(57)【要約】      （修正有）【課題】検出領域に標識物質が滞留することを抑制できる検査キットを提供する。【解決手段】ケース１０１に検査ストリップ１が格納された検査キットであって、検査ストリップ１は、サンプルパッドＳＰと、コンジュゲートパッドＣＰと、検出領域を有したメンブランＭと、吸収パッドＡｂＰと、メンブランＭ及び吸収パッドＡｂＰの一部が積層された積層部３とを備え、ケース１０１は、基体１０３、検体滴下開口部１０５、判定開口部１０６、蓋体１０２とを備え、吸収パッドＡｂＰは、セルロース繊維で作製され、吸水量が０．３７ｇ／ｃｍ３より大きく、厚さが０．１７ｍｍ以上１．４０ｍｍ以下であり、下記の式（１）又は（２）のいずれかの条件を満たす。Ｔ＜Ｄ・・（１）０≦Ｐ≦１８．８（Ｐ＝１００×（Ｔ−Ｄ）/Ｔ）・・（２）（Ｄは、積層部格納空間の高さ、Ｔは、積層部３での検査ストリップ１の厚さ、Ｐは、積層部３での検査ストリップ１の変形率。）【選択図】図４
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
ケース内に検査ストリップが格納された検査キットであって、
前記検査ストリップは、
検体を含有した検体抽出液が付与されるサンプルパッドと、
前記サンプルパッドから展開された前記検体と特異的に反応して複合体を生成する標識物質が、湿潤状態で遊離可能に保持されたコンジュゲートパッドと、
毛細管現象によって展開された前記複合体と特異的に反応する捕捉物質が固定化されている検出領域を有したメンブランと、
前記メンブランから前記検体抽出液が展開される吸収パッドと、
前記メンブラン及び前記吸収パッドの一部が積層された積層部とを備え、
前記ケースは、
前記検査ストリップを載置する基体と、
前記サンプルパッドを外部に露出させる検体滴下開口部と、前記メンブランを外部に露出させる判定開口部とが形成され、前記基体と嵌合する蓋体とを備えており、
前記吸収パッドは、セルロース繊維で作製され、体積当たりの吸水量が０．３７ｇ／ｃｍ３より大きく、厚さが０．１７ｍｍ以上１．４０ｍｍ以下であり、
下記の式（１）又は下記の式（２）のいずれかの条件を満たす
検査キット。
Ｔ＜Ｄ                                              ・・・（１）
０≦Ｐ≦１８．８（Ｐ＝１００×（Ｔ−Ｄ）/Ｔ）       ・・・（２）
（前記Ｄは、前記ケース内の積層部格納空間の高さを示し、前記Ｔは、前記積層部での前記検査ストリップの厚さを示し、前記Ｐは、前記積層部での前記検査ストリップの変形率を示す。）
【請求項２】
前記検査ストリップは、前記サンプルパッド、前記コンジュゲートパッド、前記メンブラン及び前記吸収パッドを支持するバッキングシートを備える
請求項１に記載の検査キット。
【請求項３】
前記積層部の上面と、前記積層部の上面と向かい合う前記蓋体の内面の下端との間に空間が形成されている
請求項１又は２に記載の検査キット。
【請求項４】
前記基体は、前記検査ストリップを載置する台座を備え、
前記ケース内の前記積層部格納空間の高さが、前記積層部と向かい合う前記蓋体の内面の下端と前記台座の上端との間の距離である
請求項１又は２に記載の検査キット。
【請求項５】
前記コンジュゲートパッドがガラス繊維で作製されている
請求項１〜４のいずれか１項に記載の検査キット。
【請求項６】
前記サンプルパッドがガラス繊維で作製されている
請求項１〜５のいずれか１項に記載の検査キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、検査キットに関する。
【背景技術】
【０００２】
インフルエンザウイルスなどの感染症検査や妊娠検査において、簡易診断薬(POCT：Point Of Care Testing)が広く用いられている。ＰＯＣＴとしては、例えば、イムノクロマトグラフィーなどの免疫測定法の原理を用いた検査キットが知られている。イムノクロマトグラフィーは、検体を抽出した検体抽出液が毛細管現象によりメンブラン上を移動する際、検体抽出液中の検体としての抗原及び標識物質としての着色粒子を結合させた標識抗体により複合体が形成され、メンブランに塗布された捕捉物質としての捕捉抗体により複合体が捕捉されて、その複合体の集積を目視で確認する測定方法である。
【０００３】
このようなイムノクロマトグラフィーを利用した検査キットには、標識抗体が湿潤状態で遊離可能に保持されているとともに、抗原捕捉抗体及び標識捕捉抗体が固定化されたイムノクロマト法用の検査ストリップと、検査ストリップに検体抽出液を滴下するための開口部や検査ストリップ上の免疫複合体の集積を確認できる開口部を有するケースが含まれている。
【０００４】
検査ストリップは、例えば図１０Ａに示す検査ストリップ１１０のように、帯状で軟質なバッキングシート１１上に、展開方向ｘに沿ってサンプルパッドＳＰと、コンジュゲートパッドＣＰと、メンブランＭと、吸収パッド１１１とが順に配置されている。検査ストリップ１１０は、サンプルパッドＳＰに検体抽出液が滴下されると、当該検体抽出液が毛細管現象によってコンジュゲートパッドＣＰ、メンブランＭ及び吸収パッド１１１の順に展開される。
【０００５】
コンジュゲートパッドＣＰは、例えば、所定抗原と特異的に反応し、着色粒子が結合された標識抗体Ａ１と、当該抗原とは異なる種類の抗原と特異的に反応し、標識抗体Ａ１とは異なる色の着色粒子が結合された標識抗体Ｂ１とを、湿潤状態で遊離可能に保持している。メンブランＭには、コンジュゲートパッドＣＰから吸収パッド１１１に向けて、第１テストラインＴＬ１、第２テストラインＴＬ２及びコントロールラインＣＬが順に配置された検出領域が設けられている。検査ストリップ１１０では、コンジュゲートパッドＣＰを通過した検体抽出液が、毛細管現象によって第１テストラインＴＬ１、第２テストラインＴＬ２及びコントロールラインＣＬの順に通過できる。
【０００６】
第１テストラインＴＬ１には、標識抗体Ａ１と同種の抗原に反応するが標識抗体Ａ１とはエピトープが異なる抗原捕捉抗体Ａ２が固定化されている。第２テストラインＴＬ２には、標識抗体Ｂ１と同種の抗原に反応するが標識抗体Ｂ１とはエピトープが異なる抗原捕捉抗体Ｂ２が固定化されている。コントロールラインＣＬには、標識抗体Ａ１、Ｂ１と特異的に反応する標識捕捉抗体rが固定化されている。
【０００７】
検査キットを用いた検査では、まず、検査ストリップ１１０をケースに入れ、平らな面に水平に設置する。その後、ケースの開口部から、検体を抽出した検体抽出液を検査ストリップ１１０のサンプルパッドＳＰに滴下してサンプルパッドＳＰに検体抽出液を吸収させる。その後、検体抽出液がサンプルパッドＳＰに隣接するコンジュゲートパッドＣＰへ展開される。この際、図１０Ａとの対応部分に同一符号を付して示す図１０Ｂのように、抗原Ｇ（標識抗体Ａ１と特異的に反応する）が検体抽出液内に含まれていると、検体抽出液と共に抗原ＧもコンジュゲートパッドＣＰへ展開される。
【０００８】
コンジュゲートパッドＣＰでは、サンプルパッドＳＰから流入した検体抽出液が毛細管現象により展開され、保持していた標識抗体Ａ１及び標識抗体Ｂ１が検体抽出液中に遊離される。その結果、検体抽出液中で標識抗体Ａ１と抗原Ｇとが特異的に反応し、複合体Ｃが検体抽出液中に生成される。検体抽出液中の標識抗体Ｂ１は抗原Ｇとは反応しない。そのため、検体抽出液と共に、標識抗体Ｂ１と複合体ＣがメンブランＭへ展開される。
【０００９】
メンブランＭでは、コンジュゲートパッドＣＰから流入した検体抽出液が毛細管現象により展開され、検出領域に到達する。検出領域の第１テストラインＴＬ１では、抗原捕捉抗体Ａ２と、複合体Ｃの抗原Ｇとが特異的に反応し、複合体Ｃが抗原捕捉抗体Ａ２に捕捉され、複合体Ｃが第１テストラインＴＬ１に集積する。第１テストラインＴＬ１では、複合体Ｃの標識抗体Ａ１の着色粒子によって、当該着色粒子と同色のラインが発現する。一方、第２テストラインＴＬ２では、抗原Ｇと特異的な反応が生じない抗原捕捉抗体Ｂ２が固定化されているので、複合体Ｃは捕捉されず、ラインは発現しない。このように、検査キットの使用者は、複合体Ｃの集積を目視で確認でき、ラインの発現の有無から抗原Ｇが検体抽出液内に含まれているか否か判断できる（例えば、非特許文献参照）。
【００１０】
また、コントロールラインＣＬでは、標識抗体Ａ１、Ｂ１と特異的に反応する標識捕捉抗体rが固定化されているので、複合体Ｃの標識抗体Ａ１と、標識抗体Ｂ１とが捕捉され、コントロールラインＣＬに集積し、標識抗体Ａ１の着色粒子の色と標識抗体Ｂ１の着色粒子の色とを混合した色のラインが発現する。使用者は、コントロールラインＣＬでのラインの発現の有無から、検査が適切に行われたか判断できる。検出領域を通過した検体抽出液は、吸収パッド１１１に到達し、吸収パッド１１１に吸収される。
【００１１】
このようなイムノクロマトグラフィーを利用した検査では、検体抽出液を滴下してからラインが発現するまでにある程度時間を要するため、所定の時間範囲内にラインの確認をすべきという判定時間が定められている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１２】
【非特許文献１】株式会社ニチレイバイオサイエンス「体外診断用医薬品  インフルエンザウイルスキット  イムノファインTM  FLU」、[online]、平成30年6月7日検索、インターネット（URL:http://www.nichirei.co.jp/bio/products/pdf2/522061_2.pdf）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１３】
しかしながら、検査キットの使用者が多忙であったり、判定時間を厳密に測定していないなどの理由により、判定時間内に判定をすることができず、規定された判定時間後に、ラインの有無を判定してしまう場合もある。判定時間を超えて検査ストリップを放置しておくと、検出領域が乾燥し、吸収パッドが一旦吸収した検体抽出液が検出領域に逆流したり、コンジュゲートパッドに残っていた検体抽出液の二次リリースが生じたりし、検体抽出液中の標識物質が検出領域に滞留する。検出領域に標識物質が滞留すると、検出領域の視認性が低下したり、検出領域に滞留した標識物質がライン状に見えたり、非特異反応が出現したりするなど誤った判定につながる問題がある。そのため、検出領域への標識物質の滞留を抑制することが望まれている。
【００１４】
そこで、本発明は以上の点を考慮してなされたもので、検出領域に標識物質が滞留することを抑制できる検査キットを提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【００１５】
本発明の検査キットは、ケース内に検査ストリップが格納された検査キットであって、前記検査ストリップは、検体を含有した検体抽出液が付与されるサンプルパッドと、前記サンプルパッドから展開された前記検体と特異的に反応して複合体を生成する標識物質が、湿潤状態で遊離可能に保持されたコンジュゲートパッドと、毛細管現象によって展開された前記複合体と特異的に反応する捕捉物質が固定化されている検出領域を有したメンブランと、前記メンブランから前記検体抽出液が展開される吸収パッドと、前記メンブラン及び前記吸収パッドの一部が積層された積層部とを備え、前記ケースは、前記検査ストリップを載置する基体と、前記サンプルパッドを外部に露出させる検体滴下開口部と、前記メンブランを外部に露出させる判定開口部とが形成され、前記基体と嵌合する蓋体とを備えており、前記吸収パッドは、セルロース繊維で作製され、体積当たりの吸水量が０．３７ｇ／ｃｍ３より大きく、厚さが０．１７ｍｍ以上１．４０ｍｍ以下であり、下記の式（１）又は下記の式（２）のいずれかの条件を満たす。
Ｔ＜Ｄ                                              ・・・（１）
０≦Ｐ≦１８．８（Ｐ＝１００×（Ｔ−Ｄ）/Ｔ）       ・・・（２）
（前記Ｄは、前記ケース内の積層部格納空間の高さを示し、前記Ｔは、前記積層部での前記検査ストリップの厚さを示し、前記Ｐは、前記積層部での前記検査ストリップの変形率を示す。）
【発明の効果】
【００１６】
本発明の検査キットは、吸収パッドからの検体抽出液の逆流を抑制できるので、検出領域における標識物質の滞留を抑制できる。よって、検出領域の視認性が低下したり、検出領域で滞留した標識物質がライン状に見えたり、非特異反応が出現したりするなど誤った判定につながる問題が防止される。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】本発明の実施形態の検査キットの斜視図である。
【図２】図２Ａは、ケースの蓋体の内面の構成を示す図であり、図２Ｂは、ケースの基体の上面の構成を示す図である。
【図３】図３Ａは、ケースの基体に検査ストリップが配置された状態を示す図であり、図３Ｂは、検査ストリップの断面を示す図である。
【図４】図４Ａは、検査ストリップが格納された状態のケースの断面図であり、図４Ｂは、検査ストリップが格納されていない状態のケースの断面図である。
【図５】比較例の吸収パッドを説明する図である。
【図６】厚手の吸収パッドの検体抽出液の吸水状態を説明する図である。
【図７】薄手の吸収パッドの検体抽出液の吸水状態を説明する図である。
【図８】吸収パッドの積層部の上面に力がかかったときの状況を説明する図である。
【図９】吸収パッドの積層部の上面に力がかかっていないときの状況を説明する図である。
【図１０】図１０Ａは、従来の検査キットに用いている検査ストリップの構成を示す概略図であり、図１０Ｂは、抗原を含んだ検体抽出液が検査ストリップを展開するときの様子を示す概略図である。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
（１）本発明の実施形態の検査キットの構成
（１−１）全体構成
実施形態の検査キットは、従来の検査キットと同様に、検査ストリップと、検査時に検査ストリップを格納するケースとで構成されている。図１は、検査ストリップがケース１０１に格納された状態の本実施形態の検査キット１００の斜視図である。図１に示すように、検査キット１００のケース１０１は、蓋体１０２と基体１０３とでなり、蓋体１０２と基体１０３とが嵌合することで内部に検査ストリップを格納する。なお、本実施形態では、ケース１０１の長手方向をｘ方向とし、ケース１０１の短手方向をｙ方向とし、ケース１０１の基体１０３の底面１０３ａ（図２Ｂ参照）に対して鉛直方向をｚ方向としている。
【００１９】
蓋体１０２は、蓋体１０２の上面に、周縁部が上面から窪んだ構成の検体滴下開口部１０５と、周縁部が蓋体１０２の上面から窪んだ構成の判定開口部１０６とが形成されている。検査キット１００では、検体滴下開口部１０５の下部に、後述する検査ストリップのサンプルパッドが配置され、判定開口部１０６の下部に、後述する検査ストリップのメンブランに設けられた検出領域が配置されるようになされている。そのため、検査キット１００では、検査ストリップをケース１０１に格納した状態で、検査対象者から採取した検体を抽出した検体抽出液を、検体滴下開口部１０５から外部に露出したサンプルパッドに滴下して検査を行い、判定開口部１０６から検出領域に現れた検査結果を目視で確認することができる。
【００２０】
図２Ａ、図２Ｂに示すように、蓋体１０２の内面１０２ａには、複数の嵌め込み部１１６が形成され、基体１０３の底面１０３ａには、複数の突起部１１７が嵌め込み部１１６と対応する位置に形成されている。複数の突起部１１７が対応する嵌め込み部１１６にそれぞれ嵌め込まれて、蓋体１０２と基体１０３とが嵌合し、一体となってケース１０１となる。蓋体１０２は、判定開口部１０６の周縁部１０６ａが上面側では窪んだ構成であるので、内面側では、判定開口部１０６の周縁部１０６ａが内面１０２ａから突出している。検体滴下開口部１０５の周縁部１０５ａも同様に突出している。さらに、蓋体１０２の内面１０２ａには、判定開口部１０６の周縁部１０６ａと隣接して２つの凸部１０７が設けられている。凸部１０７は、周縁部１０６ａより低く形成されている。
【００２１】
基体１０３は、底面１０３ａに、長手方向の検査ストリップの載置位置を決める複数の位置決め部１１４と、短手方向の検査ストリップの載置位置を決める複数の位置決め部１１５とを備えている。位置決め部１１４、１１５は、底面１０３ａから突出した板状の部材であり、検査ストリップの長手方向及び短手方向への移動を制限することで、基体１０３の検査ストリップの載置位置を決める。基体１０３は、底面１０３ａに、楕円柱形状の台座１０９と、台座１０９より低く、直方体形状をした３つの台座１１３とを備えている。台座１０９、１１３は、位置決め部１１４、１１５内の領域に設けられており、台座１０９、１１３上に検査ストリップが載置される。
【００２２】
続いて図３Ａ、図３Ｂを参照して、本実施形態の検査ストリップ１について説明する。図３Ａに示すように、検査ストリップ１は、バッキングシート１１（図３Ａには不図示）上に、サンプルパッドＳＰと、コンジュゲートパッドＣＰと、メンブランＭと、吸収パッドＡｂＰとが順に配置されており、サンプルパッドＳＰに滴下され、吸収された検体抽出液が、毛細管現象によりｘ方向に沿ってコンジュゲートパッドＣＰ、メンブランＭ及び吸収パッドＡｂＰの順に展開できるようになされている。また、検査ストリップ１は、基体１０３内に形成された位置決め部１１４、１１５に囲まれた領域に載置されることにより、基体１０３に対して固定され、サンプルパッドＳＰ、コンジュゲートパッドＣＰ、メンブランＭ、及び吸収パッドＡｂＰが基体１０３内の所定位置に位置決めされる。このとき、検査ストリップ１のサンプルパッドＳＰ側が台座１０９（図３Ａには図示せず）上に載置される。なお、本実施形態では、検査ストリップ１のサンプルパッドＳＰ側を上流側ともいい、吸収パッドＡｂＰ側を下流側ともいう。
【００２３】
サンプルパッドＳＰは、検体としての抗原を含有した検体抽出液が付与される。サンプルパッドＳＰは、例えばガラス繊維で作製された濾紙であり、滴下された検体抽出液を吸収し、毛細管現象により検体抽出液を展開できる。本実施形態では、コンジュゲートパッドＣＰの端部上にサンプルパッドＳＰの端部が積層され、コンジュゲートパッドＣＰの膜厚分だけサンプルパッドＳＰが盛り上がっている。
【００２４】
コンジュゲートパッドＣＰは、例えばガラス繊維で作製された濾紙であり、毛細管現象により検体抽出液を展開できる。コンジュゲートパッドＣＰは、サンプルパッドＳＰから展開された所定抗原と特異的に反応し、着色粒子が結合された標識抗体（図３Ａ、図３Ｂには不図示）を、少なくとも１種類以上、湿潤状態で遊離可能に保持している。標識物質としての標識抗体は、検査対象によって変わる。本実施形態では、サンプルパッドＳＰと反対側のコンジュゲートパッドＣＰの端部が、隣接するメンブランＭの端部に積層され、メンブランＭの膜厚分だけコンジュゲートパッドＣＰが盛り上がっている。
【００２５】
コンジュゲートパッドＣＰでは、サンプルパッドＳＰから、サンプルパッドＳＰとコンジュゲートパッドＣＰの積層部を介して検体抽出液が展開されると、検体抽出液が毛細管現象によりコンジュゲートパッドＣＰに展開されると共に、保持されている標識抗体が、検体抽出液中に遊離し、検体抽出液中の抗原と特異的に反応する。その結果、抗原と標識抗体の複合体が生成される。
【００２６】
なお、本実施形態では、サンプルパッドＳＰ及びコンジュゲートパッドＣＰは、ガラス繊維で作製されている。ガラス繊維製のサンプルパッドＳＰ及びコンジュゲートパッドＣＰは、保持できる水分量が比較的少ないため、保持できる水分量の多いセルロース繊維製のサンプルパッドＳＰやコンジュゲートパッドＣＰを用いる場合よりも、検体の滴下液量が少なくて済む。そのため、ガラス繊維製のサンプルパッドＳＰやコンジュゲートパッドＣＰは、検体由来成分を原因とする目詰まりを起こしにくく、検体抽出液の展開がスムーズであるので好ましい。このように、サンプルパッドＳＰやコンジュゲートパッドＣＰは、ガラス繊維製であることが好ましいが、セルロース繊維や、パルプ繊維、綿など他の素材を用いて作製されていてもよい。また、本実施形態では、サンプルパッドＳＰ及びコンジュゲートパッドＣＰに不織布を用いたが、毛細管現象が生じる素材であれば特に限定されず、織布や濾紙、他の紙素材であってもよい。
【００２７】
メンブランＭは、例えばニトロセルロースで作製されたメンブランであり、毛細管現象により検体抽出液を展開できる。メンブランＭは、コンジュゲートパッドＣＰから吸収パッドＡｂＰに向けて、第１テストラインＴＬ１、第２テストラインＴＬ２及びコントロールラインＣＬが順に配置された検出領域が設けられている。第１テストラインＴＬ１は、所定抗原と特異的に反応する抗原捕捉抗体が捕捉物質として固定化されており、検体抽出液と共に毛細管現象によって展開された当該抗原を含む複合体を捕捉する。同様に、第２テストラインＴＬ２は、第１テストラインＴＬ１の抗原とは異なる所定抗原と特異的に反応する抗原捕捉抗体が捕捉物質として固定化されており、検体抽出液と共に毛細管現象によって展開された当該抗原を含む複合体を捕捉する。コントロールラインＣＬは、複数種類の標識抗体と特異的に反応する標識捕捉抗体が固定化されており、検体抽出液中の標識抗体及び複合体の標識抗体を捕捉する。
【００２８】
本実施形態では、メンブランＭは、吸収パッドＡｂＰ側の端部において、隣接する吸収パッドＡｂＰの端部が積層されて、メンブランＭ及び吸収パッドＡｂＰの一部が積層された積層部３が形成されている。積層部３では、メンブランＭの膜厚分だけ吸収パッドＡｂＰが盛り上がっており、検査ストリップ１が厚くなっている。このようなメンブランＭでは、コンジュゲートパッドＣＰから、コンジュゲートパッドＣＰとメンブランＭの積層部を介して検体抽出液が展開されると、検体抽出液が、毛細管現象によりメンブランＭに展開され、検出領域を通過して積層部３に到達する。このとき、検出領域では、検体抽出液中の複合体が第１テストラインＴＬ１及び第２テストラインＴＬ２のいずれかに捕捉され、複合体の標識抗体に結合した着色粒子と同じ色のラインが複合体を捕捉したテストラインに発現する。また、検体抽出液中の標識抗体及び複合体の標識抗体がコントロールラインＣＬに捕捉され、２種類の標識抗体にそれぞれ結合した着色粒子の色を混合した色のラインがコントロールラインＣＬに発現する。
【００２９】
吸収パッドＡｂＰは、積層部３を介してメンブランＭから検体抽出液が展開される。吸収パッドＡｂＰは、毛細管現象によってメンブランＭの検体抽出液を吸収でき、メンブランＭから余分な検体抽出液が除去される。本実施形態の吸収パッドＡｂＰは、セルロース繊維で作製され、体積当たりの吸水量が０．３７ｇ／ｃｍ３より大きく、厚さが０．１７ｍｍ以上１．４０ｍｍ以下であり、かつ、ケース１０１との関係で、下記の式（１）又は下記の式（２）のいずれかの条件を満たす。
Ｔ＜Ｄ                                              ・・・（１）
０≦Ｐ≦１８．８（Ｐ＝１００×（Ｔ−Ｄ）/Ｔ）       ・・・（２）
ここで、Ｐは上記括弧内の式で定義される積層部３での検査ストリップ１の変形率であり、Ｄはケース１０１内の積層部格納空間の高さであり、Ｔは積層部３での検査ストリップ１の厚さである。なお、Ｔは、ケース１０１に格納する前の検査ストリップ１の厚さである。
【００３０】
このように構成することで、検査ストリップ１では、吸収パッドＡｂＰが力を受けて収縮することにより生じる吸収パッドＡｂＰからメンブランＭへの検体抽出液の逆流と、メンブランＭの検出領域が乾燥することで生じる吸収パッドＡｂＰからメンブランＭへの検体抽出液の逆流とを抑制でき、メンブランＭの検出領域に標識抗体が滞留することを抑制できる。このとき検査ストリップ１では、検出領域の乾燥が抑制されているので、コンジュゲートパッドＣＰからの検体抽出液の二次リリースも抑制され、より検出領域での標識抗体の滞留が抑制される。よって、検査キット１００では、検出領域の視認性が低下したり、検出領域で滞留した標識抗体がライン状に見えたり、非特異反応が出現したりすることを減らし、誤判定を抑制できる。
【００３１】
以下で、本実施形態の吸収パッドＡｂＰの構成について、詳しく説明する。まず、積層部３での検査ストリップ１の厚さＴ及び積層部格納空間の高さＤについて、より詳細に説明する。積層部３での検査ストリップ１の厚さＴは、積層部３の厚さであり、バッキングシート１１とメンブランＭと吸収パッドＡｂＰとの３層の合計厚さである。検査ストリップ１の厚さＴは、例えばノギスなどを用いて、基体１０３と蓋体１０２とを嵌合して検査ストリップ１をケース１０１に格納する前に、積層部３の厚さを測定することで求められる。積層部格納空間の高さＤの「積層部格納空間」という語句は、積層部３が格納されるケース１０１内の空間を指す。図４Ａに示すように、検査ストリップ１は、吸収パッドＡｂＰなどが設けられた側を蓋体１０２に向けて、ケース１０１に格納される。このように検査ストリップ１がケース１０１に格納されたときに、積層部３が格納されるケース１０１内の領域が積層部格納空間である。本実施形態では、積層部３は、判定開口部１０６の下流側端部よりも下流側に格納されており、凸部１０７の下部に位置している。積層部３の下部には、積層部３の最近傍の台座１１３によってバッキングシート１１と基体１０３の底面１０３ａとの間に空間が形成されている。
【００３２】
このような積層部格納空間を、検査ストリップ１が格納されていない状態のケース１０１の断面を示す図４Ｂに表すと、図４Ｂ中の点線で囲まれた領域１２０が積層部格納空間である。積層部格納空間の高さＤは、この積層部格納空間の上端と下端との間の距離である。ここで、図４Ｂに示すように、本実施形態では、ケース１０１の蓋体１０２に凸部１０７が形成されているため、凸部１０７の下端より蓋体１０２の内面１０２ａ側には積層部３を格納することができない。そのため、積層部格納空間の上端の位置は、積層部３の上面と向かい合う蓋体１０２の内面１０２ａの下端、すなわち、凸部１０７の下端となる。
【００３３】
一方で、積層部格納空間（領域１２０）の下部には、空間が存在する。この空間は、ケース１０１に検査ストリップ１が格納された際に、検査ストリップ１が台座１１３上に載置され、台座１１３によって底面１０３ａから持ち上げられたことで、積層部３のバッキングシート１１下部に形成された空間（図４Ａ参照）である。通常、積層部３がこの領域に格納されることはないので、積層部格納空間の下端は、台座１１３によって積層部３のバッキングシート１１下部に形成される空間の上端となる。積層部３の領域では、検査ストリップ１の撓みや剛性により、検査ストリップ１が、台座１１３の上端とほぼ同じ高さにあるとみなすことができるので、本実施形態では、積層部格納空間の下端は、台座１１３の上端としている。
【００３４】
積層部格納空間の高さＤは、積層部格納空間の上端と下端との間の距離であるので、凸部１０７の下端（積層部３の上面と向かい合う蓋体１０２の内面１０２ａの下端）と台座１１３の上端との間の距離、すなわち、凸部１０７の下端と台座１１３の上端との間の基体１０３の底面１０３ａに対する鉛直方向の距離である。例えば、積層部格納空間の高さＤは、凸部１０７の下端と、当該下端直下の基体１０３の底面１０３ａとの間の距離と、台座１１３の底面１０３ａからの高さとを測定し、凸部１０７の下端と基体１０３の底面１０３ａとの間の距離から台座１１３の高さを減ずることで算出できる。
【００３５】
なお、例えば、蓋体１０２が積層部３の上面と向かい合う位置に凸部１０７を備えていない場合は、蓋体１０２の内面１０２ａが積層部格納空間の上端となる。例えば、ケース１０１に格納されたとき積層部３が判定開口部１０６の領域にかかっている場合は、判定開口部１０６の周縁部１０６ａの下端が積層部格納空間の上端となる。また、基体１０３に台座１１３が設けられておらず、積層部３が基体１０３の底面１０３ａに載置されているような場合は、底面１０３ａが積層部格納空間の下端となる。
【００３６】
続いて、式（１）（２）について説明する。式（１）の条件は、Ｔ＜Ｄであり、積層部格納空間の高さＤより積層部３での検査ストリップ１の厚さが小さいことである。これは、ケース１０１に検査ストリップ１を格納した際に、積層部３の上面が蓋体１０２の内面１０２ａの下端（本実施形態の場合、凸部１０７の下端）に接しておらず、積層部３の上面と、積層部３の上面と向かい合う蓋体１０２の内面１０２ａの下端との間に空間が形成されていることを意味している。
【００３７】
式（２）の条件は、０≦Ｐ≦１８．８であり、変形率Ｐの範囲を定めている。変形率Ｐは、積層部３での検査ストリップ１の厚さＴと積層部格納空間の高さＤの差分を厚さＴで割って規格化したものを百分率で表したものである（Ｐ＝１００×（Ｔ−Ｄ）/Ｔ）。積層部３での検査ストリップ１の厚さＴが積層部格納空間の高さＤより大きい場合、ケース１０１内で積層部３が収縮しないと格納できないので、積層部３の上面が蓋体１０２の内面１０２ａの下端（本実施形態の場合、凸部１０７の下端）に押され、積層部３が当該下端によって力を受けて積層部３が収縮していると考えられる。そして、積層部３での検査ストリップ１の厚さＴと積層部格納空間の高さＤの差分が大きいほど、収縮量が多くならないと積層部格納空間に格納できないので、積層部３の収縮度合いも大きくなり、積層部３が受ける力も大きくなると解される。このように、変形率Ｐは、ケース１０１内で積層部３がどの程度収縮するかを表す指標であり、積層部３が受ける力を表す指標として用いることができる。
【００３８】
なお、変形率Ｐが０のときは、積層部３が収縮していない、すなわち、積層部３が、積層部３の上面と向かい合う蓋体１０２の内面１０２ａの下端と接しているが、当該下端から力は受けていないことを表す。よって、式（２）の条件は、積層部３が蓋体１０２の内面１０２ａの下端から所定の大きさ以下の力を受けているか又は積層部３が当該下端に接しているが力は受けていない場合である。なお、Ｔ＜Ｄの場合は、式（１）を満たすこととなるので、変形率Ｐの下限を０としている。上記の式（１）の条件を満たす場合は、積層部３の上面と、積層部３の上面と向かい合う蓋体１０２の内面１０２ａの下端との間に空間が形成されているので、積層部３が、蓋体１０２の内面１０２ａの下端から力を受けていない。
【００３９】
次に、体積当たりの吸水量について説明する。本実施形態の単位体積当たりの吸水量は、下記の方法により測定された値である。まず、吸水量を測定したい吸収パッドＡｂＰと同じ材質、厚さで、長さ９ｃｍ、幅０．４０ｃｍに裁断した吸水量の測定用吸収パッドを用意する。例えば、吸収パッドＡｂＰは面積の大きな吸収パッドから切り出して作製されているので、当該切り出し元の吸収パッドから上記のサイズに裁断することにより、測定用吸収パッドを用意する。
【００４０】
続いて、用意した測定用吸収パッドを電子天秤（PG403-S、メトラー・トレド社製）に乗せ、吸水前の測定用吸収パッドの重さＷ０［ｇ］を測定する。そして、５０ｍＬの純水を高さ５ｍｍ程度に張ったトレイに、裁断した測定用吸収パッドを、長手方向に、トレイに対して鉛直になるように差し込み、純水を測定用吸収パッドに浸潤させる。その後、高さ４．０ｃｍに純水が吸いあがるまで、測定用吸収パッドを静置する。高さ４．０ｃｍまで純水が吸いあがったら、純水から測定用吸収パッドを取出し、吸水後の測定用吸収パッドの重さＷ１［ｇ］を、上記の電子天秤で測定する。吸水後の測定用吸収パッドの重さＷ１から吸水前の測定用吸収パッドの重さＷ０を減じることで、吸水量ΔＷ［ｇ］を算出する。吸水前の測定用吸収パッドの厚さをＴａ［ｍｍ］とすると、以下の式（３）により、体積当たりの吸水量Ａ［ｇ／ｃｍ３］を算出できる。
2020003319.tif 000003
【００４１】
（１−２）作用及び効果
以上の構成において、検査キット１００は、検査ストリップ１の吸収パッドＡｂＰが、セルロース繊維で作製され、体積当たりの吸水量が０．３７ｇ／ｃｍ３より大きく、厚さが０．１７ｍｍ以上１．４０ｍｍ以下であり、式Ｔ＜Ｄ又は式０≦Ｐ≦１８．８（Ｐ＝１００×（Ｔ−Ｄ）/Ｔ）のいずれかの条件を満たすように構成した（Ｄは、ケース１０１内の積層部格納空間の高さを示し、Ｔは、積層部３での検査ストリップ１の厚さを示し、Ｐは、積層部３での検査ストリップ１の変形率を示す。）。
【００４２】
よって、検査キット１００は、吸収パッドＡｂＰからの検体抽出液の逆流を抑制できるので、検出領域における標識物質（標識抗体）の滞留を抑制できる。よって、検出領域の視認性が低下したり、検出領域で滞留した標識抗体がライン状に見えたり、非特異反応が出現したりするなど誤った判定につながる問題が防止される。
【００４３】
（２）他の実施形態
また、上述した実施形態においては、検体として抗原を適用し、標識物質として着色粒子を結合した標識抗体を適用し、捕捉物質として抗原捕捉抗体及び標識捕捉抗体を適用して、抗原抗体反応を利用したイムノクロマト法用検査ストリップについて述べたが、本発明はこれに限らず、その他種々の検体、標識物質、捕捉物質を適用して、例えば相補的核酸間反応や、リガンド・レセプター間反応を利用したクロマト法用の検査ストリップであっても良い。
【００４４】
なお、抗体に結合させる着色粒子としては、着色ラテックス粒子や、金属ゾル（金コロイドなど）、蛍光ラテックス粒子、磁気ビーズ、酵素（アルカリホスファターゼなど）を適用してもよい。例えば着色ラテックス粒子や金コロイドを用いた場合には、第１テストラインＴＬ１、第２テストラインＴＬ２でのライン発現の有無を使用者が目視により確認できる。一方、蛍光ラテックス粒子を用いた場合には、第１テストラインＴＬ１、第２テストラインＴＬ２でのライン発現の有無を蛍光リーダなどにより確認する。
【００４５】
さらに、他の実施形態としては、例えばインフルエンザウイルスの検出に用いる検査キットであってもよい。このようなインフルエンザウイルス用検査キットの検査ストリップは、上述した検査ストリップ１と基本的構成が同一であるものの、コンジュゲートパッドＣＰに保持される標識物質と、メンブランＭの検出領域に固定化される捕捉物質とが、検査対象とするインフルエンザウイルスに応じた構成となる。
【００４６】
例えば、Ａ型インフルエンザウイルス及びＢ型インフルエンザウイルスの両方を検出可能な検査ストリップでは、標識物質として、Ａ型インフルエンザウイルスと特異的に反応して複合体を生成する青色粒子標識抗Ａ型抗体と、Ｂ型インフルエンザウイルスと特異的に反応して複合体を生成すると赤色粒子標識抗Ｂ型抗体とがコンジュゲートパッドＣＰに湿潤状態で遊離可能に保持されている。
【００４７】
インフルエンザウイルス用の検査ストリップには、検出領域としての第１テストラインＴＬ１、第２テストラインＴＬ２、コントロールラインＣＬがメンブランＭに設けられており、例えば第１テストラインＴＬ１にＡ型インフルエンザウイルス抗体（例えば、マウス抗インフルエンザウイルスＡ型抗原モノクローナル抗体）が含まれ、第２テストラインＴＬ２にＢ型インフルエンザウイルス抗体（例えば、マウス抗インフルエンザウイルスＢ型抗原モノクローナル抗体）が含まれ、コントロールラインＣＬにヤギ抗マウスＩｇＧ抗体（例えば、ヤギ抗マウスＩｇＧポリクローナル抗体）が含まれている。
【００４８】
本実施形態の検査キット１００は、このようなインフルエンザウイルス用の検査キット以外にも、例えば、ＲＳウイルス、アデノウイルス又はＡ群β溶血性連鎖球菌用の検査キットとして用いることができる。この場合、標識物質や捕捉物質を、検査対象に合わせて適宜変更する。
【００４９】
上記の実施形態では、第１テストラインＴＬ１及び第２テストラインＴＬ２を有する検査ストリップ１について説明してきたが、本発明はこれに限られない。検査対象によっては、テストラインは、１つでもよく、３つ以上であってもよい。また、ケース１０１の形状、サイズは特に限定されない。検査ストリップについても、本実施形態の吸収パッドＡｂＰを備えていれば、形状やサイズは特に限定されない。
【００５０】
（３）検証試験
検証試験では、実施例として、吸収パッドＡｂＰの厚さや単位体積当たりの吸水量などの条件を変えて複数の本実施形態の検査ストリップ１を作製し、作製した検査ストリップ１をそれぞれケース１０１に格納し、検体抽出液をサンプルパッドＳＰに滴下してから所定時間後の検出領域における標識物質としての標識抗体の滞留の有無を評価した。また、比較例として、吸水量が０．３７ｇ／ｃｍ３以下の吸収パッド、厚さが１．４０ｍｍより大きい吸収パッド及びガラス繊維で作製された吸収パッドなどを有する検査ストリップを作製し、同様に、所定時間後の検出領域における標識抗体の滞留の有無を評価した。
【００５１】
（３−１）検査ストリップの作製
（３−１−１）着色粒子が結合した標識抗体の調製
最初に、着色粒子が結合した標識抗体（以下、着色粒子結合標識抗体ともいう。）を調製した。本検証試験では青色の着色粒子が結合した標識抗体と赤色の着色粒子が結合した標識抗体との２種類を調製した。まず、青色の着色粒子が結合した標識抗体を作製した。着色粒子としての青色カルボキシルラテックス粒子（ポリスチレン、粒径４００ｎｍ）の１０％水分散液３０μＬと５０ｍＭのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ６．０）２７０μＬとを混合した。次に、混合液にＥＤＣ（水溶性カルボジイミド）を最終濃度１％になるように添加し、室温で３時間活性化した。その後、遠心分離し、着色粒子を洗浄した後、１ｍｇ／ｍＬに濃度調整した標識抗体としてのマウス抗インフルエンザウイルスＡ型抗体１００μＬを添加し、室温で一晩反応させ、標識抗体と着色粒子とを結合させた。遠心分離し、着色粒子結合標識抗体を洗浄した後、１０％ＢＳＡ／ＰＢＳ溶液でブロッキングした。最後に、着色粒子結合標識抗体を遠心分離し、１０％の濃度でスクロースを含み、１％の濃度でＢＳＡを含むＰＢＳ溶液１０ｍＬ中に遠心分離した着色粒子結合標識抗体を懸濁した後、超音波分散装置にかけ、青色粒子標識抗Ａ型抗体分散液を得た。
【００５２】
次に、赤色の着色粒子が結合した標識抗体を作製した。まず、赤色カルボキシルラテックス粒子（ポリスチレン、粒径４００ｎｍ）の１０％水分散液３０μＬと５０ｍＭのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ６．０）２７０μＬとを混合した。次に、混合液にＥＤＣ（水溶性カルボジイミド）を最終濃度１％になるように添加し室温で３時間活性化した。その後、遠心分離し、着色粒子を洗浄した後、１ｍｇ／ｍＬに濃度調整したマウス抗インフルエンザウイルスＢ型抗体１００μＬを添加し、室温で一晩反応させ、標識抗体と着色粒子とを結合させた。次に遠心分離し、着色粒子結合標識抗体を洗浄した後、１０％ＢＳＡ／ＰＢＳ溶液でブロッキングした。最後に、着色粒子結合標識抗体を遠心分離し、１０％の濃度でスクロースを含み、１％の濃度でＢＳＡを含むＰＢＳ溶液１０ｍＬ中に遠心分離した着色粒子結合標識抗体を懸濁した後、超音波分散装置にかけ、赤色粒子標識抗Ｂ型抗体分散液を得た。
【００５３】
（３−１−２）コンジュゲートパッドの調製
青色粒子標識抗Ａ型抗体分散液と赤色粒子標識抗Ｂ型抗体分散液とを混合することで着色粒子混合分散液を得た。その後、網の上に並べたガラス繊維で作製されたパッド（メルク社製）に、着色粒子混合分散液を４５μＬ／ｃｍの割合で塗布し、均一に塗り広げた後、オーブンで一晩乾燥し、コンジュゲートパッドＣＰを得た。このコンジュゲートパッドＣＰは、標識物質として、青色粒子標識抗Ａ型抗体と赤色粒子標識抗Ｂ型抗体とを、湿潤状態で遊離可能に保持している。
【００５４】
（３−１−３）抗体を固定化したメンブランの調製
まず、上記の着色粒子標識抗インフルエンザＡ型抗体とはエピトープが異なるマウス抗インフルエンザウイルスＡ型抗体をリン酸緩衝液で１．０ｍｇ／ｍＬに濃度調整した溶液と、上記の着色粒子標識抗インフルエンザＢ型抗体とはエピトープが異なるマウス抗インフルエンザウイルスＢ型抗体をリン酸緩衝液で１．０ｍｇ／ｍＬに濃度調整した溶液と、ヤギ抗マウスＩｇＧ抗体をリン酸緩衝液で１．０ｍｇ／ｍＬに濃度調整した溶液とを作製した。
【００５５】
次に、ニトロセルロースメンブランシート（メルク、縦３．０ｃｍ、横４５ｃｍ）に、これらの溶液を、幅１ｍｍのライン状に、所定の間隔を空けてそれぞれ塗布した。ニトロセルロースメンブランシートの横方向に溶液を塗布した。マウス抗インフルエンザウイルスＡ型抗体を塗布したラインを第１テストラインＴＬ１、マウス抗インフルエンザウイルスＢ型抗体を塗布したラインを第２テストラインＴＬ２、ヤギ抗マウスＩｇＧ抗体を塗布したラインをコントロールラインＣＬとした。
【００５６】
塗布する位置はメンブランの短手方向の一端部から１１ｍｍの位置に第１テストラインＴＬ１、１４．５ｍｍの位置に第２テストラインＴＬ２、１８．０ｍｍの位置にコントロールラインＣＬが来るように設定した。塗布は、イムノクロマトグラフィー用ディスペンサーＸＹＺ３０５０（バイオドット社製）を用い、１μＬ／ｃｍの割合で塗布した。ライン塗布後のメンブランを１０％の濃度でスキムミルクを含むＰＢＳ溶液で６０分間ブロッキング処理した後、真空乾燥で一晩乾燥させて、抗体を固定化したメンブランＭを得た。このメンブランＭは、捕捉物質として、マウス抗インフルエンザウイルスＡ型抗体とマウス抗インフルエンザウイルスＢ型抗体とヤギ抗マウスＩｇＧ抗体とが固定化されている。
【００５７】
（３−１−４）検査ストリップの組み立て
バッキングシート(Adhesives Research，Inc社製)に対して、上記の抗体を固定化したメンブランＭを貼り合わせた後、作製したコンジュゲートパッドＣＰをメンブランＭと数ミリ重なり合うように貼り合わせた。コンジュゲートパッドＣＰのメンブランＭと反対側の端部に、サンプルパッドＳＰとして、ガラス繊維で作製されたパッド(メルク社製)を、コンジュゲートパッドＣＰに数ミリ重なるようにして貼り合わせた。そして、メンブランＭのコンジュゲートパッドＣＰと反対側には、吸収パッドＡｂＰをメンブランＭと数ミリ重なるように張り合わせた。最後に、４ｍｍ幅に裁断して検査ストリップ１を得た。吸収パッドＡｂＰの構成を種々変更して、複数の検査ストリップ１を作製した。比較例の検査ストリップも同様に作製した。なお、検証試験で使用したバッキングシートの厚さは０．３３７ｍｍであり、ニトロセルロースメンブランの厚さは０．１１０ｍｍであった。また、検証試験に用いるケース１０１の積層部格納空間の高さＤは、１．５０ｍｍであった。
【００５８】
（３−２）実施例及び比較例の検査ストリップの吸収パッドの構成
以下で、実施例及び比較例の検査ストリップの構成を説明する。
（実施例１）
実施例１の吸収パッドＡｂＰは、濾紙Ｎｏ．５９０（アドバンテック東洋、厚さ０．９３ｍｍ、セルロース繊維製）であり、単位体積当たりの吸水量は、０．９６ｇ／ｃｍ３であった。吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端との間に空間が形成されている、すなわち、下端と接触しない構成である。
【００５９】
（比較例１）
比較例１の吸収パッドは、図５に示すように、Ｎｏ．５９０の濾紙を厚さ０．０６ｍｍのプラスチックフィルムＰＦを挟んで２枚重ねにした構成である。変形率Ｐの影響を確認するために、濾紙の間にプラスチックフィルムＰＦを挟み、メンブランＭと接していない濾紙は、変形率Ｐには寄与するが、吸水には寄与しないようにした。ケース１０１に検査ストリップを格納すると、吸収パッドが変形する構成である。
【００６０】
（比較例２）
比較例２の吸収パッドは、図５に示すように、比較例１の吸収パッドにさらにＮｏ．５９０の濾紙を重ねた構成である。ケース１０１に検査ストリップを格納すると、吸収パッドが変形する構成である。
【００６１】
（比較例３）
比較例３の吸収パッドは、濾紙Ｎｏ.１０３４−２（アドバンテック東洋、厚さ１．８０ｍｍ、セルロース繊維製）であり、単位体積当たりの吸水量は、０．３７ｇ／ｃｍ３であった。ケース１０１に検査ストリップを格納すると、吸収パッドが変形する構成である。
【００６２】
（比較例４）
比較例４の吸収パッドは、比較例３の吸収パッドを切断し、厚さを半分にした構成である。吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない構成である。
【００６３】
（実施例２）
実施例２の吸収パッドＡｂＰは、実施例１の吸収パッドＡｂＰを切断し、厚さを半分にした構成である。吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない構成である。
【００６４】
（実施例３）
実施例３の吸収パッドＡｂＰは、実施例１の吸収パッドＡｂＰと同じ構成であり、実施例２の吸収パッドＡｂＰの約２倍の厚さとした。なお、実施例３、４、比較例５−７、実施例１３−１５は、吸収パッドの厚さの変化による影響のみを確認するために、蓋体１０２の判定開口部１０６の下流側の周縁部１０６ａより下流側を除去したケース１０１を用いた。このケース１０１により、積層部３の上部には蓋体が存在せず、積層部３での検査ストリップ１の厚さが厚くなっても、検査ストリップが力を受けないようにした。すなわち、吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない構成である。
【００６５】
（実施例４）
実施例４の吸収パッドＡｂＰは、実施例３の吸収パッドＡｂＰに、実施例２の吸収パッドＡｂＰを重ねた構成であり、実施例２の吸収パッドＡｂＰの約３倍の厚さ（厚さ１．４０ｍｍ）とした。
【００６６】
（比較例５）
比較例５の吸収パッドは、実施例３の吸収パッドＡｂＰを２枚重ねにした構成であり、実施例２の吸収パッドＡｂＰの約４倍の厚さとした。
【００６７】
（比較例６）
比較例６の吸収パッドは、実施例３の吸収パッドＡｂＰを３枚重ねにした構成であり、実施例２の吸収パッドＡｂＰの約６倍の厚さとした。
【００６８】
（比較例７）
比較例７の吸収パッドは、比較例３の吸収パッドと同じ構成である。実施例とは、単位体積当たりの吸水量が異なり、比較例３とは、吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない点で異なる。
【００６９】
（比較例８）
比較例８の吸収パッドは、ガラス濾紙ＤＰ‐７０（アドバンテック東洋、厚さ０．５２ｍｍ、ガラス繊維製）であり、吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない構成である。
【００７０】
（比較例９）
比較例９の吸収パッドは、ガラス濾紙ＧＤ‐１２０（アドバンテック東洋、厚さ０．５１ｍｍ、ガラス繊維製）であり、吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない構成である。
【００７１】
（比較例１０）
比較例１０の吸収パッドは、ガラス濾紙ＧＢ‐１４０（アドバンテック東洋、厚さ０．５６ｍｍ、ガラス繊維製）であり、吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない構成である。
【００７２】
（比較例１１）
比較例１１の吸収パッドは、ガラス濾紙ＧＡ‐２００（アドバンテック東洋、厚さ０．７４ｍｍ、ガラス繊維）であり、吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない構成である。
【００７３】
（実施例５）
実施例５の吸収パッドＡｂＰは、濾紙Ｎｏ．５０（アドバンテック東洋、厚さ０．２５ｍｍ、セルロース繊維製）であり、単位体積当たりの吸水量は、６．１３ｇ／ｃｍ３であった。吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない構成である。
【００７４】
（実施例６）
実施例６の吸収パッドＡｂＰは、濾紙Ｎｏ．５１Ａ（アドバンテック東洋、厚さ０．１８ｍｍ、セルロース繊維製）であり、単位体積当たりの吸水量は、２．２９ｇ／ｃｍ３であった。吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない構成である。
【００７５】
（実施例７）
実施例７の吸収パッドＡｂＰは、濾紙Ｎｏ．５１Ｂ（アドバンテック東洋、厚さ０．１７ｍｍ、セルロース繊維製）であり、単位体積当たりの吸水量は、１．４３ｇ／ｃｍ３であった。吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない構成である。
【００７６】
（実施例８）
実施例８の吸収パッドＡｂＰは、濾紙Ｎｏ．５１４Ａ（アドバンテック東洋、厚さ０．３２ｍｍ、セルロース繊維製）であり、単位体積当たりの吸水量は、０．８４ｇ／ｃｍ３であった。吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない構成である。
【００７７】
（実施例９）
実施例９の吸収パッドＡｂＰは、濾紙Ｎｏ．５２６（アドバンテック東洋、厚さ０．７０ｍｍ、セルロース繊維製）であり、単位体積当たりの吸水量は、０．５６ｇ／ｃｍ３であった。吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない構成である。
【００７８】
（実施例１０）
実施例１０の吸収パッドＡｂＰは、実施例１の吸収パッドＡｂＰに、実施例７の吸収パッドＡｂＰを重ねた構成である。ケース１０１に検査ストリップを格納すると、吸収パッドが変形する構成である。
【００７９】
（実施例１１）
実施例１１の吸収パッドＡｂＰは、実施例１の吸収パッドＡｂＰに、実施例８の吸収パッドＡｂＰを重ねた構成である。ケース１０１に検査ストリップを格納すると、吸収パッドが変形する構成である。
【００８０】
（実施例１２）
実施例１２の吸収パッドＡｂＰは、実施例１の吸収パッドＡｂＰに実施例２の吸収パッドＡｂＰを重ねた構成である。ケース１０１に検査ストリップを格納すると、吸収パッドが変形する構成である。
【００８１】
（実施例１３）
実施例１３の吸収パッドＡｂＰは、実施例１０の吸収パッドと同じ構成である。吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない構成である。
【００８２】
（実施例１４）
実施例１４の吸収パッドＡｂＰは、実施例１１の吸収パッドと同じ構成である。吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない構成である。
【００８３】
（実施例１５）
実施例１５の吸収パッドＡｂＰは、実施例１２の吸収パッドと同じ構成である。吸収パッドの上面と吸収パッドの上面と向かい合う蓋体の内面の下端とが接触しない構成である。
【００８４】
各実施例及び比較例の吸収パッドの構成の詳細は、下記の表１、表２に示した。
【表１】
2020003319.tif 000004
【００８５】
【表２】
2020003319.tif 000005
【００８６】
（３−３）検出領域における標識抗体の滞留の有無の確認
各実施例及び比較例に対して、検体抽出液をサンプルパッドに滴下してから所定時間後の検出領域における標識物質としての標識抗体の滞留の有無を評価した。検体抽出液としては、１５０ｍＭリン酸緩衝液に、０．５％の濃度でＴｒｉｔｏｎ Ｘ‐１００、０．１％の濃度でＢＳＡ、０．０９％の濃度でアジ化ナトリウムを混合した溶液を用いた。ケース１０１の検体滴下開口部１０５からサンプルパッドに当該検体抽出液を５５μＬ滴下し反応させた。滴下から１０分後〜３５分後まで５分間隔で検出領域における標識抗体の滞留の有無を調べた。その結果を上記の表１、表２に示した。
【００８７】
表１、表２に示すように、各実施例では１０分〜３５分で判定に影響を及ぼすような標識抗体の滞留が認められなかった。一方、各比較例では、１０分〜３０分までに判定に影響を及ぼすような標識抗体の滞留が認められた。
【００８８】
実施例１、１０、１１、１２と比較例１、２の結果から、変形率Ｐが０以上１８．８以下であれば、３５分経過しても標識抗体の滞留が確認されず、標識抗体の滞留を抑制できることが確認できた。また、変形率Ｐが高いほど、すなわち、積層部３が受ける力が大きいほど、標識抗体の滞留が早期に出現した。
【００８９】
実施例２、３、４及び比較例５、６の結果から、吸収パッドＡｂＰの厚さが１．４０ｍｍ以下であれば、３５分経過しても標識抗体の滞留が確認されず、標識抗体の滞留を抑制できることが確認できた。また、実施例５−９、１３−１５を見ても同様の傾向が確認でき、吸収パッドの厚さが、０．１７ｍｍ以上１．４０ｍｍ以下の範囲で、標識抗体の滞留を抑制できることが確認できた。なお、実施例４、比較例５、６の結果から、同一素材（単位体積当たりの吸水量も同じ）で吸収パッドの厚さが増すほど、標識抗体の滞留が早く出現した。
【００９０】
実施例１、５−１５及び比較例４、８−１１の結果から、吸収パッドＡｂＰがセルロース繊維で作製され、体積当たりの吸水量が０．３７ｇ／ｃｍ３より大きければ、３５分経過しても標識抗体の滞留が確認されず、標識抗体の滞留を抑制できることが確認できた。
【００９１】
（３−４）考察
まず、検出領域が乾燥することで起こる検出領域における標識抗体の滞留の抑制の観点で最適な吸収パッドＡｂＰは、イムノクロマトグラフィーで一般的に用いられているセルロース繊維製であり、かつ、体積当たりの吸水量が０．３７ｇ／ｃｍ３より大きいものであった。セルロース繊維製の吸収パッドは、水分の保持量が多いという特徴があり、さらに体積当たりの吸水量が０．３７ｇ／ｃｍ３より大きいため、このような吸収パッドＡｂＰは、単位面積当たりの水分の保持量が高く、吸収パッドＡｂＰ内により多くの水分を保持できる。そのため、吸収パッドＡｂＰでは、水分の保持量のキャパシティが限界を超えて吸収パッドＡｂＰが保持していた水分が放出されることが起きにくいと考えられる。したがって、吸収パッドＡｂＰから検体抽出液が再リリースされにくく、吸収パッドＡｂＰから逆流する標識抗体も抑制されると考えられる。よって、セルロース繊維製の吸収パッドＡｂＰの中でも体積当たりの吸水量が０．３７ｇ／ｃｍ３より大きいものが良好な結果となったと考えられる。
【００９２】
次に、厚さが１．５０ｍｍを超える厚手の吸収パッドよりも、厚さが１．４０ｍｍ以下の比較的薄手の吸収パッドのほうが、標識抗体の滞留が抑制されたことについて検討する。図６に示すように、厚手の吸収パッドＡｂＰａの場合、厚み方向にも毛細管現象による吸水が進むため、時間が経過しても吸水性能が大きく落ちることなく維持される。その結果、検出領域の乾燥が早期に生じ、吸収パッドＡｂＰａからの逆流やコンジュゲートパッドＣＰからの標識抗体の二次リリースも早期に発生し、検出領域における標識抗体の滞留が生じたものと考えられる。
【００９３】
一方で、比較的薄手の吸収パッドＡｂＰでは、図７に示すように、時間の経過とともに吸水可能な濡れていない部分までの吸収パッドＡｂＰ内での検体抽出液の移動距離が長くなってくるため、吸収パッドＡｂＰの吸水性能が低下していくと考えられる。その結果、検出領域の乾燥が抑制され、標識抗体の滞留が抑制されたと考えられる。
【００９４】
続いて、積層部での検査ストリップの厚さＴがケース内の積層部格納空間の高さＤよりも小さい又は変形率Ｐが０≦Ｐ≦１８．８を満たすことで、検出領域が乾燥することで起こる検出領域における標識抗体の滞留が抑制されることについて考える。
【００９５】
図８に示すように、吸収パッドＡｂＰｂの積層部の上面に、積層部の上面と向かい合う蓋体の内面の下端によって強い力が加えられている（変形率Ｐが１８．８より大きい）場合は、検体抽出液を含んだ吸収パッドＡｂＰｂがメンブランＭとしっかり接触するため逆流が早く起こったと考えられる。一方、図９に示すように、吸収パッドＡｂＰの積層部の上面と蓋体の下端との間に空間が形成されている、あるいは、吸収パッドＡｂＰの積層部が比較的小さい力を受けている（変形率Ｐが０≦Ｐ≦１８．８）場合は、検体抽出液を含んだ吸収パッドＡｂＰとメンブランＭの接触がそれほど強くなく、吸収パッドＡｂＰが少し反って浮いた状態となるため逆流が起こりづらくなったからであると考えられる。なお、図６−９では、説明の便宜上、バッキングシートを図示していない。
【００９６】
以上から、吸収パッドＡｂＰが、セルロース繊維で作製され、体積当たりの吸水量が０．３７ｇ／ｃｍ３より大きいこと、吸収パッドＡｂＰの厚さが０．１７ｍｍ以上１．４０ｍｍ以下であること、式Ｔ＜Ｄ又は式０≦Ｐ≦１８．８を満たすことを組み合わせることで、検出領域が乾燥することで起こる検出領域における標識抗体の滞留が顕著に抑制されると考えられる。
【符号の説明】
【００９７】
１  検査ストリップ
１１  バッキングシート
１０１  ケース
１０２  蓋体
１０３  基体
１１１、ＡｂＰ、ＡｂＰａ、ＡｂＰｂ  吸収パッド
ＳＰ  サンプルパッド
ＣＰ  コンジュゲートパッド
Ｍ  メンブラン
ＴＬ１  第１テストライン
ＴＬ２  第２テストライン
ＣＬ  コントロールライン
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【図９】
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【図１０】
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