(57)【要約】【課題】非侵襲性の刺激を用いながらも、実験動物を恐怖条件づけされたモデル動物にすることができる製造方法と製造装置を提供し、かつ、非侵襲的に恐怖条件づけされたモデル動物を提供すること。【解決手段】第１通路に配置した実験動物を第２通路に進入させ、第２通路に進入した該実験動物を不意に落下させて、恐怖条件づけを行う。第２通路は、第１通路に配置した実験動物が進入し得るように位置し、かつ、進入した実験動物を不意に落下させる機能を有する。実験動物を、第２通路において不意に落下させることによって、第１通路に再び配置されても第２通路に進入しようとしない恐怖条件づけされたモデル動物が得られる。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
第１通路に配置した実験動物を第２通路に進入させる第１ステップと、
第２通路に進入した前記実験動物を、不意に落下させる第２ステップとを有し、
第２通路は、第１通路に配置した実験動物が進入し得るように位置し、かつ、第２通路は、進入した実験動物を不意に落下させる機能を有する通路であり、
前記実験動物を、第２通路において不意に落下させることによって、第１通路に再び配置されても第２通路に進入しようとしない恐怖条件づけされたモデル動物を得る、
恐怖条件づけされたモデル動物の製造方法。
【請求項２】
第２ステップが、前記実験動物を不意にかつ非侵襲的に落下させ、かつ、下方で非侵襲的に受け止めるステップである、
請求項１に記載の製造方法。
【請求項３】
恐怖条件づけされたモデル動物の製造装置であって、当該製造装置は、
第１通路を備えた第１部材を有し、第１通路は、恐怖条件づけをすべき実験動物を配置するための通路であり、
第２通路を備えた第２部材を有し、第２部材は、第１通路に配置された実験動物が第２通路に進入し得るように配置され、かつ、第２部材は、第２通路に進入した実験動物を不意に落下させるように構成された落下機構を有し、
前記実験動物が、第２通路において不意に落下させられることによって、第１通路に再び配置されても第２通路に進入しようとしない恐怖条件づけされたモデル動物となる、
前記製造装置。
【請求項４】
前記落下機構が、前記実験動物を不意に落下させかつ下方で受け止めるように構成された機構であり、該実験動物を非侵襲的に落下させかつ非侵襲的に受け止めるように構成されている、請求項３に記載の製造装置。
【請求項５】
前記落下機構は、
（Ａ１）前記実験動物が第２通路に進入すると、該実験動物の重量に起因して第２部材が落下して、該実験動物を落下させるように構成された機構であるか、
（Ａ２）前記実験動物が第２通路に進入すると、該実験動物の重量に起因して第２部材が変位して、該実験動物を落下させるように構成された機構であるか、
（Ａ３）前記実験動物が第２通路に進入すると、該実験動物の重量に起因して第２部材が変形して、該実験動物を落下させるように構成された機構であるか、
（Ｂ１）前記実験動物が第２通路に進入すると、自動または手動で作動を開始し、第２部材を落下させて該実験動物を落下させるように構成されたアクチュエーターを有する機構であるか、
（Ｂ２）前記実験動物が第２通路に進入すると、自動または手動で作動を開始し、第２部材を変位させて該実験動物を落下させるように構成されたアクチュエーターを有する機構であるか、
（Ｂ３）前記実験動物が第２通路に進入すると、自動または手動で作動を開始し、該実験動物を第２通路外に押し出して落下させるように構成されたアクチュエーターを有する機構である、
請求項３または４に記載の製造装置。
【請求項６】
前記落下機構が、前記（Ａ１）の機構、または、前記（Ａ２）の機構であり、
第２部材は、内部が第２通路となっている筒状の長尺部材であるか、または、上面に長手方向に沿った第２通路を持った長尺部材であって、基端側の部分と先端側の部分とを有し、
第２部材の基端側の部分は第１部材の上面に配置されており、第２部材の先端側の部分は、第１部材の上面の外周縁部から空中に突き出しており、それにより、第２通路の基端側の部分は、第１部材の上面上に位置し、第２通路の先端側の部分は、第１部材の上面の外周縁部から空中に突き出しており、
前記落下機構が、前記（Ａ１）の機構である場合には、前記実験動物が第２通路の先端側の部分へと進入すると、該実験動物の重量によって第２部材は第１部材から落下し、それにより該実験動物も落下し、
前記落下機構が、前記（Ａ２）の機構である場合には、前記実験動物が第２通路の先端側の部分へと進入すると、該実験動物の重量によって該先端側の部分が降下するように傾き、それにより該実験動物も落下する、
請求項５に記載の製造装置。
【請求項７】
第１部材の第１通路は、照明によって第２通路よりも明るく照らされる通路であり、
第２部材は、光が透過しない壁部を有する筒状の長尺部材であって、
第２通路は、第１通路よりも暗い通路である、
請求項６に記載の製造装置。
【請求項８】
第２部材の先端側の部分およびそれをとりまく外界が、基端側の部分よりも暗くなるよう構成され、それにより、第２通路は、基端側の部分よりも先端側の部分の方がより暗い通路である、請求項７に記載の製造装置。
【請求項９】
第２部材が、上面に第２通路を持った長尺部材であって、
第１部材の第１通路は、照明によって第２通路よりも明るく照らされる通路であり、
第２部材の先端側の部分およびそれをとりまく外界が、第１通路よりも暗くなるように構成され、それにより、第２通路は、基端側の部分よりも先端側の部分の方がより暗い通路である、
請求項６に記載の製造装置。
【請求項１０】
当該製造装置によって製造されたモデル動物の恐怖条件づけが有効かどうかを、該モデル動物が第１通路から第２通路に進入するかどうかによって評価するための装置として使用される、請求項３〜９のいずれか１項に記載の製造装置。
【請求項１１】
請求項１または２に記載の製造方法によって得られた、恐怖条件づけされたモデル動物。
【請求項１２】
請求項２に記載の製造方法によって得られた恐怖条件づけされたモデル動物であって、前記製造方法において実験動物を不意に落下させかつ下方で受け止める操作が、該実験動物にとって非侵襲的な操作であることに起因して、当該モデル動物には外傷が無い、請求項１１に記載の恐怖条件づけされたモデル動物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、恐怖条件づけされたモデル動物（即ち、実験動物を恐怖条件づけすることによって得られたモデル動物）、および、そのモデル動物の製造方法と製造装置に関する。
【背景技術】
【０００２】
新薬や治療法の開発、神経機序の解明のための実験などには、げっ歯類などの実験動物は欠かすことができない。例えば、ＰＴＳＤ（心的外傷後ストレス障害）の治療薬の開発や、記憶・学習の神経機序の解明を行うための評価の過程では、恐怖条件づけされた実験動物が用いられる。
【０００３】
動物に、恐怖反応を誘導しない条件刺激（音、光、場所など）と、恐怖反応を誘導する非条件刺激（電気ショックなど）とを必要回数だけ提示すると、該動物は両者の関連を学習し、条件刺激の提示だけで恐怖反応を示すようになる。この学習反応が恐怖条件づけである。従来、実験動物に対する恐怖条件づけには、非条件刺激として、制御し易い電気ショックが主として用いられていた（例えば、非特許文献１など）。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】R. G. Phillips & J. E. LeDoux, "Differential contribution of amygdala and Hippocampus to cued and contextual fear conditioning", Behavioral Neuroscience, 106(2), 274-285, 1992.
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
しかしながら、実験動物に電気ショックを与えるといった侵襲的な恐怖条件づけのプロセスは、通電による火傷や強い痛みを伴うので、倫理的に問題とされる場合がある。一方、実験動物に対して非侵襲的に恐怖条件づけを行う方法や装置は開発されていない。これは、従来、強い痛みを伴う侵襲性の刺激であるからこそ、実験動物が恐怖を示すと考えられていたからであり、（非条件刺激＝強い痛みを伴う侵襲性の刺激）と考えられていたからである。
【０００６】
本発明の目的は、上記の問題を解決し、非侵襲性の刺激を用いながらも、実験動物を恐怖条件づけされたモデル動物にすることができる製造方法と製造装置を提供し、かつ、非侵襲的に恐怖条件づけされたモデル動物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の主たる構成は、次のとおりである。
〔１〕第１通路に配置した実験動物を第２通路に進入させる第１ステップと、
第２通路に進入した前記実験動物を、不意に落下させる第２ステップとを有し、
第２通路は、第１通路に配置した実験動物が進入し得るように位置し、かつ、第２通路は、進入した実験動物を不意に落下させる機能を有する通路であり、
前記実験動物を、第２通路において不意に落下させることによって、第１通路に再び配置されても第２通路に進入しようとしない恐怖条件づけされたモデル動物を得る、
恐怖条件づけされたモデル動物の製造方法。
〔２〕第２ステップが、前記実験動物を不意にかつ非侵襲的に落下させ、かつ、下方で非侵襲的に受け止めるステップである、
前記〔１〕に記載の製造方法。
〔３〕恐怖条件づけされたモデル動物の製造装置であって、当該製造装置は、
第１通路を備えた第１部材を有し、第１通路は、恐怖条件づけをすべき実験動物を配置するための通路であり、
第２通路を備えた第２部材を有し、第２部材は、第１通路に配置された実験動物が第２通路に進入し得るように配置され、かつ、第２部材は、第２通路に進入した実験動物を不意に落下させるように構成された落下機構を有し、
前記実験動物が、第２通路において不意に落下させられることによって、第１通路に再び配置されても第２通路に進入しようとしない恐怖条件づけされたモデル動物となる、
前記製造装置。
〔４〕前記落下機構が、前記実験動物を不意に落下させかつ下方で受け止めるように構成された機構であり、該実験動物を非侵襲的に落下させかつ非侵襲的に受け止めるように構成されている、前記〔３〕に記載の製造装置。
〔５〕前記落下機構は、
（Ａ１）前記実験動物が第２通路に進入すると、該実験動物の重量に起因して第２部材が落下して、該実験動物を落下させるように構成された機構であるか、
（Ａ２）前記実験動物が第２通路に進入すると、該実験動物の重量に起因して第２部材が変位して、該実験動物を落下させるように構成された機構であるか、
（Ａ３）前記実験動物が第２通路に進入すると、該実験動物の重量に起因して第２部材が変形して、該実験動物を落下させるように構成された機構であるか、
（Ｂ１）前記実験動物が第２通路に進入すると、自動または手動で作動を開始し、第２部材を落下させて該実験動物を落下させるように構成されたアクチュエーターを有する機構であるか、
（Ｂ２）前記実験動物が第２通路に進入すると、自動または手動で作動を開始し、第２部材を変位させて該実験動物を落下させるように構成されたアクチュエーターを有する機構であるか、
（Ｂ３）前記実験動物が第２通路に進入すると、自動または手動で作動を開始し、該実験動物を第２通路外に押し出して落下させるように構成されたアクチュエーターを有する機構である、
前記〔３〕または〔４〕に記載の製造装置。
〔６〕前記落下機構が、前記（Ａ１）の機構、または、前記（Ａ２）の機構であり、
第２部材は、内部が第２通路となっている筒状の長尺部材であるか、または、上面に長手方向に沿った第２通路を持った長尺部材であって、基端側の部分と先端側の部分とを有し、
第２部材の基端側の部分は第１部材の上面に配置されており、第２部材の先端側の部分は、第１部材の上面の外周縁部から空中に突き出しており、それにより、第２通路の基端側の部分は、第１部材の上面上に位置し、第２通路の先端側の部分は、第１部材の上面の外周縁部から空中に突き出しており、
前記落下機構が、前記（Ａ１）の機構である場合には、前記実験動物が第２通路の先端側の部分へと進入すると、該実験動物の重量によって第２部材は第１部材から落下し、それにより該実験動物も落下し、
前記落下機構が、前記（Ａ２）の機構である場合には、前記実験動物が第２通路の先端側の部分へと進入すると、該実験動物の重量によって該先端側の部分が降下するように傾き、それにより該実験動物も落下する、
前記〔５〕に記載の製造装置。
〔７〕第１部材の第１通路は、照明によって第２通路よりも明るく照らされる通路であり、
第２部材は、光が透過しない壁部を有する筒状の長尺部材であって、
第２通路は、第１通路よりも暗い通路である、
前記〔６〕に記載の製造装置。
〔８〕第２部材の先端側の部分およびそれをとりまく外界が、基端側の部分よりも暗くなるよう構成され、それにより、第２通路は、基端側の部分よりも先端側の部分の方がより暗い通路である、前記〔７〕に記載の製造装置。
〔９〕第２部材が、上面に第２通路を持った長尺部材であって、
第１部材の第１通路は、照明によって第２通路よりも明るく照らされる通路であり、
第２部材の先端側の部分およびそれをとりまく外界が、第１通路よりも暗くなるように構成され、それにより、第２通路は、基端側の部分よりも先端側の部分の方がより暗い通路である、
前記〔６〕に記載の製造装置。
〔１０〕当該製造装置によって製造されたモデル動物の恐怖条件づけが有効かどうかを、該モデル動物が第１通路から第２通路に進入するかどうかによって評価するための装置として使用される、前記〔３〕〜〔９〕のいずれかに記載の製造装置。
〔１１〕前記〔１〕または〔２〕に記載の製造方法によって得られた、恐怖条件づけされたモデル動物。
〔１２〕前記〔２〕に記載の製造方法によって得られた恐怖条件づけされたモデル動物であって、前記製造方法において実験動物を不意に落下させかつ下方で受け止める操作が、該実験動物にとって非侵襲的な操作であることに起因して、当該モデル動物には外傷が無い、前記〔１１〕に記載の恐怖条件づけされたモデル動物。
【発明の効果】
【０００８】
本発明では、実験動物にとって、不意に落下させられるということが恐怖であることを見出し、該不意の落下を恐怖条件づけのための非条件刺激として利用している。より具体的には、本発明では、実験動物を最初に配置するための第１通路とそこから進入可能な第２通路とが用意される。好ましい態様では、実験動物が第１通路から第２通路に進入するように誘引する要素が付与され、それにより、実験動物は第１通路から第２通路に進入しようとする。第２通路は、該実験動物を不意に落下させる機能を有し、第１通路から第２通路に進入した実験動物は不意に落下させられることになる。そのような不意の落下を一回または複数回経験させられた実験動物は、第１通路に再び配置されても、第２通路へは進入しようとはしなくなる。即ち、実験動物は、不意に落下させられたことにより、第１通路から第２通路へは進入しようとしない恐怖条件づけされたモデル動物となる。
【０００９】
また、驚くべきことに、落下させた実験動物を、下方で非侵襲的に（例えば、強い痛みや外傷を伴うような衝撃が加わらないように）受け止めたとしても、第２通路へは進入しようとはしなくなることから、不意の落下自体が実験動物にとって恐怖であることがわかった。よって、本発明の好ましい態様では、不意に落下させた実験動物を非侵襲的に受け止めるように構成し、それにより、実験動物を非衝撃的に恐怖条件づけすることに成功している。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１】図１は、本発明による製造方法を説明するための概略図であって、実験動物を不意に落下させる機能の一例を示している。また、図１は、本発明による製造装置の構成を説明するための概略図でもあり、実験動物を不意に落下させる落下機構の一例を示している。図１〜図５では、第１通路、第２通路は、紙面の左右の方向に延びている。
【図２】図２は、本発明による製造方法において、実験動物を不意に落下させる機能の他の例を示している。また、図２は、本発明による製造装置における落下機構の他の例をも示している。
【図３】図３は、本発明による製造方法において、実験動物を不意に落下させる機能のその他の例を示している。また、図３は、本発明による製造装置における落下機構のその他の例をも示している。
【図４】図４は、本発明による製造方法において、実験動物を不意に落下させる機能のその他の例を示している。また、図４は、本発明による製造装置における落下機構のその他の例をも示している。
【図５】図５は、本発明による製造方法において、実験動物を不意に落下させる機能のその他の例を示している。また、図５は、本発明による製造装置における落下機構のその他の例をも示している。
【図６】図６は、本発明による製造方法において、実験動物を不意に落下させる機能のその他の例を示している。また、図６は、本発明による製造装置における落下機構のその他の例をも示している。
【図７】図７は、本発明による製造方法において、実験動物を不意に落下させる好ましい例を示している。また、図７は、本発明による製造装置における落下機構の好ましい例をも示しており、本発明の実施例において用いた製造装置の構成例を示している。図７（ａ）では、図１〜図５と同様、第１通路、第２通路は、紙面の左右の方向に延びている。図７（ｂ）は、図７（ａ）に示した製造装置を右方から見た図であり、実験動物の図示は省略している。
【図８】図８は、本発明の実施例における恐怖条件づけの実験結果を示すグラフ図である。
【発明を実施するための形態】
【００１１】
（本発明の製造方法）
先ず、本発明の製造方法（以下、当該製造方法ともいう）を実施例に沿って説明する。以下の説明では、マウスを実験動物として用いた例を示しているが、実験動物は、他のげっ歯類や、他の種類の動物であってもよく、各実験動物の大きさや重さに応じて、通路等の大きさを適宜変更することができる。
当該製造方法は、図１（ａ）に例示するように、第１通路１１に配置した実験動物１００を、図１（ｂ）に例示するように、第２通路２１に進入させる第１ステップを有し、図１（ｃ）に示すように、第１ステップによって第２通路２１に進入した該実験動物１００を、不意に落下させる第２ステップを有する。図中の実験動物１００は、マウスを概略的に表したものである。図１（ａ）〜（ｃ）に示すように、第２通路２１は、第１通路１１に配置した実験動物１００が進入し得るように位置している。図１の例では、筒状の長尺部材２０の内面（内腔の壁面）が第２通路２１となっている。また、第２通路２１は、進入した実験動物を不意に落下させる機能を有する通路である。図１（ｃ）に示すように、実験動物１００を、第２通路２１において不意に落下させることによって、該不意の落下を経験した実験動物１００は、図１（ａ）の状態に戻って、第１通路１１に再び配置されても第２通路に進入しようとはしないようになる。即ち、実験動物１００は、恐怖条件づけされたモデル動物となる。
【００１２】
本発明において「通路」は、細長く帯状に伸びた面だけでなく、実験動物が移動可能な面であってよく、通路の幅や長さは特に限定はされない。
（第１通路）
第１通路は、実験動物を１匹配置し得るだけの狭い領域や、実験動物が第２通路に進入する前に移動できる広い領域であってよい。実験動物が第１通路から第２通路へと移動することができる領域であるならば、そのような領域は通路であり、第１通路である。
実験動物の移動方向を制限し、該実験動物を第１通路から第２通路に進入するようにガイドする点や、第２通路とオーバラップするための領域を有する点からは、第１通路は、細長く帯状に伸びた路面を有する通路であることが好ましい。例えば、実験動物が、頭胴長２０〜３０ｍｍ、体重２３〜２５ｇ程度のマウスである場合、第１通路の幅は、４５〜７０ｍｍ程度が好ましい。前記したように、他の実験動物の場合についても、その実験動物の重さや大きさに応じて、該幅を適宜決定すればよい。以下、各部の寸法についても同様である。実験動物を通路から逸脱させないように、第１通路の進行方向に沿った両側や上方には、壁面、ガードレール、柵、網などが設けられてもよい。
（第２通路）
第２通路は、実験動物が第１通路から進入し得るだけの狭い領域や、実験動物が進入した後さらに移動できる広い領域であってよい。第１通路から実験動物が移動して進入することができる領域であるならば、そのような領域は通路であり、第２通路である。
実験動物の移動方向を制限し、効率よく落下するようにガイドする点からは、第２通路もまた細長く帯状に伸びた面が好ましく、実験動物が頭胴長２０〜３０ｍｍ、体重２３〜２５ｇ程度のマウスである場合、第２通路の幅（筒の内部通路である場合は、該筒の口径）は、４５〜７０ｍｍ程度が好ましい。
【００１３】
（第２通路への進入）
本発明において、実験動物が第２通路に「進入」するとは、実験動物の体の少なくとも一部が第２通路上の空間に入ることであってよい。例えば、アクチュエーターを用いて実験動物を突き落とすような態様の場合、実験動物の鼻先が第２通路上に進入したことをセンサー等が検出し、実験動物が第２通路に進入したと制御部が認定してアクチュエーターを作動させ、第１通路上にまだ残っている実験動物の体を該アクチュエーターによって後ろから強制的に第２通路上へと押し込んで落下させるといった態様であってもよい。即ち、実験動物の体の一部が第２通路上の空間に入るだけであっても、該実験動物が第２通路に進入したものとして、該実験動物を落下させることが可能である。
実験動物の体重を利用して該実験動物を落下させる場合や、実験動物をより容易にかつ確実に第２通路で落下させるためには、実験動物の重量全部が第２通路上に入ることが好ましい。
【００１４】
（第２通路への誘引）
当該製造方法では、第１通路に配置された実験動物が第２通路に進入しようとするように、該実験動物を第２通路へと誘引する要素（誘引要素）を付加することが好ましい。誘引要素により、図１のように、実験動物を第２通路へと短時間で効果的に進入させることができる。また、該誘引要素があれば、恐怖条件づけされているかどうかの判定時（即ち、実験動物が第１通路から第２通路に進入するかどうかの判定時）において、実験動物が恐怖条件づけされたことをより明確に知ることができる。これは、誘引要素があるにも関わらず、実験動物が第２通路へ進入しない（または、第２通路へ進入する回数が減る）ということは、該誘引要素に打ち克って進入しないだけの恐怖を実験動物が感じていることを意味するからである。
【００１５】
誘引要素としては、実験動物がげっ歯類のように暗い場所へ移動しようとする特性を持った動物に対しては、第１通路をより明るくし、第２通路をより暗くすることが挙げられる。例えば、第１通路の路面における明るさを３００ルクス〜５００ルクス程度とし、遮光材料用いて形成された第２通路の最も暗い部分の明るさを、それよりも暗い５０ルクス〜２００ルクス程度とすることができる。これにより、第１通路に配置された夜行性の実験動物は、より暗い第２通路へと進入しようとする。
また、穴や狭い場所に入ろうとする特性をもった動物に対しては、第１通路をより広くし、第２通路をより狭くすること、さらには、第２通路を穴（筒状物の内部通路）とすることが挙げられる。
また、他の誘引要素としては、餌や水（飲食物）の呈示などが挙げられる。
実験動物が第２通路へとより効果的に誘引されるように、前記した誘引要素を適宜組み合わせてもよい。また、同じ第２通路の中でも、第２通路の進行方向の前方側に誘引要素を付与することにより、第２通路に入ったあとの実験動物を、より前方へと進行させることができる。
【００１６】
（不意に落下させる）
本発明において、実験動物を「不意に落下させる」とは、落下させられることを予期しない状態にある実験動物を落下させることを意味し、より好ましい態様では、落下させられることを予期しない状態にある実験動物を、突然に落下させることを意味する。
例えば、第２通路が比較的ゆっくりと傾いて実験動物が落下する場合、実験動物は、突然に落下するわけではないが、実験動物は予期しない落下に恐怖を感じる。また、第２通路が衝撃的に傾いて実験動物が落下する場合、実験動物は、予期せずかつ突然に落下させられて、より強い恐怖を感じ、より強く恐怖条件づけされる。
【００１７】
（落下）
本発明において実験動物を落下させるに際しては、実験動物だけを落下させてもよいし、第２通路を含んだ部材が落下することによって実験動物を落下に巻き込むといったように、実験動物とそれ以外の部材を落下させてもよく、即ち、少なくとも実験動物を落下させればよい。
落下は、初速度がゼロの自由落下であってもよいし、例えば、下方へ突き落す場合や、いったん放り上げる力を作用させて落とす場合のように、所定の初速度が加えられた落下であってもよい。
落下における降下は、空中を移動する降下であってもよいし、滑り台やチューブ内での降下のように後述の落下機構の部材に接触しながらの降下であってもよい。
落下における降下の方向は、特に限定はされず、鉛直下向きの方向成分を含めばよく、自由落下におけるような鉛直下向きや、横方向への打ち出しの後、放物線を描いて変化する方向、斜面に沿って滑り降りる場合のような斜め下方であってよい。
落下における降下の軌道は、特に限定はされず、直線的であっても、曲線状（例えば、円弧状、放物線状、不定の曲線状）の軌道を含んでいてもよく、例えば、斜面を降下した後、鉛直下向きに降下する軌道や、鉛直下向きに降下した後、斜面に当たって該斜面を降下する軌道、さらには該斜面の傾斜が漸近的に緩やかになっていく軌道など、実験動物を落下させる機構に応じた任意の軌道であってよい。図１（ｃ）の例のように、実験動物１００が筒状の長尺部材２０と共に落下する場合、該実験動物の落下の軌道は、落下する筒状の長尺部材の姿勢の変化に影響され、筒状の長尺部材の内面に衝突したり、該内面を滑り下りたり、内部の空中を自由落下したりする、複雑な軌道を描く場合がある。
【００１８】
（落下の開始の時点）
第２通路２１の「進入した実験動物を不意に落下させる機能」（以下、「落下機能」ともいう）は、実験動物が第２通路に進入した時点で該実験動物を落下させる機能であってもよいし、図１（ｃ）に示すように、実験動物が第２通路２１に進入した後、さらに、第２通路２１の所定の部分へと進入した時点で、該実験動物を不意に落下させる機能であってもよい。落下機能のための具体的な落下機構は後述する。
【００１９】
（落下の受け止め）
本発明において、落下を開始した実験動物は、落下し続けることはなく、下方においてのなんらかの物体に衝突して落下の移動を終える。本発明でいう「下方で受け止める」とは、落下させた実験動物の降下を止める操作を意味し、実験動物を単純に下方の落下地点に衝突させて降下を衝撃的に止める操作や、斜面やクッション材などによって落下速度を徐々に減速させて降下を緩やかに止める操作を含む。
【００２０】
（非侵襲性）
本発明の好ましい態様では、実験動物を非侵襲的に落下させ、かつ、非侵襲的に受け止める。このような非侵襲的な落下と受け止めであっても、実験動物は、落下に対して十分な恐怖を感じる。非侵襲的な落下と受け止めにより、実験動物に電気ショックを加えた場合のような外傷や強い痛みを伴うことなしに、恐怖条件づけされたモデル動物を得ることができる。
本発明において「非侵襲的」とは、落下と受け止めのプロセスの結果、実験動物が裂傷や骨折をしないなど、目視によってわかる程度の怪我や傷が生じないことを意味する。
落下と受け止めが非侵襲的であるかどうかは、例えば、皮膚の目視検査や、歩行運動の目視検査などによって確認することができる。
【００２１】
落下と受け止めを非侵襲的に行うための好ましい方法としては、
（ｉ）落差を比較的小さくして、実験動物を比較的硬い面に衝突させること、
（ｉｉ）落差を比較的大きくして、実験動物を衝撃吸収性の面に衝突させること、または、減速させながら停止させること、
（ｉｉｉ）落差を比較的小さくして、実験動物を衝撃吸収性の面に衝突させること、または、減速させながら停止させること、
（ｉｖ）落下させるために実験動物を強く叩き落としたり実験動物に過剰に強い加速を加えるといったような、侵襲的な操作を実験動物に加えず、好ましくは、落下の開始をできるだけ自然落下に近づけること、
などが挙げられる。
上記（ｉ）は、受け止め時の痛みが上記（ｉｉ）よりも強い場合があり、上記（ｉｉ）は、長く落下することによる恐怖が上記（ｉ）よりも強い場合がある。上記（ｉｉｉ）は、受け止め時の痛みが小さく、落下の時間も短く、最も非侵襲的である。上記（ｉｖ）は、実験動物を落下させる際の実験動物に与える衝撃を規制しており、例えば、第２通路から緩やかに押し出して実験動物を落下させること、実験動物を支持する第２通路を傾けて（または無くして）落下させることによって実施し得る。これらの非侵襲的な落下と受け止めの中から、実験動物がより効果的に恐怖条件づけされるものを実験により選択することができる。また、実験動物に侵襲的な影響が無い範囲において、落差を大きくしかつ降下の最後に実験動物を比較的硬い面に衝突させてもよい。実験動物を受け止める面は、より平坦な面である方が、実験動物にとっては非侵襲的である場合が多い。
【００２２】
落差は、実験動物の種類、体の大きさ、侵襲性の程度、実験動物を下方で受け止める部分の硬さ、クッション性、凹凸などに応じて適宜決定してよい。
落下と受け止めを非侵襲的に行う場合、実験動物が、例えば、頭胴長２０〜３０ｍｍ、体重２３〜２５ｇ程度のマウスである場合、硬い受け止め面に対する落差は、特に限定はされないが、３００〜５００ｍｍ程度が好ましく、４００ｍｍ程度がより好ましい。また、クッション材を受け止めに用いる場合、落下開始高さから該クッション材の上面までの落差は、クッション材の衝撃吸収性の程度によっても異なるが、前記の硬い受け止め面に対する落差と同程度であってよく、または、クッションの分だけ該落差よりも適宜大きくとってもよい。これらの落差は、あくまでも好ましい一例であって、後述の落下機構における下方への初速や、実験動物の恐怖条件づけの程度などに応じて適宜増減してよい。
【００２３】
（恐怖条件づけを判定する方法）
本発明における第１、第２ステップを経た実験動物が、恐怖条件づけされたモデル動物であるかどうかは、本発明における第１ステップを再度行い、該実験動物を第１通路に再び配置して、該実験動物が第２通路に進入しようとするかどうかによって判定することができる。判定では、本発明における第１、第２ステップで用いた第１、第２通路を再度用いてもよいし、落下機能を備えていないダミーの第２通路を有する、第１、第２通路と同じ外観を持った判定用の装置を用いてもよい。
【００２４】
（第１、第２ステップの繰り返し回数）
第１、第２ステップの繰り返し回数（恐怖条件づけの回数）は、特に限定はされず、実験動物が恐怖条件づけされたと判定されるまで繰り返してよい。第１、第２ステップの繰り返し回数は、実験動物の種類や、第２ステップにおける落下と受け止めの内容によっても異なるが、総じて１回〜１０回程度であり、マウスであれば、１〜５回程度、特に２〜５回程度が挙げられる。
最初の試行（第１、第２ステップの実施）の後、第２回目以降の試行を実施し、その第２回目以降の試行において、恐怖条件づけと、恐怖条件づけの判定とを兼用してもよい。即ち、２回目以降の試行において実験動物が落下すれば、恐怖条件づけをより強くする試行であるとみなし、実験動物が落下しなければ、その試行を判定用の試行であったとみなし、恐怖条件づけがされたと判定してもよい。
また、１回の試行（第１、第２ステップの実施）ごとに、恐怖条件づけを判定してもよいし、所定の複数回の試行を続けて行った後で、恐怖条件づけを判定してもよい。
また、第１、第２ステップの実施においては、所要時間を制限してもよい。例えば、１回目の試行（第１、第２ステップの実施）において実験動物が落下した時点で、ただちに該実験動物を第１通路に戻して第２回目の試行を開始し、所定時間（例えば、１０分間など）の間に、実験動物が何回落下するかを記録し、その回数の大小によって恐怖条件づけの大小を評価してもよい。この場合、落下から次の試行の開始までの間、経過時間の測定を停止してもよい。
【００２５】
（実験動物）
実験動物は、人間以外の動物であって、特に限定はされないが、げっ歯類（例えば、ラット、マウス、モルモットなど）、両生類（例えば、カエル、トカゲなど）、哺乳類（例えば、イヌなど）などが例示される。これらの中でも、げっ歯類は、暗い場所に移動しようとする習性を持つので、第２通路へと誘引し易く、また、向精神薬をはじめとした薬理作用の実験動物としてよく利用されるので、恐怖条件づけされたモデル動物とするには特に有用な実験動物である。
【００２６】
（本発明の製造装置）
次に、本発明の製造装置（以下、当該製造装置ともいう）を実施例に沿って説明する。
以下の説明では、本発明の製造方法についての説明と同様、マウスを実験動物として用いた例を示しているが、実験動物は、他のげっ歯類や、他の種類の動物であってもよく、各実験動物の重さや大きさに応じて、通路等の大きさを適宜変更することができる。上記で説明した本発明の製造方法は、当該製造装置によって好ましく実施される。よって、当該製造方法における通路や落下などについての上述の全ての説明は、当該製造装置の各部や動作原理の説明でもある。以下では、実験動物を好ましく落下させ受け止めて恐怖条件づけるためのより具体的な構成を説明する。
【００２７】
図１に一例を示すように、当該製造装置は、実験動物１００を恐怖条件づけされたモデル動物へと加工するための製造装置であって、第１通路１１を備えた第１部材１０と、第２通路２１を備えた第２部材２０とを有する。図１の例では、第１通路１１は第１部材１０の上面に位置するが、管路の内面や溝の底面にあってもよい。当該製造方法の説明で述べたとおり、第１通路１１は、恐怖条件づけをすべき実験動物１００を配置するための通路である。第２通路２１は、第１通路１１に配置された実験動物１００が進入し得るように配置される。第２部材２０は、第２通路２１に進入した実験動物１００を不意に落下させるように構成された落下機構を有する。図１の例では、第２部材２０とその配置状態自体が、落下機構を構成している。図１（ｃ）に示すように、実験動物１００が、第２通路２１において、該落下機構によって不意に落下させられることによって、その落下を経験した実験動物は、第１通路１１に再び配置されても、第２通路２１に進入しようとしない恐怖条件づけされたモデル動物となる。
【００２８】
（落下機構）
落下機構は、いわゆる落とし穴のように、実験動物の重量によって作動する機構であってもよいし、アクチュエーター（動力）によって能動的に作動する機構であってもよい。アクチュエーターを有する機構は、例えば、センサーが実験動物を検出し、該アクチュエーターが自動的に作動を開始して実験動物を落下させるように構成されたものでもよく、実験動物の重量によってアクチュエーターの作動開始のスイッチが入り、該アクチュエーターが実験動物を落下させるように構成されたものでもよく、また、操作者が実験動物を見ながら手動で該アクチュエーターの作動を開始させ、該アクチュエーターが実験動物を落下させるように構成されたものなどでもよい。
【００２９】
実験動物の重量によって作動する落下機構の態様例を、図を参照しながら次に説明する。以下に図示する態様例は、あくまでも原理に沿った一例であって、実験動物を落下させる原理に沿って、細部の改変を自由に加えてよい。また、落とし穴や罠などとして従来知られている、動物を不意に落下させ得るあらゆる機構を利用することができる。
【００３０】
（Ａ１）第２部材が落下する機構
この落下機構は、図１、図２、図４（ｃ）に例示するように、実験動物１００が第１通路１１から第２通路２１に進入した場合に、該実験動物の重量に起因して、第２部材２０が落下するように構成される。第２部材２０の落下により、実験動物も落下する。
図１の例では、第２部材２０は筒状の長尺部材であり、内部が第２通路２１となっている。図２の例では、第２部材２０は板状の長尺部材であり、その上面が長手方向に沿って第２通路２１となっている。いずれの例でも、第２部材の長手方向の中央（重心）は第１通路上にあるので、第２部材２０は、第１通路上に水平に横たわっている。図１（ｃ）、図２（ｃ）に示すように、実験動物１００が第２部材２０の先端側の部分２０ｂ（とりわけ、第１通路から突き出している部分）に達すると、第２部材２０は該実験動物の重量によって落下し、該実験動物も落下する。
図４（ｃ）の例では、第２部材２０は、実験動物の重量を支えることができない薄く柔軟なシートであり、図４（ａ）に示すように、実験動物を落下させるための開口部（または通路が途切れた間隙部分）１２を覆い隠している。第２部材２０の上に実験動物が進入すると、第２部材２０は該実験動物の重量によって屈曲しながら開口部１２内に落下し、該実験動物も落下する。図４（ｃ）の例は、第２部材２０が変形する点で、後述の（Ａ３）の機構にも該当する。
【００３１】
（Ａ２）第２部材が変位する機構
この落下機構は、図３、図５（ａ）〜（ｂ）、図６に例示するように、実験動物１００が第２通路２１に進入した場合に、実験動物１００の重量に起因して、第２部材２０が変位するように構成される。第２部材２０の変位によって実験動物は落下する。
第２部材が変位するとは、第２部材が移動することや第２部材の姿勢が変化することを意味する。第２部材にはたわみなどの変形が生じてもよい。
【００３２】
図３の例では、第２部材２０は、図１に示した筒状の長尺部材であって、蝶番４０によって第１部材に変位可能（蝶番４０を中心として回転可能）に取り付けられている。蝶番４０は、筒状の長尺部材の長手方向の中央よりも先端側に取り付けられているので、蝶番４０を中心として基端側の方が重く、よって、筒状の長尺部材の基端側は第１通路上に水平に横たわっている。実験動物１００が第２部材２０の先端側の部分２０ｂ（とりわけ、第１通路から突き出している部分）に達すると、図３（ｃ）に示すように、第２部材２０は該実験動物の重量によって傾き、実験動物１００だけが落下する。図３の例における筒状の長尺部材は、図２の例における長尺部材に置き換えることができる。
また、図３の例において、蝶番４０にねじりバネを装着し、第２部材２０の傾きに抗する復帰力を作用させれば、第２部材をより前方に突き出すことも可能である。
また、図３の例において、蝶番を用いず、第２部材をバネなどの弾性体で支えておき、実験動物が第２通路に進入した場合に、該実験動物の重量によって該弾性体がたわみ、第２部材が傾き、その結果、実験動物が第２通路から逸脱し落下するといった構成としてもよい。その場合、弾性体をどのような材料や形態（圧縮変形、引っ張り変形、ねじり変形など）とし、どの位置で第２部材を支持するかは、適宜決定してよい。
【００３３】
図５（ａ）〜（ｂ）の例では、第２部材２０は、実験動物の重量を支えることができる板状の部材であり、その上面が第２通路２１となっている。第２部材２０は、図５（ａ）に示すように、実験動物１００を落下させるための開口部（または第１通路が途切れた間隙部分）１２にはめ込まれた状態となって、該開口部１２を隠している。第２部材２０は、蝶番４１によって第１部材に変位可能（蝶番４１を中心としてピボット回転可能）に取り付けられている。また、第２部材２０には、蝶番４１に付帯したねじりバネなどの弾性体（図示せず）によって、図５（ａ）における時計回りの方向の力のモーメントが作用している。この力のモーメントは、実験動物の重量によって第２部材２０に作用する反時計回りの方向の力のモーメントに抗し得ない程度の力である。
開口部１２を間に挟んで、第１部材１０に対して、対向する部材１３にはストッパー１４が開口内に突起しており、該ストッパー１４が時計回転の方向に回転しようとする第２部材２０の動きを止めている。ストッパーの位置は限定されず、蝶番などに設けられてもよい。これら時計回りの方向の力のモーメントとストッパー１４とにより、第２部材２０は水平に維持されている。第２通路２１上に実験動物１００が進入すると、図５（ｂ）に示すように、第２部材２０は該実験動物の重量によってドアが開くように反時計回りに変位し、該実験動物も落下する。
【００３４】
図５（ａ）の構成では、実験動物１００が第２通路に前足を進入させた時点で、第２部材２０が反時計回りの方向に多少変位するので、実験動物が第２通路の不安定さを警戒し、それ以上は第２通路へは進入せず、よって落下させることができない可能性がある。
そこで、前記ねじりバネなどの弾性体に加えて（またはその代わりに）、ストッパー１４に磁石や粘着剤などを付与し、第２部材２０の先端部を所定の力でストッパー１４に吸着または接着しておく構成としてもよい。この構成では、磁石や粘着剤の吸着力や接着力といった上向きに固定する力があるので、実験動物１００が第２通路に前足を進入させた程度の重量では第２部材２０は全く変位しないので、実験動物は警戒しない。そして、実験動物１００の体全部が第２通路に進入した時点で、該吸着力や接着力が全重量に耐えられず、第２部材２０がストッパー１４から突然に離れ、図５（ｂ）のように、該実験動物が落下する。
図５（ａ）〜（ｂ）の例では、第２部材２０は１枚の片開きのドアの構成であったが、部材１３にも蝶番を設け、２枚の両開きのドアの構成とすることもできる。また、第２部材として、筒状の部材を用い、内部を第２通路としてもよい。
またさらに、実験動物が第２通路に完全に進入しても第２部材が落下しないようにストッパー等を設けることで、実験動物を順化し（即ち、該実験動物の警戒心を無くし）、該順化の後で、該ストッパー等を解除して第２部材が落下するようにし、第１、第２ステップの実施を開始してもよい。このような順化させる態様においても、上記したように、実験動物が第２通路に前足を進入させた程度の重量では第２部材が変位しないように、適度なストッパーを設けてもよい。
【００３５】
図６の例では、図５（ａ）〜（ｂ）の例と同様に、第２部材２０は、実験動物の重量を支えることができる板状の部材であり、その上面が第２通路２１となっている。第２部材２０は、図５の例と同様に、実験動物１００を落下させるための開口部（または第１通路が途切れた間隙部分）にはめ込まれた状態となって、該開口部を隠している。図６の例では、第２部材２０が回転用に埋め込まれたシャフト（破線で示す）４２によって第１部材に変位可能（該シャフト４２を中心として矢印方向にピボット回転可能）に取り付けられている。また、第２部材２０には、ねじりバネなどの弾性体（図示せず）によって、図６の矢印とは反対方向の力のモーメントが作用している。この力のモーメントは、実験動物の重量によって第２部材２０に作用する矢印方向に回転する力のモーメントに抗し得ない程度の力である。第２部材を水平に保つためのストッパーは適宜設けられてよい。図６（ｂ）に示すように、第２部材２０の上に実験動物１００が進入すると、第２部材２０は該実験動物の重量によってドアが開くように矢印方向に変位し、該実験動物も落下する。図５（ａ）〜（ｂ）の例で述べたような、ストッパー１４に磁石や粘着剤などを付与する構成は適宜採用してよい。
【００３６】
（Ａ３）第２部材が変形する機構
この落下機構は、図４（ｂ）および図４（ｃ）に例示するように、実験動物１００が第２通路２１に進入した場合に、該実験動物の重量に起因して、第２部材２０が変形するよう構成される。第２部材２０の変形によって実験動物は落下する。
第２部材が変形するとは、柔軟性や脆弱性により、第２部材の形状が変化することや、第２部材が破断、分離、一部または全部が崩壊することを意味する。
図４（ｂ）の例では、第２部材２０は、実験動物の重量を支えることができない機械的強度が低いシートであり、図４（ａ）に示すように、実験動物を落下させるための開口部（または通路が途切れた間隙部分）１２を覆い隠し、かつ、その外周縁が開口部の周囲に接着されている。第２部材２０の上に実験動物が進入すると、図４（ｂ）に示すように、第２部材２０は該実験動物の重量によって破断するので、該実験動物も落下する。このような第２部材の破断は、材料自体の脆弱性によるものであってもよいし、切れ目やミシン目などの脆弱性によるものであってもよい。
図４（ｃ）の例では、上記（Ａ１）の機構で説明したように、第２部材２０の上に実験動物１００が進入すると、第２部材２０は該実験動物の重量によって屈曲しながら開口部１２内に落下し、該実験動物も落下する。
【００３７】
（アクチュエーターによって作動する落下機構）
以下の（Ｂ１）〜（Ｂ４）の落下機構では、第２部材の動作にアクチュエーターが用いられる。上記での落下機構の説明のとおり、該アクチュエーターの作動の開始は、センサーや実験動物の体重を利用した自動であってもよいし、操作者による手動でもよい。
【００３８】
（Ｂ１）第２部材がアクチュエーターの作動によって落下する機構
この落下機構では、例えば、図１、図２の機構において、第２部材（筒状の長尺部材や板状の長尺部材）２０を下側で支持する可動部材を持ったアクチュエーター（図示せず）が設けられる。実験動物が第２通路に進入すると、該アクチュエーターが作動を開始し、第２部材を下側で支持する可動部材を移動させ、それにより、第２部材は支持を失い、図１（ｃ）、図２（ｃ）のように落下し、該実験動物も落下する。
【００３９】
（Ｂ２）第２部材がアクチュエーターの作動によって変位する機構
この落下機構では、例えば、図３、図６の機構において第２部材２０を能動的に変位させるアクチュエーター（図示せず）、または、図５（ｃ）の機構のように、第２部材２０の変位を止めるためのアクチュエーター５０が設けられ、該アクチュエーターが作動すると第２部材２０が駆動されて変位する。第２部材２０を能動的に変位させるアクチュエーターは、図３、図６の機構において回転動作の中心のシャフトを駆動するステッピングモーターや回転駆動可能な空圧機器などが挙げられる。
図５（ｃ）の例は、図５（ａ）の機構に対してアクチュエーター５０が加えられたものである。該アクチュエーター５０は、第２部材２０を下側で支持する可動部材５１を有すし、非作動時には、該可動部材５１が図５（ａ）の機構における第２部材２０の変位を阻止している。実験動物が第２通路に進入し、該アクチュエーターが作動すると、可動部材５１が引っ込んで、第２部材２０の支持が無くなり、第２部材は実験動物の重量によって図５（ｂ）のように変位し、該実験動物は落下する。
【００４０】
（Ｂ３）アクチュエーターが実験動物を第２通路外に押し出す機構
この落下機構では、アクチュエーターは、第２通路に作用するのではなく、第２通路に進入した実験動物に直接作用し、第２通路外に押し出して落下させるように設けられる。そのようなアクチュエーターは、直進的な可動部材の先端によって実験動物を突き落とすように構成されてもよいし、野球のバットのスウィングのようにピボット回転する可動部材の胴体によって実験動物を払い落とすように構成されてもよいし、ベルトコンベアによって実験動物を運び落とすように構成されてもよい。アクチュエーターの動作速度を調整し、また、実験動物に接する部分にクッション材を配置することで、実験動物を非侵襲的に落下させることができる。
【００４１】
落下機構は、図１等に示すように、実験動物１００を不意に落下させかつ下方の受止め部３０で受け止めるように構成された機構であればよく、該実験動物１００を非侵襲的に落下させかつ非侵襲的に受け止めるように構成された機構であることがより好ましい。
受止め部３０の受け止め面は、落下した実験動物の衝突時の速度に応じて、硬い面であっても柔らかい面であってよいが、非侵襲性をより高める点からは、実験動物を柔らかく受け止めるクッション性を有する面が好ましい。また、受け止め面は、傾斜が漸近的に緩やかになっていく斜面の最後の平面や凹面であってよい。
衝撃吸収性の受止め部としては、種々のクッション材や、ネット（網）などが例示される。
【００４２】
（第１部材の好ましい態様）
第１部材１０は、当該製造方法において説明した第１通路１１を上面に有する部材、または、内腔面に有する筒状の部材であればよく、上面に第１通路１１を有する態様は、第２部材が配置し易い。第１通路が溝状の通路であって、溝内の底面が実質的な通路である場合も、該溝内の底面は第１部材の上面である。第１部材１０の具体的な形態は、特に限定はされないが、単純な板状の部材や角材などが好ましいものとして挙げられる。第１部材１０は、床面上や当該製造装置全体の基板上に配置されてよく、第１通路が適当な高さとなるように、図７に示す脚部や架台６０などによって支持されてもよい。
第１部材には、実験動物を第１通路から逸脱させず第２通路へと導くように、図７に例示するような壁部１０ｂや、それに相当するガードレール、柵、または、網などが、第１通路に沿った両側に設けてもよい。また、第２部材の作動の障害にならない範囲で、通路に天井（板状、柵状、網状の覆い）を設けてもよい。
【００４３】
（第２部材の好ましい態様）
第２部材の態様は、落下機構と密接に結びついている。上記した落下機構の種々の態様の中でも、上記（Ａ１）または上記（Ａ２）の機構は、単純な構成であり設置も簡単であり、動力や制御装置が不要でありながら実験動物を効果的に落下させることができるので好ましい。とりわけ上記（Ａ１）の機構は、第２部材を第１部材に連結する装置（蝶番など）さえも不要であり、例えば、図１のように、第２部材を第１部材上に置くだけのより簡単な構成も可能であるので好ましい。
図１、図２に示した筒状の長尺部材や、図３に示した長尺部材は、いずれも基端側の部分２０ａと先端側の部分２０ｂとを有する。これら基端側の部分２０ａと先端側の部分２０ｂは、第２通路の基端側の部分と先端側の部分でもある。これらの長尺部材の基端側の部分２０ａは第１通路１１上に配置され、先端側の部分２０ｂは、第１通路１１の終端から空中に突き出し、基端側の部分２０ａの方が先端側の部分２０ｂよりも重いので、第２部材は、第１部材上に静止している。実験動物１００が、第２通路２１の基端側の部分２０ａに進入した後、さらに前進し、先端側の部分２０ｂ（とりわけ、第１通路から突き出している部分）へと進入すると、実験動物１００の重量によって長尺部材（第２部材）２０のバランスがくずれ、図１（ｃ）、図２（ｃ）のように第１通路から落下し（または、図３（ｃ）のように斜めに変位し）、よって、内部の実験動物１００も不意に落下する。
【００４４】
図１〜図３の例において、実験動物が頭胴長２０〜３０ｍｍ、体重２３〜２５ｇ程度のマウスである場合について、第１通路、第２通路の好ましい寸法を次に例示する。これらの寸法は、実験動物の体長（特に、尾の長さを除いた頭胴長）や体重などに応じて変更することができる。
図１（ｃ）、図２（ｃ）のように第２部材を第１通路から落下させる場合、または、図３（ｃ）、図５（ｂ）のように、第２部材を変位させる場合、第１通路、第２通路の好ましい幅は上記したとおりである。第２部材の全長は、特に限定はされないが、５０ｍｍ〜３００ｍｍ程度が好ましく、１５０ｍｍ〜２００ｍｍ程度がより好ましい。
第２部材の重量の分布が長手方向に沿って均一である場合、第２部材が水平に安定して第１通路上に位置するためには、第２部材の全長Ｌに占める、第１通路上にある部分の長さＬａの割合（Ｌａ／Ｌ）×１００は、５０％よりも大きく、７０％以下であることが好ましく、５０％〜５５％がより好ましい。第２部材が円筒状の長尺部材である場合、その内径は特に限定はされないが、実験動物を好ましく落下させるためには実験動物の高さの１５０％〜２００％程度が好ましい。
第１部材の長さは、第２通路の配置を考慮して適宜決定してよいが、２００ｍｍ〜１０００ｍｍ程度が好ましく、４００ｍｍ〜６００ｍｍ程度がより好ましい。
【００４５】
（筒状の長尺部材）
図１、図２に示した筒状の長尺部材と、図３に示した長尺部材は、実験動物を落下させる原理の点では互いに同一であるが、筒状の長尺部材の方が、いったん傾き始めた場合に、中の実験動物が身動きしにくい状態のまま頭から落下させられるので、単なる長尺部材よりも強い恐怖条件づけの効果が期待できる。
第２部材の態様の中でも、図１、図２に示すような筒状の長尺部材は、簡単な構成でありながら、第２通路は、照明などによる明るい外界よりも暗い穴となり得る。これにより、夜行性の実験動物など、暗い領域に入ろうとする特性を持った実験動物や暗い穴に入ろうとする特性を持った実験動物を、第１通路から第２通路へと効果的に誘引することができるので好ましい。よって、筒状の長尺部材の壁部は、透明であってもよいが、外光が透過しないものが、内部を簡単に暗くすることができ、より好ましい。
【００４６】
筒状の長尺部材の材料は、特に限定されず、金属、合成樹脂、木、紙など、第２部材として十分な機械的強度を有するものであってよい。筒状の長尺部材は、シート状の材料を筒状に丸めたものであってもよいし、金属材料をダイから引き抜いて形成した筒状物や、合成樹脂をダイから押し出して形成した筒状物、棒状の材料から内腔を削り出した筒状物などであってもよい。
筒状の長尺部材は、１つの材料からなる単層構造であってもよいし、遮光用の層などを備えた多層構造であってもよい。
筒状の長尺部材の断面形状（長手方向に直角に切断したときの断面の形状）は、特に限定はされず、半円形、円形、楕円形、正方形、長方形、多角形、異形などであってよいが、シート状の材料を丸めるだけで得られる点や、安定して設置できる点から、半円形が好ましい。
筒状の長尺部材の壁部の色、とりわけ内壁の色は、特に限定はされないが、内部をより暗くする点では、より暗い色が好ましく、黒色が最も好ましい。
【００４７】
（筒状の長尺部材を用いた落下機構の好ましい態様）
光が透過しない壁部を有する筒状の長尺部材を第２部材として用いる場合、第１通路を照明（日光を含む）によって第２通路よりも明るく照らし、第２通路を相対的に暗くすることが好ましい。これにより、実験動物が夜行性である場合に、第２通路は、第１通路に配置された該実験動物を該第２通路に進入するよう誘引する、より暗い通路となるので好ましい。図７はより好ましい態様を例示しており、第２部材の先端側の部分２０ｂおよびそれをとりまく外界が、黒い布帛からなる暗幕７０によって基端側の部分よりも暗くなるように覆われている。該暗幕７０は、直方体状の内部空間を作るように設けられており、直方体状の内部空間のうち、第１部材側の面と底面には暗幕は無く、第２部材の先端側の部分２０ｂを受け入れ、第２部材と実験動物が落下し得るようになっている。図７の例では、筒状の長尺部材は、図７（ｂ）に表れているように、円筒状である。暗幕７０により、第２通路は、基端側の部分２０ａよりも先端側の部分２０ｂの方がより暗い通路となっている。これにより、実験動物１００が夜行性である場合に、第２通路に進入した該実験動物は、より暗い先端側の部分（とりわけ、第１通路から突き出している部分）へと進むように誘引される。図７に示した構成は、第２部材が上面に第２通路を持った長尺部材であっても、同様に、先端側の部分２０ｂの方をより暗い通路とすることができる。
【００４８】
（恐怖条件づけを評価する装置としての用途）
当該製造装置は、当該製造装置によって製造されたモデル動物の恐怖条件づけが有効かどうかを評価するための装置としても使用することができる。前記モデル動物の恐怖条件づけが有効かどうかの評価では、当該製造装置によって落下を経験した実験動物を、再び第１通路に配置し、その実験動物が第１通路から第２通路に進入するかどうかによって、その実験動物が恐怖条件づけされたモデル動物であるかどうかが判定され得る。
【００４９】
（恐怖条件づけされたモデル動物）
本発明による恐怖条件づけされたモデル動物（当該モデル動物ともいう）は、本発明の製造方法における恐怖条件づけの原理に従って恐怖条件づけされた実験動物である。当該モデル動物は、実験動物を不意に落下させるように構成された通路（第２通路）へと配置領域（第１通路）から進入し、該通路（第２通路）で不意に落下させられた経験を有する実験動物であって、該通路に進入可能な位置（即ち、第１通路上）に再び配置されても、該通路に進入しようとしない恐怖条件づけがされたものである。
当該モデル動物は、恐怖条件づけされていることを示す特徴として、前記の通路（第２通路）に進入可能な位置に再び配置されても、該通路へは進入しようとはしないことが挙げられる。実験動物を不意に落下させるように構成された通路、および、実験動物が該通路に進入であるように最初に配置される領域（第１通路）の具体例については、上記で説明したとおりである。
実験動物が、本発明による恐怖条件づけされたモデル動物かどうかを判定するには、上記した恐怖条件づけを判定する方法が用いられる。また、当該モデル動物を製造するための、元の実験動物は、上記したとおりである。
第２通路における落下と受け止めを非侵襲的に行うことによって、当該モデル動物は、該落下と受け止めに起因する外傷等を持たず、電気ショック等による侵襲的な恐怖条件づけにおける外傷等の問題が解消されたモデル動物となっている。
【実施例】
【００５０】
本実施例では、実験動物としてマウスを用い、図７に示した本発明の製造装置を用い、本発明の製造方法を実施し、特に、落下と受け止めを非侵襲的に行い、マウスが恐怖条件づけされたモデル動物となるかどうかを実験した。
【００５１】
（製造装置の各部の仕様）
第１部材１０は、図７（ｂ）に表れているように、帯状の板部材１０ａの両側に壁部材１０ｂがさらに設けられ、全体として断面コの字形の溝状部材である。第１通路は、該溝状部材の内部底面であって、第１通路の幅は５０ｍｍ、全長は６００ｍｍである。
第２部材２０は、円筒状の長尺部材であり、厚さ約１ｍｍの黒色の紙を筒状に丸めて製作した。該円筒状の長尺部材の内径は５０ｍｍであり、全長は２００ｍｍである。第２部材の内部が第２通路である。
実験動物を不意に落下させる原理は、図１に沿って説明したとおり、マウスが第２通路を先端側へ進行することにより該マウスの重量によって第２部材２０が落下し、中のマウスも一緒に落下するというものである。第２部材の基端側の部分２０ａを含む長さ１００ｍｍの部分は、第１通路上に配置されており、先端側の部分２０ｂを含む長さ１００ｍｍの部分は、第１通路の先端から空中に突き出している。
マウスの落下を受け止めるために、第２通路の先端側の部分の直下には、網状のシートを折り畳み、厚さ約１０ｍｍのクッション材としたものを配置した。予めの落下テストにより、非侵襲的な落下と受け止めであるように、図７（ａ）に示す落差Ｈを設定した。落差Ｈは、約４００ｍｍである。
【００５２】
（恐怖条件づけと評価）
上記した製造装置を用いて、１１匹のマウスに対して恐怖条件づけと評価を次の手順にて行った。
１日目に、上記製造装置を用いて本発明の製造方法のステップ１、２を実施し、落下回数と、第２通路への進入回数（落下した場合の進入はカウントしない）を評価指標として取得した。「進入回数」とは、第２通路に進入しながらも、落下することなく第２通路から第１通路へ引き返した回数を言う。第２通路に進入して落下した場合には、進入回数にはカウントせず、落下回数としてカウントした。
１日目の個々のマウスに対する第１、第２ステップの実施では、各マウス毎に１０分間の制限時間を設け、１回の試行（第１、第２ステップの実施）においてマウスが落下した時点で、経過時間の測定を停止し、ただちにそのマウスを第１通路に戻して次の試行を再開し（経過時間の測定も再開し）、合計１０分間の間に、そのマウスが第２通路に何回進入したか、何回落下したかを記録した。
次いで、１日目の操作から約２４時間後の２日目に、上記製造装置を再度用い、１日目と同様の手順にて、各マウスごとに、１日目の操作と同じ操作を行い、落下回数と、第２通路への進入回数（落下時を除く）を取得した。ただし、２日目の個々のマウスに対する第１、第２ステップの実施では、１匹当たりの制限時間を３分間とした。これは、１日目の結果、落下のほとんどが、第1通路上にマウスを配置した時点から３分程度の間に生じていたので、マウスが第２通路に入るかどうかの評価は３分あれば十分と判断したからである。換言すると、１日目も、１匹当たりの制限時間は実質的には３分間である。
【００５３】
図８（ａ）、（ｂ）は、２日間の評価指標の結果を示すグラフ図である。図８（ａ）は、１日目と２日目における、マウス１匹当たりの落下回数を示す棒グラフであって、エラーバーは標準偏差を示している。また、図８（ｂ）は、１日目と２日目における、マウス１匹当たりの第２通路への進入回数を示す棒グラフであって、進入後に落下した場合は進入回数としてはカウントしていない。図８（ａ）に示す落下回数は、全マウスの落下回数の総数を全マウスの数で割った値（即ち、マウス１匹当たりの平均の落下回数）であり、図８（ｂ）に示す進入回数は、全マウスの進入回数の総数を全マウスの数で割った値（即ち、マウス１匹当たりの平均の進入回数）である。
図８（ａ）、（ｂ）のグラフのとおり、１日目の操作では、落下回数が２．８２回、進入回数が１．０回であったのに対し、２日目の操作では、落下回数が０回、進入回数が０．３６回であった。
この結果から、各マウスは、１日目の操作によって恐怖条件づけがなされていたと考えられる。１日目の落下回数と２日目の落下回数についてt検定を行ったところ、p<0.0001で有意な差があった。このことから、１日目の恐怖条件づけの結果、２日目では有意に落下しないことを示している。進入回数についても同様にｔ検定を行ったところ、p<0.05で有意な差があった。このことは、１日目の恐怖条件づけの結果、２日目では第２通路への進入すら有意に低下したことを意味している。
また、１日目、２日目において落下した全てのマウスを診断したところ、いずれのマウスにも外傷や骨折などの怪我はなかった。これにより、実験動物を非侵襲的に恐怖条件づけし得ることがわかった。
【産業上の利用可能性】
【００５４】
本発明の製造方法および製造装置によれば、非侵襲的な落下と受け止めによって、実験動物を傷付けることなしに、恐怖条件づけされたモデル動物にすることができる製造方法と製造装置を提供することができた。また、本発明によって、非侵襲的に恐怖条件づけされたモデル動物を提供することができた。
【００５５】
本発明によって製造された恐怖条件づけされたモデル動物は、恐怖条件づけの神経基盤・機序の解明、向精神薬や治療法の開発などに利用可能である。例えば、本発明による恐怖条件づけされたモデル動物に向精神薬を注入し、該モデル動物に対して、上記実施例と同様に落下回数と進入回数を測定した場合に、上記実施例の２日目のような結果であれば、恐怖条件づけが維持されていることから、向精神薬の効果が発現していないことが分かり、逆に、上記実施例の１日目のような結果であれば、恐怖条件づけが解消されていることから、向精神薬の効果が発現したことが分かる。このようにして、当該モデル動物を用いれば、向精神薬の効果を検証することが可能である。
【符号の説明】
【００５６】
１０    第１部材
１１    第１通路
２０    第２部材
２０ａ  第２部材の基端側の部分
２０ｂ  第２部材の先端側の部分
２１    第２通路
３０    受止め部
１００  実験動物
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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