(57)【要約】【課題】非侵襲的に採取可能な唾液中に含まれ、簡便かつ迅速に測定可能な歯周病バイオマーカーを提供すること、および、軽度歯周病の発症を判定可能な歯周病発症の判定方法を提供すること。【解決手段】自然唾液または刺激性唾液から検出され、表５、表６、表１０および表１１に記載の化合物から選択される少なくとも１種からなるバイオマーカー、ならびに、被験者の唾液を試料とし、表５、表６、表１０および表１１に記載の化合物から選択される２種以上の組み合わせからなるバイオマーカーを測定する工程を含む、歯周病の発症を判定する方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
自然唾液から検出される歯周病バイオマーカーであって、表５および表１０に記載の化合物から選択される少なくとも１種からなるバイオマーカー。
【請求項２】
表５および表１０に記載の化合物から選択される２種以上の組み合わせからなる請求項１に記載のバイオマーカー。
【請求項３】
刺激性唾液から検出される歯周病バイオマーカーであって、表７および表１１に記載の化合物から選択される少なくとも１種からなるバイオマーカー。
【請求項４】
表７および表１１に記載の化合物から選択される２種以上の組み合わせからなる請求項３に記載のバイオマーカー。
【請求項５】
自然唾液から検出される歯周病バイオマーカーであって、表１５に記載の化合物から選択される少なくとも１種からなるバイオマーカー。
【請求項６】
表１５に記載の化合物から選択される２種以上の組み合わせからなる請求項５に記載のバイオマーカー。
【請求項７】
歯周病の発症を判定する方法であって、被験体の唾液を試料とし、請求項２または４または６に記載のバイオマーカーを測定する工程を含む方法。
【請求項８】
唾液が自然唾液である請求項７に記載の方法。
【請求項９】
唾液が刺激性唾液である請求項７に記載の方法。
【請求項１０】
軽度歯周病の発症を判定する、請求項７〜９のいずれかに記載の方法。
【請求項１１】
５０代以上の被検者の自然唾液から検出される歯周病バイオマーカーであって、表１８に記載の化合物から選択される少なくとも１種からなるバイオマーカー。
【請求項１２】
表１８に記載の化合物から選択される２種以上の組み合わせからなる請求項１１に記載のバイオマーカー。
【請求項１３】
５０代以上の歯周病の発症を判定する方法であって、被験体の唾液を試料とし、請求項１２に記載のバイオマーカーを測定する工程を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、歯周病バイオマーカーおよび歯周病発症の判定方法に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
歯周病は細菌性バイオフィルムに対する生体応答を主因として惹起される炎症性疾患であり、成人が歯を失う第一原因となっている。また歯周病は、糖尿病や冠動脈疾患などの多くの全身疾患のリスク因子となることが疫学的研究によって示されている。歯周病の判定は、歯科医が診察において臨床的所見（歯周ポケットの深さ、炎症の度合い、歯骨のＸ線撮影等）に基づいて行っているのが現状であり、歯周病の病態や疾病活動性をリアルタイムにオンサイト（チェアサイド）で評価する臨床診断法はいまだ確立されていない。さらには、歯周病が全身疾患に影響を与える機序も不明であることから、臨床の場において病態に則した診断結果を迅速に出せるような新規診断法の確立が望まれている。
【０００３】
これまでに、歯肉溝浸出液中の炎症性サイトカインや歯周組織中のｍＲＮＡ発現が、歯周病の病態変化により増減することが報告されている（非特許文献１）。これらの因子をモニターすれば歯周病の病態を把握することが可能であるが、歯肉溝浸出液は多く採れても１０μＬと微量であるため、複数の因子を同時に検出することが困難である。また、半定量性ＲＴ−ＰＣＲによるサイトカインｍＲＮＡ発現検出は、侵襲的な検体採取を必要とするうえに多大な時間と手間を要するため、これらの方法をチェアサイドの迅速診断に用いることは現実には難しい。
【０００４】
また、特許文献１には、唾液中の代謝バイオマーカーレベルを決定することで歯周病を診断する方法が開示されている。しかしながら、この診断方法は未だ実用化されていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特表２０１３−５０５４２８
【非特許文献】
【０００６】
【非特許文献１】Inflammation and Regeneration, 24 (2004), 92
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、非侵襲的に採取可能な唾液中に含まれ、簡便かつ迅速に測定可能な歯周病バイオマーカーを提供すること、および、軽度歯周病の発症を判定可能な歯周病発症の判定方法を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明は、上記の課題を解決するために、以下の各発明を包含する。
［１］自然唾液から検出される歯周病バイオマーカーであって、表５および表１０に記載の化合物から選択される少なくとも１種からなるバイオマーカー。
［２］表５および表１０に記載の化合物から選択される２種以上の組み合わせからなる前記［１］に記載のバイオマーカー。
［３］刺激性唾液から検出される歯周病バイオマーカーであって、表７および表１１に記載の化合物から選択される少なくとも１種からなるバイオマーカー。
［４］表７および表１１に記載の化合物から選択される２種以上の組み合わせからなる前記［３］に記載のバイオマーカー。
［５］自然唾液から検出される歯周病バイオマーカーであって、表１５に記載の化合物から選択される少なくとも１種からなるバイオマーカー。
［６］表１５に記載の化合物から選択される２種以上の組み合わせからなる前記［５］に記載のバイオマーカー。
［７］歯周病の発症を判定する方法であって、被験者の唾液を試料とし、前記［２］または［４］または［６］に記載のバイオマーカーを測定する工程を含む方法。
［８］唾液が自然唾液である前記［７］に記載の方法。
［９］唾液が刺激性唾液である前記［７］に記載の方法。
［１０］軽度歯周病の発症を判定する、前記［７］〜［９］のいずれかに記載の方法。
［１１］５０代以上の被検者の自然唾液から検出される歯周病バイオマーカーであって、表１８に記載の化合物から選択される少なくとも１種からなるバイオマーカー。
［１２］表１８に記載の化合物から選択される２種以上の組み合わせからなる前記［１１］に記載のバイオマーカー。
［１３］５０代以上の歯周病の発症を判定する方法であって、被験体の唾液を試料とし、前記［１２］に記載のバイオマーカーを測定する工程を含む方法。
【発明の効果】
【０００９】
本発明により、非侵襲的に採取可能な唾液中に含まれる歯周病バイオマーカーを提供することができる。これらの歯周病バイオマーカーは、唾液を試料として簡便かつ迅速に測定することができる。さらに、本発明の歯周病バイオマーカーを測定することを含む、軽度歯周病の発症を判定可能な歯周病発症の判定方法を提供することができる。さらに、本発明の歯周病バイオマーカーを測定することを含む、５０代以上の被検者の歯周病の発症を判定可能な歯周病発症の判定方法を提供することができる。本発明の歯周病発症の判定方法は、歯科医師による臨床診断を補助することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１０）のマススペクトルを示す図である。
【図２】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１４）のマススペクトルを示す図である。
【図３】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２４）のマススペクトルを示す図である。
【図４】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２５）のマススペクトルを示す図である。
【図５】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３６）のマススペクトルを示す図である。
【図６】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３９）のマススペクトルを示す図である。
【図７】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号５２）のマススペクトルを示す図である。
【図８】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号５５）のマススペクトルを示す図である。
【図９】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号５８）のマススペクトルを示す図である。
【図１０】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号６０）のマススペクトルを示す図である。
【図１１】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号６１）のマススペクトルを示す図である。
【図１２】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号６６）のマススペクトルを示す図である。
【図１３】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号６９）のますスペクトルを示す図である。
【図１４】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号７１）のマススペクトルを示す図である。
【図１５】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号７３）のマススペクトルを示す図である。
【図１６】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号７７）のマススペクトルを示す図である。
【図１７】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号８３）のマススペクトルを示す図である。
【図１８】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号８５）のマススペクトルを示す図である。
【図１９】自然唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号９７）のマススペクトルを示す図である。
【００１１】
【図２０】刺激性唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２０２）のマススペクトルを示す図である。
【図２１】刺激性唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２０４）のマススペクトルを示す図である。
【図２２】刺激性唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２０６）のマススペクトルを示す図である。
【図２３】刺激性唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２０７）のマススペクトルを示す図である。
【図２４】刺激性唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２０８）のマススペクトルを示す図である。
【図２５】刺激性唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２０９）のマススペクトルを示す図である。
【図２６】刺激性唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２１０）のマススペクトルを示す図である。
【図２７】刺激性唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２１１）のマススペクトルを示す図である。
【図２８】刺激性唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２１２）のマススペクトルを示す図である。
【図２９】刺激性唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２１４）のマススペクトルを示す図である。
【図３０】刺激性唾液中の水溶性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２１５）のマススペクトルを示す図である。
【００１２】
【図３１】軽度歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０５）が認められた４５化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図３２】軽度歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた２６化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図３３】軽度歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められたグリシン、尿素および乳酸を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図３４】軽度歯周病患者の刺激性唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０５）が認められた１９化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図３５】軽度歯周病患者の刺激性唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた９化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図３６】軽度歯周病患者の刺激性唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０５）が認められた１９化合物からグリシンおよびピログルタミン酸を除いた１７化合物対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【００１３】
【図３７】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号７）のマススペクトルを示す図である。
【図３８】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号８）のマススペクトルを示す図である。
【図３９】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１０）のマススペクトルを示す図である。
【図４０】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１１）のマススペクトルを示す図である。
【図４１】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１２）のマススペクトルを示す図である。
【図４２】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１３）のマススペクトルを示す図である。
【図４３】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１５）のマススペクトルを示す図である。
【図４４】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１６）のマススペクトルを示す図である。
【図４５】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１７）のマススペクトルを示す図である。
【図４６】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１８）のマススペクトルを示す図である。
【図４７】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２０）のマススペクトルを示す図である。
【図４８】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２１）のマススペクトルを示す図である。
【図４９】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２２）のマススペクトルを示す図である。
【図５０】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２３）のマススペクトルを示す図である。
【図５１】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２４）のマススペクトルを示す図である。
【図５２】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２５）のマススペクトルを示す図である。
【図５３】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２６）のマススペクトルを示す図である。
【図５４】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２７）のマススペクトルを示す図である。
【図５５】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２８）のマススペクトルを示す図である。
【図５６】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２９）のマススペクトルを示す図である。
【図５７】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３０）のマススペクトルを示す図である。
【図５８】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３１）のマススペクトルを示す図である。
【図５９】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３２）のマススペクトルを示す図である。
【図６０】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３３）のマススペクトルを示す図である。
【図６１】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３４）のマススペクトルを示す図である。
【図６２】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３５）のマススペクトルを示す図である。
【図６３】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３６）のマススペクトルを示す図である。
【図６４】自然唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３７）のマススペクトルを示す図である。
【００１４】
【図６５】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号７）のマススペクトルを示す図である。
【図６６】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号８）のマススペクトルを示す図である。
【図６７】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号９）のマススペクトルを示す図である。
【図６８】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１０）のマススペクトルを示す図である。
【図６９】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１１）のマススペクトルを示す図である。
【図７０】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１４）のマススペクトルを示す図である。
【図７１】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１５）のマススペクトルを示す図である。
【図７２】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１６）のマススペクトルを示す図である。
【図７３】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１８）のマススペクトルを示す図である。
【図７４】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号１９）のマススペクトルを示す図である。
【図７５】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２１）のマススペクトルを示す図である。
【図７６】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２２）のマススペクトルを示す図である。
【図７７】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２４）のマススペクトルを示す図である。
【図７８】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２５）のマススペクトルを示す図である。
【図７９】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２６）のマススペクトルを示す図である。
【図８０】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２７）のマススペクトルを示す図である。
【図８１】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２８）のマススペクトルを示す図である。
【図８２】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号２９）のマススペクトルを示す図である。
【図８３】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３０）のマススペクトルを示す図である。
【図８４】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３１）のマススペクトルを示す図である。
【図８５】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３２）のマススペクトルを示す図である。
【図８６】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３３）のマススペクトルを示す図である。
【図８７】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３４）のマススペクトルを示す図である。
【図８８】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３５）のマススペクトルを示す図である。
【図８９】刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析における未同定化合物（ピーク番号３６）のマススペクトルを示す図である。
【図９０】歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０５）が認められた３９化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図９１】歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０５）が認められた化合物中の６化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図９２】歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．００１）が認められた化合物中の４化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図９３】歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．００１）が認められた化合物中の２化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図９４】歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．００１）が認められた化合物中の２化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図９５】歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．００１）が認められた化合物中の２化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図９６】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０５）が認められた４２化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図９７】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の１１化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図９８】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の１０化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図９９】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の１０化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図１００】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の９化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図１０１】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の８化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図１０２】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の８化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図１０３】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の７化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図１０４】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の６化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図１０５】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の５化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図１０６】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の５化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図１０７】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の４化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図１０８】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の４化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図１０９】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の３化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図１１０】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．００１）が認められた化合物中の２化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【図１１１】５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の２化合物を対象化合物として、ＯＰＬＳ判別分析を行った結果を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
〔歯周病バイオマーカー〕
本発明は歯周病バイオマーカーを提供する。本発明の歯周病バイオマーカー（以下、「本発明のバイオマーカー」と記す）は、唾液中の代謝物の網羅的解析（メタボローム解析）によって見出されたものであり、水溶性代謝物および揮発性代謝物が含まれる。本発明のバイオマーカーのうち、水溶性代謝物であるものとしては、表５、表６、表７、表８、表１５および表１８に記載の化合物が挙げられる。また、本発明のバイオマーカーのうち、揮発性代謝物であるものとしては、表１０および表１１に記載の化合物が挙げられる。
【００１６】
唾液は自然唾液であってもよく、刺激性唾液であってもよい。自然唾液は通常状態で口腔内に分泌される唾液である。刺激性唾液は唾液検査用ガムなどを利用して採取することができる。本発明のバイオマーカーの測定に供する唾液は、採取直後の新鮮な唾液であってもよく、凍結保存した唾液であってもよい。
【００１７】
本発明のバイオマーカーは、表５および表１０に記載の化合物（自然唾液から検出される代謝物）、ならびに、表７および表１１に記載の化合物（刺激性唾液から検出される代謝物）から選択される少なくとも１種からなるバイオマーカーであってもよく、２種以上の組み合わせからなるバイオマーカーであってもよい。２種以上の組み合わせは、水溶性代謝物と揮発性代謝物の組み合わせであってもよく、水溶性代謝物の組み合わせであってもよく、揮発性代謝物の組み合わせであってもよい。組み合わせる化合物数は、歯周病発症の有無を正確に判定できる数であれば特に限定されない。例えば、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１５種以上、２０種以上、２５種以上、３０種以上、３５種以上、４０種以上であってもよい。
【００１８】
本発明のバイオマーカーは、公知の測定方法を用いて測定することができる。例えば、ＨＰＬＣ、ＴＬＣ、電気化学分析、毛細管電気泳動（ＣＥ）、質量分析（ＭＳ）、屈折率分光法（ＲＩ）、紫外分光法（ＵＶ）、蛍光分析、ガスクロマトグラフィー（ＧＣ）、超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）、放射化学分析、近赤外分光法（近ＩＲ）、ラマン分光法、核磁気共鳴分光法（ＮＭＲ）、光散乱分析（ＬＳ）などが挙げられる。水溶性代謝物を測定する場合、ＣＥ−ＭＳ、ＨＰＬＣ−ＭＳ、ＳＦＣ−ＭＳ、ＧＣ−ＭＳなどを好適に用いることができる。揮発性代謝物を測定する場合、ＳＰＭＥ（solid phase micro extraction）−ＧＣ−ＭＳ、ＴＤ（Thermal desorption）−ＧＣ−ＭＳ、ＰＴ（purge and Trap）−ＧＣ−ＭＳ、ＨＳ（headspace）−ＧＣ−ＭＳなどを好適に用いることができる。ただし、特定の分析方法に限定されない。
【００１９】
本発明のバイオマーカーの測定に用いる測定方法は、１００μＬ以下の試料中に、１０００ｐｐｍ含まれる化合物を測定できる方法であってもよく、１００ｐｐｍ含まれる化合物を測定できる方法であってもよく、１０ｐｐｍ含まれる化合物を測定できる方法であってもよく、１ｐｐｍ含まれる化合物を測定できる方法であってもよく、１００ｐｐｂ含まれる化合物を測定できる方法であってもよく、１０ｐｐｂ含まれる化合物を測定できる方法であってもよく、１ｐｐｂ含まれる化合物を測定できる方法であってもよい。
【００２０】
〔歯周病発症の判定方法〕
本発明は、歯周病発症の判定方法または歯周病発症の判定を補助する方法を提供する。本発明の方法は、歯科医師による歯周病の臨床診断を補助することができる。本発明の方法は、軽度の歯周病患者と健常者を判別することができるので、歯周病罹患の初期における判定に非常に有用である。
【００２１】
ここで、歯周病の進行過程は、健康状態、歯肉炎、軽度歯周炎、中等度歯周炎、重度歯周炎の５段階に分けることができる。軽度の歯周病（歯周炎）は、歯と歯ぐきのすき間（歯周ポケット）が３〜５ｍｍであり、歯ぐきの炎症がひどくなり、歯周病菌が歯周組織に侵入し、歯槽骨や歯根膜も破壊されはじめる状態である。中等度の歯周病（歯周炎）は、歯周ポケット）が４〜７ｍｍであり、炎症がさらに拡大し、歯槽骨も半分近くまで破壊が進み、歯がぐらつきはじめる状態である。
【００２２】
本発明の方法は、被験体の唾液を試料とし、上記本発明のバイオマーカーを測定する工程を含むものであればよい。被験体は歯周病を発症しうる哺乳動物であれば限定されず、ヒト、サル、チンパンジー、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ブタ、ウサギ、マウス、ラット等が挙げられる。好ましくはヒトである。
【００２３】
測定するバイオマーカーは、２種以上の組み合わせからなる本発明のバイオマーカーであってもよい。組み合わせる化合物数は、３種以上、４種以上、５種以上、６種以上、７種以上、８種以上、９種以上、１０種以上、１５種以上、２０種以上、２５種以上、３０種以上、３５種以上、４０種以上であってもよい。
【００２４】
本発明の方法において、唾液試料の内部標準物質を添加して測定してもよい。水溶性代謝物をバイオマーカーとする場合の内部標準物質としては、生体で存在しない化合物を用いることができる。例えば、２−イソプロピルリンゴ酸、一般的な有機酸やアミノ酸の同位体ラベルしたもの（例えばｄ体）などを用いることができる。揮発性代謝物をバイオマーカーとする場合の内部標準物質としては、例えば、フルオロベンゼン、４−ブロモフルオロベンゼン、１，４−ジオキサンｄ８、一般的な揮発性化合物の同位体ラベルしたもの（たとえばｄ体）などを用いることができる。
【００２５】
被験体が歯周病を発症しているか否かの判定は、例えば図３２のＯＰＬＳ判別分析の結果を用いて、以下のように行うことができる。図３２は、軽度歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた２６化合物（表８参照）を対象化合物としてＯＰＬＳ判別分析を行い、二次元平面上にプロットしたものである。この図では、健常者はＸ軸の−２より左側に位置しており、軽度歯周病患者はＸ軸の−２よりに右側に位置している。したがって、被験者の自然唾液を試料として図３２で用いたものと同じ２６化合物を測定して図３２にプロットした場合に、境界線（Ｘ軸の−２）より左側にプロットされた場合は、歯周病を発症していないと判定することができ、境界線（Ｘ軸の−２）より右側にプロットされた場合は、歯周病を発症していると判定することができる。ただし、判定方法はこれに限定されず、その他の公知の判定方法から適宜選択して使用することができる。例えば、複数または単一のバイオマーカーの閾値を超えたかどうかを判定基準とするものであってもよい。
【００２６】
本発明の方法により、歯周病を発症していると判定された場合、被験体は軽度の歯周病であると判断できるので、歯周病を早期に治療することができ、歯周病関連全身疾患の世予防、早期発見、早期治療に極めて有用である。
【実施例】
【００２７】
以下、実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２８】
〔実施例１：歯周病患者唾液における水溶性代謝物の網羅的解析〕
１−１  被験者および試料
軽度から中等度（重症度１〜４）の歯周病患者２４名、健常者５名の自然唾液および刺激性唾液を試料とした（表１）。刺激性唾液は医療用ガムを用いて採取した。歯周病の重症度は、患者の臨床所見から歯科医師が判断した。
【００２９】
【表１】
2020183958.tif 000002
【００３０】
１−２  唾液中の水溶性代謝物の分析方法
（１）試料の前処理
（i）ＳＰＥカラムに蒸留水１００μＬ、ＡＣＮ１００μＬ、ＡＣＮ／水（９：１）溶液１００μＬを順に通し、カラムのコンディショニングを行った。
（ii）試料４０μＬにＡＣＮ４５０μＬを加え、１２００ｒｐｍ、３７℃で３０分間インキュベートした。
（iii）内部標準液として蒸留水に溶解した２−イソプロピルリンゴ酸１０μＬ（１００ｐｐｍ）を加え、１６，０００×ｇ、４℃で５分間遠心分離を行った。
（iv）１２０μＬの上清をカラムに充填した。
（v）ＡＣＮ１００μＬをカラムに通して脱水した。
（vi）ピリジン／ＡＣＮ（９：１）溶液に溶解したメトキシアミン塩酸塩５μＬ（２００ｍｇ／ｍＬ）をカラムに充填しメトキシ化反応させた。
（vii）３分後、ＭＳＴＦＡ２５μＬをカラムに充填しシリル化反応させた。
（viii）１０分後、ヘキサン７０μＬを通し、試料溶液を溶出させた。
（ix）濃度調整のためヘキサン３００μＬを加え
【００３１】
（２）ＧＣ−ＭＳ分析条件
以下の表２に記載の条件でＧＣ−ＭＳ分析を行った。ガスクロマトグラフにはＡｇｉｌｅｎｔ６８９０Ｎ（Agilent）を使用し、質量分析計にはＪＭＳ−Ｑ１０００ＧＣ（日本電子）を使用した。ＧＣカラムにはＣＰ−Ｓｉｌ ８ ＣＢ ｆｏｒ Ａｍｉｎｅｓ（Agilent、長さ30m×内径0.25mm×膜厚0.5μm）を使用した。
【００３２】
【表２】
2020183958.tif 000003
【００３３】
１−３  データ解析
（１）健常者と歯周病患者との二群間比較
健常者群（n=5）および歯周病患者群（n=24）の２群に分けて（表３参照）、マン・ホイットニーのＵ検定（Mann-Whitney U test）を行った。
【００３４】
【表３】
2020183958.tif 000004
【００３５】
（２）健常者と軽度歯周病患者と中等度歯周病患者との多重比較
健常者群（n=5）、軽度歯周病患者群（n=15）および中等度歯周病患者群（n=9）の３群に分けて（表４参照）、クラスカル・ウォリス検定（Kruskal-wallis Test）を行った。
【００３６】
【表４】
2020183958.tif 000005
【００３７】
１−４  自然唾液中の水溶性代謝物の分析結果
（１）健常者と歯周病患者との二群間比較
健常者と歯周病患者との間に統計的有意差が認められた４８化合物（１９個の未同定化合物を含む）を表５に示した。未同定化合物のマススペクトルを図１〜図１９に示した。
【００３８】
【表５】
2020183958.tif 000006
【００３９】
（２）健常者と軽度歯周病患者と中等度歯周病患者との多重比較
健常者と軽度歯周病患者との間に統計的有意差が認められた４５化合物、および、健常者と中等度歯周病患者との間に統計的有意差が認められた４３化合物を表６に示した。
【００４０】
【表６】
2020183958.tif 000007
【００４１】
１−５  刺激性唾液中の水溶性代謝物の分析結果
（１）健常者と歯周病患者との二群間比較
健常者と歯周病患者との間に統計的有意差が認められた２１化合物（１２個の未同定化合物を含む）を表７に示した。自然唾液では有意差が認められなかったグルコースが刺激性唾液では歯周病のマーカーとなり得ることが示された。未同定化合物のマススペクトルを図２０〜図３０に示した。なお、＃１４は図２に示されている。
【００４２】
【表７】
2020183958.tif 000008
【００４３】
（２）健常者と軽度歯周病患者と中等度歯周病患者との多重比較
健常者と軽度歯周病患者との間に統計的有意差が認められた１９化合物、および、健常者と中等度歯周病患者との間に統計的有意差が認められた１４化合物を表８に示した。
【００４４】
【表８】
2020183958.tif 000009
【００４５】
１−６  Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ＰＬＳ判別分析（ＯＰＬＳ−ＤＡ）
多変量解析ソフトウェアＳＩＭＣＡを用いて、ＯＰＬＳ−ＤＡを行った。図３１は、軽度歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０５）が認められた４５化合物を対象化合物としたときに、健常者と軽度歯周病患者が判別できることを示している。図３２は、軽度歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた２６化合物を対象化合物としたときに、健常者と軽度歯周病患者が判別できることを示している。図３３は、軽度歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物の中で、Ｐ値が非常に小さいグリシン、尿素および乳酸のみを対象化合物としたときに、健常者と軽度歯周病患者が判別できることを示している。図３４は、軽度歯周病患者の刺激性唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０５）が認められた１９化合物を対象化合物としたときに、健常者と軽度歯周病患者が判別できることを示している。ただし、患者ＩＤ４４は健常者に近いことが示されている。図３５は、軽度歯周病患者の刺激性唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた９化合物を対象化合物としたときに、健常者と軽度歯周病患者が判別が難しいことを示している。図３６は、軽度歯周病患者の刺激性唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０５）が認められた１９化合物からグリシンおよびピログルタミン酸を除いた１７化合物対象化合物としたときに、健常者と軽度歯周病患者が判別できることを示している。
【００４６】
〔実施例２：歯周病患者唾液における揮発性代謝物の網羅的解析〕
２−１  被験者および試料
実施例１と同じ被験者から採取した試料を使用した。
【００４７】
２−２  唾液中の揮発性代謝物の分析方法
（１）試料の前処理
２０ｍＬバイアル瓶に試料を２０μＬ加え、内部標準液として１ｐｐｍのパラブロモフルオロベンゼンおよびフルオロベンゼンのメタノール溶液を添加した。
【００４８】
（２）ＨＳ−ＧＣ−ＭＳ分析条件
以下のＨＳ条件および表９に記載のＧＣ−ＭＳ条件で分析を行った。ＨＳ装置にはＭＳ−６２０７０ＳＴＲＡＰ（日本電子）を使用し、ガスクロマトグラフにはＡｇｉｌｅｎｔ７８９０Ｂ（Agilent）を使用し、四重極質量分析計にはＪＭＳ−Ｑ１５００ＧＣ（日本電子）を使用した。
【００４９】
＜ＨＳ条件＞
サンプル加熱温度：７０℃
加熱平衡化時間：２７分
トラップ回数：４回
トラップ管インジェクション温度：２２０℃
【００５０】
【表９】
2020183958.tif 000010
【００５１】
２−３  データ解析
健常者群（n=5）および歯周病患者群（n=24）の２群に分けて（表３参照）、マン・ホイットニーのＵ検定（Mann-Whitney U test）を行った。
【００５２】
２−４  自然唾液中の揮発性代謝物の分析結果
健常者と歯周病患者との間に統計的有意差が認められた３７化合物（２８個の未同定化合物を含む）を表１０に示した。未同定化合物のマススペクトルを図３７〜図６４に示した。
【００５３】
【表１０】
2020183958.tif 000011
【００５４】
２−５  刺激性唾液中の揮発性代謝物の分析結果
健常者と歯周病患者との間に統計的有意差が認められた３６化合物（２５個の未同定化合物を含む）を表１１に示した。未同定化合物のマススペクトルを図６５〜図８９に示した。
【００５５】
【表１１】
2020183958.tif 000012
【００５６】
〔実施例３：歯周病患者唾液における水溶性代謝物の網羅的解析（その２）〕
３−１  被験者および試料
軽度から中等度（重症度１〜４）の歯周病患者２４名、健常者５名の自然唾液を試料とした（表１２）。歯周病の重症度は、患者の臨床所見から歯科医師が判断した。
【００５７】
【表１２】
2020183958.tif 000013
【００５８】
３−２  唾液中の水溶性代謝物の分析方法
実施例１と同じ方法でＧＣ−ＭＳ分析を行った。
【００５９】
３−３  全被験者のデータ解析
（１）健常者と歯周病患者との二群間比較
健常者群（n=10）および歯周病患者群（n=24）の２群に分けて（表１３参照）、マン・ホイットニーのＵ検定（Mann-Whitney U test）を行った。
【００６０】
【表１３】
2020183958.tif 000014
【００６１】
（２）健常者と軽度歯周病患者と中等度歯周病患者との多重比較
健常者群（n=10）、軽度歯周病患者群（n=15）および中等度歯周病患者群（n=9）の３群に分けて（表１４参照）、クラスカル・ウォリス検定（Kruskal-wallis Test）を行った。
【００６２】
【表１４】
2020183958.tif 000015
【００６３】
３−４  自然唾液中の水溶性代謝物の分析結果
（１）健常者と歯周病患者との二群間比較
健常者と歯周病患者との間に統計的有意差が認められた３９化合物を表１５に示した。
【００６４】
【表１５】
2020183958.tif 000016
【００６５】
（２）健常者と軽度歯周病患者と中等度歯周病患者との多重比較
健常者と軽度歯周病患者との間に統計的有意差が認められた３５化合物、および、健常者と中等度歯周病患者との間に統計的有意差が認められた２７化合物を表１６に示した。
【００６６】
【表１６】
2020183958.tif 000017
【００６７】
３−５  Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ＰＬＳ判別分析（ＯＰＬＳ−ＤＡ）
多変量解析ソフトウェアＳＩＭＣＡを用いて、ＯＰＬＳ−ＤＡを行った。図９０は、歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０５）が認められた３９化合物を対象化合物としたときに、健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図９１は、歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０５）が認められた化合物中の６化合物（乳酸、尿素、安息香酸、エタノールアミン、プロリン、グリシン）を対象化合物としたときに、健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図９２は、歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．００１）が認められた化合物中の４化合物（乳酸、尿素、プロリン、グリシン）を対象化合物としたときに、健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図９３は、歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．００１）が認められた化合物中の２化合物（乳酸、グリシン）を対象化合物としたときに、健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図９４は、歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．００１）が認められた化合物中の２化合物（乳酸、プロリン）を対象化合物としたときに、健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図９５は、歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．００１）が認められた２化合物（尿素、プロリン）を対象化合物としたときに、健常者と歯周病患者が判別できることを示している。
【００６８】
〔実施例４：５０代以上の健常者と歯周病患者との二群間比較〕
４−１  ５０代以上の被験者のデータ解析
実施例３の被検者中５０代以上の健常者群（n=9）および歯周病患者群（n=12）の２群に分けて（表１７参照）、マン・ホイットニーのＵ検定（Mann-Whitney U test）を行った。
【００６９】
【表１７】
2020183958.tif 000018
【００７０】
４−２  分析結果
５０代以上の健常者と５０代以上の歯周病患者との間に統計的有意差が認められた４２化合物を表１８に示した。
【００７１】
【表１８】
2020183958.tif 000019
【００７２】
４−３  Ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ＰＬＳ判別分析（ＯＰＬＳ−ＤＡ）
多変量解析ソフトウェアＳＩＭＣＡを用いて、ＯＰＬＳ−ＤＡを行った。なお、以下の図９６〜図１１１において「ピログルタミン酸」を「オキソプロリン」と表記した。
【００７３】
図９６は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０５）が認められた４２化合物を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図９７は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の１１化合物（乳酸、グリコール酸、Ｎアセチルグルコサミン、ピログルタミン酸、ヒポキサンチン、グリシルグリシン、キサンチン、アラニン、バリン、イソロイシン、グリシン）を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図９８は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の１０化合物（乳酸、Ｎアセチルグルコサミン、ピログルタミン酸、ヒポキサンチン、グリシルグリシン、キサンチン、アラニン、バリン、イソロイシン、グリシン）を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図９９は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の１０化合物（グリコール酸、Ｎアセチルグルコサミン、ピログルタミン酸、ヒポキサンチン、グリシルグリシン、キサンチン、アラニン、バリン、イソロイシン、グリシン）を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。
【００７４】
図１００は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の９化合物（乳酸、グリコール酸、ピログルタミン酸、ヒポキサンチン、グリシルグリシン、アラニン、バリン、イソロイシン、グリシン）を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図１０１は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の８化合物（乳酸、ピログルタミン酸、ヒポキサンチン、グリシルグリシン、アラニン、バリン、イソロイシン、グリシン）を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図１０２は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の８化合物（乳酸、グリコール酸、ピログルタミン酸、ヒポキサンチン、グリシルグリシン、アラニン、イソロイシン、グリシン）を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図１０３は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の７化合物（乳酸、グリコール酸、Ｎアセチルグルコサミン、ピログルタミン酸、バリン、グリシン、アラニン）を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図１０４は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の６化合物（乳酸、ピログルタミン酸、グリシルグリシン、アラニン、イソロイシン、グリシン）を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。
【００７５】
図１０５は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の５化合物（乳酸、グリコール酸、Ｎアセチルグルコサミン、ピログルタミン酸、アラニン）を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図１０６は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の５化合物（乳酸、ピログルタミン酸、グリシルグリシン、アラニン、イソロイシン）を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図１０７は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の４化合物（乳酸、グリコール酸、Ｎアセチルグルコサミン、ピログルタミン酸）を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図１０８は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の４化合物（乳酸、ピログルタミン酸、アラニン、グリシン）を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図１０９は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の３化合物（乳酸、ピログルタミン酸、アラニン）を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図１１０は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．００１）が認められた化合物中の２化合物（乳酸、Ｎアセチルグルコサミン）を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。図１１１は、５０代以上の歯周病患者の自然唾液において健常者との間に有意差（Ｐ＜０．０１）が認められた化合物中の２化合物（乳酸、ピログルタミン酸）を対象化合物としたときに、５０代以上の健常者と歯周病患者が判別できることを示している。
【００７６】
なお本発明は上述した各実施形態および実施例に限定されるものではなく、請求項に示した範囲で種々の変更が可能であり、異なる実施形態にそれぞれ開示された技術的手段を適宜組み合わせて得られる実施形態についても本発明の技術的範囲に含まれる。また、本明細書中に記載された学術文献および特許文献の全てが、本明細書中において参考として援用される。
【図１】
2020183958.tif 000020
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
2020183958.tif 000027
【図９】
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【図１０】
2020183958.tif 000029
【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
2020183958.tif 000037
【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【図２６】
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【図２７】
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【図２８】
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【図２９】
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【図３０】
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【図３１】
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【図３２】
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【図３３】
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【図３４】
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【図３５】
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【図３６】
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【図３７】
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【図３８】
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【図３９】
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【図４０】
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【図４１】
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【図４２】
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【図４３】
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【図４４】
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【図４５】
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【図４６】
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【図４７】
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【図４８】
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【図４９】
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【図５０】
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【図５１】
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【図５２】
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【図５３】
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【図５４】
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【図５５】
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【図５６】
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【図５８】
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【図５９】
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【図６０】
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【図６１】
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【図７０】
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【図７１】
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【図８０】
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【図８１】
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【図８２】
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【図９０】
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【図９１】
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【図９３】
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【図９９】
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【図１００】
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【図１０１】
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【図１０２】
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【図１０９】
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【図１１０】
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【図１１１】
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