(57)【要約】      （修正有）【課題】本発明は、ヒトＣＤ１３７に結合し、アゴニスト活性を示し、固形腫瘍および血液腫瘍を単独で、ならびに化学療法および電離放射線と組み合わせて治療するのに有用であり得る、抗体に関する。【解決手段】ある特定のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＥＲ３、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３を含む抗ヒトＣＤ１３７抗体、抗体のアミノ酸配列を有するポリヌクレオチドを含むＤＮＡ分子、ＤＮＡ分子を含む哺乳動物細胞、該細胞を培養し抗体を産生する方法を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体。
【請求項２】
配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項３】
配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域および配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項４】
配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項５】
配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１に記載の抗体。
【請求項６】
配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む抗体を発現可能な哺乳動物細胞。
【請求項７】
配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列または配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む抗体を発現可能な哺乳動物細胞。
【請求項８】
抗体を産生するための方法であって、前記抗体を発現可能な哺乳動物細胞を培養し、次いで前記抗体を回収することを含み、前記抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む、方法。
【請求項９】
抗体を産生するための方法であって、前記抗体を発現可能な哺乳動物細胞を培養し、次いで前記抗体を回収することを含み、前記抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖および配列番号１１のアミノ酸配列または配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、方法。
【請求項１０】
請求項８〜９のいずれか１項に記載の方法により産生される、抗体。
【請求項１１】
配列番号１４の配列、および配列番号１５、配列番号１６または配列番号１７のうちの１つを有するポリヌクレオチドを含む、ＤＮＡ分子。
【請求項１２】
配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、または配列番号１７の配列を有するポリヌクレオチドを含む、ＤＮＡ分子。
【請求項１３】
請求項１１または請求項１２に記載のＤＮＡ分子を含む、哺乳動物細胞。
【請求項１４】
請求項１〜５および１０のいずれか１項に記載の抗体、および許容される担体、希釈剤、または賦形剤を含む、医薬組成物。
【請求項１５】
がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、請求項１〜５および１０のいずれか１項に記載の抗体の有効量を投与することを含む、方法。
【請求項１６】
前記がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１７】
前記がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、または腎明細胞癌である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１８】
前記がんが、膀胱癌、頭頸部扁平上皮癌、または腎細胞癌である、請求項１５に記載の方法。
【請求項１９】
前記抗体が電離放射線と組み合わせて投与される、請求項１５〜１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２０】
前記抗体が、１つ以上の化学療法薬と組み合わせて投与される、請求項１５〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
療法における使用のための、請求項１〜５および１０のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項２２】
がんの治療における使用のための、請求項１〜５および１０のいずれか１項に記載の抗体。
【請求項２３】
前記がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、請求項２２に記載の使用のための抗体。
【請求項２４】
前記がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、請求項２２に記載の使用のための抗体。
【請求項２５】
前記がんが、膀胱癌、頭頸部扁平上皮癌、または腎細胞癌である、請求項２２に記載の使用のための抗体。
【請求項２６】
前記抗体が電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、請求項２２〜２５のいずれか１項に記載の使用のための抗体。
【請求項２７】
前記抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、請求項２２〜２６のいずれか１項に記載の使用のための抗体。
【請求項２８】
がんの治療のための医薬の製造のための、請求項１〜５および１０のいずれか１項に記載の抗体の使用。
【請求項２９】
前記がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、請求項２８に記載の使用。
【請求項３０】
前記がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、請求項２８に記載の使用。
【請求項３１】
前記がんが、膀胱癌、頭頸部扁平上皮癌、または腎細胞癌である、請求項２８に記載の使用。
【請求項３２】
前記抗体が電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、請求項２８〜３１のいずれか１項に記載の使用。
【請求項３３】
前記抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、請求項２８〜３２のいずれか１項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、医薬の分野に属する。特に、本発明は、ヒトＣＤ１３７に対するアゴニスト抗体、そのようなアゴニスト抗ヒトＣＤ１３７抗体を含む組成物、ならびに単独で、または化学療法および他のがん治療薬と組み合わせて、固形腫瘍および血液腫瘍の治療のためにそのようなアゴニスト抗ヒトＣＤ１３７抗体を使用する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
現在、抗腫瘍免疫応答を高めることががん治療の効果的な手段となり得ることが知られている。これに関して、４−１ＢＢとしても知られるＣＤ１３７は、ＴＮＦ受容体ファミリーに属し、Ｔ細胞の増殖とエフェクター機能を駆動し、免疫記憶を促進し、活性化誘導細胞死を阻害することによってなどによる、Ｔ細胞免疫応答の活性化に寄与する。ＣＤ１３７を標的とするアゴニスト抗体は、マウスの腫瘍モデルで単独療法として期待されている（Ｍｅｌｅｒｏ．Ｉ．ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．３（６）：６８２−６８５（１９９７））が、ヒトＣＤ１３７を標的とするアゴニスト抗体は、ヒト患者における単独療法または組み合わせ療法として十分な反応をいまだ実証していない。この点で、ウトミルマブ（完全ヒトＣＤ１３７アゴニストＩｇＧ２  ｍＡｂ）（Ｆｉｓｈｅｒ，Ｔ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．（２０１２）  ６１：１７２１−１７３３）も、ウレルマブ（ヒト化ＣＤ１３７アゴニストＩｇＧ４  ｍＡｂ）（Ｓｅｇａｌ，Ｎ．Ｈ．Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．（２０１７）２３（８）：１９２９−１９３６）も、単独療法または組み合わせ療法としてさえも、使用について規制当局の承認を受けていない。実際に、ヒトＣＤ１３７を標的とするアゴニスト抗体はいずれも、ヒトでの治療用途について承認されていない。
【０００３】
したがって、ヒトＣＤ１３７受容体を刺激し、強力な抗がん免疫応答を促進するが、許容できる毒性プロファイルを備えたさらなる完全ヒト抗体が必要である。また、がん治療のための他の治療薬と組み合わせることができる代替抗ヒトアゴニストＣＤ１３７抗体の必要性が残存する。特に、がんの単独療法および／または組み合わせ療法として十分な効力を示す抗ヒトＣＤ１３７抗体の必要性も残存する。
【０００４】
理論に限定されるものではないが、がんの単独療法および／または組み合わせ剤としてＣＤ１３７に対する現在のアゴニスト抗体の使用は、このような当該抗体のアゴニストの強度と、より高い、可能性のある有効な用量での使用から生じる免疫関連有害事象などの要因によって妨げられていると考えられている。特に、現在の抗体は、強力すぎて有害事象を引き起こしたり、準最適な効力を示したりする。
【発明の概要】
【０００５】
本明細書に記載の抗ヒトＣＤ１３７アゴニスト抗体は、ヒトＣＤ１３７およびカニクイザルＣＤ１３７に結合し、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでＴ細胞活性化を刺激し、ヒトＣＤ１３７細胞表面発現を促進し、ＮＦ−カッパＢ活性を増強し、単独療法としての非小細胞肺癌のマウス腫瘍モデルにおける腫瘍増殖を阻害し、ｉｎ  ｖｉｔｒｏでのＴ調節細胞媒介抑制を阻害し、免疫遺伝子シグネチャーを活性化し、腫瘍内ＣＤ３＋Ｔ細胞の頻度を増加し、ヒトＣＤ１３７への結合についてヒトＣＤ１３７−リガンドと競合し、ヒトＣＤ１３７の特有のアミノ酸残基に結合する、完全ヒトＦｃγ受容体媒介エフェクターヌル抗体である。
【発明を実施するための形態】
【０００６】
本開示は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供する。
【０００７】
本開示は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含む抗体を提供する。本開示は、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含む抗体を提供する。
【０００８】
本開示は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む抗体を提供する。本開示は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む抗体を提供する。
【０００９】
本開示は、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む抗体を発現可能な哺乳動物細胞を提供する。
【００１０】
本開示は、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列または配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む抗体を発現可能な哺乳動物細胞を提供する。
【００１１】
本開示は、抗体を産生するための方法であって、抗体を発現可能な哺乳動物細胞を培養し、次いで前記抗体を回収することを含み、当該抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む、方法を提供する。
【００１２】
本開示は、抗体を産生するための方法であって、抗体を発現可能な哺乳動物細胞を培養し、次いで前記抗体を回収することを含み、当該抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列または配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖とを含む、方法を提供する。
【００１３】
本開示は、抗体を産生するための方法であって、抗体を発現可能な哺乳動物細胞を培養し、次いで前記抗体を回収することを含み、当該抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む、方法によって産生される抗体を提供する。本開示は、抗体を産生するための方法であって、抗体を発現可能な哺乳動物細胞を培養し、次いで前記抗体を回収することを含み、当該抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列または配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖とを含む、方法によって産生される抗体を提供する。
【００１４】
本開示は、配列番号１４の配列と、配列番号１５、配列番号１６、または配列番号１７のうちの１つと、を有するポリヌクレオチドを含むＤＮＡ分子を提供する。本開示は、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、または配列番号１７の配列を有するポリヌクレオチドを含むＤＮＡ分子を提供する。本開示は、配列番号１４の配列と、配列番号１５、配列番号１６、または配列番号１７のうちの１つと、を有するポリヌクレオチドを含むＤＮＡ分子を含む哺乳動物細胞を提供する。本開示は、配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、または配列番号１７の配列を有するポリヌクレオチドを含むＤＮＡ分子を含む哺乳動物細胞を提供する。
【００１５】
本開示は、本明細書に開示される抗体と、許容される担体、希釈剤、または賦形剤と、を含む医薬組成物を提供する。本開示は、抗体と、許容される担体、希釈剤、または賦形剤と、を含む医薬組成物であって、当該抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む、医薬組成物を提供する。本開示は、抗体と、許容される担体、希釈剤、または賦形剤と、を含む医薬組成物であって、当該抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含む医薬組成物を提供する。本開示は、抗体と、許容される担体、希釈剤、または賦形剤と、を含む医薬組成物であって、当該抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含む医薬組成物を提供する。本開示は、抗体と、許容される担体、希釈剤、または賦形剤と、を含む医薬組成物であって、当該抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む医薬組成物を提供する。本開示は、抗体と、許容される担体、希釈剤、または賦形剤と、を含む医薬組成物であって、当該抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む医薬組成物を提供する。
【００１６】
本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の有効量を投与することを含む、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含む抗体の有効量を投与することを含む、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含む抗体の有効量を投与することを含む、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む抗体の有効量を投与することを含む、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む抗体の有効量を投与することを含む、方法を提供する。
【００１７】
本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の有効量を投与することを含み、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、方法を提供する。
【００１８】
本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の有効量を投与することを含み、当該がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、方法を提供する。
【００１９】
本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、方法を提供する。
【００２０】
本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の有効量を投与することを含み、当該抗体が、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含む抗体の有効量を投与することを含み、当該抗体が、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含む抗体の有効量を投与することを含み、当該抗体が、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む抗体の有効量を投与することを含み、当該抗体が、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む抗体の有効量を投与することを含み、当該抗体が、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、方法を提供する。
【００２１】
本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の有効量を投与することを含み、当該抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含む抗体の有効量を投与することを含み、当該抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含む抗体の有効量を投与することを含み、当該抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む抗体の有効量を投与することを含み、当該抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、方法を提供する。本開示は、がんを治療する方法であって、がんの治療を必要としている患者に、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む抗体の有効量を投与することを含み、当該抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、方法を提供する。
【００２２】
本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは膀胱癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは乳癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは胆道癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは結腸癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは子宮内膜癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは食道癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは胃癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは頭頸部癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは非小細胞肺癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは前立腺癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは直腸癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは甲状腺癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは頭頸部扁平上皮癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは腎細胞癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは胆管細胞癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは肺腺癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは肺扁平上皮癌である。本開示は、がんの治療に使用するための本明細書に開示される抗体を提供し、当該がんは腎明細胞癌である。
【００２３】
本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは膀胱癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは乳癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは胆道癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは結腸癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは子宮内膜癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは食道癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは胃癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは頭頸部癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは非小細胞肺癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは前立腺癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは直腸癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは甲状腺癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは頭頸部扁平上皮癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは腎細胞癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは胆管細胞癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは肺腺癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは肺扁平上皮癌である。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、本明細書に開示される抗体の使用を提供し、当該がんは腎明細胞癌である。
【００２４】
本開示は、治療に使用するための、本明細書に開示される抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体を提供する。本開示は、治療に使用するための、本明細書に開示される抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体であって、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む、抗体を提供する。本開示は、治療に使用するための、本明細書に開示される抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体であって、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む、抗体を提供する。本開示は、治療に使用するための、本明細書に開示される抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体であって、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む、抗体を提供する。
【００２５】
本開示は、がんの治療に使用するための、抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体であって、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含む抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含む抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む抗体を提供する。
【００２６】
本開示は、がんの治療に使用するための、抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体であって、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、抗体を提供する。
【００２７】
本開示は、がんの治療に使用するための、抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体であって、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、当該がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該がんが、当該がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、抗体を提供する。
【００２８】
本開示は、がんの治療に使用するための、抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体であって、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、当該抗体が、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該抗体が、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該抗体が、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該抗体が、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該抗体が、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、抗体を提供する。
【００２９】
本開示は、がんの治療に使用するための、抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体であって、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、当該抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、抗体を提供する。本開示は、がんの治療に使用するための抗体であって、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、抗体を提供する。
【００３０】
本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含む、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含む、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含む、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む、使用を提供する。
【００３１】
本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、使用を提供する。
【００３２】
本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、当該がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、抗体を使用する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該がんが、胆管細胞癌、頭頸部扁平上皮癌、肺腺癌、肺扁平上皮癌、腎明細胞癌、または頭頸部扁平上皮癌である、使用を提供する。
【００３３】
本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、当該抗体が、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該抗体が、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該抗体が、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該抗体が、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該抗体が、電離放射線と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、使用を提供する。
【００３４】
本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための、抗ヒトＣＤ１３７（配列番号１）抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号２のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ１、配列番号３のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ２、配列番号４のアミノ酸配列を有するＨＣＤＲ３、配列番号５のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ１、配列番号６のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ２、および配列番号７のアミノ酸配列を有するＬＣＤＲ３を含み、当該抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号９のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域と、配列番号１２のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域と、を含み、当該抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、使用を提供する。本開示は、がんの治療のための医薬の製造のための抗体の使用であって、当該抗体が、配列番号１０のアミノ酸配列を有する重鎖と、配列番号１３のアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含み、当該抗体が、１つ以上の化学療法薬と同時に、別々に、または逐次的に組み合わせて投与される、使用を提供する。
【００３５】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体、または当該抗体を含む医薬組成物であって、当該抗体が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）のうちの少なくとも１つでヒトＣＤ１３７と接触し、必要に応じて当該抗体が、当該残基のうちの少なくとも２個、好ましくは当該残基のうちの少なくとも３個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも４個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも５個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも６個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも７個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも８個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも９個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１０個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１１個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１２個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１３個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１４個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１５個、またはより好ましくは当該残基の全てと接触する、抗体または医薬組成物を提供する。本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体、または当該抗体を含む医薬組成物であって、当該抗体が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）のうちの少なくとも１つでヒトＣＤ１３７と接触し、必要に応じて当該抗体が、当該残基のうちの少なくとも２個、好ましくは当該残基のうちの少なくとも３個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも４個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも５個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも６個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも７個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも８個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも９個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１０個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１１個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１２個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１３個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１４個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１５個、またはより好ましくは当該残基の全てと接触し、接触が、Ｘ線結晶学によって決定され、接触における残基が抗体の６オングストローム以下である、抗体または医薬組成物を提供する。
【００３６】
本開示は、がんの治療のため、またはがんの治療のための医薬の製造のための、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体の使用であって、当該抗体が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）のうちの少なくとも１つでヒトＣＤ１３７と接触し、必要に応じて当該抗体が、当該残基のうちの少なくとも２個、好ましくは当該残基のうちの少なくとも３個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも４個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも５個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも６個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも７個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも８個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも９個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１０個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１１個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１２個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１３個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１４個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１５個、またはより好ましくは当該残基の全てと接触する、使用を提供する。本開示は、がんの治療のため、またはがんの治療のための医薬の製造のための、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体の使用であって、当該抗体が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）のうちの少なくとも１つでヒトＣＤ１３７と接触し、必要に応じて当該抗体が、当該残基のうちの少なくとも２個、好ましくは当該残基のうちの少なくとも３個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも４個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも５個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも６個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも７個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも８個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも９個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１０個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１１個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１２個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１３個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１４個、より好ましくは当該残基のうちの少なくとも１５個、またはより好ましくは当該残基の全てと接触し、接触が、Ｘ線結晶学によって決定され、接触における残基が抗体の６オングストローム以下である、使用を提供する。
【００３７】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体、または当該抗体を含む医薬組成物であって、当該抗体が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触する、抗体または医薬組成物を提供する。本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体、または当該抗体を含む医薬組成物であって、当該抗体が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、接触が、Ｘ線結晶学によって決定され、接触における残基が抗体の６オングストローム以下である、抗体または医薬組成物を提供する。
【００３８】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体、または当該抗体を含む医薬組成物であって、当該抗体が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、抗体または医薬組成物を提供する。本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体、または当該抗体を含む医薬組成物であって、当該抗体が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、接触が、Ｘ線結晶学によって決定され、接触における残基が抗体の６オングストローム以下であり、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、抗体または医薬組成物を提供する。
【００３９】
本開示は、がんの治療、またはがんの治療のための薬剤の製造における使用のための、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体であって、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触する、抗体を提供する。本開示は、がんの治療、またはがんの治療のための薬剤の製造における使用のための、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体であって、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、接触が、Ｘ線結晶学によって決定され、接触における残基が抗体の６オングストローム以下である、抗体を提供する。
【００４０】
本開示は、がんの治療における使用のためのヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体、またはがんの治療のための医薬の製造のための、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体の使用であって、当該抗体が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、抗体または使用を提供する。本開示は、がんの治療における使用のためのヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体、またはがんの治療のための医薬の製造のための、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体の使用であって、当該抗体が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、接触が、Ｘ線結晶学によって決定され、接触における残基が抗体の６オングストローム以下であり、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、抗体または使用を提供する。
【００４１】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体または当該抗体を含む医薬組成物であって、当該抗体が、ヒトＦｃγＲＩ、ヒトＦｃγＲＩＩａ、ヒトＦｃγＲＩＩｂ、ヒトＦｃγＲＩＩＩａ（Ｆ）、ヒトＦｃγＲＩＩＩａ（Ｖ）、またはヒトＣ１ｑに結合しない、抗体または医薬組成物を提供する。本開示は、がんの治療、またはがんの治療のための薬剤の製造における使用のための、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体であって、ヒトＦｃγＲＩ、ヒトＦｃγＲＩＩａ、ヒトＦｃγＲＩＩｂ、ヒトＦｃγＲＩＩＩａ（Ｆ）、ヒトＦｃγＲＩＩＩａ（Ｖ）、またはヒトＣ１ｑに結合しない、抗体を提供する。
【００４２】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体、または当該抗体を含む医薬組成物であって、当該抗体が、ヒトＦｃγＲＩ、ヒトＦｃγＲＩＩａ、ヒトＦｃγＲＩＩｂ、ヒトＦｃγＲＩＩＩａ（Ｆ）、ヒトＦｃγＲＩＩＩａ（Ｖ）、またはヒトＣ１ｑに結合せず、がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、抗体または医薬組成物を提供する。本開示は、がんの治療、またはがんの治療のための薬剤の製造における使用のための、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）を刺激する抗体であって、ヒトＦｃγＲＩ、ヒトＦｃγＲＩＩａ、ヒトＦｃγＲＩＩｂ、ヒトＦｃγＲＩＩＩａ（Ｆ）、ヒトＦｃγＲＩＩＩａ（Ｖ）、またはヒトＣ１ｑに結合せず、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、抗体を提供する。
【００４３】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、当該重鎖が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）のうちの少なくとも１つでヒトＣＤ１３７と接触し、当該軽鎖が、以下のアミノ酸残基、９６〜９８（両端を含む）、１００、および１１４〜１１６（両端を含む）のうちの少なくとも１つでヒトＣＤ１３７と接触する、抗体を提供する。
【００４４】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、当該重鎖が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）のうちの少なくとも１つでヒトＣＤ１３７と接触し、当該軽鎖が、以下のアミノ酸残基、９６〜９８（両端を含む）、１００、および１１４〜１１６（両端を含む）のうちの少なくとも１つでヒトＣＤ１３７と接触し、Ｘ線結晶学によって決定されるとき、接触における残基が抗体の６オングストローム以下である、抗体を提供する。
【００４５】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、当該重鎖が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、当該軽鎖が、以下のアミノ酸残基、９６〜９８（両端を含む）、１００、および１１４〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触する、抗体を提供する。
【００４６】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、当該重鎖が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、当該軽鎖が、以下のアミノ酸残基、９６〜９８（両端を含む）、１００、および１１４〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、Ｘ線結晶学によって決定されるとき、接触における残基が抗体の６オングストローム以下である、抗体を提供する。
【００４７】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、当該重鎖が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、必要に応じて、当該軽鎖が、以下のアミノ酸残基、９６〜９８（両端を含む）、１００、および１１４〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触する、抗体を提供する。
【００４８】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、当該重鎖が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、必要に応じて、当該軽鎖が、以下のアミノ酸残基、９６〜９８（両端を含む）、１００、および１１４〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、Ｘ線結晶学によって決定されるとき、接触における残基が抗体の６オングストローム以下である、抗体を提供する。
【００４９】
本開示は、がんの治療における使用のためのヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、当該重鎖が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、必要に応じて、当該軽鎖が、以下のアミノ酸残基、９６〜９８（両端を含む）、１００、および１１４〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、Ｘ線結晶学によって決定されるとき、接触における残基が抗体の６オングストローム以下である、抗体を提供する。
【００５０】
本開示は、がんの治療のための薬剤の製造における、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体の使用であって、当該抗体が重鎖および軽鎖を含み、当該重鎖が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、必要に応じて、当該軽鎖が、以下のアミノ酸残基、９６〜９８（両端を含む）、１００、および１１４〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、Ｘ線結晶学によって決定されるとき、接触における残基が抗体の６オングストローム以下である、使用を提供する。
【００５１】
本開示は、がんの治療における使用のためのヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体であって、重鎖および軽鎖を含み、当該重鎖が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、必要に応じて、当該軽鎖が、以下のアミノ酸残基、９６〜９８（両端を含む）、１００、および１１４〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、Ｘ線結晶学によって決定されるとき、接触における残基が抗体の６オングストローム以下であり、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、抗体を提供する。
【００５２】
本開示は、がんの治療のための薬剤の製造のための、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体の使用であって、当該抗体が重鎖および軽鎖を含み、当該重鎖が、以下のアミノ酸残基、５５、５９、６３、６６、７２、９３〜１０３（両端を含む）、および１１２〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、必要に応じて、当該軽鎖が、以下のアミノ酸残基、９６〜９８（両端を含む）、１００、および１１４〜１１６（両端を含む）でヒトＣＤ１３７と接触し、Ｘ線結晶学によって決定されるとき、接触における残基が抗体の６オングストローム以下であり、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、使用を提供する。
【００５３】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体であって、以下のアミノ酸残基、９７および１１５のうちの少なくとも１つでヒトＣＤ１３７に結合する、抗体を提供する。
【００５４】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体であって、アミノ酸残基、９７、１１４、および１１５のうちの少なくとも２つでヒトＣＤ１３７に結合する、抗体を提供する。
【００５５】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体であって、以下のアミノ酸残基、９７、１１４、および１１５でヒトＣＤ１３７に結合する、抗体を提供する。
【００５６】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体であって、以下のアミノ酸残基、９７および１１５のうちの少なくとも１つでヒトＣＤ１３７に結合し、以下のアミノ酸残基、９７、１１４、および１１５のうちの１つ以上に変異を有する変異型ヒトＣＤ１３７タンパク質を使用して結合が判定される、抗体を提供する。
【００５７】
本開示は、ヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体であって、以下のアミノ酸残基、９７、１１４、および１１５のうちの少なくとも２つでヒトＣＤ１３７に結合し、以下のアミノ酸残基、９７、１１４、および１１５のうちの１つ以上に変異を有する変異型ヒトＣＤ１３７タンパク質を使用して結合が判定される、抗体を提供する。
【００５８】
本開示は、がんの治療における使用のためのヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体であって、以下のアミノ酸残基、９７、１１４、および１１５でヒトＣＤ１３７に結合し、以下のアミノ酸残基、９７、１１４、および１１５のうちの１つ以上に変異を有する変異型ヒトＣＤ１３７タンパク質を使用して結合が判定される、抗体を提供する。
【００５９】
本開示は、がんの治療のための医薬の製造のためのヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体の使用であって、当該抗体が、以下のアミノ酸残基、９７、１１４、および１１５でヒトＣＤ１３７に結合し、以下のアミノ酸残基、９７、１１４、および１１５のうちの１つ以上に変異を有する変異型ヒトＣＤ１３７タンパク質を使用して結合が判定される、使用を提供する。
【００６０】
本開示は、がんの治療における使用のためのヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体であって、以下のアミノ酸残基、９７、１１４、および１１５でヒトＣＤ１３７に結合し、以下のアミノ酸残基、９７、１１４、および１１５のうちの１つ以上に変異を有する変異型ヒトＣＤ１３７タンパク質を使用して結合が判定され、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、抗体を提供する。
【００６１】
本開示は、がんの治療のための医薬の製造のためのヒトＣＤ１３７（配列番号１）のアゴニストである抗体の使用であって、当該抗体が、以下のアミノ酸残基、９７、１１４、および１１５でヒトＣＤ１３７に結合し、以下のアミノ酸残基、９７、１１４、および１１５のうちの１つ以上に変異を有する変異型ヒトＣＤ１３７タンパク質を使用して結合が判定され、当該がんが、膀胱癌、乳癌、胆道癌、結腸癌、子宮内膜癌、食道癌、胃癌、頭頸部癌、非小細胞肺癌、前立腺癌、直腸癌、または甲状腺癌である、使用を提供する。
【００６２】
本開示は、以下の特徴、（ａ）抗体は、ヒトＣＤ１３７への結合についてヒトＣＤ１３７−リガンドと競合する、（ｂ）抗体は、ヒトＦｃγＲＩ、ヒトＦｃγＲＩＩａ、ヒトＦｃγＲＩＩｂ、ヒトＦｃγＲＩＩＩａ（Ｆ）、ヒトＦｃγＲＩＩＩａ（Ｖ）、またはヒトＣ１ｑに結合しない、（ｃ）抗体はカニクイザルＣＤ１３７に結合する、（ｄ）抗体は、単独療法としてヒト非小細胞肺腫瘍の増殖を阻害する、（ｅ）抗体は腫瘍内ＣＤ３＋Ｔ細胞の頻度を増加させる、のうちの２つ以上を含む完全ヒトＣＤ１３７アゴニスト抗体を提供する。
【００６３】
有用な化学療法薬の非限定的な例には、５−フルオロウラシル、ヒドロキシウレア、ゲムシタビン、メトトレキサート、ドキソルビシン、エトポシド、カルボプラチン、シスプラチン、シクロホスファミド、メルファラン、ダカルバジン、タキソール、カンプトテシン、ＦＯＬＦＩＲＩ、ＦＯＬＦＯＸ、ドセタキセル、ダウノルビシン、パクリタキセル、オキサリプラチン、およびそれらの組み合わせが含まれる。
【００６４】
本明細書で使用されるとき、「抗体」という用語は、重鎖と軽鎖とがジスルフィド結合によって相互接続されるように、２つの重鎖（ＨＣ）と２つの軽鎖（ＬＣ）とを有するポリペプチド複合体を指し、ここで、抗体はＩｇＧサブクラス抗体である。
【００６５】
本発明の抗体は、操作された、天然に存在しないポリペプチド複合体である。本発明のＤＮＡ分子は、本発明の抗体中のポリペプチドのうちの少なくとも１つのアミノ酸配列を有するポリペプチドをコードする天然に存在しないポリヌクレオチド配列を含む、ＤＮＡ分子である。
【００６６】
本発明の抗体は、ＩｇＧタイプ抗体であり、鎖内ジスルフィド結合および鎖間ジスルフィド結合を介して架橋される「重」鎖および「軽」鎖を有する。各重鎖は、Ｎ末端ＨＣＶＲおよび重鎖定常領域（「ＨＣＣＲ」）からなる。各軽鎖は、ＬＣＶＲおよび軽鎖定常領域（「ＬＣＣＲ」）からなる。ある特定の生物系で発現されるとき、天然のヒトＦｃ配列を有する抗体はＦｃ領域においてグリコシル化される。典型的には、グリコシル化は、高度に保存されたＮ−グリコシル化部位の抗体のＦｃ領域に生じる。Ｎ−グリカンは、典型的には、アスパラギンに結合する。抗体は、他の位置でもグリコシル化され得る。
【００６７】
必要に応じて、本明細書に記載の抗ヒトＣＤ１３７抗体は、ヒトＩｇＧ１に由来するＦｃ部分を含む。ＩｇＧ１は、Ｆｃガンマ受容体ファミリー（ＦｃγＲ）のタンパク質、およびＣ１ｑに結合することが周知である。これらの受容体との相互作用は、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）および補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を誘導し得る。したがって、必要に応じて、本明細書に記載の抗ヒトＣＤ１３７抗体は、Ｆｃエフェクター機能を欠失する完全ヒトモノクローナル抗体（ＩｇＧ１、Ｆｃ−ヌル（Ｆｃ−ｎｕｌｌ））である。Ｆｃ−ヌルＩｇＧ１抗体を達成するために、残基の選択的突然変異誘発がそのＩｇＧ１  Ｆｃ領域のＣＨ２領域内で必要である。アミノ酸置換Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ｅ、およびＧ２３７ＡをＩｇＧ１  Ｆｃに導入してＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、およびＦｃγＲＩＩＩへの結合を減少させ、置換Ａ３３０ＳおよびＰ３３１Ｓを導入してＣ１ｑ媒介性補体固定を減少させる。ヒトに投与したときの免疫応答の潜在的な誘導を減少するために、ある特定のアミノ酸は、抗体生殖細胞系配列と適合させるために復帰突然変異を必要とし得る。
【００６８】
ＨＣＶＲ領域およびＬＣＶＲ領域は、フレームワーク領域（「ＦＲ」）と呼ばれるより保存されている領域とともに点在する、相補性決定領域（「ＣＤＲ」）と呼ばれる超可変領域にさらに細分することができる。各ＬＣＶＲおよびＨＣＶＲは、以下のＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順でアミノ末端からカルボキシ末端へと配置している３つのＣＤＲおよび４つのＦＲからなる。本明細書では、重鎖の３つのＣＤＲを「ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、およびＨＣＤＲ３」と称し、軽鎖の３つのＣＤＲを「ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、およびＬＣＤＲ３」と称する。ＣＤＲは、抗原との特異的相互作用を形成する残基の大部分を含有する。本発明の目的のために、ＮｏｒｔｈのＣＤＲ定義を使用する。ＮｏｒｔｈのＣＤＲの定義（Ｎｏｒｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，“Ａ  Ｎｅｗ  Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ  ｏｆ  Ａｎｔｉｂｏｄｙ  ＣＤＲ  Ｌｏｏｐ  Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ，４０６，２２８−２５６（２０１１））は、多数の結晶構造を有する親和性伝搬クラスタ化（ａｆｆｉｎｉｔｙ  ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ  ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ）に基づいている。
【００６９】
ＨＣＶＲ領域をコードする単離ＤＮＡは、ＨＣＶＲをコードするＤＮＡを、重鎖定常領域をコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に連結することによって、完全長重鎖遺伝子に変換され得る。ヒトおよび他の哺乳動物の重鎖定常領域遺伝子の配列は、当該技術分野において既知である。これらの領域を包含するＤＮＡフラグメントは、例えば、標準的なＰＣＲ増幅によって取得され得る。
【００７０】
ＬＣＶＲ領域をコードする単離ＤＮＡは、ＬＣＶＲをコードするＤＮＡを、軽鎖定常領域をコードする別のＤＮＡ分子に作動可能に連結することによって、完全長軽鎖遺伝子に変換され得る。ヒトおよび他の哺乳動物の軽鎖定常領域遺伝子の配列は、当該技術分野において既知である。これらの領域を包含するＤＮＡフラグメントは、標準的なＰＣＲ増幅によって取得され得る。軽鎖定常領域は、カッパまたはラムダ定常領域であり得る。本発明の抗体については、軽鎖定常領域がヒトカッパ定常領域であることが好ましい。
【００７１】
本発明のポリヌクレオチドは、配列が発現制御配列に作動可能に連結された後に宿主細胞において発現される。発現ベクターは、典型的には、エピソーム、または宿主染色体ＤＮＡの一体化した部分のいずれかとして、宿主生物中で複製可能である。一般に、発現ベクターは、所望のＤＮＡ配列で形質転換されたそれらの細胞の検出を可能にするために、選択マーカー、例えば、テトラサイクリン、ネオマイシン、およびジヒドロ葉酸レダクターゼを含有する。
【００７２】
本明細書に記載される抗体は、哺乳動物細胞で容易に産生され得、該哺乳動物細胞の非限定的な例には、ＣＨＯ、ＮＳ０、ＨＥＫ２９３、またはＣＯＳ細胞が含まれる。宿主細胞は、当該技術分野において周知の技法を使用して培養される。
【００７３】
目的のポリヌクレオチド配列（例えば、抗体のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドおよび発現制御配列）を含有するベクターは、細胞宿主のタイプに応じて異なる周知の方法によって宿主細胞に導入され得る。
【００７４】
タンパク質精製のさまざまな方法が用いられ得、そのような方法は、当該技術分野において既知であり、例えば、Ｄｅｕｔｓｃｈｅｒ，Ｍｅｔｈｏｄｓ  ｉｎ  Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ  １８２：８３−８９（１９９０）、およびＳｃｏｐｅｓ，Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ，３ｒｄ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，ＮＹ（１９９４）に記載される。
【００７５】
本発明の別の実施形態において、抗体または抗体をコードする核酸は単離形態で提供される。本明細書で使用する場合、「単離」という用語は、細胞環境に見出される任意の他の高分子種を含まないか、または実質的に含まない、タンパク質、ペプチド、または核酸を指す。「実質的に含まない」とは、本明細書中で使用する場合、目的のタンパク質、ペプチド、または核酸が（モル基準で）８０％超、好ましくは９０％超、より好ましくは９５％超の対象の高分子種を含むことを意味する。
【００７６】
本発明の抗体またはそれを含む薬学的組成物は、非限定的な例が静脈内投与である、非経口経路によって投与されてもよい。本発明の抗体は、単独で薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤と一緒に単回用量または複数回用量で患者に投与され得る。本発明の薬学的組成物は、当該技術分野で周知の方法によって調製することができ（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２ｎｄ  ｅｄ．（２０１２），Ａ．Ｌｏｙｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ）、本明細書に開示される抗体、および１つ以上の薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤を含む。
【００７７】
投薬計画は、最適な所望の反応（例えば、治療効果）を提供するように調整され得る。安全性および有効性を最適化するために処置投与量を滴定し得る。局所的もしくは全身性またはそれらの組み合わせで静脈内（ｉ．ｖ．）または非静脈内投与のための投与スケジュールは、典型的には、単一ボーラス投与もしくは連続注入から、１日当たり複数回の投与（例えば、４〜６時間おき）までの範囲であるか、または処置する医師および患者の状態によって示されるとおりである。投与量および投与頻度は、患者を治療する医師によって決定されてよい。
【００７８】
「治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」（または「治療する（ｔｒｅａｔ）」または「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」）という用語は、既存の症状、障害、状態、または疾患の進行または重症度を遅延、妨害、抑制、緩和、停止、軽減、または反転させることを指す。
【００７９】
「有効量」とは、研究者、医師、または他の臨床医によって求められている組織、系、動物、哺乳動物、またはヒトの生物学的もしくは医学的応答またはそれに対する所望の治療効果を誘発するであろう本発明の抗体または本発明の抗体を含む薬学的組成物の量を意味する。抗体の有効量は、個体の病状、年齢、性別、および体重、ならびに個体における所望の応答を誘発する抗体の能力などの因子に応じて変動し得る。有効量はまた、抗体の任意の毒性効果または有害効果よりも治療的に有益な効果が上回る量である。
【実施例】
【００８０】
抗体の特性評価、生成、発現、および精製
配列番号１４に示される重鎖ポリヌクレオチド配列および配列番号１７に示される軽鎖ポリヌクレオチド配列を使用した哺乳動物細胞における抗体産生は、２つの抗体産物関連種、（ａ）配列番号１０に示される重鎖アミノ酸配列および配列番号１１の軽鎖アミノ酸配列を有する完全長抗体（以下「抗体Ａ１」と呼ぶ）、ならびに（ｂ）軽鎖のｎ末端アラニンのクリッピングから生じる抗体の単一アミノ酸短縮型（以下「抗体Ａ２」と呼ぶ）の産生をもたらし、抗体Ａ２は、配列番号１０に示される重鎖アミノ酸配列、および配列番号１３に示される軽鎖アミノ酸配列を有する。本明細書で使用されるとき、「抗体Ａ１／２」は、配列番号１７に示される軽鎖ポリヌクレオチド配列の使用から生じる抗体産物を指し、抗体Ａ１（約６％）と抗体Ａ２（約９４％）とを含む。配列番号１４に示される重鎖ポリヌクレオチド配列および配列番号１５に示される軽鎖ポリヌクレオチド配列を使用して、顕著な量の抗体Ａ２を伴わずに抗体Ａ１を合成することができる。配列番号１４に示される重鎖ポリヌクレオチド配列および配列番号１６に示される軽鎖ポリヌクレオチド配列を使用して、顕著な量の抗体Ａ１を伴わずに抗体Ａ２を合成することができる。
【００８１】
本発明の抗体は、ファージディスプレイを含むがこれに限定されない、既知の方法を使用して産生してもよい。さらに、上述するものに由来する抗体は、本明細書に記載のアッセイを用いてさらにスクリーニングすることができる。
【００８２】
抗体Ａ１およびＡ２の重鎖および軽鎖の可変領域のポリペプチド、ならびに完全長の重鎖および軽鎖のアミノ酸配列、ならびにそれらをコードするヌクレオチド配列は、「アミノ酸およびヌクレオチド配列」と題するセクションに列挙されている。さらに、抗体Ａ１、Ａ２、およびＡ１／２の軽鎖、重鎖、軽鎖可変領域、および重鎖可変領域の配列番号は、表１および２に示される。
【表１】
2020182492.tif 000002
【表２】
2020182492.tif 000003
【００８３】
抗体Ａ１、Ａ２、および抗体Ａ１／２を含むがこれらに限定されない本発明の抗体は、本質的に下記のように作製および精製することができる。ＨＥＫ２９３またはＣＨＯなどの適切な宿主細胞は、最適な所定のＨＣ：ＬＣベクター比を用いて抗体を分泌するための発現系、またはＨＣとＬＣの両方をコードする単一のベクター系で、一過性にまたは安定的にトランスフェクトすることができる。抗体が分泌された既知組成培地は、多くの一般的に使用される技術のうちのいずれかを使用して精製されてもよい。例えば、培地は、リン酸緩衝生理食塩水（ｐＨ７．４）のような適合緩衝液で平衡化された、ＭａｂＳｅｌｅｃｔカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）、またはＫａｐｐａＳｅｌｅｃｔカラム（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に簡便に適用され得る。カラムは、非特異的結合構成成分を除去するために洗浄され得る。結合抗体は、例えば、ｐＨ勾配（１０ｍＭクエン酸ナトリウム緩衝液ｐＨ３．０に対して２０ｍＭのＴｒｉｓ緩衝液ｐＨ７、または１００ｍＭグリシン緩衝液ｐＨ３．０に対してリン酸緩衝生理食塩水ｐＨ７．４など）によって溶出され得る。抗体画分は、紫外線吸光度またはＳＤＳ−ＰＡＧＥなどによって検出され得、次いで、プールされ得る。意図する使用に応じて、さらなる精製は任意選択的である。抗体は、一般的な技術を使用して濃縮および／または滅菌ろ過され得る。可溶性凝集体および多量体は、サイズ排除、疎水性相互作用、イオン交換、マルチモーダル、またはヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーを含む一般的な技法によって効果的に除去され得る。生成物は、−７０℃ですぐに冷凍されてもよく、または凍結乾燥されてもよい。
【００８４】
本明細書で使用されるとき、ＢＭＳ２０Ｈ４．９は、配列番号１８に示される重鎖と、配列番号１９に示される軽鎖と、を有する抗体を指し、これまでにＵＳ７２８８６３８に記載されている。本明細書で使用されるとき、ＰＦ８３は、配列番号２０に示される重鎖と、配列番号２１に示される軽鎖と、を有する抗体を指し、これまでにＵＳ８３３７８５０に記載されている。
【００８５】
抗体Ａ１／２はヒトＣＤ１３７に結合する
本明細書に開示される抗体がヒトＣＤ１３７に結合する能力は、ＥＬＩＳＡにより測定することができる。ヒトＣＤ１３７への結合を測定するために、９６ウェルプレート（Ｎｕｎｃ）を４℃で一晩、ヒトＣＤ１３７−Ｆｃ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）でコーティングする。ウェルをブロッキング緩衝液（０．２％ウシ血清アルブミンと０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０とを含有するＰＢＳ）で２時間ブロッキングする。ウェルを、０．０５％Ｔｗｅｅｎ−２０を含有するＰＢＳで３回洗浄する。次に、抗体Ａ１／２または対照ＩｇＧ（１００マイクロリットル）を異なる濃度で添加し、室温で１時間インキュベートする。洗浄後、プレートを１００マイクロリットルのヤギ抗ヒトＩｇＧ  Ｆ（ａｂ´）２−ＨＲＰコンジュゲート（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｉｍｍｕｎｏ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）とともに室温で４５分間インキュベートする。プレートを洗浄し、次いで１００マイクロリットルの３，３´，５，５´−テトラメチルベンジジンとともにインキュベートする。６５０ｎｍにおける吸光度をＳｐｅｃｔｒａＭａｘ（登録商標）マイクロプレートリーダーで読み取る。半数効果濃度（ＥＣ５０）をＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ７ソフトウェアを用いて計算する。
【００８６】
本質的に上述のように実施された実験では、抗体Ａ１／２は０．０２７ｎＭのＥＣ５０でヒトＣＤ１３７に結合する。
【００８７】
抗体Ａ１／２はカニクイザルＣＤ１３７に結合する
本明細書に開示される抗体が細胞表面カニクイザルＣＤ１３７に結合する能力は、フローサイトメトリーアッセイを使用して測定することができる。カニクイザルＣＤ１３７を発現する安定細胞は、製造元のプロトコールに従ってＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ（商標）２０００試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（商標））を使用してＣｙｎｏ−ＣＤ１３７受容体プラスミドＤＮＡをヒト２９３細胞（ＡＴＣＣ）にトランスフェクトすることにより生成される。安定細胞は、１０％ウシ胎仔血清と１％ＧｌｕｔａＭＡＸ（商標）を含むダルベッコ改変イーグル培地において、０．５マイクログラム／ｍＬピューロマイシンを使用して選択される。フローサイトメトリーでは、Ｇｉｂｃｏ（登録商標）Ｃｅｌｌ  Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｂｕｆｆｅｒ（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用してコンフルエントな接着細胞を剥離し、ＦＡＣＳ緩衝液（３％ウシ胎仔血清を含むリン酸緩衝生理食塩水）中、４℃で１時間ブロッキングし、１×１０５細胞／ウェルの密度で、９６−ウェル丸底プレートに移す。抗体Ａ１／２、ＢＭＳ２０Ｈ４．９、ＰＦ８３、または対照ヒトＩｇＧ１（０．５マイクログラム／ｍＬで開始するＦＡＣＳ緩衝液に１：４で希釈）を添加し（１００マイクロリットル）、細胞を４℃で１時間染色する。
【００８８】
ＦＡＣＳ緩衝液で洗浄した後、二次抗体Ｒ−フィコエリトリンコンジュゲートヤギ抗ヒトＩｇＧ、Ｆ（ａｂ´）２フラグメント特異的抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を１：２００希釈で添加し、細胞を４℃で３０分間インキュベートする。細胞を洗浄し、ＬＩＶＥ／ＤＥＡＤ（登録商標）Ｆｉｘａｂｌｅ  Ｆａｒ  Ｒｅｄ  Ｄｅａｄ  Ｃｅｌｌ  Ｓｔａｉｎキット（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して、製造元のプロトコールに従って生細胞／死細胞の染色を行う。細胞をＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、ＩｎｔｅｌｌｉＣｙｔ  ＨＴＦＣ（登録商標）スクリーニングシステムで処理する。フローサイトメトリーデータは、ＦｌｏｗＪｏ（登録商標）ソフトウェアを使用して分析される。平均蛍光強度（ＭＦＩ）比は、（実験抗体のＭＦＩ）／（対照ＩｇＧのＭＦＩ）として計算される。
【００８９】
本質的に上述のように実施された実験では、０．５マイクログラム／ｍＬの濃度の抗体Ａ１／２は、ＢＭＳ２０Ｈ４．９（０．９４のＭＦＩ比）およびＰＦ８３（３７のＭＦＩ比）と比較して高い、１５３のＭＦＩ比を示す。
【００９０】
ヒト細胞に結合する抗体Ａ１／２はＣＤ１３７発現を増加させる
本明細書に開示される抗体のヒトＣＤ１３７細胞表面レベルを調節する能力は、以下のように決定することができる。ヒトＣＤ１３７を発現する安定細胞は、製造元のプロトコールに従ってＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ（商標）２０００試薬（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ（商標））を使用してヒトＣＤ１３７プラスミドＤＮＡをヒト２９３細胞（ＡＴＣＣ）にトランスフェクトすることにより生成される。安定細胞は、１０％ウシ胎仔血清と１％ＧｌｕｔａＭＡＸ（商標）を含むダルベッコ改変イーグル培地において、０．５マイクログラム／ｍＬのピューロマイシンを使用して選択される。培地中の３００ナノモル濃度で開始するＣＤ１３７抗体を３７℃で２４時間細胞とともにインキュベートする。細胞をＰＢＳで洗浄し、Ｇｉｂｃｏ（登録商標）Ｃｅｌｌ  Ｄｉｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  Ｂｕｆｆｅｒを使用して剥離し、冷緩衝液（１×ＰＢＳ、１％ＢＳＡ、０．０９％アジ化ナトリウム）中の同一のＣＤ１３７抗体で２時間染色する。洗浄後、細胞をＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７コンジュゲートヤギ抗ヒトＩｇＧ検出抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）で３０分間染色する。細胞を洗浄し、製造元のプロトコールに従ってＺｏｍｂｉｅ  Ｇｒｅｅｎ  Ｌｉｖｅ／Ｄｅａｄ（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）で差異的に標識する。全ての細胞はＦｏｒｔｅｓｓａ  Ｘ−２０で処理される。ＦｌｏｗＪｏ（登録商標）ソフトウェアを使用して分析を実施し、Ａｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７の中央蛍光強度（ＭＦＩ）を生成し、同等の可溶性蛍光色素（ＭＥＳＦ）標準曲線（Ｂａｎｇｓ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）のＡｌｅｘａ  Ｆｌｕｏｒ  ６４７分子に対して較正する。ＭＥＳＦ値は、未処理の染色対照（１００％）および未処理のアイソタイプ染色対照（０％）に対して標準化される。
【００９１】
本質的に上述のように実施された実験では、３００ナノモル濃度の抗体Ａ１／２はＰＦ８３（１２％）と比較してＣＤ１３７レベルの増加（２１％）を誘導するが、ＢＭＳ２０Ｈ４．９は細胞表面のＣＤ１３７を５６％減少させる。
【００９２】
抗体Ａ１／２のＮＦ−カッパＢルシフェラーゼレポーターアッセイ活性
本明細書に開示される抗体がＮＦ−カッパＢを活性化する能力は、以下のように測定することができる。二重安定ＮＦ−カッパＢルシフェラーゼレポーター／ヒトＣＤ１３７−２９３細胞は、製造元のプロトコールに従って、Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ（商標）２０００試薬（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅ）を使用してｐＧＬ４．３２［ｌｕｃ２Ｐ／ＮＦ−ｋａｐｐａＢ−ＲＥ／Ｈｙｇｒｏ］プラスミドＤＮＡ（Ｐｒｏｍｅｇａ）をヒトＣＤ１３７発現２９３細胞にトランスフェクトすることにより生成される。安定細胞は、１０％ウシ胎仔血清と１％ＧｌｕｔａＭＡＸ（商標）を含むダルベッコ改変イーグル培地において、１００マイクログラム／ｍＬハイグロマイシンおよび０．５マイクログラム／ｍＬピューロマイシンを使用して選択される。Ｔｈｅｒｍｏ  ＭｕｌｔｉＤｒｏｐ  Ｃｏｍｂｉ  Ｒｅａｇｅｎｔ  Ｄｉｓｐｅｎｓｅｒ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して、細胞を３８４ウェルプレートに５×１０３細胞／ウェルの密度で播種し、３７℃で一晩培養する。抗体Ａ１／２、ＢＭＳ２０Ｈ４．９、ＰＦ８３、または対照ヒトＩｇＧ１は、９マイクロモル濃度または１．３３マイクロモル濃度で開始するプレート内の１０点の２倍希釈で、Ｈａｍｉｌｔｏｎ  ＳＴＡＲ（商標）（Ｈａｍｉｌｔｏｎ  Ｃｏｍｐａｎｙ）を使用してリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で希釈され、細胞に移される。次いで、細胞を抗体とともに５％ＣＯ２において３７℃で５．５時間インキュベートし、次いで、ＯＮＥ−Ｇｌｏ（商標）ルシフェラーゼアッセイシステム（Ｐｒｏｍｅｇａ（商標））およびＴｈｅｒｍｏ（商標）Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉ  ＭｕｌｔｉＤｒｏｐ（商標）Ｃｏｍｂｉ試薬ディスペンサーを使用して処理する。発光はＳｐｅｃｔｒａＭａｘ（登録商標）マイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して測定され、データ分析はＧｅｎｅｄａｔａ  Ｓｃｒｅｅｎｅｒ（登録商標）（Ｇｅｎｅｄａｔａ）を使用して実施される。次のようにデータが標準化される：
【数１】
2020182492.tif 000004
【００９３】
本質的に上述のように実施された実験では、抗体Ａ１／２はＰＦ８３（最大活性１２％）よりも高く、ＢＭＳ２０Ｈ４．９（最大活性１１５％）よりも低い、最大活性７８％を示す。
【００９４】
抗体Ａ１／２はＴ細胞由来のインターフェロンガンマ産生を促進する
本明細書に開示される抗体のＴ細胞由来インターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−ガンマ）産生を促進する能力は、以下のように測定することができる。ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）は、Ｆｉｃｏｌｌ密度勾配遠心分離（Ｆｉｃｏｌｌ（登録商標）Ｐａｑｕｅ  ＰＬＵＳ；ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）により全血または白血球から分離され、１０％ウシ胎仔血清（ＨｙＣｌｏｎｅ）を含むロズウェルパーク記念研究所培地（ＲＰＭＩ）（Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中で増殖する。ＰＢＳ中の抗ヒトＣＤ３抗体クローンＨＩＴ３ａ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を９６ウェルプレートにコーティングし（一般的な範囲：２〜１５ナノグラム／ウェル）、４℃で一晩インキュベートする。吸引後、ウェルをＰＢＳですすぎ、ヒトＰＢＭＣを９６ウェルプレートに１．５×１０５細胞／ウェルの密度で移す。抗体Ａ１／２、ＢＭＳ２０Ｈ４．９、ＰＦ８３、または対照ヒトＩｇＧ１は、８０マイクログラム／ｍＬの開始濃度で１０％ウシ胎仔血清を含むＲＰＭＩで１：４に希釈して調製する。抗ヒトＣＤ２８抗体クローンＣＤ２８．２（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）をプレートに添加し（０．２〜２マイクログラム／ｍＬの一般的な範囲）、試験抗体を添加し、加湿５％ＣＯ２インキュベーターで、３７℃で９６時間インキュベートする。上清を収集し、Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（登録商標）ヒトＩＦＮ−ガンマＤｕｏＳｅｔ  ＥＬＩＳＡキットを使用してヒトＩＦＮ−ガンマレベルを測定する。簡潔に述べると、ＩＦＮ−ガンマ捕捉抗体を室温で一晩プレートにコーティングする（４マイクログラム／ｍＬ）。吸引および洗浄後、プレートを室温で１時間ブロッキングする。サンプルの上清とＩＦＮ−ガンマ標準を添加し、室温で２時間インキュベートする。洗浄後、１００マイクロリットルのＩＦＮ−ガンマ検出抗体を添加し、室温で２時間インキュベートし、洗浄する。ストレプトアビジン−ＨＲＰ（１：４０希釈の１００マイクロリットル）を室温で２０分間添加する。洗浄後、１００マイクロリットルの基質溶液を添加することによって２０分間プレートを発色させ、５０マイクロリットルの停止液を添加し、ＳｐｅｃｔｒａＭａｘ（登録商標）マイクロプレートリーダーによって４５０ｎｍでシグナルを測定する。データ分析は、ＳｏｆｔＭａｘ  ＰｒｏソフトウェアとＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を使用して実施される。誘導倍率は、試料平均ＩＦＮ−ガンマ（ｐｇ／ｍＬ）／対照ｈＩｇＧ１平均ＩＦＮ−ガンマ（ｐｇ／ｍＬ）として計算される。
【００９５】
本質的に上述のように実施された実験では、抗体Ａ１／２は、ＩＦＮ−ガンマサイトカイン産生によって測定されるＣＤ３／ＣＤ２８共刺激によるヒトＰＢＭＣの準最適な活性化を促進する。この点で、５マイクログラム／ｍｌの抗体Ａ１／２で処理すると、ＰＦ８３よりも高く（１．６倍の増加）、ＢＭＳ２０Ｈ４．９よりも低い（９．４倍の増加）、３．８倍の増加でＩＦＮ−ガンマの産生がもたらされる。
【００９６】
抗体Ａ１／２固相結合アッセイ
抗体Ａ１／２のヒトＣ１ｑへの結合は、ＥＬＩＳＡアッセイを使用して測定できる。抗体Ａ１／２と対照抗体（陰性対照ＩｇＧ１）をＰＢＳで連続希釈し、４℃で一晩ＥＬＩＳＡプレートにコーティングする。カゼイン緩衝液中のヒトＣ１ｑを１０ミリグラム／ｍＬの濃度で添加し、２時間インキュベートする。プレートを抗ヒトＣ１ｑ−ＨＲＰ（ＡｂＤ  Ｓｅｒｏｔｅｃ  Ｉｎｃ．、１：２００希釈）とともに１時間インキュベートすることでヒトＣ１ｑを検出し、ＴＭＢ（ＫＰＬ，Ｉｎｃ．）を使用してプレートを発色させる。Ｓｙｎｅｒｇｙ  Ｎｅｏ２ハイブリッドマルチモードリーダー（ＢｉｏＴｅｋ（登録商標））を使用して、４５０ｎｍで吸光度を測定する。
【００９７】
抗体Ａ１／２のＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ（Ｈ）、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩＩａ（Ｆ）、およびＦｃγＲＩＩＩａ（Ｖ）への結合は、ＭＳＤアッセイ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）を使用して決定される。簡潔に述べると、Ｆｃγ受容体をＭｅｓｏ  Ｓｃａｌｅプレートに一晩コーティングし、連続希釈した試験抗体をプレートに添加して２時間インキュベートする。抗体Ａ１／２は、抗ヒト二次抗体（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｄ２０ＴＦ−６）を使用して検出され、プレートはＲｅａｄ  Ｂｕｆｆｅｒ  Ｔ（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ、Ｒ９２ＴＣ−１）で発色させる。発光はＳＥＣＴＯＲ  Ｉｍａｇｅｒ  ２４００（Ｍｅｓｏ  Ｓｃａｌｅ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）で測定され、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  ７．０ソフトウェアを使用してデータが分析される。
【表３】
2020182492.tif 000005
【００９８】
本質的に上述したように実施した実験では、抗体Ａ１／２は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃγＲＩＩｂ、ＦｃγＲＩＩＩａ、ＦｃγＲＩＩＩａ、またはＣ１ｑと結合しなかった（上述の表３に示すように）。他の実験では、細胞ベースの抗体依存性細胞傷害性および補体依存性細胞傷害性アッセイにおいて、抗体Ａ１／２は検出可能なエフェクター機能を示さなかった。
【００９９】
確立された腫瘍モデルにおける抗体Ａ１／２の抗腫瘍効果
ＨＣＣ８２７ヒト非小細胞肺癌（ＡＴＣＣ）腫瘍細胞株は、それぞれの培地で維持され、移植のために採取される。腫瘍細胞（マウス当たり１×１０７個の細胞）を、７週齢のメスＮＯＤ／ＳＣＩＤガンマ（ＮＳＧ）マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）の右側腹部に皮下注射する。腫瘍の大きさが約３５０ｍｍ３〜４５０ｍｍ３に達するとき、マウスは５〜８の群に無作為化される。ナイーブヒトＰＢＭＣをＤｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）Ｈｕｍａｎ  Ｔ−ｅｘｐａｎｄｅｒ  ＣＤ３／ＣＤ２８ビーズ（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で９〜１０日間刺激して、ヒト増殖Ｔ細胞を生成し、保管する。ヒトＰＢＭＣ（ＮＹ  Ｂｌｏｏｄ  Ｃｅｎｔｅｒ）は、ＳｅｐＭａｔｅチューブ（ＳＴＥＭＣＥＬＬ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）のＦｉｃｏｌｌ（登録商標）Ｐａｑｕｅ  ＰＬＵＳで遠心分離して調製し、保管する。増殖したＴ細胞を解凍し、１×１０６個の細胞をマウスに注射する。対照として、一部のマウスでは腫瘍細胞のみを、Ｔ細胞もＰＢＭＣも伴わずに移植する。処理は０日目または１日目から開始する。処理群には、対照ＩｇＧ、ＢＭＳ２０Ｈ４．９、ＰＦ８３、および抗体Ａ１／２が含まれる。動物に腹腔内注射で１０ｍｇ／ｋｇの抗体を週に１回、４週間投与する。体重（ＢＷ）は週２回記録され、ＢＷの変化率は次の式、（観測日のＢＷ−初日のＢＷ）／初日のＢＷ×１００％を使用して計算される。腫瘍体積は、電子ノギスを使用して週に２回測定される。腫瘍体積は、式、
【数２】
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を用いて計算される。Ｔ／Ｃ％は、幾何平均値がΔＴ＞０の場合、式１００×ΔＴ／ΔＣを使用して計算される。ΔＴ＝研究の観測日の薬物処理群の平均腫瘍体積−投与の初日の薬物処理群の平均腫瘍体積、ΔＣ＝研究の観測日の対照群の平均腫瘍体積−投与の初日の対照群の平均腫瘍体積である。ＳＡＳソフトウェア（バージョン９．２）のＭＩＸＥＤ手順を使用して、時間および処理による繰り返しのある二元配置反復測定分散分析を用いて、腫瘍体積データの統計分析が実施される。
【０１００】
本質的に上述のように実施された実験では、阻害を示さなかった、ＰＦ８３（Ｔ／Ｃ％＝８１．２）およびＢＭＳ２０Ｈ４．９（Ｔ／Ｃ％＝９６．９）で処理されたマウスとは対照的に、抗体Ａ１／２で処理されたマウスは有意な腫瘍増殖阻害を示した（Ｔ／Ｃ％＝３０．６、Ｐ＜０．００１）。
【０１０１】
抗体Ａ１、抗体Ａ２、および抗体Ａ１／２の動力学／親和性の結果
Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００機器を使用して、抗体Ａ１、抗体Ａ２、および抗体Ａ１／２に結合する固定化ヒトＣＤ１３７−Ｆｃの動力学を測定できる。組換えヒト細胞外ＣＤ１３７−Ｆｃタンパク質（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）は、アミンカップリング（ＧＥ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を介してＣＭ５センサーチップに共有結合で固定化されている。ＣＤ１３７抗体試験は、ＨＢＳ−ＥＰ＋緩衝液で３０マイクロリットル／分の流速で実施される。試料はさまざまな濃度で注入され、２５℃で測定される。３０ミリリットル／分の流速で１０ミリモル濃度のグリシン−ＨＣｌ  ｐＨ２．０とともに２４秒間、各試料を注入した後、表面を再生し、その後緩衝液で１０秒間安定化させる。０．１２３ナノモル濃度〜３０ナノモル濃度の範囲の濃度のセンサーグラムは、Ｂｉａｃｏｒｅ  Ｔ２００ソフトウェアを使用して評価される。結合（Ｋａ）および解離（Ｋｄ）の速度定数の計算は、１：１ラングミュア結合モデルの近似に基づいている。動力学速度定数Ｋｄ／Ｋａの比から、平衡解離定数（ＫＤ）または結合親和定数が計算される。
【０１０２】
本質的に上述のように実施した実験において、抗体Ａ１は、抗体Ａ２、および抗体Ａ１／２は、表４に示される動力学および親和定数でヒトＣＤ１３７に結合する。
【表４】
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【０１０３】
抗体Ａ１、抗体Ａ２、および抗体Ａ１／２を比較するＮＦ−カッパＢルシフェラーゼレポーターアッセイ
本明細書に開示される抗体のＮＦ−カッパＢを活性化する能力は、抗体希釈液をＰＢＳで調製し、９マイクロモル濃度で開始して、プレート内で１０点の２倍希釈を行うという変更を加えて、本明細書に上述したように測定できる。
【０１０４】
本質的に上述のように実施された実験では、抗体Ａ１／２（最大活性７０．５％）は、抗体Ａ１（最大活性６３．４％）および抗体Ａ２（最大活性７２．３％）と比較して同様の最大活性を示した。
【０１０５】
抗体Ａ１および抗体Ａ２はＴ細胞由来のインターフェロンガンマ産生を促進する
本明細書に開示される抗体のＴ細胞由来インターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ−ガンマ）産生を促進する能力は、本明細書に上述したように測定することができる。本質的に本明細書に記載されるように実施された実験において、抗体Ａ１、抗体Ａ２、および抗体Ａ１／２は、ＩＦＮ−ガンマサイトカイン産生により測定されるＣＤ３／ＣＤ２８共刺激によるヒトＰＢＭＣの準最適な活性化を増強する。この点で、５マイクログラム／ｍｌの抗体Ａ１／２で処理すると、抗体Ａ１（３．５倍の増加）および抗体Ａ２（３．５倍の増加）に匹敵した、ＩＦＮ−ガンマの産生の３．１倍の増加がもたらされる。
【０１０６】
確立された腫瘍モデルにおける抗体Ａ１および抗体Ａ２の抗腫瘍効果
本明細書に開示される抗体のマウスの腫瘍増殖を阻害する能力は、本明細書に上述したように測定することができる。
【０１０７】
本質的に上述のように実施された実験では、抗体Ａ１、抗体Ａ２、および抗体Ａ１／２は、ＨＣＣ８２７で確立された腫瘍モデルの腫瘍増殖を阻害する。抗体Ａ１／２による処理（Ｔ／Ｃ％＝４７．１％、Ｐ＜０．００１）では、抗体Ａ１（Ｔ／Ｃ％＝５６．０％、Ｐ＜０．００１）および抗体Ａ２（Ｔ／Ｃ％＝４８．７％、Ｐ＜０．００１）と同様の腫瘍増殖の低減を示す。
【０１０８】
Ｘ線結晶構造によって決定された抗体Ａ１のエピトープ
抗体Ａ１−Ｆａｂは、１２ｍＬのＣａｐｔｕｒｅＳｅｌｅｃｔ  ＩｇＧ−ＣＨ１  Ａｆｆｉｎｉｔｙ  Ｍａｔｒｉｘを使用して２９３ＨＥＫ細胞上清から精製される。ＳＤＳ−ＰＡＧＥおよび分析サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）は、精製された抗体Ａ１−Ｆａｂの純度と品質に対処するために利用される。このマトリックスの溶離物質は、１×Ｔｒｉｓ緩衝生理食塩水（ＴＢＳ）と交換された緩衝液である。ｈＣＤ１３７＊（＊（ヒトＣＤ１３７アミノ酸２２−１６１、ΔＣ１２１Ｓ）−ＡＡＡ−６Ｈｉｓ）は、Ｎｉ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ（登録商標）Ｅｘｃｅｌカラム、Ｎｉ−ＮＴＡカラム、およびＳＥＣカラムを利用する３つのステップで２９３ＨＥＫ上清から精製される。簡潔に述べると、２リットルの上清を、緩衝液交換をすることなく、Ｎｉ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  Ｅｘｃｅｌカラムに直接ロードする。このステップの溶離液は、ＰＢＳで緩衝液交換され、Ｎｉ−ＮＴＡ重力流カラムを使用してさらに精製される。このステップの溶離液をさらに精製し、分取ＳＥＣカラムを使用して１×ＴＢＳと緩衝液交換をする。最初のＮｉ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  Ｅｘｃｅｌステップからのフロースルーには、大量のｈＣＤ１３７＊が含まれている。次いで、Ｎｉ  Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ  Ｅｘｃｅｌカラムに再びロードされ、その後Ｎｉ−ＮＴＡおよび分取ＳＥＣカラムに再びロードされる。ＳＤＳ−ＰＡＧＥは、純度に基づいてｈＣＤ１３７＊画分をプールするために使用される。ｈＣＤ１３７＊の濃度は１４．５ミリグラム／ｍＬで、抗体Ａ１−Ｆａｂの濃度は７．５ミリグラム／ｍＬである。
【０１０９】
抗体Ａ１−Ｆａｂ：ＣＤ１３７＊複合体を１：１のモル比で組み合わせ、次いで、２０ミリモル濃度のＴｒｉｓ  ｐＨ８．０、１００ミリモル濃度の塩化ナトリウムで事前に平衡化したゲルろ過カラムにかける。得られた複合体は１２．５ミリグラム／ｍＬに濃縮される。ろ過後、抗体Ａ１−Ｆａｂ：ＣＤ１３７複合体は、２１℃と８℃の両方で、Ｐｈｏｅｎｉｘ液体ハンドラーを使用して、シッティングドロッププレートでスパースマトリックス結晶スクリーニング条件で１：１の比率に設定される。大きな角柱のような結晶は、２１℃で１モル濃度のクエン酸三ナトリウムｐＨ６．５で４日以内に単一の条件で成長する。結晶を採取し、２０％グリセロールおよびリザーバー条件で凍結保護し、液体窒素にマウントしてフラッシュ凍結し、Ａｒｇｏｎｎｅ  Ｎａｔｉｏｎａｌ  ＬａｂｏｒａｔｏｒｙのＡｄｖａｎｃｅｄ  Ｐｈｏｔｏ  Ｓｏｕｒｃｅを使用して、試料をＸ線スクリーニングし、データを収集する。抗体Ａ１−Ｆａｂ／ｈＣＤ１３７＊データは、ＣＣＰ４プログラムのパッケージ（Ｗｉｎｎ，Ｍ．Ｄ．ｅｔ  ａｌ．Ａｃｔａ．Ｃｒｙｓｔ．２０１１：Ｄ６７，２３５−２４２）を使用して２．４Åへと加工する。結晶は、空間パラメーターＰ３１２１に属し、セルパラメーターはａ＝ｂ＝１２４．９Å、ｂ＝１１２．７Å、α＝β＝９０°、γ＝１２０°である。構造は、検索モデルとして内部Ｆａｂ構造を使用して、プログラムＰｈａｓｅｒ（ＭｃＣｏｙ，Ａ．Ｊ．ｅｔ  ａｌ．Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｃｒｙｓｔ．２００７  ４０：６５８−６７４）による、分子置換によって決定される。Ｆａｂの分子置換ソリューションは、Ｒｅｆｍａｃ（Ｗｉｎｎ，Ｍ．Ｄ．ｅｔ  ａｌ．Ａｃｔａ．Ｃｒｙｓｔ．２０１１：Ｄ６７，２３５−２４２；Ｍｕｒｓｈｕｄｏｖ，Ｇ．Ｎ．Ａｃｔ．Ｃｒｙｓｔ．２０１１：Ｄ６７，３５５−３６７）およびＢｕｓｔｅｒ（Ｂｒｉｃｏｇｎｅ，Ｇ．ｅｔ  ａｌ．２０１６；Ｂｕｓｔｅｒ  Ｖｅｒｓｉｏｎ  ２．１１．６．Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，Ｕｎｉｔｅｄ  Ｋｉｎｇｄｏｍ：Ｇｌｏｂａｌ  Ｐｈａｓｉｎｇ  Ｌｅｔ．）を使用して精密化される。精密化されたマップを使用して、プログラムＣＯＯＴ（Ｅｍｓｌｅｙ，Ｐ．Ａｃｔａ  Ｃｒｙｓｔ．２０１０：Ｄ６６，４８６−５０１）を使用してＣＤ１３７についてのモデルを手動で構築する。精密化されたＲファクターはＲ＝１７．８％、Ｒｆｒｅｅ＝２０．５％である。
【０１１０】
このアッセイに本質的に記載されるように実施した実験において、抗体Ａ−Ｆａｂ：ｈＣＤ１３７＊複合体の解像を行い、エピトープ／パラトープが以下の表５に示されている。表５に、ｈＣＤ１３７＊の列挙されている残基の６Å以内にある抗体Ａ１−Ｆａｂの残基を示す。抗体Ａ１−Ｆａｂの重鎖にはｈＣＤ１３７＊との５７の接触（カットオフ６Å）があり、軽鎖には１８の接触（カットオフ６Å）がある。
【表５】
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【０１１１】
抗体Ａ１／２はＣＤ１３７／ＣＤ１３７−リガンド相互作用を完全にブロックする
本明細書に開示される抗体のヒトＣＤ１３７とＣＤ１３７−リガンド（以下、ＣＤ１３７Ｌ）の相互作用を遮断する能力は、ＥＬＩＳＡアッセイで測定することができる。まず、ＥＬＩＳＡアッセイを使用して、ｈＣＤ１３７＊＊（ヒトＣＤ１３７アミノ酸２２−１６４、ΔＣ１２１Ｓ）−ＡＡＡ−ＦＬＡＧのｈＣＤ１３７Ｌ＊ならびに抗体Ａ１／２、ＢＭＳ２０Ｈ４．９、およびＰＦ８３への結合ＥＣ５０を定量化する。９６ウェルＩｍｍｕｌｏｎ（登録商標）４ＨＢＸ  ＥＬＩＳＡプレートのウェルを、１００ナノリットルのＰＢＳ、ｐＨ７．２中の５０ナノグラムのｈＣＤ１３７＊＊で、４℃で穏やかに攪拌しながら一晩コーティングする。ＰＢＳＴ中の５％ＢＳＡでブロッキングし、洗浄した後、５倍希釈系列（３９２ナノモル濃度−０．００５ナノモル濃度）のＨｉｓタグ付き組換えヒトＣＤ１３７Ｌ（以下ｈＣＤ１３７Ｌ＊と呼ぶ）（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ）、（５３−０．０００６８ナノモル濃度）のＢＭＳ２０Ｈ４．９、（１０７−０．００１４ナノモル濃度）のＰＦ８３、または（５３−０．０００６８ナノモル濃度）の抗体Ａ１／２を、各希釈液について二重で添加し、室温で１時間穏やかに撹拌しながらインキュベートする。次いで、抗ＣＤ１３７抗体で処理したウェルを洗浄し、ＨＲＰコンジュゲートヤギ抗Ｆａｂ抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）の１：１００００希釈液を添加し、標準プロトコールに従って室温でインキュベートする。次いで、ｈＣＤ１３７Ｌ＊で処理したウェルを洗浄し、ＨＲＰコンジュゲートマウス抗Ｈｉｓ抗体（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（登録商標））の１：５０００希釈液を添加し、標準プロトコールに従ってプレートを室温でインキュベートする。ＴＭＢペルオキシダーゼ発色基質と停止液は、シグナルの視覚化と検出に関する製造元の取扱説明書に従って使用される。吸光度の読み取り値は、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアバージョン６にプロットされる。ＥＣ５０値は、ソフトウェアのＯｎｅ  Ｓｉｔｅ−Ｓｐｅｃｉｆｉｃ  Ｂｉｎｄｉｎｇ関数の非線形回帰曲線適合分析によって計算される。上述のように実施された実験では、ｈＣＤ１３７＊＊に対する結合親和性（ＥＣ５０）は、ｈＣＤ１３７Ｌで０．６ナノモル濃度、抗体１／２で１．４ナノモル濃度、ＢＭＳ２０Ｈ４．９で０．４３ナノモル濃度、ＰＦ８３で１０ナノモル濃度以上と決定される。
【０１１２】
ｈＣＤ１３７Ｌ＊のｈＣＤ１３７＊＊への結合についてＢＭＳ２０Ｈ４．９、ＰＦ８３、および抗体Ａ１／２と競合する能力は、以下のように決定できる。９６ウェルＩｍｍｕｌｏｎ  ４ＨＢＸ  ＥＬＩＳＡプレートを、１００ナノリットルのＰＢＳ、ｐＨ７．２中の５０ナノグラムのｈＣＤ１３７＊＊で４℃で穏やかに攪拌しながら一晩コーティングする。ブロッキング（ＰＢＳＴ中５％ＢＳＡによる）および洗浄後、ｈＣＤ１３７Ｌ＊の５倍希釈（１９６から０．００２５ナノモル濃度）を飽和量の指定抗体、抗体Ａ１／２（２００ナノグラム／ウェル）、ＢＭＳ２０Ｈ４．９（３ナノグラム／ウェル）、またはＰＦ８３（１０００ナノグラム／ウェル）と混合する。次に、混合物を二重でウェルに添加し、室温で１時間穏やかに撹拌しながらインキュベートする。洗浄後、プレートをＨＲＰコンジュゲートヤギ抗Ｆａｂ抗体（１：１０００希釈、Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）とともに標準プロトコールに従って室温でインキュベートする。ＴＭＢペルオキシダーゼ発色基質と停止液は、シグナルの視覚化と検出に関する製造元の取扱説明書に従って使用される。
【０１１３】
ＣＤ１３７に結合したままのｍＡｂのパーセンテージをプロットし、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用した非線形回帰曲線適合分析によりＩＣ５０値を計算する。本質的に上述のように実施された実験では、ｈＣＤ１３７Ｌ＊は０．４０１ナノモル濃度のＩＣ５０で抗体Ａ１／２のｈＣＤ１３７＊＊への結合を完全に遮断する。また、ｈＣＤ１３７Ｌ＊は、１．０３７ナノモル濃度のＩＣ５０でＰＦ８３のｈＣＤ１３７＊＊への結合を遮断する（３０％の結合シグナルが表面に残る）。ＢＭＳ２０Ｈ４．９のｈＣＤ１３７＊＊への結合に対するｈＣＤ１３７Ｌ＊の測定可能な効果はない。
【０１１４】
抗体Ａ１／２は、ＢＭＳ２０Ｈ４．９およびＰＦ８３とは異なる特定のアミノ酸残基でヒトＣＤ１３７に結合する
抗体Ａ１／２、ＢＭＳ２０Ｈ４．９、およびＰＦ８３がヒトＣＤ１３７に結合するアミノ酸残基を決定するために、ヒトＣＤ１３７点変異が導入されている。ＣＤ１３７−Ｆｃ変異体は、市販の部位特異的変異導入キット（Ｑｕｉｃｋｃｈａｎｇｅ  ＩＩキット、Ｑｉａｇｅｎ）の標準プロトコールを使用して生成される。野生型および変異型ＣＤ１３７−Ｆｃタンパク質が発現および精製される。ここで報告された全ての変異体は、野生型ＣＤ１３７−Ｆｃと同様のサイズ排除プロファイルを有する（すなわち、導入された変異はタンパク質の構造的完全性を損なわない）。抗体の結合に対する変異の影響を決定するために、ＣＤ１３７−Ｆｃ野生型および変異体に対するポイントＥＬＩＳＡアッセイが利用される。９６ウェルＩｍｍｕｌｏｎ  ４ＨＢＸ  ＥＬＩＳＡプレートのウェルを、１００ナノリットルのＰＢＳ、ｐＨ７．２中の５０ナノグラムのヒトＣＤ１３７−ＥＣＤ−Ｃ１２１Ｓ−Ｆｃまたはその変異体で４℃で穏やかに攪拌しながら一晩コーティングする。ブロッキング（ＰＢＳＴ中５％ＢＳＡによる）および洗浄後、指定抗体の８点の５倍希釈系列（１００−０．００１２８ナノモル濃度）を添加し、室温で１時間穏やかに攪拌しながらインキュベートする。ウェルを洗浄し、ＨＲＰコンジュゲート二次抗体（ＨＲＰコンジュゲートヤギ抗Ｆａｂ抗体の１：１００００希釈液（Ｊａｃｋｓｏｎ  ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）を添加し、標準プロトコールに従って室温でインキュベートする。ＴＭＢペルオキシダーゼ発色基質と停止液は、シグナルの視覚化と検出に関する製造元の取扱説明書に従って使用される。各濃度点の吸光度の読み取り値は、野生型相互作用の吸光度によって標準化される。各変異体について、８つの濃度の標準化された比率の平均が決定される。
【０１１５】
変異は、Ｐ２７、Ｎ４２、Ｄ６３、Ｑ６７、Ａ９７、Ｇ９８、Ｓ１００、Ｍ１０１、Ｑ１０４、Ｋ１１４、Ｋ１１５、Ｒ１３０、Ｉ１３２、Ｒ１３４の位置でヒトＣＤ１３７（配列番号１）に個別に導入された。表６は、示されているヒトＣＤ１３７の変異体に対するＢＭＳ２０Ｈ４．９と抗体Ａ１／２の結合プロファイルを示している。表７は、示されているヒトＣＤ１３７の変異体に対するＰＦ８３と抗体Ａ１／２の結合プロファイルを示している。まとめると、表６および７は、ＢＭＳ２０Ｈ４．９およびＰＦ−８３と比較して、抗体Ａ１／２がヒトＣＤ１３７の異なるアミノ酸残基に結合することを示している。
【表６】
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【表７】
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【０１１６】
ヒト腫瘍におけるＣＤ１３７遺伝子発現
ヒト腫瘍免疫浸潤物におけるＣＤ１３７遺伝子発現プロファイルは、Ｃａｎｃｅｒ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ａｔｌａｓ（ＴＣＧＡ）データベースと計算方法論を使用して分析できる。簡潔に述べると、ＣＤ１３７／ＣＤ３ｅの発現比は、ＯｍｉｃｓｏｆｔがキュレートしたＴＣＧＡ  ＲＮＡＳｅｑの結果から生成される。腫瘍試料と同一組織の隣接する正常部におけるＣＤ１３７／ＣＤ３ｅの発現比を比較するために、ｔ検定が実施され、各腫瘍タイプについてＣｏｈｅｎのｄが計算される。腫瘍対正常部の発現比のｔ検定でＰ値＜０．０５を有し、Ｃｏｈｅｎのｄ＞０．８の大きな効果サイズを有する腫瘍タイプは、統計的に有意である。腫瘍対正常組織におけるＣＤ１３７／ＣＤ３ｅの発現比の差は、ｌｏｇ倍率変化（ｌｏｇＦＣ）として計算される。
【０１１７】
上述のように実施された実験では、乳癌、結腸癌、子宮内膜癌、膀胱癌、および頭頸部癌を含むがこれらに限定されないさまざまながんタイプにわたって腫瘍ＣＤ１３７／ＣＤ３比の増加が観察される（表８）。ＣＤ１３７＋リンパ球が豊富な腫瘍は、抗体Ａ１、抗体Ａ２、または抗体Ａ１／２を使用したＣＤ１３７抗体療法の候補である。
【表８】
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【０１１８】
抗体Ａ１／２はｉｎ  ｖｉｖｏでＣＤ３＋Ｔ細胞腫瘍浸潤を増加させる
本明細書に開示される抗体がヒト化マウスモデルにおけるＴ細胞腫瘍浸潤を変化させる能力は、免疫組織化学（ＩＨＣ）により決定することができる。簡潔に述べると、Ｌ５５ヒト非小細胞肺癌細胞（Ｌ５５−ＣＢＧ−２Ａ−ＧＦＰ、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ）をＮＳＧマウスに移植する。腫瘍のサイズが２５０〜３００ｍｍ３に達するとき、ヒトＰＢＭＣ（８×１０６細胞）を注射し、抗体を１０ミリグラム／ｋｇで週１回４週間投与する。研究の終わりに、腫瘍はホルマリンで収集され、パラフィンに処理され、切片にされ、抗ＣＤ３抗体（Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）で染色される。画像は、Ａｐｅｒｉｏ  ＸＴ  ＳｃａｎＳｃｏｐｅ（登録商標）を使用して２００倍の倍率で取得され、半定量的に分析される。総腫瘍細胞に対するＣＤ３陽性細胞のパーセンテージは、Ａｐｅｒｉｏ  ＩｍａｇｅＳｃｏｐｅソフトウェアを使用して計算される。結果は、一元配置分散分析で比較され、続いて多重比較のためにＨｏｌｍ−Ｓｉｄａｋ法（Ｓｉｇｍａ  Ｐｌｏｔ  １２．５、Ｓｙｓｔａｔ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ）で比較される。
【０１１９】
上述のように実施された実験では、抗体Ａ１／２はＬ５５で確立された腫瘍にＣＤ３＋Ｔ細胞腫瘍の浸潤を誘発する。抗体Ａ１／２（６０％）に反応したＣＤ３＋Ｔ細胞のパーセンテージは、ＢＭＳ２０Ｈ４．９（１８％）またはヒトＩｇＧ（２７％）処理と比較して高くなっている。
【０１２０】
アミノ酸およびヌクレオチド配列
配列番号１（ヒトＣＤ１３７）
ＭＧＮＳＣＹＮＩＶＡＴＬＬＬＶＬＮＦＥＲＴＲＳＬＱＤＰＣＳＮＣＰＡＧＴＦＣＤＮＮＲＮＱＩＣＳＰＣＰＰＮＳＦＳＳＡＧＧＱＲＴＣＤＩＣＲＱＣＫＧＶＦＲＴＲＫＥＣＳＳＴＳＮＡＥＣＤＣＴＰＧＦＨＣＬＧＡＧＣＳＭＣＥＱＤＣＫＱＧＱＥＬＴＫＫＧＣＫＤＣＣＦＧＴＦＮＤＱＫＲＧＩＣＲＰＷＴＮＣＳＬＤＧＫＳＶＬＶＮＧＴＫＥＲＤＶＶＣＧＰＳＰＡＤＬＳＰＧＡＳＳＶＴＰＰＡＰＡＲＥＰＧＨＳＰＱＩＩＳＦＦＬＡＬＴＳＴＡＬＬＦＬＬＦＦＬＴＬＲＦＳＶＶＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬ
配列番号２（ＨＣＤＲ１）
ＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳ
配列番号３（ＨＣＤＲ２）
ＧＩＩＰＩＦＧＴＡＮＹＡＱＫＦＱＧ
配列番号４（ＨＣＤＲ３）
ＡＲＤＬＭＴＴＡＰＧＴＹＦＤＬ
配列番号５（ＬＣＤＲ１）
ＱＡＳＱＤＩＧＮＳＬＧ
配列番号６（ＬＣＤＲ２）
ＦＤＡＳＤＬＥＴ
配列番号７（ＬＣＤＲ３）
ＱＱＧＮＳＦＰＬＴ
配列番号８（ＨＣＶＲ）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩＰＩＦＧＴＡＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＬＭＴＴＡＰＧＴＹＦＤＬＷＧＲＧＴＬＶＴＶ
配列番号９（抗体Ａ１のＬＣＶＲ）
ＡＩＲＭＴＱＳＰＰＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＱＡＳＱＤＩＧＮＳＬＧＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＶＩＦＤＡＳＤＬＥＴＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＳＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＧＮＳＦＰＬＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫ
配列番号１０（ＨＣ）
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配列番号１１（抗体Ａ１のＬＣ）
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配列番号１２（抗体Ａ２のＬＣＶＲ）
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配列番号１３（抗体Ａ２のＬＣ）
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配列番号１４（ＨＣのＤＮＡ）
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配列番号１５（抗体Ａ１のＬＣのＤＮＡ）
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配列番号１６（抗体Ａ２のＬＣのＤＮＡ）
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配列番号１７（抗体Ａ１／２のＬＣのＤＮＡ）
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配列番号１８（ＢＭＳ２０Ｈ４．９のＨＣ）
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配列番号１９（ＢＭＳ２０Ｈ４．９のＬＣ）
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配列番号２０（ＰＦ８３のＨＣ）
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配列番号２１（ＰＦ８３のＬＣ）
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【配列表】
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【外国語明細書】
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