(57)【要約】【課題】ショ糖などの甘味料の甘味を増強することにより食品に好ましい甘味を付与できる新規化合物を提供すること。【解決手段】下記一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩。2020055751.tif 000127【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
下記一般式（Ｉ）で表される化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
2020055751.tif 000112
（式中、
Ｒ1、Ｒ2はそれぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、置換基を有してもよいＣ1-6アルキル基又は置換基を有してもよいＣ1-6アルコキシ基を表し、
Ｒ3及びＲ4は、それぞれ独立して、水素原子、又は置換基を有していてもよいＣ1-6アルキル基を表し、
Ｒ5は、置換基を有していてもよいＣ1-12アルキル基、置換基を有していてもよい３〜１４員の脂環式基、置換基を有していてもよい３〜１４員の複素環式基、置換基を有していてもよい６〜１４員のアリール基、置換基を有していてもよい５〜１４員のヘテロアリール基、又は置換基を有していてもよいアミノ基を表し、
Ａは、ＮＨＣＯ、ＣＯＮＨ、単結合、ビニレン基、置換基を有していてもよい６〜１４員のアリーレン基、置換基を有していてもよい５〜１４員のヘテロアリーレン基、置換基を有していてもよい３〜１４員の二価の脂環式基、又は置換基を有していてもよい３〜１４員の二価の複素環式基を表し、
Ｄは、単結合、置換基を有していてもよいＣ1-12アルキレン基、置換式を有していてもよい３〜１４員の二価の脂環式基、又は置換式を有していてもよい３〜１４員の二価の複素環式基を表し、且つ
Ｅは、単結合又は下記式（ＩＩ）：
2020055751.tif 000113
（式中、＊は、隣接するＤへの結合を表し、
＊＊は隣接する窒素原子への結合を表し、
Ｒ6及びＲ7は、それぞれ独立して、水素原子、置換基を有していてもよいＣ1-12アルキル基、置換基を有していてもよい３〜１４員の脂環式基、置換基を有していてもよい３〜１４員の複素環式基、置換基を有していてもよい６〜１４員のアリール基、又は置換基を有していてもよい５〜１４員のヘテロアリール基を表し、或いはＲ6とＲ7はこれらの基が結合する炭素原子とともに置換基を有していてもよい３〜８員の環を形成してもよく、或いはＲ6とＲ4はこれらの基が結合する炭素原子及び窒素原子とともに置換基を有していてもよい４〜８員の環を形成してもよい。）で表される基であり、
但し、Ａ、Ｄ及びＥが同時に単結合ではないことを条件とする。）
【請求項２】
ＡがＮＨＣＯ、単結合、ビニレン基、ベンゼン環から２個の水素を除いた２価の基、フラン環から２個の水素を除いた２価の基、又はピラゾール環から２個の水素を除いた２価の基を表す、請求項１に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
【請求項３】
Ｒ5が、下記式（ＩＩＩ）又は（ＩＶ）で表される基である、請求項１又は２に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
2020055751.tif 000114
2020055751.tif 000115
（式中、Ｒ8は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ1-8アルキル基又は置換基を有していてもよいＣ1-8アルキルカルボニル基を表し、
Ｒ9は、水素原子、置換基を有していてもよい３〜１４員の脂環式基、置換基を有していてもよい３〜１４員の複素環式基、置換基を有していてもよい６〜１４員のアリール基、置換基を有していてもよい５〜１４員のヘテロアリール基、又は置換基を有していてもよいＣ1-8アルキル基を表し、且つ
＊＊＊は、隣接する炭素原子への結合を表す。）
【請求項４】
下記一般式（Ｖ）〜（ＩＸ）のいずれかで表される化合物又はその塩である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
2020055751.tif 000116
2020055751.tif 000117
2020055751.tif 000118
2020055751.tif 000119
2020055751.tif 000120
（式中、Ｒ5、Ｄ及びＥは、請求項１〜３のいずれか１項に記載した通りである。）
【請求項５】
Ｄが単結合又は直鎖状のＣ1-6アルキレン基である、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
【請求項６】
一般式（Ｉ）中の下記式（Ｘ）：
2020055751.tif 000121
（式中、＊＊＊＊は、隣接するピリジン環への結合を表し、＊＊＊＊＊は隣接するＣ＝Ｏの炭素原子への結合を表す）
で表される部分構造が、下記から成る群から選択される構造である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
2020055751.tif 000122
【請求項７】
一般式（Ｉ）中の下記式（ＸＩ）：
2020055751.tif 000123
（式中、＊＊＊＊＊＊は、隣接する窒素原子への結合部位を表す。）
で表される部分構造が、下記から成る群から選択される構造である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
2020055751.tif 000124
2020055751.tif 000125
【請求項８】
下記からなる群から選択される化合物又はその塩である、請求項１に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩：
４−アミノ−５−[５−（Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸
４−アミノ−５−［［３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［［３−［（２−シクロヘキシルアセチル）アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［（Ｅ）−４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブタ−１−エニル］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブチル］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−［［(２Ｓ)−２−アミノ−３−メチル−ペンタノイル]アミノ］−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［［（３Ｒ）−３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−フェニル−プロパノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［５−［（２−シクロヘキシルアセチル）アミノ］ペンタノイルアミノ］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[（２Ｓ，３Ｓ)−２−アミノ−３−メチル−ペンタノイル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[（２Ｓ)−２−[[（２Ｓ)−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ] −２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[(２−アミノアセチル)アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−アミノ−３−メチル−ブタノイル]アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[[(２Ｓ)−２−アミノ−４−メチル−ペンタノイル]アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−ブタノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−ペンタノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸。
【請求項９】
下記からなる群から選択される化合物又はその塩である、請求項１に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
2020055751.tif 000126
【請求項１０】
前記塩が、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、臭化水素酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酪酸塩、ヒベンズ酸塩、パモ酸塩、エナント酸塩、デカン酸塩、テオクル酸塩、サリチル酸塩、乳酸塩、シュウ酸塩、マンデル酸塩、リンゴ酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、リジン塩、オルニチン塩、アルギニン塩及びヒスチジン塩からなる群から選ばれる、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物、その互変異性体又はその立体異性体の塩。
【請求項１１】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩を含有する食品組成物。
【請求項１２】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩を含有する呈味改善剤。
【請求項１３】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩を飲食品原料に添加する工程を含む、飲食品の製造方法。
【請求項１４】
請求項１〜１０のいずれか１項に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩を飲食品原料又は飲食品に添加する工程を含む、飲食品の甘味を増強する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、特定の構造を有する低分子量有機化合物、該化合物を含有する食品組成物、該化合物を含有する呈味改善剤、及び該化合物を含有する飲食品又は飲食品の製造中間品並びに飲食品又は飲食品の製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、食生活の多様化等により、甘味、塩味、酸味、苦味、うま味で表される５基本味などの味覚に対する消費者の関心と要求が高まってきている。
同時に、健康への関心の高まりを受け、甘味が付与された食品において、低カロリー、高甘味度甘味料を用いた食品が開発されているが、このような食品は、ショ糖を用いた食品と比べ、甘味質において十分に満足を得られていないのが現状である。
一方、特許文献１には、式（ＩＡ）で表されるヘテロ環を含む化合物、該化合物を含む体内摂取可能な組成物、該化合物を含む甘味を高める組成物が開示されている。特許文献２にも特許文献1の化合物と同様の化合物が開示されている。また、特許文献３には、式（ＩＢ）で表されるヘテロ環を含む化合物、及び該化合物を含む甘味増強組成物が開示されている。特許文献４にも特許文献３の化合物と同様の化合物が開示されている。特許文献１〜４には、上記一般式の化合物がそれ単独ではほとんど甘味を呈さないものの、スクラロースやショ糖の甘味を増強し得ることが記載されている。
2020055751.tif 000002
2020055751.tif 000003
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特許第５９３１０３３号公報
【特許文献２】特表２０１５−５３０３７０号公報
【特許文献３】特許第５９８８５０６号公報
【特許文献４】特許第５９８５６４０号公報
【発明の開示】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、特許文献１〜４には、実施例において官能評価に用いた化合物の構造が開示されておらず、具体的にどのような構造を有する化合物が上記甘味を呈するのか不明である。また、特許文献１〜４に記載の化合物は、いずれも二環性の縮合環を基本骨格とするものであり、これら以外の化学構造を有し且つ飲食品の甘味増強作用を奏する化合物は開示されていない。
本発明は、上記の点に鑑みてなされたものであり、上記特許文献に記載の化合物とは異なる化学構造を有し、且つ飲食品の甘味を増強することのできる新規化合物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００５】
本発明者は、鋭意努力の結果、特定の４−アミノニコチン酸構造を有する新規な低分子量有機化合物又はその塩によって上記課題を解決できることを見出した。本発明は、以下の発明を含む。
〔１〕  下記一般式（Ｉ）で表される化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
2020055751.tif 000004
（式中、
Ｒ1、Ｒ2はそれぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、置換基を有してもよいＣ1-6アルキル基又は置換基を有してもよいＣ1-6アルコキシ基を表し、
Ｒ3及びＲ4は、それぞれ独立して、水素原子、又は置換基を有していてもよいＣ1-6アルキル基を表し、
Ｒ5は、置換基を有していてもよいＣ1-12アルキル基、置換基を有していてもよい３〜１４員の脂環式基、置換基を有していてもよい３〜１４員の複素環式基、置換基を有していてもよい６〜１４員のアリール基、置換基を有していてもよい５〜１４員のヘテロアリール基、又は置換基を有していてもよいアミノ基を表し、
Ａは、ＮＨＣＯ、ＣＯＮＨ、単結合、ビニレン基、置換基を有していてもよい６〜１４員のアリーレン基、置換基を有していてもよい５〜１４員のヘテロアリーレン基、置換基を有していてもよい３〜１４員の二価の脂環式基、又は置換基を有していてもよい３〜１４員の二価の複素環式基を表し、
Ｄは、単結合、置換基を有していてもよいＣ1-12アルキレン基、置換式を有していてもよい３〜１４員の二価の脂環式基、又は置換式を有していてもよい３〜１４員の二価の複素環式基を表し、且つ
Ｅは、単結合又は下記式（ＩＩ）：
2020055751.tif 000005
（式中、＊は、隣接するＤへの結合を表し、
＊＊は隣接する窒素原子への結合を表し、
Ｒ6及びＲ7は、それぞれ独立して、水素原子、置換基を有していてもよいＣ1-12アルキル基、置換基を有していてもよい３〜１４員の脂環式基、置換基を有していてもよい３〜１４員の複素環式基、置換基を有していてもよい６〜１４員のアリール基、又は置換基を有していてもよい５〜１４員のヘテロアリール基を表し、或いはＲ6とＲ7はこれらの基が結合する炭素原子とともに置換基を有していてもよい３〜８員の環を形成してもよく、或いはＲ6とＲ4はこれらの基が結合する炭素原子及び窒素原子とともに置換基を有していてもよい４〜８員の環を形成してもよい。）で表される基であり、
但し、Ａ、Ｄ及びＥが同時に単結合ではないことを条件とする。）
〔２〕  ＡがＮＨＣＯ、単結合、ビニレン基、ベンゼン環から２個の水素を除いた２価の基、フラン環から２個の水素を除いた２価の基、又はピラゾール環から２個の水素を除いた２価の基を表す、〔１〕に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
〔３〕  Ｒ5が、下記式（ＩＩＩ）又は（ＩＶ）で表される基である、〔１〕又は〔２〕に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
2020055751.tif 000006
2020055751.tif 000007
（式中、Ｒ8は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ1-8アルキル基又は置換基を有していてもよいＣ1-8アルキルカルボニル基を表し、
Ｒ9は、水素原子、置換基を有していてもよい３〜１４員の脂環式基、置換基を有していてもよい３〜１４員の複素環式基、置換基を有していてもよい６〜１４員のアリール基、置換基を有していてもよい５〜１４員のヘテロアリール基、又は置換基を有していてもよいＣ1-8アルキル基を表し、且つ
＊＊＊は、隣接する炭素原子への結合を表す。）
〔４〕  下記一般式（Ｖ）〜（ＩＸ）のいずれかで表される化合物又はその塩である、〔１〕〜〔３〕のいずれかに記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
2020055751.tif 000008
2020055751.tif 000009
2020055751.tif 000010
2020055751.tif 000011
2020055751.tif 000012
（式中、Ｒ5、Ｄ及びＥは、請求項１〜３のいずれか１項に記載した通りである。）
〔５〕  Ｄが単結合又は直鎖状のＣ1-6アルキレン基である、〔１〕〜〔４〕のいずれかに記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
〔６〕  一般式（Ｉ）中の下記式（Ｘ）：
2020055751.tif 000013
（式中、＊＊＊＊は、隣接するピリジン環への結合を表し、＊＊＊＊＊は隣接するＣ＝Ｏの炭素原子への結合を表す）
で表される部分構造が、下記から成る群から選択される構造である、〔１〕〜〔５〕のいずれかに記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
2020055751.tif 000014
〔７〕  一般式（Ｉ）中の下記式（ＸＩ）：
2020055751.tif 000015
（式中、＊＊＊＊＊＊は、隣接する窒素原子への結合部位を表す。）
で表される部分構造が、下記から成る群から選択される構造である、〔１〕〜〔６〕のいずれかに記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
2020055751.tif 000016
2020055751.tif 000017
〔８〕  下記からなる群から選択される化合物又はその塩である、〔１〕に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩：
４−アミノ−５−[５−（Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸
４−アミノ−５−［［３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［［３−［（２−シクロヘキシルアセチル）アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［（Ｅ）−４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブタ−１−エニル］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブチル］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−［［(２Ｓ)−２−アミノ−３−メチル−ペンタノイル]アミノ］−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［［（３Ｒ）−３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−フェニル−プロパノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［５−［（２−シクロヘキシルアセチル）アミノ］ペンタノイルアミノ］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[（２Ｓ，３Ｓ)−２−アミノ−３−メチル−ペンタノイル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[（２Ｓ)−２−[[（２Ｓ)−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ] −２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[(２−アミノアセチル)アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−アミノ−３−メチル−ブタノイル]アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[[(２Ｓ)−２−アミノ−４−メチル−ペンタノイル]アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−ブタノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−ペンタノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸。
〔９〕  下記からなる群から選択される化合物又はその塩である、〔１〕に記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩。
2020055751.tif 000018
〔１０〕  前記塩が、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、臭化水素酸塩、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、クエン酸塩、安息香酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、タンニン酸塩、酪酸塩、ヒベンズ酸塩、パモ酸塩、エナント酸塩、デカン酸塩、テオクル酸塩、サリチル酸塩、乳酸塩、シュウ酸塩、マンデル酸塩、リンゴ酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、グルタミン酸塩、アスパラギン酸塩、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、リジン塩、オルニチン塩、アルギニン塩及びヒスチジン塩からなる群から選ばれる、〔１〕〜〔９〕のいずれかに記載の化合物、その互変異性体又はその立体異性体の塩。
〔１１〕  〔１〕〜〔１０〕のいずれかに記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩を含有する食品組成物。
〔１２〕  〔１〕〜〔１０〕のいずれかに記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩を含有する呈味改善剤。
〔１３〕  〔１〕〜〔１０〕のいずれかに記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩を飲食品原料に添加する工程を含む、飲食品の製造方法。
〔１４〕  〔１〕〜〔１０〕のいずれかに記載の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩を飲食品原料又は飲食品に添加する工程を含む、飲食品の甘味を増強する方法。
【発明の効果】
【０００６】
本発明の化合物又はその塩は、飲食品原料又は飲食品に添加すると、当該飲食品の甘味を増強することができる。
【発明を実施するための形態】
【０００７】
本明細書及び特許請求の範囲において、「アルキル基」は、直鎖状及び分岐鎖状のものを含む。アルキル基としては、直鎖状および分枝鎖状の炭素数１〜１２のアルキル基が好ましく、直鎖状および分枝鎖状の炭素数１〜８のアルキル基がより好ましく、直鎖状および分枝鎖状の炭素数１〜６のアルキル基がさらにより好ましく、直鎖状および分枝鎖状の炭素数１〜４のアルキル基がさらにより好ましく、直鎖状および分枝鎖状の炭素数１〜４のアルキル基がさらにより好ましく、直鎖状および分枝鎖状の炭素数１〜３のアルキル基がさらにより好ましい。アルキル基の例としては、メチル基、エチル基、イソプロピル基、ブチル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｓｅｃ−ブチル基、ｔ−ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、２，３−ジメチルプロピル基、ヘキシル基が挙げられる。
「アルキレン基」は、直鎖状及び分岐鎖状のものを含む。アルキレン基は、直鎖状もしくは分岐鎖状の炭素数１〜１２のアルキレン基が好ましく、直鎖状および分枝鎖状の炭素数１〜８のアルキレン基がより好ましく、直鎖状および分枝鎖状の炭素数１〜６のアルキレン基がさらにより好ましく、直鎖状および分枝鎖状の炭素数１〜４のアルキレン基がさらにより好ましく、直鎖状および分枝鎖状の炭素数１〜３のアルキレン基がさらにより好ましい。アルキレン基の例としては、メチレン基、エチレン基、ｎ−プロピレン基（−（ＣＨ2）3−）、ｎ−ブチレン基（−（ＣＨ2）4−）、ｎ−ペンチレン基（−（ＣＨ2）5−）、ｎ−ヘキシレン基（−（ＣＨ2）6−）、イソプロピレン基、イソブチレン基、イソペンチレン基が挙げられる。
「アルケニル基」は、各異性体を含む炭素数２〜６の直鎖もしくは分岐鎖状のアルケニル基を示す。アルケニル基としては、炭素数２〜６の直鎖状又は分岐鎖状のアルケニル基が好ましく、炭素数２〜４の直鎖状又は分岐鎖状のアルケニル基がより好ましい。アルケニル基の例としては、ビニル基、アリル基、プロペニル基、ブテニル基、ペンテニル基及びヘキセニル基が挙げられる。
「アルキニル基」は、各異性体を含む炭素数２〜６の直鎖状又は分岐鎖状のアルキニル基を示す。アルキニル基としては、炭素数２〜６の直鎖状又は分岐鎖状のアルキニル基が好ましく、炭素数２〜４の直鎖状又は分岐鎖状のアルキニル基がより好ましい。アルキニル基の例としては、エチニル基、１−プロピニル基、２−プロピニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基及びペンチニル基が挙げられる。
【０００８】
「アリール基」としては、６〜１４員のアリール基が好ましく、６〜１２員のアリール基がより好ましく、６〜１０員のアリール基がさらにより好ましく、６〜８員のアリール基がさらにより好ましく、６員のアリール基が特に好ましい。アリール基において、例えば、６〜１４員のアリール基は、炭素数６〜１４のアリール基と言い換えることができる。アリール基の例としては、フェニル基、ナフチル基、２，３−ジヒドロキシインデニル基などが挙げられる。
「アリーレン基」としては、６〜１４員のアリーレン基が好ましく、６〜１２員のアリーレン基がより好ましく、６〜１０員のアリーレン基がさらにより好ましく、６〜８員のアリーレン基がさらにより好ましく、６員のアリーレン基が特に好ましい。アリーレン基の例としては、フェニレン基、ナフチレン基などが挙げられる。
「ヘテロアリール基」は、アリール基の環を構成する原子として、窒素、酸素及び硫黄からなる群から選ばれる少なくとも１種のヘテロ原子を有するものをいう。ヘテロアリール基は、５〜１４員のヘテロアリール基が好ましく、５〜１４員のヘテロアリール基がより好ましく、５〜１０員のヘテロアリール基がさらにより好ましく、５〜６員のヘテロアリール基が特に好ましい。ヘテロアリール基が形成出来る限り、ヘテロアリール基中に存在するヘテロ原子の数に制限はないが、ヘテロアリール基の環を構成するヘテロ原子の数は、１〜３個が好ましく、１〜２個がより好ましく、１個がさらにより好ましい。ヘテロアリール基の例としては、フラニル基、ピロリル基、オキサゾリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、ピラニル基、インデンニル基、チオフェニル基、ピリジニル基、インドリル基、キノリニル基、チアゾリル基などが挙げられる。
「ヘテロアリーレン基」は、ヘテロアリール基から１個の水素原子を更に除いた基をいう。
【０００９】
「脂環式基」は、環状の飽和又は不飽和脂肪族炭化水素基をいう。脂環式基としては、３〜１４員の脂環式基が好ましく、３〜８員の脂環式基がより好ましく、５〜８員の脂環式基がさらにより好ましく、５〜６員の脂環式基がさらにより好ましい。また、脂環式基は、飽和脂肪族炭化水素基、不飽和脂肪族炭化水素基のいずれであってもよいが、飽和脂肪族炭化水素基であることが好ましい。飽和脂肪族炭化水素基は、シクロアルキル基と言い換えることができる。脂環式基の例としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基、シクロヘキセニル基、シクロヘプチル基などが挙げられる。
「複素環式基」は、脂環式基の環を構成する原子として、窒素、酸素及び硫黄からなる群から選ばれる少なくとも１種のヘテロ原子を有するものをいう。複素環式基としては、３〜１４員の複素環式基が好ましく、３〜８員の複素環式基が好ましく、５〜８員の複素環式基がより好ましく、５〜６員の複素環式基がさらにより好ましい。複素環式基が形成出来る限り、複素環式基中に存在するヘテロ原子の数に制限はないが、複素環式基の環を構成するヘテロ原子の数は、１〜３個が好ましく、１〜２個がより好ましく、１個がさらにより好ましい。複素環式基の例としては、ピロリジニル基、ピペリジニル基、ピラジニル基、モルフォリニル基、テトラヒドロフラニル基、テトラヒドロピラニル基、テトラヒドロチオフェニル基などが挙げられる。
二価の脂環式基は、脂環式基から１個の水素原子を更に除いた二価の基をいう。
二価の複素環式基は、複素環式基から１個の水素原子を更に除いた二価の基をいう。
【００１０】
「アシル基」、「アシルアミノ基」、「アシルオキシ基」における「アシル基」としては、炭素数１〜６の直鎖もしくは分岐鎖または環状のアルキル基またはアルケニル基を有するアシル基が好ましい。好ましくは低級アシル基、すなわち炭素数１〜４のアシル基が挙げられる。例えば、アセチル基、プロピオニル基、ブチリル基、イソブチリル基、バレリル基、イソバレリル基、ピバロイル基、ヘキサノイル基、アクリロイル基、メタクリロイル基、クロトノイル基、イソクロトノイル基、シクロプロパノイル基、シクロブタノイル基、シクロペンタノイル基及びシクロヘキサノイル基等が挙げられる。
【００１１】
「アシルアミノ基」とは前述のアシル基におけるカルボニル基部分の炭素原子に窒素原子が結合した基であり、好ましくはアシル基部分は低級アシル基、すなわち炭素数１〜４のアシル基である。たとえば、アセチルアミノ基、プロピオニルアミノ基等が挙げられる。
「アシルオキシ基」とは前述のアシル基におけるカルボニル基部分の炭素原子に酸素原子が結合した基であり、好ましくはアシル基部分は低級アシル基、すなわち炭素数１〜４のアシル基である。たとえば、アセチルオキシ基、プロピオニルオキシ基、ブチリルオキシ基等が挙げられる。
「アルキルアミノ基」としては、前述のアルキル基で一置換されたアミノ基を示す。たとえば、メチルアミノ基、エチルアミノ基、プロピルアミノ基、イソプロピルアミノ基、等が挙げられる。
「ジアルキルアミノ基」としては前述のアルキル基で二置換されたアミノ基を示す。例えばジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、ジプロピルアミノ基、ジイソプロピルアミノ基及びエチルメチルアミノ基などが挙げられ、或いは２つのアルキル基が一緒になって炭素数２〜５のアルキレン基を形成した環基であってもよい。
「アルキルチオ基」とは、炭素数１〜６のアルキル基を有するアルキルチオ基を示す。たとえば、メチルチオ基、エチルチオ基、ｎ-プロピルチオ基等があげられる。
「アルキルカルバモイル基」としては、前述のアルキル基で置換されたカルバモイル基を示す。
【００１２】
「アルコキシ基」としては、炭素数１〜６のアルコキシ基が好ましい。具体的には、メトキシ、エトキシ、１−プロポキシ、２−プロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｉ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔ−ブトキシ、１−ペンチルオキシ、２−ペンチルオキシ、３−ペンチルオキシ、２−メチル−１−ブチルオキシ、３−メチル−１−ブチルオキシ、２−メチル−２−ブチルオキシ、３−メチル−２−ブチルオキシ、２，２−ジメチル−１−プロピルオキシ、１−へキシルオキシ、２−へキシルオキシ、３−へキシルオキシなどの基があげられる。好ましくは炭素数１〜３のアルコキシ基である。
「アルコキシカルボニル基」とは前述のアルコキシ基で置換されたカルボニル基を示す。
「アルコキシアルキル基」とは前述のアルコキシ基で置換されたアルキル基を示し、炭素数１〜３のアルコキシ基で置換された炭素数１〜３のアルキル基であることが好ましい。具体的にはメトキシメチル基、メトキシエチル基、エトキシメチル基、エトキシエチル基等があげられる。
「ハロゲン原子」としては、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素原子などがあげられる。これらのうち、フッ素と塩素が好ましい。
「置換基を有していてもよい」という表現は、対象とする基に存在する１又は複数の水素原子が水素以外の置換基に置き換わっていてもよいことを意味する。置換される基の構造上可能である限り置換基の数に特に制限はないが、置換基の数は、１〜５個が好ましく、１〜４個がより好ましく、１〜３個がさらにより好ましく、１〜２個がさらにより好ましく、１個がさらにより好ましい。
【００１３】
＜化合物＞
本発明の化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩は、下記一般式（Ｉ）で表される構造を有する化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩である。本明細書において、一般式（Ｉ）で表される化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩を、単に本発明の化合物ということがある。
2020055751.tif 000019
（式中、
Ｒ1、Ｒ2はそれぞれ独立して、水素原子、ハロゲン原子、置換基を有してもよいＣ1-6アルキル基又は置換基を有してもよいＣ1-6アルコキシ基を表し、
Ｒ3及びＲ4は、それぞれ独立して、水素原子、又は置換基を有していてもよいＣ1-6アルキル基を表し、
Ｒ5は、置換基を有していてもよいＣ1-12アルキル基、置換基を有していてもよい３〜１４員の脂環式基、置換基を有していてもよい３〜１４員の複素環式基、置換基を有していてもよい６〜１４員のアリール基、置換基を有していてもよい５〜１４員のヘテロアリール基、又は置換基を有していてもよいアミノ基を表し、
Ａは、ＮＨＣＯ、ＣＯＮＨ、単結合、ビニレン基、置換基を有していてもよい６〜１４員のアリーレン基、置換基を有していてもよい５〜１４員のヘテロアリーレン基、置換基を有していてもよい３〜１４員の二価の脂環式基、又は置換基を有していてもよい３〜１４員の二価の複素環式基を表し、
Ｄは、単結合、置換基を有していてもよいＣ1-12アルキレン基、置換式を有していてもよい３〜１４員の二価の脂環式基、又は置換式を有していてもよい３〜１４員の二価の複素環式基を表し、且つ
Ｅは、単結合又は下記式（ＩＩ）：
2020055751.tif 000020
（式中、＊は、隣接するＤへの結合を表し、
＊＊は隣接する窒素原子への結合を表し、
Ｒ6及びＲ7は、それぞれ独立して、水素原子、置換基を有していてもよいＣ1-12アルキル基、置換基を有していてもよい３〜１４員の脂環式基、置換基を有していてもよい３〜１４員の複素環式基、置換基を有していてもよい６〜１４員のアリール基、又は置換基を有していてもよい５〜１４員のヘテロアリール基を表し、或いはＲ6とＲ7はこれらの基が結合する炭素原子とともに置換基を有していてもよい３〜８員の環を形成してもよく、或いはＲ6とＲ4はこれらの基が結合する炭素原子及び窒素原子とともに置換基を有していてもよい４〜８員の環を形成してもよい。）で表される基であり、
但し、Ａ、Ｄ及びＥが同時に単結合ではないことを条件とする。）
【００１４】
一般式（Ｉ）中、Ｒ1は、水素原子、ハロゲン原子、置換基を有していてもよいＣ1-6アルキル基又は置換基を有してもよいＣ1-6アルコキシ基を表す。Ｒ1は、水素原子、ハロゲン原子、置換基を有していてもよいＣ1-6アルキル基であることが好ましく、水素原子、置換基を有していてもよいＣ1-6アルキル基であることがより好ましく、水素原子であることがさらにより好ましい。
一般式（Ｉ）中、Ｒ2は、水素原子、ハロゲン原子、置換基を有していてもよいＣ1-6アルキル基又は置換基を有してもよいＣ1-6アルコキシ基を表す。Ｒ2は、水素原子、ハロゲン原子、置換基を有していてもよいＣ1-6アルキル基であることが好ましく、水素原子、置換基を有していてもよいＣ1-6アルキル基であることがより好ましく、水素原子であることがさらにより好ましい。
一般式（Ｉ）中、Ｒ3は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ1-6アルキル基を表す。Ｒ3は、水素原子であることが好ましい。
一般式（Ｉ）中、Ｒ4は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ1-6アルキル基を表す。Ｒ4は、水素原子又は置換基を有していてもよいＣ1-3アルキル基であることが好ましく、水素原子又はアミノ基を有するＣ1-3アルキル基であることがより好ましく、水素原子であることがさらにより好ましい。
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3及びＲ4におけるＣ1-6アルキル基又はＣ1-6アルコキシ基が有していてもよい置換基としては、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、チオール基、シアノ基、アミノ基、シクロアルキル基、アリール基、アリールアルキル基、ヘテロアリール基、アルコキシ基、アリールオキシ基、アリールチオ基、アリールアミノ基、アルケニル基、アルキニル基、アシル基、カルボキシル基、スルホ基、ホスホノ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルチオ基、アシルオキシ基、アシルアミノ基、アルコキシカルボニル基、カルバモイル基、アルキルカルバモイル基またはグアニジノ基が挙げられる。これらの中でも、ハロゲン原子、アミノ基、シクロアルキル基、アリール基が好ましく、ハロゲン原子、アミノ基がより好ましく、ハロゲン原子がさらにより好ましい。
【００１５】
一般式（Ｉ）中、Ａは、ＮＨＣＯ、ＣＯＮＨ、単結合、ビニレン基、置換基を有していてもよい６〜１４員のアリーレン基、置換基を有していてもよい５〜１４員のヘテロアリーレン基、置換基を有していてもよい３〜１４員の二価の脂環式基又は置換基を有していてもよい３〜１４員の二価の複素環式基を表す。
Ａは、ＮＨＣＯ、単結合、ビニレン基、置換基を有していてもよい６〜１０員のアリーレン基、置換基を有していてもよい５〜１０員のヘテロアリーレン基、置換基を有していてもよい５〜１０員の二価の脂環式基又は置換基を有していてもよい５〜１０員の二価の複素環式基であることが好ましく、ＮＨＣＯ、単結合、ビニレン基、置換基を有していてもよい６員のアリーレン基、置換基を有していてもよい５〜６員のヘテロアリーレン基、置換基を有していてもよい５〜６員の二価の脂環式基又は置換基を有していてもよい５〜６員の二価の複素環式基であることがより好ましく、ＮＨＣＯ、単結合、ビニレン基、ベンゼン環から２個の水素を除いた２価の基、フラン環から２個の水素を除いた２価の基、又はピラゾール環から２個の水素を除いた２価の基であることがさらにより好ましく、ＮＨＣＯ、フラン環から２個の水素を除いた２価の基、ビニレン基又は単結合であることがさらにより好ましく、ＮＨＣＯであることが特に好ましい。これらの基は、置換基を有していても有していなくてもよいが、置換基を有していないことが好ましい。
Ａとしての各基が有していてもよい置換基としては、Ｃ1-6のアルキル基が挙げられる。これらの中でも、置換基としてはＣ1-4のアルキル基が好ましく、メチル基、エチル基がより好ましく、メチル基がさらにより好ましい。
【００１６】
一般式（Ｉ）中、Ｄは、単結合、置換基を有していてもよいＣ1-12アルキレン基、置換式を有していてもよい３〜１４員の二価の脂環式基、置換式を有していてもよい３〜１４員の二価の複素環式基を表す。Ｄは、単結合又は置換基を有していてもよいＣ1-12アルキレン基が好ましく、単結合又はＣ1-8アルキレン基がより好ましく、単結合又は置換基を有していてもよいＣ1-6アルキレン基がさらにより好ましく、単結合又は置換基を有していてもよいＣ1-4アルキレン基がさらにより好ましい。また、アルキレン基は直鎖状又は分岐鎖状のいずれであってもよいが、直鎖状であることが好ましい。
Ｄとしての各基が有していてもよい置換基としては、Ｃ1-6のアルキル基、アルコキシ基、アルキルチオ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルカルバモイル基、アルコキシカルボニル基、ハロゲン原子などが挙げられる。これらの中でも、Ｃ1-4のアルキル基が好ましく、メチル基、エチル基がより好ましく、メチル基がさらにより好ましい。Ｄとしての各基は置換基を有していても有していなくてもよいが、置換基を有していないことが好ましい。
【００１７】
一般式（Ｉ）中、Ｅは、単結合又は下記式（ＩＩ）で表される基である。
2020055751.tif 000021
（式中、＊は、隣接するＤへの結合を表し、
＊＊は隣接する窒素原子への結合を表し、
Ｒ6及びＲ7は、それぞれ独立して、水素原子、置換基を有していてもよいＣ1-12アルキル基、置換基を有していてもよい３〜１４員の脂環式基、置換基を有していてもよい３〜１４員の複素環式基、置換基を有していてもよい６〜１４員のアリール基、又は置換基を有していてもよい５〜１４員のヘテロアリール基を表し、或いはＲ6とＲ7はこれらの基が結合する炭素原子とともに置換基を有していてもよい３〜８員の環を形成してもよく、或いはＲ6とＲ4はこれらの基が結合する炭素原子及び窒素原子とともに置換基を有していてもよい４〜８員の環を形成してもよい。）
Ｒ6及びＲ7は、それぞれ独立して、水素原子、Ｃ1-6アルキル基、シクロアルキル基、シクロアルキルアルキル基、アルキルシクロアルキル基、アリール基、アリールアルキル基、アルキルアリール基であることが好ましく、水素原子、Ｃ1-6アルキル基、アリール基、アリールアルキル基、アルキルアリール基であることがより好ましく、水素原子、Ｃ1-4アルキル基、フェニル基、３−メチルフェニル基、ベンジル基であることがさらにより好ましく、水素原子又はＣ1-4アルキル基であることがさらにより好ましく、メチル基であることがさらにより好ましい。また、Ｒ6とＲ7の少なくとも一方がメチル基であることが好ましく、Ｒ6とＲ7がいずれもメチル基であることも好ましい。また、Ｒ6及びＲ7の少なくとも一方が水素原子でないことが好ましい。上記Ｒ6及び／又はＲ7の各基は置換基を有していても有していなくてもよいが、置換基を有していないことが好ましい。
Ｒ6及び／又はＲ7としての各基が有していていもよい置換基としては、アルキル基、脂環式基、複素環式基、アリール基、ヘテロアリール基、アルコキシ基、アルキルチオ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルカルバモイル基、アルコキシカルボニル基、ハロゲン原子が挙げられる。これらの中でも、アルキル基、脂環式基、複素環式基、アリール基、ヘテロアリール基、アルコキシ基、アルキルチオ基、ジアルキルアミノ基、アルキルカルバモイル基が好ましく、アルキル基、脂環式基、複素環式基、アリール基、ヘテロアリール基、アルコキシ基、アルキルチオ基、ジアルキルアミノ基がより好ましく、アルキル基、脂環式基、複素環式基、アリール基、ヘテロアリール基、アルコキシ基、アルキルチオ基がさらにより好ましく、アルキル基、脂環式基、複素環式基、アリール基、ヘテロアリール基がさらにより好ましく、アルキル基、脂環式基、アリール基がさらにより好ましい。
なお、式（ＩＩ）中に不斉炭素が存在する場合、その立体化学は（Ｒ）、（Ｓ），（ＲＳ）のいずれであってもよい。
一般式（Ｉ）中、Ａ、Ｄ及びＥは同時に単結合でない。すなわち、Ａ、Ｄ及びＥのうち、少なくとも１つは単結合ではない。これらの中でも、Ａ及びＤのいずれか一方が単結合でないことが好ましい。また、Ａが単結合でないことが好ましく、Ａ及びＤがいずれも単結合でないことが好ましく、Ａ、Ｄ及びＥがいずれも単結合ではないことが特に好ましい。
【００１８】
一般式（Ｉ）中、Ｒ5は、置換基を有していてもよいＣ1-12アルキル基、置換基を有していてもよい３〜１４員の脂環式基、置換基を有していてもよい３〜１４員の複素環式基、置換基を有していてもよい６〜１４員のアリール基、置換基を有していてもよい５〜１４員のヘテロアリール基、置換基を有していてもよいアミノ基を表す。
Ｒ5としての各基が有していてもよい置換基としては、アミノ基、３〜１４員の脂環式基、３〜１４員の複素環基、６〜１４員のアリール基、５〜１４員のヘテロアリール基、−ＮＨＣＯ−アルキル基、−ＮＨＣＯ−アルコキシ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、ヒドロキシル基、ビニル基、アルコキシ基、アルキルチオ基、アルキルカルバモイル基、アルコキシカルボニル基、ハロゲン原子、ハロゲン化アルキル基、カルボキシル基が挙げられ、これらの各基は、構造的に可能な場合は、アミノ基、アルキル基、ハロゲン化アルキル基、３〜１４員の脂環式基、３〜１４員の複素環基、６〜１４員のアリール基、５〜１４員のヘテロアリール基、−ＮＨＣＯ−アルキル基、−ＮＨＣＯ−アルコキシ基、−ＮＨＣＯ−アルキレン−ＣＯＯＨ、カルボキシル基、ヒドロキシル基、ビニル基、ハロゲン原子で更に置換されていてもよい。これらの中でも、Ｒ5としての各基が有していてもよい置換基としては、アミノ基、３〜１４員の脂環式基、３〜１４員の複素環基、アミノ基で置換されていてもよい−ＮＨＣＯ−アルキル基が好ましく、アミノ基、５〜８員の脂環式基、アミノ基で置換されていてもよい−ＮＨＣＯ−アルキル基がより好ましく、アミノ基、５〜８員の脂環式基がさらにより好ましく、アミノ基及び／又はヘテロヘキシル基がさらにより好ましい。すなわち、Ｒ5は、置換基としてアミノ基及びヘテロヘキシル基から選択される１種又は２種を含むことが好ましい。
また、Ｒ5は、下記式（ＩＩＩ）又は（ＩＶ）で表される基であることが好ましい。
2020055751.tif 000022
2020055751.tif 000023
（式中、Ｒ8は、水素原子、置換基を有していてもよいＣ1-8アルキル基又は置換基を有していてもよいＣ1-8アルキルカルボニル基を表し、
Ｒ9は、水素原子、置換基を有していてもよい３〜１４員の脂環式基、置換基を有していてもよい３〜１４員の複素環式基、置換基を有していてもよい６〜１４員のアリール基、置換基を有していてもよい５〜１４員のヘテロアリール基、又は置換基を有していてもよいＣ1-8アルキル基を表し、且つ
＊＊＊は、隣接する炭素原子への結合を表す。）
【００１９】
Ｒ8は、水素原子、Ｃ1-6アルキル基、又はＣ1-8アルキルカルボニル基であることが好ましく、水素原子又はＣ1-6アルキルカルボニル基であることがより好ましく、水素原子であることがさらにより好ましい。なお、これらの基は置換基を有していても有していなくともよい。
Ｒ8としての各基が有していてもよい置換基としては、アミノ基、３〜１４員の脂環式基、３〜１４員の複素環式基、６〜１４員のアリール基、５〜１４員のヘテロアリール基、−ＮＨＣＯ−アルコキシ基、カルボキシル基、ヒドロキシル基、アルケニル基、アルコキシ基、アルキルチオ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルカルバモイル基、アルコキシカルボニル基、ハロゲン原子が挙げられる。これらの中でも、置換基としては、アミノ基、３〜１４員の脂環式基、３〜１４員の複素環式基、６〜１４員のアリール基、５〜１４員のヘテロアリール基、−ＮＨＣＯ−アルコキシ基、カルボキシル基、ヒドロキシル基、ビニル基が好ましく、アミノ基、シクロヘキシル基、−ＮＨＣＯ−アルコキシ基がさらにより好ましく、アミノ基、シクロヘキシル基がさらにより好ましい。
Ｒ9は、水素原子、３〜１４員の脂環式基、３〜１４員の複素環式基、６〜１４員のアリール基、５〜１４員のヘテロアリール基、Ｃ1-8アルキル基、６〜１４員のアリール基で置換されたアルキル基であることが好ましく、水素原子、シクロヘキシル基、フェニル基、Ｃ1-6アルキル基、ベンジル基がより好ましく、シクロヘキシル基、Ｃ1-4アルキル基であることがさらにより好ましく、シクロヘキシル基であることがさらにより好ましい。
Ｒ9としての各基が有していてもよい置換基としては、アルキル基、アルケニル基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、アルキルチオ基、アルキルアミノ基、ジアルキルアミノ基、アルキルカルバモイル基、アルコキシカルボニル基、ハロゲン原子、アリール基、ヘテロアリール基、脂環式基、複素環式基が挙げられる。これらの中でも、置換基としては、アルキル基、アルケニル基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、アルキルチオ基、ジアルキルアミノ基、アルキルカルバモイル基、アリール基、ヘテロアリール基、脂環式基、複素環式基が好ましく、アルキル基、アルケニル基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、アルキルチオ基、ジアルキルアミノ基、アリール基、ヘテロアリール基、脂環式基、複素環式基がより好ましく、アルキル基、アルケニル基、ヒドロキシル基、アルコキシ基、アルキルチオ基、アリール基、ヘテロアリール基、脂環式基、複素環式基がさらにより好ましく、アルキル基、アルケニル基、ヒドロキシル基、アリール基、ヘテロアリール基、脂環式基、複素環式基がさらにより好ましい。
なお、式（ＩＩＩ）及び／又は式（ＩＶ）中に不斉炭素が存在する場合、その立体化学は（Ｒ）、（Ｓ）、（ＲＳ）のいずれであってもよい。
【００２０】
一般式（Ｉ）で表される化合物又はその塩として、より具体的には、下記一般式（Ｖ）〜（ＩＸ）のいずれかで表される化合物又はその塩であることが好ましく、一般式（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩＩ）又は（ＩＸ）で表される化合物であることがより好ましく、一般式（Ｖ）又は（ＶＩ）で表される化合物であることがさらにより好ましく、一般式（Ｖ）で表される化合物であることがさらにより好ましい。
2020055751.tif 000024
2020055751.tif 000025
2020055751.tif 000026
2020055751.tif 000027
2020055751.tif 000028
（式中、Ｒ5、Ｄ及びＥは、上記の通りである。）
【００２１】
また、本発明の化合物は、一般式（Ｉ）中の下記式（Ｘ）：
2020055751.tif 000029
（式中、＊＊＊＊は、隣接するピリジン環への結合を表し、＊＊＊＊＊は隣接するＣ＝Ｏの炭素原子への結合を表す）
で表される部分構造が、下記から成る群から選択される構造であることが好ましい。なお、式中に不斉炭素が存在する場合、その立体化学は（Ｒ）、（Ｓ）、（ＲＳ）のいずれであってもよい。
2020055751.tif 000030
【００２２】
これらの中でも、上記式（Ｘ）で表される部分構造は、下記から成る群から選択される構造であることがより好ましい。
2020055751.tif 000031
【００２３】
また、本発明の化合物は、一般式（Ｉ）中の下記式（ＸＩ）：
2020055751.tif 000032
（式中、＊＊＊＊＊＊は、隣接する窒素原子への結合部位を表す。）
で表される部分構造が、下記から成る群から選択される構造であることが好ましい。なお、式中に不斉炭素が存在する場合、その立体化学は（Ｒ）、（Ｓ）、（ＲＳ）のいずれであってもよい。
2020055751.tif 000033
2020055751.tif 000034
【００２４】
これらの中でも、上記式（ＸＩ）で表される部分構造は、下記から成る群から選択される構造であることがより好ましい。
2020055751.tif 000035
【００２５】
本発明の好ましい化合物の具体例として、以下の化合物が挙げられる。
４−アミノ−５−[５−（Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸
４−アミノ−５−［［３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［［３−［（２−シクロヘキシルアセチル）アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［（Ｅ）−４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブタ−１−エニル］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブチル］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−［［(２Ｓ)−２−アミノ−３−メチル−ペンタノイル]アミノ］−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［［（３Ｒ）−３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−フェニル−プロパノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［５−［（２−シクロヘキシルアセチル）アミノ］ペンタノイルアミノ］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[（２Ｓ，３Ｓ)−２−アミノ−３−メチル−ペンタノイル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[（２Ｓ)−２−[[（２Ｓ)−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ] −２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[(２−アミノアセチル)アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−アミノ−３−メチル−ブタノイル]アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[[(２Ｓ)−２−アミノ−４−メチル−ペンタノイル]アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−ブタノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−ペンタノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸
これらの中でも、甘味増強作用の観点からは、下記の化合物が特に好ましい。
４−アミノ−５−[５−（Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸
４−アミノ−５−［［３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−[[３−[[（２Ｓ)−２−[[（２Ｓ)−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ] −２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−ブタノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−ペンタノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸
【００２６】
また、甘味増強作用及び甘味質の総合的観点から、本発明の化合物として、以下のものが特に好ましい。
2020055751.tif 000036
【００２７】
本発明の化合物には、一般式（Ｉ）で表される化合物の溶媒和物、例えば水和物、アルコール付加物等も含まれる。
【００２８】
＜化合物の異性体＞
本発明において、一般式（Ｉ）で表される化合物は、その互変異性体及び／又は立体異性体（エナンチオマー、ジアステレオマー）の形態を含むものであり、複数の互変異性体及び／又は立体異性体が存在し得る場合には、そのいずれであってもよい。
＜化合物の塩＞
本発明において、一般式（Ｉ）で表される化合物（異性体を含む）の塩としては、食品添加物として許容しうるものであればよく、式中に塩基性基が存在する場合の塩基性基に対しては、塩酸、硫酸、リン酸、硝酸、臭化水素酸などの無機酸との塩、酢酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、安息香酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、コハク酸、タンニン酸、酪酸、ヒベンズ酸、パモ酸、エナント酸、デカン酸、テオクル酸、サリチル酸、乳酸、シュウ酸、マンデル酸、リンゴ酸等の有機カルボン酸との塩、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸等の有機スルホン酸との塩、グルタミン酸、アスパラギン酸等の酸性アミノ酸との塩が挙げられる。これらの中でも、トリフルオロ酢酸塩、塩酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩が好ましい。
また、式中に酸性基が存在する場合の酸性基に対しては、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムなどの無機塩基との塩、リジン、オルニチン、アルギニン、ヒスチジン等の塩基性アミノ酸との塩が挙げられる。これらの中でも、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩が好ましい。
これらの中でも、一般式（Ｉ）で表される化合物の塩としては、トリフルオロ酢酸塩、塩酸塩、ナトリウム塩が好ましく、トリフルオロ酢酸塩、塩酸塩がより好ましく、トリフルオロ酢酸塩がさらにより好ましい。
塩を形成する方法としては、一般式（Ｉ）で表される化合物と必要な酸または塩基とを適当な量比で溶媒、分散剤中で混合することなどにより得ることができる。
【００２９】
＜製造方法＞
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物の製造方法は、特に限定されるものではなく、既知の方法を用いて製造することができる。例えば、一般式（Ｉ）で表される化合物として、下記一般式（ＸＶＩＩ）で表される化合物は、下記に示す方法により、容易に製造することができる。
（一般的製造方法１：Ｎ末端伸長法）
まず、一般式（ＸＩＩＩ）で表される化合物又は一般式（ＸＶＩ）で表される化合物を用意する。
一般式（ＸＩＩＩ）で表される化合物は市販されているものを用いても良いし、一般式（ＸＩＩ）で表される４−アミノ−５−ブロモ−３−ピリジンカルボン酸誘導体を、定法に従って公知の反応条件で、ニトロ化、エステル化、還元反応に付すことによって製造してもよい。
2020055751.tif 000037
（式中、Ｒ10は水素原子、炭素数１から４のアルキル基、またはベンジル基を表し、Ｒ1からＲ3は前記定義した通りである。）
一般式（ＸＶＩ）で表される化合物は、一般式（ＸＩＩ）で表される４−アミノ−５−ブロモ−３−ピリジンカルボン酸誘導体（ハロゲン化アリール）と、一般式（ＸＩＶ）で表される有機ホウ素化合物又は一般式（ＸＶ）で表されるアルケンを、パラジウム触媒を用いるクロスカップリング反応に付した後に、脱保護を行うことによって得ることができる。クロスカップリング反応としては、鈴木−宮浦カップリング反応やヘック反応が挙げられるが、これらの反応は定法に従って公知の反応条件を用いて行えばよい。
2020055751.tif 000038
（式中、Ｒ10は炭素数１から４のアルキル基、またはベンジル基を表し、Ａ、D、E、Ｒ1からＲ4は前記定義した通りである。Ｒ11、Ｒ12は水素原子または一緒になって１，１，２，２−テトラメチルエチレン基を表し、Ｒ13はｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基を表す。）
【００３０】
次に、一般式（ＸＩＩＩ）または（ＸＶＩ）で表される化合物に対し、１から３個のＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ酸をＮ末端へ順次脱水縮合し、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を脱保護し、エステル結合を加水分解するか、１から２個のＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ酸、または１つのカルボン酸化合物をＮ末端へ順次脱水縮合し、エステル結合を加水分解する。これにより、一般式（ＸＶＩＩ）で表される化合物を得ることができる。
2020055751.tif 000039
（式中、Ｒ10は炭素数１から４のアルキル基、またはベンジル基を表し、Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｒ1からＲ4、Ｒ8、及びＲ9は前記定義した通りである。）
【００３１】
（一般的製造方法２：Ｃ末端伸長法）
式（ＸＶＩＩＩ）で表されるＮ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ酸、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルジペプチド、またはＮ−アシルアミノ酸のＣ末端へ、活性エステル法により、アミノ酸および／または式（ＸＩＩＩ）、（ＸＶＩ）で表される化合物を順次脱水縮合した後にエステル結合を加水分解し、必要に応じてｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を脱保護する。これにより、一般式（ＸＶＩＩ）で表される化合物を得ることができる。
2020055751.tif 000040
（式中、Ａ、Ｄ、Ｅ、Ｒ1からＲ4、Ｒ8、およびＲ9は前記定義した通りである。）
【００３２】
上記一般的製造方法１で行われる脱水縮合反応に用いられるカルボン酸成分はジシクロヘキシルアミン塩などの塩でもよく、アミン成分は遊離体でも、塩酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩などの塩でもよい。カルボン酸成分がジシクロヘキシルアミン塩などの塩の場合は縮合の際に塩酸などの酸を加え、アミン成分が塩酸塩などの塩の場合は縮合反応の際にトリエチとの比率に制限はないが、収率良く反応させるためには、カルボン酸成分１当量に対してアミン成分またはアミン成分を０．８〜１．２当量用いればよい。塩の中和のための酸の使用量はカルボン酸成分に対して０．８〜２．０当量、好ましくは１．０〜１．５当量である。塩の中和のための塩基の使用量はアミン成分に対して０．８〜２．０当量、好ましくは１．０〜１．５当量である。
【００３３】
上記一般的製造方法１の脱水縮合反応に使用する溶媒としては、カルボン酸成分やアミン成分と反応するものでなければ特に限定はなく、例えばジクロロメタン（ＤＣＭ）、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、クロロホルム、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、アセトニトリル、酢酸エチル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）またはこれらの混合溶媒を用いることができる。中でもジクロロメタン、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミドが好ましい。溶媒量はアミン成分に対して１０〜５００倍重量、好ましくは１５〜１００倍重量である。
【００３４】
上記一般的製造方法１の脱水縮合反応に用いられる脱水縮合剤としては、ペプチド合成などで使用される一般的な縮合剤を用いればよく、例えば、Ｎ，Ｎ’−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド 塩酸塩（ＷＳＣ・ＨＣｌ）、２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニウム ヘキサフルオロホスフェート（ＨＢＴＵ）などが用いられる。その際、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール一水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ2Ｏ）などの縮合促進剤が用いられる。脱水縮合剤の使用量はカルボン酸成分に対して１．０〜２．０当量、好ましくは１．０５〜１．２０当量である。縮合促進剤の使用量はカルボン酸成分に対して０．５〜３．０当量、好ましくは１．０〜１．５当量である。
反応時間は約３〜２４時間が好ましく、これは反応温度に依存し、その範囲は５〜３５℃が好ましい。
【００３５】
エステルの加水分解法としては、通常、ペプチド合成で用いられる脱保護法を用いて行えばよい。ｔ−ブチルエステル以外のアルキルエステルまたはベンジルエステルの場合には水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウムなどの塩基によるアルカリ加水分解、ｔ−ブチルエステルの場合は塩酸、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸などによる加酸分解、ベンジルエステルの場合にはパラジウム炭素触媒などによる加水素分解を行うことができる。
例えば、ｔ−ブチルエステル以外のアルキルエステル、ベンジルエステルの場合、使用する塩基の使用量に制限はないが、収率良く反応させるためには、エステル成分に対して塩基を１．０〜１０等量、好ましくは１．２〜３．０当量用いれば良い。加水分解反応時に使用する溶媒としては、水あるいは、メタノール、エタノール、アセトニトリル、テトラヒドロフランなどの有機溶媒と水の混合溶媒をエステル成分に対して１０〜５００倍重量、好ましくは１５〜１００倍重量用いれば良い。反応時間は約１〜２４時間が好ましく、これは反応温度に依存し、その範囲は５〜１００℃が望ましい。
【００３６】
脱保護に関し、保護基であるｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基（Ｂｏｃ基）は、塩酸、トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸などの酸を用いて除去することができる。ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を除去する際に使用する酸の使用量に制限はないが、収率良く反応させるためには、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を除去しようとする成分に対して酸を１．０〜３０等量、好ましくは２．０〜１０当量用いれば良い。反応の際に使用する溶媒としては、水またはテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジオキサン、メタノール、エタノール、アセトニトリル、酢酸エチルなどの有機溶媒、あるいはこれらの混合物を用いれば良い。トリフルオロ酢酸の場合はそのまま用いても良い。溶媒の量はｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル基を除去しようとする成分に対して１０〜５００倍重量、好ましくは１５〜１００倍重量用いれば良い。反応時間は約１〜２４時間が好ましく、これは反応温度に依存し、その範囲は０〜１００℃が望ましい。
【００３７】
上記一般的製造方法２で用いられる活性エステルの原料となるカルボン酸成分はジシクロヘキシルアミン塩などの塩でもよい。カルボン酸成分がジシクロヘキシルアミン塩などの塩の場合は縮合の際に塩酸などの酸を加えて反応を行えばよい。
カルボン酸成分から活性エステル成分を得るには、ＤＣＣやＷＳＣ・ＨＣｌなどの脱水縮合剤とＮ−ヒドロキシスクシンイミド（ＨＯＳｕ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール１水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ2Ｏ）、ニトロフェノールやペンタフルオロフェノールなどの活性エステル化剤とを通常のペプチド合成反応を行う反応条件で反応させればよい。
使用するカルボン酸成分と活性エステル化剤との比率に制限はないが、収率良く反応させるためには、カルボン酸成分１当量に対して活性エステル化剤を０．８〜１．２当量用いればよい。塩の中和のために酸が必要な場合、酸の使用量はカルボン酸成分に対して０．８〜２．０当量、好ましくは１．０〜１．５当量である。
【００３８】
上記一般的製造方法２において活性エステル成分を調製する際に使用する溶媒としては、カルボン酸成分や活性エステル化剤と反応するものでなければ特に限定はなく、例えばジクロロメタン（ＤＣＭ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、クロロホルム、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、アセトニトリル、酢酸エチル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）またはこれらの混合溶媒を用いることができる。中でもジクロロメタン、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、酢酸エチルが好ましい。溶媒量はカルボン酸成分に対して１０〜５００倍重量、好ましくは１５〜１００倍重量である。
活性エステル成分を調製する際の脱水縮合剤としては、ペプチド合成などで使用される一般的な縮合剤を用いればよく、前述の通り、例えば、ＤＣＣやＷＳＣ・ＨＣｌなどが用いられる。脱水縮合剤の使用量はカルボン酸成分に対して１．０〜２．０当量、好ましくは１．０５〜１．２０当量である。
反応時間は約３〜２４時間が好ましく、これは反応温度に依存し、その範囲は５〜３５℃が好ましい。
【００３９】
上記一般的製造方法２で行われる活性エステル成分とアミン成分との縮合反応工程において、使用する活性エステル成分とアミン成分との比率に制限はないが、収率良く反応させるためには、活性エステル成分１当量に対してアミン成分を０．８〜１．２当量用いればよい。
使用する溶媒としては、活性エステル成分やアミン成分と反応するものでなければ特に限定はなく、例えばジクロロメタン（ＤＣＭ）、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、クロロホルム、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、Ｎ−メチルピロリドン（ＮＭＰ）、アセトニトリル、酢酸エチル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）またはこれらの混合溶媒を用いることができる。中でもジクロロメタン、Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド、アセトニトリル、酢酸エチルが好ましい。溶媒量は活性エステル成分に対して１０〜５００倍重量、好ましくは１５〜１００倍重量である。
反応時間は約３〜２４時間が好ましく、これは反応温度に依存し、その範囲は５〜３５℃が好ましい。
【００４０】
前記の各反応ならびに各反応成分の合成において、所望により、公知の脱保護反応、アシル化反応、アルキル化反応、水素添加反応、酸化反応、還元反応、炭素鎖延長反応または置換基交換反応を、単独あるいはその二つ以上を組み合わせて行うことにより、各置換基を変換することができる。
前記の各反応において、原料化合物が置換基としてアミノ基、カルボキシル基、ヒドロキシ基またはカルボニル基を有する場合、これらの基にペプチド化学等で一般的に用いられるような保護基が導入されていてもよく、反応後に必要に応じて、保護基を除去することにより目的化合物を得ることができる。
上記した保護基の除去方法は、公知の方法、例えば、プロテクティブ  グループス  イン  オーガニック  シンセシス 第３版  (Protective Groups in Organic Synthesis, Third Edition)、John Wiley and Sons 刊 (1999)に記載の方法等に準じて行うことができる。
【００４１】
得られる一般式（Ｉ）で表される化合物またはその塩は、常法により単離精製することができる。例えば、結晶化によって精製する場合は、溶媒として、酢酸エチル、酢酸イソプロピル、エタノール、メタノール、アセトニトリル、アセトン、ジエチルエーテル、クロロホルム、ジクロロメタン、ｎ−ヘキサン、ｎ−ヘプタンなど、あるいはこれらの混合溶媒を用いることができる。クロマトグラフによる精製法として、分取薄層クロマトグラフィー（ＰＴＬＣ）またはシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いることができる。その際の展開溶媒としては、先に結晶化の溶媒として挙げた溶媒を用いることができる。
一般式（Ｉ）で表される化合物を製造するのに使用される開始物質は、市販されているものを購入して用いてもよく、自ら合成して製造してもよい。
【００４２】
本発明の一般式（Ｉ）で表される化合物、その互変異性体若しくは立体異性体又はそれらの塩（以下、単に本発明の化合物という）は、乾燥粉末、ペースト、溶液などの物性に制限なしにあらゆる形態で用いることができる。
本発明の化合物は、呈味改善剤、特に甘味改善剤又は甘味増強剤の成分として用いることができる。呈味改善剤は、本発明の化合物を含む。呈味改善剤は、本発明の化合物のみからなるものでもよく、本発明の化合物のみから本質的になるものでもよく、本発明の化合物以外の成分を含んでいるものでもよい。その他の成分としては、本発明の化合物以外の呈味改善剤が挙げられる。本発明の化合物以外の呈味改善剤としては、フルーツフレーバーやマスキングフレーバーなどの香料類、カラギナンなどの増粘多糖類、塩化カリウムなどの無機塩類、本発明以外の甘味増強剤や甘味以外の塩味などの呈味改善剤などが挙げられる。
【００４３】
本発明の化合物は、食品組成物の成分として用いることができる。食品組成物は、本発明の化合物を含む。食品組成物としては、食品、飲料、調味料等の各種飲食品が挙げられる。
食品組成物中の本発明の化合物の量は、所望の効果が得られる量であれば特に制限されないが、食品組成物の全質量を基準として、０．１ｐｐｂ〜９９.９質量％程度であることが好ましく、１ｐｐｂ〜１０質量％程度であることがより好ましく、０．０１ｐｐｍ〜１質量％程度であることがさらにより好ましい。
本発明の化合物を含む食品組成物は、飲食品的に許容しうるあらゆる固体又は液体の担体、適当な調味原料等をさらに含んでいてもよい。
上記担体としては、例えば、グルコース、乳糖、ショ糖、澱粉、マンニトール、デキストリン、脂肪酸グリセリド、ポリエチレングリコール、ヒドロキシエチルデンプン、エチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ゼラチン、アルブミン、アミノ酸、水、生理食塩水等が挙げられる。
上記の調味原料は、当業界で用いられるいずれの調味原料であってもよく特に制限されないが、例えば、香料、糖類、甘味料、食物繊維類、ビタミン類、グルタミン酸ナトリウム（MSG）などのアミノ酸類、イノリン−リン酸（IMP）などの核酸類、塩化ナトリウムなどの無機塩類、クエン酸などの有機酸類、たん白加水分解物などの天然調味料、味噌・醤油などの発酵調味料が挙げられる。
上記の担体、他の調味原料等はいずれもその含有量は特に制限されない。
上記調味原料のうち、酵母エキスは、由来となる菌体・その培養条件・抽出処理方法のいずれも特に限定されず任意の酵母エキスを用いることができ、更に加熱処理、酵素処理、濃縮、粉末化処理等が施されたものでも良い。
【００４４】
また、本発明は、本発明の化合物を飲食品原料又は飲食品に添加する工程を含む飲食品の甘味を増強する方法を提供することができる。
本発明の飲食品の甘味を増強する方法については、本発明の化合物を飲食品原料又は飲食品に添加する工程を含む。本発明の化合物を飲食品原料又は飲食品に添加した後、これらの成分を混合することが好ましい。また、混合により得られた本発明の化合物と飲食品原料との混合物を調理する工程を更に含んでいてもよい。
本発明の化合物は、完成品である飲食品中に、０．００５〜３０重量ｐｐｍの量で含まれるように添加することが好ましく、０．０５〜１０ｐｐｍの量で含まれるように添加することがより好ましい。
本発明は、又、本発明の化合物を飲食品原料に添加する工程を含む飲食品の製造方法を提供することができる。この際、本発明の化合物を飲食品原料に、好ましくは、０．０１重量〜５０重量％添加するのがよい。本発明の化合物を飲食品原料又は飲食品に添加した後、これらの成分を混合することが好ましい。また、混合により得られた本発明の化合物と飲食品原料との混合物を調理する工程を更に含んでいてもよい。
本発明の化合物は、完成品である飲食品中に、０．００５〜３０重量ｐｐｍの量で含まれるように添加することが好ましく、０．０５〜１０ｐｐｍの量で含まれるように添加することがより好ましい。
飲食品に特に制限はないが、粉末状の食品、例えば、インスタントコーヒーなどの飲料用粉末が好ましい。また、溶液状の飲料、例えば、コーヒー、ジュース、炭酸飲料なども好ましい。
飲食品原料としては、賦形剤、調味剤、固結防止剤、消泡材、崩壊剤、潤沢剤、結合剤、等張化剤、緩衝剤、溶解補助剤、防腐剤、抗酸化剤、着色剤、矯味剤、凝固剤、pH緩衝剤などの食品に使用可能な添加剤、乳・果実などの食品原料などが挙げられる。
以下に、実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、これらは本発明を限定するものではない。
【実施例】
【００４５】
以下、実施例および試験例を挙げて、本発明の有用性を具体的に説明する。しかしながら、本発明はこれらにより何ら限定されるものではない。後述の代表的な合成例に記載の方法に準じて、化合物１〜６４の化合物を製造した。なお、以下の製造例において、合成された化合物の構造は核磁気共鳴スペクトル（Ｂｒｕｋｅｒ  ＡＶＡＮＣＥ  ４００）、並びにＥＳＩ−ＭＳスペクトルによって同定した。
【００４６】
４，５−ジアミノピリジン−３−カルボン酸メチル（中間体）の合成
2020055751.tif 000041
【００４７】
４−アミノピリジン−３−カルボン酸（５．００ｇ,  ３６．２ｍｍｏｌ）を硫酸（４０．０ｍＬ）に溶解し、氷冷化で硝酸カリウム（３．６６ｇ，  ３６．２ｍｍｏｌ）を加え７５℃で５時間攪拌した。室温に戻した後メタノール（１００ｍＬ）加え、６０℃で終夜攪拌した。反応液を酢酸カリウム（１４５ｇ）、水（２７１ｍＬ）の水溶液に氷冷下ゆっくりと加え、析出した結晶を濾過した。結晶を酢酸エチルに溶解させ、炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄後、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し濾過を行い、溶媒を留去し、４−アミノ−５−ニトロ−ピリジン−３−カルボン酸メチル（２．３６ｇ，  １２．０ｍｍｏｌ）を得た。
４−アミノ−５−ニトロ−ピリジン−３−カルボン酸メチル（２．３６ｇ，１２．０ｍｍｏｌ）、パラジウムカーボン（１００ｍｇ）にメタノール（２０．０ｍＬ）を加え、フラスコ内をアルゴン置換した後水素ガスを入れた風船を取り付け、水素置換し室温で３時間攪拌した。フラスコ内を再びアルゴン置換した後、濾過し溶媒を留去することで、４，５−ジアミノピリジン−３−カルボン酸メチル（１．８７ｇ，  １１．２ｍｍｏｌ）を得た。
メタノールの代わりにエタノールを用いれば、４−アミノ−５−ニトロ−ピリジン−３−カルボン酸エチルを得ることができる。
【００４８】
（実施例１）４−アミノ−５−[５−（Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸  ２ＴＦＡ塩（化合物１）の合成
2020055751.tif 000042
Ｂｏｃ−Ｌ−シクロヘキシルグリシン（５．１６ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド（２．３ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）を酢酸エチルに溶解し、Ｎ，Ｎ‘−ジシクロヘキシルカルボジイミド（４．１２ｇ、２０．０ｍｍｏｌ）の酢酸エチル溶液を加えて室温で一晩撹拌した。析出したＮ，Ｎ’−ジシクロヘキシル尿素をろ過により分離し、母液の酢酸エチル層を５％炭酸水素ナトリウム水溶液、水で洗浄後、減圧濃縮により溶媒を留去、残渣にｎ−ヘキサン、酢酸エチルを加えて晶析、分離、減圧乾燥しＢｏｃ−Ｌ−シクロヘキシルグリシン−Ｎ−コハク酸イミドエステル（５．７６ｇ、１６．３ｍｍｏｌ）を得た。
５-アミノペンタン酸（０．２５ｇ、２．１ｍｍｏｌ）、炭酸水素ナトリウム０．１７ｇ（２．０ｍｍｏｌ）、を水に溶解し１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（２．１ｍＬ、２．１ｍｍｏｌ）、アセトニトリルを加えて撹拌、Ｂｏｃ−Ｌ−シクロヘキシルグリシン−Ｎ−コハク酸イミドエステル（０．７１ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を加えて室温で一晩撹拌した。アセトニトリルを減圧下留去し、酢酸エチル、水を加え、６Ｍ塩酸でｐＨ１．５に調整して抽出した。有機層を水で洗浄し減圧下溶媒を留去、乾燥し５−Ｂｏｃ−Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノペンタン酸（０．７２ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を得た。
５−Ｂｏｃ−Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノペンタン酸（０．７１ｇ、２．０ｍｍｏｌ）、４、５−ジアミノニコチン酸エチルエステル（０．３５ｇ、１．９ｍｍｏｌ）をＤＭＦに溶解し、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（０．４２ｇ、２．１ｍｍｏｌ）を加えて一晩撹拌した。５％炭酸水素ナトリウム水溶液、水を加えて晶析し、分離、減圧乾燥して４−アミノ−５−[７−（Ｂｏｃ−Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸エチルエステル（０．９２ｇ、１．７７ｍｍｏｌ）を得た。
４−アミノ−５−[５−（Ｂｏｃ−Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸エチルエステル（０．９２ｇ、１．７７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ、水を加えて溶解し、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（２．１２ｍＬ、２．１２ｍｍｏｌ）を加えて室温で一晩撹拌した。水および１Ｍ塩酸（２．１２ｍＬ、２．１２ｍｍｏｌ）を加えて晶析、分離、乾燥して４−アミノ−５−[５−（Ｂｏｃ−Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸（０．６６ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）を得た。
４−アミノ−５−[５−（Ｂｏｃ−Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸（０．６６ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）トリフルオロ酢酸を加えて室温で４時間撹拌した。トリフルオロ酢酸を減圧下留去し、アセトニトリルを加えて晶析、分離、乾燥して４−アミノ−５−[５−（Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸．２ＴＦＡ塩（ＩＮ４１５０、０．８５ｇ、１．３５ｍｍｏｌ）を得た。
4-Amino-5-[5-((S)-cyclohexylglycylamino)-pentanoylamino]-nicotinic acid
４−アミノ−５−[５−（(S)−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.57 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.42 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.11 - 8.05 (m, 2H), 3.25 (dd, J = 13.3, 6.5 Hz, 5H), 3.08 (dq, J = 12.6, 6.4 Hz, 2H), 2.44 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 1.75 - 1.56 (m, 8H), 1.49 (p, J = 7.0 Hz, 2H), 1.13 (ddd, J = 32.9, 15.8, 7.6 Hz, 3H).
MS(ESI) m/z: 392.1 (M+H)+.
【００４９】
（実施例２）４−アミノ−５−[５−（Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸  ２ＨＣｌ塩（化合物２）の合成
2020055751.tif 000043
４−アミノ−５−[５−（Ｂｏｃ−Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸（０．０２５ｇ、０．０５ｍｍｏｌ）に酢酸エチル（２ｍＬ）、４Ｍ塩酸―酢酸エチル溶液（０．５ｍＬ）を加えて室温で２時間撹拌した。酢酸エチルを減圧下留去し、酢酸エチルを加えて晶析、分離、乾燥して４−アミノ−５−[５−（Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸．２ＨＣｌ塩（０．０２１ｇ、０．０４５ｍｍｏｌ）を得た。
【００５０】
（実施例３）４−アミノ−５−[５−（Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸（化合物３）の合成
2020055751.tif 000044
４−アミノ−５−[５−（Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸．２ＴＦＡ塩（０．０６２ｇ、０．１ｍｍｏｌ）に水（２ｍＬ）加えて１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液２００μＬを加えて室温で一晩撹拌した。析出した結晶を分離、４０℃で一晩減圧乾燥性し４−アミノ−５−[５−（Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸を得た。（１４ｍｇ、０．０３６ｍｍｏｌ）
【００５１】
（実施例４）４−アミノ−５−[５−（Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸  Ｎａ塩（化合物４）の合成
2020055751.tif 000045
４−アミノ−５−[５−（Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸．２ＴＦＡ塩（０．０６２ｇ、０．１ｍｍｏｌ）にメタノール（４ｍＬ）加えて８Ｍ水酸化ナトリウム水溶液４３μＬを加えて室温で一晩撹拌した。反応液を減圧下濃縮しアセトン（１５ｍＬ）加えて晶析した。析出した結晶を分離、４０℃で一晩減圧乾燥性し４−アミノ−５−[５−（Ｌ−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸Ｎａ塩を得た。（４１ｍｇ、０．０1ｍｍｏｌ）
【００５２】
（実施例５）４−アミノ−５−［［３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩（化合物５）の合成
2020055751.tif 000046
３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルーブタン酸（６５２ｍｇ，  ３．００ｍｍｏｌ）、ＣＯＭＵ（１．４１ｇ，  ３．３０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１５．０ｍＬ）に溶解し、ＤＩＰＥＡ（５６１μＬ，  ３．３０ｍｍｏｌ）を加え室温で１０分攪拌した。その後、４，５−ジアミノピリジン−３−カルボン酸メチル（５００ｍｇ，  ３．００ｍｍｏｌ）加え室温で終夜攪拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣を塩基性シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）にて精製することで４−アミノ−５−［［３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸メチル（６１７ｍｇ，  １．６８ｍｍｏｌ）を得た。
４−アミノ−５−［［３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸メチル（６１７ｍｇ，  １．６８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２．００ｍＬ）に懸濁し、トリフルオロ酢酸（２．００ｍｌ）を加えて室温で２時間撹拌した。減圧下溶媒を留去して得られた残渣を水に溶解し、凍結乾燥することにより、４−アミノ−５−［（３−アミノ−３−メチル−ブタノイル）アミノ］ピリジン−３−カルボン酸メチル  トリフルオロ酢酸塩（５９０ｍｇ，  １．６２ｍｍｏｌ）を得た。
４−アミノ−５−［（３−アミノ−３−メチル−ブタノイル）アミノ］ピリジン−３−カルボン酸メチル  トリフルオロ酢酸塩（１５９．０ｍｇ，０．５９８ｍｍｏｌ）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−２−シクロヘキシルグリシン（１５４．０ｍｇ，０．５９８ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ（１１６．０ｍｇ，０．５９８ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８２．０ｍｇ，０．５９８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２ｍＬ）に懸濁し、ＤＩＰＥＡ（０．５０ｍＬ，１．７９４ｍｍｏｌ）を加えて室温で２時間撹拌した。酢酸エチルで希釈し、炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をメタノール（１ｍＬ）の溶媒に溶解し、氷冷下２Ｍ  水酸化ナトリウム水溶液（１．００ｍＬ）を加えて室温で２時間撹拌した。反応液に氷冷下で２Ｍ  トリフルオロ酢酸水溶液（１．００ｍＬ）を加え、減圧下濃縮して得られた残渣を、オクタドデシル基化学結合型シリカゲルを充填剤とする逆相高速液体クロマトグラフィーに付し、トリフルオロ酢酸を０．０５％含有する（ｖ／ｖ）、水とアセトニトリルの混合溶液で溶出し目的のフラクションを凍結乾燥することにより、４−アミノ−５−［［３−［［（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  トリフルオロ酢酸塩（２０９．２ｍｇ，０．４２６ｍｍｏｌ）を得た。
４−アミノ−５−［［３−［［（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  トリフルオロ酢酸塩（２０９．２ｍｇ，０．４２６ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１ｍＬに溶解し、トリフルオロ酢酸１ｍＬを加えて１時間撹拌した。減圧下溶媒を留去した後、凍結乾燥を行うことで４−アミノ−５−［［３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩（１６５．４ｍｇ，０．４２３ｍｍｏｌ）を得た。
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［［３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.41 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.93 (s, 2H), 2.91 - 2.73 (m, 2H), 1.57 (dq, J = 23.5, 12.5, 11.5 Hz, 6H), 1.36 (d, J = 7.8 Hz, 6H), 1.03 (dtd, J = 45.5, 23.9, 23.3, 14.4 Hz, 6H).
MS(ESI) m/z: 392.2 (M+H)+.
【００５３】
（実施例６）４−アミノ−５−［［３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二塩酸塩（化合物６）の合成
2020055751.tif 000047
上記の点以外は実施例５と同様にして化合物６を調製した。
【００５４】
(実施例７）４−アミノ−５−［［３−［（２−シクロヘキシルアセチル）アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  トリフルオロ酢酸塩（化合物７）の合成
2020055751.tif 000048
４−アミノ−５−［（３−アミノ−３−メチル−ブタノイル）アミノ］ピリジン−３−カルボン酸メチル  トリフルオロ酢酸塩（３０．０ｍｇ，  ０．１２０ｍｍｏｌ）、２−シクロヘキシル酢酸（１７．０ｍｇ，  ０．１２０ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１５．０ｍｇ，  ０．１３０ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ（２５．０ｍｇ，  ０．１３０ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（２２μＬ，  ０．１３０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２．００ｍＬ）に溶解し室温で終夜攪拌した。反応液を酢酸エチルで希釈し、炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣を塩基性シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）にて精製することで、４−アミノ−５−［［３−［（２−シクロヘキシルアセチル）アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸メチル（１５．０ｍｇ，  ０．０３８４ｍｍｏｌ）得た。
４−アミノ−５−［［３−［（２−シクロヘキシルアセチル）アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸メチル（１５．０ｍｇ，  ０．０３８４ｍｍｏｌ）をメタノール（１．００ｍＬ）に溶解し、２Ｍ  水酸化ナトリウム水溶液（５０μＬ）を加え室温で終夜攪拌した。反応液に、酸性イオン交換樹脂を入れ中和し濾過を行い、減圧下溶媒を留去して得られた残渣を水に溶解し、凍結乾燥することにより、４−アミノ−５−［［３−［（２−シクロヘキシルアセチル）アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  トリフルオロ酢酸塩（１２．０ｍｇ，０．０３１９ｍｍｏｌ）得た。
4-amino-5-[[3-[(2-cyclohexylacetyl)amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid trifluoroacetate
４−アミノ−５−［［３−［（２−シクロヘキシルアセチル）アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  トリフルオロ酢酸塩
1H NMR (CH3OD) δ= 8.61 (s, 1H), 8.20 (s, 1H), 2.92 (s, 2H), 2.01 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 1.72 - 1.62 (m, 5H), 1.47 (s, 6H), 1.32 - 1.06 (m, 4H), 1.00 - 0.86 (m, 2H).
MS(ESI) m/z: 377.2 (M+H)+.
【００５５】
メチル−４−アミノ−５−ブロモニコチン酸（中間体）の合成
2020055751.tif 000049
４−アミノ−５−ブロモニコチン酸（０．４ｇ、１．８６ｍｍｏｌ）を硫酸１ｍＬ、メタノール４ｍＬ中で混合し、７５℃で１２時間攪拌を行った。反応終了後、酢酸エチルで希釈し、重層水及び飽和食塩水で有機層を洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥後、ろ過し、溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーを行うことでメチル−４−アミノ−５−ブロモニコチン酸（０．３９ｇ、１．７２ｍｍｏｌ）を得た。
【００５６】
（実施例８）４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二塩酸塩（化合物８）の合成
2020055751.tif 000050
４−アミノ−５−ブロモピリジン−３−カルボン酸メチル（７８６ｍｇ，３．４０ｍｍｏｌ）、［５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２−フリル］ボロン酸（１．１５ｇ，４．７７ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（９０１ｍｇ，８．５０ｍｍｏｌ）および［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（II）（１２４ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２４ｍＬ）／水（８ｍＬ）の混合溶媒中１０５℃で１．５時間撹拌した。反応溶液を減圧下濃縮し、酢酸エチルおよび炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、セライトを用いて不溶物を濾別した。濾液を酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去して得られた残渣を塩基性シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）にて精製することによって４−アミノ−５−［５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸メチル（８１３ｍｇ，２．３４ｍｍｏｌ）を得た。MS (ESI) m/z: 348 [M+H]+.
４−アミノ−５−［５−［（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸メチル（８１３ｍｇ，２．３４ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（５ｍＬ）に溶解し、４Ｎ  塩酸／１，４−ジオキサン溶液（２５ｍＬ）を加え室温で一晩撹拌した。減圧下溶媒を留去し乾燥することにより、４−アミノ−５−［５−（アミノメチル）−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸メチル  二塩酸塩（７５０ｍｇ，２．３４ｍｍｏｌ）を得た。MS (ESI) m/z: 248 [M+H]+
４−アミノ−５−［５−（アミノメチル）−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸メチル  二塩酸塩（３８．４ｍｇ，０．１２０ｍｍｏｌ）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−２−シクロヘキシルグリシン（３４．０ｍｇ，０．１３２ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ（２５．３ｍｇ，０．１３２ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（１７．８ｍｇ，０．１３２ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２ｍＬ）に懸濁し、氷冷下トリエチルアミン（０．０５０ｍＬ，０．３６ｍｍｏｌ）を加えて室温で一晩撹拌した。反応液を減圧下濃縮した後、酢酸エチルで希釈し、炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をＴＨＦ（１ｍＬ）／メタノール（１ｍＬ）の混合溶媒に溶解し、氷冷下１Ｍ  水酸化リチウム水溶液（０．６００ｍＬ）を加えて室温で２時間撹拌した。反応液に氷冷下で２Ｍ  トリフルオロ酢酸水溶液（０．３００ｍＬ）を加え、減圧下濃縮して得られた残渣を逆相高速液体クロマトグラフィーで精製することにより、４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  トリフルオロ酢酸塩（４７．６ｍｇ，０．０８１２ｍｍｏｌ）を得た。MS (ESI) m/z: 473 [M+H]+
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  トリフルオロ酢酸塩（３３．６ｍｇ，０．０５７３ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２ｍＬ）に懸濁し、トリフルオロ酢酸（２ｍＬ）を加えて室温で２時間撹拌した。減圧下溶媒を留去して得られた残渣を水に溶解し、凍結乾燥することにより、４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩（３６．０ｍｇ，  ０．０６００ｍｍｏｌ）を得た。
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩（１１０ｍｇ，  ０．１８３ｍｍｏｌ）に４Ｎ  塩酸／酢酸エチル溶液（１０ｍＬ）を加えて室温で３０分撹拌した後、減圧下溶媒を留去した。更に４Ｎ  塩酸／酢酸エチル溶液（１０ｍＬ）を加え、減圧下溶媒を留去して得られた残渣を水に溶解し、凍結乾燥することにより、４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二塩酸塩（８１．０ｍｇ，０．１８２ｍｍｏｌ）を得た。
4-amino-5-[5-[[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid dihydrochloride
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二塩酸塩
1H NMR (CD3OD) δ= 8.71 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.38 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 4.62 - 4.30 (m, 2H), 3.57 (d, J = 6.2 Hz, 1H), 1.80 - 1.48 (m, 6H), 1.25 - 0.90 (m, 5H).
【００５７】
（実施例９）４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸（化合物９）の合成
2020055751.tif 000051
上記の点以外は実施例８と同様にして化合物９を調製した。
【００５８】
(実施例１０) ４−アミノ−５−［１−［２−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］エチル］ピラゾール−４−イル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩（化合物１０）の合成
2020055751.tif 000052
４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）−１Ｈ−ピラゾール（１９４ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）および炭酸カリウム（２７６ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（１．５ｍＬ）に懸濁し、氷冷下２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチルブロミド（２２４ｍｇ，１．００ｍｍｏｌ）を加えて室温で３日間撹拌した。減圧下濃縮後、酢酸エチルで希釈し、１Ｎ  塩酸および飽和塩化アンモニウム水溶液で洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。減圧下溶媒を留去することにより、Ｎ−［２−［４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピラゾール−１−イル］エチル］カルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルの粗生成物（２４５ｍｇ）を得た。
４−アミノ−５−ブロモピリジン−３−カルボン酸メチル（１１４ｍｇ，０．４９３ｍｍｏｌ）、Ｎ−［２−［４−（４，４，５，５−テトラメチル−１，３，２−ジオキサボロラン−２−イル）ピラゾール−１−イル］エチル］カルバミン酸  ｔｅｒｔ−ブチルの粗生成物（２００ｍｇ）、炭酸ナトリウム（１３１ｍｇ，１．２３ｍｍｏｌ）および［１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（II）（１８ｍｇ，０．０２４７ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（３ｍＬ）／水（１ｍＬ）の混合溶媒中１０５℃で２時間撹拌した。反応溶液を減圧下濃縮し、酢酸エチルおよび炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、セライトを用いて不溶物を濾別した。濾液を酢酸エチルで抽出し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧下溶媒を留去して得られた残渣を塩基性シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）にて精製することによって４−アミノ−５−［１−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］ピラゾール−４−イル］ピリジン−３−カルボン酸メチル（１１０ｍｇ，０．３０４ｍｍｏｌ）を得た。
MS (ESI) m/z: 362 [M+H]+.
４−アミノ−５−［１−［２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）エチル］ピラゾール−４−イル］ピリジン−３−カルボン酸メチル（１１０ｍｇ，０．３０４ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２ｍＬ）に溶解し、４Ｎ  塩酸／１，４−ジオキサン（６ｍＬ）を加えて室温で２．５時間撹拌した。減圧下溶媒を留去することにより、４−アミノ−５−［１−（２−アミノエチル）ピラゾール−４−イル］ピリジン−３−カルボン酸メチル  塩酸塩の粗結晶（１２０ｍｇ）を得た。
MS (ESI) m/z: 262 [M+H]+.
４−アミノ−５−［１−（２−アミノエチル）ピラゾール−４−イル］ピリジン−３−カルボン酸メチル  塩酸塩（６０．０ｍｇ，０．１８０ｍｍｏｌ）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−２−シクロヘキシルグリシン（５１．０ｍｇ，０．１９８ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ（３８．０ｍｇ，０．１９８ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（２６．８ｍｇ，０．１９８ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２ｍＬ）に懸濁し、氷冷下トリエチルアミン（０．０７７８ｍＬ，０．５５８ｍｍｏｌ）を加えて室温で一晩撹拌した。反応液を減圧下濃縮した後、酢酸エチルで希釈し、炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をＴＨＦ（２ｍＬ）／メタノール（２ｍＬ）の混合溶媒に溶解し、氷冷下１Ｍ  水酸化リチウム水溶液（０．８００ｍＬ）を加えて室温で２時間撹拌した。反応液に氷冷下で２Ｍ  トリフルオロ酢酸水溶液（０．４００ｍＬ）を加え、減圧下濃縮して得られた残渣を逆相高速液体クロマトグラフィーで精製することにより、４−アミノ−５−［１−［２−［［（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］エチル］ピラゾール−４−イル］ピリジン−３−カルボン酸  トリフルオロ酢酸塩（４３．９ｍｇ，０．０７３１ｍｍｏｌ）を得た。
MS (ESI) m/z: 487 [M+H]+.
４−アミノ−５−［１−［２−［［（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］エチル］ピラゾール−４−イル］ピリジン−３−カルボン酸  トリフルオロ酢酸塩（４３．９ｍｇ，０．０７３１ｍｍｏｌ））をジクロロメタン（４ｍＬ）に懸濁し、トリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を加えて室温で１時間撹拌した。減圧下溶媒を留去して得られた残渣を水に溶解し、凍結乾燥することにより、４−アミノ−５−［１−［２−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］エチル］ピラゾール−４−イル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩（４７．８ｍｇ，０．０７７８ｍｍｏｌ）を得た。
4-amino-5-[1-[2-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]ethyl]pyrazol-4-yl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［１−［２−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］エチル］ピラゾール−４−イル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 8.73 (s, 1H), 8.50 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.03 - 7.92 (m, 3H), 7.70 (s, 1H), 4.29 - 4.11 (m, 2H), 3.78 - 3.64 (m, 2H), 3.45 - 3.41 (m, 1H), 1.62 - 1.32 (m, 6H), 1.10 - 0.74 (m, 5H).
MS (ESI) m/z: 387 [M+H]+.
【００５９】
（実施例１１）４−アミノ−５−［（Ｅ）−４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブタ−１−エニル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩（化合物１１）の合成法
2020055751.tif 000053
４−アミノ−５−ブロモピリジン−３−カルボン酸メチル（６９３ｍｇ，３．００ｍｍｏｌ）のＤＭＦ溶液（１５ｍＬ）に、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（５２０ｍｇ，０．４５０ｍｍｏｌ）、Ｎ−ブタ−３−エニルカルバミン酸 ｔｅｒｔ−ブチル（０．６９１ｍＬ，３．７５ｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．６３８ｍＬ，３．７５ｍｍｏｌ）を加えて１２０℃で一晩撹拌した。反応液に酢酸エチルおよび炭酸水素ナトリウム水溶液を加えて撹拌し、不溶物を濾別後した後、濾液を酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去して得られた残渣を、塩基性シリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン／酢酸エチル）で精製することにより、４−アミノ−５−［（Ｅ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ブタ−１−エニル］ピリジン−３−カルボン酸メチル（１９０ｍｇ，０．５９１ｍｍｏｌ）を得た。
MS (ESI) m/z: 322 [M+H]+.
４−アミノ−５−［（Ｅ）−４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）ブタ−１−エニル］ピリジン−３−カルボン酸メチル（１８８ｍｇ，０５８５ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン（２ｍＬ）に溶解し、４Ｎ  塩酸／１，４−ジオキサン溶液（８ｍＬ）を加え室温で一晩撹拌した。減圧下溶媒を留去し乾燥することにより、４−アミノ−５−［（Ｅ）−４−アミノブタ−１−エニル］ピリジン−３−カルボン酸メチル  二塩酸塩（１７２ｍｇ，０．５８５ｍｍｏｌ）を得た。
MS (ESI) m/z: 222 [M+H]+.
４−アミノ−５−［（Ｅ）−４−アミノブタ−１−エニル］ピリジン−３−カルボン酸メチル  二塩酸塩（１７２ｍｇ，０．５８５ｍｍｏｌ）、Ｎ−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−Ｌ−２−シクロヘキシルグリシン（１６６ｍｇ，０．６４４ｍｍｏｌ）、ＷＳＣＩ（１２３ｍｇ，０．６４４ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８７．０ｍｇ，０．６４４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（１０ｍＬ）に懸濁し、氷冷下トリエチルアミン（０．２７０ｍＬ，１．９３ｍｍｏｌ）を加えて室温で一晩撹拌した。反応液を減圧下濃縮した後、酢酸エチルで希釈し、炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水で洗浄後、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下溶媒を留去した。得られた残渣をヘキサン／酢酸エチルの混合溶媒で洗浄し、濾取することで４−アミノ−５−［（Ｅ）−４−［［（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブタ−１−エニル］ピリジン−３−カルボン酸メチル（１５９ｍｇ，０．３４５ｍｍｏｌ）を得た。
MS (ESI) m/z: 461 [M+H]+.
４−アミノ−５−［（Ｅ）−４−［［（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブタ−１−エニル］ピリジン−３−カルボン酸メチル（２０９ｍｇ，０．４５４ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（４ｍＬ）／メタノール（４ｍＬ）の混合溶媒に溶解し、氷冷下１Ｍ  水酸化リチウム水溶液（１．８ｍＬ）を加えて室温で一晩撹拌した。反応液に氷冷下で２Ｍ  トリフルオロ酢酸水溶液（０．９００ｍＬ）を加え、減圧下濃縮して得られた残渣を０．０５％トリフルオロ酢酸水溶液／アセトニトリルで洗浄し、固体を濾取後凍結乾燥することにより、４−アミノ−５−［（Ｅ）−４−［［（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブタ−１−エニル］ピリジン−３−カルボン酸  トリフルオロ酢酸塩（２２０ｍｇ，０．３９２ｍｍｏｌ）を得た。
MS (ESI) m/z: 4447 [M+H]+. 
４−アミノ−５−［（Ｅ）−４−［［（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブタ−１−エニル］ピリジン−３−カルボン酸  トリフルオロ酢酸塩（２１７ｍｇ，０．３８７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（４ｍＬ）に懸濁し、トリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を加えて室温で１時間撹拌した。減圧下溶媒を留去して得られた残渣を水に溶解し、凍結乾燥することにより、４−アミノ−５−［（Ｅ）−４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブタ−１−エニル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩（２４０ｍｇ，０．４１８ｍｍｏｌ）を得た。
4-amino-5-[(E)-4-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]but-1-enyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［（Ｅ）−４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブタ−１−エニル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.02 (br s, 1H), 8.76 (s, 1H), 8.70 - 8.40 (m, 2H), 8.26 (s, 1H), 8.10 (s, 3H), 6.59 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 6.29 (dt, J = 15.5, 6.7 Hz, 1H), 3.54 - 3.38 (m, 2H), 3.28 - 3.16 (m, 1H), 2.46 - 2.35 (m, 2H), 1.81 - 1.46 (m, 6H), 1.21 - 0.85 (m, 5H).
MS (ESI) m/z: 347 [M+H]+.
【００６０】
（実施例１２）４−アミノ−５−［４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブチル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩（化合物１２）の合成
2020055751.tif 000054
４−アミノ−５−［（Ｅ）−４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブタ−１−エニル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩（３３．２ｍｇ，０．０５６８ｍｍｌ）を水（５ｍＬ）に溶解し、触媒量の５％  パラジウム−炭素を加えて水素雰囲気下室温で２時間撹拌した。不溶物を濾別し、濾液を凍結乾燥することにより、４−アミノ−５−［４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブチル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩（２９．７ｍｇ，０．０５１５ｍｍｏｌ）を得た。
4-amino-5-[4-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]butyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブチル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 13.90 (br s, 1H), 9.14 ( br s, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.43 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 8.21 - 7.91 (m, 4H), 7.63 (br s, 1H), 3.58 - 3.44 (m, 2H), 3.31 - 3.24 (m, 2H), 3.14 - 3.02 (m, 1H), 2.65 - 2.56 (m, 2H), 1.80 - 1.39 (m, 8H), 1.27 - 0.90 (m, 5H).
MS (ESI) m/z: 349 [M+H]+.
【００６１】
（実施例１３）４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−［［(２Ｓ)−２−アミノ−３−メチル−ペンタノイル]アミノ］−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸  ２トリフルオロ酢酸塩（化合物１３）の合成
2020055751.tif 000055
メチル４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボキシレート（０．１６３ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を１，４−ジオキサン２．０ｍＬに溶解し４Ｎ塩酸／ジオキサン溶液２．０ｍＬを加えて一晩撹拌した。反応液を減圧濃縮して得られたペースト状の残渣０．１６８ｇをそのまま次の反応に用いた。
メチル４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボキシレート・２塩酸塩（０．０３７ｇ、０．０７７ｍｍｏｌ）をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド３．０ｍＬに溶解し、（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチルペンタン酸（０．０２０ｇ、０．０８６ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（０．０１２ｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（０．０１８ｇ、０．０９２ｍｏｌ）、トリエチルアミン（０．１２１ｍＬ、０．８７ｍｍｏｌ）を加えて一晩撹拌した。反応液に１０％重曹水２．０ｍＬ、飽和食塩水４．０ｍＬ、水４．０ｍＬの混合液と酢酸エチル２０ｍＬを加えて抽出した。有機層を１０％重曹水２．０ｍＬと飽和食塩水８．０ｍＬで洗浄後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し目的物のメチル４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−［［(２Ｓ)−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチル−ペンタノイル]アミノ］−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボキシレート０．０４２ｇを得た（ＤＭＦ残存のため純度７９％、０．０５３ｍｍｏｌ）。
メチル４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−［［(２Ｓ)−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチル−ペンタノイル]アミノ］−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボキシレート（０．０３１ｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）をテトラヒドロフラン０．５ｍＬとメタノール０．５ｍＬに溶解し、氷冷下１Ｍ水酸化リチウム水溶液０．６ｍＬを加えた。室温に戻し３時間撹拌し後、ＬＣＭＳにて原料の消失を確認した。２Ｍトリフルオロ酢酸水溶液０．３ｍＬで中和した後、反応液を減圧濃縮した。得られた残渣を０．０５％トリフルオロ酢酸−アセトニトリル溶液に溶解し、そのうちの約８０％を逆相高速液体クロマトグラフィーにて精製した。目的物を含むフラクションを回収・濃縮してアセトニトリルを除去した後、水溶液を凍結乾燥することで目的物の４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−［［(２Ｓ)−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチル−ペンタノイル]アミノ］−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボキシレート・トリフルオロ酢酸塩（０．０２１ｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）を得た。
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−［［(２Ｓ)−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−３−メチル−ペンタノイル]アミノ］−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボキシレート・トリフルオロ酢酸塩（０．０１４ｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）をジクロロメタン１．５ｍＬに懸濁し、トリフルオロ酢酸１．５ｍＬを加えた。室温で３時間撹拌後、ＬＣＭＳにて原料の消失を確認、反応液を減圧濃縮した。得られた残渣を水５．０ｍＬで希釈して凍結乾燥を行い目的の４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−［［(２Ｓ)−２−アミノ−３−メチル−ペンタノイル]アミノ］−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸・２トリフルオロ酢酸塩（０．０１５ｇ、０．０２０ｍｍｏｌ）を得た。
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-methyl-pentanoyl]amino]-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid (trifluoroacetic acid salt)
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[[(２Ｓ)−２−アミノ−３−メチル−ペンタノイル]アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸（２トリフルオロ酢酸塩）
1H NMR (CD3OD) δ= 8.78 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.47 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 3.78 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 3.09 - 2.73 (m, 2H), 1.97 - 1.62 (m, 8H), 1.50 (d, J = 14.5 Hz, 6H), 1.30 - 1.07 (m, 6H), 1.02 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 0.95 (t, J = 7.4 Hz, 3H)
MS(ESI) m/z: 505.5 (M+H)+.
【００６２】
（実施例１４〜６４）化合物１４〜６４の合成
上記の方法に準じて、下記化合物１４〜６４を合成した。
（化合物１４）
2020055751.tif 000056
4-amino-5-[[(3R)-3-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-3-phenyl-propanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［［（３Ｒ）−３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−フェニル−プロパノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.50 (s, 1H), 8.85 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.60 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.92 (s, 2H), 7.38 - 7.28 (m, 4H), 7.26 - 7.19 (m, 1H), 5.34 (q, J = 8.3 Hz, 1H), 3.48 (s, 1H), 2.93 - 2.70 (m, 2H), 1.65 - 1.38 (m, 7H), 1.13 - 0.82 (m, 2H).
MS(ESI) m/z: 440.2 (M+H)+.
【００６３】
（化合物１５）
2020055751.tif 000057
4-amino-5-[5-[(2-cyclohexylacetyl)amino]pentanoylamino]pyridine-3-carboxylic acid trifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［（２−シクロヘキシルアセチル）アミノ］ペンタノイルアミノ］ピリジン−３−カルボン酸  トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.45 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.71 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 2.99 (q, J = 6.6 Hz, 2H), 2.35 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 1.86 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 1.54 (dh, J = 15.1, 7.6, 5.9 Hz, 8H), 1.37 (p, J = 7.3 Hz, 2H), 1.19 - 0.96 (m, 3H), 0.89 - 0.75 (m, 2H).
MS(ESI) m/z: 377.2 (M+H)+.
【００６４】
（化合物１６）
2020055751.tif 000058
4-amino-5-[[3-[[(2S,3S)-2-amino-3-methyl-pentanoyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−[[３−[[（２Ｓ，３Ｓ)−２−アミノ−３−メチル−ペンタノイル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.49 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.10 - 7.99 (m, 4H), 3.70 (s, 1H), 2.94 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 2.81 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 1.72 - 1.31 (m, 9H), 0.97 - 0.77 (m, 6H).
MS(ESI) m/z: 366.2 (M+H)+.
【００６５】
（化合物１７）
2020055751.tif 000059
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−[[３−[[（２Ｓ)−２−[[（２Ｓ)−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ] −２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.49 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.28 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 8.13 - 7.95 (m, 3H), 7.89 (s, 1H), 4.16 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 3.69 (s, 1H), 2.86 (q, J = 14.3 Hz, 2H), 1.61 (dt, J = 40.0, 9.0 Hz, 15H), 1.38 (s, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.06 (p, J = 13.3 Hz, 12H).
MS(ESI) m/z: 531.3 (M+H)+.
【００６６】
（化合物１８）
2020055751.tif 000060
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-[(2-aminoacetyl)amino]-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid (trifluoroacetic acid salt)
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[(２−アミノアセチル)アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸（２トリフルオロ酢酸塩）
1H NMR (CD3OD) δ= 8.74 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 8.41 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 4.18 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 3.72 (d, J = 2.3 Hz, 2H), 3.06 - 2.77 (m, 2H), 1.74-1.65 (m, 6H), 1.48 (d, J = 13.2 Hz, 6H), 1.25-1.04 (m, 5H)
MS(ESI) m/z: 449.4 (M+H)+.
【００６７】
（化合物１９）
2020055751.tif 000061
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-3-methyl-butanoyl]amino]-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid (trifluoroacetic acid salt)
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−アミノ−３−メチル−ブタノイル]アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸（２トリフルオロ酢酸塩）
1H NMR (CD3OD) δ= 8.74 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 4.15 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.72 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 3.02 - 2.80 (m, 2H), 2.17-2.13 (m, 1H), 1.82-1.68 (m, 6H), 1.48 (d, J = 16.8 Hz, 6H), 1.29 - 0.98 (m, 11H)
MS(ESI) m/z: 491.4 (M+H)+.
【００６８】
（化合物２０）
2020055751.tif 000062
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methyl-pentanoyl]amino]-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid (trifluoroacetic acid salt)
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[[(２Ｓ)−２−アミノ−４−メチル−ペンタノイル]アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸（２トリフルオロ酢酸塩）
1H NMR (CD3OD) δ= 8.78 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 4.17 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.03 - 3.82 (m, 1H), 3.07 - 2.77 (m, 2H), 1.87 - 1.60 (m, 9H), 1.50 (d, J = 18.9 Hz, 6H), 1.31 - 1.03 (m, 5H), 0.98 (d, J = 4.8 Hz, 6H)
MS(ESI) m/z: 505.4 (M+H)+.
【００６９】
（化合物２１）
2020055751.tif 000063
4-Amino-5-[7-((S)-cyclohexylglycylamino)-heptanoylamino]-nicotinic acid (trifluoroacetic acid salt)
４−アミノ−５−[７−（(S)−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ヘプタノイルアミノ]−ニコチン酸（２トリフルオロ酢酸塩）
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.56 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.38 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.07 (s, 2H), 3.22 (dt, J = 13.1, 6.6 Hz, 2H), 3.03 (dq, J = 12.8, 6.5 Hz, 2H), 2.42 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.73 (s, 1H), 1.70 (s, 2H), 1.60 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 1.44 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 1.32 (s, 3H), 1.22 - 1.09 (m, 3H), 1.02 (t, J = 14.0 Hz, 2H).
MS(ESI) m/z: 420.1 (M+H)+.
【００７０】
（化合物２２）
2020055751.tif 000064
4-amino-5-[3-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]propanoylamino]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］プロパノイルアミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.55 (s, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.48 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.01 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 3.52 (dq, J = 13.1, 6.5 Hz, 1H), 3.42 (s, 2H), 2.58 (q, J = 6.9, 5.8 Hz, 2H), 1.70 - 1.45 (m, 6H), 0.99 (dt, J = 45.1, 13.3 Hz, 5H).
MS(ESI) m/z: 364.2 (M+H)+.
【００７１】
（化合物２３）
2020055751.tif 000065
4-amino-5-[4-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]butanoylamino]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブタノイルアミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.84 (s, 1H), 8.82 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.16 (s, 2H), 4.22 (dd, J = 16.9, 5.9 Hz, 1H), 4.05 (dd, J = 16.9, 5.2 Hz, 1H), 3.69 (s, 1H), 1.72 (d, J = 9.4 Hz, 5H), 1.62 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 1.13 (dt, J = 25.5, 15.3 Hz, 5H).
MS(ESI) m/z: 350.2 (M+H)+.
【００７２】
（化合物２４）
2020055751.tif 000066
4-Amino-5-[5-((S)-phenylalanylamino)-pentanoylamino]-nicotinic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−[７−（(S)−フェニルアラニルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.58 (s, 1H), 8.72 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.35 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.22 (s, 2H), 7.54 - 6.89 (m, 5H), 3.92 (s, 1H), 3.16 (dq, J = 13.0, 6.6 Hz, 2H), 2.99 (dt, J = 9.3, 4.8 Hz, 2H), 2.39 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 1.47 (q, J = 8.3, 7.0 Hz, 2H), 1.34 (m, 2H).
MS(ESI) m/z: 400.0 (M+H)+.
【００７３】
（化合物２５）
2020055751.tif 000067
4-Amino-5-[5-((R)-cyclohexylglycylamino)-pentanoylamino]-nicotinic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−[７−（(Ｒ)−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.58 (s, 1H), 8.72 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.42 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.08 (s, 2H), 3.25 (dq, J = 13.0, 6.6 Hz, 2H), 3.08 (dq, J = 12.7, 6.5 Hz, 2H), 2.45 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 1.70 (t, J = 13.8 Hz, 4H), 1.61 (q, J = 8.3 Hz, 4H), 1.50 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.13 (q, J = 10.2, 8.5 Hz, 3H), 1.06 (s, 1H), 1.02 (t, J = 11.3 Hz, 2H).
MS(ESI) m/z: 391.1 (M+H)+.
【００７４】
（化合物２６）
2020055751.tif 000068
4-amino-5-[5-[[(2S)-2-amino-3-methyl-pentanoyl]amino]pentanoylamino]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［（２Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−ペンタノイル］アミノ］ペンタノイルアミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.46 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.55 - 8.33 (m, 2H), 8.08 (s, 2H), 3.77 - 3.50 (m, 2H), 3.07 (dq, J = 12.7, 6.5 Hz, 1H), 2.43 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 1.79 (dtd, J = 10.0, 6.5, 3.6 Hz, 1H), 1.70 - 1.40 (m, 5H), 1.21 - 1.03 (m, 1H), 0.99 - 0.76 (m, 6H).
MS(ESI) m/z: 366.2 (M+H)+.
【００７５】
（化合物２７）
2020055751.tif 000069
4-amino-5-[5-[[(2S)-2-amino-4-methyl-pentanoyl]amino]pentanoylamino]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［（２Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−ペンタノイル］アミノ］ペンタノイルアミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.49 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.48 (d, J = 4.2 Hz, 2H), 8.10 (s, 2H), 3.68 (s, 2H), 3.10 (dq, J = 12.8, 6.4 Hz, 1H), 2.44 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 1.71 - 1.40 (m, 7H), 0.90 (t, J = 6.4 Hz, 6H).
MS(ESI) m/z: 366.2 (M+H)+.
【００７６】
（化合物２８）
2020055751.tif 000070
4-amino-5-[[(4R)-4-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-5-methyl-heptanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［［（４Ｒ）−４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−５−メチル−ヘプタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.49 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.18 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 3.83 - 3.69 (m, 1H), 3.57 (s, 2H), 2.45 - 2.29 (m, 2H), 1.94 - 1.38 (m, 6H), 1.29 - 0.97 (m, 6H), 0.89 (t, J = 7.4 Hz, 6H).
MS(ESI) m/z: 434.3 (M+H)+.
【００７７】
（化合物２９）
2020055751.tif 000071
4-amino-5-[[4-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]cyclohexanecarbonyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［［４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.42 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.25 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 8.07 - 7.89 (m, 3H), 3.92 - 3.78 (m, 1H), 3.59 - 3.50 (m, 1H), 2.56 - 2.47 (m, 1H), 1.90 - 1.36 (m, 13H), 1.24 - 0.83 (m, 6H).
MS (ESI) m/z: 418 [M+H]+.
【００７８】
（化合物３０）
2020055751.tif 000072
4-amino-5-[[(4R)-4-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-5-phenyl-pentanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［［（４Ｒ）−４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−５−フェニル−ペンタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.51 (s, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.41 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 8.07 (s, 2H), 7.37 - 7.18 (m, 5H), 2.91 - 2.81 (m, 1H), 2.42 (p, J = 8.5, 8.0 Hz, 1H), 1.89 - 1.56 (m, 11H), 1.13 (tt, J = 23.8, 12.1 Hz, 6H).
MS(ESI) m/z: 468.2 (M+H)+.
【００７９】
（化合物３１）
2020055751.tif 000073
4-amino-5-[[(4R)-4-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-5-methyl-hexanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［［（４Ｒ）−４−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−５−メチル−ヘキサノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.55 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.13 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 8.10 - 8.00 (m, 2H), 3.74 - 3.55 (m, 1H), 2.39 (t, J = 7.8 Hz, 2H), 1.91 - 1.54 (m, 10H), 1.29 - 1.00 (m, 5H), 0.90 (dd, J = 6.9, 1.5 Hz, 6H).
MS(ESI) m/z: 420.3 (M+H)+.
【００８０】
（化合物３２）
2020055751.tif 000074
4-amino-5-[[(3S)-3-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［［（３Ｓ）−３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.53 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.37 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.04 - 7.94 (m, 2H), 4.25 (p, J = 7.0 Hz, 1H), 2.51 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 1.49 (q, J = 15.8, 14.7 Hz, 7H), 1.12 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.94 (ddt, J = 27.4, 16.5, 8.1 Hz, 5H).
MS(ESI) m/z: 378.2 (M+H)+.
【００８１】
（化合物３３）
2020055751.tif 000075
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-amino-4-methyl-pentanoyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５［［３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−ペンタノイル］アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.49 (s, 1H), 8.71 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.11 - 7.99 (m, 4H), 3.70 (s, 1H), 2.94 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 2.81 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 1.69 - 1.31 (m, 9H), 0.93 - 0.80 (m, 6H).
MS(ESI) m/z: 365.2 (M+H)+.
【００８２】
（化合物３４）
2020055751.tif 000076
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-3-methyl-pentanoyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid (trifluoroacetic acid salt)
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[[(２Ｓ)−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ペンタノイル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸（２トリフルオロ酢酸塩）
1H NMR (CD3OD) δ= 8.72 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.39 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.69 (d, J = 5.9 Hz, 1H), 2.92 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 1.94 - 1.55 (m, 8H), 1.48 (d, J = 10.8 Hz, 6H), 1.33 - 1.03 (m, 6H), 1.00 - 0.75 (m, 6H)
MS(ESI) m/z: 505.5 (M+H)+.
【００８３】
（化合物３５）
2020055751.tif 000077
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-4-methyl-pentanoyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid (trifluoroacetic acid salt)
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[[(２Ｓ)−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−４−メチル−ペンタノイル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸（２トリフルオロ酢酸塩）
1H NMR (CD3OD) δ= 8.74 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 4.41 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.64 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 2.99 (d, J = 14.5 Hz, 1H), 2.86 (d, J = 14.5 Hz, 1H), 1.93 - 1.59 (m, 7H), 1.59 - 1.40 (m, 8H), 1.37 - 1.01 (m, 5H), 0.91 (t, J = 6.6 Hz, 6H)
MS(ESI) m/z: 505.5 (M+H)+.
【００８４】
（化合物３６）
2020055751.tif 000078
4-amino-5-[[(3R)-3-[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-3-(m-tolyl)propanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［［（３Ｒ）−３−［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−（ｍ−トリル）プロパノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.69 (s, 1H), 8.93 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 8.11 - 7.90 (m, 3H), 7.32 - 7.15 (m, 3H), 7.10 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 5.45 - 5.29 (m, 1H), 3.60 - 3.52 (m, 1H), 2.99 - 2.78 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.76 - 1.40 (m, 6H), 1.16 - 0.84 (m, 5H).
MS (ESI) m/z: 454 [M+H]+.
【００８５】
（化合物３７）
2020055751.tif 000079
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-cyclohexyl-2-hydroxy-acetyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid trifluoroacetate
４−アミノ−５−［［３−［［（２Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−アセチル］アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸  トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.32 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 5.38 (s, 1H), 3.57 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 2.69 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 1.61 (td, J = 29.0, 27.8, 12.9 Hz, 6H), 1.43 (d, J = 3.7 Hz, 6H), 1.26 - 0.98 (m, 5H).
MS(ESI) m/z: 393.2 (M+H)+.
【００８６】
（化合物３８）
2020055751.tif 000080
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-(tert-butoxycarbonylamino)-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid
４−アミノ−５−［［３−［［（２Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］−３−メチル−ブタノイル］アミノ］ピリジン−３−カルボン酸
MS(ESI) m/z: 492.3 (M+H)+.
【００８７】
（化合物３９）
2020055751.tif 000081
4-Amino-5-[5-(N-t-butoxycabonyl-(S)-cyclohexylglycylamino)-pentanoylamino]-nicotinic acid
４−アミノ−５−[５−（Ｎ−ｔ−ブトキシカルボニル−(Ｓ)−シクロヘキシルグリシルアミノ）−ペンタノイルアミノ]−ニコチン酸
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.20 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 6.57 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 3.74 (t, J = 8.2 Hz, 1H), 3.09 (ddt, J = 29.2, 12.9, 6.5 Hz, 3H), 2.37 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 1.64 (s, 2H), 1.58 (d, J = 8.3 Hz, 4H), 1.54 - 1.40 (m, 4H), 1.37 (s, 9H), 1.09 (d, J = 8.2 Hz, 3H), 0.97 (dt, J = 21.1, 10.5 Hz, 2H).
MS(ESI) m/z: 420.1 (M+H)+.
【００８８】
（化合物４０）
2020055751.tif 000082
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-[(2-(tert-butoxycarbonylamino)acetyl]amino]-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid (trifluoroacetic acid salt)
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[(２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)アセチル]アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸（トリフルオロ酢酸塩）
1H NMR (400 MHz, Methanol-d4) δ 8.76 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 4.07 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 3.66 (s, 2H), 3.07 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 2.76 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 1.74-1.65 (m, 6H), 1.52 (s, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.31 - 0.80 (m, 5H).
MS(ESI) m/z: 549.5 (M+H)+.
【００８９】
（化合物４１）
2020055751.tif 000083
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-(tert-butoxycarbonylamino)-3-methyl-pentanoyl]amino]-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid(trifluoroacetic acid salt)
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[[(２Ｓ)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−３−メチル−ペンタノイル]アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸（トリフルオロ酢酸塩）
1H NMR (400 MHz, Methanol-d4) δ 8.74 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 4.06 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 3.81 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.05 (d, J = 14.0 Hz 1H), 2.81 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 1.88 - 1.57 (m, 7H), 1.50 (s, 3H), 1.44 (s, 12H), 1.27 - 0.99 (m, 7H), 0.88-0.84 (m, 6H).
MS(ESI) m/z: 605.5 (M+H)+.
【００９０】
（化合物４２）
2020055751.tif 000084
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-(tert-butoxycarbonylamino)-3-methyl-butanoyl]amino]-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid (trifluoroacetic acid salt)
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[[(２Ｓ)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−３−メチル−ブタノイル]アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸（トリフルオロ酢酸塩）
1H NMR (400 MHz, Methanol-d4) δ 8.74 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 4.07 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 3.78 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 3.06 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 2.80 (d, J = 14.3 Hz, 1H), 1.98 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 1.88 - 1.57 (m, 6H), 1.50 (s, 3H), 1.43 (s, 12H), 1.28-0.94 (m, 5H), 0.89 (d, J = 7.1 Hz , 6H)
MS(ESI) m/z: 590.7 (M+H)+.
【００９１】
（化合物４３）
2020055751.tif 000085
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-(tert-butoxycarbonylamino)-4-methyl-pentanoyl]amino]-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid (trifluoroacetic acid salt)
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[[(２Ｓ)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−４−メチル−ペンタノイル]アミノ]−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸（トリフルオロ酢酸塩）
1H NMR (400 MHz, Methanol-d4) δ 8.75 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.38 (s, 1H), 4.02 (dt, J = 30.6, 7.7 Hz, 2H), 3.07 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 2.76 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 1.78-1.60 (m, 8H), 1.51 (s, 3H), 1.44 (s, 13H), 1.27-0.99 (m, 5H), 0.90 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.87 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
MS(ESI) m/z: 605.5 (M+H)+.
【００９２】
（化合物４４）
2020055751.tif 000086
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-(tert-butoxycarbonylamino)-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-4-methyl-pentanoyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid(trifluoroacetic acid salt)
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[[(２Ｓ)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−４−メチル−ペンタノイル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸（トリフルオロ酢酸塩）
1H NMR (400 MHz, Methanol-d4) δ 8.75 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 4.30 (m, 1H), 3.78 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 2.98 (d, J = 14.1 Hz, 1H), 2.85 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 1.71-1.51 (m, 9H)1.48 (s, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.23-1.12 (m, 5H), 0.93 (d, J = 4.0 Hz, 3H), 0.88 (d, J = 8.0 Hz, 3H) .
MS(ESI) m/z: 605.5 (M+H)+.
【００９３】
（化合物４５）
2020055751.tif 000087
4-amino-5-[[3-[[(2S)-2-[[(2S)-2-(tert-butoxycarbonylamino)-2-cyclohexyl-acetyl]amino]-3-methyl-pentanoyl]amino]-3-methyl-butanoyl]amino]pyridine-3-carboxylic acid (trifluoroacetic acid salt)
４−アミノ−５−[[３−[[(２Ｓ)−２−[[(２Ｓ)−２−(ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ)−２−シクロヘキシル−アセチル]アミノ]−３−メチル−ペンタノイル]アミノ]−３−メチル−ブタノイル]アミノ]ピリジン−３−カルボン酸（トリフルオロ酢酸塩）
1H NMR (400 MHz, Methanol-d4) δ 8.75 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 4.10 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 3.78 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 3.05 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 2.78 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 1.82 (m, 1H), 1.76 - 1.52 (m, 8H), 1.50 (s, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.43 (s, 9H), 1.22-0.99 (m, 5H), 0.93 (d, J = 8.0 Hz, 3H), 0.88 (d, J = 8.0 Hz, 1H).
MS(ESI) m/z: 605.5 (M+H)+.
【００９４】
（化合物４６）
2020055751.tif 000088
4-amino-5-[5-[[[(2S)-2-amino-3-methyl-butanoyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−３−メチル−ブタノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 8.95 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.07 (br s, 3H), 6.94 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.49 - 4.29 (m, 2H), 3.60 - 3.41 (m, 1H), 2.06 - 1.91 (m, 1H), 0.83 (d, J = 6.9 Hz, 6H).
MS (ESI) m/z: 333 [M+H]+.
【００９５】
（化合物４７）
2020055751.tif 000089
4-amino-5-[5-[[[(2S)-2-amino-4-methyl-pentanoyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−４−メチル−ペンタノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.09 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.17 (br s, 3H), 6.99 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.54 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.54 - 4.38 (m, 2H), 3.82 - 3.73 (m, 1H), 1.69 - 1.50 (m, 3H), 0.88 (dd, J = 8.5, 6.0 Hz, 6H).
MS (ESI) m/z: 347 [M+H]+.
【００９６】
（化合物４８）
2020055751.tif 000090
4-amino-5-[5-[[[(2S)-2-aminohexanoyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid dihydrochloride
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノヘキサノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二塩酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.40 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 9.28 (br s, 1H), 8.84 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.65 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.55 - 8.23 (m, 4H), 7.13 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.60 - 4.43 (m, 2H), 3.95 - 3.83 (m, 1H), 1.88 - 1.69 (m, 2H), 1.38 - 1.21 (m, 4H), 0.85 (t, J = 6.6 Hz, 3H).
MS (ESI) m/z: 347 [M+H]+.
【００９７】
（化合物４９）
2020055751.tif 000091
4-amino-5-[5-[[[(2S)-2-amino-3,3-dimethyl-butanoyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid dihydrochloride
４−アミノ−５−「５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−３，３−ジメチル−ブタノイル］アミノ］メチル］−２−フリル」ピリジン−３−カルボン酸  二塩酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.32 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 9.12 (br s, 1H), 8.77 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.57 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.49 - 7.94 (m, 4H), 7.05 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.54 - 4.38 (m, 2H), 3.66 - 3.60 (m, 1H), 0.99 (s, 9H).
MS (ESI) m/z: 347 [M+H]+.
【００９８】
（化合物５０）
2020055751.tif 000092
4-amino-5-[5-[[[(2S)-2-amino-2-phenyl-acetyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid dihydrochloride
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−フェニル−アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二塩酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.30 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.84 - 8.58 (m, 4H), 8.42 (s, 1H), 7.59 - 7.45 (m, 2H), 7.43 - 7.27 (m, 3H), 6.87 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.34 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 5.05 - 4.93 (m, 1H), 4.34 (qd, J = 15.8, 5.6 Hz, 2H).
MS (ESI) m/z: 367 [M+H]+.
【００９９】
（化合物５１）
2020055751.tif 000093
4-amino-5-[5-[[[(2S)-2-(carboxymethylamino)-2-cyclohexyl-acetyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−（カルボメチルアミノ）−２−シクロヘキシルアセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 8.96 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 6.90 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.56 - 4.25 (m, 2H), 3.77 - 3.60 (m, 2H), 3.52 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 1.61 (ddt, J = 40.1, 28.7, 15.3 Hz, 7H), 1.22 - 0.82 (m, 4H).
MS(ESI) m/z: 431.2 (M+H)+.
【０１００】
（化合物５２）
2020055751.tif 000094
4-amino-5-[5-[[[(2S)-2-cyclohexyl-2-hydroxy-acetyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid trifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−ヒドロキシ−アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.10 (br s, 1H), 8.72 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.45 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.36 - 7.86 (m, 2H), 6.94 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.37 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 5.36 (br s, 1H), 4.38 - 4.24 (m, 2H), 3.65 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 1.67 - 1.27 (m, 6H), 1.20 - 0.88 (m, 5H).
MS (ESI) m/z: 374 [M+H]+.
【０１０１】
（化合物５３）
2020055751.tif 000095
4-amino-5-[5-[[[(2R)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｒ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.02 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.16 (br s, 3H), 7.02 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.58 - 4.34 (m, 2H), 3.62 - 3.54 (m, 1H), 1.81 - 1.49 (m, 6H), 1.24 - 0.89 (m, 5H).
MS (ESI) m/z: 373 [M+H]+.
【０１０２】
（化合物５４）
2020055751.tif 000096
4-amino-5-[5-[[[(2S,3R)-2-amino-3-hydroxy-3-phenyl-propanoyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
and
4-amino-5-[5-[[[(2R,3S)-2-amino-3-hydroxy-3-phenyl-propanoyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ，３Ｒ）−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−フェニル−プロパノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
及び
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｒ，３Ｓ）−２−アミノ−３−ヒドロキシ−３−フェニル−プロパノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 8.75 (s, 1H), 8.73 - 8.66 (m, 1H), 8.51 - 8.38 (m, 1H), 8.33 - 7.98 (m, 3H), 7.29 - 7.11 (m, 5H), 6.89 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.40 - 6.16 (m, 1H), 6.12 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.91 - 4.71 (m, 1H), 4.44 - 4.12 (m, 2H), 3.94 - 3.74 (m, 1H).
MS (ESI) m/z: 397 [M+H]+.
【０１０３】
（化合物５５）
2020055751.tif 000097
4-amino-5-[5-[[[(2S)-2-amino-2-cyclohexyl-acetyl]-(2-aminoethyl)amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid tritrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］−２−（２−アミノエチル）アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  三トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 8.70 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.41 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.13 (s, 3H), 7.98 - 7.72 (m, 3H), 6.99 - 6.87 (m, 1H), 6.69 - 6.48 (m, 1H), 4.94 - 4.62 (m, 2H), 4.45 - 4.05 (m, 2H), 3.73 - 3.49 (m, 1H), 3.07 - 2.80 (m, 2H), 1.81 - 1.38 (m, 6H), 1.18 - 0.83 (m, 5H).
MS (ESI) m/z: 416 [M+H]+.
【０１０４】
（化合物５６）
2020055751.tif 000098
4-amino-5-[5-[[[(2S)-piperidine-2-carbonyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−ピペリジン−２−カルボニル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR (CD3OD) δ= 8.83 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.48 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.84 (dd, J = 11.8, 3.3 Hz, 1H), 3.42 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 3.03 (m, 1H), 2.21 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 2.03 - 1.81 (m, 2H), 1.75-1.63 (m, 3H).
MS(ESI) m/z: 344.6 (M+H)+.
【０１０５】
（化合物５７）
2020055751.tif 000099
4-amino-5-[5-[[(1-aminocyclohexanecarbonyl)amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［（１−アミノシクロヘキサンカルボニル）アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 8.95 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 8.81 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.18 (s, 3H), 7.02 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.47 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 2.06 - 1.90 (m, 2H), 1.81 - 1.66 (m, 2H), 1.66 - 1.46 (m, 5H), 1.39 - 1.26 (m, 1H).
MS (ESI) m/z: 359 [M+H]+.
【０１０６】
（化合物５８）
2020055751.tif 000100
4-amino-5-[5-[[[(2S)-2-cyclohexyl-2-[(4-hydroxy-4-oxo-butyl)amino]acetyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−シクロヘキシル−２−［（４−ヒドロキシ−４−オキソ−ブチル）アミノ］アセチル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.07 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 6.94 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.43 (ddd, J = 53.6, 15.8, 5.5 Hz, 2H), 3.58 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 2.77 (d, J = 11.1 Hz, 2H), 2.22 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.86 - 1.44 (m, 8H), 1.20 - 0.83 (m, 5H).
MS(ESI) m/z: 459.2 (M+H)+.
【０１０７】
（化合物５９）
2020055751.tif 000101
4-amino-5-[5-[[[(1S,2R)-2-aminocyclopentyl]carbamoylamino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［［（１Ｓ，２Ｒ）−２−アミノシクロペンチル］カルバモイルアミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 8.71 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.61 (br s, 3H), 6.92 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.62 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 4.38 - 4.16 (m, 2H), 3.99 - 3.89 (m, 1H), 3.43 - 3.37 (m, 1H), 1.98 - 1.74 (m, 2H), 1.73 - 1.59 (m, 1H), 1.59 - 1.39 (m, 3H).
【０１０８】
（化合物６０）
2020055751.tif 000102
4-amino-5-[5-[[[(2S)-2-aminopent-4-enoyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ）−２−アミノペンタ−４−エノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 9.01 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 8.80 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.19 (br s, 3H), 7.00 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.54 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 5.79 - 5.63 (m, 1H), 5.19 - 5.05 (m, 2H), 4.54 - 4.38 (m, 2H), 3.93 - 3.82 (m, 1H), 2.55 - 2.52 (m, 2H).
MS (ESI) m/z: 331 [M+H]+.
【０１０９】
（化合物６１）
2020055751.tif 000103
4-amino-5-[5-[[[(2S,3R,4S)-2-amino-4-hydroxy-3-methyl-pentanoyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［［（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）−２−アミノ−４−ヒドロキシ−３−メチル−ペンタノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 8.85 - 8.70 (m, 2H), 8.51 (s, 1H), 8.22 - 8.04 (m, 3H), 7.00 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 5.35 (br s, 1H), 4.59 - 4.35 (m, 2H), 3.88 - 3.81 (m, 1H), 3.59 - 3.52 (m, 1H), 1.85 - 1.71 (m, 1H), 1.10 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 0.78 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
MS (ESI) m/z: 363 [M+H]+.
【０１１０】
（化合物６２）
2020055751.tif 000104
4-amino-5-[5-[[[(1S,2S)-2-aminocyclopentyl]carbamoylamino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［［（１Ｓ，２Ｓ）−２−アミノシクロペンチル］カルバモイルアミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 8.71 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.89 (br s, 3H), 6.92 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.64 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.38 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.26 (qd, J = 15.9, 5.7 Hz, 2H), 3.74 (p, J = 7.6 Hz, 1H), 3.17 - 3.07 (m, 1H), 2.01 - 1.82 (m, 2H), 1.68 - 1.30 (m, 4H).
MS (ESI) m/z: 360 [M+H]+.
【０１１１】
（化合物６３）
2020055751.tif 000105
4-amino-5-[5-[[[(3S)-3-amino-4-phenyl-butanoyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−］５−［［［（３Ｓ）−３−アミノ−４−フェニル−ブタノイル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 8.79 (s, 1H), 8.72 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 8.51 (s, 1H), 7.96 (br s, 3H), 7.38 - 7.18 (m, 5H), 6.99 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.37 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.76 - 3.67 (m, 1H), 3.03 - 2.91 (m, 1H), 2.82 - 2.72 (m, 1H), 2.47 - 2.40 (m, 2H).
MS (ESI) m/z: 395 [M+H]+.
【０１１２】
（化合物６４）
2020055751.tif 000106
4-amino-5-[5-[[[(1R,2S)-2-aminocyclohexanecarbonyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
and
4-amino-5-[5-[[[(1S,2R)-2-aminocyclohexanecarbonyl]amino]methyl]-2-furyl]pyridine-3-carboxylic acid ditrifluoroacetate
４−アミノ−５−［５−［［［（１Ｒ，２Ｓ）−２−アミノシクロヘキサンカルボニル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
及び
４−アミノ−５−［５−［［［（１Ｓ，２Ｒ）−２−アミノシクロヘキサンカルボニル］アミノ］メチル］−２−フリル］ピリジン−３−カルボン酸  二トリフルオロ酢酸塩
1H NMR ((CD3)2SO) δ= 8.80 (s, 1H), 8.75 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.83 (s, 3H), 7.01 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.52 - 4.30 (m, 2H), 3.46 - 3.35 (m, 1H), 2.77 - 2.64 (m, 1H), 2.00 - 1.82 (m, 2H), 1.74 - 1.53 (m, 3H), 1.53 - 1.28 (m, 3H).
MS (ESI) m/z: 359 [M+H]+.
【０１１３】
（試験例１）甘味受容体の活性評価
評価方法：
特開２０１５−１９２６６４号公報の実施例６に記載の方法を用いて、甘味受容体の活性評価を実施した。
１０％  Ｆｅｔａｌ  ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ（ニチレイ）、１％  Ｐｅｎ  Ｓｔｒｅｐ（ＧＩＢＣＯ）を含むＤＭＥＭ／Ｈａｍ’ｓ  Ｆ−１２（ナカライテスク）培地を用いて維持したＨＥＫ２９３Ｅ細胞をＤ−ＰＢＳ（−）（ナカライテスク）で洗浄後、０．２５％  Ｔｒｙｐｓｉｎ  ＥＤＴＡ（ＧＩＢＣＯ）を用いて細胞をフラスコから回収した。遠心分離（１，２００ｒｐｍ，３ｍｉｎ）を行って上清を除去し、５％  ＦＢＳ  ＤＭＥＭ／Ｈａｍ’ｓ  Ｆ−１２中で０．７５×１０７ｃｅｌｌ／ｍＬになるように懸濁した。これを１５０ｃｍ3フラスコ（ＩＷＡＫＩ）に１０ｍＬ播種し、一晩培養（３７℃、５％  ＣＯ2）した。翌日、培地をＯｐｔｉ−ＭＥＭ（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）３０ｍＬに交換して、Ｏｐｔｉ−ＭＥＭとＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎ２０００（ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を用いて調製した甘味受容体遺伝子混合物溶液（Ｇα１５−ｔｒａｎｓ４８ＬＤ遺伝子と、Ｔ１Ｒ２キメラ遺伝子と、Ｔ１Ｒ３キメラ遺伝子の遺伝子、総計６３．８μｇ）を細胞懸濁液にゆっくり添加し、６時間培養（３７℃、５％  ＣＯ2）することで遺伝子を導入した。
【０１１４】
遺伝子導入後に、Ｄ−ＰＢＳ（−）で細胞を洗浄後、０．２５％  Ｔｒｙｐｓｉｎ  ＥＤＴＡ（ＧＩＢＣＯ）を用いて細胞をフラスコから剥がして回収した。細胞数をカウント後、５％  ＦＢＳ  ＤＭＥＭ（２．７８ｍＭグルコース、ＧＩＢＣＯ）培地中に０．５×１０６ｃｅｌｌ／ｍＬになるように懸濁した。この細胞懸濁液を、Ｄ−Ｌｙｓｉｎｅ  ｃｏａｔ  ９６ｗｅｌｌ  ｐｌａｔｅ（ＢＤバイオサイエンス）の各ウェルに７．０×１０４ｃｅｌｌになるように播種し、一晩培養した。
【０１１５】
培養後、９６ウェルの培地をすべてすて、Ａｓｓａｙ用ｂｕｆｆｅｒ（２０ｍＭ  ＨＥＰＥＳ，１４６ｍＭ  ＮａＣｌ，１ｍＭ  ＭｇＳＯ４，１．３９ｍＭグルコース，１ｍＭ  ＣａＣｌ２，２．５  ｍＭ  Ｐｒｏｂｅｎｅｃｉｄ，０．０５％  Ｂｏｖｉｎｅ  ｓｅｒｕｍ  ａｌｂｕｍｉｎ）で８０倍に希釈した細胞内カルシウムイオン測定用染色液Ｃａｌｃｉｕｍ  ａｓｓａｙ  ｋｉｔ  Ｅｘｐｒｅｓｓ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅ）を２００μＬ加え、３７℃で３０分、室温にて４５分静地し、染色を行った。染色後、下記の通り調製した刺激物（甘味物質）５０μＬをＦＤＳＳμＣＥＬＬ（浜松ホトニクス）を用いて添加し、刺激後１２０秒間までの蛍光値を測定した。刺激前後の蛍光値（Ｅｘ４８０：Ｅｍ５４０）を測定することで、刺激物の添加により甘味受容体を介して引き起こされる細胞内遊離カルシウムイオン濃度の変化を定量的に調べた。蛍光値の測定および解析には、ＦＤＳＳμＣＥＬＬ付属のソフト（ＦＤＳＳ７０００ＥＸ）を用いて行い、ΔＦ／Ｆ値は下記の方法により算出し、それを評価に用いた。
【０１１６】
2020055751.tif 000107
【０１１７】
刺激物（甘味物質）：
表１に記載の各化合物を、ジメチルスルホキシドに濃度１００ｍＭで溶解した。その後、各化合物の終濃度が１００μＭ、５０．０μＭ、２５．０μＭ、１２．５μＭ、６．２５μＭ、３．１３μＭ、１．５６μＭ、０．７８１μＭとなり、かつスクロースまたはグルコースの終濃度が２０ｍＭとなるように上記Ａｓｓａｙ用ｂｕｆｆｅｒを用いて濃度を調整し、これを刺激物（甘味物質）として使用した。
【０１１８】
各刺激物を添加した時に得られたΔＦ／Ｆ値を用いて、以下のように活性指標を算出した。具体的には、まず、化合物の濃度ごとに、化合物とスクロースを含む刺激物を添加した時のΔＦ／Ｆ値から化合物とグルコースを含む刺激物を添加した時のΔＦ／Ｆ値を引いた値を算出した。その後、上記各濃度で算出した値を合計し、その合計値をその化合物の活性指標とした。
下記参考例１の化合物は、特許文献２の実施例５に記載された化合物である。この化合物についても活性指標を求め、「（各化合物の活性指標／参考例１の活性指標）×１００」により、参考例１に対する活性指標比を求めた。その結果を表１に示す。
2020055751.tif 000108
【０１１９】
【表１】
2020055751.tif 000109
【０１２０】
（試験例２）官能評価
評価方法：
＜化合物単体の甘味の有無の確認法＞
化合物の呈味確認については以下のように実施した。なおそれぞれの化合物は食添用エタノールに濃度１００００ｐｐｍで溶解したものを使用した。化合物が終濃度１０ｐｐｍとなる水溶液を準備し、溶液を２．５オンス試料カップ中に２５ｍＬずつ分注し、被験者に室温で提示した。被検者は試料を口腔内に含み、０％、０．５％、１．０％、１．５％のショ糖水溶液と比較し、同等の甘味度と考えられる数値で評点をつけた。評価は試料を吐き出す方法で実施した。そして被検者は一つの試料を評価した後はイオン交換水で口腔内をすすぎ、試料に関しては与えられた容量の範囲内で評価を実施した。本評価は、甘味の官能評価の専門家パネル３〜４名により実施され、各試料について評点の平均値を単体の相当ショ糖濃度とした。化合物単体の甘味度を差し引くことによって、甘味増強倍率を正確に計算することができる。
【０１２１】
＜甘味増強倍率の算出方法＞
化合物の甘味増強度測定については以下のように実施した。なおそれぞれの化合物は食添用エタノールに濃度１００００ｐｐｍで溶解したものを使用した。化合物が終濃度１０ｐｐｍとなる５％ショ糖水溶液を準備し、溶液を２．５オンス試料カップ中に２５ｍＬずつ分注し、被験者に室温で提示した。被検者は試料を口腔内に含み、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％のショ糖水溶液と比較し、同等の甘味度と考えられる数値で評点をつけた。評価は試料を吐き出す方法で実施した。そして被検者は一つの試料を評価した後はイオン交換水で口内をすすぎ、試料に関しては与えられた容量の範囲内で評価を実施した。本評価は、甘味の官能評価の専門家パネル３〜４名により実施され、各試料について評点の平均値を相当ショ糖濃度とした。相当ショ糖濃度を用いて、各試料について５％ショ糖水溶液に対する甘味増強倍率を算出した（下記式１参照）。ただし、化合物単体に甘味があった場合には、化合物単体の甘味をあらかじめ差し引いた後に甘味増強倍率を算出した（下記式２参照）。
式１：相当ショ糖濃度（％）／５
式２：（相当ショ糖濃度（％）−単体の相当ショ糖濃度（％））／５
なお、参考例１についても同様に評価した。その結果を表２に示す。
【０１２２】
（試験例３）時間−強度（ＴＩ）評価
ＴＩ評価とは知覚される呈味強度の時系列的変化を記録する方法であり、化合物のＴＩ評価については以下のように実施した。なおそれぞれの化合物は食添用エタノールに濃度１００００ｐｐｍで溶解したものを使用した。化合物が終濃度１０ｐｐｍとなる５％ショ糖水溶液を準備し、溶液を２．５オンス試料カップ中に２５ｍＬずつ分注し、被験者に室温で提示した。被検者は試料を口腔内に含み、１０％ショ糖水溶液、０．１％アスパルテーム水溶液、０．０００４９２％アドバンテーム水溶液と比較し、それぞれの化合物の甘味のピーク位置を評価した。評価は試料を吐き出す方法で実施した。そして、被検者は一つの試料を評価した後はイオン交換水で口腔内をすすぎ、試料に関しては与えられた容量の範囲内で評価を実施した。化合物の甘味ピークに関してはアスパルテームの甘味ピークとなる時間（口に含んでから約３．２秒後）と比較して、ピークが早ければ先、同等であれば中、遅ければ後と記した。
本評価は、甘味の官能評価の専門家パネル３〜４名により実施された。
なお、参考例１についても同様に評価した。その結果を表２に示す。
【０１２３】
【表２】
2020055751.tif 000110
【０１２４】
（注１）５％のショ糖水溶液に化合物を添加して甘味を評価しているため、（Ａ−Ｂ）÷５により甘味増強倍率を算出した。
（注２）アスパルテームの甘味ピークとなる時間（口に含んでから約３．２秒後）と比較して、それよりもピークが早ければ先、同等であれば中、遅ければ後と記した。なお、ショ糖の甘味ピークとなる時間は口に含んでから約２．２秒後であり、アスパルテームよりも甘味ピークが早い。従って、ピークが「先」である化合物は、ショ糖に近い甘味ピークを有する。
【０１２５】
表２に示すように、本発明の化合物又はその塩は５％ショ糖水溶液の甘味強度を１．４９倍以上増強した。これらの中でも、化合物４６、化合物４７、化合物９、化合物２、化合物６、化合物１７、および化合物４は甘味強度を１．９０倍以上増強した。
また、甘味質については、化合物４６、化合物４７、化合物９、化合物８、化合物１１、化合物１２、化合物２、化合物３、化合物７、および化合物２０の甘味ピーク位置がアスパルテームよりもショ糖に近く、好ましい甘味質であることが示された。
【０１２６】
（試験例４）加熱安定性評価
被験物質を０．０１ｗｔ％（１００ｐｐｍ）になるようバッファー溶液（ｐＨ３．０およびｐＨ６．５）に溶解し、シールされたバイアル中、９０℃、２４時間加熱した。逆相高速液体クロマトグラフィーにて２４時間後に残存する被験物質の量を測定し、試験開始時の量及び２４時間後の残存量に基づいて残存率を算出した。１化合物につき３回の試験を実施し、平均値を算出した。その結果を表３に示す。
ｐＨ３クエン酸バッファーの調製：
２５ｍＭクエン酸溶液に２５ｍＭクエン酸ナトリウム溶液を加えて調製した。
ｐＨ６．５バッファーの調製：
２５ｍＭ塩酸水溶液に２５ｍＭ水酸化ナトリウム水溶液を加えて調製した。
ＨＰＬＣ測定条件：
カラム：ＳＨＩＳＥＩＤＯ  ＣＡＰＣＥＬＬ  ＣＯＲＥ  Ｃ１８，３．０ｍｍ  ×  １００ｍｍ，３μｍ
測定温度：４０℃
検出：ＵＶ  ２１０ｎｍ
流速：０．５ｍＬ／ｍｉｎ
サンプル注入量：１０μＬ
溶離液：Ａ：１０ｍＭ  ＮａＨ2ＰＯ4（ｐＨ４．７）；Ｂ：アセトニトリル
グラジエント：０〜４分：１％Ｂ；４〜１１分：４０％Ｂ；１１〜１４分：７０％Ｂ；１４〜２０分：１％Ｂ
【０１２７】
【表３】
2020055751.tif 000111
【０１２８】
試験の結果、いずれの化合物も、ｐＨ３．０および６．５において、９０℃で２４時間加熱した後にもほぼ９０％以上の残存率であり、安定であった。