(57)【要約】【課題】  抽出溶媒として有機溶媒を使用せずに、効率よくセラミド類を抽出することのできるセラミド類含有組成物の製造方法を提供する。【解決手段】  有機溶媒を含有せず、界面活性剤を含有する水性溶媒を用い、酵母を抽出することを特徴とするセラミド類含有組成物の製造方法。また、かかる製造方法にて製造されたセラミド類含有組成物、これを配合した化粧料および飲食品が、本発明により提供される。【選択図】図１
2020172544.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
有機溶媒を含有せず、界面活性剤を含有する水性溶媒を用い、酵母を抽出するセラミド類含有組成物の製造方法であって、
前記界面活性剤がポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルからなる
ことを特徴とするセラミド類含有組成物の製造方法。
【請求項２】
前記水性溶媒は前記界面活性剤を０．０１〜２質量％含有することを特徴とする請求項１に記載のセラミド類含有組成物の製造方法。
【請求項３】
前記酵母がサッカロミセス・ヴェローナ（Saccharomyces veronae）であることを特徴とする請求項１または２に記載のセラミド類含有組成物の製造方法。
【請求項４】
請求項１〜３のいずれか一項に記載の製造方法にて製造されたセラミド類含有組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、セラミド類含有組成物の製造方法に関するものであり、特に有機溶媒を含有しない水性溶媒を用いて抽出操作を行うセラミド類含有組成物の製造方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
セラミド類は、スフィンゴ脂質を構成する化合物群であり、スフィンゴイド類と脂肪酸とがアミド結合したセラミド骨格を分子内に有する化合物の一群である。セラミド骨格からなる成分（遊離セラミド）は、ヒトの角質に多量に存在し、角質細胞間の接着に寄与していることが知られている。また、セラミド類の中でも、上記セラミド骨格に１分子のグルコースが結合したグルコシルセラミドは、保湿作用や抗アトピー作用が見いだされており、化粧料や医薬品の素材として注目されている。
【０００３】
従来、セラミド類は牛の脳等から抽出されていたが、ＢＳＥが発生して以降、より安全な供給源が求められるようになっており、例えば、米糠（特許文献１）、蒟蒻（特許文献２）、酵母（特許文献３）等からセラミド類を抽出する方法が提案されている。特に酵母は、安定的な大量生産が可能であり、セラミド類の供給源として注目されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開平１１−２７９５８６号公報
【特許文献２】特開２００２−２８１９３６号公報
【特許文献３】特開２０１２−２４６２８７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ところで、植物体や微生物からセラミド類を抽出する際には、抽出溶媒として有機溶媒が用いられている。しかし、有機溶媒は、得られる抽出物中に残留することがあり、セラミド類を含有する抽出物を化粧料等に配合するうえで問題が生じる可能性があった。
【０００６】
本発明は、抽出溶媒として有機溶媒を使用せずに、効率よくセラミド類を抽出することのできるセラミド類含有組成物の製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
上記課題を解決するために、第１に本発明は、有機溶媒を含有せず、界面活性剤を含有する水性溶媒を用い、酵母を抽出することを特徴とするセラミド類含有組成物の製造方法を提供する（発明１）。
【０００８】
本発明によれば、抽出原料として酵母を用い、かつ、抽出溶媒として、有機溶媒を含有せず界面活性剤を含有する水性溶媒を用いるため、有機溶媒を使用せずに、効率よくセラミド類を抽出することができる。
【０００９】
上記発明（発明１）において、前記水性溶媒は前記界面活性剤を０．０１〜２質量％含有することが好ましい（発明２）。
【００１０】
上記発明（発明１，２）においては、前記酵母がサッカロミセス・ヴェローナ（Saccharomyces veronae）であることが好ましい（発明３）。
【００１１】
上記発明（発明１〜３）においては、前記界面活性剤がプロピレングリコール脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、およびポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルからなる群より選択される１種または２種以上であることが好ましい（発明４）。
【００１２】
第２に本発明は、上記発明（発明１〜４）に係る製造方法にて製造されたセラミド類含有組成物を提供する（発明５）。
【００１３】
第３に本発明は、上記発明（発明５）に係るセラミド類含有組成物を配合したことを特徴とする化粧料を提供する（発明６）。
【００１４】
第４に本発明は、上記発明（発明４）に係る製造方法にて製造されたセラミド類含有組成物を配合したことを特徴とする飲食品を提供する（発明７）。
【発明の効果】
【００１５】
本発明によれば、抽出溶媒として有機溶媒を使用せずに、効率よくセラミド類を抽出することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）の結果を表す写真である。
【図２】薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）の結果を表す写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
以下、本発明の実施の形態について説明する。
本実施形態に係るセラミド類含有組成物の製造方法は、有機溶媒を含有せず、界面活性剤を含有する水性溶媒を用い、酵母を抽出するものである。
【００１８】
ここで、本実施形態における「セラミド類」とは、スフィンゴイド類と脂肪酸とがアミド結合したセラミド骨格を含む化合物をいい、セラミド骨格からなる化合物（本明細書において「遊離セラミド」ということがある。）のほか、セラミド骨格中のスフィンゴイド部分が糖とグリコシド結合した糖セラミド（例えば、グルコシルセラミド、ガラクトシルセラミド等のセレブロシド）を包含する概念である。
【００１９】
１．抽出溶媒
本明細書における「水性溶媒」は、酵母からセラミド類を抽出するための溶媒として用いられるものであり、水を溶媒とし、後述する界面活性剤や、所望により塩等を含む水溶液をいう。
【００２０】
本実施形態において使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本実施形態における水性溶媒に使用し得る水としては、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００２１】
本実施形態における上記水性溶媒は、有機溶媒を含有しない。有機溶媒（例えば、クロロホルムやメタノール等）は、セラミド類の抽出において汎用されているが、得られるセラミド類含有抽出物に残留することがあり、当該抽出物を化粧料等に配合するうえで、安全性に懸念が生じ得るためである。
【００２２】
本実施形態においては、有機溶媒を用いずに酵母からセラミド類を効率よく抽出するため、界面活性剤を用いる。使用し得る界面活性剤としては、ノニオン系界面活性剤、アニオン系界面活性剤、カチオン系界面活性剤、両性界面活性剤が挙げられる。
【００２３】
具体的に、本実施形態において使用し得るノニオン系界面活性剤としては、プロピレングリコール脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ＰＯＥ（ポリオキシエチレン）ソルビタン脂肪酸エステル、ＰＯＥソルビット脂肪酸エステル、ＰＯＥグリセリン脂肪酸エステル、ＰＯＥアルキルエーテル、ＰＯＥ脂肪酸エステル、ＰＯＥ硬化ヒマシ油、ＰＯＥヒマシ油、ＰＯＥ・ＰＯＰ（ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレン）共重合体、ＰＯＥ・ＰＯＰアルキルエーテル、ポリエーテル変性シリコーンラウリン酸アルカノールアミド、アルキルアミンオキシド、水素添加大豆リン脂質などが挙げられる。
【００２４】
アニオン系界面活性剤としては、脂肪酸セッケン、α−アシルスルホン酸塩、アルキルスルホン酸塩、アルキルアリルスルホン酸塩、アルキルナフタレンスルホン酸塩、アルキル硫酸塩、ＰＯＥアルキルエーテル硫酸塩、アルキルアミド硫酸塩、アルキルリン酸塩、ＰＯＥアルキルリン酸塩、アルキルアミドリン酸塩、アルキロイルアルキルタウリン塩、Ｎ−アシルアミノ酸塩、ＰＯＥアルキルエーテルカルボン酸塩、アルキルスルホコハク酸塩、アルキルスルホ酢酸ナトリウム、アシル化加水分解コラーゲンペプチド塩、パーフルオロアルキルリン酸エステルなどが挙げられる。
【００２５】
カチオン系界面活性剤としては、塩化アルキルトリメチルアンモニウム、塩化ステアリルトリメチルアンモニウム、臭化ステアリルトリメチルアンモニウム、塩化セトステアリルトリメチルアンモニウム、塩化ジステアリルジメチルアンモニウム、塩化ステアリルジメチルベンジルアンモニウム、臭化ベヘニルトリメチルアンモニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベヘニン酸アミドプロピルジメチルヒドロキシプロピルアンモニウム、ステアリン酸ジエチルアミノエチルアミド、ステアリン酸ジメチルアミノプロピルアミド、ラノリン誘導体第四級アンモニウム塩などが挙げられる。
【００２６】
両性界面活性剤としては、カルボキシベタイン型、アミドベタイン型、スルホベタイン型、ヒドロキシスルホベタイン型、アミドスルホベタイン型、ホスホベタイン型、アミノカルボン酸塩型、イミタゾリン誘導体型、アミドアミン型などが挙げられる。
【００２７】
これらの界面活性剤は、１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。これらの中でも、セラミド類の抽出効率に優れ、また、得られるセラミド類含有組成物を化粧料や飲食品に配合したときに安全性に優れることから、ノニオン系界面活性剤が好ましく、中でも、食品添加物として使用し得る界面活性剤である、プロピレングリコール脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、またはＰＯＥソルビタン脂肪酸エステルが好ましく、ＰＯＥソルビタン脂肪酸エステルが特に好ましい。
【００２８】
本実施形態における水性溶媒は、上記界面活性剤を０．０１〜２質量％含むことが好ましく、０．０５〜０．５質量％含むことが特に好ましく、０．０７〜０．１５質量％含むことがさらに好ましい。水性溶媒が上記範囲で界面活性剤を含むことで、酵母からセラミド類を効率よく抽出できるとともに、夾雑物が抽出されるのを抑制することができる。
【００２９】
なお、本実施形態における水性溶媒には、前述した界面活性剤のほか、塩、ｐＨ調整剤などの添加剤を、本実施形態の効果を損なわない範囲で加えることができる。
【００３０】
２．抽出原料
本実施形態において用いられる抽出原料は、酵母である。本実施形態にて使用し得る酵母としては、セラミド類を産生するものであれば特に制限されないが、例えば、サッカロミセス・ヴェローナ（Saccharomyces veronae）、サッカロミセス・クルイヴェリ（Saccharomyces kluyveri）等のサッカロミセス（Saccharomyces）属；シゾサッカロミセス・ポンベ（Schizosaccharomyces pombe）等のシゾサッカロミセス（Schizosaccharomyces）属；クルイヴェロミセス・サーモトレランス（Kluyveromyces thermotolerans）、クルイヴェロミセス・ラクティス（Kluyveromyces lactis）等のクルイヴェロミセス（Kluyveromyces）属；ジゴサッカロミセス・サーモトレランス（Zygosaccharomyces thermotolerans）等のジゴサッカロミセス（Zygosaccharomyces）属；ラカンセア・サーモトレランス（Lachancea thermotolerans）、ラカンセア・クルイヴェリ（Lachancea kluyveri）等のラカンセア属；カンディダ・ウティリス（Candida utilis，トルラ酵母）等のカンディダ（Candida）属；などの酵母が好ましく例示される。なお、サッカロミセス・セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae，パン酵母）については、セラミド類を産生せず、本実施形態に利用できない。
【００３１】
本実施形態において、これらの酵母は１種を単独でまたは２種以上を併用して用いることができる。これらの中でも、セラミド類の生産性、入手の容易性および化粧料に用いたときの安全性の観点から、サッカロミセス属（サッカロミセス・セレビシエを除く）が特に好ましく、サッカロミセス・ヴェローナ（Saccharomyces veronae）がさらに好ましい。
【００３２】
本実施形態においては、かかる酵母を培養する。培養形式は、バッチ培養または連続培養のいずれでもよい。培養に用いる培地は、酵母を培養可能なものであれば特に制限されず、グルコース等の炭素源；アンモニウム塩等の窒素源；マグネシウム塩等の無機塩；必須アミノ酸やビタミンなどが含まれるものであれば良い。また、培地には、これらに加えて、またはこれらに替えて、酵母エキス、ペプトン、カゼイン等、酵母の培地に汎用される成分を用いてもよい。
【００３３】
本実施形態においては、上記成分が配合された培地として、酵母の培養に汎用される培地を好適に用いることができ、中でもＹＰＤ培地、ＹＭ培地、ＭＥ培地およびＭＲＳ培地が好ましく、ＭＲＳ培地が特に好ましい。
【００３４】
酵母の培養は、上記培地を培養槽に入れ、酵母を接種し、２５〜３５℃、好ましくは２８〜３２℃の温度範囲で、１２〜７２時間、好ましくは１８〜４８時間処理することにより、行うことができる。
【００３５】
培養を終了させたときの培養液において、エタノール濃度は、１容量％以下であることが好ましく、０．５容量％以下であることがさらに好ましい。ここで、１容量％以下とは、０容量％、すなわち培養液にエタノールが全く含まれない場合を包含するものである。また、上記培養は、主として好気呼吸により行われ、実質的にアルコール発酵が行われないことが好ましい。実質的にアルコール発酵が行われないことで得られる酵母の菌体は、エタノール濃度が低く、そのため有機溶媒を含まない水性溶媒にて抽出するとの本実施形態の効果が、如何なく発揮される。
【００３６】
得られた培養液は、そのまま界面活性剤を添加して抽出操作に供してもよいが、遠心分離、ろ過等により酵母の菌体を回収した後、界面活性剤を含む水性溶媒にて抽出操作を行うことが好ましい。
【００３７】
３．抽出方法
本実施形態においては、かかる酵母の菌体を抽出原料とし、抽出溶媒として前述した水性溶媒を用い、セラミド類を抽出する。
【００３８】
抽出操作において、上記界面活性剤を含む水性溶媒の使用量は、酵母菌体の湿質量で１００質量部に対し、１．０〜１０質量部であることが好ましく、２．０〜８．０質量部であることが特に好ましく、３．０〜６．０質量部であることがさらに好ましい。抽出時間は、１〜１０時間であることが好ましく、１．５〜５時間であることがさらに好ましい。抽出温度は、５０〜１００℃であることが好ましく、７０〜９０℃であることがさらに好ましい。
【００３９】
得られた抽出液から、ろ過、遠心分離等により抽出残渣を除去し、所望により濃縮、凍結乾燥等を行うことにより、本実施形態に係るセラミド類含有組成物を得ることができる。
【００４０】
なお、得られたセラミド類含有組成物は、必要に応じ、さらに精製を行ってもよい。精製方法は特に限定されず、常法により行うことができる。例えば、シリカゲルやアルミナ等の多孔質物質、イオン交換樹脂等を用いたカラムクロマトグラフィーに付して、セラミド類を含む画分を回収する方法等が挙げられる。
【００４１】
このようにして得られるセラミド類含有組成物は、有機溶媒を含まない水性溶媒にて抽出されたものであるため、安全性が高く、後述する化粧料および飲食品のほか、医薬品などの配合成分として好適に利用することができる。
【００４２】
４．化粧料
本実施形態に係る化粧料は、前述したセラミド類含有組成物が配合されるものである。本実施形態においては、セラミド類含有組成物をそのまま配合してもよいし、セラミド類含有組成物からさらに製剤化した組成物を配合してもよい。化粧料にセラミド類含有組成物を配合することにより、保湿作用や抗アトピー作用等、セラミド類が有する好ましい作用を化粧料に付与することができる。
【００４３】
ここで、セラミド類含有組成物を配合し得る化粧料の種類は特に限定されるものではなく、例えば、皮膚化粧料であれば、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、ファンデーション等が例示され、また、頭髪化粧料であれば、ヘアトニック、ヘアクリーム、ヘアリキッド、シャンプー、ポマード、リンス等が例示される。
【００４４】
セラミド類含有組成物の配合量は、化粧料の種類に応じて適宜調整することができるが、好適な配合率は、セラミド類含有量に換算して約０．０００１〜１０質量％であり、特に好適な配合率は、約０．００１〜１質量％である。
【００４５】
本実施形態の化粧料は、保湿作用や抗アトピー作用、セラミド類が有する好ましい作用を妨げない限り、通常の化粧料の製造に用いられる主剤、助剤又はその他の成分、例えば、収斂剤、殺菌・抗菌剤、美白剤、紫外線吸収剤、保湿剤、細胞賦活剤、消炎・抗アレルギー剤、抗酸化・活性酸素除去剤、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、香料等を併用することができる。このように併用することで、より一般性のある製品となり、また、併用された他の有効成分との間の相乗作用が通常期待される以上の優れた効果をもたらすことがある。
【００４６】
以上の本実施形態に係る化粧料は、有機溶媒を含まない水性溶媒にて抽出されたセラミド類含有組成物を配合したものであるため、セラミド類が有する好ましい作用が付与されるとともに、安全性に優れたものとなる。
【００４７】
５．飲食品
本実施形態に係る飲食品は、特定の界面活性剤を用いて抽出されたセラミド類含有組成物を配合したものである。
【００４８】
本実施形態に係る飲食品に配合されるセラミド類含有組成物は、プロピレングリコール脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、およびポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルからなる群より選択される１種または２種以上の界面活性剤を用いて抽出されたものである。これら特定の界面活性剤は、食品添加物として使用可能なものであるため、かかる界面活性剤を用いて抽出されたセラミド類含有組成物は、飲食品に配合したときに、特に安全性に優れたものとなる。
【００４９】
本実施形態においては、上記セラミド類含有組成物をそのまま配合してもよいし、上記セラミド類含有組成物からさらに製剤化した組成物を配合してもよい。飲食品に上記セラミド類含有組成物を配合することにより、保湿作用や抗アトピー作用等、セラミド類が有する好ましい作用を飲食品に付与することができる。
【００５０】
ここで、飲食品とは、人の健康に危害を加えるおそれが少なく、通常の社会生活において、経口又は消化管投与により摂取されるものをいい、行政区分上の食品、医薬品、医薬部外品等の区分に制限されるものではない。したがって、本実施形態における「飲食品」は、経口的に摂取される一般食品、健康食品、機能性食品、保健機能食品（特定保健用食品，機能性表示食品、栄養機能食品）、医薬部外品、医薬品等を幅広く含むものである。本実施形態に係る飲食品は、当該飲食品またはその包装に、セラミド類が有する好ましい作用を表示することのできる飲食品であることが好ましく、保健機能食品（特定保健用食品，機能性表示食品、栄養機能食品）、医薬部外品および医薬品であることが特に好ましい。
【００５１】
上記セラミド類含有組成物、または上記セラミド類含有組成物から製剤化した組成物を飲食品に配合する場合、それらにおける有効成分の配合量は、使用目的、症状、性別等を考慮して適宜変更することができるが、添加対象となる飲食品の一般的な摂取量を考慮して、成人１日あたりのセラミド類摂取量が約１〜１０００ｍｇになるようにするのが好ましい。なお、添加対象飲食品が顆粒状、錠剤状又はカプセル状の飲食品の場合、上記セラミド類含有組成物、または上記セラミド類含有組成物から製剤化した組成物の添加量は、添加対象飲食品に対し、セラミド類の質量に換算して通常０．１〜１００質量％であり、好ましくは５〜１００質量％である。
【００５２】
本実施形態の飲食品は、上記セラミド類含有組成物をその活性を妨げないような任意の飲食品に配合したものであってもよいし、上記セラミド類含有組成物を主成分とする栄養補助食品であってもよい。
【００５３】
本実施形態の飲食品を製造する際には、例えば、デキストリン、デンプン等の糖類；ゼラチン、大豆タンパク、トウモロコシタンパク等のタンパク質；アラニン、グルタミン、イソロイシン等のアミノ酸類；セルロース、アラビアゴム等の多糖類；大豆油、中鎖脂肪酸トリグリセリド等の油脂類などの任意の助剤を添加して任意の形状の飲食品にすることができる。
【００５４】
上記セラミド類含有組成物を配合し得る飲食品は特に限定されないが、その具体例としては、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料（これらの飲料の濃縮原液及び調整用粉末を含む）；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓；そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、しゅうまいの皮、中華麺、即席麺等の麺類；飴、チューインガム、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳等の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品；ソース、たれ等の調味料；スープ、シチュー、サラダ、惣菜、漬物；その他種々の形態の健康・栄養補助食品；錠剤、カプセル剤、ドリンク剤などが挙げられ、これらの飲食品に上記セラミド類含有組成物を配合するときに、通常用いられる補助的な原料や添加物を併用することができる。
【００５５】
以上の本実施形態に係る飲食品は、有機溶媒を含まず、食品添加物として使用可能な界面活性剤を含む水性溶媒にて抽出されたセラミド類含有組成物を配合したものであるため、セラミド類が有する好ましい作用が付与されるとともに、安全性に優れたものとなる。
【実施例】
【００５６】
以下、実施例、試験例等を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の各例に何ら制限されるものではない。
【００５７】
〔実施例１〕
ＭＲＳ培地（メルクミリポア社製）５２ｇを水１０００ｇに溶解し加熱滅菌した培地に、酵母（サッカロミセス・ヴェローナ，秋田今野商店社製）０．１ｇを接種して、フラスコに投入し、３０℃で２４時間静置することにより、培養を行った。得られた培養液を遠心分離（２，５００×ｇ，３０分）して培地上清を除去し、酵母の菌体を集菌した。
【００５８】
得られた菌体３００ｇを、０．１質量％のＴｗｅｅｎ２０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート）（日油社製）を含有する水３，０００ｇに加え、８０℃で抽出した。得られた抽出液を珪藻土でろ過し、減圧濃縮することにより、セラミド類含有組成物を抽出液として得た（２，８００ｇ）。
【００５９】
〔実施例２〕
界面活性剤としてのＴｗｅｅｎ２０の濃度を０．２質量％に変更した以外は、実施例１と同様にしてセラミド類含有組成物（２，８００ｇ）を得た。
【００６０】
〔実施例３〕
界面活性剤としてのＴｗｅｅｎ２０の濃度を０．０１質量％に変更した以外は、実施例１と同様にしてセラミド類含有組成物（２，８００ｇ）を得た。
【００６１】
〔実施例４〕
界面活性剤としてのＴｗｅｅｎ２０の濃度を０．０５質量％に変更した以外は、実施例１と同様にしてセラミド類含有組成物（２，８００ｇ）を得た。
【００６２】
〔比較例１〕
抽出溶媒として、Ｔｗｅｅｎ２０を含有しない水を用いた以外は、実施例１と同様にして抽出物（２，８００ｇ）を得た。
【００６３】
〔試験例１〕セラミド類の検出
実施例および比較例で得られた抽出物（セラミド類含有組成物）について、以下のようにしてセラミド類を検出した。
【００６４】
実施例および比較例で得られた抽出液（セラミド類含有組成物）５ｍＬに蒸留水２５ｍＬを添加して希釈し、Ｓｅｐ−Ｐａｋ（Ｗａｔｅｒｓ社製）に通液し、カラムに吸着させた。このカラムを水６ｍＬで洗浄したのち、メタノール６ｍＬを用いてグルコシルセラミドを溶出した。溶出液を減圧濃縮し、濃縮物にメタノール０．５ｍＬを加えて溶かし、試料溶液とした。一方、グルコシルセラミド標準品（トウモロコシ由来）（長良サイエンス社製，ＮＳ１７０２０２）２ｍｇを採取し、メタノール１０ｍＬに溶解し、標準溶液とした。
【００６５】
得られた試料溶液および標準溶液について、以下の条件にて薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を行い、Ｒｆ値約０．３に淡紫褐色〜紫褐色のスポットを認めた。
【００６６】
＜薄層クロマトグラフィー条件＞
展開溶媒：酢酸エチル／１−プロパノール／水混合液（８０：２０：３）
薄層板：Ｐｒｅ−Ｃｏａｔｅｄ ＴＬＣ ｐｌａｔｅｓ ＳＩＬＩＣＡＧＥＬ ６０Ｆ２５４（メルク社製）
展開距離：約６ｃｍ
検出方法：薄めた硫酸２００ｍＬにアントロン０．１ｇおよびチオ尿素２ｇを溶解したアントロン硫酸溶液を、展開後の薄層板に均等に噴霧した後、１２０℃で１０分間加熱
【００６７】
実施例１〜２のサンプルについてのＴＬＣ分析の結果を図１に、実施例１、実施例３〜４および比較例１の結果を図２に、それぞれ示す。
【００６８】
図１および２に示すように、抽出溶媒としての水に界面活性剤を加えることで、有機溶媒を用いずとも、セラミド類が効率よく抽出されることが明らかとなった。ここで、界面活性剤の含有量が０．１質量％である水性溶媒で抽出された実施例１の組成物は、セラミド類の含有量が最も多くかつ他の夾雑物が少ないことが明らかとなった。
【００６９】
〔配合例１〕
下記組成に従い、乳液を常法により製造した。
セラミド類含有組成物（実施例１）                        ０．０１ｇ
ホホバオイル                                            ４．００ｇ
１，３−ブチレングリコール                              ３．００ｇ
アルブチン                                              ３．００ｇ
ポリオキシエチレンセチルエーテル（20E.O.）              ２．５０ｇ
オリーブオイル                                          ２．００ｇ
スクワラン                                              ２．００ｇ
セタノール                                              ２．００ｇ
モノステアリン酸グリセリル                              ２．００ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.）        ２．００ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                ０．１５ｇ
グリチルリチン酸ステアリル                              ０．１０ｇ
黄杞エキス                                              ０．１０ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム                              ０．１０ｇ
イチョウ葉エキス                                        ０．１０ｇ
コンキオリン                                            ０．１０ｇ
オウバクエキス                                          ０．１０ｇ
カミツレエキス                                          ０．１０ｇ
香料                                                    ０．０５ｇ
精製水                                  残部（全量を１００ｇとする）
【００７０】
〔配合例２〕
下記組成のクリームを常法により製造した。
セラミド類含有組成物（実施例１）                        ０．０５ｇ
クジンエキス                                            ０．１ｇ
オウゴンエキス                                          ０．１ｇ
流動パラフィン                                          ５．０ｇ
サラシミツロウ                                          ４．０ｇ
スクワラン                                              ０．０ｇ
セタノール                                              ３．０ｇ
ラノリン                                                ２．０ｇ
ステアリン酸                                            １．０ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.）        １．５ｇ
モノステアリン酸グリセリル                              ３．０ｇ
油溶性甘草エキス                                        ０．１ｇ
１，３−ブチレングリコール                              ６．０ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                １．５ｇ
香料                                                    ０．１ｇ
精製水                                  残部（全量を１００ｇとする）
【００７１】
〔配合例３〕
下記組成の美容液を常法により製造した。
セラミド類含有組成物（実施例１）                        ０．０１ｇ
カミツレエキス                                          ０．１ｇ
ニンジンエキス                                          ０．１ｇ
キサンタンガム                                          ０．３ｇ
ヒドロキシエチルセルロース                              ０．１ｇ
カルボキシビニルポリマー                                ０．１ｇ
１，３−ブチレングリコール                              ４．０ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム                              ０．１ｇ
グリセリン                                              ２．０ｇ
水酸化カリウム                                          ０．２５ｇ
香料                                                    ０．０１ｇ
防腐剤（パラオキシ安息香酸メチル）                      ０．１５ｇ
エタノール                                              ２．０ｇ
精製水                                  残部（全量を１００ｇとする）
【００７２】
〔配合例４〕
下記組成のヘアトニックを常法により製造した。
セラミド類含有組成物（実施例１）                        ０．４ｇ
酢酸トコフェロール                                    適量
セファラチン                                            ０．００２ｇ
イソプロピルメチルフェノール                            ０．１ｇ
ヒアルロン酸ナトリウム                                  ０．１５ｇ
グリセリン                                            １５．０ｇ
エタノール                                            １５．０ｇ
香料                                                  適量
キレート剤（エデト酸ナトリウム）                      適量
防腐剤（ヒノキチオール）                              適量
可溶化剤（ポリオキシエチレンセチルエーテル）          適量
精製水                                  残部（全量を１００ｇとする）
【００７３】
〔配合例５〕
下記組成のシャンプーを常法により製造した。
セラミド類含有組成物（実施例１）                        ０．５ｇ
マジョラム抽出物                                        １．０ｇ
ウメ果実部抽出物                                        ０．２ｇ
ヤシ油脂肪酸メチルタウリンナトリウム                  １０．０ｇ
ヤシ油脂肪酸アミドプロピルベタイン                    １０．０ｇ
ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸ナトリウム      ２０．０ｇ
ヤシ油脂肪酸ジエタノールアミド                          ４．０ｇ
プロピレングリコール                                    ２．０ｇ
香料                                                  適量
精製水                                  残部（全量を１００ｇとする）
【００７４】
〔配合例６〕
常法により、以下の組成を有する錠剤を製造した。
セラミド類含有組成物（実施例１）                          ５．０ｍｇ
ドロマイト（カルシウム20％、マグネシウム10％含有）      ８３．４ｍｇ
カゼインホスホペプチド                                  １６．７ｍｇ
ビタミンＣ                                              ３３．４ｍｇ
マルチトール                                          １３６．８ｍｇ
コラーゲン                                              １２．７ｍｇ
ショ糖脂肪酸エステル                                    １２．０ｍｇ
【００７５】
〔配合例７〕
常法により、以下の組成を有する経口液状製剤を製造した。
＜１アンプル（１本１００ｍＬ）中の組成＞
セラミド類含有組成物（実施例１）                          ０．３質量％
ソルビット                                              １２．０質量％
安息香酸ナトリウム                                        ０．１質量％
香料                                                      １．０質量％
硫酸カルシウム                                            ０．５質量％
精製水                                          残部（１００質量％）
【産業上の利用可能性】
【００７６】
本発明によれば、化粧料、飲食品、医薬品等の配合成分として有用性が高いセラミド類を含有する組成物を、有機溶媒を含まない水性溶媒にて酵母から抽出することができ、安全性の高いセラミド類含有組成物を製造することができる。
【図１】
2020172544.tif 000003
【図２】
2020172544.tif 000004