(57)【要約】      （修正有）【課題】高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置を提供する。【解決手段】ブロードバンド及びナローバンド周波数帯を含む第一白色光ビームを発生させる第一白色光源ユニット１００と、第一側辺〜第四側辺を有し、第一側辺は第一白色光源ユニットに対向し、入射された第一白色光ビームを第二側辺から出光される第一分光ビーム及び第三側辺から出光される第二分光ビームに分ける光混合ユニット２００と、第二分光ビームを調整可能光路を経て光混合ユニットに戻す参照端ユニット６００と、平行光側及び焦点側を有し、平行光側は光混合ユニットの第二側辺に対向する第一対物レンズ３００と、第一対物レンズの焦点側に対向すると共に蛍光剤で染色したサンプルを載置するサンプル載置ユニット４００と、光入射側及び出光側を有し、光入射側は前記光混合ユニットの第四側辺に対向する投影レンズ５００と、投影レンズの出光側に対向する感知ユニット７００とを備える。【選択図】図１ａ
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
第一白色光ビームを発生させるために用いられ、前記第一白色光ビームの周波数帯はブロードバンド周波数帯及びナローバンド周波数帯を含む第一白色光源ユニットと、
第一側辺と、第二側辺と、第三側辺と、第四側辺と、を有し、前記第一側辺は前記第一白色光源ユニットに対向し、且つ前記第一側辺から入射された前記第一白色光ビームを前記第二側辺から出光される第一分光ビーム及び前記第三側辺から出光される第二分光ビームに分ける光混合ユニットと、
前記第二分光ビームを調整可能光路を経由させて前記光混合ユニットに戻すための参照端ユニットと、
平行光側及び焦点側を有し、前記平行光側は前記光混合ユニットの前記第二側辺に対向する第一対物レンズと、
生体またはサンプル載置ユニットであって、前記第一対物レンズの焦点側に対向すると共に前記サンプル載置ユニットは蛍光剤で染色したサンプルを載置させるために用いられることと、
光入射側及び出光側を有し、前記光入射側は前記光混合ユニットの前記第四側辺に対向する投影レンズと、
前記投影レンズの前記出光側に対向する感知ユニットと、を備えることを特徴とする高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置。
【請求項２】
前記光混合ユニットは第一偏光板及び第一分光器を備え、前記第一分光器は第一側辺と、第二側辺と、第三側辺と、第四側辺と、を有し、前記第一分光器の前記第一側辺は前記第一偏光板に対向し、前記第一偏光板は前記光混合ユニットの前記第一側辺に対向し、前記第一分光器の前記第二側辺は前記光混合ユニットの前記第二側辺に対向し、前記第一分光器の前記第三側辺は前記光混合ユニットの前記第三側辺に対向し、前記第一分光器の前記第四側辺は前記光混合ユニットの前記第四側辺に対向し、或いは、前記光混合ユニットは第一偏光板と、第一分光器と、短波光源ユニットと、二色性分光器と、を含み、前記第一分光器は第一側辺と、第二側辺と、第三側辺と、第四側辺と、を有し、前記第一分光器の前記第一側辺は前記第一偏光板に対向し、前記第一偏光板は前記光混合ユニットの前記第一側辺に対向し、前記第一分光器の前記第三側辺は前記光混合ユニットの第三側辺に対向し、前記第一分光器の前記第四側辺は前記光混合ユニットの前記第四側辺に対向し、前記短波光源ユニットは短波ビームを発生させるために用いられ、前記二色性分光器は第一側辺と、第二側辺と、第三側辺と、を有し、前記第一側辺は前記短波光源装置に対向し、前記第二側辺は前記光混合ユニットの前記第二側辺に対向し、前記第三側辺は前記第一分光器の前記第二側辺に対向し、前記二色性分光器は既定波長より短い波長のビームを透過させずに前記第一対物レンズの前記平行光側に反射させ、且つ前記短波ビームの波長を前記既定波長未満にするために用いられることを特徴とする請求項１に記載の高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置。
【請求項３】
前記参照端ユニットは、
第一側辺及び第二側辺を有し、前記第一側辺は前記光混合ユニットの前記第三側辺に対向する光路遅延ユニットと、
平行光側及び焦点側を有し、前記平行光側は前記光路遅延ユニットの前記第二側辺に対向する第二対物レンズと、
前記第二対物レンズの前記焦点側に対向し、前記透過ビームを反射させるために用いられる反射鏡であって、前記光路遅延ユニットは前記生体或前記サンプル載置ユニット、前記第一対物レンズ、及び前記光混合ユニットで形成されるサンプル光路に対称になるように前記調整可能光路を調整させるために用いられることを備えることを特徴とする請求項１または２に記載の高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置。
【請求項４】
前記第一白色光源ユニット及び前記短波光源ユニットは共に光源、または光源及び線状スリット、または光源及び光学格子、または光源、線状スリット、及び傾斜角を調節可能な屈折ミラー、または光源、光学格子、及び傾斜角を調節可能な屈折ミラー、またはＬＥＤ線状分布光源を備えることを特徴とする請求項１または２に記載の高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置。
【請求項５】
前記感知ユニットは第二分光器と、第二偏光板と、第三偏光板と、長波パスフィルターと、モノクロ２次元感光素子と、カラー２次元感光素子と、を備え、前記第二分光器は第一側辺と、第二側辺と、第三側辺と、を有し、前記第一側辺は前記投影レンズに対向し、前記第一白色光ビームを前記第三側辺を経由させて導出させると共に前記第三偏光板を経由させた後に前記カラー２次元感光素子に結像させ、且つ前記ブロードバンド周波数帯及び前記ナローバンド周波数帯を含む第一白色光ビーム及び蛍光ビームを分光させた後に前記第二側辺を経由させて導出させると共に前記第二偏光板、前記長波パスフィルターを順に経由させて前記ナローバンド周波数帯をフィルタリングして前後を前記モノクロ２次元感光素子に結像させ、また、前記光混合ユニットの前記第一分光器の前記第二側辺は第一１／４波長板を更に有し、前記第三側辺は第二１／４波長板を更に有し、前記第一偏光板は第一偏光方向を有し、前記第二偏光板は第二偏光方向を有し、前記第三偏光板は第三偏光方向を有し、前記第二偏光板の方向と前記第三偏光方向とは互いに垂直になり、前記第一偏光板の方向と前記第二偏光方向とは互いに垂直になり、前記第一１／４波長板は第一光学軸方向を有し、前記第二１／４波長板は第二光学軸方向を有し、前記第一光学軸方向及び前記第二光学軸方向は共に前記第一偏光方向と前記第二偏光方向との間に介在し、干渉効率を増加させ、直交偏光スペクトル吸収イメージの品質を向上させる効果を提供するために用いられることを特徴とする請求項２に記載の高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置。
【請求項６】
前記第一白色光ビームの波長は４００ｎｍ乃至８００ｎｍの間の範囲であると共に４００ｎｍ乃至４８０ｎｍの間の波長範囲の青色ナローバンド光及び４８０ｎｍ乃至８００ｎｍの間の波長範囲の黄色またはオレンジ色ブロードバンド光を含み、前記短波ビームの波長は３５０ｎｍ乃至４１０ｎｍの間の範囲であり、前記第一１／４波長板、前記第二１／４波長板、前記第一分光器、前記第二分光器、前記第二偏光板、及び前記第三偏光板の稼働波長は全て４００ｎｍ乃至８００ｎｍの間の範囲であり、前記二色性分光器の遮断波長は３６０ｎｍ乃至４２０ｎｍの間の範囲であり、前記長波パスフィルターの遮断波長は４６０ｎｍ乃至５１０ｎｍの間の範囲であることを特徴とする請求項５に記載の高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置。
【請求項７】
前記感知ユニットは偏光ビームスプリッターと、長波パスフィルターと、モノクロ２次元感光素子と、カラー２次元感光素子と、を備え、前記偏光ビームスプリッターは第一側辺と、第二側辺と、第三側辺と、を有し、前記第一側辺は前記投影レンズに対向し、前記第一白色光ビームを分光させた後に前記第三側辺を経由させて導出させると共に前記第三偏光板を経由させた後に前記カラー２次元感光素子に結像させ、且つ前記ブロードバンド周波数帯及び前記ナローバンド周波数帯を含む第一白色光ビーム及び蛍光ビームを分光させた後に前記第二側辺を経由させて導出させると共に前記長波パスフィルターにより前記ナローバンド周波数帯をフィルタリングさせて前後を前記モノクロ２次元感光素子に結像させ、前記光混合ユニットの前記第一分光器の前記第二側辺は第一１／４波長板を更に有し、前記第三側辺は第二１／４波長板を更に有し、前記第一偏光板は第一偏光方向を有し、前記偏光ビームスプリッターは第四偏光方向（Ｓ-偏光方向）を有し、前記第一偏光板の方向と前記第四偏光方向とは互いに垂直になり、前記第一１／４波長板は第一光学軸方向を有し、前記第二１／４波長板は第二光学軸方向を有し、前記第一光学軸方向及び前記第二光学軸方向は共に前記第一偏光方向と前記第四偏光方向との間に介在し、干渉効率を増加させ、直交偏光スペクトルのイメージ吸収品質を向上させる効果を提供するために用いられることを特徴とする請求項２に記載の高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置。
【請求項８】
前記第一白色光ビームの波長は４００ｎｍ乃至８００ｎｍの間の範囲であると共に４００ｎｍ乃至４８０ｎｍの間の波長範囲の青色ナローバンド光及び４８０ｎｍ乃至８００ｎｍの間の波長範囲の黄色またはオレンジ色ブロードバンド光を含み、前記短波ビームの波長は３５０ｎｍ乃至４１０ｎｍの間の範囲であり、前記第一１／４波長板、前記第二１／４波長板、前記第一分光器、前記第二分光器、前記第一偏光板、及び前記偏光ビームスプリッターの稼働波長は４００ｎｍ乃至８００ｎｍの間の範囲であり、前記二色性分光器の遮断波長は３６０ｎｍ乃至４２０ｎｍの間の範囲であり、前記長波パスフィルターの遮断波長は４６０ｎｍ乃至５１０ｎｍの間の範囲であることを特徴とする請求項７に記載の高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置。
【請求項９】
イメージ処理プロセスを実行させるための情報処理ユニットを更に備えることを特徴とする請求項１乃至３の何れか１項に記載の高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置。
【請求項１０】
前記参照端ユニットは軸方向プラットフォームを更に含み、前記サンプル載置ユニットは３次元モバイルプラットフォームを更に備え、前記軸方向プラットフォームが前記第二対物レンズ及び前記反射鏡を移動させることにより前記光路遅延ユニットが調節され、且つ前記３次元モバイルプラットフォームが前記蛍光剤で染色したサンプルを移動させることにより、前記情報処理ユニットが前記イメージ処理プロセスを実行させて前記サンプルの３次元イメージを算出させることが可能になることを特徴とする請求項９に記載の高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置。
【請求項１１】
前記サンプル載置ユニットは３次元モバイルプラットフォーム及び第二白色光源ユニットを更に備え、前記第二白色光源ユニットは白色光ＬＥＤ、白光ハロゲンランプ、或いはタングステンランプを含み、且つ前記第二白色光源ユニットは前記第一対物レンズに適度な透過輝度を提供し、Ｈ＆Ｅ切片が前記サンプル載置ユニットに載置されると、前記３次元モバイルプラットフォームが前記Ｈ＆Ｅ切片を移動させると共に前記第二白光光源が発生させた第二白色光ビームが前記Ｈ＆Ｅ切片に照射され、これにより前記情報処理ユニットが前記感知ユニットにより感知されたイメージデータに基づいて前記イメージ処理プロセスを実行させ、Ｈ＆Ｅイメージを生成させることを特徴とする請求項９に記載の高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、光切片装置に関し、更に詳しくは、光学干渉顕微鏡、直交偏光スペクトル吸収顕微鏡、及び蛍光顕微鏡を用いる光切片装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
腫瘍の切除手術を行う場合、通常は病理科の医師が凍結切片（frozen section）を用いて迅速に診断を行ってから腫瘍をきれいに切除するかどうか決定するため、時間がかかるほか、時間に迫られて全ての腫瘍組織が完全に切除されたか否か確認するのが困難になることもある。
【０００３】
従来のＨ＆Ｅ染色切片（H&E section）はパラフィン切片及び凍結切片に用いられ、現在病理部門で病理イメージを判別するための黄金律となっている。ヘマトキシリン（hematoxylin）及びエオシン（eosin）という２種類の染料により細胞核（nucleus）及び細胞質（cytoplasm）に対して青紫色及びピンク色をそれぞれ着色する。凍結切片では、水分量の多いサンプルが凍結された後に生じる氷晶（crystal ice）により組織構造が破壊されることがある。脂肪（fat）の多いサンプルでは、一般的な組織の凍結硬化温度（〜-２０℃）では脂肪組織が凍結硬化せず、切片から脱落しやすくなり、切片組織が不完全になることがある。
【０００４】
なお、光干渉断層撮影（optical coherence tomography：OCT）は近年新興の光学イメージング技術であり、主に光に対する各組織の反射、吸収、及び散光能力の違いを利用し、且つ光学干渉原理によりサンプルに対するイメージング及び識別を行うことで、生体外または生体組織のイメージ構造情報を更に獲得させる。フルフィールド光学干渉顕微鏡（full-field optical coherence microscopy：FF-OCM）は、最高の解析能力を誇る干渉型顕微鏡であり、非侵襲で細胞レベルの干渉イメージを観察可能であるが、但し、蛍光励起光やスペクトル吸収等の機能的なイメージが欠如し、病理及び生体に応用する場合、細胞核及び色素沈殿等の鍵となるイメージを獲得できなかった。
【０００５】
従来の特許文献では、例えば、特許文献１に記載される「Method and apparatus for reflected imaging analysis」は、赤血球の可視光スペクトルの吸収を観察可能なイメージング装置であり、直交偏光スペクトル吸収イメージングシステム装置を利用し、反射された背景光をフィルタリングした後、ヘモグロビン及びメラニンの散光吸収スペクトルにより、白色光スペクトル散光背景とのコントラストを形成させ、ヘモグロビン及びメラニンのスペクトル吸収プラークを結像させ、赤血球及びメラニン細胞の位置並びに吸収状態を更に定位させる。ヘモグロビンスペクトルの吸収程度は赤血球の血中酸素濃度と相関する。メラニンの吸収程度は皮膚の白さと相関する。また、特許文献２に記載される「Optical tissue sectioning using full field optical coherence tomography」には、組織切片を観察するためのフルフィールドＯＣＴ装置が記載されている。フルフィールドイメージング干渉計及び光学切片イメージングシステムを備えることを特徴とする。光学干渉計のコヒーレント長（coherent length）により被写界深度の問題を改善し、組織内の構造イメージを直接取得させる。そのイメージの横方向及び縦方向の解像度は共に１μｍ以内に達し、これにより組織の固定（fixation）プロセスを省略可能になる。例えば、凍結（frozen）、パラフィン（paraffin）被覆、実際に切片（physical section）をとるプロセス等を省略可能となる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】米国特許出願公開第ＵＳ６１０４９３９Ｂ２号明細書
【特許文献２】米国特許出願公開第ＵＳ９１８５３５７Ｂ２号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、前述した従来の技術では、下記欠点を有する。
１、特許文献２について、短波ビーム（例えば、紫外光）は分光器の分光フィルムを経由した後にパワーが本来の強度の１０％乃至４０％まで弱まり、また、分光器の反射防止膜は４００ ｎｍ未満の波長の紫外光帯域の透過率が低く、細胞核イメージが微弱になる。
２、特許文献２と特許文献１は共に、単一のサンプルの色素細胞及び細胞構造に対して同時に区別してイメージングを行うことができない。
この２つの要因のために、サンプルのイメージ品質が低下し、且つイメージの特徴情報が不足してしまう。よって、本分野では新規の光切片装置が強く望まれている。
【０００８】
そこで、本発明者は上記の欠点が改善可能と考え、鋭意検討を重ねた結果、合理的設計で上記の課題を効果的に改善する本発明の提案に至った。
【０００９】
かかる従来の実情に鑑みて、本発明は、高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置を提供することを目的とする。すなわち、新鮮な組織の造影のみならず、生体の皮膚や手術中の組織の病理診断にも使用でき、医師に対して迅速に組織情報を提供する。
【００１０】
また、本発明の他の目的は、高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置を提供する。すなわち、混色ユニットが第一分光器と第一対物レンズとの間に設置される二色性分光器を有し、短波ビームがサンプルに照射される光路中で第一分光器により減衰されないようにすることで、蛍光信号の強度を増強させ、露光時間を短縮させ、イメージ取得速度を速める。
【００１１】
さらに、本発明のさらなる他の目的は、高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置を提供する。すなわち、サンプルからのビーム（反射された短波ビーム及び短波が照射されて励起された蛍光ビームを含む）が二色性分光器を透過させる際に、短波ビームがフィルタリングされ、蛍光ビームのみを透過させることで、コントラストの高い蛍光信号を取得させ、露光時間を短縮させ、イメージ取得速度を速める。
【００１２】
なお、本発明の又別の目的は、高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置を提供する。すなわち、感知ユニットが、前記短波ビームを更にフィルタリングしてコントラストの高い蛍光信号を得るための長波パスフィルターを有し、露光時間を短縮させることによりイメージ取得速度を速める。
【００１３】
本発明の又別の目的は、高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置を提供する。すなわち、その光切片方法は、（１）光学干渉顕微鏡と直交偏光スペクトル吸収顕微鏡とを結合し、細胞構造と色素ブロックイメージとを同時に取得する。（２）光学干渉顕微鏡と蛍光顕微鏡とを結合し、前後に細胞構造及び細胞核イメージを取得する。（３）光学干渉顕微鏡と直交偏光スペクトル吸収顕微鏡とを結合させた後、蛍光顕微鏡を更に結合させ、細胞構造及び色素ブロックのイメージを同時に取得した後、細胞核のイメージを更に取得する。
【００１４】
本発明の又別の目的は、高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置を提供する。すなわち、第二白色光光源により生じる第二白色光ビームをＨ＆Ｅ凍結切片またはパラフィン切片のサンプルに照射させてその透過イメージを取得し、上述の目的のために取得されたイメージと比較する。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
上記課題を解決するために、本発明のある態様の高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置は、第一白色光ビームを発生させるために用いられ、前記第一白色光ビームの周波数帯はブロードバンド周波数帯及びナローバンド周波数帯を含む第一白色光源ユニットと、第一側辺と、第二側辺と、第三側辺と、第四側辺と、を有し、前記第一側辺は前記第一白色光源ユニットに対向し、且つ前記第一側辺から入射された前記第一白色光ビームを前記第二側辺から出光される第一分光ビーム及び前記第三側辺から出光される第二分光ビームに分ける光混合ユニットと、前記第二分光ビームを調整可能光路を経由させて前記光混合ユニットに戻すための参照端ユニットと、平行光側及び焦点側を有し、前記平行光側は前記光混合ユニットの前記第二側辺に対向する第一対物レンズと、生体またはサンプル載置ユニットであって、前記第一対物レンズの焦点側に対向すると共に前記サンプル載置ユニットは蛍光剤で染色したサンプルを載置させるために用いられることと、光入射側及び出光側を有し、前記光入射側は前記光混合ユニットの前記第四側辺に対向する投影レンズと、前記投影レンズの前記出光側に対向する感知ユニットと、を備える。
【００１６】
一実施例では、前記光混合ユニットは、第一偏光板及び第一分光器を備える。前記第一分光器は第一側辺と、第二側辺と、第三側辺と、第四側辺と、を有する。前記第一分光器の前記第一側辺は前記第一偏光板に対向し、前記第一偏光板は前記光混合ユニットの前記第一側辺に対向し、前記第一分光器の前記第二側辺は前記光混合ユニットの前記第二側辺に対向し、前記第一分光器の前記第三側辺は前記光混合ユニットの前記第三側辺に対向し、前記第一分光器の前記第四側辺は前記光混合ユニットの前記第四側辺に対向する。或いは、前記光混合ユニットは第一偏光板と、第一分光器と、短波光源ユニットと、二色性分光器と、を含む。前記第一分光器は第一側辺と、第二側辺と、第三側辺と、第四側辺と、を有する。前記第一分光器の前記第一側辺は前記第一偏光板に対向し、前記第一偏光板は前記光混合ユニットの前記第一側辺に対向し、前記第一分光器の前記第三側辺は前記光混合ユニットの第三側辺に対向し、前記第一分光器の前記第四側辺は前記光混合ユニットの前記第四側辺に対向する。前記短波光源ユニットは短波ビームを発生させるために用いられ、前記二色性分光器は第一側辺と、第二側辺と、第三側辺と、を有し、前記第一側辺は前記短波光源装置に対向し、前記第二側辺は前記光混合ユニットの前記第二側辺に対向し、前記第三側辺は前記第一分光器の前記第二側辺に対向する。前記二色性分光器は既定波長より短い波長のビームを透過させずに前記第一対物レンズの前記平行光側に反射させ、且つ前記短波ビームの波長を前記既定波長未満にするために用いられる。
【００１７】
一実施例では、前記参照端ユニットは、第一側辺及び第二側辺を有し、前記第一側辺は前記光混合ユニットの前記第三側辺に対向する光路遅延ユニットと、平行光側及び焦点側を有し、前記平行光側は前記光路遅延ユニットの前記第二側辺に対向する第二対物レンズと、前記第二対物レンズの前記焦点側に対向し、焦点側を透過させたビームを反射させるために用いられる反射鏡であって、前記光路遅延ユニットは前記生体または前記サンプル載置ユニット、前記第一対物レンズ、及び前記光混合ユニットで形成されるサンプル光路に対称になるように前記調整可能光路を調整させるために用いられることを備える。
【００１８】
一実施例では、前記第一白色光源ユニット及び前記短波光源ユニットは共に光源、または光源及び線状スリット、または光源及び光学格子、または光源、線状スリット、及び傾斜角を調節可能な屈折ミラー、または光源、光学格子、及び傾斜角を調節可能な屈折ミラー、またはＬＥＤ線状分布光源を備える。
【００１９】
一実施例では、前記感知ユニットは第二分光器と、第二偏光板と、第三偏光板と、長波パスフィルターと、モノクロ２次元感光素子と、カラー２次元感光素子と、を備える。前記第二分光器は第一側辺と、第二側辺と、第三側辺と、を有する。前記第一側辺は前記投影レンズに対向し、前記第一白色光ビームを前記第三側辺を経由させて導出させると共に前記第三偏光板を経由させた後に前記カラー２次元感光素子に結像させ、且つ前記ブロードバンド周波数帯及び前記ナローバンド周波数帯を含む第一白色光ビーム及び蛍光ビームを分光させた後に前記第二側辺を経由させて導出させると共に前記第二偏光板、前記長波パスフィルターを順に経由させて前記ナローバンド周波数帯をフィルタリングして前後を前記モノクロ２次元感光素子に結像させる。また、前記光混合ユニットの前記第一分光器の前記第二側辺は第一１／４波長板を更に有し、前記第三側辺は第二１／４波長板を更に有し、前記第一偏光板は第一偏光方向を有し、前記第二偏光板は第二偏光方向を有し、前記第三偏光板は第三偏光方向を有する。前記第二偏光板の方向と前記第三偏光方向とは互いに垂直になり、前記第一偏光板の方向と前記第二偏光方向とは互いに垂直になる。前記第一１／４波長板は第一光学軸方向を有し、前記第二１／４波長板は第二光学軸方向を有する。前記第一光学軸方向及び前記第二光学軸方向は共に前記第一偏光方向と前記第二偏光方向との間に介在し、干渉効率を増加させ、直交偏光スペクトル吸収イメージの品質を向上させる効果を提供するために用いられる。
【００２０】
一実施例では、前記第一白色光ビームの波長は４００ｎｍ乃至８００ｎｍの間の範囲であると共に４００ｎｍ乃至４８０ｎｍの間の波長範囲の青色ナローバンド光及び４８０ｎｍ乃至８００ｎｍの間の波長範囲の黄色またはオレンジ色ブロードバンド光を含む。前記短波ビームの波長は３５０ｎｍ乃至４１０ｎｍの間の範囲である。前記第一１／４波長板、前記第二１／４波長板、前記第一分光器、前記第二分光器、前記第一偏光板、前記第二偏光板、及び前記第三偏光板の稼働波長は全て４００ｎｍ乃至８００ｎｍの間の範囲である。前記二色性分光器の遮断波長は３６０ｎｍ乃至４２０ｎｍの間の範囲である。前記長波パスフィルターの遮断波長は４６０ｎｍ乃至５１０ｎｍの間の範囲である。
【００２１】
一実施例では、前記感知ユニットは偏光ビームスプリッターと、長波パスフィルターと、モノクロ２次元感光素子と、カラー２次元感光素子と、を備える。前記偏光ビームスプリッターは第一側辺と、第二側辺と、第三側辺と、を有する。前記第一側辺は前記投影レンズに対向し、前記第一白色光ビームを前記第三側辺を経由させて導出させると共に前記カラー２次元感光素子に結像させ、且つ前記ブロードバンド周波数帯及び前記ナローバンド周波数帯を含む第一白色光ビーム及び蛍光ビームを分光させた後に前記第二側辺を経由させて導出させると共に前記長波パスフィルターにより前記ナローバンド周波数帯をフィルタリングさせて前後を前記モノクロ２次元感光素子に結像させる。前記光混合ユニットの前記第一分光器の前記第二側辺は第一１／４波長板を更に有し、前記第三側辺は第二１／４波長板を更に有し、前記第一偏光板は第一偏光方向を有し、前記偏光ビームスプリッターは第四偏光方向（Ｓ-偏光方向）を有する。前記第一偏光板の方向と前記第四偏光方向とは互いに垂直になる。前記第一１／４波長板は第一光学軸方向を有し、前記第二１／４波長板は第二光学軸方向を有する。前記第一光学軸方向及び前記第二光学軸方向は共に前記第一偏光方向と前記第四偏光方向との間に介在し、干渉効率を増加させ、直交偏光スペクトルのイメージ吸収品質を向上させる効果を提供するために用いられる。
【００２２】
一実施例では、前記第一白色光ビームの波長は４００ｎｍ乃至８００ｎｍの間の範囲であると共に４００ｎｍ乃至４８０ｎｍの間の波長範囲の青色ナローバンド光及び４８０ｎｍ乃至８００ｎｍの間の波長範囲の黄色またはオレンジ色ブロードバンド光を含む。前記短波ビームの波長は３５０ｎｍ乃至４１０ｎｍの間の範囲である。前記第一１／４波長板、前記第二１／４波長板、前記第一分光器、前記第二分光器、前記第一偏光板、及び前記偏光ビームスプリッターの稼働波長は４００ｎｍ乃至８００ｎｍの間の範囲である。前記二色性分光器の遮断波長は３６０ｎｍ乃至４２０ｎｍの間の範囲であり、前記長波パスフィルターの遮断波長は４６０ｎｍ乃至５１０ｎｍの間の範囲である。
【００２３】
一実施例では、イメージ処理プロセスを実行させるための情報処理ユニットを更に備える。
【００２４】
一実施例では、前記参照端ユニットは軸方向プラットフォームを更に含む。前記サンプル載置ユニットは３次元モバイルプラットフォームを更に備える。前記軸方向プラットフォームが前記第二対物レンズ及び前記反射鏡を移動させることにより前記光路遅延ユニットが調節され、且つ前記３次元モバイルプラットフォームが前記蛍光剤で染色したサンプルを移動させることにより、前記情報処理ユニットが前記イメージ処理プロセスを実行させ、前記情報処理ユニットが前記サンプルの３次元イメージを算出させることが可能になる。
【００２５】
一実施例では、前記サンプル載置ユニットは３次元モバイルプラットフォーム及び第二白色光源ユニットを更に備える。前記第二白色光源ユニットは白色光ＬＥＤ、白光ハロゲンランプ、或いはタングステンランプを含み、且つ前記第二白色光源ユニットは前記第一対物レンズに適度な透過輝度を提供する。Ｈ＆Ｅ切片が前記サンプル載置ユニットに載置されると、前記３次元モバイルプラットフォームが前記Ｈ＆Ｅ切片を移動させると共に前記第二白光光源が発生させた第二白色光ビームが前記Ｈ＆Ｅ切片に照射される。これにより、前記情報処理ユニットが前記感知ユニットにより感知されたイメージデータに基づいて前記イメージ処理プロセスを実行させ、Ｈ＆Ｅイメージを生成させる。
【図面の簡単な説明】
【００２６】
【図１ａ】本発明の一実施形態に係る高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置を示したブロックである。
【図１ｂ】本発明の一実施形態に係る高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置の分光及びフォーカスの動作を示す概略図である。
【図２】図１に示す一実施形態の参考端ユニットを示したブロックである。
【図３ａ】図１に示す一実施形態の光混合ユニットを示したブロックである。
【図３ｂ】図１に示す他の実施形態の光混合ユニットを示したブロックである。
【図３ｃ】図１に示すさらなる他の実施形態の光混合ユニットを示したブロックである。
【図３ｄ】図１に示す又別の実施形態の光混合ユニットを示したブロックである。
【図４】図１に示す集光と収束後の投影動作を示した概略図である。
【図５ａ】図１に示す一実施形態の感知ユニットを示したブロックである。
【図５ｂ】図１に示す他の実施形態の感知ユニットを示したブロックである。
【図６】本発明の他の実施形態に係る高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置を示したブロックである。
【発明を実施するための形態】
【００２７】
本発明における好適な実施の形態について、添付図面を参照して説明する。尚、以下に説明する実施の形態は、特許請求の範囲に記載された本発明の内容を限定するものではない。また、以下に説明される構成の全てが、本発明の必須要件であるとは限らない。
【００２８】
図１ａは本発明の一実施形態に係る高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置を示したブロックである。図１ｂは本発明の一実施形態に係る高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置の分光及びフォーカスの動作を示す概略図である。
【００２９】
本発明に係る高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置は、第一白色光源ユニット１００と、光混合ユニット２００と、第一対物レンズ３００と、生体またはサンプル載置ユニット４００と、投影レンズ５００と、参照端ユニット６００と、感知ユニット７００と、を備える（図１ａ参照）。
【００３０】
前記第一白色光源ユニット１００は第一白色光ビーム１０を発生させるために用いられ、前記第一白色光ビーム１０の進行方向は中空の矢印で表示する。前記光混合ユニット２００は短波光源ユニット２５０を備え（図３ｃ及び図３ｄ参照、図１ａでは図示を省略する）、前記短波光源ユニット２５０は短波ビーム２０を発生させるために用いられ、前記短波ビーム２０の進行方向は実線の矢印で表示する。前記サンプル載置ユニット４００は蛍光剤で染色したサンプル４１０を載置させるために用いられ（図１ｂ参照、図１ａでは図示を省略する）、前記蛍光剤で染色したサンプル４１０の蛍光剤は前記短波ビーム２０が照射されると蛍光ビーム３０を放出し、前記蛍光ビーム３０の進行方向は破線の矢印で表示する。
【００３１】
図１ｂに示されるように、前記第一白色光源ユニット１００は第一白色光ビーム１０を発生させるために用いられ、前記光混合ユニット２００は第一側辺Ｓ２０１と、第二側辺Ｓ２０２と、第三側辺Ｓ２０３と、第四側辺Ｓ２０４と、を有する。前記第一側辺Ｓ２０１は前記第一白色光源ユニット１００に対向し、且つ前記第一側辺Ｓ２０１から入射された前記第一白色光ビーム１０を前記第二側辺Ｓ２０２から出光される第一分光ビーム及び前記第三側辺Ｓ２０３から出光される他の第二分光ビームに分ける。
【００３２】
前記参照端ユニット６００は前記第二分光ビームを調整可能光路を経て前記光混合ユニット２００に戻すために用いられる。前記第一対物レンズ３００は平行光側Ｓ３０１及び焦点側Ｓ３０２を有し、前記平行光側Ｓ３０１は前記光混合ユニット２００の前記第二側辺Ｓ２０２に対向する。前記生体または前記サンプル載置ユニット４００は前記第一対物レンズ３００の前記焦点側Ｓ３０２に対向する。前記投影レンズ５００は光入射側Ｓ５０１及び出光側Ｓ５０２を有し、前記光入射側Ｓ５０１は前記光混合ユニット２００の前記第四側辺Ｓ２０４に対向する。前記感知ユニット７００は前記投影レンズ５００の前記出光側Ｓ５０２に対向する。
【００３３】
前記生体または前記サンプル載置ユニット４００、前記第一対物レンズ３００、及び前記光混合ユニット２００によりサンプル光路が形成される。
【００３４】
前記第一白色光ビーム１０の周波数帯は制限されないが、例えばブロードバンド周波数帯及びナローバンド周波数帯を含む。前記第一白色光源ユニット１００及び前記短波光源ユニット２５０（図示省略）は共に制限されないが、例えば光源、または光源及び線状スリット、または光源及び光学格子、または光源、光学格子、及び傾斜角を調節可能な屈折ミラー、または光源、線状スリット、及び傾斜角を調節可能な屈折ミラー、またはＬＥＤ線状分布光源（図示省略）を備える。これは従来の技術にあたるため詳述は省く。
【００３５】
図２は図１に示す一実施形態の参考端ユニットを示したブロックである。
【００３６】
前記参照端ユニット６００は光路遅延ユニット６１０と、第二対物レンズ６２０と、反射鏡６３０と、を備える（図２参照）。
【００３７】
前記光路遅延ユニット６１０は第一側辺Ｓ６１１及び第二側辺Ｓ６１２を有し、前記第一側辺Ｓ６１１は前記光混合ユニット２００の前記第三側辺Ｓ２０３に対向する（図示省略）。前記第二対物レンズ６２０は平行光側Ｓ６２１及び焦点側Ｓ６２２を有し、前記平行光側Ｓ６２１は前記光路遅延ユニット６１０の前記第二側辺Ｓ６１２に対向する。前記反射鏡６３０は前記第二対物レンズ６２０の前記焦点側Ｓ６２２に対向し、前記焦点側Ｓ６２２から出光されるビームを反射させるために用いられる。
【００３８】
図１ｂに戻って、前記光混合ユニット２００（図示省略）、前記光路遅延ユニット６１０、前記第二対物レンズ６２０、及び前記反射鏡６３０により調整可能光路が形成される。前記参照端ユニット６００は前記第二分光ビームを前記調整可能光路を経由させて光混合ユニット２００に戻すために用いられる。前記光路遅延ユニット６１０は前記生体または前記サンプル載置ユニット４００、前記第一対物レンズ３００、及び前記光混合ユニット２００で形成されるサンプル光路に対称になるように前記調整可能光路を調整させるために用いられる。
【００３９】
図３ａは図１に示す一実施形態の光混合ユニットを示したブロックである。図３ｂは図１に示す他の実施形態の光混合ユニットを示したブロックである。  
【００４０】
図３ａに示されるように、前記光混合ユニット２００は第一偏光板２１０及び第一分光器２２０を備える。
【００４１】
前記第一分光器２２０は第一側辺Ｓ２２１と、第二側辺Ｓ２２２と、第三側辺Ｓ２２３と、第四側辺Ｓ２２４と、を有する。前記第一側辺Ｓ２２１は前記第一偏光板２１０に対向し、前記第一偏光板２１０は前記光混合ユニット２００の前記第一側辺Ｓ２０１に対向し、前記第二側辺Ｓ２２２は光混合ユニット２００の前記第二側辺Ｓ２０２に対向し、前記第三側辺Ｓ２２３は光混合ユニット２００の前記第三側辺Ｓ２０３に対向し、前記第四側辺Ｓ２２４は光混合ユニット２００の前記第四側辺Ｓ２０４に対向する。
【００４２】
図３ｂに示されるように、前記第一分光器２２０の前記第二側辺Ｓ２２２は、前記光混合ユニット２００の前記第二側辺Ｓ２０２に対向する第一１／４波長板２３０を更に有する。前記第一分光器２２０の前記第三側辺Ｓ２２３は、前記光混合ユニット２００の前記第三側辺Ｓ２０３に対向する第二１／４波長板２４０を更に有する。
【００４３】
図３ｃは図１に示すさらなる他の実施形態の光混合ユニットを示したブロックである。図３ｄは図１に示す又別の実施形態の光混合ユニットを示したブロックである。
【００４４】
図３ｃに示されるように、前記光混合ユニット２００は第一偏光板２１０と、第一分光器２２０と、短波光源ユニット２５０と、二色性分光器２６０と、を備える。
【００４５】
前記第一分光器２２０は第一側辺Ｓ２２１と、第二側辺Ｓ２２２と、第三側辺Ｓ２２３と、第四側辺Ｓ２２４と、を有する。前記第一分光器２２０の前記第一側辺Ｓ２２１は前記第一偏光板２１０に対向し、前記第一偏光板２１０は前記光混合ユニット２００の前記第一側辺Ｓ２０１に対向し、前記第一分光器２２０の前記第三側辺Ｓ２２３は光混合ユニット２００の前記第三側辺Ｓ２０３に対向し、前記第一分光器２２０の前記第四側辺Ｓ２２４は光混合ユニット２００の前記第四側辺Ｓ２０４に対向する。前記短波光源ユニット２５０は短波ビーム２０を発生させるために用いられる。前記二色性分光器２６０は第一側辺Ｓ２６１と、第二側辺Ｓ２６２と、第三側辺Ｓ２６３と、を有する。前記第一側辺Ｓ２６１は前記短波光源装置２５０に対向し、前記第二側辺Ｓ２６２は前記光混合ユニット２００の前記第二側辺Ｓ２０２に対向し、前記第三側辺Ｓ２６３は前記第一分光器２２０の前記第二側辺Ｓ２２２に対向する。前記二色性分光器２６０は既定波長より短い波長のビームを透過させずに前記第一対物レンズ３００の前記平行光側Ｓ３０１に反射させ、焦点側Ｓ３０２から集光させ、且つ前記短波ビームの波長を前記既定波長未満にするために用いられる。
【００４６】
図３ｄに示されるように、前記第一分光器２２０の前記第二側辺Ｓ２２２は、前記二色性分光器２６０の前記第三側辺Ｓ２６３に対向する第一１／４波長板２３０を更に有する。前記第三側辺Ｓ２２３は、前記光混合ユニット２００の前記第三側辺Ｓ２０３に対向する第二１／４波長板２４０を更に有する。
【００４７】
図４は図１に示す集光と収束後の投影動作を示した概略図である。
【００４８】
前記生体または前記サンプル載置ユニット４００は前記短波ビーム２０を吸収させると共に前記第一白色光ビーム１０の前記第一分光ビームを反射させる。前記蛍光剤で染色したサンプル４１０（図示省略）中の蛍光剤は前記短波ビーム２０を照射された後に蛍光ビーム３０を放出させる（図４参照）。
【００４９】
前記二色性分光器２６０（図示省略）は既定波長より短い波長のビームを透過させずに前記第一対物レンズ３００の前記平行光側Ｓ３０１に反射させ（図示省略）、第一白色光ビーム１０の前記第一分光ビーム及び前記蛍光ビーム３０のみが前記二色性分光器２６０をそれぞれ透過させる。
【００５０】
前記参照端ユニット６００は第一白色光ビーム１０の前記第二分光ビームを調整可能光路を経由させて前記光混合ユニット２００に戻すために用いられる。光混合ユニット２００は前記第三側辺Ｓ２０３（図示省略）が参照端ユニット６００に対向していることにより、参照端ユニット６００から戻ってきた第一白色光ビーム１０の前記第二分光ビームを受光させ、Ｓ２０４（図示省略）を経由させて投影レンズ５００に導出させる。光混合ユニット２００は第二側辺Ｓ２０２（図示省略）が第一対物レンズ３００に対向していることにより、Ｓ２０４（図示省略）から蛍光ビーム３０及び第一白色光ビーム１０の前記第一分光ビームを投影レンズ５００に導出させる。
【００５１】
前記調整可能光路と前記サンプル光路とが互いに対称になっているため（in between the coherent length）、前記調整可能光路を経て反射される前記第二分光ビームに含まれるブロードバンド周波数帯ビーム及び前記サンプル光路を経て反射される前記第一分光ビームに含まれるブロードバンド周波数帯ビームが混合されると光学干渉現象が発生する。これは従来の技術にあたるため詳述は省く。
【００５２】
前記投影レンズ５００は光入射側Ｓ５０１（図示省略）及び出光側Ｓ５０２（図示省略）を有する。前記光入射側Ｓ５０１は前記光混合ユニット２００の前記第四側辺Ｓ２０４に対向する（図示省略）。前記出光側Ｓ５０２は前記感知ユニット７００に向けて前記第一白色光ビーム１０及び前記蛍光ビーム３０を投影させるために用いられる。
【００５３】
図５ａは図１に示す一実施形態の感知ユニットを示したブロックである。
【００５４】
前記感知ユニットは第二分光器７１０と、第二偏光板７２０と、第三偏光板７３０と、長波パスフィルター７４０と、モノクロ２次元感光素子７５０と、カラー２次元感光素子７６０と、を備える（図５ａ参照）。
【００５５】
前記第二分光器７１０は第一側辺Ｓ７１１と、第二側辺Ｓ７１２と、第三側辺Ｓ７１３と、を有し、前記第一側辺Ｓ７１１は前記投影レンズ５００に対向すると共に前記投影レンズ５００から投影されたビームを受光させる。前記第一白色光ビーム１０は前記第二分光器７１０を経て分光された後、前記第三側辺Ｓ７１３から導出されると共に前記第三偏光板７３０により偏光吸収された後に前記カラー２次元感光素子７６０に結像される。前記ブロードバンド周波数帯及び前記ナローバンド周波数帯を含む第一白色光ビーム１０及び前記蛍光ビーム３０は、前記第二分光器７１０を経て分光された後、前記第二側辺Ｓ７１２から導出されると共に前記第二偏光板７２０により偏光吸収され、前記長波パスフィルター７４０により前記ナローバンド周波数帯がフィルタリングされて前後が前記モノクロ２次元感光素子７５０に結像される。
【００５６】
図３ｂに戻って、前記第一偏光板２１０は第一偏光方向を有し、前記第二偏光板７２０は第二偏光方向を有し、第三偏光板７３０は第三偏光方向を有する。前記第二偏光方向と前記第三偏光方向とは互いに垂直になり、前記第一偏光方向と前記第二偏光方向とは互いに垂直になる。前記第一１／４波長板２３０は第一光学軸方向を有し、前記第二１／４波長板２４０は第二光学軸方向を有する。前記第一光学軸方向及び前記第二光学軸方向は共に前記第一偏光方向と前記第二偏光方向との間に介在し、干渉効率の増加及び直交偏光スペクトルのイメージ吸収品質を向上させる効果を提供する。
【００５７】
前記第一白色光ビーム１０の波長は４００ｎｍ乃至８００ｎｍの間の範囲であると共に４００ｎｍ乃至４８０ｎｍの間の波長範囲の青色ナローバンド光及び４８０ｎｍ乃至８００ｎｍの間の波長範囲の黄色またはオレンジ色ブロードバンド光を含む。前記短波ビーム２０の波長は３５０ｎｍ乃至４１０ｎｍの間の範囲であり、前記第一１／４波長板２３０、前記第二１／４波長板２４０、前記第一分光器２２０、前記第二分光器７１０、前記第二偏光板７２０、及び前記第三偏光板の稼働波長は４００ｎｍ乃至８００ｎｍの間の範囲であり、前記二色性分光器２６０の遮断波長は３６０ｎｍ乃至４２０ｎｍの間の範囲であり、前記長波パスフィルターの遮断波長は４６０ｎｍ乃至５１０ｎｍの間の範囲である。
【００５８】
図５ｂは図１に示す他の実施形態の感知ユニットを示したブロックである。
【００５９】
前記感知ユニットは偏光ビームスプリッター７７０と、長波パスフィルター７４０と、モノクロ２次元感光素子７５０と、カラー２次元感光素子７６０と、を備える（図５ｂ参照）。
【００６０】
前記偏光ビームスプリッター７７０は第一側辺Ｓ７７１と、第二側辺Ｓ７７２と、第三側辺Ｓ７７３と、を有し、前記第一側辺Ｓ７７１は前記投影レンズ５００に対向すると共に前記投影レンズ５００から投影されたビームを受光させる。前記第一白色光ビーム１０は前記偏光ビームスプリッター７７０により偏光されて分光された後、前記第三側辺Ｓ７７３から導出されて前記カラー２次元感光素子７６０に結像される。前記ブロードバンド周波数帯及び前記ナローバンド周波数帯を含む第一白色光ビーム１０及び前記蛍光ビーム３０は前記偏光ビームスプリッター７７０により偏光されて分光された後、前記第二側辺Ｓ７７２から導出されると共に前記長波パスフィルター７４０により前記ナローバンド周波数帯がフィルタリングされ、前後が前記モノクロ２次元感光素子７５０に結像される。
【００６１】
図３ｂに戻って、前記第一偏光板２１０は第一偏光方向を有し、前記偏光ビームスプリッター７７０は第四偏光方向（Ｓ-偏光方向）を有する。前記第一偏光方向と前記第四偏光方向とは互いに垂直になり、前記第一１／４波長板２３０は第一光学軸方向を有し、前記第二１／４波長板２４０は第二光学軸方向を有する。前記第一光学軸方向及び前記第二光学軸方向は共に前記第一偏光方向と前記第四偏光方向との間に介在し、干渉効率の増加及び直交偏光スペクトルのイメージ吸収品質を向上させる効果を提供する。
【００６２】
前記第一白色光ビーム１０の波長は４００ｎｍ乃至８００ｎｍの間の範囲であると共に４００ｎｍ乃至４８０ｎｍの間の波長範囲の青色ナローバンド光及び４８０ｎｍ乃至８００ｎｍの間の波長範囲の黄色またはオレンジ色ブロードバンド光を含む。前記短波ビーム２０の波長は３５０ｎｍ乃至４１０ｎｍの間の範囲であり、前記第一１／４波長板２３０、前記第二１／４波長板２４０、前記第一分光器２２０、前記第二分光器７１０、前記第一偏光板２１０、及び前記偏光ビームスプリッター７７０の稼働波長は４００ｎｍ乃至８００ｎｍの間の範囲であり、前記二色性分光器２６０の遮断波長は３６０ｎｍ乃至４２０ｎｍの間の範囲であり、前記長波パスフィルターの遮断波長は４６０ｎｍ乃至５１０ｎｍの間の範囲である。
【００６３】
図６は本発明の他の実施形態に係る高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置を示したブロックである。
【００６４】
前記参照端ユニット６００は軸方向プラットフォーム６４０を更に備える。前記サンプル載置ユニット４００は３次元モバイルプラットフォーム４３０を更に含む。前記高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置は、イメージ処理プロセスを実行するための情報処理装置（図示省略）を更に具備する。
【００６５】
軸方向プラットフォーム６４０が前記第二対物レンズ６２０及び前記反射鏡６３０を移動させることにより、光路遅延ユニット６１０が調節され、３次元モバイルプラットフォーム４３０が前記蛍光剤で染色したサンプル４１０を移動させることにより、前記情報処理装置（図示省略）が前記サンプルの３次元イメージ（図示省略）を算出可能となる。これは従来の技術にあたるため詳述は省く。
【００６６】
また、前記サンプル載置ユニット４００は第二白色光源ユニット４２０を更に備える。前記第二白色光源ユニット４２０は、白色光ＬＥＤ、白色光ハロゲンランプ、或いはタングステンランプを含み、且つ前記第二白色光源ユニットは前記第一対物レンズ３００に適度な透過輝度を提供するために用いられる。これにより、Ｈ＆Ｅ切片が前記サンプル載置ユニット４００に載置されると、前記３次元モバイルプラットフォームが前記Ｈ＆Ｅ切片を移動させると共に前記第二白色光光源４２０が発生させる第二白色光ビーム４０が前記Ｈ＆Ｅ切片に照射され、前記情報処理ユニットが前記感知ユニットにより感知されたイメージデータに基づいて前記イメージ処理プロセスを実行させてＨ＆Ｅイメージを生成させる。
【００６７】
上記のように構成された本発明は、以下の利点を有する。
１．本発明に係る高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置は、新鮮な組織の造影のみならず、生体の皮膚や手術中の組織の病理診断にも使用でき、医師に対して迅速に組織情報を提供する。
２．本発明に係る高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置は、混色ユニットが第一分光器と第一対物レンズとの間に設置される二色性分光器を有し、短波ビームがサンプルに照射される光路中で第一分光器により減衰されずに蛍光信号の強度が増強され、露光時間が短縮し、イメージ取得速度が速まる。
３．本発明に係る高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置は、サンプルからのビーム（反射される短波ビーム及び短波が照射されることで励起される蛍光ビームを含む）が二色性分光器を透過させる際に、短波ビームがフィルタリングされ、蛍光ビームのみが透過し、コントラストが高い蛍光信号が得られ、露光時間が短縮し、イメージ取得速度が速まる。
４．本発明に係る高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置は、感知ユニットが前記短波ビームを更にフィルタリングさせる長波パスフィルターを有し、コントラストの高い蛍光信号が得られ、これにより露光時間が短縮し、イメージ取得速度が速まる。
５．本発明に係る高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置は、その光切片方法は、（１）光学干渉顕微鏡及び直交偏光スペクトル吸収顕微鏡が結合され、細胞構造及び色素ブロックのイメージが同時に取得でき、（２）光学干渉顕微鏡及び蛍光顕微鏡が結合され、前後に細胞構造及び細胞核のイメージが取得され、（３）光学干渉顕微鏡及び直交偏光スペクトル吸収顕微鏡が結合された後、蛍光顕微鏡が更に結合され、細胞構造及び色素ブロックのイメージが同時に取得された後、細胞核のイメージが更に取得される。
６．本発明に係る高度光学干渉顕微鏡を用いた光切片装置は、第二白色光光源が発生させる第二白色光ビームがＨ＆Ｅ凍結切片またはパラフィン切片のサンプルに照射されることにより、その透過イメージが取得され、上述の目的のために取得されたイメージと比較される。
【００６８】
以上、本発明の実施形態について図面を参照して詳述したが、具体的な構成はこの実施形態に限られるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲の設計変更等も含まれる。
【図１ａ】
2020013125.tif 000003
【図１ｂ】
2020013125.tif 000004
【図２】
2020013125.tif 000005
【図３ａ】
2020013125.tif 000006
【図３ｂ】
2020013125.tif 000007
【図３ｃ】
2020013125.tif 000008
【図３ｄ】
2020013125.tif 000009
【図４】
2020013125.tif 000010
【図５ａ】
2020013125.tif 000011
【図５ｂ】
2020013125.tif 000012
【図６】
2020013125.tif 000013