(57)【要約】【課題】タンパク質溶液製剤に含まれるタンパク質中のアミノ酸残基の酸化などのタンパク質の変性を生じない、タンパク質溶液製剤収容用の医療用容器、当該医療用容器にタンパク質溶液製剤を収容した容器入りタンパク質溶液製剤、およびタンパク質の酸化、高分子量化、アニオン化などによるタンパク質溶液製剤の品質低下や失活が一層効果的に防止される容器入りタンパク質溶液製剤の包装体の提供。【解決手段】高圧蒸気滅菌されタンパク質中のアミノ酸残基の酸化を抑制する作用を有するタンパク質溶液製剤を収容するための環状オレフィン系重合体製の医療用容器、高圧蒸気滅菌され電子スピン共鳴装置にて測定したラジカル量が２．２×１０１５個／ｇ以下以下であるタンパク質溶液製剤を収容するための環状オレフィン系重合体製の医療用容器、前記した医療用容器にタンパク質溶液製剤を収容した容器入りタンパク質溶液製剤、前記した容器入りタンパク質溶液製剤を脱酸素剤と共に酸素難透過性の包装材で包装した脱酸素式包装体、および遮光能を有する包装材で包装した当該脱酸素式包装体。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
タンパク質溶液製剤を収容するための医療用容器であって、環状オレフィン系重合体から形成され、高圧蒸気滅菌されており、当該医療用容器内に収容されるタンパク質溶液製剤中のタンパク質におけるアミノ酸残基の酸化を抑制することを特徴とする、タンパク質溶液製剤を収容するための医療用容器。
【請求項２】
タンパク質溶液製剤を収容するための医療用容器であって、環状オレフィン系重合体から形成され、高圧蒸気滅菌されており、電子スピン共鳴装置にて測定したラジカル量が２．２×１０１５個／ｇ以下であることを特徴とする、タンパク質溶液製剤を収容するための医療用容器。
【請求項３】
タンパク質溶液製剤を収容するための医療用容器であって、環状オレフィン系重合体から形成され、高圧蒸気滅菌されており、電子スピン共鳴装置にて測定したラジカル量が２．２×１０１５個／ｇ以下であり、当該医療用容器内に収容されるタンパク質溶液製剤中のタンパク質におけるアミノ酸残基の酸化を抑制することを特徴とする、タンパク質溶液製剤を収容するための医療用容器。
【請求項４】
医療用容器が、環状オレフィン開環重合体の水素添加物から形成されている、請求項１〜３のいずれか１項に記載の医療用容器。
【請求項５】
シリンジまたはカートリッジである請求項１〜４のいずれか１項に記載の医療用容器。
【請求項６】
請求項１〜５のいずれか１項に記載の医療用容器内にタンパク質溶液製剤を収容した、容器入りタンパク質溶液製剤。
【請求項７】
タンパク質溶液製剤が、アミノ酸配列中にメチオニン残基またはシステイン残基を有するタンパク質からなる分子標的薬の溶液製剤である、請求項６に記載の容器入りタンパク質溶液製剤。
【請求項８】
タンパク質溶液製剤が、エリスロポエチンまたはモノクローナル抗体の溶液製剤である、請求項６または７に記載の容器入りタンパク質溶液製剤。
【請求項９】
プレフィルドシリンジ製剤である、請求項６〜８のいずれか１項に記載の容器入りタンパク質溶液製剤。
【請求項１０】
請求項６〜９のいずれか１項に記載の容器入りタンパク質溶液製剤を、脱酸素剤と共に、酸素難透過性の包装材で密封包装した包装体。
【請求項１１】
脱酸素剤の酸素吸収能が、前記包装材の収納空間全体の容積の１／５以上である請求項１０に記載の包装体。
【請求項１２】
ブリスター包装の形態をなしている請求項１０または１１に記載の包装体。
【請求項１３】
包装体を構成する酸素難透過性の包装材が遮光能を更に有するか、または脱酸素剤と共に難酸素透過性の包装材で包装した包装体が遮光能を有する外包装材で更に包装されている請求項１０〜１２のいずれか１項に記載の包装体。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、タンパク質溶液製剤を収容するための医療用容器、当該医療用容器にタンパク質溶液製剤を収容した容器入りタンパク質溶液製剤、当該容器入りタンパク質溶液製剤を酸素難透過性の包装材で包装した包装体、および当該包装体を遮光能を有する包装材で更に包装した包装体に関する。
【０００２】
本発明の医療用容器は、容器内に収容されるタンパク質溶液製剤に含まれるタンパク質中のアミノ酸残基の酸化、タンパク質の高分子量化、アニオン化などを抑制して、タンパク質の変性を防ぐことができる。
【背景技術】
【０００３】
生理活性を有するエリスロポエチン、顆粒状コロニー刺激因子、インスリン、モノクローナル抗体、その他のタンパク質製剤を液状にしてシリンジなどの容器に収容した容器入りタンパク質溶液製剤は、従来から広く用いられている。
【０００４】
容器入りタンパク質溶液製剤では、タンパク質溶液製剤を収容している容器がタンパク質の変性をもたらさず、また容器へのタンパク質の吸着などが生ずることなく、タンパク質が安定に保たれることが必要である。
【０００５】
医療の分野では、重くて破損し易いガラス製の医療用容器に代えて、軽くて破損しにくくて、取り扱い性に優れるプラスチック製の容器が、近年、広く用いられている。
【０００６】
医療用容器を製造するためのプラスチック素材としては、ポリプロピレン、ポリエチレン、環状オレフィン系重合体、ポリ塩化ビニル、ポリエステル、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリメタクリレートなどが挙げられる。これらのプラスチックのうち、環状オレフィン系重合体は、透明性、耐熱性、耐放射線滅菌性、耐酸・アルカリ性、低溶出性、低不純物性、低薬品吸着性などに優れていることから、近年、医療用容器用の素材として注目され、その使用が色々試みられており、タンパク質溶液製剤においても例外ではない。
【０００７】
環状オレフィン系重合体製の容器にタンパク質溶液製剤を収容した従来技術としては、環状オレフィン系重合体製容器にエリスロポエチン、顆粒状コロニー刺激因子などのタンパク質の溶液製剤を収容した容器入りタンパク質溶液製剤（特許文献１、２）、環状オレフィン系重合体製の容器にインスリン溶液などを収容した容器入りタンパク質溶液製剤（特許文献３）などが知られている。
【０００８】
容器入りタンパク質溶液製剤では、タンパク質溶液製剤を収容する容器は滅菌されている必要がある。タンパク質は加熱により凝固や変性を生ずるため、容器にタンパク質溶液製剤を収容した後に高圧蒸気滅菌などにより加熱滅菌することができない。従って、容器入りタンパク質溶液製剤では、容器を予め滅菌処理し、そこに無菌的に調製したタンパク質溶液製剤を充填することが行われており、充填前の容器の滅菌処理法として、γ線や電子線などの放射線照射が通常採用されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】ＷＯ ０１／０１７５４
【特許文献２】特開２０１４−５１５０２号公報
【特許文献３】特表２００１−５０６８８７号公報
【特許文献４】特開２００３−１１３１１２号公報
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】「Bell．Ｓystem．Tech．J．」，36， p．449−484（1957）
【非特許文献２】H．M．Swartz H．M．，「Biological Application of Electron Spin Resonance」，p．121（1972）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１１】
上記した従来技術を踏まえて、本発明者らは、環状オレフィン系重合体製容器に放射線の１種である電子線を照射して滅菌し、滅菌した環状オレフィン系重合体製容器にタンパク質溶液製剤を収容して容器入りタンパク質溶液製剤を調製し、当該製剤中のタンパク質の安定性などについて検討したところ、タンパク質中のアミノ酸残基の酸化、タンパク質の高分子量化、タンパク質のアニオン化などのタンパク質の変性が生じていることが判明した。タンパク質中のメチオニン残基、システイン残基、リシン残基、アルギニン残基等のアミノ酸残基の酸化、タンパク質の高分子量化、タンパク質のアニオン化などのタンパク質の変性は、タンパク質の本来の生理活性の低下や消失につながる恐れがあり、望ましくない。
【００１２】
さらに、本発明者らは、環状オレフィン系重合体製容器に放射線の１種である電子線を照射して滅菌処理し、電子スピン共鳴装置を用いて当該容器を構成する環状オレフィン系重合体中のラジカル量を測定したところ、高いラジカル量を示した。本発明者らは、電子線照射により滅菌処理した環状オレフィン系重合体製容器を無菌状態で長期間保存すれば環状オレフィン系重合体中のラジカル量が低下するのではないかと考えて、電子線を照射した環状オレフィン系重合体製容器を無菌状態で室温下に６ケ月間保存したところ、ラジカル量は１ケ月保存後には大きく低減し、６ケ月保存後には電子線の照射直後の１０００分の１以下にまで低減していた。そこで、本発明者らは、電子線を照射して滅菌した後に保存してラジカル量を低減させた環状オレフィン系重合体製容器中にタンパク質溶液製剤を収容して保存試験を行ったところ、環状オレフィン系重合体中のラジカル量が大幅に低減していたにも拘らず、予想外なことに、タンパク質中のメチオニン残基がかなりの割合で酸化されていた。なお、メチオニン残基は、タンパク質を構成するアミノ酸残基の中でも特に酸化を受けやすい。
【００１３】
したがって、本発明の目的は、タンパク質溶液製剤を収容して保存しても、タンパク質の変性、特にタンパク質中のアミノ酸残基の酸化などのタンパク質の変性が生じない、タンパク質溶液製剤を収容するための、滅菌処理された環状オレフィン系重合体製の医療用容器を提供することである。
【００１４】
そして、本発明の目的は、タンパク質中のアミノ酸残基の酸化などのタンパク質の変性が生じない環状オレフィン系重合体製の滅菌容器にタンパク質溶液製剤を収容した容器入りタンパク質溶液製剤を提供することである。
【００１５】
さらに、本発明の目的は、前記した容器入りタンパク質溶液製剤を包装材で包装した、長期保存安定性に優れる包装体を提供することである。
【課題を解決するための手段】
【００１６】
本発明者らは、上記目的を達成すべく鋭意検討を重ねてきた。
【００１７】
その結果、本発明者らは、タンパク質溶液製剤を収容するための環状オレフィン系重合体製容器にγ線や電子線などの放射線を照射して滅菌していた従来技術に代えて、環状オレフィン系重合体製容器を高圧蒸気滅菌処理し、それにより得られる滅菌後の容器にタンパク質溶液製剤を収容すると、容器内に収容したタンパク質中のアミノ酸残基の酸化などのタンパク質の変性が大幅に低減し、タンパク質の変性が抑制されることを見出した。
【００１８】
また、本発明者らは、高圧蒸気滅菌処理を施した当該環状オレフィン系重合体製容器は、電子スピン共鳴装置を用いて測定したラジカル量が所定以下の低い値であることを見出した。
【００１９】
さらに、本発明者らは、上記で得られた高圧蒸気滅菌後の環状オレフィン系重合体製容器にタンパク質溶液製剤を収容し、それを脱酸素剤と共に酸素難透過性の包装材で包装した脱酸素式包装体の形態にすると、滅菌容器に起因するタンパク質中のアミノ酸残基の酸化による変性が防止できるだけでなく、タンパク質溶液製剤中に含まれていた酸素、環状オレフィン系重合体製容器内に含まれていた酸素および環状オレフィン系重合体製容器と包装材との間に存在していた酸素が脱酸素剤によって吸収除去されて、酸素によるタンパク質溶液製剤の品質低下や失活が防止され、長期保存安定性に一層優れる容器入りタンパク質溶液製剤の包装体が得られることを見出した。
【００２０】
また、本発明者らは、当該脱酸素式包装体において、遮光能を有する包装材を用いると、環状オレフィン系重合体製容器に収容したタンパク質溶液製剤の酸素による品質低下や失活が防止されるだけでなく、タンパク質溶液製剤の光による品質低下や失活も防止されて、長期保存安定性がより一層優れたものになることを見出し、それらの種々の知見に基づいて本発明を完成した。
【００２１】
ところで、蒸気滅菌した環状ポリオレフィン製容器に３２個のアミノ酸が結合したペプチドホルモンであるカルシトニンの水溶液組成物を充填すると、γ線を照射して滅菌した環状ポリオレフィン製容器にカルシトニンの水溶液組成物を充填した場合に比べて、カルシトニンの残留率が高くなることが報告されている（特許文献４）。
【００２２】
しかし、この特許文献４には、環状ポリオレフィン製容器に収容されているカルシトニン中のアミノ酸残基の酸化については全く記載されていない。まして、特許文献４には、蒸気滅菌した環状ポリオレフィン製容器に充填すると、γ線を照射して滅菌した環状ポリオレフィン製容器に充填した場合に比べて、カルシトニン中のアミノ酸残基の酸化が低減することは記載されていない。
【００２３】
更に、特許文献４には、カルシトニンの水溶液組成物を充填するための蒸気滅菌した環状ポリオレフィン製容器におけるラジカル量についても全く記載されていない。
【００２４】
したがって、本発明は、
（１）  タンパク質溶液製剤を収容するための医療用容器であって、環状オレフィン系重合体から形成され、高圧蒸気滅菌されており、当該医療用容器内に収容されるタンパク質溶液製剤中のタンパク質におけるアミノ酸残基の酸化を抑制することを特徴とする、タンパク質溶液製剤を収容するための医療用容器；
（２）  タンパク質溶液製剤を収容するための医療用容器であって、環状オレフィン系重合体から形成され、高圧蒸気滅菌されており、電子スピン共鳴装置にて測定したラジカル量が２．２×１０１５個／ｇ以下であることを特徴とする、タンパク質溶液製剤を収容するための医療用容器；および、
（３）  タンパク質溶液製剤を収容するための医療用容器であって、環状オレフィン系重合体から形成され、高圧蒸気滅菌されており、電子スピン共鳴装置にて測定したラジカル量が２．２×１０１５個／ｇ以下であり、当該医療用容器内に収容されるタンパク質溶液製剤中のタンパク質におけるアミノ酸残基の酸化を抑制することを特徴とする、タンパク質溶液製剤を収容するための医療用容器；
である。
【００２５】
また、本発明は、
（４）  医療用容器が、環状オレフィン開環重合体の水素添加物から形成されている、前記（１）〜（３）のいずれかの医療用容器；および、
（５）  シリンジまたはカートリッジである前記（１）〜（４）のいずれかの医療用容器；
である。
【００２６】
そして、本発明は、
（６）  前記（１）〜（５）のいずれかの医療用容器内にタンパク質溶液製剤を収容した、容器入りタンパク質溶液製剤；
（７）  タンパク質溶液製剤が、アミノ酸配列中にメチオニン残基またはシステイン残基を有するタンパク質からなる分子標的薬の溶液製剤である、前記（６）の容器入りタンパク質溶液製剤；
（８）  タンパク質溶液製剤が、エリスロポエチンまたはモノクローナル抗体の溶液製剤である、前記（６）または（７）の容器入りタンパク質溶液製剤；および、
（９）  プレフィルドシリンジ製剤である、前記（６）〜（８）のいずれかの容器入りタンパク質溶液製剤；
である。
【００２７】
さらに、本発明は、
（１０）  前記（６）〜（９）のいずれかの容器入りタンパク質溶液製剤を、脱酸素剤と共に、酸素難透過性の包装材で密封包装した包装体；
（１１）  脱酸素剤の酸素吸収能が、前記包装材の収納空間全体の容積の１／５以上である前記（１０）の包装体；
（１２）  ブリスター包装の形態をなしている前記（１０）または（１１）の包装体；および、
（１３）  包装体を構成する酸素難透過性の包装材が遮光能を更に有するか、または脱酸素剤と共に難酸素透過性の包装材で包装した包装体が遮光能を有する外包装材で更に包装されている前記（１０）〜（１２）のいずれかの包装体；
である。
【発明の効果】
【００２８】
放射線を照射して滅菌する代わりに、高圧蒸気滅菌によって滅菌した本発明の環状オレフィン系重合体製の医療用容器は、当該容器にタンパク質溶液製剤を収容したときに、タンパク質中のメチオニン残基などのアミノ酸残基の酸化などが生じにくくて、タンパク質の変性を防止することができるので、タンパク質溶液製剤を収容するための容器として有効である。
【００２９】
高圧蒸気滅菌によって滅菌処理した本発明の環状オレフィン系重合体製の医療用容器は、電子スピン共鳴装置を用いて測定したラジカル量が所定以下の低い値であり、当該容器内にタンパク質溶液製剤を収容したときに、タンパク質中のメチオニン残基などのアミノ酸残基の酸化が生じにくくて、タンパク質の変性を防止することができるのでは、タンパク質溶液製剤を収容するための容器として有効である。
【００３０】
高圧蒸気滅菌した本発明の環状オレフィン系重合体製医療用容器にタンパク質溶液製剤を収容してなる本発明の容器入りタンパク質溶液製剤は、タンパク質溶液製剤に含まれるタンパク質中のメチオニン残基などのアミノ酸残基の酸化などのタンパク質の変性が生じにくく、高品質を維持する。
【００３１】
本発明の容器入りタンパク質溶液製剤を脱酸素剤と共に酸素難透過性の包装材で包装した本発明の包装体は、環状オレフィン系重合体製容器に収容されているタンパク質溶液製剤中に含まれていた酸素および環状オレフィン系重合体製容器の空間内に存在していた酸素が環状オレフィン系重合体製容器の器壁を通して脱酸素剤に吸収され、更に環状オレフィン系重合体製容器と包装材との間の空間に存在していた酸素が脱酸素剤によって吸収除去されて、包装体全体が低酸素状態に維持される。そのため、本発明の包装体は、高圧蒸気滅菌した環状オレフィン系重合体製容器を用いていることによるタンパク質溶液製剤に含まれるタンパク質中のメチオニン残基などのアミノ酸残基の酸化防止、タンパク質の高分子量化の防止、タンパク質のアニオン化の防止などと、脱酸素剤による酸素の吸収作用とが相俟って、タンパク質溶液製剤の品質低下や失活が一層効果的に防止されて、長期保存安定性により優れる。
【００３２】
本発明の容器入りタンパク質溶液製剤を脱酸素剤と共に酸素難透過性の包装材で包装し田包装体であって、しかも遮光能を有する包装材で包装された本発明の包装体は、タンパク質溶液製剤に含まれるタンパク質中のメチオニン残基などのアミノ酸残基の酸化、タンパク質の高分子量化、タンパク質のアニオン化がより一層抑制され、タンパク質溶液製剤の品質低下や失活がより一層効果的に防止されるため、長期保存安定性により一層優れる。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１】図１は、本発明の容器入りタンパク質溶液製剤を脱酸素剤と共に酸素難透過性の包装材で密封包装した本発明の包装体の一例を示す図である。
【図２】図２は、容器入りタンパク質溶液製剤を脱酸素剤と共に酸素難透過性の包装材で密封包装した本発明の包装体を、遮光能を有する外包装材（外袋）でさらに包装した本発明の包装体の一例を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
以下に、本発明について詳細に説明する。
【００３５】
タンパク質溶液製剤を収容するための本発明の医療用容器（タンパク質溶液製剤を収容する前の医療用容器）は、環状オレフィン系重合体から形成されている。
【００３６】
本発明の医療用容器を形成する環状オレフィン系重合体は、医療用容器の製造に用い得ることが従来から知られている環状オレフィン系重合体であればいずれでもよい。
【００３７】
そのうちでも、本発明の医療用容器は、（ａ）環状オレフィン開環重合体（ＣＯＰ）、（ｂ）環状オレフィン開環重合体の水素添加物（ＣＯＰ）、および（ｃ）環状オレフィンと非環状オレフィンの共重合体（ＣＯＣ）の中の１種または２種以上を用いて形成されていることが好ましい。
【００３８】
前記（ａ）〜（ｃ）の環状オレフィン系重合体を構成する環状オレフィンは、単環式環状オレフィン、多環式環状オレフィン、橋架け構造を有する多環式環状オレフィンまたはそれらの併用のいずれであってもよい。当該環状オレフィンの好ましい例として、置換されたまたは置換されていないノルボルネン系単量体、置換されたまたは置換されていないテトラシクロドデセン系単量体、置換されたまたは置換されていないジシクロペンタジエン系単量体、側鎖にシクロヘキシル基、フェニル基を有する環状ポリオレフィンなどを挙げることができる。
【００３９】
また、前記（ｃ）の環状オレフィン共重合体（ＣＯＣ）を構成する非環状オレフィンと
しては、例えば、エチレン、プロピレン、ブテン、イソブチレン、メチルペンテンなどを挙げることができ、これらの１種または２種以上を用いることができる。
【００４０】
限定されるものではないが、上記（ａ）の環状オレフィン開環重合体（ＣＯＰ）の典型例としては、置換または非置換のノルボルネンの開環重合体、置換または非置換のジシクロペンタジエンの開環重合体、置換または非置換のテトラシクロドデセンの開環重合体、置換または非置換のジシクロペンタジエンと置換または非置換のテトラシクロドデセンの開環共重合体などを挙げることができる。
【００４１】
限定されるものではないが、上記（ｂ）の環状オレフィン開環重合体の水素添加物（ＣＯＰ）の典型例としては、置換または非置換のノルボルネンの開環重合体の水素添加物、置換または非置換のジシクロペンタジエンの開環重合体の水素添加物、置換または非置換のテトラシクロドデセンの開環重合体の水素添加物、置換または非置換のジシクロペンタジエンと置換または非置換のテトラシクロドデセンの開環共重合体の水素添加物などを挙げることができる。
【００４２】
限定されるものではないが、上記（ｃ）の環状オレフィンと非環状オレフィンの共重合体（ＣＯＣ）の典型例としては、置換または非置換のノルボルネンとエチレンやその他の非環状オレフィンの共重合体、置換または非置換のテトラシクロドデセンとエチレンやその他の非環状オレフィンとの共重合体、側鎖にシルロヘキシル基、フェニル基を有する環状オレフィンとエチレンやその他の非環状オレフィンとの共重合体などを挙げることができる。
【００４３】
上記した（ａ）および（ｂ）の環状オレフィン系重合体（ＣＯＰ）に該当する具体的な商品としては、例えば、「ゼオネックス」（登録商標、日本ゼオン株式会社製）、「ゼオノア」（登録商標、日本ゼオン株式会社製）などを挙げることができる。
【００４４】
上記した（ｃ）の環状オレフィン共重合体（ＣＯＣ）に該当する具体的な商品としては、例えば、「アペル」（登録商標、三井化学株式会社製）、「トパス」（登録商標、」ポリプラスチック株式会社製）などを挙げることができる。
【００４５】
本発明の医療用容器は、いずれの環状オレフィン系重合体から形成されていてもよい。
【００４６】
そのうちでも、本発明の医療用容器は、環状オレフィン開環重合体の水素添加物（ＣＯＰ）から形成されていることが好ましい。環状オレフィン開環重合体の水素添加物（ＣＯＰ）は、主鎖に炭素−炭素間の二重結合を含まないため、重合体中にラジカルが発生し難く、タンパク質の酸化変性をより防止することができる。
【００４７】
本発明の医療用容器は、環状オレフィン系重合体単独から形成されていてもよいし、高圧蒸気滅菌処理時の高温に耐え得る限りは、容器の内壁を構成する最内層である環状オレフィン系重合体層と他の重合体層からなる積層構造を有していてもよいし、または本発明の主旨を逸脱しない限りにおいて環状オレフィン系重合体と他の重合体とのブレンド物から形成されていてもよい。
【００４８】
また、医療用容器の種類などに応じて、容器本体が環状オレフィン系重合体から形成され、栓体、ガスケット、プランジャー、その他の部分は、それぞれに求められる特性に応じて、弾性体、他のプラスチック、金属、その他の材料から形成されていてもよい。
【００４９】
本発明の医療用容器の種類、形状、サイズなどは特に制限されず、医療用容器に収容するタンパク質溶液製剤の種類、用途、投与方法などに応じて選択することができる。
【００５０】
本発明の医療用容器は、例えば、シリンジ（注射筒）、ペン型注入器等に用いるカートリッジ、バイアル、ボトル、バッグなどの形態にすることができる。
【００５１】
そのうちでも、本発明の医療用容器は、シリンジ（注射筒）またはカートリッジの形態であることが好ましい。これらの形態の医療用容器では、収容されたタンパク質溶液製剤を他の医療器具に移し替えることなく投与できるため、投与時のタンパク質の変性を抑えることができる。
【００５２】
また、本発明の医療用容器は、例えば、内容積が０．５ｍＬ〜５Ｌの容器とすることができる。
【００５３】
本発明の環状オレフィン系重合体製の医療用容器は、タンパク質溶液製剤の容器への収容前に、高圧蒸気滅菌されていることが必要である。
【００５４】
高圧蒸気滅菌処理の温度および圧力は、容器を形成している環状オレフィン系重合体の種類、容器の形状、容器の種類、容器のサイズ、容器壁の厚さなどによって異なり得るが、医療用容器の変形、医療用容器を形成する環状オレフィン系重合体の変質や分解などを防ぎながら、短い時間で、滅菌を完全に行うためには、一般的には、加熱温度は１１５〜１３４℃が好ましく、１２０〜１２５℃がより好ましく、１２１〜１２３℃が更に好ましい。
【００５５】
高圧蒸気滅菌処理の時間は、環状オレフィン系重合体の種類、容器の形状、容器の種類、容器のサイズ、容器壁の厚さなどによって異なり得るが、一般的には１５〜６０分間が好ましく、１５〜３０分間がより好ましく、２０〜３０分間が更に好ましい。
【００５６】
高圧蒸気滅菌してなる本発明の環状オレフィン系重合体製容器では、容器を形成している環状オレフィン系重合体における、電子スピン共鳴装置を使用して測定したラジカル量が、２．２×１０１５個／ｇ以下であることが好ましく、２．０×１０１５個／ｇ以下であることがより好ましく、１．８×１０１５個／ｇ以下であることがさらに好ましい。
【００５７】
本明細書における「電子スピン共鳴装置にて測定したラジカル量」とは、電子スピン共鳴装置を使用して、非特許文献１および２に記載されている方法に準じて測定したラジカル量をいい、詳細な測定方法については、以下の実施例の項に記載するとおりである。
【００５８】
高圧蒸気滅菌してなる本発明の医療用容器は、タンパク質溶液製剤を収容するための容器として用いられ、かかる点から、本発明は、本発明の医療用容器にタンパク質溶液製剤を予め収容した容器入りタンパク質溶液製剤を本発明の範囲に包含する。
【００５９】
本発明の医療用容器に収容するタンパク質溶液製剤としては、生理活性のあるタンパク質であって、医療分野で用いられるタンパク質の溶液製剤が好ましく用いられ、そのうちでも、タンパク質を構成するアミノ酸配列中にメチオニン残基およびシステイン残基の一方または両方、特にメチオニン残基を有する生理活性のあるタンパク質の溶液製剤が好ましく用いられる。
【００６０】
何ら限定されるものではないが、本発明で好ましく用いられるタンパク質溶液製剤の例としては、エリスロポエチン、顆粒球コロニー刺激因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、トロンボポエチンなどの造血因子、モノクローナル抗体、サイトカイン、アンタゴニスト、アゴニストなどの分子標的薬、血清アルブミン、組織プラスミノーゲン活性化因子、インシュリン、幹細胞成長因子、インターフェロンおよびインターロイキンなど
のタンパク質を含む溶液製剤を挙げることができる。
【００６１】
メチオニン残基は、タンパク質を構成するアミノ酸残基の中でも特に酸化を受けやすく、システイン残基は、酸化により分子内または分子間でジスフィド架橋を形成し、タンパク質の高次構造に影響を与える。このため、本発明の医療用容器は、エリスロポエチン、アバタセプト、エタネルセプト、アダリムマブ、リツキシマブ、トラスツズマブ、パリビズマブなどのアミノ酸配列中にメチオニン残基またはシステイン残基を有するタンパク質を含む溶液製剤を収容するための容器として適している。
【００６２】
さらに、モノクローナル抗体、アンタゴニスト、アゴニストなどのタンパク質からなる分子標的薬では、その高次構造が薬剤としての効果を発揮する上で特に重要である。このため、本発明の医療用容器は、アバタセプト、エタネルセプト、アダリムマブ、リツキシマブ、トラスツズマブ、パリビズマブなどのアミノ酸配列中にメチオニン残基またはシステイン残基を有するタンパク質からなる分子標的薬を含む溶液製剤を収容するための容器として特に適している。
【００６３】
本発明の医療用容器に収容するタンパク質溶液製剤の配合内容、ｐＨやその他の物性は特に制限されず、タンパク質溶液製剤の種類などに応じて、それぞれのタンパク質溶液製剤において従来から採用されている配合内容や物性にすることができる。
【００６４】
本発明の医療用容器に収容するタンパク質溶液製剤は、安定化剤、緩衝剤、溶解補助剤、等張化剤、ｐＨ調整剤、無痛化剤、還元剤、酸化防止剤やその他の成分の１種または２種以上を必要に応じて含有してもよい。
【００６５】
タンパク質溶液製剤が含有し得る安定化剤としては、例えば、非イオン界面活性剤（ソルビタン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビット脂肪酸エステル、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンミツロウ誘導体、ポリオキシエチレンラノリン誘導体、ポリオキシエチレン脂肪酸アミド、レシチン、グリセロリン脂質、スフィンゴリン脂質、ショ糖脂肪酸エステルなど）、陰イオン界面活性剤（アルキル硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、アルキルスルホコハク酸エステル塩など）などの界面活性剤；アミノ酸などを挙げることができる。
【００６６】
そのうちでも、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルが好ましく、特にポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（ポリソルベート８０）および／またはポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート（ポリソルベート２０）がより好ましい。
【００６７】
また、安定化剤として用い得るアミノ酸の具体例としては、ロイシン、トリプトファン、セリン、グルタミン酸、アルギニン、ヒスチジン、リジン、メチオニン、フェニルアラニンおよびアセチルトリプトファン、それらの塩などを挙げることができ、アミノ酸はＬ−体、Ｄ−体、ＤＬ−体のいずれであってもよい。
【００６８】
そのうちでも、Ｌ−ロイシン、Ｌ−トリプトファン、Ｌ−グルタミン酸、Ｌ−アルギニン、Ｌ−ヒスチジン、Ｌ−リジン、これらの塩が好ましく用いられる。
【００６９】
緩衝剤としては、例えば、リン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウムなどのリン酸塩、クエン酸ナトリウムなどのクエン酸塩などを挙げることができる。
【００７０】
溶解補助剤としては、例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート（ポリソルベート８０）および／またはポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート（ポリソルベート２０）、クレモフォール、エタノール、ドデシリベンゼンスルホン酸ナトリウムなどを挙げることができる。
【００７１】
等張化剤としては、例えば、ポリエチレングリコール；デキストラン、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、グルコース、フラクトース、ラクトース、キシロース、マンノース、マルトース、シュークロース、ラフィノースなどの糖類などを挙げることができる。
【００７２】
本発明の医療用容器に収容するタンパク質溶液製剤中のタンパク質含量は特に制限されず、タンパク質の種類、タンパク質溶液製剤の用途、使用形態などに応じて調整することができる。
【００７３】
また、本発明では、市場で流通し販売されているタンパク質溶液製剤を本発明の医療用容器に収容して、容器入りタンパク質溶液製剤としてもよい。
【００７４】
本発明の容器入りタンパク質溶液製剤としては、タンパク質溶液製剤を予め収容した形態で流通、販売される、プレフィルドシリンジ製剤、プレフィルドバッグ製剤、プレフィルドボトル製剤などを挙げることができる。そのうちでも、特に好適な容器入りタンパク質溶液製剤は、環状オレフィン系重合体製のシリンジまたはカートリッジにタンパク質溶液製剤を予め収容したプレフィルドシリンジ製剤である。
【００７５】
本発明の容器入りタンパク質溶液製剤が、タンパク質溶液製剤を収容したプレフィルドシリンジ製剤またはカートリッジ製剤である場合には、プレフィルドシリンジ製剤におけるシリンジ本体（注射筒）またはカートリッジとして、予め高圧蒸気滅菌した環状オレフィン系重合体製の注射筒またはカートリッジを用い、当該注射筒の先端に注射針を取り付けた状態でまたは取り付けずに先端部を封止し、そこに無菌的に調製したタンパク質溶液製剤を充填した後、注射筒の後端に、弾性体製のガスケットを挿入するかまたはガスケットを取り付けたプランジャーを挿入して密封することによって、タンパク質溶液製剤入りのプレフィルドシリンジ製剤またはカートリッジを得ることができる。
【００７６】
本発明の医療用容器にタンパク質溶液製剤を収容してなる容器入りタンパク質溶液製剤は、適当な包装材で包装して保存、流通、販売してもよいが、当該容器入りタンパク質溶液製剤を、脱酸素剤と共に酸素難透過性の包装材で密封包装した包装体（以下、これを「脱酸素式包装体」ということがある）の形態にして保存、流通、販売することが好ましく、本発明は、当該脱酸素式包装体を本発明の範囲に包含する。
【００７７】
本発明の脱酸素式包装体では、環状オレフィン系重合体製容器と包装材との間の空間に存在していた酸素が脱酸素剤によって吸収除去され、更に環状オレフィン系重合体製容器に収容されているタンパク質溶液製剤中に含まれていた酸素および環状オレフィン系重合体製容器の空間内に存在していた酸素が環状オレフィン系重合体製容器の器壁を通して脱酸素剤に吸収されて、タンパク質溶液製剤中も含めた、脱酸素式包装体全体が低酸素状態に維持される。そのため、本発明の脱酸素式包装体では、高圧蒸気滅菌した環状オレフィン系重合体製容器を用いていることによるタンパク質溶液製剤に含まれるタンパク質中のアミノ酸残基の酸化防止と、脱酸素剤による酸素の吸収とが相俟って、タンパク質溶液製剤の酸化による品質低下や失活が一層効果的に防止されて、長期保存安定性により優れる。
【００７８】
更に、本発明の脱酸素式包装体において、遮光能を有する包装材を用いて包装したものは、環状オレフィン系重合体製容器に収容したタンパク質溶液製剤中のタンパク質の酸化による品質低下や失活が防止されるだけでなく、光による品質低下や失活も防止されるため、長期保存安定性により一層優れている。
【００７９】
本発明の脱酸素式包装体を、遮光能を更に有する包装体にするには、例えば、
（ａ）高圧蒸気滅菌された環状オレフィン系重合体製容器に収容したタンパク質溶液製剤を、脱酸素剤と共に、酸素難透過性で且つ遮光能を有する包装材を用いて密封包装する；（ｂ）高圧蒸気滅菌された環状オレフィン系重合体製容器に収容したタンパク質溶液製剤を、脱酸素剤と共に、酸素難透過性の包装材を用いて密封包装した後、遮光能を有する外包装材を用いて更に包装する；
などの方式を採用することができる。
【００８０】
本発明の脱酸素式包装体に用いる酸素難透過性の包装材としては、一般に汎用されている酸素難透過性のフィルムやシートを使用することができ、例えば、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリエチレンナフタレート（ＰＥＮ）、エチレン・ビニルアルコール共重合体（ＥＶＯＨ）、ポリ塩化ビニリデン（ＰＶＤＣ）、塩化ビニリデン・塩化ビニル共重合体、塩化ビニリデン・アクリル酸エステル共重合体、ポリアクリロニトリル、ポリビニルアルコール、ポリアミドからなるフィルムやシート、これらの少なくとも１つを含む多層フィルムや多層シートなどを挙げることができる。
【００８１】
限定されるものではないが、酸素難透過性の包装材の具体例としては、ポリプロピレン、ポリエチレンなどポリオレフィン、ポリ塩化ビニル、ポリエステル、ポリスチレン／ポリプロピレン樹脂などの樹脂からなる層と、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリエチレンナフタレート（ＰＥＮ）、エチレン・ビニルアルコール共重合体（ＥＶＯＨ）、ポリ塩化ビニリデン（ＰＶＤＣ）、塩化ビニリデン・塩化ビニル共重合体、塩化ビニリデン・アクリル酸エステル共重合体、ポリアクリロニトリル、ポリビニルアルコール、ポリアミドなどの酸素難透過性の樹脂からなる層を有する多層フィルムまたは多層シート（具体例としては、ポリプロピレン／エチレン−ビニルアルコール系共重合体／ポリプロピレン三層フィルム、ポリエチレンテレフタレート／エチレン−ビニルアルコール系共重合体／ポリプロピレン三層フィルム、ポリエチレンテレフタレート層とエチレン−ビニルアルコール系共重合体層からなるフィルムなど）などを挙げることができる。
【００８２】
また、難酸素透過性で且つ遮光能を有する包装材としては、
＊上記で挙げた酸素難透過性の重合体よりなる酸素難透過性の単層フィルムや単層シートの一方または両方の表面に、アルミ箔層、アルミ蒸着層、酸化アルミ蒸着層、酸化ケイ素蒸着層などの遮光能を有する層を積層したシートまたはフィルムからなる包装材；
＊上記した酸素難透過性の多層フィルムや多層シートの表面や層間にアルミ箔層、アルミ蒸着層、酸化アルミ蒸着層、酸化ケイ素蒸着層などの遮光能を有する層を積層した多層シートまたは多層フィルムからなる包装材；
などを挙げることができる。
【００８３】
限定されるものではないが、本発明の脱酸素式包装体で有効に用い得る、酸素難透過性で且つ遮光能を有する包装材の具体例としては、
《１》２軸延伸ポリアミド（ＯＰＡ）／ポリエチレン（ＰＥ）／アルミニウム蒸着ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）／ポリエチレン（ＰＥ）の層構造を有する積層フィルムまたは積層シート；
《２》ＯＰＡ／ＰＥ／アルミニウム蒸着ＰＥＴ／ＰＥの層構造を有する積層フィルムまたは積層シート；
《３》ＯＰＡ／ＰＥ／アルミニウム箔／ＰＥ／ＰＥの層構造を有する積層フィルムまた
は積層シート；
《４》ＯＰＡ／ＰＥ／アルミニウム箔／ＰＥ／ＰＥＴ／ＰＥの層構造を有する積層フィルムまたは積層シート；
《５》ＰＥＴ／ＰＥ／アルミニウム蒸着ＰＥＴ／ＰＥ／エチレン−酢酸ビニル共重合体（ＥＶＡ）／ＰＥの層構造を有する積層フィルムまたは積層シート」；
《６》ポリ塩化ビニリデン／ＰＥ／アルミニウム蒸着ＰＥＴ／ＰＥの層構造を有する積層フィルムまたは積層シート；
《７》ＰＥＴ／アルミニウム蒸着エチレン−ビニルアルコール共重合体（ＥＶＯＨ）／ＰＥの層構造を有する積層フィルムまたは積層シート；
などを挙げることができる。
【００８４】
また、酸素難透過性の包装材とは別に遮光能を有する包装材を用いて脱酸素式包装体を包装する場合は、遮光能を有する包装材としては、例えば、アルミニウム箔、酸素難透過性でない何らの基材シートや基材フィルム上にアルミニウム箔層またはアルミニウム蒸着層を形成したシートまたはフィルム、アルミニウムなどの金属から形成された缶などの金属製容器、厚紙などの遮光性を有する紙から形成された袋や箱容器などを挙げることができる。
【００８５】
包装材として用いられる酸素難透過性のフィルムまたはシート、酸素難透過性で且つ遮光能を有するフィルムまたはシート、酸素難透過性でないが遮光能を有するフィルムやシートなどは、その表面、裏面および／または層間に接着剤層を更に有していてもよいし、またその表面、裏面、層間に印刷などが施されていてもよい。
【００８６】
本発明の脱酸素式包装体は、当該包装体の構造や形状などに応じて、１種類の酸素難透過性の包装材のみを用いて形成されていてもよいし、２種類以上の酸素難透過性の包装材を用いて形成されていてもよい。例えば、容器入りタンパク質溶液製剤がプレフィルドシリンジ製剤であって、当該プレフィルドシリンジ製剤を脱酸素剤と共にブリスター方式によって包装する場合には、当該ブリスター方式の包装体を、プレフィルドシリンジ製剤を収納する凹部を有する本体部分と、当該凹部にプレフィルドシリンジ製剤を収納した後にその上面を覆う被覆部分を、各々に求められる機能などに応じて、互いに異なる酸素難透過性のフィルムまたはシート、或いは互いに異なる酸素難透過性で且つ遮光能を有するフィルムまたはシートから形成し、両者をその周縁などで密封した構造にすることができる。また、前記したブリスター方式の包装体が遮光能を有していない場合には、当該ブリスター方式の包装体の全体を、遮光能を有する包装材で包んでもよいし、遮光能を有する容器中に収納してもよい。
【００８７】
図１に示すようなブリスター方式の包装体において、ボトム材３およびトップ材５のそれぞれを、酸素難透過性でかつ遮光能を有するフィルムやシートから形成すると、酸素難透過性でかつ遮光能を有するブリスター包装体を得ることができるので、望ましい。これにより、遮光能を有する外包装材を別途使用することなく、一回の包装で遮光能を有する脱酸素式包装体とすることができ、しかも外包装材が不要となるため保管の際にスペースをとらず、更には使用時にブリスター包装体から環状オレフィン系重合体容器入りのタンパク質溶液製剤を簡単に取り出すことができる。
【００８８】
また、ブリスター包装体は、袋などに収容された包装体に比べて、輸送時などの振動が環状オレフィン系重合体容器入りのタンパク質溶液製剤に伝わりにくいため、タンパク質溶液製剤にかかる物理的なストレスが軽減され、タンパク質溶液製剤の品質低下や失活などが効果的に防止される。
【００８９】
限定されるものではないが、酸素難透過性でかつ遮光能を有するブリスター包装体とし
ては、前記した《１》〜《７》の積層シートのいずれかをトップ材５として用いると共に、ボトム材３としてポリプロピレン／エチレン−ビニルアルコール系共重合体（ＥＶＯＨ）／顔料（カーボンブラックなど）含有ポリプロピレン積層シートを用いたブリスター包装体などを挙げることができる。
【００９０】
本発明の脱酸素式包装体では、脱酸素剤として、医療分野において従来から用いられている脱酸素剤のいずれもが使用できる。限定されるものではないが、本発明で用い得る脱酸素剤の例としては、水酸化鉄、酸化鉄、炭化鉄などの鉄化合物を有効成分とするものを挙げることができる。
【００９１】
市販品としてはエージレス（登録商標、三菱ガス化学株式会社製）、モジュラン（登録商標、日本化薬株式会社製）、セキュール（登録商標、ニッソーファイン株式会社製）などを挙げることができる。
【００９２】
脱酸素剤の酸素吸収能は、酸素式包装体における収納空間全体の容積の１／５以上であることが好ましく、１／３以上であることがより好ましく、２倍以上であることがさらに好ましい。これにより、より確実にタンパク質溶液製剤中も含めた脱酸素式包装体全体が低酸素状態に維持され、タンパク質溶液製剤の酸化による品質低下や失活がより一層効果的に防止される。
【実施例】
【００９３】
以下に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。
【００９４】
以下の例において、医療用容器のラジカル量は以下のようにして求めた。
【００９５】
［医療用容器のラジカル量］
医療用容器［シリンジ本体（注射筒）］の長さ方向の中央に相当する箇所の壁部から縦×横＝３ｍｍ×３ｍｍの試験片を切り取り、直径約３．５ｍｍのサンプルチューブに入れ、電子スピン共鳴装置（Ｂｒｕｋｅｒ社製「ＥＬＥＸＳＹＳ  Ｅ５８０」）を使用して、以下の条件でラジカル量を測定し、試験片１ｇ当たりのラジカル量（個）を求めた。
【００９６】
［ラジカル量の測定条件］
・設定温度：室温（２５℃）
・中心磁場：３５１７Ｇ付近
・磁場掃引幅：４００Ｇ
・変調：１００ｋＨｚ、２Ｇ
・マイクロ波：９．８５ＧＨｚ、０．１ｍＷ
・掃引時間：８３．８９ｓ×４回
・時定数：１６３．８４ｍｓ
・データポイント数：１０２４
・キャビティー：ＴＥ００１、円筒型
また、以下の実施例１、比較例１、参考例１、実施例２および実施例３では、環状オレフィン系重合体製の医療用容器として、次のものを使用した。
【００９７】
［環状オレフィン系重合体製の医療用容器］
環状ポリオレフィン重合体（ＣＯＰ）（比重＝約１）（「ゼオネックス」（登録商標、日本ゼオン株式会社製））を用いてインサート射出成形によって製造した、プレフィルドシリンジ製剤用の注射針付きシリンジ本体（シリンジサイズ：ＩＳＯ規格１１０４０−６の１ｍＬ−Ｌｏｎｇに準拠、注射針：２７Ｇ）。
【００９８】
《製造例１》［エリスロポエチン溶液製剤の製造］
エリスロポエチン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社製）を、２ｍＭのＮａ２ＨＰＯ４と０．０６ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０を含有する水溶液に加えて完全に溶解させて、エリスロポエチンの濃度が２４，０００ＩＵ／ｍＬの溶液を製造し、この溶液を以下の実施例１、比較例１、参考例１、実施例２において、エリスロポエチン溶液製剤として用いた。
【００９９】
《実施例１》
（１）  環状オレフィン重合体（ＣＯＰ）製のシリンジ本体の先端にイソプレンゴム製のキャップを取り付けて針先を封止したシリンジ（注射筒）２４個をオートクレーブに入れて、１２１℃で２０分間、高圧蒸気滅菌した。
【０１００】
（２）  上記（１）で高圧蒸気滅菌した２４個のシリンジを、６個ずつ４つのグループＩａ，ＩＩａ，ＩＩＩａおよびＩＶａに分けた。
【０１０１】
（３）（ｉ）  第１のグループＩａのシリンジ６個をさらに３個ずつ２つのグループＩａ１とＩａ２に分けた。
【０１０２】
（ｉｉ）  グループＩａ１の３個のシリンジについては、上記（１）の高圧蒸気滅菌の直後に、シリンジ本体の長さ方向の中央に相当する箇所の壁部から縦×横＝３ｍｍ×３ｍｍの試験片（重量：約４６〜６１ｍｇ）を切り取って、電子スピン共鳴装置を使用して上記した方法でラジカル量を測定し、３個の平均値を採って高圧蒸気滅菌処理直後のシリンジ本体のラジカル量を求めた。
【０１０３】
その結果を下記の表１に示す。
【０１０４】
（ｉｉｉ）（ａ）  グループＩａ２の３個のシリンジについては、それぞれに製造例１で製造したエリスロポエチン溶液製剤１．０ｍＬを充填し、後端開口部に、ブチルゴム製のガスケットを先端に取り付けたプランジャーを、０．２ｍＬのヘッドスペースが残るようにして挿入して封止し、高圧蒸気滅菌直後のシリンジ内にエリスロポエチン溶液製剤を収容した３個のプレフィルドシリンジ製剤を製造した。
【０１０５】
（ｂ）  上記（ａ）で製造した３個のプレフィルドシリンジ製剤を、温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で４週間保存した後、シリンジ内に収容されているエリスロポエチン溶液製剤に含まれているエリスロポエチン中のメチオニン残基の酸化割合を下記の方法で測定し、３個の試料の平均値を採って、メチオニン残基の酸化割合（％）とした。
【０１０６】
その結果を下記の表１に示す。
【０１０７】
《エリスロポエチン中のメチオニン残基の酸化割合》
（ｉ）  エリスロポエチン溶液製剤１００μＬと酢酸アンモニウム４００μＬ（１００ｍＭ、ｐＨ８．０）の混合物を遠心濾過器（Ｍｉｌｉｐｏｒｅ  Ｉｒｅｌａｎｄ  Ｌｔｄ．製「Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａ−０．５  １０Ｋ）の受け皿に入れて、１４，０００Ｇで１５分間遠心分離した。
【０１０８】
（ｉｉ）  濾紙上の残渣を回収し、回収した残渣に、酢酸アンモニウム溶液（１００ｍＭ、ｐＨ８．０）を加えて全量を５０μＬにした。これに、酸化メチオニンフラグメントと未酸化メチオニンフラグメントを分離するため、１μｇ／ｍＬ  Ｇｌｕ−Ｃ（ｐＨ５．６）と１００ｍＭ  酢酸アンモニウムを加えた。
【０１０９】
（ｉｉｉ）  次いで、試料を３７℃で２４時間インキュベートした後、１０ｍＭ  酢酸アンモニウム溶液（ｐＨ８．０）で希釈し、以下の条件で高速液体クロマトグラフフィー分析（ＨＰＬＣ）を行って、酸化メチオニンフラグメントの量と未酸化メチオニンフラグメントの量を測定した。
【０１１０】
［ＨＰＬＣの条件］
・移動相Ａ：０．０５％トリフルオロ酢酸水溶液
・移動相Ｂ：０．０５％のトリフルオロ酢酸を含有するアセトニトリル
・カラム：オクタデシル基結合シリカゲルカラム（Ｉｎｅｒｔｓｉｌ  ＯＤＳ−３）（５μｍ、２０５ｍｍ×２．１ｍｍ  ｉ．ｄ．）
・カラム温度：４０℃、
・注入量：３０μＬ
・トータル流速：０．２５ｍＬ／ｍｉｎ
・フローモード：直線勾配モード
・測定波長：２８０ｎｍ
（ｉｖ）  上記（ｉｉｉ）で測定した酸化メチオニンフラグメントの量（Ｍｆｂ）と未酸化メチオニンフラグメント（Ｍｆａ）の量から、以下の数式＜１＞にしたがって、エリスロポエチン中のメチオニン残基の酸化割合（％）を求めた。
【０１１１】
メチオニン残基の酸化割合（％）＝｛Ｍｆｂ／（Ｍｆａ＋Ｍｆｂ）｝×１００  ＜１＞
（４）（ｉ）  第２のグループＩＩａのシリンジ６個を、上記（１）の高圧蒸気滅菌後に温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で１ケ月間保存した後、さらに３個ずつ２つのグループＩＩａ１とＩＩａ２に分けた。
【０１１２】
（ｉｉ）  グループＩＩａ１の３個のシリンジについては、上記（ｉ）の１ケ月間の保存後に、シリンジ本体の長さ方向の中央に相当する箇所の壁部から縦×横＝３ｍｍ×３ｍｍの試験片（重量：約４６〜６１ｍｇ）を切り取って、電子スピン共鳴装置を使用して上記した方法でラジカル量を測定し、３個の平均値を採って高圧蒸気滅菌後に１ケ月間保存したときのシリンジ本体のラジカル量を求めた。
【０１１３】
その結果を下記の表１に示す。
【０１１４】
（ｉｉｉ）（ａ）  グループＩＩａ２の３個のシリンジについては、上記（ｉ）の高圧蒸気滅菌後の１ケ月間の保存後に、それぞれに製造例１で製造したエリスロポエチン溶液製剤１．０ｍＬを充填し、後端開口部に、ブチルゴム製のガスケットを先端に取り付けたプランジャーを、０．２ｍＬのヘッドスペースが残るようにして挿入して封止し、シリンジ内にエリスロポエチン溶液製剤を収容した３個のプレフィルドシリンジ製剤を製造した。
【０１１５】
（ｂ）  上記（ａ）で製造した３個のプレフィルドシリンジ製剤を、温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で４週間保存した後、シリンジ内に収容されているエリスロポエチン溶液製剤に含まれているエリスロポエチン中のメチオニン残基の酸化割合を上記した方法で測定し、３個の試料の平均値を採って、メチオニン残基の酸化割合（％）とした。
【０１１６】
その結果を下記の表１に示す。
【０１１７】
（５）（ｉ）  第３のグループＩＩＩａのシリンジ６個を、上記（１）の高圧蒸気滅菌後に温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で３ケ月間保存した後、さらに３個ずつ２つのグループＩＩＩａ１とＩＩＩａ２に分けた。
【０１１８】
（ｉｉ）  グループＩＩＩａ１の３個のシリンジについては、上記（ｉ）の３ケ月間の保存後に、シリンジ本体の長さ方向の中央に相当する箇所の壁部から縦×横＝３ｍｍ×３ｍｍの試験片（重量：約４６〜６１ｍｇ）を切り取って、電子スピン共鳴装置を使用して上記した方法でラジカル量を測定し、３個の平均値を採って。高圧蒸気滅菌処理後に３ケ月間保存したときのシリンジ本体のラジカル量を求めた。
【０１１９】
その結果を下記の表１に示す。
【０１２０】
（ｉｉｉ）（ａ）  グループＩＩＩａ２の３個のシリンジについては、上記（ｉ）の高圧蒸気滅菌後の３ケ月間の保存後に、それぞれに製造例１で製造したエリスロポエチン溶液製剤１．０ｍＬを充填し、後端開口部に、ブチルゴム製のガスケットを先端に取り付けたプランジャーを、０．２ｍＬのヘッドスペースが残るようにして挿入して封止し、シリンジ内にエリスロポエチン溶液製剤を収容した３個のプレフィルドシリンジ製剤を製造した。
【０１２１】
（ｂ）  上記（ａ）で製造した３個のプレフィルドシリンジ製剤を、温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で４週間保存した後、シリンジ内に収容されているエリスロポエチン溶液製剤に含まれているエリスロポエチン中のメチオニン残基の酸化割合を上記した方法で測定し、３個の試料の平均値を採って、メチオニン残基の酸化割合（％）とした。
【０１２２】
その結果を下記の表１に示す。
【０１２３】
（６）（ｉ）  第４のグループＩＶａのシリンジ６個を、上記（１）の高圧蒸気滅菌後に温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で６ケ月間保存した後、さらに３個ずつ２つのグループＩＶａ１とＩＶａ２に分けた。
【０１２４】
（ｉｉ）  グループＩＶａ１の３個のシリンジについては、上記（ｉ）の高圧蒸気滅菌後の６ケ月間の保存後に、シリンジ本体の長さ方向の中央に相当する箇所の壁部から縦×横＝３ｍｍ×３ｍｍの試験片（重量：約４６〜６１ｍｇ）を切り取って、電子スピン共鳴装置を使用して上記した方法でラジカル量を測定し、３個の平均値を採って、高圧蒸気滅菌処理後に６ケ月間保存したときのシリンジ本体のラジカル量を求めた。
【０１２５】
その結果を下記の表１に示す。
【０１２６】
（ｉｉｉ）（ａ）  グループＩＶａ２の３個のシリンジについては、上記（ｉ）の高圧蒸気滅菌後の６ケ月間の保存後に、それぞれに製造例１で製造したエリスロポエチン溶液製剤１．０ｍＬを充填し、後端開口部に、ブチルゴム製のガスケットを先端に取り付けたプランジャーを、０．２ｍＬのヘッドスペースが残るようにして挿入して封止し、シリンジ内にエリスロポエチン溶液製剤を収容した３個のプレフィルドシリンジ製剤を製造した。
【０１２７】
（ｂ）  上記（ａ）で製造した３個のプレフィルドシリンジ製剤を、温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で４週間保存した後、シリンジ内に収容されているエリスロポエチン溶液製剤に含まれているエリスロポエチン中のメチオニン残基の酸化割合を上記した方法で上記した方法で測定し、３個の試料の平均値を採って、メチオニン残基の酸化割合（％）とした。
【０１２８】
その結果を下記の表１に示す。
【０１２９】
《比較例１》
（１）  環状オレフィン重合体（ＣＯＰ）製のシリンジ本体の先端にイソプレンゴム製のキャップを取り付けて針先を封止したシリンジ（注射筒）２４個のそれぞれに電子線を２５ｋＧｙ照射して滅菌した。
【０１３０】
（２）  上記（１）で電子線照射して滅菌した２４個のシリンジを、６個ずつ４つのグループＩｂ，ＩＩｂ，ＩＩＩｂおよびＩＶｂに分けた。
【０１３１】
（３）（ｉ）  第１のグループＩｂのシリンジ６個を、さらに３個ずつ２つのグループＩｂ１とＩｂ２に分けた。
【０１３２】
（ｉｉ）  グループＩｂ１の３個のシリンジについては、上記（１）の電子線照射滅菌の直後に、シリンジ本体の長さ方向の中央に相当する箇所の壁部から縦×横＝３ｍｍ×３ｍｍの試験片（重量：約４６〜６１ｍｇ）を切り取って、電子スピン共鳴装置を使用して上記した方法でラジカル量を測定し、３個の平均値を採って電子線照射滅菌の直後のシリンジ本体のラジカル量を求めた。
【０１３３】
その結果を下記の表１に示す。
【０１３４】
（ｉｉｉ）（ａ）  グループＩｂ２の３個のシリンジについては、それぞれに製造例１で製造したエリスロポエチン溶液製剤１．０ｍＬを充填し、後端開口部に、ブチルゴム製のガスケットを先端に取り付けたプランジャーを、０．２ｍＬのヘッドスペースが残るようにして挿入して封止し、電子線照射滅菌直後のシリンジ内にエリスロポエチン溶液製剤を収容した３個のプレフィルドシリンジ製剤を製造した。
【０１３５】
（ｂ）  上記（ａ）で製造した３個のプレフィルドシリンジ製剤を、温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で４週間保存した後、シリンジ内に収容されているエリスロポエチン溶液製剤に含まれているエリスロポエチン中のメチオニン残基の酸化割合を上記した方法で測定し、３個の試料の平均値を採って、メチオニン残基の酸化割合（％）とした。
【０１３６】
その結果を下記の表１に示す。
【０１３７】
（４）（ｉ）  第２のグループＩＩｂのシリンジ６個を、上記（１）の電子線照射滅菌後に温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で１ケ月間保存した後、さらに３個ずつ２つのグループＩＩｂ１とＩＩｂ２に分けた。
【０１３８】
（ｉｉ）  グループＩＩｂ１の３個のシリンジについては、上記（ｉ）の電子線照射滅菌後の１ケ月間の保存後に、シリンジ本体の長さ方向の中央に相当する箇所の壁部から縦×横＝３ｍｍ×３ｍｍの試験片（重量：約４６〜６１ｍｇ）を切り取って、電子スピン共鳴装置を使用して上記した方法でラジカル量を測定し、３個の平均値を採って電子線照射滅菌後に１ケ月間保存したときのシリンジ本体のラジカル量を求めた。
【０１３９】
その結果を下記の表１に示す。
【０１４０】
（ｉｉｉ）（ａ）  グループＩＩｂ２の３個のシリンジについては、上記（ｉ）の１ケ月間の保存後に、それぞれに製造例１で製造したエリスロポエチン溶液製剤１．０ｍＬを充填し、後端開口部に、ブチルゴム製のガスケットを先端に取り付けたプランジャーを、０．２ｍＬのヘッドスペースが残るようにして挿入して封止し、シリンジ内にエリスロポエチン溶液製剤を収容した３個のプレフィルドシリンジ製剤を製造した。
【０１４１】
（ｂ）  上記（ａ）で製造した３個のプレフィルドシリンジ製剤を、温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で４週間保存した後、シリンジ内に収容されているエリスロポエチン溶液製剤に含まれているエリスロポエチン中のメチオニン残基の酸化割合を上記した方法で測定し、３個の試料の平均値を採って、メチオニン残基の酸化割合（％）とした。
【０１４２】
その結果を下記の表１に示す。
【０１４３】
（５）（ｉ）  第３のグループＩＩＩｂのシリンジ６個を、上記（１）の電子線照射滅菌後に温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で３ケ月間保存した後、さらに３個ずつ２つのグループＩＩＩｂ１とＩＩＩｂ２に分けた。
【０１４４】
（ｉｉ）  グループＩＩＩｂ１の３個のシリンジについては、上記（ｉ）の電子線照射滅菌後の３ケ月間の保存後に、シリンジ本体の長さ方向の中央に相当する箇所の壁部から縦×横＝３ｍｍ×３ｍｍの試験片（重量：約４６〜６１ｍｇ）を切り取って、電子スピン共鳴装置を使用して上記した方法でラジカル量を測定し、３個の平均値を採って電子線照射滅菌後に３ケ月間保存したときのシリンジ本体のラジカル量を求めた。
【０１４５】
その結果を下記の表１に示す。
【０１４６】
（ｉｉｉ）（ａ）  グループＩＩＩｂ２の３個のシリンジについては、上記（ｉ）の電子線照射滅菌後の３ケ月間の保存後に、それぞれに製造例１で製造したエリスロポエチン溶液製剤１．０ｍＬを充填し、後端開口部に、ブチルゴム製のガスケットを先端に取り付けたプランジャーを、０．２ｍＬのヘッドスペースが残るようにして挿入して封止し、シリンジ内にエリスロポエチン溶液製剤を収容した３個のプレフィルドシリンジ製剤を製造した。
【０１４７】
（ｂ）  上記（ａ）で製造した３個のプレフィルドシリンジ製剤を、温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で４週間保存した後、シリンジ内に収容されているエリスロポエチン溶液製剤に含まれているエリスロポエチン中のメチオニン残基の酸化割合を上記した方法で測定し、３個の試料の平均値を採って、メチオニン残基の酸化割合（％）とした。
【０１４８】
その結果を下記の表１に示す。
【０１４９】
（６）（ｉ）  第４のグループＩＶｂのシリンジ６個を、上記（１）の電子線照射滅菌後に温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で６ケ月間保存した後、さらに３個ずつ２つのグループＩＶｂ１とＩＶｂ２に分けた。
【０１５０】
（ｉｉ）  グループＩＶｂ１の３個のシリンジについては、上記（ｉ）の電子線照射滅菌後の６ケ月間の保存後に、シリンジ本体の長さ方向の中央に相当する箇所の壁部から縦×横＝３ｍｍ×３ｍｍの試験片（重量：約４６〜６１ｍｇ）を切り取って、電子スピン共鳴装置を使用して上記した方法でラジカル量を測定し、３個の平均値を採って電子線照射滅菌後に６ケ月保存したときのシリンジ本体のラジカル量を求めた。
【０１５１】
その結果を下記の表１に示す。
【０１５２】
（ｉｉｉ）（ｂ）  グループＩＶｂ２の３個のシリンジについては、上記（ｉ）の電子線照射滅菌後の６ケ月間の保存後に、それぞれに製造例１で製造したエリスロポエチン溶液製剤１．０ｍＬを充填し、後端開口部に、ブチルゴム製のガスケットを先端に取り付けたプランジャーを、０．２ｍＬのヘッドスペースが残るようにして挿入して封止し、シリンジ内にエリスロポエチン溶液製剤を収容した３個のプレフィルドシリンジ製剤を製造し
た。
【０１５３】
（ｂ）  上記（ｂ）で製造した３個のプレフィルドシリンジ製剤を、温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で４週間保存した後、シリンジ内に収容されているエリスロポエチン溶液製剤に含まれているエリスロポエチン中のメチオニン残基の酸化割合を上記した方法で測定し、３個の試料の平均値を採って、メチオニン残基の酸化割合（％）とした。
【０１５４】
その結果を下記の表１に示す。
【０１５５】
《参考例１》
（１）  シリンジ本体の３個について、滅菌処理を施さずに、当該シリンジ本体の長さ方向の中央に相当する箇所の壁部から縦×横＝３ｍｍ×３ｍｍの試験片（重量：約４６〜６１ｍｇ）を切り取って、電子スピン共鳴装置を使用して上記した方法でラジカル量を測定し、３個の平均値を採って、滅菌処理を行わないシリンジ本体のラジカル量を求めた。
【０１５６】
その結果を下記の表１に示す。
【０１５７】
（２）（ｉ）  滅菌処理を施してない別の３個のシリンジ本体のそれぞれにイソプレンゴム製のキャップを取り付けて針先を封止した後、それぞれに製造例１で製造したエリスロポエチン溶液製剤１．０ｍＬを充填し、後端開口部に、ブチルゴム製のガスケットを先端に取り付けたプランジャーを、０．２ｍＬのヘッドスペースが残るようにして挿入して封止し、滅菌処理を施してないシリンジ内にエリスロポエチン溶液製剤を収容した３個のプレフィルドシリンジ製剤を製造した。
【０１５８】
（ｉｉ）  上記（ｉ）で製造した３個のプレフィルドシリンジ製剤を、温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で４週間保存した後、シリンジ内に収容されているエリスロポエチン溶液製剤に含まれているエリスロポエチン中のメチオニン残基の酸化割合を上記した方法で測定し、３個の試料の平均値を採って、メチオニン残基の酸化割合（％）とした。
【０１５９】
その結果を下記の表１に示す。
【０１６０】
【表１】
2020022809.tif 000002
【０１６１】
上記の表１の結果にみるように、高圧蒸気滅菌した実施例１の環状オレフィン系重合体
製の医療用容器（シリンジ）では、当該容器にタンパク質（エリスロポエチン）溶液製剤を収容して保存したときに、溶液製剤に含有されているタンパク質（エリスロポエチン）中のメチオニン残基の酸化割合が小さく、タンパク質の変性を抑制することができる。
【０１６２】
それに対して、電子線照射して滅菌した比較例１の環状オレフィン系重合体製容器では、当該容器にタンパク質（エリスロポエチン）溶液製剤を収容して保存したときに、溶液製剤に含有されているタンパク質（エリスロポエチン）中のメチオニン残基の酸化割合が実施例１に比べて２倍以上となっており、タンパク質の変性が生じやすい。
【０１６３】
しかも、電子線照射して滅菌した比較例１の環状オレフィン系重合体製容器では、電子線照射滅菌後に例えば６ケ月間放置しておくと、環状オレフィン系重合体中のラジカル量は電子線照射直後の１００分の１以下に低減するにも拘わらず、当該６ケ月放置後の環状オレフィン系重合体製容器中にタンパク質（エリスロポエチン）溶液製剤を収容した場合でも、溶液製剤に含有されているタンパク質（エリスロポエチン）中のメチオニン残基の酸化割合が依然として高く、タンパク質の酸化変性が生じ易い。
【０１６４】
《実施例２》
（１）（ｉ）  ポリプロピレン（１９５μｍ）／エチレン−ビニルアルコール共重合体（１０μｍ）／ポリプロピレン（１９５μｍ）からなる三層フィルムをボトム材３として用いて、当該ボトム材３に、図１に示すように、エリスロポエチン溶液製剤を収容したプレフィルドシリンジ製剤１と脱酸素剤２を収納するための凹部４を形成した。
【０１６５】
（ｉｉ）  上記（ｉ）で形成した凹部４に、脱酸素剤２［三菱ガス化学株式会社製「エージレス（登録商標）Ｚ−１０ＰＴＲ」］と共に、実施例１の（６）の（ｉｉｉ）の（ａ）と同様の操作を行なって製造した、高圧蒸気滅菌後のシリンジ内にエリスロポエチン溶液製剤を収容したプレフィルドシリンジ製剤（高圧蒸気滅菌後に６ケ月間２５℃で保存したシリンジ本体にエリスロポエチン溶液製剤を収容したプレフィルドシリンジ製剤）１を収納した。
【０１６６】
（ｉｉｉ）  次に、その開放した上面を、ポリエチレンテレフタレート（１６μｍ）／接着剤層／印刷面／エチレン−ビニルアルコール共重合体（１２μｍ）／接着剤層／エチレン−酢酸ビニル共重合体（３０μｍ）からなるトップ材５で覆って周縁をシールして、図１に示すようなブリスター包装による、エリスロポエチン溶液製剤を収容したプレフィルドシリンジ製剤の包装体を製造した。なお、ブリスター包装体におけるプレフィリルドシリンジ製剤と脱酸素剤を収納した空間の容積は約２７ｃｍ３であり、脱酸素剤２の酸素吸収能は１０ｃｍ３であった。
【０１６７】
（ｉｖ）  上記（ｉｉｉ）で得られたブリスター包装体を、温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で３ケ月および６ケ月保存して、３ケ月保存後および６ケ月保存後に、シリンジ内に収容されているエリスロポエチン溶液製剤に含まれているエリスロポエチン中のメチオニン残基の酸化割合を上記した方法で測定したところ、下記の表２に示すとおりであった。
【０１６８】
（２）（ｉ）  高圧蒸気滅菌後のシリンジ内にエリスロポエチン溶液製剤を収容したプレフィルドシリンジ製剤（高圧蒸気滅菌後に６ケ月間２５℃で保存したシリンジ本体にエリスロポエチン溶液製剤を収容したプレフィルドシリンジ製剤）（ブリスター包装を行っていないプレフィルドシリンジ製剤）を、温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で３ケ月および６ケ月保存して、３か月保存後および６か月保存後に、シリンジ内に収容されているエリスロポエチン溶液製剤に含まれているエリスロポエチン中のメチオニン残基の酸化割合を上記した方法で測定したところ、下記の表２に示すとおりであった。
【０１６９】
【表２】
2020022809.tif 000003
【０１７０】
上記の表２の結果にみるように、高圧蒸気滅菌した環状オレフィン系重合体製シリンジにエリスロポエチン溶液製剤を収容したプレフィルドシリンジ製剤を、脱酸素剤と共に酸素難透過性の包装材で包装して脱酸素式包装体とすることによって、エリスロポエチン中のメチオニン残基の酸化割合が一層低減している。
【０１７１】
［モノクローナル抗体溶液製剤］
以下の実施例３および比較例２において、完全ヒト型ＩｇＧ１モノクローナル抗体であるアダリムマブ［Ａｂｂｉｖｅ社製、商品名：Ｈｕｍｉｒａ（登録商標）］をモノクローナル抗体溶液製剤として用いた。
【０１７２】
《実施例３》
（１）  注射針を取付けた環状オレフィン重合体（ＣＯＰ）製シリンジ本体の先端にイソプレンゴム製のキャップを取り付けて針先を封止したシリンジ（注射筒）２４個をオートクレーブに入れて、実施例１の（１）と同じように、１２１℃で２０分間、高圧蒸気滅菌した後、温度２５℃、湿度６０％ＲＨの条件下で１ケ月保存した。
【０１７３】
（２）  高圧蒸気滅菌後に１カ月間保存した上記（１）で得られた２４個のシリンジのそれぞれに、上記したモノクローナル抗体溶液製剤５００μＬを充填した後、後端開口部に、ブチルゴム製のガスケットを先端に取り付けたプランジャーを、０．２ｍＬのヘッドスペースが残るようにして挿入して封止して、滅菌処理を施したシリンジ内にモノクローナル抗体溶液製剤を収容した２４個のシリンジ入りモノクローナル抗体溶液製剤を製造した。
【０１７４】
（３）  上記（２）で得られた２４個のシリンジ入りモノクローナル抗体溶液製剤のそれぞれを、実施例２で使用したのと同じ材料および構造よりなるブリスター包装用の包装材を用いて、実施例２で使用したのと同じ脱酸素剤と共に、実施例２と同様にしてブリスター包装した後、５℃で７日間インキュベートした。
【０１７５】
（４）  上記（３）で得られたインキュベート後の２４個の包装体を１２個ずつ２つのグループ（グループＩとグループＩＩ）に分け、グループＩの包装体１２個は遮光能を有する外袋（外包装材）に入れずにそのままにし、グループＩＩの包装体１２個のそれぞれを、図２に示すように、遮光能を有する外袋６（２軸延伸ポリアミド／ポリエチレン／アルミニウム蒸着ポリエチレンテレフタレート／ポリエチレンよりなる層構造を有する積層シートから形成した外包装材）に入れて密封した。
【０１７６】
（５）  外袋に入れてないグループＩの１２個の包装体、および遮光能を有する外袋６に入れたグループＩＩの１２個の包装体のそれぞれに、２０００ルクスの光の照射下に温度２５℃で２５日間保存し、開始時（０日）、７日保存後、１４日保存後および２５日保存後の時点におけるモノクローナル抗体溶液製剤に含まれるモノクローナル抗体中のメチ
オニン残基（Ｍｅｔ２５６とＭｅｔ４３２）の酸化割合、高分子量種の生成割合、酸性分子種の生成割合を下記の方法で求めた。
【０１７７】
なお、メチオニン残基の酸化割合、高分子量種の生成割合および酸性分子種の生成割合を求めるための測定操作は、グループＩおよびグループＩＩ共に、１２個の包装体のうち、３個について開始時（光照射前）に行い、別の３個について光照射下に７日保存後に行い、更に別の３個について光照射下に１４日保存後に行い、残りの３個について光照射下に２５日保存後に行って、３個の平均値を採った。
【０１７８】
結果を下記の表３に示す。
【０１７９】
《モノクローナル抗体中のメチオニン残基の酸化割合》
ペプチドマッピング法によって以下の方法でモノクローナル抗体中のメチオニン残基の酸化割合を求めた。
【０１８０】
（ｉ）  試料（モノクローナル抗体ＩｇＧ１溶液製剤）１００μｇを８Ｍの塩化グアニジンで変性した後、マイクロスピンＧ−２５カラム（ＧＥヘルスケア社製、英国）を使用して試料中の緩衝液を消化緩衝液（１００ｍＭ  トリス塩酸緩衝液、ポリソルベート８０含量＝０．０２質量％、ｐＨ＝８．０）に置換した。
【０１８１】
（ｉｉ）  試料に、シークエンスグレード変性トリプシン３．２μｇを添加し、３７℃で６０分間インキュベートして消化した後、２５％トリフルオロ酢酸１０μＬを添加して消化反応を停止させた。
【０１８２】
（ｉｉｉ）  消化ペプチドを、ＡｄｖａｎｃｅＢｉｏペプチドマップ２．１×１５０ｍｍ、２．７μｍ  カラムを備えるＬＣ１２００システム（アジレント  テクノロジー社）を用いて、以下の条件で、逆相高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）により分離した。
【０１８３】
［ＨＰＬＣの条件］
・移動相Ａ：水とトリフルオロ酢酸＝１０００：１の水溶液
・移動相Ｂ：水とアセトニトリルとトリフルオロ酢酸＝４００：３６００：３の混合液
・カラム：ＡｄｖａｎｃｅＢｉｏペプチドマップ２．１×１５０ｍｍ、２．７μｍ
・カラム温度：５０℃、
・注入量：３０μＬ
・流速：０．２ｍＬ／ｍｉｎ
・フローモード：直線勾配モード（移動相Ｂ  ０％→４５％、６０分超え）
（ｉｖ）  溶出したペプチド画分を、エレクトロスプレーイオン源（陽イオンモード；３００〜２０００ｍ／ｚ値）を備えるＬＴＱ／ＸＬ  Ｏｒｂｉｔｒａｐ  質量分析計（サーモフィッシャー科学社）を用いて検出した。メチオニン残基の酸化割合は、Ｍｅｔ２５６またはＭｅｔ４３２含有ペプチドの理論的なｍ／ｚ±１０ｐｐｍで各抽出したイオンクロマトグラムを用いて定量した。
【０１８４】
《高分子量種の生成割合》
分子ふるいクロマトグラフィー法（ＳＥＣ法）にて、以下のようにして高分子量種の生成割合を求めた。
【０１８５】
（ｉ）  ２本を直列に接続したＴＳＫｇｅｌ  ＳｕｐｅｒＳＷｍＡｂ  ＨＲカラム（東ソー株式会社製）に、試料（モノクローナル抗体ＩｇＧ１溶液製剤）２５０μＬを供給し、リン酸緩衝液（リン酸１００ｍＭ、塩化ナトリウム４００ｍＭ、ｐＨ７．０）を用いて
アイソクラティックフロー（流速０．５ｍＬ／ｍｉｎ、温度２５℃）にて分子量ごとに分画した（測定波長２８０ｎｍ）。
【０１８６】
（ｉｉ）  メインピークよりも前の溶出ピーク（分画）を高分子量種（モノクローナル抗体の分子量よりも高い分子量を有する成分）とし、メインピークよりも後の溶出ピーク（分画）を低分子量種（モノクローナル抗体の分子量よりも低い分子量を有する成分）とし、下記の数式＜２＞に従って、高分子量種の生成割合（％）を求めた。
【０１８７】
高分子量種の生成割合（％）＝（ＭＷＨ／ＭＷＴ）×１００  ＜２＞
［式中、ＭＷＨはメインピークよりも前の溶出ピーク（分画）の合計、ＭＷＴは全溶出ピーク（全分画）の合計を示す。］
《酸性分子種の生成割合》
陽イオン交換高速液体クロマトグラフィー法（ＣＥＸ−ＨＰＬＣ法）にて、以下のようにして酸性分子種の生成割合を求めた。
【０１８８】
（ｉ）  試料（モノクローナル抗体ＩｇＧ１溶液製剤）２５μｇを、Ｐｒｏｐａｃ  ＷＣＸ−１０  カラム（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社製）に供給し、以下の条件で高速液体クロマトグラフィー分析を行った。
【０１８９】
［ＨＰＬＣの条件］
・移動相Ａ：２０ｍＭリン酸ナトリウム水溶液（ｐＨ６．８）
・移動相Ｂ：２０ｍＭリン酸ナトリウム水溶液に固体塩化ナトリウムを塩化ナトリウム濃度が５００ｍＭになるまで添加した水溶液（ｐＨ６．８）
・カラム：Ｐｒｏｐａｃ  ＷＣＸ−１０  カラム
・カラム温度：４０℃、
・注入量：２５μｇ
・流速：０．７ｍＬ／ｍｉｎ
・フローモード：直線勾配モード（移動相Ｂ  ９％→１８％）
・測定波長：２８０ｎｍ
（ｉｉ）  メインピークよりも前の溶出ピーク（分画）を酸性分子種（モノクローナル抗体よりもアニオン性の強い成分）とし、メインピークよりも後の溶出ピーク（分画）をアルカリ性分子種（モノクローナル抗体よりもアニオン性の弱い成分）とし、下記の数式＜３＞に従って酸性分子種の生成割合（％）を求めた。
【０１９０】
酸性分子種の生成割合（％）＝（ＡＭ／ＴＭ）×１００  ＜３＞
［式中、ＡＭはメインピークよりも前の溶出ピーク（分画）の合計、ＴＭは全溶出ピーク（全分画）の合計を示す。］
《比較例２》
（１）  注射針を取付けたガラス製のシリンジ本体（シリンジサイズ：ＩＳＯ規格１１０４０−６の１ｍＬ−Ｌｏｎｇに準拠、注射針：２７Ｇ）の先端にイソプレンゴム製のキャップを取り付けて針先を封止したシリンジ（注射筒）１２個を準備した。
【０１９１】
（２）  上記（１）で準備した１２個のシリンジのそれぞれに、上記したモノクローナル抗体溶液製剤５００μＬを充填した後、後端開口部に、ブチルゴム製のガスケットを先端に取り付けたプランジャーを、０．２ｍＬのヘッドスペースが残るようにして挿入して封止して、モノクローナル抗体溶液製剤を収容した１２個のガラスシリンジ入りモノクローナル抗体溶液製剤を製造した。
【０１９２】
（３）  上記（２）で得られた１２個のガラスシリンジ入りモノクローナル抗体溶液製剤のそれぞれを、実施例２で使用したのと同じ材料および構造よりなるブリスター包装用
の包装材を用いて、実施例２で使用したのと同じ脱酸素剤と共に、実施例２と同様にしてブリスター包装した後、５℃で７日間インキュベートした。
【０１９３】
（４）  上記（３）で得られたインキュベート後の１２個の包装体（遮光能を有する外袋に入れてない包装体）のそれぞれに、温度２５℃において、２０００ルクスの光の照射下に２５日間保存し、開始時（０日）、７日保存後、１４日保存後および２５日保存後の時点におけるモノクローナル抗体溶液製剤に含まれるモノクローナル抗体中のメチオニン残基（Ｍｅｔ２５６とＭｅｔ４３２）の酸化割合、高分子量種の生成割合、酸性分子種の生成割合を上記した方法で求めた。
【０１９４】
なお、メチオニン残基の酸化割合、高分子量種の生成割合および酸性分子種の生成割合を求めるための測定操作は、１２個の包装体のうち、３個について開始時（光照射前）に行い、別の３個について光照射下に７日保存後に行い、更に別の３個について光照射下に１４日保存後に行い、残りの３個について光照射下に２５日保存後に行って、３個の平均値を採った。
【０１９５】
その結果を下記の表３に示す。
【０１９６】
【表３】
2020022809.tif 000004
【０１９７】
実施例３のグループＩと比較例２の結果を対比すると、高圧蒸気滅菌後に所定期間保存してラジカル量の低減した環状オレフィン系重合体（ＣＯＰ）製シリンジ本体にモノクローナル抗体溶液製剤を充填したプレフィルドシリンジ製剤を脱酸素剤と共に酸素難透過性でブリスター包装した実施例３のグループＩのブリスター包装体は、ガラス製シリンジ本体にモノクローナル抗体溶液製剤を充填したプレフィルドシリンジ製剤を脱酸素剤と共に酸素難透過性の包装材でブリスター包装した比較例２のブリスター包装体に比べて、光の当たる条件下で保存したときに、モノクローナル抗体を構成するタンパク質（特にタンパク質中のメチオニン残基）の酸化割合が少なく、更に高分子量種の生成割合も少なく、また酸性分子種の生成割合が１４日保存後および２５日保存後では少ないことが分かる。
【０１９８】
従来、環状オレフィン系重合体容器は、ガラス容器に比べて酸素透過性が高いため、モノクローナル抗体などのタンパク質の容器を収容する容器としてはガラス容器よりも劣ると考えられてきたが、上記の表３の結果は、高圧蒸気滅菌後に所定期間保存してラジカル
量の低減した環状オレフィン系重合体容器にモノクローナル抗体などのタンパク質の溶液製剤を充填した環状オレフィン系重合体製の容器入りタンパク質溶液製剤を脱酸素剤と共に酸素難透過性の包装材で包装した本発明の包装体は、ガラス容器にモノクローナル抗体などのタンパク質の溶液製剤を充填したガラス容器入りタンパク質溶液製剤を脱酸素剤と共に酸素難透過性の包装材で包装した包装体に比べて、容器に収容されたタンパク質溶液製剤の酸化、タンパク質の高分子量化やアニオン化などの変性が抑制され、保存安定性に優れていることを示している。
【０１９９】
また、表３における実施例３のグループＩとグループＩＩの結果を見ると、実施例３のグループＩＩの包装体は、環状オレフィン系重合体（ＣＯＰ）製シリンジ本体にモノクローナル抗体溶液製剤を充填したプレフィルドシリンジ製剤を脱酸素剤と共に酸素難透過性の包装材でブリスター包装したグループＩのブリスター包装体を、遮光能を有する外袋で更に包装したことによって、遮光能を有する外袋で包装していない実施例３のグループＩの包装体に比べて、モノクローナル抗体を構成するタンパク質（特にタンパク質中のメチオニン残基）の酸化割合が一層少なく、高分子量種の生成割合も一層少なく、更に酸性分子種の生成割合が一層少なくなっている。
【０２００】
かかる結果は、高圧蒸気滅菌後に所定期間保存してラジカル量の低減した環状オレフィン系重合体容器にモノクローナル抗体などのタンパク質の溶液製剤を充填した容器入りタンパク質溶液製剤を脱酸素剤と共に酸素難透過性の包装材で包装した脱酸素式包装体を更に遮光能を有する外包装材で包装した本発明の包装体、または環状オレフィン系重合体容器入りタンパク質溶液製剤を脱酸素剤と共に酸素難透過性でかつ遮光能を有する包装材で包装した本発明の包装体が、容器に収容されたタンパク質溶液製剤の酸化、タンパク質の高分子量化やアニオン化などの変性の抑制、長期保存安定性の向上に一層有効であることを示している。
【産業上の利用可能性】
【０２０１】
高圧蒸気滅菌されタンパク質中のメチオニン残基の酸化を抑制する作用を有する本発明のタンパク質溶液製剤を収容するための本発明の環状オレフィン系重合体製の医療用容器、および高圧蒸気滅菌され電子スピン共鳴装置にて測定したラジカル量が２．２×１０１５個／ｇ以下であるタンパク質溶液製剤を収容するための本発明の環状オレフィン系重合体製の医療用容器は、当該医療用容器にタンパク質溶液製剤を収容したときに、タンパク質中のメチオニン残基などのアミノ酸残基の酸化が生じにくく、タンパク質の変性を防止することができるので、タンパク質溶液製剤を収容するための容器として有効に用いることができる。
【０２０２】
前記した本発明の医療用容器にタンパク質溶液製剤を収容した容器入りタンパク質溶液製剤は、タンパク質中のメチオニン残基などのアミノ酸残基の酸化が生じにくく、タンパク質の変性を防止することができるので、タンパク質溶液製剤として有用である。
【０２０３】
前記した本発明の容器入りタンパク質溶液製剤を脱酸素剤と共に酸素難透過性の包装材で包装した本発明の脱酸素式包装体は、包装体全体が低酸素状態に維持されため、高圧蒸気滅菌した環状オレフィン系重合体製容器を用いていることによるタンパク質中のメチオニン残基などのアミノ酸残基の酸化防止と、脱酸素剤による酸素の吸収作用とが相俟って、タンパク質溶液製剤の酸化による品質低下や失活が一層効果的に防止されて、長期間安定に保存でき、非常に有用である。
【０２０４】
さらに、高圧蒸気滅菌後に所定期間保存してラジカル量の低減した環状オレフィン系重合体容器にタンパク質の溶液製剤を充填した容器入りタンパク質溶液製剤を脱酸素剤と共に酸素難透過性の包装材で包装した脱酸素式包装体を更に遮光能を有する外包装材で放送
した本発明の包装体、または環状オレフィン系重合体容器入りタンパク質溶液製剤を脱酸素剤と共に酸素難透過性でかつ遮光能を有する包装材で包装した本発明の包装体は、包装体残体が低酸素状態に維持されるため、高圧蒸気滅菌した環状オレフィン系重合体製容器を用いることによるタンパク質中のメチオニン残基などのアミノ酸残基の酸化防止と、脱酸素剤による酸素の吸収作用と、遮光能を有する包装材による遮光効果とが相俟って、タンパク質溶液製剤の酸化および光による品質低下や失活がより一層効果的に防止されて、長期間安定の保存でき、極めて有用である。
【符号の説明】
【０２０５】
１  エリスロポエチン溶液製剤入りのプレフィルドシリンジ製剤
２  脱酸素剤
３  ボトム材
４  凹部
５  トップ材
６  遮光能を有する外袋（外包装材）
【図１】
2020022809.tif 000005
【図２】
2020022809.tif 000006
【手続補正書】
【提出日】令和1年11月6日(2019.11.6)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
医療用容器内にタンパク質溶液製剤を収容した、容器入りタンパク質溶液製剤であって、
前記タンパク質溶液製剤が、アミノ酸配列中にメチオニン残基またはシステイン残基を有するタンパク質の溶液製剤であり、
前記医療用容器が、環状オレフィン系重合体から形成され、高圧蒸気滅菌されており、当該医療用容器内に収容されるタンパク質溶液製剤中のタンパク質におけるメチオニン残基またはシステイン残基の酸化を抑制することを特徴とする、容器入りタンパク質溶液製剤。
【請求項２】
医療用容器内にタンパク質溶液製剤を収容した、容器入りタンパク質溶液製剤であって、
前記タンパク質溶液製剤が、アミノ酸配列中にメチオニン残基またはシステイン残基を有するタンパク質の溶液製剤であり、
前記医療用容器が、環状オレフィン系重合体から形成され、高圧蒸気滅菌されており、電子スピン共鳴装置にて測定したラジカル量が２．２×１０１５個／ｇ以下であることを特徴とする、容器入りタンパク質溶液製剤。
【請求項３】
医療用容器内にタンパク質溶液製剤を収容した、容器入りタンパク質溶液製剤であって、
前記タンパク質溶液製剤が、アミノ酸配列中にメチオニン残基またはシステイン残基を有するタンパク質の溶液製剤であり、
前記医療用容器が、環状オレフィン系重合体から形成され、高圧蒸気滅菌されており、電子スピン共鳴装置にて測定したラジカル量が２．２×１０１５個／ｇ以下であり、当該医療用容器内に収容されるタンパク質溶液製剤中のタンパク質におけるメチオニン残基またはシステイン残基の酸化を抑制することを特徴とする、容器入りタンパク質溶液製剤。
【請求項４】
前記タンパク質溶液製剤が、エリスロポエチン、顆粒球コロニー刺激因子、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子、トロンボポエチン、血清アルブミン、組織プラスミノーゲン活性化因子、インシュリン、幹細胞成長因子、インターフェロンおよびインターロイキンからなる群より選択されるタンパク質の溶液製剤である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の容器入りタンパク質溶液製剤。
【請求項５】
前記医療用容器が、環状オレフィン開環重合体の水素添加物から形成されている、請求項１〜４のいずれか１項に記載の容器入りタンパク質溶液製剤。
【請求項６】
前記医療用容器が、シリンジまたはカートリッジである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の容器入りタンパク質溶液製剤。
【請求項７】
プレフィルドシリンジ製剤である、請求項１〜６のいずれか１項に記載の容器入りタンパク質溶液製剤。
【請求項８】
請求項１〜７のいずれか１項に記載の容器入りタンパク質溶液製剤を、脱酸素剤と共に、酸素難透過性の包装材で密封包装した包装体。
【請求項９】
脱酸素剤の酸素吸収能が、前記包装材の収納空間全体の容積の１／５以上である請求項８に記載の包装体。
【請求項１０】
ブリスター包装の形態をなしている請求項８または９に記載の包装体。
【請求項１１】
包装体を構成する酸素難透過性の包装材が遮光能を更に有するか、または脱酸素剤と共に難酸素透過性の包装材で包装した包装体が遮光能を有する外包装材で更に包装されている請求項８〜１０のいずれか１項に記載の包装体。