(57)【要約】【課題】体液試料に含まれる分析物を決定するための診断試験エレメントを提供する。【解決手段】診断試験エレメント上に分離層を形成することができるコーティング組成物であって、固形成分として、コーティング組成物１００ｇ当たり２．０ｇ〜３．５ｇの量でケイ酸、及びコーティング組成物１００ｇ当たり１１．０ｇ〜１８．０ｇの量でＴｉＯ2を含む、コーティング組成物を用いる。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
体液試料に含まれる分析物を決定するための診断試験エレメントであって、前記試験エレメントが少なくとも１つの検出層及び少なくとも１つの分離層を有する少なくとも１つの試験フィールドを含み、前記少なくとも１つの分離層が分散−飽和固形成分及び約１．０〜１．６ｇ／ｍ2の量でＳｉＯ2を含む、診断試験エレメント。
【請求項２】
前記少なくとも１つの分離層がさらに、ＴｉＯ2を含む、請求項１に記載の診断試験エレメント。
【請求項３】
前記ＴｉＯ2が、約５．５〜９．０ｇ／ｃｍ2の量で存在する、請求項２に記載の診断試験エレメント。
【請求項４】
前記ＴｉＯ2が約０．１１：０．２９のＳｉＯ2：ＴｉＯ2比を形成する量で存在する、請求項１又は２に記載の診断試験エレメント。
【請求項５】
前記検出層及び分離層が鉄含有酸化剤を本質的に含まない、請求項１〜４のいずれか１項に記載の診断試験エレメント。
【請求項６】
前記鉄含有酸化剤がフェリシアン化カリウム（III ）である、請求項５に記載の診断試験エレメント。
【請求項７】
前記分散−飽和固形成分が、前記固形成分を、分離層を形成するコーティング組成物に、前記分散された固形成分の量のさらなる増加が観察され得ないよう最大値に達するまで（プラトー段階）、分散することにより得られた、請求項１〜６のいずれか１項に記載の診断試験エレメント。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の診断試験エレメント上に分離層を形成することができるコーティング組成物。
【請求項９】
前記組成物が、コーティング組成物１００ｇ当たり約２．０ｇ〜３．５ｇの量でケイ酸を含む、請求項８に記載のコーティング組成物。
【請求項１０】
前記組成物が、コーティング組成物１００ｇ当たり約１１．０ｇ〜１８．０ｇの量でＴｉＯ2を含む、請求項８又は９に記載のコーティング組成物。
【請求項１１】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の診断試験エレメントの製造方法であって、コーティング組成物において、分離層のための固形成分を、分散された固形成分のさらなる増加が生じないよう最大値に達するまで（プラトー段階）、分散し、前記コーティング組成物がコーティング組成物１００ｇ当たり約２．０ｇ〜３．５ｇの量でケイ酸を含む、方法。
【請求項１２】
前記コーティング組成物に、指標としてリンモリブデン酸を添加することをさらに含む、請求項１１に記載の方法。
【請求項１３】
前記リンモリブデン酸が、前記診断試験エレメントの試験フィールドに、前記コーティング組成物を添加する前、２日未満で、１日未満で、６時間未満で、３時間未満で、２時間未満で又は１時間未満で添加される、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
前記リンモリブデン酸が、前記コーティング組成物のｐＨ調節の後、添加される、請求項１２又は１３に記載の方法。
【請求項１５】
対象の試料における分析物、好ましくはグルコースの量を決定するための請求項１〜７のいずれか１項に記載の診断試験エレメントの使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、診断試験エレメントの製造分野に関する。特に、本発明は、体液試料に含まれる分析物を決定するための診断試験エレメントに関し、ここで前記試験エレメントは少なくとも１つの検出層及び少なくとも１つの分離層を有する少なくとも１つの試験フィールドを含み、前記少なくとも１つの分離層が約１．０〜１．６ｇ／ｍ2の量で分散されたＳｉＯ2を含む。本発明はまた、上記本発明の診断試験エレメント上に分離層を形成することができるコーティング組成物に関する。さらに、診断試験エレメントの製造方法、及び対象の試料における分析物、好ましくはグルコースの量を決定するための診断試験エレメントの使用が提供される。
【背景技術】
【０００２】
従来技術においては、体液の試料における分析物を検出するために使用され得る多くの診断試験エレメントが知られている。前記分析物は、例えば代謝物、例えばグルコースであり得る。分析物の定性的及び／又は定量的検出が実施され得る。既知分析物は例えば、グルコース、より特定には、血液グルコース、尿酸、エタノール及び／又はラクテートである。他方では又はさらに、他のタイプの分析物もまた検出できる。体液は例えば全血、血漿、間質液、唾液、尿、又は他のタイプの体液であり得る。本発明は、このたび、さらに可能な実施形態を制限することなく、全血液中のグルコースの検出を参照して実質的に記載される。
【０００３】
診断試験エレメントは、原則として、分析物の定性的及び／又は定量的検出のための少なくとも１つの検出試薬を含む。検出試薬は一般的に、少なくとも１つの分析物の存在下で、少なくとも１つの検出可能性質、より特定には、物理的に及び／又は化学的に検出可能な性質を変更する化学物質又は化学物質の混合物を意味するものとして理解されるべきである。好ましくは、この性質の変化は、検出されるべき少なくとも１つの分析物の存在下でのみ特異的に生じるが、しかし他の物質の存在下ではそうではない。しかしながら、実際、体液の試料における存在が一般的に、ありそうもなく、そして／又は非常に低い濃度でのみ存在する他の化学物質の存在下で、特定の制限内で、非特異的性質の変化を許容することが可能である。
【０００４】
少なくとも１つの性質変化は例えば、光学的に検出できる性質の変化、より特定には、色の変化であり得る。光学的試薬を有する診断試験の例は、従来技術において良く知られている。例えば、デンマーク特許第１９６２９６５６Ａ１号、デンマーク特許第１９６２９６５７Ａ１号、国際公開第２０１０／０５２３０６号又は欧州特許第０８２１２３４Ｂ１号は、支持体に存在し、そして色形成試薬を含む試薬システムにより、全血からの分析物を決定するための診断試験支持体を記載している。そのような診断試験支持体は、試料が添加される試料負荷側、及び光学的に検出可能な変化が分析物と試薬システムとの反応の結果として生じる検出側を有する試験フィールドを含む。試験フィールドは、試料に存在する赤血球が検出側に達しないよう構成される。さらに、試験フィールドは、透明スライド及び第１フィルム層、及びまた、その第１フィルム層に適用される第２フィルム層を有する。透明スライド上に位置する第１相は湿った状態で存在し、そしてそれにより、その上に積層する第２層よりも相当に低い光散乱性を示す。第１フィルムは、フィルターを含み、そのフィルターの屈折率は水の屈折率に近いが、第２層は、乾燥された第２層に基づいて、少なくとも２５重量％、又はさらに、２５重量％以上の濃度で、少なくとも又はさらに＞２．０、より特定には少なくとも２．２の屈折率を有する顔料を含む。例えば第１層は、フィルターとしてケイ酸アルミニウムを含むことができる。
【０００５】
しかしながら、実際、従来技術から知られている試薬エレメント、より特定には、少なくとも１つの試験フィールドを有する試験エレメントは、欠点及び技術的課題を有する。フィルム層の組成はバッチ毎に変動し得るので、変動がまた、例えば寛解変動のために、測定の間、起こり得る。現在、バッチ特異的校正曲線は、分析物の正確な測定を可能にするために、電子形式で、いわゆる「ＲＯＭ  Ｋｅｙｓ」として提供されている。しかしながら、各バッチ及びあらゆるバッチについての個々の校正曲線を適用する実務者にとってかなり厄介な測定である。さらに、混乱に起因する誤った校正曲線を使用する危険性が存在する。
【０００６】
校正曲線を包含するＲＯＭ−Ｋｅｙを交換するための混乱及び追加の作業を回避するために現在、実現されている可能性は、各エレメント上の、又は同じバッチからの複数の試験エレメントを含む雑誌上の診断試験エレメントについての校正情報の記憶である。しかしながら、この測定は、コスト集中的であり、そして各試薬エレメントは、例えばバーコードにより標識される必要があるか、又は１つのバッチの試験エレメントはバーコード標識された雑誌に保存される必要があるので、余分な製造工程を必要とする。
【０００７】
しかしながら、追加の製造工程を必要としないで実現され得る診断試験エレメントの測定品質を保護するための低コスト集中的対策が必要である。
【０００８】
本発明の根底にある技術的課題は、前述の必要性に応じるための手段及び方法の提供として見なされ得る。前記技術的課題は、請求項及び以下に特徴づけられる実施形態により解決される。
【発明の概要】
【０００９】
従って、本発明は、体液試料に含まれる分析物を決定するための診断試験エレメントに関し、ここで前記試験エレメントは少なくとも１つの検出層及び少なくとも１つの分離層を有する少なくとも１つの試験フィールドを含み、前記少なくとも１つの分離層は分散−飽和固形成分及び約１．０〜１．６ｇ／ｍ2の量でＳｉＯ2を含む。
【図面の簡単な説明】
【００１０】
【図１−１】図１は、異なったコーティング組成物についての異なった血液グルコース量（０ ｍｇ/ｄｌの 血液 （Ａ）; １０ ｍｇ/ｄｌの 血液（Ｂ）; ６０ ｍｇ/ｄｌの 血液（Ｃ）; １２０ ｍｇ/ｄｌの 血液（Ｄ）; ３００ ｍｇ/ｄｌの 血液（Ｅ）; ６００ ｍｇ/ｄｌの 血液（Ｆ））での寛解動態を示す。四角＝ＭＩＣ；ダークの三角＝ＯＡＦ、Ｋ３なしで、分散されたノーコード（ＮｏＣｏｄｅ）；空白の三角＝ＯＡＦを伴って、Ｋ３なしでのノーコード；ひし形＝ＯＡＦなしで、Ｋ３を伴ってのノーコード；クロス＝ＯＡＦ及びＫ３を伴ってのＭＩＣ。
【図１−２】図１−１に同じ。
【図１−３】図１−１に同じ。
【００１１】
【図２】図２は、ＯＡＦ、Ｋ３を伴わないで、分散されたノーコード対分散されていないノーコードコーティング組成物についての吸収容量（Ａ）及び吸収速度（Ｂ）の低下を示す。
【００１２】
【図３】図３は、低濃度グルコースでの％寛解の線状関係を示す。点線＝ＯＡＦ、Ｋ３を伴ってのノーコード；実線＝ＯＡＦを伴って、Ｋ３なしでのノーコード。
【００１３】
【図４−１】図４は、異なったコーティング組成物についての異なった血液グルコース量（０ ｍｇ/ｄｌの 血液 （Ａ）; １０ ｍｇ/ｄｌの 血液（Ｂ）; ４５ｍｇ/ｄｌの 血液（Ｃ）; １２０ ｍｇ/ｄｌの 血液（Ｄ）; ３００ ｍｇ/ｄｌの 血液（Ｅ）; ６００ ｍｇ/ｄｌの 血液（Ｆ））での寛解動態を示す。空白の四角＝ＯＡＦ及びＳｉＯ2を伴い、Ｋ３なしのノーコード；ダークの四角＝ＯＡＦ、ＳｉＯ2及びＫ３を伴ってのノーコード。
【図４−２】図４−１に同じ。
【図４−３】図４−１に同じ。
【００１４】
【図５−１】図５は、異なったコーティング組成物についての異なった血液グルコース量（０ ｍｇ/ｄｌの 血液 （Ａ）; １０ ｍｇ/ｄｌの 血液（Ｂ）; ６０ ｍｇ/ｄｌの 血液（Ｃ）; １２０ ｍｇ/ｄｌの 血液（Ｄ）; ３００ ｍｇ/ｄｌの 血液（Ｅ）; ６００ ｍｇ/ｄｌの 血液（Ｆ））での寛解動態を示す。四角＝ＭＩＣ（ＯＡＦなし、Ｋ３を有する）；クロス＝ＯＡＦ、ＳｉＯ2を伴い、Ｋ３なしでのノーコード。
【図５−２】図５−１に同じ。
【図５−３】図５−１に同じ。
【００１５】
【図６】図６は、ＯＡＦ及びＳｉＯ2を伴い、Ｋ３なしでのノーコードについての校正ユニコード曲線（Ａ）を示す。測定の精度が（Ｂ）に示されている。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
用語「診断試験エレメント（diagnostic test element）」とは、本明細書において使用される場合、試料適用及び分析のための少なくとも１つの試験フィールドを含む装置を意味する。従って、前記試験フィールドは分析物の存在又は非存在について試料を分析するための試薬を含む。典型的には、そのような試薬は、適用される試料における分析物の存在を認識し、そして決定をされるべき分析物の存在下で物理的及び／又は化学的特性の少なくとも１つの検出可能変化を経過するよう適合される、１又は２以上の検出剤を含む。典型的には、光学変化は、他の変化、例えば化学的変化又は電気化学的変化が考えられるが、光学的変化が分析物の存在下で誘発される。
【００１７】
そのような試験エレメント及びその製造の基礎をなす原理に関する詳細は、参照により本明細書に組込まれる、デンマーク特許第１９６２９６５７Ａ１号、デンマーク特許第１９６２９６５６Ａ１号又は欧州特許第０８２１２３４Ｂ１号に見出され得る。本発明に従って想定される、さらなる試験エレメントは、欧州特許第１０３５９１９Ｂ１号又は欧州特許第１０３５９２０Ｂ１号に開示されるそれらのエレメントであり、それらの特許のそれぞれの開示は参照により本明細書に組込まれる。１つの側面によれば、本発明の診断試験エレメントの層は、フィルム層であり、そしてポリマーフィルム形成剤の分散体又はエマルジョンから製造される。分散フィルム形成剤は、キャリア液体（通常、水）に不溶性であり、そしてキャリヤ液体に細かく分散される微細ポリマー粒子を含む。液体が、フィルム形成の間、蒸発により除去される場合、粒子はお互い接近し、そして微細に接触する。この工程で発生する大きな力、及びフィルム形成に伴う表面エネルギーのゲインが、実質的に閉鎖されたフィルム層に成長する粒子をもたらす。他方では、フィルム形成剤が溶媒に溶解されている、この形成剤のエマルジョンを使用することもまた可能である。溶解されたポリマーは、溶媒と不混和性であるキャリヤ液体において乳化される。ポリビニルエステル、ポリビニルアセテート、ポリアクリル酸エステル、ポリメタクリル酸、ポリビニルアミド、ポリアミド、ポリスチレンは、そのようなフィルム形成剤のためのポリマーとして特に適切である。ホモポリマーの他に、例えばブタジエン、スチレン又はマレイン酸エステルの混合重合物がまた適切である。
【００１８】
１つの実施形態によれば、分散及び／又は飽和分散は、本明細書の他の箇所に記載される方法の１つにより、又はPohl et al. (2005), Chemie Ingenieur Technik 77(3): 258-262及び欧州特許第２３６０１２０Ａ１号からの、当業者に知られている方法により達成される。また、１つの実施形態によれば、分散の程度は、本明細書の他の箇所に記載される方法の１つにより、又は上記参考文献Ｐｏｈｌ et al. 及び欧州特許第２３６０１２０Ａ１号からの当業者に知られている方法により決定される。特定の実施形態によれば、分散の飽和は、特にレーザー回折測定により、分散された粒子のサイズ分布を決定することにより、又は分散分析器、特にLUMiSizer（登録商標）(LUM GmbH, Berlin)を用いての分散の特徴付けにより決定される。
【００１９】
本発明の診断試験エレメントは、分析物の存在又は非存在又は量を決定するために使用され得ることが、上記から得られる。用語「量（amount）」とは、本明細書において使用される場合、診断試験エレメントに適用される試料に存在する分析物の絶対量又は相対量を意味する。本発明に係わる好ましい相対量は、濃度、すなわち体積に関する量である。
【００２０】
用語「体液試料（body fluid sample）」とは、本明細書において使用される場合、原則的に、すべてのタイプの体液、例えば血液及び血液誘導体、尿、唾液、リンパ、アルコール、涙、等を包含する。体液試料は、既知であるか、又は決定される分析物を含むことが疑わしいものであろう。多くの診断的に適切な分析物を含むことが知られている体液は、血液、例えば全血、血漿及び血清、尿、唾液、アルコール、滑膜液及び汗である。典型的には、しかしながら、血液及びその誘導体、血漿及び血清が、本発明によれば、体液試料として想定される。
【００２１】
特に、本発明に従って決定される分析物は、グルコースである。従って、分析物としてグルコースを決定するための典型的な検出剤は、酵素、例えばグルコースデヒドロゲナーゼである。ＦＡＤ−、ＮＡＤ＋、又はＰＱＱ−依存性グルコースデヒドロゲナーゼ又はその変異体、例えば国際公開第２０１１／０２０８５６号に開示されるそれらが使用される。さらに、検出剤は、グルコースデヒドロゲナーゼ、例えばジアホラーオゼ、及び特にリポアミドデヒドロゲナーゼ又はＮＡＤＨデヒドロゲナーゼ、又はその酵素的活性変異体から得られるレドックス同等物のトランスファーのために必要とされる酵素を含むことができる。さらに、さらに、検出試薬は、他方では又はさらに、１又は２以上のメディエーター、すなわち１つの物質から別の物質に電荷をトランスファーできる物質を含むことができる。さらに特定には、電子トランスファーのために適切であるメディエーターが使用され得る。さらに、検出試薬は再び、他方では、又はさらに、少なくとも１つのインジィケーターを含むことができる。インジィケーターは、この形でのこの物質の存在に依存して、検出され得る少なくとも１つの特性を変更できる物質であると理解され得る。例えば、酸化された形及び還元された形で、異なった光学特性、例えば異なった色を有する物質が使用され得る。他方では、又はさらに、インジケーターは、異なった電荷状態で、異なった光学特性、例えば異なった色特性を有する物質を含むことができる。特に、本発明に従って想定されるインジケーターは、２，１８−リンモリブデン酸（この後、またリンモリブデン酸と称す）である。従って、一般的に、１又は２以上の検出試薬は、単一の物質又は物質の混合物、例えば上記に説明されるように、少なくとも１つの酵素、少なくとも１つのメディエーター及び少なくとも１つのインジケーターの混合物であることが理解され得る。そのような検出試薬は原則的には、従来技術から、例えば上述の従来技術から知られている。
【００２２】
用語「試験フィールド（test field）」とは、本発明に従って言及される場合、試料適用及び／又は分析のために使用され得る診断試験エレメントの領域を意味する。試験エレメントは、診断試験エレメントの一部であるか、又は診断エレメントであり得る。原則的に、試験フィールドは、体液試料が適用される試料適用部位、及び分析物が反応試薬と反応する場合、光学及び／又は化学特性の変化の検出を可能にする検出側を有する。試験フィールドは、検出試薬を含む、少なくとも１つの検出層を有する。単一検出層を有するシステムが使用され得るか、又はお互いの上部に、直接、適用され得るか、又は１又は２以上の追加の層を介在することにより、お互いの上部に適用され得る複数の検出層が使用され得る。しかしながら、単一の検出層のみを有するシステムが特に好ましい。層とは、一般的に、層材料が支持体エレメントに平らに適用されるか、又は自立膜として形成されるエレメントを意味するとして、本発明においては理解されるべきである。層は、必ずしも必要ではないが、閉じられ得るが、しかし、例えば同様に開口部を有することができる。しかしながら、より具体的に下記に開発されるように、実質的に均等な、好ましくは多孔性であるが、しかし均一に被覆された、均質な層の厚さを有する検出層の均質実施形態が特に好ましい。層の厚さ、すなわち検出層の平均的厚さは好ましくは、３〜６０μｍ、より特定には５〜１５μｍ、例えば８μｍである。
【００２３】
本発明によれば、試験フィールドは、透明箔を含み、この上に、順に、第１フィルム層（すなわち、検出層）及び第２フィルム層（すなわち、分離層）がお互いの上に適用される。透明箔上に位置する第１層は、その上の第２層よりも相当に低く、光を散乱することが重要である。透明箔の被覆されていない側は、検出側と呼ばれ、そして第２層側は、試料適用側と呼ばれる、第１層上の第２層の残りの層の側とは反対側にある。透明箔として、プラスチック箔が、流体に対して不透過性であることが考慮される。ポリカーボネート箔が、特に適切であることが分かっている。
【００２４】
用語「検出層（detection layer）」（又は「第１層」）とは、本明細書において使用される場合、上記に特定されたような反応試薬を含む試験フィールドにおけるフィルム層を意味する。さらに、前記層はまた、ポリマーフィルム形成剤、膨潤剤、及び弱光散乱充填剤（又は充填剤をまったく含まない）を含むコーティング化合物を含むであろう。弱光充填剤は、その屈折率に近いものである。二酸化ケイ素、ケイ酸塩及びケイ酸アルミニウムが、この目的のために、特に適切であることが分かっている。
【００２５】
用語「分離層（separation layer）」(又は「第２層」)とは、本明細書において使用される場合、分散−飽和固形成分を含む試験フィールドにおけるフィルム層を意味する。典型的には、本発明の診断試験エレメントの分離層における前記分散−飽和固形成分は、前記固形成分を、分離層を形成するコーティング組成物に、前記分散された固形成分の量のさらなる増加が観察され得ないよう最大値に達するまで（プラトー段階）、分散することにより得られた。そのような分散されたコーティング組成物及び層を何にして得るかは、当業界において良く知られており、そして本明細書の他の部分に、より詳細に記載されている。
【００２６】
さらに、分離層は、約１．０〜１．６ｇ／ｍ2の量でＳｉＯ2を含むであろう。用語「約（about）」とは、＋/−１５％、＋/−１０％、＋/−５％、＋/−３％、＋/−２％ 又は＋/−１％の指示値及び指示値自体の変動を包含する。いくつかの実施形態によれば、分離層は、約１．２〜１．５ｇ／ｍ2の量でＳｉＯ2を含むであろう。いくつかの実施形態によれば、分離層は、約１．３〜１．４ｇ／ｍ2の量でＳｉＯ2を含む。いくつかの実施形態によれば、分離層は、約１．４ｇ／ｍ2の量でＳｉＯ2を含む。より典型的には、分離層は、約 １．００ 〜 １．０５ ｇ/ｍ2、１．００ 〜 １．１０ ｇ/ｍ2、１．００ 〜 １．１５ ｇ/ｍ2、１．００ 〜 １．２０ ｇ/ｍ2、１．００ 〜 １．２５ ｇ/ｍ2、１．００ 〜 １．３０ ｇ/ｍ2、１．００ 〜 １．３５ ｇ/ｍ2、１．００ 〜 １．４０ ｇ/ｍ2、１．００ 〜 １．４５ ｇ/ｍ2、１．００ 〜 １．５０ ｇ/ｍ2、又は １．００ 〜 １．５５ ｇ/ｍ2 又は 約 １．０５ 〜 １．６０ ｇ/ｍ2、１．１０ 〜 １．６０ ｇ/ｍ2、１．１５ 〜 １．６０ ｇ/ｍ2、１．２０ 〜 １．６０ ｇ/ｍ2、１．２５ 〜 １．６０ ｇ/ｍ2、１．３０ 〜 １．６０ ｇ/ｍ2、１．３５ 〜 １．６０ ｇ/ｍ2、１．４０ 〜 １．６０ ｇ/ｍ2 又は１．４５ 〜 １．６０ ｇ/ｍ2の量でＳｉＯ2を含む。さらに、分離層は、膨潤剤、及び何れの場合でも、少なくとも１つの顔料散乱光を強く必要とする。さらに、第２層はまた、非多孔性充填剤及び多孔性充填剤を含むことができる。良く膨潤する膨潤剤（すなわち、それが水を取る場合、その体積を高める物質）を添加することにより、試料液体により比較的に浸透され得る層を得るのみならず、また良好な赤血球、及び膨潤剤のこの開口効果にもかかわらず、さらにまた、血液顔料分離特性を有する層を得ることができる。色の形成、例えばグルコース試験反応の速度が主に、層を通しての試料液体の浸透に依存する試験に関して、光学的に検出できる反応が、最大１分後、測定できるほど、膨潤性質は良好であるべきである。特に適切な膨潤剤は、メチルビニルエーテルマレイン酸無水物コポリマー、キサンタンガム及びメチルビニルエーテルマレイン酸コポリマーであることが分かっている。１又は２以上の検出層が本発明の診断試験エレメントに従って使用され得ることが理解されるであろう。
【００２７】
本発明によれば、第２層は、光を非常に強く散乱すべきである。理想的には、第２フィルム層における顔料の屈折率は、少なくとも２．５であるべきである。従って、ＴｉＯ2が典型的には、その層に添加される。従って、本発明の診断試験エレメントの側面によれば、前記少なくとも１つの分離層はさらに、ＴｉＯ2を含む。典型的な側面によれば、前記ＴｉＯ2は、約５．５〜９．０ｇ／ｍ2の量で存在する。より典型的には、分離層は、約 ５．５ 〜 ６．０ ｇ/ｍ2、５．５ 〜 ６．５ ｇ/ｍ2、５．５ 〜 ７．０ ｇ/ｍ2、５．５ 〜 ７．５ ｇ/ｍ2、５．５ 〜 ８．０ ｇ/ｍ2 又は ５．５ 〜 ８．５ ｇ/ｍ2 又は 約 ６．０ 〜 ９．０ ｇ/ｍ2、６．５ 〜 ９．０ ｇ/ｍ2、７．０ 〜 ９．０ ｇ/ｍ2、７．５ 〜 ９．０ ｇ/ｍ2、又は ８．０ 〜 ９．０ ｇ/ｍ2 又は ８．５ 〜 ９．０ ｇ/ｍ2 又は 約 ８．０ 〜 ８．３ ｇ/ｍ2、７．５ 〜 ８．０ ｇ/ｍ2、７．０ 〜 ８．３ ｇ/ｍ2、６．５ 〜 ８．３ ｇ/ｍ2、又は ６．０ 〜 ８．３ ｇ/ｍ2の量でＴｉＯ2を含むことができる。いくつかの実施形態によれば、分離層は、約６．０〜８．０ｇ／ｍ2の量でＴｉＯ2を含むであろう。いくつかの実施形態によれば、分離層は、約７．０〜８．０ｇ／ｍ2の量でＴｉＯ2を含むであろう。いくつかの実施形態によれば、分離層は、約７．５ｇ／ｍ2の量でＴｉＯ2を含むであろう。さらに、前記ＴｉＯ2は、約０．１１：０．２９、より特定には、約０．１２：０．２７、０．１４：０．２５又は０．１６：０．２０のＳｉＯ2比、及びより特定には、約０．１７、０．１８又は０．１９の比を形成する量で存在することが想定される。
【００２８】
さらに、１つの側面によれば、検出層及び分離層は、鉄含有酸化剤を実質的に有さない。典型的な側面によれば、前記鉄含有酸化剤は、フェリシアン化カリウム（III ）である。
【００２９】
好都合には、分離層における固形成分の分散のレベルが診断試験エレメントの寛解動態に影響を及ぼすことが、本発明の基礎をなす研究において見出された。前記影響を最少にするために、飽和段階（プラトー段階）に達する強い分散レベル、すなわち分散のさらなる増加が可能でない最大レベルが試験エレメントの個々のバッチの寛解動態の差異を最少にするために適切であることが見出された。しかしながら、固形成分の分散レベルの上昇は、低レベルの分析物、例えば０〜１０ｍｇ／ｄＬのグルコースが決定される場合、１００％以上の寛解速度が得られる欠点を有する。さらに、その動態はまた、グルコースの場合、高い分析物レベルで減速された。前述の欠点は、分離層に、約１．０〜１．６ｇ／ｍ2の量でＳｉＯ2を含むことにより防止され得ることが見出された。前述の量でのＳｉＯ2の使用は、約１０ｍｇ／ｄＬの低グルコース濃度でされ、９０〜９８Ｒｅｍ．％の特に好ましい寛解をもたらす。さらに高い量のＳｉＯ2は、例えば６００ｍｇ／ｄＬの高いグルコースレベルと、例えば１０ｍｇ／ｄＬの低グルコースレベルとの間で、より低い顕著な寛解の差異を生む、低められた寛解をもたらす。好都合には、前述の好ましい寛解は、ＳｉＯ2のみの使用が低い好ましい寛解を生成するので、ＳｉＯ2の包含、及び固形成分の高い程度の分散に起因する。さらなる改善が、検出層及び分離層における酸化剤としてのフェリシアン化カリウム（III ）を回避することにより、及びインジケーターの加水分解又は分解を防止するよう、検出層及び分離層を形成するコーティング組成物に、非常に後期段階でインジケーターとしてリンモリブデン酸層を付与することにより得られる。さらに、コーティング組成物のｐＨ調節は、インジケーターの添加の前、実施されるべきであることが見出された。検出層及び分離層への前述の修飾を用いる場合、寛解が診断試験エレメントの異なったバッチ間で同程度であり、すなわちせいぜい＋／−５％の許容内であることが見出された。従って、本発明の診断試験エレメントのおかげで、診断試験エレメント（単一又は非コード試験ストリップ）はすべてのバッチのために一般的校正曲線の使用を可能にするので、診断試験エレメントのバッチのための個々の校正曲線を提供することはもはや必要とされない。さらに、費用及び生成時間の集中的対策、例えばバーコードを介しての各診断試験エレメントに対する校正情報の保存、又は標識された雑誌の形でのバッチの試験エレメントの提供が回避され得る。
【００３０】
前で行われた用語の定義及び説明は、以下に記載される実施形態のために準用する。
【００３１】
以下では、本発明の診断試験エレメントの特定の実施形態が特定される。
【００３２】
本発明の診断試験エレメントの実施形態によれば、前記少なくとも１つの分離層はさらに、ＴｉＯ2を含む。
【００３３】
前記診断試験エレメントのさらなる実施形態によれば、前記ＴｉＯ2は、約５．５〜９．０ｇ／ｍ2の量で存在する。
【００３４】
前記診断試験エレメントのさらなる実施形態によれば、前記ＴｉＯ2は、約０．１１：０．２９のＳｉＯ2：ＴｉＯ2比を形成する量で存在する。
【００３５】
本発明の診断試験エレメントの別の実施形態によれば、前記検出層及び分離層は、鉄含有酸化剤を実質的に含まない。
【００３６】
前記診断試験エレメントのさらなる実施形態によれば、前記鉄含有酸化剤は、フェリシアン化カリウム（III ）である。
【００３７】
本発明の診断試験エレメントのさらなる実施形態によれば、前記分散−飽和固形成分は、前記固形成分を、分離層を形成するコーティング組成物に、前記分散された固形成分の量のさらなる増加が観察され得ないよう最大値に達するまで（プラトー段階）、分散することにより得られた。
【００３８】
本発明はまた、上記本発明の診断試験エレメント上に検出層及び分離層を形成できるコーティング組成物にも関する。
【００３９】
用語「コーティング組成物（coating composition）」とは、本明細書において使用される場合、診断試験エレメントの試験フィールドにより含まれる分離層を形成できる組成物、典型的には水性組成物を意味する。前記分離層の典型的な成分はまた、コーティング組成物に含まれる。さらに、前記組成物は、参照により本明細書に組込まれる、デンマーク特許第１９６２９６５７Ａ１号、デンマーク特許第１９６２９６５６Ａ１号、欧州特許第０８２１２３４Ｂ１号、欧州特許第１０３５９１９Ｂ１号又は欧州特許第１０３５９２０Ｂ１号から当業者に良く知られている前記成分のための適切な溶媒を含むであろう。本発明の診断試験エレメントの分離層を形成できるためには、本発明のコーティング組成物は、コーティング組成物１００ｇ当たり、約２．０ｇ〜３．５ｇの量で、より特定には約２．１ｇ〜３．２ｇの量で、又は約２．１〜２．８ｇの量で、及びより特定には、約２．４５ｇの量でケイ酸を含むことが想定される。典型的な側面によれば、前記組成物はさらに、コーティング組成物１００ｇ当たり、約１１．０ｇ〜１８．０ｇ、より特定には、約１２．０ｇ〜１７．０ｇ、又は約１３．０ｇ〜１５．０ｇの量で、ＴｉＯ2を含む。
【００４０】
従って、本発明のコーティング組成物の実施形態によれば、本発明のコーティング組成物は、コーティング組成物１００ｇ当たり約２．０ｇ〜３．５ｇの量でケイ酸を含む。
【００４１】
さらに、本発明のコーティング組成物のさらなる実施形態によれば、前記組成物は、コーティング組成物１００ｇ当たり約１１．０ｇ〜１８．０ｇの量でＴｉＯ2を含む。
【００４２】
本発明はまた、本発明の診断試験エレメントの製造方法にも関し、ここで前記方法は、コーティング組成物(好ましくは、診断試験エレメントにより含まれる試験フィールドの分離層を形成するために有用なコーティング組成物)において、分離層のための固形成分を、分散された固形成分のさらなる増加が生じないよう最大値に達するまで（プラトー段階）、分散し、前記コーティング組成物がコーティング組成物１００ｇ当たり約２．０ｇ〜３．５ｇの量でケイ酸を含む。
【００４３】
本発明の方法は、１つの側面によれば、本発明の診断試験エレメントの試験フィールドに含まれる分離層を形成できるコーティングの組成物の製造を包含する。このためには、将来の分離層の固形成分が、分散された固形成分のさらなる増加が生じないよう最大に達するまで（プラトー段階）、分散されることが特に想定される。固形成分の分散のさらなる増加は、前記成分の凝集及び／又は沈降をもたらすであろう。従って、最大分散、すなわち分散の飽和は、例えば、異なった程度の飽和の分散の一連の試験を行うことにより、難しい話は抜きにして、当業者により決定され得る。コーティング組成物のさらなる成分、例えばケイ酸が溶解され、結果的に、約１．０〜１．６ｇ／ｍ2のＳｉＯ2の最終量が、コーティング組成物１００ｇ当たり約２．０ｇ〜３．５ｇの量で、分離層において達成され得る。さらに、ＴｉＯ2は、本発明の方法の１つの側面によれば、典型的には、コーティング組成物１００ｇ当たり約１１．０ｇ〜１８．０ｇの量で組成物に溶解され得る。本発明のさらなる側面によれば、酸化剤として、フェリシアン化カリウムが回避されるであろう。リンモリブデン酸が分離層においてインジケーターとして使用される場合、前記成分は、加水分解又は分解が防止され得るよう、コーティング組成物の製造のむしろ後期段階で、例えばコーティングを実施する前、１日よりも長くない時点で添加されるであろう。１つの側面によれば、前記リンモリブデン酸は、コーティング組成物のｐＨが調節された後、添加される。
【００４４】
同様の態様で、検出層のためのコーティング組成物は、すなわち必要な成分の分散及び溶解により製造され得る。検出層を形成するコーティングの溶液の成分は、本明細書の他の部分で論じられるように、検出に存在するそれらの成分である。
【００４５】
複数の層構造を有する試験フィールドを含む診断試験エレメントの製造は、原則的に、当業者に良く知られており、そして例えば、参照により本明細書に組込まれる、デンマーク特許第１９６２９６５７Ａ１号、デンマーク特許第１９６２９６５６Ａ１号又は欧州特許第０８２１２３４Ｂ１号に記載されている。１つの側面によれば、検出層のためのコーティング組成物は、まず、診断エレメント上の試験フィールドに適用される。続いて、溶媒がコーティング組成物から除去され、第１層、すなわち検出層の形成をもたらす。さらなる工程においては、分離層のためのコーティング組成物が第１層に適用される。溶媒が再び、第２層、すなわち分離層を生成するために除去される。溶媒は、溶媒を除去するために知られているすべての技法、例えば熱処理、蒸発又は凍結乾燥により、診断試験エレメントの試験フィールドへの前記組成物の適用の後、コーティング組成物から除去され得る。
【００４６】
本発明の方法の１つの実施形態によれば、前記方法はさらに、コーティング組成物に、インジケーターとしてのリンモリブデン酸を添加すること包含する。
【００４７】
前記方法の特定の実施形態によれば、前記リンモリブデン酸が、前記診断試験エレメントの試験フィールドに、前記コーティング組成物を添加する前、２日未満で、１日未満で、６時間未満で、３時間未満で、２時間未満で又は１時間未満で添加されることが想定される。
【００４８】
前述の方法のさらなる実施形態によれば、前記リンモリブデン酸は、前記コーティング組成物のｐＨ調節の後、添加される。
【００４９】
本発明はまた、体液試料における分析物の存在又は量を決定するための方法にも関する。
【００５０】
そのような方法は、典型的には、下記工程を包含することができる：
（ａ）分析物を含むと思われる体液と、本発明の診断試験エレメントとを、検出層に含まれる検出試薬により分析物の検出を可能にするために適切な条件下で、接触する工程；
（ｂ）診断試薬エレメント上の湿潤された層におけるインジケーター試薬の少なくとも１つの光学特性の変化を測定し、それにより、体液試料中の分析物の存在又は量を決定する工程。
【００５１】
「接触する」とは、本明細書において使用される場合、体液試料が、キャリヤにより含まれる本発明の組成物及び体液試料の物理的接触を可能にするような態様で、キャリヤに適用されることを意味する。特に、接触は、検出試薬の活性化になることを可能にするのに十分な時間及び十分な条件下で実施される。例えば、グルコースが分析物として決定される場合、グルコースデヒドロゲナーゼが再構成され、すなわち湿潤され、そして溶解され、そして従って、生物学的に活性になる。適切な条件は、診断キャリヤに依存し、そして当業界において知られている。試験エレメントに適用され得る体液試料は、１つの側面によれば、２μｌ以下、より特定には１μｌ以下の体積を有する。
【００５２】
検出剤の活性化、例えば生物学的活性のデヒドロゲナーゼの再構成に基づいて、前記剤はその基質、すなわち体液試料に含まれる分析物に結合し、そして検出可能な変化、例えば基質のそれぞれの生成物及びレドックス同等物への転換を誘発する。例えば、デヒドロゲナーゼにより生成されるレドックス同等物は、デヒドロゲナーゼにより触媒される酵素転換により生成されるレドックス同等物は、含まれる組成物においてレドックス同等物の存在下でインジケーターの少なくとも１つの光学特性の変化を誘発できる剤により、インジケーター試薬にトランスファーされるので、デヒドロゲナーゼ活性の決定を可能にする。次に、インジケーターの少なくとも１つの光学特性の変化が測定され得る。診断試薬エレメントに依存して、光学特性の変化の測定は、当業界において知られている異なった技法により達成され得る。光学特性、例えば色の変化を検出するためには、空間的に分解する光検出器が使用され得る。空間的に分解する光検出器は、完全一致ではない検出層の検出側の領域を記録することができる多くの光センサーを有する光検出器を意味すると理解されるべきである。より特定には、空間的に分解する光検出器は、少なくとも１つのイメージセンサー、すなわち一次元又は二次元であり得る光検出器のアレイを含むことができる。より特定には、従って、光検出器は、ＣＣＤチップ及び／又はＣＭＯＳチップを含むことができる。さらに、空間的に分解する光検出器は、空間的に分解する光検出器の画像感知面上に検出側及び／又は検出層をイメージングするための少なくとも１つの光学エレメントを含むことができる。
【００５３】
上記方法により測定される少なくとも１つの光学特性の変化は、分析物の存在の指標である。分析物の量を決定するためには、光学特性の変化の程度を比較する必要があることは、当業者により理解されるであろう。このためには、さらに、既知量の分析物により誘発される光学変化に伴うシグナル、すなわち校正シグナルに、光学変化に伴う検出されたシグナルを比較することが必要である。いかにして校正が確立され得るかは、当業者に良く知られている。
【００５４】
上記の観点から、本発明は、一般的に、対象の試料における分析物、好ましくはグルコースの量を決定するための本発明の診断試験エレメントの使用を企画する。
【００５５】
分析物の量の決定に基づいて、対象、例えばヒトが疾患に罹患しているか、又はそのための素因を有するかどうかが評価され得る。分析物がグルコースである場合、診断試験エレメントが、糖尿病、又はグルコース代謝障害を有する他の疾患又は障害を助けるために使用され得る。
【００５６】
本明細書に引用されるすべての参照文献は、それらの全開示内容及び本明細書に特異的に言及される開示内容に関して、参照により組込まれる。
【実施例】
【００５７】
次の実施例は、本発明又はその側面を単に例示するものである。しかしながら、それらは、本発明の範囲を限定するものとしては解釈されるべきではない。
実施例１：診断試験エレメントの製造
【００５８】
【表１】
2020046434.tif 000002
【００５９】
第１層のための成分を、表１に示される量で混合し、ｐＨを６．７５で調節し、そして組成物を７５ｇ／ｍ2の単位面積当たりのコーティング重量で適用した。
【００６０】
【表２】
2020046434.tif 000003
【００６１】
第１層のための成分を、表１に示される量で混合し、ｐＨを６．７５で調節し、そして組成物を５０ｇ／ｍ2の単位面積当たりのコーティング重量で適用した。
【００６２】
第１及び第２層コーティング組成物として上記コーティング組成物を用いて、診断試験エレメントの製造を、デンマーク特許第１９６２９６５７Ａ１号、デンマーク特許第１９６２９６５６Ａ１号又は欧州特許第０８２１２３４Ｂ１号に記載のようにして、実質的に実施した。
【００６３】
実施例２：第２層における固形成分及びＳｉＯ2の分散度の寛解に対する影響
血液グルコースを、Ａｃｃｕ−Ｃｈｅｋ−Ａｃｔｉｖｅ  ＭＩＣアッセイにおいて標準（ＭＩＣ）及びノーコードコーティングシステム上でのいくつかのパラメーターに対する影響を決定するために、異なったコーティングを有する診断試験エレメントを用いて、異なった濃度（すなわち、Ｏ、１０、６０、１２０、３００及び６００ｍｇ／ｄｌの血液）で測定した。次の組合せを測定した：
−フェリシアン化カリウム（Ｋ３）を伴ってのＭＩＣ；
−Ｋ３を伴ってのノーコード；
−Ｋ３なしでのノーコード；
−Ｋ３なしでの分散されたノーコード。
【００６４】
図１に示される図から明らかなように、異なった分散度が異なった寛解をもたらした。分散は通常、バッチ毎に変化するので、試験エレメントにおける分散度の前述の効果は、バッチ特異的校正の使用を必要とする。寛解に対する分散度の影響を最少にするために、次のさらなるコーティングを、高く分散された（すなわち、飽和段階において）固形成分（ＯＡＦ）と共に使用した：
−ＯＡＦ及びＫ３を伴ってＭＩＣ。
【００６５】
しかしながら、このコーティングを用いて、低グルコース濃度（例えば、血液中、０−１０ｍｇ／ｄｌのグルコース）での寛解率は１００％を越え、結果的に、校正曲線による評価はもはや不可能であった。さらに、寛解動態は、大幅に遅くなった；図１を参照のこと。
【００６６】
コーティング組成物における高分散率はまた、乾燥コーティングにおいて低められた多孔性をもたらし、結果的に、光学密度は高められた。これは、前に言及されたように、低又は０ｍｇ／ｄｌの血液グルコース試料における寛解の上昇をもたらす。さらに、グルコースのコーティング中への拡散速度が低められた。それらの効果は、さらに、異なったコーティング、すなわちＫ３なしでのノーコード及びＫ３なしで、分散されたノーコードの吸収容量の測定により検証された；図２を参照のこと。
【００６７】
吸収容量は、約２５％低められ、そして拡散速度は約５０％低められた；図２を参照のこと。
【００６８】
低レベルの血液グルコースを測定する場合、寛解の所望しない上昇を回避するために、及びその動態を改善するために、第２層におけるＳｉＯ2の量は、約０．７ｇ／ｍ2から１．０＝１．６ｇ／ｍ2の最終量まで約７０％高められた。そのような第２層を有する試験エレメントにおいては、９０〜９８寛解％の特に適切な寛解範囲が生成され得た。さらに、ＳｉＯ2のさらなる増加が低められた寛解をもたらし、結果的に、低濃度試料と高濃度試料との間の寛解の差異がそれほど顕著ではなく、従ってそのような測定システムは精度が低くなることが見出された。
【００６９】
さらに、高められた分散度ナシでの第２層における卓越したＳｉＯ2濃度がまた、寛解の低下、及び測定の間、相対的湿度に対する強い依存性をもたらしたことが見出された。従って、第２層における高められた分散度及びＳｉＯ2の上昇が、バッチ非依存性校正に関して試験エレメントを改善するために、組合して使用されるべきである。
【００７０】
実施例３：寛解に対するリンモリブデン酸及びフェリシアン化カリウムの影響
リンモリブデン酸は、後の測定との干渉を回避するために、できるだけ短期、コーティング組成物に留まることがさらに見出された。さらに、コーティング組成物のｐＨ調節を行うために使用されるＮａＯＨは、加水分解を回避するために、リンモリブデン酸の添加の前、添加されることが見出された。コーティング組成物の製造は、それに応じて修正された。しかしながら、この場合でされ、校正コード曲線は、高グルコース濃度と低グルコース濃度との間の差別を困難にするＳ字型であったことが見出された。さらに、測定時間もまた、高められることが見出された。
【００７１】
前述の側面はフェリシアン化カリウム（III ）（Ｋ３）により引起され、そして負の効果が試験エレメントの両層において前記Ｋ３を回避することにより克服され得ることが見出された；図３を参照のこと。
【００７２】
回避Ｋ３のさらなる副作用は、寛解動態が、特に血液中、４５〜１２０ｍｇ／ｄｌの中間範囲のグルコース濃度を測定する場合、大幅に早かったことであった；図４を参照のこと。
【００７３】
図５においては、本発明に従って行われた改善、すなわちＯＡＦ及びＳｉＯ2を伴って、但しＫ３ナシでのノーコードが要約され、そしてＯＡＦなしで、Ｋ３を伴っての標準ＭＩＣと比較された。
【００７４】
図６Ａは、線状減少校正曲線が得られ得ることを示す。低グルコース濃度、及び高グルコース濃度と低グルコース濃度との間での適切な差異で十分な寛解が存在し、良好な精度及び低い変動性をもたらした。
【００７５】
図６Ｂは、改善された試験エレメントの精度を示す。
【図１−１】
2020046434.tif 000004
【図１−２】
2020046434.tif 000005
【図１−３】
2020046434.tif 000006
【図２】
2020046434.tif 000007
【図３】
2020046434.tif 000008
【図４−１】
2020046434.tif 000009
【図４−２】
2020046434.tif 000010
【図４−３】
2020046434.tif 000011
【図５−１】
2020046434.tif 000012
【図５−２】
2020046434.tif 000013
【図５−３】
2020046434.tif 000014
【図６】
2020046434.tif 000015
【手続補正書】
【提出日】令和1年12月26日(2019.12.26)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
診断試験エレメント上に分離層を形成することができるコーティング組成物であって、固形成分として、コーティング組成物１００ｇ当たり２．０ｇ〜３．５ｇの量でケイ酸、及びコーティング組成物１００ｇ当たり１１．０ｇ〜１８．０ｇの量でＴｉＯ2を含む、コーティング組成物。
【請求項２】
固形成分として、光を散乱する顔料をさらに含む、請求項１に記載のコーティング組成物。
【請求項３】
固形成分として、膨潤剤をさらに含む、請求項１又は２に記載のコーティング組成物。
【請求項４】
鉄含有酸化剤を本質的に含まない、請求項１〜３のいずれか１項に記載のコーティング組成物。
【請求項５】
前記鉄含有酸化剤がフェリシアン化カリウム（III）である、請求項４に記載のコーティング組成物。
【請求項６】
分散された固形成分のさらなる増加が観察できなくなるまで、前記コーティング組成物中に前記固形成分が分散されている、請求項１〜５のいずれか１項に記載のコーティング組成物。
【請求項７】
体液試料に含まれる分析物を決定するための診断試験エレメントであって、前記試験エレメントが少なくとも１つの検出層及び少なくとも１つの分離層を有する少なくとも１つの試験フィールドを含み、前記少なくとも１つの分離層は、請求項１〜６のいずれか１項に記載のコーティング組成物を含むことを特徴とする、診断試験エレメント。
【請求項８】
前記少なくとも１つの分離層において、ＳｉＯ2が１．０〜１．６ｇ／ｍ2＋/−１５％の量で存在する、請求項７に記載の診断試験エレメント。
【請求項９】
前記少なくとも１つの分離層において、ＴｉＯ2が５．５〜９．０ｇ／ｃｍ2の量で存在する、請求項７又は８に記載の診断試験エレメント。
【請求項１０】
前記少なくとも１つの分離層において、前記ＴｉＯ2が０．１１：０．２９のＳｉＯ2：ＴｉＯ2比を形成する量で存在する、請求項９に記載の診断試験エレメント。
【請求項１１】
前記検出層及び分離層が鉄含有酸化剤を本質的に含まない、請求項７〜１０のいずれか１項に記載の診断試験エレメント。
【請求項１２】
前記鉄含有酸化剤がフェリシアン化カリウム（III）である、請求項１１に記載の診断試験エレメント。
【請求項１３】
請求項７〜１２のいずれか１項に記載の診断試験エレメントの製造方法であって、請求項１〜６のいずれか１項に記載のコーティング組成物を用いて少なくとも１つの分離層を形成する工程を含むことを特徴とする、方法。
【請求項１４】
前記コーティング組成物に、指標としてリンモリブデン酸を添加することをさらに含む、請求項１３に記載の方法。
【請求項１５】
前記リンモリブデン酸が、前記診断試験エレメントの試験フィールドに前記コーティング組成物を添加する前の、２日未満、１日未満、６時間未満、３時間未満、２時間未満で又は１時間未満において添加される、請求項１４に記載の方法。
【請求項１６】
前記リンモリブデン酸が、前記コーティング組成物のｐＨ調節の後に添加される、請求項１４又は１５に記載の方法。
【請求項１７】
対象の試料における分析物、好ましくはグルコースの量を決定するための請求項７〜１２のいずれか１項に記載の診断試験エレメントの使用。
【請求項１８】
前記診断試験エレメントの分離層及び検出層がフィルム層である、請求項７〜１２のいずれか１項に記載の診断試験エレメント。
【請求項１９】
前記フィルム層が、ポリビニルエステル、ポリビニルアセテート、ポリアクリル酸エステル、ポリメタクリル酸、ポリビニルアミド、ポリアミド、ポリスチレン、及び、ブタジエン、スチレン又はマレイン酸エステルの混合重合物から選択されるフィルム形成剤を含む、請求項１８に記載の診断試験エレメント。
【請求項２０】
前記少なくとも１つの試験フィールドが透明箔を含み、そして、前記少なくとも１つの検出層が前記透明箔の上に適用され、ここで、前記少なくとも１つの分離層が前記検出層上に位置する、請求項７〜１２、１８又は１９に記載の診断試験エレメント。
【請求項２１】
前記分離層における顔料の屈折率が、少なくとも２．５である、請求項７〜１２、又は１８〜２０に記載の診断試験エレメント。
【外国語明細書】
2020046434000001.pdf