(57)【要約】【課題】効能を増加させ、望ましくない副作用を低減させた化合物による、片頭痛及び他の関連疾患の改善された治療法の提供。【解決手段】ペプチドＮＭＤＡＲ部分アゴニストを投与することにより、片頭痛（例えば、一過性片頭痛、慢性片頭痛、網膜片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、無痛性片頭痛、片頭痛障害、月経片頭痛、腹性片頭痛、小児周期性症候群及び／または群発性頭痛）を治療する方法。ペプチドＮＭＤＡＲ部分アゴニストを投与することにより、患者の片頭痛後の長期後遺症を治療または改善するための方法。ペプチドＮＭＤＡＲ部分アゴニストを投与することを含む、必要とする患者の皮質拡延性抑制または皮質拡延性抑制を原因とする疾患若しくは病態を治療、抑制及び／または予防する方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
それを必要とする患者の片頭痛の治療方法であって、前記患者に以下に表す薬学的有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
2020114863.tif 000011
【請求項２】
前記化合物が約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇまたは約１ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇの用量で患者に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記片頭痛が、一過性片頭痛、慢性片頭痛、網膜片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、無痛性片頭痛、片頭痛障害、月経片頭痛、腹性片頭痛、小児周期性症候群または群発性頭痛である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記片頭痛が、一過性片頭痛、慢性片頭痛、網膜片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、無痛性片頭痛または群発性頭痛である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
前記片頭痛が前兆のある片頭痛（古典的片頭痛）である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記片頭痛が前兆のない片頭痛（一般的な片頭痛）である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記片頭痛がアロディニアを伴う、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
約１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ〜約１２５ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ〜約１１０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇまたは約７０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇの化合物を投与することを含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項９】
約１ｍｇ／ｋｇ、約２．５ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約７５ｍｇ／ｋｇまたは約１００ｍｇ／ｋｇの化合物を投与することを含む、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１０】
前記化合物を１日２回、ほぼ毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、約週１回、約２週毎または約月１回投与することを含む、請求項１〜９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１１】
それを必要とする患者の皮質拡延性抑制の治療、抑制及び／または予防方法であって、前記患者に以下に表す薬学的有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
2020114863.tif 000012
【請求項１２】
それを必要とする患者での片頭痛後の長期後遺症の治療及び／または改善方法であって、前記患者に以下に表す薬学的有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
2020114863.tif 000013
【請求項１３】
前記化合物が約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇまたは約１ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇの化合物の用量で患者に投与される、請求項１１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
約１〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約２〜約１５ｍｇ／ｋｇ、約５〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ〜約１２５ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ〜約１１０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇまたは約７０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇの化合物を投与することを含む、請求項１１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
約１ｍｇ／ｋｇ、約２．５ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約２１ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約７０ｍｇ／ｋｇまたは約１０ｍｇ／ｋｇの化合物を投与することを含む、請求項１１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記化合物を１日２回、ほぼ毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、約週１回、約２週毎または約月１回投与することを含む、請求項１１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
オピオイド、抗うつ剤、抗てんかん薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、セロトニン５ＨＴ１Ｂ／１Ｄアゴニスト、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸アンタゴニストまたは抗炎症化合物との共投与を更に含む、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１８】
前記患者がヒトである、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１９】
前記患者が女性である、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記患者が小児または青年期の患者である、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
それを必要とする患者での外傷性脳損傷の治療及び／または改善方法であって、前記患者に以下に表す薬学的有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
2020114863.tif 000014
【請求項２２】
前記化合物が約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇまたは約１ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇの化合物の用量で患者に投与される、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
約１〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約２〜約１５ｍｇ／ｋｇ、約５〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ〜約１２５ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ〜約１１０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇまたは約７０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇの化合物を投与することを含む、請求項２１〜２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２４】
前記化合物を１日２回、ほぼ毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、約週１回、約２週毎または約月１回投与することを含む、請求項２１〜２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２５】
ステロイド、抗うつ剤、オピオイド、抗てんかん薬、抗発作薬、抗けいれん剤、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、セロトニン５ＨＴ１Ｂ／１Ｄアゴニスト、利尿剤及び／または抗炎症化合物との共投与を更に含む、請求項２１〜２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２６】
前記患者がヒトである、請求項２１〜２５のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１４年６月２３日出願の米国仮出願第６２／０１５，７２７号及び２０１５年１月２９日出願の米国仮出願第６２／１０９，３８６号の利益及び優先権を主張するものであり、同出願はそれぞれその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
片頭痛は、反復する消耗性発作を伴う一過性の一次性頭痛障害であり、血管誘因性に焦点を置いた既存の薬物療法では抑制が不十分である場合が多い。片頭痛発作の発症は閃輝暗点すなわち片頭痛前兆によって予見される場合が多く、皮質拡延性抑制（ＳＤ；Ａｙａｔａ，Ｈｅａｄａｃｈｅ，５０：７２５−３０，２０１０、Ｅｉｋｅｒｍａｎ−Ｈａｅｒｔｅｒら，Ｃｕｒｒ．Ｎｅｕｒｏｌ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．Ｒｅｐ．，１０：１６７−７３，２０１０、及びＳaｎｃｈｅｚ−ｄｅｌ−Ｒｉｏら，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．，１７（３）：２８９−９３，２００４を参照）の現象により引き起こされる。ＳＤは、細胞外カリウムの局所的増加及びグルタミン酸塩の放出によって誘導される、緩慢に伝播する皮質脳波活性の抑制であり、これは皮質部位の広範囲にわたって自己伝播する緩慢な脱分極波を生じさせる。片頭痛患者の約１５〜３０％が前兆のある片頭痛を経験している。
【０００３】
哺乳動物の中枢神経系（ＣＮＳ）は、脳及び脊髄内で特異的シグナル伝達を生じさせるために、神経活性ペプチドであるソマトスタチン、コレシストキニン、ＶＩＰ、サブスタンスＰ、エンケファリン、ニューロペプチドＹ（ＮＰＹ）、ニューロテンシン、ＴＲＨ、ＣＣＫ及びダイノルフィンを含む多くの神経活性ペプチドを用いている（概要はＴｈｅ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，Ｃｏｏｐｅｒ，Ｂｌｏｏｍ及びＲｏｔｈ，５ｔｈ  ｅｄ．，Ｏｘｆｏｒｄ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，１９８６を参照）。ＣＮＳ内で作動する複雑なシグナル伝達経路の綿密な解明により、ＣＮＳと関連した各種障害の重要な治療標的を提示するこれらの神経活性ペプチドによって調節される特異的受容体が同定された。
【０００４】
Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）受容体（ＮＭＤＡＲ）は、脳卒中を伴う脳細胞死、痙攣性障害ならびに学習及び記憶を含む神経変性疾患に関与するとされているような受容体の一種である。ＮＭＤＡＲは、中枢神経系の通常のシナプス伝達、シナプス可塑性及び興奮毒性を調節する際にも中心的役割を果たす。ＮＭＤＡＲは更に、長期増強（ＬＴＰ）にも関与している。ＬＴＰは、学習及び記憶の基盤をなすニューロン接続を持続的に強化するものである（Ｂｌｉｓｓ  ａｎｄ  Ｃｏｌｌｉｎｇｒｉｄｇｅ，１９９３，Ｎａｔｕｒｅ  ３６１：３１−３９を参照）。
【０００５】
中枢神経系（ＣＮＳ）においては２つの一般的クラスのグルタミン酸受容体が特定されている。これはシグナル伝達タンパク質のＧタンパク質共役受容体ファミリーに属する代謝型グルタミン酸受容体と、イオンチャネル型グルタミン酸受容体である（Ｍｕｉｒ  ａｎｄ  Ｌｅｅｓ，Ｓｔｒｏｋｅ，１９９５，２６，５０３−５１３）。イオンチャネル型クラスは、受容体を活性化する選択的リガンドに応じて、ＡＭＰＡ、カイニン酸塩及びＮＭＤＡ受容体というサブタイプに更に細分化される。
【０００６】
ＮＭＤＡを調節する小分子アゴニストとアンタゴニストの化合物が潜在的治療用途向けに開発されてきた。しかしながら、これらの多くは非常に狭い治療指数、ならびに幻覚、運動失調、不合理な挙動及び有意な毒性を含む望ましくない副作用を伴い、そのいずれもが有効性及び／または安全性を制限する。
【０００７】
したがって、効能を増加させ、望ましくない副作用を低減させた化合物による、片頭痛及び他の関連疾患の改善された治療法が依然として必要とされている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【０００８】
ある種の実施形態では、本開示は、それを必要とする患者に薬学的有効量のＧＬＹＸペプチドを投与することを含む、片頭痛の治療方法に関する。ある種の実施形態では、片頭痛は、一過性片頭痛、慢性片頭痛、網膜片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、無痛性片頭痛、片頭痛障害、月経片頭痛、腹性片頭痛、小児周期性症候群及び／または群発性頭痛であり得る。ある種の実施形態では、片頭痛は前兆のない片頭痛（一般的な片頭痛）である。ある種の実施形態では、片頭痛は前兆のある片頭痛（古典的片頭痛）である。ある種の実施形態では、片頭痛はアロディニアを伴う。
【０００９】
例えば、本開示の化合物は、片頭痛（例えば、一過性片頭痛、慢性片頭痛、網膜片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、無痛性片頭痛、片頭痛障害、月経片頭痛、腹性片頭痛、小児周期性症候群及び／または群発性頭痛）の治療においてＮＭＤＡＲグリシン部位の作動と機能的に相互作用すること、または該グリシン部位の作動を調節することができる。
【００１０】
ある種の実施形態では、本開示は、それを必要とする患者に薬学的有効量のＧＬＹＸペプチドを投与することを含む、皮質拡延性抑制（ＳＤ）の治療、抑制及び／または予防方法に関する。ある種の実施形態では、本開示は、患者に薬学的有効量のＧＬＹＸペプチドを投与することを含む、それを必要とする患者での片頭痛後の長期後遺症の治療及び／または改善方法に関する。
【００１１】
ある種の実施形態では、ＧＬＹＸペプチドは、以下の構造：
2020114863.tif 000002
若しくはその薬学的に許容される塩、またはＮＭＤＡＲ部分アゴニスト活性を有するその誘導体を有する。
【００１２】
一態様では、本発明はそれを必要とする患者の片頭痛を治療する方法に関し、該方法は前記患者に以下に表す薬学的有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
2020114863.tif 000003
【００１３】
別の態様では、本発明はそれを必要とする患者の皮質拡延性抑制を治療、抑制及び／または予防する方法に関し、該方法は前記患者に以下に表す薬学的有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
2020114863.tif 000004
【００１４】
別の態様では、本発明はそれを必要とする患者での片頭痛後の長期後遺症の治療及び／または改善方法に関し、該方法は前記患者に以下に表す薬学的有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
2020114863.tif 000005
【００１５】
以下により詳細に説明するように、前兆時点で投与されると有効である薬剤は、例えば片頭痛の初期段階での介入を可能にすることにより患者にとって有益となり得る。本明細書に記載する方法は、前兆時点でのＧＬＹＸペプチドの投与を含む、前兆のある片頭痛の治療に適用できると考えられる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】海馬スライスのＣＡ１野における限局性の高［Ｋ+］によって誘発される拡延性抑制（ＳＤ）を示す。これは、ニューロン及びグリアの大量脱分極の伝播波を反映する輝度の変化をもたらす。
【図２】脳スライス内で誘発されたＳＤのデータである。開始部位でのＳＤの個々の経時的な現象出現に関してベースライン領域との間に有意差は見られなかった（Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉの多重比較検定、Ｐ＞０．２０）。このことは、ＧＬＹＸ−１３がＳＤの開始を変化させなかったことを示す。
【図３】ＧＬＹＸ−１３がＳＤ開始の不応期を延長させることを示すデータである。対照スライス（対照）では前回のＳＤの５分後にＳＤが正常に誘起されたが、ＧＬＹＸ−１３（ＧＬＹＸ−１３  ３０’）で処置したスライスでは誘発できなかった。
【図４】図４Ａは、ＳＤ「前兆」である輝度の増加が開始ピペットから広がり、スライス全体に伝播していることを示し、更にこれはＳＤ伝導速度の算出に使用できる（図４Ｂ）。
【図５】ＳＤの反復した現象出現が安定な速度を維持したかどうか、及びＧＬＹＸ−１３がＳＤ伝導速度に影響を及ぼしたかどうかを検証するために、連続する６回のＳＤを分析した反復測定一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）である。
【図６】図６Ａは、対照の錘体神経内でＳＤの２回の現象出現に応答したスパイン収縮を示し、一方の図６Ｂは１０μＭのＧＬＹＸ−１３存在下での同様の過程を示す。図６Ｃは、ＧＬＹＸ−１３がＳＤ後、スパインサイズの回復を助けたことを示す。
【図７】図７Ａは広がりの距離を示し、図７Ｂは（エストロゲン処置及びオイル処置）ラットにおける拡延性抑制の広がる速度を示す。この図から、オイル処置したラットと比較して広がる速度が速いことがわかる。
【図８】エストロゲン処置したラットからのスライスでのＳＤが、オイル処置したラットよりも長く移動したことを示す。
【図９】図９Ａは、ラット実験でのＳＤと関連した輝度変化が、ＧＬＹＸ−１３の存在下で遅延化されることを示す。図９Ｂは、ＧＬＹＸ−１３の存在下で誘発されたＳＤを示す。
【図１０】ＧＬＹＸ−１３適用前後でのエストロゲン処置したラットからのＳＤ伝播速度に対するＧＬＹＸ−１３の効果（Ｆ（１，８）＝３．１；ｐ＜０．０５）、及び２群間でのＧＬＹＸ−１３の曝露前を示す（Ｆ（１，８）＝４．２；ｐ＜０．０５）。
【図１１】爆風を受けた２４時間後のＰＥＬ試験において、ｒａｐａｓｔｉｎｅｌ（３ｍｇ／ｋｇをＩＶ、爆風後１時間）が、爆風で誘発された学習欠損を改善したことを示す。図１１Ａは、爆風からの回復時間（正常歩行までの潜在時間）データを示す。図１１Ｂは、対象間計画を使用して、単一の３分間の積極的感情学習（ＰＥＬ）試験セッションを、爆風を受けた２４時間後に実施した結果を示す。群当たりＮ＝４−６であった。*Ｐ＜０．０５（図１１Ａ）ＡＮＯＶＡ、または（図１１Ｂ）ＦｉｓｈｅｒのＰＬＳＤ事後検定（ｒａｐａｓｔｉｎｅｌ＋ＴＢＩ対ビヒクル＋ＴＢＩ）。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
片頭痛の分類
片頭痛は１９８８年に初めて包括的に分類された。直近では２００４年にＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｈｅａｄａｃｈｅ  Ｓｏｃｉｅｔｙがその頭痛分類を更新した。この分類によれば、片頭痛は、その中でも緊張型頭痛及び群発頭痛とならび一次性頭痛に分類されている。
【００１８】
片頭痛は次の７つのサブクラスに分類される（サブクラスの一部は更なる細分を含む）。
【００１９】
前兆のない片頭痛、すなわち「一般的な片頭痛」は、前兆を伴わない片頭痛を含む。
【００２０】
前兆のある片頭痛、すなわち「古典的片頭痛」は通常、前兆を伴う片頭痛を含む。あまり一般的ではないが、前兆は、無頭痛で、または非片頭痛性頭痛を伴って発症することがある。このほかに家族性片麻痺性片頭痛及び散発性片麻痺性片頭痛の２種があり、その患者は前兆及び付随する運動麻痺のある片頭痛を有する。近親者が同じ病態を有していた場合、それを「家族性」と呼び、それ以外の場合は「散発性」と呼ぶ。別の種類は脳底型片頭痛であり、この場合の頭痛及び前兆は、構音障害、回転性めまい、耳鳴りまたは多数の他の脳幹関連症状を伴うが、運動麻痺は伴わない。このタイプは当初、脳底動脈、すなわち脳幹に供給される動脈の痙攣によるものと考えられていた。前兆のある片頭痛の診断のためのガイドラインは、例えば、Ｅｒｉｋｓｅｎら，Ｅｕｒｏｐｅａｎ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ  １１：５８３−５９１，２００４及びＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｈｅａｄａｃｈｅ  Ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ，Ｓｅｃｏｎｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（ＩＣＨＤ−ＩＩ）に記載されている。前兆のある片頭痛のサブタイプとして、片頭痛性頭痛を伴う典型的前兆（ＩＨＳ  １．２．１）、非片頭痛性頭痛を伴う典型的前兆（ＩＨＳ  １．２．２）、頭痛のない典型的前兆（ＩＨＳ  １．２．３）、家族性片麻痺性片頭痛（ＩＨＳ  １．２．４）、散発性片麻痺性片頭痛（ＩＨＳ  １．２．５）及び脳底型片頭痛（ＩＨＳ  １．２．６）などのＩＣＨＤ−ＩＩに定められたものが挙げられる。
【００２１】
片頭痛の一般的な先駆症状である小児周期性症候群は、周期性嘔吐（不定期な強度間隔の嘔吐）、腹性片頭痛（通常、悪心を伴う腹痛）及び小児期の良性発作性めまい（不定期なめまい発作）を含む。
【００２２】
網膜片頭痛は、片目の視覚障害または一時的な失明をも伴う片頭痛を含む。
【００２３】
片頭痛の合併症とは、異常に長いか、または異常に頻度が高い、あるいは発作または脳病変を伴う片頭痛性頭痛及び／または前兆を表す。
【００２４】
片頭痛の疑いとは、片頭痛の一部の特徴を有する病態であるが、確実にそれを片頭痛と診断する根拠が十分でない（薬物の過剰併用が存在する）場合を表す。
【００２５】
慢性片頭痛は、片頭痛の合併症であり、片頭痛の診断基準を満たし、より長い時間間隔で発生する頭痛である。具体的には、３か月を超えて１５日／月以上である。
【００２６】
片頭痛には、（１）頭痛の数時間または数日前に発生する前駆症状、（２）頭痛の直前に起こる前兆、（３）頭痛段階として知られる痛みの段階、及び（４）後発症状、すなわち片頭痛発作に続いて経験される影響、の４つの段階が起こり得るが、この全段階が必ずしも生じるわけではない。
【００２７】
前駆症状または予兆症状は、片頭痛患者の約６０％に生じ、痛みの開始または前兆の２時間〜２日前に発症する。この症状には、気分の変調、過敏性、抑うつまたは多幸感、疲労感、特定の食物への過剰な欲求、筋肉のこり（特に頸部）、便秘または下痢、及び臭いまたは騒音に対する過敏性を含め、多種多様な現象が含まれ得る。これは前兆のある片頭痛の患者にも前兆のない片頭痛の患者にも発生し得る。
【００２８】
前兆とは、頭痛の前またはその期間中に発生する一過性の限局性神経現象である。これは数分間にわたって段階的に出現し、通常は６０分も持続しない。症状は性質として視覚性、感覚性または運動性であり得、多くの人が複数を経験する。視覚性影響が最も発生頻度が高く、症例の最大９９％に発生し、症例の５０％超では感覚性または運動性の影響を伴わない。視覚障害は多くの場合、閃輝暗点（点滅する視界の部分的な変化領域であり、読み取りまたは運転の妨げとなる場合がある）。これらは通常、視野の中心付近で始まり、その後、城の要塞または壁のように見えると形容されるジグザグ線を伴って、視野の端へと拡大していく。通常、線は白黒であるが、色のついた線を見る人もいる。視野の一部が欠ける（同名半盲として知られる）人もあれば、視野のぼけを経験する人もある。
【００２９】
感覚前兆は、２番目に一般的なタイプであり、前兆のある患者の３０〜４０％に発生する。多くの場合、最初に手及び腕の片側にしびれ感が発生し、同側の鼻から口の領域まで広がる。刺痛が止んだ後、位置感覚の消失と共に、通常は麻痺が発生する。前兆段階のその他の症状としては、発話または言語障害、回転性めまい及びあまり一般的ではないが運動性の問題を挙げることができる。運動症状では、片頭痛が片麻痺性片頭痛であり、他の前兆とは異なり、衰弱が１時間より長く持続する場合が多い。
【００３０】
前兆が後続の頭痛を伴わずに発生する場合もある。サイレント片頭痛とも呼ばれる無痛性片頭痛は、比較的まれであり、前兆及び他の症状を含むが、後続の頭痛を伴わない（すなわち、痛み段階がない）。
【００３１】
痛み段階の間、頭痛は通常、片側、拍動性であり、強度は中程度から重度である。通常は徐々に出現し、身体活動によって悪化する。しかしながら症例の４０％超では、痛みが両側にある場合があり、一般に頸痛を伴う。両側の痛みは特に、前兆のない片頭痛を有する患者によく見られる。あまり一般的ではないが、主として後頭部または頭頂部に痛みが生じる場合もある。痛みは通常、成人では４〜７２時間持続するが、幼児では１時間も持続しない場合が多い。発作の頻度は持続期間中に数回から週に数回までさまざまであり、平均して約月１回である。
【００３２】
痛みは、悪心、嘔吐、光に対する感受性、音に対する感受性、臭いに対する感受性、疲労感及び過敏性を伴う場合が多い。脳底型片頭痛、すなわち脳幹に関連した神経学的な症状を有する、または身体の両側に神経学的な症状を有する片頭痛では、一般的な影響として、回転性めまい感、ふらつき及び錯乱が挙げられる。悪心は患者のほぼ９０％に発生し、嘔吐は約１／３に発生する。その他の症状として、霧視、鼻詰まり、下痢、頻尿、蒼白または発汗を含み得る。頸部のこりが発生し得るのと同様に、頭皮の腫脹または圧痛が発生する場合がある。
【００３３】
主たる頭痛が終息した後、片頭痛の影響が数日間持続する場合がある。これを片頭痛の後発症状と呼ぶ。多くが片頭痛のあった領域に痛みを感じると訴えており、頭痛が止んだ後の数日間、思考障害を訴える患者もいる。患者は疲労を感じる場合や、頭部の痛み、認知障害、胃腸症状、気分の変化及び虚弱を有する場合がある。
【００３４】
ＧＬＹＸペプチド
ＧＬＹＸ−１３は、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸型グルタミン酸受容体（ＮＭＤＡＲ）の活性化に対して、先例のない調節作用を有する新開発の即効性、長期持続性の抗うつ剤である。この抗うつ剤は、ＮＭＤＡ受容体の活性化に必要なＮＭＤＡ受容体上の必須コアゴニストグリシン部位に作用し、この重要な受容体の活性を正常化し、低すぎる場合は増加させ、高すぎる場合は抑制する。この作用によってＧＬＹＸ−１３は、ＬＴＤを抑制しつつシナプス強度の長期増強（ＬＴＰ）の誘発を増強できると共に、加齢動物からの海馬スライスにおいて正常なＬＴＰを回復させることができる。
【００３５】
本明細書中で使用する場合、用語「ＧＬＹＸペプチド」は、ＮＭＤＡＲグリシン部位の部分アゴニスト／アンタゴニスト活性を有するペプチドを指す。ＧＬＹＸペプチドは、参照により本明細書に組み込まれる、米国特許第５，７６３，３９３号及び同第４，０８６，１９６号に記載されているような、周知の組換えまたは合成方法によって得ても良い。いくつかの実施形態では、ＧＬＹＸは、アミノ酸配列Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−ＴｈｒまたはＬ−スレオニル−Ｌ−プロリル−Ｌ−プロリル−Ｌ−スレオニンアミドを有するテトラペプチドを指す。
【００３６】
例えば、ＧＬＹＸ−１３は、以下に表す化合物を指す。
2020114863.tif 000006
式Ｉ
【００３７】
また、限定されないが酢酸塩のようなＧＬＹＸ−１３の多形体、ホモログ、水和物、溶媒和物、遊離塩基及び／または好適な塩の形態も企図される。このペプチドは、ＵＳ５，７６３，３９３に更に記載されているように、環式形態であっても非環式形態であっても良い。いくつかの実施形態では、ＧＬＹＸ−１３アナログが、１以上のＴｈｒ群またはＰｒｏ群に挿入または欠失部分、例えば、ＣＨ2、ＯＨまたはＮＨ2部分の欠失を含んでいて良い。他の実施形態では、ＧＬＹＸ−１３は、１つ以上のハロゲン、Ｃ1〜Ｃ3アルキル（場合によりハロゲンまたはアミノと置換される）、ヒドロキシ及び／またはアミノと場合により置換されていても良い。ＮＭＤＡＲのグリシン部位の部分的アゴニストは、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる、ＵＳ５，７６３，３９３、ＵＳ６，１０７，２７１及びＷｏｏｄら，ＮｅｕｒｏＲｅｐｏｒｔ，１９，１０５９−１０６１，２００８に記載されている。
【００３８】
本明細書で開示されるペプチドは、天然アミノ酸及び非天然アミノ酸の両方、例えば、全体が天然アミノ酸（若しくはその誘導体）、全体が非天然アミノ酸（若しくはその誘導体）、または天然アミノ酸と非天然アミノ酸の混合物を含み得ると理解して良い。例えば、ＧＬＹＸ‐１３中の、１、２、３またはそれ以上のアミノ酸がそれぞれ独立してＤ配置またはＬ配置を有していて良い。
【００３９】
ＧＬＹＸ−１３は、主にＮＲ２Ｂ含有ＮＭＤＡＲに作用することができ、既知のＮＭＤＡＲモジュレーター、例えばＣＰＣ−１０１，６０６及びケタミンなどの古典的な副作用を示すことがない。ある種の実施形態では、ＧＬＹＸ−１３を治療有効量で対象に投与したとき、ＧＬＹＸ−１３によって本質的に鎮静作用を伴わずに抗片頭痛または他の治療効果を得ることができる。更に他の実施形態では、ＧＬＹＸ−１３は濫用可能性（例えば、習慣性でなくても良い）を有することがない。
【００４０】
いくつかの実施形態では、ＧＬＹＸ−１３はＡＭＰＡ  ＧｌｕＲ１セリン８４５のリン酸化を増加させることができる。ある種の実施形態では、ＧＬＹＸ−１３はグリコーゲンシンターゼキナーゼ３β（ＧＳＫ−３β）を活性化することができる。場合によっては、ＧＬＹＸ−１３の投与後、β−カテニンのレベルが変化し得る。
【００４１】
いくつかの実施形態では、ＧＬＹＸ−１３またはＧＬＹＸ−１３を含む組成物は、血漿レベルに対して、インビボ力価及び／または脳内濃度が高い静脈投与を可能にし得る。
【００４２】
加えて、ＧＬＹＸ−１３はグリシン部位アンタゴニスト、例えばＬ−７０１，３２４、または治療指数が狭く、その結果、治療効果と運動失調との間の用量範囲が非常に狭くなる他のグリシン部位アンタゴニストと比較して、大きい治療指数を有することができる。例えば、Ｌ−７０１，３２４は抗けいれん効果を有する用量で運動失調が生じた（Ｂｒｉｓｔｏｗら、ＪＰＥＴ２７９：４９２−５０１，１９９６）。同様に、一連のＭｅｒｚ社の化合物は抗けいれん効果を有する用量で運動失調が生じた（Ｐａｒｓｏｎｓら，ＪＰＥＴ２８３：１２６４−１２７５，１９９７）。
【００４３】
方法
一態様では、本発明はそれを必要とする患者の片頭痛を治療する方法に関し、該方法は前記患者に以下に表す薬学的有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
2020114863.tif 000007
【００４４】
ある種の実施形態では、本化合物は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇまたは約１ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇの化合物の用量で患者に投与される。
【００４５】
ある種の実施形態では、片頭痛は、一過性片頭痛、慢性片頭痛、網膜片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、無痛性片頭痛、片頭痛障害、月経片頭痛、腹性片頭痛、小児周期性症候群または群発性頭痛である。
【００４６】
ある種の実施形態では、片頭痛は、一過性片頭痛、慢性片頭痛、網膜片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、無痛性片頭痛または群発性頭痛である。
【００４７】
ある種の実施形態では、片頭痛は前兆のある片頭痛（古典的片頭痛）である。
【００４８】
ある種の実施形態では、片頭痛は前兆のない片頭痛（一般的な片頭痛）である。
【００４９】
ある種の実施形態では、片頭痛はアロディニアを伴う。
【００５０】
ある種の実施形態では、方法は、約１〜１０ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ〜約１２５ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ〜約１１０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇまたは約７０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇの化合物を投与することを含む。
【００５１】
ある種の実施形態では、方法は、約１ｍｇ／ｋｇ、約２．５ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約１５ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約７０ｍｇ／ｋｇまたは約１００ｍｇ／ｋｇの化合物を投与することを含む。
【００５２】
ある種の実施形態では、方法は、約１日２回、ほぼ毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、約週１回、約２週毎または約４週毎に化合物を投与することを含む。
【００５３】
別の態様では、本発明はそれを必要とする患者の皮質拡延性抑制または皮質拡延性抑制を原因とする疾患若しくは病態を治療、抑制及び／または予防する方法に関し、該方法は前記患者に以下に表す薬学的有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
2020114863.tif 000008
【００５４】
別の態様では、本発明はそれを必要とする患者での片頭痛後の長期後遺症の治療及び／または改善方法に関し、該方法は前記患者に以下に表す薬学的有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む。
2020114863.tif 000009
【００５５】
ある種の実施形態では、化合物は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇの化合物の用量で患者に投与される。ある種の実施形態では、化合物は、約１ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇの化合物の用量で患者に投与される。
【００５６】
ある種の実施形態では、方法は、約１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ〜２０ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ〜約１２５ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ〜約１１０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇまたは約７０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇの化合物を投与することを含む。
【００５７】
ある種の実施形態では、方法は、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約７０ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇまたは約１００ｍｇ／ｋｇの化合物を投与することを含む。
【００５８】
ある種の実施形態では、方法は、約１日２回、ほぼ毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、約週１回または約２週毎、または例えば毎月化合物を投与することを含む。
【００５９】
ある種の実施形態では、方法は、オピオイド、抗うつ剤、抗てんかん薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、セロトニン５ＨＴ１Ｂ／１Ｄアゴニスト、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸アンタゴニストまたは抗炎症化合物との共投与を更に含む。
【００６０】
ＮＭＤＡＲ活性は、多くの実験的状況においてＳＤの現象を促進することができ、または更にはそれに必須でもあり得る。したがって、ＮＭＤＡＲの過剰活性化を防止する化合物は、片頭痛発作の発症を減少させ、更には予防するための重要な新規治療法であり得る。例えば、ＧＬＹＸ−１３は、後述するようにインビトロの海馬スライスにおいてＳＤの発生及び伝播を抑制する。特定の実験において、ＧＬＹＸ−１３は、細胞外カリウム濃度の局所的増加によってＳＤの誘発を完全に防止することができ、及び／または完全にブロックしない場合でも、ＳＤの伝播速度を低下させることができる。更に、ＧＬＹＸ−１３は、ＳＤ後、樹状突起スパインの元のサイズへの復帰を改善することができる。例えば、本明細書では、予防的に及び／または急性時に患者の片頭痛を治療する方法を提供するこのような投与により、患者の重症な片頭痛発作を改善する（または、いくつかの実施形態では早期に抑える）ことができる。
【００６１】
ある種の実施形態では、患者はヒトである。企図される患者には、女性患者及び／または青年期の患者を含む。
【００６２】
また本明細書では、治療耐性患者での片頭痛（例えば、一過性片頭痛、慢性片頭痛、網膜片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、無痛性片頭痛、片頭痛障害、月経片頭痛、腹性片頭痛、小児周期性症候群または群発性頭痛）の治療方法、または難治性片頭痛、例えば少なくとも１つのまたは少なくとも２つの他の化合物または治療法の適切なクールに反応しない、及び／または反応しなかった片頭痛に罹患している患者の治療方法も提供する。例えば、ａ）場合により患者を治療耐性と同定すること、及びｂ）ＧＬＹＸ−１３の有効量を前記患者に投与することを含む、治療耐性患者での片頭痛（例えば、一過性片頭痛、慢性片頭痛、網膜片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、無痛性片頭痛、片頭痛障害、月経片頭痛、腹性片頭痛、小児周期性症候群または群発性頭痛）の治療方法を提供する。ある種の実施形態では、片頭痛は前兆のある片頭痛である。
【００６３】
本明細書の一実施形態では、有効量のＧＬＹＸペプチド、例えば単一単位用量を投与することを含む、それを必要とする患者での片頭痛（例えば、一過性片頭痛、慢性片頭痛、網膜片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、無痛性片頭痛、片頭痛障害、月経片頭痛、腹性片頭痛、小児周期性症候群または群発性頭痛）の急性治療方法を提供する。例えば、本明細書の一実施形態では、有効量（例えば単一単位用量）のＧＬＹＸ−１３ペプチドを急性投与することを含む、片頭痛発作を発症しているそれを必要とする患者での片頭痛の治療方法を企図する。このような方法は、前記投与後の約２週間以下、１週間以下、１日以下または１時間以下（例えば１５分以下、３０分以下）で少なくとも１種の片頭痛症状の患者を回復させることができる。いくつかの実施形態では、このような方法は、前記投与後の約１日以上、１週間以上または２週間以上で少なくとも１種の片頭痛症状の患者を回復させることができる。例えば、本明細書では片頭痛を罹患している患者に有効量のＧＬＹＸペプチドを投与することを含む方法を提供し、ここでの前記患者はＧＬＹＸペプチドの最初の投与後、片頭痛治療用の別の薬剤を投与した同じ患者と比較して、実質的に早期に少なくとも１種の片頭痛症状が軽減される。当業者であれば、このような急性投与方法は入院または外来環境において有利であり得ることが理解されよう。本明細書に記載する方法は、前兆のある片頭痛期間中に発生するアロディニアの治療にも有益であり得る。
【００６４】
本発明の方法は、抑うつ症を有する患者、外傷性脳損傷、てんかんに罹患した患者、または脳卒中の危険性がある患者の治療に使用しても良い。例えば、本明細書の一実施形態では、有効量のＧＬＹＸペプチド、例えばＧＬＹＸ−１３を投与することを含む、外傷性脳損傷を治療するための方法を提供する。他の実施形態では、有効量のＧＬＹＸペプチド、例えばＧＬＹＸ−１３を投与することを含む、てんかんを治療するための方法を提供する。
【００６５】
前兆のある片頭痛の患者は、心臓血管症状に加えて、他の神経性及び／または心理性病態及び障害の危険が増加する場合がある。例えば、前兆のある片頭痛と大うつ病または自殺企図との併発は、非誘発発作を生じる危険性を増加させたことが示されている（Ｈｅｓｄｏｒｆｆｅｒら、Ｅｐｉｌｅｐｓｙ  Ｒｅｓ．７５（２−３）：２２０−２２３，２００７）。前兆のある片頭痛と関連した他の病態として、ＮＯ活性マーカーが有意に高いこと、抑うつ症の発生率が増加すること、及び一般的な集団の場合よりも遺伝バイオマーカーと脳卒中との相関性が実質的に高いことが挙げられる（Ｅｔｍｉｎａｎら、＃ＭＪ３３０（７４８２）：６３，２００５）。これらの病態のいずれかを有する、またはその危険性のある片頭痛患者は、この疾患を治療するまたはそれに対処するための投薬を受けている場合があり、このような薬剤が前兆のある片頭痛の治療に現在使用されている薬剤と悪い相互作用を起こす場合がある。本明細書に示すように、これらの病態の一部はトリプタン治療（例えば、脳卒中及びスマトリプタン治療）にとって禁忌である。加えて、セロトニン症候群に関して、ＦＤＡが２００６年に公衆衛生勧告を出した。これはトリプタンをセロトニン再摂取阻害剤（ＳＳＲＩ）または選択的なセロトニン／ノルエピネフリン再摂取阻害剤（ＳＮＲＩ）である特定の抗抑うつ剤と併用するときに発生する場合がある致命的病態である。したがって、本明細書に記載する方法は、抑うつ症を有する患者または脳卒中患者またはその危険性のある患者の治療に有益であり得る。
【００６６】
用量
本発明のどの組成物も、患者の症状、年齢及び体重、治療及び予防される障害の性質及び重度、投与経路、ならびに対象組成物の形態に応じて用量が異なる。どの対象製剤も単一用量または分割用量で患者に投与して良い。本開示の組成物の用量は、当業者に既知の手法によって、または本明細書で教示する手法によって容易に決定することができる。一般に、本化合物は、例えば０．０５ｍｇ〜３０００ｍｇ（固体形態として測定）、例えば約１０ｍｇ〜約５００ｍｇ、または例えば約１〜約２００ｍｇ／ｋｇの１日用量でヒトに投与されるとき満足な結果を得ることができる。用量範囲には、例えば１０〜１０００ｍｇ（例えば５０〜８００ｍｇ）を含む。いくつかの実施形態では、５０、１００、１５０、２００、２２５、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０または１０００ｍｇの化合物が投与される。あるいは、患者の体重を用いて用量を算出することができる。例えば、患者に投与される化合物、またはその医薬組成物の用量は、１〜５００ｍｇ／ｋｇ（例えば５〜２５０ｍｇ／ｋｇ）の範囲内であって良い。例示的非限定的実施形態では、用量は５〜２００ｍｇ／ｋｇ（例えば、１、２、２．５、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５または５０ｍｇ／ｋｇ）、または１５〜１００ｍｇ／ｋｇ（例えば、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０または２００ｍｇ／ｋｇ）の範囲内であって良い。例示的非限定的実施形態では、用量は、１〜１５ｍｇ／ｋｇ、５０〜１００ｍｇ／ｋｇ、６０〜９０ｍｇ／ｋｇまたは７０〜８０ｍｇ／ｋｇの範囲内であって良い。
【００６７】
ＧＬＹＸ−１３は、高い治療指数を提供することができる。例えば、ＧＬＹＸ−１３は、約１〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約１０〜約２００ｍｇ／ｋｇ、例えば約３０ｍｇ／ｋｇ、約７５ｍｇ／ｋｇまたは約１００ｍｇ／ｋｇの静脈内投与または皮下投与の用量範囲で、治療的に有効であり得る。いくつかの実施形態では、例えば５００ｍｇ／ｋｇの静脈内投与用量で運動失調が発生しない。
【００６８】
治療用途で必要とされるＧＬＹＸペプチドの治療有効量は、治療される病態の形態、要求される治療時間の長さ、患者の年齢及び病態によって異なり、最終的には主治医によって決定される。利便上、２週、１週、６日、５日、４日、３日、２日または１日にわたって有効である単一用量で、あるいは適切な間隔、例えば１日当たり２回、３回、４回またはそれ以上の分割用量で投与される複数回用量として望ましい用量を投与して良い。
【００６９】
本開示の任意の特定の組成物に対して、有効用量または有効量、及び製剤を投与するタイミングに及ぼされ得る何らかの影響を特定することが必要な場合がある。これは、１つ以上の動物群（好ましくは群当たり少なくとも５匹の動物）を使用した、本明細書に記載する定期的な実験によって、または必要に応じてヒトの試験にて得ることができる。任意の対象組成物の有効性及び治療または予防の方法は、組成物を投与した後、１つ以上の該当する指数を測定して、この指数の治療後値と同一指数の治療前値とを比較して投与効果評価することにより、評価することができる。
【００７０】
所与の患者において最も有効な治療をもたらす正確な投与時間及び任意の特定の対象組成物の量は、対象組成物の活性、薬動動態及び生物学的利用能、患者の生理学的条件（年齢、性別、疾患の種別及びステージ、全身状態、所与の用量に対する応答性、ならびに薬剤の種類を含む）、投与経路などに依存する。本明細書に提示されるガイドラインを利用すると、治療を最適化する、例えば、最適な時間及び／または投与量を決定することができ、対象のモニタリングならびに用量及びタイミングの調整からなる典型的な実験しか必要としない。
【００７１】
対象が治療されている間、治療期間中の所定時間で１つ以上の関連指数を測定することにより、患者の健康をモニタリングしても良い。このようなモニタリングの結果に応じて、組成物、量、投与時間及び製剤を含めた、治療法を最適化しても良い。同一パラメータを測定することによって、改善の程度を特定し、患者を周期的に再評価することができる。これらの再評価に基づいて、投与される対象組成物量及び場合により投与時間の調整を行っても良い。
【００７２】
化合物の最適容量未満である少ない用量から、治療を開始しても良い。その後、最適な治療効果が得られるまで、少量ずつ用量量を増加させても良い。
【００７３】
対象組成物の使用により、別の薬剤の効果の開始及び期間を補完（ｃｏｍｐｌｉｍｅｎｔａｒｙ）できるため、組成物に含有される何らかの個々の薬剤の必要用量を減らすことができる。
【００７４】
対象組成物の毒性及び治療効能は、細胞培養または実験動物についての標準的な薬学的手順、例えばＬＤ５０及びＥＤ５０を決定するための手順によって測定することができる。
【００７５】
これらの細胞培養アッセイ及び動物試験から得たデータを、ヒトに使用される用量の範囲を処方する際に使用することができる。いずれの対象組成物の用量も、ほとんどまたは全く毒性を有しないＥＤ５０に収まる循環濃度の範囲内であることが好ましい。用いる剤形及び利用される投与経路に応じて、この範囲内で用量を変えることができる。最初に本開示の組成物に合わせて、細胞培養アッセイから治療有効量を推定しても良い。
【００７６】
ある種の実施形態では、ＧＬＹＸペプチドは予防手段として（すなわち、前駆症状段階の前に）投与される。ある種の実施形態では、ＧＬＹＸペプチドは前駆症状の期間に投与される。ある種の実施形態では、ＧＬＹＸペプチドは前兆時に投与される。「前兆時」とは、前兆の発症後かつ片頭痛の痛みの発症前の任意の時間を意味する。ある種の実施形態では、ＧＬＹＸペプチドは片頭痛の痛みを発症した後に投与される。ある種の実施形態では、ＧＬＹＸペプチドは、例えばその症状を軽減するために、後発症状期間に投与される。
【００７７】
本明細書で使用する場合、用語「予防する」は、本明細書に記載する疾患、障害または病態の１種以上の症状または病態（例えば、前兆のある痛みまたは片頭痛、及びアロディニアの有無にかかわらない痛みまたは片頭痛）を予防する予防療法または治療法を指す。予防療法は、例えば、疾患、障害または病態の発症に先立つ事象（例えば片頭痛前兆）の前（「曝露前予防」）、または後（「曝露後予防」）に開始することができる。本明細書に記載するＧＬＹＸペプチド、またはその薬学的に許容される塩若しくはその溶媒和物、またはその医薬組成物の投与を含む予防療法は、急性、短期、または慢性であり得る。予防療法のクール中に投与用量を変更しても良い。Ｋａｎｉｅｃｋｉら、「Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｐｒｉｍａｒｙ  Ｈｅａｄａｃｈｅ：Ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｍｉｇｒａｉｎｅ」、Ｓｔａｎｄａｒｄｓ  ｏｆ  Ｃａｒｅ  ｆｏｒ  Ｈｅａｄａｃｈｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｃｈｉｃａｇｏ（ＩＬ）：Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｈｅａｄａｃｈｅ  Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ；２００４，ｐ．４０−５２所収も参照されたい。
【００７８】
製剤
本開示のＧＬＹＸペプチドは、使用目的に応じて、当該技術分野において周知である各種手段によって投与することができる。例えば、本開示の組成物を経口投与しようとする場合、組成物を錠剤、カプセル、顆粒、粉末またはシロップとして製剤化することができる。あるいは、本開示の製剤を注射（静脈内、筋肉内または皮下）、滴下注入製剤または坐剤として非経口的に投与しても良い。眼の粘膜経路による適用の場合、本開示の組成物を点眼薬または眼軟膏として処方しても良い。これらの製剤は従来の手段によって調製でき、必要に応じて、任意の従来的添加剤、例えば賦形剤、バインダー、崩壊剤、潤滑剤、矯味剤、可溶化剤、懸濁助剤、乳化剤またはコーティング剤と混合しても良い。
【００７９】
発現ベクターに組み込まれる、ＧＬＹＸペプチドをコードするＤＮＡを既知の投与方法のいずれかを用いて投与し、インビボでＧＬＹＸペプチドを発現させることができる。
【００８０】
本発明の製剤では、湿潤剤、乳化剤及び滑沢剤、例えばラウリル硫酸ナトリウム及びステアリン酸マグネシウム、ならびに着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、香料及び芳香剤、防腐剤及び抗酸化剤が製剤内に存在しても良い。
【００８１】
対象組成物は、経口、局所（口腔及び舌下を含む）、経直腸、経膣、エアゾール状及び／または非経口投与に好適なものであっても良い。製剤は利便上、単位用量形態で存在する場合もあり、薬学分野で周知であるいずれかの方法によって調製されても良い。単一用量を製造するために担体材料と組み合わせることができる組成物の量は、治療される対象及び特定の投与様式に応じて異なる。
【００８２】
このような製剤の調製方法は、本開示の関連組成物と担体及び場合により１種以上の補助的成分と混合する工程を含む。一般に製剤は、関連剤と液体担体若しくは微粒子状固体担体、またはその両方とを均一かつ緊密に混合した後、必要に応じて生成物を成形することにより調製される。
【００８３】
経口投与に好適な製剤は、カプセル、カシェ剤、ピル、錠剤、トローチ剤（風味をつけた基剤、通常はスクロース及びアカシアまたはトラガカントを使用）、粉末、顆粒の形態、または水性若しくは非水性液体の溶液若しくは懸濁液の形態、または水中油型若しくは油中水型液体エマルジョンの形態、またはエリキシル若しくはシロップの形態、またはパステル剤の形態（ゼラチン及びグリセリンまたはスクロース及びアカシアなどの不活性塩基を使用）であって良く、それぞれ所定量のその対象組成物を活性成分として含有し得る。本開示の組成物は、ボーラス、舐剤またはペーストとして投与しても良い。
【００８４】
経口投与用の固体投与形態（カプセル、錠剤、ピル、糖衣錠、粉末、顆粒など）の場合、対象組成物は１種以上の薬学的に許容される担体、例えばクエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウム及び／または以下、（１）充填剤または増量剤、例えばデンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール及び／またはケイ酸、（２）バインダー、例えばカルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース及び／またはアカシアなど、（３）湿潤剤、例えばグリセロール、（４）崩壊剤、例えば寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩及び炭酸ナトリウム）、（５）溶液緩染剤、例えばパラフィン、（６）吸収促進剤、例えば第四級アンモニウム化合物、（７）湿潤剤、例えば、アセチルアルコール及びグリセロールモノステアレート、（８）吸収剤、例えばカオリン及びベントナイト粘土、（９）潤滑剤、例えばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム及びこれらの混合物；ならびに（１０）着色剤、のいずれかと混合される。カプセル、錠剤及びピルの場合、組成物は緩衝剤を含む場合もある。同類の固体組成物を、ラクトースすなわち乳糖のような賦形剤、ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどを使用した軟質及び硬質のゼラチンカプセルの充填剤として用いても良い。
【００８５】
場合により１種以上の補助成分と共に、圧縮または成形によって錠剤を作成しても良い。圧縮錠剤はバインダー（例えば、ゼラチンまたはヒドロキシプロピルメチルセルロース）、潤滑剤、不活性希釈剤、防腐剤、崩壊剤（例えば、ナトリウムデンプングリコレートまたは架橋カルボキシメチルセルロースナトリウム）、表面活性剤または分散剤を使用して調製することができる。不活性希釈液で湿らせた対象組成物の混合物を好適な機械で成形することにより、成形錠剤を作製することができる。糖衣剤、カプセル、ピル及び顆粒などの錠剤及びその他の固体剤形は、場合により薬学的製剤分野で周知の腸溶性コーティングまたはその他のコーティングなどのコーティング剤及びシェルを用いて打錠または調製して良い。
【００８６】
経口投与用の液体剤形には、薬学的に許容されるエマルジョン、ミクロエマルジョン、溶液、懸濁液、シロップ、及びエリキシルが含まれる。液体剤形には、対象組成物に加えて、当該技術分野において一般に使用される不活性希釈剤、例えば、水またはその他の溶媒、可溶化剤及び乳化剤、例えばエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、油（具体的には綿実油、落花生油、コーン油、胚芽油、オリーブ油、ひまし油及びゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフリルアルコール、ソルビタンのポリエチレングリコール及び脂肪酸エステル、シクロデキストリンならびにこれらの混合物を含有し得る。
【００８７】
懸濁液には、対象組成物に加えて、懸濁剤、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトール及びソルビタンエステル、微晶質セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天及びトラガカント、ならびにこれらの混合物を含有し得る。
【００８８】
経直腸または経膣投与用の製剤は、坐剤として与えられても良く、対象組成物と、例えば、カカオ脂、ポリエチレングリコール、座薬ワックスまたはサリチレートを含む、１種以上の好適な非刺激性賦形剤または担体と混合することにより調製できる。更に坐剤は、室温では固形だが、体温では液体であり、それによって体腔内で溶け、活性剤を放出する。経膣投与に好適な製剤には、当業者に適切であることが知られているような担体を含むペッサリー、タンポン、クリーム、ジェル、ペースト、フォームまたはスプレー製剤がある。
【００８９】
対象組成物の経皮投与用剤形としては、粉末、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ジェル、溶液及びパッチが挙げられる。
【００９０】
局所眼投与の場合、本発明の組成物は溶液、ジェル、軟膏、懸濁液または固体挿入物の形態をとることができ、単位用量が治療有効量の活性成分を含むように、または併用療法の場合にはその何倍かを含むように製剤化され得る。
【００９１】
非経口投与に好適な本発明の医薬組成物は、１種以上の薬学的に許容される無菌等張水溶液または非水溶液、分散液、懸濁液若しくはエマルジョン、または使用直前に無菌注射剤または分散液にて復元できる無菌粉末と組み合わせられた対象組成物を含む。これは抗酸化剤、緩衝剤、静菌薬、製剤が意図されたレシピエントの血液と等張性を示す溶質、または懸濁剤若しくは増粘剤を含有し得る。
【００９２】
本発明の医薬組成物に用いることができる好適な水溶性及び非水溶性担体の例として、水、エタノール、ポリオール（例えばグリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、及びこれらの好適な混合物、オリーブ油のような植物油、ならびに注入可能な有機エステル、例えばオレイン酸エチル及びシクロデキストリンが挙げられる。例えば、レシチンのようなコーティング材料を使用することにより、また分散性の場合には必要な粒子サイズを維持することにより、更に界面活性物質を使用することにより、適切な流動性を維持することができる。
【００９３】
併用療法
本明細書に記載するＧＬＹＸペプチド（例えば、ＧＬＹＸ−１３）はいずれも、単独でまたは他の薬剤と組み合わせて使用することで、本明細書で述べる疾患または病態のいずれをも治療または予防することができる。例えば一部の併用療法において、１種以上の治療化合物の用量を、単独で投与されたときの標準用量よりも低減することができる。
【００９４】
本発明の方法は、オピオイド、抗抑うつ剤、抗てんかん薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、セロトニン５ＨＴ１Ｂ／１Ｄアゴニスト、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸アンタゴニストまたは抗炎症化合物と、ＧＬＹＸペプチドとの共投与も含む。
【００９５】
本開示のある種の実施形態では、片頭痛（例えば、一過性片頭痛、慢性片頭痛、網膜片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、無痛性片頭痛、片頭痛障害、月経片頭痛、腹性片頭痛、小児周期性症候群または群発性頭痛）を治療する薬剤を製造するために、ＧＬＹＸペプチド（複数可）を単独でまたは１種以上の他の抗うつ治療薬、例えば三環系抗うつ薬、ＭＡＯ−Ｉ、ＳＳＲＩ及び二重若しくは三重の摂取阻害剤ならびに／または抗不安薬と組み合わせて使用することに関する。ＧＬＹＸペプチドと組み合わせて使用できる例示的な薬物として、Ａｎａｆｒａｎｉｌ、Ａｄａｐｉｎ、Ａｖｅｎｔｙｌ、Ｅｌａｖｉｌ、Ｎｏｒｐｒａｍｉｎ、Ｐａｍｅｌｏｒ、Ｐｅｒｔｏｆｒａｎｅ、Ｓｉｎｅｑｕａｎ、Ｓｕｒｍｏｎｔｉｌ、Ｔｏｆｒａｎｉｌ、Ｖｉｖａｃｔｉｌ、Ｐａｒｎａｔｅ、Ｎａｒｄｉｌ、Ｍａｒｐｌａｎ、Ｃｅｌｅｘａ、Ｌｅｘａｐｒｏ、Ｌｕｖｏｘ、Ｐａｘｉｌ、Ｐｒｏｚａｃ、Ｚｏｌｏｆｔ、Ｗｅｌｌｂｕｔｒｉｎ、Ｅｆｆｅｘｏｒ、Ｒｅｍｅｒｏｎ、Ｃｙｍｂａｌｔａ、Ｄｅｓｙｒｅｌ（トラゾドン）及びＬｕｄｉｏｍｉｌｌが挙げられる。
【００９６】
ある種の実施形態では、オピオイドは、アルフェンタニル、ブトルファノール、ブプレノルフィン、デキストロモラミド、デゾシン、デキストロプロポキシフェン、コデイン、ジヒドロコデイン、ジフェノキシレート、エトルフィン、フェンタニル、ヒドロコドン、ヒドロモルホン、ケトベミドン、ロペラミド、レボルファノール、レボメサドン、メプタジノール、メサドン、モルヒネ、モルヒネ−６−グルクロニド、ナルブフィン、ナロキソン、オキシコドン、オキシモルホン、ペンタゾシン、ペチジン、ピリトラミド、プロポキシフェン、レミフェンタニル、スルフェンタニル、チリジン及びトラマドールからなる群から選択される。
【００９７】
ある種の実施形態では、抗抑うつ剤は、アジナゾラム、アラプロクラート、アミネプチン、アミトリプチリン／クロルジアゼポキシド併用、アチパメゾール、アザミアンセリン、バジナプリン、ベフラリン、ビフェメラン、ビノダリン、ビペナモール、ブロファロミン、カロキサゾン、セリクラミン、シアノプラミン、シモキサトン、シタロプラム、クレメプロール、クロボキサミン、ダゼピニル、デアノール、デメキシプチリン、ジベンゼピン、ドチエピン、ドロキシドパ、エネフェキシン、エスタゾラム、エトペリドン、フェモキセチン、フェンガビン、フェゾラミン、フルオトラセン、イダゾキサン、インダルピン、インデロキサジン、イプリンドール、レボプロチリン、リチウム、リトキセチン、ロフェプラミン、メジホキサミン、メタプラミン、メトラリンドール、ミアンセリン、ミルナシプラン、ミナプリン、ミルタザピン、モンチレリン、ネブラセタム、ネホパム、ニアラミド、ノミフェンシン、ノルフルオキセチン、オロチレリン、オキサフロザン、ピナゼパム、ピルリンドール、ピゾチリン、リタンセリン、ロリプラム、セルクロレミン（ｓｅｒｃｌｏｒｅｍｉｎｅ）、セチプチリン、シブトラミン、スルブチアミン、スルピリド、テニロキサジン、トザリノン、チロリベリン、チアネプチン、チフルカルビン、トラゾドン、トフェナシン、トフィソパム、トロキサトン、トモキセチン、ベラリプリド、ビロキサジン、ビクァリン、ジメリジン及びゾメタピンからなる群から選択される。
【００９８】
ある種の実施形態では、抗てんかん薬は、カルバマゼピン、フルピルチン、ガバペンチン、ラモトリジン、オキスカルバゼピン、フェニトイン、レチガビン、トピラマート及びバルプロエートからなる群から選択される。
【００９９】
ある種の実施形態では、ＮＳＡＩＤは、アセメタシン、アスピリン、セレコキシブ、デラコキシブ、ジクロフェナク、ジフルニサル、エテンザミド、エトフェナマート、エトリコキシブ、フェノプロフェン、フルフェナム酸、フルルビプロフェン、ロナゾラク、ロルノキシカム、イブプロフェン、インドメタシン、イソキシカム、ケブゾン、ケトプロフェン、ケトロラク、ナプロキセン、ナブメトン、ニフルム酸、スリンダク、トルメチン、ピロキシカム、メクロフェナム酸、メフェナム酸、メロキシカム、メタミゾール、モフェブタゾン、オキシフェンブタゾン、パレコキシブ、フェニドン、フェニルブタゾン、ピロキシカム、プロパセタモール、プロピフェナゾン、ロフェコキシブ、サリチルアミド、スプロフェン、チアプロフェン酸、テノキシカム、バルデコキシブ、４−（４−シクロヘキシル−２−メチルオキサゾール−５−イル）−２−フルオロベンゼンスルホンアミド、Ｎ−［２−（シクロヘキシルオキシ）−４−ニトロフェニル］メタンスルホンアミド、２−（３，４−ジフルオロフェニル）−４−（３−ヒドロキシ−３−メチルブトキシ）−５−［４−（メチルスルホニル）フェニル］−３（２Ｈ）−ピリダジノン及び２−（３，５−ジフルオロフェニル）−３−［４−（メチルスルホニル）フェニル］−２−シクロペンテン−１−オンからなる群から選択される。
【０１００】
ある種の実施形態では、セロトニン５ＨＴ１Ｂ／１Ｄアゴニストは、エレトリプタン、フロバトリプタン、ナラトリプタン、リザトリプタン、スマトリプタン及びゾルミトリプタンからなる群から選択される。
【０１０１】
ある種の実施形態では、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸アンタゴニストは、アマンタジン、アプチガネル、ベソンプロジル、ブジピン、コナントキンＧ、デルセミン、デキサナビノール、デキストロメトルファン、デキストロプロポキシフェン、フェルバマート、フルオロフェルバマート、ガシクリジン、グリシン、イペノキサゾン、カイトセファリン、ケタミン、ケトベミドン、ラニセミン、リコスチネル、ミダホテル、メマンチン、Ｄ−メサドン、Ｄ−モルヒネ、ミルナシプラン、ネラメキサン、オルフェナドリン、レマセミド、スルファゾシン、ＦＰＬ−１２，４９５（ラセミド（ｒａｃｅｍｉｄｅ）代謝産物）、トピラマート、（αＲ）−α−アミノ−５−クロロ−１−（ホスホノメチル）−１Ｈ−ベンズイミダゾール−２−プロパン酸、１−アミノシクロペンタンカルボン酸、［５−（アミノメチル）−２−［［［（５Ｓ）−９−クロロ−２，３，６，７−テトラヒドロ−２，３−ジオキソ−１Ｈ−，５Ｈ−ピリド［１，２，３−ｄｅ］キノキサリン−５−イル］アセチル］アミノ］フェノキシ］−酢酸、α−アミノ−２−（２−ホスホノエチル）−シクロヘキサンプロピオン酸、α−アミノ−４−（ホスホノメチル）−ベンゼン酢酸、（３Ｅ）−２−アミノ−４−（ホスホノメチル）−３−ヘプテン酸、３−［（１Ｅ）−２−カルボキシ−２−フェニルエテニル］−４，６−ジクロロ−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸、２−ヒドロキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチル−エタンアミニウムとの８−クロロ−２，３−ジヒドロピリダジノ［４，５−ｂ］キノリン−１，４−ジオン５−酸化物塩、Ｎ’−［２−クロロ−５−（メチルチオ）フェニル］−Ｎ−メチル−Ｎ−［３−（メチルチオ）フェニル］−グアニジン、Ｎ’−［２−クロロ−５−（メチルチオ）フェニル］−Ｎ−メチル−Ｎ−［３−［（Ｒ）−メチルスルフィニル］フェニル］−グアニジン、６−クロロ−２，３，４，９−テトラヒドロ−９−メチル−２，３−ジオキソ−１Ｈ−インデノ［１，２−ｂ］ピラジン−９−酢酸、７−クロロチオキヌレン酸、（３Ｓ，４ａＲ，６Ｓ，８ａＲ）−デカヒドロ−６−（ホスホノメチル）−３−イソキノリンカルボン酸、（−）６，７−ジクロロ−１，４−ジヒドロ−５−［３−（メトキシメチル）−５−（３−ピリジニル）−４−Ｈ−１，２，４−トリアゾル−４−イル］−２，３−キノキサリンジオン、４，６−ジクロロ−３−［（Ｅ）−（２−オキソ−１−フェニル−３−ピロリジニリデン）メチル］−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸、（２Ｒ，４Ｓ）−ｒｅｌ−５，７−ジクロロ−１，２，３，４−テトラヒドロ−４−［［（フェニルアミノ）カルボニル］アミノ］−２−キノリンカルボン酸、（３Ｒ，４Ｓ）−ｒｅｌ−３，４−ジヒドロ−３−［４−ヒドロキシ−４−（フェニルメチル）−１−ピペリジニル］−２Ｈ−１−ベンゾピラン−４，７−ジオール、２−［（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−イル）アミノ］−アセトアミド、１，４−ジヒドロ−６−メチル−５−［（メチルアミノ）メチル］−７−ニトロ−２，３−キノキサリンジオン、［２−（８，９−ジオキソ−２，６−ジアザビシクロ［５．２．０］ノン−１（７）−エン−２−イル）エチル］−ホスホン酸、（２Ｒ，６Ｓ）−１���２，３，４，５，６−ヘキサヒドロ−３−［（２Ｓ）−２−メトキシプロピル］−６，１１，１１−トリメチル−２，６−メタノ−３−ベンゾアゾシン−９−オル、２−ヒドロキシ−５−［［（ペンタフルオロフェニル）メチル］アミノ］−安息香酸、１−［２−（４−ヒドロキシフェノキシ）エチル］−４−［（４−メチルフェニル）メチル］−４−ピペリジノール、１−［４−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）−３−ブチニル］−４−（フェニルメチル）−ピペリジン、２−メチル−６−フェニルエチニル）−ピリジン、３−（ホスホノメチル）−Ｌ−フェニルアラニン及び３，６，７−テトラヒドロ−２，３−ジオキソ−Ｎ−フェニル−１Ｈ，５Ｈ−ピリド［１，２，３−ｄｅ］キノキサリン−５−アセトアミドからなる群から選択される。
【０１０２】
ある種の実施形態では、抗炎症化合物は、アスピリン、セレコキシブ、コーチゾン、デラコキシブ、ジフルニサル、エトリコキシブ、フェノプロフェン、イブプロフェン、ケトプロフェン、ナプロキセン、プレドニソロン、スリンダク、トルメチン、ピロキシカム、メフェナム酸、メロキシカム、フェニルブタゾン、ロフェコキシブ、スプロフェン、バルデコキシブ、４−（４−シクロヘキシル−２−メチルオキサゾール−５−イル）−２−フルオロベンゼンスルホンアミド、Ｎ−［２−（シクロヘキシルオキシ）−４−ニトロフェニル］メタンスルホンアミド、２−（３，４−ジフルオロフェニル）−４−（３−ヒドロキシ−３−メチルブトキシ）−５−［４−（メチルスルホニル）フェニル］−３（２Ｈ）−ピリダジノン及び２−（３，５−ジフルオロフェニル）−３−［４−（メチルスルホニル）フェニル］−２−シクロペンテン−１−オンからなる群から選択される。
【０１０３】
本開示は、以下の非限定的な実施例によって示される複数の態様を有する。
【実施例】
【０１０４】
実施例１
本明細書に記載する試験には、インビトロ海馬スライスにおける、細胞外複数部位でのＳＤ伝播速度の電気生理学的モニタリング、及びＳＤが誘発する樹状突起スパインのサイズ変化をリアルタイムにイメージングするための２光子レーザー走査顕微鏡を利用した。ＮＭＤＡＲ受容体グリシン部位に機能する新規部分アゴニストであるＧＬＹＸ−１３の効果を、ＳＤ伝播の閾値及び速度、ならびに樹状突起スパインのモルホロジーに与えるＳＤのリアルタイム効果に基づいて検討した。ＧＬＹＸ−１３は、場合により細胞外カリウム濃度の局所的増加によるＳＤの誘発を完全に防止し、かつＳＤの伝搬速度を持続的に低下させた。海馬ＣＡ１領域をＳＤが通過すると、樹状突起スパインは急速な収縮を生じ、ニューロン脱分極の復帰後に逆進した。ＧＬＹＸ−１３は、樹状突起スパインがＳＤ後に元のサイズ及び位置に戻る速度及び程度を改善した。これは、ＮＭＤＡ受容体活性を調節する薬物及びその他が、反復性片頭痛発作で起こり得る損傷から脳のシナプス接続を保護できることを示す。
【０１０５】
一般的な試験法
薬物
外部溶液及びパッチピペット溶液は全て、脱イオン蒸留水（抵抗率＞１８ＭΩｃｍ-2；Ｍｉｌｌｉ−Ｑシステム）を用いて作製した。細胞外及び細胞内溶液を作製するための化学物質は、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，ＵＳＡ）から購入した。ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ  ５９４はＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓから購入した。
【０１０６】
スライスの調製及び細胞外記録法
１４〜２１日齢のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（登録商標）ラット（Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｆａｒｍｓ、Ｈｕｄｓｏｎ，ＮＹ）からの海馬スライスで実験を実施した。ラットをイソフルオレンで深麻酔して犠牲死させ、素早く脳を切除し、酸素化した（９５％Ｏ2―５％ＣＯ2）氷冷人工脳脊髄液（ＡＣＳＦ）中に配置した。ＡＣＳＦはＮａＣｌ  １２６、ＫＣｌ  ２．５、ＣａＣｌ2  ２．６、ＭｇＣｌ2  １．３、ＮａＨ2ＰＯ4  １．２５、ＮａＨＣＯ3  ２６及びグルコース  １１（単位ｍＭ）を含有する。脳を二等分して前頭葉を切除し、個々の脳半球をシアノアクリレート接着剤を使用してステージに固定し、スライスする間、連続して酸素添加された氷冷ＡＣＳＦ中に浸漬した。ビブラトーム（Ｌｅｉｃａ  １２００ｓ）を使用して、海馬を含む４００μｍ厚の冠状スライスを切り出して、インターフェイス式保持チャンバーに移し、室温にて最低１時間培養した後、Ｈａａｓ型インターフェイス式チャンバーに移して３２℃で記録した。実験開始前に９５％Ｏ2／５％ＣＯ2で飽和させたＡＣＳＦ（４ｍＬ／ｍｉｎ、ＡＣＳＦ（ｍＭ）：ＮａＣｌ  １２６；ＫＣｌ  ３；ＮａＨ2ＰＯ4  １．２５；ＭｇＣｌ  １．３；ＣａＣｌ2  ２．５；ＮａＨＣＯ3  ２６；グルコース  １０）をスライスに灌流させ、全ての薬物を浴適用した。
【０１０７】
細胞外記録は、Ｃｌａｍｐｅｘ（ｖ．９）付属ＭｕｌｔｉＣｌａｍｐ  ７００Ｂ（Ａｘｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を使用して実施し、１ｋＨｚでフィルタリングし、３ｋＨｚでデジタル化した。低抵抗（ＡＣＳＦ充填後１〜２ＭΩ）の記録用電極を薄壁ボロシリケートガラスで作製して、ＣＡ１領域の放線状層にあるシャファー側枝の終端野の先端樹状領域に、ＳＤを開始するピペットから約１５０ｍｍの距離間隔で挿入し、ＳＤの広がりをモニターした。浸漬された記録チャンバーを赤外線微分干渉コントラスト（ＤＩＣ）光学素子を備えるＺｅｉｓｓ  Ａｘｉｏｓｋｏｐ  ２ＦＳ直立顕微鏡に載置した。ＳＤによって生じるスライスの輝度変化を、１０倍の対物レンズを使用して撮像した。ＰＴＩマスターシステムによって制御された冷却ＣＣＤカメラ（ＣｏｏｌＳＮＡＰ  ＨＱ）を用いて１００ｍｓ毎に輝度変化を撮像した。電気生理学的データはＣｌａｍｐｆｉｔ  ９を用いて分析した。イメージングデータはＩｍａｇｅＪ（ＮＩＨ）を用いてデジタル化及び再構築した。
【０１０８】
双極性ステンレス刺激電極（ＦＨＣ、Ｂｏｗｄｏｉｎ，ＭＥ）をＣＡ３領域のシャファー側枝−交連繊維に置き、３０秒毎に１回、最大ｆＥＰＳＰの約５０％を誘起するように調節された刺激強度で電流パルスを印加した（５０〜１００ｐＡ；継続時間１００μｓ）。ＩＳＯ−Ｆｌｅｘ製アイソレータからの電気刺激は、Ｍａｓｔｅｒ  ８−パルス発生器（ＡＭＰＩ、Ｊｅｒｕｓａｌｅｍ，Ｉｓｒａｅｌ）によって制御し、Ｍｕｌｔｉｃｌａｍｐ  ７００Ｂ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）によって作動させた。Ｄｉｇｉｄａｔａ  １３２２を用いて信号をデジタル化し、Ｍｕｌｔｉｃｌａｍｐ  ７００Ｂ増幅器を使用して記録した。負の最大偏向の２０〜８０％を基にした線形補間によってｆＥＰＳＰの傾きを測定し、実験開始前の少なくとも１５分間、傾きが１０％以内で安定していることを確認した。ＩＢＭ互換パーソナルコンピューター上でＣｌａｍｐｆｉｔ（Ｖｅｒｓｉｏｎ  ９；Ａｘｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ）を使用してデータを分析した。少なくとも３０分の安定なベースライン期間について、放線状層の先端樹状野で、誘起されたｆＥＰＳＰ（最大振幅の５０％、２〜４ｍＶ）を記録した。
【０１０９】
海馬拡延性抑制の誘発
海馬の尖端冠状スライスを顕微鏡ステージ上の浸漬した記録チャンバーに移し、温めたＡＣＳＦ（３２℃）を灌流させ、３ｍＬ／ｍｉｎの灌流速度で細胞外［Ｋ+］を８ｍＭまで上昇させた。ガラスピペットによって３ＭのＫＣｌを加圧注入パフ（ｐｒｅｓｓｕｒｅ−ｉｎｊｅｃｔｉｎｇ  ｐｕｆｆ）して拡延性抑制を開始した。５０〜１００ｍｓ持続する８〜１０ｐｓｉの圧力パルスを、Ｐｉｃｏｓｐｒｉｔｚｅｒ  ＩＩ（Ｐａｒｋｅｒ  Ｈａｎｎｉｆｉｎ、Ｈｏｌｌｉｓ，ＮＨ）によって作動させた。３ＭのＫＣｌを充填したときのピペット抵抗は、２±０．２ＭΩであった。
【０１１０】
樹状突起スパインの収縮／回復の動的イメージング分析
海馬スライスのＣＡ１錘体神経にＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ５９４（１００μＭ）を１５分間充填した後、以前に記載されているように（Ｚｈａｎｇら，２００８）、６０ｘ／１．１ｎＡの水浸赤外線対物レンズ及び４倍デジタルズームを備えるカスタマイズされた２光子レーザー走査顕微鏡Ｏｌｙｍｐｕｓ  ＢＸ６１ＷＩを使用して３次樹状突起を撮像した。移動誤差を回避するために、０．５μｍのｚステップ間隔で、焦点層から＋／−３μｍ範囲のＸＹＺ走査モードを使用した。各画像の完了まで０．４５秒を要し、単一の深さプロファイル時間は７秒であった。蛍光の飽和と、過剰な励起光からの小さい樹状突起スパインに対する何らかの光毒性の徴候の両方を回避するように十分に注意した。起こり得る色素の光退色及び光毒性を低減するため、深さプロファイルを５分間隔で反復した。８１０ｎｍに調整したＭａｉ／Ｔａｉレーザー（Ｓｏｌｉｄ−Ｓｔａｔｅ  Ｌａｓｅｒ、Ｍｏｕｎｔａｉｎ  Ｖｉｅｗ，ＣＡ）を励起に使用し、Ｏｌｙｍｐｕｓ  ＦｌｕｏｖｉｅｗＦＶ３００ソフトウェア（Ｏｌｙｍｐｕｓ  Ａｍｅｒｉｃａ，Ｍｅｌｖｉｌｌｅ，ＮＹ）によって画像取得を制御した。ピンホールを最大開口し、発光スペクトル窓を背景上の信号に最適化した共焦点レーザー走査ヘッドの光電子増倍管によって落射蛍光を検出した。トランス蛍光経路において、５６５ｎｍのダイクロイックミラーを使用して、緑と赤の蛍光を分離し、それぞれＨＱ５２５／５０及びＨＱ６０５／５０発光フィルター（Ｃｈｒｏｍａ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｒｏｃｋｉｎｇｈａｍ，ＶＴ）を通過させて、透過または反射された励起光を除去して、２つの光電子増倍管によって同時に検出した。図は６μｍの全体的なＺプロファイルからの圧縮画像を示し、及び各投影を使用して、スパインの体積指数としての強度を算出した。
【０１１１】
データ分析
１ｋＨｚの遮断周波数を有する８極ベッセル低域フィルターを通して記録信号をフィルタリングし、１００μｓ間隔でＣｌａｍｐｅｘ（Ｖ．９）によってサンプリングした。Ｃｌａｍｐｆｉｔ（Ｖ．９）によってｆＥＰＳＰ傾きを算出した後、そのデータをＯｒｉｇｉｎ  ６．１（Ｍｉｃｒｏｃａｌ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、ＭＡ）によって更に処理し、ＣｏｒｅｌＤｒａｗ  １０（Ｃｏｒｅｌ、Ｏｔｔａｗａ，Ｏｎｔａｒｉｏ，Ｃａｎａｄａ）を用いて表示した。全データをＳＰＳＳソフトウェア（ＳＰＳＳ  Ｉｎｃ．，Ｃｈｉｃａｇｏ，ＩＬ）を使用して、一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）またはスチューデントのｔ検定によって分析した。統計的有意差は、ｐ＜０．０５に指定した。データは、実験全体の平均±ＳＥＭを表す。
【０１１２】
結果
限局性の高［Ｋ＋］によって海馬スライスのＣＡ１野に誘発される拡延性抑制
［Ｋ+］ｏを３２℃で８ｍＭまで上昇させた人工脳脊髄液（ＡＣＳＦ）中で、ＣＡ１放線状層（図１、左上）の領域上に３Ｍ［Ｋ+］ｏを１回、局所的にパフ（１００ｍｓ）すると、海馬のＣＡ１全領域にわたって９±５．４ｍｍ／ｍｉｎ（ｎ＝１６）の伝搬速度で広がるＳＤが確実に誘発された。負電位シフト（図１、右上）を特徴とするＳＤは、海馬ＣＡ１領域の放線状層シナプス層で−８±１．５ｍＶ（ｎ＝３０）の最大シフトを示し、通常これは４５秒以上持続した。
【０１１３】
ＳＤを１０分毎に誘発して、負電位シフト（図１、右上、斜線領域）、有効な振幅の測定値、及びＫ+の細胞外空間伝導の持続時間が反復したＳＤで安定的であるかを試験した。開始電極から記録された負電位シフトの領域が、６００μｍ離れた遠位の記録用電極よりも大きくなった一方（図１、下）、いずれの部位でも、１０分間隔で誘発された反復性の経時的なＳＤの個々の現象出現に関して振幅または伝播速度に有意差は見られなかった（Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉの多重比較検定、Ｐ＞０．２０）。これらの結果は、再現可能なＳＤの負電位シフトを、少なくとも最初の１０分間、海馬のＣＡ１野に安定的に反復して誘起できることを示す。
【０１１４】
ＧＬＹＸ−１３は、海馬の拡延性抑制の伝播を抑制し、不応期を延長する
ＮＭＤＡ受容体グリシンコアゴニスト部位の新規部分アゴニストＧＬＹＸ−１３が、ＮＭＤＡ受容体の活性化を生理学的範囲内に調節し、過剰な活性化を防止することにより、ＳＤの閾値を上げること、またはＳＤを阻止することができるという仮説を検証するために、ＧＬＹＸ−１３を１、１０または５０μｍで海馬スライスに３０分間、浴適用した後、ＣＡ１領域の放線状層に高［Ｋ＋］を短時間放出（パッチピペットで１ｍＭ）し、ＳＤの誘発を試みた。ナイーブスライスに高［Ｋ＋］が最初に放出されたときと、それから３０分間、それぞれ３つの試験濃度（１、１０または５０μＭ）のＧＬＹＸ−１３で浴適用した後に基づいて用量反応関係を確定し、一方でＳＤを検出するためにＤＣ電位を記録した。
【０１１５】
薬物を含まないＡＣＳＦ中で少なくとも３回のＳＤが最初に誘起された後、スライスにＧＬＹＸ−１３を灌流させ、１０分毎にＳＤの誘発を継続した。図２上部に例示するように、１０μＭのＧＬＹＸ−１３の場合、開始部位でのＳＤの個々の経時的な現象出現に関してベースライン領域との間に有意差は見られなかった（Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉの多重比較検定、Ｐ＞０．２０）。このことは、ＧＬＹＸ−１３がＳＤの開始を変化させなかったことを示す。
【０１１６】
次にＧＬＹＸ−１３が、ＳＤの反復による、近い（近位）記録部位と遠い（遠位）記録部位でのＳＤの振幅の関係に影響を及ぼしたかどうかを確認する試験を行った。スライスに１０μＭのＧＬＹＸ−１３を灌流させ、１０分毎にＳＤの誘発を継続した（図２、下）。Ｂｏｎｆｅｒｒｏｎｉの多重比較検定（Ｐ＞０．２０）は再度、対照スライスでのＳＤの個々の経時的な現象出現に関して領域間で有意差を示さなかった。近位の記録部位で、ＧＬＹＸ−１３はＳＤの負電位シフトの開始に影響を及ぼさなかった。
【０１１７】
開始部位でのＳＤの振幅は、遠位記録では、ＳＤの負電位シフトの領域と相関していた（図２、下）。その結果、ＧＬＹＸ−１３の有無による近位／遠位領域比を比較した。図２下部に示したように、遠位部位と開始部位との間の領域比は、１０μＭのＧＬＹＸ−１３の存在下では、６回目のＳＤ（第６のＳＤ）の適用により激減した。二元ＡＮＯＶＡは次の、１）観察全体にわたる同じスライスでのＳＤの反復による時間的効果（Ｆ（１、１２）＝５．１７、ｐ＜０．０５）；２）薬物治療による効果（Ｆ（１，１２）＝５．０７、ｐ＜０．０５）；及び３）時間と治療との相互作用（Ｆ（１，１２）＝３０．９１、ｐ＜０．０１）の３つの有意な効果を示した。これらの結果は、ＳＤの周期的な負電位シフトが遠位部位と開始部位との間の振幅比を変化させること、及びこの抑制がＧＬＹＸ−１３によって著しく増強されたことを示す。これらの知見は、特に複数のＳＤ事象後、ＧＬＹＸ−１３が脳経由のＳＤ伝播を有意に抑制できることを示している。
【０１１８】
前述の試験において、ＧＬＹＸ−１３が負電位シフトの振幅を減少させること、及び伝導速度を低下させることにより、ＳＤの伝播を制限でき、効果は複数のＳＤ後に最大であることが実証された。各ＳＤの開始間隔を短縮することにより、対照スライスでの各ＳＤが次の正常なＳＤ（ｎ＝７）では３〜４分間の絶対不応期を有したことを見出した。１０μＭのＧＬＹＸ−１３は、この不応期を５〜６分（ｎ＝６）まで延長させた。図３に示すように、対照スライス（対照）では前回のＳＤの５分後にＳＤが正常に誘起されたが、ＧＬＹＸ−１３（ＧＬＹＸ−１３  ３０’）で処置したスライスでは誘発できなかった。
【０１１９】
ＳＤが誘発する細胞外空間の体積シフトにより生じる光学濃度の内在的変化を利用した、ＳＤ伝播の測定
ＳＤにより、脱分極された細胞に流体が流出し、細胞が膨張するにつれ、細胞外空間体積の大きな収縮を誘発する。これはインビボの内在的光学濃度の変化として表れ得る。このような輝度強度の変化は、透過光ＤＩＣ顕微鏡を使用して脳スライス中に容易に検出することもできる。図４Ａは、ＳＤ「前兆」である輝度の増加が開始ピペットから広がり、スライス全体に伝播していることを示し、更にこれはＳＤ伝導速度の算出に使用できる（図４Ｂ）。電気生理学的記録を使用した、ＳＤの負の最大電位シフトと、輝度増加の時間経過とは良好に相関した。このように、距離を用いて輝度変化の時間経過を算出することは、ＳＤ伝導速度を測定する正確かつ利便な方法を提供する。
【０１２０】
ＳＤの反復が同一伝導速度を示すかどうかを判定するために、図４Ａ上部に図示たように、１５０μｍ離れた５箇所で輝度変化をモニターした。反復測定一元ＡＮＯＶＡは、ＳＤが個々のスライスの範囲内で、Ｐ１からＰ５まで安定した伝達速度を維持することを示した（Ｆ（５，３５）＝２．４２、ｐ＞０．０５）。その結果、伝達速度を使用して、Ｐ１からＰ５まで、連続した現象出現にわたり、ＳＤの安定性を試験することができた。ＳＤの平均伝播速度は９．０７±０．５５ｍｍ／ｍｉｎであり、範囲は７．５４〜１１．１４ｍｍ／ｍｉｎ（ｎ＝１６）であった。
【０１２１】
ＳＤの反復した現象出現が安定な速度を維持したかどうか、及びＧＬＹＸ−１３がＳＤ伝導速度に影響を及ぼしたかどうかを検証するために、図５に示したように、反復測定値によるＡＮＯＶＡ試験を使用し、連続する６回のＳＤを分析した。分析により、対照とＧＬＹＸ−１３処置したスライスとの間に有意差が見られた（Ｆ（１，５０）＝３．６６、ｐ＜０．０１）。ＳＤの数列は、全分散の３８．５％を占めた。このことは、ＳＤ伝播速度がＳＤ回数の増加と共に有意に低下したことを示す（Ｆ（５，５０）＝１４．０１、ｐ＜０．０１）。二元ＡＮＯＶＡでは、反復する全ＳＤにわたるＳＤ伝播速度に対するＧＬＹＸ−１３効果は有意に達しなかったが、ＳＤの回数とＧＬＹＸ−１３処置との間には有意な相互作用があった（Ｆ（５，５０）＝２．５３、Ｐ＜０．０５）。このことは、ＧＬＹＸ−１３（黒丸）が７回目のＳＤによってのみＳＤ伝播速度を有意に低下させたことを反映している。
【０１２２】
拡延性抑制は、ＣＡ１錘体神経樹状突起スパインの可逆的な体積縮小を引き起こす
脳内の錘体神経樹状突起の解剖学的微細構造は、意外にも多様な刺激に応答して不安定化する。脱分極、酸素／グルコース欠乏及びＮ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸は全て、インビボの海馬ＣＡ１錘体神経の樹状突起スパインの収縮をもたらすことが示されている。ＳＤに対するスパインの応答を検討するために、単一のＣＡ１錘体神経に蛍光色素ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ−５９４を充填して、２光子レーザー走査顕微鏡から収集された連続したｚスタック断面（５μｍにわたり０．２μｍステップずつ）を利用して樹状突起スパインの形状を撮像した。ＡｌｅｘａＦｌｕｒｏｒ−５９４をＣＡ１錘体神経に充填して３０分後、ニューロン内で平衡分布に到達したら、海馬スライスのＣＡ１領域の放線状層に、高［Ｋ＋］を短時間放出（パッチピペットで１Ｍ）することによりＳＤを開始させた。このときシャファー側枝アクソンがＣＡ１錘体神経の先端樹状突起にシナプスを形成する。図６Ａ及び６Ｂに示すように、ＳＤによって生じる脱分極は、圧縮されたｚスタック層の蛍光振幅によって測定される、実質的なスパイン収縮を誘発した。スパイン体積は最初のＳＤ後２０〜３０分で完全に回復する。これにより、ＳＤが誘発する脱分極の後遺症の１つが、樹状突起スパインのモルホロジーの変化であることが確認された。
【０１２３】
ＧＬＹＸ−１３は、拡延性抑制に続く樹状突起スパインの回復を改善する
最後に、ＧＬＹＸ−１３の効果を、ＳＤに対する樹状突起スパインの動的なモルホロジー応答について検討した。ＧＬＹＸ−１３がＳＤに応答してスパインの収縮を低減できるか、またはスパインの回復を改善できるかを調べた。図６Ａは、対照の錘体神経内での２回のＳＤ現象出現に応答したスパイン収縮を示し、一方の図６Ｂは１０μＭのＧＬＹＸ−１３存在下での同様の過程を示す。図６Ｃ上部に示されたように、反復測定ＡＮＯＶＡによると、樹状突起スパインから測定した蛍光強度は有意に達した（Ｆ（８，６４）＝１７．５３、ｐ＜０．００１）。更にこの有意性は、主にＳＤ後の時間経過に起因したものであった（Ｆ（８，６４）＝６．１８、ｐ＜０．０１）。このことは、ＧＬＹＸ−１３（黒丸）がＳＤによって引き起こされた収縮を変化させなかったが、ＳＤ後のスパインのサイズの回復を助けることを明らかにしている（Ｆ（８，６４）＝２．８１、ｐ＜０．０５）。
【０１２４】
実施例２
海馬スライスの調製：１４〜２１日齢のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（登録商標）ラット（Ｔａｃｏｎｉｃ  Ｆａｒｍｓ）を使用して実験を実施した。ラットをイソフルオレンで深麻酔して犠牲死させ、素早く脳を切除し、酸素化した（９５％Ｏ2―５％ＣＯ2）氷冷人工脳脊髄液（ＡＣＳＦ）中に配置した。ＡＣＳＦはＮａＣｌ  １２６、ＫＣｌ  ２．５、ＣａＣｌ2  ２．６、ＭｇＣｌ2  １．３、ＮａＨ2ＰＯ4  １．２５、ＮａＨＣＯ3  ２６及びグルコース  １１（単位ｍＭ）を含有する。脳を二等分して前頭葉を切除し、個々の脳半球をシアノアクリレート接着剤を使用してステージに固定し、スライスする間、連続して酸素添加された氷冷ＡＣＳＦ中に浸漬した。ビブラトーム（Ｌｅｉｃａ  １２００ｓ）を使用して海馬を含む４００μｍ厚の冠状スライスを切り出して、インターフェイス式保持チャンバーに移し、実験開始前に最低１時間室温にて培養した。
【０１２５】
海馬拡延性抑制の誘発：海馬の尖端冠状スライスを顕微鏡ステージ上の浸漬した記録チャンバーに移し、温めたＡＣＳＦ（３２℃）を灌流させ、３ｍＬ／ｍｉｎの灌流速度で細胞外［Ｋ＋］を８ｍＭまで上昇させた。ガラスピペットによって３ＭのＫＣｌを加圧注入パフして拡延性抑制を開始した。通常は５０ｍｓ持続する８〜１０ｐｓｉの圧力パルスを、Ｐｉｃｏｓｐｒｉｔｚｅｒによって作動させた。３ＭのＫＣｌを充填したときのピペット抵抗は、２±０．２ＭΩであった。
【０１２６】
電気生理学的記録方法：細胞外記録は、Ｃｌａｍｐｅｘ（ｖ．９）付属ＭｕｌｔｉＣｌａｍｐ  ７００Ｂ（Ａｘｏｎ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）を使用して実施し、１ｋＨｚでフィルタリングし、３ｋＨｚでデジタル化した。低抵抗（ＡＣＳＦ充填後１〜２ＭΩ）の記録用電極を薄壁ボロシリケートガラスで作製し、ＣＡ１領域の放線状層にあるシャファー側枝の終端野の先端樹状領域に、ＳＤを開始しているピペットから約１５０ｍｍの距離間隔で挿入し、ＳＤの広がりをモニターした。浸漬された記録チャンバーを赤外線微分干渉コントラスト（ＤＩＣ）光学素子を備えるＺｅｉｓｓ  Ａｘｉｏｓｋｏｐ  ２ＦＳ直立顕微鏡に載置した。ＳＤによって生じるスライスの輝度変化を、１０倍の対物レンズを使用して撮像した。ＰＴＩマスターシステムによって制御された冷却ＣＣＤカメラ（ＣｏｏｌＳＮＡＰ  ＨＱ）を用いて１００ｍｓ毎に輝度変化を撮像した。電気生理的データはＣｌａｍｐｆｉｔ  ９を用いて分析した。イメージングデータはＩｍａｇｅＪ（ＮＩＨ）を用いてデジタル化及び再構築した。すべての実験は、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈガイドラインに準拠した承認プロトコルに従って実施した。
【０１２７】
実施例１の結果は、女性及び青年期の患者に関する調査である。この実験的プロトコルを、インビトロで海馬脳内スライスのＣＡ１領域における拡延性脱分極（ＳＤ）を開始するために使用した。拡延性抑制の開始部位からの距離及びＳＤ伝播速度を、視覚的に広範囲にわたって良好に観察するため、実施例１の１０倍対物レンズを４倍対物レンズに置き換えて視野範囲を１．６ｍｍまで拡大した。両側からスライスを灌流して、脳スライスへの十分な酸素供給だけでなく、安定した細胞外環境の維持の補助にも効果的な灌流にするために記録チャンバーを変更した。これは拡延性抑制の各現象出現により、細胞外及び細胞内の両方で大幅なイオン組成変化が生じるためである。
【０１２８】
現在のコホート研究に、２か月齢の卵巣切除したＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（登録商標）雌ラットの２群を加えた。卵巣切除されたラットのうち１群は、施術後７日目から７日間、毎日エストロゲンを注入したが、もう１群は対照として、実験実施前の７日間、オイルビヒクルのみを注入した。
【０１２９】
３Ｍのカリウムのパフ後、輝度変化を視覚的に、失敗（＜１００ｍｍ）、局所的に拡延（＞１００ｍｍ；＜８００ｍｍ）、または完全な広がり（＞８００ｍｍ）に分類した。８匹のオイル処置したラットからの３９枚のスライス及び７匹のエストロゲン処置したラットからの３５枚のスライスにて、ＳＤの誘発を試みた。表１は、２群について同様の方法によって誘起されたＳＤの発生頻度をまとめたものである。オイル処置群では、エストロゲン処置群よりも失敗率が有意に高かった（カイ二乗検定、Ｐ＝０．０１４）。このことは、エストロゲン自体が限局性の脱分極時にＳＤを呈する脳組織の傾向を強化することを示している。
表１
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【０１３０】
以下の図７に示すように、輝度変化を使用して、拡延性抑制の伝達速度を評価した。３Ｍのカリウムの局所的パフによって誘発される局所的なＳＤと完全なＳＤの両方から、観察部位間のＳＤの距離を、ＳＤがこの各観察部位間の移動に要した時間で割ることにより、伝播速度を算出した。図７に示したように、エストロゲン処置したラットからのスライスでの平均拡延速度は、０．１２１±０．０１３ｍｍ／ｓであり、オイル処置した対照ラットからのスライスでの伝播速度よりも有意に速かった（０．０８３±０．００５ｍｍ／ｓ、Ｐ＜０．０５、スチューデントのｔ検定）。このデータは、エストロゲンが海馬及び場合により新皮質においてもＳＤの傾向及び速度の両方を増強する重要な役割を担っていることを示す。
【０１３１】
エストロゲンがＳＤの重度にどのように影響を及ぼすかについて、開始部位から離れて伝播するＳＤの最大距離を測定することにより試験を実施した。図８に示すように、シャファー側枝経路に沿った拡延性の終点を、検出可能な最小輝度変化（ベースラインからの変化＞５％）を示した観察部位の開始部位からの距離と、検出できない輝度変化を示した近接観察部位の距離を平均し、更に開始部位からのこの距離を測定することによって評価した。図８に示すように、エストロゲン処置したラットからのスライスでのＳＤ（０．５９４±０．０７１ｍｍ；ｎ＝１８）は、オイル処置したラットからのスライスでのＳＤ（０．３９４±０．０５１ｍｍ；ｎ＝１６、Ｐ＜０．０５、スチューデントのｔ検定）よりも有意に長距離を移動した。したがって、エストロゲン処置したラットのＳＤは、容易に誘発されただけでなく、より長距離を伝播した。
【０１３２】
次に１０分間隔で２回のＳＤが誘発された後、１０μＭのＧＬＹＸ−１３を灌流液に添加し、引き続き１０分毎にＳＤを誘発させ、ＳＤの速度及び規模が影響を受けたかどうかを判定した。図９は、ＧＬＹＸ−１３の適用前と、１０μＭの浴適用したＧＬＹＸ−１３に５０分間曝露した後での、エストロゲン処置したラットからのスライスで誘発されたＳＤの代表的な差を示す。１０の観察部位の輝度変化を測定して、ＳＤに対するＧＬＹＸ−１３の効果を評価した。図９Ｂに示すように、ＳＤは依然として直ちに誘起されたが、図９ＡはＳＤと関連した輝度変化がＧＬＹＸ−１３の存在下で遅延したことを明らかに示している。対応のあるｔ検定は、ＧＬＹＸ−１３が平均ＳＤ伝播速度を６．５６±０．５７ｍｍ／ｍｉｎから４．９６±０．２８ｍｍ／ｍｉｎへと有意に低下させたことを示した（ｎ＝５、Ｐ＜０．０１、対応のあるｔ検定）。オイル処置したラットからの海馬スライスについて、同様の実験を実施した。ＧＬＹＸ−１３が平均ＳＤ伝播速度を５．０９±０．６１ｍｍ／ｍｉｎから４．５０±０．３９ｍｍ／ｍｉｎ（ｎ＝５）へと低下させたが、この低下は統計的有意差に達しなかった。
【０１３３】
２群全体のＳＤ伝播速度に対するＧＬＹＸ−１３の効果を調べるために、二元反復ＡＮＯＶＡも実施した。図１０が示すように、ＧＬＹＸ−１３の適用前後でのエストロゲン処置したラットに第１の有意性が見られ（Ｆ（１，８）＝３．１；ｐ＜０．０５）、ＧＬＹＸ−１３曝露前の２群間で第２の有意性が生じている（Ｆ（１，８）＝４．２；ｐ＜０．０５）。この結果は、ＧＬＹＸ−１３がエストロゲン処置したラットにおいて強い効果を有し、ＳＤの伝播速度をオイル処置したラットのレベルにまで有意に低下させることを示す。
【０１３４】
実施例３
方法
動物
成体雄（２〜３か月齢）Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（登録商標）（ＳＤ）ラットをＨａｒｌａｎ（ＵＳＡ）から購入した。ポプラ材チップの寝床を有するＬｕｃｉｔｅ製ケージにラットを収容し、１２時間：１２時間の明暗サイクル（午前５時に点灯）を維持し、研究期間を通じて、随時Ｐｕｒｉｎａ（登録商標）ラット用餌（ＵＳＡ）及び水道水を摂取できるようにした。
【０１３５】
外傷性脳損傷の誘発
Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎら（Ｇｏｌｄｓｔｅｉｎ，Ｌ．Ｅ．ら．（２０１２）「Ｃｈｒｏｎｉｃ  ｔｒａｕｍａｔｉｃ  ｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｙ  ｉｎ  ｂｌａｓｔ−ｅｘｐｏｓｅｄ  ｍｉｌｉｔａｒｙ  ｖｅｔｅｒａｎｓ  ａｎｄ  ａ  ｂｌａｓｔ  ｎｅｕｒｏｔｒａｕｍａ  ｍｏｕｓｅ  ｍｏｄｅｌ」，Ｓｃｉｅｎｃｅ  Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ  ４：１３４ｒａ１６０）のプロトコルに従って、ラットで使用するために改変し、一次爆風誘発性の外傷性脳損傷を誘発させた。成体雄Ｓｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙ（登録商標）ラットをイソフルランで麻酔して、ラットの両耳に耳栓を挿入し、０．０１４インチのポリエステルフィルムを穿孔して生じるヘリウムの一次爆風（約４２ＰＳＩ）をラットに与える。シャム対照を爆風半径外に配置した。以降、爆風を受けた１時間後、動物にｒａｐａｓｔｉｎｅｌ（３ｍｇ／ｋｇをＩＶ）または０．９％の無菌生理食塩水ビヒクル（１ｍＬ／ｋｇをＩＶ）を投与し、ラットを最初に３．５〜４％のイソフルランを使用して麻酔した後、両耳を１．５×１．５ｍｍの発泡プラグ（Ｐｕｒａ−Ｆｉｔ耳栓、Ｍｏｌｄｅｘ−Ｍｅｔｒｉｃ  ＩＮＣ、Ｃｕｌｖｅｒ  Ｃｉｔｙ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）で保護した。頭部入口付き齧歯類用胸部拘束装置（Ｓｔｏｅｌｔｉｎｇ、ＵＳＡ）にラットを入れて胴体を保護すると同時に、アルミニウム衝撃波管（１８３×６１ｃｍ；Ｌ−３  Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、ＵＳＡ）の端から１０ｃｍに頭部を置き、頭部は自由に動くようにした。ラットに０．０１４インチのポリエステルフィルムを穿孔して生じるヘリウムの一次爆風（約４２ＰＳＩ）を与えた。シャム対照を爆風半径外に配置した。爆風を受けた１時間後、動物にｒａｐａｓｔｉｎｅｌ（３ｍｇ／ｋｇをＩＶ）または０．９％の無菌生理食塩水ビヒクル（１ｍＬ／ｋｇをＩＶ）を投与した。麻酔から回復するまでの潜在時間を記録した（図１１Ａ）。回復は、瞬目反射及び正向反射の表れ、ならびに通常の歩行（標準的な周期ゲート、非環状ゲート、完全な体重支持、何らかの嗅ぐ動作及び探索行動の徴候）と定義した。爆風を受けた１時間後、動物にＧＬＹＸ−１３（３ｍｇ／ｋｇをＩＶ）または０．９％の無菌生理食塩水ビヒクル（１ｍＬ／ｋｇをＩＶ）を投与した。群当たりＮ＝４−６、*Ｐ＜０．０５（図１１Ａ）ＡＮＯＶＡ。
【０１３６】
積極的感情学習（ＰＥＬ）図１１Ｂは、対象間計画を使用して、単一の３分間の積極的感情学習（ＰＥＬ）試験セッションを、爆風を受けた２４時間後に実施した結果を示す。群当たりＮ＝４−６であった。ＦｉｓｈｅｒのＰＬＳＤ事後検定を使用して、結果を評価した（ｒａｐａｓｔｉｎｅｌ＋ＴＢＩ対ビヒクル＋ＴＢＩ）。
【０１３７】
以前に記述されたように（Ｂｕｒｇｄｏｒｆ，Ｊ．ら、（２０１１）「Ｐｏｓｉｔｉｖｅ  ｅｍｏｔｉｏｎａｌ  ｌｅａｒｎｉｎｇ  ｉｓ  ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｍｅｄｉａｌ  ｐｒｅｆｒｏｎｔａｌ  ｃｏｒｔｅｘ  ｂｙ  ＧｌｕＮ２Ｂ−ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  ＮＭＤＡ  ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ」，Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ  １９２：５１５−５２３）、異種特異的な闘争遊びを実施した。試験は投薬後２週間に３時間、実施した。異種特異的な闘争遊びの刺激は、実験者の右手で施した。１５秒の異種特異的遊びブロックと１５秒の非刺激とを交互に構成した３分の異種特異的遊びを動物に経験させた。前述のように（同著）、高周波の超音波発声（ＵＳＶ）を記録して、Ａｖａｓｏｆｔ  ＳＡＳｌａｂ  Ｐｒｏ（Ｇｅｒｍａｎｙ）を用いてソノグラムによって分析した。非刺激期間の各々で発生した周波数変調された５０ｋＨｚのＵＳＶを定量化して、ＰＥＬを測定した。試験前、動物に遊び刺激の習慣はなかった。
【０１３８】
結果
図１１Ａに示すように、ＴＢＩを受けた動物は、シャム対照動物と比較して、麻酔からの回復時間が長かった［Ｆ（１，１３）＝４１．７、Ｐ＜０．０５］。図１１Ｂに示すように、ｒａｐａｓｔｉｎｅｌ（３ｍｇ／ｋｇをＩＶ）は、積極的感情学習のＴＢＩ誘発性抑制を改善した［Ｆ（２，１２）＝１０．０、Ｐ＜．０５、ＦｉｓｈｅｒのＰＬＳＤ事後検定、ｒａｐａｓｔｉｎｅｌ＋ＴＢＩ対ビヒクル＋ＴＢＩ、シャム対ビヒクル＋ＴＢＩ対、Ｐ＜０．０５］。加えて、麻酔回復時間は、ＰＥＬの率と有意に相関しなかった［ｒ（１５）＝−０．１４、Ｐ＞．０５］。積極的感情学習試験において、単一用量のｒａｐａｓｔｉｎｅｌ（３ｍｇ／ｋｇをＩＶ）は、ＴＢＩによって誘発される学習及び感情の欠如を完全に改善した。このように、この臨床前モデルでは、ｒａｐａｓｔｉｎｅｌがＴＢＩの中枢認知及び情緒的症状の治療に効果的であり、ｒａｐａｓｔｉｎｅｌはＰＴＳＤ治療に対する治療的可能性を有すると思われる。
【０１３９】
等価物
本開示の具体的実施形態を示したが、上記の具定例は例示的なものであり、限定的はでない。本開示の多くの変形は、本明細書を確認すれば当業者に明らかであろう。本開示の完全な範囲は、等価物の完全な範囲を併記した特許請求の範囲、及びこのような変形を併記した本明細書を参照することにより特定されるものである。
【０１４０】
特段の指定がない限り、本明細書及び特許請求の範囲で使用される、成分量、反応条件、パラメータ、記述的特徴などを表す全ての数値は、いずれの場合においても「約」という語で修飾されるものとして理解されるべきである。したがって、それと反対の指示がない限り、本明細書及び添付の特許請求の範囲内に示される数値パラメータは、本開示を用いて当業者が得ようとする所望の特性に応じて変動し得る近似値である。
【０１４１】
本明細書で引用される全ての刊行物及び特許出願は、以下に示す項目を含め、個別の刊行物または特許出願がそれぞれ具体的かつ個別に参照により本明細書に組み込まれた場合と同様に、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。矛盾が生じる場合には、本明細書に記載の定義を含めて本明細書が優先される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年5月7日(2020.5.7)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
それを必要とする患者の片頭痛の治療方法であって、前記患者に以下に表す薬学的有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
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【請求項２】
前記化合物が約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇまたは約１ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇの用量で患者に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記片頭痛が、一過性片頭痛、慢性片頭痛、網膜片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、無痛性片頭痛、片頭痛障害、月経片頭痛、腹性片頭痛、小児周期性症候群または群発性頭痛である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記片頭痛が、一過性片頭痛、慢性片頭痛、網膜片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、無痛性片頭痛または群発性頭痛である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項５】
前記片頭痛が前兆のある片頭痛（古典的片頭痛）である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１４１
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１４１】
本明細書で引用される全ての刊行物及び特許出願は、以下に示す項目を含め、個別の刊行物または特許出願がそれぞれ具体的かつ個別に参照により本明細書に組み込まれた場合と同様に、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。矛盾が生じる場合には、本明細書に記載の定義を含めて本明細書が優先される。
なお、本発明は、以下の態様も好ましい。
〔１〕  それを必要とする患者の片頭痛の治療方法であって、前記患者に以下に表す薬学的有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
2020114863.tif 000027
〔２〕  前記化合物が約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇまたは約１ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇの用量で患者に投与される、〔１〕に記載の方法。
〔３〕  前記片頭痛が、一過性片頭痛、慢性片頭痛、網膜片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、無痛性片頭痛、片頭痛障害、月経片頭痛、腹性片頭痛、小児周期性症候群または群発性頭痛である、〔１〕または〔２〕に記載の方法。
〔４〕  前記片頭痛が、一過性片頭痛、慢性片頭痛、網膜片頭痛、眼筋麻痺性片頭痛、無痛性片頭痛または群発性頭痛である、〔１〕または〔２〕に記載の方法。
〔５〕  前記片頭痛が前兆のある片頭痛（古典的片頭痛）である、〔１〕〜〔４〕のいずれか１項に記載の方法。
〔６〕  前記片頭痛が前兆のない片頭痛（一般的な片頭痛）である、〔１〕〜〔４〕のいずれか１項に記載の方法。
〔７〕  前記片頭痛がアロディニアを伴う、〔１〕〜〔６〕のいずれか１項に記載の方法。
〔８〕  約１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ〜約１２５ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ〜約１１０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇまたは約７０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇの化合物を投与することを含む、〔１〕〜〔７〕のいずれか１項に記載の方法。
〔９〕  約１ｍｇ／ｋｇ、約２．５ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約７５ｍｇ／ｋｇまたは約１００ｍｇ／ｋｇの化合物を投与することを含む、〔１〕〜〔７〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１０〕  前記化合物を１日２回、ほぼ毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、約週１回、約２週毎または約月１回投与することを含む、〔１〕〜〔９〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１１〕  それを必要とする患者の皮質拡延性抑制の治療、抑制及び／または予防方法であって、前記患者に以下に表す薬学的有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
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〔１２〕  それを必要とする患者での片頭痛後の長期後遺症の治療及び／または改善方法であって、前記患者に以下に表す薬学的有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
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〔１３〕  前記化合物が約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇまたは約１ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇの化合物の用量で患者に投与される、〔１１〕〜〔１２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１４〕  約１〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約２〜約１５ｍｇ／ｋｇ、約５〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ〜約１２５ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ〜約１１０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇまたは約７０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇの化合物を投与することを含む、〔１１〕〜〔１２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１５〕  約１ｍｇ／ｋｇ、約２．５ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ、約２１ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約７０ｍｇ／ｋｇまたは約１０ｍｇ／ｋｇの化合物を投与することを含む、〔１１〕〜〔１２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１６〕  前記化合物を１日２回、ほぼ毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、約週１回、約２週毎または約月１回投与することを含む、〔１１〕〜〔１５〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１７〕  オピオイド、抗うつ剤、抗てんかん薬、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、セロトニン５ＨＴ１Ｂ／１Ｄアゴニスト、Ｎ−メチル−Ｄ−アスパラギン酸アンタゴニストまたは抗炎症化合物との共投与を更に含む、〔１〕〜〔１６〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１８〕  前記患者がヒトである、〔１〕〜〔１７〕のいずれか１項に記載の方法。
〔１９〕  前記患者が女性である、〔１〕〜〔１８〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２０〕  前記患者が小児または青年期の患者である、〔１〕〜〔１９〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２１〕  それを必要とする患者での外傷性脳損傷の治療及び／または改善方法であって、前記患者に以下に表す薬学的有効量の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、前記方法。
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〔２２〕  前記化合物が約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０００ｍｇ／ｋｇまたは約１ｍｇ／ｋｇ〜約５００ｍｇ／ｋｇの化合物の用量で患者に投与される、〔２１〕に記載の方法。
〔２３〕  約１〜約２０ｍｇ／ｋｇ、約２〜約１５ｍｇ／ｋｇ、約５〜約１０ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ〜約２５０ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ〜約１５０ｍｇ／ｋｇ、約３０ｍｇ／ｋｇ〜約１２５ｍｇ／ｋｇ、約４０ｍｇ／ｋｇ〜約１１０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ、約６０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇまたは約７０ｍｇ／ｋｇ〜約９０ｍｇ／ｋｇの化合物を投与することを含む、〔２１〕〜〔２２〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２４〕  前記化合物を１日２回、ほぼ毎日、２日毎、３日毎、４日毎、５日毎、約週１回、約２週毎または約月１回投与することを含む、〔２１〕〜〔２３〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２５〕  ステロイド、抗うつ剤、オピオイド、抗てんかん薬、抗発作薬、抗けいれん剤、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、セロトニン５ＨＴ１Ｂ／１Ｄアゴニスト、利尿剤及び／または抗炎症化合物との共投与を更に含む、〔２１〕〜〔２４〕のいずれか１項に記載の方法。
〔２６〕  前記患者がヒトである、〔２１〕〜〔２５〕のいずれか１項に記載の方法。
【外国語明細書】
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