(57)【要約】      （修正有）【課題】好酸球性疾患の処置のための生物学的に活性なグルタルイミド誘導体を含有する医薬組成物の提供。【解決手段】気管支喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎及び好酸球性肺炎からなる群より選択される好酸球性疾患を処置するための医薬組成物であって、下記化合物、又はその薬学的に許容しうる塩を含む、医薬組成物。2020002152.tif 000036【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
一般式（Ｉ）：
【化１】
2020002152.tif 000020
［式中、
Ｒ１及びＲ’１は、独立して水素、又はＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は、場合によりＣ１−Ｃ６アルキルで置換された
【化２】
2020002152.tif 000021
である］の化合物、又はその薬学的に許容しうる塩である、好酸球性疾患の処置のための治療薬。
【請求項２】
Ｒ１及びＲ’１が、独立して水素又はメチルであり；
Ｒ２が、
【化３】
2020002152.tif 000022
である、請求項１に記載の治療薬。
【請求項３】
一般式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容しうる塩が、以下の化合物：
【表１】
2020002152.tif 000023
からなる群から選択される、請求項１に記載の治療薬。
【請求項４】
好酸球性疾患が、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、ポリープ状鼻副鼻腔症、好酸球性結腸炎、好酸球性症候群、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、チャーグ−ストラウス症候群、アナフィラキシーショック、クインケ浮腫、好酸球性脈管炎、好酸球性食道炎、好酸球性胃腸炎、又は線維症である、請求項１に記載の治療薬。
【請求項５】
一般式（Ｉ）：
【化４】
2020002152.tif 000024
［式中、
Ｒ１及びＲ’１は、独立して水素、又はＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は、場合によりＣ１−Ｃ６アルキルで置換された
【化５】
2020002152.tif 000025
である］の化合物、又はその薬学的に許容しうる塩の有効量、及び薬学的に許容しうる担体を含む、好酸球性疾患の処置のための医薬組成物。
【請求項６】
Ｒ１及びＲ’１が、独立して水素又はメチルであり、
Ｒ２が、
【化６】
2020002152.tif 000026
である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項７】
一般式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容しうる塩が、以下の化合物：
【表２】
2020002152.tif 000027
からなる群から選択される、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項８】
好酸球性疾患が、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、ポリープ状鼻副鼻腔症、好酸球性結腸炎、好酸球性症候群、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、チャーグ−ストラウス症候群、アナフィラキシーショック、クインケ浮腫、好酸球性脈管炎、好酸球性食道炎、好酸球性胃腸炎、又は線維症である、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項９】
好酸球性疾患を処置する方法であって、一般式（Ｉ）：
【化７】
2020002152.tif 000028
［式中、
Ｒ１及びＲ’１は、独立して水素、又はＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は、場合によりＣ１−Ｃ６アルキルで置換された
【化８】
2020002152.tif 000029
である］の化合物、又はその薬学的に許容しうる塩の有効量を患者に投与することを含む方法。
【請求項１０】
Ｒ１及びＲ’１が、独立して水素又はメチルであり、
Ｒ２が、
【化９】
2020002152.tif 000030
である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
一般式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容しうる塩が、以下の化合物：
【表３】
2020002152.tif 000031
からなる群から選択される、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
好酸球性疾患が、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、ポリープ状鼻副鼻腔症、好酸球性結腸炎、好酸球性症候群、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、チャーグ−ストラウス症候群、アナフィラキシーショック、クインケ浮腫、好酸球性脈管炎、好酸球性食道炎、好酸球性胃腸炎、又は線維症である、請求項９に記載の方法。
【請求項１３】
好酸球性疾患の処置のための治療薬の製造のための、一般式（Ｉ）：
【化１０】
2020002152.tif 000032
［式中、
Ｒ１及びＲ’１は、独立して水素、又はＣ１−Ｃ６アルキルであり；
Ｒ２は、場合によりＣ１−Ｃ６アルキルで置換された
【化１１】
2020002152.tif 000033
である］の化合物、又はその薬学的に許容しうる塩の使用。
【請求項１４】
Ｒ１及びＲ’１が、独立して水素又はメチルであり、
Ｒ２が、
【化１２】
2020002152.tif 000034
である、請求項１３に記載の使用。
【請求項１５】
一般式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容しうる塩が、以下の化合物：
【表４】
2020002152.tif 000035
からなる群から選択される、請求項１３に記載の使用。
【請求項１６】
好酸球性疾患が、気管支喘息、アレルギー性鼻炎、ポリープ状鼻副鼻腔症、好酸球性結腸炎、好酸球性症候群、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、チャーグ−ストラウス症候群、アナフィラキシーショック、クインケ浮腫、好酸球性脈管炎、好酸球性食道炎、好酸球性胃腸炎、又は線維症である、請求項１３に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、好酸球性疾患の処置のための医薬としての生物学的に活性なグルタルイミド誘導体又はその薬学的に許容しうる塩の使用に関する。
【０００２】
背景
好酸球は、自然免疫の細胞である。好酸球は、骨髄で産生され、好ましくは血液中を循環する。好酸球の主なエフェクター機能は、各種刺激による活性化に応答しての細胞質顆粒の即時放出である。細胞質顆粒は、炎症誘発性メディエーター：サイトカイン、ケモカイン、脂質−及び神経伝達物質（neuromediators）、成長因子、並びにカチオン性タンパク質を含む。好酸球のカチオン性タンパク質は、４つのクラス：主要塩基性タンパク質（ＭＢＰ）、好酸球ペルオキシダーゼ（ＥＰＯ）、好酸球カチオン性タンパク質（ＥＣＰ）、及び好酸球誘導神経毒（ＥＤＮ）を含む。これらのタンパク質は、共同して、感染性微生物及び宿主の組織の両方に対して細胞毒性作用を有し、好酸球性炎症を惹起する[Hogan SP, Rosenberg HF, Moqbel R, et al. Eosinophils: biological properties and role in health and disease//Clin Exp Allergy. 2008; 38(5):709-50]。
【０００３】
血液中の好酸球数は、正常では０．０２〜０．３×１０９／Ｌ、又は総白血球の０．５〜５％である。正常レベルに対しての血液中の好酸球数の増大が、好酸球増加症である。過好酸球増加症又は強度の好酸球増加症は、血液中の好酸球の含有率が１５％又はそれ以上である状態、通常は、総白血球数が増大している状態である[Hoffman R, Benz Jr. EJ, Shattil SJ, et al., eds. Hematology: Basic Principles and Practice. 4th ed. Philadelphia, Pa: Churchill Livingston; 2005:768]。
【０００４】
血液及び組織における好酸球レベルの増加は、各種病因及び病原の疾患を伴う。これらには、寄生虫侵襲；喘息、鼻炎、鼻ポリープ、好酸球性結腸炎、好酸球性症候群、アレルギー性結膜炎、及びアトピー性皮膚炎などの広範囲のアレルギー疾患；リウマチ性疾患（関節リウマチ、びまん性好酸球性筋膜炎、チャーグ−ストラウス症候群、結節性動脈周囲炎）；並びに不明確な病因の病態（好酸球性食道炎、好酸球性胃腸炎）が含まれる[Blanchard C, Rothenberg ME. Biology of the eosinophil// Adv Immunol. 2009; 101:81-121]。
【０００５】
アレルギー疾患のなかでも気管支喘息は、突発性の気流閉塞、気道の炎症、及び非特異的アレルゲンに対する気管支の反応性の増大を特徴とする慢性炎症性気道疾患であり、医療上、最も重要である。
【０００６】
好酸球が、喘息におけるアレルギー性応答の重要な構成要素（component）であるとの多くの証拠がある。肥満細胞によって分泌されるＩＬ−３及びＩＬ−５は、肺において好酸球の蓄積をもたらし、続いてＬＴＣ４、好酸球カチオン性タンパク質、主要塩基性タンパク質、神経毒、好酸球ペルオキシダーゼ（ＥＰＯ）、トランスフォーミング増殖因子、及び遊離ラジカルの放出を伴うこれらの細胞の活性化が起きる[Blanchard C, Rothenberg ME. Biology of the eosinophil// Adv Immunol. 2009; 101:81-121]。
【０００７】
喘息における炎症過程の活性は、好酸球カチオン性タンパク質の血清中濃度と直接相関していることが認められている[Bjornsson E., Janson C., Hakansson L. et al. Serum eosinophil cationic protein in relation to bronchial asthma in young Swedish population. Allergy 1994; Vol. 49: 400-407]。気管支喘息患者の洗浄液では、好酸球数が上昇している。好酸球は、原因が大きな影響を与えるアレルゲン（cause-significant allergen）によって直接活性化されうるため、好酸球細胞の表面は、ＩｇＥに対して低親和性の受容体を有する。好酸球細胞の表面は、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−５、ＧＭ−ＣＳＦ、ＰＡＦ、及びプロスタグランディンに対する受容体を有することが更に認められている。これらの受容体を介して上述のサイトカイン及び脂質メディエーターが、メディエーター（ＬＴＣ４、ＰＡＦ）及びサイトカイン（ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−８、ＧＭ−ＣＳＦ、ＴＧＦβ）を放出する好酸球の活性化を誘導することができる。好酸球タンパク質の作用に由来する気道上皮の破壊により、気管支の反応性亢進の発症、及び気道上皮のバリア機能の低下が惹起される。
【０００８】
現在、組織中の好酸球増加と、ある種の線維症（過好酸性症候群患者における肝線維症を伴う心内膜心筋線維症、結節硬化ホジキン病、及び気管支喘息における上皮下線維症）との間に明らかな相関が存在することが認められているため、組織の再生及び再調節における好酸球の役割が大きく注目されている[Noguchi H. et al. Tissue eosinophilia and eosinophil degranulation in syndromes associated with fibrosis // Am. J. Pathol. 1992, Vol. 140. P. 521-528]。
【０００９】
好酸球は、トランスフォーミング増殖因子−β（ＴＧＦ−β）、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）−２、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）−９、ＩＬ−１β、ＩＬ−１３、及びＩＬ−１７を含む、多数の線維形成性及び増殖因子の供給源である。抗ＩＬ−５抗体に関する臨床試験もまた、網状の基底膜における特定のマトリックスタンパク質の沈着と関連する事象における好酸球の役割を支持している[Kay AB, Phipps S, Robinson DS. A role for eosinophils in airway remodeling in asthma//Trends Immunol. 2004, Vol. 25, P. 477-82]。
【００１０】
今日、喘息を処置するために最も多く行われている方法は、コルチコステロイド（ブデソニド、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、プロピオン酸フルチカゾン、フロ酸モメタゾン）の吸入による使用である。しかし、コルチコステロイドは、全身に免疫抑制作用を誘発することにより作用するので、高血圧、骨粗鬆症、及び白内障発症など、その長期投与によって惹起される副作用がある [Barnes PJ. New drugs for asthma//Semin Respir Crit Care Med. 2012; 33(6):685-94]。コルチコステロイドは、毎日投与する必要があるため、この治療薬を有効に用いるには、この必要性に対する患者のコンプライアンスがもう一つの問題である。更に、替わりの治療法を必要とするコルチコステロイド非感受性の患者もいる。好酸球を選択的に標的とすることにより、多面的な作用を有する全身に対する免疫抑制薬の使用により惹起される副作用が克服されうる。
【００１１】
インターロイキン−５と好酸球の細胞表面上の受容体ＩＬ−５Ｒαとの間の相互作用を阻害することにより好酸球を減少させる薬物が現在臨床試験中である。このような薬物には、ヒト化抗ＩＬ−５モノクローナル抗体（ｍＡｔ）及び同時（concurrent）ＩＬ−５Ｒα阻害剤が含まれる。
【００１２】
ＩＬ−５中和モノクローナル抗体のなかでは、ＳＢ２４０５６３（メポリズマブ、Glaxo Smith Kline）が最も有効である。プレドニゾロン依存性喘息の患者のメポリズマブ療法により、血液中及び唾液中の好酸球が減少し、最も重要なことには、悪化の頻度及びプレドニゾロンの用量を低下させることにより患者の質（patient's quality）が改善されるとの報告がある[Nair P, Pizzichini MMM, Kjarsgaard M, et al. Mepolizumab for prednisone-dependent asthma with sputum eosinophilia. NEJM. 2009; 360:985-93]。別の臨床試験では、コルチコステロイド非感受性喘息の患者への抗ＩＬ−５抗体（メポリズマブ）の投与により、悪化の頻度の低下、及びＡＱＬＱ（Asthma Quality of Life Questionnaire、喘息ＱＯＬ質問票）による患者の質の改善がもたらされることが示された。喘息に対する作用に加えて、この試験では、ポリープ状鼻副鼻腔症に対する治療効果も示された[Haldar P, Brightling CE, Hargadon B, et al. Mepolizumab and exacerbations of refractory eosinophilic asthma. NEJM. 2009; 360:973-84]。
【００１３】
ポリープ状鼻副鼻腔症を有する成人における独立した臨床試験では、メポリズマブは、血液中のＥＣＰ及び可溶型ＩＬ−５Ｒαの濃度、並びに鼻におけるＩＬ−５Ｒα、ＩＬ−６、及びＩＬ−１ｂの濃度を有意に低下させ、これは、総ポリープスコアによると、疾患の緩和と関連していた[Gevaert P, Van Bruaene N, Cattaert T, et al. Mepolizumab, a humanized anti-IL-5 mAb, as a treatment option for severe nasal polyposis. J Allergy Clin Immunol. 2011; 128(5):989-995]。
【００１４】
抗ＩＬ−５抗体の使用は、気管支喘息及びポリープ状鼻副鼻腔症に限定されない。この療法は、他の好酸球介在疾患においても有効である。例えば、過好酸球症候群の患者では、メポリズマブ療法により血液中の好酸球が減少したので、プレドニゾロンの投与量を減らすことができた[Rothenberg ME, Klion AD, Roufosse FE, et al. Treatment of patients with the hypereeosiophilic syndrome with mepolizumab. NEJM. 2008; 358(12):1215-28]。抗ＩＬ−５抗体で処置された好酸球性食道炎の患者は、嚥下障害の軽減と関連する臨床像の改善、及び血液中好酸球数の６倍もの減少を示し、ある患者では、食道上皮の肥厚が軽減された[Stein ML, Collins MH, Villanueva JM, et al. Anti-IL-5 (mepolizumab) therapy for eosionophilic esophagitis. J Allergy Clin Immunol. 2006; 118(6):1312-9]。小児における薬物の臨床試験では、血液中、顕微鏡１視野において２０以下の好酸球を有する患者が、発赤、虚弱、並びに食道粘膜上の溝及び縦線などの症状の改善を示したことが示された[Assa’ad AH, Gupta SK, Collins MH, et al. An antibody against IL-5 reduces numbers of esophageal intraepithelial eosinophils in children with eosinophilic esophagitis. Gastroenterology. 2011; 141(5):1593-604]。
【００１５】
メポリズマブは、好酸球性脈管炎の療法としても首尾よく用いられる[Kahn JE, Grandpeix-Guyodo C, Marroun I, et al. Sustained response to mepolizumab in refractory Churg-Strauss syndrome. J Allergy Clin Immunol. 2010; 125:267-70]。２８歳の女性では、メポリズマブを毎月投与することによって、血液中の好酸球数が正常に戻り、コルチコステロイド喘息の成立（formation）が予防され、Ｘ線データによると、肺実質の状態が改善された[Kim S, Marigowda G, Oren E, Israel E, Wechsler M. Mepolizumab as a steroid-sparing treatment option in patients with Churg-Strauss syndrome. J Allergy Clin Immunol. 2010; 125:1336-43]。好酸球性脈管炎及び顕著な好酸球増加症を有する患者での臨床試験では、メポリズマブ療法により、コルチコステロイドの投与量を減少することができた。好酸球増加症もまた軽減したが、試験の完了後、悪化が繰り返された[Oldhoff JM, Darsow U, Werfel T, et al. Anti-IL-5 recombinant humanized monoclonal antibody (mepolizumab) for the treatment of atopic dermatitis. Allergy. 2005; 60(5):693-6]。
【００１６】
メポリズマブは、喘息、成人における好酸球性食道炎、小児における好酸球性食道炎、好酸球性脈管炎、及びポリープ状鼻副鼻腔症に対する療法の臨床試験の第２相、並びに好酸球増加症候群、小児における好酸球性食道炎、ライノウイルス誘発喘息、及び慢性閉塞性気管支炎の処置としての臨床試験の第３相にあると報告されている[Amini-Vaughan ZJ, Martinez-Moczygemba M, Huston DP. Therapeutic strategies for harnessing human eosinophils in allergic inflammation, hypereosinophilic disorders, and cancer //Curr Allergy Asthma Rep. 2012, Vol. 12, No. 5. P. 402-412]。別の医薬であるレスリズマブ（Cephalon）もまた、ヒト化抗ＩＬ−５モノクローナル抗体ＳＣＨ５５７００であり、好酸球増加症候群及びロア糸状虫症に対する療法の臨床試験の第２相、並びに小児における喘息及び好酸球性食道炎の療法の第３相にある。これらの全てにより、好酸球増加症の軽減を目的とした選択的療法は、この型の細胞によって介在される疾患（気管支喘息、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、ポリープ状鼻副鼻腔症、好酸球性食道炎、好酸球性脈管炎、及び好酸球増加症候群）の処置に対する見込みのあるアプローチであると結論することができる。
【００１７】
しかし、ｍＡｔ療法には、幾つかの欠点がある。モノクローナル抗体は、１又は２か月投与しなければならない高価な治療薬である。重要な因子は、薬物の注射を受けるために医師のオフィスを何回も訪れる必要があることによる、医師の指示に対する患者のコンプライアンスの低さの問題である。加えて、患者と治療抗体の間のアロタイプの相違により、モノクローナル抗体に基づく療法が無効になることが起こり得る。高用量のｍＡｔ及び免疫複合体形成の可能性により、受動免疫の有効性もまた低下しうる。
【００１８】
好酸球増加を特徴とする病的状態に対する治療薬を提供するその他の方法が、WO 97/45448及びWO 03/040164に開示されている。出願WO 97/45448は、天然及び突然変異型のＩＬ５によって惹起される標準から逸脱（deviate）した効果を改善、軽減、又は低下するための「ＩＬ−５の活性を別の方法で拮抗又は軽減することができる改変および変異型のＩＬ５分子」の使用を提供している。拮抗作用は、高親和性受容体とではなくＩＬ５Ｒの低親和性鎖に結合する変異型のＩＬ５の結果であることが報告されている。変種は、このように作用することによって、ＩＬ５の生理学的作用に作用することなく、その受容体との結合についてＩＬ５と競合する。
【００１９】
出願WO 03/040164は、ＩＬ−５、ＩＬ−１３、及びエオタキシン、すなわち好酸球の成熟、活性化、局在化、及び活力の重要な因子に対する抗体の内因性形成に対するワクチン接種用組成物を提供する。この組成物は、ウイルス様粒子、並びにそれに結合したＩＬ−５、ＩＬ−１３、及び／又はエオタキシンの少なくとも１のタンパク質又はペプチドを含む。本発明によると、当該組成物は、好酸球性成分によるアレルギー疾患の処置のためのワクチンの生産において有用であり、そして好酸球性成分によりアレルギー疾患を予防又は治療するための治療用ワクチンとして有用である。
【００２０】
出願No. 8501176は、ＩＬ−５Ｒに結合する抗体の使用を提供している。これらの抗体は、ＩＬ−５受容体（ＩＬ−５Ｒ）及びＦｃ−フラグメントを認識する結合部位を含む。請求される方法により、ヒトの血液、骨髄、胃腸管（例えば、食道、胃、小腸及び大腸）、又は肺における好酸球数が減少し、それにより喘息及び肺の慢性閉塞性気管支炎の臨床所見が軽減される(http://www.patentgenius.com/patent/8501176.html)。
【００２１】
Yong Sup Leeらは、Studies on the site-selective N-acyliminium ion cyclazation: synthesis of (±)-glochidine and (±)-glochidicine, Heterocycles, Vol 37, No 1. 1994において、ヒスタミン二塩酸塩を無水コハク酸と一緒に、出発試薬を２００〜２３０℃まで４０分間加熱しながら融合させることによるヒスタミンスクシンイミドの調製を開示している。
【００２２】
国際出願公開WO 2007/007054は、細胞、特に腫瘍細胞におけるＤＮＡのメチル化に対する阻害作用を有する、スクシンイミド及び一般式（Ｉ）のグルタルイミド誘導体を開示している。当該公開公報に開示されている化合物は、炭化水素鎖を含むアミノ誘導体と、対応する無水物若しくは酸、又はエステルの間の付加反応と、それに続く、必要であれば塩基の存在下での任意の環化によって調製される。
【００２３】
記載されたグルタル酸のイミドの合成方法には、無水物、ジエステルなどのジカルボン酸又はその誘導体を、第一級アミン又はそのアミドと加熱し（熱環化）[Weigand-Hilgetag, Eksperimentalnye metody v organicheskoi khimii [Experimental Methods in Organic Chemistry], ed. by N. N. Suvorov, M., Khimiya, 1968; p.446]、無水酢酸[Shimotori et al, Asymmetric synthesis of δ-lactones with lipase catalyst. Flavour and Fragrance Journal, 2007, V. 22, No. 6, P.531-539]、塩化アセチル[Ito et al., Chemoselective Hydrogenation of Imides Catalyzed by CpRu(PN) Complexes and Its Application to the Asymmetric Synthesis of Paroxetine.//Journal of the American Chemical Society, 2007, V. 129, No. 2, P. 290-291]、カルボニルジイミダゾール[Polniaszek, et al., Stereoselective nucleophilic additions to the carbon-nitrogen double bond. 3. Chiral acyliminium ions.//Journal of Organic Chemistry, 1990, V. 55, No. 1, P. 215-223]、グルタル酸若しくはコハク酸無水物[Ainhoa Ardeo et al, A practical approach to the fused β-carboline system. Asymmetric synthesis of indolo[2,3-α]indolizidinones via a diastereoselective intramolecular α-amidoalkylation reaction. /Tetrahedron Letters, 2003, 44, 8445-8448]などのカルボキシル基活性化試薬として脱水剤を用いることにより対応するジカルボン酸のモノアミドを環化することが含まれる。
【００２４】
特許出願の国際公開WO2007/000246は、ピペリジン−２，６−ジオン及びピロリジン−２，５−ジオンを、ＤＭＦ中、対応するハロ誘導体でアルキル化し、その後分取クロマトグラフィーにより目的物質である置換されたイミド誘導体を分離することによるグルタルイミドの合成方法（これは、大量の合成には適用されない）を提供する。
【００２５】
したがって、本発明の目的は、好酸球性疾患、好ましくは気管支喘息、アレルギー性鼻炎、ポリープ状鼻副鼻腔症、好酸球性結腸炎、好酸球性症候群、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、チャーグ−ストラウス症候群、アナフィラキシーショック、クインケ浮腫、好酸球性脈管炎、好酸球性食道炎、好酸球性胃腸炎、及び線維症（fibroses）などのアレルギー性の好酸球性疾患の処置に有効な非毒性グルタルイミド誘導体の使用である。
【００２６】
発明の概要
本発明は、12.04.2013の出願RU 2013116826に開示される一般式（Ｉ）：
【００２７】
【化１】
2020002152.tif 000002
【００２８】
［式中、
Ｒ１及びＲ’１は、独立して水素、又はＣ１−Ｃ６アルキル、例えば、メチルであり；
Ｒ２は、場合によりＣ１−Ｃ６アルキルで置換された
【００２９】
【化２】
2020002152.tif 000003
【００３０】
である］のグルタルイミド誘導体の、好酸球性疾患、好ましくは気管支喘息、アレルギー性鼻炎、ポリープ状鼻副鼻腔症、好酸球性結腸炎、好酸球性症候群、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、チャーグ−ストラウス症候群、アナフィラキシーショック、クインケ浮腫、好酸球性脈管炎、好酸球性食道炎、好酸球性胃腸炎、及び線維症などのアレルギー性の好酸球性疾患の処置のための使用に関する。
【００３１】
本発明者らは、グルタルイミド誘導体が、試験したすべての媒質（血液、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬ）、及び組織）において、各種炎症モデルでの好酸球増加症を抑制することを確認した。特にラットのセファデックス誘発肺炎症モデルでは、グルタルイミド誘導体は、ＢＡＬ中の好酸球数を減少し、そしてモルモットの卵白アルブミン誘発喘息モデルでは、グルタルイミド誘導体は、ＢＡＬ及び血液中の好酸球増加症を軽減した。
【００３２】
したがって、本発明は、好酸球性疾患、好ましくは気管支喘息、アレルギー性鼻炎、ポリープ状鼻副鼻腔症、好酸球性結腸炎、好酸球性症候群、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、チャーグ−ストラウス症候群、アナフィラキシーショック、クインケ浮腫、好酸球性脈管炎、好酸球性食道炎、好酸球性胃腸炎、及び線維症などのアレルギー性の好酸球性疾患を処置するための治療方法であって、一般式（Ｉ）のグルタルイミド誘導体又はその薬学的に許容しうる塩の有効量を患者に投与することを含む方法に関する。
【００３３】
本発明はまた、好酸球性疾患、好ましくは気管支喘息、アレルギー性鼻炎、ポリープ状鼻副鼻腔症、好酸球性結腸炎、好酸球性症候群、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、チャーグ−ストラウス症候群、アナフィラキシーショック、クインケ浮腫、好酸球性脈管炎、好酸球性食道炎、好酸球性胃腸炎、及び線維症などのアレルギー性の好酸球性疾患の処置のための治療薬であって、治療薬が一般式（Ｉ）のグルタルイミド誘導体又はその薬学的に許容しうる塩である治療薬に関する。
【００３４】
本発明のもう一つの主題は、一般式（Ｉ）のグルタルイミド誘導体又はその薬学的に許容しうる塩の有効量、及び薬学的に許容しうる担体を含む、好酸球性疾患、好ましくは気管支喘息、アレルギー性鼻炎、ポリープ状鼻副鼻腔症、好酸球性結腸炎、好酸球性症候群、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、チャーグ−ストラウス症候群、アナフィラキシーショック、クインケ浮腫、好酸球性脈管炎、好酸球性食道炎、好酸球性胃腸炎、及び線維症などのアレルギー性の好酸球性疾患の処置のための医薬組成物である。
【００３５】
上記の一般式（Ｉ）のグルタルイミド誘導体の合成は、12.04.2013の出願RU 2013116826に開示されている。
【００３６】
本発明で使用される化合物は、有機溶媒又は脱水剤そのもの中で、出発物質であるジカルボン酸モノアミドを脱水剤と加熱し、場合により酢酸ナトリウムを添加することを含む方法によって調製しうる。本方法で用いられる脱水剤には、ジカルボン酸無水物、有機酸のクロロ無水物（chloroanhydride）、及びカルボニルジイミダゾールが含まれる。
【００３７】
出発物質であるジカルボン酸モノアミド、及びそれを調製する方法は、国際出願の公開WO1999/001103に開示されている。
【００３８】
発明の詳細な説明
本発明で用いられる好ましい化合物は、一般式（Ｉ）：
【００３９】
【化３】
2020002152.tif 000004
【００４０】
［式中、Ｒ１及びＲ’１は、独立して水素又はメチルであり；
Ｒ２は、
【００４１】
【化４】
2020002152.tif 000005
【００４２】
である］の化合物である。
【００４３】
本発明の最も好ましい化合物は、表１に示す化合物である。
【００４４】
【表１】
2020002152.tif 000006
【００４５】
本発明による化合物の薬学的に許容しうる塩には、有機酸の付加塩（例えば、ギ酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩など）、無機酸の付加塩（例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩など）、及びアミノ酸との塩（例えば、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩など）が含まれ、好ましくはクロロヒドラート（chlorohydrate）及び酢酸塩が含まれる。
【００４６】
一般式（Ｉ）のグルタルイミド誘導体は、好酸球性疾患に対して治療上活性である。
【００４７】
本発明の化合物は、特に気管支喘息、アレルギー性鼻炎、ポリープ状鼻副鼻腔症、好酸球性結腸炎、好酸球性症候群、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、チャーグ−ストラウス症候群、アナフィラキシーショック、クインケ浮腫、好酸球性脈管炎、好酸球性食道炎、好酸球性胃腸炎、及び線維症の処置に用いることができる。
【００４８】
本発明による化合物は、所望の治療効果を提供する有効量で投与される。
【００４９】
一般式（Ｉ）の化合物は、無毒な薬学的に許容しうる担体を含む単位剤形で、経口、局所、非経口、鼻内、吸入、及び直腸内投与することができる。
【００５０】
本明細書で使用される語「非経口投与」は、皮下、静脈内、筋肉内注射又は注入を意味する。
【００５１】
本発明による化合物は、患者に対して０．１〜３０mg/kg・体重の投与量で１日１回、好ましくは０．２５〜１０mg/kgの投与量で１日１回以上投与することができる。
【００５２】
加えて、個別の患者に対する個別の投与量は、用いる化合物の活性、患者の年齢、体重、性別、一般的な健康状態、食事療法、そして治療薬投与の時間及び経路、体内からの排泄速度、用いる治療薬の特定の組み合わせ、並びに処置される個々の患者の疾患の重症度を含む多くの因子次第であることには留意すべきである。
【００５３】
本発明による医薬組成物は、所望の技術的結果を達成するのに有効な量の一般式（Ｉ）の化合物を含み、活性成分として本発明による化合物を、筋肉内、静脈内、経口、舌下、吸入、鼻内、及び直腸内投与に適した担体又は賦形剤との混合物中に含む単位剤形（例えば、固剤、半固剤、又は液剤）で投与されうる。組成物では、活性成分は、液剤、錠剤、丸薬、カプセル剤、糖衣錠、坐剤、エマルション、懸濁剤、軟膏剤、ゲル剤、及びその他の剤形の製造に適した通例の無毒の薬学的に許容しうる担体と組み合わせることができる。
【００５４】
賦形剤として用いることができる化合物は、糖類、例えばグルコース、乳糖、若しくはショ糖、マンニトール、若しくはソルビトール、セルロース誘導体、及び／又はリン酸カルシウム、例えばリン酸三カルシウム若しくは酸性リン酸カルシウムなどの各種化合物である。結合剤として用いることができる化合物、デンプンのり、例えばトウモロコシ、小麦、米、及び馬鈴薯デンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、及び／又はポリビニルピロリドンなどの風袋（tare）化合物。必要であれば、上述のデンプン類、及びカルボキシメチルデンプン、架橋ポリピニルピロリドン、寒天、又はアルギン酸若しくはその塩（アルギン酸ナトリウムなど）などの崩壊剤を用いることができる。
【００５５】
場合により用いることができる添加剤には、二酸化シリコン、タルク、ステアリン酸及びその塩（ステアリン酸マグネシウム又はステアリン酸カルシウムなど）、及び／又はプロピレングリコールなどの流動性制御剤及び滑沢剤が含まれる。
【００５６】
被覆された丸薬のコアは、通常は、胃酸に耐える層で被覆されている。アラビアゴム、タルク、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、及び／又は二酸化チタン、並びに適当な有機溶媒若しくはその塩を場合により含んでいてもよい糖類の濃縮溶液をこの目的に用いることができる。
【００５７】
添加剤は、安定化剤、増粘剤、着色料、及び香料も含んでいることができる。
【００５８】
軟膏基材としては、白色ワセリン及び黄色ワセリン（Vaselinum album及びVaselinum flavum）などの炭化水素系軟膏基材、鉱物油（Vaseline oil）（Oleum Vaselini）、並びに白色軟膏及び液体軟膏（Unguentum album及びUnguentum flavum）を用いることができ、より硬い手触りをもたらす添加剤としては、固形パラフィン又はワックスなどの物質を用いることができ；親水性ワセリン（Vaselinum hydrophylicum）、ラノリン（Lanolinum）、及びコールドクリーム（Unguentum leniens）などの吸収性軟膏基材；親水性軟膏（Unguentum hydrophylum）などの水除去可能（water-removable）軟膏基材；ポリエチレングリコール軟膏（(Unguentum Glycolis Polyaethyleni）などの水溶性軟膏基材；ベントナイト基材；及びその他。
【００５９】
メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム塩、オキシプロピルセルロース、ポリエチレングリコール、ポリエチレンオキシド、又はカルボポールを、ゲル剤用の基材として用いることができる。
【００６０】
坐剤用基材は、カカオ脂などの水不溶性基材；ゼラチン−グリセロール若しくはポリエチレンオキシド基材などの水溶性若しくは水混和性基材；又は石けん−グリセロール基材などの組み合わせ基材でありうる。
【００６１】
単位剤形を調製する場合、担体と組み合わせて使用する活性剤の量は、処置下の受容者、及び治療剤の投与の個別の方法に応じて変化しうる。
【００６２】
例えば、本発明による化合物を、注射用液剤の形成に用いる場合、この液剤中の活性剤の量は、５wt％までである。希釈剤は、０．９％塩化ナトリウム溶液、蒸留水、注射用ノボカイン溶液、リンガー溶液、グルコース溶液、又は特定の可溶化補助剤であることができる。本発明による化合物を錠剤又は坐剤の形で投与する場合、その量は、単位剤形当たり２００mgまでである。
【００６３】
本発明による剤形は、混合、造粒、被覆された丸薬の形成、溶解、及び凍結乾燥などの通例の手順により調製される。
【００６４】
本発明による化合物は、副作用、及び投与に対する禁忌を有しないことには留意すべきである。加えて、１５００mg/kgの投与量を経口投与した本発明による化合物の毒性試験では、実験動物において致死例は記録されなかった。
【００６５】
本発明による化合物の詳細な説明及びその薬理学的活性の研究は、以下の実施例に開示するが、実施例は、説明のみを目的とすることを意図し、本発明の範囲を制限することを意図するものではない。
【００６６】
実験の部
上述の一般式（Ｉ）のグルタルイミド誘導体の合成は、12.04.2013の出願RU 2013116826に開示されている。
【００６７】
一般式（Ｉ）のグルタルイミド誘導体の合成例
材料及び方法
得られた化合物の同一性を、溶媒系：クロロホルム−メタノール（９：１）（１）、クロロホルム−メタノール（１：１）（２）中、プレート「Kieselgel 60 F254」（「Merck」、ドイツ）による薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）により評価した。
【００６８】
クロマトグラム及び電気泳動図を、クロロテトラメチルベンゼン試薬及びパウリ試薬で染色した。
【００６９】
多成分混合物の分析用ＬＣ／ＭＳ系  Shimadzu Analytical HPLC SCL10Avp；質量分析計PE SCIEX API 165 (150)（カナダ）。条件：カラム：Waters ACQUITY UPLC BEH C18  ２．１×５０mm  １．７μm、勾配溶離系：０．１％ＨＣＯＯＨを含む水〜０．１％ＨＣＯＯＨを含むアセトニトリル。
【００７０】
分析用スケールの逆相ＨＰＬＣを、以下の条件下、Shimadzu ＨＰＬＣクロマトグラフで行った：カラム：Luna C18(2) 100A、２５０×４．６mm（シリアル番号599779-23）、勾配溶離系：リン酸緩衝液（pH３．０）：メタノール（条件Ａ）；カラム：Merk.LiChroCART、２５０×４mm  ５μm   LiChrospher 100RP-8E  ５μmＣ８（シリアル番号1.50837.0001）、勾配溶離系：酢酸アンモニウム緩衝液（pH７．５）：アセトニトリル（条件Ｂ）；勾配溶離系：０．００２５M ナトリウム１−ヘキシルスルホナート（pH３）：アセトニトリルを含有する緩衝液（条件Ｃ）；及びカラム：Symmetry C18  １５０×４．６mm、勾配溶離系：０．００２５M ナトリウム１−ヘキシルスルホナート（pH３）：アセトニトリルを含有する緩衝液（条件Ｄ）。
【００７１】
分光計（Bruker DPX-400、ドイツ）で１Ｈ  ＮＭＲスペクトルを記録した。
【００７２】
Ultraflex質量分析計（「Bruker」、ドイツ）を用い、マトリックスとして２，５−ジヒドロキシ安息香酸を用いたマトリックス支援レーザー脱離イオン化質量分析法により、飛行時間型質量分析計で高分解能質量スペクトルを得た。
【００７３】
実施例１
１−（２−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）エチル）ピペリジン−２，６−ジオン（化合物１）
Ｎ，Ｎ’−ジメチルホルムアミド（６０mL）、及び１，５−ペンタン二酸の２−（イミダゾール−４−イル）−エタンアミド（２０ｇ）を、２５０mLの平底フラスコに充填した。激しく撹拌しながらカルボニルジイミダゾール（１７．３ｇ；１．２当量）を加えた。反応混合物を撹拌しながら９０℃まで２時間加熱した。反応は、１Ｈ−ＮＭＲ分光法により制御した（試料（０．５mL）を硫酸エーテルで希釈し、沈澱物をＤＭＳＯ−ｄ６に溶解した）。出発物質である１，５−ペンタン二酸の２−（イミダゾール−４−イル）−エタンアミドが反応塊中に存在しなくなったら、塊を冷却し、３倍量のメチルtert−ブチルエーテル（１８０mL）へ注いだ。反応混合物を１時間放置し、沈殿物をろ過し、メチルtert−ブチルエーテル６０mLで洗浄し、乾燥した。粗生成の１−（２−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）エチル）ピペリジン−２，６−ジオンの収量は、１２．４ｇ（６７％）であった。
【００７４】
粗生成の１−（２−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）エチル）ピペリジン−２，６−ジオン（１２ｇ）及びイソプロパノール（３６mg）を１００mL平底フラスコに充填した。残渣が完全に溶解するまで混合物を加熱し、次いで活性炭１．２ｇを加え、混合物を沸点温度で１時間熟成させた。熱い溶液を、予め加熱しておいたセラミックフィルターでろ過した。フィルター上の残渣を熱イソプロパノール６mLで洗浄した。熱い保存溶液を室温まで冷却し、撹拌しながら一夜放置して結晶化させた。沈澱した結晶をろ過し、冷イソプロパノール６mLで洗浄し、乾燥した。再結晶化後、得られた１−（２−（１Ｈ−イミダゾール−４−イル）エチル）ピペリジン−２，６−ジオンの量は、１０．１ｇ（８４％）であった。Ｒｆ０．４３（１）。生成物をＬＣ／ＭＳ法で分析した：保持時間１．５７分での個々のピーク；[M+H]+=208。条件ＡでのＨＰＬＣ：保持時間１５．５分での個々のピーク。1H NMR (400.13 MHz, DMSO-d6, δ, m.d., J/Hz): 1.81 (quint, 2H, CH2CH2CH2, J=6.5 Hz), 2.58 (m, 6H, CH2C, CH2CH2CH2); 3.82 (t, 2H, CH2N, J=7.8 Hz), 6.77 (br.s, 2H, CCH), 7.49 (s, 1H, NCHN), 11.81 (br.s, 1H, NH).
【００７５】
必要であれば、本発明による化合物の合成において、複素環の窒素原子を、例えばtert−ブトキシカルボニル基（Ｂｏｃ）などのカルバマート保護基を用いて保護することができる。
【００７６】
上述の方法により、表３に示す化合物を得た。
【００７７】
【表２】
2020002152.tif 000007
【００７８】
実施例２
１−（２−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）エチル）ピペリジン−２，６−ジオン（化合物４）
１，５−ペンタン二酸の２−（１，３−ベンゾチアゾール−２−イル）エタンアミド（２２ｇ；０．０７５mol）及び無水酢酸（２３ｇ；０．２２５mol）の混合物を、ジオキサン１５０mL中で３時間沸騰させた。真空下でジオキサンを除去し、水２００mLを加え、混合物を、３０％水酸化ナトリウムで中性ｐＨまで中和した。沈澱した油状物を結晶が形成されるまで摩砕した。沈澱を、クロマトグラフィーで精製した（ＳｉＣＯ２  ６０〜１００μm、溶離剤：酢酸エチル−ヘキサン（１：１））。ＬＣ／ＭＳ、保持時間２．２６分での個々のピーク、[M+H]+=275。条件ＡでのＨＰＬＣ、保持時間９．３分での個々のピーク。1H-NMR (400.13 MHz, DMSO-d6, δ, m.d., J/Hz): 1.85 (quint, 2H, CH2CH2CH2, J= 6.8 Hz); 2.59 (t, 4H, CH2CH2CH2, J=6.8 Hz); 3.24 (t, 2H, CH2C, J= 7.3 Hz); 4.08 (t, 2H,CH2N, J=7.3 Hz); 7.43, 7.49 (t, 1H, Ar, J= 7,6 Hz); 7.96, 8.04 (d, 1H, Ar, J= 7,6 Hz)。
【００７９】
上述の方法により、表２に示す化合物を得た。
【００８０】
【表３】
2020002152.tif 000008
【００８１】
実施例３
コーティング錠、２mg、１０mg、及び１００mg
【００８２】
【表４】
2020002152.tif 000009
【００８３】
生物学的活性試験
材料及び方法
組織標本の形態学的研究を、光学顕微鏡（Leica DM LS, Leica Microsystems、ドイツ）を用いて行った。顕微鏡Leica DM LSにマウントした接眼ミクロメータースケールを用いて、微細形態計測分析（micromorphometric analysis）を行った。デジタルカメラ（Leica DC 320）により、顕微鏡写真を作成した。
ソフトウエアであるStatistica 6.0による偏差統計学的方法（variation statistics method）を用いて、得られた結果の数学的分析を行った。データは、記述統計学により解析した：データの正規分布は、シャピロ−ウィルク検定により確認した。全てのデータが正規分布に適合したので、群間偏差の解析を、スチューデントのｔ検定などのパラメトリック法により行った。ｐ＜０．０５であれば、差は有意であると考えられた。
以下に示す多数の実施例により、請求する一般式（Ｉ）の化合物の生物学的活性が説明されている。
【００８４】
実施例４
モルモットの喘息モデルにおける一般式（Ｉ）の化合物の有効性の評価
モルモットにおける気管支喘息は、標準的な方法［Ricciardolo FL, Nijkamp F, De Rose V, Folkerts G. The guinea pig as an animal model for asthma// Current Drug Targets. 2008 Jun; 9(6):452-65］によって誘発した。卵白アルブミン（Sigma）１００μg/mL及び水酸化アルミニウム１００mg/mLを含有する溶液０．５mLを非経口的に１回投与することにより、動物を免疫化した。無傷（intact）の動物は、生理学的食塩水０．５mLを投与された。
【００８５】
誘発試験１、２及び３日目に濃度を上昇させてそれぞれ０．１，０．３、及び０．５mg/mLで卵白アルブミンを吸入投与することにより、２９、３０、及び３１日目に呼吸気道の運動亢進を誘発した。吸入は、５分間、又は窒息症状が明らかになるまで（一方に倒れる）続けた。３２日目に、気管支攣縮性反応を評価しながら、攻撃量（１mg/mL）の卵白アルブミンを動物に５分間投与した。
【００８６】
検討化合物を、１日１回毎日６又は１０日間動物に投与した；投与は、攻撃量の抗原の投与の２日前に終了した。
【００８７】
気管支攣縮性反応は、呼吸運動の速度及び深さの変化、並びに片側に倒れるなどの窒息症状によって評価した。呼吸曲線は、基底部記録装置（base recording station）（PowerLab 8sp.）及びソフトウエアであるLabCartを用いて、実験室実験装置（ADInstruments、オーストラリア）により記録した。実験動物用気流センサー、及び集積増幅器（ADInstruments）を備えた呼吸計を用いて記録を行った。
【００８８】
気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬ）及び心腔血液を、攻撃量の投与２４時間後に動物から得た。麻酔下、シリンジ投与装置を用いて、気管を介して３７℃に加熱した生理学的食塩水５mLにより肺を洗浄することによりＢＡＬを採取した。
【００８９】
洗浄液１μL中の細胞要素（cell element）の絶対数（細胞増多）を、Goryaevカメラを用いて、気管支肺胞洗浄液中で計測した。次いで、ＢＡＬを２００ｇで１０分間遠心分離した。残渣を用いてスワブを調製し、これをメタノール中に固定し、ロマノフスキー−ゲエムザにより染色して、肺内細胞所見を計数した。
【００９０】
血液を血球計算器により分析して、白血球像（leykoformula）を求めた。
【００９１】
本検討は、３の実験から構成され、第一の実験は、ＢＡＬの細胞組成に対する請求される化合物１〜６の効果の評価に向けられ、第二及び第三の実験は、ＢＡＬの細胞組成、血液の細胞組成、及び気管支攣縮の重症度に対する化合物１及び２の効果を評価することを目的としていた。
【００９２】
化合物１〜６を１４mg/kgの投与量でモルモットへ１０回投与することにより、ＢＡＬ中の細胞要素の濃度が、１７．３×１０９細胞／Ｌから２．５〜６．３×１０９細胞／Ｌへと低下した（表４を参照）。検討した化合物は、好ましくは好酸球数の低下をもたらした：対照群では、ＢＡＬ中の好酸球数は、７．０５×１０９細胞／Ｌであり、処置を受けた群では、０．６０〜１．６１×１０９細胞／Ｌであり、９１〜７７％低かった。
【００９３】
【表５】
2020002152.tif 000010
【００９４】
低い用量（０．０４５、０．１４、及び１．４mg/kg）及び２つの投与計画（１０及び６回）で検討した化合物の投与により、本化合物が、広範囲の投与量（０．０４５〜１４mg/kg）及び各種処置スキームでＢＡＬ中の好酸球増多を軽減したことが示された（表５を参照）。加えて、試験した全ての投与量で、本化合物はリンパ球数を低下させ、ＢＡＬ中の単球数も、ある投与量では低下し、これは、肺における局所炎症反応の抑制を示している。
【００９５】
【表６】
2020002152.tif 000011
【００９６】
検討した化合物は、血液中の好酸球増加を軽減した。対照群では、血液中の好酸球数は、無傷の動物におけるよりも６〜８倍高かった。検討化合物の投与により、無傷の動物のレベルに好酸球数を維持することができた（表６を参照）。
【００９７】
【表７】
2020002152.tif 000012
【００９８】
攻撃量の卵白アルブミンの吸入に応答してのモルモットの気管支攣縮の重症度の評価により、気管支喘息モデルでは、検討した化合物は、好酸球を減少させたばかりでなく、疾患の臨床症状も軽減したことが示された。特にプラセボを投与された対照群では、動物８尾中５尾が、急性及び亜急性相を伴う重度の気管支攣縮を有していたが；このような動物は、検討化合物を投与された動物群には存在しなかったか、又はその数は、２尾より多くはないかのいずれかであった。同様に、呼吸数及び呼吸の深さが正常（気管支攣縮を有しない）である動物の数は、処置を受けた群においては、対照群の０〜１から４〜７へ増加していた（表７を参照）。
【００９９】
【表８】
2020002152.tif 000013
【０１００】
得られた結果により、好酸球増加症、特に気管支喘息などの実験モデルでは、請求する化合物が、好酸球増加を抑制し、本疾患の臨床症状を軽減するという信頼のおける根拠がもたらされる。
【０１０１】
実施例５
ラットのセファデックス誘発好酸球増加性肺炎症のモデルにおける一般式（Ｉ）の化合物の有効性の評価
ラットのセファデックス誘発好酸球性肺炎症のモデルを、標準的な方法により実現した[Evaldsson C, Ryden I, Uppugunduri S. Isomaltitol exacerbates neutrophilia but reduces eosinophilia: new insights into the sephadex model of lung inflammation//Int Arch Allergy Immunol. 2011; 154(4):286-94]。Sephadex G-200（Pharmacia、スエーデン）を、雄性Wistar系ラットに５mg/kgの投与量で、吸入により１回投与した。検討化合物を動物に、胃内経路により４回：セファデックス投与の２４時間及び１時間前、並びに２４時間及び４５時間後、投与した。参考製剤であるブデソニドを、同じスキームにより、０．５mg/kgの投与量で吸入により投与した。気管支肺胞洗浄液を、セファデックス吸入の４８時間後に採取し、洗浄液中の総リンパ球数及び白血球率（leukocyte formula）を求めた。１群中のラットの数は、７〜１０であった。
【０１０２】
ＢＡＬの分析により、sephadex G-200の吸入による１回の投与で、肺への白血球の明らかな流入が惹起されたことが示された。全ての細胞型の含有率が、無傷の動物と比較して対照群で上昇した；しかし、最大の上昇は、好酸球で記録された（表８〜９を参照）。
【０１０３】
ラットへの式（Ｉ）の化合物の胃内投与により、ＢＡＬ中の好酸球数は数倍低下した。請求される化合物は、試験した広範囲の投与量で活性を示した。
【０１０４】
【表９】
2020002152.tif 000014
【０１０５】
【表１０】
2020002152.tif 000015
【０１０６】
実施例６
モルモットのロイコトリエン誘発好酸球性肺炎症モデルにおける一般式（Ｉ）の化合物の有効性の評価
モルモットのロイコトリエン誘発好酸球性肺炎症のモデルを、標準的な方法により実現した[Underwood DC1, Osborn RR, Newsholme SJ, Torphy TJ, Hay DW. Persistent airway eosinophilia after leukotriene (LT) D4 administration in the guinea pig: modulation by the LTD4 receptor antagonist, pranlukast, or an interleukin-5 monoclonal antibody// Am J Respir Crit Care Med. 1996 Oct; 154(4 Pt 1):850-7]。インターロイキンＤ４（LTD4, Cayman Chemical, 米国）の濃度１０mg/kgの溶液（流速２５０mL/hr）を、二重チャンバープレチスモグラフ（Emka Technologies, フランス）の条件下、雄性モルモット（２５０〜３００ｇ）に１分間吸入させた。検討化合物を動物に、胃内経路により４回：ＬＴＤ４吸入の２４時間及び１時間前、並びに２４時間及び４５時間後、投与した。参考製剤であるモンテルカスト（０．８mg/kg）を、胃内経路により、ＬＴＤ４の吸入の１時間前に１回投与した。気管支肺胞洗浄液を、ＬＴＤ４の吸入の４８時間後に採取し、洗浄液中の総リンパ球数及び白血球率（leukocyte formula）を求めた。１群中のモルモットの数は、８であった。
【０１０７】
ＢＡＬの分析により、モルモットへのロイコトリエンＤ４の吸入による１回の投与で、肺への好中球、好酸球、及び単球／マクロファージの明らかな流入が惹起されたことが示された。細胞数の最も顕著な上昇（２５倍）が、好酸球で観察された（表１０を参照）。
【０１０８】
モルモットへの検討化合物の胃内投与により、ＢＡＬ中の好酸球数が２．１〜３．４倍減少した。本化合物は、広範囲の投与量（０．１４〜１４mg/kg）で作用を示した。請求された化合物及びモンテルカストの有効性の比較分析により、請求された化合物及びロイコトリエン受容体アゴニストの効果が、強度において匹敵することが示された。
【０１０９】
【表１１】
2020002152.tif 000016
【０１１０】
実施例７
モルモットのアレルギー性鼻炎モデルにおける一般式（Ｉ）の化合物の有効性の評価
モルモットのアレルギー性鼻炎モデルを、標準的な方法により実現した[Vishnu N. Thakare, M.M. Osama, Suresh R. Naik. Therapeutic potential of curcumin in experimentally induced allergic rhinitis in guinea pigs // Int Immunopharmacol. 2013 Sep; 17(1):18-25]。
【０１１１】
モルモットを、卵白アルブミン（１００μg/匹）及び水酸化アルミニウム（５mg/匹）（両方とも、生理食塩水中で希釈及び懸濁した）の４回の胃内投与（０、７、１４、及び２１日目）により免疫化した。検討の２８日目に、動物の各鼻腔に卵白アルブミン溶液（６０mg/mL）を２０μLの投与量で鼻内投与した。３５日目に、動物に卵白アルブミン溶液（２００μg/mL、２５μL）を皮下投与した；動物の背部は、投与部位をあらかじめ剃毛しておいた。注射部位の腫脹及び発赤が、感作されたことを裏付けていた。検討の４２日目、卵白アルブミン溶液（６０mg/mL、２０μL/鼻腔）を鼻内投与した。偽性免疫化（pseudoimmunized）された動物の群は、まさにアレルギー性炎症の形成の対照として形成した：０、７、１４、及び２１日目に、モルモットには、水酸化アルミニウム溶液（５mg/匹）を投与し、２８及び３５日目には、生理食塩水を投与し、４２日目には、卵白アルブミン溶液（６０mg/mL、２０μL/鼻腔）を投与した。
【０１１２】
検討化合物（１４mg/kg）を３回：卵白アルブミンの最後の投与の４８、２４、及び１時間前に、胃内投与した。参照製剤であるデキサメサゾンを、卵白アルブミンの最後の鼻内投与の３時間前に胃内経路で１回投与した。
【０１１３】
くしゃみ及び鼻を引っ掻く行動の回数などの臨床症状を、卵白アルブミンの最後の投与後２時間にわたり記録した。鼻洗浄液を、卵白アルブミンの最後の投与後４時間後に採取し、洗浄液中の総リンパ球数及び白血球組成（formula）を求めた。一群中のモルモットの数は８であった。
【０１１４】
鼻洗浄液の分析により、アレルギー性鼻炎は、鼻腔への白血球の明らかな流入を伴っていることが示された。最大の増加は、好酸球で記録された（表１１）。
【０１１５】
モルモットへの一般式（Ｉ）の化合物の３回の投与により、鼻洗浄液中の好酸球数が、偽性免疫化動物で観察されたレベルまで低下した。請求された化合物及びデキサメサゾンの効果は、強度においては匹敵していた。
【０１１６】
【表１２】
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【０１１７】
卵白アルブミンの最後の鼻腔内投与後２時間にわたるアレルギー性鼻炎の臨床症状の記録により、実験動物におけるくしゃみ及び鼻を引っ掻く行動の回数の明らかな増加が示され、アレルギー性鼻炎を実現したモデルの妥当性が示された。一般式（Ｉ）の化合物による療法により、鼻炎の臨床症状が、偽性動物において観察されたレベルまで軽減された。参照製剤は、同様の効果を有していた（表１２を参照）。
【０１１８】
【表１３】
2020002152.tif 000018
【０１１９】
実施例８
マウスの逆症療法皮膚炎（allopathic dermatitis）のモデルにおける一般式（Ｉ）の化合物の有効性の評価
逆症療法皮膚炎のモデルを、標準的な方法により実現した[Mechanism of dinitrochlorobenzene-induced dermatitis in mice: role of specific antibodies in pathogenesis//PLoS One. 2009; 4(11)]。
検討の０及び１２日目に、９５％エタノール中の１−クロロ−２，４−ジニトロベンゼン（DNCB, Sigma-Aldrich, 米国)の２％溶液１００μLを、雄性Balb/c系マウスの背部の剃毛した部位に適用した。検討の１７日目、動物の右の「検討」耳に、２％ＤＮＣＢのアルコール溶液２０μLを１時間の間隔をおいて２回適用した。検討化合物及び参照製剤であるデキサメサゾンを、検討の８〜１７日目の間１日１回胃内経路により投与した。
【０１２０】
検討の１８日目に、ＣＯ２カメラ中で動物を安楽死させた。「検討」及び「対照」の耳の重量を測定した。「検討」及び「対照」耳の重量の差のパーセントで表した応答指標（ＲＩ）を算出した。
【０１２１】
検討により、一般式（Ｉ）の化合物は、アトピー性皮膚炎の実験モデルにおいて、応答指標を低下したことが示された。請求された化合物及びステロイド製剤であるデキサメサゾンの効果は、強度において匹敵していた（表１３を参照）。
【０１２２】
【表１４】
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【０１２３】
得られた結果は、好酸球増加症、特にラットのセファデックス誘発好酸球性肺炎症、モルモットのロイコトリエン誘発好酸球性肺炎症、モルモットのアレルギー性鼻炎及び喘息、マウスのアトピー性皮膚炎などの実験モデルでは、一般式（Ｉ）の化合物が、好酸球増加を有意に軽減するとの結論の根拠を示している。
【手続補正書】
【提出日】令和1年8月21日(2019.8.21)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
気管支喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎及び好酸球性肺炎からなる群より選択される好酸球性疾患を処置するための医薬組成物であって、式：
【化１】
2020002152.tif 000037
の化合物、又はその薬学的に許容しうる塩を含む、医薬組成物。
【請求項２】
好酸球性疾患が、気管支喘息、アレルギー性鼻炎及びアトピー性皮膚炎からなる群より選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
気管支喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎及び好酸球性肺炎からなる群より選択される好酸球性疾患を処置するための医薬を製造するための使用であって、式：
【化２】
2020002152.tif 000038
の化合物、又はその薬学的に許容しうる塩の、使用。
【請求項４】
好酸球性疾患が、気管支喘息、アレルギー性鼻炎及びアトピー性皮膚炎からなる群より選択される、請求項３に記載の使用。
【外国語明細書】
2020002152000001.pdf