(57)【要約】      （修正有）【課題】液性免疫の抑制が治療的に有益である状態の治療または防止のための方法の提供。【解決手段】ＶＩＳＴＡアンタゴニストの単独使用、または他の免疫阻害物質と関連させて使用する方法。好ましくは、ＶＩＳＴＡアンタゴニストは抗ＶＩＳＴＡ抗体またはＶＩＳＴＡの断片である、方法。より好ましくは、他の免疫阻害物質は、ｉＮＯＳ／ＮＯ促進物質もしくは一酸化窒素もしくはＰＤ−１アゴニストもしくはＰＤ−Ｌ１アゴニストもしくはＣＤ４０アンタゴニストなどの別の液性免疫阻害物質である、方法。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
必要とする対象における、ＶＩＳＴＡが媒介する液性免疫阻害の阻害方法または無効化方法であって、ＶＩＳＴＡアンタゴニストの投与を含む前記方法。
【請求項２】
Ｂ細胞免疫が抑制される癌または感染性疾患状態を有する対象の治療のために使用される、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
必要とする対象における、ＶＩＳＴＡが媒介する液性免疫阻害の促進方法または増加方法であって、ＶＩＳＴＡアゴニストの投与を含む前記方法。
【請求項４】
Ｂ細胞応答または抗体応答が疾患病理に関与する、自己免疫性状態、アレルギー性状態、炎症性状態、または感染性状態を有する対象の治療のために使用される、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
必要とする対象における、限定はされないが、抗原特異的な抗体応答を含む、Ｂ細胞増殖またはＢ細胞応答の抑制方法であって、ＶＩＳＴＡアゴニストの投与を含む前記方法。
【請求項６】
Ｂ細胞応答または抗体応答が疾患病理に関与する、自己免疫性状態、アレルギー性状態、炎症性状態、または感染性状態を有する対象の治療のために使用される、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
必要とする対象における、限定はされないが、抗原特異的な抗体応答を含む、Ｂ細胞増殖またはＢ細胞応答の増加方法であって、ＶＩＳＴＡアンタゴニストの投与を含む前記方法。
【請求項８】
Ｂ細胞免疫が抑制される癌または感染性疾患状態を有する対象の治療のために使用される、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
抗原または治療抗体に対して誘発される液性免疫応答の促進方法であって、ＶＩＳＴＡアンタゴニストの使用を含む治療レジメンにおける、そのような抗原または抗体の投与を含む前記方法。
【請求項１０】
前記抗原が、腫瘍抗原、自己抗原、アレルゲン、または感染病原体の抗原である、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記抗体が、腫瘍抗原、自己抗原、アレルゲン、または感染病原体の抗原に対して特異的である、請求項９に記載の方法。
【請求項１２】
治療ワクチンまたは予防ワクチンによって誘発される液性免疫応答の促進方法であって、ＶＩＳＴＡアンタゴニストの使用を含む治療レジメンにおける、そのようなワクチンの投与を含む前記方法。
【請求項１３】
前記ワクチンが、腫瘍抗原、自己抗原、アレルゲン、または感染病原体の抗原を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項１４】
ｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質の投与をさらに含む、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
ｉＮＯＳ／ＮＯ促進物質、または一酸化窒素もしくは一酸化窒素を含む化合物の投与を
さらに含む、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記ｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質が、一酸化窒素を阻害する化合物であるか、または一酸化窒素の合成を阻害する化合物である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１７】
前記ｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質が、一酸化窒素を促進する化合物であるか、または一酸化窒素の合成を促進する化合物である、請求項１４に記載の方法。
【請求項１８】
前記化合物が、任意選択で、ＮＧ−ニトロ−Ｌ−アルギニンメチルエステル、ＮＧ−エチル−Ｌ−アルギニン、Ｎ−イミノエチル−Ｌ−アルギニン、Ｌ−ＮＧ−メチルアルギニン、及びＮＧ−ニトロ−Ｌ−アルギニンであるアルギニン誘導体であるか、または前記阻害物質が、ＮＧ−ニトロ−Ｌアルギニンメチルエステルである、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記化合物が、ロバスタチン、フェニル酢酸のナトリウム塩（ＮａＰＡ）、ＦＰＴ阻害物質ＩＩ、Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）、及びｃＡＭＰであるか、またはこれらのすべてが、参照によって、それらの全体がここに組み込まれる、米国第６，５８６，４７４号、第６，５４５，１７０号、第６，５９３，３７２号、第６，７８７，６６８号、第６，８０９，１１７号、第６，５９１，８８９号、第７，１９６，１１８号、第７，０４９，０５８号において開示されているｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質のいずれかである、請求項１７に記載の方法。
【請求項２０】
前記ＶＩＳＴＡアンタゴニストが、抗ＶＩＳＴＡ抗体またはＶＩＳＴＡの断片である、請求項１〜１９のいずれかに記載の方法。
【請求項２１】
前記ｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質が、Ｌ−ＮＭＡまたはＬＮＭＭＡである、先行請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項２２】
前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、アゴニストである抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体または抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体断片またはＶＩＳＴＡ−Ｉｇ結合体またはＶＩＳＴＡの多量体形態である、先行請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項２３】
前記ＶＩＳＴＡ−Ｉｇが、任意選択で、少なくとも１つのエフェクター機能の減弱または増加のために改変され得る、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４のＦｃ領域またはその断片を含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
前記対象が、癌または感染性疾患を有する、先行請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項２５】
前記対象が、レトロウイルスなどのウイルス、細菌、または寄生虫によって引き起こされる感染性疾患を有する、先行請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項２６】
前記対象が、進行した癌もしくは転移性の癌を有し、及び／または固形腫瘍を有する、先行請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項２７】
前記癌が、肉腫、黒色腫、卵巣癌、肺癌、リンパ腫、白血病、または骨髄性の癌である、請求項２６に記載の方法。
【請求項２８】
前記ＶＩＳＴＡアゴニストまたはＶＩＳＴＡアンタゴニストが、未変化の抗ＶＩＳＴＡ抗体または抗ＶＩＳＴＡ抗体断片である、先行請求項に記載の方法。
【請求項２９】
前記抗体が、ヒトのものであるか、またはヒト化されたものである、請求項２８に記載の方法。
【請求項３０】
前記抗体が、ヒトＦｃ領域を含む請求項２８に記載の方法。
【請求項３１】
前記Ｆｃ領域が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４のものである、請求項３０に記載の方法。
【請求項３２】
前記Ｆｃ領域に変異が導入され、補体との結合、ＦｃＲとの結合、ＡＤＣＣ、糖鎖修飾、または半減期を阻害または増進する、請求項２８に記載の方法。
【請求項３３】
ＰＤ−１アゴニストもしくはＰＤ−Ｌ１アゴニスト、またはＰＤ−１アンタゴニストもしくはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストの投与をさらに含む、先行請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項３４】
前記アンタゴニストが、抗ＰＤ−１抗体もしくは抗ＰＤ−Ｌ１抗体、またはＰＤ−１融合タンパク質である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３５】
前記アゴニストが、抗ＰＤ−１抗体もしくは抗ＰＤ−Ｌ１抗体、またはＰＤ−１融合タンパク質もしくはＰＤ−Ｌ１融合タンパク質、またはＰＤ−１もしくはＰＤ−Ｌ１を発現する細胞である、請求項３３に記載の方法。
【請求項３６】
ＶＩＳＴＡアンタゴニスト及びｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質が、一緒に投与される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項３７】
ＶＩＳＴＡアゴニスト及びｉＮＯＳ／ＮＯ促進物質が、一緒に投与される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項３８】
Ｂ細胞免疫を促進するための治療レジメンにおいて、ＶＩＳＴＡアンタゴニスト及びｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質が別々に投与される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項３９】
ＶＩＳＴＡアンタゴニストである化合物及びｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質である化合物が、単独投与されるこうした化合物のいずれかと比較して、液性免疫に対する相乗作用を誘発するために十分な量で投与される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
【請求項４０】
ＶＩＳＴＡアゴニストである化合物、及びｉＮＯＳ／ＮＯ促進物質または一酸化窒素が、単独投与されるこうした化合物のいずれかと比較して、液性免疫に対する相乗作用を誘発するために十分な量で投与される、先行請求項のいずれかに記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、２０１４年６月１１日出願の米国仮出願第６２／０１０，７３６号に対する優先権を主張する。この出願は、参照によってその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
本発明は、ＶＩＳＴＡがＢ細胞応答性を調節（抑制）するという発見に関する。この発見に基づき、本発明は、Ｂ細胞応答性の抑制と、Ｂ細胞応答性の低減が治療的に有益である状態の治療と、を目的とした、ＶＩＳＴＡアゴニストの単独使用、またはｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質などの他の免疫抑制因子と関連させた使用に関する。また、本発明は、Ｂ細胞応答性の促進と、Ｂ細胞応答性の増進が治療的に有益である状態の治療のための、ＶＩＳＴＡアンタゴニストの単独使用または併用にも関する。
【背景技術】
【０００３】
骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）による、Ｔ細胞応答に対する阻害は、腫瘍の微小環境において、十分に明らかにされている。本発明の発明者らは、ＬＰ−ＢＭ５レトロウイルスを、それに感受性であるＢ６マウスに感染させ、その感染期間中に単球性ＭＤＳＣを導入することで、重度の免疫不全が引き起こされることを示した（２０１３，Ｊ．Ｖｉｒａｌ．８７：２０５８−２０７１）。こうしたＭＤＳＣは、エクスビボでの抑制アッセイにおいて、Ｔ細胞応答性だけでなく、Ｂ細胞応答性も阻害した。刺激されたＴ細胞の増殖及びＩＦＮ−ガンマの産生の、ＭＤＳＣによる阻害は、ほとんど完全にｉＮＯＳ／ＮＯ依存性であった一方で、Ｂ細胞応答のＭＤＳＣによる抑制の、ｉＮＯＳ／ＮＯに対する依存性は、僅か約５０％にすぎなかった。この結果は、ｉＮＯＳ阻害物質と、ＭＤＳＣの供給源としてｉＮＯＳのノックアウト（ｋ．ｏ．）マウスと、を使用して示したものである。
【０００４】
ここで、我々は、新規に説明される負のチェックポイント制御因子であるＶＩＳＴＡを調べることによって、ＭＤＳＣによるＢ細胞応答性の阻害における、追加の抑制機構をさらに研究した。抗ＶＩＳＴＡ遮断抗体、及びＬＰ−ＢＭ５に感染したＶＩＳＴＡ−／−ＭＤＳＣを使用したところ、ＭＤＳＣによるＢ細胞応答の抑制は、ＭＤＳＣが発現したＶＩＳＴＡに部分的に依存するものであった。試薬を併用して、ｉＮＯＳ／ＮＯ及びＶＩＳＴＡの両方を遮断すると、ＭＤＳＣによるＢ細胞応答性の抑制は、相乗的とはいかないにせよ、相加的に解除された。こうした結果は、ＬＰ−ＢＭ５が誘導する免疫不全における、ＭＤＳＣの役割と矛盾しないと共に、現在研究課程にある、ＭＤＳＣによるＢ細胞応答の抑制に関する領域において、特有の抑制経路が複数存在し、それらの関与が強調されていることとも矛盾しないものであった。
【発明の概要】
【０００５】
前述のように、本発明は、ＶIＳＴＡがＢ細胞応答性を調節（抑制）するという発見に
関する。この発見に基づき、本発明は、Ｂ細胞応答性の抑制と、Ｂ細胞応答性の低減が治療的に有益である状態の治療と、を目的とした、ＶＩＳＴＡアゴニストの使用に関する。また、本発明は、Ｂ細胞応答性の促進と、Ｂ細胞応答性の増進が治療的に有益である状態の治療のための、ＶＩＳＴＡアンタゴニストの使用に関する。
【０００６】
具体的には、ヒトにおいてＢ細胞応答性の低減が望ましい状態を治療するために、アゴニストである抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体もしくは抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体断片、または例えば、ＶＩＳＴＡ融合タンパク質といったＶＩＳＴＡポリペプチドが使用される。具体的には、これは、疾患病理にＢ細胞応答が関与する、自己免疫性状態、アレルギー性状態、及び炎
症性状態を治療する上で、治療的に望ましくあり得る。
【０００７】
また、ヒトにおいてＢ細胞応答性の増加が望ましい状態を治療するために、アンタゴニストである抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体もしくは抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体断片、または例えば、ＶＩＳＴＡ断片及びＶＩＳＴＡ結合体といったＶＩＳＴＡポリペプチドを単独、または抗原及び可能性のある別の免疫アゴニストと関連させて使用してよい。具体的には、これは、癌、感染性疾患の治療において、治療的に望ましくあり得ると共に、例えば、腫瘍抗原、自己抗原、または感染病原体もしくは感染病原体に感染した細胞に対して特異的である抗原といった、所望の抗原に対する、例えば、防御的なＢ細胞免疫応答を誘発するための、予防ワクチン及び治療ワクチンといったワクチンの効力促進においても、治療的に望ましくあり得る。
【０００８】
ＶＩＳＴＡは、Ｔ細胞活性化のＶ−ドメイン免疫グロブリン抑制因子（ＶＩＳＴＡ）（ＧｅｎＢａｎｋ：ＪＮ６０２１８４）７５と命名された、免疫グロブリン（Ｉｇ）ファミリーのリガンドである。ＶＩＳＴＡの重要な特徴には下記のものが含まれる。ＰＤ−Ｌ１に対して、ＶＩＳＴＡが有する相同性は限られたものであるが、その特有構造に起因して、ＶＩＳＴＡはＢ７ファミリーには属していない。ＶＩＳＴＡは、造血性コンパートメント内に排他的に発現するものであり、ＣＤ１１ｂを高発現する骨髄系細胞（ＣＤ１１ｂ．ｓｕｐ．ｈｉｇｈ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｃｅｌｌ）上で発現レベルが非常に高く、ＣＤ４＋Ｔ細胞及びＣＤ８＋Ｔ細胞、ならびに制御性Ｔ細胞上の発現レベルは低い。可溶性であるＶＩＳＴＡ−Ｉｇ融合タンパク質、またはＡＰＣ上に発現するＶＩＳＴＡは、ＰＤ−１非依存性である未同定の受容体を介して、ＣＤ４＋Ｔ細胞及びＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖及びサイトカイン産生を抑制するためのリガンドとして働く。抗ＶＩＳＴＡｍＡｂ（１３Ｆ３）は、ＶＩＳＴＡが媒介するＴ細胞の抑制をインビトロで無効にし、抗腫瘍Ｔ細胞応答を増進することによって、複数のマウス腫瘍モデルにおいて腫瘍の増殖を抑制した。腫瘍細胞上でＶＩＳＴＡを過剰発現させると、ワクチン接種した宿主における、防御的な抗腫瘍免疫が損なわれた。ＶＩＳＴＡをノックアウトしたマウスでは、炎症性の表現型が発生し、これは、末梢性寛容の減少を示唆するものである。米国特許第８，２３６，３０４号及び第８，２３１，８７２号、公開国際出願ＷＯ／２０１１／１２００１３及びＷＯ／２００６／１１６１８１、米国公開出願第２００８／０２８７３５８号、第２０１１／００２７２７８号、及び第２０１２／０１９５８９４号、ならびに２００５年４月２５日出願の米国仮特許出願第６０／６７４，５６７号、２０１２年６月２２日出願の第６１／６６３，４３１号、２０１２年６月２５日出願の第６１／６６３，９６９号、２０１０年１０月６日出願の第６１／３９０，４３４号、２０１１年１月２６日出願の第６１／４３６，３７９号、及び２０１１年３月７日出願の第６１／４４９，８８２号を参照のこと。これらの文献はそれぞれ、その全体が参照によって、本明細書に組み込まれる。
【０００９】
したがって、ＶＩＳＴＡは、Ｔ細胞関連の免疫応答を決定的に制御する免疫チェックポイントタンパク質リガンドであることが一般に知られている。しかしながら、本発明以前は、ＶＩＳＴＡがさらにＢ細胞応答性を制御することは知られていなかった。
【００１０】
骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）によるＴ細胞応答に対する阻害は、腫瘍の微小環境において、十分に明らかにされている。しかしながら、Ｂ細胞応答に対するその作用の解明は、はるかに遅れている。本明細書で、我々は、負のチェックポイント制御因子であるＶＩＳＴＡが関与する、ＭＤＳＣによるＢ細胞応答性の阻害における、追加の抑制機構を示す。抗ＶＩＳＴＡ遮断抗体、及びＬＰ−ＢＭ５に感染したＶＩＳＴＡ−／−ＭＤＳＣを使用したところ、ＭＤＳＣによるＢ細胞応答の抑制は、ＭＤＳＣが発現したＶＩＳＴＡに部分的に依存するものであった。試薬を併用して、ｉＮＯＳ／ＮＯ及びＶＩＳＴＡの両方を遮断すると、ＭＤＳＣによるＢ細胞応答性の抑制は、相乗的とはいかないにせよ、相加的に解除された。こうした結果は、ＬＰ−ＢＭ５が誘導する免疫不全において、ＭＤＳＣが能
動的に役割を担っていると共に、現在研究課程にある、ＭＤＳＣによるＢ細胞応答の抑制に関する領域において、特有の抑制経路が複数存在し、それらが強く関与していることを示すものである。
【００１１】
発明の例示の実施形態
本発明は、必要とする対象における、ＶＩＳＴＡが媒介する液性免疫阻害の阻害方法または無効化方法を提供し、当該方法は、例えば、Ｂ細胞免疫が抑制される癌または感染性疾患状態を有する対象における、ＶＩＳＴＡアンタゴニストの単独投与、または別の免疫アゴニストと関連させた投与を含む。
【００１２】
本発明は、必要とする対象における、ＶＩＳＴＡが媒介する液性免疫阻害の促進方法または増加方法も提供し、当該方法は、例えば、疾患病理にＢ細胞応答または抗体応答が関与する、自己免疫性状態、アレルギー性状態、炎症性状態、または感染性状態を有する対象における、ＶＩＳＴＡアゴニストの単独投与、または別の免疫アンタゴニストと関連させた投与を含む。
【００１３】
本発明は、必要とする対象における、限定はされないが、抗原特異的な抗体応答を含むＢ細胞増殖またはＢ細胞応答の抑制方法も提供し、当該方法は、例えば、疾患病理にＢ細胞応答または抗体応答が関与する、自己免疫性状態、アレルギー性状態、炎症性状態、または感染性状態を有する対象に対する、ＶＩＳＴＡアゴニストの投与を含む。
【００１４】
本発明は、必要とする対象における、限定はされないが、抗原特異的な抗体応答を含むＢ細胞増殖またはＢ細胞応答の増加方法も提供し、当該方法は、例えば、Ｂ細胞免疫が抑制される癌または感染性疾患状態を有する対象に対する、ＶＩＳＴＡアゴニストの投与を含む。
【００１５】
本発明は、抗原または治療抗体に対して誘発される液性免疫応答の促進方法も提供し、当該方法は、ＶＩＳＴＡアンタゴニストの使用を含む治療レジメンにおける、そのような抗原または抗体の投与を含み、例えば、当該抗原は、腫瘍抗原、自己抗原、アレルゲン、もしくは感染病原体の抗原であるか、または当該抗体は、腫瘍抗原、自己抗原、アレルゲンもしくは感染病原体の抗原に対して特異的である。
【００１６】
本発明は、治療ワクチンまたは予防ワクチンによって誘発される液性免疫応答の促進方法も提供し、当該方法は、ＶＩＳＴＡアンタゴニストの使用を含む治療レジメンにおける、そのようなワクチンの投与を含み、例えば、当該ワクチンは、腫瘍抗原、自己抗原、アレルゲン、または感染病原体の抗原を含む。
【００１７】
本発明は、ＶＩＳＴＡアンタゴニスト及びｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質を使用した、液性免疫応答の促進方法も提供し、当該ｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質は、例えば、任意選択で、ＮＧ−ニトロ−Ｌ−アルギニンメチルエステル、ＮＧ−エチル−Ｌ−アルギニン、Ｎ−イミノエチル−Ｌ−アルギニン、Ｌ−ＮＧ−メチルアルギニン、及びＮＧ−ニトロ−Ｌ−アルギニンであるアルギニン誘導体であるか、または当該阻害物質は、ＮＧ−ニトロ−Ｌ−アルギニンメチルエステルもしくはロバスタチン、フェニル酢酸のナトリウム塩（ＮａＰＡ）、ＦＰＴ阻害物質ＩＩ、Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）、及びｃＡＭＰであるか、または米国第６，５８６，４７４号、第６，５４５，１７０号、第６，５９３，３７２号、第６，７８７，６６８号、第６，８０９，１１７号、第６，５９１，８８９号、第７，１９６，１１８号、第７，０４９，０５８号に開示のｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質のいずれかであり、これらはすべて、参照によって、それらの全体が本明細書に組み込まれる。
【００１８】
本発明は、ＶＩＳＴＡアゴニストと、例えば、一酸化窒素または一酸化窒素を含む化合
物といったｉＮＯＳ／ＮＯ促進物質と、を使用した、液性免疫応答の阻害方法も提供する。
【００１９】
前述の実施形態のいずれかでは、ＶＩＳＴＡアンタゴニストには、アンタゴニストである抗ビスタ抗体またはＶＩＳＴＡの断片が含まれてよい。
【００２０】
前述の実施形態のいずれかでは、ＶＩＳＴＡアゴニストには、アゴニストである抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体または抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体断片またはＶＩＳＴＡ−Ｉｇ結合体またはＶＩＳＴＡの多量体形態が含まれてよく、例えば、当該ＶＩＳＴＡ−Ｉｇは、少なくとも１つのエフェクター機能の減弱もしくは増加のために、任意選択で改変され得るＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、もしくはＩｇＧ４のＦｃ領域もしくはその断片を含むか、またはヒト抗体もしくはヒト化抗体を含んでよい。
【００２１】
前述の実施形態のいずれかでは、ＶＩＳＴＡアンタゴニストまたはＶＩＳＴＡアゴニストは、ＰＤ−１アゴニストもしくはＰＤ−Ｌ１アゴニスト、またはＰＤ−１アンタゴニストもしくはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストと関連させて使用してよく、例えば、当該アゴニストまたはアンタゴニストは、抗ＰＤ−１抗体もしくは抗ＰＤ−Ｌ１抗体、またはＰＤ−１融合タンパク質、またはＰＤ−１もしくはＰＤ−Ｌ１を発現する細胞である。
【００２２】
前述の実施形態のいずれかでは、ＶＩＳＴＡアンタゴニスト及びｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質は、一緒に投与される。
【００２３】
前述の実施形態のいずれかでは、ＶＩＳＴＡアゴニスト及びｉＮＯＳ／ＮＯ促進物質は、一緒に投与される。
【００２４】
前述の実施形態のいずれかでは、ＶＩＳＴＡアンタゴニスト及びｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質は、Ｂ細胞免疫を促進するための治療レジメンにおいて、別々に投与される。
【００２５】
前述の実施形態のいずれかでは、ＶＩＳＴＡアンタゴニストである化合物及びｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質である化合物は、単独投与されるこうした化合物のいずれかと比較して、液性免疫に対する相乗作用を誘発するために十分な量で投与される。
【００２６】
前述の実施形態のいずれかでは、ＶＩＳＴＡアゴニストである化合物及びｉＮＯＳ／ＮＯ促進物質または一酸化窒素は、単独投与されるこうした化合物のいずれかと比較して、液性免疫に対する相乗作用を誘発するために十分な量で投与される。
【図面の簡単な説明】
【００２７】
【図１】図１Ａ−Ｂは、インビボでのＬＰ−ＢＭ５による感染に伴って、脾臓細胞においてＶＩＳＴＡの発現が増加することを示す。
【図２】図２Ａ−Ｃは、Ｌｙ６Ｃ＋ＣＤ１１ｂ＋で精製した脾臓細胞が、インビトロでＢ細胞増殖及びＴ細胞増殖を抑制するためには、異なる機構的要件を有していることを示す。
【図３】図３は、ナイーブＶＩＳＴＡ−／−レスポンダー脾臓細胞と、ａ−ＶＩＳＴＡで事前処理したＬｙ６Ｃ＋ＣＤ１１ｂ＋ＭＤＳＣと、をレスポンダー：抑制因子（Ｒ：Ｓ）の比が３：１となるように混合し、α−ＣＤ４０及びＩＬ−４で３日間刺激したものを示す。
【図４】図４は、記載の系統のマウスにＬＰ−ＢＭ５を感染させ、５週間後に当該マウスから精製した単球性ＭＤＳＣ（Ｌｙ６Ｃ＋ＣＤ１１ｂ＋）を示しており、フローサイトメトリーによる評価で、ナイーブＶＩＳＴＡ−／−脾臓細胞の増殖が異なるパターンで抑制されていることを示すものである。
【図５Ａ】図５Ａ−Ｂは、Ｂ細胞増殖の単球性の抑制が、２つの主な機構であるｉＮＯＳ／ＮＯ及びＶＩＳＴＡに依存するものであることを示す。
【図５Ｂ】図５Ａ−Ｂは、Ｂ細胞増殖の単球性の抑制が、２つの主な機構であるｉＮＯＳ／ＮＯ及びＶＩＳＴＡに依存するものであることを示す。
【発明を実施するための形態】
【００２８】
発明の詳細な説明
本発明の詳細を記載する前に、下記の定義を提供する。
【００２９】
別段の定義がない限り、本明細書で使用する専門用語及び科学用語はすべて、本発明が属する技術分野の当業者が一般に理解するものと同一の意味を有する。本発明において、または本発明の試験において、本明細書に記載のものと類似または同等の方法及び材料を使用してよいが、本明細書には、適した方法及び材料を記載する。材料、方法、及び実施例は、単に例示にすぎず、限定を意図するものではない。
【００３０】
本明細書の説明及び請求の範囲全体においては、「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、別段の明確な記載内容がない限り、複数の参照を含むことを意味する。
【００３１】
「癌（ｃａｎｃｅｒ）」及び「癌性（ｃａｎｃｅｒｏｕｓ）」という用語は、典型的には、未制御の細胞増殖によって特徴づけられる、哺乳動物の生理的状態を指すか、またはそれを説明するものである。癌の例には、限定はされないが、カルシノーマ、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、及び白血病が含まれる。そのような癌のより具体的な例には、扁平細胞癌、肺癌（小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、及び肺の扁平上皮癌を含む）、腹膜の癌、肝細胞癌、胃（ｇａｓｔｒｉｃ）癌または胃（ｓｔｏｍａｃｈ）癌（胃腸癌を含む）、膵癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝癌（ｌｉｖｅｒ  ｃａｎｃｅｒ）、膀胱癌、肝細胞腫、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺癌、腎（ｋｉｄｎｅｙ）癌または腎（ｒｅｎａｌ）癌、肝癌（ｌｉｖｅｒ  ｃａｎｃｅｒ）、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌（ｈｅｐａｔｉｃ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、ならびに様々な型の頭部癌及び頸部癌、ならびにＢ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ、中悪性度／濾胞性ＮＨＬ、中悪性度びまん性ＮＨＬ、高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ、高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ、高悪性度小型非切れ込み核細胞性ＮＨＬ、巨大腫瘤病変ＮＨＬ、マントル細胞リンパ腫、エイズ関連リンパ腫、及びワルデンストレーム高ガンマグロブリン血症を含む）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、慢性骨髄芽球性白血病、多発性骨髄腫、ならびに移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）が含まれる。
【００３２】
本発明によって治療が可能な例示の癌には、限定はされないが、カルシノーマ、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫、及び白血病またはリンパ系腫瘍が含まれる。そのような癌のより具体的な例には、結腸直腸癌、膀胱癌、卵巣癌、黒色腫（ｍｅｌａｎｏｍａ）、扁平上皮癌、肺癌（小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、及び肺の扁平上皮癌を含む）、腹膜の癌、肝細胞癌、胃（ｇａｓｔｒｉｃ）癌または胃（ｓｔｏｍａｃｈ）癌（胃腸癌を含む）、膵癌、神経膠芽腫、子宮頸癌、卵巣癌、肝癌（ｌｉｖｅｒ  ｃａｎｃｅｒ）、膀胱癌、肝細胞腫、乳癌、結腸癌、結腸直腸癌、子宮内膜癌または子宮癌、唾液腺癌、腎（ｋｉｄｎｅｙ）癌または腎（ｒｅｎａｌ）癌、肝癌（ｌｉｖｅｒ  ｃａｎｃｅｒ）、前立腺癌、外陰癌、甲状腺癌、肝癌（ｈｅｐａｔｉｃ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、ならびに様々な型の頭部癌及び頸部癌、ならびにＢ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ、中悪性度／濾胞性ＮＨＬ、中悪性度びまん性ＮＨＬ、高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ、高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ、高悪性度小型非切れ込み核細胞性ＮＨＬ、巨大腫瘤病変ＮＨＬ、マントル細胞リンパ腫、エイズ関連リンパ腫、及びワルデンストレーム高ガンマグロブリン血症を含む）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、
急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、慢性骨髄芽球性白血病、ならびに移植後リンパ増殖性障害（ＰＴＬＤ）、ならびに母斑症、浮腫（脳腫瘍に関連するものなど）、及びメイグス症候群に関連する異常な血管増殖が含まれる。好ましくは、癌は、結腸直腸癌、乳癌、結腸直腸癌、直腸癌、非小細胞肺癌、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、腎細胞癌、前立腺癌、肝癌（ｌｉｖｅｒ  ｃａｎｃｅｒ）、膵癌、軟部組織肉腫、カポジ肉腫、カルチノイド細胞腫（ｃａｒｃｉｎｏｉｄ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、頭部癌及び頸部癌、黒色腫、卵巣癌、中皮腫、ならびに多発性骨髄腫からなる郡から選択される。例示の１つの実施例では、癌は、早期または進行した（転移性であるものを含む）膀胱癌、卵巣癌、または黒色腫である。別の実施形態では、癌は、結腸直腸癌である。本発明の治療が可能な癌性の状態には、骨髄由来抑制細胞によるＶＩＳＴＡの発現が抗腫瘍応答及び抗浸潤性免疫応答を抑制する転移性癌が含まれる。本発明の方法は、血管形成腫瘍の治療に特に適している。
【００３３】
本発明は、化学療法もしくは放射線療法または他の生物製剤を併用した癌の治療にも適していると共に、それらの活性の増進にも適しており、すなわち、骨髄由来抑制細胞によるＶＩＳＴＡの発現が抗腫瘍応答及び化学療法もしくは放射線療法の効力または他の生物製剤の効力を抑制している個体における、それらを併用した癌の治療、及びそれらの活性の増進にも適している。本発明に従って、抗癌活性を示す任意の化学療法剤を使用することができる。好ましくは、化学療法剤は、アルキル化剤、代謝拮抗剤、葉酸類似物質、ピリミジン類似物質、プリン類似物質及び関連阻害物質、ビンカアルカロイド、エピポドフィロトキシン、抗生物質、Ｌ−アスパラギナーゼ、トポイソメラーゼ阻害物質、インターフェロン、白金配位化合物、アントラセンジオンで置換された尿素、メチルヒドラジン誘導体、副腎皮質抑制剤、副腎皮質ステロイド、プロゲスチン、エストロゲン、抗エストロゲン剤、アンドロゲン、抗アンドロゲン剤、ならびに性腺刺激ホルモン放出ホルモン類似物質からなる郡から選択される。より好ましくは、化学療法剤は、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、ロイコボリン（ＬＶ）、イリノテカン、オキサリプラチン、カペシタビン、パクリタキセル、及びドセタキセルからなる郡から選択される。抗ＶＥＧＥ抗体の投与と組み合わせて投与するために、２つ以上の化学療法剤を混合物として使用することができる。好ましい併用化学療法の１つは、５−ＦＵ及び１つまたは複数の他の化学療法剤を含むフルオロウラシルに基づくものである。併用化学療法の適した投薬レジメンは、当該技術分野で知られており、例えば、Ｓａｌｔｚら（１９９９）Ｐｒｏｃ．ＡＳＣＯ  １８：２３３ａ及びＤｏｕｉｌｌａｒｄら（２０００）Ｌａｎｃｅｔ  ３５５：１０４１−７において説明されている。生物製剤は、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ−４に対する抗体、及びＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＣＴＬＡ−４の融合タンパク質などの別の免疫増強剤ならびにサイトカイン、増殖因子のアンタゴニスト及びアゴニスト、ホルモン、ならびに抗サイトカイン抗体であってよい。
【００３４】
本明細書では、「活性化受容体（ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ  ｒｅｃｅｐｔｏｒ）」は、抗原、複合化抗原（例えば、ＭＨＣ分子と関連があるもの）、Ｉｇ−融合タンパク質、リガンド、または抗体に結合する免疫細胞受容体を広く指す。活性化受容体は、限定はされないが、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、Ｂ細胞受容体（ＢＣＲ）、サイトカイン受容体、ＬＰＳ受容体、補体受容体、及びＦｃ受容体である。例えば、Ｔ細胞受容体は、Ｔ細胞上に存在し、ＣＤ３分子と結合する。Ｔ細胞受容体は、ＭＨＣ分子との関連において、抗原（ならびにポリクローナルＴ細胞活性化試薬）によって刺激される。ＴＣＲを介したＴ細胞活性化は、多数の変化をもたらし、当該変化は、例えば、タンパク質のリン酸化、膜脂質の変化、イオン流出、環状ヌクレオチドの変化、ＲＮＡ転写の変化、タンパク質合成の変化、及び細胞容積の変化である。例えば、Ｔ細胞受容体は、Ｔ細胞上に存在し、ＣＤ３分子と結合する。Ｔ細胞受容体は、ＭＨＣ分子との関連において、抗原（ならびにポリクローナルＴ細胞活性化試薬）によって刺激される。ＴＣＲを介したＴ細胞活性化は、多数の変化をもたらし、当該変化は、例えば、タンパク質のリン酸化、膜脂質の変化、イオン流出、
環状ヌクレオチドの変化、ＲＮＡ転写の変化、タンパク質合成の変化、及び細胞容積の変化である。
【００３５】
本明細書では、「抗原提示細胞」は、抗原提示専門の細胞（例えば、Ｂリンパ球、単球、樹状細胞、及びランゲルハンス細胞）ならびに他の抗原提示細胞（例えば、角化細胞、内皮細胞、星状細胞、線維芽細胞、及び乏突起膠細胞）を広く指す。
【００３６】
本明細書では、「アミノ酸」は、天然起源のアミノ酸及び合成アミノ酸、ならびに天然起源のアミノ酸に類似した様式で機能するアミノ酸類似物質及びアミノ酸模倣物質を広く指す。天然起源のアミノ酸は、遺伝コードによってコードされるアミノ酸、ならびに後に修飾されるアミノ酸（例えば、ヒドロキシプロリン、ガンマ−カルボキシグルタミン酸、及びＯ−リン酸化セリン）である。アミノ酸類似物質は、天然起源のアミノ酸と同一の基本化学構造（すなわち、水素、カルボキシル基、アミノ基に結合した炭素）及びＲ基を有する化合物を指す（例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチルメチオニンスルホニウム）。類似物質は、修飾されたＲ基（例えば、ノルロイシン）、または修飾されたペプチド骨格主鎖を有し得るが、天然起源のアミノ酸と同一の基本化学構造を保持しているものである。アミノ酸模倣物質は、アミノ酸の一般化学構造とは異なるが、天然起源のアミノ酸と類似した様式で機能する構造を有する化学化合物を指す。
【００３７】
本明細書では、「アネルギー」または「寛容」は、活性化受容体が媒介する刺激に対する屈折性（ｒｅｆｒａｃｔｉｖｉｔｙ）を広く指す。屈折性は、一般に、抗原特異的であり、寛容化抗原に対する曝露終了後に持続するものである。例えば、Ｔ細胞におけるアネルギー（無応答性とは対照的）は、例えば、ＩＬ−２といったサイトカインの産生欠如によって特徴づけられる。Ｔ細胞が抗原に対して曝露され、第１シグナル（Ｔ細胞受容体またはＣＤ−３が媒介するシグナル）を受け取る際に、第２シグナル（共刺激シグナル）が存在しないと、Ｔ細胞にアネルギーが生じる。こうした条件下で、同一抗原に対して細胞が再度曝露されると（たとえ共刺激分子の存在下で再曝露が生じたとしても）、サイトカイン産生に失敗し、したがって、増殖に失敗する。しかしながら、アネルギー性Ｔ細胞は、無関係な抗原に対する応答は開始することができ、サイトカイン（例えば、ＩＬ−２）と共に培養されたならば、増殖することができる。例えば、Ｔ細胞アネルギーは、Ｔリンパ球によるＩＬ−２産生の欠如によっても観測することができ、これは、ＥＬＩＳＡによって測定されるか、または指標細胞株を使用した増殖アッセイによって測定される。あるいは、レポーター遺伝子構築物を使用することができる。例えば、アネルギー性Ｔ細胞は、５’のＩＬ−２遺伝子転写促進因子の制御下にある異種性プロモーターが誘導するＩＬ−２遺伝子の転写開始に失敗するか、または当該転写促進因子内に見ることができるＡＰＩ配列の多量体が誘導するＩＬ−２遺伝子の転写開始に失敗する（Ｋａｎｇら（１９９２）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２５７：１１３４）。共刺激シグナルの調節は、免疫細胞のエフェクター機能の調節につながるものである。したがって、「ＰＤ−Ｌ３活性またはＶＩＳＴＡ活性」という用語は、ＰＤ−Ｌ３ポリペプチドまたはＶＩＳＴＡポリペプチドが、１つまたは複数のその天然結合パートナーに対して結合する能力と、免疫細胞の共刺激シグナルまたは阻害性シグナルを調節する能力と、免疫応答を調節する能力と、を含む。免疫細胞における阻害性シグナルの調節は、免疫細胞の増殖の調節、及び／または免疫細胞によるサイトカイン分泌の調節をもたらすものである。
【００３８】
本明細書では、「抗体」は、抗体の「抗原結合部分」（「抗体部分」、「抗原結合断片」、「抗体断片」とも互換的に使用される）、ならびに全体抗体分子を広く指す。本明細書では、「抗原結合部位」という用語は、抗原（例えば、ＶＩＳＴＡ（ＰＤ−Ｌ３））に対して特異的に結合する能力を保持した１つまたは複数の抗体断片を指す。抗体の抗原結合機能は、全長抗体の断片によって生じ得るものである。抗体の「抗原結合部分」という用語に包含される抗原結合断片の例には、（ａ）ＶＬドメイン、ＶＨドメイン、ＣＬドメ
イン、及びＣＨ１ドメインからなる１価の断片であるＦａｂ断片、（ｂ）ヒンジ領域で、ジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む２価の断片であるＦ（ａｂ’）２断片、（ｃ）ＶＨドメイン及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片、（ｄ）抗体の単一アームのＶＬドメイン及びＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｅ）ＶＨドメインからなるｄＡｂ断片（Ｗａｒｄら（１９８９）Ｎａｔｕｒｅ  ３４１：５４４−５４６）、ならびに（ｆ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が含まれる。さらに、Ｆｖ断片の２つのドメインであるＶＬ及びＶＨは、別々の遺伝子によってコードされるものであるが、組換え手法を使用し、合成リンカーによって結合することができ、当該合成リンカーは、それらを、ＶＬ領域及びＶＨ領域が対となり、１価の分子を形成した単一タンパク質とすることが可能なものである。（当該１価の分子は、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られる。例えば、Ｂｉｒｄら（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２４２：４２３−４２６、Ｈｕｓｔｏｎら（１９８８）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ  ８５：５８７９−５８８３、及びＯｓｂｏｕｒｎら（１９９８）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１６：７７８を参照のこと。単鎖抗体も、抗体の「抗原結合部分」という用語内に包含されことを意図する。完全ＩｇＧ分子または他のアイソタイプをコードする発現ベクターを作成するために、ヒト免疫グロブリン定常領域のｃＤＮＡまたはゲノム配列に対して、特異的なｓｃＦｖの任意のＶＨ配列及びＶＬ配列を連結することができる。タンパク質化学または組換えＤＮＡ技術のいずれかを使用した、Ｆａｂ、Ｆｖまたは他の免疫グロブリン断片の作成にも、ＶＨ及びＶＬを使用することができる。ダイアボディなどの、他の形態の単鎖抗体も包含される。ダイアボディは、ＶＨドメイン及びＶＬドメインを単一ポリペプチド鎖上に発現させた、２価の２重特異性抗体であるが、同一鎖上の２つのドメイン間で対形成することが不可能な非常に短いリンカーを使用しており、それによって、ドメインに、別の鎖の相補性ドメインとの対形成を強制し、２つ抗原結合部位を創出しているものである。例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒら（１９９３）Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ
９０：６４４４−６４４８、Ｐｏｌｊａｋら（１９９４）Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ  ２：１１２１−１１２３を参照のこと。
【００３９】
またさらに、抗体またはその抗原結合部分（抗原結合断片、抗体断片、抗体部分）は、抗体または抗体部分が、１つまたは複数の他のタンパク質またはペプチドと、共有結合または非共有結合で会合することによって形成される、より大きな免疫接着分子の一部であり得る。免疫接着分子の例には、４量体であるｓｃＦＶ分子を作成するために、ストレプトアビジンのコア領域の使用した例（Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖら（１９９５）Ｈｕｍ．Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ  Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ  ６：９３−１０１）、ならびに２価のビオチン化ｓｃＦｖ分子を作成するために、システイン残基、マーカーペプチド、及びＣ末端ポリヒスチジンタグを使用した例が含まれる。Ｋｉｐｒｉｙａｎｏｖら（１９９４）Ｍｏｌ
Ｉｍｍｕｎｏｌ．３１：１０４７−１０５８。Ｆａｂ断片及びＦ（ａｂ’）２断片などの抗体部分は、それぞれ、全抗体のパパイン消化または全抗体のペプシン消化などの従来の手法を使用して、全抗体から調製することができる。さらに、抗体、抗体部分、及び免疫接着分子は、本明細書に記載されるような標準的な組換えＤＮＡ手法を使用して取得することができる。
【００４０】
抗体は、ポリクローナル、モノクローナル、異種、同種、同系、または例えば、ヒト化、キメラといったそれらの改変形態であってよい。好ましくは、本発明の抗体は、ＶＩＳＴＡ（ＰＤ−Ｌ３）分子に対して、特異的または実質的に特異的に結合する。本明細書では、「モノクローナル抗体」及び「モノクローナル抗体組成物」という用語は、抗原の特定エピトープとの免疫反応が可能な抗原結合部位を１種のみ含む抗体分子の集団を指し、一方、「ポリクローナル抗体」及び「ポリクローナル抗体組成物」という用語は、特定抗原との相互作用が可能な抗原結合部位を複数種含む抗体分子の集団を指す。モノクローナル抗体組成物は、典型的には、それが免疫反応する特定抗原に向けて示す結合親和性が単一のものである。
【００４１】
本明細書では、「抗原」は、抗体の結合が可能な分子または分子部分を広く指し、当該抗原は、動物において、その抗原のエピトープへの結合が可能な抗体の産生を誘導することがさらに可能なものである。抗原が有するエピトープは、１つまたは複数であってよい。本明細書で特異的反応と称すものは、抗原が、他の抗原によって誘起され得る多数の他の抗体とは反応せず、その抗原に対応する抗体と、高度に選択的な様式で反応することを意味する。特定の関心抗原に対する免疫応答の増進が好ましい場合、抗原の例には、限定はされないが、防御的な免疫応答を誘発し得る感染性疾患の抗原が例示として含まれる。
【００４２】
本明細書では、「アレルギー性疾患」は、アレルギー性反応を伴う疾患を広く指す。より具体的には、「アレルギー性疾患」は、アレルゲンが同定されており、そのアレルゲンに対する曝露と、病理学的変化の発生との間に強い相関が存在し、その病理学的変化が免疫学的機構を有していることが証明されている疾患であると定義される。本明細書では、免疫学的機構は、白血球がアレルゲンによる刺激に対して免疫応答を示すことを意味する。
【００４３】
本明細書では、「アンチセンス核酸分子」は、ｍＲＮＡ配列に対して相補性であるか、または遺伝子をコードする鎖に対して相補性である、タンパク質をコードする「センス」核酸に対して相補性（例えば、２本鎖ｃＤＮＡ分子のコード鎖に対して相補性）である核酸配列を広く指す。したがって、アンチセンス核酸分子は、センス核酸分子に対して水素結合することができる。
【００４４】
本明細書では、「喘息」は、炎症、気道の狭小化、及び吸入物質に対する気道の反応性の増加によって特徴づけられる呼吸器系の疾患を広く指す。喘息は、排他的ではないが、アトピー性症状またはアレルギー性症状と関連することが多い。
【００４５】
本明細書では、「アポトーシス」は、当該技術分野で知られる手法を使用して特徴づけることができるプログラム細胞死を広く指す。アポトーシス細胞死は、細胞の縮小、膜の小疱形成、及び結果的に細胞が断片化するクロマチン凝縮によって特徴づけることができる。アポトーシスが進行中の細胞は、特徴的なパターンを有した、ヌクレオソーム間のＤＮＡの切断も示す。
【００４６】
本明細書では、「自己免疫」または「自己免疫疾患もしくは自己免疫状態」は、個体自体の組織から生じるか、またはそれを対象とする疾患もしくは障害、またはその共分離（ｃｏ−ｓｅｇｒｅｇａｔｅ）もしくは徴候、またはそこからもたらされる状態を広く指す。
【００４７】
本明細書では、「Ｂ細胞受容体（ＢＣＲ）」は、Ｂ細胞上に見られる、膜Ｉｇ（ｍＩｇ）と、他の膜貫通ポリペプチド（例えば、Ｉｇα及びＩｇβ）と、の複合体を広く指す。ｍＩｇのシグナル伝達機能は、オリゴマーまたは多量体である抗原によって受容体分子が架橋することによって引き起こされる。Ｂ細胞は、抗免疫グロブリン抗体によっても活性化することができる。ＢＣＲ活性化の際は、Ｂ細胞において、チロシンリン酸化を含む多数の変化が生じる。
【００４８】
本明細書では、「癌（ｃａｎｃｅｒ）」は、異常であり、制御されておらず、悪性増殖または悪性腫瘍を引き起こす細胞分裂（例えば、未制御の細胞増殖）によって特徴づけられる任意の新生物疾患（浸潤性または転移性を問わず）を広く指す。
【００４９】
本明細書では、「キメラ抗体」は、定常領域またはその一部が、変更、置換、または交換され、その結果、抗原結合部位（可変領域）が、クラス、エフェクター機能、及び／も
しくは種が異なるか、もしくは変更された定常領域に連結されている抗体分子であるか、または、そのキメラ抗体に対して、新規の特性を与える完全に異なる分子に連結されている抗体分子を広く指し、例えば、酵素、毒素、ホルモン、増殖因子、薬物、可変領域、またはそれらの一部が、抗原特性が異なるか、または変更された可変領域で、変更、置換、または交換される。
【００５０】
本明細書では、「コード領域」は、アミノ酸残基へと翻訳されるコドンを含む核酸配列領域を広く指し、一方、「非コード領域」という用語は、アミノ酸へと翻訳されない核酸配列領域（例えば、５’非翻訳領域及び３’非翻訳領域）を指す。
【００５１】
本明細書では、「保存的に改変された変異体」は、アミノ酸配列及び核酸配列の両方に適用され、特定の核酸配列に関して、本質的に同一である配列へと保存的に改変された変異体を広く指し、同一もしくは本質的に同一であるアミノ酸配列をコードする核酸であるか、またはその核酸がアミノ酸配列をコードしない核酸を指す。遺伝コードは縮重しているため、非常に多くの数の機能的に同一である核酸が、任意の所与のタンパク質をコードする。「無変化変形形態（ｓｉｌｅｎｔ  ｖａｒｉａｔｉｏｎ）」は、一種の保存的に改変された核酸変形形態である。ポリペプチドをコードする、本明細書のあらゆる核酸配列も、核酸の無変化変形形態で可能性のあるものはすべて説明するものである。当業者であれば、機能的に同一である分子を生じさせるために、核酸中のそれぞれのコドン（通常、メチオニンを対象とする唯一のコドンであるＡＵＧ、及び通常、トリプトファンを対象とする唯一のコドンであるＴＧＧは除く）は改変され得ることを認識するであろう。
【００５２】
本明細書では、「相補性決定領域」、「超可変領域」、または「ＣＤＲ」は、抗体の軽鎖または重鎖の可変領域に見られる、１つまたは複数の超可変領域または相補性決定領域（ＣＤＲ）を広く指す。Ｋａｂａｔら（１９８７）“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄを参照のこと。こうした表現は、Ｋａｂａｔら（１９８３）“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ，ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ  ａｎｄ  Ｈｕｍａｎ  Ｓｅｒｖｉｃｅｓによって定義されるような超可変領域、または抗体の３次元構造を有する超可変ループを含む。Ｃｈｏｔｈｉａ  ａｎｄ  Ｌｅｓｋ（１９８７）Ｊ  Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１−９１７。それぞれの鎖のＣＤＲは、フレームワーク領域によって非常に近接して維持されており、他の鎖に由来するＣＤＲと共に、抗原結合部位の形成に寄与するものである。ＣＤＲ内には、選択性決定領域（ＳＤＲ）と説明される選択（ｓｅｌｅｃｔ）アミノ酸が存在し、これは、抗体−抗原相互作用において、ＣＤＲが使用する決定的な接触残基に相当するものである。Ｋａｓｈｍｉｒｉ（２００５）Ｍｅｔｈｏｄｓ  ３６：２５−３４。
【００５３】
本明細書では、「対照量」は、マーカーを広く指し、試験量のマーカーに対して比較されることになる任意の量またはある一定範囲の量であり得る。例えば、対照量のマーカーは、特定の疾患もしくは状態を有する患者、またはそのような疾患もしくは状態を有さない人におけるマーカーの量であってよい。対照量は、絶対量（例えば、マイクログラム／１０、または相対量（例えば、シグナルの相対強度）のいずれかであり得る。
【００５４】
本明細書では、「共刺激受容体」は、免疫細胞に共刺激シグナルを伝達する受容体を広く指し、例えば、ＣＤ２８またはＩＣＯＳである。本明細書では、「阻害性受容体」という用語は、免疫細胞に対する負のシグナルを伝達する受容体を含む。
【００５５】
本明細書では、「共刺激する」は、増殖またはエフェクター機能を誘導する、第２の非活性化受容体が媒介するシグナル（「共刺激シグナル」）を、共刺激分子が与える能力を
広く指す。例えば、共刺激シグナルは、（例えば、Ｔ細胞受容体が媒介するシグナルを受け取ったＴ細胞において）サイトカイン分泌をもたらし得る。細胞の受容体が媒介するシグナルを（例えば、活性化受容体を介して）受け取った免疫細胞は、「活性化された免疫細胞」と本明細書で称され得る。
【００５６】
本明細書では、「細胞質ドメイン」は、細胞の細胞質へと伸びたタンパク質部分を広く指す。
【００５７】
本明細書では、「診断の（ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ）」は、病的な状態の存在または性質の特定を広く指す。診断方法は、その感度または特異性で異なる。診断アッセイの「感度（ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ）」は、疾患を有しており、陽性の結果を受ける個体の割合（「真の陽性」の割合）である。疾患を有しており、アッセイによって検出されない個体は、「偽の陰性」である。疾患を有さず、アッセイにおいて陰性の結果を受ける対象は、「真の陰性」と呼ばれる。診断アッセイの「特異性」は、１マイナス偽の陽性割合であり、「偽の陽性」割合は、疾患を有さないが陽性の結果を受ける割合であると定義される。特定の診断方法が、状態の確定診断を提供しなくてよいが、その方法が、診断に役立つ陽性指標を提供するのであれば十分である。
【００５８】
本明細書では、「診断（ｄｉａｇｎｏｓｉｎｇ）」は、疾患もしくは症状の分類、疾患の重症度の決定、疾患の進行の監視、疾患の予後の予測、及び／または回復の見込みの予測を広く指す。「検出」という用語も、前述のいずれを任意選択で包含してよい。いくつかの実施形態では、対象から得た生体試料における、本発明のポリヌクレオチドまたはポリペプチドのレベルの決定が、本発明による疾患の診断に影響を与えてよく、決定したレベルは、その疾患に対する素因、またはその疾患の存在の有無と相関し得るものである。「対象から得た生体試料」は、対象から物理的に取り出していない試料も任意選択で含んでよいことに留意されるべきである。
【００５９】
本明細書では、「有効量」は、患者に対して、疾患の治療のために投与されると、当該疾患に対してそのような治療の効果を与えるために十分である化合物、抗体、抗原または細胞の量を広く指す。有効量は、予防に有効な量、及び／または防止に有効な量であってよい。有効量は、徴候／症状の低減に有効な量、徴候／症状の発生防止、徴候／症状の発生重症度の低減、徴候／症状の発生排除、徴候／症状の発生進行の鈍化、徴候／症状の発生進行の防止、及び／または徴候／症状の発生予防作用、のために有効な量であってよい。「有効量」は、治療されることになる患者の、疾患及びその重症度ならびに年齢、体重、病歴、感受性、及び既存の状態に応じて変化してよい。「有効量」という用語は、本発明の目的のための「治療上有効な量」と同義である。
【００６０】
本明細書では、「細胞外ドメイン」は、細胞表面から伸びたタンパク質部分を広く指す。
【００６１】
本明細書では、「発現ベクター」は、原核細胞、酵母細胞、真菌細胞、植物細胞、昆虫細胞、または哺乳類細胞を含む任意の細胞において、インビトロまたはインビボで、恒常的または誘導的に、本発明の核酸配列を発現する目的のための、任意の組換え発現システムを広く指す。当該用語は、直鎖状または環状の発現システムを含む。当該用語は、エピソームのままで存在する発現システム、または宿主細胞ゲノムへと組み込まれる発現システムを含む。発現システムは、自己複製能力を有しているか、または有していない可能性があり、有していない場合は、すなわち、細胞において、一過性発現のみを推進するものである。当該用語は、組換え核酸の転写に必要な、最小の配列のみを含む組換え発現カセットを含む。
【００６２】
本明細書では、「ファミリー」は、本発明のポリペプチド分子及び核酸分子を広く指し、共通構造のドメインまたはモチーフを有すると共に、本明細書で定義されるようなアミノ酸配列相同性または核酸配列相同性を十分に有した、２つ以上のポリペプチド分子または核酸分子を意味することを意図する。ファミリーのメンバーは、天然起源または非天然起源であり得、同一種または異種のいずれかに由来し得る。例えば、ファミリーは、ヒト起源である最初のポリペプチド、ならびにヒト起源である他の異なるポリペプチドを含み得るか、あるいは、非ヒト起源のホモログ（例えば、サルのポリペプチド）を含み得る。ファミリーのメンバーは、共通の機能特性も有し得る。
【００６３】
本明細書では、「Ｆｃ受容体」（ＦｃＲ）は、免疫グロブリン分子（Ｉｇ）のＦｃ部分を標的とする細胞表面受容体を広く指す。Ｆｃ受容体は、免疫応答に関与する多くの細胞で見られるものである。ヒトＦｃＲの中で、これまで同定されたものは、ＩｇＧ（ＦｃγＲと命名された）、ＩｇＥ（Ｆｃ．イプシロン．Ｒ１）、ＩｇＡ（ＦｅαＲ）、及び重合ＩｇＭ／Ａ（ＦｃμαＲ）を認識するものである。ＦｃＲは、下記の細胞型においてみられる。すなわち、ＦｃεＲＩ（マスト細胞）、Ｆｃ．イプシロン．ＲＩＩ（白血球の多く）、ＲｃαＲ（好中球）、及びＦｃμαＲ（腺上皮、肝細胞）である。Ｈｏｇｇ（１９８８）Ｉｍｍｕｎｏｌ  Ｔｏｄａｙ  ９：１８５−８６。ＦｃγＲは、幅広く研究されており、細胞免疫防御において中心であると共に、自己免疫疾患の病態形成に関与する炎症メディエーター及び加水分解酵素の放出を刺激する役割を担うものである。Ｕｎｋｅｌｅｓｓ（１９８８）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６：２５１−８７。ＦｃγＲは、エフェクター細胞と、Ｉｇを分泌するリンパ球とを決定的に結び付けるものであり、これは、マクロファージ／単球、多核白血球、及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞のＦｃγＲが、ＩｇＧによって媒介される特異的な認識要素を与えるためである。ヒト白血球は、ＩｇＧを標的とする異なる受容体を少なくとも３つ有しており、当該受容体は、すなわち、ｈＦｃγＲＩ（単球／マクロファージ上に見られる）、ｈＦｃγ．ＲＩＩ（単球、好中球、好酸球、血小板、おそらくＢ細胞、及びＫ５６２細胞株上に見られる）、ならびにＦｃγＩＩＩ（ＮＫ細胞、好中球、好酸球、及びマクロファージ上に見られる）である。
【００６４】
Ｔ細胞に関して、Ｔ細胞への共刺激シグナルの伝達には、シクロスポリンによって阻害されないシグナル伝達経路が関与している。さらに、共刺激シグナルは、Ｔ細胞における、サイトカイン分泌（例えば、ＩＬ−２及び／またはＩＬ−１０）を誘導することができ、及び／またはＴ細胞における、抗原に対する無応答性の誘導、アネルギーの誘導、もしくは細胞死の誘導を防止することができる。
【００６５】
本明細書では、「フレームワーク領域」または「ＦＲ」は、抗体の軽鎖及び重鎖の可変領域内に存在する、１つまたは複数のフレームワーク領域を広く指す。Ｋａｂａｔら（１９８７）“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ  ｏｆ  Ｐｒｏｔｅｉｎｓ  ｏｆ  Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”  Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄを参照のこと。こうした表現は、抗体の軽鎖及び重鎖の可変領域内に存在するＣＤＲ間に挿入されているアミノ酸配列領域を含む。
【００６６】
本明細書では、「異種性の」は、核酸部分を広く指し、当該核酸が、天然において、お互いに同一である関係性において見られない２つ以上の部分配列を含むことを示す。例えば、当該核酸は、典型的には、組換えで産生されて、無関係な遺伝子を配置した２つ以上の配列を有することで、新しい機能性核酸が作成されるものである（例えば、ある供給源由来のプロモーターと、別の供給源由来のコード領域とを使用する）。同様に、異種性タンパク質は、当該タンパク質が、天然において、お互いに同一である関係性において見られない２つ以上の配列を含むことを示すものである（例えば、融合タンパク質）。
【００６７】
本明細書では、「高親和性」は、抗体が、標的抗原に対して、少なくとも１０−８Ｍの
ＫＤ、より好ましくは、少なくとも１０−９ＭのＫＤ、さらにより好ましくは、少なくとも１０−１０ＭのＫＤを有することを広く指す。しかしながら、「高親和性」である結合は、他の抗体アイソタイプで変化し得るものである。例えば、ＩｇＭアイソタイプにとっての「高親和性」である結合は、抗体が、少なくとも１０−７Ｍ、より好ましくは、少なくとも１０−８ＭのＫＤを有することを指す。
【００６８】
本明細書では、「相同性」は、核酸配列と、参照核酸配列との類似性度合い、またはポリペプチド配列と、参照ポリペプチド配列との類似性度合いを広く指す。相同性は、部分的または完全なものであってよい。完全相同性は、核酸配列またはアミノ酸配列が同一であることを示す。部分的に相同性である核酸配列またはアミノ酸配列は、参照核酸配列または参照アミノ酸配列と同一ではないものである。相同性の度合いは、配列比較によって決定することができる。「配列同一性」という用語は、「相同性」と互換的に使用してよい。
【００６９】
本明細書では、「宿主細胞」は、本発明の組換え発現ベクターのなどの、本発明の核酸分子が導入された細胞を広く指す。宿主細胞は、原核細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ）、または酵母、昆虫細胞（例えば、ＳＦ９）、両生類細胞、またはＣＨＯ、ＨｅＬａ、ＨＥＫ−２９３などの哺乳類細胞などの真核細胞であってよく、例えば、培養細胞、人工培養組織（ｅｘｐｌａｎｔ）、及びインビボの細胞である。「宿主細胞」及び「組換え宿主細胞」という用語は、本明細書で互換的に使用される。そのような用語は、特定の対象細胞だけでなく、そのような細胞の子孫または潜在的子孫も指すことを理解されるべきである。なぜならこれは、変異または環境の影響のいずれかに起因して、後に続く世代において、ある特定の変態が生じ得るためであり、実際、子孫は親細胞と同一ではあり得ないが、依然として、本明細書で使用される用語の範囲内に含まれる。
【００７０】
本明細書では、「ヒト化抗体」は、非ヒト細胞によって産生された抗体を含むことを広く指し、当該産生抗体は、ヒト細胞によって産生されるであろうものと非常に類似した抗体へと変更された可変領域及び定常領域を有する。例えば、非ヒト抗体のアミノ酸配列を変更することによって、ヒト生殖系列の免疫グロブリンの配列においてみられるアミノ酸を組み込む。本発明のヒト化抗体は、ヒト生殖系列の免疫グロブリンの配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、無作為もしくは部位特異的であるインビトロでの変異誘発、またはインビボでの体細胞変異によって導入される変異）を、例えば、ＣＤＲにおいて含んでよい。本明細書では、「ヒト化抗体」という用語は、マウスなどの別の哺乳類種の生殖系列から得られたＣＤＲ配列が、ヒトフレームワーク領域の配列に移植された抗体も含む。
【００７１】
本明細書では、「ハイブリダイゼーション」は、鎖がお互いに逆平行に配置されると、相補性であるヌクレオチド間で水素結合が形成されることによって生じる、相補性（部分的相補性を含む）ポリヌクレオチド鎖の物理的相互作用を広く指す。
【００７２】
本明細書では、「ＩｇＶドメイン」及び「ＩｇＣドメイン」は、Ｉｇスーパーファミリーのメンバーであるドメインを広く指す。こうしたドメインは、Ｉｇフォールドと呼ばれる特徴的な折り畳みパターンを有した構造単位に対応するものである。Ｉｇフォールドは、２つのベータシートのサンドイッチからなるものであり、すべてではないが、ほとんどのドメインにおいて、それぞれのベータシートが５〜１０残基のアミノ酸の逆平行ベータ鎖からなり、２つのシート間に、保存されたジスルフィド結合を有する。Ｉｇ分子、ＴＣＲ分子、及びＭＨＣ分子のＩｇＣドメインは、同一型の配列パターンを共有しており、ＩｇスーパーファミリーのＣ１セットと呼ばれる。他のＩｇＣドメインは、他のセットに含まれる。ＩｇＶｄメインも配列パターンを共有しており、Ｖセットドメインと呼ばれる。ＩｇＶドメインは、Ｃ−ドメインより長く、ベータ鎖の対をさらに形成するものである。
【００７３】
本明細書では、「免疫細胞」は、造血性起源の細胞であり、免疫応答において役割を担う細胞を広く指す。免疫細胞には、Ｂ細胞及びＴ細胞などのリンパ球、ナチュラルキラー細胞、ならびに単球、マクロファージ、好酸球、マスト細胞、好塩基球、及び顆粒球などの骨髄系細胞が含まれる。
【００７４】
本明細書では、「免疫アッセイ」は、抗原に特異的に結合する抗体を使用するアッセイを広く指す。免疫アッセイは、抗原の単離、標的化、及び／または定量のために、特定抗体の特異的結合特性を使用することによって特徴づけられてよい。
【００７５】
本明細書では、「免疫応答」は、Ｔ細胞の共刺激の調節が影響を与える、Ｔ細胞媒介性及び／またはＢ細胞媒介性の免疫応答を広く指す。例示の免疫応答には、Ｂ細胞応答（例えば、抗体産生）、Ｔ細胞応答（例えば、サイトカイン産生、及び細胞傷害活性）、ならびに例えば、マクロファージといった、サイトカインに応答性である細胞の活性化が含まれる。本明細書では、免疫応答に関する「下方調節（ｄｏｗｎｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ）」という用語は、任意の１つまたは複数の免疫応答の減少を含み、一方、免疫応答に関する「上方調節（ｕｐｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ）」という用語は、任意の１つまたは複数の免疫応答の増加を含む。１つの型の免疫応答の上方調節は、別の型の免疫応答において、対応する下方調節を引き起こし得ることを理解されよう。例えば、ある特定のサイトカイン（例えば、ＩＬ−１０）の産生の上方調節は、細胞免疫応答の下方調節を引き起こし得る。
【００７６】
本明細書では、「炎症性状態または炎症性疾患」は、慢性または急性の炎症性疾患を広く指す。
【００７７】
本明細書では、「阻害性シグナル」は、免疫細胞上の阻害性受容体分子を介して伝達されるシグナルを広く指す。シグナルは、活性化受容体（例えば、ＴＣＲ分子、ＣＤ３分子、ＢＣＲ分子、またはＦｃ分子）を介したシグナルと拮抗し、例えば、二次情報伝達物質の生成阻害、増殖阻害、または例えば、食作用の減少、抗体産生の減少、もしくは細胞傷害活性の減少といった、免疫細胞のエフェクター機能の阻害、あるいは免疫細胞におけるメディエーター（例えば、サイトカイン（例えば、ＩＬ−２）及び／またはアレルギー性応答のメディエーター）産生の欠如、あるいはアネルギーの発生をもたらし得る。
【００７８】
本明細書では、「単離された」は、それが天然に生じるその元環境から取り出された材料を広く指し、したがって、その天然環境に由来して、人の手によって変えられたものである。単離された材料は、例えば、ベクターシステムに含まれる外来性の核酸、宿主細胞内に含まれる外来性の核酸、またはその元環境から取り出され、このようにして、人の手によって変えられた任意の材料である（例えば、「単離された抗体」）。例えば、本明細書では、「単離された」または「精製された」は、タンパク質、ＤＮＡ、抗体、ＲＮＡ、または生物学的に活性であるそれらの部分であって、当該生体物質が得られる細胞源もしくは組織源に由来する細胞材料もしくは他の混入タンパク質を実質的に含まないものであるか、または化学的に合成される場合は、化学前駆物質もしくは他の化学物質を実質的に含まないものを広く指す。「細胞材料を実質的に含まない」という言葉は、ＶＩＳＴＡ（ＰＤ−Ｌ３）タンパク質の調製であって、当該タンパク質が、それが単離された細胞の細胞構成成分から分離される調製、またはそれが組換えで産生された細胞の細胞構成成分から分離される調製を含む。
【００７９】
本明細書では、「単離された抗体」は、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を指すことを意図する（例えば、ＰＤ−Ｌ３またはＶＩＳＴＡに特異的に結合し、ＰＤ−Ｌ３またはＶＩＳＴＡ以外の抗原に特異的に結合する抗体を実質的に含まない、単離された抗体）。さらに、単離された抗体は、他の細胞材料及び／または化学物質
を実質的に含有し得ない。
【００８０】
本明細書では、「Ｋ−ａｓｓｏｃ」または「Ｋａ」は、特定の抗体−抗原相互作用の会合速度を広く指し、一方、本明細書では、「Ｋｄｉｓｓ」または「Ｋｄ」という用語は、特定の抗体−抗原相互作用の解離速度を指す。本明細書では、「ＫＤ」という用語は、解離定数を指すことを意図し、当該解離定数は、ＫｄのＫａに対する比（すなわち、Ｋｄ／Ｋａ）から得られるものであり、モル濃度（Ｍ）として表現される。抗体のＫＤ値は、当該技術分野でよく確立された方法を使用して決定することができる。
【００８１】
本明細書では、「標識」または「検出可能部分」は、分光学的手段、光化学的手段、生化学的手段、免疫化学的手段、化学的手段、または他の物理的手段によって検出が可能な組成物を広く指す。
【００８２】
本明細書では、「低厳密性条件」、「中厳密性条件」、「高厳密性条件」、または「超厳密性条件」は、核酸ハイブリダイゼーション及び洗浄のための条件を広く指す。ハイブリダイゼーション反応の実施を対象にしたガイダンスは、Ａｕｓｕｂｅｌら（２００２）Ｓｈｏｒｔ  Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ  ｉｎ  Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｂｉｏｌｏｇｙ（５．ｓｕｐ．ｔｈ  Ｅｄ．）Ｊｏｈｎ  Ｗｉｌｅｙ  ＆  Ｓｏｎｓ，ＮＹにおいて見つけることができる。例示の特異的ハイブリダイゼーション条件には、限定はされないが、下記の条件が含まれる。すなわち、（１）低厳密性ハイブリダイゼーション条件は、６倍の塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム（ＳＳＣ）を約４５℃で使用した後、０．２倍のＳＳＣ、０．１％のＳＤＳを使用して少なくとも５０℃で２回洗浄する条件であり（低厳密性条件では、洗浄温度を５５℃まで上昇させることができる）、（２）中厳密性ハイブリダイゼーション条件は、６倍のＳＳＣを約４５℃で使用した後、０．２倍のＳＳＣ、０．１％のＳＤＳを使用して６０℃で１回または複数回洗浄する条件であり、（３）高厳密性ハイブリダイゼーション条件は、６倍のＳＳＣを約４５℃で使用した後、０．２倍のＳＳＣ、０．１％のＳＤＳを使用して６５℃で１回または複数回洗浄する条件であり、そして（４）超厳密性ハイブリダイゼーション条件は、０．５Ｍのリン酸ナトリウム、７％のＳＤＳを６５℃で使用した後、０．２倍のＳＳＣ、１％のＳＤＳを６５℃で使用して１回または複数回洗浄する条件である。
【００８３】
本明細書では、「哺乳動物」は、ヒトを含む、クラスが哺乳綱である温血脊椎動物のいずれか及びすべてを広く指し、皮膚が毛で覆われていること、及び雌性動物では、若年を育てるための、乳を産生する乳腺によって特徴づけられる。哺乳動物の例には、限定はされないが、アルパカ、アルマジロ、カピバラ、ネコ、ラクダ、チンパンジー、チンチラ、ウシ、イヌ、ヤギ、ゴリラ、ハムスター、ウマ、ヒト、キツネザル、ラマ、マウス、非ヒト霊長類、ブタ、ラット、ヒツジ、トガリネズミ、リス、バク（ｔａｐｉｒ）、及びハタネズミが含まれる。哺乳動物には、限定はされないが、ウシ種、イヌ種、ウマ種、ネコ種、マウス種、ヒツジ種、ブタ種、霊長類種、及びげっ歯類種が含まれる。また、哺乳動物には、ワシントンＤ．Ｃ．のＮａｔｉｏｎａｌ  Ｍｕｓｅｕｍ  ｏｆ  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｈｉｓｔｏｒｙ，Ｓｍｉｔｈｓｏｎｉａｎ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎによって維持されているＭａｍｍａｌ  Ｓｐｅｃｉｅｓ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｗｏｒｌｄに示されているもののいずれか、またはそのすべても含まれる。
【００８４】
本明細書では、「天然起源の核酸分子」は、天然に生じる核酸配列を有するＲＮＡ分子またはＤＮＡ分子（例えば、天然タンパク質をコードする）を広く指す。
【００８５】
本明細書では、「核酸」または「核酸配列」は、１本鎖形態または２本鎖形態のいずれかであるデオキシリボヌクレオチドまたはリボヌクレオチドのオリゴヌクレオチドを広く指す。当該用語は、核酸、すなわち、オリゴヌクレオチドを包含し、天然ヌクレオチドの
既知の類似物質を含む。当該用語は、合成骨格主鎖を有する核酸様構造も包含する。別段の記載がない限り、特定の核酸配列は、明示的に示される配列に加えて、保存的に改変（例えば、縮重コドンでの置換）されたその変異体及び相補性配列も黙示的に包含する。核酸という用語は、遺伝子、ｃＤＮＡ、ｍＲＮＡ、オリゴヌクレオチド、及びポリヌクレオチドと互換的に使用される。
【００８６】
本明細書では、「オリゴマー形成ドメイン」は、ＶＩＳＴＡ細胞外ドメインまたはその断片に結合すると、オリゴマー形成を促進するドメインを広く指す。当該オリゴマー形成ドメインは、例えば、ロイシンジッパーといった、自己会合するアルファヘリックスを含み、当該アルファヘリックスは、追加のジスルフィド結合によって、さらに安定化され得る。ドメインは、膜をまたぐ、方向性のある折り畳みに適合するように設計されており、この折り畳みは、ポリペプチドがインビボで折り畳まれて、機能性の結合タンパク質となることを促進するプロセスであると考えられている。その例は、当該技術分野で知られており、例としては、コイルドＧＣＮ４、及びＣＯＭＰが含まれる。
【００８７】
αヘリカルコイルドコイルは、タンパク質において見られる、おそらく最も広汎性のサブユニットオリゴマー形成モチーフである。したがって、コイルドコイルは、様々な異なる機能を果たすものである。例えば、転写活性化因子のいくつかのファミリーでは、短いロイシンジッパーが、ＤＮＡに対するＤＮＡ結合領域の位置決めにおいて重要な役割を担っている。Ｅｌｌｅｎｂｅｒｇｅｒら（１９９２）Ｃｅｌｌ  ７１：１２２３−１２３７。コイルドコイルは、中間系フィラメントタンパク質のオリゴマー形成にも使用される。さらに、コイルドコイルタンパク質は、小胞膜の融合及びウイルス膜の融合の両方において、重要な役割を担っているようである。Ｓｋｅｈｅｌ  ａｎｄ  Ｗｉｌｅｙ（１９９８）Ｃｅｌｌ  ９５：８７１−８７４。両方の場合で、融合されることになる膜に包埋されている疎水性配列は、長いアルファ−ヘリックスの束からなる桿状複合体の同一末端に位置している。この分子配置は、複合体が膜の融合に向けて会合するにつれて、膜の近接した接合を引き起こすためのものであると考えられている。コイルドコイルは、オリゴマー形成を制御するために使用されることが多い。コイルドコイルは、転写因子を含む多くの型のタンパク質に見られ、当該タンパク質には、限定はされないが、数ある中でも、ＧＣＮ４、ウイルス融合ペプチド、ＳＮＡＲＥ複合体、及びある特定のｔＲＮＡ合成酵素が含まれる。トロポミオシン、中間系フィラメント、及び紡錘極体の構成成分などのタンパク質では、非常に長いコイルドコイルが見られる。コイルドコイルは、お互いが巻き付いて高次コイルを形成しているアルファ−へリックスの多くに関与しており、その高次コイル形成様式は、平行配向または逆平行配向で会合する、高度に組織化されたものである。２量体及び３量体が最も一般的ではあるが。へリックスは、同一タンパク質または異なるタンパク質に由来し得るものである。コイルドコイルは、構成成分であるへリックスが一緒になり、その疎水性の継ぎ目が隠れることによって形成される。疎水性の継ぎ目は、それぞれのへリックスに巻き付いてねじれるため、へリックスもねじれてお互いが巻き付いたコイルを形成することで、疎水性の継ぎ目が隠れて、高次コイルが形成される。これは、隣接へリックス間での側鎖の特徴的な嵌合であり、ノブ・イントゥ・ホール（ｋｎｏｂ−ｉｎｔｏ−ｈｏｌｅ）パッキングとしても知られ、コイルドコイルとしての構造を定義するものである。平行である立体構造をとることが最も一般的ではあるが、この型の相互作用が生じるために、へリックスが同一方向に並ぶ必要はない。逆平行である立体構造は、３量体では非常に稀であり、５量体では知られていないが、分子内２量体では、より一般的であり、分子内２量体では、２つのへリックスが、短いループによって結合されることが多い。細胞外空間では、ヘテロ３量体のコイルドコイルタンパク質であるラミニンが、基底膜の形成において重要な役割を担っている。他の例は、トロンボスポンジン及び軟骨オリゴマー基質タンパク質（ＣＯＭＰ）であり、３つの鎖（トロンボスポンジン１及びトロンボスポンジン２）または５つ鎖（トロンボスポンジン３、トロンボスポンジン４、及びＣＯＭＰ）が��合されたものである。当該分子は、外観が花束様であり、それがオリゴ
マー構造を有している理由は、おそらく、Ｃ末端ドメインの、細胞受容体との多価相互作用によるものである。塩基性領域ロイシンジッパー（ｂａｓｉｃ  ｒｅｇｉｏｎ  ｌｅｕｃｉｎｅ  ｚｉｐｐｅｒ）（ｂＺＩＰ）ＤＮＡ結合モチーフを含む真核生物タンパク質で同定されたものは３０を超え、酵母の転写活性化因子であるＧＣＮ４はその内の１つである。Ｅｌｌｅｎｂｅｒｇｅｒら（１９９２）Ｃｅｌｌ  ７１：１２２３−１２３７。ｂＺＩＰの２量体は、連続するアルファへリックスの１つの対であり、当該アルファへリックスは、そのカルボキシ末端の３４残基にわたって平行コイルドコイルを形成しており、ＤＮＡ結合部位の主要な溝を通り抜け、そのアミノ末端に向かって徐々に分岐しているものである。コイルドコイルの２量体形成接合部は、ＤＮＡ軸に対してほとんど垂直に配向していることにより、複合体の外観はＴ字となる。ｂＺＩＰは、疎水性かつ非極性である残基が７残基繰り返す配列を４〜３つ含み、当該残基は、平行アルファへリックスのコイルドコイルへと一緒にパッキングされる。Ｅｌｌｅｎｂｅｒｇｅｒら（１９９２）Ｃｅｌｌ
７１：１２２３−１２３７。２量体の安定性は、７残基の繰り返し位置ａ及び位置ｂにおけるロイシン残基及び非極性残基の隣り合ったパッキング、ならびに限られた数のへリックス内またはヘリックス間の塩橋からもたらされるものであり、これは、ＧＣＮ４のロイシンジッパーペプチドの結晶構造において示されたものである。Ｅｌｌｅｎｂｅｒｇｅｒら（１９９２）Ｃｅｌｌ  ７１：１２２３−１２３７。別の例は、Ｍｒ５２，０００であるサブユニットのホモ３量体として、ウシの気管軟骨から単離されたＣＭＰ（マトリリン−１）であり（Ｐａｕｌｓｓｏｎ  ＆  Ｈｅｉｎｅｇａｒｄ（１９８１）Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｊ．１９７：３６７−３７５）、それぞれのサブユニットは、ｖＷＦＡ１モジュール、単一ＥＧＦドメイン、ｖＷＦＡ２モジュール、及び５つの７残基繰り返し配列にまたがるコイルドコイルドメインからなるものである。Ｋｉｓｓら（１９８９）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６４：８１２６−８１３４、Ｈａｕｓｅｒ  ａｎｄ  Ｐａｕｌｓｓｏｎ（１９９４）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９：２５７４７−２５７５３。精製されたＣＭＰを電子顕微鏡で解析することにより、それぞれのサブユニットが楕円体を形成している花束様の３量体構造が示され、当該楕円体は、コイルドコイルに対応する共通点に由来して現れるものである。Ｈａｕｓｅｒ  ａｎｄ  Ｐａｕｌｓｓｏｎ（１９９４）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９：２５７４７−２５７５３。マトリリン−１におけるコイルドコイルドメインは、これまで幅広く研究されてきた。非変性条件下で、鎖間のジスルフィド結合を完全に還元した後に、３量体構造は保持される。Ｈａｕｓｅｒ  ａｎｄ  Ｐａｕｌｓｓｏｎ（１９９４）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９：２５７４７−２５７５３。さらなる別の例は、軟骨オリゴマー基質タンパク質（ＣＯＭＰ）である。非コラーゲン性の糖タンパク質であるＣＯＭＰは、軟骨において最初に同定されたものである。Ｈｅｄｂｏｍら（１９９２）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６７：６１３２−６１３６。当該タンパク質は、５つのサブユニットを有した５２４ｋＤａのホモ５量体であり、当該サブユニットは、Ｎ末端の７残基繰り返し領域（ｃｃ）、それに続く４つの上皮増殖因子（ＥＧＦ）様ドメイン（ＥＦ）、７つのカルシウム結合ドメイン（Ｔ３）、及びＣ末端球状ドメイン（ＴＣ）からなるものである。このドメイン組成によると、ＣＯＭＰは、トロンボスポンジンのファイミリーに属する。位置ａ及び位置ｂにおいて、疎水性残基を選択的に有する７残基の繰り返し（ａｂｃｄｅｆｇ）ｎが、へリックスのコイルドコイルドメインを形成している。Ｃｏｈｅｎ  ａｎｄ  Ｐａｒｒｙ（１９９４）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２６３：４８８−４８９。最近、ＣＯＭＰの組換えである５本鎖コイルドコイルドメイン（ＣＯＭＰｃｃ）が結晶化され、０．２ｎｍの分解能で、その構造が解析された。Ｍａｌａｓｈｋｅｖｉｃｈら（１９９６）Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２７４：７６１−７６５。
【００８８】
本明細書では、「動作可能な形で連結された」は、２つのＤＮＡ断片によってコードされるアミノ酸配列がフレーム内に残存するように、２つのＤＮＡ断片が連結されることを広く指す。
【００８９】
本明細書では、「パラトープ」は、抗原を認識する抗体部分を広く指す（例えば、抗体
の抗原結合部位）。パラトープは、抗体のＦｖ領域の小さな領域（例えば、１５〜２２残基のアミノ酸）であってよく、抗体の重鎖部分及び軽鎖部分を含んでよい。ＧｏｌｄｓｂｙらＡｎｔｉｇｅｎｓ（Ｃｈａｐｔｅｒ  ３）Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（５．ｓｕｐ．ｔｈ
Ｅｄ．）Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ：Ｗ．Ｈ．Ｆｒｅｅｍａｎ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐａｎｙの５７〜７５ページ目を参照のこと。
【００９０】
本明細書では、「患者（ｐａｔｉｅｎｔ）」は、疾患状態の緩和または疾患状態の発生もしくは再発の防止のいずれかのための治療を必要とする任意の動物を広く指す。また、本明細書では、「患者」は、危険因子、疾患歴、感受性、症状、徴候を有し、以前に診断され、疾患の患者集団のメンバーとなる危険があるか、またはそのメンバーである任意の動物も広く指す。患者は、ヒトなどの臨床的な患者であるか、またはペット、家畜化動物、家畜、外来動物、もしくは動物園の動物などの獣医学的な患者であってよい。「対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）」という用語は、「患者」という用語と互換的に使用されてよい。
【００９１】
「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」は、互換的に使用され、アミノ酸残基の重合体を広く指す。当該用語は、１つまたは複数のアミノ酸残基が、対応する天然起源のアミノ酸の類似物質または模倣物質であるアミノ酸重合体、ならびに天然起源のアミノ酸重合体に対して適用される。当該用語は、１つまたは複数のアミノ酸残基が、対応する天然起源のアミノ酸の人工的な化学的模倣物質であるアミノ酸重合体、ならびに天然起源のアミノ酸重合体、及び非天然起源のアミノ酸重合体に対して適用される。ポリペプチドは、例えば、糖タンパク質を形成させるために、糖質残基を付加することによって、修飾することができる。「ポリペプチド」、「ペプチド」、及び「タンパク質」という用語は、糖タンパク質、ならびに非糖タンパク質を含む。
【００９２】
本明細書では、「プロモーター」は、核酸の転写を方向づける一連の核酸配列を広く指す。本明細書では、プロモーターは、ポリメラーゼＩＩ型プロモーターの場合、ＴＡＴＡ配列などの、転写開始部位の近くに必要となる核酸配列を含む。プロモーターは、遠位の転写促進因子または転写抑制因子の配列も任意選択で含み、当該配列は、転写開始部位から数千塩基対ほど離れて位置し得るものである。「恒常的」プロモーターは、ほとんどの環境条件下または発生条件下において活動性であるプロモーターである。「誘導性」プロモーターは、環境制御下または発生制御下において活動性であるプロモーターである。
【００９３】
本明細書では、「予防上有効な量」は、疾患の予防または疾患再発の防止のために、患者に対して投与されると、疾患または再発のための、そのような予防をもたらすために十分である化合物量を広く指す。予防上有効な量は、徴候及び／または症状の発生を防止するために有効な量であってよい。「予防上有効な量」は、治療されることになる患者の、疾患及びその重症度、ならびに年齢、体重、病歴、状態に対する素因、既存の状態に応じて変化してよい。
【００９４】
本明細書では、「予防」は、徴候及び／または症状が、患者に存在しないか、寛解中であるか、または患者に以前存在したものである、治療の過程を広く指す。予防は、患者の疾患の治療の後に生じる疾患の防止を含む。さらに、防止は、疾患を潜在的に発症し得る患者の治療を含み、特に、疾患に感受性である患者（例えば、患者集団のメンバー、危険因子を有する個体、または疾患発症の危険を有する個体）の治療を含む。
【００９５】
本明細書では、「組換えの（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ）」は、産物に関するものとして、例えば、細胞、または核酸、タンパク質、またはベクターを広く指し、細胞、核酸、タンパク質、またはベクターが、異種性の核酸もしくはタンパク質の導入によって改変されたか、または天然の核酸もしくはタンパク質の変更によって改変されたことを示すか、あるいは細胞が、そのように改変された細胞から得られたものであることを示す。したがっ
て、例えば、組換え細胞は、その細胞の天然（非組換え）形態には見られない遺伝子を発現するか、または天然の遺伝子を、通常とは異なる状態において、異常に発現するか、その発現状態にあるか、もしくはそれを全く発現しない。
【００９６】
本明細書では、「シグナル配列」または「シグナルペプチド」は、約１５残基以上のアミノ酸を含むペプチドを広く指し、当該ペプチドは、分泌型ポリペプチド及び膜結合型ポリペプチドのＮ末端に生じ、多数の疎水性アミノ酸残基を含むものである。例えば、シグナル配列は、少なくとも約１０〜３０のアミノ酸残基、好ましくは約１５〜２５のアミノ酸残基、より好ましくは、約１８〜２０のアミノ酸残基、及びさらにより好ましくは、約１９のアミノ酸残基を含み、少なくとも約３５〜６５％、好ましくは、約３８〜５０％、及びより好ましくは、約４０〜４５％の疎水性アミノ酸残基（例えば、バリン、ロイシン、イソロイシン、またはフェニルアラニン）を有する。「シグナル配列」は、当該技術分野で「シグナルペプチド」とも称され、そのような配列を含むポリペプチドを方向づけ、脂質二重層へと移行させ、分泌ポリペプチド及び膜結合ポリペプチドにおいて切断されるために働く。
【００９７】
本明細書では、抗体に対して、「特異的に（もしくは選択的に）結合する」または「に特異的に（もしくは選択的に）免疫反応性である」または「特異的に相互作用もしくは結合する」は、タンパク質またはペプチド（もしくは他のエピトープ）を広く指し、いくつかの実施形態では、タンパク質及び他の生物製剤の不均一集団におけるタンパク質の存在を決定的にする結合反応を指す。例えば、指定の免疫アッセイ条件下で、特定の抗体が、特定のタンパク質に対して、基礎環境（非特異的シグナル）と比較して少なくとも２倍を超えて強く結合すると共に、試料中に存在する他のタンパク質に対して有意な量で実質的に結合することはない。典型的には、特異的反応または選択的反応であれば、基礎環境のシグナルまたはノイズの少なくとも２倍であり、より典型的には、基礎環境の約１０〜１００倍を超えることになる。
【００９８】
本明細書では、「特異的にハイブリッド形成可能である」及び「相補性である」は、核酸が伝統的なＷａｔｓｏｎ−Ｃｒｉｃｋまたは他の非伝統的な型のいずれかによって、別の核酸配列と水素結合を形成できることを広く指す。当該核酸の相補性配列を有した核酸分子に対する結合自由エネルギーは、例えば、ＲＮＡｉ活性といった、当該核酸の関連機能を生じさせることを十分に可能にするものである。核酸分子に対する結合自由エネルギーの決定は当該技術分野においてよく知られている。例えば、Ｔｕｒｎｅｒら（１９８７）ＣＳＨ  Ｓｙｍｐ．Ｑｕａｎｔ．Ｂｉｏｌ．ＬＩＩ：１２３−３３、Ｆｒｉｅｒら（１９８６）ＰＮＡＳ  ８３：９３７３−７７、Ｔｕｒｎｅｒら（１９８７）Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１０９：３７８３−８５を参照のこと。相補性割合は、第２の核酸配列と、水素結合を形成（例えば、Ｗａｔｓｏｎ−Ｃｒｉｃｋの塩基対形成）することができる、核酸分子中の近接残基の割合を示す（１０の内、少なくとも約５、６、７、８、９、１０は、少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、及び１００％の相補性を含むということである）。「完全に相補性である」、または１００％の相補性は、核酸配列のすべての近接残基が、第２の核酸配列に存在する同一の数の近接残基と水素結合することを広く指す。「実質的相補性」は、ポリヌクレオチド鎖が、非相補性となるように選択された、突出などのポリヌクレオチド鎖領域を除いて、少なくとも約９０％の相補性を示すことを指す。特異的な結合が望ましい条件下、すなわち、インビボアッセイもしくは治療処置の場合は、生理学的条件下、またはインビトロアッセイの場合は、アッセイが実施される条件下で、非標的配列に対する、オリゴマー化合物の非特異的結合を回避するために、十分な度合いの相補性が、特異的結合には必要である。非標的配列は、通常、少なくとも５つのヌクレオチドが異なり得る。
【００９９】
本明細書では、疾患の「徴候」は、患者の検査で発見が可能である、疾患を示す任意の
異常性を広く指し、主観的な疾患指標である症状とは対照的に、疾患の客観的指標である。
【０１００】
本明細書では、「固体担体」、「担体」、及び「基質」は、固体構造または半固体構造をとり、別の材料が結合できる任意の材料を広く指し、限定はされないが、滑面担体（例えば、金属表面、ガラス表面、プラスチック表面、シリコン表面、及びセラミック表面）ならびに加工（ｔｅｘｔｕｒｅｄ）材料及び多孔性材料が含まれる。
【０１０１】
本明細書では、「対象（ｓｕｂｊｅｃｔ）」は、本発明による治療に適した任意の個体を広く指し、限定はされないが、トリ対象及び哺乳類対象が含まれ、好ましくは哺乳類である。本発明による治療の必要がある哺乳類対象はいずれも適した対象である。ヒト対象は、性別及び発生の段階（すなわち、新生児、幼児、若年、青年、成人）を問わず、本発明による治療が可能である。本発明は、動物対象に対しても実施してよく、具体的には、獣医学的目的、ならびに薬物選別目的及び薬物開発目的のために、マウス、ラット、イヌ、ネコ、ウシ、ヤギ、ヒツジ、及びウマなどの動物対象に対しても実施してよい。「対象」は、「患者」と互換的に使用される。
【０１０２】
本明細書では、「化学的前駆物質または他の化学物質を実質的に含まない」は、タンパク質が、タンパク質合成に関与する化学的前駆物質または他の化学物質から分離される、ＶＩＳＴＡタンパク質の調製物を広く指す。１つの実施形態では、「化学的前駆物質または他の化学物質を実質的に含まない」という言葉は、化学的前駆物質または非ＶＩＳＴＡ化学物質の含有量が（乾燥重量で）約３０％未満であるか、より好ましくは、化学的前駆物質または非ＶＩＳＴＡ化学物質の含有量が約２０％未満であるか、さらにより好ましくは、化学的前駆物質または非ＶＩＳＴＡ化学物質の含有量が約１０％未満であるか、及び最も好ましくは、化学的前駆物質または非ＶＩＳＴＡ（ＰＤ−Ｌ３）化学物質の含有量が約５％未満であるＶＩＳＴＡタンパク質の調製物を含む。
【０１０３】
本明細書では、疾患の「症状」は、患者に生じ、疾患が示す、構造、機能、または感覚における、任意の病的現象または正常からの逸脱を広く指す。
【０１０４】
本明細書では、「Ｔ細胞」は、ＣＤ４＋Ｔ細胞、及びＣＤ８＋Ｔ細胞を広く指す。Ｔ細胞という用語は、１型ヘルパーＴ細胞及び２型ヘルパーＴ細胞の両方も含む。
【０１０５】
本明細書では、「Ｔｒｅｇ細胞」（抑制性Ｔ細胞と称されることもある）は、免疫システムを調節し、自己抗原に対する寛容を維持して、自己免疫疾患を抑止することができるＴ細胞の亜集団を広く指す。Ｆｏｘｐ３＋ＣＤ４＋ＣＤ２５＋制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）は、正常な生理学的条件下での末梢性寛容の維持に非常に重要であると共に、癌における抗腫瘍免疫応答を抑制する。
【０１０６】
本明細書では、「治療（ｔｈｅｒａｐｙ）」、「治療の（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ）」、「治療（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、または「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」は、疾患の治療、疾患のもしくはその臨床的症状の発症抑止もしくは発症低減、及び／または疾患の緩和であり、疾患またはその臨床的症状の退縮を引き起こすものを広く指す。治療は、疾患、徴候、及び／または疾患症状の予防、治療、療法、低減、軽減、及び／またはそれらからの解放の提供を包含する。治療は、進行中である疾患の徴候及び／または症状（例えば、炎症、疼痛）を有する患者における徴候及び／または症状の軽減を包含する。治療は、「予防」も包含する。「低減した」という用語は、治療の目的では、徴候及び／または症状の、有意な臨床的低減を広く指す。治療は、再発または反復する徴候及び／もしくは症状（例えば、炎症、疼痛）の治療を含む。治療には、限定はされないが、任意の時間における徴候及び／または症状の出現防止、ならびに現存する徴候及び／または症状の低減、
ならびに現存する徴候及び／または症状の排除が含まれる。治療は、慢性疾患の治療（維持管理）及び急性疾患の治療を含む。例えば、治療は、徴候及び／または症状（例えば、炎症、疼痛）の再発または反復の治療または防止を含む。
【０１０７】
本明細書では、「膜貫通ドメイン」は、細胞膜にまたがる、長さがアミノ酸約１５残基のアミノ酸配列を広く指す。より好ましくは、膜貫通ドメインは、少なくとも約２０、少なくとも約２５、少なくとも約３０、少なくとも約３５、少なくとも約４０、または少なくとも約４５のアミノ酸残基を含んで細胞質にまたがる。膜貫通ドメインは、疎水性残基が豊富であり、典型的には、アルファへリックス構造を有する。１つの実施形態では、膜貫通ドメインのアミノ酸の少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、またはそれを超える割合が疎水性であり、例えば、ロイシン、イソロイシン、チロシン、またはトリプトファンである。膜貫通ドメインは、例えば、Ｚａｇｏｔｔａら（１９９６）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．１９：２３５−２６３において説明されている。
【０１０８】
本明細書では、「遺伝子導入動物」は、非ヒト動物、好ましくは、哺乳動物、より好ましくは、マウスであり、その動物の１つまたは複数の細胞が「導入遺伝子」を含むものを広く指す。「導入遺伝子」という用語は、遺伝子導入動物の発生起源である細胞のゲノムへと組み込まれた外来性ＤＮＡであり、成熟動物のゲノムに依然として存在して、遺伝子導入動物の１つまたは複数の細胞型または組織における、コード遺伝子の発現を方向づけるものを指す。
【０１０９】
本明細書では、「腫瘍」は、組織の新生物形成の形態、具体的には、内在性組織が自発的、自律的、及び不可逆的に過剰増殖し、程度の差はあるものの、阻害解除された形態にある、少なくとも１つの細胞または細胞塊であり、その増殖が、概して、程度の差はあるものの、特定細胞及び特定組織の機能の明白な減少と関連しているものを広く指す。この細胞または細胞塊は、その増殖に関して、それ自体によって、または宿主生物の制御機構によって、効果的に阻害されないものであり、例えば、結腸直腸癌、黒色腫、またはカルシノーマである。腫瘍抗原は、悪性細胞自体の中またはその細胞上に存在する抗原を含むだけでなく、内皮細胞及び他の血管構成成分を含む、腫瘍組織を支持する間質に存在する抗原も含む。
【０１１０】
本明細書では、「無応答性」は、刺激に対する免疫細胞の屈折性を広く指し、当該刺激は、例えば、活性化受容体またはサイトカインを介した刺激である。無応答性は、例えば、免疫抑制剤または高用量の抗原に対する曝露に起因して生じ得る。
【０１１１】
本明細書では、「可変領域」または「ＶＲ」は、抗体における軽鎖及び重鎖のそれぞれの対内に存在するドメインであり、抗原に対する抗体の結合に直接的に関与するものを広く指す。それぞれの重鎖は、一方の末端に可変ドメイン（ＶＨ）を有し、それに多くの定常ドメインが続いている。それぞれの軽鎖は、一方の末端に可変ドメイン（ＶＬ）を有し、そのもう一方の末端に定常ドメインを有する。軽鎖の定常ドメインは、重鎖の最初の定常ドメインと並列しており、軽鎖の可変ドメインは、重鎖の可変ドメインと並列している。
【０１１２】
本明細書では、「ベクター」は、それに連結された別の核酸分子を輸送する能力を有する核酸分子を広く指す。ベクターの１つの型は、「プラスミド」であり、これは、追加のＤＮＡセグメントを連結し得る環状２本鎖ＤＮＡループを指す。別の型のベクターは、ウイルスベクターであり、これは、追加のＤＮＡセグメントをウイルスゲノムへと連結し得るものである。ある特定のベクターは、それが導入される宿主細胞において、自己複製する能力を有している（例えば、細菌の複製起点を有する細菌ベクター及びエピソーム哺乳
類ベクター）。他のベクター（例えば、非エピソーム哺乳類ベクター）は、宿主細胞への導入に際して、宿主細胞のゲノムへと組み込まれ、それによって宿主ゲノムと共に複製される。さらに、ある特定のベクターは、それが動作可能な形で連結されたゲノムの発現を方向づける能力を有している。本明細書では、ベクターは、「組換え発現ベクター」または単に「発現ベクター」と称される。一般に、組換えＤＮＡ手法において実用的である発現ベクターは、プラスミドの形態であることが多い。本明細書では、「プラスミド」及び「ベクター」は、互換的に使用されてよく、これは、プラスミドが最も一般に使用されるベクター形態であることと同様である。しかしながら、本発明は、同等機能を有して働く、ウイルスベクターなどの、そのような他の形態の発現ベクター（例えば、複製欠損性のレトロウイルス、アデノウイルス、及びアデノ随伴ウイルス）を含むことを意図する。手法及び手順は、当該技術分野において知られる従来方法に従って、ならびに本明細書にわたって引用及び議論されている様々な一般参考文献及びより特定の参考文献において説明されているように、一般に実施される。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（２００１）Ｍｏｌｅｃ．Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ｌａｂ．Ｍａｎｕａｌ［３．ｓｕｐ．ｒｄ  Ｅｄ］Ｃｏｌｄ  Ｓｐｒｉｎｇ  Ｈａｒｂｏｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ｐｒｅｓｓを参照のこと。組換えＤＮＡ、オリゴヌクレオチド合成、及び組織培養、ならびに形質転換（例えば、電気穿孔、リポフェクション）に標準手法を使用してよい。酵素反応及び精製手法は、製造者の説明書に従って実施するか、または当該技術分野で一般に達成されるように実施するか、または本明細書に記載されるように実施してよい。
【０１１３】
本明細書に記載の分析化学、合成有機化学、ならびに医薬品（ｍｅｄｉｃｉｎａｌ）化学及び医薬（ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ）化学に関連して利用される命名法、ならびにそれらの実験手順及び実験手法は、当該技術分野においてよく知られており、一般に使用されるものである。化学合成、化学分析、医薬調製、処方、及び送達、ならびに患者の治療に標準手法を使用してよい。
【０１１４】
本明細書では、「ＶＩＳＴＡアゴニスト」は、ＶＩＳＴＡの発現または活性、具体的には、例えば、抗原特異的な抗体応答といったＢ細胞増殖及びＢ細胞応答に対する、ＶＩＳＴＡの抑制作用を直接的または間接的に促進する任意の化合物を含む。これには、アゴニストである抗ＶＩＳＴＡ抗体及び抗ＶＩＳＴＡ抗体断片、抗体もしくはその抗体断片、ペプチド、糖アルコイド（ｇｌｙｃｏａｌｋｏｉｄ）、アンチセンス核酸、リボザイム、レチノイド、アベミル（ａｖｅｍｉｒ）、小分子、またはそれらの任意の組み合わせが含まれる。好ましいＶＩＳＴＡアゴニストには、ＶＩＳＴＡ−Ｉｇポリペプチドであり、例えば、ＶＩＳＴＡポリペプチドまたはその断片が、例えば、ヒトのＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４といった抗体の全Ｆｃ領域またはそのＦｃ領域の断片に対して結合しているものが含まれる。他の例示のＶＩＳＴＡアゴニストには、ＶＩＳＴＡの多量体形態であり、すなわち、２つ以上のＶＩＳＴＡポリペプチドまたはその断片を含むものが含まれ、例えば、典型的には、オリゴマー化または多量体化したドメインまたは配列を介して結合した、２、３、４、５、または６個のＶＩＳＴＡポリペプチドである。そのような配列は、知られており、利用可能である。また、ＶＩＳＴＡアゴニストには、その表面にＶＩＳＴＡを発現する遺伝子導入細胞、及びＶＩＳＴＡの発現を促進する核酸が含まれる。ほとんどの実例では、そのようなアゴニストは、ヒトＶＩＳＴＡに特異的であろう。
【０１１５】
本明細書では、「ＶＩＳＴＡアンタゴニスト」は、ＶＩＳＴＡの発現または活性、具体的には、例えば、抗原特異的な抗体応答といったＢ細胞増殖及びＢ細胞応答に対する、ＶＩＳＴＡの抑制作用を直接的または間接的に阻害または遮断する任意の化合物を指す。これには、アンタゴニストである抗ＶＩＳＴＡ抗体及び抗ＶＩＳＴＡ抗体断片、抗体もしくはその抗体断片、ペプチド、糖アルコイド（ｇｌｙｃｏａｌｋｏｉｄ）、アンチセンス核酸、リボザイム、レチノイド、アベミル（ａｖｅｍｉｒ）、小分子、またはそれらの任意の組み合わせが含まれる。好ましいＶＩＳＴＡアンタゴニストには、例えば、抗原特異的
な抗体応答といったＢ細胞増殖またはＢ細胞応答性に対するＭＳＤＣの抑制作用を遮断または阻害する抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体及び抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体断片が含まれる。他の好ましいＶＩＳＴＡアンタゴニストには、アンチセンス核酸及び干渉ＲＮＡもしくはｓｉＲＮＡまたはペプチド核酸（「ＰＮＡ」）などの、ＶＩＳＴＡの発現を遮断または抑制する核酸が含まれる。他の例示のＶＩＳＴＡアンタゴニストには、例えば、免疫細胞といった細胞に対するＶＩＳＴＡの結合を遮断するＶＩＳＴＡ断片と、免疫細胞に対するＶＩＳＴＡの結合を遮断するＶＩＳＴＡポリペプチドを発現する細胞と、が含まれる。
【０１１６】
宿主による病態形成度合いの制御は、免疫制御性の応答を明らかに反映するものであり、例えば、腫瘍微小環境との関連において、過度の負の免疫制御をもたらす制御機構が含まれる。ウイルス感染では、ほとんどの場合、ウイルスが免疫制御性の細胞及び分子を乗っ取ることで、宿主応答性を減少させることによって、病態形成を間接的に増加促進するにすぎない一方で、誤って方向づけされた免疫制御性システムが、疾患を近くに引き起こすエフェクター細胞／分子として直接的に働き得る可能性がある。
【０１１７】
過去１０年にわたってよく研究された免疫制御性の細胞型は、骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）である（Ｏｓｔｒａｎｄ−Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，２０１０、Ｙｏｕｎ  ａｎｄ  Ｇａｂｒｉｌｏｖｉｃｈ，２０１０において概説されている）。ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋Ｔｒｅｇ細胞のように、ＭＤＳＣは、具体的には、様々な腫瘍システムにおいて、防御的なＴ細胞免疫応答に関して、負の様式にある一次的活動であるとみなされている。さらに、ＭＤＳＣ制御性である制御が、自己免疫疾患のプロセスを制限することができるという証拠を提供する文献が、数は少ないものの増加している（Ｂｏｗｅｎ  ａｎｄ  Ｏｌｓｏｎ，２００９）。ＭＤＳＣは、その最終定義が、それが（未成熟な）骨髄起源であることと、その抑制性様式に基づいているものの、マウスシステムにおいて、Ｇｒ−１及びＣＤ１１ｂが陽性である表面表現型を有していることが一般に認められている。ＭＤＳＣ集団は、典型的には、不均一ではあるものの、表現型的に識別可能な細胞表面表現型を有するマウスＭＤＳＣサブセットが２つ存在する。ｍＡｂを使用することで、抗Ｇｒ−１が認識する特異性を分離する。すなわち、顆粒球／ＰＭＮ様ＭＤＳＣサブセットは、Ｌｙ６Ｇ＋／ｈｉ  Ｌｙ６Ｃ＋／ｌｏであり、一方、単球性ＭＤＳＣサブセットは、Ｌｙ６Ｇ＋／ｌｏ  Ｌｙ６Ｃ＋／ｈｉ（Ｏｓｔｒａｎｄ−Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ，２０１０、Ｐｅｒａｎｚｏｎｉら  ２０１０、Ｙｏｕｎ  ａｎｄ  Ｇａｂｒｉｌｏｖｉｃｈ，２０１０において概説されている）。腫瘍微小環境の広範囲にわたる研究に主に基づいて、ＭＤＳＣは、それがレスポンダーＴ細胞の抑制を引き起こす機構によって、異なる形でも特徴づけられた。当該機構には、アルギナーゼ、ｉＮＯＳ／ＮＯ、他の酸素活性種及び窒素活性種、ならびに他の機構が含まれる（ＬａＦａｃｅ  ａｎｄ  Ｔａｌｍａｄｇｅにおいて概説されている）。ＭＤＳＣの総説によっては、Ｂ細胞応答が、ＭＤＳＣ制御に対して感受性であり得、ＭＤＳＣが、ポリクローナル活性化因子及び分裂促進物質に対して、ＭＨＣに制限されない応答を幅広く示し得ることを示しているものの、ＭＤＳＣによるＢ細胞の標的化に主眼を置いた文献は明らかに限られている。
【０１１８】
様々な感染性疾患におけるＭＤＳＣの研究もまた遅れている。関連文献は、すなわち、細菌感染（Ｇａｂｒｉｌｏｖｉｃｈ  ａｎｄ  Ｎａｇａｒａｊ，２００９）、酵母／真菌感染（Ｍｅｎｃａｃｃｉら  ２００２）、原虫寄生虫感染（Ｖｏｉｓｉｎら  ２００４）、寄生虫様感染（Ｂｒｙｓら  ２００５）、及びウイルス感染であり、ウイルス感染は、例えば、Ａ型インフルエンザウイルス（Ｊｅｉｓｙ−Ｓｃｏｔｔら  ２０１１）、慢性マウスＢ型肝炎ウイルス（Ｃｈｅｎら  ２０１１）、ならびに水疱性口内炎ウイルス（Ｗｉｌｌｍｏｎら  ２０１１）及び単純ヘルペスウイルス１型操作株（Ｗａｌｋｅｒら  ２０１１）の両方である。しかし、レトロウイルス感染、及びその結果として生じる後天性免疫不全などの疾患と関連した、ＭＤＳＣ集団の存在または機能に対する報告は、最近のものが少数存在するにすぎない（Ｖｏｌｌｂｒｅｃｈｔら  ２０１２，ｃｏｍｍｅｎｔ  Ｍ
ａｃａｎｔａｎｇａｙら  ２０１２、Ｇｒｅｅｎら  ２０１３、Ｑｉｎら  ２０１３，Ｇａｒｇ  ａｎｄ  Ｓｐｅｃｔｏｒ，２０１４）。
【０１１９】
レトロウイルスは、様々な免疫制御性の機構を都合よく利用する能力を有する。ＨＩＶ−１及びＳＩＶは、エフェクターＴ細胞上で、ＰＤ１の成熟前発現を引き起こすことが示され、これにより、抗ウイルスＣＤ８＋細胞溶解性（ｃｙｔｏｌｙｔｉｃ）Ｔリンパ球（ＣＴＬ）エフェクター細胞に対して不適切に早期な下方制御を強いることができ、これは、ウイルス排除の後期段階において生じる正常なＴ細胞収縮期と類似したものである（Ｄａｙら  ２００６、Ｖｅｌｕら  ２００９）。マウスフレンドウイルス（ＦＶ）によって、ＰＤ−１及びＴｉｍ−３の発現が変更されることで、レトロウイルス負荷及び病態形成に対して様々な作用を与えることが報告され（Ｔａｋａｍｕｒａら  ２０１０、Ｚｅｌｉｎｓｋｙら  ２０１１）、これには、「消耗（ｅｘｈａｕｓｔｉｏｎ）」、または他のウイルスシステムにおいて観測される、相対的に「無機能（ｆｕｎｃｔｉｏｎ−ｌｅｓｓ）」であるＴ細胞の表現型が含まれる（Ｄａｙら  ２００６、Ｖｅｌｕら  ２００９）。ウイルス感染は、抗腫瘍免疫及び自己免疫の主要な制御点である、ＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞などの免疫制御性の細胞も変え得るものである（Ｓａｋａｇｕｃｈｉ，２００４、Ｐｉｃｃｉｒｉｌｌｏ  ａｎｄ  Ｓｈｅｖａｃｈ，２００４において概説されている）。本明細書に記載の研究のＬＰ−ＢＭ５マウスレトロウイルスシステムでは、ＬＰ−ＢＭ５の病態形成の媒介における、ＣＤ２５＋ＣＤ４＋Ｔ細胞の直接的な役割を支持する証拠が早期に報告されており、当該Ｔ細胞は、ＦｏｘＰ３を含めずに他のマーカーを評価することによってＴｒｅｇであるとされた（Ｂｅｉｌｈａｒｚら  ２００４）。しかしながら、ＬＰ−ＢＭ５の感染／病態形成における、真のＣＤ４＋ＦｏｘＰ３＋Ｔｒｅｇ細胞の非間接的な役割を支持する報告が後になされ、それは、防御的なＣＤ８＋ＣＴＬ応答の発生を（ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１と共に）制限するものであった（Ｌｉ  ａｎｄ
Ｇｒｅｅｎ，２００６、Ｌｉ  ａｎｄ  Ｇｒｅｅｎ  ２０１１）。
【０１２０】
ＬＰ−ＢＭ５レトロウイルス分離株が感染した後、高度に感受性であるＣ５７ＢＬ／６（Ｂ６）系などの、ある特定の近交系マウスは、免疫不全を含む疾患症候群を発症する。Ｔ細胞応答及びＢ細胞応答の重度な減衰を含む、重度の免疫不全が感染後約５週間で始まり、直ちに表面化して、数多くの疾患特徴が引き起こされる（Ｓｉｍａｒｄら  １９９７）。結果的に、疾患の進行に対する感受性が増加しており、通常であれば限定的な感染を引き起こす環境病原体に対して曝露されると死に至ることもある。ＬＰ−ＢＭ５による感染の後半時点では、Ｂ６マウスに、Ｂ細胞リンパ腫が発生する。ＬＰ−ＢＭ５が誘導する疾患のこうした特徴は、ＨＩＶに感染した個体において見られるものの多くと類似しているため、この症候群は、マウスＡＩＤＳ（ＭＡＩＤＳ）と命名された。
【０１２１】
ＬＰ−ＢＭ５レトロウイルスによる病態形成の機構は、完全には理解されていない。ＣＤ４＋Ｔ細胞もしくはＢ細胞のいずれかを遺伝的に欠損しているＢ６マウス、または抗体によってＣＤ４＋Ｔ細胞もしくはＢ細胞のいずれかを事前にインビボで枯渇させたＢ６マウスへ、ＬＰ−ＢＭ５を接種すると、感染は引き起こすが、ウイルスが誘導する疾患は引き起こさない（Ｙｅｔｔｅｒら  １９８８）。「病原性ＣＤ４＋エフェクターＴ細胞がこのように必要であることと関連し、我々は、ＣＤ１５４／ＣＤ４０相互作用が、ＬＰ−ＢＭ５の病態形成の誘導及び進行の両方に必要であることを決定した。Ｂ６マウスの感染開始時点、または感染の３〜４週間後のいずれかに、□−ＣＤ１５４（ＣＤ４０リガンド）モノクローナル抗体（ｍＡｂ）を使用してインビボ処理を実施すると、脾腫、高ガンマグロブリン血症、免疫細胞サブセットの表現型の変化、ならびにＢ細胞及びＴ細胞の免疫不全を含む、標準ＭＡＩＤＳパラメーターの実質的な阻害を引き起こす（Ｇｒｅｅｎら  １９９６、Ｇｒｅｅｎら  １９９８）。ＬＰ−ＢＭ５が誘導する疾患の度合いは、ＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１及びＩＬ−１０によっても制御されており、これらが働いて病原性ＣＤ４＋Ｔ細胞を下方制御することで、結果として疾患の低減につながるものであった（Ｌｉ  ａ
ｎｄ  Ｇｒｅｅｎ，２００６）。ＰＤ−１のライゲーション及びＣＤ４＋Ｔｒｅｇ細胞を組み合わせることでも、Ｂ６マウスにおける防御的なＣＤ８＋ＣＴＬ応答の発生を阻害した（Ｌｉ  ａｎｄ  Ｇｒｅｅｎ，２０１１）。ＣＤ１１ｂ＋ＦｃＲγＩＩＩ／ＩＩ＋骨髄系細胞集団が増殖することも、ＬＰ−ＢＭ５が誘導する病態形成の顕著な特徴である。この細胞表面表現型に基づいて、我々は、最近、レトロウイルスが誘導するＭＤＳＣの、このシステムへの関与の可能性について評価した。実際、我々は、骨髄系細胞表面表現型（Ｇｒ−１＋、Ｌｙ６Ｃ＋、Ｌｙ６Ｇ−、ＣＤ１１ｂ＋）を有した、ＬＰ−ＢＭ５が誘導するＭＤＳＣ集団を特定し、当該ＭＤＳＣ集団は、ＬＰ−ＢＭ５が誘導する免疫不全を測定するために標準的に使用される刺激に対する免疫応答への対抗に有効である、エクスビボでの強力な阻害活性を有していた。我々は、以前に、有益な情報が得られるＢ６ノックアウト系をいくつか使用することによって、ＬＰ−ＢＭ５の病態形成に対する感受性レベルが変化することを示し、我々は、ＬＰ−ＢＭ５がインビボで誘導する疾患重症度と、ＭＤＳＣによるエクスビボでの抑制活性との直接的な相関を確立した（Ｇｒｅｅｎら  ２０１３）。
【０１２２】
これも最近のことあるが、決定的な負の免疫制御因子リガンドのサブセットに属する新しい免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパーファミリーのメンバーであるＶＩＳＴＡ（Ｔ細胞活性化のＶ−ドメインＩｇ抑制因子）が定義された（Ｗａｎｇら  ２０１１、ＬｅＭｅｒｃｉｅｒら  ２０１４、Ｌｉｎｅｓら  ２０１４）。ＶＩＳＴＡは、Ｂ７ファミリーのリガンドであるＰＤ−Ｌ１に対して相同性を有し、特に、その細胞外ドメインに対して相同性を有する。ＶＩＳＴＡは、造血性細胞上で主に発現するため、骨髄系抗原提示細胞（ＡＰＣ）上及びＴ細胞上にて高度に増加し得る。ＶＩＳＴＡが自己免疫及び抗腫瘍免疫においてＴ細胞応答を阻害するために働くということを示す証拠がいくつか存在する。第１に、ＶＩＳＴＡ特異的ｍＡｂは、ＶＩＳＴＡを発現しているＡＰＣによる、ＶＩＳＴＡ誘導性のＴ細胞応答抑制をインビトロで妨害する。第２に、抗ＶＩＳＴＡ処理は、マウスにおいて、Ｔ細胞が媒介する実験用自己免疫脳脊髄炎の発症を悪化させる。第３に、可溶性のＶＩＳＴＡ−Ｉｇ融合タンパク質、またはＡＰＣ上でのＶＩＳＴＡの発現は、Ｔ細胞の増殖及びサイトカイン産生をインビトロで阻害する。第４に、腫瘍細胞上でのＶＩＳＴＡの過剰発現は、マウスにおける防御的な抗腫瘍免疫をインビボで直接的に妨害する。こうした早期の報告をまとめると、ＶＩＳＴＡが、ＰＤ−Ｌ１などの他のＩｇスーパーファミリーのメンバーとは重複しない機能活性を有した、新規の免疫制御性分子として働き、したがって、疾患の重症度に関して本質的に反対の意義を有してはいるが、自己免疫、及び腫瘍細胞に対するＴ細胞免疫監視の両方の発生及び制御において重要な役割を担っている可能性があることを示している。
【０１２３】
本出願では、我々は、こうしたＭＤＳＣの抑制機構にＶＩＳＴＡが関与している可能性に関して、さきほど説明したＬＰ−ＢＭ５レトロウイルスが誘導する単球性ＭＤＳＣ集団をさらに評価した（Ｇｒｅｅｎら  ２０１３）。具体的には、Ｔ細胞増殖及びＩＦＮ−γ産生応答の、ＭＤＳＣによる阻害が、ｉＮＯＳ／ＮＯにほとんど完全に依存する（Ｇｒｅｅｎら  ２０１３）ものであることを考慮し、我々は、ＭＤＳＣのＴ細胞標的へのＶＩＳＴＡの関与と、Ｂ細胞標的へのＶＳＩＴＡの関与とを対比し、これは、我々が、ｉＮＯＳ／ＮＯに起因するものであるとし、ＭＤＳＣによる抑制機構の約５０％しか以前に説明することができなかったことである。我々の結果は、Ｔ細胞応答性の抑制とＢ細胞応答性の抑制との対比において、ＭＤＳＣが発現するＶＩＳＴＡが異なる役割を果たすことを示しており、ＭＤＳＣ機能の不均一性、及び異なるＭＤＳＣ亜集団の可能性を明確に示すものである。
【実施例】
【０１２４】
実験実施例
実施例において使用した材料及び方法
マウス．７週齢の雄性Ｃ５７ＢＬ／６（Ｂ６）マウスをＮａｔｉｏｎａｌ  Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ  ｏｆ  Ｈｅａｌｔｈ（メリーランド州、ベゼスダ）から購入し、Ｄａｒｔｍｏｕｔｈ  Ｍｅｄｉｃａｌ  Ｓｃｈｏｏｌ  Ａｎｉｍａｌ  ｆａｃｉｌｉｔｙにおいて飼育し、約８〜１０週齢となったところで使用した。Ｂ６へと完全に戻し交配させたｉＮＯＳノックアウトマウスの繁殖ペアは、Ｊａｃｋｓｏｎ  Ｌａｂｓ（メイン州、バーハーバー）から入手し、当該繁殖ペアは、元は、以前に説明された（Ｌａｕｂａｃｈら  １９９５）ようにして得られたものである。また、Ｂ６へと戻し交配させたものであり、報告に沿って得たＶＩＳＴＡノックアウト繁殖ペアは、から入手した。
【０１２５】
細胞精製．実験に向けて、ＬＰ−Ｂ５を感染させた３匹のマウスまたは４匹のマウス（感染後５週間（５ｗ．ｐ．ｉ．））のいずれかに由来する抑制細胞集団である脾臓細胞の懸濁液をプールし、□−Ｌｙ６Ｇを結合させた常磁性ビーズで標識した後、製造者のプロトコール（ＭＡＣＳ，Ｍｉｌｔｅｎｙｉ  Ｂｉｏｔｅｃ，カリフォルニア州、オーバーン）に従って、カラム精製を実施した。最初の精製に由来するカラム溶出部を□−ＣＤ１１ｂを結合させた常磁性ビーズで標識してからカラム精製に供すことで、陽性に選択された細胞集団が得られ、そのＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６Ｃ＋は、＞７５％であった。
【０１２６】
ＬＰ−ＢＭ５ウイルス接種．ＬＰ−ＢＭ５は、以前の説明（Ｋｌｉｎｋｅｎら  １９８８）に沿って、我々の研究室で調製した。ＬＰ−ＢＭ５ウイルスのストックを産生させるために、ＬＰ−ＢＭ５ウイルス調製物を感染させたＳＣ−１細胞に由来するクローン化細胞株としてＧ６細胞を、非感染ＳＣ−１細胞との共培養に使用した。当該Ｇ６細胞は、元は、Ｊａｎｅｔ  Ｈａｒｔｌｅｙ博士及びＨｅｒｂｅｒｔ  Ｍｏｒｓｅ博士（ＮＩＨ）の好意により提供されたものである。５ｘ１０４の同種志向性プラーク形成単位をマウスの腹腔内に感染させた。当該プラーク形成単位は、標準的なレトロウイルスＸＣプラークアッセイ（Ｒｏｗｅら  １９７０）によって決定した。
【０１２７】
３Ｈ−チミジン取り込み増殖アッセイ．レスポンダー細胞の目的で、未分画またはＣＤ１９＋で精製したもののいずれかである５ｘ１０５個の非感染脾臓細胞を、１．６ｘ１０５個（別段の記載がない限り）のＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６Ｇ＋、またはＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６Ｃ＋で濃縮した抑制細胞と共に、９６ウェル平底プレートに播種した。当該抑制細胞は、記載の野生型Ｂ６系、またはＢ６ノックアウト系である、５−ｗ．ｐ．ｉ．のＬＰ−ＢＭ５感染マウスの脾臓から得たものである。５％のＦＣＳ、Ｌグルタミン、抗生物質、及び最終濃度で１０．ｉｇ／ｍｌのＬＰＳ、５０．ｉｇ／ｍｌのｃｔ−ＣＤ４０と１０ｎｇ／ｍｌのＩＬ−４、または２．ｉｇ／ｍｌのＣｏｎＡのいずれかを含む培地を、プレートのすべてのウェルに３連で分注した。増殖抑制の阻害アッセイに向けて、非分画またはＣＤ１１ｂ＋Ｌｙ６Ｃ＋で濃縮した抑制細胞を１時間事前処理してから、ＮＯＳ阻害物質である０．８ｍＭのＮＧ−モノメチル−Ｌ−アルギニン（Ｌ−ＮＭＭＡ）、負対照である、そのエナンチオマーのＮＧ−モノメチル−Ｄ−アルギニン（Ｄ−ＮＭＭＡ）（Ａ．Ｇ．Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，カリフォルニア州、サンディエゴ）、または８０ｕｇ／ｍｌの精製ｃｔ−ＶＩＳＴＡ（１３Ｆ３）もしくは対照ＨＩｇのいずれかとの共培養を開始した。６６時間後、すべてのウェルに、１ｍＣｉの３Ｈ−チミジン（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，マサチューセッツ州、ウォルサム）を添加し、シンチレーション測定（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ，マサチューセッツ州、ウォルサム）によるチミジンの取り込み評価のために６時間後に回収した。Ｂ細胞レスポンダー細胞及びＴ細胞レスポンダー細胞の刺激データは、いずれも抑制割合として示されている。抑制割合の計算では、まず初めに、残留する応答性割合（Ｒ）を次のように計算した。Ｒ＝（共培養したレスポンダー細胞及び実験用抑制細胞のｃｐｍ）÷（共培養したレスポンダー細胞及び対象である非感染抑制細胞のｃｐｍ）ｘ１００％。平均値の標準偏差は、３連ウェルで決定し、等分散を仮定した２つの試料による両側スチューデントＴ検定によって、統計学的に比較した。
【０１２８】
ＣＦＳＥ希釈増殖アッセイ．ナイーブレスポンダー脾臓細胞を５．ｉＭのＣＦＳＥ（Ｃｅｌｌ  ｔｒａｃｅ，ＣＦＳＥ  ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ  Ｋｉｔ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｒｏｂｅｓ，オレゴン州、ユージーン）を含むＰＢＳ／０．５％ＢＳＡを使用して、３７℃で１０分標識した後、１０％のＦＢＳを含む冷却ＲＰＭＩを氷上で添加して５分間保持した。冷却した１０％ＦＣＳ／ＲＰＭＩで３回洗浄した後、上記の３Ｈ−チミジン取り込み増殖アッセイと同一の様式で、細胞培養を開始した。培養４日目に、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）であるｃｔ−ＣＤ１９−ＰｅｒＣＰ（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ，カリフォルニア州、サンディエゴ）で染色し、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーター（ＢＤ  ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，カリフォルニア州、サンノゼ）で分析した。
【０１２９】
フローサイトメトリー．５ｘ１０５個の脾臓細胞を、ＦｃγＩＩＩ／ＩＩ受容体を標的とする非標識化ｍＡＢ（２．４Ｇ２，Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ，カリフォルニア州、サンノゼ）と共に、氷上で１０分間インキュベートした後、ＦＩＴＣ-、ＰＥ-、ＡＰＣ-またはＰ
ｅｒＣＰ-が結合した抗体を使用して、氷上で２５分間、表面染色した。ＣｅｌｌＱｕｅ
ｓｔソフトウェア（ＢＤ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，カリフォルニア州、サンノゼ）を使用し、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒフローサイトメーターで染色細胞を解析して、対数増幅によって定量化した。下記のマウス抗原の発現を検出するために、記載のｍＡｂを用いた。精製ＶＩＳＴＡ（１３Ｆ４）／ＰＥストレプトアビジン、ＣＤ４（ＲＭ４−５）、ＣＤ１９（６Ｄ５）、ＣＤ１１ｂ（Ｍ１／７０）、Ｌｙ６Ｇ（１Ａ８）、Ｌｙ６Ｃ（ＨＫ１．４）。適切なＦＩＴＣ-、ＰＥ-、ＰｅｒＣＰ-、またはＡＰＣ-が結合した、無関係な特異性を有するＩｇアイソタイプを各実験用ｍＡｂの対照として使用した。
【０１３０】
実施例１：脾臓細胞によるＶＩＳＴＡの発現
この実施例は、図１の実験に関するものである。こうした実験では、脾臓細胞によるＶＩＳＴＡの発現は、インビボでＬＰ−ＢＭ５が感染することで増加することが示された。図１（Ａ）は、フローサイトメトリー分析を含むものであり、非感染野生型Ｂ６マウスまたは感染後５週間もしくは８．５週間の野生型Ｂ６マウスに由来する脾臓細胞のＶＩＳＴＡ発現パターンを示している。割合は、ＶＩＳＴＡの発現に陽性である細胞を示し、イタリック体である値は、ＶＩＳＴＡに陽性である細胞のＭＦＩを示す。図１（Ｂ）は、脾臓細胞表面のＶＩＳＴＡの発現であり、下記の群のＣＤ１１ｂ＋細胞のＶＩＳＴＡを示す。すなわち、記載の非感染マウス系または感染マウス系から、その後に精製することなく得た細胞と、５ｗｐｉ−ＬＰ−ＢＭ５マウスから精製したＬｙ６Ｃ＋ＣＤ１１ｂ＋脾臓細胞と、である。示されている結果パターンは、２回の追加実験を代表するものである。
【０１３１】
実施例２：Ｌｙ６Ｃ＋ＣＤ１１ｂ＋で精製した脾臓細胞は、Ｂ細胞増殖と、Ｔ細胞増殖とをインビトロで抑制するために、異なる機構的必要要件を有している。
この実施例は、図２の実験に関するものである。こうした実験は、Ｌｙ６Ｃ＋ＣＤ１１ｂ＋で精製した脾臓細胞が、Ｂ細胞増殖と、Ｔ細胞増殖とをインビトロで抑制するために、異なる機構的必要要件を有していることを示している。図２（Ａ及びＢ）は、レスポンダー対抑制因子（Ｒ：Ｓ）の比を３：１とし、ナイーブＢ６レスポンダー脾臓細胞を、ａ−ＶＩＳＴＡ及びＬＮＭＭＡで事前に処理したＬｙ６Ｃ＋ＣＤ１１ｂ＋ＭＤＳＣと混合し、（Ａ）ａ−ＣＤ４０及びＩＬ−４、または（Ｂ）ＣｏｎＡで３日間刺激した実験の結果を示す。
【０１３２】
図では、３Ｈ−チミジンの取り込みは、抑制％に変換されている（材料及び方法を参照のこと）。示されている結果パターンは、それぞれ刺激の３回の追加実験を代表するものである。図２Ｃは、４回の独立した実験の平均値＋標準偏差を示し、ナイーブ野生型Ｂ６レスポンダーと共に３日間培養する前に実施した、Ｌｙ６Ｃ＋ＣＤ１１ｂ＋ＭＤＳＣに対するａ−ＶＩＳＴＡでの事前処理が抑制を遮断した％を示している。有意性レベルは次のとおりである。＊はｐ＜０．０５、＊＊はＰ＜０．０１、＊＊＊はＰ＜０．００１の有意
差レベルであることを示す。
【０１３３】
実施例３：ＭＤＳＣが媒介する脾臓細胞の増殖阻害に対する、ＶＩＳＴＡアンタゴニストの作用
この実施例は、図３の実験に関するものである。こうした実験では、レスポンダー対抑制因子（Ｒ：Ｓ）の比を３：１として、ナイーブＶＩＳＴＡ−／−レスポンダー脾臓細胞を、α−ＶＩＳＴＡで事前処理したＬｙ６Ｃ＋ＣＤ１１ｂ＋ＭＤＳＣと混合し、ａ−ＣＤ４０及びＩＬ−４で３日間刺激した。示されている結果パターンは、３回の追加実験を代表するものである。＊はｐ＜０．０５、＊＊はＰ＜０．０１、＊＊＊はＰ＜０．００１、有意差なし（ｎｓ．）は、Ｐ＞０．０５であることを示す。
【０１３４】
実施例４：ＭＤＳＣによる脾臓細胞の増殖抑制
この実施例は、図４の実験に関するものである。こうした実験では、ＬＰ−ＢＭ５に感染後、５週間が経過した、記載の種のマウスから精製した単球性ＭＤＳＣ（Ｌｙ６Ｃ＋ＣＤ１１ｂ＋）が、ナイーブＶＩＳＴＡ−／−脾臓細胞の増殖を異なるパターンで抑制していることを示しており、これはフローサイトメトリーによって評価したものである。ＣＦＳＥで標識したＶＩＳＴＡ−／−レスポンダー細胞を、ｃｔ−ＣＤ４０＋ＩＬ４の存在下（＋）または非存在下（−）かつ、単球性ＭＤＳＣの存在下または非存在下で３日間培養した。すなわち、（ａ）（−）と、（ｂ）（＋）（灰色の影付き曲線）と、（ｃ）（＋）、野生型のＭＤＳＣ（黒色の開曲線）と、（ｄ）（＋）、ＤＮＭＭＡで処理した野生型のＭＤＳＣ（黒色の開曲線）と、（ｅ）（＋）、ＬＮＭＭＡで処理した野生型のＭＤＳＣと、（ｆ）（＋）、ＩＮＯＳ−／−ＭＤＳＣ（点線の曲線）と、（ｇ）（＋）と、（ｈ）（＋）、ＶＩＳＴＡ−／−ＭＤＳＣ及び野生型のＭＤＳＣの対比と、である。４日間のインキュベーションの終了時点で、すべての培養物に由来する細胞を、ｃｔ−ＣＤ１９と蛍光色素が結合したｍＡｂで染色し、ＦＡＣＳによってＣＦＳＥ希釈も評価した。ＣＦＳＥ標識したＶＩＳＴＡ−／−レスポンダーは、％＝最初の増殖ピーク中の細胞の割合ｅであり、イタリック体の数＝ＣＦＳＥ＋細胞のＭＦＩである。示されている結果パターンは、１回の追加実験を代表するものである。
【０１３５】
実施例５：ＭＤＳＣによるＢ細胞の増殖抑制
この実施例は、図５の実験に関するものである。こうした実験では、Ｂ細胞増殖の単球性の抑制が、２つの主な機構であるｉＮＯＳ／ＮＯ及びＶＩＳＴＡに依存することが示された。５Ａの実験では、ＬＰ−ＢＭ５に感染した５ｗ．ｐ．の野生型マウスまたはＶＩＳＴＡ−／−マウスから精製したＬｙ６Ｃ＋ＣＤ１１ｂ＋ＭＤＳＣをｃｔ−ＶＩＳＴＡ遮断抗体または対照ＨＩｇ、ＬＮＭＭＡまたは対照ＤＮＭＭＡで事前に処理してから、ＶＩＳＴＡ−／−レスポンダー細胞、ｃｔ−ＣＤ４０、及びＩＬ−４と共に３日間培養した。５（Ｂ）の実験では、パネル（Ａ）に示すものと同一の処理レジメンに、ｃｔ−ＶＩＳＴＡ及びＬＮＭＭＡの両方を含む組み合わせレジメンを含めて、野生型のＬｙ６Ｃ＋ＣＤ１１ｂ＋ＭＤＳＣを事前処理した。レスポンダーが取り込んだ３Ｈチミジンのｃｐｍによって、（Ａ）及び（Ｂ）の両方の抑制％を計算した。示されている結果パターンは、２回の追加実験（Ａ）及び１回の追加実験（Ｂ）を代表するものである。＊は、Ｐ＜０．０５、＊＊は、Ｐ＜０．０１、有意差なし（ｎｓ．）はＰ＞０．０５であることを示す。
【０１３６】
結果及び結論
ＬＰ−ＢＭ５レトロウイルスによる感染後にＭＤＳＣが増殖するため、ＶＩＳＴＡの細胞表面発現は、感染後（ｐ．ｉ．）に初めて評価した。５ｗ．ｐ．ｉ．の時点で、ＶＩＳＴＡ＋脾臓細胞の割合は増加していなかったが、ＶＩＳＴＡのＭＦＩは増加し、陽性ピークの形状が変化した（図１Ａ）。この変化は、非感染Ｂ６マウスにおいて、ＣＤ４  Ｔ細胞がＶＩＳＴＡを優位に発現するという報告（Ｗａｎｇら  ２０１１）と、インビボでの刺激に際して増殖するＣＤ１１ｂ＋ＶＩＳＴＡ＋細胞などの細胞型のさらなる存在と、の
両方に一致するものであり、本明細書では、我々が報告したＬＰ−ＢＭ５感染が、ＭＤＳＣを増殖させている（我々の参考文献）。８．５ｗ．ｐ．ｉ．の時点で、ＶＩＳＴＡの発現増加は、より明白であった（図１Ａ）。非感染Ｂ６マウスと、５ｗ．ｐ．ｉ．の野生型Ｂ６マウス、ＶＩＳＴＡ−／−Ｂ６マウス、及びＩＮＯＳ−／−Ｂ６マウスと、に由来する細胞による、ＶＩＳＴＡ及びＣＤ１１ｂの同時発現をさらに染色して対比させることで、抗ＶＩＳＴＡｍＡｂの特異性を確認し、高度に濃縮された単球性ＭＤＳＣ集団における、ＶＩＳＴＡの発現増加を実証した（図１Ｂ）（以前にＬｙ６Ｃも発現していることを示した（我々の参考文献を参照のこと。本明細書では、データ未掲載）。さらに、Ｗａｎｇら（２０１１）による研究によって予測されていたように、他の主なＶＩＳＴＡ＋集団は、ＣＤ４  Ｔ細胞コンパートメントであった（データ未掲載）。
【０１３７】
次に、単球性ＭＤＳＣによるＶＩＳＴＡ発現の機能性を、遮断実験において評価した。最初に、ＭＤＳＣによる抑制において、ＶＩＳＴＡが機構的に関与している可能性を、ｉＮＯＳ／ＮＯの既知の分化的役割と比較した（図２Ａ／Ｂ）。ＭＤＳＣによる、Ｔ細胞応答性の抑制は、ｉＮＯＳ／ＮＯに本質的に完全に依存するものであることが、ｉＮＯＳ阻害物質であるＬＮＭＭＡ（対照であるＤＮＭＭＡとの比較）によって明らかとなった一方で、Ｂ細胞応答性では、ＭＤＳＣによる抑制は、ＬＮＭＭＡによって約５０％遮断された（以前にＧｒｅｅｎら  ２０１３において示したとおり）。際立って対照的であったことは、抗ＶＩＳＴＡｍＡｂが、ＭＤＳＣによる、Ｂ細胞応答性の抑制を再び約５０％遮断した一方で、ＭＤＳＣによる、Ｔ細胞応答性の抑制は、本質的に影響を受けなかったことである。実際、いくつかの独立した実験にわたって、抗ＶＩＳＴＡによる遮断の範囲は、６５％あたりに集中していたが、対照であるハムスター免疫グロブリン（ＨＩｇ）の非特異的な軽微な作用を考慮すれば、約５５％のデルタに近づくものであった。したがって、Ｂ細胞応答の抑制のために、ＶＩＳＴＡは、ｉＮＯＳ／ＮＯと比較して区別可能な様式で働くようである。
【０１３８】
抗ＶＩＳＴＡの遮断作用が、ＭＤＳＣを特異的に対象としていることを明解に示すために、ＶＩＳＴＡ−／−レスポンダー細胞を使用して、抗ＶＩＳＴＡによる遮断実験を繰り返した（図３）。抗ＶＩＳＴＡによって、高有意（ｐ＝０．０００１）ではあるが、部分的な遮断（しかし、ＨＩｇでは遮断はされなかった）が再び観測された。こうした結果によって、遮断は、ＭＤＳＣのＶＩＳＴＡに依存するものであることが確認され、単純化かつ明確化の目的で、続くすべての実験で、ＶＩＳＴＡ−／−レスポンダー細胞を用いた。
【０１３９】
こうした発見を独立して実証し、これら２つの分子機構を比較するために、様々な野生型及びノックアウト型のＢ６を起源とし、対比させた単球性ＭＤＳＣの存在下で、ＣＦＳＥを事前負荷したレスポンダー細胞を刺激し、フローサイトメトリーによる分析を実施し、ＣＤ１９＋Ｂ細胞を同定した（図４）。図４Ａでは、野生型のＭＤＳＣが、刺激されたＢ細胞を抑制することが明瞭に観測され（パネルａ、パネルｂ、及びパネルｃの比較）、ＬＮＭＭＡを含めることによって、増殖曲線が部分的に回復し、ＭＤＳＣの非存在下で刺激された対照Ｂ細胞のものへと近づいた（ＤＮＭＭＡでは現象は生じなかった）（パネルｄ、パネルｅ）。また、ｉＮＯＳ／ＮＯに対する、この部分的な依存は、最初の増殖ピークに示される細胞割合と、最初の増殖ピーク及びそれに続くすべての増殖ピークを合わせて達成したＣＦＳＥのＭＦＩ値と、の両方によって明らかとなった。このＣＦＳＥ増殖プロファイルは、ｉＮＯＳ−／−ＭＤＳＣを（阻害物質非存在下で）代わりに使用すると、図４ＢのｉＮＯＳ−／−ＭＤＳＣの曲線と、野生型のＭＤＳＣ＋ＬＮＭＭＡの曲線と、を対比させたオーバレイが一致するによって明確に示された（パネルｅとパネルｆとの比較）。しかしながら、重要なことに、ＶＩＳＴＡ−／−ＭＤＳＣを用いると、２つの結果は顕著であった。すなわち、１）ＭＤＳＣのＶＩＳＴＡ発現の減少に起因して、ＭＤＳＣによる抑制が部分的に遮断されること（図４パネルｇ）、及び２）ＭＤＳＣのＶＩＳＴＡの除去に起因する増殖曲線の遮断プロファイルと、ＬＮＭＭＡによるｉＮＯＳ／ＮＯの遮断
に起因する増殖曲線の遮断プロファイルと、を対比して、それぞれの遮断プロファイルを、阻害物質非存在下での野生型のＭＤＳＣによる抑制と比較すると、非常に異なるということ（図４、パネルｈ）である。こうした発見は、ＭＤＳＣによる、Ｂ細胞応答性の抑制が、ＶＩＳＴＡに依存する要素と、ｉＮＯＳ／ＮＯに依存する要素とが、区別可能な性質を有していることを確認するものであり、これら２つの機構が独立していることを示唆したものである。
【０１４０】
ＭＤＳＣによるＢ細胞の抑制における、これら２つの経路の役割を評価するために、追加の組み合わせ「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」実験を実施した。第１に、我々は、ｉＮＯＳ／ＮＯの阻害物質であるＬＮＭＭＡの存在下で、野生型及びＶＩＳＴＡ−／−を起源とするＭＤＳＣを対比させて用いた。野生型のＭＤＳＣ（対照として）では、Ｂ細胞応答性に対するその抑制は、抗ＶＩＳＴＡｍＡｂまたはＬＮＭＭＡのいずれによっても部分的に遮断され（図５Ａ）、上記の我々の結果と一致した。対照的に、同一のレスポンダー細胞及び試薬を使用した同一の実験では、ＶＩＳＴＡ−／−起源のＭＤＳＣは、ＬＮＭＭＡのみによって遮断可能な様式において、Ｂ細胞の応答性を抑制した（図５Ａ）。そして、遮断度合いは、この時点で本質的に１００％であり、これは、ｉＮＯＳ／ＮＯ経路のみが保持されていることを示している。こうしたデータは、ＭＤＳＣによる抑制の主な機構経路は２つのみであるということと、より一層一致するものであった。第２の手法では、抗ＶＩＳＴＡ、ＬＮＭＭＡ、またはこれら２つの遮断試薬の組み合わせで、野生型のＭＤＳＣを処理した（図５Ｂ）。ＶＩＳＴＡ及びｉＮＯＳ／ＮＯの両方の関与を妨害した組み合わせ処理のみで、本質的に完全な抑制遮断が生じた。まとめると（図５Ａ／Ｂ）、相乗的とはいかないにせよ、ＭＤＳＣによる抑制の、この相加的な遮断は、ＬＰ−ＢＭ５に感染したマウスに由来する単球性ＭＤＳＣによる、Ｂ細胞応答の２つの主な抑制機構を定義し、ｉＮＯＳ／ＮＯ及びＶＩＳＴＡへの依存性を再び示すものであった。
【０１４１】
結論として、本明細書で我々は、ＭＤＳＣによる抑制、具体的には、ＭＤＳＣによるＢ細胞応答性の抑制において、新規の負のチェックポイント制御因子であるＶＩＳＴＡが関与していることを説明しており、我々の知見では、これは初めてのことである。このＶＩＳＴＡ依存性の抑制機構が、ＭＤＳＣによるＢ細胞応答の抑制のみにおいて、役割を担うもの（ｐｌａｙｅｒ）であり、Ｔ細胞応答ではそうではないという我々の観測が、我々の発見の新規性に貢献している。したがって、ＭＤＳＣによるＢ細胞反応性の抑制は、まさに研究中の領域であった。我々は、ＬＰ−ＢＭ５レトロウイルスが誘導するＭＤＳＣによる抑制が、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−１（またはＩＬ−１０）のいずれにも依存しないことを以前に報告した（Ｇｒｅｅｎら  ２０１３）。したがって、ＶＩＳＴＡ依存性経路の関与に対する本明細書の結果は、ｉＮＯＳ／ＮＯの機構とあわせて、配列相同性が最も近接したその類縁体であるＰＤ−Ｌ１（Ｗａｎｇら  ２０１１）との対比において、ＶＩＳＴＡが関連する機能の特有性を明確に示すものである。ＬＰ−ＢＭ５レトロウイルスに感染したマウスに由来する同一の単球性ＭＤＳＣ集団による、Ｂ細胞の抑制と、Ｔ細胞の抑制との対比において、ＶＩＳＴＡが分化的に関与していることを総合すると、こうした結果は、異なる機構を有する機能性／表現型ＭＤＳＣ亜集団の存在可能性、及び抑制標的から、ＬＰ−ＢＭ５が誘導するＭＡＩＤＳに特有である、Ｔ細胞応答及びＢ細胞応答の重度かつ幅広い免疫不全におけるＭＤＳＣサブセットの役割に至るまで、重要なさらなる疑問を提起するものである。
【０１４２】
本発明の治療用途
Ｂ細胞応答性に対するＶＩＳＴＡの作用、具体的には、ＭＳＤＣによって媒介される、Ｂ細胞応答性に対するＶＩＳＴＡの抑制作用に基づき、ＶＩＳＴＡアンタゴニストを単独または他の免疫活性化因子もしくは免疫アゴニストと関連させて使用してよく、具体的には、Ｂ細胞応答性の増加が治療的に望ましい状態を治療または防止するために、アゴニストである抗ＣＤ４０抗体またはＣＤ４０ＬポリペプチドなどのＣＤ４０アゴニストなどの
、液性免疫を増進するものと関連させて使用してよい。そのような状態には、具体的には、Ｂ細胞が応答する癌が含まれ、例えば、抗体応答が疾患病理に関与するか、または予防免疫もしくは治療免疫に関与するものである。そのような癌の状態の例には、限定はされないが、カルシノーマ、リンパ腫、芽細胞腫、肉腫（脂肪肉腫を含む）、神経内分泌腫瘍、中皮腫、シュワン腫（ｓｃｈｗａｎｏｍａ）、髄膜腫、腺癌、黒色腫、卵巣癌、乳癌、肺癌、脳癌、消化器癌、及び白血病またはリンパ系腫瘍が含まれる。
【０１４３】
そのような癌のより具体的な例には、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）などの血液系腫瘍が含まれる。ＮＨＬ癌（ｃａｎｃｅｒ）には、限定はされないが、バーキットリンパ腫（ＢＬ）、小リンパ球性リンパ腫／慢性リンパ性白血病（ＳＬＬ／ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＣＬ）、辺縁帯リンパ腫（ＭＺＬ）、ヘアリー細胞白血病（ＨＣＬ）及びリンパ形質細胞性白血病（ＬＰＬ）、粘膜関連リンパ組織型節外性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫（ＭＡＬＴ）、結節性辺縁帯Ｂ細胞リンパ腫、縦隔大細胞型細胞リンパ腫、血管内大細胞型細胞リンパ腫、原発性滲出液リンパ腫、前駆Ｂリンパ芽球性白血病／リンパ腫、前駆Ｔ細胞及びＮＫ細胞リンパ腫（前駆Ｔリンパ芽球性リンパ腫、芽球性ＮＫ細胞リンパ腫）、末梢性Ｔ細胞リンパ腫及び末梢性Ｔ細胞白血病（ＰＴＬ）、成人Ｔ細胞白血病／Ｔ細胞リンパ腫及び大顆粒リンパ球性白血病、Ｔ細胞性慢性リンパ性白血病／前リンパ球性白血病、Ｔ細胞大顆粒リンパ球性白血病、侵攻性ＮＫ細胞白血病、節外性Ｔ／ＮＫ細胞リンパ腫、腸症型Ｔ細胞リンパ腫、肝脾Ｔ細胞リンパ腫、未分化大細胞リンパ腫（ＡＬＣＬ）、血管中心性及び血管免疫芽細胞性のＴ細胞リンパ腫、菌状息肉腫／セザリー症候群、ならびに皮膚Ｔ細胞リンパ腫（ＣＴＣＬ）を含む成熟Ｔ細胞及びＮＫ細胞の腫瘍が含まれる。ＶＩＳＴＡアンタゴニストによる治療が可能であり得る他の癌には、限定はされないが、ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞性急性リンパ芽球性白血病／リンパ腫（Ｂ−ＡＬＬ）、及びＴ細胞性急性リンパ芽球性白血病／リンパ腫（Ｔ−ＡＬＬ）を含むリンパ球前駆細胞の腫瘍、胸腺腫、ランゲルハンス細胞組織球症、多発性骨髄腫（ＭＭ）、成熟を伴うＡＭＬ、分化を伴わないＡＭＬ、急性前骨髄球性白血病、急性骨髄単球性白血病、及び急性単球性白血病を含む急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）などの骨髄性新生物、骨髄異形成症候群、ならびに慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）を含む慢性骨髄増殖性疾患（ＭＤＳ）が含まれる。ＶＩＳＴＡアンタゴニストで治療が可能であり得る他の癌には、限定はされないが、神経膠腫、神経膠芽腫、神経芽細胞腫、星状細胞腫、髄芽腫、上衣腫、及び網膜芽細胞腫などの中枢神経系の腫瘍と、頭頸部の固形腫瘍（例えば、上咽頭癌、唾液腺癌、及び食道癌）、肺の固形腫瘍（例えば、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、及び肺の扁平上皮癌）、消化器系の固形腫瘍（例えば、胃腸癌を含む胃（ｇａｓｔｒｉｃ）癌または胃（ｓｔｏｍａｃｈ）癌、胆管または胆道の癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、及び肛門癌）、生殖器系の固形腫瘍（例えば、精巣、陰茎、または前立腺の癌、子宮、腟、外陰部、子宮頸部、卵巣、及び子宮内膜の癌）、皮膚の固形腫瘍（例えば、黒色腫、基底細胞癌、扁平上皮癌、日光角化症）、肝臓の固形腫瘍（例えば、肝癌（ｌｉｖｅｒ  ｃａｎｃｅｒ）、肝癌（ｈｅｐａｔｉｃ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ）、肝細胞癌、及び肝細胞腫）、骨の固形腫瘍（例えば、骨巨細胞腫、及び溶骨性骨癌）、さらなる組織ならびに臓器の固形腫瘍（例えば、膵癌、膀胱癌、腎（ｋｉｄｎｅｙ）癌または腎（ｒｅｎａｌ）癌、甲状腺癌、乳癌、腹膜の癌、及びカポジ肉腫）と、脈管系��腫瘍（例えば、血管肉腫及び血管外皮腫）と、が含まれる。
【０１４４】
治療し得る他の特定の癌の指標には、限定はされないが、すべての非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、特に、抵抗性／耐性ＮＨＬ、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、Ｂ細胞性急性リンパ芽球性白血病／リンパ腫（Ｂ−ＡＬＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、及び多発性骨髄腫（ＭＭ）が含まれる。
【０１４５】
Ｂ細胞応答性に対するＶＩＳＴＡの作用、具体的には、ＭＳＤＣによって媒介される、Ｂ細胞応答性に対するＶＩＳＴＡの抑制作用にさらに基づき、Ｂ細胞応答性の増加が治療
的に望ましい感染性の状態を治療または防止するために、ＶＩＳＴＡアンタゴニストを使用してよい。そのような状態には、具体的には、ウイルス、細菌、真菌、原虫、及び寄生虫などの病原体によって引き起こされる疾患が含まれる。アデノウイルス、サイトメガロウイルス、デング熱、エプスタイン・バーウイルス、ハンタン、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、単純ヘルペスＩ型、単純ヘルペスＩＩ型、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、インフルエンザ、麻疹、流行性耳下腺炎、パポーバウイルス、ポリオ、呼吸器多核体ウイルス（ＲＳＶ）、牛疫、ライノウイルス、ロタウイルス、風疹、ＳＡＲＳウイルス、天然痘、ウイルス性髄膜炎、及び同様のものを含むウイルスによって、感染性疾患は引き起こされ得る。Ｂａｃｉｌｌｕｓ  ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ  ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ  ｊｅｊｕｎｉ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ  ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ  ｔｅｔａｎｉ、Ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａ、Ｅ．  ｃｏｌｉ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ  ｐｙｌｏｒｉ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ  ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ  ｎｅｉｓｓｅｒｉａ、Ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ  ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｓ．ｐｎｅｕｍｏｎｉａ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ、Ｖｉｂｒｉｏ  ｃｈｏｌｅｒａｅ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ  ｐｅｓｔｉｓ、及び同様のものを含む細菌によっても、感染性疾患は引き起こされ得る。Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ  ｆｕｍｉｇａｔｕｓ、Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ  ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ、Ｃａｎｄｉｄａ  ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ  ｉｍｍｉｔｉｓ、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ  ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ、Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ  ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ，  Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ  ｍａｒｎｅｆｆｅｉ、及び同様のものなどの真菌によっても、感染性疾患は引き起こされ得る。クラミジア、コクジジオア（ｋｏｋｚｉｄｉｏａ）、リーシュマニア、マラリア、リケッチア、トリパノソーマ、及び同様のものなどの原虫及び寄生虫によっても、感染性疾患は引き起こされ得る。
【０１４６】
Ｂ細胞応答性に対するＶＩＳＴＡの作用、具体的には、ＭＳＤＣによって媒介される、Ｂ細胞応答性に対するＶＩＳＴＡの抑制作用にさらに基づき、治療ワクチンの効力を「後押しする（ｂｏｏｓｔ）」ために、ＶＩＳＴＡアンタゴニストを使用してよい。本発明の本出願では、対象は、１つもしくは複数の抗原、または典型的には、それに対して特異的なヒト抗体もしくヒト化抗体である１つもしくは複数の抗体を、少なくとも１つのＶＩＳＴＡアンタゴニストと組み合わせて、投与することによって、特定抗原に対して、能動的または受動的に免疫化されることになり、当該ＶＩＳＴＡアンタゴニストは、例えば、抗ＶＩＳＴＡ抗体、あるいはアンタゴニストであるＶＩＳＴＡポリペプチドまたはＶＩＳＴＡの活性もしくは発現を弱めるそのようなペプチドもしくはアンチセンス核酸などの核酸を含むＶＩＳＴＡ結合体である。
【０１４７】
ＶＩＳＴＡアンタゴニストは、所望の抗原または抗体を含むワクチンの投与の、前、同時、または後に投与されてよい。そのような抗原または抗体、及びＶＩＳＴＡアンタゴニストは、同一または異なる製剤に存在してよい。最も典型的には、それらは、異なる製剤に含められる。ＶＩＳＴＡアンタゴニストは、所望の抗原に対して誘発されることになるか、または治療抗体によって誘発されることになるＢ細胞免疫応答をＶＩＳＴＡアンタゴニストが促進するような量及び投薬条件で投与される。この抗原は、腫瘍抗原、例えば、細菌、ウイルス、酵母、真菌、もしくは寄生虫の抗原といった感染病原体の抗原を含むか、またはアレルゲンもしくは自己抗原を含んでよい。同様に、投与される抗体は、腫瘍抗原、例えば、細菌、ウイルス、酵母、真菌、もしくは寄生虫の抗原といった感染病原体の抗原、アレルゲン、または自己抗原に対して特異的であってよい。
【０１４８】
また、Ｂ細胞応答性に対するＶＩＳＴＡの作用、具体的には、ＭＳＤＣによって媒介される、Ｂ細胞応答性に対するＶＩＳＴＡの抑制作用にさらに基づき、Ｂ細胞応答性の低減
が治療的に望ましい状態を治療または防止するために、ＶＩＳＴＡアゴニストを使用してよい。そのような状態には、具体的には、Ｂ細胞応答が疾患病理に関与している自己免疫状態、Ｂ細胞応答が疾患病理に関与している炎症性状態、及びＢ細胞応答が疾患病理に関与しているアレルギー性状態が含まれる。
【０１４９】
ＶＩＳＴＡアゴニストで治療が可能な、そのような自己免疫状態の例には、下記のものが含まれる。すなわち、同種膵島移植片拒絶（ａｌｌｏｇｅｎｉｃ  ｉｓｌｅｔ  ｇｒａｆｔ  ｒｅｊｅｃｔｉｏｎ）、円形脱毛症、強直性脊椎炎、抗リン脂質抗体症候群、自己免疫アジソン病、抗好中球細胞質自己抗体（ＡＮＣＡ）、副腎の自己免疫疾患、自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性肝炎、自己免疫性心筋炎、自己免疫性好中球減少症、自己免疫性卵巣炎及び自己免疫性精巣炎、自己免疫性血小板減少症、自己免疫性蕁麻疹、ベーチェット病、水疱性類天疱瘡、心筋症、キャッスルマン病、セリアック病皮膚炎（ｃｅｌｉａｃ  ｓｐｒｕｃｅ−ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ）、慢性疲労免疫機能障害症候群、慢性炎症性脱髄性多発神経炎、チャーグ・ストラウス症候群、瘢痕性類天疱瘡、クレスト症候群、寒冷凝集素症、クローン病、皮膚筋炎、円板状エリテマトーデス、本態性混合型クリオグロブリン血症、第ＶＩＩＩ因子欠乏症、線維筋痛−線維筋炎（ｆｉｂｒｏｍｙａｌｇｉａ−ｆｉｂｒｏｍｙｏｓｉｔｉｓ）、糸球体腎炎、グレーブス病、ギラン・バレー症候群、グッドパスチャー症候群、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、橋本甲状腺炎、血友病Ａ、特発性肺線維症、特発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、ＩｇＡ腎症（ｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ）、ＩｇＭ多発神経炎（ｐｏｌｙｎｅｕｒｏｐａｔｈｙ）、免疫媒介性の血小板減少症、若年性関節炎、川崎病、扁平苔癬、エリテマトーデス、メニエール病、混合性結合組織疾患、多発性硬化症、１型糖尿病、重症筋無力症、尋常性天疱瘡、悪性貧血、結節性多発動脈炎、多発性軟骨炎、多腺性症候群、リウマチ性多発筋痛症、多発性筋炎及び皮膚筋炎、原発性無ガンマグロブリン血症、原発性胆汁性肝硬変、乾癬、乾癬性関節炎、レイノー現象（Ｒｅｙｎａｕｄ‘ｓ  ｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎ）、ライター症候群、関節リウマチ、サルコイドーシス、強皮症、シェーグレン症候群、固形臓器移植片拒絶、スティフマン症候群、全身性エリテマトーデス、高安動脈炎、側頭動脈炎／巨細胞性動脈炎、血栓性血小板減少性紫斑病、潰瘍性大腸炎、ブドウ膜炎、疱疹状皮膚炎型血管炎（ｄｅｒｍａｔｉｔｉｓ
ｈｅｒｐｅｔｉｆｏｒｍｉｓ  ｖａｓｃｕｌｉｔｉｓ）などの血管炎、白斑、ならびにウェグナー肉芽腫症（Ｗｅｇｎｅｒ’ｓ  ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｏｓｉｓ）である。
【０１５０】
ＶＩＳＴＡアゴニストで治療が可能な、そのような自己免疫状態の例には、下記のものが含まれる。すなわち、急性呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）、急性化膿性関節炎、アジュバント関節炎、若年性特発性関節炎、アレルギー性脳脊髄炎、アレルギー性鼻炎、アレルギー性血管炎、アレルギー、喘息、アテローム性動脈硬化、慢性的な細菌感染またはウイルス感染に起因する慢性炎症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、冠動脈疾患、脳炎、炎症性腸疾患、炎症性骨溶解症、急性過敏性反応及び遅延型過敏性反応と関連した炎症、腫瘍と関連した炎症、末梢神経損傷または脱髄性疾患、熱傷及び虚血などの組織外傷と関連した炎症、髄膜炎に起因する炎症、多臓器損傷症候群、肺線維症、敗血症性ショック及び感染性ショック、スティーブンス・ジョンソン症候群、未分化関節症（ａｒｔｈｒｏｐｙ）、ならびに未分化脊椎関節症である。
【０１５１】
ＶＩＳＴＡアゴニストで治療が可能な、そのようなアレルギー性状態の例が、例として含まれ、ＶＩＳＴＡアゴニストを使用した治療が可能な好ましいアレルギー性状態には、アレルギー性接触皮膚炎、汎発性脱毛症、喘息、アナフィラクトイド紫斑喘息、アトピー性皮膚炎、疱疹状皮膚炎、持久性隆起性紅斑、輪状紅斑、多形性紅斑、結節性紅斑、アレルギー性肉芽腫症、環状肉芽腫、顆粒球減少症、過敏性肺炎、角膜炎、ネフローゼ症候群、オーバーラップ症候群、鳩飼病、特発性多発性神経炎、蕁麻疹、ブドウ膜炎、若年性皮膚筋炎、及び白斑が含まれる。
【０１５２】
Ｂ細胞応答性の低減が望ましくあり得る状態の他の例には、アレルギー性気管支肺アスペルギルス症、自己免疫性溶血性貧血、黒色表皮腫、アレルギー性接触皮膚炎、アジソン病、アトピー性皮膚炎、円形脱毛症、汎発性脱毛症、アミロイドーシス、アナフィラクトイド紫斑、アナフィラキシー様反応、再生不良性貧血、遺伝性血管性浮腫、特発性血管性浮腫、強直性脊椎炎、頭部動脈炎、巨細胞性動脈炎、高安動脈炎、側頭動脈炎、喘息、毛細血管拡張性運動失調症、自己免疫性卵巣炎、自己免疫性精巣炎、多腺性自己免疫異常（Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ  ｐｏｌｙｅｎｄｏｃｒｉｎｅ  ｆａｉｌｕｒｅ）、ベーチェット病、ベルジェ病、バージャー病、水疱性類天疱瘡、カンジダ症、慢性皮膚粘膜カンジダ症、カプラン症候群、心筋梗塞後症候群、心膜切開後症候群、心炎、セリアックスプルー、シャーガス病、チェディアック・東症候群、チャーグ・ストラウス疾患、コーガン症候群、寒冷凝集素症、クレスト症候群、クローン病、クリオグロブリン血症、原因不明の線維化性胞隔炎、疱疹状皮膚炎、皮膚筋炎、糖尿病、ダイアモンドブラックファン症候群、ディジョージ症候群、円板状エリテマトーデス、好酸球性筋膜炎、上強膜炎、持久性隆起性紅斑、輪状紅斑、多形性紅斑、結節性紅斑、家族性地中海熱、フェルティ症候群、肺線維症、アナフィラキシー様糸球体腎炎、自己免疫性糸球体腎炎、連鎖球菌感染後糸球体腎炎、移植後糸球体腎炎、膜性糸球体腎炎、グッドパスチャー症候群、移植片対宿主病、免疫媒介性顆粒球減少症、環状肉芽腫、アレルギー性肉芽腫症、肉芽腫性筋炎、グレーブス病、橋本甲状腺炎、新生児溶血性疾患、特発性ヘモクロマトーシス、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、慢性活動性肝炎及び慢性進行性肝炎、組織球症Ｘ、好酸球増加症候群、特発性血小板減少性紫斑病、ヨブ症候群、若年性皮膚筋炎、若年性関節リウマチ（若年性慢性関節炎）、川崎病、角膜炎、乾性角結膜炎、ランドリー・ギラン・バレー・ストロール症候群（Ｌａｎｄｒｙ−Ｇｕｉｌｌａｉｎ−Ｂａｒｒｅ−Ｓｔｒｏｈｌ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、ハンセン病、らい腫型、レフレル症候群、ライエル症候群、ライム病、リンパ腫様肉芽腫症、全身性肥満細胞症、混合性結合組織疾患、多発単神経炎、マックル・ウェルズ症候群、皮膚粘膜リンパ節症候群、皮膚粘膜リンパ節症候群、多中心性細網組織球症、多発性硬化症、重症筋無力症、菌状息肉症、全身性壊死性血管炎、ネフローゼ症候群、オーバーラップ症候群、脂肪織炎、発作性寒冷ヘモグロビン尿症、発作性夜間ヘモグロビン尿症、類天疱瘡、天疱瘡、紅斑性天疱瘡、落葉状天疱瘡、尋常性天疱瘡、鳩飼病、過敏症間質性肺炎、結節性多発動脈炎、リウマチ性多発筋痛症、多発性筋炎、特発性多発神経炎、ポルトガル家族性多発神経炎、子癇前症／子癇、原発性胆汁性肝硬変、進行性全身性硬化症（強皮症）、乾癬、乾癬性関節炎、肺胞蛋白症、肺線維症、レイノー現象／レイノー病、リーデル甲状腺炎、ライター症候群、再発性多発軟骨炎、リウマチ熱、関節リウマチ、サルコイドーシス、強膜炎、硬化性胆管炎、血清病、セザリー症候群、シェーグレン症候群、スティーブンス・ジョンソン症候群、スチル病、亜急性硬化性全脳炎、交感性眼炎、全身性エリテマトーデス、移植片拒絶、潰瘍性大腸炎、未分化結合組織疾患、慢性蕁麻疹、寒冷蕁麻疹、ブドウ膜炎、白斑、ウェーバー・クリスチャン病、ウェゲナー肉芽腫症、ウィスコット・アルドリッチ症候群が含まれる。ＶＩＳＴＡアゴニストまたはＶＩＳＴＡアンタゴニストで治療が可能な他のＢ細胞関連の状態には、Ｂ細胞が、過多、過少、過活動性、または不活性であるか（もしくはＢ細胞の活性が実質的に減少している）、あるいはＢ細胞が機能障害性であることによって特徴づけられる疾患を含むＢ細胞関連の状態が含まれる。Ｂ細胞が関与することが知られている例示のヒト疾患には、限定はされないが、自己免疫疾患（例えば、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、シェーグレン症候群、ＡＮＣＡ関連血管炎、抗リン脂質抗体症候群、突発性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、自己免疫性溶血性貧血、ギラン・バレー症候群、慢性免疫多発神経炎、自己免疫性甲状腺炎、Ｉ型（自己免疫性）糖尿病、膜性糸球体腎症、グッドパスチャー症候群、自己免疫性胃炎、悪性貧血、尋常性天疱瘡、原発性胆汁性肝硬変、皮膚筋炎−多発性筋炎、重症筋無力症、全身性硬化症（強皮症）、多発性硬化症、間質性肺疾患、慢性疲労症候群、妊娠性抗好中球細胞質抗体に起因する自己免疫性甲状腺炎（ＡＮＣＡ）、及びセリアック病）と、炎症性疾患（例えば、免疫グロブリンＡ腎症、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、慢性移植片拒絶、アトピー性皮膚炎、橋本甲状腺炎、グレーブス病、萎縮性甲状腺炎、リーデル
甲状腺炎、喘息、ライム神経ボレリア症、潰瘍性大腸炎、クローン病、及びアレルギー）と、癌（例えば、リンパ腫、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、侵攻性（ａｇｇｒｅｓｓうｉｖｅ）ＮＨＬ、再発した侵攻性ＮＨＬ、再発した低悪性ＮＨＬ、抵抗性ＮＨＬ、抵抗性の無痛性、免疫グロブリンが変異したＣＬＬ及び免疫グロブリンが未変異のＣＬＬを含む慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、小リンパ球性リンパ腫、白血病、ヘアリー細胞白血病（ＨＣＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、マントル細胞リンパ腫、中悪性度／濾胞性ＮＨＬ、中悪性度びまん性ＮＨＬ、高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ、高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ、高悪性度小型非切れ込み核細胞性ＮＨＬ、巨大腫瘤病変ＮＨＬ、バーキットリンパ腫、多発性骨髄腫、前駆Ｂ細胞急性リンパ芽球性白血病、及び下記のものに由来する他の悪性腫瘍が含まれ、すなわち、初期Ｂ細胞前駆体、ヘアリー細胞白血病、ヌル急性リンパ芽球性白血病、ワルデンストレーム高ガンマグロブリン血症、胚中心Ｂ細胞様（ＧＣＢ）ＤＬＢＣＬ、活性化Ｂ細胞様（ＡＢＣ）ＤＬＢＣＬ、及び３型ＤＬＢＣＬを含むびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、前リンパ球性白血病、軽鎖病、形質細胞腫、骨硬化性骨髄腫、形質細胞性白血病、意義不明の単クローン性ガンマグロブリン血症（ＭＧＵＳ）、くすぶり型多発性骨髄腫（ＳＭＭ）、低悪性度多発性骨髄腫（ＩＭＭ）、古典的ホジキンリンパ腫及び結節性リンパ球優位型ホジキンリンパ腫を含むホジキンリンパ腫、リンパ形質細胞性リンパ腫（ＬＰＬ）、ならびに胃粘膜関連リンパ組織型（ＭＡＬＴ）リンパ腫を含む辺縁帯リンパ腫である）と、が含まれる。
【０１５３】
強皮症は、限定はされないが、限局性皮膚疾患、びまん性皮膚疾患、皮膚硬化を伴わない（ｓｉｎｅ）強皮症、未分化結合組織疾患、オーバーラップ症候群、限局性強皮症、モルフェア、線状強皮症、サーベル状切痕、成年性浮腫性硬化症（ｓｃｌｅｒｅｄｅｍａ  ａｄｕｌｔｏｒｕｍ  ｏｆ  Ｂｕｓｃｈｋｅ）、硬化性粘液水腫、慢性移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、好酸球性筋膜炎、糖尿病性皮膚硬化症、ならびに原発性アミロイドーシス、及び多発性骨髄腫と関連するアミロイドーシスを含む疾患の混成群を包含する。（Ｈａｒｒｉｓｏｎ’ｓ  Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ  ｏｆ  Ｉｎｔｅｒｎａｌ  Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１６．ｓｕｐ．ｔｈ  ｅｄ．／ｅｄｉｔｏｒｓ，Ｄｅｎｎｉｓ  Ｌ．Ｋａｓｐｅｒら．Ｔｈｅ  ＭｃＧｒａｗ−Ｈｉｌｌ  Ｃｏｍｐａｎｉｅｓ，Ｉｎｃ．２００５  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．において概説されている）。
【０１５４】
配列
マウスＶＩＳＴＡ配列識別番号：１
１  ｍｇｖｐａｖｐｅａｓ  ｓｐｒｗｇｔｌｌｌａ  ｉｆｌａａｓｒｇｌｖ  ａａｆｋｖｔｔｐｙｓ  ｌｙｖｃｐｅｇｑｎａ  ｔｌｔｃｒｉｌｇｐｖ
６１  ｓｋｇｈｄｖｔｉｙｋ  ｔｗｙｌｓｓｒｇｅｖ  ｑｍｃｋｅｈｒｐｉｒ  ｎｆｔｌｑｈｌｑｈｈ  ｇｓｈｌｋａｎａｓｈ  ｄｑｐｑｋｈｇｌｅｌ
１２１  ａｓｄｈｈｇｎｆｓｉ  ｔｌｒｎｖｔｐｒｄｓ  ｇｌｙｃｃｌｖｉｅｌ  ｋｎｈｈｐｅｑｒｆｙ  ｇｓｍｅｌｑｖｑａｇ  ｋｇｓｇｓｔｃｍａｓ
１８１  ｎｅｑｄｓｄｓｉｔａ  ａａｌａｔｇａｃｉｖ  ｇｉｌｃｌｐｌｉｌｌ  ｌｖｙｋｑｒｑｖａｓ  ｈｒｒａｑｅｌｖｒｍ  ｄｓｎｔｑｇｉｅｎｐ
２４１  ｇｆｅｔｔｐｐｆｑｇ  ｍｐｅａｋｔｒｐｐｌ  ｓｙｖａｑｒｑｐｓｅ  ｓｇｒｙｌｌｓｄｐｓ  ｔｐｌｓｐｐｇｐｇｄ  ｖｆｆｐｓｌｄｐｖｐ
３０１  ｄｓｐｎｓｅａｉ
マウスＶＩＳＴＡ配列識別番号：２
１  ｍｇｖｐａｖｐｅａｓ  ｓｐｒｗｇｔｌｌｌａ  ｉｆｌａａｓｒｇｌｖ  ａａｆｋｖｔｔｐｙｓ  ｌｙｖｃｐｅｇｑｎａ  ｔｌｔｃｒｉｌｇｐｖ
６１  ｓｋｇｈｄｖｔｉｙｋ  ｔｗｙｌｓｓｒｇｅｖ  ｑｍｃｋｅｈｒｐｉｒ  ｎｆｔｌｑｈｌｑｈｈ  ｇｓｈｌｋａｎａｓｈ  ｄｑｐｑｋｈｇｌｅｌ
１２１  ａｓｄｈｈｇｎｆｓｉ  ｔｌｒｎｖｔｐｒｄｓ  ｇｌｙｃｃｌｖｉｅｌ  ｋｎｈｈｐｅｑｒｆｙ  ｇｓｍｅｌｑｖｑａｇ  ｋｇｓｇｓｔｃｍａｓ
１８１  ｎｅｑｄｓｄｓｉｔａ  ａａｌａｔｇａｃｉｖ  ｇｉｌｃｌｐｌｉｌｌ  ｌｖｙｋｑｒｑｖａｓ  ｈｒｒａｑｅｌｖｒｍ  ｄｓｓｎｔｑｇｉｅｎ
２４１  ｐｇｆｅｔｔｐｐｆｑ  ｇｍｐｅａｋｔｒｐｐ  ｌｓｙｖａｑｒｑｐｓ  ｅｓｇｒｙｌｌｓｄｐ  ｓｔｐｌｓｐｐｇｐｇ  ｄｖｆｆｐｓｌｄｐｖ
３０１  ｐｄｓｐｎｓｅａｉ
マウスＶＩＳＴＡ配列識別番号：３
１  ｍｇｖｐａｖｐｅａｓ  ｓｐｒｗｇｔｌｌｌａ  ｉｆｌａａｓｒｇｌｖ  ａａｆｋｖｔｔｐｙｓ  ｌｙｖｃｐｅｇｑｎａ  ｔｌｔｃｒｉｌｇｐｖ
６１  ｓｋｇｈｄｖｔｉｙｋ  ｔｗｙｌｓｓｒｇｅｖ  ｑｍｃｋｅｈｒｐｉｒ  ｎｆｔｌｑｈｌｑｈｈ  ｇｓｈｌｋａｎａｓｈ  ｄｑｐｑｋｈｇｌｅｌ
１２１  ａｓｄｈｈｇｎｆｓｉ  ｔｌｒｎｖｔｐｒｄｓ  ｇｌｙｃｃｌｖｉｅｌ  ｋｎｈｈｐｅｑｒｆｙ  ｇｓｍｅｌｑｖｑａｇ  ｋｇｓｇｓｔｃｍａｓ  
１８１  ｎｅｑｄｓｄｓｉｔａ  ａａｌａｔｇａｃｉｖ  ｇｉｌｃｌｐｌｉｌｌ  ｌｖｙｋｑｒｑｖａｓ  ｈｒｒａｑｅｌｖｒｍ  ｄｓｓｎｔｑｇｉｅｎ
２４１  ｐｇｆｅｔｔｐｐｆｑ  ｇｍｐｅａｋｔｒｐｐ  ｌｓｙｖａｑｒｑｐｓ  ｅｓｇｒｙｌｌｓｄｐ  ｓｔｐｌｓｐｐｇｐｇ  ｄｖｆｆｐｓｌｄｐｖ
３０１  ｐｄｓｐｎｓｅａｉ
ヒトＶＩＳＴＡ配列識別番号：４
１  ｍｇｖｐｔａｌｅａｇ  ｓｗｒｗｇｓｌｌｆａ  ｌｆｌａａｓｌｇｐｖ  ａａｆｋｖａｔｐｙｓ  ｌｙｖｃｐｅｇｑｎｖ  ｔｌｔｃｒｌｌｇｐｖ
６１  ｄｋｇｈｄｖｔｆｙｋ  ｔｗｙｒｓｓｒｇｅｖ  ｑｔｃｓｅｒｒｐｉｒ  ｎｌｔｆｑｄｌｈｌｈ  ｈｇｇｈｑａａｎｔｓ  ｈｄｌａｑｒｈｇｌｅ
１２１  ｓａｓｄｈｈｇｎｆｓ  ｉｔｍｒｎｌｔｌｌｄ  ｓｇｌｙｃｃｌｖｖｅ  ｉｒｈｈｈｓｅｈｒｖ  ｈｇａｍｅｌｑｖｑｔ  ｇｋｄａｐｓｎｃｖｖ
１８１  ｙｐｓｓｓｑｄｓｅｎ  ｉｔａａａｌａｔｇａ  ｃｉｖｇｉｌｃｌｐｌ  ｉｌｌｌｖｙｋｑｒｑ  ａａｓｎｒｒａｑｅｌ  ｖｒｍｄｓｎｉｑｇｉ
２４１  ｅｎｐｇｆｅａｓｐｐ  ａｑｇｉｐｅａｋｖｒ  ｈｐｌｓｙｖａｑｒｑ  ｐｓｅｓｇｒｈｌｌｓ  ｅｐｓｔｐｌｓｐｐｇ  ｐｇｄｖｆｆｐｓｌｄ
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ｉｎｔｒａｔｕｍｏｒａｌ  ｏｎｃｏｌｙｔｉｃ  ｖｉｒｕｓ  ａｎｄ  ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１９（１）：１４０−１４９．
３３．Ｙｅｔｔｅｒ，Ｒ．Ａ．，Ｒ．Ｍ．Ｌ．Ｂｕｌｌｅｒ，Ｊ．Ｓ．Ｌｅｅ，Ｋ．Ｌ．Ｅｌｋｉｎｓ，Ｄ．Ｅ．Ｍｏｓｉｅｒ，Ｔ．Ｎ．Ｆｒｅｄｒｉｃｋｓｏｎ，ａｎｄ  Ｈ．Ｃ．Ｍｏｒｓｅ  ＩＩＩ．１９８８．ＣＤ４＋  Ｔ  ｃｅｌｌｓ  ａｒｅ  ｒｅｑｕｉｒｅｄ  ｆｏｒ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｏｆ  ａ  ｍｕｒｉｎｅ  ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ−ｉｎｄｕｃｅｄ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｓｙｎｄｒｏｍｅ（ＭＡＩＤＳ）．Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６８：６２３−６３５．
３４．Ｙｏｕｎ，Ｊ．，Ｄ．Ｉ．Ｇａｂｒｉｌｏｖｉｃｈ．２０１０．Ｔｈｅ  ｂｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｍｙｅｌｏｉｄ−ｄｅｒｉｖｅｄ  ｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒ  ｃｅｌｌｓ：ｔｈｅ  ｂｌｅｓｓｉｎｇ  ａｎｄ  ｔｈｅ  ｃｕｒｓｅ  ｏｆ  ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ  ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４０：２９６９−２９７５．
３５．Ｚｅｌｉｎｓｋｙ，Ｇ．，Ｋ．Ｋ．Ｄｉｅｔｚｅ，Ｙ．Ｐ．Ｈｕｓｅｃｋｅｎ，Ｓ．Ｓｃｈｉｍｍｅｒ，Ｓ．Ｎａｉｒ，Ｔ．Ｗｅｒｎｅｒ，Ｋ．Ｇｉｂｂｅｒｔ，Ｏ．Ｋｅｒｓｈａｗ，Ａ．Ｄ．Ｇｒｕｂｅｒ，Ｔ．Ｓｐａｒｗａｓｓｅｒ，ａｎｄ  Ｕ．Ｄｉｔｔｍｅｒ．２００９．Ｔｈｅ  ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ  Ｔ−ｃｅｌｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ  ｄｕｒｉｎｇ  ａｃｕｔｅ  ｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ  ｉｓ  ｌｏｃａｌｌｙ  ｄｅｆｉｎｅｄ  ａｎｄ  ｃｏｎｔｒｏｌｓ  ｔｈｅ  ｍａｇｎｉｔｕｄｅ  ａｎｄ  ｄｕｒａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｖｉｒｕｓ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ  ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ  Ｔ−ｃｅｌｌ  ｒｅｓｐｏｎｓｅ．Ｂｌｏｏｄ．１１４：３１９９−３２０７．
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年7月22日(2020.7.22)
【手続補正１】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０１５３
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０１５３】
強皮症は、限定はされないが、限局性皮膚疾患、びまん性皮膚疾患、皮膚硬化を伴わない（ｓｉｎｅ）強皮症、未分化結合組織疾患、オーバーラップ症候群、限局性強皮症、モルフェア、線状強皮症、サーベル状切痕、成年性浮腫性硬化症（ｓｃｌｅｒｅｄｅｍａ  ａｄｕｌｔｏｒｕｍ  ｏｆ  Ｂｕｓｃｈｋｅ）、硬化性粘液水腫、慢性移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、好酸球性筋膜炎、糖尿病性皮膚硬化症、ならびに原発性アミロイドーシス、及び多発性骨髄腫と関連するアミロイドーシスを含む疾患の混成群を包含する。（Harrison’s Principles of Internal Medicine,16.sup.th ed./editors,Dennis L.Kasperら.The McGraw-Hill Companies,Inc.2005 New York, N.Y.において概説されている）。
本願は以下の発明を包含する。
［項目１］  必要とする対象における、ＶＩＳＴＡが媒介する液性免疫阻害の阻害方法または無効化方法であって、ＶＩＳＴＡアンタゴニストの投与を含む前記方法。
［項目２］  Ｂ細胞免疫が抑制される癌または感染性疾患状態を有する対象の治療のために使用される、項目１に記載の方法。
［項目３］  必要とする対象における、ＶＩＳＴＡが媒介する液性免疫阻害の促進方法または増加方法であって、ＶＩＳＴＡアゴニストの投与を含む前記方法。
［項目４］  Ｂ細胞応答または抗体応答が疾患病理に関与する、自己免疫性状態、アレルギー性状態、炎症性状態、または感染性状態を有する対象の治療のために使用される、項目３に記載の方法。
［項目５］  必要とする対象における、限定はされないが、抗原特異的な抗体応答を含む、Ｂ細胞増殖またはＢ細胞応答の抑制方法であって、ＶＩＳＴＡアゴニストの投与を含む前記方法。
［項目６］  Ｂ細胞応答または抗体応答が疾患病理に関与する、自己免疫性状態、アレルギー性状態、炎症性状態、または感染性状態を有する対象の治療のために使用される、項目５に記載の方法。
［項目７］  必要とする対象における、限定はされないが、抗原特異的な抗体応答を含む、Ｂ細胞増殖またはＢ細胞応答の増加方法であって、ＶＩＳＴＡアンタゴニストの投与を含む前記方法。
［項目８］  Ｂ細胞免疫が抑制される癌または感染性疾患状態を有する対象の治療のために使用される、項目７に記載の方法。
［項目９］  抗原または治療抗体に対して誘発される液性免疫応答の促進方法であって、ＶＩＳＴＡアンタゴニストの使用を含む治療レジメンにおける、そのような抗原または抗体の投与を含む前記方法。
［項目１０］  前記抗原が、腫瘍抗原、自己抗原、アレルゲン、または感染病原体の抗原である、項目９に記載の方法。
［項目１１］  前記抗体が、腫瘍抗原、自己抗原、アレルゲン、または感染病原体の抗原に対して特異的である、項目９に記載の方法。
［項目１２］  治療ワクチンまたは予防ワクチンによって誘発される液性免疫応答の促進方法であって、ＶＩＳＴＡアンタゴニストの使用を含む治療レジメンにおける、そのようなワクチンの投与を含む前記方法。
［項目１３］  前記ワクチンが、腫瘍抗原、自己抗原、アレルゲン、または感染病原体の抗原を含む、項目１２に記載の方法。
［項目１４］  ｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質の投与をさらに含む、項目１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
［項目１５］  ｉＮＯＳ／ＮＯ促進物質、または一酸化窒素もしくは一酸化窒素を含む化合物の投与をさらに含む、項目１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
［項目１６］  前記ｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質が、一酸化窒素を阻害する化合物であるか、または一酸化窒素の合成を阻害する化合物である、項目１４に記載の方法。
［項目１７］  前記ｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質が、一酸化窒素を促進する化合物であるか、または一酸化窒素の合成を促進する化合物である、項目１４に記載の方法。
［項目１８］  前記化合物が、任意選択で、ＮＧ−ニトロ−Ｌ−アルギニンメチルエステル、ＮＧ−エチル−Ｌ−アルギニン、Ｎ−イミノエチル−Ｌ−アルギニン、Ｌ−ＮＧ−メチルアルギニン、及びＮＧ−ニトロ−Ｌ−アルギニンであるアルギニン誘導体であるか、または前記阻害物質が、ＮＧ−ニトロ−Ｌアルギニンメチルエステルである、項目１７に記載の方法。
［項目１９］  前記化合物が、ロバスタチン、フェニル酢酸のナトリウム塩（ＮａＰＡ）、ＦＰＴ阻害物質ＩＩ、Ｎ−アセチルシステイン（ＮＡＣ）、及びｃＡＭＰであるか、またはこれらのすべてが、参照によって、それらの全体がここに組み込まれる、米国第６，５８６，４７４号、第６，５４５，１７０号、第６，５９３，３７２号、第６，７８７，６６８号、第６，８０９，１１７号、第６，５９１，８８９号、第７，１９６，１１８号、第７，０４９，０５８号において開示されているｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質のいずれかである、項目１７に記載の方法。
［項目２０］  前記ＶＩＳＴＡアンタゴニストが、抗ＶＩＳＴＡ抗体またはＶＩＳＴＡの断片である、項目１〜１９のいずれかに記載の方法。
［項目２１］  前記ｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質が、Ｌ−ＮＭＡまたはＬＮＭＭＡである、先行項目のいずれかに記載の方法。
［項目２２］  前記ＶＩＳＴＡアゴニストが、アゴニストである抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体または抗ヒトＶＩＳＴＡ抗体断片またはＶＩＳＴＡ−Ｉｇ結合体またはＶＩＳＴＡの多量体形態である、先行項目のいずれかに記載の方法。
［項目２３］  前記ＶＩＳＴＡ−Ｉｇが、任意選択で、少なくとも１つのエフェクター機能の減弱または増加のために改変され得る、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４のＦｃ領域またはその断片を含む、項目２２に記載の方法。
［項目２４］  前記対象が、癌または感染性疾患を有する、先行項目のいずれかに記載の方法。
［項目２５］  前記対象が、レトロウイルスなどのウイルス、細菌、または寄生虫によって引き起こされる感染性疾患を有する、先行項目のいずれかに記載の方法。
［項目２６］  前記対象が、進行した癌もしくは転移性の癌を有し、及び／または固形腫瘍を有する、先行項目のいずれかに記載の方法。
［項目２７］  前記癌が、肉腫、黒色腫、卵巣癌、肺癌、リンパ腫、白血病、または骨髄性の癌である、項目２６に記載の方法。
［項目２８］  前記ＶＩＳＴＡアゴニストまたはＶＩＳＴＡアンタゴニストが、未変化の抗ＶＩＳＴＡ抗体または抗ＶＩＳＴＡ抗体断片である、先行項目に記載の方法。
［項目２９］  前記抗体が、ヒトのものであるか、またはヒト化されたものである、項目２８に記載の方法。
［項目３０］  前記抗体が、ヒトＦｃ領域を含む項目２８に記載の方法。
［項目３１］  前記Ｆｃ領域が、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４のものである、項目３０に記載の方法。
［項目３２］  前記Ｆｃ領域に変異が導入され、補体との結合、ＦｃＲとの結合、ＡＤＣＣ、糖鎖修飾、または半減期を阻害または増進する、項目２８に記載の方法。
［項目３３］  ＰＤ−１アゴニストもしくはＰＤ−Ｌ１アゴニスト、またはＰＤ−１アンタゴニストもしくはＰＤ−Ｌ１アンタゴニストの投与をさらに含む、先行項目のいずれかに記載の方法。
［項目３４］  前記アンタゴニストが、抗ＰＤ−１抗体もしくは抗ＰＤ−Ｌ１抗体、またはＰＤ−１融合タンパク質である、項目３３に記載の方法。
［項目３５］  前記アゴニストが、抗ＰＤ−１抗体もしくは抗ＰＤ−Ｌ１抗体、またはＰＤ−１融合タンパク質もしくはＰＤ−Ｌ１融合タンパク質、またはＰＤ−１もしくはＰＤ−Ｌ１を発現する細胞である、項目３３に記載の方法。
［項目３６］  ＶＩＳＴＡアンタゴニスト及びｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質が、一緒に投与される、先行項目のいずれかに記載の方法。
［項目３７］  ＶＩＳＴＡアゴニスト及びｉＮＯＳ／ＮＯ促進物質が、一緒に投与される、先行項目のいずれかに記載の方法。
［項目３８］  Ｂ細胞免疫を促進するための治療レジメンにおいて、ＶＩＳＴＡアンタゴニスト及びｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質が別々に投与される、先行項目のいずれかに記載の方法。
［項目３９］  ＶＩＳＴＡアンタゴニストである化合物及びｉＮＯＳ／ＮＯ阻害物質である化合物が、単独投与されるこうした化合物のいずれかと比較して、液性免疫に対する相乗作用を誘発するために十分な量で投与される、先行項目のいずれかに記載の方法。
［項目４０］  ＶＩＳＴＡアゴニストである化合物、及びｉＮＯＳ／ＮＯ促進物質または一酸化窒素が、単独投与されるこうした化合物のいずれかと比較して、液性免疫に対する相乗作用を誘発するために十分な量で投与される、先行項目のいずれかに記載の方法。
【手続補正２】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
必要とする対象における、ＶＩＳＴＡが媒介する液性免疫阻害の阻害方法または無効化方法であって、ＶＩＳＴＡアンタゴニストの投与を含む前記方法。
【外国語明細書】
2020169192000001.pdf