(57)【要約】      （修正有）【課題】観察時に標本が動かず、また浮かんだり歪んだりせず、更にはカバーガラスなしでも安定的に顕微鏡にセットすることができる観察標本セット用具の提供。【解決手段】観察標本セット用具Ｐは、貫通穴部１１を有する透明合成樹脂製シート１０と、透明合成樹脂製シート１０の貫通穴部１１より広い面積を有する２枚のカバーガラス２０、３０と、透明合成樹脂製シート１０の両端部を挟持する２個のアダプター４０，５０とから成る。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
貫通穴部を有する透明合成樹脂製シートと、当該透明合成樹脂製シートの貫通穴部より広い面積を有する２枚のカバーガラスと、当該透明合成樹脂製シートの両端部を挟持する２個のアダプターとから成ることを特徴とする顕微鏡への観察標本セット用具。
【請求項２】
前記アダプターが、端部に透明合成樹脂製シート挟持用凹溝部を有することを特徴とする請求項１記載の顕微鏡への観察標本セット用具。
【請求項３】
前記観察標本が、透明化処理した生体組織のスライス標本であることを特徴とする請求項１又は２記載の顕微鏡への観察標本セット用具。
【請求項４】
透明合成樹脂製シートの上面に、第１のカバーガラスを固定して貫通穴部を閉止するステップと；当該第１のカバーガラス側の面を下面として、透明合成樹脂製シートの貫通穴部から露出した第１のカバーガラス面に観察標本を置き、アガロースを添加するステップと；当該標本及びアガロースの上から第２のカバーガラスを載せるステップと；当該第２のカバーガラスの上からパラフィンフィルム、次いで重りを載せて静置するステップと；当該重りとパラフィンフィルムを取り除くステップと；当該透明合成樹脂製シートの両端部をアダプターで挟持するステップと；当該アダプターで挟持した透明合成樹脂製シートを顕微鏡ステージに設置するステップとを有することを特徴とする顕微鏡への観察標本セット方法。
【請求項５】
前記重りとパラフィンフィルムを取り除くステップの後に、更に２枚のカバーガラスを取り除くステップを有することを特徴とする請求項４記載の顕微鏡への観察標本セット方法。
【請求項６】
前記アダプターで挟持した透明合成樹脂製シートをディッシュに入れて顕微鏡ステージに設置することを特徴とする請求項４又は５記載の顕微鏡への観察標本セット方法。
【請求項７】
前記観察標本が、透明化処理した生体組織のスライス標本であることを特徴とする請求項４〜６のいずれか１項記載の顕微鏡への観察標本セット方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、顕微鏡への観察標本セット用具及び方法、特に透明化処理した生体組織のスライス標本を顕微鏡のステージにセットするのに好適な用具及びそれを用いたセット方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、観察標本、特に透明化処理した生体組織のスライス標本を顕微鏡にセットする方法としては、スライドガラスの上面に、貫通穴部を有するシリコンゴムシートを密着させて、当該シートの貫通穴部から露出したスライドガラス面にスライス標本を置き、マウント溶液で浸した後、その上方からカバーガラスを密着させた状態で顕微鏡ステージにセットする方法が既に知られている（例えば、非特許文献１参照）。
【０００３】
しかしながら、斯かる従来の方法によるときは、マウント溶液で浸すとスライス標本が観察時に動いてしまう問題があった。そこでこれを防止すべくアガロースゲルで固定することも行なわれているが、アガロースゲルの粘性と比重が高いことから往々にして、スライス標本が浮かんだり、歪んだりしてしまう問題があった。
また、当該従来の方法で用いられているシリコンゴムシートは、強度が不足するため、カバーガラスなしのシリコンゴムシートのみでは顕微鏡にセットできないのが実状であった。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】See Through Chamber製品情報、富士フイルム和光純薬株式会社、〔2019年5月23日検索〕、インターネット<URL:https://labchem-wako.fujifilm.com/jp/category/00597.html>
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は、上記の如き従来の問題と実状に鑑みてなされたものであり、観察時に標本が動かず、また浮かんだり歪んだりせず、更にはカバーガラスなしでも安定的に顕微鏡にセットすることができる観察標本セット用具と、それを用いたセット方法を提供することを課題としている。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は、上記の課題を解決すべく種々研究を重ねた結果、貫通穴部を有する透明合成樹脂製シートと、当該透明合成樹脂製シートの両端部を挟持するアダプターを用いれば、極めて良い結果が得られることを見い出し、本発明を完成した。
【０００７】
すなわち、本発明は、貫通穴部を有する透明合成樹脂製シートと、当該透明合成樹脂製シートの貫通穴部より広い面積を有する２枚のカバーガラスと、当該透明合成樹脂製シートの両端部を挟持する２個のアダプターとから成ることを特徴とする顕微鏡への観察標本セット用具により上記課題を解決したものである。
【０００８】
また、本発明は、透明合成樹脂製シートの上面に、第１のカバーガラスを固定して貫通穴部を閉止するステップと；当該第１のカバーガラス側の面を下面として、透明合成樹脂製シートの貫通穴部から露出した第１のカバーガラス面に観察標本を置き、アガロースを添加するステップと；当該標本及びアガロースの上から第２のカバーガラスを載せるステップと；当該第２のカバーガラスの上からパラフィンフィルム、次いで重りを載せて静置するステップと；当該重りとパラフィンフィルムを取り除くステップと；当該透明合成樹脂製シートの両端部をアダプターで挟持するステップと；当該アダプターで挟持した透明合成樹脂製シートを顕微鏡ステージに設置するステップとを有することを特徴とする顕微鏡への観察標本セット方法により上記課題を解決したものである。
【発明の効果】
【０００９】
本発明の観察標本セット用具を用いれば、透明合成樹脂製シートが十分な強度を有し、しかもその両端をアダプターで挟持して顕微鏡ステージに安定的にセットすることができ、カバーガラスなしでの観察が可能となる。また、観察標本の厚みに合わせて透明合成樹脂製シートの厚みを自由に変更できるが、本発明においてはアダプターを介することにより、透明合成樹脂製シートの両端部を常に一定の厚み（例えば１ｍｍ）で保持し得るので、安定的に顕微鏡ステージに設置することができる。
【００１０】
また、本発明の観察標本セット方法によれば、マウント溶液を使用しないので、観察時に標本が動くことがなく、またアガロースを添加した透明合成樹脂製シートを上下からカバーガラスで挟み、更に重りで観察標本を圧着するので、観察標本が浮かんだりせず、また歪みや変形することもない。従って、観察標本が一定の厚さで水平状態に、しかも上・下面が平行状態に保持されるので、精度良く、しかも効率的に顕微鏡観察をすることができる。特に、当該上限両面にカバーガラスを付けた状態であれば、観察標本の密閉性が高く、５日間程度は室温でも標本の透明性に大きな変化は生じず、高い標本保持性・携帯性が得られる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】本発明観察標本セット用具の断面説明図。
【図２】本発明観察標本セット用具における透明合成樹脂製シートの平面説明図。
【図３】本発明観察標本セット用具におけるカバーガラスの平面説明図。
【図４】本発明観察標本セット用具におけるアダプターの平面説明図。
【図５】本発明観察標本セット方法のステップ例を示す断面説明図。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
以下本発明の一実施の形態を図面と共に説明する。
【００１３】
図１において、Ｐは観察標本セット用具で、透明合成樹脂製シート１０と、２枚のカバーガラス２０，３０と、２個のアダプター４０，５０とから構成されている。
この透明合成樹脂製シート１０は、その中央部に図１及び図２に示すように貫通穴部１１を有している。ここに合成樹脂としては、例えば、株式会社キーエンス製「ＡＧＩＬＩＳＴＡ  ＡＲ−Ｍ２（商品名）」が強度付与性の点で有利なものとして挙げられる。また、透明合成樹脂製シート１０のサイズとしては特に限定されないが、例えば、縦２６ｍｍ、横５５ｍｍの長方形状のものが好適なものとして挙げられ、またその中央部の貫通穴部１１のサイズも特に限定されないが、例えば、縦９ｍｍ、横３０ｍｍの長方形状で、角部に丸味を付与したものが好適なものとして挙げられる。尚、透明合成樹脂製シート１０の厚さは観察標本の厚みに合わせて適宜設定できるが、通常１ｍｍ程度が好ましい。
【００１４】
カバーカラス２０，３０は、図３に示すように、従来の透明なカバーガラスと同様なもので、そのサイズは透明合成樹脂製シート１０の貫通穴部１１より広い面積を有するものであれば特に限定されず、透明合成樹脂製シート１０と同じサイズか、あるいはそれより小さい例えば、縦２４ｍｍ、横３６ｍｍの長方形状で、厚さ１ｍｍ程度のものが好適に使用される。
【００１５】
アダプター４０，５０は、図１及び図４に示すように、全体として長方形状の平板体から成り、その長手辺の一方の端部に凹溝部４１，５１を有し、これにより透明合成樹脂製シート１０両端部を挟持するようになっている。当該凹溝部４１，５１のサイズは、透明合成樹脂製シート１０のサイズに合せて適宜選定されるが、例えば、図１に示される断面図において間口巾が１．５５ｍｍ、奥行が７．２ｍｍの凹溝が好適なものとして挙げられ、またアダプター全体のサイズとしては、例えば図４において縦が１６．２ｍｍ、横が４．５ｍｍの長方形状が好適なものとして挙げられる。また、アダプター４０，５０の厚さは、全体として均一な厚さであっても良いが、例えば、凹溝部４１，５１が存在するエリア４０ａ，５０ａにおいては断面略コの字状とし、当該凹溝部を形成する上下の壁厚をそれぞれ１．５ｍｍとし、凹溝部の間口巾を含めて全体として４．５５ｍｍの厚さとする一方、凹溝部４１，５１が存在しないエリア４０ｂ，５０ｂにおいては２ｍｍの薄板状とするのが、顕微鏡のステージに安定的にセットする上で好適なものとして挙げられる。尚、アダプター４０，５０の材質としては、例えば、ポリ乳酸樹脂等が好適なものとして挙げられる。
【００１６】
次に、斯かる観察標本セット用具を用いた本発明の観察標本セット方法を図５を用いて説明する。
【００１７】
まず、透明合成樹脂製シート１０の上面に、第１のカバーガラス２０を固定して当該シート１０の貫通穴部１１を閉止する（図５（１））。ここに、第１カバーガラス２０の固定には適宜瞬間接着剤やアガロースゲルを用いることができる。
【００１８】
次に、上下反転せしめて、当該第１のカバーガラス２０側の面を下面とし、透明合成樹脂製シート１０の貫通穴部１１から露出した第１のカバーガラス２０の上面に、観察標本６０を置く（図５（２））。ここに、観察標本６０としては、透明化処理した生体組織のスライス標本が特に効果的である。
【００１９】
次に、当該観察標本６０が置かれた貫通穴部１１にアガロース７０を添加し、その上から気泡が入らないように第２のカバーガラス３０をゆっくり載せる（図５（３））。ここにアガロース７０としては、例えば０．５〜１．５％の低融点アガロースが好適に使用される。
【００２０】
次に、当該第２のカバーガラスの上からパラフィンフィルム８０を載せた後、更に重り９０を載せて３０分間程度静置し、アガロースを固化せしめる（図５（４））。ここに重り９０の材質としては例えば鉛が好適なものとして挙げられ、その重量としては計３５０〜５００ｇ程度とするのが好ましい。
【００２１】
次に、当該重り９０とパラフィンフィルム８０を取り除く（図５（５））。更に撮影時にカバーガラスが不要な対物レンズ仕様の場合には、第１カバーガラス２０及び第２カバーガラス３０も取り除き、当該透明合成樹脂製シート１０の両端部を、アダプター４０の凹溝部４１に挿入して挟持せしめる（図５（６））。
次に、このアダプター４０で挟持した状態で透明合成樹脂製シート１０を顕微鏡ステージに設置する（図示省略）。
尚、長時間に渡る撮影が必要で、液の蒸発が無視できない場合や、対物レンズの作動距離が長い場合（数ｍｍ）には、当該アダプター４０で挟持した透明合成樹脂製シート１０をディッシュに入れ液に浸して顕微鏡ステージに設置するのが望ましい。
【符号の説明】
【００２２】
Ｐ：観察標本セット用具
１０：透明合成樹脂製シート
１１：貫通穴部
２０：第１カバーガラス
３０：第２カバーガラス
４０，５０：アダプター
４１，５１：凹溝部
６０：観察標本
７０：アガロース
８０：パラフィンフィルム
９０：重り
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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