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−６、ＣＤ２７、ＢＤＣＡ２、ＩＬ−１２、ＩＬ−
２３、ＩＦＮ−αＤ、ＩＬ−１７、ＣＤ２０、ＩＬ−１０、ＣＤ２２、ＩＬ−２１、ＩＣ
ＯＳ、ＩＣＯＳＬ、若しくはＩＦＮ−γと結合する抗体、
ｂ）コルチコステロイド、抗マラリア剤、免疫抑制剤、細胞毒性剤、若しくはＢ細胞
調節剤、又は
ｃ）プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デフラザコート（defl
azcort）、ヒドロキシクロロキン、アザチオプリン、メトトレキサート、シクロホスファ
ミド、ミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）、ミコフェノール酸ナトリウム、シクロス
ポリン、レフルノミド、タクロリムス、リツキシマブ（商標）、又はベリムマブ（商標）
である、実施形態４１に記載の抗体。
４３）前記抗体がＩＦＮ−αＤ、ＩＦＮ−α１、及び／又はＩＦＮ−βを中和しない、
実施形態１〜３０のいずれか一項に記載の抗体。
【０４０３】
次に、本発明を以下の特定の非限定的な実施例を参照して説明する。
【０４０４】
材料及び方法
ＩＳＲＥレポーター遺伝子アッセイ（「ＩＳＲＥレポーター遺伝子アッセイ」）
完全に活性なＩ型ＩＦＮシグナル伝達経路を発現する（ＳＴＡＴ２及びＩＲＦ９を安定
に発現する）ように操作され、ＩＦＮ−α／β誘導性ＩＳＧ５４プロモーターの制御下で
、ＳＥＡＰレポーター遺伝子でトランスフェクトされたＨＥＫ−Ｂｌｕｅ（商標）ＩＦＮ
−α／β細胞（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ（Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用した。これらの
細胞を、１０％ウシ胎児血清、１００ｕｇ／ｍＬのブラストサイジン、及び３０ｕｇ／ｍ
ＬのゼオシンでＤｕｌｂｅｃｃｏの改変イーグル培地中のコラーゲンＩ型コーティングさ
れたＴ１５０フラスコにて、３７℃、５％ＣＯ2で増殖させた。細胞を採取し、５０，０
００細胞／ｍＬの３８４ウェルプレートに、５０μＬ／ウェルでプレーティングした。プ
レーティングした細胞を３７℃、５％ＣＯ2で２４時間インキュベートした。試験したイ
ンターフェロン試料を調製し、使用済みのＨＥＫ  ＩＳＲＥ無血清培地中で希釈し、ＩＦ
Ｎ試料５０μＬを各ウェルに添加した。プレーティングした細胞を３７℃、５％ＣＯ2で
２０時間インキュベートした。室温で２０分間インキュベートした後、６０μＬ／ウェル
のＱＵＡＮＴＩ−Ｂｌｕｅ（登録商標）を濾過水中に再縣濁した２０μＬのプレーティン
グした細胞上清から、アルカリホスファターゼが検出された。光密度をＢｉｏｔｅｋ  Ｓ
ｙｎｅｒｇｙプレートリーダー上で、６５０ｎｍで読み取った。
【０４０５】
いくつかのＩＳＲＥレポーター遺伝子アッセイを、以下のように９６ウェルプレートで
行った。ＨＥＫ−Ｂｌｕｅ（登録商標）ＩＦＮ−α／β細胞（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ（Ｓａ
ｎ  Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を、無選別培地（ＤＭＥＭ＋Ｇｌｕｔａｍａｘ／１０％（ＦＢＳ
，Ｇｉｂｃｏ））１００μＬ中の５０，０００細胞／ウェルでプレーティングし、３７℃
で終夜インキュベートさせた。翌日、Ｉ型ＩＦＮ刺激因子を、別の９６ウェルＵ底トラン
スファープレート（ＢＤ  Ｆａｌｃｏｎ）において、Ｉ型ＩＦＮ阻害剤あり又はなしで調
製して（即ち組み換えインターフェロン、白血球ＩＦＮ、ＩＣによって誘導されたＩＦＮ
調製物、血清など）、３７℃で１０分間予熱した。インキュベータから細胞プレートを取
り出し、培地を取り除き、９６ウェルＵ底トランスファープレートにおいて調製した１０
０μＬの適切な処置物と交換した。細胞を再び３７℃で２４時間置いた。翌日、４０μＬ
の上清を、１６０μＬのＱＵＡＮＴＩ−Ｂｌｕｅ（登録商標）ＳＥＡＰ基材（Ｉｎｖｉｖ
ｏｇｅｎ）を含む９６ウェル平底プレート（ＢＤ  Ｆａｌｃｏｎ）に移した。プレートを
約１５分間発色させ、６５０ｎｍの吸光度で分光計を使用して読み取った。
【実施例】
【０４０６】
実施例１．ＳＬＥ患者の血中に可溶性ＩＦＮ−ωが存在し、かつ活性である
ＶｅｒｉＰｌｅｘヒトインターフェロン多重ＥＬＩＳＡキット（ＰＢＬ  Ａｓｓａｙ  
Ｓｃｉｅｎｃｅ、カタログ番号５１５００−１）を用いた多重ＥＬＩＳＡを用いて、製造
業者の指示に従い、中国南京市出身の２つの独立したＳＬＥコーホートの血漿、及び米国
の白人コーホートから収集した血清を可溶性ＩＦＮ−ω及びＩＦＮ−αに関して分析した
。多重ＥＬＩＳＡは多くのＩＦＮ−αサブタイプを検出するが、全てを検出せず、全ＩＦ
Ｎ−α濃度対ＩＦＮ−ωの量的な違いは正確に反映しない場合がある。
【０４０７】
ＩＦＮ−αに加えてＩＦＮ−ωは、中国南京市出身のコーホート（図１Ａ）、及び白人
コーホート（図１Ｂ）の各コーホートの両方からの特定の患者において上昇したことが判
明した。図１Ａは、上昇したＩＦＮ−α又はＩＦＮ−ωを有することが判明した患者のみ
の結果を示す。白人群の血清試料を、ＩＳＲＥレポーター遺伝子アッセイを用いてＩＦＮ
−Ｉ活性に関して更にスクリーニングした。ＥＬＩＳＡによって最高量の検出可能ＩＦＮ
タンパク質を示したドナーは、レポーター遺伝子アッセイにおいてＩＳＲＥ誘導の最高濃
度を示した（図１Ｃ）。
【０４０８】
実施例２．ＩＦＮ−ω及びＩＦＮ−αの複合遮断は、ＩＦＮ−αの遮断のみと比較して
より優れたＳＬＥ免疫複合体によって誘導されたＩＦＮの阻害をもたらす
ＳＬＥ免疫複合体によって誘導されたＩＦＮ（ＳＬＥに存在するＩ型ＩＦＮ環境をより
良好に表わす刺激である）を減少させるためのＩＦＮ−αのみの阻害、又はＩＦＮ−ω及
びＩＦＮ−αの両方の阻害の効果を評価した。ヒトＰＢＭＣを２名の個別のＳＬＥドナー
から調製した免疫複合体で刺激することにより、ＳＬＥ免疫複合体によって誘導されたＩ
ＦＮを調製し、この馴化培地をＩＦＮ阻害剤及び対照の存在下のＩ型ＩＦＮ誘導性レポー
ター遺伝子アッセイ（ＩＳＲＥレポーター遺伝子アッセイ）で利用した。
【０４０９】
免疫複合体の調製
タンパク質Ａ／Ｇカラム（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号８９９
５８）を使用し、製造業者の指示に従い、ＳＬＥドナー２３２及び２９３の血漿（ＩＦＮ
活性に関して予備スクリーニングした）、並びに健常対照の血漿（Ａｓｔａｒｔｅ  Ｂｉ
ｏｌｏｇｉｃｓ）をＩｇＧ精製に利用した。プールされた健常ドナーの調製物からの血清
（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号３４００５１００）を、健常対照
のＩｇＧの精製に用いた。免疫複合体形成のための溶解物を生成するために、ＨＥＫ２９
３Ｔ細胞（ＡＴＣＣ、カタログ番号ＣＲＬ−３２１６）を１×ＤＰＢＳ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅ
ｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号１４１９０−２５０）中で５×１０7細胞／ｍｌに
濃縮した。溶解物を生成するために、１０分間の凍結解凍を４サイクル実施し、３０分間
の初期凍結を除いては、−８０℃で凍結し、３７℃で解凍した。４回目の凍結解凍後、細
胞残屑を４００×ｇで５分間の遠心分離によって除去した。精製ＩｇＧ調製物及び細胞溶
解物を、続いてＢＣＡタンパク質アッセイ（Ｐｉｅｒｃｅ、カタログ番号２３２２５）を
用いて、製造業者の指示に従い定量した。免疫複合体で刺激した馴化培地調製物を生成す
るため、Ｃｅｌｌ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ管（ＢＤ  Ｖａｃｕｔａｉｎｅｒ、カタログ
番号３６２７５３）を用いて健常ドナーのヘパリンナトリウム化血液からのＰＢＭＣを単
離し、ＲＰＭＩ  １６４０（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号１１８
７５−０８５）＋１０％  ＦＢＳ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号
１６１４０−０６３）培地で２×１０6細胞／ｍｌに再懸濁して、２ｍｌ／ウェルの６ウ
ェルプレートにプレーティングした。ＳＬＥからの精製ＩｇＧ及び健常血清を細胞溶解物
と各５００ｕｇ／ｍｌの同等の濃度でプレミックスし、ＲＴで３０分間インキュベートし
、続いて２ｍｌ／ウェルでＰＢＭＣに添加し、３７℃で２４時間インキュベートした。プ
レートを１０００ｒｐｍで５分間遠心分離にかけ、ＰＢＭＣ免疫複合体刺激馴化培地を回
収し、アリコートし、将来の使用のために−８０℃で保存した。
【０４１０】
活性アッセイ
ＨＥＫ−Ｂｌｕｅ  ＩＦＮ−α／β細胞（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）を９６ウェル平底プレ
ート中の２００μｌ  ＤＭＥＭ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）＋１０％ウシ胎
児血清（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）に５０，０００細胞／ウェルでプレーテ
ィングし、３７℃で５時間インキュベートして、細胞をプレートに付着させた。５時間後
、ＨＥＫ  Ｂｌｕｅ細胞をインキュベータから取り出し、上清を、ドナー２３２  ＰＢＭ
Ｃ馴化培地の１：６希釈物、又はドナー２９３馴化培地１：８１希釈物と交換し（希釈剤
としてＨＥＫ  Ｂｌｕｅ細胞培養培地を用いて）、０．４、２、１０、５０、及び１００
μｇ／ｍｌの広域の抗ＩＦＮ−αアンタゴニストｍＡｂ（Ｍ２４、ヒトＩｇＧ１）に加え
て固定濃度２０μｇ／ｍｌのアイソタイプ対照（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、ネズミＩｇＧ
１）、１００μｇ／ｍｌの抗ＩＦＮ−αと組み合わせて２０μｇ／ｍｌの抗ＩＦＮ−ωア
ンタゴニストｍＡｂ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、クローンＯＭＧ５、ネズミＩｇＧ１）、
又は１００μｇ／ｍｌのヒトＩｇＧ１アイソタイプ対照（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ  Ｂｉｏｔｅ
ｃｈ）と組み合わせた２０μｇ／ｍｌのネズミＩｇＧ１アイソタイプ対照、の処置を加え
たか、又は加えなかった。細胞を３７℃で終夜インキュベートした。翌日、各ウェルから
４０μｌの細胞上清を取り除き、別個の９６ウェル平底プレート中の１６０μｌのＱｕａ
ｎｔｉ−Ｂｌｕｅアルカリホスファターゼ基質（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）に添加した。上清
を基質と１０分間反応させ、プレートを６５０ｎｍ波長の分光光度計で読み取った。Ｇｒ
ａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍで光学濃度をプロットした。
【０４１１】
ＩＦＮ−αアンタゴニストの存在下でのＩＦＮ−ωの更なる遮断は、ＩＦＮ−αのみの
遮断と比較してＳＬＥ関連ＩＦＮ−Ｉ活性の強化された抑制をもたらした（図２）。予測
通り、健常ドナーからの免疫複合体で刺激されたＰＢＭＣからの馴化培地（ＨＶ  ＩＣ馴
化培地）は、ＳＬＥ患者の免疫複合体のインターフェロン産生能（interferogenic poten
tial）を示す検出可能なＩＳＲＥ活性を有さなかった。
【０４１２】
実施例３．ＩＦＮ−ωの免疫調節効果は、ＩＦＮ−αのそれと同様である
ケモカイン分泌、ＩＦＮ遺伝子シグネチャ、樹状細胞の成熟及び活性化、並びにＢ細胞
の成熟を誘導するＩＦＮ−ωの能力を、ＩＦＮ−αと比較して評価した。これらの研究で
は、最も広く用いられる治療的ＩＦＮ−α分子であるＩＦＮ−αＡ及びＩＦＮ−α２を、
代表的なＩＦＮ−αサブタイプ対照として主に用いた。いくつかのアッセイでは、ＩＦＮ
−αＢ２を用いた。
【０４１３】
ケモカイン分泌及びＩＦＮ遺伝子シグネチャの誘導
６名の健常ヒトドナーから単離したＰＢＭＣをＩＦＮ−αＡ（ＩＦＮ−α２）又はＩＦ
Ｎ−ωで刺激し、上清及びペレット剤を回収して分析した。処置後３、６、及び２４時間
。２５のサイトカインのパネル（Ｌ−１β、ＩＬ−１ＲＡ、ＩＬ−２、ＩＬ−２Ｒ、ＩＬ
−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３
、ＩＬ−１５、ＩＬ−１７、ＴＮＦ−α、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−γ、ＧＭ−ＣＳＦ、ＭＩ
Ｐ−１α、ＭＩＰ−１β、ＩＰ−１０、ＭＩＧ、Ｅｏｔａｘｉｎ、ＲＡＮＴＥＳ、及びＭ
ＣＰ−１）を、Ｌｕｍｉｎｅｘイムノアッセイを用いて上清から測定した。ＩＦＮ−ω及
びＩＦＮ−α２はいずれも検出可能なＩＰ−１０、ＭＣＰ−１、ＩＬ−１ＲＡ、ＩＬ−６
、ＭＩＰ−１α、及びＭＩＰ−１βのレベルを高めた。図３は、ＩＦＮ−ω及びＩＦＮ−
α２によるＩＰ−１０の誘導を示す。ＩＬ−８の分泌は、これらの試験における両方の処
置によって減少された。ＩＦＮ−α又はＩＦＮ−ω処置によってＩＬ−２Ｒ、ＩＬ−１２
、及びＲＡＮＴＥＳのレベルは変更されなかった（ＲＡＮＴＥＳのみが上昇した１ドナー
の例外を除く）。サイトカインパネルの他の全ての検体は、ＩＦＮ−α又はＩＦＮ−ω処
置に関連して変化することはなかった、又は検出限界を下回っていた。
【０４１４】
回収したペレットをＲＮＡのために処理して２１遺伝子ＩＦＮパネルシグネチャ（21-g
ene IFN panel signature）を用いてマイクロアレイによって評価し、ＩＦＮ−ω及びＩ
ＦＮ−αによって誘導された発現における可能な類似及び／又は差異を評価した。ＩＦＮ
−ωで処置したヒトＰＢＭＣは、ＩＦＮ−αＡで処置した細胞と比較して、ほぼ（neary
）区別不能な定性的及び動的遺伝子発現応答を示した。未処置の対照に対してＩＦＮ−α
Ａ処置によって調節された遺伝子の９２．５％を、３時間時点でＩＦＮ−ω処置で更に調
節した。処置後６時間及び２４時間時点で、ＩＦＮ−α処置によって調節された遺伝子の
９７．８３％及び９９．２５％を、それぞれＩＦＮ−ωによっても調節した（データは示
さず）。
【０４１５】
要約すれば、６名の個別の健常ヒトドナーから得たＰＢＭＣ調製物間のＩＦＮ−α及び
ＩＦＮ−ωによって誘導された区別不可能な定性サイトカイン放出及び遺伝子発現プロフ
ァイルは、これらは同様の免疫調節効果を付与し得ることを示す。
【０４１６】
ＩＦＮ−ωは、ＩＦＮ−ω遮断抗体によって阻害される樹状細胞の分化を誘導する。
【０４１７】
単球からＤＣへの分化及び機能性を誘導するＩＦＮ−ω及びＩＦＮ−αの能力を評価し
た。
【０４１８】
５０μｇ／ｍｌの抗ＩＦＮ−α又は抗ＩＦＮ−ωの存在下又は不在下で、ＧＭ−ＣＳＦ
のみの、又はＩＦＮ−α又はＩＦＮ−ωを伴った存在下で、標準的な方法を用いて３日間
、精製単球をＤＣに分化した。細胞を採取し、８色ＦＡＣＳによって表面マーカーの発現
に関して分析した。ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−ωは、特徴的なＤＣ表面マーカー発現ＣＤ８
３、及びＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ４０、ＣＤ１１ｃを誘導し、発現又は単球マーカーＣ
Ｄ１４を低減した。培養の開始時に抗ＩＦＮ−α又は抗ＩＦＮ−ωのいずれかを濃度５０
μｇ／ｍｌで添加することによりＤＣの分化が部分的に阻害されたが、アイソタイプ抗体
には何の効果もなかった（データ示さず）。
【０４１９】
混合リンパ球反応（ＭＬＲ）を用いて分化したＤＣの機能性を実証した。分化したＤＣ
を採取し、洗浄し、新鮮培地で再懸濁し、精製したＣＤ４＋Ｔ細胞を用いてＤＣ：ＣＤ４
＋Ｔ細胞比率１：１０、１：２０、及び１：１００で培養した。６日目に上清を回収して
、２６サイトカイン／ケモカイン用の多重ビーズアッセイを用いて、分泌サイトカインに
関して分析した。ＩＦＮ−α又はＩＦＮ−ωのいずれかの存在下で分化されたＤＣは、Ｔ
細胞特異性サイトカインＩＦＮ−γ及びＩＬ−１７の分泌によって示されるように、ＣＤ
４＋細胞を活性化した。抗ＩＦＮ−α又は抗ＩＦＮ−ω抗体のいずれかの存在下で分化さ
れたＤＣは、ＣＤ４＋Ｔ細胞の活性化を誘導しなかった。図４Ａは、抗ＩＦＮ−α又は抗
ＩＦＮ−ω抗体の存在下で分化されたＤＣによって活性化されたＣＤ４＋細胞から誘導さ
れたＩＦＮ−γ分泌物が欠如していることを示す。図４Ｂは、抗ＩＦＮ−α又は抗ＩＦＮ
−ω抗体の存在下で分化されたＤＣによって活性化されたＣＤ４＋細胞から誘導されたＩ
Ｌ−１７分泌物が欠如していることを示す。ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−ωは、ＩＬ−４、Ｉ
Ｌ−５、ＩＬ−１２ｐ４０、及びＩＬ−１３（データ示さず）の分泌も誘導した。全ての
培養条件はＧＭ−ＣＳＦを含んでいた。データは２つの研究を表す。エラーバーはＬｕｍ
ｉｎｅｘ３連のＳＤを示す。図に示す実験では、データは、１：２０のＤＣ：ＣＤ４  Ｔ
細胞比が用いられたことを示した。
【０４２０】
ＩＦＮ−ωは、Ｔ細胞に依存しないＢ細胞の活性化を誘導する。
Ｂ細胞は、病原性自己抗体及びサイトカインの生成を介して、またＴ細胞に抗原を提示
することにより、狼瘡病原に決定的に重要な役割を果たす。Ｂ細胞の活性化及び機能的成
熟は、Ｔ細胞依存性（ＴＤ）又はＴ細胞非依存性（ＴＩ）の方法で生じ得る。ＴＩのＢ細
胞の応答においては、ＴＬＲリガンド又は樹状細胞誘導サイトカインがＴ細胞のヘルプの
代替となることができるために、Ｂ細胞はＴ依存性耐性対照（T-dependent tolerance co
ntrol）から放出される。ＴＬＲリガンド（例えば二本鎖ＤＮＡ）及びＤＣ誘導サイトカ
イン（例えばＩ型ＩＦＮ）が疾患病因に寄与すると考えられるＳＬＥにおいては、ＴＩの
Ｂ細胞はおそらく適切な機構を示す。自己抗体の生成の他にも、自己反応性Ｂ細胞は、自
己抗原をＴ細胞に提示して炎症促進性サイトカインを分泌することにより重要な病原性役
割を果たすと考えられる。ＩＦＮ−αは、Ｔ細胞誘導因子の不在下で、Ｂ細胞受容体（Ｂ
ＣＲ）及びＣｐＧ（それぞれ特異的な抗原及びＴＬＲシグナルを模倣する）に対する抗体
によって活性化されたヒトＢ細胞によって炎症促進性ＩＬ−６の生成を増進することが報
告されている。更に、形質球様ＤＣとの同時培養も、可溶性因子に依存するＣＤ８６発現
レベルによって決定されるＢ細胞の活性化を増進することが示されている。ヒトＢ細胞に
よるＣＤ８６発現及び炎症促進性サイトカインの生成を増進するＩＦＮ−ωの能力を、Ｔ
細胞非依存性培養系を用いて調査した。示されるようにＣｐＧ（ＯＤＮ−２００６）、抗
ＢＣＲ、並びにＣｐＧ及び抗ＢＣＲ、並びに様々な濃度のＩＦＮ−α２（α２ｂ）又はＩ
ＦＮ−ωを用いて、末梢血Ｂ細胞を培養した（ＩＦＮ濃度の単位はＵ／ｍｌ）。３日後、
フローサイトメトリーによってＣＤ８６発現（平均蛍光レベル）を決定し、上清を、ＩＬ
−６を含む２６−ｐｌｅｘのＬｕｍｉｎｅｘイムノアッセイによって分析した。結果を複
製試料±ＳＤの平均値として表した。
【０４２１】
試験された両方のドナー試料で抗ＢＣＲ及び抗ＢＣＲ／ＣｐＧ刺激でのＣＤ８６発現の
用量依存的なＩＦＮ−ωによって誘導された上方調節が観察されたが、一方で刺激なしの
Ｂリンパ球の同時培養は弱い効果しか示さなかった。ＩＮＦ−ωは、ＩＦＮ−α２Ｂと比
較してより近いＣＤ８６の発現を誘導した。図５Ａは、１ドナーのＢ細胞からＩＦＮ−ω
によって誘導されたＣＤ８６の発現を示す。ＩＦＮ−ωは、試験した両方のドナー試料で
、ＩＦＮ−α２Ｂと比較してより近い程度のＣｐＧ及び抗ＢＣＲ／ＣｐＧ刺激によるＩＬ
−６の生成も用量依存的に誘導した。図５Ｂは、１ドナーのＢ細胞からＩＦＮ−ωによっ
て誘導されたＩＬ−６の分泌を示す。
【０４２２】
ＩＦＮ−ωはＢＬｙＳ分泌を誘導する
ＢＬｙＳ（ＢＡＦＦ）はＢ細胞生存因子であり、臨床的に有効なヒトＳＬＥ中の標的で
ある。ＩＦＮ−α処置は、投薬から２４時間後に患者から単離したＰＢＭＣをマイクロア
レイ及びｑＰＣＲ分析することによって決定されるように、インビボでＢＬｙＳ遺伝子発
現を誘導することが判明している。よって、ＢＬｙＳの分泌を誘導するＩＦＮ−ωの能力
を評価した。
【０４２３】
ＰＢＭＣを２つの正常な健常ドナーから単離した。同等の濃度のＩＦＮ−ω及びＩＦＮ
−αを用いて細胞を７２時間の間刺激し、その時点で上清を回収して、ＥＬＩＳＡによっ
て可溶性ＢＬｙＳに関して分析した。結果を複製試料±ＳＤの平均値として表した。
【０４２４】
ＩＦＮ−ω及びＩＦＮ−αは、インビトロでヒトＰＢＭＣのＢＬｙＳ分泌を誘導する点
では同様にコンピテントであった。１名のドナーからの結果を図６に示す。
【０４２５】
実施例４．免疫付与、ファージパニング、抗体の特徴付け、及び結晶学研究に使用され
るヒトＩ型ＩＦＮ抗原の生成
表４に示す２０の個別の組み換えヒトＩ型ＩＦＮ−αをクローニングし、配列番号２１
〜２５のようなシグナル配列を用い、標準的な方法を用いて、ＨＥＫ  ２９３細胞におい
て発現させた。タンパク質は特に指示しない限りはヒトである。発現レベル及び可溶性を
改善するために、ヒトＩＦＮ−ωの位置８０の単一のアミノ酸突然変異体であるＩＦＮ−
ωＴ８０Ｅを生成し、ＨＥＫ  ２９３細胞において発現させた。Ｔ８０Ｅ  ＩＦＮ−ω変
異体（配列番号２）は、野生型タンパク質と同等の活性を有した。ＩＦＮ−αＤ及びＩＦ
Ｎ−α１は、位置１１４の１つのアミノ酸が異なる（バリン対アラニン）。αＡ及びα２
は、位置２３の１つのアミノ酸が異なる（αＡのリシン対α２のアルギニン）。α４は２
つの形態４ａ及び４ｂを有し、これらは位置５１（α４ａのアラニン対α４ｂのスレオニ
ン）及び１１４（α４ａのグルタミン酸対α４ｂのバリン）の２つのアミノ酸が異なる。
これらの変異は受容体結合領域外に位置し、活性に影響を及ぼさない。抗体は、これらの
変異体の対（αＤ／α１、αＡ／α２、及びα４ａ／α４ｂ）を等しく良好に中和しする
ことが判明し、その後のいくつかの実験では、各対１つの抗原のみを使用した。
【０４２６】
【表４】
2020073499.tif 000005
【０４２７】
実施例５．ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−ωに結合する抗体の生成
ＩＦＮ−α及びＩＦＮ−ωに結合するＦａｂｓを、ＳｈｉらのＪ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ  
３９７：３８５−９６，２０１０、国際公開公報第ＷＯ２００９／０８５４６２号；米国
特許出願公開第ＵＳ２０１０／００２１４７７号で説明されるように新たなｐＩＸファー
ジディスプレイライブラリから選択した。要約すると、ライブラリは、ヒト足場を多様化
することによって作製されたものであり、生殖系列ＶＨ遺伝子であるＩＧＨＶ１−６９*
０１、ＩＧＨＶ３−２３*０１及びＩＧＨＶ５−５１*０１を、Ｈ３ループを介してヒトＩ
ＧＨＪ−４ミニ遺伝子で組み換え、そしてヒト生殖系列ＶＬκ遺伝子であるＯ１２（ＩＧ
ＫＶ１−３９*０１）、Ｌ６（ＩＧＫＶ３−１１*０１）、Ａ２７（ＩＧＫＶ３−２０*０
１）及びＢ３（ＩＧＫＶ４−１*０１）をＩＧＫＪ−１ミニ遺伝子で組み換えることで、
完全なＶＨ及びＶＬドメインを構築した。多様化に際し、重鎖及び軽鎖可変領域内の、タ
ンパク質抗原及びペプチド抗原と高頻度に接していると確認された位置に相当するＨ１、
Ｈ２、Ｌ１、Ｌ２及びＬ３ループ周辺の位置を選択した。選択した位置での配列多様性は
、それぞれのＩＧＨＶ又はＩＧＬＶ遺伝子のＩＧＨＶ又はＩＧＬＶ生殖系列遺伝子ファミ
リーそれぞれの位置で生じる残基に制限した。７〜１４アミノ酸長の単鎖〜中鎖型の合成
ループを利用することにより、Ｈ３ループにおいて多様性が発生した。Ｈ３でのアミノ酸
分布を、ヒト抗体において観察されるアミノ酸の変動を模倣するよう設計した。ライブラ
リ設計の詳細は、ＳｈｉらのＪ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３９７、３８５−９６、２０１０年
に記載されている。ライブラリを生成するために利用した足場は、これらのヒトＶＨ及び
ＶＬ生殖系列遺伝子起源に準じて命名した。ＩＦＮ−及びＩＦＮ−に対するパニング実験
では、３つの重鎖ライブラリを、４個の生殖系列軽鎖又は生殖系列軽鎖ライブラリと組み
合わせることで１２個の固有ＶＨ：ＶＬの組み合わせを生成した。
【０４２８】
ライブラリを、ビオチン化ヒトＩＦＮ−α２又はビオチン化ヒトＩＦＮ−αＧのいずれ
かに対してパニングした。３回のパニングの後、抗原としてヒトＩＦＮ−α２、ＩＦＮ−
αＧ、及びマカクザルＩＦＮ−ωを用いたポリクローナルファージＥＬＩＳＡ法を実施し
て、各パニング実験の特異的富化を検出した。ＩＦＮ−α２、ＩＦＮ−αＧ、及びＩＦＮ
−ωに対する結合剤の富化を実証したこれらのパニング実験で回収されたファージを、モ
ノクローナルＦａｂのＥＬＩＳＡで更にスクリーニングして、ここで個々のＦａｂクロー
ンから発現したＦａｂタンパク質を結合剤として用いた。陰性対照の３倍である２０ｎＭ
のビオチン化抗原に対する結合シグナルを有するＦａｂクローンを、２次Ｆａｂスクリー
ニングのために選択した。選択（select）ＦａｂをＩｇＧ１／κ背景にクローニングし、
更にＰｒｏｔｅＯｎ及びＩＳＲＥレポーター遺伝子アッセイを用いて特徴付けした。これ
らのアッセイから、ｍＡｂ  ＩＦＷＭ３７１を更なる改変及び親和性成熟のために選択し
た。
【０４２９】
表５は、様々なＩ型ＩＦＮ及びＩＦＮ−βに対してＰｒｏｔｅＯｎ及びＩＳＲＥレポー
ター遺伝子アッセイを用いて測定した、ＩＦＷＭ３７１の親和性（ＫD）及びＩＣ50値を
示す。ＩＦＮ−α１（ＩＦＮ−αＤ）を除き、全てのヒトＩＦＮ−αタンパク質に結合し
たＩＦＷＭ３７１を、１７９ｐＭ〜１０ｎＭの範囲で試験した。抗体は、ＩＦＮ−α１（
ＩＦＮ−αＤ）には結合しなかった。抗体は、ヒト、チンパンジー、及びマカクザルＩＦ
Ｎ−ωにも結合したが、ＩＦＮ−βには結合しなかった。ＩＦＷＭ３７１は、抗体が中和
しなかったＩＦＮ−α１（αＤ）を除いて、試験された全てのＩＦＮ−α分子に対する中
和活性を示した。ＩＦＷＭ３７１はＶＨ  ＩＦＷＨ５９１（配列番号２８）及びＶＬ  Ｐ
Ｈ９Ｌ４（生殖系列Ｏ１２）（配列番号２９）を含む。
【０４３０】
【表５】
2020073499.tif 000006
【０４３１】
実施例６．ＩＦＮ−ω  Ｔ８０Ｅと複合したＩＦＷＭ３７１の結晶構造
エピトープ及びパラトープ、ＩＦＮ−αサブタイプ及びＩＦＮ−ωに対する広範な結合
特異性の構造的基礎を明らかにし、親和性及び特異性を改善するための改変を支持するた
めするため、ＩＦＷＭ３７１のＦａｂと複合したヒトＩＦＮ−ω  Ｔ８０Ｅの結晶学的研
究を実施した。
【０４３２】
Ｈｉｓタグ付けしたＦａｂ  ＩＦＷＭ３７１（ＩｇＧ１／カッパアイソタイプ）をクロ
ーニングし、ＨＥＫ２９３細胞において発現し、アフィニティ、イオン交換、及びサイズ
排除クロマトグラフィーを用いて精製した。Ｆａｂは、２０ｍＭのトリス（ｐＨ７．４）
、５０ｍＭのＮａＣｌに受容された。Ｃ末端６ｘＨｉｓタグを有するヒトＩＦＮ−ω  Ｔ
８０Ｅ変異体（以下、単にＩＦＮ−ωと呼ぶ）をＨＥＫ２９３細胞内で発現させた。タン
パク質は、２０ｍＭのトリス（ｐＨ７．４）、５０ｍＭのＮａＣｌに受容された。
【０４３３】
複合体を、ＩＦＮ−ωとＦａｂ  ＩＦＷＭ３７１とを１．２：１．０のモル比（過剰Ｉ
ＦＮ−ω）で混合し、４℃で終夜インキュベートし、２０ｍｍ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５
）、０．２５ＭのＮａＣｌで平衡したＳｕｐｅｒｄｅｘ  ２００カラムで精製し、続いて
Ａｍｉｃｏｎ−Ｕｌｔｒａ  １０ｋＤａカットオフを用いて９．９６ｍｇ／ｍｌに濃縮す
ることによって調製した。Ｘ回折に適した結晶を、ＭＭＳ播種した２０％のＰＥＧ  ３Ｋ
、０．２Ｍの第二リン酸アンモニウムから得た（Ｏｂｍｏｌｏｖａ，Ｇ．，Ｍａｌｉａ，
Ｔ．Ｊ．，Ｔｅｐｌｙａｋｏｖ，Ａ．，Ｓｗｅｅｔ，Ｒ．＆  Ｇｉｌｌｉｌａｎｄ，Ｇ．
Ｌ．（２０１０）Ｐｒｏｍｏｔｉｎｇ  ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａｎｔ
ｉｂｏｄｙ−ａｎｔｉｇｅｎ  ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ  ｖｉａ  ｍｉｃｒｏｓｅｅｄ  ｍａ
ｔｒｉｘ  ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ．Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  Ｄ  Ｂｉｏｌ  Ｃ
ｒｙｓｔａｌｌｏｇｒ  ６６，９２７〜３３．）。
【０４３４】
Ｘ線データ収集のために、ＩＦＮ−ω／Ｆａｂ  ＩＦＷＭ３７１複合体の１つの結晶を
、２０％グリコールを補充した母液（２０％  ＰＥＧ  ３３５０、０．２Ｍ（ＮＨ4）2Ｈ
ＰＯ4、ｐＨ７．９）に数秒間浸漬し、１００Ｋの窒素流中で急速凍結させた。Ｘ線回折
データは、Ｏｓｍｉｃ（登録商標）ＶａｒｉＭａｘ（登録商標）共焦点光学系、Ｓａｔｕ
ｒｎ９４４ＣＣＤ検出器、及びＸ−ｓｔｒｅａｍ（商標）２０００極低温冷却システム（
Ｒｉｇａｋｕ，ＴＸ）を備えたＲｉｇａｋｕ  ＭｉｃｒｏＭａｘ（商標）−００７ＨＦマ
イクロフォーカスＸ線ジェネレータを用いて収集した。回折強度は１／４度画像の２０５
度の結晶回転にわたって検出された。Ｘ線データをＸＤＳプログラムで処理した。Ｘ線デ
ータ統計を表６に示す。
【０４３５】
ＩＦＮ−ω／Ｆａｂ  ＩＦＭ３７１複合体の構造を、Ｐｈａｓｅｒを用いた分子置換法
（ＭＲ）により解析した。ＭＲの検索モデルは、Ｆａｂ１５（ＰＤＢ  ＩＤ  ３ＮＡ９；
Ｌｕｏ，Ｊ．，Ｏｂｍｏｌｏｖａ，Ｇ．，Ｈｕａｎｇ，Ａ．，Ｓｔｒａｋｅ，Ｂ．，Ｔｅ
ｐｌｙａｋｏｖ，Ａ．，Ｍａｌｉａ，Ｔ．，Ｍｕｚａｍｍｉｌ，Ｓ．，Ｚｈａｏ，Ｙ．，
Ｇｉｌｌｉｌａｎｄ，Ｇ．Ｌ．＆  Ｆｅｎｇ，Ｙ．（２０１０）Ｃｏｅｖｏｌｕｔｉｏｎ
ｏｆ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｓｔａｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｖｋａｐｐａ  ＣＤＲ−Ｌ３
ｃａｎｏｎｉｃａｌ  ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ．Ｊ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ４０２，７０８〜１
９）及びＩＦＮ−α４Ａの結晶構造であった。しかしながら、ＩＦＮ−ωのＭＲ溶液は激
しい分子間衝突のため得ることができなかった。Ｆａｂ  ＩＦＷＭ３７１のみに位相合わ
せ（phased）された電子密度マップの検査は、ＩＦＮ−ω分子の半分超の電子密度が消失
していることを示した。しかしながら、ＩＦＮ−ω分子の残部はその密度に容易にフィッ
トした。続いてＰＨＥＮＩＸで構造を精密化し、ＣＯＯＴを用いてモデルの調整を実行し
た。
【０４３６】
【表６】
2020073499.tif 000007
【０４３７】
ＩＦＮ−ω／Ｆａｂ  ＩＦＷＭ３７１複合体の全体的な分子構造を図７Ａに示す。非対
称単位中に１つの複合体が存在した。ＩＦＮ−ω分子の分子構造モデルは、ヘリカルセグ
メントＡＢ並びにヘリックスＤ及びＥに対応する残基２３〜３９及び１１９〜１５３を含
んでいた。残基の番号付けは、配列番号１に示されるＩＦＮ−ωアミノ酸配列に準ずる。
ヘリックスＡ、Ｂ、及びＣ、並びに接続ループを無秩序化した。Ｆａｂ分子構造モデルは
、軽鎖に１〜２１２残基（配列番号２９）、及び重鎖に１〜２２２残基（配列番号２８）
を含んでいた。Ｃ末端６ｘＨｉｓタグ、鎖間ジスルフィド結合、及び重鎖の１３７〜１４
１の残基を無秩序化した。更に、抗体／抗原界面に広範な水素結合ネットワークを形成す
る多くの水分子が存在した（図７Ｂ）。
【０４３８】
観察されたＩＦＮ−ω分子の部分は、公開されるＩＦＮ−ωの完全長モデル（ＰＤＢ  
ｉｄ  ３ｓｅ４、４０の残基に関して０．５４ÅのＣα  ｒｍｓｄ）の対応する部分とほ
ぼ同一であり、また約４０のＣａ原子に対して０．４２Åの平均ＲＭＳＤを有するＩＦＮ
−α２（６つのＩＦＮ−α２分子、ＰＤＢコード１ｒｈ２）と非常に似通っていた。ＩＦ
Ｎ−ω／Ｆａｂ  ＩＦＷＭ３７１中のＩＦＮ−ωのモデルは、ヘリックスＣ及びＤの部分
、並びに接続ループ（ループＡＢ）のみを含んでいた。電子密度中に他の部分は存在しな
かった。結晶パッキング分析は、消失したヘリックスのための十分な空間が存在しないこ
とを示した。回折データを慎重に分析することにより、これが、双晶化又は不正確な空間
群の割り当てなどの異常に起因するアーチファクトでないことが示された。したがって、
これは、ＩＦＮ−ωタンパク質が結晶化プロセス中に開裂した可能性が高い。
【０４３９】
Ｆａｂ  ＩＦＷＭ３７１は、ＡＢループの残基（Ｓ２５〜Ｄ３５）、並びにヘリックス
ＥのＭ１４６及びＫ１５０の残基からなる立体配座エピトープを認識した（図８Ａ）。パ
ラトープはＬＣＤＲ２を除く５つのＣＤＲからの残基で構成されている。パラトープ残基
は一連のポケットを形成し、そこに、ＩＦＮ−ωの短いＡＢへリックスの残基Ｆ２７、Ｌ
３０、及びＲ３３の側鎖がドッキングする。図８Ｂは、ＩＦＷＭ３７１のＶＬ及びＶＨ中
のパラトープ残基を示す。抗体と抗原との間の相互作用の大半が、ファンデルワールス（
ｖｄｗ）及び疎水性パッキング、並びに抗体−抗原間の水素結合であると考えられる。図
８Ｃは、ＩＦＮ−ωとＩＦＷＭ３７１との間の相互作用の２Ｄ相互作用マップを示す。図
では、ＩＦＮ−ωエピトープ残基は灰色で強調され、ＶＬパラトープ残基は枠で囲まれ、
ＶＨパラトープ残基は円で囲まれている。図は、大半の抗原／抗体相互作用が、ＩＦＮ−
ωＡＢヘリックスの３つのエピトープ残基Ｆ２７、Ｌ３０、及びＲ３３によって形成され
ることを実証する。したがって、ＩＦＮ−ωのこの領域がエピトープの主要部分を構成し
ている。この複合体の別の特徴は、水分子が抗原識別を媒介する重要な役割を果たしてい
ると考えられることである。３つの水クラスタ（ＷＣ）が界面に存在した。ＷＣ１は、Ｈ
ＣＤＲ３とＩＦＮ−ωのＲ３４、Ｆ３６、及びＥ１４７との間の水素結合相互作用に寄与
した。ＷＣ２はＶＨ／ＶＬ対合、並びにＦｖと主エピトープ残基Ｌ３０、Ｒ３３、及びそ
の隣接残基との間の水素結合を媒介した。ＷＣ３水分子は界面の辺縁部に存在し、おそら
く相互作用に対する重要性は低い。
【０４４０】
ＩＦＷＭ３７１は多くのＩＦＮ−αサブタイプ及びＩＦＮ−ωと強く結合するが、ＩＦ
Ｎ−αＤ又はＩＦＮ−α１は除く。ＩＦＷＭ３７１はＩＦＮ−βとは結合しない。ＩＦＮ
の配列アラインメントを図９に示す。ＩＦＷＭ３７１エピトープ残基は、サブタイプ間で
大部分が保存されており、これはＩＦＮＭ３７１の広範な特異性がエピトープ保存の結果
であることを示している。しかしながら、ＩＦＷＭ３７１が結合しないＩＦＮ−αＤ又は
ＩＦＮ−α１は、Ｆ２７ではなくＳ２７を含み、これはＦ２７側鎖の疎水性接触の大部分
を喪失することにつながる。Ｆ２７はＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、及びＬＣＤＲ３の残基に
よって形成された深いポケットにドッキングするため、側鎖接触の喪失は、ＩＦＮ−αＤ
及びＩＦＮ−α１タンパク質による結合が非常に少ないか又は存在しないためである可能
性が最も高い。これは、Ｆ２７が結合する「ホットスポット」残基のうちの１つであるこ
とを更に示す。Ｐ２６は良好に保存されない残基である。Ｈｉｓ又はＬｅｕ残基はいくつ
かのＩＦＮ−αサブタイプにおいてこの位置を占める。寸法及び形状の違いのために、こ
の残基はＩＦＷＭ３７１とこれらの突然変異を有するＩＦＮ−αとの間の局所相互作用に
大きな影響を及ぼし得る。
【０４４１】
実施例７．ＩＦＷＭ３７１のアラニンスキャン
ＩＦＷＭ３７１重鎖及び軽鎖ＣＤＲ残基のアラニンスキャンを実施し、続く親和性成熟
への取り組みに導いた。いくつかの溶媒曝露の低い又は溶剤に曝露されていない残基を除
く、重鎖及び軽鎖両方のＣＤＲ中の全ての残基をアラニンと置換した。ＣＤＲの天然残基
がアラニンである場合、チロシン及び／又はセリン及び／又はアスパラギン酸と置換した
。可能性のある発生傾向を有する１つの位置（ＩＦＷＨ５９１中Ｗ１０４、配列番号２８
）をアラニン、チロシン、セリン、及びアスパラギン酸で置換した。突然変異させたｍＡ
ｂをＨＥＫ２９３細胞内で一時的に発現させ、細胞上清のＩＦＮのパネルに対する結合活
性をＥＬＩＳＡによって試験した。２つのＶＨ突然変異体、ＩＦＷＨ５９１  Ｒ５９Ａ（
配列番号３０）及びＩＦＷＨ５９１  Ｎ１０３Ａ（配列番号３１）は、親ｍＡｂと比較し
て著しく改善された結合を有した。
【０４４２】
実施例８．ＩＦＷＭ３７１の親和性成熟
ライブラリ設計
２つの別個のＶＬライブラリ（ＰＨ９Ｌ４Ｌ２及びＰＨ９Ｌ４Ｌ３）を設計して、親和
性成熟ＩＦＷＭ３７１軽鎖ＰＨ９Ｌ４（Ｏ１２）（配列番号２９）に対して使用した。ラ
イブラリＰＨ９Ｌ４Ｌ２の多様化のために選択された位置は、抗タンパク質及び抗ペプチ
ド複合体で頻繁に見られる残基位置に基づいた。各位置を多様化するために用いられた残
基をＩＧＫＶ遺伝子の生殖系列遺伝子ファミリー内でコードした（Ｓｈｉら（２０１０）
Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３９７：３８５−９６）。ライブラリの複雑性は、親和性成熟の
間に多様性が十分に評価されるように１０7ライブラリメンバーを超えないように制限さ
れた（実際のライブラリ複雑性は３．５7）。表７は、ライブラリ中のＶＬLＰＨ９Ｌ４（
Ｏ１２）のＬＣＤＲ１位置３０、３１、及び３２、ＬＣＤＲ２位置５０、並びにＬＣＤＲ
３位置９１、９２、９３、９４、及び９６のライブラリ設計多様化スキームを示す。残基
番号付けはＫａｂａｔに準ずる。
【０４４３】
【表７】
2020073499.tif 000008
【０４４４】
第２の軽鎖親和性成熟ライブラリＰＨ９Ｌ４Ｌ３中で多様化する残基位置は、抗体−タ
ンパク質複合体間の構造分析に基づいて選択し、各位置における多様性は、抗体−タンパ
ク質構造、並びに各位置での生殖系列遺伝子中のアミノ酸の使用の分析に基づいて設計し
た（Ｇ．ＲａｇｈｕｎａｔｈａｎらのＡｎｔｉｇｅｎ−ｂｉｎｄｉｎｇ  ｓｉｔｅ  ａｎ
ａｔｏｍｙ  ａｎｄ  ｓｏｍａｔｉｃ  ｍｕｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅ
ｓ  ｔｈａｔ  ｒｅｃｏｇｎｉｚｅ  ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ  ｔｙｐｅｓ  ｏｆ  ａｎｔｉ
ｇｅｎｓ．Ｊ．Ｍｏｌ  Ｒｅｃｏｇｎｉｔ．２５：１０３〜１１３（２０１２））。ＬＣ
ＤＲ３の場合、各位置が異なる生化学的性質のアミノ酸（即ち、極性／無極性、正／負に
帯電）を有するように、多様性を天然のレパートリーを超えて拡大した。更に、位置ごと
の各アミノ酸の相対度数を変化させ、これをＳｌｏｎｉｎｇライブラリ合成技術によって
実現した。表８はＰＨ９Ｌ４Ｌ３のライブラリ組成を示す。残基番号付けはＫａｂａｔに
準ずる。
【０４４５】
【表８】
2020073499.tif 000009
【０４４６】
パニング及び特徴付け
軽鎖ライブラリＰＨ９Ｌ４Ｌ２又はＰＨ９Ｌ４Ｌ３と親重鎖ＩＦＷＨ５９１（配列番号
２８）とを組み合わせることにより、親和性成熟ライブラリを生成した。続いてライブラ
リを用いて高親和性抗体を選択するためにパニングした。いくつかの親和性成熟パニング
実験は、ＩＦＮ−ωのみ又はいくつかのＩＦＮ−αサブタイプのみのいずれかに対する結
合に偏って改善したが、両方は改善しなかった。大半のＩＦＮ−αサブタイプ及びＩＦＮ
−ωに関して改善されたＩＣ50を用いて広範な中和抗体を生成するために、互いに対して
より多様化されたＩＦＮ−αサブタイプのサブセット（ＩＦＮ−α２、ＩＦＮ−α４ａ、
ＩＦＮ−αＦ、及びＩＦＮ−αＧ）を各パニングラウンド間でマカクザル又はヒトＩＦＮ
−ωで交互にパニングした。各パニング実験に対して合計３ラウンドのパニングを実施し
た。
【０４４７】
各クローンのＦａｂタンパク質をＴＧ−１Ｅ大腸菌内で発現させ、バクテリア細胞溶解
物をＦａｂのＥＬＩＳＡに用いて、ＩＦＷＭ３７１と比較したヒトＩＦＮ−α４ａ、ＩＦ
Ｎ−αＦ、及びＩＦＮ−ωに対するこれらの親和性を決定した。ＩＦＷＭ３７１Ｆａｂは
これらの抗原に弱く結合したため、抗原に対するより高い親和性を有するＦａｂ  ＩＦＷ
Ｆ４７７を比較のための代理Ｆａｂとして用いた。４２のクローンを、ＥＬＩＳＡの代理
Ｆａｂと比較して数倍高い結合活性を示すものとして特定した。いくつかの変異体は、Ｌ
ＣＤＲ１に１つのアミノ酸挿入を含んでおり、これは原ライブラリ設計の一部ではないが
、ライブラリ合成の間に挿入された。全体として、ＶLの親和性成熟は、代理Ｆａｂと比
較して結合の顕著な改善をもたらした。２つのライブラリの最高のクローンのそれぞれが
、ヒトＩＦＮ−ωに対し代理Ｆａｂ  ＩＦＷＦ４７７と比較して２３倍を超える高さの結
合活性を示した。
【０４４８】
更なる機能的及び生物物理学的特徴付けのため、ライブラリ由来の合計４２の軽鎖と、
親重鎖ＩＦＷＨ５９１（配列番号２８）、並びに実施例７で説明したアラニンスキャン実
験で特定された改善された結合活性を有する２つのＶH変異体のＩＦＷＨ６２４（ＩＦＷ
Ｈ５９１  Ｒ５９Ａ配列番号３０）及びＩＦＷＨ６２９（ＩＦＷＨ５９１  Ｎ１０３Ａ、
配列番号３１）とを組み合わせた。続いて、合計１２６の変換されたｍＡｂ（４２の軽鎖
と３つの重鎖との組み合わせ）を発現させて、更に特徴付けした。表９は、親及び選択（
select）親和性成熟抗体、並びにこれらの重鎖及び軽鎖可変領域を示す。
【０４４９】
【表９−１】
2020073499.tif 000010
【０４５０】
【表９−２】
2020073499.tif 000011
【０４５１】
１２６の生成されたｍＡｂのヒトＩＦＮ−ω及びヒトＩＦＮ−αサブタイプのパネルに
対する親和性をＰｒｏｔｅＯｎによって測定した。４８ウェルプレートのＨＥＫ２９３Ｅ
細胞中でｍＡｂを対照と共に一時的に３連でトランスフェクトし、細胞上清を本実験で使
用した。アッセイのスループットを改善するために、個別の抗原の濃度を１つのみ使用し
た。表１０は、親ＩＦＷＭ３７１及び選択（select）親和性成熟抗体に対するＫＤ値を示
す。ｍＡｂの大半は、試験された全ての抗原に対する結合親和性の顕著な改善を示した。
それらのうちのいくつかは、親ｍＡｂと比較して１００倍超の改善を示した。
【０４５２】
【表１０−１】
2020073499.tif 000012
【０４５３】
【表１０−２】
2020073499.tif 000013
【０４５４】
【表１０−３】
2020073499.tif 000014
【０４５５】
１２６のパネルの選択抗体を、そのＩＦＮ−αサブタイプ及びＩＦＮ−ωのスペクトル
を阻害する能力に関してＩＳＲＥアッセイにおいて特徴付けし、また、これらの溶解度特
性及び生物物理学的特性を評価した。選択抗体に関し、ＩＳＲＥアッセイのＩＣ50値を表
１１及び表１２に示す。１１の組み換えＩＦＮ−αサブタイプ及びＩＦＮ−ωに対するい
くつかの抗体に関して、ＩＣ50値は２桁以下のｐＭであった。これは、その抗原に対する
ＩＣ50が１桁から２桁のｎＭの範囲である親ｍＡｂのＩＦＷＭ３７１と比較して１００倍
を超える改善を示す。親抗体として、親和性成熟された抗体はＩＦＮ−αＤ又はＩＦＮ−
βを中和しなかった。最も強力な親和性成熟された抗体ｍＡｂのＩＦＷＭ３４２３は、そ
れが結合した全てのインターフェロンサブタイプに対して概ね１桁ピコモルのＩＣ50を有
した。
【０４５６】
【表１１】
2020073499.tif 000015
【０４５７】
【表１２】
2020073499.tif 000016
【０４５８】
実施例９．翻訳後修飾リスクを最小化するための抗体の改変
中和活性、溶解度特性、及び生物物理学的特性に基づき、ＩＦＷＭ３７１、ＩＦＷＭ３
３３１（ＩＦＷＢ３０６６）、ＩＦＷＭ３３９９（ＩＦＷＢ３１３４）、ＩＦＷＭ３４２
１（ＩＦＷＢ３１５６）、及びＩＦＷＭ３４２３（ＩＦＷＢ３１５８）の親和性成熟由来
の４つのｍＡｂを更に分析した。これらのｍＡｂの重鎖はＩＦＷＨ５９１（配列番号２８
）又はＩＦＷＨ６２９（配列番号３１）のいずれかからなり、これらの軽鎖はＩＦＷＬ９
８４（配列番号７１）、又はＩＦＷＬ１０４８（配列番号５３）、又はＩＦＷＬ１０７３
（配列番号６１）のいずれかからなる。
【０４５９】
どちらのＶＨ鎖も、ＨＣＤＲ２の酸触媒加水分解配列モチーフ（Ｄ５２−Ｐ５３）、異
性化モチーフ（Ｄ５５−Ｓ５６）を含むいくつかの潜在的翻訳後修飾（ＰＴＭ）モチーフ
、びにＨＣＤＲ１（Ｗ３３）及びＣＤＲ−Ｈ３（Ｗ１０４）に潜在的酸化部位をそのＣＤ
Ｒ内に含む。
【０４６０】
ＩＦＷＬ９８４（配列番号７１）及びＩＦＷＬ１０４８（配列番号５３）のＶＬはＬＣ
ＤＲ１に１つの異性化モチーフ（Ｄ３０−Ｇ３１）を含み、一方でＩＦＷ１０７３（配列
番号６１）のＶＬはＬＣＤＲ３（Ｗ９２及びＷ９４）に潜在的酸化部位、並びにＬＣＤＲ
１（Ｎ３１−Ｓ３２）に脱アミド部位を含む。
【０４６１】
重鎖ＣＤＲのＰＴＭリスクを低減させるために、ＨＣＤＲ２中のＤ５２を生殖系列残基
チロシン（Ｄ５２Ｙ）に復帰突然変異させた。Ｐ５３をアラニンに突然変異させた。ＨＣ
ＤＲ３中のＷ１０４（ＶＨ＿Ｗ１０４）をアラニン、チロシン、セリン、又はアスパラギ
ン酸と置換した。突然変異させた重鎖を３つの異なる軽鎖と共発現させて、ＩＳＲＥアッ
セイで試験した。これらの実験から、重鎖ＩＦＷＨ６１５（配列番号１５７）及びＩＦＷ
Ｈ６１７（配列番号１５８）を有する抗体を更に特徴付けした。
【０４６２】
ＶＬ  ＩＦＷＬ９８４（配列番号７１）及びＩＦＷＬ１０４８（配列番号５３）のＰＴ
Ｍリスクを低減するために、実施例６で説明したＩＦＷＭ３７１／ＩＦＮ−ω複合体構造
から得た構造的情報の案内に従い、潜在的ＰＴＭモチーフを除去するための一連の突然変
異を設計した。更に、共通の軽鎖ＩＦＷＬ９８４を有するＩＦＷＭ３４２１（ＩＦＷＢ３
１５６）及びＩＦＷＭ３４２３（ＩＦＷＢ３１５８）の溶解度特性を改善するために、抗
体軽鎖全体の表面疎水性を低減させるために、これらのＣＤＲにおけるいくつかの疎水性
残基での一連の突然変異を発生させた。ＩＦＮ−ω及び白血球ＩＦＮを阻害するため、実
施例１１で説明された方法を用いて、親ＩＦＷＨ５９１を有するＨＥＫ２９３Ｅ細胞内で
ＩＦＷＬ９８４変異体を発現させ、細胞上清内で発現した抗体をＩＳＲＥレポーター遺伝
子アッセイでスクリーニングした。結果として得られた抗体ＩＦＷＢ３１９６（Ｄ３０Ｅ
Ｆ３２Ｙ）、ＩＦＷＢ３２０１（Ｄ３０Ｓ、Ｇ３１Ｓ）、及びＩＦＷＢ３２０２（Ｄ３
０Ｓ、Ｇ３１Ｓ、Ｆ３２Ｙ）は良好な中和活性を保持した。表１３は、親ＩＦＷＨ５９１
重鎖可変領域（配列番号２８）及び変異体ＩＦＷＬ９８４軽鎖を有する、生成された抗体
のＶＬ配列を示す。親ＩＦＷＭ３４２１はＩＦＷＨ５９１のＶＨを有し、親ＩＦＷＭ３４
２３はＩＦＷＨ６２９のＶＨを有する。表１４は、選択（select）発生された抗体ＩＦＮ
−ω及び白血球ＩＦＮを中和するためのＩＣ50値を示す。
【０４６３】
【表１３】
2020073499.tif 000017
【０４６４】
【表１４】
2020073499.tif 000018
【０４６５】
同様に、ＰＴＭリスクを低減するように２６のＩＦＷＬ１０４８の変異体を構築した。
ＨＥＫ２９３Ｅ細胞内で生成された軽鎖を重鎖ＩＦＷＨ５９１と共発現させ、抗体を含む
上清をＩＳＲＥアッセイでスクリーニングした。表１５は生成された抗体のＶＨ及びＶＬ
配列を示し、表１６はＩＦＮ−ω及び白血球ＩＦＮに対する抗体のＩＣ50値を示す。ＩＦ
ＷＢ３２１０（Ｄ３０Ｓ）、ＩＦＷＢ３２１１（Ｄ３０Ｅ）、及びＩＦＷＢ３２２３（Ｄ
３０Ｓ、Ｇ３１Ｓ）を含むＬＣＤＲ１中のＤＧモチーフ（Ｄ３０−Ｇ３１）が除去された
、変異体ＩＦＷＬ１０４８鎖を有する結果として得られた抗体は、親ｍＡｂ（ＩＦＷＢ３
０５６（ＶＬ：ＩＦＷＬ１０４８、ＶＨ：ＩＦＷＨ５９１）、及びＩＦＷＢ３１３４（Ｖ
Ｌ：ＩＦＷＬ１０４８、ＶＨ：ＩＦＷＨ６２９））としての同様の中和活性を示した。し
かしながら、ＩＦＷＢ３２１９（Ｄ３０Ｅ、Ａ３２Ｙ）、ＩＦＷＢ３２２７（Ｄ３０Ｓ、
Ｇ３１Ｓ、Ｆ９４Ｌ）、及びＩＦＷＢ３２３０（Ｄ３０Ｓ、Ｇ３１Ｓ、Ａ３２Ｙ、Ｆ９４
Ｌ）を含む、疎水性を低減するためにＤＧモチーフが除去され、かつ置換がなされた、変
異体ＩＦＷＬ１０４８鎖を有する得られた抗体は、親ｍＡｂと比較してより低い活性を示
した。
【０４６６】
【表１５】
2020073499.tif 000019
【０４６７】
【表１６】
2020073499.tif 000020
【０４６８】
ＩＦＷＢ３０６６のＶＬ  ＩＦＷＬ１０７３の潜在的ＰＴＭモチーフは、ＬＣＤＲ３（
Ｗ９２及びＷ９４）上に潜在的な酸化部位を含んでいた。ＩＦＷＬ１０７３（ＱＱＧＷＤ
ＷＰＬＴ、配列番号９８）のＬＣＤＲ３を、多くの親和性成熟された抗体（ＱＱＳＹＤＦ
ＰＬＴ、配列番号１５４）のＬＣＤＲ３中に存在することが特定されたコンセンサス配列
ＬＣＤＲ３と置換した。更に、ＬＣＤＲ１の潜在的脱アミド部位（Ｎ３１〜Ｓ３２）に対
処するためにいくつかの突然変異体を設計した。ＩＦＷＬ１０７３の１４の生成された変
異体をＩＦＷＨ５９１と組み合わせ、４８ウェルのＨＥＫ２９３Ｅの一過性トランスフェ
クションにて発現させた。細胞上清を、組み換えヒトＩＦＮ−ω及びウイルスによって誘
導された白血球によって発現されたＩＦＮに対する中和活性に関してＩＳＲＥアッセイで
直接試験した。突然変異Ｗ９３Ｙ及び／又はＷ９５Ｆを有するｍＡｂは、いくらかの中和
活性の改善を示した。ＣＤＲ−Ｌ１を置換又は短縮することによってＮＳモチーフを除去
する突然変異体は、中和活性の低減又は消失を示した。表１７は生成された抗体のＶＨ及
びＶＬ配列を示し、表１８はＩＦＮ−ω及び白血球ＩＦＮに対するＩＣ50値を示す。
【０４６９】
【表１７】
2020073499.tif 000021
【０４７０】
【表１８】
2020073499.tif 000022
【０４７１】
ＰＴＭリスクを最小化させる組み換えの取り組みから誘導された選択ＶＬ変異体を、Ｉ
ＦＷＨ５９１又はＩＦＷＨ６２９のいずれかと組み合わせ、発現及び精製のためにスケー
ルアップした。表１９は、抗体のＶＬ／ＶＨ対合を示す。表２０は、様々な組み換えＩＦ
Ｎ−αサブタイプ及びＩＦＮ−ωに対する選択得られた抗体のＩＣ50値を示す。
【０４７２】
【表１９】
2020073499.tif 000023
【０４７３】
【表２０】
2020073499.tif 000024
【０４７４】
実施例１０．抗ＩＦＮ−α／ω抗体の広範な中和能力
生成された抗体のうちのいくつかは、上記のＩＳＲＥアッセイを用いて測定された、１
００ｐＭ以下のＩＣ50でＩＦＮ−ω及び複数のＩＦＮ−αサブタイプを中和した。これら
の抗体の可変領域配列を表２１に示す。表２２は抗体のＬＣＤＲ１配列を示し、表２３は
ＬＣＤＲ２を示し、表２４はＬＣＤＲ３を示し、表２５はＨＣＤＲ１を示し、表２６はＨ
ＣＤＲ２を示し、表２７はＨＣＤＲ３を示す。図１０はＩＳＲＥアッセイでの各Ｉ型ＩＦ
ＮのＩＣ50値を示す。
【０４７５】
【表２１】
2020073499.tif 000025
【０４７６】
【表２２】
2020073499.tif 000026
【０４７７】
【表２３】
2020073499.tif 000027
【０４７８】
【表２４】
2020073499.tif 000028
【０４７９】
【表２５】
2020073499.tif 000029
【０４８０】
【表２６】
2020073499.tif 000030
【０４８１】
【表２７】
2020073499.tif 000031
【０４８２】
実施例１１．抗ＩＦＮ−α／ω抗体は白血球ＩＦＮを中和する
全血からのＩＦＮによって誘導されたＩＰ−１０の放出を阻害する抗体の能力によって
、白血球ＩＦＮを中和する抗体の能力を評価した。
【０４８３】
親和性成熟キャンペーンから、又はＰＴＭリスクを最小化した後の選択抗体の内因性Ｉ
型ＩＦＮを阻害する能力を更に特徴付けした。全ての特徴付けされた抗体はＩｇＧ１／κ
型であった。抗体ＩＦＷＭ３５２２、ＩＦＷＭ３５２５、ＩＦＷＭ３３９９、及びＩＦＷ
Ｍ３４２３をアッセイで使用した。
【０４８４】
ＩＰ−１０放出アッセイ
２４０μｌの全血（Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｐｅｃｉａｌｔｙ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉ
ｏｎ）を、細胞培養培地（１０％のＨＩ  ＦＢＳ及び１％のペンストレップ（penn strep
）を有するＲＰＭＩ１６４０）中に希釈したＩＦＮ又はＩＦＮ含有馴化培地あり又はなし
の３０μＩの抗体（抗ＩＦＮ−α／ω又はアイソタイプ対照）を含む９６ウェルのＵ底プ
レートの各ウェルに添加した。刺激のために、２５０Ｕ／ｍｌ（最終容量）のヒト白血球
ＩＦＮ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）、及び１０μｌ／ウェルのＳＬＥ免疫複合体で処
理した馴化培地を利用した。ＩＦＮと抗体との混合物を室温で２０〜３０分間プレインキ
ュベートした後に、全血に添加した。プレートを３７℃で２０〜２２時間かけて終夜イン
キュベートした。翌日、室温でプレートを４００×ｇで５分間遠心分離にかけて血漿を除
去し、−２０℃で凍結させた。各処置からの複製試料をＣＸＣＬ１０／ＩＰ−１０  ＥＬ
ＩＳＡキット（Ｑｉａｇｅｎ）を用いて分析した。解凍時に、回収した血漿を、試料希釈
緩衝液を用いて２．５倍に希釈して、アッセイで使用した。標準の希釈に関して以下のわ
ずかな改変を加えた他は製造業者のプロトコルに従った。抗原標準の２倍希釈液を濃度４
０００ｐｇ／ｍｌから開始して３１．２５ｐｇ／ｍｌで完了して作製した。反応停止後３
０分以内に４５０ｎｍの吸光度でプレートを読み取った。Ｓｏｆｔｍａｘ  Ｐｒｏを用い
て分析を実施した。
【０４８５】
結果
関連する細胞型中の内因性ＩＦＮ−Ｉ調製物を中和する能力に関して選択抗体を特徴付
けした。全血のＩＦＮ刺激はインビトロ及びインビボのＩＰ−１０（ＣＸＣＬ１０）放出
を誘導する（Ａｒｉｃｏ，Ｅ．らのＣｏｎｃｏｍｉｔａｎｔ  ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ｏｆ
ＩＦＮａｌｐｈａ  ｓｉｇｎａｔｕｒｅ  ａｎｄ  ａｃｔｉｖａｔｅｄ  ｍｏｎｏｃｙ
ｔｅ／ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌ  ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｐｅｒｉ
ｐｈｅｒａｌ  ｂｌｏｏｄ  ｏｆ  ＩＦＮａｌｐｈａ−ｔｒｅａｔｅｄ  ｓｕｂｊｅｃｔ
ｓ  ａｔ  ｅａｒｌｙ  ｔｉｍｅｓ  ａｆｔｅｒ  ｒｅｐｅａｔｅｄ  ｌｏｃａｌ  ｃｙ
ｔｏｋｉｎｅ  ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ．Ｊ  Ｔｒａｎｓｌ  Ｍｅｄ  ９，６７，ｄｏｉ：
１０．１１８６／１４７９〜５８７６〜９〜６７（２０１１）．、Ｍｏｈｔｙ，Ａ．Ｍ．
らのＩｎｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ＩＰ−１０／ＣＸＣＬ１０  ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ  ａｓ
ａｎ  ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ  ｅｆｆｅｃｔ  ｏｆ  ｌｏｗ−ｄｏｓｅ  
ａｄｊｕｖａｎｔ  ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−ａｌｐｈａ  ｄｕｒｉｎｇ  ｔｒｅａｔｍｅ
ｎｔ  ｏｆ  ｍｅｌａｎｏｍａ．Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ  ２１５，１１３〜１２３
，ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｉｍｂｉｏ．２００９．０３．００８（２０１０））。
ＩＰ−１０はＳＬＥ中で上昇し、いくつかの研究では疾患活性及び疾患の臨床症状と相関
することが示されている（Ｂａｕｅｒ，Ｊ．Ｗ．らのＩｎｔｅｒｆｅｒｏｎ−ｒｅｇｕｌ
ａｔｅｄ  ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ  ａｓ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  ｏｆ  ｓｙｓｔｅｍｉ
ｃ  ｌｕｐｕｓ  ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ：ａ
ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ  ｓｔｕｄｙ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  ｒｈｅｕｍａｔｉ
ｓｍ  ６０，３０９８〜３１０７，ｄｏｉ：１０．１００２／ａｒｔ．２４８０３（２０
０９）、Ｋｏｎｇ，Ｋ．Ｏ．らのＥｎｈａｎｃｅｄ  ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ  ｏｆ  ｉｎ
ｔｅｒｆｅｒｏｎ−ｉｎｄｕｃｉｂｌｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ−１０  ｃｏｒｒｅｌａｔｅｓ
ｗｉｔｈ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｍａｎｉ
ｆｅｓｔａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｌｕｐｕｓ  ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓ
ｕｓ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ａｎｄ  ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ  
１５６，１３４〜１４０，ｄｏｉ：１０．１１１１／ｊ．１３６５〜２２４９．２００９
．０３８８０．ｘ（２００９）、Ｒｏｓｅ，Ｔ．らのＩＦＮａｌｐｈａ  ａｎｄ  ｉｔｓ
ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＩＰ−１０  ａｎｄ  ＳＩＧＬＥＣ−１，ａｒ
ｅ  ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ  ｏｆ  ｄｉｓｅａｓｅ  ａｃｔｉｖｉｔｙ  ｉｎ  ｓｙｓｔ
ｅｍｉｃ  ｌｕｐｕｓ  ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ．Ａｎｎａｌｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｒ
ｈｅｕｍａｔｉｃ  ｄｉｓｅａｓｅｓ  ７２，１６３９〜１６４５，ｄｏｉ：１０．１１
３６／ａｎｎｒｈｅｕｍｄｉｓ−２０１２〜２０１５８６（２０１３））。
【０４８６】
全血中で白血球ＩＦＮによって誘導されるＩＰ−１０放出を阻害する抗ＩＦＮ−α／ω
ｍＡｂの能力をインビトロで検査した。ＩＦＮ−Ｉは、感染の制御を助けるために、ウイ
ルスなどの感染性因子に応答して急速に生成される。ヒト白血球ＩＦＮは、ウイルス感染
後に白血球によって生成され、大半がＩＦＮ−αサブタイプ及びＩＦＮ−ωからなる、天
然のＩＦＮの混合物である。ＩＦＮ−ωは、これらの調製物中の全ＩＦＮ−Ｉ活性の約１
５％を構成すると考えられる。重要なことに、感染は、ＳＬＥの誘発及び増悪の両方に潜
在的に寄与すると考えられる。この研究では、阻害剤又は対照の存在下でヒト白血球ＩＦ
Ｎを２名の健常ヒトドナーからの全血試料に添加し、血漿をＩＦＮ曝露から２４時間後の
ＩＰ−１０放出に関して評価した。抗ＩＦＮ−α／ωｍＡｂ：ＩＦＷＭ３５２２及びＩＦ
ＷＭ３５２５（図１１Ａ）、並びにＩＦＷＭ３３９９（図１１Ｂ）は全て、試験された両
方のドナー中で、白血球ＩＦＮによって誘導されたＩＰ−１０放出を用量依存的に中和し
た。
【０４８７】
実施例１２．抗ＩＦＮ−α／ω抗体はＳＬＥ免疫複合体を中和する
ＳＬＥの顕著な特徴は、典型的には臨床的に定義された疾患の発生に先立つ、抗二本鎖
ＤＮＡ（抗ｄｓＤＮＡ）などの自己抗体の存在である。核酸リガンドに結合した自己抗体
は、ＳＬＥ患者におけるＩ型ＩＦＮの内因性誘導因子であると考えられている。自己抗原
のクリアランス障害と関連した圧倒的多数の自己抗体は、ＩＦＮ生成のフィードバックサ
イクルに至り、形質細胞様樹状細胞（ｐＤＣ）への免疫複合体のＦｃ受容体依存性の内在
化が、循環するＩＦＮの増量及びＩＦＮ遺伝子シグネチャの確立につながる。
【０４８８】
我々は、より多くの疾患関連ＩＦＮ調製物を中和する抗ＩＦＮ−α／ωの能力を更に試
験した。
【０４８９】
免疫複合体を本質的に実施例１に記載される方法で調製した。続いて、これらのＳＬＥ
患者由来の免疫複合体を健常ドナーのＰＢＭＣ及び細胞培養から回収したＩＦＮ含有馴化
培地（ＩＣ９２及びＩＣ１６３）に添加した。次に、阻害剤又は対照の存在下で馴化培地
を４名の健常ドナーからの健常ドナー全血に添加して、ＩＦＮによって誘導されたＩＰ−
１０放出に対するＩＦＮ−α／ω中和の影響を決定した。ＩＦＷＭ３５２２、ＩＦＷＭ３
５２５、及びＩＦＷＭ３３９９は全て、両方のＳＬＥ免疫複合体によって誘導されたＩＦ
Ｎ調製物を用いた全ての全血ドナー中で、ＩＰ−１０放出を用量依存的に中和した。図１
２Ａは、１名のドナー（ＳＬＥドナー９２）からの抗体ＩＦＷＭ３５２２及びＩＦＷＭ２
５２５によりヒト全血中でＳＬＥ免疫複合体によって誘導されたＩＦＮに刺激されたＩＰ
−１０の放出を示す。図１２Ｂは、抗体ＩＦＷＭ３３９９及びアイソタイプ対照に関する
結果を示す。
【０４９０】
実施例１３．抗ＩＦＮ−α／ω抗体はＳＬＥ血漿を中和する
抗ＩＦＮ−α／ωｍＡｂは、両方の滅菌リガンド（免疫複合体、実施例１２）、及び微
生物リガンド（白血球ＩＦＮ、実施例１１）への曝露後にヒト初代細胞から生成された内
因性ＩＦＮ−Ｉ調製物の強力な用量依存的中和を実証した。生理学的Ｉ型ＩＦＮを中和す
るＩＦＮ−α／ωｍＡｂの効力を、ＳＬＥ患者の血清及び血漿からのＩＦＮ−Ｉ活性を中
和する抗体の能力によって更に評価した。この方法は、インビトロでは再現（recapitula
te）が困難であり得るＩＦＮスペクトルを含み得る患者からの実際に循環するＩＦＮ−Ｉ
環境を中和する抗体の能力を評価する。
【０４９１】
ＳＬＥ血清を用いるＩＳＲＥアッセイ
ＨＥＫ  Ｂｌｕｅ（α／β）細胞（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）を５０，０００細胞／ウェル
（合計容量２００μｌのＤＭＥＭ＋１０％  ＦＢＳ）でプレーティングし、３７℃で終夜
インキュベートした。翌日、本アッセイにおける３０分のインキュベーション後に１．０
以上のＯＤ達成を基準に予め選択されたプール血漿（３ドナー）又は血清（１３ドナー）
を解凍して、ＤＭＥＭ＋１０％  ＦＢＳと１：１（ｖ／ｖ）の比率で混合した。予めプレ
ーティングしたＨＥＫ  Ｂｌｕｅ細胞から上清を除去して、１００μｌのＳＬＥ血漿又は
血清／培地混合物と置き換え、３７℃で終夜インキュベートさせた。翌日、４０μｌの馴
化培地を除去し、新しいプレートに１６０μｌのＱｕａｎｔｉ−Ｂｌｕｅ基質（Ｉｎｖｉ
ｖｏＧｅｎ）を添加して、３０分間インキュベートさせた。分光光度計を用いて６５０ナ
ノメートル波長でプレートを読み取り、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍを用いてＩＣ50値
を計算した。
【０４９２】
結果
ＩＳＲＥアッセイを用いて、中国人患者のコーホート（ＳＬＥコーホート１）のＳＬＥ
血清、及び主にアフリカ系アメリカ人コーホート（ＳＬＥコーホート２）のＳＬＥ血漿を
ＩＦＮ−Ｉ活性に関して予備スクリーニングした。１．０以上のＯＤを有するＳＬＥドナ
ーの血清又は血漿試料は、アンタゴニスト抗体による阻害が容易に測定され得るように十
分なＩＦＮ−Ｉ活性の窓を有していると決定された。続いてこれらのドナー試料をプール
して、反復実験及び抗体の滴定を実現するのに十分な試料堆積を生成する血清又は血漿ス
トックを生成した。ＳＬＥ患者における定性的かつ定量的ＩＦＮ−Ｉ応答の潜在的な多様
性をより良好に捕捉するために、様々な人種／民族コーホートからのＳＬＥ患者試料を利
用した。アフリカ系アメリカ人及びアジア人ドナーは、白人ドナーと比較してより高いＩ
ＦＮ−Ｉ活性を有すると考えられる。試験された抗ＩＦＮ−α／ωｍＡｂは、プールされ
たＳＬＥ患者の血清及び血漿試料中のＩＦＮ−Ｉ活性を用量依存的に中和した。両方のＳ
ＬＥコーホートからのプール試料を用いた２つの独立した実験からのＩＣ50値を表２８に
示す。
【０４９３】
【表２８】
2020073499.tif 000032
【０４９４】
実施例１４．抗ＩＦＮ−α／ω抗体はＩＦＮ遺伝子シグネチャを中和する
Ｉ型ＩＦＮは、健常対照と比較して一部のＳＬＥ患者でも過剰発現する遺伝子のスペク
トルを誘導する。このＩＦＮ遺伝子シグネチャを示すＳＬＥ患者の血漿試料は、健常ドナ
ーＰＢＭＣ又は細胞株に添加されたときに同様の遺伝子のセットの過剰発現を誘導するこ
とができ、この活性は、ＩＦＮ−αを標的とする抗体によって主に中和される（Ｈｕａら
、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ  ａｎｄ  ｒｈｅｕｍａｔｉｓｍ  ５４，１９０６〜１９１６，ｄ
ｏｉ：１０．１００２／ａｒｔ．２１８９０（２００６））。
【０４９５】
ＳＬＥ患者のヘパリン化全血中に存在するＩＦＮ−Ｉシグネチャの正規化への抗体の効
果を決定するためのアッセイを開発した。ＩＦＮ−Ｉ誘導性遺伝子ＭＸ１（ミクソウイル
ス耐性１）発現をＩＦＮ−Ｉ活性のマーカーとして用いた。
【０４９６】
材料
ＳＬＥ又は健常血液をナトリウムヘパリン管に回収してから２〜４時間後に、２４０μ
ｌを抗ＩＦＮ−α／ω抗体又はヒトＩｇＧ１アイソタイプ対照を含む９６ウェルのＵ底プ
レートにプレーティングした。ＰＢＳに希釈した抗体を、２４０μｌの血液に３０μｌ／
ウェルで添加した。３７℃で２４時間インキュベートした後、ＰＡＸｇｅｎｅ安定試薬（
ＱＩＡＧＥＮ）を９６ディープウェルプレートに添加し、血液試料を移して、ピぺッティ
ングにより十分に混合した。プレートを封止して、更なる処理のために−８０℃で凍結し
た。解凍後、試料を２ｍｌのＳａｆｅ−Ｌｏｃｋ管（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ）に移して、５
０００×ｇで１０分間回転させた。上清を吸引して、試料ペレットを渦動によって４３２
μｌのＤＮａｓｅ／ＲＮａｓｅフリー水に再懸濁させた。試料を５０００×ｇで更に遠心
分離して、ペレットを３５０μｌのＢＲ１緩衝液に再懸濁させた。次に３００μｌのＢＲ
２緩衝液を添加し、続いて４０μｌのプロテイナーゼＫを添加し、試料を５５℃でインキ
ュベートし、８００ｒｐｍで１０分間振盪した。精製の残部に関しては製造業者のプロト
コルに従った（ＱＩＡＧＥＮ、カタログ番号７６２１６４）。各試料の全ＲＮＡのうち１
２０ｎｇをｉＳｃｒｉｐｔ  ｃＤＮＡ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓキット（ＢＩＯ−ＲＡＤ）を
用いてｃＤＮＡに変換し、ヒトＭＸ１及びβ−アクチニン（ＡＣＴＢ）用のプライマー／
プローブ対（それぞれカタログ番号Ｈｓ００８９５６０８＿ｍ１及びＨｓ０１０６０６６
５＿ｇ１）をｑＰＣＲに対して利用した。データをＶｉｉａ７  Ｒｅａｌ  Ｔｉｍｅ  Ｐ
ＣＲシステム上に収集して、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍで分析し、ＡＣＴＢ（ｄＣＴ
）に対するＭＸ１の発現の変化を示した。
【０４９７】
結果
患者の血中のＩＦＮ−Ｉシグネチャを低減させるＩＦＮ−α／ω抗体の能力を、ＭＸ１
遺伝子発現をＩＦＮ−Ｉ活性のマーカーとして用いて評価した。
【０４９８】
ＭＸ１遺伝子発現は、健常対照と比較してＳＬＥ患者の血中で約７倍増加した。試験さ
れた抗ＩＦＮ−α／ω抗体は、２４時間のインキュベーション後、ＳＬＥ患者血中のＭＸ
１発現を用量依存的に減少させ、最高の抗体濃度で、ＭＸ１の発現を健常対照で観察され
るレベル近くに正規化した。図１３は、βアクチン発現に対して正規化された１名のＳＬ
ＥドナーにおけるＭＸ１発現への抗体処置の効果を示し、これは健常対照と比較して上昇
した基準ＭＸ１発現を有する複数名のドナーを表す。
【０４９９】
実施例１５．抗ＩＦＮ−α／ω抗体はカニクイザルＩ型ＩＦＮを中和する
様々なカニクイザルＩ型ＩＦＮを中和する選択抗ＩＦＮ−α／ω抗体の能力を、ＩＳＲ
Ｅレポーター遺伝子アッセイを用いて評価した。
【０５００】
マカクザルＩＦＮ−α２（ＰＢＬ  Ａｓｓａｙ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＩＦＮ−α４（
Ｓｉｎｏ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ）、ＩＦＮ−α８（Ｓｉｎｏ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ）
、及びＩＦＮ−α１３（Ｓｉｎｏ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ）を本アッセイで使用した。各
ＩＦＮに対して予め決定されたＥＣ７５値を用いてＩＣ50値を決定した。（ＩＦＮ−α２
で０．０７８ｎｇ／ｍｌ、ＩＦＮ−α４で２．６８ｎｇ／ｍｌ、ＩＦＮ−α８で０．６６
ｎｇ／ｍｌ、ＩＦＮ−α１３で１８．４）。選択抗ＩＦＮ−α／ωｍＡｂのＩＣ50を表２
９に示す。表２０のデータは２つの独立した実験の平均である。ＩＦＮ−α／ωｍＡｂの
ＩＦＷＭ３５２５及びＩＦＷＭ３５２２は、試験に利用可能なヒト抗原とオルソロガスマ
カクザル抗原との間で同様の交差中和特性を示した。この分子がヒトＩＦＮ−αＤと同様
に位置２７（Ｓ２７）にセリンを有するため、マカクザルＩＦＮ−α１３の欠如が予期さ
れた。
【０５０１】
【表２９】
2020073499.tif 000033
【０５０２】
実施例１６．ＩＦＮ−ωＴ８０Ｅと複合したＩＦＷＭ３４２１の結晶構造
結晶化、Ｘ線データ収集、及び構造決定を、以下の変更を除いて本質的に実施例６で説
明したように実施した。
【０５０３】
複合体はＩＦＮ−ωを混合することにより調製した。比１．０５：１．００（過剰ＩＦ
Ｎ−ω）のＦａｂを４℃で終夜インキュベートし、続いて精製なしで５０ｍＭのＴｒｉｓ
（ｐＨ７．４）／２０ｍＭのＮａＣｌ中８．３７ｍｇ／ｍＬに濃縮した。Ｘ線データ収集
の結晶をＭＭＳ播種したＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５、０．２Ｍ  Ｌｉ２ＳＯ４、１８％  Ｐ
ＥＧ３３５０）から得た。
【０５０４】
ＩＦＮω／Ｆａｂ３１８６複合体のＸ線データ収集については、２０％グリセロールを
補充した合成母液（０．１Ｍ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、２０％  ＰＥＧ３３５０、０
．２Ｍ  ＬｉＳＯ４）に結晶を浸し、液体窒素中で急速凍結させた。ＡＰＳ（Ａｒｇｏｎ
ｎｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｌａｂ）でＸ線データを収集した。ＥＬＮ  ＡＴｅｐｌｙａｋ
−２０１３−００１４。回折データをＸＤＳで処理した。構造精密化統計を表３０に提供
する。
【０５０５】
【表３０】
2020073499.tif 000034
【０５０６】
ＩＦＮω／Ｆａｂ３４２１の結晶構造を１．９Åと決定した（表３０）。ＩＦＮ−ωモ
デルは２３〜３９及び１１８〜１５３の残基を含んでいた。ＩＦＮ−ω分子の大半は電子
密度を全く有さず、これらのための余地が結晶内に存在しなかったが、これはＩＦＮ−ω
の開裂も起きたことを示す。
【０５０７】
ＩＦＮ−ω／Ｆａｂ３４２１複合体の全体的な構造は、ＩＦＮω／ＦａｂＭ３７１と非
常に似通っていた。個別の成分（ＶＨ、ＶＬ、及びＩＦＮω）の主鎖構造は全て、ほぼ同
一であった（それぞれＣα  ｒｍｓｄ  ０．１７、０．２３、及び０．３６Å）。
【０５０８】
しかしながら、多くの有意な構造的差異が存在した。第１に、２つの構造をＶＬ上に重
ね合わせて、ＶＨを４度回転させ、抗原を１１度回転させ、その結果、ＩＦＮ−ω分子を
ＶＬに対して大きくシフトさせる。第２に、水素結合及び水構造（特にＷＣ２）は、２つ
の構造間で異なった（図１４Ａ及び１４Ｂ）。ＩＦＮ−ωのＲ３３は、患者のＭ３７１複
合体内にＨＣＤＲ３のＤ１０７との塩橋を含む６つの水素結合を作製した（図１４Ａ）。
成熟形態では、ＩＦＮ−ωのＲ３３及びＶＨのＤ１０７の両方の側鎖の電子密度の定義は
さほど明確ではなく、これらは遠く離れており（図示せず）、したがって電荷−電荷相互
作用の数及び強さを減少させるように考えられる（図１４Ｂ）。Ｍ３７１中のＶＨのＨ９
９に関与する水分子は、現在は存在しない（図１４Ａ、１４Ｂ）。第３に、ＨＣＤＲ３の
Ｆ１０８は、抗原結合に関与していないが、これはＶＬ／ＶＨ界面の一部である。これは
存在する構造内に２つの代替的コンフォメーションを採用する（図１４Ｃ）。ＶＬのＬ９
６Ｉ突然変異と共に、ＶＬ／ＶＨドメインの相対回転が、これを単一の回転異性体に低減
させた。したがって、これは成熟突然変異のその部分がより良好なＦｖ対合をもたらした
と考えられる。第４に、成熟中に２つの位置をＦ（Ａ５０Ｆ及びＹ３２Ｆ）に突然変異さ
せた。Ｙ３２はＩＦＮ−ω主鎖を有する２つの水素結合を形成する。しかしながら、これ
らもＦへの突然変異の結果として失われた（図１４Ｄ）。Ａ５０Ｆ変異は抗原との新たな
接触を全く生じさせない。むしろ、フェニル環がＶＨのＷ１０４とスタックして、これが
続いて抗原とパックする（packs）（図１４Ｄ）。ＬＣＤＲ３では、２つの更なる疎水性
突然変異（Ｔ９４Ｌ及びＬ９６Ｉ）が、抗原のＬ３０及びＦ２７に対するより良好な疎水
性ポケットを形成すると考えられる。２つの更なる負電荷突然変異（Ｓ３９Ｄ及びＳ９３
Ｄ）は、溶媒に対する場合を除いていかなる相互作用も形成しない。全体的には、親和性
の改善は、極性相互作用を低減させるが、抗原及びＶＬ／ＶＨ対合と共に、より良好な疎
水性パッキングを支持／強化する成熟プロセスの結果である。
【０５０９】
エピトープ及びパラトープ残基図１５は、ＩＦＮ−ωとＩＦＷＭ３４２１との間の２Ｄ
相互作用ｍＡｂを示す。エピトープ残基はＭ３７１構造のものと同一である。パラトープ
残基もほぼ同一である（図１５）。しかしながら、上述したように、成熟プロセスは、多
くの構造的及び相互作用の差異をもたらし、これが結合親和性の改善の原因である可能性
がある。
【０５１０】
実施例１７．ＩＦＮ−ω  Ｔ８０Ｅと複合したＩＦＷＭ３５２５  １の結晶構造
結晶化、Ｘ線データ収集、及び構造決定を、本質的に実施例６で説明したように実施し
た。
【０５１１】
複合体を、ＩＦＮ−ωとＩＦＷＭ３５２５のＦａｂとを１．０５：１．０のモル比（過
剰ＩＦＮ−ω、１．９２：１．１２ｍｇ）で混合し、４℃で終夜インキュベートし、２０
ｍｍ  ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、０．２５ＭのＮａＣｌ（１０％グリセロール）で平衡
したＳｕｐｅｒｄｅｘ  ２００カラムで精製し、続いて９．７９ｍｇ／ｍｌに濃縮するこ
とによって調製した。Ｘ回析に適する結晶を、ＩＦＮ−ω／Ｆａｂ３１８６結晶からの種
を用いたＭＭＳ播種によって、１８％ＰＥＧ  ３Ｋ、０．２Ｍクエン酸ナトリウムから得
た。
【０５１２】
Ｘ線データ収集のために、ＩＦＮ−ω／ＩＦＷＭ３５２５複合体の１結晶を合成母液（
２０％  ＰＥＧ３３５０、０．２Ｍクエン酸ナトリウム２５％グリセロール）に数秒間浸
漬し、液体窒素中で急速凍結させた。ＡＰＳ（Ａｒｇｏｎｎｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｌａ
ｂ）でＸ線データを収集した。回折データをＸＤＳ１０で処理した。
【０５１３】
ＩＦＮ−ω／ＩＦＷＭ３５２５複合体の構造を、Ｐｈａｓｅｒを用いた分子置換法（Ｍ
Ｒ）により解析した。ＭＲの検索モデルは、ＩＦＮ−ω／ＦａｂＭ３７１の結晶構造であ
った。続いてＰＨＥＮＩＸで構造を精密化し、ＣＯＯＴを用いてモデルの調整を実行した
。他の全ての結晶学的計算は、ＣＣＰ４プログラムスイートを用いて行った。全ての分子
グラフィックを、ＰｙＭｏｌを用いて生成した。構造精密化統計を表３１に提供する。
【０５１４】
【表３１】
2020073499.tif 000035
【０５１５】
ＩＦＮ−ω／ＩＦＷＭ３５２５８複合体の全体的な構造は、ＩＦＮ−ω／ＦａｂＭ３７
１と非常に似通っていた。ＩＦＮ−ω分子の分子構造モデルはヘリカルセグメントＡＢ並
びにヘリックスＤ及びＥに対応する残基２３〜３９及び１１９〜１５３を含む。ヘリック
スＡ、Ｂ、及びＣ、並びに接続ループを無秩序化する。ＩＦＮ−ωのこれらの失われた部
分は、Ｍ３７１及びＭ３４２１複合体構造で判明した限定されたタンパク質分解のためで
ある可能性がある。Ｆａｂ分子構造モデルは、軽鎖の場合１〜２１３の残基、重鎖の場合
１〜２２２の残基を含む。Ｃ末端６ｘＨｉｓタグ、鎖間ジスルフィド結合、及び重鎖の１
３７〜１４１の残基を無秩序化する。低い回折分解能のため、溶媒水分子を含まなかった
。
【０５１６】
図１６はＩＦＮ−ωとＩＦＷＭ３５２５のＦａｂとの間の２次元相互作用マップを示す
。Ａｂ／Ａｇ相互作用の大部分は、ＡＢへリックスのエピトープ残基Ｆ２７、Ｌ３０、及
びＲ３３によるものである。したがって、ＩＦＮ−ωのこの領域がエピトープの主な部分
を構成していると考えられる。親Ｍ３７１と比較して、このエピトープは、ＩＦＷＭ３５
２５のＨＣＤＲ３との相互作用を形成するＩＦＮ−ωのヘリックスＥからの残基をもう２
つ含む。
【０５１７】
ＩＦＷＭ３５２５は、ＩＦＮ−ω及びＩＦＮ−αサブタイプの大半に対して広範な結合
特異性を有する。これは、ＩＦＮβ及びＩＦＮ−α−Ｄ／１には結合しない。ＩＦＮの配
列アラインメント（図９）は、ＩＦＮ−ω及びＩＦＮ−αサブタイプの間でＩＦＷＭ３５
２５エピトープ残基の大半が保存されていることを示す。更に、ＩＦＮ−α（ＰＤＢコー
ド２ＲＨ２、（これは、ＰＤＢ中でＣαの痕跡のみが利用可能であったため、蓄積したデ
ータを用いて再構成及び精密化した）及びＩＦＮ−ωのエピトープ残基の構造の比較は、
エピトープ残基が非常に似通った主鎖及び側鎖構造を有することを示す。したがって、配
列及び構造の保存（又はエピトープ保存）は、ＩＦＷＭ３５２５によるＩＦＮ−α／ωの
広範な結合の原因であると考えられる。
【０５１８】
【表３２−１】
2020073499.tif 000036
【０５１９】
【表３２−２】
2020073499.tif 000037
【０５２０】
【表３２−３】
2020073499.tif 000038
【０５２１】
【表３２−４】
2020073499.tif 000039
【０５２２】
【表３２−５】
2020073499.tif 000040
【０５２３】
【表３２−６】
2020073499.tif 000041
【０５２４】
【表３２−７】
2020073499.tif 000042
【０５２５】
【表３２−８】
2020073499.tif 000043
【０５２６】
【表３２−９】
2020073499.tif 000044
【０５２７】
【表３２−１０】
2020073499.tif 000045
【０５２８】
【表３２−１１】
2020073499.tif 000046
【０５２９】
【表３２−１２】
2020073499.tif 000047
【０５３０】
【表３２−１３】
2020073499.tif 000048
【０５３１】
【表３２−１４】
2020073499.tif 000049
【０５３２】
【表３２−１５】
2020073499.tif 000050
【０５３３】
【表３２−１６】
2020073499.tif 000051
【０５３４】
【表３２−１７】
2020073499.tif 000052
【０５３５】
【表３２−１８】
2020073499.tif 000053
【０５３６】
【表３２−１９】
2020073499.tif 000054
【０５３７】
【表３２−２０】
2020073499.tif 000055
【０５３８】
【表３２−２１】
2020073499.tif 000056
【０５３９】
【表３２−２２】
2020073499.tif 000057
【０５４０】
【表３２−２３】
2020073499.tif 000058
【０５４１】
【表３２−２４】
2020073499.tif 000059
【図１Ａ】
2020073499.tif 000060
【図１Ｂ】
2020073499.tif 000061
【図１Ｃ】
2020073499.tif 000062
【図２】
2020073499.tif 000063
【図３】
2020073499.tif 000064
【図４Ａ】
2020073499.tif 000065
【図４Ｂ】
2020073499.tif 000066
【図５Ａ】
2020073499.tif 000067
【図５Ｂ】
2020073499.tif 000068
【図６】
2020073499.tif 000069
【図７Ａ】
2020073499.tif 000070
【図７Ｂ】
2020073499.tif 000071
【図８Ａ】
2020073499.tif 000072
【図８Ｂ】
2020073499.tif 000073
【図８Ｃ】
2020073499.tif 000074
【図９】
2020073499.tif 000075
【図１０】
2020073499.tif 000076
【図１１Ａ】
2020073499.tif 000077
【図１１Ｂ】
2020073499.tif 000078
【図１２Ａ】
2020073499.tif 000079
【図１２Ｂ】
2020073499.tif 000080
【図１３Ａ】
2020073499.tif 000081
【図１３Ｂ】
2020073499.tif 000082
【図１４Ａ】
2020073499.tif 000083
【図１４Ｂ】
2020073499.tif 000084
【図１４Ｃ】
2020073499.tif 000085
【図１４Ｄ】
2020073499.tif 000086
【図１５】
2020073499.tif 000087
【図１６】
2020073499.tif 000088
【配列表】
2020073499000001.app
【手続補正書】
【提出日】令和2年1月17日(2020.1.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗体又はその抗原結合断片を含む医薬組成物であって、
抗体又はその抗原結合断片は重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含み、
（ｉ）重鎖可変領域が、それぞれ配列番号１０９、１１３、及び１１６の重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）１（ＨＣＤＲ１）、２（ＨＣＤＲ２）、及び３（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含み、並びに軽鎖可変領域が、それぞれ配列番号８２、９４、及び９９の軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１（ＬＣＤＲ１）、２（ＬＣＤＲ２）、及び３（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含み、あるいは
（ｉｉ）重鎖可変領域が、配列番号２８の重鎖可変領域アミノ酸配列を含み、及び軽鎖可変領域が、配列番号１５０の軽鎖可変領域アミノ酸配列を含み、
患者における免疫媒介炎症性疾患、自己免疫疾患、又は慢性ウイルス感染症の治療に用いるためのものであり、
例えば、ここで、
（ａ）前記免疫媒介炎症性疾患又は前記自己免疫疾患とは、狼瘡、乾癬、免疫性血小板減少症（ＩＴＰ）、エカルディ−グチエール症候群（ＡＧＳ）、全身性硬化症、シェーグレン症候群、筋炎、分類不能型免疫不全症（ＣＶＩＤ）、自己免疫性甲状腺疾患、Ｉ型糖尿病、関節リウマチ、移植片拒絶反応、又は移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）であり、好ましくは、狼瘡が、全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）又は皮膚紅斑性狼瘡（ＣＬＥ）であり、例えば、前記患者が狼瘡腎炎を有する；
（ｂ）前記患者がＩ型インターフェロンシグネチャを示す；及び／又は
（ｃ）前記慢性ウイルス感染症がＨＩＶ又はＣ型肝炎感染症である、
医薬組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０５４１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０５４１】
【表３２−２４】
2020073499.tif 000089
以下の態様を包含し得る。
［１］  ヒトインターフェロンオメガ（ＩＦＮ−ω）及び少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトインターフェロンアルファ（ＩＦＮ−α）サブタイプと結合し、それらの生物活性を中和する、単離されたモノクローナル抗体。
［２］  前記ヒトＩＦＮ−ω及び前記ヒトＩＦＮ−αサブタイプの前記生物活性が、シグナル伝達性転写因子２（ＳＴＡＴ２）、インターフェロン調節因子９（ＩＲＦ９）、及びＳＥＡＰを安定に発現するＨＥＫ２９３細胞におけるインターフェロン誘導性ＩＳＧ５４プロモーター下での前記ヒトＩＦＮ−ω又は前記ヒトＩＦＮ−αサブタイプによって誘導された分泌胚アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）の発現である、上記［１］に記載の抗体。
［３］  前記抗体が、少なくとも約１×１０−９Ｍ以下、約１×１０−１０Ｍ以下、約５×１０−１１Ｍ以下、又は約１×１０−１１Ｍ以下のＩＣ５０で前記ヒトＩＦＮ−ωの前記生物活性を中和する、上記［２］に記載の抗体。
［４］  前記抗体が、少なくとも約１×１０−１０Ｍ以下のＩＣ５０値で前記ヒトＩＦＮ−ωの前記生物活性を中和する、上記［３］に記載の抗体。
［５］  前記抗体が、約１×１０−１０Ｍ〜約６×１０−１２ＭのＩＣ５０値で前記ヒトＩＦＮ−ωの前記活性を中和する、上記［４］に記載の抗体。
［６］  前記抗体が、少なくとも約２×１０−１０Ｍ以下、約１．５×１０−１０Ｍ以下、又は約１×１０−１０Ｍ以下のＩＣ５０値で少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、又は１１のヒトＩＦＮ−αサブタイプを中和する、上記［５］に記載の抗体。
［７］  前記ＩＦＮ−αサブタイプが、ＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＫ、ＩＦＮ−αＷＡ、及びＩＦＮ−α４ａからなる群から選択される、上記［６］に記載の抗体。
［８］  ａ）配列番号１０９のＨＣＤＲ１アミノ酸配列、
ｂ）配列番号１１１、１１２、又は１１３のＨＣＤＲ２アミノ酸配列、
ｃ）配列番号１１５又は１１６のＨＣＤＲ３アミノ酸配列、
ｄ）配列番号７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、又は９１のＬＣＤＲ１アミノ酸配列、
ｅ）配列番号９３、９４、又は９５のＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び
ｆ）配列番号９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、１０３、１０４、１０５、１０６、又は１０７のＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む、上記［６］に記載の抗体。
［９］  前記抗体が、それぞれ配列番号１０９、１１３、及び１１６の重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）１（ＨＣＤＲ１）、２（ＨＣＤＲ２）、及び３（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列、並びにそれぞれ配列番号８２、９４、及び９９の軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１（ＬＣＤＲ１）、２（ＬＣＤＲ２）、及び３（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む、上記［８］に記載の抗体。
［１０］  前記抗体が、それぞれ配列番号１０９、１１４、及び１２１の重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）１（ＨＣＤＲ１）、２（ＨＣＤＲ２）、及び３（ＨＣＤＲ３）のアミノ酸配列、並びにそれぞれ配列番号１１８、１１９、及び１２０の軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）１（ＬＣＤＲ１）、２（ＬＣＤＲ２）、及び３（ＬＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含む、上記［６］に記載の抗体。
［１１］  前記抗体が、ＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＫ、ＩＦＮ−αＷＡ、及びＩＦＮ−α４ａからなる群から選択される少なくとも６つのヒトＩＦＮ−αサブタイプを中和する、上記［６］に記載の抗体。
［１２］  前記抗体が、それぞれ配列番号１０９、１１４、１２１、１５９、１１９、及び１６０のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む、上記［１１］に記載の抗体。
［１３］  前記抗体が、ＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＩ、ＩＦＮ−αＪ１、ＩＦＮ−αＫ、ＩＦＮ−αＷＡ、及びＩＦＮ−α４ａからなる群から選択される少なくとも１０のヒトＩＦＮ−αサブタイプを中和する、上記［６］に記載の抗体。
［１４］  前記抗体が、少なくともアミノ酸残基Ｆ２７、Ｌ３０、及びＲ３３において配列番号１のヒトＩＦＮ−ωと結合する、上記［１３］に記載の抗体。
［１５］  前記抗体が、それぞれ配列番号１０９、１１４、１２１、１６１、１１９、及び１６２のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む、上記［１４］に記載の抗体。
［１６］  前記抗体が、少なくとも前記ヒトＩＦＮ−αサブタイプのＩＦＮ−αＡ、ＩＦＮ−αＢ２、ＩＦＮ−αＣ、ＩＦＮ−αＦ、ＩＦＮ−αＧ、ＩＦＮ−αＨ２、ＩＦＮ−αＪ１、及びＩＦＮ−α４ａを中和する、上記［１５］に記載の抗体。
［１７］  前記抗体が、ＩＦＮ−αＩ、ＩＦＮ−αＫ、又はＩＦＮ−αＷＡを更に中和する、上記［１６］に記載の抗体。
［１８］  前記抗体が、
ａ）２５０Ｕ／ｍＬのインターフェロンによって誘導された全血中での白血球インターフェロンによって誘導されたＩＰ−１０の放出を、１０μｇ／ｍｌの抗体の存在下で前記抗体の不在下と比較して約５０％以上阻害する、あるいは
ｂ）全血中の全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）免疫複合体によって誘導されたＩＰ−１０の放出を、１０μｇ／ｍｌの抗体の存在下で前記抗体の不在下と比較して約５０％以上阻害する、上記［１４］に記載の抗体。
［１９］  前記抗体が、配列番号２８と少なくとも９０％、９５％、又は９７％同一の重鎖可変領域（ＶＨ）アミノ酸配列、及び配列番号１５０と少なくとも９０％、９５％、又は９７％同一の軽鎖可変領域（ＶＬ）アミノ酸配列を含む、上記［５］に記載の抗体。
［２０］  配列番号、
ａ）それぞれ１０９、１１３、１１６、７７、９３、及び１０４、
ｂ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８５、９３、及び９６、
ｃ）それぞれ１０９、１１３、１１５、７９、９５、及び１０７、
ｄ）それぞれ１０９、１１３、１１６、７６、９３、及び１０３、
ｅ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８５、９３、及び９６、
ｆ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８９、９５、及び１００、
ｇ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８６、９３、及び１０５、
ｈ）それぞれ１０９、１１３、１１５、７６、９３、及び１０３、
ｉ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８０、９３、及び９７、
ｊ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８４、９３、及び９７、
ｋ）それぞれ１０９、１１３、１１６、９０、９３、及び９７、
ｌ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８８、９３、及び１０２、
ｍ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８７、９３、及び１０５、
ｎ）それぞれ１０９、１１３、１１６、９１、９３、及び１０６、
ｏ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８０、９３、及び９７、
ｐ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８３、９３、及び１０１、
ｑ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８２、９４、及び９８、
ｒ）それぞれ１０９、１１３、１１５、７８、９５、及び１００、
ｓ）それぞれ１０９、１１１、１１６、８１、９３、及び１０６、
ｔ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８２、９４、及び９９、
ｕ）それぞれ１０９、１１３、１１５、８１、９３、及び１０６、
ｖ）それぞれ１０９、１１２、１１６、８１、９３、及び１０６、あるいは
ｗ）それぞれ１０９、１１３、１１６、８１、９３、及び１０６のＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３の配列を含む、上記［１９］に記載の抗体。
［２１］  前記抗体が、ヒト化されている又はヒトである、上記［２０］に記載の抗体。
［２２］  前記ヒト抗体重鎖可変領域フレームワークがヒト生殖系列遺伝子ＩＧＨＶ５−５１（配列番号１５５）由来である、上記［２１］に記載の抗体。
［２３］  前記ヒト抗体軽鎖可変領域フレームワークがヒト生殖系列遺伝子ＩＧＫＶ１Ｄ−３９（配列番号１５６）由来である、上記［２２］に記載の抗体。
［２４］  前記抗体が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４サブタイプのものである、上記［２１］に記載の抗体。
［２５］  前記抗体がＦｃ領域内に少なくとも１つの置換を有する、上記［２４］に記載の抗体。
［２６］  前記置換が、置換Ｍ２５２Ｙ／Ｓ２５４Ｔ／Ｔ２５６Ｅ、Ｖ２３４Ａ／Ｇ２３７Ａ／Ｐ２３８Ｓ／Ｈ２８Ａ／Ｖ３０９Ｌ／Ａ３３０Ｓ／Ｐ３３１Ｓ、又はＰ２３８Ｓ／Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａを含み、残基の番号付けがＥＵ番号付けに準ずる、上記［２５］に記載の抗体。
［２７］  重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、
ａ）前記ＶＨが配列番号２８、３１、１５７、又は１５８のアミノ酸配列を含む、上記［１９］に記載の抗体。
［２８］  前記ＶＬが配列番号３５、３９、４０、４２、４６、５２、５３、５４、５７、６１、６２、６８、７１、７３、７５、１３５、又は１５０のアミノ酸配列を含む、上記［２７］に記載の抗体。
［２９］  配列番号、
ａ）それぞれ２８及び４０、
ｂ）それぞれ２８及び３９、
ｃ）それぞれ３１及び６２、
ｄ）それぞれ２８及び５４、
ｅ）それぞれ３１及び３９、
ｆ）それぞれ３１及び６８、
ｇ）それぞれ２８及び４２、
ｈ）それぞれ３１及び５４、
ｉ）それぞれ２８及び５３、
ｊ）それぞれ２８及び７３、
ｋ）それぞれ２８及び７５、
ｌ）それぞれ２８及び５２、
ｍ）それぞれ２８及び３５、
ｎ）それぞれ２８及び１３５、
ｏ）それぞれ３１及び５３、
ｐ）それぞれ２８及び４６、
ｑ）それぞれ２８及び６１、
ｒ）それぞれ３１及び５７、
ｓ）それぞれ１５７及び７１、
ｔ）それぞれ２８及び１５０、
ｕ）それぞれ３１及び７１、
ｖ）それぞれ１５８及び７１、あるいは
ｗ）それぞれ２８及び７１、の前記ＶＨ及び前記ＶＬを含む、上記［２８］に記載の抗体。
［３０］  配列番号２８のＶＨアミノ酸配列及び配列番号１５０のＶＬアミノ酸配列を含む、上記［１９］に記載の抗体。
［３１］  前記抗体が二重特異性である、上記［１］、［２０］、又は［２９］に記載の抗体。
［３２］  前記抗体が、ＢＬｙＳ、ＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−６、ＣＤ２７、ＢＤＣＡ２、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３、ＩＦＮ−αＤ、ＩＬ−１７、ＣＤ２０、ＩＬ−１０、ＣＤ２２、ＩＬ−２１、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳＬ、又はＩＦＮ−γと結合する、上記［３１］に記載の抗体。
［３３］  上記［１］、［２０］、又は［２９］に記載の抗体と、医薬的に許容される担体と、を含む、医薬組成物。
［３４］  （ｉ）上記［２０］若しくは［２９］に記載の抗体ＶＨ若しくはＶＬ、又は（ｉｉ）上記［２０］若しくは［２９］に記載の抗体ＶＨ及びＶＬをコードするポリヌクレオチド。
［３５］  上記［３５］のポリヌクレオチドを含むベクター。
［３６］  上記［３５］のベクターを含む宿主細胞。
［３７］  上記［２０］に記載の抗体の生成方法であって、前記抗体が発現する条件下で上記［３６］に記載の宿主細胞を培養することと、前記宿主細胞によって生成された前記抗体を回収することと、を含む、方法。
［３８］  免疫媒介炎症性疾患、自己免疫疾患、又は慢性ウイルス感染症の治療方法であって、上記［１］、［２０］、又は［２９］に記載の単離された抗体の治療有効量を、それを必要とする患者に、前記疾患又は前記感染症を治療するのに十分な時間投与することを含む、方法。
［３９］  前記免疫媒介炎症性疾患又は前記自己免疫疾患とは、狼瘡、乾癬、免疫性血小板減少症（ＩＴＰ）、エカルディ−グチエール症候群（ＡＧＳ）、全身性硬化症、シェーグレン症候群、筋炎、分類不能型免疫不全症（ＣＶＩＤ）、自己免疫性甲状腺疾患、Ｉ型糖尿病、関節リウマチ、移植片拒絶反応、又は移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）である、上記［３８］に記載の方法。
［４０］  狼瘡が、全身性紅斑性狼瘡（ＳＬＥ）又は皮膚紅斑性狼瘡（ＣＬＥ）である、上記［３９］に記載の方法。
［４１］  前記患者が狼瘡腎炎を有する、上記［４０］に記載の方法。
［４２］  前記患者がＩ型インターフェロンシグネチャを示す、上記［３８］に記載の方法。
［４３］  前記慢性ウイルス感染症がＨＩＶ又はＣ型肝炎感染症である、上記［３８］に記載の方法。
［４４］  前記抗体が上記［２０］又は［２９］に記載の抗体を含む、上記［３８］に記載の方法。
［４５］  前記抗体が、二重特異性抗体である、上記［３８］に記載の方法。
［４６］  前記二重特異性抗体が、ＢＬｙＳ、ＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−６、ＣＤ２７、ＢＤＣＡ２、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３、ＩＦＮ−αＤ、ＩＬ−１７、ＣＤ２０、ＩＬ−１０、ＣＤ２２、ＩＬ−２１、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳＬ、又はＩＦＮ−γを中和する、上記［４５］に記載の方法。
［４７］  第２の治療薬を更に投与する、上記［３８］に記載の方法。
［４８］  前記第２の治療薬が、ＢＬｙＳ、ＣＤ４０Ｌ、ＩＬ−６、ＣＤ２７、ＢＤＣＡ２、ＩＬ−１２、ＩＬ−２３、ＩＦＮ−αＤ、ＩＬ−１７、ＣＤ２０、ＩＬ−１０、ＣＤ２２、ＩＬ−２１、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳＬ、又はＩＦＮ−γと結合する抗体である、上記［４７］に記載の方法。
［４９］  前記第２の治療薬がコルチコステロイド、抗マラリア剤、免疫抑制剤、細胞毒性剤、又はＢ細胞調節剤である、上記［４７］に記載の方法。
［５０］  前記第２の治療薬がプレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デフラザコート、ヒドロキシクロロキン、アザチオプリン、メトトレキサート、シクロホスファミド、ミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）、ミコフェノール酸ナトリウム、シクロスポリン、レフルノミド、タクロリムス、リツキシマブ（商標）、又はベリムマブ（商標）である、上記［４９］に記載の方法。
［５１］  前記抗体がＩＦＮ−αＤ、ＩＦＮ−α１、及び／又はＩＦＮ−βを中和しない、上記［１］〜［３２］のいずれか一項に記載の抗体。
【外国語明細書】
2020073499000001.pdf