(57)【要約】【課題】  血液悪性疾患を患っている被験体を処置するための方法の提供。血液悪性疾患を患っており、高い末梢がん性細胞負荷を有する被験体を処置するための方法。【解決手段】  上記方法は、血液悪性疾患関連抗原を標的化する薬剤を被験体に投与するステップを含み、被験体が低い末梢がん性細胞負荷を有する。上記方法は、（ｉ）被験体の末梢がん性細胞負荷を医学的に低下させるステップと、（ｉｉ）被験体の末梢がん性細胞負荷がまだ低い間に、血液悪性疾患関連抗原を標的化する薬剤を被験体に投与するステップとを含む。２２５Ａｃ−ＨｕＭ１９５などのα放射性同位体で標識された抗ＣＤ３３抗体を使用して急性骨髄性白血病を処置するための方法が特に想定される。【選択図】図１
2020094065.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
本明細書に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
この出願は、２０１６年５月２７日に出願された米国仮出願第６２／３４２，５６８号（この内容は、その全体が参考として本明細書に援用される）の優先権を主張する。
【０００２】
この出願全体を通して、種々の刊行物が引用される。これらの刊行物の開示は、参照により本明細書において本出願に組み込まれて、本発明が属する分野の水準をより充分に記載するものである。
【０００３】
本発明は、血液悪性疾患関連抗原を標的化する有効な薬剤（毒素コンジュゲート抗体など）を低用量で使用して、血液悪性疾患を患っている被験体を処置することに関し、ここで被験体は低い末梢がん性細胞負荷を有する。
【背景技術】
【０００４】
細胞毒性剤コンジュゲート抗体は、近年、急性骨髄性白血病（「ＡＭＬ」）などの血液悪性疾患を処置するための有望なツールとなっている。特に興味深いものとして、２２５−アクチニウム（２２５Ａｃ）などのα放射性同位体のような有効な細胞毒性剤を有するがん細胞特異的抗体の治療用コンジュゲートがある。
【０００５】
しかし、有効な細胞毒性剤で標識されたモノクローナル抗体の用量を、臨床試験で確立された最大耐量を超えて安全に漸増することはできない。この安全性に基づく投薬制約により、抗体コンジュゲートの用量を飽和レベルまで漸増することが妨げられる。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
したがって、これらのコンジュゲートに対して、治療的に有効であるためには十分高いが、毒性を回避するには十分低い用量でこれらを投与することによって、ＡＭＬおよび他の血液がんを処置するのに満たされていないニーズが存在する。また、患者の年齢、併存症および疾患の重症度とは無関係な様式で、このバランスを達成するのにも満たされていないニーズが存在する。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明は、血液悪性疾患を患っている被験体を処置するための方法であって、血液悪性疾患関連抗原を標的化する薬剤を被験体に投与するステップを含み、被験体が低い末梢がん性細胞負荷を有する、方法を提供する。
【０００８】
本発明は、血液悪性疾患を患っており、高い末梢がん性細胞負荷を有する被験体を処置するための方法であって、（ｉ）被験体の末梢がん性細胞負荷を医学的に低下させるステップと、（ｉｉ）被験体の末梢がん性細胞負荷がまだ低い間に、血液悪性疾患関連抗原を標的化する薬剤を被験体に投与するステップとを含む、方法も提供する。
【０００９】
本発明は、急性骨髄性白血病を患っているヒト被験体を処置するための方法であって、α放射性同位体で標識された抗ＣＤ３３抗体を被験体に投与するステップを含み、（ｉ）被験体が低い末梢芽球負荷を有し、（ｉｉ）抗体が亜飽和用量で投与される、方法をさらに提供する。
【００１０】
本発明は、急性骨髄性白血病を患っており、高い末梢芽球負荷を有するヒト被験体を処置するための方法であって、（ｉ）被験体の末梢芽球負荷を医学的に低下させるステップと、（ｉｉ）被験体の末梢芽球負荷がまだ低い間に、α放射性同位体で標識された抗ＣＤ３３抗体を被験体に投与するステップとを含み、抗体が亜飽和用量で投与される、方法をまたさらに提供する。
【００１１】
本発明は、急性骨髄性白血病を患っているヒト被験体を処置するための方法であって、２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５を被験体に静脈内投与するステップを含み、（ｉ）被験体が低い末梢芽球負荷を有し、（ｉｉ）２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５が亜飽和用量で投与される、方法をまたさらに提供する。
【００１２】
最後に、本発明は、急性骨髄性白血病を患っており、高い末梢芽球負荷を有するヒト被験体を処置するための方法であって、（ｉ）被験体の末梢芽球負荷を医学的に低下させるステップと、（ｉｉ）被験体の末梢芽球負荷がまだ低い間に、２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５を被験体に静脈内投与するステップとを含み、２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５が亜飽和用量で投与される、方法を提供する。
例えば、本発明は、以下の項目を提供する：
（項目１）
血液悪性疾患を患っている被験体を処置するための方法であって、血液悪性疾患関連抗原を標的化する薬剤を前記被験体に投与するステップを含み、前記被験体が低い末梢がん性細胞負荷を有する、方法。
（項目２）
前記被験体がヒトである、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記血液悪性疾患が急性骨髄性白血病である、項目１に記載の方法。
（項目４）
前記薬剤が亜飽和用量で投与される、項目１に記載の方法。
（項目５）
前記薬剤が静脈内に投与される、項目１に記載の方法。
（項目６）
前記抗原を標的化する薬剤が、細胞毒性剤で標識された抗ＣＤ３３抗体である、項目１に記載の方法。
（項目７）
前記がん性細胞が白血病芽球であり、前記被験体の低い末梢がん性細胞負荷が医学的に誘導される、項目１に記載の方法。
（項目８）
前記被験体の低い末梢がん性細胞負荷が薬学的に誘導される、項目７に記載の方法。
（項目９）
血液悪性疾患を患っており、高い末梢がん性細胞負荷を有する被験体を処置するための方法であって、（ｉ）前記被験体の末梢がん性細胞負荷を医学的に低下させるステップと
、（ｉｉ）前記被験体の末梢がん性細胞負荷がまだ低い間に、血液悪性疾患関連抗原を標的化する薬剤を前記被験体に投与するステップとを含む、方法。
（項目１０）
前記被験体がヒトである、項目９に記載の方法。
（項目１１）
前記血液悪性疾患が急性骨髄性白血病である、項目９に記載の方法。
（項目１２）
前記抗原を標的化する薬剤が亜飽和用量で投与される、項目９に記載の方法。
（項目１３）
前記抗原を標的化する薬剤が静脈内に投与される、項目９に記載の方法。
（項目１４）
前記抗原を標的化する薬剤が、細胞毒性剤で標識された抗ＣＤ３３抗体である、項目９に記載の方法。
（項目１５）
前記被験体の末梢がん性細胞負荷を医学的に低下させるステップが、前記被験体の末梢がん性細胞負荷を薬学的に低下させるステップを含む、項目９に記載の方法。
（項目１６）
急性骨髄性白血病を患っているヒト被験体を処置するための方法であって、α放射性同位体で標識された抗ＣＤ３３抗体を前記被験体に投与するステップを含み、（ｉ）前記被験体が低い末梢芽球負荷を有し、（ｉｉ）前記抗体が亜飽和用量で投与される、方法。
（項目１７）
前記被験体の低い末梢芽球負荷が医学的に誘導される、項目１６に記載の方法。
（項目１８）
前記被験体の低い末梢芽球負荷が薬学的に誘導される、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記抗体が静脈内に投与される、項目１６に記載の方法。
（項目２０）
急性骨髄性白血病を患っており、高い末梢芽球負荷を有するヒト被験体を処置するための方法であって、（ｉ）前記被験体の末梢芽球負荷を医学的に低下させるステップと、（ｉｉ）前記被験体の末梢芽球負荷がまだ低い間に、α放射性同位体で標識された抗ＣＤ３３抗体を前記被験体に投与するステップとを含み、前記抗体が亜飽和用量で投与される、方法。
（項目２１）
前記被験体の末梢芽球負荷を医学的に低下させるステップが、前記被験体の末梢芽球負荷を薬学的に低下させるステップを含む、項目２０に記載の方法。
（項目２２）
前記抗体が静脈内に投与される、項目２０に記載の方法。
（項目２３）
急性骨髄性白血病を患っているヒト被験体を処置するための方法であって、２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５を前記被験体に静脈内投与するステップを含み、（ｉ）前記被験体が低い末梢芽球負荷を有し、（ｉｉ）前記２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５が亜飽和用量で投与される、方法。
（項目２４）
前記被験体の低い末梢芽球負荷が医学的に誘導される、項目２３に記載の方法。
（項目２５）
前記被験体の低い末梢芽球負荷が薬学的に誘導される、項目２４に記載の方法。
（項目２６）
前記２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５が静脈内に投与される、項目２３に記載の方法。
（項目２７）
急性骨髄性白血病を患っており、高い末梢芽球負荷を有するヒト被験体を処置するための方法であって、（ｉ）前記被験体の末梢芽球負荷を医学的に低下させるステップと、（ｉｉ）前記被験体の末梢芽球負荷がまだ低い間に、２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５を前記被験体に静脈内投与するステップとを含み、前記２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５が亜飽和用量で投与される、方法。
（項目２８）
前記被験体の末梢芽球負荷を医学的に低下させるステップが、前記被験体の末梢芽球負荷を薬学的に低下させるステップを含む、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
前記２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５が静脈内に投与される、項目２７に記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【００１３】
【図１】この図は、ＨｕＭ１９５の発現プラスミドの模式図を示す。ＨｕＭ１９５のヒト化ＶＬおよびＶＨエクソンはＸｂａＩ部位によって挟まれている。ＶＬエクソンは、哺乳動物発現ベクターｐＶｋに、ＶＨエクソンはｐＶｇ１に挿入された（Ｃｏら、Ｊ．  Ｉｍｍｕｎｏｌ．  １４８巻：１１４９〜１１５４頁、１９９２年）。
【００１４】
【図２】この図は、ＸｂａＩ部位とＢａｍＨＩ部位との間にｐＶｋでクローニングされたＨｕＭ１９５軽鎖の全配列を示す。ヌクレオチド番号は、プラスミドｐＶｋ−ＨｕＭ１９５におけるその位置を示す。ＶＬおよびＣＫエクソンは１文字コードで翻訳され、点は翻訳終止コドンを示す。成熟軽鎖は、二重下線を付したアスパラギン酸（Ｄ）で始まる。イントロン配列はイタリック体である。ポリＡシグナルには下線を付している。
【００１５】
【図３−１】この図は、ＸｂａＩ部位とＢａｍＨＩ部位との間にｐＶｇ１でクローニングされたＨｕＭ１９５重鎖の全配列を示す。ヌクレオチド番号は、プラスミドｐＶｇ１−ＨｕＭ１９５におけるその位置を示す。ＶＨ、ＣＨ１、Ｈ、ＣＨ２およびＣＨ３エクソンは１文字コードで翻訳され、点は翻訳終止コドンを示す。成熟重鎖は、二重下線を付したグルタミン（Ｑ）で始まる。イントロン配列はイタリック体である。ポリＡシグナルには下線を付している。
【図３−２】この図は、ＸｂａＩ部位とＢａｍＨＩ部位との間にｐＶｇ１でクローニングされたＨｕＭ１９５重鎖の全配列を示す。ヌクレオチド番号は、プラスミドｐＶｇ１−ＨｕＭ１９５におけるその位置を示す。ＶＨ、ＣＨ１、Ｈ、ＣＨ２およびＣＨ３エクソンは１文字コードで翻訳され、点は翻訳終止コドンを示す。成熟重鎖は、二重下線を付したグルタミン（Ｑ）で始まる。イントロン配列はイタリック体である。ポリＡシグナルには下線を付している。
【００１６】
【図４】この図は、２２５Ａｃ−リンツズマブ（２２５Ａｃ−ＨｕＭ１９５）の構造を示す。
【００１７】
【図５】この図は、２２５Ａｃ−ＨｕＭ１９５生成のフローチャートを示す。
【００１８】
【図６】この図は、ＡＭＬの２２５Ａｃ−リンツズマブ（２２５Ａｃ−ＨｕＭ１９５）による処置の投薬プロトコルを示す。
【発明を実施するための形態】
【００１９】
本発明は、ＡＭＬなどの血液悪性疾患を患っている被験体を処置するための驚くほど効果的な方法を提供する。これらの方法は、ＣＤ３３などの血液悪性疾患関連抗原を標的化するα放射性同位体とコンジュゲートした抗体などの有効な薬剤を使用する。処置されている被験体は、低い末梢がん性細胞負荷を有し、理想的には、亜飽和用量の薬剤のみが被験体を処置するために必要とされる。
【００２０】
定義
本出願では、以下に示す意味を有するある特定の用語が使用される。
【００２１】
本明細書で使用する場合、薬剤に関して、「投与する」は、任意の公知の方法により、薬剤を被験体の身体に送達することを意味する。具体的な投与方式として、限定するものではないが、静脈内、経口、舌下、経皮、皮下、腹腔内、髄腔内および腫瘍内投与が挙げられる。
【００２２】
さらに、本発明では、使用される種々の抗体および他の抗原を標的化する薬剤（ａｎｔｉｇｅｎ−ｔａｒｇｅｔｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）は、１種または複数の日常的に使用される薬学的に許容される担体を使用して製剤化することができる。このような担体は当業者に周知である。例えば、注射用薬物送達系は、液剤、懸濁剤、ゲル剤、マイクロスフェアおよびポリマー注射剤を含み、溶解度変更剤（ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ−ａｌｔｅｒｉｎｇ  ａｇｅｎｔ）（例えば、エタノール、プロピレングリコールおよびスクロース）およびポリマー（例えば、ポリカプリラクトン（ｐｏｌｙｃａｐｒｙｌａｃｔｏｎｅ）およびＰＬＧＡ）などの賦形剤を含むことができる。移植可能な系は、ロッドおよびディスクを含み、ＰＬＧＡおよびポリカプリラクトンなどの賦形剤を含有することができる。
【００２３】
本明細書で使用する場合、血液悪性疾患関連抗原を標的化する「薬剤」は、このような目的に対して有用である任意のタイプの化合物または組成物でありうる。薬剤のタイプとして、限定するものではないが、抗体、他のタンパク質ベースの薬物、ペプチド、核酸、炭水化物および小分子薬物が挙げられる。
【００２４】
本明細書で使用する場合、用語「抗体」として、限定するものではないが、（ａ）２つの重鎖と２つの軽鎖を含み、抗原を認識する免疫グロブリン分子、（ｂ）ポリクローナルおよびモノクローナル免疫グロブリン分子、（ｃ）その一価および二価の断片、ならびに
（ｄ）その二重特異性形態が挙げられる。免疫グロブリン分子は、これらに限定されないが、ＩｇＡ、分泌性ＩｇＡ、ＩｇＧおよびＩｇＭを含む、一般的に公知のクラスのいずれかに由来してよい。ＩｇＧサブクラスもまた、当業者に周知であり、これらに限定されないが、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３およびＩｇＧ４が挙げられる。抗体は、天然に存在するものと天然に存在しないものの両方であってよい。さらに、抗体として、キメラ抗体、完全な合成抗体、単鎖抗体、およびその断片が挙げられる。抗体は、ヒト、ヒト化または非ヒト抗体であってよい。
【００２５】
本明細書で使用する場合、「抗ＣＤ３３抗体」は、ＣＤ３３のいずれかの利用可能なエピトープに結合する抗体である。一実施形態では、抗ＣＤ３３抗体は、抗体ＨｕＭ１９５に認識されるエピトープに結合する。
【００２６】
本明細書で使用する場合、用語「負荷」は、がん性細胞に関連して使用される場合、量を意味する。よって、がん性細胞「負荷」は、がん性細胞の量を意味する。がん性細胞は、ＡＭＬの場合の「骨髄芽球負荷」などの、その起源とする組織（すなわち、疾患の原発部位）に関する負荷を有する。がん性細胞はまた、ＡＭＬの場合の血液、肝臓および脾臓における芽球負荷などの、起源とする組織以外の１種または複数の組織に関する負荷を有する。用語「末梢負荷」はこのような細胞に関する。ＡＭＬの場合の芽球などの、がん性細胞の末梢負荷は、様々な転帰を有する様々な方法で測定することができる。例えば、ＡＭＬの場合では、「末梢芽球負荷」は、骨髄の外側の総芽球集団、または血液、脾臓および肝臓を合わせた総芽球集団、または単に単位体積当たりの細胞で測定される血液の芽球集団として測定することができる。骨髄を起源とするＡＭＬおよび他のがんに関連して本明細書で使用される場合、他に記述されていなければ、用語「末梢がん性細胞負荷」（例えば、末梢芽球負荷）は、単位体積当たりの細胞で測定される血液のがん性細胞集団（例えば、１μｌ当たりの細胞数）を指す。この血液をベースとする測定値は、例えば、脾臓および肝臓での負荷のより扱いにくい測定値に対する有用な代用物である。
【００２７】
本明細書では、血液悪性疾患関連抗原を標的化する薬剤（例えば、抗体）を最大安全用量で被験体に投与した際に、薬剤が、疾患の原発部位においてその標的抗原の９０％超に結合するのに十分な量でその部位に到達しない場合、被験体の末梢がん性細胞負荷は「高い」。逆に、血液悪性疾患関連抗原を標的化する薬剤（例えば、抗体）を最大安全用量で被験体に投与した際に、薬剤が、疾患の原発部位においてその標的抗原の９０％超に結合するのに十分な量でその部位に到達する場合、被験体の末梢がん性細胞負荷は「低い」。ＡＭＬの場合では、低い末梢芽球負荷の例は、１μｌ当たり１，０００個またはそれ未満の芽球、１μｌ当たり５００個またはそれ未満の芽球、１μｌ当たり４００個またはそれ未満の芽球、１μｌ当たり３００個またはそれ未満の芽球、１μｌ当たり２００個またはそれ未満の芽球、１μｌ当たり１００個またはそれ未満の芽球、および１μｌ当たり５０個またはそれ未満の芽球をもたらすものである。
【００２８】
本明細書で使用する場合、用語「細胞毒性剤」として、限定するものではないが、放射性核種、タンパク質ベースの毒素、非タンパク質ベースの毒素、および化学療法剤が挙げられる。放射性核種として、例えば、α放射性同位体（すなわち、２２５Ａｃ、２１３Ｂｉおよび２１３Ｐｏなどのα放射性同位体）、ベータ線放射性同位体（例えば、９０Ｙ）、およびガンマ線放射性同位体（例えば、１３７Ｃｓ（その崩壊産物である１３７Ｂａを介してガンマ線を放射する））が挙げられる。タンパク質ベースの毒素として、限定するものではないが、リシンおよびその毒性部分、ならびにボツリヌス毒素およびその毒性部分が挙げられる。細胞毒性剤を抗体に付着させる（すなわち、抗体を細胞毒性剤で「標識する」）ための方法は周知である。
【００２９】
「血液悪性疾患」は、血液がんとしても公知であり、骨髄などの血液形成組織または免疫系の他の細胞を起源とするがんである。血液悪性疾患として、限定するものではないが、白血病（ＡＭＬ、急性前骨髄球性白血病、急性リンパ芽球性白血病、急性混合系統白血病（ａｃｕｔｅ  ｍｉｘｅｄ  ｌｉｎｅａｇｅ  ｌｅｕｋｅｍｉａ）、慢性骨髄性白血病、慢性リンパ性白血病、ヘアリーセル白血病、大顆粒リンパ球性白血病など）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、骨髄増殖性障害（真性多血症（ｐｏｌｙｃｉｔｅｒｍｉａ  ｖｅｒａ）、本態性血小板増加症、原発性骨髄線維症および慢性骨髄性白血病）、リンパ腫、多発性骨髄腫、およびＭＧＵＳならびに類似する障害が挙げられる。
【００３０】
本明細書で使用する場合、「血液悪性疾患関連抗原」は、例えば、その特定の悪性疾患に関連するがん細胞の表面に、排他的にまたは優勢に見られるタンパク質および／または炭水化物マーカーでありうる。血液悪性疾患関連抗原の例として、限定するものではないが、ＣＤ２０、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ４５、ＣＤ５２、ＣＤ１２３およびＣＤ３１９が挙げられる。
【００３１】
抗体「ＨｕＭ１９５」（リンツズマブとしても公知）は、それを作製する方法も同様に公知である。同様に、ＨｕＭ１９５を２２５Ａｃで標識する方法も公知である。これらの方法は、例えば、Ｓｃｈｅｉｎｂｅｒｇらの米国特許第６，６８３，１６２号に例示されている。この情報は、以下の実施例および図面でも例示されている。
【００３２】
低い末梢がん性細胞負荷は、そうするための任意の公知の方法を使用して「医学的に誘導され」うる。これらの方法として、例えば、（１日当たり１０〜７０ｍｇ／ｋｇのヒドロキシウレアの経口投与などによる）薬学的誘導、および脾臓除去が挙げられる。
【００３３】
本明細書で使用する場合、用語「被験体」として、限定するものではないが、ヒト、非ヒト霊長類、イヌ、ネコ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ウシ、ウサギ、ブタ、ラットおよびマウスなどの哺乳動物が挙げられる。被験体がヒトである場合、被験体はいずれの年齢であってもよい。例えば、被験体は、６０歳もしくはそれより高い年齢、６５歳もしくはそれより高い年齢、７０歳もしくはそれより高い年齢、７５歳もしくはそれより高い年齢、８０歳もしくはそれより高い年齢、８５歳もしくはそれより高い年齢、または９０歳もしくはそれより高い年齢であってよい。ＡＭＬを患っているヒト被験体では、被験体の骨髄芽球負荷は、例えば、５％を超え、１０％を超え、２０％を超え、３０％を超え、４０％を超え、５０％を超え、６０％を超え、７０％を超え、８０％を超え、または９０％を超えうる。さらなる例として、ＡＭＬを患っているヒト被験体では、被験体は、新たに診断され、または再発しおよび／もしくは難治性であるか、または寛解状態にありうる。
【００３４】
本明細書で使用する場合、血液悪性疾患関連抗原を標的化する薬剤の「亜飽和用量」は、標的抗原の存在よりも少ない標的抗原結合部位（例えば、Ｆａｂ）を被験体の身体に導入する用量である。例として、抗ＣＤ３３抗体では、亜飽和用量は、ＣＤ３３分子の存在よりも少ないＣＤ３３結合部位を被験体の身体に導入する用量である。一実施形態では、血液悪性疾患関連抗原を標的化する薬剤の亜飽和用量は、標的抗原結合部位  対  標的抗原の比が９：１０またはそれ未満である用量である。別の実施形態では、標的抗原結合部位  対  標的抗原の比は、１：２もしくはそれ未満、１：５もしくはそれ未満、１：１０もしくはそれ未満、１：２０もしくはそれ未満、または１：１００もしくはそれ未満である。
【００３５】
α放射性同位体または他の細胞毒性剤で標識された抗体などの薬剤では、被験体に投与される薬物の大部分は、典型的には、標識されていない抗体からなり、少数部分が標識された抗体である。したがって、一実施形態では、血液悪性疾患関連抗原を標的化する薬剤の亜飽和用量は、全（すなわち、標識されたおよび標識されていない）標的抗原結合部位  対  標的抗原の比が９：１０またはそれ未満である（また、１：２もしくはそれ未満、１：５もしくはそれ未満、１：１０もしくはそれ未満、１：２０もしくはそれ未満、または１：１００もしくはそれ未満でありうる）用量である。別の実施形態では、血液悪性疾患関連抗原を標的化する薬剤の亜飽和用量は、標識された標的抗原結合部位  対  標的抗原の比が９：１０またはそれ未満である（また、１：２もしくはそれ未満、１：５もしくはそれ未満、１：１０もしくはそれ未満、１：２０もしくはそれ未満、または１：１００もしくはそれ未満でありうる）用量である。
【００３６】
この発明と関連して使用される亜飽和用量として、例えば、単回投与、および２回またはそれより多い投与（すなわち、画分）が挙げられる。各用量において投与される量は、例えば、放射線（例えば、μＣｉ／ｋｇ）または重量（例えば、ｍｇ／ｋｇまたはｍｇ／ｍ２）で測定することができる。ＡＭＬを処置するための２２５Ａｃ−ＨｕＭ１９５（「アクチマブ（Ａｃｔｉｍａｂ）−Ａ」としても公知）の場合では、投薬レジメンとして、限定するものではないが、以下が挙げられる：（ｉ）２×０．５μＣｉ／ｋｇ、２×１．０μＣｉ／ｋｇ、２×１．５μＣｉ／ｋｇ、または２×２．０μＣｉ／ｋｇ、ここで、画分は、１週間おきに投与される；（ｉｉ）１×０．５μＣｉ／ｋｇ、１×１．０μＣｉ／ｋｇ、１×２．０μＣｉ／ｋｇ、１×３．０μＣｉ／ｋｇ、または１×４．０μＣｉ／ｋｇ；（ｉｉｉ）１×１５〜２０μｇ／ｋｇ（標識された０．０３〜０．０６μｇ／ｋｇ）；および（ｉｖ）被験体当たりおよそ２ｍｇ未満または２ｍｇ（被験体当たりおよそ０．０４ｍｇの標識された抗体）。
【００３７】
本明細書で使用する場合、障害を患っている被験体を「処置すること」として、限定するものではないが、（ｉ）障害の進行を遅延させること、停止させることもしくは逆転させること、（ｉｉ）障害の症状の進行を遅延させること、停止させることもしくは逆転させること、（ｉｉｉ）障害の再発の可能性を低減すること、および／または（ｉｖ）障害の症状が再発する可能性を低減することが挙げられる。好ましい実施形態では、障害を患っている被験体を処置することは、（ｉ）障害の進行を、理想的には、障害を取り除く点まで逆転させること、および／または（ｉｉ）障害の症状の進行を、理想的には、症状を取り除く点まで逆転させること、および／または（ｉｉｉ）再発の可能性を低減させるかまたは取り除くこと（すなわち、ＡＭＬに対する寛解後療法の一般的な目的であり、理想的には、残っている白血病細胞をすべて破壊させる地固め（ｃｏｎｓｏｌｉｄａｔｉｏｎ））を意味する。
【００３８】
ＡＭＬの処置など、血液悪性疾患の処置は、いくつかの臨床エンドポイントに従って測定することができる。これらとして、限定するものではないが、生存期間（数週、数カ月または数年の生存期間の改善、例えば、１カ月、２カ月またはそれより長い追加の生存期間など）、および応答状態（完全寛解（ＣＲ）、ほぼ完全寛解（ｎＣＲ）、非常に良好な部分寛解（ＶＧＰＲ）および部分寛解（ＰＲ）など）が挙げられる。
【００３９】
一実施形態では、ＡＭＬの処置などの血液悪性疾患の処置は、寛解について測定することができる。ここでは、以下の非限定例が含まれる。（１）形態学的な完全寛解（「ＣＲ」）：ＡＮＣ≧１，０００／ｍｃｌ、血小板数≧１００，０００／ｍｃｌ、５％未満の骨髄芽球、アウエル小体なし、骨髄外疾患のエビデンスなし。（骨髄細胞充実性、ヘモグロビン濃度に対する要件はなし）。（２）血球数の回復が不完全な形態学的な完全寛解（「ＣＲｉ」）：ＡＮＣが＜１，０００／ｍｃｌおよび／または血小板数が＜１００，０００／ｍｃｌである以外はＣＲと同じ。（３）部分寛解（ＰＲ）：ＡＮＣ≧１，０００／ｍｃｌ、血小板数＞１００，０００／ｍｃｌ、および骨髄穿刺芽球のパーセンテージが５〜２５％まで少なくとも５０％低下、または持続するアウエル小体を有する骨髄芽球が５％未満。これらの基準などは公知であり、例えば、ＳＷＯＧ  Ｏｎｃｏｌｏｇｙ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ  Ｐｒｏｆｅｓｓｉｏｎａｌ  （ＯＲＰ）  Ｍａｎｕａｌ  Ｉ巻、１１Ａ章、Ｌｅｕｋｅｍｉａ（２０１４年）に記載されている。
【００４０】
発明の実施形態
本発明は、血液悪性疾患を患っている被験体を処置するための第１の方法であって、血液悪性疾患関連抗原を標的化する薬剤を被験体に投与するステップを含み、被験体が低い末梢がん性細胞負荷を有する、方法を提供する。
【００４１】
第１の方法の一実施形態では、被験体の低い末梢がん性細胞負荷は、ヒドロキシウレアのような医薬品を投与することなどにより、医学的に誘導される。あるいは、被験体の低い末梢がん性細胞負荷は、天然に存在しうる。
【００４２】
本発明は、血液悪性疾患を患っており、高い末梢がん性細胞負荷を有する被験体を処置
するための第２の方法であって、（ｉ）被験体の末梢がん性細胞負荷を医学的に低下させ
るステップと、（ｉｉ）被験体の末梢がん性細胞負荷がまだ低い間に、血液悪性疾患関連
抗原を標的化する薬剤を被験体に投与するステップとを含む、方法も提供する。
【００４３】
好ましくは、これらの方法では、被験体はヒトである。これらの方法の一実施形態では、血液悪性疾患は、急性骨髄性白血病であり、がん性細胞は白血病芽球である。
【００４４】
抗原を標的化する薬剤は、好ましくは、亜飽和用量で投与され、静脈内または別の経路を介して投与することができる。この薬剤は、例えば、細胞毒性剤（例えば、２２５Ａｃ
のようなα放射性同位体）で標識された抗ＣＤ３３抗体でありうる。
【００４５】
本発明は、急性骨髄性白血病を患っているヒト被験体を処置するための第３の方法であって、α放射性同位体で標識された抗ＣＤ３３抗体を被験体に投与するステップを含み、（ｉ）被験体が低い末梢芽球負荷を有し、（ｉｉ）抗体が亜飽和用量で投与される、方法をさらに提供する。
【００４６】
一実施形態では、被験体の低い末梢芽球負荷は医学的に誘導され、好ましくは、（例えば、ヒドロキシウレアを投与することにより）薬学的に誘導される。あるいは、被験体の低い末梢芽球負荷は、天然に存在しうる。
【００４７】
本発明は、急性骨髄性白血病を患っており、高い末梢芽球負荷を有するヒト被験体を処置するための第４の方法であって、（ｉ）被験体の末梢芽球負荷を医学的に低下させるステップと、（ｉｉ）被験体の末梢芽球負荷がまだ低い間に、α放射性同位体で標識された抗ＣＤ３３抗体を被験体に投与するステップとを含み、抗体が亜飽和用量で投与される、方法をまたさらに提供する。
【００４８】
好ましくは、被験体の末梢芽球負荷を医学的に低下させるステップは、（例えば、ヒドロキシウレアを投与することにより）被験体の末梢芽球負荷を薬学的に低下させるステップを含む。抗体は、静脈内または別の経路を介して投与することができる。
【００４９】
本発明は、急性骨髄性白血病を患っているヒト被験体を処置するための方法であって、２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５を被験体に静脈内投与するステップを含み、（ｉ）被験体が低い末梢芽球負荷を有し、（ｉｉ）２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５が亜飽和用量で投与される、方法をまたさらに提供する。
【００５０】
一実施形態では、被験体の低い末梢芽球負荷は医学的に誘導され、好ましくは、（例えば、ヒドロキシウレアを投与することにより）薬学的に誘導される。あるいは、被験体の低い末梢がん性細胞負荷は、天然に存在しうる。２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５は、好ましくは、静脈内に投与される。
【００５１】
最後に、本発明は、急性骨髄性白血病を患っており、高い末梢芽球負荷を有するヒト被験体を処置するための方法であって、（ｉ）被験体の末梢芽球負荷を医学的に低下させるステップと、（ｉｉ）被験体の末梢芽球負荷がまだ低い間に、２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５を被験体に静脈内投与するステップとを含み、２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５が亜飽和用量で投与される、方法を提供する。
【００５２】
好ましくは、被験体の末梢芽球負荷を医学的に低下させるステップは、（例えば、ヒドロキシウレアを投与することにより）被験体の末梢芽球負荷を薬学的に低下させるステップを含む。また、２２５Ａｃ標識ＨｕＭ１９５は、好ましくは、静脈内に投与される。
【００５３】
本発明は、以下に続く実施例を参照することにより、よりよく理解されるが、当業者は、詳述された具体的実施例は、その後に続く特許請求の範囲においてより充分に記載されている本発明の例証に過ぎないことを容易に理解するであろう。
【実施例】
【００５４】
（実施例１  ２２５Ａｃ−リンツズマブ（２２５Ａｃ−ＨｕＭ１９５）の構造）
２２５Ａｃ−リンツズマブは３つの重要な構成成分を含む；ヒト化モノクローナル抗体ＨｕＭ１９５（一般名、リンツズマブ）、α放射性同位体２２５Ａｃ、および二官能性キレート  ２−（ｐ−イソチオシアナトベンジル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７，１０−四酢酸（ｐ−ＳＣＮ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ）。図４に示すように、ＨｕＭ１９５は、２２５Ａｃに結合し、抗体のリジン残基を介してＩｇＧに共有結合する二官能性キレート  ｐ−ＳＣＮ−Ｂｎ−ＤＯＴＡを使用して放射標識される。
【００５５】
（実施例２  ｐ−ＳＣＮ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ）
ＤＯＴＡ、２−（４−イソチオシアナトベンジル）−１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−四酢酸（ＭａｃｒｏｃｙｃｌｉｃｓアイテムコードＢ２０５−ＧＭＰ）は、米国特許第４，９２３，９８５号に十分に記載されている多重ステップの有機合成によって合成する。
【００５６】
（実施例３  ２２５Ａｃ−リンツズマブ（２２５Ａｃ−ＨｕＭ１９５）の調製）
２２５Ａｃ−リンツズマブを調製する手順は、Ｍｉｃｈａｅｌ  Ｒ．  ＭｃＤｅｖｉｔｔ、「Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ  ｏｆ  ２２５Ａｃ  ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ」、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｉｓｏｔｏｐｅ、５７巻（２００２年）、８４１〜８４７頁に記載されている方法に基づく。この手順は、二官能性キレート、ｐ−ＳＣＮ−Ｂｎ−ＤＯＴＡを放射性同位体２２５Ａｃで放射標識すること、その後、放射標識されたｐ−ＳＣＮ−Ｂｎ−ＤＯＴＡを抗体（ＨｕＭ１９５）に結合させることを含む。構築物２２５Ａｃ−ｐ−ＳＣＮ−Ｂｎ−ＤＯＴＡ−ＨｕＭ１９５を、１０ＤＧサイズ排除クロマトグラフィーを使用して精製し、１％のヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を用いて溶出する。得られた薬物製品、Ａｃ２２５−リンツズマブを、次いで、０．２μｍの滅菌フィルターに通す。
【００５７】
（実施例４  ２２５Ａｃ−リンツズマブ（２２５Ａｃ−ＨｕＭ１９５）の調製のためのプロセスフロー）
図５に示す手順は、すべての構成成分の正体、および、次に、製造に対する成分のＱＣリリースを確認することから始まる。２２５Ａｃを、放射能レベルを確認するためにアッセイし、塩酸を用いて所望の放射能濃度に再構成する。凍結乾燥したｐ−ＳＣＮＢｎ−ＤＯＴＡのバイアルを、金属を含まない水を用いて、１０ｍｇ／ｍＬの濃度に再構成する。アクチニウム反応バイアルに、０．０２ｍｌのアスコルビン酸溶液（１５０ｍｇ／ｍＬ）と０．０５ｍｌの再構成したｐ−ＳＣＮ−Ｂｎ−ＤＯＴＡを添加し、２Ｍのテトラメチルアンモニウムアセテート（ＴＭＡＡ）を用いて、ｐＨを５から５．５の間に調整する。次いで、混合物を５５±４℃で３０分間加熱する。
【００５８】
２２５Ａｃ−ｐ−ＳＣＮ−Ｂｎ−ＤＯＴＡの標識効率を決定するために、反応混合物のアリコートを取り出し、Ｓｅｐｈａｄｅｘ  Ｃ２５カチオン交換樹脂の１ｍｌカラムに加える。０．９％の食塩溶液で、生成物を２〜４ｍｌの画分に溶出する。溶出する２２５Ａｃ放射能の画分は、２２５Ａｃ−ｐ−ＳＣＮ−Ｂｎ−ＤＯＴＡであり、カラムに保持されている画分は、キレート化されていない非反応性２２５Ａｃである。典型的には、標識効率は９５％を超える。
【００５９】
反応混合物に、０．２２ｍｌの事前に調製したＤＴＰＡ中のＨｕＭ１９５（１ｍｇのＨｕＭ１９５）と０．０２ｍｌのアスコルビン酸を添加する。ＤＴＰＡを添加して、抗体の標識化と競合する可能性のあるあらゆる痕跡量の金属と結合させる。放射線防護剤としてアスコルビン酸を添加する。ｐＨは、炭酸緩衝液を用いて、ｐＨ８．５〜９まで調整する。混合物を３７±３℃で３０分間加熱する。最終生成物を、１０ＤＧ樹脂を使用するサイズ排除クロマトグラフィーで精製し、１％のＨＳＡ  ２ｍｌで溶出する。典型的な反応収率は１０％である。
【００６０】
（実施例５  再発した難治性ＡＭＬ患者に対する第１相臨床試験におけるアクチマブ−Ａ処置）
全ての年齢の再発した難治性成人ＡＭＬ患者が、この単一処置群治験に登録された。処置は、以下の表１に示す漸増用量で投与するアクチマブ−Ａの単回注入からなった。
【表１】
2020094065.tif 000003
【００６１】
各コホートを３名の患者に対して計画した。３名の患者がいずれも用量規制毒性（ＤＬＴ）を経験しない場合に用量漸増を進めた。３名の患者の内の１名がＤＬＴを経験した場合、コホートは追加の３名の患者で拡大した。いずれもＤＬＴを経験しなかった場合、用量漸増を続けた。６名の患者の内の２名がＤＬＴを経験した場合、用量レベルを低下させた。合計２０名の患者を処置し、循環芽球数を含むそのベースライン特性を集めた。循環芽球数は、１８名の患者について利用可能であった。処置後、主に、患者の赤色骨髄における全細胞のパーセンテージとして芽球を含む、抗白血病効果を含め、安全性と有効性について患者を追跡した。
【００６２】
（実施例６  新たに診断されたＡＭＬ患者の第１／２相治験におけるアクチマブ−Ａ処置）
アクチマブ−Ａ第１／２相多施設治験の第１相の部分では、集中化学療法レジメンによる処置に対して不適格である、新たに診断された年配のＡＭＬ患者を１クール（ｃｏｕｒｓｅ）の低用量のシタラビンと、その後の以下の表２の通りの漸増分割用量（２画分）のアクチマブ−Ａによって処置した。患者の疾患がアクチマブ−Ａ処置後に進行しなかった場合、かつ患者がその他の点では適格なままであった場合、さらに最大１１回の低用量のシタラビン処置サイクルを投与することとした。
【表２】
2020094065.tif 000004
【００６３】
各コホートは３名の患者を登録するよう計画した。３名の患者がいずれも用量規制毒性
（「ＤＬＴ」）を経験しなかった場合に用量漸増を進めた。３名の患者のうちの１名がＤＬＴを経験した場合、コホートは追加の３名の患者で拡大した。いずれもＤＬＴを経験しなかった場合、用量漸増を続けた。６名の患者のうちの２名がＤＬＴを経験した場合、用量レベルを低下させた。合計１８名の患者を処置し、循環芽球数を含むそのベースライン特性を集めた。循環芽球数は、１８名の患者すべてについて利用可能であった。処置後、主に、患者の赤色骨髄における全細胞のパーセンテージとして芽球を含む、抗白血病効果を含め、安全性と有効性について患者を追跡した。
【００６４】
（実施例７  再発した難治性ＡＭＬ患者に対するアクチマブ−Ａの第１相治験および年配の新たに診断されたＡＭＬ患者に対する第１／２相治験における有効性転帰）
初期の抗白血病有効性は、複合完全奏効（「ＣＲｃ」）を達成する関数として分析し、ここで、ＣＲｃは、５％以下の処置後の患者の骨髄芽球のパーセンテージを達成することとして定義する。参照された治験の両方における用量レベル当たりの応答率を以下の表３および４に示す。表３は、再発した難治性ＡＭＬ患者の第１相単回用量治験に対する有効性転帰を示す。
【表３】
2020094065.tif 000005
【００６５】
表４は、年配の新たに診断されたＡＭＬ患者における第１相分割用量治験に対する有効性転帰を示す。
【表４】
2020094065.tif 000006
【００６６】
（実施例８  新たに診断されたＡＭＬ患者に対するアクチマブ−Ａの第１／２相治験の一般的に使用されるリスク因子による有効性分析）
【００６７】
新たに診断されたＡＭＬにおいて応答する可能性を決定する予後因子として使用される、いくつかの一般的に使用される測定基準が存在する。最も一般的に使用される予後因子は、年齢、細胞遺伝学および先行する血液疾患の存在（最も多いのは骨髄異形成症候群（ＭＤＳ、この場合には、ＡＭＬは続発性ＡＭＬ（「ｓＡＭＬ」）と称される）である。これらの因子は、年配の新たに診断されたＡＭＬの第１相治験の有効性転帰を分析するために適用した。これらの分析の結果を以下の表５に表す。
【表５】
2020094065.tif 000007
【００６８】
上記一般的に使用される予後因子のいずれも、応答転帰における統計的に有意な差と相関しないと結論づけた。
【００６９】
（実施例９  ＡＭＬ患者に対するアクチマブ−Ａの第１相および第１／２相臨床試験における有効性転帰と末梢芽球負荷の相関）
追加の分析を実施し、循環芽球の数が臨床転帰と強くかつ統計的に有意な相関を有することを驚くべきことに発見した。この発見は、両方の治験、すなわち、再発した／難治性の患者と新たに診断された患者の両方において観察された。１マイクロリットル当たり２００個より少ない循環芽球数は応答と一致した。しかし、循環芽球数が１マイクロリットル当たり２００個より多いかまたは２００個であった際には、患者は応答しなかった。これらのデータを以下の表６に表す。
【表６】
2020094065.tif 000008
【００７０】
（実施例１０  アクチマブ−Ａ処置に先立って、末梢芽球状態に従って新たに診断されたＡＭＬ患者および再発した／難治性のＡＭＬ患者の応答）
【００７１】
ＡＭＬ患者の応答転帰を、末梢血１マイクロリットル当たり２００個未満の循環芽球を有する患者のみを選択することによって、参照された２つの治験における用量レベルで比較した。以下の表７〜９にこれらの知見をまとめる。
【００７２】
表７は、再発した難治性のＡＭＬ患者に対する第１相治験の用量レベルによる末梢芽球数当たりの有効性転帰を示す。
【表７】
2020094065.tif 000009
【００７３】
表８は、新たに診断された年配のＡＭＬ患者に対する第１／２相治験における用量レベルによる末梢芽球数当たりの有効性転帰を示す。
【表８】
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【００７４】
表９は、両方のＡＭＬ治験における応答の統計分析を示す。
【表９】
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【００７５】
（実施例１１  有意な白血病芽球細胞の死滅に基づくアクチマブ−Ａの抗白血病効果）
臨床試験の早期段階では、抗白血病効果は、骨髄の白血病芽球負荷を５０％以上低減する研究される療法の能力としての尺度であることが多い。この効果を有するアクチマブ−Ａの能力を、末梢血１マイクロリットル当たり、２００個以上の末梢芽球負荷を有する患者と、２００個未満の末梢芽球負荷を有する患者とを比較することによって分析した。これらの分析の結果を以下の表１０に表す。これらの結果は、３８名の患者の分析を表し、ここで、データはそのうちの３１名について利用可能であった。
【表１０】
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【化１】
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【化２】
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【図１】
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【図２】
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【図３−１】
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【図３−２】
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【図４】
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【図５】
2020094065.tif 000020
【図６】
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【配列表】
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【外国語明細書】
2020094065000001.pdf