(57)【要約】【課題】被験者におけるがん免疫療法の効果を高める方法、及び被験者のＭ１マクロファージプールを増加する方法の提供。【解決手段】本発明の被験者におけるがん免疫療法の効果を高める方法は、被験者にキバナオウギの多糖体抽出物の有効量を投与する工程を含む。また本発明の被験者のＭ１マクロファージプールを増加する方法は、望ましくないＭ２マクロファージ活性化に関連付けられた１つ以上の疾患を患っている被験者にキバナオウギの多糖体抽出物の有効量を投与する工程を含む。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
患者のＭ１マクロファージプールを増加することにより、望ましくないＭ２マクロファージ活性化に関連付けられた症状を治療するための医薬組成物であって、アラビノース：ガラクトース比が約１.５：１〜約３：１の範囲であり、約５％〜約１５％のアラビノース；約１.５％未満のラムノース；約３％〜約７％のガラクトース；約４％未満のガラクツロン酸；および約７０％〜約９０％のグルコースを含み、平均分子量が約２０kDa〜約６０kDaであるキバナオウギ（Astragalus membranaceus）の多糖体抽出物を含有する、医薬組成物。
【請求項２】
その望ましくないＭ２マクロファージ活性化に関連付けられた症状が、がん、ぜんそく、アレルギーおよび進行性線維症を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項３】
（i）マクロファージの腫瘍促進機能；（ii）腫瘍関連マクロファージの腫瘍内への動員；（iii）腫瘍浸潤及び転移；（iv）腫瘍血管新生；（v）腫瘍成長；または（vi）腫瘍細胞の増殖を減少する効果を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明はがん免疫療法の効果を高める方法に関し、特に、本発明は被験者のＭ１マクロファージプールを増加する、および／または被験者の樹状細胞の機能的成熟を強化する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
最近の研究では、腫瘍形成と腫瘍進行における、腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）、腫瘍関連樹状細胞（ＴＡＤＣ）、細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、及びその他免疫細胞の重要な役割が示唆されている。これらの細胞は、細胞間の直接効果、またはサイトカインとケモカインの産生による間接的効果を介して、腫瘍微小環境（ＴＭＥ）に大きな影響を与え得る。さらに、これら細胞からの分泌物は、腫瘍細胞の増殖、血管新生、転移の制御において特定の役割を定義している。樹状細胞、マクロファージ、Ｔ細胞、好中球が腫瘍に対して細胞毒性を示すように操作できる可能性を示唆する最近の研究によって実証されているように、それらは生体内における腫瘍促進能力において役割を担っている。従って、これらの細胞を標的とする治療が有望である、またはそれらを腫瘍への薬剤または抗がん性粒子送達システムの構成要素とすることが可能である（Ｃａｎｃｅｒ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ：  Ｍｕｌｔｉ−ｐｒｏｎｇｅｄ  ｔｕｍｏｕｒ  ａｔｔａｃｋ．Ｎａｔｕｒｅ  ２８  Ｖｏｌ．５３８，  ４３１，  ２０１６）。
【０００３】
天然のアジュバント及び専門の抗原提示細胞（ＡＰＣ）として、樹状細胞（ＤＣ）はがん細胞に対して反応する免疫力の中心的役割を果たす。ＤＣ療法の原理は、ＤＣの基本能力を利用してＴ細胞ベースの抗がん応答を促進することである。最も重要なプロセスは、ＭＨＣクラスＩを介した外来性抗原の提示（通常ＭＨＣクラスＩＩ上で提示される）に依存する、免疫賦活能を備えた抗原をクロスプレゼンテーションするＤＣの能力であり、これが抗腫瘍免疫応答のための直接的なＣＤ８＋Ｔ細胞刺激を可能にする（Ｃａｎｃｅｒ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ｖｉａ  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｖｏｌ．１２，  ２６５−２７７，  ２０１２）。ほとんどの治療プロトコルで単球由来ＤＣ（ｍｏＤＣ）が使用され、これは未成熟ＤＣへの分化と、その後の抗がん機能を備えたＤＣへの成熟を必要とする。ここで、すべての成熟した（または活性化された）ＤＣが等しく抗がん機能を備え、免疫原性であるわけではないことに言及しておく。抗腫瘍免疫応答を備えたＤＣの機能成熟のバイオマーカーは、ＣＤ８０、ＣＤ８３、ＣＤ８６、ＣＤ１０３である。分化プロトコルの選択が単球由来ＤＣ（ｍｏＤＣ）の免疫賦活能を最大化するために極めて重要である。ほとんどのプロトコルがＩＬ‐４とＧＭ-ＣＳＦを使用する。しかしながら、この古典的な方法は、ＩＬ‐４をＩＬ‐１５またはＩＦＮαで置換する方法で示されるように、改善可能である。
【０００４】
腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）は腫瘍微小環境における主役であり、腫瘍中の高ＴＡＭはがん患者の予後不良に関連付けられる。生物学的機能に基づき、マクロファージは、古典的Ｍ１マクロファージと選択的Ｍ２マクロファージの２つの表現型に広く分類される。Ｍ１マクロファージは、Ｔｈ１サイトカインインターフェロン‐γ、細菌部分、及びＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）アゴニストによって活性化され、ＩＬ‐６、ＩＬ‐１２、ＩＬ‐２３、腫瘍壊死因子‐α（ＴＮＦ‐α）などの炎症性因子の産生によって特徴付けられる。従って、Ｍ１マクロファージは炎症反応と抗腫瘍免疫に関係がある。反対に、Ｍ２マクロファージはＴｈ２サイトカイン（ＩＬ‐４、ＩＬ‐１０、ＩＬ‐１３）に関連付けられ、かつ抗炎症反応、創傷治癒、腫瘍促進性性質に関係がある。一般に、ＴＡＭはＭ２マクロファージに類似しており、Ｍ２様ＴＡＭは腫瘍進行（腫瘍増殖、血管新生／脈管形成、転移、及び宿主の免疫監視の回避と破壊を含む）と治療抵抗のための腫瘍微小環境に必須の調節因子である（Ｄｉｖｅｒｓｅ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ  ｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｕｍｏｒ  ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ．Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  ｐｐ １‐９, ２０１６）。従って、臨床転帰の予後マーカーとして役立つ可能性に加え、ＴＡＭのＭ２表現型からＭ１表現型へのリプログラミングは抗腫瘍免疫療法と腫瘍進行阻害において重要な問題である。
【０００５】
米国特許第８７２８５４３号は、患者の特発性血小板減少性紫斑病の治療法を開示しており、これには患者に対するキバナオウギ（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ）抽出物の治療的有効量投与が含まれる。
【０００６】
米国特許第９１３９６５２号では、患者のＭ１マクロファージプールを増加する方法が教示されており、この方法は患者のＭ１マクロファージプールを増加するに足る量のコロニー刺激因子１受容体に結合可能なモノクローナル抗体を患者に投与することが含まれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】米国特許第８７２８５４３号明細書
【特許文献２】米国特許第９１３９６５２号明細書
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】Ｃａｎｃｅｒ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ：  Ｍｕｌｔｉ−ｐｒｏｎｇｅｄ  ｔｕｍｏｕｒ  ａｔｔａｃｋ．Ｎａｔｕｒｅ  ２８  Ｖｏｌ．５３８，  ４３１，  ２０１６
【非特許文献２】Ｃａｎｃｅｒ  ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ  ｖｉａ  ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ  ｃｅｌｌｓ，  Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｖｏｌ．１２，  ２６５−２７７，  ２０１２
【非特許文献３】Ｄｉｖｅｒｓｅ  ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ  ｐｏｌａｒｉｚａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｔｕｍｏｒ  ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ．Ａｒｃｈｉｖｅｓ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃａｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ，  ｐｐ １‐９, ２０１６
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明によれば、キバナオウギの多糖体抽出物が、被験者における樹状細胞の機能的成熟（ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ）の強化、および／またはマクロファージのＭ１型への再分極に有効であることが予期せず発見された。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
したがって、一態様において、本発明は、被験者にキバナオウギの多糖体抽出物の有効量を投与する工程を含む、被験者におけるがん免疫療法の効果を高める方法を提供する。
【００１１】
本発明の一部の好ましい実施態様において、前記多糖体抽出物は、約１.５：１〜約３：１の範囲であるアラビノース：ガラクトース比；約５％〜約１５％のアラビノース；約１.５％未満のラムノース；約３％〜約７％のガラクトース；約４％未満のガラクツロン酸；約７０％〜約９０％のグルコースを含む。一実施態様において、前記多糖体抽出物は約２０ｋＤａ〜約６０ｋＤａの範囲の平均分子量を有する。
【００１２】
本発明によれば、前記多糖体抽出物は、被験者における樹状細胞の機能的成熟の強化、および／またはマクロファージのＭ１型への再分極に有効な量で投与することができる。
【００１３】
別の一態様において、本発明は、望ましくないＭ２マクロファージ活性化に関連付けられた１つ以上の疾患を患っている被験者のＭ１マクロファージプールを増加する方法を提供し、前記方法が、前記被験者にキバナオウギの多糖体抽出物の有効量を投与する工程を含む。
【００１４】
本発明の特定の実施態様において、前記望ましくないＭ２マクロファージ活性化に関連付けられた１つ以上の疾患は、がん、ぜんそく、アレルギー、または進行性線維症を含む。
【００１５】
本発明の特定の実施態様によれば、前記多糖体抽出物は約２０ｋＤａ〜約６０ｋＤａの範囲の平均分子量を有する。
【００１６】
本発明の特定の実施態様によれば、前記方法は、（i）マクロファージの腫瘍促進機能；（ii）腫瘍関連マクロファージの腫瘍内への動員；（iii）腫瘍浸潤及び転移；（iv）腫瘍血管新生；（v）腫瘍成長；（vi）腫瘍細胞の増殖；の少なくとも１つを減少する。
【００１７】
さらなる一態様において、本発明は、必要とする被験者において結腸がんを治療する方法を提供し、前記方法が前記被験者にキバナオウギの多糖体抽出物の治療的有効量を投与する工程を含む。
【００１８】
本発明によれば、前記多糖体抽出物は、被験者における樹状細胞の機能的成熟の強化、および／またはマクロファージのＭ１型への再分極に有効な量で投与することができる。
【００１９】
前述の概要の説明と、以下の詳細な説明は、本発明を限定するものではなく、例示と説明のみを目的としていると理解されるべきである。
【００２０】
本発明の前述の概要、及び以下の詳細な説明は、添付の図面を参照しながら読むことでより理解されるであろう。本発明の例示を目的として、現時点で好ましい実施形態が図面に記載されている。
【図面の簡単な説明】
【００２１】
【図１Ａ】キバナオウギの多糖体抽出物（ＰＧ２）が、がん患者の末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）由来のＣＤ８０＋樹状細胞の集団を増加することを示すグラフである。１：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４；２：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４、次にＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）治療；３：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４、洗浄、次にＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）治療。*、ｐ＜０.０５、第１群と比較。**、ｐ＜０.０１、第１群と比較。
【図１Ｂ】キバナオウギの多糖体抽出物（ＰＧ２）が、がん患者のＰＢＭＣ由来のＣＤ１０３＋樹状細胞の集団を増加することを示すグラフである。１：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４；２：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４、次にＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）治療；３：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４、洗浄、次にＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）治療。*、ｐ＜０.０５、第１群と比較。**、ｐ＜０.０１、第１群と比較。
【図１Ｃ】キバナオウギの多糖体抽出物（ＰＧ２）が、がん患者のＰＢＭＣ由来のＣＤ８６＋樹状細胞の集団を増加することを示すグラフである。１：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４；２：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４、次にＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）治療；３：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４、洗浄、次にＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）治療。*、ｐ＜０.０５、第１群と比較。
【図２Ａ】キバナオウギの多糖体抽出物（ＰＧ２）が、結腸がん患者のＰＢＭＣ由来のＣＤ８０＋樹状細胞の集団を増加することを示すグラフである。１：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４；２：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４、次にＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）治療；３：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４、洗浄、次にＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）治療。*、ｐ＜０.０５、第１群と比較。**、ｐ＜０.０１、第１群と比較。
【図２Ｂ】キバナオウギの多糖体抽出物（ＰＧ２）が、乳がん患者のＰＢＭＣ由来のＣＤ８０＋樹状細胞の集団を増加することを示すグラフである。１：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４；２：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４、次にＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）治療；３：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４、洗浄、次にＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）治療。*、ｐ＜０.０５、第１群と比較。
【図２Ｃ】キバナオウギの多糖体抽出物（ＰＧ２）が、卵巣がん患者のＰＢＭＣ由来のＣＤ８０＋樹状細胞の集団を増加することを示すグラフである。１：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４；２：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４、次にＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）治療；３：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４、洗浄、次にＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）治療。*、ｐ＜０.０５、第１群と比較。**、ｐ＜０.０１、第１群と比較。
【図２Ｄ】キバナオウギの多糖体抽出物（ＰＧ２）が、肝臓がん患者のＰＢＭＣ由来のＣＤ８０＋樹状細胞の集団を増加することを示すグラフである。１：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４；２：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４、次にＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）治療；３：ＧＭ-ＣＳＦ＋ＩＬ４、洗浄、次にＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）治療。*、ｐ＜０.０５、第１群と比較。
【図３Ａ】キバナオウギの多糖体抽出物（ＰＧ２）が、がん患者のＰＢＭＣ由来のＣＤ８０＋マクロファージの集団を増加することを示すグラフである。**、ｐ＜０.０１、対照群（ホルボールミリスチン酸アセテート（ＰＭＡ）誘導のみ）と比較。
【図３Ｂ】キバナオウギの多糖体抽出物（ＰＧ２）が、がん患者のＰＢＭＣ由来のＣＤ２０６＋マクロファージの集団を減少することを示すグラフである。*、ｐ＜０.０５、対照群（ＰＭＡ誘導のみ）と比較。
【図４Ａ】キバナオウギの多糖体抽出物（ＰＧ２）が、結腸がん患者のＰＢＭＣ由来のＣＤ８０＋マクロファージの集団を増加することを示すグラフである。**、ｐ＜０.０１、対照群（ＰＭＡ誘導のみ）と比較。
【図４Ｂ】キバナオウギの多糖体抽出物（ＰＧ２）が、肝臓がん患者のＰＢＭＣ由来のＣＤ８０＋マクロファージの集団を増加することを示すグラフである。*、ｐ＜０.０５、**、ｐ＜０.０１、対照群（ＰＭＡ誘導のみ）と比較。
【図４Ｃ】キバナオウギの多糖体抽出物（ＰＧ２）が、胃がん患者のＰＢＭＣ由来のＣＤ８０＋マクロファージの集団を増加することを示すグラフである。*、ｐ＜０.０５、対照群（ＰＭＡ誘導のみ）と比較。
【図４Ｄ】キバナオウギの多糖体抽出物（ＰＧ２）が、脳腫瘍患者のＰＢＭＣ由来のＣＤ８０＋マクロファージの集団を増加することを示すグラフである。*、ｐ＜０.０５、**、ｐ＜０.０１、対照群（ＰＭＡ誘導のみ）と比較。
【発明を実施するための形態】
【００２２】
一態様において、本発明は被験者におけるがん免疫療法の効果を高める方法を提供する。前記方法は、被験者にキバナオウギ（Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ  ｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ）（Ｈｕａｎｇ―Ｃｈｉ）の多糖体抽出物の有効量を投与する工程を含む。
【００２３】
本発明の特定の実施態様によれば、前記多糖体抽出物は約２０ｋＤａ〜約６０ｋＤａの範囲の平均分子量を有する。
【００２４】
本発明の一部の好ましい実施態様において、前記多糖体抽出物は、約１.５：１〜約３：１の範囲であるアラビノース：ガラクトース比；約５％〜約１５％のアラビノース；約１.５％未満のラムノース；約３％〜約７％のガラクトース；約４％未満のガラクツロン酸；約７０％〜約９０％のグルコースを含む。一実施態様において、前記多糖体抽出物は約２０ｋＤａ〜約６０ｋＤａの範囲の平均分子量を有する。
【００２５】
前記キバナオウギの多糖体抽出物は、例えば、米国特許第８７２８５４３号に記載された方法など、先行技術において示されている方法によって作製することができる。本発明の好ましい実施態様によれば、前記キバナオウギの多糖体抽出物は、ＰＧ２（Ｐｈｙｔｏｈｅａｌｔｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、台湾）である（Ｈｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，  ｖｏｌ．２０１５，  Ａrticle ＩＤ ８２６３１９, １０ページ, ２０１５；及びＣｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ  ２０７, １８４‐１９１, ２０１７参照）。
【００２６】
本発明によれば、前記多糖体抽出物は、被験者における樹状細胞の機能的成熟の強化、および／またはマクロファージのＭ１型への再分極（または被験者のＭ１マクロファージプール増加）に有効な量で投与することができる。
【００２７】
別の一態様において、本発明は、望ましくないＭ２マクロファージ活性化に関連付けられた１つ以上の疾患を患っている被験者のＭ１マクロファージプールを増加する方法を提供する。前記方法は、被験者にキバナオウギの多糖体抽出物の有効量を投与する工程を含む。
【００２８】
本発明の特定の実施態様において、前記望ましくないＭ２マクロファージ活性化に関連付けられた１つ以上の疾患は、がん、ぜんそく、アレルギー、または進行性線維症を含む。
【００２９】
本発明の特定の実施態様によれば、前記多糖体抽出物は約２０ｋＤａ〜約６０ｋＤａの範囲の平均分子量を有する。
【００３０】
本発明の一部の好ましい実施態様において、前記多糖体抽出物は、約１.５：１〜約３：１の範囲であるアラビノース：ガラクトース比；約５％〜約１５％のアラビノース；約１.５％未満のラムノース；約３％〜約７％のガラクトース；約４％未満のガラクツロン酸；約７０％〜約９０％のグルコースを含む。一実施態様において、前記多糖体抽出物は約２０ｋＤａ〜約６０ｋＤａの範囲の平均分子量を有する。
【００３１】
本発明の特定の実施態様によれば、前記方法は、（i）少なくとも１つのマクロファージの腫瘍促進機能；（ii）腫瘍関連マクロファージの腫瘍内への動員；（iii）腫瘍浸潤及び転移；（iv）腫瘍血管新生；（v）腫瘍成長；（vi）腫瘍細胞の増殖；の少なくとも１つを減少する。
【００３２】
さらなる一態様において、本発明は、必要とする被験者において結腸がんを治療する方法を提供し、そのうち、前記方法が前記被験者にキバナオウギの多糖体抽出物の治療的有効量を投与する工程を含む。
【００３３】
本発明の特定の実施態様によれば、前記多糖体抽出物は約２０ｋＤａ〜約６０ｋＤａの範囲の平均分子量を有する。
【００３４】
本発明の一部の好ましい実施態様において、前記多糖体抽出物は、約１.５：１〜約３：１の範囲であるアラビノース：ガラクトース比；約５％〜約１５％のアラビノース；約１.５％未満のラムノース；約３％〜約７％のガラクトース；約４％未満のガラクツロン酸；約７０％〜約９０％のグルコースを含む。一実施態様において、前記多糖体抽出物は約２０ｋＤａ〜約６０ｋＤａの範囲の平均分子量を有する。
【００３５】
本発明によれば、前記多糖体抽出物は、被験者における樹状細胞の機能的成熟の強化、および／またはマクロファージのＭ１型への再分極に有効な量で投与することができる。
【００３６】
以下、限定ではなく例示を目的として提供される次の実施例により、本発明についてさらに説明する。
【実施例１】
【００３７】
樹状細胞の機能的成熟に対するキバナオウギの多糖体抽出物の効果
【００３８】
キバナオウギの多糖体抽出物ＰＧ２がＰｈｙｔｏｈｅａｌｔｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（台湾）より購入された（Ｈｏｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ  ｏｆ  Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ，  ｖｏｌ．２０１５，  Ａｒｔｉｃｌｅ  ＩＤ  ８２６３１９, １０ページ, ２０１５；及びＣｈａｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ  Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌ  ２０７, １８４‐１９１, ２０１７参照）。末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）試料が１１人のがん患者より採集された。ＰＢＭＣ（１×１０６）は２日間の培養後、（１）２０ｎｇ／ｍＬの顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ-ＣＳＦ）と２０ｎｇ／ｍＬのインターロイキン‐４（ＩＬ‐４）；（２）２０ｎｇ／ｍＬの顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ-ＣＳＦ）と２０ｎｇ／ｍＬのインターロイキン‐４（ＩＬ‐４）、次にＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）で４８時間；または（３）２０ｎｇ／ｍＬの顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ-ＣＳＦ）と２０ｎｇ／ｍＬのインターロイキン‐４（ＩＬ‐４）、洗浄、次に４８時間のＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）処理で処理された。
【００３９】
ＣＤ８０＋、ＣＤ１０３＋またはＣＤ８６＋樹状細胞の割合はフローサイトメトリーにより測定された。結果、キバナオウギの多糖体抽出物が樹状細胞の機能的成熟を促進することが示された（図１Ａ〜図１Ｃ）。図２Ａ〜図２Ｄに、キバナオウギの多糖体抽出物が、多様ながん患者のＰＢＭＣ由来のＣＤ８０＋樹状細胞の集団を増加することを示す。このデータは、ＰＧ２が免疫不全のがん患者にとって強力な免疫刺激物質であることを示唆している。
【実施例２】
【００４０】
マクロファージ表現型に対するキバナオウギの多糖体抽出物の効果
【００４１】
キバナオウギの多糖体抽出物ＰＧ２がＰｈｙｔｏｈｅａｌｔｈ  Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ（台湾）より購入された。末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）試料が１７人のがん患者より採集された。１０％ＦＣＳを１×１０６細胞／ｍｌの濃度で添加した培地にＰＢＭＣを播種し、最終量７ｍｌが１０ｍｌの組織培養ディッシュに移された。ＰＢＭＣが、PＭＡ２５ｎｇ／ｍｌで２４時間処理され、さらに２０ｎｇ／ｍｌのＩＬ‐４と２０ｎｇ／ｍｌのＩＬ‐１３で２４時間処理された。その後、細胞はＰＧ２（１６ｍｇ／ｍｌ）で４８時間処理された。ＣＤ８０＋またはＣＤ２０６＋マクロファージの割合はフローサイトメトリーにより測定された。結果、キバナオウギの多糖体抽出物が、マクロファージの表現型をＭ２からＭ１に変化させることが示された（図３Ａ〜図３Ｂ）。図４Ａ〜図４Ｄに、キバナオウギの多糖体抽出物が、多様ながん患者のＰＢＭＣ由来のＣＤ８０＋マクロファージの集団を増加することを示す。
【００４２】
本発明の広範な概念を逸脱することなく上述した実施態様に変更を加えることが可能であることは、当業者には明らかであろう。従って、本発明は開示された具体的な実施態様に限定されず、添付の特許請求の範囲により定義される本発明の要旨と範囲内の変更は、本発明に含まれると理解される。
【図１Ａ】
2020040997.tif 000002
【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図２Ｃ】
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【図２Ｄ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図４Ｃ】
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【図４Ｄ】
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