(57)【要約】【課題】培養膜を挟持する二つの部材の組付け状態での密着性を向上させること。【解決手段】細胞培養器具は、膜体と、膜体に接合された支持枠と、を有する培養膜と、軸方向に筒状に延びる第一筒部と、軸方向に向いた軸方向端面が形成された、支持枠に当接して培養膜が載置される載置部と、を有する第一部材と、軸方向に筒状に延びる第二筒部と、載置部の軸方向端面に軸方向で対向し、載置部との間で支持枠を挟持する対向部と、を有する第二部材と、を備える。第一部材及び第二部材は、載置部と対向部とが支持枠を挟持するように互いに組み付けられた状態で互いに離間する軸方向への相対移動を規制する係止部を有する。【選択図】図１
2020162457.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
膜体と、前記膜体に接合された支持枠と、を有する培養膜と、
軸方向に筒状に延びる第一筒部と、軸方向に向いた軸方向端面が形成された、前記支持枠に当接して前記培養膜が載置される載置部と、を有する第一部材と、
軸方向に筒状に延びる第二筒部と、前記載置部の軸方向端面に軸方向で対向し、前記載置部との間で前記支持枠を挟持する対向部と、を有する第二部材と、
を備える細胞培養器具であって、
前記第一部材及び前記第二部材は、前記載置部と前記対向部とが前記支持枠を挟持するように互いに組み付けられた状態で互いに離間する軸方向への相対移動を規制する係止部を有する、細胞培養器具。
【請求項２】
前記係止部は、
前記第一筒部及び前記第二筒部の一方に設けられ、周方向に延びる凹部と、
前記第一筒部及び前記第二筒部の他方に設けられ、前記第一部材と前記第二部材との周方向への相対回転により前記凹部内で相対移動して前記凹部に嵌る凸部と、
を有する、請求項１に記載された細胞培養器具。
【請求項３】
前記凹部は、前記第一筒部及び前記第二筒部の一方の周壁に径方向へ凹んで設けられ、
前記凸部は、前記第一筒部及び前記第二筒部の他方の周壁に径方向へ突起して設けられている、請求項２に記載された細胞培養器具。
【請求項４】
前記係止部は、
前記第一筒部及び前記第二筒部の一方に設けられ、軸方向先端部に径方向に突出する爪部が設けられた、径方向に弾性変形可能な弾性変形部と、
前記第一筒部及び前記第二筒部の他方に設けられ、前記第一部材と前記第二部材とが軸方向に所定位置関係まで接近した際に前記爪部が引っ掛かる溝部と、
を有する、請求項１に記載された細胞培養器具。
【請求項５】
前記第一部材は、前記第一筒部の周壁における少なくとも前記載置部に載置された前記培養膜よりも軸方向の前記載置部側の箇所を含む所定部位を径方向に貫通するように設けられ、前記第一筒部の一部を開口させる側面開口部を有する、請求項１乃至４の何れか一項に記載された細胞培養器具。
【請求項６】
前記第一筒部は、内周面が前記培養膜を前記載置部まで案内可能に形成された周壁部を有し、
前記周壁部は、径方向に貫通しかつ前記第一筒部の軸方向端部から前記載置部が設けられた部位にかけて軸方向に延びるように設けられた切欠部を有する、請求項１乃至５の何れか一項に記載された細胞培養器具。
【請求項７】
前記第一筒部は、内周面が前記培養膜を前記載置部まで案内可能に形成された周壁部を有し、
前記周壁部は、径方向に貫通しかつ前記第一筒部の軸方向端部から前記載置部が設けられた部位にかけて軸方向に延びるように設けられた切欠部を有し、
前記側面開口部及び前記切欠部は、前記第一部材における周方向同じ位置に設けられ、軸方向に連続して配置されている、請求項５に記載された細胞培養器具。
【請求項８】
前記第一筒部は、内周面が前記培養膜を前記載置部まで案内可能に形成された周壁部を有し、
前記周壁部は、径方向に貫通しかつ前記第一筒部の軸方向端部から前記載置部が設けられた部位にかけて軸方向に延びるように設けられた切欠部を有し、
前記側面開口部及び前記切欠部は、前記第一部材における周方向異なる位置に設けられている、請求項５に記載された細胞培養器具。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞を培養するために用いられる細胞培養器具に関する。
【背景技術】
【０００２】
従来、細胞を培養するための細胞培養器具が知られている（例えば、特許文献１）。特許文献１記載の細胞培養器具は、培養膜と、外筒と、内筒と、を備えている。外筒は、軸方向に延びるスリットを有し、このスリットの存在により径方向に弾性変形可能である。内筒は、培養膜を載置する載置部を有していると共に、外筒の内径よりも大きな外径を有している。内筒は、培養膜を載置した状態で、外筒に対して軸方向に相対移動されてその載置側から外筒内に挿入される。この挿入が行われると、外筒が径方向外側へ弾性変形することで内筒と外筒とが互いに径方向で隙間無く接しつつ、培養膜が内筒と外筒との間で挟持されて保持される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開２０１７−２９０９２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
しかしながら、上記の細胞培養器具では、内筒と外筒との間の培養膜の保持力が、内筒と外筒との間の弾性力である摩擦力に依存する。このため、この細胞培養器具では、上記の弾性力が小さいと、培養時に内筒と外筒との密着性が低下して、組立後に内筒と外筒との軸方向への相対移動が生じ、培養膜を挟んだ両側間でのシール性が低下してしまう。
【０００５】
本発明は、このような点に鑑みてなされたものであり、培養膜を挟持する二つの部材の組付け状態での密着性を向上させることで、培養膜を挟んだ両側間でのシール性を確保することが可能な細胞培養器具を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の一態様である細胞培養器具は、膜体と、前記膜体に接合された支持枠と、を有する培養膜と、軸方向に筒状に延びる第一筒部と、軸方向に向いた軸方向端面が形成された、前記支持枠に当接して前記培養膜が載置される載置部と、を有する第一部材と、軸方向に筒状に延びる第二筒部と、前記載置部の軸方向端面に軸方向で対向し、前記載置部との間で前記支持枠を挟持する対向部と、を有する第二部材と、を備える細胞培養器具であって、前記第一部材及び前記第二部材は、前記載置部と前記対向部とが前記支持枠を挟持するように互いに組み付けられた状態で互いに離間する軸方向への相対移動を規制する係止部を有する、細胞培養器具である。
【０００７】
この構成によれば、第一部材の載置部と第二部材の対向部とが培養膜の支持枠を挟持するように互いに組み付けられた状態で、係止部により、第一部材と第二部材との互いに離間する軸方向への相対移動を規制することができる。このため、培養膜を挟持する第一部材と第二部材との組付け状態での密着性を向上させることができ、細胞培養時に培養膜を挟んだ両側間でのシール性を確保することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】第一実施形態に係る細胞培養器具の分解斜視図である。
【図２】第一実施形態の細胞培養器具の側面図（尚、一部は断面図である。）である。
【図３】第一実施形態の細胞培養器具の上面図である。
【図４】第一実施形態の細胞培養器具を図３に示すIV−IVで切断した断面図である。
【図５】第一実施形態の細胞培養器具が備える第一部材及び第二部材の係止部を説明するための図である。
【図６】一変形形態に係る細胞培養器具が備える第一部材及び第二部材の係止部を説明するための図である。
【図７】第二実施形態に係る細胞培養器具の側面図（左半分）及び断面図（右半分）である。
【図８】第三実施形態に係る細胞培養器具が備える第一部材及び第二部材の係止部の係止前の状態を表した図である。
【図９】第三実施形態に係る細胞培養器具が備える第一部材及び第二部材の係止部の係止後の状態を表した図である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
以下、本発明に係る細胞培養器具の具体的な実施形態について、図面を用いて説明する。
【００１０】
［第一実施形態］
第一実施形態の細胞培養器具１は、足場依存性のある細胞を培養する器具である。細胞培養器具１は、二種類の細胞を膜の両面に培養することが可能である。細胞培養器具１は、図１、図２、図３、及び図４に示す如く、培養膜１０と、第一部材２０と、第二部材３０と、を備えている。細胞培養器具１は、培養膜１０を第一部材２０と第二部材３０とで挟持して固定する。
【００１１】
培養膜１０は、細胞が培養されるシート状の膜である。培養膜１０は、膜体１１と、支持枠１２と、を有している。膜体１１は、細胞培養時に細胞の足場となる膜本体部である。膜体１１は、両面に細孔が設けられた多孔質膜である。膜体１１は、例えば、ポリウレタン、シリコーン樹脂、フェノール樹脂、エポキシ樹脂、不飽和ポリエステル、ポリイミドなどの熱硬化性樹脂により形成されている。膜体１１の膜厚は、例えば０．１μｍ−１００μｍである。
【００１２】
支持枠１２は、膜体１１を支持して補強する基材である。支持枠１２は、中央部に円形の孔１２ａが開いた環状の枠体である。支持枠１２は、膜体１１の周縁に接合されて固定されている。尚、支持枠１２の形状は、少なくとも環状の枠体部を含むものであればよく、更に、その枠体部の周方向一部から径方向外側に向けて突出する突起部を含んでいてもよい。この突起部は、例えば、人がピンセットなどの治具で培養膜１０を把持するときに取り扱い易くするための機能を有している。支持枠１２は、膜体１１よりも硬質な材料により形成されている。支持枠１２の材料は、例えば、ポリエチレン、ポリプロピレン、ＡＢＳ樹脂、アクリル樹脂、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）などの熱可塑性樹脂、或いは、シリコーンゴムなどの熱硬化性エラストマーである。支持枠１２の厚みは、例えば、０．０５ｍｍ−０．５ｍｍである。
【００１３】
第一部材２０は、培養膜１０を挟持固定するための基材である。第一部材２０は、筒状に形成された部材である。第一部材２０は、樹脂材料やゴムなどにより形成されている。第一部材２０は、第一筒部２１と、載置部２２と、側面開口部２３と、を有している。第一筒部２１と載置部２２とは、互いに一体で形成されている。
【００１４】
第一筒部２１は、軸方向Ｘに筒状に延びる中空部位である。第一筒部２１は、例えば円筒状に形成されている。尚、第一筒部２１の内径は、軸方向Ｘの位置に拘わらず一定であってもよいが、軸方向Ｘの位置に応じて変化する（具体的には、載置部２２から遠い軸方向Ｘの位置ほど大きくなる）こととしてもよい。第一筒部２１は、周壁部２１ａを有している。周壁部２１ａの内周面は、培養膜１０を軸方向Ｘに載置部２２まで案内可能に形成されている。
【００１５】
周壁部２１ａは、切欠部２１ｂを有している。切欠部２１ｂは、周壁部２１ａを径方向に貫通しかつ軸方向Ｘに延びるように設けられている。切欠部２１ｂは、第一筒部２１における培養膜１０を第一部材２０に対して軸方向Ｘに挿入する軸方向端部から載置部２２が設けられた部位にかけて軸方向Ｘに延びている。切欠部２１ｂは、周壁部２１ａの周方向一部に設けられ、周壁部２１ａに一箇所設けられている。切欠部２１ｂは、第一部材２０と第二部材３０とで挟持する培養膜１０を載置部２２に着脱させるための治具を径方向外方から挿入させるためのスリットである。すなわち、切欠部２１ｂは、第一部材２０に対して径方向外方から挿入した治具を軸方向Ｘに移動可能とする機能を有している。
【００１６】
載置部２２は、培養膜１０が載置される部位である。載置部２２は、第一筒部２１の軸方向一端に接続されている。載置部２２は、第一筒部２１の軸方向一端の内周側に環状に形成されている。尚、載置部２２は、第一筒部２１の軸方向一端の内周側に周方向に断続的に設けられていてもよい。載置部２２は、軸方向Ｘに向いた軸方向端面が形成された壁部２２ａと、壁部２２ａの中央部に円形に開いた孔部２２ｂと、を有している。載置部２２は、壁部２２ａにおける内側の軸方向端面にて培養膜１０の支持枠１２に当接してその培養膜１０を保持する。載置部２２の壁部２２ａに保持された培養膜１０は、載置部２２の孔部２２ｂを通じて外部に露出する。
【００１７】
側面開口部２３は、第一筒部２１の周壁部２１ａを径方向に貫通するように設けられている。側面開口部２３は、第一筒部２１の内部を外部に連通させる孔部である。側面開口部２３は、周壁部２１ａの周方向一部に設けられ、周壁部２１ａの所定部位に一箇所設けられている。この側面開口部２３が設けられる所定部位は、少なくとも載置部２２に載置された培養膜１０よりも軸方向Ｘの載置部２２側の箇所を含んでいる。側面開口部２３は、載置部２２に載置された培養膜１０の下面に溜まるエアを外部に放出するエア抜き機能を有している。側面開口部２３は、第一部材２０における、上記の切欠部２１ｂと周方向同じ位置に設けられている。側面開口部２３は、その切欠部２１ｂに対して軸方向Ｘに連続して配置されており、その切欠部２１ｂに一体化されている。
【００１８】
第二部材３０は、第一部材２０と対をなす、培養膜１０を挟持固定するための基材である。第二部材３０は、筒状に形成された部材である。第二部材３０は、第一部材２０の第一筒部２１内に挿入されて配置される。第二部材３０は、樹脂材料やゴムなどにより形成されている。第二部材３０は、第二筒部３１と、対向部３２と、把持部３３と、を有している。第二筒部３１と対向部３２と把持部３３とは、互いに一体で形成されている。
【００１９】
第二筒部３１は、軸方向Ｘに筒状に延びる中空部位である。第二筒部３１は、例えば円筒状に形成されている。第二筒部３１の外径は、第一部材２０の第一筒部２１の内径に略一致する大きさを有している。尚、第二筒部３１の内径又は外径は、軸方向Ｘの位置に拘わらず一定であってもよいが、軸方向Ｘの位置に応じて変化する（具体的には、載置部２２から遠い軸方向Ｘの位置ほど大きくなる）こととしてもよい。
【００２０】
対向部３２は、第一部材２０の載置部２２の壁部２２ａに軸方向Ｘで対向する部位である。対向部３２は、第一部材２０の載置部２２との間で培養膜１０を挟持する機能を有している。対向部３２は、第二筒部３１の軸方向一端に接続されている。対向部３２は、第二筒部３１の軸方向一端の内周側に環状に形成されている。尚、対向部３２は、第二筒部３１の軸方向一端の内周側に周方向に断続的に設けられていてもよい。
【００２１】
対向部３２は、軸方向Ｘに向いた軸方向端面が形成された壁部３２ａと、壁部３２ａの中央部に円形に開いた孔部３２ｂと、を有している。対向部３２は、壁部３２ａにおける外側の軸方向端面にて培養膜１０の支持枠１２に当接してその培養膜１０を保持する。載置部２２と対向部３２との間に挟持された培養膜１０は、対向部３２の孔部３２ｂを通じて第二筒部３１の内側空間に露出する。
【００２２】
把持部３３は、人がピンセットなどの治具で第二部材３０を第一部材２０に組み付ける際にその第二部材３０を取り扱い易くするための機能を有している。把持部３３は、アーム部３３ａと、接続部３３ｂと、を有している。アーム部３３ａは、複数本（例えば三本）設けられている。各アーム部３３ａの一端は、第二筒部３１における対向部３２とは軸方向反対側の軸方向他端に接続されている。アーム部３３ａは、第二筒部３１の周方向に間隔を空けて配置されている。アーム部３３ａは、第二筒部３１の軸方向他端から軸方向Ｘの外方へ延びている。接続部３３ｂは、複数本のアーム部３３ａの他端を繋ぐように環状に形成されている。接続部３３ｂは、周方向一部で切り欠かれており、Ｃ字状に形成されている。
【００２３】
第一部材２０及び第二部材３０は、互いの組付け状態で互いに離間する軸方向Ｘへの相対移動を規制する係止部を有している。すなわち、第一部材２０は、係止部としての凹部２５を有していると共に、第二部材３０は、係止部としての凸部３５を有している。凹部２５及び凸部３５は、図５に示す如く、第一部材２０及び第二部材３０の組付け状態で互いに離間する軸方向Ｘへの相対移動を規制する。
【００２４】
第一部材２０の凹部２５は、第一筒部２１の周壁部２１ａの内面に径方向外側へ向けて凹んで設けられた溝部である。凹部２５は、例えば第一部材２０の周方向二箇所（例えば１８０°異なる位置）に設けられている。凹部２５は、Ｌ字状に形成されている。すなわち、凹部２５は、軸方向Ｘに延びる軸平行部２５ａと、軸方向Ｘに対して直交する方向に延びる直交部２５ｂと、を有している。軸平行部２５ａ及び直交部２５ｂはそれぞれ、第二部材３０の凸部３５の幅以上の幅を有している。軸平行部２５ａは、第一筒部２１における載置部２２とは軸方向反対側の軸方向他端から軸方向一端側へ向けて延びている。直交部２５ｂは、軸平行部２５ａにおける軸方向一端部に接続されて、直交方向に延びている。直交部２５ｂは、軸方向他端側に上記の第二部材３０の凸部３５が係止される係止壁２６を形成している。
【００２５】
第二部材３０の凸部３５は、第二筒部３１の外面に径方向外側へ向けて突起して設けられた突起部である。凸部３５は、例えば第二部材３０の周方向二箇所（例えば１８０°異なる位置）に設けられている。凸部３５は、凹部２５（特に直交部２５ｂ）に対応した大きさに形成されている。具体的には、凸部３５は、凹部２５の直交部２５ｂの幅（すなわち軸方向長さ）に対応した幅（すなわち軸方向長さ）を有している。
【００２６】
尚、凹部２５の直交部２５ｂの幅は、周方向位置に応じて変化するものであってよい。例えば、その幅は、図６に示す如く、第一部材２０と第二部材３０との組付け時に凸部３５が直交部２５ｂにおける軸平行部２５ａに近い側から遠い奥側まで移動し易いように軸平行部２５ａに近い側で最も広く、軸平行部２５ａから遠い奥側にかけて徐々に狭くなっていてよい。また、その幅は、凸部３５が直交部２５ｂの奥側の所定箇所に嵌った後にその所定箇所から軸平行部２５ａに近い側へ移動し難くなるように、その所定箇所が最小幅の箇所よりも軸平行部２５ａから遠い奥側に位置してその所定箇所の幅が最小幅よりも広くなっていてもよい。
【００２７】
第一部材２０と第二部材３０との組み付けは、凸部３５が凹部２５に沿って移動するように行われる。凸部３５は、凹部２５の先端側付近に嵌って係止壁２６に係止されることが可能である。第一部材２０と第二部材３０とは、凸部３５が凹部２５に嵌って係止壁２６に係止されることにより、互いに組み付けられた状態になり、互いに離間する軸方向Ｘへの相対移動が規制されることとなる。
【００２８】
尚、凸部３５が凹部２５に嵌ることにより第一部材２０と第二部材３０との組み付けが完了した状態では、載置部２２と対向部３２との軸方向Ｘに離間する距離は、培養膜１０の支持枠１２における組み付け前の厚さよりも小さくなるように設定されている。これにより、組み付け完了状態では、培養膜１０が第一部材２０の載置部２２と第二部材３０の対向部３２とに挟持される。
【００２９】
次に、細胞培養器具１の組み立てについて説明する。
【００３０】
細胞培養器具１の構成部品である培養膜１０、第一部材２０、及び第二部材３０を用意する。細胞培養器具１の組み立ては、ピンセットなどの治具を用いた人の手作業により行われる。この組み立て手順としては、まず、第一部材２０への培養膜１０の組み付けが行われる。第一部材２０への培養膜１０の組み付けは、治具で培養膜１０を把持したうえで、その培養膜１０を第一部材２０に対してその第一部材２０における載置部２２とは軸方向反対側から軸方向Ｘへ移動させて挿入し、その培養膜１０を第一部材２０の載置部２２の軸方向端面に当接させて載置することにより実現される。尚、上記した第一部材２０への培養膜１０の組み付けは、第一部材２０を載置部２２側の軸方向端部が下方に位置するようにセットした状態で行われることとすればよい。
【００３１】
次に、上記の如く載置部２２に培養膜１０が載置された第一部材２０への第二部材３０の組み付けが行われる。この組み付けは、まず、治具で第二部材３０の把持部３３を把持したうえで、その第二部材３０を第一部材２０に対してその第一部材２０における載置部２２とは軸方向反対側から軸方向Ｘの互いに近づく方向へ移動させて挿入し、第二部材３０の凸部３５を第一部材２０の凹部２５の軸平行部２５ａに沿って移動させ、その後、第二部材３０を第一部材２０に対して周方向一方へ移動させ、第二部材３０の凸部３５を第一部材２０の凹部２５の直交部２５ｂに沿って移動させることにより実現される。尚、上記した第一部材２０への第二部材３０の組み付けは、第一部材２０を載置部２２側の軸方向端部が下方に位置するようにセットした状態で第二部材３０をその第一部材２０の上方から挿入するものとすればよい。
【００３２】
上記の移動が行われて、第二部材３０の凸部３５が第一部材２０の凹部２５の先端側付近に嵌ると、両部材２０，３０の軸方向Ｘの互いに離間する方向への相対移動が規制されると共に両部材２０，３０が互いに装着されて、両部材２０，３０の組み付けが完了する。両部材２０，３０の組み付けが完了すると、載置部２２と対向部３２とがその間で培養膜１０（具体的には、支持枠１２）を挟持すると共に、第二部材３０の凸部３５が第一部材２０の凹部２５の係止壁２６に係止される。
【００３３】
この細胞培養器具１の構造によれば、第一部材２０及び第二部材３０の組付後、第一部材２０及び第二部材３０により培養膜１０の支持枠１２を挟持した状態で、その第一部材２０と第二部材３０との軸方向Ｘへの相対移動を、係止部としての凹部２５及び凸部３５により規制することができる。このため、培養膜１０を挟持する第一部材２０と第二部材３０との組付け状態での密着性を向上させることができ、細胞培養時に培養膜１０を挟んだ両側間でのシール性を確保することができる。尚、側面開口部２３に位置する培養膜１０は、第一部材２０及び第二部材３０に挟持されていないが、その領域は狭いため、支持枠１２と第二部材３０の弾性押圧力のみでシールされている。
【００３４】
上記の如く第一部材２０と第二部材３０との組み付けが完了すると、その後、培養膜１０の一方の面への細胞培養が行われる。細胞培養は、細胞培養器具１を細胞培養用のプレートのウェル内に入れて培養液で満たせばよい。上記の培養膜１０の一方の面への細胞培養は、まず、培養膜１０の第二部材３０側の一方の面が鉛直上方を向くように細胞培養器具１を培養液中に浸漬し、その状態でその一方の面側の空間に対して一種目の細胞を供給することにより行われる。
【００３５】
上記の如く、一種目の細胞の培養が完了すると、次に、細胞培養器具１の第一部材２０と第二部材３０との組み付けが解除され、培養膜１０が上下反転されて、再度、第一部材２０と第二部材３０とが組み付けられる。第一部材２０と第二部材３０との組み付けの解除は、上記した組む付けの手順とは逆の手順で行われる。具体的には、その組み付け解除は、まず、第二部材３０を第一部材２０に対して周方向他方へ移動させ、その後、第二部材３０を第一部材２０に対して軸方向Ｘの互いに離間する方向へ移動させることにより実現される。この組み付けが解除されると、次に、培養膜１０が、第一部材２０の載置部２２に載置された状態から治具で軸方向Ｘへ移動され、その後に上下反転されて、再度、その載置部２２の軸方向端面に当接されて載置される。そして、上記の如く、その載置部２２に培養膜１０が載置された第一部材２０への第二部材３０の組み付けが行われる。
【００３６】
上記の組み付けが完了すると、載置部２２と対向部３２とがその間で培養膜１０を挟持すると共に、第二部材３０の凸部３５が第一部材２０の凹部２５の係止壁２６に係止されるので、上記の効果と同様の効果を得ることができる。また、この組み付けが完了すると、その後、培養膜１０の他方の面への細胞培養が行われる。この培養膜１０の他方の面への細胞培養は、まず、培養膜１０の第二部材３０側の他方の面が鉛直上方を向いた状態で細胞培養器具１を培養液中に浸漬し、その状態でその他方の面側の空間に対して二種目の細胞を供給することにより行われる。
【００３７】
このように、細胞培養器具１の構造によれば、培養膜１０の両面に二種類の細胞を培養することができる。また、培養膜１０の両面に二種類の細胞を培養するうえで、培養膜１０の片面での細胞の培養後、第一部材２０と第二部材３０との組み付け解除後に培養膜１０自体を上下反転させることとすればよく、第一部材２０及び第二部材３０自体を上下反転させることは不要である。このため、培養膜１０の両面に二種類の細胞を培養するうえでの作業性を向上させることができる。
【００３８】
また、培養膜１０の両面に二種類の細胞を培養するうえで、培養膜１０の上下反転を考慮して細胞培養器具を上下対称構造とすることは不要である。このため、第一部材２０における載置部２２に載置される培養膜１０よりも軸方向Ｘの載置部２２側の構造を簡略化して、細胞培養器具１の小型化を図ることができ、細胞培養を実現するうえでウェルの小型化や培養液の少量化を図ることができる。更に、培養膜１０を独立して第一部材２０及び第二部材３０から取り外すことができるので、細胞培養後の培養膜１０に対して単独で顕微鏡観察などの評価を行うことができ、培養膜と保持部材とが一体となった構造に比べて、その評価を容易かつ適切に行うことができる。
【００３９】
また、細胞培養器具１において、第一部材２０は、第一筒部２１にて周壁部２１ａを径方向に貫通しかつ軸方向Ｘに延びる切欠部２１ｂを有している。この切欠部２１ｂは、第一部材２０の径方向外方からピンセットなどの治具を挿入させて軸方向Ｘに移動させるためのスリットである。培養膜１０は、第一部材２０の載置部２２に載置されて第一部材２０と第二部材３０とで挟持されるが、その載置部２２への着脱作業のために、切欠部２１ｂから挿入されたピンセットなどの治具で把持されることが可能である。このため、治具を用いた第一部材２０の載置部２２への培養膜１０の着脱を容易に行うことができると共に、培養膜１０の両面への細胞培養を実現するうえで細胞培養器具１として多くの部品を用意することは不要であり、最小限の構成で培養膜１０の両面への細胞培養を行うことができる。
【００４０】
第一部材２０は、また、第一筒部２１にて周壁部２１ａを径方向に貫通する側面開口部２３を有している。この側面開口部２３は、周壁部２１ａにおける少なくとも載置部２２に載置された培養膜１０よりも軸方向Ｘの載置部２２側の箇所を含む所定部位に設けられている。このため、培養膜１０の一方の面への一種目の細胞の培養後、その培養膜１０を上下反転させて他方の面への二種目の細胞の培養を行う際、一種目の細胞が培養されている面に溜まるエアを側面開口部２３を介して第一部材２０の外部へ放出することができるので、最初に播種される一種目の細胞の培養面上にエアが残留するのを防止することができ、そのエア残留に起因する不都合（例えば、一種目の細胞が培養液に接触しないことなど）を回避することができる。
【００４１】
更に、上記した切欠部２１ｂ及び側面開口部２３は、第一部材２０における互いに周方向同じ位置に設けられており、互いに軸方向Ｘに連続して配置されて一体化されている。このため、切欠部２１ｂ及び側面開口部２３が設けられる第一部材２０の型構造を簡素化することができ、第一部材２０を精度良く簡易に製造することができる。
【００４２】
尚、上記の第一実施形態においては、第一部材２０の凹部２５及び第二部材３０の凸部３５がそれぞれ、特許請求の範囲に記載した「係止部」に相当している。
【００４３】
ところで、上記の第一実施形態においては、第一部材２０の切欠部２１ｂ及び側面開口部２３が、互いに周方向同じ位置に設けられ、互いに軸方向Ｘに連続して配置されている。しかしながら、本発明は、これに限定されるものではなく、第一部材２０の切欠部２１ｂ及び側面開口部２３が、互いに周方向異なる位置に設けられ、互いに軸方向Ｘに不連続で配置されていてもよい。この変形形態の構造によれば、上記の第一実施形態の構造に比べて、第一部材２０の周方向への捩れ剛性を確保することができる。
【００４４】
また、上記の第一実施形態においては、第一部材２０が、第一筒部２１の周壁部２１ａの内面に径方向外側へ向けて凹んで設けられた凹部２５を有すると共に、第二部材３０が、第二筒部３１の外面に径方向外側へ向けて突起して設けられた凸部３５を有する。しかしながら、本発明は、これに限定されるものではなく、第一部材２０が、第一筒部２１の内面に径方向内側へ向けて突起して設けられた凸部を有すると共に、第二部材３０が、第二筒部３１の外面に径方向内側へ向けて凹んで設けられた凹部を有するものとしてもよい。
【００４５】
また、上記の第一実施形態においては、二種類の細胞を培養膜１０の両面に播種することとしている。しかしながら、本発明は、これに限定されるものではなく、三種類以上の細胞を培養膜１０の両面に播種することとしてもよい。例えば、三種類の細胞を用意して、二種類の細胞を培養膜１０の一方の面に播種し、その後、培養膜１０を裏返して、一種類の細胞を培養膜１０の他方の面に播種することとしてもよい。
【００４６】
［第二実施形態］
第二実施形態の細胞培養器具１００は、上記第一実施形態の細胞培養器具１と同様に、足場依存性のある細胞を培養する器具である。以下、細胞培養器具１００において、細胞培養器具１と同じ構成要素については、同じ符号を付してその説明を省略又は簡略する。
【００４７】
細胞培養器具１００は、図７に示す如く、培養膜１０と、第一部材１１０と、第二部材１２０と、を備えている。細胞培養器具１００は、培養膜１０を第一部材１１０と第二部材１２０とで挟持して固定する。
【００４８】
第一部材１１０及び第二部材１２０はそれぞれ、培養膜１０を挟持固定するための基材である。第一部材１１０及び第二部材１２０はそれぞれ、筒状に形成された部材である。第一部材１１０及び第二部材１２０はそれぞれ、樹脂材料やゴムなどにより形成されている。
【００４９】
第一部材１１０は、軸方向Ｘに筒状に延びる第一筒部１１１と、載置部（図示せず）と、第一筒部１１１を径方向に貫通する側面開口部１１２と、を有している。側面開口部１１２は、第一筒部１１１における少なくとも載置部に載置された培養膜１０よりも軸方向Ｘの載置部側（図７における下側）の箇所を含む所定部位に設けられている。尚、この載置部は、第一筒部１１１における軸方向Ｘに向いた軸方向端面であってよい。
【００５０】
第二部材１２０は、第一部材１１０の第一筒部１１１の一部に外挿されて配置される。第二部材１２０は、軸方向Ｘに筒状に延びる第二筒部１２１と、第一部材１１０の載置部に軸方向Ｘで対向する対向部１２２と、第一筒部１１１を径方向に貫通する側面開口部１２３と、を有している。対向部１２２は、第二筒部１２１の軸方向一端（図７における下端）の内周側に環状に形成されている。対向部１２２は、軸方向端面にて培養膜１０の支持枠１２に当接してその培養膜１０を保持する。尚、対向部１２２は、第二筒部１２１における軸方向Ｘに向いた軸方向端面であってよい。
【００５１】
側面開口部１２３は、第二筒部１２１の周方向一部に設けられ、第二筒部１２１の所定部位に一箇所設けられている。側面開口部１２３は、第一部材１１０の側面開口部１１２に連通している。この側面開口部１２３が設けられる所定部位は、少なくとも載置部に載置された培養膜１０よりも軸方向Ｘの載置部側（図７における下側）の箇所を含んでいる。側面開口部１２３は、第一部材１１０の側面開口部１１２と共に、載置部に載置された培養膜１０の下面に溜まるエアを外部に放出するエア抜き機能を有している。
【００５２】
第一部材１１０及び第二部材１２０は、互いの組付け状態で互いに離間する軸方向Ｘへの相対移動を規制する係止部を有している。すなわち、第一部材１１０は、係止部としての凸部１１３を有していると共に、第二部材１２０は、係止部としての凹部１２４を有している。凸部１１３及び凹部１２４は、第一部材１１０及び第二部材１２０の組付け状態で互いに離間する軸方向Ｘへの相対移動を規制する。
【００５３】
凸部１１３は、第一筒部１１１の外面に径方向外側へ向けて突起して設けられた突起部である。凸部１１３は、例えば第一部材１１０の周方向二箇所（例えば１８０°異なる位置）に設けられている。凸部１１３は、凹部１２４に対応した大きさに形成されている。具体的には、凸部１１３は、凹部１２４の幅に対応した幅を有している。
【００５４】
凹部１２４は、第二筒部１２１の内面に径方向外側へ向けて凹んで設けられた溝部である。凹部１２４は、第二筒部１２１の軸方向一端部に形成されている。凹部１２４は、例えば第二部材１２０の周方向二箇所（例えば１８０°異なる位置）に設けられている。凹部１２４は、軸方向Ｘに対して傾斜して形成されている。すなわち、凹部１２４は、周方向に延びつつ軸方向Ｘに延びるように螺旋状に形成されている。凹部１２４の最奥部は、上記の第一部材１１０の凸部１１３が係止される係止壁を形成している。
【００５５】
第一部材１１０と第二部材１２０との組み付けは、凸部１１３が凹部１２４に沿って移動するように行われる。凸部１１３は、凹部１２４の最奥部に嵌って係止壁に係止されることが可能である。第一部材１１０と第二部材１２０とは、凸部１１３が凹部１２４に嵌って係止壁に係止されることにより、互いに組み付けられた状態になり、互いに離間する軸方向Ｘへの相対移動が規制されることとなる。
【００５６】
次に、細胞培養器具１００の組み立てについて説明する。
【００５７】
細胞培養器具１００の構成部品である培養膜１０、第一部材１１０、及び第二部材１２０を用意する。細胞培養器具１００の組み立ては、ピンセットなどの治具を用いた人の手作業により行われる。この組み立て手順としては、まず、第一部材１１０への培養膜１０の組み付けが行われる。第一部材１１０への培養膜１０の組み付けは、治具で培養膜１０を把持したうえで、その培養膜１０を第一部材１１０に対して軸方向Ｘへ移動させて、その培養膜１０を第一部材１１０の載置部の軸方向端面に当接させて載置することにより実現される。尚、上記した第一部材１１０への培養膜１０の組み付けは、第一部材１１０を載置部側の軸方向端部が上方に位置するようにセットした状態で行われることとすればよい。
【００５８】
次に、上記の如く載置部に培養膜１０が載置された第一部材１１０への第二部材１２０の組み付けが行われる。この組み付けは、まず、治具で第二部材１２０を第一部材１１０に対して軸方向Ｘの互いに近づく方向へ移動させて外挿すると共に周方向に回転させて、第一部材１１０の凸部１１３を第二部材１２０の凹部１２４に沿って移動させることにより実現される。尚、上記した第一部材１１０への第二部材１２０の組み付けは、第一部材１１０を載置部側の軸方向端部が上方に位置するようにセットした状態で第二部材１２０をその第一部材１１０の上方から挿入するものとすればよい。
【００５９】
上記の移動が行われて、第一部材１１０の凸部１１３が第二部材１２０の凹部１２４の最奥部に嵌ると、両部材１１０，１２０の軸方向Ｘの互いに離間する方向への相対移動が規制されると共に両部材１１０，１２０が互いに装着されて、両部材１１０，１２０の組み付けが完了する。両部材１１０，１２０の組み付けが完了すると、載置部と対向部１２２とがその間で培養膜１０（具体的には、支持枠１２）を挟持すると共に、第一部材１１０の凸部１１３が第二部材１２０の凹部１２４の係止壁に係止される。
【００６０】
この細胞培養器具１００の構造によれば、第一部材１１０及び第二部材１２０の組付後、第一部材１１０及び第二部材１２０により培養膜１０の支持枠１２を挟持した状態で、その第一部材１１０と第二部材１２０との軸方向Ｘへの相対移動を、係止部としての凸部１１３及び凹部１２４により規制することができる。このため、培養膜１０を挟持する第一部材１１０と第二部材１２０との組付け状態での密着性を向上させることができ、細胞培養時に培養膜１０を挟んだ両側間でのシール性を確保することができる。
【００６１】
上記の如く第一部材１１０と第二部材１２０との組み付けが完了すると、その後、上記第一実施形態の場合と同様の手法で、培養膜１０の両面への細胞培養が行われる。従って、細胞培養器具１００によれば、上記第一実施形態の細胞培養器具１と同様の効果を得ることができる。
【００６２】
尚、上記の第二実施形態においては、第一部材１１０の凸部１１３及び第二部材１２０の凹部１２４がそれぞれ、特許請求の範囲に記載した「係止部」に相当している。
【００６３】
ところで、上記の第二実施形態においては、第一部材１１０が、第一筒部１１１の外面に径方向外側へ向けて突起して設けられた凸部１１３を有すると共に、第二部材１２０が、第二筒部１２１の内面に径方向外側へ向けて凹んで設けられた凹部１２４を有する。しかしながら、本発明は、これに限定されるものではなく、第一部材１１０が、第一筒部１１１の外面に径方向内側へ向けて凹んで設けられた凹部を有すると共に、第二部材１２０が、第二筒部１２１の内面に径方向内側へ向けて突起して設けられた凸部を有するものとしてもよい。
【００６４】
［第三実施形態］
第三実施形態の細胞培養器具２００は、上記第一実施形態の細胞培養器具１と同様に、足場依存性のある細胞を培養する器具である。以下、細胞培養器具２００において、細胞培養器具１と同じ構成要素については、同じ符号を付してその説明を省略又は簡略する。
【００６５】
細胞培養器具２００は、図８及び図９に示す如く、培養膜１０と、第一部材２１０と、第二部材２２０と、を備えている。細胞培養器具２００は、培養膜１０を第一部材２１０と第二部材２２０とで挟持して固定する。
【００６６】
第一部材２１０及び第二部材２２０はそれぞれ、培養膜１０を挟持固定するための基材である。第一部材２１０及び第二部材２２０はそれぞれ、筒状に形成された部材である。第一部材２１０及び第二部材２２０はそれぞれ、樹脂材料やゴムなどにより形成されている。
【００６７】
第一部材２１０は、上記第一実施形態の第一部材２０の第一筒部２１及び載置部２２と同様の、軸方向Ｘに筒状に延びる第一筒部２１１と、培養膜１０が載置される載置部２１２と、を有している。第二部材２２０は、上記第一実施形態の第二部材３０の第二筒部３１及び対向部３２と同様の、第一部材２１０の第一筒部２１１内に挿入されて配置される。第二部材２２０は、軸方向Ｘに筒状に延びる第二筒部２２１と、第一部材２１０の載置部２１２に軸方向Ｘで対向する対向部２２２と、を有している。
【００６８】
第一部材２１０及び第二部材２２０は、互いの組付け状態で互いに離間する軸方向Ｘへの相対移動を規制する係止部を有している。この係止部は、いわゆるスナップフィット方式の係止部である。すなわち、第一部材２１０は、係止部としての弾性変形部２１３を有していると共に、第二部材２２０は、係止部としての溝部２２３を有している。弾性変形部２１３及び溝部２２３は、第一部材２１０及び第二部材２２０の組付け状態で互いに離間する軸方向Ｘへの相対移動を規制する。
【００６９】
弾性変形部２１３は、第一筒部２１１の軸方向端面から軸方向Ｘへ向けて板状に延びる部位である。弾性変形部２１３は、径方向に弾性変形することが可能である。弾性変形部２１３は、例えば第一部材２１０の周方向二箇所（例えば１８０°異なる位置）に設けられている。弾性変形部２１３の軸方向先端部には、爪部２１４が設けられている。爪部２１４は、弾性変形部２１３の板状本体から径方向内側に突出する引掛部である。爪部２１４の径方向内面は、テーパ状に傾斜した傾斜面２１５をなしている。爪部２１４の径方向幅は、根元側が最大であり、軸方向先端にかけて徐々に小さくなるように設定されている。
【００７０】
溝部２２３は、第二筒部２２１の外面に径方向内側へ向けて凹んで設けられている。溝部２２３は、第二筒部２２１の軸方向中途に形成されている。溝部２２３は、第一部材２１０と第二部材２２０とが軸方向Ｘに所定位置関係まで接近した際に爪部２１４が引っ掛かる部位である。溝部２２３は、例えば第二部材２２０の周方向二箇所（例えば１８０°異なる位置）に設けられている。溝部２２３は、第一部材２１０の弾性変形部２１３の爪部２１４に対応した大きさに形成されている。溝部２２３は、第一部材２１０の爪部２１４が引っ掛かって係止される係止壁を形成している。
【００７１】
第一部材２１０と第二部材２２０との組み付けは、図８及び図９に示す如く、弾性変形部２１３の爪部２１４が溝部２２３に引っ掛かるように軸方向Ｘに相対移動させることにより行われる。第一部材２１０と第二部材２２０とは、爪部２１４が溝部２２３に引っ掛かって係止されることにより、互いに組み付けられた状態になり、互いに離間する軸方向Ｘへの相対移動が規制されることとなる。
【００７２】
次に、細胞培養器具２００の組み立てについて説明する。
【００７３】
細胞培養器具２００の構成部品である培養膜１０、第一部材２１０、及び第二部材２２０を用意する。細胞培養器具２００の組み立ては、ピンセットなどの治具を用いた人の手作業により行われる。この組み立て手順としては、まず、第一部材２１０への培養膜１０の組み付けが行われる。第一部材２１０への培養膜１０の組み付けは、治具で培養膜１０を把持したうえで、その培養膜１０を第一部材２１０に対して軸方向Ｘへ移動させて、その培養膜１０を第一部材２１０の載置部２１２の軸方向端面に当接させて載置することにより実現される。尚、上記した第一部材２１０への培養膜１０の組み付けは、第一部材２１０を載置部側の軸方向端部が上方に位置するようにセットした状態で行われることとすればよい。
【００７４】
次に、上記の如く載置部に培養膜１０が載置された第一部材２１０への第二部材２２０の組み付けが行われる。この組み付けは、治具で第二部材１２０を第一部材１１０に対して軸方向Ｘの互いに近づく方向へ移動させて挿入することにより実現される。具体的には、まず、第二部材２２０の第二筒部２２１を第一部材２１０の弾性変形部２１３の爪部２１４の傾斜面２１５に当接させて、その弾性変形部２１３の軸方向先端部を径方向外側に撓ませて変形させ、その後、弾性変形部２１３の爪部２１４が第二部材２２０の溝部２２３に達した際に弾性変形部２１３の軸方向先端部を径方向内側に戻し変形させてその爪部２１４を溝部２２３に引っ掛ける。尚、上記した第一部材２１０への第二部材２２０の組み付けは、第一部材２１０を載置部２１２側の軸方向端部が下方に位置するようにセットした状態で第二部材２２０をその第一部材２１０の上方から挿入するものとすればよい。
【００７５】
上記の移動が行われて、第一部材２１０の弾性変形部２１３の爪部２１４が第二部材２２０の溝部２２３に引っ掛かると、両部材２１０，２２０の軸方向Ｘの互いに離間する方向への相対移動が規制されると共に両部材２１０，２２０が互いに装着されて、両部材２１０，２２０の組み付けが完了する。両部材２１０，２２０の組み付けが完了すると、載置部２１２と対向部２２２とがその間で培養膜１０（具体的には、支持枠１２）を挟持すると共に、第一部材２１０の爪部２１４が第二部材２２０の溝部２２３に係止される。
【００７６】
この細胞培養器具２００の構造によれば、第一部材２１０及び第二部材２２０の組付後、第一部材２１０及び第二部材２２０により培養膜１０の支持枠１２を挟持した状態で、その第一部材２１０と第二部材２２０との軸方向Ｘへの相対移動を、係止部としての弾性変形部２１３及び溝部２２３により規制することができる。このため、培養膜１０を挟持する第一部材２１０と第二部材２２０との組付け状態での密着性を向上させることができ、細胞培養時に培養膜１０を挟んだ両側間でのシール性を確保することができる。
【００７７】
上記の如く第一部材２１０と第二部材２２０との組み付けが完了すると、その後、上記第一実施形態の場合と同様の手法で、培養膜１０の両面への細胞培養が行われる。従って、細胞培養器具２００によれば、上記第一実施形態の細胞培養器具１と同様の効果を得ることができる。また、細胞培養器具２００によれば、第一部材２１０と第二部材２２０との組み付けを両部材２１０，２２０を軸方向Ｘに相対移動させるだけで実現することができるので、組み付け性を簡素化して、組み付け作業を容易化することができる。
【００７８】
尚、第一部材２１０と第二部材２２０との組み付けを解除するためには、図９に示す如く、棒状の治具３００を用いて、その第一部材２１０の弾性変形部２１３を強制的に径方向外側に撓ませて変形させ、その状態で第二部材２２０を第一部材２１０から軸方向Ｘに引き抜くこととすればよい。また、この治具３００を用いて第一部材２１０と第二部材２２０との組み付けを解除するためには、第一部材２１０の弾性変形部２１３の爪部２１４が第二部材２２０の溝部２２３に引っ掛かっている状態で、治具３００が爪部２１４の傾斜面２１５に当接できるように、その傾斜面２１５の一部が第二部材２２０の第二筒部２２１の外面よりも径方向外側に位置していることが必要である。この構成によれば、治具３００を用いて第一部材２１０と第二部材２２０との組み付けを解除することができる。
【００７９】
ところで、上記の第三実施形態においては、第一部材２１０の弾性変形部２１３及び第二部材２２０の溝部２２３がそれぞれ、特許請求の範囲に記載した「係止部」に相当している。
【００８０】
また、上記の第三実施形態においては、第一部材２１０が、板状本体から径方向内側に突出する爪部２１４が設けられた弾性変形部２１３を有すると共に、第二部材２２０が、第二筒部２２１の外面に径方向内側へ向けて凹んで設けられた溝部２２３を有する。しかしながら、本発明は、これに限定されるものではなく、第一部材２１０が、第一筒部２１１の内面に径方向外側へ向けて凹んで設けられた溝部を有すると共に、第二部材２２０が、板状本体から径方向外側に突出する爪部が設けられた弾性変形部を有するものとしてもよい。
【００８１】
尚、上記の第一、第二、及び第三実施形態においては、培養膜１０が、膜体１１と、膜体１１の周縁に接合される環状の支持枠１２と、を有するものとした。しかしながら、本発明は、これに限定されるものではなく、支持枠１２は、膜体１１に接合される枠状の構造を有すれば、例えば軸方向Ｘから見て十字状や網状に形成されていてもよい。
【００８２】
尚、本発明は、上述した実施形態や変形形態に限定されるものではなく、本発明の趣旨を逸脱しない範囲で種々の変更を施すことが可能である。
【符号の説明】
【００８３】
１，１００，２００：細胞培養器具、１０：培養膜、１１：膜体、１２：支持枠、２０，１１０，２１０：第一部材、２１，１１１，２１１：第一筒部、２１ａ：周壁部、２１ｂ：切欠部、２２，２１２：載置部、２３：側面開口部、２５，１２４：凹部、２５ａ：軸平行部、２５ｂ：直交部、３０，１２０，２２０：第二部材、３１，１２１，２２１：第二筒部、３２，１２２，２２２：対向部、３５，１１３：凸部、２１３：弾性変形部、２１４：爪部、２１５：傾斜面、２２３：溝部。
【図１】
2020162457.tif 000003
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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