(57)【要約】【課題】培養空間の側方を覆う側壁部に化合物が吸着しにくい細胞培養デバイスを実現する。【解決手段】細胞を培養するための培養空間（４１）を有する細胞培養デバイス（１）は、培養空間（４１）の下方を覆い細胞を支持する底面部（４１Ａ）と、培養空間（４１）の側方を覆う側壁部（４１Ｂ）とを備える。側壁部（４１Ｂ）の内面の純水に対する接触角が３°以上９０°以下である。【選択図】図５
2020141640.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
細胞を培養するための培養空間を有する細胞培養デバイスであって、
前記培養空間の下方を覆い前記細胞を支持する底面部と、前記培養空間の側方を覆う側壁部と、を備え、
前記側壁部の内面の純水に対する接触角が３°以上９０°以下である、細胞培養デバイス。
【請求項２】
前記側壁部の内面が、下記の式（１）、式（２）、式（３）、及び式（４）で表される基からなる群より選択される少なくとも１つの基を含む、請求項１に記載の細胞培養デバイス。
【化１】
2020141640.tif 000009
［ここで、
式（１）において、Ｒ１２は、ＮＨ又は酸素原子であり、ｍは、０〜４の整数であり、Ｒ１３は、水素原子、水酸基、又はメトキシ基であり、
式（３）において、Ｒ３２は、水素原子又はメチル基であり、ｎは、２〜１００の整数である。］
【請求項３】
前記側壁部の内面に、親水性構成単位を含む重合体を主体とするコーティング層が形成されており、
前記親水性構成単位は、下記の式（５）、式（６）、式（７）、及び式（８）で表される構成単位からなる群より選択される少なくとも１つの構成単位を含む、請求項１に記載の細胞培養デバイス。
【化２】
2020141640.tif 000010
［ここで、＊は結合を表し、
式（５）において、Ｒ１１は、水素原子又はメチル基であり、Ｒ１２は、ＮＨ又は酸素原子であり、ｍは、０〜４の整数であり、Ｒ１３は、水素原子、水酸基、又はメトキシ基であり、
式（６）において、Ｒ２１は、水素原子又はメチル基であり、
式（７）において、Ｒ３１は、水素原子又はメチル基であり、Ｒ３２は、水素原子又はメチル基であり、ｎは、２〜１００の整数である。］
【請求項４】
前記重合体における前記親水性構成単位の合計が４０ｍｏｌ％以上である、請求項３に記載の細胞培養デバイス。
【請求項５】
前記底面部の表面に、前記細胞が結合する細胞結合因子を有するポリマーを主体とする接着層が形成されている、請求項１から４のいずれか一項に記載の細胞培養デバイス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、細胞培養デバイスに関する。
【背景技術】
【０００２】
細胞を培養するための培養空間を有する細胞培養デバイスが利用されている。かかる細胞培養デバイスは、例えば培養空間において細胞を培養し、化合物の細胞への作用を評価する等の目的で利用される場合がある。このような目的で利用されるシステムの一例が、例えば下記の非特許文献１に開示されている。
【０００３】
細胞を培養するにあたっては、培養空間の下方を覆う底面部に支持される状態で培養することが考えられる。この場合、化合物が培養空間の側方を覆う側壁部に吸着してしまうと、その吸着によるロスによって相互作用評価の精度が低下してしまうという問題があった。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００４】
【非特許文献１】The Pharmaceutical Society of Japan, YAKUGAKU ZASSHI 138, 815・822 (2018)
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
培養空間の側方を覆う側壁部に化合物が吸着しにくい細胞培養デバイスの実現が望まれる。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明に係る細胞培養デバイスは、
細胞を培養するための培養空間を有する細胞培養デバイスであって、
前記培養空間の下方を覆い前記細胞を支持する底面部と、前記培養空間の側方を覆う側壁部と、を備え、
前記側壁部の内面の純水に対する接触角が３°以上９０°以下である。
【０００７】
この構成によれば、培養空間の側方を覆う側壁部の内面の純水に対する接触角が３°以上９０°以下であることで、側壁部の内面の親水度が高められている。このため、その側壁部の内面には、親水性度があまり高くない（言い換えれば、疎水性度が比較的高い）化合物が吸着しにくい。従って、親水性または疎水性を調節することによって、側壁部に化合物が吸着しにくい細胞培養デバイスを実現することができる。
【０００８】
以下、本発明の好適な態様について説明する。但し、以下に記載する好適な態様例によって、本発明の範囲が限定される訳ではない。
【０００９】
一態様として、
前記側壁部の内面が、下記の式（１）、式（２）、式（３）、及び式（４）で表される基からなる群より選択される少なくとも１つの基を含むことが好ましい。
【化１】
2020141640.tif 000003
［ここで、
式（１）において、Ｒ１２は、ＮＨ又は酸素原子であり、ｍは、０〜４の整数であり、Ｒ１３は、水素原子、水酸基、又はメトキシ基であり、
式（３）において、Ｒ３２は、水素原子又はメチル基であり、ｎは、２〜１００の整数である。］
【００１０】
この構成によれば、式（１）、式（２）、式（３）、及び式（４）で表される基からなる群より選択される少なくとも１つの基を側壁部の内面に含ませることで、側壁部の内面の純水に対する接触角を、適切に３°以上９０°以下とすることができる。よって、側壁部に化合物を吸着しにくくすることができる。
【００１１】
一態様として、
前記側壁部の内面に、親水性構成単位を含む重合体を主体とするコーティング層が形成されており、
前記親水性構成単位は、下記の式（５）、式（６）、式（７）、及び式（８）で表される構成単位からなる群より選択される少なくとも１つの構成単位を含むことが好ましい。
【化２】
2020141640.tif 000004
［ここで、＊は結合を表し、
式（５）において、Ｒ１１は、水素原子又はメチル基であり、Ｒ１２は、ＮＨ又は酸素原子であり、ｍは、０〜４の整数であり、Ｒ１３は、水素原子、水酸基、又はメトキシ基であり、
式（６）において、Ｒ２１は、水素原子又はメチル基であり、
式（７）において、Ｒ３１は、水素原子又はメチル基であり、Ｒ３２は、水素原子又はメチル基であり、ｎは、２〜１００の整数である。］
【００１２】
この構成によれば、式（５）、式（６）、式（７）、及び式（８）で表される構成単位からなる群より選択される少なくとも１つの構成単位を含む親水性構成単位を含む重合体を主体とするコーティング層を側壁部の内面に形成することで、側壁部の内面の純水に対する接触角を、適切に３°以上９０°以下とすることができる。よって、側壁部に化合物を吸着しにくくすることができる。
【００１３】
一態様として、
前記重合体における前記親水性構成単位の合計が４０ｍｏｌ％以上であることが好ましい。
【００１４】
この構成によれば、側壁部の内面の親水性度をさらに高めることができる。よって、側壁部に化合物をより吸着しにくくすることができる。
【００１５】
一態様として、
前記底面部の表面に、前記細胞が結合する細胞結合因子を有するポリマーを主体とする接着層が形成されていることが好ましい。
【００１６】
この構成によれば、底面部の表面に接着層を接着させ、その接着層を構成するポリマーの細胞結合因子に細胞を結合させることで、底面部の表面に強固に細胞を固定することができる。
【００１７】
本発明のさらなる特徴と利点は、図面を参照して記述する以下の例示的かつ非限定的な実施形態の説明によってより明確になるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００１８】
【図１】細胞培養デバイスの平面図
【図２】図１におけるＩＩ−ＩＩ断面図
【図３】図１におけるＩＩＩ−ＩＩＩ断面図
【図４】図１におけるＩＶ−ＩＶ断面図
【図５】図２の部分拡大図
【図６】図４の部分拡大図
【発明を実施するための形態】
【００１９】
細胞培養デバイスの実施形態について、図面を参照して説明する。図１〜図４に示すように、本実施形態の細胞培養デバイス１は、細胞Ｃを培養するための培養空間４１，４２を備えている。また、細胞培養デバイス１は、第一凹部２１、第二凹部２２、及び接続溝部２３が形成された基材２と、この基材２を覆うように一体化される被覆材３とを備えている。
【００２０】
基材２は、例えば基材形成用樹脂組成物を用いて作製することができる。基材形成用樹脂組成物に含まれる樹脂としては、特に限定されないが、例えば（メタ）アクリル系樹脂、スチレン系樹脂、ポリカーボネート系樹脂、ポリオレフィン系樹脂、ポリ塩化ビニル、ポリエステル、ポリビニルアセテート、ビニル−アセテート共重合体、ナイロン、ポリメチルペンテン、シリコン樹脂、アミノ樹脂、ポリスルフォン、ポリエーテルスルフォン、ポリエーテルイミド、フッ素樹脂、及びポリイミドからなる群から選択される１種以上の樹脂を例示することができる。なお、基材２は、樹脂製に限定されることなく、例えばガラス製又はシリコン製等であっても良い。
【００２１】
被覆材３は、例えばフィルム材形成用樹脂組成物を用いて作製することができる。フィルム材形成用樹脂組成物に含まれる樹脂としては、特に限定されないが、例えば（メタ）アクリル系樹脂、ポリスチレン、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ塩化ビニル、ポリカーボネート、ポリエステル、ポリビニルアセテート、ビニル−アセテート共重合体、スチレン−メタクリル酸メチル共重合体、アクリロニトリル−スチレン共重合体、アクリロニトリル−ブタジエン−スチレン共重合体、ナイロン、ポリメチルペンテン、シリコン樹脂、アミノ樹脂、ポリスルフォン、ポリエーテルスルフォン、ポリエーテルイミド、フッ素樹脂、及びポリイミドからなる群から選択される１種以上の樹脂を例示することができる。なお、被覆材３は、上述したフィルム材形成用樹脂組成物を用いて作製する以外に、市販の樹脂製フィルム材をそのまま又は加工して用いても良い。
【００２２】
第一凹部２１と被覆材３とで区画された空間として、第一培養空間４１が形成されている。第二凹部２２と被覆材３とで区画された空間として、第二培養空間４２が形成されている。接続溝部２３と被覆材３とで区画された空間として、接続流路４３が形成されている。接続流路４３は、第一培養空間４１と第二培養空間４２とを連通している。なお、この接続流路４３は、例えば、第一培養空間４１及び第二培養空間４２のいずれか一方で培養した細胞の上澄を他方の空間に移動させて、相互作用を見るとき等に用いることができる。
【００２３】
細胞培養デバイス１は、例えば第一培養空間４１及び第二培養空間４２で細胞Ｃを培養した状態で化合物を導入し、その評価を行うために利用することができる。なお、本実施形態において、「化合物」とは、生体由来の物質（例えばタンパク質、脂質、及び糖質等）及び人工合成化合物を言う。
【００２４】
図２及び図５に示すように、細胞培養デバイス１は、第一培養空間４１の下方を覆い細胞Ｃを支持する底面部４１Ａと、第一培養空間４１の側方を覆う側壁部４１Ｂと、第一培養空間４１の上方を覆う上面部４１Ｃとを備えている。また、図３に示すように、細胞培養デバイス１は、第二培養空間４２の下方を覆い細胞Ｃを支持する底面部４２Ａと、第二培養空間４２の側方を覆う側壁部４２Ｂと、第二培養空間４２の上方を覆う上面部４２Ｃとを備えている。また、図６に示すように、細胞培養デバイス１は、接続流路４３の下方を覆う底面部４３Ａと、接続流路４３の側方を覆う側壁部４３Ｂと、接続流路４３の上方を覆う上面部４３Ｃとを備えている。
【００２５】
本実施形態の細胞培養デバイス１において、第一培養空間４１の側壁部４１Ｂの内面の、純水に対する接触角は、３°以上９０°以下とされている。同様に、第二培養空間４２の側壁部４２Ｂの内面の、純水に対する接触角は、３°以上９０°以下とされている。これらの接触角を３°未満とするにはそのための処理が大がかりになる等してコスト面から好ましくない場合がある。一方、これらの接触角が９０°を超えて過大となると親水性度が低下して化合物の吸着量が増加するおそれがある。接触角を３°以上９０°以下とすることで、比較的低コストに、培養空間４１，４２の側壁部４１Ｂ，４２Ｂへの化合物の吸着量を少なく抑えることができる。
【００２６】
側壁部４１Ｂの内面の純水に対する接触角は、好ましくは５°以上であり、８°以上であることがさらに好ましい。また、側壁部４１Ｂの内面の純水に対する接触角は、好ましくは８０°以下であり、７０°以下であることがさらに好ましい。
【００２７】
これらのことは、第二培養空間４２の側方を覆う側壁部４２Ｂの内面の純水に対する接触角に関しても同様である。
【００２８】
側壁部４１Ｂ，４２Ｂの内面の純水に対する接触角を上記の範囲内の値とするため、側壁部４１Ｂ，４２Ｂの内面は、下記の式（１）、式（２）、式（３）、及び式（４）で表される基からなる群より選択される少なくとも１つの基を含むことができる。
【００２９】
【化３】
2020141640.tif 000005
【００３０】
ここで、式（１）において、Ｒ１２は、ＮＨ又は酸素原子である。ｍは、０〜４の整数である。Ｒ１３は、水素原子、水酸基、又はメトキシ基である。また、式（３）において、Ｒ３２は、水素原子又はメチル基である。ｎは、２〜１００の整数である。
【００３１】
これらの基を側壁部４１Ｂ，４２Ｂの内面に含ませることで、側壁部４１Ｂ，４２Ｂの内面の低吸着性を高めることができる。また、細胞傷害性を低減させることができる。また、優れた生体適合性と低吸着性とを有するため、培養空間４１，４２において、細胞凝集塊を良好に作製することができる。
【００３２】
側壁部４１Ｂ，４２Ｂの内面に、上記の式（１）、式（２）、式（３）、及び式（４）で表される基からなる群より選択される少なくとも１つの基を含ませるため、親水性構成単位を含む重合体を主体とするコーティング層Ｌｃ（図５を参照）を形成することができる。このコーティング層Ｌｃの主体となる重合体における親水性構成単位は、下記の式（５）、式（６）、式（７）、及び式（８）で表される構成単位からなる群より選択される少なくとも１つの構成単位を含むことができる。
【００３３】
【化４】
2020141640.tif 000006
【００３４】
ここで、＊は結合を表す。式（５）において、Ｒ１１は、水素原子又はメチル基である。Ｒ１２は、ＮＨ又は酸素原子である。ｍは、０〜４の整数である。Ｒ１３は、水素原子、水酸基、又はメトキシ基である。式（６）において、Ｒ２１は、水素原子又はメチル基である。式（７）において、Ｒ３１は、水素原子又はメチル基である。Ｒ３２は、水素原子又はメチル基である。ｎは、２〜１００の整数である。
【００３５】
一例として、式（５）で表される構成単位に関しては、Ｒ１１が水素原子である場合の親水性構成単位の原料となるモノマーとして、例えばＮ−（２−ヒドロキシエチル）アクリルアミド（ＨＥＡＡ）が挙げられる。また、Ｒ１１がメチル基である場合の親水性構成単位の原料となるモノマーとして、例えばメタクリル酸２−ヒドロキシエチル（ＨＥＭＡ）が挙げられる。
【００３６】
コーティング層Ｌｃの主体となる重合体は、疎水性構成単位をさらに含んでも良い。この場合の疎水性構成単位は、下記の式（９）及び式（１０）で表される構成単位からなる群より選択される少なくとも１つの構成単位を含むことができる。
【００３７】
【化５】
2020141640.tif 000007
【００３８】
ここで、＊は結合を表す。式（９）において、Ｒ４１は、水素原子又はメチル基である。Ｒ４２は、炭素数１〜１０の直鎖又は分枝鎖のアルキル基、炭素数３〜８の脂環式アルキル基、若しくはこれらの組み合わせである。式（１０）において、Ｒ５１は、水素原子又はメチル基である。
【００３９】
一例として、炭素数１〜１０の直鎖又は分枝鎖のアルキル基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、メチルエチル基、ブチル基、１，２−ジメチルエチル基、ペンチル基、１−メチルブチル基、２−メチルブチル基、およびヘキシル基等が挙げられる。炭素数３〜８の脂環式アルキル基としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基等が挙げられる。
【００４０】
コーティング層Ｌｃの主体となる重合体がこれらの疎水性構成単位をさらに含むことで、例えばポリプロピレン等の樹脂材料で構成される基材２へのコート性が改善される。よって、低吸着性と基材２へのコート性とを両立させることができる。
【００４１】
コーティング層Ｌｃの主体となる重合体における親水性構成単位の合計含有量は、４０ｍｏｌ％以上であることが好ましい。親水性構成単位の合計含有量は、４０ｍｏｌ％以上８０ｍｏｌ％以下であることが好ましく、５０ｍｏｌ％以上７０ｍｏｌ％以下であることがさらに好ましい。また、当該重合体における疎水性構成単位の合計含有量は、６０ｍｏｌ％以下であることが好ましい。疎水性構成単位の合計含有量は、１０ｍｏｌ％以上５０ｍｏｌ％以下であることが好ましく、２０ｍｏｌ％以上３５ｍｏｌ％以下であることがさらに好ましい。
【００４２】
コーティング層Ｌｃの主体となる重合体は、上述した親水性構成単位や疎水性構成単位に加え、架橋性構成単位をさらに含んでも良い。架橋性構成単位の含有量は、例えば１ｍｏｌ％以上１０ｍｏｌ％以下であって良く、２ｍｏｌ％以上７ｍｏｌ％以下であることが好ましい。
【００４３】
図５に示すように、本実施形態の細胞培養デバイス１において、第一培養空間４１の底面部４１Ａや第二培養空間４２の底面部４２Ａの表面には、上述した構成単位を含む重合体を主体とするコーティング層Ｌｃは形成されていない。それに代えて、底面部４１Ａ，４２Ａの表面には、細胞Ｃが結合する細胞結合因子を有するポリマーを主体とする接着層Ｌａが形成されている。
【００４４】
接着層Ｌａの主体となるポリマーは、分子内に疎水性を有する直鎖状骨格と、その直鎖状骨格に結合した細胞結合因子とを有する、疎水結合性吸着ポリマーであって良い。この疎水結合性吸着ポリマーは、分子内に疎水性を有する直鎖状骨格と細胞結合因子が結合し得る官能基とを有するポリマーと、その官能基に結合して固定化された細胞結合因子とを有する。分子内に疎水性を有する直鎖状骨格と細胞結合因子が結合し得る官能基とを有するポリマーは、例えば下記の式（１１）で表される。
【００４５】
【化６】
2020141640.tif 000008
【００４６】
ここで、＊は結合を表す。式（１１）において、Ｘは、ＣＨ又はＮＨＣＨＣＯを表す。Ｙは、ＣＨ又はＮＨＣＲ６２ＣＯを表す。Ｒ６１は、水素原子、炭素数１〜１０のアルキル基、炭素数１〜１０のアルコキシ基、炭素数６〜１０のアリール基又はアラアルキル基、若しくは炭素数６〜１０のアリールオキシ基又はアラアルキルオキシ基を表す。Ｒ６２は、水素原子又は炭素数１〜１０のアルキル基を表す。Ｚは、官能基（反応基）を表し、Ｘと互いに結合していても良い。ＳＰは、スペーサーであり、（−ＣＨ２−）ｓ又は（−ＮＨＣＨＲ６３ＣＯ−）ｔを表す。Ｒ６３は、水素原子又は炭素数１〜１０のアルキル基を表す。ｐは、１以上の整数を表し、ｓ及びｔは、独立して０〜８の整数を表し、ｒは、１以上の整数を表す。
【００４７】
式（１１）においてＺで表される官能基（反応基）は、タンパク質又はペプチドが有する反応性基と反応して結合し得るものであれば特に限定されない。一例としては、カルボキシル基、アミノ基、メルカプト基、水酸基、及びこれらの反応性誘導体等を例示することができる。また、カルボキシル基の反応性誘導体としては、酸ハロゲン化物、酸無水物、酸イミド、及び活性エステル等を例示することができ、アミノ基の反応性誘導体としては、イソシアナート基等を例示することができる。また、酸無水物や酸イミド等は、Ｘと結合して環を形成していても良い。
【００４８】
分子内に疎水性を有する直鎖状骨格と細胞結合因子が結合し得る官能基とを有するポリマーは、共重合体であっても良い。例えば、無水マレイン酸とビニル系化合物との共重合体が代表例として例示される。具体的には、例えば無水マレイン酸とメチルビニルエーテルとの共重合体であるＭＭＡＣ（methyl vinyl ether/maleic anhydride copolymer）、無水マレイン酸とブチルビニルエーテルとの共重合体であるＭＢＡＣ（butyl vinyl ether/maleic anhydride copolymer）、無水マレイン酸とヘキシルビニルエーテルとの共重合体であるＭＨＡＣ（hexyl vinyl ether/maleic anhydride copolymer）、及び無水マレイン酸とスチレンとの共重合体であるＭＡＳＴ（styrene/maleic anhydride copolymer）を例示することができる。
【００４９】
細胞結合因子は、Ｚで表される官能基（反応基）に結合するとともに、細胞Ｃが結合するものであり、例えば細胞接着タンパク質又は細胞接着ペプチドがこれに該当する。細胞結合因子は、Ｚで表される官能基（反応基）と、例えばアミド結合、チオアミド結合、エステル結合、及びチオエステル結合等によって結合（共有結合）する。細胞接着タンパク質としては、例えばフィブロネクチン（ＦＮ）、コラーゲン（Ｃｏｌ）、ラミニン（ＬＮ）、及びビトロネクチン（ＶＮ）等が例示される。細胞接着ペプチドとしては、上記の細胞接着タンパク質のアミノ酸配列の中で、細胞接着に関わる領域のいずれかのペプチドを用いることができる。
【００５０】
このような接着層Ｌａを底面部４１Ａ，４２Ａの表面に形成することで、底面部４１Ａ，４２Ａの表面に強固に細胞Ｃを固定することができる。
【００５１】
このように、本実施形態の細胞培養デバイス１では、培養空間４１，４２において、底面部４１Ａ，４２Ａの表面に接着層Ｌａが形成され、側壁部４１Ｂ，４２Ｂの内面にコーティング層Ｌｃが形成されている。なお、上面部４１Ｃ，４２Ｃの内面にもコーティング層Ｌｃが形成されている。このため、底面部４１Ａ，４２Ａの表面に強固に細胞Ｃを固定しつつ、側壁部４１Ｂ，４２Ｂや上面部４１Ｃ，４２Ｃの内面への化合物の吸着量を少なく抑えることができる。
【００５２】
また、本実施形態の細胞培養デバイス１では、図６に示すように、接続流路４３において、底面部４３Ａ及び側壁部４３Ｂの両方の内面にコーティング層Ｌｃが形成されている。なお、上面部４３Ｃの内面にもコーティング層Ｌｃが形成されている。このため、接続流路４３における化合物の吸着量を少なく抑えることができる。よって、細胞Ｃと化合物との相互作用を精度良く解析することができる。
【００５３】
〔その他の実施形態〕
（１）上記の実施形態では、培養空間４１，４２の底面部４１Ａ，４２Ａが基材２の表面により構成されている例について説明した。しかし、そのような構成に限定されることなく、例えば培養空間４１，４２の底面部４１Ａ，４２Ａが膜によって構成されても良い。この場合、膜で構成される底面部４１Ａ，４２Ａの表面に接着層Ｌａが形成され、その接着層Ｌａを介して細胞Ｃが固定されると良い。また、接続流路４３は、第一培養空間４１の底面部４１Ａを通過した後の化合物含有溶液を第二培養空間４２に供給するように設けられても良い。
【００５４】
（２）上記の実施形態では、培養空間４１，４２の底面部４１Ａ，４２Ａに接着層Ｌａが形成されている構成を例として説明した。しかし、そのような構成に限定されることなく、細胞Ｃが十分な強度で底面部４１Ａ，４２Ａに固定されるのであれば、接着層Ｌａが形成されなくても良い。
【００５５】
（３）上述した各実施形態（上記の実施形態及びその他の実施形態を含む；以下同様）で開示される構成は、矛盾が生じない限り、他の実施形態で開示される構成と組み合わせて適用することも可能である。その他の構成に関しても、本明細書において開示された実施形態は全ての点で例示であって、本開示の趣旨を逸脱しない範囲内で適宜改変することが可能である。
【符号の説明】
【００５６】
１        細胞培養デバイス
４１      第一培養空間（培養空間）
４１Ａ    底面部
４１Ｂ    側壁部
４２      第二培養空間（培養空間）
４２Ａ    底面部
４２Ｂ    側壁部
Ｌｃ      コーティング層
Ｌａ      接着層
【図１】
2020141640.tif 000011
【図２】
2020141640.tif 000012
【図３】
2020141640.tif 000013
【図４】
2020141640.tif 000014
【図５】
2020141640.tif 000015
【図６】
2020141640.tif 000016