(57)【要約】【課題】同様の薬剤の入手できる製剤と比較したとき、投与時の特定の非所望の副作用の減少効果を有する、非経口使用又は他の内服のための医薬活性剤を含有する医薬組成物の提供【解決手段】本発明は、医薬と医薬として許容できる担体を含有する医薬組成物であって、医薬として許容できる担体は、蛋白質、例えば、ヒト血清アルブミンおよび／またはデフェロキサミンを含む、医薬組成物に関する。ヒト血清アルブミンは、ヒトへの医薬組成物の投与の１つ以上の副作用を減少するのに有効な量で存在する。本発明はまた、ヒトへの医薬組成物の投与の１つ以上の副作用を減少するための方法、微生物増殖および医薬組成物の酸化の阻害、ならびに、細胞への医薬の輸送および結合の増大方法をも提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
パクリタキセルと医薬として許容できる担体とを含有する注射用医薬組成物であって、該医薬として許容できる担体は、アルブミンを含み、該組成物中の該アルブミンと該パクリタキセルとは粒子として調製され、該粒子は２００ｎｍ未満の粒子サイズを有し、該組成物中のアルブミンとパクリタキセルとの重量比が１：１〜９：１である、医薬組成物。
【請求項２】
前記アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
クレモホール非含有である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項４】
前記医薬組成物中のアルブミンとパクリタキセルとの比（ｗ／ｗ）が１：１〜５：１である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項５】
前記医薬組成物中のアルブミンとパクリタキセルとの比（ｗ／ｗ）が１：１〜９：１である、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記医薬組成物中のアルブミンとパクリタキセルとの比（ｗ／ｗ）が、９：１である請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項７】
パクリタキセルと医薬として許容できる担体とを含有する注射用液体医薬組成物であって、該医薬として許容できる担体は、アルブミンを含み、該組成物中の該アルブミンと該パクリタキセルは粒子として調製され、該粒子は２００ｎｍ未満の粒子サイズを有し、該組成物中のアルブミンとパクリタキセルの重量比が１：１〜９：１であり、該液体医薬組成物が重量で０．５％〜５％のアルブミンを含み、さらに生理食塩水を含む、液体医薬組成物。
【請求項８】
前記アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項７に記載の液体医薬組成物。
【請求項９】
クレモホール非含有である、請求項７に記載の液体医薬組成物。
【請求項１０】
前記医薬組成物中のアルブミンとパクリタキセルとの重量比が１：１〜９：１である、請求項７に記載の液体医薬組成物。
【請求項１１】
前記医薬組成物中のアルブミンとパクリタキセルとの重量比が、９：１である請求項７に記載の液体医薬組成物。
【請求項１２】
重量で５％アルブミンを含有する、請求項７に記載の液体医薬組成物。
【請求項１３】
前記組成物中のｐＨが５．０〜８．０である、請求項７に記載の液体医薬組成物。
【請求項１４】
前記アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項１３に記載の液体医薬組成物。
【請求項１５】
前記医薬組成物中のアルブミンとパクリタキセルとの重量比が１：１〜９：１である、請求項１３に記載の液体医薬組成物。
【請求項１６】
前記医薬組成物中のアルブミンとパクリタキセルとの重量比が、９：１である請求項１３に記載の液体医薬組成物。
【請求項１７】
前記アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項１０に記載の液体医薬組成物。
【請求項１８】
前記アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項１１に記載の液体医薬組成物。
【請求項１９】
前記アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項１５に記載の液体医薬組成物。
【請求項２０】
前記アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項１６に記載の液体医薬組成物。
【請求項２１】
パクリタキセルと医薬として許容できる担体とを含有する注射用医薬組成物を含む密封容器であって、該医薬として許容できる担体は、アルブミンを含み、該組成物中の該アルブミンと該パクリタキセルは粒子として調製され、該粒子は２００ｎｍ未満の粒子サイズを有し、該組成物中のアルブミンとパクリタキセルの重量比が１：１〜９：１である、密封容器。
【請求項２２】
前記アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項２１に記載の密封容器。
【請求項２３】
前記医薬組成物中のアルブミンとパクリタキセルとの重量比が１：１〜９：１である、請求項２１に記載の密封容器。
【請求項２４】
前記医薬組成物中のアルブミンとパクリタキセルとの重量比が、９：１である請求項２１に記載の密封容器。
【請求項２５】
単回投与用容器である、請求項２１に記載の密封容器。
【請求項２６】
多回投与用容器である、請求項２１に記載の密封容器。
【請求項２７】
前記医薬組成物が液体組成物である、請求項２１に記載の密封容器。
【請求項２８】
前記医薬組成物が乾燥組成物である、請求項２１に記載の密封容器。
【請求項２９】
前記医薬組成物が凍結乾燥されている、請求項２１に記載の密封容器。
【請求項３０】
前記アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項２９に記載の密封容器。
【請求項３１】
前記医薬組成物中のアルブミンとパクリタキセルとの重量比が１：１〜９：１である、請求項２９に記載の密封容器。
【請求項３２】
前記医薬組成物中のアルブミンとパクリタキセルとの重量比が、９：１である請求項２９に記載の密封容器。
【請求項３３】
前記アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項３１に記載の密封容器。
【請求項３４】
前記アルブミンがヒト血清アルブミンである、請求項３２に記載の密封容器。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連特許出願への相互参照
本特許出願は、２００２年１２月９日出願の米国仮特許出願第６０／４３２，３１７号、２００３年１２月３日出願の米国仮特許出願（弁理士整理番号２２５５１９）、２００３年１２月４日出願の米国仮特許出願（弁理士整理番号２２５５４９）、及び２００３年１２月５日出願の米国仮特許出願（弁理士整理番号２２５５８５）の利益を主張する。
【０００２】
発明の分野
本発明は、同様の薬剤の入手できる製剤と比較したとき、投与時の特定の非所望の副作用の減少効果を有する、非経口使用又は他の内服のための医薬活性剤を含有する医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
非経口使用の多数の薬剤、特に静脈内投与される薬剤が、静脈刺激、静脈炎、注射での焼灼や疼痛、静脈血栓、血管外漏出、及び他の投与関連副作用などの望ましくない副作用を引き起こすことはよく認識されている。これらの薬剤の多数は水不溶性であり、従って、患者に投与するときに刺激性、アレルギー性、又は毒性である、可溶化剤、界面活性剤、溶媒、及び／又は乳化剤と共に製剤化される（例えば、Ｂｒｉｇｇｓｅｔａｌ．，  Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｓ  ３７，  １０９９  （１９８２）、及びＷａｕｇｈ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｈｏｓｐ．  Ｐｈａｒｍａｃｉｓｔｓ，  ４８，１５２０（１９９１）参照）。しばしば、製剤中に存在する遊離薬剤は、投与で疼痛又は刺激を引き起こす。例えば、進行性非小細胞肺癌の最前線化学療法としてイフォスファミドとビノレルビンの末梢静脈投与を受けた患者の５０％で静脈炎が観察された（例えば、Ｖａｌｌｅｊｏｅｔａｌ．，  Ａｍ．  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｏｎｃｏｌ．，  １９（６），  ５８４−８  （１９９６）参照）。更に、バンコマイシンは、静脈炎などの副作用を誘導することが示されている（例えば、ＬｏｐｅｓＲｏｃｈａｅｔ  ａｌ．，  Ｂｒａｚ．  Ｊ．  Ｉｎｆｅｃｔ．  Ｄｉｓ．，  ６（４），  １９６−２００  （２００２）参照）。固形腫瘍を有する患者でシスプラチン、ゲンシタビン、及びＳＵ５４１６の使用により、深部静脈血栓や静脈炎などの有害事象が起こった（例えば、Ｋｕｅｎｅｎｅｔａｌ．，  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｏｎｃｏｌ．，２０（６），  １６５７−６７  （２００２）参照）。更に、麻酔剤であるプロポフォールは、特に、レシチン安定化脂肪エマルジョンとして投与されるとき、注射時疼痛、焼灼及び静脈刺激を引き起こしうる（例えば、Ｔａｎｅｔａｌ．，  Ａｎａｔｈｅｓｉａ，  ５３，  ４６８−７６，  （１９９８）参照）。投与関連副作用を示す他の薬剤として、例えば、タキソール（パクリタキセル）（例えば、タキソールＩ．Ｖ．用の添付文書参照）、コダロン（アミオダロン塩酸塩）（例えば、コダロンＩ．Ｖ．用の添付文書参照）、甲状腺ホルモンＴ３即ちリオチロニン（トリオスタットとして市販）、チオテパ、ブレオマイシン、及び診断用放射線造影剤が挙げられる。
【０００４】
注射用薬剤、特に水不溶性薬剤の製造に関連した別の問題は、無菌性の保証である。薬剤エマルジョン／分散液の無菌製造は、製造前の全ての成分の完全滅菌、次いで、製造の全ての工程での完全無菌技術によって達成されうる。しかし、このような方法は、時間がかかり、高価である。更に、製造又は保管中の空気への暴露による薬剤の製剤の酸化により、例えば、ｐＨ減少、薬剤分解、及び脱色が起こりえ、それによって、薬剤の製剤の不安定化及び／又は保存寿命の減少が起こりうる。
【０００５】
薬剤の製剤の投与関連副作用と関連した問題を避けるために、別の製剤が試みられた。例えば、プロポフォールに関し、プロポフォール誘導疼痛の減少方法として、溶媒の脂肪含量増加（例えば、長鎖トリグリセライド（ＬＣＴ））、前投薬、非ステロイド剤による前処置、局所麻酔剤、オピオイド、リドカインの添加、シクロデキストリンの添加、及び精密濾過が挙げられる（例えば、Ｍａｙｅｒｅｔａｌ．，  Ａｎａｅｓｔｈｅｓｉｓｔ，４５（１１），  １０８２−４  （１９９６）、Ｄａｖｉｅｓ，  ｅｔ  ａｌ．  Ａｎａｅｓｔｈｅｓｉａ，  ５７，  ５５７−６１（２００２）、Ｄｏｅｎｉｃｋｅ，  ｅｔａｌ．，Ａｎａｅｓｔｈ．  Ａｎａｌｇ．，  ８２，  ４７２−４  （１９９６）、Ｌａｒｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎａｅｓｔｈｅｓｉｔｉｓ５０，  ８４２−５  （２００１）、Ｌｉｌｌｅｙｅｔ  ａｌ．，  Ａｎａｅｓｔｈｅｓｉａ，  ５１，  ８１５−８  （１９９６）、Ｂｉｅｌｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｎｅｓｔｈ．Ａｎａｌｇ．，  ８２（５），  ９２０−４（１９９６）、及びＫｎｉｂｂｅ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｒ．  Ｊ．  Ｃｌｉｎ．  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，  ４７（６），  ６５３−６０（１９９９）参照）。しかし、これらの製剤は他の副作用（例えば、心臓血管合併症）を誘導するか、又はプロポフォールエマルジョンの不安定化を引き起こす。
【０００６】
細菌汚染の問題を克服するために、プロポフォール製剤は、ＥＤＴＡ等価物（例えば、エデテート）、ペンテテート、又はサルファイト含有薬剤などの抗菌剤と共に開発されてきたか、又は、低ｐＨで製剤化されてきた（例えば、米国特許５，７１４，５２０、５，７３１，３５５、５，７３１，３５６、６，０２８，１０８、６，１００，３０２、６，１４７，１２２、６，１７７，４７７、６，３９９，０８７、６，４６９，０６９、及び国際特許出願番号第ＷＯ９９／３９６９６号参照）。しかし、エデテートやペンテテートは金属イオンキレーターなので、身体系から必須金属イオンをスカベンジすることにより危険である可能性を有する。更に、薬剤の製剤へのサルファイトの添加は、小児科集団や硫黄にアレルギーがある一般集団の人々に副作用の可能性を示す。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
従って、薬剤の非経口投与又はインビボ投与と関連した副作用を減少又は除去する組成物及び方法の必要性が依然としてある。また、滅菌性である医薬組成物、及びこのような組成物の製造方法の必要性がある。更に、薬剤不安定化を防止するために、医薬製剤の酸化を減少又は除去する医薬組成物及び方法の必要性がある。
【０００８】
本発明はこのような組成物及び方法を提供する。本発明のこれらの、そして他の利点、並びに更なる本発明の特徴は、本明細書で提供される発明の説明から明白となろう。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
発明の要旨
本発明は、医薬組成物の様々な実施態様を提供する。種々の実施態様の性質の１つ、幾つか、又は全部は、本発明の様々な実施態様で見出すことができ、依然として添付の特許請求の範囲の範囲内である。
【００１０】
本発明は、医薬と医薬として許容できる担体を含有する医薬組成物であって、医薬として許容できる担体は、ヒトへの医薬組成物の投与の１つ以上の副作用を減少するのに有効な量でアルブミンなどの蛋白質、より好ましくはヒト血清アルブミンを含み、医薬として許容できる担体は、医薬組成物における微生物増殖を阻害するのに有効な量でデフェロキサミンを含む、医薬組成物を提供する。本発明はまた、医薬と医薬として許容できる担体を含有する医薬組成物であって、医薬として許容できる担体は、ヒトへの医薬組成物の投与の１つ以上の副作用を減少するのに有効な量でアルブミンなどの蛋白質を含み、医薬として許容できる担体は、医薬組成物中の酸化を阻害するのに有効な量でデフェロキサミンを含む、医薬組成物を提供する。
【００１１】
本発明は、（ａ）医薬と医薬として許容できる担体を含む医薬組成物をヒトへ投与することを含む、ヒトへの医薬組成物投与と関連した１つ以上の副作用の減少方法であって、医薬として許容できる担体がアルブミンとデフェロキサミンを含む、方法を提供する。また、医薬組成物における微生物増殖の阻害方法、又は酸化の阻害方法、又は微生物増殖及び酸化の阻害方法が提供される。これらの方法は、医薬と医薬として許容できる担体を含有する医薬組成物を製造することを含み、医薬として許容できる担体は、医薬組成物における微生物増殖の阻害に有効な量で又は酸化の阻害に有効な量で、デフェロキサミンを含む。
【００１２】
本発明はまた、疾患部位への医薬の輸送の増大方法を提供し、該方法は、医薬と医薬として許容できる担体を含有する医薬組成物のヒトへの投与を含み、医薬として許容できる担体はアルブミンを含み、医薬組成物中のアルブミンと医薬との比は約１８：１以下である。本発明は更に、インビトロ又はインビボの細胞への医薬の結合の増大方法を提供し、該方法は、医薬と医薬として許容できる担体を含有する医薬組成物をインビトロ又はインビボの細胞へ投与することを含み、医薬として許容できる担体はアルブミンを含み、医薬組成物中のアルブミンと医薬との比は約１８：１以下である。
【００１３】
本発明はまた、医薬と医薬として許容できる担体を含有する医薬組成物を提供し、該医薬として許容できる担体は、ヒトにおける疾患部位への薬剤の輸送を増大させるのに有効な量でアルブミンを含み、アルブミンと医薬との比は約１８：１以下である。
【００１４】
本発明は更に、医薬と蛋白質を組み合わせることによる、インビトロ又はインビボの細胞への医薬の輸送の増大方法を提供し、該蛋白質は、該細胞上の特異的細胞表面レセプターと結合し、蛋白質−医薬の組み合わせと該レセプターとの結合によって輸送が引き起こされ、蛋白質と医薬の比は約１８：１以下である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
発明の詳細な説明
本発明は、医薬と医薬として許容できる担体を含有する医薬組成物を提供し、該医薬として許容できる担体は、ヒトへの医薬組成物の投与の１つ以上の副作用を減少するのに有効な量でアルブミンなどの蛋白質、好ましくはヒト血清アルブミンを含み、医薬として許容できる担体は、医薬組成物における微生物増殖を阻害するのに有効な量でデフェロキサミンを含む。本発明はまた、医薬と医薬として許容できる担体を含有する医薬組成物を提供し、医薬として許容できる担体は、ヒトへの医薬組成物の投与の１つ以上の副作用を減少するのに有効な量でアルブミンなどの蛋白質を含み、医薬として許容できる担体は、医薬組成物における酸化を阻害するのに有効な量でデフェロキサミンを含む。
【００１６】
任意の適切な医薬が、本発明の医薬組成物で使用できる。適切な医薬として、抗癌剤又は抗新生物剤、抗微小管剤、免疫抑制剤、麻酔剤、ホルモン、心臓血管障害で使用する薬剤、抗不整脈剤、抗生物質、抗真菌剤、抗高血圧剤、抗喘息剤、鎮痛剤、抗炎症剤、抗関節炎剤、及び血管作用剤が挙げられるが、それらに限定されない。本発明は、多数の他の薬剤クラスとも同様に有用である。より詳細には、適切な医薬として、タキサン、（例えば、タキソール（登録商標）（パクリタキセル）及びタキソテール（商標）（ドセタキセル））、エポチロン、カンプトテシン、コルヒチン、アミオダロン、甲状腺ホルモン、血管作用性ペプチド（例えば、血管作用性腸管ペプチド）、アムホテリシン、コルチコステロイド、プロポフォール、メラトニン、シクロスポリン、ラパマイシン（シロリムス）、タクロリムス、マイコフェノール酸、イフォスファミド、ビノレルビン、バンコマイシン、ゲンシタビン、ＳＵ５４１６、チオテパ、ブレオマイシン、診断用放射線造影剤、及びそれらの誘導体が挙げられるが、それらに限定されない。本発明の組成物で有用な他の薬剤は、例えば、米国特許５，９１６，５９６及び同時係属中の米国特許出願番号第０９／４４６，７８３号に記載されている。好ましくは、医薬は、プロポフォール、パクリタキセル、又はドセタキセルである。より好ましくは、医薬は、プロポフォール又はパクリタキセルである。最も好ましくは、医薬はプロポフォールである。
【００１７】
タキソール（登録商標）（パクリタキセル）（Ｂｒｉｓｔｏｌ−ＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ）は、卵巣、乳房、肺、食道、及び頭頚部の癌腫に対し活性である。しかし、タキソールは、投与に関連した毒性、その上、骨髄抑制、好中球減少性熱、アナフィラキシー反応、及び末梢神経障害などの重大な急性及び累積性の毒性を誘導することが示されている。パクリタキセルは、水に僅かしか溶けないので、典型的には、クレモホールが溶媒として使用され、大きな注入容量と特殊なチューブ及びフィルターを必要とする。クレモホールは、アナフィラキシーや他の過敏性反応（コルチコステロイド、抗ヒスタミン、及びＨ２ブロッカーによる前処置を必要としうる）を含む、重大でありうる副作用と関連する（例えば、Ｇｅｌｄｅｒｂｌｏｍｅｔａｌ．，  Ｅｕｒ．  Ｊ．  ｏｆ  Ｃａｎｃｅｒ，  ３７，１５９０−１５９８，  （２００１）参照）。タキソテール（商標）（ドセタキセル）は、アントラサイクリン耐性乳癌の治療に使用されるが、また、重大でありうる過敏症や体液貯留の副作用を誘導することが以前に示されている。エポチロン（及びその誘導体）はまた、典型的には、クレモホール中で投与され、重大な好中球減少症、過敏症及び神経障害を誘導することが示されている。
【００１８】
プロポフォール（２，６−ジイソプロピルフェノール）は疎水性の、水不溶性の油であり、ヒトや動物の全身麻酔や鎮静を誘導及び維持するために、静脈内麻酔剤として広く使用される。典型的には、プロポフォールは血流中に直接投与され、血液−脳関門を乗り越える。プロポフォールを含有する医薬組成物は、この障壁を乗り越え、脳の関連機構を抑制するために十分な脂質溶解性を有するに違いない。プロポフォールは、２２．５℃で１．０＋／−０．０２μＭの水中最大溶解度を有する（例えば、Ｔｏｎｎｅｒｅｔａｌ．，Ａｎｅｓｔｈｅｓｉｏｌｏｇｙ，  ７７，  ９２６−９３１  （１９９２）参照）。従って、プロポフォールは一般的に、可溶化剤、界面活性剤、溶媒を含むエマルジョンとして、又は水中油型エマルジョンとして製剤化される（例えば、米国特許６，１５０，４２３、６，３２６，４０６、及び６，３６２，２３４参照）。活性な医薬に加えて、本発明の組成物は、医薬担体又は賦形剤を含む。担体の選択は必ずしも重要ではなく、当業界公知の担体の任意のものが、組成物で使用できる。担体の選択は好ましくは、部分的には、医薬組成物を投与する特定の部位、及び医薬組成物を投与するのに使用される特定の方法により決定される。好ましくは、医薬として許容できる担体は蛋白質を含む。任意の適切な蛋白質が使用できる。適切な蛋白質の例として、アルブミン、ＩｇＡを含む免疫グロブリン、リポ蛋白質、アポリポ蛋白質Ｂ、ベータ−２−マクログロブリン、チログロブリンなどが挙げられるが、それらに限定されない。最も好ましくは、医薬として許容できる担体はアルブミンを含み、最も好ましくはヒト血清アルブミンを含む。本発明に適したアルブミンを含む蛋白質は、起源が天然であってもよいし、合成製造されてもよい。
【００１９】
ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）は、Ｍｒ６５Ｋの非常に可溶性の球形蛋白質であり、５８５アミノ酸からなる。ＨＳＡは血漿中で最も豊富な蛋白質で、ヒト血漿のコロイド性浸透圧の７０〜８０％を占める。ＨＳＡのアミノ酸配列は、合計１７ジスルフィド架橋、１つの遊離チオール（Ｃｙｓ３４）、及び唯一のトリプトファン（Ｔｒｐ２１４）を含む。ＨＳＡ溶液の静脈内使用は、乏血性ショック（ｈｙｐｏｖｏｌｕｍｉｃｓｈｏｃｋ）の予防と治療のために（例えば、Ｔｕｌｌｉｓ，ＪＡＭＡ，  ２３７，  ３５５−３６０，  ４６０−４６３，  （１９７７））及びＨｏｕｓｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｕｒｇｅｒｙ，
Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｏｂｓｔｅｔｒｉｃｓ，１５０，  ８１１−８１６  （１９８０）参照）、そして、新生児の高ビリルビン血症の治療での交換輸血に関連して（例えば、Ｆｉｎｌａｙｓｏｎ，Ｓｅｍｉｎａｒｓ  ｉｎ  Ｔｈｒｏｍｂｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｈｅｍｏｓｔａｓｉｓ，  ６，  ８５−１２０，  （１９８０）参照）記載された。
【００２０】
ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）は、複数の疎水性結合部位（ＨＳＡの内因性リガンドである脂肪酸のための合計８つ）を有し、多様なセットの薬剤、特に中性及び陰性荷電の疎水性化合物と結合する（Ｇｏｏｄｍａｎｅｔａｌ．，  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，  ９ｔｈ  ｅｄ，  ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ（１９９６））。２つの高親和性結合部位がＨＳＡのサブドメインＩＩＡとＩＩＩＡで提案され、それは、極性リガンド性質の結合点として機能する、表面近傍の荷電したリジン残基及びアルギニン残基をもった非常に伸長した疎水性ポケットである（例えば、Ｆｅｈｓｋｅｅｔａｌ．，  Ｂｉｏｃｈｅｍ．  Ｐｈａｒｍｃｏｌ．，  ３０，  ６８７−９２  （１９８１）、Ｖｏｒｕｍ，  Ｄａｎ．  Ｍｅｄ．
Ｂｕｌｌ．，４６，  ３７９−９９（１９９９）、Ｋｒａｇｈ−Ｈａｎｓｅｎ，Ｄａｎ．  Ｍｅｄ．  Ｂｕｌｌ．，  １４４１，  １３１−４０  （１９９０）、Ｃｕｒｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，  ５，  ８２７−３５（１９９８）、Ｓｕｇｉｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｔｅｉｎ．  Ｅｎｇ．，  １２，  ４３９−４６  （１９９９）、Ｈｅ  ｅｔａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，  ３５８，  ２０９−１５（１９９２）、及びＣａｒｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｄｖ．  Ｐｒｏｔｅｉｎ．  Ｃｈｅｍ．，  ４５，  １５３−２０３  （１９９４）参照）。パクリタキセル及びプロポフォールはＨＳＡと結合することが示されている（例えば、Ｐａａｌｅｔａｌ．，  Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｂｉｏｃｈｅｍ．，  ２６８（７），  ２１８７−９１  （２００１）、Ｐｕｒｃｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｃｈｉｍ．  Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ，１４７８（１），  ６１−８  （２０００）、Ａｌｔｍａｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ａｒｚｎｅｉｍｉｔｔｅｌｆｏｒｓｃｈｕｎｇ，  ４５，  １０５３−６  （１９９５）、及びＧａｒｒｉｄｏｅｔａｌ．，  Ｒｅｖ．  Ｅｓｐ．  Ａｎｅｓｔｅｓｔｉｏｌ．  Ｒｅａｎｉｍ．，  ４１，  ３０８−１２  （１９９４）参照））。更に、ドセタキセルは、ヒト血漿蛋白質に結合することが示されている（例えば、Ｕｒｉｅｎｅｔａｌ．，Ｉｎｖｅｓｔ．  Ｎｅｗ  Ｄｒｕｇｓ，  １４（２），  １４７−５１  （１９９６）参照）。従って、いずれの特定の理論にも縛られることは望まないが、本発明の医薬組成物中にアルブミンなどの蛋白質を含めることにより、医薬組成物の投与と関連した副作用における減少が起こる（減少は、少なくとも部分的には、組成物中に存在する任意の遊離薬剤へのヒト血清アルブミンの結合によるものである）と考えられる。
【００２１】
本発明の医薬組成物中に包含されるアルブミンの量は、医薬活性剤、他の賦形剤、意図した投与の経路と部位に依存して変化しよう。望ましくは、組成物中に包含されるアルブミンの量は、ヒトへの本発明の医薬組成物の投与に起因する１つ以上の副作用活性医薬を減少させるのに有効な量である。典型的には、医薬組成物は液体形態で製造され、次いで、アルブミンが溶液に添加される。好ましくは、液体形態の医薬組成物は、アルブミンを約０．１重量％〜約２５重量％（例えば、約０．５重量％、約５重量％、約１０重量％、約１５重量％、又は約２０重量％）含む。最も好ましくは、液体形態の医薬組成物は、アルブミンを約０．５重量％〜約５重量％含む。医薬組成物は、例えば、凍結乾燥、噴霧乾燥、流動床乾燥、湿式顆粒化、及び当業界公知の他の適切な方法により脱水できる。組成物が、湿式顆粒化、流動床乾燥、当業者公知の他の方法などにより、組成物が固体形態で製造されるとき、好ましくは、アルブミンは、活性医薬及び他の賦形剤（存在すれば）に溶液として適用される。好ましくは、ＨＳＡ溶液は、アルブミンが約０．１重量％〜約２５重量％（約０．５重量％、約５重量％、約１０重量％、約１５重量％、又は約２０重量％）である。
【００２２】
アルブミンに加えて、好ましくは、本発明の組成物はデフェロキサミンを含む。デフェロキサミンは、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｐｉｌｏｓｕｓから単離された天然物であり、鉄錯体を形成することができる。例えば、ＵＳＰ注射用メシル酸デフェロキサミンは、鉄キレート剤として食品医薬品局に承認され、筋肉内、皮下、静脈内投与に利用できる。メシル酸デフェロキサミンＵＳＰは白色乃至オフホワイトの粉末である。それは、水に自由に溶け、その分子量は６５６．７９である。メシル酸デフェロキサミンの化学名は、Ｎ−［５−［３−［（５−アミノペンチル）−ヒドロキシカルバモイル］−プロピオン−アミド］ペンチル］−３［［５−（（Ｎ−ヒドロキシアセトアミド）ペンチル］−カルバモイル］プロピオノヒドロキサミン酸一メタンスルホネート（塩）であり、その構造式は、Ｃ２５Ｈ４８Ｎ６Ｏ８．ＣＨ３ＳＯ３Ｈである。実施例に記載するように、デフェロキサミン、又はそのアナログ、誘導体、あるいは塩（例えば、メシル酸塩）は、医薬組成物における微生物増殖と酸化を阻害し、組成物中の遊離薬剤と結合すると考えられている。デフェロキサミンはまた、フェノール性化合物に結合することが示されている（例えば、Ｊｕｖｅｎｅｔａｌ．，  Ｊ．  Ａｐｐｌ．  Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．，  ７６（６），  ６２６−３１  （１９９４）参照）。パクリタキセル、ドセタキセル、プロポフォールなどは、フェノール性様であるか、又はフェノール性もしくはフェニル置換基を有する。従って、デフェロキサミンは、本発明の医薬組成物中の遊離薬剤に結合、又はその量を減少しえ、それによってまた、注射の際の刺激又は疼痛を減少又は軽減しうると考えられる。
【００２３】
組成物中に包含されるデフェロキサミン、又はその好適塩、即ち、デフェロキサミンのメシル酸塩の量は、活性医薬及び他の賦形剤に依存しよう。望ましくは、組成物中のデフェロキサミン、その塩、及びそのアナログの量は、微生物増殖及び／又は酸化の阻害に有効な量である。上記のように、典型的には、医薬組成物は液体形態で製造され、次いで、デフェロキサミン、その塩、及びそのアナログを溶液に加える。好ましくは、液体形態の医薬組成物は、デフェロキサミン、その塩、又はそのアナログを約０．０００１重量％〜約０．５重量％（例えば、約０．００５重量％、約０．１重量％、又は約０．２５重量％）含む。より好ましくは、液体形態の組成物は、好適なデフェロキサミンの塩、即ちメシル酸デフェロキサミンの同様の量を含む。最も好ましくは、液体形態の医薬組成物は、メシル酸デフェロキサミンを約０．１重量％含む。湿式顆粒化、流動床乾燥、及び当業者公知の他の方法などによって、上記のように、組成物が固体形態で製造されるとき、好ましくは、メシル酸デフェロキサミンは、溶液として、活性医薬及び他の賦形剤（存在すれば）に適用される。好ましくは、メシル酸デフェロキサミン溶液は、デフェロキサミンを約０．０００１重量％〜約０．５重量％（例えば、約０．００５重量％、約０．１重量％、又は約０．２５重量％）である。
【００２４】
本発明に従い、医薬組成物は、組成物の性質を改善するために、他の薬剤、賦形剤、又は安定化剤を含みうる。例えば、ナノ粒子又はナノ小滴の陰性ゼータ電位を増加させることによって安定性を増大させるために、特定の陰性荷電成分を加えうる。このような陰性荷電成分として、グリコール酸、コール酸、ケノデオキシコール酸、タウロコール酸、グリコケノデオキシコール酸、タウロケノデオキシコール酸、リトコール酸、ウルソデオキシコール酸、デヒドロコール酸及びその他からなる胆汁酸の胆汁塩；以下のホスファチジルコリンを含むレシチン（卵黄）ベースのリン脂質を含むリン脂質：パルミトイルオレオイルホスファチジルコリン、パルミトイルリノレオイルホスファチジルコリン、ステアロイルリノレオイルホスファチジルコリンステアロイルオレオイルホスファチジルコリン、ステアロイルアラキドイルホスファチジルコリン、及びジパルミトイルホスファチジルコリンが挙げられるが、それらに限定されない。Ｌ−α−ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）、ジステアリオルホスファチジルコリン（ｄｉｓｔｅａｒｙｏｌｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ）（ＤＳＰＣ）、水素化ダイズホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、Ｄ−α−ホスファチジルコリン、β−アセチル−γ−Ｏ−ヘキサデシル，Ｌ−α−ホスファチジルコリン、β−アセチル−γ−Ｏ−ヘキサデシル，ＤＬ−α−ホスファチジルコリン、β−アセチル−γ−Ｏ−ヘキサデシル，Ｌ−α−ホスファチジルコリン、β−アセチル−γ−Ｏ−オクタデシル，Ｌ−α−ホスファチジルコリン、β−アラキドノイル−γ−Ｏ−ヘキサデシル，Ｌ−α−ホスファチジルコリン、β−アセチル−γ−Ｏ−（オクタデク−９−シス−エンイル），Ｄ−α−ホスファチジルコリン、β−アラキドノイル−γ−Ｏ−パルミトイル，３−ｓｎ−ホスファチジルコリン、２−アラキジノイル−１−ステアロイル，Ｌ−α−ホスファチジルコリン、β−アラキドノイル−γ−ステアロイル，Ｌ−α−ホスファチジルコリン、ジアラキドイル，Ｌ−α−ホスファチジルコリン、ジベヘノイル，Ｌ−α−ホスファチジルコリン、β−（ｃｉｓ−８，１１，１４−エイコサトリエノイル）−γ−Ｏ−ヘキサデシル，Ｌ−α−ホスファチジルコリン、β−オレオイル−γ−ミリストイル，Ｌ−α−ホスファチジルコリン、β−（ピレン−１−イル）デカノイル−γ−パルミトイル，３−ｓｎ−ホスファチジル−Ｎ，Ｎ−ジメチルエタノールアミン、１，２−ジパルミトイル，Ｌ−α−ホスファチジルエタノールアミン、ジヘプタデカノイル，３−ｓｎ−ホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジラウロイル，３−ｓｎ−ホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジミリストイル，３−ｓｎ−ホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジオレオイル，３−ｓｎ−ホスファチジルエタノールアミン、１，２−ジパルミトイル，Ｌ−α−ホスファチジルエタノールアミン、ジパルミトイル，Ｌ−α−ホスファチジルエタノールアミン、ジパルミトイル，Ｎ−ダンシル，Ｌ−α−ホスファチジルエタノールアミン、ジパルミトイル，Ｎ，Ｎ−ジメチル，Ｌ−α−ジミリストイルホスファチジルグリセロール（ナトリウム塩）（ＤＭＰＧ��、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール（ナトリウム塩）（ＤＰＰＧ）、ジステアロイルホスファチジルグリセロール（ナトリウム塩）（ＤＳＰＧ）、Ｎ−（カルボニル−メトキシポリエチレングリコール２０００）−１，２−ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミンナトリウム（ＭＰＥＧ−ＤＳＰＥ）、Ｌ−α−ホスファチジン酸，ジデカノイルナトリウム塩、Ｌ−α−ホスファチジン酸，ジヘプタデカノイルナトリウム塩、３−ｓｎ−ホスファチジン酸，１，２−ジミリストイルナトリウム塩、Ｌ−α−ホスファチジン酸，ジオクタノイルナトリウム塩、Ｌ−α−ホスファチジン酸，ジオレオイルナトリウム塩、Ｌ−α−ホスファチジン酸，ジパルミトイルナトリウム塩、Ｌ−α−ホスファチジル−ＤＬ−グリセロール，ジミリストイルナトリウム塩、Ｌ−α−ホスファチジル−ＤＬ−グリセロール，ジオレオイルナトリウム塩、Ｌ−α−ホスファチジル−ＤＬ−グリセロール，ジパルミトイルアンモニウム塩、Ｌ−α−ホスファチジル−ＤＬ−グリセロール，ジステアロイルアンモニウム塩、Ｌ−α−ホスファチジル−ＤＬ−グリセロール，β−オレオイル−γ−パルミトイルアンモニウム塩、Ｌ−α−ホスファチジルイノシトールアンモニウム塩、Ｌ−α−ホスファチジルイノシトールナトリウム塩、Ｌ−α−ホスファチジル−Ｌ−セリン，ジオレオイルナトリウム塩、Ｌ−α−ホスファチジル−Ｌ−セリン及びジパルミトイルナトリウム塩を含む、他のリン脂質。乳化剤の陰性荷電界面活性剤、例えば、コレステリル硫酸ナトリウムなども添加剤として適切である。
【００２５】
医薬（例えば、プロポフォール）は単独で使用してもよいし、水不混和性溶媒に溶解してもよい。ダイズ、サフラワー、綿実、コーン、ヒマワリ、ラッカセイ、ヒマシ、又はオリーブの油などの広範囲の水不混和性溶媒が使用されうる。好適な油は植物油であり、ダイズ油が最好適である。ダイズ油は、組成物の１重量％〜１０重量％の範囲で使用されうる。好ましくは、ダイズ油は、医薬組成物中に約３重量％の量で存在する。
【００２６】
本発明の医薬組成物は、医薬として許容できる界面活性剤で安定化できる。本明細書で使用する用語「界面活性剤」は、両親媒性分子の界面活性の群（単数又は複数）を指す。界面活性剤は、アニオン性、カチオン性、ノニオン性、及び両性イオン性でありうる。任意の適切な界面活性剤が本発明の医薬組成物に含められうる。適切な界面活性剤として、ホスファチド、ポリオキシエチレンソルビタンエステル、及びトコフェリルポリエチレングリコールスクシネートなどの非イオン性界面活性剤が挙げられる。好適な界面活性剤は、卵レシチン、ツウィーン８０、及びビタミンＥ−ｔｄ−α−トコフェリルポリエチレングリコール−１０００スクシネート（ＴＰＧＳ）である。ダイズ油含有製剤に関しては、卵レシチンが好適で、３％ダイズ油含有製剤について１．２重量％以下であり、好ましくは組成物の１．１重量％である。ダイズ油無しの製剤に関しては、ツウィーン８０又はビタミンＥ−ＴＰＧＳが好適な界面活性剤である。典型的には、０．１〜１．５重量％のツウィーン８０又は０．５〜４重量％のビタミンＥ−ＴＰＧＳが適切である。好ましくは、１．５重量％のツウィーン８０又は１重量％のビタミンＥ−ＴＰＧＳが使用される。他の適切な界面活性剤の例は、例えば、Ｂｅｃｈｅｒ，Ｅｍｕｌｓｉｏｎｓ：Ｔｈｅｏｒｙ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，  Ｒｏｂｅｒｔ  Ｅ．  Ｋｒｉｅｇｅｒ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ，  Ｍａｌａｂａｒ，  Ｆｌａ．  （１９６５）に記載されている。
【００２７】
本発明の医薬組成物の種々の適切な製剤がある（例えば、米国特許５，９１６，５９６参照）。以下の製剤と方法は単に例示であり、決して限定的なものではない。経口投与に適した製剤は、（ａ）水、生理食塩水、又はオレンジジュースなどの希釈剤中に溶解した有効量の化合物などの液体溶剤、（ｂ）カプセル、サッシェ、又は錠剤（各々は、固体又は顆粒として、所定量の活性成分を含有する）、（ｃ）適切な液体中の懸濁剤、及び（ｄ）適切なエマルジョンからなりうる。錠剤形態は、ラクトース、マンニトール、コーンスターチ、ポテトスターチ、微結晶セルロース、アカシア、ゼラチン、コロイド性二酸化ケイ素、クロスカルメロースナトリウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、並びに、他の賦形剤、着色剤、希釈剤、緩衝剤、湿潤剤、保存剤、矯味剤、及び薬理的に適合性のある賦形剤の１つ以上を含有しうる。ロゼンジ形態は、フレーバー（通常、シュークロース及びアカシアもしくはトラガカント）中に活性成分を含有しうるし、並びに、芳香錠は、ゼラチンやグリセリン、又はシュークロースやアカシアなどの不活性基剤中に活性成分を含有しえ、エマルジョン、ゲルなどは、活性成分の他に、当業界公知のような賦形剤を含有しうる。
【００２８】
非経口投与に適切な製剤としては、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、及び、意図した受容者の血液と製剤を等張にする溶質を含有しうる、水性及び非水性の等張滅菌注射液、並びに、懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定化剤、及び保存剤を含有しうる、水性及び非水性の滅菌懸濁剤が挙げられる。製剤は、アンプルやバイアルなどの、単回投与又は多回投与の密封容器で存在でき、使用直前に注射用の滅菌液体賦形剤（例えば、水）の添加のみを必要とするフリーズドライ（凍結乾燥）状態で保存できる。即時注射液及び懸濁剤は、既に記載した種類の滅菌粉末、顆粒、及び錠剤から調製できる。注射可能な製剤が好適である。
【００２９】
本発明の医薬組成物を含むエアロゾル投与に適した製剤として、単独で、又は吸入により投与されるエアロゾル製剤に製造できる他の適切な成分と組み合せて、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、及び、溶質を含有しうる、水性及び非水性の等張滅菌溶剤、並びに、懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定化剤、及び保存剤を含有しうる、水性及び非水性の滅菌懸濁剤が挙げられる。これらのエアロゾル製剤は、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素などの加圧可能な噴射剤中に入れることができる。それらはまた、ネブライザー又はアトマイザー中のような非加圧製剤のための医薬として製剤化できる。
【００３０】
他の適切な製剤も可能である。例えば、座薬は、乳化基剤又は水溶性基剤などの種々の基剤の使用によって製造することができる。膣投与に適した製剤は、活性成分の他に、適切であると当業界で知られているような担体を含有するペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、泡状物、又はスプレー製剤として存在できる。
【００３１】
本発明の好適実施態様では、医薬組成物は、４．５〜９．０のｐＨ範囲、より好ましくは５．０〜８．０のｐＨを有するように製剤化される。医薬組成物はまた、グリセロールなどの適切な張性改変剤の添加によって血液と等張にすることができる。更に、好ましくは、医薬として許容できる担体はまた、発熱物質非含有水、又はＵＳＰ注射用水を含む。好ましくは、本発明の医薬組成物は、滅菌水性製剤、ナノ粒子、水中油型エマルジョン、又は油中水型エマルジョンとして製造される。最も好ましくは、医薬組成物は水中油型エマルジョンである。
【００３２】
本発明のプロポフォールを含む医薬組成物に関しては、水中油型エマルジョンは、水不混和性溶媒単独にプロポフォールを溶解し、アルブミン、デフェロキサミン、界面活性剤、及び他の水溶性成分を含む水相を製造し、油を水相と混合することによって製造される。粗エマルジョンは、１０，０００〜２５，０００ｐｓｉの圧力で高圧ホモジナイズし、５〜２０サイクル再循環させ、理想のエマルジョンを形成する。好適な圧力は、１５，０００〜２０，０００ｐｓｉ．、より好ましくは１０，０００ｐｓｉ．である。粗エマルジョンは、７〜１５サイクル再循環されえ、好ましくは１５サイクル再循環される。あるいは、ホモジナイザーを通した不連続な通過物が使用されうる。
【００３３】
好ましくは、本発明の医薬組成物は、約２００ナノメートル（ｎｍ）未満の粒子又は小滴サイズを有しうる。例えば、パクリタキセル、ドセタキセル、ラパマイシン、シクロスポリン、プロポフォール及びその他の場合に、これらの分散物の平均サイズは２００ｎｍ未満である。
【００３４】
本発明は更に、ヒトへの医薬組成物の投与と関連した１つ以上の副作用の減少方法を提供する。該方法は、医薬と医薬として許容できる担体とを含有する医薬組成物をヒトへ投与することを含み、該医薬として許容できる担体は、アルブミン及びデフェロキサミンを含む。本発明の医薬組成物と関連して上記した、医薬組成物、医薬、及び医薬として許容できる担体、並びにそれらの成分の説明はまた、本発明の方法のそれらの同じ局面に適用できる。
【００３５】
本発明の文脈で、ヒトに投与される本発明の医薬組成物の投与量は、特定の医薬組成物、投与方法、治療する特定部位と共に変わろう。投与量は、所望の時間枠内で特定疾患に対し治療応答又は予防応答などの所望の応答を、又は、医薬がプロポフォールなどの麻酔剤のとき麻酔応答を、生じさせるのに十分であるべきである。
【００３６】
ヒトへの医薬組成物の投与の任意の適切な手段が本発明の文脈内で使用できるが、好ましくは、本発明の医薬組成物は、静脈内投与、動脈内投与、肺内投与、経口投与、吸入、小嚢内（ｉｎｔｒａｖｅｓｉｃｕｌａｒ）投与、筋肉内投与、気管内投与、皮下投与、眼内投与、くも膜下腔（ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌ）投与、又は経皮投与により、ヒトに投与される。例えば、本発明の医薬組成物は、吸入により投与でき、気道の状態を治療できる。アルブミンは、気道の内面と分泌における天然の成分なので、本発明の医薬組成物の吸入と関連する最小の副作用が存在する。本発明の組成物を用いて、肺線維症、閉塞性細気管支炎（ｂｒｏｎｃｈｅｏｌｉｔｉｓｏｂｌｉｔｅｒａｎｓ）、肺癌、細気管支肺胞上皮癌などの呼吸器状態を治療できる。
【００３７】
本発明の方法により、ヒトへの医薬組成物の投与に関連した１つ以上の副作用が減少する。このような副作用として、例えば、骨髄抑制、神経毒性、過敏症、炎症、静脈刺激、静脈炎、疼痛、皮膚刺激、及びそれらの組み合わせが挙げられる。しかし、これらの副作用は単なる例示であり、種々の医薬と関連した他の副作用又は副作用の組み合わせは、本発明の新規な組成物及び方法の使用により減少又は避けられうる。
【００３８】
本発明は更に、医薬組成物における微生物増殖の阻害方法を提供する。「微生物増殖の阻害」は、医薬組成物からの微生物の完全除去、又は医薬組成物における微生物増殖の量もしくは速度の減少を意味する。該方法は、医薬と医薬として許容できる担体を含む医薬組成物を製造することを含み、該医薬として許容できる担体は、医薬組成物における微生物増殖の阻害に有効な量で、デフェロキサミン、その塩、そのアナログ、及びそれらの組み合わせを含む。更に、本発明は、医薬組成物の酸化の阻害方法を提供する。この方法は、医薬と医薬として許容できる担体を含む医薬組成物を製造することを含み、該医薬として許容できる担体は、医薬組成物の酸化の阻害に有効な量で、デフェロキサミン、その塩、そのアナログ、及びそれらの組み合わせを含む。本発明の医薬組成物と関連して上記した、医薬組成物、医薬、及び医薬として許容できる担体、並びにそれらの成分の説明はまた、本発明の方法のそれらの同じ局面に適用できる。
【００３９】
組成物中に含まれるデフェロキサミン、又はその好適塩、デフェロキサミンのメシル酸塩の量は、活性医薬と他の賦形剤に依存しよう。望ましくは、組成物中のデフェロキサミン、その塩、そのアナログの量は、微生物増殖の阻害及び／又は酸化の阻害に有効な量である。上記のように、典型的には、医薬組成物は液体形態で製造され、次いで、デフェロキサミン、その（ｉｔ）塩、そのアナログが溶液に加えられる。好ましくは、液体形態の医薬組成物は、デフェロキサミン、その塩、又はそのアナログを、約０．０００１重量％〜約０．５重量％（例えば、約０．００５重量％、約０．１重量％、又は約０．２５重量％）含む。より好ましくは、液体形態の医薬組成物は、好適なデフェロキサミン塩、即ちメシル酸デフェロキサミンを同様の量含む。最も好ましくは、液体形態の医薬組成物は、メシル酸デフェロキサミンを約０．５重量％含む。湿式顆粒化、流動床乾燥、及び当業者公知の他の方法などにより、上記のように、組成物が固体形態で製造されるとき、好ましくは、メシル酸デフェロキサミンは、活性医薬及び他の賦形剤（存在すれば）に溶液として適用される。好ましくは、メシル酸デフェロキサミン溶液は、デフェロキサミンが約０．０００１重量％〜約０．５重量％（例えば、約０．００５重量％、約０．１重量％、又は約０．２５重量％）である。
【００４０】
本発明はまた、疾患部位への医薬の輸送の増大方法を提供し、該方法は、医薬と医薬として許容できる担体を含有する医薬組成物をヒトへ投与することを含み、該医薬として許容できる担体はアルブミンを含み、医薬組成物中のアルブミンと医薬との比は約１８：１以下である。本発明は更に、インビトロ又はインビボの細胞への医薬の結合の増大方法でを提供し、該方法は、医薬と医薬として許容できる担体を含有する医薬組成物をインビトロ又はインビボの細胞へ投与することを含み、該医薬として許容できる担体はアルブミンを含み、医薬組成物中のアルブミンと医薬との比は約１８：１以下である。本発明の医薬組成物及び本発明の方法と関連して上記した、医薬組成物、医薬、医薬として許容できる担体、投与経路並びにそれらの成分の説明はまた、輸送方法と結合方法のそれらの同じ局面に適用できる。
【００４１】
疾患部位への医薬の輸送の増大方法又は細胞への医薬の結合の増大方法において、医薬として許容できる担体は、好ましくは、アルブミン、最も好ましくは、ヒト血清アルブミンを含む。いずれの１つの特定の理論に縛られないが、医薬組成物中の蛋白質（例えば、ヒト血清アルブミン）と医薬との比は、細胞に医薬を結合し輸送する医薬の能力に影響を与えると考えられる。この点に関し、医薬に対する蛋白質の高い比は一般的に、乏しい医薬の細胞結合と輸送に関連するが、これは可能性として、細胞表面のレセプターに関する競合の結果である。蛋白質（例えば、アルブミン）と活性医薬との比は、医薬の十分量が細胞に結合するか、又は細胞によって輸送されるようなものでなくてはならない。蛋白質−薬剤製剤の代表的範囲は、蛋白質と薬剤との比（ｗ／ｗ）が０．０１：１〜約１００：１である。より好ましくは、比は、０．０２：１〜約４０：１の範囲である。蛋白質と医薬との比は、異なる蛋白質と医薬の組み合わせに対し最適化されなければならないであろうが、一般的には、蛋白質（例えば、アルブミン）と医薬との比は約１８：１以下（例えば、約１５：１、約１０：１、約５：１、又は約３：１）である。より好ましくは、比は、約０．２：１〜約１２：１である。最も好ましくは、比は約１：１〜約９：１である。好ましくは、製剤は本質的に、クレモホール非含有であり、より好ましくはクレモホールＥＬ（登録商標）（ＢＡＳＦ）非含有である。クレモホールＥＬ（登録商標）は、ヒマシ油とエチレンオキサイドのポリエーテルである非イオン性乳化剤である。上記のように、典型的には、クレモホールは、パクリタキセルの溶媒として使用され、重大でありうる副作用と関連する（例えば、Ｇｅｌｄｅｒｂｌｏｍｅｔａｌ．，  上記参照）。
【００４２】
医薬は、本明細書で記載した任意の適切な医薬でありうる（例えば、プロポフォール、パクリタキセル、又はドセタキセル）。更に、医薬は核酸配列、最も好ましくはＤＮＡ配列でありうる。この点に関し、本発明の医薬組成物は、レセプター媒介／小胞／小嚢輸送により遺伝子を細胞へ輸送するために使用できる。プラスミド又はｃ−ＤＮＡを含む（しかし、これらに限定されない）遺伝子や他の遺伝物質などのＤＮＡ配列を細胞（例えば、内皮細胞又は腫瘍細胞）に輸送するために、遺伝物質と組み合わせてアルブミンを含む医薬組成物が製造できる。腫瘍細胞や炎症部位の他の細胞は蛋白質の高い取り込みを有するので、遺伝物質は優先的に、これらの細胞型に取り込まれ、有用な治療効果のために、細胞の遺伝物質に組み込まれうる。ヒト血清アルブミンなどの蛋白質の使用は、ウイルス関連疾患又は副作用の危険性無く、遺伝物質の送達のための非ウイルスベクターとして役立つ。例えば、β−ガラクトシダーゼ又は緑色蛍光蛋白質（ＧＦＰ）及びアルブミンをコードする核酸配列を含む医薬組成物を製造でき、ヒト臍静脈又はヒト肺微細血管由来の内皮細胞と接触させ、内皮細胞への核酸配列の組み込みを容易にできる。例えば、蛍光又は染色などの当業界公知の方法を用いて、核酸配列の組み込みが検出できる。
【００４３】
疾患部位への医薬の輸送の増大の本発明の方法において、疾患は任意の適切な疾患又は状態でありうる。好ましくは、疾患は、癌、心臓血管疾患、又は関節炎である。
【００４４】
インビトロ又はインビボの細胞への医薬の結合の増大の本発明の方法において、医薬組成物はインビトロ又はインビボの細胞に投与される。望ましくは、細胞は動物細胞である。より好ましくは、細胞は哺乳動物細胞であり、最も好ましくは細胞はヒト細胞である。好ましくは、医薬組成物はインビボの細胞に投与される。細胞は、医薬組成物の投与の望ましい標的である任意の適切な細胞でありうる。例えば、細胞は、例えば、食道、胃、小腸、結腸、直腸、肛門、肝臓、胆嚢、膵臓を含む消化器系の組織に位置しうるか、又はそれ由来でありうる。細胞はまた、例えば、喉頭、肺、気管支を含む呼吸器系の組織に位置しうるか、又はそれ由来でありうる。細胞は、例えば、子宮頚部、子宮体（ｕｔｅｒｉｎｅｃｏｒｐｕｓ）、卵巣外陰部、膣、前立腺、精巣、ペニス（これらは男性及び女性生殖系を構成する）、並びに膀胱、腎臓、腎盂、尿管（これらは泌尿器系を含む）に位置しうるか、又はそれ由来でありうる。細胞は、例えば、内皮細胞や心筋細胞を含む心臓血管系の組織に位置しうるか、又はそれ由来でありうる。細胞はまた、リンパ系（例えば、リンパ球）、神経系（例えば、ニューロン又はグリア細胞）、及び内分泌系（例えば、甲状腺細胞）の組織に位置しうるか、又はそれ由来でありうる。好ましくは、細胞は、心臓血管系の組織に位置するか、又はそれ由来である。最も好ましくは、細胞は内皮細胞である。細胞への医薬の輸送増大と結合増大の本発明の方法の文脈で、望ましくは、医薬組成物は１つより多い細胞と接触する。
【００４５】
本発明の別の局面で、細胞への医薬の輸送増大と結合増大の本発明の方法を用いて、腫瘍細胞を治療できる。腫瘍細胞は、正常細胞と比べて、例えば、アルブミンやトランスフェリンを含む蛋白質の取り込みの増大を示す。腫瘍細胞は、速い速度で分裂しているので、これらは、正常細胞と比べて、更なる栄養源を必要とする。パクリタキセルとヒト血清アルブミンを含む本発明医薬組成物の腫瘍研究は、腫瘍へのアルブミン−パクリタキセルの高い取り込みを示した。これは、アルブミンに特異的である糖蛋白質６０（「ｇｐ６０」）レセプターによるアルブミン−薬剤輸送の、以前には認識されていない現象によるものであることが見出された。
【００４６】
従って、本発明の別の局面に基づき、腫瘍細胞上に存在するアルブミン特異的ｇｐ６０レセプターと他の蛋白質輸送レセプターは、腫瘍増殖を阻害するための標的として使用できる。ｇｐ６０レセプターに対する抗体を用いて、あるいは、腫瘍細胞又は腫瘍内皮細胞上のｇｐ６０及び他の蛋白質輸送レセプターを結合、ブロック、又は不活化する他の大きなもしくは小さな分子化合物を用いて、ｇｐ６０レセプターをブロックすることによって、これらの細胞への蛋白質の輸送をブロックすることが可能であり、それによって、その増殖速度を減少させ、細胞死を引き起こすことが可能である。従って、この機構のブロックにより、癌又は他の疾患を有する被験体（例えば、ヒト）の治療をもたらす。特異的蛋白質レセプターのブロック／結合の同定は、単離ｇｐ６０、又はｇｐ１６もしくはｇｐ３０などの他のレセプターに対する任意数の化合物のスクリーニングによって、又は全細胞調製物を使用することによって、なされる。更に、例えば、ｇｐ６０又はカベオリン−１、又は輸送に特異的な他の蛋白質をコードする遺伝子の「ノックアウト」変異を含むマウスなどの、適切な動物モデルもこの目的のために使用できる。従って、ｇｐ６０、ｇｐ１６、ｇｐ３０、又は他の蛋白質レセプターをブロック又は結合する化合物の同定方法は、本発明の範囲内である。
【００４７】
更に、ｇｐ６０レセプター又は他の蛋白質レセプターをブロック又は結合する化合物は、癌を含む幾つかの疾患の治療で使用できる。癌治療に関し、ブロック化合物又は結合化合物は、単一剤として、又は他の標準的化学療法（単数又は複数）と組み合わせて使用されうる。例えば、通常の化学療法又は本発明のアルブミン−薬剤医薬組成物（これは腫瘍で高い蓄積を示す）で、次いで、腫瘍細胞への蛋白質の輸送をブロックする化合物で癌を治療することは有用である。ブロック化合物は、他の化学療法剤又は抗癌剤の前に、又は共に投与できる。従って、ｇｐ６０レセプター又は他の蛋白質レセプターをブロック又は結合できる任意の化合物は、本発明の範囲内である。
【００４８】
例えば、アルブミン−パクリタキセル、アルブミン−ドセタキセル、アルブミン−エポチロン、アルブミン−カンプトテシン、又はアルブミン−ラパマイシン、及びその他などの本発明のアルブミン−薬剤組成物は、疾患の治療に有用である。このような薬剤組成物は、必要部位、例えば、腫瘍への蛋白質−薬剤組成物のレセプター媒介輸送を増大することにより有効である。いずれの特定の理論にも縛られることを望まないが、治療効果を生じる、レセプター媒介輸送による蛋白質−薬剤組成物の輸送は、例えば、アルブミン−パクリタキセル組成物の腫瘍への輸送、並びに肺を横断してのアルブミン−パクリタキセルとアルブミン−ラパマイシンの輸送の機構と考えられる。このような組織で、ｇｐ６０、ｇｐ１６、又はｇｐ３０の存在によって輸送が生じる。従って、疾患部位、例えば、炎症（例えば、関節炎）又は腫瘍へのそれらの輸送がｇｐ６０、ｇｐ１６、又はｇｐ３０レセプターと関連し、治療効果を生じる薬剤及び蛋白質−薬剤組成物は、本発明の組成物と考えられる。
【００４９】
本発明の別の局面に基づき、内皮細胞は、特異的機能を有する細胞と共培養できる。内皮細胞と、島細胞、肝細胞、神経内分泌細胞、及びその他などの他の細胞型とのインキュベーションは、これらの細胞に蛋白質や他の利点のある成分などの成分の必要な輸送を可能とする。内皮細胞は、インビボ条件（即ち、ここで、これらの細胞型は、通常、内皮細胞の近傍にあって、それらの適切な機能に必要な栄養素、増殖因子、ホルモンシグナルなどの輸送のために内皮細胞に依存するだろう）をシミュレートするために、培養細胞型へのこれらの成分の輸送を提供する。内皮細胞が存在しないとき、これらの異なる細胞型を十分に培養し、生理的成果を得ることは、以前は不可能であった。所望の細胞型を用いた培養での内皮細胞の存在は、インビトロ又はエキソビボの、膵島、肝細胞、又は神経内分泌組織の分化と適当な機能化を可能とする。従って、内皮細胞非存在下で培養したものと比べた場合、膵島との内皮細胞の共培養により、生理的性質（例えば、インスリン分泌能力）が改善した膵島が得られることがわかる。次いで、この組織をエキソビボで使用して、又はインビボで移植して、十分な細胞機能の欠如によって引き起こされる疾患（例えば、島細胞の場合の糖尿病、肝細胞の場合の肝機能不全、及び神経内分泌細胞の場合の神経内分泌障害又は鎮痛）を治療できる。他の組織や臓器（上記）起源の細胞も内皮細胞と共培養して、同じ利益を提供しうる。更に、共培養を用いて、標的細胞型に遺伝物質を組み込ませうる。これらの培養でのアルブミンの存在は、おおいに利点があることがわかる。
【００５０】
以下の実施例で本発明を更に説明するが、勿論、その範囲を制限するものとは決して解釈されるべきではない。
【実施例】
【００５１】
実施例１
本実施例は、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。パクリタキセル−アルブミン組成物の製造は、米国特許５，４３９，６８６及び５，９１６，５９６に記載されている（これらは、引用によりそれら全体が援用される）。詳細には、パクリタキセル３０ｍｇを塩化メチレン３．０ｍｌに溶解した。溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（２％ｗ／ｖ）２７．０ｍｌに加えた。デフェロキサミンを必要に応じ加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザー、モデルＴｅｍｐｅｓｔ  Ｉ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた系をロータリーエバポレーターに移し、塩化メチレンを、２０〜３０分間、減圧下（３０ｍｍＨｇ）、４０℃で急速除去した。生じた分散液は半透明で、生じたパクリタキセル粒子の典型的平均直径は、範囲５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）であった。分散液を更に４８時間、凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元の分散物に容易に再構成できた。再構成後の粒子サイズは、凍結乾燥前と同じであった。
【００５２】
本実施例で使用した薬剤、溶媒、蛋白質の量、型及び割合は、決して限定的ではないことを認識すべきである。クレモホール製剤に溶解したパクリタキセルの毒性と比較したとき、アルブミン含有の本発明の医薬組成物はかなり低い毒性を示した。
【００５３】
実施例２
本実施例は、アミオダロンとアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。アミオダロン３０ｍｇを塩化メチレン３．０ｍｌに溶解した。溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（１％ｗ／ｖ）２７．０ｍｌに加えた。デフェロキサミンを必要に応じ加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザー、モデルＴｅｍｐｅｓｔ  Ｉ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた系をロータリーエバポレーターに移し、塩化メチレンを、２０〜３０分間、減圧下（３０ｍｍＨｇ）、４０℃で急速除去した。生じた分散液は半透明で、生じたアミオダロン粒子の典型的平均直径は、範囲５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）であった。分散液を更に４８時間、凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元の分散物に容易に再構成された。再構成後の粒子サイズは、凍結乾燥前と同じであった。
【００５４】
本実施例で使用した薬剤、溶媒、蛋白質の量、型及び割合は、決して限定的ではないことを認識すべきである。ツウィーン製剤に溶解したアミオダロンの毒性と比較したとき、アルブミン含有の本発明の医薬組成物はかなり低い毒性を示した。
【００５５】
実施例３
本実施例は、リオチロニンとアルブミン組成物を含む医薬組成物の製造を示す。リオチロニン（又は適切な塩）を、濃度０．５〜５０ｍｇ／ｍｌで水性アルコール性溶液又はアルカリ溶液に溶解した。アルコール性（又はアルカリ）溶液を、アルブミン溶液（０．１〜２５％ｗ／ｖ）に加え、撹拌した。撹拌は、スターラーでの低い剪断、又は超音波処理器もしくはホモジナイザーでの高い剪断であった。リオチロニンの低濃度（５〜１０００μｇ／ｍｌ）で清澄溶液が得られた。濃度が増加するにつれ、ミルク状安定懸濁液が得られた。これらの溶液又は懸濁液を、滅菌フィルターを通し濾過した。有機溶媒を蒸発又は他の適切な方法で除去した。
【００５６】
実施例４
本実施例は、ラパマイシンとアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。ラパマイシン３０ｍｇをクロロホルム／エタノール２ｍｌに溶解した。次いで、溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（３％ｗ／ｖ）２７．０ｍｌに加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザーモデル  Ｔｅｍｐｅｓｔ  Ｉ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた系をＲｏｔａｖａｐに移し、溶媒を、２０〜３０分間、減圧下（３０ｍｍＨｇ）、４０℃で急速除去した。生じた分散液は半透明で、生じた粒子の典型的平均直径は、範囲５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）であった。分散液を更に４８時間、凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元の分散物に容易に再構成された。再構成後の粒子サイズは、凍結乾燥前と同じであった。本実施例で使用した薬剤、溶媒、蛋白質の量、型及び割合は、決して限定的ではないことを認識すべきである。
【００５７】
実施例５
本実施例は、エポチロンＢとアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。エポチロンＢ３０ｍｇをクロロホルム／エタノール２ｍｌに溶解した。次いで、溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（３％ｗ／ｖ）２７．０ｍｌに加えた。デフェロキサミンを必要に応じ加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザーモデル  Ｔｅｍｐｅｓｔ  Ｉ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた系をＲｏｔａｖａｐに移し、溶媒を、２０〜３０分間、減圧下（３０ｍｍＨｇ）、４０℃で急速除去した。生じた分散液は半透明で、生じた粒子の典型的平均直径は、範囲５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）であった。分散液を更に４８時間、凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元の分散物に容易に再構成された。再構成後の粒子サイズは、凍結乾燥前と同じであった。本実施例で使用した薬剤、溶媒、蛋白質の量、型及び割合は、決して限定的ではないことを認識すべきである。クレモホール製剤に溶解したエポチロンＢの毒性と比較したとき、アルブミン含有の医薬組成物はかなり低い毒性を示した。
【００５８】
実施例６
本実施例は、コルヒチンダイマーとアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。コルヒチン−ダイマー３０ｍｇをクロロホルム／エタノール２ｍｌに溶解した。次いで、溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（３％ｗ／ｖ）２７．０ｍｌに加えた。デフェロキサミンを必要に応じ加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザーモデル  Ｔｅｍｐｅｓｔ  Ｉ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた系をＲｏｔａｖａｐに移し、溶媒を、２０〜３０分間、減圧下（３０ｍｍＨｇ）、４０℃で急速除去した。生じた分散液は半透明で、生じた粒子の典型的平均直径は、範囲５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）であった。分散液を更に４８時間、凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元の分散物に容易に再構成された。再構成後の粒子サイズは、凍結乾燥前と同じであった。本実施例で使用した薬剤、溶媒、蛋白質の量、型及び割合は、限定的ではないことを認識すべきである。ツウィーンに溶解したコルヒチンダイマーの毒性と比較したとき、アルブミン含有の医薬組成物はかなり低い毒性を示した。
【００５９】
実施例７
本実施例は、ドセタキセルとアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。ドセタキセル３０ｍｇをクロロホルム／エタノール２ｍｌに溶解した。次いで、溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（３％ｗ／ｖ）２７．０ｍｌに加えた。デフェロキサミンを必要に応じ加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザーモデル  Ｔｅｍｐｅｓｔ  Ｉ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた系をＲｏｔａｖａｐに移し、溶媒を、２０〜３０分間、減圧下（３０ｍｍＨｇ）、４０℃で急速除去した。生じた分散液は半透明で、生じた粒子の典型的平均直径は、範囲５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）であった。分散液を更に４８時間、凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元の分散物に容易に再構成された。再構成後の粒子サイズは、凍結乾燥前と同じであった。本実施例で使用した薬剤、溶媒、及び蛋白質の量、型及び割合は、限定的ではないことを認識すべきである。ツウィーン／エタノール（これはこの薬剤用の標準的溶媒である）に溶解したドセタキセルの毒性と比較したとき、アルブミン含有の医薬組成物はかなり低い毒性を示した。
【００６０】
実施例８
本実施例は、ドセタキセルとアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。ドセタキセル１５０ｍｇを酢酸エチル／酢酸ブチル１ｍｌ及び油（例えば、ダイズ油又はビタミンＥ油）０．５ｍｌに溶解した。溶媒と油の他の比を使用し、これらの組成物も本発明の一部と考えられる。少量の陰性荷電成分（例えば、安息香酸（０．００１％〜０．５％））も場合によっては加えられた。次いで、溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（５％ｗ／ｖ）２７．０ｍｌに加えた。デフェロキサミンを必要に応じ加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザーモデル  Ｔｅｍｐｅｓｔ  Ｉ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた系をＲｏｔａｖａｐに移し、溶媒を、２０〜３０分間、減圧下（３０ｍｍＨｇ）、４０℃で急速除去した。生じた分散液は半透明で、生じた粒子の典型的平均直径は、範囲５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）であった。分散液を更に４８時間、凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元の分散物に容易に再構成された。再構成後の粒子サイズは、凍結乾燥前と同じであった。本実施例で使用した薬剤、溶媒、蛋白質の量、型及び割合は、限定的ではないことを認識すべきである。ツウィーン／エタノール（これはこの薬剤用の標準的溶媒である）に溶解したドセタキセルの毒性と比較したとき、アルブミン含有の医薬組成物はかなり低い毒性を示した。
【００６１】
実施例９
本実施例は、タキサンＩＤＮ５３９０とアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。ＩＤＮ５３９０１５０ｍｇを酢酸エチル／酢酸ブチル１ｍｌ及び油（例えば、ダイズ油又はビタミンＥ油）０．５ｍｌに溶解した。溶媒と油の他の比を使用し、これらの組成物も本発明の一部と考えられる。少量の陰性荷電成分（例えば、安息香酸（０．００１％〜０．５％））も場合によっては加えられた。次いで、溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（５％ｗ／ｖ）２７．０ｍｌに加えた。デフェロキサミンを必要に応じ加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザーモデル  Ｔｅｍｐｅｓｔ  Ｉ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた系をＲｏｔａｖａｐに移し、溶媒を、２０〜３０分間、減圧下（３０ｍｍＨｇ）、４０℃で急速除去した。生じた分散液は半透明で、生じた粒子の典型的平均直径は、範囲５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）であった。分散液を更に４８時間、凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元の分散物に容易に再構成された。再構成後の粒子サイズは、凍結乾燥前と同じであった。本実施例で使用した薬剤、溶媒、蛋白質の量、型及び割合は、限定的ではないことを認識すべきである。ツウィーンに溶解したＩＤＮ５３９０の毒性と比較したとき、アルブミン含有の医薬組成物はかなり低い毒性を示した。
【００６２】
実施例１０
本実施例は、タキサンＩＤＮ５１０９とアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。ＩＤＮ５１０９１５０ｍｇをクロロホルム／エタノール２ｍｌに溶解した。溶媒と油の他の比を使用し、これらの組成物も本発明の一部と考えられる。少量の陰性荷電成分（例えば、安息香酸（０．００１％〜０．５％））も場合によっては加えられた。次いで、溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（５％ｗ／ｖ）２７．０ｍｌに加えた。デフェロキサミンを必要に応じ加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザーモデル  Ｔｅｍｐｅｓｔ  Ｉ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた系をＲｏｔａｖａｐに移し、溶媒を、２０〜３０分間、減圧下（３０ｍｍＨｇ）、４０℃で急速除去した。生じた分散液は半透明で、生じた粒子の典型的平均直径は、範囲５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）であった。分散液を更に４８時間、凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元の分散物に容易に再構成された。再構成後の粒子サイズは、凍結乾燥前と同じであった。本実施例で使用した薬剤、溶媒、及び蛋白質の量、型及び割合は、限定的ではないことを認識すべきである。ツウィーンに溶解したＩＤＮ５１０９の毒性と比較したとき、アルブミン含有の医薬組成物はかなり低い毒性を示した。
【００６３】
実施例１１
本実施例は、１０−ヒドロキシカンプトテシン（１０ＨＣ）とアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。１０−ＨＣ３０ｍｇをＤＭＦ／塩化メチレン／ダイズ油２．０ｍｌに溶解した。次いで、溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（３％ｗ／ｖ）２７．０ｍｌに加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザーモデル  Ｔｅｍｐｅｓｔ  Ｉ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた系をＲｏｔａｖａｐに移し、溶媒を、２０〜３０分間、減圧下（３０ｍｍＨｇ）、４０℃で急速除去した。生じた分散液は半透明で、生じた粒子の典型的平均直径は、範囲５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）であった。分散液を更に４８時間、凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元の分散物に容易に再構成された。再構成後の粒子サイズは、凍結乾燥前と同じであった。本実施例で使用した薬剤、溶媒、蛋白質の量、型及び割合は、決して限定的ではないことを認識すべきである。
【００６４】
実施例１２
本実施例は、シクロスポリンとアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。シクロスポリン３０ｍｇを塩化メチレン３．０ｍｌに溶解した。次いで、溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（１％ｗ／ｖ）２７．０ｍｌに加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザーモデル  Ｔｅｍｐｅｓｔ  Ｉ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた系をＲｏｔａｖａｐに移し、塩化メチレンを、２０〜３０分間、減圧下（３０ｍｍＨｇ）、４０℃で急速除去した。生じた分散液は半透明で、生じた粒子の典型的平均直径は、範囲５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）であった。分散液を更に４８時間、凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元の分散物に容易に再構成された。再構成後の粒子サイズは、凍結乾燥前と同じであった。
【００６５】
実施例１３
本実施例は、油を含みかつシクロスポリンとアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。シクロスポリン３０ｍｇを適切な油（１０％オレンジ油を含むゴマ油）３．０ｍｌに溶解した。次いで、溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（１％ｖ／ｗ）２７．０ｍｌに加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザー、モデルＴｅｍｐｅｓｔ  Ｉ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた分散液は、範囲５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）の典型的平均直径を有した。分散液は直接使用するか、又は適切な凍結保護剤を場合によっては添加することによって４８時間凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元の分散物に容易に再構成された。本実施例で使用した薬剤、溶媒、及び蛋白質の量、型及び割合は、決して限定的ではないことを認識すべきである。
【００６６】
実施例１４
本実施例は、アムホテリシンとアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。アムホテリシン３０ｍｇをメチルピロリジノン／塩化メチレン３．０ｍｌに溶解した。溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（１％ｗ／ｖ）２７．０ｍｌに加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザー、モデルＴｅｍｐｅｓｔ  Ｉ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた系をロータリーエバポレーターに移し、溶媒を、２０〜３０分間、減圧下（３０ｍｍＨｇ）、４０℃で急速除去した。生じた分散液は半透明で、生じたアムホテリシン粒子の典型的平均直径は、５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）であった。分散液を更に４８時間、凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元の分散物に容易に再構成することができた。再構成後の粒子サイズは、凍結乾燥前と同じであった。本実施例で使用した薬剤、溶媒、及び蛋白質の量、型及び割合は、決して限定的ではないことを認識すべきである。脂質、胆汁塩などの他の成分の添加によっても、適切な製剤が得られた。
【００６７】
実施例１５
本実施例は、アルブミンとパクリタキセルを含む医薬組成物の前臨床の薬物動態学と薬力学を示す。
【００６８】
マウスとラットでの幾つかの前臨床の薬物動態学的研究を行い、クレモホール−パクリタキセル（タキソール）医薬組成物に対するアルブミン−パクリタキセル医薬組成物の利点の可能性を評価した。これらの研究は以下を示した：（１）ラットでのアルブミン−パクリタキセルの薬物動態学は投与量に対し線形であるが、タキソール薬物動態学は、非線形であった、（２）アルブミンとパクリタキセルを含む医薬組成物は、低血漿ＡＵＣとＣｍａｘを示し、タキソールと比べて、組織へのアルブミン−パクリタキセル組成物のより速い分布が示唆された（排泄も同様）、（３）アルブミンとパクリタキセルを含む医薬組成物は、低Ｃｍａｘを示し、これは、タキソールに対してのピーク血液レベルと関連する毒性の減少の恐らく説明となる、（４）示したアルブミンとパクリタキセルを含む医薬組成物の半減期は、タキソールに対し、ラットで約２倍大きく、腫瘍保持マウスで約４倍大きかった、及び、（５）アルブミンとパクリタキセルを含む医薬組成物中でのパクリタキセルの代謝は、タキソール医薬組成物におけるよりも遅かった。ラットで注射２４時間後、タキソールでのほんの２２％と比べて、アルブミンとパクリタキセルを含む医薬組成物での全放射活性の４４％がまだパクリタキセルと関連していた。上記薬力学の最終的な効果、即ち、示されたアルブミンとパクリタキセルを含む医薬組成物の、細胞内取り込みの増加、半減期の増加、遅い代謝により、腫瘍保持マウスでタキソールよりも、腫瘍ＡＵＣが１．７倍高く、腫瘍Ｃｍａｘが１．２倍高く、腫瘍半減期が１．７倍長くなった。
【００６９】
実施例１６
本実施例は、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物に関連する副作用の減少及び毒性の減少を示す。
【００７０】
クレモホールの非存在下、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物の独特の性質のために、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物の毒性はタキソールよりもかなり低い。マウスとラットでの前臨床研究で、マウスでの単回投与の急性毒性研究は、タキソールよりも、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物で約５９倍大きいＬＤ５０投与量を示した。マウスでの多回投与の毒性研究で、ＬＤ５０投与量は、タキソールよりも、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物で約１０倍大きかった。更なる研究は、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物とタキソールで処置したラットでの骨髄抑制の程度を評価した。等投与量で、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物は、タキソールよりもラットでの骨髄抑制がかなり小さいことを結果は示した。ラットでの急性毒性研究で、９ｍｇ／ｋｇのタキソールを受けた動物で大脳皮質壊死又は重度の神経毒性が観察されたが、１２０ｍｇ／ｋｇまでの投与量でパクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物を受けた動物ではなかった。従って、パクリタキセルを含む医薬組成物でのアルブミンの存在により、パクリタキセルを含む通常の医薬組成物と比べて、副作用と毒性のかなりの減少が生じる。
【００７１】
実施例１７
本実施例は、ヒトでのパクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物の臨床効果を示す。
【００７２】
現在まで５００人超のヒト患者での臨床研究により、クレモホール−パクリタキセル組成物（タキソール）と比較して、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物（「アルブミン−パクリタキセル」）の毒性と副作用の減少を支持する証拠が提供される。１９人の患者のフェーズＩ研究で、３週毎に与えられるアルブミン−パクリタキセルの最大耐量は３００ｍｇ／ｍ２であった。３週毎に１回投与される１７５ｍｇ／ｍ２であるクレモホール−パクリタキセルの一般的投与量よりも、これはかなり高い。これらの患者での血液毒性は穏和で、過敏症はなく、神経障害は穏和で、静脈刺激などの投与関連副作用は無かった。
【００７３】
２７人の患者の別のフェーズＩ研究で、１週スケジュールで与えられるアルブミン−パクリタキセルの最大耐量は１２５〜１５０ｍｇ／ｍ２であった。１週スケジュールで投与されるとき８０ｍｇ／ｍ２であるクレモホール−パクリタキセルの一般的投与量よりも、これはかなり高い。これらの患者での血液毒性は穏和で、過敏症はなく、神経障害は穏和で、静脈刺激などの投与関連副作用は無かった。
【００７４】
４３人と６３人の患者で３週毎にそれぞれ１７５又は３００ｍｇ／ｍ２で与えられるアルブミン−パクリタキセルの２つのフェーズＩＩ研究で、血液毒性は小さく、患者のほんの７％と２４％において、それぞれ１７５ｍｇ／ｍ２及び３００ｍｇ／ｍ２でＡＮＣ＜５００／ｍｍ３であった。１７５ｍｇ／ｍ２及び３００ｍｇ／ｍ２でそれぞれ、患者の０％及び１４％で重篤な神経障害が起こった。重篤な過敏症の発生は無く、静脈刺激、注射時疼痛などの投与関連副作用の発生も無かった。これらの副作用は、タキソールでの経験よりもかなり小さかった。
【００７５】
タキソール（これはクレモホール−パクリタキセルを含む）に対しアルブミン−パクリタキセル組成物ＡＢＩ−００７を比較するフェーズＩＩＩトライアルで、ＡＢＩ−００７の投与量はかなり高く（２６０ｍｇ／ｍ２対１７５ｍｇ／ｍ２（タキソール））、それは良く許容されることが示された。アルブミン−パクリタキセル組成物はまた、クレモホール−パクリタキセルと比較するとき、かなりの好中球減少症の減少を示した。
【００７６】
実施例１８
本実施例は、アルブミンとパクリタキセルを含む医薬組成物を用いる前臨床効能の増大を示す。
【００７７】
子宮扁平上皮癌腫Ａ４３１に対するアルブミン−パクリタキセル及びタキソールの効果を比較するインビトロ細胞毒性研究によって、アルブミン−パクリタキセルに関し細胞毒性活性で約４倍の増加が示され、アルブミン−パクリタキセルとタキソールのＩＣ５０は、それぞれ０．００３８及び０．０１２μｇ／ｍｌであった。
【００７８】
胸腺欠損マウスでの５つの異なるヒト異種移植腫瘍モデルで（ＭＸ−１乳房、ＮＣＩ−Ｈ５２２肺、ＳＫ−ＯＶ−３卵巣、ＰＣ−３前立腺、ＨＴ−２９結腸）、ＡＢＩ−００７のＭＴＤ又は等毒性投与量は、タキソールよりも１．５〜３．４倍大きく、肺腫瘍（ｐ＝０．１５）を除いて全ての腫瘍で（ｐ＜０．０５）、腫瘍増殖遅延での統計的に有意な改善が起こった。
【００７９】
ＭＸ  １乳房モデルで、タキソールの等投与量で処置した群で２０〜４０％の生存であったのに対し、アルブミン−パクリタキセル処置動物の１００％が１０３日生存した。
【００８０】
実施例１９
本実施例は、動脈内投与したアルブミンとパクリタキセルを含む医薬組成物を用いる臨床効能の増大を示す。
【００８１】
本明細書に記載したように、アルブミンとパクリタキセルを含む医薬組成物の動脈内投与のフェーズＩ／ＩＩ研究で、頭頚部癌（Ｎ＝３１）と肛門管癌（Ｎ＝１２）の故に患者が登録された。投与量は、経皮的超選択的動脈内注入３〜４週毎、３０分にわたって投与される１２０〜３００ｍｇ／ｍ２から段階的に増加した。頭頚部癌患者は応答率７６％（Ｎ＝２９）を示し、一方、肛門管癌患者は応答率６４％（Ｎ＝１１）を示した。
【００８２】
実施例２０
本実施例は、３％油を含みかつプロポフォールとアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。
【００８３】
プロポフォール１％（重量）を含む水中油型エマルジョンを以下のように製造した。注射用水にグリセロール（２．２５重量％）とヒト血清アルブミン（０．５重量％）を加えることによって水相を製造し、溶解するまで、撹拌した。水相をフィルター（０．２ｕｍフィルター）を通過させた。約５０℃〜６０℃で、ダイズ油（３重量％）中に卵レシチン（０．４重量％）とプロポフォール（１重量％）を溶解することによって油相を製造し、溶解するまで、撹拌した。油相を水相に加え、１０，０００ＲＰＭで５分間ホモジナイズした。粗エマルジョンを２０，０００ｐｓｉで高圧ホモジナイズし、５℃で１５サイクル再循環させた。あるいは、ホモジナイザーを通過した不連続な通過物を用いた。最終エマルジョンを濾過し（０．２μｍフィルター）、窒素下保存した。生じた医薬組成物は、以下の一般的範囲の成分（重量％）を含んでいた：プロポフォール０．５〜５％；ヒト血清アルブミン０．５〜３％；ダイズ油０．５〜３．０％；卵レシチン０．１２〜１．２％；グリセロール２．２５％；注射用水１００まで適量；ｐＨ５〜８。適切なキレーター、例えばデフェロキサミン（０．００１〜０．１％）も場合によっては加えた。
【００８４】
実施例２１
本実施例は、５％油を含みかつプロポフォールとアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。
【００８５】
プロポフォール１％（重量）を含む水中油型エマルジョンを以下のように製造した。注射用水にグリセロール（２．２５重量％）とヒト血清アルブミン（０．５重量％）を加えることによって水相を製造し、溶解するまで、撹拌した。水相をフィルター（０．２ｕｍフィルター）を通過させた。約５０℃〜６０℃で、ダイズ油（５重量％）中に卵レシチン（０．８重量％）とプロポフォール（１重量％）を溶解することによって製造した油相、溶解するまで、撹拌した。油相を水相に加え、１０，０００ＲＰＭで５分間ホモジナイズした。粗エマルジョンを２０，０００ｐｓｉで高圧ホモジナイズし、５℃で１５サイクル再循環させた。あるいは、ホモジナイザーを通過した不連続な通過物を用いた。最終エマルジョンを濾過し（０．２μｍフィルター）、窒素下保存した。生じた医薬組成物は、以下の一般的範囲の成分（重量％）を含んでいた：プロポフォール０．５〜５％；ヒト血清アルブミン０．５〜３％；ダイズ油０．５〜１０．０％；卵レシチン０．１２〜１．２％；グリセロール２．２５％；注射用水１００まで適量；ｐＨ５〜８。適切なキレーター、例えばデフェロキサミン（０．００１〜０．１％）も場合によっては加えた。
【００８６】
実施例２２
本実施例は、油非含有の、プロポフォールとアルブミンを含む医薬組成物の製造を示す。
【００８７】
実施例１８に記載したのと同様の手順を用いて、アルブミンとツウィーン８０を含むプロポフォール組成物を製造した。注射用水にグリセロール（２．２５重量％）、ヒト血清アルブミン（０．５重量％）、ツウィーン８０（１．５重量％）及びメシル酸デフェロキサミン（０．１重量％）を加えることによって水相を製造し、溶解するまで、撹拌した。水相をフィルター（０．２μｍフィルター）を通過させた。プロポフォール（１重量％）を水相に加え、１０，０００ＲＰＭで５分間ホモジナイズした。粗エマルジョンを２０，０００ｐｓｉで高圧ホモジナイズし、５℃で１５サイクル再循環させた。あるいは、ホモジナイザーを通過した不連続な通過物を用いた。最終エマルジョンを濾過し（０．２ｕｍフィルター）、窒素下保存した。生じた医薬組成物は、以下の一般的範囲の成分を含んでいた（重量％）：プロポフォール０．５〜５；ヒト血清アルブミン０．５〜３％；ツウィーン８００．１〜１．５％；メシル酸デフェロキサミン０．０００１〜０．１％；グリセロール２．２５％；注射用水１００まで適量；ｐＨ５〜８。
【００８８】
実施例２３
本実施例は、油非含有の、プロポフォール、アルブミン、及びビタミンＥ−ＴＰＧＳを含む医薬組成物の製造を示す。
【００８９】
実施例１９に記載したのと同様の手順を用いて、アルブミンとビタミンＥ−ＴＰＧＳを含むプロポフォール組成物を製造した。注射用水にグリセロール（２．２５重量％）、ヒト血清アルブミン（０．５重量％）、ビタミンＥ−ＴＰＧＳ（１重量％）、メシル酸デフェロキサミン（０．１重量％）を加えることによって水相を製造し、溶解するまで、撹拌した。水相をフィルター（０．２ｕｍフィルター）を通過させた。プロポフォール（１重量％）を水相に加え、１０，０００ＲＰＭで５分間ホモジナイズした。粗エマルジョンを２０，０００ｐｓｉで高圧ホモジナイズし、５℃で１５サイクル再循環させた。あるいは、ホモジナイザーを通過した不連続な通過物を用いた。最終エマルジョンを濾過し（０．２μｍフィルター）、窒素下保存した。生じた医薬組成物は、以下の一般的範囲の成分を含んでいた（重量％）：プロポフォール０．５〜５；ヒト血清アルブミン０．５〜３％；ビタミンＥ−ＴＰＧＳ０．５〜４．０％；場合によってはメシル酸デフェロキサミン０．０００１〜０．１％；グリセロール２．２５％；注射用水１００まで適量；ｐＨ５〜８。
【００９０】
実施例２４
本実施例は、プロポフォール、アルブミン、ビタミンＥ−ＴＰＧＳ、及び１％油を含む医薬組成物の製造を示す。
【００９１】
プロポフォール１％（重量）を含むエマルジョンを以下の方法によって製造した。注射用水にグリセロール（２．２５重量％）とヒト血清アルブミン（０．５重量％）を加えることによって水相を製造し、溶解するまで、撹拌した。水相をフィルター（０．２μｍフィルター）を通過させた。界面活性剤（例えば、ビタミンＥ−ＴＰＧＳ（０．５％））を水相に加えた。油相はプロポフォール（１重量％）と１％ダイズ油からなっていた。油相を水相に加え、１０，０００ＲＰＭで５分間ホモジナイズした。粗エマルジョンを２０，０００ｐｓｉで高圧ホモジナイズし、５℃で１５サイクルまで再循環させた。あるいは、ホモジナイザーを通過した不連続な通過物を用いた。最終エマルジョンを濾過し（０．２μｍフィルター）、窒素下保存した。
【００９２】
生じた医薬組成物は、以下の一般的範囲の成分を含んでいた（重量％）：プロポフォール０．５〜５％；ヒト血清アルブミン０．０１〜３％；ビタミンＥ−ＴＰＧＳ０．１〜２％；ダイズ油又は他の油（０．１％〜５％）；グリセロール２．２５％；注射用水１００まで適量；ｐＨ５〜８。デフェロキサミンを場合によっては加えた（０．００１重量％〜０．１重量％）。
【００９３】
実施例２５
本実施例は、プロポフォール、アルブミン、ビタミンＥ−ＴＰＧＳ、１％油、及び陰性荷電成分を含む医薬組成物の製造を示す。
【００９４】
プロポフォール１％（重量）を含むエマルジョンを以下の方法によって製造した。注射用水にグリセロール（２．２５重量％）とヒト血清アルブミン（０．５重量％）を加えることによって水相を製造し、溶解するまで、撹拌した。水相をフィルター（０．２μｍフィルター）を通過させた。界面活性剤（例えば、ビタミンＥ−ＴＰＧＳ（０．５％））を水相に加えた。油相はプロポフォール（１重量％）と１％ダイズ油からなっていた。少量の陰性荷電成分（０．００１％〜１％）（例えば、リン脂質又は胆汁塩）を加えた。油相を水相に加え、１０，０００ＲＰＭで５分間ホモジナイズした。粗エマルジョンを２０，０００ｐｓｉで高圧ホモジナイズし、５℃で１５サイクルまで再循環させた。あるいは、ホモジナイザーを通過した不連続な通過物を用いた。最終エマルジョンを濾過し（０．２μｍフィルター）、窒素下保存した。
【００９５】
生じた医薬組成物は、以下の一般的範囲の成分を含んでいた（重量％）：プロポフォール０．５〜５％；ヒト血清アルブミン０．０１〜３％；ビタミンＥ−ＴＰＧＳ０．１〜２％；ダイズ油又は他の油（０．１％〜５％）；グリセロール２．２５％；注射用水１００まで適量；ｐＨ５〜８。デフェロキサミンを場合によっては加えた（０．００１重量％〜０．１重量％）。
【００９６】
実施例２６
本実施例は、プロポフォール、アルブミン、ビタミンＥ−ＴＰＧＳ、１％油、及び陰性荷電成分（デオキシコール酸ナトリウム）を含む医薬組成物の製造を示す。
【００９７】
プロポフォール１％（重量）を含むエマルジョンを以下の方法によって製造した。注射用水にグリセロール（２．２５重量％）とヒト血清アルブミン（０．５重量％）を加えることによって水相を製造し、溶解するまで、撹拌した。水相をフィルター（０．２μｍフィルター）を通過させた。界面活性剤（例えば、ビタミンＥ−ＴＰＧＳ（０．５％））を水相に加えた。油相はプロポフォール（１重量％）と１％ダイズ油からなっていた。少量の陰性荷電成分（０．００１％〜１％）（例えば、デオキシコール酸ナトリウム）を加えた。油相を水相に加え、１０，０００ＲＰＭで５分間ホモジナイズした。粗エマルジョンを２０，０００ｐｓｉで高圧ホモジナイズし、５℃で１５サイクルまで再循環させた。あるいは、ホモジナイザーを通過した不連続な通過物を用いた。最終エマルジョンを濾過し（０．２μｍフィルター）、窒素下保存した。
【００９８】
生じた医薬組成物は、以下の一般的範囲の成分を含んでいた（重量％）：プロポフォール０．５〜５％；ヒト血清アルブミン０．０１〜３％；ビタミンＥ−ＴＰＧＳ０．１〜２％；ダイズ油又は他の油（０．１％〜５％）；グリセロール２．２５％；注射用水１００まで適量；ｐＨ５〜８。デフェロキサミンを場合によっては加えた（０．００１重量％〜０．１重量％）を加えた。
【００９９】
実施例２７
本実施例は、プロポフォール、アルブミン、ビタミンＥ−ＴＰＧＳ、１％油、及び陰性荷電成分（リン脂質、胆汁酸塩、ポリアミノ酸等）を含む医薬組成物の製造を示す。
【０１００】
プロポフォール１％（重量）を含むエマルジョンを以下のように製造した。注射用水にグリセロール（２．２５重量％）とヒト血清アルブミン（０．５重量％）を加えることによって水相を製造し、溶解するまで、撹拌した。水相をフィルター（０．２μｍフィルター）を通過させた。界面活性剤（例えば、ビタミンＥ−ＴＰＧＳ（０．５％））を水相に加えた。油相はプロポフォール（１重量％）と１％ダイズ油からなっていた。少量の陰性荷電成分（０．００１％〜１％）（例えば、ホスファチジルコリン）を加えた。油相を水相に加え、１０，０００ＲＰＭで５分間ホモジナイズした。粗エマルジョンを２０，０００ｐｓｉで高圧ホモジナイズし、５℃で１５サイクルまで再循環させた。あるいは、ホモジナイザーを通過した不連続な通過物を用いた。最終エマルジョンを濾過し（０．２μｍフィルター）、窒素下保存した。
【０１０１】
生じた医薬組成物は、以下の一般的範囲の成分を含んでいた（重量％）：プロポフォール０．５〜５％；ヒト血清アルブミン０．０１〜３％；ビタミンＥ−ＴＰＧＳ０．１〜２％；ダイズ油又は他の油（０．１％〜５％）；グリセロール２．２５％；注射用水１００まで適量；ｐＨ５〜８。デフェロキサミンを場合によっては加えた（０．００１重量％〜０．１重量％）を加えた。
【０１０２】
実施例２８
本実施例は、アルブミンへのプロポフォールの結合を示す。
【０１０３】
アルブミンへのプロポフォールの結合は以下のように測定した。プロポフォールの溶解度は水中とアルブミンを含む溶液中で試験した。プロポフォール２５０μＬを、水又はアルブミン溶液１０ｍＬに加え、２時間、シンチレーションバイアル中で撹拌した。次いで、溶液を、１５ｍＬポリエチレン遠心分離管に移し、約１６時間４０℃に保った。水とアルブミン溶液のサンプルを、プロポフォールについてアッセイした。水へのプロポフォールの溶解度は０．１２ｍｇ／ｍｌであると測定された。アルブミン溶液へのプロポフォールの溶解度は、アルブミンの濃度に依存し、アルブミンの濃度が２％（２０ｍｇ／ｍｌ）のとき、０．４４ｍｇ／ｍｌまで増加した。溶液を、３０ｋＤＭＷＣＯフィルターで限外濾過し、濾液をプロポフォールについてアッセイした。プロポフォール／水溶液では、プロポフォール６１％を濾液に回収することができたが、プロポフォール／アルブミン溶液では、ほんの１４％が濾液に回収され、プロポフォールのアルブミンとのかなりの結合が示された。これらの結果に基づき、プロポフォールを含む医薬組成物へのアルブミンの添加により、プロポフォールのアルブミン結合に由来する遊離プロポフォール量の減少が起こる。
【０１０４】
実施例２９
本実施例は、濾過／膜接触による医薬組成物中での遊離プロポフォールの減少を示す。
【０１０５】
実施例２８で記載した実験で観察されたように、プロポフォールを含む医薬組成物の濾過又は限外濾過により、遊離プロポフォール量の減少が起こる。ディプリバン、及びアルブミンを含む本発明に基づき製造された医薬組成物（それらの各々は１％プロポフォール（１０ｍｇ／ｍｌ）を含んでいた）を、３０ｋＤ膜を用いて限外濾過した。遊離プロポフォール量を、ＨＰＬＣを用いて濾液で測定した。ディプリバンに関し、濾液中の遊離プロポフォールの濃度は約１７μｇ／ｍであり、本発明の医薬組成物に関し、濾液中の遊離プロポフォールの濃度は約７μｇ／ｍｌであった。結果は、プロポフォールとアルブミンを含む医薬組成物に関し、ファクターが２より大きい、遊離プロポフォールの有効な減少に相当する。
【０１０６】
実施例３０
本実施例は、ヒトへのプロポフォールとアルブミンを含む医薬組成物の投与を示す。
【０１０７】
プロポフォールとアルブミンを含む医薬組成物の有害皮膚知覚と、市販のプロポフォール製剤であるディプリバンのそれを比較するために、無作為化、二重盲検の臨床試験を行った。試験は、優良臨床規範を遵守して行い、インフォームドコンセントを被験体からとった。どちらの性の成人ヒト被験体も、手の背面の傷の無い、見かけ上正常の皮膚を有するならば、参加に適格であった。
冷蔵庫に元々は保存してあった製剤を室温にし、次いで、製剤１０μＬを、同時に被験体の両手の背面にゆっくりと配置した。製剤に関する彼らの手の全体反応及び感触を記録した。本研究の結果を表１に記載する。
【０１０８】
【表１】
2020011999.tif 000002
【０１０９】
実施例３１
本実施例は、プロポフォールを含む医薬組成物中の抗酸化剤としてのデフェロキサミンの使用を示す。
【０１１０】
プロポフォールの酸化を防止する上でのメシル酸デフェロキサミンの効果を試験するために、プロポフォールとメシル酸デフェロキサミンを含みかつツウィーン又はＴＰＧＳを含む医薬組成物を、４°、２５°、又は４０℃で保存した。プロポフォールの濃度を、経時、これらの製剤について測定し、デフェロキサミンの抗酸化剤活性を測定した。データは、時間ゼロに対する％力価として表２及び３に下記する。
【０１１１】
【表２】
2020011999.tif 000003
【０１１２】
【表３】
2020011999.tif 000004
【０１１３】
これらの条件下では、デフェロキサミンは、プロポフォール酸化のレベルの減少に有効であった。効果は、より高温でより顕著であった。４℃では有意な酸化は発生しなかった。本研究は、不活性又はテフロンコートのストッパーを用いて行った。
【０１１４】
実施例３２
本実施例は、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物（ＡＢＩ−００７）の肺内送達を示す。
【０１１５】
本研究の目的は、Ｓｐｒａｇｕｅ  Ｄａｗｌｅｙラットへの気管内注入後、血液中で［３Ｈ］ＡＢＩ−００７の時間経過を測定し、組織を選択することであった。
【０１１６】
動物に投与する気管内投与製剤の標的容量は、ｋｇ体重当たり投与容量１．５ｍＬに基づき計算した。投与装置は、１−ｍＬ気密ルアーロックシリンジに装着したＰｅｎｎ−Ｃｅｎｔｕｒｙ微量噴霧器（モデル１Ａ−１Ｂ；Ｐｅｎｎ−Ｃｅｎｔｕｒｙ，  Ｉｎｃ．，フィラデルフィア，  ＰＡ；  ＤｅＬｏｎｇ  Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｏｒｓ，  ロングブランチ，  ＮＪから購入）からなっていた。投与製剤の適切な容量が投与装置中に引かれ、充填された装置の重量を量り、重量を記録した。カテーテルを、麻酔した動物の気管に配置し、投与装置の微量噴霧器部分をカテーテルを通して気管に配置し、投与量を投与した。投与量投与後、空の投与装置の重量を再計量し、投与された投与量を、投与前後の投与装置の重量の差として計算した。全ての動物の平均投与量は、体重ｋｇ当たりパクリタキセル４．７７３８±０．００６０（ＣＶ１．５０５９）ｍｇであった。
【０１１７】
血液サンプル約２５０μＬを、以下の所定の投与後時点でＪＶＣラットの留置頚部カニューレから集めた：１、５、１０、１５、３０、及び４５分（分）、ならびに１、４、８、及び２４時間（時間）。２４時間血液サンプル、ならびに１０分、４５分、及び２時間で供死した動物から集めた血液サンプルを、供死した麻酔したラットから心臓穿刺で集めた。全放射活性につき分析した全ての血液サンプルを、予め秤量したサンプル管に分注し、サンプル管を再秤量し、各サンプルの重量を引き算によって計算した。頚部静脈から集めた血液サンプル及び供死した各動物から集めた血液の２５０−μＬアリコートを、全トリチウム含量に関しアッセイした。
【０１１８】
全てのラットに関し、血液中のトリチウムの最大濃度は、投与後５分（０．０８３３時間）に観察された。４時間〜２４時間の時間間隔にわたって測定したトリチウムの除去半減期は、１９．７３時間〜４３．０２時間の範囲であった。この間隔は、ほんの３つのデータ点のみを含み、それは、このパラメーターの変動性を説明しうることに注意すべきである。血液からのトリチウムの見かけのクリアランスは、０．０４Ｌ／時間のオーダーであった。これらの実験の結果を表４に下記する。
【０１１９】
【表４】
2020011999.tif 000005
【０１２０】
ラットへの静脈内投与後の［３Ｈ］ＡＢＩ−００７由来の放射活性の平均血液濃度を、時間の関数として解析し、［３Ｈ］ＡＢＩ−００７の気管内投与由来のトリチウムのバイオアベイラビリティーを評価した。この解析により、２４時間ＡＵＣ（ＡＵＣｌａｓｔ）６．１３５４ｍｇ−ｅｑ□ｈｒ／Ｌが得られた。これらのデータに基づき、［３Ｈ］ＡＢＩ−００７の気管内投与由来の放射活性は、高度に生物的に利用可能である。これらの解析は、全放射活性に基づいている。
【０１２１】
［３Ｈ］ＡＢＩ−００７由来のトリチウムは、気管内注入後、急速に吸収される。［３Ｈ］ＡＢＩ−００７の気管内投与後の血液中のトリチウムの平均吸収及び除去半減期（それぞれ、ｋ０１半減期及びｋ１０半減期）（平均＋／−ＳＤ）は、それぞれ０．０１５５＋／−０．００５８時間及び４．７３８＋／−０．３６６時間であった。血液からのトリチウムの平均の見かけのクリアランスは０．１２３５＋／−０．０１８０Ｌ／時間であった（上記表４参照）。
【０１２２】
［３Ｈ］ＡＢＩ−００７由来のトリチウムは、気管内投与後、吸収され、分配された。血液中のトリチウムの時間経過は、２コンパートメントモデルによって良く記載され、平均吸収及び除去半減期は、それぞれ０．０１５５及び４．７３８時間であった。投与した投与量の約２８％が、気管内投与後１０分に肺で回収された。試験した全ての時点で、消化管を除き、他の組織で最大で投与量の１％未満が回収された。
【０１２３】
［３Ｈ］Ｃａｐｘｏｌ（登録商標）を用いて以前に行われた静脈内投与研究からの結果に基づき、気管内投与由来のトリチウムのバイオアベイラビリティーは、この投与量群での３匹の動物で１．２２９±０．２６８（平均±ＳＤ）であった。しかし、バイオアベイラビリティーのこの推定値は、全放射活性に基づくことに注意すべきである。驚くべきことに、アルブミンを含む本発明の組成物を用いる肺経路によって送達されたパクリタキセルは急速に生物的に利用可能であり、肺内皮を通っての優秀な移行が示された。動物で毒性は記録されず、細胞毒性物質の肺送達は、肺毒性を引き起こすことが知られているので、それは驚くべきことであった。
【０１２４】
放射活性のかなりの量が、投与後２４時間で消化管（内容物を含む）に存在した（気管内投与量の２７％）。消化管でのトリチウムの存在は、胆汁排出によるものかもしれないし、次なる嚥下を伴う粘膜毛様体クリアランスによる気道からのトリチウムのクリアランスによるものかもしれない。
【０１２５】
実施例３３
本実施例は、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物の肺送達でのＡｅｒｏｔｅｃｈＩＩ及びＰａｒｉネブライザーの研究を示す。
【０１２６】
研究は、以下の条件下、パクリタキセル−アルブミン医薬組成物ＡＢＩ−００７を用いて行われた：室温（２０〜２３℃）、相対湿度（４８〜５４％）、周囲圧（６２９ｍｍＨｇ）、ネブライザー流速（ＡｅｒｏｔｅｃｈＩＩで１０Ｌ／分、Ｐａｒｉで７Ｌ／分）、全流速（２８．３Ｌ／分）、ネブライザー圧力低下（ＡｅｒｏｔｅｃｈＩＩで２３  ｌｂ／ｉｎ２、Ｐａｒｉで３２  ｌｂ／ｉｎ２）、実行時間（１５〜６０秒）、サンプル容量（１．５ｍＬ）、ＡＢＩ−００７パクリタキセル濃度（５、１０、１５及び２０ｍｇ／ｍＬ）。
【０１２７】
ＡＢＩ−００７が濃度範囲５〜１５ｍｇ／ｍＬで再構成されたとき、ＡｅｒｏｔｅｃｈＩＩ及びＰａｒｉネブライザーの両方は、許容できる全体の効率（３０％〜６０％）を提供した。Ｐａｒｉネブライザー効率は、ＡｅｒｏｔｅｃｈＩＩネブライザーよりも高いネブライザー効率を有した。Ｐａｒｉネブライザー効率は、ＡＢＩ−００７濃度が増加するにつれ、いくらか減少した。良好な微細粒子分画が観察された（７４％〜９６％）。ＡｅｒｏｔｅｃｈＩＩネブライザーは、Ｐａｒｉネブライザーよりも高い微細粒子分画を有した。微細粒子分画は、濃度とは無関係であった。
【０１２８】
Ｐａｒｉネブライザーは、ＡＢＩ−００７の１５ｍｇ／ｍＬ溶液を用いて３０分未満でパクリタキセル１００ｍｇを送達した。ＡｅｒｏｔｅｃｈＩＩネブライザーは、ＡＢＩ−００７の１０ｍｇ／ｍＬ又は１５ｍｇ／ｍＬ溶液を用いて約６５分でパクリタキセル１００ｍｇを送達した。性能安定性を、ＡｅｒｏｔｅｃｈＩＩ及びＰａｒｉネブライザーの両方について試験した。薬剤が尽きるまで、両方のネブライザーのエアロゾル濃度と効率は安定であった。１５ｍｇ／ｍＬで、Ｐａｒｉネブライザーは、ＡｅｒｏｔｅｃｈＩＩネブライザーの２倍の速度で薬剤を消費し、ＡｅｒｏｔｅｃｈＩＩネブライザーよりも高いエアロゾル濃度を産生した。
【０１２９】
結論として、パクリタキセル（ＡＢＩ−００７）のナノ粒子／アルブミン製剤は、肺経路で投与したとき、ラットで良好なバイオアベイラビリティーを示す。投与した投与量で初期毒性の明白な徴候は無かった。ナノ粒子パクリタキセル（ＡＢＩ−００７）の肺送達は、通常のネブライザーを用いて達成されうる。
【０１３０】
実施例３４
本実施例は、アルブミンとラパマイシンを含む医薬組成物の肺内送達を示す。本研究の目的は、静脈内導入と比較した、ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙラットへの気管内注入後の血中ラパマイシンの肺吸収を測定することであった。
【０１３１】
動物に投与した気管内投与製剤の標的容量は、ｋｇ体重当たり１ｍＬの投与容量に基づき計算した。気管内投与装置は、１ｍＬ気密ルアーロックシリンジに装着したＰｅｎｎ−Ｃｅｎｔｕｒｙ微量噴霧器（モデル１Ａ−１Ｂ；Ｐｅｎｎ−Ｃｅｎｔｕｒｙ，  Ｉｎｃ．，  フィラデルフィア，  ＰＡ；  ＤｅＬｏｎｇ  Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｏｒｓ，  ロングブランチ，  ＮＪから購入）からなっていた。投与製剤の適切な容量が投与装置に引かれ、充填された装置の重量を量り、重量を記録した。カテーテルを、麻酔した動物の気管内に配置し、投与装置の微量噴霧器部分をカテーテルを通して気管に配置し、投与した。投与量投与後、空の投与装置の重量を再計量し、投与された投与量を、投与前後の投与装置の重量の差として計算した。
【０１３２】
サンプル２５０μＬを、以下の所定の投与後時点でラットの留置頚部カニューレから集めた：１、５、１０、１５、３０、及び４５分（分）、ならびに１、４、８、及び２４時間（時間）。分析した全ての血液サンプルを、予め秤量したサンプル管に分注し、サンプル管を再秤量し、各サンプルの重量を引き算によって計算した。集めた血液サンプルを、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて、全ラパマイシン濃度に関し分析した。
【０１３３】
驚くべきことに、結果は、静脈内に対し肺経路により送達されたラパマイシンの血液濃度に有意な差を示さなかった。アルブミンを含む医薬組成物を用いて肺経路によって送達されたラパマイシンのバイオアベイラビリティーは１０９％と計算され、肺内皮を通る良好な移行が示された。
【０１３４】
実施例３５
本実施例は、本発明に従い製造したラパマイシンとアルブミンを含む医薬組成物の肺内投与後のアルブミン−ラパマイシンの組織分布を示す。本研究の目的は、静脈内導入と比較した、ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙラットへの気管内注入後、組織中ラパマイシンの肺吸収を測定することであった。
【０１３５】
動物に投与した気管内投与製剤の標的容量は、ｋｇ体重当たり１ｍＬの投与容量に基づき計算した。投与装置は、１−ｍＬ気密ルアーロックシリンジに装着したＰｅｎｎ−Ｃｅｎｔｕｒｙ微量噴霧器（モデル１Ａ−１Ｂ；Ｐｅｎｎ−Ｃｅｎｔｕｒｙ，  Ｉｎｃ．，  フィラデルフィア，  ＰＡ；  ＤｅＬｏｎｇ  Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｏｒｓ，  ロングブランチ，ＮＪから購入）からなっていた。投与製剤の適切な容量が投与装置に引かれ、充填された装置の重量を量り、重量を記録した。カテーテルを、麻酔した動物の気管に配置し、投与装置の微量噴霧器部分をカテーテルを通して気管内に配置し、投与した。投与量投与後、空の投与装置の重量を再計量し、投与された投与量を、投与前後の投与装置の重量の差として計算した。
【０１３６】
１０分、４５分、２時間、及び２４時間の時点当たり群当たり３匹のラットの脳、肺、及び肝臓からサンプルを集めた。サンプルを集め、ＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて、全ラパマイシン濃度に関し分析した。静脈内送達と比べて、肺を介して送達したとき、ラパマイシン濃度は肺組織で、より大きいことを結果は示す。しかし、静脈内（ＩＶ）と比べて、気管内（ＩＴ）を介して送達したとき、脳の全ラパマイシンの全濃度はより小さい。肝臓では、ＩＴ送達であろうとＩＶ送達であろうと、ラパマイシンの濃度で差異は無いようである。これらの結果に基づき、ラパマイシンの肺送達は、状態（即ち、肺移植）の治療に適切でありえ、そこでは、ラパマイシンの高い局所濃度は利点があろう。
【０１３７】
実施例３６
本実施例は、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物（ＡＢＩ−００７）の経口送達を示す。
【０１３８】
トリチウム化ＡＢＩ−００７を用いて、ラットで経口強制供給後、パクリタキセルの経口バイオアベイラビリティーを測定した。一晩絶食後、５匹のラットに、ＡＢＩ−００７中の５．５ｍｇ／ｋｇパクリタキセルを与え（Ａ群）、別の５匹のラット（Ｂ群）を、シクロスポリン（５．０ｍｇ／ｋｇ）で前処理し、次いでＡＢＩ−００７中の５．６ｍｇ／ｋｇパクリタキセルを与えた。０．５、１、２、３、４、５、６、８、１２、及び２４時間で採った血液サンプルの薬物動態解析は、燃焼による血液サンプル中の放射活性の測定後行った。経口バイオアベイラビリティーは、以前に得られた静脈内データとの比較によって測定した。結果を表５に下記する。
【０１３９】
【表５】
2020011999.tif 000006
【０１４０】
パーセント吸収の計算のために、ＡＵＣ０−２４  ＩＶ（６．０６μｇ×時間／ｍＬ）及びＩＶ投与量（５．１ｍｇ／ｋｇ）を用いた（ＡＢＩ−００７のＩＶ投与に基づくデータ）。
【０１４１】
経口バイオアベイラビリティー４４％がＡＢＩ−００７単独について観察された。これは、パクリタキセルの他の製剤について見られるよりも劇的に高い。動物をシクロスポリン（ＣｓＡ）で処置したとき、バイオアベイラビリティーは１２１％に増加した。ＣｓＡは、ＧＩ管からパクリタキセルなどの化合物の吸収を通常妨げるであろうｐ−糖蛋白質ポンプの公知の抑制剤であるので、これは予期される。１００％超のバイオアベイラビリティーは、ＧＩ管へのパクリタキセルの胆汁排出後の再吸収によって説明できる。他の公知の吸収の抑制剤又は増大剤も、この目的のために利用されうる。
【０１４２】
実施例３７
本実施例は、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物の投与で、赤血球と腫瘍細胞へのパクリタキセルの浸透の改善を示す。
【０１４３】
ヒトＭＸ−１乳房腫瘍フラグメントを胸腺欠損マウスに皮下移植した。上記のように、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物（「パクリタキセル−アルブミン」）とタキソールを、３Ｈパクリタキセルを用いて、比活性２５μＣｉ／ｍｇパクリタキセルへ製造した。腫瘍体積が約５００ｍｍ３に到達したとき、２０ｍｇ／ｋｇ放射標識パクリタキセル−アルブミン又はタキソールを生理食塩水中で静脈投与した。投与後５、１５、及び３０分、ならびに１、３、８、及び２４時間で、血漿、血液、腫瘍組織のサンプルをとり、放射活性を分析した。ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ，Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ，ＵＳＡを用いて、腫瘍の薬物動態（ＡＵＣ及び吸収定数）を解析した。
【０１４４】
薬剤の静脈投与後収束（ｕｎｉｔｙ）まで血漿／血液放射活性比の急速低下によって示されるように、パクリタキセル−アルブミンは、赤血球（ＲＢＣ）への急速分配を示した。ＲＢＣへの完全分配は、パクリタキセル−アルブミンの投与後１時間という速さで起こった。対照的に、ＲＢＣへの、タキソールとして製剤化されたパクリタキセルの分配はかなり遅く、８時間超まで完了しなかった。
【０１４５】
パクリタキセル−アルブミンは、腫瘍組織への急速分配を示し、タキソールより３．３倍大きい吸収定数（Ｋａ）であった。Ｋａは、パクリタキセル−アルブミンとタキソールについてそれぞれ、０．４３時間−１及び０．１３時間−１であった。パクリタキセルの迅速取り込みのため、タキソールについてよりもパクリタキセル−アルブミンについて３３％大きい腫瘍ＡＵＣが得られた。ＡＵＣは、パクリタキセル−アルブミンとタキソールについてそれぞれ、３６３２ｎＣｉ＊時間／ｇ及び２７３９ｎＣｉ＊時間／ｇであった。
【０１４６】
実施例３８
本実施例は、マウスに投与した、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物の安全性を示す。
【０１４７】
５連続日毎日、パクリタキセル−アルブミン又はタキソールの増加していく投与量で胸腺欠損マウスを処置した。生存を投与量に対しプロットし、ＬＤ５０を求めた。生存は、タキソールに対しパクリタキセル−アルブミンで非常に改善された（ｐ＝０．０１７、ＡＮＯＶＡ）。パクリタキセル−アルブミンとタキソールのＬＤ５０は、ｑ１ｄ×５スケジュールで、それぞれ４７ｍｇ／ｋｇ／日及び３０ｍｇ／ｋｇ／日と計算された。１３．４ｍｇ／ｋｇ／日の投与量レベルで、パクリタキセル−アルブミンとタキソール両方が良く許容され、それぞれ死亡率は１％（７２匹マウス中１匹死亡）と４％（４７匹マウス中２匹死亡）であった。２０ｍｇ／ｋｇ／日の投与量レベルで、パクリタキセル−アルブミンで１％死亡率（７２匹マウス中１匹死亡）対タキソールで１７％死亡率（４７匹マウス中８匹死亡）（ｐ＝０．００２５）であった。３０ｍｇ／ｋｇ／日の投与量レベルで、パクリタキセル−アルブミンで４％死亡率（７２匹マウス中３匹死亡）対タキソールで４９％死亡率（４７匹マウス中２３匹死亡）（ｐ＜０．０００１）であった。
【０１４８】
実施例３９
本実施例は、パクリタキセル−アルブミン組成物の微細血管内皮細胞（ＥＣ）を通る新規なパクリタキセル輸送機構を示す。
【０１４９】
ナノ粒子及びアルブミン−パクリタキセル組成物は、腫瘍の「漏れる」血管から生じるＥＰＲ効果により、腫瘍組織に蓄積しうる。アルブミン特異的ｇｐ６０レセプター（アルボンディン）は、細胞表面の小胞内のレセプターのトランスサイトーシスによってＥＣを通してアルブミンを輸送した。このトランスサイトーシス機構により、下にある間質空間へのアルブミン−パクリタキセルの輸送が可能となる。対照的に、タキソール中のクレモホールは、アルブミンへのパクリタキセルの結合を阻害し、腫瘍へのパクリタキセル輸送を非常に減少させた。更に、ｇｐ１６とｇｐ３０レセプターはまた、結合パクリタキセルを含む改変アルブミンの細胞内輸送に関与し、これにより、タキソールと比較して、より大きな抗血管形成効果をもって、内皮細胞へのパクリタキセルの結合の増大が起きた。
【０１５０】
実施例４０
本実施例は、タキソールと比べて、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物の内皮トランスサイトーシスの増大を示す。
【０１５１】
ヒト肺微細血管内皮細胞（ＨＬＭＶＥＣ）を、トランスウエルでコンフルエンスまで増殖させた。濃度２０μｇ／ｍＬで、パクリタキセルとアルブミンを含む本発明の医薬組成物、又は蛍光パクリタキセルを含むタキソール（Ｆｌｕｔａｘ）を上部トランスウエルチャンバーに加えた。
【０１５２】
上部チャンバーから下部チャンバーへのトランスサイトーシスによるパクリタキセルの輸送を、蛍光光度計を用いて連続してモニターした。アルブミン無くしてＦｌｕｔａｘのみを含む対照も用いた。Ｆｌｕｔａｘを含む対照は、輸送を示さず、コンフルエントなＨＬＭＶＥＣ単層の完全性が立証された。アルブミン−パクリタキセル組成物からのパクリタキセルの輸送は、ＨＳＡ５％存在下で（生理的濃度）、タキソールからのパクリタキセルよりもかなり速かった。アルブミン−パクリタキセル組成物とタキソールの輸送速度定数（Ｋｔ）はそれぞれ、１．３９６時間−１及び０．０３時間−１であった。単層を通って輸送されたパクリタキセルの全量は、タキソールよりも、アルブミン−パクリタキセル組成物で３倍大きかった。
【０１５３】
実施例４１
本実施例は、タキソールと比べた、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物による内皮細胞（ＥＣ）結合の改善を示す。
【０１５４】
ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）を、９６ウエルマイクロタイタープレートで増殖させた。１つの実験では、パクリタキセル（Ｆｌｕｔａｘ−ＯｒｅｇｏｎＧｒｅｅｎ標識パクリタキセル）を、クレモホールＥＬ／ＥｔＯＨ（タキソールのビヒクルである）の増加する濃度の存在下、ＨＵＶＥＣと反応させた。別の実験では、アルブミンとＦｌｕｔａｘを含む医薬組成物とタキソール−Ｆｌｕｔａｘ組成物を、種々の最終濃度でＨＵＶＥＣと反応させた。パクリタキセルの細胞への結合はクレモホールによって阻害された。阻害は、クレモホールＥＬ／ＥｔＯＨ０．０２％のＩＣ５０によって示された。この濃度のクレモホールは、少なくとも２４時間、タキソール化学療法の間持続することが示されている。従って、それは、インビボの関連プロセスである。試験した全ての濃度で、アルブミン−パクリタキセル組成物からのパクリタキセルのかなりの量が細胞に結合した。比較して、タキソールでは、殆ど、又は全く結合が観察されなかった。
【０１５５】
実施例４２
本実施例は、タキソールと比べて、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物によるアルブミン結合の改善を示す。
【０１５６】
ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）をプラスチックＥＬＩＳＡプレートに固定した。クレモホールＥＬ／ＥｔＯＨの増加していく濃度の存在下、パクリタキセル（Ｆｌｕｔａｘ−ＯｒｅｇｏｎＧｒｅｅｎ標識パクリタキセル）を、固定したＨＳＡと反応させた。別の実験では、最終濃度２０μｇパクリタキセル／ｍＬで、アルブミン−パクリタキセル−Ｆｌｕｔａｘ組成物及びタキソール−Ｆｌｕｔａｘ組成物を固定したＨＳＡと反応させた。パクリタキセルのアルブミンへの結合はクレモホールによって阻害された。阻害は、クレモホールＥＬ／ＥｔＯＨの０．００３％のＩＣ５０によって示された。この濃度のクレモホールは、少なくとも２４時間、タキソール化学療法の間持続することが示されている。従って、それは、インビボの関連プロセスである。関連薬理学的パクリタキセル濃度（２０μｇ／ｍＬ）で、アルブミン−パクリタキセル組成物からのパクリタキセルのかなりの量が固定したＨＳＡに結合した。比較して、タキソールでは、全く結合が観察されなかった。
【０１５７】
実施例４３
本実施例は、タキソールと比べて、パクリタキセルとアルブミンを含む医薬組成物についてのパクリタキセルのアルブミンへの輸送の増大を示す。
【０１５８】
タキソール−Ｆｌｕｔａｘ及びアルブミン−パクリタキセル−Ｆｌｕｔａｘ組成物を、２０μｇ／ｍＬ、４０μｇ／ｍｌ、及び８０μｇ／ｍｌで、Ｈａｎｋｓ緩衝液中の５％ＨＳＡ又は血清と混合した。混合物を直ちに、ネイティブ３〜１４％ポリアクリルアミドゲル上で分離し、アルブミンに結合したパクリタキセル量を、走査蛍光光度計で測定した。ＨＳＡへのパクリタキセルの輸送は、タキソールに対しアルブミン−パクリタキセル組成物でより迅速であった。血清又は５％ＨＳＡを、アルブミン−パクリタキセル−Ｆｌｕｔａｘ組成物又はタキソール−Ｆｌｕｔａｘ組成物とインキュベートしたとき、より多くのパクリタキセルがＨＳＡと共に電気泳動した。５％ＨＳＡへの暴露で、２０μｇ／ｍｌ、４０μｇ／ｍｌ、及び８０μｇ／ｍｌで、タキソール−Ｆｌｕｔａｘ組成物よりもアルブミン−パクリタキセル−Ｆｌｕｔａｘ組成物で、それぞれ４５％、６０％、及び３３％多いパクリタキセルがＨＳＡに移行した。ヒト血清への暴露で、２０μｇ／ｍｌ、４０μｇ／ｍｌ、及び８０μｇ／ｍｌで、タキソール−Ｆｌｕｔａｘ組成物よりもアルブミン−パクリタキセル−Ｆｌｕｔａｘ組成物で、それぞれ１２１％、３１％、及び８３％多いパクリタキセルがＨＳＡに移行した。２６０ｍｇ／ｍ２でＡＢＩ−００７のＣｍａｘは約２０μｇ／ｍＬで、従って、これは、インビボの重要なプロセスである。
【０１５９】
実施例４４
本実施例は、糖蛋白質ｇｐ６０が、アルブミン−パクリタキセルの結合とトランスサイトーシスの責を担うことを示す。
【０１６０】
蛍光標識パクリタキセル（Ｆｌｕｔａｘ）アルブミン組成物を、培養中の微細血管内皮細胞と接触させた。アルブミン−パクリタキセルと結合するｇｐ６０レセプターと仮定された明確な領域の証拠を示して、蛍光染色が顕微鏡下観察された。パクリタキセルの明確な蛍光と共に局在化するローダミン標識アルブミンを用いることによって、これは確認された。
【０１６１】
実施例４５
本実施例は、アルブミン量の増加は、パクリタキセルの結合と競合しうることを示す。
【０１６２】
アルブミンを、マイクロタイタープレートに固定した。蛍光パクリタキセルをウエルに加え、パクリタキセルの結合を、走査蛍光光度計を用いて測定した。アルブミンの増加していく量をウエルに加え、固定したアルブミンへのパクリタキセル結合の阻害のレベルを測定した。添加アルブミン量の増加につれ、結合での対応する減少が見られることをデータは示した。同様の効果は、内皮細胞への結合でも見られた。より高いアルブミン濃度は、パクリタキセルの結合を阻害することを上記は示した。従って、より少量のアルブミンを有する本発明の組成物が好適である。
【０１６３】
実施例４６
本実施例は、本発明組成物中より少量のアルブミンが安定な組成物を生じることを示す。
【０１６４】
組成物中のより少量のアルブミンが本発明医薬組成物の安定性に影響を与えるかどうかを研究するために、少量のアルブミンを有するアルブミン−パクリタキセル組成物を製造した。パクリタキセル力価、不純物形成、粒子サイズ、ｐＨ及び安定性の他の典型的パラメーターに関し、異なる温度（２〜８℃、２５℃及び４０℃）で数ヶ月間試験したとき、これらの組成物は、より多量のアルブミンを有する組成物と同程度に安定であることが見出された。従って、より少量のアルブミンを有する組成物が好適である。これは、コストを非常に減少し、また、細胞との結合及び細胞への輸送の増大を可能としうるからである。
【０１６５】
実施例４７
本実施例は、高いパクリタキセルに対するアルブミンの比を有するアルブミンとパクリタキセルを含む医薬組成物を示す。
【０１６６】
パクリタキセル３０ｍｇを塩化メチレン３．０ｍｌに溶解した。溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（３％ｗ／ｖ）２７．０ｍｌに加えた（パクリタキセルに対するアルブミンの比２７に対応）。デフェロキサミンを必要に応じ加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザー、モデルＴｅｍｐｅｓｔＩ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた系をロータリーエバポレーターに移し、塩化メチレンを、２０〜３０分間、減圧下（３０ｍｍＨｇ）、４０℃で急速除去した。生じた分散液は半透明で、生じたパクリタキセル粒子の典型的平均直径は、範囲５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）であった。分散液を更に４８時間、凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元々の分散物に容易に再構成された。再構成後の粒子サイズは、凍結乾燥前と同じであった。
【０１６７】
本実施例で使用した薬剤、溶媒、蛋白質の量、型、割合は、決して限定的ではないことを認識すべきである。クレモホール製剤に溶解したパクリタキセルの毒性と比較したとき、アルブミン含有の本発明の医薬組成物は大幅に低い毒性を示した。
【０１６８】
実施例４８
本実施例は、低いパクリタキセルに対するアルブミンの比を有するアルブミンとパクリタキセルを含む医薬組成物を示す。
【０１６９】
詳細には、パクリタキセル３００ｍｇを塩化メチレン３．０ｍｌに溶解した。溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（５％ｗ／ｖ）２７ｍｌに加えた（パクリタキセルに対するアルブミンの比４．５に対応）。デフェロキサミンを必要に応じ加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザー、モデルＴｅｍｐｅｓｔＩ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた系をロータリーエバポレーターに移し、塩化メチレンを、２０〜３０分間、減圧下（３０ｍｍＨｇ）、４０℃で急速除去した。生じた分散液は半透明で、生じたパクリタキセル粒子の典型的平均直径は、範囲５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）であった。分散液を更に４８時間、凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元々の分散物に容易に再構成された。再構成後の粒子サイズは、凍結乾燥前と同じであった。
【０１７０】
本実施例で使用した薬剤、溶媒、蛋白質の量、型及び割合は、決して限定的ではないことを認識すべきである。クレモホール製剤に溶解したパクリタキセルの毒性と比較したとき、アルブミン含有の本発明の医薬組成物は大幅に低い毒性を示した。
【０１７１】
実施例４９
本実施例は、中間のパクリタキセルに対するアルブミンの比を有するアルブミンとパクリタキセルを含む医薬組成物を示す。
【０１７２】
詳細には、パクリタキセル１３５ｍｇを塩化メチレン３．０ｍｌに溶解した。溶液を、ヒト血清アルブミン溶液（５％ｗ／ｖ）２７ｍｌに加えた。デフェロキサミンを必要に応じ加えた。混合物を低ＲＰＭ（Ｖｉｔｒｉｓホモジナイザー、モデルＴｅｍｐｅｓｔ  Ｉ．Ｑ．）で５分ホモジナイズし、粗エマルジョンを形成させ、次いで、高圧ホモジナイザー（Ａｖｅｓｔｉｎ）に移した。エマルジョンを少なくとも５サイクルの間リサイクルしつつ、乳化を９０００〜４０，０００ｐｓｉで行った。生じた系をロータリーエバポレーターに移し、塩化メチレンを、２０〜３０分間、減圧下（３０ｍｍＨｇ）、４０℃で急速除去した。生じた分散液は半透明で、生じたパクリタキセル粒子の典型的平均直径は、範囲５０〜２２０ｎｍ（Ｚ平均、ＭａｌｖｅｒｎＺｅｔａｓｉｚｅｒ）であった。分散液を更に４８時間、凍結乾燥した。生じたケーキは、滅菌水又は生理食塩水の添加によって、元々の分散物に容易に再構成された。再構成後の粒子サイズは、凍結乾燥前と同じであった。本発明の組成物中のパクリタキセルに対するアルブミンの計算した比（ｗ／ｗ）は約１０である。
【０１７３】
本実施例で使用した薬剤、溶媒、蛋白質の量、型及び割合は、決して限定的ではないことを認識すべきである。クレモホール製剤に溶解したパクリタキセルの毒性と比較したとき、アルブミン含有の本発明の医薬組成物は大幅に低い毒性を示した。
【０１７４】
実施例５０
本実施例は、アルブミン−パクリタキセル組成物を用いた動物モデルでの慢性関節リウマチの治療を示す。
【０１７５】
Ｌｏｕｖａｉｎラットのコラーゲン誘導関節炎モデルを用いて、関節炎に対するアルブミン−パクリタキセル組成物の治療効果を試験した。実験動物の脚サイズをモニターし、関節炎の重篤度を評価した。
【０１７６】
関節炎が十分に進行した後（通常、コラーゲン注入後約９〜１０日）、実験動物を異なる群に分け、腹腔内６回アルブミン−パクリタキセル１ｍｇ／ｋｇｑ．ｏ．ｄ又はアルブミン−パクリタキセル０．５ｍｇ／ｋｇ＋プレドニゾン０．２ｍｇ／ｋｇｑ．ｏ．ｄ．（併用治療）、次いで、３週間１週当たり１回受けさせた。脚サイズを治療開始（０日）で測定し、薬剤注入時毎回測定した。１つの群は、対照として正常生理食塩水のみを受けた。実験終了までに、治療開始時に対し、アルブミン−パクリタキセルを受けた群は、脚サイズの４２％減少を達成し、併用治療群は脚サイズの３３％減少を示し、一方、対照群は、脚サイズの約２０％増加を有した。
【０１７７】
結論として、アルブミン−パクリタキセル組成物は、関節炎に対し治療効果を示した。アルブミン−パクリタキセルの組み合わせは、ｇｐ６０のようなレセプター媒介機構を通じて輸送によって関節炎病巣部位に局在化するらしい。
【０１７８】
実施例５１
本実施例は、心臓血管再狭窄を治療するためのアルブミン−パクリタキセル組成物の使用を示す。
【０１７９】
動物中のパクリタキセル溶出ステントは不完全な治癒を引き起こし、場合によっては、動脈で新生内膜増殖の持続性抑制の欠如を引き起こす。本研究では、インステント再狭窄減少のための、新規全身的送達アルブミン−パクリタキセル本発明組成物の効力を試験した。
【０１８０】
両側腸骨動脈ステントを入れた３８羽のＮｅｗ  ＺｅａｌａｎｄＷｈｉｔｅウサギで、生理食塩水再構成のアルブミン−パクリタキセルを試験した。アルブミン−パクリタキセル（１．０〜５．０ｍｇ／ｋｇパクリタキセル投与量）を１０分動脈内点滴として投与した；対照動物はビヒクルを受けた（０．９％正常生理食塩水）。
【０１８１】
追跡慢性実験で、２８日で、静脈内３．５−ｍｇ／ｋｇ繰り返しアルブミン−パクリタキセル投与有り又は無しで、ステントにアルブミン−パクリタキセル５．０ｍｇ／ｋｇを与えた；これらの研究は３ヶ月で終了した。２８日で、アルブミン−パクリタキセル＞＝２．５ｍｇ／ｋｇの投与量によって、新生内膜厚さの平均は減少し（ｐ＜＝０．０２）、治癒の遅延の証拠を示した。しかし、アルブミン−パクリタキセル５．０ｍｇ／ｋｇの単回投与の効力は９０日までに失われた。対照的に、ステント設置後２８日与えられたアルブミン−パクリタキセル３．５ｍｇ／ｋｇの第２繰り返し投与により、９０日で新生内膜厚さの持続性抑制が生じ（ｐ＜＝０．００９。対単回投与アルブミン−パクリタキセル５．０ｍｇ／ｋｇ及び対照）、ほぼ完全な新生内膜治癒であった。
【０１８２】
全身的アルブミン−パクリタキセルは、２８日で新生内膜増殖を減少するが、持続性新生内膜抑制には、単回繰り返し投与が必要であった。従って、本発明組成物は、最狭窄などの心臓血管疾患の治療に適切である。パクリタキセル以外の医薬（例えば、ラパマイシン、他のタキサン、エポチロン等）を含む発明組成物は全て、血液透析を必要とする患者での動脈−静脈アクセスのために使用されるものなどの血管又は人工血管グラフトにおける再狭窄の治療に適している。
【外国語明細書】
2020011999000001.pdf