(57)【要約】【課題】消化器疾患を治療するためのペプチド、組成物、および方法を提供すること。【解決手段】本発明は、グアニル酸シクラーゼＣ（ＧＣ−Ｃ）受容体を活性化するペプチドおよび他の薬剤を使用して、限定されないが、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、消化管運動障害、機能性消化管障害、胃食道逆流症（ＧＥＲＤ）、十二指腸胃逆流、クローン病、潰瘍性大腸炎、炎症性腸疾患、機能性胸焼け、消化不良、内臓痛、胃不全麻痺、慢性偽性腸閉塞（または偽性結腸閉塞）、便秘に関連する障害および状態、ならびに本明細書に記載される他の状態および障害を含む消化器疾患および状態を治療するための、ペプチド、組成物、および関連する方法を特徴とする。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
図面に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、消化器疾患を治療するためのペプチド、組成物、および方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
消化器疾患（ＧＩ）は、米国だけで２，０００万〜６，０００万人の人々に影響を及ぼ
す一般的な腸の慢性疾患である過敏性腸症候群（ＩＢＳ）を含む（Ｌｅｈｍａｎ  Ｂｒｏ
ｔｈｅｒｓのＧｌｏｂａｌ  Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅにおける過敏性腸症候群に関する業界
最新情報（１９９９年９月付））。ＩＢＳは、胃腸科医によって診断される最も一般的な
疾患であり、プライマリーケア医への受診の１２％を占める（Ｃａｍｉｌｌｅｒｉ  ２０
０１，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  １２０：６５２−６６８）。米国では、直接
的な医療費および欠勤による間接的な費用により、ＩＢＳの経済的影響は年間に２５０億
ドルであると推定される（Ｔａｌｌｅｙ  １９９５，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ
１０９：１７３６−１７４１）。ＩＢＳに罹患する患者は、欠勤が３倍多く、生活の質
の低下を報告している。ＩＢＳを治療するために存在する処方の選択肢が少ないため、Ｉ
ＢＳに苦しむ患者の満たされていない非常に大きな医療上の必要性が存在する。
【０００３】
ＩＢＳに罹患する患者は、腹痛および排便パターンの障害に苦しんでいる。優勢な排便
習慣に基づいて、ＩＢＳ患者の３つのサブグループが定義されている：便秘型過敏性腸症
候群（ｃ−ＩＢＳ）、下痢型過敏性腸症候群（ｄ−ＩＢＳ）、または２つの過敏性腸症候
群の交互型（ａ−ＩＢＳ）。ｃ−ＩＢＳに罹患する人々の推定数は、ＩＢＳ患者の２０〜
５０％であり、３０％であると言われることが多い。同様の性比を有する他の２つのサブ
グループとは対照的に、ｃ−ＩＢＳは女性により多く見られる（３：１の比率）（Ｔａｌ
ｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．１９９５，Ａｍ  Ｊ  Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ  １４２：７６−８３）
。
【０００４】
ＩＢＳの定義および診断基準は、「ローマ基準」に形式化されており（Ｄｒｏｓｓｍａ
ｎ  ｅｔ  ａｌ．１９９９，Ｇｕｔ  ４５：Ｓｕｐｐｌ  ＩＩ：１−８１）、臨床診療に
おいて広く受け入れられている。最近、ＩＢＳの病因における炎症の役割に関する証言が
増加している。報告によると、ＩＢＳ患者のサブセットが、結腸炎症および肥満細胞にお
ける小さいながらも有意な増加、誘導性一酸化窒素（ＮＯ）およびシンターゼ（ｉＮＯＳ
）の増加、ならびに炎症性サイトカインの発現の変化を有することが示されている（Ｍｅ
ｄｓｃａｐｅ  ＣｏｖｅｒａｇｅによるＤＤＷ  ＷｅｅｋのＴａｌｌｅｙ  ２０００から
の報告）。
【０００５】
消化器疾患は便秘も含むことができ、３，４００万人もの米国人が慢性便秘（ＣＣ）に
関連する症状に苦しんでおり、８５０万人の患者が治療を求めてきた。ＣＣに罹患する患
者は、硬い塊状の便、排便時のいきみ、残便感、および１週間に３回未満の排便を経験す
ることが多い。ＣＣの不快感および膨満感は、患者の作業能力および典型的な日常活動に
参加する能力を低下させることにより、彼らの生活の質に大きな影響を及ぼす。
【０００６】
ＣＣ患者の半数は、現在利用可能なＣＣの治療に満足していない。よって、ＣＣを治療
する新しい化合物および方法の必要性が依然として存在する。
【０００７】
特許文献１（米国特許第７，３０４，０３６号）および特許文献２（米国特許第７，３
７１，７２７号）は、消化器疾患の治療のために、グアニル酸シクラーゼＣ（ＧＣ−Ｃ）
受容体の作動薬として作用するペプチドを開示している。開示される特定のペプチドの１
つは、以下のアミノ酸配列からなるリナクロチドである：Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙ
ｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙ
ｒ。これらの特許は、リナクロチドおよび関連するペプチドを調製するための方法も開示
している。
【０００８】
リナクロチドは、以下のアミノ酸構造を有する：
【化１】
2020128424.tif 000002
【０００９】
リナクロチドは、経口投与され、便秘を伴う過敏性腸症候群（ＩＢＳ−ｃ）および慢性
便秘（ＣＣ）の治療のために、現在、臨床試験中であり、（１）内臓痛の軽減、（２）膨
満感の軽減、および（３）消化管通過の増加を含むＧＩの生理機能に大きな影響を有する
：これは、排便回数の増加および便の硬さの改善につながる可能性がある。経口投与され
たリナクロチドは、管腔側においてＧＣ−Ｃを活性化することにより局所的に作用する：
治療用量レベルでの経口投与後には、検出可能なレベルのリナクロチドは全身に認められ
ない。よって、リナクロチドの臨床試験、ならびにリナクロチドおよび関連するペプチド
を用いて行われた前臨床試験の結果から、ＧＣ−Ｃペプチド作動薬が治療に使用され得る
ことが示唆される。
【００１０】
米国特許第７，３０４，０３６号および第７，３７１，７２７号の内容は、参照により
、それらの全体が本明細書に組み込まれる。
本発明は、α−アミン基で、グアニル酸シクラーゼ−Ｃ（ＧＣ−Ｃ）受容体を活性化す
ること、および／または異なる親和性で該受容体に結合することが可能なケトン誘導体に
修飾され得るペプチドを特徴とする。本発明はまた、さらなる硫黄原子とのシステイン結
合で修飾され得、かつ、それらのαアミン基でさらに修飾され得るペプチドも特徴とする
。他の組織では低レベルのＧＣ−Ｃが検出されているが、ＧＣ−Ｃは、哺乳動物の腸機能
における重要な調節因子である。ＧＣ−Ｃは、内因性ホルモンであるグアニリンおよびウ
ログアニリン、ならびに熱安定性エンテロトキシンファミリー由来の腸内細菌ペプチド（
ＳＴペプチド）に反応する。作動薬がＧＣ−Ｃに結合すると、第２のメッセンジャーであ
る環状ＧＭＰ（ｃ−ＧＭＰ）の上昇、ならびに塩化物および炭酸水素塩分泌の増加が見ら
れ、腸液分泌の増加がもたらされる。本発明のいくつかの例において、本明細書に記載さ
れるペプチドは、ｃ−ＧＭＰレベル上昇の増加をもたらすことができ、消化器疾患を治療
するための治療選択肢を提供する。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１１】
【特許文献１】米国特許第７，３０４，０３６号明細書
【特許文献２】米国特許第７，３７１，７２７号明細書
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本発明は、グアニル酸シクラーゼＣ（ＧＣ−Ｃ）受容体を活性化するペプチドおよび組
成物を使用して、限定されないが、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、消化管運動障害、便秘、
機能性消化管障害、胃食道逆流症（ＧＥＲＤ）、十二指腸胃逆流、クローン病、潰瘍性大
腸炎、炎症性腸疾患、機能性胸焼け、消化不良、内臓痛、胃不全麻痺、慢性偽性腸閉塞（
または偽性結腸閉塞）、ならびに本明細書に記載される他の状態および障害を含む消化器
疾患および状態を治療するための、ペプチド、組成物、および関連する方法を特徴とする
。
【００１３】
本発明の一態様は、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩を提供し、ペプチドは、
アミノ酸配列Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌ
ａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒを含み、ペプチドのＣｙｓ１アミノ酸のα
−アミンは、酸化反応または酵素反応により脱アミノ化される（「Ｃｙｓ１−α−ケトン
ペプチド」）。
【００１４】
一実施形態において、ペプチドは、
【化２】
2020128424.tif 000003
のアミノ酸構造またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００１５】
別の実施形態において、ペプチドは、
【化３】
2020128424.tif 000004
アミノ酸構造またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００１６】
本発明の１つ以上の実施形態の詳細は、添付の説明に記載される。
特定の実施形態では、例えば以下が提供される：
（項目１）
ペプチドまたはその薬学的に許容される塩であって、前記ペプチドは、アミノ酸配列Ｃ
ｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔ
ｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒを含み、前記ペプチドのＣｙｓ１アミノ酸のα−アミンは
、脱アミノ化されている、前記ペプチドまたはその薬学的に許容される塩。
（項目２）
前記ペプチドは、
【化４２】
2020128424.tif 000005
のアミノ酸構造を含む、項目１に記載のペプチドまたはその薬学的に許容される塩。
（項目３）
前記ペプチドは、
【化４３】
2020128424.tif 000006
のアミノ酸構造を含む、項目１に記載のペプチドまたはその薬学的に許容される塩。
（項目４）
ペプチドまたはその薬学的に許容される塩であって、前記ペプチドは、アミノ酸配列Ｃ
ｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔ
ｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒからなり、前記ペプチドのＣｙｓ１アミノ酸のα−アミン
は、脱アミノ化されている、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩。
（項目５）
前記ペプチドは、
【化４４】
2020128424.tif 000007
のアミノ酸構造からなる、項目４に記載のペプチドまたはその薬学的に許容される塩。
（項目６）
前記ペプチドは、
【化４５】
2020128424.tif 000008
のアミノ酸構造からなる、項目４に記載のペプチドまたはその薬学的に許容される塩。
（項目７）
前記ペプチドは、グアニル酸シクラーゼＣ受容体を活性化する、項目１〜６のいずれか
１項に記載のペプチドまたはその薬学的に許容される塩。
（項目８）
前記ペプチドは、３０個以下のアミノ酸を含む、項目１〜３のいずれか１項に記載のペ
プチドまたはその薬学的に許容される塩。
（項目９）
前記ペプチドは、２０個以下のアミノ酸を含む、項目１〜３のいずれか１項に記載のペ
プチドまたはその薬学的に許容される塩。
（項目１０）
５個未満のアミノ酸が、前記アミノ酸配列の最初のＣｙｓ残基に先行する、項目１〜３
のいずれか１項に記載のペプチドまたはその薬学的に許容される塩。
（項目１１）
前記ペプチドまたはその薬学的に許容される塩が単離される、項目１〜１０のいずれか
１項に記載のペプチドまたはその薬学的に許容される塩。
（項目１２）
前記ペプチドまたはその薬学的に許容される塩が精製される、項目１〜１１のいずれか
１項に記載のペプチドまたはその薬学的に許容される塩。
（項目１３）
項目１〜１２のいずれか１項に記載のペプチドまたはその薬学的に許容される塩を含む
、医薬組成物。
（項目１４）
項目１〜１２のいずれか１項に記載の２つ以上のペプチドまたはその薬学的に許容され
る塩を含む、医薬組成物。
（項目１５）
ｉ．ペプチドが、
【化４６】
2020128424.tif 000009
のアミノ酸構造を含む、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩、
ｉｉ．ペプチドが、
【化４７】
2020128424.tif 000010
のアミノ酸構造を含む、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩、
および
ｉｉｉ．ペプチドが、
【化４８】
2020128424.tif 000011
のアミノ酸構造を含む、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩、から選択される１つ
以上のペプチドを含む、医薬組成物。
（項目１６）
ペプチドは、
【化４９】
2020128424.tif 000012
；
のアミノ酸構造を含み、
前記ペプチドまたはその薬学的に許容される塩は、リナクロチドの重量と比較して、１０
重量％、２０重量％、３０重量％、４０重量％、５０重量％、６０重量％、７０重量％、
８０重量％、または９０重量％未満を占める、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬
学的に許容される塩を含む医薬組成物。
（項目１７）
ペプチドは、
【化５０】
2020128424.tif 000013
；
のアミノ酸構造を含み、
前記ペプチドまたはその薬学的に許容される塩は、リナクロチドの重量と比較して、９重
量％、８重量％、７重量％、６重量％、５重量％、４重量％、３重量％、２重量％、また
は１重量％未満を占める、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬学的に許容される塩
を含む医薬組成物。
（項目１８）
ペプチドは、
【化５１】
2020128424.tif 000014
，
のアミノ酸構造からなり、
前記ペプチドは、リナクロチドまたは別のグアニル酸シクラーゼＣ作動薬の重量と比較し
て、少なくとも９０重量％を占める、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩を含む医
薬組成物。
（項目１９）
ペプチドは、
【化５２】
2020128424.tif 000015
；
のアミノ酸構造を含み、
前記ペプチドは、リナクロチドまたは別のグアニル酸シクラーゼＣ作動薬の重量と比較し
て、少なくとも９０重量％を占める、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩から本質
的になる医薬組成物。
（項目２０）
ペプチドは、
【化５３】
2020128424.tif 000016
のアミノ酸構造を含み、
前記ペプチドまたはその薬学的に許容される塩は、リナクロチドの重量と比較して、１０
重量％、２０重量％、３０重量％、４０重量％、５０重量％、６０重量％、７０重量％、
８０重量％、または９０重量％未満を占める、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬
学的に許容される塩を含む医薬組成物。
（項目２１）
ペプチドは、
【化５４】
2020128424.tif 000017
；
のアミノ酸構造を含み、
前記ペプチドまたはその薬学的に許容される塩は、リナクロチドの重量と比較して、９重
量％、８重量％、７重量％、６重量％、５重量％、４重量％、３重量％、２重量％、また
は１重量％未満を占める、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬学的に許容される塩
を含む医薬組成物。
（項目２２）
ペプチドは、
【化５５】
2020128424.tif 000018
，
のアミノ酸構造からなり、
前記ペプチドは、リナクロチドまたは別のグアニル酸シクラーゼＣ作動薬の重量と比較し
て、少なくとも９０重量％を占める、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩を含む医
薬組成物。
（項目２３）
ペプチドは、
【化５６】
2020128424.tif 000019
；
のアミノ酸構造を含み、
前記ペプチドは、リナクロチドまたは別のグアニル酸シクラーゼＣ作動薬の重量と比較し
て、少なくとも９０重量％を占める、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩から本質
的になる医薬組成物。
（項目２４）
リナクロチドと、Ｃｙｓ１−α−ケトンペプチドと、
ｉ．ペプチドが、
【化５７】
2020128424.tif 000020
のアミノ酸構造を含む、ペプチド（「Ｃｙｓ１−ＩＭＤ」）またはその薬学的に許容され
る塩と、
ｉｉ．ペプチドが、
【化５８】
2020128424.tif 000021
のアミノ酸構造を含む、加水分解ペプチド（「Ａｓｐ７」）またはその薬学的に許容され
る塩と、
ｉｉｉ．ペプチドが、
【化５９】
2020128424.tif 000022
のアミノ酸構造を含む、アセチル化ペプチド（「Ｃｙｓ１−Ｎ−アセチル」）またはその
薬学的に許容される塩と、
ｉｖ．ペプチドが、Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ
Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ  のアミノ酸配列を含み、さらなる
硫黄原子が、６つのシステイニル硫黄のうちのいずれか１つに付着していてもよい、リナ
クロチドトリスルフィドペプチドまたはその薬学的に許容される塩と、
ｖ．ペプチドが、
【化６０】
2020128424.tif 000023
のアミノ酸構造を含む、ペプチド（「Ｄｅｓ−Ｔｙｒ１４」）またはその薬学的に許容さ
れる塩と、から選択される１つ以上のペプチドを含む、医薬組成物。
（項目２５）
前記ペプチドは、Ｃｙｓ１−ＩＭＤペプチドである、項目２４に記載の医薬組成物。
（項目２６）
前記ペプチドは、加水分解Ａｓｐ７ペプチドである、項目２４に記載の医薬組成物。
（項目２７）
前記ペプチドは、アセチル化Ｃｙｓ１−Ｎ−アセチルペプチドである、項目２４に記載
の医薬組成物。
（項目２８）
前記ペプチドは、リナクロチドトリスルフィドペプチドである、項目２４に記載の医薬
組成物。
（項目２９）
前記ペプチドは、Ｄｅｓ−Ｔｙｒ１４ペプチドである、項目２４に記載の医薬組成物。
（項目３０）
（ｉ）Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｋ＋、Ｎａ＋もしくはＡｌ３＋から
選択されるカチオン、または（ｉｉ）立体障害１級アミンから選択される１つ以上の薬剤
をさらに含む、項目１３〜２９のいずれか１項に記載の医薬組成物。
（項目３１）
薬学的に許容される担体と、項目１〜１２のいずれか１項に記載のペプチドと、（ｉ）
Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｋ＋、Ｎａ＋もしくはＡｌ３＋から選択され
るカチオン、または（ｉｉ）立体障害１級アミンから選択される１つ以上の薬剤と、を含
む、医薬組成物。
（項目３２）
前記薬剤は、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｋ＋、Ｎａ＋、またはＡｌ３
＋である、項目３０または３１に記載の医薬組成物。
（項目３３）
前記Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｋ＋、Ｎａ＋、またはＡｌ３＋は、酢
酸マグネシウム、塩化マグネシウム、リン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、酢酸カル
シウム、塩化カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、酢酸亜鉛、塩化亜鉛、リ
ン酸亜鉛、硫酸亜鉛、酢酸マンガン、塩化マンガン、リン酸マンガン、硫酸マンガン、酢
酸カリウム、塩化カリウム、リン酸カリウム、硫酸カリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナト
リウム、リン酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、酢酸アルミニウム、塩化アルミニウム、リ
ン酸アルミニウム、または硫酸アルミニウムとして提供される、項目３２に記載の医薬組
成物。
（項目３４）
前記薬剤は、立体障害１級アミンである、項目３０または３１に記載の医薬組成物。
（項目３５）
前記立体障害１級アミンは、アミノ酸である、項目３４に記載の医薬組成物。
（項目３６）
前記アミノ酸は、天然型アミノ酸、非天然型アミノ酸、またはアミノ酸誘導体である、
項目３５に記載の医薬組成物。
（項目３７）
前記天然型アミノ酸は、ヒスチジン、フェニルアラニン、アラニン、グルタミン酸、ア
スパラギン酸、グルタミン、ロイシン、メチオニン、アスパラギン、チロシン、スレオニ
ン、イソロイシン、トリプトファン、もしくはバリンであるか、または前記非天然型アミ
ノ酸は、１−アミノシクロヘキサンカルボン酸、ランタニン（ｌａｎｔｈａｎｉｎｅ）、
またはテアニンである、項目３６に記載の医薬組成物。
（項目３８）
前記立体障害１級アミンは、式
【化６１】
2020128424.tif 000024
（式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ
６アルキルエーテル、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオエーテル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボン酸
、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボキシルアミド、およびアルキルアリールから独立して選択さ
れ、いずれの基もハロゲンまたはアミノで単置換または多置換され得るが、但し、Ｒ１、
Ｒ２、およびＲ３のうちの１つ以下がＨである）を有する、項目３４に記載の医薬組成物
。
（項目３９）
前記立体障害１級アミンは、シクロヘキシルアミンまたは２‐メチルブチルアミンであ
る、項目３８に記載の医薬組成物。
（項目４０）
前記立体障害１級アミンは、高分子アミンである、項目３４に記載の医薬組成物。
（項目４１）
前記高分子アミンは、キトサンである、項目４０に記載の医薬組成物。
（項目４２）
前記医薬組成物は、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｋ＋、Ｎａ＋、または
Ａｌ３＋をさらに含む、項目３４〜４１のいずれか１項に記載の医薬組成物。
（項目４３）
前記Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｋ＋、Ｎａ＋、またはＡｌ３＋は、酢
酸マグネシウム、塩化マグネシウム、リン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、酢酸カル
シウム、塩化カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、酢酸亜鉛、塩化亜鉛、リ
ン酸亜鉛、硫酸亜鉛、酢酸マンガン、塩化マンガン、リン酸マンガン、硫酸マンガン、酢
酸カリウム、塩化カリウム、リン酸カリウム、硫酸カリウム、酢酸ナトリウム、塩化ナト
リウム、リン酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、酢酸アルミニウム、塩化アルミニウム、リ
ン酸アルミニウム、または硫酸アルミニウムとして提供される、項目４２に記載の医薬組
成物。
（項目４４）
抗酸化剤をさらに含む、項目１３〜４３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
（項目４５）
前記抗酸化剤は、ＢＨＡ、ビタミンＥ、または没食子酸プロピルである、項目４４に記
載の医薬組成物。
（項目４６）
薬学的に許容される結合剤または添加剤をさらに含む、項目１３〜３９のいずれか１項
に記載の医薬組成物。
（項目４７）
前記薬学的に許容される結合剤または添加剤は、ポリビニルアルコール、ポリビニルピ
ロリドン（ポビドン）、デンプン、マルトデキストリン、またはセルロースエーテルから
選択される、項目４６に記載の医薬組成物。
（項目４８）
前記薬学的に許容される結合剤または添加剤は、ポリビニルアルコールである、項目４
７に記載の医薬組成物。
（項目４９）
前記薬学的に許容される結合剤または添加剤は、セルロースエーテルである、項目４７
に記載の医薬組成物。
（項目５０）
前記セルロースエーテルは、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキシメチル
セルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシエチルメチルセルロース、ヒドロ
キシプロピルセルロース、およびヒドロキシプロピルメチルセルロースから選択される、
項目４９に記載の医薬組成物。
（項目５１）
薬学的に許容される充填剤をさらに含む、項目１３〜５０のいずれか１項に記載の医薬
組成物。
（項目５２）
前記薬学的に許容される充填剤は、セルロース、イソマルト、マンニトール、またはリ
ン酸水素カルシウムである、項目５１に記載の医薬組成物。
（項目５３）
前記セルロースは、微細セルロースおよび微結晶性セルロースから選択される、項目５
２に記載の医薬組成物。
（項目５４）
さらなる治療剤をさらに含む、項目１３〜５３のいずれか１項に記載の医薬組成物。
（項目５５）
前記さらなる治療剤は、鎮痛剤、抗うつ剤、運動促進剤もしくは機能調整剤、制吐剤、
抗生物質、プロトンポンプ阻害剤、酸遮断薬、ＰＤＥ５阻害剤、酸ポンプ拮抗薬、ＧＡＢ
Ａ−Ｂ作動薬、胆汁酸封鎖剤、または粘膜保護剤のうちの１つ以上から選択される、項目
５４に記載の医薬組成物。
（項目５６）
項目１３〜２３のいずれか１項に記載の医薬組成物を含む、投薬単位。
（項目５７）
前記投薬単位は、カプセルまたは錠剤である、項目５６に記載の投薬単位。
（項目５８）
前記投薬単位は、カプセルである、項目５７に記載の投薬単位。
（項目５９）
前記投薬単位の各々は、５μｇ〜１ｍｇのリナクロチドを含む、項目５７に記載の投薬
単位。
（項目６０）
項目２４〜５５のいずれか１項に記載の医薬組成物を含む、投薬単位。
（項目６１）
前記投薬単位は、カプセルまたは錠剤である、項目６０に記載の投薬単位。
（項目６２）
前記投薬単位は、カプセルである、項目６１に記載の投薬単位。
（項目６３）
前記投薬単位の各々は、５μｇ〜１ｍｇのリナクロチドを含む、項目６１に記載の投薬
単位。
（項目６４）
前記投薬単位の各々は、２９０μｇのリナクロチドを含む、項目６３に記載の投薬単位
。
（項目６５）
前記投薬単位の各々は、１４５μｇのリナクロチドを含む、項目６３に記載の投薬単位
。
（項目６６）
項目１３〜５５のいずれか１項に記載の医薬組成物を投与することを含む、消化器疾患
を治療するための方法。
（項目６７）
前記消化器疾患は、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、便秘、機能性消化管障害、胃食道逆流
症、機能性胸焼け、消化不良、内臓痛、胃不全麻痺、慢性偽性腸閉塞、偽性結腸閉塞、ク
ローン病、潰瘍性大腸炎、および炎症性腸疾患からなる群から選択される、項目６６に記
載の方法。
（項目６８）
前記消化器疾患は、便秘である、項目６７に記載の方法。
（項目６９）
前記便秘は、慢性便秘であるか、特発性便秘であるか、術後イレウスに起因するか、ま
たはアヘン剤の使用によって引き起こされる、項目６８に記載の方法。
（項目７０）
前記消化器疾患は、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）である、項目６７に記載の方法。
（項目７１）
前記過敏性腸症候群は、便秘型過敏性腸症候群（ｃ−ＩＢＳ）、下痢型過敏性腸症候群
（ｄ−ＩＢＳ）、または２つの過敏性腸症候群の交互型（ａ−ＩＢＳ）である、項目７０
に記載の方法。
（項目７２）
前記消化器疾患は、消化不良である、項目６７に記載の方法。
（項目７３）
前記消化器疾患は、胃不全麻痺である、項目６７に記載の方法。
（項目７４）
前記胃不全麻痺は、特発性、糖尿病性、または術後の胃不全麻痺である、項目７３に記
載の方法。
（項目７５）
前記消化器疾患は、慢性偽性腸閉塞である、項目６７に記載の方法。
（項目７６）
前記消化器疾患は、クローン病である、項目６７に記載の方法。
（項目７７）
前記消化器疾患は、潰瘍性大腸炎である、項目６７に記載の方法。
（項目７８）
前記消化器疾患は、炎症性腸疾患である、項目６７に記載の方法。
（項目７９）
前記消化器疾患は、内臓痛である、項目６７に記載の方法。
（項目８０）
有効量の項目１３〜５５のいずれか１項に記載の医薬組成物を患者に投与することを含
む、前記患者における腸運動を増加させるための方法。
（項目８１）
生物試料または生物を項目１〜１２のいずれか１項に記載のペプチドと接触させること
を含む、前記生物試料または生物におけるグアニル酸シクラーゼＣ（ＧＣ−Ｃ）受容体の
活性を増加させる方法。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】競合放射性リガンド結合アッセイにおける、Ｔ８４細胞上の細胞表面ＧＣ−Ｃ受容体に対する本発明の例示的ペプチドの特異的結合を示す。
【図２】Ｔ８４細胞のｃ−ＧＭＰアッセイにおける、本発明の例示的ペプチドの用量反応を示す。
【図３】ＲＰ−ＨＰＬＣによる例示的ペプチドの分析の例を示しており、「Ｃｙｓ１−α−ケトン」は、Ｎ末端αアミノ基で修飾されたリナクロチドケトン誘導体を指す。
【００１８】
図面は、例として提供されるのであって、本発明の範囲を限定することを意図するもの
ではない。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
グアニル酸シクラーゼＣ（ＧＣ−Ｃ）は、胃および腸の上皮細胞の頂端面に位置する膜
貫通型受容体である。該レセプターは、細胞外リガンド結合ドメイン、単一の膜貫通領域
、およびＣ末端グアニリルシクラーゼドメインを有する。リガンドがＧＣ−Ｃの細胞外ド
メインに結合すると、細胞内触媒ドメインが、ＧＴＰからのｃＧＭＰの生成を触媒する。
Ｉｎ  ｖｉｖｏでは、この細胞内ｃＧＭＰの増加により、腸管腔への塩化物および炭酸水
素塩の分泌の増加、管腔ｐＨの上昇、管腔のナトリウム吸収の低下、流体分泌の増加、な
らびに腸通過の促進をもたらす事象のカスケードが開始される。ｃＧＭＰは、上皮から粘
膜および管腔内へと双方向に分泌される。本発明のペプチドおよび組成物は、腸内の液体
および電解質平衡の調節因子である腸のＧＣ−Ｃ受容体に結合する。
【００２０】
ある状況において、腸のＧＣ−Ｃ受容体に結合して活性化するが、ペプチドの非変異型
よりも活性が低いかまたは活性が高い変異型または修飾ペプチドを用いて患者を治療する
ことが望ましい場合がある。活性の低下は、受容体への親和性の低下、または一旦結合し
てから受容体を活性化させる能力の低下、またはペプチドの安定性の低下から生じ得る。
活性の増加は、受容体への親和性の増加、または一旦結合してから受容体を活性化させる
能力の増加、またはペプチドの安定性の増加から生じ得る。
【００２１】
例示的ペプチドの説明
種々の実施形態において、ペプチドは、アミノ酸配列Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ
Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ
を含み、ペプチドのＣｙｓ１アミノ酸のα−アミンは、酸化反応または酵素触媒により脱
アミノ化される。このペプチドは、例えば、シッフ塩基生成物を形成するＣｙｓ１アミノ
酸のα−アミンの求核攻撃に関与するリナクロチドの酸化的脱アミノ化、その後のシッフ
塩基のプロトトロピック互変異性、そして最後に酸中での加水分解により、平衡状態にあ
るα−Ｃｙｓ１ケトンおよびその水和物を得ることにより生成され得る。この２つのペプ
チドの混合物は、「Ｃｙｓ１−α−ケトン」または「Ｃｙｓ１−ケトン」と称される。こ
れらのペプチドは互変異性であってもよく、異なる比率の種々の互変異性混合物が有用で
あり得、本発明の範囲内であり得る。
【００２２】
いくつかの実施形態において、ペプチドは、アミノ酸配列Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔ
ｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔ
ｙｒを含み、ペプチドのＣｙｓ１アミノ酸のα−アミンが脱アミノ化される。
【００２３】
一実施形態において、ペプチドは、
【化４】
2020128424.tif 000025
のアミノ酸構造またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００２４】
別の実施形態において、ペプチドは、
【化５】
2020128424.tif 000026
のアミノ酸構造またはその薬学的に許容される塩を含む。
【００２５】
当業者は、
【化６】
2020128424.tif 000027
のアミノ酸構造を含むペプチドが、
【化７】
2020128424.tif 000028
のアミノ酸構造を含むそのジェミナルなジオール一水和物形態と平衡状態にあり得ること
を理解するであろう。
本明細書で使用される場合、用語「Ｃｙｓ１−α−ケトンペプチド」または構造
【化８】
2020128424.tif 000029
は、Ｃｙｓ１−α−ケトン構造およびジェミナルなジオール一水和物形態の両方を含むこ
とが意図される。
【００２６】
別の実施形態において、ペプチドは、Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙ
ｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒのアミノ酸配列
を含み、さらなる硫黄原子が、６つのシステイニル硫黄のうちのいずれか１つに付着して
いてもよい。
一実施形態において、ペプチドは、リナクロチドの３つのジスルフィドシステイニル結
合のうちの１つに単一の硫黄原子を付加することにより形成するリナクロチドトリスルフ
ィド生成物（本明細書において「リナクロチドトリスルフィド生成物」または「リナクロ
チドトリスルフィドペプチド」と称される）を含む。
【００２７】
一実施形態において、ペプチドは、
【化９】
2020128424.tif 000030
、
【化１０】
2020128424.tif 000031
、
および
【化１１】
2020128424.tif 000032
から選択されるアミノ酸構造を含む。
【００２８】
さらなる一実施形態において、ペプチドは、アミノ酸配列  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  
Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  
Ｔｙｒからなり、ペプチドのＣｙｓ１アミノ酸のα−アミンが脱アミノ化される。
【００２９】
一実施形態において、ペプチドは、
【化１２】
2020128424.tif 000033
のアミノ酸構造またはその薬学的に許容される塩からなる。
【００３０】
一実施形態において、ペプチドは、
【化１３】
2020128424.tif 000034
のアミノ酸構造またはその薬学的に許容される塩からなる。
【００３１】
別の実施形態において、ペプチドは、Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙ
ｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒのアミノ酸配列
からなり、さらなる硫黄原子が、６つのシステイニル硫黄のうちのいずれか１つに付着し
ていてもよい。
【００３２】
一実施形態において、ペプチドは、
【化１４】
2020128424.tif 000035
、
【化１５】
2020128424.tif 000036
、
および
【化１６】
2020128424.tif 000037
から選択されるアミノ酸構造からなる。
【００３３】
いくつかの実施形態において、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩は、グアニル
酸シクラーゼＣ受容体を活性化する。
【００３４】
他の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩は、３０個未満のア
ミノ酸を有する。
【００３５】
さらなる実施形態において、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩は、２０個未満
のアミノ酸を有する。
【００３６】
他の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩は、５個未満のアミ
ノ酸がアミノ酸配列の最初のＣｙｓ残基に先行するペプチドを含む。
【００３７】
いくつかの実施形態において、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩が単離される
。
【００３８】
他の実施形態において、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩が精製される。
【００３９】
いくつかの実施形態において、ペプチドの薬学的に許容される塩が提供される。ある場
合において、薬学的に許容される塩は塩化物塩である。
【００４０】
変異または修飾ペプチド
種々の実施形態において、ペプチドは、１つのジスルフィド結合を形成する２つのＣｙ
ｓを含むか、ペプチドは、２つのジスルフィド結合を形成する４つのＣｙｓを含むか、ま
たはペプチドは、３つのジスルフィド結合を形成する６つのＣｙｓを含む。
【００４１】
種々の実施形態において、ペプチドは、１つのトリスルフィド結合を形成する２つのＣ
ｙｓを含むか、ペプチドは、２つのトリスルフィド結合を形成する４つのＣｙｓを含むか
、またはペプチドは、３つのトリスルフィド結合を形成する６つのＣｙｓを含む。
【００４２】
あるペプチドにおいて、通常ジスルフィド結合を形成するＣｙｓ残基の一方もしくは両
方の対の一方または両方のメンバーを、ホモシステイン、ペニシラミン、３−メルカプト
プロリン（Ｋｏｌｏｄｚｉｅｊ  ｅｔ  ａｌ．１９９６  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｅｐｔ  Ｐｒｏ
ｔｅｉｎ  Ｒｅｓ  ４８：２７４）；β，βジメチルシステイン（Ｈｕｎｔ  ｅｔ  ａｌ
．１９９３  Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｅｐｔ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ  ４２：２４９）、または
ジアミノプロピオン酸（Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．１９７８  Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  ２
１：１１７）によって置換して、通常のジスルフィド結合の位置で代替の内部架橋を形成
することができる。他の実施形態において、ジスルフィド結合は、炭化水素架橋によって
置き換えられてもよい（Ｓｃｈａｆｍｅｉｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．２０００  Ｊ  Ａｍ  
Ｃｈｅｍ  Ｓｏｃ  １２２：５８９１、Ｐａｔｇｉｒｉ  ｅｔ  ａｌ．２００８  Ａｃｃ
Ｃｈｅｍ  Ｒｅｓ  ４１：１２８９、Ｈｅｎｃｈｅｙ  ｅｔ  ａｌ．２００８  Ｃｕｒ
ｒ  Ｏｐｉｎ  Ｃｈｅｍ  Ｂｉｏｌ  １２：６９２）。
【００４３】
ペプチドの生成
一実施形態において、本発明のペプチドまたは前駆体ペプチドは、限定されないが、細
菌（例えば、大腸菌または枯草菌）、昆虫細胞系（例えば、ショウジョウバエＳｆ９細胞
系）、酵母細胞系（例えば、出芽酵母、酵母類）、もしくは糸状真菌発現系、または動物
細胞発現系（例えば、哺乳類細胞発現系）を含む任意の既知のタンパク質発現系において
、組換えによって生成することができる。いくつかの実施形態において、組換えによって
生成されたペプチドは、本発明のペプチドを形成するように発現させた後に化学修飾され
てもよい。
【００４４】
ペプチドまたは変異ペプチドが組換えによって生成される場合、例えば、大腸菌、ペプ
チドをコードする核酸分子は、細胞からの成熟ペプチドの分泌を可能にするリーダー配列
をコードすることもできる。そのため、ペプチドをコードする配列は、例えば、天然に存
在する細菌性ＳＴペプチドのプレ配列およびプロ配列を含むことができる。分泌された成
熟ペプチドは、培養培地から精製することができる。
【００４５】
本明細書に記載されるペプチドをコードする配列は、核酸分子を細菌細胞に送達してそ
の中に維持することができるベクターに挿入することができる。ＤＮＡ分子は、自己複製
ベクター（適切なベクターは、例えば、ｐＧＥＭ３ＺおよびｐｃＤＮＡ３、ならびにその
誘導体を含む）に挿入されてもよい。ベクター核酸は、細菌ＤＮＡ、またはバクテリオフ
ァージλもしくはＭ１３およびその誘導体等のバクテリオファージＤＮＡであってもよい
。本明細書に記載される核酸を含有するベクターの構築の後に、細菌等の宿主細胞の形質
転換が行われてもよい。好適な細菌宿主として、限定されないが、大腸菌、枯草菌、シュ
ードモナス、およびサルモネラ菌が挙げられる。コード化核酸分子に加えて、遺伝子構築
物もまた、プロモーター配列および制御配列等の発現を可能にする要素を含む。発現ベク
ターは、転写開始を制御する転写調節配列、例えば、プロモーター配列、エンハンサー配
列、オペレーター配列、およびリプレッサー配列等を含有してもよい。様々な転写調節配
列が当業者に周知である。発現ベクターはまた、翻訳調節配列（例えば、非翻訳５’配列
、非翻訳３’配列、または内部リボソーム進入部位）を含むこともできる。ベクターは、
自己複製することが可能であるか、またはペプチド生成中に安定性を確保するために宿主
ＤＮＡに組み込むことができる。
【００４６】
本明細書に記載されるペプチドを含むタンパク質コード配列は、精製を容易にするため
に、ペプチド親和性タグ、例えば、グルタチオンＳ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、マ
ルトースＥ結合タンパク質、プロテインＡ、ＦＬＡＧタグ、ヘキサ−ヒスチジン、ｍｙｃ
タグまたはインフルエンザＨＡタグ等をコードする核酸に融合することもできる。親和性
タグまたはレポーター融合は、翻訳融合が生成されるように、対象となるペプチドの読み
枠を、親和性タグをコードする遺伝子の読み枠に結合する。融合遺伝子の発現により、対
象となるペプチドおよび親和性タグの両方を含む単一のペプチドの翻訳がもたらされる。
親和性タグが用いられるある場合において、プロテアーゼ認識部位をコードするＤＮＡ配
列が、親和性タグの読み枠と対象となるペプチドの読み枠との間に融合される。
【００４７】
バクテリア以外の当業者に周知のタンパク質発現系において、本明細書に記載されるペ
プチドおよび変異体の未成熟型および成熟型を生成するのに好適な遺伝子構築物および方
法を使用して、生物系においてペプチドを生成することもできる。
【００４８】
他の実施形態において、通常、翻訳機構によって組み込まれないアミノ酸を含有する上
述のペプチドは、ｔＲＮＡ修飾方法による組換えによって生成されてもよい。ｔＲＮＡを
修飾するための方法として、限定されないが、非天然および／または任意のアミノ酸の組
み込みを可能にするように、アンチコドン、アミノ酸付着部位、および／またはアクセプ
ターステムを修飾することが当該技術分野で知られている（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈ
ｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．（２００８）３７２：４８０−４８５；Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．
（２００９）１６：３２３−３６；Ｎａｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ（２００７）４：２３９−４
４；Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ  Ｂｉｏｌ．（２００６）７：７７５−８２；Ｍ
ｅｔｈｏｄｓ（２００５）３６：２２７−２３８；Ｍｅｔｈｏｄｓ（２００５）３６：２
７０−２７８；Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．（２００４）７３：１４７−１７６
；Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ  Ｒｅｓ．（２００４）３２：６２００−６２１１；Ｐｒｏｃ．Ｎ
ａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ（２００３）１００：６３５３−６３５７；Ｒｏｙａ
ｌ  Ｓｏｃ．Ｃｈｅｍ．（２００４）３３：４２２−４３０）．
【００４９】
いくつかの実施形態において、ペプチドは化学的に生成されてもよい。ペプチドは、従
来のＢＯＣまたはＦＭＯＣ保護を用いた溶相合成および固相合成を含む多数の異なる方法
によって合成することができる。例えば、ペプチドは、連続的なアミノ酸カップリングを
用いて、２−クロロトリチルまたはＷａｎｇ樹脂上で合成することができる。以下の保護
基を使用することができる：フルオレニルメチルオキシカルボニルまたはｔｅｒｔ−ブチ
ルオキシカルボニル（α−アミノ基、Ｎ末端）；トリチルまたはｔｅｒｔ−ブチル（Ｃｙ
ｓのチオール基）；ｔｅｒｔ−ブチル（存在する場合、グルタミン酸のγ−カルボキシル
およびスレオニンのヒドロキシル基）；ならびにトリチル（存在する場合、アスパラギン
側鎖のβ−アミド官能基およびチロシンのフェノール基）。カップリングは、三級アミン
の存在下でＤＩＣおよびＨＯＢｔを用いて達成することができ、ペプチドを脱保護し、カ
クテルＫ（トリフルオロ酢酸８１重量％、フェノール５重量％、チオアニソール５重量％
、１，２−エタンジチオール２．５重量％、水３重量％、硫化ジメチル２重量％、ヨウ化
アンモニウム１．５重量％）を使用して固相支持体から切断することができる。トリフル
オロ酢酸および他の揮発物を除去した後、有機溶媒を用いてペプチドを沈殿させることが
できる。Ｃｙｓ残基間のジスルフィド結合は、ジメチルスルホキシド（Ｔａｍ  ｅｔ  ａ
ｌ．（１９９１）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１３：６６５７−６２）を使用して、
または空気酸化ストラテジーを使用して形成することができる。得られたペプチドは、逆
相クロマトグラフィーによって精製し、凍結乾燥することができる。いくつかの実施形態
において、化学的に合成されたペプチドは、本発明のペプチドを形成するように合成され
た後に化学修飾されてもよい。
【００５０】
これらのペプチドは、塩基またはその薬学的に許容される塩のいずれかの形態で、作製
、単離、または使用することができる。塩の例として、限定されないが、ペプチドの酢酸
塩、塩化物、硫酸塩、およびリン酸塩が挙げられる。
【００５１】
ペプチドおよびＧＣ−Ｃ受容体作動薬の組成物
別の態様において、ペプチドを、単独でまたは組み合わせて、任意の薬学的に許容され
る担体または媒体と組み合わせることができる、医薬組成物が提供される。
【００５２】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は、本明細書に記載されるペプチドまたはそ
の薬学的に許容される塩を含む。医薬組成物は、本明細書に記載される２つ以上のペプチ
ドまたはその薬学的に許容される塩を含んでもよい。
【００５３】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は、
ｉ．ペプチドが、
【化１７】
2020128424.tif 000038
のアミノ酸構造を含む、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩、
ｉｉ．ペプチドが、
【化１８】
2020128424.tif 000039
のアミノ酸構造を含む、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩、
または
ｉｉｉ．ペプチドが、
【化１９】
2020128424.tif 000040
のアミノ酸構造を含む、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩、から選択される２つ
以上のペプチドを含む。
【００５４】
他の実施形態において、医薬組成物は、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬学的
に許容される塩を含み、ペプチドは、
【化２０】
2020128424.tif 000041
のアミノ酸構造を含み、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩は、リナクロチドの重
量と比較して、１０重量％、２０重量％、３０重量％、４０重量％、５０重量％、６０重
量％、７０重量％、８０重量％、または９０重量％未満を占める。
【００５５】
さらなる実施形態において、医薬組成物は、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬
学的に許容される塩を含み、ペプチドは、
【化２１】
2020128424.tif 000042
のアミノ酸構造を含み、医薬組成物は、リナクロチドの重量と比較して、９重量％、８重
量％、７重量％、６重量％、５重量％、４重量％、３重量％、２重量％、１重量％、また
は０．５重量％未満のペプチドまたはその薬学的に許容される塩を含む。
【００５６】
さらなる実施形態において、医薬組成物は、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬
学的に許容される塩を含み、ペプチドは、
【化２２】
2020128424.tif 000043
のアミノ酸構造を含み、医薬組成物は、リナクロチドの重量と比較して、約０．０１〜９
重量％（例えば、約０．０１〜８重量％、約０．０１〜７重量％、約０．０１〜６重量％
、約０．０１〜５重量％、約０．０１〜４重量％、約０．０１〜３重量％、約０．０１〜
２重量％、約０．０１〜２重量％、約０．０１〜１重量％）のペプチドまたはその薬学的
に許容される塩を含む。
【００５７】
他の実施形態において、医薬組成物は、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬学的
に許容される塩を含み、ペプチドは、
【化２３】
2020128424.tif 000044
のアミノ酸構造を含み、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩は、リナクロチドの重
量と比較して、１０重量％、２０重量％、３０重量％、４０重量％、５０重量％、６０重
量％、７０重量％、８０重量％、または９０重量％未満を占める。
【００５８】
さらなる実施形態において、医薬組成物は、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬
学的に許容される塩を含み、ペプチドは、
【化２４】
2020128424.tif 000045
のアミノ酸構造を含み、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩は、リナクロチドの重
量と比較して、９重量％、８重量％、７重量％、６重量％、５重量％、４重量％、３重量
％、２重量％、１重量％、または０．５重量％未満を占める。
【００５９】
さらなる実施形態において、医薬組成物は、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬
学的に許容される塩を含み、ペプチドは、
【化２５】
2020128424.tif 000046
；
のアミノ酸構造を含み、医薬組成物は、リナクロチドの重量と比較して、約０．０１〜９
重量％（例えば、約０．０１〜８重量％、約０．０１〜７重量％、約０．０１〜６重量％
、約０．０１〜５重量％、約０．０１〜４重量％、約０．０１〜３重量％、約０．０１〜
２重量％、約０．０１〜２重量％、約０．０１〜１重量％）のペプチドまたはその薬学的
に許容される塩を含む。
【００６０】
他の実施形態において、医薬組成物は、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬学的
に許容される塩を含み、ペプチドは、
【化２６】
2020128424.tif 000047
のアミノ酸構造からなり、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩は、リナクロチドの
重量と比較して、１０重量％、２０重量％、３０重量％、４０重量％、５０重量％、６０
重量％、７０重量％、８０重量％、または９０重量％未満を占める。
【００６１】
さらなる実施形態において、医薬組成物は、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬
学的に許容される塩を含み、ペプチドは、
【化２７】
2020128424.tif 000048
のアミノ酸構造からなり、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩は、リナクロチドの
重量と比較して、９重量％、８重量％、７重量％、６重量％、５重量％、４重量％、３重
量％、２重量％、１重量％、または０．５重量％未満を占める。
【００６２】
さらなる実施形態において、医薬組成物は、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬
学的に許容される塩を含み、ペプチドは、
【化２８】
2020128424.tif 000049
のアミノ酸構造からなり、医薬組成物は、リナクロチドの重量と比較して、約０．０１〜
９重量％（例えば、約０．０１〜８重量％、約０．０１〜７重量％、約０．０１〜６重量
％、約０．０１〜５重量％、約０．０１〜４重量％、約０．０１〜３重量％、約０．０１
〜２重量％、約０．０１〜２重量％、約０．０１〜１重量％）のペプチドまたはその薬学
的に許容される塩を含む。
【００６３】
他の実施形態において、医薬組成物は、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬学的
に許容される塩を含み、ペプチドは、
【化２９】
2020128424.tif 000050
のアミノ酸構造からなり、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩は、リナクロチドの
重量と比較して、１０重量％、２０重量％、３０重量％、４０重量％、５０重量％、６０
重量％、７０重量％、８０重量％、または９０重量％未満を占める。
【００６４】
さらなる実施形態において、医薬組成物は、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬
学的に許容される塩を含み、ペプチドは、
【化３０】
2020128424.tif 000051
のアミノ酸構造からなり、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩は、リナクロチドの
重量と比較して、９重量％、８重量％、７重量％、６重量％、５重量％、４重量％、３重
量％、２重量％、１重量％、または０．５重量％を占める。
【００６５】
さらなる実施形態において、医薬組成物は、リナクロチドおよびペプチドまたはその薬
学的に許容される塩を含み、ペプチドは、
【化３１】
2020128424.tif 000052
のアミノ酸構造からなり、医薬組成物は、リナクロチドの重量と比較して、約０．０１−
９重量％（例えば、約０．０１〜８重量％、約０．０１〜７重量％、約０．０１〜６重量
％、約０．０１〜５重量％、約０．０１〜４重量％、約０．０１〜３重量％、約０．０１
〜２重量％、約０．０１〜２重量％、約０．０１〜１重量％）のペプチドまたはその薬学
的に許容される塩を含む。
【００６６】
いくつかの実施形態において、Ｃｙｓ１−α−ケトンペプチドは、組成物の約１５重量
％未満、組成物の約１０重量％未満、組成物の約７重量％未満、組成物の約５重量％未満
、組成物の約４重量％未満、組成物の約３重量％未満、組成物の約２重量％未満、または
組成物の約１重量％未満を占める。別の例示的な実施形態において、Ｃｙｓ１−α−ケト
ンペプチドは、組成物の約０．０１％〜約１５重量％、組成物の約０．０５％〜約１０重
量％、組成物の約０．０５％〜約７重量％、または組成物の約０．０５％〜約５重量％を
占める。さらなる例示的な実施形態において、Ｃｙｓ１−α−ケトンペプチドは、組成物
の約０．５％〜約２重量％を占める。
【００６７】
さらなる実施形態において、リナクロチドおよびＣｙｓ１−α−ケトンペプチドを含む
医薬組成物を投与することを含む、消化器疾患を治療する方法を必要とする患者における
該疾患を治療する方法が提供される。
【００６８】
いくつかの実施形態において、リナクロチドおよびリナクロチドトリスルフィド生成物
を含む医薬組成物が提供される。一実施形態において、リナクロチドトリスルフィド生成
物は、リナクロチドの３つのジスルフィドシステイニル結合のうちの１つに対する単一の
硫黄原子の付加として形成する。該生成物の３つの可能な構造を以下に示すが、当業者は
、硫黄原子が、６つのシステイニル硫黄のうちのいずれか１つに付着し得ることを認識す
るであろう。
【化３２】
2020128424.tif 000053
【化３３】
2020128424.tif 000054
【化３４】
2020128424.tif 000055
【００６９】
別の実施形態において、リナクロチドに対する２つ以上の硫黄原子の付加がある場合が
あり、付加される硫黄原子当たり３２ＡＵその分子量を増加させる。
【００７０】
いくつかの他の実施形態において、リナクロチドトリスルフィド生成物は、組成物の約
１５重量％未満、組成物の約１０重量％未満、組成物の約７重量％未満、組成物の約５重
量％未満、組成物の４重量％未満、組成物の約３重量％未満、組成物の約２重量％未満、
または組成物の約１重量％未満を占める。
【００７１】
他の例示的な実施形態において、リナクロチドトリスルフィド生成物は、組成物の約０
．０１％〜１５重量％、組成物の約０．０５％〜約１０重量％、組成物の約０．０５％〜
約７重量％、または組成物の約０．０５％〜約５重量％を占める。さらなる例示的な実施
形態において、リナクロチドトリスルフィド生成物は、組成物の約０．５％〜約２重量％
を占める。
【００７２】
さらなる実施形態において、リナクロチドおよびリナクロチドトリスルフィド生成物を
含む医薬組成物を投与することを含む、消化器疾患を治療する方法を必要とする患者にお
ける該疾患を治療する方法が提供される。
【００７３】
他の実施形態において、医薬組成物は、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩から
本質的になり、ペプチドは、
【化３５】
2020128424.tif 000056
のアミノ酸構造を含む。
【００７４】
他の実施形態において、医薬組成物は、ペプチドまたはその薬学的に許容される塩から
本質的になり、ペプチドは、
【化３６】
2020128424.tif 000057
のアミノ酸構造を含む。
【００７５】
用語「本質的になる」およびその変形例は、組成物に言及して使用される場合、該組成
物が、唯一の活性ペプチドと、他の所望される薬学的に不活性な添加剤、賦形剤、および
／または構成成分（例えば、ポリマー、立体障害１級アミン、カチオン、充填剤、結合剤
、担体、賦形剤、希釈剤、崩壊添加剤、滑沢剤、溶媒、分散剤、コーティング添加剤、吸
収促進添加剤、制御放出添加剤、固化防止添加剤、抗菌添加剤、保存剤、甘味添加剤、着
色剤、着香剤、乾燥剤、可塑剤、色素等）とを含み、他の活性な薬学的成分（複数可）を
含まないことを意味するために本明細書において使用される。
【００７６】
いくつかの実施形態において、リナクロチドと、Ｃｙｓ１−α−ケトンペプチドと、
ｉ．ペプチドが、
【化３７】
2020128424.tif 000058
のアミノ酸構造を含む、ペプチド（「Ｃｙｓ１−ＩＭＤ」）またはその薬学的に許容され
る塩、
ｉｉ．ペプチドが、
【化３８】
2020128424.tif 000059
のアミノ酸構造を含む、加水分解ペプチド（「Ａｓｐ７」）またはその薬学的に許容され
る塩、
ｉｉｉ．ペプチドが、
【化３９】
2020128424.tif 000060
のアミノ酸構造を含む、アセチル化ペプチド（「Ｃｙｓ１−Ｎ−アセチル」）またはその
薬学的に許容される塩、
ｉｖ．ペプチドが、Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ
Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒのアミノ酸配列を含み、さらなる硫
黄原子が、６つのシステイニル硫黄のうちのいずれか１つに付着していてもよい、リナク
ロチドトリスルフィドペプチドまたはその薬学的に許容される塩、および
ｖ．ペプチドが、
【化４０】
2020128424.tif 000061
のアミノ酸構造を含む、ペプチド（「Ｄｅｓ−Ｔｙｒ１４」）またはその薬学的に許容さ
れる塩、から選択される１つ以上のペプチドと、を含む医薬組成物が提供される。
【００７７】
いくつかの実施形態において、Ｃｙｓ１−α−ケトンペプチドは、組成物の約１５重量
％未満、組成物の約１０重量％未満、組成物の約７重量％未満、組成物の約５重量％未満
、組成物の約４重量％未満、組成物の約３重量％未満、組成物の約２重量％未満、組成物
の約１．５重量％未満、または組成物の約１重量％未満を占める。他の例示的な実施形態
において、Ｃｙｓ１−α−ケトンペプチドは、組成物の約０．０１％〜約１５重量％、組
成物の約０．０５％〜約１０重量％、組成物の約０．０５％〜約７重量％、または組成物
の約０．０５％〜約５重量％を占める。
【００７８】
いくつかの実施形態において、Ｃｙｓ１−ＩＭＤペプチドは、組成物の約１５重量％未
満、組成物の約１０重量％未満、組成物の約７重量％未満、組成物の約５重量％未満、組
成物の約４重量％未満、組成物の約３．５重量％未満、組成物の約３重量％未満、組成物
の約２重量％未満、または組成物の約１重量％未満を占める。他の例示的な実施形態にお
いて、Ｃｙｓ１−ＩＭＤペプチドは、組成物の約０．０１％〜約１５重量％、組成物の約
０．０５％〜約１０重量％、組成物の約０．０５％〜約７重量％、または組成物の約０．
０５％〜約５重量％を占める。
【００７９】
いくつかの実施形態において、加水分解ペプチド（「Ａｓｐ７」）は、組成物の約１５
重量％未満、組成物の約１０重量％未満、組成物の約７重量％未満、組成物の約５重量％
未満、組成物の約４重量％未満、組成物の約３．５重量％未満、組成物の約３重量％未満
、組成物の約２重量％未満、または組成物の約１重量％未満を占める。他の例示的な実施
形態において、加水分解ペプチド（「Ａｓｐ７」）は、組成物の約０．０１％〜約１５重
量％、組成物の約０．０５％〜約１０重量％、組成物の約０．０５％〜約７重量％、また
は組成物の薬０．０５％〜約５重量％を占める。
【００８０】
いくつかの実施形態において、アセチル化ペプチド（「Ｃｙｓ１−Ｎ−Ａｃｅｔｙｌ」
）は、組成物の約１５重量％未満、組成物の約１０重量％未満、組成物の約７重量％未満
、組成物の約５重量％未満、組成物の約４重量％未満、組成物の約３．５重量％未満、組
成物の約３重量％未満、組成物の約２重量％未満、または組成物の約１重量％未満を占め
る。他の例示的な実施形態において、アセチル化ペプチド（「Ｃｙｓ１−Ｎ−Ａｃｅｔｙ
ｌ」）は、組成物の約０．０１％〜約１５重量％、組成物の約０．０５％〜約１０重量％
、組成物の約０．０５％〜約７重量％、または組成物の約０．０５％〜約５重量％を占め
る。
【００８１】
いくつかの実施形態において、リナクロチドトリスルフィドペプチドは、組成物の約１
５重量％未満、組成物の約１０重量％未満、組成物の約７重量％未満、組成物の約５重量
％未満、組成物の約４重量％未満、組成物の約３．５重量％未満、組成物の約３重量％未
満、組成物の約２重量％未満、または組成物の約１重量％未満を占める。他の例示的な実
施形態において、リナクロチドトリスルフィドペプチドは、組成物の約０．０１％〜約１
５重量％、組成物の約０．０５％〜約１０重量％、組成物の約０．０５％〜約７重量％、
または組成物の約０．０５％〜約５重量％を占める。
【００８２】
いくつかの実施形態において、Ｄｅｓ−Ｔｙｒ１４ペプチドは、組成物の約１５重量％
未満、組成物の約１０重量％未満、組成物の約７重量％未満、組成物の約５重量％未満、
組成物の約４重量％未満、組成物の約３．５重量％未満、組成物の約３重量％未満、組成
物の約２重量％未満、または組成物の約１重量％未満を占める。他の例示的な実施形態に
おいて、Ｄｅｓ−Ｔｙｒ１４ペプチドは、組成物の約０．０１％〜約１５重量％、組成物
の約０．０５％〜約１０重量％、組成物の約０．０５％〜約７重量％、または組成物の約
０．０５％〜約５重量％を占める。
【００８３】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は、リナクロチド、Ｃｙｓ１−α−ケトンペ
プチド、および任意の所望の濃度のジスルフィド結合した多量体を含む。
【００８４】
いくつかの実施形態において、組成物は、１０重量％未満の多量体（複数可）を含む。
【００８５】
いくつかの実施形態において、組成物は、７重量％未満の多量体（複数可）を含む。
【００８６】
いくつかの実施形態において、組成物は、６重量％未満の多量体（複数可）を含む。
【００８７】
いくつかの実施形態において、組成物は、５重量％未満の多量体（複数可）を含む。
【００８８】
いくつかの実施形態において、組成物は、４重量％未満の多量体（複数可）を含む。
【００８９】
いくつかの実施形態において、組成物は、３重量％未満の多量体（複数可）を含む。
【００９０】
いくつかの実施形態において、組成物は、２重量％未満の多量体（複数可）を含む。
【００９１】
いくつかの実施形態において、組成物は、１重量％未満の多量体（複数可）を含む。
【００９２】
本明細書に記載されるペプチドは、任意の薬学的に忍容性を示す担体または媒体、例え
ば、溶媒、分散剤、コーティング剤、吸収促進剤、制御放出剤、および１つ以上の不活性
賦形剤（デンプン、ポリオール、顆粒化剤、微結晶性セルロース（例えば、セルフィア、
Ｃｅｌｐｈｅｒｅビーズ（登録商標））、希釈剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤等を含む）等
と組み合わせることができる。必要に応じて、開示される組成物の錠剤の剤形が、標準的
な水性または非水性技術によってコーティングされてもよい。
【００９３】
薬学的に許容される担体および薬学的に許容される不活性担体ならびに上述のさらなる
成分として使用するための賦形剤の例として、限定されないが、結合剤、充填剤、崩壊剤
、滑沢剤、抗菌剤、およびコーティング剤が挙げられる。
【００９４】
本明細書で使用される場合、用語「結合剤」は、本発明の実施において使用され得る任
意の薬学的に許容される結合剤を指す。薬学的に許容される結合剤の例として、限定され
ないが、デンプン（例えば、コーンスターチ、ジャガイモデンプン、およびα化デンプン
（例えば、Ｃｏｌｏｒｃｏｎ，Ｌｔｄ．から販売されているＳＴＡＲＣＨ  １５００（登
録商標）およびＳＴＡＲＣＨ  １５００  ＬＭ（登録商標）、ならびに他のデンプン）、
マルトデキストリン、ゼラチン、天然および合成ゴム（アカシアゴム、粉末化トラガカン
トゴム、グアーガム等）、セルロースまたはセルロースエーテルおよびその誘導体（例え
ば、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシエチルメチルセルロー
ス、ヒドロキシプロピルセルロース、およびヒドロキシプロピルメチルセルロース（ヒプ
ロメロース）、エチルセルロース、酢酸セルロース、カルボキシメチルセルロースカルシ
ウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロース、微結晶性
セルロース（例えば、ＦＭＣ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、Ｍａｒｃｕｓ  Ｈｏｏｋ，ＰＡ
，ＵＳＡから販売されているＡＶＩＣＥＬ（商標）（例えば、ＡＶＩＣＥＬ−ＰＨ−１０
１（商標）、−１０３（商標）および−１０５（商標）等））、ポリビニルアルコール、
ポリビニルピロリドン（例えば、ポリビニルピロリドンＫ３０、ポビドン）、セルロース
エーテル、ならびにこれらの混合物が挙げられる。
【００９５】
本明細書で使用される場合、用語「充填剤」は、本発明の実施において使用され得る任
意の薬学的に許容される充填剤を指す。薬学的に許容される充填剤の例として、限定され
ないが、タルク、炭酸カルシウム（例えば、顆粒または粉末）、二塩基性リン酸カルシウ
ム、三塩基性リン酸カルシウム、硫酸カルシウム（例えば、顆粒または粉末）、微結晶性
セルロース（例えば、Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０１またはＣｅｌｐｈｅｒｅ  ＣＰ−３０５
）、粉末化セルロース、デキストレート、カオリン、マンニトール、ケイ酸、ソルビトー
ル、デンプン（例えば、Ｓｔａｒｃｈ  １５００）、α化デンプン、ラクトース、グルコ
ース、フルクトース、ガラクトース、トレハロース、スクロース、マルトース、イソマル
ト、ラフィノース、マルチトール、メレジトース、スタキオース、ラクチトール、パラチ
ニット、キシリトール、ミオイノシトール、およびこれらの混合物が挙げられる。
【００９６】
特にペプチドをコーティングするために使用され得る薬学的に許容される充填剤の例と
して、限定されないが、タルク、微結晶性セルロース（例えば、Ａｖｉｃｅｌ  ＰＨ１０
１またはＣｅｌｐｈｅｒｅ  ＣＰ−３０５）、微細セルロース、粉末化セルロース、デキ
ストレート、カオリン、マンニトール、ケイ酸、ソルビトール、デンプン、α化デンプン
、ラクトース、グルコース、フルクトース、ガラクトース、トレハロース、スクロース、
マルトース、イソマルト、二塩基性リン酸カルシウム、ラフィノース、マルチトール、メ
レジトース、スタキオース、ラクチトール、パラチニット、キシリトール、マンニトール
、ミオイノシトール、およびこれらの混合物が挙げられる。
【００９７】
本明細書で使用される場合、用語「添加剤」は、任意の薬学的に許容される添加剤を指
す。薬学的に許容される添加剤として、限定されないが、崩壊剤、分散添加剤、滑沢剤、
流動促進剤、抗酸化剤、コーティング添加剤、希釈剤、界面活性剤、香味添加剤、湿潤剤
、吸収促進添加剤、制御放出添加剤、固化防止添加剤、抗菌剤（例えば、保存剤）、着色
剤、乾燥剤、可塑剤、および色素が挙げられる。本明細書で使用される場合、用語「賦形
剤」は、任意の薬学的に許容される添加剤、充填剤、結合剤、または薬剤である。
【００９８】
本発明の組成物はまた、他の治療成分、固化防止剤、保存剤、甘味剤、着色剤、着香剤
、乾燥剤、可塑剤、色素、流動促進剤、接着防止剤、帯電防止剤、界面活性剤（湿潤剤）
、抗酸化剤、膜コーティング剤等も任意選択的に含むことができる。いずれのそのような
任意選択的な成分も、製剤の安定性を保証するために、本明細書に記載される化合物と適
合性でなければならない。組成物は、必要に応じて、例えば、ラクトース、グルコース、
フルクトース、ガラクトース、トレハロース、スクロース、マルトース、ラフィノース、
マルチトール、メレジトース、スタキオース、ラクチトール、パラチニット、デンプン、
キシリトール、マンニトール、ミオイノシトール等、およびその水和物、ならびにアミノ
酸、例えば、アラニン、グリシン、およびベタイン、ならびにペプチドおよびタンパク質
、例えば卵白を含む他の添加剤を含有してもよい。
【００９９】
組成物は、例えば、種々のさらなる溶媒、分散剤、コーティング剤、吸収促進添加剤、
制御放出添加剤、および１つ以上の不活性添加剤（例えば、デンプン、ポリオール、顆粒
化添加剤、微結晶性セルロース、希釈剤、滑沢剤、結合剤、崩壊添加剤等を含む）等を含
むことができる。必要に応じて、開示される組成物の錠剤の剤形が、標準的な水性または
非水性技術によってコーティングされてもよい。組成物はまた、例えば、固化防止添加剤
、保存剤、甘味添加剤、着色剤、着香剤、乾燥剤、可塑剤、色素等も含むことができる。
【０１００】
好適な崩壊剤として、例えば、寒天、炭酸カルシウム、微結晶性セルロース、クロスカ
ルメロースナトリウム、クロスポビドン、ポビドン、ポラクリリンカリウム、デンプング
リコール酸ナトリウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、他のデンプン、α化デンプ
ン、粘土、他のアルギン、他のセルロース、ガム、およびそれらの混合物が挙げられる。
【０１０１】
好適な潤沢剤として、例えば、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、
鉱物油、軽鉱物油、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール
、他のグリコール、ステアリン酸、硫酸ラウリルナトリウム、タルク、水素添加植物油（
例えば、落花生油、綿実油、ヒマワリ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、および
ダイズ油）、ステアリン酸亜鉛、オレイン酸エチル、ラウリン酸エチル、寒天、シロイド
シリカゲル（ＡＥＲＯＳＩＬ  ２００、Ｗ．Ｒ．Ｇｒａｃｅ  Ｃｏ．、Ｂａｌｔｉｍｏｒ
ｅ，ＭＤ  ＵＳＡ）、合成シリカの凝集エアロゾル（Ｅｖｏｎｉｋ  Ｄｅｇｕｓｓａ  Ｃ
ｏ．、Ｐｌａｎｏ，ＴＸ  ＵＳＡ）、発熱性二酸化ケイ素（ＣＡＢ−Ｏ−ＳＩＬ、Ｃａｂ
ｏｔ  Ｃｏ．、Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ  ＵＳＡ）、ならびにそれらの混合物が挙げられる。
【０１０２】
好適な流動促進剤として、例えば、ロイシン、コロイド状二酸化ケイ素、三ケイ酸マグ
ネシウム、粉末化セルロース、デンプン、タルク、およびリン酸三カルシウムが挙げられ
る。
【０１０３】
好適な固化防止添加剤として、例えば、ケイ酸カルシウム、ケイ酸マグネシウム、二酸
化ケイ素、コロイド状二酸化ケイ素、タルク、およびそれらの混合物が挙げられる。
【０１０４】
例えば、ペプチド組成物のための保存剤として使用され得る好適な抗菌添加剤として、
例えば、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、安息香酸、ベンジルアルコール、
ブチルパラベン、塩化セチルピリジニウム、クレゾール、クロロブタノール、デヒドロ酢
酸、エチルパラベン、メチルパラベン、フェノール、フェニルエチルアルコール、フェノ
キシエタノール、酢酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、ソルビン酸カリウム、プロピル
パラベン、安息香酸ナトリウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、ソ
ルビン酸、チメロサール、チモ、およびそれらの混合物が挙げられる。
【０１０５】
好適な抗酸化剤として、例えば、ＢＨＡ（ブチル化ヒドロキシアニソール）、ＢＨＴ（
ブチル化ヒドロキシトルエン）、ビタミンＥ、没食子酸プロピル、アスコルビン酸および
その塩またはエステル、トコフェロールおよびそのエステル、α−リポ酸およびβ−カロ
チンが挙げられる。
【０１０６】
好適なコーティング添加剤として、例えば、カルボキシルメチルセルロースナトリウム
、酢酸フタル酸セルロース、エチルセルロース、ゼラチン、医薬品用グレーズ、ヒドロキ
シプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、フタル酸ヒドロキシプロ
ピルメチルセルロース、メチルセルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルアセテ
ートフタレート、シェラック、スクロース、二酸化チタン、カルナウバワックス、マイク
ロクリスタリンワックス、およびそれらの混合物が挙げられる。好適な保護コーティング
剤として、Ａｑｕａｃｏａｔ（例えば、Ａｑｕａｃｏａｔ  Ｅｔｈｙｌｃｅｌｌｕｌｏｓ
ｅ  Ａｑｕａｅｏｕｓ  Ｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ、１５重量％、ＦＭＣ  Ｂｉｏｐｏｌｙｍ
ｅｒ、ＥＣＤ−３０）、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ  Ｅ  ＰＯ  ＰＥ
−ＥＬ、Ｒｏｅｈｍ  Ｐｈａｒｍａ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ）、およびＯｐａｄｒｙ（例えば
、Ｏｐａｄｒｙ  ＡＭＢ水分散液、２０重量％、Ｃｏｌｏｒｃｏｎ）が挙げられる。
【０１０７】
特定の実施形態において、ペプチド組成物に好適な添加剤は、スクロース、タルク、ス
テアリン酸マグネシウム、クロスポビドン、またはＢＨＡのうちの１つ以上を含む。
【０１０８】
本発明の組成物はまた、限定されないが、Ｌ−ヒスチジン、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（登録商
標）、ポロクサマー（Ｌｕｔｒｏｌ（登録商標）およびポロクサマー１８８等）、アスコ
ルビン酸、グルタチオン、透過促進剤（例えば、脂質、コール酸ナトリウム、アシルカル
ニチン、サリチル酸塩、胆汁酸塩混合物、脂肪酸ミセル、キレート化剤、脂肪酸、界面活
性剤、中鎖グリセリド）、プロテアーゼ阻害剤（例えば、ダイズトリプシン阻害剤、有機
酸）、ｐＨ低下剤および生物学的利用能を促進するのに有効な吸収促進剤（米国特許第６
０８６９１８号および同第５９１２０１４号に記載されるものを含むが、これらに限定さ
れない）、咀嚼錠用の材料（ブドウ糖、フルクトース、ラクトース一水和物、ラクトース
およびアスパルテーム、ラクトースおよびセルロース、マルトデキストリン、マルトース
、マンニトール、微結晶性セルロースおよびグアーガム、結晶ソルビトール等）；非経口
剤（マンニトールおよびポビドン等）；可塑剤（セバシン酸ジブチル、コーティング用可
塑剤、ポリビニルアセテートフタラート等）；粉末潤滑剤（ベヘン酸グリセリル等）；軟
ゼラチンカプセル剤（ソルビトール特殊溶液等）；コーティング用球体（砂糖球等）；球
形化剤（ベヘン酸グリセリルおよび微結晶性セルロース等）；懸濁／ゲル化剤（カラゲナ
ン、ゲランガム、マンニトール、微結晶性セルロース、ポビドン、デンプングリコール酸
ナトリウム、キサンタンガム等）；甘味剤（アスパルテーム、アスパルテームおよびラク
トース、ブドウ糖、フルクトース、蜂蜜、マルトデキストリン、マルトース、マンニトー
ル、糖蜜、結晶ソルビトール、ソルビトール特殊溶液、スクロース等）；湿式造粒剤（炭
酸カルシウム、無水ラクトース、ラクトース一水和物、マルトデキストリン、マンニトー
ル、微結晶性セルロース、ポビドン、デンプン等）、キャラメル、カルボキシメチルセル
ロースナトリウム、チェリークリーム香料およびチェリー香料、無水クエン酸、クエン酸
、粉砂糖、Ｄ＆Ｃ赤色３３号、Ｄ＆Ｃ黄色１０号アルミニウムレーキ、エデト酸二ナトリ
ウム、１５％エチルアルコール、ＦＤ＆Ｃ黄色６号アルミニウムレーキ、ＦＤ＆Ｃ青色１
号アルミニウムレーキ、ＦＤ＆Ｃ青色１号、ＦＤ＆Ｃ青色２号アルミニウムレーキ、ＦＤ
＆Ｃ緑色３号、ＦＤ＆Ｃ赤色４０号、ＦＤ＆Ｃ黄色６号アルミニウムレーキ、ＦＤ＆Ｃ黄
色６号、ＦＤ＆Ｃ黄色１０号、パルミトステアリン酸グリセロール、モノステアリン酸グ
リセリル、インジゴカルミン、レシチン、マンニトール、メチルおよびプロピルパラベン
、グリチルリチン酸モノアンモニウム、天然および人工オレンジ香料、医薬品用グレーズ
、ポロクサマー１８８、ポリデキストロース、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０
、ポリビドン、α化コーンスターチ、α化デンプン、赤色酸化鉄、サッカリンナトリウム
、カルボキシメチルエーテルナトリウム、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム、リン酸
ナトリウム、イチゴ香料、合成黒色酸化鉄、合成赤色酸化鉄、二酸化チタン、および白蝋
を含む、他の賦形剤、薬剤、およびそのカテゴリーを含むことができる。
【０１０９】
いくつかの実施形態において、明細書に記載されるペプチドと、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、
Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｋ＋、Ｎａ＋、もしくはＡｌ３＋、それらの組み合わせ、および／
または立体障害１級アミンから選択される１つ以上の薬剤とを含む医薬組成物が提供され
る。
【０１１０】
さらなる実施形態において、薬剤は、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、もしくはＺｎ２＋、または
それらの組み合わせである。いくつかの実施形態において、カチオンは、限定されないが
、酢酸マグネシウム、塩化マグネシウム、リン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、酢酸
カルシウム、塩化カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、酢酸亜鉛、塩化亜鉛
、リン酸亜鉛、硫酸亜鉛、酢酸マンガン、塩化マンガン、リン酸マンガン、硫酸マンガン
、酢酸カリウム、塩化カリウム、リン酸カリウム、硫酸カリウム、酢酸ナトリウム、塩化
ナトリウム、リン酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、酢酸アルミニウム、塩化アルミニウム
、リン酸アルミニウム、または硫酸アルミニウムとして提供される。さらなる実施形態に
おいて、カチオンは、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カル
シウム、酢酸亜鉛、塩化マンガン、塩化カリウム、塩化ナトリウム、または塩化アルミニ
ウムとして提供される。他の実施形態において、カチオンは、塩化カルシウム、塩化マグ
ネシウム、または酢酸亜鉛として提供される。
【０１１１】
別の実施形態において、薬剤は、立体障害１級アミンである。
【０１１２】
さらなる一実施形態において、立体障害１級アミンは、アミノ酸である。
【０１１３】
さらなる一実施形態において、アミノ酸は、天然型アミノ酸である。
【０１１４】
さらなる一実施形態において、天然型アミノ酸は、ヒスチジン、フェニルアラニン、ア
ラニン、グルタミン酸、アスパラギン酸、グルタミン、ロイシン、メチオニン、アスパラ
ギン、チロシン、スレオニン、イソロイシン、トリプトファン、グリシン、およびバリン
からなる群から選択され、さらに、天然型アミノ酸は、ロイシン、イソロイシン、アラニ
ン、またはメチオニンである。
【０１１５】
さらなる一実施形態において、天然型アミノ酸は、ロイシンである。別の実施形態にお
いて、立体障害１級アミンは、非天然型アミノ酸（例えば、１−アミノシクロヘキサンカ
ルボン酸、ランタニン（ｌａｎｔｈａｎｉｎｅ）、またはテアニン）である。
【０１１６】
さらなる一実施形態において、立体障害１級アミンは、シクロヘキシルアミン、２−メ
チルブチルアミン、または高分子アミン（例えば、キトサン）である。
【０１１７】
別の実施形態において、１つ以上の立体障害１級アミンが組成物中に使用されてもよい
。
【０１１８】
場合によっては、立体障害１級アミンは、式
【化４１】
2020128424.tif 000062
を有し、式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は、Ｈ、Ｃ（Ｏ）ＯＨ、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ
１−Ｃ６アルキルエーテル、Ｃ１−Ｃ６アルキルチオエーテル、Ｃ１−Ｃ６アルキルカル
ボン酸、Ｃ１−Ｃ６アルキルカルボキシルアミド、およびアルキルアリールから独立して
選択され、いずれの基もハロゲンまたはアミノで単置換または多置換され得るが、但し、
Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３のうちの２つ以下がＨである。
【０１１９】
別の実施形態において、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３のうちの１つ以下がＨである。
【０１２０】
他の実施形態において、薬学的に許容される担体と、ペプチドと、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋
、Ｚｎ２＋、Ｍｎ２＋、Ｋ＋、Ｎａ＋、もしくはＡｌ３＋、またはそれらの混合物から選
択されるカチオンと、立体障害１級アミンとを含む医薬組成物が提供される。
【０１２１】
一実施形態において、カチオンは、Ｍｇ２＋、Ｃａ２＋、もしくはＺｎ２＋、またはそ
れらの混合物である。
【０１２２】
さらなる一実施形態において、医薬組成物は、薬学的に許容される結合剤ならびに／ま
たは、薬学的に許容される流動促進剤、滑沢剤、もしくは流動促進剤および滑沢剤の両方
として作用する添加剤、ならびに／または抗酸化剤をさらに含む。
【０１２３】
いくつかの実施形態において、医薬組成物は、担体に適用される。
【０１２４】
いくつかの実施形態において、担体は、充填剤である。
【０１２５】
場合によっては、担体に適用される水溶液中のカチオン：立体障害１級アミン：ペプチ
ドのモル比は、５〜１００：５〜５０：１である。場合によっては、カチオン：立体障害
１級アミンのモル比は、２：１以上（例えば、５：１〜２：１）であってもよい。したが
って、場合によっては、担体に適用されるカチオン：立体障害１級アミン：ペプチドのモ
ル比は、１００：５０：１、１００：３０：１、８０：４０：１、８０：３０：１、８０
：２０：１、６０：３０：１、６０：２０：１、５０：３０：１、５０：２０：１、４０
：２０：１、２０：２０：１、１０：１０：１、１０：５：１、または５：１０：１であ
る。結合剤、例えば、メチルセルロースが、担体に適用されるＧＣ−Ｃ作動薬ペプチド溶
液中に存在する場合、それは、０．５％〜２．５重量％（例えば、０．７％〜１．７％、
または０．７％〜１％、または１．５％、または０．７％）で存在し得る。
【０１２６】
さらなる一実施形態において、医薬組成物は、薬学的に許容される結合剤もしくは添加
剤、ならびに／または薬学的に許容される流動促進剤、滑沢剤、もしくは流動促進剤およ
び滑沢剤の両方として作用する添加剤、ならびに／または抗酸化剤をさらに含む。
【０１２７】
本発明による好適な医薬組成物は、一般に、意図される用途に依存して幅広い最終濃度
を与えるように、薬学的に許容される希釈剤または賦形剤、例えば、無菌水溶液等ととも
に、ある量の活性化合物（複数可）を含む。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅ
ｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ  （１８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌ
ｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，  １９９５）によって例示されるような調製技術は、一
般に、当該技術分野において周知である。
【０１２８】
本明細書に記載される組成物は、治療される疾患の重症度および種類に依存して、全身
的または局所的に、例えば、経口的に（例えば、カプセル剤、散剤、溶剤、懸濁剤、錠剤
、舌下剤等を使用）、吸入によって（例えば、エアロゾル、ガス、吸入器、ネブライザー
等を用いる）、耳に（例えば、点耳剤を使用）、局部的に（例えば、クリーム剤、ゲル剤
、塗布剤、ローション剤、軟膏剤、ペースト剤、経皮パッチ等を使用）、眼に（例えば、
点眼薬、点眼ゲル、点眼軟膏を用いる）、経直腸的に（例えば、浣腸または坐剤を使用）
、経鼻的に、口腔内に、膣内に（例えば、膣洗浄、子宮内デバイス、膣坐剤、膣リングも
しくは錠剤等を使用）、埋め込み型貯留容器等を介して、または非経口的に、投与されて
もよい。本明細書において使用される用語「非経口的」は、限定されないが、皮下、静脈
内、筋肉内、関節内、滑液内、胸骨内、くも膜下腔内、肝内、病巣内、および頭蓋内への
注射または注入技術を含む。好ましくは、組成物は、経口的に、腹腔内に、または静脈内
に投与される。
【０１２９】
消化器疾患の治療のために、本明細書に記載されるペプチドは、例えば、錠剤、カプセ
ル剤、所定量の有効成分のペレットを収容する小袋、ゲル剤、ペースト剤、シロップ剤、
ボーラス剤、舐剤、スラリー剤、散剤、凍結乾燥粉末剤、顆粒剤として、水溶液または非
水溶液中の液剤もしくは懸濁剤として、水中油型乳液剤または油中水型乳液剤として、リ
ポソーム製剤を介して（例えば、欧州特許第ＥＰ７３６２９９号を参照のこと）、あるい
はいずれか他の形態で、好ましくは経口的に投与される。経口投与組成物は、結合剤、潤
沢剤、不活性希釈剤、潤滑性、界面活性、または分散性の薬剤、香味剤、および保湿剤を
含むことができる。錠剤等の経口投与製剤は、任意選択的に、コーティングされているか
または分割線が入っていてもよく、中の有効成分の持続、遅延、または放出制御を提供す
るように製剤化され得る。
【０１３０】
ペプチドは、限定されないが、本明細書に記載される薬剤を含む消化器疾患を治療する
ために使用される他の薬剤とともに併用投与することができる。
【０１３１】
別の態様において、好適な医薬組成物は、１つ以上の他の治療剤を含んでもよい。その
ような治療剤として、限定されないが、鎮痛剤；プロトンポンプ阻害剤、酸ポンプ拮抗薬
、Ｈ２受容体拮抗薬を含む抗分泌剤；ＰＤＥ５阻害剤；ＧＡＢＡ−Ｂ拮抗薬；胆汁酸封鎖
剤；運動促進剤および機能調整剤；抗うつ剤；抗生物質；制吐剤；ならびに粘膜保護材が
挙げられる。
【０１３２】
治療方法
種々の実施形態において、本明細書に記載されるペプチドおよび組成物は、患者の消化
器疾患の治療に有用である。
【０１３３】
いくつかの実施形態において、消化器疾患は、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、便秘、機能
性消化管障害、胃食道逆流症、機能性胸焼け、消化不良、内臓痛、胃不全麻痺、慢性偽性
腸閉塞、偽性結腸閉塞、クローン病、潰瘍性大腸炎、および炎症性腸疾患からなる群から
選択される。
【０１３４】
さらなる一実施形態において、消化器疾患は便秘である。便秘は、慢性便秘であるか、
特発性便秘であるか、術後イレウスに起因するか、またはアヘン剤の使用によって引き起
こされ得る。便秘を定義する臨床的に許容される基準は、排便回数、便の硬さ、および排
便の容易さを含む。便秘の一般的な定義の１つは、１週間に３回未満の排便である。他の
定義は、異常に硬い便または過度のいきみを必要とする排便を含む（Ｓｃｈｉｌｌｅｒ  
２００１，Ａｌｉｍｅｎｔ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ  １５：７４９−７６３）。
便秘は、特発性（機能性便秘または大腸通過遅延型便秘）であり得るか、または神経性、
代謝性、もしくは内分泌性の疾患を含む他の原因に続発し得る。これらの疾患は、真性糖
尿病、甲状腺機能低下症、甲状腺機能亢進症、低カルシウム血症、多発性硬化症、パーキ
ンソン病、脊髄傷害、神経線維腫症、自律神経障害、シャーガス病、ヒルシュスプルング
病、および嚢胞性線維症を含む。便秘はまた、手術の結果（術後イレウス）であり得るか
、または、鎮痛薬（オピオイド等）、抗圧剤、抗痙攣剤、抗うつ剤、鎮痙薬、および抗精
神病薬等の薬物の使用に起因し得る。
【０１３５】
他の実施形態において、消化器疾患は過敏性腸症候群（ＩＢＳ）である。過敏性腸症候
群は、便秘型過敏性腸症候群（ｃ−ＩＢＳ）、下痢型過敏性腸症候群（ｄ−ＩＢＳ）、ま
たは２つの過敏性腸症候群の交互型（ａ−ＩＢＳ）であり得る。
【０１３６】
他の実施形態において、消化器疾患は消化不良である。
【０１３７】
他の実施形態において、消化器疾患は胃不全麻痺である。胃不全麻痺は、特発性、糖尿
病性、または術後の胃不全麻痺から選択することができる。
【０１３８】
さらに他の実施形態において、消化器疾患は慢性偽性腸閉塞である。
【０１３９】
他の実施形態において、消化器疾患はクローン病である。
【０１４０】
いくつかの実施形態において、消化器疾患は潰瘍性大腸炎である。
【０１４１】
いくつかの実施形態において、消化器疾患は炎症性腸疾患である。
【０１４２】
別の実施形態において、消化器疾患は内臓痛である。
【０１４３】
さらなる一実施形態において、本発明は、患者に本明細書に記載されるペプチドを含む
医薬組成物を投与することを含む、患者の胃腸痛または内臓痛を軽減するための方法を特
徴とする。本明細書に記載されるペプチド作動薬は、消化器疾患に関連する内臓痛または
別の疾患に関連する疼痛の治療、予防、または軽減のために、単独で、または併用療法に
おいて使用することができる。
【０１４４】
別の実施形態において、本発明は、患者に本明細書に記載される精製されたペプチドを
含む医薬組成物を投与することを含む、消化管の炎症、例えば、消化器疾患または感染ま
たは何らかの他の疾患に関連する炎症を含む炎症を治療するための方法を特徴とする。
【０１４５】
別の実施形態において、本発明は、腸グアニル酸シクラーゼ（ＧＣ−Ｃ）受容体の作動
薬を、経口的、直腸坐剤により、または非経口的のいずれかで投与することを含む、消化
器疾患を治療するための方法を特徴とする。
【０１４６】
さらに別の実施形態において、本発明は、腸グアニル酸シクラーゼ（ＧＣ−Ｃ）受容体
の作動薬を投与することを含む、消化器疾患を治療するための方法を特徴とする。
【０１４７】
別の実施形態において、本発明は、生物試料、組織（例えば、腸管粘膜）、もしくは細
胞（例えば、ＧＣ−Ａ受容体を保持する細胞）、または全生物におけるグアニル酸シクラ
ーゼＣ（ＧＣ−Ｃ）受容体の活性を増加させる方法を特徴とする。
【０１４８】
別の態様において、本発明は、試料、組織、または生物を本明細書に記載されるペプチ
ドと接触させることにより、生物試料、組織（例えば、腸管粘膜）、もしくは細胞（例え
ば、ＧＣ−Ａ受容体を保持する細胞）、または全生物における環状グアノシン３’−一リ
ン酸（ｃＧＭＰ）のレベルを増加させる方法を特徴とする。
【０１４９】
本明細書に記載されるペプチドＧＣ−Ｃ受容体作動薬は、他の薬剤と併用投与すること
ができる。例えば、ペプチドは、鎮痛性のペプチドまたは化合物とともに投与することが
できる。鎮痛性のペプチドまたは化合物は、本明細書に記載されるペプチドに共有結合的
に付着していてもよいか、または、併用療法において本明細書に記載されるペプチドと一
緒にまたは連続的に投与される別個の薬剤であってもよい。本明細書に記載されるペプチ
ドはまた、抗うつ剤、運動促進剤または機能調整剤、制吐剤、抗生物質、プロトンポンプ
阻害剤、酸遮断薬（例えば、ヒスタミンＨ２受容体拮抗薬）、酸ポンプ拮抗薬、ＰＤＥ５
阻害剤、ＧＡＢＡ−Ｂ作動薬、胆汁酸封鎖剤、および粘膜保護剤を含む、ＧＩ疾患を治療
するために使用される他の薬剤と併用投与されてもよい。
【０１５０】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載されるペプチドとともに使用され得る有
用な鎮痛剤は、Ｃａチャネル遮断薬（例えば、ジコノチド）、５ＨＴ受容体拮抗薬（例え
ば、５ＨＴ３、５ＨＴ４、および５ＨＴ１受容体拮抗薬）、５ＨＴ４作動薬（例えば、テ
ガセロッド［Ｚｅｌｎｏｒｍ（登録商標）］、モサプリド、ザコプリド、シサプリド、レ
ンザプリド、プルカロプリド［Ｒｅｓｏｌｏｒ（登録商標）］、ＢＩＭＵ  １およびＢＩ
ＭＵ  ８等のベンズイミダゾロン誘導体、ならびにリレキザプリド）、５ＨＴ１作動薬（
例えば、スマトリプタンおよびブスピロン）、オピオイド受容体作動薬（例えば、ロペラ
ミド、フェドトジン、エンケファリンペンタペプチド、モルヒネ、ジフェニルオキシラー
ト、フラケファミド、トリメブチン、およびフェンタニル）、ＣＣＫ受容体作動薬（例え
ば、ロキシグルミドおよびデクスロキシグルミド）、ＮＫ１受容体拮抗薬（例えば、アプ
レピタント、ボホピタント、エズロピタント、Ｒ−６７３（Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ  Ｒ
ｏｃｈｅ  Ｌｔｄ）、ＳＲ−４８９６８およびＳＲ−１４０３３（Ｓａｎｏｆｉ  Ｓｙｎ
ｔｈｅｌａｂｏ）、ＣＰ−１２２，７２１（Ｐｆｉｚｅｒ，Ｉｎｃ．）、ＧＷ６７９７６
９（Ｇｌａｘｏ  Ｓｍｉｔｈ  Ｋｌｉｎｅ）、ならびにＴＡＫ−６３７（Ｔａｋｅｄａ／
Ａｂｂｏｔ））、ＮＫ２受容体拮抗薬（例えば、ネパデュタント、サレデュタント、ＧＷ
５９７５９９（Ｇｌａｘｏ  Ｓｍｉｔｈ  Ｋｌｉｎｅ）、ＳＲ−１４４１９０（Ｓａｎｏ
ｆｉ−Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ）、ならびにＵＫ−２９０７９５（Ｐｆｉｚｅｒ  Ｉｎｃ）
）、ＮＫ３受容体拮抗薬（例えば、オサネタント（ＳＲ−１４２８０１；Ｓａｎｏｆｉ−
Ｓｙｎｔｈｅｌａｂｏ）、ＳＲ−２４１５８６およびタルネタント）、ノルエピネフリン
−セロトニン再取り込み阻害剤（ＮＳＲＩ）（例えば、ミルナシプラン）、混合型および
選択的ドーパミン受容体拮抗薬（例えば、メトクロプラミド、イトプリド、ドンペリドン
）、バニロイドおよびカンナビノイド受容体作動薬、シアロルフィンおよびシアロルフィ
ン関連ペプチドが挙げられる。種々のクラスの鎮痛薬が文献に記載されている。
【０１５１】
いくつかの実施形態において、１つ以上の他の治療剤が、本明細書に記載されるペプチ
ドと組み合わせて使用されてもよい。そのような薬剤は、抗うつ剤、運動促進剤または機
能調整剤、制吐剤、抗生物質、プロトンポンプ阻害剤、酸遮断薬（例えば、ヒスタミンＨ
２受容体拮抗薬）、酸ポンプ拮抗薬、ＰＤＥ５阻害剤、ＧＡＢＡ−Ｂ作動薬、胆汁酸封鎖
剤、および粘膜保護剤を含む。
【０１５２】
抗うつ剤の例として、限定されないが、三環系抗うつ剤、例えば、アミトリプチリン（
Ｅｌａｖｉｌ（登録商標））、デシプラミン（Ｎｏｒｐｒａｍｉｎ（登録商標））、イミ
プラミン（Ｔｏｆｒａｎｉｌ（登録商標））、アモキサピン（Ａｓｅｎｄｉｎ（登録商標
））ノルトリプチリン等；選択的セロトニン再取り込み阻害剤（ＳＳＲＩ）、例えば、パ
ロキセチン（Ｐａｘｉｌ（登録商標））、フルオキセチン（Ｐｒｏｚａｃ（登録商標））
、セルトラリン（Ｚｏｌｏｆｔ（登録商標））、およびシトラロプラム（Ｃｅｌｅｘａ（
登録商標））等；ならびにドキセピン（Ｓｉｎｅｑｕａｎ（登録商標））およびトラゾド
ン（Ｄｅｓｙｒｅｌ（登録商標））等の他の抗うつ剤が挙げられる。
【０１５３】
運動促進剤および機能調整剤の例として、限定されないが、イトプリド、オクトレオチ
ド、ベタネコール、メトクロプラミド（Ｒｅｇｌａｎ（登録商標））、ドンペリドン（Ｍ
ｏｔｉｌｉｕｍ（登録商標））、エリスロマイシン（およびその誘導体）、ならびにシサ
プリド（Ｐｒｏｐｕｌｓｉｄ（登録商標））が挙げられる。制吐剤の例として、限定され
ないが、プロクロルペラジンが挙げられる。
【０１５４】
使用され得る抗生物質の例として、ピロリ菌感染症を治療するために使用され得るもの
、例えば、アモキシシリン、テトラサイクリン、メトロニダゾール、またはクラリスロマ
イシン等が挙げられる。エリスロマイシンおよびその誘導体等の他の抗生物質も、本明細
書に記載されるペプチドと組み合わせて使用され得る。
【０１５５】
プロトンポンプ阻害剤の例として、限定されないが、オメプラゾール（Ｐｒｉｌｏｓｅ
ｃ（登録商標））、エソメプラゾール（Ｎｅｘｉｕｍ（登録商標））、ランソプラゾール
（Ｐｒｅｖａｃｉｄ（登録商標））、パントプラゾール（Ｐｒｏｔｏｎｉｘ（登録商標）
）、およびラベプラゾール（Ａｃｉｐｈｅｘ（登録商標））が挙げられる。Ｈ２受容体遮
断薬の例として、限定されないが、シメチジン、ラニチジン、ファモチジン、およびニザ
チジンが挙げられる。酸ポンプ拮抗薬の例として、限定されないが、レバプラザン、ＣＳ
−５２６（Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．（２００７）３２３：３０８−
３１７）、ＰＦ−０３７１６５５６（Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．（２
００９）３２８（２）：６７１−９）、およびＹＨ１８８５（Ｄｒｕｇ  Ｍｅｔａｂ．Ｄ
ｉｓｐｏｓ．（２００１）２９（１）：５４−９）が挙げられる。
【０１５６】
ＰＤＥ５阻害剤の例として、限定されないが、アバナフィル、ロデナフィル、ミロデナ
フィル、シルデナフィルクエン酸塩、タダラフィル、バルデナフィル、およびウデナフィ
ルが挙げられる。ＧＡＢＡ−Ｂ作動薬として、限定されないが、バクロフェンおよびＸＰ
１９９８６（ＣＡＳ登録番号８４７３５３−３０−４）が挙げられる。胆汁酸封鎖剤の例
として、限定されないが、ＧＴ１０２−２７９、コレスチラミン、コレセベラム、コレセ
ベラム塩酸塩、ウルソデオキシコール酸、コレスチポール、コレスチラン、セベラマー、
エピクロルヒドリンと架橋したポリジアリルアミン、架橋デキストランのジアルキルアミ
ノアルキル誘導体、およびＮ−（シクロアルキル）アルキルアミンが挙げられる。粘膜保
護剤の例として、限定されないが、スクラルフェート（Ｃａｒａｆａｔｅ）、テプレノン
、ポラプレジンク、セトラキサート、および次サリチル酸ビスマスが挙げられる。
【０１５７】
併用療法は、それぞれが別々に製剤化されて投与される２つ以上の薬剤、例えば、本明
細書に記載されるペプチドおよび別の治療用ペプチドもしくは化合物を投与することによ
って、または２つ以上の薬剤を単一の製剤として投与することによって、達成することが
できる。他の組み合わせも併用療法に包含される。例えば、２つの薬剤を一緒に製剤化し
、第３の薬剤を含有する別の製剤と併せて投与することができる。併用療法において２つ
以上の薬剤が同時に投与されてもよいが、そうである必要はない。例えば、第１の薬剤（
または薬剤の組み合わせ）の投与が、第２の薬剤（または薬剤の組み合わせ）の投与に、
数分、数時間、数日、または数週間先行することができる。したがって、２つ以上の薬剤
は、互いの数分以内に、または互いに１、２、３、６、９、１２、１５、１８、もしくは
２４時間以内に、または互いに１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１２、１４
日以内に、または互いに２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０週間以内に投与
されてもよい。場合によっては、より長い間隔さえも可能である。多くの場合、併用療法
に使用される２つ以上の薬剤が患者の体内に同時に存在することが望ましいが、そうであ
る必要はない。
【０１５８】
投与量
成人のヒトの用量範囲は、一般に、本明細書に記載されるペプチドの５μｇ〜１００ｍ
ｇ／日の経口投与であってもよい。錠剤、カプセル剤、または個別の単位で提供される他
の提示形態は、そのような投与量でまたは該投与量の倍量として有効な本明細書に記載さ
れる化合物の量、例えば、２５μｇ〜２ｍｇ、または約１００μｇ〜１ｍｇを含有する単
位を都合よく含有し得る。患者に処方される化合物の正確な量は、担当医師の責任に委ね
られる。しかしながら、用いられる用量は、患者の年齢および性別、治療される具体的な
疾患、ならびにその重症度を含む多数の要素に依存する。
【０１５９】
他の実施形態において、用量は、１日当たり経口で５０μｇ、６７．５μｇ、１００μ
ｇ、１３３μｇ、１４５μｇ、１５０μｇ、２００μｇ、２６６μｇ、２９０μｇ、３０
０μｇ、４００μｇ、５００μｇ、または６００μｇである。
【０１６０】
種々の実施形態において、投薬単位は、１日の任意の時間に食物とともに、１日の任意
の時間に食物なしで、一晩絶食した後に食物とともに（例えば、朝食とともに）、低脂肪
の軽食の後に就寝時に、投与される。
【０１６１】
特定の一実施形態において、投薬単位は、食物摂取（例えば、食事）の前または後に投
与される。
【０１６２】
さらなる一実施形態において、投薬単位は、食物摂取の約１５分から１時間前に投与さ
れる。
【０１６３】
種々の実施形態において、投薬単位は、１日１回、１日２回、１日３回、１日４回、１
日５回、または１日６回投与される。特定の実施形態において、投薬単位と１日用量は等
しい。
【０１６４】
投薬単位中の２つ以上の有効成分の各々の正確な量は、各構成成分の所望の投与量に依
存する。そのため、具体的な投与計画（例えば、投与のための特定の単位数および具体的
なタイミングを指定する投与計画）に従って投与されたときに、患者が単一構成成分のみ
を用いて治療された場合に送達されるのと同じ投与量の各構成成分を送達する投薬単位を
作製することが有用であり得る。
【０１６５】
他の状況において、患者が単一構成成分のみを用いて治療された場合に投与されるであ
ろう投与量よりも少ない投与量の１つ以上の構成成分を送達する投薬単位を作製すること
が望ましいかもしれない。
【０１６６】
最後に、患者が単一構成成分のみを用いて治療された場合に投与されるであろう投与量
よりも多い投与量の１つ以上の構成成分を送達する投薬単位を作製することが望ましいか
もしれない。
【０１６７】
医薬組成物は、限定されないが、本明細書に記載される賦形剤を含むさらなる成分を含
むことができる。特定の実施形態において、投薬単位の１つ以上の治療剤が、持続放出製
剤または制御放出製剤中に存在してもよく、さらなる治療剤が、持続放出製剤中に存在し
なくてもよい。例えば、本明細書に記載されるペプチドまたは作動薬は、制御放出製剤ま
たは持続放出製剤中のいずれかに存在し得るかまたはし得ない別の薬剤と同じ投薬単位で
、持続放出製剤または制御放出製剤中に存在してもよい。したがって、特定の実施形態に
おいて、本明細書に記載される薬剤のうちの１つ以上の即時放出と、１つ以上の別の薬剤
の制御放出とを提供することが望ましいかもしれない。
【０１６８】
本発明は、その特定の例示的な実施形態を参照して説明されてきた。しかしながら、当
業者は、上述の例示的な実施形態の形式以外の特定の形式において本発明を具現化するこ
とが可能であることを容易に理解するであろう。これは、本発明の主旨から逸脱すること
なく行われ得る。例示的な実施形態は、例示であるに過ぎず、決して限定的に解釈される
べきではない。本発明の範囲は、前述の説明によってではなく、むしろ添付の特許請求の
範囲およびその等価物によって定義される。
【実施例】
【０１６９】
本明細書に記載されるようなＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドまたはその薬学的に許容される塩
は、固相化学合成および天然の折り畳み（空気酸化）により、Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｅｐ
ｔｉｄｅ  Ｃｏｍｐａｎｙ（Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）によって調製された。場合によ
っては、本明細書に記載されるように合成した後にペプチドを修飾した。Ｃｙｓ１−α−
ケトンペプチドは、例えば、１．５Ｌのメタノール／ジメチルホルムアミド（９：１ｖ／
ｖ）および２８．８ｇの３，５−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−１，２−ベンゾキノン（１０当
量）を２０ｇ（１３．１ｍｍｏｌ）のリナクロチドに加え、室温で１時間撹拌することに
より合成した。ＨＰＬＣによりシッフ塩基の形成をモニタリングした。全てのリナクロチ
ドが消費されてから、１７Ｌの０．１Ｍ  ＨＣｌを加え、反応混合物を２日間撹拌した。
反応混合物を濾過し、ジクロロメタンで２回抽出し、得られた水溶液を調製スケールの逆
相ＨＰＬＣ用Ｃ−１８カラムに適用してＣｙｓ１−α−ケトンを精製した。調製用ＨＰＬ
Ｃに使用したＨＰＬＣカラムは、移動相Ａ（水中０．０５％酢酸）で平衡化した直径２イ
ンチのＣ１８カラムであった。１００ｍＬ／分の流束の移動相Ａで未結合材料を洗浄し、
６０分間にわたって、１０％から４０％の移動相Ｂ（アセトニトリル）の直線勾配でペプ
チド関連材料を溶出した。Ｃｙｓ１−ケトンを含有する画分をプールし、続いて凍結乾燥
により溶媒を除去した。
【０１７０】
実施例１：ＧＣ−Ｃ活性の分析のためのＴ８４細胞におけるｃＧＭＰの蓄積
ヒト結腸癌細胞株であるＴ８４細胞をＡＴＣＣ（Ｐ／Ｎ  ＣＣＬ−２４８）から入手し
、Ｔ−１５０フラスコ中で６０〜７０％の培養密度まで培養した。トリプシンを用いて単
層を剥離し、９６ウェル組織培養プレート（Ｃｏｓｔａｒ、Ｐ／Ｎ  ３５９６）に２．０
×１０５細胞／ウェルの細胞密度で播種するために使用し、５％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）
およびＬ−グルタミンを補充した２ｍＭダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）／栄養
混合物Ｆ−１２（５０／５０）（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ、それぞれ、Ｐ／Ｎ  １０−０９２
−ＣＶ、３５−０１５０ＣＶ、および２５−００５−Ｃｌ）を用いて、５％二酸化炭素環
境において一晩増殖させた。
【０１７１】
一晩のインキュベーション後、２．０×１０５細胞／ウェルで播種した９６ウェルプレ
ートを、栄養補助剤を加えていない０．２ｍＬのＤＭＥＭ（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ、Ｐ／Ｎ
１０−０１３−ＣＶ）で２回洗浄した。いずれのホスホジエステラーゼ活性も阻害する
ために、ＤＭＥＭ中、０．１８０ｍＬの１ｍＭ  ３−イソブチル−１−メチルキサンチン
（ＩＢＭＸ；Ｓｉｇｍａ  Ｐ／Ｎ  Ｉ５８７９）とともに３７℃で１０分間細胞をインキ
ュベートした。Ｈａｍｉｌｔｏｎ  Ｍｉｃｒｏｌａｂ  Ｒｏｂｏｔ（Ｍｏｄｅｌ  ＳＴＡ
Ｒｌｅｔ）を使用して、各被験物質について０．１〜１０，０００ｎＭ（最終濃度）の範
囲の検量線を準備した。０．０２ｍＬの各標準物質を、９６ウェルプレート内でＤＭＥＭ
中の１ｍＭ  ＩＢＭＸ（０．１８０ｍＬ）とともに３７℃で３０分間インキュベートする
ことにより、ＧＣ−Ｃ活性アッセイを行った。インキュベーション後、上清を除去し、氷
上で３０分間、０．１Ｍ冷塩酸（ＨＣｌ）を用いて細胞を溶解させた。１７５μＬ／ウェ
ルの体積の各ライセートを新しい９６ウェルプレート（Ｗａｔｅｒｓ、Ｐ／Ｎ  １８６０
０２４８１）に移し、１，０００×ｇで１０分間遠心分離し、あらゆる細胞片を除去した
。得られた上清を９０μＬのアリコートで新しい９６ウェルプレートに写し、９０μＬの
１Ｍ酢酸アンモニウムでｐＨ７に中和した。タンデム質量分析による検出とともに液体ク
ロマトグラフィーを使用して（ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ）、遠心分離および中和したＴ８４細胞
ライセートを分析した。表１に概略が示される方法を使用して、各細胞ライセート試料中
のグアノシン３’，５’−環状一リン酸（ｃＧＭＰ）の濃度を定量化した。Ｓｉｇｍａか
ら購入した環状ＧＭＰ（Ｐ／Ｎ  Ｇ６１２９）を使用して、０．１Ｍ  ＨＣｌにおける検
量線を準備した。各標準物質を等しい体積の酢酸アンモニウムで中和し、１〜１，０２４
ｎＭ（最終濃度）の範囲のｃＧＭＰ検量線を作製した。
【０１７２】
ＬＣ／ＭＳ条件を使用して各試料の環状ＧＭＰの濃度を測定し（下の表１）、標準曲線
を計算した。分析物ピーク面積を用いて１／ｘ２で重み付けした線形較正曲線を生成し、
それを用いて各試料中のｃＧＭＰ濃度を推定した。ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐｒｉｓｍ  Ｖｅ
ｒｓｉｏｎ  ５．０１（ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｓｏｆｔｗａｒｅ、Ｓａｎ  Ｄｉｅｇｏ，Ｃ
Ａ）を使用して、各被験物質について５０％有効濃度（ＥＣ５０）値を生成した。ＥＣ５
０値の差が統計的に有意であることを判定するために、ＧｒａｐｈＰａｄソフトウェアの
Ｆ検定を用いて各製剤分解物の平均活性曲線をリナクロチド対照と比較した。これらの比
較のために、ｐ値を決定し、０．０５以上の値がＧＣ−Ｃ作動薬の活性における有意な差
を示すものとした。
【表１】
2020128424.tif 000063
【０１７３】
実施例２：Ｔ８４細胞中のＧＣ−Ｃ受容体に対する例示的ペプチドの相対結合親和性
ヒト結腸上皮細胞（Ｔ８４）上の細胞表面ＧＣ−Ｃ受容体上の結合部位について、ペプ
チドが、既知のＧＣ−Ｃ作動薬であるブタ由来の熱安定性エンテロトキシン（ｐＳＴａ）
と競合する競合結合アッセイを用いて、グアニル酸シクラーゼ−Ｃ受容体（ＧＣ−Ｃ）に
対するリナクロチドおよびＣｙｓ１−α−ケトンの相対結合親和性を測定した。ｐＳＴａ
、すなわちＭＭ  ４１６２５１を１２５Ｉで放射標識し、その受容体結合の測定を可能に
した。種々の濃度の各ペプチド（０．１〜３，０００ｎＭ）を、ダルベッコ変法イーグル
培地（ＤＭＥＭ）、０．５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、２．０×１０５のＴ８４細
胞、および１７０ｐＭ［１２５Ｉ］−ｐＳＴａ（２００，０００ｃｐｍ）を含有する０．
２０ｍＬの反応混合物に加えることにより競合結合アッセイを行った。３７℃で６０分間
インキュベーションした後、真空濾過により反応混合物をガラス繊維フィルタに適用し、
受容体に結合した材料を単離した。次いで、シンチレーション測定により、フィルタ上に
捕捉された結合放射性リガンドの濃度を測定した。各ペプチドについて、最も少ない量の
競合物質との反応を用いて放射性リガンドの最大特異的結合を測定した。３，０００ｎｍ
の各試験ペプチドを含有する反応物において、［１２５Ｉ］−ｐＳＴａの非特異的結合を
測定した。そのデータを使用して競合放射性リガンドの結合曲線を構築し、ＩＣ５０およ
びＫｉ値によって測定されるリナクロチドおよびＣｙｓ１−α−ケトンの相対結合親和性
を測定した。
【０１７４】
リナクロチドおよびＣｙｓ１−α−ケトンのどちらも、Ｔ８４細胞上の細胞表面ＧＣ−
Ｃ受容体への［１２５Ｉ］−ｐＳＴａの特異的結合を競合的に阻害した。阻害定数（Ｋｉ
）によって測定されるそれらの相対結合親和性は次の通りであった：リナクロチドのＫｉ
＝３．９±１．６ｎＭ、およびＣｙｓ１−α−ケトンのＫｉ＝５．２±０．９ｎＭ（図１
）。
【０１７５】
実施例３：例示的ペプチドによって誘導されたＴ８４細胞におけるｃＧＭＰの反応
Ｔ８４細胞におけるグアニル酸シクラーゼ−Ｃ受容体（ＧＣ−Ｃ）作動薬の活性につい
て、リナクロチドおよびＣｙｓ１−α−ケトンを次の通りに試験した。９６ウェルプレー
トの各ウェルにおいて、０．１８ｍＬのダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）中、１
ｍＭ  ３−イソブチル−１−メチルキサンチン（ＩＢＭＸ）とともに約２００，０００個
のＴ８４細胞／ウェルを最初に３７℃で１０分間インキュベートした。各ペプチドを０．
１〜１０，０００ｎＭの範囲の最終濃度まで希釈し、Ｔ８４細胞を含有する９６ウェルプ
レートに０．０２ｍＬの各希釈液を２通りに加え、ウェル当たりの最終体積を０．２ｍＬ
とした。ペプチド反応物を３７℃で３０分間インキュベートした。インキュベーション後
、上清を除去して廃棄し、氷上で３０分間、０．１Ｍ冷塩酸（ＨＣｌ）を用いて細胞を溶
解させた。遠心分離により細胞片を除去し、タンデム質量分析とともに液体クロマトグラ
フィーを使用して、各ライセート中のグアノシン３’，５’−環状一リン酸（ｃＧＭＰ）
の濃度を測定した。そのデータを使用して用量反応曲線を構築し、各被験物質について５
０％有効濃度（ＥＣ５０）を計算した。
【０１７６】
リナクロチドおよびＣｙｓ１−α−ケトンは、細胞内ｃＧＭＰの増加によって測定され
るように、Ｔ８４細胞におけるＧＣ−Ｃ作動薬の活性を示した（図２）。リナクロチドお
よびＣｙｓ１−α−ケトンのＥＣ５０値は、それぞれ、３１５±１０５ｎＭおよび３５２
±５５ｎＭであった。Ｆ検定を用いたＣｙｓ１−α−ケトンの用量反応曲線に対するリナ
クロチドの用量反応曲線の比較により、ＥＣ５０値には統計的に差がないことが示された
（ｐ＝０．８８８４）。
【０１７７】
実施例４：例示的ペプチドの含有量および純度の測定
Ｃｙｓ１−α−ケトンペプチド
２２４ｍｇのＡｖｉｃｅｌビーズ上に噴霧された１ｍｇのリナクロチドを含有する２０
ｇの製剤ビーズを、４０℃、７５％相対湿度で２か月間インキュベートすることにより、
（参照により本明細書に組み込まれる米国特許第２０１０／００４８４８９号に記載され
るような）リナクロチド製剤を圧縮した。ボルテックス混合機中、２０ｍＬの０．１Ｎ  
ＨＣｌとともに室温で１時間緩やかに撹拌することにより、ビーズからペプチド関連材料
を抽出した。得られた懸濁液を１，０００×ｇで５分間遠心分離してビーズをペレット化
し、抽出されたペプチドを含有する上清を凍結乾燥した。乾燥した試料を２．５ｍＬの０
．１Ｎ  ＨＣｌ中で再構成し、Ｃｙｓ−ａ−ケトンを単離し、以下の方法を使用して調製
用ＨＰＬＣにより精製した：ＹＭＣ  Ｐｒｏ（商標）Ｃ１８カラム（寸法：３．０×１５
０ｍｍ、３．５ｕｍ、１２０Å：Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐ．、Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）ま
たはその等価物を使用して４０℃に維持する。移動相Ａ（ＭＰＡ）は、９８：２の水／０
．１％トリフルオロ酢酸を含有するアセトニトリルからなり、移動相Ｂ（ＭＰＢ）は、５
：９５の水／０．１％トリフルオロ酢酸を含有するアセトニトリルからなる。ペプチドの
溶出は、１２分で８２％から７８％へのＭＰＡおよび１８％から２２％へのＭＰＢの勾配
、続いて１分で５０％のＭＰＡおよび５０％のＭＰＢまでの傾斜、５０％のＭＰＡおよび
５０％のＭＰＢでの３分間の維持、続いて８２％のＭＰＡおよび１８％のＭＰＢでの７分
間の洗浄により達成される。流束は、０．６ｍＬ／分であり、検出は、２２０ｎｍのＵＶ
により達成される。
【０１７８】
画分を手で回収し、Ｃｙｓ１−ａ−ケトンを含有する画分をプールして凍結乾燥した。
乾燥した残渣を１．６ｍＬの水中で再構成して最終濃度を０．５ｍｇ／ｍＬとし、−２０
℃で冷凍保存した。後述の方法を用いた分析ＨＰＬＣにより精製したＣｙｓ１−ａ−ケト
ンのアリコートを試験し、純度が９０．７％であると決定した。
【０１７９】
本発明のペプチドの含有量および純度は、Ｃｈｅｍｓｔａｔｉｏｎ  Ｒｅｖ  Ａ．０９
．０３ソフトウェアまたはその等価物を用いたＡｇｉｌｅｎｔ  Ｓｅｒｉｅｓ  １１００
ＬＣ  Ｓｙｓｔｅｍを使用して、逆相勾配液体クロマトグラフィーによって決定され得
る。ＹＭＣ  Ｐｒｏ（商標）Ｃ１８カラム（寸法：３．０×１５０ｍｍ、３．５ｕｍ、１
２０Å：Ｗａｔｅｒｓ  Ｃｏｒｐ．、Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ）またはその等価物を使用し
て４０℃に維持する。移動相Ａ（ＭＰＡ）は、０．１％トリフルオロ酢酸を含む水からな
り、移動相Ｂ（ＭＰＢ）は、９５％アセトニトリル：０．１％トリフルオロ酢酸を含む５
％水からなる。ペプチドの溶出は、０％のＭＰＢで４分、続いて１０％のＭＰＢで５分、
続いて２３％のＭＰＢで３４分、続いて３４％のＭＰＢで６分、続いて８０％のＭＰＢで
１０分の勾配で達成される。１分で０％のＭＰＢに戻し、続いて１００％のＭＰＡに７分
間保持することにより、カラムの再平衡化を行う。流束は、０．６ｍＬ／分であり、検出
は、２２０ｎｍのＵＶにより達成される。
【０１８０】
ＲＰ−ＨＰＬＣによるリナクロチドおよびＣｙｓ１−α−ケトン生成物の分析の例を図
３に示す
【０１８１】
調製した試料中のペプチド濃度を、同様に調製したペプチド外部標準に対して決定する
ことにより、精製したペプチドの含有量を測定した。
他の実施形態
【０１８２】
本開示において言及した全ての刊行物および特許は、各個々の刊行物または特許出願が
参照によって組み込まれていることが具体的にかつ個別に示されている場合と同じ程度に
、参照によって本明細書に組み込まれる。参照によって組み込まれた特許または刊行物の
いずれかにおける用語の意味が、本開示において使用される用語の意味と矛盾する場合、
本開示における用語の意味が支配的であることが意図される。さらに、上記の議論は、本
発明の例示的な実施形態を開示および説明しているに過ぎない。当業者は、そのような考
察ならびに添付の図面および特許請求の範囲から、以下の特許請求の範囲に定義されるよ
うな本発明の主旨および範囲から逸脱することなく、種々の修正および変更が行われ得る
ことを容易に認識するであろう。
【図１】
2020128424.tif 000064
【図２】
2020128424.tif 000065
【図３】
2020128424.tif 000066
【配列表】
2020128424000001.app
【外国語明細書】
2020128424000001.pdf