(57)【要約】【課題】新たなＩＬ−１７発現抑制剤の提供。【解決手段】イソプレンを構成単位とし分岐鎖を有することもある直鎖炭素鎖状で且つ当該炭素鎖中に炭素−炭素の単結合と炭素−炭素の二重結合とが交互に連続する炭素鎖構造を有するテルペンもしくはその誘導体またはそれらの塩を含有するＩＬ−１７発現抑制剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
イソプレンを構成単位とし分岐鎖を有することもある直鎖炭素鎖状で且つ当該炭素鎖中に炭素−炭素の単結合と炭素−炭素の二重結合とが交互に連続する炭素鎖構造を有するテルペンもしくはその誘導体またはそれらの塩を含有するＩＬ−１７発現抑制剤。
【請求項２】
イソプレンを構成単位とし分岐鎖を有することもある直鎖炭素鎖状で且つ当該炭素鎖中に炭素−炭素の単結合と炭素−炭素の二重結合とが交互に連続する炭素鎖構造を有するテルペンもしくはその誘導体またはそれらの塩を含有するＩＬ−１７活性抑制剤。
【請求項３】
イソプレンを構成単位とし分岐鎖を有することもある直鎖炭素鎖状で且つ当該炭素鎖中に炭素−炭素の単結合と炭素−炭素の二重結合とが交互に連続する炭素鎖構造を有するテルペンもしくはその誘導体またはそれらの塩を含有するＩＬ−１７の誘発する疾病の予防及び／又は治療剤。
【請求項４】
イソプレンを構成単位とし分岐鎖を有することもある直鎖炭素鎖状で且つ当該炭素鎖中に炭素−炭素の単結合と炭素−炭素の二重結合とが交互に連続する炭素鎖構造を有するテルペンもしくはその誘導体またはそれらの塩を含有するＩＬ−１７の関与する疾病の予防及び／又は治療剤。
【請求項５】
アスタキサンチンを含有するＩＬ−１７の関与する疾病の予防及び又は治療剤。
【請求項６】
ルテインを含有するＩＬ−１７の関与する疾病の予防及び又は治療剤。
【請求項７】
リコピンを含有するＩＬ−１７の関与する疾病の予防及び又は治療剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、インターロイキン−１７発現抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
インターロイキン−１７ファミリー（以下、ＩＬ−１７と記す。なお、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−１７Ｆが代表的である。）は、１９９０年代より注目されてきているサイトカインの一つであり、リンパ球をはじめ生体内で複数の細胞で産生され、繊維芽細胞や上皮細胞、血管内皮細胞、マクロファージなど種々の細胞に作用して、生理的条件では生体防御機構として炎症性サイトカインやケモカイン、細胞接着因子など、種々の因子を誘導して生体防御のシステムの機能維持に重要である。しかしながら、主にＰａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｔｈ１７細胞、所謂、活性化Ｔｈ１７細胞などより多量に産生される場合は、本物質は炎症を誘導することが知られている。そのようにしてＩＬ−１７が誘導、発症或いは症状の進行に強く関与する疾患としては、関節リウマチ、多発性硬化症、炎症性大腸炎、乾癬、接触型過敏症、遅延型過敏症、非アトピー性喘息、腫瘍等があげられる（非特許文献１及び２）。
このようなＩＬ−１７の作用を抑制するものとしては、モノクローナル抗体が知られており乾癬の治療においてその有用性は広く知られているが、医薬品としての使用の簡便性や製造の容易性等の観点から、同作用を有する合成可能な低分子有機化合物が強く望まれてきた。
【０００３】
一方、テルペン（ｔｅｒｐｅｎｅ）は、五炭素化合物であるイソプレンを構成単位とする炭化水素で、植物や昆虫、菌類などによって作り出される生体物質である。もともと精油の中から大量に見つかった一群の炭素１０個の化合物に与えられた名称であり、そのため炭素１０個を基準として体系化されている。分類によってはテルペン類のうち、カルボニル基やヒドロキシ基などの官能基を持つ誘導体はテルペノイド（ｔｅｒｐｅｎｏｉｄ）と呼ばれる。
テルペンやその代表的誘導体であるテルペノイドは、芳香や風味、発色等に関わるとされているが、活性化Ｔｈ１７細胞が産生するＩＬ−１７の活性抑制、発現抑制等についての直接的な作用については、全く知られていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】Iwakura Y, Ishigame H, Saijo S, Nakae S., Immunity. 2011;34(2):149-62
【非特許文献２】Ghoreschi K, Laurence A et al., Nature. 2010; 467(7318): 967-971
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明の主な課題は、ＩＬ−１７の発現抑制剤及び活性抑制剤、ひいてはＩＬ−１７が引き起こす或いは関与する疾病の予防・治療剤の提供である。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者等は、ＩＬ−１７発現抑制効果及び活性抑制効果を有し、ひいてはＩＬ−１７が引き起こす或いは関与する疾病の予防・治療薬を見出すべく鋭意検討した結果、テルペンやテルペノイド等が優れたＩＬ−１７発現抑制効果及び活性抑制効果を有することを見出し、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち、本発明は、次の発明〔１〕〜〔４〕を提供するものである。
【０００８】
〔１〕イソプレンを構成単位とし分岐鎖を有することもある直鎖炭素鎖状で且つ当該炭素鎖中に炭素−炭素の単結合と炭素−炭素の二重結合とが交互に連続する炭素鎖構造を有するテルペンもしくはその誘導体またはそれらの塩を含有するＩＬ−１７発現抑制剤。
〔２〕イソプレンを構成単位とし分岐鎖を有することもある直鎖炭素鎖状で且つ当該炭素鎖中に炭素−炭素の単結合と炭素−炭素の二重結合とが交互に連続する炭素鎖構造を有するテルペンもしくはその誘導体またはそれらの塩を含有するＩＬ−１７活性抑制剤。
〔３〕イソプレンを構成単位とし分岐鎖を有することもある直鎖炭素鎖状で且つ当該炭素鎖中に炭素−炭素の単結合と炭素−炭素の二重結合とが交互に連続する炭素鎖構造を有するテルペンもしくはその誘導体またはそれらの塩を含有するＩＬ−１７の誘発する疾病の予防及び又は治療剤。
〔４〕イソプレンを構成単位とし分岐鎖を有することもある直鎖炭素鎖状で且つ当該炭素鎖中に炭素−炭素の単結合と炭素−炭素の二重結合とが交互に連続する炭素鎖構造を有するテルペンもしくはその誘導体またはそれらの塩を含有するＩＬ−１７の関与する疾病の予防及び／又は治療剤。
【発明の効果】
【０００９】
本発明においては、イソプレンを構成単位とし分岐鎖を有することもある直鎖炭素鎖状で且つ当該炭素鎖中に炭素−炭素の単結合と炭素−炭素の二重結合とが交互に連続する炭素鎖構造を有するテルペンもしくはその誘導体またはそれらの塩が優れたＩＬ−１７の発現抑制効果を有することを見出したものである。それゆえ、本発明のイソプレンを構成単位とし分岐鎖を有することもある直鎖炭素鎖状で且つ当該炭素鎖中に炭素−炭素の単結合と炭素＝炭素の二重結合とが交互に連続する炭素鎖構造を有するテルペンもしくはその誘導体またはそれらの塩を含有する医薬組成物は、ＩＬ−１７の発現抑制剤若しくは活性抑制剤、更にはＩＬ−１７が誘発或いは関与する疾患の予防、治療剤もしくは改善剤として優れたものである。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】種々のテルペノイドのＩＬ−１７遺伝子の発現試験結果を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明が関わるＩＬ−１７は前記のごとく、炎症性サイトカインやケモカイン、細胞接着因子など、種々の因子を誘導して炎症を誘導する因子であり、これにより発症する或いはＩＬ−１７が発症や進行に関与する疾患としては、関節リウマチ、多発性硬化症、炎症性大腸炎、乾癬、接触型過敏症、遅延型過敏症、非アトピー性喘息、腫瘍等が挙げられる。これらの疾患のうち、本発明の対象とするＩＬ−１７が引き起こす或いは関与するものとしては、炎症性大腸炎が好ましく、炎症性大腸炎のうち、潰瘍性大腸炎がさらに好ましい。
【００１２】
本発明に関わる「イソプレンを構成単位とし分岐鎖を有することもある直鎖炭素鎖状で且つ当該炭素鎖中に炭素−炭素の単結合と炭素−炭素の二重結合とが交互に連続する炭素鎖構造を有するテルペンもしくはその誘導体」は、構造式CH2=C(CH3)CH=CH2で表されるイソプレンを構成単位とし、本構成単位が複数連続（重合）し、その連続体は分岐鎖を有することもある直鎖炭素鎖構造を形成し且つ炭素−炭素の単結合と炭素−炭素の二重結合とが交互に連続する構造体を意味する。当該構造体を構成するイソプレンが連続する個数は、通常３〜８であり、好ましくは４〜６である。当該構造体は、水酸基（−ＯＨ）、カルボニル基（Ｃ＝Ｏ）、カルボキシル基（−ＣＯＯＨ）やそのエステル基、エーテル基（−Ｏ−）、アミド基（−ＮＲＣ＝Ｏ）、ウレイド基（−ＮＲ1（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ2−）等の官能基で置換されてテルペン誘導体となっていてもよい。
【００１３】
そのようなテルペン及びその誘導体の例としては、α−カロテン、β−カロテン、γ−カロテン、リコペンのようなカロテン類やルテイン、ゼアキサンチン、カンタキサンチン、フコキサンチン、アスタキサンチン、アンテラキサンチン、ビオラキサンチンに代表されるキサントフィル類を挙げることができる。
このようなカロテン類、キサントフィル類の更に具体的な化合物としては、以下の化学構造式で表される化合物を挙げることができる。
【００１４】
【化１】
2020117465.tif 000002
【００１５】
上記の各種カロテン類やキサントフィル類の化合物については、分子内に官能基或いは置換基を導入し得る構造を有することから、これまで数多くの置換基を導入した誘導体が合成されてきている。このような置換基導入の誘導体が、本発明に関わる具体的テルペン誘導体である。そのような誘導体としては、以下の特許文献に開示される化合物を挙げることができる。
【００１６】
特開平０８−３３７５９２、特開平１０−３２７８６５、特表２００６−５１７１９７、ＵＳ２００５００４２３５、ＵＳ２００５００９７５８、ＵＳ２００５００９９３０、ＵＳ２００５０２６８７４、ＵＳ２００５０４９２４８、ＵＳ２００５０５９６５９、ＵＳ２００５１１３３７２、ＵＳ２００５１４８５１７、ＵＳ２００６０５８２６９、ＷＯ２００５１０２３５６、ＷＯ２００６１０５２１４、ＷＯ２００７０６７９５７、特開２００７−３３０１０５、特開２００９−２０１３６９、ＷＯ２０１４０５１１００、ＷＯ２００８１０６６０６、ＢＥ６３２６８７、ＦＲ１３５８７６０、ＷＯ２０１６０３７７８５Ａ、ＷＯ２０１０１００２２６Ａ、ＷＯ２０１０１００２２７Ａ、ＷＯ２０１０１００２２９Ａ、ＷＯ２０１０１００２３３Ａ、ＷＯ２０１０１００２２８Ａ、ＷＯ２０１０１００２３２Ａ、ＷＯ２００９０２７４９９Ａ、ＷＯ２００８１１８８６２Ａ、ＵＳ２００５０３７９９５、ＵＳ２００９０９９０６１、ＷＯ２０１５１７８４０４Ａ、ＵＳ２００８００８７９８、ＷＯ２００４０１１４２３Ａ、ＵＳ２００５０９０４６９、ＵＳ２００５１１３３７２、ＵＳ２００５１４３４７５、ＵＳ２００５１４８５１７、ＵＳ２００５００４２３５、ＵＳ２００５００９７５８、ＵＳ２００５００９７８８、ＵＳ２００５００９９３０、ＵＳ２００５０２６８７４、ＵＳ２００５０４９２４８、ＵＳ２００５０５９６３５、ＵＳ２００５０５９６５９、ＵＳ２００５０６５０９６、ＵＳ２００５０７５３１６、ＷＯ２００８０２３２８３Ａ、ＷＯ２００３０６６５８３Ａ、ＷＯ２００３０９３２２９Ａ、特開２００７−２３８５６４、ＷＯ２０１５１７８４０４
【００１７】
このように、本発明に関わるテルペン及びその誘導体は、天然物として単離し得るものや上記の特許文献に開示されている化合物、それらを原料として公知の化学反応により各種のテルペン及びその誘導体を製造することができ、本発明に関わるテルペン及びその誘導体はそれら全てを包含するものである。
【００１８】
テルペンに具体的に導入する置換基としては、カルボキシル基、アミノ基、水酸基、アルキル基、アリール基、複素環基、カルボニル基、エステル基、アミド基、ウレイド基やそれらを適宜組み合わせた置換基を挙げることができる。
【００１９】
本発明に関わるテルペン及びその誘導体が分子内にカルボキシル基を有する場合には塩基物質或いは塩基化合物と通常の塩形成反応をさせることにより薬学上許容される塩を形成することができる。そのような塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩のようなアルカリ金属塩；カルシウム塩、マグネシウム塩のようなアルカリ土類金属塩；リシン塩、オルニチン塩、アルギニン塩のようなアミノ酸塩を挙げることができ、中でもナトリウム塩、リシン塩を好ましいものとして挙げることができる。
【００２０】
また、本発明に関わるテルペン及びその誘導体が分子内にアミノ基を有する場合には酸性物質或いは酸と通常の酸付加反応をさせることにより薬学上許容される酸付加塩を形成することができる。そのような、酸としては、通常の無機酸や有機酸を挙げることができ、具体的には、塩酸、硫酸、硝酸等の無機酸；酢酸、コハク酸、プロピオン酸、シュウ酸、リンゴ酸等の有機酸を挙げることができる。
【００２１】
本発明に関わるテルペン及びその誘導体は、炭素鎖構造において炭素−炭素の単結合と炭素−炭素の二重結合とが交互に連続することから化学構造上トランス及びシスの幾何異性体の構造を取り得る。本発明にかかる有効成分は、トランス体のみならず、シス体や、両幾何異性体の各種混合比での混合物も本発明に関わる有効成分として含むものである。
さらに、本発明に関わるテルペン及びその誘導体は、分子内に不斉炭素を含む場合があり、それに起因する光学異性体やその各種の混合比の化合物も本発明に関わる有効成分として含むものである。
【００２２】
本発明によって処置し得る対象には、ヒトを含む恒温動物、たとえばイヌ、ネコ、ウマ、サル、ウサギ、ラットまたはマウスが含まれるが、これらに限定されない。
【００２３】
本発明に関わるテルペン及びその誘導体またはその塩は、経口剤、注射剤、軟膏剤、坐剤あるいは肛門から直接薬剤を注入する注腸剤として投与可能である。
【００２４】
ドリンク剤、注射剤、注腸剤などの液剤は、有効成分を必要に応じてｐＨ調製剤、緩衝剤、溶解剤、懸濁剤等、等張化剤、安定化剤、防腐剤などの存在下、通常の製剤化技術を使用して製造すればよい。ｐＨ調製剤としては、例えば、塩酸、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、トリエタノールアミンなどを挙げることができる。緩衝材としては、例えば、リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、ホウ酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、アスパラギン酸ナトリウムなどを挙げることができる。懸濁剤としては、例えば、ポリソルベート８０、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ナトリウムカルボキシルメチルセルロース、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、アラビアガム、粉末トラガント、ポリビニルピロリドン、モノステアリン酸グリセリンなどを挙げることができる。溶解剤としては、例えば、ポリソルベート８０、水添ポリオキシエチレンヒマシ油、ニコチン酸アミド、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、マクロゴール、ヒマシ油脂肪酸エチルエステル、ワセリン、グリセリン、プロピレングリコールなどを挙げることができる。安定化剤としては、例えば亜硫酸ナトリウム、メタ亜硫酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、モノエタノールアミンなどを挙げることができる。防腐剤としては、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチル、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、フェノール、クレゾール、クロロクレゾール、塩化ベンザルコニウム、パラベンなどを挙げることができる。
【００２５】
固形の経口剤については錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤等いずれの形態で投与されてもよく、有効成分を、薬学的に許容される賦形剤、崩壊剤、結合剤等の医薬添加剤と適宜混合し、通常の製剤化技術を用いることにより製造することができる。
【００２６】
坐剤については、有効成分をワセリン等の汎用される坐剤基剤と組み合わせて通常の製剤化技術を用いることにより製造することができる。
【００２７】
本発明に関わるテルペン及びその誘導体またはその塩を投与する場合には、症状、患者の年齢、体重、性別もしくは一般的な健康状態に応じて、投与方法及び投与製剤を適宜選択すればよい。例えば体重約７０ｋｇの温血動物に経口あるいは肛門から投与するときには、１日当たり０．０１〜１０００ｍｇ、好ましくは１〜１００ｍｇ、より好ましくは５〜２０ｍｇを１日１回またはそれ以上、例えば、１〜６回で投与すればよい。また、注射剤として投与する場合には、通常成人に対し１日あたり０．５〜５ｍｇ程度を静脈内に投与すればよく、症状に応じて適宜増減すればよい。
【００２８】
本発明に係るテルペンもしくはその誘導体、それらの幾何異性体、それら幾何異性体の混合物、それらの光学異性体またはそれらの塩は、上記の投与量の範囲においては、症状を経過観察しつつ、安全に投与し得る。
【実施例】
【００２９】
以下、本発明を更に実施例により説明する。
ただし、本発明の範囲は下記実施例に何ら限定されるものではない。
【００３０】
実施例１
マウスＰａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｔｈ１７細胞におけるＩＬ−１７Ａ発現抑制
ＩＬ−１７が関与する疾病の原因として、生理的にＩＬ−１７を産生する細胞よりむしろ、Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｔｈ１７細胞によることが考えられる。従って、非特許文献２に従い、マウスのＮａiｖｅ  Ｔ細胞からＩＬ−１β、ＩＬ−６、ＩＬ−２３、抗ＩＦＮ-γ抗体存在下で、Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｔｈ１７細胞に分化させ、それに対するカロテノイド類のＩＬ−１７Ａ遺伝子発現抑制について検討した。
【００３１】
試験方法
細胞の単離：マウスからリンパ節及び脾臓を摘出し、細胞懸濁液を調製した。この細胞懸濁液をＥａｓｙＳｅｐTM  Ｍｏｕｓｅ  Ｎａｉｖｅ  ＣＤ４+  Ｔ  Ｃｅｌｌ  Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ（ＳＴＥＭＣＥＬＬ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）によりナイーブＣＤ４陽性細胞を単離した。
細胞培養：ナイーブＣＤ４陽性Ｔ細胞を、牛胎児血清（ＭＰ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ）含有ＲＰＭＩ−１６４０培地（ＮＡＣＡＬＡＩ  ＴＥＳＱＵＥ）及びサイトカインと中和抗体（ＩＬ−１β、２０ｎｇ／ｍＬ；ＩＬ−６、２０ｎｇ／ｍＬ；ＩＬ−２３、５０ｎｇ／ｍＬ；抗ＩＦＮ-γ抗体、１０μｇ／ｍＬ）中で、２日間の期間にわたって、プレートに結合させた抗ＣＤ３及び可溶性ＣＤ２８抗体（各々１０μｇ／ｍＬ）で刺激した。
ＲＮＡ抽出：培養後の細胞を回収し、ＲＮｅａｓｙ  ９６  Ｋｉｔ（ＱＩＡＧＥＮ）を用いてＲＮＡを抽出した。
【００３２】
逆転写反応：抽出したＲＮＡは、ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔTM  ＲＴ  Ｍａｓｔｅｒ  Ｍｉｘ  （Ｐｅｒｆｅｃｔ  Ｒｅａｌ  Ｔｉｍｅ）（Ｔａｋａｒａ  Ｂｉｏ）を用いて逆転写反応を行った。
リアルタイムＰＣＲ：逆転写物は、ＧＴＦ２Ｂ、ＩＬ−１７Ａ及びＩＬ−２２に対するプライマーとＴＢ  ＧｒｅｅｎTM  Ｐｒｅｍｉｘ  Ｅｘ  ＴａｑTM  ＩＩ（Ｔｌｉ  ＲＮａｓｅＨ  Ｐｌｕｓ）（Ｔａｋａｒａ  Ｂｉｏ）を用いてリアルタイムＰＣＲを行った。
【００３３】
【表１】
2020117465.tif 000003
【００３４】
【表２】
2020117465.tif 000004
【００３５】
結果
結果は、図１に示す。Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｔｈ１７細胞におけるＩＬ−１７遺伝子の発現はＶｅｈｉｃｌｅ群と比較して、アスタキサンチンは４１％、β−カロテンは７３％、フコキサンチンは７２％、カプサンチンは３８％、リコペンは８９％の検出量減少が認められた。従って、これらテルぺノイドは、ＩＬ−１７産生の抑制作用を示した。
【図１】
2020117465.tif 000005
【配列表】
2020117465000001.app