(57)【要約】      （修正有）【課題】病原体から植物を防御する方法の提供。【解決手段】融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー、および、当該融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを含有する製剤の適用。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
融合タンパク質を発現している組換えバチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ）ファミリーのメンバーを植物生育環境へと導入すること、または、融合タンパク質を発現している組換えバチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ）ファミリーのメンバーを植物、植物種子、または植物もしくは植物種子の周辺域へと適用することを含む、病原体から植物を防御する方法であって、
ここで、前記融合タンパク質は、
少なくとも一つの病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチド、および
標的化配列、エキソスポリウムタンパク質またはエキソスポリウムタンパク質断片、ここで、これらは、組換えバチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ）ファミリーのメンバーのエキソスポリウムへと融合タンパク質を向かわせる、
を含有するものであり、
前記病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドは、組換えバチルス・セレウスファミリーのメンバーのエキソスポリウムに物理的に付加され、酵素を含むものである、
方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１３年３月１５日に出願された米国仮特許出願第６１／７９９，２６２号の利益を主張し、その全体が、参照により本明細書に援用される。
【０００２】
本発明は、概して、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムへと融合タンパク質を向かわせる標的化配列、エキソスポリウム（ｅｘｏｓｐｏｒｉｕｍ）タンパク質、または、エキソスポリウムタンパク質断片を含有する融合タンパク質に関する。本発明はまた、そのような融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー、または、当該融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを含有する製剤に関する。本発明はさらに、植物または植物生育環境に、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー、もしくは当該製剤を適用することによる、植物の生育を刺激する、病原体から植物を保護する、および、植物におけるストレス耐性を増強させるための方法に関する。本発明はまた、植物または植物物質上に融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの芽胞を固定する方法に関する。
【背景技術】
【０００３】
植物根の周囲は、根圏と呼ばれる領域である。根圏において、細菌、真菌および他の生物は栄養素を奪い合い、および、植物の根組織へ競い合って結合する。有害な細菌および真菌、ならびに有益な細菌および真菌のどちらも根圏を支配することができる。細菌、真菌および植物の根系はすべて、根圏のペプチド、酵素および他のタンパク質の作用により影響を受け得る。土壌添加物、または、これらペプチド、酵素または他のタンパク質のうち特定のものを用いて植物を処置することにより、有益な土壌細菌および真菌の群全体に有益な効果をもたらし、植物の生育、とってより健康的な土壌環境が創り出され、植物の生育を改善し、および、特定の細菌病原体および真菌病原体に対し植物が保護される。しかしながら、植物に対しそのような有益な効果をもたらすため、ペプチド、酵素および他のタンパク質を導入しようと過去に試みられたことがあったが、土壌中では酵素、タンパク質およびペプチドの活性維持が困難であり、失敗に終わっている。さらに、土壌中には広く自然に存在しているプロテアーゼがあるため、土壌中ではタンパク質が分解されてしまう。植物根の周囲環境（根圏）は、元々の土壌の質とは異なる、ユニークな、細菌、真菌、栄養素および根の混合体である。これら生物体の間の共生関係はユニークであり、外来性タンパク質を含有させ、より良いものに改変することができうる。根圏中に高濃度の真菌および細菌が存在すると、土壌中のタンパク質に対するプロテアーゼおよび有害な他の因子が異常な高レベルとなり、そのためにタンパク質の分解がさらに多くなる。その上、土壌中に導入された酵素および他のタンパク質は、植物根から速やかに消散されてしまう。
【０００４】
ゆえに、当分野において、植物（たとえば、植物根系）へ、ペプチド、酵素および他のタンパク質を効率的に送達し、それら分子が活性を維持している期間を延長させるための方法が求められている。さらに、当分野において、根圏および植物の葉および、特に植物根へ、それらペプチド、酵素およびタンパク質を選択的に向かわせる方法が求められている。
【発明の概要】
【０００５】
本発明は、植物生育刺激タンパク質もしくはペプチドを少なくとも１つ、植物のストレス耐性を増強させるタンパク質もしくはペプチドを少なくとも１つ、または、植物結合タンパク質もしくはペプチドを少なくとも１つ、含有する融合タンパク質を目的とする。植物生育刺激タンパク質またはペプチドは、ペプチドホルモン、非ホルモンペプチド、または、植物生育刺激化合物の産生または活性化に関与する酵素を含有する。融合タンパク質はまた、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片を含有する。標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片は、（ａ）配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約４３％の同一性を有するアミノ酸配列を含有する標的化配列であって、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は少なくとも約５４％である、標的化配列；（ｂ）配列番号１のアミノ酸１〜３５を含有する標的化配列；（ｃ）配列番号１のアミノ酸２０〜３５を含有する標的化配列；（ｄ）配列番号１を含有する標的化配列；（ｅ）配列番号２と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｆ）配列番号３のアミノ酸１〜２７を含有する標的化配列；（ｇ）配列番号３のアミノ酸１２〜２７を含有する標的化配列；（ｈ）配列番号３を含有する標的化配列；（ｉ）配列番号４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｊ）配列番号５のアミノ酸１〜３８を含有する標的化配列；（ｋ）配列番号５のアミノ酸２３〜３８を含有する標的化配列；（ｌ）配列番号５を含有する標的化配列；（ｍ）配列番号６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｎ）配列番号７のアミノ酸１〜２８を含有する標的化配列；（ｏ）配列番号７のアミノ酸１３〜２８を含有する標的化配列；（ｐ）配列番号７を含有する標的化配列；（ｑ）配列番号８と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｒ）配列番号９のアミノ酸１〜２４を含有する標的化配列；（ｓ）配列番号９のアミノ酸９〜２４を含有する標的化配列；（ｔ）配列番号９を含有する標的化配列；（ｕ）配列番号１０と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｖ）配列番号１１のアミノ酸１〜３３を含有する標的化配列；（ｗ）配列番号１１のアミノ酸１８〜３３を含有する標的化配列；（ｘ）配列番号１１を含有する標的化配列；（ｙ）配列番号１２と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｚ）配列番号１３のアミノ酸１〜３３を含有する標的化配列；（ａａ）配列番号１３のアミノ酸１８〜３３を含有する標的化配列；（ａｂ）配列番号１３を含有する標的化配列；（ａｃ）配列番号１４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ａｄ）配列番号１５のアミノ酸１〜４３を含有する標的化配列；（ａｅ）配列番号１５のアミノ酸２８〜４３を含有する標的化配列；（ａｆ）配列番号１５を含有する標的化配列；（ａｇ）配列番号１６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ａｈ）配列番号１７のアミノ酸１〜２７を含有する標的化配列；（ａｉ）配列番号１７のアミノ酸１２〜２７を含有する標的化配列；（ａｊ）配列番号１７を含有する標的化配列；（ａｋ）配列番号１８と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ａｌ）配列番号１９のアミノ酸１〜３３を含有する標的化配列；（ａｍ）配列番号１９のアミノ酸１８〜３３を含有する標的化配列；（ａｎ）配列番号１９を含有する標的化配列；（ａｏ）配列番号２０と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ａｐ）配列番号２１のアミノ酸１〜３３を含有する標的化配列；（ａｑ）配列番号２１のアミノ酸１８〜３３を含有する標的化配列；（ａｒ）配列番号２１を含有する標的化配列；（ａｓ）配列番号２２と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ａｔ）配列番号２３のアミノ酸１〜２４を含有する標的化配列；（ａｕ）配列番号２３のアミノ酸９〜２４を含有する標的化配列；（ａｖ）配列番号２３を含有する標的化配列；（ａｗ）配列番号２４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ａｘ）配列番号２５のアミノ酸１〜２４を含有する標的化配列；（ａｙ）配列番号２５のアミノ酸９〜２４を含有する標的化配列；（ａｚ）配列番号２５を含有する標的化配列；（ｂａ）配列番号２６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｂｂ）配列番号２７のアミノ酸１〜３０を含有する標的化配列；（ｂｃ）配列番号２７のアミノ酸１５〜３０を含有する標的化配列；（ｂｄ）配列番号２７を含有する標的化配列；（ｂｅ）配列番号２８と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｂｆ）配列番号２９のアミノ酸１〜３３を含有する標的化配列；（ｂｇ）配列番号２９のアミノ酸１８〜３３を含有する標的化配列；（ｂｈ）配列番号２９を含有する標的化配列；（ｂｉ）配列番号３０と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｂｊ）配列番号３１のアミノ酸１〜２４を含有する標的化配列；（ｂｋ）配列番号３１のアミノ酸９〜２４を含有する標的化配列；（ｂｌ）配列番号３１を含有する標的化配列；（ｂｍ）配列番号３２と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｂｎ）配列番号３３のアミノ酸１〜１５を含有する標的化配列；（ｂｏ）配列番号３３を含有する標的化配列；（ｂｐ）配列番号３４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｂｑ）配列番号３５のアミノ酸１〜１６を含有する標的化配列；（ｂｒ）配列番号３５を含有する標的化配列；（ｂｓ）配列番号３６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｂｔ）配列番号４３のアミノ酸１〜２９を含有する標的化配列；（ｂｕ）配列番号４３のアミノ酸１４〜２９を含有する標的化配列；（ｂｖ）配列番号４３を含有する標的化配列；（ｂｗ）配列番号４４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｂｘ）配列番号４５のアミノ酸１〜３５を含有する標的化配列；（ｂｙ）配列番号４５のアミノ酸２０〜３５を含有する標的化配列；（ｂｚ）配列番号４５を含有する標的化配列；（ｃａ）配列番号４６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｃｂ）配列番号４７のアミノ酸１〜４３を含有する標的化配列；（ｃｃ）配列番号４７のアミノ酸２８〜４３を含有する標的化配列；（ｃｄ）配列番号４７を含有する標的化配列；（ｃｅ）配列番号４８と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｃｆ）配列番号４９のアミノ酸１〜３２を含有する標的化配列；（ｃｇ）配列番号４９のアミノ酸１７〜３２を含有する標的化配列；（ｃｈ）配列番号４９を含有する標的化配列；（ｃｉ）配列番号５０と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｃｊ）配列番号５１のアミノ酸１〜３３を含有する標的化配列；（ｃｋ）配列番号５１のアミノ酸１８〜３３を含有する標的化配列；（ｃｌ）配列番号５１を含有する標的化配列；（ｃｍ）配列番号５２と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｃｎ）配列番号５３のアミノ酸１〜３３を含有する標的化配列；（ｃｏ）配列番号５３のアミノ酸１８〜３３を含有する標的化配列；（ｃｐ）配列番号５３を含有する標的化配列；（ｃｑ）配列番号５４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｃｒ）配列番号５５のアミノ酸１〜３０を含有する標的化配列；（ｃｓ）配列番号５５のアミノ酸１５〜３０を含有する標的化配列；（ｃｔ）配列番号５５を含有する標的化配列；（ｃｕ）配列番号５６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｃｖ）配列番号５７のアミノ酸１〜１３０を含有する標的化配列；（ｃｗ）配列番号５７のアミノ酸１１５〜１３０を含有する標的化配列；（ｃｘ）配列番号５７を含有する標的化配列；（ｃｙ）配列番号５８と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｃｚ）配列番号５９と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質断片；（ｄａ）配列番号６０を含有する標的化配列；（ｄｂ）配列番号６１を含有する標的化配列；（ｄｃ）配列番号６２を含有する標的化配列；（ｄｄ）配列番号６３を含有する標的化配列；（ｄｅ）配列番号６４を含有する標的化配列；（ｄｆ）配列番号６５を含有する標的化配列；（ｄｇ）配列番号６６を含有する標的化配列；（ｄｈ）配列番号６７を含有する標的化配列；（ｄｉ）配列番号６８を含有する標的化配列；（ｄｊ）配列番号６９を含有する標的化配列；（ｄｋ）配列番号７０を含有する標的化配列；（ｄｌ）配列番号７１と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｍ）配列番号７２と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｎ）配列番号７３と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｏ）配列番号７４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｐ）配列番号７５と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｑ）配列番号７６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｒ）配列番号７７と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｓ）配列番号７８と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｔ）配列番号７９と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｕ）配列番号８０と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｖ）配列番号８１と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｗ）配列番号８２と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｘ）配列番号８３と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｙ）配列番号８４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｚ）配列番号１のアミノ酸２２〜３１を含有する標的化配列；（ｅａ）配列番号１のアミノ酸２２〜３３を含有する標的化配列；（ｅｂ）配列番号１のアミノ酸２０〜３１を含有する標的化配列；（ｅｃ）配列番号３のアミノ酸１４〜２３を含有する標的化配列；（ｅｄ）配列番号３のアミノ酸１４〜２５を含有する標的化配列；または、（ｅｆ）配列番号３のアミノ酸１２〜２３を含有する標的化配列、であっても良い。
【０００６】
本発明はまた、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、または、エキソスポリウムタンパク質断片、および、病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質を目的とする。標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片は、（ａ）１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約４３％の同一性を有するアミノ酸配列からなる標的化配列であって、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は少なくとも約５４％である、標的化配列；（ｂ）配列番号１のアミノ酸１〜３５からなる標的化配列；（ｃ）配列番号１のアミノ酸２０〜３５からなる標的化配列；（ｄ）配列番号１からなる標的化配列；（ｅ）配列番号６０を含有する標的化配列；（ｆ）配列番号３のアミノ酸１〜２７を含有する標的化配列；（ｇ）配列番号３のアミノ酸１２〜２７を含有する標的化配列；（ｈ）配列番号３を含有する標的化配列；（ｉ）配列番号４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｊ）配列番号５のアミノ酸１〜３８を含有する標的化配列；（ｋ）配列番号５のアミノ酸２３〜３８を含有する標的化配列；（ｌ）配列番号５を含有する標的化配列；（ｍ）配列番号６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｎ）配列番号７のアミノ酸１〜２８を含有する標的化配列；（ｏ）配列番号７のアミノ酸１３〜２８を含有する標的化配列；（ｐ）配列番号７を含有する標的化配列；（ｑ）配列番号８と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｒ）配列番号９のアミノ酸１〜２４を含有する標的化配列；（ｓ）配列番号９のアミノ酸９〜２４を含有する標的化配列；（ｔ）配列番号９を含有する標的化配列；（ｕ）配列番号１０と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｖ）配列番号１１のアミノ酸１〜３３を含有する標的化配列；（ｗ）配列番号１１のアミノ酸１８〜３３を含有する標的化配列；（ｘ）配列番号１１を含有する標的化配列；（ｙ）配列番号１２と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｚ）配列番号１３のアミノ酸１〜３３を含有する標的化配列；（ａａ）配列番号１３のアミノ酸１８〜３３を含有する標的化配列；（ａｂ）配列番号１３を含有する標的化配列；（ａｃ）配列番号１４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ａｄ）配列番号１５のアミノ酸１〜４３を含有する標的化配列；（ａｅ）配列番号１５のアミノ酸２８〜４３を含有する標的化配列；（ａｆ）配列番号１５を含有する標的化配列；（ａｇ）配列番号１６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ａｈ）配列番号１７のアミノ酸１〜２７を含有する標的化配列；（ａｉ）配列番号１７のアミノ酸１２〜２７を含有する標的化配列；（ａｊ）配列番号１７を含有する標的化配列；（ａｋ）配列番号１８と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ａｌ）配列番号１９のアミノ酸１〜３３を含有する標的化配列；（ａｍ）配列番号１９のアミノ酸１８〜３３を含有する標的化配列；（ａｎ）配列番号１９を含有する標的化配列；（ａｏ）配列番号２０と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ａｐ）配列番号２１のアミノ酸１〜３３を含有する標的化配列；（ａｑ）配列番号２１のアミノ酸１８〜３３を含有する標的化配列；（ａｒ）配列番号２１を含有する標的化配列；（ａｓ）配列番号２２と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ａｔ）配列番号２３のアミノ酸１〜２４を含有する標的化配列；（ａｕ）配列番号２３のアミノ酸９〜２４を含有する標的化配列；（ａｖ）配列番号２３を含有する標的化配列；（ａｗ）配列番号２４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ａｘ）配列番号２５のアミノ酸１〜２４を含有する標的化配列；（ａｙ）配列番号２５のアミノ酸９〜２４を含有する標的化配列；（ａｚ）配列番号２５を含有する標的化配列；（ｂａ）配列番号２６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｂｂ）配列番号２７のアミノ酸１〜３０を含有する標的化配列；（ｂｃ）配列番号２７のアミノ酸１５〜３０を含有する標的化配列；（ｂｄ）配列番号２７を含有する標的化配列；（ｂｅ）配列番号２８と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｂｆ）配列番号２９のアミノ酸１〜３３を含有する標的化配列；（ｂｇ）配列番号２９のアミノ酸１８〜３３を含有する標的化配列；（ｂｈ）配列番号２９を含有する標的化配列；（ｂｉ）配列番号３０と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｂｊ）配列番号３１のアミノ酸１〜２４を含有する標的化配列；（ｂｋ）配列番号３１のアミノ酸９〜２４を含有する標的化配列；（ｂｌ）配列番号３１を含有する標的化配列；（ｂｍ）配列番号３２と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｂｎ）配列番号３３のアミノ酸１〜１５を含有する標的化配列；（ｂｏ）配列番号３３を含有する標的化配列；（ｂｐ）配列番号３４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｂｑ）配列番号３５のアミノ酸１〜１６を含有する標的化配列；（ｂｒ）配列番号３５を含有する標的化配列；（ｂｓ）配列番号３６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｂｔ）配列番号４３のアミノ酸１〜２９を含有する標的化配列；（ｂｕ）配列番号４３のアミノ酸１４〜２９を含有する標的化配列；（ｂｖ）配列番号４３を含有する標的化配列；（ｂｗ）配列番号４４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｂｘ）配列番号４５のアミノ酸１〜３５を含有する標的化配列；（ｂｙ）配列番号４５のアミノ酸２０〜３５を含有する標的化配列；（ｂｚ）配列番号４５を含有する標的化配列；（ｃａ）配列番号４６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｃｂ）配列番号４７のアミノ酸１〜４３を含有する標的化配列；（ｃｃ）配列番号４７のアミノ酸２８〜４３を含有する標的化配列；（ｃｄ）配列番号４７を含有する標的化配列；（ｃｅ）配列番号４８と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｃｆ）配列番号４９のアミノ酸１〜３２を含有する標的化配列；（ｃｇ）配列番号４９のアミノ酸１７〜３２を含有する標的化配列；（ｃｈ）配列番号４９を含有する標的化配列；（ｃｉ）配列番号５０と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｃｊ）配列番号５１のアミノ酸１〜３３を含有する標的化配列；（ｃｋ）配列番号５１のアミノ酸１８〜３３を含有する標的化配列；（ｃｌ）配列番号５１を含有する標的化配列；（ｃｍ）配列番号５２と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｃｎ）配列番号５３のアミノ酸１〜３３を含有する標的化配列；（ｃｏ）配列番号５３のアミノ酸１８〜３３を含有する標的化配列；（ｃｐ）配列番号５３を含有する標的化配列；（ｃｑ）配列番号５４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｃｒ）配列番号５５のアミノ酸１〜３０を含有する標的化配列；（ｃｓ）配列番号５５のアミノ酸１５〜３０を含有する標的化配列；（ｃｔ）配列番号５５を含有する標的化配列；（ｃｕ）配列番号５６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｃｖ）配列番号５７のアミノ酸１〜１３０を含有する標的化配列；（ｃｗ）配列番号５７のアミノ酸１１５〜１３０を含有する標的化配列；（ｃｘ）配列番号５７を含有する標的化配列；（ｃｙ）配列番号５８と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｃｚ）配列番号５９と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質断片；（ｄａ）配列番号６１を含有する標的化配列；（ｄｂ）配列番号６２を含有する標的化配列；（ｄｃ）配列番号６３を含有する標的化配列；（ｄｄ）配列番号６４を含有する標的化配列；（ｄｅ）配列番号６５を含有する標的化配列；（ｄｆ）配列番号６６を含有する標的化配列；（ｄｇ）配列番号６７を含有する標的化配列；（ｄｈ）配列番号６８を含有する標的化配列；（ｄｉ）配列番号６９を含有する標的化配列；（ｄｊ）配列番号７０を含有する標的化配列；（ｄｋ）配列番号７１と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｌ）配列番号７２と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｍ）配列番号７３と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｎ）配列番号７４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｏ）配列番号７５と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｐ）配列番号７６と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｑ）配列番号７７と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｒ）配列番号７８と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｓ）配列番号７９と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｔ）配列番号８０と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｕ）配列番号８１と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｖ）配列番号８２と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｗ）配列番号８３と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｘ）配列番号８４と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質；（ｄｙ）配列番号１のアミノ酸２２〜３１を含有する標的化配列；（ｄｚ）配列番号１のアミノ酸２２〜３３を含有する標的化配列；（ｅａ）配列番号１のアミノ酸２２〜３３からなる標的化配列；（ｅｂ）配列番号３のアミノ酸１４〜２３を含有する標的化配列；（ｅｃ）配列番号３のアミノ酸１４〜２５を含有する標的化配列；または、（ｅｄ）配列番号３のアミノ酸１２〜２３を含有する標的化配列、であってもよい。
【０００７】
本発明はさらに、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質またはエキソスポリウムタンパク質断片、および、病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質を目的とする。病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドは、ハーピン（ｈａｒｐｉｎ）、αエラスチン、βエラスチン、システミン、フェニルアラニンアンモニアリアーゼ、エリシチン、ディフェンシン、クリプトゲイン、フラジェリンタンパク質、フラジェリンペプチド、バクテリオシン、リゾチーム、リゾチームペプチド、シデロフォア、非リボソーム活性ペプチド、コンアルブミン、アルブミン、ラクトフェリン、ラクトフェリンペプチド、またはＴａｓＡを含有しても良い。あるいは、病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドは、殺虫活性、殺蠕虫活性を有するか、または、昆虫もしくは蠕虫の捕食を抑制するか、またはそれらの組み合わせである。あるいは、病原体から植物を防御するタンパク質は、酵素を含有する。標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片は、上述の［０００５］段落に列記される標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片のいずれかであっても良い。
【０００８】
本発明はまた、対象のタンパク質またはペプチドを少なくとも１つ、およびエキソスポリウムタンパク質を含有する融合タンパク質を目的とする。エキソスポリウムタンパク質は、配列番号７１、７５、８０、８１、８２、８３、および８４のうちのいずれか１つと少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質であっても良い。
【０００９】
本発明はさらに、融合タンパク質のいずれかを発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーに関するものである。
【００１０】
本発明はまた、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのいずれか、および、農学的に受容可能な担体を含有する製剤を目的とする。
【００１１】
本発明はまた、植物の生育を刺激する方法に関する。当該方法には、植物生育刺激タンパク質またはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのいずれか、または、植物生育刺激タンパク質またはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを含有する製剤のいずれかを植物生育環境へと導入すること、を含む。あるいは、当該方法には、植物生育刺激タンパク質またはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのいずれか、または、植物生育刺激タンパク質またはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを含有する製剤のいずれかを、植物もしくは植物の種子へと適用すること、または、植物もしくは植物の種子の周辺域へと適用すること、を含む。植物生育刺激タンパク質またはペプチドは、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ科のメンバーのエキソスポリウムに物理的に付加されている。
【００１２】
本発明はまた、植物の生育を刺激する方法を目的とするものである。当該方法には、融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを植物生育環境へと導入すること、または、植物、植物の種子、または、植物もしくは植物種子の周辺域へ、融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを適用すること、が含まれる。融合タンパク質は、植物生育刺激タンパク質またはペプチドを少なくとも１つ、および、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質もしくはエキソスポリウムタンパク質断片を含有する。標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片は、上述の［０００５］段落に列記されるもののいずれかであっても良い。植物生育刺激タンパク質またはペプチドは、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムに物理的に付加されている。
【００１３】
本発明はさらに、病原体から植物を防御する、または、植物におけるストレス耐性を増強する方法に関する。当該方法には、病原体から植物を防御するタンパク質もしくはペプチドを少なくとも１つ、または、植物におけるストレス耐性を増強するタンパク質もしくはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのいずれか、または、病原体から植物を防御するタンパク質もしくはペプチドを少なくとも１つ、または、植物におけるストレス耐性を増強するタンパク質もしくはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのいずれかを含有する製剤のいずれか、を植物生育環境へ導入することが含まれる。あるいは、当該方法には、病原体から植物を防御するタンパク質もしくはペプチドを少なくとも１つ、または、植物におけるストレス耐性を増強するタンパク質またはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのいずれか、または、病原体から植物を防御するタンパク質もしくはペプチドを少なくとも１つ、または、植物におけるストレス耐性を増強するタンパク質またはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのいずれかを含有する製剤のいずれか、を植物、植物種子、または植物周辺域へと適用することが含まれる。病原体から植物を防御するタンパク質もしくはペプチド、または、植物におけるストレス耐性を増強するタンパク質もしくはペプチドは、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムに物理的に付加されている。
【００１４】
本発明はまた、植物に組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの芽胞を固定する方法を目的とする。当該方法には、植物結合タンパク質またはペプチドを少なくとも１つ発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのいずれか、または、植物結合タンパク質またはペプチドを少なくとも１つ発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのうちのいずれかを含有する製剤のいずれかを、植物生育環境へ導入することが含まれる。あるいは、当該方法には、植物結合タンパク質またはペプチドを少なくとも１つ発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのいずれか、または、植物結合タンパク質またはペプチドを少なくとも１つ発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのうちのいずれかを含有する製剤のいずれかを、植物、植物種子、または、植物もしくは植物種子の周辺域に適用することが含まれる。当該植物結合タンパク質またはペプチドは、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムに物理的に付加されている。
【００１５】
他の目的および特性は、以下において、ある部分において明らかであり、ある部分において指摘される
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｓｔｅｒｎｅ株  ＢｃｌＡのアミノ末端部分のアミノ酸配列と、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー由来の様々なエキソスポリウムタンパク質の対応する領域とのアライメントを示す。
【００１７】
【図２】エキソスポリウム上で、ｍＣｈｅｒｒｙレポーターに連結された、様々なエキソスポリウムタンパク質を含有する融合タンパク質の発現の例示的な蛍光顕微鏡の結果を示す。
【００１８】
定義
本明細書において、「１つの」（ａ、ａｎ、ｏｎｅ）、「当該」（ｔｈｅ）、および「上述の」（ｓａｉｄ）が用いられる場合、その意味は、他で示されない限り、「少なくとも１つ」または「１以上」である。
【００１９】
「含有する」「含む」および「有する」という用語は、包括的であることが意図され、および、列記される因子以外の追加の因子がありうることを意味する。
【００２０】
「生物活性ペプチド」という用語は、生物学的活性を発揮する任意のペプチドを指す。「生物活性ペプチド」は、たとえば、プロテアーゼまたはペプチダーゼによる、タンパク質、ペプチド、プロタンパク質、またはプレプロタンパク質の開裂を介して作製されても良い。
【００２１】
「植物生育刺激化合物の産生または活性化に関与する酵素」には、植物の生育を刺激する、または、植物の構造を変える化合物の生物学的合成経路における任意の工程を触媒する任意の酵素、または、植物の生育を刺激するもしくは植物の構造を変える化合物の不活性または低活性の誘導体の、当該化合物の活性型またはより高い活性型への転換を触媒する任意の酵素が含まれる。そのような化合物としては、たとえば、限定されないが、たとえばオーキシン、およびサイトカイニン等の小分子植物ホルモン、生物活性ペプチド、および、根圏中の細菌または真菌により合成される植物生育刺激小分子（たとえば、２，３−ブタンジオール）が挙げられる。
【００２２】
本明細書において使用される、「融合タンパク質」という用語は、２以上の別のタンパク質から得た配列を含有するポリペプチド配列を有するタンパク質を指す。融合タンパク質は、発現された際に、各々の元のタンパク質に由来する機能的特性を有する１つのポリペプチドを産生する核酸配列を生成するために、第一のポリペプチドのすべてまたは一部をコードする核酸分子と、第二のポリペプチドのすべてまたは一部をコードする核酸分子を共に結合することにより作製されても良い。
【００２３】
「組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの芽胞を植物上に固定する」という用語は、植物（たとえば、植物の根、または、たとえば葉、幹、花、もしくは実等の植物の空中の部分）に、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの芽胞を結合させ、当該芽胞が、植物生育環境中または植物の空中部分の周辺環境中に消散される代わりに、植物の根の構造もしくは空中の部分に維持されることを指す。
【００２４】
「植物生育環境」には、植物の生育をサポートすることができる任意の物質が含まれる。
【００２５】
本明細書において使用される、「植物免疫システム増強タンパク質またはペプチド」には、植物の免疫システムに有益な効果を有する任意のタンパク質またはペプチドが含まれる。
【００２６】
本明細書において使用される、「植物生育刺激タンパク質またはペプチド」という用語には、当該タンパク質またはペプチドに曝された植物において、植物の生育を増加させる任意のタンパク質またはペプチドが含まれる。
【００２７】
本明細書において使用される、「病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチド」とは、当該タンパク質またはペプチドに曝された植物を病原体に感染しにくくする任意のタンパク質またはペプチドが含まれる。
【００２８】
本明細書において使用される、「植物におけるストレス耐性を増強させるタンパク質またはペプチド」には、当該タンパク質またはペプチドに曝された植物を、ストレスに対して、より耐性とさせる任意のタンパク質またはペプチドが含まれる。
【００２９】
「植物結合タンパク質またはペプチド」という用語は、植物の任意の部分（たとえば、植物の根、または、たとえば枝葉、幹、花または実等の空中部分）または植物物質に特異的に、または非特異的に結合することができる任意のペプチドまたはタンパク質を指す。
【００３０】
本明細書において使用される、「標的化配列」という用語は、より長いポリペプチドまたはタンパク質の一部として存在する際、特定の細胞内部位に、当該より長いポリペプチドまたはタンパク質を局在させるポリペプチド配列を指す。本明細書に記述される標的化配列は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムへのタンパク質の局在化をもたらす。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
本発明は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムへと融合タンパク質を向かわせる標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、または、エキソスポリウムタンパク質断片、および：（ａ）植物生育刺激タンパク質またはペプチドを少なくとも１つ；（ｂ）病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドを少なくとも１つ；（ｃ）植物のストレス耐性を増強させるタンパク質またはペプチドを少なくとも１つ；または（ｄ）植物結合タンパク質またはペプチドを少なくとも１つ、含有する融合タンパク質に関する。Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの細菌中で発現された際、これら融合タンパク質は、芽胞のエキソスポリウム層に向かわされ、および、当該タンパク質またはペプチドが、当該芽胞の外側に提示されるよう、物理的に方向づけられる。
【００３２】
このＢａｃｉｌｌｕｓエキソスポリウム提示（ＢＥＭＤ）システムは、ペプチド、酵素、および他のタンパク質を植物（たとえば、植物の枝葉、実、花、幹または根）へと送達、または、植物生育環境（たとえば土壌等）へと送達するために用いることができる。土壌または、本方法における他の植物生育環境へ送達されるペプチド、酵素およびタンパク質は、長期間、土壌中で活性を維持し、活性を示す。本明細書に記述される融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの細菌を土壌または植物の根圏へ導入することにより、多くの異なる土壌条件下において、植物の生育が有益に増強される。これら酵素を生成するＢＥＭＤを使用することにより、植物の発育の最初の数か月にわたり、植物および根圏に対し、有益な効果を発揮し続けることが可能となる。
【００３３】
標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、およびエキソスポリウムタンパク質断片
参照しやすくするために、本明細書において言及されるペプチドおよびタンパク質の配列番号を以下の表１に列記する。
【表１−１】
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【表１−２】
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【表１−３】
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【表１−４】
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【表１−５】
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【表１−６】
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【表１−７】
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【表１−８】
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【表１−９】
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【表１−１０】
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【表１−１１】
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【表１−１２】
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【表１−１３】
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【表１−１４】
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【表１−１５】
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【表１−１６】
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【００３４】
Ｂａｃｉｌｌｕｓは、桿菌属である。細菌のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーには、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓａｍａｎｉｉ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｇａｅｍｏｋｅｎｓｉｓ、および、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓの種が含まれる。ストレスのかかった環境下において、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリー細菌は胞子形成を経て、長期間、休眠状態となることができる長円状の芽胞を形成する。芽胞の最外層はエキソスポリウム（ｅｘｏｓｐｏｒｉｕｍ）として知られており、毛髪様の突起の外けばにより囲まれた基底層を含有する。毛髪様のけば上のフィラメントは主にコラーゲン様糖タンパク質ＢｃｌＡにより形成されており、一方、基底層は、多くの異なるタンパク質から構成される。他のコラーゲン関連タンパク質であるＢｃｌＢもまた、エキソスポリウム中に存在し、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの芽胞上に露出されている。表面けばの主成分であるＢｃｌＡは、基底層に位置づけられたそのアミノ末端（Ｎ末端）でエキソスポリウムに付着され、および、そのカルボキシ末端（Ｃ末端）は、芽胞の外側に伸びていることが示されている。
【００３５】
従前に、ＢｃｌＡおよびＢｃｌＢのＮ末端領域のある配列を用いて、ペプチドまたはタンパク質をＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓの芽胞のエキソスポリウムへと向かわせることができたことが見出されている（米国特許出願第２０１０／０２３３１２４号および同第２０１１／０２８１３１６号、ならびに、Ｔｈｏｍｐｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．、Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ｏｆ  ｔｈｅ  ＢｃｌＡ  ａｎｄ  ＢｃｌＢ  ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｔｏ  ｔｈｅ  Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ  ｓｐｏｒｅ  ｓｕｒｆａｃｅ、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ  ７０（２）：４２１−３４  （２００８）を参照のこと。それら各々の全体が、参照により本明細書に援用される）。また、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓのＢｅｔＡ／ＢＡＳ３２９０タンパク質は、エキソスポリウムに局在化したことが発見された。
【００３６】
特に、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｓｔｅｒｎｅ株のＢｃｌＡのアミノ酸２０〜３５で、エキソスポリウムへと向かわせるには十分であることが判明している。ＢｃｌＡのアミノ酸１〜４１（配列番号１）と、関連配列を有する数種の他のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのエキソスポリウムタンパク質およびＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのタンパク質の対応するＮ末端領域との配列アライメントを、図１に示す。図１から明らかであるように、ＢｃｌＡのアミノ酸２０〜４１に相当する領域において、すべてのタンパク質の間で高い相同性の領域が存在する。しかしながら、これら配列において、ＢｃｌＡのアミノ酸３６〜４１に相当するアミノ酸は、二次構造を有し、エキソスポリウムへの融合タンパク質の局在化には必須ではない。ＢｃｌＡの保存標的化配列領域（配列番号１のアミノ酸２０〜３５）を、図１に太字で示しており、それらは、エキソスポリウムへの局在に必要とされる最小限の標的化配列に相当する。図１で下線を引いた配列は、より高度に保存された領域（標的化配列内のＢｃｌＡのアミノ酸２５〜３５にわたる）であり、および、ＥｘｓＦＡ／ＢｘｐＢ／ＥｘｓＦＢおよびホモログに対する認識配列であり、記述されるタンパク質をエキソスポリウムの表面上に向かわせ、集合させる。図１の配列番号３、５および７のアミノ酸配列は、それぞれ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｓｔｅｒｎｅ株ＢｅｔＡ／ＢＡＳ３２９０のアミノ酸１〜３３、メチオニン、それに続きＢａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｓｔｅｒｎｅ株ＢＡＳ４６２３のアミノ酸２〜４３、および、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｓｔｅｒｎｅ株のＢｃｌＢのアミノ酸１〜３４である。（ＢＡＳ４６２３については、天然型タンパク質の第１位に存在するバリンをメチオニンと置換することで、より良い発現をもたらしたことが判明した）。図１に明らかなように、これら配列の各々は、ＢｃｌＡのアミノ酸２０〜３５に相当する保存領域を含有し（配列番号１の太字）、および、ＢｃｌＡのアミノ酸２０〜３５に相当するより高度に保存された領域を含有する（下線）。
【００３７】
Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー由来のさらなるタンパク質もまた、保存標的化領域を含有する。特に、図１において、配列番号９は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｓｔｅｒｎｅ株ＢＡＳ１８８２のアミノ酸１〜３０、配列番号１１は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４  ２２８０遺伝子産物のアミノ酸１〜３９、配列番号１３は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４  ３５７２遺伝子産物のアミノ酸１〜３９、配列番号１５は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ  ＶＤ２００エキソスポリウムリーダーペプチドのアミノ酸１〜４９、配列番号１７は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ  ＶＤ１６６エキソスポリウムリーダーペプチドのアミノ酸１〜３３、配列番号１９は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ  ＶＤ２００仮想タンパク質ＩＫＧ＿０４６６３のアミノ酸１〜３９、配列番号２１は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４  ＹＶＴＮ  βプロペラタンパク質のアミノ酸１〜３９、配列番号２３は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４仮想タンパク質ｂｃｅｒｋｂａｂ４＿２３６３のアミノ酸１〜３０、配列番号２５は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４仮想タンパク質ｂｃｅｒｋｂａｂ４＿２１３１のアミノ酸１〜３０、配列番号２７は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４三重ヘリックスリピート含有コラーゲンのアミノ酸１〜３６、配列番号２９は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ２０４８仮想タンパク質ｂｍｙｃｏ０００１＿２１６６０のアミノ酸１〜３９、配列番号３１は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ２０４８仮想タンパク質ｂｍｙｃ０００１＿２２５４０のアミノ酸１〜３０、配列番号３３は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ２０４８仮想タンパク質ｂｍｙｃ０００１＿２１５１０のアミノ酸１〜２１、配列番号３５は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ３５６４６コラーゲン三重ヘリックスリピートタンパク質のアミノ酸１〜２２、配列番号４３は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ仮想タンパク質ＷＰ＿６９６５２のアミノ酸１〜３５、配列番号４５は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムリーダーＷＰ０１６１１７７１７のアミノ酸１〜４１、配列番号４７は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムペプチドＷＰ００２１０５１９２のアミノ酸１〜４９、配列番号４９は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ仮想タンパク質ＷＰ８７３５３のアミノ酸１〜３８、配列番号５１は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムペプチド０２１１２３６９のアミノ酸１〜３９、配列番号５３は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムタンパク質ＷＰ０１６０９９７７０のアミノ酸１〜３９、配列番号５５は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ仮想タンパク質ＹＰ００６６１２５２５のアミノ酸１〜３６、および、配列番号５７は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ仮想タンパク質ＴＩＧＲ０３７２０のアミノ酸１〜３６である。図１に示されるように、これらタンパク質のＮ末端領域のそれぞれは、ＢｃｌＡのアミノ酸２０〜３５（配列番号１）と共に保存されている領域、および、ＢｃｌＡのアミノ酸２５〜３５に相当する、より高度に保存された領域を含有している。
【００３８】
本発明の融合タンパク質において、アミノ酸２０〜３５を含有するＢｃｌＡの任意の部分は、本発明において、標的化配列として用いることができる。さらに、全長エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片は、エキソスポリウムへと当該融合タンパク質を向かわせるために用いることができる。ゆえに、全長ＢｃｌＡまたは、アミノ酸２０〜３５を含有するＢｃｌＡの断片は、エキソスポリウムへの標的化のために用いることができる。たとえば、全長ＢｃｌＡ（配列番号２）または、たとえば配列番号５９（ＢｃｌＡのアミノ酸１〜１９６）等のカルボキシ末端を欠いた中間サイズのＢｃｌＡ断片を、エキソスポリウムへと当該融合タンパク質を向かわせるために用いることができる。たとえば、配列番号５９の断片等の中間サイズの断片は、全長ＢｃｌＡより二次構造が少なく、および、標的化配列としての使用に適していることが判明している。標的化配列はまた、アミノ酸２０〜３５を含有する、たとえば配列番号１（ＢｃｌＡのアミノ酸１〜４１）、配列番号１のアミノ酸１〜３５、配列番号１のアミノ酸２０〜３５、または、配列番号６０（ＢｃｌＡのアミノ酸２０〜３５にメチオニン残基が連結）等を含有する、さらに短いＢｃｌＡ部分を含有しても良い。アミノ酸２０〜３５の一部のみを含有する、さらに短いＢｃｌＡ断片もまた、エキソスポリウムへと融合タンパク質を向かわせる能力を示す。たとえば、標的化配列は、配列番号１のアミノ酸２２〜３１、配列番号１のアミノ酸２２〜３３、または、配列番号１のアミノ酸２０〜３１を含有しても良い。
【００３９】
あるいは、ＢｅｔＡ／ＢＡＳ３２９０、ＢＡＳ４６２３、ＢｃｌＢ、ＢＡＳ１８８２、ＫＢＡＢ４  ２２８０遺伝子産物、ＫＢＡＢ４  ３５７２遺伝子産物、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ  ＶＤ２００エキソスポリウムリーダーペプチド、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ  ＶＤ１６６エキソスポリウムリーダーペプチド、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ  ＶＤ２００仮想タンパク質ＩＫＧ＿０４６６３、Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４  ＹＶＴＮ  βプロペラタンパク質、Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４仮想タンパク質ｂｃｅｒｋｂａｂ４＿２３６３、Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４仮想タンパク質ｂｃｅｒｋｂａｂ４＿２１３１、Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４三重ヘリックスリピート含有コラーゲン、Ｂ．ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ２０４８仮想タンパク質ｂｍｙｃｏ０００１＿２１６６０、Ｂ．ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ２０４８仮想タンパク質ｂｍｙｃ０００１＿２２５４０、Ｂ．ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ２０４８仮想タンパク質ｂｍｙｃ０００１＿２１５１０、Ｂ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ３５６４６コラーゲン三重ヘリックスリピートタンパク質、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ仮想タンパク質ＷＰ＿６９６５２、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムリーダーＷＰ０１６１１７７１７、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムペプチドＷＰ００２１０５１９２、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ仮想タンパク質ＷＰ８７３５３、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムペプチド０２１１２３６９、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムタンパク質ＷＰ０１６０９９７７０、Ｂ．  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ仮想タンパク質ＹＰ００６６１２５２５、または、Ｂ．ｍｙｃｏｉｄｅｓ仮想タンパク質ＴＩＧＲ０３７２０の任意の部分（それらは、ＢｃｌＡのアミノ酸２０〜３５に相当するアミノ酸を含有する）を、標的化配列として用いても良い。図１に示されるように、ＢｅｔＡ／ＢＡＳ３２９０のアミノ酸１２〜２７、ＢＡＳ４６２３のアミノ酸２３〜３８、ＢｃｌＢのアミノ酸１３〜２８、ＢＡＳ１８８２のアミノ酸９〜２４、ＫＢＡＢ４  ２２８０遺伝子産物のアミノ酸１８〜３３、ＫＢＡＢ４  ３５７２遺伝子産物のアミノ酸１８〜３３、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ  ＶＤ２００エキソスポリウムリーダーペプチドのアミノ酸２８〜４３、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ  ＶＤ１６６エキソスポリウムリーダーペプチドのアミノ酸１２〜２７、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ  ＶＤ２００仮想タンパク質ＩＫＧ＿０４６６３のアミノ酸１８〜３３、Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４  ＹＶＴＮ  βプロペラタンパク質のアミノ酸１８〜３３、Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４仮想タンパク質ｂｃｅｒｋｂａｂ４＿２３６３のアミノ酸９〜２４、Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４仮想タンパク質ｂｃｅｒｋｂａｂ４＿２１３１のアミノ酸９〜２４、Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４三重ヘリックスリピート含有コラーゲンのアミノ酸１５〜３０、Ｂ．ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ２０４８仮想タンパク質ｂｍｙｃｏ０００１＿２１６６０のアミノ酸１８〜３３、Ｂ．ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ２０４８仮想タンパク質ｂｍｙｃ０００１＿２２５４０のアミノ酸９〜２４、Ｂ．ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ２０４８仮想��ンパク質ｂｍｙｃ０００１＿２１５１０のアミノ酸１〜１５、Ｂ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ３５６４６コラーゲン三重ヘリックスリピートタンパク質のアミノ酸１〜１６、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ仮想タンパク質ＷＰ＿６９６５２のアミノ酸１４〜２９、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムリーダーＷＰ０１６１１７７１７のアミノ酸２０〜３５、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムペプチドＷＰ００２１０５１９２のアミノ酸２８〜４３、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ仮想タンパク質ＷＰ８７３５３のアミノ酸１７〜３２、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムペプチド０２１１２３６９のアミノ酸１８〜３３、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムタンパク質ＷＰ０１６０９９７７０のアミノ酸１８〜３３、Ｂ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ仮想タンパク質ＹＰ００６６１２５２５のアミノ酸１５〜３０、および、Ｂ．ｍｙｃｏｉｄｅｓ仮想タンパク質ＴＩＧＲ０３７２０のアミノ酸１１５〜１３０は、ＢｃｌＡのアミノ酸２０〜３５に相当する。ゆえに、上述の対応するアミノ酸を含有するこれらタンパク質の任意の部分を、標的化配列として用いても良い。
【００４０】
さらに、ＢｃｌＡのアミノ酸２０〜３５または、上述の対応する任意のアミノ酸を含有する任意のアミノ酸配列を、標的化配列として用いても良い。
【００４１】
ゆえに、標的化配列は、配列番号１のアミノ酸１〜３５、配列番号１のアミノ酸２０〜３５、配列番号１、配列番号６０、配列番号１のアミノ酸２２〜３１、配列番号１のアミノ酸２２〜３３、または、配列番号１のアミノ酸２０〜３１を含有しても良い。あるいは、標的化配列は、配列番号１のアミノ酸１〜３５、配列番号１のアミノ酸２０〜３５、配列番号１、または、配列番号６０からなる。あるいは、標的化配列は、配列番号１のアミノ酸２２〜３１、配列番号１のアミノ酸２２〜３３、または、配列番号１のアミノ酸２０〜３１からなっても良い。あるいは、エキソスポリウムタンパク質は、全長ＢｃｌＡ（配列番号２）を含有しても良く、または、エキソスポリウムタンパク質断片は、たとえば配列番号５９（ＢｃｌＡのアミノ酸１〜１９６）等のカルボキシ末端を欠いたＢｃｌＡの中間サイズの断片を含有しても良い。あるいは、エキソスポリウムタンパク質断片は、配列番号５９からなっても良い。
【００４２】
標的化配列はまた、配列番号３のアミノ酸１〜２７、配列番号３のアミノ酸１２〜２７、または配列番号３を含有しても良く、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長ＢｅｔＡ／ＢＡＳ３２９０（配列番号４）を含有しても良い。また、ＢｅｔＡ／ＢＡＳ３２９０のアミノ酸１２〜２７に連結されたメチオニン残基を標的配列として用いることができることが明らかになっている。ゆえに、標的化配列は、配列番号６１を含有しても良い。標的化配列はまた、配列番号３のアミノ酸１４〜２３、配列番号３のアミノ酸１４〜２５、または、配列番号３のアミノ酸１２〜２３を含有しても良い。
【００４３】
標的化配列はまた、配列番号５のアミノ酸１〜３８、配列番号５のアミノ酸２３〜３８、または配列番号５を含有しても良く、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長ＢＡＳ４６２３（配列番号６）を含有しても良い。
【００４４】
あるいは、標的化配列は、配列番号７のアミノ酸１〜２８、配列番号７のアミノ酸１３〜２８、または配列番号７を含有しても良く、またはエキソスポリウムタンパク質は、全長ＢｃｌＢ（配列番号８）を含有しても良い。
【００４５】
標的化配列はまた、配列番号９のアミノ酸１〜２４、配列番号９のアミノ酸９〜２４、または、配列番号９を含有しても良く、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長ＢＡＳ１８８２（配列番号１０）を含有しても良い。ＢＡＳ１８８２のアミノ酸９〜２４に連結されたメチオニン残基もまた、標的化配列として用いることができる。ゆえに、標的化配列は、配列番号６９を含有しても良い。
【００４６】
標的化配列はまた、配列番号１１のアミノ酸１〜３３、配列番号１１のアミノ酸１８〜３３、または配列番号１１を含有してもよく、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４  ２２８０遺伝子産物（配列番号１２）を含有しても良い。Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４  ２２８０遺伝子産物のアミノ酸１８〜３３に連結されたメチオニン残基もまた、標的化配列として用いることができる。ゆえに、標的化配列は、配列番号６２を含有しても良い。
【００４７】
標的化配列は、配列番号１３のアミノ酸１〜３３、配列番号１３のアミノ酸１８〜３３、または配列番号１３を含有しても良く、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４  ３５７２遺伝子産物（配列番号１４）を含有しても良い。Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４  ３５７２遺伝子産物のアミノ酸１８〜３３に連結されたメチオニン残基もまた、標的化配列として用いることができる。ゆえに、標的化配列は、配列番号６３を含有しても良い。
【００４８】
あるいは、標的化配列は、配列番号１５のアミノ酸１〜４３、配列番号１５のアミノ酸２８〜４３、または配列番号１５を含有しても良く、またはエキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ  ＶＤ２００エキソスポリウムリーダーペプチド（配列番号１６）を含有しても良い。
【００４９】
標的化配列は、配列番号１７のアミノ酸１〜２７、配列番号１７のアミノ酸１２〜２７、または配列番号１７を含有しても良く、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ  ＶＤ１６６エキソスポリウムリーダーペプチド（配列番号１８）を含有しても良い。Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ  ＶＤ１６６エキソスポリウムリーダーペプチドのアミノ酸１２〜２７に連結されたメチオニン残基もまた、標的化配列として用いることができる。ゆえに、標的化配列は、配列番号６４を含有しても良い。
【００５０】
標的化配列は、配列番号１９のアミノ酸１〜３３、配列番号１９のアミノ酸１８〜３３、または配列番号１９を含有しても良く、またはエキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．  ｃｅｒｅｕｓ  ＶＤ２００仮想タンパク質ＩＫＧ＿０４６６３（配列番号２０）を含有しても良い。
【００５１】
あるいは、標的化配列は、配列番号２１のアミノ酸１〜３３、配列番号２１のアミノ酸１８〜３３、または配列番号２１を含有しても良く、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４  ＹＶＴＮ  βプロペラタンパク質（配列番号２２）を含有しても良い。Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４  ＹＶＴＮ  βプロペラタンパク質のアミノ酸１８〜３３に連結されたメチオニン残基もまた、標的化配列として用いることができる。ゆえに、標的化配列は、配列番号６５を含有しても良い。
【００５２】
標的化配列はまた、配列番号２３のアミノ酸１〜２４、配列番号２３のアミノ酸９〜２４、または、配列番号２３を含有しても良く、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．  ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４仮想タンパク質ｂｃｅｒｋｂａｂ４＿２３６３（配列番号２４）を含有しても良い。Ｂ．  ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４仮想タンパク質ｂｃｅｒｋｂａｂ４＿２３６３のアミノ酸９〜２４に連結されたメチオニン残基もまた、標的化配列として用いることができる。ゆえに、標的化配列は、配列番号６６を含有しても良い。
【００５３】
標的化配列はまた、配列番号２５のアミノ酸１〜２４、配列番号２５のアミノ酸９〜２４、または、配列番号２５を含有し、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４仮想タンパク質ｂｃｅｒｋｂａｂ４＿２１３１（配列番号２６）を含有しても良い。Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４仮想タンパク質ｂｃｅｒｋｂａｂ４＿２１３１のアミノ酸９〜２４に連結されたメチオニン残基もまた、標的化配列として用いることができる。ゆえに、標的化配列は、配列番号６７を含有しても良い。
【００５４】
あるいは、標的化配列は、配列番号２７のアミノ酸１〜３０、配列番号２７のアミノ酸１５〜３０、または配列番号２７を含有し、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４三重へリックスリピート含有コラーゲン（配列番号２８）を含有しても良い。
【００５５】
標的化配列は、配列番号２９のアミノ酸１〜３３、配列番号２９のアミノ酸１８〜３３、または配列番号２９を含有しても良く、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ２０４８仮想タンパク質ｂｍｙｃｏ０００１＿２１６６０（配列番号３０）を含有しても良い。
【００５６】
標的化配列はまた、配列番号３１のアミノ酸１〜２４、配列番号３１のアミノ酸９〜２４、または、配列番号３１を含有しても良く、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ２０４８仮想タンパク質ｂｍｙｃ０００１＿２２５４０（配列番号３２）を含有しても良い。Ｂ．  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ２０４８仮想タンパク質ｂｍｙｃ０００１＿２２５４０のアミノ酸９〜２４に連結されたメチオニン残基もまた、標的化配列として用いることができる。ゆえに、標的化配列は、配列番号６８を含有しても良い。
【００５７】
あるいは、標的化配列は、配列番号３３のアミノ酸１〜１５、配列番号３３を含有し、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ２０４８  仮想タンパク質ｂｍｙｃ０００１＿２１５１０（配列番号３４）を含有する。
【００５８】
標的化配列はまた、配列番号３５のアミノ酸１〜１６、配列番号３５を含有してもよく、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ３５６４６コラーゲン三重ヘリックスリピートタンパク質（配列番号３６）を含有してもよい。
【００５９】
標的化配列は、配列番号４３のアミノ酸１〜２９、配列番号４３のアミノ酸１４〜２９、または配列番号４３を含有してもよく、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ仮想タンパク質ＷＰ＿６９６５２（配列番号４４）を含有してもよい。
【００６０】
あるいは、標的化配列は、配列番号４５のアミノ酸１〜３５、配列番号４５のアミノ酸２０〜３５、または、配列番号４５を含有し、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムリーダーＷＰ０１６１１７７１７（配列番号４６）を含有しても良い。Ｂ．ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムリーダーＷＰ０１６１１７７１７のアミノ酸２０〜３５に連結されたメチオニン残基もまた、標的化配列として用いることができる。ゆえに、標的化配列は、配列番号７０を含有しても良い。
【００６１】
標的化配列は、配列番号４７のアミノ酸１〜４３、配列番号４７のアミノ酸２８〜４３、または配列番号４７を含有してもよく、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．  ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムペプチドＷＰ００２１０５１９２（配列番号４８）を含有してもよい。
【００６２】
標的化配列は、配列番号４９のアミノ酸１〜３２、配列番号４９のアミノ酸１７〜３２、または配列番号４９を含有してもよく、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ仮想タンパク質ＷＰ８７３５３（配列番号５０）を含有してもよい。
【００６３】
あるいは、標的化配列は、配列番号５１のアミノ酸１〜３３、配列番号５１のアミノ酸１８〜３３、または配列番号５１を含有してもよく、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムペプチド０２１１２３６９（配列番号５２）を含有してもよい。
【００６４】
標的化配列は、配列番号５３のアミノ酸１〜３３、配列番号５３のアミノ酸１８〜３３、または配列番号５３を含有してもよく、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｃｅｒｅｕｓエキソスポリウムタンパク質ＷＰ０１６０９９７７０（配列番号５４）を含有してもよい。
【００６５】
あるいは、標的化配列は、配列番号５５のアミノ酸１〜３０、配列番号５５のアミノ酸１５〜３０、または配列番号５５を含有してもよく、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ仮想タンパク質ＹＰ００６６１２５２５（配列番号５６）を含有してもよい。
【００６６】
標的化配列はまた、配列番号５７のアミノ酸１〜１３０、配列番号５７のアミノ酸１１５〜１３０、または配列番号５７を含有してもよく、または、エキソスポリウムタンパク質は、全長Ｂ．ｍｙｃｏｉｄｅｓ仮想タンパク質ＴＩＧＲ０３７２０（配列番号５８）を含有してもよい。
【００６７】
さらに、ＢｃｌＡのアミノ酸２０〜３５が保存されているが、アミノ酸２５〜３５はさらに保存されており、エキソスポリウムへとタンパク質を向かわせる標的化配列の能力に影響を与えることなく、この領域にある程度のバリエーションが存在しうることが図１の配列アライメントから明らかであろう。図１において、ＢｃｌＡのアミノ酸２０〜３５（「２０〜３５同一性％」）および、ＢｃｌＡのアミノ酸２５〜３５（「２５〜３５同一性％」）に対する、各配列の対応するアミノ酸各々の同一性のパーセントを列記する。ゆえに、たとえば、ＢｃｌＡのアミノ酸２０〜３５との比較と比較して、ＢｅｔＡ／ＢＡＳ３２９０の対応するアミノ酸は、約８１．３％の同一性であり、ＢＡＳ４６２３の対応するアミノ酸は、約５０．０％の同一性であり、ＢｃｌＢの対応するアミノ酸は約４３．８％の同一性であり、ＢＡＳ１８８２の対応するアミノ酸は約６２．５％の同一性であり、ＫＢＡＢ４  ２２８０遺伝子産物の対応するアミノ酸は約８１．３％の同一性であり、および、ＫＢＡＢ４  ３５７２遺伝子産物の対応するアミノ酸は約８１．３％の同一性である。残りの配列に対する、この領域上の配列同一性は、図１に列記する。
【００６８】
ＢｃｌＡのアミノ酸２５〜３５に関しては、ＢｅｔＡ／ＢＡＳ３２９０の対応するアミノ酸は、約９０．９％の同一性であり、ＢＡＳ４６２３の対応するアミノ酸は、約７２．７％の同一性であり、ＢｃｌＢの対応するアミノ酸は、約５４．５％の同一性であり、ＢＡＳ１８８２の対応するアミノ酸は、７２．７％の同一性であり、ＫＢＡＢ４  ２２８０遺伝子産物の対応するアミノ酸は、約９０．９％の同一性であり、および、ＫＢＡＢ４  ３５７２遺伝子産物の対応するアミノ酸は、約８１．８％の同一性である。残りの配列に関する、この領域上の配列同一性は図１に列記する。
【００６９】
ゆえに、標的化配列は、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約４３％の同一性を有するアミノ酸配列を含有しても良く、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約５４％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約４３％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約５４％である。
【００７０】
標的化配列はまた、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約５０％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約６３％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約５０％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約６３％である。
【００７１】
標的化配列はまた、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約５０％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約７２％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約５０％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約７２％である。
【００７２】
標的化配列はまた、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約５６％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約６３％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約５６％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約６３％である。
【００７３】
標的化配列はまた、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約６２％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約７２％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約６２％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、配列番号１のアミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約７２％である。
【００７４】
標的化配列はまた、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約６８％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約８１％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約６８％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約８１％である。
【００７５】
標的化配列はまた、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約７２％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約７５％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、配列番号１のアミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約７２％である。
【００７６】
標的化配列はまた、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約８１％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約７５％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、配列番号１のアミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約８１％である。
【００７７】
標的化配列はまた、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約８１％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約８１％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約８１％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約８１％である。
【００７８】
標的化配列はまた、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約８１％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約９０％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約８１％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約９０％である。
【００７９】
当業者であれば、標的化配列が、ＢｃｌＡのアミノ酸２０〜３５、ＢｅｔＡ／ＢＡＳ３２９０、ＢＡＳ４２６３、ＢｃｌＢ、ＢＡＳ１８８２、ＫＢＡＢ４  ２２８０遺伝子産物、もしくは、ＫＢＡＢ  ３５７２遺伝子産物の対応するアミノ酸を含有する限り、または、ＢｃｌＡのアミノ酸２０〜３５および２５〜３５に対する上述の配列同一性のいずれかを含有する配列が存在している限り、上記の配列の変異体もまた、標的化配列としても用いることができることを理解するであろう。
【００８０】
さらに、ＢｃｌＡのアミノ酸２５〜３５との相同性を有する領域が欠落している、あるＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのエキソスポリウムタンパク質もまた、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムへペプチドまたはタンパク質を向かわせるために用いることができることが、判明している。特に、融合タンパク質は、配列番号７１（Ｂ．  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＩｎｈＡ）を含有するエキソスポリウムタンパク質、配列番号７２（Ｂ．  ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｓｔｅｒｎｅ  ＢＡＳ１１４１（ＥｘｓＹ））を含有するエキソスポリウムタンパク質、配列番号７３（Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｓｔｅｒｎｅ  ＢＡＳ１１４４  （ＢｘｐＢ／ＥｘｓＦＡ））を含有するエキソスポリウムタンパク質、配列番号７４（Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｓｔｅｒｎｅ  ＢＡＳ１１４５（ＣｏｔＹ））を含有するエキソスポリウムタンパク質、配列番号７５（Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｓｔｅｒｎｅ  ＢＡＳ１１４０）を含有するエキソスポリウムタンパク質、配列番号７６（Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｈ９４０１  ＥｘｓＦＢ）を含有するエキソスポリウムタンパク質、配列番号７７（Ｂ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＨＤ７４  ＩｎｈＡ１）を含有するエキソスポリウムタンパク質、配列番号７８（Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ  ＡＴＣＣ  １０８７６  ＥｘｓＪ）を含有するエキソスポリウムタンパク質、配列番号７９（Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ  ＥｘｓＨ）を含有するエキソスポリウムタンパク質、配列番号８０（Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ａｍｅｓ  ＹｊｃＡ）を含有するエキソスポリウムタンパク質、配列番号８１（Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ  ＹｊｃＢ）を含有するエキソスポリウムタンパク質、配列番号８２（Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｓｔｅｒｎｅ  ＢｃｌＣ）を含有するエキソスポリウムタンパク質、配列番号８３（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ血清型ｋｏｎｋｕｋｉａｎ株９７−２７酸ホスファターゼ）を含有するエキソスポリウムタンパク質、または、配列番号８４（Ｂ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＨＤ７４  ＩｎｈＡ２）を含有するエキソスポリウムタンパク質、を含有しても良い。本明細書に記述される融合タンパク質中に配列番号７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、または８４を含有するエキソスポリウムタンパク質を包含することにより、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ科のメンバーのエキソスポリウムへの標的化がもたらされる。
【００８１】
さらに、上述の全長エキソスポリウムタンパク質またはエキソスポリウムタンパク質断片のいずれかと、高度の配列同一性を有するエキソスポリウムタンパク質を用いて、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムへペプチドまたはタンパク質を向かわせることができる。ゆえに、融合タンパク質は、配列番号２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、５９、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、および８４のいずれか１つと少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質を含有してもよい。あるいは、融合タンパク質は、配列番号２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、５９、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、および８４のいずれか１つと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも１００％の同一性を有するエキソスポリウムタンパク質を含有しても良い。
【００８２】
あるいは、融合タンパク質は、配列番号５９と少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列からなるエキソスポリウムタンパク質断片を含有しても良い。あるいは、融合タンパク質は、配列番号５９と、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列からなるエキソスポリウムタンパク質断片を含有しても良い。
【００８３】
本明細書に記述される標的化配列、エキソスポリウムタンパク質またはエキソスポリウムタンパク質断片のいずれかにおいて、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片は、そのカルボキシ末端でＧＸＴのアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、Ｘは、任意のアミノ酸である。
【００８４】
本明細書に記述される標的化配列、エキソスポリウムタンパク質またはエキソスポリウムタンパク質断片のいずれかにおいて、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片は、配列番号１のアミノ酸２０に相当する標的化配列の位置で、アラニン残基を含有しても良い。
【００８５】
融合タンパク質
本発明は、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片、および、少なくとも１つの植物生育刺激タンパク質またはペプチドを含有する融合タンパク質に関するものであり、ここで、当該植物生育刺激タンパク質またはペプチドは、ペプチドホルモン、非ホルモン性ペプチド、または、植物生育刺激化合物の産生または活性化に関与する酵素を含有する。標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片は、上述の［０００５］段落に記述される標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片のいずれかであっても良い。
【００８６】
本発明はさらに、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片、および、植物においてストレス耐性を増強させるタンパク質またはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質に関する。標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片は、上述の［０００５］段落に記述される標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片のいずれかであっても良い。
【００８７】
さらに、本発明は、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片、および、植物結合タンパク質またはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質に関する。標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片は、上述の［０００５］段落に記述される標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片のいずれかであっても良い。
【００８８】
また、本発明は、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片、および、病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質に関する。標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片は、上述の［０００６］段落に記述される標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片のいずれかであっても良い。
【００８９】
本発明はさらに、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片、および、病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質に関する。病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドは、ハーピン、αエラスチン、βエラスチン、システミン、フェニルアラニンアンモニアリアーゼ、エリシチン、ディフェンシン、クリプトゲイン、フラジェリンタンパク質、フラジェリンペプチド、バクテリオシン、リゾチーム、リゾチームペプチド、シデロフォア、非リボソーム活性ペプチド、コンアルブミン、アルブミン、ラクトフェリン、ラクトフェリンペプチド、またはＴａｓＡを含有する。あるいは、病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドは、殺虫活性、殺蠕虫活性を有するか、または、昆虫もしくは蠕虫の捕食を抑制するか、またはそれらの組み合わせである。あるいは、病原体から植物を防御するタンパク質は、酵素を含有する。標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片は、上述の［０００５］段落に列記される標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片のいずれかであっても良い。
【００９０】
融合タンパク質は、当分野公知の標準的なクローニング法および分子生物学法を用いて作製されても良い。たとえば、タンパク質またはペプチドをコードする遺伝子（たとえば、植物生育刺激タンパク質またはペプチドをコードする遺伝子）は、融合タンパク質をコードするＤＮＡ分子を形成するために、ポリメラーゼ鎖反応（ＰＣＲ）により増幅され、および、上述の標的化配列のいずれかをコードするＤＮＡにライゲートされても良い。融合タンパク質をコードするＤＮＡ分子は、任意の適切なベクター（たとえば、プラスミドベクター）にクローニングされても良い。ベクターは、融合タンパク質をコードするＤＮＡ分子が容易に挿入されうる、多重クローニング部位を適切に含有する。ベクターで形質転換、トランスフェクト、または作製された細菌が容易に特定および単離できるよう、ベクターは、たとえば抗生物質抵抗性遺伝子等の選択可能マーカーもまた、適切に含有する。ベクターがプラスミドである場合、プラスミドは、複製起点もまた、適切に含有する。融合タンパク質をコードするＤＮＡは、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ科のメンバーの芽胞のエキソスポリウムで融合タンパク質の発現を誘導する、胞子形成プロモーター（たとえば、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ科のメンバー由来の天然型ｂｃｌＡプロモーター）の適切な制御下にある。あるいは、融合タンパク質をコードするＤＮＡは、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓ科のメンバーの宿主の染色体ＤＮＡに組み込まれても良い。
【００９１】
融合タンパク質はまた、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、エキソスポリウムタンパク質断片、または、植物生育刺激タンパク質もしくはペプチド、病原体から植物を防御するタンパク質もしくはペプチド、植物におけるストレス耐性を増強させるタンパク質もしくはペプチド、または、植物結合タンパク質もしくはペプチドの一部ではない、追加のポリペプチド配列を含有しても良い。たとえば、融合タンパク質は、融合タンパク質の精製または可視化（たとえば、ポリヒスチジンタグ、または蛍光タンパク質（たとえば、ＧＦＰまたはＹＦＰ））、または、融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーメンバーの芽胞の可視化を容易にするためのタグもしくはマーカーを含有してもよい。
【００９２】
本明細書に記述される標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、およびエキソスポリウムタンパク質断片を用いた、エキソスポリウムでの融合タンパク質の発現は、これら配列のアミノ末端における二次構造の欠落により増強され、それにより、融合タンパク質の天然型のフォールディングおよび活性の維持が可能となる。適切なフォールディングは、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、エキソスポリウムタンパク質断片と、融合パートナータンパク質の間に、短いアミノ酸リンカーを含有させることによりさらに増強されることができる。
【００９３】
ゆえに、本明細書に記述される任意の融合タンパク質は、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片と、植物生育刺激タンパク質もしくはペプチド、病原体から植物を防御するタンパク質もしくはペプチド、植物におけるストレス耐性を増強させるタンパク質もしくはペプチド、または、植物結合タンパク質もしくはペプチドとの間にアミノ酸リンカーを含有してもよい。
【００９４】
リンカーは、ポリアラニンリンカーまたはポリグリシンリンカーを含有しても良い。アラニン残基とグリシン残基の両方の混合物を含有するリンカーを用いても良い。たとえば、標的化配列が配列番号１を含有する場合、融合タンパク質は、以下の構造のうちの１つを有しても良い：
リンカー無し：配列番号１−融合パートナータンパク質
アラニンリンカー：配列番号１−Ａｎ−融合パートナータンパク質
グリシンリンカー：配列番号１−Ｇｎ−融合パートナータンパク質
混合アラニンおよびグリシンリンカー：配列番号１−（Ａ／Ｇ）ｎ−融合パートナータンパク質
ここで、Ａｎ、Ｇｎ、および（Ａ／Ｇ）ｎは、それぞれ、任意の数のアラニン、任意の数のグリシン、または、任意の数のアラニンとグリシンの混合物である。たとえば、ｎは、１〜２５、好ましくは６〜１０であっても良い。リンカーがアラニン残基とグリシン残基の混合物を含有する場合、グリシン残基とアラニン残基の任意の組み合わせを用いても良い。上述の構造において、「融合パートナータンパク質」とは、植物生育刺激タンパク質もしくはペプチド、病原体から植物を防御するタンパク質もしくはペプチド、植物におけるストレス耐性を増強するタンパク質もしくはペプチド、または、植物結合タンパク質もしくはペプチドを表す。
【００９５】
あるいは、またはさらに、リンカーは、プロテアーゼ認識部位を含有しても良い。プロテアーゼ認識部位を含有することで、当該プロテアーゼ認識部位を認識するプロテアーゼに曝されると、植物生育刺激タンパク質もしくはペプチド、病原体から植物を防御するタンパク質もしくはペプチド、植物におけるストレス耐性を増強するタンパク質もしくはペプチド、または、植物結合タンパク質もしくはペプチドの標的化された除去が可能となる。
【００９６】
植物生育刺激タンパク質およびペプチド
上述のように、本発明は、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片、および、植物生育刺激タンパク質またはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質に関するものであり、ここで、当該植物生育刺激タンパク質またはペプチドは、ペプチドホルモン、非ホルモン性ペプチド、または、植物生育刺激化合物の産生または活性化に関与する酵素を含有する。
【００９７】
たとえば、植物生育刺激タンパク質またはペプチドが、ペプチドホルモンを含有する場合、当該ペプチドホルモンは、フィトスルホカイン（たとえば、フィトスルホカイン−α）、クラバータ３（ｃｌａｖａｔａ３）（ＣＬＶ３）、システミン、ＺｍｌＧＦ、またはＳＣＲ／ＳＰ１１を含有しても良い。
【００９８】
植物生育刺激タンパク質またはペプチドが、非ホルモン性ペプチドを含有する場合、当該非ホルモン性ペプチドは、ＲＫＮ  １６Ｄ１０、Ｈｇ−Ｓｙｖ４６、ｅＮＯＤ４０ペプチド、メリチン（ｍｅｌｉｔｔｉｎ）、マストパラン、Ｍａｓ７、ＲＨＰＰ、ＰＯＬＡＲＩＳ、または、ｋｕｎｉｔｚトリプシンインヒビター（ＫＴＩ）を含有してもよい。
【００９９】
植物生育刺激タンパク質またはペプチドは、植物生育刺激化合物の産生または活性化に関与する酵素を含有しても良い。植物生育刺激化合物の産生または活性化に関与する酵素は、植物の生育を刺激する化合物もしくは植物の構造を変える化合物の生物学的合成経路における任意の工程を触媒する任意の酵素、または、植物の生育を刺激する化合物もしくは植物の構造を変える化合物の不活性または低活性誘導体の、当該化合物の活性型または、より高い活性型への転換を触媒する任意の酵素であっても良い。
【０１００】
植物生育刺激化合物は、根圏中で細菌または真菌により産生される化合物（たとえば、２，３−ブタンジオール）を含有しても良い。
【０１０１】
あるいは、植物生育刺激化合物は、植物成長ホルモン（たとえば、サイトカイニンもしくはサイトカイニン誘導体、エチレン、オーキシンもしくはオーキシン誘導体、ジベレリン酸もしくはジベレリン酸誘導体、アブシジン酸もしくはアブシジン酸誘導体、または、ジャスモン酸もしくはジャスモン酸誘導体）を含有しても良い。
【０１０２】
植物生育刺激化合物がサイトカイニンまたはサイトカイニン誘導体を含有する場合、当該サイトカイニンまたはサイトカイニン誘導体は、キネチン、シス−ゼアチン、トランス−ゼアチン、６−ベンジルアミノプリン、ジヒドロキシゼアチン、Ｎ６−（Ｄ２−イソペンテニル）アデニン、リボシルゼアチン、Ｎ６−（Ｄ２−イソペンテニル）アデノシン、２−メチルチオ−シス−リボシルゼアチン、シス−リボシルゼアチン、トランス−リボシルゼアチン、２−メチルチオ−トランス−リボシルゼアチン、リボシルゼアチン−５−モノスホスフェート、Ｎ６−メチルアミノプリン、Ｎ６−ジメチルアミノプリン、２’−デオキシゼアチンリボシド、４−ヒドロキシ−３−メチル−トランス−２−ブテニルアミノプリン、オルト−トポリン、メタ−トポリン、ベンジルアデニン、オルト−メチルトポリン、メタ−メチルトポリン、または、それらの組み合わせを含有しても良い。
【０１０３】
植物生育刺激化合物が、オーキシンまたはオーキシン誘導体を含有する場合、当該オーキシンまたはオーキシン誘導体は、活性オーキシン、不活性オーキシン、結合オーキシン、天然型オーキシンまたは合成オーキシン、またはそれらの組み合わせを含有しても良い。たとえば、オーキシンまたはオーキシン誘導体は、インドール−３−酢酸、インドール−３−ピルビン酸、インドール−３−アセトアルドキシム、インドール−３−アセトアミド、インドール−３−アセトニトリル、インドール−３−エタノール、インドール−３−ピルビン酸塩、インドール−３−アセトアルドキシム、インドール−３−酪酸、フェニル酢酸、４−クロロインドール−３−酢酸、グルコース結合オーキシン、またはそれらの組み合わせを含有しても良い。
【０１０４】
植物生育刺激化合物の産生または活性化に関与する酵素は、アセトイン還元酵素、インドール−３−アセトアミド加水分解酵素、トリプトファンモノオキシゲナーゼ、アセト乳酸合成酵素、αアセト乳酸デカルボキシラーゼ、ピルビン酸デカルボキシラーゼ、ジアセチル還元酵素、ブタンジオール脱水素酵素、アミノトランスフェラーゼ（たとえば、トリプトファンアミノトランスフェラーゼ）、トリプトファンデカルボキシラーゼ、アミンオキシダーゼ、インドール−３−ピルビン酸デカルボキシラーゼ、インドール−３−アセトアルデヒド脱水素酵素、トリプトファン側鎖オキシダーゼ、ニトリル加水分解酵素、ニトリラーゼ、ペプチダーゼ、プロテアーゼ、アデノシンホスフェートイソペンテニルトランスフェラーゼ、ホスファターゼ、アデノシンキナーゼ、アデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ、ＣＹＰ７３５Ａ、５’リボヌクレオチドホスホヒドロラーゼ、アデノシンヌクレオシダーゼ、ゼアチン  シス−トランスイソメラーゼ、ゼアチン  Ｏ−グルコシルトランスフェラーゼ、β−グルコシダーゼ、シス−ヒドロキシラーゼ、ＣＫシス−ヒドロキシラーゼ、ＣＫ  Ｎ−グルコシルトランスフェラーゼ、２，５−リボヌクレオチドホスホヒドロラーゼ、アデノシンヌクレオシダーゼ、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、ゼアチン還元酵素、ヒドロキシルアミン還元酵素、２−オキソグルタレートジオキシゲナーゼ、ジべレリン２Ｂ／３Ｂ加水分解酵素、ジベレリン３−オキシダーゼ、ジベレリン２０−オキシダーゼ、キトシナーゼ、キチナーゼ、β−１，３−グルカナーゼ、β−１，４−グルカナーゼ、β−１，６−グルカナーゼ、アミノシクロプロパン−１−カルボン酸デアミナーゼ、または、ノッド因子の産生に関与する酵素（たとえば、ｎｏｄＡ、ｎｏｄＢまたはｎｏｄＩ）を含有しても良い。
【０１０５】
酵素が、プロテアーゼまたはペプチダーゼを含有する場合、当該プロテアーゼまたはペプチダーゼは、タンパク質、ペプチド、プロタンパク質またはプレプロタンパク質を開裂し、生物活性ペプチドを産生するプロテアーゼまたはペプチダーゼであっても良い。生物活性ペプチドは、生物学的活性を発揮する任意のペプチドであっても良い。
【０１０６】
生物活性ペプチドの例としては、ＲＫＮ  １６Ｄ１０およびＲＨＰＰが挙げられる。
【０１０７】
タンパク質、ペプチド、プロタンパク質またはプレプロタンパク質を開裂し、生物活性ペプチドを産生するプロテアーゼまたはペプチダーゼは、サブチリシン、酸プロテアーゼ、アルカリプロテアーゼ、プロテイナーゼ、エンドペプチダーゼ、エキソペプチダーゼ、サーモリシン、パパイン、ペプシン、トリプシン、プロナーゼ、カルボキシラーゼ、セリンプロテアーゼ、グルタミン酸プロテアーゼ、アスパラギン酸プロテアーゼ、システインプロテアーゼ、スレオニンプロテアーゼまたはメタロプロテアーゼを含有しても良い。
【０１０８】
プロテアーゼまたはペプチダーゼは、タンパク質が豊富な食品中のタンパク質を開裂することができる（たとえば、大豆食または酵母抽出物）。
【０１０９】
病原体から植物を防御するタンパク質およびペプチド
本発明は、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片、および、病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドを少なくとも１つ含有する融合タンパク質に関するものである。
【０１１０】
病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドは、植物の免疫応答を刺激するタンパク質またはペプチドを含有しても良い。たとえば、植物の免疫応答を刺激するタンパク質またはペプチドは、植物免疫システムのエンハンサータンパク質またはペプチドを含有しても良い。植物免疫システムのエンハンサータンパク質またはペプチドは、植物の免疫システムに有益な効果を有する任意のタンパク質またはペプチドであっても良い。適切な植物免疫システムエンハンサータンパク質またはペプチドとしては、ハーピン、αエラスチン、βエラスチン、システミン、フェニルアラニンアンモニアリアーゼ、エリシチン、ディフェンシン、クリプトゲイン、フラジェリンタンパク質およびフラジェリンペプチド（たとえば、ｆｌｇ２２）が挙げられる。
【０１１１】
あるいは、病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドは、抗菌活性、抗真菌活性、または抗菌活性と抗真菌活性の両方を有するタンパク質またはペプチドであっても良い。そのようなタンパク質またはペプチドの例としては、バクテリオシン、リゾチーム、リゾチームペプチド（たとえば、ＬｙｓＭ）、シデロフォア、非リボソーム活性ペプチド、コンアルブミン、アルブミン、ラクトフェリン、ラクトフェリンペプチド（たとえば、ＬｆｃｉｎＢ）、およびＴａｓＡが挙げられる。
【０１１２】
病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドは、殺虫活性、殺蠕虫活性を有するか、または、昆虫もしくは蠕虫の捕食を抑制するか、またはそれらの組み合わせである、タンパク質またはペプチドであっても良い。たとえば、病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドは、殺虫性細菌毒素（たとえば、ＶＩＰ殺虫タンパク質）、エンドトキシン、Ｃｒｙ毒素（たとえば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ由来のＣｒｙ毒素）、プロテアーゼ阻害タンパク質またはペプチド（たとえば、トリプシンインヒビター、または、クワイプロテアーゼインヒビター）、システインプロテアーゼ、またはキチナーゼを含有しても良い。Ｃｒｙ毒素が、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ由来のＣｒｙ毒素である場合、Ｃｒｙ毒素は、Ｃｒｙ５Ｂタンパク質またはＣｒｙ２１Ａタンパク質であっても良い。Ｃｒｙ５ＢおよびＣｒｙ２１Ａは、殺虫活性および殺線虫活性の両方を有している。
【０１１３】
病原体から植物を防御するタンパク質は、酵素を含有しても良い。適切な酵素としては、プロテアーゼおよびラクトナーゼが挙げられる。プロテアーゼおよびラクトナーゼは、細菌のシグナル伝達分子に対して特異的であっても良い（たとえば、細菌ラクトンホモセリンシグナル伝達分子）。
【０１１４】
酵素がラクトナーゼである場合、ラクトナーゼは、１，４−ラクトナーゼ、２−ピロン−４，６−ジカルボキシレートラクトナーゼ、３−オキソアジペートエノールラクトナーゼ、アクチノマイシンラクトナーゼ、デオキシリモネートＡ環−ラクトナーゼ、グルコノラクトナーゼＬ−ラムノノ−１、４−ラクトナーゼ、リモニン−Ｄ環−ラクトナーゼ、ステロイド−ラクトナーゼ、トリアセテート−ラクトナーゼ、または、キシロノ−１，４−ラクトナーゼを含有しても良い。
【０１１５】
酵素はまた、細菌または真菌の細胞成分に特異的な酵素であっても良い。たとえば、酵素は、β−１，３−グルカナーゼ、β−１，４−グルカナーゼ、β−１，６−グルカナーゼ、キトシナーゼ、キチナーゼ、キトシナーゼ様酵素、リチカーゼ、ペプチダーゼ、プロテイナーゼ、プロテアーゼ（たとえば、アルカリプロテアーゼ、酸プロテアーゼ、または中性プロテアーゼ等）、ムタノリシン（ｍｕｔａｎｏｌｙｓｉｎ）、スタホリシン（ｓｔａｐｈｏｌｙｓｉｎ）、またはリゾチームを含有しても良い。
【０１１６】
病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドを含有する任意の上述の融合タンパク質に対し、病原体は、細菌性の病原体または真菌性の病原体であっても良い。たとえば、病原体は、αクラスプロテオバクテリア、βクラスプロテオバクテリア、γクラスプロテオバクテリア、または、それらの組み合わせを含有しても良い。特定の細菌性病原体としては、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ、Ｐａｎｔｏｅａ  ｓｔｅｗａｒｔｉｉ、Ｅｒｗｉｎｉａ  ｃａｒｏｔｏｖｏｒａ、Ｒａｌｓｔｏｎｉａ  ｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｙｒｉｎｇａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ  ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ、およびそれらの組み合わせが挙げられる。
【０１１７】
他の細菌性病原体および真菌性病原体としては、Ａｃａｒｏｓｐｏｒｉｎａ  ｍｉｃｒｏｓｐｏｒａ、Ａｃｅｒｉａ  ｇｕｅｒｒｅｒｏｎｉｓ、Ａｃｈｌｙａ  ｃｏｎｓｐｉｃｕａ、Ａｃｈｌｙａ  ｋｌｅｂｓｉａｎａ、Ａｃｈｌｙｓｉｅｌｌａ  ｗｉｌｌｉａｍｓｉ、Ａｃｈｏｌｅｐｌａｓｍａｔａｃｅａｅ、Ａｃｉｄｏｖｏｒａｘ  ａｖｅｎａｅ、Ａｃｒｅｍｏｎｉｕｍ  ｓｔｒｉｃｔｕｍ、Ａｃｒｏｃａｌｙｍｍａ  ｍｅｄｉｃａｇｉｎｉｓ、Ａｃｒｏｄｏｎｔｉｕｍ  ｓｉｍｐｌｅｘ、Ａｃｒｏｐｈｉａｌｏｐｈｏｒａ  ｆｕｓｉｓｐｏｒａ、Ａｃｒｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｔｉｎｇｉｔａｎｉｎｕｍ、Ａｅｃｉｄｉｕｍ、Ａｅｃｉｄｉｕｍ  ａｅｃｈｍａｎｔｈｅｒａｅ、Ａｅｃｉｄｉｕｍ  ａｍａｒｙｌｌｉｄｉｓ、Ａｅｃｉｄｉｕｍ  ｂｒｅｙｎｉａｅ、Ａｅｃｉｄｉｕｍ  ｃａｍｐａｎｕｌａｓｔｒｉ、Ａｅｃｉｄｉｕｍ  ｃａｎｎａｂｉｓ、Ａｅｃｉｄｉｕｍ  ｃａｎｔｅｎｓｉｓ、Ａｅｃｉｄｉｕｍ  ｃａｓｐｉｃｕｍ、Ａｅｃｉｄｉｕｍ  ｆｏｅｎｉｃｕｌｉ、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ、Ａｌｂｏｎｅｃｔｒｉａ  ｒｉｇｉｄｉｕｓｃｕｌａ、Ａｌｂｕｇｏ  ｂｌｉｔｉ、Ａｌｂｕｇｏ  ｃａｎｄｉｄａ、Ａｌｂｕｇｏ  ｉｐｏｍｏｅａｅ−ｐａｎｄｕｒａｔａｅ、Ａｌｂｕｇｏ  ｌａｉｂａｃｈｉｉ、Ａｌｂｕｇｏ  ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ、Ａｌｂｕｇｏ  ｔｒａｇｏｐｏｇｏｎｉｓ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ａｌｔｅｒｎａｔａ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｂｒａｓｓｉｃａｅ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｂｒａｓｓｉｃｉｃｏｌａ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｃａｒｔｈａｍｉ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｃｉｎｅｒａｒｉａｅ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｃｉｔｒｉ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｄａｕｃｉ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｄｉａｎｔｈｉ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｄｉａｎｔｈｉｃｏｌａ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｅｕｐｈｏｒｂｉｉｃｏｌａ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｈｅｌｉａｎｔｈｉ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｈｅｌｉａｎｔｈｉｃｏｌａ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｊａｐｏｎｉｃａ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｌｅｕｃａｎｔｈｅｍｉ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｌｉｍｉｃｏｌａ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｌｉｎｉｃｏｌａ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｍａｌｉ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｐａｄｗｉｃｋｉｉ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｐａｎａｘ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｒａｄｉｃｉｎａ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｒａｐｈａｎｉ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｓａｐｏｎａｒｉａｅ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｓｅｎｅｃｉｏｎｉｓ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｓｏｌａｎｉ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｔｅｎｕｉｓｓｉｍａ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｔｒｉｔｉｃｉｎａ、Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ  ｚｉｎｎｉａｅ、Ａｍａｚｏｎｉａ、Ａｍｐｈｏｂｏｔｒｙｓ  ｒｉｃｉｎｉ、Ａｎｇｕｉｌｌｏｓｐｏｒｅｌｌａ  ｖｅｒｍｉｆｏｒｍｉｓ、Ａｎｇｕｉｎａ（属）、Ａｎｇｕｉｎａ  ａｇｒｏｓｔｉｓ、Ａｎｇｕｉｎａ  ａｍｓｉｎｃｋｉａｅ、Ａｎｇｕｉｎａ  ａｕｓｔｒａｌｉｓ、Ａｎｇｕｉｎａ  ｂａｌｓａｍｏｐｈｉｌａ、Ａｎｇｕｉｎａ  ｆｕｎｅｓｔａ、Ａｎｇｕｉｎａ  ｇｒａｍｉｎｉｓ、Ａｎｇｕｉｎａ  ｓｐｅｒｍｏｐｈａｇａ、Ａｎｇｕｉｎａ  ｔｒｉｔｉｃｉ、Ａｎｉｓ���ｇｒａｍｍａ  ａｎｏｍａｌａ、Ａｎｔｈｏｓｔｏｍｅｌｌａ  ｐｕｌｌｕｌａｎｓ、Ａｎｔｒｏｄｉａ  ａｌｂｉｄａ、Ａｎｔｒｏｄｉａ  ｓｅｒｉａｌｉｆｏｒｍｉｓ、Ａｎｔｒｏｄｉａ  ｓｅｒｉａｌｉｓ、Ａｐｈａｎｏｍｙｃｅｓ  ｃｌａｄｏｇａｍｕｓ、Ａｐｈａｎｏｍｙｃｅｓ  ｃｏｃｈｌｉｏｉｄｅｓ、Ａｐｈａｎｏｍｙｃｅｓ  ｅｕｔｅｉｃｈｅｓ、Ａｐｈａｎｏｍｙｃｅｓ  ｅｕｔｅｉｃｈｅｓ  ｆ．ｓｐ．  ｐｉｓｉ、Ａｐｈａｎｏｍｙｃｅｓ  ｒａｐｈａｎｉ、Ａｐｈｅｌｅｎｃｈｏｉｄｅｓ、Ａｐｈｅｌｅｎｃｈｏｉｄｅｓ  ａｒａｃｈｉｄｉｓ、Ａｐｈｅｌｅｎｃｈｏｉｄｅｓ  ｂｅｓｓｅｙｉ、Ａｐｈｅｌｅｎｃｈｏｉｄｅｓ  ｆｒａｇａｒｉａｅ、Ａｐｈｅｌｅｎｃｈｏｉｄｅｓ  ｐａｒｉｅｔｉｎｕｓ、Ａｐｈｅｌｅｎｃｈｏｉｄｅｓ  ｒｉｔｚｅｍａｂｏｓｉ、Ａｐｈｅｌｅｎｃｈｕｓ  ａｖｅｎａｅ、Ａｐｉｏｇｎｏｍｏｎｉａ  ｅｒｒａｂｕｎｄａ、Ａｐｉｏｇｎｏｍｏｎｉａ  ｖｅｎｅｔａ、Ａｐｉｏｓｐｏｒａ  ｍｏｎｔａｇｎｅｉ、Ａｐｐｅｎｄｉｃｕｌｅｌｌａ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ａｆｆｉｎｉｓ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ａｐａｌｏｓｃｌｅｒａ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｃａｍｅｒｕｎｅｎｓｉｓ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｄｕｐｌｉｃａｔｅ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｆｅｌｌｅａ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｆｕｍｏｓａ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｆｕｓｃｉｐｅｓ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｇｒｉｓｅｏｍｅｌｌｅａ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｈｅｉｍｉｉ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｍｅｌｌｅａ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｍｅｌｌｅｏｒｕｂｅｎｓ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｍｏｎｔａｇｎｅｉ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｏｍｎｉｔｕｅｎｓ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｐａｌｌｉｄｕｌａ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｐａｕｌｅｎｓｉｓ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｐｅｌｌｉｃｕｌａｔａ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｐｒｏｃｅｒａ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｐｕｉｇｇａｒｉｉ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｓｉｎｇｕｌａｒ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｓｏｃｉａｌｉｓ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｓｏｌｉｄｉｐｅｓ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｔａｂｅｓｃｅｎｓ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｔｉｇｒｅｎｓｉｓ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｕｍｂｒｉｎｏｂｒｕｎｎｅａ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｖｉｒｉｄｉｆｌａｖａ、Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ  ｙｕｎｇｅｎｓｉｓ、Ａｒｔｈｒｏｃｌａｄｉｅｌｌａ、Ａｒｔｈｕｒｉｏｍｙｃｅｓ  ｐｅｃｋｉａｎｕｓ、Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ａｓｐａｒａｇｉｎｅ、Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ｂｏｈｅｍｉｃａ、Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ｃａｒｉｃａｅ、Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ｄｏｒｏｎｉｃｉ、Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ｆａｂａｅ  ｆ．ｓｐ．  ｌｅｎｔｉｓ、Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ｇｒａｍｉｎｅａ、Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ｈｏｒｄｅｉ、Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ｈｕｍｕｌｉ、Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ｐｉｓｉ、Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ｐｒａｓａｄｉｉ、Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ｓｏｒｇｈｉ、Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ｓｐｉｎａｃｉａｅ、Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ｔａｒｄａ、Ａｓｃｏｃｈｙｔａ  ｔｒｉｔｉｃｉ、Ａｓｃｏｓｐｏｒａ  ｒｕｂｏｒｕｍ、Ａｓｈｂｙａ  ｇｏｓｓｙｐｉｉ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ａｃｕｌｅａｔｕｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｉｓｃｈｅｒｉａｎｕｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ、Ａｓｐｅｒｉｓｐｏｒｉｕｍ  ｃａｒｉｃａｅ、Ａｓｐｅｒｉｓｐｏｒｉｕｍ  ｍｉｎｕｔｕｌｕｍ、Ａｓｔｅｒｉｄｉｅｌｌａ、Ａｓｔｅｒｉｄｉｅｌｌａ  ｐｅｒｓｅａｅ、Ａｓｔｅｒｏｍａ  ｃａｒｙａｅ、Ａｓｔｅｒｏｍａ  ｃｏｒｙｌｉ、Ａｓｔｅｒｏｍａ  ｉｎｃｏｎｓｐｉｃｕｕｍ、Ａｔｈｅｌｉａ  ａｒａｃｈｎｏｉｄｅａ、Ａｔｈｅｌｉａ  ｒｏｌｆｓｉｉ、Ａｕｒａｎｔｉｐｏｒｕｓ  ｆｉｓｓｉｌｉｓ、Ｂｅｌｏｎｏｌａｉｍｕｓ、Ｂｅｌｏｎｏｌａｉｍｕｓ  ｇｒａｃｉｌｉｓ、Ｂｅｌｏｎｏｌａｉｍｕｓ  ｌｏｎｇｉｃａｕｄａｔｕｓ、Ｂｅｎｉｏｗｓｋｉａ  ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅａ、Ｂｉｏｎｅｃｔｒｉａ  ｏｃｈｒｏｌｅｕｃａ、Ｂｉｐｏｌａｒｉｓ、Ｂｉｐｏｌａｒｉｓ  ｃａｃｔｉｖｏｒａ、Ｂｉｐｏｌａｒｉｓ  ｃｏｏｋｉｅ、Ｂｉｐｏｌａｒｉｓ  ｉｎｃｕｒｖａｔａ、Ｂｉｐｏｌａｒｉｓ  ｓａｃｃｈａｒｉ、Ｂｉｓｃｏｇｎｉａｕｘｉａ  ｃａｐｎｏｄｅｓ  ｖａｒ．  ｃａｐｎｏｄｅｓ、Ｂｉｓｃｏｇｎｉａｕｘｉａ  ｍａｒｇｉｎａｔａ、Ｂｉｓｃｏｇｎｉａｕｘｉａ  ｎｕｍｍｕｌａｒｉａ、Ｂｊｅｒｋａｎｄｅｒａ  ａｄｕｓｔａ、Ｂｌａｋｅｓｌｅａ  ｔｒｉｓｐｏｒａ、Ｂｌｕｍｅｒｉａ  ｇｒａｍｉｎｉｓ、Ｂｏｔｒｙｏｄｉｐｌｏｄｉａ  ｏｎｃｉｄｉｉ、Ｂｏｔｒｙｏｄｉｐｌｏｄｉａ  ｕｌｍｉｃｏｌａ、Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｃｏｃｏｇｅｎａ、Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｃｏｒｔｉｃｏｌａ、Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｄｉｓｒｕｐｔａ、Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｄｏｔｈｉｄｅａ、Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｍａｒｃｏｎｉｉ、Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｏｂｔｕｓｅ、Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｑｕｅｒｃｕｕｍ、Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｒｈｏｄｉｎａ、Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｒｉｂｉｓ、Ｂｏｔｒｙｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｓｔｅｖｅｎｓｉｉ、Ｂｏｔｒｙｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｐｕｌｃｈｒｕｍ、Ｂｏｔｒｙｏｔｉｎｉａ、Ｂｏｔｒｙｏｔｉｎｉａ  ｆｕｃｋｅｌｉａｎａ、Ｂｏｔｒｙｔｉｓ  ａｎｔｈｏｐｈｉｌａ、Ｂｏｔｒｙｔｉｓ  ｃｉｎｅｒｅａ、Ｂｏｔｒｙｔｉｓ  ｆａｂａｅ、Ｂｒｅｍｉａ  ｌａｃｔｕｃａｅ、Ｂｒｅｎｎｅｒｉａ  ｓａｌｉｃｉｓ、Ｂｒｉｏｓｉａ  ａｍｐｅｌｏｐｈａｇａ、Ｂｕｌｂｏｍｉｃｒｏｓｐｈａｅｒａ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ａｎｄｒｏｐｏｇｏｎｉｓ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｃａｒｙｏｐｈｙｌｌｉ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ  ｇｌｕｍａｅ、Ｃａｄｏｐｈｏｒａ  ｍａｌｏｒｕｍ、Ｃａｅｓｐｉｔｏｔｈｅｃａ、Ｃａｌｏｎｅｃｔｒｉａ  ｉｎｄｕｓｉａｔａ、Ｃａｌｏｎｅｃｔｒｉａ  ｋｙｏｔｅｎｓｉｓ、Ｃａｌｏｎｅｃｔｒｉａ  ｑｕｉｎｑｕｅｓｅｐｔａｔａ、Ｃａｌｖａｔｉａ  ｖｅｒｓｉｓｐｏｒａ、Ｃａｍａｒｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｐｉｓｔａｃｉａｅ、Ｃａｍａｒｏｔｅｌｌａ  ａｃｒｏｃｏｍｉａｅ、Ｃａｍａｒｏｔｅｌｌａ  ｃｏｓｔａｒｉｃｅｎｓｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａｔｕｓ  Ｌｉｂｅｒｉｂａｃｔｅｒ、Ｃａｐｉｔｏｒｏｓｔｒｕｍ  ｃｏｃｏｅｓ、Ｃａｐｎｏｄｉｕｍ  ｆｏｏｔｉｉ、Ｃａｐｎｏｄｉｕｍ  ｍａｎｇｉｆｅｒｕｍ、Ｃａｐｎｏｄｉｕｍ  ｒａｍ��ｓｕｍ、Ｃａｐｎｏｄｉｕｍ  ｔｈｅａｅ、Ｃａｕｌｉｍｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｃｅｐｈａｌｅｕｒｏｓ  ｖｉｒｅｓｃｅｎｓ、Ｃｅｐｈａｌｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｇｒａｍｉｎｅｕｍ、Ｃｅｒａｔｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｃｅｒｅａｌ、Ｃｅｒａｔｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｃｏｒｎｉｇｅｒｕｍ、Ｃｅｒａｔｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｎｏｘｉｕｍ、Ｃｅｒａｔｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｒａｍｉｃｏｌａ、Ｃｅｒａｔｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｓｅｔａｒｉａｅ、Ｃｅｒａｔｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｓｔｅｖｅｎｓｉｉ、Ｃｅｒａｔｏｃｙｓｔｉｓ  ａｄｉｐｏｓａ、Ｃｅｒａｔｏｃｙｓｔｉｓ  ｃｏｅｒｕｌｅｓｃｅｎｓ、Ｃｅｒａｔｏｃｙｓｔｉｓ  ｆｉｍｂｒｉａｔａ、Ｃｅｒａｔｏｃｙｓｔｉｓ  ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍｉｓ、Ｃｅｒａｔｏｃｙｓｔｉｓ  ｐａｒａｄｏｘａ、Ｃｅｒａｔｏｃｙｓｔｉｓ  ｐｉｌｉｆｅｒａ、Ｃｅｒａｔｏｃｙｓｔｉｓ  ｐｌｕｒｉａｎｎｕｌａｔａ、Ｃｅｒａｔｏｒｈｉｚａ  ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ、Ｃｅｒａｔｏｓｐｅｒｍｏｐｓｉｓ、Ｃｅｒｃｏｓｅｐｔｏｒｉａ  ｏｃｅｌｌａｔａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ａｎｇｒｅｃｉ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ａｐｉｉ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ａｐｉｉ  ｆ．ｓｐ．  ｃｌｅｒｏｄｅｎｄｒｉ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ａｐｉｉｃｏｌａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ａｒａｃｈｉｄｉｃｏｌａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ａｓｐａｒａｇｉ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ａｔｒｏｆｉｌｉｆｏｒｍｉｓ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｂｅｔｉｃｏｌａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｂｒａｃｈｙｐｕｓ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｂｒａｓｓｉｃｉｃｏｌａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｂｒｕｎｋｉｉ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｃａｎｎａｂｉｓ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｃａｎｔｕａｒｉｅｎｓｉｓ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｃａｐｓｉｃｉ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｃａｒｏｔａｅ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｃｏｒｙｌｉｎａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｆｒａｇａｒｉａｅ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｆｕｃｈｓｉａｅ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｆｕｓｃａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｆｕｓｉｍａｃｕｌａｎｓ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｇｅｒｂｅｒａｅ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｈａｌｓｔｅｄｉｉ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｈａｎｄｅｌｉｉ、Ｃｅｒｃ
ｏｓｐｏｒａ  ｈａｙｉ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｈｙｄｒａｎｇｅａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｋｉｋｕｃｈｉｉ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｌｅｎｔｉｓ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｌｉｑｕｉｄａｍｂａｒｉｓ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｌｏｎｇｉｐｅｓ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｌｏｎｇｉｓｓｉｍａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｍａｍａｏｎｉｓ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｍａｎｇｉｆｅｒａｅ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｍｅｄｉｃａｇｉｎｉｓ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｍｅｌｏｎｇｅｎａｅ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｍｉｎｉｍａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｍｉｎｕｔａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｏｄｏｎｔｏｇｌｏｓｓｉ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｐａｐａｙａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｐｅｎｎｉｓｅｔｉ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｐｉｓａ−ｓａｔｉｖａｅ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｐｌａｔａｎｉｃｏｌａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｐｕｄｅｒｉｉ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｐｕｌｃｈｅｒｒｉｍａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｒｈａｐｉｄｉｃｏｌａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｒｏｓｉｃｏｌａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｒｕｂｒｏｔｉｎｃｔａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｓｏｊｉｎａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｓｏｌａｎｉ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｓｏｌａｎｉ−ｔｕｂｅｒｏｓｉ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｓｏｒｇｈｉ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｔｈｅａｅ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｔｕｂｅｒｃｕｌａｎｓ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｖｅｘａｎｓ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｖｉｃｏｓａｅ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｚｅａｅ−ｍａｙｄｉｓ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｚｅｂｒｉｎａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｚｏｎａｔａ、Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒｅｌｌａ  ｒｕｂｉ、Ｃｅｒｅａｌ  ｃｙｓｔ  ｎｅｍａｔｏｄｅ、Ｃｅｒｉｐｏｒｉａ  ｓｐｉｓｓａ、Ｃｅｒｉｐｏｒｉａ  ｘｙｌｏｓｔｒｏｍａｔｏｉｄｅｓ、Ｃｅｒｒｅｎａ  ｕｎｉｃｏｌｏｒ、Ｃｅｕｔｈｏｓｐｏｒａ  ｌａｕｒｉ、Ｃｈｏａｎｅｐｈｏｒａ、Ｃｈｏａｎｅｐｈｏｒａ  ｃｕｃｕｒｂｉｔａｒｕｍ、Ｃｈｏａｎｅｐｈｏｒａ  ｉｎｆｕｎｄｉｂｕｌｉｆｅｒａ、Ｃｈｏｎｄｒｏｓｔｅｒｅｕｍ  ｐｕｒｐｕｒｅｕｍ、Ｃｈｒｙｓｏｍｙｘａ  ｌｅｄｉ  ｖａｒ．  ｒｈｏｄｏｄｅｎｄｒｉ、Ｃｈｒｙｓｏｍｙｘａ  ｌｅｄｉｃｏｌａ、Ｃｈｒｙｓｏｍｙｘａ  ｐｉｐｅｒｉａｎａ、Ｃｈｒｙｓｏｍｙｘａ  ｒｏａｎｅｎｓｉｓ、Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ、Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ  ａｒｔｈｒｏｐｏｄｉｉ、Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｃａｒｙｉｇｅｎｕｍ、Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ、Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ  ｆ．ｓｐ．  ｐｉｓｉｃｏｌａ、Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｃｕｃｕｍｅｒｉｎｕｍ、Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｈｅｒｂａｒｕｍ、Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｍｕｓａｅ、Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｏｎｃｏｂａｅ、Ｃｌａｖｉｂａｃｔｅｒ  ｍｉｃｈｉｇａｎｅｎｓｉｓ、Ｃｌａｖｉｃｅｐｓ  ｆｕｓｉｆｏｒｍｉｓ、Ｃｌａｖｉｃｅｐｓ  ｐｕｒｐｕｒｅａ、Ｃｌａｖｉｃｅｐｓ  ｓｏｒｇｈｉ、Ｃｌａｖｉｃｅｐｓ  ｚｉｚａｎｉａｅ、Ｃｌｉｍａｃｏｄｏｎ  ｐｕｌｃｈｅｒｒｉｍｕｓ、Ｃｌｉｍａｃｏｄｏｎ  ｓｅｐｔｅ��ｔｒｉｏｎａｌｉｓ、Ｃｌｉｔｏｃｙｂｅ  ｐａｒａｓｉｔｉｃａ、Ｃｌｏｎｏｓｔａｃｈｙｓ  ｒｏｓｅａ  ｆ．  ｒｏｓｅａ、Ｃｌｙｐｅｏｐｏｒｔｈｅ  ｉｌｉａｕ、Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ、Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ  ｃａｒｂｏｎｕｍ、Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ  ｃｙｍｂｏｐｏｇｏｎｉｓ、Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ  ｈａｗａｉｉｅｎｓｉｓ、Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ  ｈｅｔｅｒｏｓｔｒｏｐｈｕｓ、Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ  ｌｕｎａｔｕｓ、Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ  ｍｉｙａｂｅａｎｕｓ、Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ  ｒａｖｅｎｅｌｉｉ、Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ  ｓａｔｉｖｕｓ、Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ  ｓｅｔａｒｉａｅ、Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ  ｓｐｉｃｉｆｅｒ、Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ  ｓｔｅｎｏｓｐｉｌｕｓ、Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ  ｔｕｂｅｒｃｕｌａｔｕｓ、Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ  ｖｉｃｔｏｒｉａｅ、Ｃｏｌｅｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｈｅｌｉａｎｔｈｉ、Ｃｏｌｅｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｉｐｏｍｏｅａｅ、Ｃｏｌｅｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｍａｄｉａｅ、Ｃｏｌｅｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｐａｃｉｆｉｃｕｍ、Ｃｏｌｅｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｔｕｓｓｉｌａｇｉｎｉｓ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ａｃｕｔａｔｕｍ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ａｒａｃｈｉｄｉｓ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｃａｐｓｉｃｉ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｃｅｒｅａｌｅ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｃｒａｓｓｉｐｅｓ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｄｅｍａｔｉｕｍ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｄｅｍａｔｉｕｍ  ｆ．  ｓｐｉｎａｃｉａｅ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｄｅｒｒｉｄｉｓ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｄｅｓｔｒｕｃｔｉｖｕｍ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｆｒａｇａｒｉａｅ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｇｏｓｓｙｐｉｉ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｈｉｇｇｉｎｓｉａｎｕｍ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｋａｈａｗａｅ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｌｉｎｄｅｍｕｔｈｉａｎｕｍ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｌｉｎｉ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｍａｎｇｅｎｏｔｉｉ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｍｕｓａｅ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｎｉｇｒｕｍ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｏｒｂｉｃｕｌａｒｅ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｐｉｓｉ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｓｕｂｌｉｎｅｏｌｕｍ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｔｒｉｃｈｅｌｌｕｍ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｔｒｉｆｏｌｉｉ、Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｔｒｕｎｃａｔｕｍ、Ｃｏｎｉｅｌｌａ  ｃａｓｔａｎｅｉｃｏｌａ、Ｃｏｎｉｅｌｌａ  ｄｉｐｌｏｄｉｅｌｌａ、Ｃｏｎｉｅｌｌａ  ｆｒａｇａｒｉａｅ、Ｃｏｎｉｏｔｈｅｃｉｕｍ  ｃｈｏｍａｔｏｓｐｏｒｕｍ、Ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍ  ｃｅｌｔｉｄｉｓ−ａｕｓｔｒａｌｉｓ、Ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍ  ｈｅｎｒｉｑｕｅｓｉｉ、Ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍ  ｒｏｓａｒｕｍ、Ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍ  ｗｅｒｎｓｄｏｒｆｆｉａｅ、Ｃｏｐｒｉｎｏｐｓｉｓ  ｐｓｙｃｈｒｏｍｏｒｂｉｄａ、Ｃｏｒｄａｎａ  ｊｏｈｎｓｔｏｎｉｉ、Ｃｏｒｄａｎａ  ｍｕｓａｅ、Ｃｏｒｉｏｌｏｐｓｉｓ  ｆｌｏｃｃｏｓｅ、Ｃｏｒｉｏｌｏｐｓｉｓ  ｇａｌｌｉｃａ、Ｃｏｒｔｉｃｉｕｍ  ｉｎｖｉｓｕｍ、Ｃｏｒｔｉｃｉｕｍ  ｐｅｎｉｃｉｌｌａｔｕｍ、Ｃｏｒｔｉｃｉｕｍ  ｔｈｅａｅ、Ｃｏｒｙｎｅｏｐｓｉｓ  ｒｕｂｉ、Ｃｏｒｙｎｅｓｐｏｒａ  ｃａｓｓｉｉｃｏｌａ、Ｃｏｒｙｎｅｕｍ  ｒｈｏｄｏｄｅｎｄｒｉ、Ｃｒｉｎｉｐｅｌｌｉｓ  ｓａｒｍｅｎｔｏｓａ、Ｃｒｏｎａｒｔｉｕｍ  ｒｉｂｉｃｏｌａ、Ｃｒｙｐｈｏｎｅｃｔｒｉａｃｅａｅ、Ｃｒｙｐｔｏｃｌｉｎｅ  ｃｙｃｌａｍｉｎｉｓ、Ｃｒｙｐｔｏｍｅｌｉｏｌａ、Ｃｒｙｐｔｏｐｏｒｕｓ  ｖｏｌｖａｔｕｓ、Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｅｌｌａ  ｕｍｂｒｉｎａ、Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｏｐｓｉｓ  ｔａｒｒａｃｏｎｅｎｓｉｓ、Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｍｉｎｉｍｕｍ、Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ  ｃａｒｉｃａｅ−ｐａｐａｙａｅ、Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ  ｐｅｎｎｉｓｅｔｉ、Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ  ｓｅｎｅｇａｌｅｎｓｉｓ、Ｃｕｒｖｕｌａｒｉａ  ｔｒｉｆｏｌｉｉ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃａｒｐｏｎ  ｃａｎｄｉｄｕｍ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃａｒｐｏｎ  ｉａｎｔｈｏｔｈｅｌｅ  ｖａｒ．  ｉａｎｔｈｏｔｈｅｌｅ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃａｒｐｏｎ  ｍａｇｎｕｓｉａｎｕｍ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃａｒｐｏｎ  ｍｕｓａｅ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｌａｄｉｅｌｌａ  ｃａｍｅｌｌｉａｅ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｌａｄｉｅｌｌａ  ｐａｒｖａ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｌａｄｉｕｍ  ｃｌａｖａｔｕｍ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｌａｄｉｕｍ  ｌａｎｃｅｏｌａｔｕｍ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｌａｄｉｕｍ  ｐｅｒｕｖｉａｎｕｍ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｃｌａｄｉｕｍ  ｐｔｅｒｉｄｉｓ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｃａｎｎａｂｉｎｕｍ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｊｕｇｌａｎｄｉｓ、Ｃｙｌｉｎｄｒｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｒｕｂｉ、Ｃｙｍａｄｏｔｈｅａ  ｔｒｉｆｏｌｉｉ、Ｃｙｔｏｓｐｏｒａ、Ｃｙｔｏｓｐｏｒａ  ｐａｌｍａｒｕｍ、Ｃｙｔｏｓｐｏｒａ  ｐｅｒｓｏｎａｔａ、Ｃｙｔｏｓｐｏｒａ  ｐｌａｔａｎｉ、Ｃｙｔｏｓｐｏｒａ  ｓａｃｃｈａｒｉ、Ｃｙｔｏｓｐｏｒａ  ｓａｃｃｕｌｕｓ、Ｃｙｔｏｓｐｏｒａ  ｔｅｒｅｂｉｎｔｈｉ、Ｃｙｔｏｓｐｏｒｉｎａ  ｌｕｄｉｂｕｎｄａ、Ｄａｃｔｕｌｉｏｐｈｏｒａ  ｅｌｏｎｇａｔａ、Ｄａｅｄａｌｅｏｐｓｉｓ  ｃｏｎｆｒａｇｏｓａ、Ｄａｓｉｎｅｕｒａ  ｕｒｔｉｃａｅ、Ｄａｔｒｏｎｉａ  ｓｃｕｔｅｌｌａｔａ、Ｄａｖｉｄｉｅｌｌａ  ｃａｒｉｎｔｈｉａｃａ、Ｄａｖｉｄｉｅｌｌａ  ｄｉａｎｔｈｉ、Ｄａｖｉｄｉｅｌｌａ  ｔａｓｓｉａｎａ、Ｄｅｉｇｈｔｏｎｉｅｌｌａ  ｐａｐｕａｎａ、Ｄｅｉｇｈｔｏｎｉｅｌｌａ  ｔｏｒｕｌｏｓａ、Ｄｅｎｄｒｏｐｈｏｍａ  ｍａｒｃｏｎｉｉ、Ｄｅｎｄｒｏｐｈｏｒａ  ｅｒｕｍｐｅｎｓ、Ｄｅｎｔｉｃｕｌａｒｉａ  ｍａｎｇｉｆｅｒａｅ、Ｄｅｒｍｅａ  ｐｓｅｕｄｏｔｓｕｇａｅ、Ｄｉａｐｏｒｔｈａｃｅａｅ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ａｒｃｔｉｉ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｃｉｔｒｉ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｄｕｌｃａｍａｒａｅ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｅｒｅｓ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｈｅｌｉａｎｔｈｉ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｌａｇｕｎｅｎｓｉｓ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｌｏｋｏｙａｅ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｍｅ��ｏｎｉｓ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｏｒｔｈｏｃｅｒａｓ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｐｅｒｎｉｃｉｏｓａ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｐｈａｓｅｏｌｏｒｕｍ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｐｈａｓｅｏｌｏｒｕｍ  ｖａｒ．  ｃａｕｌｉｖｏｒａ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｐｈａｓｅｏｌｏｒｕｍ  ｖａｒ．  ｐｈａｓｅｏｌｏｒｕｍ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｐｈａｓｅｏｌｏｒｕｍ  ｖａｒ．  ｓｏｊａｅ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｒｕｄｉｓ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｔａｎａｋａｅ、Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ  ｔｏｘｉｃａ、Ｄｉｂｏｔｒｙｏｎ  ｍｏｒｂｏｓｕｍ、Ｄｉｃａｒｐｅｌｌａ  ｄｒｙｉｎａ、Ｄｉｄｙｍｅｌｌａ  ｂｒｙｏｎｉａｅ、Ｄｉｄｙｍｅｌｌａ  ｆａｂａｅ、Ｄｉｄｙｍｅｌｌａ  ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ、Ｄｉｄｙｍｏｓｐｈａｅｒｉａ  ａｒａｃｈｉｄｉｃｏｌａ、Ｄｉｄｙｍｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｔａｉｗａｎｅｎｓｉｓ、Ｄｉｌｏｐｈｏｓｐｏｒａ  ａｌｏｐｅｃｕｒｉ、Ｄｉｍｅｒｉｅｌｌａ  ｓａｃｃｈａｒｉ、Ｄｉｐｌｏｃａｒｐｏｎ  ｅａｒｌｉａｎｕｍ、Ｄｉｐｌｏｃａｒｐｏｎ  ｍａｌｉ、Ｄｉｐｌｏｃａｒｐｏｎ  ｍｅｓｐｉｌｉ、Ｄｉｐｌｏｃａｒｐｏｎ  ｒｏｓａｅ、Ｄｉｐｌｏｄｉａ  ｌａｅｌｉｏ−ｃａｔｔｌｅｙａｅ、Ｄｉｐｌｏｄｉａ  ｍａｎｉｈｏｔｉ、Ｄｉｐｌｏｄｉａ  ｐａｒａｐｈｙｓａｒｉａ、Ｄｉｐｌｏｄｉａ  ｔｈｅａｅ−ｓｉｎｅｎｓｉｓ、Ｄｉｓｃｏｓｉａ  ａｒｔｏｃｒｅａｓ、Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａ  ｆｕｌｖｉｄａ、Ｄｉｓｃｏｓｔｒｏｍａ  ｃｏｒｔｉｃｏｌａ、Ｄｉｓｔｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ、Ｄｉｓｔｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｌｉｖｉｓｔｏｎａｅ、Ｄｉｔｙｌｅｎｃｈｕｓ、Ｄｉｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ａｆｒｉｃａｎｕｓ、Ｄｉｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ａｎｇｕｓｔｕｓ、Ｄｉｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｄｅｓｔｒｕｃｔｏｒ、Ｄｉｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｄｉｐｓａｃｉ、Ｄｏｌｉｃｈｏｄｏｒｕｓ  ｈｅｔｅｒｏｃｅｐｈａｌｕｓ、Ｄｏｔｈｉｄｅｏｍｙｃｅｔｅｓ、Ｄｏｔｈｉｏｒｅｌｌａ  ａｒｏｍａｔｉｃ、Ｄｏｔｈｉｏｒｅｌｌａ  ｄｏｍｉｎｉｃａｎａ、Ｄｏｔｈｉｏｒｅｌｌａ  ｇｒｅｇａｒｉａ、Ｄｏｔｈｉｏｒｅｌｌａ  ｕｌｍｉ、Ｄｒｅｃｈｓｌｅｒａ  ａｖｅｎａｃｅａ、Ｄｒｅｃｈｓｌｅｒａ  ｃａｍｐａｎｕｌａｔａ、Ｄｒｅ
ｃｈｓｌｅｒａ  ｄｅｍａｔｉｏｉｄｅａ、Ｄｒｅｃｈｓｌｅｒａ  ｇｉｇａｎｔｅａ、Ｄｒｅｃｈｓｌｅｒａ  ｇｌｙｃｉｎｅｓ、Ｄｒｅｃｈｓｌｅｒａ  ｍｕｓａｅ−ｓａｐｉｅｎｔｉｕｍ、Ｄｒｅｃｈｓｌｅｒａ  ｔｅｒｅｓ  ｆ．  ｍａｃｕｌａｔｅ、Ｄｒｅｃｈｓｌｅｒａ  ｗｉｒｒｅｇａｎｅｎｓｉｓ、Ｄｕｒａｎｄｉｅｌｌａ  ｐｓｅｕｄｏｔｓｕｇａｅ、Ｅｂａｌｌｉｓｔｒａ  ｌｉｎｅａｔａ、Ｅｂａｌｌｉｓｔｒａ  ｏｒｙｚａｅ、Ｅｂａｌｌｉｓｔｒａｃｅａｅ、Ｅｃｈｉｎｏｄｏｎｔｉｕｍ  ｔｉｎｃｔｏｒｉｕｍ、Ｅｃｔｅｎｄｏｍｅｌｉｏｌａ、Ｅｌｓｉｎｏｅ  ａｍｐｅｌｉｎａ、Ｅｌｓｉｎｏｅ  ａｕｓｔｒａｌｉｓ、Ｅｌｓｉｎｏｅ  ｂａｔａｔａｓ、Ｅｌｓｉｎｏｅ  ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ、Ｅｌｓｉｎｏｅ  ｆａｗｃｅｔｔｉｉ、Ｅｌｓｉｎｏｅ  ｌｅｕｃｏｓｐｉｌａ、Ｅｌｓｉｎｏｅ  ｍａｎｇｉｆｅｒａｅ、Ｅｌｓｉｎｏｅ  ｐｉｒｉ、Ｅｌｓｉｎｏｅ  ｒａｎｄｉｉ、Ｅｌｓｉｎｏｅ  ｒｏｓａｒｕｍ、Ｅｌｓｉｎｏｅ  ｓａｃｃｈａｒｉ、Ｅｌｓｉｎｏｅ  ｔｈｅａｅ、Ｅｌｓｉｎｏｅ  ｖｅｎｅｔａ、Ｅｎｄｏｍｅｌｉｏｌａ、Ｅｎｄｏｔｈｉａ  ｒａｄｉｃａｌｉｓ、Ｅｎｄｏｔｈｉｅｌｌａ  ｇｙｒｏｓａ、Ｅｎｔｏｌｅｕｃａ  ｍａｍｍａｔａ、Ｅｎｔｏｒｒｈｉｚｏｍｙｃｅｔｅｓ、Ｅｎｔｙｌｏｍａ  ａｇｅｒａｔｉｎａｅ、Ｅｎｔｙｌｏｍａ  ｄａｈｌｉａ、Ｅｎｔｙｌｏｍａ  ｅｌｌｉｓｉｉ、Ｅｐｉｃｏｃｃｕｍ  ｎｉｇｒｕｍ、Ｅｒｇｏｔ、Ｅｒｗｉｎｉａ、Ｅｒｗｉｎｉａ  ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｉ、Ｅｒｗｉｎｉａ  ｐｓｉｄｉｉ、Ｅｒｙｓｉｐｈａｃｅａｅ、  Ｅｒｙｓｉｐｈａｌｅｓ、Ｅｒｙｓｉｐｈｅ、Ｅｒｙｓｉｐｈｅ  ａｌｐｈｉｔｏｉｄｅｓ、Ｅｒｙｓｉｐｈｅ  ｂｅｔａｅ、Ｅｒｙｓｉｐｈｅ  ｂｒｕｎｎｅｏｐｕｎｃｔａｔａ、Ｅｒｙｓｉｐｈｅ  ｃｉｃｈｏｒａｃｅａｒｕｍ、Ｅｒｙｓｉｐｈｅ  ｃｒｕｃｉｆｅｒａｒｕｍ、Ｅｒｙｓｉｐｈｅ  ｆｌｅｘｕｏｓａ、Ｅｒｙｓｉｐｈｅ  ｇｒａｍｉｎｉｓ  ｆ．  ｓｐ．  ａｖｅｎａｅ、Ｅｒｙｓｉｐｈｅ  ｇｒａｍｉｎｉｓ  ｆ．ｓｐ．  ｔｒｉｔｉｃｉ、Ｅｒｙｓｉｐｈｅ  ｈｅｒａｃｌｅｉ、Ｅｒｙｓｉｐｈｅ  ｐｉｓｉ、Ｅｕｔｙｐｅｌｌａ  ｐａｒａｓｉｔｉｃａ、Ｅｕｔｙｐｅｌｌａ  ｓｃｏｐａｒｉａ、Ｅｘｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｂｕｒｔｉｉ、Ｅｘｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｒｅｔｉｃｕｌａｔｕｍ、Ｅｘｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｖａｃｃｉｎｉｉ  ｖａｒ．  ｊａｐｏｎｉｃｕｍ、Ｅｘｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｖａｃｃｉｎｉｉ−ｕｌｉｇｉｎｏｓｉ、Ｅｘｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｖｅｘａｎｓ、Ｅｘｏｐｈｉａｌａ、Ｆｌａｖｅｓｃｅｎｃｅ  ｄｏｒｅｅ、Ｆｏｍｅｓ  ｆａｓｃｉａｔｕｓ、Ｆｏｍｅｓ  ｌａｍａｅｎｓｉｓ、Ｆｏｍｅｓ  ｍｅｌｉａｅ、Ｆｏｍｉｔｏｐｓｉｓ  ｃａｊａｎｄｅｒｉ、Ｆｏｍｉｔｏｐｓｉｓ  ｐａｌｕｓｔｒｉｓ、Ｆｏｍｉｔｏｐｓｉｓ  ｒｏｓｅａ、Ｆｏｍｉｔｏｐｓｉｓ  ｓｐｒａｇｕｅｉ、Ｆｏｍｉｔｏｐｓｉｓ  ｓｕｐｉｎａ、Ｆｏｒｍａ  ｓｐｅｃｉａｌｉｓ、Ｆｒｏｍｍｅｅｌｌａ  ｔｏｒｍｅｎｔｉｌｌａｅ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ａｆｆｉｎｅ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ａｒｔｈｒｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｃｉｒｃｉｎａｔｕｍ、Ｆ���ｓａｒｉｕｍ  ｃｒｏｏｋｗｅｌｌｅｎｓｅ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｃｕｌｍｏｒｕｍ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｉｎｃａｒｎａｔｕｍ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｓｏｌａｎｉ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｍｅｒｉｓｍｏｉｄｅｓ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ａｌｂｅｄｉｎｉｓ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ａｓｐａｒａｇｉ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ｂａｔａｔａｓ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ｂｅｔａｅ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ｃａｎｎａｂｉｓ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ｃｉｔｒｉ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ｃｏｆｆｅａ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ｃｕｂｅｎｓｅ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ｃｙｃｌａｍｉｎｉｓ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ｄｉａｎｔｈｉ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ｌｅｎｔｉｓ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ｌｉｎｉ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ｍｅｄｉｃａｇｉｎｉｓ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ｐｉｓｉ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ  ｆ．ｓｐ．  ｒａｄｉｃｉｓ−ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｐａｌｌｉｄｏｒｏｓｅｕｍ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｕｍ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｒｅｄｏｌｅｎｓ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｓａｃｃｈａｒｉ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｓｏｌａｎｉ  ｆ．ｓｐ．  ｐｉｓｉ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｓｐｏｒｏｔｒｉｃｈｉｏｉｄｅｓ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ、Ｆｕｓａｒｉｕｍ  ｓｕｌｐｈｕｒｅｕｍ、Ｆｕｓｃｏｐｏｒｉａ  ｔｏｒｕｌｏｓａ、Ｆｕｓｉｃｌａｄｉｕｍ  ｐｉｓｉｃｏｌａ、Ｆｕｓｉｃｏｃｃｕｍ  ａｅｓｃｕｌｉ、Ｆｕｓｉｃｏｃｃｕｍ  ａｍｙｇｄａｌｉ、Ｇａｅｕｍａｎｎｏｍｙｃｅｓ  ｇｒａｍｉｎｉｓ  ｖａｒ  ｔｒｉｔｉｃｉ、Ｇａｅｕｍａｎｎｏｍｙｃｅｓ  ｇｒａｍｉｎｉｓ  ｖａｒ．  ａｖｅｎａｅ、Ｇａｅｕｍａｎｎｏｍｙｃｅｓ  ｇｒａｍｉｎｉｓ  ｖａｒ．  ｇｒａｍｉｎｉｓ、Ｇａｌａｃｔｏｍｙｃｅｓ  ｃａｎｄｉｄｕｍ、Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｂｒｏｗｎｉｉ、Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｌｏｂａｔｕｍ、Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｏｒｂｉｆｏｒｍｅ、Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｐｈｉｌｉｐｐｉｉ、Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｔｏｒｎａｔｕｍ、Ｇａｎｏｄｅｒｍａ  ｚｏｎａｔｕｍ、Ｇｅａｓｔｒｕｍｉａ  ｐｏｌｙｓｔｉｇｍａｔｉｓ、Ｇｅｏｒｇｅｆｉｓｃｈｅｒｉａｃｅａｅ、Ｇｅｏｒｇｅｆｉｓｃｈｅｒｉａｌｅｓ、Ｇｅｏｓｍｉｔｈｉａ  ｍｏｒｂｉｄａ、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｃａｎｄｉｄｕｍ、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｃａｎｄｉｄｕｍ  ｖａｒ．  ｃｉｔｒｉ−ａｕｒａｎｔｉｉ、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ  ｋｌｅｂａｈｎｉｉ、Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ、Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ  ａｃｕｍｉｎａｔａ、Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ  ａｖｅｎａｃｅａ、Ｇｉｂｂｅｒｅ���ｌａ  ｂａｃｃａｔａ、Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ  ｃｙａｎｏｇｅｎａ、Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ  ｆｕｊｉｋｕｒｏｉ、Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ  ｆｕｊｉｋｕｒｏｉ  ｖａｒ．  ｓｕｂｇｌｕｔｉｎａｎｓ、Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ  ｉｎｔｒｉｃａｎｓ、Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ  ｐｕｌｉｃａｒｉｓ、Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ  ｓｔｉｌｂｏｉｄｅｓ、Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ  ｘｙｌａｒｉｏｉｄｅｓ、Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ  ｚｅａｅ、Ｇｉｂｅｌｌｉｎａ  ｃｅｒｅａｌｉｓ、Ｇｉｌｂｅｒｔｅｌｌａ  ｐｅｒｓｉｃａｒｉａ、Ｇｊａｅｒｕｍｉａｃｅａｅ、Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ  ｖｅｒｍｏｅｓｅｎｉ、Ｇｌｏｂｏｄｅｒａ  ｐａｌｌｉｄａ、Ｇｌｏｂｏｄｅｒａ  ｒｏｓｔｏｃｈｉｅｎｓｉｓ、Ｇｌｏｂｏｄｅｒａ  ｔａｂａｃｕｍ、Ｇｌｏｅｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｓｏｒｇｈｉ、Ｇｌｏｅｏｃｙｓｔｉｄｉｅｌｌｕｍ  ｐｏｒｏｓｕｍ、Ｇｌｏｅｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｍｅｘｉｃａｎｕｍ、Ｇｌｏｅｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｔｒａｂｅｕｍ、Ｇｌｏｅｏｐｏｒｕｓ  ｄｉｃｈｒｏｕｓ、Ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｃａｔｔｌｅｙａｅ、Ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｔｈｅａｅ−ｓｉｎｅｎｓｉｓ、Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ  ｃｉｎｇｕｌａｔｅ、Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ  ｇｌｙｃｉｎｅｓ、Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ  ｇｒａｍｉｎｉｃｏｌａ、Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ  ｔｕｃｕｍａｎｅｎｓｉｓ、Ｇｎｏｍｏｎｉａ  ｃａｒｙａｅ、Ｇｎｏｍｏｎｉａ  ｃｏｍａｒｉ、Ｇｎｏｍｏｎｉａ  ｄｉｓｐｏｒａ、Ｇｎｏｍｏｎｉａ  ｉｌｉａｕ、Ｇｎｏｍｏｎｉａ  ｌｅｐｔｏｓｔｙｌａ、Ｇｎｏｍｏｎｉａ  ｎｅｒｖｉｓｅｄａ、Ｇｎｏｍｏｎｉａ  ｒｕｂｉ、Ｇｏｌｏｖｉｎｏｍｙｃｅｓ  ｃｉｃｈｏｒａｃｅａｒｕｍ  ｖａｒ．  ｌａｔｉｓｐｏｒｕｓ、Ｇｒａｎｕｌｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｖｅｌｌｅｒｅｕｍ、Ｇｒａｐｈｉｏｌａ  ｐｈｏｅｎｉｃｉｓ、Ｇｒａｐｈｉｕｍ  ｒｉｇｉｄｕｍ、Ｇｒａｐｈｉｕｍ  ｒｕｂｒｕｍ、Ｇｒａｐｈｙｌｌｉｕｍ  ｐｅｎｔａｍｅｒｕｍ、Ｇｒｏｖｅｓｉｎｉａ  ｐｙｒａｍｉｄａｌｉｓ、Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａ  ｂｉｄｗｅｌｌｉｉ  ｆ．  ｍｕｓｃａｄｉｎｉｉ、Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａ  ｃａｍｅｌｌｉａｅ、Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａ  ｃｉｔｒｉｃａｒｐａ、Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａ  ｍａｎｇｉｆｅｒａｅ、Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａ  ｍｕｓａｅ、Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａ  ｐｈｉｌｏｐｒｉｎａ、Ｇｕｍｍｏｓｉｓ、Ｇｙｍｎｏｃｏｎｉａ  ｎｉｔｅｎｓ、Ｇｙｍｎｏｐｕｓ  ｄｒｙｏｐｈｉｌｕｓ、Ｇｙｍｎｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ  ｃｌａｖｉｐｅｓ、Ｇｙｍｎｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ  ｓａｂｉｎａｅ、Ｇｙｍｎｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ  ｇｌｏｂｏｓｕｍ、Ｇｙｍｎｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ  ｊｕｎｉｐｅｒｉ−ｖｉｒｇｉｎｉａｎａｅ、Ｇｙｍｎｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ  ｋｅｒｎｉａｎｕｍ、Ｇｙｍｎｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ  ｎｅｌｓｏｎｉｉ、Ｇｙｍｎｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ  ｙａｍａｄａｅ、Ｈａｅｍａｔｏｎｅｃｔｒｉａ  ｈａｅｍａｔｏｃｏｃｃａ、Ｈａｎｓｅｎｕｌａ  ｓｕｂｐｅｌｌｉｃｕｌｏｓａ、Ｈａｐａｌｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｄｅｆｏｒｍａｎｓ、Ｈａｐｌｏｂａｓｉｄｉｏｎ  ｍｕｓａｅ、Ｈａｕｓｔｏｒｉｕｍ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｃｏｍｐａｃｔｕｍ、Ｈｅｌｉｃｏｂａ���ｉｄｉｕｍ  ｌｏｎｇｉｓｐｏｒｕｍ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｐｕｒｐｕｒｅｕｍ、Ｈｅｌｉｃｏｍａ  ｍｕｅｌｌｅｒｉ、Ｈｅｌｉｃｏｔｙｌｅｎｃｈｕｓ、Ｈｅｌｉｃｏｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｄｉｈｙｓｔｅｒａ、Ｈｅｌｉｃｏｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｍｕｌｔｉｃｉｎｃｔｕｓ、Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｃｏｏｋｅｉ、Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｐａｐｕｌｏｓｕｍ、Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｓｏｌａｎｉ、Ｈｅｌｏｔｉａｌｅｓ、Ｈｅｍｉｃｒｉｃｏｎｅｍｏｉｄｅｓ  ｋａｎａｙａｅｎｓｉｓ、Ｈｅｍｉｃｒｉｃｏｎｅｍｏｉｄｅｓ  ｍａｎｇｉｆｅｒａｅ、Ｈｅｍｉｃｙｃｌｉｏｐｈｏｒａ  ａｒｅｎａｒｉａ、Ｈｅｍｌｏｃｋ  ｗｏｏｌｌｙ  ａｄｅｌｇｉｄ、Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎｉａ  ｃｒｅｂｅｒｒｉｍａ、Ｈｅｎｄｅｒｓｏｎｉａ  ｔｈｅｉｃｏｌａ、Ｈｅｒｉｃｉｕｍ  ｃｏｒａｌｌｏｉｄｅｓ、Ｈｅｔｅｒｏｂａｓｉｄｉｏｎ  ａｎｎｏｓｕｍ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ａｍｙｇｄａｌｉ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ａｒｅｎａｒｉａ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ａｕｃｋｌａｎｄｉｃａ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ａｖｅｎａｅ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｂｅｒｇｅｎｉａｅ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｂｉｆｅｎｅｓｔｒａ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｃａｃｔｉ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｃａｊａｎｉ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｃａｎａｄｅｎｓｉｓ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｃａｒｄｉｏｌａｔａ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｃａｒｏｔａｅ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｃｉｃｅｒｉ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｃｒｕｃｉｆｅｒａｅ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｄｅｌｖｉｉ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｅｌａｃｈｉｓｔａ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｆｉｌｉｐｊｅｖｉ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｇａｍｂｉｅｎｓｉｓ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｇｏｅｔｔｉｎｇｉａｎａ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｈｏｒｄｅｃａｌｉｓ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｈｕｍｕｌｉ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｌａｔｉｐｏｎｓ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｍｅｄｉｃａｇｉｎｉｓ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｏｒｙｚａｅ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｏｒｙｚｉｃｏｌａ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｒｏｓｉｉ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｓａｃｃｈ
ａｒｉ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｓｃｈａｃｈｔｉｉ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｔａｂａｃｕｍ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｔｒｉｆｏｌｉｉ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒｉｄａｅ、Ｈｅｘａｇｏｎｉａ  ｈｙｄｎｏｉｄｅｓ、Ｈｉｒｓｃｈｍａｎｎｉｅｌｌａ  ｏｒｙｚａｅ、Ｈｏｐｌａｌａｉｍｕｓ  ｇａｌｅａｔｕｓ、Ｈｏｐｌｏｌａｉｍｉｄａｅ、Ｈｏｐｌｏｌａｉｍｕｓ  ｃｏｌｕｍｂｕｓ、Ｈｏｐｌｏｌａｉｍｕｓ  ｉｎｄｉｃｕｓ、Ｈｏｐｌｏｌａｉｍｕｓ  ｍａｇｎｉｓｔｙｌｕｓ、Ｈｏｐｌｏｌａｉｍｕｓ  ｐａｒａｒｏｂｕｓｔｕｓ、Ｈｏｐｌｏｌａｉｍｕｓ  ｓｅｉｎｈｏｒｓｔｉ、Ｈｏｐｌｏｌａｉｍｕｓ  ｕｎｉｆｏｒｍｉｓ、Ｈｕａｎｇｌｏｎｇｂｉｎｇ、Ｈｙａｌｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ、Ｈｙａｌｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｄｉｓ、Ｈｙａｌｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｂｒａｓｓｉｃａｅ、Ｈｙａｌｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｐａｒａｓｉｔｉｃａ、Ｈｙｍｅｎｕｌａ  ａｆｆｉｎｉｓ、Ｈｙｐｈｏｄｅｒｍｅｌｌａ  ｃｏｒｒｕｇａｔａ、Ｈｙｐｈｏｄｏｎｔｉａ  ａｓｐｅｒａ、Ｈｙｐｈｏｄｏｎｔｉａ  ｓａｍｂｕｃｉ、Ｈｙｐｏｃｈｎｕｓ、Ｈｙｐｏｘｙｌｏｎ  ｔｉｎｃｔｏｒ、Ｉｄｒｉｅｌｌａ  ｌｕｎａｔａ、Ｉｎｏｎｏｔｕｓ  ａｒｉｚｏｎｉｃｕｓ、Ｉｎｏｎｏｔｕｓ  ｃｕｔｉｃｕｌａｒｉｓ、Ｉｎｏｎｏｔｕｓ  ｄｒｙｏｐｈｉｌｕｓ、Ｉｎｏｎｏｔｕｓ  ｈｉｓｐｉｄｕｓ、Ｉｎｏｎｏｔｕｓ  ｌｕｄｏｖｉｃｉａｎｕｓ、Ｉｎｏｎｏｔｕｓ  ｍｕｎｚｉｉ、Ｉｎｏｎｏｔｕｓ  ｔａｍａｒｉｃｉｓ、Ｉｒｅｎｏｐｓｉｓ、Ｉｒｐｅｘ  ｄｅｓｔｒｕｅｎｓ、Ｉｒｐｅｘ  ｌａｃｔｅｕｓ、Ｉｓａｒｉｏｐｓｉｓ  ｃｌａｖｉｓｐｏｒａ、Ｊｏｈｎｃｏｕｃｈｉａ  ｍａｎｇｉｆｅｒａｅ、Ｋａｂａｔｉｅｌｌａ  ｃａｕｌｉｖｏｒａ、Ｋａｂａｔｉｅｌｌａ  ｌｉｎｉ、Ｋａｒｎａｌ  ｂｕｎｔ、Ｋｈｕｓｋｉａ  ｏｒｙｚａｅ、Ｋｒｅｔｚｓｃｈｍａｒｉａ  ｄｅｕｓｔａ、Ｋｒｅｔｚｓｃｈｍａｒｉａ  ｚｏｎａｔａ、Ｋｕｅｈｎｅｏｌａ  ｕｒｅｄｉｎｉｓ、Ｋｕｔｉｌａｋｅｓａ  ｐｉｒｏｎｉｉ、Ｌａｂｒｅｌｌａ  ｃｏｒｙｌｉ、Ｌａｅｔｉｃｏｒｔｉｃｉｕｍ  ｒｏｓｅｕｍ、Ｌａｅｔｉｐｏｒｕｓ  ｂａｕｄｏｎｉｉ、Ｌａｇｅｎｏｃｙｓｔｉｓ  ｒａｄｉｃｉｃｏｌａ、Ｌａｒｉｃｉｆｏｍｅｓ  ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ、Ｌａｓｉｏｄｉｐｌｏｄｉａ  ｔｈｅｏｂｒｏｍａｅ、Ｌｅａｎｄｒｉａ  ｍｏｍｏｒｄｉｃａｅ、Ｌｅｉｆｓｏｎｉａ  ｘｙｌｉ  ｘｙｌｉ、Ｌｅｎｔｉｎｕｓ  ｔｉｇｒｉｎｕｓ、Ｌｅｎｚｉｔｅｓ  ｂｅｔｕｌｉｎａ、Ｌｅｎｚｉｔｅｓ  ｅｌｅｇａｎｓ、Ｌｅｐｔｅｕｔｙｐａ  ｃｕｐｒｅｓｓｉ、Ｌｅｐｔｏｄｏｎｔｉｄｉｕｍ  ｅｌａｔｉｕｓ  ｖａｒ．  ｅｌａｔｉｕｓ、Ｌｅｐｔｏｇｒａｐｈｉｕｍ  ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ、Ｌｅｐｔｏｓｐｈａｅｒｉａ  ａｃｕｔａ、Ｌｅｐｔｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｃａｎｎａｂｉｎａ、Ｌｅｐｔｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｃｏｎｉｏｔｈｙｒｉｕｍ、Ｌｅｐｔｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｌｉｂａｎｏｔｉｓ、Ｌｅｐｔｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｌｉｎｄｑｕｉｓｔｉｉ、Ｌｅｐｔｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｍａｃｕｌａｎｓ、Ｌｅｐｔｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｍｕｓａｒｕｍ、Ｌｅｐｔｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｐｒａ��ｅｎｓｉｓ、Ｌｅｐｔｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｓａｃｃｈａｒｉ、Ｌｅｐｔｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｗｏｒｏｎｉｎｉｉ、Ｌｅｐｔｏｓｐｈａｅｒｕｌｉｎａ  ｃｒａｓｓｉａｓｃａ、Ｌｅｐｔｏｓｐｈａｅｒｕｌｉｎａ  ｔｒｉｆｏｌｉｉ、Ｌｅｐｔｏｔｈｙｒｉｕｍ  ｎｅｒｖｉｓｅｄｕｍ、Ｌｅｐｔｏｔｒｏｃｈｉｌａ  ｍｅｄｉｃａｇｉｎｉｓ、Ｌｅｕｃｏｃｙｔｏｓｐｏｒａ  ｌｅｕｃｏｓｔｏｍａ、Ｌｅｕｃｏｓｔｏｍａ  ａｕｅｒｓｗａｌｄｉｉ、Ｌｅｕｃｏｓｔｏｍａ  ｋｕｎｚｅｉ、Ｌｅｕｃｏｓｔｏｍａ  ｐｅｒｓｏｏｎｉｉ、Ｌｅｖｅｉｌｌｕｌａ  ｃｏｍｐｏｓｉｔａｒｕｍ  ｆ．  ｈｅｌｉａｎｔｈｉ、Ｌｅｖｅｉｌｌｕｌａ  ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｒｕｍ  ｆ．  ｌｅｎｔｉｓ、Ｌｅｖｅｉｌｌｕｌａ  ｔａｕｒｉｃａ、Ｌｉｇｎｉｅｒａ  ｐｉｌｏｒｕｍ、Ｌｉｍａｃｉｎｕｌａ  ｔｅｎｕｉｓ、Ｌｉｎｏｃｈｏｒａ  ｇｒａｍｉｎｉｓ、Ｌｏｎｇｉｄｏｒｕｓ  ａｆｒｉｃａｎｕｓ、Ｌｏｎｇｉｄｏｒｕｓ  ｍａｘｉｍｕｓ、Ｌｏｎｇｉｄｏｒｕｓ  ｓｙｌｐｈｕｓ、Ｌｏｐｈａｒｉａ  ｃｒａｓｓａ、Ｌｏｐｈｏｄｅｒｍｉｕｍ、Ｌｏｐｈｏｄｅｒｍｉｕｍ  ａｕｃｕｐａｒｉａｅ、Ｌｏｐｈｏｄｅｒｍｉｕｍ  ｓｃｈｗｅｉｎｉｔｚｉｉ、Ｌｏｐｈｏｄｅｒｍｉｕｍ  ｓｅｄｉｔｉｏｓｕｍ、Ｍａｃｒｏｐｈｏｍａ  ｍａｎｇｉｆｅｒａｅ、Ｍａｃｒｏｐｈｏｍａ  ｔｈｅｉｃｏｌａ、Ｍａｃｒｏｐｈｏｍｉｎａ  ｐｈａｓｅｏｌｉｎａ、Ｍａｃｒｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｃｏｃｏｓ、Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ、Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ  ｇｒｉｓｅａ、Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ  ｓａｌｖｉｎｉｉ、Ｍａｍｉａｎｉｅｌｌａ  ｃｏｒｙｌｉ、Ｍａｒａｓｍｉｅｌｌｕｓ  ｃｏｃｏｐｈｉｌｕｓ、Ｍａｒａｓｍｉｅｌｌｕｓ  ｉｎｏｄｅｒｍａ、Ｍａｒａｓｍｉｅｌｌｕｓ  ｓｃａｎｄｅｎｓ、Ｍａｒａｓｍｉｅｌｌｕｓ  ｓｔｅｎｏｐｈｙｌｌｕｓ、Ｍａｒａｓｍｉｕｓ  ｃｒｉｎｉｓ−ｅｑｕｉ、Ｍａｒａｓｍｉｕｓ  ｓａｃｃｈａｒｉ、Ｍａｒａｓｍｉｕｓ  ｓｅｍｉｕｓｔｕｓ、Ｍａｒａｓｍｉｕｓ  ｓｔｅｎｏｐｈｙｌｌｕｓ、Ｍａｒａｓｍｉｕｓ  ｔｅｎｕｉｓｓｉｍｕｓ、Ｍａｓｓａｒｉｎａ  ｗａｌｋｅｒｉ、Ｍａｕｇｉｎｉｅｌｌａ  ｓｃａｅｔｔａｅ、Ｍｅｌａｍｐｓｏｒａ、Ｍｅｌａｍｐｓｏｒａ  ｌｉｎｉ  ｖａｒ．  ｌｉｎｉ、Ｍｅｌａｍｐｓｏｒａ  ｍｅｄｕｓａｅ、Ｍｅｌａｍｐｓｏｒａ  ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ、Ｍｅｌａｎｃｏｎｉｓ  ｃａｒｔｈｕｓｉａｎａ、Ｍｅｌａｎｃｏｎｉｕｍ  ｊｕｇｌａｎｄｉｎｕｍ、Ｍｅｌｉｏｌａ、Ｍｅｌｉｏｌａ  ｍａｎｇｉｆｅｒａｅ、Ｍｅｌｉｏｌａｃｅａｅ、Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ａｃｒｏｎｅａ、Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ａｒｅｎａｒｉａ、Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ａｒｔｉｅｌｌｉａ、Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ｂｒｅｖｉｃａｕｄａ、Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ｃｈｉｔｗｏｏｄｉ、Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ｅｎｔｅｒｏｌｏｂｉｉ、Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ｆｒｕｇｌｉａ、Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ｇａｊｕｓｃｕｓ、Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ｉｎｃｏｇｎｉｔａ、Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ｊａｖａｎｉｃａ、Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ｎａａｓｉ、Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ｐａｒｔｉｔｙｌａ、Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ｔｈａｍｅ��ｉ、Ｍｅｒｉｐｉｌｕｓ  ｇｉｇａｎｔｅｕｓ、Ｍｅｒｌｉｎｉｕｓ  ｂｒｅｖｉｄｅｎｓ、Ｍｅｒｕｌｉｏｐｓｉｓ  ａｍｂｉｇｕａ、Ｍｅｓｏｃｒｉｃｏｎｅｍａ  ｘｅｎｏｐｌａｘ、Ｍｉｃｒｏａｓｃｕｓ  ｂｒｅｖｉｃａｕｌｉｓ、Ｍｉｃｒｏｂｏｔｒｙｕｍ  ｖｉｏｌａｃｅｕｍ、Ｍｉｃｒｏｄｏｃｈｉｕｍ  ｂｏｌｌｅｙｉ、Ｍｉｃｒｏｄｏｃｈｉｕｍ  ｄｉｍｅｒｕｍ、Ｍｉｃｒｏｄｏｃｈｉｕｍ  ｐａｎａｔｔｏｎｉａｎｕｍ、Ｍｉｃｒｏｄｏｃｈｉｕｍ  ｐｈｒａｇｍｉｔｉｓ、Ｍｉｃｒｏｓｐｈａｅｒａ、Ｍｉｃｒｏｓｐｈａｅｒａ  ｃｏｒｙｌｉ、Ｍｉｃｒｏｓｐｈａｅｒａ  ｄｉｆｆｕｓａ、Ｍｉｃｒｏｓｐｈａｅｒａ  ｅｌｌｉｓｉｉ、Ｍｉｃｒｏｓｐｈａｅｒａ  ｅｕｐｈｏｒｂｉａｅ、Ｍｉｃｒｏｓｐｈａｅｒａ  ｈｏｍｍａｅ、Ｍｉｃｒｏｓｐｈａｅｒａ  ｐｅｎｉｃｉｌｌａｔａ、Ｍｉｃｒｏｓｐｈａｅｒａ  ｐｅｎｉｃｉｌｌａｔａ  ｖａｒ．  ｖａｃｃｉｎｉｉ、Ｍｉｃｒｏｓｐｈａｅｒａ  ｖａｃｃｉｎｉｉ、Ｍｉｃｒｏｓｐｈａｅｒａ  ｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓａ、Ｍｉｃｒｏｓｔｒｏｍａ  ｊｕｇｌａｎｄｉｓ、Ｍｏｅｓｚｉｏｍｙｃｅｓ  ｂｕｌｌａｔｕｓ、Ｍｏｎｉｌｉｎｉａ  ａｚａｌｅａｅ、Ｍｏｎｉｌｉｎｉａ  ｆｒｕｃｔｉｃｏｌａ、Ｍｏｎｉｌｉｎｉａ  ｆｒｕｃｔｉｇｅｎａ、Ｍｏｎｉｌｉｎｉａ  ｌａｘａ、Ｍｏｎｉｌｉｎｉａ  ｍａｌｉ、Ｍｏｎｉｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ  ｐｅｒｎｉｃｉｏｓａ、Ｍｏｎｉｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ  ｒｏｒｅｒｉ、Ｍｏｎｉｌｏｃｈａｅｔｅｓ  ｉｎｆｕｓｃａｎｓ、Ｍｏｎｏｃｈａｅｔｉａ  ｃｏｒｙｌｉ、Ｍｏｎｏｃｈａｅｔｉａ  ｍａｌｉ、Ｍｏｎｏｇｒａｐｈｅｌｌａ  ａｌｂｅｓｃｅｎｓ、Ｍｏｎｏｇｒａｐｈｅｌｌａ  ｃｕｃｕｍｅｒｉｎａ、Ｍｏｎｏｇｒａｐｈｅｌｌａ  ｎｉｖａｌｉｓ  ｖａｒ．  ｎｅｇｌｅｃｔａ、Ｍｏｎｏｇｒａｐｈｅｌｌａ  ｎｉｖａｌｉｓ  ｖａｒ．  ｎｉｖａｌｉｓ、Ｍｏｎｏｎｅｇａｖｉｒａｌｅｓ、Ｍｏｎｏｓｐｏｒａｓｃｕｓ  ｃａｎｎｏｎｂａｌｌｕｓ、Ｍｏｎｏｓｐｏｒａｓｃｕｓ  ｅｕｔｙｐｏｉｄｅｓ、Ｍｏｎｏｓｔｉｃｈｅｌｌａ  ｃｏｒｙｌｉ、Ｍｕｃｏｒ  ｃｉｒｃｉｎｅｌｌｏｉｄｅｓ、Ｍｕｃｏｒ  ｈｉｅｍａｌｉｓ、Ｍｕｃｏｒ  ｈｉｅｍａｌｉｓ  ｆ．  ｓｉｌｖａｔｉｃｕｓ、Ｍｕｃｏｒ  ｍｕｃｅｄｏ、Ｍｕｃｏｒ  ｐａｒｏｎｙｃｈｉｕｓ、Ｍｕｃｏｒ  ｐｉｒｉｆｏｒｍｉｓ、Ｍｕｃｏｒ  ｒａｃｅｍｏｓｕｓ、Ｍｙｃｅｎａ  ｃｉｔｒｉｃｏｌｏｒ、Ｍｙｃｅｎａ  ｍａｃｕｌａｔｅ、Ｍｙｃｏｃｅｎｔｒｏｓｐｏｒａ  ａｃｅｒｉｎａ、Ｍｙｃｏｌｅｐｔｏｄｉｓｃｕｓ  ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ａｎｇｕｌａｔａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ａｒａｃｈｉｄｉｓ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ａｒｅｏｌａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｂｅｒｋｅｌｅｙｉ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｂｏｌｌｅａｎａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｂｒａｓｓｉｃｉｃｏｌａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｃａｒｉｃａｅ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｃａｒｙｉｇｅｎａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｃｅｒａｓｅｌｌａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｃｉｔｒｉ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｃｏｆｆｅｉｃｏｌａ、���ｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｃｏｎｆｕｓａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｃｒｕｅｎｔａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｄｅｎｄｒｏｉｄｅｓ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｅｕｍｕｓａｅ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｆｒａｇａｒｉａｅ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｇｏｓｓｙｐｉｎａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｇｒａｍｉｎｉｃｏｌａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｈｅｎｎｉｎｇｓｉｉ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｈｏｒｉｉ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｊｕｇｌａｎｄｉｓ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｌａｇｅｎｉｆｏｒｍｉｓ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｌｉｎｉｃｏｌａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｌｏｕｉｓｉａｎａｅ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｍｕｓａｅ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｍｕｓｉｃｏｌａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｐａｌｍｉｃｏｌａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｐｉｎｏｄｅｓ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｐｉｓｔａｃｉａｒｕｍ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｐｉｓｔａｃｉｎａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｐｌａｔａｎｉｆｏｌｉａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｐｏｍｉ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｐｕｎｃｔｉｆｏｒｍｉｓ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｐｙｒｉ、Ｄｉｄｙｍｅｌｌａ  ｒａｂｉｅｉ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｒｅｃｕｔｉｔａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｒｏｓｉｃｏｌａ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｒｕｂｉ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｓｔｉｇｍｉｎａ−ｐｌａｔａｎｉ、Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｓｔｒｉａｔｉｆｏｒｍａｎｓ、Ｍｙｃｏｖｅｌｌｏｓｉｅｌｌａ  ｃｏｎｃｏｒｓ、Ｍｙｃｏｖｅｌｌｏｓｉｅｌｌａ  ｆｕｌｖａ、Ｍｙｃｏｖｅｌｌｏｓｉｅｌｌａ  ｋｏｅｐｋｅｉ、Ｍｙｃｏｖｅｌｌｏｓｉｅｌｌａ  ｖａｇｉｎａｅ、Ｍｙｒｉｏｇｅｎｏｓｐｏｒａ  ａｃｉｃｕｌｉｓｐｏｒａ、Ｍｙｒｏｔｈｅｃｉｕｍ  ｒｏｒｉｄｕｍ、Ｍｙｒｏｔｈｅｃｉｕｍ  ｖｅｒｒｕｃａｒｉａ、Ｎａｃｏｂｂｕｓ  ａｂｅｒｒａｎｓ、Ｎａｃｏｂｂｕｓ  ｄｏｒｓａｌｉｓ、Ｎａｅｖａｌａ  ｐｅｒｅｘｉｇｕａ、Ｎａｏｈ
ｉｄｅｍｙｃｅｓ  ｖａｃｃｉｎｉｉ、Ｎｅｃｔｒｉａ、Ｎｅｃｔｒｉａ  ｃｉｎｎａｂａｒｉｎａ、Ｎｅｃｔｒｉａ  ｃｏｃｃｉｎｅａ、Ｎｅｃｔｒｉａ  ｄｉｔｉｓｓｉｍａ、ｅｃｔｒｉａ  ｆｏｌｉｉｃｏｌａ、Ｎｅｃｔｒｉａ  ｍａｍｍｏｉｄｅａ  ｖａｒ．  ｒｕｂｉ、Ｎｅｃｔｒｉａ  ｍａｕｒｉｔｉｉｃｏｌａ、Ｎｅｃｔｒｉａ  ｐｅｚｉｚａ、Ｎｅｃｔｒｉａ  ｐｓｅｕｄｏｔｒｉｃｈｉａ、Ｎｅｃｔｒｉａ  ｒａｄｉｃｉｃｏｌａ、Ｎｅｃｔｒｉａ  ｒａｍｕｌａｒｉａｅ、Ｎｅｃｔｒｉｅｌｌａ  ｐｉｒｏｎｉｉ、Ｎｅｍａｎｉａ  ｄｉｆｆｕｓａ、Ｎｅｍａｎｉａ  ｓｅｒｐｅｎｓ  ｖａｒ．  ｓｅｒｐｅｎｓ、Ｎｅｍａｔｏｓｐｏｒａ  ｃｏｒｙｌｉ、Ｎｅｏｃｏｓｍｏｓｐｏｒａ  ｖａｓｉｎｆｅｃｔａ、Ｎｅｏｄｅｉｇｈｔｏｎｉａ  ｐｈｏｅｎｉｃｕｍ、Ｎｅｏｅｒｙｓｉｐｈｅ、Ｎｅｏｆａｂｒａｅａ  ｍａｌｉｃｏｒｔｉｃｉｓ、Ｎｅｏｆａｂｒａｅａ  ｐｅｒｅｎｎａｎｓ、Ｎｅｏｆｕｓｉｃｏｃｃｕｍ  ｍａｎｇｉｆｅｒａｅ、Ｎｅｏｎｅｃｔｒｉａ  ｇａｌｌｉｇｅｎａ、Ｏｉｄｉｏｐｓｉｓ  ｇｏｓｓｙｐｉｉ、Ｏｉｄｉｕｍ（属）、Ｏｉｄｉｕｍ  ａｒａｃｈｉｄｉｓ、Ｏｉｄｉｕｍ  ｃａｒｉｃａｅ−ｐａｐａｙａｅ、Ｏｉｄｉｕｍ  ｉｎｄｉｃｕｍ、Ｏｉｄｉｕｍ  ｍａｎｇｉｆｅｒａｅ、Ｏｉｄｉｕｍ  ｍａｎｉｈｏｔｉｓ、Ｏｉｄｉｕｍ  ｔｉｎｇｉｔａｎｉｎｕｍ、Ｏｌｐｉｄｉｕｍ  ｂｒａｓｓｉｃａｅ、Ｏｍｐｈａｌｉａ  ｔｒａｌｕｃｉｄａ、Ｏｎｃｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｔｈｅｏｂｒｏｍａｅ、Ｏｎｎｉａ  ｔｏｍｅｎｔｏｓａ、Ｏｐｈｉｏｂｏｌｕｓ  ａｎｇｕｉｌｌｉｄｅｓ、Ｏｐｈｉｏｂｏｌｕｓ  ｃａｎｎａｂｉｎｕｓ、Ｏｐｈｉｏｉｒｅｎｉｎａ、Ｏｐｈｉｏｓｔｏｍａ  ｕｌｍｉ、Ｏｐｈｉｏｓｔｏｍａ  ｗａｇｅｎｅｒｉ、Ｏｖｕｌａｒｉｏｐｓｉｓ  ｐａｐａｙａｅ、Ｏｖｕｌｉｎｉａ  ａｚａｌｅａｅ、Ｏｖｕｌｉｔｉｓ  ａｚａｌｅａｅ、Ｏｘｙｐｏｒｕｓ  ｃｏｒｔｉｃｏｌａ、Ｏｘｙｐｏｒｕｓ  ｌａｔｅｍａｒｇｉｎａｔｕｓ、Ｏｘｙｐｏｒｕｓ  ｐｏｐｕｌｉｎｕｓ、Ｏｘｙｐｏｒｕｓ  ｓｉｍｉｌｉｓ、Ｏｚｏｎｉｕｍ  ｔｅｘａｎｕｍ  ｖａｒ．  ｐａｒａｓｉｔｉｃｕｍ、Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓ  ｆｕｌｖｕｓ、Ｐａｒａｌｏｎｇｉｄｏｒｕｓ  ｍａｘｉｍｕｓ、Ｐａｒａｔｒｉｃｈｏｄｏｒｕｓ  ｃｈｒｉｓｔｉｅｉ、Ｐａｒａｔｒｉｃｈｏｄｏｒｕｓ  ｍｉｎｏｒ、Ｐａｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｃｕｒｖｉｔａｔｕｓ、Ｐａｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｅｌａｃｈｉｓｔｕｓ、Ｐａｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｈａｍａｔｕｓ、Ｐａｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｍａｃｒｏｐｈａｌｌｕｓ、Ｐａｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｍｉｃｒｏｄｏｒｕｓ、Ｐａｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｐｒｏｊｅｃｔｕｓ、Ｐａｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｔｅｎｕｉｃａｕｄａｔｕｓ、Ｐａｔｈｏｖａｒ、Ｐａｕａｈｉａ、Ｐｅａｃｈ  ｌａｔｅｎｔ  ｍｏｓａｉｃ  ｖｉｒｏｉｄ、Ｐｅｃｔｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｃａｒｏｔｏｖｏｒｕｍ、Ｐｅｌｔａｓｔｅｒ  ｆｒｕｃｔｉｃｏｌａ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ａｕｒａｎｔｉｏｇｒｉｓｅｕｍ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｄｉｇｉｔａｔｕｍ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｅｘｐａｎｓｕｍ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｆｕｎｉｃｕｌｏｓｕｍ���Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｇｌａｂｒｕｍ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｉｔａｌｉｃｕｍ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｐｕｒｐｕｒｏｇｅｎｕｍ、Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｕｌａｉｅｎｓｅ、Ｐｅｎｉｏｐｈｏｒａ、Ｐｅｎｉｏｐｈｏｒａ  ａｌｂｏｂａｄｉａ、Ｐｅｎｉｏｐｈｏｒａ  ｃｉｎｅｒｅａ、Ｐｅｎｉｏｐｈｏｒａ  ｑｕｅｒｃｉｎａ、Ｐｅｎｉｏｐｈｏｒａ  ｓａｃｒａｔａ、Ｐｅｒｅｎｎｉｐｏｒｉａ  ｆｒａｘｉｎｅａ、Ｐｅｒｅｎｎｉｐｏｒｉａ  ｆｒａｘｉｎｏｐｈｉｌａ、Ｐｅｒｅｎｎｉｐｏｒｉａ  ｍｅｄｕｌｌａ−ｐａｎｉｓ、Ｐｅｒｅｎｎｉｐｏｒｉａ  ｓｕｂａｃｉｄａ、Ｐｅｒｉｃｏｎｉａ  ｃｉｒｃｉｎａｔａ、Ｐｅｒｉｃｏｎｉｅｌｌａ  ｃｏｃｏｅｓ、Ｐｅｒｉｄｅｒｍｉｕｍ  ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃｕｍ、Ｐｅｒｏｎｏｓｃｌｅｒｏｓｐｏｒａ  ｍｉｓｃａｎｔｈｉ、Ｐｅｒｏｎｏｓｃｌｅｒｏｓｐｏｒａ  ｓａｃｃｈａｒｉ、Ｐｅｒｏｎｏｓｃｌｅｒｏｓｐｏｒａ  ｓｏｒｇｈｉ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ａｎｅｍｏｎｅｓ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ａｎｔｉｒｒｈｉｎｉ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｃｏｎｇｌｏｍｅｒａｔａ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｄｅｓｔｒｕｃｔｏｒ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｄｉａｎｔｈｉ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｄｉａｎｔｈｉｃｏｌａ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｆａｒｉｎｏｓａ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｆａｒｉｎｏｓａ  ｆ．ｓｐ．  ｂｅｔａｅ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｈｙｏｓｃｙａｍｉ  ｆ．ｓｐ．  ｔａｂａｃｉｎａ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｍａｎｓｈｕｒｉｃａ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｐｏｔｅｎｔｉｌｌａｅ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｓｐａｒｓａ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｔｒｉｆｏｌｉｏｒｕｍ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｖａｌｅｒｉａｎｅｌｌａｅ、Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｖｉｃｉａｅ、Ｐｅｓｔａｌｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｃｏｎｃｅｎｔｒｉｃａ、Ｐｅｓｔａｌｏｔｉａ  ｌｏｎｇｉｓｅｔａ、Ｐｅｓｔａｌｏｔｉａ  ｌｏｎｇｉｓｅｔｕｌａ、Ｐｅｓｔａｌｏｔｉａ  ｒｈｏｄｏｄｅｎｄｒｉ、Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓ、Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓ  ａｄｕｓｔａ、Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓ  ａｒａｃｈｉｄｉｓ、Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓ  ｄｉｓｓｅｍｉｎａｔａ、Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓ  ｇｕｅｐｉｎｉ、Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓ  ｌｅｐｒｏｇｅｎａ、Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓ  ｌｏｎｇｉｓｅｔａ、Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓ  ｍａｎｇｉｆｅｒａｅ、Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓ  ｐａｌｍａｒｕｍ、Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓ  ｓｙｄｏｗｉａｎａ、Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓ  ｔｈｅａｅ、Ｐｅｓｔａｌｏｔｉｏｐｓｉｓ  ｖｅｒｓｉｃｏｌｏｒ、Ｐｈａｃｉｄｉｏｐｙｃｎｉｓ  ｐａｄｗｉｃｋｉｉ、Ｐｈａｃｉｄｉｕｍ  ｉｎｆｅｓｔａｎｓ、Ｐｈａｅｏｃｈｏｒｏｐｓｉｓ  ｍｕｃｏｓａ、Ｐｈａｅｏｃｙｔｏｓｔｒｏｍａ  ｉｌｉａｕ、Ｐｈａｅｏｃｙｔｏｓｔｒｏｍａ  ｓａｃｃｈａｒｉ、Ｐｈａｅｏｉｓａｒｉｏｐｓｉｓ  ｂａｔａｔｉｃｏｌａ、Ｐｈａｅｏｌｕｓ  ｓｃｈｗｅｉｎｉｔｚｉｉ、Ｐｈａｅｏｒａｍｕｌａｒｉａ  ａｎｇｏｌｅｎｓｉｓ��Ｐｈａｅｏｒａｍｕｌａｒｉａ  ｄｉｓｓｉｌｉｅｎｓ、Ｐｈａｅｏｒａｍｕｌａｒｉａ  ｈｅｔｅｒｏｓｐｏｒａ、Ｐｈａｅｏｒａｍｕｌａｒｉａ  ｍａｎｉｈｏｔｉｓ、Ｐｈａｅｏｓｅｐｔｏｒｉａ  ｍｕｓａｅ、Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｍａｎｇｉｆｅｒａｅ、Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｔｈｅａｅ、Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａ  ａｖｅｎａｒｉａ  ｆ．ｓｐ．  ａｖｅｎａｒｉａ、Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａ  ａｖｅｎａｒｉａ  ｆ．ｓｐ．  ｔｒｉｔｉｃａｅ、Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｈｅｒｐｏｔｒｉｃｈｏｉｄｅｓ、Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃａ、Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｎｏｄｏｒｕｍ、Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉｏｐｓｉｓ  ｏｂｔｕｓｉｓｐｏｒａ、Ｐｈａｅｏｔｒｉｃｈｏｃｏｎｉｓ  ｃｒｏｔａｌａｒｉａｅ、Ｐｈａｋｏｐｓｏｒａ  ｇｏｓｓｙｐｉｉ、Ｐｈａｋｏｐｓｏｒａ  ｐａｃｈｙｒｈｉｚｉ、Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ  ａｌｌａｎｔｏｓｐｏｒａ、Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ  ａｒｉｚｏｎｉｃａ、Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ  ａｖｅｌｌａｎｅａ、Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ  ｂｕｒｔｉｉ、Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ  ｃａｒｎｏｓａ、Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ  ｃｈｒｙｓｏｒｈｉｚｏｎ、Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ  ｒａｄｉｃａｔａ、Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ  ｓａｌｍｏｎｉｃｏｌｏｒ、Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ  ｔｕｂｅｒｃｕｌａｔａ、Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ  ｖｅｌｕｔｉｎａ、Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ  ｆｅｒｒｅｕｓ、Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ  ｇｉｌｖｕｓ、Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ  ｉｇｎｉａｒｉｕｓ、Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ  ｐｉｎｉ、Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ  ｐｏｍａｃｅｕｓ、Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓ  ｗｅｉｒｉｉ、Ｐｈｉａｌｏｐｈｏｒａ  ａｓｔｅｒｉｓ、Ｐｈｉａｌｏｐｈｏｒａ  ｃｉｎｅｒｅｓｃｅｎｓ、Ｐｈｉａｌｏｐｈｏｒａ  ｇｒｅｇａｔａ、Ｐｈｉａｌｏｐｈｏｒａ  ｔｒａｃｈｅｉｐｈｉｌａ、Ｐｈｌｏｅｏｓｐｏｒａ  ｍｕｌｔｉｍａｃｕｌａｎｓ、Ｐｈｏｌｉｏｔａ  ｖａｒｉｉｃｙｓｔｉｓ、Ｐｈｏｍａ、Ｐｈｏｍａ  ｃａｒｉｃａｅ−ｐａｐａｙａｅ、Ｐｈｏｍａ  ｃｌｅｍａｔｉｄｉｎａ、Ｐｈｏｍａ  ｃｏｓｔａｒｉｃｅｎｓｉｓ、Ｐｈｏｍａ  ｃｕｃｕｒｂｉｔａｃｅａｒｕｍ、Ｐｈｏｍａ  ｄｅｓｔｒｕｃｔｉｖａ、Ｐｈｏｍａ  ｄｒａｃｏｎｉｓ、Ｐｈｏｍａ  ｅｕｐｙｒｅｎａ、Ｐｈｏｍａ  ｅｘｉｇｕａ、Ｐｈｏｍａ  ｅｘｉｇｕａ  ｖａｒ．  ｅｘｉｇｕａ、Ｐｈｏｍａ  ｅｘｉｇｕａ  ｖａｒ．  ｆｏｖｅａｔａ、Ｐｈｏｍａ  ｅｘｉｇｕａ  ｖａｒ．  ｌｉｎｉｃｏｌａ、Ｐｈｏｍａ  ｇｌｏｍｅｒａｔａ、Ｐｈｏｍａ  ｇｌｙｃｉｎｉｃｏｌａ、Ｐｈｏｍａ  ｈｅｒｂａｒｕｍ、Ｐｈｏｍａ  ｉｎｓｉｄｉｏｓａ、Ｐｈｏｍａ  ｍｅｄｉｃａｇｉｎｉｓ、Ｐｈｏｍａ  ｍｉｃｒｏｓｐｏｒａ、Ｐｈｏｍａ  ｎｅｂｕｌｏｓａ、Ｐｈｏｍａ  ｏｎｃｉｄｉｉ−ｓｐｈａｃｅｌａｔｉ、Ｐｈｏｍａ  ｐｉｎｏｄｅｌｌａ、Ｐｈｏｍａ  ｓｃａｂｒａ、Ｐｈｏｍａ  ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｉｄｅｓ、Ｐｈｏｍａ  ｓｔｒａｓｓｅｒｉ、Ｐｈｏｍａ  ｔｒａｃｈｅｉｐｈｉｌａ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ａｒｎｏｌｄｉａｅ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ａｓｐａｒａｇｉ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ���ｓｐａｒａｇｉｃｏｌａ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ａｚａｄｉｒａｃｈｔａｅ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ｃａｎｎａｂｉｎａ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ｃａｒｉｃａｅ−ｐａｐａｙａｅ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ｃｏｆｆｅａｅ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ｅｌａｅａｇｎｉ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ｇａｎｊａｅ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ｊａｖａｎｉｃａ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ｌｏｋｏｙａｅ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ｍａｎｇｉｆｅｒａｅ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ｏｂｓｃｕｒａｎｓ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ｐｅｒｓｅａｅ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ｐｒｕｎｏｒｕｍ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ｓｃａｂｒａ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｉｄｅｓ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ｔａｎａｋａｅ、Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ  ｔｈｅａｅ、Ｐｈｏｔｏａｓｓｉｍｉｌａｔｅ、Ｐｈｒａｇｍｉｄｉｕｍ、Ｐｈｒａｇｍｉｄｉｕｍ  ｍｕｃｒｏｎａｔｕｍ、Ｐｈｒａｇｍｉｄｉｕｍ  ｒｏｓａｅ−ｐｉｍｐｉｎｅｌｌｉｆｏｌｉａｅ、Ｐｈｒａｇｍｉｄｉｕｍ  ｒｕｂｉ−ｉｄａｅｉ、Ｐｈｒａｇｍｉｄｉｕｍ  ｖｉｏｌａｃｅｕｍ、Ｐｈｙｌｌａｃｈｏｒａ  ｃａｎｎａｂｉｓ、Ｐｈｙｌｌａｃｈｏｒａ  ｇｒａｍｉｎｉｓ  ｖａｒ．  ｇｒａｍｉｎｉｓ、Ｐｈｙｌｌａｃｈｏｒａ  ｇｒａｔｉｓｓｉｍａ、Ｐｈｙｌｌａｃｈｏｒａ  ｍｕｓｉｃｏｌａ、Ｐｈｙｌｌａｃｈｏｒａ  ｐｏｍｉｇｅｎａ、Ｐｈｙｌｌａｃｈｏｒａ  ｓａｃｃｈａｒｉ、Ｐｈｙｌｌａｃｔｉｎｉａ、Ｐｈｙｌｌａｃｔｉｎｉａ  ａｎｇｕｌａｔａ、Ｐｈｙｌｌａｃｔｉｎｉａ  ｇｕｔｔａｔａ、Ｐｈｙｌｌｏｄｙ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ａｌｌｉａｒｉａｅｆｏｌｉａｅ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ａｎａｃａｒｄｉａｃｅａｒｕｍ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ａｒａｃｈｉｄｉｓ−ｈｙｐｏｇａｅａｅ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｂａｔａｔａｓ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｃａｐｉｔａｌｅｎｓｉｓ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｃａｒｉｃａｅ−ｐａｐａｙａｅ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｃａｒｐｏｇｅｎａ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｃｉｒｃｕｍｓｃｉｓｓａ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｃｏｆｆｅｉｃｏｌａ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｃｏｎｃｅｎｔｒｉｃａ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｃｏ
ｒｙｌｉ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｃｕｃｕｒｂｉｔａｃｅａｒｕｍ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｃｙｃｌａｍｉｎｅｌｌａ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｅｒｒａｔｉｃａ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｈａｗａｉｉｅｎｓｉｓ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｌｅｎｔｉｓｃｉ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｍａｎｉｈｏｔｉｓ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｍｉｃｒｏｐｕｎｃｔａ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｍｏｒｔｏｎｉｉ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｐａｌｍｅｔｔｏ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｐｅｎｉｃｉｌｌａｒｉａｅ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｐｅｒｓｅａｅ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｐｌａｔａｎｉ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｐｓｅｕｄｏｃａｐｓｉｃｉ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｓｏｊａｅｃｏｌａ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｓｏｌｉｔａｒｉａ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｔｈｅａｅ、Ｐｈｙｌｌｏｓｔｉｃｔａ  ｔｈｅｉｃｏｌａ、Ｐｈｙｍａｔｏｔｒｉｃｈｏｐｓｉｓ  ｏｍｎｉｖｏｒａ、Ｐｈｙｓａｌｏｓｐｏｒａ  ａｂｄｉｔａ、Ｐｈｙｓａｌｏｓｐｏｒａ  ｄｉｓｒｕｐｔａ、Ｐｈｙｓａｌｏｓｐｏｒａ  ｐｅｒｓｅａｅ、Ｐｈｙｓａｒｕｍ  ｃｉｎｅｒｅｕｍ、Ｐｈｙｓｏｄｅｒｍａ  ａｌｆａｌｆａｅ、Ｐｈｙｓｏｄｅｒｍａ  ｌｅｐｒｏｉｄｅｓ、Ｐｈｙｓｏｄｅｒｍａ  ｔｒｉｆｏｌｉｉ、Ｐｈｙｓｏｐｅｌｌａ  ａｍｐｅｌｏｐｓｉｄｉｓ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ａｌｎｉ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｂｏｅｈｍｅｒｉａｅ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｃａｃｔｏｒｕｍ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｃａｊａｎｉ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｃａｍｂｉｖｏｒａ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｃａｐｓｉｃｉ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｃｉｎｎａｍｏｍｉ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｃｉｔｒｉｃｏｌａ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｃｉｔｒｏｐｈｔｈｏｒａ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｃｒｙｐｔｏｇｅａ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｄｒｅｃｈｓｌｅｒｉ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｅｒｙｔｈｒｏｓｅｐｔｉｃａ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｆｒａｇａｒｉａｅ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｆｒａｇａｒｉａｅ  ｖａｒ．  ｒｕｂｉ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｇａｌｌｉｃａ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｈｉｂｅｒｎａｌｉｓ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｉｎｆｅｓｔａｎｓ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｉｎｆｌａｔａ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｉｒａｎｉｃａ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｋａｔｓｕｒａｅ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｋｅｒｎｏｖｉａｅ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｌａｔｅｒａｌｉｓ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｍｅｄｉｃａｇｉｎｉｓ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｍｅｇａｋａｒｙａ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｍｅｇａｓｐｅｒｍａ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｎｉｃｏｔｉａｎａｅ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｐａｌｍｉｖｏｒａ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｐｈａｓｅｏｌｉ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｐｌｕｒｉｖｏｒａ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｒａｍｏｒｕｍ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｓｏｊａｅ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｓｙｒｉｎｇａｅ、Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ  ｔｅｎ��ａｃｕｌａｔａ、Ｐｈｙｔｏｐｌａｓｍａ、Ｐｉｃｈｉａ  ｍｅｍｂｒａｎｉｆａｃｉｅｎｓ、Ｐｉｃｈｉａ  ｓｕｂｐｅｌｌｉｃｕｌｏｓａ、Ｐｉｌｅｏｌａｒｉａ  ｔｅｒｅｂｉｎｔｈｉ、Ｐｉｌｉｄｉｅｌｌａ  ｑｕｅｒｃｉｃｏｌａ、Ｐｌａｓｍｏｄｉｏｐｈｏｒａ  ｂｒａｓｓｉｃａｅ、Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ、Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ  ｈａｌｓｔｅｄｉｉ、Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ  ｈｅｌｉａｎｔｈｉ  ｆ．  ｈｅｌｉａｎｔｈｉ、Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ  ｌａｃｔｕｃａｅ−ｒａｄｉｃｉｓ、Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ  ｎｉｖｅａ、Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ  ｏｂｄｕｃｅｎｓ、Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ  ｐｅｎｎｉｓｅｔｉ、Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ  ｐｙｇｍａｅａ、Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ  ｖｉｔｉｃｏｌａ、Ｐｌａｔｙｃｈｏｒａ  ｕｌｍｉ、Ｐｌｅｎｏｄｏｍｕｓ  ｄｅｓｔｒｕｅｎｓ、Ｐｌｅｎｏｄｏｍｕｓ  ｍｅｌｉｌｏｔｉ、Ｐｌｅｏｃｈａｅｔａ、Ｐｌｅｏｓｐｈａｅｒｕｌｉｎａ  ｓｏｊｉｃｏｌａ、Ｐｌｅｏｓｐｏｒａ  ａｌｆａｌｆａｅ、Ｐｌｅｏｓｐｏｒａ  ｂｅｔａｅ、Ｐｌｅｏｓｐｏｒａ  ｈｅｒｂａｒｕｍ、Ｐｌｅｏｓｐｏｒａ  ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ、Ｐｌｅｏｓｐｏｒａ  ｔａｒｄａ、Ｐｌｅｏｓｐｏｒａ  ｔｈｅａｅ、Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ  ｄｒｙｉｎｕｓ、Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ、Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ  ｃｌａｎｄｅｓｔｉｎａ  ｖａｒ．  ｃｌａｎｄｅｓｔｉｎｅ、Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ  ｆｕｓｃａ、Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ  ｌｅｕｃｏｔｒｉｃｈａ、Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ  ｍａｃｕｌａｒｉｓ、Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ  ｐａｎｎｏｓａ、Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ  ｔｒｉｄａｃｔｙｌａ、Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ  ｔｒｉｄａｃｔｙｌａ  ｖａｒ．  ｔｒｉｄａｃｔｙｌａ、Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ  ｘａｎｔｈｉｉ、Ｐｏｌｙｍｙｘａ  ｇｒａｍｉｎｉｓ、Ｐｏｌｙｓｃｙｔａｌｕｍ  ｐｕｓｔｕｌａｎｓ、Ｐｏｌｙｓｔｉｇｍａ  ｆｕｌｖｕｍ、Ｐｏｒｉａ  ｈｙｐｏｂｒｕｎｎｅａ、Ｐｏｓｔｉａ  ｔｅｐｈｒｏｌｅｕｃａ、Ｐｏｔａｔｏ  ｃｙｓｔ  ｎｅｍａｔｏｄｅ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ａｌｌｅｎｉ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｂｒａｃｈｙｕｒｕｓ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｃｏｆｆｅａｅ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｃｒｅｎａｔｕｓ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｄｕｌｓｃｕｓ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｆａｌｌａｘ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｆｌａｋｋｅｎｓｉｓ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｇｏｏｄｅｙｉ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｈｅｘｉｎｃｉｓｕｓ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｌｏｏｓｉ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｍｉｎｕｔｕｓ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｍｕｌｃｈａｎｄｉ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｍｕｓｉｃｏｌａ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｎｅｇｌｅｃｔｕｓ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｐｅｎｅｔｒａｎｓ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｐｒａｔｅｎｓｉｓ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｒｅｎｉｆｏｒｍｉａ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｓｃｒｉｂｎｅｒｉ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｔｈｏｒｎｅｉ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｖｕｌｎｕｓ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｚｅａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ、Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ａｒｅｃａｃｅａｒｕｍ、Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｃａｎｎａｂｉｎａ、Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｆｕｌｉｇｅｎａ、Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｇｕｎｎｅｒａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｋａｋｉ、Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｍａｌｉ、Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｐａｎｄｏｒｅａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｐｕｄｅｒｉ、Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｐｕｒｐｕｒｅａ、Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｒｈａｐｉｓｉｃｏｌａ、Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｓｕｂｓｅｓｓｉｌｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｔｈｅａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ  ｖｉｔｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｃｅｒｃｏｓｐｏｒｅｌｌａ  ｃａｐｓｅｌｌａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ  ｅｒａｇｒｏｓｔｉｄｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｅｐｉｃｏｃｃｕｍ  ｃｏｃｏｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｍｙｇｄａｌｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｓｐｌｅｎｉｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｖｅｌｌａｎａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｃａｒｉｃａｐａｐａｙａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｃｉｃｈｏｒｉｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｃｏｒｏｎａｆａｃｉｅｎｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｃｏｒｒｕｇａｔｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｆｉｃｕｓｅｒｅｃｔａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｆｕｓｃｏｖａｇｉｎａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｈｅｌｉａｎｔｈｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｍａｒｇｉｎａｌｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｍｅｌｉａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｏｒｙｚｉｈａｂｉｔａｎｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｐａｌｌｅｒｏｎｉａｎａ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｐａｐａｖｅｒｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓａｌｏｍｏｎｉｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓａｖａｓｔａｎｏｉ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｓｙｒｉｎｇａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｔｏｍａｔｏ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｔｒｅｍａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｔｕｒｂｉｎｅｌｌａｅ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ｖｉｒｉｄｉｆｌａｖａ、Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｃａｎｎａｂｉｎａ、Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｃｕｂｅｎｓｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ  ｈｕｍｕｌｉ、Ｐｓｅｕｄｏｐｅｚｉｃｕｌａ  ｔｅｔｒａｓｐｏｒａ、Ｐｓｅｕｄｏｐｅｚｉｃｕｌａ  ｔｒａｃｈｅｉｐｈｉｌａ、Ｐｓｅｕｄｏｐｅｚｉｚａ  ｊｏｎｅｓｉｉ、Ｐｓｅｕｄｏｐｅｚｉｚａ  ｍｅｄｉｃａｇｉｎｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｐｅｚｉｚａ  ｔｒｉｆｏｌｉｉ、Ｐｓｅｕｄｏｓｅｐｔｏｒｉａ  ｄｏｎａｃｉｓ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ａｎｇｕｓｔａｔａ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ａｒａｃｈｉｄｉｓ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ａｒｉｓｔｉｄａｅ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ａｓｐａｒａｇｉ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｃａｃａｂａｔａ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｃａｍｐａｎｕｌａｅ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｃａｒｔｈａｍｉ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｃｏｒｏｎａｔｅ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｃｏｒｏｎａｔａ  ｖａｒ．  ｈｏｒｄｅｉ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｄｉｏｉｃａｅ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｅｒｉａｎｔｈｉ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｅｘｔｅｎｓｉｃｏｌａ  ｖａｒ．  ｈｉｅｒａｃｉａｔａ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｈｅｌｉａｎｔｈｉ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｈｏｒｄｅｉ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｊａｃｅａｅ  ｖａｒ．  ｓｏｌｓｔｉｔｉａｌｉｓ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｋｕｅｈｎｉｉ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｍａｒｉａｅ−ｗｉｌｓｏｎｉａｅ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｍｅｌａｎｏｃｅｐｈａｌａ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｍｅｎｔｈａｅ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｐｅｌａｒｇｏｎｉｉ−ｚｏｎａｌｉｓ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｐｉｔｔｉｅｒｉａｎａ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｐｏａｒｕｍ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｐｓｉｄｉｉ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｐｕｒｐｕｒｅａ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｒｅｃｏｎｄｉｔａ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｓｃｈｅｄｏｎｎａｒｄｉｉ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｓｅｓｓｉｌｉｓ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｓｔｒｉｉｆｏｒｍｉｓ  ｆ．  ｓｐ．  ｈｏｒｄｅｉ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｓｔｒｉｉｆｏｒｍｉｓ  ｖａｒ．  ｓｔｒｉｉｆｏｒｍｉｓ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｓｕｂｎｉｔｅｎｓ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｓｕｂｓｔｒｉａｔａ  ｖａｒ．  ｉｎｄｉｃａ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｖｅｒｒｕｃａ、Ｐｕｃｃｉｎｉａ  ｘａｎｔｈｉｉ、Ｐｕｃｃｉｎｉａｃｅａｅ、Ｐｕｃｃｉｎｉａｓｔｒｕｍ、Ｐｕｃｃｉｎｉａｓｔｒｕｍ  ａｍｅｒｉｃａｎｕｍ、Ｐｕｃｃｉｎｉａｓｔｒｕｍ  ａｒｃｔｉｃｕｍ、Ｐｕｃｃｉｎｉａｓｔｒｕｍ  ｃｏｒｙｌｉ、Ｐｕｃｃｉｎｉａｓｔｒｕｍ  ｅｐｉｌｏｂｉｉ、Ｐｕｃｃｉｎｉａｓｔｒｕｍ  ｈｙｄｒａｎｇｅａｅ、Ｐｕｎｃｔｏｄｅｒａ  ｃｈａｌｃｏｅｎｓｉｓ、Ｐｙｃｎｏｐｏｒｕｓ  ｃｉｎｎａｂａｒｉｎｕｓ、Ｐｙｃｎｏｐｏｒｕｓ  ｓａｎｇｕｉｎｅｕｓ、Ｐｙｃｎｏｓｔｙｓａｎｕｓ  ａｚａｌｅａｅ、Ｐｙｒｅｎｏｃｈａｅｔａ  ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ、Ｐｙｒｅｎｏｃｈａｅｔａ  ｔｅｒｒｅｓｔｒｉｓ、Ｐｙｒｅｎｏｐｅｚｉｚａ  ｂｒａｓｓｉｃａｅ、Ｐｙｒｅｎｏｐｈｏｒａ、Ｐｙｒｅｎｏｐｈｏｒａ  ａｖｅｎａｅ、Ｐｙｒｅｎｏｐｈｏｒａ  ｃｈａｅｔｏｍｉｏｉｄｅｓ、Ｐｙｒｅｎｏｐｈｏｒａ  ｇｒａｍｉｎｅａ、Ｐｙｒｅｎｏｐｈｏｒａ  ｓｅｍｉｎｉｐｅｒｄａ、Ｐｙｒｅｎｏｐｈｏｒａ  ｔｅｒｅｓ、Ｐｙｒｅｎｏｐｈｏｒａ  ｔｅｒｅｓ  ｆ．  ｍａｃｕｌａｔａ、Ｐｙｒｅｎｏｐｈｏｒａ  ｔｅｒｅｓ  ｆ．  ｔｅｒｅｓ、Ｐｙｒｅ
ｎｏｐｈｏｒａ  ｔｒｉｔｉｃｉ−ｒｅｐｅｎｔｉｓ、Ｐｙｔｈｉａｃｅａｅ、Ｐｙｔｈｉａｌｅｓ、Ｐｙｔｈｉｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ａｃａｎｔｈｉｃｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ａｐｈａｎｉｄｅｒｍａｔｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ａｒｉｓｔｏｓｐｏｒｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ａｒｒｈｅｎｏｍａｎｅｓ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｂｕｉｓｍａｎｉａｅ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｄｅｂａｒｙａｎｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｄｅｌｉｅｎｓｅ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｄｉｓｓｏｔｏｃｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｇｒａｍｉｎｉｃｏｌａ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｈｅｔｅｒｏｔｈａｌｌｉｃｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｈｙｐｏｇｙｎｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｉｒｒｅｇｕｌａｒｅ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｉｗａｙａｍａｅ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｍａｓｔｏｐｈｏｒｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｍｉｄｄｌｅｔｏｎｉｉ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｍｙｒｉｏｔｙｌｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｏｋａｎｏｇａｎｅｎｓｅ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｐａｄｄｉｃｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｐａｒｏｅｃａｎｄｒｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｐｅｒｎｉｃｉｏｓｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｒｏｓｔｒａｔｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｓｃｌｅｒｏｔｅｉｃｈｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｓｐｉｎｏｓｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｓｐｌｅｎｄｅｎｓ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｓｕｌｃａｔｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｓｙｌｖａｔｉｃｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｔａｒｄｉｃｒｅｓｃｅｎｓ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｔｒａｃｈｅｉｐｈｉｌｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｕｌｔｉｍｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｕｌｔｉｍｕｍ  ｖａｒ．  ｕｌｔｉｍｕｍ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｖｅｘａｎｓ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｖｉｏｌａｅ、Ｐｙｔｈｉｕｍ  ｖｏｌｕｔｕｍ、Ｑｕｉｎｉｓｕｌｃｉｕｓ  ａｃｕｔｕｓ、Ｑｕｉｎｉｓｕｌｃｉｕｓ  ｃａｐｉｔａｔｕｓ、Ｒａｄｏｐｈｏｌｏｕｓ  ｓｉｍｉｌｉｓ、Ｒａｄｏｐｈｏｌｕｓ  ｓｉｍｉｌｉｓ、Ｒａｌｓｔｏｎｉａ  ｓｏｌａｎａｃｅａｒｕｍ、Ｒａｍｉｃｈｌｏｒｉｄｉｕｍ  ｍｕｓａｅ、Ｒａｍｕｌａｒｉａ、Ｒａｍｕｌａｒｉａ  ｂｅｔｉｃｏｌａ、Ｒａｍｕｌａｒｉａ  ｂｒｕｎｎｅａ、Ｒａｍｕｌａｒｉａ  ｃｏｒｙｌｉ、Ｒａｍｕｌａｒｉａ  ｃｙｃｌａｍｉｎｉｃｏｌａ、Ｒａｍｕｌａｒｉａ  ｍａｃｒｏｓｐｏｒａ、Ｒａｍｕｌａｒｉａ  ｍｅｎｔｈｉｃｏｌａ、Ｒａｍｕｌａｒｉａ  ｎｅｃａｔｏｒ、Ｒａｍｕｌａｒｉａ  ｐｒｉｍｕｌａｅ、Ｒａｍｕｌａｒｉａ  ｓｐｉｎａｃｉａｅ、Ｒａｍｕｌａｒｉａ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｒａｍｕｌａｒｉａ  ｔｅｎｅｌｌａ、Ｒａｍｕｌｉｓｐｏｒａ  ｓｏｒｇｈｉ、Ｒａｍｕｌｉｓｐｏｒａ  ｓｏｒｇｈｉｃｏｌａ、Ｒｅｓｉｎｉｃｉｕｍ  ｂｉｃｏｌｏｒ、Ｒｈａｂｄｏｃｌｉｎｅ  ｐｓｅｕｄｏｔｓｕｇａｅ、Ｒｈａｂｄｏｃｌｉｎｅ  ｗｅｉｒｉｉ  Ｒｈａｂｄｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｒｈｉｎｏｃｌａｄｉｕｍ  ｃｏｒｔｉｃｏｌａ、Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ、Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ  ｌｅｇｕｍｉｎｉｃｏｌａ、Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ  ｒｕｂｉ、Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ  ｓｏｌａｎｉ、Ｒｈｉｚｏｍｏｒｐｈａ  ｓｕｂｃｏｒｔｉｃａｌｉｓ、Ｒｈｉｚｏｐｈｙｄｉｕｍ  ｇｒａｍｉｎｉｓ、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ａｒｒｈｉｚｕｓ、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ｃｉｒｃｉｎａｎｓ、Ｒｈｉｚｏｐｕｓ  ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｓ  ｖａｒ．  ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｅｓ、Ｒｈｉｚｏｐ���ｓ  ｏｒｙｚａｅ、Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ  ｆａｓｃｉａｎｓ、Ｒｈｙｎｃｈｏｓｐｏｒｉｕｍ、Ｒｈｙｎｃｈｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｓｅｃａｌｉｓ、Ｒｈｙｔｉｄｈｙｓｔｅｒｏｎ  ｒｕｆｕｌｕｍ、Ｒｈｙｔｉｓｍａ  ａｃｅｒｉｎｕｍ、Ｒｈｙｔｉｓｍａ  ｖｉｔｉｓ、Ｒｉｇｉｄｏｐｏｒｕｓ  ｌｉｎｅａｔｕｓ、Ｒｉｇｉｄｏｐｏｒｕｓ  ｍｉｃｒｏｐｏｒｕｓ、Ｒｉｇｉｄｏｐｏｒｕｓ  ｕｌｍａｒｉｕｓ、Ｒｉｇｉｄｏｐｏｒｕｓ  ｖｉｎｃｔｕｓ、Ｒｏｓｅｌｌｉｎｉａ  ａｒｃｕａｔａ、Ｒｏｓｅｌｌｉｎｉａ  ｂｕｎｏｄｅｓ、Ｒｏｓｅｌｌｉｎｉａ  ｎｅｃａｔｒｉｘ、Ｒｏｓｅｌｌｉｎｉａ  ｐｅｐｏ、Ｒｏｓｅｌｌｉｎｉａ  ｓｕｂｉｃｕｌａｔａ、Ｒｏｔｙｌｅｎｃｈｕｌｕｓ、Ｒｏｔｙｌｅｎｃｈｕｌｕｓ  ｐａｒｖｕｓ、Ｒｏｔｙｌｅｎｃｈｕｌｕｓ  ｒｅｎｉｆｏｒｍｉｓ、Ｒｏｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｂｒａｃｈｙｕｒｕｓ、Ｒｏｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｒｏｂｕｓｔｕｓ、Ｓａｃｃｈａｒｉｃｏｌａ  ｔａｉｗａｎｅｎｓｉｓ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｆｌｏｒｅｎｔｉｎｕｓ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｋｌｕｙｖｅｒｉ、Ｓａｒｏｃｌａｄｉｕｍ  ｏｒｙｚａｅ、Ｓａｗａｄａｅａ、Ｓａｗａｄａｅａ  ｔｕｌａｓｎｅｉ、Ｓｃｈｉｆｆｎｅｒｕｌａ  ｃａｎｎａｂｉｓ、Ｓｃｈｉｚｏｐａｒｍｅ  ｓｔｒａｍｉｎｅａ、Ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌｕｍ  ｃｏｍｍｕｎｅ、Ｓｃｈｉｚｏｐｏｒａ  ｆｌａｖｉｐｏｒａ、Ｓｃｈｉｚｏｔｈｙｒｉｕｍ  ｐｏｍｉ、Ｓｃｌｅｒｏｄｅｒｒｉｓ  ｃａｎｋｅｒ、Ｓｃｌｅｒｏｐｈｔｈｏｒａ  ｍａｃｒｏｓｐｏｒａ、Ｓｃｌｅｒｏｐｈｔｈｏｒａ  ｒａｙｓｓｉａｅ、Ｓｃｌｅｒｏｓｐｏｒａ  ｇｒａｍｉｎｉｃｏｌａ、Ｓｃｌｅｒｏｓｐｏｒａ  ｍｉｓｃｈａｎｔｈｉ、Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ  ｂｏｒｅａｌｉｓ、Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ  ｍｉｎｏｒ、Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ  ｒｉｃｉｎｉ、Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ  ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ、Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ  ｓｐｅｒｍｏｐｈｉｌａ、Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ  ｔｒｉｆｏｌｉｏｒｕｍ、Ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍ、Ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍ  ｃｉｎｎａｍｏｍｉ、Ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍ  ｄｅｌｐｈｉｎｉｉ、Ｓｃｕｔｅｌｌｏｎｅｍａ  ｂｒａｃｈｙｕｒｕｍ、Ｓｃｕｔｅｌｌｏｎｅｍａ  ｃａｖｅｎｅｓｓｉ、Ｓｃｙｔｉｎｏｓｔｒｏｍａ  ｇａｌａｃｔｉｎｕｍ、Ｓｅｉｍａｔｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｍａｒｉａｅ、Ｓｅｉｍａｔｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｒｈｏｄｏｄｅｎｄｒｉ、Ｓｅｌｅｎｏｐｈｏｍａ  ｌｉｎｉｃｏｌａ、Ｓｅｐｔｏｂａｓｉｄｉｕｍ、Ｓｅｐｔｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｂｏｇｏｒｉｅｎｓｅ、Ｓｅｐｔｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｐｉｌｏｓｕｍ、Ｓｅｐｔｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｐｓｅｕｄｏｐｅｄｉｃｅｌｌａｔｕｍ、Ｓｅｐｔｏｂａｓｉｄｉｕｍ  ｔｈｅａｅ、Ｓｅｐｔｏｃｙｔａ  ｒｕｂｏｒｕｍ、Ｓｅｐｔｏｇｌｏｅｕｍ  ｐｏｔｅｎｔｉｌｌａｅ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ａｃｉｃｕｌｏｓａ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ａｍｐｅｌｉｎａ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ａｚａｌｅａ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｂａｔａｔｉｃｏｌａ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｃａｍｐａｎｕｌａｅ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｃａｎｎａｂｉｓ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｃａｒｙａｅ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｃｉｔｒｉ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｃｕｃｕｒｂｉｔａｃｅａｒｕｍ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｄａｒｒｏｗｉｉ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｄｉａｎｔｈｉ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｅｕｍｕｓａｅ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｆｒａｇａｒｉａｅ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｆｒａｇａｒｉａｅｃｏｌａ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｇｌｙｃｉｎｅｓ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｈｅｌｉａｎｔｈｉ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｈｕｍｕｌｉ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｈｙｄｒａｎｇｅａｅ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｌａｃｔｕｃａｅ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｌｉｑｕｉｄａｍｂａｒｉｓ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ  ｖａｒ．  ｍａｌａｇｕｔｉｉ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｍｅｎｔｈａｅ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｏｓｔｒｙａｅ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｐａｓｓｅｒｉｎｉｉ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｐｉｓｉ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｐｉｓｔａｃｉａｅ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｐｌａｔａｎｉｆｏｌｉａ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｒｈｏｄｏｄｅｎｄｒｉ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｓｅｃａｌｉｓ、Ｓｅｐｔｏｒｉａ  ｓｅｌｅｎｏｐｈｏｍｏｉｄｅｓ、Ｓｅｔｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｒｏｓｔｒａｔａ、Ｓｅｔｏｓｐｈａｅｒｉａ  ｔｕｒｃｉｃａ、Ｓｉｒｏｓｐｏｒｉｕｍ  ｄｉｆｆｕｓｕｍ、Ｓｐａｒａｓｓｉｓ、Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ、Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ  ａｒａｃｈｉｄｉｓ、Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ  ｃｏｒｙｌｉ、Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ  ｍｅｎｔｈａｅ、Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ  ｐｅｒｓｅａｅ、Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ  ｐｏｉｎｓｅｔｔｉａｅ、Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ  ｐｙｒｉｎｕｍ、Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ  ｒａｎｄｉｉ、Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ  ｓａｃｃｈａｒｉ、Ｓｐｈａｃｅｌｏｍａ  ｔｈｅａｅ、Ｓｐｈａｃｅｌｏｔｈｅｃａ  ｒｅｉｌｉａｎａ、Ｓｐｈａｅｒｅｌｌａ  ｐｌａｔａｎｉｆｏｌｉａ、Ｓｐｈａｅｒｏｐｓｉｓ  ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ、Ｓｐｈａｅｒｏｔｈｅｃａ、Ｓｐｈａｅｒｏｔｈｅｃａ  ｃａｓｔａｇｎｅｉ、Ｓｐｈａｅｒｏｔｈｅｃａ  ｆｕｌｉｇｉｎｅａ、Ｓｐｈａｅｒｕｌｉｎａ  ｏｒｙｚｉｎａ、Ｓｐｈａｅｒｕｌｉｎａ  ｒｅｈｍｉａｎａ、Ｓｐｈａｅｒｕｌｉｎａ  ｒｕｂｉ、Ｓｐｈｅｎｏｓｐｏｒａ  ｋｅｖｏｒｋｉａｎｉｉ、Ｓｐｉｎｉｇｅｒ  ｍｅｉｎｅｃｋｅｌｌｕｓ、Ｓｐｉｒｏｐｌａｓｍａ、Ｓｐｏｎｇｉｐｅｌｌｉｓ  ｕｎｉｃｏｌｏｒ、Ｓｐｏｒｉｓｏｒｉｕｍ  ｃｒｕｅｎｔｕｍ、Ｓｐｏｒｉｓｏｒｉｕｍ  ｅｈｒｅｎｂｅｒｇｉ、Ｓｐｏｒｉｓｏｒｉｕｍ  ｓｃｉｔａｍｉｎｅｕｍ、Ｓｐｏｒｉｓｏｒｉｕｍ  ｓｏｒｇｈｉ、Ｓｐｏｒｏｎｅｍａ  ｐｈａｃｉｄｉｏｉｄｅｓ、Ｓｔａｇｏｎｏｓｐｏｒａ  ａｖｅｎａｅ  ｆ．ｓｐ．  ｔｒｉｔｉｃａｅ、Ｓｔａｇｏｎｏｓｐｏｒａ  ｍｅｌｉｌｏｔｉ、Ｓｔａｇｏｎｏｓｐｏｒａ  ｒｅｃｅｄｅｎｓ、Ｓｔａｇｏｎｏｓｐｏｒａ  ｓａｃｃｈａｒｉ、Ｓｔａｇｏｎｏｓｐｏｒａ  ｔａｉｎａｎｅｎｓｉｓ、Ｓｔｅｃｃｈｅｒｉｎｕｍ  ｏｃｈｒａｃｅｕｍ、Ｓｔｅｇｏｃｉｎｔｒａｃｔｉａ  ｊｕｎｃｉ、Ｓｔｅｇｏｐｈｏｒａ  ｕｌｍｅａ、Ｓｔｅｍｐｈｙｌｉｕｍ  ａｌｆａｌｆａ、Ｓｔｅｍｐｈｙｌｉｕｍ  ｂｏｌｉｃｋｉｉ、Ｓｔｅｍｐｈｙｌｉｕｍ  ｃａｎｎａｂｉｎｕｍ、Ｓｔｅｍｐｈｙｌｉｕｍ  ｇｌｏｂｕｌｉｆｅｒｕｍ、Ｓｔｅｍｐｈｙｌｉｕｍ  ｌ��ｃｏｐｅｒｓｉｃｉ、Ｓｔｅｍｐｈｙｌｉｕｍ  ｓａｒｃｉｎｉｆｏｒｍｅ、Ｓｔｅｍｐｈｙｌｉｕｍ  ｓｏｌａｎｉ、Ｓｔｅｍｐｈｙｌｉｕｍ  ｖｅｓｉｃａｒｉｕｍ、Ｓｔｅｎｅｌｌａ  ａｎｔｈｕｒｉｉｃｏｌａ、Ｓｔｅｒｅｕｍ、Ｓｔｅｒｅｕｍ  ｈｉｒｓｕｔｕｍ、Ｓｔｅｒｅｕｍ  ｒａｍｅａｌｅ、Ｓｔｅｒｅｕｍ  ｓａｎｇｕｉｎｏｌｅｎｔｕｍ、Ｓｔｉｇｍａｔｏｍｙｃｏｓｉｓ、Ｓｔｉｇｍｅｌｌａ  ｐｌａｔａｎｉ−ｒａｃｅｍｏｓａｅ、Ｓｔｉｇｍｉｎａ  ｃａｒｐｏｐｈｉｌａ、Ｓｔｉｇｍｉｎａ  ｌｉｑｕｉｄａｍｂａｒｉｓ、Ｓｔｉｇｍｉｎａ  ｐａｌｍｉｖｏｒａ、Ｓｔｉｇｍｉｎａ  ｐｌａｔａｎｉ、Ｓｔｉｇｍｉｎａ  ｐｌａｔａｎｉ−ｒａｃｅｍｏｓａｅ、Ｓｕｂａｎｇｕｉｎａ  ｒａｄｉｃｉｃｏｌａ、Ｓｕｂａｎｇｕｉｎａ  ｗｅｖｅｌｌｉ、Ｓｙｄｏｗｉａ  ｐｏｌｙｓｐｏｒａ、Ｓｙｄｏｗｉｅｌｌａ  ｄｅｐｒｅｓｓｕｌａ、Ｓｙｄｏｗｉｅｌｌａｃｅａｅ、Ｓｙｎｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｅｎｄｏｂｉｏｔｉｃｕｍ、Ｓｙｎｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｆｒａｇａｒｉａｅ、Ｓｙｎｃｈｙｔｒｉｕｍ  ｌｉｑｕｉｄａｍｂａｒｉｓ、Ｔａｉｗａｎｏｆｕｎｇｕｓ  ｃａｍｐｈｏｒａｔｕｓ、Ｔａｐｅｓｉａ  ａｃｕｆｏｒｍｉｓ、Ｔａｐｅｓｉａ  ｙａｌｌｕｎｄａｅ、Ｔａｐｈｒｉｎａ  ａｕｒｅａ、Ｔａｐｈｒｉｎａ  ｂｕｌｌａｔａ、Ｔａｐｈｒｉｎａ  ｃａｅｒｕｌｅｓｃｅｎｓ、Ｔａｐｈｒｉｎａ  ｃｏｒｙｌｉ、Ｔａｐｈｒｉｎａ  ｄｅｆｏｒｍａｎｓ、Ｔａｐｈｒｉｎａ  ｅｎｔｏｍｏｓｐｏｒａ、Ｔａｐｈｒｉｎａ  ｊｏｈａｎｓｏｎｉｉ、Ｔａｐｈｒｉｎａ  ｐｏｔｅｎｔｉｌｌａｅ、Ｔａｐｈｒｉｎａ  ｕｌｍｉ、Ｔａｐｈｒｉｎａ  ｗｉｅｓｎｅｒｉ、Ｔｈａｎａｔｅｐｈｏｒｕｓ  ｃｕｃｕｍｅｒｉｓ、Ｔｈｉｅｌａｖｉｏｐｓｉｓ、Ｔｈｉｅｌａｖｉｏｐｓｉｓ  ｂａｓｉｃｏｌａ、Ｔｈｙｒｏｓｔｒｏｍａ  ｃｏｍｐａｃｔｕｍ、Ｔｉｌｌｅｔｉａ  ｂａｒｃｌａｙａｎａ、Ｔｉｌｌｅｔｉａ  ｃａｒｉｅｓ、Ｔｉｌｌｅｔｉａ  ｃｏｎｔｒｏｖｅｒｓａ、Ｔｉｌｌｅｔｉａ  ｌａｅｖｉｓ、Ｔｉｌｌｅｔｉａ  ｔｒｉｔｉｃｉ、Ｔｉｌｌｅｔｉａ  ｗａｌｋｅｒｉ、Ｔｉｌｌｅｔｉａｒｉａｃｅａｅ、Ｔｏｂａｃｃｏ  ｎｅｃｒｏｓｉｓ  ｖｉｒｕｓ、Ｔｏ
ｇｎｉｎｉａｃｅａｅ、Ｔｒａｃｈｙｓｐｈａｅｒａ  ｆｒｕｃｔｉｇｅｎａ、Ｔｒａｍｅｔｅｓ  ｇｉｂｂｏｓａ、Ｔｒａｍｅｔｅｓ  ｈｉｒｓｕｔｅ、Ｔｒａｍｅｔｅｓ  ｎｉｖｏｓａ、Ｔｒａｍｅｔｅｓ  ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ、Ｔｒａｎｚｓｃｈｅｌｉａ  ｄｉｓｃｏｌｏｒ  ｆ．ｓｐ．  ｐｅｒｓｉｃａ、Ｔｒａｎｚｓｃｈｅｌｉａ  ｐｒｕｎｉ−ｓｐｉｎｏｓａｅ  ｖａｒ．  ｄｉｓｃｏｌｏｒ、Ｔｒｉｃｈａｐｔｕｍ  ｂｉｆｏｒｍｅ、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｈａｒｚｉａｎｕｍ、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｋｏｎｉｎｇｉｉ、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｖｉｒｉｄｅ、Ｔｒｉｃｈｏｔｈｅｃｉｕｍ  ｒｏｓｅｕｍ、Ｔｒｉｐｏｓｐｅｒｍｕｍ  ａｃｅｒｉｎｕｍ、Ｔｒｕｎｃａｔｅｌｌａ、Ｔｒｕｎｃａｔｅｌｌａ  ｌａｕｒｏｃｅｒａｓｉ、Ｔｕｂｅｒｃｕｌａｒｉａ  ｌａｔｅｒｉｔｉａ、Ｔｕｂｅｒｃｕｌａｒｉａ  ｕｌｍｅａ、Ｔｕｂｅｕｆｉａ  ｐｅｚｉｚｕｌａ、Ｔｕｎｓｔａｌｌｉａ  ａｃｕｌｅａｔａ、Ｔｙｌｅｎｃｈｏｒｈｙｎｃｈｕｓ、Ｔｙｌｅｎｃｈｏｒｈｙｎｃｈｕｓ  ｂｒｅｖｉｌｉｎｅａｔｕｓ、Ｔｙｌｅｎｃｈｏｒｈｙｎｃｈｕｓ  ｃｌａｙｔｏｎｉ、Ｔｙｌｅｎｃｈｏｒｈｙｎｃｈｕｓ  ｄｕｂｉｕｓ、Ｔｙｌｅｎｃｈｏｒｈｙｎｃｈｕｓ  ｍａｘｉｍｕｓ、Ｔｙｌｅｎｃｈｏｒｈｙｎｃｈｕｓ  ｎｕｄｕｓ、Ｔｙｌｅｎｃｈｏｒｈｙｎｃｈｕｓ  ｐｈａｓｅｏｌｉ、Ｔｙｌｅｎｃｈｏｒｈｙｎｃｈｕｓ  ｖｕｌｇａｒｉｓ、Ｔｙｌｅｎｃｈｏｒｈｙｎｃｈｕｓ  ｚｅａｅ、Ｔｙｌｅｎｃｈｕｌｕｓ  ｓｅｍｉｐｅｎｅｔｒａｎｓ、Ｔｙｐｈｕｌａ  ｉｄａｈｏｅｎｓｉｓ、Ｔｙｐｈｕｌａ  ｉｎｃａｒｎａｔｅ、Ｔｙｐｈｕｌａ  ｉｓｈｉｋａｒｉｅｎｓｉｓ、Ｔｙｐｈｕｌａ  ｉｓｈｉｋａｒｉｅｎｓｉｓ  ｖａｒ．  ｃａｎａｄｅｎｓｉｓ、Ｔｙｐｈｕｌａ  ｖａｒｉａｂｉｌｉｓ、Ｔｙｐｈｕｌｏｃｈａｅｔａ、Ｔｙｒｏｍｙｃｅｓ  ｃａｌｋｉｎｓｉｉ、Ｔｙｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｈｉｏｎｅｕｓ、Ｔｙｒｏｍｙｃｅｓ  ｇａｌａｃｔｉｎｕｓ、Ｕｌｏｃｌａｄｉｕｍ  ａｔｒｕｍ、Ｕｌｏｃｌａｄｉｕｍ  ｃｏｎｓｏｒｔｉａｌｅ、Ｕｎｃｉｎｕｌａ、Ｕｎｃｉｎｕｌａ  ｍａｃｒｏｓｐｏｒａ、Ｕｎｃｉｎｕｌａ  ｎｅｃａｔｏｒ、Ｕｒｅｄｏ  ｂｅｈｎｉｃｋｉａｎａ、Ｕｒｅｄｏ  ｋｒｉｅｇｅｒｉａｎａ、Ｕｒｅｄｏ  ｍｕｓａｅ、Ｕｒｅｄｏ  ｎｉｇｒｏｐｕｎｃｔａ、Ｕｒｅｄｏ  ｒａｎｇｅｌｉｉ、Ｕｒｏｃｙｓｔｉｓ、Ｕｒｏｃｙｓｔｉｓ  ａｇｒｏｐｙｒｉ、Ｕｒｏｃｙｓｔｉｓ  ｂｒａｓｓｉｃａｅ、Ｕｒｏｃｙｓｔｉｓ  ｏｃｃｕｌｔａ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  ａｐｉｏｓｐｏｒｕｓ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  ｂｅｔｉｃｏｌａ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｉｃｅｒｉｓ−ａｒｉｅｔｉｎｉ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  ｄｉａｎｔｈｉ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  ｅｕｐｈｏｒｂｉａｅ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  ｇｒａｍｉｎｉｓ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  ｉｎｃｏｎｓｐｉｃｕｕｓ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  ｌｉｎｅｏｌａｔｕｓ  ｓｕｂｓｐ．  ｎｅａｒｃｔｉｃｕｓ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  ｍｅｄｉｃａｇｉｎｉｓ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  ｍｕｓａｅ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  ｏｂｌｏｎｇｕｓ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  ｐｉｓｉ−ｓａｔｉｖｉ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  ｐｒｏｅｍｉｎｅｎｓ  ｖａｒ．  ｐｏｉｎｓｅｔ���ｉａｅ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  ｔｒｉｆｏｌｉｉ−ｒｅｐｅｎｔｉｓ  ｖａｒ．  ｆａｌｌｅｎｓ、Ｕｒｏｍｙｃｅｓ  ｖｉｃｉａｅ−ｆａｂａｅ  ｖａｒ．  ｖｉｃｉａｅ−ｆａｂａｅ、Ｕｒｏｐｈｌｙｃｔｉｓ  ｌｅｐｒｏｉｄｅｓ、Ｕｒｏｐｈｌｙｃｔｉｓ  ｔｒｉｆｏｌｉｉ、Ｕｒｏｐｈｏｒａ  ｃａｒｄｕｉ、Ｕｓｔｉｌａｇｉｎａｌｅｓ、Ｕｓｔｉｌａｇｉｎｏｉｄｅａ  ｖｉｒｅｎｓ、Ｕｓｔｉｌａｇｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ、Ｕｓｔｉｌａｇｏ、Ｕｓｔｉｌａｇｏ  ａｖｅｎａｅ、Ｕｓｔｉｌａｇｏ  ｈｏｒｄｅｉ、Ｕｓｔｉｌａｇｏ  ｍａｙｄｉｓ、Ｕｓｔｉｌａｇｏ  ｎｉｇｒａ、Ｕｓｔｉｌａｇｏ  ｎｕｄａ、Ｕｓｔｉｌａｇｏ  ｓｃｉｔａｍｉｎｅａ、Ｕｓｔｉｌａｇｏ  ｔｒｉｔｉｃｉ、Ｖａｌｓａ  ａｂｉｅｔｉｓ、Ｖａｌｓａ  ａｍｂｉｅｎｓ、Ｖａｌｓａ  ａｕｅｒｓｗａｌｄｉｉ、Ｖａｌｓａ  ｃｅｒａｔｏｓｐｅｒｍａ、Ｖａｌｓａ  ｋｕｎｚｅｉ、Ｖａｌｓａ  ｎｉｖｅａ、Ｖａｌｓａ  ｓｏｒｄｉｄａ、Ｖａｌｓａｒｉａ  ｉｎｓｉｔｉｖａ、Ｖｅｎｔｕｒｉａ  ｃａｒｐｏｐｈｉｌａ、Ｖｅｎｔｕｒｉａ  ｉｎａｅｑｕａｌｉｓ、Ｖｅｎｔｕｒｉａ  ｐｉｒｉｎａ、Ｖｅｎｔｕｒｉａ  ｐｙｒｉｎａ、Ｖｅｒｏｎａｅａ  ｍｕｓａｅ、Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ、Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ａｌｂｏ−ａｔｒｕｍ、Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ａｌｂｏ−ａｔｒｕｍ  ｖａｒ．  ｍｅｎｔｈａｅ、Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｄａｈｌｉａｅ、Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｌｏｎｇｉｓｐｏｒｕｍ、Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｔｈｅｏｂｒｏｍａｅ、Ｖｉｌｌｏｓｉｃｌａｖａ  ｖｉｒｅｎｓ、Ｖｉｒｅｓｃｅｎｃｅ、Ｗａｉｔｅａ  ｃｉｒｃｉｎａｔａ、Ｗｕｅｓｔｎｅｉｏｐｓｉｓ  Ｇｅｏｒｇｉａｎａ、Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ  ａｍｐｅｌｉｎａ、Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ  ａｘｏｎｏｐｏｄｉｓ、Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ  ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ、Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ  ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ  ｐｖ．  ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ、Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ  ｏｒｙｚａｅ、Ｘｅｒｏｍｐｈａｌｉｎａ  ｆｒａｘｉｎｏｐｈｉｌａ、Ｘｉｐｈｉｎｅｍａ  ａｍｅｒｉｃａｎｕｍ、Ｘｉｐｈｉｎｅｍａ  ｂａｋｅｒｉ、Ｘｉｐｈｉｎｅｍａ  ｂｒｅｖｉｃｏｌｌｅ、Ｘｉｐｈｉｎｅｍａ  ｄｉｖｅｒｓｉｃａｕｄａｔｕｍ、Ｘｉｐｈｉｎｅｍａ  ｉｎｓｉｇｎｅ、Ｘｉｐｈｉｎｅｍａ  ｒｉｖｅｓｉ、Ｘｉｐｈｉｎｅｍａ  ｖｕｉｔｔｅｎｅｚｉ、Ｘｙｌａｒｉａ  ｍａｌｉ、Ｘｙｌａｒｉａ  ｐｏｌｙｍｏｒｐｈａ、Ｘｙｌｅｌｌａ  ｆａｓｔｉｄｉｏｓａ、Ｘｙｌｏｐｈｉｌｕｓ、Ｘｙｌｏｐｈｉｌｕｓ  ａｍｐｅｌｉｎｕｓ、Ｚｏｐｆｉａ  ｒｈｉｚｏｐｈｉｌａ、Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｂａｉｌｉｉ、および、Ｚｙｇｏｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｆｌｏｒｅｎｔｉｎｕｓ、が挙げられる。
【０１１８】
昆虫および蠕虫の病原体としては、Ａｃａｌｙｍｍａ、Ａｃｙｒｔｈｏｓｉｐｈｏｎ  ｐｉｓｕｍ、Ａｆｒｉｃａｎ  ａｒｍｙｗｏｒｍ、アフリカ蜂化ミツバチ、Ａｇｒｏｍｙｚｉｄａｅ、Ａｇｒｏｔｉｓ  ｍｕｎｄａ、Ａｇｒｏｔｉｓ  ｐｏｒｐｈｙｒｉｃｏｌｌｉｓ、Ａｌｅｕｒｏｃａｎｔｈｕｓ  ｗｏｇｌｕｍｉ、Ａｌｅｙｒｏｄｅｓ  ｐｒｏｌｅｔｅｌｌａ、Ａｌｐｈｉｔｏｂｉｕｓ  ｄｉａｐｅｒｉｎｕｓ、Ａｌｔｉｃａ  ｃｈａｌｙｂｅａ、Ａｎａｓａ  ｔｒｉｓｔｉｓ、Ａｎｇｕｉｎａ  ｔｒｉｔｉｃｉ、Ａｎｉｓｏｐｌｉａ  ａｕｓｔｒｉａｃａ、Ａｎｔｈｏｎｏｍｕｓ  ｐｏｍｏｒｕｍ、Ａｎｔｈｏｎｏｍｕｓ  ｓｉｇｎａｔｕｓ、Ａｏｎｉｄｉｅｌｌａ  ａｕｒａｎｔｉｉ、Ａｐａｍｅａ  ａｐａｍｉｆｏｒｍｉｓ、Ａｐａｍｅａ  ｎｉｖｅｉｖｅｎｏｓａ、Ａｐｈｅｌｅｎｃｈｏｉｄｅｓ  ｓｐｐ．、アブラムシ、Ａｐｈｉｓ  ｇｏｓｓｙｐｉｉ、ａｐｐｌｅ  ｍａｇｇｏｔ、アルゼンチンアリ、ａｒｍｙ  ｃｕｔｗｏｒｍ、Ａｒｏｔｒｏｐｈｏｒａ  ａｒｃｕａｔａｌｉｓ、Ａｓｔｅｒｏｌｅｃａｎｉｕｍ  ｃｏｆｆｅａｅ、Ａｔｈｏｕｓ  ｈａｅｍｏｒｒｈｏｉｄａｌｉｓ、Ａｕｌａｃｏｐｈｏｒａ、Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ  ｐｌａｇｕｅ  ｌｏｃｕｓｔ、Ｂａｃｔｅｒｉｃｅｒａ  ｃｏｃｋｅｒｅｌｌｉ、Ｂａｃｔｒｏｃｅｒａ、Ｂａｃｔｒｏｃｅｒａ  ｃｏｒｒｅｃｔａ、Ｂａｇｒａｄａ  ｈｉｌａｒｉｓ、ｂａｎｄｅｄ  ｈｉｃｋｏｒｙ  ｂｏｒｅｒ、ビートアワヨトウ、Ｂｅｌｏｎｏｌａｉｍｕｓ  ｓｐｐ．、ｂｌａｃｋ  ｂｅａｎ  ａｐｈｉｄ、Ｂｌｅｐｈａｒｉｄｏｐｔｅｒｕｓ  ｃｈｌｏｒｉｏｎｉｓ、Ｂｏｇｏｎｇ  ｍｏｔｈ、ワタミハナゾウムシ、Ｂｒａｄｙｓｉａ  ｓｉｍｉｌｉｇｉｂｂｏｓａ、Ｂｒａｓｓｉｃａ  ｐｏｄ  ｍｉｄｇｅ、Ｂｒｅｖｉｃｏｒｙｎｅ  ｂｒａｓｓｉｃａｅ、ｂｒｏｗｎ  ｌｏｃｕｓｔ、クサギカメムシ、ｂｒｏｗｎ  ｐｌａｎｔｈｏｐｐｅｒ、Ｂｕｒｓｅｐｈｅｌｅｎｃｈｕｓ  ｓｐｐ．、コナガ、アオムシ、Ｃａｌｌｏｓｏｂｒｕｃｈｕｓ  ｍａｃｕｌａｔｕｓ、ｃａｎｅ  ｂｅｅｔｌｅ、ｃａｒｒｏｔ  ｆｌｙ、ムギシストセンチュウ、Ｃｅｃｉｄｏｍｙｉｉｄａｅ、Ｃｅｒａｔｉｔｉｓ  ｃａｐｉｔａｔａ、Ｃｅｒａｔｉｔｉｓ  ｒｏｓａ、ｃｅｒｅａｌ  ｌｅａｆ  ｂｅｅｔｌｅ、Ｃｈｌｏｒｏｐｓ  ｐｕｍｉｌｉｏｎｉｓ、ｃｉｔｒｕｓ  ｌｏｎｇ−ｈｏｒｎｅｄ  ｂｅｅｔｌｅ、Ｃｏｃｃｕｓ  ｖｉｒｉｄｉｓ、コドリンガ、コーヒーノミキクイムシ、コロラドハムシ、ヒラタコクヌストモドキ、ｃｒａｍｂｕｓ、ｃｕｃｕｍｂｅｒ  ｂｅｅｔｌｅ、Ｃｕｒｃｕｌｉｏ  ｎｕｃｕｍ、Ｃｕｒｃｕｌｉｏ  ｏｃｃｉｄｅｎｔｉｓ、ヨトウムシ、Ｃｙｃｌｏｃｅｐｈａｌａ  ｂｏｒｅａｌｉｓ、ｄａｒｋ  ｓｗｏｒｄ−ｇｒａｓｓ、ｄａｔｅ  ｓｔｏｎｅ  ｂｅｅｔｌｅ、Ｄｅｌｉａ  ｓｐｐ．、Ｄｅｌｉａ  ａｎｔｉｑｕａ、Ｄｅｌｉａ  ｆｌｏｒａｌｉｓ、Ｄｅｌｉａ  ｒａｄｉｃｕｍ、サバクバッタ、Ｄｉａｂｒｏｔｉｃａ、Ｄｉａｂｒｏｔｉｃａ  ｂａｌｔｅａｔａ、Ｄｉａｂｒｏｔｉｃａ  ｓｐｅｃｉｏｓａ、コナガ、Ｄｉａｐｈａｎｉａ  ｉｎｄｉｃａ、Ｄｉａｐｈａｎｉａ  ｎｉｔｉｄａｌｉｓ、Ｄｉａｐｈｏｒｉｎａ  ｃｉｔｒｉ、Ｄｉａｐｒｅｐｅｓ  ａｂｂｒｅｖｉａｔｕ���、Ｄｉａｔｒａｅａ  ｓａｃｃｈａｒａｌｉｓ、ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ  ｇｒａｓｓｈｏｐｐｅｒ、Ｄｉｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｓｐｐ．、Ｄｏｃｉｏｓｔａｕｒｕｓ  ｍａｒｏｃｃａｎｕｓ、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ  ｓｕｚｕｋｉｉ、Ｄｒｙｏｃｏｓｍｕｓ  ｋｕｒｉｐｈｉｌｕｓ、Ｅａｒｉａｓ  ｐｅｒｈｕｅｇｅｌｉ、Ｅｐｉｃａｕｔａ  ｖｉｔｔａｔａ、Ｅｐｉｌａｃｈｎａ  ｖａｒｉｖｅｓｔｉｓ、Ｅｒｉｏｎｏｔａ  ｔｈｒａｘ、Ｅｒｉｏｓｏｍａｔｉｎａｅ、Ｅｕｌｅｉａ  ｈｅｒａｃｌｅｉ、Ｅｕｍｅｔｏｐｉｎａ  ｆｌａｖｉｐｅｓ、Ｅｕｐｏｅｃｉｌｉａ  ａｍｂｉｇｕｅｌｌａ、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ｃｏｒｎ  ｂｏｒｅｒ、Ｅｕｒｙｄｅｍａ  ｏｌｅｒａｃｅａ、Ｅｕｒｙｇａｓｔｅｒ  ｉｎｔｅｇｒｉｃｅｐｓ、ｆｏｒｅｓｔ  ｂｕｇ、Ｆｒａｎｋｌｉｎｉｅｌｌａ  ｔｒｉｔｉｃｉ、Ｇａｌｌｅｒｉａ  ｍｅｌｌｏｎｅｌｌａ、ｇａｒｄｅｎ  ｄａｒｔ、ｇｌａｓｓｙ−ｗｉｎｇｅｄ  ｓｈａｒｐｓｈｏｏｔｅｒ、温室シロバエ、Ｇｒｙｌｌｏｔａｌｐａ  ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ、Ｇｒｙｌｌｕｓ  ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉｃｕｓ、マイマイガ、Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ  ａｒｍｉｇｅｒａ、Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ  ｇｅｌｏｔｏｐｏｅｏｎ、Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ  ｐｕｎｃｔｉｇｅｒａ、Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａ  ｚｅａ、Ｈｅｌｉｏｔｈｉｓ  ｖｉｒｅｓｃｅｎｓ、Ｈｅｎｏｓｅｐｉｌａｃｈｎａ  ｖｉｇｉｎｔｉｏｃｔｏｐｕｎｃｔａｔａ、Ｈｅｓｓｉａｎ  ｆｌｙ、Ｈｅｔｅｒｏｄｅｒａ  ｓｐｐ．、Ｊａｃｏｂｉａｓｃａ  ｆｏｒｍｏｓａｎａ、マメコガネ、ヒメアカカツオブシムシ、Ｌａｍｐｉｄｅｓ  ｂｏｅｔｉｃｕｓ、潜葉性昆虫、Ｌｅｐｉｄｉｏｔａ  ｃｏｎｓｏｂｒｉｎａ、Ｌｅｐｉｄｏｓａｐｈｅｓ  ｂｅｃｋｉｉ、Ｌｅｐｉｄｏｓａｐｈｅｓ  ｕｌｍｉ、Ｌｅｐｔｏｇｌｏｓｓｕｓ  ｚｏｎａｔｕｓ、Ｌｅｐｔｏｐｔｅｒｎａ  ｄｏｌａｂｒａｔａ、ｌｅｓｓｅｒ  ｗａｘ  ｍｏｔｈ、Ｌｅｕｃｏｐｔｅｒａ（ガ）、Ｌｅｕｃｏｐｔｅｒａ  ｃａｆｆｅｉｎａ、ｌｉｇｈｔ  ｂｒｏｗｎ  ａｐｐｌｅ  ｍｏｔｈ、Ｌｉｓｓｏｒｈｏｐｔｒｕｓ  ｏｒｙｚｏｐｈｉｌｕｓ、オナガセセリ、Ｌｙｇｕｓ、Ｌｙｇｕｓ  ｈｅｓｐｅｒｕｓ、Ｍａｃｏｎｅｌｌｉｃｏｃｃｕｓ  ｈｉｒｓｕｔｕｓ、Ｍａｃｒｏｄａｃｔｙｌｕｓ  ｓｕｂｓｐｉｎｏｓｕｓ、Ｍａｃｒｏｓｉｐｈｕｍ  ｅｕｐｈｏｒｂｉａｅ、コクゾウ、Ｍａｎｄｕｃａ  ｓｅｘｔａ、Ｍａｙｅｔｉｏｌａ  ｈｏｒｄｅｉ、コナカイガラムシ、Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅ  ｓｐｐ．、Ｍｅｇａｃｏｐｔａ  ｃｒｉｂｒａｒｉａ、Ｍｅｔｃａｌｆａ  ｐｒｕｉｎｏｓａ、ガ、ｌｅｅｋ  ｍｏｔｈ、Ｍｙｚｕｓ  ｐｅｒｓｉｃａｅ、Ｎａｃｃｏｂｕｓ  ｓｐｐ．、Ｎｅｚａｒａ  ｖｉｒｉｄｕｌａ、ｏａｋ  ｐｒｏｃｅｓｓｉｏｎａｒｙ、ｏｌｉｖｅ  ｆｒｕｉｔ  ｆｌｙ、Ｏｐｈｉｏｍｙｉａ  ｓｉｍｐｌｅｘ、Ｏｐｉｓｉｎａ  ａｒｅｎｏｓｅｌｌａ、Ｏｐｏｍｙｚａ、Ｏｐｏｍｙｚａ  ｆｌｏｒｕｍ、Ｏｐｏｍｙｚｉｄａｅ、Ｏｓｃｉｎｅｌｌａ  ｆｒｉｔ、Ｏｓｔｒｉｎｉａ  ｆｕｒｎａｃａｌｉｓ、Ｏｘｙｃａｒｅｎｕｓ  ｈｙａｌｉｎｉｐｅｎｎｉｓ、ｐａｐａｙａ  ｍｅａｌｙ  ｂｕｇ、Ｐａｐｉｌｉｏ  ｄｅｍｏｄｏｃｕｓ、Ｐａｒａｔａｃｈａｒｄｉｎａ  ｐｓｅｕｄｏｌｏｂａｔａ、Ｐｅｎｔａｔｏｍｏｉｄｅａ、Ｐｈｔｈｏｒｉｍａｅａ  ｏｐｅｒｃｕｌｅｌｌａ、Ｐｈｙｌｌｏｐｈａｇａ、Ｐｈｙｌｌｏｘｅｒａ、Ｐｈｙｌｌｏｘｅｒｉｄａｅ、Ｐｈｙｌｌｏｘｅｒｏｉｄｅａ、Ｐｉｅｒｉｓ  ｂｒａｓｓｉｃａｅ、ワタアカミムシ、Ｐｌａｎｏｃｏｃｃｕｓ  ｃｉｔｒｉ、Ｐｌａｔｙｎｏｔａ  ｉｄａｅｕｓａｌｉｓ、Ｐｌｕｍ  ｃｕｒｃｕｌｉｏ、Ｐｒａｔｙｌｅｎｃｈｕｓ  ｓｐｐ．、Ｐｒｉｏｎｕｓ  ｃａｌｉｆｏｒｎｉｃｕｓ、Ｐｓｅｕｄｏｃｏｃｃｕｓ  ｖｉｂｕｒｎｉ、Ｐｙｒａｌｉｓ  ｆａｒｉｎａｌｉｓ、ｒｅｄ  ｉｍｐｏｒｔｅｄ  ｆｉｒｅ  ａｎｔ、ｒｅｄ  ｌｏｃｕｓｔ、ネグサレセンチュウ、ネコブセンチュウ、Ｒａｄｏｐｈｏｌｕｓ  ｓｐｐ．、Ｒｏｔｙｌｅｎｃｈｕｌｕｓ  ｓｐｐ．、Ｒｈａｇｏｌｅｔｉｓ  ｃｅｒａｓｉ、Ｒｈａｇｏｌｅｔｉｓ  ｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｓ、Ｒｈａｇｏｌｅｔｉｓ  ｍｅｎｄａｘ、Ｒｈｏｐａｌｏｓｉｐｈｕｍ  ｍａｉｄｉｓ、Ｒｈｙａｃｉｏｎｉａ  ｆｒｕｓｔｒａｎａ、Ｒｈｙｎｃｈｏｐｈｏｒｕｓ  ｆｅｒｒｕｇｉｎｅｕｓ、Ｒｈｙｎｃｈｏｐｈｏｒｕｓ  ｐａｌｍａｒｕｍ、Ｒｈｙｚｏｐｅｒｔｈａ、ガイマイツヅリガ、ｒｉｃｅ  ｓｔｉｎｋ  ｂｕｇ、Ｒｕｓｓｉａｎ  ｗｈｅａｔ  ａｐｈｉｄ、Ｓａｎ  Ｊｏｓｅ  ｓｃａｌｅ、カイガラムシ、Ｓｃｈｉｓｔｏｃｅｒｃａ  ａｍｅｒｉｃａｎａ、Ｓｃｉａｒｉｄａｅ、Ｓｃｉｒｔｏｔｈｒｉｐｓ  ｄｏｒｓａｌｉｓ、Ｓｃｕｔｅｌｌｅｒｉｄａｅ、Ｓｃｕｔｉｐｈｏｒａ  ｐｅｄｉｃｅｌｌａｔａ、ｓｅｅｄ  ｇａｌｌ  ｎｅｍａｔｏｄｅｓ、ｓｅｒｐｅｎｔｉｎｅ  ｌｅａｆ  ｍｉｎｅｒ、シルバーリーフコナジラミ、Ｓｉｐｈａ  ｆｌａｖａ、ｓｍａｌｌ  ｈｉｖｅ  ｂｅｅｔｌｅ、Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔｅｒｎ  ｃｏｒｎ  ｂｏｒｅｒ、ｓｏｙｂｅａｎ  ａｐｈｉｄ、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｃｉｌｉｕｍ、Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ  ｌｉｔｕｒａ、ｓｐｏｔｔｅｄ  ｃｕｃｕｍｂｅｒ  ｂｅｅｔｌｅ、ｓｑｕａｓｈ  ｖｉｎｅ  ｂｏｒｅｒ、ｓｔｅｍ  Ｎｅｍａｔｏｄｅｓ、Ｓｔｅｎｏｔｕｓ  ｂｉｎｏｔａｔｕｓ、Ｓｔｒａｕｚｉａ  ｌｏｎｇｉｐｅｎｎｉｓ、キスジノミハムシ、ｓｕｎｎ  ｐｅｓｔ、ｓｗｅｅｔｐｏｔａｔｏ  ｂｕｇ、サビイロメクラガメ、アザミウマ、Ｔｈｒｉｐｓ  ａｎｇｕｓｔｉｃｅｐｓ、Ｔｈｒｉｐｓ  ｐａｌｍｉ、Ｔｏｘｏｐｔｅｒａ  ｃｉｔｒｉｃｉｄａ、Ｔｒｉｃｈｏｄｏｒｕｓ  ｓｐｐ．、Ｔｒｉｏｚａ  ｅｒｙｔｒｅａｅ、カブラヤガ、Ｔｕｔａ  ａｂｓｏｌｕｔａ、Ｔｙｌｅｎｃｈｕｌｕｓ  ｓｐｐ．、ヒメマルカツオブシムシ、Ｖｉｒａｃｈｏｌａ  ｉｓｏｃｒａｔｅｓ、ｗａｘｗｏｒｍ、Ｗｅｓｔｅｒｎ  ｃｏｒｎ  ｒｏｏｔｗｏｒｍ、ミカンキイロアザミウマ、ｗｈｅａｔ  ｆｌｙ、ｗｈｅａｔ  ｗｅｅｖｉｌ、コナジラミ、ｗｉｎｔｅｒ  ｍｏｔｈ、および、Ｘｉｐｈｅｎｅｍａ  ｓｐｐが挙げられる。
【０１１９】
たとえば、昆虫または蠕虫病原体は、ヨトウムシ（ａｒｍｙ  ｗｏｒｍ）、タマナヤガ、Ｅｕｒｏｐｅａｎ  ｃｏｒｎ  ｂｏｒｅｒ、ツマジロクサヨトウ、ヨトウムシ（ｃｕｔｗｏｒｍ）、マメコガネ、ｌｅｓｓｅｒ  ｃｏｒｎｓｔａｌｋ  ｂｏｒｅｒ、ｍａｉｚｅ  ｂｉｌｌｂｕｇ、ｓｅｅｄ  ｃｏｒｎ  ｍａｇｇｏｔ、ｗｅｂｗｏｒｍ、ｓｏｕｔｈｅｒｎ  ｃｏｒｎｓｔａｌｋ  ｂｏｒｅｒ、ｓｏｕｔｈｅｒｎ  ｃｏｒｎ  ｒｏｏｔｗｏｒｍ、ｓｏｕｔｈｅｒｎ  ｐｏｔａｔｏ  ｗｉｒｅｗｏｒｍ、ｓｔａｌｋ  ｂｏｒｅｒ、ｓｕｇａｒｃａｎｅ  ｂｅｅｔｌｅ、コガネムシの幼虫、ｃａｂｂａｇｅ  ｌｏｏｐｅｒ、ワタミハナゾウムシ、ｙｅｌｌｏｗ  ｓｔｒｉｐｅｄ  ａｒｍｙｗｏｒｍ、ｃｅｒｅａｌ  ｌｅａｆ  ｂｅｅｔｌｅ、ヒメコガネナガカメムシ、アブラムシ、ビートアワヨトウ、インゲンテントウ、ｓｏｙｂｅａｎ  ｌｏｏｐｅｒ、ｓｏｙｂｅａｎ  ｓｔｅｍ  ｂｏｒｅｒ、またはそれらの組み合わせであっても良い。
【０１２０】
植物におけるストレス耐性を増強させるタンパク質およびペプチド
本発明はまた、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片、および、植物におけるストレス耐性を増強させる少なくとも１つのタンパク質またはペプチドを含有する融合タンパク質に関するものである。
【０１２１】
たとえば、植物におけるストレス耐性を増強させるタンパク質またはペプチドは、ストレス関連化合物を分解させる酵素を含有する。ストレス関連化合物としては、限定されないが、アミノシクロプロパン−１−カルボン酸（ＡＣＣ）、活性酸素種、一酸化窒素、オキシリピン、フェノール類が挙げられる。具体的な活性酸素種としては、ヒドロキシル、過酸化水素、酸素およびスーパーオキシドが挙げられる。ストレス関連化合物を分解する酵素は、スーパーオキシドジスムターゼ、オキシダーゼ、カタラーゼ、アミノシクロプロパン−１−カルボン酸デアミナーゼ、ペルオキシダーゼ、抗酸化酵素、または、抗酸化ペプチドを含有しても良い。
【０１２２】
植物におけるストレス耐性を増強させるタンパク質またはペプチドはまた、環境ストレスから植物を防御するタンパク質またはペプチドを含有しても良い。環境ストレスは、たとえば、干ばつ、洪水、高温、凍結、塩、重金属、低ｐＨ、高ｐＨ、またはそれらの組み合わせが挙げられる。たとえば、環境ストレスから植物を防御するタンパク質またはペプチドは、氷核形成タンパク質、プロリナーゼ、フェニルアラニンアンモニアリアーゼ、イソコリスミ酸シンターゼ、イソコリスミ酸ピルビン酸リアーゼ、またはコリン脱水素酵素が挙げられる。
【０１２３】
植物結合タンパク質およびペプチド
本発明はまた、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質、および、少なくとも植物結合タンパク質またはペプチドを含有する融合タンパク質に関するものである。植物結合タンパク質またはペプチドは、植物の任意の部分（たとえば、植物の根、または、たとえば葉、幹、花または実等の空中部分）または植物物質に特異的に、または非特異的に結合することができる任意のタンパク質またはペプチドであっても良い。ゆえに、たとえば、植物結合タンパク質またはペプチドは、根結合タンパク質もしくはペプチド、または、葉結合タンパク質もしくはペプチドであっても良い。
【０１２４】
適切な植物結合タンパク質およびペプチドとしては、アドヘシン（たとえば、リカドヘシン（ｒｈｉｃａｄｈｅｓｉｎ））、フラジェリン、オムプチン（ｏｍｐｔｉｎ）、レクチン、エクスパンシン、バイオフィルム構造タンパク質（たとえば、ＴａｓＡまたはＹｕａＢ）、線毛タンパク質、カーラス（ｃｕｒｌｕｓ）タンパク質、インチミン（ｉｎｔｉｍｉｎ）、インベーシン、アグルチニン、および、非線毛（ａｆｉｍｂｒｉａｌ）タンパク質が挙げられる。
【０１２５】
他の融合タンパク質
本発明はさらに、少なくとも１つの対象のタンパク質またはペプチド、および、配列番号７１、７５、８０、８１、８２、８３、および８４のいずれか１つと少なくとも８５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有するエキソスポリウムタンパク質を含有するエキソスポリウムタンパク質、を含有する融合タンパク質に関するものである。あるいは、当該エキソスポリウムタンパク質は、配列番号７１、７５、８０、８１、８２、８３、および８４のいずれか１つと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または少なくとも１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含有しても良い。
【０１２６】
対象のタンパク質またはペプチドは、任意のタンパク質またはペプチドを含有しても良い。たとえば、対象のタンパク質またはペプチドは、本明細書に記述される任意のタンパク質またはペプチドを含有しても良い。たとえば、対象のタンパク質またはペプチドは、本明細書に記述される任意の植物生育刺激タンパク質もしくはペプチド、本明細書に記述される病原体から植物を防御する任意のタンパク質もしくはペプチド、本明細書に記述される植物におけるストレス耐性を増強させる任意のタンパク質もしくはペプチド、または、本明細書に記述される任意の植物結合タンパク質もしくはペプチド、を含有しても良い。
【０１２７】
ゆえに、対象のタンパク質またはペプチドが、植物生育刺激タンパク質またはペプチドを含有する場合、当該植物生育刺激タンパク質またはペプチドは、ペプチドホルモン、非ホルモン性ペプチド、または、植物生育刺激化合物の産生または活性化に関与する酵素を含有しても良い。あるいは、植物生育刺激タンパク質またはペプチドは、以下に記述される細菌、真菌、または植物の栄養源を分解または改変する任意の酵素を含有しても良い。
【０１２８】
融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー
本発明はまた、融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーに関するものである。当該融合タンパク質は、上述の任意の融合タンパク質であっても良い。
【０１２９】
組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーは、上述の任意の融合タンパク質を２つ以上、共発現しても良い。たとえば、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーは、植物結合タンパク質またはペプチドを含有する少なくとも１つの融合タンパク質を、植物生育刺激タンパク質またはペプチドを含有する少なくとも１つの融合タンパク質、病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドを含有する少なくとも１つの融合タンパク質、または、植物におけるストレス耐性を増強させる少なくとも１つのタンパク質またはペプチドと共に、共発現しても良い。
【０１３０】
組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーは、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓａｍａｎｉｉ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｇａｅｍｏｋｅｎｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ、またはそれらの組み合わせを含有してもよい。たとえば、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーは、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ、または、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓを含有しても良い。特に、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーは、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ、または、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓを含有しても良い。
【０１３１】
融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを作製するために、任意の組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、当分野公知の標準的な方法を用いて（たとえば、エレクトロポレーションにより）、融合タンパク質をコードするベクターと結合、形質導入、または形質転換しても良い。次いで、細菌をスクリーニングし、任意の当分野公知の方法により形質転換体を特定しても良い。たとえば、ベクターが抗生物質耐性遺伝子を含有する場合、当該細菌は、抗生物質耐性に対してスクリーニングされても良い。あるいは、融合タンパク質をコードするＤＮＡを、Ｂ．ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの宿主の染色体ＤＮＡに組み込んでも良い。組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、次いで、芽胞形成が誘導される条件下に曝しても良い。芽胞形成誘導の適切な条件は当分野に公知である。たとえば、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、寒天プレート上に置き、数日間（たとえば、３日間）、約３０℃の温度でインキュベートしても良い。
【０１３２】
上述の任意の種の不活性株、非毒性株、または遺伝子操作株が、適切に使用されても良い。たとえば、Ｃｒｙ毒素を欠いたＢａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓを用いても良い。あるいは、またはさらに、融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーの芽胞が作製された時点で、使用されてさらに発芽することを防ぐために不活化されても良い。当分野公知の、細菌性芽胞を不活化する任意の方法を用いても良い。適切な方法としては、限定されないが、加熱処置、ガンマ線照射、ｘ線照射、ＵＶ−Ａ照射、ＵＶ−Ｂ照射、化学処置（たとえば、グルタルアルデヒド（ｇｌｕｔｅｒａｌｄｅｈｙｄｅ）、ホルムアルデヒド、過酸化水素、酢酸、漂白、または任意のそれらの組み合わせを用いた処置）、またはそれらの組み合わせが挙げられる。あるいは、毒素産生株、または、遺伝的に不活化された、もしくは物理的に不活化された株由来の芽胞を用いても良い。
【０１３３】
植物生育刺激効果、および／または、他の有益か特性を有する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー
多くのＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの株が、固有の有益な特性を有している。たとえば、一部の株は、植物生育刺激効果を有している。本明細書に記述される任意の融合タンパク質を、そのような株で発現しても良い。
【０１３４】
たとえば、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーは、植物生育刺激細菌株を含有しても良い。
【０１３５】
植物生育刺激細菌株は、殺虫性毒素（たとえば、Ｃｒｙ毒素）を産生、殺真菌性化合物（たとえば、β−１，３−グルカナーゼ、キトシナーゼ、リチカーゼ、またはそれらの組み合わせ）を産生、殺線虫性化合物（たとえば、Ｃｒｙ毒素）を産生、殺菌性化合物を産生する、１以上の抗生物質に対して抵抗性である、１以上の遊離複製プラスミドを含有する、植物の根に結合する、植物の根にコロニー形成する、バイオフィルムを形成する、栄養素を可溶化する、有機酸を分泌する、または、それらの任意の組み合わせである細菌株を含有しても良い。
【０１３６】
たとえば、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーが、植物生育刺激細菌株を含有する場合、当該植物生育刺激細菌株は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＢＴ１５５（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．Ｂ−５０９２１）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＥＥ１１８（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．Ｂ−５０９１８）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＥＥ１４１（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．Ｂ−５０９１６）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＢＴ４６−３（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．Ｂ−５０９２２）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーであるＥＥ１２８（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．Ｂ−５０９１７）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ０１３Ａ（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．Ｂ−５０９２４）、または、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーであるＥＥ３４９（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．Ｂ−５０９２８）を含有しても良い。これら株の各々は、２０１４年３月１０日にＵｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ（ＵＳＤＡ）  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ（ＡＲＳ）（住所は、１８１５  Ｎｏｒｔｈ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｔｒｅｅｔ，  Ｐｅｏｒｉａ，  Ｉｌｌｉｎｏｉｓ  ６１６０４  Ｕ．Ｓ．Ａ．）に寄託されており、および、カッコ内に示されるＮＲＲＬ寄託番号により特定される。
【０１３７】
これら植物生育刺激株は、様々な活力のある植物の根圏から単離され、および、１６Ｓ  ｒＲＮＡの配列（本明細書において、配列番号１０４〜１１０に提示）および生化学アッセイを介して特定された。当該株は、標準的な生化学的指標および形態学的指標により、少なくともその属指定に対して特定された。たとえばＢａｃｉｌｌｕｓ等のグラム陽性株確定のための生化学的アッセイとしては、たとえば、ＰＥＡ培地および普通寒天上での増殖、顕微鏡観察、５％および７．５％ＮａＣｌ培地での増殖、ｐＨ５およびｐＨ９での増殖、４２℃および５０℃での増殖、セロビオース、ラクトース、グリセロール、グルコース、スクロース、ｄ−マンニトールおよびデンプンを用いた発酵で酸を産生する能力；蛍光色素の産生；ゼラチンの加水分解；硝酸塩還元；カタラーゼ産生、デンプン加水分解；オキシダーゼ反応、ウレアーゼ産生ならびに運動性が挙げられる。これら株の特定および、植物生育刺激効果の証明に関しては、以下の実施例に詳述する。
【０１３８】
たとえば、植物生育刺激細菌株を含有する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーは、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＢＴ１５５、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＥＥ１４１、または、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ０１３Ａを含有しても良い。組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーは、本明細書に記述される任意の融合タンパク質（たとえば、配列番号６０の標的化配列および、非ホルモン性ペプチド（たとえば、kｕｎｉｔｚトリプシンインヒビター（ＫＴＩ））、植物生育刺激化合物の産生または活性化に関与する酵素（たとえば、キトシナーゼ）、植物結合タンパク質もしくはペプチド（たとえば、ＴａｓＡ）；病原体から植物を防御するタンパク質もしくはペプチド（たとえば、ＴａｓＡ）、または、細菌、真菌もしくは植物の栄養源を分解または改変する酵素（たとえば、ＰｈｏＡまたはフィターゼ等のホスファターゼ、またはエンドグルカナーゼ）を含有する融合タンパク質）を発現しても良い。
【０１３９】
プロモーター
本明細書に記述される任意の組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて、融合タンパク質は、融合タンパク質の標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウム断片に固有のプロモーターの制御下で発現されても良い。たとえば、融合タンパク質が、Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ  ｓｔｅｒｎｅ  ＢｃｌＡ由来の標的化配列（たとえば、配列番号１のアミノ酸２０〜３５、配列番号１のアミノ酸１〜３５、配列番号１または配列番号６０）を含有する場合、または、融合タンパク質が、全長ＢｃｌＡ（配列番号２）または全長ＢｃｌＡの断片（配列番号５９）を含有する場合、当該融合タンパク質は、Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ  ｓｔｅｒｎｅのゲノムにおいて、ＢｃｌＡ遺伝子と通常関連するプロモーター（たとえば、配列番号８５のプロモーター）の制御下で発現されても良い。
【０１４０】
あるいは、融合タンパク質は、高発現型胞子形成プロモーターの制御下で発現されても良い。一部の例において、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片に固有のプロモーターは、高発現型胞子形成プロモーターである。他の例において、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片に固有のプロモーターは、高発現型胞子形成プロモーターではない。後者の場合において、高発現型胞子形成プロモーターと、天然型プロモーターを置き換えることが有益であり得る。高発現型胞子形成プロモーターの制御下での融合タンパク質の発現により、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムタンパク質上での当該融合タンパク質の発現増加がもたらされる。
【０１４１】
高発現型胞子形成プロモーターは、１以上のシグマ−Ｋ胞子形成特異的ポリメラーゼプロモーター配列を含有しても良い。
【０１４２】
Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおける融合タンパク質の発現に適切な高発現型胞子形成プロモーターとしては、以下の表２のものが挙げられる：
【表２−１】
2020143064.tif 000018
【表２−２】
2020143064.tif 000019
【表２−３】
2020143064.tif 000020
【０１４３】
上述の表２のプロモーター配列において、シグマ−Ｋ胞子形成特異的ポリメラーゼプロモーター配列の位置は、太字および下線文字で示されている。Ｃｒｙ１Ａプロモーター（Ｂ．  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＨＤ−７３；配列番号９０）は、総合で４つのシグマ−Ｋ配列（そのうちの２つは互いに重複しており、表２において二重下線で示されている）を有している。
【０１４４】
Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーでの融合タンパク質の発現における使用に好ましい高発現型胞子形成プロモーターとしては、ＢｅｔＡプロモーター（Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｓｔｅｒｎｅ；配列番号８６）、ＢｃｌＡプロモーター（Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｓｔｅｒｎｅ；配列番号８５）、ＢｃｌＡクラスターグリコシルトランスフェラーゼオペロン１および２プロモーター（Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｓｔｅｒｎｅ；配列番号：１０１および１０２）、および、ＹＶＴＮ  βプロペラタンパク質プロモーター（Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ  ４；配列番号８９）が挙げられる。
【０１４５】
本明細書に記述される任意の組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて、融合タンパク質は、配列番号８５〜１０３のいずれか１つの核酸配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する核酸配列を含有する芽胞形成プロモーターの制御下で発現されても良い。
【０１４６】
芽胞形成プロモーターが配列番号８５〜１０３のいずれか１つの核酸配列と少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％の同一性を有する核酸配列を含有する場合、シグマ−Ｋ芽胞形成特異的ポリメラーゼプロモーターの配列（複数含む）は、好ましくは、配列番号８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１０１、１０２、または、１０３の対応するヌクレオチドと１００％の同一性を有する。たとえば、上述の表２に示されているように、Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ  ｓｔｅｒｎｅのＢｃｌＡプロモーター（配列番号８５）は、２４〜３２、３５〜４３、および１２９〜１３７のヌクレオチドで、シグマ−Ｋ芽胞形成特異的ポリメラーゼプロモーター配列を有する。ゆえに、もし芽胞形成プロモーターが、配列番号８５の核酸配列と少なくとも９０％の同一性を有する配列を含有する場合、配列番号８５の２４〜３２、３５〜４３、および１２９〜１３７のヌクレオチドに相当する芽胞形成プロモーターのヌクレオチドは、配列番号８５の２４〜３２、３５〜４３、および１２９〜１３７のヌクレオチドと１００％の同一性を有することが好ましい。
【０１４７】
製剤
本発明はまた、前述の項で検討された任意の組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーおよび農学的に受容可能な担体を含有する製剤に関する。
【０１４８】
農学的に受容可能な担体は、農学的使用に適した任意の担体であっても良い。たとえば、適切な農学的に受容可能な担体としては、限定されないが、分散剤、界面活性剤、添加剤、水、増粘剤、凝固防止剤、残基分解物、たい肥化剤、粒状塗布物、珪藻土、油、着色剤、安定化剤、防腐剤、ポリマー類、コーティング、およびそれらの組み合わせが挙げられる。
【０１４９】
添加剤は、油、ゴム、樹脂、粘土、ポリオキシエチレングリコール、テルペン、粘着性有機物、脂肪酸エステル、硫酸化アルコール、スルホン酸アルキル、硫酸化石油、アルコール硫酸、ナトリウムアルキルブタンジアメート（ｓｏｄｉｕｍ  ａｌｋｙｌ  ｂｕｔａｎｅ  ｄｉａｍａｔｅ）、ナトリウムチオブタンジオエートのポリエステル、ベンゼンアセトニトリル誘導体、タンパク質性物質（たとえば、乳製品、小麦粉、大豆ミール、血液、アルブミン、ゼラチン、またはそれらの組み合わせ）、または、それらの組み合わせを含有しても良い。
【０１５０】
増粘剤は、ポリエチレングリコールの長鎖スルホン酸アルキル、オレイン酸ポリオキシエチレン、またはそれらの組み合わせを含有しても良い。
【０１５１】
界面活性剤は、重油、重油蒸留物、ポリオール脂肪酸エステル、ポリエトキシル化脂肪酸エステル、アリールアルキルポリオキシエチレングリコール、アルキル酢酸アミン、アルキルスルホン酸アリール、多価アルコール、リン酸アルキル、またはそれらの組み合わせを含有しても良い。
【０１５２】
凝固防止剤は、ナトリウム塩、炭酸カルシウム、珪藻土、またはそれらの組み合わせを含有する。たとえば、ナトリウム塩は、モノメチルスルホン酸ナフタレンのナトリウム塩、ジメチルスルホン酸ナフタレンのナトリウム塩、亜硫酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、またはそれらの組み合わせを含有しても良い。
【０１５３】
適切な農学的に受容可能な担体としては、バーミキュライト、木炭、製糖工場の炭酸化プレス泥、もみ殻、カルボキシメチルセルロース、泥炭、パーライト、細砂、炭酸カルシウム、粉末、ミョウバン、デンプン、滑石、ポリビニルピロリドン、またはそれらの組み合わせが挙げられる。
【０１５４】
製剤は、植物もしくは植物生育環境への適用のために、種子被覆製剤、液体製剤、または、植物もしくは植物生育環境への適用のために固形製剤を含有しても良い。
【０１５５】
たとえば、種子被覆製剤は、種子への適用のために、水性または油性の溶液を含有しても良い。あるいは、種子被覆製剤は、種子への適用のために、粉末または顆粒の製剤を含有しても良い。
【０１５６】
植物または植物生育環境への適用のための液体製剤は、濃縮製剤または、すぐに使える（ｒｅａｄｙ−ｔｏ−ｕｓｅ）製剤を含有しても良い。
【０１５７】
植物または植物生育環境への適用のための固形製剤は、顆粒剤または粉末剤を含有しても良い。
【０１５８】
また、任意の上述の製剤は、たとえば、肥料、微量栄養素肥料物質、殺虫剤、除草剤、植物生育改善物質、防かび剤、殺虫剤、軟体動物駆除剤、殺藻剤、細菌接種剤、真菌接種剤、またはそれらの組み合わせを含有しても良い。
【０１５９】
肥料は、液体肥料を含有しても良い。
【０１６０】
肥料は、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、硫酸硝酸アンモニウム、塩化アンモニウム、重硫酸アンモニウム、ポリ硫化アンモニウム、チオ硫化アンモニウム、アンモニア水、無水アンモニア、ポリリン酸アンモニウム、硫酸アルミニウム、硝酸カルシウム、カルシウム硝酸アンモニウム、硫酸カルシウム、か焼マグネサイト、方解石質石灰岩、酸化カルシウム、硝酸カルシウム、ドロマイト質石灰石、消石灰、炭酸カルシウム、リン酸２アンモニウム、リン酸１アンモニウム、硝酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、硝酸カリウム、塩化カリウム、硫酸カリウムマグネシウム、硫酸カリウム、硝酸ナトリウム、苦灰質石灰岩、マグネシア、尿素、尿素−ホルムアルデヒド、尿素硝酸アンモニウム、硫黄被覆尿素、ポリマー被覆尿素、イソブチリデンジウレア、Ｋ２ＳＯ４−２ＭｇＳＯ４、カイナイト、シルビナイト、キーゼル石、Ｅｐｓｏｍ塩、元素状硫黄、泥灰土、粉末牡蠣、魚粉、油かす、魚肥料、血粉、リン鉱石、過リン酸肥料、スラグ、骨粉、木灰、肥料、バットグアノ、ピートモス、堆肥、生砂、綿実粉、羽毛粉、蟹粉、魚乳濁液、フミン酸、またはそれらの組み合わせを含有しても良い。
【０１６１】
微量栄養素肥料物質は、ホウ酸、ホウ酸塩、ホウ素フリット、硫酸銅、銅フリット、銅キレート、四ホウ酸ナトリウム十水和物、硫酸鉄、酸化鉄、硫酸鉄アンモニウム、鉄フリット、鉄キレート、硫酸マンガン、酸化マンガン、マンガンキレート、塩化マンガン、マンガンフリット、モリブデン酸ナトリウム、モリブデン酸、硫酸亜鉛、酸化亜鉛、炭酸亜鉛、亜鉛フリット、リン酸亜鉛、亜鉛キレート、またはそれらの組み合わせを含有しても良い。
【０１６２】
殺虫剤は、有機リン酸塩、カルバミン酸塩、ピレスロイド、ダニ駆除剤、フタル酸アルキル、ホウ酸、ホウ酸塩、フッ化物、硫黄、ハロ芳香族置換尿素、炭化水素エステル、生物ベースの殺虫剤、またはそれらの組み合わせを含有しても良い。
【０１６３】
除草剤は、クロロフェノキシ化合物、ニトロフェノール化合物、ニトロクレゾール化合物、ジピリジル化合物、アセトアミド、脂肪酸、アニリド、ベンズアミド、安息香酸、安息香酸誘導体、アニス酸、アニス酸誘導体、ベンゾニトリル、ベンゾチアジアジノン二酸化物、チオカルバミド酸塩、カルバミン酸塩、カルバニレート、クロロピリジニル、シクロヘキセノン誘導体、ジニトロアミノベンゼン誘導体、フルオロジニトロトルイジン化合物、イソキサゾリジノン、ニコチン酸、イソプロピルアミン、イソプロピルアミン誘導体、オキサジアゾリノン、リン酸塩、フタル酸塩、ピコリン酸化合物、トリアジン、トリアゾール、ウラシル、尿素誘導体、エンドサル、塩素酸ナトリウム、またはそれらの組み合わせを含有しても良い。
【０１６４】
防かび剤は、置換ベンゼン、チオカルバマート、エチレンビスジチオカルバマート、チオフタリドアミド、銅化合物、有機水銀化合物、有機スズ化合物、カドミウム化合物、アニラジン、ベノミル、シクロへキサミド、ドジン（ｄｏｄｉｎｅ）、エトリジアゾール、イプロジオン、メトラキシル（ｍｅｔｌａｘｙｌ）、チアミメホン（ｔｈｉａｍｉｍｅｆｏｎ）、トリホリン、またはそれらの組み合わせを含有しても良い。
【０１６５】
真菌接種剤は、Ｇｌｏｍｅｒａｃｅａｅ科の真菌接種剤、Ｃｌａｒｏｉｄｏｇｌｏｍｅｒａｃｅａｅ科の真菌接種剤、Ｇｉｇａｓｐｏｒａｃｅａｅ科の真菌接種剤、Ａｃａｕｌｏｓｐｏｒａｃｅａｅ科の真菌接種剤、Ｓａｃｃｕｌｏｓｐｏｒａｃｅａｅ科の真菌接種剤、Ｅｎｔｒｏｐｈｏｓｐｏｒａｃｅａｅ科の真菌接種剤、Ｐａｃｉｄｓｐｏｒａｃｅａｅ科の真菌接種剤、Ｄｉｖｅｒｓｉｓｐｏｒａｃｅａｅ科の真菌接種剤、Ｐａｒａｇｌｏｍｅｒａｃｅａｅ科の真菌接種剤、Ａｒｃｈａｅｏｓｐｏｒａｃｅａｅ科の真菌接種剤、Ｇｅｏｓｉｐｈｏｎａｃｅａｅ科の真菌接種剤、Ａｍｂｉｓｐｏｒａｃｅａｅ科の真菌接種剤、Ｓｃｕｔｅｌｌｏｓｐｏｒａｃｅａｅ科の真菌接種剤、Ｄｅｎｔｉｓｃｕｌｔａｔａｃｅａｅ科の真菌接種剤、Ｒａｃｏｃｅｔｒａｃｅａｅ科の真菌接種剤、ｐｈｙｌｕｍ  Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｏｔａ科の真菌接種剤、ｐｈｙｌｕｍ  Ａｓｃｏｍｙｃｏｔａ科の真菌接種剤、ｐｈｙｌｕｍ  Ｚｙｇｏｍｙｃｏｔａ科の真菌接種剤、またはそれらの組み合わせを含有しても良い。
【０１６６】
細菌接種剤は、Ｒｈｉｚｏｂｉｕｍ属の細菌接種剤、Ｂｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ属の細菌接種剤、Ｍｅｓｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ属の細菌接種剤、Ａｚｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ属の細菌接種剤、Ａｌｌｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ属の細菌接種剤、Ｓｉｎｏｒｈｉｚｏｂｉｕｍ属の細菌接種剤、Ｋｌｕｙｖｅｒａ属の細菌接種剤、Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ属の細菌接種剤、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ属の細菌接種剤、Ａｚｏｓｐｉｒｉｌｌｉｕｍ属の細菌接種剤、Ｂａｃｉｌｌｕｓ属の細菌接種剤、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ属の細菌接種剤、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ属の細菌接種剤、Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ属の細菌接種剤、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ属の細菌接種剤、Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ属の細菌接種剤、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属の細菌接種剤、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ属の細菌接種剤、Ｇｌｉｏｃｌａｄｉｕｍ属の細菌接種剤、Ｇｌｏｍｕｓ属の細菌接種剤、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ属の細菌接種剤、またはそれらの組み合わせを含有しても良い。
【０１６７】
細菌接種剤は、植物生育刺激細菌株を含有しても良い。植物生育刺激細菌株は、殺虫性毒素（たとえば、Ｃｒｙ毒素）を産生する細菌株、抗真菌化合物（たとえば、β−１，３−グルカナーゼ、キトシナーゼ、リチカーゼ、またはそれらの組み合わせ）を産生する細菌株、殺線虫性化合物（たとえば、Ｃｒｙ毒素）を産生する細菌株、殺菌性化合物を産生する細菌株、１以上の抗生物質に対して抵抗性である細菌株、１以上の遊離複製プラスミドを含有する細菌株、植物の根に結合する細菌株、植物の根にコロニー形成する細菌株、バイオフィルムを形成する細菌株、栄養素を可溶化する細菌株、有機酸を分泌する細菌株、または、それらの任意の組み合わせである細菌株を含有しても良い。
【０１６８】
たとえば、細菌接種剤は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ  ＣＡＰ５３（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０８１９）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ  ＣＡＰ５６（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０８１７）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｆｌｅｘｕｓ  ＢＴ０５４（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０８１６）、Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ  ｋｏｎｄｒａｔｉｅｖａｅ  ＮＣ３５（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０８２０）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＢＴ１５５（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０９２１）、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅ  ＣＡＰ１２（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０８２２）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｎｅａｌｓｏｎｉｉ  ＢＯＢＡ５７（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  ＮＲＲＬ  Ｂ−５０８２１）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＥＥ１１８（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０９１８）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ＥＥ１４８（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０９２７）、Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ  ＥＥ１０７（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０９２０）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＥＥ１４１（ＮＲＲＬ  ＮＯ．  Ｂ−５０９１６）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＢＴ４６−３（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０９２２）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーであるＥＥ１２８（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０９１７）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ０１３Ａ（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０９２４）、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍａｓｓｉｌｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ２３（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０９２３）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーであるＥＥ３４９（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０９２８）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ＥＥ２１８（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０９２６）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ  ＥＥ２８１（ＮＲＲＬ  Ｎｏ．  Ｂ−５０９２５）、または、それらの組み合わせを含有しても良い。これら株のそれぞれは、Ｕｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ  ｏｆ  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ  （ＵＳＤＡ）  Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｓｅｒｖｉｃｅ  （ＡＲＳ）（住所は、１８１５  Ｎｏｒｔｈ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｓｔｒｅｅｔ、Ｐｅｏｒｉａ、Ｉｌｌｉｎｏｉｓ  ６１６０４  Ｕ．Ｓ．Ａ．）に、２０１３年３月１１日に（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ  ＣＡＰ５３、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ  ＣＡＰ５６、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｆｌｅｘｕｓ  ＢＴ０５４、Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ  ｋｏｎｄｒａｔｉｅｖａｅ  ＮＣ３５、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅ  ＣＡＰ１２、および、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｎｅａｌｓｏｎｉｉ  ＢＯＢＡ５７）寄託されており、または、２０１４年３月１０日に（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＢＴ１５５、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＥＥ１１８、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ＥＥ１４８、Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ  ＥＥ１０７、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＥＥ１４１、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＢＴ４６−３、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーであるＥＥ１２８、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ０１３Ａ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍａｓｓｉｌｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ２３、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーであるＥＥ３４９、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ＥＥ２１８、および、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ  ＥＥ２８１）寄託されており、ならびに、カッコ内に示されるＮＲＲＬ番号によって特定される。
【０１６９】
これら植物生育刺激株は、様々な活力のある植物の根圏から単離され、および、１６Ｓ  ｒＲＮＡの配列（本明細書において、配列番号１０４〜１２１に提示）および生化学アッセイを介して特定された。当該株は、標準的な生化学的指標および形態学的指標により、少なくともその属指定に対して特定された。たとえばＰａｒａｃｏｃｃｕｓ  ｋｏｎｄｒａｔｉｅｖａｅ、Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ  ｆａｅｃａｌｉｓ、および、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ  ｃｌｏａｃａｅ等のグラム陰性株確定のための生化学的アッセイとしては、たとえば、ＭａｃＣｏｎｋｅｙ培地および普通寒天上での増殖、顕微鏡観察、５％および７．５％ＮａＣｌ培地での増殖、ｐＨ５およびｐＨ９での増殖、４２℃および５０℃での増殖、セロビオース、ラクトース、グリセロール、グルコース、スクロース、ｄ−マンニトールおよびデンプンを用いた発酵で酸を産生する能力；蛍光色素の産生；ゼラチンの加水分解；硝酸塩還元；デンプン加水分解；オキシダーゼ反応、カタラーゼ産生、ウレアーゼ産生ならびに運動性が挙げられる。同様に、たとえばＢａｃｉｌｌｕｓおよびＰａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ等のグラム陽性株確定のための生化学的アッセイとしては、ＰＥＡ培地および普通寒天上での増殖、顕微鏡観察、５％および７．５％ＮａＣｌ培地での増殖、ｐＨ５およびｐＨ９での増殖、４２℃および５０℃での増殖、セロビオース、ラクトース、グリセロール、グルコース、スクロース、ｄ−マンニトールおよびデンプンを用いた発酵で酸を産生する能力；蛍光色素の産生；ゼラチンの加水分解；硝酸塩還元；カタラーゼ産生、デンプン加水分解；オキシダーゼ反応、ウレアーゼ産生ならびに運動性が挙げられる。これら株の特定および、植物生育刺激効果の証明に関しては、以下の実施例に詳述する。
【０１７０】
たとえば、製剤は、Ｐａｒａｃｏｃｃｕｓ  ｋｏｎｄｒａｔｉｅｖａｅ  ＮＣ３５、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｒｙａｂｈａｔｔａｉ  ＣＡＰ５３、またはＢａｃｉｌｌｕｓ  ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ  ＥＥ２８１を含有する植物生育刺激細菌株を含有しても良く、ここで、当該製剤はさらに、本明細書に記述される組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー（本明細書の組換え植物生育刺激Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの株（たとえば、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＢＴ１５５、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ  ＥＥ１４１、または、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ０１３Ａ等））のいずれかを含有する。組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーは、本明細書に記述される任意の融合タンパク質（たとえば、配列番号６０の標的化配列および、非ホルモン性ペプチド（たとえば、kｕｎｉｔｚトリプシンインヒビター（ＫＴＩ））、植物生育刺激化合物の産生または活性化に関与する酵素（たとえば、キトシナーゼ）、植物結合タンパク質もしくはペプチド（たとえば、ＴａｓＡ）；病原体から植物を防御するタンパク質もしくはペプチド（たとえば、ＴａｓＡ）、または、細菌、真菌もしくは植物の栄養源を分解もしくは改変する酵素（たとえば、たとえばＰｈｏＡまたはフィターゼ等のホスファターゼ、またはエンドグルカナーゼ）を含有する融合タンパク質）を発現しても良い。
【０１７１】
植物生育を刺激する方法
本発明はまた、植物の生育を刺激する方法に関するものである。植物の生育を刺激する方法には、上述の組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのいずれか、または、上述の製剤のいずれかを植物生育環境へと導入することが含まれる。あるいは、上述の組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー、または上述の製剤のいずれかを、植物、植物の種子、または、植物もしくは植物種子の周辺域へと適用しても良い。そのような方法において、植物生育刺激タンパク質またはペプチドは、組換えＢａｃｉｌｌｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムに物理的に付加されている。
【０１７２】
あるいは、植物生育刺激方法は、融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、植物生育環境へと導入すること、または、融合タンパク質を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、植物、植物種子、または、植物もしくは植物種子の周辺域へと適用することを含有する。融合タンパク質は、少なくとも１つの植物生育刺激タンパク質またはペプチド、および、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片を含有する。植物生育刺激タンパク質またはペプチドは、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムに物理的に付加されている。標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片は、上述の［０００５］段落に列記されている標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片のいずれかであっても良い。
【０１７３】
さらに、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約４３％の同一性を有し、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約５４％である。あるいは、標的化配列は、配列番号１のアミノ酸１〜３５、配列番号１のアミノ酸２０〜３５、配列番号１、または配列番号６０からなる。
【０１７４】
標的化配列は、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約５０％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約６３％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約５０％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約６３％である。
【０１７５】
標的化配列は、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約５０％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約７２％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約５０％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約７２％である。
【０１７６】
標的化配列はまた、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約５６％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約６３％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約５６％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約６３％である。
【０１７７】
標的化配列は、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約６２％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約７２％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約６２％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、配列番号１のアミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約７２％である。
【０１７８】
標的化配列は、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約６８％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約８１％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約６８％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約８１％である。
【０１７９】
標的化配列はまた、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約７２％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約７５％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、配列番号１のアミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約７２％である。
【０１８０】
標的化配列は、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約７５％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約８１％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約７５％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、配列番号１のアミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約８１％である。
【０１８１】
標的化配列は、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約８１％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約８１％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約８１％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約８１％である。
【０１８２】
標的化配列は、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約８１％の同一性を有するアミノ酸配列を含有してもよく、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約９０％である。あるいは、標的化配列は、１６アミノ酸からなり、および、配列番号１のアミノ酸２０〜３５と少なくとも約８１％の同一性を有するアミノ酸配列からなり、ここで、アミノ酸２５〜３５との同一性は、少なくとも約９０％である。
【０１８３】
あるいは、エキソスポリウムタンパク質またはエキソスポリウムタンパク質断片は、配列番号２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、４４、４６、４８、５０、５２、５４、５６、５８、５９、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、および８４のいずれか１つと少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含有しても良い。
【０１８４】
植物生育刺激タンパク質は、酵素を含有しても良い。たとえば、酵素は、細菌源、真菌源、もしくは植物の栄養源を分解または改変する酵素を含有しても良い。そのような酵素としては、セルラーゼ、リパーゼ、リグニンオキシダーゼ、プロテアーゼ、グリコシド加水分解酵素、ホスファターゼ、ニトロゲナーゼ、ヌクレアーゼ、アミダーゼ、硝酸還元酵素、亜硝酸還元酵素、アミラーゼ、アンモニアオキシダーゼ、リグニナーゼ、グルコシダーゼ、ホスホリパーゼ、フィターゼ、ぺクチナーゼ、グルカナーゼ、スルファターゼ、ウレアーゼ、キシラナーゼ、および親鉄剤（シデロフォア）が挙げられる。植物生育環境へと導入、または、植物、種子、または植物もしくは植物種子の周辺域へと適用された場合、細菌源、真菌源、もしくは植物の栄養源を分解または改変する酵素を含有する融合タンパク質は、植物の周辺で栄養源を処理し、および、植物による栄養の取り込みの増強、または、植物周辺の有益な細菌または真菌による栄養の取り込みの増強をもたらす。
【０１８５】
適切なセルラーゼとしては、エンドセルラーゼ（たとえば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓエンドグルカナーゼ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓエンドグルカナーゼ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓエンドグルカナーゼ、または、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｌａｕｓｉｉエンドグルカナーゼ）、エキソセルラーゼ（たとえば、Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ  ｒｅｅｓｅｉエキソセルラーゼ）、および、β−グルコシダーゼ（たとえば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  β−グルコシダーゼ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  β−グルコシダーゼ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ  β−グルコシダーゼ、または、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｌａｕｓｉｉ  Ｂ−グルコシダーゼ）が挙げられる。
【０１８６】
リパーゼは、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓリパーゼ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓリパーゼ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓリパーゼ、または、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｌａｕｓｉｉリパーゼを含有しても良い。
【０１８７】
適切なリグニンオキシダーゼは、リグニンペルオキシダーゼ、ラッカーゼ、グリオキサルオキシダーゼ、リグニナーゼ、およびマンガンペルオキシダーゼを含有する。
【０１８８】
プロテアーゼは、サブチリシン、酸プロテアーゼ、アルカリプロテアーゼ、プロテイナーゼ、ペプチダーゼ、エンドペプチダーゼ、エキソペプチダーゼ、サーモリシン、パパイン、ペプシン、トリプシン、プロナーゼ、カルボキシラーゼ、セリンプロテアーゼ、グルタミン酸プロテアーゼ、アスパラギン酸プロテアーゼ、システインプロテアーゼ、スレオニンプロテアーゼ、またはメタロプロテアーゼを含有しても良い。
【０１８９】
ホスファターゼは、リン酸モノエステル加水分解酵素、ホスホモノエステラーゼ（たとえば、ＰｈｏＡ４）、リン酸ジエステル加水分解酵素、ホスホジエステラーゼ、三リン酸モノエステル加水分解酵素、無水ホスホリル加水分解酵素、ピロホスファターゼ、フィターゼ（たとえば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ＥＥ１４８フィターゼ、または、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ０１３Ａフィターゼ）、トリメタホスファターゼ、またはトリホスファターゼを含有しても良い。
【０１９０】
ニトロゲナーゼは、Ｎｉｆファミリーのニトロゲナーゼ（たとえば、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍａｓｓｉｌｉｅｎｓｉｓ  ＮｉｆＢＤＥＨＫＮＸＶ）を含有しても良い。
【０１９１】
植物の生育を刺激する上述のいずれかの方法において、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを含有する植物生育環境中で育った植物は、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを含有していない同一の植物生育環境中での生育と比較し、生育の増強を示す。
【０１９２】
植物の生育を刺激する上述のいずれかの方法において、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーは、上述の組換え植物生育刺激細菌株のいずれかを含有しても良い。
【０１９３】
植物の生育を刺激する上述のいずれかの方法において、融合タンパク質は、上述のいずれかのプロモーターの制御下で発現されても良い。
【０１９４】
病原体から植物を防御する方法
本発明はさらに、病原体から植物を防御する方法に関するものである。当該方法には、上述の任意の組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー、または上述の任意の製剤を植物生育環境中へと導入することが含まれる。あるいは、当該方法には、上述の任意の組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー、または上述の任意の製剤を、植物、植物種子、または植物もしくは植物種子の周辺域へと適用することが含まれる。これら方法において、病原体から植物を防御するタンパク質またはペプチドは、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムに物理的に付加されている。
【０１９５】
組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを含有する植物生育環境中で育った植物は、当該組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを含有しない同一の植物生育環境中で育った植物と比較し、病原体に感染しにくい。病原体に対する抵抗性の高さは、病原体から植物を防御する当該タンパク質またはペプチドによる、植物の免疫システムの刺激の結果であってもよく、または、病原体から植物を防御する当該タンパク質またはペプチドの、病原体に対する間接的効果または直接的効果の結果であっても良い。
【０１９６】
植物におけるストレス耐性を増強させる方法
本発明はさらに、植物におけるストレス耐性を増強させる方法に関するものである。当該方法には、上述の任意の組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー、または上述の任意の製剤を植物生育環境中へと導入することが含まれる。あるいは、当該方法には、上述の任意の組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー、または上述の任意の製剤を、植物、植物種子、または植物もしくは植物種子の周辺域へと適用することが含まれる。これら方法において、植物におけるストレス耐性を増強させるタンパク質またはペプチドは、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムに物理的に付加されている。
【０１９７】
組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを含有する植物生育環境中で育った植物は、当該組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを含有しない同一の植物生育環境中で育った植物と比較し、ストレスの影響を受けにくい。
【０１９８】
植物にＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの芽胞を固定する方法
本発明はまた、植物に組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの芽胞を固定する方法を目的とするものである。これら方法には、上述の任意の組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー、または上述の任意の製剤を植物生育環境中へと導入することが含まれる。あるいは、当該方法には、上述の任意の組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー、または上述の任意の製剤を、植物、植物種子、または植物もしくは植物種子の周辺域へと適用することが含まれる。植物結合タンパク質またはペプチドは、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムに物理的に付加されている。
【０１９９】
これら方法により、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの芽胞が、植物に結合することが可能となり、それにより、当該芽胞は当該植物上に維持される。たとえば、これら方法により、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの芽胞が、植物の根に結合することが可能となり、または、植物の空中の部分（たとえば、葉、幹、花、もしくは実等）に結合することが可能となり、それにより、当該芽胞は、植物生育環境中へと消散することなく、または、植物の空中部分の周辺環境へと消散することなく、植物の根構造、または、植物の空中部分に維持される。
【０２００】
植物に組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの芽胞を固定する任意の方法において、当該植物結合タンパク質またはペプチドは、植物、または植物構造、または植物下部構造（たとえば、植物の根、および、植物の根の下部構造、または、植物の空中部分もしくは植物の空中部分の下部構造）に選択的にＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを向かわせ、および維持させることができる。
【０２０１】
植物生育環境
上述の任意の方法において、植物生育環境は、植物の生育をサポートすることができる物質である。植物生育環境は、土壌、水、水性溶液、砂、砂利、多糖、マルチ、堆肥、ピートモス、わら、丸太、粘土、大豆ミール、酵母抽出物、またはそれらの組み合わせを含有しても良い。たとえば、植物生育環境は、土壌、堆肥、ピートモス、またはそれらの組み合わせを含有する。
【０２０２】
植物生育環境は、土壌は、任意選択的に、酵素の基質を補充されても良い。たとえば、基質は、トリプトファン、アデノシン一リン酸、アデノシン二リン酸、アデノシン三リン酸（たとえば、アデノシン−３−三リン酸）、インドール、トリメタホスフェート、フェロドキシン、アセトイン、ジアセチル、ピルビン酸、アセト乳酸、ペクチン、セルロース、メチルセルロース、デンプン、キチン、ペクチン、タンパク質食品、セルロース誘導体、リン酸、アセトイン、キトサン、インドール−３−酢酸の不活性型誘導体、ジベレリン酸の不活性型誘導体、キシラン、コリン、コリン誘導体、プロリン、ポリプロリン、プロリン富化食、プロリン富化タンパク質、フェニルアラニン、コリスミ酸、アラビノキシラン、脂質、ワックス、油、フィチン酸、リグニン、フミン酸、コリン、コリン誘導体、またはそれらの組み合わせを含有しても良い。
【０２０３】
応用方法
上述の任意の方法において、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー、または製剤を、植物生育環境へと導入してもよく、または、植物、植物種子、または植物もしくは植物種子の周辺域へと適用しても良い。
【０２０４】
たとえば、当該方法は、植え付けの前に、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー、または、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを含有する製剤を用いて、種子をコーティングすることを含有しても良い。
【０２０５】
あるいは、当該方法は、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー、または製剤を、植物の空中部分（たとえば、枝葉、幹、実、または花等）に適用することを含有しても良い。たとえば、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー、または製剤は、植物の葉、または他の空中部分に、スプレー、ブラッシング、浸す、または他の方法で適用されても良い。
【０２０６】
当該方法は、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを含有する液体製剤または固形製剤を、当該環境（たとえば、土壌、堆肥、ピートモス、またはそれらの組み合わせ）に適用することにより、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、植物の生育環境中へと導入することを含有しても良い。
【０２０７】
製剤は、植物生育環境に種子、苗、挿し木、球根または植物を植え付ける前、植え付けと同時、または植え付けの後に、植物生育環境へと適用されても良い。
【０２０８】
農薬の同時適用
上述の任意の方法にはさらに、植物生育環境中に少なくとも１つの農薬を導入すること、または、植物もしくは種子に少なくとも１つの農薬を適用することを含有しても良い。農薬は、製剤に含有される上述の任意のもの、またはそれらの組み合わせであっても良い。
【０２０９】
植物
上述の方法は、様々な植物で実施することができる。たとえば、植物は、双子葉植物、単子葉植物、または裸子植物であっても良い。
【０２１０】
たとえば、植物が双子葉植物である場合、当該双子葉植物は、豆、エンドウ、トマト、コショウ、カボチャ、アルファルファ、アーモンド、アニスシード、リンゴ、アプリコット、ａｒｒａｃｈａ、アーティチョーク、アボカド、フタゴマメ、ビート、ベルガモット、黒コショウ、ｂｒａｃｋ  ｗａｔｔｌｅ、ブラックベリー、ブルーベリー、ダイダイ、青梗菜、ブラジル・ナッツ、パンノキ、ブロッコリ、ソラマメ、芽キャベツ、ソバ、キャベツ、アマナズナ、白菜、カカオ、カンタループ、ヒメウイキョウ種子、カルドン、イナゴマメ、ニンジン、カシューナッツ、キャッサバ、トウゴマの実、カリフラワー、根用セロリ、セロリ、チェリー、クリ、ヒヨコマメ、チコリ、チリペッパー、菊、シナモン、シトロン、クレメンタイン、クローブ、クローバー、コーヒー、コーラナット、西洋アブラナ、トウモロコシ、綿、綿実、ササゲ、ハマナ、クランベリー、クレソン、キュウリ、干しぶどう、カスタードアップル、ナンバンサイカチ、アメリカヤブマメ、ナス、キクヂシャ、ウイキョウ、コロハ、イチジク、ムラサキハシバミ、アマ、ゼラニウム、グーズベリー、ヒョウタン、ブドウ、グレープフルーツ、グアバ、麻、麻実、ヘンナ、ホップ、馬豆、セイヨウワサビ、インディゴ、ジャスミン、キクイモ、ジュート、ケール、カポック、ケナフ、カブキャベツ、キンカン、ラベンダー、レモン、ヒラマメ、ハギ、レタス、ライム、カンゾウ、レイシ、ビワ、ルピナス、マカデミアナッツ、メイス、マンダリン、テンサイ、マンゴー、セイヨウカリン、メロン、ミント、桑、マスタード、ネクタリン、ニジェール種子、ナツメグ、オクラ、オリーブ、アヘン、オレンジ、パパイヤ、パースニップ、エンドウ、モモ、ピーナッツ、洋ナシ、ペカンナット、柿、キマメ、ピスタチオ、オオバコ、プラム、ザクロ、ポメロ、ケシの実、ジャガイモ、サツマイモ、プルーン、カボチャ、ケブラチョ、マルメロ、Ｃｉｎｃｈｏｎａ属の樹木、キノア、ハツカダイコン、ラミー、ナタネ、ラズベリー、レア、ルバーブ、バラ、ゴム、ルタバガ、ベニバナ、イガマメ、バラモンジン、サポディラ、ウンシュウミカン、フタナミソウ、ゴマ、シアバターノキ、大豆、ホウレンソウ、トウナス、イチゴ、テンサイ、サトウキビ、ヒマワリ、スウェーデンカブラ、ピーマン、タンジェリン、茶、テフ、タバコ、トマト、シロツメクサ、アブラギリ、カブ、ボンテンカ、カラスノエンドウ、クルミ、スイカ、イエルバ  マテ、フユガラシ、ナズナ、コショウソウ（ｇａｒｄｅｎ  ｃｒｅｓｓ）、コショウソウ（ｐｅｐｐｅｒ  ｃｒｅｓｓ）、クレソン、グンバイナズナ、トウシミキ、ローレル、月桂樹、桂皮、ｊａｍｕｎ、ヒメウイキョウ、タマリンド、ペパーミント、オレガノ、ローズマリー、セージ、トゲバンレイシ、ルリソウ、テリハボク属、にがうり、ククイの実、タヒチセイヨウトチノキ、バジル、ハックルベリー、ハイビスカス、パッションフルーツ、スターアップル、サッサフラス、サボテン、セイヨウオトギリソウ、ミソハギ、サンザシ、コリアンダーの葉、カレープラント、キウィ、タイム、ズッキーニ、ウルーコ、クズイモ、ウォーターリーフ、ｓｐｉｎｙ  ｍｏｎｋｅｙ  ｏｒａｎｇｅ、ｙｅｌｌｏｗ  ｍｏｍｂｉｎ、スターフルーツ���アマランス、ワサビ、トウガラシ、イエロープラム、ｍａｓｈｕａ、Ｃｈｉｎｅｓｅ  ｔｏｏｎ、つるな、ｂｏｗｅｒ  ｓｐｉｎａｃｈ、ｕｇｕ、エゾヨモギギク、ハコベ、ジョコテ、蒲桃、ｐａｒａｃｒｅｓｓ、ケシアザミ、Ｃｈｉｎｅｓｅ  ｐｏｔａｔｏ、ｈｏｒｓｅ  ｐａｒｓｌｅｙ、垣根芥子、センノウ、ａｇａｔｅ、ｃａｓｓｏｄ  ｔｒｅｅ、アザミ、オランダワレモコウ、スターグーズベリー、オカヒジキ、アツケシソウ、ｓｉｌｖｅｒ  ｌａｃｅ  ｆｅｒｎ、ｃｏｌｌａｒｄ  ｇｒｅｅｎｓ、サクラソウ、キバナクリンソウ、スベリヒユ、ミチヤナギ、トクノウコウ、ツリーレタス、ｗｉｌｄ  ｂｅｔｅｌ、Ｗｅｓｔ  Ａｆｒｉｃａｎ  ｐｅｐｐｅｒ、サンタ草、タラゴン、パセリ、チャービル、ｌａｎｄ  ｃｒｅｓｓ、オランダワレモコウユキノシタ、ｈｏｎｅｙｈｅｒｂ、フキ、シソ、ヤナギタデ、エゴマ、苦豆、ｏｃａ、ｋａｍｐｏｎｇ、中国セロリ、レモンバジル、タイバジル、水含羞草、ヤブニンジン、キャベツヤシ、ｍｏｒｉｎｇａ、ｍａｕｋａ、こごみ、ｒｉｃｅ  ｐａｄｄｙ  ｈｅｒｂ、イエローサワーレタス、トウキ草、コショウ草、マカ、ヒョウタン、フジマメ、空芯菜、ｃａｔｓｅａｒ、ｆｉｓｈｗｏｒｔ、沖縄ホウレンソウ、ｌｏｔｕｓ  ｓｗｅｅｔｊｕｉｃｅ、ｇａｌｌａｎｔ  ｓｏｌｄｉｅｒ、ｃｕｌａｎｔｒｏ、キバナスズシロ、カルドン、ｃａｉｇｕａ、ミツバ、ｃｈｉｐｉｌｉｎ、サムファイア、ｍａｍｐａｔ、ｅｂｏｌｏ、ｉｖｙ  ｇｏｕｒｄ、ｃａｂｂａｇｅ  ｔｈｉｓｔｌｅ、ハマナ、ｃｈａｙａ、ｈｕａｕｚｏｎｔｌｅ、エチオピアマスタード、ｍａｇｅｎｔａ  ｓｐｒｅｅｎ、ｇｏｏｄ  ｋｉｎｇ  ｈｅｎｒｙ、ｅｐａｚｏｌｅ、ｌａｍｂ‘ｓ  ｑｕａｒｔｅｒｓ、ｃｅｎｔｅｌｌａ  ｐｌｕｍｅｄ  ｃｏｃｋｓｃｏｍｂ、セイヨウフウチョウボク、ｒａｐｉｎｉ、白菜、ミズナ、Ｃｈｉｎｅｓｅ  ｓａｖｏｙ、ｋａｉ−ｌａｎ、マスタードグリーン、Ｍａｌａｂａｒ  ｓｐｉｎａｃｈ、フダンソウ、ウスベニタチアオイ、ｃｌｉｍｂｉｎｇ  ｗａｔｔｌｅ、Ｃｈｉｎａ  ｊｕｔｅ、パプリカ、ベニノキ種、スペアミント、キダチハッカ、マヨラナ、クミン、カモミール、レモンバーム 、オールスパイス、コケモモ、チェリモヤ、野生キイチゴ、セイヨウスモモ、ピタヤ、ドリアン、セイヨウニワトコ、フェイジョア、インドパンノキ、ジャンブル、ナツメ、ほおずき、紫マンゴスチン、ランブータン、アカフサスグリ、クロスグリ、サラルベリー、温州ミカン、アグリ、アズキ豆、黒豆、ササゲ、ｂｏｒｌｏｔｔｉ  ｂｅａｎ、インゲンマメ（ｃｏｍｍｏｎ  ｂｅａｎ）、緑豆、インゲンマメ（ｋｉｄｎｅｙ  ｂｅａｎ）、アオイマメ、ヤエナリ、白インゲンマメ、うずら豆、ベニバナインゲン、キヌサヤ、スナップエンドウ、ロマネスコ、ｃａｌａｂｒｅｓｅ、イラクサ、ピーマン、ｒａｄｄｉｃｈｉｏ、ダイコン、白ハツカダイコン、ムカゴニンジン、ｔａｔｏ  ｓｏｉ、ｂｒｏｃｃｏｌｉｎｉ、黒ハツカダイコン、ゴボウ、ソラマメ、ｂｒｏｃｃｏｌｉ  ｒａａｂ、フジマメ、ルピナス、アオギリ科ステルクリア属の高木、ムクナ、シカクマメ、ヤムビーン、マルガ、ヤグルマギク、ｕｍｂｒｅｌｌａ  ｂｕｓｈ、ｔｊｕｎｔｊｕｌａ、ｗａｋａｌｐｕｌｋａ、ｗｉｔｃｈｅｔｔｙ  ��ｕｓｈ、ｗｉｒｙ  ｗａｔｔｌｅ、チーア、ｂｅｅｃｈ  ｎｕｔ、ククイノキ、コロシント、メリコッカノキ、Ｍａｙａ  ｎｕｔ、モンゴンゴ、ｏｇｂｏｎｏ  ｎｕｔ、ｐａｒａｄｉｓｅ  ｎｕｔ、および、チェンぺダック、からなる群から選択されても良い。
【０２１１】
あるいは、双子葉植物は、Ａｃａｎｔｈａｃｅａｅ（アカンサス）、Ａｃｅｒａｃｅａｅ（メープル）、Ａｃｈａｒｉａｃｅａｅ、Ａｃｈａｔｏｃａｒｐａｃｅａｅ（ａｃｈａｔｏｃａｒｐｕｓ）、Ａｃｔｉｎｉｄｉａｃｅａｅ（チャイニーズグーズベリー）、Ａｄｏｘａｃｅａｅ（連複草）、Ａｅｘｔｏｘｉｃａｃｅａｅ、Ａｉｚｏａｃｅａｅ（マツバギク）、Ａｋａｎｉａｃｅａｅ、Ａｌａｎｇｉａｃｅａｅ、Ａｌｓｅｕｏｓｍｉａｃｅａｅ、Ａｌｚａｔｅａｃｅａｅ、Ａｍａｒａｎｔｈａｃｅａｅ（アマランサス）、Ａｍｂｏｒｅｌｌａｃｅａｅ、Ａｎａｃａｒｄｉａｃｅａｅ（ウルシ）、Ａｎｃｉｓｔｒｏｃｌａｄａｃｅａｅ、Ａｎｉｓｏｐｈｙｌｌｅａｃｅａｅ、Ａｎｎｏｎａｃｅａｅ（牛心梨）、Ａｐｉａｃｅａｅ（人参）、Ａｐｏｃｙｎａｃｅａｅ（バシクルモン）、Ａｑｕｉｆｏｌｉａｃｅａｅ（セイヨウヒイラギ）、Ａｒａｌｉａｃｅａｅ（チョウセンニンジン）、Ａｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉａｃｅａｅ（ウマノスズクサ）、Ａｓｃｌｅｐｉａｄａｃｅａｅ（トウワタ）、Ａｓｔｅｒａｃｅａｅ（アスター）、Ａｕｓｔｒｏｂａｉｌｅｙａｃｅａｅ、Ｂａｌａｎｏｐａｃｅａｅ、Ｂａｌａｎｏｐｈｏｒａｃｅａｅ（ツチトリモチ）、Ｂａｌｓａｍｉｎａｃｅａｅ（オジギソウ）、Ｂａｒｂｅｙａｃｅａｅ、Ｂａｒｃｌａｙａｃｅａｅ、Ｂａｓｅｌｌａｃｅａｅ（ｂａｓｅｌｌａ）、Ｂａｔａｃｅａｅ（オカヒジキ）、Ｂｅｇｏｎｉａｃｅａｅ（ベゴニア）、Ｂｅｒｂｅｒｉｄａｃｅａｅ（メギ）、Ｂｅｔｕｌａｃｅａｅ（カバノキ）、Ｂｉｇｎｏｎｉａｃｅａｅ（アメリカノウゼンカズラ）、Ｂｉｘａｃｅａｅ（ｌｉｐｓｔｉｃｋ  ｔｒｅｅ）、Ｂｏｍｂａｃａｃｅａｅ（カポックノキ）、Ｂｏｒａｇｉｎａｃｅａｅ（ルリジサ）、Ｂｒａｓｓｉｃａｃｅａｅ（カラシ、または、Ｃｒｕｃｉｆｅｒａｅ）、Ｂｒｅｔｓｃｈｎｅｉｄｅｒａｃｅａｅ、Ｂｒｕｎｅｌｌｉａｃｅａｅ（ｂｒｕｎｅｌｌｉａ）、Ｂｒｕｎｉａｃｅａｅ、Ｂｒｕｎｏｎｉａｃｅａｅ、Ｂｕｄｄｌｅｊａｃｅａｅ（ブッドレア）、Ｂｕｒｓｅｒａｃｅａｅ（フランキンセンス）、Ｂｕｘａｃｅａｅ（ツゲの木）、Ｂｙｂｌｉｄａｃｅａｅ、Ｃａｂｏｍｂａｃｅａｅ（ジュンサイ）、Ｃａｃｔａｃｅａｅ（サボテン）、Ｃａｅｓａｌｐｉｎｉａｃｅａｅ、Ｃａｌｌｉｔｒｉｃｈａｃｅａｅ（ｗａｔｅｒ  ｓｔａｒｗｏｒｔ）、Ｃａｌｙｃａｎｔｈａｃｅａｅ（ｓｔｒａｗｂｅｒｒｙ  ｓｈｒｕｂ）、Ｃａｌｙｃｅｒａｃｅａｅ（ｃａｌｙｃｅｒａ）、Ｃａｍｐａｎｕｌａｃｅａｅ（ホタルブクロ）、Ｃａｎｅｌｌａｃｅａｅ（ハッケイ）、Ｃａｎｎａｂａｃｅａｅ（麻）、Ｃａｐｐａｒａｃｅａｅ（ケッパー）、Ｃａｐｒｉｆｏｌｉａｃｅａｅ（セイヨウスイカズラ）、Ｃａｒｄｉｏｐｔｅｒｉｄａｃｅａｅ、Ｃａｒｉｃａｃｅａｅ（パパイヤ）、Ｃａｒｙｏｃａｒａｃｅａｅ（ｓｏｕａｒｉ）、Ｃａｒｙｏｐｈｙｌｌａｃｅａｅ（ナデシコ）、Ｃａｓｕａｒｉｎａｃｅａｅ（ｓｈｅ−ｏａｋ）、Ｃｅｃｒｏｐｉａｃｅａｅ（セクロピア）、Ｃｅｌａｓｔｒａｃｅａｅ（アメリカウメモドキ）、Ｃｅｐｈａｌｏｔａｃｅａｅ、Ｃｅｒａｔｏｐｈｙｌｌａｃｅａｅ（ツノゴケ）、Ｃｅｒｃｉｄｉｐｈｙｌｌａｃｅａｅ（カツラの木）、Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉａｃｅａｅ（アカザ）、Ｃｈｌｏｒａｎｔｈａｃｅａｅ（ヒトリシズカ）、Ｃｈｒｙｓｏｂａｌａｎａｃｅａｅ（ココア果実）、Ｃｉｒｃａｅａｓｔｅｒａｃｅａｅ、Ｃｉｓｔａｃｅａｅ（キスツス・クレティクス）、Ｃｌｅｔｈｒａｃｅａｅ（リョウブ）、Ｃｌｕｓｉａｃｅａｅ（マンゴスチン、または、Ｇｕｔｔｉｆｅｒａｅ）、Ｃｎｅｏｒａｃｅａｅ、Ｃｏｌｕｍｅｌｌｉａｃｅａｅ、Ｃｏｍｂｒｅｔａｃｅａｅ（モモタマナ）、Ｃｏｍｐｏｓｉｔａｅ（アスター）、Ｃｏｎｎａｒａｃｅａｅ（ｃａｎｎａｒｕｓ）、Ｃｏｎｖｏｌｖｕｌａｃｅａｅ（アサガオ）、Ｃｏｒｉａｒｉａｃｅａｅ、Ｃｏｒｎａｃｅａｅ（ハナミズキ）、Ｃｏｒｙｎｏｃａｒｐａｃｅａｅ（ｋａｒａｋａ）、Ｃｒａｓｓｕｌａｃｅａｅ（マンネングサ）、Ｃｒｏｓｓｏｓｏｍａｔａｃｅａｅ（クロッソソマ）、Ｃｒｙｐｔｅｒｏｎｉａｃｅａｅ、Ｃｕｃｕｒｂｉｔａｃｅａｅ（キュウリ）、Ｃｕｎｏｎｉａｃｅａｅ（クノニア）、Ｃｕｓｃｕｔａｃｅａｅ（ネナシカズラ）、Ｃｙｒｉｌｌａｃｅａｅ（ｃｙｒｉｌｌａ）、Ｄａｐｈｎｉｐｈｙｌｌａｃｅａｅ、Ｄａｔｉｓｃａｃｅａｅ（ｄａｔｉｓｃａ）、Ｄａｖｉｄｓｏｎｉａｃｅａｅ、Ｄｅｇｅｎｅｒｉａｃｅａｅ、Ｄｉａｌｙｐｅｔａｌａｎｔｈａｃｅａｅ、Ｄｉａｐｅｎｓｉａｃｅａｅ（イワウメ）、Ｄｉｃｈａｐｅｔａｌａｃｅａｅ、Ｄｉｄｉｅｒｅａｃｅａｅ、Ｄｉｄｙｍｅｌａｃｅａｅ、Ｄｉｌｌｅｎｉａｃｅａｅ（ビワモドキ）、Ｄｉｏｎｃｏｐｈｙｌｌａｃｅａｅ、Ｄｉｐｅｎｔｏｄｏｎｔａｃｅａｅ、Ｄｉｐｓａｃａｃｅａｅ（ナベナ）、Ｄｉｐｔｅｒｏｃａｒｐａｃｅａｅ（メランチ）、Ｄｏｎａｔｉａｃｅａｅ、Ｄｒｏｓｅｒａｃｅａｅ（モウセンゴケ）、Ｄｕｃｋｅｏｄｅｎｄｒａｃｅａｅ、Ｅｂｅｎａｃｅａｅ（黒檀）、Ｅｌａｅａｇｎａｃｅａｅ（グミ）、Ｅｌａｅｏｃａｒｐａｃｅａｅ（ホルトノキ）、Ｅｌａｔｉｎａｃｅａｅ（ｗａｔｅｒｗｏｒｔ）、Ｅｍｐｅｔｒａｃｅａｅ（ガンコウラン）、Ｅｐａｃｒｉｄａｃｅａｅ（エパクリス）、Ｅｒｅｍｏｌｅｐｉｄａｃｅａｅ（ｃａｔｋｉｎ−ｍｉｓｔｌｅｔｏｅ）、Ｅｒｉｃａｃｅａｅ（ヒース）、Ｅｒｙｔｈｒｏｘｙｌａｃｅａｅ（コカ）、Ｅｕｃｏｍｍｉａｃｅａｅ、Ｅｕｃｒｙｐｈｉａｃｅａｅ、Ｅｕｐｈｏｒｂｉａｃｅａｅ（トウダイグサ）、Ｅｕｐｏｍａｔｉａｃｅａｅ、Ｅｕｐｔｅｌｅａｃｅａｅ、Ｆａｂａｃｅａｅ（エンドウまたはｌｅｇｕｍｅ）、Ｆａｇａｃｅａｅ（ブナノキ）、Ｆｌａｃｏｕｒｔｉａｃｅａｅ（イイギリ）、Ｆｏｕｑｕｉｅｒｉａｃｅａｅ（オコチョウ）、Ｆｒａｎｋｅｎｉａｃｅａｅ（ｆｒａｎｋｅｎｉａ）、Ｆｕｍａｒｉａｃｅａｅ（カラクサケマン）、Ｇａｒｒｙａｃｅａｅ（ｓｉｌｋ  ｔａｓｓｅｌ）、Ｇｅｉｓｓｏｌｏｍａｔａｃｅａｅ、Ｇｅｎｔｉａｎａｃｅａｅ（リンドウ）、Ｇｅｒａｎｉａｃｅａｅ（ゼラニウム）、Ｇｅｓｎｅｒｉａｃｅａｅ（ｇｅｓｎｅｒｉａｄ）、Ｇｌｏｂｕｌａｒｉａｃｅａｅ、Ｇｏｍｏｒｔｅｇａｃｅａｅ、Ｇｏｏｄｅｎｉａｃｅａｅ（クサトベラ）、Ｇｒｅｙｉａｃｅａｅ、Ｇｒｏｓｓｕｌａｒｉａｃｅａｅ（スグリ）、Ｇｒｕｂｂｉａｃｅａｅ、Ｇｕｎｎｅｒａｃｅａｅ（グンネラ）、Ｇｙｒｏｓｔｅｍｏｎａｃｅａｅ、Ｈａ���ｏｒａｇａｃｅａｅ（フサモ）、Ｈａｍａｍｅｌｉｄａｃｅａｅ（マンサク）、Ｈｅｒｎａｎｄｉａｃｅａｅ（ハスノハギリ）、Ｈｉｍａｎｔａｎｄｒａｃｅａｅ、Ｈｉｐｐｏｃａｓｔａｎａｃｅａｅ（トチノキ）、Ｈｉｐｐｏｃｒａｔｅａｃｅａｅ（ｈｉｐｐｏｃｒａｔｅａ）、Ｈｉｐｐｕｒｉｄａｃｅａｅ（スギナモ）、Ｈｏｐｌｅｓｔｉｇｍａｔａｃｅａｅ、Ｈｕａｃｅａｅ、Ｈｕｇｏｎｉａｃｅａｅ、Ｈｕｍｉｒｉａｃｅａｅ、Ｈｙｄｎｏｒａｃｅａｅ、Ｈｙｄｒａｎｇｅａｃｅａｅ（アジサイ）、Ｈｙｄｒｏｐｈｙｌｌａｃｅａｅ（ウォーターリーフ）、Ｈｙｄｒｏｓｔａｃｈｙａｃｅａｅ、Ｉｃａｃｉｎａｃｅａｅ（クロタキカズラ）、Ｉｄｉｏｓｐｅｒｍａｃｅａｅ、Ｉｌｌｉｃｉａｃｅａｅ（トウシミキ）、Ｉｘｏｎａｎｔｈａｃｅａｅ、Ｊｕｇｌａｎｄａｃｅａｅ（クルミ）、Ｊｕｌｉａｎｉａｃｅａｅ、Ｋｒａｍｅｒｉａｃｅａｅ（ラタニア）、Ｌａｃｉｓｔｅｍａｔａｃｅａｅ、Ｌａｍｉａｃｅａｅ（ミント、またはＬａｂｉａｔａｅ）、Ｌａｒｄｉｚａｂａｌａｃｅａｅ（アケビ）、Ｌａｕｒａｃｅａｅ（月桂樹）、Ｌｅｃｙｔｈｉｄａｃｅａｅ（ブラジル・ナッツ）、Ｌｅｅａｃｅａｅ、Ｌｅｉｔｎｅｒｉａｃｅａｅ（ｃｏｒｋｗｏｏｄ）、Ｌｅｎｎｏａｃｅａｅ（ｌｅｎｎｏａ）、Ｌｅｎｔｉｂｕｌａｒｉａｃｅａｅ（タヌキモ）、Ｌｉｍｎａｎｔｈａｃｅａｅ（メドウフォーム）、Ｌｉｎａｃｅａｅ（亜麻）、Ｌｉｓｓｏｃａｒｐａｃｅａｅ、Ｌｏａｓａｃｅａｅ（ロアサ）、Ｌｏｇａｎｉａｃｅａｅ（フジウツギ）、Ｌｏｒａｎｔｈａｃｅａｅ（ｓｈｏｗｙ  ｍｉｓｔｌｅｔｏｅ）、Ｌｙｔｈｒａｃｅａｅ（オカトラノオ）、Ｍａｇｎｏｌｉａｃｅａｅ（モクレン）、Ｍａｌｅｓｈｅｒｂｉａｃｅａｅ、Ｍａｌｐｉｇｈｉａｃｅａｅ（アセロラ）、Ｍａｌｖａｃｅａｅ（ゼニアオイ）、Ｍａｒｃｇｒａｖｉａｃｅａｅ（ｓｈｉｎｇｌｅ  ｐｌａｎｔ）、Ｍｅｄｕｓａｇｙｎａｃｅａｅ、Ｍｅｄｕｓａｎｄｒａｃｅａｅ、Ｍｅｌａｓｔｏｍａｔａｃｅａｅ（ノボタン）、Ｍｅｌｉａｃｅａｅ（マホガニー）、Ｍｅｌｉａｎｔｈａｃｅａｅ、Ｍｅｎｄｏｎｃｉａｃｅａｅ、Ｍｅｎｉｓｐｅｒｍａｃｅａｅ（コウモリカズラ）、Ｍｅｎｙａｎｔｈａｃｅａｅ（ミツガシワ）、Ｍｉｍｏｓａｃｅａｅ、Ｍｉｓｏｄｅｎｄｒａｃｅａｅ、Ｍｉｔｒａｓｔｅｍｏｎａｃｅａｅ、Ｍｏｌｌｕｇｉｎａｃｅａｅ（クルマバザクロソウ）、Ｍｏｎｉｍｉａｃｅａｅ（ｍｏｎｉｍｉａ）、Ｍｏｎｏｔｒｏｐａｃｅａｅ（ギンリョウソウモドキ）、Ｍｏｒａｃｅａｅ（桑）、Ｍｏｒｉｎｇａｃｅａｅ（ワサビノキ）、Ｍｙｏｐｏｒａｃｅａｅ（ハマジンチョウ）、Ｍｙｒｉｃａｃｅａｅ（ヤマモモ）、Ｍｙｒｉｓｔｉｃａｃｅａｅ（ナツメグ）、Ｍｙｒｏｔｈａｍｎａｃｅａｅ、Ｍｙｒｓｉｎａｃｅａｅ（ヤブコウジ）、Ｍｙｒｔａｃｅａｅ（ギンバイカ）、Ｎｅｌｕｍｂｏｎａｃｅａｅ（ｌｏｔｕｓ  ｌｉｌｙ）、Ｎｅｐｅｎｔｈａｃｅａｅ（Ｅａｓｔ  Ｉｎｄｉａｎ  ｐｉｔｃｈｅｒｐｌａｎｔ）、Ｎｅｕｒａｄａｃｅａｅ、Ｎｏｌａｎａｃｅａｅ、Ｎｏｔｈｏｆａｇａｃｅａｅ、Ｎｙｃｔａｇｉｎａｃｅａｅ（オシロイバナ）、Ｎｙｍｐｈａｅａｃｅａｅ（スイレン）、Ｎｙｓｓａｃｅａｅ（ｓｏｕｒ  ｇｕｍ）、Ｏｃ���ｎａｃｅａｅ（ｏｃｈｎａ）、Ｏｌａｃａｃｅａｅ（ｏｌａｘ）、Ｏｌｅａｃｅａｅ（オリーブ）、Ｏｌｉｎｉａｃｅａｅ、Ｏｎａｇｒａｃｅａｅ（マツヨイグサ）、Ｏｎｃｏｔｈｅｃａｃｅａｅ、Ｏｐｉｌｉａｃｅａｅ、Ｏｒｏｂａｎｃｈａｃｅａｅ（ハマウツボ）、Ｏｘａｌｉｄａｃｅａｅ（カタバミ）、Ｐａｅｏｎｉａｃｅａｅ（ボタン）、Ｐａｎｄａｃｅａｅ、Ｐａｐａｖｅｒａｃｅａｅ（ポピー）、Ｐａｐｉｌｉｏｎａｃｅａｅ、Ｐａｒａｃｒｙｐｈｉａｃｅａｅ、Ｐａｓｓｉｆｌｏｒａｃｅａｅ（トケイソウ）、Ｐｅｄａｌｉａｃｅａｅ（ゴマ）、Ｐｅｌｌｉｃｉｅｒａｃｅａｅ、Ｐｅｎａｅａｃｅａｅ、Ｐｅｎｔａｐｈｒａｇｍａｔａｃｅａｅ、Ｐｅｎｔａｐｈｙｌａｃａｃｅａｅ、Ｐｅｒｉｄｉｓｃａｃｅａｅ、Ｐｈｙｓｅｎａｃｅａｅ、Ｐｈｙｔｏｌａｃｃａｃｅａｅ（ヨウシュヤマゴボウ）、Ｐｉｐｅｒａｃｅａｅ（コショウ）、Ｐｉｔｔｏｓｐｏｒａｃｅａｅ（トベラ）、Ｐｌａｎｔａｇｉｎａｃｅａｅ（オオバコ）、Ｐｌａｔａｎａｃｅａｅ（プラタナス）、Ｐｌｕｍｂａｇｉｎａｃｅａｅ（ルリマツリ）、Ｐｏｄｏｓｔｅｍａｃｅａｅ（ｒｉｖｅｒ  ｗｅｅｄ）、Ｐｏｌｅｍｏｎｉａｃｅａｅ（フロックス）、Ｐｏｌｙｇａｌａｃｅａｅ（ヒメハギ）、Ｐｏｌｙｇｏｎａｃｅａｅ（ソバ）、Ｐｏｒｔｕｌａｃａｃｅａｅ（スベリヒユ）、Ｐｒｉｍｕｌａｃｅａｅ（サクラソウ）、Ｐｒｏｔｅａｃｅａｅ（プロテア）、Ｐｕｎｉｃａｃｅａｅ（ザクロ）、Ｐｙｒｏｌａｃｅａｅ（イチヤクソウ）、Ｑｕｉｉｎａｃｅａｅ、Ｒａｆｆｌｅｓｉａｃｅａｅ（ラフレシア）、Ｒａｎｕｎｃｕｌａｃｅａｅ（ｂｕｔｔｅｒｃｕｐ  ｏｒｒａｎｕｎｃｕｌｕｓ）、Ｒｅｓｅｄａｃｅａｅ（モクセイソウ）、Ｒｅｔｚｉａｃｅａｅ、Ｒｈａｂｄｏｄｅｎｄｒａｃｅａｅ、Ｒｈａｍｎａｃｅａｅ（クロウメモドキ）、Ｒｈｉｚｏｐｈｏｒａｃｅａｅ（オオバヒルギ）、Ｒｈｏｉｐｔｅｌｅａｃｅａｅ、Ｒｈｙｎｃｈｏｃａｌｙｃａｃｅａｅ、Ｒｏｓａｃｅａｅ（バラ）、Ｒｕｂｉａｃｅａｅ（セイヨウアカネ）、Ｒｕｔａｃｅａｅ（ルー）、Ｓａｂｉａｃｅａｅ（アワブキ）、Ｓａｃｃｉｆｏｌｉａｃｅａｅ、Ｓａｌｉｃａｃｅａｅ（柳）、Ｓａｌｖａｄｏｒａｃｅａｅ、Ｓａｎｔａｌａｃｅａｅ（サンダルウッド）、Ｓａｐｉｎｄａｃｅａｅ（ムクロジ）、Ｓａｐｏｔａｃｅａｅ（サポディラ）、Ｓａｒｃｏｌａｅｎａｃｅａｅ、Ｓａｒｇｅｎｔｏｄｏｘ
ａｃｅａｅ、Ｓａｒｒａｃｅｎｉａｃｅａｅ（食虫植物）、Ｓａｕｒｕｒａｃｅａｅ（アメリカハンゲショウ）、Ｓａｘｉｆｒａｇａｃｅａｅ（ユキノシタ）、Ｓｃｈｉｓａｎｄｒａｃｅａｅ（マツブサ）、Ｓｃｒｏｐｈｕｌａｒｉａｃｅａｅ（ゴマノハグサ）、Ｓｃｙｐｈｏｓｔｅｇｉａｃｅａｅ、Ｓｃｙｔｏｐｅｔａｌａｃｅａｅ、Ｓｉｍａｒｏｕｂａｃｅａｅ（カシア）、Ｓｉｍｍｏｎｄｓｉａｃｅａｅ（ホホバ）、Ｓｏｌａｎａｃｅａｅ（ジャガイモ）、Ｓｏｎｎｅｒａｔｉａｃｅａｅ（ハマザクロ）、Ｓｐｈａｅｒｏｓｅｐａｌａｃｅａｅ、Ｓｐｈｅｎｏｃｌｅａｃｅａｅ（ｓｐｅｎｏｃｌｅａ）、Ｓｔａｃｋｈｏｕｓｉａｃｅａｅ（ｓｔａｃｋｈｏｕｓｉａ）、Ｓｔａｃｈｙｕｒａｃｅａｅ、Ｓｔａｐｈｙｌｅａｃｅａｅ（ミツバウツギ）、Ｓｔｅｒｃｕｌｉａｃｅａｅ（カカオ）、Ｓｔｙｌｉｄｉａｃｅａｅ、Ｓｔｙｒａｃａｃｅａｅ（エゴノキ）、Ｓｕｒｉａｎａｃｅａｅ（ｓｕｒｉａｎａ）、Ｓｙｍｐｌｏｃａｃｅａｅ（ハマノキ）、Ｔａｍａｒｉｃａｃｅａｅ（ギョリュウ）、Ｔｅｐｕｉａｎｔｈａｃｅａｅ、Ｔｅｔｒａｃｅｎｔｒａｃｅａｅ、Ｔｅｔｒａｍｅｒｉｓｔａｃｅａｅ、Ｔｈｅａｃｅａｅ（茶）、Ｔｈｅｌｉｇｏｎａｃｅａｅ、Ｔｈｅｏｐｈｒａｓｔａｃｅａｅ（テオフラスタ）、Ｔｈｙｍｅｌａｅａｃｅａｅ（西洋オニシバリ）、Ｔｉｃｏｄｅｎｄｒａｃｅａｅ、Ｔｉｌｉａｃｅａｅ（シナノキ）、Ｔｏｖａｒｉａｃｅａｅ、Ｔｒａｐａｃｅａｅ（ヒシ）、Ｔｒｅｍａｎｄｒａｃｅａｅ、Ｔｒｉｇｏｎｉａｃｅａｅ、Ｔｒｉｍｅｎｉａｃｅａｅ、Ｔｒｏｃｈｏｄｅｎｄｒａｃｅａｅ、Ｔｒｏｐａｅｏｌａｃｅａｅ（キンレンカ）、Ｔｕｒｎｅｒａｃｅａｅ（ツルネラ）、Ｕｌｍａｃｅａｅ（エルム）、Ｕｒｔｉｃａｃｅａｅ（イラクサ）、Ｖａｌｅｒｉａｎａｃｅａｅ（カノコソウ）、Ｖｅｒｂｅｎａｃｅａｅ（バーベナ）、Ｖｉｏｌａｃｅａｅ（スミレ）、Ｖｉｓｃａｃｅａｅ（Ｃｈｒｉｓｔｍａｓ  ｍｉｓｔｌｅｔｏｅ）、Ｖｉｔａｃｅａｅ（ブドウ）、Ｖｏｃｈｙｓｉａｃｅａｅ、Ｗｉｎｔｅｒａｃｅａｅ（シキミモドキ）、Ｘａｎｔｈｏｐｈｙｌｌａｃｅａｅ、および、Ｚｙｇｏｐｈｙｌｌａｃｅａｅ（メキシコハマビシ）からなる群から選択される科由来のものであっても良い。
【０２１２】
植物が単子葉植物である場合、当該単子葉植物は、トウモロコシ、コムギ、オーツ、イネ、オオムギ、キビ、バナナ、タマネギ、ニンニク、アスパラガス、ライグラス、アワ、フォニオ、ｒａｉｓｈａｎ、ｎｉｐａ  ｇｒａｓｓ、ターメリック、サフラン、ガランガル、チャイブ、カルダモン、ナツメヤシ、パイナップル、エシャロット、セイヨウネギ、ハルタマネギ、ヒシの実、ヒラタマネギ、ジュズダマ、竹、シコクビエ、ｓｐｏｔｌｅｓｓ  ｗａｔｅｒｍｅａｌ、ａｒｒｏｗｌｅａｆ  ｅｌｅｐｈａｎｔ  ｅａｒ、Ｔａｈｉｔｉａｎ  ｓｐｉｎａｃｈ、マニラアサ、ビンロウジュ、ｂａｊｒａ、ビンロウジ、ｂｒｏｏｍ  ｍｉｌｌｅｔ、ｂｒｏｏｍ  ｓｏｒｇｈｕｍ、コウスイガヤ、ココナッツ、ココヤム、トウモロコシ、タロイモ、アズキモロコシ、デュラムコムギ、ｅｄｏ、ｆｉｑｕｅ、ｆｏｒｍｉｏ、ショウガ、オーチャードグラス、アフリカハネガヤ、スーダングラス、ギニアコーン、マニラアサ、ヘネッケン、雑種トウモロコシ、ｊｏｗａｒ、レモングラス、リュウゼツラン、ｂｕｌｒｕｓｈ  ｍｉｌｌｅｔ、シコクビエ、アワ、ヒエ、キビ、ニュージーランド麻、オーツ、油やし、ｐａｌｍ  ｐａｌｍｙｒａ、サゴヤシ、コヌカグサ、サイザルアサ、ソルガム、スペルトコムギ、スイートコーン、スイートソルガム、タロイモ、テフ、チモシーグラス、ライ小麦、バニラ、コムギ、およびヤムイモからなる群から選択されても良い。
【０２１３】
あるいは、単子葉植物は、Ａｃｏｒａｃｅａｅ（ラタン）、Ａｇａｖａｃｅａｅ（アオノリュウゼツラン）、Ａｌｉｓｍａｔａｃｅａｅ（サジオモダカ）、Ａｌｏｅａｃｅａｅ（アロエ）、Ａｐｏｎｏｇｅｔｏｎａｃｅａｅ（キボウホウ）、Ａｒａｃｅａｅ（アルム）、Ａｒｅｃａｃｅａｅ（ヤシ）、Ｂｒｏｍｅｌｉａｃｅａｅ（アナナス）、Ｂｕｒｍａｎｎｉａｃｅａｅ（ヒナノシャクジョウ）、Ｂｕｔｏｍａｃｅａｅ（ハナイ）、Ｃａｎｎａｃｅａｅ（カンナ）、Ｃｅｎｔｒｏｌｅｐｉｄａｃｅａｅ、Ｃｏｍｍｅｌｉｎａｃｅａｅ（ムラサキツユクサ）、Ｃｏｒｓｉａｃｅａｅ、Ｃｏｓｔａｃｅａｅ（コスツス）、Ｃｙａｎａｓｔｒａｃｅａｅ、Ｃｙｃｌａｎｔｈａｃｅａｅ（パナマソウ）、Ｃｙｍｏｄｏｃｅａｃｅａｅ（ｍａｎａｔｅｅ  ｇｒａｓｓ）、Ｃｙｐｅｒａｃｅａｅ（スゲ）、Ｄｉｏｓｃｏｒｅａｃｅａｅ（ヤムイモ）、Ｅｒｉｏｃａｕｌａｃｅａｅ（星草）、Ｆｌａｇｅｌｌａｒｉａｃｅａｅ、Ｇｅｏｓｉｒｉｄａｃｅａｅ、Ｈａｅｍｏｄｏｒａｃｅａｅ（ハエモドラム）、Ｈａｎｇｕａｎａｃｅａｅ（ハングアナ）、Ｈｅｌｉｃｏｎｉａｃｅａｅ（ヘリコニア）、Ｈｙｄａｔｅｌｌａｃｅａｅ、Ｈｙｄｒｏｃｈａｒｉｔａｃｅａｅ（セキショウモ）、Ｉｒｉｄａｃｅａｅ（アイリス）、Ｊｏｉｎｖｉｌｌｅａｃｅａｅ（ヨインウィレア）、Ｊｕｎｃａｃｅａｅ（イグサ）、Ｊｕｎｃａｇｉｎａｃｅａｅ（ａｒｒｏｗ  ｇｒａｓｓ）、Ｌｅｍｎａｃｅａｅ（ウキクサ）、Ｌｉｌｉａｃｅａｅ（ユリ）、Ｌｉｍｎｏｃｈａｒｉｔａｃｅａｅ（ウォーターポピー）、Ｌｏｗｉａｃｅａｅ、Ｍａｒａｎｔａｃｅａｅ（マランタ・レウコネウラ）、Ｍａｙａｃａｃｅａｅ（マヤカ）、Ｍｕｓａｃｅａｅ（バナナ）、Ｎａｊａｄａｃｅａｅ（スイレン）、Ｏｒｃｈｉｄａｃｅａｅ（ラン）、Ｐａｎｄａｎａｃｅａｅ（タコノキ）、Ｐｅｔｒｏｓａｖｉａｃｅａｅ、Ｐｈｉｌｙｄｒａｃｅａｅ（タヌキアヤメ）、Ｐｏａｃｅａｅ（イネ）、Ｐｏｎｔｅｄｅｒｉａｃｅａｅ（ホテイアオイ）、Ｐｏｓｉｄｏｎｉａｃｅａｅ（ｐｏｓｉｄｏｎｉａ）、Ｐｏｔａｍｏｇｅｔｏｎａｃｅａｅ（ヒルムシロ）、Ｒａｐａｔｅａｃｅａｅ、Ｒｅｓｔｉｏｎａｃｅａｅ、Ｒｕｐｐｉａｃｅａｅ（ｄｉｔｃｈ  ｇｒａｓｓ）、Ｓｃｈｅｕｃｈｚｅｒｉａｃｅａｅ（ホロムイソウ）、Ｓｍｉｌａｃａｃｅａｅ（サルトリイバラ）、Ｓｐａｒｇａｎｉａｃｅａｅ（ミクリ）、Ｓｔｅｍｏｎａｃｅａｅ（ビャクブ）、Ｓｔｒｅｌｉｔｚｉａｃｅａｅ、Ｔａｃｃａｃｅａｅ（タッカ）、Ｔｈｕｒｎｉａｃｅａｅ、Ｔｒｉｕｒｉｄａｃｅａｅ、Ｔｙｐｈａｃｅａｅ（ガマ）、Ｖｅｌｌｏｚｉａｃｅａｅ、Ｘａｎｔｈｏｒｒｈｏｅａｃｅａｅ、Ｘｙｒｉｄａｃｅａｅ（ｙｅｌｌｏｗ−ｅｙｅｄ  ｇｒａｓｓ）、Ｚａｎｎｉｃｈｅｌｌｉａｃｅａｅ（ｈｏｒｎｅｄ  ｐｏｎｄｗｅｅｄ）、Ｚｉｎｇｉｂｅｒａｃｅａｅ（ショウガ）、および、Ｚｏｓｔｅｒａｃｅａｅ（アマモ）からなる群から選択される科由来であっても良い。
【０２１４】
植物が裸子植物である場合、当該裸子植物は、Ａｒａｕｃａｒｉａｃｅａｅ、Ｂｏｗｅｎｉａｃｅａｅ、Ｃｅｐｈａｌｏｔａｘａｃｅａｅ、Ｃｕｐｒｅｓｓａｃｅａｅ、Ｃｙｃａｄａｃｅａｅ、Ｅｐｈｅｄｒａｃｅａｅ、Ｇｉｎｋｇｏａｃｅａｅ、Ｇｎｅｔａｃｅａｅ、Ｐｉｎａｃｅａｅ、Ｐｏｄｏｃａｒｐａｃｅａｅ、Ｔａｘａｃｅａｅ、Ｔａｘｏｄｉａｃｅａｅ、Ｗｅｌｗｉｔｓｃｈｉａｃｅａｅ、および、Ｚａｍｉａｃｅａｅからなる群から選択されても良い。
【実施例】
【０２１５】
以下の非限定的な実施例は、本発明をさらに解説するために提示されているものである。
【０２１６】
実施例１．大豆における、植物の生育を刺激するためのリパーゼまたはエンドグルカナーゼを提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓのリパーゼおよびエンドグルカナーゼ遺伝子は、以下の表３に示されるプライマーを用いたポリメラーゼ鎖反応（ＰＣＲ）を介して増幅した。
【表３】
2020143064.tif 000021
【０２１７】
融合構築物を作製するために、重複伸長（ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇ  ｅｘｔｅｎｓｉｏｎ、ＳＯＥ）技術によるスプライシングを用いて、ＢｃｌＡの最初の３５アミノ酸（配列番号１のアミノ酸１〜３５）をコードするＢａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓＤＮＡの天然型ｂｃｌＡプロモーターへと遺伝子を融合した。正しい増幅物を、Ｅ．ｃｏｌｉ／ＢａｃｉｌｌｕｓシャトルベクターのｐＨＰ１３へとクローニングし、正しいクローンをＤＮＡ配列解析によりスクリーニングした。正しいクローンを、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓへとエレクトロポレーションし（Ｃｒｙ−、プラスミド−）、クロラムフェニコール耐性に対してスクリーニングした。正しい形質転換体を、３０℃で一晩、脳心臓浸出物液体培地中で増殖させ、普通寒天培地上に置き、３日間、３０℃でインキュベートした。融合構築物を発現している芽胞（ＢＥＭＤ芽胞）を、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中で洗浄することにより、プレートから採取し、遠心により精製し、ＰＢＳ中で再度洗浄した。非形質転換対照のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ（Ｂ．ｔ．）の芽胞も同様に作製した。
【０２１８】
大豆（株Ｊａｋｅ  ０１１−２８−０４）は、標準的なローム表土で満たした、１０ｃｍの深さのポット中で、２．５４ｃｍの深さに植えた。芽胞は、５０ｍｌの水で１ｘ１０４／ｍｌの濃度に希釈され、種まきの際に各種子に適用された。Ｔ５ランプ、５４ワットを用いた最適な光の下、植物を生育させ、１５．５〜２５．５℃の間に制御された温度条件下で、１日当たり１１時間、光に曝した。２週間の試験期間中、３日ごとに植物に十分に水を与えた。２週間の最後に、各植物の高さを測定し、測定値を、対照のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓの芽胞に対して標準化した。２つの独立した試験を行った。
【０２１９】
結果は、平均の標準誤差とともに表４に示す。両試験において、リパーゼまたはエンドグルカナーゼのいずれかを提示するＢＥＭＤ芽胞の存在下で生育した大豆は、対照のＢ．ｔ．芽胞処置した大豆よりも有意に高く生育していた（ｔ-検定を用いた統計分析）。
【表４】
2020143064.tif 000022
【０２２０】
実施例２．トウモロコシにおける、植物の生育を刺激するためのエンドグルカナーゼを提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
エンドグルカナーゼを発現するＢＥＭＤ芽胞は、上述の実施例１と同じ方法で作製した。トウモロコシは、標準的なローム表土で満たした、１０ｃｍの深さのポット中で、３．８ｃｍの深さで植えた。芽胞、対照、および、エンドグルカナーゼを発現するＢＥＭＤは、５０ｍｌの水で１ｘ１０４／ｍｌの濃度に希釈され、種まきの際に各植物に適用された。水のみの対照もまた含まれた。Ｔ５ランプ、５４ワットを用いた最適な光の下、植物を生育させ、１５．５〜２５．５℃の間に制御された温度条件下で、１日当たり１１時間、光に曝した。１週間の試験期間中、３日ごとに植物に十分に水を与えた。１週間の最後に、各植物の高さを測定し、測定値を、対照のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓの芽胞に対して標準化した。
【０２２１】
結果は、平均の標準誤差とともに表５に示す。エンドグルカナーゼを提示するＢＥＭＤ芽胞の存在下で生育したトウモロコシは、対照のＢ．ｔ．芽胞処置した大豆、および水のみの対照植物の両方よりも有意に大きく成長していた（ｔ検定を用いた統計分析）。
【表５】
2020143064.tif 000023
【０２２２】
実施例３．小麦における、植物の生育を刺激するためのエンドグルカナーゼまたはプロテアーゼを提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
エンドグルカナーゼを発現するＢＥＭＤ芽胞は、上述の実施例１と同じ方法で作製した。Ｅ．ｃｏｌｉプロテアーゼＰｔｒＢを発現するＢＥＭＤ芽胞は、上述の実施例１と類似した方法および以下のプライマーを用いて作製した：
ｇｇａｔｃｃａｔｇｃｔａｃｃａａａａｇｃｃ  （フォワード、配列番号４１）、および、
ｇｇａｔｃｃｔｔａｇｔｃｃｇｃａｇｇｃｇｔａｇｃ  （リバース、配列番号４２）
【０２２３】
秋まき硬質小麦（Ｗｉｎｔｅｒ  ｈａｒｄ  ｗｈｅａｔ）は、標準的なローム表土で満たした、１０ｃｍの深さのポット中で、２．５４ｃｍの深さで植えた。芽胞、対照、および、エンドグルカナーゼまたはプロテアーゼを発現するＢＥＭＤは、５０ｍｌの水で１ｘ１０４／ｍｌの濃度に希釈され、種まきの際に各植物に適用された。水のみの対照もまた含まれた。Ｔ５ランプ、５４ワットを用いた最適な光の下、植物を生育させ、１５．５〜２５．５℃の間に制御された温度条件下で、１日当たり１１時間、光に曝した。１週間の試験期間中、３日ごとに植物に十分に水を与えた。１週間の最後に、各植物の高さを測定し、測定値を、対照の水のみの植物に対して標準化した。
【０２２４】
結果は、平均の標準誤差とともに表６に示す。エンドグルカナーゼまたはプロテアーゼを提示するＢＥＭＤ芽胞の存在下で生育した小麦は、対照のＢ．ｔ．芽胞処置した大豆、および水のみの対照大豆の両方よりも有意に大きく成長していた（ｔ検定を用いた統計分析）。
【表６】
2020143064.tif 000024
【０２２５】
実施例４．ライグラスにおける、植物の生育を刺激するためのエンドグルカナーゼを提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
エンドグルカナーゼを発現するＢＥＭＤ芽胞は、上述の実施例１と同じ方法で作製した。ペレニアルライグラスは、標準的なローム表土で満たした、１０ｃｍの深さのポット中で、６．４ｍｍの深さで植えた。芽胞、両方の対照、および、エンドグルカナーゼを発現するＢＥＭＤは、５０ｍｌの水で１ｘ１０４／ｍｌの濃度に希釈され、種まきの際に各植物に適用された。水のみの対照もまた含まれている。Ｔ５ランプ、５４ワットを用いた最適な光の下、植物を生育させ、１５．５〜２５．５℃の間に制御された温度条件下で、１日当たり１１時間、光に曝した。２週間の試験期間中、３日ごとに植物に十分に水を与えた。２週間の最後に、各植物の高さを測定し、測定値を、対照の水のみの植物に対して標準化した。
【０２２６】
結果は、平均の標準誤差とともに表７に示す。エンドグルカナーゼを提示するＢＥＭＤ芽胞の存在下で生育したライグラスは、対照のＢ．ｔ．芽胞処置したライグラス、および水のみの対照ライグラスよりも有意に大きく成長していた（ｔ検定を用いた統計分析）。
【表７】
2020143064.tif 000025
【０２２７】
実施例５．植物の生育を刺激する植物ホルモンの合成または活性化に関与する酵素を提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
また、植物ホルモンの合成に関与する酵素を提示させるために、ＢＥＭＤ系を用いても良い。たとえば、植物ホルモンのインドール−３−酢酸は、植物における強力な生育刺激物質である。インドール−３−酢酸は、酵素のトリプトファンモノオキシゲナーゼおよびインドール−３−アセトアミド加水分解酵素により、トリプトファンからｉｎ  ｖｉｖｏで合成される。インドール−３−酢酸および他のオーキシンホルモンもまた、酵素のニトリラーゼ、トリプトファンアミノトランスフェラーゼ、インドール−３−アセトアルデヒド脱水素酵素、インドール−３−ピルビン酸デカルボキシラーゼ、アミンオキシダーゼ、トリプトファンデカルボキシラーゼ、およびトリプトファン側鎖オキシダーゼにより、トリプトファンおよび／またはインドールからｉｎ  ｖｉｖｏで合成されることができる。
【０２２８】
また、植物成長ホルモンの、生物活性型または不活性型への改変に関与する酵素を提示するＢＥＭＤ系を用いても良い。たとえば、ニトリラーゼをＢＥＭＤ系上で発現させ、インドール−３−アセトニトリルの、生物活性型のインドール−３−酢酸への転換を触媒することができる。さらに、植物ホルモンの不活性型（たとえば、インドール−３−アセトニトリル）を、ＢＥＭＤ発現されたニトリラーゼと共に植物生育環境中に添加して、植物生育環境中に活性型ホルモンを徐々に放出させることができる。多くの他の植物ホルモンの不活性型、または低活性型は、それらに対応する酵素を用いて改変することができる。
【０２２９】
関連植物成長ホルモン（オーキシン）としては、インドール−３−ピルビン酸、インドール−３−アセトアルドキシム、インドール−３−アセトアミド、インドール−３−アセトニトリル、インドール−３−エタノール、インドール−３−ピルビン酸塩、インドール−３−酪酸、フェニル酢酸、４−クロロインドール−３−酢酸、およびインドール−３−アセトアルドキシムが挙げられる。これらホルモンは、酵素のトリプトファンモノオキシゲナーゼ、インドール−３−アセトアミド加水分解酵素、ニトリラーゼ、ニトリル加水分解酵素、アセト乳酸合成酵素、アルファアセト乳酸デカルボキシラーゼ、トリプトファンアミノトランスフェラーゼ、インドール−３−アセトアルデヒド脱水素酵素、インドール−３−ピルビン酸デカルボキシラーゼ、アミンオキシダーゼ、トリプトファンデカルボキシラーゼ、およびトリプトファン側鎖オキシダーゼを介して、ｉｎ  ｖｉｖｏでトリプトファンおよび／またはインドールから合成される。
【０２３０】
サイトカイニンファミリーの成長ホルモンもまた、ＢＥＭＤ系中で発現される酵素により合成されることができる。サイトカイニンの例としては、キネチン、ゼアチン（シスおよびトランス）、６−ベンジルアミノプリン、ジヒドロキシゼアチン、Ｎ６−（Ｄ２−イソペンテニル）アデニン、リボシルゼアチン、Ｎ６−（Ｄ２−イソペンテニル）アデノシン、２メチルチオ−シス−リボシルゼアチン、シスリボシルゼアチン、、リボシルゼアチン−５−モノホスフェート、Ｎ６−メチルアミノプリン、Ｎ６−ジメチルアミノプリン、２’−デオキシゼアチンリボシド、４−ヒドロキシ−３−メチル−トランス−２−ブテニルアミノプリン、オルト−トポリン、メタ−トポリン、ベンジルアデニン、オルト−メチルトポリン、およびメタ−メチルトポリンが挙げられる。これら植物生育刺激化合物は、アデノシンホスフェートイソペンテニルトランスフェラーゼ、ホスファターゼ、アデノシンキナーゼ、アデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ、ＣＹＰ７３５Ａ、５’リボヌクレオチドホスホヒドロラーゼ、アデノシンヌクレオシダーゼ、ゼアチン  シス−トランスイソメラーゼ、ゼアチンＯ−グルコシルトランスフェラーゼ、β−グルコシダーゼ、シス−ヒドロキシラーゼ、ＣＫシス−ヒドロキシラーゼ、ＣＫ  Ｎ−グルコシルトランスフェラーゼ、２，５−リボヌクレオチドホスホヒドロラーゼ、アデノシンヌクレオシダーゼ、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、およびゼアチン還元酵素を含む酵素により、メバロン酸塩、または、アデノシン１リン酸／２リン酸／３リン酸からｉｎ  ｖｉｖｏで合成される。
【０２３１】
上述の実施例１と類似した方法を用いて、これら酵素のいずれかを、ＢＥＭＤ系に組み込ませ、融合構築物がＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー中で発現された際に、発現された酵素をエキソスポリウムへと向かわせる標的化配列および当該酵素を含有する融合構築物を作製することにより、ＢＥＭＤ芽胞上に提示させてもよい。次いで、そのような構築物を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、上述の実施例１と類似した方法を用いて、植物の生育を刺激するために、土壌または他の植物生育環境に添加し、または、植物の葉に直接適用しても良い。
【０２３２】
酵素の前駆体または基質を、植物生育環境に補充しても良い。たとえば、トリプトファン、アデノシンモノホスファターゼ、アデノシンジホスファターゼ、アデノシントリホスファターゼ、またはインドールを植物生育環境に補充しても良い。これら基質の適切な濃度は、１００ｎＭ〜１００μＭである。
【０２３３】
実施例６．植物の生育を刺激するために、タンパク質、ペプチド、プロタンパク質、またはプレプロタンパク質を生物活性型ペプチドへと開裂するプロテアーゼまたはペプチダーゼを提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
植物上で直接または間接的に作用することができる生物活性型のペプチドに、植物生育環境中で利用可能なタンパク質を酵素的に開裂することができるプロテアーゼおよびペプチダーゼを、ＢＥＭＤ系で発現させても良い。例としては、植物の生育を直接刺激することができる活性型ペプチドへの、植物生育環境中に添加された大豆食品、酵母抽出物、または他のタンパク質が豊富な食品の酵素開裂が挙げられる。タンパク質食品の酵素的開裂により生成された生物活性型ペプチドとしては、強力な植物根発育刺激物質であるＲＨＰＰおよびＲＫＮ  １６Ｄ１０が挙げられる。さらに、ＢＥＭＤで発現されたプロテアーゼおよびペプチダーゼにより、その生物活性型へと、プロタンパク質またはプレプロプロテインを活性型に開裂しても良い。不活性型プロタンパク質またはプレプロプロテインを植物生育環境中に添加し、ＢＥＭＤプロテアーゼにより徐々に開裂させ、生物活性型タンパク質を持続放出させても良い。
【０２３４】
上述の実施例１に類似の方法を用いて、これらプロテアーゼおよびペプチダーゼのいずれかを、ＢＥＭＤ系に組み込み、プロテアーゼまたはペプチダーゼ、および、融合構築物がＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー中で発現された際にエキソスポリウムへと発現された酵素を向かわせる標的化配列を含有する融合構築物を作製することにより、ＢＥＭＤ芽胞上に提示させても良い。次いで、そのような構築物を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、大豆食品、酵母抽出物、または別のタンパク質に富んだ食品と共に土壌または他の植物生育環境に添加し、植物の生育を刺激しても良い。大豆食品、酵母抽出物、または他のタンパク質に富んだ食品は、当該タンパク質食品、酵母抽出物、または他のタンパク質に富んだ食品を約１０μｇ／Ｌ〜約１００ｍｇ／Ｌで含有する液体組成物の形態で、適切に植物生育環境に添加される。
【０２３５】
実施例７．植物生育刺激のための、プロテアーゼＰｔｒＢを発現するＢＥＭＤ芽胞の使用
Ｅ．ｃｏｌｉプロテアーゼＰｔｒＢを発現するＢＥＭＤ芽胞を、実施例３に記述されるように作製した。大豆種子を、標準的なローム表土で満たした、１０ｃｍの深さのポット中で、２．５４ｃｍの深さで植えた。芽胞、両方の対照、および、プロテアーゼを発現するＢＥＭＤは、５０ｍｌの水で１ｘ１０４／ｍｌの濃度に希釈され、種まきの際に各植物に適用された。水のみの対照もまた含まれた。２５ｍｇ／ポットの大豆食品を、植え付けの際に水に加えた。Ｔ５ランプ、５４ワットを用いた最適な光の下、植物を生育させ、１５．５〜２５．５℃の間に制御された温度条件下で、１日当たり１３時間、光に曝した。１週間の試験期間中、３日ごとに植物に十分に水を与えた。２週間の最後に、各植物の高さを測定し、測定値を、対照の水のみの植物に対して標準化した。
【０２３６】
結果は、水対照の割合として、平均の標準誤差とともに表８に示す。プロテアーゼを提示するＢＥＭＤ芽胞の存在下で生育した大豆は、対照のＢ．ｔ．芽胞処置した大豆、および水のみの対照大豆よりも有意に高く生育していた（ｔ検定を用いた統計分析）。水対照またはＢ．ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ対照植物に大豆食品を添加しても、ほとんど効果は無かった。対照的に、大豆食品およびＢＥＭＤプロテアーゼ系の存在下では、大豆植物は、他の全ての処置群を有意に超える応答を示した。
【表８】
2020143064.tif 000026
【０２３７】
実施例８．植物生育の刺激に関与するタンパク質またはペプチドを提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
また、ＢＥＭＤ系を用いて、植物の生育促進に直接関与するタンパク質またはペプチドを提示させても良い。たとえば、植物生育を刺激する植物ペプチドホルモンまたは非ホルモン性ペプチドを、ＢＥＭＤ系中で発現させても良い。たとえば、植物受容体に直接結合し、活性化させる非ホルモン性ペプチドを、ＢＥＭＤ系中で発現させ、植物および標的植物の根の受容体に直接作用させても良い。そのようなペプチドホルモンおよび非ホルモン性ペプチドとしては、フィトスルホカイン、カルカルバ（ｃａｌｃａｌｖａ）３（ＣＬＶ３）、システミン、ＲＫＮ  １６Ｄ１０、Ｈｇ−Ｓｙｖ４６、ｅＮＯＤ４０、ＮＯＤファミリータンパク質、ＺｍｌＧＦ、ＳＣＲ／ＳＰ１１ファミリータンパク質およびペプチダーゼ、ＲＨＰＰ、ＰＯＬＡＲＩＳ、ならびにＫＴＩが挙げられる。これらペプチドおよび関連ペプチドを、ＢＥＭＤ系中で発現させ、植物生育環境に送達または、葉に直接適用させ、植物の生育を刺激しても良い。
【０２３８】
上述の実施例１と類似の方法を用いて、これらタンパク質またはペプチドのいずれかを、ＢＥＭＤ系に組み込み、酵素、および、融合構築物がＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー中で発現された際にエキソスポリウムへと発現された酵素を向かわせる標的化配列を含有する融合構築物を作製することにより、ＢＥＭＤ芽胞上に提示させても良い。次いで、植物の生育を刺激するために、実施例１と類似の方法を用いて、そのような構築物を発現する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、土壌、または他の植物生育環境に添加し、または、植物の葉に直接適用しても良い。
【０２３９】
実施例９．植物生育を刺激するための、ＰＯＬＡＲＩＳまたはＫＴＩを発現するＢＥＭＤ芽胞の使用
配列番号６０の標的化配列に結合されたＰＯＬＡＲＩＳまたはＫＴＩペプチドをコードする遺伝子を合成することにより、植物ペプチドであるＰＯＬＡＲＩＳおよび大豆ペプチドＫＴＩを発現するＢＥＭＤ芽胞を作製した。次いで、遺伝子をＢａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓに導入し、芽胞を、実施例１に記述されるように作製した。大豆種子を、標準的なローム表土で満たした、１０ｃｍの深さのポット中で、２．５４ｃｍの深さで植えた。ＰＯＬＡＲＩＳまたはＫＴＩを発現するＢＥＭＤ芽胞は、５０ｍｌの水で１ｘ１０４／ｍｌの濃度に希釈され、種まきの際に各植物に適用された。水のみの対照もまた含まれた。純粋なＰＯＬＡＲＩＳおよびＫＴＩペプチドもまた、０．０５ｍｇ／ポットで、大豆に対するその効果を検証した。Ｔ５ランプ、５４ワットを用いた最適な光の下、植物を生育させ、１５．５〜２５．５℃の間に制御された温度条件下で、１日当たり１３時間、光に曝した。２週間の試験期間中、３日ごとに植物に十分に水を与えた。２週間の最後に、各植物の高さを測定し、根を測定し、測定値を、対照の水のみの植物に対して標準化した。
【０２４０】
結果は、水対照の割合として、平均の標準誤差とともに表９に示す。ＰＯＬＡＲＩＳを提示するＢＥＭＤ芽胞の存在下で生育した大豆は、水対照の大豆よりも高く生育し、根の発育に関しては、わずかな増加がみられた。遊離ＫＴＩペプチドの存在により、植物の生育が有意に阻害され、高さが６〜８％低かったが、根の長さは１５％増えた。ＢＥＭＤ系でＫＴＩを発現することにより、根の生育が促進され、植物の高さに対する阻害効果は無かった。重要なことは、遊離ＫＴＩペプチドと対照のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ芽胞が存在しても、ＫＴＩの発育阻害効果を防止しなかったが、ＫＴＩを伴うＢＥＭＤは発育阻害を示さなかったことである。
【表９】
2020143064.tif 000027
【０２４１】
実施例１０．植物の生育を刺激するための、および／または、栄養を処理するために、細菌、真菌もしくは植物の栄養源を分解または改変する酵素を提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
また、ＢＥＭＤ系を用いて、土壌または他の植物生育環境中に存在する細菌、真菌、または植物の栄養源を有益に分解または改変する酵素を提示しても良い。そのような酵素は、土壌または他の植物生育環境中に存在する産物を、植物、ならびに／または、根圏の有益な細菌および／もしくは真菌が容易に取り込める形態へと分解する。そのような酵素としては、たとえば、炭水化物複合体を分解するグルコシド加水分解酵素、セルロースを分解するセルラーゼ；脂質（油、脂肪、およびワックスを含む）を分解するリパーゼ；リグニンおよびフミン酸を分解するリグニンオキシダーゼ；ポリペプチドを分解するプロテアーゼ；膜を分解するホスホリパーゼ；窒素を戻すアミダーゼおよびニトロゲナーゼ；デンプンを処理するアミラーゼ；ヌクレオチドを戻すヌクレアーゼ；ペクチンを分解するぺクチナーゼ；硫黄を戻すスルファターゼ、ならびに、キシランおよびアラビノキシランを分解するキシラナーゼが挙げられる。得られた産物（単糖、アミノ酸、脂肪酸、および他の栄養を含む）は、植物による直接取り込み、ならびに／または、有益細菌および／もしくは真菌の植物の根圏における増殖、成長のための刺激のために容易に利用可能である。
【０２４２】
さらに、土壌中の様々な有機および無機の形態からの植物による取り込みのために、酵素および他の生物分子を用いて、リン酸、窒素、および他の重要な基本的栄養物を放出および隔離しても良い。たとえば、ホスファターゼを用いて、植物が利用可能な無機リン酸へと、環境中のリン酸塩を分解しても良い。リン酸は、植物生育環境中に自然に存在しているリン酸塩であっても良い。あるいは、またはさらに、植物生育環境に、たとえば、標準的な農学的改良物であるトリメタリン酸塩を補充しても良い。有用なホスファターゼの例としては、リン酸モノエステル加水分解酵素、ホスホモノエステラーゼ、リン酸ジエステル加水分解酵素、ホスホジエステラーゼ、トリリン酸モノエステル加水分解酵素、リン酸無水物加水分解酵素、ピロホスファターゼ、フィターゼ、トリメタホスファターゼ、およびトリホスファターゼが挙げられる。たとえば、酵素のトリメタホスファターゼ、トリホスファターゼ、および、ピロホスファターゼは、トリメタリン酸を、有用な無機リン酸へと連続的に分解する。
【０２４３】
酵素のニトロゲナーゼファミリーは、大気中の窒素（Ｎ２）をアンモニアへと転換し、それにより、植物がアクセスできない窒素を、利用可能な形態へと転換することができる。適切な酵素は、ニトロゲナーゼのＮｉｆファミリーに属するものが挙げられる。
【０２４４】
化学的エネルギーもまた、アデノシン−３−トリリン酸、フェロドキシン、または、そのようなエネルギーをＢＥＭＤ系内に作製する追加の酵素として、植物生育環境中に直接添加することができる。これらは、ニトロゲナーゼの補因子であり、土壌中に存在が限定されている。ゆえに、そのような補因子を土壌に添加して、上述の反応を増強しても良い。
【０２４５】
植物生育環境に添加することができる他のサプリメントとしては、デンプン、セルロースおよびセルロース誘導体、ペクチン、キシランおよびアラビノキシラン、脂肪、ワックス、油、フィチン酸、リグニン、フミン酸、ならびに、上述の酵素類が活性を発揮する他の栄養源が挙げられる。
【０２４６】
実施例１に記述される方法と類似の方法を用いて、これら酵素のいずれかを、ＢＥＭＤ系に組み込み、酵素、および、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムへと融合構築物を向かわせる標的化配列を含有する融合構築物を作製することにより、ＢＥＭＤ芽胞上に提示させても良い。次いで、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー中で融合構築物を発現させ、この組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、植物の生育を刺激するために、実施例１に記述される方法と類似の方法を用いて土壌、または他の植物生育環境に添加しても良い。
【０２４７】
実施例１１．植物生育刺激のための、ホスファターゼを発現するＢＥＭＤ芽胞の使用
Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓホスファターゼＡ４（ＰｈｏＡ４）を発現するＢＥＭＤ芽胞は、配列番号６０の標的化配列に連結されたＰｈｏＡ４をコードする遺伝子を合成することにより作製した。この遺伝子を、次いで、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓに導入し、芽胞を、実施例１のように作製した。トウモロコシを、標準的なローム表土で満たした、１０ｃｍの深さのポット中で、２．５４ｃｍの深さで植えた。ＰｈｏＡ４を発現するＢＥＭＤ芽胞は、５０ｍｌの水で１ｘ１０４／ｍｌの濃度に希釈され、種まきの際に各植物に適用された。水のみの対照もまた含まれた。ホスファターゼは、液体中で、０．５ｍｇ／ポットの比率でポットに添加された。Ｔ５ランプ、５４ワットを用いた最適な光の下、植物を生育させ、１５．５〜２５．５℃の間に制御された温度条件下で、１日当たり１３時間、光に曝した。２週間の試験期間中、３日ごとに植物に十分に水を与えた。２週間の最後に、各植物の高さを測定し、測定値を、対照の水のみの植物に対して標準化した。
【０２４８】
結果を表１０に示す。ＰｈｏＡ４を提示するＢＥＭＤ芽胞の存在下で生育されたトウモロコシは、特にポリリン酸の存在下で、生育の増強を示した。この効果は、ポリリン酸単独の効果よりも強かった。
【表１０】
2020143064.tif 000028
【０２４９】
実施例１２．植物の生育刺激のための、２，３−ブタンジオールの合成、または、ジベレリン酸の合成もしくは活性化に関与する酵素を提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
また、ＢＥＭＤ系を用いて、植物生育促進化合物である２，３−ブランジオールの合成に関与する酵素を提示しても良い。ｉｎ  ｖｉｖｏにおいて、２，３−ブタンジオールは、根圏中の有益細菌および有益真菌により、アセトイン、ジアセチル、アセト乳酸、またはピルビン酸から、酵素のアセト乳酸合成酵素、α−アセト乳酸デカルボキシラーゼ、ピルビン酸デカルボキシラーゼ、ジアセチル還元酵素、ブタンジオール脱水素酵素、およびアセトイン還元酵素により合成される。
【０２５０】
また、ＢＥＭＤ系を用いて、植物生育促進化合物であるジベレリン酸の合成または活性化に関与する酵素を提示しても良い。ジベレリン酸は、酵素（限定されないが、ヒドロキシルアミン還元酵素、２−オキソグルタレート（２−ｏｘｏｇｌｕｔｕｒａｔｅ）ジオキシゲナーゼ、ジベレリン２Ｂ／３Ｂ加水分解酵素、ジベレリン３−オキシダーゼ、および、ジベレリン２０−オキシダーゼが挙げられる）の作用により、不活性型、または低活性型から産生されることができる。
【０２５１】
これら酵素のいずれかをＢＥＭＤ系に組み込み、実施例１に記述される方法と類似の方法を用いて、ＢＥＭＤ芽胞上に提示しても良い。酵素、および、融合タンパク質がＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現された際にエキソスポリウムへと酵素を向かわせる標的化配列を含有する融合構築物が構築されても良い。次いで、融合構築物をＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現させ、当該Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、植物生育の刺激のために、土壌、または他の植物生育環境へと添加する。
【０２５２】
ＢＥＭＤ上に提示される酵素の効果を上げるために、土壌に、酵素の基質を補充しても良い。たとえば、土壌または他の植物生育環境に、アセトイン（アセトイン還元酵素の基質）；ピルビン酸（ピルビン酸デカルボキシラーゼの基質）；ジアセチル（ジアセチル還元酵素の基質）；および／または、アセト乳酸（アセト乳酸デカルボキシラーゼの基質）を補充しても良い。あるいは、またはさらに、土壌または他の植物生育環境に、ジベレリン酸の低活性型または不活性型（土壌または他の植物生育環境中で、上述の酵素により高活性型へと転換される）を補充しても良い。
【０２５３】
実施例１３．病原体から植物を防御するための、プロテアーゼを提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
また、ＢＥＭＤ系を用いて、１以上の病原体から植物を防御するプロテアーゼを提示させても良い。たとえば、ある細菌性病原体は、細菌のラクトンホモセリンまたは関連シグナル伝達分子の分泌を介して、個々のメンバー間で相互交流を行うことができる。ゆえに、細菌性ラクトンホモセリンシグナル伝達分子に特異的なプロテアーゼは、毒素の分泌および病原性因子の上方制御を行うために細菌にとって必須な工程である、細菌間の相互交流を阻害することにより、そのような細菌性病原体から植物を防御することができる。細菌性ラクトンホモセリンシグナル伝達分子に特異的な適切なプロテアーゼとしては、エンドペプチダーゼおよびエキソペプチダーゼが挙げられる。
【０２５４】
細菌性ラクトンホモセリンシグナル伝達分子に特異的なプロテアーゼを、実施例１に記述された方法と類似の方法を用いて、ＢＥＭＤ系に組み込んでも良い。プロテアーゼおよび、融合構築物がＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現された際にエキソスポリウムへと当該プロテアーゼを向かわせる標的化配列を含有する融合構築物を調製しても良い。次いで、融合構築物をＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現させ、当該Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、土壌、または他の植物生育環境へと添加する。次いで、当該プロテアーゼは、細菌性ラクトンホモセリンシグナル伝達分子を分解し、これら生物体の病原性にとって重要な工程を阻害し、それにより、これら病原体から植物を防御する。他のプロテアーゼおよびペプチダーゼも、実施例６および７に示されるＢＥＭＤ系上で、この能力を有効に発揮する。
【０２５５】
実施例１４．病原体から植物を防御するための、抗菌性タンパク質およびペプチドを提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
また、ＢＥＭＤ系を用いて、１以上の病原体から植物を防御することに役立つ抗細菌性活性および／または抗真菌活性を示す酵素を提示させても良い。たとえば、バクテリオシン、リゾチーム（たとえば、ＬｙｓＭ）、シデロフォア、コンアルブミン、アルブミン、ラクトフェリン（たとえば、ＬｆｃｉｎＢ）、またはＴａｓＡ等の抗菌性タンパク質およびペプチドはすべて、ＢＥＭＤ系中で発現させ、植物の細菌性病原体および真菌性病原体にその効果を発揮させても良い。バクテリオシン、アルブミン、コンアルブミン、リゾチーム、およびラクトフェリンは、その標的に直接抗菌活性を発揮し、一方で、シデロフォアは、病原体が病原性を発揮するのに必要な必須栄養素に結合する。たとえば、ラクトフェリンのペプチドＬｆｃｉｎＢは、ＢＥＭＤ系の表面上で発現された際、植物生育環境中のラクトフェリンペプチドに感受性のある細菌細胞を溶解する。これらタンパク質およびペプチドは、限定された微生物に対し特異的に作用し、および、植物生育環境中の全ての微生物に影響を与えることなく、病原体群を選択的に標的とすることができる。
【０２５６】
これらタンパク質またはペプチドのいずれかを実施例１に記述された方法と類似の方法を用いて、ＢＥＭＤ系に組み込んでも良い。酵素および、融合構築物がＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現された際にエキソスポリウムへと当該酵素を向かわせる標的化配列を含有する融合構築物を調製しても良い。次いで、融合構築物をＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現させ、当該Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、１以上の病原体から植物を防御するために、土壌、または他の植物生育環境へと添加する。
【０２５７】
実施例１５．細菌から植物を防御するための抗菌性ペプチドを発現するＢＥＭＤ芽胞の使用
２つの抗菌性ペプチド（ＬｆｃｉｎＢ（ウシラクトフェリン由来）およびＬｙｓＭ（ニワトリリゾチーム由来））のいずれかをコードする遺伝子を、ＢｃｌＡプロモーター（配列番号８５）の制御下で、ＢｃｌＡ標的化配列（配列番号６０）に連結させ、合成した。当該遺伝子を、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ０１３Ａへと導入し、脳心臓滲出培養液中で形質転換されたＢａｃｉｌｌｕｓを一晩培養して増殖させ、３０℃で普通寒天プレート上に置き、３日間増殖させることにより、芽胞を形成させた。プレートから芽胞を洗い流し、ＰＢＳで３回洗浄した。Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ  ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ培養物を、ＴＳＢ液体培地において３７℃で一晩、増殖させた。次いで、一晩培養させたものを沈殿させ、ＰＢＳで洗浄し、Ａｂｓ５９５＝０．２でＰＢＳ中に再懸濁した。ＬｙｓＭまたはＬｆｃｉｎＢペプチドを発現する１ｘ１０４のＢＥＭＤを、Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓと共に、３７℃で３時間、ＰＢＳ中で振とうさせながらインキュベートした。Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの対照試料は、未処置のままとした（ＢＥＭＤ芽胞無し）。３時間のインキュベートの後、Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの希釈プレートを作製し、３７℃で一晩インキュベートした。Ｓ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの培養物を、翌日に計数し、殺傷割合を定量した。以下の表１１にあるように、殺傷活性の値を記録した。ＢＥＭＤ発現ペプチドは、有意に多くのＳ．ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ細胞を殺傷した。これは、根圏、種子、または他の植物物質上の細菌の殺傷にそのまま当てはめられる。ある種の細菌に特異的なペプチドを選択することにより、植物近傍の微生物群を有益なものに変えることができ、または、重要な病原体を選択的に標的とすることもできる。
【表１１】
2020143064.tif 000029
【０２５８】
実施例１６．病原体から植物を防御するための酵素を提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
また、ＢＥＭＤ系を用いて１以上の病原体から植物を防御する酵素を提示させても良い。たとえば、酵母およびカビ細胞壁は、たとえばβ−１，３−グルカナーゼ、β−１，４−グルカナーゼ、β−１，６−グルカナーゼ、キトシナーゼ、キチナーゼ、キトシナーゼ様タンパク質、およびリチカーゼ等の酵素により分解される。細菌細胞壁は、プロテイナーゼ、プロテアーゼ、ムタノリシン、スタホリシン、およびリゾチームから選択される酵素により分解される。これら細胞壁分解酵素の各々を根圏の病原性微生物の選択阻害のためにＢＥＭＤ系上で発現させ、および植物生育環境へと添加しても良い。
【０２５９】
また、ＢＥＭＤ系を用いて、たとえば所望される植物の昆虫および／または蠕虫の捕食を抑制することにより、昆虫または蠕虫の病原体から植物を防御する酵素またはタンパク質を提示させても良い。対象のそのようなタンパク質および酵素の例としては、エンドトキシン、Ｃｒｙ毒素、他の殺虫性タンパク質毒素、プロテアーゼ阻害物質、システインプロテアーゼ、Ｃｒｙ５Ｂタンパク質、Ｃｒｙ２１Ａタンパク質、キチナーゼ、プロテアーゼ阻害タンパク質、プロテアーゼ阻害ペプチド、トリプシンインヒビター、およびクワイプロテアーゼ阻害物質が挙げられる。
【０２６０】
これらタンパク質またはペプチドのいずれかを実施例１に記述された方法と類似の方法を用いて、ＢＥＭＤ系に組み込んでも良い。酵素および、融合構築物がＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現された際にエキソスポリウムへと当該酵素を向かわせる標的化配列を含有する融合構築物を調製しても良い。次いで、融合構築物をＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現させ、当該Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、病原体から植物を防御するために、土壌、または他の植物生育環境へと添加する。
【０２６１】
実施例１７．植物防御のための抗真菌性酵素を発現するＢＥＭＤ芽胞の使用、および、Ｓａｃｃｈｒｏｍｙｃｅｓへの有効性の提示
抗真菌性酵素のβ−１，３−グルカナーゼ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ由来）をコードする遺伝子を、ＢｃｌＡプロモーター（配列番号８５）の制御下で、ＢｃｌＡ標的化配列（配列番号６０）に連結させ、合成した。当該遺伝子を、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ０１３Ａへと導入し、脳心臓滲出培養液中で形質転換されたＢａｃｉｌｌｕｓを一晩培養して増殖させ、３０℃で普通寒天プレート上に置き、３日間増殖させることにより、芽胞を形成させた。プレートから芽胞を洗い流し、ＰＢＳで３回洗浄した。Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ  ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ培養物を、ＹＺ液体培地において３７℃で一晩、増殖させた。次いで、一晩培養させたものを沈殿させ、ＰＢＳで洗浄し、Ａｂｓ５９５＝０．２でＰＢＳ中に再懸濁した。β−１，３−グルカナーゼを発現する１ｘ１０４のＢＥＭＤを、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓと共に、３７℃で１時間、ＰＢＳ中で振とうさせながらインキュベートした。Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓの対照試料は、未処置のままとした（ＢＥＭＤ芽胞無し）。３時間のインキュベートの後、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓの希釈プレートを作製し、３７℃で一晩インキュベートした。Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓの培養物を、翌日に計数し、殺傷パーセントを定量した。以下の表１２に、β−１，３−グルカナーゼを発現するＢＥＭＤ芽胞の殺傷活性の値を示す。ＢＥＭＤ発現酵素は、有意に多くのＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ細胞を殺傷した。これは、根圏、種子、または他の植物物質上の真菌微生物の殺傷にそのまま当てはめられる。ある種の真菌に特異的なペプチドを選択することにより、植物近傍の微生物群を有益なものに変えることができ、または、重要な病原体を選択的に標的とすることもできる。
【表１２】
2020143064.tif 000030
【０２６２】
実施例１８．病原体から植物を防御するための、植物免疫システム刺激ペプチドまたはタンパク質を提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
また、ＢＥＭＤ系を用いて、植物免疫システム増強ペプチドおよびタンパク質を提示しても良い。これらタンパク質は、植物免疫システムを刺激して植物病原体から植物自身を防御するよう、ＢＥＭＤ芽胞の外側に発現され、および、植物生育環境中に送達されても良い。例示的なタンパク質およびペプチドとしては、ハーピン、α−エラスチン、β−エラスチン、システミン、フェニルアラニンアンモニア−リアーゼ、エリシチン、ディフェンシン、クリプトゲイン、ならびに、フラジェリンタンパク質およびペプチドが挙げられる。これらタンパク質およびペプチドに植物を曝すことにより、植物において、多くの植物病原体に対する抵抗性が刺激される。
【０２６３】
これらタンパク質またはペプチドのいずれかをＢＥＭＤ系へと導入し、実施例１に記述される方法と類似の方法を用いてＢＥＭＤ芽胞上に提示させても良い。酵素および、融合構築物がＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現された際にエキソスポリウムへと当該酵素を向かわせる標的化配列を含有する融合構築物を調製しても良い。次いで、融合構築物をＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現させ、当該Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、病原体から植物を防御するために、土壌、または他の植物生育環境へと添加する。
【０２６４】
実施例１９．植物の根系、または、植物の葉において、組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを固定するための、根結合タンパク質もしくはペプチド、または葉結合タンパク質もしくはペプチドを提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
また、根および葉に結合するタンパク質ならびにペプチドをＢＥＭＤ系に導入し、ＢＥＭＤ芽胞が植物の根系または葉に固定されるようにしても良い。ＢＥＭＤ芽胞上にそのような根、または葉に結合するリガンドを提示することにより、植物の根系、または根系の下部構造、または葉、または葉の下部構造に芽胞が向かい、他の提示されている生物学的分子および酵素が有効であるために最適な位置でＢＥＭＤ芽胞が維持されることが可能となる。
【０２６５】
たとえば、リカドヘシン（ｒｈｉｃａｄｈｅｓｉｎ）は、根毛に結合する根結合リガンドである。ゆえに、ＢＥＭＤ芽胞上にリカドヘシンを提示することにより、芽胞を根毛に向かわせることができる。植物の根または葉に選択的に結合することができる他のタンパク質としては、アドヘシン、フラジェリン、オンプチン（ｏｍｐｔｉｎ）、レクチン、線毛タンパク質、カーラスタンパク質（ｃｕｒｌｕｓ  ｐｒｏｔｅｉｎ）、インチミン、インベーシン、アグルチニン、非線毛タンパク質（ａｆｉｍｂｒｉａｌ  ｐｒｏｔｅｉｎ）、ＴａｓＡまたはＹｕａＢが挙げられる。
【０２６６】
そのような根または葉に結合するタンパク質およびペプチドを、実施例１に記述される方法と類似の方法を用いてＢＥＭＤ系に導入しても良い。根もしくは葉結合タンパク質またはペプチド、および、融合構築物がＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現された際にエキソスポリウムへと当該タンパク質またはペプチドを向かわせる標的化配列を含有する融合構築物を調製しても良い。次いで、根または葉結合リガンドを含有する融合構築物をＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現させる。そのような融合構築物は、本明細書に記述される任意の有益な酵素（たとえば、植物ホルモンの合成に関与する酵素、栄養源を分解する酵素、または、病原体から植物を防御するプロテアーゼ等）を含有する１以上の追加の融合構築物と共に共発現されても良い。当該Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、土壌、または他の植物生育環境へと添加するか、または、植物の葉に適用する。根または葉結合リガンドは、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを植物の根系または植物の葉に向かわせ、そこに固定し、それによって、共発現された融合構築物が根系または葉系のすぐ近傍でその効果を発揮できるようにする。
【０２６７】
実施例２０．植物のストレス耐性を増強させるタンパク質または酵素を提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
植物におけるストレス耐性を増強させるタンパク質、ペプチド、および酵素をＢＥＭＤ系に導入し、根、葉、または植物生育環境への添加を介して標的植物への送達を行っても良い。ストレスを受けている間、植物はストレス関連化合物（アミノシクロプロパン−１−カルボン酸（ＡＣＣ）、活性酸素種、その他等）を放出し、それにより、植物の生育が負の影響を受ける。ＢＥＭＤ系を用いて、そのようなストレス関連化合物を分解する酵素（たとえば、アミノシクロプロパン−１−カルボン酸デアミナーゼ、スーパーオキシドジスムターゼ、オキシダーゼ、カタラーゼ、および、活性酸素種に作用する他の酵素等）を提示しても良い。そのような酵素により、これらストレス関連化合物の量が減少し、植物が生育を継続することが出来、さらには、ストレス条件下で力強く育つことができる。
【０２６８】
ＢＥＭＤ芽胞上に提示させるために、これらタンパク質またはペプチドのいずれかを実施例１に記述される方法と類似の方法を用いてＢＥＭＤ系に組み込んでもよい。酵素および、融合構築物がＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現された際にエキソスポリウムへと当該酵素を向かわせる標的化配列を含有する融合構築物を調製しても良い。次いで、融合構築物をＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現させ、当該Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、標的植物のストレス耐性を増強させるために、土壌、または別の植物生育環境へと添加、または、植物の葉に適用する。
【０２６９】
実施例２１．防御酵素のカタラーゼを発現するＢＥＭＤ芽胞の調製
防御酵素のカタラーゼ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓ由来）をコードする遺伝子を、ＢｅｔＡプロモーター（配列番号８６）の制御下で、ＢｅｔＡ標的化配列（配列番号６１）に連結させ、合成した。当該遺伝子を、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ０１３Ａへと導入した。脳心臓滲出培養液中で形質転換されたＢａｃｉｌｌｕｓおよび野生型株を一晩培養して増殖させ、３０℃で普通寒天プレート上に置き、３日間増殖させることにより、芽胞を形成させた。プレートから芽胞を洗い流し、ＰＢＳで３回洗浄した。３滴の過酸化水素を各芽胞のペレットに添加した。酵素のカタラーゼは、過酸化水素を水とＯ２ガスに転換する。対照の芽胞は泡立たないが、ＢＥＭＤ−カタラーゼ芽胞はすぐに発泡し、芽胞の表面上に酵素活性があることを示す。ストレスの間、植物により産生されるフリーラジカルに作用するよう、他の防御酵素を同様の方法で提示させ、植物に送達しても良い。
【０２７０】
実施例２２．環境ストレスから種子または植物を防御するタンパク質または酵素を提示する組換えＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用
環境ストレスから植物を防御するタンパク質、ペプチド、および酵素をＢＥＭＤ系に導入し、根、葉、または植物生育環境への添加を介して標的植物への送達を行っても良い。氷結されている間、植物は氷の影響によりダメージを受ける。ＢＥＭＤ系を用いて、そのような影響から植物を防御するペプチド、タンパク質または酵素を提示させても良い。たとえば、ＢＥＭＤ系を用いて、コリン脱水素酵素（霜から植物または種子を防御する防御産物を産生することにより作用する）を提示しても良い。また、これら酵素の基質（たとえば、コリンおよび／またはコリン誘導体）を植物生育環境に添加しても良い。そのような基質を添加することにより、ＢＥＭＤ発現酵素により植物環境中に産生された防御物質（ベタインおよび関連化学物質）の量を増やすことができる。ベタイン誘導体は、低温ストレスから種子を防御することが知られている。
【０２７１】
これらタンパク質またはペプチドのいずれかを実施例１に記述される方法と類似の方法を用いてＢＥＭＤ系に組み込んでもよい。酵素および、融合構築物がＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現された際にエキソスポリウムへと当該酵素を向かわせる標的化配列を含有する融合構築物を調製しても良い。次いで、融合構築物をＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて発現させ、当該Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーを、環境ストレスおよび因子から植物を防御するために、土壌、または他の植物生育環境へと添加、または、植物の葉に適用する。
【０２７２】
実施例２３．増強された、または、別のプロモーターエレメントを用いることによる、ＢＥＭＤ系における融合構築物の発現増強
ＢＥＭＤ系は、本明細書に記述される標的化配列の１以上を用いた幅広いタンパク質、ペプチドおよび酵素を提示することができる。これら標的化配列の一部は、エキソスポリウムに対し高い親和性を有しているため融合タンパク質の発現に有益であるが、融合タンパク質の発現レベルは低いため、ＢＥＭＤ系上で用いることには制限がある。そのような融合タンパク質および配列に対しては、天然プロモーターの代わりに、別の高発現芽胞形成プロモーターを用いても良い。
【０２７３】
たとえば、配列番号１３（Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４遺伝子３５７２のアミノ酸１〜３９）により、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーのエキソスポリウムへのタンパク質の送達が非常に効率的となるＮ末端配列がもたらされる（以下の表１３に示す）。本明細書に記述されるように、全ての遺伝子は、その完全形で合成される（プロモーター領域および融合タンパク質のコード領域を含む）。Ｂ．  ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４遺伝子３５７２に対する天然プロモーターエレメント（配列番号８８）を用いて、β−ガラクトシダーゼ酵素（大腸菌由来）に融合された配列番号１３の標的化配列を含有する融合タンパク質を発現した場合は、低レベルの融合タンパク質が発現されるため、芽胞表面上の酵素活性は低い。酵素活性は、１０分間の溶液中の０．５Ｍ  ｏ−ニトロフェニルガラクトシドの転換により測定した。酵素転換は、ＡＢＳ５４０で分光光度計を用いて測定した。Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４遺伝子３５７２の天然型プロモーターエレメントを配列番号８６の高発現プロモーター（Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ  ＢｅｔＡ／ＢＡＳ３２９０）、または、配列番号８９の高発現プロモーター（Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４  ＹＶＴＮ  βプロペラタンパク質）と置き換えることにより、芽胞の酵素活性が劇的に増加した。他方、Ｂ．ｗｅｉｈｅｎｓｔｅｐｈｅｎｓｉｓ  ＫＢＡＢ４遺伝子３５７２の天然型プロモーターエレメントを、Ｂ．ａｎｔｈｒａｃｉｓ  Ｓｔｅｒｎｅ  ＢＡＳ１８８２の天然型プロモーター（配列番号８７）と置き換えた場合には、芽胞の酵素活性は減少した。β−ガラクトシダーゼに融合された配列番号１３の標的化配列の発現レベルは、ＢＡＳ１８８２（配列番号８７）のプロモーターにより誘導された場合には非常に低く（０．３８Ｘ）、ＢｅｔＡプロモーター（配列番号８６）またはＹＶＴＮタンパク質プロモーター（配列番号８９）から誘導された場合には大きく改善された。
【表１３】
2020143064.tif 000031
【０２７４】
実施例２４．植物生育促進細菌株の単離および同定
最も健康で、最も耐性のあるジャガイモ（Ｓｏｌａｎｕｍ  ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ）、黄色夏カボチャ（Ｃｕｃｕｒｂｉｔａ  ｐｅｐｏ）、トマト（Ｓｏｌａｎｕｍ  ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍ）、および、ｐｏｌｅ  ｂｅａｎ（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ  ｃｏｃｃｉｎｅｕｓ）植物の根圏から土壌試料を採取し、滅菌水で希釈して、普通寒天プレートに撒いた。高成長率を示し、継代および増殖することができた細菌単離株をさらなる実験に選択した。選択された株を、最小培地（ＫＨ２ＰＯ４  ３ｇ、Ｎａ２ＨＰＯ４  ６ｇ、ＮＨ４Ｃｌ  １ｇ、ＮａＣｌ  ０．５０ｇ、ＭｇＳＯ４７Ｈ２Ｏ  ０．１５ｇ、ＣａＣｌ２２Ｈ２Ｏ  ０．０１３ｇ、および、グルコース１ｇ／Ｌ  乾重量）中で増殖させた。選択された株を一晩培養した（３０℃）ものをスピンダウンし、培地を棄て、等量の滅菌水に再懸濁した。１回の処置当たり１０のレタス種子を、大きな残渣をふるいにかけて取り除いた表土に、１ｃｍの深さで植えた（Ｃｏｌｕｍｂｉａ，ＭＯ）。種子は、植え付け時に、水に再懸濁した細菌０．５μｌを１０ｍｌのＨ２Ｏに混合したものとともに、４ｃｍのポットに接種した。１０ｍｌのＨ２Ｏは、細菌が３ｉｎ３（７．６２ｃｍ３）の土壌に細菌が送達されるのに十分であり、ならびに、種子の適切な発芽のために土壌を満たすのに十分であった。植物は６５〜７５°Ｆ（１８〜２４℃）の温度で、１１時間の光照射／日とともに生育させ、５ｍｌの水を３日毎に与えた。１週間後、植物の高さと葉の直径、ならびに、植物の全体的な健康を記録した。根圏単離物の最初のスクリーニングによって、４つの植物の根圏から、２００を超える異なる種の細菌および真菌が得られた。一部の細菌種を表１４に示す。同定された株は、その正規の細菌名で示されている。他の株は、不明  番号により示されている。対照に近い結果となった接種物（＋／−２％）は、表に含めなかった。
【表１４】
2020143064.tif 000032
【０２７５】
最初のレタスの試験において、植物全体の健康および植物の高さに最も大きな効果のあった細菌株を、次の同定に供した。細菌株は、Ｌｕｒｉａ  Ｂｅｒｔａｎｉ液体培地中、３７℃で増殖させ、一晩培養したものを遠心でスピンダウンした。培地を棄て、残った細菌のペレットを、Ｑｉａｇｅｎ  Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌ  ＤＮＡ  Ｉｓｏｌａｔｉｏｎキットを用いた染色体ＤＮＡの単離に供した。染色体ＤＮＡは、プライマーＥ３３８Ｆ  ５’−ＡＣＴ  ＣＣＴ  ＡＣＧ  ＧＧＡ  ＧＧＣ  ＡＧＣ  ＡＧＴ−３’（配列番号１２２）、Ｅ１０９９Ｒ  Ａ  ５’−ＧＧＧ  ＴＴＧ  ＣＧＣ  ＴＣＧ  ＴＴＧ  Ｃ−３’  （配列番号１２３）、およびＥ１０９９Ｒ  Ｂ  ５’−ＧＧＧ  ＴＴＧ  ＣＧＣ  ＴＣＧ  ＴＴＡ  Ｃ−３’（配列番号１２４）を用いて、１６Ｓ  ｒＲＮＡコード領域のＰＣＲ増幅に供した。ＰＣＲ増幅物は、Ｐｒｏｍｅｇａ  ＰＣＲ精製キットを用いて精製し、得られた増幅物を希釈し、ＤＮＡ配列解析のためにＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｍｉｓｓｏｕｒｉ  ＤＮＡ  Ｃｏｒｅに送付した。ＤＮＡ配列を、細菌単離物のＮＣＢＩ  ＢＬＡＳＴデータベースと比較し、属種は、公知の株との直接比較により特定した。最も特定された種を表１４に示す。多くの場合において、１６Ｓ  ｒＲＮＡ  ＤＮＡ配列からは、選択された細菌株の属を示すことが出来たのみであった。直接同定が利用できなかった場合、当分野に標準的な方法を用いた追加の生化学分析を行い、種および株レベルで識別を行い、それらを表１５に示す。
【表１５】
2020143064.tif 000033
【０２７６】
実施例２５．追加の植物生育促進細菌株の単離および同定
Ｇａｓ、Ｋａｎｓａｓに近い農場から土壌試料を集め、滅菌水で希釈し、普通寒天培地に撒いた。高成長率を示し、継代および増殖することができた細菌単離株をさらなる実験に選択した。選択された株を、最小培地（ＫＨ２ＰＯ４  ３ｇ、Ｎａ２ＨＰＯ４  ６ｇ、ＮＨ４Ｃｌ  １ｇ、ＮａＣｌ  ０．５０ｇ、ＭｇＳＯ４７Ｈ２Ｏ  ０．１５ｇ、ＣａＣｌ２２Ｈ２０  ０．０１３ｇ、および、グルコース１ｇ／Ｌ  乾重量）中で増殖させた。選択された株を一晩培養した（３０℃）ものをスピンダウンし、培地を棄て、等量の滅菌水に再懸濁した。トウモロコシの種子を市販の種子ポリマー（水単独と混合したもの（トータルで１．６μｌ／種子）、または、選択細菌株（トータルで１．６μｌ／種子）を含有するもの）でコートした。コートされた種子は、（３インチ）７．６２ｃｍ直径のポットに、大きな残渣をふるいにかけて取り除いた表土（Ｃｏｌｕｍｂｉａ、ＭＯ）に１インチ（２．５４ｃｍ）の深さで植えた。植物は１８〜２４℃（６５〜７５°Ｆ）の温度で、１１時間の光照射／日とともに生育させ、５０ｍｌの水を３日毎に与えた。２週間後、植物の高さと葉の直径、ならびに、植物の全体的な健康を記録した。発芽アッセイおよび３日目の根の長さを測定するために、種子を上述のようにコートし、ペーパータオル毎に１０個の種子で等しく撒いた。ペーパータオルは１０ｍｌの水で湿らせ、くるくると巻き、小さなプラスチック袋内に置き、３０℃でインキュベートするか、または、発芽加熱マット上に２７〜３０℃（８０〜８５°Ｆ）で置いた。根の測定は、３日後に記録した。根圏単離物の最初のスクリーニングによって、根圏から１００を超える異なる種の細菌および真菌が得られた。一部の細菌種を表１６に示す。同定された株は、その正規の細菌名で示されている。
【表１６】
2020143064.tif 000034
【０２７７】
植物の健康に最も大きな効果のあった細菌株を、表１６に示す。細菌株は、Ｌｕｒｉａ  Ｂｅｒｔａｎｉ液体培地中、３７℃で増殖させ、一晩培養したものを遠心でスピンダウンした。培地を棄て、残った細菌のペレットを、Ｑｉａｇｅｎ  Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａｌ  ＤＮＡ  Ｉｓｏｌａｔｉｏｎキットを用いた染色体ＤＮＡの単離に供した。染色体ＤＮＡは、プライマーＥ３３８Ｆ  ５’−ＡＣＴ  ＣＣＴ  ＡＣＧ  ＧＧＡ  ＧＧＣ  ＡＧＣ  ＡＧＴ−３’（配列番号１２２）、Ｅ１０９９Ｒ  Ａ  ５’−ＧＧＧ  ＴＴＧ  ＣＧＣ  ＴＣＧ  ＴＴＧ  Ｃ−３’  （配列番号１２３）、およびＥ１０９９Ｒ  Ｂ  ５’−ＧＧＧ  ＴＴＧ  ＣＧＣ  ＴＣＧ  ＴＴＡ  Ｃ−３’（配列番号１２４）を用いて、１６Ｓ  ｒＲＮＡコード領域のＰＣＲ増幅に供した。ＰＣＲ増幅物は、Ｐｒｏｍｅｇａ  ＰＣＲ精製キットを用いて精製し、得られた増幅物を希釈し、ＤＮＡ配列解析のためにＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  ｏｆ  Ｍｉｓｓｏｕｒｉ  ＤＮＡ  Ｃｏｒｅに送付した。ＤＮＡ配列を、細菌単離物のＮＣＢＩ  ＢＬＡＳＴデータベースと比較し、属種は、公知の株との直接比較により特定した。最も特定された種を表１６に示す。多くの場合において、１６Ｓ  ｒＲＮＡ  ＤＮＡ配列からは、選択された細菌株の属を示すことが出来たのみであった。直接同定が利用できなかった場合、当分野に標準的な方法を用いた追加の生化学分析を行い、種および株レベルで識別を行い、識別された株を表１７に示す。
【表１７】
2020143064.tif 000035
【０２７８】
実施例２６．アルファルファに対する、植物生育促進細菌株の検証
選択された株を、最小培地（ＫＨ２ＰＯ４  ３ｇ、Ｎａ２ＨＰＯ４  ６ｇ、ＮＨ４Ｃｌ  １ｇ、ＮａＣｌ  ０．５０ｇ、ＭｇＳＯ４７Ｈ２Ｏ  ０．１５ｇ、ＣａＣｌ２２Ｈ２Ｏ  ０．０１３ｇ、および、グルコース１ｇ／Ｌ  乾重量）中で増殖させた。選択された株を一晩培養した（３０℃）ものをスピンダウンし、培地を棄て、等量の滅菌水に再懸濁した。１０個のＺｅｂａコートされたアルファルファの種子は、大きな残渣をふるいにかけて取り除いた表土（Ｃｏｌｕｍｂｉａ、ＭＯ）に０．６ｃｍの深さで各処置に対して植えた。種子は、植え付け時に、水に再懸濁した細菌０．５μｌを１０ｍｌのＨ２Ｏに混合したものとともに接種した。１０ｍｌのＨ２Ｏは、細菌が３ｉｎ３（７．６２ｃｍ３）の土壌に細菌が送達されるのに十分であり、ならびに、種子の適切な発芽のために土壌を満たすのに十分であった。植物は６５〜７５°Ｆ（１８〜２４℃）の温度で、１１時間の光照射／日とともに生育させ、５ｍｌの水を３日毎に与えた。アルファルファを１週間育て、記載された条件下での発芽および植物の最初の伸長を分析した。同定された株は、その正規の細菌名で示され、最終的な高さのデータを表１８に示す。
【表１８】
2020143064.tif 000036
【０２７９】
実施例２７．キュウリに対する植物生育促進細菌株の検証
選択された株を、最小培地（ＫＨ２ＰＯ４  ３ｇ、Ｎａ２ＨＰＯ４  ６ｇ、ＮＨ４Ｃｌ  １ｇ、ＮａＣｌ  ０．５０ｇ、ＭｇＳＯ４７Ｈ２Ｏ  ０．１５ｇ、ＣａＣｌ２２Ｈ２Ｏ  ０．０１３ｇ、および、グルコース１ｇ／Ｌ  乾重量）中で増殖させた。選択された株を一晩培養した（３０℃）ものをスピンダウンし、培地を棄て、等量の滅菌水に再懸濁した。１０個のキュウリの種子を、大きな残渣をふるいにかけて取り除いた表土（Ｃｏｌｕｍｂｉａ、ＭＯ）に１ｃｍの深さで各処置に対して植えた。種子は、植え付け時に、水に再懸濁した細菌０．５μｌを１０ｍｌのＨ２Ｏに混合したものとともに接種した。１０ｍｌのＨ２Ｏは、細菌が３ｉｎ３（７．６２ｃｍ３）の土壌に細菌が送達されるのに十分であり、ならびに、種子の適切な発芽のために土壌を満たすのに十分であった。植物は６５〜７５°Ｆ（１８〜２４℃）の温度で、１１時間の光照射／日とともに生育させ、５ｍｌの水を３日毎に与えた。キュウリを２週間育て、記載された条件下での発芽および植物の最初の伸長を分析した。同定された株は、その正規の細菌名で示され、最終的な高さのデータを表１９に示す。
【表１９】
2020143064.tif 000037
【０２８０】
実施例２８．黄色カボチャ（ｙｅｌｌｏｗ  ｓｑｕａｓｈ）に対する植物生育促進細菌株の検証
選択された株を、最小培地（ＫＨ２ＰＯ４  ３ｇ、Ｎａ２ＨＰＯ４  ６ｇ、ＮＨ４Ｃｌ  １ｇ、ＮａＣｌ  ０．５０ｇ、ＭｇＳＯ４７Ｈ２Ｏ  ０．１５ｇ、ＣａＣｌ２２Ｈ２Ｏ  ０．０１３ｇ、および、グルコース１ｇ／Ｌ  乾重量）中で増殖させた。選択された株を一晩培養した（３０℃）ものをスピンダウンし、培地を棄て、等量の滅菌水に再懸濁した。１０個の黄色カボチャの種子を、大きな残渣をふるいにかけて取り除いた表土（Ｃｏｌｕｍｂｉａ、ＭＯ）に１ｃｍの深さで各処置に対して植えた。種子は、植え付け時に、水に再懸濁した細菌０．５μｌを１０ｍｌのＨ２Ｏに混合したものとともに接種した。１０ｍｌのＨ２Ｏは、細菌が３ｉｎ３（７．６２ｃｍ３）の土壌に細菌が送達されるのに十分であり、ならびに、種子の適切な発芽のために土壌を満たすのに十分であった。植物は６５〜７５°Ｆ（１８〜２４℃）の温度で、１１時間の光照射／日とともに生育させ、５ｍｌの水を３日毎に与えた。カボチャを２週間育て、記載された条件下での発芽および植物の最初の伸長を分析した。同定された株は、その正規の細菌名で示され、最終的な高さおよび最終的な葉の直径（２つの葉の長さによる）のデータを表２０に示す。
【表２０】
2020143064.tif 000038
【０２８１】
実施例２９．ライグラスに対する植物生育促進細菌株の検証
選択された株を、最小培地（ＫＨ２ＰＯ４  ３ｇ、Ｎａ２ＨＰＯ４  ６ｇ、ＮＨ４Ｃｌ  １ｇ、ＮａＣｌ  ０．５０ｇ、ＭｇＳＯ４７Ｈ２Ｏ  ０．１５ｇ、ＣａＣｌ２２Ｈ２Ｏ  ０．０１３ｇ、および、グルコース１ｇ／Ｌ  乾重量）中で増殖させた。選択された株を一晩培養した（３０℃）ものをスピンダウンし、培地を棄て、等量の滅菌水に再懸濁した。３０個のライグラスの種子を、大きな残渣をふるいにかけて取り除いた表土（Ｃｏｌｕｍｂｉａ、ＭＯ）に０．３ｃｍの深さで各処置に対して植えた。種子は、植え付け時に、水に再懸濁した細菌０．５μｌを１０ｍｌのＨ２Ｏに混合したものとともに接種した。１０ｍｌのＨ２Ｏは、細菌が３ｉｎ３（７．６２ｃｍ３）の土壌に細菌が送達されるのに十分であり、ならびに、種子の適切な発芽のために土壌を満たすのに十分であった。植物は６５〜７５°Ｆ（１８〜２４℃）の温度で、１１時間の光照射／日とともに生育させ、５ｍｌの水を３日毎に与えた。ライグラスを１．５週間育て、記載された条件下での発芽および植物の最初の伸長を分析した。同定された株は、その正規の細菌名で示され、最終的な高さのデータを表２１に示す。
【表２１】
2020143064.tif 000039
【０２８２】
実施例３０．トウモロコシに対する植物生育促進細菌株の検証
選択された株を、最小培地（ＫＨ２ＰＯ４  ３ｇ、Ｎａ２ＨＰＯ４  ６ｇ、ＮＨ４Ｃｌ  １ｇ、ＮａＣｌ  ０．５０ｇ、ＭｇＳＯ４７Ｈ２Ｏ  ０．１５ｇ、ＣａＣｌ２２Ｈ２Ｏ  ０．０１３ｇ、および、グルコース１ｇ／Ｌ  乾重量）中で増殖させた。選択された株を一晩培養した（３０℃）ものをスピンダウンし、培地を棄て、等量の滅菌水に再懸濁した。１０個のトウモロコシ種子を、大きな残渣をふるいにかけて取り除いた表土（Ｃｏｌｕｍｂｉａ、ＭＯ）に２．５ｃｍの深さで各処置に対して植えた。種子は、植え付け時に、水に再懸濁した細菌０．５μｌを１０ｍｌのＨ２Ｏに混合したものとともに接種した。１０ｍｌのＨ２Ｏは、細菌が３ｉｎ３（７．６２ｃｍ３）の土壌に細菌が送達されるのに十分であり、ならびに、種子の適切な発芽のために土壌を満たすのに十分であった。植物は６５〜７５°Ｆ（１８〜２４℃）の温度で、１１時間の光照射／日とともに生育させ、５ｍｌの水を３日毎に与えた。トウモロコシを２週間育て、記載された条件下での発芽および植物の最初の伸長を分析した。同定された株は、その正規の細菌名で示され、最終的な高さのデータを表２２に示す。
【表２２】
2020143064.tif 000040
【０２８３】
実施例３１．大豆に対する植物生育促進細菌株の検証
選択された株を、最小培地（ＫＨ２ＰＯ４  ３ｇ、Ｎａ２ＨＰＯ４  ６ｇ、ＮＨ４Ｃｌ  １ｇ、ＮａＣｌ  ０．５０ｇ、ＭｇＳＯ４７Ｈ２Ｏ  ０．１５ｇ、ＣａＣｌ２２Ｈ２Ｏ  ０．０１３ｇ、および、グルコース１ｇ／Ｌ  乾重量）中で増殖させた。選択された株を一晩培養した（３０℃）ものをスピンダウンし、培地を棄て、等量の滅菌水に再懸濁した。１０個の大豆種子を、大きな残渣をふるいにかけて取り除いた表土（Ｃｏｌｕｍｂｉａ、ＭＯ）に２．５ｃｍの深さで各処置に対して植えた。種子は、植え付け時に、水に再懸濁した細菌０．５μｌを１０ｍｌのＨ２Ｏに混合したものとともに接種した。２つの細菌株を検証する際、０．５μｌの各再懸濁された細菌は、１０ｍｌのＨ２Ｏと混合された。１０ｍｌのＨ２Ｏは、細菌が３ｉｎ３（７．６２ｃｍ３）の土壌に細菌が送達されるのに十分であり、ならびに、種子の適切な発芽のために土壌を満たすのに十分であった。植物は６５〜７５°Ｆ（１８〜２４℃）の温度で、１１時間の光照射／日とともに生育させ、５ｍｌの水を３日毎に与えた。大豆を２週間育て、記載された条件下での発芽および植物の最初の伸長を分析した。同定された株は、その正規の細菌名で示され、最終的な高さのデータを表２３に示す。本発明の細菌株とＢｒａｄｙｒｈｉｚｏｂｉｕｍ  ｓｐ．またはＲｈｉｚｏｂｉｕｍ  ｓｐ．のメンバーと共に接種することにより、各接種単独と比較し、植物の生育が増加した。
【表２３】
2020143064.tif 000041
【０２８４】
実施例３２．植物生育促進の特性を有するＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー
Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ株ＢＴ１５５、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ株ＥＥ１１８、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ株ＥＥ１４１、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｙｃｏｉｄｅｓ株ＢＴ４６−３、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー株ＥＥ３４９、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ株ＢＴ０１３Ａ、および、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ株ＥＥ２８１を、Ｌｕｒｉａ  Ｂｅｒｔａｎｉ液体培地中、３７℃で増殖させ、一晩培養したものをスピンダウンし、培地を棄て、等量の滅菌水に再懸濁した。２０個のトウモロコシ種子を、大きな残渣をふるいにかけて取り除いた表土（Ｃｏｌｕｍｂｉａ、ＭＯ）に２．５ｃｍの深さで各処置に対して植えた。種子は、植え付け時に、水に再懸濁した細菌０．５μｌを５０ｍｌのＨ２Ｏに混合したものとともに接種した。５０ｍｌのＨ２Ｏは、細菌が２９ｉｎ３（４４２．５ｃｍ３）の土壌に細菌が送達されるのに十分であり、ならびに、種子の適切な発芽のために土壌を満たすのに十分であった。植物は６５〜７２°Ｆの温度で、１３時間の光照射／日とともに生育させ、５ｍｌの水を３日毎に与えた。苗木を２週間育て、記載された条件下での発芽および植物の最初の伸長を分析した。同定された株は、その正規の細菌名で示され、最終的な高さのデータを表２４に示す。
【表２４】
2020143064.tif 000042
全ての検証した植物生育促進細菌は、記述される条件下、２週間でトウモロコシの高さに有益な効果をもたらした。Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーであるＥＥ１２８株は、この試験で最も高い効果を有しており、トウモロコシの高さにおいて１４％を超えるブースト効果があった。
【０２８５】
実施例３３．ＢＥＭＤ発現宿主として、植物生育促進および他の有益な活性に関するスクリーニングのための、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの選択強化
有益な農業的効果をもたらすために本明細書に記述される標的化配列のいずれかを用いて、広範なタンパク質、ペプチド、酵素を提示するためにＢＥＭＤ系を用いてもよい。追加の有益な効果は、内在的に有益な特性を有する発現宿主（たとえば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー）を選択することにより得ることができる。Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの多くの株が、植物生育促進の効果を有している。さらに、多くのＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー株が、直接的な殺真菌活性、殺虫活性、殺線虫活性、または他の防御的活性を介した防御効果を有している。ＢＥＭＤ系の発現宿主として、そのような株を用いることにより、最終芽胞産物は、農業における複数の有益な効果を有する。
【０２８６】
表２５において、融合タンパク質が様々なＢａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの株で発現された実験に関する結果を示す。すべての株が、配列番号１のアミノ酸１〜３５、および、トウモロコシにおけるリン酸取り込み強化に有益な酵素であるＢａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ由来のホスファターゼＰｈｏＡ４を含有する融合タンパク質を発現している。当該遺伝子は合成され、ｐＭＫ４ベクターにクローニングされ、および、以下の表２５に示されるＢａｃｉｌｌｕｓ  ｓｐｐ．の各々に導入された。クロラムフェニコール１０μｇ／ｍｌを含有する普通寒天プレート上で３日間、３０℃でインキュベートすることにより、株は芽胞形成した。芽胞を集め、洗浄し、植え付けの際に、５ｍｇポリリン酸／ポットと共に、７．６２ｃｍの直径のポット毎に、５０ｍｌの水に溶解した１ｘ１０５ＣＦＵ／ｍｌの比率でトウモロコシに適用された。トウモロコシは２週間、シルトローム土壌中で生育された。植物は、Ｔ５ランプ、５４ワットを用いた最適な光の下で、１５．５〜２５．５℃の間に制御された温度条件下、１日当たり１３時間光を当てられ、生育された。植物は、２週間の試験の間、３日毎に水を十分に与えられた。２週間の最後、各植物の高さを計測し、計測値は、対照のＢａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓの芽胞に対して標準化された。配列番号１−ホスファターゼ融合タンパク質の発現により、選択された発現宿主株に関わらず、２週でトウモロコシの高さが増加した。表２５に示されるように、植物生育促進Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの使用により、さらにトウモロコシの高さが増加した。
【表２５】
2020143064.tif 000043
【０２８７】
実施例３４．Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓの表面上にβ−ガラクトシダーゼを発現するための、様々な標的化配列の使用
ＢｃｌＡのアミノ酸２０〜３５（配列番号１のアミノ酸２０〜３５）と高度な相同性を有する様々な標的化配列を、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの表面上に酵素、タンパク質、およびペプチドを提示するために用いても良い。いくつかの標的化配列を、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓリパーゼに連結された標的化配列を含有する融合タンパク質を作製することにより比較した。融合構築物は、標的化配列に対し天然型であるプロモーターを用いて合成し、複製プラスミドｐＭＫ４にクローニングし、および、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ０１３Ａへと導入した。クロラムフェニコール１０μｇ／ｍｌを含有する普通寒天プレート上で３日間、３０℃でインキュベートすることにより、株は芽胞形成した。芽胞を集め、洗浄し、１ｘ１０８／ｍｌの比率でＰＢＳ中に再懸濁した。各融合構築物の芽胞に対し、１ｘ１０５個の芽胞を、４００μｌのｄＨ２Ｏに懸濁した。反応物を、所望される反応温度（４０℃）にまで、反応成分と共に加熱した。２００μｌのワーキング緩衝液を添加した（溶液Ａ：溶液Ｂが９：１）。溶液Ａは、５０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ１０）および１３．６ｍＭのデオキシコール酸であり、溶液Ｂは、イソプロパノールに溶解した３ｍｇ／ｍｌのｐ−ニトロフェニルパルミチン酸である。反応物を４０℃で１０分間インキュベートし、氷上に置き、芽胞を取り除くために遠心し、４２０ｎｍの吸光度を測定した。結果を以下の図２６に示す。活性は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓリパーゼに融合された配列番号１のアミノ酸１〜３５を含有する対照融合タンパク質に対して標準化された。
【表２６】
2020143064.tif 000044
【０２８８】
リパーゼに連結されたいくつかの標的化配列は、芽胞表面上の酵素の発現レベルおよび活性の増加をもたらした。特に、配列番号６０、６２、および６４（各々、より短い標的化配列を含有する）は、ＢＥＭＤ芽胞の表面上に融合物の発現増強をもたらした。検証された標的化配列を含有する融合タンパク質はすべて、リパーゼを表面に提示した。
【０２８９】
実施例３５．Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓの表面上にリパーゼを発現させるための様々なエキソスポリウム配列の使用、および、エキソスポリウム表面への融合タンパク質の局在化の証明
様々なエキソスポリウムタンパク質を、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの表面上に酵素、タンパク質およびペプチドを提示するために用いることができる。いくつかのエキソスポリウムタンパク質を、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓリパーゼに連結されたエキソスポリウムタンパク質を含有する融合タンパク質を実施例３４に記述されるように作製することにより比較した。融合構築物は、以下の表２７に示されるエキソスポリウムタンパク質に対して天然型であるプロモーターを用いて合成され、複製プラスミドのｐＭＫ４にクローニングされ、および、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ０１３Ａへと導入された。様々なエキソスポリウムタンパク質‐Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ１６８リパーゼ融合物を提示する芽胞を、脳心臓滲出液体培地中で形質転換された細菌を、１０μｇ／ｍｌのクロラムフェニコールの選択圧と共に増殖させ、普通寒天プレート上に置き、および、３０℃で３日間インキュベートすることにより作製した。３日後、芽胞をプレートから洗い流し、遠心により精製し、および、１ｘ１０８ＣＦＵ／ｍｌでＰＢＳに再懸濁した。
【０２９０】
各融合構築物に対し１ｘ１０５個の芽胞を、４００μｌのｄＨ２Ｏに再懸濁した。反応物を、所望される反応温度（４０℃）にまで、反応成分と共に加熱した。２００μｌのワーキング緩衝液を添加した（溶液Ａ：溶液Ｂは９：１）。溶液Ａは、５０ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ１０）および１３．６ｍＭのデオキシコール酸であり、溶液Ｂは、イソプロパノールに溶解した３ｍｇ／ｍｌのｐ−ニトロフェニルパルミチン酸である。反応物を４０℃で１０分間インキュベートし、氷上に置き、芽胞を取り除くために遠心し、４２０ｎｍの吸光度を測定した。結果を以下の図２７に示す。活性は、リパーゼに連結された配列番号７２に対して標準化された。
【表２７】
2020143064.tif 000045
【０２９１】
配列番号７２および７３のエキソスポリウムタンパク質の使用により、芽胞上の酵素活性は最も高くなった。エキソスポリウムタンパク質を含有する全ての融合タンパク質は、異なるレベルではあるが、活性なＢａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ１６８リパーゼを表面に提示した。
【０２９２】
さらに別のエキソスポリウムタンパク質が、蛍光レポーターであるｍＣｈｅｒｒｙを用いて、エキソスポリウムへ融合タンパク質を向かわせることができることが示された。ｍＣｈｅｒｒｙレポーターに連結された配列番号７４、８３および７３のエキソスポリウムタンパク質を含有した融合構築物が作製された。芽胞を１．５日間増殖させ、回収し、上述のように再懸濁した。７μｌの蛍光芽胞を、Ｎｉｋｏｎ  Ｅ１０００顕微鏡に置き、後期芽胞形成の間、画像化を行った。リングの中の円状の局在は、外側芽胞層の局在の指標であり、それが出現することは、エキソスポリウムタンパク質が出現したことを表す。蛍光顕微鏡の結果は図２に示す。図２Ａ、２Ｂおよび２Ｃは、それぞれ配列番号７４、８３および７３のエキソスポリウムタンパク質とｍＣｈｅｒｒｙレポーターを含有する融合タンパク質を発現している芽胞の蛍光顕微鏡画像である。３つの融合物すべてが、高レベルの蛍光とエキソスポリウムの局在を示し、このことから、エキソスポリウムの表面上に外来性タンパク質を発現させるための利用可能性が示された。
【０２９３】
実施例３６．Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ芽胞においてホスファターゼを発現させるための様々な標的化配列およびエキソスポリウムタンパク質の使用、ならびに、大豆におけるホスファターゼ発現芽胞の効果
Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ＥＥ１４８ホスファターゼＡ４（ＰｈｏＡ４）を発現するＢＥＭＤ芽胞は、様々な標的化配列および、ＰｈｏＡ４に連結されたその天然型プロモーターの制御下にあるエキソスポリウムタンパク質をコードする遺伝子を遺伝子合成することにより作製した。合成された遺伝子をｐＭＫ４にクローニングし、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ０１３Ａに導入した。様々なエキソスポリウムタンパク質‐Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ＥＥ１４８  ＰｈｏＡ４融合物を提示する芽胞は、脳心臓滲出液体培地中で形質転換された細菌を、１０μｇ／ｍｌのクロラムフェニコールの選択圧と共に増殖させ、普通寒天プレートに置き、３日間、３０℃でインキュベートすることにより作製した。３日後、芽胞をプレートから洗い流し、遠心により精製し、ＰＢＳ中に１ｘ１０８ＣＦＵ／ｍｌで再懸濁した。
【０２９４】
標準的なローム表土で満たした１０ｃｍの深さのポットに、２．５４ｃｍの深さで大豆を植えた。ＰｈｏＡ４発現ＢＥＭＤ芽胞は、５０ｍｌの水で１ｘ１０４／ｍｌの濃度まで希釈し、植え付けの際に各植物に適用された。水のみの対照もまた含まれた。ポリリン酸を、液体中０．５ｍｇ／ポットの比率でポットに添加した。植物は、Ｔ５ランプ、５４ワットを用いた最適な光の下で、１５．５〜２５．５℃の間に制御された温度条件下、１日当たり１３時間光を当てられ、生育された。植物は、２週間の試験の間、３日毎に水を十分に与えられた。２週間の最後、各植物の高さを計測し、計測値は、対照の水のみの植物に対して標準化された。
【０２９５】
結果を表２８に示す。様々な標的化配列に連結されたＰｈｏＡ４と、ＰｈｏＡ４と異なる融合パートナーを有するエキソスポリウムタンパク質を含有する融合タンパク質を発現しているＢＥＭＤ芽胞の存在下で生育した大豆はすべて生育の増強を示したが、効果の程度は、用いられた標的化配列またはエキソスポリウムタンパク質によって変化した。
【表２８】
2020143064.tif 000046
【０２９６】
実施例３７．ＢＥＭＤ芽胞ならびに、種子処置、液体肥料および他の添加物の共適用
融合タンパク質を発現しているＢＥＭＤ芽胞を、様々な種子処置との適合性に関して検証した。ＢＥＭＤ芽胞は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ＥＥ１４８  ＰｈｏＡ４由来のホスファターゼ（ＰｈｏＡ４）またはＰＯＬＡＲＩＳペプチドに連結された配列番号１のアミノ酸１〜３５の標的化配列を含有する融合タンパク質を発現させた。合成された遺伝子をｐＭＫ４にクローニングし、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ０１３Ａに導入した。様々なエキソスポリウムタンパク質‐Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｓｕｂｔｉｌｉｓ  ＥＥ１４８  ＰｈｏＡ４またはＰＯＬＡＲＩＳ融合物を提示する芽胞は、脳心臓滲出液体培地中で形質転換された細菌を、１０μｇ／ｍｌのクロラムフェニコールの選択圧と共に増殖させ、普通寒天プレートに置き、３日間、３０℃でインキュベートすることにより作製した。３日後、芽胞をプレートから洗い流し、遠心により精製し、ＰＢＳ中に１ｘ１０８ＣＦＵ／ｍｌで再懸濁した。
【０２９７】
植物は、Ｔ５ランプ、５４ワットを用いた最適な光の下で、１５．５〜２５．５℃の間に制御された温度条件下、１日当たり１３時間光を当てられ、生育された。植物は、２週間の試験の間、３日毎に水を十分に与えられた。２週間の最後、各植物の高さを計測し、計測値は、対照の水のみの植物に対して標準化された。結果を以下の表２９に示す。水浸＝５０ｍｌ／ポットで土壌に適用された。ポリマー＝ＡＣＣＥＬＥＲＯＮ種子コーティングポリマーのみ。ＢＥＭＤ芽胞は、水浸適用に対しては、１ｘ１０４細胞／５０ｍｌで添加された。種子コーティング適用に対しては、ＢＥＭＤ芽胞は１．３ｘ１０４細胞／種子で添加された。１０−３４−０および６−２４−６は、標準的な市販の開始肥料組成物である。１０−３４−０は液体リン酸アンモニウムである。６−２４−６は、オルト／ポリ組成での低塩液体リン酸肥料である。着色料＝Ｂｅｃｋｅｒ  Ｕｎｄｅｒｗｏｏｄ赤種子コーティング着色剤。ＭＡＣＨＯ、ＡＰＲＯＮ、およびＣＲＵＩＳＥＲは、種子に用いられた市販の抗真菌剤である。ＭＡＣＨＯは活性成分であるイミダクリプリドを含有し、ＡＰＲＯＮは活性成分であるメフェノキサムを含有し、ＣＲＵＩＳＥＲは、活性成分であるチアメトキサム、メフェノキサム、およびフルジオキソニルの混合物を含有している。芽胞は、多くの種子適用と適合性があり、トウモロコシにおいて、植物生育促進の活性を維持していることが判明した。
【表２９】
2020143064.tif 000047
【０２９８】
ＢＥＭＤ芽胞は、検証した種子コーティング追加物すべてと適合性があることが判明した。ＢＥＭＤ  ＰｈＡ４芽胞を着色剤およびポリマー単独と組み合わせた場合、若干の活性減少があったものの、着色剤と他の抗真菌剤と組み合わせることにより、完全な活性が再び得られた。また、ＢＥＭＤ芽胞は液体肥料でも良く作用した。直接的な栄養補給を介して、開始肥料は植物の生育に寄与したものと思われる。ＢＥＭＤ芽胞は開始肥料の両方と連携したことから、過剰な栄養源の存在下でも、ホスファターゼ活性によって、植物の生育増強がもたらされることが示唆される。ＢＥＭＤ芽胞と抗真菌剤を組み合わせることにより、ＢＥＭＤ芽胞単独よりも植物の生育が大きく増加したことから、早期の生育期間中、若いトウモロコシが保護されたことが示唆される。
【０２９９】
実施例３８．トウモロコシに対するストレスによる生育阻害を減少させるための葉面添加としてのＢＥＭＤ芽胞の使用
ＢＥＭＤ芽胞提示系を用いて、農場または温室の生育中の植物の、何らかのストレスを緩和することができる酵素を送達しても良い。これを行うために、土壌中の活性酸素種に対して選択的に作用する酵素を選択した。活性酸素種は、植物におけるストレスの重要なマーカーである。
【０３００】
キトシナーゼ、スーパーオキシドジムスターゼ、カタラーゼ、またはβ１，３−グルカナーゼ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ０１３Ａ由来）に連結された配列番号１のアミノ酸１〜３５の標的化配列を含有する融合タンパク質を発現するＢＥＭＤ芽胞を作製した。合成された遺伝子をｐＭＫ４にクローニングし、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ  ＢＴ０１３Ａに導入した。様々なタンパク質融合物を提示する芽胞は、脳心臓滲出液体培地中で形質転換された細菌を、１０μｇ／ｍｌのクロラムフェニコールの選択圧と共に増殖させ、普通寒天プレートに置き、３日間、３０℃でインキュベートすることにより作製した。３日後、芽胞をプレートから洗い流し、遠心により精製し、ＰＢＳ中に１ｘ１０８ＣＦＵ／ｍｌで再懸濁した。
【０３０１】
３週齢のトウモロコシ（Ｖ５ステージ）は、Ｔ５ランプ、５４ワットを用いた最適な光の下で、１５．５〜２５．５℃の間に制御された温度条件下、１日当たり１３時間光を当てられ、生育された。植物は、試験の間、３日毎に水を十分に与えられた。植物がＶ５に到達したとき、ＢＥＭＤ芽胞または陽性対照化学物質を、１ｘ１０５ＢＥＭＤ芽胞／ｍｌ、または、当該化学物質に推奨される濃度のいずれかで、葉にスプレーした。トータルで１ｍｌのスプレーを各植物に個々に適用した。植物の高さは、葉面スプレー適用の少し前に計測した。次いで、３２．２℃まで加温し、水やりを週に１度に減らすことにより、トウモロコシにストレスを与えた。２週間の間、ストレス条件下に植物を置いた。２週間の最後、植物の高さを再度計測し、外観を記録した。ストレス条件下では、対照処置群において植物の生育は最小であった。水のみの対照と比較して、２週間にわたり植物の高さが増加することにより、ストレス条件下でも生育し続けていると記録された。結果を以下の表３０に示す。
【表３０】
2020143064.tif 000048
【０３０２】
いくつかのストレス除去酵素を、上述の表３０に示されるように、ＢＥＭＤ系を用いてトウモロコシに適用した。対照芽胞は有意な効果が無かった（植物の高さが−１．６％の減少）。ＢＥＭＤキトシナーゼ酵素は、その基質であるキトサンと組み合わせた場合に、ポジティブな効果が得られた。最も良く作用した２つの酵素は、ＢＥＭＤ  β−１，３−グルカナーゼおよびＢＥＭＤスーパーオキシドジムスターゼであった。ＢＥＭＤ  β−１，３−グルカナーゼは、主に抗真菌活性を有しているが、植物に対し直接な効果を与えることもできる。サリチル酸およびＢＴＨは、葉面アッセイに対する陽性対照であり、陽性反応は両方に対して認められた。この葉面送達法は、季節な様々なタイミングで、植物にストレス除去酵素を送達するのに有用である。
【０３０３】
実施例３９．様々なシグマ−Ｋ含有プロモーターを使用した融合タンパク質の発現レベル
上述の実施例２３に示されているように、標的化配列、エキソスポリウムタンパク質、またはエキソスポリウムタンパク質断片の天然型プロモーターを置き換えることにより、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーの芽胞のエキソスポリウムで発現される融合タンパク質のレベルに大きな影響を与えることができる。たとえば、天然型であるＢｃｌＡプロモーターをＢｃｌＢプロモーターに置き換えることにより、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーの芽胞の表面上の融合タンパク質のレベルは大きく減少する。あるいは、天然型であるＢｃｌＢプロモーターをＢｃｌＡプロモーターと置き換えることにより、エキソスポリウム上の融合タンパク質のレベルは劇的に増加する。
【０３０４】
その天然型芽胞形成プロモーターの制御下にある様々なエキソスポリウムタンパク質の相対プロモーター発現レベルは、Ｂｅｒｇｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００８のマイクロアレイデータから得た。相対発現レベルは、後期芽胞形成期（実験開始から３００分、シグマＫプロモーターが最も活性を有するとき）に測定された。シグマＫプロモーターは、エキソスポリウム局在化遺伝子および関連タンパク質の発現にとって重要なプロモーターである。相対発現は、全ての所与の時間で、染色体の他の全ての遺伝子の平均と比較した、遺伝子の発現レベルの増加である。以下の表３１において、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバーにおいて、シグマＫにより誘導された様々な遺伝子の送達発現レベルを示す。
【表３１】
2020143064.tif 000049
【０３０５】
上述を考慮すれば、本発明の複数の目的が達成され、および、他の有益な結果も得られたことが明らかであろう。
【０３０６】
上述の融合タンパク質、Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ｃｅｒｅｕｓファミリーのメンバー、製剤、および方法には、本発明の主旨から逸脱することなく様々な改変が可能であり、上述の明細書に含まれ、および添付の図面に示されるすべての内容は、解説と解釈され、限定の意図は無いとみなされるべきである。
【図１】
2020143064.tif 000050
【図２】
2020143064.tif 000051
【配列表】
2020143064000001.app