(57)【要約】【課題】サンショオール類の安定化方法、サンショオール類含有組成物、及びその製造方法を提供する。【解決手段】サンショオール類の安定化方法は、サンショオール類と抗酸化剤とを液体中で混合する混合工程を含む。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
サンショオール類の安定化方法であって、
サンショオール類と抗酸化剤とを液体中で混合する混合工程を含む、サンショオール類の安定化方法。
【請求項２】
前記液体は、水及び水溶性の有機溶媒のうちの少なくとも一方を含み、
前記混合工程は、ｐＨが６以上の条件下で行う、請求項１に記載のサンショオール類の安定化方法。
【請求項３】
前記抗酸化剤は、ジヒドロキシ安息香酸もしくはその塩又はエステル体、トリヒドロキシ安息香酸もしくはその塩又はエステル体、ヒドロキシ桂皮酸類又はその塩、アスコルビン酸類又はその塩、及び、トコフェロール類からなる群より選ばれる１種又は２種以上である、請求項１又は２に記載のサンショオール類の安定化方法。
【請求項４】
サンショオール類含有組成物であって、
サンショオール類と、抗酸化剤と、液体とを含み、
前記液体は、水及び水溶性の有機溶媒のうちの少なくとも一方を含み、
前記サンショオール類含有組成物のｐＨは６以上である、サンショオール類含有組成物。
【請求項５】
前記抗酸化剤は、ジヒドロキシ安息香酸もしくはその塩又はエステル体、トリヒドロキシ安息香酸もしくはその塩又はエステル体、ヒドロキシ桂皮酸類又はその塩、アスコルビン酸類又はその塩、及び、トコフェロール類からなる群より選ばれる１種又は２種以上である、請求項４に記載のサンショオール類含有組成物。
【請求項６】
サンショオール類含有組成物の製造方法であって、
サンショオール類と抗酸化剤とを液体中で混合する混合工程を含み、
前記液体は、水及び水溶性の有機溶媒のうちの少なくとも一方を含み、
前記混合工程は、ｐＨが６以上の条件下で行う、サンショオール類含有組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、サンショオール類の安定化方法、サンショオール類含有組成物、及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
山椒は、痺れ感を伴う辛み成分を含み、この辛み成分は、山椒に含まれるヒドロキシサンショオール等のアミド誘導体によるものであることが知られている（特許文献１等）。また、山椒から抽出された抽出物を、食品、化粧品、医薬品等に使用することも知られている（特許文献１、２等）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２０１３−１０３９０１号公報
【特許文献２】特開２００１−３５４９５８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
ところで、食品や化粧品、医薬品等の製品の成分として山椒を用いる場合、山椒の果実や果皮を粉末状にしたり、抽出精製したりすることがある。山椒が有する味や香り、色合い等の風味は、山椒の果実や果皮を乾燥した状態では比較的安定に維持されるが、山椒の果皮等を粉末状にした粉末状物や抽出精製した抽出物は、空気や光にさらされる条件下や常温下等に置くと劣化しやすい傾向にある。山椒の粉末状物や抽出物が劣化すると、これらを含む製品の品質の低下を招来する可能性があるため、山椒の粉末状物や抽出物の劣化を抑制することが求められている。
【０００５】
本発明は、特にサンショオール類に着目し、このサンショオール類を安定化することができるサンショオール類の安定化方法、サンショオール類含有組成物、及びその製造方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は、以下のサンショオール類の安定化方法、サンショオール類含有組成物、及びその製造方法を提供する。
【０００７】
〔１〕  サンショオール類の安定化方法であって、サンショオール類と抗酸化剤とを液体中で混合する混合工程を含む、サンショオール類の安定化方法。
【０００８】
〔２〕  サンショオール類の安定化方法において、前記液体は、水及び水溶性の有機溶媒のうちの少なくとも一方を含み、
前記混合工程は、ｐＨが６以上の条件下で行う。
【０００９】
〔３〕  サンショオール類の安定化方法において、前記抗酸化剤は、ジヒドロキシ安息香酸もしくはその塩又はエステル体、トリヒドロキシ安息香酸もしくはその塩又はエステル体、ヒドロキシ桂皮酸類又はその塩、アスコルビン酸類又はその塩、及び、トコフェロール類からなる群より選ばれる１種又は２種以上である。
【００１０】
〔４〕  サンショオール類含有組成物であって、
サンショオール類と、抗酸化剤と、液体とを含み、
前記液体は、水及び水溶性の有機溶媒のうちの少なくとも一方を含む、サンショオール類含有組成物。
【００１１】
〔５〕  サンショオール類含有組成物において、前記抗酸化剤は、ジヒドロキシ安息香酸もしくはその塩又はエステル体、トリヒドロキシ安息香酸もしくはその塩又はエステル体、ヒドロキシ桂皮酸類又はその塩、アスコルビン酸類又はその塩、及び、トコフェロール類からなる群より選ばれる１種又は２種以上である。
【００１２】
〔６〕  サンショオール類含有組成物の製造方法であって、
サンショオール類と抗酸化剤とを液体中で混合する混合工程を含み、
水及び水溶性の有機溶媒のうちの少なくとも一方を含み、
前記混合工程は、ｐＨが６以上の条件下で行う、サンショオール類含有組成物の製造方法。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、サンショオール類を安定化することができるサンショオール類の安定化方法、サンショオール類含有組成物、及びその製造方法を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
（サンショオール類の安定化方法）
本実施形態のサンショオール類の安定化方法は、サンショオール類と抗酸化剤とを液体中で混合する混合工程を含む。この安定化方法によれば、サンショオール類を長期にわたって安定に保存しやすくなり、サンショオール類を、食品、補助食品、飲料、医薬品、医薬部外品、化粧品、飼料、洗剤、日用品等の各種製品に用いたときに、これらの製品中においてサンショオール類を安定した状態で存在させることができるため、これら製品の長寿命化を図ることが期待できる。
【００１５】
（サンショオール類）
サンショオール類は、山椒から抽出されるものであってもよく、合成されたものであってもよい。本実施形態のサンショオール類としては、α−サンショオール、β−サンショオール、γ−サンショオール、δ−サンショオール、ヒドロキシ−α−サンショオール、ヒドロキシ−β−サンショオール、ヒドロキシ−γ−サンショオール等を挙げることができる。このうち、サンショオールは、山椒に多く含まれる成分であるヒドロキシ−α−サンショオール、α−サンショオールであることが好ましい。
【００１６】
サンショオール類は、食品における辛み成分として知られているだけでなく、塩味増強剤、消化管運動改善剤（消化管麻痺（術後イレウス）改善剤）、抗酸化剤等の薬剤；麻酔効果、記憶促進効果、脂肪燃焼効果等を目的とした補助食品（サプリメント）等に用いられることが知られている。本実施形態のサンショオール類の安定化方法によって安定化されたサンショオール類を用いれば、サンショオール類を含む各種製品の保管寿命（shelf time）を向上することが期待できる。
【００１７】
サンショオール類は、山椒から抽出された山椒抽出物（以下、単に「山椒抽出物」ということがある。）に含まれるものであってもよい。山椒抽出物とは、山椒をなす部位から抽出される抽出物であって、少なくともサンショオール類を含むものをいう。山椒抽出物は、山椒から抽出されるサンショオール類以外の抽出物を含んでいてもよい。山椒抽出物は、サンショオール類等の山椒抽出物の抽出に用いた溶媒中に存在するものであってもよく、この溶媒の少なくとも一部を除去した濃縮物中に存在するものであってもよく、溶媒を乾燥により除去した乾燥物であってもよい。
【００１８】
山椒抽出物を得るために用いることができる山椒は、ミカン科サンショウ属の植物であれば特に限定されない。山椒の具体的としては、サンショウ（Zanthoxylum piperitum DC）、アサクラザンショウ（Z.piperitum DC.var.inerme Makino）、ヤマアサクラザンショウ（Zanthoxylum piperium DC. forma brevispinosum Makino）、イヌザンショウ（Zanthoxylum schinifolium Sieb.et Zucc.）、ホワジョウ（Zanthoxylum bungeanum Maxim.）、フユザンショウ（Zanthoxylum armatum var．subtrifoliatum）、テリハサンショウ（Zanthoxylum nitidum）等が挙げられる。このうち、食品に一般的に使用されており、品質に優れ、安全性の高いサンショウ、アサクラザンショウが好ましく、和歌山県産の特産品である品種名ブドウザンショウがより好ましい。
【００１９】
山椒抽出物を得るために用いる山椒の部位は、山椒の果実、果皮、じょうのう膜、種子、葉、幹、枝、根、茎等のいずれの部位であってもよい。サンショオール類の採取効率や作業性等の観点からは、山椒の果実、果皮、じょうのう膜、葉を用いることが好ましく、山椒の果実、果皮、じょうのう膜を用いることがより好ましく、山椒の果実、果皮を用いることがさらに好ましい。
【００２０】
山椒の部位から山椒抽出物を得る抽出方法としては、従来公知の方法であれば特に限定されない。例えば、圧搾法、水蒸気蒸留法、溶媒抽出法、超臨界抽出法、炭酸ガス抽出法、油脂吸着法を挙げることができる。このうち、山椒からサンショオール類を効率的に抽出できることから、溶媒抽出法を用いることが好ましい。
【００２１】
溶媒抽出法では、山椒の部位を、必要に応じて、乾燥や、切断、破砕、粉砕等の前処理を行った後、抽出溶媒として、有機溶媒、水、又は、水と有機溶媒との混合液体を用いて抽出すればよい。有機溶媒としては、後述する有機溶媒を挙げることができる。
【００２２】
サンショオール類を合成によって得る場合は、公知の合成法にしたがって合成すればよい。
【００２３】
（抗酸化剤）
抗酸化剤は、一般に抗酸化作用を有するとされる物質であり、特に、食品や医薬品に使用することができる安全な抗酸化剤が好ましい。本実施形態における抗酸化剤は、水溶性のものであってもよく、脂溶性のものであってもよい。
【００２４】
水溶性の抗酸化剤としては、プロトカテク酸等のジヒドロキシ安息香酸又はその塩；没食子酸等のトリヒドロキシ安息香酸又はその塩；カフェ酸、フェルラ酸等のヒドロキシ桂皮酸類又はその塩；アスコルビン酸やエリソルビン酸等のアスコルビン酸類又はその塩；チオウレア、システイン、グルタチオン等のチオール類；α−リポ酸、ジヒドロリポ酸、リポアミド、ジヒドロイポアミド等のリポ酸類等を挙げることができる。これらの酸の塩としては、アルカリ金属塩やアルカリ土類金属を挙げることができ、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩を挙げることができる。
【００２５】
脂溶性の抗酸化剤としては、ジヒドロキシ安息香酸のエステル体；トリヒドロキシ安息香酸のエステル体；α−トコフェロールやβ−トコフェロール等のトコフェロール類；ケルセチンやナリンゲニン等のフラボノイド類等を挙げることができる。上記した酸のエステル体としては、例えば、炭素数１〜５のアルキルエステル基を有するものを挙げることができる。
【００２６】
サンショオール類と混合する抗酸化剤は、１種以上を用いればよく、２種以上を用いてもよい。２種以上の抗酸化剤を用いる場合、水溶性の抗酸化剤と脂溶性の抗酸化剤とを組み合わせて用いることが好ましい。
【００２７】
（混合工程）
サンショオール類の安定化方法における混合工程は、サンショオール類と抗酸化剤とを液体中で混合する工程である。サンショオール類及び抗酸化剤はそれぞれ、液体に溶解していてもよく、液体に分散していてもよい。この混合工程で用いる液体は、特に限定されず、有機溶媒、水、又は、水と有機溶媒との混合液体を挙げることができる。山椒抽出物に含まれるサンショオール類を安定化する場合、混合工程で用いる液体は、サンショオール類の山椒抽出物の抽出に用いた抽出溶媒であってもよい。また、合成によって得られたサンショオール類を安定化する場合は、混合工程で用いる液体は、合成時に用いる溶媒、例えば精製に用いる溶媒等であってもよい。
【００２８】
混合工程で用いる液体としての有機溶媒としては、例えば、エタノール、メタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等の炭素数１〜４のアルコール；ジエチルエーテル、テトラヒドロフラン等のエーテル類；酢酸エチル等のエステル類；アセトン等のケトン類；アセトニトリル等のニトリル類；ベンゼン、トルエン等の芳香族炭化水素類；塩化メチレン、クロロホルム等のハロゲン化脂肪族炭化水素類；ヘキサン；これらの混合物等を挙げることができる。このうち、炭素数１〜４のアルコール、エステル類、アセトン類、ハロゲン化脂肪族炭化水素類、これらの有機溶媒のうち水溶性の有機溶媒（後述）のうちの１以上と水との混合液体が好ましく、炭素数１〜４のアルコール、アセトン、酢酸エチル、アセトニトリル、クロロホルム、これらの有機溶媒（但し、クロロホルムを除く。）のうちの１以上と水との混合液体がより好ましく、エタノール、メタノール、２−プロパノール、アセトン、酢酸エチル、アセトニトリル、クロロホルム、これらの有機溶媒（但し、クロロホルムを除く。）のうちの１以上と水との混合液体がさらに好ましい。
【００２９】
なお、サンショオール類の安定化方法によって安定化したサンショオール類を食品や医薬品等に用いる場合には、サンショオール類の安定化方法に用いる溶媒は、エタノールや１−プロパノール等の食品や医薬品に使用することができる安全な溶媒を用いることが好ましい。
【００３０】
サンショオール類は、酸化等の反応や加水分解等の分解により劣化しやすい。そのため、サンショオール類と抗酸化剤との混合工程は、山椒からのサンショオール類の抽出後、又は、サンショオール類の合成後、できるだけ早い時期に行うことが好ましく、抽出直後や合成直後に、サンショオール類と抗酸化剤とを液体中で混合することが好ましい。例えば、サンショオール類を含む薬剤や補助食品等を製造する際に、あらかじめサンショオール類と抗酸化剤とを混合して、サンショオール類を安定化しておき、この安定化されたサンショオール類と、薬剤や補助食品（サンショオール類を適用する製品）をなす材料とを混合することにより、これらの製品中においてサンショオール類を安定化した状態で存在させることができるため、これら製品の長寿命化を図ることが期待できる。
【００３１】
混合工程は、サンショオール類と抗酸化剤とを液体中で混合する工程を１段階で行ってもよく、２段階以上で行ってもよい。山椒から抽出したサンショオール類と抗酸化剤との混合工程を２段階で行う場合、例えば次のように行うことができる。まず第１混合工程において、山椒からサンショオール類を抽出した抽出液に抗酸化剤を添加する。その後、第１混合工程で得た抗酸化剤が添加された抽出液を濃縮又は乾燥等して、抗酸化剤を含むサンショオール類（以下、「抗酸化剤含有サンショオール類」）を得る。次に第２混合工程において、抗酸化剤含有サンショオール類と抗酸化剤とを液体中で混合する。第１混合工程で用いる抗酸化剤と、第２混合工程で用いる抗酸化剤とは、同じであってもよく異なるものであってもよい。合成で得られたサンショオール類についても、上記と同様に２段階以上で混合工程を行ってもよい。このように２段階以上で混合工程を行うことにより、サンショオール類を得た直後にサンショオール類を安定化することができるとともに（第１混合工程）、サンショオール類の各種製品（食品、補助食品、飲料、医薬品、医薬部外品、化粧品、飼料、洗剤、日用品等）への適用に際しても、サンショオール類（抗酸化剤含有サンショオール類）にさらに抗酸化剤を添加することにより、サンショオール類のさらなる安定化を図ることが期待できる。
【００３２】
液体が水及び水溶性の有機溶媒のうちの少なくとも一方を含む場合、混合工程は液体のｐＨが６以上の条件下で行うことが好ましく、ｐＨは６．５以上であることがより好ましく、７．０以上であることがさらに好ましい。また、ｐＨの上限値は特に限定されないが、通常１４以下であり、１２以下であることが好ましく、１０以下であってもよく、９以下であってもよい。水及び水溶性の有機溶媒のうちの少なくとも一方を含む液体を用いた場合に混合工程をｐＨ６以上の条件下で行うことにより、サンショオール類を効果的に安定化させることができる。この場合、抗酸化剤は水溶性の抗酸化剤であってもよく、脂溶性の抗酸化剤であってもよく、これらを組み合わせてもよい。なお、本明細書において、水溶性の有機溶媒とは、水に対して５重量％以上溶解する有機溶媒をいう。水溶性の有機溶媒としては、上記した炭素数１〜４のアルコール、エーテル類、エステル類、ケトン類、ニトリル類等を挙げることができる。
【００３３】
混合工程における液体のｐＨは、抗酸化剤の種類によって調整してもよく、緩衝液やアルカリ剤等を用いて調整してもよい。アルカリ剤としては、例えば、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、リン酸類のカリウム塩又はナトリウム塩等を挙げることができる。混合工程では、液体中でサンショオール類と抗酸化剤とを混合することができれば特に限定されず、液体とサンショオール類とを含む混合体（Ａ）に抗酸化剤を添加してもよく、液体と抗酸化剤とを含む混合体（Ｂ）にサンショオール類を添加してもよく、混合体（Ａ）と混合体（Ｂ）とを混合してもよく、液体中に、サンショオール類及び抗酸化剤を添加して混合してもよい。このとき、混合工程におけるｐＨが６以上に保たれればよく、ｐＨは、例えば混合体（Ａ）や混合体（Ｂ）、液体において調整しておいてもよく、サンショオール類と抗酸化剤とを混合しながらｐＨ測定を行い、ｐＨが６以上に保たれるようにアルカリ剤等を添加するようにしてもよい。
【００３４】
サンショオール類は、酸性条件下において加水分解されやすいと推測される。本実施形態の抗酸化剤は、その種類やその添加量、添加条件等によっては、サンショオール類と混合したときに酸性条件に傾くことが考えられる。そのため、サンショオール類の安定化方法において、混合工程において、水及び水溶性の有機溶媒のうちの少なくとも一方を含む液体を用いる場合には、ｐＨが６以上となる条件下でサンショオール類と抗酸化剤とを混合することにより、抗酸化剤によってサンショオールの酸化を抑制するとともに、サンショオール類の加水分解も抑制してサンショオール類を安定化できると考えられる。
【００３５】
なお、混合工程における液体として、芳香族炭化水素類、ハロゲン化脂肪族炭化水素類、ヘキサン等の脂溶性の有機溶媒を用いる場合は、脂溶性の抗酸化剤を用いることが好ましい。
【００３６】
サンショオール類の各種製品（食品、補助食品、飲料、医薬品、医薬部外品、化粧品、飼料、洗剤、日用品等）への適用に際しては、水を含む液体を用いることが多い。そのため、例えば、上記した第１混合工程は、任意の液体及び任意の抗酸化剤を用いて混合工程を行い、上記した第２混合工程では、水を含む液体中で、抗酸化剤とサンショオール類（抗酸化剤含有サンショオール類）とを混合するようにしてもよい。
【００３７】
混合工程における抗酸化剤の添加量は、抗酸化剤の種類にもよるが、通常、サンショオール類１モルに対して、０．２モル以上であることが好ましく、０．５モル以上であることがより好ましく、１モル以上であってもよく、５モル以上であってもよく、１０モル以上であってもよく、１５モル以上であってもよく、また、３０モル以下であってもよく、２５モル以下であってもよく、２０モル以下であってもよい。
【００３８】
（サンショオール類含有組成物）
本実施形態のサンショオール類含有組成物は、サンショオール類と、抗酸化剤と、液体とを含み、ｐＨは６以上であり、液体は水及び水溶性の有機溶媒のうちの少なくとも一方を含むものである。サンショオール類、抗酸化剤、及び液体については上記したとおりである。サンショオール類含有組成物は、水及び水溶性の有機溶媒のうちの少なくとも一方を含んでいればよく、水と水溶性の有機有機溶媒との混合液体であってもよい。また、抗酸化剤は、水溶性の抗酸化剤であってもよく、脂溶性の抗酸化剤であってもよく、２種以上の抗酸化剤を含んでいてもよい。サンショオール類含有組成物は、サンショオール類及び抗酸化剤が液体中に存在するものであればよく、サンショオール類及び抗酸化剤が分散した分散状態であってもよく、乳化剤等を添加して乳化状態としたものであってもよい。
【００３９】
サンショオール類含有組成物のｐＨは、６以上であり、ｐＨは６．５以上であることがより好ましく、７．０以上であることがさらに好ましい。また、ｐＨの上限値は特に限定されないが、通常１４以下であり、１２以下であることが好ましく、１０以下であってもよく、９以下であってもよい。サンショオール類含有組成物のｐＨが６以上であることにより、サンショオール類を効果的に安定化させることができる。
【００４０】
サンショオール類含有組成物に含まれる抗酸化剤の含有量は、抗酸化剤の種類にもよるが、通常、サンショオール類１モルに対して、０．２モル以上であることが好ましく、０．５モル以上であることがより好ましく、１モル以上であってもよく、５モル以上であってもよく、１０モル以上であってもよく、１５モル以上であってもよく、また、３０モル以下であってもよく、２５モル以下であってもよく、２０モル以下であってもよい。サンショオール類に対する抗酸化剤の含有量が少なすぎると、サンショオール類含有組成物中でサンショオール類を安定化しにくくなる傾向にある。
【００４１】
サンショオール類含有組成物は液体を含むものであるが、このサンショオール類含有組成物を乾燥して液体を除去して粒子状物や粉末状物にして、各種製品に用いてもよい。サンショオール類含有組成物から液体を除去する方法としては、噴霧乾燥、凍結乾燥、真空乾燥等、公知の乾燥手段を用いることができる。
【００４２】
サンショオール類含有組成物は、（ａ）そのままで、（ｂ）液体を除去して粒子状物や粉末状物として、又は、（ｃ）粒子状物や粉末状物を再び液体に溶解又は分散させて、食品、補助食品、飲料、医薬品、医薬部外品、化粧品、飼料等の各種製品に添加して用いることができる。サンショオール類含有組成物を用いることにより、これらの製品中でサンショオール類を安定した状態で存在させることができるため、これらの製品の保管寿命（shelf time）を向上することが期待できる。
【００４３】
（サンショオール類含有組成物の製造方法）
本実施形態のサンショオール類含有組成物の製造方法は、サンショオール類と抗酸化剤とを液体中で混合する混合工程を含み、液体は水及び水溶性の有機溶媒のうちの少なくとも一方を含み、混合工程は、ｐＨが６以上の条件下で行う方法である。サンショオール類、抗酸化剤、液体、及び混合工程については、上記したとおりである。混合工程で用いる液体は、水及び水溶性の有機溶媒のうちの少なくとも一方を含んでいればよく、水と水溶性の有機溶媒との混合液体であってもよい。また、抗酸化剤は、水溶性の抗酸化剤であってもよく、脂溶性の抗酸化剤であってもよく、２種以上の抗酸化剤を含んでいてもよい。
【００４４】
サンショオール類含有組成物の製造方法は、混合工程の後に、液体の少なくとも一部を除去する乾燥工程を含んでいてもよく、この組成物に乳化剤を添加して乳化する乳化工程を含んでいてもよい。乾燥工程としては、液体の一部を除去する濃縮工程であってもよく、液体を含むサンショオール類含有組成物を噴霧乾燥、凍結乾燥、真空乾燥等により乾燥して、粒子状物又は粉末状物を得てもよい。
【００４５】
上記のサンショオール類含有組成物の製造方法によって得られたサンショオール類含有組成物は、食品、補助食品、飲料、医薬品、医薬部外品、化粧品、飼料等の各種製品に添加して用いることができる。上記した製造方法によって得られたサンショオール類含有組成物を用いることにより、これらの製品中でサンショオール類を安定した状態で存在させることができるため、これらの製品の保管寿命（shelf time）を向上することが期待できる。
【実施例】
【００４６】
以下、実施例及び比較例を示して本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの例によって限定されるものではない。
【００４７】
［高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）による分析］
高速液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）分析は、逆相系で行った。ＨＰＬＣ装置はＬＣ−２０１０（島津製作所製）であり、ポンプはＬＣ−１０ＡＤｖｐ、カラムオーブンはＣＴＯ−１０ＡＣｖｐ、システムコントローラーはＳＣＬ−１０Ａｖｐで構成されている。カラムはInertSustainSwift C18  4.6×250mm（ＧＬ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、カラム温度は４０℃、移動相は、Ａ液が３０％アセトニトリル、Ｂ液が８０％アセトニトリル、グラジエント条件は、０ｍｉｎ  Ｂ液０％→３５ｍｉｎ  Ｂ４５％→５０ｍｉｎ  Ｂ液１００％→５１ｍｉｎ  Ｂ液０％→５５ｍｉｎ  Ｂ液０％とし、検出波長は２７０ｎｍで行い、ヒドロキシ−α−サンショオールのピーク面積値から、ヒドロキシ−α−サンショオールの含有量を算出した。
【００４８】
［ｐＨの測定］
ｐＨ測定装置（ｐＨメータＦ５２、ＨＯＲＩＢＡ社製）を用いて行った。
【００４９】
〔実施例１〜３１〕
完熟サンショウ（和歌山県産、品種名ブドウザンショウ）を乾燥させ、篩で篩って果皮と種子とを分離し、果皮と種子との間にあるじょうのう膜を集めた。このじょうのう膜をラボミルサー（ＬＭ−ＰＬＵＳ、大阪ケミカル株式会社製）で粉砕して、目開き２５０μｍの篩を通過させて、篩を通過したサンショウのじょうのう膜の粉末状物を得た。この粉末状物０．４ｇに対して、抽出溶媒として５０体積％のエタノール水溶液８ｍＬを加えて懸濁し、ボルテックスミキサーで振とうし、超音波処理を行って遠心分離した後、上清を採取した。採取した上清と表１に示す抗酸化剤とをスピッツ管に入れ、温度７０℃に設定したオイルバス中に保温した。上清１ｍＬ中のヒドロキシ−α−サンショオールの含有量は２．５μｍｏｌであった。また、抗酸化剤の添加量及びヒドロキシ−α−サンショオール１ｍｏｌに対するモル比は、表１及び表２に示すとおりである。
【００５０】
上清及び抗酸化剤を含む試料をオイルバスで保温する前に、試料中のヒドロキシ−α−サンショオールの含有量をＨＰＬＣを測定した。また、試料をオイルバスで保温し、保温９日目の試料中のヒドロキシ−α−サンショオールの含有量をＨＰＬＣで測定した。ＨＰＬＣ測定で得られた測定を用い、０日目（オイルバスでの保温前）の試料のＨＰＬＣ測定で得られた測定値を１００として、保温９日目の試料のＨＰＬＣ測定で得られた測定値の割合（［保温９日目のヒドロキシ−α−サンショオールの含有量／０日目のヒドロキシ−α−サンショオールの含有量］×１００［％］）を算出し、残存率（％）とした。結果を表１及び表２に示す。一部の実施例については、上清及び抗酸化剤を含む試料をオイルバスで保温する前に行ったｐＨ測定の結果を示す。なお、実施例７〜１０、２９び３０については、水酸化ナトリウムを用いてｐＨを調整した。これら以外の実施例については、ｐＨ調整を行っていない。
【００５１】
〔比較例１〕
抗酸化剤を添加しないこと以外は実施例１〜３１と同様にして、オイルバス保温前の試料、及び、オイルバス保温９日目のヒドロキシ−α−サンショオールの含有量をＨＰＬＣを測定した。その結果を表２に示す。比較例１では、ｐＨ調整は行っていない。
【００５２】
なお、各実施例及び各比較例で用いた、プロトカテク酸、没食子酸、カフェ酸、及びナリンゲニンは、Sigma-Aldrich社から入手し、没食子酸エチル、α−トコフェロール、アスコルビン酸ナトリウム、エリソルビン酸ナトリウム、フェルラ酸、及びケルセチンは、和光純薬工業社から入手した。没食子酸ナトリウムは没食子酸をＮａＯＨで中和して調製した。
【００５３】
【表１】
2020029422.tif 000002
【００５４】
【表２】
2020029422.tif 000003
【００５５】
なお、上記した実施例及び比較例では、山椒抽出物中のヒドロキシ−α−サンショオール以外のサンショオール類の含有量は、ヒドロキシ−α−サンショオールの含有量に比べて微量であるため、ヒドロキシ−α−サンショオールの含有量を、山椒抽出物中のサンショオール類の含有量と近似することができる。また、上記した実施例及び比較例で行った温度７０℃のオイルバス中での９日間の保存処理は、化合物の安定性予測するための加速試験のために設定された条件である。加速試験では、温度７０℃で７日間の保存処理を、温度２５℃（室温）で３年間の保存と同等とみなすことができると考えられるため、実施例及び比較例で行った温度７０℃で９日間の保存処理は、温度２５℃で３年間を超える保存に相当すると考えられる。
【００５６】
〔実施例３２〕
抗酸化剤として、（ａ）没食子酸ナトリウム０．６５μｍｏｌ／ｍＬを用いた場合、（ｂ）アスコルコルビン酸ナトリウム２５μｍｏｌ／ｍＬを用いた場合、（ｃ）没食子酸ナトリウム０．６５μｍｏｌ／ｍＬとアスコルコルビン酸ナトリウム２５μｍｏｌ／ｍＬとを用いた場合について、実施例１〜３１と同様の手順で、オイルバスでの保温８日目の試料中のヒドロキシ−α−サンショオールの含有量をＨＰＬＣで測定し、残存率を測定した。
【００５７】
その結果、上記（ｃ）の場合のヒドロキシ−α−サンショオールの残存率は、上記（ａ）の場合のヒドロキシ−α−サンショオールの残存率と上記（ｂ）の場合のヒドロキシ−α−サンショオールの残存率との合計量と同程度であることが確認でき、相加的な効果が確認できた。
【００５８】
〔実施例３３〕
抗酸化剤として、（ｂ）アスコルコルビン酸ナトリウム２５μｍｏｌ／ｍＬを用いた場合、（ｄ）トコフェロール０．５８μｍｏｌ／ｍＬを用いた場合、（ｅ）没食子酸ナトリウム０．６５μｍｏｌ／ｍＬとアスコルコルビン酸ナトリウム２５μｍｏｌ／ｍＬとを用いた場合について、実施例３２と同様にして、オイルバスでの保温８日目の試料中のヒドロキシ−α−サンショオールの含有量をＨＰＬＣで測定し、残存率を測定した。
【００５９】
その結果、上記（ｅ）の場合のヒドロキシ−α−サンショオールの残存率は、上記（ｂ）の場合のヒドロキシ−α−サンショオールの残存率と上記（ｄ）の場合のヒドロキシ−α−サンショオールの残存率との合計量と同程度であることが確認でき、相加的な効果が確認できた。
【００６０】
〔実施例３４〜３７〕
実施例１〜３１と同様にして、オイルバスで保温する前の上清及び抗酸化剤を含む試料を準備した。上清と混合した抗酸化剤の種類及び量は、表３に示すとおりである。この試料に、１ｇのデンプンを添加して凍結乾燥し、この凍結乾燥物を温度７０℃に設定したオイルバス中で６５時間保温した後、凍結乾燥物をエタノールに溶解させて、ヒドロキシ−α−サンショオールの含有量をＨＰＬＣで測定し、残存率を算出した。その結果を表３に示す。
【００６１】
〔比較例２〕
抗酸化剤を添加しないこと以外は実施例３４〜３７と同様にして、凍結乾燥物中のヒドロキシ−α−サンショオールの含有量をＨＰＬＣで測定し、残存率を算出した。その結果を表３に示す。
【００６２】
〔比較例３及び４〕
実施例１〜３１と同様にして、上清を準備し、この上清に１ｇのデンプンを添加して凍結乾燥した後、粉末状の抗酸化剤を添加して、粉末混合物を得た。得られた粉末混合物を温度７０℃に設定したオイルバス中で６５時間保温した後、この粉末混合物をエタノールに溶解させて、ヒドロキシ−α−サンショオールの含有量をＨＰＬＣで測定し、残存率を算出した。その結果を表３に示す。
【００６３】
【表３】
2020029422.tif 000004
【００６４】
今回開示された実施の形態および実施例はすべての点で例示であって、制限的なものではないと考えられるべきである。本発明の範囲は上記した実施の形態ではなく特許請求の範囲によって示され、特許請求の範囲と均等の意味、および範囲内でのすべての変更が含まれることが意図される。
【産業上の利用可能性】
【００６５】
本発明のサンショオール類の安定化方法によって安定化されたサンショオール類は、食品、補助食品（サプリメント）、飲料、医薬品、医薬部外品、化粧品、飼料等の各種製品に混合して用いることができる。
【手続補正書】
【提出日】令和1年8月15日(2019.8.15)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
サンショオール類の安定化方法であって、
サンショオール類と抗酸化剤とを液体中で混合する混合工程を含み、
前記液体は、水及び水溶性の有機溶媒のうちの少なくとも一方を含み、
前記混合工程は、ｐＨが６以上の条件下で行う、サンショオール類の安定化方法。
【請求項２】
前記抗酸化剤は、ジヒドロキシ安息香酸もしくはその塩又はエステル体、トリヒドロキシ安息香酸もしくはその塩又はエステル体、ヒドロキシ桂皮酸類又はその塩、アスコルビン酸類又はその塩、及び、トコフェロール類からなる群より選ばれる１種又は２種以上である、請求項１に記載のサンショオール類の安定化方法。