(57)【要約】      （修正有）【課題】多孔質ビーズの吸着性を維持しつつ、改善された血液適合性を有する血液処理用ビーズを提供すること。【解決手段】多孔質ビーズ、及び上記多孔質ビーズの表面上に担持されたポリマーを有する、血液処理用ビーズであって、上記多孔質ビーズは、アクリル系樹脂、スチレン系樹脂、及びセルロース系樹脂からなる群から選択される少なくとも一つの樹脂から構成され、上記ポリマーは、下記一般式（１）で表されるモノマーを単量体単位として含む、血液処理用ビーズ。2020006155.tif 000010｛式（１）中、Ｒ１は、−ＣＨ３であり、Ｒ２は、−ＣＨ２（ＣＨ２）ｑＯＣＨ３又は−ＣＨ２ＣｍＨ２ｍ＋１であり、ｑは１〜５であり、ｍは０〜１７である。｝【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
多孔質ビーズ、及び前記多孔質ビーズの表面上に担持されたポリマーを有する、血液処理用ビーズであって、
前記多孔質ビーズは、アクリル系樹脂、スチレン系樹脂、及びセルロース系樹脂からなる群から選択される少なくとも一つの樹脂から構成され、
前記ポリマーは、下記一般式（１）：
【化１】
2020006155.tif 000009
｛式（１）中、Ｒ１は、−ＣＨ３であり、Ｒ２は、−ＣＨ２（ＣＨ２）ｑＯＣＨ３又は−ＣＨ２ＣｍＨ２ｍ＋１であり、ｑは１〜５であり、ｍは０〜１７である。｝
で表されるモノマーを単量体単位として含む、血液処理用ビーズ。
【請求項２】
前記血液処理用ビーズの表面における、窒素原子の割合が、原子番号３番から９２番までの原子の総数を基準として、原子百分率で０．２％以上０．７％以下である、請求項１に記載の血液処理用ビーズ。
【請求項３】
ｑは１又は２であり、ｍは０〜１１である、請求項１又は２に記載の多孔質吸着ビーズ。
【請求項４】
前記一般式（１）で表されるモノマーの含有量は、前記ポリマーを構成するモノマー全体を基準として４０モル％以上である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
【請求項５】
前記ポリマーは、電荷を有するモノマーを単量体単位として更に含む、請求項１〜４のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
【請求項６】
前記電荷を有するモノマーは、アミノ基、カルボキシル基、リン酸基、スルホン酸基、及び両性イオン基からなる群から選択される少なくとも一つの基を有するモノマーである、請求項５に記載の血液処理用ビーズ。
【請求項７】
前記電荷を有するモノマーは、２−アミノエチルメタクリレート（ＡＥＭＡ）、ジメチルアミノエチルメタクリレート（ＤＭＡＥＭＡ）、ジエチルアミノエチルメタクリレート（ＤＥＡＥＭＡ）、［２−（メタクリロイルオキシ）エチル］トリメチルアンモニウム、アクリル酸（ＡＡｃ）、メタクリル酸（ＭＡｃ）、Ｎ−メタクリロイルオキシエチル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアンモニウム−α−Ｎ−メチルカルボキシベタイン（ＣＭＢ）、及びリン酸２−（メタクリロイルオキシ）エチル２−（トリメチルアンモニオ）エチル（ＭＰＣ）からなる群から選択される少なくとも一つである、請求項５に記載の血液処理用ビーズ。
【請求項８】
前記電荷を有するモノマーの含有量は、前記ポリマーを構成するモノマー全体を基準として１０モル％以上６０モル％以下である、請求項５〜７のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
【請求項９】
前記電荷を有するモノマーの含有量は、前記ポリマーを構成するモノマー全体を基準として１５モル％以上４０モル％以下である、請求項５〜７のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
【請求項１０】
前記血液処理用ビーズの表面における、炭素原子と酸素原子の割合の和が、原子番号３番から９２番までの原子の総数を基準として、原子百分率で９７．０％以上である、請求項１〜９のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
【請求項１１】
前記ポリマーの量は、前記多孔質ビーズ乾燥時重量１ｇ当たり０．０８ｍｇ以上１１４ｍｇ以下である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
【請求項１２】
前記ポリマーの量は、前記多孔質ビーズ乾燥時重量１ｇ当たり２．０ｍｇ以上２０ｍｇ以下である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
【請求項１３】
前記多孔質ビーズの体積平均粒子径は、３００μｍ〜１０００μｍである、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
【請求項１４】
前記多孔質ビーズの細孔径５ｎｍ〜１００ｎｍの積算細孔容量が０．５ｃｍ３／ｇ以上であり、細孔径１００ｎｍ〜１０００ｎｍの積算細孔容量が０．２ｃｍ３／ｇ以下である、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
【請求項１５】
前記一般式（１）で表されるモノマーは、２−メトキシエチルメタクリレート、ｎ−ブチルメタクリレート、及びラウリル酸メタクリレートからなる群から選択される少なくとも一つである、請求項１〜１４のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
【請求項１６】
血液から１０００Ｄａ超〜６６０００Ｄａ未満の疎水性蛋白質分子を除去する、請求項１〜１５のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
【請求項１７】
血液からサイトカイン及びハイモビリティグループボックス１（ＨＭＧＢ１）を除去する、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の多孔質吸着ビーズ。
【請求項１８】
請求項１〜１７のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズを有する、血液浄化器。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、血液処理用ビーズに関する。
【背景技術】
【０００２】
敗血症をはじめとする虚血性疾患の治療においては、その原因物質と考えられる炎症性メディエーター、例えばサイトカイン及びアラーミン等を患者の血液中から除去する、種々のアフェレシス療法が行われている。近年、アフェレシス療法の一つとして、炎症性メディエーターを吸着により除去する、吸着型血液浄化器の開発が進んでいる。
【０００３】
上市されている吸着型血液浄化器としては、例えば、エンドトキシン除去機能を有する繊維をロール状に巻き付けた吸着体を用いた、トレミキシン（登録商標）（東レ・メディカル株式会社）；アラーミン（ＨＭＧＢ１）及びサイトカイン（ＩＬ−６等）吸着機能を有する中空糸を用いた、持続的血液浄化療法（ＣＲＲＴ）向け吸着型血液浄化器である、セプザイリス（登録商標）（バクスター株式会社）；並びにサイトカイン除去機能を有する多孔性ポリマービーズを用いた、ＣｙｔｏＳｏｒｂ（登録商標）（サイトソーベンツ社）等が挙げられる。
【０００４】
血液浄化器は患者の血液に直接触れるため、生体適合性を有することが必要である。血液浄化器に生体適合性を付与するため、吸着体は、生体適合性ポリマー、典型的には親水性ポリマーでコーティングされる。
【０００５】
例えば、特許文献１は、特定構造の単量体を含むメタノール溶液に特定のラジカル重合開始剤を加えて重合反応を行うことにより製造される、抗血栓性コーティング材を記載している。この抗血栓性コーティング材は、ｅＰＴＦＥ製人工血管等の人工器官、及びカテーテル等の医療機器に塗布され、それらに生体適合性を与えることができる。
【０００６】
特許文献２は、非イオン性基を有するモノマー単位と、塩基性含窒素官能基を有するモノマー単位と、ホモポリマーを形成した場合にＮ値が２以下となるモノマー単位とを含む、特定構造の共重合体を記載している。この共重合体をフィルター上に担持することにより、赤血球へ悪影響を与えずに赤血球を含む生体由来液を処理することが可能な、生体由来液処理フィルターを提供することができる。
【０００７】
特許文献３は、両性イオン部分およびオリゴエチレングリコール部分の少なくとも１つを複数有する架橋ポリマー材料を、吸着体としての多孔質ビーズ上にコーティングすることを記載している。
【０００８】
このような吸着型血液浄化器は、虚血性疾患の治療のほか、心臓手術及び臓器移植手術などの、炎症性メディエーターの過剰産生が問題となる場面での活用が期待されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００９】
【特許文献１】特開２０１７−０２５２８５号公報
【特許文献２】特開２０１７−１８５０３７号公報
【特許文献３】特表２０１６−５１４５６８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
しかしながら、上記の特許文献１〜３等に記載されているような従来の生体適合性ポリマーを、吸着体としての多孔質ビーズにコーティング（本願明細書において「担持」ともいう。）すると、多孔質ビーズの生体適合性を向上させることができるものの、多孔質ビーズの表面が親水化され、疎水性蛋白質である炎症性メディエーターの吸着性が低下する。そのため、生体適合性の向上と吸着性の向上とはトレードオフの関係にあると考えられている。
【００１１】
上記のような背景に鑑み、本発明は、多孔質ビーズの吸着性を維持しつつ、改善された血液適合性を有する血液処理用ビーズを提供することを課題の一つとする。
【課題を解決するための手段】
【００１２】
本願発明者らは、上記課題を解決するため鋭意検討を重ねた結果、下記一般式（１）で表されるモノマーを単量体単位として含むポリマーを、特定の多孔質ビーズ上に担持することにより上記課題を解決できることを見いだし、本発明を完成するに至った。以下、本発明の実施形態の例を列記する。
［１］
多孔質ビーズ、及び上記多孔質ビーズの表面上に担持されたポリマーを有する、血液処理用ビーズであって、
上記多孔質ビーズは、アクリル系樹脂、スチレン系樹脂、及びセルロース系樹脂からなる群から選択される少なくとも一つの樹脂から構成され、
上記ポリマーは、下記一般式（１）：
【化１】
2020006155.tif 000002
｛式（１）中、Ｒ１は、−ＣＨ３であり、Ｒ２は、−ＣＨ２（ＣＨ２）ｑＯＣＨ３又は−ＣＨ２ＣｍＨ２ｍ＋１であり、ｑは１〜５であり、ｍは０〜１７である。｝
で表されるモノマーを単量体単位として含む、血液処理用ビーズ。
［２］
上記血液処理用ビーズの表面における窒素原子の割合が、原子番号３番から９２番までの原子の総数を基準として、原子百分率で０．２％以上０．７％以下である、項目１に記載の血液処理用ビーズ。
［３］
ｑは１又は２であり、ｍは０〜１１である、項目１又は２に記載の多孔質吸着ビーズ。
［４］
上記一般式（１）で表されるモノマーの含有量は、上記ポリマーを構成するモノマー全体を基準として４０モル％以上である、項目１〜３のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
［５］
上記ポリマーは、電荷を有するモノマーを単量体単位として更に含む、項目１〜４のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
［６］
上記電荷を有するモノマーは、アミノ基、カルボキシル基、リン酸基、スルホン酸基、及び両性イオン基からなる群から選択される少なくとも一つの基を有するモノマーである、項目５に記載の血液処理用ビーズ。
［７］
上記電荷を有するモノマーは、２−アミノエチルメタクリレート（ＡＥＭＡ）、ジメチルアミノエチルメタクリレート（ＤＭＡＥＭＡ）、ジエチルアミノエチルメタクリレート（ＤＥＡＥＭＡ）、［２−（メタクリロイルオキシ）エチル］トリメチルアンモニウム、アクリル酸（ＡＡｃ）、メタクリル酸（ＭＡｃ）、Ｎ−メタクリロイルオキシエチル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアンモニウム−α−Ｎ−メチルカルボキシベタイン（ＣＭＢ）、及びリン酸２−（メタクリロイルオキシ）エチル２−（トリメチルアンモニオ）エチル（ＭＰＣ）からなる群から選択される少なくとも一つである、項目５に記載の血液処理用ビーズ。
［８］
上記電荷を有するモノマーの含有量は、上記ポリマーを構成するモノマー全体を基準として１０モル％以上６０モル％以下である、項目５〜７のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
［９］
上記電荷を有するモノマーの含有量は、上記ポリマーを構成するモノマー全体を基準として１５モル％以上４０モル％以下である、項目５〜７のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
［１０］
上記血液処理用ビーズの表面における、炭素原子と酸素原子の割合の和が、原子番号３番から９２番までの原子の総数を基準として、原子百分率で９７．０％以上である、項目１〜９のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
［１１］
上記ポリマーの量は、上記多孔質ビーズ乾燥時重量１ｇ当たり０．０８ｍｇ以上１１４ｍｇ以下である、項目１〜１０のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
［１２］
上記ポリマーの量は、上記多孔質ビーズ乾燥時重量１ｇ当たり２．０ｍｇ以上２０ｍｇ以下である、項目１〜１０のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
［１３］
上記多孔質ビーズの体積平均粒子径は、３００μｍ〜１０００μｍである、項目１〜１２のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
［１４］
上記多孔質ビーズの細孔径５ｎｍ〜１００ｎｍの積算細孔容量が０．５ｃｍ３／ｇ以上であり、細孔径１００ｎｍ〜２００ｎｍの積算細孔容量が０．２ｃｍ３／ｇ以下である、項目１〜１３のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
［１５］
上記一般式（１）で表されるモノマーは、２−メトキシエチルメタクリレート、ｎ−ブチルメタクリレート、及びラウリル酸メタクリレートからなる群から選択される少なくとも一つである、項目１〜１４のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
［１６］
血液から１０００Ｄａ超〜６６０００Ｄａ未満の疎水性蛋白質分子を除去する、項目１〜１５のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズ。
［１７］
血液からサイトカイン及びハイモビリティグループボックス１（ＨＭＧＢ１）を除去する、項目１〜１６のいずれか一項に記載の多孔質吸着ビーズ。
［１８］
項目１〜１７のいずれか一項に記載の血液処理用ビーズを有する、血液浄化器。
【発明の効果】
【００１３】
本発明によれば、多孔質ビーズの吸着性を維持しつつ、血液適合性を向上させることができる。なお、上述の記載は、本発明の全ての実施形態及び本発明に関する全ての利点を開示したものとみなしてはならない。本発明の更なる実施形態及びその利点は、以下の記載及び図面を参照することにより明らかとなる。
【図面の簡単な説明】
【００１４】
【図１】図１は、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎ（オルガノ社製、スチレン系ポリマービーズ）の、Ｌｏｇ微分細孔容積分布及び積算細孔容量を示すグラフである。
【図２】図２は、ピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０（ピュロライト社製、アクリル系ビーズ）の、Ｌｏｇ微分細孔容積分布及び積算細孔容量を示すグラフである。
【図３】図３は、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎ、及びピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０の、累計体積粒度分布を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１５】
以下、本発明の実施形態（以下、「本実施形態」という。）を例示する目的で詳細に説明するが、本発明は本実施形態に限定されるものではない。本願明細書において、各数値範囲の上限値及び下限値は任意に組み合わせることができる。
【００１６】
《血液処理用ビーズ》
〈生体適合性ポリマー〉
本実施形態における血液処理用ビーズは、吸着体としての多孔質ビーズ上に担持されたポリマーを有する。ポリマーは、下記一般式（１）で表されるモノマーを単量体単位として含むポリマーである（「生体適合性ポリマー」ともいう。）。
【化２】
2020006155.tif 000003
式（１）中、Ｒ１はメチル基（−ＣＨ３）である。Ｒ２は、末端にメトキシ基を有する直鎖アルキル基（−ＣＨ２（ＣＨ２）ｑＯＣＨ３）であるか、又はアルキル基（−ＣＨ２ＣｍＨ２ｍ＋１）である。Ｒ２において、ｑは１〜５、好ましくは１〜３、より好ましくは１又は２であり、ｍは０〜１７、より好ましくは０〜１１である。Ｒ２がアルキル基（−ＣＨ２ＣｍＨ２ｍ＋１）である場合、ＣｍＨ２ｍ＋１部分は、直鎖であってもよく、分岐鎖であってもよく、好ましくは直鎖である。
【００１７】
式（１）で表されるモノマーは、２−メトキシエチルメタクリレート（ＭＥＭＡ）、ｎ−ブチルメタクリレート（ＢＭＡ）、及びラウリル酸メタクリレート（ＬＭＡ）からなる群から選択される少なくとも一つであることがより好ましく、２−メトキシエチルメタクリレート（ＭＥＭＡ）であることが更に好ましい。式（１）で表されるモノマーが上記である場合、多孔質ビーズへの過度吸着性をより高く維持しつつ、血液適合性を向上させることができるため、好ましい。
【００１８】
理論に限定されないが、本実施形態の血液処理用ビーズは、Ｒ１がメチル基（−ＣＨ３）であり、かつ特定のＲ２基を有するモノマーを単量体単位として含む生体適合性ポリマーを、特定の材料から構成される多孔質ビーズ上に担持することにより、多孔質ビーズの吸着性を維持しつつ、血液適合性を向上させることができる。そのメカニズムは、本願の出願時において未だ明らかではないが、発明者らは以下のように推察している。従来は、多孔質ビーズを生体適合性ポリマーで処理する際、十分な生体適合性を確保するために、より多くの生体適合性ポリマーを多孔質ビーズに含浸させることが好ましいと考えられてきた。そのため、多孔質ビーズに対して含浸性のよい生体適合性ポリマーが好ましく用いられてきた。そうすると、体適合性ポリマーの親水性によって多孔質ビーズ内部の細孔（吸着サイト）が過度に親水化され、疎水性である炎症性メディエーターの吸着を妨げる。また、多孔質ビーズ内部の吸着サイトが生体適合性ポリマーによって物理的に塞がれることにより、吸着性が低下すると考えられる。したがって、従来、多孔質ビーズの生体適合性の向上と吸着性の向上とはトレードオフの関係にある。
【００１９】
これに対して、本実施形態の血液処理用ビーズは、上記特定の生体適合性ポリマーと、特定の材料から構成される多孔質ビーズとの組み合わせによって、多孔質ビーズの表面及び吸着サイトにおける親水性／疎水性のバランスが改善される。これに加えて、又は他の実施形態において、上記特定の生体適合性ポリマーと、特定の材料から構成される多孔質ビーズとの組み合わせによって、多孔質ビーズに対する含浸性が適度に調整される。その理由としては、Ｒ１が水素原子である生体適合性ポリマーは、多孔質ビーズに対して含浸性が高く、本願特定の材料から構成される多孔質ビーズの表面全体に対して、非選択的に、換言すればより均一に、コートされる傾向がある。一方で、Ｒ１がメチル基であるモノマーを単量体単位として含む本実施形態におけるポリマーは、多孔質ビーズに対する含浸性が適度に抑えられており、多孔質ビーズの表面のうち、生体適合性ポリマーが付着しにくい滑らかな表面よりも、付着しやすい荒い表面に優先的にコートされる傾向がある。その結果、多孔質ビーズの滑らかな表面は、生体適合性ポリマーが付着せずに残りやすい。この傾向は血小板にも当てはまり、血小板は、ビーズ表面の滑らかな表面よりも、荒い表面に付着しやすい。このとき、荒い表面には本実施形態におけるポリマーが優先的に付着しているので、血小板がビーズ表面に付着することを効果的に抑制することができる。さらに、生体適合性ポリマーが付着していない表面が存在することにより、多孔質ビーズに担持される生体適合性ポリマーの量を抑えつつ、吸着サイトの閉塞が低減される。その結果、本実施形態の血液処理用ビーズは、多孔質ビーズの吸着性を維持しつつ、血液適合性を向上させることができると考えられる。このように、本実施形態の血液処理用ビーズは、従来トレードオフの関係にあると考えられてきた生体適合性と吸着性とを、予想外にも両立させることができる。
【００２０】
式（１）で表されるモノマーの含有量は、生体適合性ポリマーを構成するモノマー全体を基準として、好ましくは４０モル％以上、より好ましくは６０モル％以上である。該モノマーの含有量の上限値は限定されず、生体適合性ポリマーを構成するモノマー全体を基準として、１００モル％であってもよく、又は８０モル％以下、若しくは６０モル％以下であってもよい。
【００２１】
生体適合性ポリマーは、式（１）で表されるモノマーと共重合可能な、電荷を有するモノマーを単量体単位として更に含むことが好ましい。本願明細書において、「電荷を有するモノマー」は、ｐＨ７．０の条件下で部分的もしくは完全に正電荷又は負電荷を帯びる官能基を有するモノマーである。生体適合性ポリマーが電荷を有するモノマーを単量体単位として更に含む場合、本実施形態における多孔質ビーズとの組み合わせにおいて、多孔質ビーズ上への生体適合性ポリマーの担持量が低減され、吸着性の低下を抑制できる。また、電荷を有するモノマーは高い親水性を有するため、生体適合性も向上する。その結果、より良好な吸着性及び血液適合性を有する血液処理用ビーズが得られる傾向にある。
【００２２】
電荷を有するモノマーとしては、例えば、アミノ基（−ＮＨ２、−ＮＨＲ３、ＮＲ３Ｒ４）、カルボキシル基（−ＣＯＯＨ）、リン酸基（−ＯＰＯ３Ｈ２）、スルホン酸基（−ＳＯ３Ｈ）、及び両性イオン基からなる群から選択される少なくとも一つの基を有するモノマーが挙げられる。アミノ基において、Ｒ３及びＲ４は、それぞれ独立して、炭素数１〜３のアルキル基であることが好ましく、炭素数１又は２のアルキル基であることがより好ましい。
【００２３】
これらの中でも、電荷を有するモノマーは、アミノ基、カルボキシル基、及び両性イオン基からなる群から選択される少なくとも一つの基を有するモノマーであることがより好ましい。電荷を有するモノマーは、アミノ基を有するカチオン性モノマー、カルボキシル基を有するアニオン性モノマー、アミノ基とカルボキシル基との両性イオン型モノマー、及びアミノ基とリン酸基との両性イオン型モノマーからなる群から選択される少なくとも一つであることが更に好ましい。電荷を有するモノマーがカルボキシル基を有する場合、多孔質ビーズがＣａ２＋を吸着し、血液凝固の亢進を抑制できる点で、更に好ましい。
【００２４】
より具体的には、電荷を有するモノマーとしては、２−アミノエチルメタクリレート（ＡＥＭＡ）、ジメチルアミノエチルメタクリレート（ＤＭＡＥＭＡ）、ジエチルアミノエチルメタクリレート（ＤＥＡＥＭＡ）、［２−（メタクリロイルオキシ）エチル］トリメチルアンモニウム、アクリル酸（ＡＡｃ）、メタクリル酸（ＭＡｃ）、リン酸２−（メタクリロイルオキシ）エチル、Ｎ−メタクリロイルオキシエチル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアンモニウム−α−Ｎ−メチルカルボキシベタイン（ＣＭＢ）、［２−（メタクリロイルオキシ）エチル］ジメチル−（３−スルホプロピル）アンモニウムヒドロキシド（ＳＰＢ）、［３−（メタクリロイルアミノ）プロピル］ジメチル（３−スルホプロピル）アンモニウムヒドロキシド（ＳＰＢＡ）、リン酸２−（メタクリロイルオキシ）エチル２−（トリメチルアンモニオ）エチル（ＭＰＣ）、及び［３−（メタクリロイルアミノ）プロピル］ジメチル（３−スルホブチル）アンモニウムからなる群から選択される少なくとも一つであることがより好ましい。
【００２５】
これらの中でも、電荷を有するモノマーは、メチルアミノエチルメタクリレート（ＤＭＡＥＭＡ）、ジエチルアミノエチルメタクリレート（ＤＥＡＥＭＡ）、アクリル酸（ＡＡｃ）、Ｎ−メタクリロイルオキシエチル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアンモニウム−α−Ｎ−メチルカルボキシベタイン（ＣＭＢ）、及びリン酸２−（メタクリロイルオキシ）エチル２−（トリメチルアンモニオ）エチル（ＭＰＣ）からなる群から選択される少なくとも一つであることがより好ましく、Ｎ−メタクリロイルオキシエチル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアンモニウム−α−Ｎ−メチルカルボキシベタイン（ＣＭＢ）であることが更に好ましい。
【００２６】
電荷を有するモノマーの含有量は、生体適合性ポリマーを構成するモノマー全体を基準として、好ましくは１０モル％以上６０モル％以下、より好ましくは１５モル％以上４０モル％以下である。電荷を有するモノマーの含有量が上記範囲内である場合、多孔質ビーズへの含浸性及び親水性のバランスに優れ、より吸着性及び生体適合性に優れた血液処理用ビーズが得られる傾向にある。生体適合性ポリマーの組成及び構造の分析方法については、実施例の欄で詳述する。
【００２７】
生体適合性ポリマーの重量平均分子量（Ｍｗ）は、好ましくは５，０００以上５，０００，０００以下、より好ましくは１０，０００以上１，０００，０００以下、更に好ましくは１０，０００以上３００，０００以下である。生体適合性ポリマーの重量平均分子量が上記範囲内であると、多孔質ビーズへの適度な含浸性、血液中への溶出の防止、及び担持量の低減等の観点から好ましい。生体適合性ポリマーの重量平均分子量（Ｍｗ）の分析方法は、例えば、比較例に記載するように、ゲルパーミエーションクロマトグラフィー（ＧＰＣ）などにより測定することができる。
【００２８】
多孔質ビーズ上に担持される生体適合性ポリマーの量（担持量）は、多孔質ビーズ乾燥時重量１ｇ当たり、好ましくは０．０８ｍｇ以上１１４ｍｇ以下、より好ましくは０．８ｍｇ以上５６ｍｇ以下、更に好ましくは２．０ｍｇ以上２０ｍｇ以下である。生体適合性ポリマーの担持量（コーティング量）の測定方法については、実施例の欄で詳述する。
【００２９】
一実施形態において、本実施形態における生体適合性ポリマーと特定の材料から構成される多孔質ビーズとの組み合わせによって、担持量が上記範囲に抑えられる。他の実施形態において、生体適合性ポリマーを多孔質ビーズに適用する条件を変更することによって、担持量を上記範囲に制御してもよい。担持量が上記範囲内であることにより、吸着サイトの閉塞が低減され、その結果、多孔質ビーズの吸着性をより高く維持しつつ、血液適合性を向上させることができると考えられる。
【００３０】
生体適合性ポリマーが「多孔質ビーズの表面上に担持されている」とは、他の一つの表現では、生体適合性ポリマーが、多孔質ビーズの表面の少なくとも一部に存在する状態を指すものである。したがって、本実施形態において、生体適合性ポリマーは、多孔質ビーズの表面の全てに担持（コーティング）されている必要はない。また、本発明の課題を解決することができる限りにおいて、生体適合性ポリマーは、多孔質ビーズの細孔内に存在していてもよく、細孔をある程度閉塞していてもよい。
【００３１】
生体適合性ポリマーは、上記式（１）のモノマー、及び電荷を有する任意のモノマーに加えて、他のモノマーを単量体単位として更に含んでいてもよい。他のモノマーとしては、これらのモノマーと共重合可能であれば限定されない。
【００３２】
他のモノマーとしては、例えば、式（１）において、Ｒ１が水素（Ｈ）であるか、又は炭素数２以上のアルキル基であるモノマー；Ｒ２の−ＣＨ２（ＣＨ２）ｑＯＣＨ３において、末端がメトキシキ基ではなく、炭素数２以上のアルコキシ基、例えばエトキシ基、プロポキシ基、及びブトキシ基等であるモノマー；Ｒ２の−ＣＨ２（ＣＨ２）ｑＯＣＨ３において、ｑが０又は６以上であるモノマー；Ｒ２の−ＣＨ２ＣｍＨ２ｍ＋１において、ｍが１８以上であるモノマー；並びにこれらの組み合わせが挙げられる。
【００３３】
他のモノマーとしては、より具体的には、メチルアクリレート、エチルアクリレート、イソプロピルアクリレート、ブチルアクリレート、ヘキシルアクリレート、２−エチルヘキシルアクリレート、メチルメタクリレート、メトキシメチルアクリレート、メトキシエチルアクリレート、メトキシプロピルアクリレート、メトキシブチルアクリレート、エトキシメチルアクリレート、エトキシエチルアクリレート、エトキシプロピルアクリレート、エトキシブチルアクリレート、プロポキシメチルアクリレート、プロポキシエチルアクリレート、プロポキシプロピルアクリレート、プロポキシブチルアクリレート、ブトキシメチルアクリレート、ブトキシエチルアクリレート、ブトキシプロピルアクリレート、ブトキシブチルアクリレート、エトキシメチルメタクリレート、エトキシエチルメタクリレート、エトキシプロピルメタクリレート、エトキシブチルメタクリレート、プロポキシメチルメタクリレート、プロポキシエチルメタクリレート、プロポキシプロピルメタクリレート、プロポキシブチルメタクリレート、ブトキシメチルメタクリレート、ブトキシエチルメタクリレート、ブトキシプロピルメタクリレート、及びブトキシブチルメタクリレート等が挙げられる。
【００３４】
〈多孔質ビーズ〉
本実施形態における血液処理用ビーズは、吸着体としての多孔質ビーズを有する。多孔質ビーズは、アクリル系樹脂、スチレン系樹脂、及びセルロース系樹脂からなる群から選択される少なくとも一つの樹脂から構成される。本願明細書において、本発明の課題を解決することができる限りにおいて、多孔質ビーズは、他の樹脂及び他の成分を含んでいてもよい。
【００３５】
多孔質ビーズとしては、市販の多孔質ビーズを使用することができる。アクリル系樹脂から構成される市販の多孔質ビーズとしては、例えば、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ７ＨＰ（オルガノ社製）、ダイヤイオンＴＭＨＰ２ＭＧ（三菱ケミカル社製）、ピュロソーブＴＭＰＡＤ６１０（ピュロライト社製）、ピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０（ピュロライト社製）及びＭｕｒｏｍａｃ（商標登録）ＰＡＰ−９２１０（室町ケミカル社製）等を挙げることができる。スチレン系樹脂から構成される市販の多孔質ビーズとしては、例えば、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ４（オルガノ社製）、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ２０００（オルガノ社製）、アンバーライトＴＭＦＰＸ６６（オルガノ社製）、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎ（オルガノ社製）、ダイヤイオンＴＭＨＰ２０（三菱ケミカル社製）、ダイヤイオンＴＭＨＰ２１（三菱ケミカル社製）、ダイヤイオンＴＭＳＰ７００（三菱ケミカル社製）、ピュロソーブＴＭＰＡＤ６００（ピュロライト社製）、ピュロソーブＴＭＰＡＤ９００（ピュロライト社製）、及びＭｕｒｏｍａｃ（商標登録）ＳＡＰ−９２１０（室町ケミカル社製）等を挙げることができる。セルロース系樹脂から構成される市販の多孔質ビーズとしては、例えば、ビスコパール（商標登録）ミニ（レンゴー株式会社社製）、及びＣ８３２９（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社製）等を挙げることができる。
【００３６】
多孔質ビーズの体積平均粒子径は、好ましくは３００μｍ〜１０００μｍ、より好ましくは４００μｍ〜８００μｍ、更に好ましくは４２０μｍ〜７００μｍである。体積平均粒子径が３００μｍ以上であることにより、血液をカラムに流した際の圧上昇を効果的に抑制することができ、体積平均粒子径が１０００μｍ以下であることにより、迅速な吸着性能を発揮することできる。本願において、多孔質ビーズの「体積平均粒子径」の測定方法については、実施例の欄で詳述する。
【００３７】
多孔質ビーズの細孔径５ｎｍ〜１００ｎｍの積算細孔容量が、０．５ｃｍ３／ｇ以上であることが好ましく、０．８ｃｍ３／ｇ以上であることがより好ましく、１．０ｃｍ３／ｇ以上であることが更に好ましい。該積算細孔容量の上限値は、好ましくは３．５ｃｍ３／ｇ以下、より好ましくは３．０ｃｍ３／ｇ以下、更に好ましくは２．５ｃｍ３／ｇ以下である。該積算細孔容量が上記範囲内である場合、ポリマーを担持させている多孔質ビーズの吸着性がより向上し、多孔質ビーズはより多くの疎水性蛋白質分子を除去することができるため好ましい。また該積算細孔容量が上記範囲内である場合、溶出する生体適合性ポリマーをその細孔内により効果的に吸着することができる。その結果、より良好な血液適合性を有しつつ、生体適合性ポリマーの血液中への溶出が低減された血液処理用ビーズを得ることができるため好ましい。
【００３８】
上記積算細孔容量の特徴に加えて、又は他の実施形態において、多孔質ビーズの細孔径１００ｎｍ〜２００ｎｍの積算細孔容量が、０．２ｃｍ３／ｇ以下であることが好ましく、０．１ｃｍ３／ｇ以下であることがより好ましく、０．０５ｃｍ３／ｇ以下であることが更に好ましい。該積算細孔容量が上記特徴を有する場合、多孔質ビーズは疎水性蛋白質分子の吸着に適したサイズの細孔を多く有し、その結果、より吸着性に優れた血液処理用ビーズを得ることができるため好ましい。多孔質ビーズの積算細孔容量の測定方法については、実施例の欄で詳述する。
【００３９】
〈血液処理用ビーズの元素割合及び原子割合〉
（元素分析に基づく元素割合）
血液処理用ビーズ全体を構成する元素のうち、窒素元素の割合は、０質量％超１．０質量％以下であることが好ましく、０質量％超０．３質量％以下であることがより好ましい。窒素元素の割合が上記範囲内である場合、血液処理用ビーズは、疎水性蛋白質分子を吸着しつつ高い血液適合性を有するため好ましい。血液処理用ビーズ全体を構成する元素のうち、炭素元素、水素元素、及び酸素元素の総和は、９７．０質量％以上であることが好ましく、９９．０質量％以上であることがより好ましい。これらの元素の割合が上記範囲内である場合、血液処理用ビーズはより多くの疎水性蛋白質分子を除去することができるため好ましい。血液処理用ビーズ全体を構成する元素を基準とする元素割合は、元素分析で測定することができる。測定方法については、実施例の欄で詳述する。
【００４０】
（ＸＰＳに基づく原子割合）
上記元素分析に基づく元素割合の特徴に加えて、又は他の実施形態において、血液処理用ビーズの表面に存在する窒素原子の割合は、血液処理用ビーズの表面に存在する原子番号３番のリチウム原子から原子番号９２番のウラン原子の総数を基準として、原子百分率で０．２％以上０．７％以下であることが好ましく、０．２％以上０．５％以下であることがより好ましく、０．３％以上０．５％以下であることが更に好ましい。血液処理用ビーズの表面に存在する窒素原子数の割合が上記範囲内である場合、血液処理用ビーズは、疎水性蛋白質分子を吸着しつつ高い血液適合性を有するため好ましい。血液処理用ビーズの表面に存在する炭素原子と酸素原子の割合の総和は、血液処理用ビーズの表面に存在する原子番号３番のリチウム原子から原子番号９２番のウラン原子の総数を基準として、原子百分率で９７．０％以上であることが好ましい。血液処理用ビーズの表面に存在するリン原子の割合は、血液処理用ビーズの表面に存在する原子番号３番のリチウム原子から原子番号９２番のウラン原子の総数を基準として、原子百分率で、好ましくは３％以下、より好ましくは１％以下である。血液処理用ビーズの表面に存在する特定の原子の割合は、X線光電分光法（ＸＰＳ）により測定することができる。測定方法については、実施例の欄で詳述する。
【００４１】
血液処理用ビーズを粉砕して粉体にし、該粉体の表面をＸＰＳで測定することにより、血液処理用ビーズの全体を構成する特定原子の割合を、原子番号３番から９２番までの原子の総数を基準として測定することができる。このようにして測定した血液処理用ビーズの全体を構成する窒素原子の割合は、原子番号３番から９２番までの原子の総数を基準として、０％超０．１％以下であることが好ましい。血液処理用ビーズの全体を構成するリン原子の割合は、原子番号３番から９２番までの原子の総数を基準として、０．１％以下であることが好ましい。窒素原子及びリン原子の割合が、それぞれ上記範囲内である場合、血液処理用ビーズは、疎水性蛋白質分子を吸着しつつ高い血液適合性を有するため好ましい。
【００４２】
〈血液処理用ビーズの吸着性〉
本実施形態における血液処理用ビーズは、例えば、血液から１０００Ｄａ超〜６６０００Ｄａ未満の疎水性蛋白質分子を除去すると、ポリマーを担持させている多孔質ビーズの吸着性がより向上し、溶出する生体適合性ポリマーをその細孔内により効果的に吸着することができる。その結果、より良好な血液適合性を有しつつ、生体適合性ポリマーの血液中への溶出が低減された血液処理用ビーズを得ることができるため好ましい。本願明細書において、ある疎水性蛋白質分子を「除去することができる」とは、除去対象の疎水性蛋白質分子を含む血漿サンプル中を血液処理用ビーズに接触させて振とうさせたとき、該血液処理用ビーズへの該疎水性蛋白質の吸着率が３０％以上であることを意味する。血液処理用ビーズの吸着性の評価方法は、実施例の欄で詳述する。本実施形態における血液処理用ビーズは、より好ましくは８０００Ｄａ超〜６６０００Ｄａ未満、更に好ましくは８０００Ｄａ超〜５１０００Ｄａ未満の疎水性蛋白質分子を除去することができる。例えば、サイトカインは分子量約５〜６０ｋＤａ（ＩＬ−１ｂ：約１７．５ｋＤａ、１Ｌ−６：約２４．５ｋＤａ、ＩＬ−８：約８ｋＤａ、ＩＬ−１０（二量体）：約３７．５ｋＤａ、ＴＮＦ−α（三量体）：約５１ｋＤａ）、アラーミンであるハイモビリティグループボックス１（ＨＭＧＢ１）は分子量約３０ｋＤａの疎水性蛋白質である。
【００４３】
除去される疎水性蛋白質分子としては、敗血症の原因と考えられる蛋白質分子、例えば、病原微生物に由来する外因性物質であるＰＡＭＰｓ(pathogen-associated molecular patterns)；並びに炎症反応に繋がる種々の炎症性メディエーター、例えば、組織障害により放出される内因性物質であるアラーミン、及び炎症反応を引き起こすサイトカインが挙げられる。疎水性蛋白質分子としては、白血球もまた挙げられる。
【００４４】
ＰＡＭＰｓとしては、例えば、エンドトキシン（ＬＰＳ）、ペプチドグリカン（ＰＧＮ）、リポテイコ酸、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、及びフラジェリン等が挙げられる。
【００４５】
アラーミンとしては、例えば、ハイモビリティグループボックス１（ＨＭＧＢ１）、熱ショックタンパク（ＨＳＰｓ）、ヒストン、フィブリノーゲン、好中球エラスターゼ、及びマクロファージ遊走阻止因子（ＭＩＦ）等が挙げられる。
【００４６】
サイトカインとしては、例えば、インターロイキン（ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、及びＩＬ−１８）、並びに腫瘍壊死因子（ＴＮＦ−α、及びＴＮＦ−β）等が挙げられる。
これらの中でも、血液処理用ビーズは、アラーミン及びサイトカインを除去することが好ましく、ＨＭＧＢ１及びサイトカインを除去することがより好ましい。
【００４７】
〈血液処理用ビーズの生体適合性〉
本実施形態における血液処理用ビーズは、上記のように優れた吸着性を維持しながら、生体適合性にも優れている。用語「生体適合性」とは、血液浄化器の目的や使用方法によって異なるが、本願明細書においては、血液処理用ビーズへの血小板の付着量を生体適合性の指標として用いる。血液処理用ビーズへの血小板の付着量が抑制されるほど、血液処理用ビーズは生体適合性に優れている。血液処理用ビーズの血小板付着性の評価方法は、実施例の欄で詳述する。
【００４８】
本実施形態における血液処理用ビーズは、実施例の欄で詳述する「血液処理用ビーズの血小板付着性」の評価方法に基づいて測定した場合に、多孔質ビーズへの血小板吸着率は、好ましくは０．１％〜３０％、より好ましくは０．３％〜２０％、更に好ましくは０．５％〜１１％である。例えば、アクリル系樹脂から構成される多孔質ビーズを用いた場合、該付着量は、好ましくは０．１％〜２２％、より好ましくは０．３％〜１３％、更に好ましくは０．５％〜９％である。例えば、スチレン系樹脂から構成される多孔質ビーズを用いた場合、該付着量は、好ましくは０．５％〜３０％、より好ましくは１％〜２２％、更に好ましくは３％〜１１％である。
【００４９】
《血液処理用ビーズの製造方法》
本実施形態の血液処理用ビーズの製造方法は限定されない。例えば、本実施形態の血液処理用ビーズの製造方法は、アクリル系樹脂、スチレン系樹脂、及びセルロース系樹脂からなる群から選択される少なくとも一つの樹脂から構成される多孔質ビーズの表面上に、本実施形態における生体適合性ポリマーを担持することを含む。本実施形態における生体適合性ポリマーは、下記一般式（１）で表されるモノマーを単量体単位として含み、
【化３】
2020006155.tif 000004
式（１）中、Ｒ１は、−ＣＨ３であり、Ｒ２は、−ＣＨ２（ＣＨ２）ｑＯＣＨ３又は−ＣＨ２ＣｍＨ２ｍ＋１であり、ｑは１〜５であり、ｍは０〜１７である。生体適合性ポリマー及びモノマーについての詳細は上述したので、ここでは記載を省略する。
【００５０】
〈生体適合性ポリマーの製造方法〉
本実施形態において、生体適合性ポリマーの製造方法は限定されない。例えば、生体適合性ポリマーの製造方法は、任意の溶媒中に式（１）のモノマーを含有するモノマー溶液を調整することと、上記モノマー溶液に任意の重合開始剤を添加して重合溶液を調整することと、上記モノマーを重合させることとを含む。
【００５１】
式（１）のモノマーに加えて、電荷を有するモノマーを、上記モノマー溶液中及び／又は上記重合溶液中に更に添加して、式（１）のモノマーと共重合させてもよい。電荷を有するモノマーについての詳細は上述したので、ここでは記載を省略する。
【００５２】
重合された生体適合性ポリマーは、任意の精製方法、例えば、再沈澱法、透析法、限外濾過法、及び抽出法等によって精製することができる。精製された生体適合性ポリマーは、任意の乾燥方法、例えば、減圧乾燥、噴霧乾燥、凍結乾燥、及び加熱乾燥等によって乾燥させることができる。
【００５３】
〈生体適合性ポリマーの担持方法〉
生体適合性ポリマーを多孔質ビーズの表面上に担持する方法としては、任意の担持方法、例えば塗布法、スプレー法、及びディップ法等を用いることができる。
【００５４】
例えば、ディップ法は、任意の溶媒、例えばアルコール、クロロホルム、アセトン、テトラヒドロフラン、及びジメチルホルムアミド等に上記生体適合性ポリマーを溶解したコーティング溶液を調整し、コーティング溶液に多孔質ビーズを浸漬することを含む。含浸後、コーティング溶液から多孔質ビーズを取り出して余分な溶液を取り除き、次いで任意の乾燥方法により乾燥させることができる。乾燥方法としては、乾燥気体中での風乾、減圧雰囲気中で常温又は加熱しながら乾燥を行う減圧乾燥等が挙げられる。減圧乾燥は、本実施形態における多孔質ビーズ１ｇ当たりのポリマーの量を少なくする観点から好ましい。
【００５５】
塗布法及びスプレー法では、例えば、上記コーティング溶液を多孔質ビーズに塗布又はスプレーした後、上記のように乾燥させることを含む。
【００５６】
《血液浄化器》
本実施形態の血液浄化器は、本実施形態の血液処理用ビーズを有する。血液浄化器は、一般に、血液入口、内部空間、及び血液出口を有する本体容器を有し、内部空間は血液処理用ビーズを収容することができる。血液浄化処理の際には、一般に、処理前の血液が血液入口を通って内部空間へと導入され、内部空間内に存在する本実施形態の血液処理用ビーズと接触することによって処理され、処理済み血液は血液出口を通って流出することができる。
【００５７】
本体容器の形状としては、限定されないが、例えば、筒状、典型的には円筒状のカラム等を挙げることができる。
【００５８】
本体容器を構成する材料としては、限定されないが、熱可塑性樹脂、例えばポリプロピレン、ポリエチレン、ポリエステル、ポリスチレン、ポリ四フッ化エチレン、ポリカーボネート、アクリロニトリルブタジエンスチレン（ＡＢＳ）、及びビニル芳香族炭化水素と共役ジエンとからなる共重合体等が挙げられる。また、封止のために熱硬化性樹脂、例えばポリウレタン、及びエポキシ等が用いられることもある。
【実施例】
【００５９】
以下、実施例及び比較例により本発明の実施形態を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例及び比較例に限定されるものではない。
【００６０】
《多孔質ビーズの物性測定》
〈多孔質ビーズの体積平均粒子径〉
超純水にて膨潤された多孔質ビーズの大きさをデジタルマイクロスコープＶＨＸ―９００（キーエンス社製）を用いて２０００ビーズ測定し、それらの体積平均を体積平均粒子径（μｍ）として算出した。
【００６１】
〈多孔質ビーズの積算細孔容量〉
超純水にて膨潤された多孔質ビーズを凍結後２４時間凍結乾燥し、多孔質ビーズを乾燥させた後、ＶａｃＰｒｅｐ０６１（島津製作所−マイクロメリティックス社製）を用いて６０℃で１５時間の脱ガス処理（減圧乾燥）を行った。その後、ＴｒｉＳｔａｒII  ３０２０（島津製作所−マイクロメリティックス社製）を用いてＮ２ガス吸着法にて積算細孔容量（ｃｍ３／ｇ）の測定を行った。この際、積算細孔容量としてはＢＪＨ法によるDesorption Cumulative Pore Volumeを採用した。
【００６２】
《実施例１》
〈コーティングポリマーの合成〉
２−メトキシエチルメタクリレート（ＭＥＭＡ、化４構造式（ｉ）の化合物）と、Ｎ，Ｎ−ジエチルアミノエチルメタクリレート（ＤＥＡＥＭＡ、化４構造式（ｉｉ）の化合物）と、Ｎ−メタクリロイルオキシエチル−Ｎ，Ｎ−ジメチルアンモニウム−α−Ｎ−メチルカルボキシベタイン（ＣＭＢ、化４構造式（ｉｉｉ）の化合物）との共重合体を通常の溶液重合によって合成した。重合条件は、エタノール溶液中、開始剤としてアゾイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）０．００２５モル／Ｌ存在下、各モノマー濃度を１モル／Ｌとし、反応温度６０℃にて８時間重合反応を行い、ポリマー重合液を得た。得られたポリマー重合液をジエチルエーテルに滴下し、析出したポリマーを回収した。回収したポリマーを、ジエチルエーテルを用いて再沈殿操作を行うことで精製した。その後、得られたポリマーを減圧条件下で２４時間乾燥してコーティングポリマーを得た。
【００６３】
コーティングポリマー中のＭＥＭＡモノマー単位と、ＤＥＡＥＭＡモノマー単位と、ＣＭＢモノマー単位とのモル比は以下のように測定した。得られたコーティングポリマーをジメチルスルホキシドへ溶解した後、１Ｈ−ＮＭＲ測定を行うことにより算出したチャートにおける４．３２ｐｐｍ（ＣＭＢに固有のＨ原子由来）のピーク及び２．６３ｐｐｍ（ＤＥＡＥＭＡに固有のＨ原子由来）のピークと、０．６５−２．１５ｐｐｍ（全体のＨ原子量）の面積比から次の式により算出した。
ＤＥＡＥＭＡモノマーのモル比＝（“２．６３ｐｐｍ領域の面積比”／２）／（“０．６５−２．１５ｐｐｍ領域の面積比”／５−“２．６３ｐｐｍ領域の面積比”×０．３）×１００
ＣＭＢモノマーのモル比＝（“４．３２ｐｐｍ領域の面積比”／２）／（“０．６５−２．１５ｐｐｍ領域の面積比”／５−“２．６３ｐｐｍ領域の面積比”×０．３）×１００
ＭＥＭＡモノマーのモル比＝１００−ＤＥＡＥＭＡモノマーのモル比−ＣＭＢモノマーのモル比
コーティングポリマーにおけるＭＥＭＡモノマー単位と、ＤＥＡＥＭＡモノマー単位と、ＣＭＢモノマー単位とのモル比は、８０／１０／１０と算出された。
【００６４】
〈コーティング液の調製〉
上記コーティングポリマーを７０Ｗ／Ｗ％のエチルアルコールへ添加した後、１２時間撹拌し、コーティングポリマー濃度が０．１重量％のコーティング液を調整した。
【００６５】
〈ビーズの調製〉
多孔質ビーズとしてアンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎ（オルガノ社製、スチレン系ポリマービーズ、体積平均粒子径６０９μｍ、細孔径５ｎｍ〜１００ｎｍの積算細孔容量１．４７２ｃｍ３／ｇ、細孔径１００ｎｍ〜２００ｎｍの積算細孔容量０．０２０ｃｍ３／ｇ）を用いた。アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０ＮのＬｏｇ微分細孔容積分布及び積算細孔容量のグラフを図１に、累計体積粒度分布のグラフを図３に示す。超純水で膨潤されたビーズ２ｍＬ（乾燥時０．４４ｇ）をポリプロピレン（ＰＰ）製の１５ｍＬコニカルチューブに入れた後、７０Ｗ／Ｗ％のエチルアルコール１０ｍＬを加えた。振とう機（インビトロシェイカーＷＡＶＥ−Ｓ１、ＴＡＩＴＥＣ社製）を用いて振とう角度１０度、４０ｒ／ｍｉｎで１２時間振とう後、振とう後の溶液をセルストレーナー（ミニセルストレーナーII、ナイロンメッシュ７０μｍ、フナコシ社製）にて濾過した。濾過後の溶液の２２０ｎｍにおける吸光度を島津紫外可視分光光度計ＵＶ−２６００（島津製作所社製）にて測定後、濾過にて得られたビーズを再度１５ｍＬコニカルチューブに加えた。このコニカルチューブへの７０Ｗ／Ｗ％のエチルアルコールの添加、振とう機による１２時間の振とう、セルストレーナーによる溶液除去の一連の作業を、濾過後溶液の２２０ｎｍにおける吸光度が０．０３以下になるまで繰り返し行った。
【００６６】
〈コーティング方法〉
上記処理により得られたビーズ２ｍＬを含有した１５ｍＬコニカルチューブに、上記コーティング液１０ｍＬを加え、振とう機（インビトロシェイカーＷＡＶＥ−Ｓ１、ＴＡＩＴＥＣ社製）を用いて振とう角度１０度、４０ｒ／ｍｉｎで３時間振とうさせた。その後、コート処理後溶液をセルストレーナー（ミニセルストレーナーII、ナイロンメッシュ７０μｍ、フナコシ社製）にて濾過し、コート後ビーズを得た。濾過後のコート処理後溶液の２２０ｎｍにおける吸光度を島津紫外可視分光光度計ＵＶ−２６００にて測定後、濾過にて得られたコート後ビーズを再度１５ｍＬコニカルチューブに加えた。ここでビーズへのコーティング量（ｍｇ／ビーズ乾燥ｇ）を下記式により算出した結果、コーティングポリマーのコーティング量は６ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであった。
処理後溶液内コーティングポリマー重量（ｍｇ）＝処理前溶液内コーティングポリマー重量（ｍｇ）×処理後溶液の２２０ｎｍの吸光度／処理前溶液内の２２０ｎｍの吸光度
コーティング量（ｍｇ／ビーズ乾燥ｇ）＝（処理前溶液内コーティングポリマー重量−処理後溶液内コーティングポリマー重量）／使用ビーズ乾燥ｇ
【００６７】
続いて、上記のコート後ビーズを含有した１５ｍＬコニカルチューブを、５０℃で１５時間真空乾燥（絶対圧力０．００３ＭＰａ以下）を行った後、コニカルチューブ内に２０Ｗ／Ｗ％のエチルアルコールを１２ｍＬ加えた。振とう機（インビトロシェイカーＷＡＶＥ−Ｓ１、ＴＡＩＴＥＣ社製）を用いて振とう角度１０度、４０ｒ／ｍｉｎで１２時間振とう後、ビーズが浸潤した溶液をセルストレーナー（ミニセルストレーナーII、ナイロンメッシュ７０μｍ、フナコシ社製）にて除去し、得られたビーズを再度１５ｍＬコニカルチューブに加えた。その後、１５ｍＬコニカルチューブへの超純水１２ｍＬの添加、振とう機による３時間の振とう、セルストレーナーによる溶液除去の一連の作業を計５度繰り返し行った。最後にコニカルチューブに生理食塩水（大塚生食注、大塚製薬工場社製）を１２ｍＬ充填し、γ線照射により滅菌作業を行い、血液処理用ビーズを得た。
【００６８】
〈血液処理用ビーズ全体の元素分析〉
上記の血液処理用ビーズ１ｍＬに含まれる溶液をセルストレーナーにて除去し、得られたビーズを１５ｍＬコニカルチューブに加えた。その後、１５ｍＬコニカルチューブへ超純水１２ｍＬを添加することで、ビーズ溶液を超純水にて置換した。超純水にて置換された血液処理用ビーズを５０℃で１５時間真空乾燥（絶対圧力０．００３ＭＰａ以下）を行った。乾燥後の血液処理用ビーズを、元素分析装置（株式会社堀場製作所製、酸素・窒素・水素分析装置ＥＭＧＡ−９３０）を用いて元素分析を行った。試験は３検体で分析し、その平均値を採用した。その結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。
【００６９】
〈血液処理用ビーズ表面のＸＰＳ測定〉
上記の乾燥後の血液処理用ビーズから無作為に５０粒選択し、そのビーズ１粒１粒の表面状態を、Ｋ−Ａｌｐｈａ＋（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  社製）を用いて、ＸＰＳにて測定した。測定条件は、照射Ｘ線：単結晶分光ＡＩ  Ｋα、Ｘ線スポット径：１５０μｍ、中和電子銃：使用、であった。それらの５０粒の血液処理用ビーズ表面に存在する、原子番号３番のリチウム原子から原子番号９２番のウラン原子の総数に対する窒素原子存在率の値を平均化したものを、血液処理用ビーズ表面の窒素原子存在率（％）として算出した。その結果を表３に記す。
【００７０】
〈血液処理用ビーズ全体のＸＰＳ測定〉
上記の乾燥後の血液処理用ビーズをすりこぎ棒により粉砕し、血液処理用ビーズの粉体を作製した。その粉体の表面状態を、Ｋ−Ａｌｐｈａ＋（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ  社製）を用いて、ＸＰＳにて測定した。測定条件は、照射Ｘ線：単結晶分光ＡＩ  Ｋα、Ｘ線スポット径：１５０μｍ、中和電子銃：使用、であった。測定は１０検体について行い、原子番号３番のリチウム原子から原子番号９２番のウラン原子の総数に対する窒素原子存在率の値を平均化したものを、血液処理用ビーズ全体の窒素原子存在率（％）として算出した。その結果を表３に記す。
【００７１】
〈血液処理用ビーズの吸着性〉
健常ボランティアから採血した血液にヘパリンナトリウム（ヘパリンナトリウム注５万単位／５０ｍＬ、ニプロ社製）を２０００  ＩＵ／ｍＬ濃度になるように添加後、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ  ｃｏｌｉ  Ｏ１１１：Ｂ４由来のリポポリサッカライド（ＬＰＳ）（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ社製）を０．１μｇ／ｍＬ濃度になるように添加し、振とう機（インビトロシェイカーＷＡＶＥ−Ｓ１、ＴＡＩＴＥＣ社製）を用いて振とう角度１０度、１０ｒ／ｍｉｎで２４時間、３７℃で振とうさせた。その後、遠心機（ハイブリッド高速冷却遠心機  ６２００、久保田商事社製）を用いて、室温で２０００ｇで２０分間遠心し、上清を血漿サンプルとして取得した。取得した血漿サンプル３．６ｍＬと上記の血液処理用ビーズ０．４５ｍＬ（乾燥時０．１０ｇ）をポリプロピレン（ＰＰ）製の５ｍＬチューブ内で混合し、振とう機を用いて振とう角度１０度、１０ｒ／ｍｉｎで２時間、３７℃で振とうさせた（これをビーズ接触有サンプルとする）。この時、取得した血漿サンプル３．６ｍＬにビーズを添加しないサンプルも準備し、ビーズ接触有サンプルと同じ処理を行った（これをビーズ接触無サンプルとする）。振とうさせた後のＰＰ製チューブを、遠心機を用いて、室温で２０００ｇで１分間遠心し、ビーズ接触有及び無サンプルの上清を取得した。取得した上清を用いて、各種サイトカイン濃度をＢｉｏ−Ｐｌｅｘシステム（Ｂｉｏ−Ｒａｄ社製  Ｂｉｏ−Ｐｌｅｘ  Ｐｒｏ  ヒト  サイトカイン  ＧＩ２７−ｐｌｅｘ  パネル）を用いて、添付の取扱説明書に従い測定した。またＨＭＧＢ−１濃度はＨＭＧＢ１  ＥＬＩＳＡＫ  Ｋｉｔ  ＩＩ（株式会社  シノテスト製）を用いて、添付の取扱説明書に従い測定した。ここで、ビーズのサイトカイン、ＨＭＧＢ−１吸着率は下記式にて算出した。その結果を表１に記す。
各種サイトカイン吸着率（％）＝（“ビーズ接触無サンプルのサイトカイン濃度”−“ビーズ接触有サンプルのサイトカイン濃度”）／“ビーズ接触無サンプルのサイトカイン濃度”×１００
ＨＭＧＢ−１吸着率（％）＝（“ビーズ接触無サンプルのＨＭＧＢ−１濃度”−“ビーズ接触有サンプルのＨＭＧＢ−１濃度”）／“ビーズ接触無サンプルのＨＭＧＢ−１濃度”×１００
尚、今回の実験におけるビーズ接触無サイトカイン濃度、ビーズ接触無ＨＭＧＢ−１濃度はＩＬ−１ｂ：３６５８ｐｇ／ｍＬ、ＩＬ−６：５５４０ｐｇ／ｍＬ、ＩＬ−８：６１４４ｐｇ／ｍＬ、ＩＬ−１０：８４６ｐｇ／ｍＬ、ＴＮＦ−α：８０８５ｐｇ／ｍＬ、ＨＭＧＢ−１：２７ｎｇ／ｍＬであった。
【００７２】
〈血液処理用ビーズの血小板付着性〉
健常ボランティアから採血した血液にヘパリンナトリウム（ヘパリンナトリウム注５万単位／５０ｍＬ、ニプロ社製）を１２００  ＩＵ／ｍＬ濃度になるように添加した（これを処理前血液とする）。処理前血液４．４ｍＬに対し上記の血液処理用ビーズ０．６５ｍＬ（乾燥時０．１５ｇ）をポリプロピレン（ＰＰ）製の５ｍＬチューブ内で混合した。ＲＯＴＡＴＯＲ  ＲＴ−５（タイテック社製）の直径２０ｃｍの円板状回転体上に、チューブを回転体の半径方向に沿うよう放射状に取り付けた。円板状回転体の回転面の角度が水平から２２度になるようにセットして、４ｒｐｍの速度で３時間、３７℃で回転攪拌した。ビーズ接触後の血液をセルストレーナー（ミニセルストレーナーII、ナイロンメッシュ７０μｍ、フナコシ社製）にて濾過し、ビーズを除去した（これを処理後血液とする）。処理後血液の血小板濃度を、ミクロセルカウンター  ＸＴ−１８００ｉ（Ｓｙｓｍｅｘ社製）にて測定した。下記式からビーズへの血小板付着率を算出した結果を表１に示す。
血小板吸着率（％）＝（処理前血液の血小板数−処理後血液の血小板数）／（処理前血液の血小板数）×１００
尚、今回の実験で使用した処理前血液は、白血球濃度：４９２０個／μＬ、赤血球濃度：４３０×１０＾４個／μＬ、血小板濃度：２４０×１０＾３個／μＬ、ヘマトクリット値：３８．８％であった。またヘモクロンＪｒ．シグニチャー＋（インターナショナルテクニダイン社製、ヘモクロン  テストカ−トリッジ  ＪＡＣＴ−ＬＲ）にて測定した、処理前血液の活性化凝固時間は３０４秒であった。
【００７３】
《実施例２》
コーティングポリマーの組成がＭＥＭＡ／ＤＥＡＥＭＡ／ＣＭＢ＝６０／２０／２０（モル比）であること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【００７４】
《実施例３》
コーティングポリマーの組成がＭＥＭＡ／ＣＭＢ＝７５／２５（モル比）であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が８ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【００７５】
《実施例４》
コーティングポリマーの組成がＭＥＭＡ／ＣＭＢ＝７５／２５（モル比）であること、使用コーティング液のコーティングポリマー濃度が０．５重量％であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が３１ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【００７６】
《実施例５》
コーティングポリマーの組成がＭＥＭＡ／ＣＭＢ＝７５／２５（モル比）であること、使用コーティング液のコーティングポリマー濃度が０．０３３重量％であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が２．４ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【００７７】
《実施例６》
コーティングポリマーの組成がＭＥＭＡ／ＤＥＡＥＭＡ＝８０／２０（モル比）であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が１０ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【００７８】
《実施例７》
コーティングポリマーの組成がＭＥＭＡ／ＤＥＡＥＭＡ／ＡＡｃ（アクリル酸、化４構造式（ｉｖ）の化合物）＝６０／２８／１２（モル比）であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が８ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【００７９】
《実施例８》
コーティングポリマーの組成がＭＥＭＡ／ＤＥＡＥＭＡ／ＡＡｃ＝７１／１５／１４（モル比）であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が５ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【００８０】
《実施例９》
コーティングポリマーの組成がＭＥＭＡ／ＤＥＡＥＭＡ／ＭＡｃ（メタアクリル酸、化４構造式（ｖ）の化合物）＝６２／１５／２３（モル比）であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が４ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【００８１】
《実施例１０》
コーティングポリマーの組成がＭＥＭＡ＝１００（モル比）であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が１１ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【００８２】
《実施例１１》
コーティングポリマーの組成がＢＭＡ（ｎ‐ブチルメタクリレート、化４構造式（ｖｉ）の化合物）／ＤＥＡＥＭＡ／ＣＭＢ＝８０／１０／１０（モル比）であること、コーティングポリマーの溶液として７０Ｗ／Ｗ％のエチルアルコールの代わりに１００Ｗ／Ｗ％のエチルアルコールを用いたこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が４ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【００８３】
《実施例１２》
コーティングポリマーの組成がＢＭＡ／ＣＭＢ＝７０／３０（モル比）であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が６ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【００８４】
《実施例１３》
コーティングポリマーの組成がＬＭＡ（ラウリル酸メタクリレート、化４構造式（ｖｉｉ）の化合物）／ＤＥＡＥＭＡ／ＣＭＢ＝８０／１０／１０（モル比）であること、コーティングポリマーの溶液として７０Ｗ／Ｗ％のエチルアルコールの代わりに１００Ｗ／Ｗ％のｎ−ブチルアルコールを用いたこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が４ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【００８５】
《実施例１４》
コーティングポリマーの組成がＬＭＡ／ＤＥＡＥＭＡ／ＣＭＢ＝６０／２０／２０（モル比）であること、コーティングポリマーの溶液として７０Ｗ／Ｗ％のエチルアルコールの代わりに１００Ｗ／Ｗ％のｎ−ブチルアルコールを用いたこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が４ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【００８６】
《実施例１５》
コーティングポリマーの組成がＬＭＡ／ＤＥＡＥＭＡ／ＣＭＢ＝４０／３０／３０（モル比）であること、及びコーティングポリマーの溶液として７０Ｗ／Ｗ％のエチルアルコールの代わりに１００Ｗ／Ｗ％のエチルアルコールを用いたこと以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【００８７】
《実施例１６》
コーティングポリマーの組成がＬＭＡ／ＣＭＢ＝７０／３０（モル比）であること、コーティングポリマーの溶液として７０Ｗ／Ｗ％のエチルアルコールの代わりに１００Ｗ／Ｗ％のエチルアルコールを用いたこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が５ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【００８８】
《実施例１７》
コーティングポリマーの組成がＭＥＭＡ／ＣＭＢ＝８５／１５（モル比）であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が９ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【００８９】
《実施例１８》
コーティングポリマーの組成がＭＥＭＡ／ＭＰＣ（リン酸２−（メタクリロイルオキシ）エチル２−（トリメチルアンモニオ）エチル、化４構造式（ｖｉｉｉ）の化合物）＝８５／１５（モル比）であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が７ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【００９０】
《実施例１９》
コーティングポリマーの組成がＭＥＭＡ／ＤＭＡＥＭＡ（ジメチルアミノエチルメタクリレート、化４構造式（ｉｘ）の化合物）＝８０／２０（モル比）であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が９ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【００９１】
《実施例２０》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０（ピュロライト社製、アクリル系ポリマービーズ、体積平均粒子径６２１μｍ、細孔径５ｎｍ〜１００ｎｍの積算細孔容量０．８２３ｃｍ３／ｇ、細孔径１００ｎｍ〜２００ｎｍの積算細孔容量０．０３８ｃｍ３／ｇ）を選択したこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が１４ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。ピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０のＬｏｇ微分細孔容積分布及び積算細孔容量のグラフを図２に、累計体積粒度分布のグラフを図３に示す。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【００９２】
《実施例２１》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０を選択したこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が１３ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例２と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。
【００９３】
《実施例２２》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０を選択したこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が６ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例３と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【００９４】
《実施例２３》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０を選択したこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が１９ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例４と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。
【００９５】
《実施例２４》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０を選択したこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が１６ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例６と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。
【００９６】
《実施例２５》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０を選択したこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が１３ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例７と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。
【００９７】
《実施例２６》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０を選択したこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が１５ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１０と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。
【００９８】
《比較例１》
コーティングポリマーの組成がＭＥＡ（２−メトキシエチルアクリレート、化４構造式（ｘ）の化合物）／ＤＥＡＥＭＡ／ＣＭＢ＝８０／１０／１０（モル比）であること、使用コーティング液のコーティングポリマー濃度が０．３重量％であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が５５ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法でサイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【００９９】
《比較例２》
コーティングポリマーの組成がＭＥＡ／ＤＥＡＥＭＡ／ＣＭＢ＝８０／１０／１０（モル比）であること、使用コーティング液のコーティングポリマー濃度が０．５重量％であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が９４ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【０１００】
《比較例３》
コーティングポリマーの組成がＢＡ（ブチルアクリレート、化４構造式（ｘｉ）の化合物）＝１００（モル比）であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が１６ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【０１０１】
《比較例４》
コーティングポリマーの組成がＢＡ／ＤＥＡＥＭＡ／ＣＭＢ＝６０／２０／２０（モル比）であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が１２ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【０１０２】
《比較例５》
（コーティングポリマーの合成）
３口ナスフラスコに３−メトキシプロピルアクリレート７．５０ｇ（ＭＣ３Ａ、化４構造式（ｘｉｉ）の化合物）、１，４−ジオキサン３０．２ｇ、及びアゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）７．５ｍｇを加えた。乾燥窒素ガスを反応溶液中に通しながら３０分間攪拌し、反応系を窒素置換した。３口ナスフラスコの下部温度を７５℃に設定したオイルバスに浸漬し、窒素気流下、６時間攪拌することで重合を行った。重合反応の進行を１Ｈ  ＮＭＲによって確認し、十分に高い反応転化率（９０％前後）であることを確認した後、重合系を室温まで放冷することで反応を停止した。重合溶液をヘキサンに滴下することでポリマーを沈殿させ、デカントによって上澄みを除き、沈殿物をテトラヒドロフランに溶解させて回収した。テトラヒドロフランに溶解した後、ヘキサンで再沈殿させる作業を２回繰り返して精製を行い、得られた沈殿物を更に水中で２４時間攪拌した。デカントによって水を取り除き、沈殿物をテトラヒドロフランに溶解させて回収した。溶媒を減圧留去した後、真空乾燥機で乾燥し、重合体を得た。得られた重合体の一部を用いて、分子量を測定したところ、数平均分子量（Ｍｎ）３１０００及び分子量分布（Ｍｗ／Ｍｎ）２．５であった。
【０１０３】
上記コーティングポリマーを用いて、実施例１と同様の方法でビーズのコーティングを行った結果、コーティング量は１９ｍｇ／ビーズ乾燥ｇと算出された。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【０１０４】
《比較例６》
使用コーティング液のコーティングポリマー濃度が０．５重量％であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が９１ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、比較例５と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【０１０５】
《比較例７》
（コーティングポリマーの合成）
２−メトキシエチルアクリレート（ＭＥＡ）１５ｇ、１，４−ジオキサン６０ｇ、アゾビスイソブチロニトリル１５ｍｇを開始剤として７５℃で１０時間重合を行った以外は、比較例５と同等の手法で合成を行った。ＧＰＣの分子量分析の結果から、その数平均分子量（Ｍｎ）は２０，０００であり、分子量分布（Ｍｗ／Ｍｎ）は２．４であった。
【０１０６】
上記コーティングポリマーを用いて、実施例１と同様の方法でビーズのコーティングを行った結果、コーティング量は２１ｍｇ／ビーズ乾燥ｇと算出された。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【０１０７】
《比較例８》
使用コーティング液のコーティングポリマー濃度が０．３重量％であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が５６ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、比較例７と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【０１０８】
《比較例９》
使用コーティング液のコーティングポリマー濃度が０．５重量％であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が９７ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、比較例７と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【０１０９】
《比較例１０》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０を選択したこと、コーティングポリマーの組成がＭＥＡ／ＤＥＡＥＭＡ／ＣＭＢ＝８０／１０／１０（モル比）であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が２０ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。
【０１１０】
《比較例１１》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０を選択したこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が６３ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、比較例２と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。
【０１１１】
《比較例１２》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０を選択したこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が２４ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、比較例５と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。
【０１１２】
《比較例１３》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０を選択したこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が１１４ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、比較例６と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。
【０１１３】
《比較例１４》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０を選択したこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が２３ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、比較例７と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。
【０１１４】
《比較例１５》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０を選択したこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が７０ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、比較例８と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。
【０１１５】
《比較例１６》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０を選択したこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が１０７ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、比較例９と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【０１１６】
《比較例１７》
コーティングポリマーとしてＰＶＰ（ポリビニルピロリドンＫ９０、富士フイルム和光純薬社製）を用いたこと、使用コーティング液のコーティングポリマー濃度が０．５重量％であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が３５ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。
【０１１７】
《比較例１８》
使用コーティング液のコーティングポリマー濃度が０重量％であること、及びコーティングポリマーのコーティング量が０ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は、実施例１と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表１に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【０１１８】
《比較例１９》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０を選択したこと、及びコーティングポリマーのコーティング量が３４ｍｇ／ビーズ乾燥ｇであること以外は比較例１７と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。
【０１１９】
《比較例２０》
ビーズとして、アンバーライトＴＭＸＡＤＴＭ１１８０Ｎの代わりにピュロソーブＴＭＰＡＤ９５０を選択したこと以外は比較例１８と同様に血液処理用ビーズを作製した。実施例１と同様の方法で元素分析を行った結果、窒素元素の割合は０．３質量％以下であった。実施例１と同様の方法で、サイトカイン吸着性能評価、血小板付着性評価を実施した結果を表２に示す。実施例１と同様の方法で、ビーズ表面のＸＰＳ測定、ビーズ全体のＸＰＳ測定を行った結果を表３に示す。
【０１２０】
以上、実施例及び比較例における、生体適合性ポリマー（コート剤）の組成、多孔質ビーズの種類、生体適合性ポリマーの担持量（コート量）、血液処理用ビーズの生体適合性（血小板付着量）、血液処理用ビーズのサイトカイン吸着性を下記表１及び２に記載する。また、実施例及び比較例における、血液処理用ビーズの表面及び全体のＸＰＳ測定に基づく原子割合を、下表３に記載する。
【０１２１】
今回実施例および比較例で使用した血液処理用ビーズの元素分析に基づく窒素元素の割合は、すべての血液処理用ビーズにおいて０．３質量％以下であった。また、血液処理用ビーズの元素分析に基づく、炭素元素と水素元素と酸素元素の割合の総和は、すべての血液処理用ビーズにおいて９９．０質量％以上であった。
【０１２２】
【表１】
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【０１２３】
【表２】
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【０１２４】
【化４】
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【０１２５】
【表３】
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【０１２６】
表１〜２を参照すると、実施例の血液処理用ビーズは、比較例の血液処理用ビーズに比べて、生体適合性ポリマーの担持量がより少なく、多孔質ビーズの吸着性を高く維持しつつ、血液適合性を向上させることが分かる。
【０１２７】
表１の実施例１〜１９の生体適合性ポリマーは、コート量が１１ｍｇ以下でも血小板付着率がすべて１４％以下であった。これに対して、比較例１〜５及び７、１８の生体適合性ポリマーはコート量が２１ｍｇ以下のとき血小板付着率が１５％以上であった。比較例６、８及び９のようにコート量を５０ｍｇ以上にすれば、血小板付着率は１４％以下となるが、サイトカイン吸着量が顕著に減少してしまう。同様に表２の実施例２０〜２６のポリマーは、コート量が２０ｍｇ以下でも血小板付着率がすべて８％以下であった。これに対して、比較例１０〜１６及び２０のポリマーは、コート量を２０ｍｇ以上にしても血小板付着率がすべて１０％以上であった。
【０１２８】
表１〜３を参照すると、実施例１、３〜６、８、１２、１５、１８、２０及び２２の血液処理用ビーズは、血液処理用ビーズの表面に存在する窒素原子の割合が、原子番号３番から９２番までの原子の総数を基準として、原子百分率で０．２％以上０．７％以下であることにより、比較例の血液処理用ビーズに比べて、生体適合性ポリマーの担持量がより少なく、多孔質ビーズの吸着性が高く、また、改善された血液適合性を有することが分かる。
【産業上の利用可能性】
【０１２９】
本発明の血液処理用ビーズは、例えば、敗血症をはじめとする虚血性疾患の治療に使用することができる。また、本発明の血液処理用ビーズは、虚血性疾患の治療のほか、心臓手術及び臓器移植手術などの炎症性メディエーターの過剰産生が問題となる場面での活用も期待される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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