(57)【要約】  【課題】ノロウイルスの消毒効果に優れかつ人体に対する安全性も高い抗ウイルス剤であって、従来有効活用されていなかった原料を用いて作製することのできるものを提供する。  【解決手段】カキノキ属（Diospyros）の植物の果実の抽出物（カキ抽出物）と、ナツメヤシ属（Phoenix）の植物の種子の抽出物（デーツ種子抽出物）とを含有する、ノロウイルスまたはその代替ウイルスに対する抗ウイルス剤。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも縮合型タンニンを含む、カキノキ属（Diospyros）の植物の果実の抽出物（以下「カキ抽出物」という。）と、少なくともタンニンを含む、ナツメヤシ属（Phoenix）の植物の種子の抽出物（以下「デーツ種子抽出物」という。）とを含有する、ノロウイルスまたはその代替ウイルスに対する抗ウイルス剤。
【請求項２】
前記カキ抽出物がカキノキ（Diospyros kaki）の果実の抽出物である、請求項１に記載の抗ウイルス剤。
【請求項３】
前記カキ抽出物がエタノール水溶液による抽出物である、請求項１または２に記載の抗ウイルス剤。
【請求項４】
前記デーツ種子抽出物がナツメヤシ（Phoenix dactylifera）の種子の抽出物である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の抗ウイルス剤。
【請求項５】
前記デーツ種子抽出物がエタノール水溶液による抽出物である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の抗ウイルス剤。
【請求項６】
前記デーツ種子抽出物が低分子タンニンについて富化されたものである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の抗ウイルス剤。
【請求項７】
前記カキノキ属の植物の果実１重量部に相当する前記カキ抽出物に対して、前記ナツメヤシ属の植物の種子１０〜１００重量部に相当する前記デーツ種子抽出物を含有する、請求項１〜６のいずれか一項に記載の抗ウイルス剤。
【請求項８】
前記ナツメヤシ属の植物の種子１重量部に相当する前記デーツ種子抽出物に対して、前記カキノキ属の植物の果実０．０００５〜０．１重量部に相当する前記カキ抽出物を含有する、請求項１〜６のいずれか一項に記載の抗ウイルス剤。
【請求項９】
請求項１〜８のいずれか一項に記載の抗ウイルス剤と、アルコール、有機酸および／またはその塩、界面活性剤、抗菌剤、保湿剤および化粧品用油脂類からなる群より選ばれる少なくとも１つの成分とを含有する、ノロウイルスまたはその代替ウイルスに対する抗ウイルス組成物。
【請求項１０】
前記アルコールとしてエタノールおよび／またはプロパノールを含有する、請求項９に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項１１】
前記有機酸および／またはその塩として、乳酸、クエン酸およびフェルラ酸ならびにそれらの塩からなる群より選ばれる少なくとも１種を含有する、請求項９または１０に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項１２】
前記界面活性剤として、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ラウリルグルコシド、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸アンモニウム、ラウレス硫酸ナトリウムおよびオレフィンスルホン酸ナトリウムからなる群より選ばれる少なくとも１種を含有する、請求項９〜１１のいずれか一項に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項１３】
前記組成物全体１００重量％に対して、前記カキノキ属の植物の果実０．０５〜１重量％に相当する前記カキ抽出物を含む前記抗ウイルス剤を含有する、請求項９〜１２のいずれか一項に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項１４】
前記組成物全体１００重量％に対して、前記ナツメヤシ属の植物の種子１．２５〜２．５重量％に相当する前記デーツ種子抽出物を含む前記抗ウイルス剤を含有する、請求項９〜１３のいずれか一項に記載の抗ウイルス組成物。
【請求項１５】
カキ抽出物およびデーツ種子抽出物を併用することにより、カキ抽出物、デーツ種子抽出物それぞれ単独のノロウイルスまたはその代替ウイルスに対する抗ウイルス作用を相乗効果により増強する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、ノロウイルスまたはその代替ウイルスに対して有効な抗ウイルス剤および抗ウイルス組成物に関する。また本発明は、カキノキ等の果実の抽出物およびナツメヤシ等の種子の抽出物それぞれの用途に関する。
【背景技術】
【０００２】
ノロウイルス（Norovirus）は、カリシウイルス科ノロウイルス属に分類される、直径が約３０ｎｍのプラス鎖の一本鎖ＲＮＡウイルスである。１９６８年に米国で食中毒・急性胃腸炎の病原体として発見されて以来、世界各国で検出され、日本においてもノロウイルスに起因する食中毒の発生が毎年多数報告されている。感染源としては、カキなどの二枚貝を原因食とする食材からの感染と患者の吐物・排泄物からの二次感染があり、特に後者が感染拡大の大きな原因となっている。ノロウイルスは感染力が極めて強く、１０個以上のウイルスで感染するともいわれている。
【０００３】
ノロウイルスの感染拡大を抑制するためには、原因食品を加熱する一次感染の予防とともに、調理器具や調理者の手指などの消毒によりノロウイルスの二次感染を予防することが極めて重要である。ところがノロウイルスは、ウイルス粒子の外層にエンベロープと呼ばれる膜状の構造を持たないウイルス（非エンベロープウイルス）であるため、エンベロープを持つウイルス（エンベロープウイルス）に対して有効である界面活性剤やアルコール（エタノール等）によっては消毒することができない。飲食店、給食施設、工場など食品を調理加工する場において、抗菌剤として汎用されていた塩化ベンザルコニウムやエタノール類にはノロウイルスに対する効果が認められておらず、塩素系漂白剤（次亜塩素酸ナトリウム等）、ヨード剤（ポピドンヨード等）、アルデヒド剤（グルタラール等）などがある程度有効とされていた。例えば、８５℃以上で１分間の加熱、または２００ｐｐｍ以上の次亜塩素酸ナトリウムでの処理は、ノロウイルスの消毒方法として公的に認められている（厚生労働省）。しかしながら、人体に対する安全性への配慮から作業者の手指や調理器具類にこれらの薬剤類を使用することは適当とはいえず、まして食品に混入するおそれのある調理場での薬剤類の使用は現実的に困難である。
【０００４】
上記の観点から、食品添加物に準じる植物由来の抽出物であって、ノロウイルス（またはその他の比エンベロープウイルス）の消毒に有効な抗ウイルス剤やそれを含有する抗ウイルス組成物の研究開発が進められている。ノロウイルス等に対する抗ウイルス剤の有効成分としては、例えば、カキノキ属（Diospyros）の植物の果実の抽出物（特許文献１、２）、カリンに代表されるボケ属（Chaenomeles）の植物の抽出物（特許文献３）、バナナに代表されるバショウ属（Musa）の植物の抽出物（特許文献４）、ブドウ種子由来ポリフェノールであるプロアントシアニジン（特許文献５）、栗渋皮抽出物（特許文献６）がこれまでに提案されている。
【０００５】
一方、デーツ（ナツメヤシの実）は、日本では、甘みやコクを出すためにお好みソースの原料として用いられているが、その種子は産業廃棄物として大量に処分されている。デーツ種子の抽出物について、これまで抗ウイルス剤の有効成分として利用できることは知られていない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】国際公開２００８／１５３０７７号
【特許文献２】国際公開２００９／１２３１８３号
【特許文献３】特開２０１３−０８７１０１号公報
【特許文献４】特開２０１３−０８７１０２号公報
【特許文献５】特開２０１３−０４７１９６号公報
【特許文献６】特開２０１７−０７１５８５号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
本発明は、ノロウイルス（またはその代替ウイルス）に対する抗ウイルス作用に優れ、かつ人体に対する安全性も高い抗ウイルス剤であって、従来有効活用されていなかった原料を用いて製造することのできるものを提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【０００８】
本発明者らは、カキノキ（Diospyros kaki）に代表されるカキノキ属（Diospyros）の植物の果実の抽出物（本明細書において「カキ抽出物」という。）と、ナツメヤシ（Phoenix dactylifera）に代表されるナツメヤシ属（Phoenix）の植物の種子の抽出物（本明細書において「デーツ種子抽出物」という。）に注目した。そして、上記２種類の抽出物をそれぞれ比較的低い濃度で単独で使用した場合には十分な抗ノロウイルス作用が認められない（例えば後述する感染価減少値が３に満たない）としても、それらを併用した場合は意外にも十分な抗ノロウイルス作用が認められるようになる（例えば後述する感染価減少値が３以上になる）こと、つまり抗ノロウイルス作用における飛躍的な（好ましくは相乗効果的な）増強効果が発揮されることを見出した。
【０００９】
本発明者らはさらに、上記の相乗効果にとって、デーツ種子抽出物に含まれる成分のうち、ＢＳＡ等のタンパク質との凝集能を有する分子量が比較的高いタンニン（高分子タンニン）は不要であること、つまりＢＳＡ等のタンパク質との凝集能を有さない分子量が比較的低いタンニン（低分子タンニン）またはその他の成分が重要であることも見出した。高分子タンニンの方がノロウイルスのカプシドタンパク質と相互作用によって抗ノロウイルス作用を増強するように思われるところ、そのような相互作用を起こさない低分子タンニン等の成分の方が抗ノロウイルス作用を増強させる効果を有することは意外である。
【００１０】
すなわち、本発明は下記の事項を包含する。
［１］
少なくとも縮合型タンニンを含む、カキノキ属（Diospyros）の植物の果実の抽出物（以下「カキ抽出物」という。）と、少なくともタンニンを含む、ナツメヤシ属（Phoenix）の植物の種子の抽出物（以下「デーツ種子抽出物」という。）とを含有する、ノロウイルスまたはその代替ウイルスに対する抗ウイルス剤。
［２］
前記カキ抽出物がカキノキ（Diospyros kaki）の果実の抽出物である、項１に記載の抗ウイルス剤。
［３］
前記カキ抽出物がエタノール水溶液による抽出物である、項１または２に記載の抗ウイルス剤。
［４］
前記デーツ種子抽出物がナツメヤシ（Phoenix dactylifera）の種子の抽出物である、項１〜３のいずれか一項に記載の抗ウイルス剤。
［５］
前記デーツ種子抽出物がエタノール水溶液による抽出物である、項１〜４のいずれか一項に記載の抗ウイルス剤。
［６］
前記デーツ種子抽出物が低分子タンニンについて富化されたものである、項１〜５のいずれか一項に記載の抗ウイルス剤。
［７］
前記カキノキ属の植物の果実１重量部に相当する前記カキ抽出物に対して、前記ナツメヤシ属の植物の種子１０〜１００重量部に相当する前記デーツ種子抽出物を含有する、項１〜６のいずれか一項に記載の抗ウイルス剤。
［８］
前記ナツメヤシ属の植物の種子１重量部に相当する前記デーツ種子抽出物に対して、前記カキノキ属の植物の果実０．０００５〜０．１重量部に相当する前記カキ抽出物を含有する、項１〜６のいずれか一項に記載の抗ウイルス剤。
［９］
項１〜８のいずれか一項に記載の抗ウイルス剤と、アルコール、有機酸および／またはその塩、界面活性剤、抗菌剤、保湿剤および化粧品用油脂類からなる群より選ばれる少なくとも１つの成分とを含有する、ノロウイルスまたはその代替ウイルスに対する抗ウイルス組成物。
［１０］
前記アルコールとしてエタノールおよび／またはプロパノールを含有する、項９に記載の抗ウイルス組成物。
［１１］
前記有機酸および／またはその塩として、乳酸、クエン酸およびフェルラ酸ならびにそれらの塩からなる群より選ばれる少なくとも１種を含有する、項９または１０に記載の抗ウイルス組成物。
［１２］
前記界面活性剤として、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ラウリルグルコシド、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸アンモニウム、ラウレス硫酸ナトリウムおよびオレフィンスルホン酸ナトリウムからなる群より選ばれる少なくとも１種を含有する、項９〜１１のいずれか一項に記載の抗ウイルス組成物。
［１３］
前記組成物全体１００重量％に対して、前記カキノキ属の植物の果実０．０５〜１重量％に相当する前記カキ抽出物を含む前記抗ウイルス剤を含有する、項９〜１２のいずれか一項に記載の抗ウイルス組成物。
［１４］
前記組成物全体１００重量％に対して、前記ナツメヤシ属の植物の種子１．２５〜２．５重量％に相当する前記デーツ種子抽出物を含む前記抗ウイルス剤を含有する、項９〜１３のいずれか一項に記載の抗ウイルス組成物。
［１５］
カキ抽出物およびデーツ種子抽出物を併用することにより、カキ抽出物、デーツ種子抽出物それぞれ単独のノロウイルスまたはその代替ウイルスに対する抗ウイルス作用を相乗効果により増強する方法。
【発明の効果】
【００１１】
カキ抽出物およびデーツ種子抽出物を抗ウイルス剤として併用することにより、ノロウイルス（またはその代替ウイルス）に対する抗ウイルス作用において相乗効果が発揮され、優れた抗ウイルス作用（抗ウイルス活性）が示される。したがって、それぞれ単独では充分な抗ウイルス作用を奏さないほどの低濃度であっても、組成物中に混合して配合することができるようになるため、カキ抽出物およびデーツ種子抽出物の用途が広がる。
【００１２】
本発明は一つの側面において、すでに優れた抗ノロウイルス作用（抗ウイルス活性）を有することが知られているカキ抽出物を含有する抗ウイルス剤および抗ウイルス組成物について、着色・発色の観点から改良できるものと期待される。従来、カキ抽出物はカキ縮合型タンニンにより僅かに着色しており、例えば噴霧後しばらく経過してカキ縮合型タンニンが酸化するとさらに濃く発色することがあるため、有機酸等を添加することでそのような着色および発色を抑制していた。しかし本発明においては、ほとんど無色透明であるがカキ抽出物の抗ウイルス作用を相乗効果的に増強することに貢献する、高分子タンニンを除去したデーツ種子抽出物を併用することで、カキ抽出物の使用量を少なくすることができる。そのため、抗ウイルス剤および抗ウイルス組成物の製造にあたって、下記抽出物の着色・発色をより容易に抑制することができる、あるいは発色・着色を目立たなくすることができるようになる。
【００１３】
また、これまではほとんど産業廃棄物として処理されていたデーツ種子を、本発明の抗ウイルス剤の一方の成分であるデーツ種子抽出物の原料として有効活用できるようになるため、デーツを大量に消費する事業者にとってコスト面での貢献も大きい。
【００１４】
このような本発明の抗ウイルス剤およびそれを有効成分として含有する抗ウイルス組成物は、食品を取り扱う状況下や医療機関などにおいてノロウイルスを消毒し感染を予防するための製品として、性能面およびコスト面の両面で競争力の高い優れた製品となり得る。
【００１５】
なお、本発明の抗ウイルス剤が有する、ノロウイルス（またはその代替ウイルス）に対する「抗ウイルス作用」（本明細書において「抗ノロウイルス作用」と呼ぶこともある。）とは、少なくともノロウイルスの感染・増殖能力を喪失させる、またはノロウイルスを不活性化させる作用を含み、通常はさらに、ノロウイルスのゲノムを減少または実質的に消滅させる作用までを含む。抗ウイルス作用は、例えばｌｏｇ  ＰＦＵ／ｍＬまたはｌｏｇ  ＴＣＩＤ５０／ｍＬで表される感染価（コントロールの感染価と比較したときの減少値、Δｌｏｇ  ＰＦＵ／ｍＬまたはΔｌｏｇ  ＴＣＩＤ５０／ｍＬ）によって評価および確認することができる。また、抗ウイルス作用のうちノロウイルスのゲノムを消滅させる作用は、例えばリアルタイムＲＴ−ＰＣＲ法により測定されるＣｔ値またはそれから換算されるノロウイルスのゲノム遺伝子のコピー数（コントロールと比較したときのゲノム残存率）によって評価および確認することができる。これらの評価方法はノロウイルスおよびその他のウイルスに対する抗ウイルス作用について周知慣用であり、例えば本明細書の実施例に示したような、標準的な手法によって実施することができる。本発明における抗ウイルス作用は、感染価の減少値、ゲノム残存率、またはその他の手法のいずれによって評価されるものであってもよい。本明細書では、上記のような抗ウイルス作用によってもたらされる効果を「消毒効果」と呼ぶことがある。
【００１６】
抗ウイルス作用は、本発明の抗ウイルス剤および抗ウイルス組成物の用途に応じて所期の目的が達成される水準に到達していればよく、その作用の強さは特に限定されるものではない。一般的な抗ウイルス作用については、感染価減少値（Δｌｏｇ  ＰＦＵ／ｍＬまたはΔｌｏｇ  ＴＣＩＤ５０／ｍＬ）が３以上であるかどうかが一つの基準とされている。本明細書では、「抗ウイルス作用」によって３以上の感染価減少値がもたらされる場合、抗ウイルス剤または抗ウイルス組成物は「抗ウイルス活性を有する」（ノロウイルスに対するものであれば「抗ノロウイルス活性を有する」）と表現する。また、ノロウイルスのゲノムの減少は感染価の減少を過小評価する傾向にあることを考慮すると、感染価減少値が２以上である場合に、「抗ウイルス活性を有する」と評価する（本明細書の記載を読み替える）ことも可能である。
【００１７】
また、本発明の抗ウイルス剤における、カキ抽出物とデーツ種子抽出物との併用による抗ウイルス作用に対する「相乗効果」は、ＦＩＣインデックス（Fractional Inhibitory Concentration Index）を応用することによって評価および確認することができる。ＦＩＣインデックスは、細菌類に対する薬剤の効果を評価するための手法として周知慣用であり、各薬剤の単独でのＭＩＣ（Minimum Inhibitory Concentration：最少生育阻止濃度）および２剤を併用したときのＭＩＣを測定し、それを用いる所定の式によってＦＩＣインデックスを算出して、その値を基準と照らし合わせて、相乗効果の有無を判定する（ＦＩＣインデックスの計算式および判定基準は後記実施例参照）。ＭＩＣはウイルスについては測定できないため、本発明では、感染価減少値（Δｌｏｇ  ＰＦＵ／ｍＬ）が３となる濃度、または上記のようなことを考慮して感染価減少値が２となる濃度をＭＩＣの代替としてよい。
【００１８】
本明細書の実施例（参考例、調製例を含む）に開示されているように、本発明によれば、ノロウイルスに対しても、ノロウイルスの代替ウイルスに対しても、抗ウイルス作用の飛躍的な（相乗効果的な）増強効果が認められる。このような増強効果と、ノロウイルスの代替ウイルスに対して抗ウイルス活性を有する（感染価減少値が３以上である）ことから、本発明の抗ウイルス剤はノロウイルスに対しても同様に抗ウイルス活性を有するものと推認できる。
【図面の簡単な説明】
【００１９】
【図１】図１は、調製例２において測定した、デーツ種子と抽出溶媒の比率を変更した各デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）のタンニン含有量を表すグラフである。
【図２】図２は、調製例３において測定した、抽出溶媒を変更した各デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）および各デーツ果実抽出物（ＤＦＥ）のタンニンの含有量を表すグラフである（ｎ＝３）。
【図３】図３は、参考例２において測定した、抽出溶媒を変更した各デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）または各デーツ果実抽出物（ＤＦＥ）を単独で含む試験液の、ＭＳ２ファージに対する抗ウイルス作用（感染価減少値）を表すグラフである（ｎ＝３）。
【図４】図４は、参考例３において測定した、デーツ種子と抽出溶媒である５０％エタノール水溶液の比率を変更した各デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）を単独で含む試験液の、ノロウイルスに対する抗ウイルス作用（ゲノム残存率）を表すグラフである。
【図５】図５は、参考例４において測定した、デーツ種子と抽出溶媒である７０％エタノール水溶液の比率を変更した各デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）を単独で含む試験液の、ノロウイルスに対する抗ウイルス作用（ゲノム残存率）を表すグラフである。
【図６】図６は、実施例１において測定した、カキ抽出物（ＰＥ）単独、デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）単独、またはＰＥおよびＤＳＥの両方を含む試験液の、ＭＳ２ファージに対する抗ウイルス作用（感染価減少値）を表すグラフである（ｎ＝３）。
【図７】図７は、実施例１（２．相乗効果の有無の検証）における、カキ抽出物（ＰＥ）にデーツ種子抽出物（ＤＳＥ）を組み合わせることによる、ＭＳ２ファージに対する抗ウイルス作用（感染価減少値）における相乗効果の評価に関するグラフである。［Ａ］ＰＥの濃度を０．０５％に固定し、ＤＳＥの濃度を変化させた場合。［Ｂ］ＰＥの濃度を０．１％に固定し、ＤＳＥの濃度を変化させた場合。
【図８】図８は、実施例１（２．相乗効果の有無の検証）における、デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）にカキ抽出物（ＰＥ）を組み合わせることによる、ＭＳ２ファージに対する抗ウイルス作用（感染価減少値）における相乗効果の評価に関するグラフである。［Ａ］ＤＳＥの濃度を１．２５％に固定し、ＰＥの濃度を変化させた場合。［Ｂ］ＤＳＥの濃度を２．５％に固定し、ＰＥの濃度を変化させた場合。
【図９】図９は、調製例４において調製された、ＢＳＡの使用量を変更して処理した各デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）についての、タンニン含有量（右縦軸）とＭＳ２ファージに対する抗ウイルス作用（感染価減少値、左縦軸）の結果を表すグラフである（ｎ＝３）。横軸下の写真は、各ＢＳＡ処理ＤＳＥの写真であり、凝集（沈澱）した高分子タンニンが認められる。
【図１０】図１０は、調製例５における、デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）およびＢＳＡ処理ＤＳＥの成分を、抽出物薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）により分析した際の、バニリン塩酸塩法による呈色反応を表す写真等である。
【図１１】図１１は、実施例２において測定した、カキ抽出物（ＰＥ）、ＢＳＡ処理デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）、およびそれらの混合物による、ＭＳ２ファージに対する抗ウイルス作用（感染価減少値）を表すグラフである（ｎ＝３）。
【図１２】図１２は、実施例３において測定した、カキ抽出物（ＰＥ）、デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）、およびそれらの混合物による、ノロウイルスに対する抗ウイルス作用（ゲノム残存率）を表すグラフである（ｎ＝４）。
【発明を実施するための形態】
【００２０】
− 抗ウイルス剤 −
本発明の抗ウイルス剤は、ノロウイルスまたはその代替ウイルスに対するものであって、少なくとも縮合型タンニンを含む、カキノキ属（Diospyros）の植物の果実の抽出物（カキ抽出物）と、少なくともタンニンを含む、ナツメヤシ属（Phoenix）の植物の種子の抽出物（デーツ種子抽出物）とを含有する。このような抗ウイルス剤は、カキ抽出物およびデーツ種子抽出物のみからなるものであってもよいし、これら２つの抽出物に加えて、適切な溶媒や賦形剤、またノロウイルスおよびその代替ウイルスに対する抗ウイルス作用を同等以上にする（増強する）ことのできる物質を含有するものであってもよい。
【００２１】
天然のカキノキ属の植物の果実および天然のナツメヤシ属の植物の種子には、タンパク質の凝集能（変成作用、収斂作用）や金属イオンへの結合能などを有し、渋味を感じさせる物質、いわゆる「タンニン」と総称される種々の化合物が豊富に含まれている。したがって、それらの抽出物である本発明のカキ抽出物およびデーツ種子抽出物は、抽出工程およびその他の工程において特定の成分を除去するような操作を行っていないかぎり、タンニン（カキ抽出物については縮合型タンニン、デーツ種子抽出物については高分子タンニンおよび低分子タンニン）を自ずと含むものであるとみなせる。
【００２２】
タンニンは一般的に、「縮合型タンニン」と「加水分解型タンニン」に大別することができる。縮合型タンニンは、フラバン骨格を有するエピカテキン（ＥＣ）、エピガロカテキン（ＥＧＣ）、エピカテキンガレート（ＥＣｇ）、エピガロカテキンガレート（ＥＧＣｇ）などのカテキン類（下記構造式参照）が、Ｃ４−Ｃ８（またはＣ４−Ｃ６間）の炭素−炭素結合によって縮合した化合物である。縮合型タンニンは加水分解されないが、酸性条件下で加熱することによってアントシアニジンを生成することからプロアントシアニジンとも呼ばれる。一方、加水分解型タンニンは、グルコース等の糖アルコールと没食子酸等のカルボン酸（多価フェノール）とがエステル結合により結合した構造を有しており、加水分解される。縮合型タンニンおよび加水分解型タンニンは、構成単位の構造や結合数の異なる、高分子量から低分子量まで多岐にわたるポリマーおよびオリゴマーを包含する。なお、縮合型タンニンの構造単位として例示したＥＣｇおよびＥＧＣｇ（それぞれ、ＥＣまたはＥＧＣの没食子酸エステルであり、そのエステル結合を加水分解することが可能である。）も加水分解型タンニンに分類されることがある。また、本明細書において、ＥＣ、ＥＧＣ、ＥＣｇ、ＥＧＣｇなどのカテキン類、その他の多量体化していない化合物も、広義の「タンニン」に含める、特に「低分子タンニン」に含めることができる。
【００２３】
【化１】
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【００２４】
カキ抽出物とデーツ種子抽出物の間では（さらにその他の植物原料に由来する抽出物との間では）、タンニンとして含有される化合物の構造および各化合物の割合（組成）が相違しており、本明細書ではそれぞれに特徴的な組成のタンニンを「カキタンニン」、「デーツ種子タンニン」などと呼ぶこともある。詳細は以下に述べるが、カキ抽出物（カキタンニン）には高分子量のタンニンである縮合型タンニンが多く含まれる一方、それ以外のタンニンは少量しか含まれない。これに対してデーツ種子抽出物（デーツ種子タンニン）は、高分子量のタンニンだけでなく低分子量のタンニンも比較的多く含まれる。
【００２５】
・カキ抽出物
本発明で用いるカキ抽出物は、カキノキ属の植物、代表的にはカキノキ、の果実に含まれる物質の集合体であって、抗ノロウイルス作用を有するものである。天然のカキ抽出物はタンニンおよびそれ以外の様々な物質を含有するが、抗ウイルス作用を有する物質として、少なくとも下記推定構造式で表されるカキ縮合型タンニンを含有することが好ましい。カキ縮合型タンニンの平均分子量や構成成分の比率には諸説有るが、Liら（C. Li, J. D. Reed, A. E. Hagerman, the XXVth International Conferenceon Polyphenols, 2010.5）によると、平均分子量は１１ｋＤａ、構成成分比はＥＧＣ：ＥＧＣｇ：ＥＣ：ＥＣｇは４：１１：３：８と報告されている。
【００２６】
【化２】
2020040907.tif 000003
【００２７】
カキ抽出物が含有するタンニンは通常、ほとんどが縮合型タンニンであり、加水分解型タンニンやＥＧＣ等のカテキン類はわずかである。カキ抽出物のノロウイルス等に対する抗ウイルス作用は、主に縮合型タンニンが担っていると考えられ、エピガロカテキンガレート等単独ではノロウイルス等に対する抗ウイルス作用はほとんど示されないため、本発明で用いるカキ抽出物は、縮合型タンニンの純度（カキ抽出物の固形分全体に対する縮合型タンニンの割合）が高い方が好ましい。縮合型タンニンは、後述するような抽出方法により得られるカキ抽出物の固形分全体に対して１０〜５０重量％程度、通常は２０〜３０重量％程度の割合（カキ抽出物の原料とする、水分を含む生のカキ果実を基準とすれば、例えば０．１〜１重量％程度）で含まれている。ただし、カキ抽出物中の縮合型タンニン以外の物質が、カキ抽出物中（縮合型タンニン等）および／またはデーツ種子抽出物のノロウイルス等に対する抗ウイルス作用を増強ないし補助していたりする可能性も排除されるものではない。
【００２８】
また、本発明のカキ抽出物は、水および／またはアルコールに対して可溶性の縮合型タンニンを豊富に含むもの、逆に言えば縮合型タンニンが不溶化処理されていないもの（不溶化している縮合型タンニンが実質的にないもの、ないし不溶化している縮合型タンニンが存在したとしてもその割合が低いもの）が好ましい。いわゆる渋柿に豊富に含まれているカキ縮合型タンニンは基本的に水等に対して可溶性であり、口腔内で渋味を感じさせたり、タンパク質を凝集させたりといったタンニンの典型的な性質が発揮される。一方で、いわゆる甘柿や、渋柿をアルコールまたは炭酸ガスを用いて渋抜きしたものは、本来水等に対して可溶性であるカキ縮合型タンニンが不溶化しているため、渋味を感じないなど、上記のようなタンニンの性質が表れにくくなっている。カキ縮合型の不溶化のプロセスには、果実の成熟や渋抜き処理により生じるホルムアルデヒドによって、カキ縮合型タンニン同士が８位の部位においてさらに架橋されるためと推測されている（下記反応式参照、矢印は８位の部位を表す）。本発明による抗ウイルス活性や、組成物に配合したときの挙動などを考慮すると、カキ縮合型タンニンは、水および／またはアルコールに対して可溶性である方が好ましい。
【００２９】
【化３】
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【００３０】
カキ抽出物の原料は特に限定されるものではなく、様々なカキノキ属（Diospyros）の植物、代表的にはカキノキ（Diospyros kaki）の果実を原料とすることができるが、例えば不溶化していない縮合型タンニンを豊富に含む渋柿（例えば蜂屋、平種無といった品種）の未成熟果を用いると効率的かつ経済的である。果実のうち、特に果肉の部分に縮合型タンニンが豊富に含まれているが、果実全体を丸ごと、または果肉に果皮や種子が付着した状態で原料とすることもできる。
【００３１】
カキ抽出物は、例えば、蔕を除去した渋柿を、粉砕、圧搾して搾汁を回収するか、適度な大きさに切断してからミキサーにかけて液状にし、さらに遠心分離機にかけて上澄み液を回収する方法、あるいは適切な溶媒で抽出して抽出液を回収する方法によって得られるものである。「カキ抽出物」の実施形態には、必要に応じて後述するような処理を施したカキ果実の搾汁液や、それと水および／またはエタノール（もしくはその他のアルコール）との混合液も包含される。
【００３２】
カキ抽出物の抽出溶媒としては、植物由来原料から抽出液を調製する際に用いられている一般的な溶媒を用いることができるが、例えば水；メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノール等の低級アルコール；プロピレングリコール、グリセリン等の多価アルコール；ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドなどの極性溶媒または両極性溶媒を用いることができる。抗ウイルス作用や生体への安全性を考慮すると、水および／またはエタノール（もしくはその他のアルコール）を含有する溶媒、例えばエタノール水溶液を用いることが好ましい。エタノール水溶液中のエタノールの濃度は適宜調整することができるが、通常１０ｖｏｌ％以上、好ましくは３０ｖｏｌ％以上、より好ましくは５０ｖｏｌ％以上、かつ通常９０ｖｏｌ％以下、好ましくは８０ｖｏｌ％以下、より好ましくは７０ｖｏｌ％以下である。
【００３３】
カキ抽出物の原料と抽出溶媒との比率は、所望の濃度の抽出液が得られるよう、好ましくはなるべく多くの原料中の成分（特に縮合型タンニン）を抽出できるよう、用いる抽出溶媒およびその他の抽出条件に応じて適宜調節することができる。
【００３４】
カキ抽出物を抽出する際の温度、圧力、時間、その他の条件も適宜調整することができる。カキ抽出物は、例えば、室温付近、常圧で、１０分〜一晩程度かけた抽出処理により得られるが、必要に応じて加熱、加圧、長時間化してもよい。抽出処理には適宜、遠心分離処理、残渣の濾過処理などを組み合わせることができる。
【００３５】
カキ抽出物の調製方法は、抗ノロウイルス作用を有し、デーツ種子抽出物と併用したときに相乗効果が奏され、抗ノロウイルス活性が認められるようになるものが得られる限り特に限定されるものではなく、上に例示したような方法による抽出工程の他、さらに必要に応じて加熱／アルコール処理工程、精製工程、凍結乾燥工程、粉末化工程などを含むことができる。これらの工程は、カキ抽出物に含有されるカキ縮合型タンニンおよびその他の成分による抗ノロウイルス作用が極力低下しない条件下で行うことが望ましく、当業者であればそのような条件を適宜設定することができる。
【００３６】
本発明のカキ抽出物として、上述のようなカキノキ属の植物の果実の抽出物をそのまま用いることもできるが、特に搾汁液等については、加熱またはアルコールで処理した抽出物を用いることが望ましい。このような処理により、カキ抽出物（搾汁液等）の腐敗、着色、臭気の発生などを抑制することができ、保存性が高く工業的に利用しやすいカキ抽出物とすることができるとともに、原料としたカキノキ属の植物の果実に由来する酵素を失活させることができるため抗ウイルス性を検証するための測定が妨害される（正しく評価できない）おそれも低減できる。
【００３７】
加熱処理の温度および時間条件は、搾汁液等に含有されているカキノキ属の植物に由来する酵素を失活させることができる程度の条件であればよく、植物の酵素を失活させるための一般的な条件を採用することができる。すなわち、温度は通常６０〜１３０℃、時間は通常５秒〜３０分であり、たとえば、１２０℃〜１３０℃で５〜１０秒間、あるいは約８５℃で５〜１５分間などの条件で加熱処理を行えばよい。また、加熱処理工程の態様は特に限定されるものではなく、たとえば搾汁液を殺菌する工程における加熱や、粉末化する工程における加熱、あるいは柿渋（詳細は後述）を製造するための発酵開始前の加熱などを、加熱処理工程とみなすこともできる。
【００３８】
一方、アルコール処理は、通常１０〜９０ｖｏｌ％、好ましくは３０〜８０ｖｏｌ％、より好ましくは５０〜７０ｖｏｌ％のエタノール等のアルコールを用いて行うことができる。たとえば、カキ搾汁液に９５ｖｏｌ％エタノールを同量程度添加する（処理液全体におけるエタノールの濃度を４７．５ｖｏｌ％とする）ように処理し、その後は密閉遮光容器内で保存することが好ましい。このようにして得られるアルコール処理されたカキ搾汁液は、通常淡褐色の液体となる。また、アルコール処理工程の態様も特に限定されるものではなく、たとえばエタノール等のアルコール水溶液を用いて抽出をする工程や、典型的には本発明の抗ウイルス組成物としてのアルコール製剤を製造するための一工程として、必要に応じて上記の加熱処理が施されたカキ抽出物にアルコールを添加して混合することにより行うことを、アルコール処理工程とみなすこともできる。
【００３９】
上記のような工程により得られたカキ抽出物が抽出液の状態である場合、保存性（着色等の変質の防止）や取り扱い性などの観点から、凍結乾燥工程により固形化し、さらに粉末化工程により固形化物を粉砕して粉末化することが好ましい。このようにして調製されるカキ抽出物の凍結乾燥粉末は、通常微黄色である。凍結乾燥粉末はさらに、使用時まで冷凍保存しておくことが好ましい。
【００４０】
なお、日本の食品衛生法に基づく「既存添加物名簿収載品目リスト」に「柿タンニン」（品名/別名＝柿渋、柿抽出物。基原・製法・本質＝カキ科カキ（Diospyros kaki THUNB.）の実より、搾汁したもの、又は水若しくはエタノールで抽出して得られたものである。主成分はタンニン及びタンニン酸である。）として記載されている添加物を、本発明におけるカキ抽出物として使用してもよい。
【００４１】
本発明におけるカキ抽出物としては、未成熟の渋柿を搾汁したのち長期間（１〜３年程度）発酵、熟成させて得られる液体であって、固形分および発酵により生成した有機酸などを含有する（例えば、液体の全量に対して約１０重量％の固形分を含有し、その約半分、すなわち約５重量％の縮合型タンニンを含有する）「柿渋」を利用してもよい。このような柿渋は従来、民間薬や塗料などとして利用されており、商品として一般的に市販されている。このような「柿渋」は、渋柿の搾汁液にカキ由来の酵母培養液を加え、２０〜２５℃で１〜３ヶ月間発酵させたもの（通常は赤褐色の液体）であってもよい。
【００４２】
さらに、カキノキ属の植物の果実の抽出物を再現ないし模倣した物質、例えばカキノキ属の植物の果実から得られる抽出物と同等の成分（特に同等の含有量の縮合型タンニン）および抗ノロウイルス作用を有する抽出物を、カキノキ属の植物の果実以外の部位（葉、樹皮等）から調製したり、人工的に調製したりしたものを、本発明におけるカキ抽出物として使用できる可能性もある。
【００４３】
・デーツ種子抽出物
本発明で用いるデーツ種子抽出物は、ナツメヤシ属の植物の種子に含まれる物質の集合体であって、抗ノロウイルス作用を有するものである。天然のデーツ種子抽出物は様々な物質を含有するが、抗ノロウイルス作用を有する物質として、少なくとも低分子タンニン（全タンニンから高分子タンニンを除去した画分）を含有することが好ましく、低分子タンニンの純度（デーツ種子抽出物の固形分全体に対する低分子タンニンの割合）は高い方が好ましい。ただし、デーツ種子抽出物の低分子タンニン以外の物質、例えば高分子タンニンまたはその他のタンニン様化合物が、それ自身抗ノロウイルス作用を有していたり、デーツ種子抽出物（低分子タンニン）および／またはカキ抽出物中の抗ノロウイルス作用を増強ないし補助していたりする可能性も排除されるものではない。
【００４４】
本明細書において、デーツ種子抽出物が含有する「タンニン」とは、バニリン塩酸塩法、フォーリンチオカルト法、ＥｃＣｌ２法、その他の測定方法により、好ましくはバニリン塩酸塩法により定量できる物質を指す。「高分子タンニン」とは、前記「タンニン」のうち、ＢＳＡまたはその他のタンパク質、好ましくはＢＳＡとの凝集能を有する画分、換言すればＢＳＡ等と反応させることにより溶液中から除去できる画分を指す。「低分子タンニン」は、前記「タンニン」のうち、ＢＳＡ等との凝集能を有さない画分、換言すればＢＳＡ等と反応させたときに溶液（上清）中に溶解して残存する画分を指す。デーツ種子抽出物が含有する「低分子タンニン」には、具体的には、少なくとも、エピガロカテキンガレートおよび／またはエピカテキンが含まれる。なお、通常は「高分子タンニン」は黄褐色、「低分子タンニン」はほとんど無色であり、デーツ種子抽出物の溶液から高分子タンニンを除去した後の上清（低分子タンニン溶液）はほぼ無色となる。
【００４５】
後記実施例において示されているように、本発明における相乗効果は、カキ抽出物と、全画分のタンニンを含有するデーツ種子抽出物との併用によっても奏されるが、カキ抽出物と、デーツ種子抽出物のうち「高分子タンニン」を除去した画分、すなわち「低分子タンニン」の画分との併用によっても奏される。したがって、本発明におけるデーツ種子抽出物は、少なくとも低分子タンニンを含有することが好ましい。
【００４６】
デーツ種子抽出物は、低分子タンニンについて富化されたもの、つまりタンニン全体に含まれる高分子タンニンの比率（重量比）を低減させ、低分子タンニンの比率を増加させたものが好ましい。本発明の一側面において、デーツ種子抽出物は、抽出された全タンニンから精製処理等によって高分子タンニンを除去し、タンニンとして実質的に低分子タンニンのみを含有するものが望ましい。「実質的に」は、高分子タンニンを除去するための精製処理等によっても除去しきれなかった微量の（または検出限界以下の）分子タンニンが残存することは許容されることを意味する。このような実施形態は、相乗効果によって抗ウイルス活性を有するとみなされる水準を保持しつつ（感染価減少値が少なくとも３であり）、デーツ種子抽出物の高分子タンニンによる着色を低減することができるため好適である。
【００４７】
デーツ種子抽出物中の高分子タンニンを低減させる（除去する）ための手段は特に限定されるものではない。例えば、デーツ種子抽出物の溶液を、ＢＳＡまたはその他のタンパク質の溶液と混合し、高分子タンニンとＢＳＡ等のタンパク質との凝集物を沈澱させ、その上清を回収する方法を用いることができる。この際のＢＳＡの濃度は、通常１ｍｇ／ｍＬ以上、好ましくは２ｍｇ／ｍＬ以上、より好ましくは３ｍｇ／ｍＬ以上である。
【００４８】
本発明の一実施形態において、抗ウイルス剤が含有するデーツ種子抽出物は、デーツ種子抽出物中の全タンニン量に対して、５０重量％以上、７５重量％以上、または８０重量％以上の高分子タンニンが除去されている、言い換えれば低分子タンニンが２倍以上、４倍以上または５倍以上に富化されている。これらの割合を用いて、本明細書に記載されている「ナツメヤシ属の植物の種子１重量部に相当するデーツ種子抽出物」から換算される「タンニン」の重量を「低分子タンニン」の重量に換算してもよい。
【００４９】
デーツ種子抽出物中の高分子タンニンを低減させる（除去する）ための手段としては、高分子タンニンと低分子タンニンの挙動の相違を利用した、シリカゲル、イオン交換樹脂、活性担当の吸着材を用いたカラムクロマトグラフィや、ポリビニルポリピロリドン（ＰＶＰＰ）との接触処理などにより、低分子タンニン画分を回収する（高分子タンニン画分を破棄する）方法を用いることも可能である。
【００５０】
デーツ種子抽出物の調製方法は、抗ノロウイルス作用を有し、カキ抽出物と併用したときに相乗効果が奏され、抗ノロウイルス活性が認められるようになるものが得られる限り特に限定されるものではなく、上に例示したような方法による抽出工程の他、さらに必要に応じて濃縮工程、精製工程、（凍結）乾燥工程、粉砕・粉末化工程などを含むことができる。これらの工程は、デーツ種子抽出物に含有される低分子タンニンおよびその他の成分による抗ノロウイルス作用が極力低下しない条件下で行うことが望ましく、当業者であればそのような条件を適宜設定することができる。
【００５１】
デーツ種子抽出物の原料は特に限定されるものではなく、様々なナツメヤシ属（Phoenix）の植物、代表的にはナツメヤシ（Phoenix dactylifera）の種子を原料とすることができるが、デーツ（ナツメヤシの果肉）を利用した後に残される種子を用いると、産業廃棄物の効率的な利用といえ、経済的である上、環境に対する負荷を減らすこともできる。デーツのタンニンの含有量は、種子中で高く、果肉中では低いため、種子のみを原料とすることが望ましいが、種子に果肉が付着した状態で原料とすることもできる。
【００５２】
デーツ種子抽出物は、例えば、デーツ種子の粉砕物または凍結乾燥粉末を適切な温度および時間で抽出溶媒に浸漬することにより、抽出液として回収されるものである。
【００５３】
デーツ種子抽出物の抽出溶媒としては、植物由来原料から抽出液を調製する際に用いられている一般的な溶媒を用いることができるが、例えば水；メタノール、エタノール、ｎ−プロパノール、ｎ−ブタノール等の低級アルコール；プロピレングリコール、グリセリン等の多価アルコール；ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシドなどの極性溶媒または両極性溶媒を用いることができる。抗ウイルス作用や生体への安全性を考慮すると、水および／またはエタノール（もしくはその他のアルコール）を含有する溶媒が好ましく、さらに抽出物中に含まれるタンニン量および抗ウイルス作用を考慮すると、例えばエタノール水溶液（もしくはその他のアルコールの水溶液）を用いることが好ましい。エタノール水溶液中のエタノールの濃度は適宜調整することができるが、通常１０ｖｏｌ％以上、好ましくは３０ｖｏｌ％以上、より好ましくは５０ｖｏｌ％以上、かつ通常９０ｖｏｌ％以下、好ましくは８０ｖｏｌ％以下、より好ましくは７０ｖｏｌ％以下である。
【００５４】
なお、後記実施例（参考例）に示すように、デーツ種子抽出物は、水を抽出溶媒として用いたときよりも、エタノール水溶液を抽出溶媒として用いたときの方が、タンニンの含有量が高くなる傾向にある。しかしながら、本発明は後者のデーツ種子抽出物を使用する実施形態に限定されるものではなく、抗ウイルス剤やそれを含有する抗ウイルス組成物の用途に応じて、所期の抗ウイルス活性（消毒効果）を奏することができれば、前者のデーツ種子抽出物を使用する実施形態であってもよい。
【００５５】
デーツ種子抽出物の原料と抽出溶媒との比率は、所望の濃度の抽出液が得られるよう、好ましくはなるべく多くの原料中の成分（特にタンニン）を抽出できるよう、用いる抽出溶媒およびその他の抽出条件に応じて適宜調節することができる。例えば、抽出溶媒としてエタノール水溶液を用いる場合、エタノール水溶液に対する原料（デーツ種子）の重量比が少なくとも１０重量％に達するまでは、当該重量比が大きいほど抽出物中のタンニン量も多い、つまり抗ウイルス作用の面で好ましい抽出物が得られる傾向にある。
【００５６】
デーツ種子抽出物を抽出する際の温度、圧力、時間、その他の条件も適宜調整することができる。デーツ種子抽出物は、例えば、室温付近、常圧で、１０分〜一晩程度かけた抽出処理により得られるが、必要に応じて加熱、加圧、長時間化してもよい。抽出処理には適宜、遠心分離処理、残渣の濾過処理などを組み合わせることができる。
【００５７】
デーツ種子抽出物についても、必要に応じて、カキ抽出物について前述した加熱／アルコール処理工程、凍結乾燥工程、粉末化工程などを同様に（必要に応じて適宜改変しながら）行ってもよい。
【００５８】
さらに、ナツメヤシ属の植物の種子の抽出物を再現ないし模倣した物質、例えばナツメヤシ属の植物の種子から得られる抽出物と同等の成分（特に同等の含有量の低分子タンニン）および抗ノロウイルス作用を有する抽出物を、ナツメヤシ属の植物の種子以外の部位から調製したり、人工的に調製したりしたものを、本発明におけるデーツ種子抽出物として使用できる可能性もある。
【００５９】
・ノロウイルス
本発明の抗ウイルス剤が対象とするノロウイルスは、カリシウイルス科ノロウイルス属に属するウイルスの総称であり、ヒトノロウイルス、マウスノロウイルス等を包含する。また、ヒトノロウイルスにはこれまで２つの遺伝子群（GIおよびGII）があること、さらにGIは9種類（GI.1〜GI.9）、GIIは22種類（GII.1〜GII.22）の遺伝子型に分類できることが知られているが、本発明の抗ウイルス剤はいずれの遺伝子群および遺伝子型のヒトノロウイルスを対象とすることもできる。
【００６０】
本発明の抗ウイルス剤は、ノロウイルスだけでなく、その代替ウイルス、例えばＭＳ２ファージ、ネコカリシウイルス等を対象とすることもできる。本発明では、後記実施例に示すように、ノロウイルスに対しても、その代替ウイルスに対しても、優れた抗ウイルス作用（抗ウイルス活性）を示す。
【００６１】
・抗ウイルス剤の調製および用途
本発明の抗ウイルス剤が「ノロウイルスまたはその代替ウイルスに対する」ものであるとは、抗ウイルス剤を溶解してそれらのウイルスと接触させたときに、前述したような「抗ウイルス作用」が奏されること、または「抗ウイルス作用」を奏することができる用途を有すること、を意味する。このときの抗ウイルス剤の「抗ウイルス作用」の強さは特に限定されるものではなく、少なくともノロウイルス等の感染・増殖能力を喪失させる（不活性化させる）こと、またはノロウイルス等の遺伝子を消滅させることが、客観的な指標、測定データ等により確認できればよい。抗ウイルス作用を評価するための指標としては、例えば感染価減少値（Δｌｏｇ  ＰＦＵ／ｍＬまたはΔｌｏｇ  ＴＣＩＤ５０／ｍＬ）またはゲノム残存率を用いることができる。本発明の好ましい実施形態においては、「抗ウイルス作用が奏される」ことは、前述したような「抗ウイルス活性を有する」こと、例えばノロウイルス等の感染価減少値が３以上であること、好ましくは４以上であること、より好ましくは５以上であること、を意味する。
【００６２】
本発明の抗ウイルス剤は、上述したようにして得られるカキ抽出物とデーツ種子抽出物とを、適切な割合で混合することにより調製することができる。抗ウイルス剤中の、カキ抽出物とデーツ種子抽出物との比率は、抗ウイルス剤の抗ウイルス活性が所望の水準のものとなるよう適宜調節することができ、特に限定されるものではない。この比率は、必要に応じて、カキ抽出物がカキ縮合型タンニンについて富化されているか（カキ抽出物中のカキ縮合型タンニンの純度）、デーツ種子抽出物が低分子タンニンについて富化されているか（デーツ種子抽出物中の低分子タンニンの純度）などを考慮しながらさらに調節することができる。
【００６３】
本発明の一実施形態において、本発明の抗ウイルス剤は、カキノキ属の植物の果実１重量部に相当するカキ抽出物に対して、ナツメヤシ属の植物の種子１０重量部以上または２０重量部以上、好ましくは１００重量部以下または５０重量部以下に相当するデーツ種子抽出物を含有する。
【００６４】
本発明の一実施形態において、本発明の抗ウイルス剤は、ナツメヤシ属の植物の種子１重量部に相当するデーツ種子抽出物に対して、カキノキ属の植物の果実０．０００５重量部以上または０．０１重量部以上、好ましくは０．１重量部以下または０．０５重量部以下に相当するカキ抽出物を含有する。
【００６５】
なお、本明細書において「カキノキ属の植物の果実１重量部に相当するカキ抽出物」とは、カキノキ属の植物の果実（水分等を含む生の果実）１重量部に含まれている成分（縮合型タンニン等）を含有するカキ抽出物であって、前述したような抽出溶媒、例えば水および／またはエタノール（もしくはその他のアルコール）を含有する溶媒、好ましくはエタノール水溶液（例えば５０％エタノール水溶液）を用いることにより抽出される成分を含有するカキ抽出物である。本発明の一実施形態において、「カキノキ属の植物の果実１重量部に相当するカキ抽出物」には、０．００１〜０．０１重量部程度（０．１〜１重量％程度）の縮合型タンニンが含まれている。この割合を用いて、本明細書に記載されている「カキノキ属の植物の果実１重量部に相当するカキ抽出物」の重量を「縮合型タンニン」の重量に換算してもよい。
【００６６】
本明細書において「ナツメヤシ属の植物の種子１重量部に相当するデーツ種子抽出物」とは、ナツメヤシ属の植物の種子（水分等を含む生の種子）１重量部に含まれている成分（タンニン等）を含有するデーツ種子抽出物であって、前述したような抽出溶媒、例えば水および／またはエタノール（もしくはその他のアルコール）を含有する溶媒、好ましくはエタノール水溶液（例えば５０％または７０％エタノール水溶液）を用いることにより抽出される成分を含有するデーツ種子抽出物である。本発明の一実施形態において、「ナツメヤシ属の植物の種子１重量部に相当するデーツ種子抽出物」には、約０．０１〜０．０３重量部のタンニンが含まれている（後記調製例２および調製例３、図１および図２参照）。これらの割合を用いて、本明細書に記載されている「ナツメヤシ属の植物の種子１重量部に相当するデーツ種子抽出物」の重量を「タンニン」の重量に換算してもよい。
【００６７】
本発明の抗ウイルス剤は、カキ抽出物の原料（典型的にはカキの果実、好ましくは例えばその凍結乾燥粉末）およびデーツ種子抽出物の原料（典型的にはデーツ種子、好ましくは例えばその凍結乾燥粉末）を抽出溶媒に添加し、同時に抽出した後、濾過して、最初からカキ抽出物およびデーツ種子抽出物の混合物（混合液）となっている状態で回収すること、または残渣を濾過せずにそのまま使用することも可能である。
【００６８】
本発明の抗ウイルス剤の用途は特に限定されるものではなく、ノロウイルスまたはその代替ウイルスに対する抗ウイルス活性が求められる様々な実施形態において使用することができる。本発明の抗ウイルス剤は、固形状（例えば凍結乾燥粉末）で使用してもよいし、水、緩衝液（ＰＢＳ等）、その他の適切な溶媒に溶解させた溶液（組成物ではない形態）に調製して使用してもよい。抗ウイルス剤の溶液は、本発明の抗ウイルス組成物またはその他の製品の基剤とみなすこともでき、後述する本発明の抗ウイルス組成物中のカキ抽出物およびデーツ種子抽出物の含有量の規定は、そのような抗ウイルス剤の溶液中のカキ抽出物およびデーツ種子抽出物の含有量の規定に応用することができる。
【００６９】
本発明の抗ウイルス剤の代表的な用途として、後述するような本発明の抗ウイルス組成物（例えばアルコール製剤、洗浄用組成物、化粧用組成物）に、ノロウイルス等に対する有効成分として配合することが挙げられる。抗ウイルス組成物の製造に先立って、カキ抽出物とデーツ種子抽出物とを混合して本発明の抗ウイルス剤をあらかじめ調製しておいてもよい。抗ウイルス組成物を製造する際に、カキ抽出物とデーツ種子抽出物とは別々に添加し、組成物中でカキ抽出物とデーツ種子抽出物とが共存することを、本発明の抗ウイルス剤の使用とみなすこともできる。
【００７０】
本発明の一側面において、本発明の抗ウイルス剤の使用は、カキ抽出物およびデーツ種子抽出物を併用することにより、カキ抽出物、デーツ種子抽出物それぞれのノロウイルスまたはその代替ウイルスに対する抗ウイルス作用を相乗効果により増強する方法、に置き換えることができる。
【００７１】
本発明の一実施形態において、本発明の抗ウイルス剤は、in vitroまたはex vivoでの試験・研究における試薬として、例えば、培地に添加してノロウイルスまたはその代替ウイルスと接触させて、それらのウイルスに対する抗ウイルス作用（活性）の影響を分析するための物質として使用することができる。その際、必要に応じて、抗ウイルス作用をさらに増強させるための候補薬剤を添加したり、抗ウイルス作用に影響する条件を変更してみたりすることもできる。
【００７２】
本発明のさらなる形態として、本発明の抗ウイルス剤は、医薬組成物または食品組成物に、ノロウイルス等に対する有効成分として配合することも挙げられる。換言すれば、本発明の抗ウイルス剤は、in vivoで（ヒトまたはその他の動物の生体内で）ノロウイルス等と接触させて、例えばノロウイルスによる食中毒を処置したり、ノロウイルスの感染を予防したりするための物質として、使用することも可能である。
【００７３】
なお、抗ウイルス組成物において、抗ウイルス剤中のカキ抽出物（カキ縮合型タンニン）は、抗ノロウイルス活性とともに、保湿作用（皮膚の収斂作用等）を有する成分として機能することができる。
【００７４】
− 抗ウイルス組成物 −
本発明の抗ウイルス組成物は、少なくともノロウイルスまたはその代替ウイルスに対する消毒効果を有するものであって、少なくとも、本発明の抗ウイルス剤と、アルコール、有機酸および／またはその塩（本明細書において「有機酸等」と呼ぶことがある。）、界面活性剤、抗菌剤、保湿剤および化粧品用油脂類からなる群より選ばれる少なくとも１つの成分とを含有し、必要に応じてさらにその他の成分を含有していてもよい。
【００７５】
抗ウイルス組成物の実施形態は特に限定されるものではなく、上記の成分を含有する様々な組成物の形態に調製することができるが、代表的には以下のようなアルコール製剤、洗浄用組成物、および化粧用組成物が挙げられる。これらの抗ウイルス組成物は、所望の物体または場所を処理（塗布、散布、浸漬等）し、そこに存在しているノロウイルスを消毒するために、または将来的にそこにノロウイルスが存在することを予防するために使用することができる。また、本発明の抗ウイルス組成物は、ノロウイルスの消毒効果だけでなく、所望によりノロウイルス以外の非エンベロープウイルス、エンベロープウイルス、細菌類、その他の微生物に対する消毒効果を併せて持たせるように調製することもできる。
【００７６】
抗ウイルス組成物中の抗ウイルス剤の含有量は、一方でノロウイルス等に対する消毒効果、製品の着色（カキ縮合型タンニンが参加されることによる発色）、その他の組成物に応じた目的（作用）や性状を考慮し、他方で抗ウイルス剤の組成（カキ抽出物およびデーツ種子抽出物の成分および量）などを考慮しながら、所望の抗ウイルス作用（抗ウイルス活性）が奏されるよう、適宜調整することができる。本発明の抗ウイルス組成物は、例えば、下記（Ａ）および／または（Ｂ）の条件、好ましくは（Ａ）および（Ｂ）の両方の条件を満たす含有量とすることができる：
（Ａ）前記組成物全体（溶媒等、有効成分以外の成分を含む。）１００重量％に対して、カキノキ属の植物の果実０．００００２重量％以上、０．０００１重量％以上、０．０００２重量％以上、０．０００４重量％以上、０．００２重量％以上、０．００３重量％以上、０．００５重量％以上、０．０１重量％以上、０．０２重量％以上、または０．０５重量％以上、かつ１０重量％以下、５重量％以下、２重量％以下、１重量％以下、０．５重量％以下、０．１重量％以下、０．０５重量％以下または０．０１重量％以下（但し、下限値の数値が上限値の数値よりも大きくなる組み合わせは除く。）に相当するカキ抽出物を含む抗ウイルス剤を含有する；
（Ｂ）前記組成物全体（溶媒等、有効成分以外の成分を含む。）１００重量％に対して、ナツメヤシ属の植物の種子０．１重量％以上、０．２重量％以上、０．３％以上、０．５重量％以上、１．０重量％以上、１．５重量％以上または２．０重量％以上、かつ２０重量％以下、１０重量％以下、５．０重量％以下、２．５重量％以下、２．０重量％以下、１．５重量％以下、１．０重量％以下、０．５重量％以下または０．２重量％以下（但し、下限値の数値が上限値の数値よりも大きくなる組み合わせは除く。）に相当するデーツ種子抽出物を含む抗ウイルス剤を含有する。
【００７７】
なお、本発明の抗ウイルス組成物が使用時に所定の倍率で希釈されることを想定した実施形態である（濃縮型である）場合は、使用時のカキ抽出物および／またはデーツ種子抽出物の濃度が上記の数値範囲を満たすものとなるよう、貯蔵時のカキ抽出物および／またはデーツ種子抽出物の濃度は上記の数値範囲よりも（希釈倍率の分だけ）高いものとなるよう調製することができる。
【００７８】
本発明の好ましい実施形態において、抗ウイルス組成物は、カキ抽出物およびデーツ種子抽出物が所定の範囲の比率にあることで「相乗効果」が奏される抗ウイルス剤を、所定の範囲の量で含有することにより、「抗ウイルス活性を有する」（感染価減少値が３以上である）ものとなっている。
【００７９】
「相乗効果」は、カキ抽出物およびデーツ種子抽出物を「混合する」（併用する）ことによって奏される。「混合」は通常、前者に後者を「添加」することと、逆に後者に前者を「添加」することとは区別されない。例えば、抗ウイルス剤を組成物に配合する実施形態を考慮し、カキ抽出物またはデーツ種子抽出物のいずれか一方の濃度を先に設定し、そこに他方を適切な濃度で添加することによって、添加しなかった場合と比較して相乗効果的に抗ウイルス作用が増強するようにすることができる。
【００８０】
ここで、「相乗効果」には、「ＦＩＣインデックス」（後記数式参照）による判定が「相乗効果」である場合および「部分的相乗効果」である場合の両方が含まれる。例えば、後記実施例に示すように、抽出溶媒（５０％エタノール水溶液）に対して０．０５重量％のカキノキ属の植物（カキノキ）の果実を用いて調製されたカキ抽出物に対しては、デーツ種子抽出物の添加により「相乗効果」があると判定され、抽出溶媒（５０％エタノール水溶液）に対して０．１重量％のカキノキ属の植物（カキノキ）の果実を用いて調製されたカキ抽出物に対しては、デーツ種子抽出物の添加により「部分的相乗効果」があると判定されるが、これらはどちらも「相乗効果」が奏されるとみなされる。逆に、抽出溶媒（５０％エタノール水溶液）に対して１．２５重量％のナツメヤシ属の植物（デーツ）の種子を用いて調製されたデーツ種子抽出物に対しては、カキ抽出物の添加により「相乗効果」があると判定され、抽出溶媒（５０％エタノール水溶液）に対して２．５重量％のナツメヤシ属の植物（デーツ）の種子を用いて調製されたデーツ種子抽出物に対しては、カキ抽出物の添加により「部分的相乗効果」があると判定されるが、これらはどちらも「相乗効果」が奏されるとみなされる。カキ抽出物またはデーツ種子抽出物が他の濃度であるときも、「相乗効果」または「部分的相乗効果」があると判定されれば、「相乗効果」が奏されるとみなされる。このように「相乗効果」が奏される上で、抗ウイルス組成物が「抗ウイルス活性を有する」のであれば、通常想定されるよりも少量のカキ抽出物およびデーツ種子抽出物によって効果的に抗ウイルス活性を有するものになっているといえる。
【００８１】
本発明のより好ましい実施形態においては、抗ウイルス組成物中のカキ抽出物およびデーツ種子抽出物の少なくとも一方、好ましくは両方の濃度は、カキ抽出物単独および／またはデーツ種子抽出物単独では「抗ウイルス活性を有さない」範囲内にある。換言すれば、本発明のより好ましい実施形態においては、それぞれ所定の範囲の濃度にあるカキ抽出物およびデーツ種子抽出物の両方を含有することによって初めて、抗ウイルス組成物は「抗ウイルス活性を有する」ものとなっている。
【００８２】
カキ抽出物については、例えば、実施例１（図６）に例示されているように、抽出溶媒（５０％エタノール）に対してカキノキ属の植物（カキノキ）の果実０．１重量％または０．０５重量％を用いて調製された試験液を単独で用いた場合、すなわちそれと混合したウイルス（ＭＳ２ファージ）液の容量を考慮した場合、組成物（混合液）１００重量部に対してカキノキ属の植物の果実約０．０９３重量部または０．０４７重量部を用いて調製された試験液を単独で用いた場合、感染価減少値はそれぞれ１．１２および０．２４で「抗ウイルス活性を有さない」と認められるが、２．相乗効果の有無の検証（図７および図８）に示されているように、デーツ種子抽出物を併用することによって感染価減少値は少なくとも３まで引き上げられ、「抗ウイルス活性を有する」と認められるようになる。したがって、本発明の好ましい一実施形態において、本発明の組成物は、組成物全体１００重量部に対して、カキノキ属の植物の果実０．１重量部以下または０．０５重量部以下、例えば０．０５〜０．１重量部に相当するカキ抽出物を含む抗ウイルス剤を含有する。
【００８３】
デーツ種子抽出物については、例えば、実施例１（図６）に例示されているように、抽出溶媒（５０％エタノール）に対してナツメヤシ属の植物（デーツ）の種子２．５重量％または１．２５重量％を用いて調製された試験液を単独で用いた場合、すなわちそれと混合したウイルス（ＭＳ２ファージ）液の容量を考慮した場合、組成物（混合液）１００重量部に対してカキノキ属の植物の果実約２．３３重量部または１．１６重量部を用いて調製された試験液を単独で用いた場合、感染価減少値がそれぞれ０．８１およびほぼ０（検出限界以下）で「抗ウイルス活性を有さない」と認められるが、２．相乗効果の有無の検証（図７および図８）に示されているように、カキ種子抽出物を併用することによって感染価減少値は少なくとも３まで引き上げられ、「抗ウイルス活性を有する」と認められるようになる。したがって、本発明の好ましい一実施形態において、本発明の組成物は、組成物全体１００重量部に対して、ナツメヤシ属の植物の種子２．５重量部以下または１．２５重量部以下、例えば１．２５〜２．５重量部に相当するデーツ種子抽出物を含む抗ウイルス剤を含有する。
【００８４】
・アルコール製剤
本発明のウイルス組成物の一つの実施形態として、少なくとも本発明の抗ウイルス剤と（比較的多量の）アルコールとを含有するアルコール製剤が挙げられる。アルコール製剤はさらに、有機酸等、界面活性剤、またはその両方を含有することが好ましい。このようなアルコール製剤は、作業者の手指、食品、食器、調理器具、冷蔵庫、食器、ショーケース、テーブル・椅子、施設などのドアノブ・手すり、トイレ、患者の汚物を取り扱った器具などに付着した、または付着するおそれのあるノロウイルス等を消毒するための組成物であり、例えば従来のエタノール製剤と同様の噴霧剤として調製することができる。
【００８５】
・洗浄用組成物
本発明の抗ウイルス組成物の一つの実施形態として、少なくとも本発明の抗ウイルス剤と（洗浄に適した量および種類の）界面活性剤とを含有する洗浄用組成物が挙げられる。洗浄用組成物はさらに、アルコール、有機酸等、界面活性剤および殺菌剤からなる群より選ばれる少なくとも１種を含有することが好ましく、それら全部を含有することがより好ましい。このような洗浄用組成物は、作業者の手指、食品、食器、調理器具、着衣などの汚れを落とすとともに、そこに付着した、または付着するおそれのあるノロウイルス等を消毒するための組成物であり、例えば液状または固形状の洗剤（代表的にはハンドソープ）として調製することができる。
【００８６】
・化粧用組成物
本発明の抗ウイルス組成物の一つの実施形態として、少なくとも本発明の抗ウイルス剤と保湿剤および／または化粧品用油脂類とを含有する化粧用組成物が挙げられる。化粧用組成物はさらに、アルコール、有機酸等、保湿剤および抗炎症剤からなる群より選ばれる少なくとも１種を含有することが好ましく、それら全部を含有することがより好ましい。このような化粧用組成物は、水仕事等で荒れやすい作業者の手指に塗ってスキンケアをするとともに、食指に付着した、または付着するおそれのあるノロウイルス等を消毒するための組成物であり、例えばローション、クリーム、乳液、その他の基礎化粧品（代表的にはハンドローション）として調製することができる。
【００８７】
・アルコール
アルコールは、抗ウイルス組成物に含まれる各種の成分、例えばカキ抽出物およびデーツ種子抽出物が含有するタンニン、特にカキ抽出物が含有する縮合型タンニンの溶解性を向上させることができる成分である。アルコールはまた、エンベロープウイルスや細菌類に対する消毒効果を有することから、それを配合したアルコール製剤またはその他の抗ウイルス組成物に、ノロウイルスだけでなく、エンベロープウイルスや細菌類に対する消毒効果（抗菌作用）を賦与することができる。また、アルコールは肌への収斂性や防腐性をもたらす成分として化粧用組成物に配合することもできる。
【００８８】
本発明の抗ウイルス組成物に配合して用いることのできるアルコールとしては、例えばメタノール、エタノール、プロパノール（ｎ−プロパノール）、ブタノール（ｎ−ブタノール）等の低級アルコールが挙げられるが、食品添加物としても認められているエタノールおよびプロパノールが好ましく、特にエタノールが好ましい。これらのアルコールは、いずれか１種を単独で用いてもよいし、複数の種類を併用してもよい。
【００８９】
抗ウイルス組成物中のアルコールの含有量は、目的（作用）やアルコールの種類などを考慮しながら適宜調整することができる。例えば、アルコールは、抗ウイルス組成物全体（溶媒等、有効成分以外の成分を含む。）に対して、通常は１０〜８０重量％、好ましくは３０〜７０重量％で配合することができる。
【００９０】
なお、カキ抽出物および／またはデーツ種子抽出物がエタノール等のアルコールを用いて抽出等の処理がなされたものであって、処理に用いたアルコールと混合した状態にある場合、そのアルコールを抗ウイルス組成物の成分の一部または全部として配合してもよい。抗ウイルス組成物が含有すべき量よりも、アルコール処理に用いたアルコールの量が少なければ、その不足分を補うようにアルコールを追加して抗ウイルス組成物を調製してもよい。
【００９１】
・有機酸等（有機酸および／またはその塩）
有機酸等は、ｐＨを調節することによって抗ウイルス組成物に含まれる各種の成分、例えばカキ抽出物およびデーツ種子抽出物が含有するタンニン、特にカキ抽出物が含有する縮合型タンニンの溶解性を向上させると共に、タンニンが鉄と接触したときの着色を防止するキレート剤として、またはタンニンの酸化による着色（例えばカキ抽出物中のカキ縮合型タンニンの赤色の発色）を抑制する酸化防止剤として、組成物中に配合して用いることができる。有機酸等は、一部の非エンベロープウイルス、エンベロープウイルスおよび細菌類を消毒する効果を有する成分としても用いることができる。
【００９２】
なお、本発明の抗ウイルス組成物の成分としての有機酸および／またはその塩は通常、カキ抽出物および／またはデーツ種子抽出物が天然の状態で含有する可能性のあるもの以外に、製造時に添加されるものを指す。
【００９３】
本発明で用いることのできる有機酸としては、例えば乳酸、リンゴ酸、クエン酸、酒石酸、サリチル酸、コハク酸、フマル酸、イタコン酸、フェルラ酸、アスコルビン酸（ビタミンＣ）が挙げられる。また、それらの有機酸の塩としては、例えばナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩が挙げられる。これらの有機酸および／またはその塩は、いずれか１種を単独で用いてもよいし、複数の種類を併用してもよい。
【００９４】
本発明の好ましい一実施形態において、本発明の抗ウイルス組成物としてのアルコール製剤は、有機酸および／またはその塩として、乳酸、クエン酸、フェルラ酸および乳酸ならびにそれらの塩からなる群より選ばれる少なくとも１種を含有する。例えば、乳酸および乳酸カルシウムはそれぞれ「酸味料」および「強化剤」として、クエン酸およびクエン酸ナトリウム（クエン酸三ナトリウム）はそれぞれ「酸味料」および「調味料」として、またフェルラ酸は「酸化防止剤」として、「食品添加物リスト」（厚生労働省）に掲載されている物質であるが、本発明の抗ウイルス組成物においては上述したような効果を発揮する成分となる。
【００９５】
抗ウイルス組成物中の有機酸等の含有量は、目的（作用）や有機酸等の種類などを考慮しながら適宜調整することができる。例えば、有機酸等は、抗ウイルス組成物全体（溶媒等、有効成分以外の成分を含む。）に対して、通常は０．０１〜５．０重量％、好ましくは０．０５〜２．５重量％の割合となる量で添加することができる。あるいは、有機酸等は、抗ウイルス組成物のｐＨが、通常は６．０〜２．０、好ましくは５．０〜３．０となる量で配合することができる。
【００９６】
・界面活性剤
界面活性剤は、抗ウイルス組成物に含まれる各種の成分を乳化する乳化剤として作用すると共に、エンベロープウイルスおよび細菌類を消毒する効果を有する成分として用いることができる。また、界面活性剤は、食指、食品、食器、調理器具等を洗浄するための成分として洗浄用組成物に配合したり、ローション、クリーム、乳液等において油相と水相とを混和するための成分として化粧用組成物に配合したりすることもできる。
【００９７】
界面活性剤には、カチオン系、アニオン系、両イオン系および非イオン系のものがあるが、カキ抽出物に含まれるカキ縮合型タンニンおよびデーツ種子抽出物に含まれる低分子タンニン（いわゆるポリフェノール）や、任意で配合される有機酸および／またはその塩の化学的性質を考慮すると、本発明ではアニオン系界面活性剤および／または非イオン系界面活性剤を用いることが好ましい。
【００９８】
アニオン系界面活性剤としては、例えば、石けん（高級脂肪酸のアルカリ塩）、モノアルキル硫酸塩（オレフィン(C14-16)スルホン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸アンモニウム等）、アルキルポリオキシエチレン硫酸塩（ラウレス硫酸ナトリウム等）、アルキルベンゼンスルホン酸塩、モノアルキルリン酸塩が挙げられる。
【００９９】
非イオン系界面活性剤としては、例えば、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、糖アルコール脂肪酸エステル（ソルビタン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ラウリルグルコシド等）、脂肪酸ジエタノールアミドが挙げられる。
【０１００】
これらの界面活性剤のうち、グリセリン脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸部分エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ラウリルグルコシドなど食品添加物として認められている非イオン性界面活性剤は、食指、食品、食器、調理器具等に付着しても問題にならない点で特に好ましい。また、オレフィン(C14-16)スルホン酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸アンモニウム等のモノアルキル硫酸塩、ラウレス硫酸ナトリウム等のアルキルポリオキシエチレン硫酸塩も好ましい。
【０１０１】
抗ウイルス組成物中の界面活性剤の含有量は、添加する目的や用いる界面活性剤の種類などを考慮しながら適宜調整することができる。例えば、界面活性剤は、抗ウイルス組成物全体（溶媒等、有効成分以外の成分を含む。）に対して、通常は０．０５〜５．０重量％、好ましくは０．１〜２．５重量％の割合となる量で配合することができる。
【０１０２】
・抗菌剤
抗菌剤（殺菌剤、除菌剤、静菌剤と呼ばれることもある。）は、本発明の抗ウイルス組成物に、ノロウイルスに加えて細菌類に対する消毒効果、例えば食品加工の際の感染あるいは院内感染が問題となる大腸菌、黄色ブドウ球菌、ＭＲＳＡ、サルモネラ、腸炎ビブリオ、緑膿菌などに対する消毒効果を賦与するために、組成物中に配合して用いることができる。また、抗菌剤は防腐剤として化粧用組成物に配合することもできる。
【０１０３】
なお、本発明の抗ウイルス組成物の成分としての抗菌剤は、アルコール（エタノール等）、有機酸および／またはその塩（クエン酸等）など、抗ウイルス組成物の他の成分として挙げられているもの以外に、製造時に添加されるものを指す。
【０１０４】
抗菌剤としては、例えば次のものが挙げられる。これらの抗菌剤は、いずれか１種を単独で用いてもよいし、複数の種類を併用してもよい。
・天然抗菌剤…タンパク質類（白子タンパク、卵白リゾチーム等）、ペプチド類（ポリリジン等）など；
・抗生物質…ペニシリン系抗生物質、クロラムフェニコール、ストレプトマイシン、テトラサイクリン系抗生物質、セファロスポリン系抗生物質など；
・合成抗菌剤…塩素系化合物（トリクロサン等）、ヨード系化合物（ポピドンヨード等）、亜鉛化合物（セチルピリジニウム亜鉛等）、ベンゼンカルボン酸類（安息香酸、サリチル酸、イソプロピルメチルフェノール（シメン−５−オールと呼ばれることもある。）、ブチルパラヒドロキシベンゾエート（＝ブチルパラベン）等）、有機酸エステル類（グリセリンエステル、ショ糖エステル等）、アルデヒド類（グルタルアルデヒド、ホルムアルデヒド等）、ビグアナイド系化合物（グルコン酸クロルヘキシジン等）、第四級アンモニウム塩（塩化ベンザルコニウム、臭化セチルアンモニウム等）など。
【０１０５】
これらの抗菌剤のうち、イソプロピルメチルフェノール（シメン−５−オール）、ブチルパラヒドロキシベンゾエート、トリクロサンなどは、抗菌作用に優れており、カキ抽出物およびデーツ種子抽出物との相溶性も良好であることから、本発明における好ましい抗菌剤である。
【０１０６】
・保湿剤
保湿剤（湿潤剤と呼ばれることもある。）は、主に本発明の抗ウイルス組成物を化粧用組成物として製造する場合に用いられる成分であって、皮膚の角質層の水分を保持し、肌の柔軟性や弾力性を維持するための成分である。
【０１０７】
保湿剤としては、一般的なローション、乳液、クリーム等の化粧品に用いられているもの、例えばグリセリン、プロピレングリコール、ソルビトール、ポリエチレングリコール、ヒアルロン酸、コンドロイチン硫酸ナトリウム、セラミド、アロエエキスが挙げられる。これらの保湿剤のうち、例えばグリセリンおよびプロピレングリコールは、本発明の抗ウイルス組成物（化粧用組成物）に配合するためのものとして好ましい。
【０１０８】
・化粧品用油脂類
化粧品用油脂類は、皮膚面に被膜を形成して皮膚の保護や柔軟性、滑沢性の賦与などの役割を果たし、また化粧品に適度な使用感を持たせるための成分である。
【０１０９】
化粧品用油脂類としては、一般的な乳液、クリーム等の化粧品に用いられているものと同様の化粧品用油脂類を用いることができ、たとえば下記のようなものが挙げられる。
・ 油脂（高級脂肪酸とグリセリンのエステル）…植物性油脂、動物性油脂またはこれらの水素添加物（部分水添ナタネ油等）、合成トリグリセリド（トリ(カプリル/カプリン酸)グリセリル等）など；
・ ロウ（高級脂肪酸と高級アルコールの常温で固体のエステル）…植物性ロウ、動物性ロウ（蜜蝋、ラノリン等）など；
・ 炭化水素…鉱物性炭化水素（流動パラフィン、ワセリン、パラフィン等）、動物性炭化水素（スクワラン等）など；
・ 高級脂肪酸…ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、イソステアリン酸など；
・ 高級アルコール…セタノール、ステアリルアルコール、ラノリンアルコールなど；
・ エステル（ロウ類以外の、脂肪酸とアルコールとのエステル）…ミリスチン酸ミリスチル、ジオレイン酸プロピレングリコール、乳酸セチルなど。
【０１１０】
これらの化粧品用油脂類のうち、例えばトリ(カプリル/カプリン酸)グリセリルは、本発明の抗ウイルス組成物（化粧用組成物）に配合するためのものとして好ましい。
【０１１１】
・その他の成分
本発明の抗ウイルス組成物は、典型的には水（または前述したようなアルコール水溶液）を溶媒とする溶液の形態に調製され、上記の成分以外の残部は水（精製水等）および／またはその他の溶媒とすることができる。
【０１１２】
また、本発明の抗ウイルス組成物は、上記の成分以外にも、従来のアルコール製剤、洗浄用組成物、化粧用組成物などが含有することのできる一般的な成分ないし公知の成分を任意で含有することができる。そのような任意成分としては、例えば、酸化防止剤・保存料（亜硫酸ナトリウム等）、香料、色素、その他の医薬品、化粧品、食品等に配合することができる各種の成分ないし添加物が挙げられる。
【０１１３】
任意成分の一例として、化粧法組成物に配合することのできる抗炎症剤が挙げられる。抗炎症剤としては、例えば、グリチルリチン酸ジカリウム、アラントインが挙げられる。
【０１１４】
＜抗ウイルス組成物の使用方法および製造方法＞
本発明の抗ウイルス組成物が「ノロウイルスまたはその代替ウイルスに対する」ものであるとは、「ノロウイルスまたはその代替ウイルスに対する」抗ウイルス剤を含有することにより、それらのウイルスと接触させたときに、前述したような「抗ウイルス作用」が奏されること、または「抗ウイルス作用」を奏することができる用途を有すること、を意味する。このときの抗ウイルス組成物の「抗ウイルス作用」の強さは特に限定されるものではなく、少なくともノロウイルス等の感染・増殖能力を喪失させる（不活性化させる）こと、好ましくはさらに、ノロウイルス等の粒子または遺伝子を消滅させることが、客観的な測定データ等により確認できればよい。本発明の好ましい実施形態においては、「抗ウイルス作用が奏される」ことは、前述したような「抗ウイルス活性を有する」こと、例えば感染価減少値（Δｌｏｇ  ＰＦＵ／ｍＬまたはΔｌｏｇ  ＴＣＩＤ５０／ｍＬ）が３以上であること、好ましくは４以上であること、より好ましくは５以上であること、を意味する。
【０１１５】
本発明の抗ウイルス組成物は、その実施形態に応じて、従来の抗ウイルス組成物と同様の方法で使用することができる。抗ウイルス組成物を適用する部位は、ヒトまたはその他の動物の部位（体内および体表）であってもよいし、それ以外の部位であってもよい。
【０１１６】
たとえば、抗ウイルス剤を噴霧剤、ハンドソープ等として調製した場合は、従来と同様の方法で、非エンベロープウイルスが存在する可能性のある部位（食品、食器、調理器具、作業従事者の手指や着衣等）に適用すればよい。また、抗ウイルス剤は、マスク、エアコンフィルター、衣類、ウェットティッシュ等に含浸させるための液剤として調製することや、使用時に適切な濃度となるよう希釈して用いる濃縮型の液剤として調製することも可能である。
【０１１７】
本発明の抗ウイルス剤が医薬組成物の形態をとる場合、その投与量および投与方法（投与経路、投与スケジュール等）は、患者の年齢、体重、症状なども考慮しながら、剤型に応じて適切な範囲内で決定すればよい。なお、医薬組成物としての本発明の抗ウイルス剤の適用（投与）対象はヒトに限定されるものではなく、非エンベロープウイルスが感染しうるヒト以外の動物を適用（投与）対象とすることもできる。
【０１１８】
本発明の抗ウイルス組成物は、前述したような方法により調製されるカキ抽出物およびデーツ種子抽出物（本発明の抗ウイルス剤）をノロウイルスに対する有効成分として使用するとともに、組成物の実施形態に応じたその他の成分、すなわちアルコール、有機酸および／またはその塩、界面活性剤、抗菌剤、保湿剤および化粧品用油脂類からなる群より選ばれる少なくとも１つの成分、さらに必要に応じてその他の任意成分を使用した上で、従来の抗ウイルス組成物の製造方法に準じた工程および製造装置により製造することができる。
【実施例】
【０１１９】
［調製例１］カキ抽出物の調製
十分に殺菌（NaClO）、洗浄、変色防止（ビタミンＣ）等の処理をした、蔕を切除した柿の未成熟果を、ダイス状にカットして潰した。得られた果実・果汁溶液を２００メッシュ篩にかけ、遠心分離し、高温殺菌処理（１２０〜１３０℃、７〜１０秒）をした後、フリーズドライ処理をして、カキ果実のフリーズドライ（ＦＤ）粉末を調製した。得られたＦＤ粉末の約５％がカキ縮合型タンニンであった。
【０１２０】
このカキ果実ＦＤ粉末０．０１ｇに対して５０％エタノール水溶液１０ｍＬの割合で、両者をボルテックスで混合し、室温で一晩放置した後、遠心分離し（１３ｋ×ｇ、５分間）、ＡＤＶＡＮＴＥＣフィルターで滅菌処理をした。得られたカキ抽出物を試験液をとし、「０．１％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」と表記する（ＰＥ：Persimmon Extract）。
【０１２１】
［調製例２］デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）の調製、ならびに各抽出物中のタンニンの定量
デーツ種子（ＤＳ：Date Seed）を粉砕・粉末化したもの（デーツ種子粉末）０．５ｇと、５０％もしくは７０％のエタノール水溶液１０ｍＬまたは蒸留水１０ｍＬとをボルテックスで混合し、室温で一晩放置した後、遠心分離し（１３，０００×ｇ、５分間）、ＡＤＶＡＮＴＥＣフィルターで滅菌処理をした。得られた３つのデーツ種子抽出物を試験液とし、それぞれ「５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」、「５％ＤＳＥ／７０％ＥｔＯＨ」および「５％ＤＳＥ／Ｗａｔｅｒ」と表記する。
【０１２２】
上記のようにして得られた３つの試験液のそれぞれについて、バニリン塩酸塩法、フォーリンチオカルト法およびＥｃＣｌ２法の３通りの方法で濾紙上で呈色反応を行い、タンニンの含有量を定性的に評価したところ、「５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」が最も呈色が濃かった（図示せず）。また、この試験液についてＢＳＡによる凝集反応を行っても、ＢＳＡの凝集物が生成し、充分なタンニンが存在することが裏付けられた（図示せず）。
【０１２３】
また、「５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」および「５％ＤＳＥ／７０％ＥｔＯＨ」については、次の手順で試験液中のタンニンの含有量をバニリン塩酸塩法により定量した。９６ウェルプレートにおいて、各試験液１５μＬと、４％バニリン／メタノール溶液９０μＬおよび濃塩酸４５μＬからなる試薬とを混合した。室温で２０分間、遮光下で静置した後、５００ｎｍにおける吸光度を測定した。測定された吸光度と、濃度が既知のカテキン溶液を標準液として作成された検量線から、各試験液中のタンニンの濃度を定量した。
【０１２４】
さらに、デーツ種子抽出物を調製する際の原料の量を変えた試験液を追加で調製し、上記と同様にしてタンニンの含有量をバニリン塩酸塩法により定量した。１０ｍＬの５０％ＥｔＯＨを用いて、デーツ粉末の量を０．５ｇ（５％）から、１ｇ（１０％）に増加させた、または０．４５ｇ、０．４ｇ、０．３ｇ、０．２５ｇ、０．１ｇ（それぞれ４．５％、４％、３％、２．５％、１％）などに段階的に減少させた試験液を調製し、それぞれ「１０％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」、「４．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」、「４％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」、「３％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」、「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」、「１％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」と表記する。また、１０ｍＬの７０％ＥｔＯＨを用いて、デーツ種子粉末の量を、０．５ｇ（５％）から、１ｇ（１０％）に増加させた、または０．１ｇ（１％）に減少させた試験液を調製し、それぞれ「１０％ＤＳＥ／７０％ＥｔＯＨ」、「１％ＤＳＥ／７０％ＥｔＯＨ」と表記する。
【０１２５】
上記各試験液のタンニンの含有量をバニリン塩酸塩法により定量した結果を図１示す。前述した傾向と同様に、「５０％ＥｔＯＨ」の試験液の方が全体的に、「７０％ＥｔＯＨ」の試験液よりも、タンニンの含有量が高い傾向にあった。
【０１２６】
［調製例３］デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）およびデーツ果実抽出物（ＤＦＥ）の調製、ならびに各抽出物中のタンニンの定量
調製例２と同様の手順で再度、３つの試験液「５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」、「５％ＤＳＥ／７０％ＥｔＯＨ」および「５％ＤＳＥ／Ｗａｔｅｒ」を調製した。また、デーツ種子を粉砕・粉末化したもの（デーツ種子粉末）の代わりに、デーツ種を取り除いたデーツ果実（ＤＦ：Date Fruit）を粉砕・粉末化したもの（デーツ果実粉末）を原料とし、それ以外は「５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」および「５％ＤＳＥ／Ｗａｔｅｒ」と同様の手順で、新たに２つの試験液「５％ＤＦＥ／５０％ＥｔＯＨ」および「５％ＤＦＥ／Ｗａｔｅｒ」を調製した。
【０１２７】
これらの試験液のタンニンの含有量を、調製例２と同様の手順で、バニリン塩酸塩法により定量した。結果を図２に示す。タンニンは、水または５０％エタノール水溶液を用いたデーツ果実（ＤＦ）抽出物にはほとんど含まれていないが、水を用いたデーツ種子（ＤＳ）抽出物には少量含まれ、５０％または７０％エタノール水溶液を用いたデーツ種子（ＤＳ）抽出物に豊富に含まれることが分かった。
【０１２８】
［参考例１］デーツ種子（ＤＳ）抽出物単独によるＭＳ２ファージに対する抗ウイルス作用の評価−その１−
ＪＩＳ規格の方法を一部改変し以下のような手順により、デーツ種子抽出物を単独で使用した場合のＭＳ２ファージ（ノロウイルスの代替ウイルス）に対する抗ウイルス作用（感染価減少値）を評価した。
【０１２９】
あらかじめ力価を１０７〜１０８ＰＦＵ／ｍＬに調整済みのＭＳ２ファージ溶液１５μＬと、調製例２において５０％ＥｔＯＨを用いて調製された各試験液１３５μＬとを混合し、２分間室温で反応させた。この混合液１００μＬをＬＢ培地９００μＬに加えて反応を止めた。ＬＢ培地を用いて１０倍希釈系列で段階希釈し、ＭＳ２ファージ試薬とした。
【０１３０】
２ｍＬの軟寒天ＬＢ培地（０．５％）に、あらかじめ調製した大腸菌（E. coli）溶液１００μＬを加え、そこにさらにＭＳ２ファージ試薬１００μＬを加えた。よく混合した後、ＢＬ寒天培地に注ぎ、プラーク数から力価を計測し、感染価減少値（Δｌｏｇ  ＰＦＵ／ｍＬ）を算出した。
【０１３１】
結果を表１に示す。感染価減少値が３以上（有効数字１桁とする）の場合に抗ウイルス活性を有する（消毒効果がある）と認めるという基準の下、１０％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨおよび５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨは抗ウイルス活性を有すると認められる。一方、４．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ〜０．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨについては、一定の抗ウイルス作用（感染価の減少）が認められるものの、抗ウイルス活性を有するとは認められない。
【０１３２】
調製例２（図１）のデータを参照すると、５％ＤＳ／５０％ＥｔＯＨは０．８１ｍｇ／ｍＬの濃度でタンニンを含有することから、およそ０．８０ｍｇ／ｍＬの濃度のタンニンを含有する（それと一緒にタンニン以外の成分も含有する）デーツ種子抽出物は単独で、ＭＳ２ファージに対する抗ウイルス活性を有するといえる。
【０１３３】
【表１】
2020040907.tif 000005
【０１３４】
［参考例２］デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）単独によるＭＳ２ファージに対する抗ウイルス作用の評価−その２−
調製例３で調製した合計５つの試験液と、対照として「５０％ＥｔＯＨ」および「７０％ＥｔＯＨ」（デーツ種子抽出物を含有しない、抽出溶媒そのもの）について、参考例１と同様の手順により、ＭＳ２ファージに対する抗ウイルス活性（感染価減少値）を評価した。
【０１３５】
結果を図３に示す。感染価減少値が３以上（有効数字１桁とする）の場合に抗ウイルス活性を有する（消毒効果がある）と認めるという基準の下、「５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」および「５％ＤＳＥ／７０％ＥｔＯＨ」は抗ウイルス活性を有すると認められる。「５％ＤＦＥ／５０％ＥｔＯＨ」については、一定の感染価の減少が認められるものの、抗ウイルス活性を有するとは認められない。
【０１３６】
［参考例３］デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）単独によるノロウイルスに対する抗ウイルス作用の評価−その１−
ノロウイルスに罹患した患者の糞便由来のノロウイルス懸濁液を精製、保存して使用した。ノロウイルスの濃度は１０６〜１０７／ｍＬであった。このノロウイルス懸濁液１．２μＬと、前記試験液「５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」（調製例２参照）１０．８μＬとを混合し、２分間室温で反応させた後、９９０μＬのＬＢ培地に加えて反応を止めた（１００倍希釈）。この反応液から市販のキットを用いて、ノロウイルスのＲＮＡを抽出し、ＤＮａｓｅで処理し、ｃＤＮＡを合成した。このｃＤＮＡ溶液を用いて常法に従ってリアルタイムＰＣＲを行い、上記の反応によって残存したノロウイルス量を定量し、コントロールに対するゲノム残存率（％）を算出した。
【０１３７】
コントロールとしては次の２つを行った。１つは、前記試験液「５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」１０．８μＬの代わりに「５０％ＥｔＯＨ」１０．８μＬを用いたこと以外は上記と同様の手順でノロウイルス量を定量したコントロール（Total control）である。もう１つは、上記の手順のように培地に加える前に試験液とノロウイルス懸濁液を接触させるのではなく、９９０μＬのＬＢ培地に試験液「５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」９μＬを加えてから、ノロウイルス懸濁液１μＬを加えて接触させ、反応後の培地１４０μＬから上記と同様の手順でリアルタイムＰＣＲによりノロウイルス量を定量したコントロールである（「５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ−Ｃ」と表記する。）。上記の試験は２反復行い、ゲノム残存率はその平均値±ＳＤとして求めた。
【０１３８】
結果を図４に示す。「５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」の抗ノロウイルス作用はあまり強くないが（ゲノム残存率約６５％）、「１０％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」は一定程度の抗ノロウイルス作用を有していた（ゲノム残存率約１５％）。
【０１３９】
［参考例４］デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）単独によるノロウイルスに対する抗ウイルス作用の評価−その２−
試験液として、「５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」の代わりに「５％ＤＳＥ／７０％ＥｔＯＨ」および「１０％ＤＳＥ／７０％ＥｔＯＨ」を用い、コントロールもそれぞれに対応するものに変更したこと以外は、参考例３と同様の手順でゲノム残存率（％）を測定した。
【０１４０】
結果を図５に示す。「１０％ＤＳＥ／７０％ＥｔＯＨ」は強い抗ノロウイルス活性を有しており（ゲノム残存率約５％）、「５％ＤＳＥ／７０％ＥｔＯＨ」も一定程度の抗ノロウイルス活性を有していた（ゲノム残存率約１８％）。
【０１４１】
［実施例１］カキ抽出物（ＰＥ）およびデーツ種子抽出物（ＤＳＥ）の併用による、ＭＳ２ファージに対する抗ウイルス作用の評価
【０１４２】
１．感染価減少値の測定
調製例１と同様のカキ抽出物（ＰＥ）試験液「０．１％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」を調製し、さらにその試験液を５０％ＥｔＯＨで希釈して試験液「０．０５％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」を調製した。また、調製例２と同様のデーツ種子抽出物（ＤＳＥ）試験液「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」を調製し、さらにその試験液を５０％ＥｔＯＨで希釈して試験液「１．２５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」を調製した。
【０１４３】
参考例１の手順において、ＭＳ２ファージ溶液１５μＬと各試験液１３５μＬとの混合を、下記（i）〜（vi）のように変更し、それ以外は同様にして、カキ抽出物単独の場合、デーツ種子抽出物単独の場合、およびカキ抽出物とデーツ種子抽出物を併用した場合のＭＳ２ファージに対する抗ウイルス作用（感染価減少値）を比較した。
（i）ＭＳ２ファージ溶液１５μＬと、試験液「０．１％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」１３５μＬとを混合。
（ii）ＭＳ２ファージ溶液１５μＬと、試験液「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」１３５μＬとを混合。
（iii）ＭＳ２ファージ溶液１５μＬと、試験液「０．１％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」１３５μＬと、試験液「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」１３５μＬとを混合。
（iv）ＭＳ２ファージ溶液１５μＬと、試験液「０．０５％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」１３５μＬとを混合。
（v）ＭＳ２ファージ溶液１５μＬと、試験液「１．２５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」１３５μＬとを混合。
（vi）ＭＳ２ファージ溶液１５μＬと、試験液「０．０５％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」１３５μＬと、試験液「１．２５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」１３５μＬとを混合。
【０１４４】
結果を図６に示す。感染価減少値が３以上（有効数字１桁とする）の場合に抗ウイルス活性を有する（消毒効果がある）と認めるという基準の下、まず（i）〜（iii）を対比すると、「０．１％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」単独の感染価減少値は１．１２、「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」単独の感染価減少値は０．８１で、共に抗ウイルス活性を有するとは認められなかったが、それらを併用すると感染価減少値が５．５２と飛躍的に高まり、抗ウイルス活性を有すると認められるようになった。同様に、（iv）〜（vi）を対比すると、「０．０５％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」単独の感染価減少値は０．２４、「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」単独の感染価減少値は０（測定限界以下）で、共に抗ウイルス活性を有するとは認められなかったが、それらを併用すると感染価減少値が３．２７と飛躍的に高まり、抗ウイルス活性を有すると認められるようになった。
【０１４５】
２．相乗効果の有無の検証
上記「１．感染価減少値の測定」の結果のうち、（iii）および（vi）のケースにおいて相乗効果が認められるといえるかどうか、次のようにして検証した。
【０１４６】
本発明（実施例）では、ＦＩＣインデックスにより相乗効果を判定する。ＦＩＣインデックスの計算式および判定基準は下記の通りである。ＦＩＣインデックスによる判定が「相乗効果」および「部分的相乗効果」の場合に、相乗効果があるとみなす。
【０１４７】
【数１】
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【０１４８】
まず、次のような手順で上記ＦＩＣインデックス計算式中の「単独時薬剤ＡのＭＩＣ値」を求めた。試験液「０．１％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」を希釈してカキ抽出物（ＰＥ）試験液中のＰＥ濃度を様々に変化させた試験液を調製し、それらの試験液を単独で用いながら感染価減少値を測定していったところ、試験液のＰＥ濃度が０．３４％のときに感染価減少値が３となる（消毒効果を有すると認められる）ことが分かった。したがって「単独時薬剤ＡのＭＩＣ値」は「０．３４」となる。同様にして、デーツ種子抽出物（ＤＳＥ）試験液を用いて「単独時薬剤ＢのＭＩＣ値」を求めたところ、「４．３１」となる。
【０１４９】
続いて、ＰＥおよびＤＳＥを混合した試験液の感染価減少値を測定するために、ＰＥ試験液の濃度を０．０５％に固定してＤＳＥ試験液の濃度を変化させたところ、ＤＳＥ試験液の濃度が１．２６％のときに感染価減少値が３となる（消毒効果が認められるようになる）ことが分かった（図７［Ａ］参照）。したがって「併用時薬剤ＡのＭＩＣ値」は「０．０５」、「併用時薬剤ＢのＭＩＣ値は」「１．２６」となる。
【０１５０】
各ＭＩＣ値を上記ＦＩＣインデックス計算式に代入すると、ＦＩＣインデックスは（０．０５／０．３４）＋（１．２６／４．３１）≒０．４４と算出され、「相乗効果」（０．５以下）と判定される。つまり、濃度０．０５％のＰＥ試験液には消毒効果が認められないが、濃度が一定の水準よりも高いＤＳＥを添加することによって消毒効果が認められるよう改良することができ、その際には抗ウイルス作用において「相乗効果」が発揮されるといえる。
【０１５１】
さらに、上記の手順において、ＰＥ試験液の濃度を０．１％に固定してＤＳＥ試験液の濃度を変化させたところ、ＤＳＥ試験液の濃度が１．２２％のときに感染価減少値が３となる（消毒効果が認められるようになる）ことが分かった（図７［Ｂ］参照）。このとき、「併用時薬剤ＡのＭＩＣ値」は「０．１」、「併用時薬剤ＢのＭＩＣ値は」「１．２２」となり、ＦＩＣインデックスは（０．１／０．３４）＋（１．２２／４．３１）≒０．５８と算出され、「部分的相乗効果」（０．５より大きく０．７５以下）と判定される。つまり、消毒効果が認められない濃度０．１％のＰＥ試験液についても、濃度が一定の水準よりも高いＤＳＥを添加することによって、抗ウイルス作用における“部分的相乗効果”が発揮され（本発明においてはこれも相乗効果があるとみなす）、消毒効果が認められるよう改良することができる。
【０１５２】
逆に、ＤＳＥ試験液の濃度を固定し、ＰＥ試験液の濃度を変化させた場合の評価も行った。ＤＳＥ試験液の濃度を１．２５％に固定した場合は、ＰＥ試験液の濃度が０．０２３％のときに感染価減少値が３となって消毒効果が認められるようになり（図８［Ａ］参照）、ＦＩＣインデックスは（０．０２３／０．３４）＋（１．２５／４．３１）≒０．３６と算出され、「相乗効果」（０．５以下）と判定される。ＤＳＥ試験液の濃度を２．５％に固定した場合は、ＰＥ試験液の濃度が０．００１６％のときに感染価減少値が３となって消毒効果が認められるようになり（図８［Ｂ］参照）、ＦＩＣインデックスは（０．００１６／０．３４）＋（２．５／４．３１）≒０．５６と算出され、「部分的相乗効果」（０．５より大きく０．７５以下）と判定される。つまり、消毒効果が認められない濃度２．５％および１．２５％のＤＳＥ試験液について、濃度が一定の水準よりも高いＰＥを添加することによって、抗ウイルス作用における“相乗効果”または“部分的相乗効果”が発揮され（本発明においてはどちらも相乗効果があるとみなす）、消毒効果が認められるよう改良することができる。
【０１５３】
［調製例４］ＢＳＡ処理デーツ種子抽出物（その１）の調製、ならびにタンニンの定量およびＭＳ２ファージに対する抗ウイルス作用の評価
高分子量のタンニンはウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）に結合し、凝集塊を形成することはよく知られている。ＢＳＡ濃度が０ｍｇ／ｍＬ（コントロール）、１ｍｇ／ｍＬ、２ｍｇ／ｍＬおよび３ｍｇ／ｍＬとなるよう滅菌水にＢＳＡを溶解した水溶液を調製し、前記デーツ種子抽出物試験液「１０％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」と等量ずつ混合した。混合液を室温で１５分間静置し、１０，０００×ｇで１０分間遠心分離し、上清を回収し、「ＢＳＡ処理試験液」（ＥｔＯＨ濃度は２５％）とした。なお、ＢＳＡ処理前の試験液は淡黄褐色であったが、ＢＳＡよりにより黄褐色の凝集塊（沈澱）が生じ、上清はほぼ無色透明になった（図９参照）。
【０１５４】
ＢＳＡ処理試験液について、調製例２と同様の手順により、ＢＳＡ処理試験液中のタンニンの含有量をバニリン塩酸塩法で測定した。あわせて、参考例１と同様の手順により、ＭＳ２ファージに対する抗ウイルス作用（感染価減少値）を評価した。
【０１５５】
結果を図９に示す。処理に用いたＢＳＡ濃度が高い試験液ほどタンニンの含有量が減少し、抗ウイルス作用も低下する傾向にあるが、抗ウイルス作用が実質的になくなるＢＳＡ濃度が２ｍｇ／ｍＬおよび３ｍｇ／ｍＬでも一定程度のタンニンは残存していることが分かった。このような結果から、高濃度のＢＳＡで処理した試験液からは、ＢＳＡの凝集能を有するタンニン、すなわち「高分子タンニン」が除去され、その試験液を単独で用いた場合の抗ウイルス活性はほぼ失われるが、ＢＳＡの凝集能は有さないもののバニリン塩酸塩法により呈色するタンニン、すなわち「低分子タンニン」が残存していることが示唆される。
【０１５６】
［調製例５］ＢＳＡ処理デーツ種子抽出物（その２）の調製、およびそこに含まれる成分の分析
前記デーツ種子抽出物試験液「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」および前記１ｍｇ／ｍＬの濃度のＢＳＡ溶液を用いて、調製例４と同様の手順で、ＢＳＡ処理試験液「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ／ＢＳＡ（１ｍｇ／ｍＬ）処理」を調製した。
【０１５７】
上記２つの試験液に含まれる成分を薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）により分析した。展開液にはトルエン：アセトン：酢酸＝３：３：１の混合溶媒を用いた。展開槽にて展開し、乾燥した後、スポットにバニリン塩酸塩法の試薬（４％バニリン／メタノール：塩酸＝２：１）を噴霧して呈色させた。対照として、カテキンのモノマー標準物質であるフラバン−３−オール類（エピカテキン、エピカテキンガレート、エピガロカテキン、エピガロカテキンガレート）を用いた。
【０１５８】
結果を図１０に示す。「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」および「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ／ＢＳＡ（１ｍｇ／ｍＬ）処理」はいずれも、それぞれエピガロカテキンガレート（ＥＧＣｇ）およびエピカテキン（ＥＣ）に対応するスポットIIおよびIIIの呈色反応があり、これら２種の化合物が「低分子タンニン」であるものと推測される。一方、「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」でのみに見られるスポットIは「高分子タンニン」を表していると推測される。
【０１５９】
なお、同図に併せて掲載してあるが、ＴＬＣで同様にカキ抽出物の成分分析を行った際にはスポットIの位置にだけ呈色があった。カキ抽出物が含有するタンニンはほぼ全て「高分子タンニン」（カキ縮合型タンニン）で「低分子タンニン」は存在しないと推測される。
【０１６０】
［実施例２］カキ抽出物およびＢＳＡ処理デーツ種子抽出物の併用による、ＭＳ２ファージに対する抗ウイルス作用の評価
参考例１の手順において、ＭＳ２ファージ溶液１５μＬと各試験液１３５μＬとの混合を、下記（i’）、(vii)および（viii）のように変更し、それ以外は同様にして、カキ抽出物単独の場合、デーツ種子抽出物単独の場合、およびカキ抽出物とデーツ種子抽出物を併用した場合のＭＳ２ファージに対する抗ウイルス作用（感染価減少値）を比較した。なお、下記（i’）は実施例１の（i）と同条件の試験を再度行ったものである。
（i’）ＭＳ２ファージ溶液１５μＬと、前記試験液「０．１％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」１３５μＬとを混合。
（vii）ＭＳ２ファージ溶液１５μＬと、前記試験液「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ／ＢＳＡ（１ｍｇ／ｍＬ）処理」１３５μＬとを混合。
（viii）ＭＳ２ファージ溶液１５μＬと、前記試験液「０．１％ＰＥ／２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ／ＢＳＡ（１ｍｇ／ｍＬ）処理」１３５μＬとを混合。
【０１６１】
結果を図１１に示す。「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ／ＢＳＡ（１ｍｇ／ｍＬ）処理」を単独で用いた場合の抗ウイルス作用（感染価減少値＝０．１０）は、ＢＳＡ無処理の試験液「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」を単独で用いた場合（実施例１の（ii）、図６参照、感染価減少値＝０．８１）よりも大幅に低下している。しかしながら「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ／ＢＳＡ（１ｍｇ／ｍＬ）処理」を「０．１％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」と併用した場合の抗ウイルス作用（感染価減少値＝３．５９）は、「０．１％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」と「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」とを併用した場合（実施例１の（iii）、図６参照、感染価減少値＝５．５２）ほどではないが、「抗ウイルス活性を有する」と認められる水準に到達している。このような結果から、デーツ種子抽出物は高分子タンニンおよび低分子タンニンを含有するが、カキ抽出物の抗ウイルス作用を増強する（相乗効果を発揮する）ためにはその両方が必須なのではなく、低分子タンニンだけでもよいことが示唆される。
【０１６２】
［実施例３］カキ抽出物およびデーツ種子抽出物の併用による、ノロウイルスに対する抗ウイルス作用の評価
実施例１と同様にして、カキ抽出物（ＰＥ）の濃度が０．０５％のエタノール水溶液「０．０５％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」およびデーツ種子抽出物（ＤＳＥ）の濃度が２．５％のエタノール水溶液「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」を調製した。
【０１６３】
参考例３の手順において、ノロウイルス懸濁液１．２μＬと試験液「５％ＤＳ／５０％ＥｔＯＨ」１０．８μＬと混合を、下記（iv）〜（xii）のように変更し、それ以外は同様にして、ＰＥ単独の場合、ＤＳＥ単独の場合、およびＰＥとＤＳＥを併用した場合の、ノロウイルスに対する抗ウイルス作用（ゲノム残存率）を比較した。ＰＢＳのみ、または５０％エタノール水溶液のみを試験液として用いた場合を対照とした。
（iv）ノロウイルス懸濁液１．２μＬと、ＰＢＳ１０．８μＬとを混合。
（x）ノロウイルス懸濁液１．２μＬと、５０％エタノール水溶液１０．８μＬとを混合。
（xi）ノロウイルス溶液１．２μＬと、試験液「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」１０．８μＬとを混合。
（xii）ノロウイルス溶液１．２μＬと、試験液「０．０５％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」１０．８μＬとを混合。
（xiii）ノロウイルス溶液１．２μＬと、試験液「２．５％ＤＳＥ／０．０５％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」１０．８μＬとを混合。
【０１６４】
結果を図１２に示す。「２．５％ＤＳＥ／５０％ＥｔＯＨ」および「０．０５％ＰＥ／５０％ＥｔＯＨ」の抗ウイルス作用（ゲノム残存率約５１％）は、コントロールとして用いたそれらの溶媒「５０％ＥｔＯＨ」の抗ウイルス作用（ゲノム残存率約６０％）と大きな差はないが、それらを併用した場合は抗ウイルス作用が著しく増強された（ゲノム残存率約７％）。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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【図１１】
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【図１２】
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