(57)【要約】【課題】簡単な装置構成で、バイオリアクタ内の中空糸への細胞を播種又は細胞の採取に好適なバイオリアクタ、細胞培養装置及び細胞培養方法を提供する。【解決手段】筒状に形成され、内部に複数の中空糸６８が束ねられた中空糸モジュール７０を収容したリアクタハウジング６２と、前記リアクタハウジング６２の上流側に設けられ、前記中空糸６８の中空部に連通し培養液が流入する入口ポート５４が形成された入口側ハウジング６４と、前記リアクタハウジング６２の下流側に設けられ、前記中空糸６８の中空部に連通し前記培養液が流出する出口ポート５６が形成された出口側ハウジング６６と、前記入口側ハウジング６４と前記リアクタハウジング６２との間に設けられ、前記培養液を貯留するとともに、その容積を可変とすることが可能なように構成された貯留室７１と、を備える。【選択図】図１
2020171241.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
筒状に形成され、内部に複数の中空糸が束ねられた中空糸モジュールを収容したリアクタハウジングと、
前記リアクタハウジングの上流側に設けられ、前記中空糸の中空部に連通し培養液が流入する入口ポートが形成された入口側ハウジングと、
前記リアクタハウジングの下流側に設けられ、前記中空糸の中空部に連通し前記培養液が流出する出口ポートが形成された出口側ハウジングと、
前記入口側ハウジングと前記リアクタハウジングとの間に設けられ、前記培養液を貯留するとともに、その容積を可変とすることが可能なように構成された貯留室と、
を備えた、バイオリアクタ。
【請求項２】
請求項１記載のバイオリアクタであって、前記貯留室は、前記中空糸の延在方向に平行な軸方向に伸縮することで容積を可変とする、バイオリアクタ。
【請求項３】
請求項２記載のバイオリアクタであって、前記貯留室は、前記リアクタハウジングの断面と略同一断面で構成されている、バイオリアクタ。
【請求項４】
請求項２又は３記載のバイオリアクタであって、さらに、前記貯留室を前記軸方向に伸縮させる駆動装置を備えた、バイオリアクタ。
【請求項５】
請求項１〜４のいずれか１項に記載のバイオリアクタであって、前記貯留室は、一端が前記リアクタハウジングに接合され、他端が前記入口側ハウジングに接合された蛇腹部材により形成されている、バイオリアクタ。
【請求項６】
請求項１〜４のいずれか１項に記載のバイオリアクタであって、前記貯留室は、前記入口側ハウジングから延び出て前記リアクタハウジングに摺動可能な側壁部の内側に形成されている、バイオリアクタ。
【請求項７】
請求項２〜４のいずれか１項に記載のバイオリアクタであって、前記入口側ハウジングの側壁部が前記軸方向に長く形成され、前記入口側ハウジングの内部には内部の空間を仕切るとともに前記軸方向に摺動可能なピストンが配設され、前記貯留室は前記ピストンと前記中空糸モジュールとの間に形成されている、バイオリアクタ。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載のバイオリアクタと、
前記出口ポートから流出した前記培養液を前記入口ポートに循環させる第１循環流路と、
を備えた、細胞培養装置。
【請求項９】
請求項８記載の細胞培養装置であって、前記第１循環流路に前記バイオリアクタの前記貯留室の伸縮に伴う前記培養液の量の変動を吸収するバッファ部が設けられている、細胞培養装置。
【請求項１０】
請求項８又は９記載の細胞培養装置であって、前記第１循環流路には、前記バイオリアクタの前記貯留室の前記培養液の逆流を阻止する逆止弁が設けられている、細胞培養装置。
【請求項１１】
請求項８〜１０のいずれか１項に記載の細胞培養装置を用いて細胞を培養する細胞培養方法であって、
前記第１循環流路に細胞含有液を供給して前記バイオリアクタの前記中空糸に細胞を播種する播種工程を有し、
前記播種工程は、
前記細胞含有液を前記バイオリアクタの前記貯留室に貯留する工程と、
前記貯留室を前記中空糸の延在方向に平行な軸方向に収縮させて前記貯留室内の前記細胞含有液を前記中空糸に送り込む工程と、
を有する、細胞培養方法。
【請求項１２】
請求項１１記載の細胞培養方法であって、さらに、
前記中空糸に播種された細胞を培養する培養工程と、
前記培養工程の後に、前記第１循環流路の前記培養液に剥離剤を添加する剥離剤添加工程と、
前記中空糸に前記培養液を流して細胞を剥離させる剥離工程と、を備え、
前記剥離工程は、前記バイオリアクタの前記貯留室に前記培養液を貯留する工程と、前記貯留室を収縮させて貯留された前記培養液を前記中空糸内に流して細胞を前記中空糸の表面から引き剥がす工程と、
を有する、細胞培養方法。
【請求項１３】
請求項１２記載の細胞培養方法であって、
前記剥離工程の際の前記貯留室の収縮速度は、前記播種工程の際の前記貯留室の収縮速度よりも早い、細胞培養方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、中空糸内で細胞を培養するバイオリアクタ、細胞培養装置及び細胞培養方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
近年、生体組織から採取した細胞を生体外で培養し、必要な細胞数まで増幅した後、治療に使用する細胞療法に注目が集まっている。このような細胞の培養には、従来より、フラスコを用いる培養方法が知られているが、複雑な操作が必要であり、多くの人手を要するという問題がある。
【０００３】
そこで、より省力的に細胞を培養すべく、中空糸を用いたバイオリアクタ（中空糸型バイオリアクタ）内で細胞の培養を行う細胞培養装置が提案されている。例えば、特許文献１には、中空糸の内側を経る流路（ＩＣループとも呼ぶ）に培養液（細胞培養培地）を循環させつつ細胞を成長させるとともに、中空糸の外側を経る流路（ＥＣループとも呼ぶ）内の溶液を介して、必要な物質の供給と代謝老廃物の除去とを行う細胞培養装置が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特表２０１６−５３７００１号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
ところで、上記の細胞培養装置において、中空糸の表面に付着して成長する接着性細胞を培養する場合には、細胞の播種及び成長した細胞の採取が行われる。多数の中空糸に対する細胞の播種は、細胞を添加した培養液をバイオリアクタ内に流すことで行われる。また、細胞の採取は、トリプシン溶液等の剥離剤を添加した培養液をバイオリアクタ内に流すことで行われる。
【０００６】
しかしながら、細胞の播種を行う場合には、バイオリアクタ内の培養液の流れが均一ではないことから、バイオリアクタ内で均一に細胞を播種することが困難であるという問題がある。
【０００７】
また、バイオリアクタ内から成長した細胞を採取する場合にも、バイオリアクタ内の培養液の流れが均一ではないことから、培養液の流速が遅い部分に付着した細胞を回収しにくいという問題がある。
【０００８】
そこで、本発明は、バイオリアクタ内の中空糸への細胞の播種又は細胞の採取に好適なバイオリアクタ、細胞培養装置及び細胞培養方法を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明の一観点は、筒状に形成され、内部に複数の中空糸が束ねられた中空糸モジュールを収容したリアクタハウジングと、前記リアクタハウジングの上流側に設けられ、前記中空糸の中空部に連通し培養液が流入する入口ポートが形成された入口側ハウジングと、前記リアクタハウジングの下流側に設けられ、前記中空糸の中空部に連通し前記培養液が流出する出口ポートが形成された出口側ハウジングと、前記入口側ハウジングと前記リアクタハウジングとの間に設けられ、前記培養液を貯留するとともに、その容積を可変とすることが可能なように構成された貯留室と、を備えた、バイオリアクタにある。
【００１０】
本発明の別の一観点は、上記観点のバイオリアクタと、前記出口ポートから流出した培養液を前記入口ポートに循環させる第１循環流路と、を備えた、細胞培養装置にある。
【００１１】
本発明のさらに別の一観点は、上記観点の細胞培養装置を用いて細胞を培養する細胞培養方法であって、前記第１循環流路に細胞含有液を供給して前記バイオリアクタの前記中空糸に細胞を播種する播種工程を有し、前記播種工程は、前記細胞含有液を前記バイオリアクタの前記貯留室に貯留する工程と、前記貯留室を前記中空糸の延在方向に平行な軸方向に収縮させて前記貯留室内の前記細胞含有液を前記中空糸に送り込む工程と、を有する、細胞培養方法にある。
【発明の効果】
【００１２】
上記観点のバイオリアクタ、細胞培養装置及び細胞培養方法は、バイオリアクタの入口ポートの近傍に設けられた貯留室に、培養液を貯留する。そして、その貯留室を軸方向に収縮させることにより、バイオリアクタ内で培養液の流速を均一にした状態で、中空糸に培養液を通すことができる。その結果、バイオリアクタ内の中空糸へ均一に細胞を播種でき、又はバイオリアクタ内の中空糸からの細胞の採取を効率よく行える。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】本発明の第１実施形態に係る細胞培養装置の概略構成図である。
【図２】図１のバイオリアクタの断面図である。
【図３】図３Ａは、蛇腹壁部の接続構造の第１構成例を示す部分拡大断面図であり、図３Ｂは蛇腹壁部の接続構造の第２構成例を示す部分拡大断面図であり、図３Ｃは蛇腹壁部の接続構造の第３構成例を示す部分拡大断面図である。
【図４】第１実施形態に係る細胞培養方法のフローチャートである。
【図５】図４の細胞培養方法のプライミング工程の説明図である。
【図６】図４の細胞培養方法の播種工程の説明図である。
【図７】図６の播種工程におけるバイオリアクタの動作を示す断面図である。
【図８】図８Ａ及び図８Ｂは、比較例に係るバイオリアクタの播種工程を示す断面図である。
【図９】図４の細胞培養方法の接着工程の説明図である。
【図１０】図４の細胞培養方法の培養工程の説明図である。
【図１１】図４の細胞培養方法の剥離剤添加工程の説明図である。
【図１２】図４の細胞培養方法の剥離工程の説明図である。
【図１３】図４の細胞培養方法の回収工程の説明図である。
【図１４】第２実施形態に係るバイオリアクタの断面図である。
【図１５】第３実施形態に係るバイオリアクタの断面図である。
【発明を実施するための形態】
【００１４】
以下、本発明に係るバイオリアクタ、細胞培養装置及び細胞培養方法について好適な実施形態を挙げ、添付の図面を参照しながら説明する。
【００１５】
（第１の実施形態）
図１に示す、本実施形態の細胞培養装置１０は、例えば、生体組織から分離した細胞を培養して増殖するために用いることができる。本実施形態において、細胞培養装置１０が培養する細胞は、中空糸６８（図２参照）の表面に付着して成長する接着性細胞である。なお、細胞培養装置１０は、接着性細胞だけではなく、培養液の中に浮遊しながら成長する浮遊性細胞の成長に用いることもできるし、接着性細胞と浮遊性細胞とを同時に成長させる目的に使用することもできる。また、細胞としては、肝細胞（間葉系幹細胞、造血幹細胞等）、線維芽細胞、角化細胞、前駆細胞、その他完全分化細胞又はそれらを混合したものの培養にも用いることができる。
【００１６】
図示のように、細胞培養装置１０は、中空糸６８を内蔵したバイオリアクタ１２と、バイオリアクタ１２の中空糸６８の内部空間（中空部ともいう）に培養液を流す第１循環流路１４（ＩＣループともいう）と、バイオリアクタ１２の中空糸６８の外部空間に培養液を流す第２循環流路１６（ＥＣループともいう）と、を備える。また、細胞培養装置１０は、第１循環流路１４及び第２循環流路１６には液剤を供給する供給部２０と、第１循環流路１４及び第２循環流路１６から培養液が排出される排出部２８と、バイオリアクタ１２で培養された細胞を培養液とともに回収する回収部３０とを備える。
【００１７】
第１循環流路１４には、培養液（培地ともいう）と、細胞含有液と、剥離剤とが供給可能に構成されている。また第２循環流路１６には、培養液が供給されるように構成されている。
【００１８】
培養液は、培地とも呼ばれ、中空糸６８に播種された細胞の成長に必要な栄養分を与える液体である。具体的に、培養液には、アミノ酸、ビタミン、無機塩及びグルコース等の炭素源に血清を加え、所定のｐｈ値及び浸透圧に調整された水溶液からなる基本培地を用いることができる。間葉系幹細胞を培養する場合には、血清として、ＦＢＳ（ウシ血清）を含む培養液を用いることもできる。また、培養する細胞の種類に応じて、培養液として、基本培地の血清の一部又は全部を、他の栄養素、動物由来の因子及びホルモン等で置き換えた低血清培地又は無血清培地とすることもできる。
【００１９】
細胞含有液は、中空糸６８に播種させる細胞を含んだ細胞懸濁液である。細胞含有液は、例えば、培養液に細胞を分散させることで調整される。剥離剤は、中空糸６８の表面に付着した接着性細胞を剥離させるための薬剤である。剥離剤としては、例えば、細胞のたんぱく質を分解するトリプシン溶液又はトリプシンＥＤＴＡ溶液等を用いることができる。
【００２０】
供給部２０は、第１収容部２２（培養液収容バッグ）と、第２収容部２４（細胞含有液収容バッグ）と、第３収容部２６（剥離剤収容バッグ）と、複数の供給流路と、複数の供給バルブと、供給ポンプ３７とを備える。第１収容部２２には第１供給流路２３が接続され、第２収容部２４には第２供給流路２５が接続され、第３収容部２６には第３供給流路２７が接続されている。第１供給流路２３には、第１供給バルブ３２が設けられ、第２供給流路２５には第２供給バルブ３４が設けられ、第３供給流路２７には第３供給バルブ３６が設けられている。
【００２１】
第１供給バルブ３２は、第１供給流路２３を開放又は閉塞する開閉弁であり、培養液の供給又は停止を制御する。第２供給バルブ３４は、第２供給流路２５を開放又は閉塞する開閉弁であり、細胞含有液の供給又は停止を制御する。第３供給バルブ３６は、第３供給流路２７を開放又は閉塞する開閉弁であり、剥離剤の供給又は停止を制御する。第１供給流路２３、第２供給流路２５及び第３供給流路２７は各バルブの下流側で合流して供給ポンプ３７に接続されている。
【００２２】
供給ポンプ３７は、第１供給流路２３、第２供給流路２５、及び第３供給流路２７の合流部の下流側に設けられており、第１収容部２２、第２収容部２４及び第３収容部２６から供給された液体を第１循環流路１４及び／又は第２循環流路１６に導く。供給ポンプ３７には、導入流路１５が接続されている。
【００２３】
導入流路１５は、途中で、第１循環流路１４に向かう第１導入流路１５ａと、第２循環流路１６に向かう第２導入流路１５ｂとに分岐している。第１導入流路１５ａには、第１循環流路１４への液体の流入を制御する第１導入バルブ４０が設けられている。また、第２導入流路１５ｂには第２循環流路１６への培養液（液体）の流入を制御する第２導入バルブ４２が設けられている。
【００２４】
第１循環流路１４は、一端がバイオリアクタ１２の入口ポート５４に接続され、他端が出口ポート５６に接続され、バイオリアクタ１２の中空糸６８の内部を通る経路で循環する流路である。第１循環流路１４には、バイオリアクタ１２の他に、バッファ部１３と、第１循環ポンプ３８と、第１循環バルブ４４とが設けられている。
【００２５】
バイオリアクタ１２は、図２に示すように、中空糸モジュール７０を収容した筒状のリアクタハウジング６２と、入口側ハウジング６４と出口側ハウジング６６と、蛇腹壁部７２（蛇腹部材）とを備えている。中空糸モジュール７０は、複数の中空糸６８と、中空糸６８を束ねる接続部材６９とを備えている。中空糸モジュール７０の中空糸６８は、接続部材６９を介してリアクタハウジング６２に接合されている。接続部材６９は、リアクタハウジング６２の一端部６２ａと他端部６２ｂとにそれぞれ設けられている。接続部材６９は、複数の中空糸６８を結束する結束材又は複数の中空糸６８を束ねて接合する接着剤よりなる。これらの接続部材６９によって、中空糸６８の外側の空間が、リアクタハウジング６２内に画定されている。中空糸６８の外側の空間は、第２循環流路１６の一部を構成し、第２循環流路１６内を循環する培養液の流路となっている。
【００２６】
中空糸６８は、液体が流通可能な内径に形成された中空部を有した管状の膜（中空糸膜）によって構成されている。その中空糸６８を構成する中空糸膜の壁厚は、酸素や二酸化炭素等のガス成分が拡散するのに十分な膜厚に形成されている。中空糸６８は、例えば、外径が１００μｍ〜１００００μｍであり、壁厚は１０μｍ〜１００μｍ程度とすることができる。中空糸モジュール７０は、このような中空糸６８が数百本〜数万本束ねられて構成されている。バイオリアクタ１２において、中空糸６８は、その内部の中空部の延在方向が、軸ａ方向と略平行となるように配置されている。
【００２７】
中空糸６８を構成する中空糸膜は、第１循環流路１４の培養液と第２循環流路１６の培養液との間で、塩類、糖分、アミノ酸、及び各種成長因子等の物質交換を行うべく、微細（〜数μｍ程度）な孔が無数に形成された多孔質膜を用いることができる。具体的には、例えば、ポリエーテルスルフォン（ＰＥＳ）等の培養液との濡れ性に優れた親水性の樹脂や、ポリプロピレン等の樹脂材料の表面を親水加工した樹脂材料を用いると好適である。
【００２８】
入口側ハウジング６４は、リアクタハウジング６２の一端部６２ａに対向して配置されている。入口側ハウジング６４の中央部には、中空糸６８の内部の中空部に連通する入口ポート５４が形成されている。この入口側ハウジング６４は、バイオリアクタ１２の軸ａ方向に伸縮自在な蛇腹壁部７２を介してリアクタハウジング６２に接続されている。蛇腹壁部７２は、交互に異なる方向に屈曲可能な折目が複数連なって形成されたシート状の部材である。蛇腹壁部７２は、折目が折りたたまれることで収縮し、折目が伸びることで軸ａ方向に伸長する。
【００２９】
蛇腹壁部７２は、例えば、ポリプロピレン、ポリエステル、又はポリエチレン、シリコーンゴム等の柔軟な樹脂材料によって形成されており、リアクタハウジング６２の外形と略同じ外形を有する筒状に形成されている。図３Ａに示すように、入口側ハウジング６４の側壁部６５の内側部には、蛇腹壁部７２を固定するための接合部材７６が接合されている。その接合部材７６の端面７６ａには蛇腹壁部７２の一端部７２ａが接着剤又は溶着等により気密及び液密に接合されている。また、蛇腹壁部７２の他端部７２ｂは接着剤又は溶着等によりリアクタハウジング６２に気密及び液密に接合されている。
【００３０】
図２に示すように、入口側ハウジング６４とリアクタハウジング６２との間の蛇腹壁部７２により囲まれた部分に、培養液を貯留する貯留室７１が形成されている。貯留室７１は、蛇腹壁部７２の伸長又は収縮に伴って、軸ａ方向に伸縮可能となっている。蛇腹壁部７２の伸長又は収縮は、入口側ハウジング６４に取り付けられた駆動装置７４によって入口側ハウジング６４を移動させることにより行われる。駆動装置７４は、アクチュエータよりなり、駆動装置７４のシャフト７４ａを出口側（矢印ａ２方向）に押し出すことにより、入口側ハウジング６４がリアクタハウジング６２側に接近し、蛇腹壁部７２及び貯留室７１が収縮する。また、駆動装置７４がシャフト７４ａを入口側（矢印ａ１方向）に引き込むことにより、入口側ハウジング６４がリアクタハウジング６２から離間して蛇腹壁部７２及び貯留室７１が軸ａ方向に伸びる。
【００３１】
なお、蛇腹壁部７２の入口側ハウジング６４への接続構造は図３Ａに示す構造に限定されるものではない。図３Ｂに示すように、入口側ハウジング６４の側壁部６５の内周面６４ａにねじ溝を形成するとともに、そのねじ溝に係合するねじ山が形成された接合部材７６Ａを設けてもよい。この場合には、接合部材７６Ａのねじ山と側壁部６５のねじ溝との間に蛇腹壁部７２の一端部７２ｃを挟み込むようにして気密及び液密に接合する。
【００３２】
また、図３Ｃに示すように、入口側ハウジング６４の側壁部６５に出口側に向けて内径が小さくなる嵌合凹部６４ｂを設けるとともに、その嵌合凹部６４ｂに嵌合部材７６Ｂを嵌合させる。その際に、蛇腹壁部７２の一端部７２ｄを嵌合部材７６Ｂと嵌合凹部６４ｂとで挟み込むようにして蛇腹壁部７２と入口側ハウジング６４とを気密及び液密に接合するようにしてもよい。この場合には、リアクタハウジング６２の一端側に嵌合凹部６２ｃを形成し、その嵌合凹部６２ｃに嵌合部材７６Ｂ１を嵌合させる際に、蛇腹壁部７２の他端部７２ｅを挟み込むことで、気密及び液密に接合するようにしてもよい。
【００３３】
図２に示すように、リアクタハウジング６２の他端部６２ｂには、出口側ハウジング６６が接合されている。出口側ハウジング６６は、中空糸モジュール７０の他端側を覆う。出口側ハウジング６６の中央部には、出口ポート５６が形成されている。出口ポート５６は、中空糸モジュール７０の接続部材６９を貫通して伸びる中空糸６８の内部の中空部と連通している。これにより、入口ポート５４から流入した培養液は、中空糸６８の内部の中空部を通過して、出口ポート５６から流出する。
【００３４】
また、リアクタハウジング６２の側部には、中空糸６８の外側の空間に培養液を導入する第２入口ポート５８と、中空糸６８の外側の空間から培養液が流出する第２出口ポート６０とが設けられている。特に限定されるものではないが、第２入口ポート５８を入口ポート５４の近傍に形成し、第２出口ポート６０を出口ポート５６側に形成することで、中空糸６８の内外の培養液の流れを同じ向きとしてもよい。
【００３５】
図１に示すように、バッファ部１３は、バイオリアクタ１２の貯留室７１（図２参照）の容積の増減に応じて第１循環流路１４内の培養液を収容し又は培養液を放出する容量可変の容器によって構成されている。バッファ部１３は、例えば、樹脂フィルムを張り合わせた柔軟なバッグとして構成できる。特に限定されないが、バッファ部１３は、バイオリアクタ１２の入口ポート５４の近傍に設けることができる。
【００３６】
バッファ部１３と第１循環流路１４との接続部の下流側には、培養液の逆流を防ぐための逆止弁４３が設けられている。逆止弁４３は、貯留室７１を収縮させた際に、バイオリアクタ１２の培養液が第１循環流路１４内を逆流するのを阻止するように構成されている。
【００３７】
第１循環ポンプ３８は、特に限定されないが、第１循環バルブ４４とバイオリアクタ１２の出口ポート５６との間の第１循環流路１４に設けられている。この第１循環ポンプ３８は、第１循環流路１４内を循環する液体の流れを生み出すとともに、細胞の回収及び培養液の排出の際に第１循環流路１４内の液体を回収部３０や排出部２８に送り出すように構成されている。
【００３８】
第１循環バルブ４４は、第１循環流路１４を開放又は閉塞する開閉弁であり、培養液を循環させる際は開放するように構成されている。また、第１循環流路１４への培養液の導入又は排出において、第１循環流路１４を閉塞する。
【００３９】
第１導入流路１５ａは、第１循環流路１４の第１循環バルブ４４と入口ポート５４との間に接続されている。また、第１循環流路１４の出口ポート５６と第１循環バルブ４４との間には、第１排出流路５１と、回収流路５３とが接続されている。第１排出流路５１は、排出された培養液（液体）を収容する排出部２８（廃液収容バッグ）に接続されている。また、回収流路５３には、回収部３０（収穫バッグ）が接続されている。第１排出流路５１には、第１排出流路５１を開放又は閉塞する第１排出バルブ５０が設けられている。また、回収流路５３には、回収流路５３を開放又は閉塞する回収バルブ５２が設けられている。回収バルブ５２は、第１循環流路１４内で培養液を循環させる際には閉塞しており、第１循環流路１４と排出部２８及び回収部３０とを分離している。
【００４０】
一方、第２循環流路１６は、一端がバイオリアクタ１２の第２入口ポート５８に接続され、他端がバイオリアクタ１２の第２出口ポート６０に接続され、中空糸６８の外部を通る経路で循環する流路である。第２循環流路１６を流れる培養液は、第１循環流路１４側に細胞の代謝に必要な栄養素を供給するとともに、細胞の代謝によって発生した老廃物の排出を行う。第２循環流路１６の培養液としては、第１循環流路１４に供給される培養液と同様なものを使用できる。また、第２循環流路１６には、ガス交換ユニット１８と、第２循環ポンプ３９と、第２循環バルブ４６と、が設けられている。
【００４１】
ガス交換ユニット１８は、中空糸を備え、第２循環流路１６を流れる培養液が中空糸内を通過するように構成されている。ガス交換ユニット１８には、ＣＯ2インキュベータ１７等からの供給される酸素及び二酸化炭素を含むガスが供給される。ガス交換ユニット１８は、中空糸を介して培養液とガスとの物質交換を行って、培養液中の酸素及び二酸化炭素の濃度を所定値とする。
【００４２】
第２循環ポンプ３９は、第２循環流路１６の培養液を流動させることで、第２循環流路１６内を所定方向に流動させる。図示のように、バイオリアクタ１２内において、第１循環流路１４の培養液の流れと同方向となる向きに第２循環流路１６内の培養液を循環させると好適である。ただし、これに限定されるものではなく、逆方向に循環させてもよい。
【００４３】
第２循環バルブ４６は、第２循環流路１６を開放又は閉塞する開閉弁であり、培養液を循環させる際は開放するように構成されている。また、第２循環流路１６への培養液の導入又は排出において、第２循環流路１６を閉塞する。
【００４４】
第２循環流路１６の第２循環バルブ４６と第２入口ポート５８との間には、第２導入流路１５ｂが接続されている。第２導入流路１５ｂには、第２導入バルブ４２が設けられており、第２循環流路１６と供給部２０とを分離させることができる。また、第２循環流路１６の第２出口ポート６０と第２循環バルブ４６との間には、第２排出流路４９を介して排出部２８が接続されている。第２排出流路４９には、第２排出バルブ４８が設けられており、第２循環流路１６と排出部２８とを分離可能に構成されている。
【００４５】
上記の細胞培養装置１０において、バイオリアクタ１２、第１循環流路１４、及び第２循環流路１６は、ＣＯ2インキュベータ１７の内部に収容される。ＣＯ2インキュベータ１７は、バイオリアクタ１２、第１循環流路１４、及び第２循環流路１６を細胞の培養に適した環境とするべく、所定温度及び湿度に維持された雰囲気を提供する。また、培養液を体内のＣＯ2濃度に近づけるべく大気中よりも高濃度のＣＯ2を含む雰囲気ガスを供給する。ガス交換ユニット１８は、所定のフィルタを介して、ＣＯ2インキュベータ１７の内部の雰囲気ガスを取り込むポンプ（不図示）と雰囲気ガス中の異物を除去するフィルタ（不図示）とを備えていてもよい。
【００４６】
さらに、細胞培養装置１０は、制御部９０を備えている。制御部９０は、細胞培養装置１０の流路に設けられたバルブ、ポンプ、及びＣＯ2インキュベータ１７の動作を制御する。制御部９０は、細胞培養装置１０における細胞培養方法の実施に必要な動作を行うことができる。
【００４７】
次に、上記の細胞培養装置１０を用いた細胞培養方法について説明する。
【００４８】
図４のステップＳ１０の準備工程において、細胞培養装置１０の各収容部（第１収容部２２、第２収容部２４、第３収容部２６）並びに、排出部２８及び回収部３０を所定の流路に接続する。なお、第１収容部２２には、培養液が収容され、第２収容部２４には細胞含有液が収容され、第３収容部２６には剥離剤が収容されている。準備工程では、全てのバルブが閉状態となっている。
【００４９】
次に、図４のステップＳ２０のプライミング工程において、細胞培養装置１０のプライミング処理を行う。具体的には、図５に示すように、制御部９０は、第２供給バルブ３４、第３供給バルブ３６及び回収バルブ５２を閉状態とする。その他のバルブは開状態とする。また、制御部９０は、供給ポンプ３７を連続的に又は観血的に駆動させる。制御部９０は、第１循環流路１４及び第２循環流路１６を培地が流通するように第１循環ポンプ３８及び第２循環ポンプ３９を駆動させる。
【００５０】
プライミング工程において、第１収容部２２の培養液が、第１循環流路１４及び第２循環流路１６に導入されて所定方向に循環する。バイオリアクタ１２の内部が満たされる。なお、バイオリアクタ１２の貯留室７１は伸長した状態に保たれ、貯留室７１の内部は、培養液で満たされる。第１循環流路１４及び第２循環流路１６の空気は、培養液の流れに従って、排出部２８に排出される。プライミング工程は、バイオリアクタ１２、第１循環流路１４及び第２循環流路１６が培養液で満たされるまで行われる。
【００５１】
次に、図４のステップＳ３０の播種工程において、バイオリアクタ１２の中空糸６８に細胞の播種が行われる。具体的には、図６に示すように、制御部９０は、第１供給バルブ３２、第３供給バルブ３６、第２導入バルブ４２、第２排出バルブ４８及び回収バルブ５２を閉状態にする。また、制御部９０は、第２供給バルブ３４、第１導入バルブ４０、第１循環バルブ４４及び第２循環バルブ４６を開状態とする。また、第１循環ポンプ３８及び第２循環ポンプ３９を駆動させて第１循環流路１４及び第２循環流路１６内で培養液を循環させる。
【００５２】
播種工程において、第１導入流路１５ａを介して、第２収容部２４の細胞含有液がバイオリアクタ１２に向けて流れ込む。細胞含有液は、逆止弁４３を通過してバイオリアクタ１２の入口ポート５４からバイオリアクタ１２内に導入される。そして、図７に示すように、細胞含有液は、バイオリアクタ１２の貯留室７１に貯留される。
【００５３】
その後、貯留室７１が細胞含有液で満たされた所定のタイミングで、制御部９０は、駆動装置７４のシャフト７４ａを駆動させて、入口側ハウジング６４を矢印Ａに示す方向に変位させる。これにより、蛇腹壁部７２及び貯留室７１が収縮して、貯留室７１に貯留された細胞含有液が貯留室７１から押し出される。その際に、逆止弁４３の作用により、細胞含有液は入口ポート５４側には流出せずに、中空糸モジュール７０側に押し出される。その結果、中空糸６８の内部に細胞含有液が導入され、中空糸６８の内部に細胞の播種が行われる。
【００５４】
その際に、貯留室７１は、入口側ハウジング６４の全体に押圧されて一定の径を保ったまま軸方向に収縮する。その結果、貯留室７１内の細胞含有液は、径方向に一定の流速分布を維持したまま中空糸６８に導入される。これにより、中空糸モジュール７０の中空糸６８内に均等な量の細胞含有液が導入され、各中空糸６８に均等な量の細胞を播種することができる。
【００５５】
これに対し、図８Ａ及び図８Ｂの比較例に示す貯留室７１を有しないバイオリアクタ１１２の場合には、入口ポート５４から導入された培養液（細胞含有液）の流れにばらつきが生じてしまう。例えば、図８Ａに示すように、培養液の流速が比較的早い場合には、入口ポート５４に近い中心付近の培養液の流速がより速くなり、周辺部の流速が遅くなってしまう。その結果、径方向の中央付近の斜線を付した部分により多くの細胞が播種されてしまい、周辺部に播種される細胞の数が少なくなってしまう。
【００５６】
また、図８Ｂに示すように、培養液（細胞含有液）の流速が比較的遅い場合には、図８Ａとは逆に、バイオリアクタ１１２の中心の流速が相対的に遅くなり、周辺部分の流速が相対的に早くなってしまう。この条件で播種を行うと、図の斜線を付した周辺部分により多くの細胞が播種されてしまい、中央部に播種される細胞の数が少なくなってしまう。
【００５７】
これに対し、図７に示す本実施形態のバイオリアクタ１２によれば、播種のタイミングで均一な流速を発生させることができるので、中空糸モジュール７０の中空糸６８に均一に細胞を播種できる。
【００５８】
なお、播種工程の際の貯留室７１の収縮に伴って押し出された培養液の一部は図６のバッファ部１３に貯留されることで、第１循環流路１４内の培養液（及び細胞含有液）の量が一定に保たれる。
【００５９】
次に、図４のステップＳ４０の接着工程において、中空糸６８に細胞を接着させる処理が行われる。具体的には、図９に示すように、制御部９０は、第１供給バルブ３２、第２供給バルブ３４、第３供給バルブ３６、第１導入バルブ４０、第２導入バルブ４２、第１排出バルブ５０、第２排出バルブ４８及び回収バルブ５２を閉状態とする。また、制御部９０は、供給ポンプ３７及び第１循環ポンプ３８を停止させる。第１循環ポンプ３８は停止させる代わりに第１循環流路１４内の培養液が極めて低速で循環するように低速で駆動させてもよい。これにより、第１循環流路１４内の培養液の流れが停止又は極めて低速となり、細胞を中空糸６８の表面に接着させることができる。接着工程は、細胞が中空糸６８の表面に接着するまでの間、例えば数分〜１０分程度行われる。
【００６０】
その後、図４のステップＳ５０の培養工程において、中空糸６８の表面に播種及び接着された細胞の培養を行う。具体的には、図１０に示すように、制御部９０は、第１供給バルブ３２、第２供給バルブ３４、第３供給バルブ３６、第１導入バルブ４０、第２導入バルブ４２、第１排出バルブ５０、第２排出バルブ４８及び回収バルブ５２を閉状態とする。また、制御部９０は、供給ポンプ３７を停止させ、第１循環ポンプ３８及び第２循環ポンプ３９を駆動させる。制御部９０は、ガス交換ユニット１８に所定のガスを供給して第２循環流路１６にガス成分の供給及び不要なガス成分の除去を行う。
【００６１】
これにより、第１循環流路１４内を培養液が循環する。バイオリアクタ１２に導入された培養液は、各中空糸６８に供給され、細胞に栄養が供給される。また、第２循環流路１６を循環する培養液からは、中空糸６８を介して酸素や栄養分が供給される。さらに、細胞の成長に伴って排出された老廃物は、中空糸６８を介して第２循環流路１６内の培養液に排出される。このように、第２循環流路１６内の培養液は、細胞の成長に必要な養分を供給するとともに、老廃物を貯留する役割を果たし、第１循環流路１４内の細胞の成長に良好な育成環境が提供される。
【００６２】
なお、培養工程において、第１循環流路１４及び第２循環流路１６の培養液が閉鎖された循環路のみを流れる例について説明したが、これに限定されるものではない。第１収容部２２から、所定量の培養液を第１循環流路１４及び第２循環流路１６の少なくとも一方に流すとともに、一部の培養液を排出部２８に排出しながら、培養工程を行ってもよい。以上の培養工程は、細胞が十分に培養されるまで所定時間行われる。
【００６３】
次に、図４のステップＳ６０の剥離剤添加工程において、剥離剤を添加して中空糸６８内の細胞に剥離剤を接触させる。具体的には、図１１に示すように、制御部９０は、第１供給バルブ３２、第２供給バルブ３４、第２導入バルブ４２、第２排出バルブ４８及び回収バルブ５２を閉状態とする。また、制御部９０は、第３供給バルブ３６、第１導入バルブ４０、第１循環バルブ４４、第２循環バルブ４６及び第１排出バルブ５０を開状態とする。さらに、供給ポンプ３７、第１循環ポンプ３８を駆動させる。
【００６４】
これにより、第３収容部２６の剥離剤が、第１導入バルブ４０を介して第１循環流路１４に導入される。そして、剥離剤は、第１循環流路１４の培養液の流れに乗ってバイオリアクタ１２の入口ポート５４を介して中空糸６８に導かれる。これにより、中空糸６８内の細胞に剥離剤が接触する。
【００６５】
その後、図４のステップＳ７０の剥離工程において、培養された細胞を中空糸６８から剥離させる。具体的には、図１２に示すように、制御部９０は、第１供給バルブ３２、第２供給バルブ３４、第３供給バルブ３６、第１導入バルブ４０、第２導入バルブ４２、第１排出バルブ５０及び第２排出バルブ４８を閉状態とする。その他のバルブは開状態とする。また、第１循環ポンプ３８を作動させる。
【００６６】
次に、図２に示すように、制御部９０は、バイオリアクタ１２の駆動装置７４のシャフト７４ａを引き込むように駆動させて、バッファ部１３の培養液を貯留室７１に培養液に貯留する。その後、図７に示すように、制御部９０は駆動装置７４のシャフト７４ａを勢いよく押し出すように駆動させて、入口側ハウジング６４をリアクタハウジング６２側に移動させる。これにより、貯留室７１の培養液を中空糸６８に送り出す処理を行う。剥離工程の際の入口側ハウジング６４の移動速度は、播種工程の際の入口側ハウジング６４の移動速度よりも早くして、中空糸６８の培養液の流速をより高めることが好ましい。このような培養液の流れによって、中空糸６８の内側に付着した細胞を効率よく剥離させることができる。
【００６７】
図８Ａの比較例のバイオリアクタ１１２では、剥離工程において培養液の流速を速くすると、入口ポート５４に近い径方向中心側の流速ばかり早くなってしまい、周辺部分の流速が上がらず、バイオリアクタ１１２の周辺部の細胞を十分に剥離させることがでず、一部が残留してしまう。
【００６８】
これに対し、図７に示す本実施形態のバイオリアクタ１２によれば、径方向に流速分布が発生しにくいため、径方向外周側の培養液の流速を高めることができるので、中空糸モジュール７０内の細胞を効率よく剥離させることができる。
【００６９】
その後、図４のステップＳ８０の回収工程において、剥離された細胞を回収する。具体的には、図１３に示すように、制御部９０は、第２供給バルブ３４、第３供給バルブ３６、第２導入バルブ４２、第１循環バルブ４４、第１排出バルブ５０及び第２排出バルブ４８を閉状態とする。また、制御部９０は、第１供給バルブ３２、第１導入バルブ４０及び回収バルブ５２を開状態とする。さらに、制御部９０は、供給ポンプ３７を駆動させる。
【００７０】
これにより、第１収容部２２の培養液が、第１導入流路１５ａを介してバイオリアクタ１２に流れ込む。そして、バイオリアクタ１２から流れ出た培養液は、回収流路５３を介して回収部３０に収容される。その際に、バイオリアクタ１２の中空糸６８から剥離した細胞は、培養液とともにバイオリアクタ１２から流出して回収部３０に回収される。バイオリアクタ１２内の細胞の回収が終了すると、一連の動作フローが終了する。
【００７１】
本実施形態のバイオリアクタ１２、細胞培養装置１０及び細胞培養方法は、以下の効果を奏する。
【００７２】
バイオリアクタ１２において、入口側ハウジング６４とリアクタハウジング６２との間に、軸ａ方向に伸縮する貯留室７１が設けられている。貯留室７１は、培養液を貯留するとともに、貯留した培養液を中空糸６８に向けて送り込むように構成されている。
【００７３】
このように、本実施形態では、貯留室７１に蓄えた培養液を中空糸６８に送り込むことができるので、培養液に細胞を添加した細胞含有液を均一な流量で中空糸６８に供給できる。これにより、中空糸６８に均一な量の細胞を播種することができる。また、細胞を剥離する剥離工程において、中空糸モジュール７０の周辺部の中空糸６８に対しても十分な流速で培養液を流すことができる。その結果、中空糸モジュール７０の周辺部の中空糸６８からも確実に細胞を回収することができ、培養した細胞の回収率を向上させることができる。
【００７４】
バイオリアクタ１２において、貯留室７１は、リアクタハウジング６２の断面サイズと同じ断面サイズに形成されるとともに、一定の断面サイズを維持しつつ軸ａ方向に伸縮する。このような構成により、貯留室７１から中空糸モジュール７０に培養液を送り出す際に、径方向の流速のばらつきを抑制できる。
【００７５】
バイオリアクタ１２おいて、さらに、貯留室７１を軸ａ方向に伸縮させる駆動装置７４を備えている。このような構成により、播種工程及び剥離工程に人手が不要となり、作業者の負担を軽減できる。
【００７６】
バイオリアクタ１２において、貯留室７１は、一端がリアクタハウジング６２に接合され、他端が入口側ハウジング６４に接合された蛇腹壁部７２により形成されている。このような構成によれば、簡素な装置構成で、軸ａ方向に伸縮可能な貯留室７１を実現できる。
【００７７】
細胞培養装置１０は、上記のバイオリアクタ１２と、出口ポート５６から流出した培養液を入口ポート５４に循環させる第１循環流路１４と、を備えている。このような細胞培養装置１０によれば、バイオリアクタ１２において均一に細胞を播種することができるため、より効率よく細胞を培養することができる。
【００７８】
細胞培養装置１０には、バイオリアクタ１２の貯留室７１の伸縮に伴う培養液の量の変動を吸収するバッファ部１３が設けられている。これにより、貯留室７１の伸縮動作を円滑に行うことができる。
【００７９】
細胞培養装置１０において、第１循環流路１４には、バイオリアクタ１２の貯留室７１の培養液の逆流を阻止する逆止弁４３が設けられている。このような構成により、貯留室７１が収縮した場合であっても、培養液の逆流を阻止することができ、貯留室７１に貯留された培養液を中空糸６８内に確実に送り込むことができる。
【００８０】
本実施形態の細胞培養方法は、細胞培養装置１０を用いて細胞を培養する細胞培養方法であり、細胞含有液をバイオリアクタ１２の貯留室７１に貯留する工程と、貯留室７１を軸ａ方向に収縮させて貯留室７１内の細胞含有液を中空糸６８に送り込む工程と、により細胞の播種を行う。このような構成により、バイオリアクタ１２の中空糸６８に均一に細胞の播種することができ、効率よく細胞を培養できる。
【００８１】
細胞培養方法は、中空糸６８に播種された細胞を培養する培養工程と、培養工程の後に第１循環流路１４の培養液に剥離剤を添加する剥離剤添加工程と、前記中空糸６８に培養液を流して細胞を剥離させる剥離工程と、を備え、剥離工程は、バイオリアクタ１２の貯留室７１に培養液を貯留する工程と、貯留室７１を収縮させて貯留された培養液を中空糸６８内に流して細胞を中空糸６８の表面から引き剥がす工程と、を有する。
【００８２】
このように、細胞を中空糸６８から剥離させる剥離工程において、貯留室７１を伸縮させることで、中空糸モジュール７０の周辺部の中空糸６８にも十分な流速で培養液を流すことができる。その結果、この細胞培養方法によれば、中空糸６８からより効率よく細胞を剥離させることができる。
【００８３】
細胞培養方法において、剥離工程の際の貯留室７１の収縮速度は、播種工程の際の貯留室７１の収縮速度よりも早い。これにより、細胞を剥離させるのに十分な流速で中空糸６８に培養液を流すことができる。
【００８４】
（第２実施形態）
以下、図２のバイオリアクタ１２の変形例について説明する。本実施形態のバイオリアクタ１２Ａは、図１４に示すように、入口側ハウジング６４Ａにおいて、軸ａ方向に長く伸び出た側壁部６５Ａが形成されている。側壁部６５Ａは、リアクタハウジング６２の外周に当接するように形成された内周面を備えている。入口側ハウジング６４Ａは、側壁部６５Ａ及びリアクタハウジング６２の外周部によって案内されて軸ａ方向に摺動可能となっている。そして、入口側ハウジング６４Ａとリアクタハウジング６２の中空糸モジュール７０との間の部分に、貯留室７１Ａが形成されている。
【００８５】
側壁部６５Ａの内周部には環状のパッキン収容溝６５ｂが周方向の全域にわたって形成されており、そのパッキン収容溝６５ｂにパッキン６５ａが収容されている。側壁部６５Ａによってパッキン６５ａがリアクタハウジング６２の外周部に押し付けられることにより、貯留室７１Ａが気密及び液密に封止される。
【００８６】
入口側ハウジング６４Ａには、駆動装置７４が接続されており、駆動装置７４のシャフト７４ａを押し出すことにより、入口側ハウジング６４Ａがリアクタハウジング６２側に変位する。これにより、貯留室７１Ａが軸ａ方向に収縮する。また、駆動装置７４のシャフト７４ａを引き込むことにより、入口側ハウジング６４Ａがリアクタハウジング６２から離間する方向に変位する。これにより、貯留室７１Ａが軸ａ方向に伸びる。すなわち、貯留室７１Ａは、入口側ハウジング６４Ａの変位に伴って、軸ａ方向に伸縮自在となっている。
【００８７】
このようなバイオリアクタ１２Ａによれば、図４のステップＳ３０に示す播種工程において、入口側ハウジング６４Ａを変位させることにより、貯留室７１Ａ内の細胞含有液を一定の流速分布で中空糸モジュール７０側に送り込むことができる。これにより、図２のバイオリアクタ１２と同様の効果を得ることができる。
【００８８】
また、バイオリアクタ１２Ａは、図４のステップＳ７０の剥離工程においても、図２のバイオリアクタ１２と同様に、中空糸モジュール７０の周辺部の中空糸６８に対して十分な流速で培養液を流すことができるので、バイオリアクタ１２Ａ内の細胞を効率よく回収することが可能となる。
【００８９】
なお、以上の説明では、入口側ハウジング６４Ａの側壁部６５Ａがリアクタハウジング６２の外周部に沿って摺動する例を説明したが、これに限定されるものではない。例えば、入口側ハウジング６４Ａの側壁部６５Ａがリアクタハウジング６２に内周部に当接して摺動するものであってもよい。
【００９０】
本実施形態のバイオリアクタ１２Ａは、以下の効果を奏する。
【００９１】
バイオリアクタ１２Ａにおいて、貯留室７１Ａは、入口側ハウジング６４Ａから延び出てリアクタハウジング６２に摺動可能な側壁部６５Ａの内側に形成されている。このような構成により、図２のバイオリアクタ１２と同様の効果を得ることができる。
【００９２】
（第３実施形態）
第３実施形態に係るバイオリアクタ１２Ｂは、図１５に示すように、リアクタハウジング６２の入口側に設けられた入口側ハウジング６４Ｂを備えている。入口側ハウジング６４Ｂは、中央部に入口ポート５４が形成されるとともに、その周縁部からは、軸ａ方向に伸び出た側壁部６５Ｂを備えている。側壁部６５Ｂの端部は、リアクタハウジング６２の外周部に、例えば、ねじ止め等の手法で接合されている。
【００９３】
入口側ハウジング６４Ｂの内側には、リアクタハウジング６２の断面と略同一断面の空室７９が形成されている。この空室７９には、側壁部６５Ｂの内周部の径と同じ外径に形成されたピストン７７が配設されている。ピストン７７の外周部には、環状のパッキン収容溝７７ｂが周方向の全域にわたって形成されており、そのパッキン収容溝７７ｂにパッキン７８が収容されている。パッキン７８は、側壁部６５Ｂに押し付けられた状態となっており、このパッキン７８によって、空室７９が入口ポート５４側の領域と、中空糸モジュール７０側の貯留室７１Ｂとに気密及び液密に仕切られている。
【００９４】
ピストン７７は、側壁部６５Ｂの内周面に沿って軸ａ方向に摺動可能となっており、ピストン７７の変位に伴って、貯留室７１Ｂが軸ａ方向に伸縮自在となっている。ピストン７７の入口ポート５４側の端面には駆動装置７４のシャフト７４ａが接続されている。駆動装置７４の本体は入口側ハウジング６４Ｂの外側に配置されており、駆動装置７４のシャフト７４ａは、入口側ハウジング６４Ｂのシール部７４ｂを貫通してピストン７７に接続されている。駆動装置７４を駆動させることで、ピストン７７の位置が変位して、貯留室７１Ｂを伸縮可能に構成している。
【００９５】
また、ピストン７７には、貯留室７１Ｂに培養液を導入するための貫通孔７７ａが設けられている。その貫通孔７７ａには、培養液の逆流を阻止するための逆止弁８０が設けられている。逆止弁８０は、入口ポート５４から貯留室７１Ｂに流入する向きに液体の流通を許容する一方で、貯留室７１Ｂから入口ポート５４に逆流する液体の流れを阻止するように構成されている。
【００９６】
本実施形態のバイオリアクタ１２Ｂにおいて、駆動装置７４を駆動させてピストン７７を中空糸モジュール７０側に移動させると、貯留室７１Ｂに貯留された培養液又は細胞含有液が中空糸６８に送り込まれる。
【００９７】
本実施形態のバイオリアクタ１２Ｂは、以下の効果を奏する。
【００９８】
バイオリアクタ１２Ｂにおいて、入口側ハウジング６４Ｂの側壁部６５Ｂが軸ａ方向に長く形成されるとともに、入口側ハウジング６４Ｂには内部の空室７９を仕切るとともに軸ａ方向に摺動可能なピストン７７が配設されている。そして、貯留室７１Ｂはピストン７７と中空糸モジュール７０との間に形成されている。
【００９９】
このような構成により、本実施形態のバイオリアクタ１２Ｂは、図２のバイオリアクタ１２と同様の効果を奏することができる。
【０１００】
上記において、本発明について好適な実施形態を挙げて説明したが、本発明は前記実施形態に限定されるものではなく、本発明の趣旨を逸脱しない範囲において、種々の改変が可能なことは言うまでもない。
【符号の説明】
【０１０１】
１０…細胞培養装置                １２、１２Ａ、１２Ｂ…バイオリアクタ
６２…リアクタハウジング          ６４、６４Ａ、６４Ｂ…入口側ハウジング
６５、６５Ｂ…側壁部              ６６…出口側ハウジング
７０…中空糸モジュール            ７１…貯留室
７１Ｂ…空室                      ７２…蛇腹壁部
７４…駆動装置                    ７７…ピストン
【図１】
2020171241.tif 000003
【図２】
2020171241.tif 000004
【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
2020171241.tif 000009
【図８】
2020171241.tif 000010
【図９】
2020171241.tif 000011
【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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【図１３】
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【図１４】
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【図１５】
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