(57)【要約】【課題】保護基であるＴ-ブチルオキシカルボニル基の除去工程において除去困難な不純物を生じ、また除去工程の反応に工業的生産に適さない化合物を使用しなければならないという従来のリナグリプチンの製法上の課題を解決し、大規模な工業的生産にも適した新たなリナグリプチンの製造方法を開発する。【解決手段】化合物４からリナグリプチン（化合物１）を合成する合成方法について、下記工程Ａ、Ｂから成る工程による反応とする。（工程Ａ）化合物４を親水系有機溶媒に溶解した後、酸性条件下でインキュベーションする工程、および、（工程Ｂ）工程Ａ終了後に水層部を回収し、ｐＨ１１以上の塩基性条件下でインキュベーションする工程。2020070296.tif 000018  （上記式中、Ｂｏｃはｔ-ブチルオキシカルボニル基を示す）【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
化合物４からリナグリプチン（化合物１）を合成する製造法において、当該化合物４から化合物１への変換を、下記工程（Ａ）および工程（Ｂ）を実施することを特徴とするリナグリプチンの製造法。
（工程Ａ）化合物４を親水系有機溶媒に溶解した後、酸性条件下でインキュベーションする工程、および、
（工程Ｂ）工程Ａ終了後に水層部を回収し、ｐＨ１１以上の塩基性条件下でインキュベーションする工程
2020070296.tif 000017
（上記式中、Ｂｏｃはｔ-ブチルオキシカルボニル基を示す）
【請求項２】
工程Ａのインキュベーションを、反応系における水分含有率２０％以下で行う、請求項１記載の製造法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、リナグリプチンの改良された製造方法に関する。
【背景技術】
【０００２】
下記構造式１で表されるリナグリプチン（Ｌｉｎａｇｌｉｐｔｉｎ、８−［（３Ｒ）−３−ａｍｉｎｏｐｉｐｅｒｉｄｉｎ−１−ｙｌ］−７−（ｂｕｔ−２−ｙｎ−１−ｙｌ）−３−  ｍｅｔｈｙｌ−１−［（４−ｍｅｔｈｙｌｑｕｉｎａｚｏｌｉｎ−２−ｙｌ）ｍｅｔｈｙｌ］−３，７−ｄｉｈｙｄｒｏ−１Ｈ−ｐｕｒｉｎｅ−２，６−ｄｉｏｎｅ）は、ジペプチジルペプチダーゼ４（ＤＰＰ４）阻害薬に分類される経口血糖降下薬であって、２型糖尿病治療薬等として用いられている化合物である。
【０００３】
【化１】
2020070296.tif 000002
【０００４】
リナグリプチンの合成方法として従来、下記［化２］にて示すスキームに従って合成する方法が知られている（特許文献１、非特許文献１）。
【０００５】
【化２】
2020070296.tif 000003
【０００６】
（上記式中、Ｂｒはブロモ基、Ｂｏｃはｔ-ブチルオキシカルボニル基を示す）
すなわち、原料化合物２に対してアミノピペリジンユニットを導入し、化合物４を得た後に（工程１）、ｔ−ブチルオキシカルボニル基の除去を行い（工程２）、目的化合物である化合物１を得るというものである。
【０００７】
従来法における工程１の反応は、ジメチルホルムアミド等の溶媒中で、炭酸カリウム等の無機塩基の存在下で行っている。また、工程２の反応は、塩化メチレン、酢酸エチル、ジオキサン、メタノール、イソプロパノールおよびジエチルエーテル等の溶媒を使用し、０〜８０℃の温度条件にて、トリフルオロ酢酸、ジクロロメタンもしくは塩酸等の酸や、ブロモトリメチルシラン、ヨードトリメチルシラン等で処理することによってなされる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００８】
【特許文献１】特表２００６−５０３０１３
【特許文献２】特表２００８−５１９００５
【非特許文献】
【０００９】
【非特許文献１】Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．  Ｖｏｌ．５０，  Ｎｏ．２６、ｐ．６４５０−６４５３，２００７
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【００１０】
しかしながら、従来法による合成法では、特に工業規模で、除去することが困難な不純物が生じるため、工業的製造、特に純度要求が厳しい薬物製造には不適であると指摘されていた（特許文献２）。当該不純物は、使用される保護基に起因するため、当該問題を解決する改良合成法として、ｔ-ブチルオキシカルボニル基に代えてフタロイル基を用いる方法が知られているが（特許文献２）、この方法でも満足いく結果ではなかった。
【００１１】
さらに従来法のもう１つの問題として、ｔ-ブチルオキシカルボニル基の除去工程において、トリフルオロ酢酸、ブロモトリメチルシラン、ヨードトリメチルシランまたはジクロロメタン等の医薬品製造の使用において安全性への懸念を有する化合物を反応に用いる必要があるため、大規模な工業的生産に適さない点が指摘されていた。なお、工業的生産に比較的適した塩酸やイソプロパノールを使用可能と記載する公知文献も存在するが（非特許文献１）、当該化合物を用いて実際に合成を行った例は記載されておらず、どのような条件においてリナグリプチンを高純度で得られるかは依然として不明であった。
【００１２】
したがって本願発明の課題は、保護基であるｔ-ブチルオキシカルボニル基の除去工程において除去困難な不純物を生じ、また除去工程の反応に工業的生産に適さない化合物を使用しなければならないという従来のリナグリプチンの製法上の課題を解決し、大規模な工業的生産にも適した新たなリナグリプチンの製造方法を開発することにある。
【課題を解決するための手段】
【００１３】
本願発明者らは課題を解決すべく鋭意検討を行った結果、リナグリプチン合成反応中の工程２において、塩酸のような工業的生産にも適した化合物を用いて反応を行ったとき、２種の不純物が生じることを見出した。そこで、工程２の脱保護反応を後述する実験例に示すように詳細に解析した結果、下記のような工程Ａ、工程Ｂに分けて実施することによって、前記工程２における２種の不純物の生成を抑え、かつ工業的生産に適さない溶媒を使用することなくリナグリプチンを製造できることを見出し、本発明を完成させた。
【００１４】
【化３】
2020070296.tif 000004
（上記式中、Ｂｏｃはｔ-ブチルオキシカルボニル基を示す）
【００１５】
すなわち本願発明は、上記［化３］に示す工程から成る化合物１（リナグリプチン）の合成方法において、化合物４から上記化合物１への変換を、下記工程（Ａ）および工程（Ｂ）を実施することを特徴とするリナグリプチンの製造法に関するものである。
（工程Ａ）化合物４を親水系有機溶媒に溶解した後、酸性条件下でインキュベーションする工程、および、
（工程Ｂ）工程Ａ終了後に水層部を回収し、ｐＨ１１以上の塩基性条件下でインキュベーションする工程。
【発明の効果】
【００１６】
本願発明の方法によれば、ｔ-ブチルオキシカルボニル基を用いた合成法において従来問題とされていた不純物の生成を生じることなく、また工業生産に適さない化合物を用いることなく、高純度のリナグリプチンを合成することができる。具体的には、トリフルオロ酢酸、ジクロロメタン、ブロモトリメチルシランまたはヨードトリメチルシラン等ののような工業的製造に適さない溶媒を用いることなく、純度９９％以上という高い純度でリナグリプチンを得ることができるものである。
【図面の簡単な説明】
【００１７】
【図１】図１は、ｔ-ブチルオキシカルボニル基除去工程後、塩基性条件に供する前の反応液におけるＨＰＬＣ分析結果を示す。上段は全体図、下段は保持時間２〜１０分の部分を拡大した図を示す。
【図２】図２は、ｔ-ブチルオキシカルボニル基除去工程後、塩基性条件に供した後の反応液におけるＨＰＬＣ分析結果を示す。上段は全体図、下段は保持時間２〜１０分の部分を拡大した図を示す。
【発明を実施するための形態】
【００１８】
本願発明は、下記スキームに示す工程から成る化合物１（リナグリプチン）の合成方法において、化合物４から上記化合物１への変換を、
（工程Ａ）化合物４を親水系有機に溶解した後、酸性条件下でインキュベーションする工程、および、
（工程Ｂ）工程Ａ終了後に水層部を回収し、ｐＨ１１以上の塩基性条件下でインキュベーションする工程、
から成ることを特徴とする、リナグリプチンの合成方法である。なお本明細書において「インキュベーション」とは、反応系を適切な温度下に置き、化学反応を進めることをいう。
【００１９】
【化４】
2020070296.tif 000005
（上記式中、Ｂｏｃはｔ-ブチルオキシカルボニル基を示す）
【００２０】
化合物４は公知化合物であり（特許文献１、非特許文献１）、前述した［化２］に示すスキームによって合成することも可能である。
【００２１】
化合物４を合成するための原料化合物である化合物２は公知であり、市販されているほか、例えば非特許文献１の記載に従って合成することが可能である。また、化合物３も公知であって、市販のものを購入できるほか、公知文献（例えば、中国特許公開第１０５１３０８７９号）に従って合成することが可能である。
【００２２】
化合物２と３を反応させ化合物４を得る反応は、公知の方法（特許文献１、非特許文献１）に従って行うことが可能である。具体的には、化合物２および３を、イソプロパノール、ブタノール、ジオキサン、ＤＭＦ（ジメチルホルムアミド）、ジメチルスルホキシド、エチレングリコールモノメチルエーテル、エチレングリコールジエチルエーテル、ＮＭＰ（Ｎ−メチル−２−ピロリドン）、ＤＭＡｃ（Ｎ，Ｎ−ジメチルアセトアミド）、アセトニトリル、トルエン、ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）またはスルホラン等の溶媒に溶解した後、炭酸ナトリウム、炭酸カリウムまたは水酸化カリウム等の無機塩またはトリエチルアミン等の三級有機塩基、またはＮ−エチル−ジイソプロピルアミン（ヒューニッヒ塩基）の存在下、また場合により、アルカリ金属ハライドまたはパラジウムを主成分とする触媒等の反応促進剤の存在下、７０〜９０℃で４〜４８時間程度撹拌することで反応させた後、水を添加し、結晶として沈殿する化合物４を濾取するなどの方法を例示することができる。得られた化合物４は、必要に応じて再結晶化などの工程をさらに経ても良い。
【００２３】
このようにして得られた化合物４におけるｔ-ブチルオキシカルボニル基を脱保護して、目的化合物である化合物１を得る際、下記工程（Ａ）と工程（Ｂ）を分けて実施する。工程（Ａ）と工程（Ｂ）は連続して実施するのが通常であるが、間隔を置いて実施してもかまわない。
【００２４】
工程（Ａ）：
化合物４を親水系有機に溶解した後、酸性条件下でインキュベーションする工程、
工程（Ｂ）：
工程Ａで得られた化合物溶液を、ｐＨ１１以上の塩基性条件下でインキュベーションする工程。
【００２５】
工程Ａでは、化合物４を親水系有機溶媒に溶解した後、酸性条件下でインキュベーションする。具体的には、化合物４をメタノール、エタノール、ブタノール、イソプロパノール、アセトニトリル、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、トルエン等の親水系有機溶媒に加え、必要に応じ加熱しながら溶解させた後、塩酸、硫酸、硝酸等の酸を加えて酸性条件とし、さらに０．１〜２４時間反応させる。このとき、メタノール、エタノール、プロパノールまたはイソプロパノール等のアルコール類をさらに添加しても良い。
【００２６】
当該反応系における水分含有率は２０％以下とすることが好ましく、１０％以下とすることがより好ましく、５％以下とすることがさらに好ましい。当該水分含有率とすることにより、不純物の生成をより抑えることが可能となる。反応系における水分含有率は、例えば、反応に添加する塩酸の濃度や量を調節することなどによって調整可能である。反応終了後は、酢酸エチル、酢酸イソプロピル、酢酸ｎ−ブチル、酢酸イソブチル、酢酸ｔ−ブチル、クロロホルム、ジクロロメタン、２−メチルテトラヒドロフラン、ジエチルエーテルまたはトルエン／水等による抽出を実施し、水層を回収する。
【００２７】
続く工程Ｂでは、上記工程Ａで得た水層部をｐＨ１１以上の塩基性条件下でインキュベーションする。具体的には、前記水層部に対して水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、ナトリウムメトキシド等のアルカリを十分量添加した後、０．１〜２４時間撹拌すればよく、このとき必要に応じて加熱を行ってもよい。また、メタノール、エタノール、プロパノールおよびイソプロパノール等のアルコールをさらに添加しても良い。当該方法によって、不純物を生成させることなく、目的化合物であるリナグリプチン（化合物１）を得ることができる。
【００２８】
上記反応終了後は、適宜知られた方法により、化合物１を単離・精製すればよい。具体例としては、反応終了後、まず酢酸エチル、酢酸イソプロピル、酢酸ｎ−ブチル、酢酸イソブチル、酢酸ｔ−ブチル、クロロホルム、ジクロロメタン、２−メチルテトラヒドロフラン、ジエチルエーテルまたはトルエン／水等による抽出を行い、有機溶媒層を回収した後、溶媒を減圧留去する。次に、生じた残渣をエタノールに溶解させて加熱し、連続的に温度を下げることで化合物１を結晶として析出させる方法などをとることができる。結晶化は、必要に応じて複数回行っても良い。
【００２９】
本願発明のリナグリプチンの製造方法によれば、反応系に、工業的生産に適さないトリフルオロ酢酸、ブロモトリメチルシラン、ヨードトリメチルシランまたはジクロロメタン等の化合物を用いることなく、また、２種の不純物の生成を完全に抑制し、ＨＰＬＣ純度９９％以上という高い純度でリナグリプチンを得ることができる。
【実施例】
【００３０】
以下、本願発明を実施例等により説明するが、本願発明はこれらによって何ら制限されるものではない。
【００３１】
（実験例）不純物の生成に関する検討
【００３２】
【化５】
2020070296.tif 000006
（上記式中、Ｂｒはブロモ基、Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボニル基を示す）
【００３３】
上記リナグリプチンの製造方法における工程２の工程（ｔ−ブチルオキシカルボニル基の除去工程）について、トリフルオロ酢酸、ジクロロメタン、ブロモトリメチルシランまたはヨードトリメチルシラン等の毒性の高い物質を用いずに反応を行った際の不純物生成について検討を行った。
【００３４】
（１）反応系中の水分含有率による、不純物生成の検討
工業的に容易に使用可能である塩酸とメタノールによる、化合物４のｔ−ブチルオキシカルボニル基の除去を検討した。すなわち、文献記載の合成法によって得られた化合物４にメタノールを加え、加熱還流下で溶解させた後、濃塩酸（濃度３７％（ｗ／ｖ））／メタノールを加え、同温で３時間撹拌した。このとき、反応系における水分含有率（％）が５０．８％、３９．０％、３．９％である３つの条件で反応を行った。
【００３５】
【化６】
2020070296.tif 000007
（上記式中、Ｂｏｃはｔ-ブチルオキシカルボニル基を示す）
【００３６】
反応終了後のそれぞれの液についてＨＰＬＣ分析を行った結果、主要な不純物として不純物１と不純物２が確認された。これらの不純物は系内の水分含有率によってその生成比が大きく変化することが確認された（表１）。
【００３７】
【表１】
2020070296.tif 000008
【００３８】
化合物１の含有量が最も大きかった番号２の方法による結果を用いて、メタノールの減圧留去と酢酸エチル／脱イオン水による抽出を実施したところ、目的化合物である化合物１の含有量の減少と共に、不純物２の含有量の著しい増加が確認された（表２）。
【００３９】
【表２】
2020070296.tif 000009
【００４０】
（２）不純物２に関する検討
不純物２の含有量増加の原因究明のため、不純物２の構造決定を行うこととした。
化合物１、不純物１および不純物２を含む反応液に対し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによる不純物２の単離を試みた。しかしながら、目的の不純物２を得ることができず、代わりに精製前には存在が確認されなかった新たな不純物３が確認された。ＥＳＩ−ＭＳによる解析の結果、不純物３は化合物１の二量体であることが示唆された。
【００４１】
化合物１の二量体として化合物５が知られている（特許第５８７６１５０号）。化合物５は化合物１に対して、４ｍｏｌ／Ｌ塩酸を作用させた後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによる精製を行うことで得られる。
【００４２】
【化７】
2020070296.tif 000010
【００４３】
不純物３の存在を確認した一連の実験操作と化合物５の製法がほぼ一致することから、不純物３と化合物５は同一の化合物であると推定した。さらに、不純物２は不純物３の中間体である可能性が高いことから、化合物１から化合物５（不純物３と推定）に至る反応機構を以下のように推定し、不純物２の構造を、化合物１のキナゾリン部位が異性化した化合物６または化合物７であると推測した。
【００４４】
【化８】
2020070296.tif 000011
【００４５】
化合物１と、不純物２であると予想される化合物６や化合物７の安定性を比較すると、芳香族性の観点から化合物１の方が安定であると推測され、化合物１から化合物６や化合物７への異性化は理論上進行しない。理論上進行しない化合物１から化合物７や化合物８への異性化が進行した要因として、化合物１のキナゾリン部位へのプロトン化により、化合物１と化合物６や化合物７とのエネルギー差が小さくなったためと考えられた。
【００４６】
そこで、キナゾリン部位に存在するプロトンを奪う（脱プロトン化を進行させる）ことによって、化合物６や化合物７から化合物１への異性化を進行させ、結果として不純物２の生成を抑制させることができると予想し、検討を行った。
【００４７】
【化９】
2020070296.tif 000012
【００４８】
しかるに、［表１］の番号２で示す条件による反応液（化合物１、不純物１および不純物２を含有する）を、ナトリウムメトキシド／メタノールを用いて塩基性条件に付した。塩基性条件に供する前後の反応液それぞれについてＨＰＬＣ分析を行い、結果を比較したところ、塩基性条件に供する前に確認されていた不純物２に相当するピークが、塩基性条件に供した後には確認されなくなっていた（表３、図１、図２）。
【００４９】
したがって、上記に推定した通り、不純物２は化合物６または７に示す化合物であり、塩基性条件に付すことによって当該不純物２の化合物１への異性化が進行することで、液中の不純物２が除去されたことが明らかになった。
【００５０】
【表３】
2020070296.tif 000013
【００５１】
（３）不純物１に関する検討
塩基性条件下での異性化によって不純物２の生成を抑制できることが明らかになったことから、続いて、不純物１の解析を行った。
【００５２】
不純物１は、反応系における水分含有率の上昇に伴って生成量が増加することから（表１）、化合物１の加水分解体であると推定された。シリカゲルカラムクロマトグラフィーによる単離を実施したところ、その構造は化合物８であることが判明した。すなわち、化合物８（不純物１）が生成する反応機構として、化合物１が化合物６または化合物７（不純物２）に異性化した後、加水分解が進行することで生成すると推定された。
【００５３】
【化１０】
2020070296.tif 000014
【００５４】
（４）不純物生成の抑制に関するまとめ
以上より、工業的に容易に使用可能な塩酸による化合物４のｔ-ブチルオキシカルボニル基の除去においては、生じた化合物１のキナゾリン部位の異性化によって不純物２（化合物６または７）が、また、不純物２の加水分解によって不純物１（化合物８）が生じることが明らかになった。また、不純物２（化合物６または化合物７）の副生は避けられないが、当該不純物２（化合物６または化合物７）は、塩基性条件下に付すことで化合物１に異性化させることが可能であるため、その副生は大きな問題にはならないことが判明した。
【００５５】
一方で、不純物１（化合物８）については、一度副生してしまうと化合物１に再変換させることは困難であるため、可能な限り副生を抑制するのが望ましい。そこで、［表１］番号３に示すように、反応系中の水分含有率を減らすことで、不純物１の生成量を減らすことが好ましいことが明らかになった。さらに、当該反応後に得られる化合物１と不純物２の混合物を塩基性条件に付すことで、不純物の含有量を抑えつつ、目的の化合物１を得られることが示された。
【００５６】
（実施例１）検討した合成スキームによるリナグリプチンの合成例
実験例の検討結果を工程の反応に反映させた上で、リナグリプチンを下記のように合成した。
【００５７】
【化１１】
2020070296.tif 000015
（上記式中、Ｂｒはブロモ基、Ｂｏｃはｔ-ブチルオキシカルボニル基を示す）
【００５８】
（アミノピペリジンユニットの導入）
化合物２（Ｅｍｅｉｓｈａｎ  Ｈｏｎｇｓｈｅｎｇ社、１０ｇ，２２ｍｍｏｌ）と化合物３（Ｅｍｅｉｓｈａｎ  Ｈｏｎｇｓｈｅｎｇ社、４．９ｇ，２４ｍｍｏｌ）に対しＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（４４ｍＬ）を加えた後、８０℃で撹拌しながら炭酸カリウム（６．１ｇ，４４ｍｍｏｌ）を加え、同温で２３時間撹拌した。反応終了後、同温で脱イオン水（５０ｍＬ）を加えた後、反応溶液の温度が室温に下がるまで撹拌した。析出した結晶を回収することで粗精製の化合物４（１９ｇ，＜２２ｍｍｏｌ）を得た。得られた粗精製の化合物４のＨＰＬＣ純度は９９．４％であった。
【００５９】
粗精製の化合物４（６．０ｇ，＜７．０ｍｍｏｌ）に対しエタノール（２３ｍＬ）を加え、８０℃で溶解させた後、同温で脱イオン水（２６ｍＬ）をゆっくり加え、１時間撹拌した。得られた懸濁液に対しエタノール（４ｍＬ）を加え、懸濁液の温度が５０℃に下がるまで  撹拌した。析出した結晶を回収することで化合物４（３．３ｇ，５．７ｍｍｏｌ，８２％）を得た。得られた化合物４のＨＰＬＣ純度は９９．８％であった。
【００６０】
化合物４のマススペクトル（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ＝５７３．９２［Ｍ＋Ｈ］＋
【００６１】
（ｔ−ブチルオキシカルボニル基の除去）
【００６２】
【化１２】
2020070296.tif 000016
（上記式中、Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボニル基を示す）
【００６３】
＜工程Ａ＞
化合物４（３．３ｇ，５．７ｍｍｏｌ）に対しメタノール（８．６ｍＬ）を加え、加熱還流下で溶解させた後、濃塩酸（濃度３７％（ｗ／ｖ））／メタノール（１／３）（２．９ｍＬ）を加え、同温で４時間撹拌した（反応における水分含有率３．９％）。反応終了後、脱イオン水（１０ｍＬ）を添加し、メタノールの減圧留去を行った。続いて、酢酸エチル／脱イオン水による抽出を実施し、水層を回収した。
【００６４】
＜工程Ｂ＞
次に、回収した水層にメタノール（１０ｍＬ）と水酸化ナトリウム水溶液（６．０ｍｏｌ／Ｌ，８．１ｍＬ）を順次加えて塩基性条件下とした後、加熱還流下で５時間撹拌した。水酸化ナトリウム添加後、ｐＨ１１以上となっていることをｐＨ試験紙によって確認した。反応終了後、酢酸エチル／脱イオン水による抽出を実施し、有機層を回収した。
【００６５】
当該液のＨＰＬＣ分析を行った結果、化合物１エリア面積（％）において、不純物１は０．１０１％、不純物２は検出限界以下であり、確かに不純物１および２の生成を十分に抑制できていることが明らかになった。
【００６６】
溶媒の減圧留去を行った後、残渣にエタノール（１１ｍＬ）を加え、８０℃で撹拌した。残渣が完全に溶解した後、溶液の温度を４０℃まで下げ、結晶を析出させた。析出した結晶を回収し、化合物１（１．９ｇ，４．０ｍｍｏｌ，７０％）を得た。得られた結晶における化合物１のＨＰＬＣ純度は９９．６％であった。
【００６７】
化合物１のマススペクトル（ＥＳＩ＋）：ｍ／ｚ＝４７３．７５［Ｍ＋Ｈ］＋
【００６８】
このように、本願発明の方法によれば、トリフルオロ酢酸、ブロモトリメチルシラン、ヨードトリメチルシランまたはジクロロメタン等の、医薬品製造の使用において安全性への懸念を有する化合物を反応に用いることなく、しかも不純物の生成をきわめて低く抑制しながら、リナグリプチンを合成できることが明らかになった。
【図１】
2020070296.tif 000019
【図２】
2020070296.tif 000020