(57)【要約】      （修正有）【課題】高度に濃縮されたタンパク質製剤の粘度を低下させるために有用な化合物、そのような製剤の粘度を低下させる方法、及び、粘度が低下した医薬製剤を提供する。【解決手段】粘度低下性濃度の、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤を、治療用タンパク質と組み合わせて活用する、方法。安定した医薬製剤も提供する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療用タンパク質を少なくとも７０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む液体医薬製剤の粘度を低下させるための方法であって、粘度低下性濃度の、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤と、前記治療用タンパク質とを組み合わせるステップを含む、前記方法。
【請求項２】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルアルギニンである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルリジンである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルヒスチジンである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルプロリンである、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記製剤の粘度が少なくとも２５％低下する、請求項１に記載の方法。
【請求項７】
前記製剤の粘度が少なくとも５０％低下する、請求項１に記載の方法。
【請求項８】
前記製剤の粘度が少なくとも８０％低下する、請求項１に記載の方法。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれかに記載の方法により生成された医薬製剤。
【請求項１０】
少なくとも７０ｍｇ／ｍＬの濃度の治療用タンパク質、ならびにｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項１１】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルアルギニンである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルリジンである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルヒスチジンである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルプロリンである、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
前記賦形剤の前記濃度が、約２００ｍＭ未満である、請求項１０に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
約４．０から約８．０の間のｐＨを有する、請求項１０〜１５のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項１７】
約４．６〜約５．４のｐＨを有する、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
凍結乾燥粉末を調製する方法であって、請求項１０〜１７のいずれかに記載の医薬組成物を凍結乾燥するステップを含む、前記方法。
【請求項１９】
治療用タンパク質、ならびにｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤を含む凍結乾燥粉末であって、前記賦形剤が希釈剤を用いる再構成の際に粘度を低下させるのに有効な重量：重量濃度で存在する、前記凍結乾燥粉末。
【請求項２０】
前記賦形剤が、治療用タンパク質１ｍｇあたり約１００μｇから治療用タンパク質１ｍｇあたり約１ｍｇの間の濃度で存在する、請求項１９に記載の凍結乾燥粉末。
【請求項２１】
前記賦形剤が、治療用タンパク質１ｍｇあたり約２００μｇ〜約５００μｇから治療用タンパク質１ｍｇあたり約１ｍｇの間の濃度で存在する、請求項１９に記載の凍結乾燥粉末。
【請求項２２】
滅菌水性希釈液を添加するステップを含む、請求項１９〜２１のいずれかに記載の凍結乾燥粉末を再構成するための方法。
【請求項２３】
前記治療用タンパク質が抗体である、請求項１〜８、１８または２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項２４】
前記治療用タンパク質が抗体である、請求項９〜１７のいずれかに記載の医薬製剤または医薬組成物。
【請求項２５】
前記治療用タンパク質が抗体である、請求項１９〜２１のいずれかに記載の凍結乾燥粉末。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０１４年１０月２３日に出願された米国仮特許出願第６２／０６７，６３７号の利益を主張する。
【背景技術】
【０００２】
抗体などの医薬的に活性なタンパク質は、特に非経口注射用に液体溶液へと製剤化されることがしばしばある。皮下経路を介して投与される必要がある生成物については、例えば、自己投与における使用は；１〜２ミリリットルを超える送達容量の製剤は、十分に忍容されない。そのような場合は、高度に濃縮されたタンパク質製剤が、用量体積の制限を満たすのに望ましい。高用量及び少用量は、タンパク質治療剤が１００ｍｇ／ｍｌ以上の濃度に達することができるような投与手段を必要とする。高度に濃縮されたタンパク質製剤は、タンパク質治療剤の製造能力及び投与に多くの課題を提起する可能性がある。いくつかの高度に濃縮されたタンパク質製剤により提起される１つの課題は、粘度の増加である。高粘度製剤は、バルク及び充填段階を含む製造中の取扱いが難しい。高粘度製剤は、シリンジ内に引き込み、注射することも難しく、患者への投与を困難かつ不快にさせる。高度に濃縮されたタンパク質製剤の粘度を低下させるために有用な化合物を同定する、そのような製剤の粘度を低下させる方法を開発する、粘度が低下した医薬製剤を提供することの必要性は、製薬産業において周知である。本発明は、そのような化合物、方法及び製剤を提供する。
【発明の概要】
【０００３】
タンパク質製剤の粘度の低下において使用するために選択された濃度で、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤を提供する。高濃度治療用タンパク質を、粘度低下性濃度の、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤と組み合わせることにより、タンパク質製剤の粘度を低下させるための方法を本明細書に提供する。治療用タンパク質ならびにｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤を含む凍結乾燥粉末であって、該賦形剤が希釈剤を用いる再構成の際に粘度を低下させるのに有効な重量：重量濃度で存在する、前記凍結乾燥粉末も提供する。治療用タンパク質ならびにｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤を含有する再構成（ｒｅｃｏｎｓｉｔｉｔｕｔｉｏｎ）のための希釈剤を含む凍結乾燥粉末も提供する。
【０００４】
治療用タンパク質を少なくとも７０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む液体医薬製剤の粘度を低下させるための方法であって、該治療用タンパク質を、粘度低下性濃度の、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤と組み合わせるステップを含む、前記方法を本明細書に提供する。一実施形態では、製剤の粘度は、少なくとも５％低下する。別の実施形態では、製剤の粘度は、少なくとも１０％低下する。別の実施形態では、製剤の粘度は、少なくとも２０％低下する。別の実施形態では、製剤の粘度は、少なくとも３０％低下する。別の実施形態では、製剤の粘度は、少なくとも４０％低下する。別の実施形態では、製剤の粘度は、少なくとも５０％低下する。別の実施形態では、製剤の粘度は、少なくとも６０％低下する。別の実施形態では、製剤の粘度は、少なくとも７０％低下する。別の実施形態では、製剤の粘度は、少なくとも８０％低下する。関連する実施形態では、このような方法により生成した医薬製剤を提供する。
【０００５】
治療用タンパク質を少なくとも７０ｍｇ／ｍＬの濃度で、ならびにｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤を含む、医薬組成物も提供する。一実施形態では、賦形剤の濃度は、約５ｍＭ〜約７００ｍＭである。関連する実施形態では、賦形剤の濃度は、約１００ｍＭ〜約４００ｍＭである。別の関連する実施形態では、賦形剤の濃度は、約２００ｍＭ〜約３００ｍＭである。なおも別の関連する実施形態では、賦形剤の濃度は、約１４０ｍＭ〜約１７０ｍＭである。約４．０から約８．０の間のｐＨを有するそのような医薬組成物も提供する。関連する実施形態では、ｐＨは、約４．０〜約６．０である。さらなる関連する実施形態では、ｐＨは、約４．８〜約５．４である。
【０００６】
凍結乾燥粉末を調製する方法であって、上記のような医薬製剤を凍結乾燥させるステップを含む、前記方法も提供する。
【０００７】
治療用タンパク質ならびにｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤を含む凍結乾燥粉末であって、該賦形剤が希釈剤を用いる再構成の際に粘度を低下させるのに有効な重量：重量濃度で存在する、前記凍結乾燥粉末を提供する。一実施形態では、賦形剤は、治療用タンパク質１ｍｇあたり約１００μｇから治療用タンパク質１ｍｇあたり約１ｍｇの間の濃度で存在する。関連する実施形態では、賦形剤は、治療用タンパク質１ｍｇあたり約２００μｇから約５００μｇの間の濃度で存在する。さらに関連する実施形態では、賦形剤は、治療用タンパク質１ｍｇあたり約１５０μｇから約２５０μｇの間の濃度で存在する。滅菌希釈液を添加するステップを含む、上記のような凍結乾燥粉末を再構成するための方法も提供する。
【０００８】
抗体である治療用タンパク質も提供する。治療用タンパク質が抗体である、上記のような製剤または組成物も提供する。加えて、治療用タンパク質が抗体である、上記のような凍結乾燥粉末も本明細書で提供する。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】抗体溶液の粘度に及ぼす様々な賦形剤の効果を示す棒グラフである。
【図２】抗体溶液の粘度に及ぼす様々な賦形剤の効果を示す棒グラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
高濃度治療用タンパク質製剤の粘度を低下させることは、製薬産業にとって興味深いことである。賦形剤である、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物は、そのような製剤の粘度を低下させると発見された。本発明は、賦形剤をタンパク質製剤の粘度の低下において使用するために選択された濃度で賦形剤を提供する。治療用タンパク質を、粘度低下性濃度の、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤と組み合わせることにより、タンパク質製剤の粘度を低下させるための方法を本明細書に提供する。治療用タンパク質ならびにｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤を含む凍結乾燥粉末であって、該賦形剤が希釈剤を用いる再構成の際に粘度を低下させるのに有効な重量：重量濃度で存在する、前記凍結乾燥粉末も提供する。
【００１１】
文脈により別途必要とされない限り、単数形の用語は複数形を含み、複数形の用語は単数形を含むものとする。一般に、本明細書に記載の細胞及び組織培養、分子生物学、免疫学、微生物学、遺伝学ならびにタンパク質及び核酸化学ならびにハイブリダイゼーションに関連して使用される学術用語は、当該分野において周知で一般的に使用されているものである。本発明の方法及び技術は、一般に、当該分野で周知の従来の方法に従って、ならびに別段の指示がない限り、本明細書全体を通して引用される及び考察される様々な一般的及びより具体的な参考文献に記載されているとおりに実施される。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ  ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（２００１）及びＡｕｓｕｂｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ（１９９２）、及びＨａｒｌｏｗ  ａｎｄ  Ｌａｎｅ  Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（１９９０）を参照されたい。酵素反応及び精製技術は、当該分野で一般的に達成されるかまたは本明細書に記載されるように、製造者の仕様書に従って実施される。本明細書に記載される分析化学、合成有機化学、及び医学薬学化学に関連して使用される用語ならびにこれらの実験手順及び技術は、当該分野において周知であり、一般的に使用されているものである。標準的な技術を、化学合成、化学分析、医薬調製、製剤化、及び送達ならびに患者の処置のために使用することができる。
【００１２】
特定される全ての特許及び他の刊行物は、例えば、記載されたものと関連して使用され得るそのような刊行物に記載された方法論を記載する及び開示する目的で、その全体が参照により明示的に本明細書に組み込まれる。
【００１３】
双性イオンは、化合物に関して正味ゼロ電荷を生じる別個の正電荷及び負電荷を有することを特徴とする。ほとんどのアミノ酸は生理学的ｐＨで双生イオンである。本明細書に開示するように、双性イオン、特にｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物を含有する医薬製剤は、概してポリオール含有製剤よりも低い粘度を有する一方で、同等またはそれ以上の安定性を有すると見いだされている。
【００１４】
Ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、及びｎ−アセチルプロリンは、天然に生じるアミノ酸を改変したものである。Ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、及びｎ−アセチルプロリンは、ｄ及びｌ型の両方のアミノ酸、例えば、ｎ−アセチル−ｌアルギニン、ｎ−アセチル−ｄアルギニン、ｎ−アセチル−ｌリジン、ｎ−アセチル−ｄリジン、ｎ−アセチル−ｌヒスチジン、ｎ−アセチル−ｄヒスチジン、ｎ−アセチル−ｌプロリン及びｎ−アセチル−ｄプロリンを含む。
【００１５】
「ポリペプチド」及び「タンパク質」という用語は、本明細書で互換可能に使用される。本発明の安定した医薬製剤における使用が企図される例示的なポリペプチドには、抗体、ペプチボディ、免疫グロブリン様タンパク質、非抗体タンパク質及び非免疫グロブリン様タンパク質が挙げられる。天然に生じるタンパク質の類似体は、本発明の製剤に含むことが企図され、これには改変グリコシル化を伴うポリペプチド、グリコシル化を伴わないポリペプチド（非グリコシル化）が含まれる。本明細書で用いるとき、「類似体」は、親配列に対して、挿入、欠失または置換を有する一方で、親活性の生物学的活性を依然として実質的に維持しているアミノ産配列を指す。このことは、当業者に既知の生物学的アッセイを使用して決定される。本発明の製剤は、天然に生じるポリペプチドまたは類似体ポリペプチドの誘導体も含んでよく、類似体ポリペプチドは、例えば、水溶性高分子（例えば、ＰＥＧ化）、放射性核種、または他の診断もしくは標的化もしくは治療部分を付着するように化学的に修飾されている。
【００１６】
抗体は、本発明に従って製剤化されてよい。本明細書で用いるとき、「抗体」という用語は、完全構築抗体、モノクローナル抗体（ヒト抗体、ヒト化抗体またはキメラ抗体を含む）、ポリクローナル抗体、多重特異的抗体（例えば、二重特異的抗体）、マキシボディ、ＢｉＴｅ、ＤＡＲＴ、及び前述の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む抗原と結合できる抗体断片（例えば、Ｆａｂ’、Ｆ’（ａｂ）２、Ｆｖ、一本鎖抗体、ダイアボディ）をそれらが所望の生物学的活性を呈する限り、含む。
【００１７】
少なくとも１つの抗原結合性ペプチドに付着した抗体Ｆｃドメインを含む分子であるペプチボディは、概して、ＰＣＴ出願ＷＯ００／２４７８２に記載されている。免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバーである免疫グロブリン様タンパク質は、抗体可変領域の部分と同様の構造において折り畳まれる１つまたは複数の免疫グロブリン様ドメインを含有する。
【００１８】
以下の１つまたは複数に結合するものを含むタンパク質は、本発明の組成物及び方法において有用であるだろう。それらには、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、及びＣＤ３４を含むがこれらに限定されないＣＤタンパク質；受容体結合に干渉するものを含む。ＨＥＲ２、ＨＥＲ３、ＨＥＲ４、及びＥＧＦ受容体を含む、ＨＥＲ受容体ファミリータンパク質。細胞接着分子、例えば、ＬＦＡ−Ｉ、ＭｏＩ、ｐ１５０、９５、ＶＬＡ−４、ＩＣＡＭ−Ｉ、ＶＣＡＭ、及びアルファｖ／ベータ３インテグリン。血管内皮増殖因子（「ＶＥＧＦ」）、成長ホルモン、甲状腺刺激ホルモン、卵胞刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、成長ホルモン放出因子、副甲状腺ホルモン、ミュラー管阻害物質、ヒトマクロファージ炎症性タンパク質（ＭＩＰ−Ｉ−アルファ）、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、ＮＧＦ−ベータなどの神経成長因子、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、例えばａＦＧＦ及びｂＦＧＦを含む線維芽細胞成長因子、上皮成長因子（ＥＧＦ）、なかでもＴＧＦ−α、及びＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２、ＴＧＦ−β３、ＴＧＦ−β４、またはＴＧＦ−β５を含むＴＧＦ−βを含むトランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）、インスリン様成長因子−Ｉ及び−ＩＩ（ＩＧＦ−Ｉ及びＩＧＦ−ＩＩ）、ｄｅｓ（１−３）−ＩＧＦ−Ｉ（脳ＩＧＦ−Ｉ）、ならびに骨誘導性因子を含むがこれらに限定されない、増殖因子。インスリン、インスリンＡ鎖、インスリンＢ鎖、プロインスリン、及びインスリン様成長因子結合性タンパク質を含むがこれらに限定されない、インスリン及びインスリン関連タンパク質。凝固及び凝固関連タンパク質、例えば、なかでも、第ＶＩＩＩ因子、組織因子、フォン・ヴィレブランド因子、プロテインＣ、アルファ−１−アンチトリプシン、ウロキナーゼ及び組織プラスミノーゲン活性化因子（「ｔ−ＰＡ」）などのプラスミノーゲン活性化因子、ボンバジン、トロンビン、ならびにトロンボポエチン；（ｖｉｉ）アルブミン、ＩｇＥ、及び血液型抗原を含むがこれらに限定されない、他の血液及び血清タンパク質。以下を、なかでも、Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦ、及びＧ−ＣＳＦ、ならびにその受容体、例えばＣＳＦ−１受容体（ｃ−ｆｍｓ）を含む、コロニー刺激因子及びその受容体。例えば、ｆｌｋ２／ｆｌｔ３受容体、肥満（ＯＢ）受容体、ＬＤＬ受容体、成長ホルモン受容体、トロンボポエチン受容体（「ＴＰＯ−Ｒ」、「ｃ−ｍｐｌ」）、グルカゴン受容体、インターロイキン受容体、インターフェロン受容体、Ｔ細胞受容体、ｃ−Ｋｉｔなどの幹細胞因子受容体、及び本明細書に挙げる他の受容体を含む、受容体及び受容体関連タンパク質。例えば、ＯＸ４０受容体に対するリガンドである、ＯＸ４０Ｌを含む受容体リガンド。骨由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）及びニューロトロフィン−３、−４、−５、または−６（ＮＴ−３、ＮＴ−４、ＮＴ−５、またはＮＴ−６）を含むがこれらに限定されない、神経栄養因子。リラキシンＡ鎖、リラキシンＢ鎖、及びプロリラキシン；例えば、インターフェロン−α、−β、及び−γ、ならびにそれらの受容体を含む、インターフェロン及びインターフェロン受容体。ＩＬ−Ｉ〜ＩＬ−３３及び、なかでもＩＬ−８受容体など���ＩＬ−Ｉ〜ＩＬ−３３受容体を含むがこれらに限定されない、インターロイキン及びインターロイキン受容体。ＡＩＤＳエンベロープウイルス抗原を含むがこれに限定されない、ウイルス抗原。リポタンパク質、カルシトニン、グルカゴン、心房性ナトリウム利尿因子、肺界面活性剤、腫瘍壊死因子アルファ及び腫瘍壊死因子ベータ、エンケファリナーゼ、ＲＡＮＴＥＳ（ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｏｎ  ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ  ｎｏｒｍａｌｌｙ  Ｔ−ｃｅｌｌ  ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ  ａｎｄ  ｓｅｃｒｅｔｅｄ）、マウスゴナドトロピン関連ペプチド、ＤＮａｓｅ、インヒビン、及びアクチビン。インテグリン、プロテインＡまたはＤ、リウマチ因子、免疫毒素、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）、スーパーオキシドディスムターゼ、表面膜タンパク質、崩壊促進因子（ＤＡＦ）、ＡＩＤＳエンベロープ、輸送タンパク質、ホーミング受容体、アドレシン、調節タンパク質、イムノアドヘシン、抗体。ミオスタチン、ＴＡＬＬ−Ｉを含むＴＡＬＬタンパク質、アミロイド−ベータタンパク質を含むがこれに限定されないアミロイドタンパク質、胸腺間質性リンパ球新生因子（「ＴＳＬＰ」）、ＲＡＮＫリガンド（「ＯＰＧＬ」）、ｃ−ｋｉｔ、ＴＮＦ受容体１型を含むＴＮＦ受容体、ＴＲＡＩＬ−Ｒ２、アンジオポエチン、及び上記のいずれかの生物学的に活性な断片または類似体または変異体が含まれる。
【００１９】
例示的なタンパク質及び抗体には、Ａｃｔｉｖａｓｅ（登録商標）（アルテプラーゼ）；アリロクマブ（Ｈ１Ｈ３１６Ｐと命名された抗ＰＣＳＫ９モノクローナル抗体、米国特許第８．０６２，６４０号を参照されたい）；Ａｒａｎｅｓｐ（登録商標）（ダルベポエチン−アルファ）、Ｅｐｏｇｅｎ（登録商標）（エポエチンアルファ、またはエリスロポエチン）；Ａｖｏｎｅｘ（登録商標）（インターフェロンβ−Ｉａ）；Ｂｅｘｘａｒ（登録商標）（トシツモマブ）；Ｂｅｔａｓｅｒｏｎ（登録商標）（インターフェロン−β）；ボコシズマブ（Ｌ１Ｌ３と命名された抗ＰＣＳＫ９モノクローナル抗体、米国特許第８，０８０，２４３号を参照されたい）；Ｃａｍｐａｔｈ（登録商標）（アレムツズマブ）；Ｄｙｎｅｐｏ（登録商標）（エポエチンデルタ）；Ｖｅｌｃａｄｅ（登録商標）（ボルテゾミブ）；ＭＬＮ０００２（抗α４β７  ｍＡｂ）；ＭＬＮ１２０２（抗ＣＣＲ２ケモカイン受容体ｍＡｂ）；Ｅｎｂｒｅｌ（登録商標）（エタネルセプト）；Ｅｐｒｅｘ（登録商標）（エポエチンアルファ）；Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標）（セツキシマブ）；エボロクマブ（２１Ｂ１２と命名された抗ＰＣＳＫ９モノクローナル抗体、米国特許第８，０３０，４６７号を参照されたい）；Ｇｅｎｏｔｒｏｐｉｎ（登録商標）（ソマトロピン）；Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ（登録商標）（トラスツズマブ）；Ｈｕｍａｔｒｏｐｅ（登録商標）（注射用ソマトロピン［ｒＤＮＡ由来］）；Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）（アダリムマブ）；Ｉｎｆｅｒｇｅｎ（登録商標）（インターフェロンアルファコン−１）；Ｎａｔｒｅｃｏｒ（登録商標）（ネシリチド）；Ｋｉｎｅｒｅｔ（登録商標）（アナキンラ）、Ｌｅｕｋｉｎｅ（登録商標）（サルガモスチム（Ｓａｒｇａｍｏｓｔｉｍ））；ＬｙｍｐｈｏＣｉｄｅ（登録商標）（エピラツズマブ）；Ｂｅｎｌｙｓｔａ（商標）（ベリムマブ）；Ｍｅｔａｌｙｓｅ（登録商標）（テネクテプラーゼ）；Ｍｉｒｃｅｒａ（登録商標）（メトキシポリエチレングリコール−エポエチンベータ）；ＭｙＩｏｔａｒｇ（登録商標）（ゲムツズマブ・オゾガマイシン）；Ｒａｐｔｉｖａ（登録商標）（エファリズマブ）；Ｃｉｍｚｉａ（登録商標）（セルトリズマブペゴル）；Ｓｏｌｉｒｉｓ（商標）（エクリズマブ）；ペキセリズマブ（抗Ｃ５補体）；ＭＥＤＩ−５２４（Ｎｕｍａｘ（登録商標））；Ｌｕｃｅｎｔｉｓ（登録商標）（ラニビズマブ）；エドレコロマブ、（Ｐａｎｏｒｅｘ（登録商標））；Ｔｒａｂｉｏ（登録商標）（レルデリムマブ）；ＴｈｅｒａＣｉｍ  ｈＲ３（ニモツズマブ）；オムニターグ（ペルツズマブ、２Ｃ４）；Ｏｓｉｄｅｍ（登録商標）（ＩＤＭ−Ｉ）；ＯｖａＲｅｘ（登録商標）（Ｂ４３．１３）；Ｎｕｖｉｏｎ（登録商標）（ビシリズマブ）；カンツズマブメルタンシン（ｈｕＣ２４２−ＤＭｌ）；ＮｅｏＲｅｃｏｒｍｏｎ（登録商標）（エポエチンベータ）；Ｎｅｕｍｅｇａ（登録商標）（オプレルベキン）；Ｎｅｕｌａｓｔａ（登録商標）（ＰＥＧ化フィルガストリム（ｆｉｌｇａｓｔｒｉｍ）、ＰＥＧ化Ｇ−ＣＳＦ、ＰＥＧ化ｈｕ−Ｍｅｔ−Ｇ−ＣＳＦ）；Ｎｅｕｐｏｇｅｎ（登録商標）（フィルグラスチム）；Ｏｒｔｈｏｃｌｏｎｅ  ＯＫＴ３（登録商標）（ムロモナブ���Ｄ３）、Ｐｒｏｃｒｉｔ（登録商標）（エポエチンアルファ）；Ｒｅｍｉｃａｄｅ（登録商標）（インフリキシマブ）、Ｒｅｏｐｒｏ（登録商標）（アブシキシマブ）、Ａｃｔｅｍｒａ（登録商標）（抗ＩＬ６受容体ｍＡｂ）、Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標）（ベバシズマブ）、ＨｕＭａｘ−ＣＤ４（ザノリムマブ）、Ｒｉｔｕｘａｎ（登録商標）（リツキシマブ）；Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）（エルロチニブ）；Ｒｏｆｅｒｏｎ−Ａ（登録商標）−（インターフェロンアルファ−２ａ）；Ｓｉｍｕｌｅｃｔ（登録商標）（バシリキシマブ）；Ｓｔｅｌａｒａ（商標）（ウステキヌマブ）；Ｐｒｅｘｉｇｅ（登録商標）（ルミラコキシブ）；Ｓｙｎａｇｉｓ（登録商標）（パリビズマブ）；１４６Ｂ７−ＣＨＯ（抗ＩＬ１５抗体、米国特許第７．１５３，５０７号を参照されたい）、Ｔｙｓａｂｒｉ（登録商標）（ナタリズマブ）；Ｖａｌｏｒｔｉｍ（登録商標）（ＭＤＸ−１３０３、抗バチルス・アントラシス防御抗原ｍＡｂ）；ＡＢｔｈｒａｘ（商標）；Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（登録商標）（パニツムマブ）；Ｘｏｌａｉｒ（登録商標）（オマリズマブ）、ＥＴＩ２１１（抗ＭＲＳＡ  ｍＡｂ）、ＩＬ−Ｉトラップ（ヒトＩｇＧ１のＦｃ部分及び両ＩＬ−Ｉ受容体要素（Ｉ型受容体及び受容体アクセサリータンパク質）の細胞外ドメイン）、ＶＥＧＦトラップ（ＩｇＧ１  Ｆｃに融合したＶＥＧＦＲ１のＩｇドメイン）、Ｚｅｎａｐａｘ（登録商標）（ダクリズマブ）；Ｚｅｎａｐａｘ（登録商標）（ダクリズマブ）、Ｚｅｖａｌｉｎ（登録商標）（イブリツモマブチウキセタン）、ゼチーア（エゼチミブ）、アタシセプト（ＴＡＣＩ−Ｉｇ）、抗α４β７  ｍＡｂ（ベドリズマブ）；ガリキシマブ（抗ＣＤ８０モノクローナル抗体）、抗ＣＤ２３  ｍＡｂ（ルミリキシマブ）；ＢＲ２−Ｆｃ（ｈｕＢＲ３／ｈｕＦｃ融合タンパク質、可溶性ＢＡＦＦアンタゴニスト）；Ｓｉｍｐｏｎｉ（商標）（ゴリムマブ）；マパツムマブ（ヒト抗ＴＲＡＩＬ受容体−１  ｍＡｂ）；オクレリズマブ（抗ＣＤ２０ヒトｍＡｂ）；ＨｕＭａｘ−ＥＧＦＲ（ザルツムマブ）；Ｍ２００（ボロシキシマブ、抗α５β１インテグリンｍＡｂ）；ＭＤＸ−０１０（イピリムマブ、抗ＣＴＬＡ−４  ｍＡｂ及びＶＥＧＦＲ−Ｉ（ＩＭＣ−１８Ｆ１）；抗ＢＲ３  ｍＡｂ；抗クロストリジウム・ディフィシル毒素Ａ及び毒素Ｂ  Ｃ  ｍＡｂであるＭＤＸ−０６６（ＣＤＡ−Ｉ）及びＭＤＸ−１３８８）；抗ＣＤ２２  ｄｓＦｖ−ＰＥ３８コンジュゲート（ＣＡＴ−３８８８及びＣＡＴ−８０１５）；抗ＣＤ２５  ｍＡｂ（ＨｕＭａｘ−ＴＡＣ）；抗ＴＳＬＰ抗体（米国特許第７，９８２，０１６号、米国特許第８２３２３７２号及び米国公開出願第２００９０１８６０２２号を参照されたい）；抗ＴＳＬＰ受容体抗体（米国特許第８，１０１，１８２号を参照されたい）；Ａ５と命名された抗ＴＳＬＰ抗体（米国特許第７，９８２，０１６号を参照されたい）；（抗ＣＤ３  ｍＡｂ（ＮＩ−０４０１）；アデカツムマブ（ＭＴ２０１、抗ＥｐＣＡＭ−ＣＤ３２６ｍＡｂ）；ＭＤＸ−０６０、ＳＧＮ−３０、ＳＧＮ−３５（抗ＣＤ３０  ｍＡｂ）；ＭＤＸ−１３３３（抗ＩＦＮＡＲ）；ＨｕＭａｘ  ＣＤ３８（抗ＣＤ３８  ｍＡｂ）；抗ＣＤ４０Ｌ  ｍＡｂ；抗クリプトｍＡｂ；抗ＣＴＧＦ特発性肺線維症第Ｉ相Ｆｉｂｒｏｇｅｎ（ＦＧ−３０１９）；抗ＣＴＬＡ４  ｍＡｂ；抗エオタキシン１  ｍＡｂ（ＣＡＴ−２１３）；抗ＦＧＦ８  ｍＡｂ；抗ガングリオシドＧＤ２  ｍＡｂ；抗スクレロスチン抗体（米国特許第８，７１５，６６３号または米国特許第７，５９２，４２９号を参照されたい）。Ａｂ−５と命名された抗スクレロスチン抗体（米国特許第８，７１５，６６３号または米国特許第７，５９２，４２９号を参照されたい）；抗ガングリオシドＧＭ２  ｍＡｂ；抗ＧＤＦ−８ヒトｍＡｂ（ＭＹＯ−０２９）；抗ＧＭ−ＣＳＦ受容体ｍＡｂ（ＣＡＭ−３００１）；抗ＨｅｐＣ  ｍＡｂ（ＨｕＭａｘ  ＨｅｐＣ）；ＭＥＤＩ−５４５、ＭＤＸ−１１０３（抗ＩＦＮα  ｍＡｂ）；抗ＩＧＦＩＲ  ｍＡｂ；抗ＩＧＦ−ＩＲ  ｍＡｂ（ＨｕＭａｘ−Ｉｎｆｌａｍ）；抗ＩＬ１２／ＩＬ２３ｐ４０  ｍＡｂ（ブリアキヌマブ）；抗ＩＬ−２３ｐ１９  ｍＡｂ（ＬＹ２５２５６２３）；抗ＩＬ１３  ｍＡｂ（ＣＡＴ−３５４）；抗ＩＬ−１７  ｍＡｂ（ＡＩＮ４５７）；抗ＩＬ２Ｒａ  ｍＡｂ（ＨｕＭａｘ−ＴＡＣ）；抗ＩＬ５受容体ｍＡｂ；抗インテグリン受容体ｍＡｂ（ＭＤＸ−Ｏ１８、ＣＮＴＯ９５）；抗ＩＰＩＯ潰瘍性大腸炎ｍＡｂ（ＭＤＸ−１１００）；抗ＬＬＹ抗体；ＢＭＳ−６６５１３；抗マンノース受容体／ｈＣＧβ  ｍＡｂ（ＭＤＸ−１３０７）；抗メソテリンｄｓＦｖ−ＰＥ３８コンジュゲート（ＣＡＴ−５００１）；抗ＰＤ１  ｍＡｂ（ＭＤＸ−１１０６（ＯＮＯ−４５３８））；抗ＰＤＧＦＲα  抗体（ＩＭＣ−３Ｇ３）；抗ＴＧＦβ  ｍＡｂ（ＧＣ−１００８）；抗ＴＲＡＩＬ受容体−２ヒトｍＡｂ（ＨＧＳ−ＥＴＲ２）；抗ＴＷＥＡＫ  ｍＡｂ；抗ＶＥＧＦＲ／Ｆｌｔ−１  ｍＡｂ；抗ＺＰ３  ｍＡｂ（ＨｕＭａｘ−ＺＰ３）；ＮＶＳ抗体＃１；ＮＶＳ抗体＃２；ならびに配列、配列番号８及び配列番号６を含むアミロイド−ベータモノクローナル抗体（米国特許第７，９０６，６２５号を参照されたい）が含まれる。
【００２０】
製剤中の例示的なタンパク質濃度は、約７０ｍｇ／ｍｌ〜約３００ｍｇ／ｍｌ、約１２０ｍｇ／ｍｌ〜約２７０ｍｇ／ｍｌ、約１４０ｍｇ／ｍｌ〜約２５５ｍｇ／ｍｌ、約１４０ｍｇ／ｍｌ〜約２４０ｍｇ／ｍｌ、または約１４０ｍｇ／ｍｌ〜約２２０ｍｇ／ｍｌ、またあるいは、約１９０ｍｇ／ｍｌ〜約２１０ｍｇ／ｍｌの範囲であってよい。タンパク質の濃度は、医薬製剤の最終使用に依存し得、当業者により容易に決定され得る。タンパク質の特に企図される濃度は、少なくとも約７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、２００、２０５、２１０、２１５、２２０、２２５、２３０、２３５、２４０、２４５、２５０、２５５、２６０、２６５、２７０、２７５、２８０、２８５、２９０、２９５及び３００ｍｇ／ｍｌであり、間にある全ての値を含む。
【００２１】
本明細書で用いるとき、「医薬製剤」は、生物学的に活性なタンパク質などの医薬的に活性な薬物の滅菌組成物であり、それを必要とする患者への非経口投与（静脈内、筋肉内、皮下、エアロゾル化、肺内、鼻腔内または髄腔内を含むがこれらに限定されない）に好適であり、医薬的に許容され得る賦形剤、希釈剤、及び米国食品医薬品局または他の外国権威により安全とみなされた他の添加剤のみを含む。医薬製剤は、直接投与されてよい液体、例えば、水性、溶液、及び投与前に希釈剤を加えることにより溶液中に再構成され得る凍結乾燥粉末を含む。「医薬製剤」という用語の範囲から具体的に排除されるものは、患者に対する局所投与用の組成物、経口摂取用の組成物、及び非経口的栄養補給のための組成物である。
【００２２】
「貯蔵寿命」は、本明細書で用いるとき、医薬製剤が特定の保管条件下、例えば２〜８℃で保管されているとき、その間の医薬製剤中の治療用タンパク質などの有効成分の劣化が最小（例えば、約５％〜１０％以下の劣化）である保管期間を意味する。劣化を評価するための技術は、医薬製剤中のタンパク質のアイデンティティに依存して異なる。例示的な技術には、例えば、凝集を検出するためのサイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）−ＨＰＬＣ、例えば、タンパク質断片化を検出するための逆相（ＲＰ）−ＨＰＬＣ、例えば、タンパク質の電荷における変化を検出するためのイオン交換−ＨＰＬＣ、タンパク質の立体構造の変化を検出するための質量分析、蛍光分光法、円偏光二色性（ＣＤ）分光法、フーリエ変換赤外分光分析（ＦＴ−ＩＲ）、及びラマン分光法が含まれる。全てのこれらの技術は、単独でまたは組み合わせて使用して、医薬製剤中のタンパク質の劣化を評価し、その製剤の貯蔵寿命を決定することができる。本発明の医薬製剤は、好ましくは、２〜８℃で保管されたとき、２年間で劣化（例えば、断片化、凝集またはアンフォールディング）において約５〜１０％以下の増加を呈する。
【００２３】
本明細書で用いるとき、生物学的に活性なタンパク質の「安定した」製剤とは、対照処方試料と比較して２〜８℃で少なくとも２年間保管する際に少なくとも２０％の凝集の減少及び／または生物学的活性の喪失の低下を呈するか、またあるいは、熱応力の条件下、例えば、１週間〜１２週間にわたって２５℃；１〜１２週間にわたって４０℃；７〜８日にわたって５２℃等で凝集の減少及び／または生物学的活性の喪失の低下を呈する製剤である。
【００２４】
本明細書で用いるとき、「粘度」は、液体の流れに対する抵抗性であり、センチポアズ（ｃＰ）またはミリパスカル−秒（ｍＰａ−ｓ）の単位で測定され得、ここで、所与の剪断速度で、１ｃＰ＝１ｍＰａ−ｓである。粘度は、粘度計、例えば、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ製のアナログ粘度計、ＬＶＴモデル、及びＡＲ−Ｇ２、ＴＡ  ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ製を使用することにより測定され得る。粘度は、当該分野で公知の任意の他の方法及び任意の他の単位（例えば、絶対粘度、動粘性係数または粘性係数）で測定されてよく、重要なのは、本発明に記載される賦形剤の使用により得られる粘度における低下率（％）であることが理解されたい。粘度を決定するために使用する方法にかかわらず、賦形剤製剤対対照製剤における粘度の低下率（％）は、所与の剪断速度においておおよそ同じままであるだろう。
【００２５】
本明細書で用いるとき、「粘度を低下させる」のに有効な量の賦形剤（または「粘度低下性」の量または濃度のかかる賦形剤）を含有する製剤は、投与のためのその最終形態（溶液の場合、または粉末の場合は、意図する量の希釈剤を用いる再構成の際）における製剤の粘度が、適切な対照製剤、例えば、水、緩衝液、他の公知の粘度低下性物質、例えば塩等、及び、例えば、本明細書に例示するものなどの対照製剤の粘度よりも少なくとも５％少ないことを意味する。賦形剤不含対照製剤も、たとえそれらが、例えば、低張性のために治療用製剤として実装可能でない可能性がある場合であっても使用されてよい。
【００２６】
同様に、「粘度が低下した」製剤は、対照製剤と比較して、低下した粘度を呈する製剤である。
【００２７】
タンパク質治療剤は、しばしば、溶液の粘度増加をもたらし得る高濃度で与えられる必要がある。そのような高タンパク質濃度で典型的に見られる粘度の増加を呈さない高濃度製剤を提供することが非常に望ましい。
【００２８】
高粘度製剤は、バルク及び充填段階を含む製造中の取扱いが難しい。高粘度製剤は、シリンジに引き込み、注射することも難しく、しばしば、患者にとって不快であり得るより低いゲージの針の使用を必要とする。ｎ−アセチル−ｌ−アルギニンを生物学的に活性なタンパク質の溶液に添加することは、高濃度タンパク質溶液の粘度を低下させた。
【００２９】
ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤の使用により、他の賦形剤で典型的に見られるような大きな粘度の増加を伴うことなく、製剤中でより高い濃度の治療用タンパク質を使用することが可能になる。ゆえに、本発明は、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤を、粘度を低下させるのに有効な量で添加することにより、タンパク質製剤の粘度を安定化するまたは低下させるための方法を提供する。本発明は、有効量または濃度の、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤を含有する、抗体を含む治療用タンパク質の粘度が低下した製剤も提供する。粘度を低下させる好適または最適な濃度を同定するために、それぞれ異なる濃度の本明細書に記載の賦形剤を含有する、１つまたは複数の製剤をスクリーニングする方法も企図される。粘度が低下した本発明の溶液製剤から凍結乾燥粉末を調製する方法、及び本発明の凍結乾燥粉末を滅菌希釈剤の添加により再構成する方法をさらに提供する。
【００３０】
ゆえに、本発明は、生物学的に活性なポリペプチドならびに粘度低下性濃度の、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤を含有する医薬製剤を提供する。粘度における低下は、対照製剤に対して少なくとも約５〜９０％である。一実施形態では、粘度の低下は、約１０〜８０％の範囲である。他の例示的な実施形態では、粘度の低下は、少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％または８５％である。
【００３１】
本発明の製剤は、医薬的に許容され得る塩、緩衝液、界面活性剤、他の賦形剤、キャリア、希釈剤、及び／または他の製剤薬剤を任意で含んでよい。
【００３２】
例示的な医薬的に許容され得る緩衝液には、酢酸塩（例えば、酢酸ナトリウム）、コハク酸塩（コハク酸ナトリウムなど）、グルタミン酸、グルタミン酸塩、グルコン酸塩、ヒスチジン、クエン酸塩または他の有機酸緩衝液が含まれる。例示的な緩衝液濃度は、例えば、緩衝液及び製剤の所望の張性（例えば、等張、高張または低張）に応じて、約１ｍＭ〜約２００ｍＭ、または約１０ｍＭ〜約６０ｍＭであることができる。例示的なｐＨには、約４．５〜約８．０、または約４．８〜約５．５、または約４〜６、または約５〜５．５、または約５、約５超、約５．５超、約６超、または約６．５超が含まれる。
【００３３】
好適な希釈剤、他の賦形剤、またはキャリア及び他の薬剤には、抗酸化剤、着色剤、香味及び希釈薬剤、乳化剤、懸濁化剤、溶媒、充填剤、増量剤、緩衝剤、ビヒクル、希釈剤及び／または医薬補助剤が含まれるが、これらに限定されない。例えば、好適なビヒクルは、生理学的食塩水、クエン酸緩衝食塩水、または人工脳脊髄液であってよく、非経口投与用の組成物に一般的な他の物質を補充することが可能である。中性緩衝食塩水または血清アルブミンと混合した食塩水は、さらなる例示的なビヒクルである。当業者は、本発明において使用される組成物及び剤形において使用することができる様々な緩衝液を容易に認識するだろう。典型的な緩衝液には、医薬的に許容され得る弱酸、弱塩基、またはそれらの混合物が含まれるが、これらに限定されない。例示的な緩衝液成分には、水溶性物質、例えば、リン酸、酒石酸、乳酸、コハク酸、クエン酸、酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、またはその塩である。例示的な塩には、無機及び有機酸、または塩基、例えば、金属もしくはアミンが、約５０〜２００ｍＭ、または１００〜２００ｍＭ、または約１００ｍＭ、または約１５０ｍＭなどの例示的な濃度で含まれる。
【００３４】
他の賦形剤または安定剤も含まれてよく、例えば、糖（例えば、スクロース、グルコース、トレハロース、フルクトース、キシロース、マンニトース、フコース）、ポリオール（例えば、グリセロール、マンニトール、ソルビトール、グリコール、イノシトール）、アミノ酸もしくはアミノ酸誘導体（例えば、アルギニン、プロリン、ヒスチジン、リジン、グリシン、メチオニン、等）または界面活性剤（例えば、ポリソルベート２０、もしくはポリソルベート８０を含むポリソルベート、またはポロクサマー１８８を含むポロクサマー、ＴＰＧＳ（ｄ−アルファトコフェリルポリエチレングリコール１０００コハク酸塩）も含まれてよい。界面活性剤の例示的な濃度は、約０．００１％〜約１．０％、または約０．００３％〜約０．５％の範囲であってよい。ベンジルアルコール、フェノール、ｍ−クレゾール、クロロブタノールまたは塩化ベンゼトニウムなどの保存剤も、例えば、約０．１％〜約２％、または約０．５％〜約１％の範囲の濃度で含まれてよい。
【００３５】
Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  ２１ｓｔ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（２００５）に記載されているものなどの１つまたは複数の他の医薬的に許容され得るキャリア、賦形剤または安定剤は、それらが製剤の所望の特性に悪影響を与えない限り製剤中に含まれてよい。
【００３６】
製剤中の抗体などの治療用タンパク質の濃度は、医薬製剤の最終使用に依存し得、当業者により容易に決定されることができる。
【００３７】
アンタゴニストである治療用タンパク質は、しばしば、アゴニストであるものよりも高い濃度で投与される。抗体を含む、治療用タンパク質の特に企図される高濃度（ＰＥＧ化などの化学修飾の重量は考慮にいれない）は、少なくとも約７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５  ２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、または５００ｍｇ／ｍｌである、及び／または約２５０、３００、３５０、４００、４５０または５００ｍｇ／ｍｌ未満である。製剤中の、抗体などの治療用タンパク質の例示的な高濃度は、少なくとも約１００ｍｇ／ｍｌ〜約５００ｍｇ／ｍｌの範囲であり得る。他のタンパク質濃度（ＰＥＧ化などの化学修飾の重量は考慮にいれない）も企図され、例えば、少なくとも約１、５、１０、２０、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５または７０ｍｇ／ｍｌである。本発明は、治療用タンパク質の濃度が、１００、１２５、１５０、１７５または２００ｃＰなどの少なくとも６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２５、３０、３５ｃＰまたはより高い粘度をもたらし、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤を含むことが、５％以上の粘度の低下をもたらす製剤及び方法を特に企図する。例えば、約３０ｃＰの粘度を有する溶液は、標準的な２７ゲージの針で注射することが難しい可能性がある。本明細書での治療用タンパク質のｍｇ／ｍｌ濃度、治療用タンパク質の重量（ｍｇ）または治療用タンパク質の分子量（ｋＤ）に対する言及は、いずれの非タンパク質性修飾も除く、治療用タンパク質のタンパク質性部分のそれぞれの重量を意味する。
【００３８】
本発明は、治療用タンパク質を、粘度を低下させる量の、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤と組み合わせることにより、治療用タンパク質の液体医薬製剤の粘度を低下させる及び／または安定性を改善させる方法を提供する。
【００３９】
例示的な実施形態では、治療用タンパク質は、上記のように高タンパク質濃度である。いくつかの実施形態では、粘度の低下は、対照製剤と比較して少なくとも約５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％または８５％である。
【００４０】
別の態様では、本発明は、治療用タンパク質ならびにｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤を含む液体溶液であって、該製剤が対照製剤と比較して低下した粘度を呈する、前記液体溶液を提供する。例示的な実施形態では、治療用タンパク質は、上記のように高タンパク質濃度である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の賦形剤は、粘度低下性（重量：体積）濃度で存在する。これらの賦形剤はいずれも、それらの溶解限度までの濃度で使用できる。そのような溶液は、糖または他のポリオール、例えばスクロースもしくはソルビトール、またはアミノ酸、例えば、アルギニン、プロリン、ヒスチジン、リジン、グリシン、メチオニン等を、さらに安定性を改善する、凝集を減少する、及び／または粘度を有意に増加させることなく製剤を等張性にするために有効な量でさらに含んでよい。
【００４１】
例示的な実施形態では、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤の濃度は、少なくとも約５０ｍＭ〜約３００ｍＭ、または少なくとも約１００ｍＭ〜約２５０ｍＭ、または少なくとも約１４０ｍＭ〜約２００ｍＭである。例示的な実施形態では、賦形剤の濃度は、少なくとも約５０、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、１８０、１８５、１９０、１９５、２００、２１０、２２０、２５０、または３００ｍＭまたはそれより大きい。他の例示的な実施形態には、粘度を有意に増加させることなく製剤を等張性にするのに有効な賦形剤の濃度が含まれる。例示的な濃度には、少なくとも約１８０ｍＭ以上のものが含まれ、さらなる実施形態では、量は少なくとも約２００ｍＭ以上である。
【００４２】
別の態様では、本発明は、治療用タンパク質ならびにｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤を含む凍結乾燥タンパク質製剤であって、推奨量の希釈剤を用いる再構成の際に、該製剤が対照製剤と比較して低下した粘度を呈する、前記凍結乾燥タンパク質製剤を提供する。例示的な実施形態では、治療用タンパク質は、上記のように高タンパク質濃度である。いくつかの実施形態では、賦形剤は、希釈剤を用いる再構成の際に粘度を低下させるのに有効な量（重量：重量濃度）で存在する。そのような製剤は、糖または他のポリオール、例えば、スクロースもしくはソルビトール、または少なくとも１つのアミノ酸、例えば、アルギニン、プロリン、ヒスチジン、リジン、グリシン、メチオニン等を、さらに安定性を改善する、凝集を減少させる、及び／または粘度を有意に増加させることなく製剤を等張性にするのに有効な量でさらに含み得る。
【００４３】
例示的な実施形態では、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤の濃度は、治療用タンパク質１ｍｇあたり少なくとも約１μｇ〜治療用タンパク質１ｍｇあたり最大で約１．０ｍｇである。いくつかの実施形態では、賦形剤の濃度は、治療用タンパク質１ｍｇあたり、少なくとも約１、１０、５０、１００、１５０、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００または５５０μｇである。他の例示的な実施形態では、賦形剤の濃度は、治療用タンパク質１ｍｇあたり最大で約６００、６５０、７００、７５０、８００、８５０、９００、９５０または１０００μｇである。
【００４４】
なおも別の実施形態では、本発明は、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物を賦形剤として本明細書に記載の量または濃度のいずれかで使用することにより、液体製剤中でのタンパク質の自己会合を防ぐ方法を提供する。改善した安定性（例えば、凝集の減少）及び貯蔵寿命を有する製剤も提供する。
【００４５】
本発明は、本発明の液体タンパク質製剤、及びその投与のための説明書を、任意で容器、シリンジ及び／または他の投与デバイスを伴って含むキットも提供する。本発明は、本発明の凍結乾燥タンパク質製剤を任意で容器内で、及びその再構成及び投与のための説明書を、任意で滅菌希釈剤のバイアルを伴って、及び任意でシリンジまたは他の投与デバイスを伴って含む、キットをさらに提供する。例示的な容器には、バイアル、管、ボトル、シングルもしくはマルチチャンバープレフィルドシリンジ、またはカートリッジが含まれる。例示的な投与デバイスには、有針もしくは無針シリンジ、注入ポンプ、ジェット注射器、ペン型デバイス、経皮注射器、または他の無針注射器、または経鼻もしくは経肺送達のためのエアゾールデバイスが含まれる。
【００４６】
別の態様では、賦形剤の粘度低下性濃度についてスクリーニングするための方法であって：（１）第一濃度の、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群より選択される賦形剤ならびに治療用タンパク質、例えば抗体を含む第一溶液の粘度を評価すること、（２）異なる第二濃度の賦形剤及び治療用タンパク質を含む第二溶液の粘度を評価すること、ならびに（３）第一溶液の粘性が低い場合に、第一濃度の賦形剤が第二の濃度の賦形剤より粘度低下性であることを決定するステップを含む、前記方法を提供する。粘度は、例えば、Ａｒｉｅｓ  ＡＲＧ２レオメーターまたはＢｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＲＶ−ＤＶＩＩＩレオメーターを使用して、決定することができる。
【００４７】
賦形剤の凝集減少性または安定化濃度についてスクリーニングするための同様の方法を提供する。
【００４８】
安定性は、多くの方法において評価することができ、それには、ある範囲の温度（熱安定性）及び／または期間（貯蔵寿命）にわたる及び／またはストレスの多い取扱い状況（例えば、物理的な振とう）に曝露された後の立体構造の変化をモニタリングすることを含む。様々な濃度の製剤成分を含有する製剤の安定性は、様々な方法を使用して測定することができる。例えば、タンパク質凝集の量は、混濁の目視観察により、特定の波長で吸光度を測定することにより、サイズ排除クロマトグラフィー（タンパク質の凝集体は、その未変性活性状態でのタンパク質と比較して異なる分画で溶出するだろう）、ＨＰＬＣ、または他のクロマトグラフィー法により測定することができる。立体構造の変化を測定する他の方法を使用することができ、それには、例えば、変性の温度を決定するための示差走査熱量測定（ＤＳＣ）、またはタンパク質のモル楕円率を測定する円偏光二色性（ＣＤ）を使用することが含まれる。蛍光も、組成物を分析するために使用することができる。蛍光は、光または熱の形態でのエネルギーの放出または吸収、及び光の極性特性の変化を包含する。蛍光発光は、タンパク質に固有のものであることができるか、蛍光レポーター分子によるものであることができる。例えば、ＡＮＳは、部分的に折り畳まれていないタンパク質の疎水性ポケットに結合する蛍光プローブである。折り畳まれていないタンパク質の濃度が増加すれば、疎水性ポケットの数が増加し、その後、結合できるＡＮＳの濃度が増加する。ＡＮＳ結合におけるこの増加を、タンパク質試料の蛍光シグナルの検出によりモニターすることができる。安定性を測定するための他の手段を使用することができ、それらは当業者に周知である。
【００４９】
本発明は、本発明の例示的な実施形態を詳述する以下の実施例を参照することにより、より完全に理解されるだろう。しかしながら、それらは、本発明の範囲を限定するものと解釈されるべきではない。本開示全体にわたる引用は全て、参照により明示的に本明細書に組み込まれる。
【実施例】
【００５０】
実施例１
ＩｇＧ２抗体調製物（１４０ｍｇ／ｍｌ）（抗体Ａ）を、１０ｍＭグルタミン酸ナトリウム１％スクロースｐＨ５．２に対して、Ｓｎａｋｅｓｋｉｎ（登録商標）プリーツ付き透析チューブ１０，０００ＭＷＣＯ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、マサチューセッツ州、ウォルサム）を使用して、透析した。１２０ｍｇ／ｍＬの抗体Ａを含む１０ｍＭグルタミン酸ナトリウム１％スクロースｐＨ５．２を、３ｃｃバイアル中に、各１ｍＬの充填量で充填した。バイアルを、Ｖｉｒｔｉｓ凍結乾燥機を使用して凍結乾燥した。バイアルを、４５０ｕＬの様々な溶液（水−対照または２００ｍＭ賦形剤溶液）で再構成した。再構成の後、抗体Ａ濃度を、ＳＯＬＯ−ＶＰＥ測定器を使用して１９０ｍｇ／ｍＬであると決定した。粘度を、Ａｒｉｅｓ  ＡＲＧ２レオメーターを使用して２５℃で測定し、それらは以下の表１に記録されている。
【００５１】
【表１】
2020037559.tif 000003
2020037559.tif 000004
【００５２】
図１は、抗体溶液の粘度に及ぼす様々な賦形剤の効果を示す。データは、被験賦形剤が水対照と比較して低下した粘度を有することを示す。
【００５３】
実施例２
ＩｇＧ１抗体調製物（７０ｍｇ／ｍｌ）（抗体Ｂ）及びＩｇＧ２抗体調製物（７０ｍｇ／ｍｌ）（抗体Ｃ）を、それぞれ、２０ｍＭ酢酸ナトリウムｐＨ４．７及び４．９に対して、１０，０００ＭＷＣＯ透析チューブを使用して透析した。抗体試料を、３０，０００ＭＷＣＯ遠心フィルター及びＡｌｌｅｇｒａ  Ｘ−１２Ｒ遠心機を使用して濃縮した。抗体試料濃度を、Ａｇｉｌｅｎｔ紫外可視分光光度計を使用して決定した。賦形剤を含有する試料を、バルク濃縮液を予め秤量した固形賦形剤でスパイクすることによって調製した。粘性試料を、ポジティブディスプレイスメント式ピペットを使用して移した。粘度は、Ｂｒｏｏｋｆｉｅｌｄ  ＲＶ−ＤＶＩＩＩ＋プログラム可能レオメーターを使用して２５℃で測定し、それらは以下の表２．１及び２．２に記録されている。
【表２】
2020037559.tif 000005
【表３】
2020037559.tif 000006
【００５４】
賦形剤である、ｎ−アセチル−ｌアルギニンについては、抗体Ｂの粘度の低減はおおよそ４５％であり、抗体Ｃの粘度の低減はおおよそ５６％である。
【００５５】
実施例３
ＩｇＧ２抗体調製物（１４０ｍｇ／ｍｌ）（抗体Ｄ）を、１０ｍＭグルタミン酸ナトリウム１％スクロースｐＨ５．２に対して、Ｓｎａｋｅｓｋｉｎ（登録商標）プリーツ付き透析チューブ１０，０００ＭＷＣＯ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、マサチューセッツ州、ウォルサム）を使用して透析した。１００ｍｇ／ｍＬの抗体Ｄを含む１０ｍＭグルタミン酸ナトリウム１％スクロースｐＨ５．２を、３ｃｃバイアル中に、各１ｍＬの充填量で充填した。バイアルを、Ｖｉｒｔｉｓ凍結乾燥機を使用して凍結乾燥した。バイアルを、４５０ｕＬの水（対照−賦形剤無し）または１０ｍＭグルタミン酸塩２００ｍＭ  ｎ−アセチル−ＬアルギニンｐＨ５．２のいずれかで再構成した。抗体Ｄ濃度を、ＳＯＬＯ−ＶＰＥ測定器を使用して決定した。粘度は、Ａｒｉｅｓ  ＡＲＧ２レオメーターを使用して２５℃で測定し、それらは以下の表３．０に記録されている。
【表４】
2020037559.tif 000007
【００５６】
賦形剤である、ｎ−アセチル−ｌアルギニンについては、抗体Ｄの粘度の低減はおおよそ４０％である。
【００５７】
実施例４
ＩｇＧ２抗体調製物（１４０ｍｇ／ｍｌ）（抗体Ｅ）を、６ダイアフィルトレーション容量の緩衝液Ａ（１０ｍＭグルタミン酸塩２６０ｍＭ  ｎ−アセチル−ｌアルギニンｐＨ４．６）または緩衝液Ｂ（１０ｍＭグルタミン酸ナトリウムｐＨ４．６）を用いて限外ろ過及びダイアフィルトレーションを使用して、２００ｍｇ／ｍｌまで濃縮した。ＵＦＤＦ試料の最終ｐＨは、５．２であると決定された。抗体Ｅ濃度を、ＳＯＬＯ−ＶＰＥ測定器を使用して決定した。粘度は、Ａｒｉｅｓ  ＡＲＧ２レオメーターを使用して２０℃で測定し、それらは以下の表４．０に記録した。
【表５】
2020037559.tif 000008
【００５８】
賦形剤である、ｎ−アセチル−ｌアルギニンについては、抗体Ｅの粘度の低減はおおよそ５４％である。
【００５９】
実施例５
ＩｇＧ２抗体調製物（１４０ｍｇ／ｍｌ）（抗体Ａ）を、１０ｍＭグルタミン酸ナトリウム１％スクロースｐＨ５．２に対して、Ｓｎａｋｅｓｋｉｎ（登録商標）プリーツ付き透析チューブ１０，０００ＭＷＣＯ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、マサチューセッツ州、ウォルサム）を使用して透析した。１２０ｍｇ／ｍＬの抗体Ａを含む１０ｍＭグルタミン酸ナトリウム１％スクロースｐＨ５．２を、３ｃｃバイアル中に、各１ｍＬの充填量で充填した。バイアルを、Ｖｉｒｔｉｓ凍結乾燥機を使用して凍結乾燥した。バイアルを、４５０ｕＬの様々な溶液（水−対照または２００ｍＭ賦形剤溶液）を用いて再構成した（以下の表５を参照されたい）。再構成の後、抗体Ａ濃度を、ＳＯＬＯ−ＶＰＥ測定器を使用して１９０ｍｇ／ｍＬであると決定した。粘度を、Ａｒｉｅｓ  ＡＲＧ２レオメーターを使用して２５℃で測定し、それらは以下の表５に記録されている。
【００６０】
【表６】
2020037559.tif 000009
【００６１】
図２は、抗体溶液の粘度に及ぼす様々な賦形剤の効果を示す。データは、被験賦形剤が対照、ならびに賦形剤である、ｎ−アセチル−ｌアルギニン及びｎ−アセチル−ｌヒスチジンと比較して低下した粘度を有すること、賦形剤ヒスチジン単独と比較して低下した粘度を有することを示す。
【図１】
2020037559.tif 000010
【図２】
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【手続補正書】
【提出日】令和1年11月19日(2019.11.19)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
抗体を少なくとも７０ｍｇ／ｍｌの濃度で含む液体医薬製剤の粘度を低下させるための方法であって、粘度低下性濃度の、ｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群から選択される賦形剤と、前記抗体とを組み合わせるステップを含み、前記組み合わせるステップの後の前記抗体の濃度が、少なくとも７０ｍｇ／ｍｌである、方法。
【請求項２】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルアルギニンである、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルリジンである、請求項１に記載の方法。
【請求項４】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルヒスチジンである、請求項１に記載の方法。
【請求項５】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルプロリンである、請求項１に記載の方法。
【請求項６】
前記製剤の粘度が少なくとも２５％低下する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項７】
前記製剤の粘度が少なくとも５０％低下する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項８】
前記製剤の粘度が少なくとも８０％低下する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項９】
少なくとも７０ｍｇ／ｍＬの濃度の抗体、ならびにｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群から選択される賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項１０】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルアルギニンである、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１１】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルリジンである、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１２】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルヒスチジンである、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１３】
前記賦形剤が、ｎ−アセチルプロリンである、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１４】
前記賦形剤の濃度が、約２００ｍＭ未満である、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項１５】
３０ｃＰ未満の粘度を有する、請求項９〜１４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１６】
約４．０〜約８．０のｐＨを有する、請求項９〜１５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項１７】
約４．６〜約５．４のｐＨを有する、請求項１６に記載の医薬組成物。
【請求項１８】
凍結乾燥粉末を調製する方法であって、請求項９〜１７のいずれか一項に記載の医薬組成物を凍結乾燥するステップを含む、方法。
【請求項１９】
抗体、ならびにｎ−アセチルアルギニン、ｎ−アセチルリジン、ｎ−アセチルヒスチジン、ｎ−アセチルプロリン及びそれらの混合物からなる群から選択される賦形剤を含む凍結乾燥粉末であって、希釈剤を用いる再構成の際に粘度を低下させるのに有効な重量：重量濃度で前記賦形剤が存在する、前記凍結乾燥粉末。
【請求項２０】
前記賦形剤が、抗体１ｍｇあたり約１００μｇから抗体１ｍｇあたり約１ｍｇの間の濃度で存在する、請求項１９に記載の凍結乾燥粉末。
【請求項２１】
前記賦形剤が、抗体１ｍｇあたり約２００μｇ〜約５００μｇから抗体１ｍｇあたり１ｍｇの間の濃度で存在する、請求項１９に記載の凍結乾燥粉末。
【請求項２２】
滅菌水性希釈液を添加するステップを含む、請求項１９〜２１のいずれか一項に記載の凍結乾燥粉末を再構成するための方法。
【請求項２３】
抗体が、ヒト抗体、ヒト化抗体、又はキメラモノクローナル抗体である、請求項１〜８、１８及び２２のいずれか一項に記載の方法、請求項９〜１７のいずれか一項に記載の医薬組成物、又は請求項１９〜２１のいずれか一項に記載の凍結乾燥粉末。
【外国語明細書】
2020037559000001.pdf