(57)【要約】【課題】結合ビタミンを含む注入可能なヒアルロン酸ベースのヒドロゲル組成物の提供。【解決手段】ヒアルロン酸と、前記ヒアルロン酸に共有結合されたビタミンＣ誘導体とを含み、結合度が約３モル％〜約４０モル％である、注入可能な皮膚充填剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒアルロン酸と、
前記ヒアルロン酸に共有結合されたビタミンＣ誘導体と、
を含み、
結合度が、約３モル％〜約４０モル％である、注入可能な皮膚充填剤。
【請求項２】
前記ヒアルロン酸が、Ｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシドと架橋結合される、請求項１に記載の皮膚充填剤。
【請求項３】
前記ヒアルロン酸が、Ｓｔａｒ‐ＰＥＧアミンと架橋結合される、請求項１に記載の皮膚充填剤。
【請求項４】
前記ヒアルロン酸が、ＢＤＤＥと架橋結合される、請求項１に記載の皮膚充填剤。
【請求項５】
前記結合度が、約３モル％〜約１５モル％である、請求項４に記載の皮膚充填剤。
【請求項６】
ビタミンＣ誘導体が、ＡＡ２Ｇである、請求項１に記載の皮膚充填剤。
【請求項７】
前記ビタミンＣ誘導体が、ビタゲンである、請求項１に記載の皮膚充填剤。
【請求項８】
前記ビタミンＣ誘導体が、ＡＡ２Ｐである、請求項１に記載の皮膚充填剤。
【請求項９】
ヒトの皮膚に導入されたときに、少なくとも約１ヶ月〜最大約２０ヶ月間、前記ヒトにアスコルビン酸を放出する、皮膚欠損の治療に使用される請求項１に記載の皮膚充填剤。
【請求項１０】
Ｓｔａｒ  ＰＥＧアミンと架橋結合され、かつ約３モル％〜約４０モル％の結合度を有するヒアルロン酸と、
前記ヒアルロン酸に共有結合されたＡＡ２Ｐと、
を含み、
前記皮膚充填剤が、ヒトの皮膚に導入されたときに、少なくとも約１ヶ月〜最大約２０ヶ月間、前記ヒトにアスコルビン酸を放出する、注入可能な皮膚充填剤。
【請求項１１】
皮膚充填剤を作製する方法であって、
ヒアルロン酸を提供するステップと、
架橋剤をビタミンＣ誘導体と反応させるステップと、
前記反応した架橋剤およびビタミンＣ誘導体を前記ヒアルロン酸に添加して、共有結合されたビタミンＣを含む架橋結合されたヒアルロン酸組成物を形成するステップと、
前記架橋結合されたヒアルロン酸組成物を均質化および中和して、約３モル％〜約４０モル％の結合度を有する注入可能なゲルを得るステップと、
を含む、方法。
【請求項１２】
前記反応させるステップが、ビタミンＣ誘導体を架橋剤と予め反応させて、架橋剤によってキャップされたビタミンＣ誘導体、未反応の架橋剤、および遊離ＡＡ２Ｇを含有する組成物を得ることを含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記架橋剤が、ＢＤＤＥであり、ビタミンＣ誘導体が、ＡＡ２Ｇ、ビタゲン、およびＳＡＰである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記架橋剤が、４‐アームエポキシドであり、ビタミンＣ誘導体が、ＡＡ２Ｇ、ビタゲン、およびＳＡＰである、請求項１２に記載の方法。
【請求項１５】
前記架橋剤が、Ｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシドである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１６】
前記架橋剤が、Ｓｔａｒ‐ＰＥＧアミンである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１７】
ビタミンＣ誘導体が、ＡＡ２Ｇである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１８】
前記ビタミンＣ誘導体が、ビタゲンである、請求項１１に記載の方法。
【請求項１９】
前記ビタミンＣ誘導体が、ＡＡ２Ｐである、請求項１１に記載の方法。
【請求項２０】
請求項１に記載の皮膚充填剤を患者に導入することを含む、皮膚状態を治療する方法。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１１年６月３日出願の米国仮特許出願第６１／４９３，３０９号に対する優先権およびその利益を主張するものであり、この全開示は、この参照により本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、概して、皮膚充填剤組成物に関し、より具体的には、抗酸化物質を含む注入可能な皮膚充填剤組成物に関する。
【０００３】
皮膚の老化は進行性の現象であり、経時的に生じ、アルコール消費、喫煙、および日光露出等の生活要因の影響を受け得る。顔面皮膚の老化は、萎縮、たるみ、および肥厚を特徴とし得る。萎縮は、皮膚組織の厚みの激減に相当する。皮下組織のたるみは、余分な皮膚および眼瞼下垂につながり、頬および瞼の垂れ下がった外観につながる。肥厚は、顔面下部および首の膨張による過剰な体重増加を指す。これらの変化は、典型的には、乾燥、弾力性の喪失、およびザラザラした質感に関連する。
【０００４】
ヒアルロン酸（ＨＡ）としても知られるヒアルロナンは、結合組織、上皮組織、および神経組織においてヒトの体全体に広く分布される非硫酸化グリコサミノグリカンである。ヒアルロナンは、皮膚の異なる層に豊富であり、そこで、それは、例えば、良好な水和作用を確保し、細胞外マトリックスの組織化を支援し、充填剤物質として働き、かつ組織修復機構に関与するといった複数の機能を有する。しかしながら、年齢とともに、皮膚中に存在するヒアルロナン、コラーゲン、エラスチン、および他のマトリックス重合体の量は減少する。例えば、太陽からの紫外線への繰り返しの露出は、皮膚細胞のヒアルロナン産生の減少、ならびにその分解速度の増加の両方を引き起こす。このヒアルロナン喪失は、例えば、欠点、欠損、疾患、および／または障害等の様々な皮膚状態をもたらす。例えば、皮膚中の水分含有量と皮膚組織中のヒアルロナンレベルとの間に強い相関関係が存在する。皮膚が老化するにつれ、皮膚中のヒアルロナンの量および質は低下する。これらの変化は、皮膚の乾燥およびしわにつながる。
【０００５】
皮膚充填剤は、軟組織状態の治療および他の皮膚治療において有用であり、これは、皮膚充填剤が、これらの皮膚状態を治療するために、失われた内因性マトリックス重合体を置換し得るか、または既存のマトリックス重合体の機能を高める／促進し得るためである。これまでに、そのような組成物は、しわ、線、ひだ、傷跡を充填するため、かつ例えば、薄い唇をふくらませるか、またはくぼんだ目もしくは厚みが薄い頬を充填する等の皮膚組織を高めるための美容用途において使用されている。皮膚充填剤組成物において使用される１つの一般的なマトリックス重合体は、ヒアルロナンである。ヒアルロナンがヒトの体にとって自然であるため、それは、概して、耐性に優れており、多種多様の皮膚状態に対する極めてリスクの低い治療である。
【０００６】
かつては、ヒアルロナンを含む組成物は、非架橋結合状態で存在する自然に存在する重合体から作製されていた。自然に存在するヒアルロナンは、水分子に対して優れた生体適合性および親和性を呈するが、皮膚充填剤としては乏しい生体力学的特性を呈する。１つの主な理由は、この重合体が架橋結合されていないため、溶解性が高く、したがって、皮膚領域に投与されるとすぐに除去されることである。この生体内クリアランスは、主に、この重合体の迅速な分解、主にヒアルロニダーゼによる酵素分解およびフリーラジカルによる化学分解により達成される。したがって、依然として商業的に使用されているが、非架橋結合ヒアルロナン重合体を含む組成物は、投与後数日以内に分解する傾向があり、ひいては、それらの皮膚改善効果を維持するために極めて頻繁な再注入を必要とする。
【０００７】
これらの生体内分解経路の影響を最小限に抑えるために、マトリックス重合体は、安定化したヒドロゲルを形成するために相互に架橋結合される。架橋結合されたマトリックス重合体を含むヒドロゲルは、より固形の物質であるため、そのようなヒドロゲルを含む皮膚充填剤は、移植部位の定位置により長く留まる。さらに、ヒドロゲルのより固形の性質が、皮膚充填剤の機械的特性を改善し、その皮膚充填剤が、皮膚領域をより良好に引き上げ、かつ充填するため、これらのヒドロゲルは、皮膚充填剤としてより好適である。ヒアルロナン重合体は、典型的には、架橋剤と架橋結合されて、ヒアルロナン重合体間で共有結合を形成する。そのような架橋結合された重合体は、分解により耐性を示すより水溶性の低いヒドロゲルネットワークを形成し、したがって、非架橋結合ヒアルロナン組成物ほど頻繁な再注入を必要としない。
【０００８】
アスコルビン酸またはＡｓＡとしても知られるビタミンＣは、過酸化水素等の活性酸素種を減少させ、それにより中和し、ひいては心血管疾患、高血圧、慢性炎症性疾患、糖尿病、および重篤な火傷を伴う状態の治療を含む様々な臨床的利益のために酸化ストレスを低下させる抗酸化物質として周知である。例えば、いくつかの利益の中で、ビタミンＣは、抗炎症薬の役割を果たし、コラーゲン新生および血管新生を促進する。ビタミンＣは、酵素反応における補因子として機能することによりコラーゲン新生および／または血管新生を促進して、コラーゲン形成を促進し、血管および軟骨を発達させ、維持することで知られている。ビタミンＣは、チロシナーゼの生物学的機能を阻害して、メラニン形成を予防するか、またはメラニン色素沈着の色を薄くすることで知られている。これらの理由のため、ビタミンＣを含有する皮膚充填剤組成物の開発に関心が集まっている。
【０００９】
ビタミンＣは、概して、空気、光、および熱への暴露時に不安定である。それは、ある特定のレベルで細胞毒性であるとも考えられている。ビタミンＣがヒアルロン酸ゲルと物理的に混合され、かつ皮膚に注入されるとき、そのビタミンＣは、１週間未満にその混合物から完全に放出される。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
持続放出速度、すなわち、数日間ではなく数週間または数ヶ月間にわたる放出速度を有する、ビタミンＣまたは別のビタミンを有する注入可能なヒアルロン酸ベースの組成物を提供することが所望される。しかしながら、ビタミンを含む安定した有効な持続放出皮膚充填剤製品を開発することは困難であることが証明されている。本発明は、結合ビタミン、例えば、ビタミン誘導体を含む、改善されたヒアルロン酸ベースの皮膚充填剤組成物を提供する。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明は、皮膚状態の治療に有用な新規の皮膚充填剤を提供する。より具体的には、本発明は、生体適合性重合体、例えば、ヒアルロン酸、およびビタミン、例えば、ビタミンＣ、例えば、ビタミンＣ誘導体を一般的に含む、有効な長期持続性治療用皮膚充填剤組成物を提供する。
【００１２】
本発明の一態様において、重合体は、多糖類、例えば、ヒアルロン酸である。ヒアルロン酸は、架橋結合された成分を含む。ビタミンは、ビタミンＣ、例えば、ビタミンＣ誘導体を含み得る。より具体的には、ビタミンＣは、Ｌ‐アスコルビン酸２‐グルコシド（ＡＡ２Ｇ）、リン酸アスコルビル３‐アミノプロピル（ａｓｃｏｂｙｌ  ３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）（ビタゲン）、およびリン酸アスコルビルナトリウム（ＡＡ２Ｐ）のうちの少なくとも１つである。
【００１３】
ビタミンは、概して、正常な成長および栄養摂取のために必須である１群の有機化合物のうちのいずれかとして定義されており、それらが体によって合成され得ないため、食生活に少量必要とされる。
【００１４】
本発明の一態様において、ビタミンは、ビタミン誘導体であり、好適な反応プロセス、例えば、エーテル化、アミド化、およびエステル化により重合体に共有結合される。
【００１５】
結合度は、最大約５モル％、最大約１０モル％、最大約１５モル％、最大約２０モル％、最大約２５モル％、最大約３０モル％、または最大約４０モル％である。
【００１６】
本発明の別の態様において、架橋結合されたヒアルロン酸および結合ビタミンＣを含む注入可能な皮膚充填剤組成物の作製方法が提供される。
【００１７】
本発明のさらに別の態様において、本発明に従う組成物を皮膚に導入することを含む、皮膚欠損を治療する方法が提供される。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】Ｌ‐アスコルビン酸２‐グルコシド（ＡＡ２Ｇ）の構造の表示である。
【図２】リン酸アスコルビル３‐アミノプロピル（ａｓｃｏｂｙｌ  ３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）（ビタゲン）の構造の表示である。
【図３】リン酸アスコルビルナトリウム（ＡＡ２Ｐ）の構造の表示である。
【図４】１，４‐ブタンジオールジグリシジルエーテル（ＢＤＤＥ）の構造の表示である。
【図５】ペンタエリスリトールグリシダールエーテル（Ｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシド）の構造の表示である。
【図６】ペンタエリスリトール（３‐アミノプロピル）エーテル（Ｓｔａｒ‐ＰＥＧアミン）の構造の表示である。
【図７】本発明に従う様々な皮膚充填剤組成物についての結合度およびＧ’値を示す表である。
【図８】本発明に従うＨＡ‐ＡＡ２Ｇ（ＢＤＤＥ）皮膚充填剤組成物についての結合度、ＨＡ濃度、およびＧ’値を示す表である。
【図９】ＡＡ２Ｇ‐ＰＢＳ溶液からのＡｓＡ放出に対するα‐グルコシダーゼ濃度の影響を示す表である。
【図１０】本発明に従う結合された皮膚充填剤からの遊離ＡｓＡの放出プロファイル（放出維持）（モル％でのＡＡ２Ｇ変換対反応時間）の表示を示す。
【図１１Ａ】本発明に従う様々な皮膚充填剤についての追加の放出データを示す。
【図１１Ｂ】本発明に従う様々な皮膚充填剤についての追加の放出データを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明の一態様において、皮膚充填剤組成物が提供され、これらの組成物は、生体適合性重合体、例えば、架橋結合されたヒアルロン酸等の多糖類、およびその重合体に共有結合されたビタミンＣ誘導体を概して含む。その組成物は、皮膚の新規コラーゲン新生および他の治療的または美容的利益のためのビタミンＣの放出維持を提供する。例えば、皮内で、皮膚に導入されたときに、その組成物は、体内の内因性酵素と反応し、そして経時的に、生理活性ビタミンＣが酵素切断により生体内で生成される。ビタミンＣが数週間または数ヶ月の期間にわたりその組成物から放出されるにつれて、その付帯する利益が体にとって利用可能になる。
【００２０】
その重合体はタンパク質、ペプチドおよびポリペプチド、ポリリジン、コラーゲン、プロコラーゲン、エラスチン、およびラミニンからなる重合体の群から選択され得る。
【００２１】
その重合体はヒドロキシル、アミン、およびカルボキシル官能基を有する合成重合体、ポリ（ビニルアルコール）、ポリエチレングリコール、ポリビニルアミン、ポリアリルアミン、デアセチル化ポリアクリルアミド、ポリアクリル酸、およびポリメタクリル酸からなる重合体の群から選択され得る。その重合体は樹状（ｄｅｎｔｒｉｃ）ポリオールおよび樹状（ｄｅｎｔｒｉｃ）ポリアミンを含む、樹状（ｄｅｎｔｒｉｃ）または有枝重合体からなる重合体の群から選択され得る。その重合体はヒドロキシル、アミン、およびカルボキシル官能基を有する固体表面からなる重合体の群から選択され得る。
【００２２】
その多糖類はデンプンならびにその誘導体、デキストランならびにその誘導体、セルロースならびにその誘導体、キチンおよびキトサンおよびアルギン酸塩ならびにその誘導体を含む多糖類の群から選択され得る。
【００２３】
本発明の１つの例示的な実施形態において、重合体はグリコサミノグリカンである。本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、２つ、またはそれ以上の異なるグリコサミノグリカン重合体をさらに含み得る。本明細書中で使用されるとき、用語「グリコサミノグリカン」は「ＧＡＧ」および「ムコ多糖」と同義であり、そして繰返し二糖単位からなる長い直鎖多糖を指す。その繰返し単位はヘキソサミン（窒素含有六炭糖）に結合されたヘキソース（六炭糖）またはヘキスロン酸およびその医薬として許容される塩からなる。ＧＡＧファミリーのメンバーは、例えば、グルクロン酸、イズロン酸、ガラクトース、ガラクトサミン、グルコサミンのように、それらが含有するヘキソサミン、ヘキソース、またはヘキスロン酸単位の型において様々であり、そしてグリコシド結合の幾何においてもまた変化し得る。どんなグリコサミノグリカン重合体も、そのグリコサミノグリカン重合体が皮膚状態を改善するという条件で、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物において有用である。グリコサミノグリカンの非限定的な例として、コンドロイチン硫酸、デルマタン硫酸、ケラタン硫酸、ヒアルロナンが挙げられる。グリコサミノグリカンの許容される塩の非限定的な例として、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、およびそれらの組み合わせが挙げられる。本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物および方法において有用なグリコサミノグリカンおよびそれらから生じた重合体は、例えば、Ｐｉｒｏｎ  ａｎｄ  Ｔｈｏｌｉｎ，Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｉｎｇ，Ｈｙｄｒｏｇｅｌ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，Ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ  Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ（ｓ）  ａｎｄ  Ｈｙｄｒｏｇｅｌ（ｓ），ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ，米国特許公報第２００３／０１４８９９５号、Ｌｅｂｒｅｔｏｎ，Ｃｒｏｓｓ‐Ｌｉｎｋｉｎｇ  ｏｆ  Ｌｏｗ  ａｎｄ  Ｈｉｇｈ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｗｅｉｇｈｔ  Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ  Ｍｏｎｏｐｈａｓｅ  Ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ、Ｌｅｂｒｅｔｏｎ，Ｖｉｓｃｏｅｌａｓｔｉｃ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎ  Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  Ｓｏｄｉｕｍ  Ｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ  Ｍｅｔｈｙｌ  Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ，  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ，米国特許公報第２００８／００８９９１８号、Ｌｅｂｒｅｔｏｎ，Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ  Ａｃｉｄ‐Ｂａｓｅｄ  Ｇｅｌｓ  Ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ  Ｌｉｄｏｃａｉｎｅ，米国特許公報第２０１０／００２８４３８号、およびＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ  ｔｈｕｓ  Ｏｂｔａｉｎｅｄ，米国特許公報第２００６／０１９４７５８号、およびＤｉ  Ｎａｐｏｌｉ，Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  Ｉｎｔｒａｄｅｒｍａｌ  Ｓｏｆｔ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ａｕｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ，国際公開第  ２００４／０７３７５９号に示されており、それぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物および方法において有用なＧＡＧは、例えば、ヒアルロナンベースの皮膚充填剤、ＪＵＶＥＤＥＲＭ（登録商標）、ＪＵＶＥＤＥＲＭ（登録商標）３０、ＪＵＶＥＤＥＲＭ（登録商標）Ｕｌｔｒａ、ＪＵＶＥＤＥＲＭ（登録商標）Ｕｌｔｒａ  Ｐｌｕｓ、ＪＵＶＥＤＥＲＭ（登録商標）Ｕｌｔｒａ  ＸＣ、およびＪＵＶＥＤＥＲＭ（登録商標）Ｕｌｔｒａ  Ｐｌｕｓ  ＸＣ（Ａｌｌｅｒｇａｎ  Ｉｎｃ，Ｉｒｖｉｎｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）のように商業的に入手可能である。表１は代表的なＧＡＧを列挙する。
【００２４】
【表１】
2020179280.tif 000002
【００２５】
本発明の態様は、一部分において、コンドロイチン硫酸重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「コンドロイチン硫酸重合体」はＤ‐グルクロン酸（ＧｌｃＡ）およびＮ‐アセチル‐Ｄ‐ガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）の２つの交互に現れる単糖の二糖を含む様々な長さの直鎖状硫酸化重合体およびその医薬として許容される塩を指す。コンドロイチン硫酸重合体は、エピマー化され、Ｌ‐イズロン酸（ＩｄｏＡ）になるＤ‐グルクロン酸残基をもまた含み得る。その場合、生じる二糖はデルマタン硫酸と呼ばれる。コンドロイチン硫酸重合体は１００個超の糖の鎖を有することができ、そのうちのそれぞれは様々な位置および量で硫酸化され得る。コンドロイチン硫酸重合体は軟骨の重要な構造成分であり、そして圧縮に対するその抵抗性の大部分を提供する。どんなコンドロイチン硫酸重合体も、そのコンドロイチン硫酸重合体が皮膚状態を改善するという条件で、本明細書中に開示される組成物中で有用である。コンドロイチン硫酸の医薬として許容される塩の非限定的な例として、コンドロイチン硫酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸カリウム、コンドロイチン硫酸マグネシウム、コンドロイチン硫酸カルシウム、およびそれらの組み合わせが挙げられる。
【００２６】
本明細書の態様は、一部分において、ケラタン硫酸重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「ケラタン硫酸重合体」は、二糖単位であって、β‐Ｄ‐ガラクトースおよびＮ‐アセチル‐Ｄ‐ガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）をそれ自体含む、二糖単位を含む様々な長さの重合体およびその医薬として許容される塩を指す。ケラタン硫酸の繰返し領域内の二糖はフコシル化されることができ、そしてＮ‐アセチルノイラミン酸はその鎖の末端をキャップする。どんなケラタン硫酸重合体も、そのケラタン硫酸重合体が皮膚状態を改善するという条件で、本明細書中に開示される組成物中で有用である。ケラタン硫酸の医薬として許容される塩の非限定的な例として、ケラタン硫酸ナトリウム、ケラタン硫酸カリウム、ケラタン硫酸マグネシウム、ケラタン硫酸カルシウム、およびそれらの組み合わせが挙げられる。
【００２７】
本明細書の態様は、一部分において、ヒアルロナン重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「ヒアルロン酸重合体」は「ＨＡ重合体」、「ヒアルロン酸重合体」、および「ヒアルロン酸塩重合体」と同義であり、二糖単位であって、交互に現れるβ‐１，４およびβ‐１，３グリコシド結合により共に結合されるＤ‐グルクロン酸およびＤ‐Ｎ‐アセチルグルコサミン単量体をそれ自体含む、二糖単位を含む陰イオン性非硫酸化グリコサミノグリカン重合体およびその医薬として許容される塩を指す。ヒアルロナン重合体は動物および非動物源から精製され得る。ヒアルロナン重合体の大きさは約５，０００ダルトン〜約２０，０００，０００ダルトンに及び得る。どんなヒアルロナン重合体も、そのヒアルロナンが皮膚状態を改善するという条件で、本明細書中に開示される組成物中で有用である。ヒアルロナンの医薬として許容される塩の非限定的な例として、ヒアルロナンナトリウム、ヒアルロナンカリウム、ヒアルロナンマグネシウム、ヒアルロナンカルシウム、およびそれらの組み合わせが挙げられる。
【００２８】
本明細書の態様は、一部分において、架橋結合されたグリコサミノグリカン重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「架橋結合された」は個々の重合体分子または単量体鎖を結合して、ゲルのような、より安定な構造にする分子間結合を指す。よって、架橋結合されたグリコサミノグリカン重合体は少なくとも１つの個々の重合体分子を別の重合体分子に結合する少なくとも１つの分子間結合を有する。グリコサミノグリカン重合体の架橋結合はヒドロゲルの形成を典型的にもたらす。そのようなヒドロゲルは高い粘性を有し、そして細い針を通して押し出すために相当な力を要する。本明細書中に開示されるグリコサミノグリカン重合体は、非限定的に、多機能なＰＥＧベースの架橋剤、ジビニルスルホン、ジグリシジルエーテル、およびビス‐エポキシド、ビスカルボジイミドを含むジアルデヒドおよびジスルフィド架橋剤を用いて架橋結合され得る。ヒアルロナン架橋剤の非限定的な例として、ペンタエリスリトールテトラグリシジルエーテル（ＰＥＴＧＥ）のような他機能ＰＥＧベースの架橋剤、ジビニルスルホン（ＤＶＳ）、１，４‐ブタンジオールジグリシジルエーテル（ＢＤＤＥ）、１，２‐ビス（２，３‐エポキシプロポキシ）エチレン（ＥＧＤＧＥ）、１，２，７，８‐ジエポキシオクタン（ＤＥＯ）、（フェニレンビス‐（エチル）‐カルボジイミドおよび１，６ヘキサメチレンビス（エチルカルボジイミド）、アジピン酸ジヒドラジド（ＡＤＨ）、ビス（スルホスクシンイミジル）スベリン酸塩（ＢＳ）、ヘキサメチレンジアミン（ＨＭＤＡ）、１‐（２，３‐エポキシプロピル）‐２，３‐エポキシシクロヘキサン、またはそれらの組み合わせが挙げられる。他の有用な架橋剤は、参照によりその全体が組み込まれる、２０１０年１０月２２日出願のＳｔｒｏｕｍｐｏｕｌｉｓ  ａｎｄ  Ｔｅｚｅｌ，Ｔｕｎａｂｌｙ  Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｄ  Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ、米国特許出願第１２／９１０，４６６号中に開示されている。グリコサミノグリカン重合体を架橋結合する方法の非限定的な例は、例えば、に記載されている。本明細書に開示の組成物および方法において有用なグリコサミノグリカン重合体の非限定的な例は、例えば、Ｐｉｒｏｎ  ａｎｄ  Ｔｈｏｌｉｎ，Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｉｎｇ，Ｈｙｄｒｏｇｅｌ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，  Ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ  Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ（ｓ）  ａｎｄ  Ｈｙｄｒｏｇｅｌ（ｓ），ｕｓｅｓ  Ｔｈｅｒｅｏｆ，米国特許公報第２００３／０１４８９９５号、Ｌｅｂｒｅｔｏｎ，Ｃｒｏｓｓ‐Ｌｉｎｋｉｎｇ  ｏｆ  Ｌｏｗ  ａｎｄ  Ｈｉｇｈ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｗｅｉｇｈｔ  Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ Ｍｏｎｏｐｈａｓｅ  Ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ、Ｌｅｂｒｅｔｏｎ，Ｖｉｓｃｏｅｌａｓｔｉｃ  Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ  Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ  Ｓｏｄｉｕｍ  Ｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅ  ａｎｄ  Ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ  Ｍｅｔｈｙｌ  Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ，Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｕｓｅｓ，米国特許公報第２００８／００８９９１８号、Ｌｅｂｒｅｔｏｎ， Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ  Ａｃｉｄ‐Ｂａｓｅｄ  Ｇｅｌｓ  Ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ  Ｌｉｄｏｃａｉｎｅ，米国特許公報第２０１０／００２８４３８号、およびＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ  ａｎｄ  Ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ  ｔｈｕｓ  Ｏｂｔａｉｎｅｄ，米国特許公報第２００６／０１９４７５８号、およびＤｉ  Ｎａｐｏｌｉ，Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｍｅｔｈｏｄ  ｆｏｒ  Ｉｎｔｒａｄｅｒｍａｌ  Ｓｏｆｔ  Ｔｉｓｓｕｅ  Ａｕｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ，国際公開第２００４／０７３７５９号に記載されており、それぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００２９】
本明細書に従って、式中の「％」は重量対重量（すなわち、重量／重量）パーセントとして定義される。例として、１重量／重量％は、１０ｍｇ／ｇの濃度を意味する。
【００３０】
１つの実施形態において、ヒドロゲル組成物は、架橋結合されたグリコサミノグリカン重合体を含み、ここでその架橋結合されたグリコサミノグリカン重合体は本明細書中に開示されるように皮膚状態を改善するのに十分な量で存在する。この実施形態の態様において、組成物は、架橋結合されたコンドロイチン硫酸重合体、架橋結合されたデルマタン硫酸重合体、架橋結合されたケラタン硫酸重合体、架橋結合されたヘパラン重合体、架橋結合されたヘパラン硫酸重合体、または架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。この実施形態の他の態様において、組成物は、架橋結合されたグリコサミノグリカンを含み、ここでその架橋結合されたグリコサミノグリカンは、例えば、その組成物中に存在する全グリコサミノグリカンの約１重量％、約２重量％、約３重量％、約４重量％、約５重量％、約６重量％、約７重量％、約８重量％、または約９％もしくは約１０重量％を示す。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、架橋結合されたグリコサミノグリカンを含み、ここでその架橋結合されたグリコサミノグリカンは、例えば、その組成物中に存在する全グリコサミノグリカンの最大１重量％、最大２重量％、最大３重量％、最大４重量％、最大５重量％、最大６重量％、最大７重量％、最大８重量％、最大９重量％、または最大１０重量％を示す。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、架橋結合されたグリコサミノグリカンを含み、ここでその架橋結合されたグリコサミノグリカンは、例えば、その組成物中に存在する全グリコサミノグリカンの約０重量％〜約２０重量％、約１重量％〜約１７重量％、約３重量％〜約１５重量％、または約５重量％〜約１０重量％、例えば、約１１重量％、約１５重量％、または約１７重量％を示す。
【００３１】
この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、架橋結合されたグリコサミノグリカンを含み、ここでその架橋結合されたグリコサミノグリカンは、例えば、約２ｍｇ／ｇ、約３ｍｇ／ｇ、約４ｍｇ／ｇ、約５ｍｇ／ｇ、約６ｍｇ／ｇ、約７ｍｇ／ｇ、約８ｍｇ／ｇ、約９ｍｇ／ｇ、約１０ｍｇ／ｇ、約１１ｍｇ／ｇ、約１２ｍｇ／ｇ、約１３ｍｇ／ｇ、約１３．５ｍｇ／ｇ、約１４ｍｇ／ｇ、約１５ｍｇ／ｇ、約１６ｍｇ／ｇ、約１７ｍｇ／ｇ、約１８ｍｇ／ｇ、約１９ｍｇ／ｇ、または約２０ｍｇ／ｇの濃度で存在する。この実施形態の他の態様において、組成物は、架橋結合されたグリコサミノグリカンを含み、ここでその架橋結合されたグリコサミノグリカンは、例えば、少なくとも１ｍｇ／ｇ、少なくとも２ｍｇ／ｇ、少なくとも３ｍｇ／ｇ、少なくとも４ｍｇ／ｇ、少なくとも５ｍｇ／ｇ、少なくとも１０ｍｇ／ｇ、少なくとも１５ｍｇ／ｇ、少なくとも２０ｍｇ／ｇ、または少なくとも２５ｍｇ／ｇ、または約４０ｍｇ／ｇの濃度で存在する。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、架橋結合されたグリコサミノグリカンを含み、ここでその架橋結合されたグリコサミノグリカンは、例えば、最大１ｍｇ／ｇ、最大２ｍｇ／ｇ、最大３ｍｇ／ｇ、最大４ｍｇ／ｇ、最大５ｍｇ／ｇ、最大１０ｍｇ／ｇ、最大１５ｍｇ／ｇ、最大２０ｍｇ／ｇ、最大２５ｍｇ／ｇ、または最大４０ｍｇ／ｇの濃度で存在する。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、架橋結合されたグリコサミノグリカンを含み、ここでその架橋結合されたグリコサミノグリカンは、例えば、約７．５ｍｇ／ｇ〜約１９．５ｍｇ／ｇ、約８．５ｍｇ／ｇ〜約１８．５ｍｇ／ｇ、約９．５ｍｇ／ｇ〜約１７．５ｍｇ／ｇ、約１０．５ｍｇ／ｇ〜約１６．５ｍｇ／ｇ、約１１．５ｍｇ／ｇ〜約１５．５ｍｇ／ｇ、または約１２．５ｍｇ／ｇ〜約１４．５ｍｇ／ｇ、最大約４０ｍｇ／ｇの濃度で存在する。
【００３２】
本明細書の態様は、一部分において、低分子量のヒアルロナン重合体、高分子量のヒアルロナン重合体、または低および高分子量両方のヒアルロナン重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、「ヒアルロナン」について言及するとき、用語「高分子量」は、１，０００，０００ダルトン、またはそれ以上の平均分子量を有するヒアルロナン重合体を指す。高分子量ヒアルロナン重合体の非限定的な例として、ヒアルロナン重合体約１，５００，０００ダルトン、約２，０００，０００ダルトン、約２，５００，０００ダルトン、約３，０００，０００ダルトン、約３，５００，０００ダルトン、約４，０００，０００ダルトン、約４，５００，０００ダルトン、および約５，０００，０００ダルトンが挙げられる。本明細書中で使用されるとき、「ヒアルロナン」について言及するとき、用語「低分子量」は、１，０００，０００ダルトン未満の平均分子量を有するヒアルロナン重合体を指す。低分子量ヒアルロナン重合体の非限定的な例として、約２００，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン、約４００，０００ダルトン、約５００，０００ダルトン、約６００，０００ダルトン、約７００，０００ダルトン、約８００，０００ダルトンの、および約９００，０００ダルトンのヒアルロナン重合体が挙げられる。
【００３３】
１つの実施形態において、組成物は、低分子量の架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。この実施形態の態様において、組成物は、例えば、約１００，０００ダルトン、約２００，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン、約４００，０００ダルトン、約５００，０００ダルトン、約６００，０００ダルトン、約７００，０００ダルトン、約８００，０００ダルトン、または約９００，０００ダルトンの平均分子量を有する架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、例えば、最大１００，０００ダルトン、最大２００，０００ダルトン、最大３００，０００ダルトン、最大４００，０００ダルトン、最大５００，０００ダルトン、最大６００，０００ダルトン、最大７００，０００ダルトン、最大８００，０００ダルトン、最大９００，０００ダルトン、または最大９５０，０００ダルトンの平均分子量を有する架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、例えば、約１００，０００ダルトン〜約５００，０００ダルトン、約２００，０００ダルトン〜約５００，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン〜約５００，０００ダルトン、約４００，０００ダルトン〜約５００，０００ダルトン、約５００，０００ダルトン〜約９５０，０００ダルトン、約６００，０００ダルトン〜約９５０，０００ダルトン、約７００，０００ダルトン〜約９５０，０００ダルトン、約８００，０００ダルトン〜約９５０，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン〜約６００，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン〜約７００，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン〜約８００，０００ダルトン、または約４００，０００ダルトン〜約７００，０００ダルトンの平均分子量を有する架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。
【００３４】
別の実施形態において、組成物は、高分子量の架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。この実施形態の態様において、組成物は、例えば、約１，０００，０００ダルトン、約１，５００，０００ダルトン、約２，０００，０００ダルトン、約２，５００，０００ダルトン、約３，０００，０００ダルトン、約３，５００，０００ダルトン、約４，０００，０００ダルトン、約４，５００，０００ダルトン、または約５，０００，０００ダルトンの平均分子量を有する架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、例えば、少なくとも１，０００，０００ダルトン、少なくとも１，５００，０００ダルトン、少なくとも２，０００，０００ダルトン、少なくとも２，５００，０００ダルトン、少なくとも３，０００，０００ダルトン、少なくとも３，５００，０００ダルトン、少なくとも４，０００，０００ダルトン、少なくとも４，５００，０００ダルトン、または少なくとも５，０００，０００ダルトンの平均分子量を有する架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、例えば、約１，０００，０００ダルトン〜約５，０００，０００ダルトン、約１，５００，０００ダルトン〜約５，０００，０００ダルトン、約２，０００，０００ダルトン〜約５，０００，０００ダルトン、約２，５００，０００ダルトン〜約５，０００，０００ダルトン、約２，０００，０００ダルトン〜約３，０００，０００ダルトン、約２，５００，０００ダルトン〜約３，５００，０００ダルトン、または約２，０００，０００ダルトン〜約４，０００，０００ダルトンの平均分子量を有する架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。
【００３５】
さらに別の実施形態において、組成物は、架橋結合されたヒアルロナン重合体を含み、ここでその架橋結合されたヒアルロナン重合体は様々な割合の高分子量ヒアルロナン重合体および低分子量ヒアルロナン重合体両方の組み合わせを含む。この実施形態の態様において、組成物は、架橋結合されたヒアルロナン重合体を含み、ここでその架橋結合されたヒアルロナン重合体は、約２０：１、約１５：１、約１０：１、約５：１、約１：１、約１：５、約１：１０、約１：１５、または約１：２０の割合の高分子量ヒアルロナン重合体および低分子量ヒアルロナン重合体両方の組み合わせを含む。
【００３６】
本明細書の態様は、一部分において、ある程度の架橋結合を有する架橋結合されたグリコサミノグリカン重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「架橋結合の程度」は架橋剤に結合された、例えば、ヒアルロナンの二糖単量体単位等のグリコサミノグリカン重合体単量体単位の割合を指す。架橋結合の程度は架橋剤対グリコサミノグリカンの重量パーセント率として表される。
【００３７】
本明細書の態様は、一部分において、架橋結合されていないグリコサミノグリカン重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「架橋結合されていない（非架橋結合）」は個々のグリコサミノグリカン重合体分子または単量体鎖を結合する分子間結合の欠如を指す。よって、非架橋結合グリコサミノグリカン重合体は分子間結合によりいかなる他のグリコサミノグリカン重合体に結合されていない。この実施形態の態様において、組成物は、非架橋結合コンドロイチン硫酸重合体、非架橋結合デルマタン硫酸重合体、非架橋結合ケラタン硫酸重合体、非架橋結合ヘパラン重合体、非架橋結合ヘパラン硫酸重合体、または非架橋結合ヒアルロナン重合体を含む。非架橋結合グリコサミノグリカン重合体は、水溶性であり、概して、天然では流体のままである。よって、非架橋結合グリコサミノグリカン重合体は、多くの場合、細い針を通した組成物の押し出しプロセスを促進するための潤滑剤としてグリコサミノグリカン重合体ベースのヒドロゲル組成物と混合される。
１つの実施形態において、組成物は、非架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含み、ここでその非架橋結合グリコサミノグリカン重合体は本明細書中に開示されるように皮膚状態を改善するのに十分な量で存在する。この実施形態の態様において、組成物は、非架橋結合グリコサミノグリカンを含み、ここでその非架橋結合グリコサミノグリカンは、例えば、約２ｍｇ／ｇ、約３ｍｇ／ｇ、約４ｍｇ／ｇ、約５ｍｇ／ｇ、約６ｍｇ／ｇ、約７ｍｇ／ｇ、約８ｍｇ／ｇ、約９ｍｇ／ｇ、約１０ｍｇ／ｇ、約１１ｍｇ／ｇ、約１２ｍｇ／ｇ、約１３ｍｇ／ｇ、約１３．５ｍｇ／ｇ、約１４ｍｇ／ｇ、約１５ｍｇ／ｇ、約１６ｍｇ／ｇ、約１７ｍｇ／ｇ、約１８ｍｇ／ｇ、約１９ｍｇ／ｇ、約２０ｍｇ／ｇ、約４０ｍｇ／ｇ、または約６０ｍｇ／ｇの濃度で存在する。この実施形態の他の態様において、組成物は、非架橋結合グリコサミノグリカンを含み、ここでその非架橋結合グリコサミノグリカンは、例えば、少なくとも１ｍｇ／ｇ、少なくとも２ｍｇ／ｇ、少なくとも３ｍｇ／ｇ、少なくとも４ｍｇ／ｇ、少なくとも５ｍｇ／ｇ、少なくとも１０ｍｇ／ｇ、少なくとも１５ｍｇ／ｇ、少なくとも２０ｍｇ／ｇ、少なくとも２５ｍｇ／ｇ、少なくとも３５ｍｇ／ｇ、または少なくとも４０ｍｇ／ｇの濃度で存在する。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、非架橋結合グリコサミノグリカンを含み、ここでその非架橋結合グリコサミノグリカンは、例えば、最大１ｍｇ／ｇ、最大２ｍｇ／ｇ、最大３ｍｇ／ｇ、最大４ｍｇ／ｇ、最大５ｍｇ／ｇ、最大１０ｍｇ／ｇ、最大１５ｍｇ／ｇ、最大２０ｍｇ／ｇ、または最大２５ｍｇ／ｇの濃度で存在する。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、非架橋結合グリコサミノグリカンを含み、ここでその非架橋結合グリコサミノグリカンは、例えば、約１ｍｇ／ｇ〜約６０ｍｇ／ｇ、約１０ｍｇ／ｇ〜約４０ｍｇ／ｇ、約７．５ｍｇ／ｇ〜約１９．５ｍｇ／ｇ、約８．５ｍｇ／ｇ〜約１８．５ｍｇ／ｇ、約９．５ｍｇ／ｇ〜約１７．５ｍｇ／ｇ、約１０．５ｍｇ／ｇ〜約１６．５ｍｇ／ｇ、約１１．５ｍｇ／ｇ〜約１５．５ｍｇ／ｇ、または約１２．５ｍｇ／ｇ〜約１４．５ｍｇ／ｇの濃度で存在する。
【００３８】
１つの実施形態において、組成物は、低分子量の非架橋結合ヒアルロナン重合体を含む。この実施形態の態様において、組成物は、例えば、約１００，０００ダルトン、約２００，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン、約４００，０００ダルトン、約５００，０００ダルトン、約６００，０００ダルトン、約７００，０００ダルトン、約８００，０００ダルトン、または約９００，０００ダルトンの平均分子量を有する非架橋結合ヒアルロナンを含む。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、例えば、最大１００，０００ダルトン、最大２００，０００ダルトン、最大３００，０００ダルトン、最大４００，０００ダルトン、最大５００，０００ダルトン、最大６００，０００ダルトン、最大７００，０００ダルトン、最大８００，０００ダルトン、最大９００，０００ダルトン、または最大９５０，０００の平均分子量を有する非架橋結合ヒアルロナン重合体を含む。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、例えば、約１００，０００ダルトン〜約５００，０００ダルトン、約２００，０００ダルトン〜約５００，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン〜約５００，０００ダルトン、約４００，０００ダルトン〜約５００，０００ダルトン、約５００，０００ダルトン〜約９５０，０００ダルトン、約６００，０００ダルトン〜約９５０，０００ダルトン、約７００，０００ダルトン〜約９５０，０００ダルトン、約８００，０００ダルトン〜約９５０，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン〜約６００，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン〜約７００，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン〜約８００，０００ダルトン、または約４００，０００ダルトン〜約７００，０００ダルトンの平均分子量を有する非架橋結合ヒアルロナン重合体を含む。
【００３９】
別の実施形態において、組成物は、高分子量の非架橋結合ヒアルロナン重合体を含む。この実施形態の態様において、組成物は、例えば、約１，０００，０００ダルトン、約１，５００，０００ダルトン、約２，０００，０００ダルトン、約２，５００，０００ダルトン、約３，０００，０００ダルトン、約３，５００，０００ダルトン、約４，０００，０００ダルトン、約４，５００，０００ダルトン、または約５，０００，０００ダルトンの平均分子量を有する非架橋結合ヒアルロナンを含む。この実施形態の他の態様において、組成物は、例えば、少なくとも１，０００，０００ダルトン、少なくとも１，５００，０００ダルトン、少なくとも２，０００，０００ダルトン、少なくとも２，５００，０００ダルトン、少なくとも３，０００，０００ダルトン、少なくとも３，５００，０００ダルトン、少なくとも４，０００，０００ダルトン、少なくとも４，５００，０００ダルトン、または少なくとも５，０００，０００ダルトンの平均分子量を有する非架橋結合ヒアルロナン重合体を含む。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、例えば、約１，０００，０００ダルトン〜約５，０００，０００ダルトン、約１，５００，０００ダルトン〜約５，０００，０００ダルトン、約２，０００，０００ダルトン〜約５，０００，０００ダルトン、約２，５００，０００ダルトン〜約５，０００，０００ダルトン、約２，０００，０００ダルトン〜約３，０００，０００ダルトン、約２，５００，０００ダルトン〜約３，５００，０００ダルトン、または約２，０００，０００ダルトン〜約４，０００，０００ダルトンの平均分子量を有する非架橋結合ヒアルロナン重合体を含む。さらに他の態様において、組成物は、例えば、２，０００，０００ダルトン超〜約３，０００，０００ダルトン未満、２，０００，０００ダルトン超〜約３，５００，０００ダルトン未満、２，０００，０００ダルトン超〜約４，０００，０００ダルトン未満、２，０００，０００ダルトン超〜約４，５００，０００ダルトン未満、２，０００，０００ダルトン超〜約５，０００，０００ダルトン未満の平均分子量を有する非架橋結合ヒアルロナン重合体を含有する。
【００４０】
別の実施形態において、組成物は、非架橋結合ヒアルロナン重合体を含み、ここでその非架橋結合ヒアルロナンは、様々な割合の高分子量ヒアルロナン重合体および低分子量ヒアルロナン重合体両方の組み合わせを含む。この実施形態の態様において、組成物は、非架橋結合ヒアルロナン重合体を含み、ここでその非架橋結合ヒアルロナン重合体は、約２０：１、約１５：１、約１０：１、約５：１、約１：１、約１：５、約１：１０、約１：１５、または約１：２０の割合の高分子量ヒアルロナン重合体および低分子量ヒアルロナン重合体両方の組み合わせを含む。
【００４１】
本明細書の態様は、一部分において、実質的に架橋結合されていないグリコサミノグリカン重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「実質的に架橋結合されていない（実質的に非架橋結合）」は、組成物のうちの少なくとも９０重量％のレベルでの本明細書中に開示される組成物中の非架橋結合グリコサミノグリカン重合体の存在を指し、その組成物のうちの残りの最大１０重量％は架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含む他の成分から成る。この実施形態の態様において、組成物は、実質的に非架橋結合のコンドロイチン硫酸重合体、実質的に非架橋結合のデルマタン硫酸重合体、実質的に非架橋結合のケラタン硫酸重合体、実質的に非架橋結合のヘパラン重合体、実質的に非架橋結合のヘパラン硫酸重合体、または実質的に非架橋結合のヒアルロナン重合体を含む。この実施形態の他の態様において、組成物は、非架橋結合グリコサミノグリカンを含み、ここでその非架橋結合グリコサミノグリカンは、例えば、その組成物中に存在する全グリコサミノグリカンの約９０重量％以上、約９１重量％以上、約９２重量％以上、約９３重量％以上、約９４重量％以上、約９５重量％以上、約９６重量％以上、約９７重量％以上、約９８重量％以上、または約９９重量％以上、または約１００重量％を示す。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、非架橋結合グリコサミノグリカンを含み、ここでその非架橋結合グリコサミノグリカンは、例えば、その組成物中に存在する全グリコサミノグリカンの約９０重量％〜約１００重量％、約９３重量％〜約１００重量％、約９５重量％〜約１００重量％、または約９７重量％〜約１００重量％を示す。
【００４２】
本明細書の態様は、一部分において、架橋結合グリコサミノグリカン重合体を本質的に含まないヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「本質的に含まない」（または「本質的に〜からなる」）は微量な架橋結合マトリックス重合体しか検出され得ない組成物を指す。この実施形態の一態様において、組成物は、架橋結合コンドロイチン硫酸重合体を本質的に含まないコンドロイチン硫酸、架橋結合デルマタン硫酸重合体を本質的に含まないデルマタン硫酸、架橋結合ケラタン硫酸重合体を本質的に含まないケラタン硫酸、架橋結合ヘパラン重合体を本質的に含まないヘパラン、架橋結合ヘパラン硫酸重合体を本質的に含まないヘパラン硫酸、または架橋結合ヒアルロナン重合体を本質的に含まないヒアルロナン硫酸を含む。
【００４３】
本明細書の態様は、一部分において、架橋結合グリコサミノグリカン重合体を完全に含まないヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「完全に含まない」は使用される装置またはプロセスの検出範囲内で架橋結合グリコサミノグリカン重合体が検出され得ない、またはその存在が確認され得ない組成物を指す。この実施形態の一態様において、組成物は、架橋結合コンドロイチン硫酸重合体を完全に含まないコンドロイチン硫酸、架橋結合デルマタン硫酸重合体を完全に含まないデルマタン硫酸、架橋結合ケラタン硫酸重合体を完全に含まないケラタン硫酸、架橋結合ヘパラン重合体を完全に含まないヘパラン、架橋結合ヘパラン硫酸重合体を完全に含まないヘパラン硫酸、または架橋結合ヒアルロナン重合体を完全に含まないヒアルロナン硫酸を含む。
【００４４】
本明細書の態様は、一部分において、ある割合の架橋結合グリコサミノグリカン重合体および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。架橋結合および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体のこの割合はゲル：流体率としてもまた知られる。いかなるゲル：流体率も、そのような割合が本明細書中に開示されるように皮膚状態を改善する本明細書中に開示される組成物を作製するという条件で、本明細書中に開示される組成物の作製において有用である。本発明に係る組成物中のゲル：流体率の非限定的な例として、１００：０、９８：２、９０：１０、７５：２５、７０：３０、６０：４０、５０：５０、４０：６０、３０：７０、２５：７５、１０：９０、２：９８、および０：１００が挙げられる。
【００４５】
この実施形態の態様において、組成物は、架橋結合グリコサミノグリカン重合体および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含み、ここでそのゲル：流体率は、例えば、約０：１００、約１：９９、約２：９８、約３：９７、約４：９６、約５：９５、約６：９４、約７：９３、約８：９２、約９：９１、または約１０：９０である。この実施形態の他の態様において、組成物は、架橋結合グリコサミノグリカン重合体および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含み、ここでそのゲル：流体率は、例えば、最大１：９９、最大２：９８、最大３：９７、最大４：９６、最大５：９５、最大６：９４、最大７：９３、最大８：９２、最大９：９１、または最大１０：９０である。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、架橋結合グリコサミノグリカン重合体および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含み、ここでそのゲル：流体率は、例えば、約０：１００〜約３：９７、約０：１００〜約５：９５、または約０：１００〜約１０：９０である。
【００４６】
この実施形態の他の態様において、組成物は、架橋結合グリコサミノグリカン重合体および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含み、ここでそのゲル：流体率は、例えば、約１５：８５、約２０：８０、約２５：７５、約３０：７０、約３５：６５、約４０：６０、約４５：５５、約５０：５０、約５５：４５、約６０：４０、約６５：３５、約７０：３０、約７５：２５、約８０：２０、約８５：１５、約９０：１０、約９５：５、約９８：２、または約１００：０である。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、架橋結合グリコサミノグリカン重合体および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含み、ここでそのゲル：流体率は、例えば、最大１５：８５、最大２０：８０、最大２５：７５、最大３０：７０、最大３５：６５、最大４０：６０、最大４５：５５、最大５０：５０、最大５５：４５、最大６０：４０、最大６５：３５、最大７０：３０、最大７５：２５、最大８０：２０、最大８５：１５、最大９０：１０、最大９５：５、最大９８：２、または最大１００：０である。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、架橋結合グリコサミノグリカン重合体および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含み、ここでそのゲル：流体率は、例えば、約１０：９０〜約７０：３０、約１５：８５〜約７０：３０、約１０：９０〜約５５：４５、約８０：２０〜約９５：５、約９０：１０〜約１００：０、約７５：２５〜約１００：０、または約６０：４０〜約１００：０である。
【００４７】
本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、その組成物が個人に投与されるとき有益な効果を提供する別の剤または剤の組み合わせをさらに含み得る。そのような有益な剤は非限定的に、抗酸化物質、かゆみ止め、抗セルライト剤、抗傷跡剤、抗炎症剤、麻酔剤、抗刺激物剤、血管収縮薬、血管拡張薬、止血剤もしくは抗線溶剤のような抗出血剤、角質溶解剤、テンション剤、抗ざそう剤、色素沈着剤、抗色素沈着剤、または保湿剤を含む。
【００４８】
本明細書の態様は、一部分において、麻酔剤を随意に含み得る、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を提供する。麻酔剤は好ましくは局所麻酔剤、すなわち、例えば、アミノアミド局所麻酔薬およびアミノエステル局所麻酔薬等の、可逆的な局所麻酔および痛覚の喪失を引き起こす麻酔剤である。本明細書中に開示される組成物中に含まれる麻酔剤の量はその組成物の投与に際して個人が経験する痛みをやわらげるのに有効な量である。よって、本明細書中に開示される組成物中に含まれる麻酔剤の量はその組成物総量のうちの約０．１重量％〜約５重量％である。麻酔剤の非限定的な例として、リドカイン、アムブカイン（ａｍｂｕｃａｉｎｅ）、アモラノン、アミロカイン（ａｍｙｌｏｃａｉｎｅ）、ベノキシネート、ベンゾカイン、ベトキシカイン（ｂｅｔｏｘｙｃａｉｎｅ）、ビフェナミン、ブピバカイン、ブタカイン、ブタンベン、ブタニリカイン、ブテタミン、ブトキシカイン（ｂｕｔｏｘｙｃａｉｎｅ）、カルチカイン、クロロプロカイン、コカエチレン、コカイン、シクロメチカイン、ジブカイン、ジメチソキン（ｄｉｍｅｔｈｙｓｏｑｕｉｎ）、ジメトカイン（ｄｉｍｅｔｈｏｃａｉｎｅ）、ジペロドン、ジシクロニン（ｄｙｃｙｃｌｏｎｉｎｅ）、エクゴニジン（ｅｃｇｏｎｉｄｉｎｅ）、エクゴニン、塩化エチル、エチドカイン、ベータ‐ユーカイン、ユープロシン（ｅｕｐｒｏｃｉｎ）、フェナルコミン（ｆｅｎａｌｃｏｍｉｎｅ）、フォルモカイン（ｆｏｒｍｏｃａｉｎｅ）、ヘキシルカイン、ヒドロキシテトラカイン、イソブチルｐ‐アミノ安息香酸、ロイシノカイン（ｌｅｕｃｉｎｏｃａｉｎｅ）メシレート、レボキサドロール（ｌｅｖｏｘａｄｒｏｌ）、リドカイン、メピバカイン、メプリルカイン、メタブトキシカイン、塩化メチル、ミルテカイン（ｍｙｒｔｅｃａｉｎｅ）、ネパイン、オクタカイン（ｏｃｔａｃａｉｎｅ）、オルトカイン、オキセサゼイン、パレトキシカイン（ｐａｒｅｔｈｏｘｙｃａｉｎｅ）、フェナカイン、フェノール、ピペロカイン、ピリドカイン（ｐｉｒｉｄｏｃａｉｎｅ）、 ポリドカノール、プラモキシン、プリロカイン、プロカイン、プロパノカイン（ｐｒｏｐａｎｏｃａｉｎｅ）、プロパラカイン、プロピポカイン（ｐｒｏｐｉｐｏｃａｉｎｅ）、プロポキシカイン、スードコカイン（ｐｓｕｅｄｏｃｏｃａｉｎｅ）、ピロカイン（ｐｙｒｒｏｃａｉｎｅ）、ロピバカイン、サリチルアルコール、テトラカイン、トリカイン、トリメカイン、ゾラミン、それらの組み合わせ、およびそれらの塩が挙げられる。アミノエステル局所麻酔薬の非限定的な例として、プロカイン、クロロプロカイン、コカイン、シクロメチカイン、シメトカイン（ｃｉｍｅｔｈｏｃａｉｎｅ）（ラロカイン（ｌａｒｏｃａｉｎｅ））、プロポキシカイン、プロカイン（ノボカイン）、プロパラカイン、テトラカイン（アメソカイン）を含む。アミノアミド局所麻酔薬の非限定的な例として、アルチカイン、ブピバカイン、シンコカイン（ジブカイン）、エチドカイン、レボブピバカイン、リドカイン（リグノカイン）、メピバカイン、ピペロカイン、プリロカイン、ロピバカイン、およびトリメカインが挙げられる。本明細書中に開示される組成物は、単一の麻酔剤または複数��麻酔剤を含み得る。組み合わせ局所麻酔薬の非限定的な例には、リドカイン／プリロカイン（ＥＭＬＡ）がある。
【００４９】
したがって、１つの実施形態において、本明細書中に開示される組成物は、麻酔剤およびその塩を含む。この実施形態の態様において、本明細書中に開示される組成物は、アミノアミド局所麻酔薬およびその塩またはアミノエステル局所麻酔薬およびその塩を含む。この実施形態の他の態様において、本明細書中に開示される組成物は、プロカイン、クロロプロカイン、コカイン、シクロメチカイン、シメトカイン、プロポキシカイン、プロカイン、プロパラカイン、テトラカイン、もしくはそれらの塩、またはそれらの組み合わせを含む。この実施形態のさらに他の態様において、本明細書中に開示される組成物は、アルチカイン、ブピバカイン、シンコカイン、エチドカイン、レボブピバカイン、リドカイン、メピバカイン、ピペロカイン、プリロカイン、ロピバカイン、トリメカイン、もしくはそれらの塩、またはそれらの組み合わせを含む。この実施形態のさらに他の態様において、本明細書中に開示される組成物は、リドカイン／プリロカインの組み合わせを含む。
【００５０】
この実施形態の他の態様において、本明細書中に開示される組成物は、例えば、その全組成物の約０．１重量％、約０．２重量％、約０．３重量％、約０．４重量％、約０．５重量％、約０．６重量％、約０．７重量％、約０．８重量％、約０．９重量％、約１．０重量％、約２．０重量％、約３．０重量％、約４．０重量％、約５．０重量％、約６．０重量％、約７．０重量％、約８．０重量％、約９．０重量％、または約１０重量％の量の麻酔剤を含む。さらに他の態様において、本明細書中に開示される組成物は、例えば、その全組成物の少なくとも０．１重量％、少なくとも０．２重量％、少なくとも０．３重量％、少なくとも０．４重量％、少なくとも０．５重量％、少なくとも０．６重量％、少なくとも０．７重量％、少なくとも０．８重量％、少なくとも０．９重量％、少なくとも１．０重量％、少なくとも２．０重量％、少なくとも３．０重量％、少なくとも４．０重量％、少なくとも５．０重量％、少なくとも６．０重量％、少なくとも７．０重量％、少なくとも８．０重量％、少なくとも９．０重量％、または少なくとも１０重量％の量の麻酔剤を含む。さらに他の態様において、本明細書中に開示される組成物は、例えば、その全組成物の最大０．１重量％、最大０．２重量％、最大０．３重量％、最大０．４重量％、最大０．５重量％、最大０．６重量％、最大０．７重量％、最大０．８重量％、最大０．９重量％、最大１．０重量％、最大２．０重量％、最大３．０重量％、最大４．０重量％、最大５．０重量％、最大６．０重量％、最大７．０重量％、最大８．０重量％、最大９．０重量％、または最大１０重量％の量の麻酔剤を含む。さらなる態様において、本明細書中に開示される組成物は、例えば、その全組成物の約０．１重量％〜約０．５重量％、約０．１重量％〜約１．０重量％、約０．１重量％〜約２．０重量％、約０．１重量％〜約３．０重量％、約０．１重量％〜約４．０重量％、約０．１重量％〜約５．０重量％、約０．２重量％〜約０．９重量％、約０．２重量％〜約１．０重量％、約０．２重量％〜約２．０重量％、約０．５重量％〜約１．０重量％、または約０．５重量％〜約２．０重量％の量の麻酔剤を含む。
【００５１】
別の実施形態において、本明細書中に開示される組成物は、麻酔剤を含まない。
【００５２】
本発明の一態様において、重合体、例えば、グリコサミノグリカン重合体、例えば、ヒアルロン酸重合体、例えば、少なくとも一部が架橋結合されるヒアルロン酸およびその重合体に共有結合された有益な剤を含む、注入可能な皮膚充填剤が提供される。
【００５３】
その重合体に共有結合される有益な剤は、例えば、体内でのその剤の放出の延長を高めるために、その重合体に化学的に結合され得るビタミン、抗酸化物質、増殖因子、ペプチド、または他のいかなる有益な剤を含み得る。
【００５４】
その有益な剤はビタミンを含み得る。いくつかの実施形態において、ビタミンはビタミンＣ、レチノイド、およびビタミンＥのうちの少なくとも１つである。
【００５５】
１つの特に有利な実施形態において、その重合体に共有結合される有益な剤はビタミンＣ、またはビタミンＣ誘導体である。その組成物中のビタミンＣの量は、体内で放出されたとき少なくとも１つの所望の治療的または美容的利益、例えば、非限定的に、コラーゲン新生、抗炎症、細胞生存率の向上、抗酸化、血管新生、不透明さ、および他の利益を提供するのに有効な量である。本明細書中に開示される組成物中に含まれるビタミンＣの量はその組成物総量のうちの約０．０４重量％〜約５．０重量％、例えば、その組成物総量のうちの約０．１重量％〜約４．０重量％、例えば、その組成物総量のうちの約０．２重量％〜約２．０重量％である。１つの実施形態において、本明細書中に開示される組成物中に含まれるビタミンＣの量はその組成物総量のうちの約０．３重量％〜約１．２重量％である。
【００５６】
本発明に係る組成物中の重合体に共有結合される好適なビタミンＣまたはビタミンＣ誘導体はアスコルビン酸、Ｌ‐アスコルビン酸、Ｌ‐アスコルビン酸２‐硫酸塩（ＡＡ‐２Ｓ）およびＬ‐アスコルビン酸２‐リン酸塩（ＡＡ‐２Ｐ）、アスコルビン酸２‐Ｏ‐グルコシド（ＡＡ‐２Ｇ）、６‐Ｏ‐アシル‐２‐Ｏ‐アルファ‐Ｄ‐グルコピラノシル‐Ｌ‐アスコルビン酸（６‐Ａｃｙｌ‐ＡＡ‐２Ｇ）、（リン酸アスコルビル３‐アミノプロピル（ａｓｃｏｂｙｌ  ３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、パルミチン酸アスコルビル）、それらの誘導体および組み合わせを含む。本明細書中に開示される組成物は、単一のビタミンＣ剤または複数のビタミンＣ剤を含み得る。
【００５７】
本発明の別の態様において、その重合体に化学的に結合される有益な剤はレチノイドである。好適なレチノイドはレチノール（‐ヒドロキシル基、‐ＯＨ）、トレチノイン（レチノイン酸‐カルボキシル酸基‐ＣＯＯＨ）、およびアダパレンス（ａｄａｐａｌｅｎｃｅ）（カルボキシル基、‐ＣＯＯＨ）を含む。
【００５８】
本発明の別の態様において、その重合体に化学的に結合される有益な剤はビタミンＥ、例えば、（ｇ‐トコフェロール、ｄ‐トコフェロール）である。
【００５９】
本発明の別の態様において、その重合体に化学的に結合される有益な剤は抗酸化物質、例えば、アルファ‐リポ酸（ＡＬＡ、‐ＣＯＯＨ）、ジメチルアミノエタノール（ＤＭＡＥ、‐ＯＨ）、カタラーゼ（‐ＯＨ）である。
【００６０】
本発明の別の態様において、その重合体に化学的に結合される有益な剤は（アミン基を有する）増殖因子、例えば、上皮増殖因子（アミン基を有するＥＧＦ）、形質転換増殖因子（アミン基を有するＴＧＦ）である。
【００６１】
本発明の別の態様において、その重合体に化学的に結合される有益な剤は（アミン基を有する）ペプチド、例えば、マイクロコラーゲンペンタペプチド、ケラチン、またはエラスチンである。
【００６２】
本発明の別の態様において、少なくとも一部が架橋結合されたグリコサミノグリカン重合体、および例えば、本明細書中に開示される組成物の酵素分解および／または化学分解等の、その組成物の分解を低下させるまたは妨げるのに有効な量の抗酸化剤を含む注入可能な皮膚充填剤が提供される。よって、本明細書中に開示される組成物中に含まれる抗酸化剤の量はその組成物総量のうちの約０．１重量％〜約１０重量％である。抗酸化剤の非限定的な例として、ポリオール、フラボノイド、フィトアレキシン、アスコルビン酸剤、トコフェロール、トコトリエノール、リポ酸、メラトニン、カロテノイド、それらの類似体または誘導体、およびそれらの組み合わせが挙げられる。本明細書中に開示される組成物は、単一の抗酸化剤または複数の抗酸化剤、レチノール、補酵素、イデベノン、アロプリノール、グルタチオン、亜セレン酸ナトリウムを含み得る。
【００６３】
本明細書の態様は、一部分において、重合体およびその重合体に共有結合されたビタミンＣを含むヒドロゲル組成物を提供する。ビタミンＣの非限定的な例として、アスコルビン酸、ならびにアスコルビン酸のナトリウム、カリウム、およびカルシウム塩、長鎖脂肪酸を有するアスコルビン酸の脂肪溶解性エステル（パルミチン酸アスコルビルまたはステアリン酸アスコルビル）、リン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）、リン酸アスコルビルナトリウム（ＳＡＰ）、およびアスコルビン酸２‐グルコシド（ＡＡ２Ｇ（登録商標））、リン酸アスコルビルナトリウム（ＡＡ２Ｐ）、硫酸アスコルビル二ナトリウム、およびリン酸アスコルビル３‐アミノプロピル（ａｓｃｏｂｙｌ  ３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ  ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）（ビタゲン）が挙げられる。
【００６４】
アスコルビン酸は、例えば、その全組成物の約０．０１重量％、約０．１重量％、約０．２重量％、約０．３重量％、約０．４重量％、約０．５重量％、約０．６重量％、約０．７重量％、約０．８重量％、約０．９重量％、約１．０重量％、約２．０重量％、約３．０重量％、約４．０重量％、約５．０重量％、約６．０重量％、約７．０重量％、約８．０重量％、約９．０重量％、または約１０重量％の量でその組成物中に存在し得る。さらに他の態様において、本明細書中に開示される組成物は、例えば、その全組成物の少なくとも０．１重量％、少なくとも０．２重量％、少なくとも０．３重量％、少なくとも０．４重量％、少なくとも０．５重量％、少なくとも０．６重量％、少なくとも０．７重量％、少なくとも０．８重量％、少なくとも０．９重量％、少なくとも１．０重量％、少なくとも２．０重量％、少なくとも３．０重量％、少なくとも４．０重量％、少なくとも５．０重量％、少なくとも６．０重量％、少なくとも７．０重量％、少なくとも８．０重量％、少なくとも９．０重量％、または少なくとも１０重量％の量のアスコルビン酸を含む。さらに他の態様において、本明細書中に開示される組成物は、例えば、その全組成物の最大０．１重量％、最大０．２重量％、最大０．３重量％、最大０．４重量％、最大０．５重量％、最大０．６重量％、最大０．７重量％、最大０．８重量％、最大０．９重量％、最大１．０重量％、最大２．０重量％、最大３．０重量％、最大４．０重量％、最大５．０重量％、最大６．０重量％、最大７．０重量％、最大８．０重量％、最大９．０重量％、または最大１０重量％の量のアスコルビン酸を含む。さらなる態様において、本明細書中に開示される組成物は、例えば、その全組成物の約０．１重量％〜約０．５重量％、約０．１重量％〜約１．０重量％、約０．１重量％〜約２．０重量％、約０．１重量％〜約３．０重量％、約０．１重量％〜約４．０重量％、約０．１重量％〜約５．０重量％、約０．２重量％〜約０．９重量％、約０．２重量％〜約１．０重量％、約０．２重量％〜約２．０重量％、約０．５重量％〜約１．０重量％、または約０．５重量％〜約２．０重量％の量のアスコルビン酸を含む。
【００６５】
本発明の１つの実施形態において、架橋結合されたヒアルロン酸ベースの重合体およびその重合体に化学的に結合されたビタミンＣを含み、かつ最大約３モル％、最大約５モル％、最大約１０モル％、最大約１５モル％、最大約２０モル％、最大約２５モル％、最大約３０モル％、または最大約４０モル％の結合度を有する、ヒドロゲル組成物が提供される。
【００６６】
本発明の１つの実施形態において、ヒアルロン酸がＳｔａｒ‐ＰＥＧエポキシドまたはＳｔａｒＰＥＧアミドと架橋結合された、皮膚充填剤が提供される。この実施形態において、結合度は約２０モル％〜約３２モル％であり得る。
【００６７】
本発明の別の実施形態において、ヒアルロン酸がＢＤＤＥと架橋結合された、皮膚充填剤が提供される。この実施形態において、結合度は約３モル％〜約１５モル％、例えば、約１０モル％〜約１３モル％であり得る。
【００６８】
いくつかの実施形態において、皮膚充填剤はバイオアベイラビリティを維持する。例えば、ヒトの皮膚に導入されたときに、少なくとも約１ヶ月〜最大約２０ヶ月、またはそれ以上の間、アスコルビン酸または他のビタミンをヒトに放出するために有効である、皮膚充填剤が提供される。
【００６９】
本明細書の態様は、一部分において、複素弾性率、弾性率、粘性率、および／またはタンジェントδを示す、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中に開示される組成物は、その組成物が、力（ストレス、変形）を適用されたときに、弾性成分（例えば、架橋結合されたグリコサミノグリカン重合体等の、固体様）および粘性成分（例えば、架橋結合されていないグリコサミノグリカン重合体、または担体相等の液体様）を有するという点で粘弾性である。この特性を示した流体力学的属性は、変形に対する組成物全体の抵抗性を定義する、複素弾性率（Ｇ＊）である。複素弾性率は実数および虚数部分を有する複素数である、Ｇ＊＝Ｇ’＋ｉＧ’’である。Ｇ＊の絶対値はＡｂｓ（Ｇ＊）＝Ｓｑｒｔ（Ｇ’２＋Ｇ’’２）である。複素弾性率は弾性率（Ｇ’）および粘性率（Ｇ’’）の合計として定義され得る。Ｆａｌｃｏｎｅ，ｅｔ  ａｌ．，Ｔｅｍｐｏｒａｒｙ  Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ  Ｄｅｒｍａｌ  Ｆｉｌｌｅｒｓ：Ａ  Ｍｏｄｅｌ  ｆｏｒ  Ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ  Ｂａｓｅｄ  ｏｎ  Ｐｈｙｓｉｃａｌ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｄｅｒｍａｔｏｌ  Ｓｕｒｇ．３５（８）：１２３８−１２４３（２００９）、Ｔｅｚｅｌ，上記、２００８、Ｋａｂｌｉｋ，上記、２００９、Ｂｅａｓｌｅｙ，上記、２００９、それぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【００７０】
弾性率、または弾性の係数は、力をかけられたときに、ヒドロゲル物質が変形に抵抗する能力、または逆に言えば、非恒久的に変形される物体の性質を指す。弾性率は組成物の硬度を特徴付け、それはその組成物の運動からのエネルギーの貯蔵を示すので、貯蔵弾性率としても知られる。弾性率は弾性と強度との間の相互作用を示し（Ｇ’＝圧力／歪み）、よって、組成物の硬さまたは軟らかさの定量的計測を定める。物体の弾性率は弾性変形領域における物体の圧力対歪み曲線の傾きとして定義される。λ＝圧力／歪み、ここでλは弾性率（単位：パスカル）であり、圧力は（変形を引き起こす力）／（力がかけられた領域）であり、歪みはその物体の元の状態に対してその圧力により引き起こされた変化率である。その力がかけられる速さによるが、より硬い組成物は、より高い弾性率を有するであろう、かつ、より硬い組成物は、例えば、注入等の、ある一定の距離、その物質を変形するためにより大きな力を要するであろう。教示を含めて、圧力がどのようにして計測されるべきかを明記すれば、多くの型の弾性率が定義される。３つの主要な弾性率は引張弾性率、せん断弾性率、および体積弾性率である。
【００７１】
粘性率は粘性損失として失われるエネルギーを示すので、損失弾性率としてもまた知られる。タンジェントδは粘性率と弾性率の割合である。タンジェントδ＝Ｇ’’／Ｇ’。Ｆａｌｃｏｎｅ，上記，２００９。本明細書中に開示されるタンジェントδ値については、タンジェントδは周波数１Ｈｚでの動的弾性率から得られる。より低いタンジェントδはより硬い、より固い、またはより弾性の組成物に相当する。
【００７２】
別の実施形態において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、ある弾性率を示す。この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約２５Ｐａ、約５０Ｐａ、約７５Ｐａ、約１００Ｐａ、約１２５Ｐａ、約１５０Ｐａ、約１７５Ｐａ、約２００Ｐａ、約２５０Ｐａ、約３００Ｐａ、約３５０Ｐａ、約４００Ｐａ、約４５０Ｐａ、約５００Ｐａ、約５５０Ｐａ、約６００Ｐａ、約６５０Ｐａ、約７００Ｐａ、約７５０Ｐａ、約８００Ｐａ、約８５０Ｐａ、約９００Ｐａ、約９５０Ｐａ、約１，０００Ｐａ、約１，２００Ｐａ、約１，３００Ｐａ、約１，４００Ｐａ、約１，５００Ｐａ、約１，６００Ｐａ、約１，７００Ｐａ、約１，８００Ｐａ、約１，９００Ｐａ、約２，０００Ｐａ、約２，１００Ｐａ、約２，２００Ｐａ、約２，３００Ｐａ、約２，４００Ｐａ、または約２，５００Ｐａの弾性率を示す。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、少なくとも２５Ｐａ、少なくとも５０Ｐａ、少なくとも７５Ｐａ、少なくとも１００Ｐａ、少なくとも１２５Ｐａ、少なくとも１５０Ｐａ、少なくとも１７５Ｐａ、少なくとも２００Ｐａ、少なくとも２５０Ｐａ、少なくとも３００Ｐａ、少なくとも３５０Ｐａ、少なくとも４００Ｐａ、少なくとも４５０Ｐａ、少なくとも５００Ｐａ、少なくとも５５０Ｐａ、少なくとも６００Ｐａ、少なくとも６５０Ｐａ、少なくとも７００Ｐａ、少なくとも７５０Ｐａ、少なくとも８００Ｐａ、少なくとも８５０Ｐａ、少なくとも９００Ｐａ、少なくとも９５０Ｐａ、少なくとも１，０００Ｐａ、少なくとも１，２００Ｐａ、少なくとも１，３００Ｐａ、少なくとも１，４００Ｐａ、少なくとも１，５００Ｐａ、少なくとも１，６００Ｐａ、少なくとも１，７００Ｐａ、少なくとも１，８００Ｐａ、少なくとも１，９００Ｐａ、少なくとも２，０００Ｐａ、少なくとも２，１００Ｐａ、少なくとも２，２００Ｐａ、少なくとも２，３００Ｐａ、少なくとも２，４００Ｐａ、または少なくとも２，５００Ｐａの弾性率を示す。この実施形態のさらに他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、最大２５Ｐａ、最大５０Ｐａ、最大７５Ｐａ、最大１００Ｐａ、最大１２５Ｐａ、最大１５０Ｐａ、最大１７５Ｐａ、最大２００Ｐａ、最大２５０Ｐａ、最大３００Ｐａ、最大３５０Ｐａ、最大４００Ｐａ、最大４５０Ｐａ、最大５００Ｐａ、最大５５０Ｐａ、最大６００Ｐａ、最大６５０Ｐａ、最大７００Ｐａ、最大７５０Ｐａ、最大８００Ｐａ、最大８５０Ｐａ、最大９００Ｐａ、最大９５０Ｐａ、最大１，０００Ｐａ、最大１，２００Ｐａ、最大１，３００Ｐａ、最大１，４００Ｐａ、最大１，５００Ｐａ、または最大１，６００Ｐａの弾性率を示す。この実施形態のさらに他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約２５Ｐａ〜約１５０Ｐａ、約２５Ｐａ〜約３００Ｐａ、約２５Ｐａ〜約５００Ｐａ、約２５Ｐａ〜約８００Ｐａ、約１２５Ｐａ〜約３００Ｐａ、約１２５Ｐａ〜約５００Ｐａ、約１２５Ｐａ〜約８００Ｐａ、約５００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約６００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約７００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約８００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約９００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約１，０００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約１，１００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約１，２００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約５００Ｐａ〜約２，５００Ｐａ、約１，０００Ｐａ〜約２，５００Ｐａ、約１，５００Ｐａ〜約２，５００Ｐａ、約２，０００Ｐａ〜約２，５００Ｐａ、約１，３００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約１，４００Ｐａ〜約１，７００Ｐａ、約１，５００Ｐａ〜約１，８００Ｐａ、約１，６００Ｐａ〜約１，９００Ｐａ、約１，７００Ｐａ〜約２，０００Ｐａ、約１，８００Ｐａ〜約２，１００Ｐａ、約１，９００Ｐａ〜約２，２００Ｐａ、約２，０００Ｐａ〜約２，３００Ｐａ、約２，１００Ｐａ〜約２，４００Ｐａ、または約２，２００Ｐａ〜約２，５００Ｐａの弾性率を示す。
【００７３】
別の実施形態において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、ある粘性率を示す。この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約１０Ｐａ、約２０Ｐａ、約３０Ｐａ、約４０Ｐａ、約５０Ｐａ、約６０Ｐａ、約７０Ｐａ、約８０Ｐａ、約９０Ｐａ、約１００Ｐａ、約１５０Ｐａ、約２００Ｐａ、約２５０Ｐａ、約３００Ｐａ、約３５０Ｐａ、約４００Ｐａ、約４５０Ｐａ、約５００Ｐａ、約５５０Ｐａ、約６００Ｐａ、約６５０Ｐａ、または約７００Ｐａの粘性率を示す。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、最大１０Ｐａ、最大２０Ｐａ、最大３０Ｐａ、最大４０Ｐａ、最大５０Ｐａ、最大６０Ｐａ、最大７０Ｐａ、最大８０Ｐａ、最大９０Ｐａ、最大１００Ｐａ、最大１５０Ｐａ、最大２００Ｐａ、最大２５０Ｐａ、最大３００Ｐａ、最大３５０Ｐａ、最大４００Ｐａ、最大４５０Ｐａ、最大５００Ｐａ、最大５５０Ｐａ、最大６００Ｐａ、最大６５０Ｐａ、または最大７００Ｐａの粘性率を示す。この実施形態のさらに他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約１０Ｐａ〜約３０Ｐａ、約１０Ｐａ〜約５０Ｐａ、約１０Ｐａ〜約１００Ｐａ、約１０Ｐａ〜約１５０Ｐａ、約７０Ｐａ〜約１００Ｐａ、約５０Ｐａ〜約３５０Ｐａ、約１５０Ｐａ〜約４５０Ｐａ、約２５０Ｐａ〜約５５０Ｐａ、約３５０Ｐａ〜約７００Ｐａ、約５０Ｐａ〜約１５０Ｐａ、約１００Ｐａ〜約２００Ｐａ、約１５０Ｐａ〜約２５０Ｐａ、約２００Ｐａ〜約３００Ｐａ、約２５０Ｐａ〜約３５０Ｐａ、約３００Ｐａ〜約４００Ｐａ、約３５０Ｐａ〜約４５０Ｐａ、約４００Ｐａ〜約５００Ｐａ、約４５０Ｐａ〜約５５０Ｐａ、約５００Ｐａ〜約６００Ｐａ、約５５０Ｐａ〜約６５０Ｐａ、または約６００Ｐａ〜約７００Ｐａの粘性率を示す。
【００７４】
別の実施形態において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、あるタンジェントδを示す。この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約０．１、約０．２、約０．３、約０．４、約０．５、約０．６、約０．７、約０．８、約０．９、約１．０、約１．１、約１．２、約１．３、約１．４、約１．５、約１．６、約１．７、約１．８、約１．９、約２．０、約２．１、約２．２、約２．３、約２．４、または約２．５のタンジェントδを示す。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、最大０．１、最大０．２、最大０．３、最大０．４、最大０．５、最大０．６、最大０．７、最大０．８、最大０．９、最大１．０、最大１．１、最大１．２、最大１．３、最大１．４、最大１．５、最大１．６、最大１．７、最大１．８、最大１．９、最大２．０、最大２．１、最大２．２、最大２．３、最大２．４、または最大２．５のタンジェントδを示す。この実施形態のさらに他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約０．１〜約０．３、約０．３〜約０．５、約０．５〜約０．８、約１．１〜約１．４、約１．４〜約１．７、約０．３〜約０．６、約０．１〜約０．５、約０．５〜約０．９、約０．１〜約０．６、約０．１〜約１．０、約０．５〜約１．５、約１．０〜約２．０、または約１．５〜約２．５のタンジェントδを示す。
【００７５】
本明細書の態様は、一部分において、透明性および／または半透明性を有する本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を提供する。（透明または透明度とも呼ばれる）透明性は光が物質を通り抜けることを可能にする物理的特性であり、一方、（半透明または半透明度とも呼ばれる）半透明性は光が拡散して通り抜けることを可能にするのみである。反対の特性は不透明性である。透明な物質は澄んでいるが、一方、半透明な物質は明らかには透けて見え得ない。本明細書中に開示される絹フィブロインヒドロゲルは透明性および半透明性等の、光学特性を呈し得る、または呈し得ない。ある特定の場合、例えば、表面のしわの充填において、不透明ヒドロゲルを有することは有益であろう。レンズまたは眼に充填するための「体液」の開発等の、他の場合において、半透明ヒドロゲルを有することは有益であろう。これらの特性はヒドロゲル物質の構造分布に作用することにより改変され得る。ヒドロゲルの光学特性を制御するために使用される因子は、非限定的に、重合体濃度、ゲル結晶度、およびヒドロゲルの均一性を含む。
【００７６】
光が物質にぶつかるとき、光はいくつかの異なる様式でその物質と相互作用し得る。これらの相互作用は光の性質（その波長、周波数、エネルギー等）およびその物質の性質による。光波は反射、および屈折を伴う透過率のいくつかの組み合わせにより物体と相互作用する。よって、光学的に透明な物質はそれに降りかかる光の多くが伝導されることを可能にし、光がほとんど反射されない。光の伝導を可能にしない物質は光学的に不透明または単に不透明と呼ばれる。
【００７７】
１つの実施形態において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、光学的に透明である。この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、光の約７５％、光の約８０％、光の約８５％、光の約９０％、光の約９５％、または光の約１００％を伝導する。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、光の少なくとも７５％、光の少なくとも８０％、光の少なくとも８５％、光の少なくとも９０％、または光の少なくとも９５％を伝導する。この実施形態のさらに他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、光の約７５％〜約１００％、光の約８０％〜約１００％、光の約８５％〜約１００％、光の約９０％〜約１００％、または光の約９５％〜約１００％を伝導する。
【００７８】
別の実施形態において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、光学的に不透明である。この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、光の約５％、光の約１０％、光の約１５％、光の約２０％、光の約２５％、光の約３０％、光の約３５％、光の約４０％、光の約４５％、光の約５０％、光の約５５％、光の約６０％、光の約６５％、または光の約７０％を伝導する。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、光の最大５％、光の最大１０％、光の最大１５％、光の最大２０％、光の最大２５％、光の最大３０％、光の最大３５％、光の最大４０％、光の最大４５％、光の最大５０％、光の最大５５％、光の最大６０％、光の最大６５％、光の最大７０％、または光の最大７５％を伝導する。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、光の例えば、約５％〜約１５％、約５％〜約２０％、約５％〜約２５％、約５％〜約３０％、約５％〜約３５％、約５％〜約４０％、約５％〜約４５％、約５％〜約５０％、約５％〜約５５％、約５％〜約６０％、約５％〜約６５％、約５％〜約７０％、約５％〜約７５％、約１５％〜約２０％、約１５％〜約２５％、約１５％〜約３０％、約１５％〜約３５％、約１５％〜約４０％、約１５％〜約４５％、約１５％〜約５０％、約１５％〜約５５％、約１５％〜約６０％、約１５％〜約６５％、約１５％〜約７０％、約１５％〜約７５％、約２５％〜約３５％、約２５％〜約４０％、約２５％〜約４５％、約２５％〜約５０％、約２５％〜約５５％、約２５％〜約６０％、約２５％〜約６５％、約２５％〜約７０％、または約２５％〜約７５％を伝導する。
【００７９】
１つの実施形態において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、光学的に半透明である。この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、光の約７５％、光の約８０％、光の約８５％、光の約９０％、光の約９５％、または光の約１００％を拡散して伝導する。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、光の少なくとも７５％、光の少なくとも８０％、光の少なくとも８５％、光の少なくとも９０％、または光の少なくとも９５％を拡散して伝導する。この実施形態のさらに他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、光の約７５％〜約１００％、光の約８０％〜約１００％、光の約８５％〜約１００％、光の約９０％〜約１００％、または光の約９５％〜約１００％を拡散して伝導する。
【００８０】
本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、そのヒドロゲルを粉砕して粒子にすることによりさらにプロセスされ、そして随意に、例えば、水または食塩水等の、担体相と混合し、溶液、油、ローション、ゲル、軟膏、クリーム、スラリー、膏薬、またはペーストのような注入可能なまたは局所的物質を形成し得る。よって、開示されるヒドロゲル組成物は、単相性または多相性組成物であり得る。ヒドロゲルは直径約１５μｍ〜約３０μｍ、約５０μｍ〜約７５μｍ、約１００μｍ〜約１５０μｍ、約２００μｍ〜約３００μｍ、約４５０μｍ〜約５５０μｍ、約６００μｍ〜約７００μｍ、約７５０μｍ〜約８５０μｍ、または約９００μｍ〜約１，０００μｍ等の、約１０μｍ〜約１０００μｍの粒子サイズに製粉され得る。
【００８１】
本明細書の態様は、一部分において、注入可能である本明細書中に開示される組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「注入可能な」は細い針を伴う注入装置を用いて個人の皮膚領域にその組成物を投与することが必要な特性を有する物質を指す。本明細書中で使用されるとき、用語「細い針」は２７ゲージ、またはそれ以下の針を指す。本明細書中に開示される組成物の注入可能性は上記に議論されるようにヒドロゲル粒子をある大きさにすることにより達成され得る。
【００８２】
この実施形態の態様において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、細い針を通して注入可能である。この実施形態の他の態様において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、例えば、約２７ゲージ、約３０ゲージ、または約３２ゲージの針を通して注入可能である。この実施形態のさらに他の態様において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、例えば、２２ゲージ、もしくはそれ以下、２７ゲージ、もしくはそれ以下、３０ゲージ、もしくはそれ以下、または３２ゲージ、もしくはそれ以下の針を通して注入可能である。この実施形態のさらに他の態様において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、例えば、約２２ゲージ〜約３５ゲージ、２２ゲージ〜約３４ゲージ、２２ゲージ〜約３３ゲージ、２２ゲージ〜約３２ゲージ、約２２ゲージ〜約２７ゲージ、または約２７ゲージ〜約３２ゲージの針を通して注入可能である。
【００８３】
この実施形態の態様において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、１００ｍｍ／分の速度で約６０Ｎ、約５５Ｎ、約５０Ｎ、約４５Ｎ、約４０Ｎ、約３５Ｎ、約３０Ｎ、約２５Ｎ、約２０Ｎ、または約１５Ｎの押出力で注入され得る。この実施形態の他の態様において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、約６０Ｎ、もしくはそれ以下、約５５Ｎ、もしくはそれ以下、約５０Ｎ、もしくはそれ以下、約４５Ｎ、もしくはそれ以下、約４０Ｎ、もしくはそれ以下、約３５Ｎ、もしくはそれ以下、約３０Ｎ、もしくはそれ以下、約２５Ｎ、もしくはそれ以下、約２０Ｎ、もしくはそれ以下、約１５Ｎ、もしくはそれ以下、約１０Ｎ、もしくはそれ以下、または約５Ｎ、もしくはそれ以下の押出力で２７ゲージの針を通して注入され得る。この実施形態のさらに他の態様において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、約６０Ｎ、もしくはそれ以下、約５５Ｎ、もしくはそれ以下、約５０Ｎ、もしくはそれ以下、約４５Ｎ、もしくはそれ以下、約４０Ｎ、もしくはそれ以下、約３５Ｎ、もしくはそれ以下、約３０Ｎ、もしくはそれ以下、約２５Ｎ、もしくはそれ以下、約２０Ｎ、もしくはそれ以下、約１５Ｎ、もしくはそれ以下、約１０Ｎ、もしくはそれ以下、または約５Ｎ、もしくはそれ以下の押出力で３０ゲージの針を通して注入され得る。この実施形態のさらに他の態様において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、約６０Ｎ、もしくはそれ以下、約５５Ｎ、もしくはそれ以下、約５０Ｎ、もしくはそれ以下、約４５Ｎ、もしくはそれ以下、約４０Ｎ、もしくはそれ以下、約３５Ｎ、もしくはそれ以下、約３０Ｎ、もしくはそれ以下、約２５Ｎ、もしくはそれ以下、約２０Ｎ、もしくはそれ以下、約１５Ｎ、もしくはそれ以下、約１０Ｎ、もしくはそれ以下、または約５Ｎ、もしくはそれ以下の押出力で３２ゲージの針を通して注入され得る。
【００８４】
本明細書の態様は、一部分において、粘着性を示す、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を提供する。粘着性は、粘着性吸引力、粘着力、または圧縮力とも呼ばれ、分子を合体させるよう働く、物質内の類似分子間の分子間引力により引き起こされる物質の物理的特性である。粘着性は重量グラム（ｇｍｆ）を用いて表される。粘着性は、他の因子のうち、開始遊離グリコサミノグリカン重合体の分子量率、グリコサミノグリカン重合体の架橋結合度、架橋結合後の残留遊離グリコサミノグリカン重合体の量、およびそのヒドロゲル組成物のｐＨにより影響を受ける。組成物は、投与部位に局在したまま残るように十分に粘着性であるべきである。さらに、ある特定の用途において、十分な粘着性は組成物が機械的な負荷循環の場合において、その形、ひいては機能性を保持するために重要である。よって、１つの実施形態において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、水と同等の粘着性を示す。さらに別の実施形態において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、投与部位に局在したまま残るのに十分な粘着性を示す。さらに別の実施形態において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、その形を保持するのに十分な粘着性を示す。１つのさらなる実施形態において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、その形および機能性を保持するのに十分な粘着性を示す。
【００８５】
本明細書の態様は、一部分において、生理学的に許容される容量オスモル濃度を示す、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「容量オスモル濃度」は溶液中で浸透圧的に活性な溶質の濃度を指す。本明細書中で使用されるとき、用語「生理学的に許容される容量オスモル濃度」は生体の正常な機能にしたがう、またはそれに特徴的な容量オスモル濃度を指す。よって、本明細書中に開示されるようなヒドロゲル組成物の投与は、哺乳類に投与されたとき、長期のまたは恒久的な有害な効果を実質的に有さない容量オスモル濃度を示す。容量オスモル濃度は溶媒リットル当たりの浸透圧的に活性な溶質のオスモルを用いて表される（Ｏｓｍｏｌ／ＬまたはＯｓｍ／Ｌ）。容量オスモル濃度は、溶質のモルではなく、浸透圧的に活性な溶質粒子のモルを計測するので、モル濃度とは区別される。いくつかの化合物は溶液中で解離し得るが、一方で、他の化合物は解離し得ないので、その区別が生じる。溶液の容量オスモル濃度は以下の式から計算され得る：Ｏｓｍｏｌ／Ｌ＝ΣψｉηｉＣｉ、ここでψはその溶液の非理想特性の程度を表す浸透係数であり、ηは分子が解離した、粒子（例えば、イオン）の数であり、そしてＣはその溶質のモル濃度であり、そしてｉは特定の溶質の同一性を表す標識である。本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の容量オスモル濃度は溶液を計測する従来の方法を用いて計測され得る。
【００８６】
１つの実施形態において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、生理学的に許容される容量オスモル濃度を示す。この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約１００ｍＯｓｍ／Ｌ、約１５０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２００ｍＯｓｍ／Ｌ、約２５０ｍＯｓｍ／Ｌ、約３００ｍＯｓｍ／Ｌ、約３５０ｍＯｓｍ／Ｌ、約４００ｍＯｓｍ／Ｌ、約４５０ｍＯｓｍ／Ｌ、または約５００ｍＯｓｍ／Ｌの容量オスモル濃度を示す。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、少なくとも１００ｍＯｓｍ／Ｌ、少なくとも１５０ｍＯｓｍ／Ｌ、少なくとも２００ｍＯｓｍ／Ｌ、少なくとも２５０ｍＯｓｍ／Ｌ、少なくとも３００ｍＯｓｍ／Ｌ、少なくとも３５０ｍＯｓｍ／Ｌ、少なくとも４００ｍＯｓｍ／Ｌ、少なくとも４５０ｍＯｓｍ／Ｌ、または少なくとも５００ｍＯｓｍ／Ｌの容量オスモル濃度を示す。この実施形態のさらに他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、最大１００ｍＯｓｍ／Ｌ、最大１５０ｍＯｓｍ／Ｌ、最大２００ｍＯｓｍ／Ｌ、最大２５０ｍＯｓｍ／Ｌ、最大３００ｍＯｓｍ／Ｌ、最大３５０ｍＯｓｍ／Ｌ、最大４００ｍＯｓｍ／Ｌ、最大４５０ｍＯｓｍ／Ｌ、または最大５００ｍＯｓｍ／Ｌの容量オスモル濃度を示す。この実施形態のさらに他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約１００ｍＯｓｍ／Ｌ〜約５００ｍＯｓｍ／Ｌ、約２００ｍＯｓｍ／Ｌ〜約５００ｍＯｓｍ／Ｌ、約２００ｍＯｓｍ／Ｌ〜約４００ｍＯｓｍ／Ｌ、約３００ｍＯｓｍ／Ｌ〜約４００ｍＯｓｍ／Ｌ、約２７０ｍＯｓｍ／Ｌ〜約３９０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２２５ｍＯｓｍ／Ｌ〜約３５０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２５０ｍＯｓｍ／Ｌ〜約３２５ｍＯｓｍ／Ｌ、約２７５ｍＯｓｍ／Ｌ〜約３００ｍＯｓｍ／Ｌ、または約２８５ｍＯｓｍ／Ｌ〜約２９０ｍＯｓｍ／Ｌの容量オスモル濃度を示す。
【００８７】
本明細書の態様は、一部分において、生理学的に許容される重量オスモル濃度を示す、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「重量オスモル濃度」は体内の溶媒キロ当たりの浸透圧的に活性な溶質の濃度を指す。本明細書中で使用されるとき、用語「生理学的に許容される重量オスモル濃度」は生体の正常な機能に従う、またはそれに特徴的な重量オスモル濃度を指す。よって、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の投与は、哺乳類に投与されたとき、長期のまたは恒久的な有害な効果を実質的に有さない重量オスモル濃度を示す。重量オスモル濃度は溶媒キログラム当たりの浸透圧的に活性な溶質のオスモルを用いて表され（ｏｓｍｏｌ／ｋｇまたはＯｓｍ／ｋｇ）、そしてその溶液中に存在する全ての溶質のモル濃度の合計に等しい。溶液の重量オスモル濃度は浸透圧計を用いて計測され得る。最新の研究室で最も一般的に使用される器具は氷点降下浸透圧計である。この器具は、重量オスモル濃度が増加している溶液中で起こる氷点変化（氷点降下浸透圧計）、または重量オスモル濃度が増加している溶液中で起こる蒸気圧変化（蒸気圧降下浸透圧計）を計測する。
【００８８】
１つの実施形態において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、生理学的に許容される重量オスモル濃度を示す。この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約１００ｍＯｓｍ／ｋｇ、約１５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２００ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約３００ｍＯｓｍ／ｋｇ、約３５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約４００ｍＯｓｍ／ｋｇ、約４５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、または約５００ｍＯｓｍ／ｋｇの重量オスモル濃度を示す。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、少なくとも１００ｍＯｓｍ／ｋｇ、少なくとも１５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、少なくとも２００ｍＯｓｍ／ｋｇ、少なくとも２５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、少なくとも３００ｍＯｓｍ／ｋｇ、少なくとも３５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、少なくとも４００ｍＯｓｍ／ｋｇ、少なくとも４５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、または少なくとも５００ｍＯｓｍ／ｋｇの重量オスモル濃度を示す。この実施形態のさらに他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、最大１００ｍＯｓｍ／ｋｇ、最大１５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、最大２００ｍＯｓｍ／ｋｇ、最大２５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、最大３００ｍＯｓｍ／ｋｇ、最大３５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、最大４００ｍＯｓｍ／ｋｇ、最大４５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、または最大５００ｍＯｓｍ／ｋｇの重量オスモル濃度を示す。この実施形態のさらに他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約１００ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約５００ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２００ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約５００ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２００ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約４００ｍＯｓｍ／ｋｇ、約３００ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約４００ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２７０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約３９０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２２５ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約３５０ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２５０ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約３２５ｍＯｓｍ／ｋｇ、約２７５ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約３００ｍＯｓｍ／ｋｇ、または約２８５ｍＯｓｍ／ｋｇ〜約２９０ｍＯｓｍ／ｋｇの重量オスモル濃度を示す。
【００８９】
本明細書の態様は、一部分において、実質的な安定性を示す、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物について言及するとき、用語「安定性」または「安定な」は個人への投与前の貯蔵中にいかなる実質的なまたは顕著な程度まで低下し、分解し、または壊れる傾向がない組成物を指す。本明細書中で使用されるとき、用語「実質的な熱安定性」、「実質的に熱安定な」、「オートクレーブ安定な」、または「蒸気滅菌安定な」は本明細書中に開示されるような熱処理にかけられたときに実質的に安定である、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を指す。
【００９０】
本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の安定性は、例えば、常圧でのまたは圧力下での（例えば、オートクレーブ）蒸気滅菌等の、熱処理に、ヒドロゲル組成物をかけることにより決定され得る。好ましくは、その熱処理は約１分〜約１０分間少なくとも約１００℃の温度で行われる。本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の実質的な安定性は、１）滅菌後の本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の押出力（ΔＦ）の変化を決定することにより評価されることができ、ここで（特定の添加物を伴うヒドロゲル組成物の押出力）−（添加物の添加を伴わないヒドロゲル組成物の押出力）により計算されるとき、２Ｎ未満の押出力の変化は実質的に安定なヒドロゲル組成物の表示であり、および／または２）滅菌後の本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の流体力学的特性の変化を決定することにより評価されることができ、ここで（添加物を伴うゲル製剤のタンジェントδ  １Ｈｚ）−（添加物を伴わないゲル製剤のタンジェントδ  １Ｈｚ）により計算されるとき、０．１未満のタンジェントδ  １Ｈｚの変化は実質的に安定なヒドロゲル組成物の表示である。よって、本明細書中に開示される実質的に安定なヒドロゲル組成物は、以下の特徴：均一性、押出力、粘着性、ヒアルロナン濃度、剤（単数または複数）濃度、容量オスモル濃度、ｐＨ、または熱処理前のヒドロゲルに所望される他の流体力学的特徴のうちの１つ以上を滅菌後に保持する。
【００９１】
１つの実施形態において、グリコサミノグリカン重合体および本明細書中に開示される少なくとも１つの剤を含むヒドロゲル組成物は、本明細書中に開示される所望のヒドロゲル特性を維持する熱処理を用いてプロセスされる。この実施形態の態様において、グリコサミノグリカン重合体および本明細書中に開示される少なくとも１つの剤を含むヒドロゲル組成物は、例えば、約１００℃、約１０５℃、約１１０℃、約１１５℃、約１２０℃、約１２５℃、または約１３０℃の熱処理を用いてプロセスされる。この実施形態の他の態様において、グリコサミノグリカン重合体および本明細書中に開示される少なくとも１つの剤を含むヒドロゲル組成物は、例えば、少なくとも１００℃、少なくとも１０５℃、少なくとも１１０℃、少なくとも１１５℃、少なくとも１２０℃、少なくとも１２５℃、または少なくとも１３０℃の熱処理を用いてプロセスされる。この実施形態のさらに他の態様において、グリコサミノグリカン重合体および本明細書中に開示される少なくとも１つの剤を含むヒドロゲル組成物は、例えば、約１００℃〜約１２０℃、約１００℃〜約１２５℃、約１００℃〜約１３０℃、約１００℃〜約１３５℃、約１１０℃〜約１２０℃、約１１０℃〜約１２５℃、約１１０℃〜約１３０℃、約１１０℃〜約１３５℃、約１２０℃〜約１２５℃、約１２０℃〜約１３０℃、約１２０℃〜約１３５℃、約１２５℃〜約１３０℃、または約１２５℃〜約１３５℃の熱処理を用いてプロセスされる。
【００９２】
本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の長期安定性は、ヒドロゲル組成物を、例えば、約４５℃環境での約６０日間の保存等の熱処理に供することにより決定され得る。本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の長期安定性は、１）４５℃熱処理後のヒドロゲル組成物の透明度および色を評価することにより評価されることができ、ここで、透明なおよび無色のヒドロゲル組成物は、実質的に安定なヒドロゲル組成物の表示であり、２）４５℃熱処理後の本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の押出力（ΔＦ）の変化を決定することにより評価されることができ、ここで、（４５℃熱処理前の特定の添加物を伴うヒドロゲル組成物の押出力）−（４５℃熱処理後の特定の添加物を伴うヒドロゲル組成物の押出力）により計算されるとき、２Ｎ未満の押出力の変化は実質的に安定なヒドロゲル組成物の表示であり、および／または３）滅菌後の本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の流体力学的特性の変化を決定することにより評価されることができ、ここで、（４５℃熱処理前の特定の添加物を伴うゲル形成のタンジェントδ  １Ｈｚ）−（４５℃熱処理後の特定の添加物を伴うゲル形成のタンジェントδ  １Ｈｚ）により計算されるとき、０．１未満のタンジェントδ  １Ｈｚの変化は実質的に安定なヒドロゲル組成物の表示である。よって、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の長期安定性は４５℃熱処理後の以下の特徴：透明度（透明性および半透明性）、均一性、および粘着性のうちの１つ以上の保持により評価される。
【００９３】
この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約３ヶ月、約６ヶ月、約９ヶ月、約１２ヶ月、約１５ヶ月、約１８ヶ月、約２１ヶ月、約２４ヶ月、約２７ヶ月、約３０ヶ月、約３３ヶ月、または約３６ヶ月間、室温で実質的に安定である。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、少なくとも３ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１２ヶ月、少なくとも１５ヶ月、少なくとも１８ヶ月、少なくとも２１ヶ月、少なくとも２４ヶ月、少なくとも２７ヶ月、少なくとも３０ヶ月、少なくとも３３ヶ月、または少なくとも３６ヶ月間、室温で実質的に安定である。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約３ヶ月〜約１２ヶ月、約３ヶ月〜約１８ヶ月、約３ヶ月〜約２４ヶ月、約３ヶ月〜約３０ヶ月、約３ヶ月〜約３６ヶ月、約６ヶ月〜約１２ヶ月、約６ヶ月〜約１８ヶ月、約６ヶ月〜約２４ヶ月、約６ヶ月〜約３０ヶ月、約６ヶ月〜約３６ヶ月、約９ヶ月〜約１２ヶ月、約９ヶ月〜約１８ヶ月、約９ヶ月〜約２４ヶ月、約９ヶ月〜約３０ヶ月、約９ヶ月〜約３６ヶ月、約１２ヶ月〜約１８ヶ月、約１２ヶ月〜約２４ヶ月、約１２ヶ月〜約３０ヶ月、約１２ヶ月〜約３６ヶ月、約１８ヶ月〜約２４ヶ月、約１８ヶ月〜約３０ヶ月、または約１８ヶ月〜約３６ヶ月間、室温で実質的に安定である。
【００９４】
本明細書の態様は、一部分において、医薬として許容される組成物である、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「医薬として許容される」は、個人に投与されたとき、悪い、アレルギー性の、または他の有害なもしくは所望されない反応を生じないいかなる分子実体または組成物を意味する。医薬として許容されるヒドロゲル組成物は、医療および獣医学的用途に有用である。医薬として許容されるヒドロゲル組成物は、単独でまたは他の補足的な活性成分、剤、薬物、もしくはホルモンとの組み合わせで個人に投与され得る。
【００９５】
本明細書の態様は、一部分において、薬理学的に許容される賦形剤を含む、本明細書中に開示されるようなヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「薬理学的に許容される賦形剤」は「薬理学的賦形剤」または「賦形剤」と同義であり、哺乳類に投与されたときに長期のまたは恒久的な有害な効果を実質的に有さない賦形剤を指し、そして例えば、安定化剤、充填剤、凍結保護物質、溶解保護物質、添加物、媒体、担体、希釈剤、または補助剤等の、化合物を包含する。賦形剤は一般的に活性成分と混合され、またはその活性成分を希釈するもしくは封入することが許容され、そして固体、半固体、または液体剤であり得る。本明細書中に開示される医薬組成物は、活性成分の、医薬として許容される組成物へのプロセスを促進する、１つ以上の医薬として許容される賦形剤を含み得ることもまた考えられる。いかなる薬理学的に許容される賦形剤もその活性成分と非親和性でない限り、医薬として許容される組成物中でのその使用が企図される。薬理学的に許容される賦形剤の非限定的な例は、例えば、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｄｏｓａｇｅ  Ｆｏｒｍｓ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ（Ｈｏｗａｒｄ  Ｃ．Ａｎｓｅｌ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，７ｔｈ  ｅｄ．１９９９）、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ（Ａｌｆｏｎｓｏ  Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ  ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０ｔｈ  ｅｄ．２０００）、Ｇｏｏｄｍａｎ＆Ｇｉｌｍａｎ’ｓ  Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ（Ｊｏｅｌ  Ｇ．Ｈａｒｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，ｅｄｓ．，ＭｃＧｒａｗ‐Ｈｉｌｌ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ，１０ｔｈ  ｅｄ．２００１）、およびＨａｎｄｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（Ｒａｙｍｏｎｄ  Ｃ．Ｒｏｗｅ  ｅｔ  ａｌ．，ＡＰｈＡ  Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，４ｔｈ  ｅｄｉｔｉｏｎ  ２００３）で見つけることができ、それぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【００９６】
本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、非限定的に、緩衝液、保存剤、等張化剤、塩、抗酸化物質、重量オスモル濃度調節剤、乳化剤、湿潤剤、甘味または香味剤等を含む、非限定的に、他の医薬として許容される成分を随意に含み得ることがさらに考えられる。
【００９７】
医薬として許容される緩衝液は本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を調製するために使用され得る緩衝液であるが、ただし、生じる調製物は医薬として許容されるものである。医薬として許容される緩衝液の非限定的な例として、酢酸塩緩衝液、ホウ酸塩緩衝液、クエン酸塩緩衝液、中性緩衝食塩水、リン酸塩緩衝液、およびリン酸塩緩衝食塩水が挙げられる。医薬として許容される緩衝液のいかなる濃度も、治療的に有効な量の活性成分がこの有効な濃度の緩衝液を用いて回復されるという条件で、本明細書中に開示される医薬組成物の調合において有用であり得る。生理学的に許容される緩衝液の濃度の非限定的な例は、約０．１ｍＭ〜約９００ｍＭの範囲内で生じる。医薬として許容される緩衝液のｐＨは、生じる調製物が医薬として許容されるという条件で、調節され得る。必要に応じ、酸または塩基が医薬組成物のｐＨを調節するために使用され得ることが理解される。いかなる緩衝されたｐＨレベルも、治療的に有効な量のマトリックス重合体活性成分がこの有効なｐＨレベルを用いて回復されるという条件で、医薬組成物の調合において有用であり得る。生理学的に許容されるｐＨの非限定的な例は、約ｐＨ５．０〜約ｐＨ８．５の範囲内で生じる。例えば、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物のｐＨは約５．０〜約８．０、または約６．５〜約７．５、約７．０〜約７．４、または約７．１〜約７．３であり得る。
【００９８】
医薬として許容される保存剤は、非限定的に、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、アセチルシステイン、ブチル化ヒドロキシアニソール、およびブチル化ヒドロキシトルエンを含む。医薬として許容される保存剤は、非限定的に、塩化ベンザルコニウム、クロロブタノール、チメロサール、酢酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、例えば、ＰＵＲＩＴＥ（登録商標）（Ａｌｌｅｒｇａｎ，Ｉｎｃ．Ｉｒｖｉｎｅ，ＣＡ）等の安定化オキシクロロ組成物、ならびに例えば、ＤＴＰＡまたはＤＴＰＡ‐ビスアミド、ＤＴＰＡカルシウム、およびＣａＮａＤＴＰＡ‐ビスアミド等のキレート剤を含む。
【００９９】
本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物において有用な医薬として許容される等張化剤は、非限定的に、例えば、塩化ナトリウムおよび塩化カリウム等の塩、ならびにグリセリンを含む。その組成物は、塩として提供されることができ、そして非限定的に、塩酸、硫酸、酢酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸等を含む、多くの酸と共に形成され得る。塩はその対応する遊離塩基形より水性または他のプロトン溶媒中で可溶性である傾向がある。これらのおよび薬理学分野において既知の他の物質が本明細書中に開示される医薬組成物中に含まれ得ることが理解される。薬理学的に許容される成分の他の非限定的な例は、例えば、Ａｎｓｅｌ，上記，（１９９９）、Ｇｅｎｎａｒｏ，上記，（２０００）、Ｈａｒｄｍａｎ，上記，（２００１）、およびＲｏｗｅ，上記，（２００３）で見つけることができ、それぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１００】
本明細書の態様は、一部分において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を投与することによる個人の軟組織状態を治療する方法を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「治療する」は軟組織の欠点、欠損、疾患、および／または障害を特徴とする軟組織状態の美容的または臨床的症状を個人において低下させることもしくは消去すること、または軟組織の欠点、欠損、疾患、および／または障害を特徴とする状態の美容的または臨床的症状の開始を個人において遅らせることもしくは妨げることを指す。例えば、用語「治療する」は軟組織の欠損、疾患、および／または障害を特徴とする状態の症状を例えば、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも１００％、低下させることを意味し得る。軟組織の欠損、疾患、および／または障害を特徴とする状態の治療における本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の有効性はその状態に関連する１つ以上の美容的、臨床的症状、および／または生理学的指標を観察することにより決定され得る。軟組織の欠損、疾患、および／または障害における改善は、同時治療の必要性が低下したことによってもまた示され得る。当業者は特定の軟組織の欠損、疾患、および／または障害に関連する適切な症状または指標を知っているであろう、そして、ある個人が本明細書中に開示される化合物または組成物での治療の対象になるかどうかを決定する方法を知っているであろう。
【０１０１】
ヒドロゲル組成物は、個人に投与される。個人は典型的にどんな年齢、性別、または人種のヒトでもある。典型的に、軟組織状態を治療するための従来の処置の対象であるいかなる個人も本明細書中に開示される方法の対象である。老化皮膚の徴候を有する対象は成人であるが、早期老化または治療に好適な他の皮膚状態（例えば、傷跡）を有する対象もまた本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物で治療され得る。さらに、現在開示されるヒドロゲル組成物および方法は、現在の軟組織移植技術では技術的に不可能であり得る、または審美的に許容され得ない、体の部分または領域の少しの／中程度の拡張、形の変化、または輪郭の変化を求める個人に適用し得る。手術前評価はその処置に関連する全ての危険性および利点を開示する徹底的なインフォームドコンセントに加えて、ルーチンの履歴および身体検査を典型的に含む。
【０１０２】
本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物および方法は軟組織状態の治療において有用である。軟組織状態は、非限定的に、軟組織の欠点、欠損、疾患、および／または障害を含む。軟組織状態の非限定的な例は、例えば、胸の増大、胸の再構築、乳房固定、小乳房症、胸部発育不全、ポーランド症候群、カプセルの収縮および／または破裂のような移植合併症のための欠陥等の、胸の欠点、欠損、疾患、および／または障害、例えば、顔面の増大、顔面の再構築、メソセラピー、パリー‐ロンバーグ症候群、深在性エリテマトーデス、皮膚の穴、傷跡、こけた頬、薄い唇、鼻の欠点もしくは欠損、後眼窩の欠点もしくは欠損、眉間の線、鼻唇の線、口周囲の線、および／もしくはほうれい線のような顔のひだ、線、および／もしくはしわ、および／または顔面の他の輪郭の欠陥もしくは欠点等の、顔の欠点、欠損、疾患、または障害、首の欠点、欠損、疾患、または障害、皮膚の欠点、欠損、疾患、および／または障害、例えば、上腕、前腕、手、肩、背中、腹部を含む胴、臀部、腿、ふくらはぎを含む下腿、足底皮下脂肪を含む足、眼、生殖器、または他の体の部分、領域、もしくは範囲の増大または再構築等の、他の軟組織の欠点、欠損、疾患、および／または障害、またはこれらの体の部分、領域、もしくは範囲に影響する疾患または障害、失禁、大便失禁、他の形態の失調、および胃食道逆流疾患（ＧＥＲＤ）を含む。本明細書中で使用されるとき、用語「メソセラピー」は上皮、真皮上皮の接合部、および／または真皮に小さな多数の液滴として投与される剤の上皮内、皮内、および／または皮下注入を含む、皮膚の非外科的美容処置技術を指す。
【０１０３】
本明細書中に開示されるような方法のいずれかで使用されるヒドロゲル組成物の量は、所望される変化および／または改善、所望される軟組織状態の症状の低下および／または消去、個人および／または医師により所望される臨床的および／または美容的効果、ならびに治療される体の部分または領域に基づいて典型的に決定されるであろう。組成物投与の有効性は以下の臨床的および／または美容的計測：軟組織の形の変化および／または改善、軟組織の大きさの変化および／または改善、軟組織の輪郭の変化および／または改善、組織機能の変化および／または改善、組織内殖の支持および／または新規コラーゲン沈着、組成物の移植維持、患者の満足および／または生活の質の改善、ならびに埋め込み可能な外来物質の使用の減少のうちの１つ以上により表され得る。
【０１０４】
例えば、胸の増大処置について、その組成物および方法の有効性は以下の臨床的および／または美容的計測：胸の大きさの増加、胸の形の変化、胸の輪郭の変化、移植維持、カプセル収縮の危険性の低下、リポ壊死のう胞形成の速度の低下、患者の満足および／または生活の質の改善、ならびに胸部移植の使用の減少のうちの１つ以上により表され得る。
【０１０５】
別の例として、顔面の軟組織の治療におけるその組成物および方法の有効性は以下の臨床的および／または美容的計測：唇、頬、または眼領域の大きさ、形、および／または輪郭の増大のような顔面の造作の大きさ、形、および／または輪郭の増大、唇、頬、または眼領域の形の大きさ、形、および／または輪郭の変化のような顔面の造作の大きさ、形、および／または輪郭の変化、皮膚のしわ、ひだ、もしくは線の減少または消去、皮膚のしわ、ひだ、または線に対する抵抗性、皮膚の水分補給、皮膚の弾力性の増加、皮膚の粗さの低下または消去、皮膚緊縮性の増加および／または改善、引き伸ばされた線もしくは跡の減少または消去、皮膚の色調、つや、明るさ、および／もしくは輝きの増加ならびに／または改善、皮膚の色の増加および／または改善、皮膚の青白さの低下または消去、組成物の移植維持、副作用の減少、患者の満足および／または生活の質の改善のうちの１つ以上により表され得る。
【０１０６】
さらに別の例として、尿失禁処置について、括約筋支持のための組成物および方法の有効性は以下の臨床的計測：失禁頻度の減少、移植維持、患者の満足および／または生活の質の改善、ならびに埋め込み可能な外来性充填剤の使用の減少のうちの１つ以上により表され得る。
【０１０７】
この実施形態の態様において、投与されるヒドロゲル組成物の量は、例えば、約０．０１ｇ、約０．０５ｇ、約０．１ｇ、約０．５ｇ、約１ｇ、約５ｇ、約１０ｇ、約２０ｇ、約３０ｇ、約４０ｇ、約５０ｇ、約６０ｇ、約７０ｇ、約８０ｇ、約９０ｇ、約１００ｇ、約１５０ｇ、または約２００ｇである。この実施形態の他の態様において、投与されるヒドロゲル組成物の量は、例えば、約０．０１ｇ〜約０．１ｇ、約０．１ｇ〜約１ｇ、約１ｇ〜約１０ｇ、約１０ｇ〜約１００ｇ、または約５０ｇ〜約２００ｇである。この実施形態のさらに他の態様において、投与されるヒドロゲル組成物の量は、例えば、約０．０１ｍＬ、約０．０５ｍＬ、約０．１ｍＬ、約０．５ｍＬ、約１ｍＬ、約５ｍＬ、約１０ｍＬ、約２０ｍＬ、約３０ｍＬ、約４０ｍＬ、約５０ｍＬ、約６０ｍＬ、約７０ｍＬ、約８０ｍＬ、約９０ｍＬ、約１００ｍＬ、約１５０ｍＬ、または約２００ｍＬである。この実施形態の他の態様において、投与されるヒドロゲル組成物の量は、例えば、約０．０１ｍＬ〜約０．１ｍＬ、約０．１ｍＬ〜約１ｍＬ、約１ｍＬ〜約１０ｍＬ、約１０ｍＬ〜約１００ｍＬ、または約５０ｍＬ〜約２００ｍＬである。
【０１０８】
治療期間は個人および／または医師により所望される美容的および／または臨床的効果、ならびに治療される体の部分または領域に基づいて典型的に決定されるであろう。この実施形態の態様において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の投与は、例えば、約６ヶ月、約７ヶ月、約８ヶ月、約９ヶ月、約１０ヶ月、約１１ヶ月、約１２ヶ月、約１３ヶ月、約１４ヶ月、約１５ヶ月、約１８ヶ月、または約２４ヶ月間、軟組織状態を治療し得る。この実施形態の他の態様において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の投与は、例えば、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１０ヶ月、少なくとも１１ヶ月、少なくとも１２ヶ月、少なくとも１３ヶ月、少なくとも１４ヶ月、少なくとも１５ヶ月、少なくとも１８ヶ月、または少なくとも２４ヶ月間、軟組織状態を治療し得る。この実施形態のさらなる態様において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の投与は、例えば、約６ヶ月〜約１２ヶ月、約６ヶ月〜約１５ヶ月、約６ヶ月〜約１８ヶ月、約６ヶ月〜約２１ヶ月、約６ヶ月〜約２４ヶ月、約９ヶ月〜約１２ヶ月、約９ヶ月〜約１５ヶ月、約９ヶ月〜約１８ヶ月、約９ヶ月〜約２１ヶ月、約６ヶ月〜約２４ヶ月、約１２ヶ月〜約１５ヶ月、約１２ヶ月〜約１８ヶ月、約１２ヶ月〜約２１ヶ月、約１２ヶ月〜約２４ヶ月、約１５ヶ月〜約１８ヶ月、約１５ヶ月〜約２１ヶ月、約１５ヶ月〜約２４ヶ月、約１８ヶ月〜約２１ヶ月、約１８ヶ月〜約２４ヶ月、または約２１ヶ月〜約２４ヶ月間、軟組織状態を治療し得る。
【０１０９】
本明細書の態様は、一部分において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の投与を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「投与」は、臨床的に、治療的に、または実験的に有益な結果をもたらす可能性のある、本明細書中に開示される組成物を個人に提供するいかなる送達機構をも意味する。個人に組成物を投与するために使用される実際の送達機構は、非限定的に、皮膚状態の型、皮膚状態の位置、皮膚状態の原因、皮膚状態の重篤さ、所望される軽減の程度、所望される軽減の期間、使用される特定の組成物、使用される特定の組成物の排泄速度、使用される特定の組成物の薬力学、使用される特定の組成物中に含まれる他の化合物の性質、特定の投与経路、例えば、年齢、体重、一般的な健康等の、個人の特定の特徴、履歴、および危険因子、またはそれらの組み合わせを含む因子を考慮に入れることにより当業者に決定され得る。この実施形態の一態様において、本明細書中に開示される組成物は、注入により個人の皮膚領域に投与される。
【０１１０】
個々の患者へのヒドロゲル組成物の投与経路は個人および／または医師により所望される美容的および／または臨床的効果、ならびに治療される体の部分または領域に基づいて典型的に決定されるであろう。本明細書中に開示される組成物は、非限定的に、針を伴うシリンジ、ピストル（例えば、油空圧ピストル）、カテーテル、局所的なもの、または直接的な外科的埋め込みによるものを含む当業者に既知のどんな手段によっても投与され得る。本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、例えば、皮膚領域もしくは皮下組織領域等の、皮膚領域に投与され得る。例えば、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、約０．２６ｍｍ〜約０．４ｍｍの直径および約４ｍｍ〜約１４ｍｍに及ぶ長さの針を利用して注入され得る。あるいは、その針は２１〜３２Ｇであり、かつ約４ｍｍ〜約７０ｍｍの長さを有し得る。好ましくは、その針は使い捨ての針である。その針はシリンジ、カテーテル、および／またはピストルと結合され得る。
【０１１１】
さらに、本明細書中に開示される組成物は、一回または複数回にわたり、投与され得る。最終的に、使用されるタイミングは良質医療の基準に従うであろう。例えば、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、１回、または数日間もしくは数週間空けたセッションでいくつかのセッションにわたり投与され得る。例えば、個人は１、２、３、４、５、６、もしくは７日毎、または１、２、３、もしくは４週間毎に本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を投与され得る。個人への本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物の投与は毎月または隔月の頻度であり、または３、６、９、または１２ヶ月毎に投与され得る。
【０１１２】
胸の軟組織置換処置について、投与経路は脇の下、乳輪周囲、および／または乳房下部の経路を含み得る。あるいは、またはさらに、組成物は、体軸横断内視鏡胸筋下アプローチをとおして送達され得る。顔面の軟組織置換処置について、投与経路は正面、側頭、頬骨、眼周囲、下顎（ａｍｄｉｂｕｌａ）、口周囲、または顎の経路であり得る。尿失禁処置において、投与経路は経尿道または尿道周囲の経路を含み得る。あるいは、またはさらに、投与は順行性経路により送達され得る。本明細書中で議論される経路は所望の臨床的効果を達成するために複数の経路の使用を除外しない。
【０１１３】
本明細書の態様は、一部分において、皮膚領域を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「皮膚領域」は上皮皮膚接合部、ならびに表層真皮（乳頭状領域）および深層真皮（網状領域）を含む真皮を含む、皮膚の領域を指す。皮膚は３つの主要な層である、防水性を提供し、かつ感染に対するバリアとして働く上皮、皮膚の付属物のための場所として働く真皮、および皮下組織（皮下脂肪層）から成る。上皮は血管を含有せず、そして、真皮からの拡散により養われる。上皮を作り上げる細胞の主な型はケラチノサイト、メラノサイト、ランゲルハンス細胞、およびメルケル細胞である。
【０１１４】
真皮は結合組織からなる上皮の下の皮膚層であり、そして、圧力および歪みから体を保護する。真皮は基部膜により上皮にしっかりと結合される。それは触覚および温覚を与える、多くの機械受容器／神経末端を抱えもする。それは毛包、汗腺、皮脂腺、アポクリン汗腺、リンパ管、および血管を含有する。真皮中の血管は栄養を提供し、かつその細胞自体からのおよび上皮の基底細胞層からの除去物を消耗する。真皮は構造的に２つの領域：乳頭状領域と呼ばれる上皮に近い表面領域、および網状領域として知られる深くより厚い領域に分けられる。
【０１１５】
乳頭状領域はゆるい乳輪状結合組織からなる。それは上皮に向かって伸びる乳頭突起と呼ばれるその指のような放射のために名付けられる。乳頭突起は、上皮と互いに組み合わさる「でこぼこの」表面を真皮に提供し、その２つの皮膚層間結合を増強する。網状領域は乳頭状領域中に深く存在し、かつ通常非常により厚い。それは密集した不規則な結合組織からなり、そして、それ全体を織りなすコラーゲン性の、弾力性の、および網状の繊維の密集からその名前が付けられている。これらのタンパク質繊維は真皮の強度、拡張性、および弾力性の特性を提供する。髪の毛の根元、皮脂腺、汗腺、受容体、爪、および血管もまた網状領域内に位置される。入れ墨のインクは真皮中に保持される。妊娠による妊娠線もまた真皮中に位置される。
【０１１６】
皮下組織は真皮の下に存在する。その目的は下にある骨および筋肉に皮膚の皮膚領域を結合すること、および皮膚領域に血管および神経を供給することである。それはゆるい結合組織およびエラスチンからなる。主な細胞型は線維芽細胞、マクロファージ、および脂肪細胞である（皮下組織は体脂肪のうちの５０％を含有する）。脂肪は体の詰め物および断熱材として働く。
【０１１７】
この実施形態の一態様において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、皮膚領域または皮下組織領域への注入により個人の皮膚領域に投与される。この実施形態の態様において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物は、例えば、上皮皮膚接合領域、乳頭状領域、網状領域、またはそれらの組み合わせへの注入により個人の皮膚領域に投与される。
【０１１８】
本明細書の他の態様は、一部分において、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚状態を患う個人に投与するステップを含む、皮膚状態を治療する方法を開示し、ここでその組成物の投与は皮膚状態を改善し、それにより皮膚状態を治療する。この実施形態の一態様において、皮膚の脱水を治療する方法は、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚の脱水を患う個人に投与するステップを含み、ここでその組成物の投与は皮膚に水分を補給し、それにより皮膚の脱水を治療する。この実施形態の別の態様において、皮膚の弾力性の不足を治療する方法は、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚の弾力性の不足を患う個人に投与するステップを含み、ここでその組成物の投与は皮膚の弾力性を増大させ、それにより皮膚の弾力性の不足を治療する。この実施形態のさらに別の態様において、皮膚の粗さを治療する方法は、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚の粗さを患う個人に投与するステップを含み、ここでその組成物の投与は皮膚の粗さを低下させ、それにより皮膚の粗さを治療する。この実施形態のさらに別の態様において、皮膚の緊縮性の不足を治療する方法は本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚の緊縮性の不足を患う個人に投与するステップを含み、ここでその組成物の投与は皮膚をよりぴんと張らせ、それにより皮膚の緊縮性の不足を治療する。
【０１１９】
この実施形態の１つのさらなる態様において、皮膚の引き伸ばされた線または跡を治療する方法は、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚の引き伸ばされた線または跡を患う個人に投与するステップを含み、ここでその組成物の投与は皮膚の引き伸ばされた線または跡を減少させまたは消去し、それにより皮膚の引き伸ばされた線または跡を治療する。この実施形態の別の態様において、皮膚の青白さを治療する方法は、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚の青白さを患う個人に投与するステップを含み、ここでその組成物の投与は皮膚の色調または輝きを増大させ、それにより皮膚の青白さを治療する。この実施形態の別の態様において、皮膚のしわを治療する方法は、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚のしわを患う個人に投与するステップを含み、ここでその組成物の投与は皮膚のしわを減少させまたは消去し、それにより皮膚のしわを治療する。この実施形態のさらに別の態様において、皮膚のしわを治療する方法は、本明細書中に開示されるヒドロゲル組成物を個人に投与するステップを含み、ここでその組成物の投与は皮膚のしわに対して皮膚を抵抗性にさせ、それにより皮膚のしわを治療する。
【０１２０】
本発明のある実施形態に従う結合ビタミンＣ／ＨＡゲルは放出プロファイルの点でビタミンＣとＨＡとの物理的混合に優る明らかな利点を示した。結合ＨＡゲルは単純なインビトロ放出条件（酵素が関連しない）において十分安定である。結合ビタミンＣゲルは酵素の助けを伴って放出の維持を示すと考えられる。エーテル化を通して結合されたＡＡ２Ｇゲルの場合、活性ビタミンＣの放出はα‐グルコシダーゼおよび／またはヒアルロニダーゼにより誘発される。アミド化による結合ビタゲンまたはＡＡ２Ｐゲルに関して、活性ビタミンＣの放出はホスファターゼにより誘発される。結合ＡＡ２Ｇゲルの場合、活性ビタミンＣの放出は加水分解およびグルコシダーゼにより誘発される。
【０１２１】
いくつかの実施形態において、皮膚充填剤はバイオアベイラビリティを維持する。例えば、（例えば、顔面の空所の軟組織の欠損の修正のためにヒトに皮内でまたは皮下で）ヒトの皮膚に導入されたときに、ヒトにアスコルビン酸（または他のビタミン）を少なくとも約１ヶ月〜最大約２０ヶ月間、またはそれ以上放出する、皮膚充填剤が提供される。
【０１２２】
例えば、充填剤の期間と調和したビタミンＣ有効性の維持を予測するために、結合度についての見積もりがなされる。この見積もりはエーテル化によるＨＡへのＡＡ２Ｇ結合の形成に基づいた。その製剤は生理学的条件下で安定であるが、細胞膜に結合されたα‐グルコシダーゼによりアスコルビン酸（ＡｓＡ）の放出を開始する。α‐グルコシダーゼが細胞膜に結合しているという事実のために、ＡｓＡの放出は充填剤／細胞境界面で起こる。ＨＡ‐ＡＡ２ＧからのＡｓＡのさらなる放出にＨＡ分解が付随し、ＡＡ２Ｇが線維芽細胞に使用可能になるであろう。ＡｓＡの放出はしたがって、ＡＡ２Ｇ結合度およびＨＡの期間による。およそ５モル％の結合度を有するゲルは少なくとも最大１ヶ月間、例えば、３〜５ヶ月間、活性ビタミンＣを放出し得る。１０モル％の結合度を有するゲルは最大６〜８ヶ月間、活性ビタミンＣを放出し得る。１５モル％の結合度を有するゲルは最大約１０ヶ月間、またはそれ以上、活性ビタミンＣを放出し得る。３０モル％では最大１年半である。
【表２】
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＊ゲルのパラメーター：体積  ０．１ｃｃ、濃度  ２４ｍｇ／ｍＬに基づく。（０．１×２４×３％×１０００）／（３３８＊０．１）＝２．１３（ｍＭ）
＊＊仮定：
・ＡｓＡは一定の速度で放出される。
・ＡｓＡの有効な濃度は０．０５ｍＭであり、そして２日間超、有効性を維持する。２．１３＊２／（０．０５＊３０）＝２．８（ヶ月）
【０１２３】
本発明の１つの実施形態において、Ｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシドと架橋結合されたヒアルロン酸を含み、かつ約５モル％〜約４０モル％の結合度でそのヒアルロン酸に結合されたビタミンＣ誘導体（例えば、ＡＡ２Ｇ（アスコルビン酸２‐グルコシド）、ビタゲン（リン酸Ｌ‐アスコルビル３‐アミノプロピル）、およびＳＡＰ（リン酸アスコルビルナトリウム）のうちの１つ）を有する皮膚充填剤が提供される。
【０１２４】
この皮膚充填剤の作製方法は、４‐アームエポキシドによってキャップされたＡＡ２Ｇ（ＡＡ２Ｇ‐４アームエポキシド）、未反応の４‐アームエポキシド、および遊離ＡＡ２Ｇを含有する組成物を得るために好適な割合、反応温度、および反応時間で、ペンタエリスリトールグリシダールエーテル（Ｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシド）をアスコルビン酸２‐グルコシド（ＡＡ２Ｇ）と反応させることを含む。４アームエポキシドでキャップされたＡＡ２Ｇ（ＡＡ２Ｇ‐４アームエポキシド）はエポキシル基によりヒアルロン酸に結合される。未反応の４アームエポキシドはヒアルロン酸を架橋結合するための架橋剤として、およびＡＡ２Ｇをさらに結合するための結合剤として働く。
【０１２５】
本発明の別の実施形態において、ＢＤＤＥと架橋結合されたヒアルロン酸を含み、かつ約３モル％〜約１５モル％の結合度でそのヒアルロン酸に結合されたビタミンＣ誘導体（例えば、ＡＡ２Ｇ（アスコルビン酸２‐グルコシド）、ビタゲン（リン酸Ｌ‐アスコルビル３‐アミノプロピル）、およびＳＡＰ（リン酸アスコルビルナトリウム）のうちの１つ）を有する皮膚充填剤が提供される。
【０１２６】
この皮膚充填剤の作製方法は、ＢＤＤＥによってキャップされたＡＡ２Ｇ（ＡＡ２Ｇ‐ＢＤＤＥ）、未反応のＢＤＤＥ、および遊離ＡＡ２Ｇを含有する組成物を得るために好適な割合、反応温度、および反応時間で、ＢＤＤＥをアスコルビン酸２‐グルコシド（ＡＡ２Ｇ）と反応させることを含む。ＢＤＤＥでキャップされたＡＡ２Ｇ（ＡＡ２Ｇ‐ＢＤＤＥ）はエポキシル基によりヒアルロン酸に結合される。未反応のＢＤＤＥはヒアルロン酸を架橋結合するための架橋剤として、およびＡＡ２Ｇをさらに結合するための結合剤として働く。
【０１２７】
図９はＡＡ２Ｇ‐ＰＢＳ溶液からのＡｓＡ放出に対するα‐グルコシダーゼ濃度の効果を示す表である。ＡＡ２ＧのＡｓＡへの変換はα‐グリコシダーゼの濃度による。α‐グリコシダーゼ濃度がゲル１ｇ当たり６．３ユニットであるとき、ＡＡ２Ｇは１５分間でほとんど完全にＡｓＡに変換した。α‐グリコシダーゼ濃度がゲル１ｇ当たり４．７ユニットであるとき、ＡＡ２ＧをＡｓＡに完全に変換するのに３０分かかった。さらなるα‐グリコシダーゼ濃度喪失はＡＡ２ＧのＡｓＡへの変換を遅くした。
【０１２８】
図１０は本発明に従う結合された皮膚充填剤からの遊離ＡｓＡの放出プロファイルの表示（放出維持）（モル％でのＡＡ２Ｇ変換対反応時間）を示す。ＡＡ２ＧはＡＡ２Ｇ／ジュビダーム（Ｊｕｖｅｄｅｒｍ）混合物中で、４０分でＡｓＡに完全に変換した。ＨＡ‐ＡＡ２Ｇ結合物はＡｓＡへのＡＡ２Ｇ変換の時間依存性を示した。
【０１２９】
図１１Ａおよび１１Ｂは本発明に従う様々な皮膚充填剤についての追加の放出データを示す。より具体的には、ＨＡ‐ＡＡ２Ｇゲル中のＡＡ２ＧのＡｓＡへの変換はα‐グリコシダーゼ濃度に依存する。高いα‐グリコシダーゼ濃度はＡＡ２ＧのＡｓＡへの変換を速くした。所与のα‐グリコシダーゼ濃度について、種々の製剤はＡＡ２ＧのＡｓＡへの異なるプロファイルを示した。
実施例
【実施例１】
【０１３０】
架橋剤としてＢＤＤＥを用いて架橋結合されたＨＡゲルへのＡＡ２Ｇ結合
４００．６ｍｇのＬＭＷ  ＨＡをシリンジ中の１８０２ｍｇの１重量％ＮａＯＨ中で約３０分間水和した。８００．７ｍｇのＡＡ２Ｇ、続いて７１３．７ｍｇのＢＤＤＥ、および１４１６．８ｍｇの１０％ＮａＯＨをバイアル中に入れた。上記溶液（ｐＨ１２超）を５０℃の水浴中で約２０分間反応させ、その後上記水和ＨＡに添加した。その添加後、その混合物を２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより約２０回混合した。その混合ペーストをバイアル中に入れ、そして５０℃の水浴中に約２．５時間入れた。２２３．５ｍｇの１２Ｍ  ＨＣｌを９．０５ｇのＰＢＳ（ｐＨ７．４）に添加した。約２．５時間後、ＨＡ‐ＡＡ２Ｇゲルが形成された。そのゲルを切断して断片にし、そしてＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液をそれに添加した。そのゲルを中和させ、そして環状振騰器上で一晩膨潤させた。そのゲルを、約６０μｍスクリーンをとおしてふるいにかけ、そして２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより約２０回混合した。そのゲルを１５，０００ＭＷＣＯ  ＲＣ透析バッグ中に入れ、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中で透析した。その透析を、ＰＢＳ緩衝液を頻繁に交換しながら約１８５時間続けた。その透析後、そのゲルをシリンジ中に入れ、そして４℃の冷蔵庫内で貯蔵した。
【実施例２】
【０１３１】
ＡＡ２Ｇ結合の決定
実施例１中に示されるようなゲルの重量を透析直前、および透析後に決定した。そのゲルが透析後に約１ｇ／ｍＬであったと仮定した。透析を、１ＬのＰＢＳ中で８時間超あたりに顕著なＡＡ２Ｇが出てこなくなった点で止めた。そのＡＡ２ＧをＵＶ／Ｖｉｓ分光光度計（Ｎａｎｏｄｒｏｐ  ２０００Ｃ、ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて２６０ｎｍで計測した。ＡＡ２Ｇの較正曲線を２％ＨＡ中の様々な濃度のＡＡ２Ｇを用いて計算した（２６０ｎｍでの吸収＝１．４８３８［ＡＡ２Ｇ（ｍＭ）］）。
透析後のＨＡの重量：ＨＡの出発重量×（透析前の実際の重量／理論的重量）
透析後のＡＡ２Ｇのｍｍｏｌ：式（２６０ｎｍでの吸収＝１．４８３８［ＡＡ２Ｇ（ｍＭ）］）中に透析後の２６０ｎｍでの吸収を入れた。
ＡＡ２Ｇでの結合：（ＡＡ２Ｇ（ｍｍｏｌ）／ＨＡ（ｍｍｏｌ））×１００％
実施例１中に示されるようなゲル中のＡＡ２Ｇ結合度は１４．７モル％である。
【実施例３】
【０１３２】
ゲルの流体力学的特性の決定
振動平行プレートレオメータ（Ａｎｔｏｎ  Ｐａａｒ，  Ｐｈｙｓｉｃａ  ＭＣＲ  ３０１）を実施例１中で得られたゲルの特性を計測するために使用した。使用されたプレートの直径は２５ｍｍであった。そのプレート間のギャップを１ｍｍに設定した。各計測について、一定の歪みでの周波数掃引をはじめに、その後、固定周波数での歪み掃引を行った。Ｇ’（貯蔵弾性率）を１％の歪みでの歪み掃引曲線から得た。そのゲルについてのその値は１４５０Ｐａである。
【実施例４】
【０１３３】
可変性の結合度およびゲル流体力学的特性を有する、架橋剤としてＢＤＤＥを用いた、架橋結合されたＨＡゲルへのＡＡ２Ｇ結合
本手順は実施例１中に示されるものと類似した。結合度は架橋剤対ＨＡおよびＡＡ２Ｇモル率を調整することにより改変される。ゲル特性を実施例３中に示されるように計測した。詳細は以下のとおりである。
４００．８ｍｇのＬＭＷ  ＨＡをシリンジ中の１７５２．１ｍｇの１％ＮａＯＨ中で約３０分間水和した。８００．３ｍｇのＡＡ２Ｇ、続いて３５４．１ｍｇのＢＤＤＥ、および１４０２．０ｍｇの１０％ＮａＯＨをバイアル中に入れた。上記溶液（ｐＨ１２超）を５０℃の水浴中で約２０分間反応させ、その後上記水和ＨＡに添加した。その添加後、その混合物を２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより約２０回混合した。その混合ペーストをバイアル中に入れ、そして５０℃の水浴中に約２．５時間入れた。１４０．９ｍｇの１２Ｍ  ＨＣｌを９．００５３ｇのＰＢＳ（ｐＨ７．４）に添加した。約２．５時間後、ＨＡ‐ＡＡ２Ｇゲルが形成された。そのゲルを切断して断片にし、ＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液をそれに添加した。そのゲルを中和させ、そして環状振騰器上で一晩膨潤させた。そのゲルを、約６０μｍスクリーンをとおしてふるいにかけ、そして２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより約２０回混合した。そのゲルを１５，０００ＭＷＣＯ  ＲＣ透析バッグ中に入れ、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中で透析した。その透析を、ＰＢＳ緩衝液を頻繁に交換しながら約１６４．５時間続けた。その透析後、そのゲルをシリンジ中に入れ、そして４℃の冷蔵庫内で貯蔵した。結合度は１３％である。ゲル貯蔵弾性率（Ｇ’）は、８０３Ｐａである。
【実施例５】
【０１３４】
架橋剤としてＢＤＤＥを用いた、架橋結合されたＨＡゲルへのＡＡ２Ｇ結合。結合度は５．３％であり、Ｇ’は約３００Ｐａである。
４００．３ｍｇのＬＭＷ  ＨＡをシリンジ中の３００２．０ｍｇの１％ＮａＯＨ中で約３０分間水和した。８００．５ｍｇのＡＡ２Ｇ、続いて２６４．３ｍｇのＢＤＤＥ、および１１００．０ｍｇの１０％ＮａＯＨをバイアル中に入れた。上記溶液（ｐＨ１２超）を５０℃の水浴中で約２０分間反応させ、その後上記水和ＨＡに添加した。その添加後、その混合物を２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより約２０回混合した。その混合ペーストをバイアル中に入れ、そして５０℃の水浴中に約２．５時間入れた。１０４．２ｍｇの１２Ｍ  ＨＣｌを８．５１２８ｇのＰＢＳ（ｐＨ７．４）に添加した。約２．５時間後、ＨＡ‐ＡＡ２Ｇゲルが形成され、そしてＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液をそれに添加した。そのゲルを中和させ、そして環状振騰器上で週末にかけて（約５５時間）膨潤させた。そのゲルを、約６０μｍスクリーンをとおしてふるいにかけ、そして２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより約２０回混合した。そのゲルを１５，０００ＭＷＣＯ  ＲＣ透析バッグ中に入れ、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中で透析した。その透析を、ＰＢＳ緩衝液を頻繁に交換しながら約１１４時間続けた。その透析後、そのゲルをシリンジ中に入れ、そして４℃の冷蔵庫内で貯蔵した。結合度およびゲル流体力学的特性を実施例２および３中に示されるような手順で計測する。結合度は５．３％である。ゲル貯蔵弾性率は約３００Ｐａである。
【実施例６】
【０１３５】
架橋剤としてｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシドを用いた、架橋結合されたＨＡゲルへのＡＡ２Ｇ結合。結合度は２９．４％であり、Ｇ’は約２３５Ｐａである。
２００．４ｍｇのＬＭＷ  ＨＡをシリンジ中の２０００ｍｇの１％ＮａＯＨ中で約３０分間水和した。４００ｍｇのＡＡ２Ｇ、続いて３１２．７ｍｇのｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシド、および１０２６．５ｍｇの１０％ＮａＯＨをバイアル中に入れた。上記溶液を５０℃の水浴中で約２０分間反応させ、その後上記水和ＨＡに添加した。その添加後、その混合物を２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより約２０回混合した。その混合ペーストをバイアル中に入れ、そして５０℃の水浴中に約２．５時間入れた。１８７．４ｍｇの１２Ｍ  ＨＣｌを３．０３４ｇのＰＢＳ（ｐＨ７．４）に添加した。約２．５時間後、ＨＡ‐ＡＡ２Ｇゲルが形成され、そしてＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液をそれに添加した。そのゲルを中和させ、そして環状振騰器上で週末にかけて（約６８時間）膨潤させた。そのゲルを、約６０μｍスクリーンをとおしてふるいにかけ、そして２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより約２０回混合した。そのゲルを１５，０００ＭＷＣＯ  ＲＣ透析バッグ中に入れ、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中で透析した。その透析を、ＰＢＳ緩衝液を頻繁に交換しながら約９５時間続けた。その透析後、そのゲルをシリンジ中に入れ、そして４℃の冷蔵庫内で貯蔵した。結合度およびゲル流体力学的特性は実施例２および３中に示されるような手順で計測される。結合度は２９．４％である。ゲル貯蔵弾性率は約２３５Ｐａである。
【実施例７】
【０１３６】
架橋剤としてｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシドを用いた、架橋結合されたＨＡゲルへのＡＡ２Ｇ結合。結合度は２７．８％であり、Ｇ’は約３６３Ｐａである。
２００．３ｍｇのＬＭＷ  ＨＡをシリンジ中の２０００ｍｇの１％ＮａＯＨ中で約３０分間水和した。４００．２ｍｇのＡＡ２Ｇ、続いて３１３．４ｍｇのｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシド、および１０２２．６ｍｇの１０％ＮａＯＨをバイアル中に入れた。上記溶液を上記水和ＨＡに添加した。その添加後、その混合物を２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより約２０回混合した。その混合ペーストをバイアル中に入れ、そして５０℃の水浴中に約２．５時間入れた。１９６．５ｍｇの１２Ｍ  ＨＣｌを３．０１６ｇのＰＢＳ（ｐＨ７．４）に添加した。約２．５時間後、ＨＡ‐ＡＡ２Ｇゲルが形成され、そして上記ＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液をそれに添加した。そのゲルを中和させ、そして環状振騰器上で一晩（約２４時間）膨潤させた。そのゲルを、約６０μｍスクリーンをとおしてふるいにかけ、そして２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより約２０回混合した。そのゲルを１５，０００ＭＷＣＯ  ＲＣ透析バッグ中に入れ、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中で透析した。その透析を、ＰＢＳ緩衝液を頻繁に交換しながら約９８．５時間続けた。その透析後、そのゲルをシリンジ中に入れ、そして４℃の冷蔵庫内で貯蔵した。結合度およびゲル流体力学的特性を実施例２および３中に示されるような手順で計測する。結合度は２７．８％である。ゲル貯蔵弾性率は約３６３Ｐａである。
【実施例８】
【０１３７】
架橋剤としてＢＤＤＥを用いた、架橋結合されたＨＭＷ  ＨＡゲルへのＡＡ２Ｇ結合。結合度は９．８モル％であり、Ｇ’は約２３８Ｐａである。
４００．３ｍｇのＨＭＷ  ＨＡをシリンジ中の２５０１．３ｍｇの４重量％ＮａＯＨ中で約３０分間水和した。１２００ｍｇのＡＡ２Ｇ、続いて３０４．７ｍｇのＢＤＤＥ、および１１７８．６ｍｇの１６重量％ＮａＯＨをバイアル中に入れた。上記溶液（ｐＨ１２超）を５０℃の水浴中で約２０分間反応させ、そして２０ｃｃのシリンジに移し、その後上記水和ＨＡに添加した。その添加後、その混合物を２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより約２０回混合した。その混合ペーストを２０ｃｃのバイアル中に入れ、そして５０℃の水浴中に約２．５時間入れた。約２．５時間後、ＨＡ‐ＡＡ２Ｇゲルが形成された。その後、２２６．６ｍｇの１２Ｍ  ＨＣｌを８４９２．２ｍｇの１０倍ＰＢＳ（ｐＨ７．４）に添加し、ＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液を得、そのＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液を、上記ゲルを中和させ、膨潤させるために添加した。そのゲルを環状振騰器上で４８時間にわたり、中和させ、そして膨潤させた。そのゲルを、約６０μｍスクリーンをとおしてふるいにかけ、そして２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより約２０回混合した。そのゲルを２０，０００ＭＷＣＯ  ＣＥ透析バッグ中に入れ、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中で透析した。その透析を、ＰＢＳ緩衝液を頻繁に交換しながら約１１４時間続けた。その透析後、そのゲルをシリンジ中に入れ、そして４℃の冷蔵庫内で貯蔵した。結合度およびゲル流体力学的特性を実施例２および３中に示されるような手順で計測する。結合度は５．３％である。ゲル貯蔵弾性率は約３００Ｐａである。
【実施例９】
【０１３８】
架橋剤としてＢＤＤＥを用いた、架橋結合されたＬＭＷ  ＨＡゲルへのビタゲン結合。結合度は１５モル％であり、Ｇ’は約３６５Ｐａである。
３９８．２ｍｇのＬＭＷ  ＨＡをシリンジ中の１７５３．２４ｍｇの１重量％ＮａＯＨ中で約４０分間水和した。ＢＤＤＥ（３１１．７ｍｇ）を膨潤したＨＡに添加し、そしてＨＡをさらなる８０分間、膨潤させ続けた。膨潤したＨＡ／ＢＤＤＥ混合物を５０℃で２０分間予め反応させた。
８０１．９ｍｇのビタゲンを１４５９．７ｍｇの１０重量％ＮａＯＨ中で別に溶解し、そしてＢＤＤＥと予め反応させたＨＡと混合した。その混合物を５０℃でさらなる２．５時間、反応させ続けた。約２．５時間後、ＨＡ‐ビタゲンゲルが形成された。その後、１９５ｍｇの１２Ｍ  ＨＣｌを９００４．０ｍｇの１０倍ＰＢＳ（ｐＨ７．４）に添加し、ＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液を得、そしてそのＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液を、上記ゲルを中和させ、そして膨潤させるために添加した。そのゲルを環状振騰器上で４８時間にわたり、中和させ、そして膨潤させた。そのゲルを、約６０μｍスクリーンをとおしてふるいにかけ、そして２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより約２０分間混合した。そのゲルを２０，０００ＭＷＣＯ  ＣＥ透析バッグ中に入れ、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中で透析した。その透析を、ＰＢＳ緩衝液を頻繁に交換しながら約１２０時間続けた。その透析後、そのゲルをシリンジ中に入れ、そして４℃の冷蔵庫内で貯蔵した。そのゲルの流体力学的特性を実施例３中に示されるような手順で計測した。結合度は物質収支により約１５モル％と計算される。ゲル貯蔵弾性率は約３６５Ｐａである。
【実施例１０】
【０１３９】
アミド化化学反応による直鎖状ＨＡへのビタゲン結合
２００．３ｍｇのＨＭＷ  ＨＡを６０ｃｃのシリンジ中の１０ｍＬの水中で水和した。５００ｍｇのビタゲンを０．５ｍＬの水中に溶解し、そして溶液をｐＨ４．８まで中和した。１９７．７ｍｇのＥＤＣおよび１４９ｍｇのＮＨＳを６ｍＬの水中で別に溶解した。上記溶液（溶液およびＥＤＣ／ＮＨＳ溶液）を２３．５ｍＬの水を含有する別の６０ｃｃシリンジに添加する。その２つのシリンジを、２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより２０回混合する。その混合物を１つのシリンジ中で貯蔵し、そして３７℃浴中に４時間浸した。最後に、その溶液を、顕著なビタゲンが観察されなくなるまで、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）に対して透析した。結合度を、示される実施例３と類似の方法により決定した。結合度は約１０モル％である。
【実施例１１】
【０１４０】
架橋結合されたＨＡゲルへのＡＡ２Ｐ結合
２００．４ｍｇのＬＭＷ  ＨＡをシリンジ中の１０００ｍｇのＭＥＳ  ５．２緩衝液中で約３０分間水和する。２９２ｍｇのＡＡ２Ｐをバイアル中に入れ、続いて３００ｍｇのｓｔａｒ‐ＰＥＧアミンを添加する。上記溶液を室温で一晩反応させる。そのゲルをＰＢＳ緩衝液で水和し、ＰＢＳ緩衝液に対して透析し、未反応のＡＡ２Ｐを除去した。最終的なゲルを実施例２および３中に示されるように特徴付け、結合度およびゲル流体力学的特性を決定した。結合度は約２０モル％である。貯蔵弾性率（Ｇ’）は約５００Ｐａである。
【実施例１２】
【０１４１】
ＡＡ２Ｇを伴うＨＡ／ＢＤＤＥ皮膚充填剤製品の製剤
上記実施例中に示されるゲルのいずれにも、透析後、好適な量の遊離ＨＡゲルが、ゲルの粘着性および／または注入可能性を改善改変するよう、そのゲルに添加され得る。例えば、均一な粘弾性ゲル（「遊離」ＨＡゲル）を得るために、遊離ＨＡ繊維をリン酸緩衝液中で膨潤させる。（例えば、約１ｗ／ｗ％〜約５ｗ／ｗ％の遊離ＨＡを有する組成物を得るために）この非架橋結合ゲルは透析ステップ前に、実施例１中で得られたＨＡ／ＢＤＤＥ架橋結合ゲルに添加される。生じるゲルをその後、処理済み滅菌シリンジ中に満たし、そして滅菌のために十分な温度および圧で少なくとも約１分間オートクレーブにかける。オートクレーブ後、最終的なＨＡ‐ＡＡ２Ｇ製品を包装し、そして皮膚充填剤として使用するために医師に配布する。
【実施例１３】
【０１４２】
リドカインを含むＨＡ‐ＡＡ２Ｇ皮膚充填剤の製剤
実施例１２の手順に従う、ただし、透析ステップ後、かつ遊離ＨＡゲル添加前に、リドカインクロル水和物（リドカインＨＣｌ）をその混合物に添加する。粉末形態のリドカインＨＣｌははじめにＷＦＩ中で可溶化され、そして０．２μｍフィルターをとおしてろ過され得る。希釈ＮａＯＨ溶液をわずかに塩基性のｐＨ（例えば、約７．５〜約８のｐＨ）に到達させるためにその粘着性ＨＡ‐ＡＡ２Ｇゲルに添加する。上記リドカインＨＣｌ溶液をその後、そのわずかに塩基性のゲルに添加し、最終的に所望される濃度、例えば、約０．３ｗ／ｗ％に到達させる。ＨＡ‐ＡＡ２Ｇ／リドカイン混合物の結果としてのｐＨは、そのとき、約７であり、そしてＨＡ濃度は約２４ｍｇ／ｍＬである。適切なブレンダー機構を備えた標準の反応器中で、適切な均一性を得るために機械的混合を行う。
【実施例１４】
【０１４３】
ＨＡヒドロゲルへのカルボキシル官能基を含有する添加物の結合
レチノイン酸（トレチノインとしても知られる）、アダパレンス（ａｄａｐａｌｅｎｃｅ）（、およびアルファ‐リポ酸等の、添加物はカルボキシル官能基（‐ＣＯＯＨ）を含有する。これらの添加物はＥＤＣ化学反応を用いたエステル化によりＨＡヒドロゲルに結合される。本発明の１つの実施形態に従う結合についての実施例は、以下のように説明される。
２００ｍｇのＨＭＷ  ＨＡを６０ｃｃシリンジ中の１０ｍＬのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ４．８）中で水和する。別のシリンジ中で、２００ｍｇのレチノイン酸を５ｍＬの水‐アセトン混合物（水／アセトン体積率１：３）中に溶解する。上記２つのシリンジをシリンジ接続器により約２０回混合する。その後、１９７．７ｍｇのＥＤＣおよび１４９ｍｇのＮＨＳを別のシリンジ中の６ｍＬの水中で別に溶解する。ＥＤＣおよびＮＨＳを含有するシリンジをＨＡおよびレチノイン酸を含有するシリンジと繋げ、２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより反応物を少なくとも２０回混合する。その混合物を１つのシリンジ中で貯蔵し、そして３７℃浴中に４時間浸す。そのゲルをイソプロパノールに対して透析し、未結合のレチノイン酸を除去し、そしてその後、無菌条件下でＰＢＳ緩衝液に対して透析する。そのゲルを滅菌シリンジ中に包装し、そして４℃で貯蔵する。
【実施例１５】
【０１４４】
ＨＡヒドロゲルへのヒドロキシル官能基を含有する添加物の結合
レチノール（トレチノインとしても知られる）、カタラーゼ、ジメチルアミノエタノール、およびｇ‐トコフェロール等の添加物はヒドロキシル官能基（‐ＯＨ）を含有する。これらの添加物はＥＤＣ化学反応を用いたエステル化によりＨＡヒドロゲルに結合される。結合についての典型的な実施例は、以下のように説明される。
２００ｍｇのＨＭＷ  ＨＡを６０ｃｃのシリンジ中の１０ｍＬの２‐（Ｎ‐モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）緩衝液（ｐＨ４．８）中で水和する。別のシリンジ中で、２００ｍｇのレチノール酸を５ｍＬの水‐アセトン混合物（水／アセトン体積率１：３）中に溶解する。上記２つのシリンジをシリンジ接続器により約２０回混合する。その後、１９７．７ｍｇのＥＤＣおよび１４９ｍｇのＮＨＳを別のシリンジ中の６ｍＬの水中で別に溶解する。ＥＤＣおよびＮＨＳを含有するシリンジをＨＡおよびレチノールを含有するシリンジに繋げ、２つのシリンジ間を行ったり来たりさせることにより反応物を少なくとも２０回混合する。その混合物を１つのシリンジ中で貯蔵し、そして３７℃浴中に４時間浸す。そのゲルをイソプロパノールに対して透析し、未結合のレチノールを除去し、そしてその後、無菌（ａｓｐｅｃｔ）条件下でＰＢＳ緩衝液に対して透析する。そのゲルを滅菌シリンジ中に包装し、そして４℃で貯蔵する。
【実施例１６】
【０１４５】
改変後のＨＡヒドロゲルへのヒドロキシル官能基を含有する添加物の結合
これは２つのステップのプロセスである。ステップ１：ＨＡヒドロゲル、例えば、ジュビダームまたはレスチラン（ｒｅｓｔｙｌａｎｅ）をＥＤＣ／ＮＨＳで処理し、ＨＡのカルボキシル基を活性化する。ステップ２：活性化されたＨＡヒドロゲルを、ヒドロキシル基を含有する添加物で処理する。ヒドロキシル基を含有する添加物はレチノール、カタラーゼ、ジメチルアミノエタノール、およびｇ‐トコフェロールヒドロキシル官能基（‐ＯＨ）である。架橋結合されたＨＡゲルへの添加物の結合についての典型的な実施例は、以下のとおりである。
２ｇｍのジュビダームゲルを２００ｇｍのＥＤＣおよび１５０ｍｇのＮＨＳと室温で混合する。その後、３ｍＬのアセトン‐水混合物中の２００ｍｇのレチノールを添加する。上記混合物を３７℃で４時間反応させる。そのゲルをイソプロパノールに対して透析し、未結合のレチノールを除去し、そしてその後、無菌条件下でＰＢＳ緩衝液に対して透析する。そのゲルを滅菌シリンジ中に包装し、そして４℃で貯蔵する。
【実施例１７】
【０１４６】
ＨＡヒドロゲルへの増殖因子、ペプチド、またはエラスチンの結合
官能アミン基を含有する、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、形質転換増殖因子（ＴＧＦ）、およびペプチド等の、添加物はＨＡに結合され、有益な皮膚充填剤を形成し得る。これらの添加物はアミド化化学反応によりＨＡに結合される。結合についての典型的な実施例は、以下のように説明される。
２００．３ｍｇのＨＭＷ  ＨＡを１０ｍＬのＭＥＳ緩衝水（ｐＨ５．４）中で水和する。１００ｍｇのＭＥＳ溶液中の２０ｍｇのＥＧＦを添加する。上記混合物に、１９７．７ｍｇのＥＤＣおよび１４９ｍｇを添加する。生じる反応混合物を３７℃で４時間反応させる。反応完了後、そのゲルをイソプロパノールに対してさらに透析し、そしてその後、無菌条件下でＰＢＳ緩衝液に対して透析する。そのゲルを滅菌シリンジ中に包装し、４℃で貯蔵する。
【０１４７】
最後に、本明細書の態様が様々な実施形態について示されているが、当業者は開示される特定の実施例が本明細書中に開示される発明の原理の単に例示であることを容易に理解するであろうことが理解されるべきである。それゆえ、開示される発明は本明細書中に示される特定の方法、プロトコル、および／または試薬等に決して限定されないことが理解されるべきである。よって、本明細書の精神から離れることなく、当業者は多くのおよび様々な改変または変化を作出し得る、あるいは、開示される発明の代替の構成は本明細書中の教示に従ってなされ得る。詳細における変化は付属の請求項中に定義されるような本発明の精神から離れることなく、なされ得る。最後に、本明細書中で使用される用語は特定の実施形態を説明する目的のためのみであり、そして請求項によってのみ定義される本発明の範囲を限定するとは意図されない。さらに、上記説明中に含有される、または付属の図面中に示される全ての事柄は単に例示として、および限定ではないと解釈されるべきであることが意図される。したがって、本発明は示されるおよび説明されるとおりの正確なものに限定されない。
【０１４８】
本発明を実施するために本発明者に知られる最も良い様式を含む、本発明のある特定の実施形態が本明細書中に示される。もちろん、これらの示される実施形態についての変形は上記説明を読めば当業者に明らかになるであろう。本発明者は、当業者がそのような変形を使用することを適切であると予想し、そして本発明者は本発明が本明細書中に具体的に示されるものとは異なって実施されることを意図する。したがって、本発明は適用可能な法により許可されるように、本明細書中に付属の請求項中に列挙される発明の全ての改変および均等物を含む。さらに、上記に示される要素の、それらの全ての可能な変形の、どんな組み合わせも、本明細書中に別段の定めなき限り、または別段のように文脈により明らかに矛盾しない限り、本発明に含まれる。
【０１４９】
本明細書中に開示される本発明の代替の要素または実施形態のグループ化は限定として解釈されるべきでない。各グループ構成要素は個々に、またはそのグループの他の構成要素もしくは本明細書中に見られる他の要素とのどんな組み合わせでも言及され、そして請求され得る。１グループの１つ以上の構成要素は利便性および／または特許性の理由のためにグループ中に含められ、またはグループから消去され得る。そのような包含または消去が起こるとき、本明細書は改変されたグループを含有し、したがって付属の請求項中で使用される全てのマーカッシュ形式のグループの記述を実現するとみなされる。
【０１５０】
別段の定めなき限り、本明細書および請求項中で使用される成分の量、分子量等の特性、反応条件等を表す全ての数字は用語「約」により全ての場合において修飾されると理解されるべきである。本明細書中で使用されるとき、用語「約」は、そのように指定された項目、パラメータ、または用語が、示された項目、パラメータ、または用語の値の１０パーセント超および未満の範囲を包含することを意味する。したがって、逆の定めなき限り、本明細書および付属の請求項中に設定される数字パラメータは本発明により得られると考えられる所望の特性により変化し得る近似値である。何はともあれ、かつ請求項の範囲に対する均等物の原則の適用を限定する試みではなく、各数字パラメータは少なくとも報告される有意な桁の数字に照らして、かつ通常の端数処理技術を適用することにより解釈されるべきである。本発明の広い範囲を示す数字範囲およびパラメータは近似値であるにもかかわらず、特定の実施例中に示される数値は可能な限り正確に報告される。どの数値も、しかしながら、それらの各試験計測中に見られる標準偏差から必然的に生じるある特定の誤差を本質的に含有する。
【０１５１】
本発明を示す文脈中で（特に以下の請求項の文脈中で）使用される用語「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」、および同様の指示物は、本明細書中に別段の定めなき限りまたは文脈により明らかに矛盾しない限り、単数および複数の両方を含むと解釈されるべきである。本明細書中の値の範囲の列挙はその範囲に入る各別々の値を個々に言及する省略法として働くと単に意図される。本明細書中に別段の定めなき限り、各個々の値は、それが本明細書中に個々に列挙されているかのように本明細書中に組み込まれる。本明細書中に示される全ての方法は、本明細書中に別段の定めなき限り、または別段のように文脈により明らかに矛盾しない限り、いかなる好適な順序でも行われ得る。本明細書中に提供されるいかなるおよび全ての実施例または例示的な言語（例えば、「等の」）の使用は単に本発明をよりよく例示することが意図され、そして別段のように請求される本発明の範囲についての限定を提示しない。本明細書中のどの言語も本発明の実施に本質的な非請求要素を示すと解釈されるべきでない。
【０１５２】
本明細書中に開示される特定の実施形態は言語からなるまたは本質的に言語からなることを用いて請求項中でさらに限定され得る。請求項中で使用されるとき、改正毎に提出されまたは追加されようとも、接続用語「からなる」は請求項中で特定されない要素、ステップ、または成分を除外する。接続用語「本質的に〜からなる」は特定の物質またはステップ、ならびに基本的なおよび新規の特性（単数または複数）に実質的に影響しないものに請求項の範囲を限定する。そのように請求される本発明の実施形態は本明細書中に本質的にまたは明示的に示され、および可能にされる。
【０１５３】
本明細書中に引用されるおよび特定される全ての特許、特許公報、および他の出版物は、例えば、本発明に関連して使用され得るそのような出版物中に示される組成物および方法を示すおよび開示する目的のために、それらの全体が引用により本明細書中に個々におよび明示的に組み込まれる。これらの出版物は本出願の出願日前のそれらの開示についてのみ提供される。この点におけるいずれも、本発明者が先発明によってまたは他の理由のためにそのような開示に先行する権利を与えられないことの承認として解釈されるべきでない。その日付についての全ての記述またはこれらの文書の内容についての表示は本出願人に入手可能な情報に基づき、そしてこれらの文書の日付または内容の正確さについての承認を構成しない。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１Ａ】
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【図１１Ｂ】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年9月10日(2020.9.10)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
ヒアルロン酸、およびヒアルロン酸と共有結合したビタミンC誘導体を含む、皮膚充填剤組成物。
【請求項２】
ビタミンC誘導体が、約3モル％〜約15モル％の結合度でヒアルロン酸と共有結合している、請求項1に記載の皮膚充填剤組成物。
【請求項３】
ビタミンC誘導体が、生体内で酵素切断によりビタミンCに変換される、請求項1または2に記載の皮膚充填剤組成物。
【請求項４】
ビタミンC誘導体が、アスコルビン酸2-グルコシド（AA2G）、リン酸アスコルビル3-アミノプロピルおよびリン酸アスコルビルナトリウム（AA2P）より選択される、請求項1〜3のいずれか一項に記載の皮膚充填剤組成物。
【請求項５】
ビタミンC誘導体が、アスコルビン酸2-グルコシド（AA2G）である、請求項4に記載の皮膚充填剤組成物。
【請求項６】
ビタミンC誘導体が、リン酸アスコルビル3-アミノプロピルである、請求項4に記載の皮膚充填剤組成物。
【請求項７】
ビタミンC誘導体が、リン酸アスコルビルナトリウム（AA2P）である、請求項4に記載の皮膚充填剤組成物。
【請求項８】
ヒアルロン酸が、架橋している、請求項1〜7のいずれか一項に記載の皮膚充填剤組成物。
【請求項９】
ヒアルロン酸が、1,4-ブタンジオールジグリシジルエーテル（BDDE）、ペンタエリスリトールグリシダールエーテル（Star-PEGエポキシド）またはペンタエリスリトール(3-アミノプロピル)エーテル（Star-PEGアミン）で架橋している、請求項8に記載の皮膚充填剤組成物。
【請求項１０】
ヒアルロン酸が、1,4-ブタンジオールジグリシジルエーテル（BDDE）で架橋している、請求項9に記載の皮膚充填剤組成物。
【請求項１１】
麻酔剤をさらに含む、請求項1〜10のいずれか一項に記載の皮膚充填剤組成物。
【請求項１２】
麻酔剤が、リドカインである、請求項11に記載の皮膚充填剤組成物。
【請求項１３】
軟組織状態の治療のための、請求項1〜12のいずれか一項に記載の皮膚充填剤組成物。
【請求項１４】
軟組織状態が、しわまたは傷跡である、請求項13に記載の皮膚充填剤組成物。