(57)【要約】【課題】抗血栓処理による医療材料の強度の損失を軽減しつつ、心臓又はその周辺の動脈のような血流速度の大きい部位に適用した場合の、留置早期の血栓形成を防止できる。【解決手段】ポリエステルからなる基材と、アルキレンイミンをモノマーとして含む窒素含有ポリマーと、重量平均分子量が２０００〜７０００の低分子量ヘパリンと、を備え、上記基材は、上記窒素含有ポリマーと共有結合し、上記窒素含有ポリマーは、上記低分子量ヘパリンとイオン結合し、表面におけるＸ線電子分光法（ＸＰＳ）で測定した全原子の存在量に対する硫黄原子の存在比率が、１．０原子数％以上３．０原子数％未満である心臓インプラント用の医療材料を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ポリエステルからなる基材と、
アルキレンイミンをモノマーとして含む窒素含有ポリマーと、
重量平均分子量が２０００〜７０００の低分子量ヘパリンと、
を備え、
前記基材は、前記窒素含有ポリマーと共有結合し、
前記窒素含有ポリマーは、前記低分子量ヘパリンとイオン結合し、
表面におけるＸ線電子分光法（ＸＰＳ）で測定した全原子の存在量に対する硫黄原子の存在比率が、１．０原子数％以上３．０原子数％未満である、心臓インプラント用の医療材料。
【請求項２】
前記存在比率は、１．１〜１．５原子数％である、請求項１記載の医療材料。
【請求項３】
面積あたりの抗ファクターＸａ活性が、５ｍＩＵ／ｃｍ２以上２０ｍＩＵ／ｃｍ２未満である、請求項１又は２記載の医療材料。
【請求項４】
左心耳閉塞デバイス用である、請求項１〜３のいずれか一項記載の医療材料。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか一項記載の医療材料を備えた、心臓インプラント。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、心臓インプラント用の医療材料に関する。
【背景技術】
【０００２】
脳卒中はガン、心臓病に次いで本邦における死因の第３位である。脳卒中の患者数は現在約１７０万人といわれており、毎年２５万人以上が新たに発症していると推察されている。一旦脳卒中に罹患すると寝たきり状態となることが多く、寝たきりの原因の約３割近くが脳卒中等の脳血管疾患というデータもある。さらには、今後の高齢者の増加や糖尿病、高脂血症等の生活習慣病の増加により脳卒中の患者は増加の一途をたどっている状況であり、その対策は急務となっている。
【０００３】
脳卒中の一種である「心原性脳塞栓症」は、脳梗塞の中の２０〜２５％を占めており、心房細動等により心臓の拍動のリズムが乱れ、血液が鬱滞して血栓を形成し、それが脳へと飛散することで発症する。この時の血栓形成の大部分は、心臓の左心耳と呼ばれる、左肺静脈の根元と僧帽弁の間の左心房の前外側壁に連結された小さい親指又は吹き流し様の閉鎖した空洞で発生するか又はそこを原発とする。
【０００４】
心房細動患者に対する経皮的左心耳閉鎖治療では、左心耳閉塞デバイスの留置後、その表面が生体由来の組織又は新生内膜により被覆されるまでは、血栓形成を阻害するため、一定期間の抗凝固剤や抗血小板薬の投与が必須である。
【０００５】
一方、血栓の種類は白色血栓、赤色血栓及び混合血栓の大きく３つに分類される。白色血栓は血小板を主成分とし、血流の速い部分に形成される。また、白色血栓は人工材料が血液と接触した早期に形成されることが知られている。心臓又はその周辺の動脈は血流速度が大きいことから、この部位に左心耳閉塞デバイスを留置する場合、留置後の比較的早い時期に左心耳閉塞デバイスの表面に白色血栓が形成されることが予想される。
【０００６】
留置後、左心耳閉塞デバイスの表面上で血栓が形成する原因は、左心耳閉塞デバイスが生体側に異物として認識され、その表面で血液凝固反応が進行することである。一定期間の抗凝固剤や抗血小板薬の投与以外で血栓の形成を阻害する方法としては、基材表面を少なくとも一つの第１又は第２級アミノ基を有するポリアミンにより処理してアミノ化し、得られたアミノ化表面を４級塩化し、４級塩化した表面と未分画ヘパリンとを反応させる方法が報告されている（特許文献１）。また、別の方法としては、第４級アンモニウム塩等の有機カチオン混合物や第４級ホスホニウム化合物とヘパリン又はヘパリン誘導体との間でイオン複合体を形成させ、有機溶媒に溶かして基材の表面に塗布することで抗血栓性材料を得る方法（特許文献２及び３）や、第３級アミノ基を含むポリマーを基材の表面に塗布して、アミノ基を第４級アンモニウム化してヘパリンをイオン結合させて抗血栓性材料を得る方法（特許文献４）が報告されている。
【０００７】
他に、カチオン性ポリマーを基材に固定し、そのカチオン性ポリマーを介して抗凝固剤であるヘパリン又はヘパリン誘導体を基材の表面上に固定化する方法が報告されている（特許文献５及び６）。また、カチオン性ポリマーを介して固定化するヘパリンとして、ヘパリンの中でも未分画ヘパリン、平均分子量が４０００〜６０００である低分子量ヘパリンやアンチトロンビンＩＩＩに高親和性のヘパリン等のヘパリンを用いてもよいことが報告されている（特許文献７）。ヘパリンの中でも未分画ヘパリンは弱い血小板凝集亢進作用を有することが知られている。これに対し、低分子量ヘパリンは未分画ヘパリンに比べて血小板凝集亢進作用が弱いとされている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特許公報昭６０−４１９４７
【特許文献２】特許第４２７３９６５号公報
【特許文献３】特開平１０−１５１１９２号公報
【特許文献４】特許第３３４１５０３号公報
【特許文献５】ＷＯ２０１５／０８０１７７
【特許文献６】ＷＯ２０１６／１９０４０７
【特許文献７】ＷＯ２０１４／１６８１９８
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】西部俊哉ら、日血外会誌  ４  ６４３−６４９、１９９５
【非特許文献２】東レ・ニューハウス  プロテクト添付文書、第９版、東レ株式会社
【非特許文献３】ＷＡＴＣＨＭＡＮ左心耳閉鎖システム添付文書、第１版、ボストン・サイエンティフィック  ジャパン株式会社
【非特許文献４】Ｓｒｉｎｉｖａｓ  ＲＤら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  １３８（９）、８７４−８８５、２０１８
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
しかしながら、特許文献１は基材に適用する未分画ヘパリンの最適な量が示されていないため、当該技術を心臓インプラント用の医療材料に用いた場合、血流速度の大きい部位であるため、未分画ヘパリンの持つ血小板凝集亢進作用により基材表面に白色血栓が形成される可能性がある。
【００１１】
特許文献６及び７で開示された方法では、ヘパリン等を含むイオン複合体を有機溶媒に溶かして基材に塗布しているが、使用する有機溶媒は、イオン複合体は溶解するが基材は溶解しないものである必要があり、塗布後の乾燥工程においても、イオン複合体中の親水性の高い部分が有機溶媒を避けて凝集して相分離を引き起こすため、基材の表面に均一に塗布できないのが現状である。当該技術を心臓インプラント用の医療材料に用いた場合、基材表面のヘパリン等を含むイオン複合体が塗布されていない部分を起点に血栓が形成される可能性がある。
【００１２】
一方、特許文献４に記載されるように、３級アミノ基を含むポリマーを塗布して、該アミノ基を第４級アンモニウム化してヘパリンをイオン結合させる方法では、必要量のヘパリンを担持させるためには分厚いコーティングが必要となり、当該技術を左心耳閉塞デバイスのような心臓インプラント用の医療材料に用いた場合、血液が通過するフィルター膜部分の微細な目開きが破壊されることで、血液の通過が阻害され、また血流に影響を与えることで、血栓形成を促進してしまうおそれがある。
【００１３】
特許文献２〜４には抗血栓性を発揮するためのヘパリン又はヘパリン誘導体の最適量について記載されているが、低分子量ヘパリンについての記載はない。特許文献２には血小板付着抑制作用を発揮するためのヘパリン又はヘパリン誘導体の最適量についても記載されているが、血流速度の大きい部位に留置した場合の最適量についての記載がないため、血流速度の大きい部位に適用した場合、基材表面に白色血栓が形成される可能性がある。
【００１４】
心拍の影響を受ける心臓又はその周辺の動脈の中に留置して使用される心臓インプラントは、心拍の影響を受けないように機械的な強度を有していることが必須である。特許文献１〜４に記載の抗血栓処理方法は、ヘパリン又はヘパリン誘導体の基材表面量を多くするために反応条件が過酷になり、基材が劣化し、心室、心房又は動脈に留置するための強度を保持できなくなる可能性がある。
【００１５】
このように、従来技術では、抗血栓処理による医療材料の強度の損失を軽減しつつ、心臓又はその周辺の動脈のような血流速度の大きい部位に適用した場合の、留置早期の抗血栓性を達成することができなかった。
【００１６】
そこで本発明は、抗血栓処理による医療材料の強度の損失を軽減しつつ、心臓又はその周辺の動脈のような血流速度の大きい部位に適用した場合の、留置早期の血栓形成を防止できる心臓インプラント用の医療材料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１７】
本発明は、上記課題を解決するため鋭意研究を重ねた結果、（１）〜（５）の発明を見出した。
（１）  ポリエステルからなる基材と、アルキレンイミンをモノマーとして含む窒素含有ポリマーと、重量平均分子量が２０００〜７０００の低分子量ヘパリンと、を備え、上記基材は、上記窒素含有ポリマーと共有結合し、上記窒素含有ポリマーは、上記低分子量ヘパリンとイオン結合し、表面におけるＸ線電子分光法（ＸＰＳ）で測定した全原子の存在量に対する硫黄原子の存在比率が、１．０原子数％以上３．０原子数％未満である、心臓インプラント用の医療材料。
（２）  上記存在比率は、１．１〜１．５原子数％である、（１）記載の医療材料。
（３）  面積あたりの抗ファクターＸａ活性が、５ｍＩＵ／ｃｍ２以上２０ｍＩＵ／ｃｍ２未満である、（１）又は（２）記載の医療材料。
（４）  左心耳閉塞デバイス用である、（１）〜（３）のいずれか記載の医療材料。
（５）  （１）〜（４）のいずれか記載の医療材料を備えた、心臓インプラント。
【発明の効果】
【００１８】
本発明の医療材料によれば、硫黄原子の存在比率を特定の範囲に制御することで、留置初期の血栓形成、特に血小板血栓形成を防ぐことができ、また抗血栓処理による医療材料の強度の損失が軽減できるため、左心耳閉塞デバイス等の心臓インプラント用の医療器材に好適に利用することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明の心臓インプラント用の医療材料は、ポリエステルからなる基材と、アルキレンイミンをモノマーとして含む窒素含有ポリマーと、重量平均分子量が２０００〜７０００の低分子量ヘパリンと、を備え、上記基材は、上記窒素含有ポリマーと共有結合し、上記窒素含有ポリマーは、上記低分子量ヘパリンとイオン結合し、表面におけるＸ線電子分光法（ＸＰＳ）で測定した全原子の存在量に対する硫黄原子の存在比率が、１．０原子数％以上３．０原子数％未満であることを特徴とする。
【００２０】
医療器材とは、医療機器及び医療器具を示す。本発明の医療材料は、抗血栓処理による医療材料の強度の損失が小さいという特性を有することから、医療機器及び医療器具の中でも、血流速度が大きく、また心拍の影響を受ける、心臓又はその周辺の動脈に適用する、左心耳閉塞デバイス等の心臓インプラント用の医療器材に利用することができる。
【００２１】
上記の医療材料とは、医療器材を構成する材料として用いることができる材料である。本発明の心臓インプラント用の医療材料は、低分子量ヘパリンを有しており、本発明の医療材料を用いて医療器材を形成することができる。
【００２２】
低分子量ヘパリンとは、重量平均分子量が２０００〜７０００の範囲の低分子量であるヘパリンを意味している（以下、低分子量ヘパリンは通常、重量平均分子量が２０００〜７０００の範囲のヘパリンを指す）。上記医療材料において、低分子量ヘパリンは、重量平均分子量が２０００〜７０００の範囲の低分子量ヘパリンを用いることが好ましく、重量平均分子量が４０００〜７０００の範囲の低分子量ヘパリンを用いることがより好ましく、重量平均分子量が４４００〜５０００の範囲の低分子量ヘパリンを用いることがさらにより好ましい。また、低分子量ヘパリンの重量平均分子量は、液体クロマトグラフィーにより測定することができる。
【００２３】
上記基材は、ポリエステルからなる。また、基材の材料は、ポリエステルであれば特に限定されないが、コストの観点から、ポリエチレンテレフタレート（以下、ＰＥＴ）、ポリブチレンテレフタレート又はナイロンであることが好ましく、ポリエチレンテレフタレート又はポリブチレンテレフタレートであることがより好ましい。
【００２４】
上記基材は、例えば、不織布、織物、編物又は組みひも等の繊維構造体を構成していることが好ましい。上記基材を心臓インプラント用の医療材料に用いる場合、心臓の拍動に追従するため伸縮性及び柔軟性が要求され、また血圧に耐える耐圧性が要求され、心拍の影響を受けないように機械的な強度が要求されることから、編物の繊維構造体を構成していることがより好ましい。
【００２５】
上記編物の種類としては特に限定されず、平編（天竺）、１×１天竺、鹿子編、リブ編、両面編、パール編、ブリスター編、シングルデンビ編、シングルコード編、シングルアトラス編、トリコット編、ハーフトリコット編、ダブルデンビ編及びサテン編等が用いられるが、高繊維密度構造が可能なトリコット編又はハーフトリコット編が好ましい。
【００２６】
上記医療材料が使用される医療機器及び医療器具には、心拍の影響を受ける心室、心房又は動脈の中に留置して使用される医療機器及び医療器具が含まれるため、医療材料は心拍の影響を受けないように機械的な強度を有していることが必須である。また、上記医療材料は、留置初期の血栓形成を防ぐための抗血栓処理が施されるが、抗血栓処理の条件によっては基材が劣化し、引っ張り試験における伸び等の力学特性が低下しやすくなる。医療材料の力学特性の低下は、抗血栓処理前の基材と抗血栓処理により得られた医療材料を用いて引っ張り試験を行い、それぞれの伸びの差から、抗血栓処理による伸びの変動を調べることで判定できる。
【００２７】
伸びとは引っ張り力を加えたときの変形量であり、具体的には引っ張り試験機を用いて、抗血栓処理前の基材と抗血栓処理により得られた医療材料をそれぞれ一定速度で引っ張り、試料が破断したときの基材あるいは医療材料の長さを測定する。伸びは破断時の基材あるいは医療材料の長さから、試験前の基材あるいは医療材料の長さを除すことにより求めることができる。
【００２８】
医療材料の抗血栓処理による伸びの変動は、抗血栓処理後の医療材料の伸びを、抗血栓処理前の基材の伸びで除した比で示される。ここで、心房や心室等の血流速度が速く、心拍の影響を受ける場所での強度の損失を最低限に留めるため、抗血栓処理による伸びの変動が１に近いものを、好ましい医療材料とする。
【００２９】
上記アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーの構成モノマーであるアルキレンイミンは、カチオン性の窒素原子を有するため、窒素含有ポリマーはカチオン性を示し、一方、低分子量ヘパリンはアニオン性を示すため、イオン結合することが可能である。ここで、構成モノマーとは、ポリマーを構成する繰り返し単位の由来となるモノマーを指し、アルキレンイミンを構成モノマーとして含むポリマーの場合であれば、アルキレンイミンが由来の繰り返し単位を有する。
【００３０】
アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーは、単独重合体であってもよく、共重合体であってもよい。ポリマーが共重合体である場合には、ランダム共重合体、ブロック共重合体、グラフト共重合体又は交互共重合体のいずれであってもよいが、低分子量ヘパリンと多点的にイオン結合できるため、窒素原子を含んだ繰り返し単位が連続するブロック重合体であることがより好ましい。
【００３１】
単独重合体とは、１種類の構成モノマーを重合して得られる高分子化合物をいい、共重合体とは、２種類以上のモノマーを共重合して得られる高分子化合物をいう。中でもブロック共重合体とは、繰り返し単位の異なる少なくとも２種類以上のポリマーが共有結合でつながり、長い連鎖になったような分子構造の共重合体をいい、ブロックとは、ブロック共重合体を構成する「繰り返し単位の異なる少なくとも２種類以上のポリマー」のそれぞれを指す。
【００３２】
アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーは直鎖状でもよいし、分岐状でもよいが、低分子量ヘパリンと多点的にイオン結合を形成しやすくなるため、分岐状であることがより好ましい。
【００３３】
低分子量ヘパリンとイオン相互作用に基づく吸着量が多いことから、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーとしてポリアルキレンイミンを用いることが好ましい。ポリアルキレンイミンは、ポリエチレンイミン、ポリプロピレンイミン、ポリブチレンイミン又はアルコキシル化されたポリアルキレンイミン等が挙げられるが、カチオン性の窒素原子が最も高密度で存在するため、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーは、ポリエチレンイミンがより好ましい。
【００３４】
ポリエチレンイミンの具体例としては、“ＬＵＰＡＳＯＬ”（登録商標）（ＢＡＳＦ社製）や“ＥＰＯＭＩＮ”（登録商標）（株式会社日本触媒製）等が挙げられるが、本発明の効果を妨げない範囲で他のモノマーとの共重合体であってもよく変性体であってもよい。ここでいう変性体とは、ポリマーを構成するモノマーの繰り返し単位は同じであるが、例えば、後述する放射線の照射により、その一部がラジカル分解や再結合等を起こしているものを指す。
【００３５】
アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーは、特に限定されるものではないが、性能に影響を与えない範囲で他のモノマーを含んでいてもよく、例えば、エチレングリコール、プロピレングリコール、ビニルピロリドン、ビニルアルコール、ビニルカプロラクタム、酢酸ビニル、スチレン、メチルメタクリレート、ヒドロキシエチルメタクリレート又はシロキサン等のモノマーを含んでいてもよい。
【００３６】
上記のアルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーの重量平均分子量は、６００以上であることが好ましく、１，０００以上であることがより好ましく、１０，０００以上であることがさらにより好ましい。また、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーの重量平均分子量は、２，０００，０００以下であることが好ましく、１，５００，０００以下であることがより好ましく、１，０００，０００以下であることがさらに好ましい。アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーの重量平均分子量は、例えば、ゲル・パーミエーション・クロマトグラフィー法や、光散乱法等により測定することができる。
【００３７】
上記医療材料において、上記低分子量ヘパリンは、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーと、低分子量ヘパリンとをイオン結合させてから基材の表面と共有結合させてもよいし、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーを基材の表面と共有結合させてから、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーと、低分子量ヘパリンとをイオン結合させてもよい。
【００３８】
本発明に用いた低分子量ヘパリンの重量平均分子量は、日本薬局方「パルナパリンナトリウム」の「分子量」の項記載の方法により、液体クロマトグラフィーにより測定することができる。
【００３９】
上記低分子量ヘパリンは、酸性溶媒中のヘパリンに亜硝酸ナトリウムを添加しヘパリンを分解する方法、ヘパリンが持つエステル結合をアルカリ処理してヘパリンを分解する方法、過酸化水素水の存在下で発生するフリーラジカルによりヘパリンを分解する方法、非水性溶媒中で強塩基を用いることでヘパリンの四級アンモニウム塩部位でβ脱離反応を起こしヘパリンを分解する方法及びヘパリナーゼを用いて酵素特異的にヘパリンを分解する方法等の化学的手法によるヘパリンの解重合により得ることができる。
【００４０】
上記低分子量ヘパリンのうち、臨床で一般的に用いられている例としては、レビパリン、エノキサパリン、パルナパリン、セルトパリン、ダルテパリン又はチンザパリン等を挙げることができる。
【００４１】
低分子量ヘパリンが医療材料の表面に存在している場合、Ｘ線電子分光法（ＸＰＳ）によって、医療材料の表面における低分子量ヘパリンの存在量を定量することができる。ここで、医療材料の表面における低分子量ヘパリンの存在量は、医療材料の表面における硫黄原子の存在比率を指標とすることができる。Ｘ線電子分光法（ＸＰＳ）で測定した際の全原子の存在量に対する硫黄原子の存在比率が低すぎると、医療材料における低分子量ヘパリンの表面量が少なく、長期間の使用を可能にするために重要な、心臓インプラントの留置初期における血栓形成を防ぐための抗血栓性を持たせることが出来ない。一方で、Ｘ線電子分光法（ＸＰＳ）で測定した際の全原子の存在量に対する硫黄原子の存在比率が高すぎると、低分子量ヘパリンの表面量が多くなり、血小板を刺激して血小板血栓の形成が促進されることがある。同時に、低分子量ヘパリンの表面量を多くするためには、基材に低分子量ヘパリンを固定するために必要な表面加工の反応条件が過酷になり、抗血栓処理による医療材料の伸びの変動が発生する。この時、伸びの変動が大きいと、心室、心房の中に留置した場合、速い血流速度や心拍の影響を受けて著しく変形し、強度を保持できなくなったり、変形部分で血流の乱れが起こり、血栓が形成されることがある。
【００４２】
上記の問題を解決するため、心臓インプラント用の医療材料の表面をＸ線電子分光法（ＸＰＳ）で測定した際の全原子の存在量に対する硫黄原子の存在比率は、１．０原子数％以上３．０原子数％未満が好ましいことを見出した。
【００４３】
加えて、医療材料の面積あたりの抗ファクターＸａ活性（ｍＩＵ／ｃｍ２）を測定した。ここで、抗ファクターＸａ活性とは、プロトロンビンからトロンビンへの変換を促進する第Ｘａ因子の活性を阻害する程度を表す指標であり、これにより、医療材料の表面における低分子量ヘパリンの活性単位での量を知ることができる。測定方法としては、“テストチーム（登録商標）  ヘパリンＳ”（積水メディカル株式会社製）を用いて測定することにより、医療材料の面積あたりの抗ファクターＸａ活性を測定することができる。
【００４４】
抗ファクターＸａ活性が低すぎると、医療材料の表面における低分子量ヘパリンの量が少なく、目的の抗血栓性は得られにくくなる。一方で、抗ファクターＸａ活性が高すぎると、医療材料の表面における低分子量ヘパリンの量が多くなり、血小板を刺激して血小板血栓の形成が促進されることがある。そのため、面積あたりの抗ファクターＸａ活性は、５ｍＩＵ／ｃｍ２以上２０ｍＩＵ／ｃｍ２未満であることが好ましい。ここでいう抗ファクターＸａ活性は、生理食塩水に３０分浸漬した後に測定した数値を指す。
【００４５】
また、医療材料の面積あたりの抗ファクターＸａ活性は、重量あたりの抗ファクターＸａ活性で示すことも出来る。この方法は、医療材料の面積あたりの重量を測定するとともに、以下の式１により、医療材料の重量あたりの抗ファクターＸａ活性を算出できる。
Ａｗ＝Ａａ／Ｗ  ・・・式１
Ａａ：医療材料の面積あたりの抗ファクターＸａ活性（ＩＵ／ｃｍ２）
Ａｗ：医療材料の重量あたりの抗ファクターＸａ活性（ＩＵ／ｍｇ）
Ｗ：医療材料の面積あたりの重量（ｍｇ／ｃｍ２）
【００４６】
アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーが血液等の体液中に溶出すると、低分子量ヘパリンを窒素含有ポリマーを介して基材に結合できなくなるため、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーは、ポリエステルからなる基材の表面と共有結合している。
【００４７】
上記アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーと基材の表面が有する原子（具体的には炭素、窒素、酸素、硫黄等）の共有結合は、単結合であっても多重結合であってもよい。アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーが基材と共有結合していることは、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーの良溶媒で洗浄した際の洗浄液中にアルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーが溶出しないことから判定することができる。ここで、アルキレンイミンを構成モノマーとして含む窒素含有ポリマーの良溶媒としては、ポリエステルからなる基材を溶解せず、共有結合を化学的に切断しない溶媒を選択する。
【実施例】
【００４８】
以下、実施例及び比較例を挙げて詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００４９】
（実施例１）
ＰＥＴメッシュ（繊維径：２７μｍ、繊維間距離：１００μｍ）に抗血栓処理を行った。ＰＥＴメッシュを、ポリエチレンイミン（ＬＵＰＡＳＯＬ（登録商標）  Ｐ；ＢＡＳＦ社製、重量平均分子量：７５０，０００）を５．０重量％含む水溶液に浸漬し、８０℃で２時間加熱し、ＰＥＴメッシュにポリエチレンイミンをアミノリシス反応により共有結合させた。反応後の水溶液を除去し、蒸留水で洗浄した。
【００５０】
さらにＰＥＴメッシュを、臭化エチルを１．０容量％、メタノールを３０容量％含む水溶液に浸漬し、３５℃で１時間反応させた後、５０℃に加温して４時間反応させ、ＰＥＴメッシュの表面に共有結合されたポリエチレンイミンを第４級アンモニウム化した。ポリエチレンイミンを第４級アンモニウム化した後に水溶液を除去し、メタノールを３０容量％含む水溶液及び蒸留水で洗浄した。
【００５１】
ダルテパリンナトリウム（ダルテパリンＮａ静注５０００単位／５ｍＬ「サワイ」、沢井製薬株式会社製）を５４国際単位／ｍＬ、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を調製し、ｐＨ４に調整した。ＰＥＴメッシュをこの水溶液に浸漬し、７０℃で６時間反応させて、ポリエチレンイミンとイオン結合させた。水溶液を除去し、蒸留水で洗浄後、真空乾燥し、これを医療材料１とした。
【００５２】
（実施例２）
実施例１のダルテパリンナトリウムの代わりに、レビパリンナトリウム（クリバリン透析用１０００単位／ｍＬ  バイアル５ｍＬ、マイランＥＰＤ合同会社）を５４国際単位／ｍＬ、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ４に調整した水溶液を用いた以外は、実施例１に記載と同様の抗血栓処理を行い、これを医療材料２とした。
【００５３】
（実施例３）
下記の（ａ）〜（ｅ）の工程を連続的に行なうことで、生成物１を得た。
【００５４】
（ａ）過ヨウ素酸によるヘパリン鎖の切断工程
ヘパリンナトリウム（Ｏｒｇａｎｏｎ  ＡＰＩ社製）を４重量％含む、４０℃の水溶液を調製し、塩酸を６ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を用いて溶液のｐＨを５．０に調節した。この溶液に、メタ過ヨウ素酸ナトリウム（和光純薬工業株式会社製）を４重量％含む、４℃の水溶液を攪拌しながら添加した。塩酸を６ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を用いて、溶液のｐＨを５．０に調節した。溶液を４℃で２４時間保存した。
【００５５】
（ｂ）残留過ヨウ素酸塩の除去工程
過ヨウ素酸によるヘパリン鎖の切断工程で得た溶液を、再生セルロース製の透析チューブ（多孔率３〜２０００Ｄａ）内に分散させ、蒸留水に対して１５時間透析を行った。
【００５６】
（ｃ）塩基性溶媒中での解重合工程
水酸化ナトリウムを１０ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を、残留過ヨウ素酸塩の除去工程で得た溶液に対して２容量％となるよう添加し、２０℃で３時間攪拌した。
【００５７】
（ｄ）還元工程
塩基性溶媒中での解重合工程で得た溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（和光純薬工業株式会社製）を０．０６２５重量％となるよう添加し、２０℃で４時間攪拌した。塩酸を６ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を用いて溶液のｐＨを４．０に調節した。１５分間攪拌した後、水酸化ナトリウムを１０ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を用いてｐＨ７．０に調整した。この溶液に、塩化ナトリウム（和光純薬工業株式会社製）を２重量％となるよう添加し、さらに１．５倍容のエタノールを添加し、混合した。溶液を３時間静置した後、２５００回転で２０分間、遠心分離した。沈殿物を回収し、９９．５容量％エタノール（和光純薬工業株式会社製）２００ｍＬ中に懸濁させ、ホモジナイザーを用いて破砕し、ブフナーロートを用いて減圧濾過により回収した。回収物を４０℃で真空乾燥させた。
【００５８】
（ｅ）アルコール分画工程
還元工程で得た回収物８．９ｇを蒸留水１２０ｍＬに溶解させた。回収物の２０倍重量の塩化ナトリウムを添加し、塩酸を６ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液を用いて溶液のｐＨを３．５に調節した。溶液中の塩化ナトリウム濃度が１ｇ／ｍＬとなるよう蒸留水を添加した。溶液量の５０％容の９９．５容量％エタノールを攪拌しながら添加した。さらに１５分間攪拌し、その後、溶液を室温で１０時間静置した。溶液を２５００回転で２０分間、遠心分離した。沈殿物を回収し、９９．５容量％エタノール１５０ｍＬ中に懸濁させ、ホモジナイザーを用いて破砕し、ブフナーロートを用いて減圧濾過により回収した。回収物を９９．５容量％エタノール３００ｍＬで洗浄し、４０℃で２４時間、真空乾燥させ、生成物１を得た。
【００５９】
生成物１の重量平均分子量を、日本薬局方「パルナパリンナトリウム」の「分子量」の項記載の方法により測定したところ、生成物１の重量平均分子量は、２５００であった。
【００６０】
実施例１のダルテパリンナトリウムの代わりに、生成物１を５４国際単位／ｍＬ、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ４に調整した水溶液を用いた以外は、実施例１に記載と同様の抗血栓処理を行い、これを医療材料３とした。
【００６１】
（実施例４）
繊維径３０μｍのＰＥＴ製マルチフィラメントを使用し、トリコット編み機を使用して平編物を作製し、これを編物１とした。
【００６２】
上記編物の目開きは、マルチフィラメントからなる編物の編み目にできた間隙の直径として表されるが、編み方によって隙間の形状が異なるため、基準となる測定方法は無い。そこで便宜的に、編物の編み目に対し垂直上方向から撮影した画像中の糸が存在しない部分として検出される編み目の間隙に内接する最大円に基づき、上記編物の目開きを規定した。具体的には、得られた画像内の編み目の間隙をランダムで選定し、編み目の間隙を円近似して、編み目の間隙に内接する最大円を得た。間隙に内接する最大円の直径を測定し、これを編物の目開きとした。
【００６３】
編み目の間隙の測定は１０箇所行い、この平均値を目開きの平均値とした。すなわち、上記編物の目開きの平均値は、編物の間隙に内接する最大円の直径の平均値で示される。
【００６４】
編物１の目開きの平均値を上記の方法により測定したところ、編物１の目開きの平均値は、１００μｍであった。
【００６５】
実施例１のＰＥＴメッシュの代わりに、編物１を用いた以外は、実施例１に記載の抗血栓処理と同様の抗血栓処理を行い、これを医療材料４とした。
【００６６】
（比較例１）
実施例１に記載の抗血栓処理を行わないことで、抗血栓処理をされていない状態の実施例１のＰＥＴメッシュを得たこととし、医療材料５とした。
【００６７】
（比較例２）
実施例１のダルテパリンナトリウムの代わりに、ヘパリンナトリウム（Ｏｒｇａｎｏｎ  ＡＰＩ社製）を０．７５重量％、０．１ｍｏｌ／Ｌ塩化ナトリウム水溶液（ｐＨ４に調整）を用いた以外は、実施例１に記載と同様の抗血栓処理を行い、これを医療材料６とした。
【００６８】
（比較例３）
実施例１の抗血栓処理の代わりに、以下の工程（ａ）〜（ｄ）からなる抗血栓処理を行い、これを医療材料７とした。
【００６９】
（ａ）加水分解及び酸化工程
硫酸を０．６ｍｏｌ／Ｌ、過マンガン酸カリウム（和光純薬工業株式会社製）を５．０重量％含む水溶液に実施例１のＰＥＴメッシュを浸漬し、６０℃で３時間反応させてＰＥＴメッシュの表面を加水分解及び酸化した。反応後に水溶液を除去し、塩酸及び蒸留水で洗浄した。
【００７０】
（ｂ）ポリエチレンイミン縮合反応工程
続いて、ＤＭＴ−ＭＭ（和光純薬工業株式会社製）を０．５重量％、ポリエチレンイミン（ＬＵＰＡＳＯＬ（登録商標）  Ｐ；ＢＡＳＦ社製、重量平均分子量：７５０，０００）を５．０重量％含む水溶液にＰＥＴメッシュを浸漬し、３０℃で２時間反応させてＰＥＴメッシュにポリエチレンイミンを縮合反応により共有結合させた。反応後に水溶液を除去し、蒸留水等で洗浄した。
【００７１】
（ｃ）第４級アンモニウム化工程
続いて、臭化エチルを１重量％、メタノールを３０重量％含む水溶液にＰＥＴメッシュを浸漬し、３５℃で１時間反応させた後、５０℃に加温して４時間反応させ、ポリエチレンイミンを第４級アンモニウム化した。反応後の水溶液を除去し、メタノールや蒸留水で洗浄した。
【００７２】
（ｄ）ヘパリンイオン結合工程
最後に、ヘパリンナトリウム（Ｏｒｇａｎｏｎ  ＡＰＩ社製）を０．７５重量％、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液（ｐＨ４に調整）に浸漬し、７０℃で６時間反応させて、アルキルスルホン酸化ポリエチレンイミンとイオン結合させた。水溶液を除去し、蒸留水で洗浄後、真空乾燥した。
【００７３】
（比較例４）
実施例１のＰＥＴメッシュを用い、ＰＥＴメッシュにポリエチレンイミンを共有結合させる工程が以下の工程１であることと、その後のＰＥＴメッシュの表面に共有結合されたポリエチレンイミンを第４級アンモニウム化する反応における、臭化エチルを１．０容量％、メタノールを３０容量％含む水溶液にＰＥＴメッシュを浸漬した場合の反応条件が、３５〜５０℃で５時間であること以外は、実施例１に記載と同様の抗血栓処理を行い、これを医療材料８とした。
【００７４】
（工程１）
硫酸を０．６ｍｏｌ／Ｌ、過マンガン酸カリウム（和光純薬工業株式会社製）を３．０重量％含む水溶液にＰＥＴメッシュを浸漬し、６０℃で３時間反応させてＰＥＴメッシュの表面を加水分解及び酸化した（加水分解及び酸化する工程）。反応後に水溶液を除去し、塩酸を６ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液で３回、蒸留水で１回洗浄した。
【００７５】
４（−４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルフォリニウムクロリドｎ水和物（以下、「ＤＭＴ−ＭＭ」）（和光純薬工業株式会社製）を２．０重量％、ポリエチレンイミン（（ＬＵＰＡＳＯＬ（登録商標）  ＳＫ；ＢＡＳＦ社製、重量平均分子量：２，０００，０００）を５．０重量％含む水溶液にＰＥＴメッシュを浸漬し、５０℃で２時間反応させてＰＥＴメッシュにポリエチレンイミンを縮合反応により共有結合させた。反応後に水溶液を除去し、５０℃の蒸留水及びＰＢＳ（−）（日水製薬株式会社製）で洗浄した。
【００７６】
（比較例５）
実施例１のポリエチレンイミン（ＬＵＰＡＳＯＬ（登録商標）  Ｐ；ＢＡＳＦ社製、重量平均分子量：７５０，０００）の代わりに、ポリエチレンイミン（平均分子量約６００；和光純薬工業株式会社製）を用いたこと、ならびにＰＥＴメッシュにポリエチレンイミンをアミノリシス反応により共有結合させた後に、ＰＥＴメッシュを、臭化エチルを１．０容量％、メタノールを３０容量％含む水溶液に浸漬し、３５℃で１時間反応させた後、５０℃に加温して４時間反応させ、ＰＥＴメッシュの表面に共有結合されたポリエチレンイミンを第４級アンモニウム化する工程を実施しなかったこと以外は、実施例１に記載と同様の抗血栓処理を行い、これを医療材料９とした。
【００７７】
（比較例６）
実施例１のＰＥＴメッシュの代わりに、ポリウレタン製メッシュ（繊維間距離：１００μｍ）を用いた以外は、実施例１に記載と同様の抗血栓処理を行い、これを医療材料１０とした。
【００７８】
（比較例７）
実施例１の、ＰＥＴメッシュにポリエチレンイミン（ＬＵＰＡＳＯＬ（登録商標）  Ｐ；ＢＡＳＦ社製、重量平均分子量：７５０，０００）をアミノリシス反応により共有結合させた反応の代わりに、ＰＥＴメッシュをポリエチレンイミン（平均分子量約６００；和光純薬工業株式会社製）を５．０重量％含む水溶液に浸漬し、５ｋＧｙのγ線を照射（ＪＳ−８５００型コバルト６０γ線照射装置；ノーディオン・インターナショナル社製）し共有結合させたことと、ダルテパリンナトリウムの代わりに、レビパリンナトリウム（クリバリン透析用１０００単位／ｍＬ  バイアル５ｍＬ、マイランＥＰＤ合同会社）を５４国際単位／ｍＬ、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液（ｐＨ４に調整）を用いたこと以外は、実施例１に記載と同様の抗血栓処理を行い、これを医療材料１１とした。
【００７９】
（比較例８）
下記の（ａ）〜（ｃ）の工程を連続的に行なうことで、生成物２を得た。
【００８０】
（ａ）ヘパリンの解重合工程
ヘパリンナトリウム（Ｏｒｇａｎｏｎ  ＡＰＩ社製）を、酢酸ナトリウムを０．１５ｍｏｌ／Ｌ、塩化ナトリウムを０．１５ｍｏｌ／Ｌ、塩化カルシウムを０．００５ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ６．９に調整した水溶液に２重量％となるよう溶解させ、３０℃で２４時間静置した。ヘパリナーゼＩＩ（デクストララボラトリーズ社製）を０．４ｍｇ添加し、８時間後にさらに０．２ｍｇ、２４時間後に０．２ｍｇ、３６時間後に０．２ｍｇ添加した。１０倍量の９９．５容量％エタノールにて沈殿させた後、得られた解重合生成物を乾燥した。
【００８１】
（ｂ）クロマトグラフィーによる選択工程
アンチトロンビンを固定化したセファロース（登録商標）を充填したカラムを、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液と０．０５ｍｏｌ／Ｌのトリス−塩酸緩衝液（ｐＨ７．５）で平衡化した。ヘパリンの解重合工程で得た解重合生成物をカラム頂部に乗せた。平衡化に用いた溶液でカラムを洗浄して非固定化成分を除去したのち、塩化カルシウムを１ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ７．２に調整した水溶液で溶出した。ピークを示す画分を含む溶出液に５倍容の９９．５容量％エタノールを添加し、形成された沈殿物を遠心分離により回収し、９９．５容量％エタノールで洗浄し、減圧下で６０度で乾燥させた。
【００８２】
（ｃ）ゲル濾過工程
クロマトグラフィーによる選択工程で得た生成物２５ｇをセファデックス（登録商標）Ｇ５０スーパーファイン（ＧＥヘルスケア・ジャパン株式会社製）に乗せ、塩化カルシウムを０．２ｍｏｌ／Ｌ含む水溶液で溶出される画分を回収した。これをセファデックスＧ２５を用いて脱塩し、凍結乾燥させて生成物２を得た。
【００８３】
生成物２の重量平均分子量を、日本薬局方「パルナパリンナトリウム」の「分子量」の項記載の方法により測定したところ、生成物２の重量平均分子量は、１２００であった。
【００８４】
実施例１のダルテパリンナトリウムの代わりに、生成物２を５４国際単位／ｍＬ、塩化ナトリウムを０．１ｍｏｌ／Ｌ含み、ｐＨ４に調整した水溶液を用いた以外は、実施例１に記載と同様の抗血栓処理を行い、これを医療材料１２とした。
【００８５】
（実験例）
医療材料１〜１２について、以下の（１）〜（４）に示した項目を測定し、その測定結果を表１に示した。
【００８６】
（１）医療材料の表面におけるＸＰＳを用いた原子分析
医療材料１〜１２の表面における全原子の存在量に対する硫黄原子の存在比率は、ＸＰＳによって求めることができる。
［測定条件］
装置          ：ＥＳＣＡＬＡＢ２２０ｉＸＬ（ＶＧ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）
励起Ｘ線      ：ｍｏｎｏｃｈｒｏｍａｔｉｃＡｌＫα１，２線（１４８６．６ｅＶ）
Ｘ線径        ：１ｍｍ
Ｘ電子脱出角度：９０°（医療材料の表面に対する検出器の傾き）
【００８７】
ここでいう医療材料の表面とは、ＸＰＳの測定条件におけるＸ電子脱出角度、すなわち医療材料の表面に対する検出器の傾きを９０°として測定した場合に検出される、測定表面からの深さ１０ｎｍまでのことを指す。医療材料の表面にＸ線を照射し、生じる光電子のエネルギーを測定することで得られる物質中の束縛電子の結合エネルギー値から、医療材料の表面の原子情報が得られ、また各結合エネルギー値のピークのエネルギーシフトから価数や結合状態に関する情報が得られる。さらに、各ピークの面積比を用いて定量、すなわち各原子や価数、結合状態の存在比率を算出することができる。
【００８８】
具体的には、硫黄原子の存在を示すＳ２ｐピークは結合エネルギー値が１６１ｅＶ〜１７０ｅＶ付近に見られ、本発明においては、全ピークに対するＳ２ｐピークの面積比が１．０〜３．０原子数％であることが好ましいことを見出した。医療材料の表面をＸ線電子分光法（ＸＰＳ）で測定した際の全原子の存在量に対する硫黄原子の存在比率は、小数点第２位を四捨五入して算出した。
【００８９】
（２）面積あたりの抗ファクターＸａ活性  
“テストチーム（登録商標）ヘパリンＳ”（積水メディカル株式会社製）のキットの操作手順を参考にして検量線を作成した。具体的には、栄研チューブにヘパリン標準液２００μＬを添加し、３７℃で６分間インキュベートした。ファクターＸａ液２００μＬを添加し、混和後に３７℃で３０秒間インキュベートした。３７℃に加温しておいた基質液（Ｓ−２２２２溶液）２００μＬを添加し、混和後に３７℃で３分間インキュベートした。反応停止液３００μＬを添加し、混和した。マイクロプレートに反応停止後の溶液を３００μＬ分注し、４０５ｎｍの吸光度をマイクロプレートリーダ（ＭＴＰ−３００；コロナ電気株式会社製）で測定して、テストチーム（登録商標）ヘパリンＳのキットの操作手順に従って検量線を作成した。次に、医療材料１〜３、５〜１２を横幅０．５ｃｍ、縦幅０．５ｃｍのサイズにカットし、これをサンプルとした。サンプルを５００μＬの生理食塩水に浸漬し、３７℃で３０分間洗浄した。“テストチーム（登録商標）ヘパリンＳ”（積水メディカル株式会社製）の操作手順を参考にして生理食塩水洗浄後のサンプルを反応させた。具体的には、生理食塩水洗浄後のサンプルを栄研チューブに入れ、ヒト正常血漿２０μＬ、緩衝液１６０μＬ、アンチトロンビンＩＩＩ液２０μＬ添加し、混和後に３７℃で６分間インキュベートした。ファクターＸａ液２００μＬ添加し、混和後に３７℃で３０秒間インキュベートした。３７℃に加温しておいた基質液２００μＬ添加し、混和後に３７℃で３分間インキュベートした。反応停止液３００μＬ添加し、混和した。反応停止後の溶液をエッペンチューブに分注した。この際に、サンプルは取り除いた。エッペンチューブに分注した反応停止後の溶液をマイクロプレートに３００μＬ添加し、４０５ｎｍの吸光度をマイクロプレートリーダ（ＭＴＰ−３００；コロナ電気株式会社製）で測定して、テストチーム（登録商標）ヘパリンＳの操作手順に従って面積あたりの抗ファクターＸａ活性を算出した。
【００９０】
（３）抗血栓処理による伸びの変動の測定
医療材料１〜１２及び編物１について、横幅０．７ｃｍ、縦幅１ｃｍのサイズに５枚ずつカットし、医療材料の伸びを下記条件による引っ張り試験を実施して評価した。
［測定条件］
装置          ：引っ張り試験機テンシロンＲＴＥ−１２１０（オリエンテック社製）
ロードセル    ：５００Ｎ
試料初期長さ  ：１０ｍｍ
引っ張り速度  ：５ｍｍ／分
【００９１】
５回の引っ張り試験から求めた伸びの値を平均し、伸びの平均値を計算した。さらに、式２を用いて、抗血栓処理による伸びの変動を計算した。抗血栓処理後の医療材料としては、医療材料１〜１２を用いた。このうち、医療材料１〜３、６〜１２については基材にＰＥＴメッシュを用いているため、抗血栓処理前の基材として医療材料５を用いて抗血栓処理前の基材の伸びの平均値（ＭＬｐｒｅ）を算出し、医療材料４については基材に編物を用いているため、抗血栓処理前の基材として編物１を用いて抗血栓処理前の基材の伸びの平均値（ＭＬｐｒｅ）を算出した。
Ｐ＝ＭＬｐｏｓｔ／ＭＬｐｒｅ  ・・・式２
Ｐ：抗血栓処理による伸びの変動
ＭＬｐｏｓｔ：抗血栓処理後の医療材料の伸びの平均値（Ｎ）
ＭＬｐｒｅ：抗血栓処理前の基材の伸びの平均値（Ｎ）
【００９２】
実施例及び比較例における伸びの変動の結果を表１に示した。実施例１〜４では、抗血栓処理による伸びの変動が１となり、心拍の影響を受ける場所での基材の強度の損失を最低限に留めつつ、抗血栓処理ができたことが示せている。一方、比較例３及び４のように、抗血栓処理の際にヘパリンの結合量を増やしたものについては、基材表面のヘパリン量を多くするため抗血栓処理の条件が過酷となり、抗血栓処理による伸びの変動が高くなっていることが示された。
【００９３】
（４）遊離血栓捕獲器具を用いた動物実験
医療材料１〜１２を用いて遊離血栓捕捉器具を作製し、エチレンオキシドガス滅菌を行い、動物実験にて抗血栓性を評価した。ヒトにおける遊離血栓捕捉器具を用いた頸動脈ステント留置術での施行条件を参考にして、ヘパリンナトリウム注射液（味の素製薬株式会社）を静脈内に投与し、活性化全血凝固時間を２００秒以上３００秒以下に維持した条件下で、ＨＢＤ（交雑種）イヌ（雄、体重１２〜１６ｋｇ）の総頚動脈に遊離血栓捕捉器具を留置し、エコー及び造影剤にて血流を確認した。遊離血栓捕捉器具を留置してから、ＰＥＴメッシュに血栓が形成され、閉塞によって遊離血栓捕捉器具よりも末梢側の血流が完全に確認できなくなるまでの時間を測定し、これを留置時間（分）とした。
【００９４】
また、留置時間が６０分を越えるか、閉塞を確認した時点で、医療材料１〜１２を用いた遊離血栓捕捉器具について体内から抜去し、生理食塩水で洗浄したのち、ＰＥＴメッシュ部分を切開し、マイクロスコープ（ＫＨ−１３００、株式会社ハイロックス製）を用いて倍率５０倍にてＰＥＴメッシュ外側の画像を撮影した。画像解析ソフトＩｍａｇｅＪ（アメリカ国立衛生研究所製）を用いて、ＰＥＴメッシュ外側の面積及びＰＥＴメッシュ外側に付着した血栓の面積を計測した。その結果から、以下の式３を用いて血栓付着率（％）を計算した。留置時間及び血栓付着率の結果を表１に示した。
Ｒ＝Ａｃ／Ａｔ×１００  ・・・式３
Ｒ  ：血栓付着率（％）
Ａｃ：ＰＥＴメッシュ外側に付着した血栓の面積（ｃｍ２）
Ａｔ：ＰＥＴメッシュ外側の面積（ｃｍ２）
【００９５】
ここで、長期間留置する心血管系の器具の一例として、人工血管が挙げられるが、長期間にわたり開存するためには移植初期の血栓形成を防止することが重要であるとの報告がなされている（西部俊哉ら、日血外会誌  ４  ６４３−６４９、１９９５）。この報告から、本実験において留置時間が６０分を越えるものについては、長期間の使用可能性が担保されており、心臓インプラント用の医療材料として好ましく、特にヒト総頸動脈における平均血流速度はヒト左心耳における血流速度とほぼ等しいことから、左心耳閉塞デバイスに用いる医療材料として好ましいと判断した。
【００９６】
また、遊離血栓捕捉器具の捕捉部分に血栓が付着し、血流が減弱又は遮断されると虚血性合併症のリスクが増加することから、臨床で使用されている遊離血栓捕捉器具の添付文書の中には、使用中の造影検査において捕捉部分の２５％以上に血栓を確認した場合は、血栓溶解等の処置を行い、可能な限り血栓を溶解してから抜去する旨が記載されている（東レ・ニューハウス  プロテクト添付文書、第９版、東レ株式会社）。この添付文書について、捕捉部分の血栓としては、フィルター内に捕捉された血栓と、フィルター捕捉部分を構成する医療材料に付着した血栓とが考えられるが、本実験においては正常動物を使用しているため、捕捉部分の血栓は全てフィルター捕捉部分に付着した血栓として換算した。
【００９７】
ここで、捕捉部分を構成する医療材料に付着した血栓は、末梢側へ飛散し、脳梗塞の原因になる可能性があるが、左心耳閉塞デバイスにおいても、左心耳閉塞デバイスの左心室内腔側と接する部分に血栓が付着すると、末梢側である脳に血栓が飛散する可能性があり、遊離血栓捕捉器具と同様の問題が発生すると考えられる。このことから、本実験においても、遊離血栓捕捉器具の留置時間が６０分を超えた場合でも、捕捉部分の２５％以上に血栓を確認した場合、すなわち、血栓付着率が２５％以上となる場合、心臓インプラント用の医療材料として不適切であると判断した。このように、血栓付着率が２５％以下であることが好ましいが、血栓付着率が１０％以下である場合、より塞栓が発生しにくくなることからさらに好ましいと考えた。
【００９８】
ＷＯ２０１６／１９０４０７の実施例では、抗血栓性被覆材料を被覆したＰＥＴメッシュを遊離血栓捕捉器具に組み立て、イヌ頸動脈に留置して留置時間を計測しているが、この実験条件は遊離血栓捕捉器具の留置中にヘパリンを投与せず、血中にヘパリンが存在しない条件であるのに対し、本実験では、心臓インプラントを留置する際により近い条件として、留置の際にヘパリンを投与しており、血中にヘパリンが存在する条件としている。
【００９９】
ここで、本明細書中において、ＷＯ２０１６／１９０４０７に記載の実施例３のサンプル８と同様の方法で作成された比較例３は、本実験のように血中にヘパリンの存在する条件下では、過剰量のヘパリンによる血小板凝集亢進作用により血小板を主体とする血栓が形成され、留置６０分までに閉塞し、また血栓付着率も２５％以上の高値であったことが確認できた。
【０１００】
比較例４は、比較例３の未分画ヘパリンの代わりに低分子量ヘパリンを用いたものであるが、血中のヘパリンの血小板凝集亢進作用により血小板を主体とする血栓が形成され、留置６０分までに閉塞し、また血栓付着率も２５％以上の高値であった。また、表面のヘパリンの量を多くするため抗血栓処理の条件が過酷となり、抗血栓処理による伸びの変動が高値であった。
【０１０１】
ヒト臨床での施行条件において、ヘパリンによる血小板凝集亢進作用を軽減するためには、基材表面のヘパリン量を少なくする方針が考えられる。比較例２は、比較例３に比べて全原子の存在量に対する硫黄原子の存在比率及び面積あたりの抗ファクターＸａ活性が小さい。抗血栓処理の条件は穏やかであり、抗血栓処理による伸びの変動は認められなかったが、未分画ヘパリンを使用しているため、未分画ヘパリンの有する血小板凝集亢進作用により血小板を主体とする血栓が形成され、留置６０分までに閉塞し、また血栓付着率も２５％以上の高値であった。
【０１０２】
これらに対し、実施例１〜４は、比較例２〜４に比べて、全原子の存在量に対する硫黄原子の存在比率又は面積あたりの抗ファクターＸａ活性が小さく、かつ、血小板凝集亢進作用の小さい低分子量ヘパリンを使用しているため、留置６０分まで閉塞せず開存し続け、血栓付着率は１０％以下であった。また、抗血栓処理による伸びの変動は認められなかったことから、抗血栓処理による基材強度損失を防止できた。
【０１０３】
左心耳閉塞デバイスの使用にあたってのガイドラインは現時点では存在しないが、現在、日本国内で承認されているＷＡＴＣＨＭＡＮ（登録商標）左心耳閉鎖システムの添付文書に明示されているように、心臓インプラントの留置時において、ヘパリン使用は必須であり、少なくとも２００〜３００秒の活性化全血凝固時間が得られるように調整するとされている（ＷＡＴＣＨＭＡＮ左心耳閉鎖システム添付文書、第１版、ボストン・サイエンティフィック  ジャパン株式会社）。しかし、血中にヘパリンが存在する条件下で左心耳閉塞デバイスを留置された患者の３．７％に左心耳閉塞デバイス由来の血栓がみられたとの報告がある（Ｓｒｉｎｉｖａｓ  ＲＤら、Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ  １３８（９）、８７４−８８５、２０１８）。これは、血中にヘパリンが存在する条件下であっても左心耳閉塞デバイス上で血栓形成反応が起きるためと考えられる。一方、実施例１〜４は、血中にヘパリンが存在するだけでなく、抗血栓処理によって医療材料そのものへの血栓形成反応が抑制されるため、血中にヘパリンが存在する条件下での血栓付着率を特に低減させていることが分かる。このため本発明の医療材料は、デバイス由来の血栓の発生率を低減させることで、左心耳閉塞デバイスの材料として好適に用いることが示された。
【０１０４】
【表１】
2020178957.tif 000002
【産業上の利用可能性】
【０１０５】
本発明のインプラント用の医療材料は、医療器材に好適に用いることができ、特に、左心耳閉塞デバイス等の心臓インプラント用の医療器材に用いることができる。