(57)【要約】      （修正有）【課題】９９．５％を超える高い純度であり、安定な結晶性アクリジニウム臭化物の多形態、並びに、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の治療のための医薬組成物の提供。【解決手段】7.7±0.2°2θ, 10.4±0.2°2θ, 13.2±0.2°2θ, 13.8±0.2°2θ, 19.9±0.2°2θ, 20.3±0.2°2θ, 20.8±0.2°2θ, 24.2±0.2°2θ, 25.7±0.2°2θ, 26.1±0.2°2θ, 29.2±0.2°2θ, 30.8±0.2°2θにピークを有する粉末ＸＲＰＤパターンを特徴とする結晶性アクリジニウム臭化物。該結晶性アクリジニウム臭化物、及び乾燥粉末、溶液または懸濁液の形態での吸入のための医薬上許容される添加物とを含む医薬組成物。該添加物が、ラクトース又はα−ラクトース・一水和物であることが好ましい。【選択図】図１
2020143160.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
7.7±0.2°2θ, 10.4±0.2°2θ, 13.2±0.2°2θ, 13.8±0.2°2θ, 19.9±0.2°2θ, 20.3±0.2°2θ, 20.8±0.2°2θ, 24.2±0.2°2θ, 25.7±0.2°2θ, 26.1±0.2°2θ, 29.2±0.2°2θ, 30.8±0.2°2θにピークを有する粉末ＸＲＰＤパターンを特徴とする結晶性アクリジニウム臭化物。
【請求項２】
ＴＧＡによる重量減少がないことを特徴とする請求項１に記載の結晶性アクリジニウム臭化物。
【請求項３】
２２８℃に吸熱ピークを有するＤＳＣサーモグラムを特徴とする請求項１に記載の結晶性アクリジニウム臭化物。
【請求項４】
請求項１乃至３のいずれか１項に記載の結晶性アクリジニウム臭化物と、乾燥粉末、溶液または懸濁液の形態での吸入のための医薬上許容される添加物とを含む医薬組成物。
【請求項５】
前記医薬上許容される添加物が、医薬上許容される乾燥粉末担体である乾燥粉末製剤の形態の請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項６】
前記医薬上許容される添加物が、ラクトースまたはα−ラクトース・一水和物である請求項４に記載の医薬組成物。
【請求項７】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の治療に使用する請求項１乃至３のいずれか１項に記載の結晶性アクリジニウム臭化物。
【請求項８】
慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）の治療に使用する請求項４乃至６のいずれか１項に記載の医薬組成物。
【請求項９】
以下に示すＸＲＰＤパターンを特徴とする結晶性アクリジニウム臭化物及び非晶質アクリジニウム臭化物の混合物。
【化１】
2020143160.tif 000008
【請求項１０】
前記混合物の全質量に対する非晶質アクリジニウム臭化物の割合が、２０質量パーセント以下である請求項９に記載の結晶性アクリジニウム臭化物及び非晶質アクリジニウム臭化物の混合物。
【請求項１１】
前記混合物の全質量に対する非晶質アクリジニウム臭化物の割合が、１０質量パーセント以下である請求項９に記載の結晶性アクリジニウム臭化物及び非晶質アクリジニウム臭化物の混合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、アクリジニウム塩（aclidinium salts）、特にアクリジニウム臭化物（aclidinium bromide）の製造方法に関する。本発明はまた、乾燥粉末、溶液または懸濁液の形態のアクリジニウムを含む医薬組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
本発明は、アクリジニウム塩の新規な製造方法に関する。アクリジニウムの化学名は、（３Ｒ）−３−［２−ヒドロキシ（ジ−２−チエニル）アセトキシ］−１−（３−フェノキシプロピル）−１−アゾニアビシクロ［２．２．２］オクタン（(3R)-3-[2-hydroxy(di-2-thienyl)acetoxy]-1-(3-phenoxypropyl)-1-azoniabicyclo[2.2.2]octane）である。アクリジニウム塩の構造を以下に示す（１）。
【０００３】
【化１】
2020143160.tif 000003
Ｘ-は、薬学的に許容されるアニオン（anion）、例えば臭化物（bromide）、塩化物（chloride）またはヨウ化物（iodide）である。
【０００４】
好ましい塩は、アクリジニウム臭化物、第四級アンモニウム塩（quaternary ammonium salt）である。
【０００５】
アクリジニウム臭化物は、白色からオフホワイトの結晶性粉末である。活性型（active form）は、Ｒ−異性体（R-isomer）であり、Ｓ−異性体（S-isomer）は、イン・ビトロ（in vitro）でムスカリン性受容体（muscarinic receptors）に対して小さな親和性（affinity）を有し、アセチルコリン誘発性の気管支収縮（acetylcholine induced bronchoconstriction）に限定された効果を有する。薬物は、微粉化した（micronized）アクリジニウム臭化物とα‐ラクトース・一水和物（α-lactose monohydrate）との混合物からなる吸入粉末（inhalation powder）として処方される。
【０００６】
アクリジニウム臭化物は、ムスカリン・アンタゴニスト（muscarinic antagonist）であり、Ｂｒｅｔａｒｉｓ Ｇｅｎｕａｉｒ（ＥＵ加盟国）、Ｔｕｄｏｒｚａ Ｐｒｅｓｓａｉｒ（米国およびカナダ）、Ｅｋｌｉｒａ Ｇｅｎｕａｉｒ（英国）として商業的に入手可能である。
【０００７】
本組成物及び製造方法は、国際公開第０１／０４１１８号（特許文献１）に記載されている。その後、改良された製造方法が、国際公開第２００８／００９３９７号（特許文献２）に記載されており、また、J.Med.Chem. 2009, 52, 5076-5092（非特許文献１）の記事にも記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】国際公開第０１／０４１１８号
【特許文献２】国際公開第２００８／００９３９７号
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】J.Med.Chem. 2009, 52, 5076-5092
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
国際公開第０１／０４１１８号に開示されたアクリジニウム臭化物の製造方法は、２つの主な欠点を有する：
・潜在的な遺伝毒性試薬（potential genotoxic reagent）である３−フェノキシプロピルブロミドを過剰に使用する−当量（equivalents）５
・反応時間が長い−７２時間。
【００１１】
国際公開第２００８／００９３９７号に開示された製造方法は、特定の溶媒の群を使用し、３−フェノキシプロピルブロミドの使用量を減らし、最終生成物内のこの試薬の含有量を制御することでこれらの欠点を克服することである。
【００１２】
この方法は、試薬３−フェノキシプロピルブロミドの量を減らしながら、特定の溶媒（５０℃〜２１０℃の間の沸点を有するケトンまたは環状エーテル）を使用して、反応時間を８時間に短縮することができる。しかしながら、これは還流（reflux）の下で反応を実施する必要がある。
【００１３】
さらに、考慮した溶媒が５０℃〜２１０℃の間の沸点を有することを考慮すると、場合によっては反応温度が非常に高くなければならず、製造方法に余計な操作上の問題が生じる。
【００１４】
本発明者らは、上述の欠点を最小化または排除しながら、高い化学的純度（chemical purity）、９９．０％を超える、好ましくは９９．５％を超える、安定的に（consistently）生成物を提供する製造方法、及び、安定した（consistent）多形体を発明した。本発明の方法はまた、制御された粒子サイズを有する生成物の製造を可能にする。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明の１つの態様によれば、２−ヒドロキシ−２，２−ジチエン−２−イル酢酸１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３（Ｒ）−イルメチルエステルと、３−フェノキシプロピルブロミドとを反応させることで、（３Ｒ）−３−［２−ヒドロキシ（ジ−２−チエニル）アセトキシ］−１−（３−フェノキシプロピル）−１−アゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンブロミド（アクリジニウム臭化物）を製造する製造方法であって、反応は、アミド基、及び／または、スルホキシド基を有する溶媒の群から選択される溶媒または溶媒の混合物中で行われることを特徴とする製造方法を提供する。
【００１６】
他の態様では、本発明は、7.7±0.2°2θ, 10.4±0.2°2θ, 13.2±0.2°2θ, 13.8±0.2°2θ, 19.9±0.2°2θ, 20.3±0.2°2θ, 20.8±0.2°2θ, 24.2±0.2°2θ, 25.7±0.2°2θ, 26.1±0.2°2θ, 29.2±0.2°2θ, 30.8±0.2°2θにピークを有する粉末ＸＲＰＤパターンを特徴とする結晶性アクリジニウム臭化物を提供する。
【００１７】
他の態様では、本発明は、以下に示す粉末ＸＲＰＤパターンを特徴とする本明細書に記載の記載の製造方法により任意に得られるアクリジニウム臭化物の結晶性及び非晶質（amorphous）の混合物を提供する：
【００１８】
【化２】
2020143160.tif 000004
他の態様では、アクリジニウム臭化物の製造方法であって、溶媒または溶媒の混合物中で、アクリジニウム臭化物の溶液を乾燥させる乾燥工程を含み、乾燥工程は、好ましくは噴霧乾燥によって乾燥させる製造方法を提供する。
【００１９】
他の態様では、本発明は、本明細書に記載の医薬上許容される（pharmaceutically acceptable）アクリジニウム塩（好ましくはアクリジニウム臭化物）と、医薬上許容される添加物（excipient）を含む医薬組成物を提供する。アクリジニウム臭化物は、本明細書に記載の製造方法によって製造することが好ましい。
【００２０】
他の態様では、本発明は、本明細書に記載のアクリジニウム臭化物、または、本明細書に記載の製造方法によって得られたアクリジニウム臭化物、または、本明細書に記載のアクリジニウム臭化物を含む医薬に使用される医薬組成物であり、好ましくは、慢性閉塞性肺疾患（chronic obstructive pulmonary disease）（ＣＯＰＤ）の治療に使用するものを提供する。
【００２１】
アクリジニウム臭化物の製造は、Ｎ−デスプロピルアクリジニウム（N-despropylaclidinium）（ＩＶ）を生成するための３Ｒ−キヌクリジノール（3R-quinucidinol）（ＩＩ）とＭＤＴＧ（ＩＩＩ）との間のエステル交換反応（transesterification reaction）、続く、Ｎ−デスプロピルアクリジニウムと３−フェノキシプロピルブロミド（3-phenoxypropyl bromide）（Ｖ）（四級化反応[quaternization reaction]）でアクリジニウム臭化物を合成することを含む（スキーム１）。
【００２２】
【化３】
2020143160.tif 000005
エステル交換反応には、様々な塩基を使用することができる。特に、Ｋ2ＣＯ3、ナトリウムメトキシド（sodium methoxide）、ナトリウムエトキシド（sodium ethoxide）、ナトリウムｔｅｒｔブトキシド（sodium tert butoxide）、トリアザビシクロデセン（triazabicyclodecene）（ＴＢＤ）、及び、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene）（ＤＢＵ）を使用することができる。
【００２３】
四級化反応において異なる溶媒または溶媒の混合物を使用することにより、本発明の製造方法は、１００℃未満の温度で、すなわち室温付近の温度で、最も好ましくは２０℃〜３０℃で、好ましくは３０℃または２０℃近辺で、反応を実施しながら、従来技術の欠点を克服することができる。
【００２４】
驚くべきことに、反応時間は８時間未満、好ましくは６時間未満、より好ましくは４時間未満に維持され、使用される遺伝子毒性試薬の量は、好ましくは１．２〜２．０モル当量の範囲に維持される。
【００２５】
選択される溶媒は、スルホキシド基を有する溶媒、好ましくはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、ジエチルスルホキシド、または、アミド基の溶媒のいずれか、好ましくはジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、（ジメチルアセトアミド）ＤＭＡ、または、これらの混合物であってよい。
【００２６】
本明細書に記載の四級化反応の更なる利点は、このようにして得られた固体の生成物を微粉化して、所望の粒径範囲、例えば吸入に適した粒度分布（particle size distribution）を達成することができることである。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】無水結晶形態のアクリジニウム臭化物の粉末ＸＲＰＤパターンである。
【図２】板状の粒子を有する生成物の電子走査顕微鏡（ＳＥＭ）画像である。
【図３】立方体形状の粒子を有する生成物の電子走査顕微鏡（ＳＥＭ）画像である。
【図４】非常に小さい平行に並ぶパイプ状の粒子を有する生成物の電子走査顕微鏡（ＳＥＭ）画像である。
【図５】無水アクリジニウム臭化物の熱重量分析結果である。
【図６】無水アクリジニウム臭化物の示差走査熱量測定（ＤＳＣ）結果である。
【図７】噴霧乾燥工程によって得られた結晶形態と非晶質アクリジニウム臭化物の混合物のＸＲＰＤパターンである。
【図８】微粉化した生成物の電子走査顕微鏡（ＳＥＭ）画像である。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
本発明は、（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルヒドロキシ（ジ−２−チエニル）アセテートと３−フェノキシプロピルブロミドとを反応させることで、（３Ｒ）−３−［２−ヒドロキシ（ジ−２−チエニル）アセトキシ］−１−（３−フェノキシプロピル）−１−アゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンブロミドを製造する製造方法であって、反応が、アミド基、及び／または、他の溶媒の群から選択される、または、沸点より低い温度のスルホキシド基（sulfoxide group）を有する溶媒の混合物から選択される溶媒または溶媒の混合物中で行われることを特徴とする。反応温度は１００℃未満、好ましくは５０℃未満であり、好ましい態様では、反応温度は約３０℃〜約２０℃、適切には約３０℃、または約２０℃である。
【００２９】
好ましい態様において、反応は不活性ガスのフロー（flow）中で、好ましくは乾燥不活性ガスのフローの中で、好ましくは乾燥窒素、乾燥ヘリウムまたはそれらの混合物のフロー中で行われる。
【００３０】
好ましい態様では、反応は大気圧より低い圧力で行われる。標準大気圧は１０１３２５ｐａ（７６０ｍｍＨｇ相当）であり、圧力はこれ以下であることが好ましい。代わりに、圧力は、反応が起こっている場所に基づいて、周囲大気圧より低くてもよい。
【００３１】
反応混合物から、形成されたアルコールが除去されることが好ましい。
【００３２】
反応溶媒が、ＤＭＦまたはＤＭＦを含有する溶媒の混合物、ＤＭＡまたはＤＭＡを含有する溶媒の混合物、ＤＭＳＯまたはＤＭＳＯを含有する溶媒の混合物であることが好ましい。１つの好ましい溶媒は、ＤＭＳＯまたはＤＭＳＯを含有する溶媒の混合物である。
【００３３】
例えば、溶媒としてＤＭＳＯを使用する場合、結晶化ステップを必要とせずに、９９．５％を超える純度を達成することができる。他の溶媒については、所望の純度を達成するために、結晶化ステップが必要な場合がある。
【００３４】
好ましい態様では、（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルヒドロキシ（ジ−２−チエニル）アセテートに対する３−フェノキシプロピルブロミドのモル当量の比が、１．２〜２．０の範囲であり、好ましくは、１．５〜２．０の範囲であり、より好ましくは１．８である。
【００３５】
最終生成物中の遺伝毒性不純物３−フェノキシプロピルブロミドの含有量は、常に５００ｐｐｍ未満、より好ましくは２００ｐｐｍ未満である。
【００３６】
本発明の製造方法の全反応時間は、８時間以下であることが好ましい。好ましい態様では、反応時間は、６時間以下であり、より好ましくは、４時間以下である。
【００３７】
本発明の方法は、必要に応じて、ＤＭＳＯ（または他の適切な溶媒）中に生成物を溶解させ、共溶媒としてアセトニトリル（または他の適切な溶媒）を使用して精製生成物を沈殿させることにより、アクリジニウム臭化物を精製するステップをさらに含んでもよい。
【００３８】
本発明の製造方法によって得られたアクリジニウム臭化物は、結晶性であることが好ましい。
【００３９】
本発明の製造方法１つの好ましい態様では、得られたアクリジニウム臭化物は、結晶性物質と非晶質物質の混合物である。
【００４０】
本発明の好ましい態様では、アクリジニウム臭化物の無水結晶形態（anhydrous crystalline form）が得られる。この形態は、図１に示す粉末ＸＲＰＤパターンを有し、7.7±0.2°2θ, 10.4±0.2°2θ, 13.2±0.2°2θ, 13.8±0.2°2θ, 19.9±0.2°2θ, 20.3±0.2°2θ, 20.8±0.2°2θ, 24.2±0.2°2θ, 25.7±0.2°2θ, 26.1±0.2°2θ, 29.2±0.2°2θ, 30.8±0.2°2θにピークを有する粉末ＸＲＰＤパターンを特徴とする。
【００４１】
この無水結晶形態は、異なる結晶習性および形態（morphologies）で得ることができる。
【００４２】
この無水結晶形態のアクリジニウム臭化物は、ＴＧＡによる重量減少がないことをさらに特徴とすることが好ましい。また、さらに、２２８℃に吸熱ピーク（endotherm peak）を有するＤＳＣサーモグラムを特徴とすることが好ましい。
【００４３】
１つの態様では、結晶形態のアクリジニウム臭化物は、少量の非晶質アクリジニウム臭化物を含んでいてもよい。非晶質アクリジニウム臭化物の割合が、２０質量パーセント濃度以下、好ましくは１０質量パーセント濃度以下であることが適切である（質量パーセント濃度は、材料の全質量に対するものである）。
【００４４】
アンチソルベント結晶化技術（anti-solvent crystallization technique）を実施すると、異なる形態（morphology）が観察された。図２に示すように、電子走査顕微鏡（Electro Scanning Microscopy）（ＳＥＭ）分析によって、粒子は、板状の形状（plate like shape）を示した。
【００４５】
熱サイクル法（thermocycling process）を用いて生成物を結晶化させると、図３に示すように立方体形状の粒子（cube-shape particles）が得られる。
【００４６】
そして、反応混合物を冷却して結晶化を行うと、図４に示すように、生成物の形態は非常に小さい平行に並ぶパイプ状の粒子（very small parallel piped shape particles）からなる。
【００４７】
本明細書に記載の方法に従って得られる無水結晶性アクリジニウム臭化物は、図５の熱重量分析（ＴＧＡ）による溶融および分解まで重量損失がないことをさらに特徴とする。
【００４８】
無水結晶性アクリジニウム臭化物は、示差走査熱量測定（Differential Scanning Calorimetry）（ＤＳＣ）サーモグラム（図６）によってさらに特徴付けられる。転移開始温度（temperature given by the onset of the transition）（Ｔonset）である２２７℃で、単一の吸熱転移を有している。この転移は、結晶形態の融解に対応する。
【００４９】
本発明はまた、凍結乾燥または噴霧乾燥または他の適切な乾燥方法によって、溶媒中または溶媒混合物中のアクリジニウム塩の溶液を乾燥することによって、アクリジニウム塩、好ましくはアクリジニウム臭化物を得る方法に関する。乾燥ステップは、噴霧乾燥ステップが好ましい。
【００５０】
１つの好ましい態様において、溶媒または溶媒の混合物は、スルホキシド基を有する溶媒から選択される。混合物はＤＭＳＯを含むことが好ましく、溶媒はＤＭＳＯであることが最も好ましい。
【００５１】
好ましい態様では、乾燥ステップが噴霧乾燥工程である場合、得られる生成物は、結晶、少量の非晶質を有する結晶、純非晶質（pure amorphous）、少量の結晶を有する非晶質、または、様々な比率で非晶質と結晶形態が混ざった混合物のいずれであってもよい。
【００５２】
ＸＲＰＤパターン（図７）は、噴霧乾燥工程によって得られた結晶形態と非晶質アクリジニウム臭化物の混合物を示している。
【００５３】
本発明はまた、アクリジニウムを含む医薬組成物に関する。医薬組成物は、医薬上許容される塩の乾燥粉末、溶液または懸濁液の形態である。例えば、医薬品添加物（好ましくは医薬上許容される乾燥粉末担体）と混合された上述の無水物（anhydrous）、水和物（hydrate）または溶媒和物（solvate）である。
【００５４】
好ましくは、医薬上許容される塩の形態は、アクリジニウム臭化物である。
【００５５】
適切には、医薬上許容される担体は、ラクトースまたはα−ラクトース・一水和物である。
【００５６】
本発明はまた、医薬上許容される添加物と共に、本明細書に記載の、または、本明細書に記載の製造方法によって得られる医薬上許容される塩の乾燥粉末、溶液、または、懸濁液の形態のアクリジニウムを含む吸入用の医薬組成物を提供する。
【００５７】
好ましくは、医薬組成物は、医薬上許容される添加物が乾燥粉末担体である乾燥粉末製剤の形態である。医薬上許容される担体は、好ましくはラクトースまたはα−ラクトース・一水和物である。
【００５８】
本発明は、アクリジニウム臭化物が、別の医薬上許容される塩形態のアクリジニウムで置き換えられた、本明細書に記載の医薬組成物を包含することができる。しかしながら、使用される塩形態は、好ましくはアクリジニウム臭化物である。
【００５９】
例えば、塩化物塩（chloride salts）またはヨウ化物塩（iodide salts）を使用することができる。これらの塩の合成経路（synthetic route）は、適切な塩化物またはヨウ化物試薬を使用すべきであることを除いて、臭化物塩の製造方法と本質的に同一である。例えば、３−フェノキシプロピルブロミドの代わりに３−フェノキシプロピルクロライドを使用することができる。
【００６０】
［実施例］
本発明を以下の実施例により説明する。これらの実施例は、本開示の特定の態様を例示するために提供され、本発明の範囲を限定するものではない。
【００６１】
下記の実施例の生成物のＨＰＬＣ分析を、Ｚｏｒｂａｚ ＳＢ−Ｃ３カラム（１５０ｍｍ×３．０ｍｍ×３．５μｍ）で行った。
【００６２】
１．２ｍｌ／分の流速での移動相は、水（ｐＨ３．０でメタンスルホン酸ナトリウム[sodium methanesulfonate]及びリン酸二水素カリウム[potassium dihydrogenphosphate]を含有−Ａ相（Phase A））と、メタノール：アセトニトリル：Ａ相（１０：４０：５０  ｖ／ｖ／ｖ）の混合物の二成分系（binary system）である。全実行時間は、５０分であった。
【００６３】
実施例１−エステル交換反応（Transesterification reaction）
（３Ｒ）−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルヒドロキシ（ジ−２−チエニル）アセテート（化合物ＩＶ）の合成
５００ｍｌのトルエンの（３Ｒ）−キヌクリジノール溶液（１０．３０ｇ，８１．０ｍｍｏｌ）に、ジ（２−チエニル）グリコール酸メチル（ＭＤＴＧ）（２０ｇ，７８ｍｍｏｌ）を加えた。溶液をトルエンの連続蒸留および新鮮なトルエンとの置換を伴って還流した；
蒸留後、ナトリウムメトキシド（１．７０ｇ、３１ｍｍｏｌ）を添加し、反応が完了したとみなされるまで、窒素フロー下８０°／９０℃で蒸留を行った。ＭＤＴＧ含量がＨＰＬＣにより面積（area）で≦２．０％である場合、反応は完了したとみなされる；
反応混合物を、２−ヒドロキシ−２，２−ビス（２−チエニル）酢酸（ＤＴＧ）の含有量が≦１．５％になるまで、水およびブライン（brine）で洗浄する；
有機溶液を５０℃以下の温度で、真空下で、最終容量５０ｍｌまで濃縮する；
懸濁液を２０°／２５℃まで冷却し、この温度で少なくとも２時間にわたって撹拌した；
懸濁液を１０℃から１５℃の間まで冷却し、この温度で少なくとも４時間にわたって撹拌した；
生成物を濾過し、予め１０℃〜１５℃の温度に冷却しておいたイソプロピルエーテルで洗浄した；
所望の生成物（１８．４ｇ）が、ＨＰＬＣにより面積９９．２０％以上（not less than）の純度で得られた。
【００６４】
実施例２−エステル交換反応
（３Ｒ）−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルヒドロキシ（ジ−２−チエニル）アセテート（化合物ＩＶ）の合成
２５０ｍｌのトルエンの（３Ｒ）−キヌクリジノール溶液（５．１５ｇ，４０．５ｍｍｏｌ）を６５℃から７０℃の間の温度まで加熱し、ナトリウムメトキシド（０．６５ｇ，１１．８ｍｍｏｌ）を加えた；
７５℃〜８５℃の間の温度の窒素フロー下で、１００ｍｌのトルエンのＭＤＴＧ溶液（１０．０ｇ；３９．３ｍｍｏｌ）を１時間かけて加えた；
７５℃〜８５℃の間の温度の窒素フロー下で、トルエンおよびメタノールの共沸混合物（azeotrope）を、反応が完了したとみなされるまで、蒸留（新鮮なトルエンの置換を伴う）によって除去した；
有機相中のＤＴＧ副生物の含有量が≦１．５％になるまで、反応混合物を２０％ＮａＣｌ水溶液で４回洗浄した；
有機相を乾燥させ、４０℃以下の温度で、真空下で、最終容量２５ｍｌまで濃縮した；
懸濁液を１０°／１５°まで冷却し、この温度で少なくとも５時間にわたって撹拌した；
所望の生成物（８．５ｇ）が、ＨＰＬＣにより面積９８．０％以上（not less than）の純度で得られた。
【００６５】
実施例３−四級化反応
アクリジニウム臭化物−（３Ｒ）−３−［２−ヒドロキシ（ジ−２−チエニル）アセトキシ］−１−（３−フェノキシプロピル）−１−アゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンブロミド（化合物Ｉ）の合成
不活性雰囲気下、３０ｍｌのＤＭＦの（３Ｒ）−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルヒドロキシ（ジ−２−チエニル）アセテート（５ｇ；１４．２６ｍｍｏｌ）の懸濁液に、３−フェノキシプロピルブロミド（３．４２ｍｌ，２１．６８ｍｍｏｌ）を２０℃〜２５℃の温度でゆっくりと加えた；
この懸濁液を、出発物質（starting material）の含有量がＨＰＬＣにより面積で０．５％未満になるまで約３０℃で撹拌した；
反応が完了したら、懸濁液にアセトニトリル（４３ｍｌ）を加えた。懸濁液を２０℃〜２５℃の温度で冷却し、温度を２０℃〜２５℃に維持しながら２時間撹拌した；
生成物を濾過し、予め１０℃〜１５℃の温度に冷却しておいたアセトニトリルで洗浄した；
アクリジニウム臭化物が、ＨＰＬＣにより面積９９．４％の純度で得られた（７．４８ｇ）。
【００６６】
実施例４〜８−四級化反応
実施例４〜８の方法は、異なる量の反応溶媒および試薬３−フェノキシプロピルブロミドを使用したこと以外は、実施例３に記載された方法と同じである。
【００６７】
【表１】
2020143160.tif 000006
溶媒としてＤＭＦを使用し、選択したパラメータは、３−フェノキシプロピルブロミドの当量は、１．８８であり；溶媒量は３．７ｍｌ／ｇであり；温度は３０℃である。
【００６８】
実施例９−四級化反応
アクリジニウム臭化物−（３Ｒ）−３−［２−ヒドロキシ（ジ−２−チエニル）アセトキシ］−１−（３−フェノキシプロピル）−１−アゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンブロミド（化合物Ｉ）の合成
不活性雰囲気下、３０ｍｌのＤＭＡの（３Ｒ）−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルヒドロキシ（ジ−２−チエニル）アセテート（５ｇ，１４．２６ｍｍｏｌ）の懸濁液に、３−フェノキシプロピルブロミド（４．２３ｍｌ，２６．８２ｍｍｏｌ）を２０℃〜２５℃の温度でゆっくりと加えた；
この懸濁液を、出発物質の含有量がＨＰＬＣにより面積で０．５％未満になるまで約３０℃で撹拌した；
反応が完了したら、懸濁液にアセトニトリル（４３ｍｌ）を加えた。懸濁液を２０℃〜２５℃の温度で冷却し、温度を２０℃〜２５℃に維持しながら２時間撹拌した；
生成物を濾過し、予め１０℃〜１５℃の温度に冷却しておいたアセトニトリルで洗浄した；
アクリジニウム臭化物が、ＨＰＬＣにより面積９８．９８％の純度で得られた（７．４ｇ）。
【００６９】
実施例１０−四級化反応
アクリジニウム臭化物−（３Ｒ）−３−［２−ヒドロキシ（ジ−２−チエニル）アセトキシ］−１−（３−フェノキシプロピル）−１−アゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンブロミド（化合物Ｉ）の合成
不活性雰囲気下、２７．７ｍｌのＤＭＳＯの（３Ｒ）−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イルヒドロキシ（ジ−２−チエニル）アセテート（４．５０ｇ，１２．８４ｍｍｏｌ）の懸濁液に、３−フェノキシプロピルブロミド（３．８０ｍｌ，２４．１４ｍｍｏｌ）を３０℃の温度で加えた；
この懸濁液を、出発物質の含有量がＨＰＬＣにより面積で０．５％未満になるまで約３０℃で撹拌した；
反応が完了したら、懸濁液にアセトニトリル（５４ｍｌ）を加えた。懸濁液を２０℃〜２５℃の温度で冷却し、温度を２０℃〜２５℃に維持しながら２時間撹拌した；
生成物を濾過し、予め１０℃〜１５℃の温度に冷却しておいたアセトニトリルで洗浄した；
アクリジニウム臭化物が、ＨＰＬＣにより面積９９．８８％の純度で得られた（５．８ｇ）。
【００７０】
実施例１１−化合物（Ｉ）の精製
アクリジニウム臭化物−（３Ｒ）−３−［２−ヒドロキシ（ジ−２−チエニル）アセトキシ］−１−（３−フェノキシプロピル）−１−アゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンブロミド（化合物Ｉ）の精製
不活性雰囲気下、４０℃〜４５℃の間の温度で、５００ｍｌのジメチルスルホキシドに（３Ｒ）−３−［２−ヒドロキシ（ジ−２−チエニル）アセトキシ］−１−（３−フェノキシプロピル）−１−アゾニアビシクロ［２．２．２］オクタンブロミド（５０ｇ）を加えた。得られた溶液に、ゆっくり１ｌのアセトニトリルを加えた；
生成物を結晶化し、温度が２０℃〜２５℃の間になるまで、ゆっくりと冷却した；
温度を２０℃〜２５℃に維持しながら懸濁液を２時間撹拌した；
精製されたアクリジニウム臭化物が、ＨＰＬＣにより面積９９．９１％の純度で得られた（３３ｇ）。
【００７１】
実施例１２−微粉化（Micronization）
アクリジニウム臭化物の粒度分布（ＰＳＤ）が吸入に適した範囲（１〜５μｍ）に容易に調整できるかどうかを判断するために、ジェットミリングによって微粉化を行った。微粉化には、純粋な窒素の供給を受ける、Ａ１．５”ジェットミラー（流体ジェットミル Ｊ２０／ＤＳ２０）を使用した。この実施例では、ベンチュリおよびノズルの圧力が４〜１０ｂａｒの二重スクリュー型フィーダにより、一定の流量で粉末を添加した。
【００７２】
得られた分析結果を以下の表に要約する。得られた生成物は、９９．５％より高い純度および高収率（９０重量％）で、吸入可能範囲内のＰＳＤを有していた。わずか１回の通過で、粉末は所望のＰＳＤに達し、生成物上に、非晶質物質は検出されなかった。さらに、微粉化した生成物のＳＥＭ画像は均質な（homogeneous）ＰＳＤを示した（図８）。
【００７３】
【表２】
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測定条件
全てのＸＲＰＤは、高スループットＸＲＰＤセットアップを用いて得られた。データ収集は、室温において、単色ＣｕＫα放射線を用いて、１．５°から４１．５°の範囲の２θ領域で行った。
【００７４】
ＴＧＡ／ＤＳＣ
使用した装置は、Ｉｎ及びＡｌを用いて温度較正した、ＴＧＡ／ＳＤＲＡ ８５１ｅ（Ｍｅｔｔｌｅｒ−Ｔｏｌｅｄｏ）である。シールにピンホールをあけ、１０℃／ｍｉｎの割合で、２５℃から３００℃まで、坩堝（crucible）をＴＧＡで加熱した。
【００７５】
ＳＥＭ
使用した装置は、外付けＳＥディテクタ（external SE detector）を備えたＰｈｉｌｌｉｐｓ ＳＥＭ ５２５顕微鏡である。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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