(57)【要約】【課題】ＩｇＥ産生阻害活性、及びＩＬ−１２産生誘導活性を有する免疫調節用組成物を提供する。【解決手段】褐藻類に属する海藻を原料として含有する培養液に、麹菌を接種して好気性条件下で培養することにより、褐藻類に属する海藻の麹菌発酵物を得る。この褐藻類に属する海藻発酵物を免疫調節用組成物の有効成分とする。本発明の免疫調節用組成物は、ＩｇＥ産生阻害活性及び／又はＩＬ−１２産生誘導活性を有することが好ましい。また、前記褐藻類に属する海藻が、マコンブ、ヒダカコンブ（ミツイシコンブ）、リシリコンブ、ナガコンブ、アラメ、及びワカメからなる群より選ばれた少なくとも１種であることが好ましい。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
褐藻類に属する海藻の麹菌発酵物を有効成分として含有する免疫調節用組成物。
【請求項２】
ＩｇＥ産生阻害活性及び／又はＬ−１２産生誘導活性を有する、請求項１に記載の免疫調節用組成物。
【請求項３】
前記褐藻類に属する海藻が、マコンブ、ヒダカコンブ（ミツイシコンブ）、リシリコンブ、ナガコンブ、アラメ、及びワカメからなる群より選ばれた少なくとも１種である、請求項１又は２に記載の免疫調節用組成物。
【請求項４】
褐藻類に属する海藻を原料として含有する培養液に、麹菌を接種して好気性条件下で培養することにより、褐藻類に属する海藻の麹菌発酵物を得ることを特徴とする免疫調節用組成物の製造方法。
【請求項５】
前記免疫調節用組成物は、ＩｇＥ産生阻害活性及び／又はＬ−１２産生誘導活性を有する、請求項４に記載の免疫調節用組成物の製造方法。
【請求項６】
前記培養液中の前記海藻の固形分濃度を０．１〜１０．０質量％とする、請求項４又は５に記載の免疫調節用組成物の製造方法。
【請求項７】
前記麹菌の培養を３６〜６０時間行う、請求項４〜６のいずれか１項に記載の免疫調節用組成物の製造方法。
【請求項８】
前記麹菌発酵物又はその乾燥物を、３０〜６０℃の温水で処理して抽出物を得る、請求項４〜７のいずれか１項に記載の免疫調節用組成物の製造方法。
【請求項９】
前記褐藻類に属する海藻として、マコンブ、ヒダカコンブ（ミツイシコンブ）、リシリコンブ、ナガコンブ、アラメ、及びワカメからなる群より選ばれた少なくとも１種を用いる、請求項４〜８のいずれか１項に記載の免疫調節用組成物の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、褐藻類に属する海藻を麹菌で発酵させて得られる免疫調節用組成物及びその製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、アレルギーや癌等の免疫に関わる疾患の患者数が増加している。その治療は長期間に及び、高額な医療費がかかること、また Quality of Life を低下させるだけでなく、最悪の場合は死に至らしめることから、その予防や多種の治療が必要とされる。このため、免疫調節作用を有する有用で安全な食品や医薬品が求められている。
【０００３】
一方、海藻は日本では古くから食材や薬として用いられてきた。海藻はミネラル、炭水化物を多く含むが、この炭水化物の大部分は海藻特有の多糖類であり、有用なものである。海藻が含む多糖類は、細胞壁に含まれて藻体を支える骨格多糖類、細胞間を充填する粘質多糖類、エネルギー貯蔵形態である貯蔵多糖類に特に分類される。特に粘質多糖類のフコイダンやアルギン酸は褐藻類特有の成分であり、利用の範囲は広く、工業、医療、食品等さまざまな分野に応用されている。さらに、生理活性としては抗凝固・抗血栓作用、抗炎症作用、抗ウイルス作用、コレステロール低下作用、高血圧低下作用等の報告がある。
【０００４】
ここで、海藻の発酵物が免疫調節作用を有することを開示した文献として、例えば下記文献１には、海藻の納豆菌発酵物がマクロファージ産生能に基づく免疫賦活活性と抗腫瘍活性を有することが記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００５】
【特許文献１】特開２００６−３２０２５７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
しかしながら、褐藻類に属する海藻の麹菌発酵物が免疫調節作用を有するという報告は、発明者が知る限り未だない。
【０００７】
したがって、本発明の目的は、ＩｇＥ産生阻害活性、及びＩＬ−１２産生誘導活性を有する免疫調節用組成物を提供することにある。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
上記目的を達成するため、本発明の１つは、褐藻類に属する海藻の麹菌発酵物を有効成分として含有する免疫調節用組成物を提供するものである。本発明の有効成分である褐藻類に属する海藻の麹菌発酵物は、ＩｇＥ産生阻害活性、及びＩＬ−１２産生誘導活性を有するので、免疫調節作用を有する。
【０００９】
本発明の免疫調節用組成物は、ＩｇＥ産生阻害活性及び／又はＬ−１２産生誘導活性を有することが好ましい。
【００１０】
本発明の免疫調節用組成物における褐藻類に属する海藻は、マコンブ、ヒダカコンブ（ミツイシコンブ）、リシリコンブ、ナガコンブ、アラメ、及びワカメからなる群より選ばれた少なくとも１種であることが好ましい。
【００１１】
また、本発明のもう１つは、褐藻類に属する海藻を原料として含有する培養液に、麹菌を接種して好気性条件下で培養することにより、褐藻類に属する海藻の麹菌発酵物を得ることを特徴とする免疫調節用組成物の製造方法を提供するものである。これによれば、ＩｇＥ産生阻害活性、及びＩＬ−１２産生誘導活性を有する免疫調節用組成物を得ることができる。
【００１２】
本発明の免疫調節用組成物の製造方法において、前記免疫調節用組成物はＩｇＥ産生阻害活性及び／又はIＬ−１２産生誘導活性を有することが好ましい。
【００１３】
本発明の免疫調節用組成物の製造方法において、前記培養液中の前記褐藻類に属する海藻の固形分濃度を０．１〜１０．０質量％とすることが好ましい。これによれば、培養液の粘度等が発酵に適した状態となり、麹菌による発酵を良好に進行させることができる。
【００１４】
本発明の免疫調節用組成物の製造方法において、前記麹菌の培養を３６〜６０時間行うことが好ましい。これによれば、ＩｇＥ産生阻害活性、及びＩＬ−１２産生誘導活性を有する発酵物を効率よく得ることができる。
【００１５】
本発明の免疫調節用組成物の製造方法において、前記麹菌発酵物又はその乾燥物を、３０〜６０℃の温水で処理して抽出物を得ることが好ましい。これによれば、ＩｇＥ産生阻害活性、及びＩＬ−１２産生誘導活性を有する発酵物を効率よく得ることができる。
【００１６】
本発明の免疫調節用組成物の製造方法において、前記褐藻類に属する海藻として、マコンブ、ヒダカコンブ（ミツイシコンブ）、リシリコンブ、ナガコンブ、アラメ、及びワカメからなる群より選ばれた少なくとも１種を用いることが好ましい。
【発明の効果】
【００１７】
本発明の有効成分である褐藻類に属する海藻の麹菌発酵物は、ＩｇＥ産生阻害活性、及びＩＬ−１２産生誘導活性を有するので、免疫調節作用を有する。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】麹菌（アスペルギルス・オリゼ）、及び納豆菌（バチルス・サブチリス  ナットー）を用いて発酵させたヒダカコンブのＩＬ−１２産生量を示す図表である。
【図２】麹菌６株を用いて発酵させたヒダカコンブのＩｇＥ産生阻害率を示す図表である。
【図３】麹菌５株を用いて発酵させたヒダカコンブのＩＬ−１２産生量を示す図表である。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明における褐藻類に属する海藻は、コンブ目コンブ科のマコンブ、ヒダカコンブ（ミツイシコンブ）、リシリコンブ、ナガコンブ、およびアラメ、コンブ目チガイソ科のワカメ、ヒバマタ目ホンダワラ科のヒジキ、ホンダワラ、およびアカモク、並びにナガマツモ目モズク科のモズク等が挙げられる。本発明においては、いずれの褐藻類に属する海藻も用いることができるが、容易かつ安価に入手でき、麹菌発酵物のＩｇＥ産生阻害効果やＩＬ−１２産生誘導活性が高いという点で褐藻類コンブ目に属する海藻のマコンブ、ヒダカコンブ（ミツイシコンブ）、リシリコンブ、ナガコンブ、アラメ、及びワカメからなる群から選ばれた少なくとも１種であることが好ましい。
【００２０】
原料として用いる褐藻類に属する海藻の形態は、特に限定されず、例えば、生、又は乾燥した褐藻類に属する海藻の粉砕物や粉末等が使用できる。
【００２１】
本発明における麹菌としては、特に限定されないが、黄麹菌のアスペルギルス・オリゼ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｏｒｙｚａｅ）、及びアスペルギルス・ソーヤ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｓｏｊａｅ）、アスペルギルス・ルーチェンシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｌｕｃｈｕｅｎｓｉｓ）黒麹菌のアスペルギルス・ニガー（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｎｉｇｅｒ）、アスペルギルス・アワモリ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ａｗａｍｏｒｉ）、及びアスペルギルス・サイトイ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｓａｉｔｏｉ）、並びに白麹菌のアスペルギルス・ウサミ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｕｓａｍｉｉ）、及びアスペルギルス・カワチ（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｋａｗａｃｈｉｉ）等が挙げられる。この中でも特にアスペルギルス・オリゼ、アスペルギルス・ソーヤ、アスペルギルス・ルーチェンシスが好ましく使用される。
【００２２】
本発明における免疫調節用組成物の製造方法は、褐藻類に属する海藻を原料として含有する培養液に、麹菌を接種して好気性条件下で培養することにより、褐藻類に属する海藻の麹菌発酵物を得ることを特徴とする。
【００２３】
培養液中には、褐藻類に属する海藻原料を固形分濃度で好ましくは０．１〜１０．０質量％、より好ましくは０．２〜５．０質量％となるように添加し、更に必要に応じてその他の原料を添加して、好ましくは加熱滅菌することにより調製することができる。
【００２４】
褐藻類に属する海藻原料の固形分濃度が上記範囲であれば、培養液の粘度等が発酵に適した状態となり、麹菌による発酵を良好に進行させることができる。褐藻類に属する海藻原料の固形分濃度が０．１質量％未満では、培養液の単位体積当たりの発酵物の収量が少なくなり、生産性が悪くなり、１０．０質量％を超えると、培養液の撹拌がしにくくなることによって通気性が悪くなり、発酵の進行が低下する傾向がある。
【００２５】
培養液としては、麹菌の通常の培養に用いられるものでよく、例えば、ペプトン、イーストエクストラクト等のエキス類等を添加することができる。
【００２６】
また、加熱滅菌条件は、特に限定されないが、好ましくは６５〜１３０℃で５〜５０分程度の加熱滅菌が好ましく採用される。
【００２７】
なお、本発明においては、麹菌を用いることにより、褐藻類に属する海藻原料を酵素等によって分解することなく発酵させることができるが、更に発酵を促進させるため、海藻原料を酵素等によって分解して培地原料としてもよい。この場合の酵素としては、例えばセルラーゼ、ヘミセルラーゼ等を用いることができる。
【００２８】
上記培養液に、好ましくは、予め前培養して活性化した麹菌を接種し、好気性条件下で、好ましくは２０〜３７℃、より好ましくは２５〜３０℃の温度下で、好ましくは３６〜６０時間、より好ましくは４８〜５２時間培養する。培養温度や時間が上記範囲未満ではＩｇＥ産生阻害活性やＩＬ−１２産生誘導活性が十分に上昇しない傾向があり、上記範囲を超えてもＩｇＥ産生阻害活性やＩＬ−１２産生誘導活性がそれ以上上昇せず、生産性が悪くなる傾向がある。
【００２９】
培養を好気性条件下とする方法としては、特に限定されないが、例えば振とう培養、通気撹拌培養、静置培養等が挙げられる。工業的に生産する場合には、通気撹拌培養が好ましく採用される。
【００３０】
このようにして得られた麹菌の培養液は、そのまま、あるいは更に加工処理することにより、本発明の免疫調節用組成物の有効成分として利用することができる。なお、本発明において、麹菌発酵物とは、麹菌の培養液そのものだけでなく、その加工処理物も含むものとする。
【００３１】
培養液の加工処理方法としては、例えば、（１）培養液を濃縮して濃縮液としたり、（２）培養液をろ過、遠心分離等の手段で固液分離したり、（３）培養液又はその濃縮液を、例えば凍結乾燥、減圧乾燥、噴霧乾燥等の手段で乾燥し、必要により更に粉砕し、篩分け等を行って粉末化したり、（４）培養液を固液分離した上清を必要により濃縮し、乾燥させて粉末エキスとしたり、（５）培養液、その濃縮液、あるいは培養液の乾燥物に、抽出溶媒を添加して有効成分を抽出し、固液分離して抽出液を採取し、該抽出液を濃縮又は乾燥粉末化する方法等を採用することができる。
【００３２】
培養液、その濃縮液、あるいは培養液の乾燥物に、抽出溶媒を添加して有効成分を抽出する場合、抽出溶媒としては、水、又は含水アルコールが好ましく用いられ、特に３０〜６０℃の温水が好ましく、４０〜５５℃の温水がさらに好ましく用いられる。温水の温度が３０℃未満では、ＩｇＥ産生阻害活性やＩＬ−１２産生誘導活性を高めにくく、６０℃を超えると、ＩｇＥ産生阻害活性やＩＬ−１２産生誘導活性が低下する傾向がある。
【００３３】
本発明の免疫調節用組成物は、上記のようにして得られた麹菌発酵物を有効成分として含有するものであればよい。本発明の免疫調節用組成物においては、本発明の目的を損なわない限り、他の成分を含有することに特に制限はない。例えば、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、コーティング剤、着色剤、発色剤、矯味剤、着香剤、酸化防止剤、防腐剤、呈味剤、酸味剤、甘味剤、強化剤、ビタミン剤、膨張剤、増粘剤、界面活性剤等を添加することができる。
【００３４】
本発明の免疫調節用組成物の投与形態は、特に限定されないが、経口投与組成物であることが好ましい。
【００３５】
本発明の免疫調節用組成物の製品形態は、特に限定されない。経口投与組成物である場合の製品形態の例としては、液状（液剤）、シロップ状（シロップ剤）、粉末状（顆粒、細粒）、錠剤（錠剤、タブレット）、カプセル状（カプセル剤）、ソフトカプセル状（ソフトカプセル剤）、固形状、半液体状、クリーム状、ペースト状等が挙げられる。
【００３６】
また、免疫調節用組成物は、例えば医薬品、医薬部外品、機能性食品、栄養補助食品、サプリメント、健康食品、動物用医薬品、動物用医薬部外品、動物用機能性食品、動物用栄養補助食品、動物用サプリメント、動物用健康食品等の製品自体あるいはその原料として使用することができる。
【００３７】
さらに、免疫調節用組成物は、ＩｇＥ産生阻害活性やＩＬ−１２産生誘導活性を増加させる効果を付与する目的で、広く一般食品の原料としても使用できる。一般食品としては、例えば、パン、菓子、麺、畜肉又は魚肉の加工品、スープ、飲料、ふりかけ、調味料等が挙げられる。
【００３８】
本発明の免疫調節用組成物の有効投与量は、特に限定されず、服用者の年齢、体重、性別等によって適宜決定することができるが、通常、成人１日当たりの麹菌発酵物の服用量は、乾燥固形分量として３．５〜６０ｇが好ましく、１０〜５０ｇがより好ましく、３０〜４０ｇがさらに好ましい。本発明の免疫調節用組成物は、１日１回〜数回に分け、又は任意の期間及び間隔で服用され得る。
【００３９】
本発明の免疫調節用組成物は、後述する実施例に示されるように、ＩｇＥ産生阻害活性及び／又はＩＬ−１２産生誘導活性を有するので、対象に投与することにより、その対象の免疫を調節することができる。ここで、「調節」とは、本明細書では、免疫応答を誘発し、増強し、刺激して、または支持することを指す。
【００４０】
免疫調節によって改善が期待される具体的な疾患等としては、例えば、アナフィラキシーショック、アレルギー性鼻炎、結膜炎、自己免疫性溶血性貧血、顆粒球減少症、血小板減少症、血清症、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、関節リウマチ（ＲＡ）、糸球体腎炎、接触性皮膚炎、アレルギー性脳炎、移植拒絶反応等が挙げられる。その他、インフルエンザや風邪等にも改善が期待される。
【実施例】
【００４１】
以下、実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、これらの実施例は本発明を何ら限定するものではない。なお、特に断らない限り、含有率を示す％は質量％を表す。
【００４２】
＜実験例１＞
各種微生物を用いて発酵させたヒダカコンブのＩＬ−１２産生量を定量した。
【００４３】
ここで、ＩＬ−１２は、主にＴ細胞やナチュラルキラー（ＮＫ）細胞に作用して、その増殖促進、ＩＦＮ−γ産生誘導作用、細胞傷害性の増強、さらにナイーブＴ細胞のＴｈ1細胞への分化誘導等を引き起こす。そのため、ＩＬ−１２ の産生量を増加させることで、細胞性免疫が亢進し、癌細胞にアポトーシスを誘導できるという報告がある。
【００４４】
１．各種微生物によるヒダカコンブ発酵培養液の作製
ヒダカコンブを原料として、各種微生物の発酵培養液を作製した。発酵に用いた微生物には、納豆菌はバチルス・サブチリス  ナットー、麹菌はアスペルギルス・オリゼを用いた。なお、これらの微生物は、いずれも市販されており、当業者が容易に入手できる微生物である。
（１）納豆菌の培養方法
−８０℃中で冷凍保存していた納豆菌をＳＰ培地を用いて３０℃で１日振とう培養し、これを納豆菌前培養液とした。
【００４５】
５％となるように蒸留水にヒダカコンブ粉末を添加し、ヒダカコンブ懸濁液を調製した。その懸濁液に１２１℃、１５分間の加圧加熱滅菌を行い、十分に冷ましてから、ヒダカコンブ懸濁液の１％の納豆菌前培養液を添加した。その後、３０℃で振とう培養を２日間行い、発酵培養液を得た。
（２）麹菌の培養方法
−８０℃中で冷凍保存していた麹菌をＰＤＢ培地を用いて２８℃で１日振とう培養し、これを麹菌前培養液とした。
【００４６】
１％となるように蒸留水にヒダカコンブ粉末を添加し、ヒダカコンブ懸濁液を調製した。その懸濁液に１２１℃、１５分間の加圧加熱滅菌を行い、十分に冷ましてから、ヒダカコンブ懸濁液の１％の麹菌前培養液を添加した。その後、２８℃で振とう培養を２日間行い、発酵培養液を得た。
【００４７】
２．発酵物の作製
上記の各発酵培養液を−２０℃で凍結し、次いで凍結乾燥を行った。この凍結乾燥物を１０μｇ／ｍＬとなるように蒸留水に懸濁し、５０℃恒温槽中で１時間振とうした。これを遠心分離し、上清をヒダカコンブの発酵物とした。なお、対照には、ヒダカコンブ粉末を蒸留水と懸濁させた懸濁液を未発酵物として用いた。
【００４８】
３．ＩＬ−１２産生量の定量
上記の未発酵物又は発酵物と、ＲＰＭＩ−１６４０培地に希釈したＢＡＬＢ/Ｃマウス脾臓の細胞懸濁液（５×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍＬ）をそれぞれ１００μＬずつ、９６ｗｅｌｌプレートに添加し、３７℃で７２時間インキュベートした。その後、培養上清を回収して遠心分離を行い、上清のみを回収し、ＩＬ−１２産生量の定量に供した。
【００４９】
ＩＬ−１２産生量は、Quantikine（登録商標） ELISA Mouse IL-12 p70 Immunoassay を用いてキットのプロトコルに従い、定量した。
【００５０】
４．結果
図１に示すように、未発酵物のＩＬ−１２産生量は２．７ｐｇ／ｍＬ、納豆菌発酵物は検出限界以下、麹菌発酵物は５８．７ｐｇ／ｍＬであった。麹菌発酵物が顕著なＩＬ−１２産生量を示したことから、麹菌発酵ヒダカコンブを摂取することによる免疫調節作用を期待することができた。
【００５１】
＜実験例２＞
麹菌を用いて発酵させたヒダカコンブ（以下、「麹菌発酵物」ともいう）のＩｇＥ産生阻害活性を測定した。
【００５２】
ここで、ＩｇＥは、その抗体が産生されることによりＩ型アレルギーの主な原因となる。ＩｇＥ抗体とはＢ細胞から産生される抗原特異的な抗体であり、マスト細胞表面のＦｃεＲに結合して、体内に侵入してきた抗原と結合して、マスト細胞をさせることでマスト細胞からヒスタミン等の血管透過性の亢進や粘液分泌の促進を起こし、数分という単位で組織の発赤・膨張を誘導する。そのため、ＩｇＥ抗体の産生を阻害することで、アレルギーの症状を緩和できると考えられている。
【００５３】
１．麹菌発酵物の作製
麹菌としては A. oryzae 001（受託番号：ＮＩＴＥ  Ｐ−０２７４８）、株式会社樋口松之助商店から購入した A. oryzae M-01、A. oryzae S-03、A. oryzae W-30、A. sojae No.9 、及び A. luchuensis SH-34を使用した。
【００５４】
上記実験１と同様の方法で、各麹菌発酵物を得た。
【００５５】
２．ＩｇＥ産生阻害活性の測定
各麹菌発酵物をＲＰＭＩ−１６４０培地で初濃度２００μｇ/ｍＬ、６００μｇ/ｍＬ、又は２０００μｇ/ｍＬに調整したものと、ＲＰＭＩ−１６４０培地に希釈したＵ２６６細胞懸濁液（２×１０５ｃｅｌｌｓ／ｍＬ）をそれぞれ３００μＬずつ、４８ｗｅｌｌプレートに添加し、３７℃で２４時間インキュベートした。その後、プレートシェイクを行い、次いで遠心分離を行った。上清を回収し、ＩｇＥ産生阻害活性の測定に供した。
【００５６】
ＩｇＥ産生阻害活性は、Human IgE ELISA Quantitation Setを用いてキットのプロトコルに従い、定量した。ＩｇＥ産生阻害率（％）は以下の式を用いて算出した。コントロールには抽出物の代わりに蒸留水を添加した。
【００５７】
ＩｇＥ産生阻害率（％）＝（１−Ｓ／Ｃ）*１００
Ｓ：発酵物添加区のＩｇＥ産生量、Ｃ：コントロールのＩｇＥ産生量
３．結果
図２に示すように、未発酵物のＩｇＥ産生阻害率は２．６％、A. oryzae 001発酵物（２００μｇ／ｍＬ）は４．１％、A. oryzae M-01発酵物（２００μｇ／ｍＬ）は６．６％、A. oryzae S-03発酵物（６００μｇ／ｍＬ）は４．２％、A. oryzae W-30発酵物（２００μｇ／ｍＬ）は１９．４％、A. sojae No.9発酵物（２０００μｇ／ｍＬ）は９．７％、及びA. luchuensis SH-34発酵物（６００μｇ／ｍＬ）は４．１％であり、未発酵物と比較すると、いずれの発酵物にもＩｇＥ産生阻害活性の上昇が確認できた。
【００５８】
このことから、麹菌発酵ヒダカコンブを摂取することによる免疫調節作用を期待することができた。
【００５９】
＜実験例３＞
麹菌発酵ヒダカコンブのＩＬ−１２産生量を定量した。
【００６０】
１．麹菌発酵ヒダカコンブの作製
上記実験１と同様の方法で、各麹菌発酵物を得た。
ただし、凍結乾燥物は１０μｇ／ｍＬ、又は１００μｇ／ｍＬとなるように蒸留水に懸濁し、５０℃恒温槽中で１時間振とうしたものを用いた。
【００６１】
２．ＩＬ−１２産生量の定量
上記実験１と同様の方法で、各麹菌発酵物のＩＬ−１２産生量を定量した（A. sojae No.9発酵抽出物は除く）。
【００６２】
３．結果
図３に示すように、未発酵物のＩＬ−１２産生量は２．７ｐｇ／ｍＬ、A. oryzae 001発酵物（１０μｇ／ｍＬ）は５８．７ｐｇ／ｍＬ、A. oryzae M-01発酵物（１００μｇ／ｍＬ）は８．９ｐｇ／ｍＬ、A. oryzae S-03発酵物（１００μｇ／ｍＬ）は６．６ｐｇ／ｍＬ、A. oryzae W-30発酵物（１００μｇ／ｍＬ）は３１．４ｐｇ／ｍＬ、及びA. luchuensis SH-34発酵物（１０μｇ／ｍＬ）は８７ｐｇ／ｍＬであり、未発出物と比較すると、いずれの発酵物にもＩＬ−１２産生量の上昇が確認できた。
【００６３】
このことから、麹菌発酵ヒダカコンブを摂取することによる免疫調節作用を期待することができた。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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