(57)【要約】      （修正有）【課題】記憶、学習能力等の脳機能の改善に有効な認知機能改善剤及び認知機能改善用食品の提供。【解決手段】カテキン類及びオルニチンを有効成分とする認知能改善剤。カテキン類及びオルニチンを有効成分とする認知機能改善用食品。カテキン類とオルニチンとの質量比が１：０．１〜１０である、認知機能改善剤及び認知機能改善用食品。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
カテキン類及びオルニチンを有効成分とする認知能改善剤。
【請求項２】
カテキン類及びオルニチンを有効成分とする認知機能改善用食品。
【請求項３】
認知機能の改善がアンモニアの過剰蓄積を伴う認知能低下の改善である、請求項１記載の剤又は請求項２記載の食品。
【請求項４】
認知機能の改善がアルツハイマー型認知症に伴う認知能低下の改善である、請求項１若しくは３記載の剤、又は請求項２若しくは３記載の食品。
【請求項５】
カテキン類及びオルニチンを有効成分とするアルツハイマー病の予防又は改善剤。
【請求項６】
カテキン類及びオルニチンを有効成分とするアルツハイマー病の予防又は改善用食品。
【請求項７】
カテキン類とオルニチンとの質量比が１：０．１〜１０である、請求項１〜６のいずれか１項記載の剤又は食品。
【請求項８】
前記カテキン類が、カテキン、ガロカテキン、カテキンガレート、ガロカテキンガレート、エピカテキン、エピガロカテキン、エピカテキンガレート、及びエピガロカテキンガレートからなる群より選択される少なくとも１種である、請求項１〜７のいずれか１項記載の剤又は食品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、認知機能改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、総人口に対する高齢者の比率が上昇し、加齢に伴う記憶、学習能力の低下や、さらには疾病としての認知症の増加が問題になっている。認知症の原因疾患としては、アルツハイマー病に代表される神経変性疾患、脳梗塞や脳出血等による脳血管障害、脳腫瘍、頭部外傷、感染症、代謝性疾患等が挙げられる。特に、高齢化の進展に伴って患者数が著しく増加しているのはアルツハイマー病である。アルツハイマー病は、急激な短期の記銘力、記憶力の低下、人格障害等を引き起こすことから、介護の面から社会問題になっている。
【０００３】
アルツハイマー病は、認知症の中でも最も多いタイプで、認知低下及び壊滅的な神経変性によって特徴付けられる。アルツハイマー病の予防及び/又は治療には様々な要因が関与する可能性がある。現在広く認識されている、β-アミロイドペプチド（Ａβ）の細胞外蓄積及びタウの細胞内蓄積がアルツハイマー病の病因であるという仮説は有力であるが、Ａβ又はタウを標的とした薬物療法は成功しておらず、アルツハイマー病の臨床的に有効な唯一の薬物療法は、コリン作動性経路を標的とする薬物である。
【０００４】
体内のアンモニアは、肝臓の尿素回路により無毒な尿素へと変換され、尿中に排出される。アルギニン、オルニチン及びシトルリンは、アンモニアを無毒な尿素に変換する肝臓の尿素回路に関与している。尿素回路に関与するアミノ酸であるオルニチン、シトルリン又はアルギニンにより血中アンモニアの上昇が抑制されることが報告されている（特許文献１、２、及び非特許文献１）。
アンモニアは、脳機能に対する毒性が実証されているヒト組織の代謝の正常な最終産物であり、例えば、肝機能低下による血中アンモニア上昇が脳機能を低下することは、肝性脳症として知られている。また、従来から、血中アンモニアレベルとアルツハイマー病との間の関連性が様々提唱・示唆されており（非特許文献２−６）、最近、アンモニア曝露の持続時間及び大きさに依存して、脳アンモニアの上昇は、記憶機能障害、認知及び空間学習を含むアルツハイマー病に共通する典型的な神経学的症状を引き起こすこと、病態生理学的には、ミトコンドリア機能障害、細胞グルコース代謝の崩壊、神経伝達の低下及び炎症反応が起こることが報告され、慢性的に上昇したアンモニアレベルがアルツハイマー病の発症に関連するとの従来の推定が妥当であることが報告されている（非特許文献７）。
【０００５】
非特許文献７においては、アルツハイマー病の脳とアンモニアの関係について以下のように考察されている。脳では、正常又は高アンモニア性状態のいずれかにおいて、グルタミン合成酵素（１−グルタミン酸：アンモニアリガーゼ（ＡＤＰ形成；ＥＣ６．３．１．２））（ＧＳ）によるグルタミンのＡＴＰ依存性形成の経路は、主にアンモニア除去に使用される。アルツハイマー病の脳において、皮質におけるＡβ及び老人斑（ＳＰ）の細胞外沈着密度は、Ａβの神経毒性を増強するだけでなく、それと相互作用することによってＧＳの酸化的構造変化を誘発する。これは、アストロサイトのＧＳ活性の喪失を引き起こし、脳のアンモニアクリアランス機構（グルタメート−グルタミンサイクル）及びアストロサイトの障害を誘発する。
すなわち、非特許文献７においては、アルツハイマー病の脳におけるＡβ及び老人斑（ＳＰ）の細胞外沈着は、それ自体が神経障害を引き起こすだけでなく、脳のアンモニアクリアランス能力も低下させ、認知機能低下を引き起こすことが示され、アルツハイマー病におけるアンモニア低減の重要性が提案されている。
【０００６】
さらに、非特許文献７においては、大量の乳酸菌を含む食事がアルツハイマー病の治療に効果があることが記載され、その機序は、乳酸菌により消化管からのアンモニア産生又は吸収が抑制され、血中アンモニア濃度の低下をもたらしたためと考察されている。
したがって、末梢に作用して血中アンモニア濃度を低下させることがアルツハイマー病の治療に効果があると考えられる。
【０００７】
一方、緑茶等に含まれているカテキン類については、種々の薬理作用が報告され、認知機能改善効果があることも報告されている（特許文献３）。しかしながら、オルニチンと組み合わせた場合の作用効果は報告されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特開２０１１−１３２１７４号公報
【特許文献２】国際公開第２００９／０４８１４８号
【特許文献３】特表２００９−５３９９９１号公報
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Takeda et al., J. Nutr. Sci. Vitaminol., 2011, 57:246-250
【非特許文献２】Fisman M. et.al., J. Am. Geriatr. Soc., 1989, 37, 1102-1102
【非特許文献３】Fisman M. et.al., AM. J. PSYCHIATRY, 1985, 142, 71-73
【非特許文献４】Hoyer S., ADV. EXP. MED. BIOL., 1994, 368, 197-205
【非特許文献５】Seiler N., Neurochem. Int., 2002, 41, 189-207
【非特許文献６】Seiler N., Neurochem Res., 1993, 18, 235-245
【非特許文献７】Jin Y.Y. et.al., Nutrients, 2018, 10, 564
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
本発明は、記憶、学習能力等の脳機能の改善に有効な認知機能改善剤を提供することに関する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、カテキン類とオルニチンとを併用することにより、カテキン類単独又はオルニチン単独の場合と比べて、肝細胞におけるアンモニア代謝が顕著に向上することを見出し、これが認知機能の改善に有用であることを見出した。
【００１２】
すなわち、本発明は、以下を提供する。
１）カテキン類及びオルニチンを有効成分とする認知能改善剤。
２）カテキン類及びオルニチンを有効成分とする認知機能改善用食品。
３）カテキン類及びオルニチンを有効成分とするアルツハイマー病の予防又は改善剤。
４）カテキン類及びオルニチンを有効成分とするアルツハイマー病の予防又は改善用食品。
【発明の効果】
【００１３】
本発明の認知機能改善剤は、体内のアンモニア代謝を促進し、脳の記憶、学習能力等の認知機能の低下を伴う障害、例えばアルツハイマー病を効果的に予防又は改善することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】カテキン類及びオルニチンが肝細胞のアンモニア代謝に及ぼす影響。横軸は肝細胞培養培地、縦軸は該培地中のアンモニア濃度を表す。データは平均値±ＳＥ（ｎ＝３）、＊p<0.05（Dunnett test, vs. 対照群）。
【図２】カテキン類及びオルニチンが血中アンモニア濃度に及ぼす影響。Ａ：１回目（試験素材摂取なし）の血中アンモニア濃度、Ｂ：２回目（試験素材摂取後）の血中アンモニア濃度。データは平均値±ＳＥ（各群ｎ＝１５）。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
本明細書において、「非治療的」とは、医療行為を含まない、すなわち人間を手術、治治療又は診断する方法を含まない、より具体的には医師、又は医療従事者もしくは医師の指示を受けた者が人間に対して手術、治療又は診断を実施する方法を含まない概念である。
【００１６】
本明細書において、「予防」とは、個体における疾患もしくは状態の発症の防止、抑制又は遅延、あるいは個体の疾患もしくは状態の発症の危険性を低下させることをいう。また本明細書において、「改善」とは、疾患もしくは状態の好転、疾患もしくは状態の悪化の防止、抑制又は遅延、あるいは疾患もしくは状態の進行の逆転、防止、抑制又は遅延をいう。
【００１７】
本明細書において、「カテキン類」とは、カテキン（Ｃ）、ガロカテキン（ＧＣ）、カテキンガレート（Ｃｇ）、ガロカテキンガレート（ＧＣｇ）、エピカテキン（ＥＣ）、エピガロカテキン（ＥＧＣ）、エピカテキンガレート（ＥＣｇ）、及びエピガロカテキンガレート（ＥＧＣｇ）からなる群より選択される少なくとも１種を意味する。
【００１８】
カテキン類は、Ｃａｍｅｌｌｉａ属、例えばＣ．  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  ｖａｒ．  ｓｉｎｅｎｓｉｓ、Ｃ．  ｓｉｎｅｎｓｉｓ  ｖａｒ．  ａｓｓａｍｉｃａ、やぶきた種、又はそれらの雑種から得られる葉から製造された茶葉から、水又は熱水、場合によってはこれに抽出助剤を添加したもので抽出することができる。当該茶葉には、（１）煎茶、番茶、玉露、てん茶、釜入り茶等の緑茶；（２）総称して烏龍茶と呼ばれる鉄観音、色種、黄金桂、武夷岩茶などの半発酵茶；（３）紅茶と呼ばれるダージリン、ウバ、キーマン等の発酵茶の茶葉が含まれる。当該茶葉からのカテキン類の抽出は、撹拌抽出などの通常の方法により行うことができる。抽出用の水又は熱水には、予めアスコルビン酸ナトリウムなどの有機酸又は有機酸塩類を添加してもよい。必要に応じて、抽出には、煮沸脱気や窒素ガス等の不活性ガスを通気して溶存酸素を除去しつつ、いわゆる非酸化的雰囲気下で抽出する方法を併用してもよい。
【００１９】
あるいは、カテキン類を茶葉から直接抽出するかわりに、茶抽出物の濃縮物又は精製物が使用されてもよい。茶抽出物の濃縮物とは、例えば茶葉から熱水もしくは水溶性有機溶剤により抽出された抽出物を濃縮したものであり、茶抽出物の精製物とは、例えば当該抽出物を溶剤やカラム等を用いて精製したものである。当該茶抽出物の濃縮物又は精製物の例としては、特開昭５９−２１９３８４号、特開平４−２０５８９号、特開平５−２６０９０７号、特開平５−３０６２７９号等に詳細に例示されている方法で調製したものが挙げられる。茶抽出物、及びその濃縮物又は精製物は市販品を使用してもよく、その例としては、三井農林（株）「ポリフェノン」、（株）伊藤園「テアフラン」、太陽化学（株）「サンフェノン」、サントリー（株）「サンウーロン」等が挙げられる。茶抽出物の濃縮物又は精製物の形態としては、固体、液体、スラリー、ならびにそれらを水、炭酸水又は通常の手順で抽出された茶類抽出液等に溶解又は希釈したものが挙げられるが、特に限定されない。
【００２０】
さらに、本発明におけるカテキン類は、茶葉以外の他の原料起源、例えばブドウ及びその加工品（ワイン、ジュース類等）又はカカオ豆及びその加工品に由来するもの、あるいは化学合成品であってもよい。
【００２１】
本発明のカテキン類は、好ましくは茶抽出物の濃縮物又は精製物の形態で使用され、より好ましくは緑茶抽出物の濃縮物又は精製物の形態で使用される。
【００２２】
本発明において、オルニチンは、遊離体又はその塩の形態で使用することができる。オルニチンは、Ｌ−体、Ｄ−体、ＤＬ−体、及びそれらの混合物のいずれであってもよいが、好ましくはＬ−体である。
【００２３】
オルニチンの塩としては、酸付加塩、金属塩、アンモニウム塩、有機アミン付加塩、アミノ酸付加塩等が挙げられる。当該酸付加塩としては、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩等の無機酸塩、及び酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、リンゴ酸塩、乳酸塩、α−ケトグルタル酸塩、グルコン酸塩、カプリル酸塩等の有機酸塩が挙げられる。当該金属塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、亜鉛塩等が挙げられる。当該アンモニウム塩としては、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム等の塩が挙げられる。当該有機アミン付加塩としては、モルホリン、ピペリジン等の塩が挙げられる。当該アミノ酸付加塩としては、グリシン、フェニルアラニン、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸等の塩が挙げられる。このうち、ナトリウム塩、又は塩酸塩が好ましい例として挙げられる。
【００２４】
当該オルニチンの遊離体又はそれらの塩は、それらを含む動植物から単離精製する方法、化学合成、発酵生産等により得ることができる。あるいは市販品を購入してもよい。
【００２５】
後述する実施例に示すとおり、カテキン類及びオルニチンを併用することにより、カテキン類又はオルニチンを単独で使用する場合と比べて、顕著に高いアンモニア代謝促進作用が達成される。前述の如く、高濃度のアンモニアが血中に蓄積し、その一部が脳内に移行することで様々な神経症状が引き起こされる。例えば、アンモニア曝露の持続時間及び大きさに依存して、脳アンモニアの上昇は、記憶機能障害、認知及び空間学習を含むアルツハイマー病に共通する典型的な神経学的症状を引き起こすこと、血中アンモニア濃度を低下することによりアルツハイマー病の治療に効果があることが報告されている（前記非特許文献７）。
【００２６】
したがって、優れたアンモニア代謝促進作用を有するカテキン類及びオルニチンの組み合わせは、認知機能改善剤（好ましくは、アンモニアの過剰蓄積を伴う認知機能低下の改善剤、アルツハイマー型認知症による認知能低下の改善剤）、更にはアルツハイマー病の予防又は改善剤（以下、「認知機能改善剤等」とも称する）となり得、また当該認知機能改善剤等を製造するために使用できる。
【００２７】
また、カテキン類及びオルニチンの組み合わせは、認知機能改善（好ましくは、アンモニアの過剰蓄積を伴う認知機能低下の改善、アルツハイマー型認知症による認知能低下の改善）、アルツハイマー病の予防又は改善のために使用することができる。ここで、当該使用は、ヒト若しくは非ヒト動物への投与、又はそれらに由来する検体における使用であり得、また治療的使用であっても非治療的使用であってもよい。ここで、非ヒト動物としては、非ヒト哺乳動物、両生類、及び軟骨魚類が挙げられ、非ヒト哺乳動物としては、例えば類人猿、その他霊長類、マウス、ラット、ウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、イヌ、ネコ、ハムスター、及びコンパニオン動物等が挙げられる。
本発明のカテキン類及びオルニチンの組み合わせを適用する対象としては、好ましくはアンモニア代謝が低下しているヒト、認知機能が低下しているヒト、アルツハイマー病の予防又は改善を望むヒト等が挙げられる。
【００２８】
なお、本発明において、カテキン類及びオルニチンの組み合わせは、それらが生体内で協働できる限りにおいて、両成分が同時に投与されてもよく、又は各成分が別個に投与されてもよい。
【００２９】
本発明において、「認知機能」とは、記憶、学習、思考、注意又は知覚、言語、時空間認識、見当識、その他抽象的事象の認知又は総合判断能力、及び実行能力などが挙げられ、好ましくは記憶又は学習能力、総合判断能力、及び実行能力が挙げられる。
「認知機能の改善」とは、認知機能の維持・向上、認知機能の低下に伴う各種症状（認知機能障害）の緩和・治癒を意味する。
したがって、本発明の認知機能改善剤は、認知機能障害を呈する疾患又は状態の予防又は改善用として有用である。斯かる認知機能障害を呈する疾患又は状態としては、例えば、認知症（例、老人性認知症、アルツハイマー病、脳血管性認知症、外傷後認知症の他、脳腫瘍、慢性硬膜下血腫、正常圧脳水腫、髄膜炎、パーキンソン病等の種々の疾患により生じる認知症）、非認知症性の認知障害（例、軽度認知障害（ＭＣＩ））、記憶又は学習障害（例、脳発達障害に伴う記憶及び学習障害）等が挙げられるが、好ましくは、アルツハイマー病、又はアルツハイマー型認知症である。
【００３０】
本発明の認知機能改善剤等は、認知機能の改善（好ましくは、アンモニアの過剰蓄積を伴う認知機能低下の改善、アルツハイマー型認知症による認知能低下の改善）、又はアルツハイマー病の予防又は改善効果を発揮する、ヒト若しくは動物用の医薬品、医薬部外品、食品となり、また当該医薬品、医薬部外品、食品に配合して使用される素材又は製剤となり得る。
なお、当該食品には、認知機能の改善（好ましくは、アンモニアの過剰蓄積を伴う認知機能低下の改善、アルツハイマー型認知症による認知能低下の改善）、又はアルツハイマー病の予防又は改善効果をコンセプトとし、必要に応じてその旨を表示した食品、機能性表示食品、特定保健用食品、病者用食品、サプリメントが包含される。
該医薬品、医薬部外品、食品は、カテキン類及びオルニチンを含む１つの組成物として提供されてもよく、又は、カテキン類又はオルニチンをそれぞれ含む組成物の組み合わせとして提供されてもよい。
【００３１】
本発明の認知機能改善剤等を医薬品（医薬部外品を含む）として用いる場合、当該医薬品は任意の投与形態で投与され得る。投与形態としては、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤等による経口投与又は注射剤、坐剤、吸入薬、経皮吸収剤等による非経口投与が挙げられるが、好ましい形態は経口投与である。
このような種々の剤型の医薬製剤は、本発明のカテキン類及びオルニチンと他の薬学的に許容される賦形剤、結合剤、増量剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、嬌味剤、香料、被膜剤、担体、希釈剤等を適宜組み合わせて調製することができる。
【００３２】
本発明の認知機能改善剤等を食品として用いる場合、当該食品の形態は、パン類、ケーキ類、麺類、菓子類、ゼリー類、冷凍食品、アイスクリーム類、乳製品、飲料などの各種食品組成物の他、上述した経口投与製剤と同様の形態（錠剤、カプセル剤、シロップ等）が挙げられる。
種々の形態の食品は、本発明のカテキン類及びオルニチンと他の食品材料や、溶剤、軟化剤、油、乳化剤、防腐剤、香科、安定剤、着色剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤等を適宜組み合わせて調製することができる。
【００３３】
当該医薬品（医薬部外品も含む）中におけるカテキン類の含有量は、特に限定されないが、好ましくは０．１質量％以上、より好ましくは１質量％以上、さらに好ましくは３質量％以上であり、かつ好ましくは２０質量％以下、より好ましくは１０質量％以下、さらに好ましくは５質量％以下である。さらに、当該含有量の例として、０．１〜２０質量％、０．１〜１０質量％、０．１〜５質量％、１〜２０質量％、１〜１０質量％、１〜５質量％、３〜２０質量％、３〜１０質量％、及び３〜５質量％が挙げられる。
【００３４】
当該医薬品（医薬部外品も含む）中におけるオルニチンの含有量は、特に限定されないが、オルニチン遊離体換算で、好ましくは０．３質量％以上、より好ましくは３質量％以上、さらに好ましくは５質量％以上、さらに好ましくは９質量％以上であり、かつ好ましくは６０質量％以下、より好ましくは３０質量％以下、さらに好ましくは２０質量％以下、さらに好ましくは１５質量％以下である。さらに、当該含有量の例として、０．３〜６０質量％、０．３〜３０質量％、０．３〜２０質量％、０．３〜１５質量％、３〜６０質量％、３〜３０質量％、３〜２０質量％、３〜１５質量％、５〜６０質量％、５〜３０質量％、５〜２０質量％、５〜１５質量％、９〜６０質量％、９〜３０質量％、９〜２０質量％、及び９〜１５質量％が挙げられる。
【００３５】
当該医薬品（医薬部外品も含む）においては、上記に挙げたカテキン類の濃度（０．１〜２０質量％、０．１〜１０質量％、０．１〜５質量％、１〜２０質量％、１〜１０質量％、１〜５質量％、３〜２０質量％、３〜１０質量％、及び３〜５質量％）のいずれかと、上記に挙げたオルニチン濃度（０．３〜６０質量％、０．３〜３０質量％、０．３〜２０質量％、０．３〜１５質量％、３〜６０質量％、３〜３０質量％、３〜２０質量％、３〜１５質量％、５〜６０質量％、５〜３０質量％、５〜２０質量％、５〜１５質量％、９〜６０質量％、９〜３０質量％、９〜２０質量％、及び９〜１５質量％）のいずれかを、任意に組み合わせることができる。
【００３６】
当該食品中におけるカテキン類の含有量は、特に限定されないが、好ましくは０．０５質量％以上、より好ましくは０．１質量％以上、さらに好ましくは１質量％以上であり、かつ好ましくは１０質量％以下、より好ましくは５質量％以下、さらに好ましくは１質量％以下である。さらに、当該含有量の例として、０．０５〜１０質量％、０．０５〜５質量％、０．０５〜１質量％、０．１〜１０質量％、０．１〜５質量％、０．１〜１質量％、１〜１０質量％、及び１〜５質量％が挙げられる。
【００３７】
当該食品中におけるオルニチンの含有量は、特に限定されないが、オルニチン遊離体換算で、好ましくは０．１５質量％以上、より好ましくは０．３質量％以上、さらに好ましくは３質量％以上、さらに好ましくは５質量％以上であり、かつ好ましくは３０質量％以下、より好ましくは２０質量％以下、さらに好ましくは１５質量％以下、さらに好ましくは５質量％以下、さらに好ましくは３質量％以下である。さらに、当該含有量の例として、０．１５〜３０質量％、０．１５〜２０質量％、０．１５〜１５質量％、０．１５〜５質量％、０．１５〜３質量％、０．３〜３０質量％、０．３〜２０質量％、０．３〜１５質量％、０．３〜５質量％、０．３〜３質量％、３〜３０質量％、３〜２０質量％、３〜１５質量％、３〜５質量％、５〜３０質量％、５〜２０質量％、及び５〜１５質量％が挙げられる。
【００３８】
当該食品においては、上記に挙げたカテキン類の濃度（０．０５〜１０質量％、０．０５〜５質量％、０．０５〜１質量％、０．１〜１０質量％、０．１〜５質量％、０．１〜１質量％、１〜１０質量％、及び１〜５質量％）のいずれかと、上記に挙げたオルニチン濃度（０．１５〜３０質量％、０．１５〜２０質量％、０．１５〜１５質量％、０．１５〜５質量％、０．１５〜３質量％、０．３〜２０質量％、０．３〜３０質量％、０．３〜１５質量％、０．３〜５質量％、０．３〜３質量％、３〜３０質量％、３〜２０質量％、３〜１５質量％、３〜５質量％、５〜３０質量％、５〜２０質量％、及び５〜１５質量％）のいずれかを、任意に組み合わせることができる。
【００３９】
また本発明において使用されるカテキン類とオルニチン（遊離体換算）との量比は、質量比で、好ましくは１：０．１〜１０、より好ましくは１：０．５〜１０、さらに好ましくは１：１〜８、さらに好ましくは１：１〜５、なお好ましくは１：２〜４である。
【００４０】
本発明においては、アンモニア代謝促進作用を有する他の素材を、カテキン類及びオルニチンと組み合わせて使用することができる。そのような他の素材の例としては、アルギニン、シトルリン及びその組み合わせが挙げられる。
【００４１】
本発明において、カテキン類及びオルニチンの投与量及び投与計画は、対象の種、体重、性別、年齢、状態、又はその他の要因に従って当業者により適宜決定されればよい。限定ではないが、経口投与の場合、本発明によるカテキン類及びオルニチンの成人１人１日当たりの投与量の例は、以下のとおりである：
［カテキン類］好ましくは１００〜３０００ｍｇ／６０ｋｇ体重、より好ましくは２５０〜２０００ｍｇ／６０ｋｇ体重、さらに好ましくは２５０〜１０００ｍｇ／６０ｋｇ体重、さらに好ましくは２５０〜６００ｍｇ／６０ｋｇ体重；
［オルニチン（遊離体換算）］好ましくは１００〜５０００ｍｇ／６０ｋｇ体重、より好ましくは２５０〜３０００ｍｇ／６０ｋｇ体重、さらに好ましくは４００〜２０００ｍｇ／６０ｋｇ体重、さらに好ましくは５００〜２０００ｍｇ／６０ｋｇ体重、さらに好ましくは８００〜１６００ｍｇ／６０ｋｇ体重、別の例において、好ましくは２５０〜８００ｍｇ／６０ｋｇ体重、さらに好ましくは５００〜８００ｍｇ／６０ｋｇ体重、
上記の用量を、例えば、１日１回、又は１日２回もしくは３回以上に分けて投与することが好ましい。
【００４２】
本発明の認知機能改善剤等が食品として使用される場合の好ましい実施形態としては、該カテキン類及びオルニチンは、カテキン類を１〜１０質量％、オルニチンを５〜２０質量％（遊離体換算）含有し、かつカテキン類とオルニチン（遊離体換算）の質量比が１：０．５〜１０である組成物が挙げられる。
【００４３】
本発明の認知機能改善剤等が飲料として使用される場合の好ましい実施形態としては、該カテキン類及びオルニチンは、カテキン類を０．０５７〜０．５６７質量％、オルニチンを０．２８３〜１．１３２質量％（遊離体換算）含有し、かつカテキン類とオルニチン（遊離体換算）の質量比が１：０．５〜１０である組成物が挙げられる。
【００４４】
本発明の認知機能改善剤等が医薬品として使用される場合の好ましい実施形態としては、該カテキン類及びオルニチンは、カテキン類を１〜１０質量％、オルニチンを５〜２０質量％（遊離体換算）含有し、かつカテキン類とオルニチン（遊離体換算）の質量比が１：０．５〜１０である組成物が挙げられる。
【００４５】
本発明の認知機能改善剤等の投与量の好ましい例は、成人１人１日当たりの経口投与量として、カテキン類２５０〜１，０００ｍｇ／６０ｋｇ体重、かつオルニチン４００〜２０００ｍｇ（遊離体換算）／６０ｋｇ体重である。上記の用量を、例えば、１日１回、又は１日２回もしくは３回以上に分けて投与することが好ましい。
【００４６】
上述した実施形態に関し、本発明においてはさらに以下の態様が開示される。
＜１＞カテキン類及びオルニチンを有効成分とする認知能改善剤。
＜２＞カテキン類及びオルニチンを有効成分とする認知機能改善用食品。
＜３＞認知機能の改善がアンモニアの過剰蓄積を伴う認知能低下の改善である、＜１＞の剤又は＜２＞の食品。
＜４＞認知機能の改善がアルツハイマー型認知症に伴う認知能低下の改善である、＜１＞若しくは＜３＞の剤、又は＜２＞若しくは＜３＞の食品。
＜５＞カテキン類及びオルニチンを有効成分とするアルツハイマー病の予防又は改善剤。
＜６＞カテキン類及びオルニチンを有効成分とするアルツハイマー病の予防又は改善用食品。
【００４７】
＜７＞認知能改善剤を製造するための、カテキン類及びオルニチンの使用。
＜８＞認知能改善用食品を製造するための、カテキン類及びオルニチンの使用
＜９＞認知機能の改善がアンモニアの過剰蓄積を伴う認知能低下の改善である、＜７＞又は＜８＞の使用。
＜１０＞認知機能の改善がアルツハイマー型認知症に伴う認知能低下の改善である、＜７＞〜＜９＞いずれかの使用。
＜１１＞アルツハイマー病の予防又は改善剤を製造するための、カテキン類及びオルニチンの使用。
＜１２＞アルツハイマー病の予防又は改善用食品を製造するための、カテキン類及びオルニチンの使用。
【００４８】
＜１３＞認知能改善に使用するための、カテキン類及びオルニチンの組み合わせ。
＜１４＞認知機能の改善がアンモニアの過剰蓄積を伴う認知能低下の改善である、＜１３＞の組み合わせ。
＜１５＞認知機能の改善がアルツハイマー型認知症に伴う認知能低下の改善である、＜１３＞又は＜１４＞の組み合わせ。
＜１６＞アルツハイマー病の予防又は改善に使用するための、カテキン類及びオルニチンの組み合わせ。
【００４９】
＜１７＞認知能を改善するための、カテキン類及びオルニチンの非治療的使用。
＜１８＞認知機能の改善がアンモニアの過剰蓄積を伴う認知能低下の改善である、＜１７＞の使用。
＜１９＞認知機能の改善がアルツハイマー型認知症に伴う認知能低下の改善である、＜１７＞又は＜１８＞の使用。
＜２０＞アルツハイマー病を予防又は改善するための、カテキン類及びオルニチンの非治療的使用。
【００５０】
＜２１＞カテキン類及びオルニチンの有効量を、それを必要とする対象に投与する認知能改善方法。
＜２２＞認知機能の改善がアンモニアの過剰蓄積を伴う認知能低下の改善である、＜２１＞の方法。
＜２３＞認知機能の改善がアルツハイマー型認知症に伴う認知能低下の改善である、＜２１＞又は＜２２＞の方法。
＜２４＞カテキン類及びオルニチンの有効量を、それを必要とする対象に投与するアルツハイマー病の予防又は改善方法。
【００５１】
＜２５＞＜１＞〜＜２４＞において、カテキン類とオルニチンとの質量比は好ましくは１：０．１〜１０、より好ましくは１：０．５〜１０、さらに好ましくは１：１〜８、さらに好ましくは１：１〜５、なお好ましくは１：２〜４である。
＜２６＞＜１＞〜＜２４＞において、前記カテキン類は、カテキン、ガロカテキン、カテキンガレート、ガロカテキンガレート、エピカテキン、エピガロカテキン、エピカテキンガレート、及びエピガロカテキンガレートからなる群より選択される少なくとも１種である。
＜２７＞＜２＞、＜３＞、＜４＞及び＜６＞において、食品中におけるカテキン類の含有量は、好ましくは０．０５質量％以上、より好ましくは０．１質量％以上、さらに好ましくは１質量％以上であり、かつ好ましくは１０質量％以下、より好ましくは５質量％以下、さらに好ましくは１質量％以下であるか、又は０．０５〜１０質量％、０．０５〜５質量％、０．０５〜１質量％、０．１〜１０質量％、０．１〜５質量％、０．１〜１質量％、１〜１０質量％、及び１〜５質量％である。
＜２８＞＜２＞、＜３＞、＜４＞及び＜６＞において、食品中におけるオルニチンの含有量は、オルニチン遊離体換算で、好ましくは０．１５質量％以上、より好ましくは０．３質量％以上、さらに好ましくは３質量％以上、さらに好ましくは５質量％以上であり、かつ好ましくは３０質量％以下、より好ましくは２０質量％以下、さらに好ましくは１５質量％以下、さらに好ましくは５質量％以下、さらに好ましくは３質量％以下であるか、又は、０．１５〜３０質量％、０．１５〜２０質量％、０．１５〜１５質量％、０．１５〜５質量％、０．１５〜３質量％、０．３〜３０質量％、０．３〜２０質量％、０．３〜１５質量％、０．３〜５質量％、０．３〜３質量％、３〜３０質量％、３〜２０質量％、３〜１５質量％、３〜５質量％、５〜３０質量％、５〜２０質量％、及び５〜１５質量％である。
【実施例】
【００５２】
以下、実施例を用いて本発明をさらに具体的に説明する。ただし、本発明の技術的範囲はこれら実施例に限定されるものではない。
【００５３】
参考例１  カテキン類含有緑茶抽出物の調製
市販の緑茶抽出物（三井農林(株)「ポリフェノンＨＧ」）１，０００ｇを、２５℃、２００ｒｐｍの撹拌条件下で、９５質量％エタノール水溶液９，０００ｇ中に懸濁させた。これに活性炭（クラレケミカル（株）、「クラレコールＧＬＣ」）２００ｇと酸性白土（水澤化学（株）、「ミズカエース♯６００」）５００ｇとを投入し、約１０分間撹拌を続けた。さらに２５℃で３０分間撹拌処理を続けた。次に、懸濁液を２号ろ紙でろ過して活性炭、酸性白土、及び沈殿物を除去した後、ろ過液を０．２μｍメンブランフィルターにて再ろ過した。イオン交換水２００ｇをろ過液に加え、４０℃、３．３ｋＰａでエタノールを留去し、減圧濃縮した。濃縮物のうち７５０ｇをステンレス容器に投入し、イオン交換水で全量を１０，０００ｇとし、５質量％重炭酸ナトリウム水溶液３０ｇを添加してｐＨ５．５に調整した。得られた濃縮物を含む溶液に、２２℃、１５０ｒｐｍの撹拌条件下で、イオン交換水１０．７ｇ中にキッコーマンタンナーゼＫＴＦＨ（Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｇｒａｄｅ、５００Ｕ／ｇ以上）２．７ｇを溶解させた酵素液を添加した。３０分後に反応液のｐＨが４．２４に低下した時点で、９５℃の温浴に該ステンレス容器を浸漬し、９０℃１０分間保持して酵素活性を完全に失活させた。次いで、反応液を２５℃まで冷却した後に濃縮処理を行い、緑茶抽出物の精製物を得た。得られた精製緑茶抽出物は、（Ａ）カテキン類の含有量が１４．９量％、該カテキン類中のカテキンガレート類の割合が４５．３質量％であった。
【００５４】
実施例１  カテキン類及びオルニチンが肝細胞のアンモニア代謝に及ぼす影響
肝細胞には、肝細胞培養キットＰ−２（ＨＰＣ０３Ｐ−ＢＡＬ、雄性Ｂａｌｂ／ｃマウス由来、２４ｗｅｌｌ、１×１０5ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌ、コスモ・バイオ株式会社）を用いた。カテキン類としては、参考例１で調製した緑茶抽出物（カテキン類１４．９質量％含有）を用いた。肝細胞を、対照培地、オルニチン含有培地（１ｍＭオルニチン塩酸塩（オルニチン換算として０．０１３２%）含有対照培地）、カテキン類含有培地（０．００１質量％緑茶抽出物（カテキン類として０．０００１４９質量％）含有対照培地）、又は、オルニチン及びカテキン類含有培地（１ｍＭオルニチン塩酸塩及び０．００１質量％緑茶抽出物含有対照培地）中で、３７℃にて２０時間培養した。対照培地には、５ｍＭ塩化アンモニウム含有ＤＭＥＭ培地（高グルコース、ＧｌｕｔａＭＡＸ添加、ペニシリン／ストレプトマイシン添加、ピルビン酸不含有、フェノールレッド不含有、グルタミン不含有、ＦＢＳ不含有）を用いた。培養後の培地上清を回収し、これに含まれるアンモニアをＡｍｍｏｎｉａ  Ａｓｓａｙ  Ｋｉｔ（ａｂｃａｍ）を用いて定量した。定量値について、対照群との間での有意差検定を行った（Ｄｕｎｎｅｔｔ  ｔｅｓｔ，ｖｓ．対照群、ｎ＝３）。
【００５５】
アンモニアの定量結果を図１に示す。対照群に対し、オルニチン塩酸塩及びカテキン類含有群において、培地中のアンモニア濃度が統計学的に有意に低減し、アンモニア代謝が促進されたことが示された。
【００５６】
実施例２  カテキン類及びオルニチンがヒトの血中アンモニア濃度に及ぼす影響
１．方法
（被験者）
健康な成人男性１５名（２１〜３９歳）を被験者とした。
（実験計画）
試験では、本測定１として、被験者全員に対照飲料１本（プラセボヘルシアウォーター  グレープフルーツ味  ５００ｍＬ：カテキン類非含有）及びプラセボサプリメント（プラセプラス（プラセボ製薬株式会社））１２粒を摂取させ、その５０分後、血中アンモニア濃度を測定した。
本測定１後、本測定２として１５名を本測定１での血中アンモニア濃度平均値に差が無い様に５名ずつの３つ群（カテキン類単独群、オルニチン単独群、カテキン類とオルニチン併用群）に分け、本測定１から２週間以上の後、それぞれ、
カテキン類単独群には、カテキン飲料１本（ヘルシアウォーター  グレープフルーツ味  ５００ｍＬ：花王株式会社、カテキン類５４０ｍｇ含有）及びプラセボサプリメント（プラセプラス（プラセボ製薬株式会社））１２粒、
オルニチン単独群には、対照飲料１本（プラセボヘルシアウォーター  グレープフルーツ味  ５００ｍＬ：カテキン類非含有）及びオルニチンサプリメント（オルニチン（協和発酵バイオ株式会社）、１２粒中にオルニチン１６００ｍｇ含有）１２粒、
カテキン類とオルニチン併用群にはカテキン飲料１本（ヘルシアウォーター  グレープフルーツ味  ５００ｍＬ：花王株式会社、カテキン類５４０ｍｇ含有）及びオルニチンサプリメント（オルニチン（協和発酵バイオ株式会社）、１２粒中にオルニチン１６００ｍｇ含有）１２粒、
を摂取させ、その５０分後、血中アンモニア濃度を測定した。
【００５７】
（試験素材）
試験素材の詳細は以下のとおり：
カテキン飲料：ヘルシアウォーター  グレープフルーツ味  ５００ｍＬ（花王株式会社）、１本あたりカテキン類５４０ｍｇ含有；
プラセボサプリメント：プラセプラス（プラセボ製薬株式会社）、アミノ酸不含有；
オルニチンサプリメント：オルニチン（協和発酵バイオ株式会社）、１２粒中にオルニチン１６００ｍｇ含有；
試験素材の提供は単盲検法により行われた。
【００５８】
（血中アンモニア濃度測定）
本測定１及び２では、試験素材の摂取５０分後に、各被験者の指先から採血した。採血した血液（全血）について、血中アンモニア測定装置（ポケットケムＢＡ  ＰＡ−４１４０、アークレイ株式会社）を用いて、血中アンモニア濃度を測定した。
２回の試験で得られた全被験者のデータを、測定間での有意差検定を行った（t-test）。
【００５９】
２．結果
（血中アンモニア濃度）
結果を図２に示す。各群の本測定１の際の値をＡ、本測定２の際の値をＢで示す。図２が示すように、カテキン類単独群（Ｃａｔ）、オルニチン単独群（Ｏｒｎ）が、対照摂取時（本測定１）と比較し、本測定２の際に血中アンモニア濃度が低下しなかったのに対し、カテキン類とオルニチン併用群（Ｃａｔ＋Ｏｒｎ）は２０％以上低下した（ｐ＜０．１）。このことから、カテキン類とオルニチンの併用摂取が、血中アンモニア濃度を低下させることが示された。
【図１】
2020089318.tif 000002
【図２】
2020089318.tif 000003