(57)【要約】【課題】カテーテルによる細胞移植療法において、細胞の生着率を向上させ、改善した治療効果をもたらすことができる、心疾患治療用組成物を提供する。【解決手段】細胞移植療法に用いられる心疾患治療用組成物であって、カテーテルによって投与され、細胞と、徐放性担体に担持された生物活性物質とを含み、前記生物活性物質が、前記細胞の心筋及び／又は血管への分化能を増強させる機能、心臓の線維化組織の心筋及び／又は血管への分化能を増強させる機能ならびに心臓の心筋細胞及び／又は血管細胞の増殖能を増強させる機能から選ばれる少なくとも１つの機能を有する、組成物。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞移植療法に用いられる心疾患治療用組成物であって、
カテーテルによって投与され、
細胞と、徐放性担体に担持された生物活性物質とを含み、
前記生物活性物質が、前記細胞の心筋及び／又は血管への分化能を増強させる機能、心臓の線維化組織の心筋及び／又は血管への分化能を増強させる機能ならびに心臓の心筋細胞及び／又は血管細胞の増殖能を増強させる機能から選ばれる少なくとも１つの機能を有する、
組成物。
【請求項２】
前記細胞を含む第１の組成物と、前記徐放性担体に担持された前記生物活性物質を含む第２の組成物とを含む、請求項１記載の心疾患治療用組成物。
【請求項３】
前記第１の組成物と前記第２の組成物を同時又は異なるタイミングで投与する、請求項２記載の心疾患治療用組成物。
【請求項４】
前記第１の組成物を投与した後、前記第２の組成物を投与する、請求項３記載の心疾患治療用組成物。
【請求項５】
前記第２の組成物を投与した後、前記第１の組成物を投与する、請求項３記載の心疾患治療用組成物。
【請求項６】
前記細胞が、骨格筋芽細胞、骨髄単核細胞、間葉系幹細胞、内皮前駆細胞、心臓幹細胞、ＥＳ細胞、ｉＰＳ細胞、心筋様細胞及び造血細胞からなる群より選ばれる少なくとも１種である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の心疾患治療用組成物。
【請求項７】
前記生物活性物質が、細胞増殖（成長）因子、エクソソーム及びｍｉＲＮＡからなる群より選ばれる少なくとも１種である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の心疾患治療用組成物。
【請求項８】
前記生物活性物質が、塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）、酸性線維芽細胞成長因子（ａＦＧＦ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、トランスフォーミング成長因子−β（ＴＧＦ−β）、血管内皮細胞成長因子（ＶＥＧＦ）、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）、間質細胞由来因子（ＳＤＦ-１）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ-１）、線維芽細胞増殖因子２（ＦＧＦ２）及び線維芽細胞増殖因子１０（ＦＧＦ１０）からなる群より選ばれる少なくとも１種である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の心疾患治療用組成物。
【請求項９】
前記徐放性担体が、脱細胞化された生物由来組織、天然由来材料及び生体適合性の合成材料から選ばれる少なくとも１種である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の心疾患治療用組成物。
【請求項１０】
前記徐放性担体が、脱細胞化された心臓組織である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の心疾患治療用組成物。
【請求項１１】
前記徐放性担体が、ヒドロゲルの形態である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の心疾患治療用組成物。
【請求項１２】
前記徐放性担体が、逆熱応答性である、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の心疾患治療用組成物。
【請求項１３】
前記カテーテルが、マルチルーメンカテーテルである、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の心疾患治療用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞移植療法に用いられる心疾患治療用組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、心不全等の心疾患の治療として、心臓の左心室の内壁等の生体組織に細胞を移植して、血管新生、細胞分化等を図る治療が行われている。しかしながら、細胞のみを単独で移植した場合、細胞の生着が不十分であり、所望の治療効果が得られないという問題があった。
【０００３】
この問題を解決するため、細胞増殖（成長）因子を含有するヒドロゲルからなる細胞移植療法用材料を、細胞移植の際に適用する方法（特許文献１）、塩基性線維芽成長因子を含むヒドロゲルと心臓組織由来の多能性幹細胞とを含む、細胞移植療法に用いられる心疾患治療薬（特許文献２）が提案されている。
【０００４】
また、心臓治療においては、心臓由来の細胞外マトリックスを使用する組成物が提案されている（特許文献３、特許文献４）
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００２−１４５７９７号公報
【特許文献２】国際公開第２００９／０４８１６６号
【特許文献３】特表２０１３−５３６２４６号公報
【特許文献４】特表２０１８−５２１０１８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、カテーテルによる細胞移植療法における細胞の生着率は依然として低く、十分な治療効果が得られていないのが現状である。本発明は、カテーテルによる細胞移植療法において、細胞の生着率を向上させ、改善した治療効果をもたらすことができる、心疾患治療用組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の要旨は以下のとおりである。
（１）細胞移植療法に用いられる心疾患治療用組成物であって、
カテーテルによって投与され、
細胞と、徐放性担体に担持された生物活性物質とを含み、
前記生物活性物質が、前記細胞の心筋及び／又は血管への分化能を増強させる機能、心臓の線維化組織の心筋及び／又は血管への分化能を増強させる機能ならびに心臓の心筋細胞及び／又は血管細胞の増殖能を増強させる機能から選ばれる少なくとも１つの機能を有する、
組成物。
（２）前記細胞を含む第１の組成物と、前記徐放性担体に担持された生物活性物質を含む第２の組成物とを含む、（１）の心疾患治療用組成物。
（３）前記第１の組成物と前記第２の組成物を同時又は異なるタイミングで投与する、（２）の心疾患治療用組成物。
（４）前記第１の組成物を投与した後、前記第２の組成物を投与する、（３）の心疾患治療用組成物。
（５）前記第２の組成物を投与した後、前記第１の組成物を投与する、（３）の心疾患治療用組成物。
（６）前記細胞が、骨格筋芽細胞、骨髄単核細胞、間葉系幹細胞、内皮前駆細胞、心臓幹細胞、ＥＳ細胞、ｉＰＳ細胞、心筋様細胞及び造血細胞からなる群より選ばれる少なくとも１種である、（１）〜（５）のいずれかの心疾患治療用組成物。
（７）前記生物活性物質が、細胞増殖（成長）因子、エクソソーム及びｍｉＲＮＡからなる群より選ばれる少なくとも１種である、（１）〜（６）のいずれかの心疾患治療用組成物。
（８）前記生物活性物質が、塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）、酸性線維芽細胞成長因子（ａＦＧＦ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、トランスフォーミング成長因子−β（ＴＧＦ−β）、血管内皮細胞成長因子（ＶＥＧＦ）、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）、間質細胞由来因子（ＳＤＦ-１）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ-１）、線維芽細胞増殖因子２（ＦＧＦ２）及び線維芽細胞増殖因子１０（ＦＧＦ１０）からなる群より選ばれる少なくとも１種である、（１）〜（６）のいずれかの心疾患治療用組成物。
（９）前記徐放性担体が、脱細胞化された生物由来組織、天然由来材料及び生体適合性の合成材料から選ばれる少なくとも１種である、（１）〜（８）のいずれかの心疾患治療用組成物。
（１０）前記徐放性担体が、脱細胞化された心臓組織である、（１）〜（８）のいずれかの心疾患治療用組成物。
（１１）前記徐放性担体が、ヒドロゲルの形態である、（１）〜（１０）のいずれかの心疾患治療用組成物。
（１２）前記徐放性担体が、逆熱応答性である、（１）〜（１１）のいずれかの心疾患治療用組成物。
（１３）前記カテーテルが、マルチルーメンカテーテルである、（１）〜（１２）のいずれかの心疾患治療用組成物。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、カテーテルによる細胞移植療法において、細胞の生着率を向上させることができる心疾患治療用組成物が提供される。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】本発明の組成物の投与に使用することができるマルチルーメンカテーテルの部分構造の外観斜視図である。
【図２】本発明の組成物の投与に使用することができるマルチルーメンカテーテルの部分構造の断面図である。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本発明は、細胞移植療法に用いられる心疾患治療用組成物に関する。本発明の組成物は、心臓の収縮及び拡張機能の向上が求められる心疾患の治療に適している。心疾患としては、心筋梗塞、狭心症、心筋外傷が挙げられる。細胞移植療法における移植部位としては、心臓の左心室、右心室、心房が挙げられる。本発明の組成物は、左心室内側への移植に適している。
【００１１】
＜細胞＞
本発明の組成物は、細胞を含む。細胞は、心疾患の細胞移植療法に用いることができるものであればよい。
【００１２】
細胞としては、体細胞（例えば、心筋細胞、線維芽細胞、上皮細胞、内皮細胞、肝細胞、膵細胞、腎細胞、副腎細胞、歯根膜細胞、歯肉細胞、骨膜細胞、皮膚細胞、滑膜細胞、軟骨細胞）、幹細胞（例えば、筋芽細胞、心臓幹細胞等の組織幹細胞、胚性幹細胞、ｉＰＳ（induced pluripotent stem）細胞等の多能性幹細胞、間葉系幹細胞）が挙げられる。体細胞は、幹細胞、特にｉＰＳ細胞から分化させたものであってもよい。具体的な細胞としては、筋芽細胞（例えば、骨格筋芽細胞）、間葉系幹細胞（例えば、骨髄、脂肪組織、末梢血、皮膚、毛根、筋組織、子宮内膜、胎盤、臍帯血由来のもの）、心筋細胞、線維芽細胞、心臓幹細胞、胚性幹細胞、ｉＰＳ細胞、滑膜細胞、軟骨細胞、上皮細胞（例えば、口腔粘膜上皮細胞、網膜色素上皮細胞、鼻粘膜上皮細胞）、内皮細胞（例えば、血管内皮細胞）、肝細胞（例えば、肝実質細胞）、膵細胞（例えば、膵島細胞）、腎細胞、副腎細胞、歯根膜細胞、歯肉細胞、骨膜細胞、皮膚細胞が挙げられる。
【００１３】
中でも、骨格筋芽細胞、骨髄単核細胞、間葉系幹細胞、内皮前駆細胞、心臓幹細胞、ＥＳ細胞、ｉＰＳ細胞、心筋様細胞（線維芽細胞から、心筋誘導因子を遺伝子導入し、作製された心筋細胞と同様の性質を示す細胞）、造血細胞が好ましい。
【００１４】
骨格筋芽細胞としてはＣＤ５６陽性を示すもの、骨髄単核細胞としてはＣＤ１７７陽性、ＣＤ３４陽性を示すもの、間葉系幹細胞としてはＣＤ１０５陽性示すもの、ＣＤ１１７陽性、ＣＤ４５陰性を示すもの、内皮前駆細胞としてはＣＤ３４陽性、ＣＤ１３３陽性を示すもの、心臓幹細胞としてはｃ−ｋｉｔ陽性、ＣＤ４５陰性を示すもの、ＥＳ細胞としてはＯｃｔ４陽性、Ｎａｎｏｎｇ陽性、ＳＳＥＡ４陽性を示すもの、ｉＰＳ細胞としては、Ｏｃｔ４陽性、Ｎａｎｏｎｇ陽性、ＳＳＥＡ４陽性を示すものが、それぞれ挙げられる。ｉＰＳ細胞又はｉＰＳ細胞から心筋細胞への分化の途中段階にあり、ＣＤ８２陽性、ＧＦＲＡ２陽性、ＰＤＧＦＲＡ陽性、ＫＤＲＡ陽性を示す細胞も好ましい。
【００１５】
細胞は、１種でも、２種以上の組み合わせでもよい。
【００１６】
＜徐放性担体に担持された生物活性物質＞
本発明の組成物は、徐放性担体に担持された生物活性物質を含む。
【００１７】
＜＜生物活性物質＞＞
本明細書において、生物活性物質とは、導入された生体内で生理活性を示す物質をいう。本発明における生物活物質は、細胞の心筋及び／又は血管への分化能を増強させる機能、心臓の線維化組織の心筋及び／又は血管への分化能を増強させる機能ならびに心臓の心筋細胞及び／又は血管細胞の増殖能を増強させる機能のいずれか１つの機能を少なくとも有するものであり、導入された生体内において当該機能の発揮を通じて生理活性を示し、ひいては生体内での細胞の生着を促すことができる。
【００１８】
細胞の心筋及び／又は血管への分化能を増強させる機能において、細胞は、本発明の組成物に含まれる細胞に対応する。心臓の線維化組織の心筋及び／又は血管への分化能を増強させる機能において、線維化組織は、心臓の梗塞部、線維芽細胞を含む。心臓の心筋細胞及び／又は血管細胞の増殖能を増強させる機能には、これらの細胞のアポトーシスを防ぐ機能も包含される。心筋細胞は、正常細胞及び冬眠心筋を含む。
【００１９】
このような生物活物質としては、細胞増殖（成長）因子、エクソソーム、ｍｉＲＮＡ、サイトカイン、ケモカイン、インターロイキン、生理活性タンパク質、心外膜由来パラクリン因子（例えば、低グリコシル化フォリスタチン様１（ＦＳＴL１））が挙げられる。
【００２０】
中でも、細胞増殖（成長）因子、エクソソーム、ｍｉＲＮＡが好ましい。
【００２１】
細胞増殖（成長）因子としては、塩基性線維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）、酸性線維芽細胞成長因子（ａＦＧＦ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、トランスフォーミング成長因子−β（ＴＧＦ−β）、血管内皮細胞成長因子（ＶＥＧＦ）、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）、間質細胞由来因子（ＳＤＦ-１）、インスリン様成長因子（ＩＧＦ-１）、線維芽細胞増殖因子２（ＦＧＦ２）、線維芽細胞増殖因子１０（ＦＧＦ１０）が挙げられる。
【００２２】
エクソソームとしては、幹細胞由来エクソソーム（例えば、ＣＰＣ由来エクソソーム、ＭＳＣ由来エクソソーム）が挙げられる。エクソソームは、低酸素、酸化ストレス等の外的刺激を与えた細胞に由来するエクソソーム（stress-preconditioned exosome）であってもよく、遺伝子改変された細胞に由来するエクソソーム（Gene-modified cell-derived exosome）であってもよい。
【００２３】
ｍｉＲＮＡとしては、ｍｉＲ−１、ｍｉＲ−１３３ａ、ｍｉＲ−１２６、ｍｉＲ−１５５が挙げられる。ｍｉＲＮＡは、エクソソームに内包された形態であってもよい。
【００２４】
生物活性物質は、１種でも、２種以上の組み合わせでもよい。
【００２５】
＜＜徐放性担体＞＞
本発明における徐放性担体は、生物活性物質を担持することができ、生体環境に導入された後、担持した生物活性物質を徐放するものであればよい。生物活性物質は、分子間力、水素結合等の物理的作用により、徐放性担体に担持され得、生体内で徐放性担体が吸収・分解されるのに伴い、徐放され得る。生物活性物質が徐放されることで、細胞の生着を促す生理活性が持続的に示され、ひいては細胞の生着率を向上させることができる。
【００２６】
徐放性担体としては、脱細胞化された生物由来組織（細胞外マトリックス）、天然由来材料、生体適合性の合成材料が挙げられる。これらの徐放性担体は、導入された生体内で、細胞の生着環境を整える働きが期待できる。中でも、細胞外マトリックスが好ましい。
【００２７】
細胞外マトリックスとしては、心臓、腎臓、膀胱、軟骨等に由来する組織を脱細胞化したものが挙げられる。組織は、哺乳動物（例えば、ヒト、ブタ、ウシ、ヤギ、ラット）からのものであることができ、ヒトからのものであることが好ましい。中でも、心臓組織（例えば、心筋組織）由来の細胞外マトリックスが好ましく、特に、ヒトの心臓組織（例えば、心筋組織）由来の細胞外マトリックスが好ましい。
【００２８】
細胞外マトリックスは、心臓（例えば、心筋）、腎臓、膀胱、軟骨等の生物由来組織をホモジナイズすることで、抽出することができる。界面活性剤を有する処理液（例えば、硫酸ドデシルナトリウム（ＳＤＳ）溶液）による処理、又は超高静圧の印加によって、生物由来組織中の細胞を破壊し、破壊した細胞を除去することで、脱細胞化を行い、適宜、凍結乾燥、酵素による消化、可溶化等を行い、細胞外マトリックスを得てもよい。  
【００２９】
細胞外マトリックスは、主に繊維状タンパク質、構造タンパク質、グリコサミノグリカン等の成分で構成され、以下のものを含む全ての型のコラーゲン：原繊維（Ｉ型、ＩＩ型、ＩＩＩ型、Ｖ型、ＸＩ型）；ｆａｃｉｔ（ＩＸ型、ＸＩＩ型、ＸＩＶ型）；短鎖（ＶＩＩＩ型、Ｘ型）、基底膜（ＩＶ型）、及び他のもの（ＶＩ型、ＶＩＩ型、ＸＩＩＩ型）、エラスチン、フィブロネクチン、フィブリノーゲン、フィビュリン、カドヘリン、ラミニン、アグリン、エンタクチン、テネイシン、リンクタンパク質、プロテオグリカン、アグリカン、パールカン、バーシカン、ニューロカン、ブレビカン、デコリン、ビグリカン、セルグリシン、シンデカン、グリピカン、ルミカン、ケラトカン、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン、ヒアルロン酸、キチン等を含み得る。個々の成分の比率は、脱細胞化する組織の構成に依存する。
【００３０】
細胞外マトリックスに含まれる成分は、０．５〜３００ｋＤａの分子量であることが好ましく、より好ましくは１〜２００ｋＤａである。
【００３１】
天然由来材料としては、ゼラチン、コラーゲン、デンプン、ペクチン、ヒアルロン酸、キチン、キトサン、アルギン酸、フィブリン、マトリゲル、ケラチン及びこれらの誘導体が挙げられる。
【００３２】
生体適合性の合成材料としては、ポリ乳酸（ＰＬＬＡ）、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、乳酸とグリコール酸の共重合体（ＰＬＧＡ）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポロキサマーが挙げられる。
【００３３】
徐放性担体は、細胞外マトリックス、天然由来材料及び生体適合性の合成材料から選ばれる２種以上からなる複合材料であってもよい。例えば、ＰＬＧＡ粒子が細胞外マトリックスで被覆された材料、アルギン酸粒子が細胞外マトリックスで被覆された材料が挙げられる。
【００３４】
徐放性担体は、ヒドロゲルの形態であってもよい。例えば、生物活性物質を担持させる際に、徐放性担体をヒドロゲルの形態にしてもよい。
【００３５】
徐放性担体は、外部刺激に応答して、物理的及び／又は化学的特性の変化を示すものであってもよい。外部刺激としては、温度、ｐＨ、電場、光が挙げられ、中でも、温度、ｐＨが好ましい。外部刺激は、導入された生体内の環境を含む。物理的及び／又は化学的特性の変化としては、粘度の上昇又は低下が挙げられ、中でも粘度の上昇が好ましい。
【００３６】
徐放性担体は、投与対象の生体内の環境と同様の条件下で、粘度の上昇を示すものが好ましい。このような徐放性担体を組成物に含有させることによって、カテーテル投与の際には、組成物を流動状態とすることができ、その後、投与対象の生体内の環境により組成物の粘度が上昇することで、投与された細胞や生物活性物質の漏出防止を図ることができる。
【００３７】
中でも、逆熱応答性を示す徐放性担体が好ましい。本明細書において、逆熱応答性とは、温度の上昇に伴い粘度の上昇を示す性質をいう。生体内の環境と同様の温度（例えば、体温（３７℃）付近））で、例えば、液状から硬質ゲルの硬さまで粘度が変化するような逆熱応答性を示す徐放性担体を使用することで、カテーテル投与の際には、組成物を流動状態とすることができ、その後、投与対象の体温等により組成物の粘度が上昇することで、投与対象に形成された穿刺痕を封止することができ、生物活性物質の漏出防止を図ることができる。このような逆熱応答性を有する徐放性担体としては、細胞外マトリックス、コラーゲン、ポロキサマー（例えば、ポロキサマー４０７）が挙げられる。細胞外マトリックスの逆熱応答性は、生物組織を脱細胞化した後、酵素による消化を行うことによって制御することができる。
【００３８】
徐放性担体は、１種でも、２種以上の組み合わせでもよい。
【００３９】
＜＜担持方法＞＞
生物活性物質を徐放性担体に担持させる方法としては、生物活性物質と徐放性担体を液体（例えば、水、水溶液等の溶液）中で混合する方法が挙げられる。本明細書において、溶液は、懸濁液を含む。
【００４０】
細胞外マトリックスを徐放性担体として使用する場合、粉末形態の細胞外マトリックスを調製し、これを生物活性物質の溶液（例えば、水溶液）と混合する方法が挙げられる。粉末形態の細胞外マトリックスは、凍結乾燥させた細胞外マトリックスを粉砕することにより得ることができる。粉末形態の細胞外マトリックスは、多孔質であることができ、孔に生物活性物質を担持させることができる。
【００４１】
＜その他の成分＞
本発明の組成物には、細胞及び徐放性担体に担持された生物活性物質に加えて、造影剤、ｐＨ調整剤、薬剤（例えば、プロスタサイクリン作動薬）、水、緩衝液、生理食塩水等の任意成分を含むことができる。
【００４２】
＜組成物＞
本発明の組成物において、細胞の量は、使用する細胞の種類、心疾患の種類、程度、患者の年齢等によって変動させることができ、例えば、１×１０５〜１×１０９個／患者が挙げられる。本発明の組成物によれば、細胞の生着率が向上することが見込めるので、従来よりも少ない量としてもよい。
生物活性物質の量は、使用する細胞の種類によって変動させることができ、例えば、細胞１×１０６個当たり、０．１〜１０００μｇが挙げられる。本発明の組成物によれば、生物活性物質を生体内に止まらせ、機能を発揮させることが見込めるので、従来よりも少ない量としてもよい。
徐放性担体の量は、生物活性物質を担持できる量であれば、特に限定されない。細胞外マトリックスを徐放性担体として使用する場合、細胞の生着環境を整える点から、組成物中、０．１〜９０質量％が挙げられる。
【００４３】
本発明の組成物は、細胞、徐放性担体に担持された生物活性物質、任意成分を混合することによって得ることができる。あるいは、細胞、徐放性担体に担持された生物活性物質、任意成分のいずれか１つ以上を含む組成物を複数調製して、各組成物をカテーテルにより投与することを通して、細胞、徐放性担体に担持された生物活性物質、任意成分の組み合わせとしてもよい。徐放性担体に担持された生物活性物質は溶液（例えば、水溶液）の形態であってもよい。
【００４４】
例えば、本発明の組成物は、細胞を含む第１の組成物と、徐放性担体に担持された生物活性物質を含む第２の組成物の組み合わせであってもよい。第１の組成物、第２の組成物は、それぞれ任意成分を含むことができる。あるいは、任意成分を含む組成物をさらに調製し、カテーテルにより投与することを通して、組み合わせてもよい。
【００４５】
第１の組成物は、細胞を水、生理食塩水、緩衝液等の液体で希釈したものが挙げられる。第２の組成物は、溶液（例えば、水溶液）の形態にある徐放性担体に担持された生物活性物質が挙げられる。
【００４６】
第１の組成物と第２の組成物は、同時又は異なるタイミングで投与することができる。異なるタイミングでの投与の場合、第１の組成物を投与した後、第２の組成物を投与してもよく、あるいは第２の組成物を投与した後、第１の組成物を投与してもよく、第１の組成物と第２の組成物を交互に投与してもよい。先に投与を開始した組成物の投与終了の前に、次に投与する組成物の投与を開始してもよいが、先に投与を開始した組成物の投与終了後に、次に投与する組成物の投与を開始することが好ましい。投与の先・後は、投与の開始の先・後で決まるものとする。
【００４７】
細胞の漏出を防ぐ点から、第１の組成物を投与した後に、第２の組成物を投与することが好ましい。中でも、第２の組成物において逆熱応答性の徐放性担体を用いると、第１の組成物の投与した後に投与される第２の組成物の粘度が体温により上昇して、心臓組織への穿刺痕を封止することができるので、細胞の漏出を防ぐ点から、特に好ましい。
【００４８】
細胞が生体組織に生着し易い環境を予め整える点から、第２の組成物を投与した後に、第１の組成物を投与することが好ましい。中でも、第２の組成物において逆熱応答性の徐放性担体を用いると、第２の組成物の粘度が体温により上昇して、生物活性物質が生体内に止まりやすくなるので、生体組織に生着し易い環境を整える点から、特に好ましい。
【００４９】
本発明の組成物は、カテーテル投与可能な粘度に調整して、カテーテルを投与することができる。粘度は、カテーテルの内径に応じて変動させることができ、カテーテル投与時のハンドリング性及び穿刺痕からの細胞漏出防止の点から、例えば、１〜２０，０００ｍＰａ・ｓとすることができ、好ましくは１〜３，０００ｍＰａ・ｓであり、より好ましくは１〜１００ｍＰａ・ｓである。細胞、徐放性担体に担持された生物活性物質、任意成分のいずれか１つ以上を含む組成物を複数調製して、各組成物をカテーテルにより投与する場合、各組成物について、上記の粘度の例示及び好ましい範囲を適用することができる。よって、第１の組成物、第２の組成物についても同様に上記の例示及び好ましい範囲を適用することができるが、一般に、第１の組成物の方が、第２の組成物よりも高い粘度を有する。
【００５０】
細胞漏出防止の点から、投与後に組成物の粘度が上昇し、例えば流動性を失った状態となり、カテーテル内を注入方向に対して逆流することが抑制されることが好ましい。好ましくは、粘度が上昇し、例えば流動性を失った状態となるまでの時間は、投与後、数秒〜数１０分であることが好ましく、より好ましくは１０秒〜５分である。細胞、徐放性担体に担持された生物活性物質、任意成分のいずれか１つ以上を含む組成物を複数調製して、各組成物をカテーテルにより投与する場合、各組成物について、上記の時間の例示及び好ましい範囲を適用することができる。よって、第１の組成物、第２の組成物についても同様に上記の時間の例示及び好ましい範囲を適用することができる。
【００５１】
＜カテーテル＞
本発明の組成物はカテーテルによって投与される。カテーテルは、心疾患の細胞移植療法に用いることができるものであればよい。例えば、カテーテルを、大腿動脈から被検者の体内に挿入し、大動脈及び大動脈弁を通じて左心室内まで延在させることができる。カテーテルの外径は、例えば、２０Ｆｒ以下とすることができ、３〜１２Ｆｒが好ましく、４〜８Ｆｒが特に好ましい。
【００５２】
第１の組成物と第２の組成物の組み合わせの場合、複数のルーメンを備えるマルチルーメンカテーテルを用いることができる。第１の組成物を複数のルーメンのいくつかを通して投与し、第２の組成物を複数のルーメンの他のいくつかを通して投与することができる。例えば、第１のルーメンと第２のルーメンを備えるダブルルーメンカテーテルを用いる場合、第１の組成物を第１のルーメンを通して投与し、第２の組成物を第２のルーメンを通して投与することができる。
【００５３】
マルチルーメンカテーテルの複数のルーメンは、共通の開口を有していてもよく、異なる開口を有していてもよい。異なる開口を有している場合、複数のルーメンのそれぞれが開口を有していてもよく、あるいは複数のルーメンのいくつかが共通する開口を有していてもよい。第１の組成物と第２の組成物を異なる開口を通して投与することが好ましい。異なる開口を備えた穿刺部を有するマルチルーメンカテーテルを用いることにより、１つの穿刺痕で第１の組成物と第２の組成物とを異なる開口から別々に投与することができる。
【００５４】
このような投与は、例えば、遠位端側に図１及び２に示す部分構造を有するマルチルーメンカテーテルを用いて行うことができる。以下、図１及び２を例にとって、マルチルーメンカテーテルを説明するが、本発明の組成物は、このマルチルーメンカテーテルに限られず、種々のカテーテルにより投与することができる。
【００５５】
マルチルーメンカテーテル１は、径方向の内側に位置する内側ルーメン３１と、径方向の外側に位置する外側ルーメン３２（図中、４つ。）を備えている。マルチルーメンカテーテルの側面１１は遠位端８に向かうに連れて縮径するテーパ面１２を備えている。内側ルーメン３１は先端面２０に開口３３を有し、外側ルーメン３２はテーパ面１２に開口３４を有する。このように、内側ルーメン３１の開口３３は、外側ルーメン３２の開口３４よりも軸方向の遠位端８側に位置する。
【００５６】
このマルチルーメンカテーテル１の遠位端８を生体組織に穿刺した状態で、内側ルーメン３１の開口３３から第１の組成物を投与し、外側ルーメン３２の開口３４から第２の組成物を投与すると、生体組織の内壁近辺に第２の組成物が供給され、それよりも生体組織の奥側に第１の組成物が供給されることになる。そのため、マルチルーメンカテーテル１を生体組織の内壁から抜去した後に、第１の組成物に含まれる細胞が穿刺痕から漏出することを、第２の組成物により抑制でき、細胞の生体組織への生着を促すことができる。中でも、第１の組成物を投与した後に、第２の組成物を投与し、第２の組成物において逆熱応答性の徐放性担体を用いた場合、第２の組成物の粘度が体温により上昇して、心臓組織に形成された穿刺痕を封止することができるので、特に好ましい。
【００５７】
＜参考例＞
ブタの心筋を脱細胞化し、凍結乾燥・粉砕した粉末のバイアル（２０ｍＬバイアル中粉末１００ｍｇ）を−２０℃で冷凍保管した。冷凍保管から取り出した直後のバイアルに注射用水（滅菌水）６ｍＬを添加し、１５００ｒｐｍに設定したボルテックスミキサーによって６０秒間振とうし、懸濁液とした。得られた懸濁液を１０ｍＬシリンジに取り、そのうち２ｍＬを用いて、振動式粘度計（株式会社エー・アンド・デイ社製ＳＶ−１Ａ）により粘度を測定した（２５℃）。粘度は６．６４ｍＰａ・ｓであり、カテーテル投与可能であることが確認できた。
【産業上の利用可能性】
【００５８】
本開示は、細胞移植療法に用いられる心疾患治療用組成物に関する。
【符号の説明】
【００５９】
１  カテーテル
８  遠位端
１１  側面
１２  テーパ面
２０  先端面
３１  内側ルーメン
３２  外側ルーメン
３３  内側ルーメンの開口
３４  外側ルーメンの開口
【図１】
2020050641.tif 000002
【図２】
2020050641.tif 000003