(57)【要約】【課題】精神機能の低下を抑制することができる新規素材およびそれを含む組成物の提供。【解決手段】本発明によれば、ＧＴＷＹ（配列番号１）のアミノ酸配列を有するペプチドまたはその薬学上許容される塩もしくは溶媒和物を含んでなる、精神機能の低下抑制用組成物が提供される。本発明の組成物は、精神機能が低下した対象または精神機能の低下のリスクがある対象に摂取させることができる。精神機能の低下は、うつに関連する状態や不安に関連する状態から選択することができる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ＧＴＷＹ（配列番号１）のアミノ酸配列を有するペプチドまたはその薬学上許容される塩もしくは溶媒和物を有効成分として含んでなる、精神機能の低下抑制用組成物。
【請求項２】
精神機能の低下が、うつに関連する状態および不安に関連する状態からなる群から選択される１種または２種以上の状態である、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
精神機能が低下した対象または精神機能の低下のリスクがある対象に摂取させる、請求項１または２に記載の組成物。
【請求項４】
ＧＴＷＹ（配列番号１）のアミノ酸配列を有するペプチドまたはその薬学上許容される塩もしくは溶媒和物を、ヒト１日当たり０．０１〜１００ｍｇ（乾燥質量換算）の量で対象に摂取させる、請求項１〜３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項５】
食品組成物である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項６】
１回摂取に適した単位包装形態である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、精神機能の低下抑制等のための組成物に関する。
【背景技術】
【０００２】
現代社会においては若年層から老年層まで幅広い世代において疲労やストレス等により意欲の低下や抑うつ症状等の精神機能の低下がみられる。精神機能の低下は仕事の生産性の低下や日常生活の質の低下に直結することから大きな社会問題となっている。
【０００３】
これまでに精神機能の低下を改善する食品素材としてホエイタンパク質加水分解物が示唆されている（特許文献１）が、精神機能の低下抑制に有効な、日常生活において手軽に摂取できる食品素材は未だ少ないのが現状である。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特表２００６−５１０３６７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は精神機能の低下を抑制することができる新規素材およびそれを含む組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明者は今般、テトラペプチドＧＴＷＹが、尾懸垂試験において抑うつ状態および意欲低下を改善することを見出した。本発明はこの知見に基づくものである。
【０００７】
すなわち、本発明によれば以下の発明が提供される。
［１］ＧＴＷＹ（配列番号１）のアミノ酸配列を有するペプチドまたはその薬学上許容される塩もしくは溶媒和物を有効成分として含んでなる、精神機能の低下抑制用組成物および精神機能の低下抑制剤。
［２］精神機能の低下が、うつに関連する状態および不安に関連する状態からなる群から選択される１種または２種以上の状態である、上記［１］に記載の組成物および用剤。
［３］精神機能が低下した対象または精神機能の低下のリスクがある対象に摂取させる、上記［１］または［２］に記載の組成物および用剤。
［４］ＧＴＷＹ（配列番号１）のアミノ酸配列を有するペプチドまたはその薬学上許容される塩もしくは溶媒和物を、ヒト１日当たり０．０１〜１００ｍｇ（乾燥質量換算）の量で対象に摂取させる、上記［１］〜［３］のいずれかに記載の組成物および用剤。
［５］食品組成物である、上記［１］〜［４］のいずれかに記載の組成物および用剤。
［６］１回摂取に適した単位包装形態である、上記［１］〜［５］のいずれかに記載の組成物および用剤。
［７］ＧＴＷＹ（配列番号１）のアミノ酸配列を有するペプチドまたはその薬学上許容される塩もしくは溶媒和物を有効成分として含んでなる、うつおよび／または不安の治療、予防または改善用組成物およびうつおよび／または不安の治療、予防または改善剤。
【０００８】
上記［１］と上記［７］の組成物を本明細書において「本発明の組成物」と、上記［１］と上記［７］の用剤を本明細書において「本発明の用剤」と、それぞれいうことがある。
【０００９】
本発明の組成物および用剤が有効成分とするテトラペプチド：ＧＴＷＹ（配列番号１）は、精神機能の低下抑制機能を発揮する機能性素材として利用できるとともに、ヒトを含む哺乳類に安全な機能性素材として利用できる点で有利である。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１は尾懸垂試験（実施例１）におけるＧＴＷＹペプチド非投与群（対照群）（０ｍｇ／ｋｇ）およびＧＴＷＹペプチド投与群（０．３ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ）の無動状態の時間（無動時間）の平均±標準誤差を示すグラフである。＊はｐ＜０．０５ｖｓ．対照群（ダネット検定）を示す。
【図２】図２は尾懸垂試験（実施例１）におけるＧＴＷＹペプチド非投与群（対照群）（０ｍｇ／ｋｇ）およびＧＴＷＹペプチド投与群（０．１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ）の無動状態の時間（無動時間）の平均±標準誤差を示すグラフである。＊はｐ＜０．０５ｖｓ．対照群（ダネット検定）を示す。
【発明の具体的説明】
【００１１】
本発明の組成物および用剤は、ＧＴＷＹ（配列番号１）のアミノ酸配列を有するペプチド（以下、「本発明のペプチド」ということがある）を有効成分として含有してなるものである。ここで、「アミノ酸配列を有するペプチド」とは、該アミノ酸配列により配列が特定されたペプチドを意味する。なお、本発明のペプチドは、β−ラクトリンと称されることもある（Nutrients 2019, 11, 348; doi:10.3390/nu11020348）。
【００１２】
本発明のペプチドは、化学合成によって得られたものを用いてもよく、乳、大豆、小麦、卵、畜肉、魚肉、魚介などに由来するタンパク質やポリペプチド原料等から化学的もしくは酵素的に分解して得られたものを用いてもよい。具体的には、例えば、本発明のペプチドの配列は、少なくとも、乳のホエイやカゼイン、牛血清アルブミン（ＢＳＡ）、大豆のグリシニン、小麦のグルテニン、卵黄のリボビテリン、卵白のオボアルブミン、オボトランスフェリン、リゾチウム、チキン蛋白のコラーゲンなどに含まれているから、これら食品もしくは食品素材を酸加水分解やプロテアーゼによる酵素処理または微生物発酵等に供して、上記ペプチドを生成させることができる。本発明の組成物および用剤としては上記食品もしくは食品素材の調製物をそのまま用いてもよいし、濃縮物として、あるいはスプレードライや凍結乾燥等により乾燥粉末として用いてもよい。また、必要に応じて不純物、塩、酵素等の除去など、任意の程度の精製を施して用いてもよい。
【００１３】
本発明のペプチドを構成するアミノ酸は、Ｌ型のアミノ酸のみから構成されていてもよいし、Ｄ型のアミノ酸のみから構成されていてもよいし、あるいは両者が混在したペプチドのいずれであってもよい。また、天然に存在するアミノ酸のみから構成されていてもよいし、アミノ酸にリン酸化やグリコシル化等、任意の官能基が結合した修飾アミノ酸のみから構成されていてもよいし、あるいは両者が混在したペプチドのいずれであってもよい。また、ペプチドが２以上の不斉炭素を含む場合には、エナンチオマー、ジアステレオマー、あるいは両者が混在したペプチドのいずれであってもよい。
【００１４】
さらに、本発明のペプチドは、遊離塩の形態であっても、その薬学上許容される塩または溶媒和物の形態であってもよく、本発明の組成物および用剤はこれらのいずれか、あるいはこれら全部または一部の混合物を含むものである。薬学上許容される塩としては酸付加塩、金属塩、アンモニウム塩および有機アミン付加塩が挙げられる。薬学上許容される酸付加塩としては、塩酸塩、硫酸塩、リン酸塩等の無機酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩、メタンスルホン酸塩等の有機酸塩等が挙げられる。また、薬学上許容される金属塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩等のアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、亜鉛塩等が挙げられる。また、薬学上許容されるアンモニウム塩としては、アンモニウム、テトラメチルアンモニウム等の塩が挙げられる。また、薬学上許容される有機アミン付加塩としては、モルホリン、ピペリジン等の付加塩が挙げられる。
【００１５】
本発明の組成物および用剤は、本発明のペプチド単独で、あるいは本発明のペプチドを含む素材（例えば、食品原料）として提供することができる。本発明の組成物および用剤はまた、本発明のペプチドまたは本発明のペプチドを含む素材と、他の成分（例えば、食品原料、食品添加物、製剤添加物）とを混合して提供することもできる。本発明の組成物および用剤における本発明のペプチドの含有量は、その目的、用途、形態、剤型、症状、体重等に応じて任意に定めることができ、本発明はこれに限定されないが、その含有量としては、全体量に対して、０．００００１〜５０質量％（固形分換算）の割合で含有させることができ、さらに好ましくは０．０００１〜１０質量％（固形分換算）の割合で含有させることができる。本発明においては、本発明の用剤を本発明のペプチドからなるものとし、本発明の組成物を本発明のペプチドと他の成分とを含んでなるものとすることができる。
【００１６】
本発明のペプチドの含有量の測定は、液体クロマトグラフィータンデム質量分析法（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）により実施することができる。当業者であればその条件設定は容易に行うことができ、測定の際に標準ペプチドとしてＬＣ／ＭＳ／ＭＳ測定用の純度のものを使用することはいうまでもないが、例えば、ＳＩＧＭＡ ＡＬＤＲＩＣＨ社製ＡＱＵＡペプチドを使用することができる。
【００１７】
本発明のペプチドを含む食品素材としては、タンパク質の酵素分解物が挙げられ、好ましくはホエイタンパク質の酵素分解物（以下、「ホエイ分解物」ということがある）である。本発明のペプチドが含まれるホエイ分解物の製造方法は公知であり、例えば、国際公開公報第２０１７／０８６３０３号の記載に従って製造することができる。あるいは、本発明のペプチドを含有する市販のホエイ酵素分解物を用いてもよく、例えば、ＬＥ８０ＧＦ−ＵＳ（ＤＭＶ社製）やＨＷ−３（雪印メグミルク社製）を本発明のペプチドとして用いてもよい。
【００１８】
本発明のペプチドをホエイタンパク質分解物として本発明の組成物および用剤に含有させる場合、本発明のペプチドをホエイタンパク質分解物に対して、０．００１〜１０質量％（固形分換算）の割合で含有させることができ、さらに好ましくは０．０１〜５質量％（固形分換算）の割合で含有させることができる。また、本発明の組成物および用剤に対して、ホエイタンパク質分解物は、０．００１〜９５質量％（固形分換算）の割合で含有させることができ、好ましくは０．０１〜５０質量％（固形分換算）の割合で含有させることができる。
【００１９】
後記実施例に示されるように、本発明のペプチドは、抑うつ状態および意欲低下の改善作用を有する。抑うつ状態や意欲低下は精神機能の低下の代表例であることから、本発明のペプチドは精神機能の低下抑制用組成物および精神機能低下抑制剤の有効成分として使用することができる。
【００２０】
本発明において「精神機能」は、情意機能（感情や意志の機能）および精神活力を含む意味で用いられる。「精神機能の低下」の例としては、うつに関連する状態および不安に関連する状態が挙げられる。うつに関連する状態としては、例えば、抑うつ状態、意欲低下、モチベーション低下、気力低下、活力低下、悲壮感、孤独感、落ち込み、絶望感、好奇心低下が挙げられる。不安に関連する状態としては、例えば、不安感、精神的疲労感、心細い感じ、落ち着かない気持ち、うろたえ、恐怖感、あれこれ心配な感じが挙げられる。
【００２１】
本発明において「精神機能の低下抑制」は、精神機能が低下した対象において精神機能を改善することのみならず、精神機能の低下のリスクがある対象において該リスクを低減することを含む意味で用いられる。すなわち、本発明の組成物および用剤は、精神機能が低下した対象または精神機能の低下のリスクがある対象に摂取させるか、あるいは投与することができる。ここで、「精神機能の低下のリスクがある対象」は、精神機能が低下していないが、将来において精神機能の低下の恐れがある対象を意味する。また、「リスクの低減」は、精神機能の低下を緩和することを含む。なお、摂取または投与対象は後述のようにヒトを含む哺乳動物である。
【００２２】
上記のように、本発明のペプチドは精神機能の低下の抑制に使用することができる。精神機能の低下は抑うつ状態や不安状態の発症および進展に関与していることから、本発明のペプチドはうつおよび不安の治療、予防または改善用組成物およびうつおよび不安の治療、予防または改善剤の有効成分として使用することができる。すなわち、本発明によれば、本発明のペプチドを含んでなる、うつおよび／または不安の治療、予防または改善用組成物と、本発明のペプチドを含んでなる、うつおよび／または不安の治療、予防または改善剤が提供される。
【００２３】
本発明の組成物および用剤は、医薬品（例えば、医薬組成物）、医薬部外品、食品（例えば、食品組成物）、飼料（ペットフード含む）等の形態で提供することができ、下記の記載に従って実施することができる。
【００２４】
本発明のペプチドは、ヒトおよび非ヒト動物に経口投与することができる。経口剤としては、顆粒剤、散剤、錠剤（糖衣錠を含む）、丸剤、カプセル剤、シロップ剤、乳剤、懸濁剤が挙げられる。これらの製剤は、当分野で通常行われている手法により、薬学上許容される担体を用いて製剤化することができる。薬学上許容される担体としては、賦形剤、結合剤、希釈剤、添加剤、香料、緩衝剤、増粘剤、着色剤、安定剤、乳化剤、分散剤、懸濁化剤、防腐剤等が挙げられる。
【００２５】
本発明のペプチドを食品として提供する場合には、それをそのまま食品として提供することができ、あるいはそれを食品に含有させて提供することができる。例えば、本発明のペプチドを食品として提供する場合には、本発明のペプチドを含有する、ホエイ分解物等のタンパク質の酵素分解物等を、そのまま食品として提供することができ、あるいはそれを食品に含有させて提供することができる。このようにして提供された食品は本発明のペプチドを有効量含有した食品である。本明細書において、本発明のペプチドを「有効量含有した」とは、個々の食品において通常喫食される量を摂取した場合に後述するような範囲で本発明のペプチドが摂取されるような含有量をいう。また「食品」とは、健康食品、機能性食品、栄養補助食品、保健機能食品（例えば、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品）、特別用途食品（例えば、幼児用食品、妊産婦用食品、病者用食品）およびサプリメントを含む意味で用いられる。なお、本発明のペプチドをヒト以外の動物に摂取させる場合には、本発明でいう食品が飼料として使用されることはいうまでもない。
【００２６】
本発明のペプチドは、上記のような精神機能の低下抑制効果を有するため、日常摂取する食品に含有させることができ、あるいは、サプリメントとして提供することができる。すなわち、本発明の組成物および用剤は食品の形態で提供することができる。この場合、本発明の組成物および用剤は１食当たりに摂取する量が予め定められた単位包装形態で提供することができる。１食当たりの単位包装形態としては、例えば、パック、包装、缶、ボトル等で一定量を規定する形態が挙げられる。本発明の組成物および用剤の各種作用をよりよく発揮させるためには、後述する、本発明のペプチドの１回当たりの摂取量に従って１食当たりの摂取量を決定できる。本発明の食品は、摂取量に関する説明事項が包装に表示されるか、あるいは説明事項が記載された文書等と一緒に提供されてもよい。
【００２７】
単位包装形態においてあらかじめ定められた１食当たりの摂取量は、１日当たりの有効摂取量であっても、１日当たりの有効摂取量を２回またはそれ以上（好ましくは２または３回）に分けた摂取量であってもよい。従って、本発明の組成物および用剤の単位包装形態には、後述のヒト１日当たりの摂取量で本発明のペプチドを含有させることができ、あるいは、後述のヒト１日当たりの摂取量の２分の１から６分の１の量で本発明のペプチドを含有させることができる。本発明の組成物および用剤は、摂取の便宜上、１食当たりの摂取量が１日当たりの有効摂取量である、「１食当たりの単位包装形態」で提供することが好ましい。
【００２８】
「食品」の形態は特に限定されるものではなく、例えば、飲料の形態であっても、半液体やゲル状の形態であっても、固形体や粉末状の形態であってもよい。また、「サプリメント」としては、本発明のペプチドに賦形剤、結合剤等を加え練り合わせた後に打錠することにより製造された錠剤や、カプセル等に封入されたカプセル剤が挙げられる。
【００２９】
本発明で提供される食品は、本発明のペプチドを含有する限り、特に限定されるものではないが、例えば、清涼飲料水、炭酸飲料、果汁入り飲料、野菜汁入り飲料、果汁および野菜汁入り飲料、牛乳等の畜乳、豆乳、乳飲料、ドリンクタイプのヨーグルト、ドリンクタイプやスティックタイプのゼリー、コーヒー、ココア、茶飲料、栄養ドリンク、エナジー飲料、スポーツドリンク、ミネラルウォーター、ニア・ウォーター、ノンアルコールのビールテイスト飲料等の非アルコール飲料；飯類、麺類、パン類およびパスタ類等炭水化物含有飲食品；チーズ類、ハードタイプまたはソフトタイプのヨーグルト、畜乳その他の油脂原料による生クリーム、アイスクリーム等の乳製品；クッキー、ケーキ、チョコレート等の洋菓子類、饅頭や羊羹等の和菓子類、ラムネ等のタブレット菓子（清涼菓子）、キャンディー類、ガム類、ゼリーやプリン等の冷菓や氷菓、スナック菓子等の各種菓子類；ウイスキー、バーボン、スピリッツ、リキュール、ワイン、果実酒、日本酒、中国酒、焼酎、ビール、アルコール度数１％以下のノンアルコールビール、発泡酒、その他雑酒、酎ハイ等のアルコール飲料；卵を用いた加工品、魚介類や畜肉（レバー等の臓物を含む）の加工品（珍味を含む）、味噌汁等のスープ類等の加工食品、みそ、しょうゆ、ふりかけ、その他シーズニング調味料等の調味料、濃厚流動食等の流動食等を例示することができる。なお、ミネラルウォーターは、発泡性および非発泡性のミネラルウォーターのいずれもが包含される。また、本発明で提供される食品には、食品製造原料および食品添加物のいずれもが含まれる。
【００３０】
茶飲料としては、発酵茶、半発酵茶および不発酵茶のいずれもが包含され、例えば、紅茶、緑茶、麦茶、玄米茶、煎茶、玉露茶、ほうじ茶、ウーロン茶、ウコン茶、プーアル茶、ルイボスティー、ローズ茶、キク茶、イチョウ葉茶、ハーブ茶（例えば、ミント茶、ジャスミン茶）が挙げられる。
【００３１】
果汁入り飲料や果汁および野菜汁入り飲料に用いられる果物としては、例えば、リンゴ、ミカン、ブドウ、バナナ、ナシ、モモ、マンゴー、アサイー、ブルーベリーおよびウメが挙げられる。また、野菜汁入り飲料や果汁および野菜汁入り飲料に用いられる野菜としては、例えば、トマト、ニンジン、セロリ、カボチャ、キュウリおよびスイカが挙げられる。
【００３２】
本発明のペプチドの摂取量は、受容者の性別、年齢および体重、症状、投与時間、剤形、投与経路並びに組み合わせる薬剤等に依存して決定できる。精神機能の低下抑制を目的とした本発明のペプチドの成人１日当たりの摂取量（乾燥質量換算）は、例えば、０．０１〜１００ｍｇ（好ましくは０．１〜１０ｍｇ）である。上記の本発明のペプチドの摂取量および下記摂取タイミングおよび摂取期間は、本発明のペプチドを非治療目的および治療目的のいずれで使用する場合にも適用があり、治療目的の場合には摂取は投与に読み替えることができる。なお、本発明のペプチドはヒト以外の哺乳動物（例えば、マウス、ラット、ウサギ、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ブタ、サル、イルカ、アシカ等）に対しても摂取させることができ、摂取量、摂取タイミングおよび摂取期間はヒトに関する記載を参考にして決定することができる。
【００３３】
本発明の本発明のペプチドは、精神機能の低下抑制作用を期待する期間内は摂取を継続することが好ましい。すなわち、本発明のペプチドは、上記量での摂取または投与を少なくとも１日（好ましくは３日、より好ましくは５日、特に好ましくは１０日）間とすることができ、また、上記量での摂取または投与を１日１回（好ましくは、１日２回または１日３回）とすることができる。本発明のペプチドはまた、精神機能の低下抑制作用を期待する日時よりも前に摂取を開始することが望ましいため、その開始時期は上記期待時の当日（好ましくは当日１時間前）でもよく、上記期待日の１日前（好ましくは３日前、より好ましくは５日前）とすることができる。精神機能の低下抑制作用を期待する日時よりも前の例としては、精神機能の低下の原因となりうるストレスや疲労の前が挙げられる。
【００３４】
本発明の組成物および用剤並びに食品には、精神機能の低下抑制効果を有する旨の表示が付されてもよい。この場合、消費者に理解しやすい表示とするため本発明の組成物および用剤並びに食品には以下の一部または全部の表示が付されてもよい。なお、本発明において「精神機能の低下抑制」が以下の表示を含む意味で用いられることはいうまでもない。
・いろいろなことが心配な方に
・やる気が落ちやすい方に
・意欲、モチベーションまたは気力の低下が気になる方に
・落ち込みやすい方に
・前向きでいたい方に
・いらいらすると不安になってしまう方に
・緊張すると不安になってしまう方に
・プレッシャーがあると不安になってしまう方に
【００３５】
本発明の別の面によれば、有効量の本発明のペプチドまたはその薬学上許容される塩もしくは溶媒和物あるいはそれを含む組成物を、それを必要としている対象に摂取させるか、あるいは投与することを含んでなる、精神機能の低下抑制方法が提供される。本発明によればまた、有効量の本発明のペプチドまたはその薬学上許容される塩もしくは溶媒和物あるいはそれを含む組成物を、それを必要としている対象に摂取させるか、あるいは投与することを含んでなる、うつおよび／または不安の治療、予防または改善方法が提供される。本発明の方法は、本発明の組成物および用剤に関する記載に従って実施することができる。
【００３６】
本発明のさらに別の面によれば、精神機能の低下抑制剤の製造のための、精神機能の低下抑制剤としての、あるいは本発明の方法における、本発明のペプチドまたはその薬学上許容される塩もしくは溶媒和物の使用が提供される。本発明の別の面によればまた、うつおよび／または不安の治療、予防または改善剤の製造のための、うつおよび／または不安の治療、予防または改善剤としての、あるいは本発明の方法における、本発明のペプチドまたはその薬学上許容される塩もしくは溶媒和物の使用が提供される。本発明の使用は、本発明の組成物および用剤に関する記載に従って実施することができる。
【００３７】
本発明のさらにまた別の面によれば、精神機能の低下抑制に用いるためのＧＴＷＹ（配列番号１）のアミノ酸配列を有するペプチドまたはその薬学上許容される塩もしくは溶媒和物が提供される。本発明によればまた、うつおよび／または不安の治療、予防または改善に用いるためのＧＴＷＹ（配列番号１）のアミノ酸配列を有するペプチドまたはその薬学上許容される塩もしくは溶媒和物が提供される。本発明によればまた、本発明の方法に用いるためのＧＴＷＹ（配列番号１）のアミノ酸配列を有するペプチドまたはその薬学上許容される塩もしくは溶媒和物が提供される。上記のＧＴＷＹ（配列番号１）のアミノ酸配列を有するペプチド並びにその薬学上許容される塩および溶媒和物は、本発明の組成物および用剤に関する記載に従って実施することができる。
【００３８】
本発明の方法および本発明の使用はヒトを含む哺乳動物における使用であってもよく、治療的使用と非治療的使用のいずれもが意図される。本明細書において、「非治療的」とはヒトを手術、治療または診断する行為（すなわち、ヒトに対する医療行為）を含まないことを意味し、具体的には、医師または医師の指示を受けた者がヒトに対して手術、治療または診断を行う方法を含まないことを意味する。
【実施例】
【００３９】
以下の例に基づき本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらの例に限定されるものではない。
【００４０】
実施例１：抑うつ状態および意欲低下に対するテトラペプチドの効果
（１）試験の概要
ＧＴＷＹペプチド（Ｂａｃｈｅｍ社）を蒸留水で溶解し、マウスへ経口投与１時間後に、尾懸垂試験を実施することにより抑うつおよび意欲・モチベーション低下に対する被験物質の改善効果を評価した。
【００４１】
（２）ＧＴＷＹペプチドの投与
５週齢のＩＣＲ（ＣＤ−１）雄マウス（日本チャールズリバー社）を、１週間の馴化飼育の後、ＧＴＷＹペプチドを乾燥質量換算で０ｍｇ／ｋｇ体重、０．３ｍｇ／ｋｇ体重、１．０ｍｇ／ｋｇ体重となるように胃内へ強制経口投与した。投与したＧＴＷＹペプチドは、投与直前に蒸留水を添加することにより調製したものである。具体的には、投与する液量が１０ｍＬ／ｋｇ体重となるよう蒸留水で調製したＧＴＷＹペプチド水溶液を胃内へ強制経口投与した。また、０ｍｇ／ｋｇの群には、投与する液量が１０ｍＬ／ｋｇ体重となるように希釈溶媒（蒸留水）を胃内へ強制経口投与した。全て一群８匹で試験を実施した。
【００４２】
（３）尾懸垂試験
上記（２）に記載のＧＴＷＹペプチドまたは蒸留水投与から１時間後に尾懸垂試験を実施した。具体的には、照度６０ルクス、温度２３．５±１℃の個別ケージ内で、逆さの状態のマウスの頭部がケージ底面から４５〜５０ｃｍの高さになるように、ケージ上面にテープ（幅１ｃｍ、長さ１５ｃｍ）の一方の端を固定し、他方の端２ｃｍを、マウスの尾（尾の先端から１ｃｍの部位）に巻き付けてテープを尾に固定し、マウスを６分間吊るした（尾懸垂）。尾懸垂状態となったマウスをビデオカメラとモニタを用いて別室から目視し、６分間中の無動状態となった時間（無動時間）（秒）を測定した。なお、無動状態とは「マウスの四肢の動きが止まり、力み（りきみ）が無くなった状態」である。
【００４３】
ここで、尾懸垂試験は抑うつ様行動を評価する方法として開発されたものである（Cryan JF, et al. Neurosci Biobehav Rev. 2005; 29: 571-625）。マウスの尾を固定し逆さの状態で吊すと、逃避行動の後に無動状態（動作を示さずぶら下がっている状態）が認められるため、一定時間中に認められる無動状態の発現時間を抑うつ様行動として評価する。尾懸垂試験で認められる無動状態は、実験動物が暴露された環境からの逃避を放棄した絶望状態、すなわち回避意欲の消失を意味するものと考えられており、意欲の指標ともなる。
【００４４】
（５）結果
尾懸垂試験の結果は、図１および図２に示される通りであった。なお、検定は全て非投与群を対照としたダネットの検定によって行った。
【００４５】
図１に示される通り、尾懸垂試験の無動時間は、０．３ｍｇ／ｋｇおよび１．０ｍｇ／ｋｇＧＴＷＹペプチド投与群では、ＧＴＷＹペプチド非投与群と比較して、無動時間が有意に減少した。このことからＧＴＷＹペプチド投与によって、抑うつ状態および意欲低下が改善し、無動時間が減少したことが確認された。
【００４６】
図２に示される通り、尾懸垂試験の無動時間は、０．１ｍｇ／ｋｇおよび０．３ｍｇ／ｋｇＧＴＷＹペプチド投与群では、非投与群と比較して、無動時間が有意に減少した。このことからＧＴＷＹペプチド投与によって、抑うつ状態および意欲低下が改善し、無動時間が減少したことが確認された。
【図１】
2020143035.tif 000002
【図２】
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【配列表】
2020143035000001.app