(57)【要約】      （修正有）【課題】ＣＤ４リンパ球除去剤を含む組成物、並びに、対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させるための、該組成物の使用方法の提供。【解決手段】疾患の治療、予防、その重篤度の軽減、及び／またはその進行の遅延を必要とする対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させる方法であって、ＣＤ４リンパ球除去剤を与えること；免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤からなる群から選ばれた少なくとも１つの追加薬剤を与えること；並びに、治療有効量の前記ＣＤ４リンパ球除去剤及び前記追加薬剤を前記対象に投与することによって、前記対象の前記疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させることを含む、前記方法。【選択図】図１１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
疾患の治療、予防、その重篤度の軽減、及び／またはその進行の遅延を必要とする対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させる方法であって、
ＣＤ４リンパ球除去剤を与えること；
免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤からなる群から選ばれた少なくとも１つの追加薬剤を与えること；並びに、
治療有効量の前記ＣＤ４リンパ球除去剤及び前記追加薬剤を前記対象に投与することによって、前記対象の前記疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させること
を含む、前記方法。
【請求項２】
対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させる方法であって、
ＣＤ４リンパ球除去剤を含む組成物を与えること；並びに、
治療有効量の前記組成物を前記対象に投与することによって、前記対象の前記疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させることを含む、前記方法。
【請求項３】
前記疾患が、感染症またはがんである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項４】
前記がんが、腎臓がん、黒色腫、前立腺がん、乳がん、膠芽細胞腫、肺がん、結腸がん、または膀胱がんである、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
前記対象がヒトである、請求項２または１に記載の方法。
【請求項６】
前記対象が、がんまたは感染症と診断されたことがある、請求項２に記載の方法。
【請求項７】
前記ＣＤ４リンパ球除去剤が、小分子、ペプチド、抗体もしくはその断片、及び核酸分子からなる群から選ばれる、請求項２または１に記載の方法。
【請求項８】
前記ＣＤ４リンパ球除去剤が、モノクローナル抗体もしくはその断片、ポリクローナル抗体もしくはその断片、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体もしくはその断片、または一本鎖抗体である、請求項２または１に記載の方法。
【請求項９】
前記ＣＤ４リンパ球除去剤が、ヒト化抗ＣＤ４抗体である、請求項２または１に記載の方法。
【請求項１０】
前記ＣＤ４リンパ球除去剤が、ザノリムマブである、請求項２または１に記載の方法。
【請求項１１】
前記ＣＤ４リンパ球除去剤が、１００〜２００ｍｇ／日、２００〜３００ｍｇ／日、３００〜４００ｍｇ／日、４００〜５００ｍｇ／日、５００〜６００ｍｇ／日、６００〜７００ｍｇ／日、７００〜８００ｍｇ／日、８００〜９００ｍｇ／日、９００〜１０００ｍｇ／日、１０００〜１１００ｍｇ／日、１１００〜１２００ｍｇ／日、１２００〜１３００ｍｇ／日、１３００〜１４００ｍｇ／日、１４００〜１５００ｍｇ／日、１５００〜１６００ｍｇ／日、１６００〜１７００ｍｇ／日、１７００〜１８００ｍｇ／日、１８００〜１９００ｍｇ／日、または１９００〜２０００ｍｇ／日で投与される、請求項２または１に記載の方法。
【請求項１２】
養子免疫治療薬が、樹状細胞ワクチンである、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１３】
前記免疫チェックポイント阻害薬が、抗ＰＤ１抗体である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１４】
前記組成物が、ｍＴＯＲ阻害剤をさらに含む、請求項１または２に記載の方法。
【請求項１５】
前記組成物が、静脈内に、筋肉内に、皮下に、腹腔内に、経口に、または吸入を介して投与される、請求項２または１に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＣＤ４リンパ球除去剤及び前記追加薬剤が同時に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＣＤ４リンパ球除去剤が、前記追加薬剤の投与前、投与中、または投与後に投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１８】
前記追加薬剤が、０．１〜０．５ｍｇ／日、０．５〜１．０ｍｇ／日、１．０〜１．５ｍｇ／日、１．５〜２．０ｍｇ／日、２．０〜２．５ｍｇ／日、２．５〜５ｍｇ／日、５〜１０ｍｇ／日、１０〜１５ｍｇ／日、１５〜２０ｍｇ／日、２０〜２５ｍｇ／日、２５〜３０ｍｇ／日、３０〜３５ｍｇ／日、３５〜４０ｍｇ／日、４０〜４５ｍｇ／日、４５〜５０ｍｇ／日、５０〜５５ｍｇ／日、５５〜６０ｍｇ／日、６０〜６５ｍｇ／日、６５〜７０ｍｇ／日、７０〜７５ｍｇ／日、７５〜８０ｍｇ／日、８０〜８５ｍｇ／日、８５〜９０ｍｇ／日、９０〜９５ｍｇ／日、または９５〜１００ｍｇ／日で投与される、請求項１に記載の方法。
【請求項１９】
前記追加薬剤が、免疫チェックポイント阻害薬である、請求項１に記載の方法。
【請求項２０】
前記免疫チェックポイント阻害薬が、ＰＤ−１に対する抗体、ＰＤ−Ｌ１に対する抗体、ＰＤ−Ｌ２に対する抗体、ＣＴＬＡ−４に対する抗体、ＫＩＲに対する抗体、ＩＤＯ１に対する抗体、ＩＤＯ２に対する抗体、ＴＩＭ−３に対する抗体、ＬＡＧ−３に対する抗体、ＯＸ４０Ｒに対する抗体、及びＰＳに対する抗体、またはこれらの組合せからなる群から選ばれる、請求項１９に記載の方法。
【請求項２１】
前記追加薬剤が養子免疫治療剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項２２】
前記養子免疫治療剤が、樹状細胞ワクチン、ペプチドワクチン、キメラＴ細胞抗原系療法、免疫サイトカイン、熱ショックタンパク質系ワクチン、腫瘍溶解物系ワクチン、腫瘍抗原を含有するウイルスベクター、ウイルスワクチン、細菌ワクチン、及び真菌ワクチン、またはこれらの組合せからなる群から選ばれる、請求項２１に記載の方法。
【請求項２３】
前記追加薬剤が、免疫アジュバントである、請求項１に記載の方法。
【請求項２４】
前記免疫アジュバントが、アルミニウム塩、ビロソーム、及び油性アジュバント、またはこれらの組合せからなる群から選ばれる、請求項２３に記載の方法。
【請求項２５】
前記追加薬剤が、免疫調節剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項２６】
前記免疫調節剤が、ｍＴＯＲ阻害剤、ＳＴＡＴ阻害剤、ＴＧＦβ受容体阻害剤、及びチロシンキナーゼ阻害剤、またはこれらの組合せからなる群から選ばれる、請求項２５に記載の方法。
【請求項２７】
前記ｍＴＯＲ阻害剤が、小分子、ペプチド、抗体またはその断片、核酸分子、及びマクロライド化合物からなる群から選ばれる、請求項１４に記載の方法。
【請求項２８】
前記ｍＴＯＲ阻害剤が、（ｉ）テムシロリムス（ＣＣＩ−７７９）またはその医薬的な等価物、アナログ、誘導体、もしくは塩、（ｉｉ）エベロリムス（ｅｖｉｒｏｌｉｍｕｓ）（ＲＡＤ−００１）またはその医薬的な等価物、アナログ、誘導体、もしくは塩、及び（ｉｉｉ）シロリムス（ラパマイシン）またはその医薬的な等価物、アナログ、誘導体、もしくは塩からなる群から選ばれる、請求項２７に記載の方法。
【請求項２９】
ＣＤ４リンパ球除去剤を含む組成物。
【請求項３０】
ＣＤ４リンパ球除去剤、並びに、免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤からなる群から選ばれた少なくとも１つの追加薬剤を含む組成物。
【請求項３１】
医薬的に許容される担体をさらに含む、請求項２９または３０に記載の組成物。
【請求項３２】
対象の疾患の治療、予防、その重篤度の軽減、及び／またはその進行の遅延用のキットであって、
ＣＤ４リンパ球除去剤を含む組成物；並びに
前記対象の前記疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させるための前記組成物の使用説明書
を含む、前記キット。
【請求項３３】
対象の疾患の治療、予防、その重篤度の軽減、及び／またはその進行の遅延用のキットであって、
ＣＤ４リンパ球除去剤；
免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤からなる群から選ばれた少なくとも１つの追加薬剤；並びに、
前記対象の前記疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させるための、前記組成物の使用説明書
を含む、前記キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、分子免疫学及び細胞生物学に関する。具体的には、ＣＤ４リンパ球除去剤を単独で、または、免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、もしくは免疫調節剤のうちのいずれか１つ以上と併せて用いた、がんまたは感染症の治療用組成物及び治療方法を本書に記載する。
【背景技術】
【０００２】
本書に引用したすべての文献は、個々の文献または特許出願が、参照することにより組み込まれるように具体的かつ個別に示されている場合と同じ範囲まで、参照することによりそれらが全体として組み込まれる。以下の説明は、本発明の理解に有用でありうる情報を含む。本書に示した情報のいずれも、先行技術もしくは現在主張されている発明に関連すると解釈されず、または、具体的もしくは暗黙的に参照されたいかなる文献も先行技術であると解釈されない。
【０００３】
免疫系は、がんを予防することができる。効果的な免疫刺激は、反復抗原投与に迅速に対応可能な長期記憶リンパ球を生産する。ＣＤ４発現リンパ球は、ヘルパーＴ細胞及び制御性Ｔ細胞の両方を含む。ヘルパーＴ細胞は、養子免疫反応を高めるには欠かせない。しかしながら、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）は、細胞傷害性Ｔ細胞の機能を阻害し、通常は、免疫反応を制限する働きをする。従って、ＣＤ４の除去は、Ｔｒｅｇ活性を取り除く方法として評価された。Ｔｒｅｇ細胞はＣＤ４リンパ球のほんの一部でしかないにもかかわらず、ＣＤ４の除去は、いまだＴｒｅｇ活性の除去に対する効果的な手法であり、重大なことには、臨床用途への迅速な移行の可能性を有する。ヒト化ＣＤ４除去抗体は、自己免疫疾患の臨床試験において、免疫系を阻害する方法として評価されている。しかしながら、本書では、免疫系を刺激するためのＣＤ４リンパ球除去抗体の利用を記載する。本書では、ＣＤ４＋リンパ球の除去と、免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤のうちのいずれか１つ以上またはこれらの組合せとの併用による、対象のがん及び感染症に対する治療を提供する。
【発明の概要】
【０００４】
本発明の様々な実施形態において、対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させる方法を提供する。該方法は、ＣＤ４リンパ球除去剤を含む組成物を与えること、並びに、治療有効量の該組成物を該対象に投与することによって該対象の該疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させることを含む。
【０００５】
本発明の様々な実施形態において、対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させる方法を提供する。該方法は、ＣＤ４リンパ球除去剤、並びに免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤からなる群から選ばれた少なくとも１つの追加薬剤を与えること；並びに、治療有効量の該ＣＤ４リンパ球除去剤、並びに治療有効量の免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤のうちの該少なくとも１つを該対象に投与することによって該対象の該疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させることを含む。いくつかの実施形態では、該方法は、治療有効量のｍＴＯＲ阻害剤を投与することをさらに含む。
【０００６】
本発明の様々な実施形態において、対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させる方法を提供する。該方法は、ＣＤ４リンパ球除去剤及び養子免疫治療薬（例えば、樹状細胞（ＤＣ）ワクチン）を与えること、並びに、治療有効量の該ＣＤ４リンパ球除去剤及び治療有効量の該養子免疫治療薬を投与することによって該対象の該疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させることを含む。
【０００７】
本発明の様々な実施形態において、対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させる方法を提供する。該方法は、ＣＤ４リンパ球除去剤及びチェックポイント阻害薬（例えば、抗ＰＤ−１抗体）を与えること、並びに、治療有効量の該ＣＤ４リンパ球除去剤及び治療有効量の該チェックポイント阻害薬を投与することによって該対象の該疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させることを含む。
【０００８】
本発明の様々な実施形態において、対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させる方法を提供する。該方法は、ＣＤ４リンパ球除去剤、樹状細胞（ＤＣ）ワクチン、及びｍＴＯＲ阻害剤を与えること、並びに、それぞれ有効量の該ＣＤ４リンパ球除去剤、樹状細胞ワクチン、及びｍＴＯＲ阻害剤を投与することによって該対象の該疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させることを含む。
【０００９】
本発明の様々な実施形態において、ＣＤ４リンパ球除去剤を含む医薬組成物を提供する。さらなる実施形態では、免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤のうちのいずれか１つを含む医薬組成物を提供する。
【００１０】
本発明の様々な実施形態において、対象の疾患の治療、予防、その重篤度の軽減、及び／またはその進行の遅延用のキットを提供する。該キットは、ＣＤ４リンパ球除去剤、並びに該対象の該疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させるための該組成物の使用説明書を含む。
【００１１】
本発明の様々な実施形態において、対象の疾患の治療、予防、その重篤度の軽減、及び／またはその進行の遅延用のキットを提供する。該キットは、ＣＤ４リンパ球除去剤、並びに免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤のうちの少なくとも１つを含む。該キットは、該対象の該疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させるための、該ＣＤ４リンパ球除去剤並びに該免疫チェックポイント阻害薬、該養子免疫治療剤、該免疫アジュバント、及び該免疫調節剤のうちの該少なくとも１つの使用説明書をさらに含む。
【００１２】
様々な実施形態において、該疾患はがんである。典型的な実施形態では、該がんは、腎臓がん、黒色腫、前立腺がん、乳がん、膠芽細胞腫、肺がん、結腸がん、または膀胱がんのいずれかでありうる。いくつかの実施形態では、該疾患は感染症である。
【００１３】
本発明の様々な方法、組成物、及びキットは、がんまたは感染症の治療において有用性を見出す。典型的な実施形態では、本発明の該方法、組成物、及びキットは、限定されないが、上皮性悪性腫瘍と黒色腫を含む悪性腫瘍細胞増殖性の障害または疾病の特定のサブセットの治療において有用性を見出す。典型的な実施形態では、上皮性悪性腫瘍としては腎細胞がんが挙げられる。
[本発明1001]
疾患の治療、予防、その重篤度の軽減、及び／またはその進行の遅延を必要とする対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させる方法であって、
ＣＤ4リンパ球除去剤を与えること；
免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤からなる群から選ばれた少なくとも1つの追加薬剤を与えること；並びに、
治療有効量の前記ＣＤ4リンパ球除去剤及び前記追加薬剤を前記対象に投与することによって、前記対象の前記疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させること
を含む、前記方法。
[本発明1002]
対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させる方法であって、
ＣＤ4リンパ球除去剤を含む組成物を与えること；並びに、
治療有効量の前記組成物を前記対象に投与することによって、前記対象の前記疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させることを含む、前記方法。
[本発明1003]
前記疾患が、感染症またはがんである、本発明1001または1002の方法。
[本発明1004]
前記がんが、腎臓がん、黒色腫、前立腺がん、乳がん、膠芽細胞腫、肺がん、結腸がん、または膀胱がんである、本発明1003の方法。
[本発明1005]
前記対象がヒトである、本発明1002または1001の方法。
[本発明1006]
前記対象が、がんまたは感染症と診断されたことがある、本発明1002の方法。
[本発明1007]
前記ＣＤ4リンパ球除去剤が、小分子、ペプチド、抗体もしくはその断片、及び核酸分子からなる群から選ばれる、本発明1002または1001の方法。
[本発明1008]
前記ＣＤ4リンパ球除去剤が、モノクローナル抗体もしくはその断片、ポリクローナル抗体もしくはその断片、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体もしくはその断片、または一本鎖抗体である、本発明1002または1001の方法。
[本発明1009]
前記ＣＤ4リンパ球除去剤が、ヒト化抗ＣＤ4抗体である、本発明1002または1001の方法。
[本発明1010]
前記ＣＤ4リンパ球除去剤が、ザノリムマブである、本発明1002または1001の方法。
[本発明1011]
前記ＣＤ4リンパ球除去剤が、100〜200ｍｇ／日、200〜300ｍｇ／日、300〜400ｍｇ／日、400〜500ｍｇ／日、500〜600ｍｇ／日、600〜700ｍｇ／日、700〜800ｍｇ／日、800〜900ｍｇ／日、900〜1000ｍｇ／日、1000〜1100ｍｇ／日、1100〜1200ｍｇ／日、1200〜1300ｍｇ／日、1300〜1400ｍｇ／日、1400〜1500ｍｇ／日、1500〜1600ｍｇ／日、1600〜1700ｍｇ／日、1700〜1800ｍｇ／日、1800〜1900ｍｇ／日、または1900〜2000ｍｇ／日で投与される、本発明1002または1001の方法。
[本発明1012]
養子免疫治療薬が、樹状細胞ワクチンである、本発明1001または1002の方法。
[本発明1013]
前記免疫チェックポイント阻害薬が、抗ＰＤ1抗体である、本発明1001または1002の方法。
[本発明1014]
前記組成物が、ｍＴＯＲ阻害剤をさらに含む、本発明1001または1002の方法。
[本発明1015]
前記組成物が、静脈内に、筋肉内に、皮下に、腹腔内に、経口に、または吸入を介して投与される、本発明1002または1001の方法。
[本発明1016]
前記ＣＤ4リンパ球除去剤及び前記追加薬剤が同時に投与される、本発明1001の方法。
[本発明1017]
前記ＣＤ4リンパ球除去剤が、前記追加薬剤の投与前、投与中、または投与後に投与される、本発明1001の方法。
[本発明1018]
前記追加薬剤が、0．1〜0．5ｍｇ／日、0．5〜1．0ｍｇ／日、1．0〜1．5ｍｇ／日、1．5〜2．0ｍｇ／日、2．0〜2．5ｍｇ／日、2．5〜5ｍｇ／日、5〜10ｍｇ／日、10〜15ｍｇ／日、15〜20ｍｇ／日、20〜25ｍｇ／日、25〜30ｍｇ／日、30〜35ｍｇ／日、35〜40ｍｇ／日、40〜45ｍｇ／日、45〜50ｍｇ／日、50〜55ｍｇ／日、55〜60ｍｇ／日、60〜65ｍｇ／日、65〜70ｍｇ／日、70〜75ｍｇ／日、75〜80ｍｇ／日、80〜85ｍｇ／日、85〜90ｍｇ／日、90〜95ｍｇ／日、または95〜100ｍｇ／日で投与される、本発明1001の方法。
[本発明1019]
前記追加薬剤が、免疫チェックポイント阻害薬である、本発明1001の方法。
[本発明1020]
前記免疫チェックポイント阻害薬が、ＰＤ−1に対する抗体、ＰＤ−Ｌ1に対する抗体、ＰＤ−Ｌ2に対する抗体、ＣＴＬＡ−4に対する抗体、ＫＩＲに対する抗体、ＩＤＯ1に対する抗体、ＩＤＯ2に対する抗体、ＴＩＭ−3に対する抗体、ＬＡＧ−3に対する抗体、ＯＸ40Ｒに対する抗体、及びＰＳに対する抗体、またはこれらの組合せからなる群から選ばれる、本発明1019の方法。
[本発明1021]
前記追加薬剤が養子免疫治療剤である、本発明1001の方法。
[本発明1022]
前記養子免疫治療剤が、樹状細胞ワクチン、ペプチドワクチン、キメラＴ細胞抗原系療法、免疫サイトカイン、熱ショックタンパク質系ワクチン、腫瘍溶解物系ワクチン、腫瘍抗原を含有するウイルスベクター、ウイルスワクチン、細菌ワクチン、及び真菌ワクチン、またはこれらの組合せからなる群から選ばれる、本発明1021の方法。
[本発明1023]
前記追加薬剤が、免疫アジュバントである、本発明1001の方法。
[本発明1024]
前記免疫アジュバントが、アルミニウム塩、ビロソーム、及び油性アジュバント、またはこれらの組合せからなる群から選ばれる、本発明1023の方法。
[本発明1025]
前記追加薬剤が、免疫調節剤である、本発明1001の方法。
[本発明1026]
前記免疫調節剤が、ｍＴＯＲ阻害剤、ＳＴＡＴ阻害剤、ＴＧＦβ受容体阻害剤、及びチロシンキナーゼ阻害剤、またはこれらの組合せからなる群から選ばれる、本発明1025の方法。
[本発明1027]
前記ｍＴＯＲ阻害剤が、小分子、ペプチド、抗体またはその断片、核酸分子、及びマクロライド化合物からなる群から選ばれる、本発明1014の方法。
[本発明1028]
前記ｍＴＯＲ阻害剤が、（ｉ）テムシロリムス（ＣＣＩ−779）またはその医薬的な等価物、アナログ、誘導体、もしくは塩、（ｉｉ）エベロリムス（ｅｖｉｒｏｌｉｍｕｓ）（ＲＡＤ−001）またはその医薬的な等価物、アナログ、誘導体、もしくは塩、及び（ｉｉｉ）シロリムス（ラパマイシン）またはその医薬的な等価物、アナログ、誘導体、もしくは塩からなる群から選ばれる、本発明1027の方法。
[本発明1029]
ＣＤ4リンパ球除去剤を含む組成物。
[本発明1030]
ＣＤ4リンパ球除去剤、並びに、免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤からなる群から選ばれた少なくとも1つの追加薬剤を含む組成物。
[本発明1031]
医薬的に許容される担体をさらに含む、本発明1029または1030の組成物。
[本発明1032]
対象の疾患の治療、予防、その重篤度の軽減、及び／またはその進行の遅延用のキットであって、
ＣＤ4リンパ球除去剤を含む組成物；並びに
前記対象の前記疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させるための前記組成物の使用説明書
を含む、前記キット。
[本発明1033]
対象の疾患の治療、予防、その重篤度の軽減、及び／またはその進行の遅延用のキットであって、
ＣＤ4リンパ球除去剤；
免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤からなる群から選ばれた少なくとも1つの追加薬剤；並びに、
前記対象の前記疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させるための、前記組成物の使用説明書
を含む、前記キット。
【００１４】
典型的な実施形態を、図面を参照して説明する。本書に開示した実施形態及び図面は、限定ではなく、例示であると見なされることを目的とする。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１Ａ】本発明の様々な実施形態の通り、ｍＴＯＲ阻害の免疫刺激及び阻害効果の両方が存在することを示しているが、正味の影響は、抗腫瘍免疫の強化である。（ａ）黒色腫腫瘍の予防モデルの実験スキーム：マウス（ｎ＝５／群）に、腫瘍溶解物でパルスしたＤＣワクチンを−３０日及び−２３日に投与し、テムシロリムスを−２３日から−１３日まで毎日腹腔内注射した。０日に、Ｂ１６腫瘍細胞を脇腹に皮下注射した。Ｂ１６腫瘍増殖（左）及び生存（右）曲線を示す。結果は、２つ組の実験の代表例である。（ｂ）ＤＣワクチン及びテムシロリムス処置後のリンパ球を特徴決定するための実験スキーム：Ｔｈｙ１．１  Ｐｍｅｌ−１リンパ球は、Ｔｈｙ１．２  Ｂ６マウスに養子移入し、このマウスは、腫瘍溶解物でパルスしたＤＣワクチンを−６日に投与され、５日間毎日テムシロリムスを投与された。脾細胞を０日に採取し、ＣＤ８、Ｔｈｙ１．１、Ｔｂｅｔ、Ｅｏｍｅｓ、及びＣＤ４／ＦｏｘＰ３について染色し、フローサイトメトリーで分析した。代表的な結果（左）及び要約データ（右）を示す。結果は、２つ組の実験の代表例である。（ｃ）リンパ球は、ｐｍｅｌ−１リンパ球及び、腫瘍溶解物でパルスし、ＣｐＧで活性化した、テムシロリムス処置ＤＣを用いて、４８時間インビトロ混合培養で特徴決定した。リンパ球は、ＣＤ８、Ｔｈｙ１．１、Ｔｂｅｔ、Ｅｏｍｅｓ、及びＣＤ４／ＦｏｘＰ３について染色し、フローサイトメトリーで分析した。代表的な結果（左）及び要約データ（右）を示す。結果は、２つ組の実験の代表例である。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００５。
【図１Ｂ】図１Ａの説明を参照のこと。
【図１Ｃ】図１Ａの説明を参照のこと。
【図２−１】本発明の様々な実施形態の通り、ＣＤ４除去がｍＴｏｒ阻害の抗腫瘍効果を高めたことを示している。（ａ）ＲＥＮＣＡ−ＣＡ９腫瘍細胞を０日にＢａｌｂ／Ｃマウス（ｎ＝５／群）に注入した。ＣＤ４リンパ球を６日目と１０日目にαＣＤ４抗体で除去した。マウスを１４日目から３４日目まで毎日テムシロリムスで処置した。腫瘍増殖を観察した。結果は、３つ組の実験の代表例である。（ｂ）同じ実験で、リンパ球を４５日目に採取し、ＣＡ９ペプチドで再刺激し、ＣＤ８及びＩＦＮγについて染色した。（ｃ）ＣＤ４除去後、脾臓、リンパ節、及び血液を０、１、１０日目に採取した。リンパ球をＣＤ４、ＣＤ８、及びＦｏｘＰ３について染色し、フローサイトメトリーで分析した。（ｃ〜ｅ）ＣＤ４除去後０、１、及び１０日目の脾臓、リンパ節、及び血液中のＣＤ４細胞の割合を示す。（ｄ）ＣＤ４除去後、ＣＤ４またはＣＤ８陽性脾細胞の割合を示し、ＦｏｘＰ３陽性のＣＤ４細胞の割合を示す。（ｅ）同じ実験で、ＣＤ４、ＣＤ８、及びＣＤ４／ＦｏｘＰ３陽性脾細胞の絶対数を示す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００５。
【図２−２】図２−１の説明を参照のこと。
【図３Ａ】本発明の様々な実施形態の通り、ＣＤ４除去とテムシロリムスの組合せが、記憶ＣＤ８細胞に依存する抗腫瘍免疫を生成したことを示している。（ａ）担がんマウス（ｎ＝８）を毎日テムシロリムスで処置し、その後、最初の腫瘍注入の３５日後に、ＲＥＮＣＡ−ＣＡ９の再投与試験を行った。ＣＤ８細胞は、αＣＤ８抗体の注射によって３６日目に除去した。（ｂ）テムシロリムス処置及びＣＤ４除去処置をし、その後、最初の腫瘍注入の３５日後に、ＲＥＮＣＡ−ＣＡ９の再投与試験を行った担がんマウス（ｎ＝８）。ＣＤ８細胞はαＣＤ８抗体の注射によって３６日目に除去した。（ｃ〜ｅ）テムシロリムス処置及びＣＤ４除去処置をしたマウスから、リンパ球を採取した。該リンパ球をＣＡ９ペプチド及びＩＬ２（１０ｕ／ｍｌ）とともに３日間インビトロで培養し、その後未感作Ｂ６マウスに養子移入し、このマウスに２４時間後、２ｘ１０５のＲＥＮＣＡ腫瘍細胞を静脈注射して投与試験を行った。該静脈注射腫瘍投与の３０日後、肺を採取した。肺重量（ｄ）及び肺腫瘍沈着物の数（ｅ）を測定した。ＩＬ２、インターロイキン−２、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００５。
【図３Ｂ】図３Ａの説明を参照のこと。
【図３Ｃ】図３Ａの説明を参照のこと。
【図３Ｄ】図３Ａの説明を参照のこと。
【図３Ｅ】図３Ａの説明を参照のこと。
【図４Ａ】本発明の様々な実施形態の通り、ＣＤ４除去とテムシロリムス処置の組合せがＣＤ８記憶細胞の機能を高めたことを示している。（ａ）実験スキーム：Ｔｈｙ１．１  Ｐｍｅｌ−１マウスからのリンパ球をＴｈｙ１．２  Ｂ６マウスに養子移入し、このマウスを腫瘍溶解物でパルスしたＤＣワクチンで刺激し、７日目及び１０日目にαＣＤ４抗体で、並びに１０日目から２４日目まで毎日テムシロリムスで処置した。結果は、３つ組の実験の代表例である。（ｂ）脾細胞（ｎ＝３／群）は、腫瘍溶解物でパルスしたＤＣワクチンでの再投与試験の１日前に採取し、抗体染色し、フローサイトメトリーで分析した。表示したマーカーに対して陽性のＣＤ８細胞の割合を示す。（ｃ）脾細胞（ｎ＝３／群）は、腫瘍溶解物でパルスしたＤＣワクチンでの再投与試験の４日後に採取し、抗体染色し、フローサイトメトリーで分析した。表示したマーカーに対して陽性のＣＤ８細胞の割合を示す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００５。
【図４Ｂ】図４Ａの説明を参照のこと。
【図４Ｃ】図４Ａの説明を参照のこと。
【図５Ａ】本発明の様々な実施形態の通り、ＦｏｘＰ３＋Ｔｒｅｇ除去及びテムシロリムスの組合せが、生体内でのＣＴＬ機能を高めたことを示している。（ａ）実験スキーム：ＤＥＲＥＧマウスは、腫瘍溶解物でパルスしたＤＣワクチンを投与され、６日目と１０日目に腹腔内でジフテリア毒素、及び１０日目から２０日目まで毎日テムシロリムス処置された。生体内ＣＴＬ分析を３５日目に行った。（ｂ）ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋細胞は、ジフテリア毒素でのマウスの処置の前後に採取した末梢リンパ球を用いて、フローサイトメトリーで評価した。（ｃ）該生体内ＣＴＬの結果は、標的細胞の注射の１４時間後に採取した脾細胞を用いて、フローサイトメトリーで分析した。ＣＴＬ、細胞傷害性Ｔリンパ球、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００５。
【図５Ｂ】図５Ａの説明を参照のこと。
【図５Ｃ】図５Ａの説明を参照のこと。
【図６Ａ】本発明の様々な実施形態の通り、ＦｏｘＰ３＋Ｔｒｅｇの養子移入が、ＣＤ４除去とテムシロリムスの組合せで処置されたマウスの生体内でのＣＴＬの機能を低減したことを示している。（ａ）実験スキーム：Ｂ６は腫瘍溶解物でパルスしたＤＣワクチンを投与され、６日目と１０日目に腹腔内でαＣＤ４抗体、及び１４日目から２４日目まで毎日テムシロリムス処置された。腫瘍溶解物でパルスしたＤＣワクチンを投与されたＧＦＰ−ＦｏｘＰ３マウスからのリンパ球から選り出したＴｒｅｇは、２０日目に養子移入され、生体内ＣＴＬ分析を３５日目に行った。（ｂ）該生体内ＣＴＬの結果は、標的細胞の注射の１４時間後に採取した脾細胞を用いて、フローサイトメトリーで分析した（ｎ＝３／群）。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００５。
【図６Ｂ】図６Ａの説明を参照のこと。
【図７−１】本発明の様々な実施形態の通り、ＣＤ４除去処置の後、回復するＴｒｅｇ集団は免疫抑制性が低いことを示している。（ａ）マウスは、図４ａに概説した実験スキームを用いて処置した。４５日目に、脾細胞をＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋細胞についてフローサイトメトリーで調べた。（ｂ）ＣＤ４除去から回復した脾細胞を、ＣＤ４＋細胞を濃縮するために用い、ＣＤ４＋細胞をその後ＣＤ２５の状態によって分類した。得られた群について、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋の状態とＣＤ４＋ＣＤ２５−の状態についての代表的なフローサイトメトリーを示す。（ｃ）ＣＤ４＋ＣＤ２５−細胞をＢ１６腫瘍溶解物でパルスしたＤＣとともに共培養した。該ＣＤ４＋ＣＤ２５−細胞は、ＩＦＮγまたはＩＬ４発現について、フローサイトメトリーで分析した。（ｄ）ＣＤ４＋ＣＤ２５＋細胞は、Ｂ１６腫瘍溶解物でパルスしたＤＣ及びＢ１６腫瘍溶解物でパルスしたＤＣで免疫付与したマウスからのＣＤ８細胞とともに共培養した。ＣＤ８細胞増殖は、ＣＦＳＥ希釈分析を用いて、フローサイトメトリーで観察した。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００５。
【図７−２】図７−１の説明を参照のこと。
【図８】本発明の様々な実施形態の通り、腫瘍がＴｒｅｇを増やすことを示している。ＦｏｘＰ３を発現するＣＤ４細胞の割合は、担がんマウス（直径約１ｃｍ）並びに腫瘍を持たないコントロールマウスからのリンパ節、脾臓、骨髄、及び末梢血リンパ球（ＰＢＬ）から調べた。フローサイトメトリーの結果を示す。
【図９】本発明の様々な実施形態の通り、αＣＤ４抗体がエフェクターＣＤ４亜型を除去することを示している。（ａ）脾細胞をαＣＤ４抗体の投与前（０日）及び投与の１日後または１０日後に採取し、フローサイトメトリーで分析した。ＣＤ４及びＩＬ−２、ＩＬ−４、またはＩＬ−１７が染色されている脾細胞の合計数を示す。（ｂ）ＩＬ−２、ＩＬ−４、またはＩＬ−１７が染色されているＣＤ４細胞の割合を示す。
【図１０】本発明の様々な実施形態の通り、免疫刺激の前のＣＤ４除去が、ＣＤ８記憶細胞の形成を防ぐことを示している。実験スキームは図４と同様である。αＣＤ４抗体が−１日と＋１日目に投与された追加の群（Ａ群）が含まれる。（ａ）記憶細胞の再投与の５日後に採取した脾細胞から、Ｔｈｙ１．１を発現するＣＤ８細胞の割合を示す。（ｂ）Ｅｏｍｅｓを発現するＣＤ８細胞の割合を示す。＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．０１、＊＊＊ｐ＜０．００５。
【図１１】本発明の様々な実施形態の通り、ＴｒｅｇまたはＣＤ４の除去が抗腫瘍効果を高めることを示している。
【図１２】本発明の様々な実施形態の通り、ＣＤ４の除去がＰＤ−１遮断抗腫瘍効果を高めることを示している。
【図１３】本発明の様々な実施形態の通り、ＣＤ４の除去が腫瘍特異的細胞性免疫を高めることを示している。Ａ．実験図。Ｂ．ＣＤ４の除去は、ＣＤ８細胞からの、腫瘍特異的インターフェロン−ガンマ分泌を刺激した。従って、ＣＤ４の除去は、腫瘍に応えて活性化されることが可能なＣＤ８細胞の教育につながった。Ｃ．これらの同じＣＤ８細胞は、ＲＥＮＣＡ腫瘍細胞の殺滅が可能であった。Ｄ．Ｂ１６腫瘍増殖曲線。
【図１４】本発明の様々な実施形態の通り、抗ＣＤ４抗体、テムシロリムス、及び樹状細胞ワクチンの組合せが抗腫瘍活性の向上を見せたことを示している。Ａ．実験図。Ｂ．Ｂ１６腫瘍増殖曲線を標準誤差（ＳＥＭ）とともに示す。＊＊ｐ＜０．００１。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
発明の詳細な説明
本書に引用したすべての参考文献は、完全に説明されたものとして、参照することによりそれらが全体として組み込まれる。別段の定義のない限り、本書で用いた技術的及び科学的用語は、本発明が属する当業者によって通常理解されるものと同じ意味を有する。Ａｌｌｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ２２ｎｄ  ｅｄ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐｒｅｓｓ  （Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  １５，２０１２）；Ｈｏｒｎｙａｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｔｏ  Ｎａｎｏｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｎａｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＣＲＣ  Ｐｒｅｓｓ  （２００８）；Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎ  ａｎｄ  Ｓａｉｎｓｂｕｒｙ，Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ  ３ｒｄ  ｅｄ．，ｒｅｖｉｓｅｄ  ｅｄ．，Ｊ．  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ  ２００６）；Ｓｍｉｔｈ，  Ｍａｒｃｈ'ｓ  Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ，Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ  ａｎｄ  Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ７ｔｈ  ｅｄ．，Ｊ．  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，ＮＹ  ２０１３）；Ｓｉｎｇｌｅｔｏｎ，Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ  ｏｆ  ＤＮＡ  ａｎｄ  Ｇｅｎｏｍｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  ３ｒｄ  ｅｄ．，Ｗｉｌｅｙ−Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ（Ｎｏｖｅｍｂｅｒ  ２８，  ２０１２）；及び、Ｇｒｅｅｎ  ａｎｄ  Ｓａｍｂｒｏｏｋ，  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  ４ｔｈ  ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓ  （Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ，  ＮＹ  ２０１２）は、本出願に用いた用語の多くへの一般的な指針を当業者に与える。抗体の製造方法の参照用には、Ｇｒｅｅｎｆｉｅｌｄ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ａ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｍａｎｕａｌ  ２ｎｄ  ｅｄ．，Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｐｒｅｓｓ（Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  ＮＹ，２０１３）；Ｋoｈｌｅｒ  ａｎｄ  Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｄｅｒｉｖａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ａｎｔｉｂｏｄｙ−ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ  ｔｉｓｓｕｅ  ｃｕｌｔｕｒｅ  ａｎｄ  ｔｕｍｏｒ  ｌｉｎｅｓ  ｂｙ  ｃｅｌｌ  ｆｕｓｉｏｎ，Ｅｕｒ．  Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９７６  Ｊｕｌ，６（７）：５１１−９；Ｑｕｅｅｎ  ａｎｄ  Ｓｅｌｉｃｋ，Ｈｕｍａｎｉｚｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ，Ｕ．Ｓ．Ｐａｔｅｎｔ  Ｎｏ．５，５８５，０８９（１９９６  Ｄｅｃ）；及びＲｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｒｅｓｈａｐｉｎｇ  ｈｕｍａｎ  ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  ｆｏｒ  ｔｈｅｒａｐｙ，Ｎａｔｕｒｅ  １９８８  Ｍａｒ  ２４，３３２（６１６２）：３２３−７を参照されたい。
【００１７】
小児科学の参照用には、Ｓｃｈｗａｒｔｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  ５−Ｍｉｎｕｔｅ  Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ  Ｃｏｎｓｕｌｔ  ４ｔｈ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，（Ｊｕｎｅ  １６，  ２００５）；Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｔｈｅ  Ｈａｒｒｉｅｔ  Ｌａｎｅ  Ｈａｎｄｂｏｏｋ：Ａ  Ｍａｎｕａｌ  ｆｏｒ  Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ  Ｈｏｕｓｅ  Ｏｆｆｉｃｅｒｓ  １７ｔｈ  ｅｄ．，Ｍｏｓｂｙ（Ｊｕｎｅ  ２４，  ２００５）；及びＨａｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ａｎｄ  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ  ｉｎ  Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ（Ｃｕｒｒｅｎｔ  Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ  Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ  ＆  Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）  １８ｔｈ  ｅｄ．，  ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｍｅｄｉｃａｌ  （Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ２５，  ２００６）を参照されたい。
【００１８】
当業者であれば、本発明の実施に用いることができる本書に記載のものと同様または同等の多くの方法及び材料を認めるであろう。本発明の他の特徴及び利点は、例として本発明の実施形態の様々な特徴を説明する添付図面と併せて、以下の詳細な説明から明らかになろう。実際には、本発明は、記載した方法及び材料に何ら限定されない。便宜上、本明細書、実施例、及び添付の特許請求の範囲に本書で用いられた特定の用語をここにまとめる。
【００１９】
別段の定めのない限り、または文脈から黙示的でない限り、以下の用語及び成句は以下に示した意味を含む。明確に別段の定めのない限り、または文脈から明らかでない限り、以下の用語及び成句は、該用語または成句が関連する技術分野で習得された意味を排除しない。本発明の範囲は、特許請求の範囲によってのみ限定されるため、これらの定義は、具体的な実施形態の説明に役立てるために提供され、請求項にかかる発明を限定することが目的ではない。別段の定義のない限り、本書で用いた技術的及び科学的用語は、本発明が属する当業者によって通常理解されるものと同じ意味を有する。
【００２０】
ここで、「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」という用語は、実施形態にとって有用であって、さらに有用であるなしを問わず不特定の要素の包含を受け入れる、組成物、方法、及びそれらの（１つまたは複数の）各成分に関連して使用される。当業者には、一般に、本書で使用される用語は、通常「オープンな」用語として意図されている（例えば、「含むこと（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」という用語は、「〜を含めるがこれに限定されない」と解釈されるものとし、「有すること（ｈａｖｉｎｇ）」という用語は、「少なくとも〜を有する」と解釈されるものとし、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」という用語は、「〜が挙げられるがこれに限定されない」と解釈されるものとする、等）ことを目的とすることが理解されよう。
【００２１】
別段の定めのない限り、「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」、並びに本出願（特に、特許請求の範囲の中で）の特定の実施形態の説明の中で使用される同様の言及は、単数形及び複数形の両方を網羅すると解釈されうる。本書の値域の記載は、該範囲内の別個の値の各々への個別の簡単な指示方法の役割を果たすだけの目的である。本書に別段の指示のない限り、個別の値の各々は、本書に個別に記載されたものとして本明細書に組み込まれる。本書に記載の方法は、本書に別段の指示のない限り、または文脈によって明らかに矛盾しない限り、適切な順序で行うことができる。あらゆる例、または、本書の特定の実施形態に関連する例示的文体（例えば、「ｓｕｃｈ  ａｓ」）の使用は、単に本出願の理解をさらに容易にすることを目的とし、別段に主張した本出願の範囲の限定をもたらさない。略語「ｅ．ｇ．」は、ラテン語のｅｘｅｍｐｌｉ  ｇｒａｔｉａに由来し、本書では、限定されない例を示すために用いられる。従って、略語「ｅ．ｇ．」は、「例えば（ｆｏｒ  ｅｘａｍｐｌｅ）」という用語と同義である。本明細書の文体は、本出願の実施に必須の、任意の主張されていない要素を示すと見なされるべきではない。
【００２２】
ここで、「処置する（ｔｒｅａｔ）」、「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」、「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、または「緩和（ａｍｅｌｉｏｒａｔｉｏｎ）」という用語は、疾病、障害、または医学的状態に関して用いられた場合、治療的処置及び予防的（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃもしくはｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ）対策の両方のことを言うとともに、その目的は、症状もしくは疾患の進行または重篤度の予防、回復、緩和、改善、抑制、低下、減速、もしくは停止である。「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」という用語は、疾患の悪影響もしくは症状の少なくとも１つを減少または緩和することを含む。治療は、通常、１つ以上の症状または臨床的指標が減少した場合に「有効」である。または、治療は、病態の進行が減少または停止された場合に「有効」である。すなわち、「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、症状または指標の改良だけでなく、治療しない場合に予期される症状の進行もしくは悪化の停止または少なくとも減速を含む。さらに、「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、該治療が最終的に失敗であっても、有益な結果の追求もしくは獲得、または、疾患の個々の発症の可能性を下げることを意味しうる。治療を必要とする人とは、すでに該疾患を有する人及び該疾患に罹りやすい人、または該疾患が予防されるべき人が挙げられる。
【００２３】
「有益な結果」または「望ましい結果」とは、病状の重篤度の低下または緩和、病状の悪化の防止、病状の治癒、病状の発症の防止、患者の病状の発症の可能性の低下、死亡率と罹患率の減少、及び患者の寿命もしくは平均余命の延長を挙げることができるが、これらに何ら限定されない。限定されない例として、「有益な結果」または「望ましい結果」は、１つ以上の症状の緩和、欠損の範囲の縮小、がんの進行の安定化（すなわち、悪化しない）状態、転移もしくは侵襲性の遅延または減速、及びがんに伴う症状の改善もしくは緩和でありうる。
【００２４】
ここで、「投与」という用語は、本書に開示の薬剤を、該薬剤の所望の部位での少なくとも部分的局在をもたらす方法または経路によって、対象へ配置することを言う。
【００２５】
ここで、「がん」または「腫瘍」とは、身体の器官及び系統の正常機能を妨げる制御されない細胞増殖、並びに／または、悪性もしくは良性を問わずすべての新生細胞の成長及び増殖、並びにすべての前がん状態及びがん性の細胞並びに組織を言う。この定義の中には、良性及び悪性がん、並びに休眠腫瘍または微小転移巣を含む。ここで、「上皮性悪性腫瘍」という用語は、上皮細胞から生じるがんを言う。ここで、「侵襲的」という用語は、周辺組織への浸潤及び周辺組織の破壊能力を言う。黒色腫は、皮膚腫瘍の侵襲型である。がんの例としては、限定されないが、Ｂ細胞リンパ腫（ホジキンリンパ腫及び／または非ホジキンリンパ腫）、脳腫瘍（ｂｒａｉｎ  ｔｕｍｏｒ）、乳がん、結腸がん、肺がん、肝細胞がん、胃がん、膵臓がん、子宮頸がん、卵巣がん、肝臓がん、膀胱がん、尿道がん、甲状腺がん、腎臓がん、上皮性悪性腫瘍、黒色腫、頭頸部がん、脳腫瘍（ｂｒａｉｎ  ｃａｎｃｅｒ）、並びに、限定されないがアンドロゲン依存性前立腺がん及びアンドロゲン非依存性前立腺がんを含む前立腺がんが挙げられる。
【００２６】
ここで、「疾患」及び「病状」とは、がん、腫瘍、または感染症を含みうる。典型的な実施形態では、該疾患は、悪性腫瘍細胞増殖性の障害もしくは疾患の任意の型を含むが、これに何ら限定されない。典型的な実施形態では、疾患は、腎臓がん、黒色腫、前立腺がん、乳がん、膠芽細胞腫、肺がん、結腸がん、または膀胱がんのうちのいずれか１つ以上を含む。
【００２７】
ここで、「免疫細胞」とは、哺乳類の免疫系の細胞を言い、限定されないが、抗原提示細胞、Ｂ細胞、好塩基球、細胞傷害性Ｔ細胞、樹状細胞、好酸球、顆粒球、ヘルパーＴ細胞、白血球、リンパ球、マクロファージ、肥満細胞、記憶細胞、単球、ナチュラルキラー細胞、好中球、食細胞、形質細胞、及びＴ細胞が挙げられる。
【００２８】
ここで、「免疫反応」とは、限定されないが、先天免疫、液性免疫、細胞性免疫、免疫、炎症反応、後天性（適応）免疫、自己免疫、及び／または過剰免疫を含む免疫を言う。
【００２９】
ここで、「試料」または「生体試料」という用語は、生物有機体から採取もしくは単離した試料、例えば、対象からの腫瘍試料を意味する。典型的な生体試料としては、限定されないが、体液試料；血清；血漿；尿；唾液；腫瘍試料；腫瘍生検標本及び／または組織試料等が挙げられる。該用語は、上述した試料の混合物も含む。「試料」という用語は、未処置または予備処置（もしくは予備加工）生体試料も含む。いくつかの実施形態では、試料は対象からの１つ以上の細胞を含みうる。いくつかの実施形態では、試料は腫瘍細胞試料でありうるとともに、例えば、該試料は、がん細胞、腫瘍由来の細胞、及び／または腫瘍生研標本を含みうる。
【００３０】
「機能的」という用語は、「誘導体」、「変種」、または「断片」と併せて用いられた場合、その誘導体、変種、もしくは断片となる実体または分子の生物活性と実質的に同じ生物活性を有するポリペプチドを言う。
【００３１】
ここで、「対象」とは、ヒトまたは動物を意味する。通常、該動物は、霊長類、げっ歯類、家畜、または狩猟動物等の脊椎動物である。霊長類としては、チンパンジー、カニクイザル、サル、クモザル、及びマカク、例えば、アカゲザルが挙げられる。げっ歯類としては、マウス、ラット、ウッドチャック、フェレット、ウサギ、及びハムスターが挙げられる。家畜及び狩猟動物としては、ウシ、ウマ、ブタ、シカ、バイソン、スイギュウ、ネコ科の種、例えば、イエネコ、及びイヌ科の種、例えば、イヌ、キツネ、オオカミが挙げられる。本書では、「患者」、「個体」、及び「対象」という用語は、同じ意味で用いられる。実施形態では、該対象は哺乳類である。該哺乳類は、ヒト、非ヒト霊長類、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウマ、またはウシでありうるが、これらの例には限定されない。さらに、本書に記載の方法は、家畜及び／または愛玩動物の治療に用いることができる。
【００３２】
対象は、観察が必要な病態（例えば、がんもしくは感染症）をもしくはそのような病態に関連する１つ以上の合併症を患っているかもしくは有していると以前に診断または同定されたことがあってもよく、かつ場合により、該病態または該疾病／疾患に関連する１つ以上の合併症の治療をすでに受けたことがあってもよい。または、対象は、該疾病／疾患に関連する病態または１つ以上の合併症を有していると以前に診断された者でなくてもよい。例えば、対象は、病態もしくは病態に関連する１つ以上の合併症の危険因子の１つ以上を示す者である場合もあるし、危険因子を示さない対象である場合もある。特定の病態に対する治療「を必要とする対象」とは、その疾病／疾患を有する、その疾患を有すると診断された、またはその疾病を発症する危険がある対象でありうる。
【００３３】
「統計的に有意な」または「有意に」という用語は、差のある統計的証拠を言う。これは、帰無仮説が実際に真である場合に帰無仮説を棄却する決定を行う確率と定義される。該決定は、しばしばｐ値を用いてなされる。
【００３４】
ここで、「ＣＤ４リンパ球」とは、ＣＤ４を発現するリンパ球、すなわち、ＣＤ４＋であるリンパ球を言う。ＣＤ４リンパ球は、ＣＤ４を発現するＴ細胞でありうる。
【００３５】
「Ｔ細胞」及び「Ｔリンパ球」という用語は、どちらを使っても変わりはなく、本書では同義的に用いられる。例としては、限定されないが、未感作Ｔ細胞、中心記憶Ｔ細胞、エフェクター記憶Ｔ細胞、またはこれらの組合せが挙げられる。
【００３６】
ここで、「治療薬」とは、例えば、疾病の治療、抑制、予防、その影響の軽減、その重篤度の低下、発症の可能性の低下、その進行の遅延、及び／または治癒のために使用される薬剤を言う。該治療薬が標的とする疾病としては、限定されないが、感染症、上皮性悪性腫瘍、非上皮性悪性腫瘍、リンパ腫、白血病、胚細胞腫瘍、芽細胞腫、様々な免疫細胞で発現する抗原、及び様々な血液疾患に関連する細胞で発現する抗原、並びに／または炎症性疾患が挙げられる。
【００３７】
本書で別段に定義されない限り、本出願に関連して用いた科学的及び技術的用語は、本開示が属する当業者によって通常理解されるものと同じ意味を有するものとする。本発明は、本書に記載の特定の手段、プロトコル、及び試薬等に限定されず、それ自体は変動しうることを理解されたい。本書で用いた用語は、特定の実施形態の記載のみを目的とし、特許請求の範囲によってのみ定義される本発明の範囲を限定することを意図しない。
【００３８】
本書では、ＣＤ４リンパ球除去剤を単独で、もしくは様々な他の療法及び薬剤と組み合わせて用い、免疫系を標的とした、がん並びに／または感染症を治療するための方法、組成物、並びにキットを提供する。ＣＤ４リンパ球除去剤との組合せで用いることができる治療法及び薬剤の非限定的な例としては、免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【００３９】
治療方法
様々な実施形態において、本発明は、対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させる方法を提供する。該方法は、ＣＤ４リンパ球除去剤を含む組成物を与えること、並びに治療有効量の該組成物を該対象に投与することによって該対象の該疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させることを含む。いくつかの実施形態では、該疾患はがんまたは感染症である。いくつかの実施形態では、該対象はがんと診断されている。いくつかの実施形態では、該対象は、感染症と診断されている。様々な実施形態において、該対象は、ＣＤ４リンパ球除去剤を含む該組成物の投与の前に、免疫系を準備するのに十分長い期間疾病に罹患している。様々な実施形態において、該対象の罹患期間は、１日以上、２日以上、３日以上、４日以上、５日以上、６日以上、７日以上、８日以上、９日以上、１０日以上、１５日以上、２０日以上、１か月以上、２か月以上、３か月以上、４か月以上、５か月以上、６か月以上、１年以上、またはこれらの組合せである。
【００４０】
様々な実施形態において、本発明は、対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させる方法を提供する。該方法は、ＣＤ４リンパ球除去剤、並びに免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療薬、免疫アジュバント、及び免疫調節剤からなる群から選ばれた少なくとも１つの追加薬剤を与えること；並びに、治療有効量の該ＣＤ４リンパ球除去剤、並びに治療有効量の免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療薬、免疫アジュバント、及び免疫調節剤のうちの少なくとも１つを該対象に投与することによって該対象の該疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させることを含む。いくつかの実施形態では、該方法は、ｍＴＯＲ阻害剤を該対象に投与することをさらに含む。様々な実施形態において、該ＣＤ４リンパ球除去剤及び該追加薬剤は、連続して、または同時に投与されうる。いくつかの実施形態では、該疾患はがんである。いくつかの実施形態では、該疾患は感染症である。
【００４１】
様々な実施形態において、本発明は、対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させる方法を提供する。該方法は、ＣＤ４リンパ球除去剤及び養子免疫治療薬を与えること、並びに、治療有効量の該ＣＤ４リンパ球除去剤及び治療有効量の該養子免疫治療薬を該対象に投与することによって該対象の該疾患を治療し、抑制し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させることを含む。実施形態では、該ＣＤ４リンパ球除去剤は、抗ＣＤ４抗体、その断片、もしくはその変種であり、該養子免疫治療薬は樹状細胞ワクチンである。様々な実施形態において、該疾患はがんまたは感染症である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４抗体及び樹状細胞ワクチンは、同時に投与される。いくつかの実施形態では、該抗ＣＤ４抗体及び該樹状細胞ワクチンは、連続的に投与される。いくつかの実施形態では、該方法は、有効量のｍＴＯＲ阻害剤を、該ＣＤ４リンパ球除去剤及び該養子免疫治療薬と連続して、または同時に投与することをさらに含みうる。
【００４２】
様々な実施形態において、本発明は、対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させる方法を提供する。該方法は、ＣＤ４リンパ球除去剤及び免疫チェックポイント阻害薬を与えること、並びに、治療有効量の該ＣＤ４リンパ球除去剤及び治療有効量の該免疫チェックポイント阻害薬を該対象に投与することによって該対象の該疾患を治療し、抑制し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させることを含む。実施形態では、該ＣＤ４リンパ球除去剤は、抗ＣＤ４抗体、その断片、またはその変種であり、該チェックポイント阻害薬は、抗ＰＤ−１抗体、その断片、またはその変種である。様々な実施形態において、該疾患はがんまたは感染症である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４抗体及び抗ＰＤ−１抗体は、同時に投与される。いくつかの実施形態では、該抗ＣＤ４抗体及び該抗ＰＤ−１抗体は、連続的に投与される。該方法は、ｍＴＯＲ阻害剤を投与することをさらに含みうる。いくつかの実施形態では、該方法は、有効量のｍＴＯＲ阻害剤を、該ＣＤ４リンパ球除去剤及び該チェックポイント阻害薬と連続して、または同時に投与することをさらに含みうる。
【００４３】
様々な実施形態において、本発明は、対象の疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させる方法を提供する。該方法は、ＣＤ４リンパ球除去剤、養子免疫治療薬、及びｍＴＯＲ阻害剤を与えること、並びに、治療有効量の該ＣＤ４リンパ球除去剤、治療有効量の該養子免疫治療薬、及び治療有効量の該ｍＴＯＲ阻害剤を該対象に投与することによって該対象の該疾患を治療し、抑制し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させることを含む。実施形態では、該ＣＤ４リンパ球除去剤は、抗ＣＤ４抗体、その断片、またはその変種である。実施形態では、該養子免疫治療薬は樹状細胞ワクチンである。実施形態では、該ｍＴＯＲ阻害剤は、テムシロリムスである。様々な実施形態において、該疾患はがんまたは感染症である。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４抗体、樹状細胞ワクチン、及び該ｍＴＯＲ阻害剤（例えばテムシロリムス）は同時に投与される。いくつかの実施形態では、抗ＣＤ４抗体、樹状細胞ワクチン、及び該ｍＴＯＲ阻害剤（例えばテムシロリムス）は連続的に投与される。
【００４４】
様々な実施形態において、本書に記載の方法は、がんの転移の予防またはがんの再発の予防のために、それを必要とする対象に用いられうる。
【００４５】
本発明の様々な実施形態において、該ＣＤ４リンパ球除去剤は、小分子、ペプチド、抗体またはその断片、及び核酸分子のうちのいずれか１つ以上でありうる。実施形態では、該抗体はＣＤ４を、制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ細胞）等のＣＤ４発現Ｔ細胞に特異的に結び付ける。
【００４６】
抗体（例えば、抗ＣＤ４抗体または抗ＰＤ−１抗体）は、モノクローナル抗体もしくはその断片、ポリクローナル抗体もしくはその断片、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体もしくはその断片、または一本鎖抗体のうちのいずれか１つ以上でよい。これら抗体は、任意の起源、例えば、ラット、マウス、モルモット、イヌ、ネコ、ウサギ、ブタ、ウシ、ウマ、ヤギ、ロバ、またはヒト由来でよい。抗体の断片は、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ′）２、Ｆｖ断片、またはそれらの融合タンパク質のうちのいずれか１つ以上でよい。
【００４７】
様々な実施形態において、該ＣＤ４リンパ球除去剤は、ヒト化抗ＣＤ４抗体またはその断片である。様々な実施形態において、該ＣＤ４リンパ球除去剤は、ザノリムマブ、ケリキシマブ、及びＯＫＴ４である。
【００４８】
本発明のいくつかの実施形態において、該ＣＤ４リンパ球除去剤及び該追加薬剤は、同時に投与される。他の実施形態では、該ＣＤ４リンパ球除去剤及び該追加薬剤は、連続的に投与される。例えば、該ＣＤ４リンパ球除去剤は、該追加薬剤の投与前、投与中、または投与後に投与される。さらなる実施形態では、該ＣＤ４リンパ球除去剤及び該追加薬剤は、食物とともに、または食物なしで投与される。本発明によれば、該ＣＤ４リンパ球除去剤及び／または該追加薬剤は、限定されないが、がんワクチン及び化学療法薬を含む他の薬剤と組み合わせて用いてもよい。本書に記載の通り、該追加薬剤は、免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療薬、免疫アジュバント、及び免疫調節剤のうちのいずれか１つ以上である。
【００４９】
様々な実施形態において、該追加薬剤は、免疫チェックポイント阻害薬である。免疫チェックポイント阻害薬の例としては、限定されないが、抗ＰＤ−１抗体、例えば、ランブロリズマブ（ＭＫ−３４７５）、ニボルマブ（ＢＭＳ−９３６５５８）、及びピディリズマブ（ＣＴ−０１１）、抗ＰＤ−Ｌ１抗体、例えば、ＭＰＤＬ３２８０Ａ（ＲＧ７４４６）、ＭＥＤＩ４７３６、及びＢＭＳ−９３６５５９、抗ＰＤ−Ｌ２抗体、Ｂ７−ＤＣ−Ｆｃ融合タンパク質、例えば、ＡＭＰ−２２４、抗ＣＴＬＡ−４抗体、例えば、トレメリムマブ（ＣＰ−６７５，２０６）及びイピリムマブ（ＭＤＸ−０１０）、Ｂ７／ＣＤ２８受容体スーパーファミリーに対する抗体、抗インドールアミン（２，３）−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）抗体、抗ＩＤＯ１抗体、抗ＩＤＯ２抗体、トリプトファン、トリプトファン模倣薬、１−メチルトリプトファン（１−ＭＴ）)、インドキシモド（Ｄ−１−メチルトリプトファン（Ｄ−１−ＭＴ））、Ｌ−１−メチルトリプトファン（Ｌ−１−ＭＴ）、ＴＸ−２２７４、ヒドロキシアミジン阻害剤、例えば、ＩＮＣＢ０２４３６０、抗ＴＩＭ−３抗体、抗ＬＡＧ−３抗体、例えば、ＢＭＳ−９８６０１６、ＭＨＣクラスＩＩ駆動樹状細胞活性化を作動させる組み換え可溶性ＬＡＧ−３Ｉｇ融合タンパク質、例えば、ＩＭＰ３２１、抗ＫＩＲ２ＤＬ１／２／３または抗ＫＩＲ）抗体、例えば、リリルマブ（ＩＰＨ２１０２）、ウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３）、抗ホスファチジルセリン（抗ＰＳ）抗体、例えば、バビツキシマブ、Ｎ−グリコリル−ＧＭ３ガングリオシドのヒトモノクローナル抗体に対する抗イディオタイプマウスモノクローナル抗体、例えば、ラコツモマブ（以前は１Ｅ１０の名で呼ばれた）、抗ＯＸ４０Ｒ抗体、例えばＩｇＧ  ＣＤ１３４  ｍＡｂ、抗Ｂ７−Ｈ３抗体、例えば、ＭＧＡ２７１、並びに免疫チェックポイント遺伝子を抑制することによってがんを治療するように設計された低分子干渉（ｓｉ）ＲＮＡ系がんワクチンが挙げられる。さらなる情報は、十分に説明されたものとして、参照することにより全体として本書に組み込まれるＣｒｅｅｌａｎ  ＢＣ（Ｕｐｄａｔｅ  ｏｎ  ｉｍｍｕｎｅ  ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｉｎ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ，Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｏｎｔｒｏｌ．２０１４  Ｊａｎ；２１（１）：８０−９）及びＪａｎｅ  ｄｅ  Ｌａｒｔｉｇｕｅ（Ａｎｏｔｈｅｒ  Ｉｍｍｕｎｅ  Ｃｈｅｃｋｐｏｉｎｔ  Ｅｍｅｒｇｅｓ  ａｓ  Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｔａｒｇｅｔ，  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ  ｏｎｌｉｎｅ  ｂｙ  ｏｎｃｌｉｖｅ．ｃｏｍ，  Ｔｕｅｓｄａｙ，  Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ  ２４，２０１３）に見出すことができる。いくつかの実施形態では、該免疫チェックポイント阻害薬は、ＰＤ−１に対する抗体、ＰＤ−Ｌ１に対する抗体、ＰＤ−Ｌ２に対する抗体、ＣＴＬＡ−４に対する抗体、ＫＩＲに対する抗体、ＩＤＯ１に対する抗体、ＩＤＯ２に対する抗体、ＴＩＭ−３に対する抗体、ＬＡＧ−３に対する抗体、ＯＸ４０Ｒに対する抗体、及びＰＳに対する抗体、またはこれらの組合せからなる群から選ばれる。
【００５０】
様々な実施形態において、該追加薬剤は、養子免疫治療剤である。いくつかの実施形態では、該養子免疫治療剤は、樹状細胞ワクチン、ペプチドワクチン、キメラＴ細胞抗原系療法、Ｔ細胞系療法、免疫サイトカイン、熱ショックタンパク質系ワクチン、腫瘍溶解物系ワクチン、腫瘍抗原を含有するウイルスベクター、ウイルスワクチン、細菌ワクチン、及び真菌ワクチン、またはこれらの組合せからなる群から選ばれる。さらなる情報は、十分に説明されたものとして、参照することにより全体として本書に組み込まれる、Ｒａｄｖａｎｙｉ  ｅｔ  ａｌ．Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０１２  Ｄｅｃ  １５；１８（２４）：６７５８−７０；Ｅｐｕｂ  ２０１２  Ｏｃｔ  ２に見出すことができる。
【００５１】
様々な実施形態において、該追加薬剤は、免疫アジュバントである。アジュバントの例としては、限定されないが、カチオン性リポソーム−ＤＮＡ複合体ＪＶＲＳ−１００、水酸化アルミニウムワクチンアジュバント、リン酸アルミニウムワクチンアジュバント、硫酸アルミニウムカリウムアジュバント、Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ、ＩＳＣＯＭ（商標）、完全フロイントアジュバント、フロイント不完全アジュバント、ＣｐＧ  ＤＮＡワクチンアジュバント、コレラ毒素、コレラ毒素Ｂサブユニット、リポソーム、サポニンワクチンアジュバント、ＤＤＡアジュバント、スクアレン系アジュバント、Ｅｔｘ  Ｂサブユニットアジュバント、ＩＬ−１２ワクチンアジュバント、ＬＴＫ６３ワクチン変異体アジュバント、ＴｉｔｅｒＭａｘ  Ｇｏｌｄアジュバント、Ｒｉｂｉワクチンアジュバント、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ  ＩＳＡ  ７２０アジュバント、コリネバクテリウム由来Ｐ４０ワクチンアジュバント、ＭＰＬ（商標）アジュバント、ＡＳ０４、ＡＳ０２、リポ多糖類ワクチンアジュバント、ムラミルジペプチドアジュバント、ＣＲＬ１００５、死滅Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｐａｒｖｕｍワクチンアジュバント、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ  ＩＳＡ  ５１、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ成分ワクチンアジュバント、カチオン性リポソームワクチンアジュバント、アダマンチルアミドジペプチドワクチンアジュバント、アラセルＡ、ＶＳＡ−３アジュバント、アルミニウムワクチンアジュバント、Ｐｏｌｙｇｅｎワクチンアジュバント、Ａｄｊｕｍｅｒ（商標）、藻類グルカン、Ｂａｙ  Ｒ１００５、Ｔｈｅｒａｍｉｄｅ（登録商標）、ステアリルチロシン、Ｓｐｅｃｏｌ、Ａｌｇａｍｍｕｌｉｎ、Ａｖｒｉｄｉｎｅ（登録商標）、リン酸カルシウムゲル、ＣＴＡ１−ＤＤ遺伝子融合タンパク質、ＤＯＣ／Ａｌｕｍ  Ｃｏｍｐｌｅｘ、ガンマイヌリン、Ｇｅｒｂｕアジュバント、ＧＭ−ＣＳＦ、ＧＭＤＰ、組み換えｈＩＦＮ−ガンマ／インターフェロン−ｇ、インターロイキン−１β、インターロイキン−２、インターロイキン−７、Ｓｃｌａｖｏペプチド、Ｒｅｈｙｄｒａｇｅｌ  ＬＶ、Ｒｅｈｙｄｒａｇｅｌ  ＨＰＡ、Ｌｏｘｏｒｉｂｉｎｅ、ＭＦ５９、ＭＴＰ−ＰＥリポソーム、ムラメチド、ムラパルミチン、Ｄ−ムラパルミチン、ＮＡＧＯ、非イオン性界面活性剤ベシクル、ＰＭＭＡ、渦巻型のタンパク質、ＱＳ−２１、ＳＰＴ（抗原処方）、ナノエマルションワクチンアジュバント、ＡＳ０３、Ｑｕｉｌ−Ａワクチンアジュバント、ＲＣ５２９ワクチンアジュバント、ＬＴＲ１９２Ｇワクチンアジュバント、Ｅ．ｃｏｌｉ易熱性毒素、ＬＴ、非晶質アルミニウムヒドロキシホスフェートスルフェートアジュバント、リン酸カルシウムワクチンアジュバント、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ  Ｉｎｃｏｍｐｌｅｔｅ  Ｓｅｐｐｉｃアジュバント、イミキモド、レシキモド、ＡＦ０３、フラジェリン、ポリ（Ｉ：Ｃ）、ＩＳＣＯＭＡＴＲＩＸ（登録商標）、Ａｂｉｓｃｏ−１００ワクチンアジュバント、アルブミン−ヘパリン微粒子ワクチンアジュバント、ＡＳ−２ワクチンアジュバント、Ｂ７−２ワクチンアジュバント、ＤＨＥＡワクチンアジュバント、副刺激分子に対する抗体を含む免疫リポソーム、ＳＡＦ−１、センダイプロテ���リポソーム、センダイ含有脂質マトリクス、トレオニルムラミルジペプチド（ＴＭＤＰ）、Ｔｙ粒子ワクチンアジュバント、ブピバカインワクチンアジュバント、ＤＬ−ＰＧＬ（ポリエステル  ポリ（ＤＬ−ラクチド−コ−グリコリド））ワクチンアジュバント、ＩＬ−１５ワクチンアジュバント、ＬＴＫ７２ワクチンアジュバント、ＭＰＬ−ＳＥワクチンアジュバント、コレラ毒素の非毒性変異体Ｅ１１２ＫのｍＣＴ−Ｅ１１２Ｋ、マトリクス−Ｓ、及び水溶性トリテルペングルコシド化合物が挙げられる。さらなる情報は、十分に説明されたものとして、参照することにより全体として本書に組み込まれる、Ｓａｙｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，（ＶＡＸＪＯ：Ａ  ＷＥＢ−ＢＡＳＥＤ  ＶＡＣＣＩＮＥ  ＡＤＪＵＶＡＮＴ  ＤＡＴＡＢＡＳＥ  ＡＮＤ  ＩＴＳ  ＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮ  ＦＯＲ  ＡＮＡＬＹＳＩＳ  ＯＦ  ＶＡＣＣＩＮＥ  ＡＤＪＵＶＡＮＴＳ  ＡＮＤ  ＴＨＥＩＲ  ＵＳＥＳ  ＩＮ  ＶＡＣＣＩＮＥ  ＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴ，２０１２；２０１２：８３１４８６；Ｅｐｕｂ  ２０１２  Ｍａｒ  １３）に見出すことができる。いくつかの実施形態では、該免疫アジュバントは、アルミニウム塩、ビロソーム、及び油性アジュバント、またはこれらの組合せからなる群から選ばれる。
【００５２】
様々な実施形態において、該追加薬剤は、免疫調節剤である。いくつかの実施形態では、該免疫調節剤は、ｍＴＯＲ阻害剤、ＳＴＡＴ阻害剤、ＴＧＦβ受容体阻害剤、及びチロシンキナーゼ阻害剤、またはこれらの組合せからなる群から選ばれる。
【００５３】
様々な実施形態において、該方法はｍＴＯＲ阻害剤を該対象に投与することをさらに含んでよい。本発明によれば、該ｍＴＯＲ阻害剤は、小分子、ペプチド、抗体もしくはその断片、核酸分子、及び／またはマクロライド化合物のうちのいずれか１つ以上でよい。実施形態では、該抗体は、特異的にｍＴＯＲに結合してｍＴＯＲを阻害する。該抗体は、モノクローナル抗体もしくはその断片、ポリクローナル抗体もしくはその断片、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体もしくはその断片、または一本鎖抗体のうちのいずれか１つ以上でよい。これら抗体は、任意の起源、例えば、ラット、マウス、モルモット、イヌ、ネコ、ウサギ、ブタ、ウシ、ウマ、ヤギ、ロバ、またはヒト由来でよい。抗体の断片は、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ′）２、Ｆｖ断片、またはそれらの融合タンパク質のうちのいずれか１つ以上でよい。
【００５４】
本発明の１つの実施形態では、該ｍＴＯＲ阻害剤は、マクロライド化合物である。請求項にかかる発明とともに用いてもよいマクロライド化合物の例としては、限定されないが、テムシロリムス（ＣＣＩ−７７９）もしくはその医薬的な等価物、アナログ、誘導体、もしくは塩、エベロリムス（ｅｖｉｒｏｌｉｍｕｓ）（ＲＡＤ−００１）もしくはその医薬的な等価物、アナログ、誘導体、もしくは塩、及び／またはシロリムス（ラパマイシン）もしくはその医薬的な等価物、アナログ、誘導体、もしくは塩が挙げられる。
【００５５】
様々な実施形態において、該追加薬剤は、ＳＴＡＴ阻害剤である。ＳＴＡＴ阻害剤の例としては、限定されないが、ＳＯＣＳ（サイトカインシグナル伝達系サプレッサー）、ＰＩＡＳ１、ＰＩＡＳ２、ＰＩＡＳ３、ＰＩＡＳ４、ＰＩＡＳｘａ、ＰＩＡＳｘｂ、及びＰＩＡＳｙを含めてＰＩＡＳ（活性化ｓｔａｔ抑制タンパク質）、ニフロキサジド（５−ニトロ−２−フラルデヒド−ｐ−ヒドロキシベンゾイルヒドラゾン）、Ｎ−［２−（１，３，４−オキサジアゾリル）］−４−キノリンカルボキサミド、非ペプチド性小分子阻害剤、Ｓｔａｔｔｉｃ、ＳＴＡ−２１、ＬＬＬ−３、ＬＬＬ１２、ＸＺＨ−５、Ｓ３１−２０１、ＳＦ−１０６６、ＳＦ−１０８７、１７ｏ、クリプトタンシノン、ＦＬＬ３２、Ｃ１８８−９、ＬＹ５、ＢＰ−１１０８、ＢＰ−１０７５、ガリエララクトン、ＪＱ１、ＳＴＸ−０１１９、ＦＬＬＬ１１、ＦＬＬＬ１２、ＦＬＬＬ３２、ＦＬＬＬ６２、ホルモン由来ニコチン酸ヒドラジド、ＩＳ３  ２９５、ＳＴＡＴ経路を標的とするオリゴヌクレオチド、ＳＴＡＴ経路を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）、ＡＺＤ９１５０（ＩＳＩＳ−ＳＴＡＴ３ＲｘまたはＩＳＩＳ４８１４６４、ＳＴＡＴ３に対する合成ＡＳＯ、ＳＴＡＴ３デコイオリゴヌクレオチド（ＯＤＮ）、ＳＴＡＴ３−ｓｉＲＮＡ、ＳＴＡＴ３−Ｇ−カルテット、ＳＴＡＴ５−ＯＤＮ、ＳＴＡＴ５−ｓｉＲＮＡ、ＯＰＢ−３１１２１、ペプチド及びペプチド模倣薬阻害剤、ＸｐＹＬ、Ａｃ−ｐＹＬＰＱＴＶ−ＮＨ３、ＩＳＳ６１０、Ｓ３１−Ｍ２００１、並びにＣＪ−１３８３が挙げられる。さらなる情報は、十分に説明されたものとして、参照することにより全体として本書に組み込まれる、Ｆｕｒｑａｎ  ｅｔ  ａｌ．（ＳＴＡＴ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ  ｆｏｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ，Ｊ  Ｈｅｍａｔｏｌ  Ｏｎｃｏｌ．２０１３  Ｄｅｃ  ５；６：９０）に見出すことができる。
【００５６】
様々な実施形態において、該追加薬剤は、ＪＡＫ阻害剤である。ＪＡＫ阻害剤の例としては、限定されないが、チルホスチンＡＧ４９０、ＣＰ−６９０５５０、ルキソリチニブ（ＩＮＣＢ０１８４２４）、ＴＧ１０１３４８（ＳＡＲ  ３０２５３）、レスタウルチニブ（ＣＥＰ７０１）、ＣＹＴ３８７、パクリチニブ（ＳＢ１５１８）、ＡＺＤ１４８０、ＸＬ０１９、及びＬＹ２７８４５４４が挙げられる。さらなる情報は、十分に説明されたものとして、参照することにより全体として本書に組み込まれる、Ｍａｓｃａｒｅｎｈａｓ  ｅｔ  ａｌ．（Ｂｉｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ  ｏｆ  ｍｙｅｌｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ  ｎｅｏｐｌａｓｍｓ  ａｎｄ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＪＡＫ  ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ  ｒｕｘｏｌｉｔｉｎｉｂ，Ｃｕｒｒ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．  ２０１２；１９（２６）：４３９９−４１３）に見出すことができる。
【００５７】
様々な実施形態において、該追加薬剤は、ＴＧＦβ受容体阻害剤である。ＴＧＦβ受容体阻害剤の例としては、限定されないが、優性阻害ＴＧＦβタイプＩＩ受容体（ＴβＲＩＩ）、リガンドトラップ、可溶性ＴβＲＩＩ細胞外ドメイン、可溶性ベータグリカン細胞外ドメイン、組み換えＦｃ−融合タンパク質であって、ＴβＲＩＩ（ＴβＲＩＩ−Ｆｃ）またはタイプＩＩＩ受容体／ベータグリカンのどちらかの可溶性細胞外ドメインを含むもの、可溶性ヒトα２マクログロブリン血漿タンパク質、レルデリムマブ（ＣＡＴ−１５２）、メテリムマブ（ＣＡＴ−１９２）、及びＧＣ−１００８（フレソリムマブ）を含む完全ヒト化ｐａｎ−ＴＧＦ−βモノクローナル中和抗体、並びに１Ｄ１１；それらの相補的ＲＮＡ配列に混成し、ｍＲＮＡの分解を促進するように設計されたアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）、ＡＰ１２００９（トラベデルセン）及びＡＰ−１１０１４；受容体キナーゼ阻害剤、ＳＢ５０５１２４、ＳＢ−４３１５４２、ＬＹ５５０４１０、ＬＹ５８０２７６、ＬＹ２１５７２９、ＬＹ３６４９３７、ＬＹ２１０９７６１、Ｋｉ２６８９４、ＳＤ−０９３、及びＳＤ−２０８；ペプチドアプタマー、Ｔｒｘ−ＳＡＲＡアプタマー；ＴＧＦ−β受容体タイプＩＩ遺伝子発現を、ＲＮＡ干渉により抑制する小ヘアピンＲＮＡをコードするベクター、及びｓｈＲＮＡレンチウイルスまたはアデノ関連ベクターが挙げられる。さらなる情報は、十分に説明されたものとして、参照することにより全体として本書に組み込まれる、Ｃｏｎｎｏｌｌｙ  ｅｔ  ａｌ．（Ｃｏｍｐｌｅｘｉｔｉｅｓ  ｏｆ  ＴＧＦ−β  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｃａｎｃｅｒ  ｔｈｅｒａｐｙ，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｂｉｏｌ  Ｓｃｉ．２０１２；８（７）：９６４−７８；Ｅｐｕｂ  ２０１２  Ｊｕｌ  １２）及びＫａｍｉｎｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．（ＴＧＦ  ｂｅｔａ  ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ  ａｎｄ  ｉｔｓ  ｒｏｌｅ  ｉｎ  ｔｕｍｏｕｒ  ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ；Ａｃｔａ  Ｂｉｏｃｈｉｍ  Ｐｏｌ．２００５；５２（２）：３２９−３７．Ｅｐｕｂ  ２００５  Ｊｕｎ  ２５）に見出すことができる。
【００５８】
様々な実施形態において、該追加薬剤は、チロシンキナーゼ阻害剤である。チロシンキナーゼ阻害剤の例としては、限定されないが、スニチニブ、エルロチニブ、バンデタニブ、セディラニブ、ブリバニブ、フォレチニブ、及びドビチニブが挙げられる。さらなる情報は、十分に説明されたものとして、参照することにより全体として本書に組み込まれる、Ｈｕｙｎｈ  Ｈ．（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ  ｔａｒｇｅｔｅｄ  ｔｈｅｒａｐｙ  ｉｎ  ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２０１０  Ｓｅｐ  １；８０（５）：５５０−６０．Ｅｐｕｂ  ２０１０  Ａｐｒ  ４）に見出すことができる。
【００５９】
いくつかの実施形態において、本書に記載の方法は、化学療法剤を、ＣＤ４リンパ球除去剤を含む組成物またはＣＤ４リンパ球除去剤並びに免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤からなる群から選ばれた追加薬剤を含む組成物を投与されている対象に投与することをさらに含む。化学療法剤の非限定的な例としては、アルキル化剤、例えば、チオテパ及びＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）シクロホスファミド;アルキルスルホネート、例えば、ブスルファン、インプロスルファン、及びピポスルファン；アジリジン、例えば、ベンゾドーパ、カルボコン、メツレドーパ、及びウレドーパ；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミド、及びトリメチロールメラミンを含むエチレンイミン並びにメチラメラミン；アセトゲニン類（特にブラタシン及びブラタシノン）；カンプトテシン（合成アナログトポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシン、及びビゼレシン合成アナログを含む）；クリプトフィシン類（特に、クリプトフィシン１及びクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成アナログＫＷ−２１８９及びＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エリュテロビン；パンクラチスタチン；サルコディクチイン；スポンジスタチン；ナイトロジェンマスタード類、例えば、クロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベンビシン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード；ニトロソ尿素類、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、フォテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、及びラニムヌスチン；抗生物質、例えば、エネジイン系抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシンガンマ１Ｉ及びカリケアマイシンオメガＩ１（例えば、Ａｇｎｅｗ，Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．，３３：１８３−１８６（１９９４）参照）；ダイネミシン、ダイネミシンＡ；ビスホスホネート類、例えばクロドロネート；エスペラミシン；並びにネオカルジノスタチン発色団および関連する色素タンパク質エネジイン系抗生物質発色団）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アウトラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標）ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシン、及びデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン類、例えばマイトマイシンＣ、マイコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、ピューロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメックス、ジノス��チン、ゾルビシン；代謝拮抗物質、例えば、メトトレキセート及び５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）；葉酸アナログ、例えば、デノプテリン、メトトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキセート；プリンアナログ、例えば、フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン；ピリミジンアナログ、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフル、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン；アンドロゲン類、例えばカルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン；抗アドレナール類、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン；葉酸補充薬、例えば、葉酸;アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトレキサート；デフォファミン；デメコルシン；ジアジコン；エルフォルニチン;酢酸エリプチニウム；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダイニン；メイタンシノイド類、例えば、メイタンシン及びアンサミトシン類；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモル；ニトラエリン；ペントスタチン；フェナメト；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖類複合体（ＪＨＳ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、オレゴン州ユージーン）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジクオン；２，２′，２″−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン類（特に、Ｔ−２毒素、ベラクリンＡ、ロリジンＡ、及びアンギジン）；ウレタン（ｕｒｅｔｈａｎ）；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド類、例えば、ＴＡＸＯＬ（登録商標）パクリタキセル（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ  Ｓｑｕｉｂｂ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、ニュージャージー州プリンストン）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（登録商標）クレモフォール不含、パクリタキセルのアルブミン操作ナノ粒子処方（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｐａｒｔｎｅｒｓ、イリノイ州シャウムバーグ、Ｉｌｌ．）、及びＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）ドセタキセル（Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ  Ｒｏｒｅｒ、フランスアントニー）；クロラムブシル；ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）ゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；白金アナログ、例えば、シスプラチン、オキサリプラチン、及びカルボプラチン；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ；ビノレルビン；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；ゼローダ；イバンドロネート；イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ、ＣＰＴ−１１）（イリノテカンと５−ＦＵ及びロイコボリンとの処方計画を含む）；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ  ２０００；ジフルオロメチルオル��チン（ＤＭＦＯ）；レチノイド類、例えば、レチノイン酸；カペシタビン；コンブレタスタチン；ロイコボリン（ＬＶ）；オキサリプラチン、オキサリプラチン処方計画（ＦＯＬＦＯＸ）；ラパチニブ（Ｔｙｋｅｒｂ）；細胞増殖を減少させるＰＫＣ−アルファ阻害剤、Ｒａｆ阻害剤、Ｈ−Ｒａｓ阻害剤、ＥＧＦＲ阻害剤（例えば、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標）））及びＶＥＧＦ−Ａ阻害剤、並びに上記のいずれかの医薬的に許容される塩、酸、または誘導体を挙げることができる。加えて、該治療方法は、放射線療法の利用をさらに含むことができる。
【００６０】
がんの例としては、限定されないが、上皮性悪性腫瘍、芽細胞腫、及び非上皮性悪性腫瘍が挙げられる。かかるがんのより具体的な例としては、限定されないが、基底細胞がん、胆管細胞がん；膀胱がん；骨肉腫；脳及びＣＮＳがん；乳がん；腹膜のがん；子宮頸がん；絨毛腫；大腸がん；結合組織がん；消化器系のがん；子宮内膜がん；食道がん；眼がん；頭頸部がん；胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ  ｃａｎｃｅｒ；消化管がんを含む）；膠芽細胞腫；肝臓がん（ｈｅｐａｔｉｃ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）；ヘパトーマ；上皮内新生物；腎臓がん；喉頭がん；肝臓がん（ｌｉｖｅｒ  ｃａｎｃｅｒ）；肺がん（例えば、小細胞肺がん、非小細胞肺がん、肺腺がん、及び扁平上皮肺がん）；リンパ腫、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫；黒色腫；骨髄腫；神経芽細胞腫；口腔がん（例えば、唇、舌、口、及び咽頭）；卵巣がん；膵臓がん；前立腺がん；網膜芽細胞腫；横紋筋肉腫；直腸がん；呼吸器系のがん；唾液腺がん；非上皮性悪性腫瘍；皮膚がん；扁平上皮がん；胃がん（ｓｔｏｍａｃｈ  ｃａｎｃｅｒ）；精巣がん；甲状腺がん；子宮及び子宮内膜がん；泌尿器系のがん；外陰がん；並びに他の上皮性悪性腫瘍及び非上皮性悪性腫瘍が挙げられる。
【００６１】
本発明によれば、該疾患は、悪性腫瘍細胞増殖性の障害もしくは疾病でありうる。さらに本発明によれば、該疾患は、腎細胞がんまたは黒色腫である。該治療薬が標的とする疾病としては、上皮性悪性腫瘍、非上皮性悪性腫瘍、胚細胞腫瘍、及び／または芽細胞腫が挙げられる。
【００６２】
様々な実施形態において、感染症は、感染性の細菌によって引き起こされる。感染性の細菌の例としては：ヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉｓ）、ボレリア・ブルグドルフェリ（Ｂｏｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ）、レジオネラ・ニューモフィラ（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌｉａ）、マイコバクテリア属種（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉａ  ｓｐ．）（例えば、ヒト結核菌（Ｍ．ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ）、トリ結核菌（Ｍ．ａｖｉｕｍ）、マイコバクテリウム・イントラセルラーレ（Ｍ．ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｅ）、マイコバクテリウム・カンサシイ（Ｍ．ｋａｎｓａｉｉ）、マイコバクテリウム・ゴルドネ（Ｍ．ｇｏｒｄｏｎａｅ））、黄色ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ａｕｒｅｕｓ）、淋菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ）、髄膜炎菌（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ  ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ）、リステリア菌（Ｌｉｓｔｅｒｉａ  ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ）、化膿性連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｙｏｇｅｎｅｓ）（ストレプトコッカス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）Ａ群）、ストレプトコッカス・アガラクチア（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ａｇａｌａｃｔｉａｅ）（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  Ｂ群）、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ（ビリダンス群）、ストレプトコッカス・フェカリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ）、ストレプトコッカス・ボビス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｂｏｖｉｓ）、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ（嫌気性種）、肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、病原性カンピロバクター属種（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐ．）、エンテロコッカス属種（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ  ｓｐ．）、インフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、炭疽菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ）、ジフテリア菌（ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ）、コリネバクテリウム属種（ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｓｐ．）、ブタ丹毒菌（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘ  ｒｈｕｓｉｏｐａｔｈｉａｅ）、ウェルシュ菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、破傷風菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ）、エンテロバクター・エロゲネス（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ａｅｒｏｇｅｎｅｓ）、肺炎桿菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、パスツレラ・マルトシダ（Ｐａｓｔｕｒｅｌｌａ  ｍｕｌｔｏｃｉｄａ）、バクテロイデス属種（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ  ｓｐ．）、フソバクテリウム・ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）、ストレプトバチルス・モニリホルム（Ｓｔｒｅｐｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｉｓ）、梅毒トレポネーマ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐａｌｌｉｄｉｕｍ）、フランベジアトレポネーマ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ  ｐｅｒｔｅｎｕｅ）、レプトスピラ（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ）、及びアクチノマイセス・イスラエリ（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ  ｉｓｒａｅｌｌｉ）が挙げられる。本書に記載の組成物及び方法は、これらの細菌性の物質の感染の治療における使用を考慮している。���の感染性微生物（原生生物等）としては：熱帯熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）及びトキソプラズマ原虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ  ｇｏｎｄｉｉ）が挙げられる。本書に記載の組成物及び方法は、これらの物質の感染の治療における使用を考慮している。
【００６３】
様々な実施形態において、ウイルス抗原は、感染性ウイルスに存在し、対象の免疫反応を誘導する任意の抗原でありうる。感染性ウイルスの例としては：レトロウイルス科（例えば、ＨＩＶ）；ピコルナウイルス科（例えば、ポリオウイルス、Ａ型肝炎ウイルス；エンテロウイルス、ヒトコクサッキーウイルス、ライノウイルス、エコーウイルス）；カリシウイルス科（例えば、胃腸炎を引き起こす型）；トガウイルス科（例えば、ウマ脳炎ウイルス、風疹ウイルス）；フラビウイルス科（例えば、デングウイルス、脳炎ウイルス、黄熱ウイルス）；コロナウイルス科（例えば、コロナウイルス）；ラブドウイルス科（例えば、水疱性口内炎ウイルス、狂犬病ウイルス）；フィロウイルス科（例えば、エボラウイルス）；パラミクソウイルス科（例えば、パラインフルエンザウイルス、ムンプスウイルス、麻疹ウイルス、ＲＳウイルス）；オルトミクソウイルス科（例えば、インフルエンザウイルス）；ブニヤウイルス科（例えば、ハンタンウイルス、ブニヤウイルス、フレボウイルス、及びナイロウイルス）；アレナウイルス科（出血熱ウイルス）；レオウイルス科（例えば、レオウイルス、オルビウイルス、及びロタウイルス）；ビルナウイルス科；ヘパドナウイルス科（Ｂ型肝炎ウイルス）；パルボウイルス科（パルボウイルス）；パポバウイルス科（パピローマウイルス、ポリオーマウイルス）；アデノウイルス科（ほとんどアデノウイルス）；ヘルペスウイルス科（単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）１及びＨＳＶ−２、水痘帯状疱疹ウイルス、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、ヘルペスウイルス）；ポックスウイルス科（痘瘡ウイルス、ワクシニアウイルス、ポックスウイルス）；及びイリドウイルス科（例えば、アフリカブタコレラウイルス）；並びに未分類ウイルス（例えば、海綿状脳症の病原体、デルタ肝炎の病原体（Ｂ型肝炎ウイルスの不完全付随体と考えられている）、非Ａ非Ｂ型肝炎の病原体（クラス１＝内部から感染；クラス２＝非経口的感染（すなわち、Ｃ型肝炎）；ノルウォーク及び関連するウイルス、並びにアストロウイルス）が挙げられる。本書に記載の組成物及び方法は、これらのウイルス体の感染の治療における使用を考慮している。
【００６４】
本書に記載の組成物及び方法で治療されうる真菌感染症の例としては、限定されないが、アスペルギルス症；鵞口瘡（カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ）によって引き起こされる）；クリプトコッカス症（クリプトコッカス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）によって引き起こされる）；及びヒストプラスマ症が挙げられる。従って、感染性の真菌の例としては、限定されないが、クリプトコッカス・ネオフォルマンス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ）、ヒストプラズマ・カプスラーツム（Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ  ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ）、コクシジオイデス・イミチス（Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ  ｉｍｍｉｔｉｓ）、ブラストミセス・デルマチチジス（Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ）、トラコーマクラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ）、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓが挙げられる。本書に記載の組成物及び方法は、これらの真菌体の感染の治療における使用を考慮している。
【００６５】
様々な実施形態において、対象はヒトである。様々な実施形態において、対象は、哺乳類であって、ヒト、サル、類人猿、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ヤギ、ブタ、ウサギ、マウス、及びラットが挙げられるが、これらに限定されない。
【００６６】
様々な実施形態において、該組成物は、静脈内に、筋肉内に、皮下に、腹腔内に、経口に、または吸入を介して投与される。本発明によれば、請求項にかかる方法の組成物の投与のために、限定されないが、エアロゾル、経鼻、経口、経粘膜、経皮、非経口、埋め込みポンプ、持続注入、局所適用、カプセル、及び／または注射を含む様々な経路を用いてよい。
【００６７】
様々な実施形態において、該ＣＤ４リンパ球除去剤は、１００〜２００ｍｇ／日、２００〜３００ｍｇ／日、３００〜４００ｍｇ／日、４００〜５００ｍｇ／日、５００〜６００ｍｇ／日、６００〜７００ｍｇ／日、７００〜８００ｍｇ／日、８００〜９００ｍｇ／日、９００〜１０００ｍｇ／日、１０００〜１１００ｍｇ／日、１１００〜１２００ｍｇ／日、１２００〜１３００ｍｇ／日、１３００〜１４００ｍｇ／日、１４００〜１５００ｍｇ／日、１５００〜１６００ｍｇ／日、１６００〜１７００ｍｇ／日、１７００〜１８００ｍｇ／日、１８００〜１９００ｍｇ／日または１９００〜２０００ｍｇ／日で投与される。様々な実施形態において、該追加薬剤は、０．１〜０．５ｍｇ／日、０．５〜１．０ｍｇ／日、１．０〜１．５ｍｇ／日、１．５〜２．０ｍｇ／日、２．０〜２．５ｍｇ／日、２．５〜５ｍｇ／日、５〜１０ｍｇ／日、１０〜１５ｍｇ／日、１５〜２０ｍｇ／日、２０〜２５ｍｇ／日、２５〜３０ｍｇ／日、３０〜３５ｍｇ／日、３５〜４０ｍｇ／日、４０〜４５ｍｇ／日、４５〜５０ｍｇ／日、５０〜５５ｍｇ／日、５５〜６０ｍｇ／日、６０〜６５ｍｇ／日、６５〜７０ｍｇ／日、７０〜７５ｍｇ／日、７５〜８０ｍｇ／日、８０〜８５ｍｇ／日、８５〜９０ｍｇ／日、９０〜９５ｍｇ／日、または９５〜１００ｍｇ／日で投与される。
【００６８】
医薬組成物
様々な実施形態において、本発明は、ＣＤ４リンパ球除去剤を含む組成物を提供する。様々な実施形態において、本発明は、免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤のうちの少なくとも１つを含む組成物を提供する。免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤の例を本書に記載する。様々な実施形態において、ＣＤ４リンパ球除去剤を含む組成物と追加薬剤を含む組成物は、２つの別々の組成物である。
【００６９】
本発明によれば、哺乳類の疾病の治療に有用な該ＣＤ４リンパ球除去剤及び／または該追加薬剤は、しばしば天然に存在する免疫グロブリンまたは他の生体分子を実質的に含まずに製造される。好ましいＣＤ４リンパ球除去剤及び／または該追加薬剤はまた、哺乳類に投与された際に示す毒性が最小限である。
【００７０】
本発明の医薬組成物は、任意の医薬的に許容される賦形剤を含むことができる。「医薬的に許容される賦形剤」とは、概して安全で、非毒性、及び望ましい医薬組成物の製造に有用な賦形剤を意味し、ヒトの製薬学的用途だけでなく家畜への応用に許容される賦形剤を含む。かかる賦形剤は、固体、液体、半固体、または、エアロゾル組成物の場合には気体でよい。賦形剤の例としては、限定されないが、デンプン、糖類、微結晶性セルロース、希釈剤、造粒剤、潤滑剤、結合剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、着色剤、離型剤、コーティング剤、甘味剤、香味剤、香料剤、保存料、酸化防止剤、可塑剤、ゲル化剤、増粘剤、硬化剤（ｈａｒｄｅｎｅｒ、ｓｅｔｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）、懸濁剤、界面活性剤、保湿剤、担体、安定剤、及びこれらの組合せが挙げられる。
【００７１】
様々な実施形態において、本発明の医薬組成物は、任意の投与経路を介した送達用に処方されうる。「投与経路」とは、限定されないが、エアロゾル、経鼻、経口、経粘膜、経皮、非経口、腸内、局所、または局部的経路を含む、当技術分野で周知の任意の投与経路に言及しうる。「非経口」とは、眼窩内、注入、動脈内、嚢内、心臓内、皮内、筋肉内、腹腔内、肺内、髄腔内、胸骨下、鞘内、子宮内、静脈内、くも膜下、被膜下、皮下、経粘膜、または経気管を含む、通常注射を伴う投与経路を言う。非経口経路を介する該組成物は、注入用もしくは注射用の溶液もしくは懸濁液、または凍結乾燥粉末の形でよい。非経口経路を介する該組成物は、注入用もしくは注射用の溶液または懸濁液の形でよい。腸内経路を介する該医薬組成物は、錠剤、ゲルカプセル、糖衣錠、シロップ、懸濁液、溶液、粉末、顆粒、乳剤、制御放出を可能にするミクロスフェア、ナノスフェア、脂質小胞またはポリマー小胞の形でよい。通常、該組成物は注射によって投与される。これらの投与方法は、当業者には周知である。
【００７２】
本発明の医薬組成物は、任意の医薬的に許容される担体を含むことができる。ここで、「医薬的に許容される担体」とは、目的の化合物の、１つの体組織、器官、もしくは部分から、別の体組織、器官、もしくは部分への、運搬または輸送に関わる医薬的に許容される材料、組成物、または媒剤を言う。例えば、該担体は、液体もしくは固体充填剤、希釈剤、賦形剤、溶剤、もしくは封入材料、またはこれらの組合せでありうる。該担体の各成分は、該処方の他の構成要素と矛盾があってはならないという点において、「医薬的に許容される」必要がある。該担体の各成分はまた、これが接触しうる任意の組織もしくは器官と接触して使用するのに適切である必要もあり、その意味するところは、毒性、刺激、アレルギー反応、免疫原性、または、その治療的有用性を過度に上回る他の合併症の危険を運んではならないということである。
【００７３】
本発明の医薬組成物は、経口投与用に、カプセル化されても、錠剤化されても、または、乳剤もしくはシロップの状態に製剤化されてもよい。医薬的に許容される固体もしくは液体の担体は、該組成物の改善もしくは安定化のため、または、該組成物の製造を容易にするために加えてもよい。液体の担体としては、シロップ、落花生油、オリーブ油、グリセリン、生理食塩水、アルコール及び水が挙げられる。固体の担体としては、デンプン、ラクトース、硫酸カルシウム、二水和物、白土、ステアリン酸マグネシウムもしくはステアリン酸、タルク、ペクチン、アカシア、寒天、またはゼラチンが挙げられる。該担体はまた、徐放性材料、例えば、モノステアリン酸グリセリンもしくはジステアリン酸グリセリンを単独で、またはワックスとともに含んでもよい。
【００７４】
該医薬製剤は、錠剤型については、製粉、混合、造粒、及び必要であれば圧縮；または硬ゼラチンカプセル型については、製粉、混合、及び充填を含む従来の調剤技術に従って作製される。液体の担体が用いられる場合、該製剤はシロップ、エリキシル剤、乳剤、または水性もしくは非水性懸濁液の形態になる。かかる液体処方は、直接経口投与しても、軟ゼラチンカプセル剤に充填してもよい。
【００７５】
本発明の医薬組成物は、治療有効量で送達されうる。正確な治療有効量とは、ある対象における治療効果の観点から、最も有効な結果が得られる該組成物の量である。この量は、限定されないが、治療化合物の特徴（活性、薬物動態、薬力学、及び生体利用効率を含む）、対象の生理的状態（年齢、性別、疾病の種類及び病期、全身的な身体状態、所定の用量に対する反応性、薬物療法の型を含む）、該処方における医薬的に許容される担体もしくは複数の担体の性質、並びに投与経路を含む様々な要因によって変動する。臨床及び薬理的当業者には、日常の実験を通して、例えば、化合物の投与に対する対象の反応を観察し、それに応じて投薬量を調節することにより、治療有効量を決めることが可能であろう。追加ガイダンスについては、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ｇｅｎｎａｒｏ  ｅｄ．２０ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ  ＰＡ，  ＵＳＡ）（２０００）を参照されたい。
【００７６】
患者への投与の前に、フォーミュラント（ｆｏｒｍｕｌａｎｔ）を該組成物に加えてもよい。液体処方が好適でありうる。例えば、これらフォーミュラントとしては、油、ポリマー、ビタミン、炭水化物、アミノ酸、塩、緩衝剤、アルブミン、界面活性剤、増量剤、またはこれらの組合せを挙げることができる。
【００７７】
炭水化物のフォーミュラントとしては、糖類または糖アルコール、例えば、単糖類、二糖類、もしくは多糖類、もしくは水溶性グルカンが挙げられる。該糖類またはグルカンとしては、フルクトース、デキストロース、ラクトース、グルコース、マンノース、ソルボース、キシロース、マルトース、シュークロース、デキストラン、プルラン、デキストリン、アルファ及びベータシクロデキストリン、可溶性デンプン、ヒドロキシエチルデンプン、並びにカルボキシメチルセルロース、もしくはこれらの混合物を挙げることができる。「糖アルコール」は、ＯＨ基を有するＣ４からＣ８の炭化水素として定義され、ガラクチトール、イノシトール、マンニトール、キシリトール、ソルビトール、グリセロール、及びアラビトールを含む。上記したこれら糖類または糖アルコールは、単独でも組み合わせて用いてもよい。該糖類または糖アルコールが水性製剤に可溶である限り、使用量に所定の制限はない。１つの実施形態では、該糖類または糖アルコールの濃度は、１．０ｗ／ｖ％から７．０ｗ／ｖ％の間、より好ましくは、２．０から６．０ｗ／ｖ％の間である。
【００７８】
アミノ酸のフォーミュラントとしては、カルニチン、アルギニン、及びベタインの左旋性（Ｌ）型が挙げられるが、他のアミノ酸を加えてもよい。
【００７９】
いくつかの実施形態において、フォーミュラントとしてのポリマーとしては、平均分子量が２，０００〜３，０００のポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）または、平均分子量が３，０００〜５，０００のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）が挙げられる。
【００８０】
凍結乾燥前、または再構成後に、溶液のｐＨ変化を最小限にするために、該組成物に緩衝剤を用いることが好ましい。限定されないが、クエン酸、リン酸、コハク酸、及びグルタミン酸緩衝剤、またはこれらの混合物を含めて、ほとんどすべての生理的緩衝剤を用いることができる。いくつかの実施形態では、該濃度は０．０１〜０．３モルである。該処方に加えることができる界面活性剤は、ＥＰ  Ｎｏ．２７０，７９９及び２６８，１１０に示されている。
【００８１】
循環半減期を増加させるための別の薬物送達システムはリポソームである。リポソーム送達システムの製造方法は、Ｇａｂｉｚｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ（１９８２）４２：４７３４；Ｃａｆｉｓｏ，Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ａｃｔａ（１９８１）６４９：１２９；及びＳｚｏｋａ，Ａｎｎ  Ｒｅｖ  Ｂｉｏｐｈｙｓ  Ｅｎｇ（１９８０）９：４６７に説明されている。他の薬物送達システムは当技術分野では周知であり、また、例えば、Ｐｏｚｎａｎｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，ＤＲＵＧ  ＤＥＬＩＶＥＲＹ  ＳＹＳＴＥＭＳ（Ｒ．Ｌ．Ｊｕｌｉａｎｏ，ｅｄ．，Ｏｘｆｏｒｄ，Ｎ．Ｙ．１９８０），ｐｐ．２５３−３１５；Ｍ．Ｌ．Ｐｏｚｎａｎｓｋｙ，Ｐｈａｒｍ  Ｒｅｖｓ（１９８４）３６：２７７に記載されている。
【００８２】
液体の医薬組成物の製造後、分解を防ぎ、無菌状態を保つためにこれを凍結乾燥してもよい。液体組成物の凍結乾燥方法は、当業者には周知である。使用の直前に、該組成物は、追加の構成要素を含んでいてもよい滅菌した希釈剤（例えば、リンガー溶液、蒸留水、または滅菌生理食塩水）で再構成してもよい。再構成すると、該組成物は、当業者に周知の方法を用いて対象に投与される。
【００８３】
本発明の組成物は、従来型の周知の滅菌技術を用いて滅菌されうる。得られた溶液は、使用のために包装され、または無菌条件下でろ過され、凍結乾燥されうるとともに、凍結乾燥された製剤は、投与前に滅菌した溶液と混合される。該組成物は、生理的状態に近づけるために必要な医薬的に許容される補助物質、例えば、ｐＨ調節剤、緩衝剤、等張化剤等、例えば、酢酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、及び安定剤（例えば、１〜２０％マルトース等）を含んでよい。
【００８４】
本発明のキット
様々な実施形態において、本発明は、対象の疾患の治療、予防、その重篤度の軽減、及び／またはその進行の遅延用のキットを提供する。該キットは、ＣＤ４リンパ球除去剤を含む組成物、並びに該対象の該疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させるための該組成物の使用説明書を含む。
【００８５】
様々な実施形態において、本発明は、対象の疾患の治療、予防、その重篤度の軽減、及び／またはその進行の遅延用のキットを提供する。該キットは、ＣＤ４リンパ球除去剤を含む組成物、並びに免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤からなる群から選ばれた少なくとも１つの追加薬剤を含む組成物；並びに、該対象の該疾患を治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させるための該組成物の使用説明書を含む。
【００８６】
該キットは、本発明の組成物の少なくとも１つを含む、材料または成分の組合せである。従って、いくつかの実施形態では、該キットは、上述した通り、治療薬と複合化した薬物送達分子を含む組成物を含む。
【００８７】
本発明のキットを構成する該成分の正確な性質はその使用目的による。１つの実施形態では、該キットは、特に哺乳類の対象の治療のために構成される。別の実施形態では、該キットは、特にヒト対象の治療のために構成される。さらなる実施形態では、該キットは、動物への適用、限定されないが、農場動物、家畜、及び実験動物等の対象の治療のために構成される。
【００８８】
該キットには、使用説明書が含まれうる。「使用説明書」は、通常、所望の結果に作用する該キットの成分の使用に採用される技術を記載する具体的な表現を含む。場合により、該キットは、他の有用な成分、例えば、希釈剤、緩衝剤、医薬的に許容される担体、シリンジ、カテーテル、アプリケータ、分注もしくは計量器具、包帯材料または、当業者によって容易に認識される他の有用な道具も含む。
【００８９】
該キットに編成された材料または成分は、それらの操作性及び有用性を保つ任意の便利で適切な用法で保管されて施術者に提供されうる。例えば、該成分は、溶解、脱水、または凍結乾燥された形でよく；それらは、室温、冷蔵、または凍結温度で提供されうる。該成分は、通常、適切な（１つまたは複数の）包装材料に含有される。ここで、「包装材料」という言葉は、該キットの内容物、例えば、発明の組成物等を保管するのに用いられる１つ以上の物理的構造を言う。該包装材料は、周知の方法で、好ましくは、無菌の、汚染物質のない環境を与えるために構成される。ここで、「包装」という用語は、個々のキット成分を維持することが可能な、適切な固体マトリクスまたは材料、例えば、ガラス、プラスチック、紙、箔等を言う。従って、例えば、包装は、ＣＤリンパ球除去剤を含む組成物、または、ＣＤリンパ球除去剤及び、免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、及び免疫調節剤からなる群から選ばれた少なくとも１つの追加薬剤を含む組成物の適切な量を含むのに用いられるガラス製の薬瓶でよい。該包装材料は、通常、該キットの内容及び／または目的及び／またはその成分を表示した外部ラベルを有する。
【００９０】
本発明の投薬量
いくつかの実施形態において、請求項にかかる方法、組成物、及び／またはキットにおける該ＣＤ４リンパ球除去剤の有効量は、約１００〜２００ｍｇ／日、２００〜３００ｍｇ／日、３００〜４００ｍｇ／日、４００〜５００ｍｇ／日、５００〜６００ｍｇ／日、６００〜７００ｍｇ／日、７００〜８００ｍｇ／日、８００〜９００ｍｇ／日、９００〜１０００ｍｇ／日、１０００〜１１００ｍｇ／日、１１００〜１２００ｍｇ／日、１２００〜１３００ｍｇ／日、１３００〜１４００ｍｇ／日、１４００〜１５００ｍｇ／日、１５００〜１６００ｍｇ／日、１６００〜１７００ｍｇ／日、１７００〜１８００ｍｇ／日、１８００〜１９００ｍｇ／日、または１９００〜２０００ｍｇ／日の範囲でありうる。本発明の１つの実施形態では、該ＣＤ４リンパ球除去剤は、ヒト化抗ＣＤ４抗体（例えば、ザノリムマブ）である。
【００９１】
他の実施形態において、請求項にかかる方法、組成物、及び／またはキットにおける該ＣＤ４リンパ球除去剤の有効量は、約１００〜２００ｍｇ／週、２００〜３００ｍｇ／週、３００〜４００ｍｇ／週、４００〜５００ｍｇ／週、５００〜６００ｍｇ／週、６００〜７００ｍｇ／週、７００〜８００ｍｇ／週、８００〜９００ｍｇ／週、９００〜１０００ｍｇ／週、１０００〜１１００ｍｇ／週、１１００〜１２００ｍｇ／週、１２００〜１３００ｍｇ／週、１３００〜１４００ｍｇ／週、１４００〜１５００ｍｇ／週、１５００〜１６００ｍｇ／週、１６００〜１７００ｍｇ／週、１７００〜１８００ｍｇ／週、１８００〜１９００ｍｇ／週、または１９００〜２０００ｍｇ／週の範囲でありうる。本発明の１つの実施形態では、該ＣＤ４リンパ球除去剤は、ヒト化抗ＣＤ４抗体（例えば、ザノリムマブ）である。ザノリムマブは、１週間に９８０ｍｇの用量で投与されうる。
【００９２】
いくつかの実施形態において、請求項にかかる方法、組成物、及び／またはキットにおける該追加薬剤の有効量は、約０．１〜０．５ｍｇ／日、０．５〜１．０ｍｇ／日、１．０〜１．５ｍｇ／日、１．５〜２ｍｇ／日、２．０〜２．５ｍｇ／日、２．５〜５ｍｇ／日、５〜１０ｍｇ／日、１０〜１５ｍｇ／日、１５〜２０ｍｇ／日、２０〜２５ｍｇ／日、２５〜３０ｍｇ／日、３０〜３５ｍｇ／日、３５〜４０ｍｇ／日、４０〜４５ｍｇ／日、４５〜５０ｍｇ／日、５０〜５５ｍｇ／日、５５〜６０ｍｇ／日、６０〜６５ｍｇ／日、６５〜７０ｍｇ／日、７０〜７５ｍｇ／日、７５〜８０ｍｇ／日、８０〜８５ｍｇ／日、８５〜９０ｍｇ／日、９０〜９５ｍｇ／日、９５〜１００ｍｇ／日、０．７５〜１０ｍｇ／日、もしくは２〜１０ｍｇ／日の範囲でありうる。様々な実施形態において、該追加薬剤は、免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、または免疫調節剤のいずれかである。
【００９３】
いくつかの実施形態において、請求項にかかる方法、組成物、及び／またはキットにおける該追加薬剤の有効量は、約１〜５ｍｇ／週、５〜１０ｍｇ／週、１０〜１５ｍｇ／週、１５〜２０ｍｇ／週、２０〜２５ｍｇ／週、２５〜３０ｍｇ／週、３０〜３５ｍｇ／週、３５〜４０ｍｇ／週、４０〜４５ｍｇ／週、４５〜５０ｍｇ／週、５０〜５５ｍｇ／週、５５〜６０ｍｇ／週、６０〜６５ｍｇ／週、６５〜７０ｍｇ／週、７０〜７５ｍｇ／日、７５〜８０ｍｇ／ｍｇ、８０〜８５ｍｇ／ｍｇ、８５〜９０ｍｇ／週、９０〜９５ｍｇ／週、または９５〜１００ｍｇ／週の範囲でありうる。様々な実施形態において、該追加薬剤は、免疫チェックポイント阻害薬、養子免疫治療剤、免疫アジュバント、または免疫調節剤のいずれかである。
【００９４】
いくつかの実施形態において、該少なくとも１つの追加薬剤は、１週間に３０〜６０分かけて２５ｍｇの用量で投与されるテムシロリムス、１日当たり０．７５〜１０ｍｇの用量で投与されるエベロリムス（ｅｖｉｒｏｌｉｍｕｓ）、及び／または１日当たり２〜１０ｍｇの用量で投与されるラパマイシンを含む。
【００９５】
本発明の請求項にかかる方法の実施形態において、該ＣＤ４リンパ球除去剤及び該追加薬剤は、上述した用量で、適切な投与方法、例えば、該ＣＤ４リンパ球除去剤及び該追加薬剤のそれぞれのメーカーによって推奨された投与方法を用いて、同時に投与されうる。
【００９６】
別の方法として、該ＣＤ４リンパ球除去剤及び該追加薬剤は、上述した用量で連続的に投与される。例えば、該追加薬剤は、例えば毎日上述した用量で投与されてもよく、該ＣＤ４リンパ球除去剤（例えば、ヒト化抗ＣＤ４抗体）は、例えば、毎日、毎週、週２回、２週間ごと、及び／または毎月、上述した用量で投与されてもよい。別の方法として、該追加薬剤は、例えば、毎日、毎週、週２回、２週間ごと、及び／または毎月、上述した用量で投与されてもよく、該ＣＤ４リンパ球除去剤（例えば、ヒト化抗ＣＤ４抗体）は、例えば毎日上述した用量で投与されてもよい。さらに、該追加薬剤及び該ＣＤ４リンパ球除去剤（例えば、ヒト化抗ＣＤ４抗体）はそれぞれ、毎日、毎週、週２回、２週間ごと、及び／または毎月投与されてもよく、ここで該追加薬剤は、該ＣＤ４リンパ球除去剤が上述の用量で投与される日とは異なる日に、上述の用量で投与される。
【００９７】
該がんワクチンの投与量は、使用されるワクチンによる。該がんワクチンの有効量は、当業者（医師等）によって決められてもよいし、メーカーの推奨ごとに投与されてもよい。１つの実施形態では、該がんワクチンの初回投与は０日目になされ、第二回の投与は７日目になされる。該追加薬剤は、２〜３２日目に上述した用量で投与されうる。さらに、２〜３週ごとの抗ＣＤ４除去剤の投与は、上述した用量で、１０日目から開始されうる。例えば、熱ショックタンパク質系ワクチンが用いられる場合、熱ショックタンパク質（例えば、ｈｓｐ１１０またはｇｒｐ１７０）は腫瘍抗原（ｇｐ１００等）と複合化され、その後投与される。実施形態では、黒色腫ワクチンについては、ｈｓｐ１１０及びｇｐ１００の複合体が、２．５ｍｇ／ｋｇで皮内に投与されうる。
【００９８】
該ＣＤ４リンパ球除去剤または該追加薬剤の有効量の典型的な用量は、既知の治療化合物が用いられている場合にはメーカーの推奨する範囲でよく、また、細胞のインビトロ反応または動物モデルでの生体内反応によって当業者に示された通りでもよい。
【００９９】
例えば、ＦＤＡに認可されたテムシロリムスの用量は、週に１度、３０〜６０分かけて２５ｍｇの静脈内投与であり、エベロリムス（Ｅｖｉｒｏｌｉｍｕｓ）については、１日当たり０．７５ｍｇ〜１０ｍｇの経口投与であり、ラパマイシンについては、１日当たり約２〜１０ｍｇの経口投与であり、ザノリムマブについては、１週間に約９８０ｍｇの静脈内投与である。同じもしくは同様の投薬が、本発明の様々な実施形態に従って使用でき、または、本発明の別の実施形態に関連して、別の用量が使用されてもよい。実際の用量は、医師の判断、患者の状態、並びに、例えば、関連する培養細胞もしくは組織培養組織試料のインビトロ反応性、または適切な動物モデルで観察された反応に基づく治療法の有効性に依存しうる。
【実施例】
【０１００】
以下の実施例は、例示の目的としてのみ提示し、本発明の範囲を何ら限定することを意図していない。
【０１０１】
実施例１：実験方法
マウス及び腫瘍細胞
６〜８週齢、雌のＣ５７ＢＬ／６Ｊ、ＢＡＬＢ／ｃマウス及びＰｍｅｌ−１マウスをＪａｃｋｓｏｎ研究所（メイン州バーハーバー）から入手し、無菌状態で飼育した。ＦｏｘＰ３−ＧＦＰ遺伝子導入マウスは、マウスＦｏｘｐ３（フォークヘッドボックスＰ３）プロモーターの支配下で緑色蛍光タンパク質を発現する。ＤＥＲＥＧ（制御性Ｔ細胞除去）遺伝子導入マウスは、Ｔ．Ｓ．Ｌａｈｌ  Ｋ，Ｌｏｄｄｅｎｋｅｍｐｅｒ  Ｃ，Ｄｒｏｕｉｎ  Ｃ，Ｆｒｅｙｅｒ  Ｊ，Ａｒｎａｓｏｎ  Ｊ，Ｅｂｅｒｌ  Ｇ，  ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．２００７；２０４：５７−６３によって生成、記載された。動物を使ったすべての実験は、連邦動物福祉法並びに実験動物の管理及び利用に関するＮＩＨ指針を含む、連邦及び州の基準に準拠して行われた。
【０１０２】
Ｂ１６細胞（マウス黒色腫細胞株）は、ヒトｇｐ１００（ヒト黒色腫抗原）で形質導入した（Ｂ１６−ｇｐ１００）。ＲＥＮＣＡは、マウス腎細胞がん（ＲＣＣ）細胞株である。これらの細胞は、加熱不活性化したウシ胎仔血清（ＦＢＳ；Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、ニューヨーク州グランドアイランド）１０％、Ｌ−グルタミン２ｍｍｏｌ／Ｌ、ペニシリン１００単位／ｍＬ、及びストレプトマイシン１００μｇ／ｍＬを追加したＤＭＥＭまたはＲＰＭＩ１６４０培地で維持した。
【０１０３】
マウスの腫瘍は、脇腹に２ｘ１０５の細胞を皮下注射することによって、Ｂ１６腫瘍はＣ５７ＢＬ／６マウスで、ＲＥＮＣＡ腫瘍はＢａｌｂ／Ｃマウスで、生成させた。腫瘍の直径を週２回、キャリパーを用いて測定し、腫瘍の体積を計算した（最短径２×最長径／２）。肺転移モデルでは、腫瘍細胞は尾静脈から静脈注射した。肺転移は、解剖顕微鏡を用いて数えた。
【０１０４】
抗体及び試薬
蛍光複合体を伴うまたは伴わない、以下のモノクローナル抗体（ｍＡｂ）を、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ（サンディエゴ）から入手した。抗ＣＤ４（ＧＫ１．５及びＲＭ４−５）、抗ＣＤ８（５３−６．７）、抗ＣＤ１６／ＣＤ３２（９．３）、抗ＣＤ９０．１（ＯＸ−７）、抗ＣＤ１１ｃ（Ｎ４１８）、抗Ｂｃｌ２（ＢＣＬ／１０Ｃ４）、抗Ｔ−ｂｅｔ（４Ｂ１０）、抗ＣＤ６２Ｌ（ＭＥＬ−１４）、抗ＣＤ２７９（ＰＤ−１、２９Ｆ．１Ａ１２）、抗ＦｏｘＰ３（ＦＪＫ−１６ｓ）、抗ＩＦＮ−γ（ＸＭＧ１．２）、抗ＩＬ−２（ＪＥＳ６．５Ｈ４）、抗ＩＬ−４（１１Ｂ１１）、ＩＬ−１７Ａ（ｅＢｉｏ１７８７）。ＣｅｌｌＴｒａｃｅ  ５−（及び６−）カルボキシフルオレセインジアセテートスクシンイミジルエステル（ＣＦＳＥ）細胞増殖キットは、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ（オレゴン州ユージーン）より入手した。テムシロリムスは、ＬＣ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（マサチューセッツ州ウォバーン）より入手した。
【０１０５】
Ｔ細胞濃縮及びＴｒｅｇ選別
マウスの脾臓及びリンパ節を採取し、単細胞懸濁液に加工処理した。ＣＤ８及びＣＤ４Ｔ細胞は、マウスＣＤ８またはＣＤ４回収カラムキット（Ｃｅｄａｒｌａｎｅ  Ｌａｂｓ、ノースカロライナ州バーリントン）を用いてネガティブ濃縮した。ネガティブ選択の後のＣＤ８及びＣＤ４細胞の純度は、８５％を超えた。ＦｏｘＰ３−ＧＦＰ細胞または抗体染色ＣＤ４＋ＣＤ２５＋細胞は、ＭｏＦｌｏ  Ｃｅｌｌ  Ｓｏｒｔｅｒ（コロラド州フォートコリンズ）で選別した。
【０１０６】
ＤＣの製造及びＴ細胞の刺激
ＤＣの製造は、説明されている（Ｗａｎｇ  Ｙ，Ｗａｎｇ  ＸＹ，Ｓｕｂｊｅｃｋ  ＪＲ，Ｓｈｒｉｋａｎｔ  ＰＡ，Ｋｉｍ  ＨＬ．Ｂｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．２０１１；１０４：６４３−５２）。簡潔に言えば、マウスの骨髄を大腿骨及び脛骨から採取し、その後、１２ウェルのプレートに、ウェル当たり１ｘ１０６の細胞密度で、１０％ＦＢＳ及び１０ｎｇ／ｍｌのマウスＧＭ−ＣＳＦとともに入れた。該細胞は２日おきに供給され、７〜９日後に採取された。７５〜９０％の細胞がＣＤ１１ｃ陽性であった。マウス処置用のＤＣワクチンの製造のため、ＤＣを腫瘍細胞溶解物でパルスし、１０ｕｇ／ｍｌのＣｐＧで活性化した。ＤＣをマウスに皮下注射した。Ｐｍｅｌ−１細胞のインビトロ活性化のため、ＤＣを１０ｎｇ／ｍｌのマウスｇｐ１００ペプチド（アミノ酸２５〜３３、Ｈ２−ＤｂクラスＩ分子によって作り出される。Ａｌｐｈａ  Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、テキサス州サンアントニオ）でパルスし、１０ｕｇ／ｍｌのＣｐＧで２時間活性化した。ＤＣはＰＢＳで洗浄し、ＣＦＳＥで標識化したＰｍｅｌ−１細胞とともに共培養した。Ｐｍｅｌ−１細胞の増殖は、ＦＡＣｓｃａｎで分析した。
【０１０７】
養子移入、ＣＤ４細胞除去、及びｍＴＯＲ阻害
Ｐｍｅｌ−１リンパ球は、未感作Ｐｍｅｌ−１マウスのリンパ節及び脾臓から単離した。ＣＤ８リンパ球は、Ｃｅｄａｒｌａｎｅ精製カラムを用いて、ネガティブ選択により濃縮した。得られた細胞の少なくとも８５％がＣＤ８＋であった。５ｘ１０５の細胞をＢ５７ＢＬ／６マウスに移入した。養子移入の翌日、マウスは腫瘍溶解物でパルスしたＤＣワクチンを投与された。ＣＤ４細胞を除去するため、αＣＤ４をおよそ７日後及び９日後に投与した；マウスに２５０ｕｇのＣＤ４ｍＡｂ（クローンＧＫ１．５）を腹腔内投与した。ＣＤ８細胞を除去するため、マウスは２５０ｕｇのＣＤ８ｍＡｂ（クローン２．４３）を投与された。ＤＥＲＥＧマウスのＦｏｘＰ３細胞を除去するため、５μｇのＤＴを注射した。フローサイトメトリーを用いて、標的細胞の除去を確認した。ｍＴｏｒ阻害剤処置については、２週間毎日、１５μｇのテムシロリムスを腹腔内注射した。フローサイトメトリーを用いて、記憶細胞及びＴｒｅｇ細胞を分析した。
【０１０８】
生体内ＣＴＬ分析
生体内ＣＴＬ分析は、説明されている（Ｗａｎｇ  Ｙ，Ｗａｎｇ  ＸＹ，Ｓｕｂｊｅｃｋ  ＪＲ，Ｓｈｒｉｋａｎｔ  ＰＡ，Ｋｉｍ  ＨＬ．Ｂｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．２０１１；１０４：６４３−５２）。簡潔に言えば、脾細胞の単細胞懸濁液（１ｘ１０７細胞／ｍｌ）を未感作マウスから得、ＦＢＳ１０％を含むＤＭＥＭ中、１０μＭのペプチドを用いてまたは用いずに、３７℃で３０分間パルスした。各細胞集団は、次に異なる濃度のＣＦＳＥ（０．５または１２．５μＭ）により、２ｘ１０７細胞／ｍｌにて、ＰＢＳ／０．１％ＢＳＡ中で標識化した。ＣＦＳＥによる標識化は、等体積のＦＢＳを１分間添加することにより停止し、ＲＰＭＩ完全培地で３回洗浄した。ペプチドでパルスした、またはパルスしていない集団の各々から５ｘ１０６の細胞を混合し、免疫化及び免疫化されていないマウスに静脈注射した。移入の１６時間後、マウスを殺処分し、脾細胞を採取した。脾細胞の単細胞懸濁液を調製し、フローサイトメトリーで分析した。蛍光ドナー脾細胞の特異的溶解割合は次の通りに算出した：［（パルスされていない標的数×Ａ−パルスされた標的数）／パルスされていない標的数×Ａ］×１００、ただし、Ａ＝免疫化されていないレシピエントマウスにおける［パルスされた標的数／パルスされていない標的数］。
【０１０９】
統計
腫瘍増殖の違いは、反復測定ＡＮＯＶＡを用いて評価した。肺転移の数、生体内ＣＴＬ殺滅率、及びフローサイトメトリーからの平均割合の統計的差異は、両側スチューデントＴ検定によって評価した。すべての統計的分析は、Ｓｔａｔａ８．０（ＳｔａｔａＣｏｒｐ、テキサス州カレッジステーション）を用いて行った。Ｐ値＜０．０５を有意と見なした。
【０１１０】
実施例２：ｍＴＯＲ阻害が抗腫瘍免疫を高める
動物モデルでは、薬理学的ｍＴＯＲ阻害は、免疫記憶の形成を促進することができ、これは、感染の除去及び腫瘍増殖の減少に役立つ。これは、ｍＴＯＲ阻害剤が、固形臓器移植を受けた患者の免疫系を抑制するのに使われることから、驚くべき発見であった。テムシロリムスは、ラパマイシンアナログであり、がん治療として米国食品医薬品局（ＦＤＡ）によって認可された最初のｍＴＯＲ阻害剤の１つである。本発明者らの前臨床モデルでは、テムシロリムスでのｍＴＯＲ阻害は、腫瘍溶解物でパルスしたＤＣ（ここではＤＣワクチンと言う）の抗腫瘍免疫を高めた（図１ａ）。テムシロリムスは、腫瘍の一部の成長を直接阻害することができ、そのため、テムシロリムスの免疫効果を評価するために腫瘍予防研究が行われた。腫瘍投与試験の１３日前にＤＣワクチン及びテムシロリムスを投与することによって、直接の抗腫瘍効果が存在する可能性はなく、免疫刺激が全ての腫瘍増殖減少に起因しうると考えられる。ＤＣワクチンのみの投与は、マウスのＢ１６腫瘍細胞の増殖を減少させたが、ほとんどのマウスは、結局腫瘍増殖のために死亡した。対照的に、ＤＣワクチンとテムシロリムスの組合せは、１００％の生存という結果をもたらし、Ｂ１６腫瘍細胞の増殖を完全に抑えた。
【０１１１】
特異的ＣＤ８リンパ球へのテムシロリムスの免疫効果を評価するため、Ｔｈｙ１．１  Ｐｍｅｌ−１リンパ球をＴｈｙ１．２  Ｂ６マウスに養子移入した（図１ｂ）。Ｐｍｅｌ−１遺伝子組み換えマウスは、Ｈ２−Ｄｂ  ＭＨＣクラスＩ分子によって作り出されたｇｐ１００エピトープ（アミノ酸２５〜３３）を認識する再構成Ｔ細胞受容体を有する。リンパ球は、ＤＣワクチンとテムシロリムスで処置された後のＢ６マウスから採取した。テムシロリムスは、ＤＣワクチンとともに投与された場合、免疫刺激及び免疫抑制の両方の効果があった。テムシロリムスは、Ｐｍｅｌ−１リンパ球であるＣＤ８細胞の割合をわずかに減少させた（ｐ値０．０８）が、Ｐｍｅｌ−１リンパ球は、記憶細胞形成の初期マーカーであるＥｏｍｅｓの発現を増した。生じるかもしれない免疫抑制効果としては、Ｐｍｅｌ−１リンパ球におけるＴｂｅｔ発現の減少及びＴｒｅｇの増加が含まれた。これらの所見は、インビトロでの混合リンパ球培養研究（図１ｃ）と大いに似ていた。該インビトロ研究では、ＤＣワクチンによって誘導されたＰｍｅｌ−１リンパ球の増殖を、テムシロリムスが有意に減少させた。
【０１１２】
実施例３：ＣＤ４除去がｍＴｏｒ阻害の抗腫瘍効果を高める
テムシロリムスは、Ｔｒｅｇの増加にもかかわらず、正味の抗腫瘍免疫反応を引き起こした。さらに、腫瘍の存在自体が、Ｔｒｅｇを増加させた（図８）。従って、本発明者らは、ｍＴＯＲ阻害によって誘導された抗腫瘍免疫は、Ｔｒｅｇを標的にすることによってさらに高められうるという仮説を立てた。現在のところ、Ｔｒｅｇを選択的に除去する臨床戦略はないが、すべてのＣＤ４リンパ球を除去することは可能である。しかしながら、ＣＤ４エフェクター細胞は、免疫活性化に必要である。従って、本発明者らのマウスモデルでは、ＣＤ４リンパ球を、注入された腫瘍による免疫刺激の６日後から、αＣＤ４抗体（αＣＤ４）で除去し始めた（図２）。図１は、黒色腫のマウスモデルでの結果を示す。本発明者らは、別の古典的な免疫感受性腫瘍である胃細胞がんの第二のモデルでこの手法を試験した。腫瘍処置モデルでは、触知可能なＲＥＮＣＡ腫瘍がＢａｌｂ／ｃマウスで認められた。テムシロリムスは、ＲＥＮＣＡ腫瘍細胞の増殖をインビトロで直接阻害することが示されており（Ｗａｎｇ  Ｙ，Ｗａｎｇ  ＸＹ，Ｓｕｂｊｅｃｋ  ＪＲ，Ｓｈｒｉｋａｎｔ  ＰＡ，Ｋｉｍ  ＨＬ．Ｂｒ  Ｊ  Ｃａｎｃｅｒ．２０１１；１０４：６４３−５２）、本発明者らのマウスモデルでの腫瘍増殖の減少にも有効であった（図２ａ）。αＣＤ４単独では効果がなかったが、テムシロリムス処置にαＣＤ４を追加すると、腫瘍増殖をさらに減少させた。興味深いことに、がんワクチンを使用せず、注入された腫瘍が唯一の特異的免疫刺激源であった場合でさえ、αＣＤ４とテムシロリムスの組合せは腫瘍増殖を減少させた。
【０１１３】
同じ実験で、リンパ球を４５日目に採取し、腫瘍特異的ＩＦＮ−γ反応を評価した（図２ｂ）。非処置の担がんマウスでは、ＩＦＮ−γ反応はなかった。αＣＤ４またはテムシロリムスのいずれかの処置では、いくらかのＩＦＮ−γ反応を引き起こしたが、該組合せでの処置で、最大のＩＦＮ−γ反応を引き起こした。αＣＤ４に反応する該ＣＤ４リンパ球除去を特徴決定するため、未感作マウスを単回投与のαＣＤ４で処置した。ほとんどすべてのＣＤ４細胞が、末梢血、脾臓、及びリンパ節から翌日までに除去された（図２ｃ）一方、ＣＤ８細胞は温存された（図２ｄ）。重要なことには、ＦｏｘＰ３＋ＣＤ４＋細胞は除去され、αＣＤ４の投与の１０日後でさえ、低いままであった（図２ｅ）。αＣＤ４の単回投与は、すべてのＣＤ４サブセット集団を減少させた（図９）。
【０１１４】
実施例４：ＣＤ４除去とテムシロリムスの組合せは、記憶ＣＤ８細胞に依存する抗腫瘍免疫を作り出した
テムシロリムスは直接の抗腫瘍効果を有しうるため、αＣＤ４とテムシロリムスの組合せが、ＣＤ８リンパ球に依存する有効な抗腫瘍免疫を作り出していたことを確証することが重要であった。ＲＥＮＣＡ腫瘍を担うＢａｌｂ／ｃマウスは、テムシロリムス単独で１０日間処置され、その後第二のＲＥＮＣＡ腫瘍で投与試験された（図３ａ）。ＣＤ８エフェクター細胞を除去するためにαＣＤ８抗体（αＣＤ８）を注射されたマウスは、該第二のＲＥＮＣＡ腫瘍の増殖を増加させ、このことは、テムシロリムス単独でさえ、免疫反応を刺激することで、少なくとも部分的に作用することを示した。テムシロリムスとαＣＤ４の組合せは、第二のＲＥＮＣＡ腫瘍の増殖を完全に予防したが、αＣＤ８は、該第二の腫瘍に対する抗腫瘍効果を除去し、このことは、腫瘍制御にとっての細胞性免疫の重要性を示した（図３ｂ）。
【０１１５】
免疫系の役割をさらに確証するため、及び本発明者らが提案した、より浸潤性の腫瘍モデルの治療を試験するため、抗腫瘍免疫が転移性肺沈着物の成長を防ぐために移入されうるかどうかを評価した。定着した、皮下ＲＥＮＣＡ腫瘍の治療に、αＣＤ４とテムシロリムスの組合せを用いた（図３ｃ）。これらマウスからのリンパ球を未感作マウスに養子移入し、これらのマウスのＲＥＮＣＡ細胞による静脈内投与試験をした。該組合せ処置は、肺重量の比較（図３ｄ）及び肺沈着物の数（図３ｅ）によって定量化された通り、肺沈着物の定着と増殖を有意に減少させた（図３ｃ）。従って、記憶細胞は未感作マウスにうまく移入され、腫瘍増殖の制御に役立った。ＣＤ８細胞の除去によって、抗腫瘍活性はＣＤ８細胞に依存することが示された。免疫刺激のさらなる確認は、処置マウスから未感作マウスへのＣＤ８リンパ球の移入によってもたらされた。極めて浸潤性のがんモデルでは、移入されたリンパ球は、転移性沈着物の成長制御において有効であった。
【０１１６】
実施例５：ＣＤ４除去とテムシロリムス処置の組合せは、ＣＤ８記憶細胞の機能を高めた
テムシロリムスが腫瘍増殖を阻害する重要な機構は、特異的ＣＤ８記憶の質を高めることである。従って、本発明者らは、αＣＤ４が、さらに、ｍＴＯＲ阻害の存在下で形成された特異的ＣＤ８記憶を高めるかどうかを評価することを目的に、ＣＤ８記憶細胞の質を特徴決定した。担がんマウスの実験期間が、コントロール群での急速な腫瘍増殖のために限られることから、本発明者らは、腫瘍自体ではなく、ＤＣワクチンが免疫応答を刺激したモデルを用いた。ＤＣワクチンを用いることで、リコール反応を含めて、長期記憶が評価できる。Ｔｈｙ１．１  Ｐｍｅｌ−１リンパ球をＢ６マウスに養子移入し、これらマウスはその後Ｂ１６−ＤＣワクチンを投与され、αＣＤ４とテムシロリムスで処置された（図４ａ）。
【０１１７】
記憶細胞を評価するため、４６日目のＤＣワクチンでのマウスの再投与試験の前（図４ｂ）または後（図４ｃ）に脾細胞を採取した。再投与試験の直前には、実験群でのＰｍｅｌ−１リンパ球の割合に有意な差はなかった（図４ｂ）。しかしながら、αＣＤ４とテムシロリムスの両方で処置されたマウスからのＣＤ８リンパ球は、記憶マーカーのＥｏｍｅｓ及びＢＣＬ２の発現が有意に高かった。この群からの該ＣＤ８リンパ球は、極めて有効な中心記憶細胞のマーカーであるＣＤ６２Ｌの発現が有意に高かった。質の高い記憶細胞と一致して、ＤＣワクチンでの再投与試験の後、該組合せ処置群のＰｍｅｌ−１細胞は最も大きな拡大を示し、ＣＤ８細胞は最も高いＴｂｅｔ及びＩＬ２の発現を示した（図４ｃ）。興味深いことに、再投与試験の後でさえ、該組合せ処置群からの該拡大したＣＤ８細胞は、初期記憶マーカーのＥｏｍｅｓの最も高い発現を示した。該組合せ療法は、反復抗原投与に反応して急速に拡大可能な、最強の記憶表現型のＣＤ８リンパ球を製造した。本発明者らのモデルでは、ＣＤ４除去が免疫刺激の少なくとも６日後に始められたため、免疫プライミングの段階でＴｒｅｇは存在した。
【０１１８】
ＣＤ８記憶形成のためには、免疫プライミングの段階でＴｒｅｇが必要だということが他者によって報告されている。従って、本発明者らの処置モデルでは、最初の免疫刺激の少なくとも６日後にＴｒｅｇを除去した。しかしながら、本発明者らは、免疫プライミングの段階でＣＤ４細胞を有することの重要性を確認した。ＣＤ４除去が免疫プライミングの前に行われた場合、記憶細胞刺激後の腫瘍特異的ＣＤ８の低い拡大及び低Ｅｏｍｅｓ発現（図１０）で示されるように、ＣＤ８記憶形成は不十分であった。
【０１１９】
実施例６：Ｆｏｘｐ３  Ｔｒｅｇ細胞の除去または置換は生体内ＣＴＬ機能を変える
本発明者らの元の仮説は、テムシロリムスによって正常に誘導されたＴｒｅｇの除去は、抗腫瘍免疫を高めるであろうということであった。ＣＤ４除去が患者で実行可能なため、本発明者らは、Ｔｒｅｇ除去の方法として、ＣＤ４除去を選んだ。しかしながら、本発明者らは、ＣＤ４除去の影響が、Ｔｒｅｇの除去に直接起因しうるかどうかを試したかった。従って、本発明者らは、ＤＥＲＥＧ（制御性Ｔ細胞除去）形質導入マウスを用いたが、これらマウスは、Ｆｏｘｐ３プロモーターの支配下でＤＴＲ−ｅＧＦＰを担い、ジフテリア毒素（ＤＴ）の投与によって、特異的なＴｒｅｇの除去を可能にする（Ｌａｈｌ  Ｋ，Ｌｏｄｄｅｎｋｅｍｐｅｒ  Ｃ，Ｄｒｏｕｉｎ  Ｃ，Ｆｒｅｙｅｒ  Ｊ，Ａｒｎａｓｏｎ  Ｊ，Ｅｂｅｒｌ  Ｇ，ｅｔ  ａｌ．Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ．２００７；２０４：５７−６３．）。図２に示したものと類似の実験で、αＣＤ４の代わりに、ＤＴを６日目と１０日目に投与した（図５ａ）。免疫系をＤＣワクチンで刺激し、特異的免疫記憶を３５日目に生体内ＣＴＬで評価した（図５ｃ）。ＤＴの投与は、ほぼすべてのＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋リンパ球を除去した（図５ｂ）。コントロール群と比較した場合、特異的殺滅は、ＤＴ及びテムシロリムスで処置されたマウスで有意に増加した（図５ｃ、右端のパネル）。従って、Ｔｒｅｇの除去はＣＤ４除去と同様の免疫効果を示した。
【０１２０】
ＣＤ４除去後の免疫刺激の発症機序としてのＴｒｅｇ除去を十分に確立するため、ＴｒｅｇをＣＤ４除去後に元に戻した（図６ａ）。αＣＤ４とテムシロリムスで処置されたマウスは、生体内ＣＴＬで評価された通り、最善の特異的免疫記憶を発達させた（図６ｂ）。しかしながら、ＤＣワクチンで処置されたマウスからのＴｒｅｇが養子移入された場合、特異的殺滅は、ＤＣワクチンを投与されたのみのコントロールマウスの特異的殺滅まで減少した（図６ｂ、右端のパネル）。これらの実験は、αＣＤ４とともに特異的免疫記憶形成を高めるのは、Ｔｒｅｇ除去であることを裏付ける。
【０１２１】
実施例７：ＣＤ４除去後に最終的に回復するＴｒｅｇ集団は免疫抑制性が低い
ＤＣワクチン、αＣＤ４、及びテムシロリムスでの処置後、Ｔｒｅｇ集団は最終的に回復する（図７ａ）。実験群間で、脾臓におけるＴｒｅｇの絶対数の差は統計的に有意ではなかった。しかしながら、該処置はＴｒｅｇ機能に長期的な影響をもたらした可能性がある。従って、本発明者らは、回復したＴｒｅｇの免疫抑制機能を評価した。ＣＤ４リンパ球は、ＣＤ２５の状態によって分類した（図７ｂ）。ＣＤ４＋ＣＤ２５＋細胞の大部分はＦｏｘＰ３陽性であったのでＴｒｅｇと見なされ、ＣＤ４＋ＣＤ２５−細胞の大部分はＦｏｘＰ３陰性であったのでＣＤ４エフェクター細胞と見なされた。機能的研究において、コントロールのＣＤ４＋ＣＤ２５＋細胞はＣＤ８リンパ球の増殖を抑制した。しかしながら、ＣＤ４除去後に回復したＣＤ４＋ＣＤ２５＋は、おそらくそれらが腫瘍特異的Ｔｒｅｇである可能性が低いため、免疫抑制性が低かった（図７ｄ）。興味深いことに、ＩＦＮγ及びＩＬ４分泌が低いことで示される通り、ＣＤ４除去後、回復したＣＤ４エフェクター細胞も効果が弱かった（図７ｃ）。ＣＤ４エフェクター細胞及びＴｒｅｇの両方が腫瘍特異的である可能性が低かったと考えられる。
【０１２２】
免疫療法的手法は、固形腫瘍の治療に有効であることが証明されている。ＦＤＡは、シプリューセル−Ｔを認可し、これは、固形腫瘍の治療用の最初の市販がんワクチンとなった。ＣＴＬＡ４を標的としたモノクローナル抗体イピリムマブは、黒色腫の治療用に最近認可された。ＣＴＬＡ４及びＰＤ−１を標的とする免疫チェックポイント阻害薬は、様々な悪性腫瘍に対する多数の臨床試験で積極的に研究されている。免疫に基づいた治療は、転移性疾患のある患者の一部にも治癒的でありうるという暗示が常にあったが、免疫療法における最近の進歩によって、持続的な完全寛解が可能であることが再確認されている。従って、免疫療法は、がん治療への最も期待できる手法の１つである。
【０１２３】
実施例８：ＣＤ４リンパ球除去剤と養子免疫治療薬の組合せは抗腫瘍効果を高める
Ｂ１６腫瘍細胞を、ＦｏｘＰ３プロモーターの下でジフテリア毒素受容体を発現するように操作されたＢ６マウスであるＤＲＥＧマウスに注入した。マウスは、２日目に腫瘍溶解物でパルスしたＤＣワクチンを投与された。Ｔｒｅｇは、ジフテリア毒素で特異的に除去し、ＣＤ４細胞は６日目と１０日目にαＣＤ４抗体で除去した。腫瘍増殖を観察した。＊ｐ＝０．０５、＊＊ｐ＝０．０００９。図１１に示すように、ＣＤ４リンパ球除去とＤＣワクチンの組合せは、ＤＣワクチンのみの場合と比べて、抗腫瘍効果を高める。
【０１２４】
実施例９：ＣＤ４リンパ球除去剤と免疫チェックポイント阻害薬の組合せは抗腫瘍効果を高める
Ｂ１６腫瘍細胞をＢ６マウスに注入した。０日目。ＣＤ４細胞は、６日目と１０日目にαＣＤ４抗体で除去した。マウスは、１０日目と２４日目にαＰＤ−１抗体で処置した。腫瘍増殖を観察した。＊ｐ＝０．０２。図１２に示すように、ＣＤ４リンパ球除去と抗ＰＤ−１抗体の組合せは、抗ＰＤ−１抗体のみの場合と比べて、抗腫瘍効果を高める。
【０１２５】
実施例１０：抗ＣＤ４抗体は抗腫瘍活性を示す
ＲＥＮＣＡ−ＣＡ９腫瘍細胞を０日目にＢａｌｂ／Ｃマウス（ｎ＝５／群）に注入した。ＣＤ４リンパ球は、６日目と１０日目にαＣＤ４抗体で除去した（図１３Ａ）。４５日目にリンパ球を採取し、ＣＡ９ペプチドで再刺激し、ＣＤ８及びＩＦＮγについて染色した。結果は、２つ組の実験の代表例である（図１３Ｂ）。インビトロＣＴＬ分析用に、脾細胞を４５日目に採取し、ＩＬ２、ＲＥＮＣＡ溶解物、及びＣＡ９ペプチドとともに培養した。標的細胞はＲＥＮＣＡ細胞をＣＦＳＥで標識化して得た。エフェクター及び標的細胞は、５０：１の比率で共培養し、７−ＡＡＤ陽性でアネキシンＶ陰性のＣＦＳＥ＋細胞の割合についてＦＡＣＳで分析した（図１３Ｃ）。ヒストグラムは平均＋ＳＥＭを示す。＊ｐ＜０．０５。Ｂ１６腫瘍増殖曲線は、抗ＣＤ４抗体が抗腫瘍効果を有することを示す（図１３Ｄ）。図１３に示すように、ＣＤ４除去は、腫瘍抗原の存在下で活性化及び腫瘍細胞の殺滅が可能な腫瘍特異的ＣＤ８細胞を製造する。
【０１２６】
実施例１１：ＣＤ４リンパ球除去剤、養子免疫治療薬、及びｍＴＯＲ阻害剤の組合せは抗腫瘍効果を高める
Ｂ１６腫瘍細胞を０日目にＢ６マウス（ｎ＝５／群）の脇腹に皮下注射した。マウスは、３日目に腫瘍溶解物でパルスしたＤＣワクチンを投与され、６日目と９日目にＣＤ４リンパ球除去（抗ＣＤ４抗体を用いて）を行った。テムシロリムスを９日目から２０日目まで毎日腹腔内注射した。Ｂ１６腫瘍細胞曲線をＳＥＭとともに示す。＊＊ｐ＜０．００１。図１４に示すように、ＣＤ４リンパ球除去剤、樹状細胞ワクチン、及びｍＴＯＲ阻害剤（テムシロリムス）の組合せは、腫瘍増殖を効果的に制御した。
【０１２７】
上述した様々な方法及び技術は、本出願を実行するための多くの方法を提供する。言うまでもなく、当然のことながら、必ずしも記載されたすべての目的または有効性が本書に記載の特定の実施形態のいずれかに従って達成できるわけではない。従って、例えば、当業者には、該方法が、本書に教示または示唆された他の目的もしくは有効性を必ずしも達成しなくても、本書に教示された１つの有効性もしくは有効性の群を達成または最適化するやり方で、行うことができることが認識されよう。様々な選択肢が本書に挙げられている。当然のことながら、いくつかの好適な実施形態は、具体的に１つの、別の、またはいくつかの特徴を含み、他のものは具体的に１つの、別の、またはいくつかの特徴を排除し、さらに他のものは１つの、別の、またはいくつかの有利な特徴の包含によって特定の特徴を和らげる。
【０１２８】
さらに、当業者には、異なる実施形態からの様々な特徴の適用性が認識されよう。同様に、上述した様々な要素、特徴、及び段階、並びにかかる要素、特徴、または段階の各々の他の既知の等価物が、様々な組合せで、本書に記載の原理に従う方法を行うために、当業者によって採用されてもよい。該様々な要素、特徴、及び段階の中で、多様な実施形態において、具体的に含まれるものもあれば、具体的に排除されるものもある。
【０１２９】
本出願は、特定の実施形態及び実施例の中で開示されてきたが、当業者には、本出願の実施形態は、具体的に開示された実施形態を超えて、他の代替実施形態並びに／または、それらの使用、変更、及び等価物まで拡大することが理解されよう。
【０１３０】
本出願の好適な実施形態が本書に記載されており、本出願を実行するための本発明者らに知られている最良の形態が含まれている。これら好適な実施形態の変化形は、当業者には、前述の説明を解釈することで明らかになろう。当業者は、必要に応じて、かかる変化形を採用してもよく、本出願は、本書に具体的に記載されたものとは別の方法で実施されてもよいと考えられる。従って、本出願の多くの実施形態は、適用法で認められている通り、本書に添付の特許請求の範囲に列挙された主題のすべての変更及び等価物を含む。さらに、本書に別段の指示のない限り、または文脈から明らかに矛盾しない限り、上述した要素の、それらのすべての可能な変化形における任意の組合せが、本出願によって網羅される。
【０１３１】
本書に参照されたすべての特許、特許出願、公開特許公報、並びに他の材料、例えば、文献、書籍、明細書、出版物、文書、物、及び／または同類のものは、それに伴う審査出願経過のいずれか、本文書と矛盾する、もしくは対立するもののいずれか、または、本文書とここで、もしくは後に関連する、特許請求の範囲の最も広い範囲に関する制限効果を有しうるもののいずれかを除いて、この参照によって、それらが全体として本書に組み込まれる。例として、組み込まれた材料のいずれかに関連する説明、定義、及び／または用語の使用と、本文書に関連するそれの間に、矛盾や対立がある場合には、本文書の説明、定義、及び／または用語の使用を優先するものとする。
【０１３２】
当然のことながら、本書に開示した本出願の実施形態は、本出願の実施形態の原理の実例となる。採用されうる他の変更は、本出願の範囲内でありうる。従って、限定されない例として、本出願の実施形態の代替形態が、本書の教示に従って利用されうる。従って、本出願の実施形態は、厳密に示され説明されるように限定されない。
【０１３３】
本発明の様々な実施形態は、上記詳細な説明の中に記載されている。これらの説明は直接上記実施形態を描写しているが、当然のことながら、当業者には、本書に示され、説明された特定の実施形態に対する変更及び／または変化形が想像されうるという共通認識がある。本説明の範囲内にあるかかる変更または変化形は、同様にその中に含まれることを意図される。具体的に断りのない限り、本発明者らの意向は、本明細書及び特許請求の範囲における語句は、（１つまたは複数の）当適用技術の業者に通常の習慣的な意味を与えられるということである。
【０１３４】
本出願の申請の時点で本出願者に知られている本発明の様々な実施形態の前述の説明が提示されてきたが、これは例示及び説明目的のためである。本説明は、完全であることも、開示された厳密な形態に本発明を限定することも意図していないとともに、多くの変更及び変化形が、上記の教示の観点から可能である。記載された実施形態は、本発明の原理及び実際の適用を説明するのに役立ち、また、他の当業者が、様々な実施形態における本発明を利用し、かつ検討される特定の用途に適する様々な変更をもって利用できるようにするのに役立つ。従って、本発明は、本発明を実行するために開示された特定の実施形態に限定されないことを目的とする。
【０１３５】
本発明の具体的な実施形態が示され説明されてきたが、当業者には、本書の教示に基づいて、本発明及びそのより広い態様から逸脱することなく、変更及び修正がなされうることが明らかであり、従って、すべてのかかる変更及び修正を、それらが本発明の真の趣旨及び範囲内にあるように、特許請求の範囲内に含むものが、添付の特許請求の範囲である。
【図１Ａ】
2020196754.tif 000003
【図１Ｂ】
2020196754.tif 000004
【図１Ｃ】
2020196754.tif 000005
【図２−１】
2020196754.tif 000006
【図２−２】
2020196754.tif 000007
【図３Ａ】
2020196754.tif 000008
【図３Ｂ】
2020196754.tif 000009
【図３Ｃ】
2020196754.tif 000010
【図３Ｄ】
2020196754.tif 000011
【図３Ｅ】
2020196754.tif 000012
【図４Ａ】
2020196754.tif 000013
【図４Ｂ】
2020196754.tif 000014
【図４Ｃ】
2020196754.tif 000015
【図５Ａ】
2020196754.tif 000016
【図５Ｂ】
2020196754.tif 000017
【図５Ｃ】
2020196754.tif 000018
【図６Ａ】
2020196754.tif 000019
【図６Ｂ】
2020196754.tif 000020
【図７−１】
2020196754.tif 000021
【図７−２】
2020196754.tif 000022
【図８】
2020196754.tif 000023
【図９】
2020196754.tif 000024
【図１０】
2020196754.tif 000025
【図１１】
2020196754.tif 000026
【図１２】
2020196754.tif 000027
【図１３】
2020196754.tif 000028
【図１４】
2020196754.tif 000029
【手続補正書】
【提出日】令和2年9月28日(2020.9.28)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
がんの治療、予防、その重篤度の軽減、及び／またはその進行の遅延を必要とする対象のがんを治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させるための、治療有効量の抗ＣＤ４抗体を含み、免疫チェックポイント阻害薬と組み合わせて用いるための医薬であって、
CD4+制御性Ｔ細胞（Treg）を除去するために抗ＣＤ４抗体が投与され、
免疫チェックポイント阻害薬が、ＰＤ−１に対する抗体、ＰＤ−Ｌ１に対する抗体及びこれらの組合せからなる群から選択され、
抗CD4抗体の投与が対象におけるインターフェロン−γ(ＩＦＮ−γ)反応を引き起こし、かつ、
該がんが、黒色腫、乳がん、結腸がん、またはこれらの組み合わせである、
前記医薬。
【請求項２】
前記対象がヒトである、請求項１に記載の医薬。
【請求項３】
前記抗ＣＤ４抗体が、モノクローナル抗体もしくはその断片、ポリクローナル抗体もしくはその断片、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体もしくはその断片、または一本鎖抗体である、請求項１に記載の医薬。
【請求項４】
前記抗ＣＤ４抗体が、ヒト化抗ＣＤ４抗体である、請求項１に記載の医薬。
【請求項５】
前記抗ＣＤ４抗体が、ザノリムマブである、請求項１に記載の医薬。
【請求項６】
前記抗ＣＤ４抗体が、１００〜２００ｍｇ／日、２００〜３００ｍｇ／日、３００〜４００ｍｇ／日、４００〜５００ｍｇ／日、５００〜６００ｍｇ／日、６００〜７００ｍｇ／日、７００〜８００ｍｇ／日、８００〜９００ｍｇ／日、９００〜１０００ｍｇ／日、１０００〜１１００ｍｇ／日、１１００〜１２００ｍｇ／日、１２００〜１３００ｍｇ／日、１３００〜１４００ｍｇ／日、１４００〜１５００ｍｇ／日、１５００〜１６００ｍｇ／日、１６００〜１７００ｍｇ／日、１７００〜１８００ｍｇ／日、１８００〜１９００ｍｇ／日、または１９００〜２０００ｍｇ／日で投与される、請求項１に記載の医薬。
【請求項７】
前記抗ＣＤ４抗体及び前記免疫チェックポイント阻害剤が、静脈内に、筋肉内に、皮下に、腹腔内に、経口に、または吸入を介して投与される、請求項１に記載の医薬。
【請求項８】
前記抗ＣＤ４抗体及び前記免疫チェックポイント阻害薬が同時に投与される、請求項１に記載の医薬。
【請求項９】
前記抗ＣＤ４抗体が、前記免疫チェックポイント阻害薬の投与前または投与後に投与される、請求項１に記載の医薬。
【請求項１０】
前記免疫チェックポイント阻害薬が、０．１〜０．５ｍｇ／日、０．５〜１．０ｍｇ／日、１．０〜１．５ｍｇ／日、１．５〜２．０ｍｇ／日、２．０〜２．５ｍｇ／日、２．５〜５ｍｇ／日、５〜１０ｍｇ／日、１０〜１５ｍｇ／日、１５〜２０ｍｇ／日、２０〜２５ｍｇ／日、２５〜３０ｍｇ／日、３０〜３５ｍｇ／日、３５〜４０ｍｇ／日、４０〜４５ｍｇ／日、４５〜５０ｍｇ／日、５０〜５５ｍｇ／日、５５〜６０ｍｇ／日、６０〜６５ｍｇ／日、６５〜７０ｍｇ／日、７０〜７５ｍｇ／日、７５〜８０ｍｇ／日、８０〜８５ｍｇ／日、８５〜９０ｍｇ／日、９０〜９５ｍｇ／日、または９５〜１００ｍｇ／日で投与される、請求項１に記載の医薬。
【請求項１１】
治療有効量の養子免疫治療剤とさらに組み合わせて用いるための、請求項1に記載の医薬。
【請求項１２】
前記養子免疫治療剤が、樹状細胞ワクチン、ペプチドワクチン、キメラＴ細胞抗原系療法、免疫サイトカイン、熱ショックタンパク質系ワクチン、腫瘍溶解物系ワクチン、腫瘍抗原を含有するウイルスベクター、ウイルスワクチン、細菌ワクチン、真菌ワクチン、及びこれらの組合せからなる群から選ばれる、請求項11に記載の医薬。
【請求項１３】
前記養子免疫治療剤が、樹状細胞ワクチンである、請求項11に記載の医薬。
【請求項１４】
有効量の免疫アジュバントとさらに組み合わせて用いるための、請求項1に記載の医薬。
【請求項１５】
前記免疫アジュバントが、アルミニウム塩、ビロソーム、油性アジュバント、及びこれらの組合せからなる群から選ばれる、請求項14に記載の医薬。
【請求項１６】
治療有効量の免疫調節剤とさらに組み合わせて用いるための、請求項１に記載の医薬。
【請求項１７】
前記免疫調節剤が、ｍＴＯＲ阻害剤である、請求項16に記載の医薬。
【請求項１８】
前記ｍＴＯＲ阻害剤が、（ｉ）テムシロリムス（ＣＣＩ−７７９）、（ｉｉ）エベロリムス（ｅｖｉｒｏｌｉｍｕｓ）（ＲＡＤ−００１）及び（ｉｉｉ）シロリムス（ラパマイシン）からなる群から選ばれる、請求項17に記載の医薬。
【請求項１９】
対象のがんの治療、予防、その重篤度の軽減、及び／またはその進行の遅延用のキットであって、
抗ＣＤ４抗体を含む組成物；
免疫チェックポイント阻害薬を含む組成物；並びに
前記対象の前記がんを治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させるための、前記組成物の使用説明書
を含み、
CD4+制御性Ｔ細胞（Treg）を除去するために抗ＣＤ４抗体が投与され、
免疫チェックポイント阻害薬が、ＰＤ−１に対する抗体、ＰＤ−Ｌ１に対する抗体及びこれらの組合せからなる群から選択され、
抗CD4抗体の投与が対象におけるインターフェロン−γ(ＩＦＮ−γ)反応を引き起こし、かつ、
該がんが、黒色腫、乳がん、結腸がん、またはこれらの組み合わせである、
前記キット。
【請求項２０】
抗CD-4抗体の投与前に免疫系をプライミングするのに十分な時間がんを有していた対象のがんの治療、予防、その重篤度の軽減、及び／またはその進行の遅延用のキットであって、
抗ＣＤ４抗体を含む組成物；
抗INF-γ抗体を含む組成物；
免疫チェックポイント阻害薬を含む組成物；並びに
前記対象の前記がんを治療し、予防し、その重篤度を軽減し、及び／またはその進行を遅延させるための、前記組成物の使用説明書
を含み、
抗INF-γ抗体が抗CD4抗体の投与後にINF-γのレベルを検出するために使用され、
CD4+制御性Ｔ細胞（Treg）を除去するために抗ＣＤ４抗体が投与され、
免疫チェックポイント阻害薬が、ＰＤ−１に対する抗体、ＰＤ−Ｌ１に対する抗体及びこれらの組合せからなる群から選択され、
抗CD4抗体の投与が対象におけるインターフェロン−γ(ＩＦＮ−γ)反応を引き起こし、かつ、
該がんが、黒色腫、乳がん、結腸がん、またはこれらの組み合わせである、
前記キット。