(57)【要約】      （修正有）【課題】皮膚上の局所適用のための不織布膜の調製方法の提供。【解決手段】１つ以上の生体適合性ポリマーの好適な溶媒系での溶液を調製し、この溶液を電界紡糸することと同時に、好適な溶媒系での活性剤の溶液を、適切な時間スプレーして、該不織布膜の総重量に対して２５重量％〜８０重量％の量で前記活性剤を含む不織布膜を得ること等を特徴とする、不織布膜の調製方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
皮膚上の局所適用のための不織布膜の調製方法であって、
前記不織布膜は、ポリマーナノ繊維と、前記不織布膜の総重量に対して２５〜８０重量％の量で含まれる活性剤とを含み、
前記方法は以下のステップ、すなわち、
ａ）  １つ以上の生体適合性ポリマーの好適な溶媒系での溶液を調製するステップと、
ｂ）  前記活性剤の好適な溶媒系での溶液を調製するステップであって、その溶媒系ではステップａ）由来の１つもしくは複数の該ポリマーが不溶であり、
ステップｂ）の溶媒系はステップａ）の溶媒系とは異なる、該ステップと、
ｃ）  ステップａ）由来の溶液を電界紡糸することと同時に、ステップｂ）由来の溶液を、ステップｂ）由来の溶液の流速にて適切な時間スプレーして、該不織布膜の総重量に対して２５重量％〜８０重量％の量で前記活性剤を含む不織布膜を得る、ステップと、
ｄ）  任意に、ステップｃ）から得られた該不織布膜を乾燥するステップと、
を含み、
ｅ）  前記活性剤が好適な生体適合性溶媒系に可溶であり、
ｆ）  前記不織布膜は、前記活性剤が完全に可溶化される適切な量の前記好適な生体適合性溶媒系と前記不織布膜とが接触した後３０分間で、前記不織布膜中に含まれる前記活性剤の総重量の７０％以上の量を放出することができ、
ｇ）  前記活性剤の総量が前記不織布膜の前記ポリマーナノ繊維の外側に配置されている、方法。
【請求項２】
好適な生体適合性溶媒系中に可溶である第２の活性剤をさらに含み、前記不織布膜は、前記第２の活性剤が完全に可溶化される適切な量の前記好適な生体適合性溶媒系と接触すると直ちに前記第２の活性剤を放出することができる、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
前記ポリマーナノ繊維が電界紡糸ナノ繊維である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項４】
前記不織布膜の該ポリマーナノ繊維が５０〜２０００ｎｍの平均直径を有する、請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項５】
前記ポリマーナノ繊維が、ポリグリコール酸、ポリ−Ｄ，Ｌ−乳酸、ポリ−Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド、ポリカプロラクトン、ポリジオキサノン、ポリビニルアルコール、コラーゲン、セルロース、ヒアルロン酸、ポリアミド、ポリエステル、ポリウレタン、ポリプロピレン、エラステイン、およびそれらの組み合わせから選択される１つ以上のポリマーを含む、請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項６】
前記活性剤が、前記不織布膜の総重量に対して３０〜７０重量％の量を構成する、請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項７】
前記活性剤が治療薬および／または化粧剤である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項８】
前記活性剤がレスベラトロールまたはビタミンＣである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は活性剤の即時放出システムに関する。特に、本発明は、皮膚上の局所使用のための、ポリマーナノ繊維と多量の少なくとも１つの活性剤とを含む不織布膜、および前記膜の調製法に関する。本発明はさらに、前記膜を含む化粧品または衛生用品およびキットならびにそれらの治療および化粧用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚は、表皮および真皮という２つの異なる層から構成される、ヒトおよび動物の身体の最大の器官である。表皮は外層であり、ケラチノサイトと、その主な機能が化粧および太陽光線保護目的で重要な役割を果たすメラニンの生成である、相当量のメラノサイトとから構成される。さらに、真皮すなわち内層は、コラーゲンおよび弾性繊維の網状組織から構成され、表皮よりも厚く、肌にコシとハリを与える。
【０００３】
皮膚には複数の機能がある。これらには、外部物質または生物の侵入および内部成分の喪失を防ぎ、また紫外線放射のフィルターとしての役割も果たすバリア機能が含まれる。
【０００４】
皮膚の他の機能は、
真菌、細菌、ウイルス感染、自己免疫および腫瘍性疾患を予防する免疫機能；
創傷治癒、紫外線放射に起因する皮膚潰瘍および細胞損傷における修復機能；
栄養の吸収、代謝廃棄物の除去を可能にし、体温の調節に介入する血管機能；
外部環境との知覚および伝達機能ならびに他の個体（other individuals）に対する関係またはケアする機能である。
【０００５】
皮膚創傷の治癒は、皮膚が損傷後に自ら修復する複雑な過程である。正常な皮膚では、表皮および真皮が定常状態でバランスがとれた状態（equilibrium）で存在し、外部環境に対する保護バリアを形成する。一旦バリアが壊れると、創傷治癒の生物学的過程が直ちに始まる。
【０００６】
さらに、我々の皮膚に対する太陽放射の悪影響を回避するためにメラニンが果たす重要な保護機能にもかかわらず、この色素の異常蓄積および異常に着色した部分の形成は、美的問題だけでなく、皮膚の健康問題も引き起こす可能性がある。人種差以外に、太陽の紫外線放射（ＵＶＲ）が皮膚色素沈着における変化の主原因であることが証明されている。皮膚の異常な黒ずみまたは色素過剰（hyperpigmentation）がある部分の出現によって特徴づけられる多くの色素過剰障害は、合成メラニンレベルの増加または表皮中のメラノサイトの増加のいずれかに起因する。メラニン産生のこのような増加は、サンスポット、すなわちシミなどの非常に一般的な障害の原因であり、さらにはアジソン病、すなわち炎症後色素過剰の原因でもある。
【０００７】
治療分野、例えば創傷治癒と、化粧品分野で、例えば皮膚の外観を改善するためのどちらにおいても、皮膚への活性剤の局所適用は非常に重要である。局所投与には、活性剤の非経口投与または経口投与と比べて全身性副作用の低減を可能にする利点がある。局所投与では、第１肝臓段階（first hepatic step）と、急速に排泄される活性剤を繰り返し経口投与することに起因する血漿レベルの変動とが回避される。
【０００８】
伝統的に、活性剤を皮膚に局所適用するための方法は、好適な溶媒中に活性剤を溶解させ、その溶液を皮膚に塗布するか、または活性剤を含むエマルジョンを塗布し、それによって皮膚からの吸収を増加させることに基づく。しかしながら、これらの方法には、炎症を起こさず、良好な触感を有する活性剤と適合性のある溶媒の選択など、様々な困難がある。さらに、エマルジョンは、物理的および化学的に不安定であり、有機または無機汚染物質によって壊れやすく、光に対して感受性であることが多く、したがってそれらの長期保存は費用がかかり、かつ困難である。さらに、多くの場合、充分な量の活性剤を含むために多量の乳化剤が必要とされ、このことは皮膚炎を引き起こし得る。最後に、ビタミンＣなどの、溶液中で不安定な活性剤の場合、活性剤が水と連続的に接触すると活性剤の酸化および分解が引き起こされるので、これらの方法は適切ではない。
【０００９】
ポリマーナノ繊維は活性剤の投与用局所担体であり、低毒性および高い生体適合性などの利点をもたらす。特許文献１には、溶媒の添加によって膜からゆっくりと徐々に放出される、ビタミンＣなどの化粧品活性剤を含むポリマーナノ繊維の網状組織が記載されている。本明細書中で記載するポリマーナノ繊維は、電界紡糸処理によって、化粧品活性剤と、ナノ繊維を形成するポリマー溶液とを含む混合物から得られる。この処理にはいくつかの欠点がある。まず、用いる溶媒はナノ繊維を形成するポリマーと活性剤との両方に適したものでなければならない。両製品に最適な溶媒を見出すことはできないので、ナノ繊維は規則性を失い、この事実は肉眼で見られる。加えて、溶液は完全に均一ではないので、膜中の活性成分の均一な用量は保証できない。一方、ナノ繊維中に含まれる活性剤を放出するために、前記ナノ繊維は少なくとも部分的に分解される必要があるので、前記放出システムが活性剤の即時放出させないように、ナノ繊維のポリマーで活性剤の粒子をコーティングする。発明者らは、本明細書中で記載するナノ繊維シートがその適用後１２０分で、その中に含まれる活性剤の約１２重量％しか放出できないことを見出した。
【００１０】
活性剤の即時放出は活性剤の迅速な吸収を可能にし、結果として活性剤の化粧または治療効果の迅速な出現を可能にする。さらに、この放出形態は、創傷治癒においてなど急性状態に特に適している可能性がある。
【００１１】
したがって、当該技術分野の問題、特に、活性剤の低い吸収もしくは不充分な放出、皮膚炎および／または活性剤の安定性の問題を克服する、速効性のある皮膚上の局所活性剤の即時放出システムを開発することが必要である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１２】
【特許文献１】特開第２００８−１７９６２９号公報
【発明の概要】
【００１３】
発明者らは、皮膚上での治療または化粧品活性剤の局所放出の安定的な新規システムであって、その適用まで膜に付着したままである多量の少なくとも１つの活性剤を含み、好ましくは不活性雰囲気下および水の非存在下での保存を可能にする前記システムを開発した。膜が、膜の総重量に対して２５重量％以上の多量の活性剤を含むという事実により、皮膚上での治療または化粧品活性を増加させることができる。
【００１４】
加えて、本発明の活性剤の放出のためのシステムは、活性剤が完全に可溶化されている好適な生体適合性溶媒系と前記不織布膜が接触した後、膜中に含まれる活性剤の総量の即時放出を実質的に可能にする。したがって、本発明の不織布膜には、迅速な効果をもたらすという利点があり、これは必要に応じて実施することができ、その適用が必要とされない間は化学的および物理的に安定なままである。
【００１５】
一方、本発明の放出システムによって、皮膚の表面積あたりの活性剤の投与量を制御することが可能であり、このことは、不十分であるかまたは多すぎるかのいずれかである活性剤の不適当な投与量となる可能性がある局所エマルジョンなどの他の処方よりも優れた利点である。さらに、それは閉鎖型システムではなく、生体適合性成分を含むだけであるので、皮膚に対して悪影響を及ぼさない。さらに、本発明の放出システムは肌触りが良く、かつ適用後にはがした場合、望ましくない残留物が残らない。
【００１６】
さらに、本発明のシステムには、活性剤が溶液中で不安定である場合に活性剤が膜中で安定なままであることを可能にし、膜中の活性剤の安定性が固体状態の乾燥活性剤の安定性に匹敵するという利点がある。さらに、最終的な膜は活性剤にとって保護的雰囲気中（例えば酸素および／または水分がない）で保存することができる。
【００１７】
したがって、本発明の第１の態様は、皮膚上に局所使用するための不織布膜であって、ポリマーナノ繊維と不織布膜の総重量に対して２５〜８０重量％の量の活性剤とを含み、活性剤が好適な生体適合性溶媒系中に可溶性であり、活性剤が完全に可溶化されている、適切な量の好適な生体適合性溶媒系と膜が接触した場合、膜が活性剤を直ちに放出することができる、前記不織布膜に関する。
【００１８】
本発明に関連して、「不織布膜」という語は、固体表面（コレクタ）上の任意に堆積させ、任意に以下の１つ以上の方法によって絡み合わせてもよい、ポリマーナノ繊維の多孔質シート（フィルム）に関する。すなわち、生体適合性のりを用いた接着、溶融または溶媒過剰などの物理的方法、ならびにニードルパンチおよび水または圧気注入器によるインターレースなどの機械的方法である。膜繊維は相互接続していても、していなくてもよく、膜繊維は切断繊維であってもよいし、または連続繊維であってもよく、１つだけの材料を含んでもよいし、または異なる繊維の組み合わせとして、もしくは異なる材料の類似した繊維の組み合わせのいずれかとして異なる材料を含んでもよい。これらの異なる構成は、製造処理中に異なる層中の同じ膜中に配置することができる。
【００１９】
任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい特定の実施形態において、本発明の膜は、０．１ｍｍ〜３ｍｍ、さらに詳細には０．３ｍｍ〜１ｍｍの厚さを有する。
【００２０】
任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい別の特定の実施形態において、不織布膜中に含まれる活性剤の総量は、活性剤がポリマーナノ繊維中の内部に配置されている、ポリマーおよび活性剤の両方の混合物の電界紡糸によって得られる膜（図４で示す）とは異なり、図２および図３で示すように、膜のポリマーナノ繊維に対して外側に配置されている。したがって、本発明の不織布膜は好適な溶媒系の存在下で活性剤を放出し、すなわち放出の機序は、ポリマーナノ繊維の分解によってではなく、活性剤の可溶化によって起こる。加えて、ポリマーナノ繊維の外側をコーティングする活性剤は、膜に一貫性および凝集性を提供し、かくして膜の取扱耐性を改善する（図２および図３を参照）。
【００２１】
任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい別の特定の実施形態において、膜のポリマーナノ繊維は電界紡糸ナノ繊維、すなわち電界紡糸処理によって得られるナノ繊維である。
【００２２】
任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい別の特定の実施形態において、膜のポリマーナノ繊維は、５０〜２０００ｎｍの平均直径、さらに詳細には２００〜１２００ｎｍ、４００〜８００ｎｍおよび５００ｎｍの平均直径を有する。本発明に関連して、「平均直径」という語は、走査電子顕微鏡によって得られる画像に関する異なる測定結果、特に５０の測定結果の算術平均によって得られる直径に関する。
【００２３】
本発明の不織布膜のポリマーナノ繊維は１つ以上の生体適合性ポリマーから構成される。ナノ繊維を形成するのに適したポリマーの例は、ポリエステル、ポリ無水物ポリホスファゼン、ポリエーテルなどであり得る。任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい特定の実施形態において、本発明のナノ繊維は、他の電界紡糸ポリマーおよびそれらの組み合わせのうち、ポリグリコール酸（ＰＧＡ）、ポリ−Ｄ，Ｌ−乳酸（ＰＬＡ、ポリ乳酸）、ポリ−Ｄ，Ｌ−ラクチド−コ−グリコリド（poly-D,L-lactide-co-glycolide、ＰＬＧＡ）、ポリカプロラクトン（ＰＣＬ）、ポリジオキサノン、ポリビニルアルコール、コラーゲン、セルロース、ヒアルロン酸、ポリアミド、ポリエステル、ポリウレタン、ポリプロピレン、エラステイン（elastane）からなる群から選択される１つ以上のポリマーを含む。さらに好適には、本発明のナノ繊維はポリ−Ｄ，Ｌ−乳酸（ＰＬＡ、ポリ乳酸）を含む。
【００２４】
前述のとおり、本発明の膜は、ポリマーナノ繊維以外に、少なくとも１つの活性剤を不織布膜の総重量に関して２５〜８０重量％の量で含む。任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい特定の実施形態において、活性剤は、不織布膜の総重量に関して３０〜７０％、さらに詳細には３０％〜５５％の量で膜中に含まれる。
【００２５】
膜の活性剤は、繊維の間に配置され、この場合は結晶（結晶性もしくは非晶質構造を有する）を形成することができる固体状態であり得るか、または繊維の表面に埋め込まれた液体形態であり得る。任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい特定の実施形態において、本発明の不織布膜は、製剤分野および獣医学分野の両方で用いることができる治療活性剤を含む。任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい別の特定の実施形態において、本発明の不織布膜は化粧剤を含む。任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい別の特定の実施形態において、本発明の不織布膜は複数の活性剤を含み、さらに詳細には、膜は、好適な生体適合性溶媒系中に可溶性である第２の活性剤を含み、膜は、第２の活性剤が完全に可溶化されている適切な量の好適な生体適合性溶媒系と接触した場合に、前記第２の活性剤を直ちに放出することができる。
【００２６】
本発明に関連して、「治療的」という語は、例えば病状、生理学的状態、もしくはそれらの症状の治療、寛解もしくは減弱において、またはその評価もしくは診断のために、治療上有用であることを意味する。「化粧剤」という語は、主に、審美的および／または慰安効果を提供すること、特に、皮膚の外観、および具体的には皮膚の特性を改善することを目的とする使用に関する。
【００２７】
活性剤の例としては、Ｌ−アスコルビン酸（ビタミンＣ）、レスベラトロール、ケルセチン、ボスウェリア・セラータ（Ｂｏｓｗｅｌｌｉａ  ｓｅｒｒａｔａ）の抽出物、クルクミン、ラクトフェリン、ハイドロキノン、コウジ酸、コラーゲン、桂皮酸、過酸化ベンゾイル、トロポロン、カテコール、メルカプタミン、ナイアシンアミド、トコフェロール、フェルラ酸、アゼライン酸、ボツリヌス毒素、尿素、ならびにキサンチン、レチノイド、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸、抗生物質、抗炎症薬、治癒薬、α２−アドレナリン阻害薬、β−アドレナリン作動薬、アロマターゼ阻害薬、抗エストロゲン、コルチコステロイド、ムコ多糖、エストロゲン、イソフラボンまたはそれらの誘導体もしくは塩が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００２８】
任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい特定の実施形態において、本発明の不織布膜は、Ｌ−アスコルビン酸（ビタミンＣ）またはレスベラトロールを活性剤として含む。
【００２９】
上述のように、本発明の不織布膜は、活性剤が完全に可溶化されている適切な量の好適な生体適合性溶媒系と膜が接触した場合に、活性剤が皮膚上で吸収されるように、それらの活性剤を即時放出することができる。活性剤は前記溶媒系中に可溶性でなければならず、溶媒系は、膜の活性剤の総量を完全に溶解するために充分な適量で提供されなければならない。前記量は活性剤の種類および使用する溶媒系の種類によって変わるであろう。膜が複数の活性剤を含む場合、活性剤の各々は、好適な生体適合性溶媒系中に可溶性でなければならず、不織布膜がその適切な量と接触した場合に、同溶媒系中に可溶化され得るものでなければならない。この場合、好適な溶媒系は活性剤の各々について同じであり得るか、または異なり得る。
【００３０】
活性剤を可溶化する溶媒系は、水、親水性溶媒、親油性溶媒およびそれらの混合物からなる群から選択される１つ以上の溶媒を含み得る。「親水性」溶媒という語は、水と親和性を有し、水素結合を形成でき、したがって水および他の極性溶媒と混和性である溶媒に関する。「親油性」溶媒という語は、水と親和性を有さず、水素結合を形成する能力をほとんどまたは全く有さない非極性溶媒に関する。したがって、親油性溶媒は、脂肪（fat）、油（oil）、脂質（lipid）、および他の非極性溶媒中に混和性である。
【００３１】
膜活性剤の放出に適した溶媒の例としては、水、（Ｃ２〜Ｃ１２）アルコール、（Ｃ２〜Ｃ１２）グリコール、（Ｃ２〜Ｃ６）−グリコール（Ｃ２Ｃ６）エーテル、カプリン酸／カプリル酸、植物油、鉱油、獣脂などのトリグリセリド、それらのフラクション（fraction、断片）および混合物が挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００３２】
（Ｃ２〜Ｃ１２）アルコールという語は、２〜１２個の炭素原子および１つ以上のヒドロキシル基（ＯＨ）を含む炭化水素化合物に関する。（Ｃ２〜Ｃ１２）グリコールという語は、２〜１２個の炭素原子および隣接する炭素原子と結合した２個のヒドロキシル（ＯＨ）基を含むアルコールに関する。（Ｃ４〜Ｃ１２）グリコールエーテルという語は、４〜１２個の炭素原子および少なくとも２つのヒドロキシル（ＯＨ）および少なくとも１つのエーテル基（Ｏ）を含む炭化水素化合物であって、ヒドロキシル基（ＯＨ）およびエーテル基（Ｏ）の各々が、独立して隣接する炭素原子と結合している炭化水素化合物に関する。アルコール、グリコールおよびグリコールエーテルの非限定例としては、例えば、エタノール、エチレングリコール、プロピレングリコール、ブチレングリコール、ジエチレングリコール、テトラエチレングリコール、１，２，３−プロパントリオール（グリセリン）またはベンジルアルコールが挙げられる。
【００３３】
本明細書中の「生体適合性溶媒系」という語は、皮膚と接触して、有毒もしくは有害な免疫応答または過度の免疫応答を引き起こさない溶媒系に関する。
【００３４】
不織布膜がその中に含まれる活性剤を放出するためには、活性剤は生体適合性溶媒系中で完全に可溶化されなければならない。任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい特定の実施形態において、可溶化は２５〜３６℃の温度で起こる。
【００３５】
「完全に可溶化される」という語は、本明細書中では、その中に可溶性である溶媒系と接触した場合に、溶媒系と溶液を形成する膜の一部としての活性剤に関する。
【００３６】
各活性剤の溶解度は溶媒によって異なる。さらに、具体的な溶媒系について、各活性剤の溶解度は異なる。当業者は、活性剤がその中に完全に可溶化されるように、放出される活性剤の各々に適した生体適合性溶媒系およびその適切な量を容易かつ規定どおりに決定することができるであろう。
【００３７】
あるいは、活性剤の放出は、既に定義した不織布膜を、活性剤が１つ以上の賦形剤または好適な局所担体とともに完全に可溶化される好適な生体適合性溶媒系を含む局所組成物と接触させた後に起こり得る。概して、いかなる局所組成物も本発明の目的に好適であり得る。ただし、好適な粘度を有し、比較的短時間、例えば３０分間、さらに詳細には１５分間で膜を透過するものとする。
【００３８】
膜の活性剤を放出させるために適した局所組成物の例としては、液体、固体および半固体組成物、例えば水溶液または懸濁液、無水組成物、水中油エマルジョン、油中水エマルジョンであって、マクロエマルジョン、マイクロエマルジョンまたはナノエマルジョンのいずれかであるもの、溶液中の油滴、ミセル、リポソーム、エトソーム（またはエソソーム、ethosomes）などが挙げられる。前記組成物は、液体、ゲル、ペースト、クリーム、エマルジョン、ローション、フォーム、スプレー、パッチ、スティックの形態、または当該技術分野で公知の任意の他の形態であり得る。加えて、前記組成物は当該技術分野で周知である方法にしたがって調製することができる。好適な賦形剤および／または担体、ならびにそれらの量は、調製される処方の種類にしたがって当業者が容易に決定できる。
【００３９】
任意に、膜の活性剤を放出するために適した生体適合性溶媒系を含む局所組成物はさらに、膜について既に定義したものなどの１つ以上の活性剤も含み得る。
【００４０】
したがって、そのような局所組成物は、好適な溶媒系以外に、皮膚調色剤または皮膚にとって有益な他の薬剤を含み得る。
【００４１】
「局所賦形剤または担体」という語は、皮膚に使用するために許容される材料に関する。成分の各々は、局所組成物の他の成分と適合性があるという意味で許容されなければならない。とりわけ、過度の毒性、不適合性、不安定性、アレルギー反応がなく、ヒトまたは動物の皮膚と接触する使用にも適していなければならない。
【００４２】
「即時」放出という語は、その中に含まれる活性剤の総量を、活性剤が完全に可溶化されている好適な溶媒系と膜が接触した後すぐに、特に２５〜３６℃の温度で実質的に放出する本発明の不織布膜に関する。特定の実施形態において、本発明の不織布膜は、その中に含まれる活性剤の総重量の７０％以上、８０％以上、９０％以上の量を、膜を好適な溶媒系と接触させた後３０分間で放出することができる。特定の実施形態において、本発明の不織布膜は、その中に含まれる活性剤の総重量の５０％以上、６０％以上、７０％以上、８０％以上、９０％以上の量を、膜を好適な溶媒系と接触させた後１０分間で放出することができる。
【００４３】
図６は、本発明の不織布膜をヒトの皮膚上に適用する特定の実施形態を示し、前記膜は、１５ｍｍの直径を有し、膜湿潤の異なる段階、つまり膜をゲルと接触させた後、５分（Ａ）、１５分（Ｂ）および２５分（Ｃ）でカーボポール（Ｃａｒｂｏｐｏｌ）のゲル上に１０ｍｇのビタミンＣが装填される。
【００４４】
任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい特定の実施形態において、本発明は、ＰＬＡ、ポリエステル、ポリプロピレンおよびポリエチレンからなる群から選択される１つ以上のポリマーで構成されるポリマーナノ繊維、特に、ＰＬＡで構成されるナノ繊維、およびＬ−アスコルビン酸を、不織布膜の総重量に対して２５〜８０％、さらに詳細には３０〜７０％、さらに詳細には４０〜６０重量％の量で含み、好適な生体適合性溶媒系は水であり、さらに詳細には親水性ゲル、例えば０．５〜２％重量／体積カーボポールの水性ゲルの形態の局所組成物の一部として、またはクリーム、エマルジョンもしくはローションなどの水中油（Ｏ／Ｗ）などの局所組成物の一部としての水であり、生体適合性溶媒系の適切な量は０．０５〜０．５ｍＬ／ｃｍ２である、前記不織布膜に関する。
【００４５】
任意に本明細書中で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい特定の実施形態において、本発明は、ＰＬＡ、ポリエステル、ポリプロピレンおよびポリエチレンからなる群から選択される１つ以上のポリマーから構成されるポリマーナノ繊維、特にＰＬＡナノ繊維から構成されるポリマーナノ繊維、およびレスベラトロールを不織布膜の総重量に関して２５〜８０％、さらに詳細には２５〜６０％、さらに詳細には２５〜５０重量％の量で含む不織布膜に関し、好適な生体適合性溶媒系は、水、（Ｃ２〜Ｃ１２）アルコール、（Ｃ２〜Ｃ１２）グリコールおよびそれらの混合物から選択され、さらに詳細には、生体適合性溶媒系は、水、（Ｃ２〜Ｃ１２）アルコール、含水アルコールゲルの一部である（Ｃ２〜Ｃ１２）グリコールの混合物であり、例えば、含水アルコールゲルは水、１〜２％重量／体積のカーボポール、１０〜２５％重量／体積のエタノールまたはプロピレングリコールを含み、および、生体適合性溶媒系の適切な量は０．０５〜０．５ｍＬ／ｃｍ２である。
【００４６】
既に定義したものなどの不織布膜を含む化粧品または衛生用品も本発明の一部である。任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい特定の実施形態において、化粧品または衛生用品は、本発明の不織布膜をその上に結合させても、させなくてもよい支持体を含む。化粧品または衛生用品の例としては、ガーゼ、ばんそうこう、包帯剤、救急絆、スポンジ、ワイプ、マスクなどが挙げられるが、これらに限定されるものではない。
【００４７】
既に定義した不織布膜と、膜が活性剤と接触した場合に活性剤を可溶化することができる好適な生体適合性溶媒系とを含むキットも本発明の一部である。任意に、前記溶媒系は局所組成物の一部であってもよい。
【００４８】
上記生体適合性溶媒系に関する特定の実施形態も本発明のキットの特定の実施形態である。
【００４９】
本発明の不織布膜は、電界紡糸／エレクトロスプレー処理によって調製される。用いられる装置は、同時に動作する電界紡糸システムおよびエレクトロスプレーシステムから構成される。電界紡糸は、コレクタ（回転シリンダまたは電界紡糸およびエレクトロスプレーの堆積ゾーン間で振動する任意の他のコレクタであってよい）上に堆積する１つ以上のポリマーの溶液からポリマーナノ繊維を生成する。エレクトロスプレーなどのスプレー処理エレクトロスプレーシステムは、活性剤を含む溶液の微液滴を生成する。前記液滴を、コレクタコーティングするナノ繊維上に堆積させる。液滴の溶媒が蒸発したら、活性剤は固体形態になり、生成物の性質の根本的な傾向、その粘度および結晶を形成する能力に応じて、結晶性または非晶質構造を有し得る繊維または固体粒子に対するコーティングを形成する。図１中、本発明の不織布膜を調製するためのシステムの特定の実施形態の図（Ａ：側面図；Ｂ：正面図）を示し、図中、ａ）は活性剤のエレクトロスプレーシステムであり、ｂ）は得られた不織布膜であり、ｃ）はロータリコレクタであり、ｄ）はポリマーナノ繊維の電界紡糸システムである。
【００５０】
活性剤を堆積させるためのスプレーシステムは、活性剤自体によって決まる流速および粘度で動作し、例えば、エレクトロスプレーシステム、空気圧式スプレー、超音波スプレーまたは空気圧式／超音波複合スプレーであり得る。任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい特定の実施形態において、用いられるスプレーシステムはエレクトロスプレーである。
【００５１】
したがって、本発明の別の態様は、前記定義の所定の不織布膜の調製法であって、以下のステップ、すなわち、
ａ）  １つ以上の生体適合性ポリマーの好適な溶媒系中の溶液を調製するステップと、
ｂ）  ステップａ）の１つもしくは複数のポリマーが不溶性である好適な溶媒系中の活性剤の溶液を調製するステップと、
ｃ）  ステップａ）の溶液の電界紡糸を実施し、同時に、ステップｂ）の溶液を、ステップｂ）の溶液の適切な流速で適切な時間スプレーして、不織布膜の総重量に関して２５〜８０重量％の量で活性剤を含む不織布膜を得るステップと、
ｄ）  任意に、ステップｃ）で得られる不織布膜を乾燥するステップを含む調製法に関する。この乾燥ステップは、使用した残留している溶媒を蒸発させることによって実施できる。
【００５２】
ステップ（ａ）の１つ以上の生体適合性ポリマーの溶液に適した溶媒の数例には、ジクロロメタン、クロロホルム、酢酸エチル、アセトン、ジメチルホルムアミド、ジオキサン、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）またはそれらの混合物が含まれるが、これらに限定されるものではない。溶媒は、界面活性剤または塩などの、電界紡糸処理を改善するための添加剤を含んでもよい。
【００５３】
任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい特定の実施形態において、ステップａ）のポリマー溶液中のポリマー濃度は、溶液の総重量に対して７〜１８％重量／重量（ｗ／ｗ）である。
【００５４】
本発明に関連して、ステップｂ）において、活性剤を溶解させることができるが、ステップａ）で用いる１つ以上のポリマーを可溶化することができない溶媒系を使用する。したがって、ステップｂ）の溶媒系はステップａ）の溶媒系とは異なる。さらに、ステップｂ）の溶媒は、所望の活性剤の分解を引き起こさないように所望の活性剤と適合しなければならない。活性剤の溶液の調製に適した溶媒の数例には、エタノール、水など、またはそれらの混合物が含まれるが、それらに限定されるものではない。
【００５５】
概して、電界紡糸／エレクトロスプレー処理は、不織布膜の総重量に関して２５〜８０重量％の量で含まれる活性剤を含む不織布膜を得るために、必要な時間、流動ポリマー溶液および活性剤溶液の流速で実施する。
【００５６】
さらに、異なる活性剤濃度を有する膜の連続層が生じる異なるステップで処理を実施することができる。
【００５７】
当業者は、活性剤溶液などのポリマー溶液を調製するために適した溶媒、ならびに所望の用途に適した特性を有する不織布膜を得るために適した電界紡糸処理のパラメータを規定通りに調節することができる。
【００５８】
溶媒が膜から蒸発した後、前記膜を皮膚に直接適用することができる。特定の実施形態において、本発明の処理は、電界紡糸／エレクトロスプレー処理後に得られる不織布膜を乾燥することを含み、さらに詳細には、乾燥ステップは、電界紡糸およびエレクトロスプレーの処理で用いる溶媒を乾燥させたままにすることによって実施する。
【００５９】
本発明の別の態様は、皮膚上で局所使用するための不織布膜であって、ポリマーナノ繊維と不織布膜の総重量に関して２５〜８０重量％の量の活性剤とを含み、活性剤は、以下のステップ、すなわち、
ａ）  １つ以上の生体適合性ポリマーの好適な溶媒系での溶液を調製するステップと、
ｂ）  前記活性剤の好適な溶媒系での、溶液を調製するステップであって、その溶媒系ではステップａ）由来の１つもしくは複数の該ポリマーが不溶である、該ステップと、
ｃ）  ステップａ）由来の溶液を電界紡糸することと同時に、ステップｂ）由来の溶液を、ステップｂ）由来の溶液の流速にて適切な時間スプレーして、該不織布膜の総重量に対して２５重量％〜８０重量％の量で前記活性剤を含む不織布膜を得る、ステップと、
ｄ）  任意にステップｃ）で得られる不織布膜を乾燥するステップと
を含む処理によって得ることができる生体適合性溶媒系中に完全に可溶化されている場合に、それ自身を即時に放出することができる。
【００６０】
前記定義の本発明の処理「によって得ることができる」不織布膜とは、その調製処理によって膜を定義するために本明細書中では使用され、前記定義のステップａ）、ｂ）、ｃ）およびｄ）を含む調製処理によって得ることができる膜に関する。本発明に関連して、「得ることができる」、「得られた」という表現および同等の表現は、交換可能に使用され、いずれの場合も、「得ることができる」という表現は「得られた」という表現を包含する。
【００６１】
本発明の不織布膜は異なる皮膚処置および化粧法で有用である。
【００６２】
本発明の不織布膜が治療薬を含む場合、それは皮膚障害の疾患治療で有用である。したがって、本発明の別の態様は、皮膚の疾患、障害（disorder）または異常な状態の治療で使用するための、活性剤が治療薬である既に定義したような不織布膜に関する。本発明のこの態様は、皮膚の疾患、障害または異常状態の治療のために、ポリマーナノ繊維と不織布膜の総重量に関して２５〜８０重量％の量の活性剤とを含む、皮膚上で局所使用するための不織布膜を調製するための活性剤の使用として処方することができ、活性剤は好適な生体適合性溶媒系中に可溶性である治療薬であり、不織布膜は、活性剤が完全に可溶化されている適切な量の好適な溶媒生体適合性系と接触した場合に活性剤を即時放出することができる。
【００６３】
本発明の別の態様は、皮膚の疾患、障害または異常な状態の治療において使用するための、活性剤が治療薬である既に定義した不織布膜を含む製品に関する。本発明のこの態様は、皮膚の疾患、障害または異常状態の治療のための、ポリマーナノ繊維と不織布膜の総重量に関して２５〜８０重量％の量の活性剤とを含む皮膚上の局所使用のための不織布膜を含む衛生用品または化粧用品の調製のための活性剤の使用として処方することもでき、活性剤は、好適な生体適合性溶媒系中に可溶性である治療活性剤であり、不織布膜は、活性剤が完全に可溶化されている適切な量の好適な溶媒生体適合性系と接触した場合に活性剤を直ちに放出することができる。
【００６４】
本発明はさらに、皮膚の疾患、障害または異常な状態に苦しんでいるヒトをはじめとするほ乳類の治療のための方法にも関し、前記方法は、ヒトをはじめとする前記ほ乳類の皮膚上に、活性剤が治療薬である不織布膜または既に定義した製品を局所適用することを含む。
【００６５】
本発明の別の態様は、皮膚の疾患、障害または異常状態の治療で使用するための前記定義のキットであって、活性剤が治療薬であるキットに関する。
【００６６】
任意に本明細書中で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい特定の実施形態において、疾患、障害または異常な皮膚状態は、蜂巣炎（cellulitis）、座瘡（尋常性座瘡および嚢腫性座瘡を含む）、皮膚の老化、色素過剰（離散または斑状色素過剰を含む）、角化症（keratosis。光線性角化症、日光性角化症、および脂漏性角化症を含む）、ふけ（dandruff）、いぼ（warts）、光損傷を受けた皮膚、慢性皮膚疾患（例えば、乾癬、皮膚炎、アトピー性および脂漏性皮膚炎をはじめとする皮膚炎）、乾燥、魚鱗癬（ichthyosis）、創傷治癒およびウイルス、真菌または細菌に起因する皮膚感染症からなる群から選択される。本明細書に関連して、「治療」という語は、生理学的機能不全の補償を意味し、さらに一般的には、その兆候が特にこのような機能不全の結果である望ましくない障害の軽減または除去を意味する。
【００６７】
加えて、上述のように、本発明の不織布膜はさらに、活性剤が化粧剤である場合は化粧目的で使用することもできる。したがって、本発明はさらに、スキンケア剤としての、活性剤が化粧剤である、既に定義した不織布膜、または既に定義した膜を含む製品の化粧用途での使用にも関する。
【００６８】
ヒトをはじめとするほ乳類のスキンケアのための化粧法も本発明の一部であり、前記方法は、ヒトをはじめとする前記ほ乳類の皮膚に、活性剤が化粧剤である不織布膜または前記定義の製品を局所適用することを含む。
【００６９】
任意に本明細書中で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい特定の実施形態において、スキンケアは、なかでも以下の症状の少なくとも１つを、すなわち老化、座瘡（acne）、シワ、肌のシミ、蜂巣炎、皮膚の欠陥、粗さ、スケーリング、脱水、歪み、ひび割れおよび弾力性の欠如を改善することを含む。
【００７０】
さらに、本発明の不織布膜または前記定義の化粧品もしくは衛生用品は、肌の美白または入れ墨の除去でも有用であり得る。
【００７１】
したがって、本発明はさらに、肌の美白剤としての、活性剤が化粧剤である不織布膜または既に定義した製品の化粧使用にも関する。本発明はさらに、ヒトをはじめとするほ乳類の肌の美白のため化粧法にも関し、前記方法は、活性剤が化粧剤である不織布膜または前記定義の製品の、ヒトをはじめとする前記ほ乳類の皮膚上の局所適用を含む。
【００７２】
本発明はさらに、入れ墨除去のための、活性剤が化粧剤である不織布膜または既に定義した製品の化粧使用にも関する。本発明はさらに、ヒトをはじめとするほ乳類の皮膚から入れ墨を除去するための化粧法にも関し、前記方法は、活性剤が化粧剤である不織布膜または前記定義の製品の、ヒトをはじめとする前記ほ乳類の皮膚上の局所適用を含む。
【００７３】
任意に本発明で記載する様々な実施形態の１つ以上の特徴と組み合わせてもよい特定の実施形態では、皮膚上に適用した後に膜を皮膚から除去する。
【００７４】
明細書および特許請求の範囲全体にわたって、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という語およびその変化形は、他の技術特性、添加剤、成分またはステップを除外することを意図しない。さらに、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という語は、「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｓ  ｏｆ）」の場合を含む。発明の他の目的、利点および特徴は、発明の記載および発明の実施から当業者には部分的にわかるであろう。以下の実施例および図面は例示として提供し、本発明を制限することを意図しない。さらに、本発明は本明細書中で特定した特定の実施形態および好ましい実施形態の可能な組み合わせをすべて対象とする。
【図面の簡単な説明】
【００７５】
【図１】本発明の不織布膜の調製のためのシステムの特定の実施形態の図（Ａ：側面図、Ｂ：正面図）を示し、図中、ａ）は活性剤のエレクトロスプレーシステムであり、ｂ）は得られた不織布膜であり、ｃ）ロータリコレクタであり、ｄ）はポリマーナノ繊維の電界紡糸システムである。
【図２】異なる倍率で実施例１の本発明の膜の走査電子顕微鏡法（ＳＥＭ）によって得られる画像を示す。
【図３】異なる倍率で実施例２の本発明の膜の走査電子顕微鏡法（ＳＥＭ）によって得られる画像を示す。
【図４】異なる倍率で、当該技術分野の方法にしたがって調製した比較例１の膜の走査電子顕微鏡法（ＳＥＭ）によって得られた画像を示す。
【図５】実施例１にしたがって調製したナノ繊維膜の理論的総量（Ａ）および比較例１にしたがって調製したナノ繊維膜の理論的総量（Ｂ）に関する割合（％）として、放出されたＬ−アスコルビン酸の量を経時的に示す。
【図６Ａ】本発明の不織布膜のヒトの皮膚上の適用の特定の実施形態を示し、前記膜は１５ｍｍの直径を有し、膜湿潤の異なる段階、つまり膜をゲルと接触させた後５分（Ａ）、１５分（Ｂ）および２５分（Ｃ）でカーボポールのゲル上に１０ｍｇのビタミンＣが装填される。
【図６Ｂ】本発明の不織布膜のヒトの皮膚上の適用の特定の実施形態を示し、前記膜は１５ｍｍの直径を有し、膜湿潤の異なる段階、つまり膜をゲルと接触させた後５分（Ａ）、１５分（Ｂ）および２５分（Ｃ）でカーボポールのゲル上に１０ｍｇのビタミンＣが装填される。
【図６Ｃ】本発明の不織布膜のヒトの皮膚上の適用の特定の実施形態を示し、前記膜は１５ｍｍの直径を有し、膜湿潤の異なる段階、つまり膜をゲルと接触させた後５分（Ａ）、１５分（Ｂ）および２５分（Ｃ）でカーボポールのゲル上に１０ｍｇのビタミンＣが装填される。
【発明を実施するための形態】
【００７６】
＜実施例＞
＜Ｌ−アスコルビン酸の定量化のための高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）の技術＞
Ｌ−アスコルビン酸の検出のＨＰＬＣ技術のために選択された条件は次のものであった。
【００７７】
すなわち、
・  アイソクラチックポンプＬＣ２０ＡＤ、ＳＩＬ  ＨＴ  ２０Ａオートインジェクタ、２０Ａ  ＳＰＤ  ＵＶ検出器から構成されるＨＰＬＣ  Ｓｈｉｍａｄｚｕ装置。
【００７８】
・  ＨＰＬＣ  Ｃｏｌｕｍｎ  Ｔｒａｃｅｒ  Ｅｘｃｅｌ  １２０  ＯＤＳＡ、粒子サイズ５μｍ、１５×０．４ｃｍ。
【００７９】
・  移動相：６５％メタノール、３５％水、流れ０．７５ｍＬ／ｍｉｎ。
【００８０】
・  サンプル体積：１０μＬ。
【００８１】
・  標準濃度：５０、１００、２５０および５００μｇ／ｍＬ（リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中で調製）。
【００８２】
・  品質管理濃度：１５０ｎｇ／ｍＬ（ＰＢＳ中で調製）。
【００８３】
これらの条件下で、Ｌ−アスコルビン酸のピークは保持時間＝２．１分で出現する。較正線は試験した濃度の範囲内では直線である。
【００８４】
＜実施例１：Ｌ−アスコルビン酸を含む不織布膜の調製＞
１７％（質量基準）のＰＬＡの溶液を４０％ジオキサンおよび６０％アセトンの混合物中で調製した。溶液を２４時間撹拌して、その規則性（または均一性、regularity）を保証した。この溶液を、１００ｍｍの距離および１５ｋＶの電圧差（針側が正電圧）にて円筒形ロータリコレクタで電界紡糸（繊維の作製）するために使用した。ポリマー溶液の注入流速は１５．５ｍＬ／ｈであった。同時に、同じ円筒上および１８０°の配置（図１で示すとおり）で、活性剤溶液のエレクトロスプレーを実施した。この溶液は、２．６％（質量基準）のビタミンＣをエタノール中に溶解させ、６時間撹拌することによって調製した。エレクトロスプレーは、コレクタから２５ｍｍの距離、および１０ｋＶの電圧（針側が正電圧）で実施した。直径８０ｍｍのシリンダは１６ｍｉｎ−１の角速度で回転した。電界紡糸およびエレクトロスプレーの同時処理を５６分間維持して、０．３５２ｍｍの平均厚さを有し、膜中の活性剤の割合が５１％（ｗ／ｗ）である膜を得た。図２は、異なる倍率で得られた膜の走査電子顕微鏡法（ＳＥＭ）によって得られた画像を示す。
【００８５】
＜実施例２：レスベラトロールを含む不織布膜の調製＞
１５．８％（質量基準）のＰＬＡの溶液を４０％ジオキサンおよび６０％アセトンの混合物中で調製した。溶液を２４時間撹拌して、その規則性を保証した。この溶液を１００ｍｍの距離および１５ｋＶの電圧差（針側が正電圧）にて円筒形ロータリコレクタでの電界紡糸（繊維の作製）のために使用した。ポリマー溶液の注入流速は１５．５ｍＬ／ｈであった。同時に、同じ円筒上および１８０°の配置（図１で示すとおり）で、活性剤溶液のエレクトロスプレーを実施した。この溶液は、１．４７％（質量基準）のレスベラトロールをエタノール中に溶解させ、６時間撹拌することによって調製した。エレクトロスプレーは、コレクタから２５ｍｍの距離、および１０ｋＶの電圧（針側が正電圧）で実施した。直径８０ｍｍのシリンダは１６ｍｉｎ−１の角速度で回転した。電界紡糸およびエレクトロスプレーの同時処理を６０分間維持して、０．３２６ｍｍの平均厚さを有し、膜中の活性剤の割合が３０％（ｗ／ｗ）である膜を得た。図３は、異なる倍率で得られた、膜の走査電子顕微鏡法（ＳＥＭ）によって得られた画像を示す。
【００８６】
＜比較例１：従来技術（特開第２００８−１７９６２９号）で記載されているものに対応する方法にしたがったＬ−アスコルビン酸を含む不織膜の調製＞
１１．３％（質量基準）のＰＬＡの溶液を４０％のジオキサンと６０％のアセトンとの混合物中で調製した。５．７％（質量基準）のビタミンＣを溶液に添加した。溶液を２４時間撹拌して、その規則性を保証した。この溶液を、１００ｍｍの距離および１５ｋＶの電圧差（針側が正電圧）にて円筒形ロータリコレクタで電界紡糸（その中にビタミンＣを含む繊維の作製）するために使用した。ポリマー溶液の注入流速は１５．５ｍＬ／ｈであった。直径８０ｍｍのシリンダは１６ｍｉｎ−１の角速度で回転した。電界紡糸の処理を１１７分間維持し、０．３０６ｍｍの平均厚さを有し、膜中の活性剤の割合が３３％（ｗ／ｗ）である膜を得た。図４は、異なる倍率で比較例１の膜の走査電子顕微鏡法（ＳＥＭ）によって得られる画像を示す。
【００８７】
＜実施例３：放出アッセイ＞
６ウェルのプラスチック材料の培養プレート中、各ウェルにつき０．５０グラムのカーボポールゲル（カーボポールゲル９４０を蒸留水中１％ｗ／ｖにする）を堆積させ、次いでゲル上に、実施例１にしたがって調製して１０ｍｇのＬ−アスコルビン酸（理論的装填量）を装填したナノ繊維膜（１５ｍｍ直径）または比較例１のように調製して１２ｍｇのＬ−アスコルビン酸（理論的装填量）を装填したナノ繊維膜（１５ｍｍ直径）を堆積させた。本発明の膜の場合、理論的装入量および実際の総装填量（放出されたＬ−アスコルビン酸の量と膜中に残留するＬ−アスコルビン酸の量との合計として算出）は等しいことをＨＰＬＣ技術によって試験した。３７℃でプレートをインキュベートし、その時点から被覆した。放出されたＬ−アスコルビン酸の量を設定時間（実施例１にしたがって調製した膜の場合は３０分）、比較例１にしたがって調製した膜の場合は３０、６０、９０および１２０分）で測定するために、膜を取り出し、９．５ｍＬのリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を各ウェルに添加し、ゲルを同じウェル中にピペッティングすることによって混合した。そこから、１ｍＬのサンプルを取り、１２ｍＬの褐色バイアル中で１ｍＬのＰＢＳで希釈した。１ｍＬの使い捨てシリンジで、バイアル内容物の一部を吸引し、その内容物を０．４５μｍの使い捨てフィルターでＨＰＬＣバイアルにろ過して、不溶性化合物を除去した。バイアル中のサンプルをＨＰＬＣ装置中に既に記載した条件下で注入した。各時点で放出されたアスコルビン酸の量を総量（製造法の理論的装填量）に対する割合（％）として表した。試験は３回実施した。
【００８８】
図５は、理論的総量に対する割合（％）として表した、各時間で放出されたアスコルビン酸の量を示す。Ｌ−アスコルビン酸の本発明のナノ繊維膜（実施例１にしたがって調製）からの放出は３０分後で８７±２４％であることが観察された。さらに、活性剤は非変化形態で放出されたことがＨＰＬＣによって証明された。さらに、当該技術分野のナノ繊維膜（比較例１にしたがって調製）からのＬ−アスコルビン酸の放出は、３０分後で５％、６０分後で１０．２±０．７％、９０分後で１１．０±０．７％、１２０分後で１２．７±７．０％よりも劣っていた。
【００８９】
＜結果の分析＞
本発明の膜は、ゲル基剤と接触すると、特に膜中に含まれる活性剤の総量を放出することができるが、同等の活性剤を装入した従来技術の膜は、少量（５％未満）しか即時放出することができず、長時間インキュベーション（１２０分）しても、１３％の非常に抑制された放出しか達成されない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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