(57)【要約】【課題】マイクロチップ内において効率よく粒子を分取することができる技術を提供する。【解決手段】マイクロチップ内に設けられた流路を通流する粒子に、前記流路の第一位置で第一光ビームを照射し、前記流路の第二位置で第二光ビームを照射する光照射部と、前記第一光ビームを照射することより前記粒子から発する第一の光と前記第二光ビームを照射することより前記粒子から発する第二の光を検出する光検出部と、前記流路と連通し、アクチュエータ駆動より圧力変化する圧力変化部を有する分取部と、前記第一の光と前記第二の光の検出時間差に基づく前後の粒子が前記分取部に到達する時間差と、分取モードに基づいて、前記粒子は分取対象であるか否かを判定し、前記判定の結果に基づいて、前記アクチュエータを制御する分取制御部と、を有する、粒子分取装置を提供する。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
マイクロチップ内に設けられた流路を通流する粒子に、前記流路の第一位置で第一光ビームを照射し、前記流路の第二位置で第二光ビームを照射する光照射部と、
前記第一光ビームを照射することより前記粒子から発する第一の光と前記第二光ビームを照射することより前記粒子から発する第二の光を検出する光検出部と、
前記流路と連通し、アクチュエータ駆動より圧力変化する圧力変化部を有する分取部と、
前記第一の光と前記第二の光の検出時間差に基づく前後の粒子が前記分取部に到達する時間差と、分取モードに基づいて、前記粒子は分取対象であるか否かを判定し、前記判定の結果に基づいて、前記アクチュエータを制御する分取制御部と、
を有する、粒子分取装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本技術は、粒子分取装置及び粒子分取方法に関する。より詳しくは、光学的手法などにより分析した結果に基づいて粒子を分別して回収する技術に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、細胞、微生物及びリポソームなどの生体関連粒子の分析には、フローサイトメトリー（フローサイトメーター）を用いた光学的測定方法が利用されている。フローサイトメーターは、フローセルやマイクロチップなどに形成された流路内を通流する粒子に光を照射し、個々の粒子から発せられた蛍光や散乱光を検出して、分析する装置である。
【０００３】
フローサイトメーターには、分析結果に基づいて、特定の特性を有する粒子のみを分別して回収する機能を備えたものもあり、特に細胞を分取対象とした装置は「セルソータ」と呼ばれている。セルソータの分取方式としては、主に、粒子を含む液滴を帯電させて分離する液滴荷電方式が採用されている（例えば、特許文献１参照。）。液滴荷電方式の装置では、フローセルやマイクロチップなどから排出される流体を液滴化して、その液滴にプラス（＋）又はマイナス（−）の電荷を付与し、偏向板などにより進行方向を変更することで所定の容器に回収する。
【０００４】
しかしながら、液滴荷電方式などの液滴を形成する分取方式は、測定環境の変化や液圧変動の影響を受けやすいという問題がある。そこで、従来、マイクロチップ内で分取を行う粒子分取装置も提案されている（特許文献２参照）。この特許文献２に記載の粒子分取装置は、回収対象の粒子をマイクロチップ内の負圧吸引部に吸引して分取するため、液滴化や荷電が不要であり、粒子にダメージを与えることなく、高速でかつ安定して分取を行うことができる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００９−１４５２１３号公報
【特許文献２】特開２０１２−１２７９２２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
従来の粒子分取装置では、一般に、光検出部での検出時間から一定時間後に回収対象の粒子の取得動作を行うよう制御されている。そして、検出から取得までの時間は、液圧や検出位置から分取位置までの距離などに基づいて、予め設定されている。しかしながら、このように到達時間を固定した制御方法は、粒子の通流速度が変動すると、回収物の純度や取得率が低下するという問題がある。
【０００７】
一方、特許文献１に記載の装置では、粒子の通流速度の変動による純度低下を防止するため、粒子毎に移動速度を検出し、その移動速度に基づいて各粒子に電荷を付与するタイミングを制御している。しかしながら、荷電液滴方式の場合、各粒子がどの液滴に属するかのみ判断すればよいが、マイクロチップ内で分取を行う装置の場合、近接する粒子それぞれの属性に加え、流体機構的特性を考慮する必要がある。ここで、「粒子の属性」とは、その粒子が分取対象の粒子か否かなどであり、「流体機構的特性」とは、取得動作のパルス信号の立ち上がり時に発生する逆流などである。
【０００８】
また、荷電液滴方式では液滴に対して制御を行うが、特許文献２に記載されているようなマイクロチップ内で分取を行う装置では、個々の粒子に対して制御を行う必要がある。更に、荷電液滴方式と、マイクロチップ内で分取する方式とでは、取得位置に達するまでの経路や、粒子の到達に影響を与える因子が異なる。以上の理由から、特許文献１に記載の技術を、マイクロチップ内で分取を行う特許文献２に記載の装置に、単純に適用することはできない。
【０００９】
そこで、本開示は、マイクロチップ内において効率よく粒子を分取することができる粒子分取装置及び粒子分取方法を提供することを主目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本開示に係る粒子分取装置は、マイクロチップ内に設けられた流路を通流する粒子に、前記流路の第一位置で第一光ビームを照射し、前記流路の第二位置で第二光ビームを照射する光照射部と、前記第一光ビームを照射することより前記粒子から発する第一の光と前記第二光ビームを照射することより前記粒子から発する第二の光を検出する光検出部と、前記流路と連通し、アクチュエータを有する分取部と、前記第一の光と前記第二の光の検出時間差と、分取モードに基づいて、前記粒子は分取対象であるか否かを判定し、前記判定の結果に基づいて、前記アクチュエータを制御する分取制御部と、を有する。
前記アクチュエータは、前記判定の結果に基づいて、分取対象である前記粒子と分取対象でない前記粒子の回収先を変更してもよい。この場合、前記分取部は、前記流路に連通する吸引流路と吸引部により構成されていてもよい。また、この場合、前記アクチュエータは、前記吸引部の体積を任意のタイミングで拡張可能であってもよく、前記変更は、前記吸引部の体積を拡張したことに基づいていてもよい。更に、この場合、前記吸引部の体積を拡張したことにより吸引部に負圧を生成してもよい。
前記分取モードは、ユーザーにより選択可能であってもよい。
また、前記分取モードは、純度を優先した純度優先モード、又は取得率を優先した取得率優先モードのいずれかであってもよい。
前記第二光ビームは、前記第一光ビームと波長が異なっていてもよく、同じであってもよい。
本開示に係る粒子分取装置は、前記第一の光と前記第二の光の検出時間差から、前記粒子が前記分取部に到達する時間を算出する算出部、を更に有していてもよい。この場合、前記分取制御部は、前記光検出部で検出されたデータと、前記算出部で算出された前記時間に基づいて、前記アクチュエータを制御してもよい。また、この場合、前記算出部は、前記検出時間差から、前後の粒子が前記分取部に到達する到達時間差を算出してもよい。
前記粒子は、生体関連粒子であってもよい。
本開示に係る粒子分取装置は、前記粒子を含むサンプル液が導入されるサンプル液導入流路と、シース液が導入される１対のシース液導入流路と、を更に有していてもよい。
前記光検出部は、ＰＭＴ（Photo Multiplier Tube）、ＣＣＤ、及びＣＭＯＳ素子からなる群より選ばれるいずれか１以上のエリア撮像素子から構成されていてもよい。
前記光検出部では、前方散乱光、側方散乱光、レイリー散乱光、及びミー散乱光からなる群より選ばれるいずれか１以上の光を検出してもよい。
【００１１】
本開示に係る粒子分析システムは、マイクロチップ内に設けられた流路を通流する粒子に、前記流路の第一位置で第一光ビームを照射し、前記流路の第二位置で第二光ビームを照射する光照射部と、前記第一光ビームを照射することより前記粒子から発する第一の光と前記第二光ビームを照射することより前記粒子から発する第二の光を検出する光検出部と、前記流路と連通し、アクチュエータを有する分取部と、を有する粒子分取装置と、前記第一の光と前記第二の光の検出時間差と、分取モードに基づいて、前記粒子は分取対象であるか否かを判定し、前記判定の結果に基づいて、前記アクチュエータを制御する分取制御部、を有する、制御装置と、を有する。
また、本開示に係る粒子分取方法は、マイクロチップ内に設けられた流路を通流する粒子に、前記流路の第一位置で第一光ビームを照射し、前記流路の第二位置で第二光ビームを照射する光照射工程と、前記第一光ビームを照射することより前記粒子から発する第一の光と前記第二光ビームを照射することより前記粒子から発する第二の光を検出する光検出工程と、前記流路と連通し、アクチュエータを有する分取部に基づく分取工程と、前記第一の光と前記第二の光の検出時間差と、分取モードに基づいて、前記粒子は分取対象であるか否かを判定し、前記判定の結果に基づいて、前記アクチュエータを制御する分取制御工程と、を行う。
【発明の効果】
【００１２】
本開示によれば、分取制御部で、光検出部で検出された各粒子のデータと、到達時間算出部で算出された到達時間に基づいて、粒子を回収するか否かを判断しているため、粒子の取得性能を向上させることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】本開示の第１の実施形態に係る粒子分取装置の構成を模式的に示す図である。
【図２】図１に示す光検出部７での検出データを示す図である。
【図３】本開示の第１の実施形態の変形例に係る粒子分取装置の到達時間算出部８及び分取制御部９の回路構成を示すブロック図である。
【図４】Ａ及びＢは図３に示すイベント検出回路での処理を示す図である。
【図５】Ａ及びＢは図３に示すゲーティング回路での距離を示す図である。
【図６】取得優先モードの動作を示す図である。
【図７】Ａ及びＢは粒子が近接している場合の検出データを示す図である。
【図８】純度優先モードの動作を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本開示を実施するための形態について、添付の図面を参照して詳細に説明する。
なお、本開示は、以下に示す各実施形態に限定されるものではない。また、説明は、以下
の順序で行う。
１．第１の実施の形態
（分取制御部を備える粒子分取装置の例）
２．第１の実施の形態の変形例
（モード切り替え機能を備える粒子分取装置の例）
【００１５】
＜１．第１の実施の形態＞
先ず、本開示の第１の実施形態に係る粒子分取装置について説明する。図１は本開示の第１の実施形態の粒子分取装置の概略構成を示す図である。また、図２は光検出部７での検出データを示す図である。
【００１６】
［装置の全体構成］
図１に示すように、本実施形態の粒子分取装置は、光学的手法などにより分析した結果に基づいて粒子１０を分別して回収するものである。この粒子分取装置は、例えば、流路１、分取部２、励起光照射部３、速度検出用光照射部４、光検出部７、到達時間算出部８及び分取制御部９などを備えている。
【００１７】
［粒子１０について］
本実施形態の粒子分取装置により分析され、分取される粒子１０には、細胞、微生物及びリボゾームなどの生体関連粒子、又はラテックス粒子、ゲル粒子及び工業用粒子などの合成粒子などが広く含まれる。
【００１８】
生体関連粒子には、各種細胞を構成する染色体、リボゾーム、ミトコンドリア、オルガネラ（細胞小器官）などが含まれる。また、細胞には、植物細胞、動物細胞及び血球系細胞などが含まれる。更に、微生物には、大腸菌などの細菌類、タバコモザイクウイルスなどのウイルス類、イースト菌などの菌類などが含まれる。この生体関連粒子には、核酸や蛋白質、これらの複合体などの生体関連高分子も包含され得るものとする。
【００１９】
一方、工業用粒子としては、例えば有機高分子材料、無機材料又は金属材料などで形成されたものが挙げられる。有機高分子材料としては、ポリスチレン、スチレン・ジビニルベンゼン、ポリメチルメタクリレートなどを使用することができる。また、無機材料としては、ガラス、シリカ及び磁性材料などを使用することができる。金属材料としては、例えば金コロイド及びアルミニウムなどを使用することができる。なお、これら粒子の形状は、一般には球形であるが、非球形であってもよく、また大きさや質量なども特に限定されない。
【００２０】
［流路１］
流路１は、マイクロチップ内に形成されており、分取対象とする粒子１０を含む液体（サンプル液）が導入される。ここで、流路１を備えるマイクロチップは、ガラスや各種プラスチック（ＰＰ、ＰＣ、ＣＯＰ、ＰＤＭＳなど）により形成することができる。また、マイクロチップの材質は、励起光照射部３及び速度検出用光照射部４から照射される光に対して透過性を有し、自家蛍光が少なく、波長分散が小さいために光学誤差が少ない材質とすることが望ましい。
【００２１】
一方、流路１の成形は、ガラス製基板のウェットエッチングやドライエッチングによって、またプラスチック製基板のナノインプリントや射出成型、機械加工によって行うことができる。そして、マイクロチップは、例えば流路１などを成形した基板を、同じ材質又は異なる材質の基板で封止することで形成することができる。
【００２２】
なお、図１には、流路１における励起光や速度検出用光が照射される部分のみを示しているが、これより上流側に、粒子１０を含むサンプル液が導入されるサンプル液導入流路と、シース液が導入される１対のシース液導入流路が設けられていてもよい。この場合、シース液導入流路は、サンプル液導入流路に両側から合流し、その合流点よりも下流側に流路１が設けられる。そして、流路１内においては、サンプル流の周囲をシース流で囲み、層流を形成した状態で液が通流し、サンプル液中の粒子１０は、その通流方向に対して略１列に並んで通流する。
【００２３】
［分取部２］
分取部２は、回収対象の粒子１０を分取するものであり、マイクロチップ内に形成されている。この分取部２は、流路１の下流側端部に連通し、吸引流路２１及び負圧吸引部２２などで構成されている。負圧吸引部２２は、所定のタイミングで回収対象の微小粒子を吸引することができれば、その構成は特に限定されるものではないが、例えば、アクチュエータ（図示せず）などにより、負圧吸引部２２の体積を任意のタイミングで拡張可能な構成とすることができる。
【００２４】
［励起光照射部３］
励起光照射部３には、レーザ光などの励起光を発生する光源３１と、スポット形状を成形する光学系３２、ミラー３３などが設けられている。そして、例えばマイクロチップ内に形成された流路１内を通流する粒子１０に励起光を照射する。なお、図１には光源３１が１個の場合を例に示しているが、本開示はこれに限定されるものではなく、２以上の光源３１が設けられていてもよく、その場合、各光源３１から異なる波長の光を出射してもよい。
【００２５】
［速度検出用光照射部４］
速度検出用光照射部４には、速度検出用光を発生する光源４１と、スポット形状を成形する光学系４２、ミラー４３などが設けられている。そして、例えばマイクロチップ内に形成された流路１内を通流する粒子１０に、前述した励起光とは異なる位置で速度検出用光を照射する。この速度検出用光は、励起光と同じ波長の光としてもよいが、装置構成の簡素化の観点から、励起光と波長が異なる光を用いることが好ましい。
【００２６】
［光検出部７］
光検出部７は、流路１を通流する粒子１０から発生する光（散乱光・蛍光など）を検出するものであり、０次光除去部材７１、ミラー７２ａ〜７２ｄ、光検出器７３ａ〜７３ｄなどで構成されている。光検出器７３ａ〜７３ｄには、例えばＰＭＴ（Photo Multiplier Tube）や、ＣＣＤやＣＭＯＳ素子などのエリア撮像素子を用いることができる。
【００２７】
光検出部７では、例えば、光検出器７３ａで励起光に由来する前方散乱光を、光検出器７３ｂで速度検出用光に由来する散乱光を、光検出器７３ｃ，７３ｄで蛍光を、それぞれ検出する。なお、光検出部７での検出対象光はこれらに限定されるものではなく、側方散乱光、レイリー散乱やミー散乱などを検出してもよい。そして、光検出部７で検出された光は、電気信号に変換される。
【００２８】
［到達時間算出部８］
励起光に由来する光と速度検出用光に由来する光の検出時間差から、各粒子１０が流路に連通する分取部２に到達する時間を個別に算出する。到達時間の算出方法は、特に限定されるものではないが、例えば、図２に示すように、光検出部７で検出された励起光に由来する前方散乱光（Ｃｈ１のデータ）と、速度検出用光に由来する前方散乱光（Ｃｈ２のデータ）の検出時間差から各粒子１０の到達時間を算出する。
【００２９】
ここで、分取部２への到達時間は、例えば、下記数式１に示す単純な線形近似式により算出することができる。なお、下記数式１におけるＬ１は励起光照射位置と速度検出用光照射位置との距離、Ｌ２は速度検出用光照射位置から分取部２の吸引流路２１までの距離である（図１参照）。また、下記数式１におけるＴ１は励起光に由来する光の検出時間であり、Ｔ２は速度検出用光に由来する光の検出時間であり、（Ｔ１−Ｔ２）はこれらの検出時間差である（図２参照）。
【００３０】
【数１】
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【００３１】
なお、分取部２への到達時間の算出方法は、上記数式１に示す線形計算方法に限定されるものではなく、多項式近似やルックアップテーブルなど、他の算出方法を用いてもよい。
【００３２】
［分取制御部９］
分取制御部９は、粒子１０の分取を制御するものであり、光検出部７で検出された各粒子１０のデータと、到達時間算出部８で算出された到達時間に基づいて、粒子１０を回収するか否かを判断する。この分取制御部９では、例えば、前後の粒子１０の到達時間差を算出し、算出された到達時間差が予め設定された閾値以下の粒子は、「非回収」と判断する。これにより、粒子１０が近接して通流している場合に、回収対象の粒子の前後の粒子を巻き込んで取得してしまうことを防止できる。
【００３３】
また、分取制御部９は、前述した判断結果に基づいて、例えば、負圧吸引部２２の動作を制御するなどして、分取部２に粒子１０を回収するタイミングを制御する。これにより、目的とする粒子の取得精度を向上させ、純度や取得率が高い分取を行うことが可能となる。
【００３４】
［動作］
次に、本実施形態の粒子分取装置の動作について説明する。本実施形態の粒子分取装置により粒子を分取する際は、マイクロチップ内に設けられたサンプルインレットに、分取対象の粒子を含むサンプル液が、シースインレットにシース液が、それぞれ導入される。そして、流路１を通流する粒子１０に励起光を照射すると共に、励起光とは異なる位置で粒子１０に速度検出用光を照射する。このとき、図１に示すように、励起光及び速度検出用光が１つの集光レンズ５によって集光され、粒子１０に照射されてもよいが、それぞれ別の集光レンズで集光されてもよい。
【００３５】
次に、検出部７において、各粒子１０から発せられた光を検出し、到達時間算出部８において、励起光に由来する光と速度検出用光に由来する光の検出時間差から、分取部２に各粒子１０が到達する時間を、個別に算出する。このとき、図１に示すように、励起光に由来する光及び速度検出用光に由来する光が、１つの集光レンズ６によって集光され、検出部７の０次光除去部材７１に集光されてもよいが、それぞれ別の集光レンズで集光されてもよい。
【００３６】
その後、分取制御部９において、検出部７で検出された各粒子１０の光学特性データと、到達時間算出部８で算出した分取部２への到達時間とから、粒子１０を回収するか否かを判断する。そして、その判断結果に基づいて、分取制御部９は、分取部２に粒子１０を回収するタイミングを制御する。例えば、分取部２が流路１に連通する負圧吸引部２２を有する場合は、分取制御部９は、負圧吸引部２２に設けられたアクチュエータなどの動作を制御する。
【００３７】
以上詳述したように、本実施形態の粒子分取装置では、個々の粒子について、分取部への到達時間を算出し、各粒子の光学特性データだけでなく、分取部への到達時間も考慮して、粒子を回収するか否かを判断している。これにより、粒子の通流位置や通流状態にかかわらず、高純度又は高取得率で、粒子を分取することが可能となる。その結果、従来の粒子分取装置に比べて取得性能を向上させることができる。
【００３８】
また、本実施形態の粒子分取装置は、個々の粒子について到達時間を算出しているため、環境温度変化や供給タンク残量などによる流量変化の影響を受けにくい。これにより、流量制御を高精度に行う必要がなくなるため、低価格の圧力制御デバイスを採用することができ、流路部品管理や組立精度管理を簡素化することが可能となり、製造コストを低減することができる。
【００３９】
＜２．第１の実施の形態の変形例＞
次に、本開示の第１の実施形態の変形例に係る粒子分取装置について説明する。本変形例の粒子分取装置では、回収するか否かを判断する際に、「純度」を優先するか、「取得率」を優先するかを、ユーザーが選択可能となっている。
【００４０】
図３は本変形例の粒子分取装置の到達時間算出部８及び分取制御部９の回路構成を示すブロック図である。また、図４Ａ及び図４Ｂはイベント検出回路での処理を示す図であり、図５Ａ及び図５Ｂはゲーティング回路での距離を示す図である。「純度優先モード」又は「取得率優先モード」での分取は、例えば、図３に示す構成の回路で実現することができる。
【００４１】
［イベント検出回路］
イベント検出回路は、Ｃｈ１及びＣｈ２の検出信号でトリガーをかけて各Ｃｈの波形を読み込み、図４Ａに示す幅、高さ、面積を計算する。そして、励起光に由来する前方散乱光に関するＣｈ１の検出データと、速度検出用光に由来する前方散乱光に関するＣｈ２の検出データについては、波形中心の時間を計算し、検出時間とする。
【００４２】
そして、図４Ｂに示すように、イベント検出回路では、各粒子１０について、時系列に取得されるＣｈ１（励起光に由来する前方散乱光）及びＣｈ２（速度検出用光に由来する前方散乱光）の検出信号を関連付け、各粒子の検出データ（イベント）をパケット化する。パケットは、以降の処理が進むにつれ更新される項目を含み、Ｆｌａｇは基本的に１／０で、各ロジックで判断する取得／非取得に対応する。なお、検出時間は、Ｃｈ１及びＣｈ２のトリガー時間を使用することもできる。
【００４３】
［到達時間計算回路］
到達時間計算回路は、Ｃｈ１及びＣｈ２の検出時間（Ｔ１,Ｔ２）を使用して、上記数式１などから到達時間を算出し、それを、イベントパケットの”Sorting Time”とする。
【００４４】
［ゲーティング回路］
ゲーティング回路は、予め設定した閾値に基づいて、粒子１０の「取得／非取得」を判断し、イベントパケットの”Gate Flag”を設定する。例えば、ゲーティング取得動作開始前に、制御用コンピュータ上のＧＵＩなどで、図５Ａに示すヒストグラムチャートや、図５Ｂに示す２Ｄチャートなどをプロットし、取得する粒子の集団（目的とする特性を持つ粒子集団）を例えば幾何形状などで括り、指定する。
【００４５】
なお、「取得／非取得」を判断するパラメータ（閾値）は、各Ｃｈで取得された検出データの幅、高さ及び面積のいずれでもよく、これらを組み合わせてもよい。
【００４６】
［出力待ち行列回路］
出力待ち行列回路は、各粒子１０の検出データ（イベント）を、分取部到達時間（”Sorting Time”）に基づき、分取部到達順に並べ替える。その後、「純度優先」や「取得率優先」などのユーザーにより選択された分取モードに応じて、「取得／非取得」の判断を行う。そして、その結果に基づいて、”Sort Flag”を設定する。
【００４７】
粒子１０が近接して通流している場合、一回の取得動作で前後の粒子１０も巻き込み、複数の粒子１０を分取部２に回収してしまう可能性がある。そして、「純度優先モード」と、「取得率優先モード」とでは、この粒子１０が近接している場合の「取得／非取得」の判断方法が異なる。図６は取得優先モードの動作を示す図である。また、図７Ａ及び図７Ｂは粒子が近接している場合の検出データを示す図である。更に、図８は純度優先モードの動作を示す図である。
【００４８】
「取得率優先モード」は、捕獲粒子の純度が下がっても取得粒子数を多くするモードであり、図６に示すように、粒子１０が近接して通流している場合でも、分取対象の粒子を回収する。これに対して、「純度優先モード」は、捕獲粒子の純度を高めるモードであり、取得粒子と非取得粒子が近接してきた場合、一緒に捕獲されてしまうことを防止するため、敢えてその取得粒子を「非取得」と判断する。
【００４９】
特に「純度優先モード」の場合、図８に示すように、後から検出された粒子１０の検出データ（イベント）が、前の粒子１０と近接している場合、前のイベントの「取得／非取得」も再度判断が必要となる。ここで、図７Ａに示すΔＴ１は、設定値で、ひとつ後の粒子を巻き込む時間である（Ｔ１＝Ｔｎ＋ΔＴ１）。また、ΔＴ２も設定値で、ひとつ前の粒子を巻き込む時間である（Ｔ２＝Ｔｎ＋ΔＴ２）。
【００５０】
［出力タイミング生成回路］
出力タイミング生成回路は、出力待ち行列の最も先に取得するイベントの時刻（Sorting time）を読み出し、Clock Counter値と比較して、その時刻に出力タイミング信号を生成する。
【００５１】
［出力信号生成回路］
出力信号生成回路は、出力タイミング信号を検知し、分取部２のアクチュエーションデバイスを制御する波形信号を出力する。
【００５２】
本変形例の粒子分取装置は、回収するか否かを判断する際に、「純度」を優先するか、「取得率」を優先するかを、ユーザーが選択可能となっているため、目的に応じた分取が可能となる。なお、本変形例における上記以外の構成及び効果は、前述した第１の実施形態と同様である。
【００５３】
また、本開示は、以下のような構成をとることもできる。
（１）
流路を通流する粒子に励起光を照射する励起光照射部と、
前記粒子に前記励起光とは異なる位置で速度検出用光を照射する速度検出用光照射部と、
前記粒子から発せられた光を検出する光検出部と、
前記励起光に由来する光と前記速度検出用光に由来する光の検出時間差から、各粒子が前記流路に連通する分取部に到達する時間を個別に算出する到達時間算出部と、
前記粒子の分取を制御する分取制御部と、を有し、
前記流路及び前記分取部はマイクロチップ内に設けられており、
前記分取制御部は、前記光検出部で検出された各粒子のデータと、前記到達時間算出部で算出された到達時間に基づいて、前記粒子を回収するか否かを判断する粒子分取装置。
（２）
前記分取制御部は、前後の粒子の到達時間差を算出し、該到達時間差が閾値以下の粒子は、非回収と判断する（２）に記載の粒子分取装置。
（３）
前記速度検出用光は前記励起光と波長が異なる（１）又は（２）に記載の粒子分取装置。
（４）
前記到達時間算出部は、前記励起光に由来する散乱光と前記速度検出用光に由来する散乱光の検出時間差から各粒子の到達時間を算出する（３）に記載の粒子分取装置。
（５）
前記励起光照射部は、異なる波長の光を出射する２以上の光源を備える（１）〜（４）のいずれかに記載の粒子分取装置。
（６）
前記分取部は、前記流路に連通する負圧吸引部を有する（１）〜（５）のいずれかに記載の粒子分取装置。
（７）
前記分取制御部は、前記光検出部で検出された各粒子のデータと、前記到達時間算出部で算出された到達時間に基づいて、前記負圧吸引部の動作を制御する（６）に記載の粒子分取装置。
（８）
前記分取制御部は、前記光検出部で検出された各粒子のデータと、前記到達時間算出部で算出された到達時間に基づいて、前記分取部に前記粒子を回収するタイミングを制御する（１）〜（７）のいずれかに記載の粒子分取装置。
（９）
マイクロチップ内に設けられた流路を通流する粒子に励起光を照射する励起光照射工程と、
前記粒子に前記励起光とは異なる位置で速度検出用光を照射する速度検出用光照射工程と、
前記粒子から発せられた光を検出する光検出工程と、
前記励起光に由来する光と前記速度検出用光に由来する光の検出時間差から、前記マイクロチップ内に設けられ前記流路に連通する分取部に、各粒子が到達する時間を、個別に算出する到達時間算出工程と、
前記光検出工程で検出した各粒子のデータと、前記到達時間算出工程で算出した到達時間に基づいて、前記粒子を回収するか否かを判断する分取制御工程と、
を有する粒子分取方法。
（１０）
前記分取制御工程は、前後の粒子の到達時間差を算出し、該到達時間差が閾値以下の粒子は、非回収と判断する（９）に記載の粒子分取方法。
（１１）
前記速度検出用光として前記励起光とは波長が異なる光を用いる（９）又は（１０）に記載の粒子分取方法。
（１２）
前記到達時間算出工程は、前記励起光に由来する散乱光と前記速度検出用光に由来する散乱光の検出時間差から各粒子の到達時間を算出する（１１）に記載の粒子分取方法。
（１３）
前記励起光照射工程は、２以上の光源からそれぞれ異なる波長の光を出射する（９）〜（１２）のいずれかに記載の粒子分取方法。
（１４）
前記分取部は前記流路に連通する負圧吸引部を有し、
前記分取制御工程は、前記光検出工程で検出した各粒子のデータと、前記到達時間算出工程で算出した到達時間に基づいて、前記負圧吸引部の動作を制御する（９）〜（１３）のいずれかに記載の粒子分取方法。
（１５）
前記分取制御工程は、前記光検出工程で検出した各粒子のデータと、前記到達時間算出工程で算出した到達時間に基づいて、前記分取部に前記粒子を回収するタイミングを制御する（９）〜（１４）のいずれかに記載の粒子分取方法。
【符号の説明】
【００５４】
１  流路
２  分取部
３  励起光照射部
４  速度検出用光照射部
５、６  対物レンズ
７  光検出部
８  到達時間算出部
９  分取制御部
１０  粒子
２１  吸引流路
２２  負圧吸引部
３１、４１  光源
３２、４２  光学系
３３、４３、７２ａ〜７２ｄ  ミラー
７１  ０次光除去部材
７３ａ〜７３ｄ  光検出器
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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