(57)【要約】【課題】  本発明は、エラグ酸の新規用途を提供する。【解決手段】エラグ酸の用途として、ホスホジエステラーゼ５活性阻害用組成物、ｃＧＭＰの分解抑制または濃度上昇用組成物、陰茎内圧上昇用組成物、陰茎勃起機能の低下抑制用組成物、および／または前立腺肥大緩和用組成物の有効成分としての使用用途を挙げることができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
エラグ酸を有効成分とするホスホジエステラーゼ５活性阻害用組成物。
【請求項２】
エラグ酸を有効成分とするｃＧＭＰの分解抑制または濃度上昇用組成物。
【請求項３】
エラグ酸を有効成分とする陰茎内圧上昇用組成物。
【請求項４】
エラグ酸を有効成分とする陰茎勃起機能の低下抑制用組成物。
【請求項５】
エラグ酸を有効成分とする前立腺肥大緩和用組成物。
【請求項６】
飲食物組成物、医薬組成物または飼料組成物である請求項１〜５のいずれかに記載する組成物。
【請求項７】
ホスホジエステラーゼ５活性阻害用組成物、ｃＧＭＰの分解抑制若しくは濃度上昇用組成物、陰茎内圧上昇用組成物、陰茎勃起機能の低下抑制用組成物、または前立腺肥大緩和用組成物の製造のためのエラグ酸の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、エラグ酸について見出された新たな作用に基づく、エラグ酸の新たな用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
エラグ酸はクルミ、カシューナッツ等の実；ユーカリの葉等に含まれるポリフェノールである。エラジタンニンの加水分解や没食子酸の加熱等によっても得られることが知られている。エラグ酸は、従来より、その抗酸化作用に基づいて、食品添加物の酸化防止剤として、また化粧品の美白成分として用いられている。また、近年、エラグ酸の研究により薬理作用を含む種々の作用が判明しており、それに基づいて種々の用途が提案されている。かかる用途としては、例えばグルコシルトランスフェラーゼ阻害剤（特許文献１）、抗酸化剤（特許文献２）、高血中脂質濃度に因る疾患の予防または治療剤（特許文献３）、アポトーシス誘導剤（特許文献４）、抗ピロリ菌組成物（特許文献５）、関節炎予防または改善剤（特許文献６）、尿酸排泄促進剤（特許文献７）、及びポリフェノール安定化剤（特許文献８）が挙げられる。
【０００３】
しかしながら、エラグ酸にホスホジエステラーゼ（phosphodiesterase：ＰＤＥ）の活性を阻害する作用があることは知られていない。
【０００４】
ホスホジエステラーゼは、サイクリックＧＭＰ（ｃＧＭＰ）やサイクリックＡＭＰ（ｃＡＭＰ）を加水分解する酵素であり、哺乳動物では複数のファミリーが存在する。このうち、ホスホジエステラーゼ５（以下、本明細書において「ＰＤＥ５」と略称する場合がある）は、主にｃＧＭＰの分解に関与する。ｃＧＭＰは、細胞内セカンドメッセンジャーとして作用し、平滑筋を弛緩させ、血流を増加させる。このため、ＰＤＥ５の活性を抑制することにより、平滑筋が弛緩し、血流が増加する。
【０００５】
この作用を利用した薬剤として、従来、ＰＤＥ５阻害薬が知られており、代表的なものとしてシルデナフィル・クエン酸塩を有効成分とする医薬品を挙げることができる。ＰＤＥ５阻害薬は、ＰＤＥ５の活性を阻害してｃＧＭＰの分解を抑制し、局所血流を増加させることにより、陰茎勃起機能の低下、膀胱や前立腺の機能低下、肺高血圧症といった症状の改善に利用されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開平０１―１０９８５号公報
【特許文献２】特開平０４―２３９５９３号公報
【特許文献３】特表２００２―５２４４７７号公報
【特許文献４】特開２００２―３０８７６３号公報
【特許文献５】特開２００４−３５２６４４号公報
【特許文献６】特開２００５−４７８１７号公報
【特許文献７】特開２００６−２７３７６２号公報
【特許文献８】ＷＯ２０１３／１４１２６７号公報
【特許文献９】特開２０１８−４３９９４号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、エラグ酸の新たな用途を提供することを目的とする。具体的には、ＰＤＥ５活性阻害剤としての用途、ｃＧＭＰの分解抑制若しくは濃度上昇剤としての用途、陰茎内圧上昇剤としての用途、陰茎勃起機能の低下抑制剤としての用途、または前立腺肥大緩和剤としての用途を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、エラグ酸に着目してその作用を検討していたところ、後述する実施例に示すように、ＰＤＥ５活性阻害作用、ｃＧＭＰの分解抑制または濃度上昇作用、及び陰茎内圧上昇作用があることを見出し、エラグ酸が陰茎勃起機能の低下を抑制するための有効成分として、また前立腺肥大を緩和するための有効成分として有用であることを確認した。本発明はかかる知見に基づいてさらに研究を重ねて完成したものであり、下記の実施形態を包含するものである。
【０００９】
（１）エラグ酸を有効成分とするＰＤＥ５活性阻害用組成物。
（２）エラグ酸を有効成分とするｃＧＭＰの分解抑制または濃度上昇用組成物。
（３）エラグ酸を有効成分とする陰茎内圧上昇用組成物。
（４）エラグ酸を有効成分とする陰茎勃起機能の低下抑制用組成物。
（５）エラグ酸を有効成分とする前立腺肥大緩和用組成物。
（６）飲食物組成物、医薬組成物または飼料組成物である（１）〜（５）のいずれかに記載する組成物。
（７）ＰＤＥ５活性阻害用組成物、ｃＧＭＰの分解抑制若しくは濃度上昇用組成物、陰茎内圧上昇用組成物、陰茎勃起機能の低下抑制用組成物、または前立腺肥大緩和用組成物の製造のためのエラグ酸の使用。
【発明の効果】
【００１０】
本発明によれば、エラグ酸の新たな用途を提供することができる。具体的にはエラグ酸が有するＰＤＥ５活性阻害作用に基づいて、エラグ酸はＰＤＥ５活性阻害用組成物の有効成分としてその製造に使用することができる。またエラグ酸が有するｃＧＭＰの分解抑制または濃度上昇作用に基づいて、エラグ酸はｃＧＭＰの分解抑制または濃度上昇用組成物の有効成分としてその製造に使用することができる。さらにエラグ酸が有する陰茎内圧上昇作用に基づいて、エラグ酸は陰茎内圧上昇用組成物の有効成分としてその製造に使用することができる。さらにまたエラグ酸は上記作用に基づいて、陰茎勃起機能の低下抑制用組成物、具体的には陰茎勃起機能低下の予防または改善用組成物の有効成分としてその製造に使用することができる。またエラグ酸は上記作用に基づいて、前立腺肥大緩和用組成物、好ましくは前立腺肥大の予防または改善用組成物の有効成分としてその製造に使用することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１１】
【図１】実験例２において、蒸留水投与群（陰性コントロール群：図中「コントロール」）、シルデナフィル投与群（陽性コントロール群：図中「シルデナフィル」）、エラグ酸投与群（図中「エラグ酸」）について、各被験試料投与後に陰茎内圧を測定した結果（mean±SEM）を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１２】
（Ｉ）エラグ酸の用途
本発明が対象とするＰＤＥ５活性阻害用組成物、ｃＧＭＰの分解抑制または濃度上昇用組成物、陰茎内圧上昇用組成物、陰茎勃起機能の低下抑制用組成物、及び前立腺肥大緩和用組成物（以下、「本発明の組成物」と総称する場合がある）は、いずれもエラグ酸を有効成分とすることを特徴とする。
【００１３】
本発明の組成物の製造に際して使用するエラグ酸は、精製品（純品）であることが好ましいが、本発明の効果を奏する限り、これに限定されず粗精製物であってもよい。粗精製物としては、エラグ酸を含む植物から調製されるエラグ酸画分を挙げることができる。なお、エラグ酸を含有する植物としては、ザクロ、イチゴ、ラズベリー、クランベリー、ブラックベリー、チシマイチゴ、ブドウ、クルミ、栗、及びピーカン等といった植物の果実が知られている（特許文献８及び９参照）。またプニカラジンなどのエラジタンニンは、酸分解によりエラグ酸を生成することが知られている。このため、エラグ酸を含む粗精製物としては、エラジタンニンを含む植物から酸分解処理などによって調製されるエラグ酸画分を用いることができる。本発明が対象とするエラグ酸画分は、エラグ酸を含有する植物部位から一種類の溶媒（水；メタノールまたはエタノールのアルコール；含水アルコールなど）を用いて単回抽出し、次いでろ過して濃縮して調製されるものではなく、エラグ酸の精製度（純度）の高い画分を取得するか、またはエラグ酸を高濃度含有する濃縮画分を取得するために、溶媒抽出を複数回繰り返したり、分子量ろ過、サイズ排除クロマトグラフィー、またはイオン交換クロマトグラフィー等の精製操作を組み合わせることで得られる画分を意味する。具体的には、エラグ酸を含有する画分からエラグ酸以外の成分を除去し、エラグ酸含有量を５０質量％以上にまで高めた画分を例示することができる。植物から調製されるエラグ酸画分におけるエラグ酸含有量としては、好ましくは６０質量％以上、より好ましくは７０質量以上％、さらに好ましくは８０質量％以上、特に好ましくは９０質量％以上１００質量％以下である。
【００１４】
本発明のＰＤＥ５活性阻害用組成物は、後述する実験例１に示すように、有効成分であるエラグ酸のＰＤＥ５活性阻害作用に基づいて、ＰＤＥ５の活性を阻害することができる。平滑筋組織においてＰＤＥ５の活性が阻害されると、ｃＧＭＰから5’−ＧＭＰへの分解が阻害される結果、実験例２で示すようにｃＧＭＰ濃度が上昇する。このため、エラグ酸は、ＰＤＥ５活性阻害作用を通じてｃＧＭＰの分解抑制またはｃＧＭＰ濃度の上昇を誘導する作用を有する。この意味で、本発明はエラグ酸を有効成分とするｃＧＭＰの分解抑制用組成物またはｃＧＭＰ濃度上昇用組成物を提供するものでもある。また平滑筋組織におけるｃＧＭＰ濃度の上昇により平滑筋が弛緩する。これにより、陰茎海綿体への血流が増加することで、陰茎勃起機能の低下が抑制（予防）され、陰茎勃起機能の改善を図ることができる。このことは、後述する実験例３において、実際にラットにエラグ酸を経口投与することで陰茎内圧が有意に上昇することからも確認されている。つまり、エラグ酸には陰茎内圧上昇作用があり、前述するように陰茎内圧上昇用組成物の有効成分として使用でき、さらに陰茎勃起機能の低下抑制用組成物の有効成分として使用することができる。さらにエラグ酸は、前述する平滑筋弛緩作用に基づいて、前立腺や尿道の血流を増加させることで前立腺肥大の緩和を図ることも可能である。このため、本発明はエラグ酸を有効成分とする陰茎内圧上昇用組成物、陰茎勃起機能の低下抑制用組成物、並びに前立腺肥大緩和用組成物を提供するものである。これらのことから、本発明の組成物は、特に男性を対象として、男性機能が気になる対象者、排尿機能が気になる対象者に好ましく適用することができる。
【００１５】
これらの本発明の組成物は、ヒトを対象として医薬品若しくは医薬部外品、または飲食品の形態に調製して提供することができるほか、動物を対象として飼料の形態に調製して提供することができる。
【００１６】
（ＩＩ）本発明の組成物の形態
（１）医薬品または医薬部外品
本発明の組成物は、エラグ酸に加えて、必要によりその製剤形状（剤型）に応じて薬学的に許容される担体や添加剤を配合し、各種剤形の医薬品又は医薬部外品として調製することができる。医薬品又は医薬部外品として好ましくは経口投与形態の医薬品または医薬部外品を挙げることができる。かかる医薬品または医薬部外品としては、制限されないものの、例えば、錠剤（糖衣錠などの被覆錠剤を含む）、カプセル剤（硬質カプセル剤、軟質カプセル剤を含む）、顆粒剤、散剤、シロップ剤、腸溶剤、トローチ剤、ドリンク剤等の経口投与形態（剤型）を有する製剤として調製することができる。このような種々の剤型を有する製剤の調製は、常法に従って行うことができ、使用する担体や添加剤は特に制限されない。例えば、薬学的に許容される賦形剤（ソルビトール、グルコース、乳糖、デキストリン、澱粉等の糖類、炭酸カルシウム等の無機物、結晶セルロース、蒸留水、ゴマ油、とうもろこし油、オリーブ油、菜種油等）、液体担体（蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、エタノール等のアルコール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）、油性担体（各種の動植物油、白色ワセリン、パラフィン、ロウ類等）、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、結合剤、等張化剤、崩壊剤、滑沢剤、増量剤、界面活性剤、分散剤、懸濁剤、希釈剤、浸透圧調整剤、ｐＨ調整剤、防腐剤、抗酸化剤、着色剤、紫外線吸収剤、保湿剤、増粘剤、光沢剤、緩衝剤、保存剤、嬌味剤、香料、被膜剤、矯臭剤、細菌抑制剤等を、制限なく使用することができる。
【００１７】
当該医薬品又は医薬部外品は、前述する用途（ＰＤＥ５活性阻害、ｃＧＭＰ分解抑制または濃度上昇、陰茎内圧上昇、陰茎勃起機能の低下抑制、前立腺肥大緩和）に用いることができる。特にＰＤＥ５活性阻害薬、陰茎勃起機能（不全）予防または治療薬、前立腺肥大予防または治療薬として、特に男性を対象として、男性機能が気になる対象者、排尿機能が気になる対象者に対して適用することができる。
【００１８】
医薬品又は医薬部外品の形態を有する本発明の組成物におけるエラグ酸（有効成分）の配合量は、適用する障害やその程度、また医薬品等の形態に応じて異なり、制限されないものの、本発明の効果を奏することを限度として、固形分濃度として１〜１００質量％の範囲、好ましくは１０〜６０質量％の範囲、より好ましくは２５〜５５質量％の範囲から選択することができる。
【００１９】
医薬品又は医薬部外品の形態を有する本発明の組成物の投与又は摂取量は、被験者（患者個体）の状態、体重、性別、年齢、有効成分として配合するエラグ酸の種類、又はその他の要因に従って適宜選択、決定される。制限されないものの、例えば、ヒトに対する１日の投与又は摂取量としては、エラグ酸の投与又は摂取量に換算して０．１５〜８５ｍｇ／ｋｇの範囲から適宜設定することができる。なお、ヒトに対する投与又は摂取量は、一般にラットにおける体表面積に基づくヒト等価用量（HED）６．２（「Guidance for Industry Estimating the Maximum Safe Starting Dose in Initial Clinical Trials for Therapeutics in Adult Healthy Volunteers」参照）から換算して求めることができる。好ましくは０．５〜５０ｍｇ／ｋｇであり、より好ましくは１〜２０ｍｇ／ｋｇの範囲を例示することができる。本発明の組成物は、１日１回〜数回に分け、又は任意の期間及び間隔で摂取・投与され得る。
【００２０】
（２）飲食品
本発明の組成物を飲食品として調製する場合、その形態は、食用又は飲料用に適した形態であればよく、特に制限されない。一般の飲食品の形態を有する飲食品（明らか食品）に調製できる他、前述する医薬品と同様に、錠剤（糖衣錠などの被覆錠剤を含む）、カプセル剤（硬質カプセル剤、軟質カプセル剤を含む）、顆粒剤、散剤（粉末）、シロップ剤、腸溶剤、トローチ剤、ドリンク等の製剤形態（剤型）に調製することもでき、これらの製剤が小分け包装されてなるものであってもよい。これらの飲食品には、前述するエラグ酸に加えて、例えば、甘味剤、着色剤、抗酸化剤、ビタミン類、香料、ミネラル等の添加剤、タンパク質、脂質、糖質、炭水化物、食物繊維等の一般的な食品原料を、適宜組み合わせて配合することもできる。
【００２１】
前記の明らか食品の種類や形態は、特に制限されず、例えば、パン、麺類等に代表される小麦粉加工食品；お粥、炊き込みご飯等の米加工食品；ビスケット、ケーキ、ゼリー、チョコレート、せんべい、アイスクリーム等の菓子類；豆腐、その加工食品等の大豆加工食品；清涼飲料、果汁飲料、乳飲料、炭酸飲料等の飲料類；ヨーグルト、チーズ、バター、牛乳等の乳製品；醤油、ソース、味噌、マヨネーズ、ドレッシング等の調味料；ハム、ベーコン、ソーセージ等の蓄肉を含む加工食品；はんぺんやちくわ等の魚介肉を含む水産加工食品等、その他のお総菜が挙げられる。これらは濃厚流動食、自然流動食、半消化態栄養食、成分栄養食、ドリンク栄養食等の経口経腸栄養食品の形状を有するものであってもよい。
【００２２】
飲食品の形態を有する本発明の組成物は、ＰＤＥ５活性阻害作用、ｃＧＭＰ分解抑制または濃度上昇作用、陰茎内圧上昇作用、陰茎勃起機能の低下抑制作用、及び前立腺肥大緩和作用よりなる群から選択される少なくとも１つの作用を有し、これらの作用を利用した用途に用いることができる。特にこれらの作用機序に基づいて陰茎勃起機能の低下や不全を予防または改善すること、または／及び前立腺肥大による排尿機能の低下を予防または改善することをコンセプトとし、必要に応じてその旨を機能性表示またはヘルスクレームとして表示した機能性飲食品（機能性表示食品または特定保健用食品）の形態とすることができる。この場合、本発明の飲食品は、特に男性を対象として、男性機能が気になる対象者、排尿機能が気になる対象者に対して適用することができる。またこうした飲食品を上記症状を有するヒト以外の哺乳動物に適用する場合、当該飲食品は、飼料として位置づけることができる。
【００２３】
飲食品の形態を有する本発明の組成物におけるエラグ酸（有効成分）の配合量は、適用する症状やその程度、また飲食品等の形態に応じて異なり、制限されないものの、本発明の効果を奏することを限度として、固形分濃度として１〜１００質量％の範囲、好ましくは１０〜６０質量％の範囲、より好ましくは２５〜５５質量％の範囲から選択することができる。
【００２４】
飲食品の形態を有する本発明の組成物の摂取量は、被験者（摂取個体）の状態、体重、性別、年齢、又はその他の要因に従って適宜選択、決定される。例えば、１日の摂取量としては、エラグ酸の摂取量に換算して０．１５〜８５ｍｇ／ｋｇの範囲から適宜設定することができる。好ましくは０．５〜５０ｍｇ／ｋｇであり、より好ましくは１〜２０ｍｇ／ｋｇの範囲を例示することができる。本発明の組成物は、１日１回〜数回に分け、又は任意の期間及び間隔で摂取・投与され得る。
【実施例】
【００２５】
以下、実施例及び実験例に基づいて、本発明の構成及び効果をより詳細に説明する。但し、本発明はこれらの実施例及び実験例に制限されるものではない。なお、以下の実験は、特に言及する場合を除いて、室温（２５±５℃）及び大気圧条件下で実施した。また、実験には、シグマ社から入手したエラグ酸を使用した。
【００２６】
実験例１  ホスホジエステラーゼ５(PDE5)阻害活性の測定
エラグ酸のPDE5に対する阻害活性を測定した（n=1）。本測定では、PDE5A Assay Kit (♯60350)（BPSバイオサイエンス社製）、96wellプレート、ピペットマン、PerkinElmer EnVision 2102 Multilabel Reader（パーキンエルマー社製）を用い、PDE5A Assay Kit（以下、単に「キット」と称する）に付帯の手順書に従い、阻害活性を測定した。
【００２７】
１．実験方法
エラグ酸は、事前にジメチルスルホキシドと混合して10mMのエラグ酸含有溶液とした後、当該エラグ酸含有溶液5μLと滅菌水495μLを混合してサンプル溶液（エラグ酸濃度100μM）として、下記の実験に供した。
まず希釈調製したFAM-Cyclic-3’, 5’-GMPを25μLずつBlank用ウェルを除く各ウェル（Test用、Substrate control用、及びPositive control用のウェル）に添加した。一方、Blank用のウェルにはキット付属のPDEアッセイバッファーを25μL添加した。Test用のウェルには、さらに前記サンプル溶液を5μLを、Blank、Substrate control、及びPositive control用のウェルには、さらにサンプル溶媒（DMSO:滅菌水＝1:99）を5μL添加した。次いで、BlankとSubstrate control用のウェルにはPDEアッセイバッファーを20μLずつ添加した。一方、TestとPositive control用のウェルには希釈調製したPDE5Aを20 μLずつ添加した（200 pg/ウェル）。斯くして調製した各ウェル（Test、Blank、Substrate control、及びPositive control）の被験液（各50μL）を25℃で1時間反応させ、その後、希釈調製したBinding agentを100μLずつ各ウェルに添加し、25℃で30分間強く振とうしながら反応させた。反応終了後、プレートリーダーで蛍光偏光度を測定した（Excitation：480 nm、Emission：535 nm）。Blank値をそれぞれの測定値から減ずることで、Test、Substrate control及びPositive controlそれぞれに係る蛍光偏光度を算出し、下式に基づいてＰＤＥ５活性の阻害率を求めた。
【数１】
2020055760.tif 000002
【００２８】
２．結果
結果を表１に示す。表１にはエラグ酸によるＰＤＥ５活性の阻害率（％）を示す。
【表１】
2020055760.tif 000003
【００２９】
表１に示すように、エラグ酸にはＰＤＥ５の活性を阻害する強い作用があることが判明した。
【００３０】
実験例２  陰茎内のｃＧＭＰ量の測定
エラグ酸の陰茎組織内のｃＧＭＰ（環状グアノシン一リン酸）量に与える影響を評価した。
【００３１】
１．被験動物、被験試料
本測定には、SD系雄ラット（体重約250g/匹）、cGMP ELISA kit（カタログ番号：ADI-900-014、エンゾライフサイエンス社製）、PerkinElmer EnVision 2102 Multilabel Reader（パーキンエルマー社製）を用いた。
【００３２】
２．実験方法
具体的には、エラグ酸２ｇと蒸留水８ｍＬとを混合し、エラグ酸含有溶液（500mg/2mL/kg体重）を投与の直前に調製した。調製したエラグ酸含有溶液を、試験開始０時間及び２４時間後に、ゾンデでラットの胃内に投与した（n=8）。試験開始２５時間後にラットを過剰麻酔により安楽死させ、陰茎組織（2cm程度）を摘出した。組織重量を測定した後に、これを液体窒素を用いて凍結保存した。凍結させた組織に対して１０倍量（重量）の０．１Ｎ塩酸を添加し、超音波破砕処理をした。分散した組織を600G/10minで遠心分離し、上清を回収して、マイクロチューブに分注して−８０℃で実験まで凍結保存した。測定は、cGMP ELISA kitに記載されている方法に従って、ＥＬＩＳＡ法により陰茎組織中のｃＧＭＰ量を測定した。なお、対照実験として、前記エラグ酸含有溶液に代えて蒸留水をラット胃内に投与する以外は、前記同様にして陰茎組織中のｃＧＭＰ量を測定した。その結果、エラグ酸含有溶液投与時のｃＧＭＰ量は、蒸留水投与時のｃＧＭＰ量を上回っていた。このことから、エラグ酸投与によりｃＧＭＰの分解が抑制されてｃＧＭＰ濃度が上昇されることが確認された。前述する実験例１で確認されたエラグ酸のＰＤＥ５活性の阻害作用からも総合するに、エラグ酸投与によって、平滑筋弛緩による局所血流低下を改善し、局所血流低下に起因する症状を予防、緩和または改善することが可能であると考えられる。具体的には、陰茎海綿体への血流増加による陰茎勃起機能の改善効果、前立腺や尿道の血流を増加させることによる前立腺肥大の緩和ないし改善効果を期待することができる。
【００３３】
実験例３  陰茎内圧上昇作用の測定
エラグ酸の陰茎内圧に与える影響を評価した。
【００３４】
１．被験動物、被験試料
被験動物としてラット（SD rat、雄性、250g）を用い、被験試料を投与した後に最大陰茎内圧を測定することで評価した。被験物質としてエラグ酸、及び陽性コントロールとして陰茎内圧上昇作用が知られているシルデナフィルを用いた。披験物質はいずれも蒸留水に溶解したものを被験試料（表２参照）として下記の実験に供した。
【００３５】
２．実験方法
表２に示すように、ラットを３群（各群ｎ＝８）にわけ、陰性コントロール群には蒸留水を、シルデナフィル投与群（陽性コントロール群）にはシルデナフィル含有水溶液を、エラグ酸投与群にはエラグ酸含有水溶液を、それぞれ撹拌した後にゾンデで胃内投与した。投与から２４時間経過した翌日、再び、各群のラットに同手順にて同被験試料を胃内投与した。胃内投与の直後、誤嚥がないことを確認した後、イソフルレン浅麻酔下ウレタン麻酔（イソフルランで浅く麻酔導入した後にウレタンで麻酔）を行った。麻酔の効果が現れた１時間後に、各群ラットの陰茎を腹壁から剥離し、陰茎背神経を同定する。次いで、陰茎背神経に双極電極を装着し、陰茎海綿体に25G針を刺入し、2ml/hの速度で生理食塩水を注入しながら、電気刺激（10-20V, 20pulse/s, pulse duration 0.2 ms, train duration 30s）を与え、陰茎背神経の電気刺激時の陰茎内圧を記録した。
【表２】
2020055760.tif 000004
【００３６】
３．実験結果
結果を図１に示す。図１に示すように、エラグ酸投与群において、電気刺激による陰茎内圧が格別顕著に高くなることが確認された。このことから、エラグ酸に高い陰茎内圧上昇作用があることが確認された。
【図１】
2020055760.tif 000005