(57)【要約】      （修正有）【課題】副作用が少なく、高い治療効果を有する座瘡のパルス光力学的療法の提供。【解決手段】動物において光力学的療法（ＰＤＴ）によって座瘡を処置するのに使用するための光増感剤であって、皮膚の前処理、例えばダーマブレーション若しくはマイクロニードリングのような機械的前処理、又はピーリングのような化学的前処理の後に、前記動物の皮膚に適用すべきものである、光増感剤。４分間〜４時間に含まれる期間、特に１５分間〜３時間に含まれる期間にわたって適用すべきものである、前記光増感剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
動物において光力学的療法（ＰＤＴ）によって座瘡を処置するのに使用するための光増感剤であって、皮膚の前処理、例えばダーマブレーション若しくはマイクロニードリングのような機械的前処理、又はピーリングのような化学的前処理の後に、前記動物の皮膚に適用すべきものである、光増感剤。
【請求項２】
４分間〜４時間に含まれる期間、特に１５分間〜３時間に含まれる期間にわたって適用すべきものである、請求項１に記載の使用のための光増感剤。
【請求項３】
短期間、特に５〜１２０分間に含まれる期間、好ましくは１５〜６０分間に含まれる期間、より好ましくは２０〜４０分間に含まれる期間、例えば２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４又は３５分間の期間にわたって適用すべきものである、請求項１又は２に記載の使用のための光増感剤。
【請求項４】
動物において光力学的療法（ＰＤＴ）によって座瘡を処置するのに使用するための光増感剤であって、短期間、特に５〜１２０分間に含まれる期間、好ましくは１５〜６０分間に含まれる期間、より好ましくは２０〜４０分間に含まれる期間、例えば２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４又は３５分間の期間にわたって適用すべきものである、光増感剤。
【請求項５】
ＰＤＴに関連する副作用を予防又は軽減するための、請求項１〜４のいずれか一項に記載の使用のための光増感剤。
【請求項６】
光力学的療法が、自然光源、特に太陽光によって達成される光活性化を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載の使用のための光増感剤。
【請求項７】
前記光力学的療法が、自然光源による０．５〜３時間の期間にわたる光活性化を含む、請求項６に記載の使用のための光増感剤。
【請求項８】
前記ＰＤＴが、
ａ）前記動物の皮膚を前処理、例えば機械的前処理又は化学的前処理に供すること；
ｂ）５分間〜１２０分間に含まれる期間にわたって、前記光増感剤を含む組成物を前記動物に投与すること；及び
ｂ）０．５時間〜３時間の期間にわたって、自然光によって前記光増感剤を光活性化すること
を含む、請求項１〜７のいずれか一項に記載の使用のための光増感剤。
【請求項９】
前記ＰＤＴが、
ａ）前記動物の皮膚を前処理、例えば機械的前処理又は化学的前処理、特にサンドペーパーによる前処理に供すること；
ｂ）約３０分間、例えば約２７、２８、２９、３０、３１、３２又は３０分間、好ましくは３０分間の期間にわたって、前記光増感剤を含む組成物を前記動物に投与すること；及び
ｃ）光増感剤を除去すること；及び
ｄ）２．５時間後に、少なくとも２時間の期間にわたって、自然光（natural ligh）によって前記光増感剤を光活性化すること
を含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の使用のための光増感剤。
【請求項１０】
５−ＡＬＡ、５−ＡＬＡ誘導体、５−ＭＡＬ、５−ＭＡＬ誘導体、及び一般式Ｉ：
Ｒ２２Ｎ−ＣＨ２ＣＯＣＨ２−ＣＨ２ＣＯ−ＯＲ１（Ｉ）
（式中：
Ｒ１は、置換されている又は置換されていない直鎖状、分岐状又は環状アルキル基（例えば、置換されている又は置換されていない直鎖状アルキル基）を表し；各Ｒ２は独立して、水素原子又は場合により置換されているアルキル基、例えばＲ１基を表す）によって包含される化合物；並びにそれらの薬学的に許容し得る塩からなる群より選択される、請求項１〜９のいずれか一項に記載の使用のための光増感剤。
【請求項１１】
５−ＡＬＡ又は５−メチルＡＬＡエステルである、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の使用のための光増感剤。
【請求項１２】
前記光増感剤を含む組成物の前記動物への投与を、閉塞ありで又は閉塞なしで、より好ましくは閉塞ありで行う、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の使用のための光増感剤。
【請求項１３】
皮膚の機械的前処理又は化学的前処理を行うためのデバイスと、光増感剤を含む組成物とを含む、キット。
【請求項１４】
適合サンドペーパーと、ＡＬＡ又はＡＬＡのエステル、例えばメチルＡＬＡエステル、ヘキシルＡＬＡエステル及びベンジルＡＬＡエステル、特にメチルＡＬＡエステルを含む組成物とを含む、請求項１３に記載のキット。
【請求項１５】
サンスクリーンを更に含む、請求項１３又は１４に記載のキット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
発明の分野
本発明は、座瘡のパルス光力学的療法（又はパルスＰＤＴ）処置に関する。
【背景技術】
【０００２】
発明の背景
光力学的療法（ＰＤＴ）は、皮膚又は他の上皮器官若しくは粘膜の様々な異常又は障害の処置、特に座瘡の処置に関する技術である。ＰＤＴは、光増感（光化学療法）剤を身体の患部に適用し、続いて、光活性化光に曝露して光増感剤を活性化し、それらを細胞毒性型に変換することにより、罹患細胞を殺すことを含む（壊死、アポトーシス）。
【０００３】
ソラレン、ポルフィリン（例えば、Photofrin（登録商標））、クロリン及びフタロシアニンを含む様々な光増感剤が公知である。しかしながら、中でも、当技術分野で公知の最も臨床的に有用な光増感剤は、５−アミノレブリン酸及びその誘導体、例えば５−ＡＬＡエステル等のエステルである。
【０００４】
ＰＤＴの作用機序は、細胞内ポルフィリン（ＰｐＩＸを含む）（これは光活性蛍光化合物であり、酸素の存在下で光活性化されると、一重項酸素が形成されて、細胞区画、特にミトコンドリアへの損傷を引き起こす）に依拠する。
【０００５】
蓄積されたポルフィリンの光活性化は、光に曝露されたターゲット細胞に対する光化学反応及びそれによる光毒症をもたらす。
【０００６】
ＰＤＴは、広範囲の疾患の処置において臨床的に有用であるが、このような処置の主な欠点は、特に処置部位における付随する副作用である。これらとしては、多くの場合、処置後の炎症、例えば紅斑、腫脹、浮腫、熱傷、かゆみ、剥奪、高色素沈着及び長期刺激、並びに過敏症が挙げられる。処置部位が顔、頭皮又は首である場合、このような副作用は特に望ましくない。ＰＤＴが、例えば座瘡を伴う病変の処置のためのものである場合に、これは頻繁に生じる。
【０００７】
座瘡の処置のためのＰＤＴにおける５−ＡＬＡエステルの使用を開示する国際公開第２００６／０５１２６９号では、このような副作用の発生が認められている。国際公開第２００６／０５１２６９号には、１６重量％のメチルＡＬＡエステルを含むクリームを３時間にわたって被験体の顔に適用し、続いて、被験体の顔を非コヒーレント赤色光（光線量３７Jkm-2）に曝露する研究が記載されている。次いで、２週間後に、処置が繰り返された。結果は、メチルＡＬＡエステルによるＰＤＴが座瘡の処置に有効であることを裏付けていたが、被験体は、この処置が疼痛を引き起こし、重度の炎症を誘発したことも示していた。
【０００８】
国際公開第０２／１３７８８号には、座瘡の処置のためのＰＤＴにおけるＡＬＡ酸の使用に関する類似研究が開示されている。この場合では、２０％ＡＬＡ酸が３時間にわたって被験体の背中に適用され、次いで、被験体は１５０J/cm2の広帯域光に曝露された。この場合も同様に、結果は、ＡＬＡによるＰＤＴが座瘡の処置に有効であることを裏付けていたが、被験体は、多くの望ましくない副作用も報告していた。例えば、国際公開第０２／１３７８８号では、ＰＤＴ処置後に、紅斑、高色素沈着及び剥奪がしばしば見られたことが報告されており、いくつかの場合では、その後の処置を延期しなければならなかったとさえ記述されている。処置中及び処置後の疼痛、熱傷及びかゆみの報告も共通していた。国際公開第０２／１３７８８号には、「高用量高エネルギー」レジームとして上記処置レジームが開示されており、座瘡の永久的改善をもたらすと述べられている。国際公開第０２／１３７８８号には、「低用量低エネルギー」レジームが更に開示されており、座瘡の軽減をもたらすように設計されると述べられている。この処置では、０．１〜１０重量％のＡＬＡ酸を適用し、ＡＬＡ酸が皮膚に浸透するのを待った後、１〜２０J/cm2の光線量を照射する。国際公開第０２／１３７８８号では、座瘡を緩和するための時折の複数の処置において、このレジームを使用し、その減少を維持するために必要に応じて繰り返すことが示唆されている。このようなレジームの使用は無痛であり得ると認識されているが、国際公開第０２／１３７８８号では、この処置レジームの治療効果は、それに記載及び例証されている高用量高エネルギーレジームよりも低いことが暗示されている。
【０００９】
したがって、望ましくない副作用（例えば、炎症）がないが、高い治療効果を有する代替的なＰＤＴ法の必要性が依然として存在する。
【００１０】
炎症及び／又は紅斑は、ＰＤＴ処置に関連する主要な問題の１つである。一般に、炎症は、ＰＤＴによるＡＫ／ＢＣＣ／ＢＤの治癒における必要要素／必須条件であるが、ＢＣＣ及びＢＤについては、これらの病変は小さく、衣服によって隠れることが多いので、それほど大きな問題ではないと考えられている。反対に、座瘡は主に顔にあり、ダウンタイムを減少させる必要が重要である。
【００１１】
炎症及びＰＤＴの有効性との間のこれまでに発表されていない関係を図１に示す。
【００１２】
したがって、座瘡を処置するための方法であって、炎症性が少なく、依然として有効な方法の必要性が存在する。本発明は、その必要性に対処する。
【発明の概要】
【００１３】
本発明は、座瘡のＰＤＴ処置であって、それを必要とする被験体の皮膚を前処理、例えば（（例えば、サンドペーパーによる）ダーマブレーション又は（例えば、ダーマローラーによる）マイクロニードリングのような）機械的前処理、又はピーリングのような化学的前処理に供することを含むＰＤＴ処置に関する。本発明者らは、驚くべきことに、このような機械的前処理が、座瘡の美容的又は治療的な処置において効率的であり、アブレーションフラクショナルレーザーを用いて行われる前処理で観察される有害作用がないか、又は前記有害作用が少ないことを見出した。次いで、ＰＤＴは、光増感剤（特に、５−ＭＡＬ）を前記皮膚に適用することを含む。代表的な実施態様では、光増感剤は、４分間〜４時間、特に１５分間〜３時間に含まれる期間にわたって適用される。
【００１４】
本発明者らはまた、驚くべきことに、ＰＤＴにおいて古典的に行われる短期間にわたる光増感剤の適用が、光増感剤を長期間にわたって使用する場合と同様に効率的なＰＤＴの実施を可能にし、従来技術のＰＤＴプロトコールで通常観察される副作用が大きく減少することを見出した。
【００１５】
したがって、本発明はまた、座瘡のＰＤＴ処置であって、光増感剤（特に、５−ＭＡＬ）をそれを必要とする被験体に短期間にわたって投与すること、及び、次いで皮膚表面から光増感剤を除去することを含むＰＤＴ処置に関する。あるいは、このＰＤＴプロトコールは、本明細書においてパルスＰＤＴと指定される。
【００１６】
代表的な光増感剤としては、好ましくは、５−アミノレブリン酸（５−ＡＬＡ）及び５−ＡＬＡの誘導体（例えば、エステル）、より好ましくは５−ＡＬＡメチルエステル（又は５−ＭＡＬ）又はそれらの薬学的に許容し得る塩が挙げられる。本使用及び方法では、光活性化は、自然光又は人工光によって達成される。特定の実施態様では、ＰＤＴは、
（ａ）場合により、適切な前処理、特に機械的前処理、例えばキュレッティング、ダーマブレーション又はマイクロニードリング（又はマイクロパーフォレーション）によって、処置すべき皮膚領域を調製すること、
（ｂ）前記光増感剤を含む組成物を前記動物に特に短期間にわたって投与すること；及び
（ｃ）前記光増感剤を光活性化すること
を含む。
【００１７】
特定の実施態様では、本発明は、光増感剤（特に、５−ＭＡＬ）をそれを必要とする被験体に短期間にわたって投与すること、及び、次いで皮膚表面から光増感剤を除去することを含むパルスＰＤＴ処置を行う。次いで、本出願全体を通じて記載されるように、光活性化を行う。本発明のパルスＰＤＴ処置は、高い細胞内ＰＰＩＸ及び低い細胞外ＰＰＩＸを保証する。したがって、処置中及び処置終了後における過剰量のＰＰＩＸ形成が回避される。特に、本発明者らは、本発明のパルスＰＤＴ処置では炎症が少なく、有効性が不変であることを示す。
【００１８】
一実施態様によれば、光増感剤を皮膚に乗せる間のパルス時間は、５〜１２０分間に含まれる。好ましい実施態様によれば、光増感剤を皮膚に乗せる間のパルス時間は、１５〜６０分間、特に２０〜４０分間に含まれる。更なる特定の実施態様では、光増感剤を約３０分間（例えば、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４又は３５分間、より具体的には３０分間）投与する。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
発明の詳細な説明
用語「動物」は、本明細書では、任意のヒト又は非ヒトを意味する。本発明による処置のための好ましい動物は、ヒトである。
【００２０】
特定の実施態様では、被験体は、男性又は女性のヒト被験体である。別の特定の実施態様では、被験体は、フィッツパトリックスキンタイプＩ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ又はＶＩのものである。更なる実施態様では、被験体は、スキンタイプＩ、ＩＩ又はＩＩＩ、より具体的にはスキンタイプＩＩ又はＩＩＩのものである。
【００２１】
尋常性座瘡は、青年期に主に見られる自己限定性疾患であり、皮脂毛包を伴う。座瘡のほとんどの症例は多形性であり、面皰、丘疹、膿疱、結節、及び活動性病変の結果として陥凹瘢痕又は肥厚性瘢痕からなる様々な病変を示す。それは、古典的には皮脂腺疾患として分類されているが、実際には、毛包脂腺部が関与するプロセスである。
【００２２】
座瘡は十分に一般的であり、多くの場合において生理的なものであると称されている。軽度の座瘡は、おそらくは副腎アンドロゲンによる濾胞刺激が原因で出生時において見られることが多く、軽度の症例は、新生児期において継続し得る。しかしながら、それは、座瘡が一般的な問題となる思春期までではない。座瘡は、思春期の初期兆候であることが多い；非常に若い患者では、主な病変は面皰である。症例の最大数は、１０代の半ばから後半の期間に見られる；その後、発生率は低下する。しかしながら、特に女性では、座瘡は、２０代を通して又は更にその後も持続し得る。
【００２３】
座瘡の基本的な原因は不明であるが、その病因に関係する様々な要因に関するかなりの情報がある。座瘡は多因子疾患であり、皮脂毛包で発達する。
【００２４】
主な変化は、毛包内の角質化パターンの変化である。通常、毛包内の角質物質は、緩やかに構成されている。面皰形成の初期変化は、毛漏斗の下部で観察される。角質物質はより高密度になり、層板顆粒は数が少なく、ケラトヒアリン顆粒が増加し、細胞の一部は無定型物質（これは、おそらくは角質化プロセス中に生成される脂質である）を含有する。
【００２５】
光増感剤
ＰＤＴにおける５−ＡＬＡ（５−アミノ−４−オキソ−ペンタン酸、あるいは５−アミノレブリン酸として公知である）及び５−ＡＬＡの誘導体の使用は、科学文献及び特許文献において周知である（例えば、J. C. Kennedy et al., J. Clin. Laser Med. Surg. (1996) 14: 289-304、米国特許第５，０７９，２６２号、米国特許第５，２１１，９３８号、米国特許第５，２３４，９４０号、米国特許第５，４２２，０９３号、米国特許第６，０３４，２６７号、国際公開第９１／０１７２７号、国際公開第９６／２８４１２号、国際公開第２００５／０９２８３８号及び国際公開第２００６／０５１２６９号を参照のこと）。５−ＡＬＡ及び５−ＡＬＡの全てのこのような誘導体並びにそれらの薬学的に許容し得る塩は、本明細書に記載される使用及び方法に適切である。
【００２６】
本発明による有用な５−ＡＬＡ誘導体は、in vivoにおいて、プロトポルフィリンＩＸ（ＰｐＩＸ）又は他の任意の光増感剤（例えば、ＰｐＩＸ誘導体）を形成することができる５−ＡＬＡの任意の誘導体であり得る。典型的には、このような誘導体は、ＰｐＩＸ又はＰｐＩＸ誘導体（例えば、ＰｐＩＸエステル）の前駆体であって、したがって、in vivo投与後に、処置すべき部位においてＰｐＩＸの蓄積を誘導することができる前駆体であろう。ＰｐＩＸ又はＰｐＩＸ誘導体の適切な前駆体は、ＰｐＩＸの生合成において中間体としてin vivoで５−ＡＬＡを形成することができるか、又は中間体として５−ＡＬＡを形成せずにポルフィリンに（例えば、酵素作用によって）変換され得る５−ＡＬＡプロドラッグを含む。５−アミノレブリン酸のエステル及びそのＮ置換誘導体は、本発明で使用するのに好ましい光増感剤である。５−アミノ基が置換されていない化合物（すなわち、ＡＬＡエステル）は、特に好ましい。このような化合物は一般に公知であり、文献（例えば、PhotoCure ASAの国際公開第９６／２８４１２号、国際公開第０２／１０１２０号及び国際公開第２００５／０９２８３８号を参照のこと）に記載されている。置換されている又は置換されていないアルカノールを有する５−アミノレブリン酸のエステル（すなわち、アルキルエステル）は、本発明で使用するのに特に好ましい光増感剤である。特に、５−ＭＡＬ及び５−ＭＡＬ誘導体は、特に好ましい。有用な誘導体の例としては、一般式Ｉ：
Ｒ２２Ｎ−ＣＨ２ＣＯＣＨ２−ＣＨ２ＣＯ−ＯＲ１（Ｉ）
（式中：
Ｒ１は、置換されている又は置換されていない直鎖状、分岐状又は環状アルキル基（例えば、置換されている又は置換されていない直鎖状アルキル基）を表し、各Ｒ２は独立して、水素原子又は場合により置換されているアルキル基（例えば、Ｒ１基）を表す）の化合物及びその薬学的に許容し得る塩が挙げられる。
【００２７】
本明細書で使用される場合、用語「アルキル」は、特に指定がない限り、任意の長鎖状又は短鎖状、環状、直鎖状又は分岐状脂肪族飽和又は不飽和炭化水素基を含む。不飽和アルキル基は、一価不飽和又は多価不飽和であり得、アルケニル基及びアルキニル基の両方を含む。特に指定がない限り、このような基は、最大４０個の原子を含み得る。しかしながら、最大３０個、好ましくは最大１０個、特に好ましくは最大８個、特別に好ましくは最大６個、例えば最大４個の炭素原子、例えば１個、２個、３個又は４個の炭素原子を含むアルキル基が好ましい。
【００２８】
置換されているアルキルＲ１及びＲ２基は、一置換又は多置換され得る。
【００２９】
適切な置換基は、ヒドロキシ、アルコキシ、アシルオキシ、アルコキシカルボニルオキシ、アミノ、アリール、ニトロ、オキソ、フルオロ、−ＳＲ３、−ＮＲ３２及び−ＰＲ３２基から選択され得、各アルキル基は、１つ以上の−Ｏ−、−ＮＲ３−、−Ｓ−又は−ＰＲ３−基により場合により割り込まれていてもよく、ここで、Ｒ３は、水素原子又はＣ１−６アルキル基である。
【００３０】
好ましい置換されているアルキルＲ１基としては、１個以上のオキソ基を有するもの、好ましくは、１個、２個又は３個（好ましくは、２個又は３個）のオキソ基で置換されている直鎖状Ｃ４−１２アルキル（例えば、Ｃ８−１０アルキル）基が挙げられる。このような基の例としては、３，６−ジオキサ−１−オクチル及び３，６，９−トリオキサ−１−デシル基が挙げられる。
【００３１】
本発明で使用するのに特に好ましいのは、少なくとも１個のＲ２が水素原子を表す式Ｉの化合物である。特別に好ましい化合物では、各Ｒ２は、水素原子を表す。
【００３２】
Ｒ１が、置換されていないアルキル基（好ましくは、Ｃ１−８アルキル、例えばＣ１−６アルキル）又は上記で定義した置換基（例えば、フェニル等のアリール基又はメトキシ等のアルコキシ基）で置換されているアルキル基（例えば、Ｃ１−２アルキル、特にＣ１アルキル）を表す式Ｉの化合物も好ましい。
【００３３】
本発明で使用され得る置換されていないアルキル基としては、分岐状及び直鎖状炭化水素基の両方が挙げられる。Ｒ１が、１個以上のＣ１−６（例えば、Ｃ１−２アルキル）基で分岐しているＣ４−８、好ましくはＣ５−８直鎖状アルキル基である式Ｉの化合物が好ましい。適切な置換されていない分岐状アルキル基の代表的な例としては、２−メチルペンチル、４−メチルペンチル、１−エチルブチル及び３，３−ジメチル−１−ブチルが挙げられる。４−メチルペンチルが特に好ましい。
【００３４】
Ｒ１がＣ１−１０直鎖状アルキル基である式Ｉの化合物も好ましい。適切な置換されていないアルキル基の代表的な例としては、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル及びオクチル（例えば、ｎ−プロピル、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｎ−ヘキシル及びｎ−オクチル）が挙げられる。ヘキシル、特にｎ−ヘキシルが特に好ましい基である。メチルも特に好ましい。
【００３５】
また、本発明で使用するのに好ましいのは、Ｒ１が、アリール基で場合により置換されているＣ１−２アルキル基（好ましくは、Ｃ１アルキル基）を表す式Ｉの化合物である。
【００３６】
本発明で使用するのに更にいっそう好ましいのは、Ｒ１が、アリール基（例えば、フェニル）で置換されているアルキル基（例えば、Ｃ１−２アルキル、特にＣ１アルキル）を表す式Ｉの化合物である。式Ｉの化合物中に存在し得る好ましい置換されているアルキルＲ１基としては、場合により置換されているアリール基で置換（好ましくは、末端が置換）されているＣ１−６アルキル、好ましくはＣ１−４アルキル、特に好ましくはＣ１又はＣ２アルキル（例えば、Ｃ１アルキル）が挙げられる。
【００３７】
「アリール基」は、芳香族の基を意味する。好ましいアリール基は、最大２０個の炭素原子、より好ましくは最大１２個の炭素原子、例えば１０個又は６個の炭素原子を含む。
【００３８】
本発明の化合物中に存在し得るアリール基は、複素芳香環（例えば、５〜７員複素芳香環）であり得るが、好ましくは、非複素芳香環である。「非複素芳香環」は、炭素原子のみに由来する電子を含む芳香族系を有するアリール基を意味する。好ましいアリール基としては、フェニル及びナフチル、特にフェニルが挙げられる。本発明で使用するのに好ましい化合物では、１個又は２個（好ましくは、１個）のアリール基が存在し得る。
【００３９】
本発明の化合物中に存在し得るアリール基は、１個以上（例えば、１個〜５個）、より好ましくは１個又は２個の基（例えば、１個の基）で場合により置換されていてもよい。好ましくは、アリール基は、メタ又はパラ位、最も好ましくはパラ位で置換されている。適切な置換基としては、ハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）、アルコキシ（すなわち、Ｒが好ましくはＣ１−６アルキル基である−ＯＲ基）、ハロ（例えば、ヨード、ブロモ、より具体的にはクロロ及びフルオロ）、ニトロ及びＣ１−６アルキル（好ましくは、Ｃ１−４アルキル）が挙げられ得る。好ましいＣ１−６アルキル基としては、メチル、イソプロピル及びｔ−ブチル、特にメチルが挙げられる。特に好ましい置換基としては、クロロ及びニトロが挙げられる。更に好ましくは、アリール基は置換されていない。
【００４０】
更に好ましい態様では、本発明は、式Ｉ（式中、Ｒ１は、アリール置換Ｃ１−４アルキル基（好ましくは、Ｃ１−２、例えばＣ１）を表し、好ましくは、前記アリール基は、最大２０個の炭素原子（例えば、最大１２個の炭素原子、特に６個の炭素原子）を含み、それ自体が場合により置換されており、各Ｒ２は、前記のとおりである）の化合物である光増感剤の使用を提供する。
【００４１】
本発明で使用するのに好ましい化合物としては、メチルＡＬＡエステル、エチルＡＬＡエステル、プロピルＡＬＡエステル、ブチルＡＬＡエステル、ペンチルＡＬＡエステル、ヘキシルＡＬＡエステル、オクチルＡＬＡエステル、２−メトキシエチルＡＬＡエステル、２−メチルペンチルＡＬＡエステル、４−メチルペンチルＡＬＡエステル、１−エチルブチルＡＬＡエステル、３，３−ジメチル−１−ブチルＡＬＡエステル、ベンジルＡＬＡエステル、４−イソプロピルベンジルＡＬＡエステル、４−メチルベンジルＡＬＡエステル、２−メチルベンジルＡＬＡエステル、３−メチルベンジルＡＬＡエステル、４−［ｔ−ブチル］ベンジルＡＬＡエステル、４−［トリフルオロメチル］ベンジルＡＬＡエステル、４−メトキシベンジルＡＬＡエステル、３，４−［ジクロロ］ベンジルＡＬＡエステル、４−クロロベンジルＡＬＡエステル、４−フルオロベンジルＡＬＡエステル、２−フルオロベンジルＡＬＡエステル、３−フルオロベンジルＡＬＡエステル、２，３，４，５，６−ペンタフルオロベンジルＡＬＡエステル、３−ニトロベンジルＡＬＡエステル、４−ニトロベンジルＡＬＡエステル、２−フェニルエチルＡＬＡエステル、４−フェニルブチルＡＬＡエステル、３−ピリジニル−メチルＡＬＡエステル、４−ジフェニル−メチルＡＬＡエステル及びベンジル−５−［（１−アセチルオキシエトキシ）−カルボニル］アミノレブリナートが挙げられる。
【００４２】
本発明で使用するのに更にいっそう好ましい化合物としては、メチルＡＬＡエステル、エチルＡＬＡエステル、２−メトキシエチルＡＬＡエステル、ベンジルＡＬＡエステル、４−イソプロピルベンジルＡＬＡエステル、４−メチルベンジルＡＬＡエステル、２−メチルベンジルＡＬＡエステル、３−メチルベンジルＡＬＡエステル、４［ｔ−ブチル］ベンジルＡＬＡエステル、４−［トリフルオロメチル］ベンジルＡＬＡエステル、４−メトキシベンジルＡＬＡエステル、３，４［ジクロロ］ベンジルＡＬＡエステル、４−クロロベンジルＡＬＡエステル、４−フルオロベンジルＡＬＡエステル、２−フルオロベンジルＡＬＡエステル、３−フルオロベンジルＡＬＡエステル、４−ニトロベンジルＡＬＡエステル、２−フェニルエチルＡＬＡエステル、４−フェニルブチルＡＬＡエステル、３−ピリジニル−メチルＡＬＡエステル、４−ジフェニル−メチルＡＬＡエステル及びベンジル−５−［（１−アセチルオキシエトキシ）−カルボニル］アミノレブリナートが挙げられる。
【００４３】
本発明で使用するのに特に好ましい化合物としては、メチルＡＬＡエステル、ヘキシルＡＬＡエステル及びベンジルＡＬＡエステル、特にメチルＡＬＡエステルが挙げられる。
【００４４】
本発明で使用するための化合物は、当技術分野で利用可能な任意の従来の手順（例えば、PhotoCure ASAの国際公開第０２／１０１２０号に記載されている）によって調製され得る。例えば、５−ＡＬＡのエステルは、酸の存在下で、５−ＡＬＡを適切なアルコールと反応させることによって調製され得る。あるいは、本発明で使用するための化合物は、（例えば、Photocure ASA, Norwayから）商業的に入手可能であり得る。
【００４５】
本発明の分野で使用され得る他の光増感剤は、１，１’ビス（２エチル１，３ジオキソラン２イル）クリプトシアニン、３カルボエトキシソラレン、４，４’，６トリメチルアンゲリシン、４’アミノメチル４，５’，８トリメチルソラレン、４’ヒドロキシメチル４，５’，８トリメチルソラレン、５メチルアンゲリシン、アミノレブリン酸ヘキシルエステル、アミノレブリン酸メチルエステル、アモトサレン、アンゲリシン、バクテリオクロリン、ベンゾポルフィリン誘導体、ベルガプテン、クロロアルミニウムフタロシアニン、エチオプルプリン、フィマポルフィン、ガドリニウムテキサフィリン、ヘマトポルフィリン誘導体、ヒポクレリンＡ、ヒポクレリンＢ、レムテポルフィン、ルテチウムテキサフィリン、メロシアニン、メトキサレン、モテキサフィン、ムスクアンブレット、パデリポルフィン、パドポルフィン、フォトフリン、フォトフリンＩ、フォトフリンＩＩ、フタロシアニン、フタロシアニンアルミニウム、フタロシアニン誘導体、フタロシアニン亜鉛、ソラレン、ソラレン誘導体、ロスタポルフィン、タラポルフィン、テモポルフィン、テトラキス（３ヒドロキシフェニル）クロリン、テトラキス（４スルホフェニル）ポルフィン、テトラフェニルポルフィリン、テトラフェニルポルフィリン誘導体、テトラスルホフタロシアニン、テトラスルホフタロシアニンアルミニウム、テトラスルホフタロシアニンクロロアルミニウム、トリメチルソラレン、トリオキシサレン、バーディン誘導体、ベルテポルフィンであり得る。
【００４６】
光活性化
本発明によれば、光活性化は、人工光源又は自然光源のいずれかによって達成される。好ましい実施態様では、光増感剤の光活性化は、ＬＥＤ又は太陽光によって達成される。
【００４７】
浸透促進剤又は前処理
バイオアベイラビリティを改善するために、薬物及び化学物質の浸透を促進するための皮膚浸透促進剤及び皮膚前処理が開発されている。とりわけ、これらの促進剤又は前処理手順の作用の１つは、皮膚バリアの抵抗を軽減することである。これらの浸透促進手順は、機械的前処理、物理的前処理及び化学的前処理として分類され得る。
【００４８】
以下の表は、本発明に従って使用され得るこのような前処理／浸透促進剤の非限定的なリストである。
【表１】
2020002160.tif 000002
【００４９】
光源−人工
エレクトロルミネッセンス（ＥＬ）は、電流の通過又は強力な電場に応じて、材料が光を放出する光学的及び電気的な現象である。これは、熱から生じる黒体発光（白熱）、化学反応（化学ルミネセンス）、音（音ルミネセンス）、又は他の機械的作用（機械ルミネセンス）とは区別される。
【００５０】
エレクトロルミネッセンス源の中でも、ＬＥＤ（発光ダイオード）ランプは周知であり、本発明における人工光源として好ましい。ＬＥＤランプ（ＬＥＤ電球）は、光源として発光ダイオード（ＬＥＤ）を使用する半導体ランプである。関連のＬＥＤは、従来の半導体発光ダイオード、有機ＬＥＤ（ＯＬＥＤ）又は高分子発光ダイオード（ＰＬＥＤ）デバイスであり得る。
【００５１】
後に示す実施例で使用したＬＥＤランプは、波長（nm単位）、ＬＥＤの電力（放射照度mW/cm2単位）、ＬＥＤのエネルギー（J/cm2単位）のようないくつかの特性によって定義される。このような特定の特徴を以下に示す。
【００５２】
光源−自然
本発明のこの態様は、自然太陽光、又は人工太陽光（すなわち、ＵＶからＩＲまでの全範囲）を提供する任意の光源のいずれかによる光活性化を含む。光源としての自然太陽光の使用は、処置される動物が、処置が通常行われる臨床環境を自由に離れることができるという利点を有する。
【００５３】
光源−強度
本発明の使用及び方法では、光活性化は、当技術分野で公知の光源を使用して達成され得る。例えば、ランプ又はレーザーによって異なる身体領域を照射するための方法は、当技術分野で周知である（例えば、Van den Bergh, Chemistry in Britain, May 1986 p. 430-439を参照のこと）。照射に使用される光の波長は、より有効な増感効果を達成するように選択され得る。最も有効な光は、３００〜８００nmの範囲、典型的には４００〜７００nmの範囲内の波長の光である。
【００５４】
好ましくは、人工光による照射は、光線量及びフルエンス率に応じて、１〜３０分間、好ましくは１〜１５分間、より好ましくは５〜１０分間、好ましくは５分間にわたって実施される。単一照射を使用し得るか、又はあるいは光線量を数回分割して（例えば、照射間に１〜１０分間）送達する光分割投与を使用し得る。
【００５５】
自然光による光活性化は、好ましくは、５分間〜４時間の期間、特に２時間の期間にわたって行われる。特定の実施態様では、自然日光ＰＤＴの間、日焼けを避けるために、サンスクリーンを両群の日光曝露領域（処置領域を含む）に適用する。
【００５６】
本発明による皮膚の処置
本発明の方法及び使用は、皮膚の前処理を含み得る。角質層は、皮膚を介した物質の浸透を制限するバリアとして作用するので、前処理（促進剤）の目的は、ターゲット組織への光増感剤の吸収及びそれによるより高い有効性を促すことである。促進剤は、皮膚の機械的、物理的又は化学的な調製、例えば、マイクロダーマブレーション（特に、適合皮膚調製パッド、サンドペーパーによる）、マイクロニードリング、テープストリッピング、パンスクラバー、エクスフォリエーティングスクラブ、コンプレスラビング、低エネルギー送達での非アブレーションレーザー、及び化学的手順、例えば表面ピーリング（レチノイド（トレチノイン、アダパレン、タザロテン）、アゼライン酸、ビタミンＤ３誘導体）を含み得る。例えば、前処理は、皮膚の機械的前処理を含み得る。代表的な機械的処理は、光増感剤の適用前の、キュレッティング、ダーマブレーション（特に、適合サンドペーパーによる）、又はマイクロニードリング（又はマイクロパーフォレーション）を含む。特定の実施態様では、前処理は、適合デバイス、例えばマイクロニードルデバイス、例えばダーマローラーを使用した皮膚のパーフォレーションを含む。
【００５７】
光活性化のための人工光源によるＰＤＴは、痛みを伴う手順であり得るので、多くの場合に特定の疼痛管理が必要であるという事実は、真の問題である。
【００５８】
日光によるＰＤＴは、表皮及び真皮の化学線損傷の全ての兆候に対処する理想的な手順であり、（有意に低い疼痛スコアで化学線角化症を排除して、関連有害事象を少なくするために、日光又は人工光源を使用して、両方の手順の有効性が同じレベルであることを示すいくつかの試験によって実証されているように（Wiegell JEADV 2011））不快感がなく、治療中の疼痛がなく、広い領域を処置する可能性があるように見える。
【００５９】
自然光と合わせた促進剤、例えば上記皮膚前処理、特に機械的前処理の使用、より具体的にはダーマブレーション又はマイクロニードリングの使用、より具体的にはサンドペーパーの使用は、座瘡の処置において優れた効果をもたらし得、副作用が少ない。
【００６０】
本発明の方法及び使用はまた、閉塞ありで又は閉塞なしで、より好ましくは閉塞ありで行われ得る。
【００６１】
光増感剤は、５分間〜４時間、特に１５分間〜３時間、特に３０分間〜２時間の期間にわたって適用され得る。特定の実施態様では、光増感剤は、パルス療法として上記期間、例えば約３０分間の期間にわたって適用され得る。本明細書では、本発明者らは、このようなパルス療法が、長期の曝露を伴う治療と同様に効率的であるが、産生されるＰＰＩＸが少ないので、ＰＰＩＸに関連する副作用を防ぐという利点を有することを示す。
【００６２】
特定の実施態様では、処置は、
（ａ）場合により、適切な前処理、例えばキュレッティング、ダーマブレーション又はマイクロニードリング（マイクロパーフォレーション）、特に適合マイクロニードリングデバイス、例えばダーマローラーによるパーフォレーションによって、処置すべき皮膚領域を調製すること；
（ｂ）前記光増感剤を含む組成物を前記動物に、特に短期間にわたって投与すること；
（ｃ）前記光増感剤を光活性化すること；及び
（ｄ）場合により、光増感剤を除去すること
を含む。
【００６３】
本発明の一実施態様では、動物に対する自然日光の光力学的療法（ＰＤＴ）は、
ａ）場合により、適切な前処理、例えばキュレッティング、ダーマブレーション又はマイクロニードリング（マイクロパーフォレーション）、特に適合マイクロニードリングデバイス、例えばダーマローラーによるパーフォレーションによって、処置すべき皮膚領域を調製すること；
ｂ）前記光増感剤を含む組成物を前記動物に５分間〜２４０分間の期間にわたって投与すること；
ｃ）人工光によって１〜１５分間の期間、又は自然光によって０．５時間〜３時間の期間にわたって、前記光増感剤を光活性化すること；及び
ｄ）場合により、光増感剤を除去すること
を含む。
【００６４】
本発明のより好ましい実施態様では、動物に対する自然日光の光力学的療法（ＰＤＴ）における光増感剤の使用は、
ａ）場合により、適切な前処理、例えばキュレッティング、ダーマブレーション又はマイクロニードリング（マイクロパーフォレーション）、特に適合マイクロニードリングデバイス、例えばダーマローラーによるパーフォレーションによって、処置すべき皮膚領域を調製すること；
ｂ）前記光増感剤を含む組成物を前記動物に１５分間〜１８０分間の期間にわたって投与すること；
ｃ）自然光によって０．５時間〜２時間の期間にわたって、前記光増感剤を光活性化すること；及び
ｄ）場合により、光増感剤を除去すること
を含む。
【００６５】
本発明のより好ましい実施態様では、動物に対する光力学的療法（ＰＤＴ）に使用するための光増感剤は、
ａ）場合により、適切な前処理、例えばダーマブレーション（サンドペーパー）又はマイクロニードリング（マイクロパーフォレーション）、特に適合サンドペーパーデバイス、例えばシリコーンカーバイドサンドペーパーによるダーマブレーションによって、処置すべき皮膚領域を調製すること；
ｂ）前記光増感剤を含む組成物を前記動物に３０分間の期間にわたって投与すること；及び
ｃ）自然光によって少なくとも２時間の期間にわたって、前記を光活性化すること；及び
ｄ）場合により、光増感剤を除去すること
を含む。
【００６６】
上記特定の又は好ましい実施態様のいずれかは、光増感剤を皮膚に適用する工程の前に、上記のように皮膚を機械的に前処理する工程を含み得る。
【００６７】
別の態様によれば、本発明は、上記前処理を行うためのデバイスと、上記光増感剤を含む組成物とを含むキットに関する。このキットは、本発明の方法及び使用を行うのに有用である。特定の実施態様では、前記キットは、適合サンドペーパー又は適合マイクロパーフォレーションデバイス、例えばダーマローラーと、ＡＬＡ又はＡＬＡのエステル、例えばメチルＡＬＡエステル、ヘキシルＡＬＡエステル及びベンジルＡＬＡエステル、特にメチルＡＬＡエステルを含む組成物とを含む。加えて、本発明のキットは、サンスクリーンを含み得る。本発明のキットは、本発明の方法及び使用を行うために従うべき説明書を更に含み得る。
【図面の簡単な説明】
【００６８】
【図１】図１は、顔における炎症とＡＫ反応率（３カ月間）との対比を示すグラフである。
【図２】図２は、ＰＤＴの翌日における赤みの平均増加を示すグラフである。
【図３】図３は、異なる処置プロトコールによるＰＤＴの翌日の目視による赤みを報告するグラフである。
【図４】図４は、異なる処置後の疼痛スケールを示すグラフである。
【図５】図５は、異なる処置後の治癒率を示すグラフである。
【図６】図６は、異なるプロトコールによる処置の翌日の紅斑の割合の増加を示すグラフである。
【図７】図７は、異なるプロトコールによる処置後の紅斑のスケールを示すグラフである。
【図８】図８は、標準的な処置及び異なる「パルス」処置における平均光退色を示すグラフである。
【図９】図９は、炎症（紅斑）／ＰｐＩＸ形成の関係を示すグラフである。
【図１０】図１０は、ＩＭＰ及び前処理による４０５nmにおける蛍光の値を示すグラフである。
【図１１】図１１は、ＩＭＰ及び前処理による６３２nmにおける蛍光の値を示すグラフである。
【図１２】図１２は、閉塞及び前処理による詳細なＴＥＷＬを示すグラフである。
【実施例】
【００６９】
実施例１−光増感剤の皮膚浸透に関する機械的浸透促進剤の比較
製品の皮膚浸透に対する異なる機械的浸透促進技術（閉塞、マイクロニードル、アブレーションフラクショナルレーザー）の効果を評価した。
【００７０】
以下のプロトコールにしたがって、健常志願者１０人を処置した：
−マイクロニードル（ダーマローラー）若しくはアブレーションフラクショナルレーザー（CO2 laser fraxel repair (SOLTA)）による前処理、又は前処理なし；
−Ｍｅｔｖｉｘの適用；
−閉塞ありで又は閉塞なしで３時間のインキュベーション。
−インキュベーション中、製品適用の３０分間後、１時間後、２時間後及び３時間後に、ＰｐＩＸの光蛍光の測定を使用して、浸透を定量した。
【００７１】
青色（４０５nm）（図１０を参照のこと）及び赤色（６３２nm）（図１１を参照のこと）の光蛍光によって測定したところ、ダーマローラー及びレーザーは両方とも、閉塞なしで前処理なしの場合及び閉塞ありで前処理なしの場合と比較して、皮膚の表面及び深部におけるＭｅｔｖｉｘの浸透を同様に増加させた。
【００７２】
３時間前において、閉塞の有無で差は観察されなかった。
【００７３】
加えて、経表皮水分喪失量を測定することによって観察したところ、レーザー前処理は、ダーマローラーよりも痛みを伴って刺激性であり、レーザー前処理は、皮膚のバリア機能の低下に対してより影響を及ぼすことが見出された（図１２を参照のこと）。
【００７４】
したがって、本発明者らは、驚くべきことに、マイクロニードルデバイス等のデバイスによる機械的前処理が、製品の皮膚浸透を増加させるためにレーザー前処理と同様に効率的であるが、有害事象が少ないので、座瘡のＰＤＴ処置により適していることを示した。
【００７５】
実施例２−ＰＤＴにおける炎症を最小限にするためのＰＤＴ手順の変更
前記理論によれば、ＰＰＩＸ及び細胞酵素を細胞外区画から遠ざけて炎症を防ぐことが好ましいであろう。したがって、このプロジェクトの目的は、ミトコンドリア内のＰＰＩＸ形成を維持し、過剰量のＰＰＩＸの形成を防ぐことである。同時に、ほとんどの異常細胞が影響を受けるような長時間にわたって、ＰＰＩＸが形成されることを可能にするはずである。
【００７６】
したがって、ＰＤＴの目的は、好ましくはアポトーシスによって、異常細胞を殺すことである。理想的な状況は、ＰＰＩＸを細胞内に維持し、ミトコンドリアのみを破壊して、細胞機能に必要なＡＴＰ形成を阻害することであろう。それは、アポトーシスによる細胞死をもたらすはずである。
【００７７】
これを達成するための１つの可能な方法は、最初に、短時間にわたる５−ＭＡＬパルス処置を行って細胞内の５−ＭＡＬを高濃度にし、次いで、皮膚表面から５−ＭＡＬを除去することによって、５−ＭＡＬへの更なるアクセスを減らすことであろう。
【００７８】
皮膚表面から全ての５−ＭＡＬを除去することにより、皮膚を５−ＭＡＬに短時間曝露することのみによって、これを行うことができる。正しい「パルス時間」を見出し得る場合、それは、高い細胞ＰＰＩＸ及び低い細胞外ＰＰＩＸを保証し得る。したがって、処置中及び処置終了後における過剰量のＰＰＩＸ形成は回避されるであろう。
【００７９】
この結果は、炎症が少なく、有効性が不変であることを示しており、したがって、ミトコンドリアの破壊は、ＰＤＴにおける最も重要な因子であると思われる。
【００８０】
好ましいＭｅｔｖｉｘ「パルス時間」を推定するために、健常志願者２４人について、別の調査を実施した（方法Ｂ）。パルス時間は、２０分間、４０分間、６０分間及び従来の１８０分間であり、この後、皮膚から過剰量のＭｅｔｖｉｘを除去した。３時間後のＰＰＩＸ形成は図８に見られ、炎症との関係は図９に見られる。ＰＰＩＸ濃度は、「パルス曝露」の２０〜４０分間に上昇することがわかるので、本発明者らは、この方法変更によって、有効性及び炎症に関する以下の（方法Ａの）調査において、最小「パルス曝露」時間として３０分間を選択した。結果を、図４、５、６及び７のカラム３に示す。手順の変更は、治癒率に影響を与えずに、炎症（紅斑）を明らかに軽減する（図５）。疼痛レベルは変化しない。ＰＰＩＸ濃度は、Ｍｅｔｖｉｘへの従来の３時間曝露よりも明らかに低い（図８）。
【００８１】
方法
健常志願者
スカンジナビア人系統の健常男性志願者２４人を本研究に含めた（平均年齢３０歳、２０〜５１歳の範囲）。志願者の両方の前腕の内側において、処置領域を選択した。既製の柔軟なテンプレートを使用して、各処置領域を２×５cmサイズの４つの小さな処置部位（各部位間は少なくとも３cm）に分割した。皮膚病変を模倣するために、処置前に、閉鎖包帯によって、全ての部位を１０回テープストリッピングした（Tegaderm（商標）Roll, 3M, Glostrup, Denmark）。
【００８２】
左前腕において、ビヒクル軟膏Ｍを処置部位に適用した。
【００８３】
右前腕において、過剰量の５−ＭＡＬ  １６％（Metvix（登録商標）Photocure, Oslo, Norway）を４つの処置部位すべてに適用した。遮光性閉鎖包帯によって、全ての部位を覆った。２０分後、第１の部位から包帯を除去し、過剰のクリームを軽く拭き取った。薄いガーゼ片及び遮光性包帯によって、この部位を再び覆った。更に２０分後及び４０分後、同じ手順を第２及び第３の部位に行った。適用の１８０分後、５つの部位全てから５−ＭＡＬ及びビヒクルを除去し、最後の部位から過剰のクリームを軽く拭き取った。赤色光を全ての部位に照射した。９分間かけて３７J/cm2の全光線量を使用して、赤色ＬＥＤ光６３０nmピーク（Aktilite（商標）128; Photocure ASA, Oslo Norway）によって、照射を実施した。照射中及び照射後に、疼痛を記録した。処置後の日々における疼痛を記録するための特別な日記を志願者に配布した。処置後１日目、２日目、３日目及び８日目に、４回の経過観察来院を実施した。
【００８４】
ＰｐＩＸ蛍光
蛍光カメラ（Medeikonos AB, Gothenburg, Sweden）を使用して、５−ＭＡＬ誘導性ＰｐＩＸ蛍光を非侵襲的に示した。プログラムMatLab（登録商標）（MatLab（登録商標）, MathWorks, Natic, US）によって、写真からＰｐＩＸ蛍光の量を計算した。テープストリッピング及びクリーム適用（ベースライン）前に、並びに照射前後に、蛍光の量を測定した。
【００８５】
よって、光退色は、照射前後の画像から計算したＰｐＩＸ蛍光（ＡＵ）の差である。
【００８６】
紅斑及び色素沈着
炎症の指標として、紅斑を測定した。専門の評価者が紅斑を評価し、客観的に測定した。皮膚反射率計（Optimize Scientific 558, Chromo-Light, Espergaerde, Denmark）を使用して、紅斑及び色素沈着の客観的測定を実施した。処置前、照射直前、照射直後、及び４回の経過観察来院時に、紅斑％及び色素沈着％を測定した。
【００８７】
疼痛スコア
志願者は、照射中には１分ごとに疼痛をスコア化し、処置日の照射後には１時間ごとに日記に疼痛を記録し、その後３日間は１日２回記録し、その後５日間は１日１回記録した。その日の異なる時点でＰＤＴを実施したので、評価の回数は、初日で３〜１１回と異なっていた。０〜１０の範囲の数値スケール（０は疼痛なしであり、１０は考えられる最悪の疼痛である）を使用して、疼痛を評価した。患者が異なる処置部位を識別することを容易にするために、番号付けした前記部位の図を日記に加えた。
【００８８】
無作為化
無作為化非盲検試験として研究を設計した。統計アドバイザーが無作為化を行った。処置期間のシークエンスは事前に定義されていたので、無作為化は、４つの処置部位のうちのどれが第１の部位であるかを決定したにすぎなかった。
【００８９】
統計
文献のデータに基づいて、サンプルサイズを計算した。本発明者らは、最小臨床関連差を８．８％（以前に見出された１７．６％の５０％）に設定し、検出力０．８０及び有意水準０．０５を選択し、志願者２２人が含まれるべきである。
【００９０】
全ての結果をペアにしたので、処置部位間の疼痛スコア、紅斑％及び色素沈着％の差を確認するために、本発明者らは、ウィルコクソンの符号順位検定を使用した。全ての計算について、０．０５未満のｐ値を統計的有意とみなした。Windows用のPASW Statistics 19.0 (SPSS Inc, Chicago, Illinois, USA)を用いて、全ての分析を実施した。
【００９１】
実施例３−中程度から重度の座瘡を有する被験体における、日光（ＤＬ）ＰＤＴにおける５−ＭＡＬの有効性の評価
１．研究目的及び臨床仮説
研究目的：
本研究の主な目的は、無作為化比較治験責任医師盲検研究デザインを使用して、中程度から重度の顔面尋常性座瘡を有する患者における、ＤＬ  ＰＤＴと組み合わせた５−ＭＡＬクリームの、そのビヒクルと比較した有効性を評価することである。
【００９２】
本研究の第２の目的は、ＣＤ０６８０９−４１クリームの局所耐性を評価することである。
【００９３】
臨床仮説：
研究の仮説は、５−ＭＡＬは、ＤＬ−ＰＤＴと組み合わせた場合に、中程度から重度の座瘡において、そのビヒクルよりも有効であるというものである。本研究では、ＤＬ−ＰＤＴと組み合わせた５−ＭＡＬは、炎症性病変（これは、中程度から重度の座瘡の主な症候である）の総数を減少させ、伴う疼痛も少ないと予想される。
【００９４】
２．研究デザイン
これは、予備的、単一施設、無作為化、プラセボ比較、治験責任医師盲検、個人内（左右比較）研究であり、中程度から重度の座瘡を有し、特定の包含／除外基準を満たす被験体約１６人が参加する。
【００９５】
本研究は、以下から構成される：
・妊娠の可能性がある女性であって、スクリーニング来院と１日目来院（ベースライン）との間に最低２週間を要する者を除いて、最大４週間のスクリーニング期間（ベースライン前の３〜３０日以内）；
・在宅医療用ダーマローラー（予想される穴深さ約０．２mm）を使用して前処理した皮膚に対して、５−ＭＡＬを各被験体の顔の片側に投与し、ビヒクルを反対側に投与するＤＬ−ＰＤＴによる処置セッション。
・３カ月間の経過観察期間（エンドポイント）、及びＤＬ−ＰＤＴによる任意の第２のセッション（５−ＭＡＬクリームによって処理した顔の側にプラセボを投与する、逆もまた同様）。
・１週間の経過観察期間。
【００９６】
第２の処置セッションは必須ではない：それは、治験責任医師の判断に従って、それを要求する被験体に対してのみ実施される。
【００９７】
３．結果
以下の表に示されているように、Ｍｅｔｖｉｘ（５−ＭＡＬ、あるいは、Ｍｅｔｖｉｘｉａと称される）によるＤＬ−ＰＤＴ処置領域における座瘡病変（炎症性及び非炎症性）は、プラセボと比較して良好な結果を示し、非炎症性病変に関して、３カ月までに漸進的な退縮が観察された。ベースラインからの減少は、炎症性病変については、処置の１カ月後において約５９％であり、非炎症性病変については、３カ月間の経過観察時において５６％であった。全病変の減少は、約５０％であった。
【表２】
2020002160.tif 000003
【表３】
2020002160.tif 000004
【表４】
2020002160.tif 000005
【図１】
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【図２】
2020002160.tif 000007
【図３】
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【図４】
2020002160.tif 000009
【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
2020002160.tif 000013
【図９】
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【図１０】
2020002160.tif 000015
【図１１】
2020002160.tif 000016
【図１２】
2020002160.tif 000017
【手続補正書】
【提出日】令和1年10月1日(2019.10.1)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
明細書に記載された発明。
【外国語明細書】
2020002160000001.pdf