(57)【要約】      （修正有）【課題】移植片を形成するための生体組織（微小移植片）の１つ以上の部分を得るための装置および方法を提供する。【解決手段】中空の管１０１０が、ドナー部位において組織内に挿入され得、管内に提供されたピン１０４０が、管から微小移植片の制御可能な除去を容易にし得る。微小移植片は、管およびピンの協動した動きにより収集され、覆っている生体適合性マトリクスに直接移植され得る。離れたレシピエント部位またはマトリクス内への微小移植片の直接移植を容易にするために、針が管周囲に提供され得、複数のこのような管と、複数の微小移植片を同時に収集および／または移植するためのピンとを備え得る構成とする。収集された微小移植片は、小さな直径、例えば約１ｍｍ未満を有し得、これは、ドナー部位の治癒および／または収集された組織の生存を促進し得る。【選択図】図１１
2020000909.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
少なくとも１つの生体組織の少なくとも一部を得るための装置であって、
中空の管の遠位端に設けられる少なくとも２つの先端部を備える少なくとも１つの前記中空の管と、
少なくとも１つの前記管の中心の内腔内に少なくとも部分的に提供されるピンと、
を備え、
少なくとも１つの前記管の内径が約１ｍｍ未満であり、
少なくとも前記中空の管の少なくとも１つの部分が、ドナー部位において少なくとも１つの前記生体組織内に挿入されるように構造化され、少なくとも１つの前記管の少なくとも１つの部分が前記ドナー部位から引き抜かれると、前記ドナー部位から移植組織として前記ドナー部位の少なくとも一部を除去し、
前記ピンは、少なくとも１つの前記管の長手方向軸に沿った方向において制御可能に移動可能であり、
前記ピンは、少なくとも１つの前記管から前記移植組織の少なくとも一部の除去を容易にするように構成される、装置。
【請求項２】
少なくとも１つの前記管の内径は約０．５ｍｍ未満である、請求項１に記載の装置。
【請求項３】
少なくとも１つの前記管は、前記管の遠位端に設けられる少なくとも３つの先端部を備える、請求項１に記載の装置。
【請求項４】
少なくとも１つの前記管内の前記ピンの位置を制御するように構成される位置決め構成をさらに備える、請求項１に記載の装置。
【請求項５】
基板を貫通する少なくとも１つの開口を含む前記基板をさらに備え、少なくとも１つの前記管は、前記基板に摺動可能に取り付けられ、少なくとも１つの前記開口を通して少なくとも部分的に移動するように構成される、請求項１に記載の装置。
【請求項６】
前記基板に対して少なくとも１つの前記管の位置を制御するように構成される第１のアクチュエータと、少なくとも１つの前記管内の前記ピンの位置を制御するように構成される第２のアクチュエータとをさらに備える、請求項５に記載の装置。
【請求項７】
前記装置は複数の管を備える、請求項６に記載の装置。
【請求項８】
前記装置は少なくとも６個の管を備える、請求項６に記載の装置。
【請求項９】
前記管は、互いに対して矩形の配置または直線構造の少なくとも１つにおいて提供される、請求項８に記載の装置。
【請求項１０】
少なくとも１つの前記管内の前記移植組織の少なくとも１つの部分の存在を検出するように構成される少なくとも１つのセンサ構成をさらに備える、請求項１に記載の装置。
【請求項１１】
少なくとも１つの前記管の前記先端部の側部と長手方向軸との間の角度が約１５°未満である、請求項１に記載の装置。
【請求項１２】
少なくとも１つの前記中空の管の少なくとも一部の周囲に提供される中空の針をさらに備え、前記中空の針は、少なくとも１つの前記生体組織またはマトリクス材料の少なくとも１つ内への少なくとも１つの前記中空の管の挿入を容易にするように構造化される、請求項１に記載の装置。
【請求項１３】
少なくとも１つの前記中空の針の位置に対する少なくとも１つの前記中空の管の位置を制御するように構成される第１のアクチュエータと、少なくとも１つの前記中空の管の位置に対する前記ピンの位置を制御するように構成される第２のアクチュエータと、をさらに備える、請求項１２に記載の装置。
【請求項１４】
基板を貫通する少なくとも１つの開口を含む前記基板をさらに備え、前記中空の針が、前記基板に摺動可能に取り付けられ、少なくとも１つの前記開口を通して少なくとも部分的に移動するように構造化される、請求項１３に記載の装置。
【請求項１５】
前記基板の位置に対する前記中空の針の位置を制御するように構成される第３のアクチュエータをさらに備える、請求項１４に記載の装置。
【請求項１６】
少なくとも１つの生体組織の少なくとも一部を得るための方法であって、
ドナー組織部位上にマトリクス材料を提供する工程と、
前記マトリクス材料の上面に近接して少なくとも１つの中空の管の遠位端を配置する工程と、
ピンの遠位端が少なくとも１つの前記管の遠位端に近接するように、少なくとも１つの前記管の内腔内に前記ピンを配置する工程と、
少なくとも１つの前記管および前記ピンの遠位端が前記ドナー組織部位の表面に近接するように、前記マトリクス材料の厚さを貫通して前記ピンおよび少なくとも１つの前記管を実質的に一緒に下げる工程と、
周囲組織から少なくとも１つの前記生体組織の少なくとも一部を切断するために前記ドナー部位内に少なくとも１つの前記管を進入させる工程であって、前記ピンの遠位端を、前記ドナー組織部位の表面に近接したままにする、工程と、
少なくとも１つの前記管の遠位端が、前記マトリクス材料の下面に近接するまで、少なくとも１つの前記管および前記ピンを実質的に同じ速度で同時に持ち上げる工程と、
前記マトリクス材料に対して実質的に固定して前記ピンの位置を維持しながら、前記マトリクスから少なくとも１つの前記管を引き抜きぬく工程であって、少なくとも１つの前記生体組織の少なくとも一部を前記マトリクス材料内に存在したままにする、工程と、
を含む方法。
【請求項１７】
前記マトリクス材料に少なくとも１つの成長因子を提供する工程をさらに含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記マトリクス材料は、コラーゲン、低融点アガロース、または失活生体組織の少なくとも１つを含む、請求項１６に記載の方法。
【請求項１９】
少なくとも１つの生体組織の少なくとも一部を収集および移植するための方法であって、
少なくとも１つの前記生体組織の上面に近接して少なくとも１つの中空の管の遠位端を配置する工程と、
ピンの遠位端が少なくとも１つの前記管の遠位端の後方に所定の距離で提供されるように、少なくとも１つの前記管の内腔内に前記ピンを配置する工程と、
周囲組織から少なくとも１つの前記生体組織の少なくとも一部を切断するために少なくとも１つの前記管を少なくとも１つの前記生体組織内に進入させる工程であって、前記ピンの遠位端が、少なくとも１つの前記生体組織の上面に近接して配置される、工程と、
少なくとも１つの前記管が少なくとも１つの前記生体組織から除去されるまで、少なくとも１つの前記管および前記ピンを同時に持ち上げる工程であって、少なくとも１つの前記生体組織の少なくとも一部を少なくとも１つの前記管内に存在したままにする、工程と、
中空の針を特定の深さまでレシピエント材料内に挿入する工程と、
前記中空の針の遠位端が少なくとも１つの前記中空の管の遠位端に近接するように、前記中空の針の内腔内に少なくとも１つの前記生体組織の少なくとも一部を含む少なくとも１つの前記中空の管を提供する工程と、
少なくとも１つの前記中空の管の位置を前記レシピエント材料内に維持しながら、前記レシピエント材料から前記中空の針を後退させる工程と、
少なくとも１つの前記生体組織の少なくとも一部が前記レシピエント材料内に存在したままであるように、前記レシピエント材料に対して実質的に固定して前記ピンの位置を維持しながら、前記レシピエント材料から少なくとも１つの前記中空の管を引き抜く工程と、
を含む方法。
【請求項２０】
前記レシピエント材料は、生物学的に適合性のあるマトリクスまたはさらなる生体組織の少なくとも１つを含む、請求項１９に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１０年５月７日に出願された米国仮特許出願第６１／３３２，２３０号、２０１０年８月１３日に出願された米国仮特許出願第６１／３７３，４９８号および２０１１年１月２８日に出願された米国仮特許出願第６１／４３７，５０７号に関連し、それらから優先権を主張する。それらの開示は本明細書にその全体が参照として援用される。
【０００２】
本発明は、組織移植を提供し、例えばドナー部位由来の組織を用いて組織構造を複製する方法および装置の例示的な実施形態に関する。
【背景技術】
【０００３】
自家移植片は、個々の身体の一部（例えば「ドナー部位」）から別の部分（例えば「レシピエント部位」）に移植された組織のことを指す場合がある。自家移植片は、例えば、失った皮膚および他の組織を取り替えるため、ならびに／または外傷、創傷、やけど、外科的および出生異常からの治癒を促進するために使用され得る。自己移植についての組織の利用可能性は、複数および／または全体の領域の移植組織片、ドナー部位の治癒挙動、ドナー部位およびレシピエント部位の類似性、美的考慮を含む、候補ドナー部位の特性により制限され得る。
【０００４】
皮膚移植は外科的に実施され得る。例えば、従来の自己移植処置は、やけどにより損傷した組織の切除または外科的除去、清浄なやけど領域を覆うために使用される健康な皮膚から除去される領域であり得るドナー部位の選択、およびドナー部位から移植片が除去され得る場合、例えば電気シェーバーと同様の機器を用いる収集を含み得る。そのような機器（例えば採皮刀）は、例えば、植皮片として使用するためにやけどしていないドナー部位の皮膚から分層植皮のために約１０／１０００インチ厚であり得る組織片を穏やかに剃るように構造化され得る。次いで植皮片は治癒し得るように清浄な外傷部位上に置かれ得る。ドナー皮膚組織は、第２度熱傷の治癒と同様のプロセスにおいて、ドナー部位が自然に治癒され得るような深さまで除去され得る。
【０００５】
恒久的な創傷の被覆に使用され得る２つの従来の種類の自己移植片は、シート移植片およびメッシュ移植片を含む。シート移植片は、収集と称され得るプロセスにおいて、身体のやけどしていないドナー部位から除去された皮膚組織の小片を意味し得る。使用されるドナー皮膚の小片のサイズは、損傷した領域とほぼ同じサイズであり得る。シート移植片は、切除した創傷部位の上に適用され得、所定の位置に留められ得るか、または固定され得る。シート移植片に使用されるドナー皮膚組織は顕著に伸びることはできず、被覆される損傷した領域よりわずかに大きいシート移植片が得られ得る。なぜなら、多くの場合、収集後、移植組織がわずかに収縮する場合があるからである。
【０００６】
シート移植片は修復組織部位の改良された外観を提供できる。例えば、損傷を受けた場合、シート移植片は、顔、首および手の広い面積に使用され得るので、身体のそれらの多くの目に見える部分は、治癒後、ほとんど傷跡が残らないように見え得る。シート移植片は、例えば損傷した部位が狭い場合、やけどまたは損傷した皮膚の領域全体を被覆するために使用され得る。シート移植片の狭い領域は、配置された後、損傷し得る。なぜなら、シート移植片の配置後、体液（例えば血腫）の蓄積がシート移植片下で生じる場合があるからである。
【０００７】
シート移植片は全層植皮または分層植皮である。例えば、分層植皮の皮膚移植は、やけどおよび皮膚潰瘍患者において創傷を被覆するために使用され得る。従来の分層植皮の移植片は、例えば、リンゴの皮をむくのと同様の処置でドナー部位から表皮および上皮組織のシートを収集することによって形成され得る。次いで分層植皮が、やけどまたは潰瘍の部位に配置され得る。次いで皮膚組織は、通常、長い治癒時間の後、ドナー部位において成長して元の状態に戻り得る。分層移植は全層移植より好適であり得る。なぜなら、ドナー部位から多量の全層皮膚組織を除去することは、ドナー部位において瘢痕化および長い治癒時間、ならびに感染の高い危険性を生じる場合があるからである。しかしながら、分層皮膚自家移植片のためにドナー部位から除去した組織は、レシピエント部位において構造安定性および正常な外観を向上させる真皮の特定の要素を欠き得る、薄い上皮層のみを含み得る。
【０００８】
全層皮膚移植片は、表皮層全体および種々の厚さの真皮成分を含む組織のシートを用いて形成され得る。真皮成分は全層移植において保存され得るので、正常な皮膚の特性の多くが移植処置後に維持され得る。全層移植は、分層移植と比べて、より多くのコラーゲン量、真皮の血管網、および上皮付属器官を含み得る。しかしながら、全層移植は、より多くの組織を血管再建に必要とするため、残存についての正確な条件を必要とし得る。
【０００９】
全層皮膚移植は、例えば、局所皮弁により処置できないか、または局所皮弁が禁忌である移植処置についての顔の目に見える領域を修復するのに好適であり得る。このような全層皮膚移植は、分層皮膚移植と比べて、例えば、色、質感および厚さを含む、正常な皮膚の特性の多くを保持できる。全層皮膚移植はまた、治癒の間、ほとんど収縮することはあり得ない。これらの特性は、顔および手などの多くの目に見える領域で重要であり得る。さらに、小児における全層移植は個体と共に成長する可能性が高くなり得る。しかしながら、従来の全層皮膚移植の適用は、比較的小さな、汚染されていない、十分に血管が発達した創傷に制限され得るので、分層移植ほど、多くの種類の移植処置に適切でない場合がある。さらに、全層移植についてのドナー部位は、外科的縫合または分層移植を用いて新しい皮膚にすることを必要とし得る。
【００１０】
例えば、健康なドナー部位の十分な領域の欠如のために、シート移植を用いて被覆することが困難であり得る広い面積の傷口の開いた傷を被覆するためにメッシュ皮膚移植が使用され得る。皮膚移植のメッシュは、ドナー部位由来の皮膚組織を広い面積を被覆するために拡張することを促進できる。それはまた、創傷に配置された場合、皮膚移植下からの血液および体液の排出を促進でき、移植片喪失を防止するのに役立ち得る。メッシュ移植の拡張比（例えば、伸びていない移植領域対伸びた移植領域の比）は典型的に、約１：１〜１：４の間であり得る。例えば、ドナー皮膚は約１：１〜１：２の比でメッシュであってもよいが、より大きな拡張比は、より壊れやすい移植片、治癒するにつれてメッシュ移植の瘢痕化、および／または長い治癒時間を生じる場合がある。
【００１１】
従来の移植メッシュ処置は、組織に切れ目を入れる機械にドナー皮膚組織を供することを含み得、魚網また金網のフェンスと同様のパターンの拡張を促進できる。治癒は、新たな上皮成長で満たされる間隙または間質と称され得る、メッシュ間の空間を移植片が伸びることにより生じ得る。しかしながら、メッシュ移植は、シート移植より耐久性のない移植片を生じ得、大きなメッシュは、移植治癒後、恒久的な瘢痕化を生じる場合がある。
【００１２】
移植片の治癒および安全性を支援するために、移植片の領域は好ましくは、各手術後、少なくとも約５日間、固定され得る（例えば動かされない）。この固定化期間の間、血管が下層組織から皮膚移植片内に成長し得、２つの組織層を一緒に結合するのを支援し得る。移植片を配置してから約５日後、運動療法プログラム、入浴、および他の正常な日常生活が多くの場合、再開され得る。深い第二度および全層やけどが、迅速に治癒させ、最小の瘢痕化のために皮膚移植手術を必要とし得る。大きなやけどのサイズは、入院の間、１回より多くの移植処置を導く場合があり、治癒のために長期間の固定化を必要とし得る。
【００１３】
自己移植の代替として、直近に死亡した人々から得られた皮膚組織（例えば、同種移植片（ｈｏｍｏｇｒａｆｔ）、同種移植片（ａｌｌｏｇｒａｆｔ）、または死体皮膚と称され得る）が、清浄されている創傷領域のための一時的皮膚として使用され得る。メッシュされていない死体皮膚は、所定の位置において切除された創傷上に置かれ、固定され得る。手術後、死体皮膚は包帯で覆われ得る。次いで死体同種移植を用いる創傷被覆は恒久的な自己移植の前に除去され得る。
【００１４】
異種移植片（ｘｅｎｏｇｒａｆｔ）または異種移植片（ｈｅｔｅｒｏｇｒａｆｔ）は、種々の動物、例えばブタの一部から得られた皮膚を示し得る。異種移植片の皮膚組織もまた、十分な恒久的な自己移植片を配置する前に、切除された創傷の一時的被覆のために使用され得、それは、ヒト皮膚組織の制限された利用可能性および／または高い費用のために使用され得る。一部の場合において、ヒトの死体皮膚を使用することに対する宗教的、財政的、または文化的な反発もまた、異種移植片の使用を導く要因であり得る。異種移植片または同種移植片を用いる創傷被覆は通常、自己移植片を収集し、配置することが実現可能になるまで使用され得る一時的処置である。
【００１５】
上皮付属器官は移植処置後に再生され得る。例えば、髪は、分層移植より全層移植から成長する傾向があり得るが、このような髪の成長は創傷の部位に基づいて望ましくない場合がある。従って、全層移植についてのドナー部位は、例えば、手術時の髪の成長のパターンに部分的に基づいて注意深く選択され得る。さらに、特定の毛包は皮膚表面に対して垂直に方向付けられ得ず、それらは、移植組織を取り除くために与えられる切開が適切に方向付けられていない場合、横断し得る。
【００１６】
移植組織に位置する汗腺および皮脂腺は、移植後、最初に劣化し得る。これらの構造は、分層移植より全層移植において再生する傾向があり得る。なぜなら、全層移植は、完全な機能単位として移され得るからである。例えば、汗腺再生は、レシピエントの基本的な交感神経線維と共に皮膚移植の神経再生に部分的に依存し得る。一旦、このような内部成長が生じると、皮膚移植は、ドナー部位の性質を保持するというよりむしろレシピエント部位の発汗性質を想定し得る。対照的に、皮脂腺再生は移植神経再生とは独立し得、ドナー部位の性質を保持し得る。再生前に、皮膚移植組織は、これらの腺によって生じる皮脂の正常な潤滑を欠き得、このような移植を損傷に対してより敏感にし得る。
【００１７】
一般に、移植処置は、過剰な副作用を生じないようにドナー部位から取り除かれ得る組織の量により制限され得る。全層移植は創傷部位に改善された組織の質を提供できるが、ドナー部位は上記のようにかなり激しく損傷する場合がある。分層移植は、治癒時間と、ドナー部位およびレシピエント部位の審美性および機能的特性との間で妥協を生じ得るのに対して、メッシュは、目に見える瘢痕化を犠牲にして、より広範な移植被覆を提供できる。
【００１８】
ドナー部位からの移植組織の収集は、一般に、ドナー部位に対して望ましくない大規模の組織損傷を生じる場合がある。他方で、健康な組織に隣接する狭い面積の皮膚創傷は良好な耐容性を示すことができ、迅速に治癒し得る。このような少ない創傷の治癒は、小さい寸法を有する損傷のパターンが皮膚組織において生成され得る、「分別光熱分解（ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ  ｐｈｏｔｏｔｈｅｒｍｏｌｙｓｉｓ）」または「分別再表面化（ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ  ｒｅｓｕｒｆａｃｉｎｇ）」などの技術において行われ得る。これらの例示的な技術は、例えば、特許文献１および特許文献２に記載されている。小規模の損傷パターンは健康な組織の再生により迅速に治癒し得、さらに、目に見える瘢痕化を生じずに皮膚締め付けなどの所望の効果を提供できる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【００１９】
【特許文献１】米国特許第６，９９７，９２３号
【特許文献２】米国特許出願公開第２００６／０１５５２６６号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００２０】
組織移植に関する上記の処置の欠点を鑑みて、例えばドナー部位に対する望ましくない損傷を最小化しながら、移植に好適な組織を提供できる方法および装置の例示的な実施形態を提供することが望まれ得る。
【課題を解決するための手段】
【００２１】
本開示の例示的な実施形態は、ドナー部位の迅速な治癒を伴い得る移植組織の小さな部分を得るための方法および装置を提供する。例えば、この方法の例示的な実施形態は、組織の小さな部分、例えば微小移植片をドナー部位から収集することにより皮膚移植組織を得るために提供され得る。このような微小移植片は、小さな組織試料からより大きな組織構造を生成するために移植片または「複製」組織を形成するために使用され得る。
【００２２】
このような微小移植片は、例えば表皮および真皮組織を含み得る皮膚組織ならびに／または他の身体の器官から得られた組織を含み得る。微小移植片は、比較的小さい、例えば約１ｍｍ未満、または約０．５ｍｍ未満、または必要に応じて約０．３ｍｍ未満、または約０．２ｍｍである少なくとも１つの直径を有し得る。微小移植片のこのような例示的な小さい直径は、収集後のドナー部位の治癒および微小移植片組織の栄養素のより広範な拡散を可能にすることにより微小移植片の生存の両方を促進できる。組織部分の除去により生じるドナー部位における損傷の小さな領域は、目に見える瘢痕をほとんどまたは全く形成せずに迅速に治癒できる。皮膚組織から得られた微小移植片は、例えば、表皮および真皮組織を含み得、また、真皮／脂肪層境界に近接して位置し得る幹細胞を含んでもよい。微小移植片はまた、他の種類の組織、例えば種々の内臓器官などから得られてもよい。
【００２３】
ドナー部位から除去される真皮組織の割合は、例えば、約７０％未満、または約５０％未満であるが、他の割合が使用されてもよい。収集された組織部分は、円筒形、細長い片、または少なくとも１つの小さな寸法を含み得る他の形状などの形状であってもよい。特定の例示的な実施形態において、ドナー部位における組織の一部は、凍結または部分的に凍結され得る。このような凍結は、収集される組織部分の切断、除去および／または生存を促進できる。
【００２４】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、管内に少なくとも部分的に提供されるピンと共に少なくとも１つの中空の管を備える、微小移植片を収集するための装置が提供され得、そのピンは管の長手方向軸に沿った方向において制御可能に移動できる。ピンの直径は、管の内腔の内径と実質的に同じであり得るか、またはわずかに小さくてもよい。
【００２５】
このような管および対応するピンは、基板を貫通する少なくとも１つの穴を有する基板に機械的に取り付けられ得る。複数の直線状アクチュエータが、基板に対して少なくとも１つの管およびピンを制御可能に配置および／または移動させるように提供され得る。例えば、アクチュエータは、基板の穴を通して少なくとも１つの管を配置し、管の遠位端が基板の下面から突出する距離を制御するように構成され得る。アクチュエータはさらに、管内のピンの位置を独立して制御するように構成され得る。基板は、組織からの微小移植片の収集および／または組織内への微小移植片の移植を容易にするために組織の表面上に配置されるように構成され得る。
【００２６】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、複数の管および対応するピンが、複数の微小移植片の収集を容易にするために提供され得る。複数のアクチュエータまたは機械的構成が、互いおよび組織に対する複数の管およびピンの正確な配置および移動を容易にするために管および／またはピンの近位端と連通して提供されてもよい。アクチュエータは、管および／またはピンの全てを同時に移動させるか、または必要に応じて管もしくはピンの特定の１つを他の管から独立して移動させるように構成され得る。振動構成が、ドナーおよび／またはレシピエント部位内への管の挿入を容易にするために装置に取り付けられてもよい。
【００２７】
例示的な微小移植片は、例えば、ドナー部位の移植片またはより大きな複製を形成させるために生体適合性マトリクスに配置され得るか、あるいはレシピエント部位において組織内に直接移植され得る。生体適合性マトリクスは、コラーゲン、ポリ乳酸、ヒアルロン酸、および／または収集された微小移植片組織部分を支持し、それらの成長を促進し得る他の物質を用いて形成され得る。マトリクスは必要に応じて、例えば、組織成長または生存を促進するために栄養素、成長因子および／または他の物質を含んでもよい。収集された組織部分は、構造的安定性を提供するために光化学組織結合などの技術を用いてマトリクスに結合されてもよい。次いでマトリクスはレシピエント部位に適用され得、移植組織の連続シートを形成させるために組織部分の成長および血管再建を促進できる。必要に応じて、マトリクスは、微小移植片の成長を促進するために適切な環境に配置され得、次いでドナー部位から「複製された」組織のより大きな部分を形成できる。
【００２８】
例示的な微小移植片また、レシピエント部位に直接適用され得る移植組織を形成させるために小型の構造で集合させられてもよい。例示的な微小移植片はまた、例えば本明細書に記載される例示的な中空の管を用いて、例えば瘢痕組織などのレシピエント部位において組織内に直接挿入されてもよい。特定の例示的な実施形態において、微小移植片は、種々の種類の異種移植片を形成させるためにレシピエント部位における組織種類と異なるドナー部位組織から収集されてもよい。
【００２９】
本開示のなおさらに例示的な実施形態は、組織から微小移植片を抽出または収集し、必要に応じてそれらをマトリクス材料に直接配置するための方法を提供できる。例えば、このような例示的な方法は、以下のように組織を収集するために提供される少なくとも１つの管およびピンを備える例示的な装置を利用できる。
Ａ）マトリクス材料の一部またはシートはドナー組織部位に配置され得、管および管内に提供されるピンの遠位端は各々、マトリクス材料の上面に近接して配置され得る。
Ｂ）管およびピンは、マトリクスを貫通するように一緒に移動され得、ドナー部位の表面に近接して配置され得る。
Ｃ）次いでピンの遠位端がドナー部位の表面に存在したままで、管は、周囲組織から組織の一部を切断するためにドナー部位の組織内に下方に移動され得る。
Ｄ）次いで管の遠位端がマトリクス材料の下面またはマトリクス材料内に近接するまで、管およびピンは同時に後退され得、切断された組織を含む微小移植片は管の遠位部内に存在したままである。
Ｅ）次いでピンの位置がマトリクスに対して実質的に固定して保持されながら、管はマトリクスからさらに後退され得、それにより、管が微小移植片周囲から後退されると、微小移植片は、固定されたピンによりマトリクス材料内に保持され、マトリクス内に存在したままになる。
【００３０】
本開示のなお別の例示的な実施形態において、穴の開いた針が、中空の管およびピンの少なくとも一部の周囲に提供されてもよい。少なくとも１つの中空の管、ピン、および穴の開いた針を備える装置は、中空の管の遠位部内に含まれる微小移植片を、レシピエント部位に位置する組織内に配置するように構成され得る。穴の開いた針は、レシピエント部位において組織内に挿入され得る。ピンおよび中空の管の遠位端に収集された微小移植片を含む中空の管は、中空の管の遠位端がレシピエント部位の表面、または表面の下に近接するように穴の開いた管を通して進入され得る。中空の管を固定して保持しながら、穴の開いた針はレシピエント部位から引き抜かれ得る。次いでレシピエント部位に対して固定された管内にピンを保持しながら、中空の管が引き抜かれ得る。このように、微小移植片は、レシピエント部位の組織内に存在したままであり得、例えば中空の管が引き抜かれると、ピンによりレシピエント部位に保持される。ピンは続いて、組織が穴の開いた針により最初に分離されるレシピエント部位内に微小移植片を残すように引き抜かれ得る。基板に、その基板を貫通する少なくとも１つの開口が提供されてもよく、その基板は、組織表面に配置され、処理される組織に対する針、管および／またはピンの位置決めを容易にし、ならびに／あるいは処理の間の組織の機械的安定性を容易にするように構成される。
【００３１】
本開示のこれらおよび他の目的、特徴および利点は、添付の特許請求の範囲と併せて考慮して、以下の本開示の例示的な実施形態の詳細な説明を読むことにより明らかになるであろう。
【００３２】
本開示のさらなる目的、特徴および利点は、例示的な本開示の実施形態、例示的な実施形態の結果および／または特徴を示す添付の図面と併せて以下の詳細な説明から明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００３３】
【図１Ａ】微小移植組織の円筒状部分がドナー部位から収集された後の例示的なドナー部位の概略図である。
【図１Ｂ】治癒が行われた後の図１Ａに示す例示的なドナー部位の概略図である。
【図１Ｃ】図１Ａに示す例示的なドナー部位から除去され得る例示的な微小移植の概略図である。
【図２Ａ】生体適合マトリクスに収集された微小移植組織部分を提供することによって作製された例示的な移植の断面図である。
【図２Ｂ】移植が創傷に配置され、一部の再生が生じた後の図２Ａに示す例示的な移植の断面図である。
【図３Ａ】組織の細長い片がドナー部位から収集された後の別の例示的なドナー部位の概略図である。
【図３Ｂ】治癒が行われた後の図３Ａに示す例示的なドナー部位の概略図である。
【図３Ｃ】図３Ａに示すドナー部位から除去され得る例示的な組織片の概略図である。
【図４Ａ】移植片を生成するためにコンパクトな配置で提供される複数の例示的な円筒状微小移植組織部分の計画の概略図である。
【図４Ｂ】図４Ａに示す例示的な微小組織部分の側面図である。
【図５Ａ】本開示のさらなる例示的な実施形態に従って微小移植組織を収集するために使用され得る例示的な装置の概略図である。
【図５Ｂ】本開示のさらなる例示的な実施形態に従って微小移植組織を収集するために使用され得る例示的な装置の概略図である。
【図６Ａ】例示的な微小移植片を収集するために例示的なドナー部位に挿入される図５Ａに示す例示的な装置の概略図である。
【図６Ｂ】収集された微小移植片を含む図５Ａに示す例示的な装置の概略図である。
【図６Ｃ】収集された微小移植片が装置から除去されていることを示す図５Ａに示す例示的な装置の概略図である。
【図７】本開示のさらなる例示的な実施形態に従って微小移植組織を収集するために使用され得る例示的な装置の概略図である。
【図８Ａ】２つの先端部を備える例示的な装置の遠位端の例示的な画像である。
【図８Ｂ】図８Ａに示す例示的な装置の遠位端のさらなる例示的な画像である。
【図８Ｃ】図８Ａに示す例示的な装置の遠位端の形状と関連し得る例示的な幾何学的パラメータの例示的な概略図である。
【図８Ｄ】図８Ａに示す例示的な装置の遠位端の形状と関連し得る例示的な幾何学的パラメータの例示的な概略図である。
【図８Ｅ】図８Ａに示す例示的な装置の遠位端に提供され得る種々の例示的な幾何学的形状の例示的な概略図である。
【図８Ｆ】図８Ａに示す例示的な装置の遠位端に提供され得る種々の例示的な幾何学的形状の例示的な概略図である。
【図８Ｇ】図８Ａに示す例示的な装置の遠位端に提供され得る種々の例示的な幾何学的形状の例示的な概略図である。
【図８Ｈ】図８Ａに示す例示的な装置の遠位端に提供され得る種々の例示的な幾何学的形状の例示的な概略図である。
【図８Ｉ】図８Ａに示す例示的な装置の遠位端に提供され得る種々の例示的な幾何学的形状の例示的な概略図である。
【図８Ｊ】図８Ａに示す例示的な装置の遠位端に提供され得る種々の例示的な幾何学的形状の例示的な概略図である。
【図９】図８Ａに示す例示的な装置を用いて得られた微小移植片の例示的な画像である。
【図１０Ａ】本開示のさらなる例示的な実施形態に従って微小移植組織を収集するために使用され得る例示的な装置の部分の概略図である。
【図１０Ｂ】図１０Ａに示す例示的な装置の部分の図である。
【図１１】本開示のさらなる例示的な実施形態に従って微小組織を収集するために使用され得る例示的な装置の概略図である。
【図１２Ａ】本開示のさらなる例示的な実施形態に従って微小移植組織を収集するために使用され得る処置の例示的な順序の概略図である。
【図１２Ｂ】本開示のさらなる例示的な実施形態に従って微小移植組織を収集するために使用され得る処置の例示的な順序の概略図である。
【図１２Ｃ】本開示のさらなる例示的な実施形態に従って微小移植組織を収集するために使用され得る処置の例示的な順序の概略図である。
【図１２Ｄ】本開示のさらなる例示的な実施形態に従って微小移植組織を収集するために使用され得る処置の例示的な順序の概略図である。
【図１２Ｅ】本開示のさらなる例示的な実施形態に従って微小移植組織を収集するために使用され得る処置の例示的な順序の概略図である。
【図１３Ａ】本開示のさらなる例示的な実施形態に従って微小移植組織を収集するために使用され得る安定化基板の例示的な形状の概略図である。
【図１３Ｂ】本開示のなおさらなる例示的な実施形態に従った安定化基板のさらなる例示的な形状の例示的な画像である。
【図１４】本開示の追加の例示的な実施形態に従って微小移植組織を収集するために使用され得る２つの安定化基板を含む配置の例示的な形状の概略図である。
【図１５Ａ】収集された微小移植片をレシピエント部位における組織に直接配置するための例示的な装置および処置の概略図である。
【図１５Ｂ】収集された微小移植片をレシピエント部位における組織に直接配置するための例示的な装置および処置の概略図である。
【図１５Ｃ】収集された微小移植片をレシピエント部位における組織に直接配置するための例示的な装置および処置の概略図である。
【図１５Ｄ】収集された微小移植片をレシピエント部位における組織に直接配置するための例示的な装置および処置の概略図である。
【図１５Ｅ】収集された微小移植片をレシピエント部位における組織に直接配置するための例示的な装置および処置の概略図である。
【図１６】本開示の例示的な実施形態に従った例示的な装置および／または方法を用いてコラーゲンゲルマトリクスに置かれたブタの皮膚から収集された微小片の一連の例示的な画像である。
【図１７】本開示の例示的な実施形態に従った例示的な装置および／または方法を用いてブラックマウスから収集され、ヌードマウスに形成された創傷に移植された微小移植片の一連の例示的な画像である。
【図１８Ａ】ブタ被験体において形成された全層皮膚創傷の例示的な画像である。
【図１８Ｂ】移植された微小片を用いた、および用いていない、図１８Ａに示す例示的な創傷の治癒の進展を示す一連の例示的な画像である。
【図１９Ａ】本開示の例示的な実施形態に従った例示的な装置および／または方法を用いた生体組織からの例示的な装置の挿入および収集の例示的な順序を示す一連の図である。
【図１９Ｂ】図１９Ａに示す例示的な挿入および収集の順序に対応する時間の関数として例示的な変位および力データのプロットである。
【発明を実施するための形態】
【００３４】
図面全体にわたって、他に記載しない限り、同じ参照番号および特徴は、例示した実施形態の同様の特徴、要素、成分、または部分を示すために使用される。さらに、本開示をここで図面を参照して詳細に記載するが、例示した実施形態に関して説明するのであり、本発明を図面に例示した特定の実施形態に限定しているわけではない。
【００３５】
本開示の例示的な実施形態によれば、自己移植片を生成する方法および装置、特に、レシピエント部位に改善された組織特性を提供しながら、ドナー部位のより迅速な治癒を促進できるような方法および装置が提供され得る。本開示の例示的な実施形態は、自己移植片を提供するために使用され得る複数の小規模の組織部分（例えば微小移植片）を含み得る。このような移植片は、迅速に治癒でき、レシピエント部位に望ましい特性を有する皮膚組織を再生できる移植組織を提供しながら、ドナー部位に対する永久的な損傷を回避できる。
【００３６】
本開示の例示的な実施形態において、図１Ａに示すように、少なくとも１つの小さな寸法を有する組織部分（例えば微小移植片）が例示的なドナー部位１００から収集される、自己移植片を作製する方法が提供され得る。図１Ａに示す穴１１０は、組織部分（例えば微小移植片）が除去される例示的なドナー部位１００の領域を表す。これらの例示的な穴１１０はほぼ円形の断面形状を有してもよいが、他の形状が使用されてもよい。
【００３７】
収集した組織の治癒が起こった後の例示的なドナー部位１１０を図１Ｂに示す。除去した組織によりドナー部位において生じた損傷の小さな領域１００は迅速に治癒でき、および／または目に見える瘢痕化を有さない。例えば、図１Ｂに示す治癒したドナー部位１００の残りのパターンは、通常の視覚条件下で裸眼により容易に知覚できない。
【００３８】
例えば、ドナー部位１００に穴１１０を形成するためにドナー部位１００から組織の部分を収集または除去することによって形成され得る例示的な微小移植片１２０を図１Ｃに示す。例示的な微小移植片１２０はほぼ円筒形であり得る細長い形状を有してもよい。微小移植片１２０は、例示的なドナー部位１００由来の表皮組織１３０および真皮組織１４０の両方を含んでもよい。例えば、例示的な微小移植片１２０は、長さが約３ｍｍであってもよく、これは、典型的な皮膚層（例えば表皮層および真皮層）の深さ全体に対応し得る。ドナー部位１００の特定の皮膚または組織特性に基づいて異なる長さが使用されてもよい。一般に、顕著に多くの量の皮下組織を収集することを回避することが好適であり得るので、収集される微小移植片１２０は主に表皮組織１３０および真皮組織１４０を含み得る。例示的な微小移植片１２０の下部１５０はまた、（例えば真皮／脂肪層の境界に近接する）ドナー部位１００の真皮の下部に存在し得る幹細胞を含んでもよい。
【００３９】
収集の間に生じる穴１１０の幅または直径（それは収集される微小移植片１２０の部分のほぼ直径に対応し得る）は、約２ｍｍ未満、または約１ｍｍ未満であり得る。本開示の特定の例示的な実施形態において、微小移植片１２０の直径または幅は、約０．５ｍｍ未満、約０．３ｍｍ未満、または約０．２ｍｍ未満であり得る。例示的な穴１１０のサイズは、例えば、迅速に治癒でき、および／または瘢痕化を有さずにドナー部位１００において小さな直径領域を作製する効果に基づいて、ならびに増殖媒体に移植または置かれた場合、生存を促進するのに十分小さくてもよく、ドナー組織に存在し得る多くの量の移植組織および／または捕捉組織を形成するのに十分大きい、組織の作製部分に基づいて選択され得る。
【００４０】
例えば、生組織は、約０．１ｍｍの距離にわたって拡散輸送により栄養素と共に提供されてもよい。従って、約０．５ｍｍ未満、例えば約０．３ｍｍ未満または例えば約０．２ｍｍほどの大きさである少なくとも１つの直径を有する例示的な微小移植片１２０は、向上した生存を示し得、生存する可能性が高く、移植に使用される場合、それらは成長できる。このような例示的な微小移植片１２０は、組織の血管再生前に、レシピエント部位に置かれた場合、栄養素（例えば酸素を含む）をより受け取ることができる。
【００４１】
例えば約１〜２ｍｍの幅を有する、より大きな微小移植片１２０もまた、栄養素のこのような拡散輸送から利点を受け得、また、移植組織の顕著に大きい部分（例えば従来の全層、分層またはメッシュ移植）よりも生存する可能性がより高くなり得る。これらのより大きなサイズは、異種である収集される組織、例えば単一の微小移植片１２０内に保存され得る特定の構造を含み得る組織に好適であり得る。例えば、皮膚組織は、毛包、皮脂腺などの特定の構造を有し、皮膚からいくらか大きい微小移植片１２０を収集することは、収集および移植される場合、それらの組織構造を保存するのに役立ち得る。他方で、より小さい微小移植片、例えば、約０．５ｍｍ、または約０．２ｍｍ幅未満のものは、組織において保存される大きな構造が少ないかまたはほとんどない筋組織などの比較的同種組織に好適であり得る。
【００４２】
収集することによってドナー部位１００から除去された表面組織の割合（穴１１０によって占められる例示的なドナー部位１００の表面積の割合に対応し得る）は、約７０％未満、またはより好ましくは約５０％未満であり得る。除去される組織の割合は、そこから適切なサイズの移植片を生成するために、十分な大きさの収集された微小移植片１２０を提供するのに十分大きくてもよいが、残存している損傷していない組織からの成長に基づいてドナー部位１００において迅速な治癒を促進するのに十分小さい。組織の他の割合が、例えば、ドナー部位１００の特定の特性、必要とされる移植片のサイズ、および利用可能なドナー部位組織の全体の量などの要因に応じてドナー部位１００から除去されてもよい。
【００４３】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、例えば図２Ａに示すように、移植片２００が、生体適合マトリクス２１０に複数の微小移植片１２０を包埋または挿入することによって提供されてもよい。微小移植片１２０を含有する例示的なマトリクス２１０は、成長が起こった後、移植片２００において組織の連続層またはほぼ連続層を形成するために、収集された微小移植片１２０の成長を促進するために栄養素に曝露されてもよい。図２Ｂに示すように、マトリクス２１０および微小移植片１２０を含み得る、例示的な移植片２００は、レシピエント部位２２０（例えば清浄な創傷領域）の上に直接置かれ得る。例示的な微小移植片１２０はまた、本明細書に記載されるように、幹細胞を含んでもよく、その幹細胞もまた、レシピエント部位２２０に移植される場合、治癒および例示的な微小移植片１２０の融合を促進し得る。レシピエント部位２２０は、栄養素を提供でき、および／または収集された微小移植片１２０の血管再建を促進でき、それによりさらに、微小移植片１２０を分離する空間を最終的に満たすためにマトリクス２１０を介してそれらの成長を向上させることができる。例えば、図２Ｂは、周囲マトリクス２１０内で成長し始めた後の微小移植片１２０を示す。
【００４４】
本開示の１つの例示的な実施形態において、微小移植片１２０は、それらがドナー部位１００から除去されると、ほぼ同じ間隔（例えば同様の面密度）でマトリクス２１０に配置されてもよい。この例示的な構成により、微小移植片１２０が成長し、それらと新しい組織との間の空間を満たした後、ドナー部位１００の収集された面積全体とほぼ同じサイズであり得る量の移植組織を生成できる。マトリクス２１０内の微小移植片１２０の平均間隔はまた、収集されたドナー部位１００の面積全体より大きい移植組織を形成するために増加させてもよい。特定の移植片２００における微小移植片１２０の特定の間隔は、例えばドナー部位１００のサイズおよび損傷の割合、皮膚移植片２００により被覆されるレシピエント部位２２０のサイズ、微小移植片１２０が再成長し、連続組織層を生成する時間、移植されたレシピエント部位の望ましい外観などの要因に基づいて選択され得る。例えば、例示的な微小移植片１２０は、特定の移植片と離れて間隔を空けられてもよく、これにより、より大きな移植面積を提供できるが、また、より長い治癒時間を必要とし得、治癒した移植片２００において一部の目に見える瘢痕化または質感が起こり得る可能性もある。
【００４５】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、図３Ｃに示すように、組織部分３２０が、細長く、狭い帯状形状で収集されてもよい。１つ以上の例示的な組織片３２０は、表皮組織１３０および真皮組織１４０の両方を含んでもよく、これは図１Ｃにおける微小移植片１２０と同様である。例えば、例示的な組織片３２０の高さは、約３ｍｍまたはドナー部位１００における真皮層の局所深さに対応し得る別の長さであってもよい。より深いおよび／またはより短い真皮層の深さもまた、例えばドナー部位およびレシピエント部位、移植により修復される創傷の特性に基づいて組織片３２０を収集する場合、選択されてもよい。
【００４６】
例えば図３Ａに示すように、このような例示的な組織片３２０を収集することにより、ドナー領域１００において長く、狭い溝３１０を残すことができる。溝３１０の幅（およびそれによる収集された組織片３２０の幅）は、約１ｍｍ未満、または約０．５ｍｍ未満であり得る。特定の例示的な実施形態において、このような組織片の幅は、約０．３ｍｍまたは約０．２ｍｍ未満であってもよい。本明細書に記載するように、このような小さい寸法は、移植組織に対する栄養素の拡散輸送を促進でき、収集された組織の生存を向上させ得る。皮膚表面から溝３１０の深さは、収集された片３２０の高さに対応し得る。
【００４７】
組織片３２０から取り除かれる例示的なドナー部位３１０の表面積の割合は、約７０％未満、または約５０％未満であり得る。収集される細長い組織片３２０に関連するパラメータの選択に影響を与える要因（例えばドナー部位から取り除かれる幅および面積の割合）は、実質的に円筒形の微小移植片１２０に関して上に記載したものと同様であってもよい。収集される片３２０の長さは、例えば、薄い組織片３２０の切断、除去、および治療の容易さ、ドナー部位１００の部位などの要因に基づいて選択され得る。図３Ｂに示すように、ドナー部位に形成される細長い溝３１０もまた、少しの側部寸法および局所的な組織再生を支持できる隣接する健康な組織の存在のために、目に見える瘢痕化を有さず、またはほとんど有さずに迅速に治癒できる。
【００４８】
収集された片３２０は、例えば図２に示すマトリクス２１０と同様の生体適合マトリクスに配置され得る。組織片３２０は、例えば取り除かれるドナー部位の溝３１０の構成に対応する、ほぼ平行な構成で配置されてもよい。片３２０間の間隔は、代替として、所望されるように、ドナー部位１００の溝３１０の間隔と比べて増加または減少させてもよく、例えばそれぞれ移植組織の全体のより大きな面積またはより高密度に充填された移植組織を提供できる。このような収集された組織片３２０は、特定の移植処置に使用されてもよい。なぜなら、大きな寸法は、血管再建を促進でき、組織片３２０から形成された移植片の治癒を向上させ得る収集された皮膚組織において構造を保存できるからである。
【００４９】
収集される組織部分は、タイルパターンまたはフラクタル様形状を含む、他の形状のドナー部位から除去されてもよい。一般に、各々の除去された組織片（および例えばドナー部位における各々の対応する穴または空隙）は、約１ｍｍ未満、または０．５ｍｍ未満の少なくとも１つの小さな寸法を有し得る。特定の例示的な実施形態において、この小さな寸法は約０．３ｍｍ、または約０．２ｍｍ未満であり得る。
【００５０】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、収集された組織部分は、高密度の構成でレシピエント部位に配置され得る。例えば、図４Ａは、例えば、例示的な微小移植片１２０の隣接するものは少なくとも部分的に互いに直接接触する、例示的な高密度の配置で集められ得る複数の実質的に円筒形の微小移植片１２０の概略的な上面図を示す。図４Ｂは、図４Ａに示す微小移植片１２０の概略的な側面図を示す。この例示的な高密度の構成は、収集されるドナー部位１００の面積全体より小さい移植片を提供できるが、より迅速に治癒する傾向があり得、間隔を空けて収集される組織部分１２０、３２０を用いて形成される移植片より目に見える瘢痕化を生じる可能性が低い。同様に収集された組織の例示的な構成は、例えば図３Ｃなどに示すような組織片３２０を用いて形成されもよい。
【００５１】
例示的な生体適合マトリクス２１０は、機械的安定性を提供し、および／または収集された微小移植片２００を支持し、ならびに／あるいは組織再生を促進できるように構造化された１つ以上の材料を用いて形成されてもよい。マトリクス２１０を形成するために使用され得る材料の例としては、ポリ乳酸（ＰＬＡ）、コラーゲン（例えばコラーゲンスポンジ）、低融点アガロース（ＬＭＡ）、ヒアルロン酸（例えばヒアルラノン（ｈｙａｌｕｒａｎｏｎ））、または失活動物もしくは死体の皮膚が挙げられ得る。マトリクス２１０は、例えばドナー皮膚組織の一部を数回、凍結し、解凍することによって作製され得る、例えば同種皮膚から形成され得る。例えば、約７回の凍結／解凍サイクルが、マトリクス２１０として使用するためにドナー部位における細胞を効果的に殺傷するために実施されてもよい。凍結し、解凍した組織は、次いで、死細胞、残渣などを除去するために洗浄剤または他の組成物により洗浄され得る。
【００５２】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、生きているドナー皮膚組織試料は、マトリクス材料２１０を形成するために放射線で処理され得る。例えば、ドナー皮膚組織は、細胞をインタクトなままにし得る、致死量のｘ線、例えばガンマ線で処理され得る。従って、ドナーマトリクス材料における細胞は、乾燥前の放射線曝露後、特定の時間、例えば４８〜７２時間、生きたままであり得る。寿命の短い細胞を含むこのようなマトリクス２１０は、移植された微小移植片１２０の成長を最初に支持できるが、次いで、微小移植片１２０の成長および／または生存に対する反対の顕著な相互作用、例えば自己免疫反応が起こる前に死滅する。代替として、生存可能な微小移植片１２０によるこのような放射線照射マトリクス２１０の移植は、微小移植片１２０とマトリクス２１０との間の自己免疫反応を回避するために、放射線照射後、十分な時間、例えば７２時間またはそれ以上、遅延させてもよい。マトリクス２１０はまた、例えば細胞を洗浄剤および酸性／塩基性溶液で引き離すことによってドナー皮膚から作製されてもよい。このようなマトリクスまたは足場を作製するための例示的なプロトコルは、例えば、Ａｌｓｂｅｒｇら，Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  ＵＳＡ．２００２年９月１７日；９９（１９）：１２０２５−１２０３０に記載されている。
【００５３】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、本明細書に記載するようにマトリクス材料の少しの部分が、柱の一部がマトリクス材料から形成されることを除いて、図４Ａおよび４Ｂに示すものと同様の構成で微小移植片１２０と混合され得る。微小移植片１２０およびマトリクス柱は、例えば接着剤、光化学結合剤などを用いて接着されてもよい。微小移植片１２０およびマトリクス材料の部分の相対的サイズおよび数は、特定の割合の微小移植片材料を有する合成物を生成するために変更されてもよい。
【００５４】
栄養素または他の添加物もまた、組織再生をさらに促進するためにマトリクス２１０に提供されてもよい。そのような添加物には、例えば、１つ以上の成長因子、幹細胞が含まれる。このような成長因子の例としては、限定されないが、移植片の血管新生を向上または促進させ得る、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）、形質転換成長因子ベータ（ＴＧＦ−β）、および線維芽細胞成長因子（ＦＧＦ）が挙げられる。表皮成長因子（ＥＧＦ）およびケラチノサイト成長因子もまた、使用されてもよく、ケラチノサイトおよび線維芽細胞などの特定の皮膚細胞の動員および分化を増加できる。多血小板結晶（これは、例えば市販のシステムを用いて患者独自の血液から作製され得る）もまた、特定の成長因子を提供するために使用されてもよい。このような血漿は、外因性成長因子より作製するのに大きな労力を必要とし得るが、天然の創傷治癒環境により近くなり得る。このような成長因子は、マトリクスが液体形態のままである適切な温度にて、マトリクス２１０、例えばＬＭＡ／コラーゲンミックスに導入され得る。ＬＭＡ／コラーゲンマトリクスは次いで、加熱したＬＭＡと混合する前に、コラーゲン溶液のｐＨ値を調整することによって形成され得る。マトリクス２１０の凝固のために、例えば、混合物は、約４℃まで冷却する前に、約３７℃の温度にて約２０分間、保存され得る。
【００５５】
幹細胞源には、例えば、脂肪組織由来の幹細胞および／または骨髄由来の間充織幹細胞が含まれる。皮膚組織から得たまたは収集された微小移植片はまた、毛包由来の幹細胞を含んでもよい。このような幹細胞または他の細胞は、微小移植片の移植前にマトリクスと共に細胞を培養することによりマトリクスに導入されてもよい。低レベルの光線療法（ＬＬＬＴ）もまた、微小移植片の成長および生存を促進するために使用されてもよい。例えば、組織の治癒および／または成長をさらに促進するために組織収集および移植組織の配置後に、赤または近赤外光がドナー部位および／またはレシピエント部位を照射するために使用されてもよい。
【００５６】
成長因子および／または他の添加物が、例えば微小移植片をマトリクス材料に移植する前に成長因子を含有する溶液にマトリクス材料を浸すことによってマトリクスに導入されてもよい。成長因子はまた、例えば、時間と共にマトリクス内のリザーバから成長因子を直接移動させるか、またはポンプで移動させることによって、あるいは成長因子を、マトリクスに導入され得る生分解性ポリマーに包埋することによって、制御放出機構を用いて時間と共にそれらをマトリクス内に放出することにより導入されてもよい。特定の成長因子または添加物はまた、時間と共に切断され得る化学結合によりマトリクス材料に結合されてもよく、それによって、マトリクス内に徐々に成長因子を放出する。
【００５７】
本開示の特定の例示的な実施形態において、光化学組織結合などの特定の技術が、マトリクス２１０内の微小移植片１２０および／または組織片３２０の機械的安定性を向上させるために使用されてもよい。例えば、光化学組織結合に関する技術は米国特許第７，０７３，５１０号に記載されている。この技術は、光線感作物質を組織に適用し、続いて、組織シールを生成するために電磁エネルギーによる照射を含む。Ｒｏｓｅ  Ｂｅｎｇａｌなどの光線感作物質を、例示的な微小片１２０および／または組織片３２０を含有するマトリクス２１０に適用し、続いて、約２分間、緑光をマトリクスに曝露することができる。光化学組織結合は、微小移植片１２０および／または組織片３２０のマトリクス２１０（このマトリクス２１０は例えばヒアルロン酸またはコラーゲンなどのタンパク質を含み得る）に対するより強力な結合を促進できる重合反応に触媒作用を及ぼし得る。
【００５８】
本開示のさらに例示的な実施形態において、マトリクス材料は、微小移植片１２０と混合され得る液体またはゲル前駆体形態で提供され得る。次いでマトリクス材料は、（例えばレシピエント部位内に微小移植片１２０およびマトリクス材料の混合物を導入する前または後のいずれかに）凝固またはゲル化され得る。マトリクス２１０を形成するためのマトリクス材料の凝固は、使用されるマトリクス材料に基づいた種々の手順を用いて達成され得る。例えば、コラーゲンゲル（図１６に示したもの）は、低温にて液体形態で提供されてもよく、約３７℃まで温度を上昇することによって凝固されてもよい。他のマトリクス２１０は、化学的架橋結合機構により凝固され得るポリマーを用いて形成されてもよい。このような機構は、例えば、温度、光（光組織結合と同様）、ｐＨの変化などによって活性化、触媒化および／または開始され得る。
【００５９】
微小移植片１２０が、最初に液体形態であるマトリクス２１０に提供される場合、マトリクス２１０内の微小移植片１２０の配向はいくつかの方法で設定および／または維持され得る。例えば、液体が多い材料は微小移植片１２０の上端または上部（例えば皮膚組織から得られた微小移植片１２０の表皮面）に適用され得るので、微小移植片１２０の先端は液体マトリクス材料の表面に対して浮遊する傾向があり、それ故、マトリクス２１０の上面に対して微小移植片１２０の上端を配置する。代替として、金属塗料が微小移植片１２０の上部に適用されてもよく、次いで磁場が、マトリクス材料内に微小移植片１２０を整列させるために移植片材料に近接して印加されてもよい。このような例示的な整列（配置）手順は、特定の配向を有する微小移植片１２０を有するマトリクス２１０を生成するためにマトリクス材料の凝固またはゲル化の前および／または間に実施され得る。代替として、本開示の特定の例示的な実施形態において、微小移植片１２０は、特定の好適な配向を必要とせずにマトリクス２１０に提供されてもよい。
【００６０】
本開示のなおさらに例示的な実施形態において、図５Ａに示すように、本明細書に記載されるドナー部位１００からの例示的な微小移植片１２０の収集を促進し得る、装置５００が提供される。例示的な装置５００は、金属または別の構造的に剛性の材料から形成され得る中空の管５１０を含み得る。例えば、管５１０は、ステンレス鋼管、生検針、または同様の構造を用いて形成され得る。管５１０は、ドナー部位組織１００を通る管５１０の移動をさらに促進させるために、潤滑剤または低摩擦材料、例えばテフロン（登録商標）でコーティングされてもよい。
【００６１】
管５１０の内径は、本明細書に記載されるドナー部位から取り除かれる微小移植片１２０の特定の直径にほぼ対応するように選択され得るかまたは構造化され得る。１つの例示的な実施形態によれば、管５１０の内径は、約１ｍｍ未満であり得る。例えば、１８または２０ゲージ生検針（例えば、それぞれ０．８３８ｍｍおよび０．５６４ｍｍの内径を有する）などが、管５１０を形成するために使用されてもよい。より大きなゲージ（およびより小さな内径）を有する生検管もまた、使用されてもよい。管との相互作用に基づいて、収集される微小移植片１２０の幅または直径は、収集するために使用する装置５００の内径よりわずかに小さくてもよい。
【００６２】
管５１０の遠位端は複数の先端部を形成するために尖っているようにされ得る。例えば、図５Ａに示すように２つの例示的な先端部または延長部は、管５１０の長軸に対してある角度で管５１０の対向する側を研磨することにより形成され得る。図５Ｂに示すさらなる例示的な実施形態において、遠位端に設けられる３つの先端部または延長部５２０を有する管５１０を含む例示的な装置５５０が提供されてもよい。この例示的な構成は、例えば管５１０の長軸に対してある角度で管５１０の３つの先端部を研磨することにより形成され得、ここで、その３つの先端部は、管５１０の周囲で約１２０°の間隔を空けられている。なおさらなる例示的な実施形態において、遠位端に設けられる３つより多い先端部または延長部５２０を有する管を含む微小移植片を収集するための装置が提供されてもよい（例えば、管５１０は４、５、６、７または８個の先端部５２０を有する）。
【００６３】
例示的な先端部または延長部５１０は、ドナー部位１００において組織内への装置５００、５５０の挿入を容易にできる。例えば、管５１０の遠位端の部分を研磨することによって形成され得る、例示的な先端部または延長部５２０はまた、それらの側部に沿って傾斜した端部を有してもよく、これにより、装置５００、５５０のドナー部位組織内への挿入をさらに容易にできる。例えば、それらの先端において狭い角度を形成する先端部または延長部５２０が、より大きな先端角度を有する先端部５２０と比べて、より小さな力を用いて組織内に挿入され得るが、この力は、より広い先端角度で、それにより角度を付けられた先端領域のより短い長さを有する先端で使用されるものより、管５１０の組織内への完全な挿入を達成するのに、より長い距離および／または時間で適用される必要がある。組織を貫通するのに必要な管５１０に対する初期の力は、各々の先端部または延長部５２０の角度が一定に保持される場合、先端部５２０の数とほぼ比例し得る。管の遠位端により多くの数の先端部、延長部５２０を提供することにより、管５１０の機械的安定性および／または切断される組織の形状的制御が改良され得るが、それは、組織を貫通するのにより大きな力を使用し得る。
【００６４】
例示的な装置５００はまた、管５１０の外面に設けられるカラーまたは停止部５４０を備えてもよい。例示的な停止部５４０は、先端５２０の端部から特定の距離で管５１０に添えられてもよいか、またはこの距離は、例えば、管５１０の軸に沿って停止部５４０を移動させることによって長さの範囲を調節できるようにしてもよい。
【００６５】
図６Ａは、例えば停止部５４０がドナー部位１００の表面と接触するまでドナー部位１００における組織内へ挿入した後の例示的な装置５００を示す。組織６００の一部は管５１０の下部内に存在し得る。この組織部分６００の側面は、管５１０がドナー部位組織１００に貫通すると、管５１０の遠位端および／または先端部もしくは延長部５２０により周囲組織から切断または切り離され得る。このような組織６００は管５１０内に維持され得、例えば図６Ｂに示すように管５１０がドナー部位１００から除去される場合、微小移植片１２０を形成するためにドナー部位１００から分離され得る。このように形成される例示的な微小移植片１２０は、表皮組織１３０および真皮組織１４０の両方を含み得る。
【００６６】
例示的な微小移植片１２０は、例えば図６Ｃに示すように管５１０の近位端における開口６２０を通して圧力を与えることによって、装置５００から取り除かれ得る。このような圧力は、機械的、水圧、空気圧などであってもよい。例えば、圧力は、例えば、開口に風を吹き込むことによって、開口に取り付けられたフレキシブルな球状部を絞ることによって、小さなポンプなどの高圧源から通じるバルブを開口することによって、与えられ得る。代替として、例示的な微小移植片１２０は、例示的な装置５００をドナー部位１００の複数の位置に挿入することによって収集されてもよい。次いで管５１０内の各々の微小移植片１２０は、いずれかの微小移植片を開口の方へ管５１０の上に押し得る。一旦、管５１０が収集された組織で十分に満たされると、例示的な装置５００のドナー部位１００への各々のさらなる挿入が、近位の開口６２０から外側へ、管５１０内の最も上側の微小移植片１２０を押し出すことを容易にし得る。
【００６７】
例示的な装置５００は、収集される微小移植片１２０のほぼ所望の長さに対応する深さまでドナー部位組織１００内に挿入され得る。このような距離は、例えば、例示的な装置５００に停止部５４０を適切に配置または調節することによって、決定および／または制御され得る。例えば、例示的な装置５００は、図６Ａに示すように、先端部または延長部５２０が、真皮／脂肪層接合部６１０における、またはそれらに近接する位置まで延びるように構成または構造化され得る。例えば、微小移植片１２０は、管５１０をその軸周囲で回転させずにドナー部位から装置５００を取り除くことによってドナー部位１００から取り除かれ得る。対照的に、従来の生検針および同様物は、周囲組織から組織試料の除去を促進するために長軸周囲で回転することを必要とし得る。例示的な装置５００に設けられた先端部または延長部５２０は、ドナー部位１００における周囲組織から微小移植片１２０のそのような除去を容易にし得る。
【００６８】
本開示の特定の例示的な実施形態において、ドナー部位における組織の一部または全ては、微小移植片１２０を収集する前に、冷却、凍結、または部分的に凍結され得る。このような凍結は、微小移植片１２０の切断、除去、操作、および／または生存を促進し得る。ドナー部位組織１００は、例えば、冷却スプレー（ｃｒｙｏｐｓｐｒａｙ）を適用すること、またはドナー部位１００の表面を、適切な期間、冷却した対象物と接触させることなどの従来の冷却技術を用いて冷却または凍結され得る。例示的な装置５００はまた、微小移植片１２０を収集する前に冷却されてもよい。このような冷却および／または凍結は、例えば、微小移植片１２０が収集および／またはマトリクス２１０に配置される場合、それらの機械安定性を増加させ得る。
【００６９】
例示的な微小移植片１２０は、種々の技術を用いてマトリクス２１０内に提供され得る。例えば、個々の微小移植片１２０は、例えばピンセットなどを用いてマトリクス２１０の特定の位置に挿入され得る。図６Ｂに示すように、収集される微小移植片１２０を含む例示的な装置５００もまた、マトリクス２１０の位置に挿入され得、マトリクス２１０内に微小移植片１２０を押すために、圧力が近位の開口６２０に付与され得る。次いで例示的な装置５００がマトリクス２１０から除去されてもよく、その手順はマトリクス２１０内に複数の微小移植片１２０を配置するために反復されてもよい。近位の開口６２０は、微小移植片１２０が装置５００内にさらに押し上げられることを防ぐために、装置５００がマトリクス２１０内に挿入されている間、被覆されてもよい。例えば、微小移植片１２０が管５１０内でさらに押し上げられることを防ぎ得る非圧縮性の体積を提供するために、管５１０の上部は、流体、例えば水または生理食塩水で満たされてもよい。このような流体はまた、近位の開口６２０に圧力を付与することにより、例示的な装置５００からの微小移植片１２０の除去を容易にし得る。
【００７０】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、図７に示すように、例示的な装置７００が提供され得る。装置７００は、例えば、基部７１０に添えられるか、または機械的に結合される複数の管５１０を含んでもよい。管５１０は、種々の構成、例えば直線配置で、または基部７１０に沿った種々の２次元パターンのいずれか１つで提供されてもよい。例示的な装置７００に提供される管５１０の数は、例えば、少なくとも６個の管５１０、約１０個より多い管５１０、または約２０個より多い管５１０であってもよい。例えば、装置７００は、約３個の管５１０、少なくとも６個の管５１０の直線配置、または約１２個の管５１０、例えば矩形の３×４配置（アレイ）または２×６配置（アレイ）を含んでもよい。管５１０のより大きな配置（アレイ）もまた、本開示のさらなる例示的な実施形態において提供され得る。管５１０の間隔は、ドナーおよび／またはレシピエント部位において認識可能なパターンの形成を回避するために、いくらか不均一または変化されてもよい。多くの微小移植片１２０をより迅速に収集および／または移植するために多くの管５１０が好適であり得る。しかしながら、多くの管５１０はまた、管５１０を組織またはマトリクス内に同時に挿入するのに使用される大きな力に対応し得、これは力が非常に大きくなる場合、望ましくない場合がある。また、装置７００の機械的複雑性が、多くの管５１０により増加し得る。
【００７１】
導管７２０が管５１０の近位の開口６２０と連通して提供され得る。導管７２０はまた、例えば圧力源７３０と連通して提供されてもよい。例えば、圧力源７３０はポンプまたは変形可能な球状物などを含んでもよい。圧力源７３０は、例えば、導管７２０と連通するフレキシブルな膜を含んでもよく、その膜が変形すると、高圧が導管７２０内に与えられてもよい。このような構成は、本明細書に記載される管５１０内に収集され得る微小移植片１２０を除去および／または挿入するために近位の開口６２０に圧力を付与することを容易にし得る。
【００７２】
振動構成７４０が必要に応じて装置７００に提供されてもよい。微小移植片１２０を収集または配置するために組織またはマトリクス材料内への管５１０の挿入を促進するために、振動構成７４０は基部７１０および／または管５１０に機械的に結合され得る。振動構成７４０は、約５０〜５００μｍ、または約１００〜２００μｍの範囲の振動の振幅を有してもよい。誘導される振動の周波数は、約１０Ｈｚ〜約１０ｋＨｚ、または約５００Ｈｚ〜約２ｋＨｚ、またはさらに約１ｋＨｚであってもよい。特定の振動パラメータは、例えば、例示的な装置７００における管５１０のサイズ、平均間隔、および材料、管５１０の数、ならびに／または処理される組織に基づいて選択されてもよい。振動構成７４０は、振動の振幅および／または周波数を調節するように構成された回路を含んでもよい。
【００７３】
例示的な装置７００は、管５１０の１つ以上において複数の微小移植片１２０を同時に得るために使用され得る。例示的な装置７００を用いてそのような微小移植片１２０を得て、取り除くための例示的な手順は、図６Ａ〜６Ｃに示す例示的な装置５００を用いて単一の微小移植片１２０を得るために本明細書に記載した手順と同様であり得る。
【００７４】
振動はまた、管５１０がドナー部位１００内に完全に挿入された後に、管５１０の遠位端に近接する組織を切断するのにも役立ち得る。これは、ドナー部位１００から管５１０内への組織部分の分離および／または抽出を促進できる。これらの組織部分はまた、管５１０がドナー部位１００から引き抜かれる場合、管５１０内の摩擦により保持され得る。
【００７５】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、ドナー部位の組織は、例えば、冷却スプレーを適用すること、または組織表面を冷却した対象物と接触させることなどの対流または伝導技術を用いて、管５１０の挿入前に予め冷却され得る。管５１０がドナー部位組織１００内に挿入される場合、ドナー部位１００の冷却は痛覚を減少させることができ、また、組織１００をより剛性にすることができ、管５１０による組織部分（例えば微小移植片１２０）のより正確な切断を容易にできる。
【００７６】
例示的な装置７００における管５１０の位置および間隔は、例えば、得られる微小移植片１２０の特性、ドナー部位１００に対する損傷パターン、および／または本明細書上記の他の要因に基づいて決定され得る。例示的な装置７００に提供される管５１０の数は、種々の要因に基づいて選択され得る。例えば、より多くの数の管５１０が、より多くの微小移植片１２０をドナー部位１００から同時に収集できるようにするために望まれ得る。そのような例示的な構成は、より効果的な収集プロセスを促進できる。より少ない数の管５１０は、ドナー部位組織１００内に同時に挿入し易くなり得る。さらに、非常に多くの数の管５１０を有する例示的な装置５００は、製造および／または維持することが困難であり得る。
【００７７】
収集された組織部分は、管５１０から生体適合マトリクス材料２１０内に直接堆積され得る。管５１０およびその中に含まれる組織部分は、その組織部分を取り除く前に冷却され得る。これは、管５１０内の組織部分を固くし、それらを操作し易く、かつ配置し易くする。
【００７８】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、複数の実質的に平行なブレードを含む装置が提供され得る。隣接するブレードの特定の１つの端部は、例えば、隣接するブレード間に狭い矩形の開口を提供するために接続または閉鎖され得る。このような例示的な装置は、例えば、図３Ｃに示すような組織片３２０を形成するために使用され得る。この例示的な装置の間隔、長さ、および他の特徴は、例えば、例示的な装置５００、７００について本明細書に記載されるものと同様の要因に基づいて選択され得る。
【００７９】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、本明細書に記載される例示的な方法および装置は、皮膚組織以外の他の組織、例えば、肝臓または心臓などの内臓器官に適用され得る。従って、ドナー部位に対してほとんど損傷を生じずに、かつ、それらの迅速な治癒を促進しながら、レシピエント部位における配置に好適な移植組織を作製しながら、移植片が種々の組織のために形成されてもよい。
【００８０】
２つの先端部を含む例示的な装置の遠位端の画像を図８Ａに示す。この例示的な装置は、例えば図５Ａに示した例示的な装置５００と同様である。この例示的な装置をさらに回転させた画像を図８Ｂに示す。このような例示的な装置は、約１ｍｍの外径および約０．５ｍｍの内径を有する管を用いて形成した。先端部または延長部は、管の軸に対して適切な角度で管の遠位端の２つの対向する側を研磨することにより形成した。図８Ａおよび８Ｂに示した例示的な装置において使用した角度は約３０°であったが、他の角度を使用してもよい。管の傾斜した端部が先端部または延長部の側に沿って見られ得る。これらの先端部の形状は、本明細書により詳細に記載しているように、ドナー部位の組織内への装置の挿入および／またはドナー部位からの微小移植組織の一部の分離を容易にできる。例えば、このような微小移植片は、挿入し、管の軸に沿って管を回転させずにドナー部位から装置を引き抜くことによってドナー部位から分離され、除去され得る。
【００８１】
２つの先端部５２０を含む例示的な管５１０の遠位端の形状（穴が開いている）は、先端部または延長部５２０を形成する管５１０の対向する側部の各々と、管５１０の長手方向軸との間の角度を表す、角度αにより特徴付けられ得る。管５１０の遠位端において角度を付けられた側部は各々、例えば、管５１０の遠位端における傾斜した構造を形成するために、管５１０の軸に対してこの角度αで削られ得るか、または切断され得る。側部から見て、先端部または延長部５２０において形成された角度は、従って、図８Ｃに示すように、角度２αにより表され得る。例えば、図８Ａおよび８Ｂに示す約３０°の例示的な先端の角度は、約１５°の角度αに対応する。
【００８２】
さらなる傾斜した表面が必要に応じて、図８Ｃに示す角度αにより特徴付けられる主な傾斜に対して垂直な方向で提供されてもよい。この第２の傾角は、図８Ｄに示すように、管５１０の長手方向軸に対して削られ得るか、または切断され得る管５１０の対向する側部の各々における角度を表す、角度βにより特徴付けられ得る。この第２の斜角は、管５１０の端部において形成される先端５２０の鋭角のサイズまたは幅を減少させるために提供されてもよい。
【００８３】
図８Ｅ、８Ｆ、および８Ｇは、主な斜角αが約６°であり得る、管５１０の例示的な傾斜した端部を示す。例えば、図８Ｅにおいて形成される第２の斜角は存在せず、先端部または延長部５２０は、管５１０の壁の厚さと等しい長さを有する平らな切断端部を有する。図８Ｆおよび８Ｇは、第２の斜角に対応する角度βがまた、６°である、第２の斜角を含む。第２の斜角は、先端部または延長部５２０の先端において短い平らな切断端部を提供する図８Ｆに示す例示的な先端領域において比較的浅い。第２の斜角は、図８Ｇに示す例示的な先端領域においてより深く、先端部または延長部５２０の先端は、組織への貫通をより容易に促進できる鋭い先端部を形成する。
【００８４】
図８Ｈ、８Ｉ、および８Ｊは、図８Ｅ〜８Ｇに示すものと同様である管５１０の例示的な傾斜した端部を示すが、主な斜角αは１２°である。図８Ｈにおいて第２の斜角は存在せず、図８Ｉにおいて示す狭い第２の斜角は約６°の角度βを有し、図８Ｊにおいて示す深い第２の斜角は再び、例えば約６°の角度βを有する。
【００８５】
上記および図８Ａ〜８Ｆに示す種々の形状および先端部５２０は、例えば本明細書に記載される種々の装置および方法に関して、本開示の例示的な実施形態のいずれかにおいて使用され得る。例えば、中空の管５１０には、約１５°未満、例えば約１２°の斜角αが設けられる。このような鋭い先端の角度は、生体組織またはマトリクス材料を容易に貫通できる先端部または延長部５２０の鋭い先端を提供できる。図８Ｅ〜８Ｇに示すような、より狭い先端の角度α、例えば約６°は、密度が濃いかまたは強固な組織またはマトリクス材料内で微小移植片を収集および／または移植するのに好適であり得、先端部または延長部５２０の狭い先端は、管５１０が挿入される場合、組織またはマトリクス材料をより容易に切断するように構成され得る。図８Ｆ、８Ｇ、８Ｉ、および８Ｊに示す先端部または延長部５２０の例示的な先端などの角度βを有する第２の斜角は、より小さく、より鋭い先端部または延長部５２０の先端を提供することによって、管５１０の遠位端の種々の材料内への挿入をさらに容易にできる。しかしながら、より鋭い、および／またはより狭い先端部または延長部５２０の先端、例えば、小さい先端角度αおよび／または角度βを有する第２の斜角を有するものはまた、管５１０が組織またはマトリクス内に繰り返し挿入される場合、擦り切れ、曲がり、または他の変形をする傾向がより多くなり得る。従って、特定の用途について選択される先端の形状は、材料または組織の種類、使用される装置および管５１０の望ましい寿命に基づいて選択され得る。
【００８６】
図９は、図８Ａ〜８Ｂに示す例示的な装置を用いて生体外の皮膚組織のドナー部位から得られた複数の微小移植片の例示的な画像を示す。微小移植片は、細長く、実質的に同様の形状であるが、形状の詳細はいくらか不規則であり得る。これらの微小移植片の上部は表皮組織を含み、これらの微小移植片の下部はドナー部位から取り除かれた真皮組織を含む。これらの微小移植片の幅は、それらを収集するために使用した図８Ａ〜８Ｂに示す管５１０の内径よりわずかに小さい。
【００８７】
図９に示す微小移植片は、管が収集された組織で満たされるまで、例示的な装置をドナー部位に複数回、挿入することによって装置から取り除いた。次いでドナー部位組織内に装置を各々連続して挿入することにより、最も上側の微小移植片が管の近位端から押し出され、それを個々に分析のために回収した。このような微小移植片はまた、本明細書に記載されるように管の遠位端からそれを放出するように、微小移植片を含む管の近位端に圧力を付与することにより取り除かれてもよい。
【００８８】
本開示のなおさらなる例示的な実施形態において、図１０Ａに示すように、ドナー部位１００から例示的な微小移植片１２０の収集を容易にでき、必要に応じて、それらを、本明細書以下に記載するように、生体適合マトリクス２１０に配置する、装置１０００が提供され得る。例示的な装置１０００は、本明細書に記載されるように、図５Ａおよび５Ｂに示した中空の管５１０と同様であり得る、遠位端において複数の先端部１０２０を含み得る中空の管１０１０を含み得る。
【００８９】
本開示の１つの例示的な実施形態において、管１０１０には２つの先端部１０２０が設けられ得、先端部１０２０は、鋭角、例えば管１０１０の長手方向軸に対して約６°にて中空の管１０１０の遠位端の反対側を研磨することによって形成され得る。このような鋭い先端の角度、例えば約１２°未満は、小さな微小移植片１２０を取り除くために生体組織を貫通および切断するのに特に効果的であり得る。２つの先端部１０２０が設けられるこのような管は、組織または別の材料を貫通するための同様の直径の単一の先端部の針と関連するほぼ２倍の力を使用できる。
【００９０】
例えば、図１９Ａは、組織層からの収集針の装置の挿入および引き抜きまたは引っ張りの例示的な順序を示す。例示的な針の装置は、図５Ａに示した中空の先が尖った管５１０と同様であり得るか、または図１０Ａに示した例示的な先の尖った管１０１０と同様であり得る。時間の関数として組織に対する針の位置のプロットを、挿入および引き抜きの順序を実施するために、（例えば長手方向軸に沿って）例示的な針に付与される対応する力のプロットと一緒に図１９Ｂに示す。図１９Ｂに示したデータを得るために使用した針は、図８Ｃ、８Ｄおよび８Ｆに示した例示的な針の形状と同様の、６°の先端の斜角αおよび６°の側部の斜角βを有する２５ゲージの管から形成した。
【００９１】
図１９Ｂのグラフに与えるように、針は、約６秒で組織層を通して迅速に挿入でき、約１秒間、そこに保持でき、次いで、約０．８秒の時間で組織層の外側の位置まで安定に引っ張ることができる。組織内への挿入後、特定の深さに針を維持するのに必要とされる力、および組織層の外側の位置に針をもたらした後の針における残りの力の見かけの遅延が存在し得る。２５ゲージの管を用いて形成した針の挿入および引っ張りの間、針上で観測した最大および最小の力はそれぞれ約−０．２Ｎと０．２Ｎであった。針を組織内および組織外に動かす間の遅延および針上で得られた力は、少なくとも部分的に、針が挿入および引っ張られる場合の組織の変形および／または針が組織に対して移動した場合の組織の針に対する付着から生じる。図１９Ｂにプロットした順序の開始と終わりに見られる小さな力は、一部の摩擦成分および／または付着した成分を検出する垂直荷重と関連しているようである。
【００９２】
本開示の１つの例示的な実施形態において、管１０１０は、約０．５１ｍｍの例示的な外径および約０．３１ｍｍの内径を有する２５ゲージの薄壁の針を用いて形成した。この例示的な針のサイズは、約０．２ｍｍの幅または直径を有する微小移植片１２０を収集するために使用され得る。管１０１０は、好ましくは生体適合であり、生体組織に対して不活性である任意の十分に強い材料、例えば３０４ステンレス鋼、手術用ステンレス鋼などから形成され得る。材料強度を増加させる電解研磨などのさらなる仕上げプロセスが管１０１０に適用されてもよい。そのような仕上げプロセスは、切断の有効性を増加させ得、および／または針１０１０の有効な耐用期間を向上させ得る。
【００９３】
管１０１０は基板１０３０に摺動可能に取り付けられてもよく、図１０Ａに示すように、管１０１０は、基板１０３０に設けられる穴を通して移動する。基板１０３０に対する管１０１０の位置は、例えば実質的に管１０１０の長手方向軸に沿って基板１０３０に対して管１０１０を制御可能に移動させ得る構成を配置することによって制御され得る。このように、管１０１０の遠位端が基板１０３０の下部の表面を通して突出する距離は制御可能に変更されてもよい。
【００９４】
例示的な装置１０００はさらに、管１０１０の中心の空洞または開口内にピン１０４０を備える。ピン１０４０の直径は、管１０１０の内径と実質的に同じであり得るか、またはそれよりわずかに小さいので、管１０１０の内腔の大部分または全てを満たすか、塞ぎながら、ピン１０４０は管１０１０の軸に沿って移動できる。ピン１０４０は、低摩擦材料から形成され得るか、または例えば、管１０１０内のピン１０４０の動きを容易にするためおよび／またはピン１０４０に対する生体材料の蓄積または付着を防止するためにテフロン（登録商標）などの低摩擦材料でコーティングされ得る。ピン１０４０の遠位端は、そのピン１０４０が移動する場合、管１０１０内の微小移植片１２０の移動を容易にするために実質的に平らであり得る。
【００９５】
本開示の例示的な実施形態において、管１０１０は、約０．５１ｍｍの例示的な外径および約０．３１ｍｍの内径を有する、２５ゲージの薄壁の針を用いて形成され得る。この例示的な針のサイズは、約０．２ｍｍの幅または直径を有する微小移植片１２０を収集するために使用され得る。このサイズの管１０１０と共に使用され得るピン１０４０は、約０．２４ｍｍの外径を有し得る。管１０１０の内径とピン１０４０の直径との差は、管１０１０内のピン１０４０の動きを容易にできるが、ピンは、管１０１０の内部から微小移植片１２０を押し出すのに十分広い。管１０１０および／またはピン１０４０は、好ましくは、生体適合性であり、生体組織に対して不活性である、任意の十分に強い材料、例えば３０４ステンレス鋼、手術用ステンレス鋼などから形成され得る。
【００９６】
例えば管１０１０の長手方向軸に実質的に沿って管１０１０に対してピン１０４０を制御可能に移動できるさらなる位置決め構成がピン１０４０に設けられてもよい。このように、ピン１０４０の遠位端に対する管１０１０の遠位端の位置は制御可能に変更されてもよい。例えば、基板１０３０の下方表面に対する管１０１０およびピン１０４０の両方の遠位端の位置は好ましくは、制御可能かつ独立して選択され、変更されてもよい。
【００９７】
本明細書に記載した管１０１０およびピン１０４０の例示的な図を図１０Ｂに示し、これは、管１０１０に対して配置されたピン１０４０を示し、それらの遠位端は実質的に整列されている。ピン１０４０および／または管１０１０の部分には必要に応じて、それらの間および／または成分と生体組織との間の摩擦を減少させるためにコーティングまたは表面処理が提供されてもよい。使用され得る例示的なコーティングとしては、プラスチックまたはポリマー、例えばナイロンまたはポリエチレン、研磨した金属合金などが挙げられる。
【００９８】
ドナー部位１００から例示的な微小移植片１２０の収集を促進し、必要に応じてそれらを生体適合マトリクス２１０に配置するために使用され得る例示的な装置１１００の概略図を図１１に示す。装置１１００は、図１０Ａに示すように、管１０１０、ピン１０４０、および基板１０３０を含み得る。プレート１１１０または他の支持構造が基板１０３０に固定されてもよく、または必要に応じて単一単位のコンポーネントとして基板１０３０に設けられてもよい。
【００９９】
第１のアクチュエータ１１２０が、プレート１１１０に取り付けられてもよく、第１の接続アーム１１２５などを用いて機械的に管１０１０に結合されてもよい。同様に、第２のアクチュエータ１１３０が、プレート１１１０に取り付けられてもよく、第２の接続アーム１１３５などを用いて機械的にピン１０４０に結合されてもよい。第１のアクチュエータ１１２０および第２のアクチュエータ１１３０は、従来の線形アクチュエータなどであり得る。このようなアクチュエータ１１２０、１１３０は、適切な制御装置を備えてもよく、プレート１１１０（および基板１１３０）に対する接続アーム１１２５、１１３５の位置は、制御可能に配置され、独立して変更されてもよい。例えば、アクチュエータ１１２０、１１３０の移動の線形範囲は、例えば皮膚組織の微小移植片を収集し、本明細書以下に示すように、それらをマトリクスに配置するための装置１１００の多くの典型的な使用に関して約２ｃｍ未満であり得る。
【０１００】
図１１に示した装置１１００の例示的な概略構造において、アクチュエータ１１２０の移動または配置範囲は、管１０１０の遠位端が、基板１０３０の下方表面より上に上昇でき、遠位端が基板１０３０の下方表面の下約１〜２ｃｍの最大距離まで突出するように下降できるように選択され得る。同様に、アクチュエータ１１３０の配置範囲は、ピン１０４０の遠位端が、約１〜２ｃｍの距離まで管１０１０の遠位端より上に上昇でき、ピン１０４０の遠位端が、実質的に管１０１０の遠位端と整列（例えば先端部１０２０の先端と整列）するように下降できるように選択され得る。アクチュエータ１１２０、１１３０の移動範囲はまた、例えば収集されるドナー組織が比較的厚い場合、これらの例示的な距離より大きくてもよい。代替として、これらの移動範囲は、微小移植片が、薄い層から収集され、必要に応じて薄いマトリクスに配置される場合、いくらか小さくてもよい。
【０１０１】
本開示の実施形態に従って、ドナー部位１００から微小移植片１２０を収集し、それをマトリクス２１０に配置するための例示的な順序を図１２Ａ〜１２Ｅに示す。最初の状態のように、ドナー部位の表面は、洗浄され、滅菌され、削られ、および／または他に準備され得、図１２Ａに示すように、マトリクス材料２１０の一部またはシートがその上に配置され得る。管１０１０およびピン１０４０の遠位端は、それぞれのアクチュエータ（図示せず）により整列され得、マトリクス２１０の上方表面に近接して配置され得る。管１０１０およびピン１０４０は、それらの遠位端が、マトリクス２１０の厚さを貫通または通過できるように移動され得、図１２Ｂに示すようにドナー部位１００の表面に近接して配置される。管１０１０およびピン１０４０は、それらがマトリクス２１０を通るとき、粘性があり、柔軟で、弾性などの少量のマトリクス材料を押しのけることができる。
【０１０２】
次いで管１０１０はドナー部位１００の組織内に貫通するように下方に移動され得るが、ピン１０４０の位置はドナー部位１００に対して実質的に固定して保持され得るので、その遠位端は、図１２Ｃに示すように、ドナー部位１００の表面の近位に配置されたままになる。管１０１０の遠位端は、管１０１０がドナー部位を貫通すると、ドナー部位において周囲組織から組織の一部を切断できるので、ドナー部位１００由来の組織の一部は、管１０１０の内腔の遠位端内に位置し得る。
【０１０３】
ドナー部位１００への管１０１０の貫通の深さは、図１１に示すように、管のアクチュエータ１１２０により制御され得る。管１０１０は、その遠位端がドナー部位組織内の特定の深さに位置されるように移動できる。例えば、ドナー部位が皮膚組織である場合、管１０１０の遠位端は、真皮層の下端に近接するように、例えば図１２Ｃに示すように、下層の脂肪組織内にわずかに貫通するように延ばされ得る。
【０１０４】
次いで図１２Ｄに示すように、管１０１０の遠位端が、ドナー部位１００の表面に近接するか、またはわずかにそれを上回るまで、管１０１０およびピン１０４０は、それらが、それらの相対位置を実質的に維持するように、同時に持ち上げられ得るか、または引き抜かれ得る。微小移植片１２０として使用され得る、管１０１０によってドナー部位１００から切断された組織の一部はまた、管１０１０の遠位端内に保持され得るので、管１０１０がドナー部位１００から引き抜かれると、管１０１０はドナー部位１００から持ち上げられるか、または取り除かれる。収集される組織が皮膚組織である場合、管１０１０が皮下脂肪層の少なくとも上面を最初に貫通する場合、ドナー部位からの微小移植片１２０の除去は、容易になされ得る。微小移植片１２０の下端は、真皮組織より隣接する脂肪組織からより容易に引き離され得るか、または引き剥がされ得る。
【０１０５】
図１２Ｄに示すように、ドナー部位１００から一緒に管１０１０およびピン１０４０を引き抜き、微小移植片１２０をマトリクス材料２１０の層内に配置できる。例えば、管１０１０およびピン１０４０は、管１０１０の遠位端がマトリクス材料２１０の下方表面に近接して、またはマトリクス材料２１０内に配置されるように、実質的に同時に持ち上げられ得る。次いで管１０１０は、図１２Ｅに示すように、マトリクス２１０に対して実質的に固定されたピン１０４０の位置を保持しながら、マトリクス２１０からさらに引込められてもよい。この例示的な手順は、管１０１０が微小移植片１２０周囲から引き抜かれると、ピン１０４０を用いて実質的にマトリクス２１０の材料内の微小移植片１２０の配置を容易にする。このように、微小移植片１２０は、マトリクス２１０内に配置され得、そこに保持され得るのに対して、管１０１０およびピン１０４０は、ドナー部位１００およびマトリクス２１０から完全に取り除かれる。
【０１０６】
図１１に示した例示的な装置および図１２Ａ〜１２Ｄに示し、本明細書に記載した組織を収集する順序は、移植または自己移植処置におけるそれらの使用を容易にするために、ドナー部位から微小移植片１２０を収集し、それらをマトリクス２１０に配置するためのいくつかの利点を与える。例えば、微小移植片１２０は、汚染、生物学的ストレスなどの機会を減少させるために、外気（または別の中間環境）に曝露されずにマトリクス１２０内に配置され得る。種々の貫通深さは、収集される微小移植片の所望の深さ、使用されるマトリクス材料２１０の厚さなどに基づいて選択または調節され得る。それらの小さなサイズおよび／または軟らかい組織の一貫性のために取り扱うことが困難であり得る、微小移植片１２０は、それらがドナー部位にあるときと実質的に同じ方向でマトリクス２１０に配置され得る。
【０１０７】
存在する場合、図１１に示した基板１０３０は、装置１１００がマトリクス材料２１０の層上に配置される場合、マトリクス２１０およびドナー部位１００の表面に機械的安定性を提供できる。存在する場合、基板１０３０をマトリクス２１０および／またはドナー部位１００に配置することにより、微小移植片１２０が収集されている間、マトリクス２１０およびドナー部位１００の組織の動きおよび／または変形を防止できる。
【０１０８】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、基板１３１０は、図１３Ｂに示すように、複数の片（ストリップ）または薄板（スラット）１３１５を含み得、それらの間に細長い開口を有する。図１３Ｂに示した黒いドットは、黒色のドナー部位から収集した微小移植片であり、この図に示したレシピエント部位に移植される。ドナーおよびレシピエント部位の両方は、自己移植を生じる、ブタの皮膚組織であった。基板１０３０は、組織１００を安定化させるために上記のようにドナー組織１００上に配置され得るのに対して、収集管５１０、１０１０は、薄板１３１５の間の組織１００内に挿入され得る。基板１３１０はまた、例えば、ドナー組織１００の領域から管５１０、１０１０の繰り返しの挿入および引き抜きのために、ドナー組織に対する管５１０、１０１０の配置を容易にするために使用され得る。基板１０３０はまた、楕円形、三角形、四角形、または他の形状、あるいはそれらの組み合わせを有する複数の開口などの開口の他の幾何学的形状および構成で提供されてもよい。
【０１０９】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、図１３に示すように、基板１０３０は、機械的安定性を提供し、ドナー部位１００の組織の動きを減少させるためにドナー部位１００の表面上に直接配置され得る。基板１０３０には、貫通する１つ以上の穴１３１０が設けられ得る。例えば、上記および図１２Ａ〜１２Ｅに示したように、１つ以上の管１０１０が、ドナー部位から微小移植片１２０を切断し、抽出するために穴１３１０を通過するように構成され得る。図１３Ａに示すように、マトリクス２１０は基板１０３０の上部に提供され得る。必要に応じて、包帯材料１３２０などが、マトリクス２１０をさらに安定化させ、および／またはマトリクス２１０の取り扱いを容易にするためにマトリクス２１０の上面に配置され得る。図１３Ａに示すように、基板１０３０がマトリクス２１０とドナー部位との間に提供される場合、図１２Ａ〜Ｅの順序で示した管１０１０およびピン１０３０の移動距離または高さは、微小移植片１２０がドナー部位１００から収集され、基板１０３０の上のマトリクス２１０に配置されるように適切に制御され得る。
【０１１０】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、図１４に示すように、２つの基板１４００、１４１０が、さらなる安定化を提供するために使用され得る。貫通する１つ以上の穴１４２０を有する下方の基板１４１０は、図１３Ａに示した基板１０３０と同様に、ドナー部位１００の表面に提供され得る。マトリクス２１０は下方の基板１４１０の上に提供され得る。上方の基板１４００は、マトリクス２１０または存在する場合、包帯材料１３２０の上に提供され得る。このような上方の基板１４００には、下方の基板１４１０に提供される穴１４２０に対応し得る、および／またはそれらと整列し得る、貫通する１つ以上の穴１４２５が設けられ得る。これらの整列された穴１４２０、１４２５は、ドナー部位１００およびマトリクス２１０の両方に機械的安定性を提供しながら、マトリクス２１０およびドナー部位組織１００内および外への管１０１０の移動を容易にし得る。下方の基板１４１０および上方の基板１４００におけるこのような整列された穴１４２０、１４２５はまた、管１０１０が穴１４２０、１４２５を通して垂直に移動される場合、さらなる機械的安定性および１つ以上の管１０１０の改良された配列を提供できる。
【０１１１】
本開示のなおさらなる例示的な実施形態において、図１４に示すように、１つまたは両方の基板の周囲に近接して、障壁１４３０、例えば側壁などが、下方の基板１４１０と上方の基板１４００との間に提供され得る。下方の基板１４１０、上方の基板１４００、および障壁１４３０は、マトリクス２１０周囲の囲いを一緒に形成し得る。この例示的な構成は、例えば、マトリクス２１０が粘性または容易に変形する材料から形成される場合、マトリクス２１０の封じ込めを容易にし得る。従って、図１４に示した本開示の例示的な実施形態は、機械的剛性または安定性がない可能性のマトリクス２１０内への微小移植片１２０の配置を容易にし得る。図１４に示した例示的な実施形態は、本明細書に記載される本開示の他の種々の実施形態と共に使用されてもよい。
【０１１２】
例示的な装置１１００は、ドナー部位１００から複数の微小移植片１２０を収集し、必要に応じてそれらをマトリクス２１０に配置するために使用され得る。例えば、基板１０３０には、貫通している複数の間隔を空けた穴が設けられる。図１１に示したプレート１１１０、または管１０１０およびピン１０４０を支持する装置１１００の別の部分は、基板１０３０上で移動するように構成または構造化され得るので、管１０１０およびピン１０４０は、基板１０３０内の複数の穴に配置され得る。このような移動は、例えば基板１０３０の特定の表面領域にわたって一次元（例えば直線的）または二次元であってもよい。この例示的な方法において、基板１０３０および例示的な装置１１００を、ドナー部位１００に対して単一の位置に維持しながら、複数の微小移植片１２０が、ドナー部位１００から収集され得、例えば基板１０３０内の複数の穴に近接するマトリクス２１０の複数の位置に配置され得る。
【０１１３】
本開示のさらに例示的な実施形態において、図１１に示した装置１１００には、複数の管１０１０およびピン１０４０が提供され得る。管１０１０の全ては、単一の第１のアクチュエータ１１２０を用いて一緒に移動可能であるか、または管１０１０の特定の１つは、複数の第１のアクチュエータ１１２０および適切な第１の接続アーム１１２５を用いて同時および／または連続して移動可能である。同様に、複数のピン１０４０は、単一の第２のアクチュエータ１１３０を用いて一緒に移動可能であるか、またはピン１０４０の特定の１つは、複数の第２のアクチュエータ１１３０および適切な第２の接続アーム１１３５を用いて同時および／または連続して移動可能である。通常、管１０１０の各々の移動は、その関連したピン１０４０（すなわち、特定の管１０１０の内腔に提供されたピン１０４０）と協動することが好適であり得る。この例示的な方法において、管１０１０と関連したピン１０４０の各々の組み合わせは、図１２Ａ〜１２Ｅに示した例示的な収集および移植の順序を実施するように制御され得る。
【０１１４】
本明細書に記載した１つ以上の微小移植片１２０を含むマトリクスは、適切に修復される損傷した組織のレシピエント部位の上に配置され得る移植材料として使用され得る。通常、この移植材料は、マトリクス２１０に提供される複数の微小移植片１２０を含む。マトリクス２１０内の微小移植片１２０の間隔は、微小移植片が、マトリクス１２０内およびマトリクス１２０内を介して成長するのを促進するように選択され得、最終的に、損傷した領域の十分な被覆および／または修復が提供される。微小移植片１２０は、均一のパター、ランダム、または任意の他の所望の空間的構成においてマトリクス２１０内に配置され得る。本開示の特定の例示的な実施形態において、移植される微小移植片１２０の密度または間隔は、マトリクス２１０の異なる領域において変化されてもよい。例えば、微小移植片１２０のより高い密度および／またはより狭い間隔は、移植片の末梢一体化および／または血管再建を向上させるためにマトリクス２１０の端部のより近くで提供され得る。滅菌包帯などが、移植材料が組織の損傷した領域に配置された後に、その移植材料の上に配置され得る。そのような包帯は、取扱いを容易にし、移植材料のレシピエント部位への配置を容易にするために移植材料に付着され得る。
【０１１５】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、収集された微小移植片１２０は、例えば実質的にレシピエント部位における組織全体に直接導入または移植され得る。例えば、微小移植片１２０は、メラニン細胞を含み得るドナー部位１００から収集され得、十分なメラニン細胞を欠くレシピエント部位における組織に直接挿入され得る。このような例示的な処置は、例えば白斑または類似の状態を治療するために、皮膚組織を再色素化するために使用され得る。レシピエント部位１００における組織はまた、本明細書に記載されるように、微小移植片１２０の挿入前に、凍結または部分的に凍結されてもよい。
【０１１６】
微小移植片１２０をレシピエント部位１５１０に移植するための例示的な装置１５００を図１５Ａ〜１５Ｅに示す。装置１５００は、図１０Ａに示した装置と同様に、中空の管１０１０の遠位端において複数の先端部１０２０を含み得る中空の管１０１０と、管１０１０の中心の空洞または開口に提供されるピン１０４０とを含み得る。例示的な装置１５００は、図１５に示すように、管１０１０の周囲に提供され得る中空の穴の開いた針１５２０をさらに含み得、管１０１０は、穴の開いた針１５２０内で進みおよび／または後退し得る。穴の開いた針１５２０は、生体組織に穴を開け、貫通するように構成された単一の先端部１５２５を含み得る。穴の開いた針１５２０は手動で制御されてもよいか、または例えば図１１に示した例示的な装置１１００におけるアクチュエータ１１２０、１１３０と同様のアクチュエータを用いて制御されてもよい。
【０１１７】
本開示の例示的な方法において、管１０１０およびピン１０４０は、例えば図１２Ａ〜Ｄに示した例示的な収集順序を用いて組織微小移植片１２０を収集するために使用され得る。管１０１０およびピン１０４０がドナー部位１００から完全に引き抜かれた場合、微小移植片１２０は管１０１０に保持され得る。管１０１０およびピン１０４０は、穴の開いた管１５２０内に位置し得るので、図１５Ａに示すように、管１０１０の遠位端は穴の開いた針１５２０内にある。
【０１１８】
次いで穴の開いた針１５２０は、レシピエント部位１５１０内に進入することができ、穴の開いた針１５２０の先端部１５２５は、図１５Ｂに示すように、レシピエント部位１５１０において組織の一部を分離する。微小移植片１２０と一緒に、管１０１０およびピン１０４０は、穴の開いた針１５２０と一緒に前方に進入し得るので、微小移植片１２０を含む管１０１０の遠位端は、図１５Ｂに示すように、レシピエント部位１５１０の表面の下または表面に近接して位置する。穴の開いた針１５２０は、レシピエント部位１５１０に対して実質的に固定して管１０１０を保持しながら、レシピエント部位から引き抜かれ得るので、微小移植片１２０を含む管１０１０の遠位端は、図１５Ｃに示すように、レシピエント部位１５１０の分離された組織内に位置する。
【０１１９】
次いで管１０１０は、レシピエント部位１５１０に対して実質的に固定してピン１０４０を保持しながら、レシピエント部位１５１０から引き抜かれ得るので、図１５Ｄに示すように、管１０１０が引き抜かれる場合、微小移植片１２０はレシピエント部位１５１０の分離された組織内に存在したままである。レシピエント部位１５１０から装置１５００を除去すると、図１５Ｅに示すように、微小移植片１２０は既知の方向においてレシピエント部位１５１０内に存在したままになり得る。
【０１２０】
このような直接注入は、例えば、脱色素化されたレシピエント部位２２０内に直接メラニンを含む微小移植片１２０を移植することによって白斑を処置するための組織の正常化のために使用され得る。例示的な微小移植片１２０はまた、図１５Ａ〜５Ｅに示す例示的な方法および装置を用いて、健康なドナー部位１００から収集され得、瘢痕における健康な組織の成長を促進するために瘢痕組織を含むレシピエント部位１５１０に直接配置され得る。本開示のさらなる例示的な実施形態において、組織部分は、これらの組織部分を取り除くことによってレシピエント部位１５１０に形成される穴に微小移植片１２０を配置する前にレシピエント部位１５１０から除去され得る。穴は、そこに挿入される微小移植片１２０のサイズとほぼ同じサイズであり得るか、またはそれよりわずかに大きなサイズであってもよい。穴は、例えば、アブレーションレーザなどを用いて組織を除去または切除することによって、例えば、本明細書に記載される１つ以上の管５１０を用いてレシピエント部位に形成され得る。
【０１２１】
図１５Ａ〜１５Ｄに示した例示的な方法および装置は、皮膚以外の種々の組織、例えば筋肉組織、臓器組織などの間または中の移植を含む、種々の処置のために使用され得る。異なる組織を含む「ハイブリッド」または異種移植片もまた、本明細書に記載される例示的な方法および装置を用いて生成され得る。例えば、第１の組織種を有するドナー部位由来の微小移植片１２０が、ドナー部位における第２の組織種に配置されてもよい。このような例示的な移植処置は、多くの異なる用途に使用され得る。例えば、内分泌器官由来の微小移植片１２０は、皮膚を含むドナー部位１５１０に配置され得る。例えば、膵臓組織の微小移植片は、インスリン分泌を提供するために皮膚組織に配置され得る。別の例として、平滑筋組織は消化管に導入され得る。他の機能的組織から得られた微小移植片１２０は、異なる特徴を有するドナー部位に配置され得る。
【０１２２】
本開示の特定の例示的な実施形態において、穴の開いた針１５２０は、先の尖った先端部１５２５を有さずに管５１０、１０１０の少なくとも一部の周囲に提供され得る。穴の開いた針１５２０の遠位端は、平らであってもよく、例えば、遠位端の外側は、必要に応じて、広くなってもよいか、またはフランジを付けられてもよい。このような穴の開いた針１５２０は、管５１０、１０１０のためのガイドおよび／または支持として機能し得、管がドナー組織部位内に挿入され、そこから引き抜かれる場合、管５１０、１０１０の曲がり、歪み、破損などを低減し得るか、または防ぎ得る。それはまた、組織における管１０１０および／またはピン１０４０（存在する場合）の挿入深さの制御を容易にできる。
【０１２３】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、例えば、管５１０、１０１０の近位端に接続される、本明細書に記載される管５１０、１０１０の内腔と連通する導管が提供され得る。このような導管は、図７に示した導管と同様に構成され得る。導管はまた、低および／または高圧源、例えば真空構成および／または加圧ガスもしくは液体源と連通して提供され得る。例えば、ピン１０４０の直径は、管１０１０の内腔の直径よりわずかに小さくサイズ決めされてもよい。このような構成は、ガスなどの流体が、ピン１０４０周囲の管１０１０の内腔を通過することを促進でき、さらに、管１０１０の内腔を通して圧力差を伝播できる。導管から管１０１０の内腔までの低圧の制御可能な適用は、周囲組織から微小移植片１２０の分離を容易にできる。同様に、導管から管１０１０の内腔への高圧の適用は、微小移植片の収集後、管１０１０から微小移植片の除去または排出を容易にできる。
【０１２４】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、例えば、流体の一部が管１０１０とピン１０４０との間に存在するように、流体は、図５Ａおよび５Ｂに示した管５１０または図１０Ａに示した管１０１０内に提供され得る。流体は、ピン１０４０と管１０１０との間の摩擦を減少させ得る。流体はまた、管１０１０が複数の組織微小移植片１２０を収集するために使用される場合、管１０１０の遠位端に近接する生体組織の集合または蓄積を減少または防止し得る。流体はまた、管１０１０内の微小移植片１２０の保持および／または例えば、図６Ａ〜６Ｃ、１２Ａ〜１２Ｅ、および／または１５Ａ〜１５Ｄに示した例示的な微小移植片操作順序の適切な工程の間、低圧もしくは高圧で流体を提供することによって、管から微小移植片１１０の放出を容易にできる。例えば、流体は、ドナー部位の組織１５１０における、または本明細書に記載されるマトリクス２１０における微小移植片１２０の配置の精度を向上させ得る。収集された微小移植片１２０を配置するこのような精度は、例えば、微小移植片１２０が収集後に成長し得る場合、嚢胞の形成または他の望ましくない結果を減少または防止し得る。
【０１２５】
このような流体は、例えば、図７に示した導管７２０と同様に、管１００の近位端と連通して提供され得る導管などを通して提供され得る。代替として、流体は、管１０１０の側部に形成される開口などを通して提供され得る。図１５に示した例示的な装置１５００に提供されるような穴の開いた針１５２０が使用される場合、流体はまた、もしくは代替的に、穴の開いた針１５２０と管１０１０との間に提供され得る。
【０１２６】
使用され得る例示的な流体は、生体適合性であり、生体組織などに対して不活性である。そのような流体は好ましくは、組織１００、１５１０と接触してもいかなる副作用も生じない。例えば、流体は、生理食塩水、グリセロールなどを含んでもよい。それは、緩衝化されてもよく、１つ以上の追加の成分、例えば、抗凝固剤、抗菌剤、凝固剤などを含んでもよい。１つ以上の成長因子もまた、微小移植片１２０をマトリクス１２０に移植する前またはレシピエント部位２２０に直接移植する前に、微小移植片１２０をこのような成長因子に曝露するためにこの流体に添加されてもよく、それにより、微小移植片１２０の生存能力を高めることができる。
【０１２７】
本明細書に記載される例示的な収集および／またはマトリクス移植処置の制御を改良するために、力センサ、光センサ、および／または位置センサが必要に応じて、アクチュエータ１１２０、１１３０および／または管５１０、１０１０および／またはピン１０４０と連通して提供されてもよい。例えば、このようなセンサは、微小移植片１２０の組織および／またはサイズの特定の層を収集および／または移植するのに役立つように、管１０１および／またはピン１０４０の貫通深さおよび／または貫通抵抗を検出するために使用され得る。
【０１２８】
管５１０、１０１０内の微小移植片の存在を検出するためのセンサもまた提供されてもよい。このようなセンサは、例えば、管５１０、１０１０内の電気抵抗または抵抗の変化を検出するように構成される管５１０、１０１０に提供される小電流源を含んでもよい。例えば、小電流が（例えば電極構成において）針５１０、１０１０に流れる場合、検出される抵抗は、針５１０、１０１０が空であるかどうか、または微小移植片１２０がそこに存在しているかどうかを示し得る。代替として、レーザファイバーおよび光検出器が、微小移植片１２０が存在するか否かを示す、散乱光の変化を光学的に検出するために針内に提供されてもよい。
【０１２９】
例えば、複数のこのような微小移植片がドナー部位１００および／またはレシピエント部位１５１０の２次元走査または横断で処理される場合、このような微小移植片センサは、管５１０、１０１０により収集および／または移植された実際の微小移植片の数または割合を決定するために使用され得る。比較的少数の「失った」微小移植片は特定の処置において許容可能であるのに対して、多数の割合の「失った」微小移植片は、例えば、針５１０、１０１０を取り替える必要があること、移植材料が生存していないか、もしくは受容されていないこと、および／または処置が反復もしくは継続されなければならないことを示し得る。検出された「失った」微小移植片がドナー部位１００に局在している場合、これは、組織が特定の領域において構造的に異なり得ること、例えばモルまたは小さな瘢痕がドナー部位１００に存在し得ることを示し得る。
【０１３０】
ブタの皮膚から収集され、コラーゲンゲルに配置された微小移植片の例示的な画像のセットを図１６に示す。微小移植片の表皮部分は、これらの画像において微小移植片の下端のより暗い領域である。１２時間という短い時間でさえ（図１６の左から２番目の画像）、暗い微小移植片周囲の明るい領域によって示されるように、微小移植片から周囲ゲルマトリクスに遊走している生細胞が観察され得る。この遊走は、微小移植片をコラーゲンゲルに配置してから７２時間継続して観察され（図１６の最も右側の画像）、本開示の例示的な実施形態に従って、収集され、マトリクスに配置された微小移植片が、長時間生存することができ、生存可能な移植材料を提供できることを示す。
【０１３１】
本開示のさらなる例示的な実施形態において、微小移植片１２０は、マトリクスを有さない清浄された創傷領域２２０に移植され得る。例えば、図１７は、ヌード（無毛）マウスにおいて生成された創傷の治癒を示す一連の例示的な画像を示し、ここで、ブラックマウスの皮膚から得られた微小移植片は創傷領域に移植され、次いで創傷は治癒され得る。約６週間後、創傷は、十分に治癒しているように見え、黒い髪の一部の房が観察できる。ヌードレシピエント部位におけるこれらの黒い髪の房は、微小移植片の少なくとも一部が治癒プロセスの間に生存し、機能的な毛包がヌードレシピエントに首尾よく移植されたことを示唆している。
【０１３２】
図１８Ａは、全層皮膚組織（表皮および皮下脂肪層の下方の真皮）の実質的に正方形の領域を手術により除去することによってブタ被験体に形成される例示的な創傷を示す。この創傷のサイズは約１．５ｃｍ×１．５ｃｍである。微小移植片は、本明細書に記載した例示的な実施形態に係る、図５Ａに示した装置５００と同様の装置を用いて、ブタ被験体のドナー部位から収集した。微小移植片は、１つのこのような創傷に（マトリクスを用いず）直接移植した。２番目の同様の創傷もまた、被験体において生成し、微小移植片を移植せずに治癒できた。
【０１３３】
図１８Ｂの上側の列は、微小移植片が移植されている図１８Ａに示した創傷についての４週間にわたる治癒発達を示す一連の例示的な画像を示す。図１８Ｂの下側の列は、微小移植片を有さない創傷についての４週間にわたる治癒発達の例示的な画像を示す。観察された創傷縮小の量は、創傷部位に移植された微小移植片を有する創傷において実質的に減少しているように見える。対照的に、微小移植片を有さない創傷は、治癒プロセスの間、より顕著に縮小していように見える。創傷治癒として皮膚組織の縮小は通常、望ましくない。例えば、関節周囲の皮膚の縮小は、関節の動作の範囲を低下させ得、また、関節が曲げられるかまたは伸ばされる場合、痛みを伴い得る。いくつかの場合において、関節は実質的にまたは完全に固定され得る（例えば、顎関節周囲の重度の組織縮小は、被験体の口の開口を阻み得、流動食を必要とし得る）。従って、本明細書に記載される微小移植片の創傷領域への移植は、創傷治癒の間、組織縮小を減少できるので、このような縮小の有害な副作用を減少または回避する。
【０１３４】
本明細書に記載される例示的な方法および装置はまた、本明細書に記載される例示的な方法および装置を用いて他の種類の生体組織を収集するために使用されてもよく、皮膚に限定される必要はない。本開示の実施形態は、ドナー部位における損傷の生成を減少または回避しながら、種々の器官または組織種類から小さな組織部分（例えば微小移植片１２０）の収集を促進できる。収集された組織部分は、種々の移植または培養処理に使用され得る生存組織を提供できる。
【０１３５】
上述は本開示の原理を単に例示しているだけである。記載された実施形態に対する種々の修飾および変更は、本明細書の教示を考慮して当業者に明らかであろう。本明細書に記載される種々の例示的な実施形態は互いに交換可能に使用されてもよい。従って、当業者は、本明細書に特に記載していないが、本開示の原理を具現化する、多くの技術を考案できるだろう。それ故それらは本開示の精神および範囲内である。本明細書に引用される全ての特許および刊行物はその全体が参照として本明細書に組み込まれる。
【図１Ａ】
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【図１Ｂ】
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【図１Ｃ】
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【図２Ａ】
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【図２Ｂ】
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【図３Ａ】
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【図３Ｂ】
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【図３Ｃ】
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【図４Ａ】
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【図４Ｂ】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
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【図６Ｂ】
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【図６Ｃ】
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【図７】
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【図８Ａ】
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【図８Ｂ】
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【図８Ｃ】
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【図８Ｄ】
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【図８Ｅ】
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【図８Ｆ】
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【図８Ｇ】
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【図８Ｈ】
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【図８Ｉ】
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【図８Ｊ】
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【図９】
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【図１０Ａ】
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【図１０Ｂ】
2020000909.tif 000031
【図１１】
2020000909.tif 000032
【図１２Ａ】
2020000909.tif 000033
【図１２Ｂ】
2020000909.tif 000034
【図１２Ｃ】
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【図１２Ｄ】
2020000909.tif 000036
【図１２Ｅ】
2020000909.tif 000037
【図１３Ａ】
2020000909.tif 000038
【図１３Ｂ】
2020000909.tif 000039
【図１４】
2020000909.tif 000040
【図１５Ａ】
2020000909.tif 000041
【図１５Ｂ】
2020000909.tif 000042
【図１５Ｃ】
2020000909.tif 000043
【図１５Ｄ】
2020000909.tif 000044
【図１５Ｅ】
2020000909.tif 000045
【図１６】
2020000909.tif 000046
【図１７】
2020000909.tif 000047
【図１８Ａ】
2020000909.tif 000048
【図１８Ｂ】
2020000909.tif 000049
【図１９Ａ】
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【図１９Ｂ】
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【手続補正書】
【提出日】令和1年9月5日(2019.9.5)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
生体組織から複数の微小移植片を得るためのシステムであって、
複数の管であって、各管は、管の遠位端に設けられる少なくとも２つの先端部を備える、複数の管と、
複数のピンであって、各ピンは、各管の対応する中心の内腔内に少なくとも部分的に設けられる、複数のピンと、
各管に対して各ピンを制御可能に位置決めするための、複数の第１のアクチュエータと、
ドナー部位に配置するための基板と、
前記基板に固定される複数の支持部と、
各管が前記基板に設けられる複数の穴のうちの対応する穴を通過するように、各管は、前記基板に摺動可能に取り付けられ、
前記基板に対して各管の位置を制御するように構成される位置決め構成と、
を備え、
各管の少なくとも１つの部分は、前記管の前記少なくとも１つの部分がドナー部位から引き抜かれるときに、ドナー部位から生体組織の部分を同時に除去するためにドナー部位で生体組織に挿入されるように構成され、
各ピンは、各管からの前記生体組織の前記部分の同時除去を容易にするために構成される、
システム。
【請求項２】
前記複数の第１のアクチュエータの各々は、前記複数の支持部のうちの１つに固定され、第１の接続アームを用いて前記複数の管のうちの１つに機械的に結合される、請求項１に記載のシステム。
【請求項３】
複数の第２のアクチュエータをさらに備え、各第２のアクチュエータは、前記複数の支持部のうちの１つに固定され、第２の接続アームを用いて前記複数のピンのうちの１つに機械的に結合される、請求項１に記載のシステム。
【請求項４】
前記複数の第１および第２のアクチュエータは、各支持部に対して前記第１および第２の接続アームを制御可能に位置決めするための制御装置をさらに備え、前記第１および第２の接続アームは、互いに独立して移動可能である、請求項３に記載のシステム。
【請求項５】
前記複数の第１および第２のアクチュエータは、２ｃｍ未満の移動範囲を含む、請求項３に記載のシステム。
【請求項６】
生体組織から複数の微小移植片を得るためのシステムであって、
管の遠位端に設けられる少なくとも２つの先端部を備える複数の管と、
各々、前記複数の管の各々の中心の内腔内に少なくとも部分的に設けられる複数のピンと、
複数のアクチュエータであって、前記アクチュエータの各々は、前記複数の管のうちの１つに対して前記複数のピンのうちの１つを制御可能に位置決めすることができる、複数のアクチュエータと、
を備え、
各管の少なくとも１つの部分は、前記管の前記少なくとも１つの部分がドナー部位から引き抜かれるときに、ドナー部位から生体組織の部分を同時に除去するためにドナー部位で生体組織に挿入されるように構成され、
各ピンは、各管からの前記生体組織の前記部分の同時除去を容易にするために構成される、
システム。