(57)【要約】【課題】乳幼児の皮膚の状態を低侵襲で、簡便かつ的確に評価する、乳幼児の皮膚の状態の評価方法を提供する。【解決手段】被験乳幼児の皮膚炎部位又はその近傍部位における皮膚角層の細胞間脂質の分子会合状態を測定し、基準値と比較する工程を含む、乳幼児の皮膚状態の評価方法。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
被験乳幼児の皮膚炎部位又はその近傍部位における皮膚角層の細胞間脂質の分子会合状態を測定し、基準値と比較する工程を含む、乳幼児の皮膚状態の評価方法。
【請求項２】
皮膚炎が刺激性接触皮膚炎である請求項１記載の方法。
【請求項３】
皮膚炎がおむつの刺激によって生じる刺激性接触皮膚炎である請求項１又は２記載の方法。
【請求項４】
細胞間脂質の分子会合状態が、皮膚表面からの深さ３〜６μｍにおける角層の細胞間脂質の分子会合状態である請求項１〜３のいずれか１項記載の方法。
【請求項５】
皮膚状態の評価が、皮膚炎の発症の有無、皮膚炎の進行度、皮膚炎発症の可能性の有無、皮膚炎の治癒状況、又は皮膚炎に対する治療もしくは予防効果の計測である請求項１〜４のいずれか１項記載の方法。
【請求項６】
被験物質を塗布又は摂取する工程、皮膚角層の細胞間脂質の会合状態を測定し、基準値と比較する工程を含む、皮膚炎の改善若しくは予防、又は乳幼児の皮膚の状態の維持に対する、被験物質の有効性を評価する方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、乳幼児の皮膚の状態を評価する方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
皮膚炎の発症の有無などの乳幼児の皮膚の状態は、皮膚を目視して判断することによりある程度の評価ができる。しかし、いうまでもなく、皮膚の見た目の判断では、乳幼児の皮膚の状態を分子レベルで科学的にかつ定量的に評価することができない。
【０００３】
乳幼児の皮膚に頻発するトラブルとしておむつ皮膚炎がある。乳幼児は皮膚炎によるかゆみ、苦痛などの自覚症状を明確に言葉として訴えることができず、保護者によって認識されることが多く、保護者の意識、判断の遅れから、適切な処置を受けずに悪化してしまう場合も多かった。
【０００４】
したがって、皮膚炎の発症を悪化する前や発症前に適切に処置することは、重要であり、それを客観的に判定する方法が望まれていた。斯かる状況の下、本出願人は、おむつ皮膚炎を発症する皮膚に関する検証から、おむつ皮膚炎を有する乳幼児角層とおむつ皮膚炎を有さない乳幼児角層のそれぞれの細胞間脂質成分の組成に相違があり、当該細胞間脂質中の特定のセラミド成分の成分量比を指標として乳幼児の皮膚の状態を評価できることを見出している（特許文献１）。
【０００５】
皮膚は、体内からの水分や生体成分の損失、並びに外部からの異物の進入を防ぐ機能を有している。このような機能は、一般に「皮膚のバリア機能」と呼ばれている。皮膚のバリア機能は、主に皮膚の最外層に存在する角層が担っている。角層は角質細胞とその間を埋める細胞間脂質から成り、レンガモルタル構造と呼ばれている。角層の細胞間脂質は、多層状構造（ラメラ構造）を形成し、角層のバリア機能において重要な役割を担っているとされる。肌荒れや加齢などにより角層の細胞間脂質の構造が変化すると、皮膚のバリア機能が低下することが知られている（非特許文献１）。１２８名の日本人女性の頬を対象とした試験では、加齢に伴って細胞間脂質の側方充填構造が低下することが報告されている（非特許文献２）。
健常男性３７名の前腕屈側部を対象としてＴＥＷＬとラマン分光スペクトル中の脂質分子に由来するピークの強度を測定したところ、相関関係を示すことが報告されている（特許文献２）。
【０００６】
しかしながら、おむつ皮膚炎を起こした乳幼児の皮膚状態と細胞間脂質の会合状態との関係は全く報告されていない。細胞間脂質の会合状態と乳幼児の皮膚状態の関連を明らかにすることで、ＴＥＷＬでは推し量ることのできない細胞間脂質の状態を知ることができる。細胞間脂質の情報は、リピドミクスによる分析が主流だが、侵襲性があること、詳細な分析には時間がかかることが欠点として挙げられる。このため、乳幼児の皮疹のように、頻繁に消失・出現する皮膚に対しては、非侵襲的、かつ、その場でタイムリーに皮膚状態を評価できることは、乳幼児の皮疹における皮膚状態を理解し、かつその悪化を防ぐ上で非常に有益であると考えられる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００７】
【特許文献１】特開２０１７−２２７６１９号公報
【特許文献２】特開２０１３−２５０１７４号公報
【非特許文献】
【０００８】
【非特許文献１】八田一郎、中西加奈、太田昇  Netsu Sokutei ２００７:３４（４）:１５９−１６６
【非特許文献２】2014年 第２８回ＩＦＳＣＣ学会発表 ”Lateral Packing of Stratum Corneum Intercellular Lipids Become less rigid” T. Aosaki, S. Kikuchi, Y. Katayama, J. Okada, S. Naito, Y. Shibuya, M. Sasajima
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００９】
本発明は、乳幼児の皮膚の状態を非侵襲で、簡便かつ的確に評価する、乳幼児の皮膚の状態の評価方法を提供することに関する。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
本発明者らは、おむつかぶれの症状が見られる乳幼児の皮膚角層の細胞間脂質の構造と機能を解析し、かぶれとの関連性を調べたところ、おむつかぶれ群では経皮水分蒸散量（ＴＥＷＬ)が有意に高く、おむつかぶれ群の皮疹部は非かぶれ群の同一部位と比較し、細胞間脂質の分子会合状態（横方向）の秩序度が有意に低く、細胞間脂質の分子会合状態がおむつ皮膚炎等の乳幼児の皮膚状態を評価するための指標となり得ることを見出した。
【００１１】
すなわち、本発明は、被験乳幼児の皮膚炎部位又はその近傍部位における皮膚角層の細胞間脂質の分子会合状態を測定し、その測定値を基準値と比較する工程を含む、乳幼児の皮膚状態の評価方法、を提供する。
また本発明は、被験物質を塗布又は摂取する工程、皮膚角層の細胞間脂質の会合状態を測定し、基準値と比較する工程を含む、皮膚炎の改善若しくは予防、又は乳幼児の皮膚の状態の維持に対する、被験物質の有効性を評価する方法、を提供する。
【発明の効果】
【００１２】
本発明の方法によれば、おむつ皮膚炎等の乳幼児の皮膚の状態を、非侵襲で、簡便かつ的確に評価することが可能となる。これにより、例えば、保護者は、皮膚炎の状態を客観的指標に基いて把握できるため、必要に応じて患部を清潔に保つこと、保湿を心がけること、刺激の少ないおむつ用品を選択すること等のかぶれ対策を講じることができ、皮膚炎の発症を未然に防止できる。また皮膚炎を発症している場合は、その治療効果や治癒状況を的確に判断することができる。
また、本発明の方法によれば、乳幼児の排尿部、肛門部、臀部、鼠蹊部、腰部等の皮膚に適用する外用剤、内服剤、身体洗浄剤、入浴剤、おむつ用品等のかぶれリスクへの影響を評価することができる。
【発明を実施するための形態】
【００１３】
乳幼児の皮膚状態の評価方法は、被験乳幼児の皮膚炎部位又はその近傍部位における皮膚角層の細胞間脂質の分子会合状態を測定し、基準値と比較する工程を含むものである。
【００１４】
後記実施例に示すように、皮膚科専門医師によりおむつ皮膚炎を有すると診断された群（以下、かぶれ群）の皮疹部では経皮水分蒸散量（ＴＥＷＬ）と角層水分量が有意に高かったことから皮膚炎の発症部位（以下、「皮疹部」ともいう）はバリア機能が低下していることが認められた。そして、かぶれ群の皮疹部は非かぶれ群の同一部位と比較し、角層（深さ３−６μｍ）における細胞間脂質の分子会合状態が有意に低く、おむつかぶれの皮膚炎のバリア機能の低下に細胞間脂質の分子会合状態が関係していることが示された。したがって、角層の細胞間脂質の分子会合状態を指標として、皮膚炎に関連する皮膚状態を評価できると考えられる。とりわけ、見た目からは皮膚炎を発症しているか否かの判断が難しい、軽微又は軽度な皮膚炎の皮膚状態の評価に用いることが好ましく、軽微又は軽度な刺激性接触皮膚炎の評価に用いることが好ましい。ここで軽微又は軽度な刺激性接触皮膚炎とは、後出の表１のおむつ皮膚炎重症度評価基準に基く重症度のスコアが１又は２であることを意味する。
【００１５】
本発明において、「被験乳幼児」とは、ヒトの乳幼児を指し、例えば生後３か月〜３６か月、好ましくは生後３か月〜２４か月、より好ましくは生後４か月〜６か月までの乳幼児を指す。
【００１６】
本発明において、乳幼児の皮膚の状態が評価される部位は、角層の細胞間脂質の分子会合状態が測定される部位であって、皮膚炎部位又はその近傍部位である。
ここで、「皮膚炎部位」とは、皮膚炎の発症部位、すなわち皮疹部を指し、その近傍部位には、皮疹部と隣接する無疹部（皮膚炎の症状が見られない部位）が包含されるが、皮疹部であるのが好ましい。ここで皮疹部と隣接する無疹部とは、例えば皮疹部外縁から３ｃｍ以内、好ましくは１ｃｍ〜３ｃｍにある領域を指す。なお、皮疹部以外の一見正常と思われる無疹部の皮膚状態を評価すれば、皮膚炎の発症の有無、皮膚炎の発症の可能性、皮膚炎の病態の進行度、皮膚炎の治癒の程度や治療効果などが判定できる。
【００１７】
本発明において、「皮膚炎」とは、一般的な技術用語として用いられる「湿疹」と同義である。臨床的には、皮膚炎を発症すると、丘疹、紅斑、落屑、浸潤、などを呈する。
皮膚炎の原因としては、刺激性物質やアレルゲンなどの外的因子により発症する皮膚炎と、アトピー素因などの内的因子により発症する皮膚炎とに大別される。実際には、これら両方の要素により皮膚炎が発症する場合も多い。また、これらの要素に加えて、IV型アレルギーなどの免疫反応により、特徴的な描像を形成する場合もある。
【００１８】
皮膚炎の具体例としては、接触皮膚炎、アトピー性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、はたけ、貨幣状湿疹、感染性湿疹様皮膚炎、自家感作性皮膚炎、皮脂欠乏性皮膚炎、白色粃糠疹、手足の湿疹、単純性苔癬、うっ滞性皮膚炎が挙げられる。
このうち、本発明では接触皮膚炎を好ましく指す。ここで「接触皮膚炎」とは、皮膚に接触した物質（例えば、おむつなどの吸収性物品、衣類やタオルなどの繊維製品、ティシュペーパー、トイレットペーパーなどの紙製品、おしりふきやウェットティッシュなどの不織布、糞尿や菌由来の刺激物質、洗剤、せっけん、化粧品などの日常生活用品に含まれる化学物質、食品、金属、植物、ほこりなど）の刺激によって生じる皮膚炎（刺激性接触皮膚炎）と、アレルギー反応によって生じる皮膚炎とに大別される。本発明は特に、刺激性接触皮膚炎の評価に好適に用いることができる。
【００１９】
刺激性接触皮膚炎のうち、おむつなどの吸収性物品と乳幼児の皮膚とが接触したときに生じるおむつ皮膚炎の評価に特に好適である。このようなおむつ皮膚炎の生じやすい部位としては、排尿部、肛門部、臀部、鼠蹊部、腰部、並びにこれらの近傍部などが挙げられる。よって本発明は、排尿部、肛門部、臀部、鼠蹊部、腰部、並びにこれらの近傍部の皮膚の状態の評価に好適である。
【００２０】
本発明の「皮膚状態の評価」における「皮膚状態」とは、上記皮膚炎との関係における皮膚状態を意味し、具体的には、上記皮膚炎の発症の有無、上記皮膚炎の進行度、上記皮膚炎発症の可能性の有無、上記皮膚炎の治癒状況、上記皮膚炎に対する治療もしくは予防効果が挙げられる。
【００２１】
本発明においては、皮膚角層の細胞間脂質の分子会合状態が測定されるが、ここで、「細胞間脂質の分子会合状態」（「細胞間脂質の分子会合構造」とも称される）とは、細胞間脂質のパッキング状態を意味し、詳細には、ラメラ構造を形成する細胞間脂質において、ラメラ方向に直行する横断面での炭素鎖の並び方すなわち側方充填構造を指す。斯かる側方充填構造は、密に炭素鎖が充填されている直方晶構造と、疎に炭素鎖が充填されている六方晶構造が知られており、本発明の細胞間脂質の分子会合状態にはそれらの構造を包含する。
なお、細胞間脂質は、角質細胞の周囲を取り囲む脂質であり、セラミド、コレステロール、脂肪酸などからなる。細胞間脂質はラメラ構造を形成し、長周期ラメラ構造と短周期ラメラ構造が存在する（Van Smeden J, Janssens M, Gooris GS, Bouwstra JA. The important role of stratum corneum lipids for the cutaneous barrier function. Biochimica et Biophysica Acta - Molecular and Cell Biology of Lipids. 2014; 1841; 295-313.）。しかし、本発明においては、その構造は限定されるものではない。
【００２２】
細胞間脂質の分子会合状態は、Ｘ線回析、電子線回析、フーリエ変換ＩＲ（ＦＴ−ＩＲ）、電子顕微鏡観察、ラマン分光法などを用いて測定することができるが、本発明においては、皮膚から試料を剥離することなく非侵襲で測定できる点及びハイスループットである点から、共焦点ラマン分光法を用いて測定するのが好ましい。細胞間脂質は周囲の環境から影響を受けやすいため、共焦点ラマン分光法を用いると角層をそのまま測定できるという利点も挙げられる。
ラマン分光法を用いて角層のスペクトルを測定し、それに基づき細胞間脂質の分子会合状態を評価する手段は、例えば特開２０１３−６１２８４号公報に記載の方法に従って行うことができる。
すなわち、ラマン分光により皮膚の角層のスペクトルを測定し、測定したスペクトルから含水脱脂角層の寄与分を除去し、細胞間脂質に特異的な信号（ＣＨ２対称伸縮振動に由来するスペクトル中２８５０ｃｍ−１付近で検出される信号、及び／又はＣＨ２逆対称伸縮振動に由来するスペクトル中２８８０ｃｍ−１付近で検出される信号）を抽出したスペクトルを得、これに基づいて細胞間脂質の分子会合状態を評価することができる。
ヒトの角層のラマンスペクトルを測定した場合、細胞間脂質のＣＨ２伸縮振動由来の信号（２８５０ｃｍ−１付近の信号と２８８０ｃｍ−１付近に出現）と、タンパク質のＣＨ３伸縮振動に由来する信号（２９３０ｃｍ−１付近に出現）は、一部が重複した波数領域で観察される。そのため、タンパク質、脂質及び水を主要構成成分とする角層のラマンスペクトルを測定すると、タンパク質及び脂質にそれぞれ由来とする信号が重畳したスペクトルが得られる。そこで、角層のラマンスペクトルからタンパク質のＣＨ３伸縮振動の影響を除去して、細胞間脂質由来の信号を正確に抽出する必要がある。特開２０１３−６１２８４号公報に記載の通り、角層から細胞間脂質などの油性成分とアミノ酸などの水溶性成分を除去した後の脱脂角層に含水させた含水脱脂角層モデルのラマンスペクトルを解析すると、該ラマンスペクトル中のＣＨ３伸縮振動に由来する信号の極大吸収波長が、角層のラマンスペクトル中のＣＨ３伸縮振動に由来する信号の極大吸収波長とほぼ一致する。よって、同公報に従って角層のラマンスペクトルから含水脱脂角層の寄与分を除去することで、細胞間脂質に特異的な信号を抽出することができる。この場合、角層のラマンスペクトルの信号強度と含水脱脂角層モデルのラマンスペクトルの信号強度は必ずしも一致しないため、ラマンスペクトル中２９３０ｃｍ−１付近に出現する、ＣＨ３伸縮振動由来の信号強度に基づき、両スペクトルを規格化してから抽出することで、細胞間脂質に特異的な信号を正確に抽出することができる。このように抽出した細胞間脂質に関する２つの信号を指標として、細胞間脂質の分子会合構造を評価することができる。
【００２３】
細胞間脂質がラメラ構造を形成し測定部位における細胞間脂質の分子間相互作用が大きくなると細胞間脂質を構成するアルキル鎖の運動性が低下し、２８８０ｃｍ−１付近の信号が大きくなる。これに対して、測定部位における細胞間脂質の分子間相互作用が小さくなると細胞間脂質を構成するアルキル鎖の運動性が上昇し、２８８０ｃｍ−１付近の信号が小さくなる。以下に示す２８５０ｃｍ−１付近の信号に対する２８８０ｃｍ−１付近の信号の強度比（以下、Ｒ値と表記）が、細胞間脂質を構成するアルキル鎖の運動性や細胞間脂質の結晶構造を反映することが知られている（P.R.Carey  ラマン分光学―基礎と生化学への応用  共立出版  1984）。
【００２４】
【数１】
2020193915.tif 000002
【００２５】
Ｒ値を算出し、層構造形成の有無、細胞間脂質の会合状態、細胞間脂質を構成するアルキル鎖の運動性、細胞間脂質の結晶構造などを評価する。Ｒ値が大きくなると、細胞間脂質の分子会合状態は秩序度が高い状態（パッキングが密）であり、Ｒ値が小さくなると、細胞間脂質の分子会合状態は秩序度が低い状態（パッキングが疎）となる。
よって、本発明における細胞間脂質の分子会合状態は、斯かるＲ値を指標として評価することができる。
【００２６】
当該細胞間脂質の分子会合状態は、角層を含む皮膚の任意の深さ（例えば皮膚表面からの深さが０〜３０μｍ）において測定されるが、本発明においては、皮膚表面からの深さが２〜１５μｍ（角層全層の厚さ（角層厚）を１００％とした場合における、皮膚表面から１４〜１００％程度の深さ範囲に相当）、好ましくは２〜８μｍ（同、１４〜５６％程度の深さ範囲に相当）、より好ましくは３〜６μｍ（同、２１〜４２％程度の深さ範囲に相当）における角層の細胞間脂質の分子会合状態を測定するのが好ましい。なお、角層厚としては、ラマン分光法により取得される角層中の水分量データに基づく水分プロファイルを２本の１次直線で近似した時、該２本の直線の交点における深さを用いることができる。
細胞間脂質の会合状態は温度により影響を受けることが知られているので、ラマン分光により皮膚の角層のスペクトルを測定する前に、皮膚温を一定に保持するために、被験者を定温条件下で順化させることが好ましい。また測定時には皮膚温を測定し、皮膚温が一定であることを確認するのが好ましい。
【００２７】
測定された細胞間脂質の分子会合状態は、基準値と比較することにより、乳幼児の皮膚状態が評価される。
基準値は、例えば、細胞間脂質の分子会合状態と、乳幼児の皮膚の状態との関連づけから以下のように設定することができる。
乳幼児の皮膚の状態を、目視評価や機器分析等の手段により評価する。その評価結果に基づき、皮膚の状態が健常と判断される被験体から構成される健常群と、皮膚炎と判断される被験体から構成される皮膚炎群を作成する。これとは別途、前述の方法により細胞間脂質の分子会合状態（Ｒ値）を測定する。そして皮膚の状態の評価結果とＲ値との相関性に基づき、皮膚の状態を評価するのに適した基準値を決定される。具体的には、各群に属する乳幼児のＲ値の統計解析結果に基づき、各群を特徴づけるＲ値の数値範囲を決定する。この数値範囲は、各群の平均値を中心とした上下の一定範囲に設定することにより決定する。ここで「一定範囲」とは、標準偏差（ＳＤ）等の統計数値や、１／２ＳＤ値、１／３ＳＤ値などを用いてもよいし、予め設定した任意の数値を用いてもよい。そして、各群を特徴づける数値範囲の上限又は下限を、基準値とする。
【００２８】
例えば、Ｒ値の数値範囲を規定する「一定範囲」として１／３ＳＤ値を用いた場合、健常群のＲ値の数値範囲の下限（例えば、皮膚表面から深さ３μｍにおけるラマン分光スペクトルから算出されるＲ値の場合は１．１７７）又は皮膚炎群Ｒ値の数値範囲の上限（例えば、皮膚表面から深さ３μｍにおけるラマン分光スペクトルから算出されるＲ値の場合は１．１３１）のいずれかを基準値とし、測定された被験乳児において測定されたＲ値が基準値以上の場合を「健常である」と評価し、Ｒ値が基準値未満の場合を「皮膚炎の可能性がある」又は「皮膚炎の可能性が高い」と評価できる。
【００２９】
斯くして、本発明の方法によれば、おむつ皮膚炎等の乳幼児の皮膚の状態を、非侵襲で、簡便かつ的確に評価することができる。経皮水分蒸散量（ＴＥＷＬ）を測定することにより、皮膚バリア機能を評価する方法もあるが、ＴＥＷＬの測定では、動きを制止させて安静を保ち、長時間の測定の間、測定用プローブを水平な状態を保って非常に微弱な圧力で皮膚に接触させ続ける必要があることから、乳幼児を対象とした場合非常に困難を伴う。さらに、発汗などによる皮膚表面の残留物の影響も受けやすい。これに対して、ラマン分光による測定が可能な本発明の方法では、測定用プローブを測定部位の皮膚にしっかり密着するように、比較的短時間押し当てるだけで測定が可能であり、また表面の残留物の影響を受けずに皮膚内部の情報を得ることができるため、乳幼児を対象とした皮膚状態の評価に適した方法と云える。
なお、本発明における「評価」とは、乳幼児の皮膚の状態に関する情報提供行為であり、医師による診断等の医療行為を包含するものではない。
【００３０】
また、本発明の乳幼児の皮膚の状態の評価方法によれば、皮膚外用剤の塗布試験や、何らかの機能性食品や医薬品、医薬部外品の摂取試験等において、これらの被験物質の塗布又は摂取後の皮膚角層の細胞間脂質の分子会合状態を測定し、基準値と比較することにより、その被験物質の皮膚炎の改善若しくは予防、又は乳幼児の皮膚の状態の維持に対する有効性を評価すること、或いはそれに基づいて当該被験物質を有効成分として選択することができる。この場合、基準値としては、例えば被験物質の塗布又は摂取前の皮膚角層の細胞間脂質の分子会合状態の測定値を用いればよい。
ここで、「皮膚の状態の維持」とは、皮膚炎が改善又は予防された健康な皮膚の状態を、定常的に維持することをいう。また、「予防」とは、個体における疾患若しくは症状の発症の防止若しくは遅延、又は個体の疾患若しくは症状の発症の危険性を低下させることをいう。具体的には、細胞間脂質の分子会合状態（Ｒ値）を、前述の基準値より大きい状態に維持することを指す。
【実施例】
【００３１】
以下、本発明を実施例に基づきさらに詳細に説明するが、本発明はこれに限定されるものではない。
１．方法
（１）被験乳幼児
月齢が４−６ヶ月齢の日本人男児及び女児について、以下の基準により、非かぶれ群１３名（男６名、女７名）、かぶれ群１０名（男７名、女３名）を選抜した。
＜被験者のリクルート基準＞
おむつかぶれなし児：おむつ被覆部位に紅斑・丘疹・落屑・浸潤がない児。
おむつかぶれ児：下記表１のおむつ皮膚炎重症度評価基準に基づき皮膚科専門医師が重症度を評価し、そのスコアが３又は４の乳幼児で、かつ共焦点ラマンで測定可能な肛門から臀部にかけて比較的広範囲にかぶれがある児。
【００３２】
【表１】
2020193915.tif 000003
【００３３】
（２）評価部位
おむつ被覆部位として臀部、排尿部及び肛門部を含む範囲を評価部位とした。
（３）皮膚計測
温度２４度、湿度４０％に制御した環境可変室内において、新しいおむつを軽く着用した状態で２０分間皮膚を馴化させた。その後、皮膚温をInfrared Thermometer IR-TA Series（Chino社製）を用いて、角層水分量をCorneometer CM825（Courage and Khazaka社製 MPA5）を用いて、経皮水分蒸散量をTewameter TM300（Courage and Khazaka社製 MPA5）を用いて各部位（かぶれ児は臀部の皮疹部、非かぶれ児は臀部の無疹部）の測定を行った。角層水分量の測定は各部位につき１０点ずつ、経皮水分蒸散量の測定は各部位につき３点ずつ測定して平均値を算出した。
共焦点ラマンの計測は、共焦点ラマン分光装置 Raman spectroscopy Model3510（River Diagnostic社製）を用い、下記の測定条件にて臀部から肛門部にかけての部位１箇所について、３回以上測定し、角層内の脂質のパッキングの指標であるＲ値の平均値を算出した。
（測定条件）
励起波長：６７１ｎｍ
積算時間：１０秒／１スペクトル
対物レンズ：４０倍、ＮＡ＝１．２
深さ方向スキャン条件：皮膚表面から３μｍ毎にスキャン
【００３４】
２．結果
（１）角層性状
皮疹の評価結果と皮膚計測結果を表２に示す。非かぶれ群無疹部と比較して、皮疹スコアが有意に高いかぶれ群皮疹部では、経皮水分蒸散量と角層水分量が有意に高かったことから皮疹部はバリア機能が低下していることがわかった。皮膚温については、有意な差は認められなかった。
【００３５】
【表２】
2020193915.tif 000004
【００３６】
（２）角層内の脂質のパッキング性（共焦点ラマン分光法）
角層内Ｒ値のプロファイルは、かぶれ群皮疹部が非かぶれ群無疹部に対して深さ３μｍ（角層全層の厚さ（角層厚）を１００％とした場合における、皮膚表面より２１％付近の深さに相当）、と６μｍ（角層全層の厚さ（角層厚）を１００％とした場合における、皮膚表面より４２％付近の深さに相当）のＲ値が低かった。皮膚温は、脂質のパッキング性に影響を与えることが知られているが、上述の通り、今回、かぶれ群皮疹部と非かぶれ群で皮膚温に差がなかったため温度以外の要因、つまり、皮膚炎の皮膚状態に基づく細胞間脂質の状態の相違をＲ値で評価することができたと考える。
【００３７】
【表３】
2020193915.tif 000005