(57)【要約】      （修正有）【課題】脳癌の治療方法の提供。【解決手段】有効量の、（置換フェニル）プロペナール部分を有する式ＶＩＩＩの化合物を投与することを含む方法。2020117489.tif 000013[式中、Ｒ１８及びＲ２８は、モノ−又はジ−置換されたメトキシ基、ヒドロキシル基、又はアルキルスルホニル基；Ｒ３８又はＲ４８は、Ｈ、ＣＨ３、Ｆ、Ｃｌ、又は特定の置換基、ｎ８は１又は２の整数を表す]【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
脳癌を、治療を必要とする対象において治療する方法であって、前記対象に、有効量のＶＩＩＩの化合物および所望により、薬学的に許容される担体または賦形剤を含む医薬組成物を投与することを含む：
2020117489.tif 000010
Ｒ１８およびＲ２８は、モノ−またはジ−置換された基であり、および、メトキシ基、ヒドロキシル基、およびアルキルスルホニル基からなる群から、独立して、選択され；
Ｒ３８は、
2020117489.tif 000011
からなる群から選択され；そして、
Ｒ４８は、ＣＨ３、Ｈ、ＦおよびＣｌからなる群から選択され、そして
ｎ８は１または２である。
【請求項２】
Ｒ１８およびＲ２８が、ジ置換メトキシ基であり、
Ｒ３８が、
2020117489.tif 000012
であり、Ｒ４８が、Ｈであり、そしてｎ８は１である、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
癌が多剤耐性を有する癌である、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記脳癌がテモゾロミド耐性脳癌である、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記脳癌が原発性脳癌である、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
原発性脳癌が神経膠腫、髄膜腫、下垂体腺腫、前庭神経鞘腫、原始神経外胚葉性腫瘍（髄芽腫）、胚細胞腫瘍、神経芽腫または頭蓋咽頭腫である、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
神経膠腫が神経膠芽腫、多形神経膠芽腫、星状細胞腫、乏突起膠腫、または上衣腫である、請求項６に記載の方法。
【請求項８】
癌が二次脳癌である、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
二次脳癌の原発部位が、乳癌、結腸直腸癌、腎臓癌、肺癌、リンパ腫、骨髄腫、膵臓癌、肝臓癌、前立腺癌、膀胱癌、皮膚癌、非ホジキンリンパ腫、白血病、子宮癌、副腎癌、胃癌、胆管癌、骨癌、卵巣癌、咽頭癌、口腔癌、頭頸部癌、甲状腺癌、軟部組織肉腫、精巣癌、膣癌または黒色腫である、請求項８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野  
本発明は、治療方法に関し、本発明は、より具体的には、少なくとも一つの、（置換フェニル）プロペナール部分を有する化合物を用いた、脳癌の治療のための方法、およびその使用を提供する。
【０００２】
発明の背景
特定の天然物が、治療効果を持つ可能性があることはよく知られているため、多くの文化（漢方薬や他の多くの民間伝承薬など）で、ヒトの病気の治療と予防に使用されている。
このような治療の有効性により、製薬産業は、これらの天然物から、活性化合物を探して単離し、さまざまな疾患または病状の治療および予防のための治療薬または予防薬として有効成分を開発している。
したがって、多くの一般的に使用される医薬品が、天然物から、開発されているか、生じている。
しかしながら、天然物から分離された化合物は、その固有の宿主で特定の生理学的機能を果たすことが知られているが、一方、人間の病気に対する治療効果はすぐには分からない。
歴史的に、そのような治療的処置は、人間の、蓄積された経験または「試行錯誤」によってのみ得られた。
さらに、そのような化合物は、当初は、ヒトで使用するために作成されたものではないため、天然の形態の化合物は、ヒトの疾患を治療するために、その構造と有効性の両方において、最適な形態ではないことがよくある。
しかしながら、分析および合成化学を含む今日の現代の化学技術は、医学生物学の進歩とともに、化学構造を分析し、天然物から分離された化合物などにおける、「ファーマコフォア」（治療活動に不可欠なコア構造）を特定することを可能にした。
さらに、これらの新しい技術により、ファーマコフォアの構造に基づいて、最適な、またはより優れた治療効果を持つ新しい化合物を合成することができる。
【０００３】
化合物クルクミン（ウコン植物の主要な色素として存在する）およびその類似体の多くは、抗酸化、抗炎症、抗腫瘍、および抗血管新生活性など、ｉｎ  ｖｉｔｒｏで多数の生物学的活性を持つことが報告されている。
クルクミンもその類似体も、人間の病気を治療する治療薬として開発されていない。
これは、本来の形態のクルクミンが、おそらく、治療薬への開発に最適な分子ではないことを示す。したがって、臨床用途に適したクルクミン類似体の開発が必要である。
【０００４】
多形神経膠芽腫（Ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｅ、ＧＢＭ）は致死性疾患であり、患者は平均１４ヶ月生存する。
ほとんどの患者は、２年を超えて生存しない（Ａｇｎｉｈｏｔｒｉ  Ｓ，Ｂｕｒｒｅｌｌ  ＫＥ，Ｗｏｌｆ  Ａ，ら、神経膠芽腫、歴史、分子遺伝学、動物モデルおよび新規治療戦略の簡単なレビュー（Ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ，ａ  ｂｒｉｅｆ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｈｉｓｔｏｒｙ，  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｇｅｎｅｔｉｃｓ，  ａｎｉｍａｌ  ｍｏｄｅｌｓ  ａｎｄ  ｎｏｖｅｌ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ）、Ａｒｃｈ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｔｈｅｒ  Ｅｘｐ（Ｗａｒｓｚ）．２０１３；６１（１）：２５−４１；Ｗｉｌｓｏｎ  ＴＡ，  Ｋａｒａｊａｎｎｉｓ  ＭＡ，  Ｈａｒｔｅｒ  ＤＨ．、多形神経膠芽腫：最新技術および将来の治療法（Ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｅ：Ｓｔａｔｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｒｔ  ａｎｄ  ｆｕｔｕｒｅ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、Ｓｕｒｇ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｉｎｔ．２０１４；５：６４）。
【０００５】
外科的切除単独では、約６ヶ月の生存期間中央値をもたらす（Ｗｉｌｓｏｎ  ＴＡ，  Ｋａｒａｊａｎｎｉｓ  ＭＡ，  Ｈａｒｔｅｒ  ＤＨ．  Ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ  ｍｕｌｔｉｆｏｒｍｅ：  Ｓｔａｔｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  ａｒｔ  ａｎｄ  ｆｕｔｕｒｅ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ．  Ｓｕｒｇ  Ｎｅｕｒｏｌ  Ｉｎｔ．２０１４；５：６４）。
さらに、放射線およびテモゾロミド（ＴＭＺ）に続く、アジュバント  トテモゾロミドの同時治療が、放射線のみを受けた患者のそれと比較して、全体の生存（ＯＳ）の中央値、１２．１から１４．６ヶ月に増加させることが実証されている（Ａｇｎｉｈｏｔｒｉ  Ｓ，  Ｂｕｒｒｅｌｌ  ＫＥ，Ｗｏｌｆ  Ａ，ら、神経膠芽腫、歴史、分子遺伝学、動物モデルおよび新規治療戦略の簡単なレビュー（Ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ，  ａ  ｂｒｉｅｆ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｈｉｓｔｏｒｙ，ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｇｅｎｅｔｉｃｓ，ａｎｉｍａｌ  ｍｏｄｅｌｓ  ａｎｄ  ｎｏｖｅｌ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ）、Ａｒｃｈ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｔｈｅｒ  Ｅｘｐ（Ｗａｒｓｚ）．２０１３；６１（１）：２５−４１）。
強力な初期治療にもかかわらず、腫瘍再発はほとんど不可避であり、ＧＢＭ患者の５年生存率は９％未満のままである（Ａｇｎｉｈｏｔｒｉ  Ｓ，Ｂｕｒｒｅｌｌ  ＫＥ，Ｗｏｌｆ  Ａ，ら、神経膠芽腫、歴史、分子遺伝学、動物モデルおよび新規治療戦略の簡単なレビュー（Ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ，ａ  ｂｒｉｅｆ  ｒｅｖｉｅｗ  ｏｆ  ｈｉｓｔｏｒｙ，  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｇｅｎｅｔｉｃｓ，ａｎｉｍａｌ  ｍｏｄｅｌｓ  ａｎｄ  ｎｏｖｅｌ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ）、Ａｒｃｈ  Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｔｈｅｒ  Ｅｘｐ（Ｗａｒｓｚ）．２０１３；６１（１）：２５−４１）；Ｏｓｔｒｏｍ  ＱＴ，Ｇｉｔｔｌｅｍａｎ  Ｈ，Ｘｕ  Ｊ，  ら、  ＣＢＴＲＵＳ  Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ  Ｒｅｐｏｒｔ：  Ｐｒｉｍａｒｙ  Ｂｒａｉｎ  ａｎｄ  Ｏｔｈｅｒ  Ｃｅｎｔｒａｌ  Ｎｅｒｖｏｕｓ  Ｓｙｓｔｅｍ  Ｔｕｍｏｒｓ  Ｄｉａｇｎｏｓｅｄ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  ｉｎ  ２００９-２０１３．Ｎｅｕｒｏ−Ｏｎｃｏｌｏｇｙ．２０１６；１８（ｓｕｐｐｌ＿５）：ｖ１−ｖ７５）。
現在の従来の療法の有効性は依然として乏しく、ＧＢＭの治療に対する満たされていない医学的必要性をもたらす。
【０００６】
発明の概要
本発明は、脳癌を、治療を必要とする対象において治療する方法を提供することであり、前記対象に、有効量の式ＶＩＩＩの化合物および、所望により、薬学的に許容される担体または賦形剤を含む医薬組成物を投与することを含む；
2020117489.tif 000002
Ｒ１８およびＲ２８は、モノ−またはジ−置換された基であり、および、メトキシ基、ヒドロキシル基、およびアルキルスルホニル基からなる群から、独立して、選択され；
Ｒ３８は、
2020117489.tif 000003
からなる群から選択され；そして、
Ｒ４８は、ＣＨ３、Ｈ、ＦおよびＣｌからなる群から選択され、そして
ｎ８は、１または２である。
【０００７】
本発明は、以下のセクションで詳細に説明される。
本発明の、他の特徴、目的および利点は、発明の詳細な説明および特許請求の範囲に見出すことができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】図１Ａ〜１Ｂは、ＡＳＣ-ＪＭ１７（ＪＭ１７）が、テモゾロミド（ＴＭＺ）耐性の有無にかかわらず神経膠芽腫細胞の増殖を阻害することを示す。図１Ａ：４８時間の処理後、ＴＭＺ感受性Ａ１７２およびＰｔ＃３、ならびにＴＭＺ耐性Ａ１７２-Ｒ細胞を、ＭＴＴアッセイのために回収した。２群間の差をスチューデントｔ検定により分析した。図１Ｂ：示されるように、ＪＭ１７またはビヒクル（ＤＭＳＯ）で処理された細胞の相画像（Ｐｈａｓｅ  ｉｍａｇｅｓ）。細胞を写真撮影した。右側の図：４８時間の処理後、ＴＭＺ感受性Ｕ８７ＭＧ（上部）および耐性Ｕ８７ＭＧ-Ｒ（下部）細胞をＭＴＴ検定のために回収した（＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１）。
【０００９】
【図２】図２Ａ〜２Ｂは、ＡＳＣ−ＪＭ１７（ＪＭ１７）が、カスパーゼ３／７、８および９の増加した活性によって証明されるように、神経膠芽腫細胞においてアポトーシスを誘導することを示す。Ｃａｓｐａｓｅ−Ｇｌｏ(R)  ３／７、８および９のアッセイキットを使用し（Ｐｒｏｍｅｇａ(R)  Ｉｎｃ．）、カスパーゼを表すシグナルを、ルミノメーター（Ｐｒｏｍｅｇａ(R)  Ｉｎｃ．）で検出した。カスパーゼ３／７、カスパーゼ８およびカスパーゼ９の活性を、ＪＭ１７で４８時間処理した培養神経膠芽腫細胞の上清中で測定した（＊Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１）。
【００１０】
【図３】図３Ａ〜３Ｄは、ＡＳＣ−ＪＭ１７（ＪＭ１７）がＲＯＳ産生を増加させ、ＧＢＭ細胞において酸化ストレスを誘導することを示す。図３Ａ：Ｕ８７ＭＧ細胞を、回収前に４８時間処理し、そしてＲＯＳ産生を、ジヒドロローダミン１２３（ＤＨＲ）を使用するフローサイトメトリーアッセイによって測定した。代表的な実験のヒストグラムは、未処理対照と比較して、ＪＭ１７処理細胞における右への蛍光シフトを示す。結果を平均蛍光として定量し、右パネルに示す。さらに、Ｕ８７ＭＧおよび初代ヒトＧＢＭ細胞Ｐｔ＃３を、ＪＭ１７で濃度を上昇させて処理し、Ｈ２Ｏ２レベル濃度（図３Ｂ）、ＧＳＨ／ＧＳＳＧ比率（図３Ｃ）およびＧＳＨＲ活性（図３Ｄ）を測定した。＊Ｐおよび＃Ｐは、それぞれ、未処理対照とＵ８７ＭＧおよびＰｔ＃３の処置との間の統計的有意性を示す（＊Ｐ、＃Ｐ＜０．０５、＊＊Ｐ＜０．０１）。
【００１１】
【図４】図４Ａ〜４Ｃは、インビボでの神経膠芽腫の増殖に対する、ＡＳＣ-ＪＭ１７（ＪＭ１７）の治療効果を示す。図４Ａ：ルシフェラーゼ発現Ｕ８７ＭＧ細胞（２ｘ１０５）を、ヌードマウスの脳に頭蓋内移植した。１０日後、腫瘍サイズを表すルシフェラーゼ活性を、１０、１３、２０および２７日目に、ＩＶＩＳ２００システムによってモニターした。実験マウスに、ビヒクルまたはＪＭ１７を、１０日目から週３回、２０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇおよび８０ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内投与した。左：ＩＶＩＳ２００評価および薬物注射のためのタイムライン。図４Ｂ：二元配置ＡＮＯＶＡ（＊＊＊Ｐ＜０．０００１）によって分析されたルシフェラーゼ活性の統計解析。図４Ｃ：対数順位検定（＊＊＊Ｐ＜０．０００１）を用いて生存期間を比較した。ＪＭ１７投与は６３日目に終了した。
【００１２】
【図５】図５は、多形神経膠芽腫（ＧＢＭ）動物モデルにおける実験計画および実施の概略図を示す。動物の生存を、処置の最初の日から死亡まで評価した。体重を週に２回測定した。
【００１３】
【図６】図６は、動物生存に対するＡＳＣーＪＭ１７（ＪＭ１７）処置の効果を示す。ＴＭＺ耐性ＧＢＭ接種同所性マウスを無作為にグループ分けし、ＴＭＺまたはＴＭＺ＋ＪＭ１７で処置した。Ｋａｐｌａｎ−Ｍｅｉｅｒカーブを用いて生存率をプロットした（＊＊ｐ＜０．０１）。
【００１４】
【図７】図７は、ＡＳＣーＭ１７（ＪＭ１７）が、ＧＢＭ接種マウスにおける体重減少を防ぐことを示す。ＴＭＺまたはＴＭＺ＋ＪＭ１７で処置した、ＴＭＺ耐性ＧＢＭ接種同所性マウスの体重を週２回測定した。２１日目の体重統計をスチューデントｔ検定で分析した。＃＃ｐ＜０．０１  ＴＭＺ＋ビヒクル  対  ＴＭＺ＋ＪＭ１７（５ｍｇ／ｋｇ）；＊＊ｐ＜０．０１  ＴＭＺ＋ビヒクル  対  ＴＭＺ＋ＪＭ１７（２０ｍｇ／ｋｇ）。
【００１５】
発明の詳細な説明
本発明は、本発明の様々な実施形態の以下の詳細な説明、実施例、ならびにそれらの関連する説明を伴う化学図面および表を参照することにより、より容易に理解することができる。
特許請求の範囲によって特に示されていない限り、本発明は特定の調製方法、担体または製剤、または本発明の化合物を局所、経口または非経口用の製品または組成物に製剤化する特定の様式に限定されないことを理解されたい。なぜなら、関連分野の通常の技術者がよく知っているように、そのようなことはもちろん変わることができるからである。
また、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態のみを説明するためのものであり、限定することを意図するものではないことも理解されたい。
【００１６】
本発明は、脳癌を、治療を必要とする対象において治療する方法を提供することであり、前記対象に、有効量の（置換フェニル）プロペナール部分を有する、特に、式ＶＩＩＩの化合物および、所望により、薬学的に許容される担体または賦形剤を含む医薬組成物を投与することを含む；
2020117489.tif 000004
Ｒ１８およびＲ２８は、モノ−またはジ−置換された基であり、および、メトキシ基、ヒドロキシル基、およびアルキルスルホニル基からなる群から、独立して、選択され；
Ｒ３８は、
2020117489.tif 000005
からなる群から選択され；そして、
Ｒ４８は、ＣＨ３、Ｈ、ＦおよびＣｌからなる群から選択され、そして
ｎ８は１または２である。
【００１７】
本明細書で使用する、「（置換フェニル）プロペナール部分」という用語は、プロペナール部分（ｍが１に等しい場合）およびアルコキシまたはヒドロキシ部分、またはアルキルまたは置換アルキル部分が結合したフェニル基を含む組成物を指す。
置換は、本明細書中で使用されるプロペナール部分に対してメタまたはパラまたはオルト配置されていてもよく、
2020117489.tif 000006
を指してもよい。
ここで、ｑは、１、２、３または４の任意の数であってもよく；そじて
ｍは、１、２、３、４、またはそれ以上の任意の数であってもよい。
【００１８】
本明細書で使用される「アルキル」という用語は、不飽和を含まず、１〜１０個の炭素原子を有し、単結合で分子の残りに結合している、炭素および水素原子のみからなる直鎖または分岐の炭化水素鎖ラジカル（例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、１−メチルエチル（イソ−プロピル）、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、１，１−ジメチルエチル（ｔ−ブチル）など）を指す。
【００１９】
本明細書で使用される「アルケニル」という用語は、炭素および水素原子のみからなり、少なくとも１つの二重結合を含み、２〜１０個の炭素原子を有し、かつ、分子の残りに、単結合または二重結合で結合する直鎖または分岐の炭化水素鎖ラジカル（たとえば、エテニル、プロプ−１−エニル、ペント−１−エニル、ペンタ−１，４−ジエニルなど）を指す。
【００２０】
本明細書で使用される「アルケニレン」という用語は、炭素間二重結合を含み、式ＣｐＨ２ｐ−２で表される直鎖または分岐炭化水素鎖を指し、水素は追加の炭素‐炭素二重結合または一価の置換基で置換されていてもよい（たとえば、エテニレン、プロプ−１−エニレンなど）。
【００２１】
本明細書で使用される「アルコキシ」という用語は、式−ＯＲを有するラジカルを指し、式中、Ｒはアルキル、ハロアルキルまたはシクロアルキルである。
「所望により置換されたアルコキシ」は、式−ＯＲ’を有するラジカルを指し、式中、Ｒ’は、本明細書に記載されるように、所望により置換されたアルキルである。
【００２２】
本明細書で使用される「アルキニル」という用語は、炭素および水素原子のみからなり、少なくとも１つの三重結合を含み、２から１０個の炭素原子を有し、かつ、分子の残りに、単結合または三重結合で結合している直鎖または分岐炭化水素鎖ラジカルを指す（たとえば、エチニル、プロプ−１−イニル、ブタ−１−イニル、ペント−１−イニル、ペント−３−イニルなど）。
【００２３】
本明細書で使用される「アリール」という用語は、環の少なくとも１つが芳香族である炭素環系のラジカルを指す。
アリールは、完全に芳香族であっても、非芳香族環と組み合わさった芳香族環を含んでもよい。
「ビアリール系」は、少なくとも２つのアリール基を含む化合物である。
【００２４】
本明細書で使用される「シクロアルキル」という用語は、炭素原子および水素原子のみからなり、３〜１０個の炭素原子を有し、かつ、飽和であって、単結合により分子の残りに結合している、安定な一価単環式または二環式炭化水素ラジカルを指す（たとえば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなど）。
【００２５】
本明細書で使用される、用語「ジ−ケトンブリッジ」または「ケトン−エノールブリッジ」は、それぞれ、２つのケトンまたはケトンに近接して配置されたエノールを含む、直鎖または分岐炭化水素鎖を意味する。
「ジ−ケトンブリッジ」または「ケトン−エノール  ブリッジ」は、少なくとも２つのアリール部分の間に位置する。
【００２６】
本明細書で使用される「ヒドロキシアルキル」という用語は、１〜１０個の炭素原子を有する直鎖または分岐鎖のヒドロキシ置換炭化水素鎖ラジカル（たとえば、−ＣＨ２ＯＨ、−（ＣＨ２）２ＯＨなど）を指す。
【００２７】
本発明の好ましい一実施形態では、４，４−二置換１，７−ビス−（３，４−ジメトキシフェニル）−ヘプタ−１，６−ジエン−３，５−ジオンおよび６，６−二置換１，１１−ビス（置換フェニル）−ウンデカ−１，３，８，１０−テトラエン−５，７−ジオン足場を含む、化合物は、表１に示すとおりである。
2020117489.tif 000007
2020117489.tif 000008
【００２８】
本発明の別の好ましい実施形態において、化合物は、式ＶＩＩＩ、Ｒ１８およびＲ２８が、ジ置換メトキシ基であり、Ｒ３８が、
2020117489.tif 000009
であり、Ｒ４８が、Ｈであり、そして、ｎ８は、１であり、ＡＳＣ−ＪＭ１７と呼ぶ。
【００２９】
また、本発明は、（置換フェニル）プロペナール部分を有する化合物を含む、組成物を提供する。
本発明に係る組成物は、好ましくは、医薬組成物、食品組成物または化粧品組成物である。
【００３０】
好ましくは、医薬組成物は、（置換フェニル）‐プロペナール部分を有する化合物および所望により薬学的に許容される担体または賦形剤を含む。
【００３１】
好ましくは、医薬組成物は、有効量の化合物を含む。
【００３２】
多くの場合、範囲は、「約」１つの特定の値からおよび／または「約」別の特定の値までとして本明細書で表される。
そのような範囲が表現される場合、実施形態は、１つの特定の値からおよび／または他の特定の値までの範囲を含む。
同様に、「約」という言葉を使用して値が近似値として表される場合、特定の値が別の実施形態を形成することが理解されるであろう。
さらに、各範囲のエンドポイントは、他のエンドポイントに関連して、また他のエンドポイントから独立して、共に、重要であることが理解されるであろう。
【００３３】
「所望の（Ｏｐｔｉｏｎａｌ）」または「所望により（ｏｐｔｉｏｎａｌｌｙ）」とは、後に説明するイベントまたは状況が発生する場合と発生しない場合があり、その記載は、そのイベントまたは状況が発生する場合と発生しない場合が含まれることを意味する。
たとえば、「所望によりある試薬を含む」という語句は、前記試薬が存在する場合と存在しない場合があることを意味する。
【００３４】
明細書および添付の特許請求の範囲で使用されているように、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈がそうでないことを明確に示さない限り、複数の指示対象を含むことに留意しなければならない。
したがって、文脈で特に必要とされない限り、単数形の用語には複数形が含まれ、複数形の用語には単数形が含まれる。
【００３５】
本明細書で使用される「対象」という用語は、任意の動物、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトを指す。
対象の例には、ヒト、ヒト以外の霊長類、げっ歯類、モルモット、ウサギ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ウシ、ウマ、イヌ、ネコが含まれる。
【００３６】
本明細書で提供される、活性成分の「有効量」という用語は、所望の機能の所望の調節を提供するのに十分な量の成分を意味する。
以下に指摘するように、必要な正確な量は、病状、身体状態、年齢、性別、対象の種および体重、特定のアイデンティティおよび組成物の処方などに応じて、対象ごとに異なる。
投与計画は、最適な治療反応を誘導するために調整することができる。
例えば、治療状況の緊急性によって示されるように、いくつかの分割用量を毎日投与するか、用量を比例的に減らすことができる。
したがって、正確な「有効量」を指定することはできない。しかしながら、適切な有効量は、日常的な実験のみを使用して、当業者によって決定され得る。
【００３７】
本明細書で使用される、用語「治療する」または「治療」は、そのような用語が適用される、障害、疾患または状態を、逆転、緩和、進行の阻害、または、そのような、障害、疾患または状態の１つのまたは複数の症状の改善を示す。
【００３８】
本明細書で使用される「担体」または「賦形剤」という用語は、それ自体が治療薬ではなく、担体および／または希釈剤および／またはアジュバント、または、対象への治療薬の送達のためのビヒクルとして使用され、また、その取り扱いまたは貯蔵特性を改善するか、または経口投与に適したカプセルまたは錠剤などの個別の物品への組成物の投与単位の形成を可能にしたり促進する、製剤に添加される、いかなる物質を指す。
適切な担体または賦形剤は、医薬製剤または食品の製造分野の当業者に周知である。
担体または賦形剤には、限定ではなく例示として、緩衝剤、希釈剤、崩壊剤、結合剤、接着剤、湿潤剤、ポリマー、潤滑剤、流動促進剤、不快な味または臭気をマスクまたは打ち消すために添加される物質、香味料、色素、香料、および組成物の外観を改善するために添加される物質が含まれ得る。
許容される担体または賦形剤には、クエン酸緩衝液、リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、重炭酸緩衝液、ステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、酸化マグネシウム、リン酸および硫酸のナトリウムおよびカルシウム塩、炭酸マグネシウム、タルク、ゼラチン、アカシアゴム、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、デキストリン、マンニトール、ソルビトール、乳糖、ショ糖、デンプン、ゼラチン、セルロース系材料（アルカン酸のセルロースエステルやセルロースアルキルエステルなど）、低融点ワックスココアバター、アミノ酸、尿素、アルコール、アスコルビン酸、リン脂質、タンパク質（たとえば、血清アルブミン）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、塩化ナトリウムまたはその他の塩、リポソーム、マンニトール、ソルビトール、グリセロールまたは粉末、ポリマー（ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコールなど）、および他の薬学的に許容される材料が含まれる。
担体は、治療薬の薬理活性を破壊してはならず、治療量の治療薬を送達するのに十分な用量で投与される場合、無毒でなければならない。
【００３９】
本発明の医薬組成物は、当技術分野で公知の任意の方法により、全身的に、投与することが好ましく、筋肉内、皮内、静脈内、皮下、腹腔内、鼻腔内、経口、粘膜または外部経路を含むがこれらに限定されない。
適切な経路、製剤および投与スケジュールは、当業者によって決定され得る。
本発明において、医薬組成物は、液剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、徐放剤、粉末、顆粒、アンプル、注射、注入、キット、軟膏、ローション、リニメント、クリームまたはそれらの組み合わせなどの対応する投与経路に従って、様々な方法で製剤化することができる。
必要に応じて、それらの多くは当業者に知られている、滅菌されてもよく、または任意の薬学的に許容される担体または賦形剤と混合されてもよい。
【００４０】
本明細書で使用される外部経路は、局所投与としても知られており、吹送および吸入による投与が含まれるが、これらに限定されない。
局所投与用の様々なタイプの製剤の例には、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、泡、経皮パッチにより送達するための製剤、粉末、スプレー、エアロゾル、カプセルまたは吸入用製剤または吸入器または滴剤（目または鼻など滴剤）において使用されるカートリッジ、噴霧のための溶液／懸濁液、坐剤、ペッサリー、保持腸、およびチュアブルまたはサッカブルの錠剤またはペレットまたはリポソームまたはマイクロカプセル化製剤を含む。
【００４１】
軟膏、クリームおよびゲルは、たとえば、適切な増粘剤および／またはゲル化剤および／または溶媒を添加した水性または油性基剤で製剤化することができる。
したがって、そのような基剤は、たとえば、水および／または液体パラフィンなどの油または落花生油もしくはヒマシ油などの植物油、またはポリエチレングリコールなどの溶媒を含むことができる。
基剤の性質に応じて使用できる増粘剤およびゲル化剤には、軟パラフィン、ステアリン酸アルミニウム、セトステアリルアルコール、ポリエチレングリコール、ウール脂肪、蜜蝋、カルボキシポリメチレンおよびセルロース誘導体、および／またはモノステアリン酸グリセリルおよび／または非イオン性乳化剤が含まれる。
【００４２】
ローションは水性または油性基剤で製剤化することができ、一般に、１つまたは複数の乳化剤、安定剤、分散剤、懸濁剤または増粘剤も含む。
【００４３】
外部適用のための粉末は、たとえば、タルク、ラクトースまたはデンプンのような任意の適切な粉末基剤の助けを借りて形成され得る。
滴剤は、１つまたは複数の分散剤、可溶化剤、懸濁剤または防腐剤も含む、水性または非水性基剤で製剤化することができる。
【００４４】
スプレー組成物は、たとえば、水溶液または懸濁液として、または、適切な液化噴射剤を使用して、定量吸入器などの加圧パックから送達されるエアロゾルとして製剤化することができる。
吸入に適したエアロゾル組成物は、懸濁液または溶液のいずれであってもよい。
エアロゾル組成物は、所望により、オレイン酸またはレシチンなどの界面活性剤およびエタノールなどの共溶媒などの、当技術分野で周知の追加の製剤賦形剤を含んでもよい。
【００４５】
局所製剤は、１日に１回または複数回、患部に投与することができる。皮膚領域には、閉塞包帯が有利に使用されるかもしれない。
接着剤リザーバーシステムにより、連続的または長期の送達を実現できる。
【００４６】
本発明による化粧品組成物は、本質的に水からなる水相製剤であってもよい。また、水と水混和性溶媒（たとえば、エタノールまたはイソプロパノールなどの１〜５個の炭素原子を含む低級モノアルコール、プロピレングリコール、エチレングリコール、１，３−ブチレングリコールまたはジプロピレングリコールなどの２〜８個の炭素原子を含むグリコール、Ｃ３−Ｃ４ケトンおよびＣ２−Ｃ４アルデヒド、およびグリセリン）の混合物（２５°Ｃで、５０重量％を超える水中混和性）を含んでいてもよい。
そのような水性製剤は、好ましくは、水性ゲルまたはヒドロゲル製剤の形態である。
ヒドロゲル製剤は、液体溶液を増粘する増粘剤を含む。
増粘剤の例には、カルボマー、セルロース基材、ゴム、アルギン、寒天、ペクチン、カラギーナン、ゼラチン、ミネラルまたは改質ミネラル増粘剤、ポリエチレングリコールおよび多価アルコール、ポリアクリルアミド、その他のポリマー増粘剤が含まれ、これらに限定されない。
組成物の安定性および最適な流動特性を与える増粘剤が好ましくは使用される。
【００４７】
本発明による化粧品組成物は、エマルジョンまたはクリーム製剤の形態であってもよい。
乳化界面活性剤を含むことができる。
これらの界面活性剤は、陰イオンおよび非イオン界面活性剤から選択することができる。
界面活性剤の特性と機能（乳化）の定義については、「Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｃｈｅｍｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、Ｋｉｒｋ−Ｏｔｈｍｅｒ」、２２巻、３３３−４３２頁、第３版、１９７９年、Ｗｉｌｅｙの文献、特に、陰イオン性および非イオン性界面活性剤については、上記参考文献の３４７〜３７７頁を参照できる。
【００４８】
本発明による化粧品組成物に好ましく使用される界面活性剤は、
・非イオン性界面活性剤：
脂肪酸、脂肪アルコール、ポリエトキシ化またはポリグリセロール化脂肪アルコール（たとえば、ポリエトキシ化ステアリルまたはセチルステアリルアルコール）、ショ糖の脂肪酸エステル、アルキルグルコースエステル、特に、ポリオキシエチレン化Ｃ１−Ｃ６アルキルグルコースの脂肪酸エステル、およびそれらの混合物）；
・陰イオン界面活性剤：
・アミン、アンモニア水またはアルカリ塩、およびそれらの混合物で中和されたＣ１６−Ｃ３０脂肪酸、
から選択される。
水中油または水中ワックスのエマルジョンを得ることができる界面活性剤を使用することが好ましい。
【００４９】
本発明による化粧品組成物は、ブチル化ｐ−クレゾール、ブチル化ヒドロキノンモノメチルエーテル、およびトコフェロールからなる群から選択される生理学的に許容される抗酸化剤の有効量をさらに含むことができる。
【００５０】
本発明による化粧品組成物は、天然または修飾アミノ酸、天然または修飾ステロール化合物、天然または修飾コラーゲン、絹タンパク質または大豆タンパク質をさらに含んでもよい。
【００５１】
本発明による化粧品組成物は、好ましくは、皮膚、髪、まつげまたは爪などのケラチン物質への局所適用のために処方される。
それらは、このタイプの用途に通常使用される任意の提示形態、特に水溶液または油性溶液、水中油または油中水エマルジョン、シリコーンエマルジョン、マイクロエマルジョンまたはナノエマルジョン、水性または油性ゲルまたは液体、ペースト状または固体の無水製品であってよい。
【００５２】
本発明による化粧品組成物は、多かれ少なかれ流動性であり得、白色または着色されたクリーム、軟膏、ミルク、ローション、美容液（ｓｅｒｕｍ）、ペースト、ムースまたはゲルの外観を有し得る。
所望により、エアロゾル、パッチまたは粉末の形で皮膚に局所的に適用されてもよい。
それは、また、たとえば、スティックの形などの固体の形であってもよい。
それは、ケア製品および／または皮膚のメイクアップ製品として使用されてもよい。
あるいは、シャンプーまたはコンディショナーとして処方されてもよい。
【００５３】
既知の方法で、本発明による化粧品組成物は、親水性または親油性ゲル化剤、防腐剤、酸化防止剤、溶媒、香料、充填剤、顔料、臭気吸収剤および染料など、化粧品に一般的な添加剤および補助剤を含んでもよい。
【００５４】
化合物は、食品組成物の製造過程において、従来の食品組成物（すなわち、食用食品（ｅｄｉｂｌｅ  ｆｏｏｄ）または飲料またはその前駆体）に添加することができる。
ほとんどすべての食品組成物に本発明の化合物を補充することができる。
本発明の化合物を補充することができる食品組成物には、キャンディー、焼き菓子、アイスクリーム、乳製品、甘味および風味のスナック、スナックバー、食事代替品、ファーストフード、スープ、パスタ、麺、缶詰食品、冷凍食品、乾燥食品、冷蔵食品、油脂（ｏｉｌｓ  ａｎｄ  ｆａｔｓ）、ベビーフード、またはパンに塗られたソフトフード、またはそれらの混合物が含まれるが、これらに限定されない。
【００５５】
理論によって限定されることを望むものではないが、本発明による方法は、癌細胞において、活性酸素種（ＲＯＳ）を誘導することによって、または、癌細胞における細胞膜および内部細胞オルガネラの膜上で脂質酸化を誘導することによって、脳癌を治療することであるという本出願人の考えである。
【００５６】
還元酸化（酸化還元）状態は、細胞や臓器などの生体系における、ＧＳＨ／ＧＳＳＧ、ＮＡＤ＋／ＮＡＤＨ、およびＮＡＤＰ＋／ＮＡＤＰＨのバランスを表すために使用される。
酸化還元状態は、代謝物のいくつかのセットのバランスに反映され、その相互変換はこれらの比率に依存する。
異常な酸化還元状態は、さまざまな有害な状況で発生する可能性がある。
フリーラジカル反応は、恒常性および殺微生物の一部として発生する酸化還元反応であり、ここで、電子が分子から分離し、そして、ほぼ瞬時に再結合する。
反応性酸素種（ＲＯＳ）は、酸化還元分子の一部であり、そして、酸化還元分子または酸化防止剤に再付着しないと、人体に有害になる可能性がある。
満たされていないフリーラジカルは、それらが遭遇する細胞の突然変異を促すことができ、したがって、癌および他の疾患の原因である（Ｒ  Ｋｏｈｅｎ、Ａ  Ｎｙｓｋａ、Ｏｘｉｄａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｓｙｓｔｅｍｓ：Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  Ｓｔｒｅｓｓ  Ｐｈｅｎｏｍｅｎａ、Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ、Ｒｅｄｏｘ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ、ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｆｏｒ  Ｔｈｅｉｒ  Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ、Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃ  ｐａｔｈｏｌｏｇｙ、３０（６）：６２０−６５０、２００２；Ｔｒａｃｈｏｏｔｈａｍ  Ｄ、Ａｌｅｘａｎｄｒｅ  Ｊ、Ｈｕａｎｇ  Ｐ．、Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ  ｂｙ  ＲＯＳ−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ：  ａ  ｒａｄｉｃａｌ  ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  ａｐｐｒｏａｃｈ？  Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．、Ｊｕｌ；８（７）：５７９−９１．２００９）。
【００５７】
（置換フェニル）−プロペナール部分を有する化合物は、様々な細胞、組織、および器官において、酸化還元状況の恒常性を制御する。
腫瘍において、（置換フェニル）‐プロペナール部分を有する化合物は、細胞膜および内部細胞小器官の膜上で脂質酸化を誘導し、細胞損傷および細胞死に寄与する高レベルの酸化ストレスをもたらす。
続いて、（置換フェニル）‐プロペナール部分を有する化合物によって生成される脂質ＲＯＳは、シャペロン発現の増加、ユビキチン-プロテアソーム系の活性化、ミトコンドリア生合成の変化、折り畳まれていないタンパク質応答（ＵＰＲ）、プロテオスタシスの破壊、オートファジー、およびアポトーシスのような細胞損傷を反響させるための複数の細胞応答および分子応答を引き起こす。
これらの複数の細胞反応は、最終的に、癌細胞をアポトーシスおよびオートファジーによって死滅させる。
【００５８】
理論によって限定されることを望むものではないが、本発明による方法は、シャペロン発現を増加させることによって脳癌を治療することであると出願人は考えている。
【００５９】
理論によって限定されることを望むものではないが、本発明による方法は、ユビキチン-プロテアソーム系を活性化することによって脳癌を治療することであると出願人は考えている。
【００６０】
理論によって限定されることを望むものではないが、本発明による方法は、ミトコンドリアの生合成を変化させることによって脳癌を治療することであると出願人は考えている。
【００６１】
理論によって限定されることを望むものではないが、本発明による方法は、折り畳まれていないタンパク質応答（ＵＰＲ）を活性化することによって脳癌を治療することであると出願人は考えている。
【００６２】
理論によって限定されることを望むものではないが、本発明による方法は、プロテオスタシスを破壊することによって脳癌を治療することであると出願人は考えている。
【００６３】
理論によって限定されることを望むものではないが、本発明による方法は、オートファジーを活性化することによって脳癌を治療することであると出願人は考えている。
【００６４】
理論によって限定されることを望むものではないが、本発明による方法は、アポトーシスを活性化することによって脳癌を治療することであると出願人は考えている。
【００６５】
本発明の１つの好ましい実施形態において、脳癌は、多剤耐性を有する癌であり；好ましくは、脳癌は、テモゾロミド耐性脳癌である。
【００６６】
好ましくは、脳癌は原発性脳癌である。
原発性脳癌は、好ましくは、神経膠腫、髄膜腫、下垂体腺腫、前庭神経鞘腫、原始神経外胚葉腫瘍（髄芽腫）、胚細胞腫瘍、神経芽細胞腫または頭蓋咽頭腫である。
好ましくは、神経膠腫は、神経膠芽腫、多形神経膠芽腫、星状細胞腫、乏突起膠腫、または上衣腫である。
【００６７】
本出願人は、ＧＭＢの様々なセルラーモデルを用いて、ＡＳＣ−ＪＭ１７が、酸化ストレスを誘発し、また、外来性および内在性のアポトミック経路の両方を活性化することにより、神経膠芽腫細胞に毒性を発揮するという、膨大な実験的証拠を入手した。
さらに、ＧＢＭの検証された動物モデルにおいて、ＡＳＣ−ＪＭ１７は臨床的に意味のある病気（体重減少）を緩和する能力を実証し、最も重要なことは、実験動物の全生存期間を改善することができた。
ＡＳＣ−ＪＭ１７の抗がん効果がＴＭＺ感度およびＴＭＺ耐性ＧＢＭのモデルで実証されたことは、これらの所見をＧＢＭ患者のアンメット・メディカル・ニーズに特に関連するものにしている。
【００６８】
これらのデータを総合すると、ＡＳＣ−ＪＭ１７がＧＭＢの患者に利益をもたらす可能性があることを強く支持している。
【００６９】
好ましくは、脳癌は二次脳癌である。
本発明の１つの好ましい実施形態において、二次脳癌の原発部位は、乳癌、結腸直腸癌、腎臓癌、肺癌、リンパ腫、骨髄腫、膵臓癌、肝臓癌、前立腺癌、膀胱癌、皮膚癌、非ホジキンリンパ腫、白血病、子宮癌、副腎癌、胃癌、胆管癌、骨癌、卵巣癌、咽頭癌、口腔癌、頭頸部癌、甲状腺癌、軟部組織肉腫、精巣癌、膣癌または黒色腫である。
【００７０】
以下の実施例は、本発明を実施する際に当業者を支援するために提供される。
実施例
実施例１：多形神経膠芽腫（ＧＢＭ）のｉｎ  ｖｉｔｒｏモデルにおけるＡＳＣ−ＪＭ１７（ＪＭ１７）の有効性
ＪＭ１７は、ＴＭＺ耐性神経膠芽腫に対する細胞毒性作用を選択的に示す。
【００７１】
ＧＢＭ細胞の増殖に対するＪＭ１７の効果を、ＧＢＭ癌に独立して由来するいくつかの細胞株において研究した。
最初に、十分に特徴付けられ、市販されているＡ１７２およびＵ８７ＭＧ細胞をＡＴＣＣ  （ＡＴＣＣ  （登録商標）ＣＥＬＬ  ＬＩＮＥＳ  ＢＹ  ＧＥＮＥ  ＭＵＴＡＴＩＯＮ．２０１９）から購入した。
第２に、初代神経膠芽腫細胞、Ｐｔ＃３は、公表された手順（Ｃｈａｎｇ  ＫＹ，  Ｈｓｕ  ＴＩ，  Ｈｓｕ  ＣＣ，ら）に従ってＧＢＭ患者から誘導された。
特異性タンパク質（Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｐｒｏｔｅｉｎ）１−調節スーパーオキシドジスムターゼ２は、Ｏ（６）−メチルグアニン−ＤＮＡメチルトランスフェラーゼとは無関係に、神経膠芽腫におけるテモゾロミド耐性を高める。Ｒｅｄｏｘ  Ｂｉｏｌ．２０１７；１３：６５５−６６４；Ｃｈｕａｎｇ  ＪＹ，Ｌｏ  ＷＬ，Ｋｏ  ＣＹ，ら。
Ｓｐ１媒介ＤＮＡ脱メチル化によるＣＹＰ１７Ａ１のアップレギュレーションは、神経膠腫におけるＤＨＥＡ媒介保護を介してテモゾロミド耐性を付与する。Ｏｎｃｏｇｅｎｅｓｉｓ．２０１７；６（５）：ｅ３３９）
さらに、Ｕ８７ＭＧおよびＡ１７２のテモゾロミド（ＴＭＺ）耐性クローンを、公開されたプロトコル（Ｃｈａｎｇ  ＫＹ、Ｈｓｕ  ＴＩ、Ｈｓｕ  ＣＣら）に従って作製した。
特異性タンパク質（Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｐｒｏｔｅｉｎ）１−調節スーパーオキシドジスムターゼ２は、Ｏ（６）−メチルグアニン−ＤＮＡメチルトランスフェラーゼとは無関係に、神経膠芽腫におけるテモゾロミド耐性を高める。Ｒｅｄｏｘ  Ｂｉｏｌ．２０１７；１３：６５５−６６４；Ｃｈｕａｎｇ  ＪＹ，Ｌｏ  ＷＬ，Ｋｏ  ＣＹ，ら。
Ｓｐ１媒介ＤＮＡ脱メチル化によるＣＹＰ１７Ａ１のアップレギュレーションは、神経膠腫におけるＤＨＥＡ媒介保護を介してテモゾロミド耐性を付与する。Ｏｎｃｏｇｅｎｅｓｉｓ．２０１７；６（５）：ｅ３３９）。
細胞生存率アッセイは、以下のように行った。
サブコンフルエンシーまで増殖させた細胞を、ビヒクル（ＤＭＳＯ）または１μＭ、２μＭ、５μＭおよび１０μＭのＪＭ１７の存在下に、２４時間、４８時間または７２時間維持した（図１）。
次いで、細胞を回収し、細胞生存率を、製造業者の説明書（Ｃｈａｎｇ  ＫＹ，  Ｈｓｕ  ＴＩ，  Ｈｓｕ  ＣＣ，ら）に従って、ＭＴＴ細胞増殖アッセイによって測定した。
特異性タンパク質（Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｐｒｏｔｅｉｎ）  １−調節スーパーオキシドジスムターゼ２は、Ｏ（６）−メチルグアニン−ＤＮＡメチルトランスフェラーゼとは無関係に、神経膠芽腫におけるテモゾロミド耐性を高める。Ｒｅｄｏｘ  Ｂｉｏｌ．２０１７；１３：６５５−６６４）。
【００７２】
図１Ａおよび１Ｂに示すように、ＪＭ１７は、ＴＭＺ感受性細胞Ａ１７２およびＰｔ＃３ならびにＴＭＺ耐性神経膠芽腫細胞株Ａ１７２-Ｒの増殖を有意に減少させた。
さらに、ＴＭＺ感受性Ｕ８７ＭＧおよびＴＭＺ耐性Ｕ８７ＭＧ-Ｒの両方の増殖は、ＪＭ１７によって、時間依存性および用量依存性の様式で阻害された（図１Ｂ）。
【００７３】
注目すべきことに、１０μＭまでの濃度のＪＭ１７は、正常マウス星状細胞の生存に影響を及ぼさず（データは示さず）、癌でない細胞に対する薬物の低い毒性を示した。
【００７４】
神経膠芽腫細胞に対するＪＭ１７作用のメカニズムをさらに解明し、ＪＭ１７がアポトーシスを誘導するかどうかを評価するために、カスパーゼ３／７、８および９の活性を、薬物で処理した細胞の上清において測定した。
ＪＭ１７は、２μＭで、Ｕ８７ＭＧおよびＰｔ＃３細胞におけるカスパーゼ３／７、８および９の活性を有意に増加させることが見出された（図２）。
これらのデータは、ＪＭ１７が外因性および内因性アポトーシス経路の両方を活性化することによって神経膠芽腫細胞において毒性を示すという概念を強く支持する。
ＪＭ１７はＧＳＨＲ活性を阻害することにより神経膠芽腫細胞に酸化ストレスを誘導する。
【００７５】
細胞レドックス不均衡は、ＧＢＭにおいて見出されており、これは、細胞レドックスホメオスタシスを改善する薬学的介入が、正の治療効果を提供し得ることを示す（Ｇｏｒｒｉｎｉ  Ｃ，Ｈａｒｒｉｓ  ＩＳ，Ｍａｋ  ＴＷ．、Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｏｘｉｄａｔｉｖｅ  ｓｔｒｅｓｓ  ａｓ  ａｎ  ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  ｓｔｒａｔｅｇｙ．  Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．２０１３；１２（１２）：９３１−９４７；  Ｓａｌａｚａｒ−Ｒａｍｉｒｏ  Ａ，Ｒａｍｉｒｅｚ−Ｏｒｔｅｇａ  Ｄ，、Ｐｅｒｅｚ  ｄｅ  ｌａ  Ｃｒｕｚ  Ｖ，ら、神経膠芽腫の発症における酸化還元状態の役割（Ｒｏｌｅ  ｏｆ  Ｒｅｄｏｘ  Ｓｔａｔｕｓ  ｉｎ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ）、Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１６；７：１５６）。
ＲＯＳレベルの増加はアポトーシスを誘導するので、ＲＯＳ産生を増加させるいくつかの化合物が、ＧＢＭに対する治療剤として考慮されている  （Ｓａｌａｚａｒ−Ｒａｍｉｒｏ  Ａ，Ｒａｍｉｒｅｚ−Ｏｒｔｅｇａ  Ｄ，Ｐｅｒｅｚ  ｄｅ  ｌａ  Ｃｒｕｚ  Ｖ，ら、神経膠芽腫の発症における酸化還元状態の役割（Ｒｏｌｅ  ｏｆ  Ｒｅｄｏｘ  Ｓｔａｔｕｓ  ｉｎ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  Ｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ．、Ｆｒｏｎｔ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１６；７：１５６）。
【００７６】
図３Ａ〜３Ｄに示すように、２μＭのＪＭ１７は、Ｕ８７ＭＧ細胞におけるＲＯＳ産生を有意に増加させた。
さらに、ＪＭ１７は、ＧＳＨ／ＧＳＳＧ比率の減少と同時に、Ｈ２Ｏ２濃度を有意に増加させ（図３Ｂ〜３Ｃ）、ＪＭ１７が神経膠芽腫における酸化ストレスの強力な誘導因子であることを示した。
さらに、減少したＧＳＨのレベルを維持する役割であるグルタチオンレダクターゼ（ＧＳＨＲ）活性は、用量依存的にＪＭ１７によって有意に減少した（図３Ｄ）。
総合すると、これらのデータは、ＪＭ１７の神経膠芽腫抑制効果が癌細胞におけるＲＯＳ蓄積によって媒介されるという仮説を支持する。
【００７７】
実施例２：多形神経膠芽腫（ＧＢＭ）動物モデルにおけるＡＳＣ-ＪＭ１７（ＪＭ１７）の有効性。
ＪＭ１７は同所性マウスモデルにおいて神経膠芽腫の増殖を阻害する
ｉｎ  ｖｉｖｏでのＪＭ１７の腫瘍抑制特性をさらに調べるために、頭蓋内移植ルシフェラーゼ発現Ｕ８７ＭＧ細胞を有するＧＢＭのマウスモデルを利用した。
【００７８】
実験は以下のように行った。
ＮＯＤ-ＳＣＩＤ雄マウス（８週齢）を、ＢｉｏＬＡＳＣＯ（登録商標）Ｔａｉｗａｎ  Ｃｏ．，Ｌｔｄ．（台北、台湾）から購入し、Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｈｅａｌｔｈ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ（台南、台湾）で維持した。
頭蓋内移植のために、ルシフェラーゼ発現Ｕ８７ＭＧ細胞（２×１０５）を、定位誘導およびマイクロプロセッサーシングルシリンジ（Ｈａｒｖａｒｄ  Ａｐｐａｒａｔｕｓ（登録商標），Ｈｏｌｌｉｓｔｏｎ，ＭＡ，ＵＳＡ）を使用して、３ｍｍの深さで皮質に注入した。
移植１０日後、ＪＭ１７を週３回静脈内投与した。
静脈内注射用の製剤を調製するために、ＤＭＳＯ（５０ｍｇ／ｍｌ）中のＪＭ１７ストックをＰＢＳおよびＴｗｅｅｎ  ８０（ＭｉｌｌｉｐｏｒｅＳｉｇｍａ（登録商標）Ｃｏｒｐｏｒａｔｅ）の混合物中に希釈した。
対照マウスをビヒクル（ＤＭＳＯ／ＰＢＳ／Ｔｗｅｅｎ）で処置した。
移植後１０日目に、マウスを４つの処置群（１群あたり５匹のマウス）に無作為化し、ビヒクルまたはＪＭ１７を２０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇおよび８０ｍｇ／ｋｇの用量で週３回静脈内処置した。
処置を６３日目に停止した。
ルシフェラーゼ活性を、腫瘍サイズの尺度として、ＩＶＩＳ  ２００システム（Ｘｅｎｏｇｅｎ（登録商標）Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ａｌａｍｅｄａ，ＣＡ，ＵＳＡ）によってモニターした。
【００７９】
この実験の結果を図４Ａ〜４Ｃに示す。
図４Ａから明らかなように、Ｕ８７ＭＧ細胞のルシフェラーゼ活性は、１０日目に容易に検出可能であり、このことは、腫瘍が、処置が開始される時点までに確立されたことを示す。
予想通り、腫瘍は、ビヒクル（ＤＭＳＯ）を投与された対照群において急速に増殖していた。
移植されたＵ８７ＭＧ細胞の増殖は、ＪＭ１７を注射したマウスにおいて有意に阻害された（図４Ａ〜４Ｂ）。
重要なことに、この阻害は濃度依存性であった（図４Ａ）。
【００８０】
さらに、ルシフェラーゼ発現Ｕ８７ＭＧ細胞を移植したマウスの全生存期間は、ＪＭ１７処理によって影響を受けた。
対照群からの全ての動物は、３４日後に生存しなかった（これらのマウスは、２７〜３４日目に死んだ）。
生存期間は、２０、４０および８０ｍｇ／ｋｇのＪＭ１７投与によって、それぞれ３４〜４１日目、３８〜６６日目および４４〜７６日目まで有意に延長された（図４Ｃ）。
【００８１】
これらのデータは、ＪＭ１７がＧＢＭ患者において腫瘍増殖を抑制し、全生存期間を増加させ得るという仮説を支持する証拠を提供する。
ＪＭ１７は同所性マウスモデルにおいてＴＭＺ耐性神経膠芽腫の増殖を阻害する
【００８２】
ＪＭ１７が培養中のＴＭＺ耐性細胞Ｕ８７ＭＧ-Ｒの増殖を阻害することを見出したので、ＪＭ１７の腫瘍抑制効果を、Ｃｈａｎｇら（Ｃｈａｎｇ  ＫＹ，  Ｈｓｕ  ＴＩ，  Ｈｓｕ  ＣＣ，ら）によって開発された頭蓋内脳腫瘍マウスモデルにおいてさらに評価した。
特異性タンパク質（Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ  ｐｒｏｔｅｉｎ）  １‐調節スーパーオキシドジスムターゼ２は、Ｏ（６）‐メチルグアニン‐ＤＮＡメチルトランスフェラーゼに依存しない神経膠芽腫においてテモゾロミド耐性を増強する。Ｒｅｄｏｘ  Ｂｉｏｌ．、２０１７；１３：６５５−６６４。
簡単に述べると、頭蓋バーホールを最初に右前頭脳領域に形成した。
その後、立体静止ガイディングを用いて、超微細針を３ｍｍの深さまで挿入し、５×１０５のＴＭＺ耐性細胞を注入した。
【００８３】
２８週齢ヌードマウスにＵ８７ＭＧ―Ｒ移植を行った。
５日後、これらの動物を４つの処置群（１群あたり７匹の動物）に無作為化し、これに経口強制投与によりＴＭＺ  （１５ｍｇ／ｋｇ）および静脈内注射によりＪＭ１７を週３回（週の１、３、５日目）以下のように投与した：対照（未処置）、ＴＭＺ＋ビヒクル、ＴＭＺ＋ＪＭ１７（５ｍｇ／ｋｇ）およびＴＭＺ＋ＪＭ１７（２０ｍｇ／ｋｇ）  （図５）。
【００８４】
生存期間の中央値は、対照（未処理）群では２１日であった（図６）。
予想されたように、ＴＭＺ単独（ＴＭＺ＋ビヒクル）は、ＴＭＺ耐性腫瘍を有する動物の生存に影響を及ぼさなかった。
生存期間の中央値は、ＴＭＺ＋ビヒクル群で２０日であった。
マウスの生存期間中央値は、ＪＭ１７処置によって２４日間（５ｍｇ／ｋｇで）および２８日間（２０ｍｇ／ｋｇで）に増加した。
Ｌｏｇ−Ｒａｎｋ検定による統計分析では、生存期間の２０日から２８日への延長が統計的に有意であった（ｐ＜０．０１）。
【００８５】
体重の評価は、臨床的に関連性のあるエンドポイントとして、実験的なマウスのがん研究において罹患率を監視するために使用される検証されたアプローチである（Ｐａｓｔｅｒ  ＥＶ，  Ｖｉｌｌｉｎｅｓ  ＫＡ，  Ｈｉｃｋｍａｎ  ＤＬ．  Ｅｎｄｐｏｉｎｔｓ  ｆｏｒ  ｍｏｕｓｅ  ａｂｄｏｍｉｎａｌ  ｔｕｍｏｒ  ｍｏｄｅｌｓ：  ｒｅｆｉｎｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｃｕｒｒｅｎｔ  ｃｒｉｔｅｒｉａ．  Ｃｏｍｐ  Ｍｅｄ．、２００９；５９（３）：２３４−２４１）。
図７に示すように、ＧＢＭ接種マウスは、約４〜６日間体重を保持し、次いで体重減少が始まり、これは疾患の進行を示す。
これらの動物におけるＧＢＭはＴＭＺ耐性であるので、ＴＭＺ処置が体重減少を予防しないことは驚くべきことではない。
対照的に、ＪＭ１７処置は、ＴＭＺ処置対照と比較した場合、これらの実験で使用した両方の用量レベルで体重消耗を有意に減少させた（図７）。
【００８６】
本発明は、上述の特定の実施形態に関連して説明されたが、それに対する多くの代替物およびその修飾および変形は、当業者には明らかであろう。
そのようなすべての代替、修飾、および変形は、本発明の範囲内にあるとみなされる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【外国語明細書】
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