(57)【要約】【課題】癌の治療に使用するための癌幹細胞性阻害剤および免疫療法剤を含む組成物の提供。【解決手段】本明細書において癌の治療に使用するための方法が開示され、少なくとも１種類の癌幹細胞性阻害剤、例えば２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンのような少なくとも１種類のＳＴＡＴ３経路阻害剤を投与して、少なくとも１種類の免疫チェックポイント調節剤のような少なくとも１種類の免疫療法剤に未処置、耐性、および／または難治性である癌を感受性化または再感受性化することを含む。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
本明細書に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本出願は、２０１５年６月３日出願、米国特許仮出願第６２／１７０，４９８号および
２０１５年９月２５日出願、第６２／２３３，０８１号の３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．§１１９下で
の優先権を主張する。
【０００２】
本明細書では被験体における癌を治療するための方法が開示され、癌幹細胞性阻害剤、
このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、および
これらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第一化合物の治療上効果
的な量、ならびに免疫療法剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬
品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１
種類の第二化合物の治療上効果的な量を投与することを含む。
【０００３】
特定の実施形態では、癌幹細胞性阻害剤から選択される少なくとも１種の第一化合物は
、式Ａ：
【化１】
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を有する化合物、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容
可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される式Ａの少なくとも１種類の
化合物である。
【０００４】
特定の実施形態では、免疫療法剤から選択される少なくとも１種類の第二化合物は、少
なくとも１種類の免疫チェックポイント調節剤である。特定の実施形態では、免疫療法剤
から選択される少なくとも１種類の第二化合物は、少なくとも１種類の免疫チェックポイ
ント調節剤（例えば、免疫チェックポイント阻害剤）である。特定の実施形態では、少な
くとも１種類の免疫チェックポイント調節剤（例えば、免疫チェックポイント阻害剤）は
、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、イピリムマブ、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、ラ
ンブロリズマブ（ＭＫ３４７５）、およびトレメリムマブから選択される。特定の実施形
態では、少なくとも１種類の免疫チェックポイント調節剤（例えば、免疫チェックポイン
ト阻害剤）は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、およびイピリムマブから選択される。
【背景技術】
【０００５】
国立癌研究所は、米国で新たに１，６８５，２１０例の癌が診断され、２０１６年にこ
の疾患から５９５，６９０名の人々が死亡すると推定している。最も一般的な癌は、乳癌
、肺および気管支癌、前立腺癌、結腸および直腸癌、膀胱癌、皮膚のメラノーマ、非ホジ
キンリンパ腫、甲状腺癌、腎臓および腎盂癌、白血病、子宮内膜癌、および膵臓癌である
と考えられる。手術、放射線療法、および化学療法による特定形態の癌の治療における進
歩にもかかわらず、癌の多くのタイプは本質的には治癒しない。たとえ有効な治療が特定
の癌に利用可能であっても、治療による副作用は患者の生活の質に重大な悪影響を及ぼす
可能性がある。
【０００６】
ほとんどの従来の化学療法剤は、特に進行性固形腫瘍の患者に対して、毒性および限定
された有効性を有する。従来の化学療法剤は、癌性細胞だけでなく、健常な非癌性細胞の
両方に対して細胞毒性を引き起こす。これらの化学療法化合物の治療指数（すなわち、癌
細胞と正常細胞を区別する療法の能力の尺度）は極めて低い可能性がある。しばしば、癌
細胞を死滅させるのに有効な化学療法剤の用量は、正常細胞、特に頻繁な細胞分裂を行う
正常細胞（例えば、上皮細胞および骨髄細胞）も死滅させる。正常細胞が化学療法を受け
る場合、脱毛、貧血および免疫不全を引き起こす造血の抑制、ならびに吐き気などの副作
用がしばしば生じる。患者の全般的な健康状態に応じて、このような副作用は化学療法の
投与すべてをともに不可能にし得、または少なくとも、生活の質を低下させるという癌患
者に重大な不安を与え得る。腫瘍退縮を伴う化学療法に反応する癌患者でさえ、癌はしば
しば化学療法に対する最初の反応後に転移によって迅速に再発、進行、および拡散する。
このような再発性の癌はしばしば化学療法治療の追加計画に対して非常に難治性である。
後述されるように、癌幹細胞（ＣＳＣ）または高度な幹細胞性を有する癌細胞（高幹細胞
性癌細胞）は、従来の化学療法後に認められる迅速な腫瘍再発および抵抗性に関与してい
るものと考えられている。
【０００７】
ＣＳＣは、少なくとも次の４つの特性を有すると考えられている。
１．幹細胞性−本明細書で使用されるとき、幹細胞性は自己再生して癌細胞に形質転換す
る幹細胞集団の能力を意味する（Ｇｕｐｔａ  ＰＢら，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．２００９；１５
（９）：１０１０−１０１２）。ＣＳＣは腫瘍における全癌細胞集団の少ない割合のみを
形成するが（Ｃｌａｒｋｅ  ＭＦ，Ｂｉｏｌ．Ｂｌｏｏｄ  Ｍａｒｒｏｗ  Ｔｒａｎｓｐ
ｌａｎｔ．２００９；１１（２  ｓｕｐｐｌ．２）：１４−１６）、これらは腫瘍を大き
くする分化した癌細胞の異種系統を生じさせる（Ｇｕｐｔａら２００９を参照）。さらに
ＣＳＣは転移によって体の別の部位に拡散する能力を有し、そこでこれらは新しい腫瘍の
増殖を植え付ける。（Ｊｏｒｄａｎ  ＣＴら，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２００６；３
５５（１２）：１２５３−１２６１）。
２．異常なシグナル化経路−ＣＳＣ幹細胞性はシグナル化経路の調節不全と関連し、転移
するこれらの能力に関与し得る。正常な幹細胞では、幹細胞性シグナル化経路はしっかり
と制御されて遺伝的に完全である。これに反し、ＣＳＣにおける幹細胞性シグナル化経路
の異常調節はこれらの細胞の制御されない自己再生およびこれらの癌細胞への形質転換で
主要な役割を演じる（Ａｊａｎｉら２０１５を参照する）。幹細胞性シグナル化経路の調
節不全は化学療法および放射線療法に対するＣＳＣ耐性ならびに癌の再発および転移にも
関与する。ＣＳＣにおける幹細胞性特性の誘発および維持に含まれる例示的な幹細胞性シ
グナル化経路には、限定されないが、ヤーヌスキナーゼ／シグナルトランスデューサーお
よび転写活性化因子（ＪＡＫ／ＳＴＡＴ）、ヘッジホッグ（デザート（ＤＨＨ）、インデ
ィアン（ＩＨＨ）、およびソニック（ＳＨＨ））／ＰＡＴＣＨＥＤ／（ＰＴＣＨ１）／Ｓ
ＭＯＯＴＨＥＮＥＤ（ＳＭＯ）、ＮＯＴＣＨ／ＤＥＬＴＡ−ＬＩＫＥ（ＤＬＬ１、ＤＬＬ
３、ＤＬＬ４）／ＪＡＧＧＥＤ（ＪＡＧ１、ＪＡＧ２）／ＣＳＬ（ＣＢＦ１／Ｓｕ（Ｈ）
／Ｌａｇ−１）、ＷＮＴ／ＡＰＣ／ＧＳＫ３／β−カテニン／ＴＣＦ４、およびＮＡＮＯ
Ｇが含まれる（Ｂｏｍａｎ  ＢＭら，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２００８；２６（１７
）：２８２８−２８３８）。
３．従来療法に対する耐性−残念なことに、化学療法および放射線治療に最初に反応する
癌はすべて、これらの従来の治療法に耐性である形態で非常に頻繁に再燃する。このよう
な耐性の基礎となる詳細なメカニズムは十分理解されていないが、腫瘍微小環境の状況に
おけるＣＳＣ幹細胞性シグナル化経路（Ｂｏｍａｎら２００８を参照する）の異常調節は
（Ｂｏｒｏｖｓｋｉ  Ｔ．ら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ．２０１１；７１（３）：６３４−
６３９）、このような耐性の獲得において主要な役割を演じ得る。
４．腫瘍の再発および転移に関与する能力−化学療法および放射線は、腫瘍において迅速
に分裂する癌細胞を大部分死滅させるが、耐性を獲得することによって生存するＣＳＣで
はない（Ｊｏｒｄａｎら２００６を参照）。放射線／化学療法に耐性なＣＳＣはまた、体
の異なる部位に転移する能力も獲得し得、微小環境との相互作用を通してこれらの部位で
幹細胞性を維持する可能性があり、これによって転移性腫瘍増殖の拡散を可能にする（Ｂ
ｏｍａｎら２００８参照）。興味深いことに、ＣＳＣのこの高い腫瘍原性は、ＣＤ４４、
ＣＤ１３３、およびＣＤ１６６などの細胞表面マーカーのような成体幹細胞で通常発現さ
れる遺伝子の発現と相互関連する。
【０００８】
ＣＳＣの生存は化学療法および／または放射線による治療後に癌が再燃する主な理由で
あり得、ＣＳＣの異常なシグナル化経路を特異的に標的化する抗癌療法は、腫瘍転移を防
ぐのに役立ち、従来療法ではもはや治療できない再発性疾患を有する患者のために実行可
能な治療選択肢を提供し得る。従って、このような方法は癌患者、特に転移性疾患を有す
るこれらの患者の生存および生活の質を改善し得る。この未開発の可能性の鍵を解くには
、ＣＳＣ自己再生および生存に不可欠な経路の特定および検証が含まれる。胚幹細胞また
は成体幹細胞の増殖および分化を調節するシグナル化経路の多くは理解されているが、こ
れらと同様な経路が癌幹細胞の自己再生および生存に必要とされるかどうかは分からない
ままである。
【０００９】
転写因子であるシグナルトランスデューサーおよび転写活性化因子３（また、急性期応
答因子、ＡＰＲＦ、ＤＮＡ結合タンパク質ＡＰＲＦ、ＡＤＭＩＯ３、ＨＩＥＳとしても知
られ、本明細書ではＳＴＡＴ３と呼ばれる）は、７種の転写因子のファミリーメンバーで
あり、ＳＴＡＴ５ａおよびＳＴＡＴ５ｂを含むＳＴＡＴ１〜ＳＴＡＴ６である。ＳＴＡＴ
は、ヤーヌスキナーゼ（ＪＡＫ）などの受容体関連チロシンキナーゼ、またはＰＤＧＦＲ
、ＥＧＦＲ、ＦＬＴ３、ＥＧＦＲ、ＡＢＬ、ＫＤＲ、ｃ−ＭＥＴ、もしくはＨＥＲ２など
の内因性チロシンキナーゼ活性を有する受容体のいずれかよって活性化される。受容体関
連キナーゼによるチロシンリン酸化では、リン酸化されたＳＴＡＴタンパク質（「ｐＳＴ
ＡＴ」）は、ホモダイマーまたはヘテロダイマーとして二量体化し、細胞質から核に移動
し、標的遺伝子のプロモーターにおける特定のＤＮＡ応答エレメントと結合して、遺伝子
発現を誘発する。ＳＴＡＴ２、４、および６は主に免疫応答を調節するが、ＳＴＡＴ３は
ＳＴＡＴ１およびＳＴＡＴ５とともに、細胞周期（サイクリンＤ１、Ｄ２、およびｃ−Ｍ
ＹＣ）、細胞生存（ＢＣＬ−ＸＬ、ＢＣＬ−２、ＭＣＬ−１）、および血管新生（ＨＩＦ
１α、ＶＥＧＦ）を制御する遺伝子の発現を調節する（Ｆｕｒｑａｎら，Ｊｏｕｒｎａｌ
ｏｆ  Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ＆Ｏｎｃｏｌｏｇｙ（２０１３）６：９０）。
【００１０】
正常細胞では、ＳＴＡＴ３活性化は一時的で厳密に制御され、例えば約３０分から数時
間継続する。しかし、すべての主な癌腫ならびにいくつかの血液腫瘍を含む広い範囲の様
々なヒトの癌において、ＳＴＡＴ３は異常に活性であることが認められている。継続して
活性なＳＴＡＴ３は、すべての乳癌および肺癌、ならびに結腸直腸癌（ＣＲＣ）、卵巣癌
、肝細胞癌、多発性骨髄腫の半数以上、そしてすべての頭部／頸部癌の９５％以上に存在
する。従って、ＳＴＡＴ３は癌進行において中枢的役割を果たしていると考えられ、癌細
胞が薬物耐性を獲得する主な作用機序の１つであり得る。ＳＴＡＴ３は、細胞周期、細胞
生存、腫瘍形成、腫瘍浸潤、および転移に含まれる、限定されないが、ＢＣＬ−ＸＬ、ｃ
−ＭＹＣ、サイクリンＤ１、ＶＥＧＦ、ＭＭＰ−２、およびサバイビンなどの遺伝子を標
的とする有力な転写調節因子である。ＳＴＡＴ３はまた、腫瘍免疫監視および免疫細胞補
充の主要な負調節因子である。このため、ＳＴＡＴ３は癌の広範なスペクトルにわたって
、ＣＳＣの生存および自己再生能力を可能にし得る。ＣＳＣに対する活性を有する医薬化
合物は、例えばＳＴＡＴ３阻害によって、進行性疾患を有する癌患者のための治療選択と
してかなり有望である。
【００１１】
特定の実施形態では、式Ａの少なくとも１種類の化合物はＣＳＣ増殖および生存の阻害
剤から選択される。米国特許第８，８７７，８０３号は、式Ａの化合物がＳＴＡＴ３経路
活性を約０．２５μＭの細胞ＩＣ５０で阻害することを記載している。特許’８０３にお
ける例１３は、式Ａの少なくとも１種類の化合物を合成する例示的な方法を提供している
。特定の実施形態では、式Ａの少なくとも１種類の化合物は、癌を治療するための方法に
使用される。ＰＣＴ特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１４／０３３５６６号の例６では、式Ａ
の少なくとも１種類の化合物が、進行性癌を有する患者について臨床試験を始めるために
選択された。米国特許第８，８７７，８０３号およびＰＣＴ特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０
１４／０３３５６６号の開示はその全体が本明細書に参考として組み込まれている。
【００１２】
癌免疫は癌療法の新しい領域として期待されている。免疫系は、絶妙に適合して選択的
に標的化することができ、現在、進行性癌に対して利用され指示されているプロセスであ
る。この分野における治療法は、多くの異なる方法で癌に対する免疫反応を操作する。ワ
クチンが特定の癌抗原に向けた細胞および体液免疫反応を開始する目的で開発されており
、多くは微生物学的疾患のためにワクチンが行うことと同様な方法である。他の治療法は
、癌細胞がホストの免疫系による検出を避けるために使用する、特異的な免疫回避機構を
標的にする。これらの回避機構は免疫系の「チェックポイント」であり、これらを発現す
る細胞を免疫エフェクターが容認するように仕向ける特異的細胞表面分子である。プログ
ラム細胞死−１受容体（ＰＤ−１）およびそのリガンド（ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２）を標
的にする抗体による最近の臨床的な成功は、癌細胞が免疫チェックポイント遺伝子を奪っ
て、免疫系による内因性抗癌監視を次第に失わせることができるという概念を検証してい
る。２０１１年に米国で初めて承認されたイピリムマブは、細胞毒性Ｔリンパ球関連抗原
４（ＣＴＬＡ−４）を標的にしており、一方、ニボルマブおよびペンブロリズマブはＰＤ
−１を標的にし、共に２０１４年に米国で最初に承認された（Ｒｏｍａｎｏら，（２０１
５）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．Ｃａｎｃｅｒ  ２０１５；３：１５）。
【００１３】
結腸直腸癌では、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の存在と疾患予後の間には強い関連があ
る。例えば、高密度のＣＤ４５ＲＯ＋記憶Ｔ細胞は、転移性結腸直腸癌を有する患者にお
ける長い全生存および無疾患生存と関連している。別の例では、結腸直腸癌の肝転移にお
けるＴＩＬ密度の増加は、改善された無憎悪生存（ＰＦＳ）率と関連している。
【００１４】
ＴＩＬを増加させる治療戦略は有望であるが、最新のＦＤＡ承認されたチェックポイン
ト阻害剤は、ほとんどの消化器癌で大部分が成功していない。抗ＰＤ−１および抗ＰＤ−
Ｌ１抗体は、無選択の結腸直腸癌患者において、奏効を示さなかった。しかし結腸直腸癌
におけるＰＤ−１妨害を試験する最近の第ＩＩ相試験は、免疫チェックポイント阻害がミ
スマッチ修復欠損を有する患者コホートに効果的であり、腫瘍細胞の高度な体細胞変異負
荷が、免疫系における高い新生抗原発現および腫瘍細胞の認識をもたらし得ることを報告
した（Ｌｅら，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．（２０１５）３７２：２５０９−２０）。ミ
スマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）結腸直腸癌を有する患者における奏効率および２０週無憎
悪生存率は、それぞれミスマッチ修復能力（ｐＭＭＲ）結腸直腸癌の０％および１１％と
比べて４０％および７８％だった（疾患進行または死亡のＨＲ、０．１０［ｐ＜０．００
１］、および死亡のＨＲ、０．２２［ｐ＝０．０５］）。侵襲前面の腫瘍免疫浸潤の分析
は、ｐＭＭＲ群に対してｄＭＭＲ群でＣＤ８＋細胞毒性Ｔ細胞の密度が有意に大きいこと
を示した（ｐ＝０．０４）。腫瘍内ＣＤ８＋Ｔ細胞密度の増加も、奏効率と有意に関連し
た（ｐ＝０．０１７）。全エキソームシークエンシングおよび可能性のある変異関連新生
抗原の分析によって、ｄＭＭＲ群において腫瘍あたりの体細胞変異は１７８２例／新生抗
原は５７８例であり、これに対してｐＭＭＲ群では変異は７３例／新生抗原は２１例であ
ることが特定された。従って、ＴＩＬの効果は明らかに疾患予後の改善と関連しているが
、最近の試験は免疫チェックポイントを克服する効果は、高い変異量を有する結腸直腸癌
細胞の小サブセット（例えば、約１０〜１５％）に限定され得ることを実証している。さ
らに、ペンブロリズマブがマイクロサテライト安定（ＭＳＳ）転移性結腸直腸癌（ｍＣＲ
Ｃ）を有する患者に有効でないことが報告された。ＭＳＳｍＣＲＣを有する患者では、奏
効率は０％および疾患制御率は１１％だった。免疫関連奏効率および免疫関連無憎悪生存
は、２０週でそれぞれ０％および１１％だった。
【発明の概要】
【００１５】
本開示は少なくとも１種類の癌幹細胞性阻害剤および少なくとも１種類の免疫療法剤、
例えば免疫チェックポイント調節剤の治療併用は、少なくとも１種類の癌幹細胞性阻害剤
と少なくとも１種類の免疫治療剤の単独での両方の相加効果よりも癌細胞を阻害する大き
い効果を有するという驚くべき発見を示す。
【図面の簡単な説明】
【００１６】
【図１】本発明の特定の実施形態により、対照、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８、例示的な免疫療法剤、例えば抗ＰＤ−１抗体、または癌幹細胞性阻害剤と免疫療法剤、例えばＢＢＩ６０８と抗ＰＤ１抗体の例示的な併用のＣＴ２６結腸腫瘍の同系マウスモデルにおける例示的な抗腫瘍活性を示す図である。
【図２Ａ】本開示の特定の実施形態により、癌幹細胞性阻害剤とチェックポイント阻害剤の例示的な併用、例えばＢＢＩ６０８と抗ＰＤ−１抗体が、治療した動物（ＣＴ２６モデル、図２１Ａ；４Ｔ１モデル、図２１Ｂ）における長期抗腫瘍記憶を生じたことを示す図である。
【図２Ｂ】本開示の特定の実施形態により、癌幹細胞性阻害剤とチェックポイント阻害剤の例示的な併用、例えばＢＢＩ６０８と抗ＰＤ−１抗体が、治療した動物（ＣＴ２６モデル、図２１Ａ；４Ｔ１モデル、図２１Ｂ）における長期抗腫瘍記憶を生じたことを示す図である。
【図３Ａ】本開示の特定の実施形態により、対照、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８、例示的な免疫療法剤、例えば抗ＰＤ−１抗体、または癌幹細胞性阻害剤と免疫療法剤、例えばＢＢＩ−６０８と抗ＰＤ１抗体の例示的な併用のいずれかで処置されたＣＴ２６異種移植結腸癌細胞によって形成されたスフェアの数を比較した棒グラフを示す図である。
【図３Ｂ】本開示の特定の実施形態により、対照、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８、例示的な免疫療法剤、例えば抗ＰＤ−１抗体、または癌幹細胞性阻害剤と免疫療法剤、例えばＢＢＩ−６０８と抗ＰＤ１抗体の例示的な併用によって処置されたＣＴ２６異種移植結腸癌細胞の例示的なスフェア形成試験を示す図である。
【図４】本開示の特定の実施形態により、対照、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８、例示的な免疫療法剤、例えば抗ＰＤ−１抗体、または癌幹細胞性阻害剤と免疫療法剤、例えばＢＢＩ６０８と抗ＰＤ−１抗体の例示的な併用によって処置されたＣＴ２６異種移植結腸癌細胞における、癌幹細胞性マーカータンパク質であるＮＡＮＯＧの例示的な発現を示す図である。
【図５】本開示の特定の実施形態により、対照、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８、例示的な免疫療法剤、例えば抗ＰＤ−１抗体、または癌幹細胞性阻害剤と免疫療法剤、例えばＢＢＩ６０８と抗ＰＤ−１抗体の例示的な併用によって処置されたＣＴ２６異種移植結腸癌細胞における、例示的な癌幹細胞性マーカータンパク質である、例えばＣＤ１３３およびＣＤ４４の発現を示す図である。
【図６】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８（図６では「＊」で表示）によって処置された癌細胞における例示的な癌幹細胞性マーカーである、例えばβ−カテニン、ＮＡＮＯＧ、ＳＭＯ、およびＳＯＸ２の発現の例示的な低下を示す図である。
【図７】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８（図７では「＊」で表示）の異なる濃度によって処置されたＨｅＬａ細胞におけるＩＬ−６タンパク質産生の例示的な下方調節を示す図である。
【図８】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８（図８では「＊」で表示）によって処置されたＨｅＬａ細胞におけるＩＬ−６、サイクリンＤ１、ＭＭＰ−９、およびＢＬＣ２遺伝子発現の例示的な下方調節を示す図である。
【図９Ａ】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８によるＳＷ４８０異種移植結腸直腸癌細胞の処置後０、１、２、４、８、または２４時間におけるＩＬ−６タンパク質産生の例示的な下方調節を示す図である。
【図９Ｂ】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８によるＳＫＯＶ３異種移植卵巣癌細胞の処置後０、１、２、４、８、１６、または２４時間におけるＣＤ４４タンパク質発現の例示的な阻害を示す図である。
【図１０Ａ】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８（図１０Ａおよび図１０Ｂでは「＊」で表示）によって処置されたＳＫＯＶ３異種移植卵巣癌細胞におけるＩＤＯ１タンパク質量の例示的な低下を示す図である。
【図１０Ｂ】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８（図１０Ａおよび図１０Ｂでは「＊」で表示）によって処置されたＳＫＯＶ３異種移植卵巣癌細胞におけるＩＤＯ１タンパク質量の例示的な低下を示す図である。
【図１１】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８（図１１では「＊」で表示）によって処置されたＳＫＯＶ３異種移植卵巣癌細胞におけるインターフェロン−ガンマ（ＩＦＮγ）誘発性ＩＤＯ１発現の例示的な低下を示す図である。
【図１２Ａ】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８（図１２Ａおよび図１２Ｂでは「＊」で表示）によって処置されたＨｅＬａ細胞におけるインターフェロン−ガンマ（ＩＦＮγ）誘発性ＩＤＯ１発現の例示的な低下を示す図である。
【図１２Ｂ】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８（図１２Ａおよび図１２Ｂでは「＊」で表示）によって処置されたＨｅＬａ細胞におけるインターフェロン−ガンマ（ＩＦＮγ）誘発性ＩＤＯ１発現の例示的な低下を示す図である。
【図１３Ａ】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８によるＳＷ４８０異種移植結腸直腸癌細胞（図１３Ａ）およびＳＫＯＶ３異種移植卵巣癌細胞（図１３Ｂ）の処置後０、１、２、４、８、および２４時間におけるＩＤＯ１発現の例示的な低下を示す図である。
【図１３Ｂ】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８によるＳＷ４８０異種移植結腸直腸癌細胞（図１３Ａ）およびＳＫＯＶ３異種移植卵巣癌細胞（図１３Ｂ）の処置後０、１、２、４、８、および２４時間におけるＩＤＯ１発現の例示的な低下を示す図である。
【図１４】本開示の特定の実施形態により、対照、例示的なチェックポイント阻害剤、例えば抗ＰＤ−１抗体、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８、またはチェックポイント阻害剤と癌幹細胞性阻害剤、例えば抗ＰＤ−１抗体とＢＢＩ−６０８の例示的な併用によって処置された癌細胞におけるチェックポイント分子であるＰＤ−Ｌ１の例示的な発現を示す図である。
【図１５Ａ】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８によって処置された癌細胞におけるＩＦＮγ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現の例示的な下方調節を示す図である。
【図１５Ｂ】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８による処置後のインビボでのＰＤ−Ｌ１発現の例示的な下方調節を示す図である。
【図１６】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８がインビボでＢ細胞活性化を増加したことを示す図である。
【図１７】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８が結腸癌のＡｐｃＭｉｎ／＋マウスモデルにおいて増殖性ＣＤ８＋Ｔ細胞を増加したことを示す図である。
【図１８】本開示の特定の実施形態により、癌幹細胞性阻害剤とチェックポイント阻害剤の例示的な併用、例えばＢＢＩ６０８と抗ＰＤ−１抗体による癌の処置が、ＣＤ３抗体免疫蛍光染色によって示されたとき、腫瘍サンプルに存在する腫瘍浸潤Ｔリンパ球の数を増加したことを示す図である。
【図１９Ａ】本開示の特定の実施形態により、癌幹細胞性阻害剤とチェックポイント阻害剤の例示的な併用、例えばＢＢＩ６０８と抗ＰＤ−１抗体による癌の処置が、ＢＢＩ６０８または抗ＰＤ−１抗体いずれかの単独による処置と比べて、腫瘍サンプルに存在する腫瘍浸潤Ｔリンパ球（ＴＩＬ）の数を増加したことを示す図である。
【図１９Ｂ】本開示の特定の実施形態により、癌幹細胞性阻害剤とチェックポイント阻害剤の例示的な併用、例えばＢＢＩ６０８と抗ＰＤ−１抗体によるマウス癌モデルの処置が、ＢＢＩ６０８または抗ＰＤ−１抗体いずれかの単独による処置と比べて、腫瘍サンプルに存在する全細胞数におけるＣＤ３＋腫瘍浸潤Ｔリンパ球（ＴＩＬ）の割合を増加したことを示す図である。
【図１９Ｃ】本開示の特定の実施形態により、癌幹細胞性阻害剤とチェックポイント阻害剤の例示的な併用、例えばＢＢＩ６０８と抗ＰＤ−１抗体によるマウス癌モデルの処置が、ＢＢＩ６０８または抗ＰＤ−１抗体いずれかの単独による処置と比べて、腫瘍サンプルに存在する全細胞数におけるＣＤ８＋腫瘍浸潤Ｔリンパ球（ＴＩＬ）の割合を増加したことを示す図である。
【図２０】本開示の特定の実施形態により、例示的な癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８が、結腸癌のＡｐｃＭｉｎ／＋マウスモデルから分離された腫瘍におけるＩＦＮ−γ産生腫瘍特異的細胞毒性Ｔ細胞の数を増加したことを示す図である。
【発明を実施するための形態】
【００１７】
本明細書で使用される用語の定義は下記の通りである。
【００１８】
用語「約」が数字の範囲と結びつけて使用されるとき、これはこれらの数値の上および
下で境界を広げることによってその範囲を修正する。一般的に、用語「約」は本明細書で
は、数値を２０％、１０％、５％、または１％の変動で表示値の上および下に修正するた
めに使用される。特定の実施形態では、用語「約」は数値を１０％の変動で表示値の上お
よび下に修正するために使用される。特定の実施形態では、用語「約」は数値を５％の変
動で表示値の上および下に修正するために使用される。特定の実施形態では、用語「約」
は数値を１％の変動で表示値の上および下に修正するために使用される。
【００１９】
値の範囲が本明細書で示されるとき、これは各値およびこの範囲内の下位範囲を包含す
ることが意図されている。例えば、「１〜５ｍｇ」は、１ｍｇ、２ｍｇ、３ｍｇ、４ｍｇ
、５ｍｇ、１〜２ｍｇ、１〜３ｍｇ、１〜４ｍｇ、１〜５ｍｇ、２〜３ｍｇ、２〜４ｍｇ
、２〜５ｍｇ、３〜４ｍｇ、３〜５ｍｇ、および４〜５ｍｇを包含することが意図されて
いる。
【００２０】
用語「投与する」、「投与している」、または「投与」は本明細書ではこれらの最も広
い意味で使用される。これらの用語は本明細書で説明される化合物または医薬組成物を被
験体に導入するあらゆる方法を意味し、例えば、化合物を被験体に全身、局所、またはそ
の位置で導入することを含むことができる。このため、組成物（化合物を含有または非含
有のいずれでも）から被験体で産生される本開示の化合物は、これらの用語に包含される
。これらの用語が用語「全身的」または「全身に」とともに使用されるとき、これらは一
般的には血流における化合物または組成物のインビボでの全身吸収、または蓄積、それに
続く全身にわたる分布を意味する。
【００２１】
被験体における用語「癌」は、制御不能な増殖、不死、転移可能性、速い成長および増
殖速度、ならびに特定の形態学的特徴などの癌発生細胞に一般的な特性を有する細胞の存
在を意味する。しばしば、癌細胞は腫瘍もしくは塊の形態であるが、このような細胞は被
験体に単独で存在し得、または白血病細胞またはリンパ腫細胞のような独立した細胞とし
て血流中で循環し得る。本明細書で使用される癌の例には、限定されないが、肺癌、膵臓
癌、骨癌、皮膚癌、頭頸部癌、皮膚または眼球内黒色腫、乳癌、子宮癌、卵巣癌、腹膜癌
、結腸癌、直腸癌、結腸直腸腺癌、肛門部癌、胃癌、胃癌、消化器癌、胃腺癌、副腎皮質
癌、子宮癌、卵管癌、子宮内膜癌、膣癌、外陰癌、ホジキン病、食道癌、胃食道接合部癌
、胃食道腺癌、軟骨肉腫、小腸癌、内分泌系癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟組織
肉腫、ユーイング肉腫、尿道癌、陰茎癌、前立腺癌、膀胱癌、精巣癌、尿管癌、腎盂癌、
中皮腫、肝細胞癌、胆道癌、腎臓癌、腎細胞癌、慢性または急性白血病、リンパ球性リン
パ腫、中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物、脊髄軸腫瘍、脳幹神経膠腫、多形性グリア芽腫、
星状細胞腫、シュワン腫、上衣腫、髄芽腫、髄膜腫、扁平上皮細胞癌、下垂体腺腫を含み
、上記癌のいずれかの難治性型、または上記癌の１種類以上の組み合わせを含む。例示し
た癌のいくつかは全般的用語に含まれ、本用語に含まれる。例えば、泌尿器科癌は全般的
な用語であり、膀胱癌、前立腺癌、腎臓癌、精巣癌などを含み、肝胆道癌は別の全般用語
であり、肝臓癌（これ自体が全般的用語であり、肝細胞癌または胆管細胞癌を含む）、胆
嚢癌、胆道癌、または膵臓癌を含む。泌尿器科癌および肝胆道癌の両方は本開示によって
考慮され、用語「癌」に含まれる。
【００２２】
また、用語「癌」には用語「固形腫瘍」または「進行性固形腫瘍」が含まれる。「固形
腫瘍」は肉腫、癌腫、およびリンパ腫のような異常な腫瘍塊を形成する、癌などのこれら
の状態を意味する。固形腫瘍の例には、限定されないが、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、
神経内分泌腫瘍、胸腺種、線維腫、転移性結腸直腸癌（ｍＣＲＣ）などが含まれる。特定
の実施形態では、固形腫瘍疾患は腺腫、扁平上皮癌、大細胞癌などである。
【００２３】
特定の実施形態では、癌は食道癌、胃食道接合部癌、胃食道腺癌、胃癌、軟骨肉腫、結
腸直腸腺癌、乳癌、卵巣癌、頭頸部癌、メラノーマ、胃腺癌、肺癌、膵臓癌、腎細胞癌、
肝細胞癌、子宮頸癌、脳腫瘍、多発性骨髄腫、白血病、リンパ腫、前立腺癌、胆管癌、子
宮内膜癌、小腸腺癌、子宮肉腫、または副腎皮質癌である。特定の実施形態では、癌は食
道癌、胃食道接合部癌、胃食道腺癌、結腸直腸腺癌、乳癌、卵巣癌、頭頸部癌、メラノー
マ、胃腺癌、肺癌、膵臓癌、腎細胞癌、肝細胞癌、子宮頸癌、脳腫瘍、多発性骨髄腫、白
血病、リンパ腫、前立腺癌、胆管癌、子宮内膜癌、小腸腺癌、子宮肉腫、または副腎皮質
癌である。特定の実施形態では、癌は乳癌である。特定の実施形態では、癌は結腸直腸腺
癌である。特定の実施形態では、癌は小腸腺癌である。特定の実施形態では、癌は肝細胞
癌である。特定の実施形態では、癌は頭頸部癌である。特定の実施形態では、癌は腎細胞
癌である。特定の実施形態では、癌は卵巣癌である。特定の実施形態では、癌は前立腺癌
である。特定の実施形態では、癌は肺癌である。特定の実施形態では、癌は子宮肉腫であ
る。特定の実施形態では、癌は食道癌である。特定の実施形態では、癌は子宮内膜癌であ
る。特定の実施形態では、癌は胆管癌である。特定の実施形態において、それぞれの癌は
、切除不能、進行性、難治性、再発性、または転移性である。
【００２４】
特定の実施形態では、癌は食道癌、胃食道接合部癌、肺癌、消化器癌、白血病、リンパ
腫、骨髄腫、脳癌、膵臓癌、前立腺癌、肝臓癌、胃食道腺癌、軟骨肉腫、結腸直腸腺癌、
マイクロサテライト不安定高転移性結腸直腸癌、マイクロサテライト安定転移性結腸直腸
癌、ミスマッチ修復欠損を伴う結腸直腸癌、ミスマッチ修復欠損を伴わない結腸直腸癌、
乳癌、卵巣癌、頭頸部癌、メラノーマ、胃腺癌、肉腫、泌尿生殖器癌、婦人科癌、または
副腎皮質癌である。
【００２５】
特定の実施形態では、固形腫瘍から分離された細胞を免疫無防備ホストなどのホスト動
物に注入して固形腫瘍を確立している異種移植癌モデルにおいて、化合物または化合物の
併用の効能を試験する。特定の実施形態では、固形腫瘍から分離される細胞は癌幹細胞を
含む。ホスト動物は線虫、ミバエ、ゼブラフィッシュのようなモデル生物、またはマウス
（ヌードマウス、ＳＣＩＤマウス、ＮＯＤ／ＳＣＩＤマウス、ベージュ／ＳＣＩＤマウス
）、ラット、ウサギ、もしくは霊長類のような実験哺乳動物であることができる。重篤な
免疫不全ＮＯＤ−ＳＣＩＤマウスは、注入された細胞の関与を最大にするためのレシピエ
ントとして選択し得る。免疫不全マウスはヒト組織を拒絶せず、ＳＣＩＤおよびＮＯＤ−
ＳＣＩＤマウスは、ヒト造血および組織移植のインビボ試験用ホストとして使用されてい
る。ＭｃＣｕｎｅら，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４１：１６３２−９（１９８８）；Ｋａｍｅｌ
−Ｒｅｉｄ＆Ｄｉｃｋ，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：１７０６−９（１９８８）；Ｌａｒｏ
ｃｈｅｌｌｅら，Ｎａｔ．Ｍｅｄ．２：１３２９−３７（１９９６）。さらに、ベージュ
／ＳＣＩＤマウスも使用されている。
【００２６】
特定の実施形態では、固形腫瘍から分離された細胞を免疫適格ホストなどのホスト動物
に注入して固形腫瘍が確立されている同系癌モデルにおいて化合物または化合物の併用の
効能を試験する。特定の実施形態では、固形腫瘍から分離される細胞は癌幹細胞を含む。
ホスト動物は線虫、ミバエ、ゼブラフィッシュのようなモデル生物、好ましくはマウス（
Ｃ５７ＢＬ／６、ＢＡＬＢ／ｃ、ＶＭ／Ｄｋ、およびＢ６Ｄ２Ｆ１マウス）、ラット、ウ
サギ、または霊長類などの実験哺乳動物であることができる。
【００２７】
本明細書で使用されるとき、用語「癌幹細胞性阻害剤」は、癌幹細胞性に含まれる複数
の経路の少なくとも１つ、または複数の癌幹細胞性遺伝子の少なくとも１の発現（例えば
、タンパク質などの機能性生成物の産生）を標的化、低下、阻害、干渉、または調節する
ことができる分子を意味する。発現または発現されたタンパク質は、相当する癌幹細胞性
遺伝子のバイオマーカーとして使用することができる。これらのバイオマーカーの例には
、限定されないが、β−カテニン、ＮＡＮＯＧ、ＳＭＯ、ＳＯＸ２、ＳＴＡＴ３、ＡＸＬ
、ＡＴＭ、ｃ−ＭＹＣ、ＫＬＦ４、サバイビン、またはＢＭＩ−１が含まれる。癌幹細胞
性阻害剤は、癌幹細胞増殖ならびに異種癌細胞増殖を変化し得る。
【００２８】
特定の実施形態では、癌幹細胞性阻害剤は癌幹細胞性遺伝子によってコードされるタン
パク質と結合する小分子である。特定の実施形態では、癌幹細胞性阻害剤は、組換え結合
タンパク質もしくはペプチド（例えば、ＡＰＴＳＴＡＴ３；Ｋｉｍら，Ｃａｎｃｅｒ  Ｒ
ｅｓ．（２０１４）７４（８）：２１４４−５１を参照）、または核酸（例えば、ＳＴＡ
Ｔ３  ａｉＲＮＡ；内容がその全体について本明細書に組み込まれている米国特許第９，
３２８，３４５号を参照）、またはこれらの共役体などのバイオロジックであり、癌幹細
胞性遺伝子によってコードされるタンパク質と結合する。特定の実施形態では、癌幹細胞
性阻害剤は細胞である。特定の実施形態では、癌幹細胞性阻害剤はＳＴＡＴ３阻害剤であ
る（例えば、ＳＴＡＴ３の生物学的活性と結合して阻害する（Ｆｕｒｔｅｋら，ＡＣＳ  
Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．，２０１６，１１（２），ｐｐ３０８−３１８を参照））。
【００２９】
特定の実施形態では、癌幹細胞性阻害剤は、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［
２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ
］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン
−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、または
２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、これらのプロドラッグ、こ
れらの誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれか
の溶媒和物から選択される少なくとも１種類の化合物である。
【００３０】
特定の実施形態では、本開示の癌幹細胞性阻害剤は約３００〜約７００ｍｇの量で投与
され得る。特定の実施形態では、癌幹細胞性阻害剤は約７００〜約１２００ｍｇの量で投
与され得る。特定の実施形態では、癌幹細胞性阻害剤は約８００〜約１１００ｍｇの量で
投与され得る。特定の実施形態では、癌幹細胞性阻害剤は約８５０〜約１０５０ｍｇの量
で投与され得る。特定の実施形態では、癌幹細胞性阻害剤は約９６０〜約１０００ｍｇの
量で投与され得る。
【００３１】
特定の実施形態では、癌幹細胞性阻害剤の全量は１日に１回投与される。特定の実施形
態では、癌幹細胞性阻害剤は１日に約４８０ｍｇの用量で投与される。特定の実施形態で
は、癌幹細胞性阻害剤は１日に約９６０ｍｇの用量で投与される。特定の実施形態では、
癌幹細胞性阻害剤は１日に約１０００ｍｇの用量で投与される。特定の実施形態では、癌
幹細胞性阻害剤の全量は、１日に２回（ＢＩＤ）またはそれより多い頻度のような、１日
に１回を超える分割された用量で投与される。特定の実施形態では、癌幹細胞性阻害剤は
１日に２回約２４０ｍｇの用量で投与される。特定の実施形態では、癌幹細胞性阻害剤は
１日に２回約４８０ｍｇの用量で投与される。特定の実施形態では、癌幹細胞性阻害剤は
１日に２回約５００ｍｇの用量で投与される。特定の実施形態では、癌幹細胞性阻害剤は
経口投与される。
【００３２】
特定の実施形態では、癌幹細胞性阻害剤は式Ａの少なくとも１種類の化合物である。
【００３３】
本明細書で使用されるとき、用語「式Ａの少なくとも１種類の化合物」および「化合物
Ａ」はそれぞれ式Ａ：
【化２】
2020169223.tif 000004
を有する化合物、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容
可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される化合物を意味する。
【００３４】
特定の実施形態では、式Ａを有する化合物のプロドラッグおよび誘導体はＳＴＡＴ３阻
害剤である。式Ａを有する化合物のプロドラッグの非限定例は、例えば、米国付与前公開
第２０１２／０２５２７６３号に化合物番号４０１１および４０１２として記載されてい
るリン酸エステルおよびリン酸ジエステル、また、米国特許第９，１５０，５３０号に記
載されている適切な化合物を含む。式Ａを有する化合物の誘導体の非限定例は、例えば、
米国特許第８，９７７，８０３号に開示されている誘導体を含む。米国付与前公開第２０
１２／０２５２７６３号ならびに米国特許第９，１５０，５３０号および第８，９７７，
８０３号の開示はその全体が本明細書に参考によって組み込まれている。
【００３５】
つぎに示される式Ａを有する化合物は、
【化３】
2020169223.tif 000005
２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、ナパブカシン、またはＢＢ
Ｉ６０８としても知られ、これらの互変異性体を含み得る。
【００３６】
２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンを調製する適切な方法は、
その結晶型および追加的な癌幹細胞性阻害剤を含め、ＷＯ２００９／０３６０９９、ＷＯ
２００９／０３６１０１、ＷＯ２０１１／１１６３９８、ＷＯ２０１１／１１６３９９、
およびＷＯ２０１４／１６９０７８として公開された共同ＰＣＴ出願に記載されており、
これらの出願のそれぞれの内容はこれらの全体が本明細書に参考によって組み込まれてい
る。
【００３７】
特定の実施形態では、式Ａの少なくとも１種類の化合物は約８０〜約１５００ｍｇの量
で投与され得る。特定の実施形態では、式Ａの少なくとも１種類の化合物は約１６０〜約
１０００ｍｇの量で投与され得る。特定の実施形態では、式Ａの少なくとも１種類の化合
物は１日に約３００〜約７００ｍｇの量で投与され得る。特定の実施形態では、式Ａの少
なくとも１種類の化合物は約７００〜約１２００ｍｇの量で投与され得る。特定の実施形
態では、式Ａの少なくとも１種類の化合物は約８００〜約１１００ｍｇの量で投与され得
る。特定の実施形態では、式Ａの少なくとも１種類の化合物は約８５０〜約１０５０ｍｇ
の量で投与され得る。特定の実施形態では、式Ａの少なくとも１種類の化合物は約９６０
〜約１０００ｍｇの量で投与され得る。特定の実施形態では、式Ａの少なくとも１種類の
化合物の全量は、１日に１回投与される。特定の実施形態では、式Ａの少なくとも１種類
の化合物は１日に約４８０ｍｇの用量で投与される。特定の実施形態では、式Ａの少なく
とも１種類の化合物は１日に約９６０ｍｇの用量で投与される。特定の実施形態では、式
Ａの少なくとも１種類の化合物は１日に約１０００ｍｇの用量で投与される。特定の実施
形態では、式Ａの少なくとも１種類の化合物の全量は１日に２回（ＢＩＤ）またはそれよ
り多い頻度のような、１日に１回を超える分割された用量で投与される。特定の実施形態
では、式Ａの少なくとも１種類の化合物は１日２回約８０ｍｇ〜１日２回約７５０ｍｇの
量で投与され得る。特定の実施形態では、式Ａの少なくとも１種類の化合物は１日２回約
８０ｍｇ〜１日２回約５００ｍｇの量で投与され得る。特定の実施形態では、式Ａの少な
くとも１種類の化合物は１日２回約２４０ｍｇの用量で投与される。特定の実施形態では
、式Ａの少なくとも１種類の化合物は１日２回約４８０ｍｇの用量で投与される。特定の
実施形態では、式Ａの少なくとも１種類の化合物は１日２回約５００ｍｇの用量で投与さ
れる。特定の実施形態では、式Ａの少なくとも１種類の化合物は経口投与される。
【００３８】
本明細書で使用される用語「併用」、「併用の」、または「治療併用」は、障害、症状
、または徴候、例えば癌症状を治療する少なくとも２種類の異なる薬剤（例えば、癌幹細
胞性阻害剤から選択される少なくとも１種類の第一化合物および／または免疫療法剤から
選択される少なくとも１種類の第二化合物、および任意に１種類以上の追加薬剤）の投与
を意味する。このような併用／治療併用は、１種類の薬剤の投与を、第二薬剤の投与の前
、間、および／または後に含み得る。第一薬剤および第二薬剤は別々の医薬組成物として
被験体に同時、別々、または連続して投与することができる。第一薬剤および第二薬剤は
、同一または異なる投与経路によって被験体に投与し得る。特定の実施形態では、治療併
用は癌幹細胞性阻害剤から選択される少なくとも１種類の第一化合物の治療上効果的な量
および免疫療法剤から選択される少なくとも１種類の第二薬剤の治療上効果的な量を含む
。
【００３９】
例えば、癌幹細胞性阻害剤から選択される少なくとも１種類の第一化合物および免疫療
法剤から選択される少なくとも１種類の第二化合物は、異なる作用のメカニズムを有する
ことができる。特定の実施形態では、治療併用は、癌幹細胞性阻害剤から選択される少な
くとも１種類の第一化合物および免疫療法剤から選択される少なくとも１種類の第二化合
物の予防または治療効果を、相加的、相乗的、または増強的効果を有するようにともに機
能することによって改善する。特定の実施形態では、本開示の治療併用は、癌幹細胞性阻
害剤から選択される少なくとも１種類の第一化合物または免疫療法剤から選択される少な
くとも１種類の第二化合物と関連する副作用を低下する。癌幹細胞性阻害剤から選択され
る少なくとも１種類の第一化合物および免疫療法剤から選択される少なくとも１種類の第
二化合物の投与は、数週間まで、しかしより一般的には４８時間以内、最も一般的には２
４時間以内までの時間内で分けられ得る。
【００４０】
用語「効果的な量」および「治療上効果的な量」は、下記で示されるように、限定され
ないが、疾患治療を含む意図した結果を生じるのに十分である、本明細書で説明される化
合物または医薬組成物の量を意味する。特定の実施形態では、「治療上効果的な量」は全
身、局所、またはその位置（例えば、被検体においてその位置で産生される化合物の量）
で投与される化合物または医薬組成物の量を意味する。治療上効果的な量は、意図された
適用（インビトロまたはインビボ）、または被験体の体重および年齢、疾患状態の重篤度
、投与方法などの治療される被験体および疾患の状態に応じて変わり得、このことは従来
技術の当業者、例えば学会認定腫瘍専門医などによって容易に判断され得る。また本用語
は、細胞移動の低下などの標的細胞における特定の反応を誘発する用量に適用される。特
定の用量は、例えば、被験体の体重、特定の医薬組成物、被験体およびその年齢ならびに
現在の健康状態または健康状態のリスク、従うべき投与処方計画、疾患の重篤度、他の薬
剤との併用投与の有無、投与の時機、投与される組織、およびこれが送達される身体的送
達系に応じて変化し得る。
【００４１】
癌細胞増殖を低下させることに関する抗癌剤の「効果的な量」は、ある種の癌または腫
瘍細胞の増殖を、ある程度まで低下することができる量を意味する。本用語は、癌または
腫瘍細胞の増殖阻害、細胞分裂停止および／または細胞毒性効果、および／またはアポト
ーシスを引き起こすことができる量を含む。
【００４２】
被検体の癌の治療に関連する「治療上効果的な量」は、例えば、（１）被験体の癌の進
行における低下もしくは停止を含む、癌もしくは腫瘍増殖のある程度の阻害、（２）癌も
しくは腫瘍細胞の数の低下、（３）腫瘍サイズの低下、（４）周辺器官への癌もしくは腫
瘍細胞の浸潤の低下もしくは停止などの阻害、（５）転移の低下もしくは停止などの阻害
、（６）腫瘍の退縮もしくは排除を生じ得るが、ここまでは要求されていない抗腫瘍免疫
反応の増強、または（７）癌もしくは腫瘍と関連する１つ以上の症状のある程度までの軽
減、からなる効果の１つ以上を引き起こすことができる量を意味する。治療上効果的な量
は、対象の疾患状態、年齢、性別、および体重、ならびに対象において所望の反応を誘発
する１種類以上の抗癌剤の能力などの要因に応じて変わり得る。「治療上効果的な量」は
、化合物の投与から生じる毒性または有害効果を治療上有効な効果が上回る化合物の量で
ある。
【００４３】
用語「免疫療法剤」は本明細書で使用されるとき、被験体における免疫反応を誘発、増
強、または抑制することができるいずれかの薬剤を意味する。特定の実施形態では、免疫
療法剤は免疫チェックポイント調節剤であることができる。本明細書で使用されるとき、
用語「免疫チェックポイント調節剤」は、Ｔ細胞の活性化または機能を制御する１種類以
上の免疫チェックポイントタンパク質を完全または部分的に低下、阻害、干渉、または調
節することができる分子を意味する。特定の実施形態では、免疫チェックポイント調節剤
は免疫チェックポイント阻害剤である。
【００４４】
免疫チェックポイントタンパク質の非限定的な例には、細胞毒性Ｔリンパ球関連抗原（
ＣＴＬＡ、例えばＣＴＬＡ４）およびそのリガンドであるＣＤ８０およびＣＤ８６、プロ
グラム細胞死タンパク質（ＰＤ、例えばＰＤ−１）およびそのリガンドであるＰＤＬ１お
よびＰＤＬ２、インドールアミン−ピロール２，３−ジオキシゲナーゼ−１（ＩＤＯ１）
、Ｔ細胞膜タンパク質（ＴＩＭ、例えばＴＩＭ３）、アデノシンＡ２ａ受容体（Ａ２ａＲ
）、リンパ球活性化遺伝子（ＬＡＧ、例えばＬＡＧ３）、キラー免疫グロブリン受容体（
ＫＩＲ）などが含まれる。これらのタンパク質は、共刺激性または阻害性Ｔ細胞応答に関
与する。免疫チェックポイントタンパク質は、自己寛容および生理学的免疫反応の持続お
よび大きさを調節および維持する。
【００４５】
特定の実施形態では、免疫チェックポイント調節剤（例えば、免疫チェックポイント阻
害剤）は、免疫チェックポイントタンパク質と結合、またはその生物学的活性を阻害する
小分子、抗体、組換え結合タンパク質、またはペプチドであることができる。
【００４６】
免疫チェックポイント調節剤（例えば、免疫チェックポイント阻害剤）の非限定的な例
には、ＣＴＬＡ４阻害剤、ＰＤ１阻害剤、ＰＤＬ１、ＬＡＧ３阻害剤、ＫＩＲ阻害剤、Ｂ
７−Ｈ３リガンド、Ｂ７−Ｈ４リガンド、およびＴＩＭ３阻害剤が含まれる。
【００４７】
特定の実施形態では、免疫療法剤は、以下のものから選択される：例えば、ＡＭＰ−２
２４（ＰＤ−１リガンドであるプログラム細胞死リガンド２（ＰＤ−Ｌ２、Ｂ７−ＤＣ）
の細胞外領域およびＰＤ−１と結合するヒト免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｇ１のＦｃ領域から
なる組換えＢ７−ＤＣ  Ｆｃ融合タンパク質（本組換融合タンパク質はまたＢ７−ＤＣｌ
ｇとも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に組み込まれている国際特許出
願第ＰＣＴ／ＵＳ２００９／０５４９６９号および第ＰＣＴ／ＵＳ２０１０／０５７９４
０号を参照する））、アレムツズマブ（ＣＤ５２と結合する（アレムツズマブはまたキャ
ンパス、マブキャンパス、レムトラダ、キャンパス−１Ｈ、ＬＤＰ−０３とも呼ばれ、例
えば、内容がその全体について本明細書に組み込まれている米国特許第５，８４６，５３
４号、第７，９１０，１０４号、第８，４４０，１９０号、第８，６２３，３５７号、お
よび第８，６１７，５５４号を参照する））、アテゾリズマブ（ＰＤ−Ｌ１と結合する（
アテゾリズマブはまたＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＲＧ７４４６、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０と
も呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に組み込まれている米国特許第８，
２１７，１４９号を参照する））、バビツキシマブ（ホスファチジルセリンと結合する（
バビツキシマブはｃｈ３Ｇ４とも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に組
み込まれている米国特許第７，５７２，４４２号を参照する））、ベバシズマブ（ＶＥＧ
Ｆ−Ａと結合する（ベバシズマブはアバスチン、アルツザン、ｒｈｕＭａｂ−ＶＥＧＦ、
ＲＧ４３５、Ａ４．６．１とも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に組み
込まれている米国特許第７，１６９，９０１号、第７，６９１，９７７号、第７，７５８
，８５９号、および第８，１０１，１７７号を参照する））、ＢＭＳ−９３６５５９（プ
ログラム細胞死−１リガンド（ＰＤ−Ｌ１）と結合する（ＢＭＳ−９３６５５９抗体はＭ
ＤＸ−１１０５または１２Ａ４とも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に
組み込まれている米国特許第７，９４３，７４３号、第９，１０２，７２５号、および第
９，２１２，２２４号を参照する））、ＢＭＳ−９８６０１６（ＬＡＧ３（ＣＤ２２３）
と結合する（ＢＭＳ−９８６０１６抗体は２５Ｆ７またはＢＭＳ  ９８６０１６とも呼ば
れ、例えば、内容がその全体について本明細書に組み込まれている公開米国特許出願第２
０１５／０３０７６０９号を参照する））、ブレンツキシマブベドチン（ＣＤ３０と結合
するキメラヒト／マウス抗体薬剤共役体（ブレンツキシマブはアドセトリス、ＳＧＮ−３
５、ｃＡＣ１０−ｖｃＭＭＡＥ、ＡＣ１０とも呼ばれ、例えば、内容がその全体について
本明細書に組み込まれている米国特許第７，０９０，８４３号を参照する））、セツキシ
マブ（ＥＧＦＲと結合する（セツキシマブはアービタックス、ＩＭＣ−Ｃ２２５、ＣＭＡ
Ｂ００９、Ｍａｂ  Ｃ２２５とも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に組
み込まれている国際ＰＣＴ出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１５／０５０１３１号および公開米国
特許出願第２０１５／０３０７６０９号を参照する））、ゲムツズマブオゾガマイシン（
ＣＤ３３と結合するヒト化マウス抗体薬剤共役体（ゲムツズマブオゾガマイシンはマイロ
ターグ、ＣＭＡ−６７６、Ｐ６７．６とも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明
細書に組み込まれている公開米国特許出願第２００７／０００９５３２号を参照する））
、デュルバルマブ（ＰＤ−Ｌ１と結合する（デュルバルマブはＭＥＤＩ−４７３６、ＭＥ
ＤＩ４７３６とも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に組み込まれている
米国特許第８，７７９，１０８号および公開米国特許出願第２０１６／００６，０３４４
号を参照する））、イブリツモマブチウキセタン（キレート剤チウキセタンと共役体化さ
れたＣＤ２０と結合するネズミＩｇＧ１モノクローナル抗体（イブリツモマブチウキセタ
ンはゼヴァリン、２Ｂ８、Ｃ２Ｂ８、Ｙ２Ｂ８とも呼ばれ、例えば、内容がその全体につ
いて本明細書に組み込まれている米国特許第７，４２２，７３９号を参照する））、ＩＭ
Ｐ３２１（ＬＡＧ３の細胞外部分の免疫グロブリンとの２００ｋＤＡ可溶性ダイマー組換
え融合タンパク質（例えば、内容がその全体について本明細書に組み込まれている公開米
国特許出願第２０１１／００８３３１号を参照する））、イピリムマブ（ＣＴＬＡ４と結
合する（イピリムマブはヤーボイ、ＭＤＸ−０１０、ＭＤＸ１０１、１０Ｄ１、ＢＭＳ−
７３４０１６とも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に組み込まれている
米国特許第６，９８４，７２０号、第８，７８４，８１５号、および第８，６８５，３９
４号を参照する））、リリルマブ（キラー細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）と結合
する（リリルマブはＩＰＨ  ２１０１、ＩＰＨ２１０１、１−７Ｆ９、ＩＰＨ  ２１０２
、ＩＰＨ２１０２、またはＢＭＳ−９８６０１５とも呼ばれ、例えば、内容がその全体に
ついて本明細書に組み込まれている米国特許第８，１１９，７７５号および第８，９８１
，０６５号を参照する））、エノビリツズマブ（Ｂ７−Ｈ３と結合するヒト化マウス抗体
（エノビリツズマブはＭＧＡ２７１とも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細
書に組み込まれている米国特許第８，８０２，０９１号および第９，１５０，６５６号を
参照する））、ニボルマブ（ＰＤ−１と結合する（ニボルマブはオプジーボ、ＯＮＯ−４
５３８、ＭＤＸ−１１０６、ＢＭＳ−９３６５５８、５Ｃ４とも呼ばれ、例えば、内容が
その全体について本明細書に組み込まれている米国特許第８，００８，４４９号、第９，
０８４，７７６号、および第８，１６８，１７９号を参照する））、オファツムマブ（Ｃ
Ｄ２０と結合する（オファツムマブはアーゼラ、ＧＳＫ１８４１１５７、ＨｕＭａｘ−Ｃ
Ｄ２０、２Ｆ２とも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に組み込まれてい
る米国特許第８，５２９，９０２号を参照する））、パニツムマブ（ＥＧＦＲと結合する
（パニツムマブはベクティビックス、ＡＢＸ−ＥＧＦ、クローンＥ７．６．３、Ｐｍａｂ
、１３９とも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に組み込まれている米国
特許第６，２３５，８８３号、第７，８０７，７９８号、第９，０６２，１１３号、およ
び第９，０９６，６７２号を参照する））、ペンブロリズマブ（ＰＤ−１と結合する（ペ
ンブロリズマブはキイトルーダ、ＭＫ−３４７５、ＳＣＨ  ９００４７５、ランブロリズ
マブとも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に組み込まれている米国特許
第８，３５４，５０９号、第９，２２０，７７６号、第８，９５２，１３６号、および第
８，９００，５８７号を参照する））、ピジリズマブ（ＣＤ２０と結合する（ピジリズマ
ブはアーゼラ、ＧＳＫ１８４１１５７、ＨｕＭａｘ−ＣＤ２０、２Ｆ２、またはＣＴ−０
１１とも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に組み込まれている米国特許
第８，５２９，９０２号を参照する））、リツキシマブ（ＣＤ２０と結合する（リツキシ
マブはＭａｂＴｈｅｒａ、リツキサン、Ｃ２Ｂ８、ＩＤＥＣ−Ｃ２Ｂ８、ＩＤＥＣ−１０
２、またはＲＧ１０５とも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に組み込ま
れている米国特許第第５，７３６，１３７号を参照する））、トシツモマブ（ＣＤ２０と
結合する（トシツモマブはベキサールまたはＩ１３１とも呼ばれ、例えば、内容がその全
体について本明細書に組み込まれている米国特許第５，５９５，７２１号を参照する））
、トラスツズマブ（ＨＥＲ２／ｎｅｕと結合する（トラスツズマブはハーセプチン、ＲＧ
５９７、抗ｐｌ８５−ＨＥＲ２、ｈｕＭＡｂ４Ｄ５−８、ｒｈｕＭＡｂ  ＨＥＲ２とも呼
ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に組み込まれている米国特許第７，４３
５，７９７号および第７，５６０，１１１号を参照する））、トレメリムマブ（ＣＴＬＡ
４と結合する（トレメリムマブはチシリムマブ、ＣＰ−６７５２０６、クローン１１．２
．１とも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に組み込まれている米国特許
第６，６８２，７３６号、第８，６８５，３９４号、第７，８２４，６７９号、および第
８，１４３，３７９号を参照する））、およびウレルマブ（４−１ＢＢと結合する（ウレ
ルマブはＢＭＳ−６６３５１３とも呼ばれ、例えば、内容がその全体について本明細書に
組み込まれている米国特許第８，７１６，４５２号を参照する））。
【００４８】
特定の実施形態では、免疫療法剤はアテゾリズマブ（ＭＰＤＬ３２８０Ａ）、デュルバ
ルマブ、イピリムマブ、ランブロリズマブ（ＭＫ３４７５）、ニボルマブ、ペンブロリズ
マブ、またはトレメリムマブ（ＭＥＤＩ４７３６）から選択される。特定の実施形態では
、免疫療法剤はイピリムマブ、ニボルマブ、およびペンブロリズマブから選択される。
【００４９】
特定の実施形態では、イピリムマブは、例えば、約３ｍｇ／ｋｇの用量を３週毎に１回
、約９０分かけて静脈内に計４回で用量投与することができる。特定の実施形態では、ペ
ンブロリズマブは、例えば、約２ｍｇ／ｋｇの用量を３週毎に１回、約３０分かけて静脈
内に投与する。特定の実施形態では、ニボルマブは、例えば約３ｍｇ／ｋｇの用量を２週
毎に１回、約６０分かけて静脈内に投与する。
【００５０】
特定の実施形態では、免疫療法剤はサイトカイン、例えばインターフェロン（ＩＦＮ）
、インターロイキンなどである。具体的には、免疫療法剤はインターフェロン（ＩＦＮα
またはＩＦＮβ）、２型（ＩＦＮγ）、またはＩＩＩ型（ＩＦＮλ）であることができる
。免疫療法剤はまた、例えば、インターロイキン−１（ＩＬ−１）、インターロイキン−
１α（ＩＬ−１α）、インターロイキン−１β（ＩＬ−１β）、インターロイキン−２（
ＩＬ−２）、インターロイキン−３（ＩＬ−３）、インターロイキン−４（ＩＬ−４）、
インターロイキン−６（ＩＬ−６）、インターロイキン−８（ＩＬ−８）、インターロイ
キン−１０（ＩＬ−１０）、インターロイキン−１１（ＩＬ−１１）、インターロイキン
−１２（ＩＬ−１２）、インターロイキン−１３（ＩＬ−１３）、またはインターロイキ
ン−１８（ＩＬ−１８）などであることができる。
【００５１】
特定の実施形態では、免疫療法剤は免疫細胞などの細胞であることができる。例えば、
免疫細胞は、腫瘍に特異的なものなどであり、活性化、培養、および患者に投与すること
ができる。免疫細胞はナチュラルキラー細胞、リンホカイン活性化キラー細胞、細胞毒性
Ｔ細胞、樹状細胞、または腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）であることができる。特定の実施
形態では、免疫療法剤はシプリューセルＴ（ＡＰＣ８０１５、Ｐｒｏｖｅｎｇｅ（商標）
）であることができる。
【００５２】
本明細書で使用されるとき、「腫瘍浸潤リンパ球」（「ＴＩＬ」）は血流に残り、腫瘍
に移動している白血球（すなわち、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、マクロファージ）を意味
する。転移性消化器癌を有する患者の分析によって、ＴＩＬ集団中のＣＤ４＋およびＣＤ
８＋Ｔ細胞が患者腫瘍によって発現された体細胞変異由来の新しいエピトープを認識でき
ることが示唆される。
【００５３】
本明細書で使用される用語「進行する」、「進行した」、および「進行」は、（１）進
行性疾患（ＰＤ）の前療法（例えば、化学療法）に対する反応、（２）前療法（例えば、
化学療法）による治療後の１つ以上の新規病変の出現、および（３）標的病変の直径の合
計が対照として試験における最小合計（これはベースラインの合計が試験において最小の
場合、ベースラインの合計を含める）に対して少なくとも５％（例えば、１０％、２０％
）増加、のうちの少なくとも１つを意味する。
【００５４】
本明細書で使用される用語「塩（複数可）」は、無機および／または有機の酸および塩
基によって形成される酸および／または塩基塩を含む。本明細書で使用されるとき、用語
「医薬品として許容可能な塩」は、確実な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、ア
レルギー反応、および／または同様な事象を伴わずに被験体の組織と接触して使用するの
に適しており、正当な効果／リスク比で均衡化されている、これらの塩を意味する。医薬
品として許容可能な塩は従来技術で良く知られている。例えば、Ｂｅｒｇｅらは、Ｊ．Ｐ
ｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９７７）６６：１−１９で医薬品と
して許容可能な塩を詳細に説明している。
【００５５】
医薬品として許容可能な塩は、無機または有機酸によって生成され得る。適切な無機酸
の非限定例には、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、および過塩素酸が含まれる。適切な
有機酸の非限定例には、酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、お
よびマロン酸が含まれる。適切な医薬品として許容可能な塩の他の非限定例には、アジピ
ン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、
ベシル酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、カンファースルホン
酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシル硫酸塩、
エタンスルホン酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸塩、グリセロリン酸塩、グ
ルコン酸塩、ヘミ硫酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキ
シ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、
リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、２−ナフタレンスルホン
酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、パモ酸塩、
ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバ
ル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン
酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、および吉草酸塩が含まれる。いくつ
かの実施形態では、塩を生じ得る有機酸には、例えば、酢酸、プロピオン酸、グリコール
酸、ピルビン酸、シュウ酸、乳酸、トリフルオル酢酸、マレイン酸、マロン酸、コハク酸
、フマル酸、酒石酸、クエン酸、安息香酸、桂皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エ
タンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、およびサリチル酸が含まれる。
【００５６】
塩は開示される化合物の分離および精製の際にその場で、または別々に、この化合物を
適切な塩基または酸とそれぞれ反応させることなどによって調製し得る。塩基から得られ
る医薬品として許容可能な塩の非限定例には、アルカリ金属、アルカリ土金属、アンモニ
ウム、およびＮ＋（Ｃ１〜４アルキル）４塩が含まれる。適切なアルカリまたはアルカリ
土金属塩の非限定例には、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム
、鉄、亜鉛、銅、マンガン、およびアルミニウム塩が含まれる。さらに、適切な医薬品と
して許容可能な塩の非限定例には、必要に応じて、非毒性アンモニウム、第四級アンモニ
ウム、ならびにハロゲン化物イオン、水酸化物イオン、カルボン酸イオン、硫酸イオン、
リン酸イオン、硝酸イオン、低級アルキルスルホン酸イオン、およびアリールスルホン酸
イオンなどの対イオンを用いて形成されるアミンカチオンが含まれる。塩を生じ得る適切
な有機塩基の非限定例には、第一級アミン、第二級アミン、第三級アミン、天然由来置換
アミンを含む置換アミン、環状アミン、ならびにイソプロピルアミン、トリメチルアミン
、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、およびエタノールアミンの
ような塩基性イオン交換樹脂が含まれる。特定の実施形態では、医薬品として許容可能な
塩基付加塩は、アンモニウム、カリウム、ナトリウム、カルシウム、およびマグネシウム
塩から選択することができる。
【００５７】
本明細書で使用されるとき、用語「感受性化」またはこの同等語（例えば「感受性化す
る」または「感受性化」）は過去に治療処方計画（例えば、化学療法、標的化療法、また
は免疫療法）に耐性、非反応性、または多少反応性だった被験体を、その治療処方計画に
感受性、反応性、またはより反応性にすることを意味する。特定の実施形態では、用語「
感受性化」またはこの同等語は「再感受性化」またはこの同等語を含み、治療処方計画（
例えば、化学療法、標的化療法、または免疫療法）にこのような治療処方計画に対する前
暴露のために耐性、非反応性、または多少反応性となった被験体を、この治療処方計画に
感受性、反応性、またはより反応性にすることを意味する。
【００５８】
用語「溶媒和物」は、本開示の化合物の１つ以上の分子を１種類または複数の溶媒の１
つ以上の分子とともに含む集合体を示す。本開示の化合物の溶媒和物は、例えば水和物を
含む。
【００５９】
用語「被験体」は一般的には本明細書で説明される化合物または医薬組成物が投与され
得る生物を意味する。被験体は哺乳動物または哺乳動物細胞であることができ、ヒトまた
はヒト細胞を含む。また本用語は細胞もしくはドナーまたは当該細胞のレシピエントを含
む生物を意味する。様々な実施形態において、用語「被験体」はあらゆる動物（例えば、
哺乳動物）を意味し、ヒト、哺乳動物、および非哺乳動物に限定されないが、非ヒト霊長
類、マウス、ウサギ、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウマ、ウシ、ニワトリ、両生類、爬虫類、魚
類、線虫、および昆虫などを含み、本明細書で説明される化合物または医薬組成物のレシ
ピエントであるべきである。状況によっては、用語「被験体」と「患者」はヒト被験体に
関して本明細書では置き換え可能で使用される。
【００６０】
本明細書で使用される用語「相乗作用」、「相乗的」、「相乗的に」、または「増強さ
れた」は、２種類以上の成分の相互作用または併用の効果が、これらの個別効果の合計（
または「相加効果」）よりも大きい併用効果を生じることを意味する。
【００６１】
本明細書で使用されるとき、用語「治療」、「治療している」、「改善している」、お
よび「促進する」は置き換え可能で使用される。これらの用語は、限定されないが、治療
効果および／または予防効果を含む効果的または所望の結果を得るための方法を意味する
。治療効果によって、治療される根底にある疾患の根絶または改善を意味する。また、治
療効果は根底にある疾患と関連する生理学的症状の１つ以上の根絶または改善によって達
成され、改善が被験体で観察されるが、それにも関わらず、被験体は依然として根底にあ
る疾患を有し得る。予防効果では、医薬組成物は特定疾患を発症するリスクを有する被験
体、またはこの疾患の診断がなされていないとしても疾患の生理学的症状の１つ以上を報
告している被験体に投与することができる。
【００６２】
用語「癌を治療する」、「癌の治療」、またはこれらの同等語は、癌細胞の複製を減少
、低下、または阻害する、癌の拡散（転移形成）を減少、低下、または阻害する、腫瘍サ
イズを減少する、腫瘍の数を減少（すなわち、腫瘍負荷を低下）する、体内の癌性細胞の
数を少量化または低下する、外科的切除または他の抗癌療法後の癌の再発を予防する、お
よび／または癌が原因の疾患の症状を改善または緩和することを意味する。
【００６３】
本明細書で開示される少なくとも１種類の癌幹細胞性阻害剤または少なくとも１種類の
免疫療法剤は、医薬組成物の剤形であり得る。特定の実施形態では、医薬組成物は少なく
とも１種類の癌幹細胞性阻害剤を含み得る。特定の実施形態では、医薬組成物は式Ａの少
なくとも１種類の化合物、および少なくとも１種類の医薬品として許容可能な担体を含み
得る。特定の実施形態では、医薬組成物は少なくとも１種類の免疫療法剤を含み得る。特
定の実施形態では、医薬組成物は少なくとも１種類の免疫チェックポイント調節剤（例え
ば、免疫チェックポイント阻害剤）を含み得る。特定の実施形態では、医薬組成物は１種
類以上の化合物および少なくとも１種類の医薬品として許容可能な担体を含み得、ここで
１種類以上の化合物は被験体において式Ａの少なくとも１種類の化合物に転化され得る（
すなわち、プロドラッグ）。特定の実施形態では、医薬組成物は１種類以上の化合物およ
び少なくとも１種類の医薬品として許容可能な担体を含み得、ここで１種類以上の化合物
は被験体において少なくとも１種類の免疫療法剤に転化され得る（すなわち、プロドラッ
グ）。
【００６４】
本明細書で使用される用語「担体」は、例えば、対象医薬化合物を体の１つの器官また
は部分から体の別の器官または部分に運搬または輸送することに関する、またはそれを可
能とする、液体または固体増量剤、希釈剤、添加剤、溶媒、またはカプセル化剤などのよ
うな、医薬品として許容可能な物質、組成物、または賦形剤を意味する。各担体は製剤に
おける他の原料と適合性があり、患者に有害でないという意味で「許容可能」でなければ
ならない。医薬品として許容可能な担体、担体、および／または希釈剤の非限定例には、
ラクトース、グルコース、およびスクロースのような糖、トウモロコシデンプンおよびジ
ャガイモデンプンのようなデンプン、カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセ
ルロース、および酢酸セルロースのようなセルロースおよびその誘導体、粉末トラガカン
ト、モルト、ゼラチン、タルク、カカオバターおよび坐薬ワックスのような賦形剤、ピー
ナツオイル、綿実オイル、ベニバナオイル、ゴマオイル、オリーブオイル、コーンオイル
、およびダイズオイルのようなオイル、プロピレングリコールのようなグリコール、グリ
セリン、ソルビトール、マンニトール、およびポリエチレングリコールのようなポリオー
ル、オレイン酸エチルおよびラウリン酸エチルのようなエステル、寒天、水酸化マグネシ
ウムおよび水酸化アルミニウムのような緩衝化剤、アルギン酸、発熱物質を含まない水、
等張性生理食塩水、リンゲル溶液、エチルアルコール、リン酸緩衝液、および医薬製剤に
使用される他の非毒性適合性物質が含まれる。湿潤剤、乳化剤、ならびにラウリル硫酸ナ
トリウム、ステアリン酸マグネシウム、およびポリエチレンオキシド−ポリプロピレンオ
キシドコポリマーのような滑沢剤、同様に着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味料、香
味料と香料、保存剤、および抗酸化剤も組成物に含むことができる。
【００６５】
経口投与に適している本明細書で開示される医薬組成物は、カプセル、カシェ、ピル、
錠剤、菱形錠剤（通常、スクロースおよびアカシアまたはトラガントである香味ベースを
使用）、粉末、顆粒、水性または非水性液体の溶液、水性または非水性液体の懸濁液、水
中油エマルション、油中水エマルション、エリキシル、シロップ、トローチ（ゼラチン、
グリセリン、スクロース、および／またはアカシアのような不活性ベースを使用）、およ
び／またはマウスウォッシュの剤形であることができ、それぞれは本開示の少なくとも１
種類の化合物の所定量を含む。
【００６６】
本明細書で開示される医薬組成物はボーラス、舐剤、またはペーストとして投与し得る
。
【００６７】
経口投与用の固体投与剤形（カプセル、錠剤、ピル、糖衣錠、粉末、顆粒など）は、ク
エン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムのような１種類以上の医薬品として許容可能
な担体、および／またはデンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール
、および／またはケイ酸のような充填剤または増量剤、カルボキシメチルセルロース、ア
ルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース、および／またはアカシアな
どの結合剤、グリセロールなどの保湿剤、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピ
オカデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩、炭酸ナトリウム、およびグリコール酸デン
プンナトリウムなどの崩壊剤、パラフィンなどの溶解遅延剤、第四級アンモニウム化合物
などの吸収促進剤、セチルアルコール、モノステアリン酸グリセロール、およびポリエチ
レンオキシド−ポリプロピレンオキシドコポリマーなどの湿潤剤、カオリンおよびベント
ナイト粘土などの吸収剤、タルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム
、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、およびこれらの混合物などの
滑沢剤、ならびに着色剤のいずれかと混合され得る。カプセル、錠剤、およびピルの場合
、医薬組成物は緩衝化剤も含み得る。同様なタイプの固体組成物はまた、ラクトースまた
は乳糖、ならびに高分子量ポリエチレングリコールなどの添加剤を用いて、ソフトおよび
ハード充填ゼラチンカプセルにおける充填剤としても使用され得る。
【００６８】
経口投与用の液体投与剤形は、医薬品として許容可能なエマルション、マイクロエマル
ション、溶液、懸濁液、シロップ、およびエリキシルを含み得る。有効成分に加えて液体
投与剤形は従来技術で使用されている不活性希釈剤を含むことができ、例えば水または他
の溶媒、可溶化剤、および乳化剤などであり、エチルアルコール、イソプロピルアルコー
ル、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリ
コール、１，３−ブチレングリコール、オイル（特に綿実オイル、ピーナッツオイル、コ
ーンオイル、胚芽オイル、オリーブオイル、カスターオイル、およびゴマオイル）、グリ
セロール、テトラヒドロフリルアルコール、ポリエチレングリコール、ソルビタンの脂肪
酸エステル、およびこれらの混合物などが挙げられる。さらに、ヒドロキシプロピル−β
−シクロデキストリンなどのシクロデキストリンを使用して化合物を溶解することができ
る。
【００６９】
医薬組成物はまた、湿潤剤、乳化および懸濁化剤、甘味料、香味剤、着色剤、香料、お
よび保存剤などの補助剤を含むことができる。懸濁液は本開示による１種類以上の化合物
に加えて懸濁化剤を含むことができ、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、
ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微細結晶セルロース、アル
ミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天、およびトラガカント、ならびにこれら
の混合物などが挙げられる。
【００７０】
本明細書で開示される医薬組成物は、直腸または膣投与のために坐薬とすることができ
、本開示による１種類以上の化合物を、ココアバター、ポリエチレングリコール、坐薬ワ
ックス、またはサリチレートなどを含む１種類以上の適切な非刺激性添加剤または担体と
ともに混合して調製することができ、室温では固体だが体温で液体であり、従って直腸ま
たは膣腔で融解して本開示の化合物を放出する。膣投与に適した医薬組成物は、従来技術
で適切であることが知られている担体を含むペッサリー、タンポン、クリーム、ジェル、
ペースト、フォーム、またはスプレー製剤も含み得る。
【００７１】
本開示の医薬組成物または医薬錠剤の局所または経皮投与のための投与剤形には、粉末
、スプレー、軟膏、ペースト、クリーム、ローション、ジェル、溶液、パッチ、および吸
入剤を含むことができる。医薬組成物または医薬錠剤は、無菌条件下で、医薬品として許
容可能な担体、および必要とされ得る保存剤、緩衝剤、または高圧ガスとともに混合する
ことができる。
【００７２】
軟膏、ペースト、クリーム、およびジェルは、本開示の医薬組成物または医薬錠剤に加
えて、動物および植物脂肪、オイル、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、
セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコーン、ベントナイト、ケイ酸、タル
ク、ならびに酸化亜鉛、またはこれらの混合物などの添加剤を含むことができる。
【００７３】
粉末およびスプレーは、本開示の医薬組成物または医薬錠剤に加えて、ラクトース、タ
ルク、ケイ酸、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、およびポリアミド粉末などの添
加剤、またはこれらの物質の混合物を含むことができる。さらに、スプレーはクロロフル
オロヒドロカーボンのような一般的な高圧ガス、ならびにブタンおよびプロパンのような
揮発性非置換炭化水素を含むことができる。
【００７４】
眼科製剤、眼用軟膏、粉末、溶液なども本開示の範囲内であると解釈される。
【００７５】
非経口投与に適した組成物は、少なくとも１種類の医薬品として許容可能な無菌等張性
水性もしくは非水性溶液、分散液、懸濁液、エマルション、または使用直前に無菌注射用
溶液もしくは分散液に再構成され得る無菌粉末を含むことができ、抗酸化剤、緩衝剤、静
菌剤、製剤を意図されたレシピエントの血液と等張にする溶質、懸濁化剤、または増粘剤
を含むことができる。
【００７６】
本開示は、少なくとも１種類の癌幹細胞性阻害剤および少なくとも１種類の免疫療法剤
の治療併用が、少なくとも１種類の癌幹細胞性阻害剤と少なくとも１種類の免疫療法剤の
それぞれ単独の相加効果よりも癌細胞の阻害に大きな効果を有するという驚くべき発見を
報告する。
【００７７】
驚くべきことに、少なくとも１種類の癌幹細胞性阻害剤、例えばＢＢＩ６０８および少
なくとも１種類の免疫療法剤、例えば抗ＰＤ−１抗体の治療併用は、ネズミＣＴ２６ＣＲ
Ｃモデルに増強された抗腫瘍効果をもたらした。ＣＴ２６細胞は活動的な未分化の難治性
ヒト結腸直腸癌細胞を伴う分子的特徴を共有する。ネズミＣＴ２６ＣＲＣモデルはまたマ
イクロサテライト安定ＣＲＣモデルである。図１に示すように、ＣＴ２６腫瘍は抗ＰＤ−
１治療に最初の反応を示したが、直ちにこの治療に耐性となり、７日後により迅速に増殖
した。ＢＢＩ６０８単独療法はＣＴ２６同系ネズミＣＲＣモデルで継続的な抗腫瘍活性を
示し、治療の最後で７６％の腫瘍増殖阻害を生じた。また図１に示すように、ＢＢＩ６０
８と抗ＰＤ−１抗体の治療併用は、増強された抗腫瘍効果を生じ、治療した個体すべてに
腫瘍退縮をもたらした。さらに、退縮した腫瘍の４０％は治療中止後、３０日間検出され
ないままだった。体重低下、乱れた外観、死亡、および／または他の関連行動のような明
白な毒性は、治療経過の間、いずれの群でも認められなかった。
【００７８】
また驚くべきことに、少なくとも１種類の免疫療法剤は、癌幹細胞性を高め、高幹細胞
性癌細胞を豊富にした。高幹細胞性癌細胞の特徴は、血清フリー培地における懸濁下で腫
瘍スフェアを形成するこれらの能力である。さらに、ＣＤ１３３およびＣＤ４４が結腸直
腸癌幹細胞性マーカーとして広く使用されており、幹細胞因子ＮＡＮＯＧは高幹細胞性癌
細胞における幹細胞性特性の維持に重要な役割を演じる。図２および図３に示すように、
抗ＰＤ−１抗体治療した腫瘍から解離された腫瘍細胞は、未治療の対照腫瘍細胞よりも多
くの腫瘍スフェアを生じた。そして図４および図５に示すように、対照ＣＴ２６腫瘍は中
程度の量のＮＡＮＯＧおよびＣＤ１３３＋ＣＤ４４＋細胞を有することが認められたが、
ＮＡＮＯＧ、ＣＤ４４、およびＣＤ１３３の発現は抗ＰＤ−１抗体療法に反応して有意に
増加した。図６〜９Ｂならびに表１に示すように、癌幹細胞性阻害剤はＮＡＮＡＯＧおよ
びＣＤ４４＋、ならびに他のマーカー（例えば、ＩＬ−６、サイクリンＤｌ、ＭＭＰ−９
、ＢＣＬ２、ＳＭＯ、ＳＯＸ２、およびβ−カテニン）の量を低下するのに効果的である
ことが示された。
【００７９】
驚くべきことに、癌幹細胞性阻害剤は少なくとも１種類の免疫チェックポイント遺伝子
のタンパク質発現を低下できることが認められた。インドールアミン−ピロール２，３−
ジオキシゲナーゼ−１（ＩＤＯ１）およびプログラム死１受容体リガンド（ＰＤ−Ｌ１）
は免疫チェックポイントを阻害して、ホスト免疫監視を逃れるように癌細胞を助けること
ができる。図１０Ａおよび図１０Ｂに示すように、癌幹細胞性阻害剤ＢＢＩ６０８はＩＤ
Ｏ１タンパク質量を用量依存および時間依存の両形式で低下し、図１１、図１２Ａ、およ
び図１２Ｂに示すように、ＢＢＩ６０８はまた、内因性ＩＤＯ１発現およびインターフェ
ロン−γ誘発性ＩＤＯ１発現も阻害した。癌幹細胞性阻害剤ＢＢＩ６０８によるＩＤＯ１
発現の時間依存性阻害が２種の異なるマウスモデルで認められた（図１３Ａおよび図１３
Ｂを参照）。さらに、図１４に示すように、ＣＴ２６腫瘍細胞におけるＰＤ−Ｌ１発現が
抗ＰＤ−１抗体治療によって増加されたが、ＢＢＩ６０８治療ならびにＢＢＩ６０８と抗
ＰＤ−１抗体の治療併用の両方がＰＤ−Ｌ１発現を低下した。ＢＢＩ６０８はさらにＩＦ
Ｎγ誘発性ＰＤ−Ｌ１過剰発現を妨げ（図１５Ａを参照）、ＰＤ−Ｌ１をインビボで下方
調節した（図１５Ｂを参照）。
【００８０】
驚くべきことに、癌幹細胞性阻害剤はＴ細胞増殖および活性化を増加した。結腸癌のＡ
ｐｃＭｉｎ／＋マウスモデルでは、ＣＤ８＋Ｔ細胞は未治療対照群から採取した腫瘍でほ
とんど検出されなかったが、図１７に示すように、癌幹細胞性阻害剤ＢＢＩ６０８による
治療は腫瘍に存在する増殖する腫瘍浸潤性ＣＤ８＋Ｔリンパ球（ＴＩＬ）の数に有意な増
加をもたらした。
【００８１】
驚くべきことに、癌幹細胞性阻害剤はＢ細胞などの他のリンパ球の増殖および活性化を
増加する。例えば、図１６に示すように、ＢＢＩ６０８の治療後、Ｂ細胞増殖の複数の中
核が異種移植Ｂ１６Ｆ１０腫瘍に隣接するリンパ節に認められ、癌幹細胞性阻害剤ＢＢＩ
６０８がＢ細胞反応をインビボで誘発したことを示した。
【００８２】
さらに、図１８（ＩＨＣによる）および図１９（ＦＡＣＳによる）に示すように、腫瘍
浸潤Ｔリンパ球（ＴＩＬ）はＢＢＩ６０８および抗ＰＤ−１単独療法によって増加すると
考えられるが、ＢＢＩ６０８と抗ＰＤ−１抗体の治療併用は未治療対照腫瘍と比較して腫
瘍浸潤性Ｔ細胞数に３倍を超える増加をもたらした（図１８および図１９を参照）。具体
的には、腫瘍浸潤性Ｔ細胞（ＣＤ３＋）の数がＢＢＩ６０８と抗ＰＤ−１治療併用群で、
２種の方法で分析された対照未治療腫瘍から採取した腫瘍で検出された腫瘍浸潤Ｔリンパ
球（ＣＤ３＋）の数より３倍を超えて増加した（図１９Ａおよび図１９Ｂを参照）。同様
に、腫瘍浸潤性細胞毒性Ｔリンパ球（ＣＤ３＋およびＣＤ８＋）の数は、ＢＢＩ６０８と
抗ＰＤ−１抗体の併用によって治療された腫瘍では、未治療対照腫瘍で検出された腫瘍浸
潤性細胞毒性Ｔリンパ球の数と比べて２倍を超えて増加した（図１９Ｃ）。さらに図２０
に示すように、腫瘍抗原の存在では、未治療対照サンプルにおけるＣＤ８＋Ｔ細胞と比べ
て、癌幹細胞性阻害剤ＢＢＩ６０８治療サンプルから得られるＣＤ８＋Ｔリンパ球（細胞
毒性Ｔ細胞）の高い割合がＩＮＦ−γを産生し、ＢＢＩ６０８が腫瘍特異的細胞毒性Ｔリ
ンパ球増殖を増加したことを示した。
【００８３】
驚くべきことに、本開示の治療併用はまた、治療した被験体における長期抗腫瘍記憶を
もたらした。図２１Ａおよび図２１Ｂに示すように、ＣＴ２６腫瘍を拒絶していたＢＢＩ
６０８／抗ＰＤ−１抗体治療マウスおよび未治療対照マウスを、同一ＣＴ２６腫瘍細胞ま
たは無関係なネズミ乳癌４Ｔ１細胞のいずれかで接種した。未処理対照マウスと異なり、
ＢＢＩ６０８／抗ＰＤ−１抗体治療マウスはＣＴ２６腫瘍（図２１Ａ）に抵抗性だったが
、４Ｔ１腫瘍（図２１Ｂ）には抵抗性ではなかった。このため、いかなる特定の観察また
は仮定に制限されることなく、この結果は癌幹細胞性阻害剤および抗ＰＤ−１抗体の治療
併用によってＣＴ２６癌を治療されたマウスは、治療された腫瘍に特異的に発現される腫
瘍抗原に対する長期記憶が発達したことを示唆した。
【００８４】
いかなる特定の観察または仮定に制限されることなく、少なくとも１種類の癌幹細胞性
阻害剤（例えば、ＢＢＩ６０８）および少なくとも１種類の免疫療法剤（例えば、抗ＰＤ
−１抗体）の治療併用は、癌の治療において、例えば癌幹細胞性阻害剤単独（例えば、Ｂ
ＢＩ６０８単独）または免疫療法剤単独（例えば、抗ＰＤ−１抗体単独）による治療後に
観察される相加効果よりも大きい相乗効果を有し得る。
【００８５】
具体的には、含まれる例は、高幹細胞性癌細胞は、例えばネズミＭＳＳ  ＣＲＣモデル
において、抗ＰＤ−１治療耐性にも関与し、高癌幹細胞性特性は、例えばＣＴ２６モデル
において、抗ＰＤ−１単独療法に対する獲得された耐性に関与し得ることを示唆する。Ｃ
Ｔ２６腫瘍が抗ＰＤ−１治療に耐性となった後、腫瘍は未治療対照と比べて高幹細胞性表
現型が多く、すなわち、低接着プレートで高いスフェア形成能力を示し、ＣＲＣ高幹細胞
性マーカーであるｐ−ＳＴＡＴ３、ＮＡＮＯＧ、ＣＤ１３３、およびＣＤ４４の発現を増
加した。
【００８６】
いかなる特定の観察または仮定に制限されることなく、高幹細胞性癌細胞の免疫回避メ
カニズムは多因子的であり得るが、ｐ−ＳＴＡＴ３増加がＰＤ−１の過剰発現を生じ得、
次にＴ細胞表面上のＰＤ−１受容体と結合する投与された抗ＰＤ−１抗体と競合し、この
ようなＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−１相互作用がＴ細胞増殖および生存を阻害し、少なくとも
部分的に、ＣＴ２６腫瘍における高幹細胞性癌細胞の免疫耐性に加担している可能性があ
ると仮定することは妥当である。
【００８７】
特定の観察または仮定に制限されることなく、本明細書で考察される例は、癌幹細胞性
阻害剤から選択される少なくとも１種類の第一化合物および免疫療法剤から選択される少
なくとも１種類の第二化合物の治療併用は、癌幹細胞性阻害剤単独もしくは免疫療法剤単
独の効果、または癌幹細胞性阻害剤と免疫療法剤の相加効果よりも大きい癌増殖を阻害す
る相乗効果を生じることを示唆した。例に示すように、高幹細胞性癌細胞の癌幹細胞性阻
害剤（例えば、ＢＢＩ６０８）による治療は、高幹細胞性癌細胞の生存および自己再生の
同時阻害、ならびにインビトロおよびインビボにおける免疫チェックポイント遺伝子の下
方調節をもたらした。さらに、腫瘍細胞の癌幹細胞性阻害剤および免疫療法剤の併用（例
えば、ＢＢＩ６０８／抗ＰＤ−１抗体）による治療は、未治療対照と比べて腫瘍細胞のイ
ンビトロでのスフェア形成能力を低下させると考えられ、癌幹細胞性阻害剤（例えば、Ｂ
ＢＩ６０８）はベースおよび抗ＰＤ−１誘発されたＮＡＮＯＧ、ＣＤ４４、およびＣＤ１
３３発現、ならびに限定されないが、β−カテニン、ＳＭＯ、ＳＯＸ２、ＩＬ−６、サイ
クリンＤ１、ＭＭＰ−９、およびＢＣＬ２を含む他の癌幹細胞性マーカーの発現を低下さ
せると考えられ、癌幹細胞性阻害剤（例えば、ＢＢＩ６０８）は多くの免疫チェックポイ
ント遺伝子の発現を下方調節すると考えられて、Ｔ細胞活性化および腫瘍浸潤を増加して
長期抗腫瘍記憶を誘発し、癌幹細胞性阻害剤および免疫療法剤の併用（例えば、ＢＢＩ６
０８／抗ＰＤ−１抗体）は併用療法開始後の迅速な腫瘍の退縮に寄与する可能性がある腫
瘍内のＣＤ３＋Ｔ細胞浸潤を強く増加させた。
【００８８】
特定の実施形態では、被験体における癌を治療するための方法が本明細書で開示され、
癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許
容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第一
化合物の治療上効果的な量、ならびに免疫療法剤、このプロドラッグ、この誘導体、これ
らのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択
される少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な量を投与することを含む。
【００８９】
特定の実施形態では、（１）癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体、これ
らのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択
される少なくとも１種類の第一化合物、ならびに（２）免疫療法剤、このプロドラッグ、
この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの
溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第二化合物を、投与および／または使用のた
めの取扱説明書とともに含むキットが開示される。
【００９０】
様々な実施形態では、本明細書で開示される組成物は、癌幹細胞性阻害剤、この医薬品
として許容可能な塩、およびこの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第一化合物
、ならびに少なくとも１種類の界面活性剤を含む。
【００９１】
様々な実施形態では、本明細書で開示される組成物は、式Ａの化合物、この医薬品とし
て許容可能な塩、およびこの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の化合物、ならび
に少なくとも１種類の界面活性剤を含む。
【００９２】
特定の実施形態では、少なくとも１種類の界面活性剤は、ラウリル硫酸ナトリウム（Ｓ
ＬＳ）、ドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）、およびポリオキシルグリセリドから選択さ
れる。例えば、ポリオキシルグリセリドはラウロイルポリオキシルグリセリド（Ｇｅｌｕ
ｃｉｒｅ（商標）とも呼ばれる）またはリノレオイルポリオキシルグリセリド（Ｌａｂｒ
ａｆｉｌ（商標）とも呼ばれる）であることができる。このような組成物の例は、本明細
書に内容がその全体として組み込まれているＰＣＴ特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１４／０
３３５６６号で開示されている。
【００９３】
本開示は、選択された粒子サイズ分布を有する適切な医薬製剤および最適な粒子サイズ
分布を特定する方法、適切な薬剤処方計画、投与量、および間隔、結晶型を含む２−アセ
チルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンを調製する適切な方法、ならびに本明
細書に内容が参考によってその全体として組み込まれている、ＷＯ２００９／０３６０９
９、ＷＯ２００９／０３６１０１、ＷＯ２０１１／１１６３９８、ＷＯ２０１１／１１６
３９９、およびＷＯ２０１４／１６９０７８として公開された共同ＰＣＴ出願に記載され
たさらに具体的で適切な癌幹細胞性阻害剤のさらなる実施形態を提供する。
【００９４】
特定の実施形態では、本明細書で説明される化合物または医薬組成物は、様々な既知療
法のいずれかと併用して投与され、例えば、化学療法剤、他の抗新生物剤、抗炎症化合物
、および／または免疫抑制化合物が含まれる。特定の実施形態では、本明細書で説明され
る化合物、製品、および／または医薬組成物は、様々な既知治療のいずれかと組み合わせ
て有用であり、非限定例として、外科治療および方法、放射線療法、化学療法、および／
またはホルモンまたは他の内分泌関連治療が含まれる。
【００９５】
特定の実施形態では、本明細書において当該方法を必要とする被験体における癌を治療
する方法が提供され、当該方法は、癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体、
これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から
選択される少なくとも１種類の第一化合物の治療上効果的な量を投与することを含む。特
定の実施形態では、当該方法は、免疫療法剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらの
いずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択され
る少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な量を投与することを含む。特定の実施
形態では、当該方法は、癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのい
ずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される
少なくとも１種類の第一化合物の治療上効果的な量、ならびに免疫療法剤、このプロドラ
ッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいず
れかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な量を含む
治療併用を投与することを含む。特定の実施形態では、少なくとも１種類の癌幹細胞性阻
害剤は、医薬組成物に含まれる。特定の実施形態では、少なくとも１種類の免疫療法剤は
、医薬組成物に含まれる。
【００９６】
特定の実施形態では、本明細書において当該方法を必要とする被験体における免疫療法
剤に対する癌難治性または耐性を治療する方法が提供され、当該方法は、癌幹細胞性阻害
剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、お
よびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第一化合物の治療上
効果的な量を投与することを含む。特定の実施形態では、当該方法は、免疫療法剤、この
プロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれ
らのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な
量を投与することを含む。特定の実施形態では、当該方法は、癌幹細胞性阻害剤、このプ
ロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれら
のいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第一化合物の治療上効果的な量
、ならびに免疫療法剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品とし
て許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の
第二化合物の治療上効果的な量を含む治療併用を投与することを含む。特定の実施形態で
は、少なくとも１種類の癌幹細胞性阻害剤は、医薬組成物に含まれる。特定の実施形態で
は、少なくとも１種類の免疫療法剤は、医薬組成物に含まれる。
【００９７】
特定の実施形態では、本明細書において被験体における癌再燃を予防する方法が提供さ
れ、当該方法は、癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれか
の医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なく
とも１種類の第一化合物の治療上効果的な量を投与することを含む。特定の実施形態では
、当該方法は、免疫療法剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品
として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種
類の第二化合物の治療上効果的な量を投与することを含む。特定の実施形態では、当該方
法は、癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品と
して許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類
の第一化合物の治療上効果的な量、ならびに免疫療法剤、このプロドラッグ、この誘導体
、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物か
ら選択される少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な量を含む治療併用を投与す
ることを含む。特定の実施形態では、少なくとも１種類の癌幹細胞性阻害剤は、医薬組成
物に含まれる。特定の実施形態では、少なくとも１種類の免疫療法剤は、医薬組成物に含
まれる。
【００９８】
特定の実施形態では、本明細書において被験体における癌の再増殖または再発を抑制す
る方法が提供され、当該方法は、癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体、こ
れらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選
択される少なくとも１種類の第一化合物の治療上効果的な量を投与することを含む。特定
の実施形態では、当該方法は、免疫療法剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのい
ずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される
少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な量を投与することを含む。特定の実施形
態では、当該方法は、癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいず
れかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少
なくとも１種類の第一化合物の治療上効果的な量、ならびに免疫療法剤、このプロドラッ
グ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれ
かの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な量を含む治
療併用を投与することを含む。特定の実施形態では、少なくとも１種類の癌幹細胞性阻害
剤は、医薬組成物に含まれる。特定の実施形態では、少なくとも１種類の免疫療法剤は、
医薬組成物に含まれる。
【００９９】
特定の実施形態では、本明細書において被験体における癌を治療する方法が提供され、
当該方法は、癌と診断された被験体から得る生物学的サンプルにおける免疫チェックポイ
ント遺伝子の発現量を測定して、当該免疫チェックポイント遺伝子の発現量が基準量を超
えていることを確認し、当該被験体に癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体
、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物か
ら選択される少なくとも１種類の第一化合物の治療上効果的な量を投与することを含む。
特定の実施形態では、免疫チェックポイント遺伝子はＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２
、ＣＴＬＡ−４、ＩＤＯ１、ＳＴＡＴ３、ＩＬ−６、または他の免疫チェックポイントタ
ンパク質から選択されるバイオマーカーを発現する。特定の実施形態では、免疫チェック
ポイント遺伝子はＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＩＤＯ１、またはＩＬ−６と関連する。特定
の実施形態では、免疫チェックポイント遺伝子はＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、またはＩＤＯ
１と関連する。
【０１００】
特定の実施形態では、当該方法は癌と診断された被験体から得る生物学的サンプルにお
ける癌幹細胞性遺伝子の発現量を測定して、当該癌幹細胞性遺伝子の発現量が基準量を超
えていることを確認することを含む。特定の実施形態では、癌幹細胞性遺伝子はβ−カテ
ニン、ＮＡＮＯＧ、ＳＭＯ、ＳＯＸ２、ＳＴＡＴ３、ＡＸＬ、ＡＴＭ、ｃ−ＭＹＣ、ＫＬ
Ｆ４、サバイビン、またはＢＭＩ−１から選択されるバイオマーカーを発現する。特定の
実施形態では、癌幹細胞性遺伝子はβ−カテニン、ＮＡＮＯＧ、ＳＭＯ、ＳＯＸ２、また
はｃ−ＭＹＣから選択されるバイオマーカーを発現する。
【０１０１】
特定の実施形態では、当該方法は、免疫療法剤、このプロドラッグ、この誘導体、これ
らのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択
される少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な量を投与することを含む。
【０１０２】
特定の実施形態では、当該方法は、癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体
、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物か
ら選択される少なくとも１種類の第一化合物の治療上効果的な量、ならびに免疫療法剤、
このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、および
これらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果
的な量を含む治療併用を投与することを含む。特定の実施形態では、少なくとも１種類の
癌幹細胞性阻害剤は、医薬組成物に含まれる。特定の実施形態では、少なくとも１種類の
免疫療法剤は、医薬組成物に含まれる。
【０１０３】
特定の実施形態では、本明細書において被験体における癌を治療する方法が提供され、
被験体に癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品
として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種
類の第一化合物の治療上効果的な量を投与することを含み、ここで当該被験体は基準量を
超える免疫チェックポイント遺伝子発現量を有する。特定の実施形態では、当該癌は免疫
療法剤に難治性または耐性である。
【０１０４】
特定の実施形態では、本明細書において免疫療法剤に対して癌細胞を感受性化または再
感受性化する方法が提供され、当該方法は、癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この
誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒
和物から選択される少なくとも１種類の第一化合物を癌細胞に投与することを含み、ここ
で当該被験体は基準量を超える免疫チェックポイント遺伝子発現量を有する。特定の実施
形態では、当該癌細胞は被験体におけるものである。特定の実施形態では、免疫チェック
ポイント遺伝子は、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＩＤＯ１、および／もしくはＩＬ−６、ま
たは免疫反応を抑制するタンパク質から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーを
発現する。
【０１０５】
特定の実施形態では、当該被験体は基準量を超える癌幹細胞性遺伝子発現量を有する。
特定の実施形態では、当該癌幹細胞性遺伝子は、β−カテニン、ＮＡＮＯＧ、ＳＭＯ、Ｓ
ＯＸ２、ＳＴＡＴ３、ＡＸＬ、ＡＴＭ、ｃ−ＭＹＣ、ＫＬＦ４、サバイビン、またはＢＭ
Ｉ−１から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーを発現する。
【０１０６】
特定の実施形態では、癌幹細胞性遺伝子または免疫チェックポイント遺伝子の被験体に
おける発現量は、例えば１０％を超える腫瘍細胞が例えばＩＤＯ１を発現する場合、また
は癌が細胞膜ではなく細胞核におけるβ−カテニン局在と関連する場合、各基準量を超え
ると考えられる。従って、特定の実施形態では、当該方法は患者組織サンプルにおけるβ
−カテニンの位置を検出することを含み、ここでこのようなβ−カテニン発現の位置が患
者選択のバイオマーカーとして使用される。特定の実施形態では、有意なβ−カテニン発
現が細胞核で検出される。特定の実施形態では、β−カテニンの中程度から強い発現が、
例えば２０％以上の腫瘍細胞で検出される。
【０１０７】
特定の実施形態では、当該方法は、免疫療法剤、このプロドラッグ、この誘導体、これ
らのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択
される少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な量を投与することを含む。特定の
実施形態では、当該方法は、癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体、これら
のいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択さ
れる少なくとも１種類の第一化合物の治療上効果的な量、ならびに免疫療法剤、このプロ
ドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらの
いずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な量を
含む治療併用を投与することを含む。特定の実施形態では、少なくとも１種類の癌幹細胞
性阻害剤は、医薬組成物に含まれる。特定の実施形態では、少なくとも１種類の免疫療法
剤は、医薬組成物に含まれる。
【０１０８】
特定の実施形態では、本明細書において、癌幹細胞性遺伝子および／または免疫チェッ
クポイント遺伝子の適切な基準発現量を測定する方法が提供される。特定の実施形態では
、本明細書において、推定的なバイオマーカーを用いることによって被験体をスクリーニ
ングする方法が提供される。特定の実施形態では、本明細書において、被験体における癌
を治療する方法が提供され、選択された粒子サイズ分布を有する医薬製剤を付与すること
を含む。特定の実施形態では、本明細書において、最適化された粒子サイズ分布、適切な
薬剤処方計画、または投与量および間隔を特定する方法が提供される。特定の実施形態で
は、本明細書において、結晶型を含む２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９
−ジオンを調製する方法が提供される。この方法のいくつかは、内容が本明細書に参考に
よってその全体として組み込まれているＷＯ２００９／０３６０９９、ＷＯ２００９／０
３６１０１、ＷＯ２０１１／１１６３９８、ＷＯ２０１１／１１６３９９、およびＷＯ２
０１４／１６９０７８として公開されたＰＣＴ出願に記載されている。
【０１０９】
特定の実施形態では、本明細書において、免疫療法剤に対して癌細胞を感受性化または
再感受性化する方法が提供され、当該方法は、癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、こ
の誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶
媒和物から選択される少なくとも１種類の第一化合物を癌細胞に投与することを含む。特
定の実施形態では、当該方法は少なくとも１種類の免疫反応に対して癌細胞を感受性化ま
たは再感受性化する。特定の実施形態では、癌細胞は被験体に存在する。特定の実施形態
では、当該方法は、癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれ
かの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少な
くとも１種類の第一化合物の治療上効果的な量、ならびに免疫療法剤、このプロドラッグ
、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれか
の溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な量を含む治療
併用を投与することを含む。特定の実施形態では、少なくとも１種類の癌幹細胞性阻害剤
は、医薬組成物に含まれる。特定の実施形態では、少なくとも１種類の免疫療法剤は、医
薬組成物に含まれる。
【０１１０】
特定の実施形態では、当該方法は複数の方法によって免疫療法剤に対して癌細胞を感受
性化または再感受性化することを含む。特定の実施形態では、当該方法は癌細胞が免疫系
から逃れるのを助けることができる１種類以上のタンパク質の量を変えることを含む。特
定の実施形態では、当該方法は免疫チェックポイント遺伝子の発現を変えることを含む。
特定の実施形態では、当該方法は免疫チェックポイント遺伝子の発現を低下することを含
む。特定の実施形態では、当該方法は癌細胞によって生じる免疫抑制を変える（例えば、
低下する）ことを含む。特定の実施形態では、当該方法は腫瘍細胞の微小環境を変えるこ
とを含む。特定の実施形態では、当該方法はプログラム細胞死タンパク質１（ＰＤ１）に
対する１種類以上のリガンドの量を低下することを含む。特定の実施形態では、当該方法
はＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２の量を低下することを含む。特定の実施形態では
、当該方法はインドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ−１）の量を低下する
ことを含む。特定の実施形態では、当該方法はＴ細胞Ｉｇ−およびムチン−ドメイン含有
分子−３（ＴＩＭ−３）の量を低下することを含む。特定の実施形態では、当該方法はプ
ロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）の量を低下することを含む。
【０１１１】
特定の実施形態では、本明細書において、癌細胞またはその周辺における免疫細胞の数
を増加、免疫細胞の生存を増加、または免疫細胞を活性化する方法が提供され、当該方法
は癌細胞に癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬
品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１
種類の第一化合物を投与することを含む。特定の実施形態では、当該方法は１つ以上の免
疫細胞の存在および／または活性を増加することを含む。特定の実施形態では、当該方法
は免疫細胞の量を増加することを含む。特定の実施形態では、当該方法は免疫細胞の生存
を増加することを含む。特定の実施形態では、当該方法は免疫細胞を活性化させることを
含む。例えば、免疫細胞は白血球を含むことができる。白血球の例には、リンパ球（Ｔ細
胞、Ｔヘルパー細胞、およびナチュラルキラー細胞を含む）および／または抗原提示細胞
（樹状細胞を含む）を含むことができる。特定の実施形態では、当該方法はＴ細胞（例え
ば、細胞毒性Ｔ細胞またはＣＤ８＋細胞）の癌細胞への浸潤を増加させることを含む。特
定の実施形態では、当該方法は癌細胞またはその周辺におけるＴ細胞（例えば、細胞毒性
Ｔ細胞またはＣＤ８＋細胞）の生存を増加することを含む。特定の実施形態では、当該方
法は癌細胞またはその周辺における抗原提示細胞（例えば、樹状細胞）の補充を増加する
ことを含む。特定の実施形態では、当該方法は主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）クラスＩ
Ｉ分子の量を増加することを含む。特定の実施形態では、当該方法はインターロイキン−
１０（ＩＬ−１０）の量を増加することを含む。特定の実施形態では、癌細胞は被験体に
存在する。特定の実施形態では、当該方法は、癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、こ
の誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶
媒和物から選択される少なくとも１種類の第一化合物の治療上効果的な量、ならびに免疫
療法剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩
、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第二化合物の治
療上効果的な量を含む治療併用を投与することを含む。特定の実施形態では、少なくとも
１種類の癌幹細胞性阻害剤は医薬組成物に含まれる。特定の実施形態では、少なくとも１
種類の免疫療法剤は医薬組成物に含まれる。
【０１１２】
特定の実施形態では、癌は食道癌、胃食道接合部癌、腎細胞癌、肺癌、消化器癌、白血
病、リンパ腫、骨髄腫、脳癌、膵臓癌、子宮内膜癌、前立腺癌、肝臓癌、膀胱癌、胃食道
腺癌、軟骨肉腫、結腸直腸腺癌、マイクロサテライト不安定高転移性結腸直腸癌、マイク
ロサテライト安定転移性結腸直腸癌、ミスマッチ修復欠損を伴う結腸直腸癌、ミスマッチ
修復欠損を伴わない結腸直腸癌、乳癌、腎細胞癌、卵巣癌、頭頸部癌、メラノーマ、胃腺
癌、肉腫、泌尿生殖器癌、婦人科癌、または副腎皮質癌から選択される。特定の実施形態
では、癌はメラノーマである。特定の実施形態では、癌は乳癌である。特定の実施形態で
は、癌は膀胱癌である。特定の実施形態では、癌は腎細胞癌である。特定の実施形態では
、癌は結腸直腸癌である。特定の実施形態では、癌は結腸直腸腺癌である。特定の実施形
態では、癌はマイクロサテライト不安定高転移性結腸直腸癌である。特定の実施形態では
、癌はマイクロサテライト安定転移性結腸直腸癌である。特定の実施形態では、癌はミス
マッチ修復欠損を伴う結腸直腸癌である。特定の実施形態では、癌はミスマッチ修復欠損
を伴わない結腸直腸癌である。特定の実施形態では、癌は膵臓癌である。特定の実施形態
では、癌は子宮内膜癌である。
【０１１３】
特定の実施形態では、癌は切除不能であり得る。特定の実施形態では、癌は進行性であ
り得る。特定の実施形態では、癌は難治性であり得る。特定の実施形態では、癌は再発性
であり得る。特定の実施形態では、癌は転移性であり得る。
【０１１４】
特定の実施形態では、本明細書において、（１）癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ
、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれか
の溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第一化合物、ならびに（２）免疫療法剤、
このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、および
これらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第二化合物を、投与およ
び／または使用のための取扱説明書とともに含むキットが提供される。
【０１１５】
例
本発明の異なる特性をさらに説明するために、下記に例を示す。例はまた、本発明を実
施するために有用な方法論を説明する。これらの例は、請求される発明を制限しない。
【０１１６】
例１：ＣＴ２６ネズミ結腸癌異種移植のＢＢＩ−６０８および／または抗ＰＤ１抗体に
よる治療
ＣＴ２６ネズミ結腸癌異種移植モデル
ＢＡＬＢ／ｃマウス（Ｔａｃｏｎｉｃ、ハドソン、ＮＹ、米国）はすべて、実験動物ケ
ア評価認証協会が認定した施設において、静的なマイクロ隔離ケージで飼育した。ネズミ
ＭＳＳ状態結腸癌ＣＴ２６細胞（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−２６３９）およびネズミ乳癌細胞４
Ｔ１（ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−２５３９）を、米国培養細胞系統保存機関（ＡＴＣＣ、マナッ
サス、ＶＡ、米国）から入手し、１０％熱不活性化ウシ胎児血清を添加したＲＰＭＩ−１
６４０培地（ＡＴＣＣ）で増殖させた。対数的な増殖の間に収集した後、腫瘍をそれぞれ
８〜１２週齢の雌ＢＡＬＢ／ｃマウスの右背側脇腹に、３×１０５個のＣＴ２６腫瘍細胞
を皮下埋め込みして開始した。腫瘍容積が約２００ｍｍ３に達したとき、マウスを無作為
に４群に分け、対照としてラット免疫グロブリン（Ｉｇ）Ｇ（シグマ−アルドリッチ、セ
ントルイス、ＭＯ、米国）を１０ｍｇ／ｋｇ（静注、４日毎）、ＢＢＩ６０８を強制経口
投与で１００ｍｇ／ｋｇ（経口、１日毎）、抗ＰＤ−１抗体を１０ｍｇ／ｋｇ（ＢｉｏＸ
ｃｅｌｌ、ウェストレバノン、ＮＨ、米国、クローンＲＭＰ１−１４、静注、４日毎）、
またはＢＢＩ６０８を強制経口投与で１００ｍｇ／ｋｇ（経口、１日毎）および抗ＰＤ−
１抗体を１０ｍｇ／ｋｇ（ＢｉｏＸｃｅｌｌ、ウェストレバノン、ＮＨ、米国、クローン
ＲＭＰ１−１４、静注、４日毎）の併用の、いずれかによって連続１１日間治療した（ｎ
＝５／群）。体重および臨床症状を施設動物管理使用委員会が承認したプロトコルに従っ
て治療経過全体にわたって監視した。薬剤効能を、腫瘍容積を０．５×幅２×長さで掛け
算してｍｍ３で測定することによって分析した。代表的な結果を、少なくとも３回繰り返
した実験に関して示す。
【０１１７】
結果
図１に示すように、ＣＴ２６腫瘍は抗ＰＤ−１治療に最初の反応を示しただけであり、
直ちに耐性となり、治療７日後にさらに迅速に増殖した。ＢＢＩ６０８単独療法はＣＴ２
６同系ネズミＣＲＣモデルに継続的な抗腫瘍活性を示し、治療最後までに７６％の腫瘍増
殖阻害を生じた。逆に、ＢＢＩ６０８の抗ＰＤ−１抗体との併用治療は相乗的な抗腫瘍効
果を生じ、すべての治療した個体に腫瘍退縮をもたらした（図１）。さらに、退縮した腫
瘍の４０％が治療終了後３０日で引き続き検出されなかった。体重低下、乱れた外観、死
亡、および行動によって定められる明白な毒性は、治療経過の間いずれの群でも認められ
なかった。
【０１１８】
例２：ＢＢＩ−６０８および／または抗ＰＤ１抗体による治療後の腫瘍再負荷
ＢＢＩ−６０８および抗ＰＤ−１抗体による治療の開始３０日後、完全な腫瘍拒絶を示
した１０匹のマウスに腫瘍細胞を再負荷した。ＣＴ２６腫瘍細胞異種移植を拒絶した５匹
のＢＢＩ６０８／抗ＰＤ１抗体治療マウスを、３×１０５個のＣＴ２６細胞または３×１
０５個の４Ｔ１細胞のいずれかで左背側脇腹に再度注射した。対照として、３×１０５個
のＣＴ２６細胞または３×１０５個の４Ｔ１細胞を５匹の未処置未治療マウスの左背側脇
腹に注射した。
【０１１９】
図２Ａおよび図２Ｂに示すよう、ＣＴ２６腫瘍を拒絶していたマウスを同一ＣＴ２６腫
瘍細胞または非関連ネズミ乳癌４Ｔ１細胞のいずれかを負荷した。同一細胞が接種された
未処置マウスと比べて、再負荷されたマウスはＣＴ２６腫瘍に耐性だったが、４Ｔ１腫瘍
には耐性ではなかった。この結果は、ＢＢＩ６０８と抗ＰＤ−１抗体の併用療法によって
治療されたマウスは、ＣＴ２６腫瘍に特異的に発現される腫瘍抗原に対する長期記憶を有
したことを示す。
【０１２０】
例３：ＢＢＩ−６０８および／または抗ＰＤ１抗体による治療後の腫瘍スフェアの形成
腫瘍組織の一部を、２００Ｕ／ｍＬコラゲナーゼ（シグマ）および１００Ｕ／ｍＬのＤ
ＮアーゼＩ（シグマ）を含むＤＭＥＭ（ギブコ）を用いた３７℃、３０分間の酵素消化に
よって単一細胞懸濁系に解離させた。そして細胞を４０μｍストレーナーに通してろ過し
、ＡＣＫ溶解緩衝液（サーモフィッシャー）中で室温、５分間インキュベーションして赤
血球を取り除いた。ついでトリパンブルー（ギブコ）染色によって評価した１０００個の
生きた腫瘍細胞を１ｍＬスフェア培地に懸濁させて、低接着性細胞培養１２ウェルプレー
トに３重測定で加えた。癌スフェア培養培地は、ＤＭＥＭ／Ｆ１２（ギブコ）にＢ−２７
（ギブコ）、２０ｎｇ／ｍｌのＥＧＦ（Ｒ＆Ｄ）、１０ｎｇ／ｍｌ塩基性ＦＧＦ（Ｒ＆Ｄ
）、０．４％ＢＳＡ（ジェミニ）、および０．３％アガロースを含んだ。培養１０日後、
腫瘍スフェア数を計数した。
【０１２１】
ＣＴ２６腫瘍対照群における腫瘍細胞のほとんどが低い量の活性ｐ−ＳＴＡＴ３を有し
、腫瘍細胞のわずかな部分のみが強いｐ−ＳＴＡＴ３染色を有した。抗ＰＤ−１抗体治療
後、ｐ−ＳＴＡＴ３の強度が増加した。ＢＢＩ６０８はｐ−ＳＴＡＴ３量を、ＢＢＩ６０
８単独療法群およびＢＢＩ６０８と抗ＰＤ−１抗体の併用群の両方で低下させた。
【０１２２】
図３Ａおよび図３Ｂに示すように、抗ＰＤ−１抗体治療した腫瘍から解離された腫瘍細
胞は対照よりも多くの腫瘍スフェアを産生し、一方、ＢＢＩ６０８単独およびＢＢＩ６０
８／抗ＰＤ−１抗体併用療法群はともに対照よりも有意に少ない数のスフェアを有した。
【０１２３】
例４：ＢＢＩ−６０８および／または抗ＰＤ１抗体による治療後の遺伝子発現および細
胞表面マーカーの分析
免疫蛍光による遺伝子発現の分析
治療の最後に、腫瘍を安楽死させたマウスから収集した。切断した腫瘍の一部を３．７
％または１０％中性緩衝化ホルムアルデヒドに４℃で一晩固定し、ついでパラフィン包理
し、４〜５ミクロン切片に切断し、正帯電スライドに付着させた。ベーキングおよび脱パ
ラフィン処理後、腫瘍または対照組織を有するスライドを抗原復元のために１０ｍＭクエ
ン酸ナトリウム溶液、ｐＨ＝６．０において９８℃でインキュベーションした。その後、
スライドをＰ−ＳＴＡＴ３（Ｔｙｒ７０５）（ウサギ、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、
１：１００）、β−カテニン（マウス、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ、１：４００）、ＩＬ−６
（マウス、Ｎｏｖｕｓ  Ｂｉｏｌ．、１：１００）、ＰＤ−Ｌ１（ウサギ、Ｃｅｌｌ  Ｓ
ｉｇｎａｌｉｎｇ、１：１００）、ＰＣＮＡ（マウス、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ、１：５０
００）、ＣＤ８ａ（ウサギ、Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ、１：３０）、ＣＤ４４（ラット、Ｂ
ｉｏＬｅｇｅｎｄ、１：５０）、ＣＤ４４（マウス、Ｃｅｌｌ  Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、１
：１００）、ＣＤ１３３（マウス、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ、１：１００）、ＩＤＯ１（マウス
、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、１：１００）、および／またはＣＤ３（ウサギ、Ａｂｃａｍ、１
：１００）に対する第一抗体によって４℃で一晩、ついでＡｌｅｘａＦｌｏｕｒ蛍光色素
共役体化第二抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、１：３００または１：５００）によって室温
で１時間探査した。ＤＡＰＩ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）含有ＰｒｏＬｏｎｇ固定化メディ
ウムで固定後、２０倍対物レンズを備えたＺｅｉｓｓ  Ａｘｉｏ  Ｉｍａｇｅｒ  Ｍ２直
立蛍光顕微鏡でスライドを検査し、Ｚｅｎソフトウェアによって分析した。
【０１２４】
ウェスタンブロッティングによる遺伝子発現の分析
６ウェルプレートに加えた３×１０５個のＣＴ２６細胞を、対照ＤＭＳＯまたは１μＭ
のＢＢＩ６０８の存在下で１００ｎｇ／ｍｌのＩＦＮγによって２４時間処理した。細胞
を氷冷したＰＢＳで２回洗浄し、溶解緩衝液［５０ｍＭヘペス（ｐＨ７．５）、１％ノニ
デットＰ−４０、１５０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＥＤＴＡ、および１×プロテアーゼと
ホスファターゼ阻害剤混合物（ＥＭＤ  Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）］で溶解した。可溶性タン
パク質（２０μｇ）をＳＤＳ／ＰＡＧＥによって分離してニトロセルロースメンブランに
移した。Ｐ−ＳＴＡＴ３（Ｙ７０５）、ＰＤ−Ｌ１、およびアクチン（シグマ）に対する
第一抗体を使用して試験した。抗原−抗体複合体を増強化学発光（バイオラド）によって
可視化した。
【０１２５】
ＦＡＣＳ分析による細胞表面マーカー発現の分析
腫瘍を前述のように単一細胞懸濁液に解離させた。ＡＣＫ溶解後、細胞を計数して１０
６個／１００μＬの濃度でＰＢＳに懸濁させた。そして死んだ細胞をＺｏｍｂｉｅ  ＮＩ
Ｒ色素（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）によって標識し、Ｆｃブロッキング後、細胞をＢｉｏＬ
ｅｇｅｎｄから入手したＣＤ３（クローン１７Ａ２）、ＣＤ４（クローンＲＭ４−５）、
およびＣＤ８α（クローン５３−６．７）を含む抗体とともにインキュベーションした。
そして染色した細胞をＢＤ  ＬＳＲＦｏｒｔｅｓｓａを用いて分析した。Ｚｏｍｂｉｅ  
ＮＩＲ色素が陰性の細胞をさらにＴ細胞表面マーカー染色について分析した。
【０１２６】
遺伝子発現の統計的分析
結果を平均±標準誤差として表す。試験群間の統計学的有意は、ＧｒａｐｈＰａｄ  Ｐ
ｒｉｓｍ  Ｖ５．００および０．０５のアルファを用いた一元配置ＡＮＯＶＡによって判
断した。テューキー法を用いた事後分析を群間の有意を検定するために実施し、ｐ値＜０
．０５を有意と考えた。
【０１２７】
結果
ＢＢＩ６０８による治療後の遺伝子発現における変化を分析した。ＦａＤｕスフェア培
養をＤＭＳＯ（対照）または２ｍＭのＢＢＩ６０８によって６時間処置した。全ＲＮＡを
分離し、逆転写して得られたｃＤＮＡをｑＰＣＲ癌幹細胞アレイによって分析した。デー
タをハウスキーピング遺伝子であるＧＡＰＤＨの発現に対して基準化した。多くの主要な
分子マーカーならびに癌幹細胞の増殖および自己再生に関与する遺伝子の基準化した発現
は、これらの中で例えば、ＮＡＮＯＧ、ＡＸＬ、ＡＴＭ、ＳＴＡＴ３、およびＢＭＩ−１
が、下表１に示すように、ＢＢＩ６０８による処置で下方調節されることが認められた。
【表１】
2020169223.tif 000006
【０１２８】
図４および図５に示すように、対照ＣＴ２６腫瘍は中程度の量のＮＡＮＯＧ、ならびに
ＣＤ１３３＋ＣＤ４４＋細胞を有することが認められた。抗ＰＤ−１抗体療法はＮＡＮＯ
Ｇ、ＣＤ４４、およびＣＤ１３３発現を増加し、一方、ＢＢＩ６０８はベースおよび抗Ｐ
Ｄ−１抗体誘発ＮＡＮＯＧ、ＣＤ４４、およびＣＤ１３３発現を低下した。
【０１２９】
図６に示すように、高幹細胞性癌細胞（ＦａＤｕ癌幹細胞）のＤＭＳＯまたはＢＢＩ６
０８（２ｍＭ）による２４時間処置は自己再生遺伝子β−カテニン、ＮＡＮＯＧ、ＳＭＯ
、およびＳＯＸ２の発現低下をもたらした。
【０１３０】
図７は、ＢＢＩ６０８がＨｅＬａ細胞によるＩＬ−６タンパク質産生を下方調節したこ
とを示す。
【０１３１】
図８は、ＢＢＩ６０８がＨｅＬａ細胞においてＩＬ−６および他のＳＴＡＴ３標的遺伝
子を下方調節したことを示す。
【０１３２】
図９Ａは、ＢＢＩ６０８が結腸直腸癌異種移植モデル（ＳＷ４８０）において時間依存
的にＩＬ−６量を低下したことを示す。
【０１３３】
図９Ｂは、ＢＢＩ６０８が卵巣癌異種移植モデル（ＳＫＯＶ−３）において時間依存的
にＣＤ４４タンパク質発現を阻害したことを示す。
【０１３４】
図１０Ａは、ＢＢＩ６０８の表示濃度で３時間処理した後に、ＢＢＩ６０８がＳＫＯＶ
３細胞におけるＩＤＯ１タンパク質量を低下したことを示す。
【０１３５】
図１０Ｂは、ＢＢＩ６０８の表示濃度で８または２４時間処理したＳＫＯＶ３細胞にお
いて、ＢＢＩ６０８がＩＤＯ１タンパク質量を低下したことを示す。
【０１３６】
図１１は、ＢＢＩ６０８の１μＭまたは２μＭで６時間または２４時間処理した後に、
ＢＢＩ６０８がＳＫＯＶ３細胞における内因性ＩＤＯ１発現を阻害したことを示す。具体
的には、ＲＮＡを分離して逆転写し、ｃＤＮＡをｑＰＣＲアッセイに使用してＩＤＯ１の
ｍＲＮＡ量を測定した。データはＧＡＰＤＨに対して基準化した。
【０１３７】
図１２Ａは、ＢＢＩ６０８がＨｅＬａ細胞におけるインターフェロン−ガンマ（ＩＦＮ
γ）誘発性ＩＤＯ１発現を阻害したことを示す。具体的には、ＢＢＩ６０８（２μＭ）の
添加または無添加でＩＦＮγ（５０ｎｇ／ｍｌ）によって６時間、未処置または処置した
Ｈｅｌａ細胞からＲＮＡを分離して逆転写した。そして得られたｃＤＮＡをｑＰＣＲアッ
セイに使用してＩＤＯ１のｍＲＮＡ量を測定した。データはＧＡＰＤＨに対して基準化し
た。
【０１３８】
図１２Ｂは、ＨｅＬａ細胞におけるインターフェロン−ガンマ（ＩＦＮγ）誘発性ＩＤ
Ｏ１発現のＢＢＩ６０８による阻害の別の例を示す。具体的には、ＢＢＩ６０８（２μＭ
）の添加または無添加でＩＦＮγ（５０ｎｇ／ｍｌ）によって２４時間、未処置または処
置したＨｅｌａ細胞からＲＮＡを分離して逆転写した。そして得られたｃＤＮＡをｑＰＣ
Ｒアッセイに使用してＩＤＯ１のｍＲＮＡ量を測定した。データはＧＡＰＤＨに対して基
準化した。
【０１３９】
図１３Ａは、ＢＢＩ６０８が結腸直腸癌異種移植モデル（ＳＷ４８０）において時間依
存的にＩＤＯ１発現量を低下したことを示す。図１３Ｂは、ＢＢＩ６０８が卵巣癌異種移
植モデル（ＳＫＯＶ−３）において時間依存的にＩＤＯ１発現量も低下したことを示す。
【０１４０】
図１４は、ＣＴ２６モデルの腫瘍細胞におけるＰＤ−Ｌ１発現がＢＢＩ６０８治療によ
って低下したが、抗ＰＤ−１抗体治療によって増加したことを示す。
【０１４１】
図１５Ａは、ＩＦＮγが腫瘍細胞におけるＰＤ−Ｌ１の発現を増加したが、ＢＢＩ６０
８治療がＩＦＮγ誘発性ＰＤ−Ｌ１発現を低下したことを示す。
【０１４２】
図１５Ｂは、ＢＢＩ６０８の投与がネズミ異種移植モデルにおけるＢ１６Ｆ１０メラノ
ーマ細胞のＰＤ−Ｌ１発現染色に下方調節をもたらしたことを示し、インビボにおける免
疫回避メカニズムを阻害するＢＢＩ６０８の能力を実証する。
【０１４３】
例５：ＢＢＩ−６０８および／または抗ＰＤ１抗体による治療後の腫瘍抗原特異的Ｔ細
胞免疫反応の誘発
ＡｐｃＭｉｎ／＋Ｃ５７ＢＬ／６マウス
すべての動物を、実験動物ケア評価認証協会が認定した施設において、静的なマイクロ
隔離ケージで飼育した。検査によって、マウスは病原体フリーであることが確認され、培
養またはＰＣＲによってネズミヘリコバクター種は認められなかった。Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ
由来のＡｐｃＭｉｎ／＋マウスは、最初にＪａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（バー
ハーバー、ＭＥ）から入手し、野生型（ｗｔ）Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスと施設内で交配さ
せてＡｐｃＭｉｎ／＋を得た。１７週齢のＡｐｃＭｉｎ／＋マウスまたは相当する野生型
対照を賦形剤のみ、またはＢＢＩ６０８を１日２００ｍｇ／ｋｇのいずれかで４日間連続
して強制経口投与（経口、１日４回）によって治療した（ｎ＝４／群）。体重および臨床
症状を治療の経過を通して監視した。治療４日目に、動物を最後の投与４時間後に屠殺し
て、ＡｐｃＭｉｎ／＋小腸における腫瘍または野生型対照から得る正常小腸片を収集した
。
【０１４４】
腫瘍抗原特異的Ｔ細胞免疫反応の測定
脾臓組織を腫瘍収集した時点に上記ＡｐｃＭｉｎ／＋マウスから収集した。ＣＤ８＋Ｔ
細胞を、ＣＤ８＋Ｔ細胞分離キット（ＳＴＥＭＣＥＬＬ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を用い
て製造業者のプロトコルに従って分離した。２つの大きな腫瘍を対照ＡｐｃＭｉｎ／＋マ
ウスから収集し、１０％ＦＢＳ含有ＲＰＭＩ細胞培養培地に約１ｍｍ３のサイズに刻み、
３０ＧｙのＸ線で照射した。そして分離した脾臓Ｔ細胞を、腫瘍特異的抗原を含む照射し
たＡｐｃ腫瘍片の存在または不在下で抗ＣＤ２８抗体ともに２４時間インビトロで培養し
た。Ｔ細胞培養の最後の６時間の際に、ゴルジ分泌阻害剤モネンシンを各サンプルに加え
た。２４時間培養後、Ｔ細胞を収集してＡｌｅｘａ−４８８標識抗マウスＣＤ８ａラット
抗体（１：１００、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）によって染色し、ついで固定して、Ｃｙｔｏｆ
ｉｘ／Ｃｙｔｏｐｅｒｍ（ＢＤ）を製造業者のプロトコルに従って用いて透過処理した。
ついで、細胞内ＩＦＮ−γをＡｌｅｘａ−６４７標識抗マウスＩＦＮ−γラット抗体（１
：１００、ＢＤ）によって染色し、ＩＦＮ−γ産生ＣＤ８＋Ｔ細胞を前述のＺｅｉｓｓ蛍
光顕微鏡によって分析した。
【０１４５】
図１６はＢＢＩ６０８による治療が、異種移植Ｂ１６Ｆ１０腫瘍に隣接するリンパ節で
明らかなＢ細胞増殖の複数中核を有する頑強な免疫反応をもたらしたことを示し、Ｔ細胞
反応をインビボで誘発するＢＢＩ６０８の効能を実証する。組織はＰＣＮＡによって染色
した。
【０１４６】
図１７は結腸癌のＡｐｃＭｉｎ／＋マウスモデルにおいて、対照群ではＣＤ８＋Ｔ細胞
を見つけ出すことが困難だが、ＢＢＩ６０８は腫瘍浸潤ＣＤ８＋Ｔ細胞の数を有意に増加
したことを示す。ＣＤ８＋Ｔ細胞増殖が、増殖マーカーＰＣＮＡの増加した発現の検出に
よって実証された。ＣＤ８＋量を免疫蛍光によって分析した。
【０１４７】
図１８は、腫瘍浸潤性Ｔ細胞（ＴＩＬ）はＢＢＩ６０８および抗ＰＤ−１抗体の単独療
法によって増加する傾向があるが、この傾向は統計学的に有意ではなかったことを示す。
しかし、ＢＢＩ６０８と抗ＰＤ−１抗体治療の併用は対照腫瘍と比べて腫瘍浸潤Ｔ細胞の
数の３倍を超える増加をもたらした（図１８および図１９Ａ）。細胞毒性Ｔリンパ球（Ｃ
ＴＬ）亜集団に対する治療効果を、ＣＴ２６腫瘍から解離させた細胞にＦＡＣＳ分析を実
施して評価した。併用群の分析に十分な細胞を得るため、腫瘍を治療の２日後に収集した
。免疫蛍光染色結果と一致して、腫瘍浸潤Ｔ細胞（ＣＤ３＋）の数がＢＢＩ６０８と抗Ｐ
Ｄ−１抗体の併用治療群では、対照群と比べて２倍を超えて増加した（図１９Ｂ）。また
、ＢＢＩ６０８と抗ＰＤ−１抗体治療の併用は、対照と比べて腫瘍浸潤性細胞毒性Ｔ細胞
（ＣＤ３＋およびＣＤ８＋）の２倍を超える増加ももたらした（図１９Ｃ）。
【０１４８】
図２０は、腫瘍抗原の存在下で、ＢＢＩ６０８治療されたサンプルから得られたＣＤ８
＋Ｔ細胞（細胞毒性Ｔ細胞）が対照サンプルよりも高い割合でＩＮＦ−γを産生したこと
を示し、ＢＢＩ６０８が腫瘍特異的細胞毒性Ｔ細胞の数も増加したことを示唆する。
【０１４９】
本明細書で説明および考察される実施形態は、本発明を作製および使用するための出願
時点において、本発明者が知る最善の方法を従来技術の当業者に教示することのみが意図
されている。本明細書のいずれも本発明の範囲を限定することが意図されていない。提示
されるすべての例は代表的なものであり非限定的である。本発明の前述の実施形態は、上
記教示の観点において従来技術の当業者によって適用されて、本発明から逸脱することな
く、改良または改善され得る。従って、本請求およびこれらの同等物の範囲内で、本発明
は具体的に説明されたものとは別な方法で実施され得るものと理解されるべきである。
一実施形態において、例えば、以下の項目が提供される。
（項目１）
それを必要とする被験体における癌を治療する方法であって、
（ａ）癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第一化合物の治療上効果的な量、および
（ｂ）免疫療法剤、このプロドラッグ、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な量を投与することを含む、方法。
（項目２）
被験体における免疫療法剤に対して難治性または耐性である癌を治療する方法であって、
（ａ）癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第一化合物の治療上効果的な量、および
（ｂ）免疫療法剤、このプロドラッグ、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な量を投与することを含む、方法。
（項目３）
被験体における癌再燃を予防する方法であって、
（ａ）癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第一化合物の治療上効果的な量、および
（ｂ）免疫療法剤、このプロドラッグ、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な量
を投与することを含む、方法。
（項目４）
被験体における癌の再増殖または再発を抑制する方法であって、
（ａ）癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第一化合物の治療上効果的な量、および
（ｂ）免疫療法剤、このプロドラッグ、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な量
を投与することを含む、方法。
（項目５）
前記癌幹細胞性阻害剤がＳＴＡＴ３経路阻害剤を含む、項目１〜４のいずれか一項に記載の方法。
（項目６）
前記癌幹細胞性阻害剤が、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、および２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンを含む、項目１〜５のいずれか一項に記載の方法。
（項目７）
前記癌幹細胞性阻害剤が式Ａ：
【化１】
2020169223.tif 000007
を有する化合物を含む、項目１〜６のいずれか一項に記載の方法。
（項目８）
前記免疫療法剤が免疫チェックポイント調節剤を含む、項目１〜７のいずれか一項に記載の方法。
（項目９）
前記免疫療法剤がＰＤ１もしくはＰＤＬ１を標的とする治療剤または他の免疫チェックポイント調節剤を含む、項目１〜８のいずれか一項に記載の方法。
（項目１０）
前記被験体が基準量を超える免疫チェックポイント遺伝子発現量を有する、項目１〜９のいずれか一項に記載の方法。
（項目１１）
前記免疫チェックポイント遺伝子が、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ−４、ＩＤＯ１、ＳＴＡＴ３、およびＩＬ−６から選択される、項目１０に記載の方法。
（項目１２）
前記被験体が基準量を超える癌幹細胞性遺伝子発現量を有する、項目１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
（項目１３）
前記癌幹細胞性遺伝子が、β−カテニン、ＮＡＮＯＧ、ＳＭＯ、ＳＯＸ２、ＳＴＡＴ３、ＡＸＬ、ＡＴＭ、Ｃ−ＭＹＣ、ＫＬＦ４、サバイビン、またはＢＭＩ−１から選択される、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
前記癌が、食道癌、胃食道接合部癌、肺癌、消化器癌、白血病、リンパ腫、骨髄腫、脳癌、膵臓癌、子宮内膜癌、前立腺癌、肝臓癌、胃食道腺癌、軟骨肉腫、結腸直腸腺癌、乳癌、膀胱癌、腎細胞癌、卵巣癌、頭頸部癌、メラノーマ、胃腺癌、肉腫、泌尿生殖器癌、婦人科癌、または副腎皮質癌から選択される、項目１〜１３のいずれか一項に記載の方法。
（項目１５）
前記癌が、メラノーマ、乳癌、膀胱癌、腎細胞癌、結腸直腸癌、膵臓癌、または子宮内膜癌から選択される、項目１〜１４のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６）
前記癌が進行性、難治性、再発性、または転移性である、項目１〜１５のいずれか一項に記載の方法。
（項目１７）
癌細胞を免疫療法剤に対して感受性化または再感受性化する方法であって、前記癌細胞に癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第一化合物を投与することを含む、方法。
（項目１８）
前記癌細胞の前記感受性化または再感受性化が、免疫系から癌細胞が回避するように補助することができるタンパク質から選択される少なくとも１種類のタンパク質の量を変えることを含む、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記タンパク質が、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＩＤＯ−１、ＣＴＬＡ−４、およびＩＬ−６を含む、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
免疫細胞の数を増加する、免疫細胞の生存を増加する、または癌細胞もしくは周囲における免疫細胞を活性化する方法であって、癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第一化合物を投与することを含む、方法。
（項目２１）
前記癌細胞が被験体に存在する、項目１７〜２０のいずれか一項に記載の方法。
（項目２２）
前記癌幹細胞性阻害剤がＳＴＡＴ３経路阻害剤を含む、項目１７〜２１のいずれか一項に記載の方法。
（項目２３）
前記癌幹細胞性阻害剤が、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、および２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンを含む、項目１７〜２２のいずれか一項に記載の方法。
（項目２４）
前記癌幹細胞性阻害剤が式Ａ：
【化２】
2020169223.tif 000008
を有する化合物を含む、項目１７〜２３のいずれか一項に記載の方法。
（項目２５）
免疫療法剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第二化合物の治療上効果的な量を投与することを含む、項目１７〜２４のいずれか一項に記載の方法。
（項目２６）
前記免疫療法剤が免疫チェックポイント調節剤を含む、項目１７〜２５のいずれか一項に記載の方法。
（項目２７）
前記免疫療法剤が、ＰＤ１またはＰＤＬ１を標的とする治療剤または他の免疫チェックポイント調節剤を含む、項目１７〜２６のいずれか一項に記載の方法。
（項目２８）
前記癌が、食道癌、胃食道接合部癌、肺癌、消化器癌、白血病、リンパ腫、骨髄腫、脳癌、膵臓癌、子宮内膜癌、前立腺癌、肝臓癌、胃食道腺癌、軟骨肉腫、結腸直腸腺癌、乳癌、膀胱癌、腎細胞癌、卵巣癌、頭頸部癌、メラノーマ、胃腺癌、肉腫、泌尿生殖器癌、婦人科癌、または副腎皮質癌から選択される、項目１７〜２７のいずれか一項に記載の方法。
（項目２９）
前記癌が、メラノーマ、乳癌、膀胱癌、腎細胞癌、結腸直腸癌、膵臓癌、または子宮内膜癌から選択される、項目１７〜２８のいずれか一項に記載の方法。
（項目３０）
前記癌が進行性、難治性、再発性、または転移性である、項目１７〜２９のいずれか一項に記載の方法。
（項目３１）
前記癌がマイクロサテライト不安定高転移性結腸直腸癌である、項目１７〜３０のいずれか一項に記載の方法。
（項目３２）
前記癌がマイクロサテライト安定転移性結腸直腸癌である、項目１７〜３０のいずれか一項に記載の方法。
（項目３３）
前記癌がミスマッチ修復欠損を有する、項目１７〜３２のいずれか一項に記載の方法。（項目３４）
前記癌がミスマッチ修復欠損を有さない、項目１７〜３２のいずれか一項に記載の方法。
（項目３５）
被験体における癌を治療する方法であって、当該方法を必要とする被験体に、式Ａ：
【化３】
2020169223.tif 000009
を有する化合物、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の式Ａの化合物の治療上効果的な量、ならびに
ニボルマブ、ペンブロリズマブ、およびイピリムマブから選択される少なくとも１種類の免疫チェックポイント調節剤の治療上効果的な量
を投与することを含む、方法。
（項目３６）
被験体における免疫療法剤に対して難治性または耐性である癌を治療する方法であって、当該方法を必要とする被験体に、式Ａ：
【化４】
2020169223.tif 000010
を有する化合物、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の式Ａの化合物の治療上効果的な量、ならびに
ニボルマブ、ペンブロリズマブ、およびイピリムマブから選択される少なくとも１種類の免疫チェックポイント調節剤の治療上効果的な量
を投与することを含む、方法。
（項目３７）
癌を被験体における免疫反応に感受性化する方法であって、当該方法を必要とする被験体に、式Ａ：
【化５】
2020169223.tif 000011
を有する化合物、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の式Ａの化合物の治療上効果的な量を投与することを含む、方法。
（項目３８）
癌を被験体における免疫反応に再感受性化する方法であって、当該方法を必要とする被験体に、式Ａ：
【化６】
2020169223.tif 000012
を有する化合物、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の式Ａの化合物の治療上効果的な量を投与することを含む、方法。
（項目３９）
前記癌の前記感受性化または再感受性化が免疫細胞の量を増加することを含む、項目３７または３８に記載の方法。
（項目４０）
前記癌の前記感受性化または再感受性化が免疫細胞の生存を増加することを含む、項目３７〜３９のいずれか一項に記載の方法。
（項目４１）
前記癌の前記感受性化または再感受性化が免疫細胞を活性化することを含む、項目３７〜４０のいずれか一項に記載の方法。
（項目４２）
前記免疫細胞がＴ細胞を含む、項目３７〜４１のいずれか一項に記載の方法。
（項目４３）
前記Ｔ細胞がＣＤ８＋細胞を含む、項目４２に記載の方法。
（項目４４）
前記免疫細胞がＴヘルパー細胞を含む、項目３７〜４１のいずれか一項に記載の方法。（項目４５）
前記免疫細胞が抗原提示細胞を含む、項目３７〜４１のいずれか一項に記載の方法。
（項目４６）
前記免疫細胞が樹状細胞を含む、項目４５に記載の方法。
（項目４７）
前記癌の前記感受性化または再感受性化が免疫チェックポイント遺伝子の発現を低下することを含む、項目３７〜４６のいずれか一項に記載の方法。
（項目４８）
ＩＤＯ１の発現を低下することを含む、項目３７〜４７のいずれか一項に記載の方法。（項目４９）
ＰＤ−Ｌ１の発現を低下することを含む、項目３７〜４８のいずれか一項に記載の方法。
（項目５０）
ＰＤ−Ｌ２の発現を低下することを含む、項目３７〜４９のいずれか一項に記載の方法。
（項目５１）
ＩＬ−６の発現を低下することを含む、項目３７〜５０のいずれか一項に記載の方法。（項目５２）
（１）癌幹細胞性阻害剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第一化合物、（２）免疫療法剤、このプロドラッグ、この誘導体、これらのいずれかの医薬品として許容可能な塩、およびこれらのいずれかの溶媒和物から選択される少なくとも１種類の第二化合物、ならびに（３）前記少なくとも１種類の第一化合物および前記少なくとも１種類の第二化合物の投与および／または使用のための取扱説明書を含む、キット。
【図１】
2020169223.tif 000013
【図２Ａ】
2020169223.tif 000014
【図２Ｂ】
2020169223.tif 000015
【図３Ａ】
2020169223.tif 000016
【図３Ｂ】
2020169223.tif 000017
【図４】
2020169223.tif 000018
【図５】
2020169223.tif 000019
【図６】
2020169223.tif 000020
【図７】
2020169223.tif 000021
【図８】
2020169223.tif 000022
【図９Ａ】
2020169223.tif 000023
【図９Ｂ】
2020169223.tif 000024
【図１０Ａ】
2020169223.tif 000025
【図１０Ｂ】
2020169223.tif 000026
【図１１】
2020169223.tif 000027
【図１２Ａ】
2020169223.tif 000028
【図１２Ｂ】
2020169223.tif 000029
【図１３Ａ】
2020169223.tif 000030
【図１３Ｂ】
2020169223.tif 000031
【図１４】
2020169223.tif 000032
【図１５Ａ】
2020169223.tif 000033
【図１５Ｂ】
2020169223.tif 000034
【図１６】
2020169223.tif 000035
【図１７】
2020169223.tif 000036
【図１８】
2020169223.tif 000037
【図１９Ａ】
2020169223.tif 000038
【図１９Ｂ】
2020169223.tif 000039
【図１９Ｃ】
2020169223.tif 000040
【図２０】
2020169223.tif 000041
【外国語明細書】
2020169223000001.pdf