(57)【要約】      （修正有）【課題】炎症性サイトカインの過剰発現に関連する炎症性障害の治療を必要とする対象に、治療方法を提供する。【解決手段】有効量の、（置換フェニル）プロペナール部分を有する式Ｖの化合物を対象に投与することを含む方法。2020117488.tif 000020【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
炎症性サイトカインの過剰発現に関連する炎症性障害を、治療を必要とする対象において治療する方法であって、前記対象に、有効量の式ＶまたはＶＩＩＩの化合物および所望により、薬学的に許容される担体または賦形剤を含む医薬組成物を投与することを含む：
【化１０】
2020117488.tif 000016
式Ｖにおいて：
各「ｎ5」は、独立して、１、２、または３であり；
Ｒ35、Ｒ45、Ｒ35’、およびＲ45’は、−Ｈ、−ＯＨ、および−ＯＣＨ3からなる群から、独立して、選択され；
Ｌ5−Ｚ5は存在しないか；または
Ｌ5−Ｚ5は存在し、そして、Ｚ5が存在しない場合には、Ｌ5は、Ｃ０−Ｃ８のアルキレン、不飽和アルケニレン、およびアルキニルからなる群から選択され；
Ｚ5は、−Ｈ、−ＯＨ、芳香環、シクロアルキル、−ＣＯＲ15、−ＣＯ2Ｒ15、−ＣＯＮＲ15Ｒ25、−ＮＲ15Ｒ25、−Ｃ（Ｘ5）3からなる群から選択され；
Ｒ15およびＲ25は、独立して、−Ｈ、−ＣＨ3、および−Ｃ2Ｈ5からなる群から選択され；そして
Ｘ5は、−Ｆ、−Ｃｌ、および−Ｂｒからなる群から選択されるハロゲン原子である。
【化１１】
2020117488.tif 000017
Ｒ18およびＲ28は、モノ−またはジ−置換された基であり、および、メトキシ基、ヒドロキシル基、およびアルキルスルホニル基からなる群から、独立して、選択され；
Ｒ38は、
【化１２】
2020117488.tif 000018
からなる群から選択され；そして、
Ｒ48は、ＣＨ3、Ｈ、ＦおよびＣｌからなる群から選択され、そして
ｎ8は１または２である。
ここで、炎症性サイトカインは、ＩＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−２２およびＩＬ−３１からなる群から選択される。
【請求項２】
化合物は、式Ｖであり、そして「Ｎ5」が、１で。Ｒ35、Ｒ45、Ｒ35’、およびＲ45’は−ＯＣＨ3であり、そして、Ｌ5−Ｚ5側鎖は存在しない、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
化合物が、式ＶＩＩＩであり、Ｒ18およびＲ28が、ジ置換メトキシ基であり、Ｒ38が、
【化１３】
2020117488.tif 000019
であり、Ｒ48が、Ｈであり、そしてｎ8は１である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
医薬組成物が、局所医薬組成物である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
医薬組成物が、皮膚軟化剤、皮膚浸透剤、乳化剤、中和剤、ゲル化剤、防腐剤、またはキレート剤をさらに含む、請求項４に記載の方法。
【請求項６】
炎症性サイトカインが、樹状細胞またはマクロファージによって合成される、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記障害が、表皮障害である、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記障害が、皮膚障害である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
前記障害が、炎症性皮膚疾患である、請求項１に記載の方法。
【請求項１０】
前記障害が、日光角化症（ａｃｔｉｎｉｃ  ｋｅｒａｔｏｓｉｓ）、アトピー性皮膚炎、水疱瘡（ｃｈｉｃｋｅｎｐｏｘ）、ヘルペス（ｃｏｌｄ  ｓｏｒｅ）、接触性皮膚炎（ｃｏｎｔａｃｔ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ）、湿疹（ｅｃｚｅｍａ）、じんましん（ｈｉｖｅｓ）、とびひ（ｉｍｐｅｔｉｇｏ）、角化症（ｋｅｒａｔｏｓｉｓ  ｐｉｌａｒｉｓ）、ラテックスアレルギー、麻疹、乾癬、白癬（ｒｉｎｇｗｏｒｍ）、酒さ、ケロイド、肥厚性瘢痕（ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｉｃ  ｓｃａｒｓ）、掻痒症（ｐｒｕｒｉｔｕｓ）、または脂漏性湿疹（ｓｅｂｏｒｒｈｅｉｃ  ｅｃｚｅｍａ）である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記障害が、乾癬である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１２】
前記障害が、掻痒症（ｐｒｕｒｉｔｕｓ）である、請求項１０に記載の方法。
【請求項１３】
前記障害が、自己免疫疾患である、請求項１に記載の方法。
【請求項１４】
自己免疫疾患が、アディソン病（Ａｄｄｉｓｏｎ’ｓ  ｄｉｓｅａｓｅ）、セリアック病（ｃｅｌｉａｃ  ｄｉｓｅａｓｅ）、移植片対宿主病（ｇｒａｆｔ  ｖｅｒｓｕｓ  ｈｏｓｔ  ｄｉｓｅａｓｅ）（ＧｖＨＤ）、グレーブス病（Ｇｒａｖｅｓ’  ｄｉｓｅａｓｅ）、橋本甲状腺炎（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ’ｓ  ｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ）、炎症性腸疾患、多発性硬化症（ｍｕｌｔｉｐｌｅ  ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、重症筋無力症（ｍｙａｓｔｈｅｎｉａ  ｇｒａｖｉｓ）、悪性貧血（ｐｅｒｎｉｃｉｏｕｓ  ａｎｅｍｉａ）、乾癬性関節炎、関節リウマチ（ＲＡ）、シェーグレン症候群（Ｓｊoｇｒｅｎ’ｓ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、全身性エリテマトーデス（ｓｙｓｔｅｍｉｃ  ｌｕｐｕｓ  ｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ）（ループス）、１型糖尿病、または血管炎（ｖａｓｃｕｌｉｔｉｓ）である、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
炎症性腸疾患が、潰瘍性大腸炎またはクローン病である、請求項１４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、治療方法に関し、本発明は、より具体的には、少なくとも一つの、（置換フェニル）プロペナール部分を有する化合物を用いた、炎症性疾患の治療のための方法を提供する。
【０００２】
発明の背景
特定の天然物が、治療効果を持つ可能性があることはよく知られているため、多くの文化（漢方薬や他の多くの民間伝承薬など）で、ヒトの病気の治療と予防に使用されている。
このような治療の有効性により、製薬産業は、これらの天然物から、活性化合物を探して単離し、さまざまな疾患または病状の治療および予防のための治療薬または予防薬として有効成分を開発している。
したがって、多くの一般的に使用される医薬品が、天然物から、開発されているか、生じている。
しかしながら、天然物から分離された化合物は、その固有の宿主で特定の生理学的機能を果たすことが知られているが、一方、人間の病気に対する治療効果はすぐには分からない。
歴史的に、そのような治療的処置は、人間の、蓄積された経験または「試行錯誤」によってのみ得られた。
さらに、そのような化合物は、当初は、ヒトで使用するために作成されたものではないため、天然の形態の化合物は、ヒトの疾患を治療するために、その構造と有効性の両方において、最適な形態ではないことがよくある。
しかしながら、分析および合成化学を含む今日の現代の化学技術は、医学生物学の進歩とともに、化学構造を分析し、天然物から分離された化合物などにおける、「ファーマコフォア」（治療活動に不可欠なコア構造）を特定することを可能にした。
さらに、これらの新しい技術により、ファーマコフォアの構造に基づいて、最適な、またはより優れた治療効果を持つ新しい化合物を合成することができる。
【０００３】
化合物クルクミン（ウコン植物の主要な色素として存在する）およびその類似体の多くは、抗酸化、抗炎症、抗腫瘍、および抗血管新生活性など、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで多数の生物学的活性を持つことが報告されている。
しかし、クルクミンもその類似体も、人間の病気を治療する治療薬として開発されていない。
これは、本来の形態のクルクミンが、おそらく、治療薬への開発に最適な分子ではないことを示す。
【０００４】
乾癬は、免疫関連の慢性炎症性皮膚疾患であり、世界人口の２％〜３％の生活の質に影響を及ぼす。
乾癬は、通常、赤い、燐屑（うろこ状の隆起したプラーク）、およびケラチノサイト増殖の亢進、表皮および真皮への白血球浸潤を伴う炎症により誘発される表皮の著しい肥厚を伴う。
この病気は、微生物感染、皮膚損傷、環境、天候、ストレス、免疫障害および遺伝学などのさまざまな外的および内的要因によって引き起こされる可能性がある。
乾癬病変の白血球浸潤には、主に樹状細胞、マクロファージ、好中球、およびＴ細胞が含まれる。
樹状細胞は、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−６、およびＩＬ−２３を含む、乾癬の発症を促進する複数の炎症性サイトカインを生成する。
ＴＮＦ−αは、樹状細胞（ＤＣ）において、ＩＬ−２３産生を活性化する、強力な炎症誘発性刺激である。
ＩＬ−１βは、Ｔｈ１７細胞からのＩＬ−１７分泌を促進することができる。
ＩＬ−６は、皮膚のＴ細胞をＴｒｅｇ抑制から保護し、炎症へのＴｈ１７の関与を促進する。
これらの免疫細胞とサイトカインは、一緒になって、乾癬病変の発生の根底にある炎症反応を促進する。
乾癬の主要なメカニズムは、Ｔｈ１／Ｔｈ１７免疫応答を伴うＴ細胞および樹状細胞（ＤＣ）の異常な誘導によって主に媒介される。
樹状細胞は、自己免疫疾患の病原性炎症反応につながる、自己由来の核酸を感知する役割を果たす。
したがって、ＤＣは、乾癬を含む多くの自己免疫疾患の治療の標的と考えられている。
効果的な治療が必要である。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、炎症性サイトカインの過剰発現に関連する炎症性障害を、治療を必要とする対象において治療する方法を提供することであり、前記対象に、有効量の式ＶまたはＶＩＩＩの化合物および、所望により、薬学的に許容される担体または賦形剤を含む医薬組成物を投与することを含む；
【化１】
2020117488.tif 000002
式Ｖにおいて：
各「ｎ5」は、独立して、１、２、または３であり；
Ｒ35、Ｒ45、Ｒ35'、およびＲ45'は、−Ｈ、−ＯＨ、および−ＯＣＨ3からなる群から、独立して、選択され；
Ｌ5−Ｚ5は存在しないか；または
Ｌ5−Ｚ5は存在し、そして、Ｚ5が存在しない場合には、Ｌ5は、Ｃ０−Ｃ８のアルキレン、不飽和アルケニレン、およびアルキニルからなる群から選択され；
Ｚ5は、−Ｈ、−ＯＨ、芳香環、シクロアルキル、−ＣＯＲ15、−ＣＯ2Ｒ15、−ＣＯＮＲ15Ｒ25、−ＮＲ15Ｒ25、−Ｃ（Ｘ5）3;からなる群から選択され；
Ｒ15およびＲ25は、独立して、−Ｈ、−ＣＨ3、および−Ｃ2Ｈ5からなる群から選択され；そして
Ｘ5は、−Ｆ、−Ｃｌ、および−Ｂｒからなる群から選択されるハロゲン原子である。
【化２】
2020117488.tif 000003
Ｒ18およびＲ28は、モノ−またはジ−置換された基であり、および、メトキシ基、ヒドロキシル基、およびアルキルスルホニル基からなる群から、独立して、選択され；
Ｒ38は、
【化３】
2020117488.tif 000004
からなる群から選択され；そして、
Ｒ48は、ＣＨ3、Ｈ、ＦおよびＣｌからなる群から選択され、そして
ｎ8は、１または２である。
ここで、炎症性サイトカインは、ＩＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−２２およびＩＬ−３１からなる群から選択される。
【０００６】
本発明は、以下のセクションで詳細に説明される。
本発明の、他の特徴、目的および利点は、発明の詳細な説明および特許請求の範囲に見出すことができる。
【図面の簡単な説明】
【０００７】
【図１】図１は、マウス樹状細胞およびマクロファージに対するＡＳＣ−Ｊ９（Ｊ９）およびＡＳＣ−ＪＭ１７（ＪＭ１７）の細胞毒性の結果を示す。  細胞を、異なる濃度のＡＳＣ−Ｊ９およびＡＳＣ−ＪＭ１７で、２４時間処理した。  細胞の生存率は、ＭＴＳアッセイによって測定された。＊：ｐ＜０．０５。
【０００８】
【図２】図２は、ＡＳＣ−Ｊ９（Ｊ９）およびＡＳＣ−ＪＭ１７（ＪＭ１７）が、樹状細胞における、炎症性サイトカイン誘導サイトカインの発現に及ぼす影響を示す。  樹状細胞は、１時間、ＡＳＣ−Ｊ９およびＡＳＣ−ＪＭ１７の異なる濃度で、前処理し、次いで、炎症性サイトカインＴＮＦ−αまたはＩＬ−１βを、２４時間添加した。  マウスのサイトカイン遺伝子の発現は、ＲＴ−ｑＰＣＲによって測定された。＊：ｐ＜０．０５；ｎｓ（ｎｏｔ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ  有意でない）：
【０００９】
【図３】図３は、マウス脾細胞における、Ｒ８４８誘導サイトカイン発現に対する、ＡＳＣ−Ｊ９（Ｊ９）およびＡＳＣ−ＪＭ１７（ＪＭ１７）の効果を示す。  マウス脾細胞は、ＡＳＣ−Ｊ９またはＡＳＣ−ＪＭ１７の１μＭで、１時間、前処理し、次いで、ＴＬＲリガンドである、Ｒ８４８を、６時間添加した。  マウスのサイトカイン遺伝子の発現は、ＲＴ−ｑＰＣＲによって測定した。＊：ｐ＜０．０１。
【００１０】
【図４】図４は、マウス骨髄由来マクロファージにおける、Ｒ８４８誘導サイトカイン発現に対する、ＡＳＣ−Ｊ９（Ｊ９）およびＡＳＣ−ＪＭ１７（ＪＭ１７）の効果を示す。  マクロファージは、ＡＳＣ−Ｊ９またはＡＳＣ−ＪＭ１７の１μＭで、１時間、前処理し、次いで、ＴＬＲリガンドである、Ｒ８４８を、６時間添加した。  マウスのサイトカイン遺伝子の発現は、ＲＴ−ｑＰＣＲによって測定された。＊：ｐ＜０．０１；ｎｓ（ｎｏｔ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ  有意でない）：
【００１１】
【図５】図５Ａ〜５Ｄは、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＩＭＱ誘発乾癬性炎症に対する、ＡＳＣ−Ｊ９（Ｊ９）の抗炎症効果の評価を示す。  Ｂａｌｂ／ｃマウスは、イミキモド（ＩＭＱ）および対照クリーム、ＡＳＣ−Ｊ９またはクロベタゾールで、１０日間連続して局所治療された。（Ａ）概略スケジュールが示される。  各グループの写真観察は、０日目（Ｂ）、５日目（Ｃ）、１０日目（Ｄ）に示された。
【００１２】
【図６】図６Ａ〜６Ｄは、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＩＭＱ誘発乾癬性炎症に対する、ＡＳＣ−Ｊ９（Ｊ９）の抗炎症効果の評価を示す。  Ｂａｌｂ／ｃマウスは、イミキモド（ＩＭＱ）、および対照クリーム、ＡＳＣ−Ｊ９またはクロベタゾールで、１０日間連続して局所治療された。（Ａ）皮膚の炎症反応の重症度は、乾癬面積重症度指数（Ｐｓｏｒｉａｓｉｓ  Ａｒｅａ  Ｓｅｖｅｒｉｔｙ  Ｉｎｄｅｘ）に基づいて評価された。（Ｂ）治療の１０日後、マウスを屠殺し、ベルニエキャリパーで皮膚の厚さを測定して、乾癬反応の重症度を評価した。（Ｃ）ＲＴ−ｑＰＣＲによる、１０日間の治療後のマウス皮膚におけるサイトカイン遺伝子の発現。（Ｆ）１０日間の治療後の病変皮膚のＨ＆Ｅ染色。＊：ｐ＜０．０５；＊＊：ｐ＜０．０５；ｎｓ（ｎｏｔ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ  有意でない）：
【００１３】
【図７】図７Ａ〜７Ｃは、インビボでの、ＩＭＱ誘発性乾癬炎症に対する、ＡＳＣ−Ｊ９（Ｊ９）の抗炎症効果の評価を示す。  Ｂａｌｂ／ｃマウスは、イミキモド（ＩＭＱ）、および対照クリーム、異なる用量のＡＳＣ−Ｊ９で、連続５日間局所治療された。（Ａ）概略スケジュールを示した。各グループの写真観察は、０日目（Ｂ）、５日目（Ｃ）に示された。
【００１４】
【図８】図８Ａ〜８Ｃは、ｉｎ  ｖｉｖｏでのＩＭＱ誘発乾癬性炎症に対する、ＡＳＣ−Ｊ９（Ｊ９）の抗炎症効果の評価を示す。  Ｂａｌｂ／ｃマウスは、イミキモド（ＩＭＱ）、および対照クリーム、異なる用量のＡＳＣ−Ｊ９で、連続５日間局所治療された。（Ａ）皮膚の炎症反応の重症度は、乾癬面積重症度指数に基づいて評価された。（Ｂ）治療の５日後に、マウスを屠殺し、ベルニエキャリパーで、皮膚の厚さを測定して、乾癬反応の重症度を評価した。（Ｃ）ＲＴ−ｑＰＣＲによる１０日間の治療後のマウス皮膚におけるサイトカイン遺伝子の発現。＊：ｐ＜０．０５；＊＊：ｐ＜０．０５；ｎｓ（ｎｏｔ  ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ  有意でない）：
【００１５】
【図９】図９は、ＡＳＣ−Ｊ９が、ケロイド患者由来線維芽細胞の掻痒症（ｐｒｕｒｉｔｕｓ）マーカーを抑制することを示す。
【００１６】
発明の詳細な説明
本発明は、本発明の様々な実施形態の以下の詳細な説明、実施例、ならびにそれらの関連する説明を伴う化学図面および表を参照することにより、より容易に理解することができる。
特許請求の範囲によって特に示されていない限り、本発明は特定の調製方法、担体または製剤、または本発明の化合物を局所、経口または非経口用の製品または組成物に製剤化する特定の様式に限定されないことを理解されたい。なぜなら、関連分野の通常の技術者がよく知っているように、そのようなことはもちろん変わることができるからである。
また、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態のみを説明するためのものであり、限定することを意図するものではないことも理解されたい。
【００１７】
本発明は、炎症性サイトカインの過剰発現に関連する炎症性障害を、治療を必要とする対象において治療する方法を提供することであり、前記対象に、有効量の式ＶまたはＶＩＩＩの化合物および、所望により、薬学的に許容される担体または賦形剤を含む医薬組成物を投与することを含む；
【化４】
2020117488.tif 000005
前記式Ｖにおいて：
各「ｎ5」は、独立して、１、２、または３であり；
Ｒ35、Ｒ45、Ｒ35'、およびＲ45'は、−Ｈ、−ＯＨ、および−ＯＣＨ3からなる群から、独立して、選択され；
Ｌ5−Ｚ5は存在しないか；または
Ｌ5−Ｚ5は存在し、そして、Ｚ5が存在しない場合には、Ｌ5は、Ｃ０−Ｃ８のアルキレン、不飽和アルケニレン、およびアルキニルからなる群から選択され；
Ｚ5は、−Ｈ、−ＯＨ、芳香環、シクロアルキル、−ＣＯＲ15、−ＣＯ2Ｒ15、−ＣＯＮＲ15Ｒ25、−ＮＲ15Ｒ25、−Ｃ（Ｘ5）3;からなる群から選択され；
Ｒ15およびＲ25は、独立して、−Ｈ、−ＣＨ3、および−Ｃ2Ｈ5からなる群から選択され；そして
Ｘ5は、−Ｆ、−Ｃｌ、および−Ｂｒからなる群から選択されるハロゲン原子である。
【化５】
2020117488.tif 000006
Ｒ18およびＲ28は、モノ−またはジ−置換された基であり、および、メトキシ基、ヒドロキシル基、およびアルキルスルホニル基からなる群から、独立して、選択され；
Ｒ38は、
【化６】
2020117488.tif 000007
からなる群から選択され；そして、
Ｒ48は、ＣＨ3、Ｈ、ＦおよびＣｌからなる群から選択され、そして
ｎ8は１または２である。
ここで、炎症性サイトカインは、ＩＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−２２およびＩＬ−３１からなる群から選択される。
【００１８】
本明細書で使用する、「（置換フェニル）プロペナール部分」という用語は、プロペナール部分（ｍが１に等しい場合）およびアルコキシまたはヒドロキシ部分、またはアルキルまたは置換アルキル部分が結合したフェニル基を含む組成物を指す。
置換は、本明細書中で使用されるプロペナール部分に対してメタまたはパラまたはオルト配置されていてもよく、
【化７】
2020117488.tif 000008
を指してもよい。
ここで、ｑは、１、２、３または４の任意の数であってもよく；そじて
ｍは、１、２、３、４、またはそれ以上の任意の数であってもよい。
【００１９】
本明細書で使用される「アルキル」という用語は、不飽和を含まず、１〜１０個の炭素原子を有し、単結合で分子の残りに結合している、炭素および水素原子のみからなる直鎖または分岐の炭化水素鎖ラジカル（例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、１−メチルエチル（イソ−プロピル）、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、１，１−ジメチルエチル（ｔ−ブチル）など）を指す。
【００２０】
本明細書で使用される「アルケニル」という用語は、炭素および水素原子のみからなり、少なくとも１つの二重結合を含み、２〜１０個の炭素原子を有し、かつ、分子の残りに、単結合または二重結合で結合する直鎖または分岐の炭化水素鎖ラジカル（たとえば、エテニル、プロプ−１−エニル、ペント−１−エニル、ペンタ−１，４−ジエニルなど）を指す。
【００２１】
本明細書で使用される「アルケニレン」という用語は、炭素間二重結合を含み、式ＣpＨ2p-2で表される直鎖または分岐炭化水素鎖を指し、水素は追加の炭素‐炭素二重結合または一価の置換基で置換されていてもよい（たとえば、エテニレン、プロプ−１−エニレンなど）。
【００２２】
本明細書で使用される「アルコキシ」という用語は、式−ＯＲを有するラジカルを指し、式中、Ｒはアルキル、ハロアルキルまたはシクロアルキルである。
「所望により置換されたアルコキシ」は、式−ＯＲ’を有するラジカルを指し、式中、Ｒ’は、本明細書に記載されるように、所望により置換されたアルキルである。
【００２３】
本明細書で使用される「アルキニル」という用語は、炭素および水素原子のみからなり、少なくとも１つの三重結合を含み、２から１０個の炭素原子を有し、かつ、分子の残りに、単結合または三重結合で結合している直鎖または分岐炭化水素鎖ラジカルを指す（たとえば、エチニル、プロプ−１−イニル、ブタ−１−イニル、ペント−１−イニル、ペント−３−イニルなど）。
【００２４】
本明細書で使用される「アリール」という用語は、環の少なくとも１つが芳香族である炭素環系のラジカルを指す。
アリールは、完全に芳香族であっても、非芳香族環と組み合わさった芳香族環を含んでもよい。
「ビアリール系」は、少なくとも２つのアリール基を含む化合物である。
【００２５】
本明細書で使用される「シクロアルキル」という用語は、炭素原子および水素原子のみからなり、３〜１０個の炭素原子を有し、かつ、飽和であって、単結合により分子の残りに結合している、安定な一価単環式または二環式炭化水素ラジカルを指す（たとえば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなど）。
【００２６】
本明細書で使用される、用語「ジ−ケトンブリッジ」または「ケトン−エノールブリッジ」は、それぞれ、２つのケトンまたはケトンに近接して配置されたエノールを含む、直鎖または分岐炭化水素鎖を意味する。
「ジ−ケトンブリッジ」または「ケトン−エノール  ブリッジ」は、少なくとも２つのアリール部分の間に位置する。
【００２７】
本明細書で使用される「ヒドロキシアルキル」という用語は、１〜１０個の炭素原子を有する直鎖または分岐鎖のヒドロキシ置換炭化水素鎖ラジカル（たとえば、−ＣＨ2ＯＨ、−（ＣＨ2）2ＯＨなど）を指す。
【００２８】
いくつかの実施形態では、式Ｖによる化合物は、式Ｖ−１またはＶ−２に従って提供される：
【化８】
2020117488.tif 000009
【００２９】
本発明の好ましい一実施形態では、４，４−二置換１，７−ビス−（３，４−ジメトキシフェニル）−ヘプタ−１，６−ジエン−３，５−ジオンおよび６，６−二置換１，１１−ビス（置換フェニル）−ウンデカ−１，３，８，１０−テトラエン−５，７−ジオン足場を含む、式ＶＩＩＩの化合物は、表１に示すとおりである。
表１：
2020117488.tif 000010
2020117488.tif 000011
2020117488.tif 000012
【００３０】
本発明の別の好ましい実施形態では、化合物は式Ｖであり；
「ｎ5」は１であり；
Ｒ35、Ｒ45、Ｒ35'、およびＲ45'は−ＯＣＨ3であり；そして、
Ｌ5−Ｚ5側鎖は存在せず、ＡＳＣ−Ｊ９と呼ばれる。
【００３１】
本発明の別の好ましい実施形態において、化合物は、式ＶＩＩＩ、Ｒ18およびＲ28が、ジ置換メトキシ基であり、Ｒ38が、
【化９】
2020117488.tif 000013
であり、Ｒ48が、Ｈであり、そして、ｎ8は、１であり、ＡＳＣ−ＪＭ１７と呼ぶ。
【００３２】
また、本発明は、（置換フェニル）プロペナール部分を有する化合物を含む、組成物を提供する。
本発明に係る組成物は、好ましくは、医薬組成物、食品組成物または化粧品組成物である。
【００３３】
好ましくは、医薬組成物は、（置換フェニル）‐プロペナール部分を有する化合物および所望により薬学的に許容される担体または賦形剤を含む。
【００３４】
好ましくは、医薬組成物は、有効量の化合物を含む。
【００３５】
多くの場合、範囲は、「約」１つの特定の値からおよび／または「約」別の特定の値までとして本明細書で表される。
そのような範囲が表現される場合、実施形態は、１つの特定の値からおよび／または他の特定の値までの範囲を含む。
同様に、「約」という言葉を使用して値が近似値として表される場合、特定の値が別の実施形態を形成することが理解されるであろう。
さらに、各範囲のエンドポイントは、他のエンドポイントに関連して、また他のエンドポイントから独立して、共に、重要であることが理解されるであろう。
【００３６】
「所望の（Ｏｐｔｉｏｎａｌ）」または「所望により（ｏｐｔｉｏｎａｌｌｙ）」とは、後に説明するイベントまたは状況が発生する場合と発生しない場合があり、その記載は、そのイベントまたは状況が発生する場合と発生しない場合が含まれることを意味する。
たとえば、「所望によりある試薬を含む」という語句は、前記試薬が存在する場合と存在しない場合があることを意味する。
【００３７】
明細書および添付の特許請求の範囲で使用されているように、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈がそうでないことを明確に示さない限り、複数の指示対象を含むことに留意しなければならない。
したがって、文脈で特に必要とされない限り、単数形の用語には複数形が含まれ、複数形の用語には単数形が含まれる。
【００３８】
本明細書で使用される「対象」という用語は、任意の動物、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトを指す。
対象の例には、ヒト、ヒト以外の霊長類、げっ歯類、モルモット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ウシ、ウマ、イヌ、ネコが含まれる。
【００３９】
本明細書で提供される、活性成分の「有効量」という用語は、所望の機能の所望の調節を提供するのに十分な量の成分を意味する。
以下に指摘するように、必要な正確な量は、病状、身体状態、年齢、性別、対象の種および体重、特定のアイデンティティおよび組成物の処方などに応じて、対象ごとに異なる。
投与計画は、最適な治療反応を誘導するために調整することができる。
例えば、治療状況の緊急性によって示されるように、いくつかの分割用量を毎日投与するか、用量を比例的に減らすことができる。
したがって、正確な「有効量」を指定することはできない。しかしながら、適切な有効量は、日常的な実験のみを使用して、当業者によって決定され得る。
【００４０】
本明細書で使用される、用語「治療する」または「治療」は、そのような用語が適用される、障害、疾患または状態を、逆転、緩和、進行の阻害、または、そのような、障害、疾患または状態の１つのまたは複数の症状の改善を示す。
【００４１】
本明細書で使用される「担体」または「賦形剤」という用語は、それ自体が治療薬ではなく、担体および／または希釈剤および／またはアジュバント、または、対象への治療薬の送達のためのビヒクルとして使用され、また、その取り扱いまたは貯蔵特性を改善するか、または経口投与に適したカプセルまたは錠剤などの個別の物品への組成物の投与単位の形成を可能にしたり促進する、製剤に添加される、いかなる物質を指す。
適切な担体または賦形剤は、医薬製剤または食品の製造分野の当業者に周知である。
担体または賦形剤には、限定ではなく例示として、緩衝剤、希釈剤、崩壊剤、結合剤、接着剤、湿潤剤、ポリマー、潤滑剤、流動促進剤、不快な味または臭気をマスクまたは打ち消すために添加される物質、香味料、色素、香料、および組成物の外観を改善するために添加される物質が含まれ得る。
許容される担体または賦形剤には、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、重炭酸緩衝液、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸および硫酸のナトリウムおよびカルシウム塩、炭酸マグネシウム、タルク、ゼラチン、アカシアゴム、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、デキストリン、マンニトール、ソルビトール、乳糖、ショ糖、デンプン、ゼラチン、セルロース系材料（アルカン酸のセルロースエステルやセルロースアルキルエステルなど）、低融点ワックスココアバター、アミノ酸、尿素、アルコール、アスコルビン酸、リン脂質、タンパク質（たとえば、血清アルブミン）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、塩化ナトリウムまたはその他の塩、リポソーム、マンニトール、ソルビトール、グリセロールまたは粉末、ポリマー（ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコールなど）、および他の薬学的に許容される材料が含まれる。
担体は、治療薬の薬理活性を破壊してはならず、治療量の治療薬を送達するのに十分な用量で投与される場合、無毒でなければならない。
【００４２】
本発明の医薬組成物は、当技術分野で公知の任意の方法により局所または全身投与することが好ましく、筋肉内、皮内、静脈内、皮下、腹腔内、鼻腔内、経口、粘膜または外部経路を含むがこれらに限定されない。
適切な経路、製剤および投与スケジュールは、当業者によって決定され得る。
本発明において、医薬組成物は、液剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、徐放剤、粉末、顆粒、アンプル、注射、注入、キット、軟膏、ローション、リニメント、クリームまたはそれらの組み合わせなどの対応する投与経路に従って、様々な方法で製剤化することができる。
必要に応じて、それらの多くは当業者に知られている、滅菌されてもよく、または任意の薬学的に許容される担体または賦形剤と混合されてもよい。
【００４３】
本明細書で使用される外部経路は、局所投与としても知られており、吹送および吸入による投与が含まれるが、これらに限定されない。
局所投与用の様々なタイプの製剤の例には、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、泡、経皮パッチにより送達するための製剤、粉末、スプレー、エアロゾル、カプセルまたは吸入用製剤または吸入器または滴剤（目または鼻など滴剤）において使用されるカートリッジ、噴霧のための溶液／懸濁液、坐剤、ペッサリー、保持腸、およびチュアブルまたはサッカブルの錠剤またはペレットまたはリポソームまたはマイクロカプセル化製剤を含む。
【００４４】
軟膏、クリームおよびゲルは、たとえば、適切な増粘剤および／またはゲル化剤および／または溶媒を添加した水性または油性基剤で製剤化することができる。
したがって、そのような基剤は、たとえば、水および／または液体パラフィンなどの油または落花生油もしくはヒマシ油などの植物油、またはポリエチレングリコールなどの溶媒を含むことができる。
基剤の性質に応じて使用できる増粘剤およびゲル化剤には、軟パラフィン、ステアリン酸アルミニウム、セトステアリルアルコール、ポリエチレングリコール、ウール脂肪、蜜蝋、カルボキシポリメチレンおよびセルロース誘導体、および／またはモノステアリン酸グリセリルおよび／または非イオン性乳化剤が含まれる。
【００４５】
ローションは水性または油性基剤で製剤化することができ、一般に、１つまたは複数の乳化剤、安定剤、分散剤、懸濁剤または増粘剤も含む。
【００４６】
外部適用のための粉末は、たとえば、タルク、ラクトースまたはデンプンのような任意の適切な粉末基剤の助けを借りて形成され得る。
滴剤は、１つまたは複数の分散剤、可溶化剤、懸濁剤または防腐剤も含む、水性または非水性基剤で製剤化することができる。
【００４７】
スプレー組成物は、たとえば、水溶液または懸濁液として、または、適切な液化噴射剤を使用して、定量吸入器などの加圧パックから送達されるエアロゾルとして製剤化することができる。
吸入に適したエアロゾル組成物は、懸濁液または溶液のいずれであってもよい。
エアロゾル組成物は、所望により、オレイン酸またはレシチンなどの界面活性剤およびエタノールなどの共溶媒などの、当技術分野で周知の追加の製剤賦形剤を含んでもよい。
【００４８】
局所製剤は、１日に１回または複数回、患部に投与することができる。皮膚領域には、閉塞包帯が有利に使用されるかもしれない。
接着剤リザーバーシステムにより、連続的または長期の送達を実現できる。
【００４９】
本発明による化粧品組成物は、本質的に水からなる水相製剤であってもよい。また、水と水混和性溶媒（たとえば、エタノールまたはイソプロパノールなどの１〜５個の炭素原子を含む低級モノアルコール、プロピレングリコール、エチレングリコール、１，３−ブチレングリコールまたはジプロピレングリコールなどの２〜８個の炭素原子を含むグリコール、Ｃ３−Ｃ４ケトンおよびＣ２−Ｃ４アルデヒド、およびグリセリン）の混合物（２５°Ｃで、５０重量％を超える水中混和性）を含んでいてもよい。
そのような水性製剤は、好ましくは、水性ゲルまたはヒドロゲル製剤の形態である。
ヒドロゲル製剤は、液体溶液を増粘する増粘剤を含む。
増粘剤の例には、カルボマー、セルロース基材、ゴム、アルギン、寒天、ペクチン、カラギーナン、ゼラチン、ミネラルまたは改質ミネラル増粘剤、ポリエチレングリコールおよび多価アルコール、ポリアクリルアミド、その他のポリマー増粘剤が含まれ、これらに限定されない。
組成物の安定性および最適な流動特性を与える増粘剤が好ましくは使用される。
【００５０】
本発明による化粧品組成物は、エマルジョンまたはクリーム製剤の形態であってもよい。
乳化界面活性剤を含むことができる。
これらの界面活性剤は、陰イオンおよび非イオン界面活性剤から選択することができる。
界面活性剤の特性と機能（乳化）の定義については、「Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｋｉｒｋ−Ｏｔｈｍｅｒ」、２２巻、３３３−４３２頁、第３版、１９７９年、Ｗｉｌｅｙの文献、特に、陰イオン性および非イオン性界面活性剤については、上記参考文献の３４７〜３７７頁を参照できる。
【００５１】
本発明による化粧品組成物に好ましく使用される界面活性剤は、
・非イオン性界面活性剤：
脂肪酸、脂肪アルコール、ポリエトキシ化またはポリグリセロール化脂肪アルコール（たとえば、ポリエトキシ化ステアリルまたはセチルステアリルアルコール）、ショ糖の脂肪酸エステル、アルキルグルコースエステル、特に、ポリオキシエチレン化Ｃ１−Ｃ６アルキルグルコースの脂肪酸エステル、およびそれらの混合物）；
・陰イオン界面活性剤：
・アミン、アンモニア水またはアルカリ塩、およびそれらの混合物で中和されたＣ１６−Ｃ３０脂肪酸、
から選択される。
水中油または水中ワックスのエマルジョンを得ることができる界面活性剤を使用することが好ましい。
【００５２】
本発明による化粧品組成物は、ブチル化ｐ−クレゾール、ブチル化ヒドロキノンモノメチルエーテル、およびトコフェロールからなる群から選択される生理学的に許容される抗酸化剤の有効量をさらに含むことができる。
【００５３】
本発明による化粧品組成物は、天然または修飾アミノ酸、天然または修飾ステロール化合物、天然または修飾コラーゲン、絹タンパク質または大豆タンパク質をさらに含んでもよい。
【００５４】
本発明による化粧品組成物は、好ましくは、皮膚、髪、まつげまたは爪などのケラチン物質への局所適用のために処方される。
それらは、このタイプの用途に通常使用される任意の提示形態、特に水溶液または油性溶液、水中油または油中水エマルジョン、シリコーンエマルジョン、マイクロエマルジョンまたはナノエマルジョン、水性または油性ゲルまたは液体、ペースト状または固体の無水製品であってよい。
【００５５】
本発明による化粧品組成物は、多かれ少なかれ流動性であり得、白色または着色されたクリーム、軟膏、ミルク、ローション、美容液（ｓｅｒｕｍ）、ペースト、ムースまたはゲルの外観を有し得る。
所望により、エアロゾル、パッチまたは粉末の形で皮膚に局所的に適用されてもよい。
それは、また、たとえば、スティックの形などの固体の形であってもよい。
それは、ケア製品および／または皮膚のメイクアップ製品として使用されてもよい。
あるいは、シャンプーまたはコンディショナーとして処方されてもよい。
【００５６】
既知の方法で、本発明による化粧品組成物は、親水性または親油性ゲル化剤、防腐剤、酸化防止剤、溶媒、香料、充填剤、顔料、臭気吸収剤および染料など、化粧品に一般的な添加剤および補助剤を含んでもよい。
【００５７】
化合物は、食品組成物の製造過程において、従来の食品組成物（すなわち、食用食品（ｅｄｉｂｌｅ  ｆｏｏｄ）または飲料またはその前駆体）に添加することができる。
ほとんどすべての食品組成物に本発明の化合物を補充することができる。
本発明の化合物を補充することができる食品組成物には、キャンディー、焼き菓子、アイスクリーム、乳製品、甘味および風味のスナック、スナックバー、食事代替品、ファーストフード、スープ、パスタ、麺、缶詰食品、冷凍食品、乾燥食品、冷蔵食品、油脂（ｏｉｌｓ  ａｎｄ  ｆａｔｓ）、ベビーフード、またはパンに塗られたソフトフード、またはそれらの混合物が含まれるが、これらに限定されない。
【００５８】
本発明の好ましい実施形態では、医薬組成物は、局所用医薬組成物である。
【００５９】
本発明の好ましい一実施形態では、医薬組成物は、更に、皮膚軟化剤、皮膚浸透剤、乳化剤、中和剤、ゲル化剤、防腐剤、またはキレート剤を含む。
【００６０】
本発明はまた、上記の医薬組成物を、対象に投与することを含む、かかる治療を必要とする上記対象において炎症性サイトカイン過剰発現に関連する炎症性障害を治療する方法を提供する。
【００６１】
理論に限定されることを望まないが、本発明による方法は、活性化された樹状細胞、マクロファージ、またはＴ細胞によって合成される炎症性サイトカインを抑制することにより、障害を治療するという出願人の考えである。
【００６２】
好ましくは、炎症性サイトカインは、ＩＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−２２およびＩＬ−３１を含むが、これらに限定されない。
【００６３】
本発明の好ましい一実施形態では、障害は表皮障害である。
【００６４】
本発明の別の好ましい実施形態では、障害は皮膚障害である。
【００６５】
別の態様では、障害は炎症性皮膚障害であることが好ましい。
【００６６】
好ましくは、炎症性皮膚障害には、日光角化症、アトピー性皮膚炎、水疱瘡、ヘルペス、接触性皮膚炎、湿疹、じんましん、とびひ、角化症ピラリス、ラテックスアレルギー、麻疹、乾癬、白癬、酒さ、ケロイド、肥厚性瘢痕、掻痒症、または脂漏性湿疹が含まれるが、これらに限定されない、
【００６７】
本発明はまた、上記の医薬組成物を対象に投与することを含む、そのような治療を必要とする対象の自己免疫疾患を治療する方法を提供する。
【００６８】
本発明の好ましい一実施形態では、自己免疫疾患は、アディソン病、セリアック病、移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）、グレーブス病、橋本甲状腺炎、炎症性腸疾患、多発性硬化症、重症筋無力症、悪性貧血、乾癬性関節炎、関節リウマチ（ＲＡ）、シェーグレン症候群、全身性エリテマトーデス（狼瘡）、１型糖尿病、または血管炎を含むが、これらに限定されない。
【００６９】
好ましくは、炎症性腸疾患は、潰瘍性大腸炎またはクローン病を含むが、限定されるものではない。
【００７０】
本発明の一実施形態において、本発明者らは、イミキモドがヒトの乾癬応答に類似するマウス皮膚の乾癬性炎症を誘発するイミキモド（ＩＭＱ）誘発乾癬モデルを確立した。
私たちは、樹状細胞やマクロファージなどの免疫細胞と、このＩＭＱ誘発乾癬マウスモデルを使用して、乾癬の炎症の治療における、ＡＳＣ−Ｊ９および関連化合物の効果を評価した。
Ｉｎ  ｖｉｔｒｏの研究で、ＡＳＣ−Ｊ９およびＡＳＣ−ＪＭ１７が、マウス脾細胞、マウス骨髄由来樹状細胞、および骨髄由来のマクロファージにおける炎症性サイトカイン−またはＴＬＲリガンド−誘導性サイトカイン発現を阻害できることを、私たちは見出した。
さらに、ＡＳＣ−Ｊ９クリームが、ｉｎ  ｖｉｖｏで、ＩＭＱ誘発乾癬の炎症を軽減することも、私たちは観察した。
さらに、Ｊ９は、ＩＭＱ誘発乾癬炎症動物モデルを軽減させる。これには、紅斑の減少、病変皮膚のスケーリングと厚さの減少、および乾癬皮膚における炎症性遺伝子発現の阻害が含まれる。
これらの結果を総合すると、ＡＳＣ−Ｊ９とＡＳＣ−ＪＭ１７は抗炎症活性を発揮して乾癬の炎症を抑制する。
【００７１】
本発明の好ましい一実施形態では、ＡＳＣ−Ｊ９は、ケロイド患者由来線維芽細胞の掻痒症マーカーを抑制する。
理論に制限されることを望まないが、患者由来のケロイド線維芽細胞において、ＡＳＣ−Ｊ９は、アルテミン（ＡＲＴＮ）発現および一過性受容体電位（ＴＲＰ）チャネルのダウンレギュレーションを通じて、掻痒症を抑制すると、出願人は信じている。
ＡＲＴＮの過剰発現は、掻痒症に至る皮膚感覚ニューロンにおけるＴＲＰＶ１およびＴＲＰＡ１の発現を増強することが示されている（Ｍｏｌ  Ｐａｉｎ、２０１５  Ｍａｒ  ８；１１：８；Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ（Ｂａｓｅｌ）。２０１８  Ｄｅｃ；１１（４）：１００）。
【００７２】
以下の実施例は、本発明を実施する際に当業者を支援するために提供される。
実施例
実施例１：乾癬
材料および方法
【００７３】
試験品の保管条件
Ｉｎ  ｖｉｔｒｏ研究用のＡＳＣ−Ｊ９（Ｊ９）およびＡＳＣ−ＪＭ１７（ＪＭ１７）粉末を、ＤＭＳＯに溶解し、−２０℃で保存した。
【００７４】
０．０５％のＪ９、０．１％のＪ９、および０．５％のＪ９を含むＪ９対照クリームおよびＪ９クリームを、室温で、保存した。
【００７５】
用量調製
Ｊ９およびＪＭ１７粉末を、ストックとして、１０ｍｇ／ｍＬでＤＭＳＯに溶解し、次いで、研究用に様々な濃度に連続希釈した。
【００７６】
テストシステム：
細胞生存率についてのＭＴＳアッセイ：被験物質の細胞毒性は、ＭＴＳアッセイにより測定される。
ＭＴＳアッセイは、生細胞によって、ＭＴＳテトラゾリウム化合物が還元され、細胞培養液に可溶な色付きホルマザン色素を生成することに基づく。
この変換は、代謝的に活性な細胞のＮＡＤ（Ｐ）Ｈ依存性デヒドロゲナーゼ酵素によって実行されると考えられている。
ホルマザン色素は、４９０−５００ｎｍの吸光度を測定することにより定量化される。
非毒性の用量は、さらなるアッセイに適用される。
【００７７】
細胞培養：マウス骨髄由来樹状細胞（ＢＭＤＣ）および骨髄由来マクロファージ（ＢＭＤＭ）は、マウス骨髄細胞から生成した。
簡単に説明すると、樹状細胞は２つの誘導手順で生成できる。
骨髄細胞は、ＧＭ−ＣＳＦおよびＩＬ−４で、ＧＭＤＣと呼ばれる骨髄性ＤＣに、１０日間で誘導できるが、Ｆｉｔ３ＤＣと呼ばれる骨髄性および形質細胞様ＤＣを含む混合タイプのＤＣは、１０日間、ｆｉｔ３−リガンドで誘導することにより生成できる。
ＢＭＤＭを生成するには、３０％のＬ９２９馴化培地によって、骨髄細胞を、７日間で、ＢＭＤＭに誘導する。
【００７８】
遺伝子発現の分析：Ｉｓｏｌ−ＲＮＡ  Ｌｙｓｉｓ  Ｒｅａｇｅｎｔ（５  ＰＲＩＭＥ社、ヒルデン、ドイツ）を製造元のプロトコルに従って使用して、細胞から全ＲＮＡを精製した。
逆転写は、ＱｕａｎｔｉＮｏｖａR逆転写キット（キアゲンTM）および第一鎖ｃＤＮＡ合成のためのオリゴ−ｄＴプライマーを用いて行った。
定量的ＰＣＲは、ＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ４８０検出システム（ロシュ  ダイアグノスティックス社、ペンツベルグ、ドイツ）および遺伝子発現解析のためのＱｕａｎｔｉＮｏｖａ(R)  ＳＹＢＲ  Ｇｒｅｅｎ  ＲＴ−ＰＣＲキット用いた遺伝子特異的プライマー（添付を参照）を用いて行った。
ｍＲＮＡ発現のレベルは、ＧＡＰＤＨのレベルに正規化された。
【００７９】
乾癬性炎症の動物モデル：５または１０日間、毎日、Ｂａｌｂ／ｃマウスの剃毛した背中に、３０または４０ｍｇの５％ＩＭＱゲル（ＡｌｄａｒａTM）を塗りつけた（ｓｍｅａｒｅｄ）。
皮膚の炎症反応の重症度は、記載されているように、乾癬面積重症度指数（Ｐｓｏｒｉａｓｉｓ  Ａｒｅａ  Ｓｅｖｅｒｉｔｙ  Ｉｎｄｅｘ）（ＰＡＳＩ）に基づいて評価された。
簡単に説明すると、乾癬反応の３つのパラメーター（紅斑、燐屑（ｓｃａｌｉｎｇ）、および皮膚の厚さ）は、次のように、０から４までのスケールで独立してスコア付けされた。０：なし；１：わずか；２：中程度；３：著しい；および４：非常に著しい。
これら３つのパラメーターのスコアを加算することにより、０〜１２の累積スコアを使用して、応答の重症度を測定した。
実験の終わりに、バーニアキャリパーを用いた皮膚の厚さの測定のために、マウスを犠牲にした。
動物研究のグループ割り当てと用量レベルは、次のように説明される。
表２および３にリストされている２つの動物実験がある。
表２：第１動物実験：
2020117488.tif 000014
表３：第２動物実験：
2020117488.tif 000015
【００８０】
統計分析：すべてのデータは、平均値±ＳＤとして提示されている。
統計分析は、スチューデントのｔ検定を使用した３つの独立した実験のデータに対して実行された。
Ｐ値＜０．０５は、実験グループ間の統計的に有意な差であると考えられた。
【００８１】
データ分析
マクロファージおよび樹状細胞に対するＪ９およびＪＭ１７のｉｎ  ｖｉｔｒｏ抗炎症活性
ｉｎ  ｖｉｔｒｏ毒性試験は、ＭＴＳアッセイにより実施された。
【００８２】
マウス脾細胞、マウス骨髄由来の樹状細胞および骨髄由来マクロファージなどのさまざまな免疫細胞において、ＴＬＲリガンドによって誘導される、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、およびＩＬ−３１を含む炎症性サイトカインに対する、Ｊ９およびＪＭ１７の抗炎症効果は、定量的ＰＣＲ（ＲＴ−ｑＰＣＲ）によって分析された。
【００８３】
イミキモド（ＩＭＱ）に誘導された乾癬の炎症を有する、動物モデルに対する、Ｊ９とＪＭ１７の抑制効果
マウスは、（１）評価のために撮影され、分析された；（２）乾癬面積重症度指数（Ｐｓｏｒｉａｓｉｓ  Ａｒｅａ  Ｓｅｖｅｒｉｔｙ  Ｉｎｄｅｘ）（ＰＡＳＩ）；（３）皮膚の厚さの測定。
私たちは、病変組織における、（１）Ｈ＆Ｅ染色および（２）ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３およびＩＬ−３１を含む炎症性遺伝子発現を、定量的ＰＣＲ（ＲＴ−ｑＰＣＲ）によって、アクセスすることによるさらなる分析のために、より良い阻害効果を有する実験サンプルを選択した。
【００８４】
結果
マクロファージおよび樹状細胞に対する、Ｊ９およびＪＭ１７のｉｎ  ｖｉｔｒｏ抗炎症活性
この実施例の目的は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏおよびｉｎ  ｖｉｖｏでの乾癬の炎症に対する、Ｊ９およびＪＭ１７の抗炎症能力を評価することである。
インビトロでの研究のためのＪ９およびＪＭ１７の安全用量を見つけるために、Ｊ９およびＪＭ１７の細胞毒性をＭＴＳアッセイにより測定した。
樹状細胞とマクロファージが乾癬の炎症を開始する重要な細胞であるため、これらの２つの細胞は細胞毒性試験に選択された。
これらの細胞を、０μＭから１０μＭまでの異なる濃度のＪ９およびＪＭ１７で処理した。
図１に示すように、ＧＭＤＣ、Ｆｉｔ３ＤＣ、およびＢＭＤＭは、それぞれ最大１０μＭ、１０μＭ、および１μＭのＪ９（非毒性用量）に耐性があった。
また、ＧＭＤＣ、Ｆｉｔ３ＤＣとＢＭＤＭは、それぞれ、最大５μＭ、３μＭおよび１μＭのＪＭ１７（非毒性用量）に耐性があった。
【００８５】
ｉｎ  ｖｉｔｒｏでの、Ｊ９およびＪＭ１７の抗炎症効果を評価するため、ＧＭＤＣは、Ｊ９およびＪＭ１７で、１時間、前処理され、炎症性サイトカインであるＴＮＦ−αまたはＩＬ−１βで、２４時間、刺激された。
ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、およびＩＬ−３１を含むサイトカインの発現は、ＲＴ−ｑＰＣＲにより測定した。
図２では、Ｊ９およびＪＭ１７は、ＧＭＤＣにおいて、ＴＮＦ−αまたはＩＬ−１βが誘導するＴＮＦ−αおよびＩＬ−１βの発現を有意に阻害するが、Ｊ９およびＪＭ１７は、ＧＭＤＣでの、ＴＮＦ−αまたはＩＬ−１βが誘導するＩＬ−２２の発現を低減しなかった。
ＩＬ−１７Ａの発現は、ＴＮＦ−αまたはＩＬ−１(によって誘導されなかった。
さらに、ＩＬ−２３およびＩＬ−３１の発現は、実験群の樹状細胞では検出できなかった。
【００８６】
また、マウス脾細胞および骨髄由来マクロファージに対する、Ｊ９およびＪＭ１７の抗炎症効果を評価する。
マウス脾細胞を、Ｊ９およびＪＭ１７で、１時間、前処理し、その後、ＴＬＲリガンドのＲ８４８を、６時間添加した。
ＲＴ−ｑＰＣＲ分析は、Ｊ９およびＪＭ１７が、マウス脾細胞において、Ｒ８４８で誘導されたＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１７ＡおよびＩＬ−２２の発現を、有意に阻害するが、ＩＬ−２３およびＩＬ−３１の発現は、マウス脾細胞において検出できないことを明らかにした（図３）。
ＢＭＤＭでは、Ｒ８４８で誘導された、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−２２、およびＩＬ−３１の発現が、Ｊ９によって阻害され、Ｒ８４８で誘導された、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、およびＩＬ−１７Ａの発現が、ＪＭ１７によって阻害されることを見出した（図４）。
【００８７】
イミキモド（ＩＭＱ）により誘発された、乾癬の炎症を有する動物モデルに対する、Ｊ９とＪＭ１７の抑制効果
私たちは、さらに、インビボにおける、Ｊ９の乾癬性炎症に対する、抗炎症作用を評価した。
まず、我々は、１０日間の実験スケジュールにおける、Ｊ９対照クリーム、Ｊ９クリームおよびクロベタゾールの、ＩＭＱで誘発された乾癬炎症の阻害に対する効果を比較した（図５Ａ）。
０日目、５日目および１０日目に、評価するために各郡のマウスを写真撮影した（図５Ｂ、５Ｃおよび５Ｄ）。
５日間の治療後、ＩＭＱ治療群の病変皮膚に、重度の紅斑、鱗屑、および皮膚の厚さの増加が観察された（図５Ｂ）。
対照クリーム群では、抑制効果は観察されなかった（図５Ｂ）。
Ｊ９（２ｍｇ／ｃｍ2および１０ｍｇ／ｃｍ2）の治療により、病変皮膚の紅斑、鱗屑、および厚さが大幅に減少した（図５Ｂ）。
さらに、コルチコステロイド薬のクロベタゾールによる治療は、病変皮膚の、ＩＭＱ誘発性の紅斑、鱗屑、および皮膚厚の増加を強く阻害した（図５Ｂ）。
しかし、クロベタゾールでの治療は、皮膚の厚さを著しく減少させた（図５Ｂおよび６Ｂ）。
この実験では、紅斑の重症度、鱗屑、および皮膚の厚さの増加は、５日目のこれらのパラメーターと比較して、１０日目では増加しないことがわかった。
これらの現象は、５日目に最も重度に達した（図５および６Ａ）。
これらの群の乾癬面積重症度指数（ＰＡＳＩ）のスコアを比較し、２ｍｇ／ｃｍ2のＪ９で処理したマウス群のＰＡＳＩスコアが、３日目から１０日目で有意に減少することがわかった。
１０ｍｇ／ｃｍ2のＪ９で処置したマウス群は、４日目〜６日目に、有意に減少した（図６Ａ）。
皮膚の厚さは１０日目に測定された。
Ｊ９（２ｍｇ／ｃｍ2および１０ｍｇ／ｃｍ2）の治療は、ＩＭＱにより誘発された厚さの増加を有意に抑制した（図６Ｂ）。
また、クロベタゾールの治療は、ｓｈａｍ対照群と比較して、皮膚の厚さを減少させることを発見した（図６Ｂ）。
病変皮膚における、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１β、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３およびＩＬ−３１を含むサイトカイン遺伝子の発現もまた分析した。
これらのサイトカインのうち、我々は、Ｊ９が、ＩＭＱ誘導されたＩＬ−１βの発現を、１０日目で、減少することが観察された（図６Ｃ）。
Ｈ＆Ｅ染色の結果は、Ｊ９の治療が、表皮および真皮の厚み、および表皮におけるケラチノサイト増殖および炎症を軽減することが明らかであった（図６Ｄ）。
【００８８】
異なる濃度のＪ９クリームの治療効果をさらに理解するために、０．５％のＪ９（２ｍｇ／ｃｍ2および６ｍｇ／ｃｍ2）、０．１％のＪ９（１０ｍｇ／ｃｍ2）および０．０５％のＪ９クリーム（２ｍｇ／ｃｍ2）を、５日間の実験スケジュールで、ＩＭＱで誘発された乾癬性炎症に対する治療効果を評価するために使用した（図７Ａ）。
各群のマウスを、評価するために、０日目と５日目に撮影した（図７Ｂおよび７Ｃ）。
５日間の治療後、０．５％のＪ９（２ｍｇ／ｃｍ2および６ｍｇ／ｃｍ2）および０．１％のＪ９（１０ｍｇ／ｃｍ2）で治療したマウスで、ＩＭＱにより誘発された炎症が抑制されたが、０．０５％のＪ９を有するクリーム（２ｍｇ／ｃｍ2）で治療したマウスでは抑制されなかったことを見出した（図７Ｃ）。
病変皮膚の、ＰＡＳＩスコア、皮膚の厚さ、遺伝子発現も測定した。
０．５％のＪ９（２ｍｇ／ｃｍ2および６ｍｇ／ｃｍ2）および０．１％のＪ９（１０ｍｇ／ｃｍ2）で処理したマウスのＰＡＳＩスコアは、４日目から５日目で、著しく減少した（図８Ａ）。
同様の結果は、皮膚の厚さでも観察された（図８Ｂ）。
病変皮膚における、ＴＮＦ−αおよびＩＬ−１βのＩＭＱ誘導発現もまた、０．５％のＪ９（２ｍｇ／ｃｍ2および６ｍｇ／ｃｍ2）および０．１％のＪ９（１０ｍｇ／ｃｍ2）で処理したマウスにおいて阻害された（図８Ｃ）。
この実験では、ＩＭＱとＪ９による、病変皮膚における、ＩＬ−１７Ａ、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、およびＩＬ−３１の誘導と阻害も分析したが、これらのサイトカインの発現レベルが低いため、有意な結果は得られなかった。
【００８９】
実施例２：掻痒症
２５６Ｋおよび２６８Ｋという名前の、２つのケロイド患者由来線維芽細胞を、２４時間、ＡＳＣ−Ｊ９で処理した。
次に、細胞を収集し、そして、ＡＲＴＮとＧＡＰＤＨのｍＲＮＡ発現を、ｑＰＣＲで測定した。
【００９０】
図９に示されるように、ＡＳＣ−Ｊ９は、ケロイド患者由来の線維芽細胞における、掻痒症マーカーを抑制する。
ＡＳＣ−Ｊ９は、対象由来のケロイド線維芽細胞において、アルテミン（ＡＲＴＮ）発現を下方制御することにより、掻痒症を抑制する。
【００９１】
本発明は、上述の特定の実施形態に関連して説明されたが、それに対する多くの代替物およびその修飾および変形は、当業者には明らかであろう。
そのようなすべての代替、修飾、および変形は、本発明の範囲内にあるとみなされる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【外国語明細書】
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