(57)【要約】      （修正有）【課題】リピドＡ模倣体、その調製方法、及びその使用の提供。【解決手段】下式の化合物又は薬学的に許容されるその塩：Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ［Ａ：ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていない環状単糖残基であるか、又は、Ａは、置換又は非置換の芳香族基。Ｌ１、Ｌ２：独立して存在又は非存在であり、存在する場合は、独立して、Ｏ、Ｓ、又はＮの１つ又は複数を任意選択で含む、置換又は非置換、分岐状又は直鎖状、飽和又は不飽和の炭素鎖。Ｄ：−Ｏ−、−Ｓ−、又は−ＮＨ−。Ｅ：ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていない環状単糖残基であるか、又は、Ｅは、置換又は非置換の芳香族基。ここで、Ａ又はＥの少なくとも１つが、置換又は非置換の芳香族基であり、Ａ、Ｌ１、Ｌ２、又はＥの少なくとも１つが、１つ又は複数の脂質鎖置換基を含む］【選択図】図２
2020180142.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物又は薬学的に許容されるその塩：
Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ
［式中、
Ａは、ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていない環状単糖残基であるか、又は、Ａは、置換又は非置換の芳香族基であり、
Ｌ１及びＬ２は、独立して存在又は非存在であり、存在する場合は、独立して、Ｏ、Ｓ、又はＮの１つ又は複数を任意選択で含む、置換又は非置換、分岐状又は直鎖状、飽和又は不飽和の炭素鎖であり、
Ｄは、−Ｏ−、−Ｓ−、又は−ＮＨ−であり、
Ｅは、ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていない環状単糖残基であるか、又は、Ｅは、置換又は非置換の芳香族基であり、
ここで、Ａ又はＥの少なくとも１つが、置換又は非置換の芳香族基であり、Ａ、Ｌ１、Ｌ２、又はＥの少なくとも１つが、１つ又は複数の脂質鎖置換基を含む］。
【請求項２】
Ａ又はＥの少なくとも１つが、
【化１】
2020180142.tif 000082
から選択される芳香族基であり、前記芳香族基は、任意選択で置換又は非置換である、請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項３】
Ａ又はＥの少なくとも１つが、置換若しくは非置換の単環の炭素環式芳香族基、又は置換若しくは非置換の単環の芳香族複素環基である、請求項１又は２に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項４】
Ａ又はＥの少なくとも１つが、
【化２】
2020180142.tif 000083
であり、式中、
Ｒａは、ベンゼン環上の任意の位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６であり、
Ｒｂは、ベンゼン環上の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意の置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項５】
Ａ又はＥの少なくとも１つが、
【化３】
2020180142.tif 000084
である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項６】
Ａ又はＥの少なくとも１つが、
【化４】
2020180142.tif 000085
であり、式中、
【化５】
2020180142.tif 000086
は、ベンゼン環上の任意の位置に配置され、
Ｒａは、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６であり、
ｍは０〜６であり、
ＲＬは脂質鎖置換基であり、
Ｒｂは、ベンゼン環上の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意の置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項７】
Ａ又はＥの１つが、ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていないピラノース糖残基である、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項８】
Ａが、
【化６】
2020180142.tif 000087
であり、式中、
Ｚは−ＣＨ２Ｇ又は−ＣＨ２ＭＱであり、ここで、Ｇは、−Ｈ、−ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、Ｍは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＳＣ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｓ）−、又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）−であり、Ｑは、−Ｈであるか、又は置換若しくは非置換、分岐状若しくは直鎖状、飽和若しくは不飽和のＣ１〜２０脂肪族炭化水素であり、
Ｘ１は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６であり、
Ｙ１及びＹ２は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｏ−ＲＬ、−ＮＨ−ＲＬ、又は−Ｓ−ＲＬであり、ここで、ＲＬは脂質鎖置換基である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項９】
Ｚが−ＣＨ２ＯＨであり、Ａ上の前記置換基の立体化学が以下の式：
【化７】
2020180142.tif 000088
によって定義される、請求項８に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１０】
Ｘ１が−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、Ｙ１が−ＮＨ−ＲＬであり、Ｙ２が−Ｏ−ＲＬである、請求項８又は９に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１１】
Ｌ１が非存在であり、Ｌ２がＩであり、以下：
【化８】
2020180142.tif 000089
［式中、ｍは０〜６であり、ＲＬは脂質鎖置換基である］
のように式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ内に組み込まれている、請求項８〜１０のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１２】
Ｅが、
【化９】
2020180142.tif 000090
であり、式中、
Ｘ２は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６であり、
Ｙ３、Ｙ４、及びＹ５は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｏ−ＲＬ、−ＮＨ−ＲＬ、又は−Ｓ−ＲＬであり、ここで、ＲＬは脂質鎖置換基である、請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１３】
Ｅ上の前記置換基の立体化学が以下の式：
【化１０】
2020180142.tif 000091
によって定義される、請求項１２に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１４】
Ｘ２が−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、Ｙ３が−ＮＨ−ＲＬであり、Ｙ４が−Ｏ−ＲＬであり、Ｙ５が−ＯＨである、請求項１２又は１３に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１５】
Ｌ２が非存在であり、Ｌ１がＩＩであり、以下：
【化１１】
2020180142.tif 000092
［式中、ｍは０〜６であり、Ｙは−（ＣＯ）ｆ−であり、ここで、ｆは０又は１であり、ここで、ＲＬは脂質鎖置換基である］
のように式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ内に組み込まれている、請求項１２〜１４のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１６】
Ｄが−Ｏ−である、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１７】
Ａ又はＬ１の少なくとも１つ及びＥ又はＬ２の少なくとも１つが、１つ又は複数の脂質鎖置換基を個々に含む、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１８】
【化１２】
2020180142.tif 000093
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
ｍは０〜６であり、
Ｒ１は、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基であり、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＣＨ２ＣＯＯＨである］
である、請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項１９】
【化１３】
2020180142.tif 000094
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
Ｒ１は、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、以下のものであり：
【化１４】
2020180142.tif 000095
Ｒ７は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
ｍは０〜６であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基であり、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＣＨ２ＣＯＯＨである］
である、請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項２０】
【化１５】
2020180142.tif 000096
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
ｍは０〜６であり、
Ｙは、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、−（Ｏ）ｇ（ＣＨ２）ｈ（ＣＯ）ｊ−であり、ここで、ｇは０又は１であり、ｈは０〜６であり、ｊは０又は１であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ１は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基であり、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＣＨ２ＣＯＯＨである］
である、請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項２１】
【化１６】
2020180142.tif 000097
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
ｍは０〜６であり、
Ｒ６は、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｙは−（ＣＯ）ｆ−であり、ここで、ｆは０又は１であり、
Ｒ１は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基である］
である、請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項２２】
それぞれの脂質鎖置換基が独立して、
【化１７】
2020180142.tif 000098
であり、式中、
Ｚ１、Ｚ２、及びＺ３は、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＣＨ２−であり、
Ｘ３は−Ｈ又は−（ＣＨ２）ｐ３ＣＨ３であり、
Ｘ４は、−ＮＨ−、−Ｏ−、又は−ＣＨ２−であり、
ｐ、ｐ１、ｐ２、及びｐ３は、独立して０〜３０であり、
ｒ、ｓ、及びｔは、独立して０〜６である、請求項１〜２１のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項２３】
それぞれの脂質鎖置換基が独立して、
【化１８】
2020180142.tif 000099
である、請求項１〜２２のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項２４】
【化１９】
2020180142.tif 000100
である、請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項２５】
【化２０】
2020180142.tif 000101
である、請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項２６】
リピドＡ若しくはリポ多糖（ＬＰＳ）拮抗活性を有するか、及び／又は免疫賦活活性を有する、請求項１〜２５のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項２７】
トール様受容体４（ＴＬＲ４）と結合することができる、請求項１〜２６のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項２８】
請求項１〜２７のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩と、薬学的に許容される担体、希釈剤、又は賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項２９】
対象に請求項２８に記載の組成物を投与することを含む、前記対象においてリポ多糖（ＬＰＳ）／リピドＡ媒介性の疾患又は障害を治療又は予防する方法。
【請求項３０】
請求項１〜２７のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩と抗原とを含む、ワクチン組成物。
【請求項３１】
リポソーム、疎水性物質の連続相を含む担体、及びヘルパーＴエピトープをさらに含む、請求項３０に記載のワクチン組成物。
【請求項３２】
前記抗原が、（ｉ）たとえば、エボラウイルス、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、インフルエンザウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、百日咳菌、バチルス・アントラシス、又は四日熱マラリア原虫などの、ウイルス、細菌、若しくは原虫に由来するもの、（ｉｉ）たとえばサバイビン抗原などの膜表面結合癌抗原、又はたとえばコカインなどの毒素である、請求項３０又は３１に記載のワクチン組成物。
【請求項３３】
前記抗原が、少なくとも１つのＢ細胞エピトープ、少なくとも１つのＣＴＬエピトープ、又はその組合せを含む、請求項３０〜３２のいずれか一項に記載のワクチン組成物。
【請求項３４】
対象に、請求項３０〜３３のいずれか一項に記載のワクチン組成物を投与することを含む、前記対象において抗原に対する抗体及び／又は細胞性免疫応答を誘導又は強化する方法。
【請求項３５】
対象に、請求項３０〜３３のいずれか一項に記載のワクチン組成物を投与することを含む、癌、感染性疾患、又は嗜癖疾患を治療又は予防する方法。
【請求項３６】
請求項１〜２７のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩が、前記化合物又は薬学的に許容されるその塩を含まない対照ワクチン組成物と比較して、前記癌、感染性疾患、又は嗜癖疾患の治療又は予防における前記ワクチン組成物の有効性を改善する、請求項３５に記載の方法。
【請求項３７】
対象におけるリポ多糖（ＬＰＳ）／リピドＡ媒介性の疾患又は障害の治療又は予防における、請求項２８に記載の医薬組成物の使用。
【請求項３８】
抗原に対する抗体及び／若しくは細胞性免疫応答を誘導若しくは強化するため、又は癌、感染性疾患、若しくは嗜癖疾患を治療若しくは予防するための、請求項３０〜３３のいずれか一項に記載のワクチン組成物の使用。
【発明の詳細な説明】
【分野】
【０００１】
[001]本発明は、リピドＡ二糖主鎖の糖残基の一方又は両方を芳香族基で置き換えることを特徴とするリピドＡ模倣体、その調製方法、及びその使用に関する。
【背景】
【０００２】
[002]ワクチン戦略は、多数の病弊に対して保護をもたらすことに有効であることが証明されている。それにもかかわらず、この戦略が有効でない多くの病原体及び感染症が存在する。現在、急性及び慢性の感染症及び疾患と闘うために、より有効なワクチンの必要性が増加している。従来のワクチン戦略は生の弱毒化した病原体を免疫原として用いているが、現代のワクチン開発では、通常は改善された安全性及びより正確な標的化を提供する、組換え又は合成のサブユニットワクチンを用いる。しかし、サブユニットワクチンは乏しい免疫原性を特徴とし、多くの場合、免疫応答を増強させるためにアジュバントと共に同時投与しなければならない。
【０００３】
[003]ワクチンアジュバントとは、ワクチン製剤に付随する抗原に対する免疫応答を増強させることができる物質である。数々の化合物クラスがワクチンアジュバントとして探索されているが、アルミニウム塩の混合物であるミョウバンが、依然としてヒトワクチン使用における最も人気のあるアジュバントである。実際、７０年以上の間、ミョウバンがヒトワクチンの唯一の認可されたアジュバントであった。２００９年後期になって初めて、ＦＤＡがＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅのＡＳ０４アジュバント（ミョウバンとモノホスホリルリピドＡ、ＭＰＬ（商標）との専売混合物）（Ｇａｒｃｏｎら、Ｅｘｐｅｒｔ  Ｒｅｖ．Ｖａｃｃｉｎｅｓ、６：７２３〜７３９、２００７）を認可し、これは、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）に対して免疫化するためのセルバリックス（Ｃｅｒｖａｒｉｘ）ワクチンに使用された。しかし、ワクチン療法のための新しいアジュバントを開発及び特徴づける大きな必要性が残っている。新規アジュバントの発見が、現代のワクチン製剤の開発における重要な第一線の取り組みとして浮上している。
【０００４】
[004]内毒素としても知られるリポ多糖（ＬＰＳ）は、グラム陰性細菌の外膜構成成分である。ＬＰＳはずっと以前に抗体応答の強力な刺激物質として記載されており、大規模な研究により、ＬＰＳのアジュバント活性は、抗原と同時投与した場合にのみ作用するアルミニウム又は油に基づくアジュバントとは異なり、局所的ではなく全身性である（Ｊｏｈｎｓｏｎ，Ａ．Ｇ．、「Ａｄｊｕｖａｎｔ  ａｃｔｉｏｎ  ｏｆ  ｂａｃｔｅｒｉａｌ  ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ  ｏｎ  ｔｈｅ  ｐｒｉｍａｒｙ  ａｎｔｉｂｏｄｙ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ」、Ｌａｎｄｙ，Ｍ．及びＢｒａｕｎ，Ｗ．（編）、Ｂａｃｔｅｒｉａｌ  Ｅｎｄｏｔｏｘｉｎｓ、Ｒｕｔｇｅｒｓ  Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ  Ｐｒｅｓｓ、コネチカット州Ｎｅｗ  Ｂｒｕｎｓｗｉｃｋ、ページ２５２〜２６２、１９６４）という結論がもたらされている。ＬＰＳの免疫賦活活性のための活性構成成分は、リピドＡとして知られる分子の親油性アンカーであるとのちに決定されている。ＬＰＳ及びリピドＡはどちらも、ヒトワクチンのアジュバントとして使用するには毒性が高すぎる。したがって、アジュバント活性を親ＬＰＳ及びリピドＡ分子の発熱性及び毒性から分離するために、多くの研究が実施されている。長年の研究開発の結果、ＭＰＬ（商標）が、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅによって開発されたセルバリックスＨＰＶワクチンにおけるヒトワクチン使用について、ＦＤＡによって認可された。ＭＰＬ（商標）は培養細菌から精製した製品であり、構造的に改変されたリピドＡ分子の混合物を含有する。構造的改変により、リピドＡの毒性が低下している一方で、これらの分子の免疫賦活活性は大部分が残っている。
【０００５】
[005]約２０年前のトール様受容体（ＴＬＲ）として知られるタンパク質群の発見のおかげで、ＬＰＳ／リピドＡの免疫賦活活性に関する分子標的及び作用機構が同定されている。ＴＬＲは、自然免疫及び適応免疫応答の発生において重要な役割を果たしている。ＬＰＳ／リピドＡは、ＴＬＲタンパク質ファミリーのメンバーであるトール様受容体４（ＴＬＲ４）によって認識され、これは別のタンパク質ＭＤ−２と会合している。ＴＬＲ４／ＭＤ−２受容体複合体の活性化は下流のシグナル伝達経路をもたらし、最終的にこれが、自然免疫並びに適応免疫応答の発生を調節する。結合したリガンドＬＰＳを有するＴＬＲ４／ＭＤ−２の結晶構造が最近決定されており（Ｐａｒｋら、Ｎａｔｕｒｅ、４５８：１１９１〜１１９６、２００９）、これは、ＴＬＲ４／ＭＤ−２によるＬＰＳ／リピドＡの認識の分子基盤の直接の証拠を提供している。最近認可されたアジュバントＭＰＬ（商標）も、ＴＬＲ４／ＭＤ−２の媒介によってその活性を発揮することが示されている。ＴＬＲ４作用剤が免疫賦活性ワクチンアジュバントの重要なクラスであることは、現在では十分に認識されている。
【０００６】
[006]本開示では、本発明者らは新規リピドＡ模倣体の群を報告する。これらの化合物は、様々な疾患を治療するための免疫刺激剤及び／又はモジュレーターとして潜在的に有用である。
【概要】
【０００７】
[007]一態様では、以下の式の化合物であるリピドＡ模倣体又は薬学的に許容されるその塩を提供する：
Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ
［式中、
Ａは、ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていない環状単糖残基であるか、又は、Ａは、置換又は非置換の芳香族基であり、
Ｌ１及びＬ２は、独立して存在又は非存在であり、存在する場合は、独立して、Ｏ、Ｓ、又はＮの１つ又は複数を任意選択で含む、置換又は非置換、分岐状又は直鎖状、飽和又は不飽和の炭素鎖であり、
Ｄは、−Ｏ−、−Ｓ−、又は−ＮＨ−であり、
Ｅは、ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていない環状単糖残基であるか、又は、Ｅは、置換又は非置換の芳香族基であり、
ここで、Ａ又はＥの少なくとも１つが、置換又は非置換の芳香族基であり、Ａ、Ｌ１、Ｌ２、又はＥの少なくとも１つが、１つ又は複数の脂質鎖置換基を含む］。
【０００８】
[008]式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−ＥのリピドＡ模倣体の一部の実施形態では、Ａ又はＥの少なくとも１つが、置換又は非置換のベンゼン環である。
【０００９】
[009]式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−ＥのリピドＡ模倣体の一実施形態では、Ａ又はＥの少なくとも１つが、
【化１】
2020180142.tif 000003
であり、式中、
Ｒａは、ベンゼン環上の任意の位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６であり、
Ｒｂは、ベンゼン環上の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意の置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルである。
【００１０】
[010]より詳細には、一部の実施形態では、Ａ又はＥの少なくとも１つが、
【化２】
2020180142.tif 000004
である。
【００１１】
[011]式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−ＥのリピドＡ模倣体の別の実施形態では、Ａ又はＥの少なくとも１つが、
【化３】
2020180142.tif 000005
であり、式中、
【化４】
2020180142.tif 000006
は、ベンゼン環上の任意の位置に配置され、
Ｒａは、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６であり、
ｍは０〜６であり、
ＲＬは脂質鎖置換基であり、
Ｒｂは、ベンゼン環上の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意の置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルである。
【００１２】
[012]式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−ＥのリピドＡ模倣体の一部の実施形態では、Ｅは芳香族基であり、Ａが、
【化５】
2020180142.tif 000007
であり、式中、
Ｚは−ＣＨ２Ｇ又は−ＣＨ２ＭＱであり、ここで、Ｇは、−Ｈ、−ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、Ｍは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＳＣ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｓ）−、又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）−であり、Ｑは、−Ｈであるか、又は置換若しくは非置換、分岐状若しくは直鎖状、飽和若しくは不飽和のＣ１〜２０脂肪族炭化水素であり、
Ｘ１は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６であり、
Ｙ１及びＹ２は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｏ−ＲＬ、−ＮＨ−ＲＬ、又は−Ｓ−ＲＬであり、ここで、ＲＬは脂質鎖置換基である。
【００１３】
[013]より詳細には、Ａが直前に定義した通りである一部の実施形態では、Ｘ１は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、Ｙ１は−ＮＨ−ＲＬであり、Ｙ２は−Ｏ−ＲＬである。
【００１４】
[014]式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−ＥのリピドＡ模倣体の他の実施形態では、Ａは芳香族基であり、Ｅは、
【化６】
2020180142.tif 000008
であり、式中、
Ｘ２は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６であり、
Ｙ３、Ｙ４、及びＹ５は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｏ−ＲＬ、−ＮＨ−ＲＬ、又は−Ｓ−ＲＬであり、ここで、ＲＬは脂質鎖置換基である。
【００１５】
[015]より詳細には、Ｅが直前に定義した通りである一部の実施形態では、Ｘ２は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、Ｙ３は−ＮＨ−ＲＬであり、Ｙ４は−Ｏ−ＲＬであり、Ｙ４は−Ｏ−ＲＬであり、Ｙ５は−ＯＨである。
【００１６】
[016]一部の実施形態では、Ｌ１は、以下のＩＩによって定義されるように存在し、以下：
【化７】
2020180142.tif 000009
［式中、ｍは０〜６であり、Ｙは−（ＣＯ）ｆ−であり、ここで、ｆは０又は１であり、ここで、ＲＬは脂質鎖置換基である］
のように式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ内に組み込まれ得る。
【００１７】
[017]一部の実施形態では、Ｌ２は、以下のＩによって定義されるように存在し、以下：
【化８】
2020180142.tif 000010
［式中、ｍは０〜６であり、ＲＬは脂質鎖置換基である］
のように式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ内に組み込まれ得る。
【００１８】
[018]一実施形態では、以下の式の化合物であるリピドＡ模倣体又は薬学的に許容されるその塩を提供する：
【化９】
2020180142.tif 000011
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
ｍは０〜６であり、
Ｒ１は、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基であり、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＣＨ２ＣＯＯＨである］。
【００１９】
[019]別の実施形態では、以下の式の化合物であるリピドＡ模倣体又は薬学的に許容されるその塩を提供する：
【化１０】
2020180142.tif 000012
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
Ｒ１は、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、以下のものであり：
【化１１】
2020180142.tif 000013
Ｒ７は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
ｍは０〜６であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基であり、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＣＨ２ＣＯＯＨである］。
【００２０】
[020]別の実施形態では、以下の式の化合物であるリピドＡ模倣体又は薬学的に許容されるその塩を提供する：
【化１２】
2020180142.tif 000014
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
ｍは０〜６であり、
Ｙは、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、−（Ｏ）ｇ（ＣＨ２）ｈ（ＣＯ）ｊ−であり、ここで、ｇは０又は１であり、ｈは０〜６であり、ｊは０又は１であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ１は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基であり、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＣＨ２ＣＯＯＨである］。
【００２１】
[021]別の実施形態では、以下の式の化合物であるリピドＡ模倣体又は薬学的に許容されるその塩を提供する：
【化１３】
2020180142.tif 000015
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
ｍは０〜６であり、
Ｒ６は、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｙは−（ＣＯ）ｆ−であり、ここで、ｆは０又は１であり、
Ｒ１は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基である］。
【００２２】
[022]一実施形態では、以下に示す構造を有する、ＪＬ−２６５と命名したリピドＡ模倣体又は薬学的に許容されるその塩を提供する。
【化１４】
2020180142.tif 000016
【００２３】
[023]一実施形態では、以下に示す構造を有する、ＪＬ−２６６と命名したリピドＡ模倣体又は薬学的に許容されるその塩を提供する。
【化１５】
2020180142.tif 000017
【００２４】
[024]一部の実施形態では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体は、リピドＡ又はリポ多糖（ＬＰＳ）拮抗活性を有し得る。
【００２５】
[025]一部の実施形態では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体は、免疫賦活活性を有し得る。
【００２６】
[026]一部の実施形態では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体は、トール様受容体４（ＴＬＲ４）と結合することができ得る。
【００２７】
[027]別の態様では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体は、リピドＡ模倣体又は薬学的に許容されるその塩と、薬学的に許容される担体、希釈剤、又は賦形剤とを含む医薬組成物として配合し得る。
【００２８】
[028]別の態様では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体は、リピドＡ模倣体又は薬学的に許容されるその塩と抗原とを含むワクチン組成物として配合し得る。
【００２９】
[029]一実施形態では、ワクチン組成物は、リポソーム、疎水性物質の連続相を含む担体、及びヘルパーＴエピトープをさらに含み得る。
【００３０】
[030]一実施形態では、ワクチン組成物は、デポヴァックス（ＤｅｐｏＶａｘ）（登録商標）中で配合する。
【００３１】
[031]一実施形態では、本明細書中に記載の医薬組成物又はワクチン組成物中に含まれるリピドＡ模倣体は、ＪＬ−２６５又はＪＬ−２６６である。
【００３２】
[032]別の態様では、本明細書中に記載の医薬組成物は、対象に医薬組成物を投与することを含む、対象においてリポ多糖（ＬＰＳ）／リピドＡ媒介性の疾患又は障害を治療又は予防する方法、上記方法において有用であり得る。
【００３３】
[033]別の態様では、本明細書中に記載のワクチン組成物は、対象にワクチン組成物を投与することを含む、対象において抗原に対する抗体及び／又は細胞性免疫応答を誘導又は強化する方法において有用であり得る。
【００３４】
[034]別の態様では、本明細書中に記載のワクチン組成物は、対象にワクチン組成物を投与することを含む、癌を治療又は予防する方法において有用であり得る。
【００３５】
[035]別の態様では、本明細書中に記載のワクチン組成物は、対象にワクチン組成物を投与することを含む、感染性疾患を治療又は予防する方法において有用であり得る。
【００３６】
[036]別の態様では、本明細書中に記載のワクチン組成物は、対象にワクチン組成物を投与することを含む、嗜癖疾患を治療又は予防する方法において有用であり得る。
【００３７】
[037]別の態様では、本明細書中に記載の医薬組成物は、対象におけるリポ多糖（ＬＰＳ）／リピドＡ媒介性の疾患又は障害の治療又は予防において使用するためであり得る。
【００３８】
[038]別の態様では、本明細書中に記載のワクチン組成物は、対象において抗原に対する抗体及び／若しくは細胞性免疫応答を誘導若しくは強化すること、又は対象において癌、感染性疾患、又は嗜癖疾患を治療又は予防することにおいて使用するためであり得る。
【００３９】
[039]一実施形態では、本明細書中で言及する対象は哺乳動物である。より詳細な実施形態では、対象はヒトである。
【００４０】
[040]別の態様によれば、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体を調製する方法を提供する。
【００４１】
[041]本発明の他の態様及び特長は、当業者が以下の説明を添付の図と併せて精査することで明らかとなろう。
【００４２】
[042]以下の図は、本発明の実施形態を例としてのみ例示する。
【図面の簡単な説明】
【００４３】
【図１】大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）リピドＡの構造を例示する図である。
【図２】本発明の例示的なリピドＡ模倣体（ＪＬ−２６５）の構造を例示する図である。
【図３】本発明の例示的なリピドＡ模倣体（ＪＬ−２６６）の構造を例示する図である。
【図４】例示的なリピドＡ模倣体ＪＬ−２６５及びＪＬ−２６６を含む本発明の水性リポソームワクチン組成物によって生じた、腫瘍体積の低下を例示する図である。０日目に、マウス（Ｃ５７ＢＬ６）にＣ３腫瘍を皮下で移植した。５日目に、以下のようにマウスの群（ｎ＝７匹）にワクチン接種を行った。第１群のマウスには、アジュバントを含有しないリポソーム中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第２群のマウスには、ＪＬ−２６５（１０マイクログラム）を含有するリポソーム中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第３群のマウスには、ＪＬ−２６６（１０マイクログラム）を含有するリポソーム中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第４群のマウスは腫瘍成長の対照として役割を果たし、抗原もアジュバントも含有しない生理食塩水をワクチン接種した。腫瘍の大きさを週に１回ノギスで測定した。有意性は二元ＡＮＯＶＡによって計算し、ボンフェローニ事後検定を用いてそれぞれの群を第４群の対照と比較した：＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１。
【図５】例示的なリピドＡ模倣体ＪＬ−２６５及びＪＬ−２６６を含む本発明の油に基づくワクチン組成物によって生じた、腫瘍体積の低下を例示する図である。０日目に、マウス（Ｃ５７ＢＬ６）にＣ３腫瘍を皮下で移植した。５日目に、以下のようにマウスの群（ｎ＝７匹）にワクチン接種を行った。第１群のマウスには、アジュバントを含有しない油中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第２群のマウスには、ＪＬ−２６５（１０マイクログラム）を含有する油中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第３群のマウスには、ＪＬ−２６６（１０マイクログラム）を含有する油中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第４群のマウスは腫瘍成長の対照として役割を果たし、抗原もアジュバントも含有しない生理食塩水をワクチン接種した。腫瘍の大きさを週に１回ノギスで測定した。有意性は二元ＡＮＯＶＡによって計算し、ボンフェローニ事後検定を用いてそれぞれの群を第４群の対照と比較した：＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１。
【図６】例示的なリピドＡ模倣体ＪＬ−２６５及びＪＬ−２６６を含む本発明のデポヴァックス（登録商標）（ＤＰＸ）ワクチン組成物によって生じた、腫瘍体積の低下を例示する図である。０日目に、マウス（Ｃ５７ＢＬ６）にＣ３腫瘍を皮下で移植した。５日目に、以下のようにマウスの群（ｎ＝８匹）にワクチン接種を行った。第１群のマウスには、アジュバントを含有しないＤＰＸ中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第２群のマウスには、ＪＬ−２６５（１０マイクログラム）を含有するＤＰＸ中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第３群のマウスには、ＪＬ−２６６（１０マイクログラム）を含有するＤＰＸ中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第４群のマウスは腫瘍成長の対照として役割を果たし、抗原もアジュバントも含有しない生理食塩水をワクチン接種した。腫瘍の大きさを週に１回ノギスで測定した。有意性は二元ＡＮＯＶＡによって計算し、ボンフェローニ事後検定を用いてそれぞれの群を第４群の対照と比較した：＊＊＊＊、ｐ＜０．０００１。
【図７】ＴＬＲ４突然変異体マウスの樹状細胞と比較した、野生型マウスの樹状細胞における、例示的なリピドＡ模倣体ＪＬ−２６５及びＪＬ−２６６によって誘導されたＣＤ４０及びＣＤ８６の発現の増加を例示する図である。樹状細胞を、ナイーブＣ３Ｈ／ＨｅＯｕＪ（野生型）又はＣ３Ｈ／ＨｅＪ（ＴＬＲ４突然変異体）マウスの骨髄から単離した（ｎ＝３匹）。樹状細胞を、ＤＭＳＯビヒクル対照、又は２０マイクログラム／ミリリットルのポリＩ：Ｃ、ＬＰＳ、ＪＬ−２６５、若しくはＪＬ−２６６で終夜刺激した。翌日、細胞を、ＣＤ１１ｃ（樹状細胞マーカー）及びＣＤ４０又はＣＤ８６（樹状細胞活性化のマーカー）に特異的な蛍光色素とコンジュゲートした抗体で染色した。結果は、ＣＤ１１ｃのＣＤ４０陽性の％（図Ａ）又はＣＤ１１ｃ陽性のＣＤ８６陽性の％（図Ｂ）として示す。統計値は二元ＡＯＮＶＡによって計算した。
【図８】例示的なリピドＡ模倣体ＪＬ−２６５及びＪＬ−２６６を含む本発明のデポヴァックス（登録商標）（ＤＰＸ）ワクチン組成物によって生じた免疫原性を例示する図である。以下のようにマウスの群（Ｃ５７ＢＬ６）にワクチン接種を行った。第１群のマウス（Ｎ＝５匹）には、アジュバントを含有しないＤＰＸ中のＲ９Ｆ＋Ｆ２１Ｅペプチド（それぞれ５マイクログラム）をワクチン接種した。第２群のマウス（Ｎ＝５匹）には、ＪＬ−２６５（５マイクログラム）を含有するＤＰＸ中のＲ９Ｆ＋Ｆ２１Ｅペプチド（それぞれ５マイクログラム）をワクチン接種した。第３群のマウス（Ｎ＝５匹）には、ＪＬ−２６６（５マイクログラム）を含有するＤＰＸ中のＲ９Ｆ＋Ｆ２１Ｅペプチド（それぞれ５マイクログラム）をワクチン接種した。第４群のマウス（Ｎ＝２匹）にはワクチン接種を行わなかった。
【詳細な説明】
【００４４】
[051]内毒素としても知られるリポ多糖（ＬＰＳ）は、グラム陰性細菌の外膜構成成分である。ＬＰＳは強力な免疫賦活剤として記載されている。ＬＰＳの免疫賦活活性のための活性構成成分は、リピドＡとして知られる分子の親油性アンカーであると決定されている。
【００４５】
[052]リピドＡの核構造は細菌種にかかわらず保存されており、β−（１−６）グリコシド結合された、１−Ｏ−及び４’−Ｏ−位置でビスリン酸化されたジ−Ｄ−グルコサミン主鎖からなり、たとえば大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ）リピドＡ（図１）である。この二糖核は、エステル及びアミド結合の両方によって、鎖の数、長さ、及び組成が異なる７本までの脂質鎖でアシル化されている。
【００４６】
[053]細菌培養物から精製されたリピドＡ調製物は構造的に不均一である。したがって、これらには、組成及び性能がどちらも一貫性に欠けるという欠点がある。その不均一性が、組成及び活性の両方における大きなバッチ間のばらつきの原因となっており、これにより規制当局の認可が困難となっている。対照的に、合成リピドＡ類似体又は模倣体は構造的に定義された純粋な単独分子であり、これは、製品の製造及び性能に関して再現性及び一貫性を達成することにおいて、潜在的に有利であり得る。また、化学合成はアジュバント候補の活性／毒性プロフィールの微調整も可能にし得る。実際、新しいワクチンアジュバントを開発するために、かなりの努力が合成リピドＡ類似体又は模倣体に向けられている。
【００４７】
[054]現在、アジュバントとして臨床評価段階にある、リピドＡに基づく構造がいくつか存在する（Ｆｏｘら、Ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、５３：３０３〜３２１、２０１０）。また、還元末端グルコサミン残基が非糖構造要素によって置き換えられている単糖リピドＡ類似体は、強力な免疫賦活活性を示すことが報告されている。特に、Ｊｏｈｎｓｏｎらは、アミノアルキルグルコサミニルグリコシドリピドＡ類似体の群を報告している（Ｊｏｈｎｓｏｎら、Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  Ｌｅｔｔｅｒｓ、９：２２７３〜２２７８、１９９９）。Ｊｉａｎｇらは、ペンタエリスリトール（Ｊｉａｎｇら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、５８：８８３３〜８８４２、２００２）及びジエタノールアミン（Ｌｅｗｉｃｋｙら、ＲＳＣ  Ａｄｖ．、２：１９１７〜１９２６、２０１２、Ｌｅｗｉｃｋｙら、Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、２１：２１９９〜２２０９、２０１３）に由来するリピドＡ類似体の群を報告している。さらに、二糖単位の全体が非環状主鎖で置き換えられているリピドＡ類似体が知られている（Ｈａｗｋｉｎｓ、Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒａｐ．、３００：６５５〜６１、２００２）。
【００４８】
[055]本発明は、たとえば大腸菌リピドＡを含めたリピドＡの新規合成構造的模倣体、そのような模倣体を合成する方法、及びその使用に関する。本発明のリピドＡ模倣体は、天然リピドＡの糖残基の一方又は両方を芳香族基で置き換える。本明細書中に開示するリピドＡ模倣体は、ネイティブ細菌リピドＡの作用剤又は拮抗剤であり得る。
【００４９】
[056]定義
【００５０】
[057]用語「脂肪族炭化水素」又は「脂肪族基」（互換性があるように使用される）とは、直鎖状、分岐鎖状、又は非芳香環状に一緒に結合された炭素及び水素を含有する炭化水素化合物をいう。
【００５１】
[058]用語「アルキル」とは、それ自体で又は別の置換基の一部として、別段に記述しない限りは、たとえば１〜２０個の炭素原子などの任意数の炭素を有しており、より詳細には命名された炭素原子の数（たとえばＣ１〜６とは１〜６個の炭素原子を意味する）を有する、直鎖又は分岐鎖、飽和又は不飽和、置換又は非置換の脂肪族基をいう。
【００５２】
[059]用語「アルコキシ」とは、酸素と単結合した脂肪族炭化水素をいう（Ｒ−Ｏ）。アルキルと結合したアルコキシ基（Ｒ−Ｏ−Ｒ）はエーテルを形成する。アルコキシが水素と結合した場合はアルコール（Ｒ−ＯＨ）を形成する。
【００５３】
[060]用語「アルケン」とは、少なくとも１つの炭素−炭素の二重結合を含有する不飽和脂肪族炭化水素をいう。官能基としては、これは本明細書中において「アルケニル」とも呼び得る。用語「ジアルケニル」は、本明細書中において少なくとも２つの炭素−炭素の二重結合を含有する不飽和脂肪族炭化水素基を表すために使用する。
【００５４】
[061]用語「アルキン」とは、少なくとも１つの炭素−炭素の三重結合を含有する不飽和脂肪族炭化水素をいう。官能基としては、これは本明細書中において「アルキニル」とも呼び得る。
【００５５】
[062]別段に具体的に記述した場合以外は、本明細書中に記載のアルキル、アルコキシ、アルケン、又はアルキン置換基のいずれかについて、炭素鎖中の炭素原子の１つ又は複数をヘテロ原子（たとえば、窒素、酸素、又は硫黄）で置き換えることが可能である。
【００５６】
[063]本明細書中で使用する用語「カルボニル」及び「オキソ」とは、（Ｃ＝Ｏ）部分をいう。また、カルボニル基は−Ｃ（Ｏ）−としても表し得る。
【００５７】
[064]表現「１つ又は複数」は、本明細書中で表現「少なくとも１つ」と互換性があるように使用される。これらの表現は、「少なくとも１つ」或いは「１つ又は複数」の通常の意味に従って、本明細書中で別段に明確に記述した場合以外は、異なる実体の数（たとえば異なるリピドＡ模倣体の数、異なる抗原の数など）をいい、任意の特定の実体の量をいうわけではない。
【００５８】
[065]本明細書中で使用する表現「それを必要としている対象」とは、特定の疾患、障害、又は状態を有する対象だけでなく、疾患、障害、若しくは状態に潜在的にかかり得る対象、又は疾患、障害、若しくは状態を引き起こし得る物質に潜在的に曝露されている可能性のある対象も包含することを意味する。ワクチンを用いた治療は多くの場合予防的であるため（たとえば、場合によっては対象が感染する危険性にあるかどうかにかかわらず、潜在的な将来の感染症の効果を予防又は寛解させるために与える）、このことは本明細書中に開示したワクチン組成物に特に関連性がある。
【００５９】
[066]リピドＡ模倣体
【００６０】
[067]本発明のリピドＡ模倣体は、天然リピドＡの糖残基の一方又は両方を芳香族基で置き換える。これらのリピドＡ模倣体は、存在するリン酸基の数の相違、脂質鎖の数、構造、及び場所の変化、糖残基（又はその芳香族置換基）の間隔及び連結の変化、並びに、一方又は両方のリン酸基の、そのバイオアイソスター又は他の置換基（たとえば、カルボキシル基、硫酸基、ヒドロキシル基、若しくは水素）での置き換えなどの、天然リピドＡとのさらなる相違によって特徴づけられていてもよい。
【００６１】
[068]一実施形態では、本発明のリピドＡ模倣体は、一般に以下の式によって記載される化合物又は薬学的に許容されるその塩である：
Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ
［式中、
Ａは、ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていない環状単糖残基であるか、又は、Ａは、置換又は非置換の芳香族基であり、
Ｌ１及びＬ２は、独立して存在又は非存在であり、存在する場合は、独立して、Ｏ、Ｓ、又はＮの１つ又は複数を任意選択で含む、置換又は非置換、分岐状又は直鎖状、飽和又は不飽和の炭素鎖であり、
Ｄは、−Ｏ−、−Ｓ−、又は−ＮＨ−であり、
Ｅは、ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていない環状単糖残基であるか、又は、Ｅは、置換又は非置換の芳香族基であり、
ここで、Ａ又はＥの少なくとも１つが、置換又は非置換の芳香族基である］。
【００６２】
[069]一般に、天然リピドＡに対する構造的類似度を保存するために、以下のさらなる特長が本発明のリピドＡ模倣体において存在し得る：
（１）Ａ又はＥの少なくとも１つが、少なくとも１つのリン酸基又はリン酸基等価物を含み、
（２）Ａ、Ｌ１、Ｌ２、又はＥの少なくとも１つが、少なくとも１つの脂質鎖置換基を含む、より詳細には、Ａ又はＬ１の少なくとも１つが１つ又は複数の脂質鎖置換基を含み、Ｅ又はＬ２の少なくとも１つが１つ又は複数の脂質鎖置換基を含む。
【００６３】
[070]上記より、本発明のリピドＡ模倣体は、少なくとも４つの主要な要素、すなわち、芳香族基、糖残基（環状単糖）、リン酸基又はリン酸基等価物、及び脂質鎖置換基を含み得ることを見ることができる。しかし、これらの主要な要素の１つ若しくは複数が存在しない、又は特定の主要な要素の複数が存在し得ることが可能である。主要な要素に加えて、リンカー又はスペーサー及び置換基などの他の要素も存在し得る。
【００６４】
[071]リンカー及びスペーサーには、たとえば、式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ中でＬ１及びＬ２として同定された置換基が含まれる。また、置換基Ｄも、リンカー又はスペーサーと考えることができる。これらの特定のリンカー又はスペーサーに加えて、リピドＡ模倣体は、たとえば、それだけに限定されないが、脂質鎖置換基を連結するリンカー若しくはスペーサー及び／又はリン酸基若しくはリン酸基等価物を連結するリンカー若しくはスペーサーなどの、さらなるリンカー又はスペーサーも含み得る。
【００６５】
[072]リピドＡ模倣体の主要な要素のいずれかは、任意選択でその上で、特に糖残基（存在する場合）、芳香族基（複数可）、及び脂質鎖置換基で置換され得る。置換基の例示的な実施形態は本明細書中に記載されているが、それだけに限定されない。置換基は任意の有機基又は部分であり得る。本明細書中で使用する用語「有機基又は部分」とは、少なくとも１つの炭素原子及び典型的には少なくとも１つのＣ−Ｈ結合を有する置換基をいう。置換基は、任意数の酸素、窒素、硫黄、リン、ハロゲン、又は他の原子を含み得る。
【００６６】
[073]リピドＡ模倣体の芳香族基（複数可）
【００６７】
[074]天然リピドＡ分子の不変の構造的特徴は、そのβ−（１−６）結合したＤ−グルコサミン二糖主鎖である。本発明のリピドＡ模倣体は、グルコサミン糖残基の一方又は両方を芳香族基で置き換える。
【００６８】
[075]理論に束縛されずに、天然リピドＡのグルコサミン残基の一方又は両方を置き換えるために芳香族基を用いることで、本発明のリピドＡ模倣体とその受容体ＴＬＲ４／ＭＤ−２との間の結合を強化するために潜在的に重要であり得る、２つのユニークな構造的特徴がもたらされると考えられている。第一に、芳香族基は、結合のために有利な自由エネルギーを提供し得る、強固な系である。言い換えれば、柔軟がより低い分子は、すべての他のパラメータが同一である場合、より柔軟なその対応物よりも高い結合エネルギーを生じる潜在性を有する。第二に、芳香族基は平らな電子が豊富なπ系を含み、これは、π系が関与する一種の非共有相互作用であるπ効果又はπ相互作用をもたらし得る。π系が関与する非共有相互作用は、タンパク質−リガンド相互作用などの生物学的事象の要である。一般的なπ相互作用には、芳香族−芳香族の相互作用（πスタッキング）、Ｃ−Ｈ／π相互作用、及び陰イオン−π相互作用が含まれる。そのようなπ相互作用は、天然リピドＡ分子又は芳香族基を欠く他の合成類似体では存在しない。追加のさらなるπ相互作用が本発明のリピドＡ模倣体とその受容体ＴＬＲ４／ＭＤ−２との間の結合親和性に潜在的に寄与し、したがって、これらの化合物の生物活性が潜在的に改善され得ると考えられている。
【００６９】
[076]本明細書中で使用する用語「芳香族基」とは、１つ又は複数の芳香環を含む置換基をいう。したがって、用語「芳香族基」及び「芳香環」は本明細書中で互換性があるように使用され得る。芳香族基が複数の芳香環を含む場合、環は、ペンダント様式で一緒に付着しているか、又は融合していてもよい。用語「芳香族基」には、炭素環式芳香族基（芳香環又は環中に炭素原子のみを含有する）及び芳香族複素環基（炭素と、芳香環の少なくとも１つ中に１つ又は複数の他の原子を含有する）が包含される。
【００７０】
[077]それぞれの炭素環式芳香族基は合計３〜２６個の炭素環原子を有していてもよく、芳香族複素環基の場合は、合計３〜２６個の環原子を有しており、１〜６個の環原子が窒素、酸素、硫黄、リン、又はセレン原子から選択され得る。
【００７１】
[078]一般に、本発明のリピドＡ模倣体の芳香族基の置換基は芳香族性の基準に従う：（ｉ）基は環状でなければならない、（ｉｉ）環中の各原子は、両側のｐ軌道と重複した、占有されたｐ軌道を有していなければならない（完全共役）、（ｉｉｉ）基は平面的でなければならない、（ｉｖ）基は奇数のπ電子対を含有していなければならない（すなわちヒュッケル則を満たさなければならない：（４ｎ＋２）個のπ電子、ただし、ｎは０から開始される整数である）。
【００７２】
[079]本明細書中で使用する用語「炭素環式芳香族基」とは、１つ又は複数の炭素環を有する芳香族基を意味し、ここで、そのような環は、ペンダント様式で一緒に付着しているか、又は融合していてもよい。特定の実施形態では、炭素環式芳香族基は１、２、又は３つの環である。単環の実施形態は、環中に４〜１０個の炭素原子、より詳細には４〜７個の炭素原子、さらにより詳細には６個の炭素原子を含有し得る。二環式の実施形態は、環中に８〜１２個の炭素原子、より詳細には８〜１０、さらにより詳細には１０個の炭素原子を含有し得る。三環系の実施形態は、環中に１２〜１６個の炭素原子、より詳細には１４個の炭素原子を含有し得る。炭素環式芳香族基の例には、それだけに限定されないが、ベンゼン、ナフタレン、及びアントラセンが含まれる。
【化１６】
2020180142.tif 000018
【００７３】
[080]直前の構造に関して、炭素環原子の１つは、リピドＡ模倣体の残りの部分と結合することを理解されよう（すなわち、式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ中でＤ又はＬ１若しくはＬ２の一方と結合する）。他の炭素原子は置換又は非置換であり得る。
【００７４】
[081]本明細書中で使用する用語「芳香族複素環基」とは、１つ又は複数の環を有する芳香族基を意味し、ここで、そのような環は、ペンダント様式で一緒に付着しているか、又は融合していてもよく、芳香族基は、たとえば、窒素、酸素、硫黄、リン、又はセレンなどの少なくとも１つのヘテロ原子を有する。単環の実施形態は、環中に４〜１０員の原子、より詳細には４〜７員の原子、さらにより詳細には５又は６員の原子を含有し得る。二環式の実施形態は、環中に８〜１２員の原子、より詳細には８〜１０員の原子、さらにより詳細には９又は１０員の原子を含有し得る。三環系の実施形態は、環中に１２〜１６員の原子、より詳細には１４員の原子を含有し得る。芳香族複素環基の例には、それだけに限定されないが、以下のものが含まれる。
【化１７】
2020180142.tif 000019
【００７５】
[082]直前の構造に関して、芳香族基は、環の炭素原子の１つとの結合、又は環のヘテロ原子の１つとの結合によって、リピドＡ模倣体の残りの部分と結合する（すなわち、式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ中でＤ又はＬ１若しくはＬ２の一方と結合する）。他の炭素原子又はヘテロ原子は置換又は非置換であり得る。
【００７６】
[083]一実施形態では、リピドＡ模倣体の芳香族基は、１、２、又は３個の置換又は非置換の芳香環を含む炭素環式芳香族基である。一部の実施形態では、芳香族基は１個のみの置換又は非置換の芳香環を含み、より詳細な実施形態では、芳香族基は、置換又は非置換のベンゼン環である。ベンゼン環がリピドＡ模倣体の残りの部分と結合している場合（すなわち、式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ中でＤ又はＬ１若しくはＬ２の一方と結合する）、フェニル基と同等に呼ぶことができることを理解されよう。フェニル基の環の炭素原子は、同じ又は異なる置換基の１つ又は複数で、任意選択で置換され得る。
【００７７】
[084]本発明のリピドＡ模倣体では、Ａ又はＥの少なくとも１つは芳香族基である。一実施形態では、本明細書中以下で定義するように、Ａが芳香族基でありＥが環状単糖残基である。第２の実施形態では、本明細書中以下で定義するように、Ｅが芳香族基であり、Ａが環状単糖残基である。第３の実施形態では、Ａ及びＥがどちらも芳香族基であり、リピドＡ模倣体は環状単糖残基を含有しない。この第３の実施形態では、Ａ及びＥは同じ又は異なる芳香族基であってもよく、どちらの実施形態でも、それぞれの芳香族基は、独立して、同じ若しくは異なる置換基を有するか、又は置換基を全く有さなくてもよい。
【００７８】
[085]天然リピドＡに対する構造的類似度を保存するために、本発明の実施形態では、リピドＡ模倣体が環状単糖残基を維持するように、Ａ又はＥの１つのみが芳香族基で置き換えられていてもよい。特定の実施形態では、芳香族基で置き換えられているのはＥであり、その芳香族基はベンゼン環である。
【００７９】
[086]言及したように、芳香族基は、１つ又は複数の同一又は異なる基によって任意選択で置換されていてもよい。それだけに限定されないが、置換基は、たとえば、フッ素（−Ｆ）、塩素（−Ｃｌ）、臭素（−Ｂｒ）、若しくはヨウ素（−Ｉ）などのハロゲン原子、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、置換若しくは非置換の直鎖状若しくは分岐状のＣ１〜１０アルキル基、置換若しくは非置換の直鎖状若しくは分岐状のＣ１〜１０アルコキシ基、置換若しくは非置換の直鎖状若しくは分岐状のＣ２〜１０アルケン基、又は置換若しくは非置換の直鎖状若しくは分岐状のＣ２〜１０アルキン基から選択され得る。アルキル、アルコキシ、アルケン、又はアルキン基置換基の任意のものについて、炭素鎖中の炭素原子の１つ又は複数を窒素、酸素、又は硫黄原子で置き換え得ることが可能である。芳香族基上での置換基の置換位置は、そこで置換できる限りは特に限定されない。
【００８０】
[087]上述の置換基に加えて、又はそれに代わって、芳香族基は、リン酸基若しくは本明細書中以下で定義するリン酸基等価物の任意の１つ若しくは複数、又は本明細書中以下で定義する脂質鎖置換基の任意の１つ若しくは複数で、任意選択で置換されていてもよい。ここでも、芳香族基上での置換基の置換位置は、そこで置換できる限りは特に限定されない。
【００８１】
[088]本発明のリピドＡ模倣体の例示的な一実施形態では、式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ中のＡ又はＥの少なくとも１つは、
【化１８】
2020180142.tif 000020
であり、式中、
Ｒａは、存在又は非存在であり、存在する場合は、ベンゼン環上の任意の位置に配置され、リン酸基又は本明細書中以下で定義するリン酸基等価物であり、
Ｒｂは、存在又は非存在であり、存在する場合は、ベンゼン環上の任意の残りの位置に配置され、ハロゲン原子、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、置換若しくは非置換の直鎖状若しくは分岐状のＣ１〜１０アルキル基、置換若しくは非置換の直鎖状若しくは分岐状のＣ１〜１０アルコキシ基、置換若しくは非置換の直鎖状若しくは分岐状のＣ２〜１０アルケン基、又は置換若しくは非置換の直鎖状若しくは分岐状のＣ２〜１０アルキン基である。
【００８２】
[089]上記構造のより詳細な実施形態では、Ｒａは、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６である。一部の実施形態では、Ｒａは、−Ｈ、−ＯＨ、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２である。Ｒｂでは、より詳細な実施形態には、−Ｈ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意の置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルが含まれる。一部の実施形態では、Ｒｂは−Ｈである。
【００８３】
[090]上記構造は、Ａが環状単糖残基（たとえばグルコサミン）であり、Ｌ１が非存在であり、ＤがＯであり、Ｌ２が存在しており本明細書中に定義する脂質鎖置換基を含む場合に、本発明のリピドＡ模倣体の置換基Ｅについて特に興味深い場合がある。逆の立体配置では、Ｅが環状単糖残基（たとえばグルコサミン）であり、Ｌ２が非存在であり、ＤがＯであり、Ｌ１が存在しており本明細書中に定義する脂質鎖置換基を含む場合に、リピドＡ模倣体の置換基Ａについて上記構造が代わりに特に興味深い場合がある。これらの実施形態のそれぞれにおいて、Ａ又はＥは以下の構造の１つから選択され得る。
【化１９】
2020180142.tif 000021
【００８４】
[091]本発明のリピドＡ模倣体の別の例示的な実施形態では、式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ中のＡ又はＥの少なくとも１つは、
【化２０】
2020180142.tif 000022
であり、式中、
【化２１】
2020180142.tif 000023
は、ベンゼン環上の任意の位置に配置され、
Ｒａは、本明細書中で既に定義されているとおりであり、特定の実施形態では、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６であり、
Ｒｂは、存在又は非存在であり、存在する場合は、ベンゼン環上の任意の残りの位置に配置され、本明細書中で既に定義されているとおりである、たとえば、−Ｈ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意の置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルなどであり、
ｍは０〜６であり、
ＲＬは、本明細書中以下で定義する脂質鎖置換基である。
【００８５】
[092]上記構造は、Ａが環状単糖残基（たとえばグルコサミン）であり、Ｌ１が非存在であり、ＤがＯであり、Ｌ２が非存在である場合に、本発明のリピドＡ模倣体の置換基Ｅについて特に興味深い場合がある。逆の立体配置では、Ｅが環状単糖残基（たとえばグルコサミン）であり、Ｌ２が非存在であり、ＤがＯであり、Ｌ１が非存在である場合に、リピドＡ模倣体の置換基Ａについて上記構造が代わりに特に興味深い場合がある。
【００８６】
[093]天然リピドＡの一方又は両方の糖残基を置き換えるために使用したものより多くの芳香族基がリピドＡ模倣体中に存在し得る可能性がある。そのような「追加の」芳香族基は、リン酸若しくはリン酸等価基、脂質鎖置換基、又は他の有用な化学部分の付着に有用であり得る。また、脂質鎖置換基上の置換基としても芳香族基が存在し得る。一般に、６個までの「追加の」芳香族基が存在することができる。一部の実施形態では、「追加の」芳香族基は１個しか存在しない。他の実施形態では、「追加の」芳香族基は存在しない。
【００８７】
[094]リピドＡ模倣体の糖残基
【００８８】
[095]天然リピドＡは二糖である。本発明のリピドＡ模倣体は、天然リピドＡの糖残基の一方又は両方を芳香族基で置き換える。残りの糖残基は、保持されている（場合によっては修飾された形態で）、同様に芳香族基で置き換えられている、又は本発明のリピドＡ模倣体から完全に省略されていてもよい。リピドＡ模倣体に糖残基が含まれる場合、天然リピドＡと同じ糖残基、すなわちグルコサミンである必要はない。残りの糖残基は、存在する場合は、リピドＡの天然糖残基、異なる糖残基、又はその修飾された形態であり得る。たとえば、一実施形態では、糖残基は、本明細書中で企図する環状単糖の誘導体又は修飾体を含めた、任意の環状単糖であることができる。
【００８９】
[096]本明細書中で使用する用語「環状単糖残基」とは、化学部分の主鎖構造が環状単糖若しくは誘導体又はその修飾体のものである、本発明のリピドＡ模倣体中の化学部分をいい、たとえば環状ヘミアセタール又はヘミケタールが含まれる。用語、環状単糖は、本明細書中で「糖残基」と互換性があるように使用され得る。環状単糖とは、部分が最小限で１個の架橋酸素原子によって閉じられた炭素原子の環を含んでおり、そのそれぞれの炭素原子がヒドロキシル基と結合していることを意味する。したがって、本明細書中で使用する用語「環状単糖残基」とは、糖残基の主鎖環に加えて、それぞれの炭素原子に付着したヒドロキシル基も指す。本発明のリピドＡ模倣体では、ヒドロキシル基の１つ又は複数は、任意選択で置換されていてもよいし、又は置換されていなくてもよい。
【００９０】
[097]３員環を有する環状単糖はオキシロースであり、４員環ではオキセトースであり、５員環ではフラノースであり、６員環ではピラノースであり、７員環ではセプタノースであり、８員環ではオクタノースであり、以下同様である。閉環の位置のロカントは変動し得る。より一般的な環状単糖では、環には１個の酸素原子が含まれ、残りの環原子は炭素である。本発明のリピドＡ模倣体の一実施形態では、残りの糖残基又はその修飾体（存在する場合）は、典型的にはそれぞれフラノース環又はピラノース環などの５員環又は６員環を含む。
【化２２】
2020180142.tif 000024
【００９１】
[098]フラノース又はピラノース環は、直接又は間接的に、環の炭素原子の任意の１つで本発明のリピドＡ模倣体の芳香族基と連結していてもよく、環の残りの位置は、非置換であるか、又は任意の他の化学部分で置換されていてもよい。具体的な置換は本明細書中以下に記載されており、たとえば、脂質鎖、リン酸基又はリン酸基等価物、又は他の置換基の付加が含まれる。
【００９２】
[099]環状単糖又はその修飾体は、デオキシ糖（アルコール性ヒドロキシ基が水素によって置き換えられている）、アミノ糖（アルコール性ヒドロキシ基がアミノ基によって置き換えられている）、チオ糖（アルコール性ヒドロキシ基がチオールによって置き換えられている、若しくはＣ＝ＯがＣ＝Ｓによって置き換えられている、若しくは環状形態の環酸素が硫黄によって置き換えられている）、セレノ糖、テルロ糖、アザ糖（環炭素が窒素によって置き換えられている）、イミノ糖（環酸素が窒素によって置き換えられている）、ホスファノ糖（環酸素がリンで置き換えられている）、又はホスファ糖（環炭素がリンで置き換えられている）などであり得る。アミノ糖には、ヘミアセタールヒドロキシ基が置き換えられているグリコシルアミンが含まれる。
【００９３】
[0100]これらの構造の誘導体には、ヒドロキシ水素が他のものによって置き換えられているＯ置換の誘導体が含まれる。それだけに限定されないが、可能な置き換えには、アルキル、アシル、リン酸基又は本明細書中に定義するリン酸基等価物、ホスホン酸基、ホスフィン酸基、硫酸基、本明細書中に定義する脂質鎖置換基、又は他の置換基が含まれる。同様に、アミノ糖の誘導体にはＮ置換の誘導体が含まれ、チオ糖の誘導体にはＳ置換の誘導体が含まれる。
【００９４】
[0101]天然リピドＡに対する構造的類似度を保存するために、本発明の実施形態には、残りの糖残基の位置にあるピラノース環が含まれ得る。特定の実施形態では、残りの糖残基は以下の一般式によって表される：
【化２３】
2020180142.tif 000025
［式中、Ｚは、−Ｈ、−ＯＨ、−ＣＨ２Ｇ、又は−ＣＨ２ＭＱであり、ここで、Ｇは、−Ｈ、−ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、Ｍは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＳＣ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｓ）−、又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）−であり、Ｑは、−Ｈであるか、又は置換若しくは非置換、分岐状若しくは直鎖状、飽和若しくは不飽和のＣ１〜２０脂肪族炭化水素であり、
【化２４】
2020180142.tif 000026
は、本発明のリピドＡ模倣体の芳香族基との結合の位置を表し、ピラノース環上の任意の残りの位置は、本明細書中に記載のように置換又は非置換であり得る］。
【００９５】
[0102]天然リピドＡに対する構造的類似度をさらに保存するために、本発明の実施形態には、ピラノース糖残基が残りの糖残基として含まれ得る。本明細書中で使用する用語「ピラノース糖残基」とは、糖残基の主鎖環に加えて、それぞれの炭素原子に付着したヒドロキシル基も指す。ピラノース糖残基には、たとえば、アロース、アルトロース、グルコース、マンノース、グロース、イドース、ガラクトース、又はタロースのピラノース体などの、六炭糖の任意の環状異性体が含まれる。置換も立体化学も含まないピラノース糖残基の一般構造を以下の式に示す。
【化２５】
2020180142.tif 000027
【００９６】
[0103]本発明のリピドＡ模倣体では、ヒドロキシル基の１つ又は複数は、任意選択で置換されていてもよいし、又は置換されていなくてもよい。
【００９７】
[0104]特定の実施形態では、本発明のリピドＡ模倣体中のピラノース糖残基は、ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていない、グルコピラノース環又はガラクトピラノース環を含む。グルコピラノース及びガラクトピラノースと言及される場合、これは、Ｃ−４位で付着した化学部分（すなわちヒドロキシル又は本明細書中に定義した任意の置換基）の代替配置（すなわちエピマー）を定義することを意味する。特定の実施形態では、ピラノース糖残基は、ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていないグルコピラノース環を含む。糖残基とそれに付着している置換基との間のグリコシド結合はα又はβであることができる。
【００９８】
[0105]本発明のリピドＡ模倣体の式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ中の置換基Ａを具体的に参照すると、Ａが芳香族基で置き換えられていない場合、この置換基は、それだけに限定されないが、以下の式によって表され得る：
【化２６】
2020180142.tif 000028
［式中、
Ｚは−ＣＨ２Ｇ又は−ＣＨ２ＭＱであり、ここで、Ｇは、−Ｈ、−ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、Ｍは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＳＣ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｓ）−、又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）−であり、Ｑは、−Ｈであるか、又は置換若しくは非置換、分岐状若しくは直鎖状、飽和若しくは不飽和のＣ１〜２０脂肪族炭化水素であり、
Ｘ１は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６であり、
Ｙ１及びＹ２は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｏ−ＲＬ、−ＮＨ−ＲＬ、又は−Ｓ−ＲＬであり、ここで、ＲＬは本明細書中に定義する脂質鎖置換基である］。
【００９９】
[0106]天然リピドＡに対する構造的類似度を保存するために、本発明のリピドＡ模倣体の特定の実施形態では、Ｚは−ＣＨ２ＯＨであり、Ｘ１は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、Ｙ１は−ＮＨ−ＲＬであり、Ｙ２は−Ｏ−ＲＬであり、ここで、ＲＬは本明細書中に定義する脂質鎖置換基である。また、それだけに限定されないが、Ａ上の置換基の立体化学は以下の式：
【化２７】
2020180142.tif 000029
［式中、Ｘ１、Ｙ１、及びＹ２は本明細書中に定義したとおりである］
によって定義され得る。
【０１００】
[0107]本発明のリピドＡ模倣体の式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ中の置換基Ｅを具体的に参照すると、Ｅが芳香族基で置き換えられていない場合、この置換基は、それだけに限定されないが、以下の式によって表され得る：
【化２８】
2020180142.tif 000030
［式中、
Ｘ２は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６であり、
Ｙ３、Ｙ４、及びＹ５は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｏ−ＲＬ、−ＮＨ−ＲＬ、又は−Ｓ−ＲＬであり、ここで、ＲＬは脂質鎖置換基である］。
【０１０１】
[0108]天然リピドＡに対する構造的類似度を保存するために、本発明のリピドＡ模倣体の特定の実施形態では、Ｘ２は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、Ｙ３は−ＮＨ−ＲＬであり、Ｙ４は−Ｏ−ＲＬであり、Ｙ５は−ＯＨであり、ここで、ＲＬは本明細書中に定義する脂質鎖置換基である。また、それだけに限定されないが、Ｅ上の置換基の立体化学は以下の式：
【化２９】
2020180142.tif 000031
［式中、Ｘ２、Ｙ３、Ｙ４、及びＹ５は本明細書中に定義したとおりである］
によって定義され得る。
【０１０２】
[0109]リピドＡ模倣体のリン酸基又はリン酸基等価物
【０１０３】
[0110]天然リピドＡには、それぞれが二糖主鎖の別々の糖残基に直接付着している、２つのリン酸基が含まれる。最近認可された、ＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅによって開発されたモノホスホリルリピドＡ（ＭＰＬ（商標））は、免疫賦活活性が大部分保たれている一方で、天然二リン酸化リピドＡと比較して毒性が低下していることが判明している。本発明のリピドＡ模倣体の一部の実施形態では、天然リピドＡ中に見つかるリン酸基の１つ又は複数を省略し得る（すなわち水素で置き換える）、別の化学部分（たとえばヒドロキシル）で置き換え得る、又はリン酸基等価物で置き換え得る。
【０１０４】
[0111]本明細書中で使用する用語「リン酸基等価物」とは、一般にリン酸基のバイオアイソスターをいう。「バイオアイソスター」とは、化学部分（すなわち原子又は原子群）を代替の概して同様の化学部分で置き換えたものを表す。バイオアイソスター置き換えの目的は、すべての側面（たとえば、免疫賦活活性、毒性、発熱性など）で親化合物と同様の生物学的特性を有する化合物、又は一部のみの側面が同様で他の側面が改変されている化合物を作製することである。本明細書中で使用する「リン酸基等価物」は、もやは糖残基（又は芳香族基の置き換え）と直接付着していない限り、リン酸基（すなわち−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２）を含有することができる。
【０１０５】
[0112]リン酸基等価物の一部の例には、それだけに限定されないが、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−ＯＢ（ＯＨ）２、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）−Ｏ−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２が含まれ、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６である。これらは、リン酸基等価物の例を表し、リン酸基等価物が本質的には末端部分である。
【０１０６】
[0113]リン酸基等価物の他の可能な例には、それだけに限定されないが、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）ＯＲｐ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）ＯＲｐ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲｐ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲｐ、−Ｓ（＝Ｏ）２ＯＲｐ、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＯＲｐ、−ＯＢ（ＯＨ）ＯＲｐ、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）−Ｏ−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）ＯＲｐが含まれ、ここで、Ｒｐは置換又は非置換の１〜４個の炭素のアルキル基である。Ｒｐが置換されたアルキル基である場合、一部の実施形態では、置換は−ＯＨ又は−ＮＨ２から選択される。特に興味深いＲｐ基は−ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２である。特定の実施形態では、リン酸基等価物は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であってもよく、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６である。これらは、Ｒｐを含めるという観点からリン酸基等価物が末端部分でない可能性がある、リン酸基等価物の例を表す。
【０１０７】
[0114]本発明のリピドＡ模倣体の一実施形態では、式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ中のＡ及びＥはどちらも、それに直接付着しているリン酸基を含む。「それに直接」とは、リン酸基が、介在する化学構造なしに糖残基又は芳香族基と直接結合していることを意味する。これらの実施形態では、Ａ及びＥの一方又は両方が１つ又は複数のリン酸基等価物をさらに含み得ることが可能である。
【０１０８】
[0115]本発明のリピドＡ模倣体の別の実施形態では、式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ中のＡ又はＥの一方のみが、それに直接付着しているリン酸基を含む。一部の実施形態では、Ａ又はＥの他方では、リン酸基が−Ｈ、−ＯＨ、又はリン酸基等価物で置き換えられている。これらの実施形態では、Ａ又はＥの一方又は両方が、リン酸基の代わりであるか、又はリン酸基に加えてであるかにかかわらず、１つ又は複数のリン酸基等価物を含み得ることが可能である。
【０１０９】
[0116]本発明のリピドＡ模倣体の別の実施形態では、Ａ又はＥはどちらも、それに直接付着しているリン酸基を含まない。一部の実施形態では、Ａ及びＥの両方のリン酸基が、−Ｈ、−ＯＨ、又はリン酸基等価物で置き換えられている。これらの実施形態では、Ａ及びＥは、リン酸基の代わりであるか、又は置き換えに加えてであるかにかかわらず、１つ又は複数のリン酸基等価物を含み得ることが可能である。
【０１１０】
[0117]本発明のリピドＡ模倣体では、リン酸基又はリン酸基等価物は、位置Ａ又はＥに見つかる糖残基又は芳香族基に直接又は間接的に付着していてもよい。糖残基又は芳香族基に直接付着していない場合は、これらはスペーサー又はリンカーを介して付着していてもよい。それだけに限定されないが、スペーサー又はリンカーは、酸素、硫黄、又は窒素の１つ又は複数を任意選択で含む、置換又は非置換、分岐状又は直鎖状、飽和又は不飽和の炭素鎖であり得る。一例として、リン酸基又はリン酸基等価物は、以下の構造を介して糖残基と付着していてもよい：
【化３０】
2020180142.tif 000032
［式中、
Ｒａは、−Ｈ、−ＯＨ、リン酸基、又はリン酸基等価物であり、
ｍは０〜６であり、
ＲＬは本明細書中に定義する脂質鎖置換基である］。
【０１１１】
[0118]上記式の特定の実施形態では、Ｒａは、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６である。
【０１１２】
[0119]一部の実施形態では、本発明のリピドＡ模倣体は０、１、２、３、又は４個のリン酸又はリン酸等価基を有しており、複数を有する場合は、これらは同じ又は異なっていてもよい。したがって、本発明のリピドＡ模倣体は１つのリン酸基及び１つのリン酸基等価物を有することができる。或いは、本発明のリピドＡ模倣体は、１つのリン酸基を有しリン酸基等価物を有さない、又は１つのリン酸基等価物を有しリン酸基を有さないことができる。複数存在する場合、リン酸基又はリン酸基等価物は、Ａ若しくはＥ（両方ではない）の同じ糖残基若しくは芳香族基と付着し得るか、又はＡ及びＥの両方の糖残基若しくは芳香族基に付着し得る。
【０１１３】
[0120]天然リピドＡに対する構造的類似度を保存するために、式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅの位置Ａにピラノース糖残基が残っている本発明のリピドＡ模倣体の一部の実施形態では、リン酸基又はリン酸基等価物はピラノース環のＣ−４炭素と付着していてもよい。位置Ｅにピラノース糖残基が残っている他の実施形態では、リン酸基又はリン酸基等価物はピラノース環のＣ−１炭素と付着していてもよい。
【０１１４】
[0121]リピドＡ模倣体の脂質鎖置換基
【０１１５】
[0122]脂質の多様性が、天然リピドＡ構造間の最も顕著なばらつきに寄与している。これらはすべて、エステル及びアミド結合によって糖残基のヒドロキシ及びアミノ基と連結しているが、ばらつきには、付着している脂質鎖の数、それぞれの脂質鎖の長さ、及び脂質鎖に含有される官能基が含まれる。
【０１１６】
[0123]本明細書中で使用する用語「脂質鎖」とは、脂肪酸及びその誘導体、並びにこれらの化合物と生合成的に又は機能的に関連している物質という。一般に、それぞれの脂質鎖は、１本の主要炭素鎖及び任意選択で１つ又は複数の副炭素鎖を含む、疎水性又は両親媒性の分子である。それぞれの炭素鎖は、単結合、二重結合、又は三重結合によって順次連結された炭素原子からなる。一部の実施形態では、二重結合又は三重結合は、特定の炭素鎖の１つの結合を超えない。他の実施形態では、炭素鎖は完全に飽和している。それだけに限定されないが、炭素鎖は、その任意のものが、たとえば、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシ、アミノ、及びアルコキシから選択される置換基で、任意選択で置換されていてもよい、Ｃ１〜２２の直鎖又は分岐鎖アルキル、アルケニル、アルキニル、又はジアルケニルであり得る。長さが少なくとも６個の炭素である炭素鎖は「主要」炭素鎖と考えられ、他のより短い炭素鎖は「副」炭素鎖と考えられる。
【０１１７】
[0124]炭素鎖の炭素原子は、３、２、１、又は０個の水素と結合していてもよい。主要炭素鎖中、−ＣＨ＜及び＞Ｃ＜の炭素は通常、別の炭素鎖の付着（リンカーを用いる又は用いない）の分岐点である。また、これらはアミノ又はヒドロキシルなどの側基で置換されていてもよい。任意の主要炭素鎖の炭素原子に、１つ又は複数のカルボニル又はチオカルボニル炭素、すなわち、−Ｃ（＝Ｏ）−、又は−Ｃ（＝Ｓ）−が含まれ得る。カルボニル又はチオカルボニル炭素が１つのみ存在する場合、これは通常（必ずしもではないが）、鎖がアシル鎖（飽和又は不飽和）であるように、鎖の最初に存在する。したがって、リンカーが−Ｏ−である場合は、カルボニルへの付着によりエステル（−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−）が形成される一方で、リンカーが−ＮＨ−である場合は、付着によりアミド（−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−）が形成される。
【０１１８】
[0125]本明細書中で使用する表現「脂質鎖置換基」とは、糖残基又は芳香族基上のそれぞれの個々の脂質置換基をいう。それぞれの脂質鎖置換基は、それ自体が１つ又は複数の脂質鎖を含有し得る。本発明のリピドＡ模倣体のそれぞれの脂質鎖置換基は少なくとも１本の主要炭素鎖を含む。また、脂質鎖置換基は１つ又は複数の副炭素鎖も含み得る。副炭素鎖は、たとえば、脂質鎖置換基を糖残基若しくは芳香族基と連結させる、又は主要炭素鎖を互いに連結させる種類のリンカーであり得る。
【０１１９】
[0126]一部の実施形態では、脂質鎖置換基は単一の非分岐状脂質鎖、すなわち単一の主要炭素鎖を含み得る。他の実施形態では、脂質鎖置換基は、脂質鎖置換基が１、２、３、又は４本の主要炭素鎖を含むように、それぞれ１、２、３、又は４本の脂質鎖を含み得る。
【０１２０】
[0127]脂質鎖置換基が複数の主要炭素鎖を含む場合、糖残基又は芳香族基に最も近くから始まる主要鎖が基の一次主要鎖であると考えられる。一次主要鎖に付着している任意の鎖は二次主要鎖であると考えられる。二次主要鎖に付着している任意の主要鎖は三次主要鎖と考えられ、以下同様である。
【０１２１】
[0128]二次主要鎖は一次主要鎖の遠位末端（糖残基又は芳香族基と相対的に）に付着していてもよく、その場合、脂質鎖は直鎖状に保たれる（他の部分が存在しない限り）。或いは、二次主要鎖は一次主要鎖の内部炭素に付着していてもよく、その結果分岐状の脂質鎖が生じる。二次主要鎖は、単純な−Ｏ−、−Ｓ−、若しくは−ＮＨ−リンカーによって一次主要鎖に付着していてもよく、又は、リンカーなしで直接付着していてもよい（すなわちＣ−Ｃ）。また、複合リンカーによって付着していてもよい。二次主要鎖の一次主要鎖への付着について上述したものと同じ様式で、三次主要鎖が二次主要鎖に付着していてもよく、以下同様である。
【０１２２】
[0129]一実施形態では、高次鎖の低次鎖への付着点（たとえば二次鎖の一次鎖への付着点）は、低次（たとえば一次）鎖のＣ−３炭素である。
【０１２３】
[0130]一次主要鎖と同様、二次又はより高次の主要鎖は、二重結合若しくは三重結合した炭素原子、及び／又はカルボニル若しくはチオカルボニル炭素を含み得る。上述した様々な炭素鎖は、たとえばヒドロキシル又はアミノ基で置換され得る。一実施形態では、ヒドロキシル又はアミノ基が鎖のＣ−２又はＣ−３炭素上の置換基となる。
【０１２４】
[0131]本発明のリピドＡ模倣体の脂質補体は、本明細書中に記載の脂質鎖置換基の１つ又は複数を含む。それぞれの脂質鎖置換基は１つ又は複数の主要炭素鎖を提供する。まとめると、リピドＡ模倣体上の脂質鎖置換基は１、２、３、４、５、６、７、８つ、又はそれより多くの主要炭素鎖を提供し、特定の実施形態は３〜６本の主要炭素鎖を提供する。それぞれの脂質鎖置換基は、独立して、１、２、３、４つ、又はそれより多くの主要炭素鎖を提供し得る。一部の実施形態では、これらの主要炭素鎖は、それぞれ１０〜２２個の炭素の長さ、より詳細には１２〜１６個の炭素の長さ、さらにより詳細には１４個の炭素の長さである。
【０１２５】
[0132]大腸菌リピドＡでは、脂質基は８２個の炭素原子を提供し、エス・ミネソタ（Ｓ．ｍｉｎｎｅｓｏｔａ）リピドＡでは、９８個の炭素（７本のアシル鎖）を提供する一方で、内毒素拮抗剤であるアール・カプスラータ（Ｒ．ｃａｐｓｕｌａｔｕｓ）リピドＡでは、脂質基は６０個の炭素原子を提供する。脂質基が４２個の炭素原子を提供する単糖類似体リピドＡ作用剤が存在する。
【０１２６】
[0133]したがって、脂質鎖置換基の主要炭素鎖は、集合的に少なくとも２０、少なくとも３０、少なくとも４０、少なくとも５０、少なくとも６０、少なくとも７０、又は少なくとも８０個の炭素原子を提供し得る。対応する実施形態では、脂質鎖置換基は、集合的に１２０個以下、１１０個以下、１００個以下、又は９０個以下の炭素原子を提供し得る。
【０１２７】
[0134]一部の実施形態では、それぞれの脂質鎖置換基は、−Ｏ−、−Ｓ−、及び−ＮＨ−から選択される近位リンカーによって、リピドＡ模倣体の残りの部分（たとえば、糖残基、芳香族基、又はリンカーＬ１及び／若しくはＬ２）と接続している。糖残基との接続の場合、近位リンカーは、糖ヒドロキシルの酸素、チオ糖の硫黄、又はアミノ糖の窒素である。リピドＡ模倣体の芳香族基又は任意の他の構造（たとえばリンカーＬ１又はＬ２）との接続の場合、近位リンカーは、本明細書中に記載のそれぞれの構造の一部分である。
【０１２８】
[0135]この近位リンカーは、主要炭素鎖と直接、又は脂質鎖置換基中の遠位リンカーと結合し得る。遠位リンカーは二価、三価、四価などであり得る。通常これは少なくとも三価であり、したがって、リピドＡ模倣体の残りの部分を脂質鎖置換基の少なくとも２本の異なる主要炭素鎖と接続させる役割を果たす。遠位リンカーは、Ｃ１〜５アルキル、−Ｏ−、−Ｓ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｓ）−、−ＮＨ−、及び−Ｎ＜からなる群から独立して選択される２つ以上の要素からなり、ただし、脂質鎖置換基の主要炭素鎖と直接接続している遠位リンカーの原子は炭素原子ではない。遠位リンカーは、脂質鎖置換基が糖残基と付着していない実施形態においてより頻繁に含まれるが、必ずしもそうではない。
【０１２９】
[0136]本発明のリピドＡ模倣体に糖残基が含まれる（すなわち、式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ中のＡ及びＥがどちらも芳香族基によって置き換えられていない）場合、糖炭素骨格上の以下の部位の少なくとも１つは、脂質鎖置換基と連結していてもよい：
（Ａ）アノマー環炭素（置換基Ｅが糖残基である場合のみ）、
（Ｂ）環ヘテロ原子（通常は酸素）に直接隣接している環炭素、
（Ｃ）上記（Ａ）若しくは（Ｂ）のもの以外の環炭素、及び／又は
（Ｄ）環炭素以外の糖炭素（置換基Ａが糖残基である場合のみ）。
【０１３０】
[0137]そのような連結は、通常は本明細書中に定義した近位リンカーなどのリンカーを介したものであるが、リンカーなしの接続（すなわちＣ置換のアミノ酸）が完全に排除されるわけではないことを理解されたい。
【０１３１】
[0138]糖がグルコースなどのピラノースである場合、以下の部位の少なくとも１つは、脂質鎖置換基と連結していてもよい：
（１）糖環のＣ−２炭素（すなわち、天然リピドＡがＮ脂質付加されている部位）、
（２）糖環のＣ−３炭素（すなわち、天然リピドＡがＯ脂質付加されている部位）、
（３）糖環のＣ−１（アノマー）炭素（置換基Ｅが糖残基である場合のみ。天然リピドＡ中では、この炭素はリン酸化されている）、
（４）糖のＣ−６非環炭素（置換基Ａが糖残基である場合のみ。天然リピドＡに基づくリピドＡ二糖では、これは−ＯＨを保有しているが、これが通常、リピドＡ二糖とＬＰＳ分子の残りの部分との付着部位である）、及び／又は
（５）糖環のＣ−４炭素（天然リピドＡ中では、これは糖残基の１つでリン酸化されており、他の糖残基中で遊離ヒドロキシルを保有している）。
【０１３２】
[0139]糖残基がリピドＡ模倣体中に留まっている場合、一部の実施形態では、脂質鎖置換基は糖環のＣ−２及びＣ−３炭素に付着している。−Ｏ−リンカーがＣ−３及びＣ−４炭素で、−ＮＨ−リンカーがＣ−２炭素で見つかり得る。これらの炭素上のＮＨ２基が脂質付加されている場合、ＮＨ２はＮＨリンカーとなることが理解されよう。同様に、−ＯＨ基が脂質付加されている場合、−ＯＨは−Ｏ−リンカーとなる。
【０１３３】
[0140]糖のアノマー炭素又は非環炭素でのリンカーに関する特定の優先度はない。
【０１３４】
[0141]一実施形態では、本発明のリピドＡ模倣体上の脂質鎖置換基の少なくとも１つは、強親油性基を含む。強親油性基の決定及び同定は、Ｊｉａｎｇらによって米国特許第８，０９７，５９３号に記載されている。一般に、基の親油性は、非極性溶媒（たとえば、エタノール、ジオキサン、アセトン、ベンゼン、ｎ−オクタノール）と水の間の分子ＨＺ（式中、Ｚが問題の側鎖である）の分配係数をＳＴＰで測定することによって決定し得る。親油性はこの分配係数の対数として定義し得る。これは非極性溶媒を好む分子について正となる。
【０１３５】
[0142]分配係数（Ｐ）は、大部分が非混和性の溶媒からなる二相系中における、溶解した物質の平衡濃度の比として定義される。そのような１つの系はｎ−オクタノール：水であり、関連する分配係数（Ｐｏｗ）は、水で飽和させたオクタノール中の溶質のモル濃度対オクタノールで飽和させた水中のそのモル濃度の比である。この系は、Ｊｉａｎｇら（米国特許第８，０９７，５９３号）及びＳａｎｇｓｔｅｒ，Ｊ．、Ｏｃｔａｎｏｌ−Ｗａｔｅｒ  Ｐａｒｔｉｔｉｏｎ  Ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ：Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｓ  ａｎｄ  Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（１９９７年４月）（ＩＳＢＮ０−４７１−９７３９）に記載されている。
【０１３６】
[0143]ｌｏｇ  Ｐｏｗの実験的決定の必要性を回避するために、Ｊｉａｎｇら（米国特許第８，０９７，５９３号）によって記載されているメイラン法によって予測された値を使用することができる。メイラン法では、予測されたｌｏｇ  Ｐｏｗは、それぞれの断片の加重係数（生の係数をその断片のコピー数で掛け算）を定数０．２２９０に加算することによって得られる。検討した断片には、脂肪族に付着した−ＣＨ３（０．５４７３）、−ＣＨ２−（０．４９１１）、−ＣＨ（０．３６１４）、−ＯＨ（−１．４０８６）、−ＮＨ２（−１．４１４８）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（−０．５２３６）、−ＳＨ（−０．０００１）、−ＮＨ−（−１．４９６２）、−Ｎ＝Ｃ（−０．００１０）、−Ｏ−（−１．２５６６）、−ＣＨＯ（−０．９４２２）、−ｔｅｒｔ  Ｃ、したがって３＋Ｃ付着（−ｔｅｒｔ  Ｃ  ｓｏ  ３＋Ｃ  ａｔｔａｃｈｅｄ）（０．２６７６）、Ｃ  Ｈなし  ｔｅｒｔではない（Ｃ  ｎｏ  Ｈ  ｎｏｔ  ｔｅｒｔ）（０．９７２３）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｏ−（−０．９５０５）、−Ｃ（＝Ｏ）−（−１．５５８６）、＝ＣＨ又はＣ＜（０．３８３６）、＃Ｃ（０．１３３４）、−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（−０．５２３６）、−Ｏ−ＣＯ−Ｃ−Ｎ−ＣＯ（−０．５）、−ＳＯ−Ｏ（−９）、−Ｏ−Ｐ（−０．０１６２）、Ｏ＝Ｐ（−２．４２３９）、リン酸基に付着した−ＯＨ（０．４７５）、芳香族Ｃ（０．２９４０）、芳香族Ｎ（５員環）（−０．５２６２）、及び芳香族に付着した−ＯＨ（−０．４８０２）が含まれる。メイランアルゴリズムはプログラムＬｏｇ  Ｐｏｗ（ＫｏｗＷｉｎ（登録商標））で実装することができる。
【０１３７】
[0144]基は、メイランアルゴリズムによって予測されるそのｌｏｇ  Ｐｏｗがゼロよりも大きい場合に、親油性基であると予想される。Ｊｉａｎｇら（米国特許第８，０９７，５９３号）に記載のように、且つ本開示の目的のために、強親油性基は、予測されたｌｏｇ  Ｐｏｗが少なくとも３である、少なくとも５個の水素以外の原子を含む基であると定義されている。さらなる実施形態では、メイランアルゴリズムによって予測された強親油性基のｌｏｇ  Ｐｏｗは少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、又は少なくとも１０である。脂質鎖置換基が強親油性基を含むかどうかを決定する目的のために、近位リンカーは無視されるが、遠位リンカー（存在する場合）は基の一部であるとされる。
【０１３８】
[0145]本発明のリピドＡ模倣体の一部の実施形態では、脂質鎖置換基の任意の数が強親油性基を含み得る。一実施形態では、リピドＡ模倣体上のすべての脂質鎖置換基が強親油性基を含む。リピドＡ模倣体上の強親油性基の予測されたｌｏｇ  Ｐｏｗの合計は、少なくとも３、少なくとも６、少なくとも９、少なくとも１２、少なくとも１５、少なくとも２０、少なくとも２５、少なくとも３０、少なくとも４０、又は少なくとも５０であり得る。典型的には、それだけに限定されないが、合計は６０を超えない、５０を超えない、４０を超えない、又は３０を超えない。
【０１３９】
[0146]既に記載したように、強親油性基は少なくとも５個の水素以外の原子を含む。強親油性基（複数可）は、たとえば、記載した任意の置換を含めて、上記定義した主要及び副炭素鎖から構成されていてもよい。一部の実施形態では、強親油性基は、少なくとも６、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１１個の水素以外の原子、より詳細な実施形態では少なくとも１３個のそのような原子、さらにより詳細な実施形態では少なくとも２１個のそのような原子を含む。一般に、強親油性基は、１００個以下の水素以外の原子、８０個以下のそのような原子、６０個以下のそのような原子、又は４０個以下のそのような原子を含む。
【０１４０】
[0147]強親油性基は、典型的には炭素、ケイ素、水素、酸素、窒素、硫黄、及びリンの元素に限定された元素組成を有する。また、一部の実施形態では、酸素、窒素、硫黄、及びリンの存在は親油性を低下させる傾向にあるため、水素が関与しない基内の結合の大多数は炭素−炭素結合である。したがって、強親油性基の特定の実施形態では、非水素結合の５０％より多く、６０％より多く、又は７５％より多くが炭素−炭素結合である。同じ理由で、典型的には、強親油性基中に炭素原子間の二重結合又は三重結合は２つ以上存在せず、一部の実施形態では、炭素原子間に二重結合又は三重結合は存在しない（たとえば炭素鎖は完全に飽和している）。
【０１４１】
[0148]−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＸＦの形の脂肪酸基（式中、ＸＦは主にアルキルであるが、アルケニル、アルキニル、又はエーテル結合が含まれ得る）が、本発明のリピドＡ模倣体上の脂質鎖置換基として特に興味深い場合がある。一般に、脂肪酸は４〜２２個の炭素原子を含有する炭化水素基の鎖からなり、末端カルボキシル基によって特徴づけられている。これらは「炭素原子の数：二重結合の数」、及び任意選択でシス／トランス異性の位置によって命名され得る。したがって、適切な脂肪酸には、たとえば、それだけに限定されないが、４：０、６：０、８：０、１０：０、１２：０、１４：０、１６：０、１６：１（９ｃ）、１８：０、１８：１（９ｃ）、１８：２（９ｃ，１２ｃ）、１８：３（９ｃ，１２ｃ，１５ｃ）、１８：４（６ｃ，９ｃ，１２ｃ，１５ｃ）、１８：３（９ｃ，１１ｔ，１３ｔ）、１８：１（９ｃ）  １２−ＯＨ、２０：１（９ｃ）、２０：１（１１ｃ）、２０：４（８ｃ，１１ｃ，１４ｃ，１７ｃ）、２０：５（５ｃ，８ｃ，１１ｃ，１４ｃ，１７ｃ）、２２：０、２２：１（１１ｃ）、２２：１（１３ｃ）、２２：５（７ｃ，１０ｃ，１３ｃ，１６ｃ，１９ｃ）及び２２：６（４ｃ，７ｃ，１０ｃ，１３ｃ，１６ｃ，１９ｃ）の命名を有するものが含まれ、そのすべては天然に存在するグリコシド中に見つかる。
【０１４２】
[0149]様々な種からの天然リピドＡ中に存在する脂質構造には、１０：０、１２：０、１４：０、１６：０、１８：０、２０：０脂肪酸が含まれる。二次アシル基は通常、３−Ｏ付着している。ヒドロキシル化は通常３−ＯＨ又は２−ＯＨである。いくつかのリピドＡ分子（たとえば、ロドバクター・カプスラータ及びロドバクター・スフェロイデス（Ｒｈｏｄｏｂａｃｔｅｒ  ｓｐｈａｅｒｏｉｄｅｓ））には、１２：１又は１４：１二次アシル基が含まれる。Ａｌｅｘａｎｄｅｒら、Ｔｒｅｎｄｓ  ｉｎ  Ｇｌｙｃｏｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｇｌｙｃｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１４：６９〜８６、２００２を参照されたい。
【０１４３】
[0150]本発明のリピドＡ模倣体上の脂質鎖置換基には、以下の構造が特に興味深い：
【化３１】
2020180142.tif 000033
［式中、
Ｚ１、Ｚ２、及びＺ３は、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＣＨ２−であり；
Ｘ３は−Ｈ又は−（ＣＨ２）ｐ３ＣＨ３であり、
Ｘ４は、−ＮＨ−、−Ｏ−、又は−ＣＨ２−であり、
ｐ、ｐ１、ｐ２、及びｐ３は、独立して０〜３０であり、
ｒ、ｓ、及びｔは、独立して０〜６である］。
【０１４４】
[0151]より詳細には、以下の定義を有する上記構造が興味深い：
【化３２】
2020180142.tif 000034
［式中、Ｚ１は−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＣＨ２−であり、ｐは２〜３０である］、
【化３３】
2020180142.tif 000035
［式中、Ｚ１は−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＣＨ２−であり、ｒは０〜６であり、ｐ及びｐ１は独立して０〜３０であり、ここで、ｐ＋ｐ１＋３ｒは２〜３０である］、
【化３４】
2020180142.tif 000036
［式中、Ｚ１は−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＣＨ２−であり、ｓは０〜６であり、ｐは０〜３０であり、ここで、ｓ＋ｐ＋１は２〜３０である］、
【化３５】
2020180142.tif 000037
［式中、Ｚ１は−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＣＨ２−であり、ｓは０〜６であり、ｐは０〜３０であり、ここで、ｓ＋ｐ＋１は２〜３０である］、
【化３６】
2020180142.tif 000038
［式中、Ｚ１及びＺ２は、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＣＨ２−であり、ｐ、ｐ１、及びｐ２は、独立して、０〜３０、ｓ及びｒは独立して０〜６であり、ここで、ｐ＋ｐ１＋３ｒは３〜３０であり、ｓ＋ｐ２＋１は２〜３０である］、
【化３７】
2020180142.tif 000039
［式中、Ｚ１、Ｚ２、及びＺ３は、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＣＨ２−であり、Ｘ３は−Ｈであり、ｐ１及びｐ２は独立して２〜３０であり、ｓは０である］、
【化３８】
2020180142.tif 000040
［式中、Ｚ１は−Ｃ（＝Ｏ）−、Ｘ４−ＮＨ−、又は−Ｏ−であり、ｐ１及びｐ２は独立して２〜３０である］、
【化３９】
2020180142.tif 000041
［式中、Ｚ１及びＺ２は、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＣＨ２−であり、ｐ１及びｐ２は独立して０〜３０であり、ｓ及びｔは独立して０〜６であり、ここで、ｐ＋ｔ＋１は２〜３０であり、ｐ２＋ｓ＋１は２〜３０である］、
【化４０】
2020180142.tif 000042
［式中、Ｚ１、Ｚ２、及びＺ３は、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＣＨ２−であり、ｐ１、ｐ２、及びｐ３は独立して０〜３０であり、ｓ及びｔは独立して０〜６であり、ここで、ｐ２＋ｔ＋１は２〜３０であり、ｐ２＋ｔ＋１は２〜３０である］。
【０１４５】
[0152]包含される他の脂質鎖置換基は、Ａｓａｉらによって米国特許第６，２３５，７２４号に記載されている脂質置換基、及びＪｉａｎｇらによって米国特許第８，０９７，５９３号に記載されている脂質置換基である。これらの脂質鎖置換基は、依然として強親油性基として認定されるはずであることを理解されたい。
【０１４６】
[0153]たとえば、それだけに限定されないが、本発明のリピドＡ模倣体には、以下から独立して選択される１つ又は複数の脂質鎖置換基が含まれ得る。
【化４１】
2020180142.tif 000043
【０１４７】
[0154]直前の構造はすべて強親油性基として認定されることに注目されたい。
【０１４８】
[0155]一実施形態では、本発明のリピドＡ模倣体には１、２、３、４、５、６、７、又は８つの脂質鎖置換基が含まれ、そのそれぞれは、たとえば上述の具体的な構造から独立して選択され得る。一実施形態では、リピドＡ模倣体には、２、３、４、又は５つの脂質鎖置換基、さらなる実施形態では３又は４つの脂質鎖置換基が含まれる。脂質鎖置換基のそれぞれは、リピドＡ模倣体上の他の脂質鎖置換基と同じであっても異なっていてもよい。
【０１４９】
[0156]天然リピドＡに対する構造的類似度を保存するために、本発明のリピドＡ模倣体の一部の実施形態は、天然リピドＡ構造中に存在する脂質鎖置換基と同一である、少なくとも１つの脂質鎖置換基を含み得る。さらなる部分実施形態では、リピドＡ模倣体のすべての脂質鎖置換基が天然リピドＡ構造中に存在するものと同一であるが、それらが同じ天然リピドＡ分子中に存在するものである必要はない。
【０１５０】
[0157]他の実施形態では、本発明のリピドＡ模倣体は、任意の天然リピドＡ構造中に見つからない少なくとも１つの脂質鎖置換基を含み得る。相違は、それだけに限定されないが、主要炭素鎖（複数可）の長さ、主要炭素鎖（複数可）の分岐の度合い、主要炭素鎖（複数可）中の不飽和結合の存在若しくは位置、又は−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−（エステル）、−Ｏ−（エーテル）、若しくは−ＮＨ−（アミノ）結合の存在若しくは位置の相違であり得る。そのような脂質鎖置換基の例には、たとえば、Ｊｉａｎｇらによって米国特許第７，４９１，７０７号に開示されている合成脂質酸構造のいずれかが含まれ得る。
【０１５１】
[0158]天然大腸菌リピドＡの主要形では、二糖主鎖は２つのグルコサミンから構成される（図１）。脂質構成成分は、糖環のＣ−２及びＣ−３位置で炭素原子と連結している、６本の炭素鎖の形態をとる。糖残基の１つは、糖環のＣ−３位置で炭素原子とＯ連結している分岐状脂質、及び糖環のＣ−２位置で炭素原子とＮ連結している同様の分岐状脂質を有する。この脂質鎖置換基は以下の構造を有する。
【化４２】
2020180142.tif 000044
【０１５２】
[0159]見ることができるように、一次鎖（糖環炭素と連結しているもの）はアシル鎖である。二次アシル鎖は一次アシル鎖のＣ−３炭素のＯ連結している（カルボニル炭素がＣ−１である）。したがって、合計４本の主要炭素鎖が、天然大腸菌リピドＡの主要形においてこの最初の糖残基と直接又は間接的に連結されている。
【０１５３】
[0160]天然大腸菌リピドＡの主要形における第２の糖残基では、非分岐状であるがヒドロキシル化されたアシル鎖が糖環のＣ−３位置で炭素原子とＯ連結しており、別のそのようなアシル鎖が糖環のＣ−２位置で炭素原子とＮ連結している。この脂質鎖置換基は以下の構造を有する。
【化４３】
2020180142.tif 000045
【０１５４】
[0161]したがって、合計２本の炭素主要鎖が、天然大腸菌リピドＡの主要形においてこの第２の糖残基と連結されている。一方の糖に４本のアシル鎖が存在し、他方には２本存在するため、天然大腸菌リピドＡは、不斉ヘキサアシル脂質補体、より詳細には４／２分布を有すると言われる。
【０１５５】
[0162]一実施形態では、本発明のリピドＡ模倣体上の脂質鎖置換基も不斉ヘキサアシル脂質補体を提供し得る。それに加えて又はその代わりに、本発明のリピドＡ模倣体は、上記表示したように、天然大腸菌リピドＡの主要形のものと同一の１つ又は複数の脂質鎖置換基を含む。リピドＡ模倣体上の脂質鎖置換基の配置は、天然大腸菌リピドＡのそれと同じであっても異なっていてもよい。
【０１５６】
[0163]スペーサー、リンカー、及びリピドＡ模倣体の接続性
【０１５７】
[0164]リピドＡ模倣体には任意数のスペーサー又はリンカーが含まれ得る。リピドＡ模倣体中に存在し得るスペーサー又はリンカーの一部は既に言及されている。これらには、たとえば、脂質鎖置換基を糖残基若しくは芳香族基と接続するために存在し得る近位及び遠位リンカー、又はリン酸基若しくはリン酸基等価物を糖残基若しくは芳香族基と接続するために式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅの置換基Ａ若しくはＥ中で使用し得るスペーサー若しくはリンカーが含まれる。
【０１５８】
[0165]リピドＡ模倣体の他の具体的なスペーサー又はリンカーは、式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ中の置換基Ｌ１及びＬ２である。これらのスペーサーは存在していても存在していなくてもよい。存在する場合、これらは、それだけに限定されないが、酸素、硫黄、又は窒素の１つ又は複数を任意選択で含む、任意の置換又は非置換、分岐状又は直鎖状、飽和又は不飽和の炭素鎖であり得る。一部の実施形態では、置換基Ｌ１及びＬ２の機能的側面は、Ａ及びＥに存在する置換基の間に距離をもたらすためであり得る（たとえばスペーサー機能）。一部の実施形態では、Ｌ１及びＬ２の別の機能的側面は、脂質鎖置換基の接続部位を提供することであり得る（たとえばリンカー機能）。同様に、リン酸基又はリン酸基等価物を糖残基又は芳香族基と接続するために使用し得るスペーサー又はリンカーは、これらの機能的側面の一方又は両方を提供し得る。
【０１５９】
[0166]一例として、それだけに限定されないが、Ｌ１は以下のＩＩの構造を有し得る。
【化４４】
2020180142.tif 000046
［式中、Ａ及びＤはＡ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ中のものであり、ｍは０〜６であり、Ｙは−（ＣＯ）ｆ−であり、ここで、ｆは０又は１であり、ここで、ＲＬは脂質鎖置換基である］
【０１６０】
[0167]一例として、それだけに限定されないが、Ｌ２は以下のＩの構造を有し得る。
【化４５】
2020180142.tif 000047
［式中、Ｄ及びＥはＡ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ中のものであり、ｍは０〜６であり、ＲＬは脂質鎖置換基である］
【０１６１】
[0168]上記のＬ１及びＬ２の例示的な構造は、脂質鎖置換基の接続部位を提供するという、記載した機能的側面を提供する。多くの他の構造もこの機能的特徴をもたらすことができ、本明細書中に包含される。また、Ｌ１及び／又はＬ２の構造は脂質鎖置換基の複数の付着部位も提供する場合があり、１、２、３、又は４つの脂質鎖置換基を含み得る。特定の実施形態では、Ｌ１及びＬ２は、脂質鎖置換基の１又は２つ、より詳細には１つの付着部位を個々に提供する。
【０１６２】
[0169]リピドＡ模倣体の一実施形態では、Ａ、Ｌ１、Ｌ２、又はＥの少なくとも１つが１つ又は複数の脂質鎖置換基を含む。
【０１６３】
[0170]リピドＡ模倣体の別の実施形態では、Ａ又はＬ１の少なくとも１つが１つ又は複数の脂質鎖置換基を含む。
【０１６４】
[0171]リピドＡ模倣体の別の実施形態では、Ｌ２又はＥの少なくとも１つが１つ又は複数の脂質鎖置換基を含む。
【０１６５】
[0172]天然リピドＡに対する構造的類似度を保存するために、リピドＡ模倣体の一実施形態では、Ａ又はＬ１の少なくとも１つ及びＬ２又はＥの少なくとも１つは、１つ又は複数の脂質鎖置換基を含む。
【０１６６】
[0173]上記より、リピドＡ模倣体の特定の実施形態では、（ｉ）置換基Ａが１つ若しくは複数の脂質鎖置換基を有する糖残基である、又は（ｉｉ）置換基Ａが糖残基若しくは芳香族基であり、リン酸基若しくはリン酸基等価物を糖残基若しくは芳香族基と接続するスペーサー若しくはリンカーが存在し、このスペーサー若しくはリンカーが少なくとも１つの脂質鎖置換基を有する場合は、Ｌ１は非存在であることが理解されよう。それに加えて又はその代わりに、リピドＡ模倣体の特定の実施形態では、（ｉ）置換基Ｅが１つ若しくは複数の脂質鎖置換基を有する糖残基である、又は（ｉｉ）置換基Ｅが糖残基若しくは芳香族基であり、リン酸基若しくはリン酸基等価物を糖残基若しくは芳香族基と接続するスペーサー若しくはリンカーが存在し、このスペーサー若しくはリンカーが少なくとも１つの脂質鎖置換基を有する場合に、Ｌ２は非存在である。
【０１６７】
[0174]したがって、置換基Ａが脂質鎖置換基を含まない場合、Ｌ１は典型的に存在し、脂質鎖置換基を含む。同様に、それに加えて又はその代わりに、置換基Ｅが脂質鎖置換基を含まない場合、Ｌ２は典型的に存在し、脂質鎖置換基を含む。
【０１６８】
[0175]また、式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ中の置換基Ｄもリンカー又はスペーサーと考えることができる。この位置は、天然リピドＡ中のＯ−グリコシド結合の位置に対応する。Ｓ−及びＮ−グリコシド結合を含めた他の種類のグリコシド結合も存在する。したがって、本発明のリピドＡ模倣体では、置換基Ｄは−Ｏ−、−Ｓ−、又は−ＮＨであり得る。特定の実施形態では、天然リピドＡに対する構造的類似度を保存するために、置換基Ｄは−Ｏ−である。他の二価基も置換基Ｄとして使用することが可能である。たとえば、−Ｓ（Ｏ）−、−Ｓ（Ｏ）２−、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）Ｏ−、又は−Ｃ（Ｏ）−を、２つの分子断片を連結させるために使用することができる。そのような場合、たとえばＤが−Ｃ（Ｏ）−である場合、Ｄに直接隣接する置換基の定義を、それに応じて適応させなければならない場合があることを理解されたい（たとえばＹの定義）。
【０１６９】
[0176]リピドＡ模倣体の例示的な群
【０１７０】
[0177]例示的な一実施形態では、本発明のリピドＡ模倣体は、以下の構造を有する化合物又は薬学的に許容されるその塩であり得る：
【化４６】
2020180142.tif 000048
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
ｍは０〜６であり、
Ｒ１は、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基であり、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＣＨ２ＣＯＯＨである］。
【０１７１】
[0178]直前の構造のリピドＡ模倣体のより詳細な実施形態では、ＸはＮＨであり、ｍは１であり、Ｒ１は、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト位に配置されており、−ＯＨ又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、Ｒ２は−Ｈであり、Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５はそれぞれ独立して：
【化４７】
2020180142.tif 000049
であり、Ｒ６は−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２である。
【０１７２】
[0179]したがって、具体的な実施形態では、本発明のリピドＡ模倣体は、以下に再現するＪＬ−２６５（図２）又はＪＬ−２６６（図３）の構造によって表される。
【化４８】
2020180142.tif 000050
【０１７３】
[0180]別の例示的な実施形態では、本発明のリピドＡ模倣体は、以下の構造を有する化合物又は薬学的に許容されるその塩であり得る：
【化４９】
2020180142.tif 000051
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
Ｒ１は、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、以下のものであり：
【化５０】
2020180142.tif 000052
Ｒ７は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
ｍは０〜６であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基であり、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＣＨ２ＣＯＯＨである］。
【０１７４】
[0181]別の例示的な実施形態では、本発明のリピドＡ模倣体は、以下の構造を有する化合物又は薬学的に許容されるその塩であり得る：
【化５１】
2020180142.tif 000053
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
ｍは０〜６であり、
Ｙは、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、−（Ｏ）ｇ（ＣＨ２）ｈ（ＣＯ）ｊ−であり、ここで、ｇは０又は１であり、ｈは０〜６であり、ｊは０又は１であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ１は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基であり、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＣＨ２ＣＯＯＨである］。
【０１７５】
[0182]別の例示的な実施形態では、本発明のリピドＡ模倣体は、以下の構造を有する化合物又は薬学的に許容されるその塩であり得る：
【化５２】
2020180142.tif 000054
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
ｍは０〜６であり、
Ｒ６は、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｙは−（ＣＯ）ｆ−であり、ここで、ｆは０又は１であり、
Ｒ１は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基である］。
【０１７６】
[0183]リピドＡ模倣体ＪＬ−２６５（２）及びＪＬ−２６６（３）の合成の説明
【０１７７】
[0184]リピドＡ模倣体ＪＬ−２６５（２）及びＳＬ−２６６（３）の合成は、グリコシルアクセプター７の形成から始まった（以下のスキーム１）。したがって、３−アミノフェノール中のアミン部分を、炭酸水素ナトリウム水溶液の存在下、９０℃で２−クロロエタノールと縮合させることにより、フェノール系の非環状足場４が５８％の収率で得られた。Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中の塩化ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル（ＴＢＤＰＳ−Ｃｌ）及びイミダゾールで処理することによる、４の一次ヒドロキシル基の保護により、５が８４％の収率で得られた。これにより、最初に、ＣＨ２Ｃｌ２中、−２０℃でＮ−メチルモルホリン（ＮＭＭ）によって二脂質酸８（Ｋｉｓｏら、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．、１６２：２４７〜２５６、１９８７）をクロロギ酸イソブチル（ＩＢＣＦ）と縮合させて酸無水物を生成し、その後、これを５のアミン基とカップリングさせ５、最終的には６が８０％の全収率で得られる、混合酸無水物方法による５のアミン部分の選択的アシル化が可能となった。最後に、ＣＨ２Ｃｌ２及び酢酸の混合物中でのフッ化テトラブチルアンモニウム処理による、６のシリルエーテル保護基の切断により、所望のグリコシルアクセプター７が８１％の収率で得られた。
【化５３】
2020180142.tif 000055
【０１７８】
[0185]既知のイミデートドナー９を用いた、トリメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート（ＴＭＳＯＴｆ）に触媒されるグリコシルアクセプター７のグリコシル化（Ｊｉａｎｇら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、５８：８８３３〜８８４２、２００２）により、グリコシド１０が８９％の収率で得られた（以下のスキーム２）。１０の所望のβ−グリコシド結合は１Ｈ  ＮＭＲスペクトルデータ（δ４．５９、ｄ、Ｊ８．５Ｈｚ、Ｈ−１）によって確認された。酢酸中の亜鉛末を用いた処理による１０のＮ−Ｔｒｏｃ保護基の除去、次いで二脂質酸８を用いた、Ｎ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）に促進されるカップリングにより、ヘキサアシル化誘導体１１が６８％の全収率で得られた。リピドＡ模倣体ＪＬ−２６５（２）は、化合物１１を、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中での触媒水素化による包括的な脱保護に供することによって、８８％の収率で得られた。リピドＡ模倣体ＪＬ−２６６（３）を得るために、まず、最初にＣＨ２Ｃｌ２中のジベンジルＮ，Ｎ−ジイソプロピルホスホルアミダイト［（ＢｎＯ）２ＰＮ（ｉＰｒ）２］及び５−フェニルテトラゾールを用い、次いで亜リン酸中間体のｍ−クロロ過安息香酸（ｍ−ＣＰＢＡ）による０℃での酸化を用いた２ステップ反応によって、化合物１１を９３％の全収率で二リン酸誘導体１２へと変換した。したがって、ＴＨＦ中での触媒水素化による１２の包括的な脱保護により、リピドＡ模倣体ＪＬ−２６６（３）が８９％の収率で得られた。リピドＡ模倣体ＪＬ−２６５（２）及びＪＬ−２６６（３）の構造は、１Ｈ  ＮＭＲ及び高解像度ＭＡＬＤＩ−ＭＳデータによって確認されている。
【化５４】
2020180142.tif 000056
【０１７９】
[0186]薬学的に許容される塩
【０１８０】
[0187]本発明のリピドＡ模倣体には、開示した化合物の薬学的に許容される塩も含まれる。
【０１８１】
[0188]本明細書中で使用する用語「薬学的に許容される塩」とは、生物活性を保持しており、生物学的又は他の様式で望ましくないわけではない、リピドＡ模倣体の塩をいう。本明細書中に開示するリピドＡ模倣体の多くが、アミノ及び／若しくはカルボキシル基又はそれに類似の基が存在することで、酸及び／又は塩基塩を形成することができる。
【０１８２】
[0189]薬学的に許容される塩基付加塩は、無機及び有機塩基から調製することができる。無機塩基に由来する塩には、例のみとして、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、及びマグネシウム塩が含まれる。有機塩基に由来する塩には、それだけに限定されないが、第一級、第二級、及び第三級アミンの塩が含まれる。
【０１８３】
[0190]薬学的に許容される酸付加塩は、無機及び有機酸から調製し得る。無機酸に由来する塩には、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などが含まれる。有機酸に由来する塩には、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、シュウ酸、リンゴ酸、マロン酸、コハク酸、マレイン酸、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ｐ−トルエン−スルホン酸、サリチル酸などが含まれる。
【０１８４】
[0191]組合せ
【０１８５】
[0192]本明細書中に開示するリピドＡ模倣体のいずれかを、互いに組み合わせて、任意選択で１つ又は複数の他の製薬と一緒に使用し得る。リピドＡ模倣体を免疫学的薬剤として使用する場合、これは他の免疫学的薬剤と組み合わせて使用し得る。本明細書中で使用する用語「免疫学的薬剤」とは、免疫賦活性か免疫阻害性かにかかわらず、対象の免疫応答又は免疫系に対して効果を有することができる任意の薬剤（たとえば分子又は化合物）をいう。それだけに限定されないが、免疫学的薬剤には、本明細書中に記載されている又は当分野で知られている、抗原（免疫原及びハプテンがどちらも含まれる）、アジュバント、サイトカイン、又は任意の他の免疫調節分子が含まれる。
【０１８６】
[0193]本発明のリピドＡ模倣体のいずれかを、互いに組み合わせて、他のリピドＡ模倣体若しくは類似体、天然リピドＡ分子、又は他の製薬（たとえば、アジュバント、担体、希釈剤、賦形剤など）と共に使用し得る。とりわけ、製薬は免疫学的薬剤であり得る。
【０１８７】
[0194]組合せは、共有コンジュゲート、非共有コンジュゲート、単純な混合物、すべての要素が同じ若しくは重複する時点で対象内に存在するような使用、又は組合せのすべての要素が、それを投与した対象内で同時に活性であるような使用であり得る。同時活性は同時投与によって達成し得るが、必ずしも同時投与が必要ではない。化合物は、同時に投与しない場合でも、たとえば、長い半減期を有する化合物Ｘを、短い半減期を有する化合物Ｙの前に投与するが、Ｙを投与する際にＸが依然として体内に有効なレベルで存在する場合に、同時に活性であり得る。したがって、同時に活性には、組合せのメンバーの連続投与が含まれる。
【０１８８】
[0195]医薬組成物
【０１８９】
[0196]本発明のリピドＡ模倣体は、医薬組成物中で、薬学的に許容される担体と任意選択で共に配合し得る。
【０１９０】
[0197]一部の実施形態では、医薬組成物は、活性成分として、治療上有効な量の本明細書中に開示するリピドＡ模倣体を含有する。本実施形態において使用する「治療上有効な量」とは、障害若しくはウイルス産生自体を治療、予防、若しくは抑制すること、又はＬＰＳ／リピドＡ媒介性障害によって引き起こされた対象の免疫系の過剰活性化を抑制することを含めた、ＬＰＳ／リピドＡ媒介性の疾患若しくは障害又はＬＰＳ媒介性ウイルス産生に関連する状態又は症状を治療、予防、又は抑制するために有効な量のリピドＡ模倣体をいう。これらの実施形態では、リピドＡ模倣体は典型的にはＬＰＳ／リピドＡ拮抗剤である。任意選択で、医薬組成物には薬学的に許容される担体が含まれる。
【０１９１】
[0198]他の実施形態では、医薬組成物は、第１の構成成分としてリピドＡ模倣体以外の活性薬剤を含み、第２の構成成分として少なくとも１つの本発明のリピドＡ模倣体を含む。医薬組成物の本実施形態では、リピドＡ模倣体をたとえばアジュバントとして含め得る。本実施形態におけるリピドＡ模倣体の機能は多くの場合、補助的な免疫刺激化合物としてであるため、第１の構成成分、すなわち活性薬剤には、それだけに限定されないが、任意の治療剤又は複数の治療剤を含めることができる。一実施形態では、活性薬剤は本明細書中に記載の抗原である。抗原が活性薬剤として含まれる医薬組成物は、本明細書中以降に記載するように、本明細書中でワクチン組成物と呼ぶ。任意選択で、医薬組成物（又はワクチン組成物）には薬学的に許容される担体が含まれる。
【０１９２】
[0199]本明細書中で使用する用語「薬学的に許容される担体」とは、組成物の他の成分と適合性があり、そのレシピエントに対して有害（たとえば毒性）でないという意味で「許容される」担体をいう。典型的には、薬学的に許容される担体は、活性成分及び／又はリピドＡ模倣体の免疫調節活性と干渉しない媒体である。
【０１９３】
[0200]薬学的に許容される担体の一部の例には、決してそれだけに限定されないが、たとえば、水、リン酸緩衝生理食塩水、グリセロール、エタノール、リンゲル液、デキストロース溶液、血清含有溶液、ハンクス液、他の生理的にバランスのとれた水溶液、水中油乳濁液、油状物、油中水乳濁液、エステル、ポリ（エチレン−酢酸ビニル）、乳酸とグリコール酸のコポリマー、ポリ（乳酸）、ゼラチン、コラーゲンマトリックス、多糖、ポリ（Ｄ，Ｌラクチド）、ポリ（リンゴ酸）、ポリ（カプロラクトン）、セルロース、アルブミン、デンプン、カゼイン、デキストラン、ポリエステル、メタクリレート（ｍａｔｈａｃｒｙｌａｔｅ）、ポリウレタン、ポリエチレン、ビニルポリマー、グリコール、サイログロブリン、ヒト血清アルブミンなどのアルブミン、破傷風トキソイド、ポリＬ−リシン、ポリＬ−グルタミン酸などのポリアミノ酸、インフルエンザ、Ｂ型肝炎ウイルスコアタンパク質、その混合物等が含まれる。たとえばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ、２０００、Ｇｅｎｎａｒｏ，Ａ  Ｒ編、ペンシルベニア州Ｅａｔｏｎ：Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．を参照されたい。
【０１９４】
[0201]一部の実施形態では、本明細書中における医薬組成物又はワクチン組成物の担体は、本明細書中以降に記載する、疎水性物質の連続相を含む担体である。
【０１９５】
[0202]医薬組成物は、それだけに限定されないが、塩、緩衝剤、湿潤剤又は乳化剤、及び保存料などの、当分野で知られているさらなる賦形剤、補助剤、又は希釈剤をさらに含み得る。たとえばＰｏｒｔｅｒら編、Ｔｈｅ  Ｍｅｒｃｋ  Ｍａｎｕａｌ、第１９版、Ｍｅｒｃｋ  ａｎｄ  Ｃｏ．、ニュージャージ州Ｒａｈｗａｙ、２０１１を参照されたい。医薬組成物中で使用する場合、塩は、典型的には本明細書中に記載の薬学的に許容される塩であるべきであるが、薬学的に許容されない塩を好都合に使用して薬学的に許容されるその塩を調製してもよく、本発明の範囲から排除されない。
【０１９６】
[0203]本発明の医薬組成物には、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体に加えて、対象において免疫応答をブースト又は増強させることができる、当業者に知られている任意のアジュバント又はアジュバント混合物が任意選択でさらに含まれる。他のアジュバントの例は当業者に周知であり、それだけに限定されないが、非イオン性ブロックポリマー、水酸化アルミニウム又はリン酸アルミニウムアジュバント、及びその混合物が含まれる。また、医薬組成物には、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体に追加のアジュバントとして、他のリピドＡ模倣体又は類似体も含まれ得る。
【０１９７】
[0204]それに加えて又はその代わりに、医薬組成物には、細胞性免疫応答若しくは液性免疫応答のどちらかを優先若しくは阻害するサイトカイン、又はそのようなサイトカインに対する阻害性抗体などの免疫調節物質が含まれ得る。免疫調節物質の他の例には、たとえば、国際公開第２０１４／１５３６３６号に記載のもの（たとえばシクロホスファミド）又は免疫チェックポイント経路阻害剤（たとえばＰＤ−１経路阻害剤）などの、ＤＮＡ複製に干渉する任意の薬剤が含まれる。これら及び免疫調節物質として機能する他の化合物又は薬剤が当分野で知られており、任意の１つ又は複数の免疫調節物質を、本明細書中に記載した組成物中、又はそれと共に使用し得る。免疫調節物質は、本明細書中に記載した組成物の構成成分であるか、又は別個に投与し得る。
【０１９８】
[0205]医薬組成物の一部の実施形態では、構成成分（たとえば、リピドＡ模倣体、抗原など）を送達ビヒクル内に取り込ませ得る。そのような送達ビヒクルには、それだけに限定されないが、リポソーム、リポスフェア、ポリマー、及びミクロスフェア又はマイクロカプセルなどの徐放装置、並びにその組合せが含まれ得る。
【０１９９】
[0206]一実施形態では、これらの送達ビヒクルを使用する場合（たとえばリポソーム）、担体は、本明細書中以降に記載する、疎水性物質の連続相を含む担体である。
【０２００】
[0207]組成物は抗原提示細胞を含んでいてもよく、そのような場合、より有効な提示のために、投与の前に抗原を細胞上にパルシングし得る。
【０２０１】
[0208]一部の実施形態では、医薬組成物は、たとえば、それだけに限定されないが、代謝拮抗剤、ブレオマイシンペプチド抗生物質、ポドフィリンアルカロイド、ビンカアルカロイド、アルキル化剤（たとえばテモゾマイド）、抗生物質、シスプラチン、又はニトロソ尿素からなる群から選択されるものなどの、少なくとも１つの癌化学療法化合物をさらに含み得る。医薬組成物は、たとえば、それだけに限定されないが、ガンマグロブリン、アマンタジン、グアニジン、ヒドロキシベンズイミダゾール、インターフェロン−α、インターフェロン−β、インターフェロン−γ、チオセミカルバゾン（ｔｈｉｏｓｅｍｉｃａｒｂａｒｚｏｎｅ）、メチサゾン、リファンピン、リバビリン（ｒｉｂｖｉｒｉｎ）、ピリミジン類似体、プリン類似体、ホスカルネット、ホスホノ酢酸、アシクロビル、ジデオキシヌクレオシド、又はガンシクロビルから選択されるものなどの、少なくとも１つのウイルス化学療法化合物をさらに含み得る。たとえばＫａｔｚｕｎｇ編、Ｂａｓｉｃ  ａｎｄ  Ｃｌｉｎｉｃａｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ、第５版、Ａｐｐｌｅｔｏｎ  ａｎｄ  Ｌａｎｇｅ、コネチカット州Ｎｏｒｗａｌｋ（１９９２）を参照されたい。
【０２０２】
[0209]上述したように、医薬組成物の特定の実施形態はワクチン組成物である。これらを以下、さらに詳細に記載する。実現可能な場合、医薬組成物について上述した実施形態及び特長が本発明のワクチン組成物に同等に適用されることを理解されたい。同様に、実現可能な場合、本明細書中に記載のワクチン組成物の実施形態及び特長は一般に医薬組成物に適用され得る。
【０２０３】
[0210]ワクチン組成物
【０２０４】
[0211]本明細書中で使用する用語「ワクチン」又は「ワクチン組成物」は互換性があるように使用され得る。
【０２０５】
[0212]本発明のワクチン組成物は、リピドＡ模倣体と一緒に使用するためには、抗原を対象に送達するために適した任意の形態であり得る。本発明によるワクチン組成物は、リピドＡ模倣体と、１つ又は複数の抗原と、たとえばヒトへの投与に許容されるものなどの１つ又は複数の薬学的に許容される賦形剤又は担体との混合物によって等、既知の方法に従って配合することができる。そのような賦形剤、担体、及び配合方法の例は、たとえばＲｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｍａａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ、ペンシルベニア州Ｅａｓｔｏｎ）に見つけ得る。有効な投与に適した薬学的に許容されるワクチン組成物を配合するために、そのような組成物は、典型的には、治療上有効な量の抗原を、本明細書中に開示した１つ又は複数のリピドＡ模倣体と一緒に含有する。
【０２０６】
[0213]本発明によるワクチン組成物は、治療上有効な量で対象に投与し得る。本明細書中で使用する「治療上有効な量」とは、疾患若しくは障害、又はその疾患若しくは障害に関連する状態若しくは症状を治療する、予防する、改善する、又は寛解させるため、治療する対象の生存を延ばすため、及び／或いは液性免疫応答又は細胞性免疫応答などの対象における免疫応答を刺激、誘導、又は増強するために有効な、ワクチン又は活性成分（たとえば抗原）の量を意味する。ワクチン又は活性成分の治療上有効な量の決定は、当業者の能力範囲内に十分ある。治療上有効な量は、対象の状態、重量、性別、及び年齢などの様々な要因に応じて変動し得る。
【０２０７】
[0214]本発明のリピドＡ模倣体と一緒にワクチン組成物内に包含させるための、１つ又は複数の適切な抗原が選択された後、抗原は、当分野で知られている様々な適切な手段によって送達し得る。ワクチン組成物には、たとえば、それだけに限定されないが、リポペプチド類（たとえば、Ｖｉｔｉｅｌｌｏ，Ａ．ら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．、９５：３４１、１９９５）、ポリ（ＤＬ−ラクチド−コ−グリコリド）（「ＰＬＧ」）ミクロスフェアにカプセル封入されたペプチド組成物（たとえば、Ｅｌｄｒｉｄｇｅら、Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２８：２８７〜２９４、１９９１、Ａｌｏｎｓｏら、Ｖａｃｃｉｎｅ、１２：２９９〜３０６、１９９４、Ｊｏｎｅｓら、Ｖａｃｃｉｎｅ、１３：６７５〜６８１、１９９５を参照）、免疫刺激複合体（ＩＳＣＯＭＳ）に含有させたペプチド組成物（たとえば、Ｔａｋａｈａｓｈｉら、Ｎａｔｕｒｅ、３４４：８７３〜８７５、１９９０、Ｈｕら、Ｃｌｉｎ  Ｅｘｐ  Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１１３：２３５〜２４３、１９９８を参照）、多抗原ペプチド系（ＭＡＰ）（たとえば、Ｔａｍ，Ｊ．Ｐ．、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．、８５：５４０９〜５４１３、１９８８、Ｔａｍ，Ｊ．Ｐ．、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ、１９６：１７〜３２、１９９６を参照）、多価ペプチドとして形成されたペプチド、弾道送達系で使用するためのペプチド、典型的に結晶化されたペプチド、ウイルス送達ベクター（Ｐｅｒｋｕｓ，Ｍ．Ｅ．ら、Ｃｏｎｃｅｐｔｓ  ｉｎ  ｖａｃｃｉｎｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、Ｋａｕｆｍａｎｎ，Ｓ．Ｈ．Ｅ．編、ページ３７９、１９９６、Ｃｈａｋｒａｂａｒｔｉ，Ｓ．ら、Ｎａｔｕｒｅ、３２０：５３５、１９８６、Ｈｕ，Ｓ．Ｌ．ら、Ｎａｔｕｒｅ、３２０：５３７、１９８６、Ｋｉｅｎｙ，Ｍ．−Ｐ．ら、ＡＩＤＳ  Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、４：７９０、１９８６、Ｔｏｐ，Ｆ．Ｈ．ら、Ｊ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．、１２４：１４８、１９７１、Ｃｈａｎｄａ，Ｐ．Ｋ．ら、Ｖｉｒｏｌｏｇｙ、１７５：５３５、１９９０）、ウイルス若しくは合成起源の粒子（たとえば、Ｋｏｆｌｅｒ，Ｎ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ．、１９２：２５、１９９６、Ｅｌｄｒｉｄｇｅ，Ｊ．Ｈ．ら、Ｓｅｍ．Ｈｅｍａｔｏｌ．、３０：１６、１９９３、Ｆａｌｏ，Ｌ．Ｄ．，Ｊｒ．ら、Ｎａｔｕｒｅ  Ｍｅｄ．、７：６４９、１９９５）、アジュバント（Ｗａｒｒｅｎ，Ｈ．Ｓ．、Ｖｏｇｅｌ，Ｆ．Ｒ．、及びＣｈｅｄｉｄ，Ｌ．Ａ．、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、４：３６９，１９８６、Ｇｕｐｔａ，Ｒ．Ｋ．ら、Ｖａｃｃｉｎｅ、１１：２９３、１９９３）、リポソーム（Ｒｅｄｄｙ，Ｒ．ら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４８：１５８５、１９９２、Ｒｏｃｋ，Ｋ．Ｌ．、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ、１７：１３１、１９９６）、又は、裸の若しくは粒子吸収ｃＤＮＡ（Ｕｌｍｅｒ，Ｊ．Ｂ．ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２５９：１７４５、１９９３、Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，Ｈ．Ｌ．、Ｈｕｎｔ，Ｌ．Ａ．、及びＷｅｂｓｔｅｒ，Ｒ．Ｇ．、Ｖａｃｃｉｎｅ、１１：９５７、１９９３、Ｓｈｉｖｅｒ，Ｊ．Ｗ．ら、Ｃｏｎｃｅｐｔｓ  ｉｎ  ｖａｃｃｉｎｅ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ、Ｋａｕｆｍ���ｎｎ，Ｓ．Ｈ．Ｅ．編、ページ４２３、１９９６、Ｃｅａｓｅ，Ｋ．Ｂ．及びＢｅｒｚｏｆｓｋｙ，Ｊ．Ａ．、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１２：９２３、１９９４、並びにＥｌｄｒｉｄｇｅ，Ｊ．Ｈ．ら、Ｓｅｍ．Ｈｅｍａｔｏｌ．、３０：１６、１９９３）が含まれ得る。
【０２０８】
[0215]また、本発明のワクチン組成物には、核酸に媒介される様式も包含される。たとえば、本明細書中に記載の抗原の１つ又は複数をコードしているＤＮＡ又はＲＮＡを対象に投与し得る。そのような手法は、たとえば、Ｗｏｌｆｆら、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４７：１４６５（１９９０）、並びに米国特許第５，５８０，８５９号、第５，５８９，４６６号、第５，８０４，５６６号、第５，７３９，１１８号、第５，７３６，５２４号、第５，６７９，６４７号、及び国際公開第９８／０４７２０号に記載されている。ＤＮＡに基づく送達技術の例には、「裸のＤＮＡ」、促進（ブピビカイン、ポリマー、ペプチド媒介性）送達、カチオン性脂質複合体、及び粒子媒介性（「遺伝子銃」）又は圧力媒介性送達（たとえば米国特許第５，９２２，６８７号を参照）が含まれる。
【０２０９】
[0216]ワクチン組成物のさらなる実施形態では、抗原は、ウイルス又は細菌ベクターによって発現され得る。発現ベクターの例には、ワクシニア又は鶏痘などの弱毒化したウイルス宿主が含まれる。この手法は、たとえば本明細書中に記載の抗原をコードしているヌクレオチド配列を発現させるためのベクターとしての、ワクシニアウイルスの使用を含む。急性若しくは慢性的に感染させた宿主内、又は感染していない宿主内に導入した際、組換えワクシニアウイルスは抗原ペプチドを発現し、それによって宿主の免疫応答を誘発する。ワクシニアベクター及び免疫化プロトコルに有用な方法は、たとえば米国特許第４，７２２，８４８号に記載されている。別のベクターはＢＣＧ（バシルカルメットゲラン）である。ＢＣＧベクターはＳｔｏｖｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ、３５１：４５６〜４６０（１９９１）に記載されている。抗原の治療的投与又は免疫化に有用な多種多様の他のベクター、たとえば、アデノ及びアデノ関連ウイルスベクター、レトロウイルスベクター、チフス菌ベクター、解毒した炭疽菌毒素ベクターなどは当業者に明らかであり、本明細書中に記載したワクチン組成物に包含される。
【０２１０】
[0217]また、本発明によるワクチンは、抗原の１つ又は複数を含有する組成物も含有し、抗原は、個々に、又は同じ若しくは異なる抗原の複数コピーを含有する構築体として存在することができる。たとえば、抗原は、同じ又は異なる抗原の数個をコードしている単一の核酸分子（たとえばベクター）として存在することができる。或いは、他の実施形態では、同じ抗原を複数コピー含むホモポリマー、又は様々な異なる抗原のヘテロポリマーを使用し得る。そのようなポリマーは、抗原のコピーを複数含むために増加した免疫学的反応をもたらすという利点を有する場合があり、それにより生じる効果は、特定の抗原の１つ又は複数の抗原決定基を用いて免疫応答を誘導する能力の増強であり得る。組成物は、１つ若しくは複数の抗原の天然に存在する領域を含むことができるか、又は調製した抗原、たとえば組換え若しくは化学合成によるものを含むことができる。
【０２１１】
[0218]また、本発明のワクチンには、１つ又は複数の抗原を免疫系に提示するためのビヒクルとして、樹状細胞（ＤＣ）などの抗原提示細胞（ＡＰＣ）も含めることができる。そのようなワクチン組成物は、樹状細胞の動員及び収集後にｉｎ  ｖｉｔｒｏで作製することができ、樹状細胞のローディングはｉｎ  ｖｉｔｒｏで起こる。たとえば、樹状細胞を１つ若しくは複数の抗原をコードしているＤＮＡ若しくはＲＮＡで形質移入する、又はペプチド抗原を用いてパルシングする。その後、樹状細胞を対象に投与して、ｉｎ  ｖｉｖｏで免疫応答を誘発することができる。
【０２１２】
[0219]本発明によるワクチンは、たとえば注射（たとえば筋肉内、皮内、皮下、静脈内、若しくは腹腔内）、エアロゾル、経口、経鼻、局所、膣内、経皮、経粘膜、又は任意の他の適切な経路などの任意の適切な手段によって投与し得る。ワクチンは、対象の身体内において全身性又は局所的に分布されるように配合し得る。全身性製剤には、注射によって投与するために設計されたもの、並びに経皮、経粘膜、又は経口投与のために設計したものが含まれる。
【０２１３】
[0220]注射による投与などの一部の実施形態では、ワクチンは、油中水乳濁液又は油に基づく担体などの、本明細著中に記載の疎水性物質の連続相を含む担体中で配合し得る。それに加えて又はその代わりに、ワクチン組成物はリポソーム製剤であり得る。より詳細な実施形態では、リポソームは疎水性担体と一緒に使用し得る。また、ワクチンは、ハンクス液、リンゲル液、又は生理食塩水緩衝液中などのように、水溶液としても配合し得る。
【０２１４】
[0221]上記から明らかとなるように、本発明のワクチン組成物は、投与した際に対象において特異的な細胞性免疫応答若しくは液性免疫応答などの免疫応答を刺激することができる組成物を含めた、抗原に関連する疾患又は障害の治療において有用な任意の組成物又は抗原／免疫原送達手段（たとえばウイルスベクター）を包含することを意図する。
【０２１５】
[0222]本発明のワクチン組成物を得るために、リピドＡ模倣体及び抗原を、アジュバント、賦形剤、界面活性剤、免疫賦活性構成成分、及び／又は担体などの様々な材料と合わせることが適切であり得る。アジュバントは、特異的な免疫応答を増強させるためにワクチン組成物に含め得る。所望の投与経路又は対象における所望の分布、たとえば全身性若しくは局所的に応じて、様々な担体を使用し得る。
【０２１６】
[0223]特定の実施形態では、ワクチン組成物は、少なくとも１つの抗原、少なくとも１つの本発明のリピドＡ模倣体、リポソーム、及び疎水性物質の連続相を含む担体を含み得る。さらなる実施形態では、組成物はヘルパーＴエピトープをさらに含み得る。抗原はＢ細胞エピトープであり得るか、それを含み得る。抗原はＣＴＬエピトープであるかそれを含んでいてもよく、ヘルパーＴエピトープと融合していてもよい。
【０２１７】
[0224]したがって、一実施形態では、ワクチン組成物は、１つ又は複数の抗原、リピドＡ模倣体、ヘルパーＴエピトープ、リポソーム、及び疎水性物質の連続相を含む担体を含む。
【０２１８】
[0225]一部の実施形態では、ワクチン組成物は、少なくとも１つのリピドＡ模倣体及び少なくとも１つの抗原を、それだけに限定されないがワクチマックス（ＶａｃｃｉＭａｘ）（商標）及びデポヴァックス（登録商標）プラットフォーム技術を含めた、Ｉｍｍｕｎｏｖａｃｃｉｎｅ，Ｉｎｃのリポソームに基づく及び／又は両親媒性化合物に基づくワクチンアジュバント化プラットフォームと一緒に含むものである（たとえば、米国特許第６，７９３，９２３号及び第７，８２４，６８６号、国際公開第２００２／０３８１７５号、国際公開第２００７／０４１８３２号、国際公開第２００９／０３９６２８号、国際公開第２００９／０４３１６５号、並びに国際公開第２００９／１４６５２３号を参照）。デポヴァックス（登録商標）プラットフォームは、抗原＋アジュバントの制御かつ延長された曝露を免疫系にもたらすワクチン送達製剤である。このプラットフォームは、強力、特異的、かつ持続した免疫応答をもたらすことができ、単一用量の有効性が可能である。
【０２１９】
[0226]ワクチンは、たとえば乳化剤などの追加の構成成分を任意選択でさらに含み得る。ワクチンの例示的な実施形態より詳細な開示及びその構成成分を以下に記載する。
【０２２０】
[0227]抗原
【０２２１】
[0228]一部の実施形態では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体が含まれる本発明の医薬組成物又はワクチン組成物は、１つ又は複数の抗原も含み得る。必ずではないが、典型的には、本明細書中に開示する組成物に抗原が含まれる場合、それはワクチン組成物である。
【０２２２】
[0229]本明細書中で使用する用語「抗原」とは、免疫系の構成成分と特異的に結合することができる任意の物質又は分子をいう。一部の実施形態では、本明細書中の組成物の適切な抗原は、対象において免疫応答を誘導又は強化することができるものである。免疫応答を誘導することができる抗原は免疫原性であると言われ、免疫原とも呼ばれ得る。したがって、本明細書中で使用する用語「抗原」には免疫原が含まれ、これらの用語は、別段に具体的に記述した場合以外は互換性があるように使用され得る。また、本明細書中で使用する用語抗原にはハプテンも含まれる。当分野で理解されるように、ハプテンとは、抗原性である（たとえば、免疫系の構成成分によって結合されることができる）が、免疫原性を供給する何かしらの担体分子と付着していたい限りは免疫原性でない、小分子である。
【０２２３】
[0230]本発明の組成物において有用であり得る抗原には、たとえば、それだけに限定されないが、ポリペプチド、炭水化物、微生物又はその一部、たとえば、生きた、弱毒化した、不活性化した、若しくは死滅した細菌、ウイルス、若しくは原虫、又はその一部が含まれる。抗原は、たとえば、病原性生物剤、毒素、アレルゲン、ペプチド、適切なネイティブ、非ネイティブ、組換え、若しくは変性タンパク質若しくはポリペプチド、又はその断片、或いは対象において免疫応答を誘導又は強化することができるエピトープであり得る。一部の実施形態では、抗原は、たとえばヒト（ヒト抗原）などの動物（動物抗原）に由来するもの、又はそれに実質的に関連している抗原であり得る。
【０２２４】
[0231]本明細書中で使用する用語「由来する」には、それだけに限定されないが、元の供給源（たとえば対象）から単離された若しくは直接得られた抗原、元の供給源からの抗原と同一である若しくはそれに実質的に関連する、合成若しくは組換えにより生成した抗原、又は元の供給源の抗原若しくはその断片から作製した抗原が包含される。本明細書中で使用する用語「実質的に関連する」とは、抗原は化学的、物理的、又は他の手段（たとえば配列修飾）によって改変されていてもよいが、生じる産物は依然として元の抗原又は元の抗原に関連する疾患若しくは障害に対して免疫応答を生じることができることを意味する。
【０２２５】
[0232]また、本明細書中で使用する用語「抗原」には、抗原として機能するポリペプチドをコードしているポリヌクレオチドも含まれる。核酸に基づくワクチン接種戦略が知られており、ここではポリヌクレオチドを含有するワクチン組成物を対象に投与する。ワクチン組成物自体がポリペプチドを含有していたかのように、抗原ポリペプチドが最終的に対象内に存在するように、ポリヌクレオチドによってコードされている抗原ポリペプチドが対象内で発現される。本開示の目的のために、内容が指定する場合、用語「抗原」には、抗原として機能するポリペプチドをコードしている、そのようなポリヌクレオチドが包含される。
【０２２６】
[0233]一部の実施形態では、抗原は、以下に定義する少なくとも１つのＢ細胞エピトープ又はＣＴＬエピトープを含んでおり、対象に適切に投与した場合に、疾患に対して保護的である液性及び／又は細胞性免疫応答を誘導又は強化する分子である。
【０２２７】
[0234]一部の実施形態では、抗原は、癌、感染性疾患、又は嗜癖疾患に関連するものであり得る。
【０２２８】
[0235]本明細書中の組成物において抗原として有用であり得るウイルス又はその一部には、たとえば、それだけに限定されないが、牛痘ウイルス、ワクシニアウイルス、偽牛痘ウイルス、ヘルペスウイルス、ヒトヘルペスウイルス１、ヒトヘルペスウイルス２、サイトメガロウイルス、ヒトアデノウイルスＡ〜Ｆ、ポリオーマウイルス、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、パルボウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、オルトレオウイルス、ロタウイルス、エボラウイルス、パラインフルエンザウイルス、インフルエンザウイルス（たとえば、Ｈ５Ｎ１インフルエンザウイルス、インフルエンザＡ型ウイルス、インフルエンザＢ型ウイルス、インフルエンザＣ型ウイルス）、麻疹ウイルス、流行性耳下腺炎ウイルス、風疹ウイルス、ニューモウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、ヒト呼吸器合胞体ウイルス、狂犬病ウイルス、カリフォルニア脳炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ハンタンウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス、コロナウイルス、エンテロウイルス、ライノウイルス、ポリオウイルス、ノロウイルス、フラビウイルス、デングウイルス、西ナイルウイルス、黄熱ウイルス、及び水痘が含まれる。
【０２２９】
[0236]一実施形態では、本明細書中に開示する組成物は、それを必要としている対象においてインフルエンザウイルス感染症を治療及び／又は予防するために潜在的に有用であり得る抗原を含む。インフルエンザはオルトミクスウイルス科（Ｏｒｔｈｏｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ）の一本鎖ＲＮＡウイルスであり、多くの場合、ウイルス粒子の外側の２つ大きな糖タンパク質、赤血球凝集素（ＨＡ）、及びノイラミニダーゼ（ＮＡ）に基づいて特徴づけられる。インフルエンザＡ型の数々のＨＡ亜型が同定されている（Ｋａｗａｏｋａら、Ｖｉｒｏｌｏｇｙ（１９９０）、１７９：７５９〜７６７、Ｗｅｂｓｔｅｒら、「Ａｎｔｉｇｅｎｉｃ  ｖａｒｉａｔｉｏｎ  ａｍｏｎｇ  ｔｙｐｅ  Ａ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ  ｖｉｒｕｓｅｓ」、ページ１２７〜１６８、Ｐ．Ｐａｌｅｓｅ及びＤ．Ｗ．Ｋｉｎｇｓｂｕｒｙ（編）、Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  ｏｆ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａ  ｖｉｒｕｓｅｓ．、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ、Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ）。一部の実施形態では、抗原はＨＡ又はＮＡ糖タンパク質に由来し得る。
【０２３０】
[0237]別の実施形態では、本明細書中に開示する組成物は、それを必要としている対象においてエボラウイルス感染症を治療及び／又は予防するために潜在的に有用であり得る抗原を含む。
【０２３１】
[0238]別の実施形態では、本明細書中に開示する組成物は、それを必要としている対象においてヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）感染症を治療及び／又は予防するために潜在的に有用であり得る抗原を含む。より詳細な実施形態では、本明細書中に開示する組成物は、ＨＰＶ関連子宮頸癌又はＨＰＶ関連頭頸部癌を治療及び／又は予防するために潜在的に有用であり得る抗原を含む。一部の実施形態では、抗原は配列ＲＡＨＹＮＩＶＴＦを含むペプチドである（ＨＰＶ１６Ｅ７（Ｈ−２Ｄｂ）ペプチド４９−６７、Ｒ９Ｆ、配列番号１）。
【０２３２】
[0239]別の実施形態では、本明細書中に開示する組成物は、それを必要としている対象において呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）感染症を治療及び／又は予防するために潜在的に有用であり得る抗原を含む。より詳細な実施形態では、本明細書中に開示する組成物は、ＲＳＶ感染症に関連する肺疾患を治療及び／又は予防するために潜在的に有用であり得る抗原を含む。
【０２３３】
[0240]本明細書中の組成物において抗原として有用であり得る細菌又はその一部には、たとえば、それだけに限定されないが、炭疽菌（バチルス・アントラシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ））、ブルセラ属（Ｂｒｕｃｅｌｌａ）、百日咳菌（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ  ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、カンジダ属（Ｃａｎｄｉｄａ）、肺炎クラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、オウム病クラミジア（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｐｓｉｔｔａｃｉ）、コレラ、ボツリヌス菌（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ）、コクシジオイデス・イミチス（Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ  ｉｍｍｉｔｉｓ）、クリプトコッカス属（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、ジフテリア、大腸菌Ｏ１５７：Ｈ７、腸管出血性大腸菌、腸内毒素原性大腸菌、インフルエンザ菌（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ  ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）、ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ）、レジオネラ属（Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ）、レプトスピラ属（Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ）、リステリア属（Ｌｉｓｔｅｒｉａ）、髄膜炎菌、肺炎マイコプラズマ（Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、マイコバクテリウム属（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、百日咳、肺炎、サルモネラ属（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、シゲラ属（Ｓｈｉｇｅｌｌａ）、ブドウ球菌属（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、肺炎連鎖球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、及びエンテロコリチカ菌（Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ）が含まれる。
【０２３４】
[0241]一実施形態では、本明細書中に開示する組成物は、それを必要としている対象においてバチルス・アントラシス感染症（すなわち炭疽病）を治療及び／又は予防するために潜在的に有用であり得る抗原を含む。それだけに限定されないが、ワクチンに含有される抗原は、たとえば、炭疽菌組換え保護抗原（ｒＰＡ）（Ｌｉｓｔ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州Ｃａｍｐｂｅｌｌ）又は炭疽菌突然変異体組換え保護抗原（ｍｒＰＡ）（Ｐｆｅｎｅｘ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ）であり得る。
【０２３５】
[0242]本明細書中の組成物において抗原として有用であり得る原虫又はその一部には、たとえば、それだけに限定されないが、マラリアを引き起こすプラスモジウム属（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ）（熱帯熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｆａｌｃｉｐａｒｕｍ）、四日熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｍａｌａｒｉａｅ）、三日熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｖｉｖａｘ）、卵形マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｏｖａｌｅ）、又は二日熱マラリア原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ  ｋｎｏｗｌｅｓｉ））が含まれる。
【０２３６】
[0243]一実施形態では、本明細書中に開示する組成物は、それを必要としている対象において四日熱マラリア原虫感染症（すなわちマラリア）を治療及び／又は予防するために潜在的に有用であり得る抗原を含む。
【０２３７】
[0244]或いは、抗原は、天然に存在する又は合成の毒素又はアレルゲンであり得る。本明細書中で使用する「毒素」とは、疾患若しくは病気を引き起こすことができる、生細胞若しくは生物（たとえば、植物、動物、微生物など）によって産生された任意の物質、又は感染性物質、又は有害作用が可能な組換え若しくは合成分子をいう。毒素は、たとえば、小分子、ペプチド、又はタンパク質であり得る。毒素には、たとえばコカインなどの薬物が含まれる。毒素は抗体によって中和されることができ得る。そのような実施形態では、抗原は、（たとえば血液中で）循環中の毒素と結合してそれを捕捉する抗体の産生を誘発し、それによって、体内の別の領域（たとえば脳）へのその送達を潜在的に防止し得る。
【０２３８】
[0245]本明細書中で使用する「アレルゲン」とは、アレルギーを引き起こすことができる任意の物質をいう。アレルゲンは、それだけに限定されないが、細胞、細胞抽出物、タンパク質、ポリペプチド、ペプチド、多糖、複合多糖、多糖及び他の分子のペプチド及び非ペプチド模倣体、小分子、脂質、糖脂質、並びに、植物、動物、真菌、昆虫、食品、薬物、粉塵、及びダニの炭水化物に由来し得る。アレルゲンには、それだけに限定されないが、環境的空中アレルゲン、植物花粉（たとえばブタクサ／枯草熱）、雑草花粉アレルゲン、草花粉アレルゲン、セイバンモロコシ、樹木花粉アレルゲン、ライグラス、クモ類アレルゲン（たとえばハウスダストダニアレルゲン）、貯蔵庫ダニアレルゲン、スギ花粉／枯草熱、カビ／真菌胞子アレルゲン、動物アレルゲン（たとえば、イヌ、モルモット、ハムスター、スナネズミ、ラット、マウスなどのアレルゲン）、食物アレルゲン（たとえば、甲殻類、ナッツ、柑橘果実、小麦粉、コーヒー）、昆虫アレルゲン（たとえば、ノミ、ゴキブリ）、毒液（ハチ目（Ｈｙｍｅｎｏｐｔｅｒａ）、スズメバチ（ｙｅｌｌｏｗ  ｊａｃｋｅｔ）、ミツバチ、ワスプ（ｗａｓｐ）、ホーネット（ｈｏｒｎｅｔ）、フシアリ（ｆｉｒｅ  ａｎｔ））、細菌アレルゲン（たとえば、連鎖球菌抗原、回虫族（Ａｓｃａｒｉｓ）抗原などの寄生生物アレルゲン）、ウイルス抗原、薬物アレルゲン（たとえばペニシリン）、ホルモン（たとえばインスリン）、酵素（たとえばストレプトキナーゼ）、並びに不完全抗原又はハプテンとして作用することができる薬物又は化学薬品（たとえば、酸無水物及びイソシアネート類）が含まれる。
【０２３９】
[0246]ハプテンを本発明の組成物中で使用する場合、これをたとえばタンパク質などの担体と付着させて、ハプテン−担体付加物を形成させ得る。ハプテン−担体付加物は免疫応答を誘発することが可能である一方で、ハプテン自体は典型的には応答を誘発しない。ハプテンの非限定的な例は、アニリン、ウルシオール（ツタウルシの毒素）、ヒドララジン、フルオレセイン、ビオチン、ジゴキシゲニン、及びジニトロフェノールである。
【０２４０】
[0247]別の実施形態では、たとえばアミロイドタンパク質などの循環中の抗原を捕捉することが望ましい場合（たとえばアルツハイマー病）、抗原は疾患に関連す抗原であり得る。したがって、一部の実施形態では、本発明の組成物は、神経変性疾患が抗原の発現に関連している場合、それを必要としている対象において神経変性疾患の治療及び／又は予防において潜在的に有用であり得る抗原を含む。
【０２４１】
[0248]別の実施形態では、抗原は、たとえば国際公開第２００７／０４１８３２号の頁１７〜１９の表１に開示されているペプチド抗原などの、国際公開第２００７／０４１８３２号に開示されている抗原の任意の１つ又は複数であり得る。
【０２４２】
[0249]たとえば、それだけに限定されないが、本明細書中の組成物において抗原として有用であり得るポリペプチド又はその断片には、コレラトキソイド、破傷風トキソイド、ジフテリアトキソイド、Ｂ型肝炎表面抗原、赤血球凝集素（たとえばＨ５Ｎ１組換え赤血球凝集素タンパク質）、炭疽菌組換え保護抗原（Ｌｉｓｔ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州Ｃａｍｐｂｅｌｌ）、炭疽菌突然変異体組換え保護抗原（Ｐｆｅｎｅｘ，Ｉｎｃ．、カリフォルニア州Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ）、ノイラミニダーゼ、インフルエンザＭタンパク質、ＰｆＨＲＰ２、ｐＬＤＨ、アルドラーゼ、ＭＳＰ１、ＭＳＰ２、ＡＭＡ１、Ｄｅｒ−ｐ−１、Ｄｅｒ−ｆ−１、アディポフィリン、ＡＦＰ、ＡＩＭ−２、ＡＲＴ−４、ＢＡＧＥ、α−フェトプロテイン、ＢＣＬ−２、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、ＢＩＮＧ−４、ＣＥＡ、ＣＰＳＦ、ＣＴ、サイクリンＤ１Ｅｐ−ＣＡＭ、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥＬＦ−２、ＦＧＦ−５、Ｇ２５０、ゴナドトロピン放出ホルモン（ＧＮＲＨ）、ＨＥＲ−２、腸管カルボキシルエステラーゼ（ｉＣＥ）、ＩＬ１３Ｒα２、ＭＡＧＥ−１、ＭＡＧＥ−２、ＭＡＧＥ−３、ＭＡＲＴ−１、ＭＡＲＴ−２、Ｍ−ＣＳＦ、ＭＤＭ−２、ＭＭＰ−２、ＭＵＣ−１、ＮＹ−ＥＯＳ−１、ＭＵＭ−１、ＭＵＭ−２、ＭＵＭ−３、百日咳トキソイドタンパク質、ｐ５３、ＰＢＦ、ＰＲＡＭＥ、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ、ＲＡＧＥ−１、ＲＮＦ４３、ＲＵ１、ＲＵ２ＡＳ、ＳＡＲＴ−１、ＳＡＲＴ−２、ＳＡＲＴ−３、ＳＡＧＥ−１、ＳＣＲＮ  １、ＳＯＸ２、ＳＯＸ１０、ＳＴＥＡＰ１、サバイビン、テロメラーゼ、ＴＧＦβＲＩＩ、ＴＲＡＧ−３、ＴＲＰ−１、ＴＲＰ−２、ＴＥＲＴ、及びＷＴ１に由来するものが含まれる。
【０２４３】
[0250]用語「ポリペプチド」には、長さ（たとえば、少なくとも６、８、１０、１２、１４、１６、１８、若しくは２０個のアミノ酸）又は翻訳後修飾（たとえば、グリコシル化若しくはリン酸化）にかかわらず、任意のアミノ酸の鎖が包含され、たとえば、天然タンパク質、合成又は組換えのポリペプチド及びペプチド、エピトープ、ハイブリッド分子、変異体、相同体、類似体、ペプトイド、ペプチド模倣体などが含まれる。したがって、変異体又は誘導体には、切断及び断片を含めた欠失、挿入及び付加、たとえば保存的置換、部位特異的突然変異体及び対立遺伝子変異体、並びに、１つ又は複数の非アミノアシル基（たとえば、糖、脂質など）がペプチドと共有結合したペプトイド及び翻訳後修飾を含めた修飾体が含まれる。本明細書中で使用する用語「保存的アミノ酸置換」又は「保存的置換」とは、関連する機能の実質的な損失なしに置換を行うことができる、ペプチドの所定の位置における１つのアミノ酸による別のアミノ酸の置換をいう。そのような変化を行う場合、同様のアミノ酸残基の置換は、側鎖置換基の相対的類似度、たとえば、その大きさ、荷電、疎水性、親水性などに基づいて行うことができ、そのような置換は、ルーチン的な試験によってペプチドの機能に対するその効果についてアッセイし得る。保存的置換の具体的かつ非限定的な例には以下の例が含まれる。
【表１】
2020180142.tif 000057
【０２４４】
[0251]抗原配列に対して実質的な同一性を有するポリペプチド又はペプチドを使用し得る。２つの配列は、最適にアラインメントした際に（ギャップを許容）、それらが少なくとも約５０％の配列同一性を共有する場合、又は配列が定義された機能的モチーフを共有する場合に、実質的な同一性を有すると考えられる。代替実施形態では、最適にアラインメントした配列は、それらが指定した領域にわたって少なくとも６０％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％の同一性を共有する場合に、実質的に同一である（すなわち実質的な同一性を有する）と考えられる。用語「同一性」とは、２つのポリペプチド分子間の配列類似度をいう。同一性は、アラインメントした配列中のそれぞれの位置を比較することによって決定することができる。アミノ酸配列間の同一性の度合は、たとえば指定した領域にわたって、配列によって共有される位置での同一又は一致するアミノ酸の数の関数である。同一性を比較するための配列の最適なアラインメントは、ｈｔｔｐ：／／ｃｌｕｓｔａｌｗ．ｇｅｎｏｍｅ．ａｄ．ｊｐで利用可能なＣｌｕｓｔａｌＷプログラム、Ｓｍｉｔｈ及びＷａｔｅｒｍａｎ、１９８１、Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ、２：４８２の局所的相同性アルゴリズム、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ及びＷｕｎｓｃｈ、１９７０、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、４８：４４３の相同性アラインメントアルゴリズム、Ｐｅａｒｓｏｎ及びＬｉｐｍａｎ、１９８８、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、８５：２４４４の類似度検索方法、並びにこれらのアルゴリズムのコンピュータ実施（Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ  Ｇｅｎｅｔｉｃｓソフトウェアパッケージ、Ｇｅｎｅｔｉｃｓ  Ｃｏｍｐｕｔｅｒ  Ｇｒｏｕｐ、米国ウィスコンシン州ＭａｄｉｓｏｎのＧＡＰ、ＢＥＳＴＦＩＴ、ＦＡＳＴＡ、及びＴＦＡＳＴＡなど）を含めた、当分野で知られている様々なアルゴリズムを使用して実施し得る。また、配列同一性は、Ａｌｔｓｃｈｕｌら、１９９０、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、２１５：４０３〜１０に記載のＢＬＡＳＴアルゴリズムを使用しても決定し得る（公開されている初期設定を使用）。たとえば、国立バイオテクノロジー情報センター（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｃｅｎｔｅｒ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ  Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ）から利用可能な「ＢＬＡＳＴ２配列」ツール（インターネットよりｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ＢＬＡＳＴ／ｂｌ２ｓｅｑ／ｗｂｌａｓｔ２．ｃｇｉ）を、「ｂｌａｓｔｐ」プログラムを以下の初期設定で選択して使用し得る：予想閾値１０、ワードサイズ３、マトリックスＢＬＯＳＵＭ６２、ギャップコスト存在１１、伸長１。別の実施形態では、当業者は、任意の所定の配列を容易かつ正しくアラインメントし、単なる目視検査で配列同一性及び／又は相同性を推定することができる。
【０２４５】
[0252]本発明を実施するために使用するポリペプチド及びペプチドは、天然源から単離する、合成である、又は組換え生成したポリペプチドであることができる。ペプチド及びタンパク質は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏで組換えによって発現させることができる。本発明を実施するために使用するペプチド及びポリペプチドは、当分野で知られている任意の方法を使用して作製及び単離することができる。また、本発明を実施するために使用するポリペプチド及びペプチドは、当分野で周知の化学方法を使用して全体的に又は部分的に合成することもできる。たとえば、Ｃａｒｕｔｈｅｒｓ（１９８０）Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．Ｓｙｍｐ．Ｓｅｒ．、２１５〜２２３、Ｈｏｍ（１９８０）、Ｎｕｃｌｅｉｃ  Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．Ｓｙｍｐ．Ｓｅｒ．、２２５〜２３２、Ｂａｎｇａ，Ａ．Ｋ、Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ  Ｐｅｐｔｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ，Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ，Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ  ａｎｄ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（１９９５）、Ｔｅｃｈｎｏｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏ．、ペンシルベニア州Ｌａｎｃａｓｔｅｒを参照されたい。たとえば、ペプチド合成は様々な固相技法を使用して行うことができ（たとえばＲｏｂｅｒｇｅ（１９９５）、Ｓｃｉｅｎｃｅ、２６９：２０２、Ｍｅｒｒｉｆｉｅｌｄ（１９９７）、Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｅｎｚｙｍｏｌ．、２８９：３〜１３を参照）、自動合成は、たとえば、ＡＢＩ４３１Ａペプチド合成機（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して、製造者によって提供される指示に従って達成し得る。
【０２４６】
[0253]一部の実施形態では、抗原は、精製した抗原、たとえば、約２５％〜５０％純粋、約５０％〜約７５％純粋、約７５％〜約８５％純粋、約８５％〜約９０％純粋、約９０％〜約９５％純粋、約９５％〜約９８％純粋、約９８％〜約９９％純粋、又は９９％より高く純粋であり得る。
【０２４７】
[0254]上述のように、用語「抗原」には、抗原として機能するポリペプチドをコードしているポリヌクレオチドも含まれる。本明細書中で使用する用語「ポリヌクレオチド」には、任意の長さ（たとえば、９、１２、１８、２４、３０、６０、１５０、３００、６００、１５００個、若しくはそれより多くのヌクレオチド）又は鎖の数（たとえば一本鎖若しくは二本鎖）のヌクレオチドの鎖が包含される。ポリヌクレオチドは、ＤＮＡ（たとえば、ゲノムＤＮＡ若しくはｃＤＮＡ）又はＲＮＡ（たとえばｍＲＮＡ）或いはその組合せであり得る。これらは天然に存在する又は合成（たとえば化学合成）であり得る。ポリヌクレオチドは、ヌクレオチド鎖中の１つ若しくは複数の窒素塩基、五炭糖、又はリン酸基の修飾を含有し得ることが企図される。そのような修飾は当分野で周知であり、たとえば、ポリヌクレオチドの安定性を改善する目的のものであり得る。
【０２４８】
[0255]ポリヌクレオチドは様々な形態で送達し得る。一部の実施形態では、裸のポリヌクレオチドを、直線形態で、又は発現プラスミドなどのプラスミド内に挿入して使用し得る。他の実施形態では、ウイルス又は細菌ベクターなどの生きたベクターを使用し得る。
【０２４９】
[0256]ＤＮＡのＲＮＡへの転写及び／又はＲＮＡのポリペプチドへの翻訳を助ける１つ又は複数の調節配列が存在し得る。一部の例、たとえば、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）分子であるポリヌクレオチドの場合では、転写プロセスに関連する調節配列（たとえばプロモーター）は必要なく、タンパク質発現はプロモーターの非存在下で達成され得る。当業者は、状況の必要性に応じて適切な調節配列を含めることができる。
【０２５０】
[0257]一部の実施形態では、ポリヌクレオチドは発現カセット中に存在し、発現カセット中で、ポリヌクレオチドは、本発明の組成物を投与する対象内でポリヌクレオチドが発現されることを許可する調節配列と作動可能に連結している。発現カセットの選択は、組成物を投与する対象及び発現されたポリペプチドに望ましい特長に依存する。
【０２５１】
[0258]典型的には、発現カセットには、対象内で機能的であり、構成的又は誘導性であることができるプロモーターと、リボソーム結合部位と、必要な場合は開始コドン（ＡＴＧ）と、目的のポリペプチドをコードしているポリヌクレオチドと、ストップコドンと、任意選択で３’末端領域（翻訳及び／又は転写ターミネーター）とが含まれる。シグナルペプチドをコードしている領域などの付加配列が含まれ得る。目的のポリペプチドをコードしているポリヌクレオチドは、発現カセット中の他の調節配列のいずれかと相同的又は非相同的であり得る。シグナルペプチドをコードしている領域などの、目的のポリペプチドと一緒に発現させる配列は、典型的には発現させるタンパク質をコードしているポリヌクレオチドに隣接した位置にあり、正しい読み枠で配置されている。発現させるタンパク質単独、又は発現させる任意の他の配列（たとえばシグナルペプチド）を一緒にコードしているポリヌクレオチドによって構成されるオープンリーディングフレームは、転写及び翻訳が組成物を投与する対象において起こるように、プロモーターの制御下に置かれる。
【０２５２】
[0259]本明細書中に記載の組成物を用いた単一治療において使用する抗原の量は、抗原の種類及び対象の特徴（たとえば、大きさ、重量、年齢、性別など）に応じて変動し得る。当業者は、必要以上の実験を行わずに、特定の応用において使用するための抗原の有効量を決定できるであろう。本明細書中で使用する用語「有効量」とは、必要な用量及び期間で所望の結果を達成するために有効な量を意味する。
【０２５３】
[0260]癌関連抗原
【０２５４】
[0261]一部の実施形態では、抗原は、癌若しくは腫瘍関連タンパク質又はその断片であり得る。多くの癌又は腫瘍関連タンパク質が当分野で知られている。それだけに限定されないが、抗原は膜表面結合癌関連タンパク質からのものであり得る。表面結合癌関連タンパク質（又はその抗原）は、抗体によって認識される能力を有し得る。
【０２５５】
[0262]一部の実施形態では、癌はウイルスなどの病原体によって引き起こされ得る。癌の発生に関連づけられているウイルスは当業者に知られており、それだけに限定されないが、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、ジョン・カニンガムウイルス（ＪＣＶ）、ヒトヘルペスウイルス８、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、メルケル細胞ポリオーマウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、及びヒトＴ細胞白血病ウイルス−１が含まれる。したがって、一実施形態では、本明細書中に開示する組成物は、癌の発生に関連づけられているウイルスに関連する抗原を含み得る。
【０２５６】
[0263]特定の実施形態では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体が含まれる本発明の医薬組成物又はワクチン組成物は、１つ又は複数のサバイビン抗原を含み得る。
【０２５７】
[0264]アポトーシス反復含有５のバキュロウイルス阻害剤（ＢＩＲＣ５）とも呼ばれるサバイビンは、アポトーシスの負の調節に関与しているタンパク質である。これは、アポトーシスタンパク質阻害剤（ＩＡＰ）のファミリーのメンバーとして分類されている。サバイビンは、単一のＢＩＲモチーフとＲＩＮＧフィンガーの代わりに高い荷電のカルボキシ末端コイル領域とを含有する、１６．５ｋＤａの細胞質タンパク質である。サバイビンをコードしている遺伝子は、エフェクター細胞プロテアーゼ受容体−１（ＥＰＲ−１）の配列とほぼ同一であるが、反対方向に配向されている。サバイビンのコード配列（ヒト（ｈｏｍｏ  ｓａｐｉｅｎｓ））の長さは、ストップコドンを含めて４２９個のヌクレオチドである（配列番号２）。コードされているタンパク質サバイビン（ヒト）の長さは１４２個のアミノ酸である（配列番号３）。
【０２５８】
[0265]サバイビンタンパク質はカスパーゼ活性化を阻害するように機能し、それによってアポトーシス又はプログラム細胞死の負の調節がもたらされることが想定されている。この機能と一貫して、サバイビンは、多くの種類の癌において決まって上方調節されているが、正常組織中ではされていないトップクラスの遺伝子の１つとして同定されている（たとえば、Ａｌｔｉｅｒｉら、Ｌａｂ  Ｉｎｖｅｓｔ、７９：１３２７〜１３３３、１９９９及び米国特許第６，２４５，５２３号を参照）。したがって、この事実により癌細胞が標的とされる一方で正常細胞は標的とされないため、サバイビンが癌治療の理想的な標的となる。実際、サバイビンはヒト癌の大部分を含めた多くの腫瘍の種類で高度に発現されており、予後的価値が報告されている。
【０２５９】
[0266]一部の実施形態では、本発明のワクチンは１つ又は複数のサバイビン抗原を含み得る。本明細書中で使用する用語「サバイビン抗原」には、サバイビンタンパク質又はその断片に由来する任意のペプチド、ポリペプチド、又はその変異体（たとえばサバイビンペプチド変異体）が包含される。また、用語「サバイビン抗原」には、本明細書中に記載のサバイビンペプチド、サバイビンペプチド変異体、又はサバイビンペプチド機能的等価物をコードしているポリヌクレオチドも包含される。ポリヌクレオチドは、ＤＮＡ（たとえば、ゲノムＤＮＡ若しくはｃＤＮＡ）又はＲＮＡ（たとえばｍＲＮＡ）或いはその組合せであり得る。これらは天然に存在する又は合成（たとえば化学合成）であり得る。ポリヌクレオチドは、ヌクレオチド鎖中の１つ若しくは複数の窒素塩基、五炭糖、又はリン酸基の修飾を含有し得ることが企図される。そのような修飾は当分野で周知であり、たとえば、ポリヌクレオチドの安定性を改善する目的のものであり得る。
【０２６０】
[0267]一実施形態では、サバイビン抗原は、完全長サバイビンポリペプチド又は完全長サバイビンポリペプチドをコードしている核酸を含み得る。或いは、サバイビン抗原は、サバイビンタンパク質の任意の長さの断片を含むサバイビンペプチドであり得る。例示的な実施形態には、少なくとも５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０個のアミノ酸残基を含むサバイビンペプチドが含まれる。具体的な実施形態では、サバイビンペプチドは、サバイビンタンパク質（たとえば配列番号３）のそれぞれ７、８、９、１０、１１個の連続するアミノ酸残基からなる、ヘプタペプチド、オクタペプチド、ノナペプチド、デカペプチド、又はウンデカペプチドからなる。サバイビン抗原の特定の実施形態には、約９又は１０個のアミノ酸のサバイビンペプチドが含まれる。
【０２６１】
[0268]また、本発明のサバイビン抗原には、サバイビンペプチドの変異体及び機能的等価物も包含される。サバイビンペプチドの変異体又は機能的等価物には、１つ若しくは複数のアミノ酸の置換、欠失、若しくは付加、又はその任意の組合せなどの、サバイビンタンパク質の特定の配列と比較して相違を有するアミノ酸配列を示すペプチドが包含される。相違は、サバイビンタンパク質配列とサバイビンペプチド変異体又はサバイビンペプチド機能的等価物との間の同一性の低下として測定し得る。
【０２６２】
[0269]アミノ酸配列間の同一性は当分野で周知のアルゴリズムを使用して計算し得る。サバイビンペプチド変異体又は機能的等価物は、その全長にわたって、サバイビンタンパク質のペプチド配列と少なくとも７０％同一、たとえば、サバイビンタンパク質のペプチド配列と少なくとも７５％同一、少なくとも８０％同一、少なくとも８５％同一、少なくとも９０％同一、又は少なくとも９５％同一（９６％、９７％、９８％、又は９９％同一が含まれる）である場合に、本発明の「サバイビン抗原」の意味の範囲内にあると考えられる。特定の実施形態では、サバイビンペプチド変異体は、配列番号３の連続するアミノ酸配列と少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％同一である配列を有する。
【０２６３】
[0270]サバイビン抗原が由来することができるサバイビンタンパク質は、タンパク質が発現される任意の動物種からのサバイビンタンパク質である。特定の実施形態はヒトからのサバイビンタンパク質である（配列番号３）。選択されたサバイビンタンパク質の配列に基づいて、サバイビン抗原は、サバイビンタンパク質又はコード核酸の任意の適切な化学処理又は酵素処理によって誘導し得る。或いは、サバイビン抗原は、当業者が精通している任意の慣用のペプチド又は核酸合成手順によって合成し得る。
【０２６４】
[0271]サバイビン抗原（ペプチド又は核酸）は、サバイビンのネイティブ配列である配列を有し得る。或いは、サバイビン抗原は、たとえば本明細書中に記載のサバイビンペプチド変異体又は機能的等価物などのように、１つ又は複数の置換、欠失、又は付加によって改変されたペプチド又は核酸配列であり得る。ペプチドの免疫原性を増加させる、サバイビンペプチドの例示的な手順及び改変には、たとえば、ＨＬＡクラスＩ分子とのペプチド結合を増加させる、アンカー位置に導入されたアミノ酸置換を含む、国際公開第２００４／０６７０２３号に記載のものが含まれる。
【０２６５】
[0272]一実施形態では、サバイビン抗原は、ＭＨＣクラスＩ  ＨＬＡ分子と結合することができる、サバイビンタンパク質に由来する任意のペプチド又はその任意のサバイビンペプチド変異体である。これに沿って、サバイビン抗原は、対象において免疫応答を誘導又は強化することができる任意のサバイビンペプチド又はそのサバイビンペプチド変異体であり得る。
【０２６６】
[0273]一実施形態では、サバイビン抗原は、対象において細胞毒性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）応答を誘発することができるサバイビンタンパク質（配列番号３）からのアミノ酸配列を含むペプチド抗原、又は上記ペプチドをコードしている核酸分子である。
【０２６７】
[0274]一実施形態では、ワクチンは、配列番号３に記載のアミノ酸配列などのサバイビンタンパク質のアミノ酸配列に基づいて、１つ又は複数の合成サバイビンペプチド又はその変異体を含む。
【０２６８】
[0275]サバイビンペプチド、サバイビンペプチド変異体、及びサバイビン機能的等価物、並びにその診断目的及び治療目的、特に癌における使用は、たとえば、国際公開第２００４／０６７０２３号及び国際公開第２００６／０８１８２６号に記載されている。これらの出版物中に開示されている新規ペプチドは、癌患者において細胞毒性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）応答を誘発できることが見いだされている。特に、国際公開第２００４／０６７０２３号では、ＭＨＣクラスＩ  ＨＬＡ分子と結合することによって、広範囲の癌疾患を患っている患者においてｅｘ  ｖｉｖｏ及びｉｎ  ｓｉｔｕのＣＴＬ免疫応答をどちらも誘発することができるＭＨＣクラスＩ制限ペプチドは、サバイビンタンパク質に由来することができることが見いだされている。
【０２６９】
[0276]一実施形態では、本発明のワクチン組成物には、国際公開第２００４／０６７０２３号及び国際公開第２００６／０８１８２６号中に開示されているサバイビンペプチド、サバイビンペプチド変異体、又はサバイビンペプチド機能的等価物の任意の１つ又は複数が含まれ得る。
【０２７０】
[0277]別の実施形態では、本発明のワクチン組成物には、ＨＬＡ−Ａ、ＨＬＡ−Ｂ、又はＨＬＡ−Ｃ分子から選択されるＭＨＣクラスＩ分子のいずれかと結合することができる、サバイビンペプチド、サバイビンペプチド変異体、又はサバイビンペプチド機能的等価物の１つ又は複数が含まれ得る。
【０２７１】
[0278]サバイビンペプチド、サバイビンペプチド変異体、又はサバイビンペプチド機能的等価物が結合し得る例示的なＭＨＣクラスＩ  ＨＬＡ−Ａ分子には、それだけに限定されないが、ＨＬＡ−Ａ１、ＨＬＡ−Ａ２、ＨＬＡ−Ａ３、ＨＬＡ−Ａ９、ＨＬＡ−Ａ１０、ＨＬＡ−Ａ１１、ＨＬＡ−Ａ１９、ＨＬＡ−Ａ２３、ＨＬＡ−Ａ２４、ＨＬＡ−Ａ２５、ＨＬＡ−Ａ２６、ＨＬＡ−Ａ２８、ＨＬＡ−Ａ２９、ＨＬＡ−Ａ３０、ＨＬＡ−Ａ３１、ＨＬＡ−Ａ３２、ＨＬＡ−Ａ３３、ＨＬＡ−Ａ３４、ＨＬＡ−Ａ３６、ＨＬＡ−Ａ４３、ＨＬＡ−Ａ６６、ＨＬＡ−Ａ６８、及びＨＬＡ−Ａ６９が含まれる。
【０２７２】
[0279]サバイビンペプチド、サバイビンペプチド変異体、又はサバイビンペプチド機能的等価物が結合し得る例示的なＭＨＣクラスＩ  ＨＬＡ−Ｂ分子には、それだけに限定されないが、ＨＬＡ−Ｂ５、ＨＬＡ−Ｂ７、ＨＬＡ−Ｂ８、ＨＬＡ−Ｂ１２、ＨＬＡ−Ｂ１３、ＨＬＡ−Ｂ１４、ＨＬＡ−Ｂ１５、ＨＬＡ−Ｂ１６、ＨＬＡ−Ｂ１７、ＨＬＡ−Ｂ１８、ＨＬＡ−Ｂ２１、ＨＬＡ−Ｂ２２、ＨＬＡ−Ｂ２７、ＨＬＡ−Ｂ３５、ＨＬＡ−Ｂ３７、ＨＬＡ−Ｂ３８、ＨＬＡ−Ｂ３９、ＨＬＡ−Ｂ４０、ＨＬＡ−Ｂ４１、ＨＬＡ−Ｂ４２、ＨＬＡ−Ｂ４４、ＨＬＡ−Ｂ４５、ＨＬＡ−Ｂ４６及びＨＬＡ−Ｂ４７が含まれる。
【０２７３】
[0280]サバイビンペプチド、サバイビンペプチド変異体、又はサバイビンペプチド機能的等価物が結合し得る例示的なＭＨＣクラスＩ  ＨＬＡ−Ｃ分子には、それだけに限定されないが、ＨＬＡ−Ｃ１、ＨＬＡ−Ｃ２、ＨＬＡ−Ｃ３、ＨＬＡ−Ｃ４、ＨＬＡ−Ｃ５、ＨＬＡ−Ｃ６、ＨＬＡ−Ｃ７、及びＨＬＡ−Ｃ１６が含まれる。
【０２７４】
[0281]特定の実施形態では、本発明のワクチン組成物は、以下から選択されるサバイビンペプチド抗原の１つ又は複数を含み得る。
ｉ）        ＦＥＥＬＴＬＧＥＦ（配列番号４）      ［ＨＬＡ−Ａ１］
ｉｉ）      ＦＴＥＬＴＬＧＥＦ（配列番号５）      ［ＨＬＡ−Ａ１］
ｉｉｉ）    ＬＴＬＧＥＦＬＫＬ（配列番号６）      ［ＨＬＡ−Ａ２］
ｉｖ）      ＬＭＬＧＥＦＬＫＬ（配列番号７）      ［ＨＬＡ−Ａ２］
ｖ）        ＲＩＳＴＦＫＮＷＰＦ（配列番号８）    ［ＨＬＡ−Ａ３］
ｖｉ）      ＲＩＳＴＦＫＮＷＰＫ（配列番号９）    ［ＨＬＡ−Ａ３］
ｖｉｉ）    ＳＴＦＫＮＷＰＦＬ（配列番号１０）    ［ＨＬＡ−Ａ２４］
ｖｉｉｉ）  ＬＰＰＡＷＱＰＦＬ（配列番号１１）    ［ＨＬＡ−Ｂ７］
【０２７５】
[0282]上に列挙したサバイビンペプチドは、それだけに限定されないが、本発明によって包含される例示的なＭＨＣクラスＩ制限ペプチドを表す。サバイビンペプチドのそれぞれが結合すると考えられている特定のＭＨＣクラスＩ  ＨＬＡ分子を、右側の角括弧内に示す。本発明のワクチンは、これらのバイビンペプチドの１つ又は複数を任意の適切な組合せで含み得る。
【０２７６】
[0283]さらなる実施形態では、本発明のワクチン組成物は、以下に列挙する５つのサバイビンペプチドの任意の１つ又は複数を任意の適切な組合せで含み得る。
ｉ）      ＦＴＥＬＴＬＧＥＦ（配列番号５）      ［ＨＬＡ−Ａ１］
ｉｉ）    ＬＭＬＧＥＦＬＫＬ（配列番号７）      ［ＨＬＡ−Ａ２］
ｉｉｉ）  ＲＩＳＴＦＫＮＷＰＫ（配列番号９）    ［ＨＬＡ−Ａ３］
ｉｖ）    ＳＴＦＫＮＷＰＦＬ（配列番号１０）    ［ＨＬＡ−Ａ２４］
ｖ）      ＬＰＰＡＷＱＰＦＬ（配列番号１１）    ［ＨＬＡ−Ｂ７］
【０２７７】
[0284]特定の実施形態では、本発明の組成物は、上に列挙した５つすべてのサバイビンペプチド抗原を含む。
【０２７８】
[0285]一部の実施形態では、少なくとも１つのサバイビン抗原に加えて、本発明のワクチン組成物は、１つ又は複数の追加の抗原、たとえば本明細書中に記載したものなどを含み得る。
【０２７９】
[0286]ＣＴＬエピトープ及びＢ細胞エピトープ
【０２８０】
[0287]上述したように、一部の実施形態では、抗原は、少なくとも１つのＢ細胞エピトープ又はＣＴＬエピトープを含む分子である。
【０２８１】
[0288]エピトープは、それだけに限定されないが、ペプチド、炭水化物、脂質、糖ペプチド、及び糖脂質を含めた、任意の化学性質のものであり得る。特定の実施形態では、エピトープは、本明細書中に記載の抗原のいずれかに由来するペプチドである。エピトープは、天然に存在するエピトープと同一であり得るか、天然に存在するエピトープの修飾体であり得る。
【０２８２】
[0289]Ｂ細胞エピトープとは、Ｂ細胞及び抗体によって認識されるエピトープである。Ｂ細胞ペプチドエピトープの長さは、典型的には少なくとも５個のアミノ酸、より多くの場合は少なくとも６個のアミノ酸、さらにより多くの場合は少なくとも７又は８個のアミノ酸の長さであり、連続的（「直鎖状」）又は不連続（「コンホメーション」）であってよく、後者は、たとえば、タンパク質の折り畳みにより一次アミノ酸配列の非連続的な部分を物理的に近接させることによって形成される。また、Ｂ細胞エピトープは炭水化物エピトープであってもよい。
【０２８３】
[0290]一実施形態では、本明細書中に記載した組成物の抗原は、液性免疫応答を誘導することができるＢ細胞エピトープであり得るか、それを含み得る。
【０２８４】
[0291]一部の実施形態では、本明細書中に記載した組成物の抗原は、感染性疾患に関連するＢ細胞エピトープであり得るか、それを含み得る。たとえば、抗原は、ウイルス、たとえばインフルエンザウイルス又は呼吸器合胞体ウイルスなどに由来するＢ細胞エピトープであり得るか、それを含み得る。別の実施形態では、Ｂ細胞エピトープは、Ｈ５Ｎ１インフルエンザウイルスの赤血球凝集素糖タンパク質に由来するエピトープであり得る。
【０２８５】
[0292]別の実施形態では、本明細書中に記載した組成物の抗原は、細菌、たとえば百日咳菌又はバチルス・アントラシスなどに由来するＢ細胞エピトープであり得るか、それを含み得る。特定の実施形態では、Ｂ細胞エピトープは、百日咳菌によって産生される百日咳トキソイドタンパク質のエピトープであり得る。別の特定の実施形態では、Ｂ細胞エピトープは、炭疽菌組換え保護抗原（ｒＰＡ）又は炭疽菌突然変異体組換え保護抗原（ｍｒＰＡ）のエピトープであり得る。
【０２８６】
[0293]別の実施形態では、本明細書中に記載した組成物の抗原は、プラスモジウム属のものなどの原虫に由来するＢ細胞エピトープであり得るか、それを含み得る。
【０２８７】
[0294]さらなる実施形態では、組成物は、液性免疫応答を誘導するための抗原としてＢ細胞エピトープの混合物を含み得る。Ｂ細胞エピトープを連結させて単一のポリペプチドを形成し得る。
【０２８８】
[0295]ＣＴＬエピトープとは、細胞毒性Ｔリンパ球によって認識される分子である。ＣＴＬエピトープは、典型的には、抗原提示細胞の表面上にＭＨＣ分子と複合体化して提示される。本明細書中で使用する用語「ＣＴＬエピトープ」とは、抗原（ハプテンが含まれる）の天然ＣＴＬエピトープと実質的に同じである分子（たとえばペプチド）をいう。ＣＴＬエピトープは、その天然の対応物と比較して、１個又は２個のアミノ酸などが改変されていてもよい。別段に記述しない限りは、本明細書中におけるＣＴＬエピトープへの言及は、細胞によって取り込まれ、抗原提示細胞の表面上に提示されることができる、未結合の分子をさす。
【０２８９】
[0296]ＣＴＬエピトープは、典型的には、細胞性免疫応答が起こることができるように、Ｔ細胞受容体による認識を受け入れやすいものであるべきである。ペプチドでは、ＣＴＬエピトープはクラスＩ又はクラスＩＩ  ＭＨＣ分子と相互作用し得る。ＭＨＣクラスＩ分子によって提示されるＣＴＬエピトープは、典型的には８〜１５個のアミノ酸の長さ、より多くの場合は９〜１１個のアミノ酸の長さのペプチドである。ＭＨＣクラスＩＩ分子によって提示されるＣＴＬエピトープは、典型的には５〜２４個のアミノ酸の長さ、より多くの場合は１３〜１７個のアミノ酸の長さのペプチドである。抗原がこれらのサイズよりも大きい場合、それは免疫系によって、ＭＨＣクラスＩ又はＩＩ分子との相互作用により適したサイズの断片へと処理される。したがって、ＣＴＬエピトープは、上述したものよりも大きなペプチドの一部であってもよい。
【０２９０】
[0297]多くのＣＴＬエピトープが知られている。さらなるＣＴＬエピトープを同定するためのいくつかの技法が当分野で認識されている。一般に、それらは、ＣＴＬエピトープを潜在的に提供する分子を調製し、その分子に対する免疫応答を特徴づけることを含む。
【０２９１】
[0298]一実施形態では、本明細書中に記載した組成物の抗原は、ＣＴＬ応答を誘導することができるＣＴＬエピトープであり得るか、それを含み得る。たとえば、抗原は、ＨＰＶなどのウイルスに由来するＣＴＬエピトープであり得る。
【０２９２】
[0299]別の実施形態では、抗原は、ＨＰＶのＥ６又はＥ７タンパク質に由来するＣＴＬエピトープであり得るか、それを含み得る。たとえば、それだけに限定されないが、ＨＰＶのＥ６タンパク質のＣＴＬエピトープはペプチド配列ＴＩＨＤＩＩＬＥＣＶ（Ｔ１０Ｖ）（配列番号１２）を含んでいてもよく、ＨＰＶのＥ７タンパク質のＣＴＬエピトープは、ペプチド配列ＲＡＨＹＮＩＶＴＦ（Ｒ９Ｆ）（配列番号１）、ＹＭＬＤＬＱＰＥＴＴ（Ｙ１０Ｔ）（配列番号１３）、ＬＬＭＧＴＬＧＩＶ（Ｌ９Ｖ）（配列番号１４）、及びＴＬＧＩＶＣＰＩ（Ｔ８１）（配列番号１５）を含んでいてもよい。
【０２９３】
[0300]別の実施形態では、ＣＴＬエピトープは、たとえば本明細書中に記載したサバイビンペプチドの１つ若しくは複数又は黒色腫関連タンパク質などの腫瘍関連タンパク質のエピトープであり得る。一実施形態では、黒色腫関連タンパク質は、組換え技術又は化学合成を含めた様々な方法によって得ることができるチロシン関連タンパク質−２（ＴＲＰ−２）又はｐ５３であり得る。
【０２９４】
[0301]たとえば、それだけに限定されないが、ＴＲＰ−２由来のタンパク質のＣＴＬエピトープは、ペプチド配列ＳＶＹＤＦＦＶＷＬ（Ｓ９Ｌ、配列番号１６）又はＶＹＤＦＦＶＷＬ（Ｖ８Ｌ、配列番号１７）を含み得る。ｐ５３由来のタンパク質のＣＴＬエピトープは、たとえば、ペプチド配列ＫＹＭＣＮＳＳＣＭ（Ｋ９Ｍ、野生型ｐ５３、配列番号１８）、ＫＹＩＣＮＳＳＣＭ（ｍＫ９Ｍ、改変ｐ５３、配列番号１９）、又はＡＫＸＶＡＡＷＴＬＫＡＡＡＫＹＩＣＮＳＳＣＭ（ヘルパーＴエピトープとのｍＫ９Ｍ融合体、配列番号２０）を含み得る。
【０２９５】
[0302]さらなる実施形態では、組成物は、ＣＴＬ応答を誘導するための抗原としてＣＴＬエピトープの混合物を含み得る。ＣＴＬエピトープを連結させて単一のポリペプチドを形成し得る。
【０２９６】
[0303]一部の実施形態では、Ｂ細胞及びＣＴＬエピトープは疾患関連及び／又は疾患特異的エピトープである。そのような疾患には、それだけに限定されないが、本明細書中に既に記載したもののいずれかが含まれる。たとえば、それだけに限定されないが、疾患は、癌（たとえば、乳癌、卵巣癌、前立腺癌、膠芽細胞腫、若しくはびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫など）、感染性疾患（たとえば、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）感染症、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）感染症、インフルエンザウイルス感染症、エボラウイルス感染症、バチルス・アントラシス感染症、若しくは四日熱マラリア原虫感染症によって引き起こされる若しくはそれに関連する疾患など）、又は嗜癖疾患（たとえばコカインに対する嗜癖など）であり得る。
【０２９７】
[0304]ヘルパーＴエピトープ
【０２９８】
[0305]一部の実施形態では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体が含まれる本発明の医薬組成物又はワクチン組成物は、少なくとも１つのヘルパーＴエピトープ又はヘルパーＴ抗原も含み得る。
【０２９９】
[0306]ヘルパーＴエピトープとは、ヘルパーＴ活性を有するアミノ酸（天然又は非天然のアミノ酸）の配列である。ヘルパーＴエピトープはヘルパーＴリンパ球によって認識され、これは、免疫系の能力を確立及び最大化することにおいて重要な役割を果たしており、また、たとえば細胞毒性Ｔリンパ球などの他の免疫細胞の活性化及び指示に関与している。
【０３００】
[0307]ヘルパーＴエピトープは連続的又は不連続のエピトープからなることができる。それゆえ、ヘルパーＴのすべてのアミノ酸が必ずしもエピトープの必要な部分ではない。したがって、ヘルパーＴエピトープの類似体及びセグメントを含めたヘルパーＴエピトープは、免疫応答を増強又は刺激することができる。免疫優性ヘルパーＴエピトープは幅広く多岐にわたるＭＨＣ型を有しており、動物及びヒト集団において広範に反応性がある（Ｃｅｌｉｓら（１９８８）、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４０：１８０８〜１８１５、Ｄｅｍｏｔｚら（１９８９）、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４２：３９４〜４０２、Ｃｈｏｎｇら（１９９２）、Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．、６０：４６４０〜４６４７）。対象ペプチドのヘルパーＴドメインは、約１０〜約５０個のアミノ酸、より詳細には約１０〜約３０個のアミノ酸を有し得る。複数のヘルパーＴエピトープが存在する場合、それぞれのヘルパーＴエピトープは独立して作用する。
【０３０１】
[0308]一部の実施形態では、ヘルパーＴエピトープは、本明細書中に記載の抗原の一部を形成し得る。特に、抗原が十分な大きさのものである場合、これはヘルパーＴエピトープとして機能するエピトープを含有し得る。他の実施形態では、ヘルパーＴエピトープは抗原とは別個の分子である。
【０３０２】
[0309]別の実施形態では、ヘルパーＴエピトープ類似体には、ヘルパーＴエピトープ中に１個〜約１０個のアミノ酸残基の置換、欠失、及び挿入が含まれ得る。ヘルパーＴセグメントは、免疫応答を増強又は刺激するために十分な、ヘルパーＴエピトープの連続的な部分である。ヘルパーＴセグメントの一例は、単一のより長いペプチドに由来する一連の重複ペプチドである。
【０３０３】
[0310]特定の実施形態では、本発明の組成物は、ヘルパーＴエピトープ又は抗原として、安定性を増強するためにアラニン残基がそのアミノ末端に付加された改変破傷風毒素ペプチドＡ１６Ｌ（８３０〜８４４、ＡＱＹＩＫＡＮＳＫＦＩＧＩＴＥＬ（配列番号２１）を含み得る（Ｓｌｉｎｇｌｕｆｆら、Ｃｌｉｎ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．、７：３０１２〜３０２４、２００１）。
【０３０４】
[0311]本組成物において使用し得るヘルパーＴエピトープの他の供給源には、たとえば、Ｂ型肝炎表面抗原ヘルパーＴ細胞エピトープ、百日咳毒素ヘルパーＴ細胞エピトープ、麻疹ウイルスＦタンパク質ヘルパーＴ細胞エピトープ、クラミジア・トラコミチス（Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍｉｔｉｓ）主要外膜タンパク質ヘルパーＴ細胞エピトープ、ジフテリア毒素ヘルパーＴ細胞エピトープ、熱帯熱マラリア原虫スポロゾイト周囲ヘルパーＴ細胞エピトープ、マンソン住血吸虫（Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ  ｍａｎｓｏｎｉ）トリオースリン酸イソメラーゼヘルパーＴ細胞エピトープ、大腸菌ＴｒａＴヘルパーＴ細胞エピトープ、並びにこれらのヘルパーＴエピトープのいずれかの免疫増強性の類似体及びセグメントが含まれる。
【０３０５】
[0312]一部の実施形態では、ヘルパーＴエピトープは普遍的ヘルパーＴエピトープであり得る。本明細書中で使用する普遍的ヘルパーＴエピトープとは、クラスＩＩ（ＣＤ４＋Ｔ細胞）制限様式でＴ細胞の機能を活性化する様式で多数のＭＨＣクラスＩＩ分子と結合する、ペプチド若しくは他の免疫原性分子又はその断片をいう。普遍的ヘルパーＴエピトープの一例は、ペプチド配列ＡＫＸＶＡＡＷＴＬＫＡＡＡ（配列番号２２）（式中、Ｘはシクロヘキシルアラニルであり得る）を含むＰＡＤＲＥ（ｐａｎ−ＤＲエピトープ）である。ＰＡＤＲＥは特異的にＣＤ４＋ヘルパーＴエピトープを有している、すなわち、これはＰＡＤＲＥに特異的なＣＤ４＋ヘルパーＴ応答の誘導を刺激する。
【０３０６】
[0313]既に言及した改変破傷風毒素ペプチドＡ１６Ｌに加えて、破傷風トキソイドは、ＰＡＤＲＥと同様の様式で作用する他のヘルパーＴエピトープを有する。破傷風及びジフテリア毒素はヒトＣＤ４＋細胞に対する普遍的エピトープを有する（Ｄｉｅｔｈｅｌｍ−Ｏｋｉｔａ，Ｂ．Ｍ．ら、Ｊ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓｅａｓｅｓ、１８１：１００１〜１００９、２０００）。別の実施形態では、ヘルパーＴエピトープは、ペプチド配列ＦＮＮＦＴＶＳＦＷＬＲＶＰＫＶＳＡＳＨＬＥ（アミノ酸９４７〜９６７、配列番号２３）を含むＦ２１Ｅなどの破傷風トキソイドペプチドであり得る。
【０３０７】
[0314]特定の実施形態では、ヘルパーＴエピトープは、本発明のワクチン中の１つ又は複数の抗原の少なくとも１つと融合している（たとえば融合ペプチド）。
【０３０８】
[0315]リポソーム及び脂質に基づく粒子又は小胞、及びその製剤
【０３０９】
[0316]一部の実施形態では、本発明の医薬組成物又はワクチン組成物はリポソームを含む。特定の実施形態では、ワクチン組成物が、本明細書中に記載の疎水性物質の連続相を含む担体を含む場合に、リポソームが含まれる。リポソームは、天然細胞膜中にも見つかるバルク脂質分子を用いて配合することができるため、リポソームは、一般に安全に投与することができ、生分解性である。
【０３１０】
[0317]リポソームは、閉じ込められた水性体積を含有する、完全に閉じた脂質二重層膜である。リポソームは、単層膜ベシクル（単一の二重層膜を保有する）であり得るか、又は、それぞれの二重層が水性層によって次の層と隔てられていてもいなくてもよい、多重膜の二重層を特徴とする多重膜小胞であり得る。リポソームの一般的な記述はＧｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ  Ｇ．、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｔｏｄａｙ、１１：８９〜９７、１９９０及びＦｒｅｚａｒｄ，Ｆ．、Ｂｒａｚ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏ．Ｒｅｓ．、３２：１８１〜１８９、１９９９中に見つけることができる。
【０３１１】
[0318]リポソームは、事実上任意の種類の細胞に吸着し、その後、取り込まれている薬剤（たとえば抗原）を放出することができる。或いは、リポソームは標的細胞と融合することができ、そこでリポソームの内容物が標的細胞内に出される。或いは、リポソームは、食作用がある細胞によってエンドサイトーシスを受け得る。
【０３１２】
[0319]また、脂質が連続的な油状媒体中で脂質に基づく粒子又は小胞を形成し得ることも想定される。したがって、一部の実施形態では、本発明の医薬組成物又はワクチン組成物は、たとえば、それだけに限定されないが単層脂質小胞を含み得る。これらの単層脂質小胞は、単独で、又は二重層リポソームと同じ組成物中に一緒に存在し得る。一部の実施形態では、脂質は、単層脂質小胞以外の他の脂質に基づく粒子を形成する。
【０３１３】
[0320]本明細書及び特許請求の範囲内で使用する用語「リポソーム」には、それだけに限定されないが、「ニオソーム」、「トランスファーソーム」、及び「ビロソーム」として当分野で記載されているものを含めた、上述したすべてのそのような小胞構造が包含されることを意図する。使用し得る他の適切なリポソームには、多重膜小胞（ＭＬＶ）、オリゴ層状小胞（ＯＬＶ）、単層膜ベシクル（ＵＶ）、小型単層膜ベシクル（ＳＵＶ）、中型単層膜ベシクル（ＭＵＶ）、大型単層膜ベシクル（ＬＵＶ）、巨大単層膜ベシクル（ＧＵＶ）、多胞体小胞（ＭＶＶ）、逆相蒸発方法によって作製された単横又はオリゴ層状小胞（ＲＥＶ）、逆相蒸発方法によって作製された多重膜小胞（ＭＬＶ−ＲＥＶ）、安定多層小胞（ＳＰＬＶ）、凍結解凍ＭＬＶ（ＦＡＴＭＬＶ）、押し出し方法によって調製された小胞（ＶＥＴ）、フレンチプレスによって調製された小胞（ＦＰＶ）、融合によって調製された小胞（ＦＵＶ）、脱水−再水和小胞（ＤＲＶ）、及びバブルソーム（ＢＳＶ）が含まれる。当業者は、これらのリポソームを調製する技法は当分野で周知であることを理解されよう（たとえばＫｒｅｕｔｅｒ，Ｊ．編、Ｃｏｌｌｏｉｄａｌ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ、第６６巻、Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．、１９９４を参照）。
【０３１４】
[0321]古細菌脂質から作製したリポソームを含めた任意のリポソームを本発明において使用し得るが、リポソームの特定の実施形態は、リポソーム製剤中でリン脂質及び非エステル化コレステロールを使用する。コレステロールはリポソームを安定化するために使用し、リポソームを安定化する任意の他の化合物でコレステロールを置き換えてもよい。他のリポソーム安定化化合物は当業者に知られている。たとえば、飽和リン脂質は、安定性の増加を示す、より高い遷移温度を有するリポソームを生じる。
【０３１５】
[0322]リポソームの調製に使用し得るリン脂質には、たとえば、それだけに限定されないが、ホスホグリセロール、ホスホエタノールアミン、ホスホセリン、ホスホコリン（たとえばＤＯＰＣ、１，２−ジオレオイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホコリン）、及びホスホイノシトールからなる群から選択される少なくとも１つの頭部基を有するものが含まれる。一部の実施形態では、リポソームは、たとえば１０：１ｗ／ｗのＤＯＰＣ：コレステロール比のＤＯＰＣとコレステロールの混合物を使用して調製する。したがって、非エステル化コレステロールもリポソーム製剤中で使用する場合、コレステロールは、リン脂質の重量の約１０％に等しい量で使用し得る。リポソームを安定化するためにコレステロール以外の化合物を使用する場合、当業者は組成物中に必要な量を容易に決定することができるであろう。
【０３１６】
[0323]リポソーム組成物は、たとえば、天然脂質、合成脂質、スフィンゴ脂質、エーテル脂質、ステロール、カルジオリピン、カチオン性脂質、並びにポリ（エチレングリコール）及び他のポリマーで修飾された脂質を使用することによって得られ得る。合成脂質には以下の脂肪酸構成要素が含まれ得る：ラウロイル、ミリストイル、パルミトイル、ステアロイル、アラキドイル、オレオイル、リノレオイル、エルコイル、又はこれらの脂肪酸の組合せ。
【０３１７】
[0324]本明細書中に開示するリピドＡ模倣体又は抗原などの製薬は、リポソームの内部に取り込ませるか、それに付着させることができる。いくつかの異なる薬剤を同じリポソームの内部に取り込ませるか、それに付着させてもよく、又は、異なる薬剤を異なるリポソームと会合させ、リポソームを別個に若しくは一緒に対象に投与してもよい。
【０３１８】
[0325]一部の実施形態では、脂質部分は脂質二重層内に統合されることができるため、脂質含有分子（本明細書中に開示するリピドＡ模倣体の実施形態など）をリポソーム内に取り込ませることができる。したがって、本発明のリピドＡ模倣体は、リポソームの「表面」上に提示させてもよく、又は、それに加えて若しくはその代わりに、リポソーム内にカプセル封入すると同時に脂質二重層内に取り込ませてもよい。
【０３１９】
[0326]一部の実施形態では、１つ又は複数の抗原（たとえばハプテン）を極性脂質に付着させてもよく、立ち代ってこれはリポソーム粒子の一部となる。この場合、リポソームの脂質部分が免疫原性担体として作用し得る。一部の実施形態では、抗原の脂質化は、リポソームへのその付着（又はそれ内への取り込み）を促進する場合があり、立ち代ってこれは抗原の免疫提示を改善し得る。
【０３２０】
[0327]さらなる実施形態では、リポソームには、特定の標的細胞に対して特別な親和性を有する脂質が含まれ得る。たとえば、ラクトシルセラミドは、肝細胞に対して（及びおそらくは肝臓癌細胞に対しても）特異的な親和性を有する。
【０３２１】
[0328]別の実施形態として、本明細書中に包含される医薬組成物又はワクチン組成物は、疎水性担体（たとえば連続的な油状媒体）中に懸濁させた両親媒性化合物を含む、水を実質的に含まない製剤であり得る。そのような組成物は、たとえば、本明細書中に参考として組み込まれている国際公開第２００９／０４３１６５号に記載されている。
【０３２２】
[0329]疎水性物質の連続相を含む担体
【０３２３】
[0330]本発明の医薬組成物又はワクチン組成物は、本明細書中に記載の薬学的に許容される担体を含み得る。
【０３２４】
[0331]一部の実施形態では、担体は、たとえば液体疎水性物質などの疎水性物質の連続相を含む担体である。連続相は、本質的に純粋な疎水性物質又は疎水性物質の混合物であり得る。さらに、担体は、疎水性物質が連続相を構成する限りは、疎水性物質中の水の乳濁液又は疎水性物質の混合物中の水の乳濁液であり得る。一部の実施形態では、これらの種類の担体がアジュバントとしてさらに機能し得ることが可能である。
【０３２５】
[0332]本明細書中に記載した組成物において有用な疎水性物質は、薬学的及び／又は免疫学的に許容されるものである。担体は典型的には液体であるが、大気温で液体でない特定の疎水性物質を、たとえば温めることによって液化してもよく、これらも有用であり得る。
【０３２６】
[0333]油又は油中水乳濁液は、本明細書中に開示する医薬組成物又はワクチン組成物における使用に特に適した担体である。油は薬学的及び／又は免疫学的に許容されるはずである。適切な油には、たとえば、鉱物油（特に、ドラケオール（Ｄｒａｋｅｏｌ）（商標）６ＶＲなどの軽い若しくは低粘度の鉱物油）、植物油（たとえばダイズ油）、堅果油（たとえばピーナッツ油）、又はその混合物が含まれる。したがって、一実施形態では、担体は、植物油、堅果油、又は鉱物油などの疎水性物質である。動物性脂肪及び人工疎水性ポリマー材料、特に大気温で液体であるもの又は比較的容易に液化できるものも使用し得る。
【０３２７】
[0334]一部の実施形態では、疎水性担体は、鉱物油に基づくモデル疎水性担体である不完全フロイントアジュバント（ＩＦＡ）であり得る。
【０３２８】
[0335]別の実施形態では、疎水性担体は、モンタニド（Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ）（商標）ＩＳＡ５１（ＳＥＰＰＩＣ、フランス）として市販されているものなどの、鉱物油溶液中のオレイン酸マンニドであり得る。
【０３２９】
[0336]ワクチンの免疫原性を増強させるために、Ｉｍｍｕｎｏｖａｃｃｉｎｅ  Ｉｎｃ．は、ペプチド又はポリヌクレオチド抗原に対する強力かつ頑強な免疫応答を促進するために設計されたアジュバント化ワクチンプラットフォームを開発している。デポヴァックス（登録商標）（ＤＰＸ）は、細胞性免疫応答（Ｋａｒｋａｄａら、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ、３３（３）：２５０〜２６１、２０１０）及び／又は液性免疫応答を誘導又は強力にするために、任意の抗原又は抗原の混合物を用いて配合することができる油中リポソームの製剤である。ＤＰＸは免疫化の部位で強力なデポーを形成し、これにより免疫系に対する抗原の曝露が延長される。
【０３３０】
[0337]ＤＰＸ中におけるペプチド又はポリヌクレオチド抗原を用いた単一のワクチン接種は、第一世代の乳濁液に基づくワクチンプラットフォームであったワクチマックスと同様、モンタニドＩＳＡ５１  ＶＧ乳濁液などの他の慣用の製剤中における同じ抗原を用いた複数回のワクチン接種と同等又はそれよりも良好な免疫応答をもたらすことが示されている（Ｄａｆｔａｒｉａｎら、Ｊ  Ｔｒａｎｓｌ  Ｍｅｄ、５：２６、２００７、Ｍａｎｓｏｕｒら、Ｊ  Ｔｒａｎｓｌ  Ｍｅｄ、５：２０、２００７）。ＤＰＸ−０９０７と呼ばれる、デポヴァックス（登録商標）に基づくペプチド−ワクチンは乳房、卵巣、及び前立腺癌の患者において第Ｉ相臨床治験が完了しており、これらの進行性の患者において安全性及び免疫原性が実証されている（Ｂｅｒｉｎｓｔｅｉｎら、Ｊ  Ｔｒａｎｓｌ  Ｍｅｄ、１０（１）：１５６、２０１２）。
【０３３１】
[0338]抗原及びアジュバントを含有する水滴を捕捉する油に依存する、油中水乳濁液に基づくワクチンとは異なり、デポヴァックス（登録商標）に基づく製剤は、乳化を必要とせずに、抗原及びアジュバントの油内への直接の取り込みを促進するためにリポソームに依存する。この手法の利点には、（１）そうでなければ通常は水性希釈剤中で最大の溶解度を有する親水性の抗原／アジュバントの、油状希釈剤中での溶解度が増強されること、及び（２）ワクチン投与の厄介な乳化手順が排除されることが含まれる。
【０３３２】
[0339]一部の実施形態では、本明細書中に開示する医薬組成物又はワクチン組成物の疎水性担体は、Ｉｍｍｕｎｏｖａｃｃｉｎｅ，Ｉｎｃのリポソームに基づくアジュバント系、デポヴァックス（登録商標）であり得る。
【０３３３】
[0340]特定の実施形態では、組成物は水を実質的に含まない場合がある（たとえば「無水」）。これらの「無水」組成物の疎水性担体は、水が担体の非連続相中に存在する限りは、それでも少量の水を含有し得る可能性がある。たとえば、組成物の個々の構成成分は、凍結乾燥又は蒸発などの処理によって完全に除去され得ない結合水を有する場合があり、特定の疎水性担体はそれ中に溶解した少量の水を含有する場合がある。一般に、「無水」である本発明の組成物は、たとえば、重量／重量に基づいて、組成物の担体構成成分の全重量の約１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．５％、０．１％、０．０５％、又は０．０１％未満の水を含有する。
【０３３４】
[0341]追加のアジュバント
【０３３５】
[0342]本明細書中に開示する組成物の一部の実施形態では、リピドＡ模倣体は活性成分として（たとえばＬＰＳ／リピドＡ拮抗剤として）存在する。本明細書中に開示する他の組成物では、リピドＡ模倣体は活性成分と共に含まれる追加の構成成分である。後者の実施形態では、リピドＡ模倣体はアジュバントとして作用し得る。これらの実施形態のいずれにおいても、組成物は１つ又は複数の（追加の）アジュバントを含有し得る。
【０３３６】
[0343]多数のアジュバントが記載されており、当業者に知られている。たとえば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ、米国ペンシルベニア州Ｅａｓｔｏｎ、１９８５）及び米国薬局方：国民医薬品集（ＵＳＰ  ２４  ＮＦ１９）、１９９９年出版を参照されたい。
【０３３７】
[0344]例示的なアジュバントには、それだけに限定されないが、ミョウバン、アルミニウムの他の化合物、バチルスカルメット・ゲラン（ＢＣＧ）、タイターマックス（ＴｉｔｅｒＭａｘ）（登録商標）、リビ（Ｒｉｂｉ）（登録商標）、フロイント完全アジュバント（ＦＣＡ）、ＣｐＧ含有オリゴデオキシヌクレオチド（ＣｐＧ  ＯＤＮ）、リポペプチド類、及びポリＩ：Ｃポリヌクレオチドが含まれる。例示的なＣｐＧ  ＯＤＮは５’−ＴＣＣＡＴＧＡＣＧＴＴＣＣＴＧＡＣＧＴＴ−３’（配列番号２４）である。当業者は、標的の種及び有効性に基づいて他の適切なＣｐＧ  ＯＤＮを容易に選択することができる。例示的なリポペプチドには、それだけに限定されないが、Ｐａｍ３Ｃｙｓ−ＳＫＫＫ（ＥＭＣ  Ｍｉｃｒｏｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎｓ、ドイツ）、又はその変異体、相同体、及び類似体が含まれる。Ｐａｍ２リポペプチドファミリーは、Ｐａｍ３リポペプチドファミリーの有効な代替物であることが示されている。
【０３３８】
[0345]一部の実施形態では、医薬組成物又はワクチン組成物は、アジュバントとして、たとえばそれだけに限定されないが２６量体のデオキシイノシン／シトシン合成ポリヌクレオチドなどのポリＩ：Ｃポリヌクレオチドを含み得る。
【０３３９】
[0346]本明細書中で使用する「ポリＩ：Ｃ」又は「ポリＩ：Ｃポリヌクレオチド」とは、それぞれの鎖が少なくとも６個の連続的なイノシン酸若しくはシチジル酸残基、又は任意の順序でイノシン酸及びシチジル酸から選択される少なくとも６個の連続的な残基（たとえば、ＩＩＣＩＩＣ、ＩＣＩＣＩＣ、若しくはＩＩＩＣＣＣ）を含有しており、哺乳動物対象においてインターフェロンなどの少なくとも１つの炎症性サイトカインの産生を誘導又は増強することができる、二本鎖ポリヌクレオチド分子（ＲＮＡ若しくはＤＮＡ又はＤＮＡ及びＲＮＡの組合せ）である。ポリＩ：Ｃポリヌクレオチドは、典型的には、約８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２５、２８、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１５０、２００、２５０、３００、５００、１０００個、又はそれより多くの残基の長さを有する。上限は重要でないと考えられている。ポリＩ：Ｃポリヌクレオチドは、多くの場合、最短で約６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、又は３０個のヌクレオチドの長さ、及び最大で約１０００、５００、３００、２００、１００、９０、８０、７０、６０、５０、４５、又は４０個のヌクレオチドの長さを有する。
【０３４０】
[0347]ポリＩ：Ｃポリヌクレオチドのそれぞれの鎖はイノシン酸若しくはシチジル酸残基のホモポリマーであり得るか、又は、それぞれの鎖はイノシン酸及びシチジル酸残基をどちらも含有するヘテロポリマーであり得る。どちらも場合でも、少なくとも１つの上述の６個のＩ、６個のＣ、又は６個のＩ／Ｃ残基の連続的な領域が存在する限りは、ポリマーは１つ又は複数の非イノシン酸又は非シチジル酸残基（たとえばウリジン）によって中断され得る。典型的には、ポリＩ：Ｃポリヌクレオチドのそれぞれの鎖は、６個のＩ／Ｃ残基あたり１個以下の非Ｉ／Ｃ残基、より詳細には８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、又は３０個のＩ／Ｃ残基あたり１個以下の非Ｉ／Ｃ残基しか含有しない。
【０３４１】
[0348]ポリＩ：Ｃポリヌクレオチド中のイノシン酸若しくはシチジル酸（又は他の）残基は、インターフェロンなどの炎症性サイトカインの産生を促進するポリＩ：Ｃポリヌクレオチドの能力が保持されている限り、当分野で知られているように誘導体化又は修飾し得る。誘導体又は修飾体の非限定的な例には、たとえば、アジド修飾、フルオロ修飾、又はｉｎ  ｖｉｖｏ安定性を増加させるための、天然のリン酸ジエステル結合の代わりにチオエステル（若しくは類似の）結合の使用が含まれる。また、ポリＩ：Ｃポリヌクレオチドは、たとえば、分子を正荷電ポリリシンとカルボキシメチルセルロース又は正荷電合成ペプチドと複合体化することによって、たとえばｉｎ  ｖｉｖｏ分解に対するその耐性を増強させるためにも修飾し得る。
【０３４２】
[0349]存在する場合、ポリＩ：Ｃポリヌクレオチドは、典型的には、組成物中に、約０．００１ｍｇ〜１ｍｇ／組成物単位用量の量で含められる。特定の実施形態では、ポリＩ：Ｃポリヌクレオチドの量は約０．０４ｍｇ／１ｍＬの組成物である。
【０３４３】
[0350]本明細書中に開示する組成物の他の適切なアジュバントは、ＴＬＲ２を活性化する又はその活性を増加させるものである。本明細書中で使用する、ＴＬＲ２を「活性化する」又はその「活性を増加させる」アジュバントには任意のアジュバントが含まれ、一部の実施形態では、ＴＬＲ２作用剤として作用する脂質に基づくアジュバントが含まれる。さらに、ＴＬＲ２の活性化又はその活性の増加には、任意の単量体、ホモ二量体、又はヘテロ二量体の形態でのその活性化が包含され、ＴＬＲ１又はＴＬＲ６とのヘテロ二量体としてのＴＬＲ２（すなわちＴＬＲ１／２又はＴＬＲ２／６）の活性化が特に含まれる。ＴＬＲ２を活性化させる又はその活性を増加させるアジュバントの例示的な実施形態には、国際公開第２０１３／０４９９４１号に記載のものなどの脂質に基づくアジュバントが含まれる。
【０３４４】
[0351]使用し得るアジュバントのさらなる例には、それだけに限定されないが、ケモカイン、コロニー刺激因子、サイトカイン、１０１８  ＩＳＳ、アルミニウム塩、アンプリボックス（Ａｍｐｌｉｖａｘ）、ＡＳ０４、ＡＳ１５、ＡＢＭ２、アジュマー（Ａｄｊｕｍｅｒ）、アルガムリン（Ａｌｇａｍｍｕｌｉｎ）、ＡＳ０１Ｂ、ＡＳ０２（ＳＢＡＳＡ）、ＡＳＯ２Ａ、ＢＣＧ、カルシトリオール、キトサン、コレラ毒素、ＣＰ−８７０，８９３、ＣｐＧ、ポリＩ：Ｃ、ＣｙａＡ、デトックス（ＤＥＴＯＸ）（Ｒｉｂｉ  Ｉｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ）、臭化ジメチルジオクタデシルアンモニウム（ＤＤＡ）、フタル酸ジブチル（ＤＢＰ）、ｄＳＬＩＭ、ガンマイヌリン、ＧＭ−ＣＳＦ、ＧＭＤＰ、グリセロール、ＩＣ３０、ＩＣ３１、イミキモド、イムファクト（ＩｍｕＦａｃｔ）ＩＭＰ３２１、ＩＳパッチ（ＩＳ  Ｐａｔｃｈ）、イスコム（ＩＳＣＯＭ）、イスコマトリックス（ＩＳＣＯＭＡＴＲＩＸ）、ジュヴイミューン（ＪｕｖＩｍｍｕｎｅ）、リポバック（ＬｉｐｏＶａｃ）、ＬＰＳ、脂質コアタンパク質、ＭＦ５９、モノホスホリルリピドＡ及びその類似体又は模倣体、モンタニド（商標）ＩＭＳ１３１２、モンタニド（商標）に基づくアジュバント（たとえば、モンタニドＩＳＡ−５１、−５０、及び−７０）、ＯＫ−４３２、ＯＭ−１７４、ＯＭ−１９７−ＭＰ−ＥＣ、オンタック（ＯＮＴＡＫ）、ペプテル（ＰｅｐＴｅｌ）ベクター系、他のパルミトイルに基づく分子、ＰＬＧ微粒子、レシキモド、スクアレン、ＳＬＲ１７２、ＹＦ−１７  ＤＢＣＧ、ＱＳ２１、ＱｕｉｌＡ、Ｐ１００５、ポロキサマー、サポニン、合成ポリヌクレオチド、ザイモサン、百日咳毒素が含まれる。
【０３４５】
[0352]したがって、本明細書中の組成物は、１つ又は複数の（追加の）薬学的に許容されるアジュバントを含み得る。一部の実施形態では、抗原の少なくとも１つはアジュバントの少なくとも１つとカップリングされていてもよい。
【０３４６】
[0353]使用するアジュバントの量は抗原の量及びアジュバントの種類に依存する。当業者は、特定の応用において必要なアジュバントの量を経験的な試験によって容易に決定できるであろう。
【０３４７】
[0354]医薬組成物又はワクチン組成物を調製する方法
【０３４８】
[0355]一般に、医薬組成物を調製する方法は当分野で周知であり、これらの方法のいずれかを、本明細書中に記載した組成物を調製するために用い得る。
【０３４９】
[0356]一部の実施形態では、ワクチン組成物とは、少なくとも１つの抗原、リポソーム、少なくとも１つのリピドＡ模倣体、及び疎水性物質の連続相を含む担体を含むものである。これらの組成物を調製するための例示的な方法は、それだけに限定されないが、本明細書中にさらに記載されている。
【０３５０】
[0357]リポソームを作製する方法は当分野で周知である。たとえば、どちらも既に引用されているＧｒｅｇｏｒｉａｄｉｓ（１９９０）及びＦｒｅｚａｒｄ（１９９９）を参照されたい。リポソームを作製する任意の適切な方法を本発明の実施において使用し得るか、又はリポソームを市販の供給源から入手し得る。リポソーム、典型的には、脂質二重層を形成するリポソーム構成成分（たとえばリン脂質及びコレステロール）を、純水又は水に溶かした１つ若しくは複数の構成成分の溶液、たとえば、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、無リン酸生理食塩水、若しくは任意の他の生理的に適合性のある水溶液である、水溶液で水和することによって調製する。
【０３５１】
[0358]一実施形態では、リン脂質（たとえばホスホリポン（Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｏｎ）（商標）９０Ｇ）又はＤＯＰＣ及びコレステロールなどの、リポソーム構成成分又はリポソーム構成成分の混合物は、     クロロホルム及びメタノール又はｔｅｒｔ−ブタノールの混合物などの有機溶媒に溶かし、次いで濾過（たとえばＰＴＦＥ０．２μｍフィルター）及び乾燥（たとえば回転蒸発による）を行って、溶媒を除去し得る。
【０３５２】
[0359]生じた脂質混合物の水和は、たとえば、脂質混合物を水溶液内に注入するか、又は脂質混合物及び水溶液を超音波処理することによって達成し得る。リポソームの形成中、リポソーム構成成分は、リポソーム構成成分を水和する水溶液の体積を取り囲んで、単一の二重層（単層膜）又は複数の二重層（多重膜）を形成する。
【０３５３】
[0360]一部の実施形態では、その後、リポソームを凍結乾燥又は凍結乾燥などによって脱水する。
【０３５４】
[0361]リポソームを、連続的な疎水性相を含む担体などの適切な担体と合わせる。これは様々な方法で行うことができる。
【０３５５】
[0362]担体が疎水性物質又は疎水性物質の混合物のみで構成されている場合（たとえば１００％鉱物油の担体を使用）、リポソームを単純に疎水性物質と混合し得るか、又は複数の疎水性物質が存在する場合は、その任意の１つ若しくは組合せと混合し得る。
【０３５６】
[0363]その代わりに疎水性物質の連続相を含む担体が不連続の水性相を含有する場合、担体は、典型的には、油中水乳濁液などの疎水性相中の水性相の乳濁液の形態をとる。そのような組成物は、乳濁液を安定化させ、リポソームの均一な分布を促進するために、乳化剤を含有し得る。この観点から、担体中でのリポソームの均一な分布を促進する目的で、乳化剤は無水担体を使用した場合でも有用であり得る。典型的な乳化剤には、オレイン酸マンニド（アルラセル（Ａｒｌａｃｅｌ）（登録商標）Ａ）、レシチン（たとえばＳ１００レシチン）、リン脂質、ツイーン（Ｔｗｅｅｎ）（登録商標）８０、並びにスパン（Ｓｐａｎ）（登録商標）２０、８０、８３、及び８５が含まれる。典型的には、疎水性物質対乳化剤の体積比（ｖ／ｖ）は約５：１〜約１５：１の範囲内にある。一実施形態では、疎水性物質対乳化剤の体積比（ｖ／ｖ）は約１０：１である。
【０３５７】
[0364]リポソームは、完成した乳濁液に加えてもよく、又は乳化の前に水性相若しくは疎水性相のどちらか中に存在していてもよい。
【０３５８】
[0365]本明細著中に記載の抗原（複数可）は、配合プロセスの様々な異なる段階で導入し得る。複数の種類の抗原を組成物内に取り込ませ得る。本セクションで使用する用語「抗原」とは、任意の抗原を本発明のワクチン組成物中で配合し得ることを記載するために一般的に使用する。用語「抗原」には、単数形「抗原（ａｎｔｉｇｅｎ）」及び複数形「複数の抗原（ａｎｔｉｇｅｎｓ）」がどちらも包含される。すべての抗原がワクチン組成物内に同じ方法で導入されている必要はない。
【０３５９】
[0366]一部の実施形態では、抗原は、リポソームの脂質二重層を形成するために使用する構成成分（たとえばリン脂質（複数可）及びコレステロール）を水和するために使用する水溶液中に存在する。この場合、抗原はリポソーム内にカプセル封入され、その水性内部に存在する。生じたリポソームを洗浄又は乾燥せず、疎水性物質の連続相を含む担体と最終的に混合される残留水溶液が存在する場合は、最終産物中のリポソームの外側に追加の抗原が存在し得る可能性がある。関連する技法では、抗原は、水溶液を用いた水和の前に、リポソームの脂質二重層を形成するために使用する構成成分と混合し得る。また、抗原は、事前に形成されたリポソームに加えてもよく、その場合、抗原はリポソーム内に能動的にローディングするかリポソームの表面に結合させてもよく、又は、抗原はリポソームの外部に留まっていてもよい。そのような実施形態では、抗原を加える前に、事前に形成されたリポソームは空のリポソーム（たとえば、カプセル封入された抗原若しくはリピドＡ模倣体を含有しない）であり得るか、又は、事前に形成されたリポソームは、リポソーム内に取り込まれた若しくはそれと会合させたリピドＡ模倣体を含有し得る。これらのステップは、疎水性物質の連続相を含む担体との混合の前に起こり得る。
【０３６０】
[0367]代替手法では、その代わりに、抗原は、担体をリポソームと合わせる前、その間、又はその後に、疎水性物質の連続相を含む担体と混合し得る。担体が乳濁液である場合、抗原は、乳化の前に、水性相又は疎水性相の一方又は両方と混合し得る。或いは、抗原は乳化の後に担体と混合し得る。
【０３６１】
[0368]抗原を担体と合わせる技法は、リポソーム内及び疎水性物質の連続相を含む担体中の両方に抗原が存在するように、上述のリポソーム内への抗原のカプセル封入と一緒に使用し得る。
【０３６２】
[0369]抗原を組成物内に導入する上述の手順は、リピドＡ模倣体及び／又はヘルパーＴエピトープ（ヘルパーＴエピトープが含まれる場合）にも適用される。すなわち、リピドＡ模倣体及びヘルパーＴエピトープ（存在する場合）は、たとえば、（１）リポソームの脂質二重層を形成するために使用する構成成分を水和するために使用する水溶液、（２）リポソームの脂質二重層を形成した後の水溶液、（３）リポソームの脂質二重層を形成するために使用する構成成分、又は（４）担体をリポソームと合わせる前、その間、若しくはその後の、疎水性物質の連続相を含む担体の１つ又は複数内に導入し得る。担体が乳濁液である場合、リピドＡ模倣体及びヘルパーＴエピトープ（存在する場合）は、乳化の前、その間、又はその後に、水性相又は疎水性相の一方又は両方と混合し得る。
【０３６３】
[0370]さらなる実施形態では、リポソームが形成される際にリピドＡ模倣体の脂質鎖が脂質二重層内に取り込まれ得る。
【０３６４】
[0371]リピドＡ模倣体及びヘルパーＴエピトープ（存在する場合）を担体と合わせる技法は、リピドＡ模倣体及びヘルパーＴエピトープがリポソームの内部及び／又は疎水性物質の連続相を含む担体中のリポソームの外部に存在するように、これらの構成成分のリポソーム内へのカプセル封入、又はこれらの構成成分のリポソームへの追加と一緒に使用し得る。
【０３６５】
[0372]リピドＡ模倣体及びヘルパーＴエピトープ（存在する場合）は、抗原と一緒に同じ方法ステップで、又は別個に別の方法ステップで、組成物中に取り込ませることができる。たとえば、抗原、リピドＡ模倣体、及びヘルパーＴエピトープはすべて、３つすべての構成成分がリポソーム内にカプセル封入されるように、脂質二重層を形成するリポソーム構成成分を水和するために使用する水溶液中に存在し得る。或いは、抗原及びヘルパーＴエピトープをリポソーム内にカプセル封入させ、リピドＡ模倣体を疎水性物質の連続相を含む担体と混合し得る。さらなる実施形態では、ヘルパーＴエピトープ及び／又はリピドＡ模倣体は、抗原のカプセル封入ステップ後に、リポソーム−抗原の調製物を手動のミニ押出し機に通し、その後、得られたリポソーム−抗原調製物を、たとえばリン酸緩衝液中のリピドＡ模倣体と混合することによって、組成物内に取り込ませ得る。また、ヘルパーＴエピトープ及び／又はリピドＡ模倣体は、ヘルパーＴエピトープ及びリピドＡ模倣体が会合している又はリポソームの外部に留まり得るように、単独で又は抗原と一緒に、リポソームが形成された後に、組成物内に取り込ませる得る。また、ヘルパーＴエピトープ及び／又はリピドＡ模倣体は、抗原を加える前にリポソーム内に取り込ませる又はそれと会合させてもよく、抗原は、事前に形成されたリポソームの外側に留まっている、又はさらなる処理によってリポソーム内にローディング／それと会合される。そのような実施形態では、生じた調製物は凍結乾燥し、その後、疎水性物質の連続相を含む担体で再構成し得る。多くのそのような組合せが可能であることが理解されよう。
【０３６６】
[0373]特定の実施形態では、本明細書中に記載したワクチン組成物は、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）及びコレステロールの１０：１混合物をｔｅｒｔ−ブタノールに溶かすことによって調製し得る。抗原及びリピドＡ模倣体は、それぞれ独立して、ジメチルスルホキシド又は水の別々の溶液に溶かす。その後、抗原をＤＯＰＣ／コレステロール／ｔｅｒｔ−ブタノール混合物に加える。その後、リピドＡ模倣体もＤＯＰＣ／コレステロール／ｔｅｒｔ−ブタノール混合物に加える。ワクチン構成要素の乾燥均質混合物は、溶媒及び水を凍結乾燥によって除去することによって調製する。その後、乾燥混合物を、たとえば、それだけに限定されないが不完全フロイントアジュバント（たとえば鉱物油に基づくモデル疎水性担体）などの疎水性担体に懸濁させる。
【０３６７】
[0374]組成物が１つ又は複数の追加のアジュバントを含有する場合、そのような追加のアジュバントは、抗原について上述した様式と同様に、又は、追加のアジュバント（複数可）に適切であり得るようにそのような方法のいくつかを組み合わせることによって、組成物内に取り込ませることができる。
【０３６８】
[0375]抗原、リピドＡ模倣体、リポソーム、又は連続的な疎水性担体の貯蔵寿命を延長するために、生物活性を維持する又は化学的安定性を改善する、糖、抗酸化剤、又は保存料などの安定化剤をそのような組成物に加え得る。
【０３６９】
[0376]一部の実施形態では、抗原／リピドＡ模倣体の混合物を使用してもよく、その場合、抗原及びリピドＡ模倣体を同時に組成物内に取り込ませる。「抗原／リピドＡ模倣体の混合物」とは、抗原及びリピドＡ模倣体が、少なくとも組成物内への取り込みの前に同じ希釈剤中にある実施形態をいう。抗原／リピドＡ模倣体の混合物中の抗原及びリピドＡ模倣体は、共有結合などによって化学的に結合されていてもよいが、必ずしもそうである必要はない。
【０３７０】
[0377]一部の実施形態では、疎水性物質の連続相を含む担体自体がアジュバント活性を有し得る。不完全フロイントアジュバント及びモンタニド（商標）ＩＳＡ５１ＶＧはアジュバント効果を有する疎水性担体の例である。
【０３７１】
[0378]分子シグナル伝達
【０３７２】
[0379]ＬＰＳ／リピドＡの免疫調節活性に関する分子標的及び作用機構が同定されており、トール様受容体（ＴＬＲ）として知られるタンパク質群が関与している。ＬＰＳ／リピドＡは、ＴＬＲファミリーのメンバーであるトール様受容体４（ＴＬＲ４）によって認識され、これは別のタンパク質ＭＤ−２と会合している。ＴＬＲ４は、偏性のアクセサリータンパク質ＭＤ−２との複合体として発現される（Ａｋｉｒａ，Ｓ．Ｍ．、Ａｄｖ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．、６６７：５９〜６８、２０１０）。結合したリガンドＬＰＳを有するＴＬＲ４／ＭＤ−２の結晶構造が決定されておりＰａｒｋら、Ｎａｔｕｒｅ、４５８：１１９１〜１１９６、２００９）、これは、ＴＬＲ４／ＭＤ−２によるＬＰＳ／リピドＡの認識の分子基盤の直接の証拠を提供している。
【０３７３】
[0380]ＴＬＲ４は、自然免疫及び応免疫応答の発生において重要な役割を果たす。グラム陰性細菌ＬＰＳのＴＬＲ４の活性化は大規模に研究されており、活性化後の分子機構が詳細に説明されている（Ａｋｉｒａ，Ｓ．Ｍ．、Ａｄｖ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．、６６７：５９〜６８、２０１０）。適応免疫応答の誘導を調節する能力により、ワクチンアジュバントの開発に関してＴＬＲ４が魅力的な標的となっている（Ｊｉａｎｇら、Ｃｕｒｒ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．、１０：１４２３〜１４３９、２００３）。実際、ＴＬＲ４作用剤が免疫賦活性ワクチンアジュバントの重要なクラスであることは、十分に認識されている。
【０３７４】
[0381]一部の実施形態では、本発明のリピドＡ模倣体はＴＬＲ４を介してシグナル伝達し得る。実施例１３に示すように、例示的なリピドＡ模倣体ＪＬ−２６５及びＪＬ−２６６は、野生型マウス（Ｃ３Ｈ／ＨｅＯｕＪ）の樹状細胞においてＣＤ４０及びＣＤ８６のどちらの強力な発現の増加ももたらした（図７ａ及び７ｂを参照、白色のバー）。しかし、ＴＬＲ４突然変異体マウス（Ｃ３Ｈ／ＨｅＪ）では、樹状細胞におけるＣＤ４０及びＣＤ８６の誘導は有意に低下していた（図７ａ及び７ｂを参照、濃色のバー）。この発見は、実施例１３においてやはりＴＬＲ４を介してシグナル伝達することが示されているＬＰＳで観察されるものと一致している。ＴＬＲ４を介してシグナル伝達しないことが知られている対照ポリＩ：Ｃアジュバントは、野生型及びＴＬＲ突然変異体マウスのどちらの樹状細胞においても匹敵するＣＤ４０及びＣＤ８６の刺激をもたらした。したがって、実施例１３のデータは、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体の実施形態がＴＬＲ４を介してシグナル伝達できることを実証している。
【０３７５】
[0382]さらに、図７に示すように、ＴＬＲ突然変異体マウスでは、例示的なリピドＡ模倣体ＪＬ−２６５及びＪＬ−２６６はＬＰＳよりもわずかに低いＣＤ４０及びＣＤ８６の誘導をもたらす一方で、野生型マウスでは、どちらのリピドＡ模倣体もＬＰＳと同じ性能を示す。このことは、ＬＰＳはＴＬＲ４より他の受容体を介してシグナル伝達することができる一方で、リピドＡ模倣体はＴＬＲ４を介してのみシグナル伝達し得ることを示している。このことの潜在的な利点は、ＬＰＳと比較して、本発明のリピドＡ模倣体は他の受容体のオフターゲット刺激によって引き起こされる副作用を誘導する可能性がより少ない場合があることである。
【０３７６】
[0383]本明細書中に開示する化合物がリピドＡ模倣体であるということに鑑みて、さらに、ＴＬＲ４を介してシグナル伝達するというその実証されている能力を考慮して、本発明のリピドＡ模倣体は、アジュバント又は他の免疫調節剤として有用であり得る。この文脈において使用する用語「免疫調節剤」とは、生物学的実体に対する免疫応答の活性を誘導する（たとえば誘発する）若しくは強力にすることができる、又は免疫応答を減少させることができる化合物をいう。
【０３７７】
[0384]本明細書中で使用する免疫応答を「誘導又は強化する」ことには、たとえば、本発明の組成物を投与する前の任意の以前の免疫応答状態（又はその欠如）と比較して、宿主の利点となるように免疫応答が開始（たとえば誘発）、刺激、増強、上昇、改善、及び／又は強化される状況が包含される。本明細書中で使用する免疫応答を「減少させる」ことには、たとえば、本発明の組成物を投与する前の任意の免疫応答状態と比較して、宿主の利点となるように免疫応答が低下、減退、減弱、無効化及び／又は終結される状況が包含される。
【０３７８】
[0385]ｉ）潜在的な細菌内毒素拮抗剤としてのリピドＡ模倣体
【０３７９】
[0386]一実施形態では、本明細書中に開示のリピドＡ模倣体は天然リピドＡ又はＬＰＳの拮抗剤として作用してもよく、また、グラム陰性敗血症又は敗血症性ショックなどの、対象の免疫系の過剰活性化を特徴とするＬＰＳ／リピドＡ媒介性の疾患又は障害の治療又は予防において有用であり得る。これらの実施形態では、リピドＡ模倣体自体を本明細書中に記載した医薬組成物中の活性成分として使用し得る。
【０３８０】
[0387]たとえば、一部の実施形態では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体はＬＰＳ／リピドＡ拮抗活性を有し得る。「拮抗活性」とは、リピドＡ模倣体がＬＰＳ又はリピドＡと同じ生物学的受容体（たとえばＴＬＲ４）と結合できる場合があり、したがって、天然ＬＰＳ又はリピドＡの活性を防止又は減退させることができ得ることを意味する。そのような実施形態では、リピドＡ模倣体は、ＬＰＳ／リピドＡ媒介性の疾患又は障害の治療又は予防において有用であり得る。
【０３８１】
[0388]ヒトにおかるグラム陰性細菌感染症の際、ＬＰＳなどの細菌内毒素が血中に放出される。ＬＰＳ又はその有効成分リピドＡに対する急性炎症反応は、単球及びマクロファージからの腫瘍壊死因子−α（ＴＮＦ−α）、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、ＩＬ−６、及びロイコトリエンを含めたサイトカイン及び他の細胞媒介因子の放出をもたらす。極限レベルでは、これらのサイトカイン及び細胞媒介因子は、発熱、ショック、低血圧、及び臓器不全を含めた多くの病態生理学的事象を始動させることが知られている（たとえばＢｏｎｅ，Ｒ．Ｃ．、Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｒｅｖ．、６：５７〜６８、１９９３を参照）。これらの事象は一般に敗血症症候群と呼ばれる。敗血症は致命的であり、米国のみで毎年数万人がそれにより死亡している。
【０３８２】
[0389]ＬＰＳ媒介性障害を制御する１つの戦略は、ＬＰＳ／リピドＡの不活性な競合相手（拮抗剤）を用いて、ＬＰＳ／リピドＡが受容体と結合することを防止することである。本明細書中に開示するリピドＡ模倣体、特に天然リピドＡ分子に対するその構造的類似度を維持しているものは、免疫系による炎症性サイトカインの非制御放出を始動させずに、ＬＰＳ／リピドＡ結合受容体であるＴＬＲ４と結合し得る。ＬＰＳ／リピドＡ拮抗剤として、そのようなリピドＡ模倣体は、ＬＰＳ／リピドＡに誘導されるサイトカインの産生を阻害し、したがって、ＬＰＳ／リピドＡ媒介性の疾患又はグラム陰性細菌感染症から生じる障害を治療又は予防することにおいて利点を潜在的に与え得る。そのような疾患及び障害には、それだけに限定されないが、発熱、全身性炎症、播種性血管内血液凝固、低血圧、急性腎不全、急性呼吸窮迫症候群、肝細胞破壊、及び心不全が含まれ得る。
【０３８３】
[0390]一部の実施形態では、そのようなリピドＡ模倣体は、感染症によって引き起こされる宿主の負担を軽減するために、一般的な抗生物質と併せて投与し得る。
【０３８４】
[0391]本明細書中に開示するリピドＡ模倣体の別の潜在的な応用は、ＬＰＳ媒介性ウイルス産生を抑制することであり得る。ＬＰＳは、単球又はマクロファージ中に存在するウイルスの産生を強力に刺激する（Ｐｏｍｅｒａｎｔｚら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．、１７２（１）：２５３〜２６１、１９９０）。本明細書中に開示するリピドＡ模倣体がＬＰＳ拮抗剤として機能する一部の実施形態では、これらが、ＬＰＳ媒介性のウイルス産生の増殖を阻害することもでき得ることが企図される。そのようなウイルスには、それだけに限定されないが、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、サイトメガロウイルス、単純ヘルペスウイルス、及びインフルエンザウイルスが含まれる。したがって、リピドＡ模倣体は、潜伏性又は活性のウイルス感染症のＬＰＳ媒介性増悪を治療又は予防するための有用な治療剤を提供し得る。
【０３８５】
[0392]ｉｉ）潜在的な免疫賦活剤としてのリピドＡ模倣体
【０３８６】
[0393]別の実施形態では、本明細書中に開示のリピドＡ模倣体は、対象の免疫系を活性化又は刺激することによって、たとえば、それだけに限定されないが感染症及び癌などの広範囲の疾患の治療又は予防における免疫治療剤として使用する潜在性を有し得る。これらの実施形態では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体は、主な治療剤として使用し得るか、又は治療的若しくは予防的ワクチン組成物中にたとえばアジュバントとして含め得る。
【０３８７】
[0394]一部の実施形態では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体は免疫賦活剤として機能し得る。「免疫賦活剤」とは、リピドＡ模倣体が、抗原に対する免疫応答などの免疫応答を誘導する又は強力にする潜在性を有する（たとえばアジュバントとして作用する）ことを意味する。リピドＡ模倣体は、たとえば、抗体の産生を増強することなど液性免疫応答を増強することによって、サイトカインの産生を刺激することによって、及び／又は細胞毒性Ｔリンパ球応答を含めた細胞性免疫応答を刺激することなどによって、その効果を示し得る。また、そのような実施形態では、リピドＡ模倣体は、潜在的により良好な有効性を達成するために、組合せ療法において標的とした疾患を治療するための他の治療剤と共に、対象に有用に投与し得る。たとえば、それだけに限定されないが、リピドＡ模倣体は、抗生物質、抗ウイルス剤、抗炎症剤、及び化学療法剤と組み合わせて使用し得る。
【０３８８】
[0395]細胞性免疫と対比して、液性免疫応答は、Ｂリンパ球系統の細胞（Ｂ細胞）中で産生される分泌抗体によって媒介される。そのような分泌抗体は、たとえば、外来物質、病原体（たとえば、ウイルス、細菌など）、及び／又は癌細胞の表面上にあるものなどの抗原と結合し、破壊のためにそれらに旗を立てる。
【０３８９】
[0396]本明細書中で使用する「液性免疫応答」とは、抗体産生をいい、それに加えて又はその代わりに、たとえば、ヘルパーＴ２（Ｔｈ２）又はヘルパーＴ１７（Ｔｈ１７）細胞の産生及び／又は活性化、サイトカインの産生、アイソタイプスイッチ、親和性成熟、並びに記憶細胞の活性化などの、それに伴う付随プロセスも含まれ得る。また、「液性免疫応答」には、たとえば、毒素の中和、古典的補体活性化、並びに貪食の促進及び病原体の排除などの、抗体のエフェクター機能も含まれ得る。液性免疫応答は多くの場合ＣＤ４＋Ｔｈ２細胞によって助けられ、したがって、この細胞種の活性化又は産生も液性免疫応答の指標であり得る。用語「液性免疫応答」は本明細書中で「抗体応答」又は「抗体免疫応答」と互換性があるように使用される。
【０３９０】
[0397]「抗体」とは、免疫グロブリン遺伝子又は免疫グロブリン遺伝子の断片によって実質的に又は部分的にコードされている１つ又は複数のポリペプチドを含むタンパク質である。認識されている免疫グロブリン遺伝子には、κ、λ、α、γ、δ、ε、及びμ定常領域遺伝子、並びに無数の免疫グロブリン可変領域遺伝子が含まれる。軽鎖はκ又はλのどちらかに分類される。重鎖はγ、μ、α、δ、又はεとして分類され、立ち代ってこれは、免疫グロブリンクラスであるＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、及びＩｇＥをそれぞれ定義する。典型的な免疫グロブリン（抗体）の構造単位は、４つのポリペプチドを含有するタンパク質を含む。それぞれの抗体の構造単位は、それぞれ１本の「軽」鎖及び１本の「重」鎖を有する、２つの同一のポリペプチド鎖対からなる。それぞれの鎖のＮ末端は、抗原認識を主に司っている可変領域を定義する。抗体の構造単位（たとえばＩｇＡ及びＩｇＭクラスのもの）は、互い及び追加のポリペプチド鎖と共に、たとえばＪ鎖ポリペプチドと会合したＩｇＭ五量体として、オリゴマー体へとアセンブルされ得る。
【０３９１】
[0398]抗体は、Ｂリンパ球（Ｂ細胞）と呼ばれる白血球の部分群の、抗原特異的な糖タンパク質産物である。抗原とＢ細胞の表面上に発現された抗体との結合は、Ｂ細胞が活性化され、有糸分裂を受け、最終的には形質細胞へと分化するようにＢ細胞を刺激するこを含む抗体応答を誘導することができ、抗原特異的抗体の合成及び分泌に特殊化されている。
【０３９２】
[0399]Ｂ細胞は免疫応答中の唯一の抗体産生者であり、したがって、有効な液性免疫への主要な要素である。大量の抗体の産生に加え、Ｂ細胞は抗原提示細胞としても作用し、抗原をヘルパーＴ  ＣＤ４又は細胞毒性ＣＤ８＋Ｔ細胞などのＴ細胞に提示することができ、したがって免疫応答を伝播させる。Ｂ細胞及びＴ細胞は適応免疫応答の一部である。たとえばワクチン接種又は天然感染症のいずれかによって誘導された活性免疫応答中、抗原特異的なＢ細胞が活性化され、クローンが拡大される。拡大中、Ｂ細胞はエピトープに対してより高い親和性を有するように進化する。Ｂ細胞の増殖は、活性化ヘルパーＴ細胞によって間接的に誘導することができ、ＴＬＲなどの受容体の刺激によって直接誘導することができる。
【０３９３】
[0400]樹状細胞及びＢ細胞などの抗原提示細胞はワクチン接種部位へと引き寄せられ、ワクチン組成物に含有される抗原及びアジュバントと相互作用することができる。典型的には、アジュバントは、細胞が活性化されるようにそれを刺激し、抗原は標的の青写真を提供する。様々な種類のアジュバントが様々な刺激シグナルを細胞に提供し得る。たとえば、ポリＩ：Ｃ（ＴＬＲ３作用剤）は樹状細胞を活性化することができるが、Ｂ細胞を活性化することはできない。Ｐａｍ３Ｃｙｓ、Ｐａｍ２Ｃｙｓ、及びＦＳＬ−１などのアジュバントは、Ｂ細胞の増殖を活性化及び開始することに特に熟達しており、これは抗体応答の生成を容易にすると予想されている（Ｍｏｙｌｅら、Ｃｕｒｒ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ、２００８、Ｓｏ．、Ｊ  Ｉｍｍｕｎｏｌ、２０１２）。
【０３９４】
[0401]液性免疫応答は、有効な感染性疾患ワクチン（たとえばウイルス又は細菌侵入物に対して保護するため）の一般的な機構の１つである。しかし、液性免疫応答も癌と闘うために有用な場合がある。癌ワクチンは、癌細胞を認識して破壊することができる細胞性免疫応答を生じるように典型的に設計されている一方で、Ｂ細胞媒介性応答は、一部の例では最大の利点のために細胞毒性Ｔ細胞と協同し得る、他の機構を介して癌細胞を標的とし得る。Ｂ細胞媒介性（たとえば液性免疫応答媒介性）の抗腫瘍応答の例には、それだけに限定されないが、以下のものが含まれる。１）腫瘍細胞又は腫瘍化に影響を与える他の細胞上に見つかる表面抗原と結合するＢ細胞によって産生される抗体であって、たとえば、抗体依存性細胞媒介性細胞毒性（ＡＤＣＣ）又は補体結合を介した標的細胞の死滅を誘導し、免疫系によって認識されることができる追加の抗原の放出を潜在的にもたらすことができる抗体、２）腫瘍細胞上の受容体と結合してその刺激を遮断し、その効果を事実上中和する抗体、３）腫瘍又は腫瘍関連細胞によって放出される又はそれに関連する因子と結合して、癌を支持するシグナル伝達又は細胞経路を調節する抗体、及び４）現在は未知である機構によって、細胞内標的と結合して抗腫瘍活性を媒介する抗体が含まれる。
【０３９５】
[0402]抗体応答を評価する一方法は、特定の抗原と反応性のある抗体の力価を測定することである。これは、動物から得られた抗体含有物質の酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）などの、当分野で知られている様々な方法を使用して行い得る。たとえば、特定の抗原と結合する血清抗体の力価は、抗原への曝露の前及び後の両方で、対象において決定し得る。抗原への曝露後の、抗原特異的抗体の力価の統計的に有意な増加は、対象が抗原に対する抗体応答を開始したことを示すであろう。
【０３９６】
[0403]それだけに限定されないが、抗原特異的抗体の存在を検出するために使用し得る他のアッセイには、免疫学的アッセイ（たとえばラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ））、免疫沈降アッセイ、及びタンパク質ブロット（たとえばウエスタンブロット）アッセイ、並びに中和アッセイ（たとえば、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏアッセイにおけるウイルス感染力の中和）が含まれる。
【０３９７】
[0404]本明細書中で使用する用語「細胞性免疫応答」又は「細胞性免疫」（本明細書中で互換性があるように使用される）とは、マクロファージ及びナチュラルキラー細胞の活性化、抗原特異的細胞毒性Ｔリンパ球の産生、並びに／又は抗原に応答した様々なサイトカインの放出を特徴とする免疫応答をいう。細胞毒性Ｔリンパ球は、感染した体性又は腫瘍細胞の死滅を誘導することができるＴリンパ球の部分群（白血球の一種）であり、これらは、ウイルス（若しくは他の病原体）に感染した細胞、又は他の様式で損傷若しくは機能不全となった細胞を死滅させる。
【０３９８】
[0405]ほとんどの細胞毒性Ｔ細胞は、クラスＩ  ＭＨＣ分子と結合した特異的なペプチド抗原を認識することができるＴ細胞受容体を発現する。典型的には、細胞毒性Ｔ細胞はＣＤ８（すなわちＣＤ８＋Ｔ細胞）も発現し、これはクラスＩ  ＭＨＣ分子の一部分に誘引される。この親和性により、抗原特異的活性化中に細胞毒性Ｔ細胞及び標的細胞が密に一緒に結合されて保たれる。
【０３９９】
[0406]細胞性免疫は、たとえば、ウイルス感染細胞、細胞内細菌を有する細胞、及び腫瘍抗原を表示している癌細胞などの、その表面上に外来抗原のエピトープを表示している体細胞を溶解すること、マクロファージ及びナチュラルキラー細胞を活性化して、それらが細胞内病原体を破壊することを可能にすること、並びに、細胞を刺激して、適応免疫応答及び自然免疫応答に関与している他の細胞機能に影響を与える様々なサイトカインを分泌させることができる、抗原特異的細胞毒性Ｔリンパ球（たとえば抗原特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞）を活性化することによって、身体を保護する。
【０４００】
[0407]細胞性免疫は、適応免疫応答、続いて、樹状細胞、Ｂリンパ球、及びより低い程度でマクロファージなどの抗原提示細胞とのその相互作用を介した、細胞による抗原の認識の重要な構成成分であり、たとえば以下の様々な機構によって身体を保護する：
１．ウイルス感染細胞、細胞内細菌を有する細胞、及び腫瘍抗原を表示している癌細胞などの、その表面上に外来抗原のエピトープを表示する体細胞においてアポトーシスを誘導することができる抗原特異的細胞毒性Ｔリンパ球を活性化すること、
２．マクロファージ及びナチュラルキラー細胞を活性化して、それらが細胞内病原体を破壊することを可能にすること、並びに
３．適応免疫応答及び自然免疫応答に関与している他の細胞機能に影響を与える様々なサイトカインを分泌する細胞を刺激すること。
【０４０１】
[0408]細胞性免疫は、ウイルス感染細胞を除去するために最も有効であるが、真菌、原虫、癌、及び細胞内細菌に対する防御にも関与している。これは移植片拒絶においても主要な役割を果たす。
【０４０２】
[0409]細胞性免疫は様々な細胞種の関与を含み、様々な機構によって媒介されるため、ワクチン接種後の免疫の誘導を実証するために、いくつかの方法を使用することができる。これらは、ｉ）特異的抗原提示細胞の検出、ｉｉ）特異的エフェクター細胞及びその機能の検出、並びにｉｉｉ）サイトカインなどの可溶性媒介因子の放出の検出へと広く分類することができる。
【０４０３】
[0410]ｉ）抗原提示細胞：樹状細胞及びＢ細胞（及びより低い程度でマクロファージ）は、Ｔ細胞の増強された活性化を可能にする特殊な免疫賦活性受容体を備えており、プロフェッショナル抗原提示細胞（ＡＰＣ）と呼ばれる。これらの免疫賦活性分子（共刺激分子とも呼ばれる）は、感染症又はワクチン接種後、ＣＤ４及びＣＤ８細胞毒性Ｔ細胞などのエフェクター細胞への抗原提示プロセス中に、これらの細胞上で上方調節される。そのような共刺激分子（ＣＤ４０、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＭＨＣクラスＩ、又はＭＨＣクラスＩＩなど）は、たとえば、これらの分子に向けられた、蛍光色素とコンジュゲートした抗体を、ＡＰＣを特異的に同定する抗体（樹状細胞用のＣＤ１１ｃなど）と共に用いたフローサイトメトリーを使用して、検出することができる。
【０４０４】
[0411]ｉｉ）細胞毒性Ｔ細胞：（Ｔｃ、キラーＴ細胞、又は細胞毒性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）としても知られる）は、ウイルス（及び他の病原体）に感染した細胞、又は腫瘍抗原を発現する細胞の死滅を誘導するＴ細胞の部分群である。これらのＣＴＬは、特定の外来又は異常分子をその表面上に保有する他の細胞を直接攻撃する。そのような細胞毒性の能力は、ｉｎ  ｖｉｔｒｏ細胞溶解性アッセイ（クロム放出アッセイ）を使用して検出することができる。したがって、適応細胞性免疫の誘導は、そのような細胞毒性Ｔ細胞の存在によって実証することができ、ここで、抗原がロードされた標的細胞は、ワクチン接種又は感染症後にｉｎ  ｖｉｖｏで産生される特異的ＣＴＬによって溶解される。
【０４０５】
[0412]ナイーブ細胞毒性Ｔ細胞は、そのＴ細胞受容体（ＴＣＲ）が、ペプチド結合したＭＨＣクラスＩ分子と強力に相互作用した際に活性化される。この親和性は、抗原／ＭＨＣ複合体の種類及び配向に依存し、これにより、ＣＴＬと感染細胞が一緒に結合して保たれる。活性化された後、ＣＴＬはクローン増殖と呼ばれるプロセスを受け、ここでこれは機能性を獲得し、迅速に分裂して、「武装」エフェクター細胞の軍隊が生成される。その後、活性化されたＣＴＬは、そのユニークなＭＨＣクラスＩ＋ペプチドを保有する細胞を探索して身体全体を移動する。このことは、ペプチド−ＭＨＣクラスＩ四量体をフローサイトメトリーアッセイにおいて使用することによって、そのようなＣＴＬをｉｎ  ｖｉｔｒｏで同定するために使用することができる。
【０４０６】
[0413]これらの感染した又は機能不全の体細胞に曝露された際、エフェクターＣＴＬは、標的細胞の形質膜に孔を形成し、イオン及び水を感染細胞内に流入させ、それが破裂又は溶解することを引き起こす細胞毒素である、パーフォリン及びグラニュリシンを放出する。ＣＴＬは、孔を介して細胞に入ってアポトーシス（細胞死）を誘導するセリンプロテアーゼである、グランザイムを放出する。ＣＴＬからのこれらの分子の放出は、ワクチン接種後の細胞性免疫応答の誘導の成功の測度として使用することができる。これは、ＣＴＬを定量的に測定することができる、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）又は酵素結合免疫スポットアッセイ（ＥＬＩＳＰＯＴ）によって行うことができる。ＣＴＬはＩＦＮ−γなどの重要なサイトカインを産生することもできるため、ＩＦＮ−γ産生ＣＤ８細胞の定量的測定は、ＥＬＩＳＰＯＴによって、及びこれらの細胞中の細胞内ＩＦＮ−γのフローサイトメトリー測定によって達成することができる。
【０４０７】
[0414]ＣＤ４＋「ヘルパー」Ｔ細胞：ＣＤ４＋リンパ球、又はヘルパーＴ細胞は、免疫応答媒介因子であり、適応免疫応答の能力を確立及び最大化することにおいて重要な役割を果たす。これらの細胞は細胞毒性又は食作用活性を有さず、感染細胞を死滅させたり病原体を除去したりすることはできないが、他の細胞がこれらの任務を行うように指示することによって、実質的に免疫応答を「管理する」。それぞれ異なる種類の病原体を排除するように設計されている、Ｔｈ１及びＴｈ２と命名されている２種類のエフェクターＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞応答を、プロフェッショナルＡＰＣによって誘導することができる。
【０４０８】
[0415]ヘルパーＴ細胞は、クラスＩＩ  ＭＨＣ分子と結合した抗原を認識するＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を発現する。ナイーブヘルパーＴ細胞の活性化によりサイトカインの放出が引き起こされ、これは、それを活性化させたＡＰＣを含めた多くの細胞種の活性に影響を与える。ヘルパーＴ細胞は、細胞毒性Ｔ細胞よりもはるかに穏やかな活性化刺激を必要とする。ヘルパーＴ細胞は、細胞毒性細胞の活性化を「助ける」追加のシグナルを提供することができる。それぞれ異なる種類の病原体を排除するように設計されている、Ｔｈ１及びＴｈ２と命名されている２種類のエフェクターＣＤ４＋ヘルパーＴ細胞応答を、プロフェッショナルＡＰＣによって誘導することができる。２つのＴｈ細胞集団は、産生されるエフェクタータンパク質（サイトカイン）のパターンが異なる。一般に、Ｔｈ１細胞は、マクロファージ及び細胞毒性Ｔ細胞の活性化によって細胞性免疫応答を支援する一方で、Ｔｈ２細胞は、形質細胞への変換のためのＢ細胞の刺激によって、及び抗体の形成によって、液性免疫応答を促進する。たとえば、Ｔｈ１細胞によって調節された応答は、マウスではＩｇＧ２ａ及びＩｇＧ２ｂ（ヒトではＩｇＧ１及びＩｇＧ３）を誘導し、抗原に対する細胞媒介性免疫応答を優先し得る。抗原に対するＩｇＧ応答がＴｈ２型細胞によって調節される場合、これは圧倒的にマウスではＩｇＧ１（ヒトではＩｇＧ２）の産生を増強し得る。Ｔｈ１又はＴｈ２応答に関連するサイトカインの測定は、ワクチン接種の成功の測度を与えるであろう。これは、とりわけ、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＴＮＦ−αなどのＴｈ１−サイトカイン、又はＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ１０などのＴｈ２−サイトカインのために設計された特異的ＥＬＩＳＡによって達成することができる。
【０４０９】
[0416]ｉｉｉ）サイトカインの測定：所属リンパ節からの放出は、免疫化の成功の良好な指標を与える。抗原提示並びにＡＰＣの成熟並びにＣＤ４及びＣＤ８Ｔ細胞などの免疫エフェクター細胞の結果、いくつかのサイトカインがリンパ節細胞によって放出される。これらのＬＮＣをｉｎ  ｖｉｔｒｏで抗原の存在下で培養することで、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−２、ＩＬ−１２、ＴＮＦ−α、及びＧＭ−ＣＳＦなどの特定の重要なサイトカインの放出を測定することによって、抗原特異的免疫応答を検出することができる。これは、培養上清及び組換えサイトカインを標準として使用したＥＬＩＳＡによって行うことができる。
【０４１０】
[0417]免疫化の成功は、それだけに限定されないが、機能的抗体を検出するための血球凝集阻害（ΗＡＩＪ）及び血清中和阻害アッセイ、ワクチン接種の有効性を決定するためにワクチン接種した対象を関連する病原体で攻撃する攻撃研究、及び、たとえば活性化された又は記憶リンパ球の同定において特異的細胞表面マーカーを発現する細胞集団を決定するための、蛍光活性化細胞分取（ＦＡＣＳ）の使用を含めた、当業者に知られているいくつかの方法で決定し得る。また、当業者は、他の既知の方法を使用しても、本発明の組成物を用いた免疫化が抗体及び／又は細胞媒介性免疫応答を誘発したかどうかを決定し得る。たとえばＣｕｒｒｅｎｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ、Ｃｏｌｉｇａｎら編（Ｗｉｌｅｙ  Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ、２００７）を参照されたい。
【０４１１】
[0418]薬学的応用
【０４１２】
[0419]本明細書中に開示するリピドＡ模倣体が含まれる本発明の医薬及び／又はワクチン組成物は、対象を疾患、障害、又は状態に対して保護することができ得る。本明細書中で使用する用語「保護すること」又は「〜の保護」には、疾患、障害、又は状態を「治療すること」又は「予防すること」が包含される。
【０４１３】
[0420]本明細書中で使用する「治療すること」若しくは「〜の治療」、又は「予防すること」若しくは「〜の予防」とは、臨床結果を含めた有益又は所望の結果を得るための手法をいう。有益又は所望の結果には、それだけに限定されないが、１つ又は複数の症状又は状態の軽減又は寛解、疾患の程度の減退、疾患の状態の安定化、疾患の発生の予防、疾患の拡大の予防、疾患の進行の遅延又は減速（たとえば抑制）、疾患の発症の遅延又は減速、疾患原因因子に対する保護免疫の付与、及び症状の寛解又は緩和が含まれることができる。また、「治療すること」又は「予防すること」は、治療の非存在下において予測されるものを超えて患者の生存を延長させることも意味することができ、また、対象において感染症を予防することなどによって、疾患の進行を一時的に阻害すること又は疾患の発生を予防することも意味することができる。また、「治療すること」又は「予防すること」は、腫瘍塊の大きさの縮小、腫瘍の侵襲性の低下などにも言及し得る。
【０４１４】
[0421]一部の実施形態では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体は、組成物の「有効性を改善する」ために、医薬組成物又はワクチン組成物中に含み得る。これは、たとえば、液性免疫応答又は細胞性免疫応答の一方又は両方の誘導において、組成物の有効性を改善することを含み得る。一部の実施形態では、これは、免疫応答の外見を加速すること、免疫応答の持続性若しくは強度を改善すること、ワクチン接種部位又は腫瘍部位での免疫細胞の数を増加させること、或いは、疾患、障害、若しくは状態の予防的及び／若しくは治療的処置を増強させること、及び／又は疾患症状の進行を軽減、遅延、若しくは阻害することなどによって、組成物によってもたらされる治療効果を改善することを含み得る。また、組成物の有効性を改善することは、生活の質の改善又は罹患率の減少に関連し得る。
【０４１５】
[0422]また、組成物の「有効性を改善すること」とは、所望の結果を生じるために、より低用量の活性成分しか必要でないことも意味する。これには、用量自体が少ない実施形態及び組成物を投与する頻度がより少ない実施形態がどちらも包含される。
【０４１６】
[0423]一部の実施形態では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体が含まれる本発明の組成物は、対象において、抗原に対する抗体及び／又は細胞性免疫応答の誘導又は強化における使用に適切であり得る。たとえば、組成物中への本明細書中に開示するリピドＡ模倣体の包含は、リピドＡ模倣体を含有しない組成物（たとえば対照組成物）と比較して、抗原に対する抗体及び／又は細胞に媒介される免疫応答を増強させ得る。
【０４１７】
[0424]一部の実施形態では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体が含まれる本発明の組成物は、それを必要としている対象において、ウイルス感染症の治療及び／又は予防における使用に適切であり得る。対象はウイルスに感染している場合がある、又はウイルス感染症を発生する危険性にあり得る。本発明の組成物の使用又は投与によって治療及び／又は予防し得るウイルス感染症には、それだけに限定されないが、牛痘ウイルス、ワクシニアウイルス、偽牛痘ウイルス、ヒトヘルペスウイルス１、ヒトヘルペスウイルス２、サイトメガロウイルス、ヒトアデノウイルスＡ〜Ｆ、ポリオーマウイルス、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、パルボウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、オルトレオウイルス、ロタウイルス、エボラウイルス、パラインフルエンザウイルス、インフルエンザＡ型ウイルス、インフルエンザＢ型ウイルス、インフルエンザＣ型ウイルス、麻疹ウイルス、流行性耳下腺炎ウイルス、風疹ウイルス、ニューモウイルス、ヒト呼吸器合胞体ウイルス、狂犬病ウイルス、カリフォルニア脳炎ウイルス、日本脳炎ウイルス、ハンタンウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス、コロナウイルス、エンテロウイルス、ライノウイルス、ポリオウイルス、ノロウイルス、フラビウイルス、デングウイルス、西ナイルウイルス、黄熱ウイルス、及び水痘が含まれる。特定の実施形態では、ウイルス感染症は、ヒトパピローマウイルス、エボラウイルス、ヒト呼吸器合胞体ウイルス、又はインフルエンザウイルスである。
【０４１８】
[0425]一部の実施形態では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体が含まれる本発明の組成物は、それを必要としている対象において、非ウイルス病原体（細菌又は原虫など）による感染症の治療及び／又は予防における使用に適切であり得る。対象は病原体に感染している場合がある、又は病原体による感染症を発生する危険性にあり得る。それだけに限定されないが、例示的な細菌病原体には、炭疽菌（バチルス・アントラシス）、ブルセラ属、百日咳菌、カンジダ属、肺炎クラミジア、オウム病クラミジア、コレラ、ボツリヌス菌、コクシジオイデス・イミチス、クリプトコッカス属、ジフテリア、大腸菌Ｏ１５７：Ｈ７、腸管出血性大腸菌、腸内毒素原性大腸菌、インフルエンザ菌、ピロリ菌、レジオネラ属、レプトスピラ属、リステリア属、髄膜炎菌、肺炎マイコプラズマ、マイコバクテリウム属、百日咳、肺炎、サルモネラ属、シゲラ属、ブドウ球菌属、肺炎連鎖球菌、及びエンテロコリチカ菌が含まれ得る。特定の実施形態では、細菌感染症は炭疽菌である。それだけに限定されないが、例示的な原虫病原体には、マラリアを引き起こすプラスモジウム属のもの（熱帯熱マラリア原虫、四日熱マラリア原虫、三日熱マラリア原虫、卵形マラリア原虫、又は二日熱マラリア原虫）が含まれ得る。
【０４１９】
[0426]一部の実施形態では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体が含まれる本発明の組成物は、それを必要としている対象において、神経変性疾患の治療及び／又は予防における使用に適切であり得、ここで、神経変性疾患は抗原の発現に関連している。対象は神経変性疾患を有し得る、又は神経変性疾患を発生する危険性にあり得る。本発明の組成物の使用又は投与によって治療及び／又は予防し得る神経変性疾患には、それだけに限定されないが、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病、及び筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）が含まれる。
【０４２０】
[0427]一実施形態では、本発明の組成物は、それを必要としている対象において、アルツハイマー病を治療及び／又は予防するために使用し得る。アルツハイマー病は、患者の脳内のβ−アミロイド溶菌斑及び／又はタウタンパク質とアルツハイマー病との関連性を特徴とする（たとえばＧｏｅｄｅｒｔ及びＳｐｉｌｌａｎｔｉｎｉ、Ｓｃｉｅｎｃｅ、３１４：７７７〜７８１、２００６を参照）。また、１型単純ヘルペスウイルスも、ａｐｏＥ遺伝子の感受性バージョンを保有する人において原因的な役割を果たすことが提案されている（Ｉｔｚｈａｋｉ及びＷｏｚｎｉａｋ、Ｊ  Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｓ  Ｄｉｓ、１３：３９３〜４０５、２００８）。
【０４２１】
[0428]一部の実施形態では、本明細書中に開示するリピドＡ模倣体が含まれる本発明の組成物は、それを必要としている対象において、癌の治療及び／又は予防における使用に適切であり得る。対象は癌を有し得る、又は癌を発生する危険性にあり得る。
【０４２２】
[0429]本明細書中で使用する用語「癌」、「癌細胞」、「腫瘍」、及び「腫瘍細胞」（互換性があるように使用される）とは、細胞増殖の制御の有意な損失を特徴とする、異常な成長を示す細胞、又は不死化された細胞をいう。用語「癌」又は「腫瘍」には、転移性及び非転移性の癌又は腫瘍が含まれる。癌は、悪性腫瘍の存在を含めた、当分野において一般的に受け入れられている基準を使用して診断し得る。
【０４２３】
[0430]それだけに限定されないが、本発明の組成物の使用又は投与によって治療及び／又は予防することができ得る癌には、癌腫、腺癌、リンパ腫、白血病、肉腫、芽細胞腫、骨髄腫、及び生殖細胞腫瘍が含まれる。それだけに限定されないが、特に適切な実施形態には、膠芽細胞腫、多発性骨髄腫、卵巣癌、乳癌、輸卵管癌、前立腺癌、又は腹膜癌が含まれ得る。一実施形態では、癌はウイルスなどの病原体によって引き起こされ得る。癌の発生に関連づけられているウイルスは当業者に知られており、それだけに限定されないが、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、ジョン・カニンガムウイルス（ＪＣＶ）、ヒトヘルペスウイルス８、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、メルケル細胞ポリオーマウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、及びヒトＴ細胞白血病ウイルス−１が含まれる。別の実施形態では、癌は１つ又は複数の癌特異的抗原（たとえばサバイビン）を発現するものであり得る。
【０４２４】
[0431]本発明の組成物は、癌の治療若しくは予防、たとえば癌の重篤度の低下（たとえば、腫瘍の大きさ、侵襲性及び／若しくは侵襲性、悪性腫瘍など）、又は癌の再発の予防のどちらかにおいて有用であり得る。
【０４２５】
[0432]リピドＡ模倣体ＪＬ−２６５又はＪＬ−２６６を含む本発明のワクチン組成物は、リピドＡ模倣体が含まれない同様の組成物と比較して、マウスにおいて腫瘍体積を有意に縮小させる能力を有することが見いだされた（実施例１０及び１１、図４及び５）。本明細書中の実施例１０に記載のデータを以下の表１に要約する。
【表２】
2020180142.tif 000058
【０４２６】
[0433]上記表（表１）より、本発明の組成物（第２及び３群）は、リピドＡ模倣体を含有しない対照組成物をワクチン接種したマウス（第１群）で観察されたものよりも、それぞれ約２．８及び２．４倍小さい腫瘍体積をマウスにおいてもたらしたことを見ることができる。
【０４２７】
[0434]とりわけ、ワクチン組成物をＩｍｍｕｎｏｖａｃｃｉｎｅ，Ｉｎｃのリポソームに基づくワクチンアジュバント化プラットフォームデポヴァックス（登録商標）に懸濁させる（両親媒性化合物（リポソーム）、抗原、及びリピドＡ模倣体の乾燥混合物を鉱物油に基づく疎水性担体に懸濁させる）際に、結果がさらにより明白である。実施例１２に記載のデータ（図６）を要約する以下の表２に示すように、本発明のデポヴァックス（登録商標）組成物（第２及び３群）は、リピドＡ模倣体を含有しない対照デポヴァックス（登録商標）組成物をワクチン接種したマウス（すなわち第１群）で観察されたものよりも、それぞれ約３．１倍（ＪＬ−２６５）及び６．３倍（ＪＬ−２６６）小さい腫瘍体積をマウスにおいてもたらした。
【表３】
2020180142.tif 000059
【０４２８】
[0435]上述の例のコレクション及び本明細書中のさらなる説明から、リピドＡ模倣体ＪＬ−２６５又はＪＬ−２６６を含む本発明のワクチン組成物の実施形態は、移植した腫瘍を有するマウスにおいて腫瘍原性を有意に低下させる（たとえば、成長速度及び全体的な腫瘍体積を縮小させる）能力を有することが明らかである。また、これらの例は、本発明の組成物を作製する方法は複数存在し、デポヴァックス（登録商標）を使用して配合した組成物が腫瘍の大きさのさらにより明白な縮小をもたらすことも示している。
【０４２９】
[0436]同様に、本発明の組成物の実施形態は免疫原性であることが見いだされた。実施例１４では、ＭＨＣクラスＩエピトープ（Ｒ９Ｆ）及びＭＨＣクラスＩＩエピトープ（Ｆ２１Ｅ）の両方を、ＪＬ−２６５又はＪＬ−２６６リピドＡ模倣体と一緒に含有し、デポヴァックス（登録商標）中で配合した本発明のワクチンの免疫原性を試験した。ＩＦＮ−ガンマＥＬＩＳＰＯＴアッセイは、様々なワクチン製剤の相対的な免疫原性に関する情報を提供することができるが、必ずしも、より関連性のある腫瘍攻撃アッセイにおける有効性の指標ではない。
【０４３０】
[0437]実施例１４では、ＪＬ−２６５リピドＡ模倣体を含有する組成物（第２群）はＲ９Ｆに対する抗原特異的ＩＦＮ−ガンマ応答を増強させなかったが、それでもこれは免疫応答を生じることができた。より顕著なことに、ＪＬ−２６６を含有する組成物は免疫応答のほぼ２倍の増加をもたらした（図８）。これらの結果から、リピドＡ模倣体ＪＬ−２６５又はＪＬ−２６６を含む本発明のワクチン組成物の実施形態は免疫原性であり、特定の実施形態では、抗原に対する免疫応答を有意に増強させる能力を有することが明らかである。
【０４３１】
[0438]医薬品の投与
【０４３２】
[0439]一般に、リピドＡ模倣体、医薬組成物、又はワクチン組成物は、当分野で知られている任意の手段によって投与し得る。
【０４３３】
[0440]たとえば、それだけに限定されないが、本明細書中に記載の組成物は、経口、経鼻、直腸、又は非経口の投与に適した形態で配合してもよく、非経口の場合は、局所的又は全身性のどちらかである。非経口投与には、それだけに限定されないが、静脈内、腹腔内、皮内、皮下、筋肉内、鼻腔内、経皮、経上皮、肺内、くも膜下腔内、及び局所又は頬側の投与方法が含まれる。非経口投与は、ボーラス注射によるもの、又は時間をかけた緩やかな灌流であることができる。特定の実施形態では、投与経路は、たとえば本発明のデポヴァックス（登録商標）組成物を使用する場合に、デポー効果を達成するために筋肉内、皮下、又は皮内であり得る。
【０４３４】
[0441]当業者は、任意の特定の応用のための適切な治療レジーム、投与経路、用量などを決定することができる。考慮し得る要因には、たとえば、抗原の性質、予防又は治療する病状、対象の年齢、物理的状態、体重、性別、及び食習慣、並びに他の臨床学的因子が含まれる。たとえば、「ワクチンハンドブック」、国立予防衛生研究所学友会編（１９９４）、「予防接種の手帖、第８版」、木村三生夫、平山宗宏、及び堺春美編、近代出版（２０００）、「Ｍｉｎｉｍｕｍ  Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ  ｆｏｒ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ」、ｔｈｅ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ  Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅｒｓ  ｏｆ  Ｊａｐａｎ編（１９９３）を参照されたい。
【０４３５】
[0442]リピドＡ模倣体及び抗原の最適な量は、それだけに限定されないが、組成、疾患、対象を含めたいくつかの要因に依存する場合があり、たとえば、抗体価の観察、抗原特異的ＩＦＮ−ガンマ応答、腫瘍体積又は他の特徴の測定、及び宿主における他の免疫原性応答を含めた標準の研究を使用して、当業者が容易に確認し得る。
【０４３６】
[0443]本明細書中に記載の組成物は、単一施用で投与した場合に潜在的に有効であり得る。
【０４３７】
[0444]一部の実施形態では、本明細書中に記載の組成物は、他の治療と組み合わせて、その前又は後に使用し得る。
【０４３８】
[0445]本明細書中に記載のリピドＡ模倣体、医薬組成物、又はワクチン組成物で治療する対象は、任意の脊椎動物、より詳細には哺乳動物であり得る。一実施形態では、対象はヒトである。
【０４３９】
[0446]キット及び試薬
【０４４０】
[0447]本明細書中に開示するリピドＡ模倣体又は組成物は、使用者に任意選択でキットとして提供する。たとえば、本発明のキットは、本発明の組成物の１つ又は複数の構成成分を含有する。キットは、１つ又は複数の追加の試薬、梱包材料、キットの構成成分を保持する容器、及びキット構成成分を使用するための好ましい方法を詳述する指示一式又は使用者マニュアルをさらに含むことができる。
【０４４１】
[0448]特定の実施形態では、本発明のワクチン組成物は、２つの容器を含有するキットとして供給する。たとえば、容器１は、凍結乾燥した両親媒性化合物（たとえばリポソーム）、抗原、及びリピドＡ模倣体を含み得る。たとえば、容器２は、疎水性担体（たとえば鉱物油に基づく担体）を単独で含有し得る。
【０４４２】
[0449]発明の実施形態
【０４４３】
[0450]本発明の特定の実施形態には、それだけに限定されないが、以下のものが含まれる。
【０４４４】
[0451]（１）以下の式の化合物又は薬学的に許容されるその塩：
Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ
［式中、
Ａは、ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていない環状単糖残基であるか、又は、Ａは、置換又は非置換の芳香族基であり、
Ｌ１及びＬ２は、独立して存在又は非存在であり、存在する場合は、独立して、Ｏ、Ｓ、又はＮの１つ又は複数を任意選択で含む、置換又は非置換、分岐状又は直鎖状、飽和又は不飽和の炭素鎖であり、
Ｄは、−Ｏ−、−Ｓ−、又は−ＮＨ−であり、
Ｅは、ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていない環状単糖残基であるか、又は、Ｅは、置換又は非置換の芳香族基であり、
ここで、Ａ又はＥの少なくとも１つが、置換又は非置換の芳香族基であり、Ａ、Ｌ１、Ｌ２、又はＥの少なくとも１つが、１つ又は複数の脂質鎖置換基を含む］。
【０４４５】
[0452]（２）Ａ又はＥの少なくとも１つが、合計３〜２６個の環原子を有する置換又は非置換の芳香族基である、段落（１）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４４６】
[0453]（３）Ａ又はＥの少なくとも１つが、
【化５５】
2020180142.tif 000060
から選択される芳香族基であり、芳香族基は、任意選択で置換又は非置換である、段落（１）若しくは（２）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４４７】
[0454]（４）Ａ又はＥの少なくとも１つが、１、２、又は３個の置換又は非置換の芳香環を含む炭素環式芳香族基である、段落（１）〜（３）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４４８】
[0455]（５）Ａ又はＥの少なくとも１つが、置換若しくは非置換の単環の炭素環式芳香族基、又は置換若しくは非置換の単環の芳香族複素環基である、段落（１）〜（３）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４４９】
[0456]（６）Ａ又はＥの少なくとも１つが、置換又は非置換のベンゼン環である、段落（１）〜（５）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４５０】
[0457]（７）Ａ又はＥの少なくとも１つが、
【化５６】
2020180142.tif 000061
であり、式中、
Ｒａは、ベンゼン環上の任意の位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６であり、
Ｒｂは、ベンゼン環上の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−ＮＨ２、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意の置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルである、段落（１）〜（６）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４５１】
[0458]（８）Ａ又はＥの少なくとも１つが、
【化５７】
2020180142.tif 000062
であり、式中、
Ｒａは、ベンゼン環上の任意の位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、
Ｒｂは−Ｈである、段落（１）〜（７）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４５２】
[0459]（９）Ａ又はＥの少なくとも１つが、
【化５８】
2020180142.tif 000063
である、段落（１）〜（８）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩
【０４５３】
[0460]（１０）Ａ又はＥの少なくとも１つが、
【化５９】
2020180142.tif 000064
である、段落（１）〜（８）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４５４】
[0461]（１１）Ａ又はＥの少なくとも１つが、
【化６０】
2020180142.tif 000065
であり、式中、
【化６１】
2020180142.tif 000066
は、ベンゼン環上の任意の位置に配置され、
Ｒａは、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６であり、
ｍは０〜６であり、
ＲＬは脂質鎖置換基であり、
Ｒｂは、ベンゼン環上の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意の置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルである、段落（１）〜（６）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４５５】
[0462]（１２）Ａ又はＥの１つが、ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていない環状単糖残基である、段落（１）〜（１１）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４５６】
[0463]（１３）環状単糖残基が、ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていないピラノース糖残基である、段落（１２）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４５７】
[0464]（１４）ピラノース糖残基が、ヒドロキシル基の１つ又は複数が任意選択で置換されているか又は置換されていないグルコピラノース環又はガラクトピラノース環を含む、段落（１３）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４５８】
[0465]（１５）Ａが、
【化６２】
2020180142.tif 000067
であり、式中、
Ｚは−ＣＨ２Ｇ又は−ＣＨ２ＭＱであり、ここで、Ｇは、−Ｈ、−ハロゲン、−ＯＨ、−ＮＨ２、−ＣＯＯＨ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＳＯ３Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、Ｍは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＳＣ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｓ）−、又は−ＮＨＣ（＝Ｏ）−であり、Ｑは、−Ｈであるか、又は置換若しくは非置換、分岐状若しくは直鎖状、飽和若しくは不飽和のＣ１〜２０脂肪族炭化水素であり、
Ｘ１は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６であり、
Ｙ１及びＹ２は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｏ−ＲＬ、−ＮＨ−ＲＬ、又は−Ｓ−ＲＬであり、ここで、ＲＬは脂質鎖置換基である、段落（１）〜（１４）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４５９】
[0466]（１６）Ｚが−ＣＨ２ＯＨである、段落（１５）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４６０】
[0467]（１７）Ａ上の置換基の立体化学が以下の式：
【化６３】
2020180142.tif 000068
によって定義される、段落（１６）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４６１】
[0468]（１８）Ｘ１が−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２である、段落（１５）〜（１７）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４６２】
[0469]（１９）Ｙ１が−ＮＨ−ＲＬである、段落（１５）〜（１８）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４６３】
[0470]（２０）Ｙ２が−Ｏ−ＲＬである、段落（１５）〜（１９）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４６４】
[0471]（２１）Ｌ１が非存在である、段落（１５）〜（２０）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４６５】
[0472]（２２）Ｌ２がＩであり、以下：
【化６４】
2020180142.tif 000069
［式中、ｍは０〜６であり、ＲＬは脂質鎖置換基である］
のように式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ内に組み込まれている、段落（１５）〜（２１）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４６６】
[0473]（２３）Ｌ２が非存在である、段落（１５）〜（２１）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４６７】
[0474]（２４）Ｅが、
【化６５】
2020180142.tif 000070
であり、式中、
Ｘ２は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＳＯ３Ｈ、−ＣＨ（ＣＯＯＨ）２、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）（ＯＣＨ２ＣＨ２ＮＨ２）であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜６であり、ｑは１〜６であり、
Ｙ３、Ｙ４、及びＹ５は、独立して、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｏ−ＲＬ、−ＮＨ−ＲＬ、又は−Ｓ−ＲＬであり、ここで、ＲＬは脂質鎖置換基である、段落（１）〜（１４）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４６８】
[0475]（２５）Ｅ上の置換基の立体化学が以下の式：
【化６６】
2020180142.tif 000071
によって定義される、段落（２４）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４６９】
[0476]（２６）Ｘ２が−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２である、段落（２４）若しくは（２５）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４７０】
[0477]（２７）Ｙ３が−ＮＨ−ＲＬである、段落（２４）〜（２６）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４７１】
[0478]（２８）Ｙ４が−Ｏ−ＲＬである、段落（２４）〜（２７）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４７２】
[0479]（２９）Ｙ５が−ＯＨである、段落（２４）〜（２８）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４７３】
[0480]（３０）Ｌ２が非存在である、段落（２４）〜（２９）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４７４】
[0481]（３１）Ｌ１がＩＩであり、以下：
【化６７】
2020180142.tif 000072
［式中、ｍは０〜６であり、Ｙは−（ＣＯ）ｆ−であり、ここで、ｆは０又は１であり、ここで、ＲＬは脂質鎖置換基である］
のように式Ａ−Ｌ１−Ｄ−Ｌ２−Ｅ内に組み込まれている、段落（２４）〜（３０）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４７５】
[0482]（３２）Ｌ１が非存在である、段落（２４）〜（３０）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４７６】
[0483]（３３）Ｄが−Ｏ−である、段落（１）〜（３２）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４７７】
[0484]（３４）１、２、３、４、又は５個の脂質鎖置換基を含む、段落（１）〜（３３）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４７８】
[0485]（３５）Ａ又はＬ１の少なくとも１つが１つ又は複数の脂質鎖置換基を含む、段落（１）〜（３４）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４７９】
[0486]（３６）Ｅ又はＬ２の少なくとも１つが１つ又は複数の脂質鎖置換基を含む、段落（１）〜（３５）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４８０】
[0487]（３７）以下のものである、段落（１）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩：
【化６８】
2020180142.tif 000073
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
ｍは０〜６であり、
Ｒ１は、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基であり、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＣＨ２ＣＯＯＨである］。
【０４８１】
[0488]（３８）以下のものである、段落（１）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩：
【化６９】
2020180142.tif 000074
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
Ｒ１は、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、以下のものであり：
【化７０】
2020180142.tif 000075
Ｒ７は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
ｍは０〜６であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基であり、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＣＨ２ＣＯＯＨである］。
【０４８２】
[0489]（３９）以下のものである、段落（１）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩：
【化７１】
2020180142.tif 000076
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
ｍは０〜６であり、
Ｙは、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、−（Ｏ）ｇ（ＣＨ２）ｈ（ＣＯ）ｊ−であり、ここで、ｇは０又は１であり、ｈは０〜６であり、ｊは０又は１であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ１は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基であり、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＣＨ２ＣＯＯＨである］。
【０４８３】
[0490]（４０）以下のものである、段落（１）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩：
【化７２】
2020180142.tif 000077
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
ｍは０〜６であり、
Ｒ６は、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｙは−（ＣＯ）ｆ−であり、ここで、ｆは０又は１であり、
Ｒ１は、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基である］。
【０４８４】
[0491]（４１）それぞれの脂質鎖置換基が、独立して、化合物中に存在する任意の他の脂質鎖置換基と同じ又は異なる強親油性基を含む、段落（１）〜（４０）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４８５】
[0492]（４２）それぞれの脂質鎖置換基が、独立して、１、２、又は３本の主要炭素鎖を含む、段落（１）〜（４１）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４８６】
[0493]（４３）化合物中に存在する脂質鎖置換基が、合わせて２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０本の主要炭素鎖を提供する、段落（１）〜（４２）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４８７】
[0494]（４４）それぞれの主要炭素鎖が１〜２２個の炭素である、段落（４２）若しくは（４３）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４８８】
[0495]（４５）それぞれの主要炭素鎖が４〜１８個の炭素である、段落（４４）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４８９】
[0496]（４６）それぞれの主要炭素鎖が１４個の炭素である、段落（４５）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４９０】
[0497]（４７）それぞれの脂質鎖置換基が、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−Ｃ＝Ｃ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、又は−Ｃ（＝Ｓ）−から選択される少なくとも１つの要素を任意選択で含み、ハロゲン、−ＯＨ、又は−ＮＨ２で任意選択で置換されている、Ｃ１〜６６直鎖又は分岐鎖アルキルである、段落（１）〜（４６）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４９１】
[0498]（４８）それぞれの脂質鎖置換基が、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−Ｃ＝Ｃ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、又は−Ｃ（＝Ｓ）−から選択される少なくとも１つの要素を任意選択で含み、ハロゲン、−ＯＨ、又は−ＮＨ２で任意選択で置換されている、Ｃ４〜４２直鎖又は分岐鎖アルキルである、段落（４７）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４９２】
[0499]（４９）それぞれの脂質鎖置換基が、独立して、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＨ−、−Ｃ＝Ｃ−、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ（＝Ｏ）−、又は−Ｃ（＝Ｓ）−から選択される少なくとも１つの要素を任意選択で含み、ハロゲン、−ＯＨ、又は−ＮＨ２で任意選択で置換されている、Ｃ１４〜２８直鎖又は分岐鎖アルキルである、段落（４８）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４９３】
[0500]（５０）それぞれの脂質鎖置換基が独立して、
【化７３】
2020180142.tif 000078
であり、式中、
Ｚ１、Ｚ２、及びＺ３は、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＣＨ２−であり、
Ｘ３は−Ｈ又は−（ＣＨ２）ｐ３ＣＨ３であり、
Ｘ４は、−ＮＨ−、−Ｏ−、又は−ＣＨ２−であり、
ｐ、ｐ１、ｐ２、及びｐ３は、独立して０〜３０であり、
ｒ、ｓ、及びｔは、独立して０〜６である、段落（１）〜（４９）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４９４】
[0501]（５１）それぞれの脂質鎖置換基が独立して、
【化７４】
2020180142.tif 000079
である、段落（１）〜（５０）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４９５】
[0502]（５２）以下のものである、段落（１）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【化７５】
2020180142.tif 000080
【０４９６】
[0503]（５３）以下のものである、段落（１）に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【化７６】
2020180142.tif 000081
【０４９７】
[0504]（５４）リピドＡ又はリポ多糖（ＬＰＳ）拮抗活性を有する、段落（１）〜（５３）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４９８】
[0505]（５５）免疫賦活活性を有する、段落（１）〜（５３）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０４９９】
[0506]（５６）トール様受容体４（ＴＬＲ４）と結合することができる、段落（１）〜（５５）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【０５００】
[0507]（５７）段落（１）〜（５３）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩と、薬学的に許容される担体、希釈剤、又は賦形剤とを含む医薬組成物。
【０５０１】
[0508]（５８）リポ多糖（ＬＰＳ）／リピドＡ媒介性の疾患又は障害の治療又は予防において使用するための、段落（５７）に記載の医薬組成物。
【０５０２】
[0509]（５９）対象に段落（５７）に記載の組成物を投与することを含む、対象においてリポ多糖（ＬＰＳ）／リピドＡ媒介性の疾患又は障害を治療又は予防する方法。
【０５０３】
[0510]（６０）段落（１）〜（５３）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩と抗原とを含む、ワクチン組成物。
【０５０４】
[0511]（６１）リポソームをさらに含む、段落（６０）に記載のワクチン組成物。
【０５０５】
[0512]（６２）疎水性物質の連続相を含む担体をさらに含む、段落（６０）又は（６１）に記載のワクチン組成物。
【０５０６】
[0513]（６３）疎水性物質の連続相を含む担体が鉱物油に基づく担体である、段落（６２）に記載のワクチン組成物。
【０５０７】
[0514]（６４）ヘルパーＴエピトープをさらに含む、段落（６０）〜（６３）のいずれか一項に記載のワクチン組成物。
【０５０８】
[0515]（６５）抗原が癌、感染性疾患、又は嗜癖疾患に関連するものである、段落（６０）〜（６４）のいずれか一項に記載のワクチン組成物。
【０５０９】
[0516]（６６）抗原が、たとえば、エボラウイルス、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、インフルエンザウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、百日咳菌、バチルス・アントラシス、又は四日熱マラリア原虫などの、ウイルス、細菌、又は原虫に由来する、段落（６５）に記載のワクチン組成物。
【０５１０】
[0517]（６７）抗原が、たとえばサバイビン抗原などの膜表面結合癌抗原である、段落（６５）に記載のワクチン組成物。
【０５１１】
[0518]（６８）抗原が、たとえばコカインなどの毒素である、段落（６５）に記載のワクチン組成物。
【０５１２】
[0519]（６９）抗原が、少なくとも１つのＢ細胞エピトープ、少なくとも１つのＣＴＬエピトープ、又はその組合せを含む、段落（６０）〜（６８）のいずれか一項に記載のワクチン組成物。
【０５１３】
[0520]（７０）対象における抗原に対する抗体応答及び／又は細胞性免疫応答の誘導において使用するための、段落（６０）〜（６９）のいずれか一項に記載のワクチン組成物。
【０５１４】
[0521]（７１）癌、感染性疾患、又は嗜癖疾患の治療又は予防において使用するための、段落（６０）〜（６９）のいずれか一項に記載のワクチン組成物。
【０５１５】
[0522]（７２）対象に段落（６０）〜（６９）のいずれか一項に記載のワクチン組成物を投与することを含む、対象において抗原に対する抗体及び／又は細胞性免疫応答を誘導又は強化する方法。
【０５１６】
[0523]（７３）抗体及び／又は細胞に媒介される免疫応答が、段落（１）〜（５３）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩によって増強される、段落（７２）に記載の方法。
【０５１７】
[0524]（７４）対象に段落（６０）〜（６９）のいずれか一項に記載のワクチン組成物を投与することを含む、癌、感染性疾患、又は嗜癖疾患を治療又は予防する方法。
【０５１８】
[0525]（７５）段落（１）〜（５３）のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩が、上記化合物又は薬学的に許容されるその塩を含まない対照ワクチン組成物と比較して、癌、感染性疾患、又は嗜癖疾患の治療又は予防におけるワクチン組成物の有効性を改善する、段落（７４）に記載の方法。
【０５１９】
[0526]（７６）対象におけるリポ多糖（ＬＰＳ）／リピドＡ媒介性の疾患又は障害の治療又は予防における、段落（５７）に記載の医薬組成物の使用。
【０５２０】
[0527]（７７）抗原に対する抗体及び／若しくは細胞性免疫応答を誘導若しくは強化するため、又は癌、感染性疾患、若しくは嗜癖疾患を治療若しくは予防するための、段落（６０）〜（６９）のいずれか一項に記載のワクチン組成物の使用。
【０５２１】
[0528]本発明は、以下の非限定的な実施例によってさらに例示される。
【実施例】
【０５２２】
[0529]実施例１：Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−３−アミノフェノール（４）の調製
【０５２３】
[0530]９０℃まで加熱した水（７ｍＬ）中の３−アミノフェノール（５．００ｇ、４５．８２ｍｍｏｌ）及び炭酸水素ナトリウム（８．８５ｇ、１０５．３９ｍｍｏｌ）の溶液に、２−クロロエタノール（３．４ｍＬ、５０．４０ｍｍｏｌ）を５分間かけて滴下し、混合物を終夜攪拌した。固形物を、セライトパッドを通して濾過して除去し、濾液を真空下で濃縮した。生じた残基をＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ溶液（９：１、１０ｍＬ）で３回洗浄し、合わせた洗浄液を濃縮した。反復フラッシュクロマトグラフィーによる精製（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ、９５：５→９０：１０）により、４（４．１０ｇ、５８％）が茶色固形物として得られた。Ｒｆ  ０．３１（ＣＨ２Ｃｌ２／ＭｅＯＨ，９５：５）；［α］Ｄ２２  −０．７（ｃ  １．０，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ３．１５（ｔ，２Ｈ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，ＮＣＨ２）、３．６８（ｔ，２Ｈ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，ＯＣＨ２）、４．５８〜４．９６（ｂｒ  ｓ，３Ｈ，ＮＨ，ＯＨｘ２）、６．１５〜６．１９（ｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、６．９３（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．５，８．５Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ４５．８８（ＮＣＨ２）、６０．３０（ＯＣＨ２）、１００．０４（ＣＨ−Ａｒ）、１０４．５８（ＣＨ−Ａｒ）、１０５．４２（ＣＨ−Ａｒ）、１２９．８１（ＣＨ−Ａｒ）、１４９．９６（Ｃ−Ａｒ）、１５７．６９（Ｃ−Ａｒ）；ＨＲＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）  Ｃ８Ｈ１１ＮＯ２［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：１５４．０８６８、実測値：１５４．０８５８。
【０５２４】
[0531]実施例２：Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）エチル）−３−アミノフェノール（５）の調製
【０５２５】
[0532]ＤＭＦ（５．０ｍＬ）中の４（８６４ｍｇ、５．６２ｍｍｏｌ）及びイミダゾール（５７３ｍｇ、８．４３ｍｍｏｌ）の冷却溶液（氷水浴）に、塩化ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリル（１．６０ｍＬ、６．１８ｍｍｏｌ）を２分間かけて滴下した。温度を２時間かけてゆっくりと室温まで上昇させ、混合物を終夜攪拌した。混合物を濃縮し、ＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）に溶かし、水（４０ｍＬ）で洗浄した。水性層をＥｔＯＡｃ（２×６０ｍＬ）でさらに抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。フラッシュカラムクロマトグラフィー精製（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、３：１）により、５（１．８６ｇ、８４％）が茶色固形物として得られた。Ｒｆ  ０．３８（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ，３：１）；［α］Ｄ２２  ＋３．４（ｃ  １．０，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １．０６（ｓ，９Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）３）、３．２２（ｔ，２Ｈ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，ＮＣＨ２）、３．８５（ｔ，２Ｈ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，ＯＣＨ２）、４．０２〜４．１８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ，ＮＨ）、４．６０〜４．７４（ｂｒ  ｓ，２Ｈ，ＯＨｘ２）、６．０１（ｓ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、６．１５〜６．１８（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、６．９９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０，８．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）、７．３７〜７．４４（ｍ，６Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、７．６５〜７．６７（ｍ，４Ｈ，Ａｒ−Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １９．２７（Ｃ（ＣＨ３）３）、２６．９２（Ｃ（ＣＨ３）３）、４５．９０（ＮＣＨ２）、６２．２８（ＯＣＨ２）、１００．２２（ＣＨ−Ａｒ）、１０４．８５（ＣＨ−Ａｒ）、１０６．４８（ＣＨ−Ａｒ）、１２７．８５（ＣＨ−Ａｒ）、１２９．８６（ＣＨ−Ａｒ）、１３０．２７（ＣＨ−Ａｒ）、１３３．３９（Ｃ−Ａｒ）、１３５．６４（ＣＨ−Ａｒ）、１４９．７６（Ｃ−Ａｒ）、１５６．８１（Ｃ−Ａｒ）；ＨＲＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）  Ｃ２４Ｈ２９ＮＯ２Ｓｉ［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：３９２．２０４７、実測値：３９２．２０３３。
【０５２６】
[0533]実施例３：Ｎ−（３−ヒドロキシフェニル）−Ｎ−（２−（ｔｅｒｔ−ブチルジフェニルシリルオキシ）エチル）−（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド（６）の調製
【０５２７】
[0534]−２０℃まで冷却したＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）中の二脂質酸８（９２６ｍｇ、２．０４ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ−メチルモルホリン（３３６μＬ、３．０６ｍｍｏｌ）及びクロロギ酸イソブチル（２７８μＬ、２．１４ｍｍｏｌ）を逐次に加えた。その後、ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ）中の５（１．６ｇ、４．０８ｍｍｏｌ）の溶液を３分間かけて滴下した。混合物を低温で２時間攪拌した後、室温まで温まらせた。ＭｅＯＨ（２ｍＬ）及び水（２ｍＬ）を加え、混合物を濃縮した。残渣をＣＨ２Ｃｌ２（１２５ｍＬ）に溶かし、水（３５ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製（ヘキサン／アセトン、７：１）により、６（１．３５ｇ、８０％）が無色のシロップとして得られた。Ｒｆ  ０．３５（ヘキサン／アセトン；６：１）；［α］Ｄ２２  ＋１５．９（ｃ  １．０，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ０．８８（ｔ，６Ｈ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，ＣＨ３ｘ２）、１．０１（ｓ，９Ｈ，Ｃ（ＣＨ３）３）、１．１４〜１．３６（ｂｒ  ｍ，３８Ｈ，ＣＨ２ｘ１９）、１．５０〜１．６２（ｂｒ  ｍ，４Ｈ，Ｈ−４Ｌ，Ｈ−３Ｌ’）、２．２０（ｔ，２Ｈ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，Ｈ−２Ｌ’）、２．２９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ  １５．５，６．０Ｈｚ，Ｈ−２ＬＢ）、２．４０（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ  １５．５，７．０Ｈｚ，Ｈ−２ＬＡ）、３．７６〜３．８５（ｍ，４Ｈ，ＮＣＨ２，ＯＣＨ２）、５．１６〜５．２２（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３Ｌ）、６．３８〜６．４８（ｂｒ  ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、６．６４（ｓ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、６．７１（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）、６．８３（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）、７．１９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０，８．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）、７．３２〜７．４１（ｍ，６Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、７．５８〜７．６１（ｍ，４Ｈ，Ａｒ−Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １４．１６（ＣＨ３）、１９．１９（Ｃ（ＣＨ３）３）、２２．７２（ＣＨ２）、２５．０２（ＣＨ２）、２５．２６（ＣＨ２）、２６．８３（Ｃ（ＣＨ３）３）、２９．１７（ＣＨ２）、２９．３９（ＣＨ２）、２９．４０（ＣＨ２）、２９．５５（ＣＨ２）、２９．５７（ＣＨ２）、２９．６０（ＣＨ２）、２９．６７（ＣＨ２）、２９．６８（ＣＨ２）、２９．６９（ＣＨ２）、２９．７１（ＣＨ２）、２９．７３（ＣＨ２）、３１．９５（ＣＨ２）、３４．２６（ＣＨ２）、３４．５８（ＣＨ２）、３９．０８（Ｃ−２Ｌ）、５１．３７（ＮＣＨ２）、６１．０７（ＯＣＨ２）、７１．３６（Ｃ−３Ｌ）、１１５．２９（ＣＨ−Ａｒ）、１１５．４９（ＣＨ−Ａｒ）、１２０．１１（ＣＨ−Ａｒ）、１２７．７０（ＣＨ−Ａｒ）、１２９．６８（ＣＨ−Ａｒ）、１３０．４１（ＣＨ−Ａｒ）、１３３．５１（Ｃ−Ａｒ）、１３５．５５（ＣＨ−Ａｒ）、１４３．５６（Ｃ−Ａｒ）、１５７．１７（Ｃ−Ａｒ）、１７０．０５（Ｃ＝Ｏ）、１７３．５５（Ｃ＝Ｏ）；ＨＲＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）  Ｃ５２Ｈ８１ＮＯ５Ｓｉ［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：８２８．５９６３、実測値：８２８．５９２６。
【０５２８】
[0535]実施例４：Ｎ−（３−ヒドロキシフェニル）−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド（７）の調製
【０５２９】
[0536]ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ）中の６（９９３ｍｇ、１．２０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＨＯＡｃ（０．８５ｍＬ、１４．４９ｍｍｏｌ）及びＢｕ４ＮＦ（ＴＨＦ中に１Ｍ、７．２４ｍＬ）を逐次に加えた。混合物を室温で終夜攪拌し、その後濃縮した。残渣をＣＨ２Ｃｌ２（１５０ｍＬ）に溶かし、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（４０ｍＬ）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ、２：１：０．１）により、７（５７１ｍｇ、８１％）が無色のシロップとして得られた。Ｒｆ  ０．３１（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ，２：１：０．１）；［α］Ｄ２２  ＋４．５（ｃ  １．０，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ０．８８（ｔ，６Ｈ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，ＣＨ３ｘ２）、１．１０〜１．３２（ｂｒ  ｍ，３８Ｈ，ＣＨ２ｘ１９）、１．４４〜１．５７（ｂｒ  ｍ，４Ｈ，Ｈ−４Ｌ，Ｈ−３Ｌ’）、２．２７（ｔ，２Ｈ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，Ｈ−２Ｌ’）、２．３４〜２．４５（ｍ，２Ｈ，Ｈ−２Ｌ）、３．６８〜３．９３（ｍ，６Ｈ，ＮＣＨ２，ＯＣＨ２，ＯＨｘ２）、５．１５〜５．２４（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３Ｌ）、６．７５（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）、６．８５（ｓ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、６．８９（ｄ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）、７．２７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，８．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １４．１６（ＣＨ３）、２２．７２（ＣＨ２）、２４．９９（ＣＨ２）、２５．２０（ＣＨ２）、２９．１７（ＣＨ２）、２９．３３（ＣＨ２）、２９．４０（ＣＨ２）、２９．５３（ＣＨ２）、２９．５５（ＣＨ２）、２９．５９（ＣＨ２）、２９．６８（ＣＨ２）、２９．７１（ＣＨ２）、２９．７４（ＣＨ２）、３１．９５（ＣＨ２）、３４．４１（ＣＨ２）、３４．５９（ＣＨ２）、３９．３６（Ｃ−２Ｌ）、５２．３３（ＮＣＨ２）、６０．５４（ＯＣＨ２）、７１．４５（Ｃ−３Ｌ）、１１５．４８（ＣＨ−Ａｒ）、１１５．９７（ＣＨ−Ａｒ）、１１９．０１（ＣＨ−Ａｒ）、１３０．８６（ＣＨ−Ａｒ）、１４３．００（Ｃ−Ａｒ）、１５８．０２（Ｃ−Ａｒ）、１７２．１８（Ｃ＝Ｏ）、１７４．２２（Ｃ＝Ｏ）；ＨＲＥＳＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）  Ｃ３６Ｈ６３ＮＯ５［Ｍ＋Ｈ］＋の計算値：５９０．４７８５、実測値：５９０．４７５２。
【０５３０】
[0537]実施例５：Ｎ−（３−ヒドロキシフェニル）−Ｎ−｛２−［６−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−４−Ｏ−（ジ−Ｏ−ベンジルホスホノ）−３−Ｏ−（（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル）−２−（２，２，２−トリクロロエトキシカルボニルアミノ）−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ］−エチル｝−（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド（１０）の調製
【０５３１】
[0538]ＣＨ２Ｃｌ２（８ｍＬ）中の７（５６５ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）及びイミデート９（１．２３ｇ、０．９６ｍｍｏｌ）の溶液を、モレキュラーシーブ（４Å、４．０ｇ）の存在下で、窒素下、室温で３０分間攪拌した。ＴＭＳＯＴｆの溶液（ＣＨ２Ｃｌ２中に０．０２Ｍ、０．９５ｍＬ）を約３分間で滴下した。混合物を室温で１時間攪拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１５ｍＬ）を加えて反応を停止させた。固形物を濾取し、濾液をＣＨ２Ｃｌ２（３×３０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製（ヘキサン／ＥｔＯＡＣ／ＭｅＯＨ、３：１：０．１）により、１０（１．４６ｇ、８９％）が無色のシロップとして得られた。Ｒｆ  ０．３６（ヘキサン／ＥｔＯＡＣ／ＭｅＯＨ，３：１：０．１）；［α］Ｄ２２  −１０．６（ｃ  １．０，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ０．８８（ｔ，１２Ｈ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，ＣＨ３ｘ４）、１．１５〜１．３８（ｂｒ  ｍ，７６Ｈ，ＣＨ２ｘ３８）、１．４２〜１．５８（ｂｒ  ｍ，８Ｈ，Ｈ−４Ｌ，Ｈ−３Ｌ’）、２．１９〜２．５２（ｍ，８Ｈ，Ｈ−２Ｌ，Ｈ−２Ｌ’）、３．５４〜３．６２（ｍ，４Ｈ，Ｈ−５，Ｈ−６Ｂ，ＮＣＨ２）、３．６６〜３．７１（ｍ，１Ｈ，Ｈ−２）、３．７６〜３．８１（ｍ，１Ｈ，Ｈ−６Ａ）、３．９３〜４．０６（ｍ，２Ｈ，ＯＣＨ２）、４．４２〜４．５３（ｍ，３Ｈ，Ｈ−４，Ｐｈ−ＣＨ２）、４．５９（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．５Ｈｚ，Ｈ−１）、４．６３（ｄ，１Ｈ，Ｊ  １２．０Ｈｚ，Ｔｒｏｃ−ＨＢ）、４．７１（ｄ，１Ｈ，Ｊ  １２．０Ｈｚ，Ｔｒｏｃ−ＨＡ）、４．８７〜４．９４（ｍ，４Ｈ，（ＰｈＣＨ２Ｏ）２Ｐ）、５．１１〜５．２２（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３Ｌ）、５．２７（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ  １０．０，１０．０Ｈｚ，Ｈ−３）、５．８２（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，ＮＨ）、６．００（ｂｒ  ｓ，１Ｈ，ＯＨ）、６．６５（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）、６．８３（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）、６．９５（ｓ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、７．１７〜７．３５（ｍ，１６Ｈ，Ａｒ−Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １４．１６（ＣＨ３）、２２．７２（ＣＨ２）、２５．０１（ＣＨ２）、２５．０５（ＣＨ２）、２５．１２（ＣＨ２）、２５．１９（ＣＨ２）、２９．１９（ＣＨ２）、２９．３６（ＣＨ２）、２９．４０（ＣＨ２）、２９．５７（ＣＨ２）、２９．６０（ＣＨ２）、２９．６２（ＣＨ２）、２９．６９（ＣＨ２）、２９．７１（ＣＨ２）、２９．７３（ＣＨ２）、３１．９５（ＣＨ２）、３４．１８（ＣＨ２）、３４．３５（ＣＨ２）、３４．４５（ＣＨ２）、３４．６１（ＣＨ２）、３９．０１（Ｃ−２Ｌ）、３９．２０（Ｃ−２Ｌ）、４９．６１（ＮＣＨ２）、５６．３８（Ｃ−２）、６６．５８（ＯＣＨ２）、６８．２８（Ｃ−６）、６９．７０〜６９．８６（ｍ，（ＰｈＣＨ２Ｏ）２Ｐ）、６９．９０（Ｃ−３Ｌ）、７１．３３（Ｃ−３Ｌ）、７２．８０（Ｃ−３）、７３．４５（Ｐｈ−ＣＨ２）、７３．８８（ｄ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，Ｃ−４）、７３．９３（Ｃ−５）、７４．７１（Ｔｒｏｃ−ＣＨ２）、９５．２２（Ｔｒｏｃ−ＣＣｌ３）��１００．０１（Ｃ−１）、１１５．４２（ＣＨ−Ａｒ）、１１５．８７（ＣＨ−Ａｒ）、１１９．２２（ＣＨ−Ａｒ）、１２７．７３（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．０４（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．１４（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．３９（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．６２（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．７０（ＣＨ−Ａｒ）、１３５．４１（Ｃ−Ａｒ）、１３５．４４（Ｃ−Ａｒ）、１３７．７４（Ｃ−Ａｒ）、１４３．５２（Ｃ−Ａｒ）、１５５．０９（Ｃ＝Ｏ，Ｔｒｏｃ）、１５７．６７（Ｃ−Ａｒ）、１７０．３２（Ｃ＝Ｏ）、１７０．３８（Ｃ＝Ｏ）、１７３．５９（Ｃ＝Ｏ）；ＭＡＬＤＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）  Ｃ９４Ｈ１４６Ｃｌ３Ｎ２Ｏ１７Ｐ［Ｍ＋Ｎａ］＋の計算値：１７３３．９３２５、実測値：１７３３．９７２０。
【０５３２】
[0539]実施例６：Ｎ−（３−ヒドロキシフェニル）−Ｎ−｛２−［６−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−４−Ｏ−（ジ−Ｏ−ベンジルホスホノ）−３−Ｏ−（（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル）−２−（（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド）−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ］−エチル｝−（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド（１１）の調製
【０５３３】
[0540]氷酢酸（２０ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）中の１０（５５０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）の溶液に、亜鉛末（３．０ｇ）を加え、混合物を室温で４５分間攪拌した。その後、混合物を濾過し、固形物を酢酸／ＥｔＯＡｃ溶液（９：１、４０ｍＬ）で洗浄し、濾液を濃縮した。残渣をＣＨ２Ｃｌ２（１００ｍＬ）に溶かし、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（４０ｍＬ）で洗浄し、水性層をＣＨ２Ｃｌ２（２×４０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮することにより、粗アミン（４５５ｍｇ）が無色のシロップとして得られた。
【０５３４】
[0541]ＣＨ２Ｃｌ２（２ｍＬ）中の二脂質酸８（１８２ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）の溶液に、ＤＩＣ（１２５μＬ、０．８０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１０分間攪拌した。この混合物に、ＣＨ２Ｃｌ２中の粗アミン（４５０ｍｇ）の溶液を加え、生じた混合物を室温で終夜攪拌した。水（０．５ｍＬ）を加え、その後、混合物をＮａ２ＳＯ４で乾燥させた。固形物を濾過して除去し、濾液を濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して（ヘキサン／ＥｔＯＡＣ／ＭｅＯＨ、３：１：０．１）、１１（４３０ｍｇ、６８％）が無色のシロップとして得られた。Ｒｆ  ０．３７（ヘキサン／ＥｔＯＡＣ／ＭｅＯＨ，２：１：０．１）；［α］Ｄ２２  −３．９（ｃ  １．０，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：）：δ  ０．８８（ｔ，１８Ｈ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，ＣＨ３ｘ６）、１．１７〜１．４０（ｂｒ  ｍ，１１４Ｈ，ＣＨ２ｘ５７）、１．４０〜１．６３（ｂｒ  ｍ，１２Ｈ，Ｈ−４Ｌ，Ｈ−３Ｌ’）、２．１８〜２．５２（ｍ，１２Ｈ，Ｈ−２Ｌ，Ｈ−２Ｌ’）、３．５５〜３．６３（ｍ，４Ｈ，Ｈ−５，Ｈ−６Ｂ，ＮＣＨ２）、３．７６〜３．８０（ｍ，３Ｈ，Ｈ−６Ａ，ＯＣＨ２）、４．２０〜４．２７（ｍ，１Ｈ，Ｈ−２）、４．４０（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，Ｈ−１）、４．４３〜４．５２（ｍ，３Ｈ，Ｈ−４，Ｐｈ−ＣＨ２）、４．８７〜４．９６（ｍ，５Ｈ，（ＰｈＣＨ２Ｏ）２Ｐ，Ｈ−３Ｌ）、５．０９〜５．１４（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３，Ｈ−３Ｌ）、５．２２〜５．２８（ｍ，１Ｈ，Ｈ−３Ｌ）、６．５０（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ９．５Ｈｚ，ＮＨ）、６．６１（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）、６．８２（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）、７．０１（ｓ，１Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、７．１６（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０，８．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）、７．２３〜７．３２（ｍ，１５Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、８．６６（ｂｒ  ｓ，１Ｈ，ＯＨ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １４．１５（ＣＨ３）、２２．７２（ＣＨ２）、２４．９６（ＣＨ２）、２５．００（ＣＨ２）、２５．０９（ＣＨ２）、２５．１２（ＣＨ２）、２５．２４（ＣＨ２）、２９．２１（ＣＨ２）、２９．２５（ＣＨ２）、２９．４０（ＣＨ２）、２９．４７（ＣＨ２）、２９．４９（ＣＨ２）、２９．５７（ＣＨ２）、２９．６１（ＣＨ２）、２９．６５（ＣＨ２）、２９．６９（ＣＨ２）、２９．７１（ＣＨ２）、２９．７３（ＣＨ２）、２９．７５（ＣＨ２）、３１．９６（ＣＨ２）、３４．１３（ＣＨ２）、３４．２５（ＣＨ２）、３４．４０（ＣＨ２）、３４．４１（ＣＨ２）、３４．５０（ＣＨ２）、３４．６１（ＣＨ２）、３８．８７（Ｃ−２Ｌ）、３８．９７（Ｃ−２Ｌ）、４１．８４（Ｃ−２Ｌ）、５０．６９（ＮＣＨ２）、５３．７８（Ｃ−２）、６７．００（ＯＣＨ２）、６８．２９（Ｃ−６）、６９．６８〜６９．７３（ｍ，（ＰｈＣＨ２Ｏ）２Ｐ）、６９．７９（Ｃ−３Ｌ）、７０．８８（Ｃ−３Ｌ）、７１．４５（Ｃ−３Ｌ）、７２．８５（Ｃ−３）、７３．５３（Ｐｈ−ＣＨ２）、７３．８４（ｄ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，Ｃ−４）、７４．３１（Ｃ−５）、１００．８８（Ｃ−１）、１１５．２５（ＣＨ−Ａｒ）、１１５．５７（ＣＨ−Ａｒ）、１１８．４８（ＣＨ−Ａｒ）、１２７．６６（ＣＨ−Ａｒ）、１２７．６９（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．０４（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．１３（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．４１（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．６０（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．６１（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．６７（ＣＨ−Ａｒ）、１３５．４８（Ｃ−Ａｒ）、１３５．５３（Ｃ−Ａｒ）、１３７．８６（Ｃ−Ａｒ）、１４４．１２（Ｃ−Ａｒ）、１５８．４１（Ｃ−Ａｒ）、１７０．０４（Ｃ＝Ｏ）、１７０．９８（Ｃ＝Ｏ）、１７１．９２（Ｃ＝Ｏ）、１７３．１６（Ｃ＝Ｏ）、１７３．４３（Ｃ＝Ｏ）、１７３．７３（Ｃ＝Ｏ）；ＭＡＬＤＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）  Ｃ１１９Ｈ１９７Ｎ２Ｏ１８Ｐ［Ｍ＋Ｎａ］＋の計算値：１９９６．４１９９、実測値：１９９６．４１１７。
【０５３５】
[0542]実施例７：Ｎ−（３−（ジ−Ｏ−ベンジルホスホノ）−フェニル）−Ｎ−｛２−［６−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−４−Ｏ−（ジ−Ｏ−ベンジルホスホノ）−３−Ｏ−（（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル）−２−（（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド）−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ］−エチル｝−（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド（１２）の調製
【０５３６】
[0543]ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ）中の１１（１２２ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）の溶液に、５−フェニルテトラゾール（２７ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ−ジイソプロピルホスホルアミダイト（４２μＬ、０．１２４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で１時間攪拌し、その後、０℃まで冷却した後にｍ−クロロ過安息香酸（４６ｍｇ、７７％、０．１８６ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を低温で１時間攪拌した後、室温まで温まらせた。
【０５３７】
[0544]ＮａＨＳＯ３水溶液（１０％、１５ｍＬ）を加え、混合物を室温で２０分間攪拌した。その後、混合物をＣＨ２Ｃｌ２（３×１５ｍＬ）で抽出し、合わせた有機相を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（１５ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、フラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製（ヘキサン／アセトン、４：１）により、１２（１２９ｍｇ、９３％）が無色のシロップとして得られた。Ｒｆ  ０．２８（ヘキサン／アセトン，４：１）；［α］Ｄ２２  −２．６（ｃ  １．０，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ０．８８（ｔ，１８Ｈ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，ＣＨ３ｘ６）、１．１５〜１．３７（ｂｒ  ｍ，１１４Ｈ，ＣＨ２ｘ５７）、１．４１〜１．６４（ｂｒ  ｍ，１２Ｈ，Ｈ−４Ｌ，Ｈ−３Ｌ’）、２．１４〜２．４８（ｍ，１２Ｈ，Ｈ−２Ｌ，Ｈ−２Ｌ’）、３．４７〜３．５３（ｍ，１Ｈ，Ｈ−２）、３．５６〜３．６９（ｍ，４Ｈ，Ｈ−５，Ｈ−６Ｂ，ＮＣＨ２）、３．７５〜３．７７（ｍ，１Ｈ，Ｈ−６Ａ）、３．８２〜３．９１（ｍ，２Ｈ，ＯＣＨ２）、４．３９〜４．４９（ｍ，３Ｈ，Ｈ−４，Ｐｈ−ＣＨ２）、４．８５〜４．９２（ｍ，５Ｈ，Ｈ−１，（ＰｈＣＨ２Ｏ）２Ｐ）、５．１１〜５．１９（ｍ，７Ｈ，（ＰｈＣＨ２Ｏ）２Ｐ，Ｈ−３Ｌｘ３）、５．４９（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ  １０．０，１０．０Ｈｚ，Ｈ−３）、６．７０（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ７．５Ｈｚ，ＮＨ）、７．０２〜７．１０（ｍ，３Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、７．１９〜７．３４（ｍ，２６Ｈ，Ａｒ−Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  １４．１６（ＣＨ３）、２２．７２（ＣＨ２）、２５．０３（ＣＨ２）、２５．０５（ＣＨ２）、２５．１４（ＣＨ２）、２５．２８（ＣＨ２）、２５．３２（ＣＨ２）、２９．２３（ＣＨ２）、２９．３１（ＣＨ２）、２９．４０（ＣＨ２）、２９．４３（ＣＨ２）、２９．４８（ＣＨ２）、２９．６０（ＣＨ２）、２９．６２（ＣＨ２）、２９．６４（ＣＨ２）、２９．７２（ＣＨ２）、２９．７４（ＣＨ２）、２９．７６（ＣＨ２）、３１．９６（ＣＨ２）、３１．９８（ＣＨ２）、３４．２６（ＣＨ２）、３４．３４（ＣＨ２）、３４．４４（ＣＨ２）、３４．５４（ＣＨ２）、３８．９９（Ｃ−２Ｌ）、３９．１８（Ｃ−２Ｌ）、４０．９８（Ｃ−２Ｌ）、４９．１２（ＮＣＨ２）、５５．４３（Ｃ−２）、６６．１０（ＯＣＨ２）、６８．５５（Ｃ−６）、６９．４５〜６９．６４（ｍ，（ＰｈＣＨ２Ｏ）２Ｐ）、６９．９０（Ｃ−３Ｌ）、７０．２０〜７０．３２（ｍ，（ＰｈＣＨ２Ｏ）２Ｐ）、７０．４９（Ｃ−３Ｌ）、７０．９８（Ｃ−３Ｌ）、７２．７１（Ｃ−３）、７３．３０（Ｐｈ−ＣＨ２）、７３．９７（ｄ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，Ｈ−４）、７４．３０（Ｃ−５）、９９．３５（Ｃ−１）、１１９．７４（ＣＨ−Ａｒ）、１２０．５０（ＣＨ−Ａｒ）、１２５．５３（ＣＨ−Ａｒ）、１２７．５０（ＣＨ−Ａｒ）、１２７．５５（ＣＨ−Ａｒ）、１２７．９７（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．０８（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．１２（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．３０（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．５４（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．７０（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．７３（ＣＨ−Ａｒ）、１２８．８７（ＣＨ−Ａｒ）、１３０．６０（Ｃ��−Ａｒ）、１３５．１６（Ｃ−Ａｒ）、１３５．２１（Ｃ−Ａｒ）、１３５．６０（Ｃ−Ａｒ）、１３５．６５（Ｃ−Ａｒ）、１３８．１４（Ｃ−Ａｒ）、１４３．８２（Ｃ−Ａｒ）、１５１．０２（ｄ，Ｊ  ５．５Ｈｚ，Ｃ−Ａｒ）、１６９．６５（Ｃ＝Ｏ）、１７０．０６（Ｃ＝Ｏ）、１７０．１７（Ｃ＝Ｏ）、１７３．１５（Ｃ＝Ｏ）、１７３．１９（Ｃ＝Ｏ）、１７３．３５（Ｃ＝Ｏ）；ＭＡＬＤＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）  Ｃ１３３Ｈ２１０Ｎ２Ｏ２１Ｐ２［Ｍ＋Ｎａ］＋の計算値：２２５６．４８０１、実測値：２２５６．５１９８。
【０５３８】
[0545]実施例８：Ｎ−（３−ヒドロキシフェニル）−Ｎ−｛２−デオキシ−４−Ｏ−ホスホノ−３−Ｏ−（（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル）−２−（（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド）−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ］−エチル｝−（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド（２）の調製
【０５３９】
[0546]新鮮に蒸留したＴＨＦ（７０ｍＬ）中の１１（１４６ｍｇ、０．０７４ｍｍｏｌ）の溶液に、木炭担持パラジウム（５％、４５ｍｇ）を加え、混合物を室温、水素雰囲気で２４時間攪拌した。混合物を濾過し、濾液を濃縮した。残渣をフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して（ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ、９：１→ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、４：１：０．１）、ジオキサン−ＣＨＣｌ３混合物（９５：５）から凍結乾燥した後に、ＪＬ−２６５（２）（１１１ｍｇ、８８％）が白色の綿毛状固形物として得られた。Ｒｆ  ０．５７（ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ，４：１：０．１）；［α］Ｄ２２  −０．６（ｃ  ０．５，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ０．８９（ｔ，１８Ｈ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，ＣＨ３ｘ６）、１．１２〜１．３９（ｂｒ  ｍ，１１４Ｈ，ＣＨ２ｘ５７）、１．４３〜１．６６（ｂｒ  ｍ，１２Ｈ，Ｈ−４Ｌ，Ｈ−３Ｌ’）、２．２０〜２．４７（ｍ，１０Ｈ，Ｈ−２Ｌｘ４，Ｈ−２Ｌ’）、２．５５〜２．７２（ｍ，２Ｈ，Ｈ−２Ｌｘ２）、３．６１〜３．７４（ｍ，４  Ｈ，Ｈ−５，Ｈ−６Ｂ，ＮＣＨ２）、３．８３〜３．９４（ｍ，３Ｈ，Ｈ−２，ＯＣＨ２）、４．０１〜４．０３（ｍ，１Ｈ，Ｈ−６Ａ）、４．２０〜４．２５（ｍ，１Ｈ，Ｈ−４）、４．４８（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，Ｈ−１）、５．１０〜５．２６（ｍ，４Ｈ，Ｈ−３，Ｈ−３Ｌ）、６．６５（ｄ．１Ｈ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）、６．８１〜６．８７（ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、７．２５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０，８．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）；ＭＡＬＤＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）  Ｃ９８Ｈ１７９Ｎ２Ｏ１８Ｐ［Ｍ＋Ｎａ］＋の計算値：１７２６．２７９０、実測値：１７２６．２７９４。
【０５４０】
[0547]実施例９：Ｎ−（３−ホスホノキシフェニル）−Ｎ−｛２−デオキシ−４−Ｏ−ホスホノ−３−Ｏ−（（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカノイル）−２−（（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド）−β−Ｄ−グルコピラノシルオキシ］−エチル｝−（Ｒ）−３−テトラデカノイルオキシテトラデカンアミド（３）の調製
【０５４１】
[0548]１１の包括的な脱保護について記載したものと同様の様式で、新鮮に蒸留したＴＨＦ（７５ｍＬ）中の１２（２０３ｍｇ、０．０９１ｍｍｏｌ）及び木炭担持パラジウム（５％、４５ｍｇ）の溶液を、水素雰囲気下、室温で２４時間攪拌した。混合物を濾過し、濾液を濃縮し、生じた残基をフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して（ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ、９：１→ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ、２：１：０．２）、ジオキサン−ＣＨＣｌ３混合物（９５：５）から凍結乾燥した後に、ＪＬ−２６６（３）（１４５ｍｇ、８９％）が白色の綿毛状固形物として得られた。Ｒｆ  ０．５１（ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ／Ｈ２Ｏ／ＮＨ４ＯＨ，２：１：０．２：０．１）；［α］Ｄ２２  −０．４（ｃ  ０．５，ＣＨＣｌ３）；１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ  ０．８９（ｔ，１８Ｈ，Ｊ  ６．５Ｈｚ，ＣＨ３ｘ６）、１．１８〜１．３９（ｂｒ  ｍ，１１４Ｈ，ＣＨ２ｘ５７）、１．４９〜１．６８（ｂｒ  ｍ，１２Ｈ，Ｈ−４Ｌ，Ｈ−３Ｌ’）、２．２０〜２．４７（ｍ，１０Ｈ，Ｈ−２Ｌｘ４，Ｈ−２Ｌ’）、２．５５〜２．７２（ｍ，２Ｈ，Ｈ−２Ｌｘ２）、３．５１〜３．８０（ｂｒ  ｍ，Ｈ−２，Ｈ−５，Ｈ−６Ｂ，ＮＣＨ２）、３．８５〜３．９９（ｂｒ  ｍ，３Ｈ，Ｈ−６Ａ，ＯＣＨ２）、４．２１〜４．２８（ｂｒ  ｍ，１Ｈ，Ｈ−４）、４．５６（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，Ｈ−１）、５．１１〜５．２７（ｍ，４Ｈ，Ｈ−３，Ｈ−３Ｌ）、６．８８（ｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）、７．２０〜７．２８（ｂｒ  ｍ，２Ｈ，Ａｒ−Ｈ）、７．３５（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ  ８．０，８．０Ｈｚ，Ａｒ−Ｈ）；ＭＡＬＤＩ−ＭＳ（ｍ／ｚ）  Ｃ９８Ｈ１８０Ｎ２Ｏ２１Ｐ２［Ｍ＋Ｎａ］＋の計算値：１８０６．２４５８、実測値：１８０６．２５０２。
【０５４２】
[0549]実施例１０
【０５４３】
[0550]６〜８週齢の病原体を有さない雌のＣ５７ＢＬ６マウスを、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（カナダ、ケベック州Ｓｔ．Ｃｏｎｓｔａｎｔ）から購入し、施設の指針に従って、水及び食料を自由に与え、フィルターで制御された空気循環を用いて飼育した。
【０５４４】
[0551]本研究で使用したＣ３腫瘍株化細胞は、前臨床子宮頸癌研究の十分に記載されているマウスモデルである。ＨＰＶ１６発現Ｃ３細胞は、それ自身のプロモーター下の完全ＨＰＶ１６ゲノム及び活性化ｒａｓ癌遺伝子で形質転換させたＢ６マウス胚細胞に由来する。Ｃ３株化細胞は、皮下注射した際に腫瘍を発生し、Ｃ３腫瘍細胞移植の前又は後に投与したワクチンの有効性を調べるために、癌攻撃研究において使用されている。Ｃ３株化細胞を、１０％の熱失活ウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、２ｍＭのｌ−グルタミン、５０ｍＭの２−メルカプトエタノール、ペニシリン、及びストレプトマイシンを添加したイスコフ改変ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ、Ｓｉｇｍａ、モンタナ州Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）中で維持した。細胞を３７℃／５％のＣＯ２でインキュベートした。
【０５４５】
[0552]ＣＴＬエピトープを含有するＨＰＶ１６Ｅ７（Ｈ−２Ｄｂ）ペプチド４９−６７、ＲＡＨＹＮＩＶＴＦ（配列番号１）を、Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ  Ｇｒｏｕｐ（米国カリフォルニア州Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ）によって、ＣＤ４＋ヘルパーＴエピトープを含有するＰＡＤＲＥと融合させた。このペプチドを本明細書中以降ＦＰと呼ぶ。
【０５４６】
[0553]本明細書中のワクチンを配合するために、１６０マイクログラムのＦＰを、ｔｅｒｔ−ブタノールに溶かしたＤＯＰＣ／コレステロール混合物（１０：１、ｗ／ｗ、Ｌｉｐｏｉｄ  ＧｍｂＨ、ドイツ）と混合した。リピドＡ模倣体を含める場合は、１６０マイクログラムのＪＬ−２６５又はＪＬ−２６６をＦＰ／ＤＯＰＣ／コレステロール混合物に加えた。混合物を凍結乾燥し、その後、７００マイクロリットルの滅菌水で再溶解させて、リピドＡ模倣体を含む又は含まない、抗原を含有するリポソームを配合した。それぞれのワクチン用量は５０マイクロリットルであり、１０マイクログラムのリピドＡ模倣体（ＪＬ−２６５又はＪＬ−２６６）を含んで又含まずに、１０マイクログラムのＦＰペプチドを含有していた。
【０５４７】
[0554]これらのリポソームに基づくワクチン製剤の有効性を試験するために、マウスの群（７匹のマウス／群）の左脇腹に、１００マイクロリットルのＨＢＳＳ培地に懸濁させた５×１０Ｅ５個のＣ３細胞を皮下移植した。５日後、マウスの右脇腹に５０マイクロリットルのワクチンを皮下でワクチン接種した。第１群のマウスには、リピドＡ模倣体を含有しないリポソーム中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第２群のマウスには、ＪＬ−２６５（１０マイクログラム）を含有するリポソーム中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第３群のマウスには、ＪＬ−２６６（１０マイクログラム）を含有するリポソーム中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第４群のマウスは腫瘍成長の対照として役割を果たし、抗原もリピドＡ模倣体も含有しない生理食塩水をワクチン接種した。
【０５４８】
[0555]図４に示すように、ＪＬ−２６５又はＪＬ−２６６リピドＡ模倣体のどちらかを含有するワクチンで免疫化した第２及び３群のマウスは、対照群のマウスと比較して、２８日目に有意により小さな腫瘍体積を有していた。
【０５４９】
[0556]実施例１１
【０５５０】
[0557]６〜８週齢の病原体を有さない雌のＣ５７ＢＬ６マウスを、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（カナダ、ケベック州Ｓｔ．Ｃｏｎｓｔａｎｔ）から購入し、施設の指針に従って、水及び食料を自由に与え、フィルターで制御された空気循環を用いて飼育した。
【０５５１】
[0558]本研究で使用したＣ３腫瘍株化細胞は、前臨床子宮頸癌研究の十分に記載されているマウスモデルである。ＨＰＶ１６発現Ｃ３細胞は、それ自身のプロモーター下の完全ＨＰＶ１６ゲノム及び活性化ｒａｓ癌遺伝子で形質転換させたＢ６マウス胚細胞に由来する。Ｃ３株化細胞は、皮下注射した際に腫瘍を発生し、Ｃ３腫瘍細胞移植の前又は後に投与したワクチンの有効性を調べるために、癌攻撃研究において使用されている。Ｃ３株化細胞を、１０％の熱失活ウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、２ｍＭのｌ−グルタミン、５０ｍＭの２−メルカプトエタノール、ペニシリン、及びストレプトマイシンを添加したイスコフ改変ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ、Ｓｉｇｍａ、モンタナ州Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）中で維持した。細胞を３７℃／５％のＣＯ２でインキュベートした。
【０５５２】
[0559]ＣＴＬエピトープを含有するＨＰＶ１６Ｅ７（Ｈ−２Ｄｂ）ペプチド４９−６７、ＲＡＨＹＮＩＶＴＦ（配列番号１）を、Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ  Ｇｒｏｕｐ（米国カリフォルニア州Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ）によって、ＣＤ４＋ヘルパーＴエピトープを含有するＰＡＤＲＥと融合させた。このペプチドを本明細書中以降ＦＰと呼ぶ。
【０５５３】
[0560]本明細書中のワクチンを配合するために、ＦＰペプチドをジメチルスルホキシドに溶かし、不完全フロイントアジュバント（ＩＦＡ）と混合した。また、リピドＡ模倣体ＪＬ−２６５及びＪＬ−２６６もジメチルスルホキシドに溶かし、示した場合はＦＰ／ＩＦＡ混合物に加えた。それぞれのワクチン用量は５０マイクロリットルであり、１０マイクログラムのＦＰ抗原を含有していた。リピドＡ模倣体の用量は１０マイクログラムであった。
【０５５４】
[0561]これらの油に基づくワクチン製剤の有効性を試験するために、マウスの群（７匹のマウス／群）の左脇腹に、１００マイクロリットルのＨＢＳＳ培地に懸濁させた５×１０Ｅ５個のＣ３細胞を皮下移植した。５日後、マウスの右脇腹に５０マイクロリットルのワクチンを皮下でワクチン接種した。第１群のマウスには、リピドＡ模倣体を含有しない油中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第２群のマウスには、ＪＬ−２６５（１０マイクログラム）を含有する油中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第３群のマウスには、ＪＬ−２６６（１０マイクログラム）を含有する油中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第４群のマウスは腫瘍成長の対照として役割を果たし、抗原もリピドＡ模倣体も含有しない生理食塩水をワクチン接種した。
【０５５５】
[0562]図５に示すように、ＪＬ−２６５又はＪＬ−２６６リピドＡ模倣体のどちらかを含有するワクチンで免疫化した第２及び３群のマウスは、対照群のマウスと比較して、２８日目に有意により小さな腫瘍体積を有していた。
【０５５６】
[0563]実施例１２
【０５５７】
[0564]６〜８週齢の病原体を有さない雌のＣ５７ＢＬ６マウスを、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（カナダ、ケベック州Ｓｔ．Ｃｏｎｓｔａｎｔ）から購入し、施設の指針に従って、水及び食料を自由に与え、フィルターで制御された空気循環を用いて飼育した。
【０５５８】
[0565]本研究で使用したＣ３腫瘍株化細胞は、前臨床子宮頸癌研究の十分に記載されているマウスモデルである。ＨＰＶ１６発現Ｃ３細胞は、それ自身のプロモーター下の完全ＨＰＶ１６ゲノム及び活性化ｒａｓ癌遺伝子で形質転換させたＢ６マウス胚細胞に由来する。Ｃ３株化細胞は、皮下注射した際に腫瘍を発生し、Ｃ３腫瘍細胞移植の前又は後に投与したワクチンの有効性を調べるために、癌攻撃研究において使用されている。Ｃ３株化細胞を、１０％の熱失活ウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）、２ｍＭのｌ−グルタミン、５０ｍＭの２−メルカプトエタノール、ペニシリン、及びストレプトマイシンを添加したイスコフ改変ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ、Ｓｉｇｍａ、モンタナ州Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ）中で維持した。細胞を３７℃／５％のＣＯ２でインキュベートした。
【０５５９】
[0566]ＣＴＬエピトープを含有するＨＰＶ１６Ｅ７（Ｈ−２Ｄｂ）ペプチド４９−６７、ＲＡＨＹＮＩＶＴＦ（配列番号１）を、Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ  Ｇｒｏｕｐ（米国カリフォルニア州Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ）によって、ＣＤ４＋ヘルパーＴエピトープを含有するＰＡＤＲＥと融合させた。このペプチドを本明細書中以降ＦＰと呼ぶ。
【０５６０】
[0567]本明細書中に記載のワクチンを配合するために、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）（１２０ミリグラム／ｍＬ）及びコレステロール（１２ミリグラム／ｍＬ）の１０：１混合物をｔｅｒｔ−ブタノールに溶かした。ＦＰ抗原は最初にジメチルスルホキシドに溶かしたが、ＦＰの水懸濁液も使用することができ、その後ＤＯＰＣ／コレステロール／ｔｅｒｔ−ブタノール混合物に加えた。リピドＡ模倣体ＪＬ−２６５及びＪＬ−２６６は最初にジメチルスルホキシドに溶かした。示した場合は、ＪＬ−２６５又はＪＬ−２６６もＦＰ／ＤＯＰＣ／ｔｅｒｔ−ブタノール混合物に加えた。リピドＡ模倣体を含む又は含まない抗原の乾燥均質混合物は、製剤中に存在する溶媒及び水を凍結乾燥によって除去することによって調製した。その後、乾燥混合物を、鉱物油に基づくモデル疎水性担体である不完全フロイントアジュバントに懸濁させた。この製剤を本明細書中以降デポヴァックス（ＤＰＸ）と呼ぶ。
【０５６１】
[0568]これらの油に基づくワクチン製剤の有効性を試験するために、マウスの群（８匹のマウス／群）の左脇腹に、１００マイクロリットルのＨＢＳＳ培地に懸濁させた５×１０Ｅ５個のＣ３細胞を皮下移植した。５日後、マウスの右脇腹に５０マイクロリットルのワクチンを皮下でワクチン接種した。第１群のマウスには、リピドＡ模倣体を含有しないＤＰＸ中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第２群のマウスには、ＪＬ−２６５（１０マイクログラム）を含有するＤＰＸ中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第３群のマウスには、ＪＬ−２６６（１０マイクログラム）を含油するＤＰＸ中のＦＰペプチド（１０マイクログラム）をワクチン接種した。第４群のマウスは腫瘍成長の対照として役割を果たし、抗原もリピドＡ模倣体も含有しない生理食塩水をワクチン接種した。
【０５６２】
[0569]図６に示すように、ＪＬ−２６５又はＪＬ−２６６リピドＡ模倣体のどちらかを含有するワクチンで免疫化した第２及び３群のマウスは、対照群のマウスと比較して、４０日目に有意により小さな腫瘍体積を有していた。
【０５６３】
[0570]実施例１３
【０５６４】
[0571]６〜８週齢の、病原体を有さない雌のＣ３Ｈ／ＨｅＯｕＪ（野生型）マウス及びＣ３Ｈ／ＨｅＪ（ＴＬＲ４突然変異体）マウスをＪａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（米国メイン州Ｂａｒ  Ｈａｒｂｏｒ）から購入し、施設の指針に従って、水及び食料を自由に与え、フィルターで制御された空気循環を用いて飼育した。
【０５６５】
[0572]樹状細胞を、以下のように野生型又はＴＬＲ４突然変異体マウスのどちらかの骨髄から調製した。大腿骨及び脛骨の骨をナイーブマウスから単離し、無菌的条件下にてリン酸緩衝生理食塩水でフラッシュした。塩化アンモニウムカリウム溶解溶液を使用して赤血球を溶解した。細胞を計数し、１０％のウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ、カナダ、オンタリオ州Ｎｅｐｅａｎ）、１％のペニシリン−ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ、カナダ、オンタリオ州Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ）、２ミリモーラーのＬ−グルタミン（Ｇｉｂｃｏ）、１％のＨＥＰＥＳ緩衝液（Ｇｉｂｃｏ）、及び５．５ミリモーラーのベータ−メルカプトエタノール（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、カナダ、オンタリオ州Ｏａｋｖｉｌｌｅ）を含有する完全ＲＭＰＩ１６４０培地に、１．２×１０Ｅ６個の細胞／ミリリットルの濃度で再懸濁させた。細胞を、１０ナノグラム／ミリリットルのＧＭ−ＣＳＦ（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ、米国ニュージャージー州Ｒｏｃｋｙ  Ｈｉｌｌ）を添加した６ウェルプレート中で８日間培養し、さらなる培地を３日目及び６日目に加えた。７日目に、細胞を、ＤＭＳＯ中で調製したＪＬ−２６５若しくはＪＬ−２６６、又はＤＭＳＯビヒクル対照、又はポリＩ：Ｃ（Ｔｈｅｒｍｏ−Ｆｉｓｈｅｒ）、又はリポ多糖（ＬＰＳ、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）で刺激した。非接着細胞を８日目に収集し、ＣＤ１１ｃ（クローン）、ＣＤ４０（クローン）、又はＣＤ８６（クローン）に特異的な、蛍光色素とコンジュゲートした抗体で染色した。細胞を、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、カナダ、オンタリオ州Ｍｉｓｓｉｓｓａｕｇａ）を使用したフローサイトメトリー及びＷｉｎ  Ｌｉｓｔ  ３Ｄ  ７．０ソフトウェア（Ｖｅｒｉｔｙ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ  Ｈｏｕｓｅ、米国メイン州Ｔｏｐｓｈａｍ）によって分析した。
【０５６６】
[0573]結果は、最初にＣＤ１１ｃ陽性細胞（樹状細胞マーカー）に対してゲートし、その後、ＣＤ４０又はＣＤ８６について二重陽性であったもののパーセントを決定することによって分析した。結果を図７に示す。野生型樹状細胞では、ポリＩ：Ｃ（ＴＬＲ３作用剤）及びＬＰＳ（ＴＬＲ４作用剤）は、終夜の刺激後に、樹状細胞上のＣＤ４０及びＣＤ８６の両方の発現の増加を刺激した。新規リピドＡ模倣体ＪＬ−２６５及びＪＬ−２６６も、野生型樹状細胞においてＣＤ４０及びＣＤ８６の両方の発現の増加を誘導した。ＴＬＲ４突然変異体の樹状細胞は、野生型樹状細胞と匹敵してポリＩ：Ｃ刺激に応答したが、ＬＰＳ及び新規リピドＡ模倣体に対する応答は有意に低下していた。これらの結果は、本発明に記載の新規リピドＡ模倣体がＴＬＲ４を介してシグナル伝達することを示している。
【０５６７】
[0574]実施例１４
【０５６８】
[0575]６〜８週齢の病原体を有さない雌のＣ５７ＢＬ６マウスを、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（カナダ、ケベック州Ｓｔ．Ｃｏｎｓｔａｎｔ）から購入し、施設の指針に従って、水及び食料を自由に与え、フィルターで制御された空気循環を用いて飼育した。
【０５６９】
[0576]本実施例で使用したペプチドは、Ｐｏｌｙｐｅｐｔｉｄｅ  Ｇｒｏｕｐ（米国カリフォルニア州Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ）によって合成された。ワクチンは、ＭＨＣクラスＩエピトープＨＰＶ１６Ｅ７（Ｈ−２Ｄｂ）４９−６７（ＲＡＨＹＮＩＶＴＦ、Ｒ９Ｆ、配列番号１）及びＭＨＣクラスＩＩエピトープ破傷風毒素８３０−８４３（ＦＮＮＦＴＶＳＦＷＬＲＶＰＫＶＳＡＳＨＬＥ、Ｆ２１Ｅ、配列番号２３）を含有していた。
【０５７０】
[0577]本明細書中に記載のワクチンを配合するために、ジオレオイルホスファチジルコリン（ＤＯＰＣ）（１２０ミリグラム／ｍＬ）及びコレステロール（１２ミリグラム／ｍＬ）の１０：１混合物をｔｅｒｔ−ブタノールに溶かした。Ｒ９Ｆ及びＦ２１Ｅペプチド抗原は最初にジメチルスルホキシドに溶かし、その後、ＤＯＰＣ／コレステロール／ｔｅｒｔ−ブタノール混合物に加えた。リピドＡ模倣体ＪＬ−２６５及びＪＬ−２６６は最初にジメチルスルホキシドに溶かした。示した場合は、ＪＬ−２６５又はＪＬ−２６６もＦＰ／ＤＯＰＣ／ｔｅｒｔ−ブタノール混合物に加えた。リピドＡ模倣体を含む又は含まない抗原の乾燥均質混合物は、製剤中に存在する溶媒及び水を凍結乾燥によって除去することによって調製した。その後、乾燥混合物を、鉱物油に基づくモデル疎水性担体である不完全フロイントアジュバントに懸濁させた。この製剤を本明細書中以降デポヴァックス（ＤＰＸ）と呼ぶ。
【０５７１】
[0578]ワクチンの免疫原性を試験するために、ナイーブマウス（ｎ＝５匹）を、リピドＡ模倣体なし（第１群）、５マイクログラムのＪＬ−２６５（第２群）、又は５マイクログラムのＪＬ−２６６（第３群）と共にＲ９Ｆ及びＦ２１Ｅを含有する５０マイクロリットルのＤＰＸワクチンで皮下免疫した。第４群のマウス（ｎ＝２匹）は免疫化せず、ナイーブ対照として役割を果たした。ワクチン接種の８日後、すべての群のマウスを屠殺し、脾臓を採取した。脾細胞の単細胞懸濁液を５×１０Ｅ６個の細胞／ミリリットルの濃度で調製し、１００マイクロリットルを、抗ＩＦＮ−ガンマで事前にコーティングされた９６ウェルＥＬＩＳＰＯＴプレート（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）のウェルに加えた。二つ組で、２０マイクログラム／ミリリットルの無関係のペプチド抗原若しくはＲ９Ｆを含有する１００マイクロリットルの培地、又はペプチドを含有しない培地をバックグラウンド対照として、脾臓細胞に加えた。プレートを終夜３７℃インキュベートし、翌日、製造者の指示に従って、ＡＥＣ色素原（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ）を使用して展開した。スポットはＥＬＩＳＰＯＴプレートリーダー（Ｃ．Ｔ．Ｌ．、Ｓｈａｋｅｒ  Ｈｅｉｇｈｔｓ）を使用して定量した。
【０５７２】
[0579]図８に示すように、ＪＬ−２６５リピドＡ模倣体（第２群）はＲ９Ｆペプチドに対する抗原特異的ＩＦＮ−ガンマ応答を増強させなかったが、ＪＬ−２６６（第３群）リピドＡ模倣体は増強させた。
【０５７３】
[0580]本明細書中で引用されているすべての出版物及び特許出願は、それぞれの個々の出版物又は特許出願が具体的かつ個々に参考として組み込まれていると示されているかのように、本明細書中に参考として組み込まれている。任意の出版物の引用は、出願日前でのその開示のためであり、先行発明の理由に基づいて本発明がそのような出版物に先行する権利を有さないという承認として解釈されるべきでない。
【０５７４】
[0581]前述の発明は、理解を明瞭にする目的のために例示及び実施例によってある程度詳細に記載されているが、本発明の教示に鑑みて、添付の特許請求の範囲から逸脱せずにそれに特定の変化及び改変を行い得ることは、当業者には容易に明らかである。
【０５７５】
[0582]本明細書及び添付の特許請求の範囲中で使用する単数形「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、及び「その（ｔｈｅ）」には、内容により明らかにそうでないと指示される場合以外は、複数形の言及が含まれることに注意する必要がある。別段に定義しない限りは、本明細書中で使用するすべての技術用語及び科学用語は、本発明が属する分野の技術者に一般的に理解されるものと同じ意味を有する。
【０５７６】
[0583]明細書及び特許請求の範囲中で使用する語句「及び／又は」は、そのように結合された要素の「一方又は両方」、すなわち、一部の場合に接続的に存在し、他の場合には非接続的に存在する要素を意味すると理解されるべきである。「及び／又は」を用いて列挙した複数の要素は、同じ様式で、すなわち、そのように結合された要素の「１つ又は複数」と解釈されるべきである。具体的に同定した要素に関連しているか関連していないかにかかわらず、「及び／又は」節によって具体的に同定した要素以外の他の要素も任意選択で存在し得る。したがって、非限定的な例として、「Ａ及び／又はＢ」への言及は、「含む」などのオープンエンドの言葉と併せて使用した場合、一実施形態ではＡのみ（任意選択でＢ以外の要素が含まれる）、別の実施形態ではＢのみ（任意選択でＡ以外の要素が含まれる）、さらに別の実施形態ではＡ及びＢの両方（任意選択で他の要素が含まれる）などを指す可能性がある。
【０５７７】
[0584]明細書及び特許請求の範囲中で使用する「又は」には、上記定義した「及び／又は」と同じ意味が包含されると理解されるべきである。たとえば、リストの項目を分離する場合、「又は」又は「及び／又は」は、包括的であると解釈されるべきである、すなわち、数個の要素又は要素のリストの少なくとも１つが包含されるが、そのうちの複数、及び任意選択で追加の列挙していない項目も含まれる。
【０５７８】
[0585]明細書又は添付の特許請求の範囲中にかかわらず、本明細書中で使用する移行用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含まれる（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「保有する（ｃａｒｒｙｉｎｇ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ）」などは、包括的又はオープンエンド（すなわち、含むがそれだけに限定されないことを意味する）であると理解され、これらは列挙していない要素、材料、又は方法ステップを排除しない。移行語句「からなる」及び「から本質的になる」のみが、特許請求の範囲及び本明細書中の例示的な実施形態の段落に関してそれぞれクローズド又は部分的にクローズドの移行語句である。移行語句「からなる」は、具体的に列挙していないすべての要素、ステップ、又は成分を排除する。移行語句「から本質的になる」は、範囲を指定した要素、材料、又はステップ、並びに本明細書中に開示及び／又は特許請求した本発明の基本特徴（複数可）に実質的な影響を与えないものに限定する。
【図１】
2020180142.tif 000102
【図２】
2020180142.tif 000103
【図３】
2020180142.tif 000104
【図４】
2020180142.tif 000105
【図５】
2020180142.tif 000106
【図６】
2020180142.tif 000107
【図７】
2020180142.tif 000108
【図８】
2020180142.tif 000109
【配列表】
2020180142000001.app
【手続補正書】
【提出日】令和2年7月10日(2020.7.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
以下の式の化合物又は薬学的に許容されるその塩：
【化１】
2020180142.tif 000110
［式中、
グリコシド結合はα又はβであり、
ＸはＯ又はＮＨであり、
ｍは０〜６であり、
Ｒ１は、ベンゼン環上のＮ置換基に対してオルト、メタ、又はパラ位に配置されており、−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、−ＣＯＯＨ、−ＳＯ３Ｈ、−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｎＣＯＯＨ、又は−（Ｏ）ｋ（ＣＨ２）ｑＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２であり、ここで、ｋは０又は１であり、ｎは０〜４であり、ｑは２〜６であり、
Ｒ２は、ベンゼン環の任意の残りの位置に配置され、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃｌ、−Ｂｒ、−Ｆ、−ＣＯＯＨ、−ＣＮ、−ＳＯ３Ｈ、−ＯＣＨ３、−ＮＯ２、又は任意選択で置換若しくは非置換のＣ１〜６アルキルであり、
Ｒ３、Ｒ４、及びＲ５は、それぞれ独立して脂質鎖置換基であり、
Ｒ６は、−Ｈ、−Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）２、又は−ＣＨ２ＣＯＯＨである］。
【請求項２】
それぞれの脂質鎖置換基が独立して、
【化２】
2020180142.tif 000111
であり、式中、
Ｚ１、Ｚ２、及びＺ３は、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−又は−ＣＨ２−であり、
Ｘ３は−Ｈ又は−（ＣＨ２）ｐ３ＣＨ３であり、
Ｘ４は、−ＮＨ−、−Ｏ−、又は−ＣＨ２−であり、
ｐ、ｐ１、ｐ２、及びｐ３は、独立して０〜３０であり、
ｒ、ｓ、及びｔは、独立して０〜６である、請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項３】
それぞれの脂質鎖置換基が独立して、
【化３】
2020180142.tif 000112
である、請求項１又は２に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項４】
【化４】
2020180142.tif 000113
である、請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項５】
【化５】
2020180142.tif 000114
である、請求項１に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項６】
リピドＡ若しくはリポ多糖（ＬＰＳ）拮抗活性を有するか、及び／又は免疫賦活活性を有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項７】
トール様受容体４（ＴＬＲ４）と結合することができる、請求項１〜６のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩と、薬学的に許容される担体、希釈剤、又は賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項９】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩と抗原とを含む、ワクチン組成物。
【請求項１０】
リポソーム、疎水性物質の連続相を含む担体、及びヘルパーＴエピトープをさらに含む、請求項９に記載のワクチン組成物。
【請求項１１】
前記抗原が、（ｉ）たとえば、エボラウイルス、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、インフルエンザウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、百日咳菌、バチルス・アントラシス、又は四日熱マラリア原虫などの、ウイルス、細菌、若しくは原虫に由来するもの、（ｉｉ）たとえばサバイビン抗原などの膜表面結合癌抗原、又はたとえばコカインなどの毒素である、請求項９又は１０に記載のワクチン組成物。
【請求項１２】
前記抗原が、少なくとも１つのＢ細胞エピトープ、少なくとも１つのＣＴＬエピトープ、又はその組合せを含む、請求項９〜１１のいずれか一項に記載のワクチン組成物。
【請求項１３】
対象において抗原に対する抗体及び／又は細胞性免疫応答を誘導又は強化するための、請求項９〜１２のいずれか一項に記載のワクチン組成物。
【請求項１４】
癌、感染性疾患、又は嗜癖疾患を治療又は予防するための、請求項９〜１２のいずれか一項に記載のワクチン組成物。
【請求項１５】
請求項１〜７のいずれか一項に記載の化合物又は薬学的に許容されるその塩が、前記化合物又は薬学的に許容されるその塩を含まない対照ワクチン組成物と比較して、前記癌、感染性疾患、又は嗜癖疾患の治療又は予防における前記ワクチン組成物の有効性を改善する、請求項１４に記載のワクチン組成物。
【外国語明細書】
2020180142000001.pdf