(57)【要約】【課題】心臓病及び障害を検出、予防、及び治療する優れた方法を提供すること。【解決手段】治療を必要とする被験者の心臓機能を高める方法であって、前記被験者の心臓機能を高めるために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療を必要とする被験者の心臓機能を高める方法であって、前記被験者の心臓機能を高めるために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む方法。
【請求項２】
前記被験者が、体液中に高いＧＤＦ１５活性を有する、請求項１に記載の方法。
【請求項３】
心臓障害又は機能不全を有する被験者を治療する方法であって、前記心臓障害又は機能不全の症状を改善するために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む方法。
【請求項４】
前記被験者が、体液中に高いＧＤＦ１５活性を有する、請求項３に記載の方法。
【請求項５】
うっ血性心不全の１つ又は複数の症状を呈示する被験者における心臓縮小を軽減又は逆転する方法であって、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含み、ここで、前記組成物が、前記被験者における心臓縮小の少なくとも１つの症状を改善する方法。
【請求項６】
前記被験者が、体液中に高いＧＤＦ１５活性を有する、請求項５に記載の方法。
【請求項７】
治療を必要とする被験者のうっ血性心不全（ＣＨＦ）を治療又は予防する方法であって、前記被験者のＣＨＦを治療又は予防するために、前記被験者のＧＤＦ１５活性を低減又は阻害する組成物を有効量で投与するステップを含む方法。
【請求項８】
前記被験者が、体液中に高いＧＤＦ１５活性を有する、請求項７に記載の方法。
【請求項９】
うっ血性心不全の１つ又は複数の特徴を呈示する被験者の心臓縮小を軽減する方法であって、前記被験者の心臓縮小を軽減するために、ＧＤＦ１５の活性を調節する組成物を有効量で投与するステップを含む方法。
【請求項１０】
前記被験者が、体液中に高いＧＤＦ１５活性を有する、請求項９に記載の方法。
【請求項１１】
前記被験者が、１４ｍＬ／ｋｇ／分未満の最大ＶＯ２を呈示する、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１２】
前記被験者が、４０％未満のＬＶＥＦを呈示する、請求項１〜１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１３】
前記被験者が、１００ｐｇ／ｍｌを超えるＢＮＰレベルを呈示する、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１４】
前記被験者が、１．５ｎｇ／ｍＬを超える血清心臓トロポニンＩ（ｃＴｎＩ）レベルを呈示する、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１５】
前記被験者が、うっ血性心不全を有すると診断されている、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１６】
前記ＧＤＦ１５調節剤が、被験者におけるＧＤＦ１５活性を低減又は阻害する、請求項１〜１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項１７】
前記ＧＤＦ１５調節剤が、ＧＤＦ１５に結合する、請求項１６に記載の方法。
【請求項１８】
前記ＧＤＦ１５調節剤が、抗ＧＤＦ１５抗体である、請求項１７に記載の方法。
【請求項１９】
前記抗体が、ヒト化又はヒト抗体である、請求項１８に記載の方法。
【請求項２０】
前記被験者が、正常レベルを超える、心臓由来トロポニンＩ、心臓由来トロポニンＴ、脳性ナトリウム利尿タンパク質（ＢＮＰ）、ＢＮＰ由来のＮ末端ペプチド（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）、及び心臓由来脂肪酸結合タンパク質（ｃＦＡＢＰ）からなる群から選択されるマーカを呈示する、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項２１】
前記体液が、血漿又は血清である、請求項２、４、６、８、又は１０のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本願は、２０１４年６月２０日に提出された米国仮特許出願第６２／０１５，０９３号明細書に対する優先権を請求する。尚、この文献は、参照によりその全体を本明細書に組み込むものとする。
【０００２】
本発明は、心臓疾患若しくは心機能不全、例えば、うっ血性心不全、慢性心不全及び急性心臓病（心筋梗塞など）を有する被験者を治療するためのＧＤＦ１５調節剤を用いる方法、及びそれを含有する組成物に関する。
【背景技術】
【０００３】
うっ血性心不全とも呼ばれる心不全は、一般的で、しかも費用のかかる疾病であり、高度に衰弱性で、死に至る可能性がある。これは、年齢が６５歳を超える人が入院する主要な原因となっている。心不全は、急激な発症（「急性心不全」と呼ばれる）によるものか、又は長期にわたって発生し得る（「慢性心不全」と呼ばれる）。
【０００４】
心不全は、いくつかの他の心臓病、障害及び機能不全を伴う場合があり、そのようなものとして、以下のものが挙げられる：心停止若しくは心拍停止；心筋梗塞（心臓発作とも呼ばれる）、これは、心筋障害を指し、通常、不十分な血液供給、例えば、冠動脈閉塞に起因する；並びに心筋への障害を指す心筋症、これは、遺伝性若しくは後天性のいずれの場合もあり、拡張型、肥大型若しくは拘束型であり得る。拡張型心筋症の原因は、主として遺伝性であり、通常、左室において、筋肉の伸張及び菲薄化を伴う。これが起こると、心筋は、身体全体に血液を効率的に送り出すことができなくなり、肺、足首、腹部及びその他の臓器に体液貯留を招くと共に、息切れの感覚を引き起こし得る。肥大型心筋症は、心筋の肥厚を伴い、これは、細胞構造の錯綜配列、心筋の硬化及び高血圧を引き起こし得る。拘束型心筋症は、心室壁の硬化を伴い、そのため、心室は、血液の正常な充填に抵抗する。拘束型心筋症は、過剰量の鉄が体内に沈着して、心臓を障害しうるヘモクロマトーシス；異常な炎症によって、細胞の塊が、心臓を含む身体の臓器内に形成されるサルコイドーシス；並びに異常なレベルのタンパク質（アミリンなど）が、心臓を含む臓器内に沈着するアミロイドーシスのようないくつかの原因により起こり得る。
【０００５】
心不全に関連すると考えられるその他の心臓関連の病状として、心臓肥大、虚血性／再灌流傷害、呼吸困難、特発性肺動脈性高血圧、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、及び心血管機能障害が挙げられる。
【０００６】
増殖分化因子１５（ＧＤＦ１５）は、タンパク質のトランスフォーミング増殖因子−β（ＴＧＦ−β）スーパーファミリーのメンバーであり、細胞増殖及び分化の調節因子の役割を果たす多機能タンパク質の大きな群を含む。このファミリーの重要なメンバーとしては、ＴＧＦ−β１〜５、アクチビン、骨、軟骨及びその他の組織タイプの調節因子の役割を果たす骨形成タンパク質（ＢＭＰ）、並びに細胞調節に関与する他のタンパク質、例えば、グリア細胞株由来の神経栄養因子（ＧＤＮＦ）、及びミオスタチン（ＧＤＦ−８としても知られる）が挙げられる。ＧＤＦ１５は、初め、前立腺癌及び胎盤などの組織から単離されたが、別名：マクロファージ阻害サイトカイン１（若しくはＭＩＣ１）、ＮＳＡＩＤ活性化遺伝子１タンパク質（若しくはＮＡＧ１）、ＮＳＡＩＤ調節遺伝子１タンパク質（若しくはＮＲＧ−１）、胎盤ＴＧＦ−β（若しくはＰＴＧＦＢ）、胎盤骨形成タンパク質（若しくはＰＬＡＢ）、及び前立腺分化因子（若しくはＰＤＦ）によって知られている。
【０００７】
心臓傷害を有する被験者におけるＧＤＦ１５の活性の報告は、矛盾しており、結論に到達していない。Ｋｅｍｐｆ  ｅｔ  ａｌ．は、内在性ＧＤＦ１５が、虚血性／再灌流傷害から心臓を保護すると報告し（非特許文献１）；後に、ＧＤＦ１５は、心筋梗塞及び心不全時に心臓保護サイトカインとして機能すると報告した（非特許文献２）。また、非特許文献３；非特許文献４も参照されたい。Ｂｒｅｉｔ及びＢｒｏｗｎ、特許文献１は、ＧＤＦ１５の活性若しくは発現を阻害するか、又は増大するかのいずれかによる心血管疾患の治療を前提とするものである。さらに近年の研究は、ＧＤＦ１５レベルと心不全との間に原因となる関係が存在するか否かについてさらなる研究が必要であるとしている。非特許文献５；非特許文献６を参照されたい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】米国特許第７，９１９，０８４号明細書
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｋｅｍｐｆ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，ＣＩＲＣＵＬＡＴＩＯＮ  ＲＥＳＥＡＲＣＨ，９８：３５１−３６０
【非特許文献２】Ｋｅｍｐｆ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，ＣＬＩＮＩＣＡＬ  ＣＨＥＭＩＳＴＲＹ，５３：２８４−２９１
【非特許文献３】Ｔｏｂｉｎ及びＣｅｌｅｓｔｅ，２００６，ＤＲＵＧ  ＤＩＳＣＯＶＥＲＹ  ＴＯＤＡＹ，１１：４０５−４１１
【非特許文献４】Ｌａｊｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１０，ＤＩＡＢＥＴＥＳ  ＣＡＲＥ，３３：１５６７−１５７２
【非特許文献５】Ｂｏｎｉｃａ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，ＡＲＴＥＲＩＯＳＣＬＥＲＯＳＩＳ，ＴＨＲＯＭＢＯＳＩＳ  ＡＮＤ  ＶＡＳＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ，３１：２０３−２１０
【非特許文献６】Ｗａｌｌｅｎｔｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＥＵＲ．ＨＥＡＲＴ  Ｊ．，３４（ｓｕｐｐｌ．）：Ｐ４０４８
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
これまで達成された進歩にもかかわらず、心臓病及び障害を検出、予防、及び治療する優れた方法が依然として求められている。
【課題を解決するための手段】
【００１１】
本発明者らは、うっ血性心不全などの心臓病及び障害を有し、現在利用可能な方法で有効又は最適に治療されていない被験者が、意外なことに、ＧＤＦ１５の活性を選択的に低減又は阻害する組成物で有効に治療され得ることを見出した。これは、被験者のＧＤＦ１５の発現、レベル若しくは量、又は生物学的活性を低減することによって実施され得るが、これらは、例えば、被験者の血清又は血漿中で測定することができる。
【００１２】
本発明は、心血管疾患、うっ血性若しくは慢性心不全、心筋肥大若しくは縮小、急性冠症候群、狭心症、又はその他の心臓障害若しくは病状を有する被験者、あるいは、心筋梗塞などの心臓事象を患ったことのある被験者、あるいは、経皮的冠動脈形成術、冠動脈バイパス術、冠動脈血管形成術又はステント留置術などの心臓介入治療を受けたことがあるか、又はその必要があると診断された被験者を治療するための方法及び組成物を提供する。
【００１３】
本発明は、例えば、ＧＤＦ１５が内在性結合パートナー（また、同族受容体若しくは結合パートナーとも呼ばれる）に結合する能力を低減することにより、例えば、ＧＤＦ１５若しくは内在性結合パートナーに競合的に結合することにより、又はＧＤＦ１５の活性を中和することにより、ＧＤＦ１５の活性を低減若しくは阻害する組成物を含む。いくつかの実施形態では、こうした組成物は、ＧＤＦ１５若しくは内在性結合パートナーに結合する抗体、並びにそのような抗体を含むペプチド又は融合分子を含み得る。いくつかの実施形態では、組成物は、例えば、ＧＤＦ１５又は内在性結合パートナーに競合的に結合して、例えば、ＧＤＦ１５がその内在性結合パートナーに結合する能力を低減若しくは阻害するか、あるいはそうでなければ、ＧＤＦ１５の活性を中和することにより、ＧＤＦ１５の活性を低減若しくは阻害するペプチド又は小分子を含んでもよい。
【００１４】
いくつかの実施形態では、本発明は、１つ又は複数の心臓関連特徴を呈示する被験者を治療する方法を含み、こうした心臓関連特徴は、心血管疾患若しくは機能障害、うっ血性若しくは慢性心不全、心筋症、心臓肥大、虚血性／再灌流傷害、特発性肺動脈高血圧、ＳＴ上昇型心筋梗塞（ＳＴＥＭＩ）、又はその他の心臓障害若しくは病状の症状であり得る。
【００１５】
こうした心臓関連特徴として、以下のものが挙げられる：
（１）被験者が、低い、若しくは正常に満たない最大酸素摂取量（ＶＯ２）を呈示する；
（２）被験者が、高い、若しくは正常レベルを超える脳性ナトリウム利尿タンパク質（ＢＮＰ）又はＮ末端断片（ＮＴ−ＰｒｏＢＮＰ）を有する；
（３）被験者が、高い、若しくは正常レベルを超えるトロポニンを有する；
（４）被験者が、高い、若しくは正常レベルを超えるＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）を有する；
（５）被験者が、心電図検査に異常を有するか、又は生理的心臓活性異常、例えば、心房若しくは心室駆出量減少を有すると診断されたことがある；
（６）被験者が、胸痛若しくは不快感（狭心症）、息切れ、及び活動若しくは運動に伴う疲労の徴候若しくは症状を呈示する；又は被験者が、６分間歩行テスト（６ＭＷＴ）若しくは漸増シャトルウォーキングテスト（ＳＷＴ）などの体力テストにおいて体力の低下を呈示する；
（７）被験者が、低い正常レベルの、若しくは正常レベルに満たない心臓由来脂肪酸結合タンパク質（ｈＦＡＢＰ）を有する；
（８）被験者が、心臓肥大又は心臓縮小を呈示する；
（９）被験者が、心筋梗塞、又は血栓塞栓性脳卒中を経験したことがあるか、又は経験するリスクがあると診断されている；
（１０）被験者が、経皮的冠動脈形成術、冠動脈バイパス術、冠動脈血管形成術、ステント留置術、心臓移植、又は除細動器留置などの冠動脈介入治療を受けたことがあるか、又はその必要があると診断されている。
【００１６】
前述の心臓関連特徴はまた、本発明のＧＤＦ１５調節剤による治療に対する被験者の応答の経過をモニターするために、また、臨床的に適切と考えられる場合、投与計画を変更するために使用することもできる。いくつかの実施形態では、うっ血性若しくは慢性心不全（ＣＨＦ）などの心血管疾患又は心臓障害を有する被験者は、以前既知の治療を受けたことがあるが、前述した特徴の少なくとも１つを依然として呈示している。そのような症例において、本発明は、前述した心臓関連特徴の少なくとも１つの発生及び／又は重症度を回避若しくは軽減するための方法及び組成物を提供し、さらに本発明は、前述した心臓介入治療の１つの必要を回避又は軽減し得る。
【００１７】
一態様では、本発明は、治療を必要とする被験者の心臓機能を改善又は増大する方法を提供し、この方法は、被験者の心臓機能を改善又は増大するために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む。心臓機能は、以下に論じる生化学的及び生理学的パラメータのいずれかを含み得る。
【００１８】
別の態様では、本発明は、心臓障害又は機能不全を有する被験者を治療する方法を提供し、この方法は、被験者の心臓障害又は機能不全の症状を改善するために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む。症状は、以下に論じる生化学的及び生理学的パラメータのいずれかを含み得る。
【００１９】
別の態様では、本発明は、うっ血性心不全の１つ又は複数の症状を呈示する被験者の心臓縮小を軽減又は逆転する方法を提供し、この方法は、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含み、ここで、組成物は、被験者の心臓縮小の少なくとも１つの症状を改善する。症状は、以下に論じる生化学的及び生理学的パラメータのいずれかを含み得る。
【００２０】
別の態様では、本発明は、治療を必要とする被験者のうっ血性心不全を治療又は予防する方法を提供し、この方法は、被験者のＣＨＦを治療又は予防するために、被験者におけるＧＤＦ１５活性を低減若しくは阻害する組成物を有効量で投与するステップを含む。症状は、以下に論じる生化学的及び生理学的パラメータのいずれかを含み得る。
【００２１】
別の態様では、本発明は、うっ血性心不全の１つ又は複数の症状を呈示する被験者の心臓縮小を軽減又は逆転する方法を提供し、この方法は、ＧＤＦ１５活性を調節し、これによって、被験者の心臓縮小を軽減する組成物を有効量で投与するステップを含む。症状は、以下に論じる生化学的及び生理学的パラメータのいずれかを含み得る。
【００２２】
いくつかの実施形態では、被験者は、体液、例えば、血清又は血漿中に高いＧＤＦ１５活性を有する。いくつかの実施形態では、高いＧＤＦ１５活性とは、高いＧＤＦ１５レベルを意味する。いくつかの他の実施形態では、被験者は、１４ｍＬ／ｋｇ／分未満の最大ＶＯ２、４０％未満のＬＶＥＦ、１００ｐｇ／ｍｌ超のＢＮＰレベル、１．５ｎｇ／ｍＬ超の心臓トロポニンＩ（ｃＴｎＩ）レベル、又はこれらのいずれかの組み合わせを呈示する。いくつかの実施形態では、被験者は、既にうっ血性心不全を有すると診断されている。
【００２３】
いくつかの実施形態では、本発明のＧＤＦ１５調節剤は、被験者のＧＤＦ１５活性を低減又は阻害することができる。一部の実施形態では、ＧＤＦ１５調節剤は、ＧＤＦ１５の活性、発現又はその同族受容体との結合を阻害する。一部の実施形態では、ＧＤＦ１５調節剤はＧＤＦ１５を結合する。ＧＤＦ１５調節剤は、抗ＧＤＦ１５抗体であってよく、これは、ヒト化又はヒト抗体のいずれであってもよい。
【００２４】
いくつかの実施形態では、被験者は、正常レベルを超える、心臓由来トロポニンＩ、心臓由来トロポニンＴ、脳性ナトリウム利尿タンパク質（ＢＮＰ）、ＢＮＰ由来のＮ末端ペプチド（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）、及び心臓由来脂肪酸結合タンパク質（ｃＦＡＢＰ）からなる群から選択されるバイオマーカを呈示する。
【００２５】
本発明の方法は、ＧＤＦ１５媒介経路を阻害する組成物を有効量で投与し、これによって、以下に挙げる特徴の１つ又は複数を治療するステップを含み得る：心臓肥大又は心臓縮小；胸痛若しくは不快感（狭心症）、息切れ、及び活動若しくは運動に伴う疲労の徴候又は症状；最大ＶＯ２；高い、若しくは正常レベルを超えるトロポニン；高い、若しくは正常レベルを超える脳性ナトリウム利尿タンパク質（ＢＮＰ）若しくはそのＮ末端由来断片（ＮＴ−ＰｒｏＢＮＰ）；低い正常レベルの、若しくは正常レベルを下回る心臓由来脂肪酸結合タンパク質（ｃＦＡＢＰ）；心電図検査の異常又は心臓の生理機能若しくは活性異常、例えば、心房若しくは心室駆出量減少；狭心症、心筋梗塞、又は血栓塞栓性卒中を経験したことがあるか、そのリスクがあると診断されている；あるいは、経皮的冠動脈形成術、冠動脈バイパス術、冠動脈血管形成術、ステント留置術、心臓移植、又は除細動器留置などの冠動脈介入治療を受けたことがあるか、又はその必要があると診断されている。
【００２６】
本明細書に記載するＧＤＦ１５調節剤の使用は、被験者における以下の特徴の少なくとも１つを改善又は軽減するために使用することができ、ここで、被験者は、ＣＨＦ、心筋症、又は心不全を発症していると診断されているか、又はそれを発症するリスクがあると考えられる：
（１）被験者が、低い、若しくは正常に満たない最大酸素摂取量（ＶＯ２）を呈示する；
（２）被験者が、高い、若しくは正常レベルを超える脳性ナトリウム利尿タンパク質（ＢＮＰ）又はＮ末端断片（ＮＴ−ＰｒｏＢＮＰ）を有する；
（３）被験者が、高い、若しくは正常レベルを超えるトロポニンを有する；
（４）被験者が、高い、若しくは正常レベルを超えるＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）を有する；
（５）被験者が、心電図検査に異常を有するか、又は心臓の生理機能若しくは活性異常、例えば、心房若しくは心室駆出量減少を有すると診断されたことがある；
（６）被験者が、胸痛若しくは不快感（狭心症）、息切れ、及び活動若しくは運動に伴う疲労の徴候若しくは症状を呈示するか、又は被験者が、６分間歩行テスト（６ＭＷＴ）若しくは漸増シャトルウォーキングテスト（ＳＷＴ）などの体力テストにおいて体力の低下を呈示する；
（７）被験者が、低い正常レベルの、若しくは正常レベルに満たない心臓由来脂肪酸結合タンパク質（ｈＦＡＢＰ）を有する；
（８）被験者が、心臓肥大又は心臓縮小を呈示する；
（９）被験者が、心筋梗塞、又は血栓塞栓性脳卒中を経験したことがあるか、又は経験するリスクがあると診断されている；
（１０）被験者が、経皮的冠動脈形成術、冠動脈バイパス術、冠動脈血管形成術、ステント留置術、心臓移植、又は除細動器留置などの冠動脈介入治療を受けたことがあるか、又はその必要があると診断されている。
【００２７】
前述の特徴はまた、本発明のＧＤＦ１５調節剤での治療に対する被験者の応答を確認するために、また、臨床的に適切と考えられる場合、投与計画を変更するために、モニターすることができる。いくつかの実施形態では、ＣＨＦなどの心血管疾患又は心臓障害を有する被験者は、以前既知の治療を受けたことがあるが、前述した特徴の少なくとも１つを依然として呈示している。そのような症例において、本発明は、前述した心臓関連特徴の少なくとも１つの発生及び／又は重症度を回避若しくは軽減するための方法及び組成物を提供し、さらに本発明は、前述した冠動脈介入治療の１つの必要を回避するか、軽減することができる。特定の実施形態では、被験者は、被験者がＣＨＦを有するか、又はそれに罹患していると考えられ、従って、被験者が本発明の治療から利益を受け得るような以下の特徴の１つ又は複数を呈示する。本願全体を通して使用されるとき、「ＣＨＦを有すると考えられる」又は「ＣＨＦに罹患していると考えられる」という用語は、本願の開示内容に従って、当業者が、本発明のＧＤＦ１５阻害剤の投与から被験者が利益を受けるであろうと予想し得ることを意味する。被験者はまた、資格を持つ臨床専門家が、被験者に関する情報を調べた後、被験者が、現時点でＣＨＦに罹患していると専門的な判断又は診断をした場合に、「ＣＨＦを有すると考えられる」か、又は「ＣＨＦに罹患していると考えられる」。「ＣＨＦを有すると考えられる」又は「ＣＨＦに罹患していると考えられる」という用語は、本願の開示内容に従って、当業者が、本発明のＧＤＦ１５阻害剤の予防的又は治療的投与から利益を受けるであろうと予想し得ることを意味する。被験者はまた、資格を持つ臨床専門家が、被験者に関する情報を調べた後、被験者が、現時点で予防的又は治療的介入の根拠となるのに十分なＣＨＦを発症するリスクがあると専門的な判断又は診断をした場合に、「ＣＨＦを発症するリスクがあると考えられる」。
【００２８】
即ち、本発明の要旨は、
［１］治療を必要とする被験者の心臓機能を高める方法であって、前記被験者の心臓機能を高めるために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む方法、
［２］前記被験者が、体液中に高いＧＤＦ１５活性を有する、［１］に記載の方法、
［３］心臓障害又は機能不全を有する被験者を治療する方法であって、前記心臓障害又は機能不全の症状を改善するために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む方法、
［４］前記被験者が、体液中に高いＧＤＦ１５活性を有する、［３］に記載の方法、
［５］うっ血性心不全の１つ又は複数の症状を呈示する被験者における心臓縮小を軽減又は逆転する方法であって、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含み、ここで、前記組成物が、前記被験者における心臓縮小の少なくとも１つの症状を改善する方法、
［６］前記被験者が、体液中に高いＧＤＦ１５活性を有する、［５］に記載の方法、
［７］治療を必要とする被験者のうっ血性心不全（ＣＨＦ）を治療又は予防する方法であって、前記被験者のＣＨＦを治療又は予防するために、前記被験者のＧＤＦ１５活性を低減又は阻害する組成物を有効量で投与するステップを含む方法、
［８］前記被験者が、体液中に高いＧＤＦ１５活性を有する、［７］に記載の方法、
［９］うっ血性心不全の１つ又は複数の特徴を呈示する被験者の心臓縮小を軽減する方法であって、前記被験者の心臓縮小を軽減するために、ＧＤＦ１５の活性を調節する組成物を有効量で投与するステップを含む方法、
［１０］前記被験者が、体液中に高いＧＤＦ１５活性を有する、［９］に記載の方法、
［１１］前記被験者が、１４ｍＬ／ｋｇ／分未満の最大ＶＯ２を呈示する、［１］〜［１０］のいずれか１項に記載の方法、
［１２］前記被験者が、４０％未満のＬＶＥＦを呈示する、［１］〜［１１］のいずれか１項に記載の方法、
［１３］前記被験者が、１００ｐｇ／ｍｌを超えるＢＮＰレベルを呈示する、［１］〜［１２］のいずれか１項に記載の方法、
［１４］前記被験者が、１．５ｎｇ／ｍＬを超える血清心臓トロポニンＩ（ｃＴｎＩ）レベルを呈示する、［１］〜［１３］のいずれか１項に記載の方法、
［１５］前記被験者が、うっ血性心不全を有すると診断されている、［１］〜［１４］のいずれか１項に記載の方法、
［１６］前記ＧＤＦ１５調節剤が、被験者におけるＧＤＦ１５活性を低減又は阻害する、［１］〜［１５］のいずれか１項に記載の方法、
［１７］前記ＧＤＦ１５調節剤が、ＧＤＦ１５に結合する、［１６］に記載の方法、
［１８］前記ＧＤＦ１５調節剤が、抗ＧＤＦ１５抗体である、［１７］に記載の方法、
［１９］前記抗体が、ヒト化又はヒト抗体である、［１８］に記載の方法、
［２０］前記被験者が、正常レベルを超える、心臓由来トロポニンＩ、心臓由来トロポニンＴ、脳性ナトリウム利尿タンパク質（ＢＮＰ）、ＢＮＰ由来のＮ末端ペプチド（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）、及び心臓由来脂肪酸結合タンパク質（ｃＦＡＢＰ）からなる群から選択されるマーカを呈示する、［１］〜［１９］のいずれか１項に記載の方法、
［２１］前記体液が、血漿又は血清である、［２］、［４］、［６］、［８］、又は［１０］のいずれか１項に記載の方法
に関する。
【発明の効果】
【００２９】
本発明により、ＧＤＦ１５調節剤を用いたうっ血性心不全及びその他の心機能不全の治療が提供され得る。
【図面の簡単な説明】
【００３０】
【図１】うっ血性心不全に罹患していないヒト被験者（「非ＣＨＦ」）；悪液質を伴わないうっ血性心不全の症状を呈示する被験者（「ＣＨＦ」）；及び悪液質を伴ううっ血性心不全の症状を呈示する被験者（「ＣＨＦ  Ｃａ」）におけるＧＤＦ１５レベルを示すグラフである。
【図２】ＧＤＦ１５レベルとうっ血性心不全の重症度の間の相関を示すグラフである。ＮＹＨＡは、ニューヨーク心臓協会（Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ  Ｈｅａｒｔ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ）分類システムを指す（Ｉは最も重症度が低く、ＩＶは最も高い）。
【図３Ａ−３Ｃ】ＧＤＦ１５レベルと、心臓機能のマーカである最大酸素量（ＶＯ２）との間の相関を示すグラフである。最大ＶＯ２レベルは、ＣＨＦを有する２００人の被験者（図３Ａ）においてＧＤＦ１５レベルの増加と共に減少し、これらの被験者は、ＣＨＦの共存症として、悪液質を伴う３３人の被験者（図３Ｂ）と、悪液質を伴わない１６７人の被験者（図３Ｃ）を含む。
【図４】ＧＤＦ１５レベルと、心不全の一般的共存症である貧血の指標のトランスフェリン飽和（ＴＳＡＴ）との間の相関を示すグラフである。添付の表は、トランスフェリンレベル；鉄レベル；ヘモグロビンレベル（「Ｈｂｇ／ｄｌ」）、赤血球レベル及びフェリチンレベルを示す。
【図５Ａ−５Ｃ】ＧＤＦ１５レベルと、ＣＨＦの一般的共存症である腎機能低下の各種マーカとの間の相関を示すグラフである。図５Ａは、ＣＨＦを有する２００人の被験者において、クレアチニンレベルが、ＧＤＦ１５レベルの増加と共に増加することを示し；図５Ｂは、ＣＨＦと悪液質共存症を有する３３人の被験者において、尿素レベルが、ＧＤＦ１５レベルの増加と共に増加することを示し；図５Ｃは、クレアチニンレベルが、悪液質共存症を伴わないＣＨＦを有する１６７人の被験者においてＧＤＦ１５レベルの増加と共に増加することを示す。
【図６Ａ−６Ｄ】ＣＨＦステージＩ〜ＩＩＩ（被験者の数が少ないために、ステージＩＶは含まれない）を有する患者において、ＧＤＦ１５レベルと、ＣＨＦの一般的共存症である腎臓疾患の各種マーカとの間の相関を示すグラフであり、マーカは尿素（図６Ａ）（尿素レベルは、ＧＤＦ１５レベルの増加と共に増加する）；尿酸（図６Ｂ）（尿酸レベルは、ＧＤＦ１５レベルの増加と共に増加する）；クレアチニン（図６Ｃ）（クレアチニンレベルは、ＧＤＦ１５レベルの増加と共に増加する）；及び糸球体濾過量（ＧＦＲ）（図６Ｄ）（ＧＦＲは、ＧＤＦ１５レベルの増加と共に減少する）を含む。
【図７Ａ−７Ｂ】ＨＴ−１０８０繊維肉腫腫瘍異種移植片モデルを担持する免疫不全マウス（ＩＣＲ−ＳＣＩＤ）において、２ｍｇ／ｋｇで投与される抗ＧＤＦ１５抗体０１Ｇ０６（■）の活性を立証する実験からの結果をまとめたグラフである。抗体０１Ｇ０６での処置は、陰性対照（マウスＩｇＧ（●））及びベースライン（１日目）と比較して、体重減少を逆転し（図７Ａ）、臓器重量（肝臓、心臓、脾臓及び腎臓）の増加を誘導すると共に、組織重量（生殖腺及び腓腹筋）の増加を誘導した（図７Ｂ）。鉛直方向の矢印は、抗体を腹腔内注射により試験マウスに投与した日を示す（図７Ａ）。
【図８】ヒト腫瘍異種移植片を担持する悪液質マウス（▲）の体重に対する、ヒトＧＤＦ１５に結合してこれを阻害するモノクローナル抗体（Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７）の全身投与の効果を、ヒトＩｇＧの投与を受けた後の類似マウス（■）又は偽（ｓｈａｍ）マウス（腫瘍なし）（●）と比較して示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００３１】
本発明は、心臓関連の疾患又は障害を有する被験者、例えば、うっ血性若しくは慢性心不全、急性心筋梗塞、心筋肥大、及び心筋縮小を有する被験者を治療するための方法及び組成物を提供する。これらの方法及び組成物は、以下に挙げる１つ又は複数を含む、心筋症又はその他の心不全の症状である少なくとも１つの特徴を呈示する被験者を治療する上で有用である：
（１）被験者が、低い、若しくは正常に満たない最大酸素摂取量（ＶＯ２）を呈示する；
（２）被験者が、高い、若しくは正常レベルを超える脳性ナトリウム利尿タンパク質（ＢＮＰ）又はＮ末端断片（ＮＴ−ＰｒｏＢＮＰ）を有する；
（３）被験者が、高い、若しくは正常レベルを超えるトロポニンを有する；
（４）被験者が、高い、若しくは正常レベルを超えるＣ反応性タンパク質（ＣＲＰ）を有する；
（５）被験者が、心電図検査（ＥＣＧ）に異常を有するか、又は心臓の生理機能若しくは活性異常、例えば、心房若しくは心室駆出量減少を有すると診断されたことがある；
（６）被験者が、胸痛若しくは不快感（狭心症）、息切れ、及び活動若しくは運動に伴う疲労の徴候若しくは症状を呈示するか、又は被験者が、６分間歩行テスト（６ＭＷＴ）若しくは漸増シャトルウォーキングテスト（ＳＷＴ）などの体力テストにおいて体力の低下を呈示する；
（７）被験者が、低い正常レベルの、若しくは正常レベルに満たない心臓由来脂肪酸結合タンパク質（ｈＦＡＢＰ）を有する；
（８）被験者が、心臓肥大又は心臓縮小を呈示する；
（９）被験者が、心筋梗塞、又は血栓塞栓性脳卒中を経験したことがあるか、又は経験するリスクがあると診断されている；
（１０）被験者が、経皮的冠動脈形成術、冠動脈バイパス術、冠動脈血管形成術、ステント留置術、心臓移植、又は除細動器留置などの冠動脈介入治療を受けたことがあるか、又はその必要があると診断されている。
【００３２】
本明細書に記載する方法及び組成物による治療は、前述した特徴若しくは症状の１つ又は複数を改善又は軽減することができる。本明細書で使用されるとき、「治療する」、「治療すること」及び「治療」は、哺乳動物、例えば、ヒトの疾患の治療を意味する。これは、（ａ）疾患を阻害すること、すなわち、その発症を停止すること；並びに（ｂ）疾患を軽減する、すなわち、病態の退行を起こすことを包含する。
【００３３】
Ｉ．心臓機能アッセイ
心臓機能は、心機能の生理学的及び生化学的パラメータ、症状、機能マーカ及びバイオマーカを含む様々な手法を用いて、評価及びモニターすることができる。心機能の生理学的かつ生化学的パラメータとしては、糸球体濾過量（ＧＦＲ）；頸動脈超音波評価；頸動脈ＩＭＴ（内膜中膜複合体厚）及び頸動脈プラーク量；左心室（ＬＶ）形状及び機能；ＬＶ重量係数；拡張末期径及びＬＶ駆出率（心エコー検査）；前腕の内皮依存性及び非依存性血管拡張などの前腕血流量測定値；血流依存性血管拡張反応；並びに上腕動脈超音波検査が挙げられる。評価のための別のパラメータとしては、心エコー検査により測定される心機能不全又は律動異常；胸部Ｘ線により測定される肺うっ血；運動能力の低下；安静時の血行動態異常；心拍出量；全身血管抵抗；左室１回拍出量；大動脈圧；左室圧；等容性収縮及び弛緩時の左室圧の最大変化速度；左室拡張末期圧；心筋酸素摂取量；並びに冠動脈血流予備能が挙げられる。
【００３４】
うっ血性心不全などの心臓障害の症状としては、胸痛、又は狭心症；心雑音又はその他の異常な音；速脈又は不整脈；心電図又は心エコー図検査の異常；並びにストレステスト及び心電図の異常が挙げられる。うっ血性心不全などの心臓障害のバイオマーカとしては、脳性ナトリウム利尿タンパク質（ＢＮＰ）及びＢＮＰプロペプチドのＮ末端断片（ＮＴ−ＰｒｏＢＮＰ）；トロポニン、特に、トロポニンＩ及び心臓トロポニンＩ（ｃＴｎＩ）などの心臓トロポニン（ｃＴｎ）；トロポニンＴ及び心臓トロポニンＴ（ｃＴｎＴ）；トロポニンＣ（ＴｎＣ）；心臓由来脂肪酸結合タンパク質（ｈＦＡＢＰ）；ノルエピネフリン；動脈ナトリウム利尿ペプチド（ＡＮＰ）；ガレクチン−３；Ｃ−反応性タンパク質；腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）；インターロイキン−１；並びにインターロイキン−６が挙げられる。
【００３５】
以上各々挙げた以外に、被験者は、心臓障害又は機能不全のない被験者に存在するベースライン活性レベルに対して高レベルのＧＤＦ１５活性も呈示し得る。
【００３６】
高レベルのＧＤＦ１５活性は、被験者からのサンプル中のＧＤＦ１５のレベルを測定することによって決定することができる。「高レベル」のＧＤＦ１５とみなされる量は、目的とする特定の組織又は体液、並びに使用する特定のアッセイに応じて変動し得る。一般に、「高レベル」のＧＤＦ１５は、被験者、例えば、心臓疾患又は機能不全、例えば、ＣＨＦのない被験者の対照分布と比較して決定することができ、例えば、７５パーセンタイル（すなわち、上位四分位点又は２５％）；９０パーセンタイル（すなわち、上位１０％）；又は９５パーセンタイル（すなわち、上位５％）の事前に指定したカットオフで決定してもよい。「高レベル」のＧＤＦ１５はまた、平均を超える事前に指定されたＧＤＦ１５レベル、例えば、平均を超える１つの標準偏差、又は心臓疾患又は機能不全、例えば、ＣＨＦのない対照被験者の群の平均ＧＤＦ１５レベルを超える２つの標準偏差で決定してもよい。例えば、Ｂｒｏｗｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，ＴＨＥ  ＬＡＮＣＥＴ  ３５９：２１５９−２１６３；Ｋｅｍｐｆ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，ＮＡＴＵＲＥ  ＭＥＤＩＣＩＮＥ，１７：５８１−５８８を参照されたい。
【００３７】
好ましい身体サンプルは、体液、例えば、血漿のサンプルであるが、羊水、胎盤抽出物、全血、血清、バフィーコート、尿、脳脊髄液、精液、滑液、又は組織生検も好適であり得る。体液（例えば、血漿）中＞６００ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞８５０ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞１０００ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞１２００ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞１５００ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞１７００ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞１９００ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞２０００ｐｇ／ｍｌ、任意選択で＞２５００ｐｇ／ｍｌ、及び任意選択で＞３０００ｐｇ／ｍｌのＧＤＦ１５濃度が、高レベルのＧＤＦ１５を代表し得る。米国特許第７，９１９，０８４号明細書及びＫｅｍｐｆ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，Ｊ．ＡＭ．ＣＯＬＬ．ＣＡＲＤＩＯＬ．５０：１０５４−１０６０を参照されたい。
【００３８】
身体サンプル中に存在するＧＤＦ１５の量は、例えば、抗ＧＤＦ１５抗体を用いた免疫アッセイ（例：体液を用いた）又は免疫組織化学（例：組織生検のサンプル切片を用いた）により容易に決定することができる。Ｔｓａｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：ｅ５５１７４を参照されたい。
【００３９】
被験者は、被験者の酸素摂取量の最大測定値（最大ＶＯ２）が、正常値、例えば、１４ｍＬ／ｋｇ／分を下回る場合、うっ血性心不全に罹患していると考えられる。（Ｗｉｌｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，Ｊ．ＡＭ．ＣＯＬＬ．ＣＡＲＤＩＯＬ．，２６：４２９−４３５；Ｌａｎｉｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，Ｊ．ＥＸＥＲＣＩＳＥ  ＳＣＩＥＮＣＥ  ＆  ＦＩＴＮＥＳＳ，１０：２３−２７を参照）。しかし、最大ＶＯ２の「正常範囲」が、具体的な実験室及び検査に応じて変動し得ることは理解されよう。
【００４０】
被験者は、被験者の左心室駆出率（ＬＶＥＦ）が、正常値、例えば、４０％を下回る場合、うっ血性心不全に罹患していると考えられる。ＬＶＥＦが４０〜５５％の被験者は、正常を下回るＬＶＥＦを有すると考えられ、ＣＨＦのリスクがあると考えられる。ＬＶＥＦは、例えば、経胸壁心エコー検査を用いて試験することができる。（Ｃａｔｔａｄｏｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１１，Ｊ．ＣＡＲＤＩＡＣ  ＦＡＩＬＵＲＥ，１７：９１６−９２２を参照）。しかし、ＬＶＥＦの「正常範囲」が、具体的な実験室及び検査に応じて変動し得ることは理解されよう。
【００４１】
被験者は、被験者の血清ＢＮＰレベルが、１００ｐｇ／ｍｌを超える場合（軽度のＣＨＦ）；又は約５００ｐｇ／ｍｌを超える／下回る場合（重度のＣＨＦ）、うっ血性心不全に罹患していると考えられる。被験者は、被験者の血清ＢＮＰレベルが、高い正常値であるか、又は正常範囲を超える、すなわち５０ｐｇ／ｍｌ以上のレベルである場合、ＣＨＦのリスクがあると考えられる。正常ＢＮＰ範囲は、５０ｐｇ／ｍｌ以下である。「高い正常」濃度は、正常範囲の上位四分位点（２５％）；好ましくは、正常範囲の上位１０番目（１０％）であると考えられる。例えば、Ｓｔｒｕｎｋ  ｅｔ  ａｌ．，２００６，ＡＭ．Ｊ．ＭＥＤ．，１１９：６９ｅ１−１１；Ｃｌｅｒｉｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，２０１２，ＣＬＩＮ．ＣＨＩＭ．ＡＣＴＡ，４１４：１１２−１１９を参照されたい。しかし、ＢＮＰの「正常範囲」が、具体的な実験室及び検査に応じて変動し得ることは理解されよう。
【００４２】
被験者は、被験者の血清心臓トロポニンＩ（ｃＴｎＩ）レベルが、１．５ｎｇ／ｍＬを超える（軽度のＣＨＦ）か、又は３．１ｎｇ／ｍＬを超える（重度のＣＨＦ）場合、うっ血性心不全に罹患していると考えられる。被験者は、被験者の血清トロポニンレベルが、高い正常値であるか、又は正常範囲を超える、すなわち、１．５ｎｇ／ｍｌ以上のレベルである場合、ＣＨＦのリスクがあると考えられる。「高い正常」濃度は、正常範囲の上位四分位点（２５％）；好ましくは、正常範囲の上位１０番目（１０％）であると考えられる。例えば、Ｇａｌｖａｎｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９５，ＣＩＲＣＵＬＡＴＩＯＮ，９５：２０５３−２０５９を参照されたい。しかし、トロポニンの「正常範囲」が、具体的な実験室及び検査に応じて変動し得ることは理解されよう。さらに、当業者であれば、トロポニンの定量に基づいて、慢性又はうっ血性心不全の診断のために他の検査が利用可能であることは認識されよう、こうした検査は、ｃＴｎＩ、全ＴｎＩ、全心臓トロポニン、高感受性ＴｎＴ（ｈｓＴｎＴ）を含むトロポニンＴ（ＴｎＴ）、トロポニンＣ及び／又はその他のトロポニンを定量する他の検査を包含する。Ｈｅｒｉｎｇｌａｋｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，Ｊ．ＡＭ．ＣＯＬＬ．ＣＡＲＤＩＯＬ．６１：６７２−６８を参照されたい。
【００４３】
特定の実施形態において、被験者は、運動又は運動能力のテストにおける被験者の成績が、例えば、６マイル歩行テスト（６ＭＷＴ）又はシャトルウォーキングテスト（ＳＷＴ）において、最大ＶＯ２の低下を示す場合、うっ血性心不全に罹患していると考えられる。Ｐｕｌｚ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，ＣＡＮＡＤＩＡＮ  Ｊ．ＣＡＲＤＩＯＬＯＧＹ，２４：１３１−１３５；Ｇｒｅｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，Ｊ．ＳＣＩＥＮＣＥ  ＡＮＤ  ＭＥＤＩＣＩＮＥ  ＩＮ  ＳＰＯＲＴＳ  ４：２９２−３００を参照されたい。例えば、６ＭＷＴにおいて約５００ｍ以下の距離を歩行するか、又は６ＭＷＴで約１６．５ｍｌ／ｋｇ以下の最大ＶＯ２を呈示する被験者は、ＣＨＦに罹患していると考えられる。Ｆａｇｇｉａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，ＡＭＥＲＩＣＡＮ  ＨＥＡＲＴ  ＪＯＵＲＮＡＬ，１３４：２０３−２０６を参照されたい。ＳＷＴにおいて約４５０ｍ以下の距離を歩行するか、又はＳＷＴで約１４ｍｌ／ｋｇ以下の最大ＶＯ２を呈示する被験者は、ＣＨＦに罹患していると考えられる。Ｍｏｒａｌｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｈｅａｒｔ  Ｊｏｕｒｎａｌ，１３８：２９１−２９８を参照されたい。
【００４４】
典型的に、被験者は、基礎疾患に起因する病的心臓肥大、又は心臓重量の増加を経験する場合、うっ血性心不全に罹患していると考えられる。病的心臓肥大は、心筋組織の機能性の低下に応答して、心筋が肥大することから、「代償性心臓肥大」と呼ばれることが多い。病的又は代償性心臓肥大は、長期にわたる運動又は運動計画に応答して、心筋が肥大する生理的心臓肥大、又は「スポーツ心臓」とは異なる。心臓肥大は、公知の技術及び指数を用いて診断することができる。例えば、左室肥大（ＬＶＨ）は、心エコー検査を用いて診断することができる。左室心筋は、通常、拡張末期に約０．６〜１．１ｃｍの厚さである。心筋が、１．１ｃｍ超の厚さである場合、ＬＶＨの診断をすることができる。心筋肥大は、拡張型心筋症（ＤＣＭ）からも起こり得るが、この場合、心筋の一部が、はっきりした理由もなく拡張し得る。ＤＣＭは、胸部Ｘ線、心電図又は心エコー図の検査により診断することもできる。（ｍｙｃｌｅｖｅｌａｎｄｃｌｉｎｉｃ．ｏｒｇ／ｈｅａｒｔ／ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ／ｈｃｍ／ｄｅｆａｕｌｔ．ａｓｐｘ．を参照されたい）
【００４５】
同様に、被験者は、病的心臓縮小、又は心臓重量の有意な減少を経験するか、又はそれらを有すると診断された場合、うっ血性心不全に罹患していると考えられる。心筋縮小は、多くの場合、左室重量（ＬＶＭ）の減少に起因する。臨床的に、ＬＶＭは、神経性食欲不振の患者に観察されることが多く、心エコー図により診断することができる。Ｒｏｍａｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，ＡＭ．Ｊ．ＣＬＩＮ．ＮＵＴ．，７７：３０８−３１３；Ｍｅｃｚｅｋａｌｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＭＡＴＵＲＩＴＡＳ，７５：２１５−２２０を参照されたい。本発明の方法及び組成物は、これらの方法及び条件が、各々の疾患状態の症状を緩和して、正常な心臓構造、心臓生理、及び／又は心臓機能の回復を助けるため、心臓肥大又は心臓縮小の治療に有用となり得ることは理解されよう。
【００４６】
前述したパラメータは、ＧＤＦ１５調節剤による治療前、治療中及び治療後に容易に測定することができる。
【００４７】
一部の実施形態では、被験者の治療は、左室駆出率を少なくとも１％（治療前の左室駆出率と比較して）改善し得る。例えば、被験者の治療は、左室駆出率を少なくとも２％、少なくとも３％、少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％、少なくとも１２％、少なくとも１４％、少なくとも１６％、少なくとも１８％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、又は少なくとも５０％改善し得る。治療は、被験者が、少なくとも３０％、少なくとも３１％、少なくとも３２％、少なくとも３３％、少なくとも３４％、少なくとも３５％、少なくとも３６％、少なくとも３７％、少なくとも３８％、少なくとも３９％、少なくとも４０％、少なくとも４１％、少なくとも４２％、少なくとも４３％、少なくとも４４％、少なくとも４５％、少なくとも４６％、少なくとも４７％、少なくとも４８％、少なくとも４９％、又は少なくとも５０％の左室駆出率を達成するまで継続してよい。治療は、少なくとも５分、少なくとも１０分、少なくとも２０分、少なくとも３０分、少なくとも４５分、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも３時間、少なくとも４時間、少なくとも５時間、少なくとも６時間、少なくとも１２時間、少なくとも１日、少なくとも２日、少なくとも３日、少なくとも４日、少なくとも５日、少なくとも６日、少なくとも７日、少なくとも１０日、少なくとも１４日、少なくとも２１日、又は少なくとも２８日にわたって左室駆出率に残余の改善をもたらし得る。
【００４８】
いくつかの実施形態では、被験者の治療は、心拍出量を少なくとも１％（治療前の心拍出量と比較して）改善し得る。例えば、被験者の治療は、心拍出量を少なくとも２％、少なくとも３％、少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％、少なくとも１２％、少なくとも１４％、少なくとも１６％、少なくとも１８％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、又は少なくとも５０％改善し得る。治療は、被験者が、少なくとも２．５Ｌ／分、少なくとも３．０Ｌ／分、少なくとも３．５Ｌ／分、少なくとも４．０Ｌ／分、少なくとも４．５Ｌ／分、少なくとも５．０Ｌ／分、又は少なくとも５．２５Ｌ／分を達成するまで、継続してよい。治療は、少なくとも５分、少なくとも１０分、少なくとも２０分、少なくとも３０分、少なくとも４５分、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも３時間、少なくとも４時間、少なくとも５時間、少なくとも６時間、少なくとも１２時間、少なくとも１日、少なくとも２日、少なくとも３日、少なくとも４日、少なくとも５日、少なくとも６日、少なくとも７日、少なくとも１０日、少なくとも１４日、少なくとも２１日、又は少なくとも２８日にわたって心拍出量に残余の改善をもたらし得る。
【００４９】
一部の実施形態では、被験者の治療は、左室１回拍出量を少なくとも１％（治療前の左室１回拍出量と比較して）改善し得る。例えば、被験者の治療は、左室１回拍出量を少なくとも２％、少なくとも３％、少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％、少なくとも１２％、少なくとも１４％、少なくとも１６％、少なくとも１８％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、又は少なくとも５０％改善し得る。治療は、被験者が、少なくとも２７ｍｌ、少なくとも３０ｍｌ、少なくとも３５ｍｌ、少なくとも４０ｍｌ、少なくとも４５ｍｌ、少なくとも５０ｍｌ、少なくとも５５ｍｌ、少なくとも６０ｍｌ、少なくとも６５ｍｌ、又は少なくとも７０ｍｌの左室１回拍出量を達成するまで継続してよい。治療は、少なくとも５分、少なくとも１０分、少なくとも２０分、少なくとも３０分、少なくとも４５分、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも３時間、少なくとも４時間、少なくとも５時間、少なくとも６時間、少なくとも１２時間、少なくとも１日、少なくとも２日、少なくとも３日、少なくとも４日、少なくとも５日、少なくとも６日、少なくとも７日、少なくとも１０日、少なくとも１４日、少なくとも２１日、又は少なくとも２８日にわたって左室１回拍出量に残余の改善をもたらし得る。
【００５０】
いくつかの実施形態では、被験者の治療は、全身血管抵抗を少なくとも１％（治療前の全身血管抵抗と比較して）低減し得る。例えば、被験者の治療は、全身血管抵抗を少なくとも２％、少なくとも３％、少なくとも４％、少なくとも５％、少なくとも６％、少なくとも７％、少なくとも８％、少なくとも９％、少なくとも１０％、少なくとも１２％、少なくとも１４％、少なくとも１６％、少なくとも１８％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、又は少なくとも５０％低減し得る。治療は、被験者が、３５００ｄｙｎ・ｓ／ｃｍ５以下、３０００ｄｙｎ・ｓ／ｃｍ５以下、２５００ｄｙｎ・ｓ／ｃｍ５以下、２０００ｄｙｎ・ｓ／ｃｍ５以下、又は１６００ｄｙｎ・ｓ／ｃｍ５以下の全身血管抵抗を達成するまで、継続してよい。治療は、少なくとも５分、少なくとも１０分、少なくとも２０分、少なくとも３０分、少なくとも４５分、少なくとも１時間、少なくとも２時間、少なくとも３時間、少なくとも４時間、少なくとも５時間、少なくとも６時間、少なくとも１２時間、少なくとも１日、少なくとも２日、少なくとも３日、少なくとも４日、少なくとも５日、少なくとも６日、少なくとも７日、少なくとも１０日、少なくとも１４日、少なくとも２１日、又は少なくとも２８日にわたって全身血管抵抗に残余の改善をもたらし得る。
【００５１】
ＩＩ．慢性又はうっ血性心不全の共存症
慢性心不全は、共存症の発生により悪化することが多く、共存症は、程度が軽度から重度まで多様であり得る。ＧＤＦ１５の阻害によって、１種又は複数種のＣＨＦの一般的共存症の軽減も促進し得ることが、本発明の利点である。ＣＨＦに関連する一般的共存症の中でも、悪液質、慢性腎臓疾患、貧血、鉄欠乏症及び高血圧が挙げられる。従って、本発明は、それを必要とする被験者の心臓機能を高める方法を包含し、この方法は、１種又は複数種のＣＨＦの共存症を呈示する被験者の心臓機能を高めるために、ＧＤＦ１５阻害剤を含む組成物を有効量で投与するステップを含む。例えば、心臓機能不全又はＣＨＦに罹患している被験者は、悪液質、慢性腎臓疾患、貧血、鉄欠乏症又は高血圧の共存症を呈示し得る。
【００５２】
ＩＩＩ．ＧＤＦ１５調節剤
本明細書で使用されるとき、「ＧＤＦ１５調節剤」は、ＧＤＦ１５活性を低減又は阻害する薬剤を意味すると理解され、これは、ＧＤＦ１５の発現、量、又は生物学的活性若しくは機能の低下の結果起こり得る。本発明の実施に有用なＧＤＦ１５調節剤又は調節物質は、抗ＧＤＦ１５抗体、抗ＧＤＦ１５応答抗体、ＧＤＦ１５がその同族受容体結合パートナーに結合するのを阻止する可溶性ＧＤＦ１５模倣物若しくは類似物を含み得る。別の例示的ＧＤＦ１５調節物質としては、ＧＤＦ１５若しくはＧＤＦ１５受容体の小分子阻害剤、内在性ＧＤＦ１５若しくはＧＤＦ１５受容体の発現を干渉する干渉核酸（例えば、干渉ＲＮＡ又はアンチセンス核酸（例えば、アンチセンスＤＮＡ若しくはＲＮＡ）が挙げられる。
【００５３】
好ましい実施形態では、ＧＤＦ１５調節物質は、抗ＧＤＦ１５抗体を含んでよく、これは、ヒト化又はヒト抗体である。本明細書で使用されるとき、別に記載のない限り、用語「抗体」は、インタクトな抗体（例えば、インタクトなモノクローナル抗体）又は抗体の抗原結合断片を意味し、最適化、改変若しくは化学的に結合された抗体のインタクトな抗体若しくは抗原結合断片（例：完全ヒト抗体、半合成抗体又は完全合成抗体を含むファージディスプレイ抗体）が含まれる。最適化された抗体の例は、親和性成熟抗体である。改変された抗体の例は、Ｆｃ最適化抗体、及び多重特異性抗体（例：二重特異性抗体）である。抗原結合断片の例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、単鎖抗体（例：ｓｃＦｖ）、ミニボディ及びダイアボディが挙げられる。毒素部分に結合した抗体は、化学的に結合した抗体の一例である。
【００５４】
いくつかの実施形態では、抗体は、以下：（ａ）構造ＣＤＲＨ１−ＣＤＲＨ２−ＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と（ｂ）免疫グロブリン軽鎖可変領域を含み、ここで、重鎖可変領域と軽鎖可変領域は一緒に、ＧＤＦ１５若しくはＧＤＦ１５受容体に結合するための単一結合部位を画定する。ＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３配列は、免疫グロブリンフレームワーク（ＦＲ）配列の間に挿入されている。いくつかの他の実施形態では、抗体は、以下：（ａ）構造ＣＤＲＬ１−ＣＤＲＬ２−ＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域と（ｂ）免疫グロブリン重鎖可変領域を含み、ここで、ＩｇＧ軽鎖可変領域とＩｇＧ重鎖可変領域は一緒に、ＧＤＦ１５若しくはＧＤＦ１５受容体に結合するための単一結合部位を画定する。ＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３配列は、免疫グロブリンフレームワークＦＲ配列の間に挿入されている。いくつかの他の実施形態では、抗体は、以下：（ａ）構造ＣＤＲＨ１−ＣＤＲＨ２−ＣＤＲＨ３を含む免疫グロブリン重鎖可変領域と（ｂ）構造ＣＤＲＬ１−ＣＤＲＬ２−ＣＤＲＬ３を含む免疫グロブリン軽鎖可変領域を含み、ここで、重鎖可変領域と軽鎖可変領域は一緒に、ＧＤＦ１５若しくはＧＤＦ１５受容体に結合するための単一結合部位を画定する。例示的抗ＧＤＦ１５抗体は、例えば、米国特許出願公開第２０１４−０１９３４２７−Ａ１号明細書に記載されており、その開示内容は、あらゆる目的のために、参照により本明細書に組み込まれる。
【００５５】
本発明の方法及び組成物に有用な例示的抗ＧＤＦ１５抗体は、例えば、以下の表１に記載するＣＤＲＨ１、ＣＤＲＨ２、及びＣＤＲＨ３領域配列の９つのセットのいずれか１つを含む重鎖可変領域を含む。
【００５６】
【表１】
2020147609.tif 000002
【００５７】
本発明の方法及び組成物に有用な例示的ＧＤＦ１５抗体は、例えば、以下の表２に記載するＣＤＲＬ１、ＣＤＲＬ２、及びＣＤＲＬ３領域配列の４つのセットのいずれか１つを含む軽鎖可変領域を含む。
【００５８】
【表２】
2020147609.tif 000003
【００５９】
本発明の実施に有用な例示的抗ＧＤＦ１５抗体は、米国特許出願公開第２０１４−０１９３４２７−Ａ１号明細書に記載されており、０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、１７Ｂ１１、並びにそのヒト又はヒト化形態を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される抗体（例えば、０１Ｇ０６、０３Ｇ０５、０４Ｆ０８、０６Ｃ１１、０８Ｇ０１、１４Ｆ１１、若しくは１７Ｂ１１、又はそのヒト化形態）を用いて、ＣＨＦの症状を提示するか、又はＣＨＦを有する、若しくはＣＨＦを有するリスクがあると診断されているＣＨＦ又は別の心臓関連疾患若しくは障害を治療する。一部の実施形態では、抗体は、ＣＨＦ又は別の心臓関連疾患若しくは障害の症状又は特徴を少なくとも２％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％若しくは３５％逆転する。
【００６０】
好ましい実施形態では、本発明の実施に有用な例示的抗ＧＤＦ１５抗体は、米国特許出願公開第２０１４−０１９３４２７−Ａ１号明細書に０１Ｇ０６として示されている。０１Ｇ０６抗体のヒト化形態は、それぞれの重鎖及び軽鎖可変領域のアミノ酸配列と一緒に記載されている。例示的ヒト化抗ＧＤＦ１５抗体としては、以下のものが挙げられる：Ｈｕ０１Ｇ０６−１；Ｈｕ０１Ｇ０６−４６；Ｈｕ０１Ｇ０６−５２；Ｈｕ０１Ｇ０６−１００；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０１；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０２；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０３；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０４；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０５；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０６；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０７；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０８；Ｈｕ０１Ｇ０６−１０９；Ｈｕ０１Ｇ０６−１１０；Ｈｕ０１Ｇ０６−１１１；Ｈｕ０１Ｇ０６−１１２；Ｈｕ０１Ｇ０６−１１３；Ｈｕ０１Ｇ０６−１１４；Ｈｕ０１Ｇ０６−１２２；Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７；Ｈｕ０１Ｇ０６−１３５；Ｈｕ０１Ｇ０６−１３８；Ｈｕ０１Ｇ０６−１４６；Ｈｕ０６Ｃ１１−１；Ｈｕ０６Ｃ１１−２７；Ｈｕ０６Ｃ１１−３０；Ｈｕ１４Ｆ１１−１；Ｈｕ１４Ｆ１１−２３；Ｈｕ１４Ｆ１１−２４；Ｈｕ１４Ｆ１１−３９；及びＨｕ１４Ｆ１１−４７。前述した抗体各々の重鎖及び軽鎖のアミノ酸配列を以下の表３に記載する。
【００６１】
【表３】
2020147609.tif 000004
【００６２】
本明細書に記載する抗体は、当技術分野で公知の技術を用いて、設計、試験、及び製剤化し得ることは理解されよう。
【００６３】
配列番号２５
【化１】
2020147609.tif 000005
【００６４】
配列番号２６
【化２】
2020147609.tif 000006
【００６５】
配列番号２７
【化３】
2020147609.tif 000007
【００６６】
配列番号２９
【化４】
2020147609.tif 000008
【００６７】
配列番号２８
【化５】
2020147609.tif 000009
【００６８】
配列番号３２
【化６】
2020147609.tif 000010
【００６９】
配列番号３３
【化７】
2020147609.tif 000011
【００７０】
配列番号３５
【化８】
2020147609.tif 000012
【００７１】
配列番号３６
【化９】
2020147609.tif 000013
【００７２】
配列番号３７
【化１０】
2020147609.tif 000014
【００７３】
配列番号３０
【化１１】
2020147609.tif 000015
【００７４】
配列番号３８
【化１２】
2020147609.tif 000016
【００７５】
配列番号３９
【化１３】
2020147609.tif 000017
【００７６】
配列番号４０
【化１４】
2020147609.tif 000018
【００７７】
配列番号４１
【化１５】
2020147609.tif 000019
【００７８】
配列番号４３
【化１６】
2020147609.tif 000020
【００７９】
配列番号４２
【化１７】
2020147609.tif 000021
【００８０】
配列番号４４
【化１８】
2020147609.tif 000022
【００８１】
配列番号４５
【化１９】
2020147609.tif 000023
【００８２】
配列番号４６
【化２０】
2020147609.tif 000024
【００８３】
配列番号４７
【化２１】
2020147609.tif 000025
【００８４】
配列番号４８
【化２２】
2020147609.tif 000026
【００８５】
配列番号４９
【化２３】
2020147609.tif 000027
【００８６】
配列番号３８
【化２４】
2020147609.tif 000028
【００８７】
配列番号５１
【化２５】
2020147609.tif 000029
【００８８】
配列番号５２
【化２６】
2020147609.tif 000030
【００８９】
配列番号５４
【化２７】
2020147609.tif 000031
【００９０】
配列番号５５
【化２８】
2020147609.tif 000032
【００９１】
配列番号５６
【化２９】
2020147609.tif 000033
【００９２】
配列番号５７
【化３０】
2020147609.tif 000034
【００９３】
配列番号５０
【化３１】
2020147609.tif 000035
【００９４】
配列番号３１
【化３２】
2020147609.tif 000036
【００９５】
配列番号５３
【化３３】
2020147609.tif 000037
【００９６】
配列番号３４
【化３４】
2020147609.tif 000038
【００９７】
抗体は、ＧＤＦ１５活性を低減する中和抗体であってもよい。例えば、抗体は、抗体の非存在下、同じ条件下で同じアッセイにより測定したＧＤＦ１５活性と比較して、ｉｎ  ｖｉｖｏアッセイ（例えば、Ｊｏｈｎｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００７，ＮＡＴＵＲＥ  ＭＥＤＩＣＩＮＥ  １３：１３３３−１３４０を参照）において、ＧＤＦ１５活性を少なくとも１０％、好ましくは２０％、３０％又は４０％、より好ましくは少なくとも約５０％、６０％、８０％、又は９０％低減し得る。抗体は、ＧＤＦ１５とその内在性受容体の結合を選択的及び／若しくは有意に低減又は阻害し得る。本明細書で使用されるとき、ＧＤＦ１５とその受容体の「結合を有意に低減又は阻害する」という用語は、抗体が、前記抗体の非存在下でのＧＤＦ１５（血清レベル／活性）の少なくとも１０％、好ましくは２０％、３０％又は４０％、より好ましくは少なくとも約５０％、６０％、８０％、又は９０％を示す能力又は阻害率（％）で、ＧＤＦ１５結合を阻害することを意味すると理解される。結合は、例えば、Ｔｓａｉ  ｅｔ  ａｌ．，２０１３，ＰＬＯＳ  ＯＮＥ，８：ｅ５５１７４に記載されているように、直接又はサンドイッチ酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）を用いて測定することができる。本明細書で使用されるとき、ＧＤＦ１５又はＧＤＦ１５受容体に結合する抗体に関連する用語「選択的に」は、抗体が、機能的に無関係なタンパク質又はＴＧＦ−βスーパーファミリーの別のメンバー若しくはＴＧＦ−βスーパーファミリーのメンバーの受容体に比して、少なくとも２、３、４、５若しくは１０倍高い結合親和性で、ＧＤＦ１５又はＧＤＦ１５受容体に結合することを意味すると理解される。
【００９８】
抗体及び抗体断片の抗原性を低減又は排除する方法は、当技術分野で公知である。抗体をヒトに投与しようとするとき、ヒトにおける抗原性を低減又は排除するために、抗体を「ヒト化する」のが好ましい。好ましくは、ヒト化した抗体は各々、それが由来する非ヒト化マウス抗体と同じ若しくは実質的に同じ親和性を有する。
【００９９】
１つのヒト化手法では、マウス免疫グロブリン定常領域がヒト免疫グロブリン定常領域で置換されたキメラタンパク質を作製する。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４，ＰＲＯＣ．ＮＡＴ．ＡＣＡＤ．ＳＣＩ．８１：６８５１−６８５５，Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９８４，ＮＡＴＵＲＥ  ３１２：６０４−６０８；米国特許第６，８９３，６２５号明細書（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ）；同第５，５００，３６２号明細書（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ）；及び同第４，８１６，５６７号明細書（Ｃａｂｉｌｌｙ）を参照されたい。
【０１００】
ＣＤＲ移植として知られる手法では、軽鎖及び重鎖可変領域のＣＤＲを別の種からのフレームワークに移植する。例えば、マウスＣＤＲをヒトＦＲに移植することができる。一部の実施形態では、抗ＧＤＦ１５抗体の軽鎖及び重鎖可変領域のＣＤＲをヒトＦＲ又は共通ヒトＦＲに移植する。共通ヒトＦＲを作製するために、複数のヒト重鎖又は軽鎖アミノ酸配列由来のＦＲをアラインメントして、共通アミノ酸配列を見出す。ＣＤＲ移植は、以下の文献に記載されている：米国特許第７，０２２，５００号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；同第６，９８２，３２１号明細書（Ｗｉｎｔｅｒ）；同第６，１８０，３７０号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；同第６，０５４，２９７号明細書（Ｃａｒｔｅｒ）；同第５，６９３，７６２号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；同第５，８５９，２０５号明細書（Ａｄａｉｒ）；同第５，６９３，７６１号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；同第５，５６５，３３２号明細書（Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ）；同第５，５８５，０８９号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；同第５，５３０，１０１号明細書（Ｑｕｅｅｎ）；Ｊｏｎｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，１９８６，ＮＡＴＵＲＥ  ３２１：５２２−５２５；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，ＮＡＴＵＲＥ  ３３２：３２３−３２７；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，ＳＣＩＥＮＣＥ  ２３９：１５３４−１５３６；及びＷｉｎｔｅｒ，１９９８，ＦＥＢＳ  ＬＥＴＴ  ４３０：９２−９４。
【０１０１】
「ＳＵＰＥＲＨＵＭＡＮＩＺＡＴＩＯＮ（商標）」と呼ばれる手法では、ヒトＣＤＲとヒト化しようとするマウス抗体のそれとの構造的類似性に基づいて、ヒトＣＤＲ配列をヒト生殖系列遺伝子から選択する。例えば、米国特許第６，８８１，５５７号明細書（Ｆｏｏｔｅ）；及びＴａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００２，Ｊ．ＩＭＭＵＮＯＬ．１６９：１１１９−１１２５を参照されたい。
【０１０２】
免疫原性を低減するその他の方法として、「再構成（ｒｅｓｈａｐｉｎｇ）」、「超キメラ化（ｈｙｐｅｒｃｈｉｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ）」、及び「ベニヤリング（ｖｅｎｅｅｒｉｎｇ）／表面再構成（ｒｅｓｕｒｆａｃｉｎｇ）」が挙げられる。例えば、Ｖａｓｗａｍｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，ＡＮＮＡＬＳ  ＯＦ  ＡＬＬＥＲＧＹ，ＡＳＴＨＭＡ，＆  ＩＭＭＵＮＯＬ．８１：１０５；Ｒｏｇｕｓｋａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，ＰＲＯＴ．ＥＮＧＩＮＥＥＲ  ９：８９５−９０４；及び米国特許第６，０７２，０３５号明細書（Ｈａｒｄｍａｎ）を参照されたい。ベニヤリング（ｖｅｎｅｅｒｉｎｇ）／表面再構成（ｒｅｓｕｒｆａｃｉｎｇ）手法では、マウス抗体における表面接触可能アミノ酸残基が、ヒト抗体における同じ位置で、より頻繁に見出されるアミノ酸残基によって置換される。このタイプの抗体表面再構成は、例えば、米国特許第５，６３９，６４１号明細書（Ｐｅｄｅｒｓｅｎ）に記載されている。
【０１０３】
ヒトへの医療用途に好適な形態にマウス抗体を変換する別の手法は、ＡＣＴＩＶＭＡＢ（商標）技術（Ｖａｃｃｉｎｅｘ，Ｉｎｃ．，Ｒｏｃｈｅｓｔｅｒ，ＮＹ）であり、これは、哺乳動物細胞に抗体を発現するためのワクシニアウイルスベースのベクターを含む。ＩｇＧ重鎖及び軽鎖の高レベルの組み合わせ多様性が得られると記載されている。例えば、米国特許第６，７０６，４７７号明細書（Ｚａｕｄｅｒｅｒ）；同第６，８００，４４２号明細書（Ｚａｕｄｅｒｅｒ）；及び同第６，８７２，５１８号明細書（Ｚａｕｄｅｒｅｒ）を参照されたい。
【０１０４】
ヒトに使用するのに好適な形態にマウス抗体を変換する別の手法は、ＫａｌｏＢｉｏｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．（Ｐａｌｏ  Ａｌｔｏ，ＣＡ）により商業的に実施される技術である。この技術は、抗体選択のために「エピトープフォーカス」ライブラリーを作製するための、専売のヒト「アクセプター」ライブラリーの使用を含む。
【０１０５】
ヒトへの医療用途に好適な形態にマウス抗体を修飾する別の手法は、ＨＵＭＡＮ  ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ（商標）技術であり、これは、ＸＯＭＡ（ＵＳ）ＬＬＣにより商業的に実施される。例えば、国際公開第９３／１１７９４号パンフレット及び米国特許第５，７６６，８８６号明細書（Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ）；同第５，７７０，１９６号明細書（Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ）；同第５，８２１，１２３号明細書（Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ）；及び同第５，８６９，６１９号明細書（Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ）を参照されたい。
【０１０６】
抗体のヒト免疫原性を低減又は排除するために、前記手法のいずれかを含む任意の好適な手法を用いることができる。
【０１０７】
さらに、マウスにおいて完全ヒト抗体を作製することも可能である。いずれかの非ヒト配列を欠失した完全ヒトｍＡｂは、例えば、Ｌｏｎｂｅｒｇ  ｅｔ  ａｌ．，ＮＡＴＵＲＥ  ３６８：８５６−８５９，１９９４；Ｆｉｓｈｗｉｌｄ  ｅｔ  ａｌ．，ＮＡＴＵＲＥ  ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ  １４：８４５−８５１，１９９６；及びＭｅｎｄｅｚ  ｅｔ  ａｌ．，ＮＡＴＵＲＥ  ＧＥＮＥＴＩＣＳ  １５：１４６−１５６，１９９７で参照される技術によりヒト免疫グロブリントランスジェニックマウスから調製することができる。完全ヒトｍＡｂは、例えば、Ｋｎａｐｐｉｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ＭＯＬ．ＢＩＯＬ．２９６：５７−８６，２０００；Ｋｒｅｂｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．ＩＭＭＵＮＯＬ．ＭＥＴＨ．２５４：６７−８４  ２００１）に参照されている技術によりファージディスプレイライブラリーから調製及び最適化することもできる。
【０１０８】
おとりとして作用するＧＤＦ１５の変異体及び誘導体は、本発明の実施に有用であり得ると考えられる。例えば、欠失分析により、その同族受容体について内在性ＧＤＦ１５と競合するＧＤＦ１５のより小さな生物活性断片を見出すことも可能であろう。同様に、利用可能なＧＤＦの内在性ＧＤＦ１５受容体と競合するＧＤＦ１５受容体の可溶性生物活性断片を作製することもできる。例えば、「生物活性断片」として、限定はしないが、同族結合パートナー（例えば、それぞれＧＤＦ１５受容体又はＧＤＦ１５）との結合について、それぞれ内在性ＧＤＦ１５又は内在性ＧＤＦ１５受容体と競合する天然ＧＤＦ１５（若しくは相同体）又はＧＤＦ１５受容体（若しくは相同体）の断片が挙げられる。
【０１０９】
当技術分野で公知の技術を用いて、アンチセンス核酸（ＤＮＡ及びＲＮＡ）並びに干渉核酸（例えば、ｓｉＲＮＡ）を設計及び使用できることが考えられる。ＧＤＦ１５の例示的ｓｉＲＮＡ阻害剤としては、以下のものが挙げられる：Ｓａｎｔａ  Ｃｒｕｚ  Ｂｉｏｔｅｃｈ製のｓｉＲＮＡ（カタログ番号ｓｃ−３９７９９、マウスＧＤＦ１５をターゲティング；及びカタログ番号ｓｃ−３９７９８、ヒトＧＤＦ１５をターゲティング）、Ｌｉｆｅ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ製のｓｉＲＮＡ（カタログ番号ＡＭ１６７０８、４３９２４２０、及び１２９９００１，ヒトＧＤＦ１５をターゲティング；並びにカタログ番号１３２０００１及び４３９０７７１、マウスＧＤＦ１５をターゲティング；並びにカタログ番号１３３０００１及び４３９０７７１、ラットＧＤＦ１５をターゲティング）、Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ製のｓｉＲＮＡ（カタログ番号ＮＣ０６８３８０７、ヒトＧＤＦ１５をターゲティング）、Ｏｒｉｇｅｎｅ（カタログ番号ＳＲ３０６３２１、ヒトＧＤＦ１５をターゲティング）、ａｍｓｂｉｏ製のｓｉＲＮＡ（カタログ番号ＳＲ５０９８００、ラット（ｒａｔｅ）ＧＤＦ１５をターゲティング）、Ｄｈａｒｍａｃｏｎ製のｓｉＲＮＡ（カタログ番号Ｄ−０１９８７５−０２、ヒトＧＤＦ１５をターゲティング）、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ製のｓｉＲＮＡ（カタログ番号ＥＨＵ０５２９０１、ヒトＧＤＦ１５をターゲティング）、並びにＫｉｍ  ｅｔ  ａｌ．，２００５，ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＣＡＮＣＥＲ  ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ，４：４８７−４９３，Ｃｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２００７ ＭＯＬ．ＣＡＮＣＥＲ ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ，６：２２７１−２２７９、及びＢｏｙｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００９，Ｊ．ＩＮＶＥＳＴ．ＤＥＲＭＡＴＯＬ．，１２９：３８３−３９１に記載のｓｉＲＮＡ。
【０１１０】
ＩＶ．ＧＤＦ１５調節剤の製剤化及び送達
本明細書に開示するものなどのＧＤＦ１５調節剤を含有する医薬組成物は、標準的製剤化技術を用いて、剤形又は投与単位に製剤化することができる。しかし、医薬組成物は、意図する投与経路と適合性であるように製剤化すべきである。
【０１１１】
本明細書に記載する組成物は、限定はしないが、以下に挙げるいずれかの経路で被験者に投与することができる：静脈内（例えば、輸液ポンプ）、腹腔内、眼内、動脈内、肺内、経口、吸入、膀胱内、筋肉内、気管内、皮下、眼内、髄腔内、経皮、経胸膜、動脈内、局所、吸入（例えば、噴霧スプレーとして）、粘膜（鼻粘膜など）、皮下、経皮、胃腸、関節内、大槽内、心室内、直腸（すなわち、座薬により）、膣（すなわち、ペッサリーにより）、頭蓋内、尿道内、肝臓内、及び腫瘍内。一部の実施形態では、組成物を全身投与する（例えば、静脈内注射により）。一部の実施形態では、組成物を局所投与する（例えば、動脈内又は眼内注射により）。抗体などのＧＤＦ１５調節剤の好ましい投与経路は、静脈内注入によるものである。
【０１１２】
有用な製剤は、薬学の分野で公知の技術によって調製することができる。例えば、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ’Ｓ  ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ  ＳＣＩＥＮＣＥＳ，１８ｔｈ  ｅｄ．（Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０）を参照されたい。非経口投与に好適な製剤成分としては、注射用静菌水、生理学的食塩水、不揮発性油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール又はその他の合成溶媒などの滅菌希釈剤；ベンジルアルコール又はメチルパラベンなどの抗菌剤；アスコルビン酸又は亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤；ＥＤＴＡなどのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩又はリン酸塩などのバッファー；並びに塩化ナトリウム又はデキストロースなどの張性の調節のための薬剤が挙げられる。担体は、製造及び貯蔵の条件下で安定性であり、且つ、微生物から保護されなければならない。一部の実施形態では、組成物（例えば、抗体）を凍結乾燥し、投与時に、緩衝食塩水中で再構成する。
【０１１３】
治療用途の場合、組成物（例えば、抗体）を薬学的に許容される担体と組み合わせるのが好ましい。本明細書で用いる場合、「薬学的に許容される担体」は、過剰な毒性、刺激、アレルギー応答、又はその他の問題若しくは合併症を起こすことなく、ヒト及び動物の組織と接触させる用途に好適で、妥当な受益度／危険度比に相応するバッファー、担体、及び賦形剤を意味する。担体は、製剤の他の成分と適合性であり、且つレシピエントに対して有害ではないという意味で、「許容される」ものでなければならない。薬学的に許容される担体としては、医薬品投与と適合性のバッファー、溶媒、分散媒、コーティング剤、等張及び吸収遅延剤などが挙げられる。薬学的に活性の物質のためのこうした媒体及び薬剤の使用は当分野において公知である。
【０１１４】
医薬組成物は、滅菌されているのが好ましい。滅菌は、例えば、滅菌濾過膜を介した濾過により達成することができる。組成物が凍結乾燥されている場合、凍結乾燥及び再構成の前、又は後にフィルター滅菌を実施することができる。
【０１１５】
一般に、治療有効量の活性成分は、０．１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、例えば、１ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇの範囲である。投与する量は、治療しようとする疾患若しくは適応症の種類及び程度、患者の全身の健康状態、組成物（例えば、抗体）のｉｎ  ｖｉｖｏ効力、医薬製剤、及び投与経路に応じて変動し得る。最初の投与量は、所望の血液レベル又は組織レベルを迅速に達成するために、上限レベルを超えて増加することができる。あるいは、最初の投与量は、最適より少なくしてもよく、１日用量を治療の過程で段階的に増加させてもよい。ヒト投与量は、０．５ｍｇ／ｋｇから２０ｍｇ／ｋｇまで実施するように設計された従来の第Ｉ相用量漸増試験で最適化することができる。投与頻度は、投与経路、投与量、組成物（例えば、抗体）の血清半減期、及び治療対象の疾患などに応じて変動し得る。例示的投与頻度は、１日１回、週１回及び隔週１回である。
【０１１６】
組成物の最適な有効量は、実験により決定することができ、疾患の種類及び重症度、投与経路、疾患の進行及び被験者の健康状態、重量及び身体部位に応じて変動し得る。こうした決定は、当業者の技術の範囲内である。本明細書に記載する方法に用いることができるＧＤＦ１５調節剤分子の投与量の例として、限定はしないが、約０．０１μｇ／ｋｇ〜約３００ｍｇ／ｋｇ、若しくは約０．１μｇ／ｋｇ〜約４０ｍｇ／ｋｇの任意の用量範囲内、又は約１μｇ／ｋｇ〜約２０ｍｇ／ｋｇの範囲内、又は約１μｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇの範囲内の有効量が挙げられる。例えば、皮下投与される場合、組成物は、約０．１μｇ／ｋｇ以下、約０．０５μｇ／ｋｇ以下、又は約０．０１μｇ／ｋｇ以下などの低いマイクログラム範囲で投与してよい。
【０１１７】
いくつかの実施形態では、被験者に投与するＧＤＦ１５調節剤の量は、１用量当たり約１０μｇ〜約５００ｍｇ、例えば、１用量当たり約１０μｇ〜約５０μｇ、約５０μｇ〜約１００μｇ、約１００μｇ〜約２００μｇ、約２００μｇ〜約３００μｇ、約３００μｇ〜約５００μｇ、約５００μｇ〜約１ｍｇ、約１ｍｇ〜約１０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約５０ｍｇ、約５０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約２００ｍｇ、約２００ｍｇ〜約３００ｍｇ、約３００ｍｇ〜約４００ｍｇ、又は約４００ｍｇ〜約５００ｍｇを含む。いくつかの実施形態では、ＧＤＦ１５調節剤は、約０．０２５ｍｇ〜約４ｍｇ、約０．０３５ｍｇ〜約２ｍｇ、約０．０５ｍｇ〜約２ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約２ｍｇ、約０．２ｍｇ〜約１ｍｇ、又は約０．２ｍｇ〜約０．８ｍｇのＧＤＦ１５調節剤を投与することができる。一実施形態では、０．５ｍｇのＧＤＦ１５調節剤を局所投与する。いくつかの実施形態では、約０．０５ｍｇ〜約２ｍｇ、約０．２ｍｇ〜約２ｍｇ、約０．０５ｍｇ〜約１．５ｍｇ、約０．１５ｍｇ〜約１．５ｍｇ、約０．４ｍｇ〜約１ｍｇ、又は約０．５ｍｇ〜約０．８ｍｇのＧＤＦ１５調節剤を局所投与する。
【０１１８】
ＧＤＦ１５調節剤は、１日の単一用量として投与してもよいし、又は１日の総用量を１日２回、３回、又は４回の分割用量として投与してもよい。組成物はまた、毎日より少ない頻度で、例えば、週６回、週５回、週４回、週３回、週２回、週１回、２週間ごとに１回、３週間毎に１回、月１回、２ヵ月に１回、３ヵ月に１回、又は６ヵ月に１回投与することもできる。さらに、組成物は、特定の時間にわたって使用する組成物を徐々に放出するインプラントなどの持続的放出製剤として投与してもよく、これにより、組成物を投与する頻度を、例えば、月１回、２〜６ヵ月に１回、年１回、又は単一回投与のように減らすことができる。持続的放出デバイス（ペレット、ナノ粒子、ミクロ粒子、ナノスフィア、マイクロスフィアなど）は、注射により投与してもよいし、又は身体の様々な位置に外科的に埋め込んでもよい。
【０１１９】
本発明のいくつかの実施形態では、ＧＤＦ１５調節剤の投与は、用量が有害な作用を軽減又は阻止し、しかも、ＧＤＦ１５の活性を完全若しくは部分的に阻害するのに十分であるように滴定する。
【０１２０】
一部の態様では、ＧＤＦ１５調節剤の活性は、アンチセンス核酸又は低分子干渉核酸を用いて、標的細胞中で調節することができる。調節は、当技術分野で公知の発現構築物、例えば、抗ＧＤＦ１５ｓｉＲＮＡ又はアンチセンス分子をコードする核酸を発現するためのネイキッドＤＮＡ構築物、ＤＮＡベクターベースの構築物、並びに／又はウイルスベクター及び／若しくはウイルスベースの構築物を用いて達成することができる。
【０１２１】
こうした構築物の例示的ＤＮＡ構築物及び治療への使用は、当業者には周知である（例えば、Ｃｈｉａｒｅｌｌａ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，ＲＥＣＥＮＴ  ＰＡＴＥＮＴＳ  ＡＮＴＩ−ＩＮＦＥＣＴ．ＤＲＵＧ  ＤＩＳＣ．，３：９３−１０１；Ｇｒａｙ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，ＥＸＰＥＲＴ  ＯＰＩＮ．ＢＩＯＬ．ＴＨＥＲ．，８：９１１−９２２；Ｍｅｌｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００８，ＨＵＭ．ＧＥＮＥ  ＴＨＥＲ．，１７：１１６５−１１７６）。ネイキッドＤＮＡ構築物は、典型的に、１種又は複数種の治療用核酸（例えば、ＧＤＦ１５調節剤）とプロモータ配列を含む。ネイキッドＤＮＡ構築物は、一般にｐＤＮＡと呼ばれるＤＮＡベクターであってよい。ネイキッドＤＮＡは、典型的に、染色体ＤＮＡに組み込まれない。概して、ネイキッドＤＮＡ構築物は、脂質、ポリマー、又はウイルスタンパク質の存在を必要としないか、又はそれらと一緒に使用されない。こうした構築物は、本明細書に記載する非治療成分の１つ又は複数を含んでもよい。
【０１２２】
ＤＮＡベクターは、当技術分野で公知であり、典型的に、環状二本鎖ＤＮＡ分子である。ＤＮＡベクターは、通常、３〜５キロ塩基対の範囲のサイズ（例えば、挿入された治療核酸を含む）である。ネイキッドＤＮＡと同様に、ＤＮＡベクターは、１種又は複数種の治療用タンパク質を標的細胞に送達及び発現させるために使用することができる。ＤＮＡベクターは、染色体ＤＮＡに組み込まれない。
【０１２３】
一般に、ＤＮＡベクターは、標的細胞における複製を可能にする少なくとも１つのプロモータ配列を含む。ＤＮＡベクターの取り込みは、ＤＮＡベクターを例えばカチオン性脂質と組み合わせて、ＤＮＡ複合体を形成することにより、促進することができる。典型的に、ウイルスベクターは、ウイルスに由来する二本鎖環状ＤＮＡ分子である。ウイルスベクターは、典型的に、ネイキッドＤＮＡ及びＤＮＡベクター構築物よりサイズが大きく、外来（すなわち、ウイルスによりコードされていない）遺伝子の導入のために、より大きな容量を有する。ネイキッドＤＮＡ及びＤＮＡベクターと同様に、ウイルスベクターを用いて、１種又は複数種の治療用核酸を標的細胞に送達及び発現させることもできる。ネイキッドＤＮＡ及びＤＮＡベクターとは異なり、いくつかのウイルスベクターは、それ自体が染色体ＤＮＡに安定に組み込まれる。典型的に、ウイルスベクターは、宿主細胞において、ベクターによりコードされた１つ又は複数の核酸、例えば、治療用核酸の複製を可能にする少なくとも１つのプロモータ配列を含む。ウイルスベクターは、任意選択で、本明細書に記載する１つ又は複数の非治療成分を含んでもよい。有利なことに、標的細胞へのウイルスベクターの取り込みは、追加成分、例えば、カチオン性脂質を必要としない。むしろ、ウイルスベクターは、標的細胞との接触後直ちに細胞をトランスフェクトするか、又は細胞に感染する。
【０１２４】
本明細書に記載する手法は、特にヒトへの、ｉｎ  ｖｉｖｏでの外性遺伝子の移入のための組換え遺伝子送達系として、レトロウイルスベクター、アデノウイルス由来のベクター、及び／又はアデノ−関連ウイルスベクターの使用を含む。組換えレトロウイルスを生成するプロトコル、及びこうしたウイルスに細胞をｉｎ  ｖｉｔｒｏ又はｉｎ  ｖｉｖｏで感染させるプロトコルは、ＣＵＲＲＥＮＴ  ＰＲＯＴＯＣＯＬＳ  ＩＮ  ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ  ＢＩＯＬＯＧＹ，Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｆ．Ｍ．ｅｔ  ａｌ．（ｅｄｓ．）Ｇｒｅｅｎｅ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，（１９８９），Ｓｅｃｔｉｏｎｓ  ９．１０−９．１４、並びにその他の標準的実験マニュアルに見出すことができる。
【０１２５】
ＤＮＡベクター及びウイルスベクターのＤＮＡの形質導入因子として用いられるウイルス、例えば、アデノウイルス、レトロウイルス、及びレンチウイルスなどを本発明の実施に使用してもよい。例示的レトロウイルスとして、限定はしないが、以下のものが挙げられる：モロニーマウス白血病ウイルス（Ｍｏｌｏｎｅｙ  ｍｕｒｉｎｅ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  ｖｉｒｕｓ）（Ｍ−ＭｕＬＶ）、モロニーマウス肉腫ウイルス（Ｍｏｌｏｎｅｙ  ｍｕｒｉｎｅ  ｓａｒｃｏｍａ  ｖｉｒｕｓ）（ＭｏＭＳＶ）、ハーベイマウス肉腫ウイルス（Ｈａｒｖｅｙ  ｍｕｒｉｎｅ  ｓａｒｃｏｍａ  ｖｉｒｕｓ）（ＨａＭｕＳＶ）、マウス乳癌ウイルス（ｍｕｒｉｎｅ  ｍａｍｍａｒｙ  ｔｕｍｏｒ  ｖｉｒｕｓ）（ＭｕＭＴＶ）、テナガザル白血病ウイルス（ｇｉｂｂｏｎ  ａｐｅ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  ｖｉｒｕｓ）（ＧａＬＶ）、ネコ白血病ウイルス（ｆｅｌｉｎｅ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  ｖｉｒｕｓ）（ＦＬＶ）、スプマウイルス（ｓｐｕｍａｖｉｒｕｓ）、フレンドマウス白血病ウイルス（Ｆｒｉｅｎｄ  ｍｕｒｉｎｅ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  ｖｉｒｕｓ）、マウス幹細胞ウイルス（Ｍｕｒｉｎｅ  Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌ  Ｖｉｒｕｓ）（ＭＳＣＶ）及びラウス肉腫ウイルス（Ｒｏｕｓ  Ｓａｒｃｏｍａ  Ｖｉｒｕｓ（ＲＳＶ））並びにレンチウイルス（ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ）。本明細書で使用されるとき、用語「レンチウイルス（ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ）」は、複合型レトロウイルスの群（又は属）を指す。例示的レンチウイルスとして、限定はしないが、以下のものが挙げられる：ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス（ｈｕｍａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ）；ＨＩＶ１型、及びＨＩＶ２型を含む）；ビスナ・マエディウイルス（ｖｉｓｎａ−ｍａｅｄｉ  ｖｉｒｕｓ）（ＶＭＶ）；イヌ関節炎−脳炎ウイルス（ｃａｐｒｉｎｅ  ａｒｔｈｒｉｔｉｓ−ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ  ｖｉｒｕｓ）（ＣＡＥＶ）；ウマ感染性貧血ウイルス（ｅｑｕｉｎｅ  ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ  ａｎｅｍｉａ  ｖｉｒｕｓ）（ＥＩＡＶ）；ネコ免疫不全ウイルス（ｆｅｌｉｎｅ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ）（ＦＩＶ）；ウシ免疫不全ウイルス（ｂｏｖｉｎｅ  ｉｍｍｕｎｅ  ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ）（ＢＩＶ）；及びサル免疫不全ウイルス（ｓｉｍｉａｎ  ｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ  ｖｉｒｕｓ）（ＳＩＶ）。
【０１２６】
いくつかの実施形態では、アデノウイルスは、本明細書に記載する方法に従って用いることができる。アデノウイルスのゲノムは、それが、目的の遺伝子産物をコードして、発現するが、正常な溶菌ウイルス生活環で複製するその能力に関して不活性化されるように、操作することができる。アデノウイルス株Ａｄ５型ｄｌ３２４又はその他のアデノウイルス株（例えば、Ａｄ２、Ａｄ３、Ａｄ７など）は、当業者には周知である。組換えアデノウイルス株は、それらが、非分裂細胞に感染することができず、また、上皮細胞を含む多種の細胞型を感染させるために用いることができるという点で、特定の状況では有利となり得る。さらに、ウイルス粒子は、比較的安定しており、精製及び濃縮させやすく、前述したように、感染性のスペクトルに影響するように修飾することができる。さらに、導入されたアデノウイルスＤＮＡ（及びそこに含まれる外来ＤＮＡ）は、宿主細胞のゲノム中に組み込まれていないが、エピソームのままであるため、導入されたＤＮＡが宿主細胞（例えば、レトロウイルスＤＮＡ）に組み込まれているｉｎ  ｓｉｔｕでの挿入突然変異誘発によって起こり得る潜在的問題が回避される。さらに、外来ＤＮＡについてアデノウイルスゲノムの輸送量は、他の遺伝子送達ベクターと比較して大きい（最大８キロバイト）。
【０１２７】
アデノ関連ウイルスは、効率的複製及び生産的生活環のためのヘルパーウイルスとして、アデノウイルス又はヘルペスウイルスなどの別のウイルスを必要とする、天然の欠損ウイルスである。これはまた、そのＤＮＡを非分裂細胞に組み込むことができ、高頻度の安定な組み込みを呈示する少数のウイルスの１つでもある。
【０１２８】
様々な実施形態では、治療用トランスジーン又はＧＤＦ１５調節剤をコードするトランスジーンを発現する１つ又は複数のウイルスベクターを、被験者の細胞、組織、若しくは臓器への直接注射によりｉｎ  ｖｉｖｏで投与する。様々な他の実施形態では、ウイルス中に包膜されたベクターをｉｎ  ｖｉｔｒｏ若しくはｅｘ  ｖｉｖｏで細胞に形質導入し、任意選択で、ｅｘ  ｖｉｖｏで増殖させる。その後、形質導入した細胞を被験者に投与する。形質導入に好適な細胞として、限定はしないが、幹細胞、前駆細胞、及び分化細胞が挙げられる。いくつかの実施形態では、形質導入細胞は、胚性幹細胞、骨髄幹細胞、臍帯血幹細胞、胎盤幹細胞、間葉系幹細胞、神経幹細胞、肝幹細胞、膵幹細胞、心臓幹細胞、腎幹細胞、又は造血幹細胞である。
【０１２９】
特定の実施形態では、１つ又は複数のポリペプチドを発現する本発明のウイルスベクターを形質導入した宿主細胞を、被験者に投与して、聴覚疾患、障害、若しくは病状を治療及び／又は予防する。本発明のいくつかの実施形態に従って使用され得る、ウイルスベクターの使用に関連する他の方法は、以下の文献に見出すことができる：Ｋａｙ，１９９７，ＣＨＥＳＴ，１１１（６  Ｓｕｐｐ．）：１３８Ｓ−１４２Ｓ；Ｆｅｒｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９８，ＨＵＭ．ＧＥＮＥ  ＴＨＥＲ．，９：１９７５−８１；Ｓｈｉｒａｔｏｒｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９９，ＬＩＶＥＲ，１９：２６５−７４；Ｏｋａ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，ＣＵＲＲ．ＯＰＩＮ．ＬＩＰＩＤＯＬ．，１１：１７９−８６；Ｔｈｕｌｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，ＧＥＮＥ  ＴＨＥＲ．，７：１７４４−５２；Ｙａｎｇ，１９９２，ＣＲＩＴ．ＲＥＶ．ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬ．，１２：３３５−５６；Ａｌｔ，１９９５，Ｊ．ＨＥＰＡＴＯＬ．，２３：７４６−５８；Ｂｒｏｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，ＡＮＮ．Ｎ．Ｙ．ＡＣＡＤ．ＳＣＩ．，７１６：９０−１０１；Ｓｔｒａｙｅｒ，１９９９，ＥＸＰＥＲＴ  ＯＰＩＮ．ＩＮＶＥＳＴＩＧ．ＤＲＵＧＳ，８：２１５９−２１７２；Ｓｍｉｔｈ−Ａｒｉｃａ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，ＣＵＲＲ．ＣＡＲＤＩＯＬ．ＲＥＰ．，３：４３−４９；及びＬｅｅ  ｅｔ  ａｌ．，２０００，ＮＡＴＵＲＥ，４０８：４８３−８。
【０１３０】
本発明のいくつかの実施形態は、目的のポリヌクレオチドの条件付発現を可能にする。例えば、ポリヌクレオチドを発現させるか、又は目的のポリヌクレオチドによりコードされるポリヌクレオチドの発現に増大若しくは低減を引き起こす処置又は条件に、細胞、組織、生物などを付すことによって、発現を制御する。誘導性ポリマー／誘導系の実例として、限定はしないが、以下のものが挙げられる：グルココルチコイド若しくはエストロゲン受容体をコードする遺伝子のプロモータなどのステロイド誘導性プロモータ（対応するホルモンでの処理により誘導可能）、メタロチオニンプロモータ（様々な重金属での処置により誘導可能）、ＭＸ−１プロモータ（インターフェロンにより誘導可能）、「ＧｅｎｅＳｗｉｔｃｈ」ミフェプリストン調節系（Ｓｉｒｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，２００３，ＧＥＮＥ，３２３：６７）、クメート（ｃｕｍａｔｅ）誘導性遺伝子スイッチ（国際公開第２００２／０８８３４６号パンフレット）、テトラサイクリン依存性調節系など。
【０１３１】
条件付発現はまた、部位特異的ＤＮＡリコンビナーゼを用いることによって達成することもできる。本発明のいくつかの実施形態によれば、ベクターは、部位特異的リコンビナーゼにより媒介される組換えのための、少なくとも１つ（典型的には２つ）の部位を含む。本明細書で使用するとき、用語「リコンビナーゼ」又は「部位特異的リコンビナーゼ」は、１つ又は複数の組換え部位（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、７つ、１０、１２、１５、２０、３０、４０など）を含む組換え反応に関与する切断若しくは組み込みタンパク質、酵素、補因子又は結合タンパク質を包含し、これらは、野生型タンパク質（Ｌａｎｄｙ，１９９３，ＣＵＲＲＥＮＴ  ＯＰＩＮＩＯＮ  ＩＮ  ＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ，３：６９９−７０７を参照）、又は突然変異体、誘導体（例えば、組換えタンパク質配列若しくはその断片を含有する融合タンパク質）、及びその変異体であってもよい。本発明の具体的な実施形態での使用に好適なリコンビナーゼの例として、限定はしないが、Ｃｒｅ、Ｉｎｔ、ＩＨＦ、Ｘｉｓ、Ｆｌｐ、Ｆｉｓ、Ｈｉｎ、Ｇｉｎ、ＯＣ３１、Ｃｉｎ、Ｔｎ３レゾルバーゼ、ＴｎｄＸ、ＸｅｒＣ、ＸｅｒＤ、ＴｎｐＸ、Ｈｊｃ、Ｇｉｎ、ＳｐＣＣＥｌ．及びＰａｒＡが挙げられる。
【０１３２】
ベクターは、非常に多様な部位特異的リコンビナーゼのいずれかの１つ又は複数の組換え部位を含んでもよい。部位特異的リコンビナーゼの標的部位が、ベクター（例えば、レトロウイルスベクター若しくはレンチウイルスベクター）の組換えに必要ないずれかの部位に加えて存在することは理解すべきである。
【０１３３】
いくつかの実施形態では、ベクターは、選択マーカとも呼ばれる選択遺伝子を含む。典型的選択遺伝子は、下記のタンパク質をコードする：（ａ）抗生物質若しくはその他の毒素、例えば、アンピシリン、ネオマイシン、ヒグロマイシン、メトトレキサート、ゼオシン（Ｚｅｏｃｉｎ）、ブラストシジン（Ｂｌａｓｔｏｃｉｄｉｎ）、若しくはテトラサイクリンを付与するタンパク質、（ｂ）栄養要求性欠失を補足するタンパク質、又は（ｃ）複合培地から得られない重要な栄養素、例えば、バチルス属（Ｂａｃｉｌｌｉ）の場合、Ｄ−アラニンラセマーゼをコードする遺伝子を供給するタンパク質。形質転換した細胞株を回収するために、いくつの選択系を使用してもよい。こうした系として、限定はしないが、単純ヘルペスウイルス（ｈｅｒｐｅｓ  ｓｉｍｐｌｅｘ  ｖｉｒｕｓ）チミジンキナーゼ（Ｗｉｇｌｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９７７，ＣＥＬＬ，１１：２２３−２３２）及びアデニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（Ｌｏｗｙ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０，ＣＥＬＬ，２２：８１７−８２３）遺伝子が挙げられ、これらは、それぞれ、ｔｋ−又はａｐｒｔ−細胞で使用することができる。
【０１３４】
本明細書に記載する発現構築物を作製するために必要な分子生物学的技術は全て、標準的技術であり、当業者により認識されるであろう。
【０１３５】
いくつかの実施形態では、ＤＮＡ送達は、例えば、米国特許第５，５４３，１５８号明細書；同第５，６４１，５１５号明細書；及び同第５，３９９，３６３号明細書（各々、その全体を参照により本明細書に組み込む）に記載されているように、非経口、静脈内、筋肉内、あるいは腹腔内でも実施することができる。遊離塩基又は薬学的に許容される塩としての活性化合物の溶液は、好適には、ヒドロキシプロピルセルロースなどの界面活性剤と好適に混合した水を用いて調製することができる。分散液はまた、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、及びそれらの混合物並びに油を用いて調製することもできる。貯蔵及び使用の通常の条件下で、これらの調製物は、微生物の増殖を阻止するために防腐剤を含有する。
【０１３６】
いくつかの実施形態では、ＤＮＡ送達は、好適な宿主細胞への本発明の組成物の導入を目的とする、リポソーム、ナノカプセル、ミクロ粒子、ミクロスフィア、脂質粒子、小胞体の使用により、任意選択で、細胞貫通ポリペプチドなどとの混合によって実施してもよい。特に、本発明の組成物は、脂質粒子、リポソーム、小胞体、ナノスフィア、ナノ粒子などのいずれかに包膜して、送達のために製剤化することができる。こうした送達ビヒクルの製剤化及び使用は、公知で一般的技術を用いて実施することができる。
【０１３７】
ｅｘ  ｖｉｖｏＤＮＡ送達のための例示的製剤はまた、リン酸カルシウム、エレクトロポレーション、熱ショック及び様々なリポソーム製剤（すなわち、脂質媒介トランスフェクション）など、当技術分野で公知の各種トランスフェクション剤の使用も含み得る。本発明の具体的な実施形態は、薬学の分野でよく知られているものなど、その他の製剤を含んでもよく、これらは、例えば、ＲＥＭＩＮＧＴＯＮ：ＴＨＥ  ＳＣＩＥＮＣＥ  ＡＮＤ  ＰＲＡＣＴＩＣＥ  ＯＦ  ＰＨＡＲＭＡＣＹ，２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ．Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ，ＭＤ：Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓ，２０００に記載されている。
【０１３８】
いくつかの実施形態では、ＧＤＦ１５活性は、ＧＤＦ１５調節剤がＧＤＦ１５活性を低減又は阻害することを可能にする条件下で、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物と体液をｅｘ  ｖｉｖｏで接触させることによって阻害される。好適な体液として、血液、血漿、又はリンパ液など、個体に戻すことができるものが挙げられる。アフィニティ吸着アフェレーシスについては、Ｎｉｌｓｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９８８，ＢＬＯＯＤ，５８（１）：３８−４４；Ｃｈｒｉｓｔｉｅ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，ＴＲＡＮＳＦＵＳＩＯＮ，３３：２３４−２４２；Ｒｉｃｈｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９７，ＡＳＡＩＯ  Ｊ．，４３（１）：５３−５９；Ｓｕｚｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４，ＡＵＴＯＩＭＭＵＮＩＴＹ，１９：１０５−１１２；米国特許第５，７３３，２５４号明細書；Ｒｉｃｈｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３，ＭＥＴＡＢＯＬ．ＣＬＩＮ．ＥＸＰ．，４２：８８８−８９４；及びＷａｌｌｕｋａｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９６，ＩＮＴ’Ｌ  Ｊ．ＣＡＲＤ．，５４：１９１０１９５に概要が記載されている。
【０１３９】
従って、本発明は、被験者における本明細書に記載の１つ又は複数の疾患を治療する方法を含み、この方法は、調節剤が被験者の血液中のＧＤＦ１５活性を低減又は阻害することを可能にする条件下で、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物で、被験者の血液を体外（すなわち、身体外部若しくはｅｘ  ｖｉｖｏで）処置するステップを含む。
【実施例】
【０１４０】
実施例１．うっ血性心不全を有する被験者及びうっ血性心不全のない被験者におけるＧＤＦ１５レベル
２４５人の被験者からの血漿のサンプルを検査し、結果を図１〜６にまとめる。ＤｕｏＳｅｔ  ＥＬＩＳＡ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｋｉｔ（Ｒ＆Ｄ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，＃ＤＹ９５７）を用いて、製造者の推奨に従い、１：５０血漿希釈度でＧＤＦ１５を評価した。アッセイ間変動係数（ＣＶ）は、５．６％であり、アッセイ内ＣＶは、２．９％であった。
【０１４１】
ＧＤＦ１５レベルは、ＣＨＦを有すると診断された被験者（ｎ＝２００；悪液質を伴わないＣＨＦの場合、平均約１９００ｐｇ／ｍｌのＧＤＦ１５；悪液質を伴うＣＨＦの場合、平均約３０００ｐｇ／ｍｌのＧＤＦ１５）の方が、ＣＨＦではない被験者（ｎ＝４５；平均約１０００ｐｇ／ｍｌ）よりも有意に高いことが判明した（図１）。ＧＤＦ１５レベルは、悪液質共存症を呈示する（ｎ＝３３；平均約３０００ｐｇ／ｍｌのＧＤＦ１５）又は呈示しない（ｎ＝１６７；平均約１９００ｐｇ／ｍｌのＧＤＦ１５）にかかわらず、ＣＨＦを有する被験者の方が有意に高かった（図１）。平均ＧＤＦ１５レベルは、ＣＨＦの重症度が高くなるにつれて増加した（図２）。
【０１４２】
ＣＨＦの機能性マーカである最大ＶＯ２の分析から、最大ＶＯ２は、ＧＤＦ１５レベルの増加と共に減少した（ＣＨＦの重症度が高くなった）ことが明らかである（図３Ａ〜３Ｃ）。
【０１４３】
ＣＨＦの一般的共存症である貧血の機能性マーカ、トランスフェリン全飽和度（ＴＳＡＴ）の分析から、ＴＳＡＴは、ＧＤＦ１５レベルの増加と共に減少した（貧血の重症度が高くなった）ことが明らかである（図４）。
【０１４４】
ＣＨＦのもう一つの一般的共存症、腎機能のマーカであるクレアチニン及び尿素レベルの分析から、クレアチニンレベルは、ＧＤＦ１５レベルの増加と共に、ＣＨＦ（悪液質の有無にかかわらず）を有する被験者において増加する（腎障害の重症度が高くなる）ことが明らかである（図５Ａ及び５Ｂ）。また、尿素レベルも、ＧＤＦ１５レベルの増加と共に、悪液質のないＣＨＦを有する被験者において増加した（腎障害の重症度が高くなった）（図５Ｃ）。
【０１４５】
ＣＨＦを有する２００人の被験者における腎機能マーカの分析から、尿素、尿酸及びクレアチニンのレベルは全て、ＧＤＦ１５レベルの増加と共に増加した（腎障害が増大した）のに対し（図６Ａ、６Ｂ及び６Ｃ）、腎機能の尺度である糸球体濾過量（ＧＦＲ）は、ＧＤＦ１５レベルの増加と共に減少したことが明らかである（図６Ｄ）。
【０１４６】
実施例２．ＨＴ−１０８０異種移植片腫瘍モデルにおける心臓縮小の治療
この実施例では、ＨＴ−１０８０繊維肉腫異種移植片モデルにおける抗ＧＤＦ１５抗体０１Ｇ０６による心臓縮小（心臓重量減少により示される）の治療を明らかにする。
【０１４７】
ＨＴ−１０８０細胞を、１０％ＦＢＳを含有するイーグル最小必須培地（ＡＴＣＣ、カタログ番号３０−２００３）を用いて、５％ＣＯ２を含有する大気下、３７℃での培養で増殖させた。細胞は、５０％マトリゲル中マウス当たり５×１０６個の細胞で、８週齢雌ＩＣＲ  ＳＣＩＤマウスの脇腹に皮下接種した。体重を毎日測定した。体重が８０％に達したら、マウスを５匹ずつの２群にランダムに分けた。各群は、次の処置の１つを受けた：腹腔内注射により、１日目及び７日目に、２ｍｇ／ｋｇでマウスＩｇＧ対照（「ｍＩｇＧ」）、又は０１Ｇ０６を投与。抗体０１Ｇ０６を用いた処置によって、体重は初期体重、すなわち１００％まで増加した（ｐ＜０．００１）（図７Ａ）。
【０１４８】
図７Ａ〜Ｂのデータは、抗ＧＤＦ１５抗体の投与によって、ＨＴ−１０８０繊維肉腫異種移植片モデルにおける心臓重量減少を逆転することができることを示している。
【０１４９】
この実験では、５匹のマウスの群を投与の時点（ベースラインすなわち８０％体重減、処置なし）と試験終了時（ｍＩｇＧ若しくは０１Ｇ０６いずれかの投与から７日後）に犠牲にした。肝臓、心臓、脾臓、腎臓、生殖腺脂肪及び腓腹筋を外科的に摘出し、計量した。図７Ｂに示すように、ｍＩｇＧの投与から７日後、肝臓、心臓、脾臓、腎臓、生殖腺脂肪及び腓腹筋重量に有意な減少が観察されたが、抗体０１Ｇ０６による処置群には観察されなかった。
【０１５０】
これらの結果は、抗ＧＤＦ１５抗体の投与が、ＨＴ−１０８０異種移植腫瘍モデルにおける心臓などの主要臓器重量減少、筋肉重量減少、脂肪の減少及び不随意の体重減少を保存する（ｒｅｓｅｒｖｅｓ）ことを示している。
【０１５１】
類似の実験において、ヒト腫瘍異種移植片を担持する悪液質マウスの体重に対する、ヒトＧＤＦ１５（Ｈｕ０１Ｇ０６−１２７）に結合してこれを阻害するモノクローナル抗体の全身投与の効果を、ヒトＩｇＧを受けた類似動物又は偽（ｓｈａｍ）マウス（すなわち、腫瘍なし）と比較した。抗ＧＤＦ１５抗体の投与により、腫瘍のないマウスと比較して、体重の保持又は増加がもたらされたが、ヒトＩｇＧを注射したマウスは、体重の有意な減少を呈示した（図８）。
【０１５２】
実施例３．圧力誘起による心臓肥大のｉｎ  ｖｉｔｒｏモデル
Ｒｏｃｋｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１，ＰＲＯＣ．ＮＡＴＬ  ＡＣＡＤ．ＳＣＩ．，８８：８２７７−８２９１に記載されているように、６５〜７０％の再現性大動脈狭窄をマウスに実施する。マウスから抜管して、回復させた後、左右の頸動脈内の血圧を測定する。続いて、マウスに抗ＧＤＦ１５抗体又は対照のいずれかを投与する。７日後、心臓肥大の存在及び／又は程度について、心臓のサイズ及び重量を評価する。
【０１５３】
実施例４．慢性体液過剰による心不全のｉｎ  ｖｉｖｏモデル
Ｓｃｈｅｕｅｒｍａｎｎ−Ｆｒｅｅｓｔｏｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，２００１，ＥＵＲ．Ｊ．ＨＥＡＲＴ  ＦＡＩＬＵＲＥ，３：５３５−５４３に記載されているように、大動脈シャントをマウスに埋め込む。マウスに抗ＧＤＦ１５抗体又は対照のいずれかを投与する。３０日後、死亡率、心筋肥大の発生、血液動態パラメータ、及びＢＮＰ−ｍＲＮＡの発現レベルについて、マウスを評価する。
【０１５４】
実施例５．以前他の心臓介入治療を受けた被験者の処置
以前既知の心臓介入治療を受けたことがあるが、うっ血性心不全の少なくとも１つの特徴を呈示する、心臓縮小を呈する被験者に抗ＧＤＦ１５抗体を投与する。抗ＧＤＦ１５抗体による処置は、３ヵ月の期間にわたって継続し、その間、一定の間隔で心臓サイズ、最大ＶＯ２、トロポニンレベル及びＢＮＰレベルをモニターする。
【０１５５】
参照による組み込み
本明細書で参照される特許文献及び科学論文の各々の全開示内容は、あらゆる目的のために参照により本明細書に組み込むものとする。
【０１５６】
同等物
本発明は、その精神又は本質的特徴から逸脱することなく、他の具体的な形態で具現化され得る。そのため、前述した実施形態は、あらゆる点で、本明細書で説明する発明を制限するのではなく、例示するものと考えるべきである。従って、本発明の範囲は、以上の説明によってではなく、添付の特許請求の範囲によって示され、請求項の意味及び同等物の範囲内で生じる変更は全て、本発明の範囲に含まれるものとする。
【図１】
2020147609.tif 000039
【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５】
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【図６】
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【図７】
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【図８】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】令和2年7月17日(2020.7.17)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療を必要とする被験者の心臓機能を高める方法に使用するための組成物であって、前記被験者の心臓機能を高めるために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物。
【請求項２】
前記被験者が、体液中に高いＧＤＦ１５活性を有する、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
心臓障害又は機能不全を有する被験者を治療する方法に使用するための組成物であって、前記心臓障害又は機能不全の症状を改善するために、ＧＤＦ１５調節剤を含む組成物。
【請求項４】
前記被験者が、体液中に高いＧＤＦ１５活性を有する、請求項３に記載の組成物。
【請求項５】
治療を必要とする被験者のうっ血性心不全（ＣＨＦ）を治療又は予防する方法に使用するための組成物であって、前記被験者のＣＨＦを治療又は予防するために、前記被験者のＧＤＦ１５活性を低減又は阻害する組成物であり、前記被験者が、体液中に高いＧＤＦ１５活性を有する、組成物。
【請求項６】
うっ血性心不全の１つ又は複数の特徴を呈示する被験者の心臓縮小を軽減する方法に使用するための組成物であって、前記被験者の心臓縮小を軽減するために、ＧＤＦ１５の活性を調節する組成物。
【請求項７】
前記被験者が、４０％未満のＬＶＥＦを呈示する、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項８】
前記被験者が、１００ｐｇ／ｍｌを超えるＢＮＰレベルを呈示する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項９】
前記被験者が、１．５ｎｇ／ｍＬを超える血清心臓トロポニンＩ（ｃＴｎＩ）レベルを呈示する、請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記被験者が、うっ血性心不全を有すると診断されている、請求項１〜９のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１１】
前記ＧＤＦ１５調節剤が、被験者におけるＧＤＦ１５活性を低減又は阻害する、請求項１〜１０のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１２】
前記ＧＤＦ１５調節剤が、ＧＤＦ１５に結合する、請求項１１に記載の組成物。
【請求項１３】
前記ＧＤＦ１５調節剤が、抗ＧＤＦ１５抗体である、請求項１２に記載の組成物。
【請求項１４】
前記抗体が、ヒト化又はヒト抗体である、請求項１３に記載の組成物。
【請求項１５】
前記被験者が、正常レベルを超える、心臓由来トロポニンＩ、心臓由来トロポニンＴ、脳性ナトリウム利尿タンパク質（ＢＮＰ）、ＢＮＰ由来のＮ末端ペプチド（ＮＴ−ｐｒｏＢＮＰ）、及び心臓由来脂肪酸結合タンパク質（ｃＦＡＢＰ）からなる群から選択されるマーカを呈示する、請求項１〜１４のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１６】
前記体液が、血漿又は血清である、請求項２、４、又は５のいずれか１項に記載の組成物。