(57)【要約】【課題】安全性の高い天然抽出物を有効成分とするサーチュイン１活性化剤及びサーチュイン１活性化用皮膚化粧料を提供する。【解決手段】本発明のサーチュイン１活性化剤にキウイ及び／又はセンネンボクの抽出物を含有する。また、本発明のサーチュイン１活性化用皮膚化粧料にキウイ及び／又はセンネンボクの抽出物を配合する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
キウイ及び／又はセンネンボクの抽出物を有効成分とするサーチュイン１活性化剤。
【請求項２】
キウイ及び／又はセンネンボクの抽出物を配合したサーチュイン１活性化用皮膚化粧料。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はキウイ及び／又はセンネンボクの抽出物を有効成分とするサーチュイン１活性化剤、サーチュイン１活性化用皮膚化粧料に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
老化制御に関する研究において、古細菌、酵母、線虫、ヒトに至るまで、低栄養にならない程度のカロリー制限が抗老化、寿命延長効果を示すことがわかっている。これらの効果に関与する分子の一つとしてＳｉｒ２が同定されている。その哺乳類ホモログとして７種類のサーチュインファミリーが存在している。中でも最もＳｉｒ２と構造や機能が類似しているサーチュイン１が注目されている。
【０００３】
サーチュイン１は、ＮＡＤ依存性脱アセチル化酵素活性やＡＤＰリボシル転移酵素活性をもち、生体内で重要な役割を果たしている。例えばサーチュイン１高発現マウスにおいて身体能力の改善及び生殖期間の延長とともに、糖代謝、コレステロール代謝、脂肪代謝の改善が認められている。また、高脂肪食下での耐糖能改善、脂肪肝抑制も観察されている。つまりサーチュイン１の活性化が代謝系疾患の予防、治療又は改善に有用であると考えられている（非特許文献１）。
【０００４】
またサーチュイン１の活性化により、転写因子ＮＦ−κＢ（nuclear factor-kappa B）のｐ６５サブユニットが脱アセチル化され、ＮＦ−κＢ活性が減弱する結果、炎症を抑制することが明らかとなっており、この炎症抑制作用が炎症性疾患の予防、治療又は改善すると考えられている（非特許文献１）。さらにマウスではＮＦ−κＢの遺伝子の遮断により、皮膚の増殖能が高まることが分かっており、サーチュイン１の活性化は皮膚の増殖能の亢進に有用であると考えられる（非特許文献２）。
【０００５】
サーチュイン１はＦＯＸＯ、ｐ５３、ｐ７３、Ｋｕ７０、Ｓｍａｄ７等を脱アセチル化し、その結果として、酸化ストレス耐性の誘導、細胞死抑制を誘導する。これらの表現型の誘導が、抗老化、長寿命化の実現に寄与していると考えられている（非特許文献１）。
【０００６】
細胞老化は紫外線等の外因的ストレスに曝されることにより引き起こされる。ここで細胞老化とは永久に細胞周期が停止する現象である。サーチュイン１はＴＥＲＴ（Telomere Reverse Transcriptase）の発現を調節し、ヒストンを脱アセチル化することによりテロメアの安定性を維持し、ＷＲＮ等の修復タンパク質を脱アセチル化することでＤＮＡ修復を促進してゲノムの安定性を維持しており、これらの機能を通して細胞老化を抑制していることが明らかになっている（非特許文献３）。
【０００７】
このように、サーチュイン１は代謝系疾患改善作用、炎症性疾患改善作用、細胞老化抑制作用に加え、糖尿病改善作用、心血管保護作用、腎疾患改善作用、神経保護作用等、様々な機能を有することが明らかになっている。そのため、サーチュイン１の活性化により、代謝系疾患、炎症性疾患、細胞老化、糖尿病、心血管疾患、腎疾患、神経疾患等の各種疾患の予防、治療、又は改善に有用であると考えられている。
【０００８】
サーチュイン１を活性化させる物質として赤ブドウの皮に多く含まれているレスベラトロールが知られている。近年では特許文献１のような黒ウコンの抽出物由来のサーチュイン活性化剤も報告されている（特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開２０１８−１９９６８０号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】化学と生物, 2009年, Vol.47, No.8, p531-537
【非特許文献２】Aging cell, 2010年, 9, pp285-290
【非特許文献３】BMB Reports, 2019年, 52(1), p.24-34
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
本発明は、安全性の高い天然抽出物からサーチュイン１活性化作用を有するものを見出し、それを有効成分とするサーチュイン１活性化剤及びサーチュイン１活性化用皮膚化粧料を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
上記目的を達成するために、本発明のサーチュイン１活性化剤は、キウイ及び／又はセンネンボクの抽出物を有効成分とすることを特徴とする。また、本発明のサーチュイン１活性化用皮膚化粧料は、キウイ及び／又はセンネンボクの抽出物を配合することを特徴とする。
【発明の効果】
【００１３】
本発明のサーチュイン１活性化剤は、天然物であるキウイ及び／又はセンネンボクの抽出物を有効成分とすることにより、作用効果に優れ、かつ安全性の高いサーチュイン１活性化剤を提供することができる。
さらにキウイ及び／又はセンネンボクの抽出物を配合することにより、作用効果に優れ、かつ安全性の高いサーチュイン１活性化用皮膚用化粧料を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明の一実施形態について説明する。
〔サーチュイン１活性化剤〕
本実施形態のサーチュイン１活性化剤は、キウイ（学名：Actinidia chinensis Planch. (Actinidiaceae)）及び／又はセンネンボク（学名：Cordyline terminalis）の抽出物を有効成分とする。
【００１５】
ここで、本実施形態における「抽出物」には、キウイ（Actinidia chinensis Planch. (Actinidiaceae)）若しくはセンネンボク（Cordyline terminalis）を抽出原料として得られる抽出液、当該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、当該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。
【００１６】
キウイ（Actinidia chinensis Planch. (Actinidiaceae)）は、マタタビ科マタタビ属に属する落葉つる性低木であり、その果実は日本各地で栽培されており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用するキウイの構成部位としては、葉部、茎部、花部、果実部等の地上部、根部又はこれらの部位の混合物が挙げられるが、好ましくは果実部、特に好ましくは摘果果実部である。なお、本発明において抽出原料として使用し得るキウイ（Actinidia chinensis Planch. (Actinidiaceae)）の栽培品種としては、特に限定されるものではないが、レインボーレッド、アップルキウイ、紅心、ゴールデンキング、ゼスプリゴールド、小林３９、ビュアカントリー、ファーストエンペラー、ティアドロップ、紅鮮、グレープキウイ、さぬきゴールド、豊蜜等を好適に用いることができる。
【００１７】
本実施形態においてキウイの「摘果果実」とは、キウイ果実の栽培過程において、栽培されるキウイ果実の糖度及び大きさを所望の範囲に増大させることを目的として間引かれる（剪定される）果実のことを意味する。糖度は３．０〜７．０％が好ましく、より好ましくは４．０〜５．５％である。大きさ（長径）は１〜４ｃｍが好ましく、より好ましくは２〜３ｃｍである。
【００１８】
センネンボクは、別名ティ（Cordyline terminalis ‘Ti’）と言われるリュウゼツラン科センネンボク属に属する常緑低木であって、インド、オーストラリア、熱帯アフリカ、中国等に分布しており、これらの地域から容易に入手することができる。抽出原料として使用し得るセンネンボクの構成部位としては、例えば、葉部、枝部、幹部等の地上部、根部等の地下部、又はこれらの混合物が挙げられるが、好ましくは葉部である。
【００１９】
上記植物の抽出物は、抽出原料を乾燥した後、そのまま又は粗砕機を用いて粉砕し、抽出溶媒による抽出に供することにより得ることができる。乾燥は天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。また、ヘキサン等の非極性抽出溶媒によって脱脂等の前処理を行うことにより、極性溶媒による抽出処理を効率よく行うことができる。
【００２０】
抽出溶媒としては、極性溶媒を使用することが好ましく、例えば、水、親水性有機溶媒等が挙げられ、これらを単独で又は２種以上を組み合わせて、室温又は溶媒の沸点以下の温度で使用することが好ましい。
【００２１】
抽出溶媒として使用し得る水としては、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水等のほか、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、濾過、イオン交換、浸透圧調整、緩衝化等が含まれる。したがって、本実施形態において抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水等も含まれる。
【００２２】
抽出溶媒として使用し得る親水性有機溶媒としては、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコール等の炭素数１〜５の低級脂肪族アルコール；アセトン、メチルエチルケトン等の低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等の炭素数２〜５の多価アルコール等が挙げられる。
【００２３】
２種以上の極性溶媒の混合液を抽出溶媒として使用する場合、その混合比は適宜調整することができる。例えば、水と低級脂肪族アルコールとの混合液を抽出溶媒として使用する場合には、水と低級脂肪族アルコールとの混合比が９：１〜１：９（容量比）であることが好ましく、７：３〜２：８（容量比）であることがさらに好ましい。また、水と低級脂肪族ケトンとの混合液を使用する場合には、水と低級脂肪族ケトンとの混合比が９：１〜２：８（容量比）であることが好ましく、水と多価アルコールとの混合液を使用する場合には、水と多価アルコールとの混合比が８：２〜１：９（容量比）であることが好ましい。
【００２４】
抽出処理は、抽出原料に含まれる可溶性成分を抽出溶媒に溶出させ得る限り特に限定はされず、常法に従って行うことができる。例えば、抽出原料の１．５〜３０倍量（質量比）の抽出溶媒に、抽出原料を浸漬し、常温又は還流加熱下で可溶性成分を抽出させた後、濾過して抽出残渣を除去することにより抽出液を得ることができる。得られた抽出液から溶媒を留去するとペースト状の濃縮物が得られ、この濃縮物をさらに乾燥すると乾燥物が得られる。
【００２５】
精製は、例えば、活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理等により行うことができる。得られた抽出液はそのままでもサーチュイン１活性化剤の有効成分として使用することができるが、濃縮液又は乾燥物としたものの方が使用しやすい。
【００２６】
キウイ及びセンネンボクの抽出物は、特有の匂いを有しているため、その生理活性の低下を招かない範囲で脱色、脱臭等を目的とする精製を行うことも可能であるが、皮膚化粧料等に配合する場合には大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。
【００２７】
上記のようにして得られるキウイ及びセンネンボクの抽出物は、サーチュイン１活性化作用を有しているため、サーチュイン１活性化剤の有効成分として用いることができる。
【００２８】
本実施形態のサーチュイン１活性化剤は、医薬品、医薬部外品、化粧品等の幅広い用途に使用することができる。
【００２９】
本実施形態のサーチュイン１活性化剤は、キウイ又はセンネンボクの抽出物のみからなるものであってもよいし、キウイ又はセンネンボクの抽出物を製剤化したものであってもよい。
【００３０】
本実施形態のサーチュイン１活性化剤は、デキストリン、シクロデキストリン等の薬学的に許容し得るキャリアーその他任意の助剤を用いて、常法に従い、粉末状、顆粒状、錠剤状、液状等の任意の剤形に製剤化することができる。この際、助剤としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯臭剤等を用いることができる。サーチュイン１活性化剤は、他の組成物（例えば、皮膚化粧料、飲食品等）に配合して使用することができるほか、軟膏剤、外用液剤、貼付剤等として使用することができる。
【００３１】
本実施形態のサーチュイン１活性化剤を製剤化した場合、キウイ又はセンネンボクの抽出物の含有量は特に限定されるものではなく、目的に応じて適宜設定することができる。
【００３２】
なお、本実施形態のサーチュイン１活性化剤は、必要に応じて、サーチュイン１活性化作用を有する他の天然抽出物等を、キウイ又はセンネンボクの抽出物とともに配合して有効成分として用いることができる。
【００３３】
本実施形態のサーチュイン１活性化剤の患者に対する投与方法としては、経皮投与、経口投与等が挙げられるが、疾患の種類に応じて、その予防、治療等に好適な方法を適宜選択すればよい。また、本実施形態のサーチュイン１活性化剤の投与量も、疾患の種類、重症度、患者の個人差、投与方法、投与期間等によって適宜増減すればよい。
【００３４】
本実施形態のサーチュイン１活性化剤は、キウイ又はセンネンボクの抽出物が有するサーチュイン１活性化作用により、代謝系疾患、炎症性疾患、細胞老化、糖尿病、心血管疾患、腎疾患、神経疾患等の各種疾患の予防、治療、又は改善、さらには抗老化や長寿命化等、サーチュイン１が関与する各種現象のために用いることができる。ただし、本実施形態のサーチュイン１活性化剤は、これらの用途以外にもサーチュイン１活性化作用を発揮することに意義のあるすべての用途に用いることができる。
【００３５】
キウイ及びセンネンボクの抽出物は、サーチュイン１活性化作用を有しており、皮膚に適用した場合の使用感又は安全性に優れているため、皮膚外用剤に配合するのに好適である。この場合に、皮膚外用剤にはキウイ又はセンネンボクの抽出物をそのまま配合してもよいし、キウイ又はセンネンボクの抽出物から製剤化したサーチュイン１活性化剤を配合してもよい。キウイ若しくはセンネンボクの抽出物、又は当該キウイ若しくはセンネンボクの抽出物から製剤化したサーチュイン１活性化剤を配合することにより、皮膚外用剤にサーチュイン１活性化作用を付与することができる。
ここで皮膚外用剤としては、その区分に制限はなく、後述する皮膚化粧料のほか、経皮的に使用される医薬部外品、医薬品等を幅広く含むものである。
【００３６】
また、本実施形態のキウイ及びセンネンボクの抽出物は優れたサーチュイン１活性化作用を有するので、これらの作用機構に関する研究のための試薬としても好適に利用することができる。
【００３７】
なお、本実施形態のサーチュイン１活性化剤は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、該作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物に対して適用することもできる。
【００３８】
〔サーチュイン１活性化用皮膚化粧料〕
上記実施形態にかかるキウイ及びセンネンボクの抽出物は優れたサーチュイン１活性化作用を有しているため、皮膚化粧料に配合するのに好適である。この場合、サーチュイン１活性化成分であるキウイ又はセンネンボクの抽出物をそのまま配合してもよいし、キウイ又はセンネンボクの抽出物から製剤化したサーチュイン１活性化剤を配合してもよい。
【００３９】
キウイ又はセンネンボクの抽出物を配合し得る皮膚化粧料の種類は特に限定されるものではなく、例えば、軟膏、クリーム、乳液、ローション、パック、ファンデーション等が挙げられる。
【００４０】
キウイ又はセンネンボクの抽出物を皮膚化粧料に配合する場合、その配合量は、皮膚化粧料の種類に応じて適宜調整することができるが、好適な配合率は、０．０００１〜１０質量％（固形分換算）であり、特に好適な配合率は、０．００１〜１質量％（固形分換算）である。
【００４１】
本実施形態の皮膚化粧料は、キウイ及びセンネンボクの抽出物が有するサーチュイン１活性化作用を妨げない限り、通常の皮膚化粧料の製造に用いられる主剤、助剤又はその他の成分、例えば、収斂剤、殺菌・抗菌剤、紫外線吸収剤、保湿剤、細胞賦活剤、消炎・抗アレルギー剤、抗酸化・活性酸素除去剤、油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、香料等を併用することができる。このように併用することで、より一般性のある製品となり、また、併用された上記成分との間の相乗作用が通常期待される以上の優れた使用効果をもたらすことがある。
【００４２】
上記皮膚化粧料は、高い安全性を有しており、かつサーチュイン１活性化作用を通じて、代謝系疾患、炎症性疾患、細胞老化、糖尿病、心血管疾患、腎疾患、神経疾患等の各種疾患の予防、治療又は改善、さらには抗老化や長寿命化等、サーチュイン１が関与する各種現象のために用いることができる。
【００４３】
〔サーチュイン１活性化用飲食品〕
キウイ及びセンネンボクの抽出物は、サーチュイン１活性化作用を有しており、安全性に優れているため、飲食品に配合するのに好適である。この場合において、飲食品には、キウイ又はセンネンボクの抽出物をそのまま配合してもよいし、キウイ又はセンネンボクの抽出物から製剤化したサーチュイン１活性化剤を配合してもよい。キウイ又はセンネンボクの抽出物、又は当該キウイ又はセンネンボクの抽出物から製剤化したサーチュイン１活性化剤を配合することにより、飲食品にサーチュイン１活性化作用を付与することができる。
【００４４】
ここで飲食品とは、人の健康に危害を加えるおそれが少なく、通常の社会生活において、経口又は消化管投与により摂取されるものをいい、行政区分上の食品、医薬品、医薬部外品等の区分に制限されるものではない。したがって、本実施形態における「飲食品」は、経口的に摂取される一般食品、健康食品（機能性飲食品）、保健機能食品（特定保健用食品，栄養機能食品）、医薬部外品、医薬品等を幅広く含むものである。
【００４５】
キウイ又はセンネンボクの抽出物を飲食品に配合する場合、それらにおける有効成分の配合量は、使用目的、症状、性別等を考慮して適宜変更することができるが、添加対象となる飲食品の一般的な摂取量を考慮して、成人１日あたりの抽出物摂取量が約１〜１０００ｍｇになるようにするのが好ましい。なお、添加対象飲食品が顆粒状、錠剤状又はカプセル状の飲食品の場合、キウイ又はセンネンボクの抽出物の添加量は、添加対象飲食品に対して通常０．１〜１００質量％であり、好ましくは５〜１００質量％である。
【００４６】
本実施形態の飲食品は、上記キウイ又はセンネンボクの抽出物の活性を妨げないような任意の飲食品に配合したものであってもよいし、上記キウイ又はセンネンボクの抽出物を主成分とする栄養補助食品であってもよい。
【００４７】
本実施形態の飲食品を製造する際には、例えば、デキストリン、デンプン等の糖類；ゼラチン、大豆タンパク、トウモロコシタンパク等のタンパク質；アラニン、グルタミン、イソロイシン等のアミノ酸類；セルロース、アラビアゴム等の多糖類；大豆油、中鎖脂肪酸トリグリセリド等の油脂類等の任意の助剤を添加して任意の形状の飲食品にすることができる。
【００４８】
上記キウイ又はセンネンボクの抽出物を配合し得る飲食品は特に限定されないが、その具体例としては、清涼飲料、炭酸飲料、栄養飲料、果実飲料、乳酸飲料等の飲料（これらの飲料の濃縮原液及び調整用粉末を含む）；アイスクリーム、アイスシャーベット、かき氷等の冷菓；そば、うどん、はるさめ、ぎょうざの皮、しゅうまいの皮、中華麺、即席麺等の麺類；飴、チューインガム、キャンディー、ガム、チョコレート、錠菓、スナック菓子、ビスケット、ゼリー、ジャム、クリーム、焼き菓子等の菓子類；かまぼこ、ハム、ソーセージ等の水産・畜産加工食品；加工乳、発酵乳等の乳製品；サラダ油、てんぷら油、マーガリン、マヨネーズ、ショートニング、ホイップクリーム、ドレッシング等の油脂及び油脂加工食品；ソース、たれ等の調味料；スープ、シチュー、サラダ、惣菜、漬物；その他種々の形態の健康・栄養補助食品；錠剤、カプセル剤、ドリンク剤等が挙げられる。これらの飲食品に上記キウイ又はセンネンボクの抽出物を配合するときには、通常用いられる補助的な原料や添加物を併用することができる。
【実施例】
【００４９】
以下、実施例を示し、本発明を具体的に説明するが、本発明は下記の各例に何ら制限されるものではない。
【００５０】
〔実施例１〕キウイ摘果果実抽出液の調製
キウイ（Actinidia chinensis Planch. (Actinidiaceae)，レインボーレッド種）の摘果果実（糖度：４．３％，長径：２ｃｍ）の粉砕物２００ｇに抽出溶媒（精製水）４００ｍＬを加え、３０℃にて１時間加温抽出し、熱時濾過した。残渣についてさらに同様の抽出処理をした。得られた抽出液に対し合わせて減圧下で濃縮し、さらに乾燥してキウイ摘果果実抽出物５．５ｇを得た。３０％ＢＧ（ブチレングリコール）にて０．４３％に調製した。
【００５１】
〔実施例２〕センネンボク抽出液の調製
アオヒロバセンネンボク（東京都小笠原諸島産）の葉部の乾燥物２０ｇに対し、５０％ＢＧ（１，３ブチレングリコール，ハイシュガーケインＢＧ，高級アルコール工業社製）４ｋｇを混合し、７日間浸漬した。ＡＤＶＡＮＴＥＣ定性濾紙（Ｎｏ．２，東洋濾紙社製）及びメンブラン（０．４５μｍ）を用いて濾過し、濾液としてセンネンボク葉部抽出物（固形分：１．７６質量％）を得た。
【００５２】
〔比較例１〕ＮＭＮ（Nicotine amide mononucleotide）溶液の調製
ＮＭＮ（Nicotine amide mononucleotide）は東京化成工業社より購入し、リン酸緩衝液（ＰＢＳ（−），シグマ アルドリッチ ジャパン社製）で０．４３％に調製した。
【００５３】
〔試験例１〕サーチュイン１遺伝子の発現試験
実施例１のキウイ摘果果実抽出液、実施例２のセンネンボク葉部抽出液及び比較例１のＮＭＮ溶液について、以下のようにしてサーチュイン１遺伝子の発現試験を行った。
【００５４】
ヒト新生児包皮由来線維芽細胞（継代数３）は１０％牛胎児血清（ＦＢＳ，サーモフィッシャーサイエンティフィック社製）を含むDulbecco’s Modified Eagle Medium（ＤＭＥＭ，サーモフィッシャーサイエンティフィック社製）を用いて、３７℃、５％ＣＯ２下で前培養し、０．２５％トリプシン（シグマ アルドリッチ ジャパン社製）処理により細胞を集めた。回収した細胞を３×１０４cells／mLの濃度に１０％ＦＢＳ／ＤＭＥＭで希釈した後、細胞培養用フラスコ５０（住友ベークライト社製）に１フラスコ当たり各５ｍＬ播種し、２時間培養した。その後、実施例１を１０μＬ（試料濃度８．６μｇ／ｍＬ）、実施例２を２．４μＬ（試料濃度８．６μｇ／ｍＬ）、比較例１を１０μＬ（試料濃度８．６μｇ／ｍＬ）及び５０μＬ（試料濃度４３μｇ／ｍＬ）添加し、３日間培養した。
【００５５】
細胞毒性が無いことを確認後、培養液を除去し、リン酸緩衝液（ＰＢＳ（−），シグマ アルドリッチ ジャパン社製）で洗浄し、１％ＳＤＳ溶液（ニッポンジーン社製）１ｍＬを加えて細胞を回収した。この細胞懸濁液をボルテックスで十分攪拌した後、１８０μＬを採取した。これに１％ＫＯＨ（ナカライテスク社製）１μＬ及びProteinase K Solution（サーモフィッシャーサイエンティフィック社製）２０μＬを添加し、攪拌後１５分間、３７℃でインキュベートした。インキュベート後、RNA Clean XP（ベックマン・コールター社製）を各１００μＬ添加し、攪拌後マグネットスタンド上で５分静置した。上清を除去し、８５％エタノールで２回洗浄後、１０分間乾燥し３０μＬのNuclease-Free Water（サーモフィッシャーサイエンティフィック社製）を加えた。マグネットスタンド上で５分間静置し上清をＲＮＡ溶液とした。
【００５６】
０℃下、２００μＬのＰＣＲチューブ（バイオ・ラッド社製，クリア，ドームキャップ）にSuper ScriptTM IV VILOTM Master Mix （サーモフィッシャーサイエンティフィック社製）１に対しNuclease-free water２．５の割合で調製し、ボルテックスで攪拌後、別のＰＣＲチューブに各１４．０μＬ分注した。ＮＲＴサンプルは、Super ScriptTM IV VILOTM No RT Control（サーモフィッシャーサイエンティフィック社製）１に対しNuclease-free water２．５の割合で調製し同様に分注した。これに上で得られたＲＮＡ溶液を各６．０μＬ添加し、２５℃１０分、５０℃１０分、８５℃５分サーマルサイクラー（バイオ・ラッド社製，T100TM Thermal Cycler）を用いてインキュベートし、ｃＤＮＡサンプル及びＮＲＴサンプルとした。
【００５７】
Taqman(R) Gene Expression Assay（ACTB Hs99999903_m1又はSIRT1 Hs01009006_m1，サーモフィッシャーサイエンティフィック社製）1に対し、TaqPathTM qPCR Master Mix、CG（サーモフィッシャーサイエンティフィック社製）１０、Nuclease-free water５の割合で調製し、Nuclease-freeチューブに入れ、ボルテックスで攪拌後、スピンダウンした。これをＰＣＲチューブ（バイオ・ラッド社製，ホワイト，フラットキャップ）に各１６．０μＬ分注しｃＤＮＡサンプル、ＮＲＴサンプルを各４．０μＬ添加しピペッティング、ボルテックスで攪拌後、スピンダウンした。
【００５８】
これらのサンプルを用いてリアルタイムＰＣＲ（バイオ・ラッド社製，C1000 TouchTM Thermal Cycler）を実施した。ＰＣＲ条件は、２５℃２分、９５℃２０秒、９５℃３秒（１）、６０℃３０秒（２）（１→２を４０サイクル）で行った。
結果を表１に示す。
【００５９】
【表１】
2020189802.tif 000002
【００６０】
試料濃度８．６μｇ／ｍＬにおいて、実施例１では未処理コントロールと比較して１．６５倍、実施例２では未処理コントロールと比較して１．６４倍のサーチュイン１遺伝子の発現が認められたが、同濃度の比較例１では、サーチュイン１遺伝子の発現は示さなかった。サーチュイン１遺伝子の活性化が認められる試料濃度４３．６μｇ／ｍＬの比較例１では、未処理コントロールと比較して２．９倍のサーチュイン１遺伝子の活性化が認められた。以上の結果より、実施例１及び実施例２は、比較例１よりも強いサーチュイン１遺伝子の活性が確認された。
【００６１】
［配合例１］
下記組成に従い、乳液を常法により製造した。
キウイ抽出物                                              ０．０１ｇ
ホホバオイル                                              ４．００ｇ
１，３−ブチレングリコール                                ３．００ｇ
アルブチン                                                ３．００ｇ
ポリオキシエチレンセチルエーテル（20E.O.）                ２．５０ｇ
オリーブオイル                                            ２．００ｇ
スクワラン                                                ２．００ｇ
セタノール                                                ２．００ｇ
モノステアリン酸グリセリル                                ２．００ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.）          ２．００ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                  ０．１５ｇ
グリチルレチン酸ステアリル                                ０．１０ｇ
黄杞エキス                                                ０．１０ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム                                ０．１０ｇ
イチョウ葉エキス                                          ０．１０ｇ
コンキオリン                                              ０．１０ｇ
オウバクエキス                                            ０．１０ｇ
カミツレエキス                                            ０．１０ｇ
香料                                                      ０．０５ｇ
精製水                                  残部（全量を１００ｇとする）
【００６２】
［配合例２］
下記組成のクリームを常法により製造した。
センネンボク抽出物                                      ０．０１ｇ
クジンエキス                                              ０．１ｇ
オウゴンエキス                                            ０．１ｇ
流動パラフィン                                            ５．０ｇ
サラシミツロウ                                            ４．０ｇ
スクワラン                                              １０．０ｇ
セタノール                                                ３．０ｇ
ラノリン                                                  ２．０ｇ
ステアリン酸                                              １．０ｇ
オレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン（20E.O.）          １．５ｇ
モノステアリン酸グリセリル                                ３．０ｇ
油溶性甘草エキス                                          ０．１ｇ
１，３−ブチレングリコール                                ６．０ｇ
パラオキシ安息香酸メチル                                  １．５ｇ
香料                                                      ０．１ｇ
精製水                                  残部（全量を１００ｇとする）
【００６３】
［配合例３］
下記組成の美容液を常法により製造した。
キウイ抽出物                                            ０．０１ｇ
センネンボク抽出物                                      ０．０１ｇ
アスコルビン酸２−グルコシド                              ０．１ｇ
カミツレエキス                                            ０．１ｇ
ニンジンエキス                                            ０．１ｇ
キサンタンガム                                            ０．３ｇ
ヒドロキシエチルセルロース                                ０．１ｇ
カルボキシビニルポリマー                                  ０．１ｇ
１，３−ブチレングリコール                                ４．０ｇ
グリチルリチン酸ジカリウム                                ０．１ｇ
グリセリン                                                ２．０ｇ
水酸化カリウム                                          ０．２５ｇ
香料                                                    ０．０１ｇ
防腐剤（パラオキシ安息香酸メチル）                      ０．１５ｇ
エタノール                                                ２．０ｇ
精製水                                  残部（全量を１００ｇとする）
【産業上の利用可能性】
【００６４】
本発明のサーチュイン活性化剤は、代謝系疾患、炎症性疾患、細胞老化、糖尿病、心血管疾患、腎疾患、神経疾患等の各種疾患の予防、治療、又は改善、さらには抗老化及び長寿命化等の実現に大きく貢献することができる。