(57)【要約】【課題】効果の高い皮膚バリア機能改善剤を提供する。【解決手段】有効成分としてベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩を１．０〜２５μｍｏｌ／Ｌの濃度で配合する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩を１．０〜２５μｍｏｌ／Ｌの濃度で含む、皮膚バリア機能改善剤。
【請求項２】
ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩の濃度が１．０〜２０μｍｏｌ／Ｌである、請求項１に記載の皮膚バリア機能改善剤。
【請求項３】
ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩の濃度が１．６〜１６μｍｏｌ／Ｌである、請求項１に記載の皮膚バリア機能改善剤。
【請求項４】
ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩を生薬エキスとして含む、請求項１〜３のいずれか１項に記載の皮膚バリア機能改善剤。
【請求項５】
ベルベリン含有生薬エキスが、オウバクエキス、オウレンエキス又は南天葉エキスである、請求項４に記載の皮膚バリア機能改善剤。
【請求項６】
トコフェロール、ヒアルロン酸Ｎａ、ミツバアケビ茎エキス、加水分解エラスチン、加水分解コラーゲン、アカヤジオウ根エキス、アセチルヒアルロン酸Ｎａ、アルニカ花エキス、アロエベラ葉エキス、オウゴンエキス、オーキッドエキス、オタネニンジン根エキス、カッコンエキス、カミツレ花エキス、カンゾウ根エキス、キュウリ果実エキス、クズ根エキス、クロレラエキス、セイヨウオトギリソウ花／葉／茎エキス、セイヨウキズタ葉／茎エキス、セイヨウシロヤナギ樹皮エキス、セイヨウニワトコ花エキス、ゼニアオイエキス、センブリエキス、ダイズエキス、トウキンセンカ花エキス、トリスヘキシルデカン酸ピリドキシン、パリエタリアエキス、パルミチン酸レチノール、フユボダイジュ花エキス、マクロプチリウムアトロプルプレウム花／葉／茎エキス、メマツヨイグサ種子エキス、ヤグルマギク花エキス、ローマカミツレ花エキス、ローヤルゼリーエキス、及び加水分解ハトムギ種子からなる群より選択される１つ以上を更に含有する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の皮膚バリア機能改善剤。
【請求項７】
ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩を１．０〜２５μｍｏｌ／Ｌの濃度で含む、皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤。
【請求項８】
ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩の濃度が１．０〜２０μｍｏｌ／Ｌである、請求項７に記載の皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤。
【請求項９】
ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩の濃度が１．６〜１６μｍｏｌ／Ｌである、請求項７に記載の皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤。
【請求項１０】
ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩を生薬エキスとして含む、請求項７〜９のいずれか１項に記載の皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤。
【請求項１１】
ベルベリン含有生薬エキスが、オウバクエキス、オウレンエキス又は南天葉エキスである、請求項１０に記載の皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤。
【請求項１２】
トコフェロール、ヒアルロン酸Ｎａ、ミツバアケビ茎エキス、加水分解エラスチン、加水分解コラーゲン、アカヤジオウ根エキス、アセチルヒアルロン酸Ｎａ、アルニカ花エキス、アロエベラ葉エキス、オウゴンエキス、オーキッドエキス、オタネニンジン根エキス、カッコンエキス、カミツレ花エキス、カンゾウ根エキス、キュウリ果実エキス、クズ根エキス、クロレラエキス、セイヨウオトギリソウ花／葉／茎エキス、セイヨウキズタ葉／茎エキス、セイヨウシロヤナギ樹皮エキス、セイヨウニワトコ花エキス、ゼニアオイエキス、センブリエキス、ダイズエキス、トウキンセンカ花エキス、トリスヘキシルデカン酸ピリドキシン、パリエタリアエキス、パルミチン酸レチノール、フユボダイジュ花エキス、マクロプチリウムアトロプルプレウム花／葉／茎エキス、メマツヨイグサ種子エキス、ヤグルマギク花エキス、ローマカミツレ花エキス、ローヤルゼリーエキス、及び加水分解ハトムギ種子からなる群より選択される１つ以上を更に含有する、請求項７〜１１のいずれか１項に記載の皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤。
【請求項１３】
請求項１〜６のいずれか１項に記載の皮膚バリア機能改善剤、又は、請求項７〜１２のいずれか１項に記載の皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤を含む、スキンケア製品。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩を有効成分として含む皮膚バリア機能改善剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚のタイトジャンクション（以下、「ＴＪ」ともいう）は、表皮最外層に位置する角層バリアとともに、外部からの刺激によるダメージや体内からの水分の喪失を防ぐバリアとしての働きを担っている。ＴＪのバリア機能が低下すると、角層バリアの機能にも異常を来し、結果として皮膚のバリア機能が損なわれ、肌の乾燥や肌荒れ、更には皮膚の老化の進行につながると考えられている（非特許文献１〜２）。
ＴＪは角層直下の顆粒層の２層目の細胞間を密につなぐ構造をとっており、その主要構成タンパク質としてクローディン１が知られている（非特許文献２）。クローディン１の発現はＴＪのバリア機能にとって重要であるが、加齢や紫外線によるダメージにより、その発現が低下することが報告されている（非特許文献３）。ＴＪのバリア機能は、オウレンエキスにより改善することが知られている（非特許文献１）。
また、２７〜５．４×１０5μｍｏｌ／Ｌ（０．００１〜２０重量％）のベルベリンを含む、皮膚の老化を予防又は軽減するための組成物が知られている（特許文献１）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】特開平８−２３１３７２号公報
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】倉沢真澄, FRAGRANCE JOURNAL, 2007/1月号, No.317（Vol.35/No.1), p.81-83
【非特許文献２】久保亮治, 日本皮膚科学会雑誌, 2014, 124巻, 3号, p.305-314
【非特許文献３】Seon-Pil Jin, Letters to Editor/Journal of Dermatological Science, 2016, 84, p.97-113
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
従来品のなかには、経験的な知見に基づいて有効成分を漠然と配合したため十分な効果を発揮しないものがあり、皮膚バリア機能改善効果の高い製品の開発が望まれていた。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は、上記課題を解決すべく鋭意研究を行った結果、従来よりも低い特定範囲の濃度でベルベリン又はその塩を用いるとＴＪのバリア機能が大きく改善することを見いだし、本発明を完成させるに至った。すなわち、本発明は下記の〔１〕〜〔１３〕に関するものである。
〔１〕ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩を１．０〜２５μｍｏｌ／Ｌの濃度で含む、皮膚バリア機能改善剤。
〔２〕ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩の濃度が１．０〜２０μｍｏｌ／Ｌである、前記〔１〕に記載の皮膚バリア機能改善剤。
〔３〕ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩の濃度が１．６〜１６μｍｏｌ／Ｌである、前記〔１〕に記載の皮膚バリア機能改善剤。
〔４〕ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩を生薬エキスとして含む、前記〔１〕〜〔３〕のいずれか１項に記載の皮膚バリア機能改善剤。
〔５〕ベルベリン含有生薬エキスが、オウバクエキス、オウレンエキス又は南天葉エキスである、前記〔４〕に記載の皮膚バリア機能改善剤。
〔６〕トコフェロール、ヒアルロン酸Ｎａ、ミツバアケビ茎エキス、加水分解エラスチン、加水分解コラーゲン、アカヤジオウ根エキス、アセチルヒアルロン酸Ｎａ、アルニカ花エキス、アロエベラ葉エキス、オウゴンエキス、オーキッドエキス、オタネニンジン根エキス、カッコンエキス、カミツレ花エキス、カンゾウ根エキス、キュウリ果実エキス、クズ根エキス、クロレラエキス、セイヨウオトギリソウ花／葉／茎エキス、セイヨウキズタ葉／茎エキス、セイヨウシロヤナギ樹皮エキス、セイヨウニワトコ花エキス、ゼニアオイエキス、センブリエキス、ダイズエキス、トウキンセンカ花エキス、トリスヘキシルデカン酸ピリドキシン、パリエタリアエキス、パルミチン酸レチノール、フユボダイジュ花エキス、マクロプチリウムアトロプルプレウム花／葉／茎エキス、メマツヨイグサ種子エキス、ヤグルマギク花エキス、ローマカミツレ花エキス、ローヤルゼリーエキス、及び加水分解ハトムギ種子からなる群より選択される１つ以上を更に含有する、前記〔１〕〜〔５〕のいずれか１項に記載の皮膚バリア機能改善剤。
〔７〕ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩を１．０〜２５μｍｏｌ／Ｌの濃度で含む、皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤。
〔８〕ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩の濃度が１．０〜２０μｍｏｌ／Ｌである、前記〔７〕に記載の皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤。
〔９〕ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩の濃度が１．６〜１６μｍｏｌ／Ｌである、前記〔７〕に記載の皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤。
〔１０〕ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩を生薬エキスとして含む、前記〔７〕〜〔９〕のいずれか１項に記載の皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤。
〔１１〕ベルベリン含有生薬エキスが、オウバクエキス、オウレンエキス又は南天葉エキスである、前記〔１０〕に記載の皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤。
〔１２〕トコフェロール、ヒアルロン酸Ｎａ、ミツバアケビ茎エキス、加水分解エラスチン、加水分解コラーゲン、アカヤジオウ根エキス、アセチルヒアルロン酸Ｎａ、アルニカ花エキス、アロエベラ葉エキス、オウゴンエキス、オーキッドエキス、オタネニンジン根エキス、カッコンエキス、カミツレ花エキス、カンゾウ根エキス、キュウリ果実エキス、クズ根エキス、クロレラエキス、セイヨウオトギリソウ花／葉／茎エキス、セイヨウキズタ葉／茎エキス、セイヨウシロヤナギ樹皮エキス、セイヨウニワトコ花エキス、ゼニアオイエキス、センブリエキス、ダイズエキス、トウキンセンカ花エキス、トリスヘキシルデカン酸ピリドキシン、パリエタリアエキス、パルミチン酸レチノール、フユボダイジュ花エキス、マクロプチリウムアトロプルプレウム花／葉／茎エキス、メマツヨイグサ種子エキス、ヤグルマギク花エキス、ローマカミツレ花エキス、ローヤルゼリーエキス、及び加水分解ハトムギ種子からなる群より選択される１つ以上を更に含有する、前記〔７〕〜〔１１〕のいずれか１項に記載の皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤。
〔１３〕前記〔１〕〜〔６〕のいずれか１項に記載の皮膚バリア機能改善剤、又は、前記〔７〕〜〔１２〕のいずれか１項に記載の皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤を含む、スキンケア製品。
【発明の効果】
【０００７】
後述の実施例で示されるように、本発明の皮膚バリア機能改善剤はＴＪのバリア機能を大きく改善するので、皮膚バリア機能改善剤として有用である。
【図面の簡単な説明】
【０００８】
【図１】図１は、ベルベリンによるＴＪのバリア機能改善効果の評価に使用したアッセイ系の模式図である。
【図２】図２は、ベルベリンによるＴＪのバリア機能改善効果を示す実験結果である。
【発明を実施するための形態】
【０００９】
〔有効成分〕
本発明の皮膚バリア機能改善剤は、ベルベリン又は薬学的に許容可能なその塩を有効成分として含有する。
【００１０】
ベルベリンは、以下の化学構造式で表される化合物である。
【化１】
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【００１１】
薬学的に許容可能なベルベリンの塩（以下、「ベルベリン塩」又は「その塩」ともいう）としては、ベルベリン塩化物やベルベリン硫酸塩等が挙げられる。ベルベリン塩には、その水和物（例えば、ベルベリン塩化物水和物）が含まれる。
ベルベリン及びその塩は公知物質であり、市場で容易に入手可能であるか、又は、調製可能である。
【００１２】
ベルベリン又はその塩の濃度は、皮膚バリア機能改善剤の総容量に対して１．０〜２５μｍｏｌ／Ｌ、好ましくは１．０〜２０μｍｏｌ／Ｌ、特に好ましくは１．６〜１６μｍｏｌ／Ｌである。この濃度範囲であると、ＴＪのバリア機能の高い改善効果、ひいては皮膚バリア機能の高い改善効果が得られる。
【００１３】
本発明では、有効成分として、ベルベリン又はその塩を含む生薬エキス（以下、「生薬エキス」ともいう）を使用してもよい。
生薬エキスとしては、オウバクエキス、オウレンエキス、南天葉エキス、メギエキス、オホトリトマラズエキスやタツタソウエキス等が挙げられ、好ましくはオウバクエキス、オウレンエキス及び南天葉エキスであり、より好ましくはオウバクエキスである。
生薬エキスは公知物質であり、市場で容易に入手可能であるか、又は調製可能である。生薬エキスの製造には当該技術分野で周知の方法を使用できるが、例えば抽出溶媒として水やアルコール等を用いた抽出方法が使用できる。例えば、オウバクエキスは、ミカン科植物であるキハダ（Phellodendron amurense Ruprecht又はPhellodendron chinense Schneider）の周皮を除いた樹皮を、水や１，３−ブチレングリコール等で抽出して調製できる。
【００１４】
〔皮膚バリア機能の改善〕
皮膚バリア機能とは、皮膚が有するバリア機能（外部からの刺激によるダメージや体内からの水分の喪失を防ぐ等）をいい、皮膚（表皮）の構成要素である角層とＴＪとが有するバリア機能によりもたらされる。
ＴＪ（タイトジャンクション）は、角層直下の顆粒層の２層目の細胞同士を接着するタンパク質であり、その細胞接着構造によってバリア機能が発揮される。
本発明では、紫外線等により低下したＴＪのバリア機能をベルベリン又はその塩が改善することにより、皮膚バリア機能が改善される。
皮膚バリア機能の改善により、肌の乾燥や肌荒れ等が抑制及び／又は改善され、また皮膚老化の進行が抑制される。
【００１５】
〔任意成分〕
皮膚バリア機能改善剤には、ベルベリン又はその塩に加え、本発明の効果を損なわない範囲でスキンケア製品（皮膚用化粧品）に適用可能な１種以上の成分を任意に配合できる。任意成分としては、以下に示すものが挙げられる。
〔基剤成分〕
水（例えば、精製水）、低級アルコール（例えば、エタノール）、多価アルコール（例えば、プロピレングリコール）、油脂、界面活性剤、紫外線吸収剤、紫外線散乱剤、増粘剤、色素、顔料、防腐剤、香料等
〔その他〕
乳化剤、香料、防腐剤等
〔保湿成分〕
トコフェロール、ヒアルロン酸Ｎａ、ミツバアケビ茎エキス、加水分解エラスチン、加水分解コラーゲン、アカヤジオウ根エキス、アセチルヒアルロン酸Ｎａ、アルニカ花エキス、アロエベラ葉エキス、オウゴンエキス、オーキッドエキス、オタネニンジン根エキス、カッコンエキス、カミツレ花エキス、カンゾウ根エキス、キュウリ果実エキス、クズ根エキス、クロレラエキス、セイヨウオトギリソウ花／葉／茎エキス、セイヨウキズタ葉／茎エキス、セイヨウシロヤナギ樹皮エキス、セイヨウニワトコ花エキス、ゼニアオイエキス、センブリエキス、ダイズエキス、トウキンセンカ花エキス、トリスヘキシルデカン酸ピリドキシン、パリエタリアエキス、パルミチン酸レチノール、フユボダイジュ花エキス、マクロプチリウムアトロプルプレウム花／葉／茎エキス、メマツヨイグサ種子エキス、ヤグルマギク花エキス、ローマカミツレ花エキス、ローヤルゼリーエキス、加水分解ハトムギ種子
【００１６】
〔製造方法〕
皮膚バリア機能改善剤は、スキンケア製品（皮膚用化粧料）の一般的な製法にしたがい製造できる。例えば、有効成分を基剤成分へ添加し、混合することで製造できる。
【００１７】
〔剤型〕
皮膚バリア機能改善剤はスキンケア製品として製剤化できる。例えば、クリーム、乳液、化粧水やパック等の剤型を任意に選択できる。
【００１８】
〔皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤〕
ベルベリン又はその塩は、タイトジャンクションのバリア機能を改善することで皮膚バリア機能改善効果を発揮する。したがって、本発明の皮膚バリア機能改善剤は、皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤としても把握できる。
皮膚タイトジャンクションバリア機能改善剤の有効成分、任意成分、製造方法や剤型は、皮膚バリア機能改善剤について述べた説明が適用される。
【実施例】
【００１９】
次に、実施例により本発明の効果を具体的に説明するが、本発明は実施例に限定されるものではない。
【００２０】
〔ヒト三次元培養皮膚モデルを使用したアッセイ系〕
下記の手順に従いヒト三次元培養皮膚モデルを含むアッセイ系を構築した。
ヒト正常表皮角化細胞（Epidermal Keratinocyte Progenitors, Human, CELLnTEC社製）を、３７℃、５％ＣＯ2インキュベーター内、７５ｃｍ2フラスコ中で、Epithelial Culture Medium（CELLnTEC社製）を用いて７０〜９０％コンフルエントまで培養した。Accutase Solution（sigma社製）を用いて細胞を剥離し、NuncTM CCインサート（Thermo Scientific社製）（図１の培養カップに相当）を２４ウェルプレート（同社製）にセットしたものに、１．５５×１０5ｃｅｌｌｓ／インサートとなるように細胞を播種した。３日後に培地をCnT-Prime Airlift（CELLnTEC社製）に切り換え、その翌日から１２ウェルプレート（TPP社製）で、同培地で気液界面培養を開始した。１日おきに培地交換を行い１４日間培養したものをアッセイ用のヒト三次元培養皮膚モデルとした。アッセイ系及び三次元培養皮膚モデルの模式図を図１に示す。
【００２１】
〔ベルベリンによるＴＪのバリア機能改善効果〕
紫外線（ＵＶＢ）照射によりＴＪのバリア機能が低下することが知られている（Takuo Yuki, J Invest Dermatol, 2011, 131, 3, p.744-52）。そこで、ＵＶＢ照射条件及び添加ベルベリン濃度を変えた１〜７群（表１）についてＴＪのバリア機能を測定した。ＴＪのバリア機能は、ＴＥＲ（Transepidermal Electrical Resistance）を指標にして評価した。ＴＥＲは、細胞層のインピーダンスから算出される電気抵抗値であり、ＴＪの形成に伴い高い抵抗値を示すことから、バリア強度の指標として用いられている。
【００２２】
表１
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【００２３】
気液界面培養開始から１４日目のヒト三次元培養皮膚モデルへＵＶＢを照射した（波長：３０２ｎｍ。積算照射量：６４０ｍＪ／ｃｍ2）。照射完了後、ベルベリンを添加した。添加から５０時間後、ＴＥＲをＥＶＯＭ2を用いて測定した。結果を図２に示す。
ＵＶＢ照射によりＴＥＲ（ＴＪのバリア機能）が低下した（１群対２群）。本発明の範囲外のベルベリン濃度を用いた３群及び７群では、２群に対しＴＥＲの有意な改善はみられなかった。一方、本発明の範囲内のベルベリン濃度を用いた４〜６群では２群に対しＴＥＲの有意な改善がみられた。したがって、本発明の範囲内のベルベリンを用いることでＴＪのバリア機能が大きく改善することが確認された。
【産業上の利用可能性】
【００２４】
本発明はスキンケア製品等に利用可能である。
【図１】
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【図２】
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