(57)【要約】【課題】湿潤条件下でも強度及び接着性に優れ、かつ、生体吸収性にも優れ、さらには、生物活性薬剤を含有する場合には該薬剤の放出性に優れる、生体吸収性のシート又はフィルムを提供すること。【解決手段】リン酸化プルランを含有する組成物から成る、生体吸収性のシート又はフィルム。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
リン酸化プルランを含有する組成物から成る、生体吸収性のシート又はフィルム。
【請求項２】
組成物が更に可塑剤を含んでなる、請求項１記載のシート又はフィルム。
【請求項３】
可塑剤がグリセリン及びポリエチレングリコールから選ばれる少なくとも一種を含む、請求項２に記載のシート又はフィルム。
【請求項４】
組成物が更に生物活性薬剤を含有してなる、請求項１〜３いずれか記載のシート又はフィルム。
【請求項５】
支持体シートに支持されている、請求項１〜４いずれか記載のシート又はフィルム。
【請求項６】
生体内の臓器又は組織における創傷部、欠損部、又は脆弱部の被覆材である、請求項１〜５いずれか記載のシート又はフィルム。
【請求項７】
生体内組織の再生又は再建材料の漏洩又は拡散防止材あるいは固定材である、請求項１〜５いずれか記載のシート又はフィルム。
【請求項８】
生物活性薬剤の漏洩又は拡散防止材である、請求項１〜５いずれか記載のシート又はフィルム。
【請求項９】
化学修飾したリン酸化プルランを含有する組成物から成る、生体吸収性のシート又はフィルム。
【請求項１０】
化学修飾が、エーテル化剤、エステル化剤、アセタール化剤、イソシアネート、イソチオシアネート、カルバモイルクロリド、チオカルバモイルクロリド、シランカップリング剤、塩化スルホニル、スルホン酸無水物、ポリマー、及び高分子用架橋剤からなる群より選ばれる化合物を用いてなされる化学修飾である、請求項９記載のシート又はフィルム。
【請求項１１】
化学修飾がリン酸化プルランの表面疎水化である、請求項９又は１０記載のシート又はフィルム。
【請求項１２】
化学修飾がリン酸化プルランに架橋構造を導入するものである、請求項９又は１０記載のシート又はフィルム。
【請求項１３】
組成物が更に生物活性薬剤を含有してなる、請求項９〜１２いずれか記載のシート又はフィルム。
【請求項１４】
生物活性薬剤の徐放性が制御されたものである、請求項１３記載のシート又はフィルム。
【請求項１５】
他の層を積層した複層構造である、請求項１〜１４いずれか記載のシート又はフィルム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、生体内の臓器や組織に貼り付けて使用する生体貼付用の機能性シート又はフィルムに関する。
【背景技術】
【０００２】
外科手術などにおいて、臓器、血管等の創傷への処置方法としては、現在では、高分子縫合糸を用いた縫合の他、接着用テープ・フィルム、生体用インプラント等を使用する方法が主に用いられている。
【０００３】
例えば、特許文献１には、生体内分解性の高分子で形成された第一皮膜層と、金属、金属酸化物、ケイ素、酸化ケイ素から選ばれた一種以上で形成された第二皮膜層との積層フィルムが、第二皮膜層側で通気性を有するキャリアシートに支持された癒着防止フィルムが開示されている。ここで、積層フィルムは、第一皮膜層として当該高分子の溶液又は分散液を展延・乾燥させた後、その上に第二皮膜層を物理蒸着法あるいは化学蒸着法により形成してから、キャリアシートに重ね合わせている。そして、使用時には、積層フィルムをキャリアシートから剥離して、第一皮膜層の表面が体内組織の表面に接触するようにして貼付する。このように使用することで、体内では容易に軟化・溶融しない第二皮膜層が表層を形成することになって、第一皮膜層が他の癒着防止フィルムと癒着するおそれが低減される。
【０００４】
また、特許文献２には、生体内組織用創傷治癒用フィルムとして、アスコルビン酸誘導体と創傷治癒効果のある特定の薬剤とが、ゼラチン、スターチ（でんぷん）、アルギン酸ナトリウム、寒天、セルロース、ポリグルタミン酸、キチンキトサン、及びこんにゃくから選択される一種以上の生分解性高分子からなるシートに担持されたフィルムを開示している。フィルムの形成方法としては、具体的には、生分解性高分子に、アスコルビン酸誘導体や薬剤を配合した組成物を調製後、公知の成形法に従って成形すればよいことが記載されている。
【０００５】
一方、生分解性高分子そのものの特性を制御することで、癒着防止材料として用いる技術も知られている。例えば、特許文献３には、一定時間真空下で熱処理することにより架橋されたゼラチンフィルムが、生体内で分解吸収されながらも一定期間は形態を保持することから、優れた生体組織の癒着防止能を有することを報告している。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００６】
【特許文献１】特開２０１４−１７１５７７号公報
【特許文献２】特開２０１２−２１３６５８号公報
【特許文献３】特開２０１３−２２６１６６号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００７】
しかしながら、従来の生体吸収性のシートやフィルムは、生体内等の湿潤条件下等では未だ強度や接着性が十分ではなく、更なる改良が望まれていた。
【０００８】
本発明の課題は、湿潤条件下でも強度及び接着性に優れ、かつ、生体吸収性にも優れ、さらには、生物活性薬剤を含有する場合には該薬剤の放出性に優れる、生体吸収性のシート又はフィルムを提供することである。
また、本発明の他の課題は、溶解性が制御され、あるいは、生物活性薬剤を含有する場合には該薬剤の徐放性が制御された生体吸収性のシート又はフィルムを提供することである。
【課題を解決するための手段】
【０００９】
本発明者らは、前記課題を解決せんと鋭意検討した結果、リン酸化プルランを主成分とする組成物を用いて得られたフィルムが、湿潤下でも高い強度と接着性を示し、かつ、生体吸収性にも優れ、さらには、生物活性薬剤を含有する場合には該薬剤の放出性に優れることを見出し、さらに化学修飾したリン酸化プルランを使用することで、溶解性、徐放性などを制御できることを見出し、本発明を完成するに至った。
【００１０】
即ち、本発明は、リン酸化プルラン又は化学修飾したリン酸化プルランを含有する組成物から成る、生体吸収性のシート又はフィルムに関する。
【発明の効果】
【００１１】
本発明の生体吸収性のシート又はフィルムは、湿潤下でも強度及び接着性に優れ、かつ、生体吸収性にも優れ、さらには、生物活性薬剤を含有する場合には該薬剤の放出性に優れるという優れた効果を奏する。また、生体内に適用した組織の再生又は再建材料や生物活性薬剤の漏洩や拡散を抑制して固定することができるという優れた効果も奏する。
また、生物活性薬剤を含有する本発明のシート又はフィルムにおいて、化学修飾したリン酸化プルランを使用することで、あるいは他の層を設けることで、リン酸化プルランの溶解性が制御でき、薬剤の徐放性も制御することができる。
【図面の簡単な説明】
【００１２】
【図１】図１は、乳化剤の添加量とフィルム強度の関係を示す図である。
【図２】図２は、実施例９のフィルムの埋植部の生物活性薬剤濃度を示す図である。
【図３】図３は、実施例９のフィルムの止血実験におけるフィルム静置後と剥離後を示す写真である。
【図４】図４は、実施例１４の難溶化の結果を示す写真である。
【図５】図５は、実施例１５の２層構造を示す断面写真である。
【図６】図６は、図５の部分拡大写真である。
【図７】図７は、実施例１６におけるフィルム静置箇所を示す写真である。
【図８】図８は、実施例１６において骨形成を期待できる部位を示す写真である。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
本発明の生体吸収性のシート又はフィルムは、リン酸化プルランを含有する組成物（リン酸化プルラン組成物）からなるが、生分解性高分子として、リン酸化プルランを用いることに大きな特徴を有する。なお、本発明の生体吸収性のシート又はフィルムのことを、単に、本発明のシート又はフィルムと記載する。
【００１４】
〔リン酸化プルラン組成物〕
［リン酸化プルラン］
リン酸化プルランは、生体組織に対して親和性が高いだけでなく、そのリン酸基が生体組織に対してキレート結合を形成して吸着性を示し、その後、生体吸収性も示す。また、リン酸化プルランそのものや、その構成単位であるオリゴ糖、単糖は、生体安全性が高いものであり、生体内での酵素による代謝を受けにくいことから、異物反応が軽微である。本発明では、かかる特性を有するリン酸化プルランを生体内に適用すると、生体内の組織や臓器表面に存在する体液（組織液ともいう）がリン酸化プルランに浸潤することで、組織液内の陽イオンがリン酸化プルランのリン酸基とキレート結合を形成して架橋構造を形成するため、プルランによる増粘作用に加えて長期に亘って粘性を発揮することが可能になり、ひいては、適用箇所での自己治癒力を向上することになると考えられる。但し、これらの推測は、本発明を限定するものではない。
【００１５】
リン酸化プルランは、プルランの水酸基をリン酸化する公知の方法により製造することができる。例えば、Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  第３０２巻（１９９７年）２７〜３４ページに記載のメタリン酸ナトリウムと反応させる方法、特開２００５−３３０２６９号公報、特開２００５−３３０２７０号公報に記載されたリン酸ナトリウムと反応させる方法等が挙げられる。またさらには、ＷＯ８７／０７１４２号公報に記載のように、五酸化リンとプルランを反応させてリン酸化プルランを得る方法も好適に用いられる。得られたリン酸化プルランは、ＩＲ分析やＮＭＲ分析等により、その構造を確認することができる。なお、リン酸化プルランのリン酸化の程度は、公知の方法に従って、原料使用量や反応条件を調整する等して調整することができる。
【００１６】
また、リン酸化プルランは、その一部又は全部が塩になっていてもよく、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、アンモニウム塩や各種アミンとの塩等が例示される。リン酸化プルランの塩は、公知の方法に従って調製することができる。
【００１７】
リン酸化プルランの数平均分子量（Ｍｎ）は、生体組織との接着性、シート又はフィルムの強度、及び製造コスト等の観点から、好ましくは１０００以上、より好ましくは２０００以上、更に好ましくは５０００以上、更に好ましくは１００００以上であり、更に好ましくは２００００以上である。上限値は特に限定されるものではない。また、重量平均分子量（Ｍｗ）としては、生体組織との接着性、シート又はフィルムの強度、及び製造コスト等の観点から、好ましくは１００００以上、より好ましくは２００００以上、更に好ましくは５００００以上、更に好ましくは１０００００以上であり、更に好ましくは２０００００以上であり、上限値は特に限定されるものではない。但し、リン酸化プルランの重合が進み、高度に高分子量化すると、水への溶解が悪くなり、分子量を正確に測定することが困難となり、実際には測定できない場合もある。本発明においては、そのような高分子量体も好適例の一つとして含まれる。従って、本発明において、リン酸化プルランの重量平均分子量の上限は、特になく、測定限界を超えるものも含まれる。なお、本明細書において、リン酸化プルランの数平均分子量（Ｍｎ）と重量平均分子量（Ｍｗ）は、後述の実施例に記載の方法に従って測定することができる。
【００１８】
リン酸化プルランは、１分子に含まれる全水酸基のうち、好ましくは０．５〜１５個数％、より好ましくは２〜１４個数％、さらに好ましくは、２〜１３個数％、さらに好ましくは２〜１０個数％の水酸基がリン酸化されたものが望ましい。なお、リン酸化プルランにおけるリン酸化された水酸基の個数割合は、リン酸化プルランの元素分析を行ってリンの含有量を測定し、測定されたリンが全て、リン酸化された水酸基に由来するものとして算出することができる。
【００１９】
本発明においては、生分解性高分子としてリン酸化プルランを用いるが、本発明の効果を損なわない範囲内で、他の生分解性高分子を用いてもよい。他の生分解性高分子としては、公知のものであれば特に限定はなく、天然生分解性ポリマー、修飾天然生分解性ポリマー、合成生分解性ポリマー等が挙げられ、これらは１種単独又は２種以上組み合わせて用いることができる。
【００２０】
天然生分解性ポリマーとしては、多糖類（例えば、アルギネート、デキストラン、キチン、キトサン、ヒアルロン酸、セルロース、コラーゲン、ゼラチン、フコイジン、スターチ、及びグリコサミノグリカン）；タンパク質（例えば、アルブミン、カゼイン、ゼイン、フィブロイン）、ならびにこれらのコポリマー及びブレンドが挙げられる。
【００２１】
修飾天然生分解性ポリマーとしては、合成により修飾された天然生分解性ポリマーが挙げられる。具体的には、前記天然生分解性ポリマーの化学誘導体（化学基（例えば、アルキル、アルキレン）の置換及び／又は付加、ヒドロキシル化、酸化、ならびに、それらの組み合わせ）を用いることができ、セルロース誘導体（例えば、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、セルロースエーテル、ニトロセルロース）が例示される。なかでも、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシブチルメチルセルロース、酢酸セルロース、プロピオン酸セルロース、酢酸酪酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、カルボキシメチルセルロース、三酢酸セルロース、及び硫酸セルロースナトリウム塩が好適例として挙げられる。
【００２２】
合成生分解性ポリマーとしては、ラクトンモノマー（例えば、グリコリド、ラクチド、カプロラクトン、ε−カプロラクトン、バレロラクトン、及びδ−バレロラクトン）から調製されたポリヒドロキシ酸；ならびにカーボネート（例えば、トリメチレンカーボネート及びテトラメチレンカーボネートなど）；ジオキサノン（例えば、１，４−ジオキサノン及びｐ−ジオキサノン）；１，ジオキセパノン（例えば、１，４−ジオキセパン−２−オン及び１，５−ジオキセパン−２−オン）；ならびにこれらの組み合わせが挙げられる。これらから形成されるポリマーとしては、ポリ（乳酸）；ポリ（グリコール酸）；ポリ（トリメチレンカーボネート）；ポリ（ジオキサノン）；ポリ（ヒドロキシ酪酸）；ポリ（ヒドロキシ吉草酸）；ポリ（ラクチド−ｃｏ−（ε−カプロラクトン））；ポリ（グリコリド−ｃｏ−（ε−カプロラクトン））；ポリ（乳酸−ｃｏ−グリコール酸）；ポリカーボネート；ポリ（偽アミノ酸）；ポリ（アミノ酸）；ポリ（ヒドロキシアルカノエート）；ポリアルキレンオキサレート；ポリオキサエステル；ポリ酸無水物；ポリオルトエステル；ならびにこれらのコポリマー、ブロックコポリマー、ホモポリマー、ブレンド、及び組み合わせが挙げられる。
【００２３】
また、上記以外に、脂肪族ポリエステル；ポリエチレングリコール；グリセロール；コポリ（エーテル−エステル）；ならびにこれらのコポリマー、ブロックコポリマー、ホモポリマー、ブレンド、及び組み合わせが挙げられる。
【００２４】
本発明のシート又はフィルムに用いられる生分解性高分子のうち、リン酸化プルランの含有量としては、好ましくは５０質量％以上、より好ましくは６０質量％以上、更に好ましくは７０質量％以上、更に好ましくは８０質量％以上、更に好ましくは９０質量％以上である。上限は特に限定されず、生分解性高分子がリン酸化プルランからなるものであってもよい。
【００２５】
また、シート又はフィルム中のリン酸化プルランの含有量としては、接着性を向上させる観点から、好ましくは３０質量％を超えて、より好ましくは４０質量％以上、更に好ましくは５０質量％以上である。また、上限は特に設定されないが、通常９０質量％程度である。
【００２６】
［可塑剤］
本発明のシート又はフィルムは、リン酸化プルラン以外の成分としては、例えば、成形時の収縮などを抑制し、シート又はフィルムの柔軟性を向上させる観点から、可塑剤を含有することができる。
【００２７】
可塑剤としては、例えば、グリセリン、エチレングリコール、プロピレングリコール、ジエチレングリコール、トリエチレングリコール、ジプロピレングリコール、ソルビトール、ポリグリセリン、ポリエチレングリコール、ポリグリセリン脂肪酸エステルなどが挙げられる。これらは単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができるが、シート又はフィルムの柔軟性の観点から、グリセリン及びポリエチレングリコールから選ばれる少なくとも一種を用いることが好ましい。なお、ポリエチレングリコールの分子量としては、好ましくは１００〜１０００、より好ましくは２００〜６００が挙げられる。合成品であっても市販品であってもよい。
【００２８】
可塑剤の含有量としては、リン酸化プルラン１００質量部に対して、シート又はフィルムの柔軟性を向上させる観点から、好ましくは１質量部以上、より好ましくは３質量部以上、更に好ましくは５質量部以上であり、シート又はフィルムの取扱い性の観点から、好ましくは３０質量部以下、より好ましくは２５質量部以下、更に好ましくは２０質量部以下である。
【００２９】
また、シート又はフィルム中の可塑剤の含有量としては、シート又はフィルムの柔軟性を向上させる観点から、好ましくは１質量％以上、より好ましくは２質量％以上、更に好ましくは３質量％以上であり、シート又はフィルムの取扱い性の観点から、好ましくは２０質量％以下、より好ましくは１５質量％以下、更に好ましくは１０質量％以下である。
【００３０】
［生物活性薬剤］
本発明のシート又はフィルムは、生体内に埋め込んで使用することから薬効を付与して用いてもよく、生物活性薬剤を含有することができる。生物活性薬剤を含有する場合には、リン酸化プルランに由来するリン酸基などのイオン性基と生物活性薬剤との相互作用により、前記シート又はフィルムが生体に吸収される際に生物活性薬剤も逐次放出されて吸収されることになる。よって、本発明のシート又はフィルムが、前記生物活性薬剤の徐放用基材として機能することができる。
【００３１】
生物活性薬剤としては、特に限定はなく、例えば、
抗菌薬（以下の系に含まれる薬剤：β-ラクタム系（ペニシリン系、複合ペニシリン系、βラクタマーゼ阻害剤配合ペニシリン系、セフェム系、βラクタマーゼ阻害剤配合セフェム系、カルバペネム系、モノバクタム系、ペネム系）、アミノグリコシド系、リンコマイシン系、ホスホマイシン系、テトラサイクリン系、クロラムフェニコール系、マクロライド系、ケトライド系、ポリペプチド系、グリコペプチド系、ストレプトグラミン系、キノロン系、ニューキノロン系、サルファ剤系、オキサゾリジノン系）；
抗真菌薬（以下の系に含まれる薬剤：ポリエン系、アゾール系、アリルアミン系、キャンディン系）；
抗ウイルス薬（例えば、インターフェロン、抗ヘルペス剤、抗インフルエンザ薬、抗HIV薬（各種核酸系逆転写酵素阻害薬、核酸複製阻害薬含む）、ビダフラビン、ガンシクロビル、バルガンシクロビル、バラシクロビル、シドフォビル、ホスカルネット、アシクロビル、免疫調整剤）；
抗寄生虫薬（線虫薬（メベンダゾール、パモ酸ピランデル、チアベンダゾール、ジエチルカルバマジン、イベルメクチン）、条虫薬（ニクロサミド、プラジカンテル、アルベンダゾール）、吸虫薬（プラジカンテル）、原虫薬（メラルソプロール、エフロルニチン、メトロニダゾール、チニダゾール、ミルテホシン）、アメーバ薬（リファンピン、アンホテリシンＢ）；
抗原虫薬（たとえば、抗マラリア剤（キニーネ、クロロキン、メフロキン、ファンシダール、プリマキン）、エフロルニチン、フラゾリドン、メラルソプロール、メトロニダゾール、オルニダゾール、パロモマイシン硫酸、ペンタミジン、ピリメタミン、チニダゾール）；
非ステロイド性抗炎症薬（以下の系に含まれる各薬剤：サルチル酸系、プロピオン系、酢酸系、オキシカム系、塩基性、ピリン系、非ピリン系、総合感冒薬、COX-2阻害剤、COX-3阻害剤）；
ステロイド性抗炎症薬（例えば、コルチゾール、プレドニゾロン、トリアムシノロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン）；
抗ヒスタミン薬（以下の系に含まれる各薬剤：エタノールアミン系、プロピルアミン系、フェノチアジン系、ピペラジン系、第二世代（エピナスチン、ロラタジン、フェキソフェナジン、セチリジン））；
プロスタグランジン及び細胞毒性薬；
肥満細胞安定化剤（例えば、クロモリンナトリウム）；
受容体拮抗剤（たとえば、ヒスタミンH2受容体拮抗剤、ロイコトルエン受容体拮抗薬、交感神経β受容体拮抗薬、アンジオテンシンII受容体拮抗薬、セロトニン5-HT(3)受容体拮抗薬、NMDA受容体拮抗薬、オレキシン受容体拮抗薬、アデノシンa2a受容体拮抗薬、バソプレシン受容体拮抗薬、ADP受容体拮抗薬、ニューロキニン1受容体拮抗薬、抗コリン薬、サイトカイン受容体拮抗薬）；
抗腫瘍薬（以下の系に含まれる各薬剤：DNA架橋剤およびアルキル化剤、ニトロソウレア、白金錯体、代謝拮抗薬（葉酸拮抗薬、プリン拮抗薬、ピリミジン拮抗薬）、リボヌクレオチド還元酵素阻害薬、防錘体毒（ビンカアルカロイド類、タキサン）、トポイソメラーズ阻害剤（ポドフィトトキシン、アントラサイクリン系、カンプトテシン、チロシンキナーゼ阻害剤、ブレオマイシン類、マイトマイシン、生物学的反応修飾物質（インターフェロンα）、酵素、ホルモン製剤、アンドロゲン受容体遮断薬、アロマターゼ阻害薬、モノクローナル抗体）；
免疫原性薬剤（ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｉｃ ａｇｅｎｔｓ）；
免疫抑制剤（例えば、シクロスポリン、アザチオプリン、ミゾリビン、及びＦＫ５０６（タクロリムス））；
心臓血管薬（例えば、冠状血管拡張薬及びニトログリセリン）；
抗狭心症薬（例えば、β−アドレナリン遮断薬；カルシウムチャネル遮断薬（例えば、ニフェジピン及びジルチアゼム）及び；ニトレート（例えば、ニトログリセリン、イソソルビドジニトレート、ペンタエリトリトールテトラニトレート、及びエリトリチルテトラニトレート）；
抗不整脈薬（例えば、ブレチリウムトシレート、エスモロール、ベラパミル、アミオダロン、エンカイニド、ジゴキシン、ジギトキシン、メキシレチン、リン酸ジソピラミド、プロカインアミド、硫酸キニジン、キニジングルコネート（ｑｕｉｎｉｄｉｎｅ ｇｌｕｃｏｎａｔｅ）、キニジンポリガラクツロネート（ｑｕｉｎｉｄｉｎｅ ｐｏｌｙｇａｌａｃｔｕｒｏｎａｔｅ）、酢酸フレカイニド、トカイニド、及びリドカイン）；
抗高血圧薬（例えば、プロプラノロール（ｐｒｏｐａｎｏｌｏｌ）、プロパフェノン、オキシプレノロール（ｏｘｙｐｒｅｎｏｌｏｌ）、ニフェジピン、レセルピン、トリメタファン、フェノキシベンザミン、塩酸パルジリン、デセルピジン、ジアゾキシド、硫酸グアネチジン（ｇｕａｎｅｔｈｉｄｉｎｅ ｍｏｎｏｓｕｌｆａｔｅ）、ミノキシジル、レシンナミン、ニトロプルシドナトリウム、インドジャボク（ｒａｕｗｏｌｆｉａ ｓｅｒｐｅｎｔｉｎａ）、アルセロキシロン、及びフェントラミン）；
脈管形成剤（例えば、アンジオクライン）；
抗脈管形成剤；
抗血液凝固薬（例えば、ヘパリン、ヘパリンナトリウム、及びワルファリンナトリウム）抗うつ薬（例えば、ネオパム、オキシペルチン、ドキセピン、アモキサピン、トラゾドン、アミトリプチリン、マプロチリン、フェニルジン（ｐｈｅｎｙｌｚｉｎｅ）、デシプラミン、ノルトリプチリン、トラニルシプロミン、フルオキセチン、ドキセピン、イミプラミン、イミプラミンパモエート、イソカルボキサジド（ｉｓｏｃａｒｂｏｘａｚｉｄ）、トリミプラミン、及びプロトリプチリン）；
鎮静催眠薬（例えば、バルビツール酸類（例えば、ペントバルビタール及びセコバルビタール）；ベンゾジアゼピン（ｂｅｎｚｏｄｉａｚａｐｉｎｅ）類（例えば、塩酸フルラゼパム、トリアゾラム、及びミダゾラム））；
抗不安薬（例えば、ロラゼパム、ブスピロン、プラゼパム、クロルジアゼポキシド、オキサゼパム、クロラゼプ酸二カリウム、ジアゼパム、ヒドロキシジンパモエート、塩酸ヒドロキシジン、アルプラゾラム、ドロペリドール、ハラゼパム、クロルメザノン、及びダントロレン）；
抗精神病薬（例えば、ハロペリドール、コハク酸ロクサピン、塩酸ロクサピン、チオリダジン、塩酸チオリダジン、チオチキセン、フルフェナジン、デカン酸フルフェナジン、エナント酸フルフェナジン、トリフルオペラジン、クロルプロマジン、パーフェナジン、クエン酸リチウム、及びプロクロルペラジン）；
抗痙攣薬（例えば、バルプロ酸、ジバルプロックスナトリウム、フェニトイン（ｐｈｅｎｙｌｏｉｎ）、フェニトインナトリウム（ｐｈｅｎｙｌｏｉｎ ｓｏｄｉｕｍ）、クロナゼパム、プリミドン、フェノバルビタール（ｐｈｅｎｏｂａｒｂｉｔｏｌ）、カルバマゼピン、アモバルビタールナトリウム、メトスクシミド、メタルビタール、メフォバルビタール、メフェニトイン（ｍｅｐｈｅｎｙｌｏｉｎ）、フェンスクシミド、パラメタジオン、エトトイン、フェナセミド、セコバルビタールナトリウム（ｓｅｃｏｂａｒｂｉｔｏｌ ｓｏｄｉｕｍ）、クロラゼプ酸二カリウム、及びトリメタジオン）；
抗躁病薬（例えば、炭酸リチウム、カルバマゼピン、バルプロ酸ナトリウム、クロナゼパム、バルプロ酸ナトリウム）；
精神活性剤（精神に作用する薬剤は全て向精神薬、精神活性剤とする）；
精神安定剤（例えば、ベンゾジアゼピン系抗不安薬、エチゾラム、クロチアゼパム、アルプラゾラム、オキサゾラム、プラゼパム、ヒドロキシジン塩酸塩、タンドスピロンクエン酸塩）；
抗片頭痛剤（例えば、エルゴタミン、プロプラノロール（ｐｒｏｐａｎｏｌｏｌ）、ムチン酸イソメテプテン、及びジクロラルフェナゾン、トリプタン系）；
抗パーキンソン剤（例えば、Ｌ−ドパ及びエトスクシミド、塩酸プロフェナミン、レボドパ）；
鎮咳薬（例えば、中枢性鎮咳薬（ジヒドロコデイン）、アドレナリン作動薬（トリメトキノール）、キサンチン誘導体（テオフィルン））；
気管支拡張薬（例えば、交感神経作用薬（例えば、塩酸エピネフリン、硫酸メタプロテレノール、硫酸テルブタリン、イソエタリン、メシル酸イソエタリン、塩酸イソエタリン、硫酸アルブテロール、アルブテロール、ビトルテロルメシレート、塩酸イソプレテレノール、硫酸テルブタリン、酒石酸水素エピネフリン、硫酸メタプロテレノール、エピネフリン、及び酒石酸水素エピネフリン）；
ぜん息治療薬（例えば、ケトチフェン及びトラキサノクス）；
抗ムスカリン薬（例えば、ブチルスコポラミン臭化物、ピレンゼピン塩酸塩）；
麻酔薬（例えば、コデイン、ジヒドロコデイノン、メペリジン、モルヒネなど）；
オピオイドレセプターアンタゴニスト（例えば、ナルトレキソン及びナロキソン）；
鎮吐剤（例えば、塩酸メクリジン、ナビロン、プロクロルペラジン、ジメンヒドリネート、塩酸プロメタジン、チエチルペラジン、及びスコポラミン）；
血糖降下薬（例えば、ヒトインスリン、精製ウシインスリン、精製ブタインスリン、グリブリド、クロルプロパミド、グリピジド、トルブタミド、及びトラザミド）；
抗糖尿病薬（例えば、ビグアナイド類及びスルホニル尿素誘導体類）；
高脂質血症薬剤（ｈｙｐｏｌｉｐｉｄｅｍｉｃ ａｇｅｎｔｓ）（例えば、クロフィブレート、デキストロサイロキシンナトリウム、プロブコール、プラバスタチン（ｐｒａｖａｓｔｉｔｉｎ）、アトルバスタチン、ロバスタチン、及びナイアシン）；
血栓溶解薬（例えば、ウロキナーゼ、ストレプトキナーゼ、及びアルテプラーゼ）；
抗線維素溶解薬（例えば、アミノカプロン酸）；
血液レオロジー剤（例えば、ペントキシフィリン）；
抗血小板薬（例えば、アスピリン）；
カルシウム調節に有用な薬剤（例えば、カルシトニン及び副甲状腺ホルモン）；
赤血球生成刺激に有用な薬剤（例えば、エリトロポイエチン）；及び
抗関節炎薬（例えば、フェニルブタゾン、スリンダク、ペニシラミン（ｐｅｎｉｃｉｌｌａｎｉｎｅ）、サルサラート、ピロキシカム、アザチオプリン、インドメタシン、メクロフェナメート（ｍｅｃｌｏｆｅｎａｍａｔｅ）、金チオリンゴ酸ナトリウム、ケトプロフェン、オーラノフィン、金チオグルコース、及びトルメチンナトリウム）；
抗痛風薬（例えば、コルヒチン及びアロプリノール）；
筋弛緩薬（例えば、アフロクアロン、エペリゾン塩酸塩）；
アドレナリン作用性ニューロン遮断薬（例えば、タムスロシン）；
副交感神経様作用剤（例えば、ピロカルピン、ムスカリン）；
神経伝達物質（例えば、アドレナリン、ガンマアミノ酪酸、グリシン）；
抗体；
胃腸薬（例えば、アズレンスルホン酸ナトリウム、ウルソ、塩酸カルニチン）；
抗潰瘍／抗逆流剤（例えば、ファモチジン、シメチジン、及び塩酸ラニチジン）
利尿薬（例えば、トリクロルメチアジド、メチクラン、フロセミド）；
脂質；
リポ多糖類；
多糖類；
酵素；
うっ血除去薬（例えば、プソイドエフェドリン、フェニレフリン）；
スルホンアミド；
ビタミン；
キサンチン類（例えば、アミノフィリン、ジフィリン、硫酸メタプロテレノール、及びアミノフィリン）；
アルカロイド（例えば、モルヒネ、キニーネ、エフェドリン）；
診断薬；
が挙げられる。
【００３２】
また、前記以外の例としては、例えば、ウイルス及び細胞；ペプチド、ポリペプチド及びタンパク質、ならびにそのアナログ、ムテイン、及び活性フラグメント；免疫グロブリン；サイトカイン（例えば、リンホカイン、モノカイン、ケモカイン）；造血因子；インターロイキン（ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−６）；エリトロポイエチン；ヌクレアーゼ；腫瘍壊死因子；コロニー刺激因子（例えば、ＧＣＳＦ、ＭＣＳＦ）；インスリン；腫瘍抑制因子；血液タンパク質（例えば、フィブリン、トロンビン、フィブリノゲン、合成トロンビン、合成フィブリン、合成フィブリノゲン）；性腺刺激ホルモン（例えば、ＦＳＨ、ＬＨ、ＣＧなど）；ホルモン及びホルモンアナログ（例えば、成長ホルモン）；ワクチン（例えば、腫瘍性抗原、細菌性抗原及びウイルス性抗原）；ソマトスタチン；抗原；増殖因子又は成長因子（例えば、神経発育因子、インスリン様成長因子）；骨形成タンパク質；ＴＧＦ−β；タンパク質インヒビター；タンパク質アンタゴニスト；タンパク質アゴニスト；核酸（例えば、アンチセンス分子、ＤＮＡ、ＲＮＡ、ＲＮＡｉ）；オリゴヌクレオチド；ポリヌクレオチド；ならびにリボザイムが挙げられる。
【００３３】
また更に、他の生物活性剤としては、ミトーテン、ハロニトロソ尿素（ｈａｌｏｎｉｔｒｏｓｏｕｒｅａｓ）、アントラサイクリン（ａｎｔｈｒｏｃｙｃｌｉｎｅｓ）、エリプチシン（ｅｌｌｉｐｔｉｃｉｎｅ）、セフタジジム、オキサプロジン、バラシクロビル、ファムシクロビル、フルタミド、エナラプリル、メトホルミン（ｍｅｆｆｏｒｍｉｎ）、イトラコナゾール、ガバペンチン、ホシノプリル、トラマドール、アカルボース、ロラゼパム（ｌｏｒａｚｅｐａｎ）、ホリトロピン、オメプラゾール、リシノプリル、トラマドール（ｔｒａｍｓｄｏｌ）、レボフロキサシン、ザフィルルーカスト、顆粒球刺激因子、ニザチジン、ブプロピオン、ペリンドプリル、エルブミン（ｅｒｂｕｍｉｎｅ）、アデノシン、アレンドロネート（ａｌｅｎｄｒｏｎａｔｅ）、アルプロスタジル、ベタキソロール、硫酸ブレオマイシン、デキスフェンフルラミン、フェンタニル、ゲムシタビン、酢酸グラチラマー（ｇｌａｔｉｒａｍｅｒ ａｃｅｔａｔｅ）、グラニセトロン、ラミブジン、マンガフォジピール三ナトリウム（ｍａｎｇａｆｏｄｉｐｉｒ ｔｒｉｓｏｄｉｕｍ）、メサラミン（ｍｅｓａｌａｍｉｎｅ）、フマル酸メトプロロール、ミグリトール（ｍｉｇｌｉｔｏｌ）、モエキシプリル（ｍｏｅｘｉｐｒｉｌｌ）、モンテルカスト、酢酸オクトレオチド、オロパタジン、パリカルシトール（ｐａｒｉｃａｌｃｉｔｏｌ）、ソマトロピン、コハク酸スマトリプタン、タクリン、ナブメトン、トロバフロキサシン（ｔｒｏｖａｆｌｏｘａｃｉｎ）、ドラセトロン（ｄｏｌａｓｅｔｒｏｎ）、フィナステリド、イスラジピン（ｉｓｒａｄｉｐｉｎｅ）、トルカポン（ｔｏｌｃａｐｏｎｅ）、エノキサパリン、フルコナゾール、ランソプラゾール、パミドロネート、ジダノシン、ジクロフェナク、シサプリド、ベンラファキシン、トログリタゾン、フルバスタチン、ロサルタン、イミグルセラーゼ、ドネペジル、オランザピン、バルサルタン、フェキソフェナジン、アダパレン（ａｄａｐａｌｅｎｅ）、メシル酸ドキサゾシン、モメタゾンフランカルボン酸エステル（ｍｏｍｅｔａｓｏｎｅ ｆｕｒｏａｔｅ）、ウルソジオール、フェロジピン、塩酸ネファゾドン（ｎｅｆａｚｏｄｏｎｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、バルルビシン（ｖａｌｒｕｂｉｃｉｎ）、アルベンダゾール、酢酸メドロキシプロゲステロン、塩酸ニカルジピン、酒石酸ゾルピデム、ルビテカン（ｒｕｂｉｔｅｃａｎ）、アムロジピンベシレート／塩酸ベナゼプリル、塩酸パロキセチン、ポドフィロックス、二塩酸プラミペキソール（ｐｒａｍｉｐｅｘｏｌｅ ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、フマル酸クエチアピン、カンデサルタン、シレキセチル（ｃｉｌｅｘｅｔｉｌ）、リトナビル、ブスルファン、フルマゼニル、リスペリドン、カルバマゼピン（ｃａｒｂｅｍａｚｅｐｉｎｅ）、カルビドパ、レボドパ、ガンシクロビル、サキナビル、アンプレナビル、塩酸セルトラリン、クロブスタゾール（ｃｌｏｂｕｓｔａｓｏｌ）、ジフルコルトロン、プロピオン酸ハロベタゾール（ｈａｌｏｂｅｔａｓｏｌｐｒｏｐｒｉｏｎａｔｅ）、クエン酸シルデナフィル、クロルタリドン、イミキモッド、シンバスタチン、シタロプラム、塩酸イリノテカン、スパルフロキサシン���エファビレンツ、塩酸タムスロシン、モファフィニル（ｍｏｆａｆｉｎｉｌ）、レトロゾール（ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ）、塩酸テルビナフィン、マレイン酸ロシグリタゾン（ｒｏｓｉｇｌｉｔａｚｏｎｅ ｍａｌｅａｔｅ）、塩酸ロメフロキサシン、塩酸チロフィバン、テルミサルタン、ジアゼパム（ｄｉａｚｅｐａｍ）、ロラタジン、クエン酸トレミフェン、サリドマイド、ジノプロストン、塩酸メフロキン、トランドラプリル、塩酸ミトザントロン、トレチノイン、エトドラク、メシル酸ネルフィナビル（ｎｅｌｆｉｎａｖｉｒ ｍｅｓｙｌａｔｅ）、インジナビル（ｉｎｄｉｎａｖｉｒ）、ニフェジピン、セフロキシム、及びニモジピンが挙げられる。
【００３４】
これらの薬剤は当業者の知識の範囲内であり、例えば、実施形態において、抗微生物剤（例えば、トリクロサン（ｔｒｉｃｌｏｓａｎ）（２，４，４’−トリクロロ−２’−ヒドロキシジフェニルエーテルとしてもまた公知）、クロルヘキシジン及びその塩（酢酸クロルヘキシジン、グルコン酸クロルヘキシジン、塩酸クロルヘキシジン、及び硫酸クロルヘキシジンが挙げられる）、銀及びその塩（酢酸銀、安息香酸銀、炭酸銀、クエン酸銀、ヨウ素酸銀、ヨウ化銀、乳酸銀、ラウリン酸銀、硝酸銀、酸化銀、パルミチン酸銀、プロテイン銀、及びスルファジアジン銀が挙げられる）、ポリミキシン、テトラサイクリン、アミノグリコシド（例えば、トブラマイシン及びゲンタマイシン）、リファンピシン、バシトラシン、ネオマイシン、クロラムフェニコール、ミコナゾール、キノロン（例えば、オキソリン酸、ノルフロキサシン、ナリジクス酸、ペフロキサシン（ｐｅｆｌｏｘａｃｉｎ）、エノキサシン及びシプロフロキサシン）、ペニシリン（例えば、オキサシリン及びピプラシル（ｐｉｐｒａｃｉｌ））、ノンオキシノール９、フシジン酸、セファロスポリン）は、微生物増殖の処置のために単独又は組み合わせて用いられ得る。さらに、抗菌性タンパク質及び抗菌性ペプチド（例えば、ラクトフェリン及びラクトフェリシンＢ（ｌａｃｔｏｆｅｒｒｉｃｉｎ Ｂ））ならびに抗菌性多糖（例えば、フカン（ｆｕｃａｎ）及びその誘導体）は、微生物を殺す、又は微生物の増殖を防ぐために生物活性薬剤として含有され得る。
【００３５】
生物活性薬剤の含有量は、本発明のシート又はフィルムが適用される患者によって、一概には決定できず、適宜、調整することができる。なお、生物活性薬剤は、必要に応じて、公知の被膜剤で被覆したり、担体に吸着させたり、あるいは、リポソーム、マイクロカプセル、シクロデキストリン等で封入して用いてもよい。
【００３６】
［乳化剤］
また、本発明のシート又はフィルムは、前記以外に乳化剤を含有することができる。乳化剤によって、油溶性成分を含有する事が出来る。またシート又はフィルムの可塑性を制御することができる。生物活性薬剤と併用する場合には、乳化剤によって生物活性薬剤の体内への吸収を促進させるなど、体内への吸収性を制御することができる。
【００３７】
乳化剤としては、公知の乳化剤を用いることができる。例えば、リン脂質や、アニオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、ノニオン界面活性剤、両性界面活性剤を用いることができる。具体的には、グリセリン脂肪酸エステル、ラウリル硫酸ナトリウム、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、アルキルスルホン酸、アルキルベンゼンスルホン酸、ポリオキシエチレンアルキルエーテルスルホン酸、大豆由来レシチン、及びこれらの塩等が例示される。これらは単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。合成品であっても市販品であってもよい。
【００３８】
乳化剤の含有量としては、リン酸化プルラン１００質量部に対して、シート又はフィルムの柔軟性を向上させる観点、あるいは、生物活性薬剤を溶解又は良分散させる観点から、好ましくは２質量部以上、より好ましくは１０質量部以上、更に好ましくは１５質量部以上であり、シート又はフィルムの取扱い性の観点から、好ましくは６０質量部以下、より好ましくは５０質量部以下、更に好ましくは４０質量部以下である。
【００３９】
また、シート又はフィルム中の乳化剤の含有量としては、シート又はフィルムの柔軟性を向上させる観点、あるいは、生物活性薬剤を溶解又は良分散させる観点から、好ましくは５質量％以上、より好ましくは１０質量％以上、更に好ましくは１５質量％以上であり、シート又はフィルムの取扱い性の観点から、好ましくは３５質量％以下、より好ましくは３０質量％以下、更に好ましくは２５質量％以下である。
【００４０】
また、本発明のシート又はフィルムは、前記以外にその他の添加剤を含有することができる。その他の添加剤としては、甘味料、香料、着色剤、顔料、保存料、酸化防止剤、無機フィラー、有機フィラーなどが挙げられる。これらの含有量は、本発明の効果を損なわない範囲内で、適宜調整することができるが、生体内への適用を考慮すると、好ましくは５質量％以下、より好ましくは１質量％以下であることが望ましい。
【００４１】
本発明のシート又はフィルムは、リン酸化プルランを含有するリン酸化プルラン組成物からなるものであればよく、例えば、リン酸化プルランを溶媒に溶解し、そこに、必要により、可塑剤、生物活性薬剤、乳化剤の他、各種添加剤を添加して混合したものを展延し、乾燥して固化することによって調製することができる。ここで、生物活性薬剤と乳化剤は別途混合してから添加してもよい。
【００４２】
用いられる溶媒としては、リン酸化プルランを溶解することができるものであればよく、例えば、水、エタノール、酢酸、アセトン等が例示される。これらは単独で又は２種以上組み合わせて用いることができる。なかでも、水が好ましい。また、溶解時の温度としては特に限定はなく、例えば、２０〜４０℃が例示される。必要により、溶液の脱泡処理を行なってもよい。
【００４３】
また、リン酸化プルラン組成物を展延する方法としては、例えば、組成物の溶液を成形型に流し込んで固化させる方法や、刷毛やへら、キャスティング、印刷法等により支持体上に塗布して固化させる方法が挙げられる。
【００４４】
なお、本発明においては、支持体にシートを用いて、その上に、本発明のリン酸化プルラン組成物の層を積層したものを本発明のシート又はフィルムとすることができる。支持体シートは使用時には剥離されて、リン酸化プルラン組成物からなるシート又はフィルムが貼付されることになる。支持体シートとしては特に限定されないが、具体的には、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ナイロン、ポリ塩化ビニル、ポリエチレン、ポリプロピレン等のプラスチックフィルム、金属箔、及び、これらから選ばれる１種又は２種以上のフィルムを積層したラミネートフィルム等が挙げられる。
【００４５】
乾燥温度は用いた溶媒が蒸発するのであれば、溶媒の種類に応じて適宜調整することができる。
【００４６】
また、本発明のシート又はフィルムは、複数のリン酸化プルラン組成物層を積層したものであってもよく、公知の他の層を積層したものであってもよく、これらが組み合わさったものでもよい。複数のリン酸化プルラン組成物層を積層する場合は、例えば、層によって生物活性薬剤の種類や配合有無、含有量を調整したものを積層して作製することができる。公知の層を積層する場合は、詳細は、後述の「他の層を設ける態様」の項で説明するが、例えば、リン酸化プルラン組成物層の溶解性を制御する観点から、エチルセルロース（ＥＣ）、ヒプロメロースフタル酸エステル（ＨＰＭＣＰ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、かんてん、カラギーナン、ツェイン等を含有する被覆用の層を用いることができる。被覆用の層は生体に吸収される材料からなるものであり、公知技術に従って調製することができる。例えば、前記した原料を水に溶解し、本発明のシート又はフィルムと同様にして調製することができる。よって、本発明のシート又はフィルムの一態様としては、例えば、支持体シート上に、リン酸化プルラン組成物層、被覆用の層をこの順に積層したものが挙げられる。積層方法としては特に限定はなく、例えば、各層を個別に調製してから貼り合せてラミネートしてもよく、あるいは、既に形成された層の上に順に展延して積層してもよい。
【００４７】
かくして本発明のシート又はフィルムが得られる。本発明のシート又はフィルムの厚みとしては、下限は１０μｍ、２０μｍ、３０μｍ、５０μｍ程度であり、上限は２０００μｍ、１５００μｍ、１２００μｍ、８００μｍ、５００μｍ、３００μｍ、２００μｍ程度であり、適用箇所や生物活性薬剤を含有させる場合はその放出性に応じて、適宜設定することができる。なお、ここでの厚みとは、リン酸化プルラン組成物層の厚みのことであり、複数のリン酸化プルラン組成物層を積層させた場合には合計厚みのことである。また、一般に、「シート」とは厚みが１〜数ｍｍ程度のものであるのに対し、「フィルム」はシートよりも厚みが薄く（厚さ１０〜数１００μｍ）、薄膜を指すことが多く、両者は慣用的に区別されている。
【００４８】
本発明のシート又はフィルムの形状としては、円形、楕円形、角型（正方形、長方形、ひし形など）、星型、ハート型等、またはパンチング等任意に決定することができる。また、その面積は、シート又はフィルムの厚みに応じて一概には設定することができず、適用箇所やその目的に応じて調整することができる。例えば、０．５ｃｍ２〜５０００ｃｍ２程度、好ましくは２ｃｍ２〜３０００ｃｍ２程度である。
【００４９】
本発明のシート又はフィルムは、生体内の臓器や組織の傷害を修復あるいは再生するために用いることができる。具体的には、生体内の臓器（心臓、肺、肝臓、胃、腸、胆嚢、膵臓、脾臓、腎臓、膀胱、生殖器など）、皮膚、粘膜、神経系組織（抹消神経、脳や脊髄などの中枢神経）、骨・関節（骨、軟骨、靭帯、腱、など）、軟部組織（皮下結合組織、筋膜、筋肉、脂肪組織など）、脈管系組織（血管、リンパ管）において、創傷部、欠損部、又は脆弱部等に、本発明のシート又はフィルムを、支持体シートを含む場合は支持体シートを剥離した後、リン酸化プルラン組成物層が直接患部に接触するように貼付して用いることができる。ここで、本発明における「生体内」という用語には、生体の内部に貼付した場合のみならず。例えば、口腔内の粘膜表面や、皮膚表面などにシート又はフィルムを貼付した場合、一面は生体内で他面は生体外に露出しているような場合も包含するものである。従って、創傷部、欠損部、又は脆弱部等に対して本発明のシート又はフィルムを貼付することは、本明細書においては、生体内の臓器や組織の傷害を修復あるいは再生するためのものである。よって、本発明の一態様として、本発明のシート又はフィルムを含む、生体内の臓器又は組織における創傷部、欠損部、又は脆弱部等の被覆材を提供する。かかる被覆材は、例えば、創傷被覆、臓器の欠損部及び脆弱部等の補強、縫合し難い部位の補強、止血（出血防止）、空気漏れの防止等に用いることができる。
【００５０】
また、本発明のシート又はフィルムが生物活性薬剤を含有する場合には、その薬剤に対応する疾患に適宜用いることができる。例えば、感染症の場合は、感染を抑制する薬剤等（抗菌薬、抗ウイルス薬、抗真菌薬、殺菌薬など）を含有するフィルムを感染巣に直接接触するように貼付することで感染を沈静化することができる。上皮性腫瘍や非上皮性腫瘍の場合は、抗腫瘍薬（抗がん剤や抗体、低分子化合物など）を含有するフィルムを腫瘍部に貼付することで抗腫瘍効果を発揮できる。組織損傷部や欠損部には、成長因子やサイトカインなどの液性因子を含有したフィルムを使用することで組織修復・再生を図ることが可能となる。炎症鎮静や鎮痛・解熱に関しては、抗炎症薬（ステロイド系、非ステロイド系抗炎症薬）や免疫原性薬剤等を含有したフィルムを使用する。出血に対しては、抗凝固剤を含有したフィルムを出血部位に貼付する。麻酔薬を含有したフィルムを皮膚や粘膜に貼付して針を使わない局所麻酔が可能になる、などが例示される。本発明のシート又はフィルムの使用量、使用回数、使用期間は、含有される生物活性薬剤の種類によっても異なり、該生物活性薬剤の有効量に応じて、使用目的及び貼付対象である患者の年齢、体重、症状によって適宜設定され一定ではない。
【００５１】
本発明の別の態様として、前記被覆材や生物活性薬剤を含有する本発明のシート又はフィルムの一部又は全部に表面処理を行い、あるいは本発明のシート又はフィルム以外の他の層を設けてもよい。
【００５２】
［表面処理を行う態様］
表面処理としては、リン酸化プルランの水酸基の部分の化学修飾などが挙げられる。例えば、表面を疎水化したり、架橋構造を導入するなどが例示でき、前記化学修飾は公知の方法に従って行うことができ、また、水酸基と反応するものであれば何でも良いが、エーテル化剤、エステル化剤、アセタール化剤、イソシアネート、イソチオシアネート、カルバモイルクロリド、チオカルバモイルクロリド、シランカップリング剤、塩化スルホニル、スルホン酸無水物、ポリマー、その他高分子用架橋剤等を用いて化学修飾することなどが考えられる。これらの化学修飾によりリン酸化プルランの溶解性を制御することができ、本発明のシート又はフィルムに含まれる薬剤に徐放性を付与するなど、徐放性の制御が可能となる。したがって、リン酸化プルランの溶解性、薬剤の徐放性が制御されたリン酸化プルラン含有の生体吸収性シート又はフィルムを提供することも、本発明の一つの態様である。
【００５３】
エーテル化剤としては、メチルクロライド、エチルクロライド等のハロゲン化アルキル；炭酸ジメチル、炭酸ジエチル等の炭酸ジアルキル；硫酸ジメチル、硫酸ジエチル等の硫酸ジアルキル；エチレンオキサイド、プロピレンオキサイド等のアルキレンオキサイド等も好ましい。例えば、エチレンオキサイドガスなどが好適に使用される。また、アルキルエーテル化に限定されるものではなく、ベンジルブロマイド等によるエーテル化等も好ましい。
【００５４】
エステル化剤としては、ヘテロ原子を含んでも良いカルボン酸、酸無水物、カルボン酸ハロゲン化物、ケテン、ジケテンなどが挙げられ、酢酸、プロピオン酸、酪酸、アクリル酸、メタクリル酸及びこれらの誘導体が使用でき、例えば、無水酢酸などが好ましい。無水酢酸を用いる場合、無水酢酸の溶液にリン酸化プルランのフィルムを浸漬したり、あるいは無水酢酸の蒸気で処理してもよい。また、リン酸エステル化剤として塩化ホスホリルなどを使用することができる。化学修飾により導入する官能基としては、例えば、アセチル基、メタ クリロイル基、プロパノイル基、ブタノイル基、ｉｓｏ−ブタノイル基、ペンタノイル基 、ヘキサノイル基、ヘプタノイル基、オクタノイル基、メチル基、エチル基、プロピル基 、ｉｓｏ−プロピル基、ブチル基、ｉｓｏ−ブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル基、ペンチル基 、ヘキシル基、ヘプチル基、オクチル基等が挙げられる。
【００５５】
アセタール化剤としては、アルデヒドが挙げられる。アルデヒドは水酸基をアセタール反応することができるものであればよく、特に限定されるものではない。反応性およびコストから、ホルムアルデヒド、アセトアルデヒド、プロピオンアルデヒド、ノルマルブチルアルデヒ ドなどが好ましく、2種類以上を組み合わせても良い。
【００５６】
イソシアネートとしては、イソシアン酸メチル、エチルイソシアネート、イソプロピルイソシアネート、イソブチルイソシアネート、トリクロロメチルエチルイソシアネート、クロロエチルイソシアネート、イソプロピルイソチオシアネート、イソブチルイソチオシアネート、ジフェニルメタンイソシアネート、ヘキサメチレンジイソシアネート、トルエンジイソシアネート、イソホロンジイソシアネートなどが挙げられる。
【００５７】
イソチオシアネートとしては、メチルイソチオシアネート、エチルイソチオシアネート、イソプロピルイソチオシアネート、イソブチルイソチオシアネート、クロロエチルイソチオシアネート、n−オクチルイソチオシアネート、シクロヘキシルイソチオシアネート、フェニルイソチオシアネート、１，４−フェニレンジイソチオシアネートなどが挙げられる。
【００５８】
カルバモイルクロリドとしては、ジメチルカルバモイルクロリド、ジエチルカルバモイルクロリド、ジフェニルカルバモイルクロリド、ビス（２−クロロエチル）カルバモイルクロリド、N―メトキシ−Ｎ−メチルカルバモイルクロリド、４−モルフォリニルカルバモイルクロリドなどが挙げられる。
【００５９】
チオカルバモイルクロリドとしては、ジメチルチオカルバモイルクロリド、ジエチルカルバモイルクロリド、ジフェニルカルバモイルクロリドなどが挙げられる。
【００６０】
シランカップリング剤としては、ビニルシラザン、ヘキサメチルジシラザン、テトラメチルジシラザン、ジフェニルテトラメチルジシラザンなどのシラザン類；トリメチルクロロシラン、ジメチルジクロロシラン、メチルトリクロロシラン、ビニルトリクロロシランなどのクロロシラン類；トリメチルメトキシシラン、ジメチルジメトキシシラン、メチルトリメトキシシラン、ビニルトリメトキシシラン、ｎ−ブトキシトリメチルシラン、ｔｅｒｔ−ブトキシトリメチルシラン、ｓｅｃ−ブトキシトリメチルシラン、イソブトキシトリメチルシラン、エトキシトリエチルシラン、オクチルジメチルエトキシシラン又はシクロヘキシルオキシトリメチルシランなどのアルコキシシラン類；ブトキシポリジメチルシロキサンのようなアルコキシシロキサン類；ビニルトリアセトキシシラン、ビニルトリス（メトキシエトキシ）シラン、ビニルトリメトキシシラン、ビニルトリエトキシシラン、アリルトリメトキシシランなどのシランカップリング剤類；トリメチルシリルクロライドや、ジフェニルブチルクロライド等のシリルハライドや、ｔ−ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホネート等のシリルトリフルオロメタンスルホネートが適用可能であり、トリメチルメトキシシラン、ジメチルジメトキシシラン、メチルトリメトキシシラン、ヘキサメチルジシラザン、トリメチルクロロシラン等が好適である。
【００６１】
塩化スルホニルとしては、塩化メタンスルホニル、塩化エタンスルホニル、塩化クロロメチルスルホニル、メタンジスルホニルジクロリド、ｐ−トルエンスルホニルクロリドなどが挙げられる。
【００６２】
スルホン酸無水物としては、ベンゼンスルホン酸無水物、トリフルオロメタンスルホン酸無水物、ｐ−トルエンスルホン酸無水物などが挙げられる。
【００６３】
ポリマー等を用いる表面修飾としては両親媒性ポリマーを用いることが出来る。両親媒性のポリマーとは、ポリマーのユニット中に親水性成分と親油性成分を併せもつポリマーであり、有機溶媒、水の両者中においてそれぞれ溶解分散する性質を有している。側鎖に親水性成分と親油性成分を併せもつ単独モノマーからなるホモポリマーでもよく、親水性成分モノマーと親油性成分モノマーを共重合させた、共重合 ポリマーでも良い。親水性成分と親油性成分を併せもつ単独モノマーとしては、例えば（ポリオキシアルキレン）アクリレート及びメタクリレートがある。また、親水性成分モノマーと親油性成分モノマーを共重合させて両親媒性のポリマーを作成しても良い。その際には、重合方法が容易でかつモノマー種類の豊富なアクリル系樹脂が好ましく、アクリル系樹脂としては、アクリルモノマーだけによるホモポリマーでもよく、またアクリルモノマーを基本として他のモノマーと共重合してもよい。アクリルモノマーとしては、一般的なアクリル酸、メタクリル酸、アクリル酸メチル、メタクリル酸メチル、アクリルクロリド、メタクリルクロリドまたは無水アクリル酸等が挙げられる。
【００６４】
［他の層を設ける態様］
本発明のシート又はフィルム以外の他の層を設ける態様、即ち、他の層を積層した複層構造とすることも本発明の一つの態様であり、貼付側の反対側に他の層を設ける態様が挙げられる。このような態様とすることで、生体内で使用する場合には生物活性薬剤が体液中に漏洩することを抑制でき、皮膚等に使用する場合には生物活性薬剤の揮発を抑制できる。
【００６５】
他の層としては、前記の被覆用の層の他に、生体適合性高分子や、その他の一般的な素材を含む層が挙げられる。
【００６６】
生体適合性高分子としては、ポリ乳酸（PLA）、ポリグリコール酸（PGA）、ポリカプロラクトン（PCL）、およびそれらの共重合体をベースとするポリ（エステル）、PHB-PHV系のポリ（ヒドロキシアルカン酸）類、その他のポリ（エステル）類、デンプン、セルロース、キチン、キトサン、ゼラチン、コンドロイチン硫酸及びその塩、ヒアルロン酸及びその塩、アルギン酸及びその塩、デキストラン、デキストリン、コラーゲンなどの天然高分子、ポリカーボネート、ポリウレタン、ポリペプチド、ポリエチレンオキシド（PEO）、ポリエチレンオキシド（PEO）とポリ（テレフタル酸ブチレン）（PBT）のマルチブロック共重合体、エチレンー酢酸ビニル共重合体等が挙げられる。
【００６７】
その他一般的な素材としては、ポリエチレン（ＰＥ）、高密度ポリエチレン、中密度ポリエチレン、低密度ポリエチレン、ポリプロピレン（ＰＰ）、ポリ塩化ビニル（ＰＶＣ）、ポリ塩化ビニリデン、ポリスチレン（ＰＳ）、ポリ酢酸ビニル（ＰＶＡｃ）、テフロン（登録商標）（ポリテトラフルオロエチレン、ＰＴＦＥ）、ＡＢＳ樹脂（アクリロニトリルブタジエンスチレン樹脂）、ＡＳ樹脂、アクリル樹脂（ＰＭＭＡ）、ポリアクリロニトリル、エチレンービニルアルコール共重合体、ポリアミド（ＰＡ）、ナイロン、ポリアセタール（ＰＯＭ）、変性ポリフェニレンエーテル（ｍ−ＰＰＥ、変性ＰＰＥ、ＰＰＯ）、ポリブチレンテレフタレート（ＰＢＴ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、グラスファイバー強化ポリエチレンテレフタレート（ＧＦ−ＰＥＴ）、環状ポリオレフィン（ＣＯＰ）、ポリフェニレンスルファイド（ＰＰＳ）、ポリテトラフロロエチレン（ＰＴＦＥ）、ポリスルホン、ポリエーテルサルフォン、非晶ポリアリレート、液晶ポリマー、ポリエーテルエーテルケトン、熱可塑性ポリイミド（ＰＩ）、ポリアミドイミド（ＰＡＩ）などが挙げられる。これらの一般的な樹脂は、種類も豊富であるため、本発明の用途にそって単品のみならず、樹脂の種類や分子量を組み合わせることが可能である。
【００６８】
本発明のシート又はフィルムに他の層を積層する方法としては、特に限定されるものでないが、ドライラミネート、押出ラミネート、ウェットラミネートなど公知の方法により積層することができる。
【００６９】
また更に、本発明のシート又はフィルムは、生体内の臓器や組織に適用する際に、予め生体内組織の再生又は再建材料や生物活性薬剤を当該箇所に適用しておき、その上からリン酸化プルラン組成物層が当該材料や生物活性薬剤を被覆するようにして貼付し使用することもできる。これにより、生体内組織の再生又は再建材料や生物活性薬剤の漏洩や拡散を防止したり、固定化が容易になるという効果が奏される。よって、本発明のシート又はフィルムの一態様として、生体内組織の再生又は再建材料の漏洩又は拡散防止材あるいは固定材が挙げられる。同様に、別の態様として、生物活性薬剤の漏洩又は拡散防止材が挙げられる。具体的には、本発明のシート又はフィルムは、人工硬膜、癒着防止膜、歯周組織再生膜、スキャホールド、骨固定材、接着材等として用いることができる。
【００７０】
本明細書において、生体内組織の再生又は再建材料としては、骨補填材（人工骨（ペーストタイプ、顆粒タイプ））等を用いることができる。生物活性薬剤としては、上記したものを用いることができる。本発明のシート又はフィルムは、湿潤下での強度及び接着性に優れることから、生体内組織の再生又は再建材料や生物活性薬剤の形態は特に限定されず、ペーストタイプ、粉末状、顆粒タイプ、スポンジタイプ、液状など、各種形態のものを用いることができる。
【実施例】
【００７１】
以下、実施例を示して本発明を具体的に説明する。なお、この実施例は、単なる本発明の例示であり、何ら限定を意味するものではない。例中の部は、特記しない限り質量部である。また、「常温」とは２５℃を示す。
【００７２】
製造例１（リン酸化プルランの合成）
内容積２Ｌのセパラブルフラスコを用いて、プルラン（林原商事社製）４０．０ｇを蒸留水２００ｍＬに室温で溶解させた。この溶液を攪拌しながら、１Ｍのリン酸水溶液（水酸化ナトリウムでｐＨを５．５に調整したもの）１０００ｇを１０分かけて添加し、添加後さらに１時間攪拌を継続した。その後、１００℃から１０３℃の間で蒸留水約１１００ｍＬを留去し、続いて、１７０℃で３時間攪拌を継続した後、反応物を室温まで冷却した。反応物を取り出し、乳鉢で粉砕することで茶色固体９８．４ｇを得た。
【００７３】
上記で得られた茶色固体９０ｇを蒸留水１５００ｍＬに溶解させた。この溶液を攪拌しながら、そこに９９．５％エタノール１５００ｍＬを１０分かけて添加した。添加と同時に、析出物の生成が確認された。添加終了後、さらに１時間攪拌を継続した。その後、静置して分層し、上澄みを傾斜法により取り除いた。その後、残存した沈殿を再度蒸留水１５００ｍＬに溶解させ、９９．５％エタノール１５００ｍＬを１０分かけて添加、沈殿を回収した。前記の操作をさらに２度行った後、この沈殿を蒸留水（４００ｍＬ）に溶解させ、該溶液を攪拌している９９．５％エタノール（２０００ｍＬ）に少しずつ５分かけて添加した。析出した沈殿を、桐山ロート（３Ｇ）で濾取し、９９．５％エタノール（５００ｍＬ）で洗浄後、減圧下６０℃で１２時間乾燥させ、やや茶色かかった白色固体が２８．５ｇ得られた。さらに、この白色固体２５ｇを蒸留水に溶解させ、この溶液を小型卓上電気透析装置（マイクロアシライザーＳ３、サンアクティス製）にかけることによりリン酸化プルラン１３ｇを透明感のある薄茶色の固体として得た。
【００７４】
得られた固体のＩＲ分析（島津製作所製、ＦＴＩＲ−８２００ＰＣ）（ＫＢｒ錠剤法）を行ったところ、リン酸基部位に由来するピークが１０００〜１２００ｃｍ−１に観測された。また、３１Ｐ−ＮＭＲ（日本電子社製、ＪＮＭ−ＬＡ５００）を測定したところ２〜５ｐｐｍにプルランにエステル結合しているリン酸のリン由来のシグナルが得られた。ＩＣＰ発光分析（ジャーレルアッシュ社製、ＩＲＩＳ−ＡＰ）によりリン原子の元素分析を行い、その結果から、プルランの水酸基の約８．８個数％がリン酸化されたと判断された。またさらに、ＧＰＣ分析（カラム：ＴＳＫｇｅｌ  α−Ｍ（東ソー社製）、移動相：０．１Ｍ−ＮａＣｌ水）を行った結果、数平均分子量（Ｍｎ）は２２０００であった。
【００７５】
試験例１
生分解性ポリマーの種類による、フィルムの湿潤下での強度を調べた。
【００７６】
具体的には、１９ｍＬの蒸留水に表１に示す量の原料を溶解し、得られた溶液をアスピレーターにて減圧、脱泡後、手引きで展延し、ドライヤーで乾燥（約５５℃）することにより厚さ７０μｍのフィルムを得た。なお、リン酸化プルランは製造例１のものを、プルランは局方品を、コラーゲンは新田ゼラチン社製を用いた。
【００７７】
得られたフィルムの物性を以下に示す方法により評価した。結果を表１に示す。
【００７８】
〔せん断応力〕
フィルムを３０×１００ｍｍに切り取り、片面１０μＬの水を用いて、両面それぞれを湿潤させたその両端を長辺方向に引っ張り荷重をかけ値を測定する。試料は４枚用い、その平均値を評価に用いる。
【００７９】
【表１】
2020022861.tif 000002
【００８０】
結果、プルランでは湿潤下でのせん断粘着力が小さく、リン酸化プルランのフィルムは、これまでの既存コラーゲンフィルムよりも湿潤下で高い粘着性を示す新しい生体吸収性フィルムであることが明らかである。
【００８１】
試験例２
乳化剤は有効成分の体内への吸収促進が期待できる成分であるが、有効成分の溶解又は分散の他、フィルムの強度などの物性にも影響することから、その添加量について検討を行った。
【００８２】
具体的には、１９ｍＬの蒸留水に表２に示す量の原料を、乳化剤（ショ糖脂肪酸エステル／ソルビット＝１／４（ｖ／ｖ））、可塑剤（グリセリン）、リン酸化プルラン（製造例１）の順で溶解し、得られた溶液をアスピレーターにて減圧、脱泡後、手引きで展延し、ドライヤーで乾燥（約５５℃）することにより厚さ７０μｍのフィルムを得た。
【００８３】
得られたフィルムの物性を以下に示す方法により評価した。結果を表２及び図１に示す。
【００８４】
〔引張強度試験〕
フィルムを３０×１００ｍｍに切り取り、その両端を長辺方向にデジタルフォースゲージに挟んで牽引し、フィルムが破断した時点での強さを引張強度とする。試料は４枚用い、その平均値を評価に用いる。引張強度が大きい程フィルム強度は高いことを示し、２ＭＰａ以上であれば貼付使用に問題ないものである。
【００８５】
〔溶解試験〕
水を入れたシャーレに１６．５×２２ｍｍに切り取ったフィルムを浮かべ、静止状態で溶解する様子を観察し、完全に溶解した時間を計測する。試料は４枚用い、その平均値を評価に用いる。溶解時間が長い程フィルムの溶解性が高いことを示すが、３０〜４５秒程度であれば生体使用に問題ないものである。
【００８６】
【表２】
2020022861.tif 000003
【００８７】
結果、フィルム強度は乳化剤の添加量が増加するに伴って減少する傾向にあり、８ＭＰａ程度で飽和することが分かった。フィルム強度の目安は２ＭＰａ程度であり、乳化剤を添加しても十分に強度を維持できることが示唆された。また、溶解試験では乳化剤の添加量に関わらず４０秒前後での溶解が認められた。
【００８８】
試験例３
フィルムが生物活性薬剤を含有する場合について、フィルム化が可能であるかを検討した。
【００８９】
具体的には、１９ｍＬの蒸留水に表３に示す量の原料を、乳化剤（ショ糖脂肪酸エステル／ソルビット＝１／４（ｖ／ｖ））、可塑剤（グリセリン）の順で溶解後、生物活性薬剤を混合し、更にリン酸化プルラン（製造例１）を添加して溶解することで、得られた溶液をアスピレーターにて減圧、脱泡後、手引きで展延し、ドライヤーで乾燥（約５５℃）して厚さ７０μｍのフィルムを得た。なお、生物活性薬剤については、塩化カルシウム（富田製薬社製）、エストラジオール（ZHEJIANG XIANJU PHARMACEUTICAL CO.,LTD.製）、ラロキシフェン（LKT Laboratories, Inc.製）、アルギニン（味の素製）、ゲンタマイシン（烟台只楚薬業有限公司製）を用いた。
【００９０】
得られたフィルムの物性を試験例２及び以下に示す方法により評価した。結果を表３に示す。
【００９１】
〔剥離試験〕
フェノール樹脂を生理食塩水で濡らし、１．５ｃｍ幅（長さ１０ｃｍ）にカットしたフィルムの下半分を貼り付けて乾燥させる。フェノール樹脂をデジタルフォースゲージに挟み、接着していない側のフィルムを１８０度方向に牽引し、フィルムがフェノール樹脂から完全に剥離した時点での強さを接着強度とする。試料は４枚用い、その平均値を評価に用いる。接着強度が大きい程フィルムの粘着力は高いことを示し、２.０Ｎ／１５ｍｍ幅程度であれば貼付使用に問題ないものである。
【００９２】
【表３】
2020022861.tif 000004
【００９３】
結果、生物活性薬剤の添加によリ、プラセボ（実施例３）と比較して引張強度が低下し、エストラジオール（実施例７）及びラロキシフェン（実施例８）は他に比べても低下度合いが大きくなることが判明した。しかし、これは生物活性薬剤が分散状態で配合しているからであると考えられ、また、いずれのフィルム強度も目安（２ＭＰａ程度）より十分に高いことから、生物活性薬剤を添加しても強度が十分なフィルムが得られることが明らかになった。また、溶解試験では生物活性薬剤の添加に関わらず４０秒前後での溶解が認められた。接着強度は、全ての処方において目標値（２．０Ｎ／１５ｍｍ幅程度）をほぼ満たす結果であることが分かった。
【００９４】
試験例４
フィルムが生物活性薬剤を含有する場合に、生物活性薬剤の乳化による影響を検討した。
【００９５】
具体的には、試験例３と同じ組成に関して、生物活性薬剤を乳化剤と予め混合して乳化させてから混合する以外は、試験例３と同様にしてフィルムを得た（厚さ７０μｍ）。
【００９６】
得られたフィルムの物性を試験例３と同様にして評価した。結果を表４に示す。
【００９７】
【表４】
2020022861.tif 000005
【００９８】
結果、乳化した生物活性薬剤を用いたとしても、フィルム物性に大きな影響を与えないことが明らかになった。
【００９９】
試験例５（薬理試験１）
マウス（Ｃ５７ＢＬ／６）の背部皮下、腰背筋上に実施例１０のフィルム（１０×１０ｍｍ）を埋植し、２４時間後にマウスを屠殺し、埋植部の組織を抽出した。組織中のゲンタマイシン薬剤濃度をＥＬＩＳＡ法で測定した（埋植一日後）。なお、参考のために、実施例１０のフィルムをＰＢＳ  １ｍＬ中に一晩放置し、翌日上清を回収し同様にしてゲンタマイシン薬剤濃度を測定した（フィルム含有量）。結果を図２に示す。なお、フィルム埋植時に、フィルムは組織に直ぐ馴染み、また、ピンセットでつまむと粘着性を示していることを確認した。
【０１００】
結果、ゲンタマイシン薬剤濃度は、ＰＢＳ中に溶解したものが３３１２６ｎｇ／ｍＬ、埋植一日後の組織中の濃度が１３ｎｇ／ｍＬであり、埋植後１日後には体内に吸収されたと考えられる。
【０１０１】
試験例６（止血実験）
実施例９で得られたアルギニンフィルムについて、その止血効果を検討した（図３）。マウスの肝臓表面をこすって傷をつけ、そこにアルギニンフィルムを静置した。フィルム静置により、肉眼的に出血が軽減した傾向があった。直後にフィルムを剥がしても、肝臓表面からの出血は確認できなかった。
【０１０２】
実施例１１
３０Ｌ反応缶に超純水２６Ｌ，食品添加物プルラン（プルラン／林原社製）３５０ｇ（仕込み基準）を仕込んだ。５０ｗ／ｖ％水酸化ナトリウム水溶液５８１ｍＬを内温２０〜２５℃で追加し、同温度範囲で１９時間撹拌した。内温を０℃まで冷却し、０〜１０℃で塩化ホスホリル２２９ｇを追加した。同温度範囲で１時間撹拌した後、内温を２０〜２５℃に調整し１５時間撹拌した。ＵＦ膜を用いて膜ろ過濃縮を行い、留去液が少なくなるまで濃縮した後、超純水を追加し、リン酸化プルラン水溶液とした。得られたリン酸化プルラン水溶液をスプレードライヤーにて粉末化し、リン酸化プルラン２８０ｇを得た。但し、水へ完全に溶解しないため、重量平均分子量は測定出来なかった。
【０１０３】
実施例１２
１０００ＬＧＬ反応缶にイオン交換水５０８Ｌ，食品添加物プルラン７ｋｇ（プルラン／林原社製）（仕込み基準）を仕込んだ。予め調製した水酸化ナトリウム水溶液（水酸化ナトリウム5.81 kg、イオン交換水18kg使用）を内温２０〜２５℃で追加し、同温度範囲で５時間撹拌後、内温０〜１０℃で塩化ホスホリル４．５６ｋｇを滴下した。同温度範囲で１時間撹拌した後、内温を２０〜２５℃に調整した。水酸化ナトリウム水溶液を更に添加し、終夜攪拌した。ＵＦ膜を用いて膜ろ過濃縮を行い、留去液が少なくなるまで濃縮した後、超純水を追加し、リン酸化プルラン水溶液とした。得られたリン酸化プルラン水溶液をスプレードライヤーにて粉末化し、リン酸化プルラン３．５ｋｇ（重量平均分子量２１０１１０）を得た。
【０１０４】
実施例１２の重量平均分子量は、以下の条件で測定する。
＜測定条件＞
測定機器：    高速液体クロマトグラフ
カラム：      ＴＳＫｇｅｌ ＧＭＰＷＸＬ（７．８ｍｍＩＤ×３９０ｍｍ）×２本連結
移動相：      ２００ｍＭ硝酸ナトリウム水溶液
流速：        １ｍＬ／ｍｉｎ
検出器：      示唆屈折検出器
カラム温度：  ４０℃
注入量：      １００μＬ
試料溶液：    ２ｍｇ／ｍＬ
（試料１０ｍｇに移動相５ｍＬを加えた後，振り混ぜて溶解）
測定： プルラン標準品にて較正曲線を作成し、重量平均分子量を計算
【０１０５】
実施例１３（溶解性の制御例１）
実施例６で調製したリン酸化プルランフィルム０．０２３６ｇを１２０℃に加熱した無水酢酸の蒸気で５分間処理を行った。未処理のリン酸化プルランフィルムは２時間、超純水に浸漬させると膨潤し、溶解した。一方、無水酢酸処理したリン酸化プルランは０．０９１６ｇに膨潤し、乾燥させると０．０１７６ｇとなった。これを水中に浸漬させると、乳化剤等は溶出してしまったが、リン酸化プルランフィルムとして、柔軟性はやや失われたが、フィルム状の形態を維持した。以上より、無水酢酸処理によりリン酸化プルランフィルムを難溶化できることがわかった。なお、無水酢酸に代えて塩化ホスホリルを使用して処理しても、同様に難溶化することができる。
【０１０６】
実施例１４（溶解性の制御例２）
リン酸化プルランの粉末についてエチレンオキサイドガス滅菌を行った。ガスに対する暴露時間を変えることにより、エチレンオキサイドガスとの反応量を変えて、その変化を観察した。その結果、エチレンオキサイドガス暴露時間が進むほど、リン酸化プルランが変性することがわかり、得られたリン酸化プルランは水に対して難溶性となったことから、エチレンオキサイドガスによる処理により、リン酸化プルランを水に対して難溶化できることがわかった。結果を図４に示す。図中の５％、１０％、２０％は、エチレンオキサイドガスの濃度を示す。
【０１０７】
実施例１５（２層構造の製造例）
公知のウェットラミネート法により、実施例５と同様にして調製したリン酸化プルランフィルムにポリグリコール酸不織布（製品名：ネオベール  ０．３ｍｍ厚）を貼り合せ、リン酸化プルラン層とポリグリコール酸不織布の２層構造シートを調製した。結果を図５、６に示す。
【０１０８】
実施例１６（骨形成モデル）
ラット脊椎横突起をドリルで削り、同部位に、ＢＭＰ−２を１μｇ／ｃｍ2配合する点を除くと同様にして調製したＢＭＰ−２を含有するリン酸化プルランフィルム（５ｍｍ角）を図７の位置に静置した。フィルムは直ちに組織に吸着し、はがす事は困難であった。図８中の丸で囲んだ部位に骨形成を期待できる。
【産業上の利用可能性】
【０１０９】
本発明の生体吸収性のシート又はフィルムは、医療分野において、例えば、外科手術の際に臓器や血管等の体内組織に貼付する医療用接着剤等として好適に用いることができる。
【符号の説明】
【０１１０】
１  リン酸化プルラン層
２  ポリグリコール酸不織布
【図１】
2020022861.tif 000006
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
2020022861.tif 000010
【図６】
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【図７】
2020022861.tif 000012
【図８】
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