(57)【要約】      （修正有）【課題】肌のハリ・弾力を高めることができる化粧料の有効成分の提供。【解決手段】ケイヒエキスを含有する、ノルアドレナリン受容体及び／又はオキシトシン受容体の増殖促進剤。ケイヒエキスを含有する、肌の押し返し力を高めるための皮膚外用剤。【効果】線維芽細胞においてノルアドレナリン及び／又はオキシトシンに対する感受性を高め、テネイシンＸの産生を促進させ、内側から押し返す力の強い肌に導く。【選択図】図１
2020200240.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ケイヒエキスを含有する、ノルアドレナリン受容体及び／又はオキシトシン受容体の増殖促進剤。
【請求項２】
ケイヒエキスを含有する、テネイシンＸ産生促進剤。
【請求項３】
さらにノルアドレナリン分泌促進剤及び／又はオキシトシン分泌促進剤を含有する、請求項２に記載のテネイシンＸ産生促進剤。
【請求項４】
ケイヒエキスを含有する、肌の押し返し力を高めるための皮膚外用剤。
【請求項５】
化粧料である、請求項４に記載の皮膚外用剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ケイヒエキスの新規用途に関し、ケイヒエキスを含有する製剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
シワやタルミ等の皮膚老化症状は、見た目の印象に大きな影響を与えるものであるため、その改善への関心は高い。近年、皮膚老化症状の改善を目的とする、抗老化剤、抗シワ剤、保湿剤等の開発が盛んに行われており、ハリ・弾力のある肌を得るための化粧料が種々提案されている（特許文献１〜３等）。
【０００３】
真皮及び皮下線維構造には、糖タンパク質のひとつであるテネイシンＸが存在し、コラーゲン線維どうしをつなぎ止め、細胞外マトリックスの間隔を形成し、肌の圧縮応力を高めている（非特許文献１〜３等）。テネイシンＸは、線維芽細胞から分泌されることが知られている（非特許文献４）。
これまでにテネイシンＸを抗老化剤のターゲットとした例はみられない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１５−１３１７９７号公報
【特許文献２】特開２０１５−１７４８５７号公報
【特許文献３】特開２００３−１７１２２５号公報
【特許文献４】特開２０１５−１３４７５１号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】JID., 2004;122.885-891
【非特許文献２】Cell Adh. Migr., 2015;9(1-2).154-65
【非特許文献３】Biophys. Chem., 2010;147(1-2):87-91
【非特許文献４】IJBCB., 2004:36.1085-1089
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
ハリ・弾力のある肌は若々しく健康的な印象が得られるため、そのような効果が得られる化粧料の需要は高い。しかしながら、従前の抗老化用化粧料では、十分な効果が得られない場合があり、さらなる有効成分が求められている。
本発明は、このような状況下においてなされたものであり、肌の内側から押し返すようなハリ・弾力（圧縮応力）を高めることができる化粧料の有効成分を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明者らは、圧縮応力が高い肌を触ると好奇心があがることを見出した。そこで、テネイシンＸの肌の圧縮応力を高める作用に着目し、その産生を促進する成分が肌の押し返し力を高めるための化粧料の有効成分として適することに想到した。そして、鋭意努力を重ねた結果、テネイシンＸは好奇心があがることで分泌が促されるであろうノルアドレナリンやオキシトシン等の神経伝達物質の線維芽細胞への結合量が増加するとその産生量が増加することを見出した。さらに、ケイヒエキスが線維芽細胞においてノルアドレナリン受容体やオキシトシン受容体を増殖させて、線維芽細胞のノルアドレナリンやオキシトシンに対する感受性を高めることができることを見出し、本発明を完成させるに至った。
【０００８】
すなわち、本発明はケイヒエキスの新規用途に関し、具体的には以下の通りである。
［１］ケイヒエキスを含有する、ノルアドレナリン受容体及び／又はオキシトシン受容体の増殖促進剤。
［２］ケイヒエキスを含有する、テネイシンＸ産生促進剤。
［３］さらにノルアドレナリン分泌促進剤及び／又はオキシトシン分泌促進剤を含有する、［２］に記載のテネイシンＸ産生促進剤。
［４］ケイヒエキスを含有する、肌の押し返し力を高めるための皮膚外用剤。
［５］化粧料である、［４］に記載の皮膚外用剤。
【発明の効果】
【０００９】
本発明によれば、線維芽細胞においてノルアドレナリン及び／又はオキシトシンに対する感受性を高めることができる、ノルアドレナリン受容体及び／又はオキシトシン受容体の増殖促進剤が提供される。また、前記感受性を高めることによりテネイシンＸの産生を促進させ、内側から押し返す力の強い肌に導くことができる化粧料の有効成分が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】ケイヒエキスを添加した線維芽細胞におけるノルアドレナリン受容体（ＡＤＲＢ２）の相対発現量を表すグラフ。
【図２】ケイヒエキスを添加した線維芽細胞におけるオキシトシン受容体（ＯＸＴＲ）の相対発現量を表すグラフ。
【図３】被験試料を添加した線維芽細胞におけるテネイシンＸの相対発現量を表すグラフ。
【図４】ケイヒエキス含有皮膚外用剤を連用した肌の押し返し力の相対値を表すグラフ。
【図５】ケイヒエキス含有皮膚外用剤を連用した被験者に対する多面的感情状態尺度アンケートによる評点の相対変化を表すグラフ。
【図６】疑似皮膚を押した被験者に対するアンケートによるＶＡＳ回答値の平均を表すグラフ（各棒グラフの左：疑似皮膚Ａ、右：疑似皮膚Ｂ）。
【図７】疑似皮膚を押した被験者に対する多面的感情尺度アンケートによるＶＡＳ回答値の平均を表すグラフ（各棒グラフの左：疑似皮膚Ａ、右：疑似皮膚Ｂ）。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
本発明におけるケイヒエキスは、クスノキ科の植物カシア（Cinnamomum cassia）の樹
皮の抽出物、抽出物の画分、精製した画分、及びそれらの溶媒除去物の総称を指す。抽出溶媒としては、水、エタノール、イソプロピルアルコール、ブタノールなどのアルコール類、１，３−ブタンジオール、ポリプロピレングリコールなどの多価アルコール類、アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類、ジエチルエーテル、テトラヒドロフランなどのエーテル類等の極性溶媒から選択される１種乃至は２種以上が好適なものとして例示することができる。具体的な抽出方法としては、例えば、植物体等の抽出に用いる部位乃至はその乾燥物を予め粉砕あるいは細切したもの１質量部に対して、溶媒を１〜３０質量部加え、室温であれば数日間、沸点付近の温度であれば数時間浸漬し、室温まで冷却し後、所望により不溶物及び／又は溶媒除去し、カラムクロマトグラフィー等で分画精製する方法が挙げられる。
【００１２】
通常、線維芽細胞にはノルアドレナリン受容体及び／又はオキシトシン受容体が存在するところ、ケイヒエキスはこれらの受容体の増殖を促進する作用を有する。
ここで、線維芽細胞において前記受容体が増殖したことは、前記受容体タンパク質量や前記タンパク質をコードする遺伝子の発現量を常法により測定したり、線維芽細胞におけるノルアドレナリン及び／又はオキシトシンの感受性を測定したりすることにより確認で
きる。
ケイヒエキスが線維芽細胞においてノルアドレナリン受容体やオキシトシン受容体を増殖させることにより、線維芽細胞のノルアドレナリンやオキシトシンに対する感受性が高まる。そうすると、通常真皮にはノルアドレナリンやオキシトシンが存在するため、テネイシンＸ産生量が増加する。すなわち、間接的にケイヒエキスはテネイシンＸ産生促進剤として機能する。このようなテネイシンＸ産生量増加は、ノルアドレナリンやオキシトシンの存在量が必ずしも大きくなくても、受容体増加による感受性向上により得られる。なお、ケイヒエキス非存在下においては、ノルアドレナリン及び／又はオキシトシンの存在量依存的にテネイシンＸ産生量が増加することが、本発明者らにより確認されている。
テネイシンＸは真皮及び皮下線維構造における圧縮応力を担うため、ケイヒエキスを含有する皮膚外用剤は、ハリ・弾力、とりわけ内側から押し返す力を高める作用を持つ。
【００１３】
また、後述の試験例で示されるように、内側から押し返す力のある肌を触ると、好奇心が高まり積極的な心理状態となることが分かっている。このような昂揚感により、さらにノルアドレナリンやオキシトシンが分泌され、線維芽細胞におけるテネイシンＸ産生量が増加するという好循環が得られる点でも本発明の剤は有用である。
【００１４】
ケイヒエキスを含有するテネイシンＸ産生促進剤においては、さらにノルアドレナリン分泌促進剤及び／又はオキシトシン分泌促進剤を含有することが好ましい。これは、テネイシンＸの産生は、ノルアドレナリンやオキシトシンの線維芽細胞上の受容体への結合により促されるため、ノルアドレナリンやオキシトシンの量が増加することにより、さらにテネイシンＸ産生効果が高められるからである。
ノルアドレナリン分泌促進剤としては、例えばミルタザピン等が挙げられる。
オキシトシン分泌促進剤としては、例えばＰｒＲＰ（１９Ｐ２−Ｌ３１）等が挙げられる。
また、ここでいう「ノルアドレナリン分泌促進剤」、「オキシトシン分泌促進剤」は医薬等の医療用成分に限られず、ノルアドレナリンやオキシトシンの分泌を促しうる成分であればよい。また、ノルアドレナリンが関与している活動的な感情、及び／又はオキシトシンが関与する神話的な感情を、高める（増強させる）ことができる成分、感触の剤型、香料なども、ケイヒエキスとの併用に好ましい。
【００１５】
本発明の剤を皮膚外用剤に含有させる場合、ケイヒエキスの含有量は、皮膚外用剤全量に対して総量で、好ましくは０．００００１質量％以上、より好ましくは０．００１質量％以上、さらに好ましくは０．１質量％以上であり、また好ましくは１５質量％以下、より好ましくは１０質量％以下、さらに好ましくは５質量％以下である。
かかる範囲とすることにより、所望の効果を得やすく、また処方設計の自由度を確保できる。
【００１６】
本発明の皮膚外用剤の剤型としては、ローション剤型、乳液やクリーム等の乳化剤型、オイル剤型、オイルゲル剤型、ジェル剤型、パック、洗浄料等が挙げられ、特に限定されない。
また、本発明の皮膚外用剤は、化粧料及び医薬部外品の態様に好適である。
【００１７】
本発明の皮膚外用剤においては、ケイヒエキス以外に、通常の皮膚外用剤で使用される任意成分を本発明の効果を損なわない限りにおいて任意に含有することができる。この様な任意成分としては、各種有効成分、油性成分、界面活性剤、多価アルコール、増粘剤、粉体類、紫外線吸収剤等が挙げられる。
【００１８】
有効成分としては、美白成分、シワ改善成分、抗炎症成分、他の動植物由来の抽出物等が挙げられる。
美白成分としては、一般的に化粧料に用いられているものであれば特に限定はない。例えば、４−ｎ−ブチルレゾルシノール、アスコルビン酸グルコシド、３−О−エチルアスコルビン酸、アルブチン、エラグ酸、コウジ酸、リノール酸、ニコチン酸アミド、５，５'−ジプロピルビフェニル−２，２'−ジオール、５'−アデニル酸二ナトリウム、４−メ
トキシサリチル酸カリウム塩、ハイドロキノン、パントテン酸等が挙げられる。
【００１９】
シワ改善成分としては、一般的に化粧料に用いられているものであれば特に限定はない。例えば、三フッ化イソプロピルオキソプロピルアミノカルボニルピロリジンカルボニルメチルプロピルアミノカルボニルベンゾイルアミノ酢酸ナトリウム、ニコチン酸アミド、ビタミンＡ又はその誘導体（レチノール、レチナール、レチノイン酸、トレチノイン、イソトレチノイン、レチノイン酸トコフェロール、パルミチン酸レチノール、酢酸レチノール等）、ウルソール酸ベンジルエステル、ウルソール酸リン酸エステル、ベツリン酸ベンジルエステル、ベンジル酸リン酸エステルが挙げられる。
【００２０】
抗炎症成分としては、グリチルリチン酸、グリチルレチン酸、アラントイン、イソプロピルメチルフェノール、クラリノン、グラブリジン、サリチル酸、トコフェロール酢酸エステル、トコフェロールニコチン酸エステル、ニコチン酸アミド、パントテン酸、パントテニルアルコール、及びこれらの塩又は誘導体等が挙げられ、好ましくは、グリチルリチン酸及びその塩、グリチルレチン酸及びその塩、パントテニルアルコール並びにパントテン酸及びその塩である。
【００２１】
他の動植物由来の抽出物としては、一般的に化粧料等に用いられているものであれば特に限定はない。例えば、アケビエキス、アスナロエキス、アスパラガスエキス、アボカドエキス、アマチャエキス、アーモンドエキス、アルニカエキス、アロエエキス、アロニアエキス、アンズエキス、イチョウエキス、インドキノエキス、ウイキョウエキス、ウドエキス、エイジツエキス、エゾウコギエキス、エンメイソウエキス、オウゴンエキス、オウバクエキス、オウレンエキス、オタネニンジンエキス、オトギリソウエキス、オドリコソウエキス、オレンジエキス、カキョクエキス、カッコンエキス、カモミラエキス、カロットエキス、カワラヨモギエキス、キウイエキス、キューカンバーエキス、グアバエキス、クジンエキス、クチナシエキス、クマザサエキス、クララエキス、クルミエキス、グレープフルーツエキス、黒米エキス、クロレラエキス、クワエキス、ケイケットウエキス、ゲットウヨウエキス、ゲンチアナエキス、ゲンノショウコエキス、紅茶エキス、ゴボウエキス、コメエキス、コメ発酵エキス、コメヌカ発酵エキス、コメ胚芽油、コケモモエキス、サルビアエキス、サボンソウエキス、ササエキス、サンシャエキス、サンショウエキス、シイタケエキス、ジオウエキス、シコンエキス、シソエキス、シナノキエキス、シモツケソウエキス、シャクヤクエキス、ショウキョウエキス、ショウブ根エキス、シラカバエキス、スギナエキス、ステビアエキス、ステビア発酵物、セイヨウキズタエキス、セイヨウサンザシエキス、セイヨウニワトコエキス、セイヨウノコギリソウエキス、セイヨウハッカエキス、セージエキス、ゼニアオイエキス、センキュウエキス、センブリエキス、ソウハクヒエキス、ダイオウエキス、ダイズエキス、タイソウエキス、タイムエキス、タンポポエキス、茶エキス、チョウジエキス、チンピエキス、甜茶エキス、トウガラシエキス、トウキエキス、トウキンセンカエキス、トウニンエキス、トウヒエキス、ドクダミエキス、トマトエキス、納豆エキス、ニンジンエキス、ニンニクエキス、ノバラエキス、ハイビスカスエキス、バクモンドウエキス、ハスエキス、パセリエキス、バーチエキス、ハマメリスエキス、ヒキオコシエキス、ヒノキエキス、ビワエキス、フキタンポポエキス、フキノトウエキス、ブクリョウエキス、ブッチャーブルームエキス、ブドウエキス、ブドウ種子エキス、ヘチマエキス、ベニバナエキス、ペパーミントエキス、ボダイジュエキス、ボタンエキス、ホップエキス、マツエキス、マヨナラエキス、マロニエエキス、ミズバショウエキス、ムクロジエキス、メリッサエキス、モズクエキス、モモエキス、ヤグルマギクエキス、ユーカリエキス、ユキノシタエキス、ユズエキス、ユリエキス、ヨクイニンエキ
ス、ヨモギエキス、ラベンダーエキス、緑茶エキス、リンゴエキス、ルイボス茶エキス、レイシエキス、レタスエキス、レモンエキス、レンギョウエキス、レンゲソウエキス、ローズエキス、ローズマリーエキス、ローマカミツレエキス、ローヤルゼリーエキス、ワレモコウエキス等のエキスが好ましいものとして挙げられる。
【００２２】
油性成分としては、極性油、揮発性炭化水素油等が挙げられる。
極性油としては、合成エステル油として、ミリスチン酸イソプロピル、オクタン酸セチル、ミリスチン酸オクチルドデシル、パルミチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラウリン酸ヘキシル、ミリスチン酸ミリスチル、オレイン酸デシル、ジメチルオクタン酸ヘキシルデシル、乳酸セチル、乳酸ミリスチル、酢酸ラノリン、イソノナン酸２−エチルヘキシル、ステアリン酸イソセチル、イソステアリン酸イソセチル、１２−ヒドロキシステアリン酸コレステリル、ジ−２−エチルヘキサン酸エチレングリコール、ジペンタエリスリトール脂肪酸エステル、モノイソステアリン酸Ｎ−アルキルグリコール、ジカプリン酸ネオペンチルグリコール、リンゴ酸ジイソステアリル、ジ−２−ヘプチルウンデカン酸グリセリル、トリ−２−エチルヘキサン酸トリメチロールプロパン、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパン、テトラ−２−エチルヘキサン酸ペンタンエリスリトール、トリ−２−エチルヘキサン酸グリセリル、トリイソステアリン酸トリメチロールプロパンを挙げることができる。
【００２３】
さらに、セチル２−エチルヘキサノエート、２−エチルヘキシルパルミテート、トリミリスチン酸グリセリル、トリ−２−ヘプチルウンデカン酸グリセライド、ヒマシ油脂肪酸メチルエステル、オレイン酸オイル、セトステアリルアルコール、アセトグリセライド、パルミチン酸２−ヘプチルウンデシル、アジピン酸ジイソブチル、Ｎ−ラウロイル−Ｌ−グルタミン酸−２−オクチルドデシルエステル、アジピン酸ジ−２−ヘプチルウンデシル、エチルラウレート、セバチン酸ジ−２−エチルヘキシル、ミリスチン酸２−ヘキシルデシル、パルミチン酸２−ヘキシルデシル、アジピン酸２−ヘキシルデシル、セバチン酸ジイソプロピル、コハク酸２−エチルヘキシル、酢酸エチル、酢酸ブチル、酢酸アミル、クエン酸トリエチル、オクチルメトキシシンナメート等も挙げられる。
【００２４】
また、天然油として、アボガド油、ツバキ油、タートル油、マカデミアナッツ油、トウモロコシ油、ミンク油、オリーブ油、ナタネ油、卵黄油、ゴマ油、パーシック油、小麦胚芽油、サザンカ油、ヒマシ油、アマニ油、サフラワー油、綿実油、エノ油、大豆油、落花生油、茶実油、カヤ油、コメヌカ油、シナギリ油、日本キリ油、ホホバ油、胚芽油、トリグリセリン、トリオクタン酸グリセリル、トリイソパルミチン酸グリセリル等が挙げられる。
【００２５】
揮発性炭化水素油としては、イソドデカン、イソヘキサデカン等が挙げられる。
【００２６】
界面活性剤としては、脂肪酸セッケン（ラウリン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム等）、ラウリル硫酸カリウム、アルキル硫酸トリエタノールアミンエーテル等のアニオン界面活性剤類、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、ラウリルアミンオキサイド等のカチオン界面活性剤類、ベタイン系界面活性剤（アルキルベタイン、アミドベタイン、スルホベタイン等）、イミダゾリン系両性界面活性剤（２−ココイル−２−イミダゾリニウムヒドロキサイド−１−カルボキシエチロキシ２ナトリウム塩等）、アシルメチルタウリン等の両性界面活性剤類、ソルビタン脂肪酸エステル類（ソルビタンモノステアレート、セスキオレイン酸ソルビタン等） 、グリセリン脂肪酸エステ
ル類（モノステアリン酸グリセリル等）、プロピレングリコール脂肪酸エステル類（モノステアリン酸プロピレングリコール等）、硬化ヒマシ油誘導体、グリセリンアルキルエーテル、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステル類（ＰＯＥソルビタンモノオレエート、モノステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン等）、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル類（ＰＯ
Ｅ−ソルビットモノラウレート等）、ＰＯＥグリセリン脂肪酸エステル類（ＰＯＥ−グリセリンモノイソステアレート等）、ＰＯＥ脂肪酸エステル類（ポリエチレングリコールモノオレート、ＰＯＥジステアレート等）、ＰＯＥアルキルエーテル類（ＰＯＥ２−オクチルドデシルエーテル等）、ＰＯＥアルキルフェニルエーテル類（ＰＯＥノニルフェニルエーテル等）、プルロニック型類、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル類（ＰＯＥ・ＰＯＰ２−デシルテトラデシルエーテル等）、テトロニック類、ＰＯＥヒマシ油・硬化ヒマシ油誘導体（ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ硬化ヒマシ油等）、ショ糖脂肪酸エステル、アルキルグルコシド等の非イオン界面活性剤類、等が挙げられる。
【００２７】
多価アルコールとしては、ポリエチレングリコール、グリセリン、１，３−ブチレングリコール、エリスリトール、ソルビトール、キシリトール、マルチトール、プロピレングリコール、ジプロピレングリコール、ジグリセリン、イソプレングリコール、１，２−ペンタンジオール、２，４−ヘキシレングリコール、１，２−ヘキサンジオール、１，２−オクタンジオール等が挙げられる。
【００２８】
増粘剤としては、グアーガム、クインスシード、カラギーナン、ガラクタン、アラビアガム、ペクチン、マンナン、デンプン、キサンタンガム、カードラン、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、メチルヒドロキシプロピルセルロース、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、グリコーゲン、ヘパラン硫酸、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、トラガントガム、ケラタン硫酸、コンドロイチン、ムコイチン硫酸、ヒドロキシエチルグアガム、カルボキシメチルグアガム、デキストラン、ケラト硫酸、ローカストビーンガム、サクシノグルカン、カロニン酸，キチン、キトサン、カルボキシメチルキチン、寒天、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニルポリマー、アルキル変性カルボキシビニルポリマー、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリエチレングリコール、ベントナイト等が挙げられる。
【００２９】
粉体類としては、表面を処理されていてもよい、マイカ、タルク、カオリン、合成雲母、炭酸カルシウム、炭酸マグネシウム、無水ケイ酸（シリカ）、酸化アルミニウム、硫酸バリウム等の粉体類、表面を処理されていてもよい、ベンガラ、黄酸化鉄、黒酸化鉄、酸化コバルト、群青、紺青、酸化チタン、酸化亜鉛の無機顔料類、表面を処理されていてもよい、雲母チタン、魚燐箔、オキシ塩化ビスマス等のパール剤類、レーキ化されていてもよい赤色２０２号、赤色２２８号、赤色２２６号、黄色４号、青色４０４号、黄色５号、赤色５０５号、赤色２３０号、赤色２２３号、橙色２０１号、赤色２１３号、黄色２０４号、黄色２０３号、青色１号、緑色２０１号、紫色２０１号、赤色２０４号等の有機色素類、ポリエチレン末、ポリメタクリル酸メチル、ナイロン粉末、オルガノポリシロキサンエラストマー等の有機粉体類、が挙げられる。
【００３０】
紫外線吸収剤としては、パラアミノ安息香酸系紫外線吸収剤、アントラニル酸系紫外線吸収剤、サリチル酸系紫外線吸収剤、桂皮酸系紫外線吸収剤、ベンゾフェノン系紫外線吸収剤、糖系紫外線吸収剤、２−（２'−ヒドロキシ−５'−ｔ−オクチルフェニル)ベンゾ
トリアゾール、４−メトキシ−４'−ｔ−ブチルジベンゾイルメタン等の紫外線吸収剤類
、等が挙げられる。
【００３１】
本発明の皮膚外用剤は、前記必須成分、好ましい成分、任意成分などを常法に従って処理することにより製造することができる。
【実施例】
【００３２】
以下に、実施例を挙げて、本発明について更に詳細に説明を加えるが、本発明がかかる実施例にのみ限定されないことは言うまでもない。
【００３３】
＜１＞ノルアドレナリン受容体及び／又はオキシトシン受容体の増殖作用の確認
DMEM培地（SIGMA社製）を用いて、正常ヒト真皮線維芽細胞を２４ウェルプレートに8.0×104cells/well播種し、３７℃・５％ＣＯ２環境下で24時間培養した。培養後、培地を
除去し、PBSにて細胞を洗浄後、ケイヒエキス又は溶媒対象を含む、DMEM培地を加え、３
７℃・５％ＣＯ２環境下にて、２４時間培養した。
RNeasy Mini Kit（QIAGEN製）を用いて上記線維芽細胞のｍＲＮＡを抽出し、Superscript VILO DNA synthesis Kit（Lifetechnologies製）を用いて、ｃＤＮＡを合成した。該
ｃＤＮＡを鋳型として用いて、プライマー（primer No.R1102D01、primer No.R1102D02、Invitrogen社製）を用いてノルアドレナリン受容体（ＡＤＲＢ２）のｍＲＮＡ発現量を、プライマー（primer No.R0891A02、primer No.R0891A03、Invitrogen社製）を用いてオキシトシン受容体（ＯＸＴＲ）のｍＲＮＡ発現量を、それぞれリアルタイムｑＰＣＲ法にて測定した。また、内在性コントロール遺伝子であるTBPのｍＲＮＡ発現量を同様に測定し
た。測定には、QuantiFact SYBR GREEN PCR kit（QIAGEN製）を用いた。
【００３４】
ケイヒエキス添加群及び溶媒対照群におけるノルアドレナリン受容体mRNA発現量、及びオキシトシン受容体mRNA発現量のそれぞれについて、TBPの発現量による補正を行い、溶
媒対照群の発現量を1とした場合の相対発現量を算出した。
結果を図１及び２に示す。ケイヒエキスにノルアドレナリン受容体及びオキシトシン受容体の遺伝子発現促進作用があることが認められた。
【００３５】
＜２＞テネイシンＸ産生作用の確認
DMEM培地（SIGMA社製）を用いて正常ヒト真皮線維芽細胞を２４ウェルプレートに8.0×104cells/well播種し、３７℃・５％ＣＯ２環境下で２４時間培養した。培養後、培地を
除去し、PBSにて細胞を洗浄後、ケイヒエキス又は溶媒対象を含む、DMEM培地を加え、３
７℃・５％ＣＯ２環境下にて、２４時間培養した。培養後、培地を除去し、PBSにて細胞
を洗浄後、２％FBS含有DMEM培地を添加し、３７℃・５％ＣＯ２環境下で６時間培養した
。培養後、ノルアドレナリン（25304-31、ナカライテスク社製）10 pMを添加し、３７℃
・５％ＣＯ２環境下で２４時間培養した。培養後、オキシトシン（4048-V、ペプチド研究所社製）0.1 pMを添加し、３７℃・５％ＣＯ２環境下で２４時間培養した。
RNeasy Mini Kit（QIAGEN製）を用いて上記線維芽細胞のｍＲＮＡを抽出し、Superscript VILO DNA synthesis Kit（Lifetechnologies製）を用いて、ｃＤＮＡを合成した。該
ｃＤＮＡを鋳型として用いて、プライマー（primer No.84695859 R2432 (G12)、Primer  No.84695859 R2432 (H01)、Invitrogen社製）を用いて、テネイシンXのｍＲＮＡ発現量をリアルタイムｑＰＣＲ法にて測定した。また、内在性コントロール遺伝子であるGAPDHの
ｍＲＮＡ発現量を同様に測定した。測定には、QuantiFact SYBR GREEN PCR kit（QIAGEN
製）を用いた。
【００３６】
溶媒対照群、ケイヒエキスのみ添加群、ノルアドレナリン及びオキシトシン添加群、並びにノルアドレナリン、オキシトシン及びケイヒエキス添加群のテネイシンXのmRNA発現
量のそれぞれについて、GAPDHの発現量による補正を行い、溶媒対照群の発現量を1とした場合の相対発現量を算出した。
結果を図３に示す。ノルアドレナリン及びオキシトシン存在下、並びにケイヒエキスのみ存在下では、テネイシンＸの産生促進は認められないが、ノルアドレナリン、オキシトシン及びケイヒエキスケイヒエキスの共存下ではテネイシンＸの遺伝子発現促進作用があることが認められた。
【００３７】
＜３＞ケイヒエキス含有皮膚外用剤による肌の押し返し力及び感情への影響の確認
４０〜５０代女性４１名に対し、表１に示す処方のケイヒエキス含有皮膚外用剤を３ヵ月間連用させ、肌の押し返し力、および感情へ与える影響を検証した。
【００３８】
【表１】
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【００３９】
肌の押し返し力（弾力）は、バリストメーター（DIA-SRON社）で頬部を計測し、反発戻り時間（振り子が落ちることで皮膚表面が沈んだ後もとに戻るまでの時間）を指標とした。０ヵ月目の数値を１とした場合の、１ヵ月目、及び３ヵ月目の相対値を算出した。
結果を図４に示す。０ヵ月目に対して、ケイヒエキス含有皮膚外用剤を１ヵ月、又は３ヵ月使用すると、肌の押し返し力が向上することが認められた。
【００４０】
感情へ与える影響は、多面的感情状態尺度アンケートにより評価した。具体的には、「抑鬱・不安」、「倦怠」、「非活動的快」、「集中」、「敵意」、「活動的快」、「親和」、「驚愕」の因子に紐づく感情用語をランダムに並べて、各気分状態を１〜４の４段階で評価してもらった。各気分状態の評点について、０ヵ月目と３ヵ月目の数値を算出した。
結果を図５に示す。０ヵ月目に対して、ケイヒエキス含有皮膚外用剤を３ヵ月使用すると、ノルアドレナリンが関与する「活動的快」とオキシトシンが関与する「親和」の気分状態が向上することが認められた。
【００４１】
＜参考１＞押し返しの強い肌を触れたときの感情への影響の検討
２０〜５０代女性２０名に対し、押し返しの強さが異なる擬似皮膚数種の中から、自分の肌として想像する疑似皮膚Ａと、ハリが生じた自分の肌として想像する擬似皮膚Ｂとを選定してもらった。全ての方において、擬似皮膚Ｂは擬似皮膚Ａよりも押し返しが強いものが選ばれていた。選定した擬似皮膚を手で押し、提示された各感情状態の程度をＶＡＳ（Visual Analog Scale）を用いて回答してもらった。まず、疑似皮膚Ａを押し回答して
もらい、次いで、疑似皮膚Ａより押し返しが強い疑似皮膚Ｂを押した後に回答してもらった。
【００４２】
結果を図６及び７に示す。
押し返しが強い（と想像した）自分の肌に触れると、積極的な感情が有意に高まった。特に、拡散的好奇心の項目については、６項目中４項目において有意な高まりが認められた。
【００４３】
＜参考２＞押し返しの強い肌を触れたときの脳活動領域への影響の検討
女性５名に対し、押し返しの強さが異なる擬似皮膚数種の中から、自分の肌として想像
する疑似皮膚Ａと、ハリが生じた自分の肌として想像する擬似皮膚Ｂとを選定してもらった。全ての方において、擬似皮膚Ｂは擬似皮膚Ａよりも押し返しが強いものが選ばれていた。疑似皮膚Ａを左手で触れてｆＭＲＩで脳画像データを取得し、次いで休憩をはさんで疑似皮膚Ａより押し返しが強い疑似皮膚Ｂを用いてｆＭＲＩで脳画像データを取得した。
各疑似皮膚を押したときの脳画像データを比較して、活性に違いがみられる脳活動領域を可視化して評価した。
【００４４】
表２に、脳活動領域と関連する機能・感情との対応、及び試験により疑似皮膚Ａを押したときに比べて疑似皮膚Ｂを押したときに活性化が認められた脳活動領域を示す。
押し返しが強い（と想像した）自分の肌に触れると、好奇心及びモチベーションと関連する脳活動領域の活性化が認められた。
【００４５】
【表２】
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【産業上の利用可能性】
【００４６】
本発明は、抗老化用化粧料などの皮膚外用剤に応用できる。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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