(57)【要約】      （修正有）【課題】高リン血症を治療するための組成物の提供。【解決手段】胃腸管内でその中のリン酸イオンの輸送を阻害するように実質的に活性であり、かつグアニル酸シクラーゼＣ受容体作動薬である化合物、具体的には、細菌性熱安定性エンテロトキシン、グアニリン、プログアニリン、ウログアニリン、プロウログアニリン、リンホグアニリン、または前述のもののうちのいずれかの変異体もしくは類似体であるペプチド、更に具体的にはプレカナチドを含む組成物。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
リン酸塩低下を必要とする患者の胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害するための方法であって、グアニル酸シクラーゼＣ受容体（ＧＣ−Ｃ）作動薬化合物を前記患者に投与することを含み、前記ＧＣ−Ｃ作動薬化合物が、それを必要とする前記患者に投与されると、胃腸管内でその中のリン酸イオン（Ｐｉ）の輸送を阻害するように実質的に活性である、前記方法。
【請求項２】
リン酸塩低下を必要とする患者の胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害するための方法であって、ＮＨＥ３に結合しない化合物を前記患者に投与することを含み、前記化合物が、それを必要とする前記患者に投与されると、胃腸管内でその中のリン酸イオン（Ｐｉ）の輸送を阻害するように実質的に活性である、前記方法。
【請求項３】
前記化合物が、小腸内の上皮横断ｐＨ勾配（ｃｒｏｓｓ−ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｐＨ  ｇｒａｄｉｅｎｔ）（ＣＥＰＧ）を減少させ、前記ＣＥＰＧが、（ｉ）小腸の表面の上皮細胞の、任意に上皮細胞の亜頂端表面における細胞質と、（ｉｉ）小腸の頂端表面における不撹拌層との間のｐＨの差として定義され、前記化合物が、それを必要とする前記患者に投与されると、胃腸管内でその中のリン酸イオン（Ｐｉ）の輸送を阻害するように実質的に活性である、請求項２に記載の前記方法。
【請求項４】
前記化合物が、小腸、任意に空腸内の水吸収を減少させ、前記化合物が、それを必要とする患者に投与されると、胃腸管内でその中のリン酸イオン（Ｐｉ）の輸送を阻害するように実質的に活性である、請求項２に記載の前記方法。
【請求項５】
前記化合物が、小腸内のＣＥＰＧを減少させ、水吸収を減少させる、請求項２〜４のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項６】
前記化合物が、小腸内の水吸収を著しく減少させることなく小腸内のＣＥＰＧを減少させる、請求項２または３に記載の前記方法。
【請求項７】
前記化合物が、小腸内のＣＥＰＧを著しく減少させることなく、任意に、小腸内の重炭酸塩分泌を著しく刺激することなく、かつ／または酸分泌を阻害することなく小腸内の水吸収を減少させる、請求項２または４に記載の前記方法。
【請求項８】
前記方法が、
（ａ）高リン血症、任意に食後高リン血症を治療するための方法、
（ｂ）腎疾患、任意に慢性腎疾患（ＣＫＤ）または末期腎疾患（ＥＳＲＤ）を治療するための方法、
（ｃ）血清クレアチニンレベルを低減させるための方法、
（ｄ）タンパク尿を治療するための方法、
（ｅ）腎代替療法（ＲＲＴ）、任意に透析までの時間を遅らせるための方法、
（ｆ）ＦＧＦ２３レベルを低減させるための方法、
（ｇ）活性型ビタミンＤの高リン血症作用を低減させるための方法、
（ｈ）副甲状腺機能亢進症、任意に続発性副甲状腺機能亢進症を軽減させるための方法、
（ｉ）血清副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）を低減させるための方法、
（ｊ）任意に食後血清リンによって誘導される、内皮障害を改善するための方法、
（ｋ）血管石灰化、任意に内膜局在性血管石灰化を低減させるための方法、
（ｌ）尿中亜リン酸を低減させるための方法、
（ｍ）血清リンレベルを正常化するための方法、
（ｎ）高齢患者のリン負荷を低減させるための方法、
（ｏ）食事性リン酸塩取り込みを減少させるための方法、
（ｐ）腎肥大を低減させるための方法、及び
（ｑ）心肥大を低減させるための方法、のうちの１つ以上から選択される方法をもたらす、請求項１〜７のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項９】
前記化合物が、小腸の表面の上皮細胞の、任意に上皮細胞の亜頂端表面における細胞内ｐＨを減少させる、請求項２〜６または８のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項１０】
前記化合物が、小腸の頂端表面における不撹拌層のｐＨを増加させる、請求項２〜６または８のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項１１】
前記化合物が、（ａ）小腸内の重炭酸塩分泌を刺激するか、または（ｂ）小腸内の酸分泌を阻害するか、または（ｃ）小腸内の重炭酸塩分泌を刺激し、かつ酸分泌を阻害する、請求項２〜６または８のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項１２】
前記化合物が、小腸の表面の上皮細胞の１つ以上の細胞内二次メッセンジャーを増加させる、請求項２〜６または８のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項１３】
前記１つ以上の細胞内二次メッセンジャーが、Ｃａ＋＋、環状アデノシン一リン酸塩（ｃＡＭＰ）、及び環状グアノシン一リン酸塩（ｃＧＭＰ）から選択される、請求項１２に記載の前記方法。
【請求項１４】
前記化合物が、前記患者に経腸投与されると実質的に全身で生体利用不可能である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項１５】
前記化合物が、胃腸管の上皮に対して実質的に不透過性である、請求項１４に記載の前記方法。
【請求項１６】
前記化合物が、胃腸管の上皮に対して実質的に透過性である、請求項１４に記載の前記方法。
【請求項１７】
それを必要とする前記患者への投与が、（ａ）血清リン濃度もしくはレベルを正常な血清リンレベルの約１５０％以下に低減させ、かつ／または（ｂ）食事性亜リン酸の取り込みを無処置状態と比べて少なくとも約１０％低減させる、請求項１〜１６のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項１８】
それを必要とする前記患者への投与が、糞便中排泄におけるリン酸塩レベルを無処置状態と比べて少なくとも約１０％上昇させる、請求項１〜１７のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項１９】
それを必要とする前記患者への投与が、尿中リン酸塩濃度またはレベルを無処置状態と比べて少なくとも約１０％低減させる、請求項１〜１８のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項２０】
それを必要とする前記患者が、ＥＳＲＤを有し、前記患者への投与が、血清リン濃度またはレベルを無処置状態と比べて少なくとも約１０％低減させる、請求項１〜１９のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項２１】
それを必要とする前記患者が、ＣＫＤを有し、前記患者への投与が、ＦＧＦ２３レベル及び血清インタクト副甲状腺ホルモン（ｉＰＴＨ）レベルを無処置状態と比べて少なくとも約１０％低減させる、請求項１〜２０のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項２２】
前記化合物が、グアニル酸シクラーゼＣ受容体（ＧＣ−Ｃ）作動薬、Ｐ２Ｙ作動薬、アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬、可溶性グアニル酸シクラーゼ作動薬、アデニル酸シクラーゼ受容体作動薬、イミダゾリン−１受容体作動薬、コリン作動薬、プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬、ドパミンＤ１作動薬、メラトニン受容体作動薬、５ＨＴ４作動薬、心房性ナトリウム利尿ペプチド受容体作動薬、炭酸脱水酵素阻害薬、ホスホジエステラーゼ阻害薬、及び腺腫において下方制御される交換輸送体（Ｄｏｗｎ−Ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｉｎ  Ａｄｅｎｏｍａ）（ＤＲＡまたはＳＬＣ２６Ａ３）作動薬のうちの１つ以上から選択される、請求項２〜２１のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項２３】
前記ＧＣ−Ｃ作動薬が、ペプチド、任意に細菌性熱安定性エンテロトキシン、グアニリン、プログアニリン、ウログアニリン、プロウログアニリン、リンホグアニリン、または前述のもののうちのいずれかの変異体もしくは類似体である、請求項１または２２に記載の前記方法。
【請求項２４】
前記ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドが、アミノ酸配列（Ｉ）：Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｃｙｓ６  Ｃｙｓ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｃｙｓ１０  Ｃｙｓ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｃｙｓ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ｃｙｓ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１（配列番号１）を含み、Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５が、Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ（配列番号２）であるか、または欠損しているか、あるいはＸａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４が欠損している、請求項２３に記載の前記方法。
【請求項２５】
Ｘａａ５が、Ａｓｎ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、またはＰｈｅである、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項２６】
Ｘａａ５が、ＴｈｒまたはＩｌｅである、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項２７】
Ｘａａ５が、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、またはＴｒｐである、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項２８】
Ｘａａ８が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、またはＰｒｏである、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項２９】
Ｘａａ９が、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅである、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項３０】
Ｘａａ９が、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅである、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項３１】
Ｘａａ１２が、Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、またはＡｌａである、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項３２】
Ｘａａ１３が、Ａｌａ、Ｐｒｏ、またはＧｌｙである、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項３３】
Ｘａａ１４が、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＡｓｐである、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項３４】
Ｘａａ１６が、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＴｒｐである、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項３５】
Ｘａａ１７が、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、またはＡｌａである、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項３６】
Ｘａａ１９が、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ａｓｎ、またはＬｅｕである、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項３７】
Ｘａａ１９が、ＬｙｓまたはＡｒｇである、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項３８】
Ｘａａ２０  Ｘａａ２１がＡｓｐＰｈｅであるか、あるいはＸａａ２０がＡｓｎまたはＧｌｕであり、Ｘａａ２１が欠損している、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項３９】
Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１が欠損している、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項４０】
前記ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドが、アミノ酸配列Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ（配列番号３）、あるいは１個、２個、３個、４個、もしくは５個の欠失、挿入、及び／または置換を有するその変異体を含む、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項４１】
前記ペプチドが、アミノ酸配列Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ（配列番号４）、あるいは１個、２個、３個、４個、もしくは５個の欠失、挿入、及び／または置換を有するその変異体を含む、請求項２４に記載の前記方法。
【請求項４２】
前記ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドが、アミノ酸配列（ＩＩＩ）：Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｃｙｓ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｃｙｓ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６（配列番号５）を含み、Ｘａａ１が、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｇｌｎ、Ｐｒｏ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、もしくはＴｈｒであるか、または欠損しており、Ｘａａ２が、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｙであるか、または欠損しており、Ｘａａ３が、Ｔｈｒ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｇｌｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、またはＬｅｕであり、Ｘａａ５が、Ａｓｐ、Ｉｌｅ、またはＧｌｕであり、Ｘａａ６が、Ｉｌｅ、Ｔｒｐ、またはＬｅｕであり、Ｘａａ７が、Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、またはＴｙｒであり、Ｘａａ８が、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔであるか、または欠損しており、Ｘａａ９が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１０が、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ｔｈｒ、またはＩｌｅであり、Ｘａａ１１が、ＡｌａまたはＶａｌであり、Ｘａａ１３が、ＴｈｒまたはＡｌａであり、Ｘａａ１４が、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＳｅｒであり、Ｘａａ１５が、Ｃｙｓ、Ｔｙｒであるか、または欠損しており、Ｘａａ１６が、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、またはＳｅｒである、請求項２３に記載の前記方法。
【請求項４３】
前記ペプチドが、アミノ酸配列Ａｓｎ  Ａｓｐ  Ｇｌｕ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｖａｌ  Ａｓｎ  Ｖａｌ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｌｅｕ（配列番号６）、あるいは１個、２個、３個、４個、もしくは５個の欠失、挿入、及び／または置換を有するその変異体を含む、請求項４２に記載の前記方法。
【請求項４４】
前記Ｐ２Ｙ作動薬が、図４または図５Ａ〜５Ｃ中の化合物から選択される、請求項２２に記載の前記方法。
【請求項４５】
前記アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬が、図６Ａ〜６Ｃ中の化合物から選択される、請求項２２に記載の前記方法。
【請求項４６】
前記可溶性グアニル酸シクラーゼ作動薬が、図９Ａ〜９Ｌ中の化合物から選択される、請求項２２に記載の前記方法。
【請求項４７】
前記アデニル酸シクラーゼ受容体作動薬が、図１０中の化合物から選択される、請求項２２に記載の前記方法。
【請求項４８】
前記イミダゾリン−１受容体作動薬が、モクソニジン及び図１１中の化合物から選択される、請求項２２に記載の前記方法。
【請求項４９】
前記コリン作動薬が、図１２中の化合物から選択される、請求項２２に記載の前記方法。
【請求項５０】
前記プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬が、ＰＧＥ２またはその類似体／誘導体、及び図７または図１３中の化合物から選択される、請求項２２に記載の前記方法。
【請求項５１】
前記ドパミンＤ１作動薬が、図１４中の化合物から選択される、請求項２２に記載の前記方法。
【請求項５２】
前記メラトニン受容体作動薬が、メラトニン及び図１５中の化合物から選択される、請求項２２に記載の前記方法。
【請求項５３】
前記５ＨＴ４作動薬が、セロトニン及びその類似体、プルカロプリド、メトクロプラミド、クレオボプリド、モサプリド、プルカロプリド、レンザプリド、テガセロッド、ザコプリド、ノルシサプリド、ナロノプリド、ならびにベルセトラグから選択される、請求項２２に記載の前記方法。
【請求項５４】
前記心房性ナトリウム利尿ペプチド受容体作動薬が、Ｓｅｒ  Ｌｅｕ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｃｙｓ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ａｓｐ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｐｈｅ  Ａｒｇ  Ｔｙｒ（配列番号７）、Ｃｙｓ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ａｓｐ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ（配列番号８）、及びＳｅｒ  Ｓｅｒ  Ｃｙｓ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ａｓｐ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｐｈｅ  Ａｒｇ（配列番号９）から選択されるアミノ酸配列（１個、２個、３個、４個、もしくは５個の欠失、挿入、及び／または置換を有するそれらの変異体を含む）を含むか、またはそれから成る、請求項２２に記載の前記方法。
【請求項５５】
前記炭酸脱水酵素阻害薬が、図１７中の化合物から選択される、請求項２２に記載の前記方法。
【請求項５６】
前記ホスホジエステラーゼ阻害薬が、図１８中の化合物から選択される、請求項２２に記載の前記方法。
【請求項５７】
前記ＤＲＡ作動薬が、図２１Ａ〜Ｂから選択される、請求項２２に記載の前記方法。
【請求項５８】
前記化合物が、前記患者に経腸投与されると実質的に全身で生体利用不可能であり、（ｉ）少なくとも約２００Å２のｔＰＳＡを有する、請求項１〜５７のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項５９】
前記化合物が、少なくとも約２５０Å２のｔＰＳＡを有する、請求項５８に記載の前記方法。
【請求項６０】
前記化合物が、少なくとも約２７０Å２のｔＰＳＡを有する、請求項５８に記載の前記方法。
【請求項６１】
前記化合物が、少なくとも約３００Å２のｔＰＳＡを有する、請求項５８に記載の前記方法。
【請求項６２】
前記化合物が、少なくとも約３５０Å２のｔＰＳＡを有する、請求項５８に記載の前記方法。
【請求項６３】
前記化合物が、少なくとも約４００Å２のｔＰＳＡを有する、請求項５８に記載の前記方法。
【請求項６４】
前記化合物が、少なくとも約５００Å２のｔＰＳＡを有する、請求項５８に記載の前記方法。
【請求項６５】
前記化合物が、少なくとも約５００Ｄａの分子量を有する、請求項５８に記載の前記方法。
【請求項６６】
前記化合物が、少なくとも約１０００Ｄａの分子量を有する、請求項５８に記載の前記方法。
【請求項６７】
前記化合物が、少なくとも約２５００Ｄａの分子量を有する、請求項５８に記載の前記方法。
【請求項６８】
前記化合物が、少なくとも約５０００Ｄａの分子量を有する、請求項５８に記載の前記方法。
【請求項６９】
前記化合物が、（ｉ）ＮＨ及び／もしくはＯＨ及び／もしくは他の可能性のある水素結合供与体部分の約５超の総数、（ｉｉ）Ｏ原子及び／もしくはＮ原子及び／もしくは他の可能性のある水素結合受容体の約１０超の総数、ならびに／または（ｉｉｉ）約１０５超もしくは約１０未満のＭｏｒｉｇｕｃｈｉ分配係数を有する、請求項５８に記載の前記方法。
【請求項７０】
前記化合物が、約１００×１０−６ｃｍ／ｓ未満、または約１０×１０−６ｃｍ／ｓ未満、または約１×１０−６ｃｍ／ｓ未満、または約０．１×１０−６ｃｍ／ｓ未満の透過係数Ｐａｐｐを有する、請求項５８に記載の前記方法。
【請求項７１】
１つ以上の追加の生物活性剤を投与することをさらに含む、請求項１〜７０のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項７２】
前記化合物及び前記１つ以上の追加の生物活性剤が、単一の薬学的組成物の一部として投与される、請求項７１に記載の前記方法。
【請求項７３】
前記化合物及び前記１つ以上の追加の生物活性剤が、個別の薬学的組成物として投与される、請求項７１に記載の前記方法。
【請求項７４】
前記個別の薬学的組成物が、順次に投与される、請求項７３に記載の前記方法。
【請求項７５】
前記個別の薬学的組成物が、同時に投与される、請求項７３に記載の前記方法。
【請求項７６】
前記追加の生物活性剤が、ビタミンＤ２（エルゴカルシフェロール）、ビタミンＤ３（コレカルシフェロール）、活性型ビタミンＤ（カルシトリオール）、及び活性型ビタミンＤ類似体（例えばドキセルカルシフェロール、パリカルシトール）から選択される、請求項７１〜７５のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項７７】
前記追加の生物活性剤が、リン酸塩結合剤である、請求項７１〜７５のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項７８】
前記リン酸塩結合剤が、セベラマー（例えば、Ｒｅｎｖｅｌａ（登録商標）（炭酸セベラマー）、Ｒｅｎａｇｅｌ（登録商標）（塩酸セベラマー））、炭酸ランタン（例えば、Ｆｏｓｒｅｎｏｌ（登録商標））、炭酸カルシウム（例えば、Ｃａｌｃｉｃｈｅｗ（登録商標）、Ｔｉｔｒａｌａｃ（登録商標））、酢酸カルシウム（例えばＰｈｏｓＬｏ（登録商標）、Ｐｈｏｓｅｘ（登録商標））、酢酸カルシウム／炭酸マグネシウム（例えば、Ｒｅｎｅｐｈｏ（登録商標）、ＯｓｖａＲｅｎ（登録商標））、ＭＣＩ−１９６、クエン酸第二鉄（例えば、Ｚｅｒｅｎｅｘ（商標））、水酸化炭酸鉄マグネシウム（例えば、Ｆｅｒｍａｇａｔｅ（商標））、水酸化アルミニウム（例えば、Ａｌｕｃａｐｓ（登録商標）、Ｂａｓａｌｊｅｌ（登録商標））、ＡＰＳ１５８５、ＳＢＲ−７５９、及びＰＡ−２１から成る群から選択される、請求項７７に記載の前記方法。
【請求項７９】
前記追加の生物活性剤が、ＮａＰｉ２ｂ阻害薬である、請求項７１〜７５のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項８０】
前記追加の生物活性剤が、ナイアシンまたはニコチンアミドである、請求項７１〜７５のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項８１】
前記対象がＣＫＤを有し、前記さらに活性な生物剤が、ＡＣＥ阻害薬、アンチオゲンシンＩＩ受容体遮断薬、β遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、直接的レニン阻害薬、利尿薬、血管拡張薬、エリスロポエチン療法、鉄補充療法、終末糖化産物の阻害薬、ビタミンＤ、及びスタチンのうちの１つ以上から選択される、請求項７１〜７５のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項８２】
前記化合物または組成物が、経口投与される、請求項１〜８１のいずれか１項に記載の前記方法。
【請求項８３】
前記化合物または組成物が、１日１回経口投与される、請求項８２に記載の前記方法。
【請求項８４】
リン酸塩取り込みの阻害薬のスクリーニングの方法であって、（ａ）腸細胞を培養することと、（ｂ）前記培養された腸細胞を試験化合物と接触させることと、（ｃ）（ｉ）前記腸細胞の頂端表面におけるｐＨ、（ｉｉ）前記腸細胞の細胞内ｐＨ、及び／または（ｉｉｉ）前記腸細胞によるリン酸塩取り込みを測定することと、（ｄ）（ｃ）（ｉ）の前記ｐＨが対照と比べて増加し、（ｃ）（ｉｉ）の前記細胞内ｐＨが対照と比べて減少し、かつ／または（ｃ）（ｉｉｉ）のリン酸塩取り込みが対照と比べて減少する場合、前記試験化合物をリン酸塩取り込みの阻害薬として特定することと、を含む、前記方法。
【請求項８５】
ステップ（ａ）が、腸細胞を単層培養することを含む、請求項８４に記載の前記方法。
【請求項８６】
ステップ（ａ）が、腸陰窩から前記細胞を単離し、エンテロイド（ｅｎｔｅｒｏｉｄ）を形成するのに十分な条件下で培養することを含む、請求項８４に記載の前記方法。
【請求項８７】
ステップ（ａ）が、単離した胚性幹細胞、内胚葉細胞、または多能性幹細胞を、オルガノイドを形成するのに十分な条件下で培養することを含む、請求項８４に記載の前記方法。
【請求項８８】
ステップ（ａ）が、腸切片（複数可）をＵｓｓｉｎｇチャンバ内で培養することを含む、請求項８４に記載の前記方法。
【請求項８９】
ステップ（ｃ）（ｉ）が、前記細胞をｐＨ感応性蛍光染料と接触させることと、前記染料の蛍光を測定することと、を含む、請求項８４に記載の前記方法。
【請求項９０】
ステップ（ｃ）（ｉｉ）が、前記細胞を３３Ｐ標識化リン酸イオンと接触させることと、前記標識化リン酸イオンの取り込みを測定することと、を含む、請求項８４に記載の前記方法。
【請求項９１】
（ｄ）の前記増加及び／または減少が、統計的に有意である、請求項８４に記載の前記方法。
【請求項９２】
前記試験化合物が、小腸内の重炭酸塩分泌を刺激し、かつ／または酸分泌を阻害することで知られるか、あるいはその疑いがある小分子またはペプチドである、請求項８４に記載の前記方法。
【請求項９３】
前記試験化合物が、Ｐ２Ｙ作動薬、アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬、グアニル酸シクラーゼＣ受容体作動薬、可溶性グアニル酸シクラーゼ作動薬、アデニル酸シクラーゼ受容体作動薬、イミダゾリン−１受容体作動薬、コリン作動薬、プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬、ドパミンＤ１作動薬、メラトニン受容体作動薬、５ＨＴ４作動薬、心房性ナトリウム利尿ペプチド受容体作動薬、炭酸脱水酵素阻害薬、ホスホジエステラーゼ阻害薬、及び腺腫において下方制御される交換輸送体（ＤＲＡまたはＳＬＣ２６Ａ３）作動薬のうちの１つ以上から選択される、請求項９２に記載の前記方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願の相互参照
本出願は、米国特許法第１１９条（ｅ）の下で、２０１３年８月９日出願の米国出願第６１／８６４，２１５号、及び２０１４年２月６日出願の米国出願第６１／９３６，７１５号の優先権を主張するものであり、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０００２】
配列表に関する記載
本出願に関連する配列表は、紙のコピーの代わりにテキスト形式で提供され、ここで参照により本明細書に組み込まれる。配列表を含むテキストファイルの名称は、「ＡＲＤＥ＿０１７＿０１ＷＯ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ」である。本テキストファイルは１９３ＫＢであり、２０１４年８月８日に作成され、ＥＦＳ−Ｗｅｂを介して電子的に提出されている。
【０００３】
本発明は、小腸内を含む胃腸管内のリン酸塩輸送阻害薬としての活性を有する非ＮＨＥ３結合剤、治療薬または予防薬としてそれらを使用するための方法、及び創薬の関連方法に関する。
【背景技術】
【０００４】
不十分な腎機能、副甲状腺機能低下症、またはある特定の他の医学的状態（例えば遺伝性高リン血症、Ａｌｂｒｉｇｈｔ遺伝性骨異栄養症、アミロイドーシスなど）を有する患者は、多くの場合、高リン血症、すなわち上昇した血清リンレベルを有する（そのレベルは、例えば、約６ｍｇ／ｄＬ超である）。高リン血症は、特に長期間にわたって存在する場合、続発性副甲状腺機能亢進症、骨疾患、ならびに心血管系、関節、肺、眼、及び他の軟組織における異所性石灰化によって顕在化することが多い、カルシウム及びリン代謝の重度の異常を引き起こす。より高い血清リンレベルは、腎不全の進行、心血管石灰化、及び末期腎疾患（ＥＳＲＤ）患者の死亡率に強く関連する。正常高値の血清リンレベルは、慢性腎疾患（ＣＫＤ）を有する個人間の、そして正常な腎機能を有する個人間の心血管系事象及び死亡率に関連する（例えば、Ｊｏｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍａｎａｇ．Ｃａｒｅ  Ｐｈａｒｍ．，１３：３９７−４１１，２００７を参照されたい）。腎疾患の進行は、リン酸塩滞留を低減させることによって減速され得る。したがって、高リン血症である腎不全患者にとって、そして正常範囲内またはわずかにのみ上昇した血清リンレベルを有する慢性腎疾患患者にとって、リン酸塩滞留を低減させる療法は有益である。
【０００５】
高リン血症を経験する患者には、腸管内のリン酸塩に結合し、その吸収を防止するために、カルシウム塩が広く使用されている。炭酸カルシウム塩、酢酸塩、クエン酸塩、アルギン酸塩、及びケト酸塩を含む異なる種類のカルシウム塩が、リン酸塩結合に利用されている。しかしながら、これらの療法は多くの場合、摂取された多量のカルシウムの吸収から生じる状態である、高カルシウム血症を引き起こす。高カルシウム血症は、心不整脈、腎不全、ならびに皮膚及び血管の石灰化などの重篤な副作用を引き起こす。血清カルシウムレベルの頻繁な監視が、カルシウム系リン酸塩結合剤を用いた療法の間に必要である。他のカルシウム及びアルミニウムを含まないリン酸塩結合剤、例えば架橋したポリアミンポリマーであるセベラマーなどは、治療上活性であるために必要な投薬の量及び頻度を含む欠点を有する。これらの薬物のインビボの比較的穏やかなリン酸塩結合能力は、患者が用量（１日当たり最大７グラム以上）を増大させることを余儀なくする。そのような量は、胃腸症、腹痛、そしていくつかの極端な事例では腸穿孔などの胃腸不快感をもたらすことが示されている。
【０００６】
上昇したリン酸塩血清レベルを有する患者の腸管からのリン酸塩吸収を防止するための代替的な手法は、腸管内のリン酸塩取り込みを媒介する腸管内輸送系の阻害によるものである。上部腸管内のリン酸塩吸収は、リン酸塩の吸収をナトリウムの吸収に結合する担体介在性機構によって少なくとも部分的に媒介されることが理解されている。腸管内のリン酸塩輸送の阻害は、身体のリン過負荷を低減させる。進行腎疾患（例えばステージ４及び５）を有する患者では、身体のリン過負荷は、正常レベルを超える血清リン濃度、すなわち、高リン血症として顕在化する。高リン血症は、死亡率及び罹患率に直接関連する。腸管内のリン酸塩輸送の阻害は、血清リン濃度を低減させ、ひいてはこれらの患者の予後を改善する。ステージ２または３の慢性腎疾患患者では、身体のリン過負荷は、必ずしも高リン血症を引き起こすとは限らず、すなわち、いくらかの患者は正リン血性の状態を保つが、関連する骨障害及び血管障害を回避し、最終的には死亡率を改善するために、これらの初期段階においても身体のリン過負荷を低減または防止する必要性がある。同様に、腸管内のリン酸塩輸送の阻害は、腸管からのリン酸塩の取り込みを阻害することによって治療可能な疾患を有する患者に特に有利となろう。さらに、リン酸塩輸送の阻害は、腎不全の進行を減速させ、心血管系事象の危険性を低減させ得る。
【０００７】
腸管上皮の管腔極は、いわゆる不撹拌水層（ＵＷＬ）を含み、ここでは粘液層の粘度が原因で輸送が本質的に拡散性の性質である。この不撹拌層は、急速に透過する物質が実際には拡散によって速度制限され得るように拡散バリアとして作用する、頂端側の膜に隣接する停留層として定義される。この制限された拡散はＨ＋に適用され、したがってＵＷＬは、プロトンの外方流束及び粘液層によって課せられる拡散制限に起因するｐＨ微小気候の確立に寄与する。細胞表面近傍の酸性環境は、上皮膜を横断する比較的大きな電気化学的勾配、すなわち上皮横断ｐＨ勾配（ｃｒｏｓｓ  ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｐＨ  ｇｒａｄｉｅｎｔ）、つまりＣＥＰＧを維持する。
【０００８】
プロトン共輸送体及び−ＯＨ−交換輸送体、例えばＰＥＰＴ１、葉酸／ＯＨ−交換輸送体、及びβ−アラニン／Ｈ＋共輸送体などを介する栄養素の輸送におけるこのＣＥＰＧの関与については、強力な証拠が存在する。例えば、Ｉｋｕｍａ，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．５０：１１６６−１１７６，１９９６を参照されたい。ｐＨ微小気候の撹乱、例えば、ＣＥＰＧの減少は、栄養素の吸収を変性し得る。これは、ＰＥＰＴ１を介するペプチドのプロトン介在性吸収の事例において示されている。例えば、Ｔｈｗａｉｔｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．１２２：１３２２−１３３３，２００２、及びＴｈｗａｉｔｅｓ  ａｎｄ  Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｅｘｐ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．９２：６０３−６１９，２００７を参照されたい。しかしながら、腸管膜を横断するリン酸イオンの吸収におけるＣＥＰＧの役割は確立されていない。
【０００９】
小腸、特に空腸の上皮を横断するイオンの輸送における水吸収の関与についても証拠が存在する。Ｊｕａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ．４３：５１７−２２，１９７６。しかし、そのような機構は、リン酸塩低下治療薬の分野においてほとんど調査されていない。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【００１０】
【非特許文献１】Ｊｏｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍａｎａｇ．Ｃａｒｅ  Ｐｈａｒｍ．，１３：３９７−４１１，２００７
【非特許文献２】Ｉｋｕｍａ，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．５０：１１６６−１１７６，１９９６
【非特許文献３】Ｔｈｗａｉｔｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．１２２：１３２２−１３３３，２００２
【非特許文献４】Ｔｈｗａｉｔｅｓ  ａｎｄ  Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｅｘｐ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．９２：６０３−６１９，２００７
【非特許文献５】Ｊｕａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ  Ｍｅｔａｂ．４３：５１７−２２，１９７６
【発明の概要】
【００１１】
本発明は、広義には、胃腸管内、特に小腸内のリン酸塩輸送阻害薬としての活性を有する非ＮＨＥ３結合性化合物（それらの立体異性体、薬学的に許容される塩、及びプロドラッグを含む）、ならびに、リン酸塩取り込みを阻害するため、及びそれによって、リン酸塩取り込みの調節が治療上の利益をもたらす種々の状態または疾患のうちのいずれかを治療するための、そのような化合物の使用法に関する。
【００１２】
したがって、本発明の実施形態は、リン酸塩低下を必要とする患者の胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害するための方法であって、ＮＨＥ３に結合しない化合物を該患者に投与することを含み、該化合物が、それを必要とする該患者に投与されると、胃腸管内でその中のリン酸イオン（Ｐｉ）の輸送を阻害するように実質的に活性である、方法を含む。
【００１３】
特定の実施形態では、本化合物は、グアニル酸シクラーゼＣ受容体（ＧＣ−Ｃ）作動薬化合物である。
【００１４】
ある特定の実施形態では、本化合物は、ｐＨ調整剤である。これら及び関連する実施形態は、リン酸塩低下を必要とする患者の胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害するための方法であって、小腸内の上皮横断ｐＨ勾配（ＣＥＰＧ）を減少させる化合物を該患者に投与することを含み、該ＣＥＰＧが、（ｉ）小腸の表面の上皮細胞の、任意に上皮細胞の亜頂端表面における細胞質と、（ｉｉ）小腸の頂端表面における不撹拌層との間のｐＨの差として定義され、該化合物が、それを必要とする該患者に投与されると、胃腸管内でその中のリン酸イオン（Ｐｉ）の輸送を阻害するように実質的に活性であり、該化合物が、ＮＨＥ３に結合しない、方法を含む。
【００１５】
いくつかの実施形態では、本化合物は、小腸内、任意に空腸内の水吸収を低減させる。これら及び関連する実施形態は、リン酸塩低下を必要とする患者の胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害するための方法であって、小腸、任意に空腸内の水吸収を減少させる化合物を該患者に投与することを含み、該化合物がＮＨＥ３に結合せず、該化合物が、それを必要とする該患者に投与されると、胃腸管内でその中のリン酸イオン（Ｐｉ）の輸送を阻害するように実質的に活性である、方法を含む。
【００１６】
いくつかの実施形態では、本化合物は、小腸内のＣＥＰＧを減少させ、また小腸内の水吸収を減少させる。いくつかの実施形態では、本化合物は、小腸内の水吸収を著しく減少させることなく小腸内のＣＥＰＧを減少させる。他の実施形態では、本化合物は、小腸内のＣＥＰＧを著しく減少させることなく（例えば、重炭酸塩分泌を著しく刺激することなく、かつ／または酸分泌を阻害することなく）小腸内の水吸収を減少させる。
【００１７】
いくつかの実施形態では、本方法は、
（ａ）高リン血症、任意に食後高リン血症を治療するための方法、
（ｂ）腎疾患、任意に慢性腎疾患（ＣＫＤ）または末期腎疾患（ＥＳＲＤ）を治療するための方法、
（ｃ）血清クレアチニンレベルを低減させるための方法、
（ｄ）タンパク尿を治療するための方法、
（ｅ）腎代替療法（ＲＲＴ）、任意に透析までの時間を遅らせるための方法、
（ｆ）ＦＧＦ２３レベルを低減させるための方法、
（ｇ）活性型ビタミンＤの高リン血症作用を低減させるための方法、
（ｈ）副甲状腺機能亢進症、任意に続発性副甲状腺機能亢進症を軽減させるための方法、
（ｉ）血清副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）を低減させるための方法、
（ｊ）任意に食後血清リンによって誘導される、内皮障害を改善するための方法、
（ｋ）血管石灰化、任意に内膜局在性血管石灰化を低減させるための方法、
（ｌ）尿中亜リン酸を低減させるための方法、
（ｍ）血清リンレベルを正常化するための方法、
（ｎ）高齢患者のリン負荷を低減させるための方法、
（ｏ）食事性リン酸塩取り込みを減少させるための方法、
（ｐ）腎肥大を低減させるための方法、及び
（ｑ）心肥大を低減させるための方法、のうちの１つ以上から選択される方法をもたらす。
【００１８】
ある特定の実施形態では、本化合物は、小腸の表面の上皮細胞の、任意に上皮細胞の亜頂端表面における細胞内ｐＨを減少させる。ある特定の実施形態では、本化合物は、小腸の頂端表面における不撹拌層のｐＨを増加させる。いくつかの実施形態では、本化合物は、（ａ）小腸内の重炭酸塩分泌を刺激するか、または（ｂ）小腸内の酸分泌を阻害するか、または（ｃ）小腸内の重炭酸塩分泌を刺激し、かつ酸分泌を阻害する。
【００１９】
ある特定の実施形態では、本化合物は、小腸の表面の上皮細胞の１つ以上の細胞内二次メッセンジャーを増加させる。いくつかの実施形態では、該１つ以上の細胞内二次メッセンジャーは、Ｃａ＋＋、環状アデノシン一リン酸塩（ｃＡＭＰ）、及び環状グアノシン一リン酸塩（ｃＧＭＰ）から選択される。
【００２０】
ある特定の実施形態では、本化合物は、該患者に経腸投与されると実質的に全身で生体利用不可能である。特定の実施形態では、本化合物は、胃腸管の上皮に対して実質的に不透過性である。いくつかの実施形態では、本化合物は、胃腸管の上皮に対して実質的に透過性である。
【００２１】
ある特定の実施形態では、それを必要とする該患者への投与は、（ａ）血清リン濃度もしくはレベルを正常な血清リンレベルの約１５０％以下に低減させ、かつ／または（ｂ）食事性亜リン酸の取り込みを無処置状態と比べて少なくとも約１０％低減させる。いくつかの実施形態では、それを必要とする該患者への投与は、糞便中排泄におけるリン酸塩レベルを無処置状態と比べて少なくとも約１０％上昇させる。いくつかの実施形態では、それを必要とする該患者への投与は、尿中リン酸塩濃度またはレベルを無処置状態と比べて少なくとも約１０％低減させる。
【００２２】
いくつかの実施形態では、それを必要とする該患者は、ＥＳＲＤを有し、該患者への投与は、血清リン濃度またはレベルを無処置状態と比べて少なくとも約１０％低減させる。
【００２３】
いくつかの実施形態では、それを必要とする該患者は、ＣＫＤを有し、該患者への投与は、ＦＧＦ２３レベル及び血清インタクト副甲状腺ホルモン（ｉＰＴＨ）レベルを無処置状態と比べて少なくとも約１０％低減させる。
【００２４】
ある特定の実施形態では、本化合物は、グアニル酸シクラーゼＣ受容体（ＧＣ−Ｃ）作動薬、Ｐ２Ｙ作動薬、アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬、可溶性グアニル酸シクラーゼ作動薬、アデニル酸シクラーゼ受容体作動薬、イミダゾリン−１受容体作動薬、コリン作動薬、プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬、ドパミンＤ１作動薬、メラトニン受容体作動薬、５ＨＴ４作動薬、心房性ナトリウム利尿ペプチド受容体作動薬、炭酸脱水酵素阻害薬、ホスホジエステラーゼ阻害薬、及び腺腫において下方制御される交換輸送体（Ｄｏｗｎ−Ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｉｎ  Ａｄｅｎｏｍａ）（ＤＲＡまたはＳＬＣ２６Ａ３）作動薬のうちの１つ以上から選択される。
【００２５】
いくつかの実施形態では、ＧＣ−Ｃ作動薬は、ペプチド、任意に細菌性熱安定性エンテロトキシン、グアニリン、プログアニリン、ウログアニリン、プロウログアニリン、リンホグアニリン、または前述のもののうちのいずれかの変異体もしくは類似体である。
【００２６】
いくつかの実施形態では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、アミノ酸配列（Ｉ）：Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｃｙｓ６  Ｃｙｓ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｃｙｓ１０  Ｃｙｓ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｃｙｓ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ｃｙｓ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１（配列番号１）を含み、Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５は、Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ（配列番号２）であるか、または欠損しているか、あるいはＸａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４は欠損している。
【００２７】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ５は、Ａｓｎ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、またはＰｈｅである。
【００２８】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ５は、ＴｈｒまたはＩｌｅである。
【００２９】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ５は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、またはＴｒｐである。
【００３０】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ８は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、またはＰｒｏである。
【００３１】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ９は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅである。
【００３２】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ９は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅである。
【００３３】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ１２は、Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、またはＡｌａである。
【００３４】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ１３は、Ａｌａ、Ｐｒｏ、またはＧｌｙである。
【００３５】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＡｓｐである。
【００３６】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ１６は、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＴｒｐである。
【００３７】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ１７は、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、またはＡｌａである。
【００３８】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ１９は、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ａｓｎ、またはＬｅｕである。
【００３９】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ１９は、ＬｙｓまたはＡｒｇである。
【００４０】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ２０  Ｘａａ２１がＡｓｐＰｈｅであるか、あるいはＸａａ２０がＡｓｎまたはＧｌｕであり、Ｘａａ２１が欠損している。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１は欠損している。
【００４１】
特定の実施形態では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、アミノ酸配列Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ（配列番号３）、あるいは１個、２個、３個、４個、もしくは５個の欠失、挿入、及び／または置換を有するその変異体を含む。特定の実施形態では、ペプチドは、アミノ酸配列Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ（配列番号４）、あるいは１個、２個、３個、４個、もしくは５個の欠失、挿入、及び／または置換を有するその変異体を含む。
【００４２】
ある特定の実施形態では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、アミノ酸配列（ＩＩＩ）：Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｃｙｓ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｃｙｓ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６（配列番号５）を含み、Ｘａａ１は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｇｌｎ、Ｐｒｏ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、もしくはＴｈｒであるか、または欠損しており、Ｘａａ２は、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｙであるか、または欠損しており、Ｘａａ３は、Ｔｈｒ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｇｌｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、またはＬｅｕであり、Ｘａａ５は、Ａｓｐ、Ｉｌｅ、またはＧｌｕであり、Ｘａａ６は、Ｉｌｅ、Ｔｒｐ、またはＬｅｕであり、Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、またはＴｙｒであり、Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔであるか、または欠損しており、Ｘａａ９は、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ｔｈｒ、またはＩｌｅであり、Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＶａｌであり、Ｘａａ１３は、ＴｈｒまたはＡｌａであり、Ｘａａ１４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＳｅｒであり、Ｘａａ１５は、Ｃｙｓ、Ｔｙｒであるか、または欠損しており、Ｘａａ１６は、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、またはＳｅｒである。
【００４３】
いくつかの実施形態では、ペプチドは、アミノ酸配列Ａｓｎ  Ａｓｐ  Ｇｌｕ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｖａｌ  Ａｓｎ  Ｖａｌ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｌｅｕ（配列番号６）、あるいは１個、２個、３個、４個、もしくは５個の欠失、挿入、及び／または置換を有するその変異体を含む。
【００４４】
ある特定の実施形態では、Ｐ２Ｙ作動薬は、図４または図５Ａ〜５Ｃ中の化合物から選択される。ある特定の実施形態では、アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬は、図６Ａ〜６Ｃ中の化合物から選択される。いくつかの実施形態では、可溶性グアニル酸シクラーゼ作動薬は、図９Ａ〜９Ｌ中の化合物から選択される。ある特定の実施形態では、アデニル酸シクラーゼ受容体作動薬は、図１０中の化合物から選択される。いくつかの実施形態では、イミダゾリン−１受容体作動薬は、モクソニジン及び図１１中の化合物から選択される。ある特定の実施形態では、コリン作動薬は、図１２中の化合物から選択される。特定の実施形態では、プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬は、ＰＧＥ２またはその類似体／誘導体、及び図７または図１３中の化合物から選択される。ある特定の実施形態では、ドパミンＤ１作動薬は、図１４中の化合物から選択される。いくつかの実施形態では、メラトニン受容体作動薬は、メラトニン及び図１５中の化合物から選択される。いくつかの実施形態では、５ＨＴ４作動薬は、セロトニン及びその類似体、プルカロプリド、メトクロプラミド、クレオボプリド、モサプリド、プルカロプリド、レンザプリド、テガセロッド、ザコプリド、ノルシサプリド、ナロノプリド、ならびにベルセトラグから選択される。
【００４５】
いくつかの実施形態では、心房性ナトリウム利尿ペプチド受容体作動薬は、Ｓｅｒ  Ｌｅｕ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｃｙｓ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ａｓｐ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｐｈｅ  Ａｒｇ  Ｔｙｒ（配列番号７）、Ｃｙｓ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ａｓｐ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ（配列番号８）、及びＳｅｒ  Ｓｅｒ  Ｃｙｓ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ａｓｐ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｐｈｅ  Ａｒｇ（配列番号９）から選択されるアミノ酸配列（１個、２個、３個、４個、もしくは５個の欠失、挿入、及び／または置換を有するそれらの変異体を含む）を含むか、またはそれから成る。
【００４６】
ある特定の実施形態では、炭酸脱水酵素阻害薬は、図１７中の化合物から選択される。ある特定の実施形態では、ホスホジエステラーゼ阻害薬は、図１８の化合物から選択される。いくつかの実施形態では、ＤＲＡ作動薬は、図２１Ａ〜Ｂから選択される。
【００４７】
いくつかの実施形態では、本化合物は、該患者に経腸投与されると実質的に全身で生体利用不可能であり、（ｉ）少なくとも約２００Å２のｔＰＳＡを有する。ある特定の実施形態では、本化合物は、少なくとも約２５０Å２のｔＰＳＡ、少なくとも約２７０Å２のｔＰＳＡ、少なくとも約３００Å２のｔＰＳＡ、少なくとも約３５０Å２のｔＰＳＡ、少なくとも約４００Å２のｔＰＳＡ、または少なくとも約５００Å２のｔＰＳＡを有する。特定の実施形態では、本化合物は、少なくとも約５００Ｄａ、少なくとも約１０００Ｄａ、少なくとも約２５００Ｄａ、または少なくとも約５０００Ｄａ以上の分子量を有する。いくつかの実施形態では、本化合物は、（ｉ）ＮＨ及び／もしくはＯＨ及び／もしくは他の可能性のある水素結合供与体部分の約５超の総数、（ｉｉ）Ｏ原子及び／もしくはＮ原子及び／もしくは他の可能性のある水素結合受容体の約１０超の総数、ならびに／または（ｉｉｉ）約１０５超もしくは約１０未満のＭｏｒｉｇｕｃｈｉ分配係数を有する。いくつかの実施形態では、本化合物は、約１００×１０−６ｃｍ／ｓ未満、または約１０×１０−６ｃｍ／ｓ未満、または約１×１０−６ｃｍ／ｓ未満、または約０．１×１０−６ｃｍ／ｓ未満の透過係数Ｐａｐｐを有する。
【００４８】
ある特定の方法は、１つ以上の追加の生物活性剤を投与することをさらに含む。いくつかの実施形態では、本化合物及び１つ以上の追加の生物活性剤は、単一の薬学的組成物の一部として投与される。ある特定の実施形態では、本化合物及び１つ以上の追加の生物活性剤は、個別の薬学的組成物として投与される。いくつかの実施形態では、個別の薬学的組成物は、順次に投与される。いくつかの実施形態では、個別の薬学的組成物は、同時に投与される。
【００４９】
ある特定の実施形態では、追加の生物活性剤は、ビタミンＤ２（エルゴカルシフェロール）、ビタミンＤ３（コレカルシフェロール）、活性型ビタミンＤ（カルシトリオール）、及び活性型ビタミンＤ類似体（例えばドキセルカルシフェロール、パリカルシトール）から選択される。
【００５０】
ある特定の実施形態では、追加の生物活性剤は、リン酸塩結合剤である。いくつかの実施形態では、リン酸塩結合剤は、セベラマー（例えば、Ｒｅｎｖｅｌａ（登録商標）（炭酸セベラマー）、Ｒｅｎａｇｅｌ（登録商標）（塩酸セベラマー））、炭酸ランタン（例えば、Ｆｏｓｒｅｎｏｌ（登録商標））、炭酸カルシウム（例えば、Ｃａｌｃｉｃｈｅｗ（登録商標）、Ｔｉｔｒａｌａｃ（登録商標））、酢酸カルシウム（例えばＰｈｏｓＬｏ（登録商標）、Ｐｈｏｓｅｘ（登録商標））、酢酸カルシウム／炭酸マグネシウム（例えば、Ｒｅｎｅｐｈｏ（登録商標）、ＯｓｖａＲｅｎ（登録商標））、ＭＣＩ−１９６、クエン酸第二鉄（例えば、Ｚｅｒｅｎｅｘ（商標））、水酸化炭酸鉄マグネシウム（例えば、Ｆｅｒｍａｇａｔｅ（商標））、水酸化アルミニウム（例えば、Ａｌｕｃａｐｓ（登録商標）、Ｂａｓａｌｊｅｌ（登録商標））、ＡＰＳ１５８５、ＳＢＲ−７５９、及びＰＡ−２１から成る群から選択される。
【００５１】
ある特定の実施形態では、追加の生物活性剤は、ＮａＰｉ２ｂ阻害薬である。いくつかの実施形態では、追加の生物活性剤は、ナイアシンまたはニコチンアミドである。
【００５２】
ある特定の実施形態では、対象はＣＫＤを有し、さらに活性な生物剤は、ＡＣＥ阻害薬、アンチオゲンシンＩＩ受容体遮断薬、β遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、直接的レニン阻害薬、利尿薬、血管拡張薬、エリスロポエチン療法、鉄補充療法、終末糖化産物の阻害薬、ビタミンＤ、及びスタチンのうちの１つ以上から選択される。
【００５３】
ある特定の実施形態では、本化合物または組成物は、経口投与され、任意に、本化合物または組成物は、１日１回経口投与される。
【００５４】
リン酸塩取り込みの阻害薬のスクリーニングの方法であって、（ａ）腸細胞を培養することと、（ｂ）該培養された腸細胞を試験化合物と接触させることと、（ｃ）（ｉ）該腸細胞の頂端表面におけるｐＨ、（ｉｉ）該腸細胞の細胞内ｐＨ、及び／または（ｉｉｉ）該腸細胞によるリン酸塩取り込みを測定することと、（ｄ）（ｃ）（ｉ）の該ｐＨが対照と比べて増加し、（ｃ）（ｉｉ）の該細胞内ｐＨが対照と比べて減少し、かつ／または（ｃ）（ｉｉｉ）のリン酸塩取り込みが対照と比べて減少する場合、該試験化合物をリン酸塩取り込みの阻害薬として特定することと、を含む、該方法も含まれる。
【００５５】
いくつかの実施形態では、ステップ（ａ）は、腸細胞を単層培養することを含む。ある特定の実施形態では、ステップ（ａ）は、腸陰窩から該細胞を単離し、エンテロイド（ｅｎｔｅｒｏｉｄ）を形成するのに十分な条件下で培養することを含む。ある特定の実施形態では、ステップ（ａ）は、単離した胚性幹細胞、内胚葉細胞、または多能性幹細胞を、オルガノイドを形成するのに十分な条件下で培養することを含む。いくつかの実施形態では、ステップ（ａ）は、腸切片（複数可）をＵｓｓｉｎｇチャンバ内で培養することを含む。
【００５６】
ある特定の実施形態では、ステップ（ｃ）（ｉ）は、該細胞をｐＨ感応性蛍光染料と接触させることと、該染料の蛍光を測定することと、を含む。いくつかの実施形態では、ステップ（ｃ）（ｉｉ）は、該細胞を３３Ｐ標識化リン酸イオンと接触させることと、該標識化リン酸イオンの取り込みを測定することと、を含む。
【００５７】
いくつかの実施形態では、（ｄ）の該増加及び／または減少は、統計的に有意である。
【００５８】
ある特定の実施形態では、試験化合物は、小腸内の重炭酸塩分泌を刺激し、かつ／または酸分泌を阻害することで知られるか、あるいはその疑いがある小分子またはペプチドである。
【００５９】
ある特定の実施形態では、試験化合物は、本明細書に記載され、かつ／または当該技術分野で既知のように、Ｐ２Ｙ作動薬、アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬、グアニル酸シクラーゼＣ受容体作動薬、可溶性グアニル酸シクラーゼ作動薬、アデニル酸シクラーゼ受容体作動薬、イミダゾリン−１受容体作動薬、コリン作動薬、プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬、ドパミンＤ１作動薬、メラトニン受容体作動薬、５ＨＴ４作動薬、心房性ナトリウム利尿ペプチド受容体作動薬、炭酸脱水酵素阻害薬、ホスホジエステラーゼ阻害薬、及び腺腫において下方制御される交換輸送体（ＤＲＡまたはＳＬＣ２６Ａ３）作動薬のうちの１つ以上から選択される。
【００６０】
本発明のこれらの態様及び他の態様は、以下の詳細な説明を参照すると明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【００６１】
【図１】図１Ａ〜１Ｂにリナクロチド（ＧＣ−Ｃ受容体作動薬）が、ラットの胃腸管内のリン酸塩取り込みの取り込みを低減させることを示す。
【図２】図２Ａ〜２Ｂにモクソニジン（イミダゾリンサブタイプ１（Ｉ１）受容体作動薬）及び水溶性のフォルスコリン類似体であるコルホルシン（アデニル酸シクラーゼ作動薬）が、ラットの胃腸管内のリン酸塩取り込みの取り込みを低減させることを示す。
【図３】Ｐ２Ｙ２受容体作動薬Ｕｐ４Ｕが、ラットの胃腸管内のリン酸塩取り込みの取り込みを低減させることを示す。
【図４−１】例示的な小分子Ｐ２Ｙ受容体作動薬を示す。
【図４−２】図４−１の続きである。
【図５Ａ】例示的な小分子Ｐ２Ｙ受容体作動薬を示す。
【図５Ｂ】図５Ａの続きである。
【図５Ｃ】図５Ｂの続きである。
【図６Ａ−１】代表的なアデノシン様Ａ２ｂ作動薬（６Ｂ）及び代表的なジシアノピリジンＡ２ｂ作動薬（６Ｃ）を含む、例示的な小分子アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬を示す。
【図６Ａ−２】図６Ａ−１の続きである。
【図６Ｂ】図６Ａの続きである。
【図６Ｃ】図６Ｂの続きである。
【図７】例示的なプロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬の一覧を示す。
【図８Ａ】例示的な中性付近のｐＨ指示薬（８Ａ）及び酸性のｐＨ指示薬（８Ｂ）の光物理特性を示す。
【図８Ｂ】図８Ａの続きである。
【図９−１】ヘム依存性及びヘム非依存性作動薬（９Ａ）を含む、例示的な可溶性グアニル酸シクラーゼ（ｓＧＣ）作動薬を示す。
【図９−２】図９−１の続きである。
【図９−３】図９−２の続きである。
【図９−４】図９−３の続きである。
【図９−５】図９−４の続きである。
【図９−６】図９−５の続きである。
【図９−７】図９−６の続きである。
【図９−８】図９−７の続きである。
【図９−９】図９−８の続きである。
【図９−１０】図９−９の続きである。
【図９−１１】図９−１０の続きである。
【図９−１２】図９−１１の続きである。
【図９−１３】図９−１２の続きである。
【図９−１４】図９−１３の続きである。
【図９−１５】図９−１４の続きである。
【図９−１６】図９−１５の続きである。
【図９−１７】図９−１６の続きである。
【図９−１８】図９−１７の続きである。
【図９−１９】図９−１８の続きである。
【図９−２０】図９−１９の続きである。
【図９−２１】図９−２０の続きである。
【図９−２２】図９−２１の続きである。
【図１０−１】例示的なアデニル酸シクラーゼ受容体作動薬を示す。
【図１０−２】図１０−１の続きである。
【図１１】例示的なイミダゾリン受容体作動薬を示す。
【図１２−１】例示的なコリン作動薬及び拮抗薬であるアトロピン及び（−）−ヒヨシンを示す。
【図１２−２】図１２−１の続きである。
【図１３−１】例示的なＥＰ４受容体作動薬を示す。
【図１３−２】図１３−１の続きである。
【図１４】例示的なドパミンＤ１受容体作動薬を示す。
【図１５】例示的なメラトニン（ＭＴ２）受容体作動薬を示す。
【図１６】ＮＰ受容体（複数可）の例示的なペプチド作動薬の構造（配列番号７、８、及び９）を示す。
【図１７−１】例示的な炭酸脱水酵素阻害薬を示す。
【図１７−２】図１７−１の続きである。
【図１８】例示的なホスホジエステラーゼ阻害薬を示す。
【図１９】細胞膜を横断するｐＨ勾配、ならびに上皮膜のごく近傍及び腸管内腔のｐＨ勾配を含む、腸管内に見られるｐＨ勾配を図示する。
【図２０】ある範囲のｐＨ値にわたる（室温における）水性環境内の溶解度カルシウムイオン及びリン酸イオンの状態図を示す。
【図２１−１】サブタイプ選択的ＰＫＣ阻害薬の代表例を示す。
【図２１−２】図２１−１の続きである。
【図２２】図２２Ａ〜２２ＣにＨＥＫ−２９３細胞の内部の酸性化が、３３Ｐ標識化Ｐｉの取り込みによって測定されたときのリン酸塩取り込みの著しい低減を引き起こしたことを示す。
【発明を実施するための形態】
【００６２】
以下の説明では、本発明の種々の実施形態の完全な理解を提供するために、ある特定の具体的な詳細が記載される。しかしながら、当業者であれば、本発明がこれらの詳細を用いずに実践され得ることを理解するであろう。
【００６３】
文脈上他に要求されない限り、本明細書及び特許請求の範囲の全体にわたって、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」及びその変形、例えば「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」及び「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などは、非限定的で包括的な意味で、つまり、「含むがこれらに限定されない」として解釈されるものとする。
【００６４】
本明細書全体にわたって、「１つの実施形態」または「一実施形態」への言及は、実施形態に関連して記載される特定の特徴、構造、または特性が、本発明の少なくとも１つの実施形態に含まれることを意味する。したがって、本明細書全体にわたる種々の箇所における「１つの実施形態では」または「一実施形態では」という表現の出現は、必ずしもすべてが同じ実施形態を指すとは限らない。さらに、特定の特徴、構造、または特性は、１つ以上の実施形態において任意の好適な様式で組み合わされてよい。
【００６５】
本発明の実施形態は、広義には、グアニル酸シクラーゼ作動薬化合物などの非ＮＨＥ３結合性化合物が、胃腸管内、例えば小腸内のリン酸塩取り込みを阻害することができるという発見に関する。
【００６６】
１つの非限定的な理論によると、リン酸イオン（Ｐｉ）の細胞による取り込みは、細胞内ｐＨ及び／または隣接する細胞外環境のｐＨの変化に影響される場合がある。例えば、付随の実施例に示されるように、（細胞外ｐＨを約７．４に維持しながらの）ヒト胎児由来腎臓（ＨＥＫ−２９３）細胞の細胞内部の酸性化は、３３Ｐ標識化Ｐｉの取り込みによって測定されたときのリン酸塩取り込みの著しい低減を引き起こした。
【００６７】
ＨＥＫ−２９３細胞内でリン酸塩輸送体ＮａＰｉ２ｂ（ＳＬＣ３４Ａ２）を一過性に発現させた関連実験において、同じ現象が観察された。内因性Ｐｉ輸送体であるＰｉｔ−１及び／またはＰｉｔ−２（ＳＬＣ２０Ａ２）は、（細胞代謝需要を満たすための）非形質転換のＨＥＫ−２９３細胞におけるＰｉ取り込みの原因であるため、Ｐｉ取り込みにおける細胞内ｐＨの減少の作用は、特定のリン酸塩輸送体に必ずしも関係するとは限らない一般的な減少であると結論付けられた。Ｐｉｔ−１及びＰｉｔ−２は、リン酸塩の一塩基形態であるＮａＨ２ＰＯ３−を輸送し、一方でＮａＰｉ２ｂは、二塩基形態であるＮａＨＰＯ３２−を輸送する。細胞酸性化が両方の輸送体を用いるリン酸塩取り込みに影響するという観察は、Ｈ＋電気化学的勾配の変化のみに基づく機構と矛盾する。
【００６８】
Ｐｉ取り込みの増加が予想され得たため、これらの観察は全く反直感的である。例えば、（例えば、対応する細胞外ｐＨのあらゆる変化を伴わない）細胞内ｐＨの減少が、リン酸塩の二塩基形態（ＮａＰＯ３２−）などの塩基性アニオンの取り込みの推進力を発生させることが予想され得た。
【００６９】
それにもかかわらず、リン酸塩取り込みの低減が観察され、リン酸塩低下を必要とする患者のリン酸塩取り込みを低減させるために、直接的または間接的なｐＨ調整剤、特に胃腸管（例えば小腸）内でｐＨ調整剤としての活性を有するものの使用の可能性が提示された。この可能性は、種々のｐＨ調整剤が哺乳動物の胃腸管内のリン酸塩取り込みを低減させることができるという観察に支持される（付随の実施例を参照されたい）。本明細書において使用される場合、「ｐＨ調整」剤という用語は、胃腸管、例えば小腸もしくは十二指腸の内腔への重炭酸塩（ＨＣＯ３−）分泌を直接的もしくは間接的に増加させ、かつ／または酸／プロトン（例えば、Ｈ＋）分泌を減少させることができる、薬剤または化合物を含む。いくつかのｐＨ調整化合物は、例えば、胃腸管の上皮細胞のある特定の細胞内二次メッセンジャー、例えばＣａ＋＋、ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ、及びその他のものなどを調節する（例えば、増加させる）ことによって作用し得る。したがって、いくつかの例示的な化合物は、直接的または間接的のいずれかで、小腸の内腔への重炭酸塩分泌を刺激するか、小腸の内腔への酸分泌を阻害するか、または小腸の内腔への重炭酸塩分泌を刺激し、かつ酸分泌を阻害する。いくつかの態様では、本化合物は、隣接する細胞外環境のｐＨの調整を伴わずにまたは伴わずに、小腸の表面の上皮細胞の、任意に上皮細胞の亜頂端表面における細胞質または細胞内のｐＨを減少させる。ある特定の実施形態では、本化合物は、ナトリウム−水素交換輸送体３（ＮＨＥ３）に結合せず、それを阻害しない。
【００７０】
いくつかの態様では、本化合物は、小腸の頂端表面における「不撹拌層」のｐＨを減少させる。「不撹拌層」は、急速に透過する物質（例えば、１Ｈ＋）が拡散によって速度制限され得るように拡散バリアとして作用する、頂端側の膜に隣接する停留層（例えば、深さ約６００μｍ）を指す。理論に束縛されることを望むものではないが、そのような手法は、胃腸管の上皮細胞を横断する重炭酸塩の流動を誘発し、細胞外部（ＵＷＬ）のごく近傍のｐＨを増加させ、ひいては粘膜表面のｐＨ勾配を減少させるであろう。共輸送体、交換輸送体、及びチャネルを介する腸細胞の頂端表面におけるプロトンイオンと重炭酸イオンとの連続的な交換のため、ｐＨ勾配が細胞膜を横断して維持される。不撹拌層の結果として、上皮膜のごく近傍と腸管内腔との間に別のｐＨ勾配が確立される。２つのｐＨ勾配は、図１９に概略的に表される。
【００７１】
したがって、いくつかの態様では、ある化合物が、胃腸管内の上皮横断ｐＨ勾配（ＣＥＰＧ）を減少させる。「ＣＥＰＧ」という用語は、（ｉ）小腸の表面の上皮細胞の、任意に上皮細胞の亜頂端表面における細胞質のｐＨ（すなわち、細胞内ｐＨ）と、（ｉｉ）小腸の頂端表面における不撹拌層のｐＨとの間の差を含む。ある特定の実施形態は、重炭酸塩及び／または酸の分泌を調節することなく、あるいは不撹拌層またはＵＷＬのｐＨを変更することなく、単に胃腸管の管腔のｐＨを増加させる化合物（例えば、制酸薬）を除外する。
【００７２】
いずれか１つの理論にも束縛されることを望むものではないが、いくつかの実施形態では、腔内の遊離カルシウムイオンが、ＣＥＰＧの減少によって誘導されるＰｉ取り込みの阻害に寄与し得る。室温における水性環境内のカルシウムイオン及びリン酸イオンの状態図は、カルシウム（ひいてはリン酸塩）の溶解度がｐＨ依存性である、つまり、ｐＨが増加するにつれてリン酸塩の溶解度が減少することを示す。図２０を参照されたい。この現象は、すべての条件が同じだとすると、粘膜表面の微小環境内の薬物誘導性のｐＨの増加は、遊離Ｐｉの利用能を最小化し、ひいては胃腸管内の細胞によるその取り込みを減少させることを示唆するであろう。
【００７３】
別の非限定的な理論によると、リン酸イオンの取り込みは、小腸内、主に空腸内の水の吸収に影響される場合がある。具体的には、小腸内の水吸収の増加はリン酸塩取り込みの増加と関連し、その逆も同様である。そのような事例において、小腸内の水吸収を低減させる非ＮＨＥ３結合性化合物が、リン酸塩取り込みを阻害するために使用され得る。したがって、ある特定の実施形態は、リン酸塩低下を必要とする患者の胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害するための方法であって、小腸内の水吸収を減少させる化合物を該患者に投与することを含み、該化合物がＮＨＥ３に結合せず、該化合物が、それを必要とする該患者に投与されると、胃腸管内でその中のリン酸イオン（Ｐｉ）の輸送を阻害するように実質的に活性である、方法に関する。ある特定の実施形態では、本化合物は、例えば、分泌と吸収との間の均衡を、例えば、吸収を減少させるか、分泌を増加させるか、またはその両方によって調節することにより、「正味の」水吸収を減少させる。いくつかの実施形態では、本化合物は、空腸内の水吸収を減少させる。
【００７４】
いくつかの態様では、胃腸管内のリン酸塩取り込みの阻害は、該化合物が血流にほとんどまたは実質的に全く吸収されないように有利に設計され得る（つまり、非全身性または実質的に非全身性であるように設計される）、ある特定の化合物、及び／またはそれらを含む薬学的組成物の投与によって達成され得る。この点で本化合物は、経口投与を含む経腸投与にあたり、全身性利用能をほとんどまたは実質的に全く生じさせない特徴を有する。換言すると、本化合物は、有意義なレベルで血流に吸収されず、したがって血流での活性を有しないが、代わりにそれらの活性は実質的に胃腸管内に局在化する。
【００７５】
したがって、本明細書でさらに説明されるある特定の例示的な実施形態では、本発明の化合物は、概して、胃腸管内のそれらの活性及び／またはそれらの実質的な非全身性生体利用能に関連もしくは寄与する、構造的特徴及び／または機能的特徴の組み合わせを必要とする。そのような特徴としては、例えば、（ｉ）特定のｔＰＳＡ値及び／またはＭＷ値（例えば、それぞれ少なくとも約１９０Å２及び／または少なくとも約７３６ダルトン）、（ｉｉ）投与後の化合物及び／またはその代謝物の特定のレベルの糞便回収率（例えば、７２時間で５０％超）、（ｉｉｉ）ＮＨ及び／またはＯＨ及び／または潜在的に水素結合供与体部分の特定の数（例えば、約５超）、（ｉｖ）回転可能結合（ｒｏｔａｔａｂｌｅ  ｂｏｎｄ）の特定の数（例えば、約５超）、（ｉｖ）特定の透過性特徴（例えば、約１００×１０−６ｃｍ／ｓ未満のＰａｐｐ）、ならびに／または本明細書に記載されるいくつかの他の特徴及び特性のうちのいずれか、のうちの１つ以上を挙げることができる。
【００７６】
進行腎疾患（例えばステージ４及び５）を有する患者では、身体のリン過負荷は、正常レベルを超える血清リン濃度、すなわち、高リン血症として顕在化する。高リン血症は、死亡率及び罹患率に直接関連する。腸管内のリン酸塩輸送の阻害は、血清リン濃度を低減させ、ひいてはこれらの患者の予後を改善する。ステージ２及び３の慢性腎疾患患者では、身体のリン過負荷は、必ずしも高リン血症を引き起こすとは限らず、すなわち、患者は正リン血性の状態を保つが、これは、これらの患者の死亡率及び罹患率における危険因子であるＦＧＦ−２３の増加を誘起しない。したがって、関連する骨障害及び血管障害を回避し、最終的には死亡率を改善するために、これらの初期段階においても身体のリン過負荷を低減または防止する必要性がある。
【００７７】
腸管内のリン酸塩輸送の阻害は、腸管からのリン酸塩の取り込みを阻害することによって治療可能な疾患を有する患者に特に有利となろう。さらに、リン酸塩輸送の阻害は、リン酸塩低下の必要性に関連する他の疾患または状態の中でも、腎不全の進行を減速させ、心血管系事象の危険性を低減させ得る。
【００７８】
Ｉ．リン酸塩輸送を阻害する化合物
本発明の実施形態は、例えば、胃腸内腔の上皮膜の中またはそれに隣接するｐＨを調整すること、小腸内の水吸収を減少させること、またはその両方によって、胃腸管内のリン酸塩輸送／取り込みを阻害または低減することができる化合物に関する。ｐＨ調整化合物の例としては、小腸内の重炭酸塩分泌（すなわち、十二指腸の重炭酸塩分泌、すなわちＤＢＳ）を刺激するか、小腸内の酸／プロトン分泌を阻害するか、または両方を行うものが挙げられる。
【００７９】
本明細書において提供される化合物は、合成起源または生体起源の小分子、及びペプチドまたはポリペプチドを含み得る。「ペプチド」及び「ポリペプチド」という用語は本明細書において互換的に使用されるが、ある特定の事例では、「ペプチド」という用語は、より短いポリペプチド、例えば、すべての整数及びその間の範囲（例えば、５〜１０、８〜１２、１０〜１５）を含めて、約２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、１２個、１３個、１４個、１５個、１６個、１７個、１８個、１９個、２０個、２５個、３０個、３５個、４０個、４５個、または５０個のアミノ酸から成るポリペプチドを指す場合がある。ポリペプチド及びペプチドは、自然発生アミノ酸及び／または非自然発生アミノ酸から成る場合がある。抗体もポリペプチドとして含まれる。
【００８０】
いくつかの実施形態では、本化合物は、Ｐ２Ｙ受容体作動薬、アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬、グアニル酸シクラーゼＣ受容体作動薬、可溶性グアニル酸シクラーゼ作動薬、アデニル酸シクラーゼ受容体作動薬、イミダゾリン−１受容体作動薬、コリン作動薬、プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬、ドパミンＤ１作動薬、メラトニン受容体作動薬、５ＨＴ４作動薬、心房性ナトリウム利尿ペプチド受容体作動薬、炭酸脱水酵素阻害薬、ホスホジエステラーゼ阻害薬、または腺腫において下方制御される交換輸送体（ＤＲＡまたはＳＬＣ２６Ａ３）作動薬のうちの１つ以上から選択される。上記のように、いくつかの態様では、そのような作動薬化合物は、十二指腸及び近位空腸を含む上部胃腸管内の重炭酸塩分泌を誘導し、かつ／または酸分泌を阻害する。いくつかの態様では、この作用機構は、頂端側のプロトン及び重炭酸塩の輸送体を直接的または間接的に調節して、粘膜表面におけるＣＥＰＧまたは比較的塩基性の微小環境の減少をもたらし、それによってリン酸塩取り込み／吸収を低減させる。
【００８１】
特定の態様では、本化合物は、十二指腸の重炭酸塩分泌（ＤＢＳ）を直接的または間接的に刺激する。ＤＢＳは、酸性の胃液を中和するように腸の十二指腸及び近位空腸区域において機能する粘膜の自然防御能である。ＤＢＳは、とりわけＳＬＣ２６Ａ３（ＤＲＡ）及びＳＬＣ２６Ａ３（ＰＡＴ−１）、ＣＦＴＲを介する塩素イオン及び重炭酸イオンチャネル、ならびにカルシウム活性化塩素イオンチャネルなどの塩素イオン／重炭酸イオン交換輸送体の活性を制御するものを含む、いくつかの生物学的経路によって刺激され得る。いくつかの態様では、これらの経路は、細胞内Ｃａ＋＋、ｃＡＭＰ、及び／またはｃＧＭＰなどの１つ以上の二次メッセンジャーの増加によって刺激される。
【００８２】
いくつかの態様では、本化合物は、小腸内の水吸収を直接的または間接的に減少させる。特定の態様では、本化合物は、空腸内の水吸収を減少させる。特定の態様、本化合物は、小腸内の水吸収を、対照化合物または化合物なしと比べて、約または少なくとも約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、もしくは１００％増加させる。
【００８３】
「作動薬」という用語は、受容体などの標的分子に結合し、その標的分子による細胞応答を誘起または刺激する化合物を含む。超作動薬（ｓｕｐｅｒ  ａｇｏｎｉｓｔ）、完全作動薬、部分的作動薬、及び選択的作動薬が含まれる。超作動薬は、標的分子に対し、内因性作動薬（複数可）よりも大きな最大応答をもたらし、完全作動薬は、標的分子に対し、内因性作動薬（複数可）と比べて比較可能な応答をもたらし、部分的作動薬は、標的分子に対し、内因性作動薬（複数可）よりも著しく少ない（例えば、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％）最大応答をもたらす。
【００８４】
作動薬としてのその活性に加えて、ある特定の実施形態では、ある化合物はまた、標的へのその「特異的結合」を特徴とする場合がある。例えば、いくつかの実施形態では、ある化合物（例えば、直接作用型化合物）は、本明細書に記載される標的に、少なくとも約０．０１、０．０５、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、４０、または５０ｎＭの結合親和性（Ｋｄ）で特異的に結合することができる。特定の実施形態では、標的は、本明細書に記載されるように、Ｐ２Ｙ受容体、アデノシンＡ２ｂ受容体、グアニル酸シクラーゼＣ受容体、アデニル酸シクラーゼ受容体、イミダゾリン−１受容体、アセチルコリン受容体、プロスタグランジンＥＰ４受容体、ドパミンＤ１受容体、メラトニン受容体、５ＨＴ４、心房性ナトリウム利尿ペプチド受容体、炭酸脱水酵素、ホスホジエステラーゼ、及び腺腫において下方制御される交換輸送体（ＤＲＡまたはＳＬＣ２６Ａ３）のうちの１つ以上から選択される。
【００８５】
Ａ．Ｐ２Ｙ作動薬
ある特定の実施形態では、本化合物は、Ｐ２Ｙ作動薬（またはＰ２Ｙ受容体作動薬）である。Ｐ２Ｙ受容体は、プリン作動性のＧタンパク質結合受容体のファミリーを指す。ヒトＰ２Ｙ受容体の例としては、Ｐ２Ｙ１、Ｐ２Ｙ２、Ｐ２Ｙ４、Ｐ２Ｙ５、Ｐ２Ｙ６、Ｐ２Ｙ８、Ｐ２Ｙ９、Ｐ２Ｙ１０、Ｐ２Ｙ１１、Ｐ２Ｙ１２、Ｐ２Ｙ１３、及びＰ２Ｙ１４が挙げられる。Ｐ２Ｙ受容体の主な天然または内因性リガンドは、アデノシン５’−三リン酸塩（ＡＴＰ）、アデノシン５’−二リン酸塩（ＡＤＰ）、ウリジン５’−三リン酸塩（ＵＴＰ）、ウリジン５’−二リン酸塩（ＵＤＰ）、及びＵＤＰ−グルコース（または他のＵＤＰ糖類）である。Ａｐ４Ｕなどのジヌクレオチドも、自然発生のＰ２Ｙ作動薬である。
【００８６】
Ｐ２Ｙ受容体は、十二指腸細胞（ｄｕｏｄｅｎｏｃｙｔｅ）内のＣａ＋＋シグナル伝達を媒介し、かつ十二指腸粘膜の重炭酸塩分泌に寄与することが示されている。例えば、Ｄｏｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ  Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２９６：Ｇ４２４−Ｇ４３２，２００９を参照されたい。いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、ある特定の態様では、Ｐ２Ｙ受容体作動薬は、小腸への重炭酸塩分泌（十二指腸の重炭酸塩分泌、ＤＢＳとも称される）を刺激することによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【００８７】
いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、いくつかの実施形態では、Ｐ２Ｙ受容体作動薬は、小腸内の水吸収を減少させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【００８８】
いくつかのＰ２Ｙ受容体は、例えば、ＡＴＰ及びＡＤＰなどのアデニンヌクレオチドによって、そして他のものは、ウラシルヌクレオチドまたはＵＤＰ−グルコースによって、選択的に活性化される。Ｐ２Ｙ１受容体は、定義済みのＰ２Ｙ−プリン受容体の機能性の主要因である。それは、平滑筋、内皮、及び神経組織を含む種々の組織に加えて、血小板内でも機能する。Ｐ２Ｙ１受容体は、アデニンヌクレオチドに対して選択的である。ＡＤＰは、最も強力な生理的作動薬である。いくつかの実施形態では、本化合物は、Ｐ２Ｙ１受容体作動薬、任意に、他のＰ２Ｙ受容体と比べて選択的なＰ２Ｙ１受容体作動薬である。Ｐ２Ｙ１受容体作動薬の一例は、２−メチルチオ−ＡＤＰである。
【００８９】
特定の実施形態では、本化合物は、Ｐ２Ｙ２及び／またはＰ２Ｙ４受容体作動薬、任意に、他のＰ２Ｙ受容体と比べて選択的なＰ２Ｙ２受容体作動薬である。これらの２つの受容体は、それらのＰ２Ｙ受容体サブタイプすべてのＴＭドメインの配列において最高の同一性（６６．８％）を示す。Ｐ２Ｙ２受容体は、例えば、ウラシルヌクレオチド、ＵＤＰ糖誘導体、及びＡＴＰなどのアデニンヌクレオチドによって活性化され得る。Ｐ２Ｙ２受容体は、肺、心臓、骨格筋、脾臓、腎臓、肝臓、及び上皮を含む多くの組織内で発現される。これらの受容体は、上皮細胞内のイオン輸送の制御に当たって重要な役割を果たす。ＵＴＰ、ＡＴＰ、ＵＴＰγＳ、及びＡＴＰγＳを含む三リン酸塩ヌクレオチドは、Ｐ２Ｙ２受容体の完全作動薬として作用する。上記の作動薬に加えて、Ｐ２Ｙ２受容体も、ジアデノシン−四リン酸塩（ＡＰ４Ａ）及びＵｐ４Ｕ（ドライアイ症の治療に使用されるジクアホソル、ＩＮＳ３６５）に応答する。類似体Ｐ−（ウリジン５’）−Ｐ４−（２’−デオキシシチジン５’）四リン酸塩（ＩＮＳ３７２１７は、Ｐ２Ｙ４受容体に対するいくつかの作動薬作用を有するＰ２Ｙ２受容体における強力な作動薬である。デヌホソル（（３Ｓ，５Ｒ）−５−（４−アミノ−２−オキソピリミジン−１−イル）−３−ヒドロキシオキソラン−２−イル］メトキシ−ヒドロキシホスホリル］［［［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｒ）−５−（２，４−ジオキソピリミジン−１−イル）−３，４−ジヒドロキシオキソラン−２−イル］メトキシ−ヒドロキシホスホリル］オキシ−ヒドロキシホスホリル］リン酸塩水素（その四ナトリウム塩を含む）も、例示的なＰ２Ｙ２受容体作動薬である。ＰＳＢ１１１４も含まれる。
【００９０】
リボース及びウラシル修飾では、２’−デオキシ−２’−アミノ−ＵＴＰ及び２−チオ−ＵＴＰの両方がＰ２Ｙ２受容体におけるＵＴＰの作動薬効力を保つ。これら２つの修飾の組み合わせは、協同して効力（８ｎＭのＥＣ５０）及び選択性（Ｐ２Ｙ４に対して３００倍Ｐ２Ｙ２選択的）の両方を向上させる、２’−アミノ−２−チオ−ＵＴＰをもたらす。５位の修飾、例えば５−ブロモ−ＵＴＰ（ＥＣ５０＝０．７５μＭ）及び５−ヨード−ＵＴＰ（ＥＣ５０＝０．８３μＭ）などは、小さな疎水性基の導入がＰ２Ｙ２受容体において有益であり得ることを示唆する。
【００９１】
本明細書において提供されるＰ２Ｙ受容体作動薬は、当該技術分野で既知の他の作動薬の中でも、モノヌクレオチド、ジヌクレオチド、及びヌクレオチド糖を含む。例えば、それぞれ参照により全体が本明細書に組み込まれる、米国特許第６，６２４，１５０号、欧州第１１９６３９６号、国際公開第２００８／０６０６３２号、Ｃｏｓｙｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ．１９：３００２−５，２００９（ウリジン５’−（ホスホ）ホスホン酸塩及びＵＭＰの５’−メチレンホスホン酸塩等価物を記載する）、Ｋｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．１６：６３１９−３２，２００８（例えば、Ｐ２Ｙ６受容体作動薬であるα，β−メチレン−ＵＤＰ；選択的Ｐ２Ｙ２受容体作動薬であるＵｐ（４）−フェニルエステル及びＵｐ（４）−［１］グルコース；選択的Ｐ２Ｙ２受容体作動薬であるジハロメチレンホスホン酸塩類似体；強力かつ選択的なＰ２Ｙ２受容体作動薬であるＩＮＳ３７２１７（Ｐ（１）−（ウリジン−５’）−Ｐ（４）−（２’−デオキシシチジン−５’）四リン酸塩）の２−チオ類似体を記載する、Ｉｖａｎｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．５０：１１６６−７６，２００７、Ｂｒｏｏｋｉｎｇｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｌｅｔｔ．１７：５６２−５，２００７（一連のヌクレオシド三リン酸塩の合成及びＰ２Ｙ２作動薬活性を記載する）、及びＪａｃｏｂｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｕｒｉｎｅｒｇｉｃ  Ｓｉｇｎａｌ．５：７５−８９，２００９を参照されたい。
【００９２】
Ｐ２Ｙ受容体作動薬の追加の例としては、Ｐ１，Ｐ４−ジアデノシン四リン酸塩（Ａ２Ｐ４）、ウリジン−５’−二リン酸塩（ＵＤＰ）、ウリジン−５’−Ｏ−（２−チオ二リン酸塩）（ＵＤＰβＳ）、５−ブロモウリジン−５’−三リン酸塩（５−ＢｒＵＴＰ）、５−（１−フェニルエチニル）−ウリジン−５’−三リン酸塩（５−（１−フェニルエチニル）ＵＴＰ）、５−メチルウリジン−５’−二リン酸塩（５−メチルＵＤＰ）、４−ヘキシルチオウリジン−５’−三リン酸塩（４−ヘキシルチオＵＴＰ）、４−チオウリジン−５’−三リン酸塩（４−チオＵＴＰ）、２−メトキシウリジン−５’−三リン酸塩（２−メトキシＵＴＰ）、４−（１−モルホリノ）ウリジン−５’−四リン酸塩（４−（１−モルホリノ））ＵＰ４、４−ヘキシルオキシウリジン−５’−二リン酸塩（４−ヘキシルオキシＵＤＰ）、４−（Ｎ，Ｎ−ジメチル）シチジン−５’−三リン酸塩（Ｎ，Ｎ−ジメチルＣＴＰ）、４−（Ｎ−ヘキシル）シチジン−５’−三リン酸塩（Ｎ−ヘキシルＣＴＰ）、Ｐ１−（シチジン−５’）−Ｐ４−（ウリジン−５’−）四リン酸塩（ＣＰ４Ｕ）、Ｐ１−Ｏ−（メチル）−Ｐ４−（ウリジン−５’−）四リン酸塩（ＭｅＰ４Ｕ）、及び４−（Ｎ−シクロペンチル）チミジン−５’−三リン酸塩（Ｎ−シクロペンチルＣＴＰ）を含む、国際公開第１９９９／０９９９８号ならびに米国出願第２００２／００５２３３６号及び同第２００３／００２７７８５号に記載されるものが挙げられる。
【００９３】
５’−アデノシン−三リン酸塩（ＡＴＰ）、５’−ウリジン−三リン酸塩（ＵＴＰ）、ウリジン−５’−Ｏ−（３−チオ三リン酸塩）（ＵＴＰγＳ）、Ｐ１−（ウリジン−５’）−Ｐ．ｓｕｐ．４−（ウリジン−５’−）四リン酸塩（Ｕ２Ｐ４）、５’−［４−（チオウリジン）］−三リン酸塩（４−チオＵＴＰ）、及びＰ１−（シチジン−５’）−Ｐ４−（ウリジン−５’−）四リン酸塩（ＣＰ４Ｕ）も含まれる。ヌクレオシド二リン酸塩のある特定のチオリン酸塩類似体（例えばＵＤＰ−β−Ｓなど）の特定及び調製は、米国特許第３，８４６，４０２号及びＧｏｏｄｙ  ａｎｄ  Ｅｃｋｓｔｅｉｎ（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．９３：６２５２−６２５７．１９７１）に記載されている。代替的に、ＵＴＰ及びＵＴＰの他の類似体はまた、Ｓｉｇｍａ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．）及びＰｈａｒｍａｃｉａ（Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）などの販売業者から市販されている。Ｐ２Ｙ受容体作動薬を特定する例示的な方法は、例えば、米国出願第２００３／０１７５８１０号に記載されている。
【００９４】
いくつかの実施形態では、Ｐ２Ｙ受容体作動薬は、非内因性小分子作動薬である。Ｐ２Ｙ受容体作動薬の追加の例は、図４及び５Ａ〜５Ｃに示される。
【００９５】
Ｂ．アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬
ある特定の実施形態では、本化合物は、アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬、任意に選択的作動薬である。アデノシンは、Ａ１、Ａ２Ａ、Ａ２Ｂ、及びＡ３アデノシン受容体（ＡＲ）と名付けられた４つの受容体サブタイプにおける局在性調節因子として作用することによって、その生理機能のほとんどを発揮する。アデノシンＡ２ｂ受容体（すなわちＡＤＯＲＡ２Ｂ）は、アデノシンの存在下でアデニル酸シクラーゼ活性を刺激する膜内因性タンパク質である、Ｇタンパク質結合アデノシン受容体である。
【００９６】
Ａ２ｂ受容体は、種々の組織内で発現され、結腸の上皮細胞の粘膜及び基底面の両方の側面上の盲腸及び大腸内で高い濃度が示唆されている。Ｂａｒａｌｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｕｒｉｎｅｒｇｉｃ  Ｓｉｇｎａｌ．５：３−１９，２００９を参照されたい。いずれの部位における活性化も、ｃＡＭＰ活性化Ｃｌ−チャネル嚢胞性線維症膜貫通コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）の直接活性化を介してＣｌ−分泌をもたらす。ＣＦＴＲは、塩素イオン及び重炭酸イオン両方の分泌を調節する。例えばラットでは、Ａ２Ｂ受容体は十二指腸の絨毛の刷子縁膜に免疫局在化されており、ここでは管腔のアデノシンがＡ２Ｂ受容体及びＣＦＴＲを介して重炭酸塩分泌を刺激することが示されている。例えば、Ｈａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｅｘｐ  Ｔｈｅｒ．３３５：６０７−１３，２０１０を参照されたい。いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、ある特定の態様では、アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬は、例えばＣＥＰＧを減少させることにより、小腸への重炭酸塩分泌を刺激することによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【００９７】
いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、いくつかの実施形態では、アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬は、小腸内の水吸収を減少させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【００９８】
アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬の一般例としては、アデノシン、アデノシン様化合物、及び非アデノシン化合物が挙げられる。いくつかの実施形態では、ヌクレオシド系アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬は、修飾アデノシン化合物、例えば、プリン複素環のＮ（６）位で置換された、プリン複素環のＣ（２）位で置換された、リボース部分の５’位で置換された、アデノシン化合物、及び前述のものの任意の組み合わせなどを含む。置換ジカルボニトリルピリジンなどの非リボースリガンドも含まれ、中でも２−［６−アミノ−３，５−ジシアノ−４−［４−（シクロプロピルメトキシ）フェニル］ピリジン−２−イルスルファニル］アセトアミドが一例である。例えば、それぞれ参照により全体が本明細書に組み込まれる、Ｂａｒａｌｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｕｒｉｎｅｒｇｉｃ  Ｓｉｇｎａｌ．４：２８７−３０３，２００８、及びＢａｒａｌｄｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｕｒｉｎｅｒｇｉｃ  Ｓｉｇｎａｌ．５：３−１９，２００９を参照されたい。
【００９９】
アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬の追加の非限定的な例としては、ＢＡＹ  ６０−６５８３、ＣＶ  １８０８、ＡＭＰ５７９、ＮＥＣＡ（Ｎ−エチルカルボキサミドアデノシン）、（Ｓ）−ＰＨＰＮＥＣＡ、ＬＵＦ−５８３５、６−グアニルＮＥＣＡ、及びＬＵＦ−５８４が挙げられる。Ｂｅｕｋｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４７：３７０７−３７０９，２００４（例えば、ＬＵＦ５８３４（２−アミノ−４−（４−ヒドロキシフェニル）−６−（１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチルスルファニル）ピリジン−３，５−ジカルボニトリル）及びＬＵＦ５８３５（３−ヒドロキシフェニル類似体）などの非アデノシン作動薬を記載する）、Ｂｅｕｋｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｄ  Ｒｅｓ  Ｒｅｖ．２６：６６７−９８，２００６（例えば、アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬として（Ｓ）ＰＨＰＮＥＣＡ及びある特定の非リボースリガンドを記載する）、及びＬｉｕ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂａｓｉｃ  Ｒｅｓ  Ｃａｒｄｉｏｌ．１０５：１２９−３７，２０１０も参照されたい。米国出願第２００２／０１５６０７６号に記載されるＡ２ｂ受容体作動薬も含まれる。これらの参考文献は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０１００】
アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬の例は図６Ａ〜６Ｃに示され、それらの合成のための方法と合わせて、米国出願第２００９／０２２１６４９号ならびにＰＣＴ公開である国際公開第２００６／０２７１４２号、同第２００７／１０１５３１号、及び同第２００３／００８３８４号にさらに開示されており、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１０１】
Ｃ．グアニル酸シクラーゼＣ受容体作動薬
ある特定の実施形態では、本化合物は、グアニリルシクラーゼＣ（ＧＣ−Ｃ）作動薬、任意に選択的作動薬である。ＧＣ−Ｃは、腸上皮細胞の頂端膜において高度に濃縮されているグアニル酸シクラーゼファミリーのアイソフォームである。これはまた、急性分泌性下痢の原因である細菌分泌性の熱安定性エンテロトキシンの標的受容体である。ＧＣ−Ｃは、グアニル酸シクラーゼ２Ｃ、腸管内グアニル酸シクラーゼ、グアニル酸シクラーゼＣ受容体、及び熱安定性エンテロトキシン受容体（ｈＳＴＡＲ）としても知られる。
【０１０２】
ＧＣ−Ｃは、細胞外リガンド結合ドメイン、単一膜貫通領域、タンパク質キナーゼに類似する領域、及びＣ末端グアニル酸シクラーゼドメインを有する。チロシンキナーゼ活性は、細胞内のＧＣ−Ｃシグナル伝達経路を媒介する。グアニリン及びウログアニリンは、ＧＣ−Ｃの内因性ペプチドリガンドである。ＧＣ−Ｃの活性化は、例えば、細胞内ｃＧＭＰの増加、嚢胞性線維症膜貫通制御因子（ＣＦＴＲ）のＰＫＧＩＩ依存性リン酸塩化、ならびに（ＣＦＴＲ、そして場合によりＤＲＡまたはＰＡＴ−１を介して）塩素イオン及び重炭酸イオンの腔内分泌の増加を誘起する他の下流シグナルを引き起こす。
【０１０３】
リナクロチド、グアニリン、及び大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）熱安定性エンテロトキシン（ＳＴａ）などのＧＣ−Ｃ作動薬は、十二指腸の重炭酸塩分泌を刺激することが示されている。例えば、Ｒａｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ  Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２８６：Ｇ９５−Ｇ１０１，２００４、Ｂｕｓｂｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．６４９：３２８−３５，２０１０、Ｂｒｙａｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．８６：７６０−５，２０１０を参照されたい。いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、ある特定の態様では、ＧＣ−Ｃ作動薬は、小腸への重炭酸塩分泌を刺激することによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０１０４】
いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、いくつかの実施形態では、ＧＣ−Ｃ作動薬は、小腸内の水吸収を減少させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０１０５】
ＧＣ−Ｃ作動薬の一般例としては、ペプチド作動薬、及び内因性ＧＣ−Ｃペプチド作動薬の合成類似体を含むそれらの類似体が挙げられる。ＧＣ−Ｃ作動薬の特定例としては、大腸菌由来のものを含む熱安定性エンテロトキシン（ＳＴまたはＳＴａペプチド）、グアニリン、プログアニリン、ウログアニリン、プロウログアニリン、リンホグアニリン、リナクロチド（Ｌｉｎｚｅｓｓ）、ＳＰ−３３３、及びプレカナチド（ｐｌｅｃａｎａｔｉｄｅ）が挙げられるが、これらに限定されない。例えば、Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓ  Ｄｅｖｅｌ  Ｔｈｅｒ．７：３５１−６０，２０１３を参照されたい。リナクロチドは、過敏性腸症候群（便秘型）（ＩＢＳ−Ｃ）の治療のために販売されているＳＴａ合成類似体である。例えば、Ｂｒｙａｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｌｉｆｅ  Ｓｃｉ．８６：７６０−５，２０１０を参照されたい。プレカナチドは、ＩＢＳ−Ｃの治療のために開発されたウログアニリンの合成類似体である。例えば、Ｐｉｔａｒｉ（上記）及びＳｈａｉｌｕｂｈａｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｄｉｇ  Ｄｉｓ  Ｓｃｉ．２０１３  Ａｐｒ  ２７．［Ｅｐｕｂ  ａｈｅａｄ  ｏｆ  ｐｒｉｎｔ］を参照されたい。ＧＣ−Ｃ作動薬の追加の例は、米国出願第２０１２／００６４０３９号、同第２００４／０２５８６８７号、同第２００５／０２８７０６７号、同第２００６／０２８１６８２号、同第２００６／０２５８５９３号、同第２００６／００９４６５８号、同第２００８／００２５９６６号、同第２００３／００７３６２８号、同第２００４／０１２１９６１号、及び同第２００４／０１５２８６８号、ならびに米国特許第５，１４０，１０２号、同第７，０４１，７８６号、及び同第７，３０４，０３６号に記載されている。これらの参考文献は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０１０６】
いくつかの実施形態では、ＧＣ−Ｃ作動薬は、細菌性ＳＴ（もしくはＳＴａ）ペプチド、またはその変異体もしくは類似体もしくは誘導体である。細菌内で、ＳＴまたはＳＴａペプチドは、概して少なくとも７０個のアミノ酸を有するプレプロタンパク質から誘導される。プレ及びプロ領域は分泌過程の一部として切断され、得られる成熟タンパク質は、概して約２０個よりも少ないアミノ酸を含み、生物学的に活性である。
【０１０７】
例示的な細菌性ＳＴペプチドとしては、成熟アミノ酸配列Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ（配列番号１０）を有する大腸菌ＳＴ  Ｉｂ（Ｍｏｓｅｌｅｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．３９：１１６７，１９８３）；成熟アミノ酸配列Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ（配列番号１１）を有する大腸菌ＳＴ  Ｉａ（Ｓｏ  ａｎｄ  ＭｃＣａｒｔｈｙ，ＰＮＡＳ  ＵＳＡ．７７：４０１１，１９８０）；成熟アミノ酸配列Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ（配列番号１２）を有する大腸菌ＳＴ  Ｉ（Ｃｈａｎ  ａｎｄ  Ｇｉａｎｎｅｌｌａ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５６：７７４４，１９８１）；成熟アミノ酸配列Ａｓｎ  Ｔｈｒ  Ｐｈｅ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ（配列番号１３）を有するシトロバクターフロインディ（Ｃ．ｆｒｅｕｎｄｉｉ）ＳＴペプチド（Ｇｕａｒｉｎｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．５７：６４９，１９８９）；それぞれ以下のプロ形態のアミノ酸配列Ｇｌｎ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ａｓｐ  Ｐｒｏ  Ｐｒｏ  Ｓｅｒ  Ｐｒｏ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ａｓｐ  Ｔｒｐ  Ａｓｐ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｐ  Ｖａｌ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ（配列番号１４）（ならびにＹ−ＳＴａのＳｅｒ−７〜Ｌｅｕ−７変異体（配列番号１５）、（Ｔａｋａｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１５２：１９９，１９８５）、Ｌｙｓ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ａｓｐ  Ｔｈｒ  Ｇｌｎ  Ｔｈｒ  Ｐｒｏ  Ｓｅｒ  Ｐｒｏ  Ｓｅｒ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ  Ａｓｎ  Ａｓｐ  Ａｓｐ  Ｔｒｐ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ（配列番号１６）、Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｔｈｒ  Ａｌａ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｇｌｎ  Ｖａｌ  Ｇｌｙ  Ａｓｐ  Ｖａｌ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｔｈｒ  Ｉｌｅ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｓｅｒ  Ｇｌｕ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ｃｙｓ  Ｇｌｙ  Ｔｈｒ  Ｇｌｎ  Ｓｅｒ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ｔｈｒ  Ｇｌｎ  Ｇｌｙ  Ｇｌｕ  Ａｓｎ  Ａｓｐ  Ｔｒｐ  Ａｓｐ  Ｔｉｐ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ（配列番号１７）を有するＹ．ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ  ＳＴペプチドであるＹ−ＳＴ（Ｙ−ＳＴａ）、Ｙ−ＳＴｈ、及びＹ−ＳＴｃ（Ｈｕａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｉｃｒｏｂ．Ｐａｔｈｏｇ．２２：８９，１９９７においてレビュー）；成熟アミノ酸配列Ｓｅｒ  Ａｓｐ  Ｔｒｐ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｖａｌ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ａｌａ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ（配列番号１８）を有するＹ．ｋｒｉｓｔｅｎｓｅｎｉｉ  ＳＴペプチド；成熟アミノ酸配列Ｉｌｅ  Ａｓｐ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｉｌｅ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｌｅｕ  Ａｓｎ（配列番号１９）を有するＶ．ｃｈｏｌｅｒａｅ非０１  ＳＴペプチド（Ｔａｋａｏ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＥＢＳ  Ｌｅｔｔ．１９３：２５０，１９８５）；ならびに成熟アミノ酸配列Ｉｌｅ  Ａｓｐ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｉｌｅ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｌｅｕ  Ａｓｎ（配列番号２０）を有するＶ．ｍｉｍｉｃｕｓ  ＳＴペプチド（Ａｒｉｔａ  ｅｔ  ａｌ．，ＦＥＭＳ  Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｌｅｔｔ．７９：１０５，１９９１）が挙げられる。以下の表Ａ１は、例示的な成熟ＳＴペプチドの配列を示す。
【表１】
2020063273.tif 000003
【０１０８】
未成熟型の（プレ及びプロ領域を含む）大腸菌ＳＴ−ＩＡ（ＳＴ−Ｐ）タンパク質は、配列ｍｋｋｌｍｌａｉｆｉｓｖｌｓｆｐｓｆｓｑｓｔｅｓｌｄｓｓｋｅｋｉｔｌｅｔｋｋｃｄｖｖｋｎｎｓｅｋｋｓｅｎｍｎｎｔｆｙｃｃｅｌｃｃｎｐａｃａｇｃｙ（配列番号４１）を有する（ＧｅｎＢａｎｋ（登録商標）登録番号Ｐ０１５５９（ｇｉ：１２３７１１）を参照されたい）。プレ配列は、残基１〜１９に延びる。プロ配列は、残基２０〜５４に延びる。成熟タンパク質は、残基５５〜７２に延びる。未成熟型の（プレ及びプロ領域を含む）大腸菌ＳＴ−１Ｂ（ＳＴ−Ｈ）タンパク質は、配列ｍｋｋｓｉｌｆｉｆｌｓｖｌｓｆｓｐｆａｑｄａｋｐｖｅｓｓｋｅｋｉｔｌｅｓｋｋｃｎｉａｋｋｓｎｋｓｇｐｅｓｍｎｓｓｎｙｃｃｅｌｃｃｎｐａｃｔｇｃｙ（配列番号４２）を有する（ＧｅｎＢａｎｋ（登録商標）登録番号Ｐ０７９６５（ｇｉ：３９１５５８９））を参照されたい）。未成熟型の（プレ及びプロ領域を含む）Ｙ．ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ  ＳＴタンパク質は、配列ｍｋｋｉｖｆｖｌｙｌｍｌｓｓｆｇａｆｇｑｅｔｖｓｇｑｆｓｄａｌｓｔｐｉｔａｅｖｙｋｑａｃｄｐｐｌｐｐａｅｖｓｓｄｗｄｃｃｄｖｃｃｎｐａｃａｇｃ（配列番号４３）を有する（ＧｅｎＢａｎｋ（登録商標）登録番号Ｓ２５６５９（ｇｉ：２８２０４７））を参照されたい）。したがって、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、本明細書に記載される細菌性ＳＴペプチド配列（それらの変異体を含む）のうちのいずれか１つ以上を含むか、またはそれらから成ることができる。
【０１０９】
細菌性ＳＴペプチドは典型的に６個のＣｙｓ残基を有する。これら６個のＣｙｓ残基は、成熟及び活性型のペプチド内で３つのジスルフィド結合を形成する。６個のＣｙｓ残基が、ペプチドのアミノ末端からカルボキシ末端まで、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、及びＦとして特定される場合、ジスルフィド結合は通常は次のとおりである：Ａ−Ｄ、Ｂ−Ｅ、及びＣ−Ｆ。これらの結合の形成は、ＧＣ−Ｃ受容体結合に寄与すると考えられる。したがって、ある特定の実施形態では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、上に示されるように、Ａ−Ｄ、Ｂ−Ｅ、及びＣ−Ｆの任意の組み合わせから選択される少なくとも１つ、２つ、または３つのジスルフィド結合を有する。しかしながら、いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＧＣ−Ｃペプチド作動薬の１つ以上のシステインは、欠失しているか、または異なるアミノ酸で置換される。いくつかの実施形態では、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのシステインが、欠失しているか、または異なるアミノ酸で置換される。特定の態様では、最Ｎ末端側のシステイン残基（例えば、Ａ、Ｂ、もしくはＡ及びＢ）及び／または最Ｃ末端側のシステイン残基（単数または複数）（例えば、Ｅ、Ｆ、もしくはＥ及びＦ）は、欠失しているか、または異なるアミノ酸で置換される。ある特定の実施形態では、異なるアミノ酸は、アラニンまたはセリンである。
【０１１０】
ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドのうちある特定のものは、潜在的に機能的なキモトリプシン切断部位、例えば、Ｃｙｓ  Ｂ／Ｃｙｓ  Ｄの間またはＣｙｓ  Ｅ／Ｃｙｓ  Ｆの間のいずれかに位置するＴｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅを含む。いずれのキモトリプシン切断部位における切断も、ＧＣ−Ｃ受容体に結合するペプチドの能力を低減させ得る。ヒトの体内では、キモトリプシンの不活性型であるキモトリプシノーゲンが膵臓内で産生される。この不活性酵素が小腸に達すると、これは２つのジペプチドの除去によって活性キモトリプシンに転換される。活性キモトリプシンは、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅのカルボキシ末端側のペプチド結合においてペプチドを切断することができる。腸管内の活性キモトリプシンの存在は、適切に位置した機能的キモトリプシン切断部位を有するＧＣ−Ｃペプチド作動薬のうちある特定のものの切断を引き起こし得る。いくつかの事例では、キモトリプシン切断は、ペプチドが腸管を通過する際、適切に位置したキモトリプシン切断部位を有するＧＣ−Ｃペプチド作動薬の作用を調節すると予想される。
【０１１１】
ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドのうちある特定のものは、潜在的に機能的なトリプシン切断部位、例えば、ＬｙｓまたはＡｒｇを含む。トリプシノーゲンは、キモトリプシンのように、膵臓内で産生され胃腸管内に存在するセリンプロテアーゼである。活性型であるトリプシンは、ＬｙｓまたはＡｒｇを有するペプチドを切断する。腸管内の活性トリプシンの存在は、適切に位置した機能的トリプシン切断部位を有するＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドのうちある特定のものの切断を引き起こし得る。ある特定の事例では、トリプシン切断は、ペプチドが腸管を通過する際、適切に位置したトリプシン切断部位を有するＧＣ−Ｃペプチド作動薬の作用を調節すると予想される。
【０１１２】
ある特定の実施形態では、ペプチドは、３つのジスルフィド結合を形成し得る少なくとも６つのシステインを含む。ある特定の実施形態では、ジスルフィド結合が他の共有架橋で置換され、いくつかの場合では、システインが他の残基で置換されて、代替的な共有架橋をもたらす（本明細書の他の箇所に記載される）。ある特定のペプチドは、切断されるとペプチドを不活性化するように位置する機能的なキモトリプシンまたはトリプシン切断部位を含む。機能的な切断部位を有するある特定のペプチドは、胃腸管内で切断及び漸進的不活性化を受け、これはいくつかの状況では望ましい。ある特定のペプチドでは、機能的キモトリプシン部位は変性され、インビボのペプチドの安定性を増加させる。
【０１１３】
ある特定の実施形態では、ペプチドは、カルボキシ末端において、１個または２個以上の隣接する負荷電アミノ酸（例えば、ＡｓｐもしくはＧｌｕ）、あるいは１個または２個以上の隣接する正荷電残基（例えば、ＬｙｓもしくはＡｒｇ）、あるいは１個または２個以上の隣接する正荷電もしくは負荷電アミノ酸のいずれかを含む。これら及び関連する実施形態では、カルボキシ末端における隣接するアミノ酸のすべてが、正荷電または負荷電のいずれかである。いくつかの実施形態では、カルボキシ末端荷電アミノ酸は、Ｌｅｕに先行される。例えば、以下のアミノ酸配列：Ａｓｐ、Ａｓｐ  Ｌｙｓ、Ｌｙｓ  Ｌｙｓ  Ｌｙｓ  Ｌｙｓ  Ｌｙｓ  Ｌｙｓ（配列番号４４）、Ａｓｐ  Ｌｙｓ  Ｌｙｓ  Ｌｙｓ  Ｌｙｓ  Ｌｙｓ  Ｌｙｓ（配列番号４５）、Ｌｅｕ  Ｌｙｓ  Ｌｙｓ、及びＬｅｕ  Ａｓｐが、ペプチドのカルボキシ末端に付加され得る。特定の実施形態では、Ｌｅｕが、カルボキシ末端に付加される。
【０１１４】
いくつかの態様では、（細菌性ＳＴ類似体）ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、以下に示されるアミノ酸配列（Ｉ）を含むか、それから成るか、またはそれから本質的に成る。
Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｃｙｓ６  Ｃｙｓ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｃｙｓ１０Ｃｙｓ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｃｙｓ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ｃｙｓ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１（配列番号４６）
【０１１５】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５は、Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ（配列番号２）であるか、または欠損しているか、あるいはＸａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４は欠損している。ある特定の実施形態では、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１２、Ｘａａ１４、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、及びＸａａ１５は、任意のアミノ酸である。ある特定の実施形態では、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１２、Ｘａａ１４、Ｘａａ１６、Ｘａａ１７、及びＸａａ１９は、任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体である。
【０１１６】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ５は、Ａｓｎ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、またはＰｈｅである。他の実施形態では、Ｘａａ５は、ＴｈｒまたはＩｌｅである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ５は、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、またはＴｒｐである。ある特定の実施形態では、Ｘａａ５は、Ａｓｎ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｉｌｅ、Ｔｈｒ、またはＰｈｅである。特定の実施形態では、Ｘａａ５は、Ａｓｎである。
【０１１７】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ８は、任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ８は、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、またはＰｒｏである。他の実施形態では、Ｘａａ８は、Ｇｌｕである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ８は、ＧｌｕまたはＡｓｐである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ８は、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、またはＡｓｐである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ８は、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、またはＡｓｐである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ８は、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、またはＡｓｐである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ８は、Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ｈｉｓ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、またはＳｅｒである。特定の実施形態では、Ｘａａ８は、Ｐｒｏである。
【０１１８】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ９は、任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ９は、任意の天然もしくは非天然の芳香族アミノ酸またはアミノ酸類似体である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ９は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ９は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ９は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ９は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＶａｌである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ９は、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ９は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ９は、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、またはＭｅｔである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ９は、ＬｅｕまたはＰｈｅである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ９は、Ｌｅｕ、Ｐｈｅ、またはＴｙｒである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ９は、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、またはＨｉｓである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ９は、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ、またはＴｙｒである。ある特定の実施形態では、Ｘａａ９は、Ｌｅｕではない。特定の実施形態では、Ｘａａ９は、Ｔｙｒである。
【０１１９】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ１２は、任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体である。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１２は、Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、またはＡｌａである。特定の実施形態では、Ｘａａ１２  Ａｓｎ。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１２は、Ａｓｎ、Ｍｅｔ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＧｌｎである。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１２は、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＧｌｎである。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１２は、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、またはＧｌｎである。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１２は、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、またはＨｉｓである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１２は、Ａｓｎ、Ｓｅｒ、またはＨｉｓである。
【０１２０】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ１３は、Ａｌａ、Ｐｒｏ、またはＧｌｙである。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１３は、ＰｒｏまたはＧｌｙである。特定の実施形態では、Ｘａａ１３は、Ｐｒｏである。特定の実施形態では、Ｘａａ１３は、Ｇｌｙである。
【０１２１】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ１４は、任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体である。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１４は、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｔｈｒ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＡｓｐである。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１４は、ＡｌａまたはＧｌｙである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１４は、ＶａｌまたはＡｌａである。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１４は、ＡｌａまたはＴｈｒである。特定の実施形態では、Ｘａａ１４は、Ａｌａである。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１４は、Ｖａｌ、Ｇｌｎ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｈｒ、またはＡｌａである。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１４は、Ｇｌｙ、Ｃｙｓ、またはＳｅｒである。
【０１２２】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ１６は、任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１６は、任意の天然もしくは非天然の非芳香族アミノ酸またはアミノ酸類似体である。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１６  Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｇｌｙ、またはＶａｌ。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１６は、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＴｒｐである。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１６は、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＴｒｐである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１６は、Ｔｈｒ、Ａｌａ、またはＴｒｐである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１６は、Ｔｈｒである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１６は、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１６は、ＴｈｒまたはＡｌａである。特定の実施形態では、Ｘａａ１６それはＶａｌである。特定の実施形態では、Ｘａａ１６は、Ｇｌｙである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１６は、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｍｅｔ、またはＶａｌである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１６は、Ｖａｌ、Ａｌａ、またはＴｈｒである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１６は、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、またはＴｈｒである。
【０１２３】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ１７は、任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１７は、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、またはＡｌａである。特定の実施形態では、Ｘａａ１７は、Ｇｌｙである。特定の実施形態では、Ｘａａ１７は、Ａｌａである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１７は、ＧｌｙまたはＡｌａである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１７は、Ｇｌｙ、Ａｓｎ、Ｓｅｒ、またはＡｌａである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１７は、Ａｓｎ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＧｌｙである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１７は、Ａｓｐ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、またはＧｌｙである。
【０１２４】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ１９は、任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１９は、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ａｓｎ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、またはＡｒｇである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１９は、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、またはＬｅｕである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１９は、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１９は、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、またはＨｉｓである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１９は、ＴｙｒまたはＴｒｐである。特定の実施形態では、Ｘａａ１９は、Ｔｙｒである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１９は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＶａｌである。特定の実施形態では、Ｘａａ１９は、Ｈｉｓである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１９は、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ａｓｎ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｈｉｓ、またはＬｅｕである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１９は、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、またはＬｅｕである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１９は、ＴｙｒまたはＬｅｕである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１９は、ＬｙｓまたはＡｒｇである。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１９は、Ｐｒｏ、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、またはＧｌｕ以外の任意のアミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１９は、Ｐｒｏ以外の任意のアミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１９は欠損している。
【０１２５】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ２０は、ＡｓｐまたはＡｓｎである。ある特定の実施形態では、Ｘａａ２０  Ｘａａ２１は、ＡｓｐＰｈｅであるか、または欠損している。いくつかの実施形態では、Ｘａａ２０は、ＡｓｎまたはＧｌｕであり、Ｘａａ２１は欠損している。いくつかの実施形態では、Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１は欠損している。
【０１２６】
いくつかの態様では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、以下に示されるアミノ酸配列（ＩＩ）を含むか、それから成るか、またはそれから本質的に成り、
Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｃｙｓ６  Ｃｙｓ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｃｙｓ１０  Ｃｙｓ１１  Ａｓｎ１２  Ｐｒｏ１３  Ａｌａ１４  Ｃｙｓ１５  Ｘａａ１６  Ｇｌｙ１７  Ｃｙｓ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１（配列番号４７）
[式中、Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５は、Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ（配列番号２）であるか、または欠損しているか、あるいはＸａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４は欠損しており、Ｘａａ５は、Ａｓｎであり、
Ｘａａ８は、ＧｌｕまたはＡｓｐであり、
Ｘａａ９は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであり、
Ｘａａ１６は、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｔｒｐであり、
Ｘａａ１９は、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、もしくはＬｅｕであるか、または欠損しており、Ｘａａ２０Ｘａａ２１は、ＡｓｐＰｈｅである]。
【０１２７】
いくつかの態様では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、アミノ酸配列（ＩＩ）：Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｃｙｓ６  Ｃｙｓ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｃｙｓ１０  Ｃｙｓ１１  Ａｓｎ１２  Ｐｒｏ１３  Ａｌａ１４  Ｃｙｓ１５  Ｘａａ１６  Ｇｌｙ１７  Ｃｙｓ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１（配列番号４８）を含むか、それから成るか、またはそれから本質的に成り、Ｘａａ９は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、もしくはＶａｌであり、Ｘａａ１６は、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、もしくはＰｈｅであり、Ｘａａ９は、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、もしくはＰｈｅであり、Ｘａａ１６は、ＴｈｒもしくはＡｌａであり、Ｘａａ１９は、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅであり、Ｘａａ２０Ｘａａ２１は、ＡｓｐＰｈｅであり、Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４は、欠損しており、Ｘａａ５は、Ａｓｎであり、ペプチドは、５０個、４０個、３０個、もしくは２５個未満のアミノ酸を含むか、または５個未満のアミノ酸がＣｙｓ６に先行する。
【０１２８】
いくつかの態様では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、アミノ酸配列Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｘａａ９  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１（ＩＩ）（配列番号４９）を含むか、それから成るか、またはそれから本質的に成り、Ｘａａ９は、Ｘａａ９がＬｅｕ以外の任意のアミノ酸である、任意のアミノ酸であり；Ｘａａ９は、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ、及びＴｙｒから選択され；Ｘａａ９は、任意の天然もしくは非天然の芳香族アミノ酸から選択され；Ｘａａ９は、Ｔｙｒであり；Ｘａａ９は、Ｐｈｅであり；Ｘａａ９は、Ｔｒｐであり；Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５は、Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｔｙｒであり；Ｘａａ１、Ｘａａ２、Ｘａａ３、Ｘａａ４、及びＸａａ５は、欠損しており；Ｘａａ１、Ｘａａ２、Ｘａａ３、及びＸａａ４は、欠損しており；Ｘａａ１、Ｘａａ２、及びＸａａ３は、欠損しており；Ｘａａ１及びＸａａ２は、欠損しており；Ｘａａ１は、欠損しており；Ｘａａ２０Ｘａａ２１は、ＡｓｐＰｈｅであるか、または欠損しているか、あるいはＸａａ２０は、ＡｓｎまたはＧｌｕであり、Ｘａａ２１は、欠損しているか、あるいはＸａａ１９Ｘａａ２０Ｘａａ２１は、欠損しており、Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５及びＴｙｒ  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１は、欠損している。いくつかの態様では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、アミノ酸配列Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｃｙｓ６  Ｃｙｓ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｃｙｓ１０  Ｃｙｓ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｃｙｓ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ｃｙｓ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１（Ｉ）（配列番号５０）を含むか、それから成るか、またはそれから本質的に成り、Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５は、欠損しており、かつ／または配列Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１は、欠損しており、ペプチドは、任意に、追加のカルボキシ末端及び／もしくはアミノ末端のアミノ酸を含む。ペプチドがＸａａ１またはＸａａ２１などの１個以上の末端アミノ酸を欠損している事例では、ペプチドは、任意に、追加のカルボキシ末端及び／またはアミノ末端のアミノ酸を含み得る。
【０１２９】
ある特定の実施形態では、ペプチドは、Ｃｙｓ６とＣｙｓ１１との間、Ｃｙｓ７とＣｙｓ１５との間、及びＣｙｓ１０とＣｙｓ１６との間にジスルフィド結合を含む。いくつかの実施形態では、ペプチドは、ジスルフィド結合を有しない還元ペプチドである。さらに他の実施形態では、ペプチドは、Ｃｙｓ６とＣｙｓ１１との間のジスルフィド結合、Ｃｙｓ７とＣｙｓ１５との間のジスルフィド結合、及びＣｙｓ１０とＣｙｓ１６との間のジスルフィド結合から選択される、１つまたは２つのジスルフィド結合を有する。
【０１３０】
ある特定の実施形態では、１個以上のアミノ酸が、非自然発生アミノ酸、または自然発生もしくは非自然発生アミノ酸類似体で置換される。標準的な２０個のアミノ酸を超えるアミノ酸は多く存在する。いくつかは自然発生であり、その他は非自然発生である（例えば、Ｈｕｎｔ，Ｔｈｅ  Ｎｏｎ−Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ：Ｉｎ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ａｎｄ  Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ａｍｉｎｏ  Ａｃｉｄｓ，Ｂａｒｒｅｔｔ，Ｃｈａｐｍａｎ  ａｎｄ  Ｈａｌｌ，１９８５を参照されたい）。例えば、芳香族アミノ酸は、３，４−ジヒドロキシ−Ｌ−フェニルアラニン、３−ヨード−Ｌ−チロシン、トリヨードチロニン、Ｌ−チロキシン、フェニルグリシン（Ｐｈｇ）、またはノル−チロシン（ｎｏｒＴｙｒ）で置換され得る。Ｐｈｇ及びｎｏｒＴｙｒならびにＰｈｅ及びＴｙｒを含む他のアミノ酸は、例えば、ハロゲン、-ＣＨ３、-ＯＨ、-ＣＨ２ＮＨ３、-Ｃ（Ｏ）Ｈ、-ＣＨ２ＣＨ３、-ＣＮ、-ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ３、-ＳＨ、または別の基で置換され得る。いかなるアミノ酸も、Ｄ型のアミノ酸で置換され得る。
【０１３１】
非自然発生アミノ酸または自然発生もしくは非自然発生アミノ酸類似体に関して、式Ｉのペプチドまたは式ＩＩのペプチドにおけるいくつかの置換が可能である。例えば、いくつかの態様では、Ｘａａ８は、γ−ヒドロキシ−Ｇｌｕまたはγ−カルボキシ−Ｇｌｕで置換され得る。いくつかの態様では、Ｘａａ９は、Ｌ−α−メチルフェニルアラニンなどのα置換アミノ酸で、または、３−アミノ−Ｔｙｒ、Ｔｙｒ（ＣＨ３）、Ｔｙｒ（ＰＯ３（ＣＨ３）２）、Ｔｙｒ（ＳＯ３Ｈ）、β−シクロヘキシル−Ａｌａ、β−（１−シクロペンテニル）−Ａｌａ、β−シクロペンチル−Ａｌａ、β−シクロプロピル−Ａｌａ、β−キノリル−Ａｌａ、β−２−チアゾリル）−Ａｌａ、β−（トリアゾール−１−イル）−Ａｌａ、β−（２−ピリジル）−Ａｌａ、β−（３−ピリジル）−Ａｌａ、アミノ−Ｐｈｅ、フルオロ−Ｐｈｅ、シクロヘキシル−Ｇｌｙ、ｔＢｕ−Ｇｌｙ、β−（３−ベンゾチエニル）−Ａｌａ、β−２−チエニル）−Ａｌａ、５−メチル−Ｔｒｐ、及び４−メチル−Ｔｒｐなどの類似体で置換され得る。
【０１３２】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ１３は、次の構造を有するＮ（α）−Ｃ（α）環化アミノ酸類似体であり得る。
【化１】
2020063273.tif 000004
【０１３３】
Ｘａａ１３は、Ｈｏｍｏｐｒｏ（Ｌ−ピペコリン酸塩）、ヒドロキシ−Ｐｒｏ、３，４−デヒドロ−Ｐｒｏ、４−フルオロ−Ｐｒｏ、またはα−メチル−Ｐｒｏであってもよい。
【０１３４】
Ｘａａ１３がＧｌｙ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、またはＶａｌである態様では、Ｘａａ１４は、次のとおりであり得る。
【化２】
2020063273.tif 000005
【０１３５】
ある特定の態様では、Ｘａａ１４は、α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）、Ｌ／Ｄ−α−エチルアラニン（Ｌ／Ｄ−イソバリン）、Ｌ／Ｄ−メチルバリン、もしくはＬ／Ｄ−α−メチルロイシンなどのα置換もしくはＮメチル化アミノ酸か、またはβ−フルオロ−Ａｌａなどの非天然アミノ酸であり得る。
【０１３６】
いくつかの態様では、Ｘａａ１７は、α−アミノイソ酪酸（ａｉｂ）またはＬ／Ｄ−α−エチルアラニン（Ｌ／Ｄ−イソバリン）であり得る。
【０１３７】
非天然アミノ酸及びアミノ酸類似体の追加の例は、当該技術分野で既知であり、本明細書の他の箇所に記載される。
【０１３８】
例えば、Ｘａａ９がＴｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであるか、あるはＸａａ１６がＴｒｐであるいくつかの事例では、ペプチドは、切断がペプチドによるＧＣ−Ｃ受容体結合を変性し得る位置に位置する、潜在的に機能的なキモトリプシン切断部位を有する。Ｘａａ９がＬｙｓもしくはＡｒｇである場合、またはＸａａ１６がＬｙｓもしくはＡｒｇである場合、ペプチドは、切断がペプチドによるＧＣ−Ｃ受容体結合を変性し得る位置に位置する、潜在的に機能的なトリプシン切断部位を有する。
【０１３９】
例えば、Ｘａａ１９がＴｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであるある特定の事例では、ペプチドは、切断がペプチドのＸａａ１９のカルボキシ末端側の部分を遊離させる位置に位置する、キモトリプシン切断部位を有する。Ｘａａ１９がＬｅｕ、Ｉｌｅ、またはＶａｌである場合、ペプチドは、切断がペプチドのＸａａ１９のアミノ末端側の部分を遊離させる位置に位置する、キモトリプシン切断部位を有し得る。Ｘａａ１９がＨｉｓである場合、比較的高いｐＨで同じ作用を見ることができる。Ｘａａ１９がＬｙｓまたはＡｒｇである場合、ペプチドは、切断がペプチドのＸａａ１９のカルボキシ末端側の部分を遊離させる位置に位置する、トリプシン切断部位を有する。
【０１４０】
例えば、ペプチドのＸａａ１またはアミノ末端のアミノ酸（例えば、Ｘａａ２またはＸａａ３）がＴｒｐ、Ｔｙｒ、もしくはＰｈｅであるいくつかの事例では、ペプチドは、Ｘａａ１、Ｘａａ２、またはＸａａ３とともに、切断がペプチドのＸａａ１（またはＸａａ２またはＸａａ３）のアミノ末端側の部分を遊離させる位置に位置する、キモトリプシン切断部位を有する。本発明のペプチドのＸａａ１またはアミノ末端のアミノ酸（例えば、Ｘａａ２またはＸａａ３）がＬｙｓもしくはＡｒｇである場合、ペプチドは、Ｘａａ１、Ｘａａ２、またはＸａａ３）とともに、切断がペプチドのＸａａ１のアミノ末端側の部分を遊離させる位置に位置する、トリプシン切断部位を有する。本発明のペプチドのＸａａ１またはアミノ末端のアミノ酸がＬｅｕ、Ｉｌｅ、またはＶａｌである場合、ペプチドは、切断がペプチドのＸａａ１のアミノ末端側の部分を遊離させる位置に位置する、キモトリプシン切断部位を有し得る。Ｘａａ１がＨｉｓである場合、比較的高いｐＨで同じ作用を見ることができる。
【０１４１】
完全に折り畳まれている場合、ジスルフィド結合は、Ｃｙｓ６とＣｙｓ１１との間、Ｃｙｓ７とＣｙｓ１５との間、及びＣｙｓ１０とＣｙｓ１８との間に存在し得る。いくつかの態様では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、ＳＴペプチドと同一であるか、またはそれらとの配列類似性を有する。しかしながら、いくつかの態様では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、機能性を改善するアミノ酸変化及び／または添加を含む。これらの変化は、例えば、活性を増加または減少させ（例えば、リン酸塩取り込みを低減させるペプチドの能力を増加または減少させ）、正確に折り畳まれるペプチドの能力を変性させ、ペプチドの安定性を変性させ、ＧＣ−Ｃ受容体に結合するペプチドの能力を変性させ、かつ／または毒性を減少させることができる。いくつかの事例では、ペプチドは、野生型ＳＴペプチドよりも望ましく機能し得る。例えば、ある特定の事例では、下痢及び脱水などの望まれない副作用が低減される。
【０１４２】
配列（Ｉ）Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｃｙｓ６  Ｃｙｓ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｃｙｓ１０  Ｃｙｓ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｃｙｓ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ｃｙｓ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１（配列番号５０）またはＸａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｘａａ９  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１（ＩＩ）（配列番号４９）（Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５が欠損しており、かつ／または配列Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１が欠損している）を含むか、またはそれから成るペプチドの場合、ペプチドは、任意に、追加のカルボキシ末端及び／またはアミノ末端のアミノ酸を含み得る。例えば、ペプチドは、ペプチドの組み換え産生を促進し、かつ患者へのペプチドの投与前に切断される、アミノ末端配列を含み得る。ペプチドは、他のアミノ末端またはカルボキシ末端のアミノ酸を含んでもよい。いくつかの事例では、追加のアミノ酸は、ペプチドを保護し、ペプチドを安定化させ、かつ／またはペプチドの活性を変性する。事例では、追加のアミノ酸のいくらかまたはすべてが、患者へのペプチドの投与前に除去される。ペプチドは、１個、２個、３個、４個、５個、１０個、１５個、２０個、２５個、３０個、４０個、５０個、６０個、７０個、８０個、９０個、１００個以上のアミノ酸を、そのアミノ末端及び／またはカルボキシ末端に含み得る。隣接するアミノ酸の数は同じである必要はない。例えば、１０個の追加のアミノ酸がペプチドのアミノ末端にあり、カルボキシ末端にはなくてよい。
【０１４３】
いくつかの実施形態では、ペプチドは、アミノ酸配列（Ｉ）：Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｃｙｓ６  Ｃｙｓ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｃｙｓ１０  Ｃｙｓ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｃｙｓ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ｃｙｓ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１（配列番号５０）を含み、Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５は、欠損しており、Ｘａａ８は、Ｇｌｕであり、Ｘａａ９は、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであり、Ｘａａ１２は、Ａｓｎであり、Ｘａａ１３は、Ｐｒｏであり、Ｘａａ１４は、Ａｌａであり、Ｘａａ１６は、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐであり、Ｘａａ１７は、Ｇｌｙであり、Ｘａａ１９は、ＴｙｒまたはＬｅｕであり、Ｘａａ２０  Ｘａａ２１は、Ａｓｐ  Ｐｈｅであるか、または欠損している。Ｘａａ２０  Ｘａａ２１及び／またはＸａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５が欠損している事例では、ペプチドは、任意に、追加の隣接するアミノ酸を含み得る。
【０１４４】
アミノ酸配列Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｘａａ９  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１（ＩＩ）（配列番号４９）を含むか、それから成るか、またはそれから本質的に成るＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドの例は、以下の表Ａ２に示される。
【表２】
2020063273.tif 000006
2020063273.tif 000007
（表中、SEQ ID NO:は配列番号を表す）
ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドの追加の例は、以下の表Ａ３に示される。
【表３】
2020063273.tif 000008
2020063273.tif 000009
2020063273.tif 000010
2020063273.tif 000011
2020063273.tif 000012
2020063273.tif 000013
2020063273.tif 000014
2020063273.tif 000015
2020063273.tif 000016
（表中、SEQ ID NO:は配列番号を表す）
【０１４５】
特定の実施形態では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、アミノ酸配列Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ（配列番号４）を含むか、それから成るか、またはそれから本質的に成る。
【０１４６】
本明細書に記載されるＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドのうちのいずれの欠失変異体も含まれる。例としては、Ｃｙｓ（またはＣｙｓと置換されるアミノ酸、例えば、別のアミノ酸との共有結合を形成することができるアミノ酸）以外の、１個、２個、３個、または４個のアミノ酸（あるいは非天然アミノ酸または天然もしくは非天然のアミノ酸類似体）が欠失している、欠失変異体が挙げられる。具体例としては、２個（以上）のアミノ酸が欠失しており、ペプチドが配列Ｃｙｓａ  Ｃｙｓｂ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｃｙｓｃ  Ｃｙｓｄ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｃｙｓｅ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｃｙｓｆ（配列番号５２６）を含むものが挙げられる。これら及び関連する実施形態のいくつかでは、２個以上の欠失が、ＣｙｓｂとＣｙｓｃとの間、及び／またはＣｙｓｄとＣｙｓｅとの間、及び／またはＣｙｓｅとＣｙｓｆとの間に位置し得る。しかしながら他の実施形態では、最大で１個の欠失が、Ｃｙｓｂ及びＣｙｓｃそれぞれの間、またはＣｙｓｄとＣｙｓｅとの間、またはＣｙｓｅとＣｙｓｆとの間に存在する。したがって、配列Ｃｙｓａ  Ｃｙｓｂ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｃｙｓｃ  Ｃｙｓｄ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｃｙｓｅ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｃｙｓｆ（配列番号５２６）を含み、ａ）ＣｙｓｂとＣｙｓｃとの間の１個のアミノ酸が欠失しているか、ｂ）ＣｙｓｄとＣｙｓｅとの間の１個のアミノ酸が欠失しているか、ｃ）ＣｙｓｅとＣｙｓｆとの間の１個のアミノ酸が欠失しているか、ｄ）ＣｙｓｂとＣｙｓｃとの間の１個のアミノ酸が欠失しており、ＣｙｓｄとＣｙｓｅとの間の１個のアミノ酸が欠失しているか、ｅ）ＣｙｓｄとＣｙｓｅとの間の１個のアミノ酸が欠失しており、ＣｙｓｅとＣｙｓｆとの間の１個のアミノ酸が欠失しているか、ｆ）ＣｙｓｂとＣｙｓｃとの間の１個のアミノ酸が欠失しており、ＣｙｓｅとＣｙｓｆとの間の１個のアミノ酸が欠失しているか、またはｇ）ＣｙｓｂとＣｙｓｃとの間の１個のアミノ酸が欠失しており、ＣｙｓｄとＣｙｓｅとの間の１個のアミノ酸が欠失しており、ＣｙｓｅとＣｙｓｆとの間の１個のアミノ酸が欠失している、本明細書に記載されるＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドのうちのいずれかが含まれる。ある特定の実施形態では、欠失変異体は、ＧＣ−Ｃ受容体に結合し、かつ／またはそれを刺激するペプチドである。
【０１４７】
本明細書に記載されるＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドのうちのいずれの挿入変異体も含まれる。例としては、１個、２個、３個、または４個のアミノ酸（例えば、ＧｌｙまたはＡｌａ）がペプチド内のいずれかのアミノ酸の前または後に挿入される、挿入変異体が挙げられる。いくつかの実施形態では、１個以下のアミノ酸が２個のＣｙｓ残基間に挿入される。特定例としては、２個以上のアミノ酸が挿入され、ペプチドが配列Ｃｙｓａ  Ｃｙｓｂ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｃｙｓｃ  Ｃｙｓｄ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｃｙｓｅ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｃｙｓｆ（配列番号５２６）を含むものが挙げられる。これら及び関連する実施形態のいくつかでは、２個以上の挿入が、ＣｙｓｂとＣｙｓｃとの間、またはＣｙｓｄとＣｙｓｅとの間、またはＣｙｓｅとＣｙｓｆとの間に位置し得る。しかしながら他の実施形態では、１個以下の挿入が、ＣｙｓｂとＣｙｓｃとの間、またはＣｙｓｄとＣｙｓｅとの間、またはＣｙｓｅとＣｙｓｆとの間に存在する。したがって、配列Ｃｙｓａ  Ｃｙｓｂ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｃｙｓｃ  Ｃｙｓｄ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｃｙｓｅ  Ｘａａ  Ｘａａ  Ｃｙｓｆ（配列番号５２６）を含み、ａ）ＣｙｓｂとＣｙｓｃとの間に１個のアミノ酸が挿入されるか、ｂ）ＣｙｓｄとＣｙｓｅとの間に１個のアミノ酸が挿入されるか、ｃ）ＣｙｓｅとＣｙｓｆとの間に１個のアミノ酸が挿入されるか、ｄ）ＣｙｓｂとＣｙｓｃとの間に１個のアミノ酸が挿入され、ＣｙｓｄとＣｙｓｅとの間に１個のアミノ酸が挿入されるか、ｅ）ＣｙｓｄとＣｙｓｅとの間に１個のアミノ酸が挿入され、ＣｙｓｅとＣｙｓｆとの間に１個のアミノ酸が挿入されるか、ｆ）ＣｙｓｂとＣｙｓｃとの間に１個のアミノ酸が挿入され、ＣｙｓｅとＣｙｓｆとの間に１個のアミノ酸が挿入されるか、またはｇ）ＣｙｓｂとＣｙｓｃとの間に１個のアミノ酸が挿入され、ＣｙｓｄとＣｙｓｅとの間に１個のアミノ酸が挿入され、ＣｙｓｅとＣｙｓｆとの間に１個のアミノ酸が挿入される、本明細書に記載されるＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドのうちのいずれかが含まれる。さらに、１個以上のアミノ酸がＣｙｓａに先行して挿入され得、かつ／または１個以上のアミノ酸がＣｙｓｆの後に挿入され得る。いくつかの実施形態では、挿入変異体は、ＧＣ−Ｃ受容体に結合し、かつ／またはそれを刺激するペプチドである。
【０１４８】
Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ（配列番号４）の挿入変異体の例としては、最大４個のアミノ酸（すなわち、０個、１個、２個、３個、または４個）が各アミノ酸の後に挿入されるものが挙げられる。したがって、配列Ｃｙｓ  Ｘａａ（０〜４）Ｃｙｓ  Ｘａａ（０〜４）Ｇｌｕ  Ｘａａ（０〜４）Ｔｙｒ  Ｘａａ（０〜４）Ｃｙｓ  Ｘａａ（０〜４）Ｃｙｓ  Ｘａａ（０〜４）Ａｓｎ  Ｘａａ（０〜４）Ｐｒｏ  Ｘａａ（０〜４）Ａｌａ  Ｘａａ（０〜４）Ｃｙｓ  Ｘａａ（０〜４）Ｔｈｒ  Ｘａａ（０〜４）Ｇｌｙ  Ｘａａ（０〜４）Ｃｙｓ  Ｘａａ（０〜４）Ｔｙｒ  Ｘａａ（０〜４）（配列番号５２７）を有するペプチドが含まれる。挿入されるアミノ酸は、任意のアミノ酸またはアミノ酸類似体（天然もしくは非天然）であり得、同じでも異なっていてもよい。ある特定の実施形態では、挿入されるアミノ酸は、すべてＧｌｙであるか、またはすべてＡｌａであるか、またはＧｌｙとＡｌａとの組み合わせである。
【０１４９】
配列Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｃｙｓ６  Ｃｙｓ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｃｙｓ１０  Ｃｙｓ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｃｙｓ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ｃｙｓ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１（配列番号４６）を含むか、またはそれから成り、かつ、例えば、最大４個のアミノ酸が欠失しており、かつ／または最大４個のアミノ酸が挿入される、Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ（配列番号４）の変異体を含む、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドも含まれる。いくつかの事例では、挿入及び／または欠失は、Ｃｙｓ６とＣｙｓ１８との間に存在し得るか、またはＣｙｓ６のアミノ末端側及び／またはＣｙｓ１８のカルボキシ末端側であってもよい。
【０１５０】
ある特定の実施形態では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、コア配列Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ［Ｌｅｕ］Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ［Ｔｈｒ］Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ（配列番号５２８）に基づく。ペプチドを不活性化することができる潜在的に機能的なキモトリプシン切断部位を有する変異体を生成するために、（カッコで括って示された）Ｌｅｕまたは（カッコで括って示された）Ｔｈｒのいずれかが、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、またはＴｙｒで置換され得るか、あるいはＬｅｕ及びＴｈｒの両方が、（独立して）Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、またはＴｙｒで置換され得る。コア配列は、任意に、Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  ＴｙｒまたはＡｓｎに先行されてよい。コア配列に基づくＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドの具体例としては、以下の表Ａ４中のものが挙げられる。
【表４】
2020063273.tif 000017
【０１５１】
ある特定の実施形態では、ＧＣ−作動薬ペプチドは、グアニリン、リンホグアニリン、ウログアニリン、またはレノグアニリンペプチド、任意にヒトペプチド、またはそれらの変異体もしくは誘導体もしくは類似体である。ヒトグアニリンのアミノ酸配列は、Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ｔｈｒ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｉｌｅ  Ｃｙｓ  Ａｌａ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ（配列番号５６２）である。ヒトグアニリン配列の例示的な類似体は、以下の表Ａ５に示される。
【表５】
2020063273.tif 000018
2020063273.tif 000019
【０１５２】
したがって、いくつかの実施形態では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、ヒトグアニリン配列またはその変異体もしくは誘導体もしくは類似体を含むか、それらから成るか、またはそれらから本質的に成る。
【０１５３】
リンホグアニリンのアミノ酸配列は、Ｇｌｎ−Ｇｌｕ−Ｇｌｕ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｅｕ−Ｃｙｓ−Ｉｌｅ−Ａｓｎ−Ｍｅｔ−Ａｌａ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ．（配列番号６１５）である。ヒトリンホグアニリン配列の例示的な類似体は、以下の表Ａ６に示される。
【表６】
2020063273.tif 000020
【０１５４】
したがって、いくつかの実施形態では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、ヒトリンホグアニリン配列またはその変異体もしくは誘導体もしくは類似体を含むか、それらから成るか、またはそれらから本質的に成る。
【０１５５】
ヒトウログアニリンのアミノ酸配列は、Ａｓｎ  Ａｓｐ  Ａｓｐ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｖａｌ  Ａｓｎ  Ｖａｌ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｌｅｕ（配列番号６４８）である。いくつかの実施形態では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、ヒトウログアニリン配列またはその類似体を含むか、それらから成るか、またはそれらから本質的に成る。特定の実施形態では、ヒトウログアニリン類似体は、アミノ酸配列Ａｓｎ  Ａｓｐ  Ｇｌｕ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｖａｌ  Ａｓｎ  Ｖａｌ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｌｅｕ（配列番号６；プレカナチド）、またはＧｌｎ  Ａｓｐ  Ａｓｐ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｈｒ  Ｃｙｓ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｍｅｔ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｔｙｒ（配列番号６４９）を有する。特定の実施形態では、ペプチド（例えば、プレカナチド）のＮ末端のＡｓｎは、ピログルタミン酸である。いくつかの実施形態では、ペプチド（例えば、プレカナチド）のＣ末端のＬｅｕは、Ｄ−アミノ酸（ｄ−Ｌｅｕ）である。
【０１５６】
ある特定の実施形態では、ヒトウログアニリンペプチドまたは類似体は、以下に示されるアミノ酸配列（ＩＩＩ）を含むか、それから成るか、またはそれから本質的に成る。
Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｃｙｓ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｃｙｓ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６（配列番号６５０）
【０１５７】
いくつかの実施形態では、式ＩＩＩのＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、次のとおり定義される。
Ｘａａ１は、任意の任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体であるか、または欠損しており、
Ｘａａ２は、任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体であるか、または欠損しており、
Ｘａａ３は、任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体であるか、または欠損しており、
Ｘａａ５は、Ｇｌｕであり、
Ｘａａ６は、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、またはＬｅｕであり、
Ｘａａ７は、Ｃｙｓであり、
Ｘａａ８は、Ｃｙｓ以外の任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体（任意に、２０個の自然発生アミノ酸のうちのいずれか）であるか、または欠損しており、
Ｘａａ９は、Ｃｙｓ以外の任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体（任意に、２０個の自然発生アミノ酸のうちのいずれか）であり、
Ｘａａ１０は、ＰｒｏまたはＧｌｙであり、
Ｘａａ１１は、任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体（任意に、２０個の自然発生アミノ酸のうちのいずれか）であり、
Ｘａａ１３は、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、またはＧｌｙであり、
Ｘａａ１４は、ＧｌｙまたはＡｌａであり、
Ｘａａ１５は、Ｃｙｓであり、
Ｘａａ１６は、任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体（任意に、２０個の自然発生アミノ酸のうちのいずれか）であるか、または欠損している。
【０１５８】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ９は、Ａｓｎであり、Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＴｈｒであり、Ｘａａ８は欠損しており、Ｘａａ１６は、Ｔｙｒである。
【０１５９】
いくつかの実施形態では、Ｘａａ４は、Ｓｅｒ  Ｈｉｓ  Ｔｈｒ；Ｐｒｏ  Ｓｅｒ  Ｔｈｒ；Ｔｈｒ；Ｐｒｏ  Ａｓｐ  Ｐｒｏ；Ｉｌｅ  Ａｌａ  Ｇｌｕ  Ａｓｐ  Ｓｅｒ  Ｈｉｓ  Ｔｈｒ（配列番号６５１）；Ｉｌｅ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ａｓｐ  Ｐｒｏ  Ｓｅｒ  Ｔｈｒ（配列番号６５２）；Ａｌａ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ；Ａｓｎ  Ｔｈｒ；Ａｓｐ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ（配列番号６５３）；Ｌｙｓ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ；Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ；Ｉｌｅ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ａｓｐ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ（配列番号６５４）；Ｌｙｓ  Ｐｒｏ  Ａｓｎ  Ｔｈｒ（配列番号６５５）；Ａｓｐ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ｔｈｒ（配列番号６５６）；Ｇｌｕ  Ａｓｐ  Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ｔｈｒ（配列番号６５７）；Ｐｒｏ  Ｇｌｙ  Ｔｈｒ；Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｔｈｒ；Ｖａｌ  Ａｌａ  Ａｌａ  Ａｒｇ  Ａｌａ  Ａｓｐ  Ｌｅｕ（配列番号６５８）；Ｇｌｙ  Ａｓｐ  Ａｓｐ；Ａｓｎ  Ａｓｐ  Ｇｌｕ；Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ａｓｐ；Ａｓｎ  Ａｓｐ  Ａｓｐ；Ａｒｇ  Ｔｈｒ  Ｉｌｅ  Ａｌａ  Ａｓｎ  Ａｓｐ  Ａｓｐ（配列番号６５９）；Ｔｈｒ  Ｉｌｅ  Ａｌａ  Ａｓｎ  Ａｓｐ  Ａｓｐ（配列番号６６０）；Ａｓｐ  Ａｓｐ；Ａｒｇ  Ｔｈｒ  Ｍｅｔ  Ａｓｐ  Ａｓｎ  Ａｓｐ  Ｇｌｕ（配列番号６６１）；Ａｒｇ  Ｔｈｒ  Ｉｌｅ  Ａｌａ  Ｇｌｙ  Ａｓｐ  Ａｓｐ（配列番号６６２）；Ａｒｇ  Ｔｈｒ  Ｉｌｅ  Ａｌａ  Ａｓｎ  Ａｓｐ（配列番号６６３）；Ａｓｐ；Ｇｌｕ  Ａｓｐ；Ａｒｇ  Ｓｅｒ  Ｉｌｅ  Ｓｅｒ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ａｓｐ（配列番号６６４）；Ｔｈｒ  Ａｓｐ  Ｇｌｕ；Ａｒｇ  Ｔｈｒ  Ｉｌｅ  Ａｌａ  Ｔｈｒ  Ａｓｐ  Ｇｌｕ（配列番号６６５）；Ｇｌｕ；Ｉｌｅ  Ｉｌｅ  Ｔｈｒ  Ｐｒｏ  Ｐｒｏ  Ａｓｐ  Ｐｒｏ（配列番号６６６）；Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｌｅｕ；Ｌｙｓ  Ａｓｐ  Ａｓｐ；Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ；Ａｒｇ  Ｔｙｒ  Ｉｌｅ  Ａｓｎ  Ｇｌｎ  Ｇｌｕ  Ｇｌｕ（配列番号６６７）；Ａｌａ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｓｅｒ（配列番号６６８）；及びＴｈｒ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｔｙｒ  Ａｌａ  Ｓｅｒ（配列番号６６９）から選択される、アミノ酸配列に直接先行される。
【０１６０】
特定の実施形態では、式ＩＩＩのＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、次のとおり定義される。  Ｘａａ１は、ａ）Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｇｌｎ、Ｐｒｏ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、もしくはＴｈｒであるか、または欠損しているか、ｂ）ＬｙｓまたはＴｙｒに先行されるか、ｃ）任意のアミノ酸であるか、ｄ）欠損しているか、ｅ）Ｃｙｓ以外の任意のアミノ酸であるか、あるいはｆ）ＬｙｓまたはＡｒｇであり、
Ｘａａ２は、ａ）Ｈｉｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｙであるか、または欠損しているか、ｂ）Ｈｉｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｙ、Ｐｒｏであるか、または欠損しているか、ｃ）Ａｓｐ、Ｇｌｕ、任意のアミノ酸であるか、または欠損しているか、ｄ）ＡｓｐまたはＧｌｕであるか、ｅ）Ｃｙｓ以外の任意のアミノ酸であるか、ｅ）Ｇｌｕであるか、ｆ）欠損しているか、ｇ）Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであるか、あるいはｈ）ＬｙｓまたはＡｒｇであり、
Ｘａａ３は、ａ）Ｔｈｒ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｇｌｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、もしくはＬｅｕ；ＡｓｐまたはＧｌｕであるか、ｂ）Ｃｙｓ以外の任意のアミノ酸であるか、ｃ）Ｇｌｕであるか、ｄ）Ｔｈｒであるか、ｅ）Ｔｈｒ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｇｌｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、もしくはＬｅｕであるか、または欠損しているか、ｆ）Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであるか、あるいはｇ）ＬｙｓまたはＡｒｇであり、
Ｃｙｓ４は、任意にＸａａ４であり、かつＣｙｓ、Ｍｐｔ（メルカプトプロリン）、Ｐｅｎ（ペニシラミン）、Ｄｐｒ（ジアミノプロピオン酸）、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ５は、ａ）任意のアミノ酸であるか、ｂ）Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、またはＰｒｏであるか、ｃ）Ｇｌｕであるか、ｄ）ＧｌｕまたはＡｓｐであるか、ｅ）Ａｓｐ、Ｉｌｅ、またはＧｌｕであるか、ｆ）任意のアミノ酸であるか、あるいはｇ）Ｃｙｓ以外の任意のアミノ酸であり、
Ｘａａ６は、ａ）Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであるか、ｂ）Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅ；Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであるか、ｃ）Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであるか、ｄ）Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、またはＬｅｕであるか、ｅ）Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＶａｌであるか、ｆ）Ｉｌｅ、Ｔｒｐ、またはＬｅｕであるか、ｇ）Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであるか、ｈ）ＩｌｅまたはＬｅｕであるか、ｉ）Ｔｙｒであるか、ｊ）任意のアミノ酸であるか、ｋ）Ｌｅｕ以外の任意のアミノ酸であるか、ｌ）任意の天然もしくは非天然の芳香族アミノ酸であるか、あるいはｍ）Ｃｙｓ以外の任意のアミノ酸であり、
Ｘａａ７は、ａ）Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、またはＴｙｒ；Ｃｙｓであるか、ｂ）Ｃｙｓ、Ｍｐｔ（メルカプトプロリン）、Ｐｅｎ（ペニシラミン）、Ｄｐｒ（ジアミノプロピオン酸）、Ａｓｐ、またはＧｌｕであるか、ｃ）Ｓｅｒであるか、あるいはｄ）Ｃｙｓ以外のアミノ酸であり、
Ｘａａ８は、ａ）Ａｌａ、Ｖａｌ、またはＩｌｅであるか、ｂ）Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔであるか、または欠損しているか、ｃ）任意のアミノ酸であるか、ｄ）Ｖａｌであるか、ｅ）Ｃｙｓ以外の任意のアミノ酸であるか、あるいはｆ）欠損しており、
Ｘａａ９は、ａ）任意のアミノ酸であるか、ｂ）Ｐｈｅ及びＴｙｒ以外の任意のアミノ酸であるか、ｃ）Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、及びＴｒｐ以外の任意のアミノ酸であるか、ｄ）Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、及びＶａｌ以外の任意のアミノ酸であるか、ｅ）Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、及びＨｉｓ以外の任意のアミノ酸であるか、ｉ）Ｇｌｎ以外の任意のアミノ酸であるか、ｇ）Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、及びＴｒｐ以外の任意のアミノ酸であるか、ｈ）Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、及びＶａｌ以外の任意のアミノ酸であるか、ｉ）Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、及びＨｉｓ以外の任意のアミノ酸であるか、ｊ）任意の非芳香族アミノ酸であるか、ｋ）欠損しているか、ｌ）Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、またはＴｒｐであるか、ｍ）Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、またはＡｌａであるか、ｎ）Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＴｙｒであるか、ｏ）ＰｈｅまたはＴｙｒであるか、ｐ）Ａｓｎであるか、あるいはｑ）Ｃｙｓ以外の任意のアミノ酸であり、
Ｘａａ１０は、ａ）Ａｌａ、Ｐｒｏ、またはＧｌｙであるか、ｂ）ＰｒｏまたはＧｌｙであるか、ｃ）Ｐｒｏであるか、ｄ）Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ｔｈｒ、またはＩｌｅであるか、ｅ）任意のアミノ酸であるか、ｆ）Ｖａｌであるか、ｇ）ＶａｌまたはＰｒｏであるか、ｈ）ＡｌａまたはＶａｌであるか、ｉ）Ｃｙｓ以外の任意のアミノ酸であるか、ｊ）Ｐｒｏであるか、あるいはｋ）Ｇｌｙであり、
Ｘａａ１１は、ａ）任意のアミノ酸であるか、ｂ）Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＡｓｐであるか、ｃ）ＡｌａまたはＧｌｙであるか、ｄ）Ａｌａであるか、ｅ）ＡｌａまたはＶａｌであるか、ｆ）任意のアミノ酸であるか、ｇ）ＡｌａまたはＡｉｂ（α−アミノイソ酪酸）であるか、ｈ）Ｃｙｓ以外の任意のアミノ酸であるか、ｉ）ＡｌａまたはＴｈｒであるか、あるいはｊ）Ｔｈｒであり、
Ｃｙｓ１２は、任意にＸａａ１２であり、かつａ）Ｃｙｓ、Ｍｐｔ（メルカプトプロリン）、Ｐｅｎ（ペニシラミン）、Ｄｐｒ（ジアミノプロピオン酸）、Ａｓｐ、またはＧｌｕであるか、あるいはｂ）Ｃｙｓ以外の任意のアミノ酸であり、
Ｘａａ１３は、ａ）Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであるか、ｂ）Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＴｒｐであるか、ｃ）任意のアミノ酸であるか、ｄ）任意の非芳香族アミノ酸であるか、ｅ）Ｔｈｒ、Ａｌａ、またはＴｒｐであるか、ｆ）Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであるか、ｇ）ＴｈｒまたはＡｌａであるか、ｈ）任意のアミノ酸であるか、ｉ）Ｔｈｒであるか、ｊ）Ｃｙｓ以外の任意のアミノ酸であるか、ｋ）Ｔｈｒ、Ｖａｌ、またはＧｌｙであるか、ｌ）ＴｈｒまたはＶａｌであるか、ｍ）ＴｈｒまたはＧｌｙであるか、ｎ）ＶａｌまたはＴｈｒであるか、ｏ）Ｖａｌであるか、ｐ）Ｔｈｒであるか、あるいはｑ）Ｇｌｙであり、
Ｘａａ１４は、ａ）Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、またはＡｌａであるか、ｂ）Ｇｌｙであるか、ｃ）任意のアミノ酸であるか、ｄ）Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＳｅｒであるか、ｅ）ＧｌｙまたはＡｌａであるか、ｆ）Ｃｙｓ以外の任意のアミノ酸であるか、あるいはｇ）Ａｌａであり、
Ｘａａ１５は、ａ）Ｃｙｓ、Ｔｙｒであるか、または欠損しているか、ｂ）Ｃｙｓであるか、ｃ）Ｃｙｓ、Ｍｐｔ（メルカプトプロリン）、Ｐｅｎ（ペニシラミン）、Ｄｐｒ（ジアミノプロピオン酸）、Ａｓｐ、Ｇｌｕであるか、あるいはｄ）Ｃｙｓ以外の任意のアミノ酸であるか、または欠損しており、
Ｘａａ１６は、ａ）Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ａｓｎ、ｌｉｅ、Ｖａｌ、Ｈｉｓ、またはＬｅｕであるか、ｂ）Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ａｓｎ、またはＬｅｕであるか、ｃ）Ｔｉｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、またはＬｅｕであるか、ｄ）Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅであるか、ｅ）Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、またはＶａｌであるか、ｆ）Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、またはＳｅｒであるか、ｇ）ＴｙｒまたはＬｅｕ；ＬｙｓまたはＡｒｇであるか、ｈ）Ｈｉｓであるか、ｉ）任意のアミノ酸であるか、ｊ）Ｌｅｕであるか、または欠損しているか、ｋ）Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｌｙｓ、Ａｒｇであるか、または欠損しているか、ｌ）欠損しているか、ｍ）Ｃｙｓ以外の任意のアミノ酸であるか、あるいはｎ）Ｔｙｒである。
【０１６１】
いくつかの実施形態では、式ＩＩＩのＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、次のとおり定義される。
Ｘａａ１は、任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体であるか、または欠損しており、
Ｘａａ２は、任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体であるか、または欠損しており、
Ｘａａ３は、任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体であるか、または欠損しており、
Ｘａａ４は、Ｃｙｓ、Ｍｐｔ（メルカプトプロリン）、Ｐｅｎ（ペニシラミン）、Ｄｐｒ（ジアミノプロピオン酸）、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ５は、Ｇｌｕであり、
Ｘａａ６は、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｐｈｅ、またはＬｅｕであり、
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、Ｍｐｔ（メルカプトプロリン）、Ｐｅｎ（ペニシラミン）、Ｄｐｒ（ジアミノプロピオン酸）、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ８は、Ｃｙｓ以外の任意の天然もしくは非天然のアミノ酸またはアミノ酸類似体であるか、または欠損しており、
Ｘａａ９は、任意のアミノ酸であり、
Ｘａａ１０は、ＰｒｏまたはＧｌｙであり、
Ｘａａ１１は、任意のアミノ酸であり、
Ｘａａ１２は、Ｃｙｓ、Ｍｐｔ（メルカプトプロリン）、Ｐｅｎ（ペニシラミン）、Ｄｐｒ（ジアミノプロピオン酸）、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ１３は、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、またはＧｌｙであり、
Ｘａａ１４は、ＧｌｙまたはＡｌａであり、
Ｘａａ１５は、Ｃｙｓ、Ｍｐｔ（メルカプトプロリン）、Ｐｅｎ（ペニシラミン）、Ｄｐｒ（ジアミノプロピオン酸）、Ａｓｐ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ１６は、任意のアミノ酸であるか、または欠損している。
【０１６２】
特定の実施形態では、式ＩＩＩのＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、次のとおり定義される。  Ｘａａ１は、Ａｓｎ、任意のアミノ酸であるか、または欠損しており、
Ｘａａ２は、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、任意のアミノ酸であるか、または欠損しており、
Ｘａａ３は、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ５は、任意のアミノ酸またはＧｌｕであり、
Ｘａａ６は、任意のアミノ酸またはＬｅｕであり、
Ｘａａ７は、Ｃｙｓであり、
Ｘａａ８は、任意のアミノ酸またはＶａｌであり、
Ｘａａ９は、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、またはＴｙｒであり、
Ｘａａ１０は、任意のアミノ酸またはＶａｌであり、
Ｘａａ１１は、任意のアミノ酸またはＡｌａであり、
Ｘａａ１３は、任意のアミノ酸またはＴｈｒであり、
Ｘａａ１４は、任意のアミノ酸またはＧｌｙであり、
Ｘａａ１５は、Ｃｙｓであり、
Ｘａａ１６は、任意のアミノ酸、Ｌｅｕであるか、または欠損している。
【０１６３】
いくつかの実施形態では、式ＩＩＩのＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、キモトリプシンによってＸａａ９の後で切断されず、次のとおり定義される。
Ｘａａ１は、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｇｌｎ、Ｐｒｏ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、もしくはＴｈｒであるか、または欠損しており、
Ｘａａ２は、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、もしくはＧｌｙであるか、または欠損しており、
Ｘａａ３は、Ｔｈｒ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｇｌｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、もしくはＬｅｕであるか、または欠損しており、
Ｘａａ５は、Ａｓｐ、Ｉｌｅ、またはＧｌｕであり、
Ｘａａ６は、Ｉｌｅ、Ｔｒｐ、またはＬｅｕであり、
Ｘａａ７は、Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、またはＴｙｒであり、
Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、もしくはＭｅｔであるか、または欠損しており、
Ｘａａ９は、ａ）Ｐｈｅ及びＴｙｒ以外の任意のアミノ酸であるか、ｂ）Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、及びＴｒｐ以外の任意のアミノ酸であるか、ｃ）Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、及びＶａｌ以外の任意のアミノ酸であるか、ｄ）Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、及びＨｉｓ以外の任意のアミノ酸であるか、ｄ）任意の非芳香族アミノ酸であるか、またはｅ）欠損しているかのいずれかであり、
Ｘａａ１０は、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ｔｈｒ、またはＩｌｅであり、
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＶａｌであり、
Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＴｈｒであり、
Ｘａａ１４は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＳｅｒであり、
Ｘａａ１５は、Ｃｙｓ、Ｔｙｒであるか、または欠損しており、
Ｘａａ１６は、ａ）キモトリプシン切断部位を発生させるＴｒｐ、Ｔｙｒ、もしくはＰｈｅであるか、ｂ）トリプシン切断部位を発生させるＬｙｓもしくはＡｒｇであるか、ｃ）欠損しているか、またはｄ）ＨｉｓもしくはＬｅｕもしくはＳｅｒである。
【０１６４】
特定の実施形態では、ヒトウログアニリンペプチドまたは類似体は、以下に示されるアミノ酸配列（ＩＶ）を含むか、それから成るか、またはそれから本質的に成り、
Ａｓｎ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｇｌｕ５  Ｌｅｕ６  Ｘａａ７  Ｖａｌ８  Ａｓｎ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｘａａ１２  Ｔｈｒ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｌｅｕ１６（配列番号６７０）
[式中、Ｘａａ２は、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ３は、ＡｓｐまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ４は、ＣｙｓまたはＭｐｔ（メルカプトプロリン）またはＰｅｎ（ペニシラミン）またはＤｐｒ（ジアミノプロピオン酸）またはＡｓｐまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ７は、ＣｙｓまたはＭｐｔ（メルカプトプロリン）またはＰｅｎ（ペニシラミン）またはＤｐｒ（ジアミノプロピオン酸）またはＡｓｐまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１０は、ＶａｌまたはＰｒｏであり、
Ｘａａ１１は、ＡｌａまたはＡｉｂ（α−アミノイソ酪酸）であり、
Ｘａａ１２は、ＣｙｓまたはＭｐｔ（メルカプトプロリン）またはＰｅｎ（ペニシラミン）またはＤｐｒ（ジアミノプロピオン酸）またはＡｓｐまたはＧｌｕであり、
Ｘａａ１４は、ＧｌｙまたはＡｌａであり、
Ｘａａ１５は、ＣｙｓまたはＭｐｔ（メルカプトプロリン）またはＰｅｎ（ペニシラミン）またはＤｐｒ（ジアミノプロピオン酸）またはＡｓｐまたはＧｌｕである]。
【０１６５】
式ＩＶのある特定の実施形態では、Ｘａａ１５は、Ｃｙｓ以外であるか、または欠損しており、Ｘａａ７は、Ｓｅｒ、またはＣｙｓ以外のアミノ酸である。
【０１６６】
ある特定の実施形態では、Ｘａａ１、Ｘａａ２、Ｘａａ３、Ｘａａ５、Ｘａａ６、Ｘａａ７、Ｘａａ８、Ｘａａ９、Ｘａａ１０、Ｘａａ１１、Ｘａａ１３、Ｘａａ１４、及びＸａａ１６のうちの１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、または１２個は、Ｃｙｓ以外の任意のアミノ酸である。いくつかの実施形態では、Ｘａａ９は、Ｇｌｎ以外の任意のアミノ酸である。Ｘａａ２及びＸａａ３がＧｌｕである実施形態では、Ｘａａ９は、Ｇｌｎ以外の任意のアミノ酸である。ある特定の実施形態では、Ｘａａ１及びＸａａ２は欠損しており、Ｘａａ３は、Ｔｈｒであり、Ｘａａ５は、Ｇｌｕであり、Ｘａａ６は、ＩｌｅまたはＬｅｕであり、Ｘａａ８は、Ａｌａ、Ｖａｌ、またはＩｌｅであり、Ｘａａ９は、ＰｈｅまたはＴｙｒであり、Ｘａａ１０は、ＡｌａまたはＶａｌであり、Ｘａａ１１は、Ａｌａであり、Ｘａａ１３は、ＡｌａまたはＴｈｒであり、Ｘａａ１４は、Ｇｌｙであり、Ｘａａ１６は、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｌｙｓ、もしくはＡｒｇであるか、または欠損している。
ヒトウログアニリン類似体の具体例は、以下の表Ａ７に提供される。
【表７】
2020063273.tif 000021
2020063273.tif 000022
2020063273.tif 000023
【０１６７】
本明細書に記載されるＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドの変異体も含まれる。例としては、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、もしくはＩＶ、または配列番号１、５、４６〜５０、６５０、及び６７０、または表Ａ１〜Ａ７のうちのいずれかの配列のうちのいずれかに対して、約、少なくとも約、または約１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、もしくは１２個以下のアミノ酸置換、挿入、及び／または欠失を含む、変異体ペプチドが挙げられる。置換（複数可）は、保存的または非保存的であり得る。保存的アミノ酸置換の一例は、アミノ酸残基が、同様の側鎖を有するアミノ酸残基で置換されるものである。同様の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当該技術分野において定義されている。これらのファミリーとしては、塩基性側鎖を有するアミノ酸（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン）、非極性側鎖を有するアミノ酸（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン、トリプトファン）、β分岐側鎖を有するアミノ酸（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）、及び芳香族側鎖を有するアミノ酸（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）が挙げられる。保存的置換は、自然発生アミノ酸を非自然発生アミノ酸またはアミノ酸類似体に置換することができる。挿入及び／または欠失は、ペプチドのＮ末端、Ｃ末端、及び／または内部領域に存在し得る（例えば、Ｃ末端、Ｎ末端における、かつ／またはＮ末端及び／もしくはＣ末端の約２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、または１０個のアミノ酸の中の、約１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個のアミノ酸の挿入もしくは欠失）。いくつかの事例では、腸管内のＧＣ−Ｃ受容体に結合し、かつそれを刺激するが、非変異体形態ペプチドよりも活性が低い、変異体ペプチドを使用することが望ましい場合がある。この活性の低減は、受容体への親和性の低減、または結合した時点で受容体を活性化させる能力の低減、またはペプチドの安定性の低減から生じ得る。
【０１６８】
ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、環状ペプチドまたは線状ペプチドであり得る。さらに、同じペプチドの複数のコピーが、単一の環状または線状ペプチドに組み込まれ得る。環状ペプチドは、当該技術分野で既知の方法によって調製され得る。例えば、大環状化は多くの場合、ペプチドのＮ末端とＣ末端との間、側鎖とＮ末端もしくはＣ末端との間［例えば、ｐＨ約８．５のＫ３Ｆｅ（ＣＮ）６を用いて］（Ｓａｍｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１３７：５１８２−５１８５，１９９６）、またはシステインなどの２個のアミノ酸側鎖間（ＤｅＧｒａｄｏ，Ａｄｖ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｃｈｅｍ，３９：５１−１２４，１９８８）にアミド結合を形成することによって達成される。
【０１６９】
ペプチドは、脊椎動物（例えば、哺乳動物）種または細菌種において自然発生するペプチドのアミノ酸配列を含み得る。さらに、ペプチドは、部分的または完全に非自然発生ペプチドであってよい。
【０１７０】
本明細書に記載されるＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドに対応するペプチド類似体も含まれる。ペプチド類似体は、鋳型ペプチドのものと類似した特性を有する非ペプチド薬として、薬学産業において一般的に使用される。これらの種類の非ペプチド化合物は、「ペプチド模倣物」または「ペプチドミメティック」と名付けられる（Ｌｕｔｈｍａｎ，ｅｔ  ａｌ．，Ａ  Ｔｅｘｔｂｏｏｋ  ｏｆ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，１４：３８６−４０６，２ｎｄ  Ｅｄ．，Ｈａｒｗｏｏｄ  Ａｃａｄｅｍｉｃ  Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９９６、Ｊｏａｃｈｉｍ  Ｇｒａｎｔｅ，Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．，３３：１６９９−１７２０，１９９４、Ｆａｕｃｈｅｒｅ，Ｊ．，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓ．，１５：２９（１９８６）、Ｖｅｂｅｒ  ａｎｄ  Ｆｒｅｉｄｉｎｇｅｒ  ＴＩＮＳ，ｐ．３９２（１９８５）、及びＥｖａｎｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３０：２２９，１９８７）。ペプチドミメティックは、ペプチドの生物活性を模倣するが、化学的性質がもはやペプチド性ではない分子である。ペプチドミメティック化合物は、当該技術分野で既知であり、例えば、米国特許第６，２４５，８８６号に記載されている。
【０１７１】
本発明は、ペプトイドも含む。ペプチドのペプトイド誘導体は、生物活性のために重要な構造決定因子を保持するが、ペプチド結合を除去し、それによってタンパク質分解への耐性を与える、別の形態の修飾ペプチドに相当する（例えば、Ｓｉｍｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，ＰＮＡＳ  ＵＳＡ．８９：９３６７−９３７１，１９９２を参照されたい）。ペプトイドは、Ｎ置換グリシンのオリゴマーである。それぞれ天然アミノ酸の側鎖に対応する、いくつかのＮ−アルキル基が説明されている。本発明のペプトイドは、少なくとも１個のアミノ酸、数個のアミノ酸、またはすべてのアミノ酸残基が対応するＮ置換グリシンで置換される、化合物を含む。ペプトイドライブラリは、例えば、米国特許第５，８１１，３８７号に記載されている。
【０１７２】
いくつかの態様では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、約、少なくとも約、または約１５０個、１４０個、１３０個、１２０個、１１０個、１００個、９０個、８０個、７０個、６０個、５０個、４０個、３０個、２９個、２８個、２７個、２６個、２５個、２４個、２３個、２２個、２１個、２０個、１９個、１８個、１７個、１６個、１５個、１４個、１３個、１２個、１１個、１０個、８個、７個、６個、もしくは５個未満のアミノ酸を含むか、またはそれらから成る。いくつかの態様では、ペプチドは、（式ＩまたはＩＩの）Ｃｙｓ６のＮ末端側である５個以下のアミノ酸を含む。いくつかの態様では、ペプチドは、（式ＩまたはＩＩの）Ｃｙｓ１８のＣ末端側である２０個、１５個、１０個、または５個以下のアミノ酸を含む。
【０１７３】
いくつかの態様では、ペプチドは精製される。精製されたペプチドは、他のタンパク質、脂質、及び核酸から、またはペプチドが合成ないしは調製される化合物から分離される。精製されたペプチドは、精製された調製物の乾燥重量により少なくとも約５０、６０、７０、８０、８５、９０、９５、９６、９７、または９８％を構成し得る。
【０１７４】
上記のように、本明細書に記載されるある特定のペプチドは、１個以上またはすべての非天然アミノ酸もしくはアミノ酸類似体を含み得る。本明細書の他の箇所（例えば、上記）に記載されるものに加えて、例としては、チロシンの非天然類似体；グルタミンの非天然類似体；フェニルアラニンの非天然類似体；セリンの非天然類似体；スレオニンの非天然類似体；アルキル、アリール、アシル、アジド、シアノ、ハロ、ヒドラジン、ヒドラジド、ヒドロキシル、アルケニル、アルキンル、エーテル、チオール、スルホニル、セレノ、エステル、チオ酸、ホウ酸塩、ボロン酸塩、ホスホ、ホスホノ、ホスフィン、複素環式、エノン、イミン、アルデヒド、ヒドロキシルアミン、ケト、もしくはアミノ置換アミノ酸、またはそれらの任意の組み合わせ；光活性化可能な架橋剤を有するアミノ酸；スピン標識化アミノ酸；蛍光性アミノ酸；新規の官能基を有するアミノ酸；別の分子と共有結合的または非共有結合的に相互作用するアミノ酸；金属結合性アミノ酸；金属含有アミノ酸；放射性アミノ酸；光ケージ及び／または光異化可能な（ｐｈｏｔｏｉｓｏｍｅｒｉｚａｂｌｅ）アミノ酸；ビオチンまたはビオチン類似体含有アミノ酸；グリコシル化または炭水化物修飾アミノ酸；ケト含有アミノ酸；ポリエチレングリコールまたはポリエーテルを含むアミノ酸；重原子置換アミノ酸（例えば、重水素、トリチウム、１３Ｃ、１５Ｎ、または１８Ｏを含有するアミノ酸）；化学的に切断可能または光切断可能なアミノ酸；伸長した側鎖を有するアミノ酸；毒性基を含有するアミノ酸；糖置換アミノ酸、例えば、糖置換セリンなど；炭素結合糖含有アミノ酸；酸化還元活性アミノ酸；α．−ヒドロキシ含有酸；アミノチオ酸含有アミノ酸；α，α二置換アミノ酸；β−アミノ酸；プロリン以外の環状アミノ酸；Ｏ−メチル−Ｌ−チロシン；Ｌ−３−（２−ナフチル）アラニン；３−メチル−フェニルアラニン；ｐ−アセチル−Ｌ−フェニルアラニン；０−４−アリル−Ｌ−チロシン；４−プロピル−Ｌ−チロシン；トリ−Ｏ−アセチル−ＧｌｃＮＡｃβ−セリン；Ｌ−ドパ；フッ化フェニルアラニン；イソプロピル−Ｌ−フェニルアラニン；ｐ−アジド−Ｌ−フェニルアラニン；ｐ−アシル−Ｌ−フェニルアラニン；ｐ−ベンゾイル−Ｌ−フェニルアラニン；Ｌ−ホスホセリン；ホスホノセリン；ホスホノチロシン；ｐ−ヨード−フェニルアラニン；４−フルオロフェニルグリシン；ｐ−ブロモフェニルアラニン；ｐ−アミノ−Ｌ−フェニルアラニン；イソプロピル−Ｌ−フェニルアラニン；Ｌ−３−（２−ナフチル）アラニン；アミノ、イソプロピル、またはＯ−アリル含有フェニルアラニン類似体；ドパ、Ｏ−メチル−Ｌ−チロシン；グリコシル化アミノ酸；ｐ−（プロパルギルオキシ）フェニルアラニン；ジメチル−リジン；ヒドロキシ−プロリン；メルカプトプロピオン酸；メチル−リジン；３−ニトロ−チロシン；ノルロイシン；ピロ−グルタミン酸；Ｚ（カルボベンゾキシル）；ε−アセチル−リジン；β−アラニン；アミノベンゾイル誘導体；アミノ酪酸（Ａｂｕ）；シトルリン；アミノヘキサン酸；アミノイソ酪酸；シクロヘキシルアラニン；ｄ−シクロヘキシルアラニン；ヒドロキシプロリン；ニトロ−アルギニン；ニトロ−���ェニルアラニン；ニトロ−チロシン；ノルバリン；オクタヒドロインドールカルボン酸塩；オルニチン；ペニシラミン；テトラヒドロイソキノリン；アセトアミドメチル保護アミノ酸、ならびにＰＥＧ化アミノ酸が挙げられる。非天然アミノ酸及びアミノ酸類似体のさらなる例は、米国出願第２００３／０１０８８８５号及び同第２００３／００８２５７５号、ならびにそれらの中で引用される参考文献に見出すことができる。
【０１７５】
いくつかの実施形態では、アミノ酸は、自然発生の非必須アミノ酸、例えばタウリンで置換され得る。
【０１７６】
いくつかの実施形態では、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、または６つのシステインが、欠失しているか、または異なるアミノ酸で置換される。特定の態様では、最Ｎ末端側及び／またはＣ末端側のシステイン残基（単数または複数）は、欠失しているか、または異なるアミノ酸で置換される。ある特定の実施形態では、異なるアミノ酸は、アラニンまたはセリンである。
【０１７７】
ペプチドは、Ｌ−アミノ酸、Ｄ−アミノ酸、またはそれらの組み合わせのポリマーであり得る。例えば、ある特定の実施形態では、ペプチドは、Ｄレトロ−インベルソ（ｒｅｔｒｏ−ｉｎｖｅｒｓｏ）ペプチドである。「レトロ−インベルソ異性体」という用語は、配列の方向が逆転し、各アミノ酸残基のキラリティーが反転している、線状ペプチドの異性体を指す。例えば、Ｊａｍｅｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．３６８：７４４−７４６，１９９４、Ｂｒａｄｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ．３６８：６９２−６９３，１９９４を参照されたい。Ｄ−鏡像異性体の結合及び逆転合成の正味の結果は、各アミド結合内のカルボニル基及びアミノ基の位置が交換される一方で、各α炭素における側鎖基の位置は保存されることである。具体的に別段の記載がない限り、本発明のいかなる所定のＬ−アミノ酸配列も、対応する天然Ｌ−アミノ酸配列に対するその配列の逆を合成することによって、Ｄレトロ−インベルソペプチドにすることができる。
【０１７８】
非天然アミノ酸を含有するペプチドを製造する方法は、例えば、米国出願第２００３／０１０８８８５号及び同第２００３／００８２５７５号、Ｄｅｉｔｅｒｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ａｍ  Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２５：１１７８２−３，２００３、Ｃｈｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ．３０１：９６４−７，２００３、ならびにそれらの中で引用される参考文献に見出すことができる。
【０１７９】
いくつかの態様では、ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、代替的な結合で置換される１つ以上の従来のペプチド結合を有し得る。そのような置換は、ペプチドの安定性を増加させ得る。例えば、代替的な結合による（式ＩまたはＩＩの）Ｃｙｓ１８とＸａａ１９との間のペプチド結合の置換は、カルボキシペプチダーゼによる切断を低減させ得、胃腸管内での半減期を増加させ得る。ペプチド結合を置換し得る結合としては、レトロ−インベルソ結合（ＮＨ-Ｃ（Ｏ）の代わりにＣ（Ｏ）-ＮＨ；還元アミド結合（ＮＨ-ＣＨ２）；チオメチレン結合（Ｓ-ＣＨ２またはＣＨ２-Ｓ）；オキソメチレン結合（Ｏ-ＣＨ２またはＣＨ２-Ｏ）；エチレン結合（ＣＨ２-ＣＨ２）；チオアミド結合（Ｃ（Ｓ）-ＮＨ）；トランス−オレフィン結合（ＣＨ＝ＣＨ）；フルオロ置換トランス−オレフィン結合（ＣＦ＝ＣＨ）；ケトメチレン結合（Ｃ（Ｏ）-ＣＨＲまたはＣＨＲ-Ｃ（Ｏ）（式中、Ｒは、ＨまたはＣＨ３である）；及びフルオロ−ケトメチレン結合（Ｃ（Ｏ）-ＣＦＲまたはＣＦＲ-Ｃ（Ｏ）（式中、Ｒは、ＨまたはＦまたはＣＨ３である）が挙げられるが、これらに限定されない。
【０１８０】
いくつかのＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドでは、ジスルフィド結合を通常形成するＣｙｓ残基の１つ以上の対の一方または両方のメンバーが、ホモシステイン、ペニシラミン、３−メルカプトプロリン（例えば、Ｋｏｌｏｄｚｉｅｊ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｅｐｔ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．４８：２７４，１９９６を参照されたい）、β，βジメチルシステイン（例えば、Ｈｕｎｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｔ  Ｊ  Ｐｅｐｔ  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｅｓ．４２：２４９，１９９３を参照されたい）、またはジアミノプロピオン酸（例えば、Ｓｍｉｔｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．２１：１１７，１９７８を参照されたい）で置換されて、通常のジスルフィド結合の位置に代替的な内部架橋を形成する。
【０１８１】
いくつかの実施形態では、１つ以上のジスルフィド結合は、代替的な共有架橋、例えば、アミド結合（-ＣＨ２ＣＨ（Ｏ）ＮＨＣＨ２-または-ＣＨ２ＮＨＣＨ（Ｏ）ＣＨ２-）、エステル結合、チオエステル結合、ラクタム架橋、カルバモイル結合、尿素結合、チオ尿素結合、ホスホン酸エステル結合、アルキル結合（-ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２-）、アルケニル結合（-ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨＣＨ２-）、エーテル結合（-ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２-または-ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２-）、チオエーテル結合（-ＣＨ２ＣＨ２ＳＣＨ２-または-ＣＨ２ＳＣＨ２ＣＨ２-）、アミン結合（-ＣＨ２ＣＨ２ＮＨＣＨ２-または-ＣＨ２ＮＨＣＨ２ＣＨ２-）、またはチオアミド結合（-ＣＨ２ＣＨ（Ｓ）ＨＮＨＣＨ２-または-ＣＨ２ＮＨＣＨ（Ｓ）ＣＨ２-）で置換され得る。例えば、Ｌｅｄｕ  ｅｔ  ａｌ．（ＰＮＡＳ．１００：１１２６３−７８，２００３）は、ラクタム架橋及びアミド架橋を調製するための方法を記載する。Ｓｃｈａｆｍｅｉｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．（Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２２：５８９１，２０００）は、安定した炭化水素架橋を記載する。炭化水素架橋は、Ｇｒｕｂｂｓ触媒（Ｍａｔｅｒｉａ，Ｉｎｃ．及びＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能であり、例えば、米国特許第５，８３１，１０８号及び同第６，１１１，１２１号に記載されている）のうちの１つまたは別のものを使用して、複分解（または、飽和炭化水素架橋の場合、複分解、続いて水素添加）を介して生成され得る。いくつかの事例では、そのような代替的な架橋の生成は、Ｃｙｓ残基をＬｙｓもしくはＧｌｕなどの他の残基または非自然発生アミノ酸で置換することを必要とする。さらに、ラクタム、アミド、及び炭化水素架橋は、それらがＣｙｓに占められる位置以外の位置でアミノ酸を結合する場合でも、ペプチドを安定化させるために使用されることができる。そのような架橋は、例えば、２個のアミノ酸によって分離される２個のアミノ酸間、または６個のアミノ酸によって分離される２個のアミノ酸間で発生し得る（例えば、Ｓｃｈａｆｍｅｉｓｔｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１２２：５８９１，２０００を参照されたい）。
【０１８２】
ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、標準的な修飾を使用して修飾され得る。修飾は、アミノ（Ｎ）末端で、カルボキシ（Ｃ）末端で、内部で、または前述のもののうちのいずれかの組み合わせで発生し得る。いくつかの態様では、１つより多くの種類のペプチドの修飾が存在し得る。修飾としては、アセチル化、アミド化、ビオチン化、シナモイル化（ｃｉｎｎａｍｏｙｌａｔｉｏｎ）、ファルネシル化、ホルミル化、ミリストイル化、パルミトイル化、リン酸塩化（Ｓｅｒ、Ｔｙｒ、またはＴｈｒ）、ステアロイル化（ｓｔｅａｒｏｙｌａｔｉｏｎ）、サクシニル化、スルフリル化、及び（ジスルフィド架橋またはアミド環化を介する）環化、ならびにＣｙ３またはＣｙ５による修飾が挙げられるが、これらに限定されない。本発明のペプチドは、２，４−ジニトロフェニル（ＤＮＰ）、ＤＮＰ−リジン、７−アミノ−４−メチル−クマリン（ＡＭＣ）による修飾、フルオレセイン、ＮＢＤ（７−ニトロベンズ−２−オキサ−１，３−ジアゾール）、ｐ−ニトロ−アニリド、ローダミンＢ、ＥＤＡＮＳ（５−（（２−アミノエチル）アミノ）ナフタレン−１−スルホン酸）、ダブシル（ｄａｂｃｙｌ）、ダブシル（ｄａｂｓｙｌ）、ダンシル、Ｔｅｘａｓ  Ｒｅｄ、ＦＭＯＣ、及びＴａｍｒａ（テトラメチルローダミン）によっても修飾され得る。本発明のペプチドはまた、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）；アルキル基（例えば、Ｃ１−Ｃ２０直鎖または分岐鎖アルキル基）；脂肪酸ラジカル；ＰＥＧ、アルキル基、及び脂肪酸ラジカルの組み合わせ（米国特許第６，３０９，６３３号、Ｓｏｌｔｅｒｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．１０６−１１０，２００１を参照されたい）；ＢＳＡ及びＫＬＨ（キーホールリンペットヘモシアニン）に接合され得る。例えば、ある特定の実施形態では、Ｎ末端アミノ酸、Ｃ末端アミノ酸、または両方が、ＰＥＧ分子に接合される。
【０１８３】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載されるＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、対イオンとともに存在し得る。例示的な対イオンとしては、酢酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、エデト酸カルシウム塩、カンシル酸塩、炭酸塩、クエン酸塩、エデト酸塩（ＥＤＴＡ）、エジシル酸塩、エンボン酸塩、エシル酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコールリラルサニル酸塩（ｇｌｙｃｏｌｌｙｌａｒｓａｎｉｌａｔｅ）、ヘキシルレゾルシン酸塩（ｈｅｘｙｌｒｅｓｏｒｃｉｎａｔｅ）、ヨウ化物塩、臭化物塩、塩化物塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、イセチオン酸塩、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、エストール酸塩（ｅｓｔｏｌａｔｅ）、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、ムチン酸塩（ｍｕｃａｔｅ）、ナプシル酸塩（ｎａｐｓｙｌａｔｅ）、硝酸塩、パントテン酸塩、リン酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、テオクル酸塩、アセトアミド安息香酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アミノサリチル酸塩、アンヒドロメチレンクエン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、ショウノウ酸塩、カプリン酸塩、カプロン酸塩、カプリル酸塩、桂皮酸塩、シクラミン酸塩、ジクロロ酢酸塩、ギ酸塩、ゲンチジン酸塩、グルクロン酸塩、グリセロリン酸塩、グリコール酸塩、馬尿酸塩、フッ化物塩、マロン酸塩、ナパジシル酸塩、ニコチン酸塩、オレイン酸塩、オロト酸塩、シュウ酸塩、オキソグルタル酸塩、パルミチン酸塩、ペクチン酸塩、ペクチン酸塩ポリマーの塩、フェニルエチルバルビツール酸塩、ピクリン酸塩、プロピオン酸塩、ピドール酸塩（ｐｉｄｏｌａｔｅ）、セバシン酸塩、チオシアン酸塩（ｒｈｏｄａｎｉｄｅ）、トシル酸塩、及びタンニン酸塩が挙げられる。
【０１８４】
ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドは、種々の技術に従って産生され得る。例えば、ペプチドは、大腸菌を含むがこれらに限定されない細菌において、またはペプチドもしくはタンパク質産生のための他の系（例えば、バチルススブチリス、ショウジョウバエＳｆ９細胞を使用するバキュロウイルス発現系、酵母または糸状真菌発現系、哺乳動物細胞発現系）において産生されるか、あるいはそれらは、化学的に合成されてもよい。ペプチドまたは変異体ペプチドが細菌、例えば大腸菌内で産生される場合、ペプチドをコード化する核酸分子は、任意に、細胞からの成熟ペプチドの分泌を可能にするリーダー配列をコード化し得る。したがって、ペプチドをコード化する配列は、例えば、自然発生の細菌性ＳＴペプチドの、プレ配列及びプロ配列を含み得る。分泌された成熟ペプチドは、培養培地から精製され得る。
【０１８５】
いくつかの事例では、本発明のペプチドをコード化する配列は、細菌細胞内の核酸分子を送達及び維持することができるベクターに挿入される。ＤＮＡ分子は、自律複製ベクターに挿入され得る（好適なベクターとしては、例えば、ｐＧＥＭ３Ｚ及びｐｃＤＮＡ３、ならびにそれらの誘導体が挙げられる）。ベクター核酸は、細菌性ＤＮＡ、またはバクテリオファージλもしくはＭ１３などのバクテリオファージＤＮＡ、及びそれらの誘導体であり得る。本明細書に記載される核酸を含有するベクターの構築には、細菌などの宿主細胞の形質転換が続く場合がある。好適な細菌性宿主としては、大腸菌枯草菌、シュードモナス属、サルモネラ属が挙げられるが、これらに限定されない。遺伝子構築物は、コード化核酸分子に加えて、プロモーター及び制御配列などの、発現を可能にする要素も含み得る。発現ベクターは、プロモーター、エンハンサー、オペレーター、及びリプレッサー配列などの、転写開始を制御する転写制御配列を含有し得る。種々の転写制御配列が当業者には周知である。発現ベクターは、翻訳制御配列（例えば、非翻訳５′配列、非翻訳３′配列、または配列内リボソーム進入部位）も含み得る。ベクターは、自律複製が可能である場合があるか、または宿主ＤＮＡに組み込まれてペプチド産生中の安定性を確かにすることができる。いくつかの実施形態では、米国特許第５，３９５，４９０号に記載されるベクター、発現系、及び方法が、本明細書に記載されるＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドを産生するために使用され得る。
【０１８６】
本発明のペプチドを含むタンパク質コード化配列はまた、精製を促進するために、ポリペプチド親和性タグ（例えばグルタチオンＳ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、マルトースＥ結合タンパク質、タンパク質Ａ、ＦＬＡＧタグ、ヘキサ−ヒスチジン、ｍｙｃタグ、またはインフルエンザＨＡタグ）をコード化する核酸に融合され得る。親和性タグまたはレポーター融合は、翻訳融合が生じるように、目的のペプチドの読み枠を、親和性タグをコード化する遺伝子の読み枠と連結させる。融合遺伝子の発現は、目的のペプチドと親和性タグとの両方を含む単一ポリペプチドの翻訳をもたらす。親和性タグが用いられるいくつかの事例では、プロテアーゼ認識部位をコード化するＤＮＡ配列は、親和性タグ及び目的のペプチドの読み枠間で融合される。
【０１８７】
細菌以外のタンパク質発現系において本発明の未成熟型及び成熟型のペプチド及び変異体を産生するのに好適であり、かつ当業者に周知である遺伝子構築物ならびに方法は、生物系でペプチドを産生するためにも使用され得る。
【０１８８】
ペプチド及びそれらの変異体は、固相化学合成によって合成され得る。例えば、ペプチドは、二重結合プログラムを使用してＣｙｃ（４−ＣＨ２Ｂｘｌ）−ＯＣＨ２−４−（オキシメチル）−フェニルアセトアミドメチル樹脂上で合成され得る。正しいジスルフィド結合パターンを生成するように、保護基が適切に使用されなければならない。例えば、以下の保護基が使用され得る：ｔ−ブチルオキシカルボニル（α−アミノ基）；アセトアミドメチル（Ｃｙｓ残基Ｂ及びＥのチオール基）；４−メチルベンジル（Ｃｙｓ残基Ｃ及びＦのチオール基）；ベンジル（グルタミン酸のｙ−カルボキシル及びスレオニンのヒドロキシル基（存在する場合））；及びブロモベンジル（チロシンのフェノール基（存在する場合））。ｔ−ブトキシルカルボニルアミノ酸またはヒドロキシベンゾトリアゾールエステル（アスパラギンまたはグルタミン残基の場合）の対称無水物を用いて結合を引き起こし、０℃で６０分間、８／１／１／０．５の比（ｖ／ｖ／ｖ／ｗ）を使用するフッ化水素、硫化ジメチル、アニソール、及びｐ−チオクレゾール中の固体支持体から、ペプチドを脱保護及び切断する。減圧によってフッ化水素及び硫化ジメチルを、そしてエチルエーテル及び酢酸エチルを順次に用いる抽出によってアニソール及びｐ−チオクレゾールを除去した後、１／１の比（ｖ／ｖ）を使用する０．５Ｍのリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ８．０）とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドとの混合物を用いて、粗製ペプチドを抽出する。Ｃｙｓ残基Ｂ及びＥのジスルフィド結合は、ジメチルスルホキシドを使用して形成されたものである（Ｔａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１１３：６６５７−６２，１９９１）。得られるペプチドは、逆相クロマトグラフィによって精製され得る。Ｃｙｓ残基ＣとＦとの間のジスルフィド結合は、まず水中５０％の酢酸中にペプチドを溶解させることによって形成される。氷酢酸中の飽和ヨウ素溶液を添加する（１００ｍｌの溶液当たり１ｍｌのヨウ素溶液）。室温で２日間、密閉されたガラス容器内でインキュベーションした後、溶液を脱イオン水で５倍に希釈し、未反応ヨウ素の除去のためにエチルエーテルで４回抽出する。回転式蒸発による残存量のエチルエーテルの除去後、粗製産物の溶液を凍結乾燥し、連続逆相クロマトグラフィによって精製する。
【０１８９】
ペプチドは、従来のＦＭＯＣ保護を使用する固相合成（すなわち、ＤＣＣ−ＨＯＢｔを用いた結合及びＤＭＦ中のピペリジンを用いた脱保護）を含む多くの他の方法によっても合成され得る。Ｃｙｓチオール基は、トリチル保護され得る。ＴＦＡを用いた処理が、ペプチドの最終的な脱保護及び固体樹脂からのペプチドの遊離のために使用され得る。多くの場合、空気酸化が、適切なジスルフィド結合形成を得るのに十分である。
【０１９０】
腸管内のＧＣ−Ｃ受容体に結合し、かつ／またはそれを刺激する、ペプチド及び他の薬剤の能力は、例えば、腸管内ＧＣ−Ｃ受容体結合アッセイなどのアッセイで試験され得る。一例では、Ｔ８４ヒト結腸癌細胞株の細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｔｙｐｅ  Ｃｕｌｔｕｒｅ  Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．））を、５％のウシ胎仔血清を補充したＨａｍ’ｓ  Ｆ１２培地とダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）との１：１混合物を用いて、２４ウェルの培養プレート内でコンフルエントになるまで成長させる。アッセイで使用される細胞は、任意に、継代５４〜６０である。手短に、２４ウェルプレート内のＴ８４細胞単層を、１ｍｌの結合緩衝液（０．０５％のウシ血清アルブミン及び２５ｍＭのＨＥＰＥＳを含有するＤＭＥＭ、ｐＨ７．２）で２回洗浄し、次に、種々の濃度における成熟型の放射性標識化大腸菌ＳＴペプチド及び試験材料の存在下で、３０分間３７℃でインキュベートする。次に細胞を１ｍｌのＤＭＥＭで４回洗浄し、０．５ｍｌ／ウェルの１ＮのＮａＯＨで可溶化する。可溶化材料内の放射能のレベルは、標準的な方法を使用して決定される。
【０１９１】
ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドの追加の例は、例えば、米国特許第７，０４１，７８６号、同第７，３０４，０３６号、同第７，３７１，７２７号、同第７，４９４，９７９号、同第７，７０４，９４７号、同第７，７９９，８９７号、同第７，７４５，４０９号、同第７，７７２，１８８号、同第７，８７９，８０２号、同第７，９１０，５４６号、同第８，０３４，７８２号、同第８，０８０，５２６号、同第８，１０１，５７９号、同第８，１１４，８３１号、同第８，１１０，５５３号、同第８，３５７，７７５号、及び同第８，３６７，８００号；米国出願第２０１３／００９６０７１号、同第２０１３／０１９０２３８号、同第２０１２／００４０８９２号、同第２０１２／００４００２５号、同第２０１２／０２１３８４６号、同第２０１２／０２８９４６０号、同第２０１１／０１１８１８４号、同第２０１０／０１５２１１８号、同第２０１０／００４８４８９号、同第２０１０／０１２０６９４号、同第２０１０／０２６１８７７号、同第２００９／０２５３６３４号、同第２００９／０１９２０８３号、同第２００９／０３０５９９３号；ならびにＰＣＴ公開である国際公開第２００６／０８６６５３号及び国際公開第２００２／０９８９１２号に記載され、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１９２】
Ｄ．可溶性グアニル酸シクラーゼ作動薬
ある特定の実施形態では、本化合物は、可溶性グアニル酸シクラーゼ（ｓＧＣ）作動薬である。グアニンヌクレオチジル（グアニリル；グアニル酸塩）シクラーゼ（ＧＣ）は、種々の細胞刺激に応答して、ＧＴＰを二次メッセンジャーである環状ＧＭＰ（ｃＧＭＰ）に転換する、広く分布するシグナル伝達酵素である。膜結合性及び可溶性の両方のグアニル酸シクラーゼが存在し、これら両方がｃＧＭＰの細胞内濃度を上昇させることができる。
【０１９３】
腸管の腸細胞において、ｃＧＭＰ産生の増加は、腸管内のＮａ＋／Ｈ＋交換活性を阻害し、腸管粘膜のアルカリ化をもたらす。例えば、Ｆａｗｃｕｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｏｍｐ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ａ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．１１８：２９１−２９５，１９９７を参照されたい。いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、ある特定の態様では、可溶性グアニル酸シクラーゼ活性化因子は、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減し、ｃＧＭＰ産生を増加させ、それによって腸管粘膜のアルカリ化を高める。
【０１９４】
ｓＧＣ作動薬の一般例としては、ヘム依存性及びヘム非依存性の活性化因子が挙げられる。例えば、Ｅｖｇｅｎｏｖ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．５：７５５−７６８，２００６を参照されたい。１つの非限定的な理論によると、これら及び他のｓＧＣ活性化因子は、本明細書に記載されるように、腸管内のｓＧＣを選択的に活性化させ、ｃＧＭＰの濃度を上昇させ、それによってリン酸塩取り込みを阻害するように使用されることができる。
【０１９５】
いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、いくつかの実施形態では、ｓＧＣ作動薬は、小腸内の水吸収を減少させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０１９６】
ｓＧＣ作動薬の非限定的な例としては、Ｂａｙ  ４１−２２７１、Ｂａｙ  ５８−２６６７、及び図９Ａ〜９Ｌに示される化合物が挙げられる。例示的なｓＧＣ作動薬の追加の構造は、それらの合成のための方法と合わせて、米国特許第７，０８７，６４４号及びＰＣＴ公開である国際公開第２０１３／１０１８３０号に開示されており、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０１９７】
Ｅ．アデニル酸シクラーゼ作動薬
ある特定の実施形態では、本化合物は、アデニル酸シクラーゼ作動薬、任意に選択的作動薬である。アデニル酸シクラーゼ（またはアデニリルシクラーゼ）は、３’，５’−環状ＡＭＰ（ｃＡＭＰ）及びピロリン酸塩へのＡＴＰの転換を触媒する酵素の一種を指す。二価カチオン（例えばＭｇ）が、多くの場合、この酵素活性に関与する。アデニル酸シクラーゼによって産生されるｃＡＭＰは、転写因子または他の酵素（例えば、ｃＡＭＰ依存性キナーゼ）を含む、特異的ｃＡＭＰ結合タンパク質を介する制御シグナルとして機能する。
【０１９８】
アデニリルシクラーゼは、最も広く用いられるシグナル伝達経路のうちの１つのエフェクター分子である。その産物であるｃＡＭＰは、生物における細菌から高等真核細胞への細胞成長及び分化を調節する。動物では、膜貫通アデニリル−シクラーゼ（ｔｍＡＣ）及び可溶性アデニル酸シクラーゼ（ｓＡＣ）が存在する。例えば、Ｔｒｅｓｇｕｅｒｒｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．７９：１２７７−１２８８，２０１１を参照されたい。ｔｍＡＣとは異なり、ｓＡＣは膜貫通タンパク質ではなく、細胞質全体にわたり、そしてそれらがｃＡＭＰの細胞内機能を媒介する二次メッセンジャーの源であると考えられる特定の小器官内に分布して見出される。例えば、Ｂｕｃｋ  ａｎｄ  Ｌｅｖｉｎ，Ｓｅｎｓｏｒｓ．（Ｂａｓｅｌ）１１：２１１２−２１２８，２０１１を参照されたい。したがって、ｔｍＡＣは、細胞外シグナルを細胞内ｃＡＭＰ変化に変換するＧタンパク質によって直接調節される。対照的に、ｓＡＣアイソフォームは、重炭酸塩、カルシウム、及びＡＴＰを含む細胞内シグナルによって制御される。
【０１９９】
嚢胞性線維症膜貫通制御因子（ＣＦＴＲ）は、複数の組織の上皮で機能する塩素イオン及び重炭酸イオンチャネルである。このチャネルは、該重炭酸塩が粘膜の表面上のｐＨを決定する小腸内のＨＣＯ３−分泌を担うことが示されている。例えば、Ｋｕｎｚｅｌｍａｎｎ  ａｎｄ  Ｍａｌｌ，Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｒｅｖ．８２：２４５−２８９，２００２を参照されたい。ＣＦＴＲはｃＡＭＰによって制御され、ｃＡＭＰ依存性タンパク質キナーゼＡ（ＰＫＡ）によるＣＦＴＲ制御ドメインのリン酸塩化がその活性を増加させる。したがって、このイオンチャネルの選択的活性化は、管腔膜のアルカリ化をもたらし、それによってＣＥＰＧを低減または減少させることができる。したがって、１つの非限定的な理論によると、腸管内のｔｍＡＣの選択的刺激は、細胞内ｃＡＭＰを増加させ、ＰＫＡを刺激し、ＣＦＴＲ活性を増加させ、それによってＣＥＰＧ作用を介するＰｉの取り込みを阻害するはずである。特定の態様では、本化合物は、例えばｓＡＣと比べて、ｔｍＡＣを選択的に活性化させる。
【０２００】
フォルスコリンなどのアデニル酸シクラーゼ作動薬は、任意にＣＦＴＲのシグナル伝達を介して、（胃の重炭酸塩分泌を増加させることなく）ｃＡＭＰ介在性の十二指腸の重炭酸塩分泌を増加させることが示されている。例えば、Ｔａｋｅｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２７２（３  Ｐｔ  １）：Ｇ６４６−５３，１９９７を参照されたい。いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、ある特定の態様では、アデニル酸シクラーゼ作動薬は、小腸への重炭酸塩分泌を刺激することによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２０１】
いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、いくつかの実施形態では、アデニル酸シクラーゼ作動薬は、小腸内の水吸収を減少させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２０２】
特定の実施形態では、本化合物は、アデニル酸シクラーゼＩＩＩ（ＡＣ−ＩＩＩ）の作動薬、任意に、ＡＣ−ＩＩＩアイソフォームであるＡＤＣＹ１、ＡＤＣＹ２、ＡＤＣＹ３、ＡＤＣＹ４、ＡＤＣＹ５、ＡＤＣＹ６、ＡＤＣＹ７、ＡＤＣＹ８、ＡＤＣＹ９、及び／またはＡＤＣＹ１０のうちの１つ以上の作動薬である。
【０２０３】
アデニル酸シクラーゼ作動薬の特定例としては、コルホルシン（ＮＫＨ４７７）などの水溶性フォルスコリン類似体を含む、フォルスコリン及びその類似体／誘導体などのラブダンジテルペンが挙げられる。フォルスコリンは、ｔｍＡＣ  ＩＸを除いたすべての哺乳動物のｔｍＡＣを活性化させる、植物から単離されるジテルペン化合物である（哺乳動物のｓＡＣは、フォルスコリンに対して非感応性である）。例えば、Ｋａｍｅｎｅｔｓｋｙ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３６２：６２３−６３９，２００６を参照されたい。フォルスコリン刺激は、強力かつ長期のｃＡＭＰ変化をもたらすことができる。例えば、Ｔｒｅｓｇｕｅｒｒｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．７９：１２７７−１２８８，２０１１を参照されたい。フォルスコリン及びいくつかのフォルスコリン類似体の構造は、図１０に例示される。フォルスコリンの水溶性誘導体としては、極性脂肪族アミンでＣ−６またはＣ−７においてアシル化されるものが挙げられる。これらの誘導体は典型的に、より少ないオフターゲット活性で、ＡＣに対してより選択的である。例えば、Ｈａｒｔｚｅｌｌ  ａｎｄ  Ｂｕｄｎｉｔｚ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ４１：８８０−８８８，１９９２を参照されたい。したがって、ある特定の態様は、胃腸管を覆う細胞内でアデニル酸シクラーゼを選択的に活性化させる可溶性フォルスコリン類似体の使用を含む。
【０２０４】
フォルスコリン類似体／誘導体の特定例としては、フォルスコリン誘導体の合成において中間体として使用され得る、フォルスコリンの１−アミノアルキルカルバメート、９−アミノアルキルカルバメート、７−アミノアルキルカルバメート、６−アミノアルキカルバメート、６，７−ジアミノアルキルカルバメート、１，６−ジアミノアルキルカルバメート、１，７−ジアミノアルキルカルバメート、及び１，６，７−トリアミノアルキルカルバメートを含む、フォルスコリンのアミノアルキルカルバミル誘導体が挙げられる。米国特許第５，３５０，８６４号を参照されたい。フォルスコリン類似体／誘導体の追加の例としては、１２−クロロデスアセチルフォルスコリン、１２−クロロフォルスコリン、１２−ブロモデスアセチルフォルスコリン、１２−ブロモデスアセチルフォルスコリン、１２−フルオロデスアセチルフォルスコリン、及び１２−フルオロフォルスコリンを含む、１２−ハロゲン化フォルスコリン誘導体が挙げられる。米国特許第４，８７１，７６４号を参照されたい。
【０２０５】
いくつかの実施形態では、フォルスコリン類似体／誘導体は、６−アセチル−７−デアセチル−フォルスコリン、７−デアセチル−フォルスコリン、７−デアセチル−６−（Ｎ−アセチルグリシル）−フォルスコリン、７−デアセチル−７−β−ヘミサクニル−フォルスコリン、７−デアセチル−７−（Ｏ−Ｎ−メチルピペラジノ）−γ−ブトリル−ジヒドロクロンド−フォルスコリン、７−ＨＰＰ−フォルスコリン、６−ＨＰＰ−フォルスコリン、またはコルホルシンダロパート塩酸塩（ＮＫＨ４７７）である。例えば、米国出願第２０１１／０１７１１９５号、同第２００６／０００４０９０号、及び同第２０１１／００７７２９２号、Ｌａｕｒｅｎｚａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３２：１３３−９，１９８７、Ｌａｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．６：２０７５−８３，１９９８、Ｍｏｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２４：３１０−６，２００４を参照されたい。また、フォルスコリン類似体を合成する例示的な方法についてはＬｅｖｉｎ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｏｎ  Ｌｅｔｔｅｒｓ．３７：３０７９−３０８２，１９９６を、そして水溶性フォルスコリン類似体の追加の例、及びそれを合成する方法についてはＬａｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｉｎｄｉａｎ  Ｊ．Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．４５Ｂ：２３２−２４６，２００６を参照されたい。例示的なアデニル酸シクラーゼ作動薬の追加の構造は、それらの合成のための方法と合わせて、米国特許第４，９５４，６４２号及びＫｈａｎｄｅｌｗａｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．３１：１８７２−９，１９８８に開示されている。また、作動薬に刺激されるアデニル酸シクラーゼ活性を検出する例示的な方法／アッセイについてはＣｕｎｌｉｆｆｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ．２８：１９１３−２０，２００７を参照されたい。これらの参考文献は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０２０６】
Ｆ．イミダゾリン−１受容体作動薬
ある特定の実施形態では、本化合物は、イミダゾリン−１受容体作動薬、任意に選択的作動薬である。イミダゾリン受容体は、クロニジン、イダゾキサン、及び他のイミダゾールの非アドレナリン性の高親和性結合部位のファミリーを含む。イミダゾリンの交感神経抑制作用を媒介して血圧を低下させるＩ１受容体、モノアミンオキシダーゼのアロステリック結合部位であり、疼痛の調節及び神経保護に関与するＩ２受容体、ならびに膵β細胞からのインスリン分泌を制御するＩ３受容体という、３つの種類のイミダゾリン受容体が存在する。いくつかの態様では、本化合物は、例えば、イミダゾリン−２及び／またはイミダゾリン−３受容体と比べて選択的なイミダゾリン−１受容体作動薬である。
【０２０７】
イミダゾリン−１受容体のサブクラスは、クロニジン様薬物の中枢性降圧作用を部分的に媒介する。１つの非限定的な理論によると、活性化されたイミダゾリン−１受容体は、ホスファチジルコリンの加水分解を誘起してＤＡＧにし、これは次にアラキドン酸などの二次メッセンジャー及びＰＧＥ２などの下流エイコサノイドの合成を誘起する。例えば、Ｅｒｎｓｂｅｒｇｅｒ，Ａｎｎ．ＮＹ  Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８８１：３５−５３  １９９９を参照されたい。ＰＧＥ２は、ＤＢＳの内因性誘導因子である。例えば、Ｔａｋｅｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．１１３：１５５３−１５５９，１９９７）を参照されたい。いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、いくつかの態様では、イミダゾリン−１受容体作動薬は、ＤＢＳを増加させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２０８】
別の非限定的な理論によると、モクソニジンなどのイミダゾリン−１受容体作動薬も、胃腸管内の酸分泌を減少させることが示されている。例えば、Ｇｌａｖｉｎ  ａｎｄ  Ｓｍｙｔｈ，Ｂｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．１１４：７５１−４，１９９５を参照されたい。したがって、いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、ある特定の態様では、イミダゾリン−１受容体作動薬は、胃腸管内、例えば小腸内の酸分泌を阻害または低減することによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、特定の態様では、イミダゾリン−１受容体作動薬は、ＤＢＳを増加させ、かつ小腸内の酸分泌を低減させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２０９】
いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、いくつかの実施形態では、イミダゾリン−２受容体作動薬は、小腸内の水吸収を減少させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２１０】
イミダゾリン−１受容体作動薬の非限定的な例としては、アグマチン、アプラクロニジン、クロニジン、エファロキサン、モクソニジン、リルメニジン、Ｓ−２３５１５、Ｓ−２３７５７、ＬＮＰ−５０９、ＬＮＰ−９１１、ＬＮＰ−５０９、Ｓ−２３５１５、ＰＭＳ−８１２、ＰＭＳ−８４７、ＢＵ−９８００８、及びＴＶＰ１０２２（ラサギリンのＳ−鏡像異性体）が挙げられる。参照により全体が本明細書に組み込まれる、Ｈｅａｄ  ａｎｄ  Ｍａｙｏｒｏｖ，Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ  Ｈｅｍａｔｏｌ  Ａｇｅｎｔｓ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．４：１７−３２，２００６も参照されたい。
【０２１１】
例示的なイミダゾリン受容体作動薬の構造は図１１に示され、それらの合成のための方法と合わせて、米国特許第４，３２３，５７０号、同第５，６８６，４７７号、同第３，９８８，４６４号、同第６，３００，３６６号、同第５，４９２，９１２号、同第５，４９２，９１２号、及びＰＣＴ公開である国際公開第２００１４１７６４号にさらに開示されており、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２１２】
イミダゾリン受容体作動薬の追加の例としては、米国特許第７，３０９，７０６号、米国特許第５，６８６，４７７号（欧州第７１０，６５８号）、米国特許第５，９２５，６６５号（欧州第８４６，６８８号）、国際公開第２００１／４１７６４号、及び国際公開第２０００／０２８７８号に記載されるものが挙げられる。米国特許第５，６８６，４７７号に記載される５−（アリールオキシメチル）−オキサゾリン誘導体は、イミダゾリン−１受容体に対する選択的親和性を特徴とする。米国特許第５，９２５，６６５号に記載されるイミダゾリン誘導体は、アドレナリン性受容体に著しく結合することなくイミダゾリン受容体に結合する。国際公開第２００１／４１７６４号は、イミダゾリン受容体に対する親和性を保有するイソキノリン及びキノリン誘導体を記載する。国際公開第２０００／０２８７８号は、可能性のあるイミダゾリン受容体のリガンドとして例示的なβ−カルボリン誘導体を記載する。これらの参考文献は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０２１３】
Ｇ．コリン作動薬
ある特定の実施形態では、本化合物は、コリン作動薬、任意に選択的コリン作動薬である。コリン作動薬の例としては、アセチルコリンの産生または放出を刺激する間接的コリン作動薬（例えば、アステチルコリンエステラーゼ阻害薬）、及び１つ以上のアセチルコリン受容体に結合し、かつそれを刺激する直接的コリン作動薬が挙げられる。神経伝達物質であるアセチルコリン（２−アセトキシ−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルエタンアミニウム）は、酢酸及びコリンのエステルである。アセチルコリン受容体の一般例としては、ニコチン性アセチルコリン受容体及びムスカリン性アセチルコリン受容体が挙げられる。ニコチン性アセチルコリン受容体は、５つのタンパク質サブユニットから成るリガンド開口型イオンチャネルである。
【０２１４】
ムスカリン性アセチルコリン受容体（すなわち、Ｍ１、Ｍ２、Ｍ３、Ｍ４、及びＭ５）は、二次メッセンジャーカスケードを介して他のイオン性チャネルを活性化させるＧタンパク質結合受容体である。これらの受容体は、唾液腺ならびに胃及び腸管内の平滑筋及び粘膜細胞を含む、胃腸管内で発現される。ある特定の実施形態では、本化合物は、ムスカリン性受容体サブタイプのパン作動薬である。５つすべてのムスカリン性受容体サブタイプの内因性作動薬は、ホルモン機構及び神経機構の両方によって生理的制御を発揮するアセチルコリンである。例えば、Ｅｇｌｅｎ，Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８８１：３５−５３，２０１２を参照されたい。いくつかの自然発生の化合物も、ムスカリン（この受容体ファミリーの名前の由来であるＡｍｉｎｉｔａ  ｍｕｓｃａｒｉａキノコ由来の毒素）及びピロカルピンなどの作動薬、ならびにアトロピンまたは（−）−ヒヨスチン（ナス科植物由来）などの拮抗薬を含む、ムスカリン性受容体（図１２参照）を調節する。インビボで投与されると、ムスカリン性作動薬は唾液分泌を誘発し、一方でムスカリン性拮抗薬は口渇を引き起こす。
【０２１５】
いくつかの実施形態では、本化合物は、Ｍ３ムスカリン性受容体の相対選択的作動薬である。Ｍ３の分泌応答は、アセチルコリン（ＡＣｈ）によって生理的に刺激される。具体的には、ＡＣｈは、Ｇタンパク質結合Ｍ３ムスカリン性ＡＣｈ受容体に結合し、これが、ホスホリパーゼＣにイノシトール１，４，５−三リン酸（ＩｎＰ３）を生成させる。ＩｎＰ３は、小胞体上のＩｎＰ３受容体に結合し、かつこれを開き、１つの非限定的な理論によると、これがＣａ２＋を放出する。［Ｃａ２＋］ｉの増加は、頂端膜Ｃｌ−チャネル及び基底面Ｋ＋チャネルを活性化させる。腺房内腔へのＣｌ−の外向き電流は、Ｎａ＋を細胞全体に流し、その浸透圧勾配が流体分泌を生じさせる。例えば、Ｔｏｂｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．６０：３−２１，２００９を参照されたい。この流体は重炭酸塩に富む。
【０２１６】
重炭酸塩分泌のムスカリン性受容体による制御は繰り返し実証されており、血管内投与または皮下投与されるムスカリン性作動薬は、ムスカリン性拮抗薬によって遮断される応答である、腸管内腔への重炭酸塩の放出を増加させる。例えば、１つの非限定的な理論によると、ベタネコール（ムスカリン性受容体選択的作動薬）、カルバコール（ムスカリン性及びニコチン性アセチルコリン受容体作動薬）、及びＭｃＮ−Ａ−３４３（Ｍ１受容体選択的作動薬）などのコリン作動薬は、十二指腸の重炭酸塩分泌を増加させることが示されている。例えば、Ｓaｆｓｔｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２６７（１  Ｐｔ  １）：Ｇ１０−７，１９９４を参照されたい。いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、ある特定の態様では、コリン作動薬は、小腸への重炭酸塩分泌を刺激することによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２１７】
いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、いくつかの実施形態では、コリン作動薬は、小腸内の水吸収を減少させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２１８】
いくつかの態様では、ムスカリン性受容体作動薬は、内因性リガンドアセチルコリンに対して立体構造的に制約された構造、例えば、図１２のシス−トリメチル−（２−メチル−［１，３］ジオキソラン−４−イルメチル）アンモニウムヨウ化物構造などを保有する。例えば、Ｐｉｅｒｇｅｎｔｉｌｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ  ＆  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  １５：８８６−８９６，２００７を参照されたい。この構造は、アセチルコリンの不安定なエステルの代わりに、ＡＣｈの水素結合受容体の両方を保持するが大幅により安定している生物学的等価体である、ケタールを含有する。同様に、カルベコール及びベタネコール（図１２にも示される）の構造は、非加水分解性のカルバミン酸官能基でＡＣｈの不安定エステル基を置換するため、これらは作動薬の例である。
【０２１９】
間接作用型コリン作動薬の非限定的な例としては、カルバミン酸塩（例えば、フィゾスチグミン、ネオスチグミン、ピリドスチグミン）、ピペリジン（例えば、ドネペジル）、エドロホニウム、ヒューペルジン（ｈｕｐｅｒｚｉｎｅ）Ａ、ラドスチジル（ｌａｄｏｓｔｉｇｉｌ）、ウンゲレミン（ｕｎｇｅｒｅｍｉｎｅ）、ラクチュコピクリン、タクリン、ガランタミン、トランス−δ−９−テトラヒドロカンナビノール、及びリン酸塩（例えば、イソフルロフェート、エコチオフェート、パラチオン、マラチオン）などの、アセチルコリンエステラーゼ阻害薬が挙げられる。好ましくは、本明細書に提供される方法は、可逆的アセチルコリンエステラーゼ阻害薬を用いる。
【０２２０】
直接作用型コリン作動薬の非限定的な例としては、アセチルコリン、ニコチン、サクシニルコリン、メタコリン（アセチル−β−メチルコリン）、ＭｃＮ−Ａ−３４３、カルバコール（カルバモイルコリン）、ベタネコール（ｂｅｔｈａｎｅｃｏｌ）（カルバモイル−β−メスリコリン）、ムスカリン、ピロカルピン、オキソトレモリン、ロベリン、及びジメチルフェニルピパラジニウムが挙げられる。
【０２２１】
Ｈ．プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬
ある特定の実施形態では、本化合物は、Ｅ型プロスタノイド受容体４（ＥＰ４）作動薬（またはプロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬）、任意に選択的作動薬である。ＥＰ４受容体は、アデニル酸シクラーゼの刺激及び細胞内ｃＡＭＰレベルの上昇を引き起こすＧαｓタンパク質結合受容体として初めに説明された。ｃＡＭＰ形成を刺激したプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）受容体としてはじめてクローン化されたとき、ＥＰ４受容体は「ＥＰ２」と命名された。しかしながら、ブタプロストに感応性のある別のｃＡＭＰ刺激性ＰＧＥ２受容体が発見され、血管弛緩を媒介したブタプロスト非感応性受容体は「ＥＰ４」と改名された。これは、ＰＧＥ２について特定された４つの受容体のうちの１つである。
【０２２２】
１つの非限定的な理論によると、プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬は、例えば、ｃＡＭＰによって媒介される機構により、十二指腸の重炭酸塩分泌を刺激することが示されている。例えば、Ａｏｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ  Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２８７：Ｇ９６−１０３，２００４、Ｌｕｎｄｇｒｅｎ，Ａｃｔａ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｓｃａｎｄ．１８５：８７，２００５、Ｔａｋｅｕｃｈｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．１１３：１５５３−１５５９，１９９７を参照されたい。したがって、いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、ある特定の態様では、プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬は、小腸への重炭酸塩分泌を刺激することによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２２３】
いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、いくつかの実施形態では、ＥＰ４作動薬は、小腸内の水吸収を減少させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２２４】
プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬の非限定的な例としては、ＰＧＥ２、ＰＧＥ２類似体、ＡＥ１−３２９、ＡＧＮ２０５２０３、ＡＰＳ−９９９  Ｎａ、Ｃａｙ１０５９８（１９ａ）、ＣＰ−０４４５１９−０２、ＣＪ−０２３，４２３、ＥＰ４ＲＡＧ、ＥＲ−８１９７６２、Ｌ−９０２６８８、ルビプロストン、ＯＮＯ−４８１９ＣＤ、ＯＮＯ  ＡＥ１−３２９、ＯＮＯ  ＡＥ１−７３４、ＰＧＥ１−ＯＨ、ＴＣＳ２５１０、γ−ラクタムＰＧＥ類似体３、１１−デオキシ−ＰＧＥ１、γ−ラクタムＰＧＥ類似体２ａ、γ−ラクタムＰＧＥ類似体４が挙げられる。例えば、Ｋｏｎｙａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｔｈｅｒ．１３８：４８５−５０２，２０１３を参照されたい。
【０２２５】
ＰＧＥ２類似体の非限定的な例としては、１６，１６−ジメチルＰＧＥ２、１６−１６ジメチルＰＧＥ２ｐ−（ｐ−アセトアミドベンズアミド）フェニルエステル、１１−デオキシ−１６，１６−ジメチルＰＧＥ２、９−デオキシ−９−メチレン−１６、１６−ジメチルＰＧＥ２、９−デオキシ−９−メチレンＰＧＥ２、９−ケトフルプロステノール、５−トランスＰＧＥ２、１７−フェニル−ω−トリノルＰＧＥ２、ＰＧＥ２セリノールアミド、ＰＧＥ２メチルエステル、１６−フェニルテトラノルＰＧＥ２、１５（Ｓ）−１５−メチルＰＧＥ２、１５（Ｒ）−１５−メチルＰＧＥ２、８−イソ−１５−ケトＰＧＥ２、８−イソＰＧＥ２イソプロピルエステル、２０−ヒドロキシＰＧＥ２、１１−デオキシＰＧＥｉ、ノクロプロスト、スルプロストン、ブタプロスト、１５−ケトＰＧＥ２、及び１９（Ｒ）ヒドロキシｙＰＧＥ２が挙げられる。例えば、米国出願第２０１２／０２０２２８８号を参照されたい。
【０２２６】
プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬の追加の例としては、米国出願第２００１／００５６０６０号、同第２００２／００４０１４９号、同第２００５／０１６４９４９号、及び同第２０１１／００９８４８１号に記載されるものが挙げられる。米国特許第４，２１９，４７９号、同第４，０４９，５８２号、同第４，４２３，０６７号、同第４，４７４，８０２号、同第４，６９２，４６４号、同第４，７０８，９６３号、同第５，０１０，０６５号、同第５，０１３，７５８号、同第６，７４７，０３７号、及び同第７，７７６，８９６号、欧州特許第００８４８５６号、カナダ特許第１２４８５２５号、米国出願第２００４／０１０２４９９号、同第２００５／０４９２２７号、同第２００５／２２８１８５号、同第２００６／１０６０８８号、同第２００６／１１１４３０号、同第２００７／００１０４９５号、同第２００７／０１２３５６８号、同第２００７／０１２３５６９号、同第２００５／００２０６８６号、同第２００８／０２３４３３７号、同第２０１０／００１０２２２号、同第２０１０／０２１６６８９号、同第２００４／０１９８７０１号、同第２００４／０２０４５９０号、同第２００５／０２２７９６９号、同第２００５／０２３９８７２号、同第２００６／０１５４８９９号、同第２００６／０１６７０８１号、同第２００６／０２５８７２６号、同第２００６／０２７０７２１号、同第２００９／０１０５２３４号、同第２００９／０１０５３２１号、同第２００９／０２４７５９６号、同第２００９／０２５８９１８号、同第２００９／０２７０３９５号、同第２００４／００８７６２４号、同第２００４／０１０２５０８号、同第２００６／０２５２７９９号、同第２００９／００３００６１号、同第２００９／０１７０９３１号、同第２０１０／００２２６５０号、同第２００９／０３１２３８８号、同第２００９／０３１８５２３号、同第２０１０／００６９４５７号、同第２０１０／００７６０４８号、同第２００７／００６６６１８号、同第２００４／０２５９９２１号、同第２００５／００６５１３３号、及び同第２００７／０１９１３１９号、ならびにＰＣＴ公開である国際公開第２００４／４０７１４２８号、同第２００６／０５２６３０号、同第２００６／０４７４７６号、同第２００６／０５８０８０号、同第２００４／０６５３６５号、同第２００３／０４７５１３号、同第２００４／０８５４２１号、同第２００４／０８５４３０号、同第２００５／１１６０１０号、同第２００５／１１６０１０号、同第２００７／０１４４５４号、同第２００６／０８０３２３号、及び同第２００６／１３７４７２号に記載される、プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬も（関連する合成の方法と合わせて）含まれ、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２２７】
ＥＰ４受容体作動薬の特定例は、図１３に示される。
【０２２８】
特定の実施形態では、ＥＰ４受容体作動薬は、ルビプロストン（同様にカルシウム活性化塩素イオンチャネル作動薬）である。ルビプロストンは、胃腸上皮細胞の頂端側の側面上のＣｌＣ−２塩素イオンチャネルを特異的に活性化させることによって作用し、塩素イオンに富む流体分泌をもたらす、プロスタグランジンＥ１から誘導される二環式脂肪酸である。これらの分泌は便を軟化させ、運動性を増加させ、自発性腸管運動（ＳＢＭ）を促進する。ルビプロストンは、正味のＣｌ−分泌を変更することなくＣＦＴＲ依存性の十二指腸の重炭酸塩分泌を刺激する。例えば、Ｍｕｚｉｍｏｒｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．５７３：８２７−８４２，２００６を参照されたい。ここで、ルビプロストン誘導性の十二指腸の重炭酸塩分泌は、強力なＥＰ４受容体拮抗薬であるＡＨ２３８４８の共灌流（ｃｏ−ｐｅｒｆｕｓｉｏｎ）によって消失したが、ＥＰ１／ＥＰ２受容体拮抗薬であるＡＨ６８０９は作用を有しなかった。これらの結果は、ルビプロストンが、プロスタグランジンＥＰ４受容体を刺激することによって十二指腸の重炭酸塩分泌を増加し得ることを示唆する。したがって、ある特定の態様では、ルビプロストンは、小腸への重炭酸塩分泌を刺激することによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２２９】
上記のように、ある特定の態様は、プロスタグランジンＥＰ４受容体選択的作動薬を含む。ＥＰ４選択的作動薬は、ＥＰ４受容体サブタイプにおけるＩＣ５０より少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも３０倍、少なくとも４０倍、または少なくとも５０倍大きい、ＥＰ１、ＥＰ２、及び／またはＥＰ３受容体サブタイプにおけるＩＣ５０を有する、化合物を含む。
【０２３０】
Ｉ．ドパミンＤ１受容体作動薬
ある特定の実施形態では、本化合物は、ドパミンＤ−１受容体作動薬、任意に選択的作動薬である。ドパミンＤ１  Ｇタンパク質結合受容体は、ドパミン受容体ファミリーの中で最も高度に発現されるドパミン受容体サブタイプである。これは、アデニル酸シクラーゼを刺激し、環状ＡＭＰ依存性タンパク質キナーゼを活性化させる。
【０２３１】
１つの非限定的な理論に基づいて、ドパミンＤ１受容体作動薬、及び抹消作用型カテコール−Ｏ−メチル−トランスフェラーゼ（ＣＯＭＴ）阻害薬であるニテカポン（ＣＯＭＴ阻害薬は、ドパミンを含むカテコールアミンの組織分解を減少させる）は、腸内の重炭酸塩分泌を刺激し、単離された十二指腸の腸細胞内の環状ＡＭＰの産生を増加させることが示されている。例えば、Ｆｌｅｍｓｔｒｏｍ  ａｎｄ  Ｓａｆｓｔｅｎ，Ｄｉｇ  Ｄｉｓ  Ｓｃｉ．３９：１８３９−４２，１９９４、及びＫｎｕｔｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．１０４：１４０９−１３  １９９３、Ｉｗａｔｓｕｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２１８：２３７−４１，１９９２、及びＦｒａｇａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｂｉｏｃｈｅｍ．１８：３４７−６０，２００６を参照されたい。いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、ある特定の態様では、ドパミンＤ１受容体作動薬は、小腸への重炭酸塩分泌を刺激することによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２３２】
いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、いくつかの実施形態では、ドパミンＤ１作動薬は、小腸内の水吸収を減少させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２３３】
ドパミンＤ１受容体作動薬の非限定的な例としては、ドパミン（例えば、ドパミン塩酸塩、ＮＰＥＣケージドパミン）、ジヒドレキシジン（例えば、ジヒドレキシジン塩酸塩）、ベンザゼパイン、及びそれらの類似体／誘導体が挙げられる。ジヒドレキシジン誘導体の具体例としては、Ａ８６９２９、ジナプソリン、ジノキシリン（ｄｉｎｏｘｙｌｉｎｅ）、及びドキサントリン（ｄｏｘａｎｔｈｒｉｎｅ）が挙げられ、ベンザゼピン誘導体の具体例としては、ＳＫＦ８１２９７、ＳＫＦ８２９５８、ＳＫＦ３８３９３、フェノルドパム、及び６−Ｂｒ−ＡＰＢが挙げられる。図１４に示されるドパミンＤ１受容体作動薬も含まれる。
【０２３４】
ドパミンＤ１受容体作動薬の追加の非限定的な例としては、Ａ６８９３０、Ａ７７６３６、（Ｒ）−（−）−アポモルヒネ塩酸塩、ＣＹ２０８−２４３、ＳＫＦ８９１４５、ＳＫＦ８９６２６、７，８−ジヒドロキシ−５−フェニル−オクタヒドロベンゾ［ｈ］イソキノリン、ＹＭ４３５、ＡＢＴ−４３１、ＮＮＣ０１−００１２、ＳＣＨ２３３９０、ＳＫＦ７７３４、ＳＫＦ８１２９７、ＳＫＦ３８３２２、ＳＫＦ８３９５９、カベルゴリン、フェノルドパム（例えば、フェノルダパム（ｆｅｎｏｌｄａｐａｍ）塩酸塩）、ブロモクリプチン、ロピニロール、プラミペキソール、エンタカポン、トルカポン、ジヘキサジン（ｄｉｈｅｘａｄｉｎｅ）、ＩＰＸ−７５０、及びペルゴリドが挙げられる。Ｚｈａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｄ  Ｒｅｓ  Ｒｅｖ．２９：２７２−９４，２００９、Ｙｖｏｎｎｅ  Ｃｏｎｎｏｌｌｙ  Ｍａｒｔｉｎ，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ  Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ｖｏｌ．２０１１，Ａｒｔｉｃｌｅ  ＩＤ  ４２４５３５，８  ｐａｇｅｓ，２０１１．ｄｏｉ：１０．１１５５／２０１１／４２４５３５、Ｓａｌｍｉ  ｅｔ  ａｌ．，ＣＮＳ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｖ．１０：２３０−４２，２００４、Ｂｏｕｒｎｅ，ＣＮＳ  Ｄｒｕｇ  Ｒｅｖ．７：３９９−４１４，２００１も参照されたい。さらに、Ｄ１受容体作動薬は、当該技術分野で既知の標準的なスクリーニング方法を使用して特定され得る。非限定的な例として、ドパミンＤ１受容体作動薬のハイスループットな薬物スクリーニングのための細胞ベースの機能的アッセイが、Ｊｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｃｔａ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ  Ｓｉｎ．２６：１１８１−６，２００５に記載されている。これらの参考文献は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０２３５】
上記のように、ある特定の態様は、ドパミンＤ１受容体選択的作動薬を含む。ドパミンＤ１選択的作動薬は、Ｄ１受容体サブタイプにおけるＩＣ５０より少なくとも５倍、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも３０倍、少なくとも４０倍、または少なくとも５０倍大きい、Ｄ２、Ｄ３、Ｄ４、及び／またはＤ５受容体サブタイプにおけるＩＣ５０を有する、化合物を含む。
【０２３６】
Ｊ．メラトニン受容体作動薬
ある特定の実施形態では、本化合物は、メラトニン受容体作動薬、任意に選択的作動薬である。メラトニン受容体は、松果体ホルモンであるメラトニンに結合する、高親和性Ｇタンパク質結合受容体のファミリーを指す。Ｒｅｐｐｅｒｔ，Ｂｉｏｌ  Ｒｈｙｔｈｍｓ．１２：５２８−３１，１９９７を参照されたい。
【０２３７】
メラトニン受容体の例としては、ＭＴ１及びＭＴ２受容体が挙げられる。いくつかの態様では、メラトニン受容体作動薬は、ＭＴ１及びＭＴ２受容体の両方に結合する。いくつかの実施形態では、メラトニン受容体作動薬は、ＭＴ１またはＭＴ２受容体に選択的に結合し、例えば、ＭＴ２には結合するがＭＴ１には著しく結合しないか、またはＭＴ１には結合するがＭＴ２には著しく結合しない。
【０２３８】
非非限定的な理論によると、メラトニンなどのメラトニン受容体作動薬は、例えば、腸細胞ＭＴ２受容体における作用を介して、十二指腸の重炭酸塩分泌を刺激することが示されている。例えば、Ｓｊoｂｌｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔ．１０８：６２５−３３，２００１、Ｓｊoｂｌｏｍ  ａｎｄ  Ｆｌｅｍｓｔｒｏｍ，Ｊ．Ｐｉｎｅａｌ  Ｒｅｓ．３４：２８８−２９３，２００３を参照されたい。いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、ある特定の態様では、メラトニン受容体作動薬は、小腸への重炭酸塩分泌を刺激することによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２３９】
いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、いくつかの実施形態では、メラトニン受容体作動薬は、小腸内の水吸収を減少させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２４０】
メラトニン受容体作動薬の例としては、メラトニン（Ｎ−アセチル−５−メトキシトリプタミン）、及びメラトニン受容体に結合し、かつそれを活性化させるメラトニン類似体が挙げられる。メラトニンの一般構造は、５位のメトキシ基（５−メトキシ基）及び３位のアシルアミノエチル側鎖を有するインドール環を含み、この２つの側鎖が、メラトニン受容体（複数可）への結合及びその活性化に寄与する。インドール環は、置換の作用によってすべての位置で評価されている。例えば、Ｒｉｖａｒａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｕｒｒ  Ｔｏｐ  Ｍｅｄ  Ｃｈｅｍ．８：９５４−６８，２００８、及びＳｕｇｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｉｇｍｅｎｔ  Ｃｅｌｌ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ．１７：４５４−４６０，２００４を参照されたい。
【０２４１】
メラトニン受容体作動薬の特定例としては、サーカディン、アゴメラチン、ラメルテオン、タシメルテオン、β−メチル−６−クロロメラトニン（ＴＩＫ−３０１またはＬＹ１５６７３５）、ＴＡＫ−３７５、ＶＥＣ−１６２、ＧＲ１９６４２９、Ｓ２０２４２、Ｓ２３４７８、Ｓ２４２６８、Ｓ２５１５０、ＧＷ２９０５６９、ＢＭＳ−２１４７７８、８−メトキシ−２−クロロアセトアミドテトラリン、８−メトキシ−２−プロピオンアミド−テトラリン、Ｎ−アセチルトリプタミン、６−クロロメラトニン、２−ヨードメラトニン、８−Ｍ−ＰＤＯＴ、及び２−フェニルメラトニンに加えて、すべてが５−メトキシインドール環を部分として含有する、２−ヨードメラトニン、６−クロロメラトニン、６，７−ジクロロ−２−メチルメラトニン、及び８−ヒドロキシメラトニンが挙げられる。例えば、参照により全体が本明細書に組み込まれる、米国出願第２００５／０１６４９８７号を参照されたい。図１５に示される例示的なメラトニン受容体（ＭＴ２）作動薬も含まれる。
【０２４２】
メラトニン受容体作動薬をスクリーニングするための方法は、例えば、参照により全体が本明細書に組み込まれる、米国出願第２００３／００４４９０９号に記載されている。
【０２４３】
Ｋ．５ＨＴ４受容体作動薬
ある特定の実施形態では、本化合物は、５ＨＴ４受容体作動薬、任意に選択的作動薬である。５−ヒドロキシトリプタミン受容体４（５ＨＴ４）は、セロトニン（５−ヒドロキシトリプタミン、すなわち５−ＨＴ）または他の作動薬に応答してｃＡＭＰ産生を刺激する、Ｇタンパク質結合セロトニン受容体である。
【０２４４】
１つの非限定的な理論に基づいて、セロトニンは、例えば、腸神経節、ｃＡＭＰ依存性及びＣａ２＋依存性のシグナル伝達経路、ならびに５ＨＴ４依存性経路を介して、保護的な十二指腸の重炭酸塩分泌を増加させることが示されている。例えば、Ｓaｆｓｔｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃａｎｄ  Ｊ  Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．４１：１２７９−８９，２００６、Ｔｕｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ  Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  ２８６：Ｇ４４４−Ｇ４５１，２００４を参照されたい。いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、ある特定の態様では、５ＨＴ４受容体作動薬は、小腸への重炭酸塩分泌を刺激することによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２４５】
いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、いくつかの実施形態では、５ＨＴ４作動薬は、小腸内の水吸収を減少させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２４６】
５ＨＴ４作動薬の非限定的な例としては、セロトニン及びその類似体、ＢＩＭＵ−８、シサプリド、クレオボプリド、ＣＬ０３３４６６、ＭＬ１０３０２、モサプリド、プルカロプリド、レンザプリド、ＲＳ６７５０６、ＲＳ６７３３３、ＳＬ６５０１５５、テガセロッド、ザコプリド、ナロノプリド（ＡＴＩ−７５０５）、ベルセトラグ（ＴＤ−５１０８）が挙げられる。
【０２４７】
いくつかの実施形態では、５ＨＴ４受容体作動薬または部分的作動薬は、シサプリド鏡像異性体（（＋）シサプリド及び（−）シサプリド）、モサプリド、またはレンザプリドのうちの個々あるいは組み合わせを含む、シサプリドなどの置換ベンズアミドである。いくつかの実施形態では、５ＨＴ４受容体作動薬は、プルカロプリドなどのベンゾフラン誘導体、テガセロッドなどのインドール、またはベンズイミダゾロンである。５ＨＴ４受容体作動薬または部分的作動薬の他の非限定的な例としては、ザコプリド（ＣＡＳ  ＲＮ  ９０１８２−９２−６）、ＳＣ−５３１１６（ＣＡＳ  ＲＮ  １４１１９６−９９−８）、及びそのラセミ体であるＳＣ−４９５１８（ＣＡＳ  ＲＮ  １４６３８８−５７−０）、ＢＩＭＵ１（ＣＡＳ  ＲＮ  １２７５９５−４３−１）、ＴＳ−９５１（ＣＡＳ  ＲＮ  １７４４８６−３９−６）、ＭＬ１０３０２（ＣＡＳ  ＲＮ  １４８８６８−５５−７）、メトクロプラミド、５−メトキシトリプタミン、ＲＳ６７５０６、２−［１−（４−ピペロニル）ピペラジニル］ベンゾチアゾール、ＲＳ６６３３１、ＢＩＭＵ８、ＳＢ  ２０５１４９（レンザプリドのｎ−ブチル四級類似体）、及び、Ｂｕｃｈｈｅｉｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３８：２３３１−８，１９９５に記載されるインドールカルバジミドアミド（ｃａｒｂａｚｉｍｉｄａｍｉｄｅ）が挙げられる。シサプリドの代謝物であるノルシサプリド（ＣＡＳ  ＲＮ  １０２６７１−０４−５）；モサプリドクエン酸塩；テガセロッドのマレイン酸塩形態（ＣＡＳ  ＲＮ  １８９１８８−５７−６）；ザコプリド塩酸塩（ＣＡＳ  ＲＮ  ９９６１７−３４−２）；メザコプリド（ＣＡＳ  ＲＮ  ８９６１３−７７−４）；ＳＫ−９５１（（＋−）−４−アミノ−Ｎ−（２−（１−アザビシクロ（３．３．０）オクタン−５−イル）エチル）−５−クロロ−２，３−ジヒドロ−２−メチルベンゾ［ｂ］フラン−７−カルボキサミドヘミフマル酸）；シサプリド類似体であるＡＴＩ−７５０５；濃度依存的様式でｃＡＭＰ形成を刺激する選択的５ＨＴ４受容体作動薬であるＳＤＺ−２１６−４５４（例えば、Ｍａｒｋｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｕｎｙｎ−Ｓｃｈｍｉｅｄｅｂｅｒｇｓ  Ａｒｃｈ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．３５９：４５４−９，１９９９を参照されたい）；ＳＣ−５４７５０、すなわちアミノメチルアザアダマンタン；Ｙ−３６９１２、すなわち４−アミノ−Ｎ−［１−［３−（ベンジルスルホニル）プロピル］ピペリジン−４−イルメチル］−５−クロロ−２−メトキシベンズアミド（Ｓｏｎｄａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ  Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１２：２７３７−４７，２００４を参照されたい）；ＴＫＳ１５９、すなわち４−アミノ−５−クロロ−２−メトキシ−Ｎ−［（２Ｓ，４Ｓ）−１−エチル−２−ヒドロキシメチル−４−ピロリジニル］ベンズアミド；ＲＳ６７３３３、すなわち１−（４−アミノ−５−クロロ−２−メトキシフェニル）−３−（１−ｎ−ブチル−４−ピペリジニル）−１−プロパノン；ＫＤＲ−５１６９、すなわち４−アミノ−５−クロロ−Ｎ−［１−（３−フルオロ−４−メトキシベンジル）ピペリジン−４−イル］−２−（２−ヒドロキシエトキシ）ベンズアミド塩酸塩二水和物（Ｔａｚａｗ���，ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４３４：１６９−７６，２００２を参照されたい）；ＳＬ６５．０１５５、すなわち５−（８−アミノ−７−クロロ−２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾジオキシン−５−イル）−３−［１−（２−フェニルエチル）−４−ピペリジニル］−１，３，４−オキサジアゾール−２（３Ｈ）−オン一塩酸塩；及びＹ−３４９５９、すなわち４−アミノ−５−クロロ−２−メトキシ−Ｎ−［１−［５−（１−メチルインドール−３−イルカルボニルアミノ）ペンチル］ピペリジン−４−イルメチル］ベンズアミドも含まれる。
【０２４８】
５ＨＴ４受容体作動薬及び部分的作動薬の追加的な例メトクロプラミド（ＣＡＳ  ＲＮ  ３６４−６２−５）、５−メトキシトリプタミン（ＣＡＳ  ＲＮ  ６０８−０７−１）、ＲＳ６７５０６（ＣＡＳ  ＲＮ  １６８９８６−６１−６）、２−［１−（４−ピペロニル）ピペラジニル］ベンゾチアゾール（ＣＡＳ  ＲＮ  １５５１０６−７３−３）、ＲＳ６６３３１（Ｂｕｃｃａｆｕｓｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ．２９５：４３８−４４６，２０００を参照されたい）、ＢＩＭＵ８（エンド−Ｎ−８−メチル−８−アザビシクロ［３．２．１］オクト−３−イル）−２，３−デヒドロ−２−オキソ−３−（プロプ−２−イル）−１Ｈ−ベンズイミド−アゾール−１−カルボキサミド）、またはＳＢ  ２０５１４９（レンザプリドのｎ−ブチル四級類似体）。メトクロプラミド二塩酸塩（ＣＡＳ  ＲＮ  ２５７６−８４−３）、メトクロプラミド二塩酸塩（ＣＡＳ  ＲＮ  ５５８１−４５−３）、及びメトクロプラミド塩酸塩（ＣＡＳ  ＲＮ  ７２３２−２１−５または５４１４３−５７−６）などの、メトクロプラミドに関連する化合物も含まれる。例えば、米国出願第２００９／０３２５９４９号、Ｄｅ  Ｍａｅｙｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ  ａｎｄ  Ｍｏｔｉｌｉｔｙ．２０：９９−１１２，２００８、Ｍａｎａｂｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐｅｒｔ  Ｏｐｉｎ  Ｉｎｖｅｓｔｉｇ  Ｄｒｕｇｓ．１９：７６５−７５，２０１０、Ｔａｃｋ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｌｉｍｅｎｔａｒｙ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ＆  Ｔｈｅｒ．３５：７４５−７６７，２０１２を参照されたい。これらの参考文献は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。
【０２４９】
Ｌ．心房性ナトリウム利尿ペプチド受容体作動薬
いくつかの実施形態では、本化合物は、心房性ナトリウム利尿ペプチド（ＮＰ）受容体作動薬である。ＮＰ受容体は、細胞内グアニリルシクラーゼ（ＧＣ）活性を有する単一の膜貫通触媒受容体である。ＮＰ受容体の３つのアイソフォームである、ＮＰＲ１、ＮＰＲ２、及びＮＰＲ３が存在する。これらの受容体は、触媒ドメイン及び制御ドメイン、ならびに分岐リガンド結合ドメインを保存している。
【０２５０】
ナトリウム利尿ペプチド受容体は、脳、脈管構造腎臓、及び胃腸管内に見出され、様々な親和性でα−心房性ナトリウム利尿ペプチド、脳ナトリウム利尿ペプチド、及びＣ型ナトリウム利尿ペプチドに結合する。ＮＰ受容体の主な生理的役割は、体液体積の恒常性である。１つの非限定的な理論によると、外因性ナトリウム利尿ペプチドは、胃腸管内のＧＣ活性を刺激する。例えば、Ｒａｍｂｏｔｔｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．Ｊ．２９：１１７−１２６，１９９７を参照されたい。
【０２５１】
いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、ある特定の態様では、ＮＰ受容体作動薬は、小腸内の重炭酸塩分泌を刺激し、かつ／または酸分泌を阻害することによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２５２】
いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、いくつかの実施形態では、ＮＰ受容体作動薬は、小腸内の水吸収を減少させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２５３】
ＮＰ受容体（複数可）の例示的なペプチド作動薬の構造は図１６に示され、例えば、参照により全体が本明細書に組み込まれる、ｖｏｎ  Ｇｅｌｄｅｒｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３５：８０８−８１６，１９９２に記載されている。
【０２５４】
ある特定の実施形態では、ＮＰ受容体作動薬は、心房性ナトリウム利尿ペプチドアミノ酸配列Ｓｅｒ  Ｌｅｕ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｃｙｓ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ａｓｐ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｐｈｅ  Ａｒｇ  Ｔｙｒ（配列番号７）（１個、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個、１０個、１１個、もしくは１２個の欠失、挿入、及び／または置換を有するその活性変異体を含む）を含むか、それから成るか、またはそれから本質的に成る。欠失変異株の具体例としては、配列Ｃｙｓ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ａｓｐ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ（配列番号８）、及びＳｅｒ  Ｓｅｒ  Ｃｙｓ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ａｓｐ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｐｈｅ  Ａｒｇ（配列番号９）を有するものが挙げられる。本明細書の他の箇所に記載されるように、そのようなペプチドは、自然発生及び非自然発生アミノ酸の任意の組み合わせから成る場合がある。
【０２５５】
Ｍ．炭酸脱水酵素阻害薬
いくつかの実施形態では、本化合物は、炭酸脱水酵素阻害薬である。上皮細胞への重炭酸塩取り込みは、ＣＯ２拡散と、その後の細胞の炭酸脱水酵素（ＣＡ）によるＨＣＯ３−及びＨ＋への転換によって発生する。次に重炭酸塩は、アニオン交換によって頂端膜を横断して分泌される。ＣＡは、ＣＯ２を水和させてＨＣＯ３−及びＨ＋を生成する酵素であり、十二指腸の上皮細胞を含むほとんどの組織内に存在する。例えば、Ｋａｕｎｉｔｚ  ａｎｄ  Ａｋｉｂａ，２００６を参照されたい。この内因的に生成されるＨＣＯ３−は、輸送される重炭酸塩の重要な源である。
【０２５６】
炭酸脱水酵素には少なくとも１５個のアイソフォームが存在する。炭酸脱水酵素ＩＶ（ＣＡＩＶ）は膜結合性アイソフォームであり、一方でＣＡＩＩは、細胞質、遍在性、かつ高度に活性である（代謝回転速度、約１０６ｓ−１）。例えば、Ｓｈａｎｄｒｏ  ａｎｄ  Ｃａｓｅｙ，２００７を参照されたい。炭酸脱水酵素ＩＩは、ＣＦＴＲ、ＳＬＣ２６Ａ６、及びＤＲＡなどの重炭酸塩輸送タンパク質と（直接的及び間接的に）機能的に結合するようである。例えば、Ｓｅｉｄｌｅｒ  ａｎｄ  Ｓｊoｂｌｏｍ，２０１２を参照されたい。一般に、ＤＲＡを除いたすべての重炭酸塩輸送タンパク質のＣＯＯＨ末端尾部は、共通の炭酸脱水酵素ＩＩ結合性モチーフを保有する。例えば、Ｄｕｄｅｊａ  ａｎｄ  Ｒａｍａｓｗａｍｙ，２００６を参照されたい。
【０２５７】
炭酸脱水酵素は、ｐＨ恒常性を含むいくつかの生理的過程に関与する。アセタゾラミド及びベンゾラミドなどの従来の炭酸脱水酵素阻害薬は、ＣＡＩＩ及びＣＡＩＶを含む複数のＣＡアイソフォームを阻害することが示されている。例えば、Ｓｃｏｚｚａｆａｖａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４５：１４６６−１４７６，２００２を参照されたい。１つの非限定的な理論によると、炭酸脱水酵素の阻害は、亜頂端の細胞内ｐＨｉを減少させると予想される。いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、十二指腸の腸細胞内のＣＡの選択的阻害は、それによってＣＥＰＧを減少させ、リン酸塩輸送の減少をもたらし得る。
【０２５８】
いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、いくつかの実施形態では、炭酸脱水酵素阻害薬は、小腸内の水吸収を減少させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２５９】
図１７は、とりわけドルゾラミド及びブリンゾラミドを含む、例示的な炭酸脱水酵素阻害薬の構造を示す。ある特定の態様では、炭酸脱水酵素阻害薬は、胃腸管の頂端側の粘膜細胞内のｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ、カルシウム、または他の二次メッセンジャーを増加させることができる種類の化合物と組み合わせて使用され得る。
【０２６０】
Ｎ．ホスホジエステラーゼ阻害薬
いくつかの実施形態では、本化合物は、ホスホジエステラーゼ阻害薬である。ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）は、アデノシン内の３’環状リン酸塩結合及び／またはグアニン３’，５’環状一リン酸塩（ｃＡＭＰ及び／またはｃＧＭＰ）の加水分解を選択的に触媒する、関連するホスホヒドロリアーゼのファミリーである。これらは、それら二次メッセンジャーの分解の速度を制御することによって、それらの細胞レベル、局在化、及びその作用の持続時間を制御する。
【０２６１】
ＰＤＥ１〜１１と名付けられたＰＤＥの１１個のサブタイプが存在し、ＰＤＥ４、７、及び８は、ｃＡＭＰを選択的に分解し、ＰＤＥ５、６、及び９は、ｃＧＭＰを選択的に分解し、ＰＤＥ１、２、３、１０、及び１１は、両方の環状ヌクレオチドを分解する。ＰＤＥは遍在的に発現され、各サブタイプが特異的な組織分布を有する。図１８は、テオフィリン、シロスタゾール、ビンポセチン、アムリノン、ＥＨＮＡ、トレキンシン、ドロタベリン、ロフルミラスト、及びシルデナフィルを含む、様々なサブタイプの特異性を有する、例示的なホスホジエステラーゼ阻害薬の構造を示す。
【０２６２】
１つの非限定的な理論によると、ホスホジエステラーゼ阻害薬は、単独で、そして腸細胞内のこれらの二次メッセンジャーのレベルを維持することによって細胞質ｃＡＭＰ及びｃＧＭＰを増加させる薬剤と組み合わせて、十二指腸の重炭酸塩分泌（ＤＢＳ）を調節することができる。ＰＤＥ１及びＰＤＥ３阻害薬は、ＤＢＳの調節に特に関係する。例えば、Ｈａｙａｓｈｉ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．７４：１５０７−１５１３，２００７を参照されたい。いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、ある特定の実施形態では、ホスホジエステラーゼ阻害薬は、小腸への重炭酸塩分泌、またはＤＢＳを刺激することによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２６３】
いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、いくつかの実施形態では、ホスホジエステラーゼ阻害薬は、小腸内の水吸収を減少させることによって、胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害または低減する。
【０２６４】
ある特定の実施形態では、ＰＤＥ阻害薬は、環状ＡＭＰ（ｃＡＭＰ）及び／または環状ＧＭＰ（ｃＧＭＰ）の分解を減速させ、これは次にｃＡＭＰ及び／またはｃＧＭＰの細胞内濃度の相対的上昇を引き起こし得る。一般例としては、ＰＤＥ１阻害薬、ＰＤＥ３阻害薬、ＰＤＥ４阻害薬、ＰＤＥ５阻害薬、ＰＤＥ３／４阻害薬、及びＰＤＥ３／４／５阻害薬が挙げられる。単なる非限定的な例に過ぎないが、ＰＤＥ阻害薬は、以下の特許出願及び特許：ドイツ第１４７０３４１号、同第２１０８４３８号、同第２１２３３２８号、同第２３０５３３９号、同第２３０５５７５号、同第２３１５８０１号、同第２４０２９０８号、同第２４１３９３５号、同第２４５１４１７号、同第２４５９０９０号、同第２６４６４６９号、同第２７２７４８１号、同第２８２５０４８号、同第２８３７１６１号、同第２８４５２２０号、同第２８４７６２１号、同第２９３４７４７号、同第３０２１７９２号、同第３０３８１６６号、同第３０４４５６８号、同第３１４２９８２号、同第１１１６６７６号、同第２１６２０９６、欧州第０００７１８号、同第０００８４０８号、同第００１０７５９号、同第００５９９４８号、同第００７５４３６号、同第００９６５１７号、同第０１１２９８７号、同第０１１６９４８号、同第０１５０９３７号、同第０１５８３８０号、同第０１６１６３２号、同第０１６１９１８号、同第０１６７１２１号、同第０１９９１２７号、同第０２２００４４号、同第０２４７７２５号、同第０２５８１９１号、同第０２７２９１０号、同第０２７２９１４号、同第０２９４６４７号、同第０３００７２６号、同第０３３５３８６号、同第０３５７７８８号、同第０３８９２８２号、同第０４０６９５８号、同第０４２６１８０号、同第０４２８３０２号、同第０４３５８１１号、同第０４７０８０５号、同第０４８２２０８号、同第０４９０８２３号、同第０５０６１９４号、同第０５１１８６５号、同第０５２７１１７号、同第０６２６９３９号、同第０６６４２８９号、同第０６７１３８９号、同第０６８５４７４号、同第０６８５４７５号、同第０６８５４７９号、同第０２９３０６３号、同第０４６３７５６号、同第０４８２２０８号、同第０５７９４９６号、同第０６６７３４５号、同第０１６３９６５号、同第０３９３５００号、同第０５１０５６２号、同第０５５３１７４号、日本第９２２３４３８９号、同第９４３２９６５２号、同第９５０１０８７５号、米国特許第４，９６３，５６１号、同第５，１４１，９３１号、及び同第６，３３１，５４３号、国際特許出願公開である国際公開第９１１７９９１号、同第９２００９６８号、同第９２１２９６１号、同第９３０７１４６号、同第９３１５０４４号、同第９３１５０４５号、同第９３１８０２４号、同第９３１９０６８号、同第９３１９７２０号、同第９３１９７４７号、同第９３１９７４９号、同第９３１９７５１号、同第９３２５５１７号、同第９４０２４６５号、同第９４０６４２３号、同第９４１２４６１号、同第９４２０４５５号、同第９４２２８５２号、同第９４２５４３７号、同第９４２７９４７号、同第９５００５１６号、同第９５０１９８０号、同第９５０３７９４号、同第９５０４０４５号、同第９５０４０４６号、同第９５０５３８６号、同第９５０８５３４号、同第９５０９６２３号、同第９５０９６２４号、同第９５０９６２７号、同第９５０９８３６号、同第９５１４６６７号、同第９５１４６８０号、同第９５１４６８１号、同第９５１７３９２号、同第９５１７３９９号、同第９５１９３６２号、同第９５２２５２０号、同第９５２４３８１号、同第９５２７６９２号、同第９５２８９２６号、同第９５３５２８１号、同第９５３５２８２号、同第９６００２１８号、同第９６０１８２５号、同第９６０２５４１号、同第９６１１９１７号、同第９３０７１２４号、同第９５０１３３８号、及び同第９６０３３９９号、ならびに米国出願第２００５／０００４２２２号（式Ｉ〜ＸＩＩＩならびに段落３７〜３９、８５〜０５４５、及び５５７〜５７７に開示されるものを含む）に開示されるものを含み得、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０２６５】
ＰＤＥ５阻害薬の例としては、ＲＸ−ＲＡ−６９、ＳＣＨ−５１８６６、ＫＴ−７３４、ベスナリノン、ザプリナスト、ＳＫＦ−９６２３１、ＥＲ−２１３５５、ＢＦ／ＧＰ−３８５、ＮＭ−７０２、及びシルデナフィル（Ｖｉａｇｒａ（登録商標））が挙げられる。ＰＤＥ４阻害薬の例としては、ＲＯ−２０−１７２４、ＭＥＭ  １４１４（Ｒ１５３３／Ｒ１５００、Ｐｈａｒｍａｃｉａ  Ｒｏｃｈｅ）、デンブフィリン（ＤＥＮＢＵＦＹＬＬＩＮＥ）、ロリプラム、オキサグレラート、ニトラクアゾン（ＮＩＴＲＡＱＵＡＺＯＮＥ）、Ｙ−５９０、ＤＨ−６４７１、ＳＫＦ−９４１２０、モタピゾン、リキサジノン、インドリダン、オルプリノン、アチゾラム（ＡＴＩＺＯＲＡＭ）、ＫＳ−５０６−Ｇ、ジパムフィリン（ＤＩＰＡＭＦＹＬＬＩＮＥ）、ＢＭＹ−４３３５１、アチゾラム、アロフィリン、フィラミナスト、ＰＤＢ−０９３、ＵＣＢ−２９６４６、ＣＤＰ−８４０、ＳＫＦ−１０７８０６、ピクラミラスト、ＲＳ−１７５９７、ＲＳ−２５３４４−０００、ＳＢ−２０７４９９、チベネラスト、ＳＢ−２１０６６７、ＳＢ−２１１５７２、ＳＢ−２１１６００、ＳＢ−２１２０６６、ＳＢ−２１２１７９、ＧＷ−３６００、ＣＤＰ−８４０、モピダモール、アナグレリド、イブジラスト、アムリノン、ピモベンダン、シロスタゾール、クアジノン（ＱＵＡＺＩＮＯＮＥ）、及びＮ−（３，５−ジクロロピリド−４−イル）−３−シクロプロピルメトキシ４−ジフルオロメトキシベンズアミドが挙げられる。ＰＤＥ３阻害薬の例としては、スルマゾール、アンピゾン（ＡＭＰＩＺＯＮＥ）、シロスタミド、カルバゼラン、ピロキシモン、イマゾダン（ＩＭＡＺＯＤＡＮ）、ＣＩ−９３０、シグアゾダン、アジベンダン、サテリノン、ＳＫＦ−９５６５４、ＳＤＺ−ＭＫＳ−４９２、３４９−Ｕ−８５、エモラダン（ＥＭＯＲＡＤＡＮ）、ＥＭＤ−５３９９８、ＥＭＤ−５７０３３、ＮＳＰ−３０６、ＮＳＰ−３０７、レビジノン（ＲＥＶＩＺＩＮＯＮＥ）、ＮＭ−７０２、ＷＩＮ−６２５８２及びＷＩＮ−６３２９１、エノキシモン、ならびにミルリノンが挙げられる。ＰＤＥ３／４阻害薬の例としては、ベナフェントリン、トレキンシン、ＯＲＧ−３００２９、ザルダベリン、Ｌ−６８６３９８、ＳＤＺ−ＩＳＱ−８４４、ＯＲＧ−２０２４１、ＥＭＤ−５４６２２、及びトラフェントリンが挙げられる。ＰＤＥ阻害薬の他の例としては、シロミラスト、ペントキシフィリン、ロフルミラスト、タダラフィル（Ｃｉａｌｉｓ（登録商標））、テオフィリン、バルデナフィル（Ｌｅｖｉｔｒａ（登録商標））、及びザプリナスト（ＰＤＥ５特異性）が挙げられる。
【０２６６】
ある特定の態様では、ホスホジエステラーゼ阻害薬は、胃腸管の頂端側の粘膜細胞内のｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ、カルシウム、または他の二次メッセンジャーを増加させることができる種類の化合物と組み合わせて使用され得る。
【０２６７】
Ｏ．ＤＲＡの作動薬（ＳＬＣ２６Ａ３）
ある特定の実施形態では、本化合物は、腺腫において下方制御される交換輸送体（ＤＲＡ）とも称される、塩素イオン／重炭酸イオン交換輸送体であるＳＬＣ２６Ａ３の作動薬である。腸内のＤＲＡの１つの非限定的な機能は、管腔の塩素イオンを吸収し、重炭酸イオンを分泌することである。ＤＲＡの薬理学的刺激は、本明細書に記載されるように、例えばＵＷＬのｐＨを増加させることによって、ｐＨｉを低減させ、リン酸塩低下作用をもたらすと予想される。
【０２６８】
ＤＲＡ作動薬の例としては、リゾリン酸（ｌｙｓｏｐｈｏｓｐｈａｔｉｃ  ａｃｉｄ）（ＬＰＡ）及び構造的に関連する化合物が挙げられる。この種類の化合物は、ＤＲＡ遺伝子転写を活性化させるだけではなく、ＤＲＡの表面蓄積を増加させもすると考えられる、Ｐｉ３Ｋ／ＡＫＴ経路を通るＬＰＡ受容体（例えばＬＰＡ２）のシグナル伝達の刺激を介してＤＲＡ活性に作用すると考えられる（Ｓｉｎｇｌａ  ｅｔ  ａｌ．Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ．Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２９８：Ｇ１８２−Ｇ１８９，２０１０、Ｓｉｎｇｌａ  ｅｔ  ａｌ．Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ．Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．３０２：Ｇ６１８−Ｇ６２７，２０１２）。ＤＲＡ刺激において潜在的な役割を有するＬＰＡ関連化合物の例は、Ｊｉａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２３：１８６５−１８６９，２０１３、Ｋｉｓｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ  ８２：１１６２−１１７３，２０１２、Ｋｏｚｉａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２２：５２３９−５２４３，２０１２、Ｐａｒｒｉｌｌ，Ｅｘｐｅｒｔ．Ｏｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔ．２１：２８１−２８６，２０１１、Ｇｕｐｔｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２０：７５２５−７５２８，２０１０、Ｌｉｌｉｏｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａｃｔａ  １７６１：１５０６−１５１４，２００６、及びＤｕｒｇａｍ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ  ４８：４９１９−４９３０，２００５に記載されている。
【０２６９】
１つの非限定的な理論によると、タンパク質キナーゼＣ阻害薬は、ＤＲＡ活性を増加させ、同様に上皮横断ｐＨ勾配を発生させることもできる。例えば、インビトロのＰＫＣ作動薬であるホルボール１２−ミリステート１３−アセテート（ＰＭＡ）は、頂端膜Ｃｌ−／ＨＣＯ３−活性を直接阻害することが示された（Ｇｉｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  Ｔｒａｃｔ，Ｃｈａｐｔｅｒ  ６７，２０１２）。いずれか１つの機構に束縛されるものではないが、適切なＰＫＣアイソフォームの阻害は、Ｃｌ−／ＨＣＯ３−活性を逆に増加させ、それによって本開示に記載される機構を介するリン酸塩取り込みを阻害し得る。
【０２７０】
図２１Ａ〜Ｂ（Ｍｏｃｈｌｙ−Ｒｏｓｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ  Ｒｅｖｉｅｗｓ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  １１，９３７−９５７，２０１２）は、他の潜在的な作用機構の中でも、Ｃｌ−／ＨＣＯ３−活性を増加させる可能性のある、サブタイプ選択的ＰＫＣ阻害薬の代表的な例を示す。他の可能性のあるＤＲＡ作動薬としては、全トランス型レチノイン酸（ＡＴＲＡ）及び関連する化合物、より広義には、レチノイン酸受容体（ＲＡＲ）α、β、及びγ、好ましくはＲＡＲ−βを活性化させる化合物が挙げられる。ＲＡＲ−β作動薬は、転写レベルでＤＲＡを誘導すると考えられる（全トランス型レチノイン酸は、ＨＮＦ−１を介してＳＬＣ２６Ａ３（ＤＲＡ）発現を増加させる（Ｐｒｉｙａｍｖａｄａ  ｅｔ  ａｌ．，ＤＤＷ  ２０１３，Ｏｒｌａｎｄｏ）。別の例示的な化合物は、卵母細胞内で発現されるヒトＤＲＡの活性を刺激することが示された、Ｓ２０７８７である（Ｃｈｅｒｎｏｖａ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，５４９，１，３−１９，２００３）。神経ペプチドＹ１及びＹ２受容体の作動薬は、Ｃａｃｏ２単層内のＤＲＡ活性を刺激する。ＮＰＹによる刺激ＤＲＡは、膜輸送に非依存的であり、かつ脂質ラフトへのＤＲＡの局在化に関連することが見出された（Ｓａｋｓｅｎａ  ｅｔ  ａｌ．Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ  Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２９９：Ｇ１３３４−Ｇ１３４３，２０１０）。代表的なＮＰＹ１及びＮＰＹ２作動薬の例としては、ＮＰＹ、［Ｌｅｕ３１，Ｐｒｏ３４］−ＮＰＹ、ＮＰＹ  １３−３６、ペプチドＹＹ（３−３６）、及びＧＲ  ２３１１１８が挙げられる。
【０２７１】
ＩＩ．実質的に全身で生体利用不可能な化合物
Ａ．胃腸管に局在化可能な化合物の物理特性及び性能特性
本明細書に記載される化合物のうちある特定のものは、ヒトまたは動物の対象の胃腸内腔内で実質的に活性または局在性であるように設計される。「胃腸内腔」という用語は、本明細書において「内腔」という用語と互換的に使用され、対象の胃腸上皮細胞の頂端膜で区切られる胃腸管（胃腸（ＧＩ）管、腸とも称され得る）内の空間または空洞を指す。いくつかの実施形態では、本化合物は、（胃腸（ＧＩ）上皮としても知られる）胃腸管の上皮細胞の層を通して吸収されない。「胃腸粘膜」は、胃腸内腔を身体の残部から分離する細胞の層（複数可）を指し、小腸の粘膜などの胃及び腸管の粘膜を含む。本明細書において使用される場合、「胃腸上皮細胞」または「腸上皮細胞」は、例えば、胃の上皮細胞、腸上皮細胞、結腸上皮細胞などを含む、胃腸管の内腔に面する胃腸粘膜の表面上の任意の上皮細胞を指す。
【０２７２】
本明細書において使用される場合、「実質的に全身で生体利用不可能」及び／または「実質的に不透過性」（ならびにそれらの変形）は、概して、本化合物の統計的有意量が、そしていくつかの実施形態では本質的に全体が、胃腸内腔内に残る状況を指す。例えば、本開示の１つ以上の実施形態に従って、好ましくは本化合物の少なくとも約６０％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、またはさらには約９９．５％が胃腸内腔内に残る。そのような場合、胃腸内腔への局在化は、例えば、経細胞輸送及び傍細胞輸送の両方によって、ならびに能動性及び／または受動性輸送によって、胃腸の上皮細胞の層を横断する化合物の正味の移動を低減させることを指す。そのような実施形態における本化合物は、経細胞輸送において、例えば、小腸の上皮細胞の頂端膜を通る、胃腸上皮細胞の層の正味の透過から妨げられる。これらの実施形態における本化合物は、内腔を覆う胃腸上皮細胞間の傍細胞輸送において、「密着結合」を通る正味の透過からも妨げられる。
【０２７３】
この点で、特定の一実施形態では、本化合物は、胃腸管または胃腸内腔によって本質的に全く吸収されないことに留意されたい。本明細書において使用される場合、「実質的に不透過性」または「実質的に全身で生体利用不可能」という用語は、当該技術分野で一般に知られる手段を使用して検出可能な量の本化合物の吸収もしくは透過または全身曝露が検出されない実施形態を含む。
【０２７４】
しかしながらこの点で、代替的な実施形態では、「実質的に不透過性」または「実質的に全身で生体利用不可能」は、胃腸管、より具体的には腸上皮内で、いくらかの限定された吸収（例えば、いくらかの検出可能な量の吸収、例えば少なくとも約０．１％、０．５％、１％以上、及び約３０％、２０％、１０％、５％未満など、吸収の範囲は例えば約１％〜３０％、または５％〜２０％などである）をもたらすか、あるいはそれは発生させる；別の言い方をすれば、「実質的に不透過性」または「実質的に全身で生体利用不可能」は、胃腸管内の細胞の上皮層に対して、投与される化合物の約２０％未満（例えば、約１５％、約１０％、またはさらには約５％、４％、３％、もしくは２％未満、かつ例えば約０．５％または１％超）のいくらかの検出可能な透過性を示すが、肝臓（すなわち、肝性排泄）及び／または腎臓（すなわち、腎性排泄）によって排除される、化合物を指す場合があることに、さらに留意されたい。
【０２７５】
この点で、ある特定の実施形態では、本発明の化合物の実質的な不透過性及び／または実質的な全身の非生体利用能が原因で、本発明の化合物の約５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または９５％超が、例えば、それを必要とする対象への投与後、２４時間、３６時間、４８時間、６０時間、７２時間、８４時間、または９６時間の期間にわたって糞便から回収可能であることに、さらに留意されたい。この点で、回収される化合物は、親化合物、ならびに、例えば加水分解、コンジュゲーション、還元、酸化、Ｎ−アルキル化、グルクロン酸抱合、アセチル化、メチル化、硫酸化、リン酸塩化、または、親化合物に原子を付加するか、もしくはそれから原子を除去する任意の他の修飾によって親化合物から誘導される、その代謝物（代謝物は、任意の酵素の作用、またはｐＨ、温度、圧力、もしくは食糧が消化環境に存在する際の食糧との相互作用を含む任意の生理的環境への曝露によって生成される）の合計を含み得ることが理解される。
【０２７６】
化合物及び代謝物の糞便回収率の測定は、標準的な方法論を使用して実施され得る。例えば、化合物は好適な用量（例えば、１０ｍｇ／ｋｇ）で経口投与され得、次に投薬後の所定の時間（例えば、２４時間、３６時間、４８時間、６０時間、７２時間、９６時間）で糞便が採取される。親化合物及び代謝物は、有機溶媒で抽出され、質量分析法を使用して定量的に分析され得る。糞便中の回収パーセントを決定するために、親化合物と代謝物との物質収支分析（親＝Ｍ、代謝物１［Ｍ＋１６］、及び代謝物２［Ｍ＋３２］を含む）が使用され得る。
【０２７７】
（ｉ）透過性
この点で、種々の実施形態では、本化合物が実質的に全身で生体利用不可能である能力は、化合物の電荷、大きさ、及び／または他の物理化学的パラメータ（例えば、極性表面積、その中の水素結合供与体及び／または受容体の数、自由に回転可能な結合の数など）に基づくことに留意されたい。より具体的には、化合物の吸収の特性は、薬物動態の原理を適用すること、例えば、「ルールオブファイブ」としても知られるリピンスキーの法則を適用することによって選択され得ることに留意されたい。法則ではなくむしろ一式の指針であるが、リピンスキーは、ある特定の閾値を超える（ｉ）分子量、（ｉｉ）いくつかの水素結合供与体、（ｉｉｉ）いくつかの水素結合受容体、及び／または（ｉｖ）水／オクタノール分配係数（Ｍｏｒｉｇｕｃｈｉ対数Ｐ）を有する小分子薬物は、一般的に著しい全身濃度を示さない（すなわち、一般的にいかなる著しい度合にも吸収されない）ことを示す。（例えば、参照により本明細書に組み込まれるＬｉｐｉｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，４６：３−２６，２００１を参照されたい。）したがって、実質的に全身で生体利用不可能な化合物は、リピンスキーの閾値のうちの１つ以上を超える分子構造を有するように設計され得る。（参照により全体が本明細書に組み込まれる、Ｌｉｐｉｎｓｋｉ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  Ｅｓｔｉｍａｔｅ  Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  Ｓｅｔｔｉｎｇｓ，Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｒｅｖｉｅｗｓ，４６：３−２６，２００１、及びＬｉｐｉｎｓｋｉ，Ｄｒｕｇ−ｌｉｋｅ  Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ａｎｄ  ｔｈｅ  Ｃａｕｓｅｓ  ｏｆ  Ｐｏｏｒ  Ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  Ｐｏｏｒ  Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．＆  Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，４４：２３５−２４９，２０００も参照されたい。
【０２７８】
いくつかの実施形態では、例えば、本開示の実質的に不透過性または実質的に全身で生体利用不可能な化合物は、以下の特性：（ｉ）（非塩形態の本化合物において）約５００Ｄａ、約６００Ｄａ、約７００Ｄａ、約８００Ｄａ、約９００Ｄａ、約１０００Ｄａ、約１２００Ｄａ、約１３００Ｄａ、約１４００Ｄａ、約１５００Ｄａ、約１６００Ｄａ、約１８００Ｄａ、約２０００Ｄａ、約２５００Ｄａ、約３０００Ｄａ、約４０００Ｄａ、約５０００Ｄａ、約７５００Ｄａ、約１０，０００Ｄａ超、またはそれ以上のＭＷ；（ｉｉ）ＮＨ及び／もしくはＯＨ及び／もしくは他の可能性のある水素結合供与体の約５、約６、約７、約８、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、約１５、約２０超、またはそれ以上の総数；（ｉｉｉ）Ｏ原子及び／もしくはＮ原子及び／もしくは他の可能性のある水素結合受容体の約５、約６、約７、約８、約９、約１０、約１１、約１２、約１３、約１４、約１５、約２０超、またはそれ以上の総数；（ｉｖ）約１０５超（すなわち、約５、約６、約７、約８、約９、約１０超などの対数Ｐ）、もしくは代替的に約１０未満（すなわち、１未満、またはさらには０の対数Ｐ）のＭｏｒｉｇｕｃｈｉ分配係数；ならびに／または（ｖ）約５、約１０、もしくは約１５超、もしくはそれ以上の回転可能結合の総数、のうちの１つ以上を特徴とするように構成され得る。特定の実施形態では、本化合物は、１４ではない、すなわち約１４未満である対数Ｐ、例えば、約６〜７、６〜８、６〜９、６〜１０、６〜１１、６〜１２、６〜１３、７〜８、７〜９、７〜１０、７〜１１、７〜１２、７〜１３、８〜９、８〜１０、８〜１１、８〜１２、８〜１３、９〜１０、９〜１１、９〜１２、９〜１３、１０〜１１、１０〜１２、１０〜１３、１１〜１２、１１〜１３、または１２〜１３の範囲内の対数Ｐを有する。
【０２７９】
上記のパラメータに加えて、極性原子に属する表面として特徴付けられ得る分子の極性表面積（すなわち、「ＰＳＡ」）は、膜を通る受動性輸送と深く相関することが同様に示されており、したがって薬物の輸送特性の予測を可能にする記述子である。これは、腸管内の吸収及びＣａｃｏ２細胞単層透過の予測に成功裏に適用されている。例示的なＣａｃｏ２細胞単層透過試験の詳細については、例えば、参照により本明細書に組み込まれる米国特許第６，７３７，４２３号に提供されるＣａｃｏ２モデルの説明、特に、例えば本発明の化合物の評価または試験に適用され得るＣａｃｏ２モデルを説明する文章を参照されたい。ＰＳＡはÅ２（平方オングストローム）で表現され、分子の三次元表現から計算される。デスクトップコンピュータ及びＣｈｅｍＤｒａｗなどの市販の化学的グラフィックツールパッケージを使用する、素早い計算方法も利用可能である（例えば、関連性及び一貫性のあるすべての目的のために全内容が参照により本明細書に組み込まれる、Ｅｒｔｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ  ｏｆ  Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ  Ｃｈｅｍ．４３：３７１４−３７１７，２０００を参照されたい）。「位相幾何学的ＰＳＡ」（ｔＰＳＡ）という用語が、この高速計算方法のために作られている。ｔＰＳＡは、一般的な薬物のヒトの吸収データと深く相関する（Ｅｒｔｌ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．．４３：３７１４−３７１７，２０００の表１を参照されたい）。
【表８】
2020063273.tif 000024
2020063273.tif 000025
【０２８０】
したがって、いくつかの実施形態では、本開示の化合物は、本化合物が実質的に不透過性（例えば、細胞不透過性）または（本明細書の他の箇所で定義されるように）実質的に全身で生体利用不可能となるように、約１００Å２、約１１６Å２、約１２０Å２、約１３０Å２、もしくは約１４０Å２超、そしていくつかの事例では約１５０Å２、約１６０Å２、約１７０Å２、約１８０Å２、約１９０Å２、約２００Å２、約２２５Å２、約２５０Å２、約２７０Å２、約３００Å２、約３５０Å２、約４００Å２、約４５０Å２、約５００Å２、約７５０Å２、もしくはさらには約１０００Å２、または約１００〜１２０Å２、１００〜１３０Å２、１００〜１４０Å２、１００〜１５０Å２、１００〜１６０Å２、１００〜１７０Å２、１００〜１７０Å２、１００〜１９０Å２、１００〜２００Å２、１００〜２２５Å２、１００〜２５０Å２、１００〜３００Å２、１００〜４００Å２、１００〜５００Å２、１００〜７５０Å２、１００〜１０００Å２、１１６〜１２０Å２、１１６〜１３０Å２、１１６〜１４０Å２、１１６〜１５０Å２、１１６〜１６０Å２、１１６〜１７０Å２、１１６〜１７０Å２、１１６〜１９０Å２、１１６〜２００Å２、１１６〜２２５Å２、１１６〜２５０Å２、１１６〜３００Å２、１１６〜４００Å２、１１６〜５００Å２、１１６〜７５０Å２、１１６〜１０００Å２、１２０〜１３０Å２、１２０〜１４０Å２、１２０〜１５０Å２、１２０〜１６０Å２、１２０〜１７０Å２、１２０〜１７０Å２、１２０〜１９０Å２、１２０〜２００Å２、１２０〜２２５Å２、１２０〜２５０Å２、１２０〜３００Å２、１２０〜４００Å２、１２０〜５００Å２、１２０〜７５０Å２、１２０〜１０００Å２、１３０〜１４０Å２、１３０〜１５０Å２、１３０〜１６０Å２、１３０〜１７０Å２、１３０〜１７０Å２、１３０〜１９０Å２、１３０〜２００Å２、１３０〜２２５Å２、１３０〜２５０Å２、１３０〜３００Å２、１３０〜４００Å２、１３０〜５００Å２、１３０〜７５０Å２、１３０〜１０００Å２、１４０〜１５０Å２、１４０〜１６０Å２、１４０〜１７０Å２、１４０〜１７０Å２、１４０〜１９０Å２、１４０〜２００Å２、１４０〜２２５Å２、１４０〜２５０Å２、１４０〜３００Å２、１４０〜４００Å２、１４０〜５００Å２、１４０〜７５０Å２、１４０〜１０００Å２，１５０〜１６０Å２、１５０〜１７０Å２、１５０〜１７０Å２、１５０〜１９０Å２、１５０〜２００Å２、１５０〜２２５Å２、もしくは１５０〜２５０Å２、１５０〜３００Å２、１５０〜４００Å２、１５０〜５００Å２、１５０〜７５０Å２、１５０〜１０００Å２、２００〜２５０Å２、２００〜３００Å２、２００〜４００Å２、２００〜５００Å２、２００〜７５０Å２、２００〜１０００Å２、２５０〜２５０Å２、２５０〜３００Å２、２５０〜４００Å２、２０〜５００Å２、２５０〜７５０Å２、もしくは２５０〜１０００Å２の範囲内のｔＰＳＡ値を示すように構成され得る。
【０２８１】
リピンスキーの「法則」またはｔＰＳＡモデルには例外があるため、本開示の化合物の透過性特性は実験的にスクリーニングされ得る。透過係数は、例えばＣａｃｏ−２細胞透過性アッセイによるもの、及び／または人工膜を胃腸上皮細胞のモデルとして使用するものを含む、当業者に既知の方法によって決定され得る。胃腸粘膜の正味の透過特性を模倣するために、例えばレシチン及び／またはドデカンを含浸させた合成膜が、胃腸粘膜のモデルとして用いられ得る。この膜を使用して、本開示の化合物を含有する区画を、透過の速度が監視される区画から分離することができる。同様に、平行人工膜透過性アッセイ（ＰＡＭＰＡ）が行われ得る。そのようなインビトロの測定は、実際のインビボの透過性を合理的に示すことができる（参照により本明細書に組み込まれる、Ｗｏｈｎｓｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．４４：９２３−９３０，２００１、Ｓｃｈｍｉｄｔ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｃｏｒｐ．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ  Ｎｏｔｅ，２００２，ｎ  ＡＮ１７２５ＥＮ００，ａｎｄ  ｎ  ＡＮ１７２８ＥＮ００を参照されたい）。
【０２８２】
したがって、いくつかの実施形態では、本開示の方法で用いられる化合物は、当該技術分野で既知の手段（例えばＷｏｈｎｓｌａｎｄ  ｅｔ  ａｌ．，２００１（上記）に記載される透過性実験など）を使用して測定されたときに、約１００×１０−６ｃｍ／ｓ未満、または約１０×１０−６ｃｍ／ｓ未満、または約１×１０−６ｃｍ／ｓ未満、または約０．１×１０−６ｃｍ／ｓ未満の透過係数Ｐａｐｐを有し得る。
【０２８３】
以前に記載されたように、本開示に従って、化合物は、それらを実質的に全身で生体利用不可能にするように、腸上皮細胞の層を通るそれらの正味の吸収を妨げるように修飾され得る。いくつかの特定の実施形態では、本開示の化合物は、オリゴマー部分、ポリマー部分、疎水性部分、親水性部分、及び／または荷電部分であり得る非吸収性部分に連結、結合、ないしは付着した化合物を含み、これが全体的な化合物を実質的に不透過性または実質的に全身で生体利用不可能にする。いくつかの好ましい実施形態では、本化合物は、得られる分子が実質的に不透過性または実質的に全身で生体利用不可能になるように、マルチマーもしくはポリマー部分または部位に結合する。マルチマーもしくはポリマー部分または部位は、約５００ダルトン（Ｄａ）、約１０００Ｄａ、約２５００Ｄａ、約５０００Ｄａ、約１０，０００Ｄａ超、またはそれ以上の分子量であり得、特に、約１０００ダルトン（Ｄａ）〜約５００，０００Ｄａの範囲内、好ましくは約５０００〜約２００，０００Ｄａの範囲内の分子量を有し得、より好ましくは、本化合物の腸上皮細胞の層を通るいかなる正味の吸収をも本質的に排除するのに十分に高い分子量を有し得る。これらまたは他の特定の実施形態では、本化合物は、腸上皮細胞の層を通るその正味の吸収を実質的に妨げるように修飾される。
【０２８４】
（ｉｉ）Ｃｍａｘ及びＩＣ５０またはＥＣ５０
いくつかの実施形態では、本明細書に詳述される実質的に全身で生体利用不可能な化合物は、単独、または１つ以上の追加の薬学的に活性な化合物もしくは薬剤との組み合わせのいずれかで、それを必要とする対象に（例えば、経腸的に）投与されると、本化合物のリン酸イオン（Ｐｉ）輸送もしくは取り込みの阻害濃度であるＩＣ５０とほぼ同じかまたはそれ未満である、Ｃｍａｘとして定義される血清中で検出される最大濃度を示す。例えばいくつかの実施形態では、Ｃｍａｘは、Ｐｉ輸送もしくは取り込みを阻害するように、ＩＣ５０より約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、もしくは１００％低い。いくつかの実施形態では、Ｃｍａｘは、Ｐｉ輸送もしくは取り込みを阻害するように、ＩＣ５０の約０．０１、０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９倍である。
【０２８５】
ある特定の実施形態では、本明細書に詳述される実質的に全身で生体利用不可能な化合物のうちの１つ以上は、それを必要とする対象に（例えば、経腸的に）投与されると、（Ｐｉ輸送もしくは更新を阻害するように）Ｃｍａｘ及びＩＣ５０が同じ単位で表現される、約０．０１、０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、もしくは１．０、またはそれ未満、あるいは約０．０１〜１．０、０．０１〜０．９、０．０１〜０．８、０．０１〜０．７、０．０１〜０．６、０．０１〜０．５、０．０１〜０．４、０．０１〜０．３、０．０１〜０．２、もしくは０．０１〜０．１の範囲、または約０．１〜１．０、０．１〜０．９、０．１〜０．８、０．１〜０．７、０．１〜０．６、０．１〜０．５、０．１〜０．４、０．１〜０．３、もしくは０．１〜０．２の範囲の、Ｃｍａｘ：ＩＣ５０の比を有し得る。
【０２８６】
いくつかの実施形態では、本明細書に詳述される実質的に全身で生体利用不可能な化合物は、単独、または１つ以上の追加の薬学的に活性な化合物もしくは薬剤との組み合わせのいずれかで、それを必要とする対象に（例えば、経腸的に）投与されると、リン酸塩の糞便中排泄量を増加させるように、本化合物のＥＣ５０とほぼ同じかまたはそれ未満である、Ｃｍａｘとして定義される血清中で検出される最大濃度を示し、糞便中排泄量は、約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、もしくは１００％増加する。例えばいくつかの実施形態では、Ｃｍａｘは、リン酸塩の糞便中排泄量を増加させるように、ＥＣ５０より約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、もしくは１００％低い。いくつかの実施形態では、Ｃｍａｘは、リン酸塩の糞便中排泄量を増加させるように、ＥＣ５０の約０．０１、０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９倍である。
【０２８７】
いくつかの実施形態では、本明細書に詳述される実質的に全身で生体利用不可能な化合物のうちの１つ以上は、単独、または１つ以上の追加の薬学的に活性な化合物もしくは薬剤との組み合わせのいずれかで、それを必要とする対象に（例えば、経腸的に）投与されると、あるいは動物モデルまたは細胞ベースのアッセイで測定されると、リン酸塩の糞便中排泄量を増加させるように、約１０μＭ、９μＭ、８μＭ、７μＭ、７．５μＭ、６μＭ、５μＭ、４μＭ、３μＭ、２．５μＭ、２μＭ、１μＭ、０．５μＭ、０．１μＭ、０．０５μＭ、もしくは０．０１μＭ、またはそれ未満、またはそれ以下のＥＣ５０を有し得、ＩＣ５０は、例えば、約０．０１μＭ〜約１０μＭ、または約０．０１μＭ〜約７．５μＭ、または約０．０１μＭ〜約５μＭ、または約０．０１μＭ〜約２．５μＭ、または約０．０１μＭ〜約１．０、または約０．１μＭ〜約１０μＭ、または約０．１μＭ〜約７．５μＭ、または約０．１μＭ〜約５μＭ、または約０．１μＭ〜約２．５μＭ、または約０．１μＭ〜約１．０、または約μＭ０．５μＭ〜約１０μＭ、または約０．５μＭ〜約７．５μＭ、または約０．５μＭ〜約５μＭ、または約０．５μＭ〜約２．５μＭ、または約０．５μＭ〜約１．０μＭの範囲内である。
【０２８８】
特定の実施形態では、本明細書に詳述される実質的に全身で生体利用不可能な化合物は、単独、または１つ以上の追加の薬学的に活性な化合物もしくは薬剤との組み合わせのいずれかで、それを必要とする対象に（例えば、経腸的に）投与されると、リン酸塩の尿中排泄量を低減させるように、本化合物のＥＣ５０とほぼ同じかまたはそれ未満である、Ｃｍａｘとして定義される血清中で検出される最大濃度を示し、尿中排泄量は、約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、もしくは１００％低減する。例えばいくつかの実施形態では、Ｃｍａｘは、リン酸塩の尿中排泄量を低減させるように、ＥＣ５０より約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、もしくは１００％低い。いくつかの実施形態では、Ｃｍａｘは、リン酸塩の尿中排泄量を低減させるように、ＥＣ５０の約０．０１、０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９倍である。
【０２８９】
いくつかの実施形態では、本明細書に詳述される実質的に全身で生体利用不可能な化合物のうちの１つ以上は、単独、または１つ以上の追加の薬学的に活性な化合物もしくは薬剤との組み合わせのいずれかで、それを必要とする対象に（例えば、経腸的に）投与されると、あるいは動物モデルまたは細胞ベースのアッセイで測定されると、リン酸塩の尿中排泄量を低減させるように、約１０μＭ、９μＭ、８μＭ、７μＭ、７．５μＭ、６μＭ、５μＭ、４μＭ、３μＭ、２．５μＭ、２μＭ、１μＭ、０．５μＭ、０．１μＭ、０．０５μＭ、もしくは０．０１μＭ、またはそれ未満、またはそれ以下のＥＣ５０を有し得、ＩＣ５０は、例えば、約０．０１μＭ〜約１０μＭ、または約０．０１μＭ〜約７．５μＭ、または約０．０１μＭ〜約５μＭ、または約０．０１μＭ〜約２．５μＭ、または約０．０１μＭ〜約１．０、または約０．１μＭ〜約１０μＭ、または約０．１μＭ〜約７．５μＭ、または約０．１μＭ〜約５μＭ、または約０．１μＭ〜約２．５μＭ、または約０．１μＭ〜約１．０、または約μＭ０．５μＭ〜約１０μＭ、または約０．５μＭ〜約７．５μＭ、または約０．５μＭ〜約５μＭ、または約０．５μＭ〜約２．５μＭ、または約０．５μＭ〜約１．０μＭの範囲内である。
【０２９０】
ある特定の実施形態では、本明細書に詳述される実質的に全身で生体利用不可能な化合物のうちの１つ以上は、それを必要とする対象に（例えば、経腸的に）投与されると、（例えば、リン酸塩の糞便中排泄を増加させるように、リン酸塩の尿中排泄量を減少させるように）Ｃｍａｘ及びＥＣ５０が同じ単位で表現される、約０．０１、０．０２、０．０３、０．０４、０．０５、０．０６、０．０７、０．０８、０．０９、０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、もしくは１．０、またはそれ未満、あるいは約０．０１〜１．０、０．０１〜０．９、０．０１〜０．８、０．０１〜０．７、０．０１〜０．６、０．０１〜０．５、０．０１〜０．４、０．０１〜０．３、０．０１〜０．２、もしくは０．０１〜０．１の範囲、または約０．１〜１．０、０．１〜０．９、０．１〜０．８、０．１〜０．７、０．１〜０．６、０．１〜０．５、０．１〜０．４、０．１〜０．３、もしくは０．１〜０．２の範囲の、Ｃｍａｘ：ＥＣ５０の比を有し得る。
【０２９１】
さらに、または代替的に、本明細書に詳述される実質的に全身で生体利用不可能な化合物のうちの１つ以上は、単独、または１つ以上の追加の薬学的に活性な化合物もしくは薬剤との組み合わせのいずれかで、それを必要とする対象に（例えば、経腸的に）投与されると、約１０ｎｇ／ｍｌ、約７．５ｎｇ／ｍｌ、約５ｎｇ／ｍｌ、約２．５ｎｇ／ｍｌ、約１ｎｇ／ｍｌ、もしくは約０．５ｎｇ／ｍｌ、またはそれ未満のＣｍａｘを有し得、Ｃｍａｘは例えば、約１ｎｇ／ｍｌ〜約１０ｎｇ／ｍｌ、または約２．５ｎｇ／ｍｌ〜約７．５ｎｇ／ｍｌの範囲内である。
【０２９２】
ＩＩＩ．薬学的組成物及び治療の方法
投与の目的のために、本発明の化合物は、未加工の化学物質として患者もしくは対象に投与され得るか、または薬学的組成物として製剤化され得る。本発明の薬学的組成物は、概して、本発明の化合物、及び薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤を含む。本化合物は、本明細書に記載されるように、目的の特定の疾患または状態を治療するのに有効な量で組成物中に存在し、好ましくは対象に許容される毒性を有する。化合物（複数可）の活性は、例えば、本明細書及び以下の実施例に記載されるように、当業者によって決定され得る。適切な濃度及び薬用量は、当業者によって容易に決定され得る。
【０２９３】
本発明の化合物または組成物は、胃腸管内のリン酸塩取り込み阻害から利益を得るであろう対象の、本質的にあらゆる疾患または他の状態を治療するための方法で使用され得る。
【０２９４】
例えば、限定ではなく説明として、腎障害は腎臓の１−αヒドロキシラーゼの産生及び活性を低減させ、１，２５−ジヒドロキシビタミンＤの低下を引き起こす。ビタミンＤレベルの低下は胃腸のカルシウム吸収を制限し、血清カルシウムレベルの低下を引き起こす。より低い１，２５−ジヒドロキシビタミンＤとより低い血清カルシウムレベルとの組み合わせは、副甲状腺組織を相乗的に刺激してＰＴＨを産生及び分泌する。ネフロンの損失もＰｉ排泄を損なうが、血清Ｐレベルは、ＰＴＨ及びＦＧＦ−２３の作用によって、そして、尿中ＰＯ４排泄を相当に向上させる、より高い血清Ｐレベルによって活動的に防御される。しかしながら、ＰＴＨ及びＦＧＦ−２３の尿細管作用は、連続的なネフロン損失に直面して血清Ｐレベルを維持することができない。腎不全が腎機能の約４０〜５０％の損失まで進行すると、機能している腎組織の量の減少により、恒常性を維持するのに必要である摂取されたリン酸塩の全量の排泄ができない。結果として、高リン血症が発症する。さらに、血清Ｐレベルの上昇は、腎臓の１−αヒドロキシラーゼ活性を妨害し、活性化したビタミンＤレベルをさらに抑制し、ＰＴＨをさらに刺激し、続発性副甲状腺機能亢進症（ｓＨＰＴＨ）を引き起こす。
【０２９５】
しかしながらリンの不均衡は、必ずしも高リン血症に相当するとは限らない。むしろ、透析を未だ受けていないＣＫＤ患者の大半は正リン血性であるが、異所性石灰化、例えば内膜局在性血管石灰化の形態で過剰なリンが脈管構造内に廃棄されて、彼らのリンの均衡は陽性である。臨床的に、ＣＫＤを有する患者は、腎機能の悪化及びカルシトリオールレベルの低下と著しく関連する上昇したレベルのＦＧＦ−２３を有し、ＦＧＦ−２３の合成は、腎不全につながる体内の過剰なＰの存在によって誘導されると仮定されている。
【０２９６】
さらに、心血管疾患に対する認識されていない作用が、食後リン血症、すなわち、食事摂取に続発する血清Ｐ偏位である。さらにまた、インビトロ及びインビボの内皮機能に対するリン負荷の急性作用が研究により調査されている。ウシ大動脈内皮細胞をリン負荷に曝露すると、反応性酸素種の産生が増加し、既知の血管拡張薬である一酸化窒素が減少した。上記の健常な志願者での急性Ｐ負荷研究において、血流介在性拡張が食後血清Ｐと逆相関したことが見出された（例えば、Ｓｈｕｔｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．２０：１５０４−１２，２００９を参照されたい）。
【０２９７】
したがって、ある特定の実施形態では、本発明の化合物または組成物は、以下の方法：高リン血症、任意に食後高リン血症を治療するための方法；腎疾患（例えば、慢性腎疾患（ＣＫＤ）、末期腎疾患（ＥＳＲＤ））を治療するための方法；血清クレアチニンレベルを低減させるための方法；タンパク尿を治療するための方法；透析などの腎代替療法（ＲＲＴ）までの時間を遅らせるための方法；ＦＧＦ２３レベルを低減させるための方法；活性型ビタミンＤの高リン血症作用を低減させるための方法；続発性副甲状腺機能亢進症などの副甲状腺機能亢進症を軽減させるための方法；血清副甲状腺ホルモン（ＰＴＨまたはｉＰＴＨ）を低減させるための方法；任意に食後血清リンによって誘導される、内皮障害を改善するための方法；血管石灰化を低減させるため、または内膜局在性血管石灰化を軽減させるための方法；尿中リンを低減させるための方法；血清リンレベルを正常化するための方法；高齢患者のリン負荷を低減させるための方法；食事性リン酸塩取り込みを減少させるための方法；食後カルシウム吸収を低減させるための方法；腎肥大を低減させるための方法；及び心肥大を低減させるための方法、のうちの１つ以上から選択される方法で使用され得る。ある特定の実施形態では、リン酸塩低下を必要とする対象は、前述の状態のうちの１つ以上を有する。いくつかの実施形態では、本方法は、そのような対象を、任意に、本明細書に記載される臨床上または診断上のパラメータのうちの１つ以上に基づいて、治療前に選択または特定することを含む。
【０２９８】
高リン血症は、上昇したレベルのリン酸塩が血液中に存在する状態を指す。ヒト成人における平均の血清リン質量は、典型的に、約２．５〜４．５ｍｇ／ｄＬ（約０．８１〜１．４５ミリモル／Ｌ）の範囲である。レベルは多くの場合、成長ホルモン作用が原因で、乳児で約５０％高く、小児で約３０％高い。したがって、ある特定の方法は、高リン血症を有する成人ヒト患者を治療することを含み、該患者は、約または少なくとも約４．５、４．６、４．７、４．８、４．９、５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、もしくは５．５ｍｇ／ｄＬの血清リン質量を有する。いくつかの態様では、該治療は、高リン血症の対象の血清リン濃度またはレベルを、正常な血清リンレベルの約１５０％、１４５％、１４０％、１３５％、１３０％、１２５％、１２０％、１１５％、１１０％、１０５％、または１００％（正常化）（例えば、成人に対して２．５〜４．５ｍｇ／ｄＬまたは０．８１〜１．４５ミリモル／Ｌ）に低減させる。いくつかの態様では、治療レジメンは、リン酸塩レベルが約２．５〜４．５ｍｇ／ｄＬ（約０．８１〜１．４５ミリモル／Ｌ）の範囲内のままであるように、リン酸塩レベルを監視することをもたらし、かつ／またはそれを含む。いくつかの態様では、該治療は、例えば、血清リン濃度もしくはレベルの低減の有無にかかわらず、亜リン酸の正味の排泄を、無処置状態と比べて約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、もしくは１００％、またはそれ以上増加させることによって、外部のリンの均衡を正味の排泄に向かって移行させる。
【０２９９】
小児または青年のヒト患者を治療するための方法も含まれ、該患者は、約または少なくとも約６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４、７．５、７．６、７．７、７．８、７．９、もしくは８．０ｍｇ／ｄＬの血清リン質量を有する。本明細書に記載されるように、これら及び関連する実施形態では、本明細書に記載される化合物または組成物の投与は、対象の血清リン質量を約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、またはそれ以上低減させ得る。
【０３００】
ある特定の実施形態は、腎機能の進行性損失を特徴とする状態である、慢性腎疾患（ＣＫＤ）を治療する方法に関する。ＣＫＤの一般的な原因としては、真性糖尿病、高血圧症、及び糸球体腎炎が挙げられる。したがって、ある特定の方法は、ＣＫＤを有する対象を治療することを含み、該対象は、任意に、前述の状態のうちの１つ以上も有する。
【０３０１】
いくつかの態様では、対象は、腎障害を同様に呈するか否かを問わず、約３か月にわたって６０ｍＬ／分／１．７３ｍ２未満の糸球体濾過速度（ＧＦＲ）を有する場合、ＣＫＤを有するものとして分類される。したがって、ある特定の方法は、約６０、５５、５０、４５、４０、３０、３５、２０、２５、２０、１５、もしくは１０ｍＬ／分／１．７３ｍ２かそこら、またはそれ未満のＧＦＲ（例えば、治療前の初期ＧＦＲ）を有する対象を治療することを含む。ある特定の実施形態では、本明細書に記載される化合物または組成物の投与は、約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、またはそれ以上のＧＦＲの増加をもたらし得る。
【０３０２】
ＣＫＤは、ほとんどの場合、疾患の段階：ステージ１、ステージ２、ステージ、３、ステージ４、及びステージ５に従って特徴付けられる。ステージ１のＣＫＤは、腎障害と、約９０ｍＬ／分／１．７３ｍ２またはそれを超える、正常もしくは比較的高いＧＦＲと、を有する対象を含む。ステージ２のＣＫＤは、腎障害と、約６０〜８９ｍＬ／分／１．７３ｍ２のＧＦＲと、を有する対象を含む。ステージ３のＣＫＤは、腎障害と、約３０〜５９ｍＬ／分／１．７３ｍ２のＧＦＲと、を有する対象を含む。ステージ４のＣＫＤは、腎障害と、約１５〜２９ｍＬ／分／１．７３ｍ２のＧＦＲと、を有する対象を含む。ステージ５のＣＫＤは、確定された腎不全と、約１５ｍＬ／分／１．７３ｍ２未満のＧＦＲと、を有する対象を含む。ステージ５のＣＫＤは、末期腎疾患（ＥＳＲＤ）とも称される。したがって、ある特定の方法では、対象は、ステージ１、２、３、４、または５のＣＫＤ、及びその関連する臨床的特性（例えば、規定のＧＦＲ、腎障害）のうちの１つ以上を有する。いくつかの実施形態では、対象は、本明細書に記載され、かつ当該技術分野で既知のように、ＥＳＲＤ、及びその関連する臨床的特性のうちのいずれか１つ以上を有する。
【０３０３】
ＣＫＤは、腎臓の患部に従って特徴付けられ得る。例えば、ある特定の態様では、ＣＫＤは、両側腎動脈狭窄などの大型血管疾患、ならびに虚血性腎症、溶血性尿毒症症候群、及び血管炎などの小型血管疾患を含む、血管に関連するＣＫＤを含む。ある特定の態様では、ＣＫＤは、巣状分節性糸球体硬化症及びＩｇＡ腎炎などの原発性糸球体疾患、ならびに糖尿病性腎症及びループス腎炎などの続発性糸球体疾患を含む、糸球体に関連するＣＫＤを含む。多発性嚢胞腎疾患、薬物及び毒素誘導性の慢性尿細管間質性腎炎、ならびに逆流性腎症を含む、尿細管間質に関連するＣＫＤも含まれる。したがって、ＣＫＤの治療中のある特定の対象は、１つ以上の前述のＣＫＤに関連する特性を有し得る。
【０３０４】
ある特定の態様は、腎障害または腎障害の１つ以上の症状／臨床徴候を有する対象を治療する方法に関する。腎障害（例えば、ＣＫＤに関連する腎障害）及びその関連症状の例としては、血液検査で特定される異常（例えば、クレアチニンの高い血中または血清レベル、クレアチニンクリアランス）、尿検査で特定される異常（例えば、タンパク尿）、及び／または画像診断で特定される異常を含む、病理学的異常ならびに損傷のマーカーが挙げられる。
【０３０５】
クレアチニンは、筋肉内のクレアチンリン酸塩の分解産物であり、容易に測定され、かつ有用な、腎臓の健康の指標を提供する。健常なヒトの基準は、血中もしくは血清クレアチニンの範囲が女性で約０．５〜１．０ｍｇ／ｄＬ（約４５〜９０μモル／ｌ）、男性で約０．７〜１．２ｍｇ／ｄＬ（約６０〜１１０μモル／Ｌ）の範囲である。したがって、本明細書に記載される方法に従う治療のためのある特定の対象は、約１．０、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０ｍｇ／ｄＬまたはそれを超える、血中もしくは血清クレアチンレベルを（例えば、初めに、治療前に）有し得る。これら及び関連する実施形態では、本明細書に記載される化合物または組成物の投与は、対象の全体的な血中もしくは血清クレアチニンレベルを、約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、もしくは２００％、またはそれ以上低減させ得る。
【０３０６】
クレアチニンクリアランス速度（ＣＣｒまたはＣｒＣｌ）は、クレアチニンが排除される単位時間当たりの血漿の体積を指し、ある期間（例えば、２４時間）にわたって尿に対する血液中のクレアチニンのレベルを比較することによって測定される。クレアチンクリアランスは、多くの場合、ミリリットル／分（ｍｌ／分）として、または体重の関数（ｍｌ／分／ｋｇ）として測定される。行われる試験に応じて、正常値は、男性で約９７〜１３７ｍｌ／分、女性で約８８〜１２８ｍｌ／分の範囲である。クレアチニンクリアランスの低減は、有用な腎障害の徴候を提供する。したがって、本明細書に記載される方法に従う治療のためのある特定の男性対象は、約９７、９６、９５、９４、９３、９２、９１、９０、８９、８８、８７、８６、８５、８４、８３、８２、８１、８０、７９、７８、７７、７６、７５、７４、７３、７２、７１、７０、６９、６８、６７、６６、６５、６４、６３、６２、６１、６０、５９、５８、５７、５６、５５、５４、５３、５２、５１、５０、またはそれ未満、またはそれ以下のＣＣｒを（例えば、初めに、治療前に）有し得る。本明細書に記載される方法に従う治療のためのある特定の女性対象は、約８８、８７、８６、８５、８４、８３、８２、８１、８０、７９、７８、７７、７６、７５、７４、７３、７２、７１、７０、６９、６８、６７、６６、６５、６４、６３、６２、６１、６０、５９、５８、５７、５６、５５、５４、５３、５２、５１、５０、４９、４７、４６、４５、４４、４３、４２、４１、４０、またはそれ未満、またはそれ以下のＣＣｒを（例えば、初めに、治療前に）有し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される化合物または組成物の投与は、対象のＣＣｒを維持するか、あるいは約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、もしくは２００％、またはそれ以上増加させることができる。
【０３０７】
タンパク尿は、尿中の過剰なタンパク質の状態を指す。これは、腎障害を含む種々の病態に関連する。タンパク尿は、多くの場合、約４５ｍｇ／ミリモル超の尿中タンパク質／クレアチニン比として、または特定の試験では約３０ｍｇ／ミリモル超のアルブミン／クレアチン比として特徴付けられる。約４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、もしくは１２０ｍｇ／ミリモル、またはそれを超える尿中タンパク質／クレアチニン比、及び／または約３０、３５、４０、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、もしくは１２０ｍｇ／ミリモル、またはそれを超える尿中アルブミン／クレアチニン比を有する対象を含む、本明細書に提供される方法に従う治療のためのある特定の対象は、（例えば、治療前に）単独またはＣＫＤもしくは他の腎障害との組み合わせでタンパク尿を有する。これら及び関連する実施形態では、本明細書に記載される化合物または組成物の投与は、例えば、尿中タンパク質／クレアチニン比及び／または尿中アルブミン／クレアチニン比を、約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、もしくは２００％、またはそれ以上低減させることによって、タンパク尿を治療し得る。
【０３０８】
ＣＫＤは、種々の臨床症状に関連する。例としては、高血圧（高血圧症）、尿の蓄積、高カリウム血症、貧血、高リン血症、低カルシウム血症、代謝性アシドーシス、及び粥状動脈硬化が挙げられる。したがって、ある特定の方法では、ＣＫＤを有する対象は、前述の臨床症状のうちの１つ以上を有するか、または有する危険性がある場合もある。特定の態様では、ＣＫＤを有する対象は、本明細書に記載されるように、高リン血症を有するか、または有する危険性がある。
【０３０９】
腎代替療法（ＲＲＴ）は、ＣＫＤ及びＥＳＲＤの後期段階に開始されるものを含む、腎不全のための種々の生命維持処置に関する。ＲＲＴの例としては、透析、血液透析、血液濾過、及び腎移植が挙げられる。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従う治療のための対象は、１つ以上の種類のＲＲＴを受ける間近であるか、受けているか、または受けたことがある。いくつかの実施形態では、該対象はＲＲＴを未だ受けておらず、本明細書に記載される化合物の投与は、ＲＲＴの開始までの時間を（例えば、無処置状態と比べて）約または少なくとも約１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、あるいは約または少なくとも約１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、あるいは約または少なくとも約１年、２年、３年、４年、５年、６年、７年、８年、９年、１０年、１１年、１２年、またはそれ以上遅らせる。
【０３１０】
線維芽細胞成長因子２３（ＦＧＦ２３）は、リン及びビタミンＤの代謝を制御する。これはまた、リン酸塩尿症を促進し、カルシトリオールの産生を減少させる。ＦＧＦ２３レベルの上昇は、死亡率、左室肥大（または左室心筋重量係数）、心筋性能、内皮障害、及びＣＫＤの進行に関連する。実際に、ＦＧＦ２３レベルは、おそらく正常な血清リンレベルまたは正常なリンの均衡を維持するための生理的順応として、初期のＣＫＤで進行性に上昇する。ＦＧＦ２３レベルはまた、心臓、血管、及び腎臓の組織損傷に直接寄与し得る。したがって、ある特定の実施形態は、ＣＫＤを有する対象及び透析／血液透析を受けている対象を含む、血液または血清中の上昇したＦＧＦ２３レベルを有する対象の治療に関する（例えば、Ｋｉｒｋｐａｎｔｕｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ｎｅｐｈｒｏｌ  Ｄｉａｌ  Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．２６：１３４６−５４，２０１１を参照されたい）。いくつかの態様では、本明細書に記載される化合物または組成物の投与は、血液または血清中のＦＧＦ２３レベルの対数を、約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、もしくは２００％、またはそれ以上低減させる。
【０３１１】
ビタミンＤは、とりわけ、小腸内のリン酸イオンの吸収を刺激する。したがって、ビタミンＤの過剰なレベルまたは活性は、リン酸塩レベルの上昇及び高リン血症を引き起こし得る。したがって、ある特定の実施形態は、例えば、ビタミンＤの上昇したレベルまたは活性を有する対象の、活性型ビタミンＤの高リン血症作用を低減させるための方法に関する。いくつかの態様では、該対象は、ビタミンＤの過剰摂取に起因するビタミンＤ毒性を有する。
【０３１２】
副甲状腺機能亢進症は、副甲状腺が過剰な副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）を産生する障害である。続発性副甲状腺機能亢進症は、低カルシウム血症に応答するＰＴＨの過剰分泌、及び関連する副甲状腺の肥大を特徴とする。一般的に、腎臓は十分なビタミンＤをその活性型に転換し、十分なリン酸塩を排泄することができないため、ＣＫＤが続発性副甲状腺機能亢進症の最も一般的な原因である。不溶性リン酸カルシウムが体内で形成され、したがって循環からカルシウムが除去され、低カルシウム血症を引き起こす。副甲状腺は次に、血清カルシウムレベルの上昇を試みてＰＴＨの分泌をさらに増加させる。したがって、本明細書に提供される方法に従う治療のためのある特定の対象は、副甲状腺機能亢進症及び／または上昇したＰＴＨレベルを、任意にＣＫＤ、高リン血症、低カルシウム血症、または本明細書に記載される他の状態もしくは症状との組み合わせで、（例えば、初めに、治療前に）呈し得る。いくつかの態様では、本明細書に記載される化合物または組成物の投与は、それを必要とする対象の、続発性副甲状腺機能亢進症を含む副甲状腺機能亢進症を低減させ得る。いくつかの態様では、本明細書に記載される化合物または組成物の投与は、例えば、血清リンレベル及び関連する不溶性リン酸カルシウムの形成を低減させ、利用可能なカルシウムを増加させ、それによって低カルシウム血症に誘導されるＰＴＨの産生を低減させることによって、ＰＴＨレベルを約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、もしくは２００％、またはそれ以上低減させ得る。
【０３１３】
ある特定の実施形態では、本明細書に記載される化合物の投与は、ＣＫＤを有する対象に複数の治療効果をもたらし得る。いくつかの事例では、化合物の投与は、ＦＧＦ２３レベル及び血清副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）レベルを無処置状態と比べて約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、もしくは２００％、またはそれ以上低減させ、血圧を低減させ、タンパク尿を無処置状態と比べて少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、もしくは２００％、またはそれ以上低減させる。
【０３１４】
特定の実施形態では、本明細書に記載される化合物の投与は、ＥＳＲＤ（またはステージ５のＣＫＤ）を有する対象に複数の治療効果をもたらし得る。特定の事例では、化合物の投与は、血清リン濃度またはレベルを無処置状態と比べて約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、もしくは２００％、またはそれ以上低減させる。
【０３１５】
高リン血症は、血管石灰化から独立して、健常な対象及び腎疾患を有する対象の両方で内皮障害を引き起こし得る（例えば、Ｄｉ  Ｍａｒｃｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ．８３：２１３−２２２，２０１３を参照されたい）。食事性リン酸塩の制限またはリン酸塩結合剤による血清リンレベルの管理は、そのような対象の心血管疾患の発症を防止し得る。研究により、食事性リン酸塩の制限が、内皮の一酸化窒素シンターゼ及びＡｋｔの活性化因子リン酸塩化を増加させることによって（例えば、高リン血症を伴うＣＫＤにおける）大動脈内皮障害を改善し得ることも示されている（例えば、Ｖａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｂｉｏｃｈｅｍ  Ｎｕｔｒ．５１：２７−３２，２０１２を参照されたい）。本明細書に提供される方法に従う治療のためのある特定の対象は、任意に、高リン血症、腎疾患、または本明細書に記載される任意の他の状態と組み合わされた、内皮障害を有するか、または有する危険性がある場合がある。単独または食事性リン酸塩の制限との組み合わせで、食後または食事性リン酸塩取り込みを低減させることによって、本明細書に記載される化合物または組成物の投与は、内皮障害を発症する危険性を低減させ得るか、または、食後血清リンによって誘導される内皮障害を含む、既に存在する内皮障害を改善し得る。
【０３１６】
高リン血症は、血管石灰化の主要な誘導因子である（Ｇｉａｃｈｅｌｌｉ，Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．７５：８９０−８９７，２００９を参照されたい）。主にアパタイトの形態でのリン酸カルシウム沈着は、血管石灰化の特徴であり、血管、心筋、及び心臓弁で起こり得る。骨外性組織内のカルシウム−リン酸塩の受動的蓄積と合わせて、無機リン酸塩はまた、脈管構造内の中膜の「骨化」を直接通じて動脈石灰化を誘導し得る。さらに、血管平滑筋細胞は、骨軟骨形成性（ｏｓｔｅｏｃｈｏｎｄｒｏｇｅｎｉｃ）表現型の変化を受け、ナトリウム依存性リン酸塩共輸送体を必要とする機構を通じてそれらの細胞外マトリクスをミネラル化することによって、リン酸塩レベルの上昇に応答する。
【０３１７】
内膜石灰化は通常、動脈硬化病変に見出される。内側性石灰化は一般的に、年齢に関連する動脈硬化症及び糖尿病で観察され、ＥＳＲＤで観察される石灰化の主な形態である。実際に、動脈壁及び軟組織の広範な石灰化は、ＥＳＲＤを有する患者を含む、ＣＫＤを有する患者によく見られる特徴である。弁では、石灰化は、大動脈弁狭窄の明確な特徴であり、小葉及び弁輪の両方で、主に炎症及び機械的負荷の部位で起こる。これらの機械的変化は、動脈の脈波伝播速度及び脈圧の上昇に関連し、動脈の伸展性の障害、左室肥大を支持する後負荷の増加、及び冠動脈灌流不全を引き起こす（Ｇｕｅｒｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ．１０３：９８７−９９２，２００１を参照されたい）。したがって、内膜石灰化及び内側性石灰化の両方が、心血管疾患に関連する罹患率及び死亡率に寄与し得、おそらく、ＣＫＤ及びＥＳＲＤ患者に観察される心血管系の死亡リスクの著しい増加に主に寄与するものである。したがって、血清リンの制御は、カルシウム／リン酸塩産物の形成を低減させ、それによって血管石灰化を低減させ得る。したがって、本明細書に提供される方法に従う治療のための対象のうちある特定のものは、任意に、高リン血症、ＣＫＤ、及びＥＳＲＤのうちのいずれかと組み合わされた、内膜及び／または内側性石灰化を含む、血管石灰化を有するか、または有する危険性がある場合がある。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される化合物または組成物の投与は、それを必要とする対象の血管石灰化の発症の危険性を低減させるか、またはその形成もしくはレベルを低減させる。特定の実施形態では、本明細書に記載される化合物または組成物の投与は、血管石灰化を、例えば、無処置状態と比べて、約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、もしくは２００％、またはそれ以上低減させ得る。
【０３１８】
高齢患者は、リン酸塩の増加に特に影響されやすい場合がある。例えば、食事性及び遺伝的操作研究は、リン酸塩の毒性は老化過程を加速させるというインビボの証拠を提供し、哺乳動物の老化におけるリン酸塩の新規の役割を示唆する（例えば、Ｏｈｎｉｓｈｉ  ａｎｄ  Ｒａｚｚａｑｕｅ，ＦＡＳＥＢ  Ｊ．２４：３５６２−７１，２０１０を参照されたい）。これらの研究は、過剰なリン酸塩が、円背、非協調運動、性腺機能低下症、不妊症、骨格筋消耗、肺気腫、及び骨減少症、ならびに皮膚、腸管、胸腺、及び脾臓の全身性萎縮を含む、早期老化の多くの徴候に関連することを示す。したがって、ある特定の実施形態は、例えば、いずれか１つ以上の早期老化の徴候を低減させるために、本明細書に記載される化合物を高齢患者に投与することを含む、高齢患者のリン負荷を低減させることに関する。いくつかの事例では、高齢患者は、約または少なくとも約６０歳、６１歳、６２歳、６３歳、６４歳、６５歳、６６歳、６７歳、６８歳、６９歳、７０歳、７１歳、７２歳、７３歳、７４歳、７５歳、７６歳、７７歳、７８歳、７９歳、８０歳、８１歳、８２歳、８３歳、８４歳、８５歳、８６歳、８７歳、８８歳、８９歳、９０歳、９１歳、９２歳、９３歳、９４歳、９５歳、９６歳、９７歳、９８歳、９９歳、１００歳、またはそれ以上の年齢である。
【０３１９】
肥大は、構成細胞の拡大に起因する器官または組織の体積の増加を指す。高リン血症は、左室肥大を含む心筋肥大（Ｎｅｖｅｓ  ｅｔ  ａｌ．，Ｋｉｄｎｅｙ  Ｉｎｔ．６６：２２３７−４４，２００４、及びＡｃｈｉｎｇｅｒ  ａｎｄ  Ａｙｕｓ，Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ．１７（１２  Ｓｕｐｐｌ  ３）：Ｓ２５５−６１，２００６を参照されたい）、及び糸球体肥大を含む代償性腎肥大に関連し、後者はＣＫＤでよく観察される。本明細書に提供される方法に従う治療のためのある特定の対象は、心筋肥大、腎肥大、または両方を、単独またはＣＫＤもしくは腎障害との組み合わせで、（例えば、初めに、治療前に）有し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載される化合物の投与は、心筋肥大及び／または腎肥大を無処置状態と比べて約または少なくとも約５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、またはそれ以上低減させ得る。
【０３２０】
純粋形態または適切な薬学的組成物における、本発明の化合物またはそれらの薬学的に許容される塩の投与は、同様の有用性を供する薬剤の投与の許容される様態のうちのいずれかによって実施され得る。本発明の薬学的組成物は、本発明の化合物を薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤と合わせることによって調製され得、固体形態、半固体形態、液体形態、または気体形態の調製物、例えば錠剤、カプセル、粉末、顆粒、軟膏、溶液、坐薬、注射薬、吸入薬、ゲル、小球体、及びエアロゾルなどに製剤化され得る。そのような薬学的組成物の典型的な投与経路としては、経口、局所、経皮、吸入、非経口、舌下、頬側、直腸内、膣内、及び鼻腔内が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書において使用される場合、「非経口」という用語は、皮下注入、静脈内、筋肉内、胸骨下注入または輸注技術を含む。本発明の薬学的組成物は、患者に本組成物が投与されるとその中に含有された活性成分が生体利用可能になるように製剤化される。対象または患者に投与される組成物は、１つ以上の薬用量単位の形態を取り、例えば、錠剤は単一の薬用量単位であり得、エアロゾル形態の本発明の化合物の容器は、複数の薬用量単位を保持し得る。そのような剤形を調製する実際の方法は、当業者に既知であるか、または明らかになるであろう；例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ  Ｓｃｉｅｎｃｅ  ａｎｄ  Ｐｒａｃｔｉｃｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ  Ｃｏｌｌｅｇｅ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｙ  ａｎｄ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，２０００）を参照されたい。投与される組成物は、いずれの事象においても、本発明の教示に従う目的の疾患もしくは状態の治療のために、治療有効量の本発明の化合物またはその薬学的に許容される塩を含有する。
【０３２１】
本発明の薬学的組成物は、固体または液体の形態であり得る。一態様では、担体（複数可）は、本組成物が例えば錠剤または粉末形態になるように、微粒子である。担体（複数可）が液体であり、本組成物が、例えば経口シロップ、注射液、または、例えば吸入性投与で有用であるエアロゾルであってもよい。
【０３２２】
経口投与を目的とする場合、薬学的組成物は、好ましくは固体または液体形態のいずれかであり、半固体、半液体、懸濁液、及びゲル形態は、本明細書において固体または液体のいずれかとして見なされる形態の範囲内に含まれる。
【０３２３】
経口投与のための固体組成物として、薬学的組成物は、粉末、顆粒、圧縮錠剤、丸薬、カプセル、チューインガム、ウェハ、または同様の形態に製剤化され得る。そのような固体組成物は、典型的に、１つ以上の不活性希釈剤または食用担体を含有する。さらに、以下のうちの１つ以上が存在し得る：カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、微結晶セルロース、トラガントガム、またはゼラチンなどの結合剤；デンプン、ラクトース、またはデキストリンなどの賦形剤、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、Ｐｒｉｍｏｇｅｌ、トウモロコシデンプンなどの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムまたはＳｔｅｒｏｔｅｘなどの滑沢剤；コロイド性二酸化ケイ素などの滑剤；スクロースまたはサッカリンなどの甘味剤；ペパーミント、サリチル酸メチル、またはオレンジ香料などの香味剤；及び着色剤。
【０３２４】
薬学的組成物がカプセル、例えば、ゼラチンカプセルの形態である場合、上記の種類の材料に加えて、ポリエチレングリコールまたは油などの液体担体を含有してもよい。
【０３２５】
薬学的組成物は、液体、例えば、エリキシル剤、シロップ、溶液、乳濁液、または懸濁液の形態であってもよい。液体は、２つの例として、経口投与のためのものか、または注入による送達のためのものであってよい。経口投与を目的とする場合、好ましい組成物は、本化合物に加えて、甘味剤、防腐剤、染料／着色料、及び風味向上剤のうちの１つ以上を含有する。注入による投与を目的とする組成物中には、界面活性剤、防腐剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、緩衝液、安定剤、及び等張剤のうちの１つ以上が含まれ得る。
【０３２６】
本発明の液体薬学的組成物は、それらが溶液、懸濁液、または他の同様の形態であるかを問わず、以下のアジュバント：無菌希釈剤、例えば注射用水、食塩水溶液、好ましくは生理食塩水、リンゲル溶液、等張食塩水、固定油、例えば溶媒または懸濁媒体として機能し得る合成モノもしくはジグリセリド、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール、または他の溶媒；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなどの抗菌剤；アスコルビン酸または亜硫酸水素ナトリウムなどの抗酸化剤；エチレンジアミン四酢酸などのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩、またはリン酸塩などの緩衝液、及び、塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの浸透圧の調整のための薬剤、のうちの１つ以上を含み得る。非経口調製物は、ガラスもしくはプラスチック製のアンプル、使い捨てのシリンジ、または複数用量バイアル内に封入され得る。生理食塩水が、好ましいアジュバントである。注入可能な薬学的組成物は、好ましくは無菌である。
【０３２７】
非経口または経口投与のいずれかを目的とする本発明の液体薬学的組成物は、好適な薬用量が得られるような量の本発明の化合物を含有すべきである。
【０３２８】
本発明の薬学的組成物は、局所投与を目的とし得、この場合、担体は、好適には溶液、乳濁液、軟膏、またはゲル基剤を含み得る。基剤は、例えば、以下：鉱油、ラノリン、ポリエチレングリコール、蜜ろう、ミネラルオイル、水及びアルコールなどの希釈剤、ならびに乳化剤及び安定剤のうちの１つ以上を含み得る。増粘剤が、局所投与のための薬学的組成物中に存在し得る。経皮投与を目的とする場合、本組成物は、経皮パッチまたはイオン泳動装置を含み得る。
【０３２９】
本発明の薬学的組成物は、例えば、直腸内で溶け、薬物を放出する坐薬の形態で、直腸内投与を目的とし得る。直腸内投与のための組成物は、好適な非刺激性賦形剤として油性基剤を含有し得る。そのような基剤としては、ラノリン、カカオバター、及びポリエチレングリコールが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３３０】
本発明の薬学的組成物は、固体または液体の薬用量単位の物理形態を変性する種々の材料を含み得る。例えば、本組成物は、活性成分の周りにコーティングシェルを形成する材料を含み得る。コーティングシェルを形成する材料は典型的に不活性であり、例えば、糖、シェラック、及び他の腸溶性コーティング剤から選択され得る。代替的に、活性成分は、ゼラチンカプセルで包まれてもよい。
【０３３１】
固体または液体形態の本発明の薬学的組成物は、本発明の化合物に結合し、それによって本化合物の送達を助ける薬剤を含み得る。この能力で作用し得る好適な薬剤としては、モノクローナルもしくはポリクローナル抗体、タンパク質、またはリポソームが挙げられる。
【０３３２】
本発明の薬学的組成物は、エアロゾルとして投与され得る薬用量単位から成ってもよい。「エアロゾル」という用語は、コロイド性の性質のものから、加圧パッケージから成る系に及ぶ種々の系を意味するように使用される。送達は、液化もしくは圧縮された気体によるものか、または活性成分を分注する好適なポンプ系によるものであり得る。本発明の化合物のエアロゾルは、活性成分（複数可）を送達するために、単相、二相、または三相系で送達され得る。エアロゾルの送達は、一緒にキットを形成する、必要な容器、アクティベーター、弁、副容器（ｓｕｂｃｏｎｔａｉｎｅｒ）などを含む。当業者であれば、過度の実験を伴わずに好ましいエアロゾルを決定することができる。
【０３３３】
本発明の薬学的組成物は、薬学の技術分野で周知の方法論によって調製され得る。例えば、注入による投与を目的とする薬学的組成物は、溶液を形成するように本発明の化合物を無菌蒸留水と合わせることによって調製され得る。均質な溶液または懸濁液の形成を促進するために、界面活性剤が添加されてもよい。界面活性剤は、水性送達系における本化合物の溶解または均質な懸濁を促進するように、本発明の化合物と非共有結合的に相互作用する化合物である。
【０３３４】
本発明の化合物またはそれらの薬学的に許容される塩は、用いられる特定の化合物の活性；化合物の代謝安定性及び作用の長さ；患者の年齢、体重、全体的な健康、性別、及び食事；投与の様態及び時間；排泄の速度；薬物の組み合わせ；特定の障害または状態の重症度；ならびに療法を受けている対象を含む、種々の要因に応じて変動する、治療有効量で投与される。
【０３３５】
ある特定の実施形態では、実質的に不透過性または実質的に全身で生体利用不可能な化合物の典型的な薬用量は、１日当たり約０．２ｍｇ〜１日当たり約２ｇ、または１日当たり約１ｍｇ〜約１ｇ、または約５ｍｇ〜約５００ｍｇ、または１日当たり約１０ｍｇ〜約２５０ｍｇであり得、これは治療を必要とする対象に投与される。
【０３３６】
本明細書に記載される化合物及び組成物の投与の頻度は、１日１回（ＱＤ）〜１日２回（ＢＩＤ）または１日３回（ＴＩＤ）などで変動し得、投与の精確な頻度は、例えば、患者の状態、薬用量などとともに変動する。
【０３３７】
本発明の化合物またはそれらの薬学的に許容される誘導体は、１つ以上の他の治療剤もしくは生物活性剤、食事性サプリメント、またはそれらの任意の組み合わせの投与と同時に、その前に、あるいはその後に投与されてもよい。そのような併用療法は、本発明の化合物及び１つ以上の追加の活性剤を含有する単一の薬学的投与製剤の投与、ならびに、本発明の化合物及び独自の別々の薬学的投与製剤中の各活性剤の投与を含む。例えば、本発明の化合物及び他の活性剤は、錠剤またはカプセルなどの単一の経口投与組成物中で一緒に患者に投与され得るか、あるいは各薬剤は、別々の経口投与製剤中で投与される。別々の投与製剤が使用される場合、本発明の化合物及び１つ以上の追加の活性剤は、本質的に同時に、すなわち同時発生的に、または別々にずらした時間で、すなわち順次に投与され得、併用療法は、これらのレジメンすべてを含むものと理解される。
【０３３８】
例えば、ある特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物（または方法）に含まれる追加の生物活性剤は、例えば、ビタミンＤ２（エルゴカルシフェロール）、ビタミンＤ３（コレカルシフェロール）、活性型ビタミンＤ（カルシトリオール）、及び活性型ビタミンＤ類似体（例えばドキセルカルシフェロール、パリカルシトール）から選択される。
【０３３９】
他の特定の実施形態では、本発明の薬学的組成物（または方法）に含まれる追加の生物活性剤は、セベラマー（例えば、Ｒｅｎｖｅｌａ（登録商標）（炭酸セベラマー）、Ｒｅｎａｇｅｌ（登録商標）（塩酸セベラマー））、炭酸ランタン（例えば、Ｆｏｓｒｅｎｏｌ（登録商標））、炭酸カルシウム（例えば、Ｃａｌｃｉｃｈｅｗ（登録商標）、Ｔｉｔｒａｌａｃ（登録商標））、酢酸カルシウム（例えばＰｈｏｓＬｏ（登録商標）、Ｐｈｏｓｅｘ（登録商標））、酢酸カルシウム／炭酸マグネシウム（例えば、Ｒｅｎｅｐｈｏ（登録商標）、ＯｓｖａＲｅｎ（登録商標））、ＭＣＩ−１９６、クエン酸第二鉄（例えば、Ｚｅｒｅｎｅｘ（商標））、水酸化炭酸鉄マグネシウム（例えば、Ｆｅｒｍａｇａｔｅ（商標））、水酸化アルミニウム（例えば、Ａｌｕｃａｐｓ（登録商標）、Ｂａｓａｌｊｅｌ（登録商標））、ＡＰＳ１５８５、ＳＢＲ−７５９、ＰＡ−２１などのリン酸塩結合剤である。
【０３４０】
いくつかの実施形態では、追加の生物活性剤は、腸管内ナトリウム依存性リン酸塩輸送体の阻害薬（ＮａＰｉ２ｂ阻害薬）である。ＮａＰｉ２ｂ阻害薬の例は、例えば、国際出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０４３２６７号、同第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０４３２６１号、同第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０４３２３２号、同第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０４３２６６号、及び同第ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０４３２６３号、ならびに米国特許第８，１３４，０１５号に見出すことができ、これらはそれぞれ、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【０３４１】
ある特定の実施形態では、追加の生物活性剤は、ナイアシンまたはニコチンアミドである。
【０３４２】
いくつかの実施形態では、対象は、ＣＫＤを有するか、またはその治療中であり、追加の生物活性剤は、ＣＫＤの治療または管理に使用される化合物である。そのような化合物の例としては、高血圧薬、例えば、ＡＣＥ阻害薬、アンチオゲンシンＩＩ受容体遮断薬、β遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、直接的レニン阻害薬、利尿薬、及び血管拡張薬など；ＣＫＤの症状及び合併症を治療するための薬品、例えば、貧血のためのエリスロポエチン療法及び／または鉄補充療法、電解質不均衡のための電解質、利尿薬、ＡＣＥ阻害薬、及びアンチオゲンシンＩＩ受容体遮断薬、終末糖化産物の阻害薬（例えば、アミノグアニジン、ピリドキサミン）、ならびにビタミンＤなど；脂質低下剤、例えば、ＨＭＧ−ＣｏＡ（３−ヒドロキシ−３−メチル−グルタリル−ＣｏＡ）還元酵素阻害薬またはスタチン（例えば、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチン）などが挙げられる。
【０３４３】
本明細書において、表される式の置換基及び／または変数の組み合わせは、そのような寄与が、安定した、または合理的に安定した化合物をもたらす場合にのみ容認可能であることが理解される。
【０３４４】
本明細書に記載される過程において中間化合物の官能基が好適な保護基によって保護される必要があり得ることも、当業者には理解されるであろう。そのような官能基としては、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト、及びカルボン酸が挙げられる。ヒドロキシに好適な保護基としては、トリアルキルシリルまたはジアリールアルキルシリル（例えば、ｔ−ブチルジメチルシリル、ｔ−ブチルジフェニルシリル、またはトリメチルシリル）、テトラヒドロピラニル、ベンジルなどが挙げられる。アミノ、アミジノ、及びグアニジノに好適な保護基としては、ｔ−ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニルなどが挙げられる。メルカプトに好適な保護基としては、−Ｃ（Ｏ）−Ｒ”（Ｒ”はアルキル、アリール、またはアリールアルキルである）、ｐ−メトキシベンジル、トリチルなどが挙げられる。カルボン酸に好適な保護基としては、アルキル、アリール、またはアリールアルキルエステルが挙げられる。保護基は、当業者に既知であり、かつ本明細書に記載される標準的な技術に従って、付加または除去され得る。保護基の使用は、Ｇｒｅｅｎ，Ｔ．Ｗ．ａｎｄ  Ｐ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｚ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ  Ｇｒｏｕｐｓ  ｉｎ  Ｏｒｇａｎｉｃ  Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９９９），３ｒｄ  Ｅｄ．，Ｗｉｌｅｙに詳細に記載されている。当業者であれば理解するように、保護基は、Ｗａｎｇ樹脂、Ｒｉｎｋ樹脂、または２−クロロトリチル−クロリド樹脂などのポリマー樹脂であってもよい。
【０３４５】
そのような本発明の化合物の保護誘導体はそのような薬理学的活性を保有しないが、それらが哺乳動物に投与され、その後体内で代謝されて、薬理学的に活性な本発明の化合物を形成し得ることも、当業者には理解されるであろう。したがって、そのような誘導体は、「プロドラッグ」として説明され得る。本発明の化合物のすべてのプロドラッグが、本発明の範囲内に含まれる。
【０３４６】
さらに、遊離塩基または酸形態で存在する本発明の化合物すべてが、当業者に既知の方法による適切な無機もしくは有機塩基または酸を用いる処理によって、それらの薬学的に許容される塩に転換され得る。本発明の化合物の塩は、標準的な技術によってそれらの遊離塩基または酸形態に転換され得る。
【０３４７】
ＩＶ．創薬
胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害し得る化合物の創薬に関する方法も含まれる。特定の実施形態は、腸細胞培養物などの細胞培養物または哺乳動物の細胞株を含む細胞株を用いる、薬物スクリーニングのインビトロ方法を含む。
【０３４８】
したがって、ある特定の実施形態は、リン酸塩取り込みの阻害薬のスクリーニングの方法であって、細胞を培養することと、培養された細胞を試験化合物と接触させることと、以下：細胞の頂端表面におけるｐＨ、細胞の細胞内ｐＨ、細胞による重炭酸塩分泌、細胞による酸分泌、水吸収、及び／または細胞によるリン酸塩取り込みのうちの１つ以上を測定することと、を含む、方法に関する。
【０３４９】
以下：細胞の頂端表面におけるｐＨが対照と比べて増加すること、細胞の細胞内ｐＨが対照と比べて減少すること、細胞による重炭酸塩分泌が対照と比べて増加すること、細胞による酸分泌が対照と比べて減少すること、水吸収が対照と比べて減少すること、及び／または細胞によるリン酸塩取り込みが対照と比べて減少すること、のうちの１つ以上が起こる場合、試験化合物をリン酸塩取り込みの阻害薬として特定するステップも含まれる。いくつかの態様では、増加または減少は、統計的に有意である。「増加」及び「減少」ならびに「統計的に有意」という用語は、本明細書の他の箇所に記載される。対照は、化合物を含まない（例えば、ビヒクルのみ）か、または上記の活性のうちのいずれも保有しないことが知られる化合物を含んでもよい。対照はまた、所定の参照値を含み得る。
【０３５０】
ある特定の実施形態では、細胞は腸細胞である。腸細胞培養物の非限定的な例としては、腸細胞単層、エンテロイド、及び腸細胞オルガノイドが挙げられる。腸細胞単層は、当該技術分野における日常的な技術に従って調製され得る。腸細胞単層の非限定的な例としては、Ｃａｃｏ−２、ＨＣＴ−８、及びＴ８４細胞株などの細胞株（例えば、Ｗａｔｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ  Ｃｅｌｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２８１：Ｃ３８８−９，２００１、Ｓｈａｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ  Ｐｒｏｇ．２２：１８６−９，２００６を参照されたい）、ならびに新生仔ブタ空腸ＩＰＥＣ−Ｊ２細胞単層（例えば、Ｃｈａｐｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ｐｅｄｉａｔｒ  Ｒｅｓ．７２：５７６−８２，２０１２を参照されたい）が挙げられる。
【０３５１】
「エンテロイド」という用語は、任意に腸管組織の構造整合性（例えば、腸管上皮の三次元構造）及び細胞型を維持し、かつ一次腸管組織の遺伝子型及び表現型プロファイルを複製する、腸管組織の断片（複数可）の腸陰窩から得られる腸細胞培養物を含む。エンテロイド細胞培養物は、当該技術分野で既知の技術に従って調製され得る。（例えば、米国出願第２０１０／００４７８５３号、国際公開第２０１０／０９０５１３号、米国出願第２０１２／０１９６３１２号、及び国際公開第２０１２／１６８９３０号を参照されたい）。
【０３５２】
「オルガノイド」または「腸管内オルガノイド」という用語は、単離された胚性幹細胞、内胚葉細胞、または他の多能性幹細胞などの前駆体細胞から主に作られる腸細胞培養物を含む。オルガノイドは、例えば、前駆体細胞が複雑な三次元の腸管組織（平滑筋様層を含む間充織で包囲される極性化した円柱上皮を含み得る腸管組織を含む）となる段階的分化（例えば、国際公開第２０１１／１４０４４１号を参照されたい）によって調製され得る。いくつかの態様では、上皮は、腸管の主な機能的細胞型のすべてではないにしろほとんどを有する、陰窩様増殖帯及び絨毛様構造へとパターン形成される。いくつかの態様では、前駆体細胞は、ＬＧＲ５及び／またはＬＧＲ６などのマーカーの発現のためにまず選択または富化される。
【０３５３】
全層腸管調製物を含む培養物（例えば、Ｂｉｎｄｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２２５：１２３２−１２３９，１９７３を参照されたい）、ならびに内在性神経筋系の影響を最小限に抑えるための薬理学的処理及び漿膜筋層組織（ｓｅｒｏｍｕｓｃｕｌａｔｕｒｅ）の「ストリッピング」によって調製されるもの（例えば、Ｃｌａｒｋｅ，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎ．Ｌｉｖｅｒ  Ｐｈｙｓｉｏｌ．２９６：Ｇ１１５１−６６，２００９を参照されたい）も含まれる。漿膜筋層組織のストリッピングは、漿膜（臓側腹膜）及び腸管壁の縦走筋／輪状筋層を除去し、下層の粘膜下要素、筋肉の残遺物、及び上皮のみを残す。これらの培養物は、Ｕｓｓｉｎｇチャンバを用いる際に特に有用となり得る。
【０３５４】
ある特定の実施形態は、Ｕｓｓｉｎｇチャンバを用い得る。Ｕｓｓｉｎｇチャンバは、腸管組織などの種々の上皮組織を横断するイオン、栄養素、及び薬物の輸送を測定するための生理系を提供する（例えば、Ｃｌａｒｋｅら、上記参照）。例えば、いくつかの方法は、経上皮の重炭酸塩分泌を測定するためのｐＨスタット技術、及び／または基質の正味の分泌もしくは吸収を測定するための同位体フラックス法を用い得る。特定の実施形態では、Ｕｓｓｉｎｇチャンバは、全層腸管調製物及び漿膜筋層組織のストリッピングによって調製されるものを含む、マウスまたはラットの腸管とともに使用するために適合される（例えば、Ｃｌａｒｋｅら、上記参照）。
【０３５５】
ある特定のスクリーニング方法は、哺乳動物の細胞株を含む、種々の非腸細胞株を用い得る。例示的な哺乳動物の細胞株としては、ヒト胎児由来腎臓細胞株（例えば、ＨＥＫ  ２９３細胞）、ＳＶ４０により形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ−７、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １６５１）；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  １０）；マウスセルトリ細胞（ＴＭ４）；サル腎細胞（ＣＶ１  ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７０）；アフリカミドリザル腎細胞（ＶＥＲＯ−７６、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ−１５８７）；ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ２）；イヌ腎細胞（ＭＤＣＫ、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ３４）；バッファローラット肝細胞（ＢＲＬ  ３Ａ、ＡＴＣＣ  ＣＲＬ  １４４２）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ  ７５）；ヒト肝細胞（Ｈｅｐ  Ｇ２、ＨＢ  ８０６５）；マウス乳房腫瘍（ＭＭＴ  ０６０５６２、ＡＴＣＣ  ＣＣＬ５１）；ＴＲ１細胞；ＭＲＣ  ５細胞；ＦＳ４細胞；及びヒト肝細胞腫株（Ｈｅｐ  Ｇ２）が挙げられる。他の有用な哺乳動物の細胞株としては、ＤＨＦＲ−ＣＨＯ細胞ならびにＮＳＯ及びＳｐ２／０などの骨髄腫細胞株を含む、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞が挙げられる。
【０３５６】
ｐＨ、重炭酸塩分泌、酸分泌、水吸収、及びリン酸塩取り込みの変化を測定するための技術は、当該技術分野で既知である。例えば、細胞内ｐＨの変化は、細胞または組織をｐＨ感応性蛍光染料またはプローブと接触させること、及び染料またはプローブの蛍光を測定することによって測定され得る。ｐＨ感応性染料の例としては、２”，７”−ビス−（２−カルボキシエチル）−５−（及び−６−）カルボキシフルオレセイン４（ＢＣＥＣＦ）、２”，７”−ビス−（２−カルボキシプロピル）−５−（及び−６−）−カルボキシフルオレセイン（ＢＣＰＣＦ  １１）、５−（及び６）−カルボキシナフトフルオレセイン、ならびにその他（例えば、図８Ａ及び８Ｂ、Ｈａｎ  ａｎｄ  Ｂｕｒｇｅｓｓ，Ｃｈｅｍ  Ｒｅｖ．１１０：２７０９−２８，２０１０を参照されたい）が挙げられる。単一のイオンチャネル、個別細胞、及びインタクトな上皮層を通る、重炭酸塩輸送（インビトロ）を測定するための技術は、例えば、Ｈｕｇ  ｅｔ  ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ  Ｍｏｌ  Ｂｉｏｌ．７４１：４８９−５０９，２０１１、Ｆｅｌｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．２５４：Ｃ３８３−９０，１９８８に記載されている。上記のように、ｐＨ、重炭酸塩分泌、及び／または酸分泌の変化はまた、例えば、ｐＨスタットまたは同位体フラックス法を使用して、Ｕｓｓｉｎｇチャンバで測定され得る。リン酸塩取り込みは、例えば、細胞または組織を３３Ｐ標識化リン酸イオンと接触させること、及び標識化リン酸イオンの取り込みを測定することによって測定され得る（実施例、Ｍａｔｓｕｏ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５１７：１１１−１９，２００５を参照されたい）。ｐＨ、重炭酸塩分泌、酸分泌、及びリン酸塩取り込みを測定するための他の技術は、当業者に明らかになるであろう。
【０３５７】
ある特定の態様では、試験化合物は、小腸を含む胃腸管内の重炭酸塩分泌（例えば、ＤＢＳ）を刺激し、酸分泌を阻害し、かつ／または水吸収を減少させることで知られるか、あるいはその疑いがある小分子またはペプチドである。そのような化合物の例としては、Ｐ２Ｙ作動薬、アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬、グアニル酸シクラーゼＣ受容体作動薬（例えば、ペプチド作動薬）、可溶性グアニル酸シクラーゼ作動薬、アデニル酸シクラーゼ受容体作動薬、イミダゾリン−１受容体作動薬、コリン作動薬、プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬、ドパミンＤ１作動薬、メラトニン受容体作動薬、５ＨＴ４作動薬、心房性ナトリウム利尿ペプチド受容体作動薬、炭酸脱水酵素阻害薬、及びホスホジエステラーゼ阻害薬が挙げられるが、これらに限定されない。そのような化合物の非限定的な例は、本明細書の他の箇所に記載される。いくつかの実施形態では、本化合物は、そのような化合物のうちの１つ以上の誘導体または類似体である。そのような誘導体または類似体は、本明細書に記載されるように、例えば、本化合物の全身の非生体利用能を増加させるための修飾を含み得る。
【０３５８】
ハイスループットスクリーニング（ＨＴＳ）のために適合される、上記の方法のうちのいずれか、または当該技術分野で既知の他のスクリーニング方法も含まれる。ＨＴＳは典型的に、候補薬剤のライブラリに対するアッセイ（例えば、本明細書に記載されるように、結合及び／または活性の増加もしくは減少を測定するためのアッセイ）のスクリーニングを実行するために自動化を使用する。
【０３５９】
本明細書に提供されるスクリーニング方法のうちのいずれも、小分子ライブラリ、または組み合わせ化学によって生成されるライブラリを用い得る。一例として、そのようなライブラリは、標的分子と結合もしくは相互作用するか、または所望の生理的応答を誘発する（例えば、腸細胞の細胞内ｐＨを減少させる、リン酸塩取り込みを阻害する）小分子についてスクリーニングするために使用され得る。化学的及び／または生物学的混合物、例えば真菌、細菌、または藻類抽出物などのライブラリは、当該技術分野で既知である。分子ライブラリの合成のための方法の例は、（Ｃａｒｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４ａ、Ｃａｒｅｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４ｂ、Ｃｈｏ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３、ＤｅＷｉｔｔ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３、Ｇａｌｌｏｐ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４、Ｚｕｃｋｅｒｍａｎｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９４）に見出すことができる。
【０３６０】
薬剤のライブラリは、溶液中（Ｈｏｕｇｈｔｅｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２）、またはビーズ上（Ｌａｍ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１）、チップ上（Ｆｏｄｏｒ  ｅｔ  ａｌ．，１９９３）、細菌上、胞子上（Ｌａｄｎｅｒら、米国特許第５，２２３，４０９号、１９９３）、プラスミド上（Ｃｕｌｌ  ｅｔ  ａｌ．，１９９２）、またはファージ上（Ｃｗｉｒｌａ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０、Ｄｅｖｌｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，１９９０、Ｆｅｌｉｃｉ  ｅｔ  ａｌ．，１９９１、Ｌａｄｎｅｒら、米国特許第５，２２３，４０９号、１９９３、Ｓｃｏｔｔ  ａｎｄ  Ｓｍｉｔｈ，１９９０）に提供され得る。本発明の目的に有用なライブラリとしては、（１）化学ライブラリ、（２）天然産物ライブラリ、ならびに（３）ランダムペプチド、オリゴヌクレオチド、及び／または有機分子から成る組み合わせライブラリが挙げられるが、これらに限定されない。
【０３６１】
化学ライブラリは、既知の薬剤、または天然産物スクリーニングによって「ヒット」もしくは「リード」として特定される薬物の構造類似体から成る。天然産物ライブラリは、（１）土壌、植物、もしくは海洋微生物由来のブロスの発酵及び抽出、または（２）植物もしくは海洋生物の抽出によるスクリーニングのための混合物を生成するために使用される、微生物、動物、植物、または海洋生物の一群から誘導される。天然産物ライブラリは、ポリケチド、非リボソーム性ペプチド、及びそれらの（非自然発生）変異体を含む。例えば、Ｃａｎｅ  ｅｔ  ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ  ２８２：６３−６８，１９９８を参照されたい。組み合わせライブラリは、混合物としての多数のペプチドまたは有機化合物から成る場合がある。それらは、従来の自動合成方法、ＰＣＲ、クローニング、または専用の合成方法によって比較的容易に調製される。
【０３６２】
より具体的には、組み合わせ化学ライブラリは、試薬などのいくつかの化学的「構成要素」を合わせることにより、化学合成または生物学的合成のいずれかによって生成される多様な化学剤の一群である。例えば、ポリペプチドライブラリなどの線形組み合わせ化学ライブラリは、所定の化合物の長さ（すなわち、ポリペプチド剤中のアミノ酸の数）に対して可能性のあるすべての方法で、一式の化学的構成要素（アミノ酸）を組み合わせることによって形成される。そのような化学的構成要素の組み合わせの混合によって、数百万の化学剤が合成され得る。
【０３６３】
組み合わせ化学及びそれから生成されるライブラリの概説については、例えば、Ｈｕｃ  ａｎｄ  Ｎｇｕｙｅｎ，（２００１）Ｃｏｍｂ．Ｃｈｅｍ．Ｈｉｇｈ  Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ  Ｓｃｒｅｅｎ．４：５３−７４、Ｌｅｐｒｅ，（２００１）Ｄｒｕｇ  Ｄｉｓｃｏｖ．Ｔｏｄａｙ  ６：１３３−１４０、Ｐｅｎｇ，（２０００）Ｂｉｏｍｅｄ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．１４：４３０−４４１、Ｂｏｈｍ，Ｈ．Ｊ．ａｎｄ  Ｓｔａｈｌ，Ｍ．（２０００）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．４：２８３−２８６、Ｂａｒｎｅｓ  ａｎｄ  Ｂａｌａｓｕｂｒａｍａｎｉａｎ，（２０００）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．４：３４６−３５０、Ｌｅｐｒｅ  ｅｔ  ａｌ．，（２０００）Ｍａｓｓ  Ｓｐｅｃｔｒｏｍ  Ｒｅｖ．１９：１３９−１６１、Ｈａｌｌ，（２０００）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１８：２６２−２６２、Ｌａｚｏ  ａｎｄ  Ｗｉｐｆ，（２０００）Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２９３：７０５−７０９、Ｈｏｕｇｈｔｅｎ，（２０００）Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．４０：２７３−２８２、Ｋｏｂａｙａｓｈｉ（２０００）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．（２０００）４：３３８−３４５、Ｋｏｐｙｌｏｖ  Ｓｐｉｒｉｄｏｎｏｖａ，（２０００）Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（Ｍｏｓｋ）３４：１０９７−１１１３、Ｗｅｂｅｒ，（２０００）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｌ．４：２９５−３０２、Ｄｏｌｌｅ，（２０００）Ｊ．Ｃｏｍｂ．Ｃｈｅｍ．２：３８３−４３３、Ｆｌｏｙｄ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９９）Ｐｒｏｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．３６：９１−１６８、Ｋｕｎｄｕ  ｅｔ  ａｌ．，（１９９９）Ｐｒｏｇ．Ｄｒｕｇ  Ｒｅｓ．５３：８９−１５６、Ｃａｂｉｌｌｙ，（１９９９）Ｍｏｌ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１２：１４３−１４８、Ｌｏｗｅ，（１９９９）Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．Ｒｅｐ．１６：６４１−６５１、Ｄｏｌｌｅ  ａｎｄ  Ｎｅｌｓｏｎ，（１９９９）Ｊ．Ｃｏｍｂ．Ｃｈｅｍ．１：２３５−２８２、Ｃｚａｒｎｉｃｋ  ａｎｄ  Ｋｅｅｎｅ，（１９９８）Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．８：Ｒ７０５−Ｒ７０７、Ｄｏｌｌｅ，（１９９８）Ｍｏｌ．Ｄｉｖｅｒｓ．４：２３３−２５６、Ｍｙｅｒｓ，（１９９７）Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．８：７０１−７０７、及びＰｌｕｃｋｔｈｕｎ  ａｎｄ  Ｃｏｒｔｅｓｅ，（１９９７）Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．３７８：４４３を参照されたい。
【０３６４】
組み合わせライブラリの調製のための装置は市販されている（例えば、Ａｄｖａｎｃｅｄ  Ｃｈｅｍ  Ｔｅｃｈ（Ｌｏｕｉｓｖｉｌｌｅ  Ｋｙ．所在）の３５７  ＭＰＳ、３９０  ＭＰＳ、Ｒａｉｎｉｎ（Ｗｏｂｕｒｎ，Ｍａｓｓ．所在）のＳｙｍｐｈｏｎｙ、Ａｐｐｌｉｅｄ  Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（Ｆｏｓｔｅｒ  Ｃｉｔｙ，Ｃａｌｉｆ．所在）の４３３Ａ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ（Ｂｅｄｆｏｒｄ，Ｍａｓｓ．所在）の９０５０  Ｐｌｕｓを参照されたい）。さらに、多くの組み合わせライブラリ自体が市販されている（例えば、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ，Ｎ．Ｊ．（Ａｓｉｎｅｘ，Ｍｏｓｃｏｗ，Ｒｕ所在）のＣｏｍＧｅｎｅｘ、Ｔｒｉｐｏｓ，Ｉｎｃ．（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，Ｍｏ．所在）、ＣｈｅｍＳｔａｒ，Ｌｔｄ．（Ｍｏｓｃｏｗ，ＲＵ所在）、３Ｄ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ（Ｅｘｔｏｎ，Ｐａ．所在）、Ｍａｒｔｅｋ  Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ（Ｃｏｌｕｍｂｉａ，Ｍｄ．所在）などを参照されたい）。
【０３６５】
定義及び専門用語
「アミノ」は、−ＮＨ２ラジカルを指す。
【０３６６】
「アミノカルボニル」は、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ２ラジカルを指す。
【０３６７】
「カルボキシ」は、−ＣＯ２Ｈラジカルを指す。「カルボン酸塩」は、その塩またはエステルを指す。
【０３６８】
「シアノ」は、−ＣＮラジカルを指す。
【０３６９】
「ヒドロキシ」または「ヒドロキシル」は、−ＯＨラジカルを指す。
【０３７０】
「イミノ」は、＝ＮＨラジカルを指す。
【０３７１】
「ニトロ」は、−ＮＯ２ラジカルを指す。
【０３７２】
「オキソ」または「カルボニル」は、＝Ｏラジカルを指す。
【０３７３】
「チオキソ」は、＝Ｓラジカルを指す。
【０３７４】
「グアニジニル」（または「グアニジン」）は、−ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ２ラジカルを指す。
【０３７５】
「アミジニル」（または「アミジン」）は、−Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ２ラジカルを指す。
【０３７６】
「リン酸塩」は、−ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）２ラジカルを指す。
【０３７７】
「ホスホン酸塩」は、−Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）２ラジカルを指す。
【０３７８】
「ホスフィン酸塩」は、各Ｒａが、独立して、本明細書で定義されるアルキル基である、−ＰＨ（＝Ｏ）ＯＨラジカルを指す。
【０３７９】
「硫酸塩」は、−ＯＳ（＝Ｏ）２ＯＨラジカルを指す。
【０３８０】
「スルホン酸塩」または「ヒドロキシスルホニル」は、−Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨラジカルを指す。
【０３８１】
「スルフィン酸塩」は、−Ｓ（＝Ｏ）ＯＨラジカルを指す。
【０３８２】
「スルホニル」は、−ＳＯ２−基を含む部分を指す。例えば、「アルキスルホニル」または「アルキルスルホン」は、Ｒａが、本明細書で定義されるアルキル基である、−ＳＯ２−Ｒａ基を指す。
【０３８３】
「アルキル」は、飽和もしくは不飽和であり（すなわち、１つ以上の二重結合及び／または三重結合を含有し）、１個〜１２個の炭素原子（Ｃ１~１２アルキル）、好ましくは１個〜８個の炭素原子（Ｃ１−Ｃ８アルキル）、または１個〜６個の炭素原子（Ｃ１~Ｃ６アルキル）を有し、かつ単結合によって分子の残部に結合する、炭素及び水素原子のみから成る直鎖または分岐鎖の炭化水素鎖ラジカル、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、１−メチルエチル（イソ−プロピル）、ｎ−ブチル、ｎ−ペンチル、１，１−ジメチルエチル（ｔ−ブチル）、３−メチルヘキシル、２−メチルヘキシル、エテニル、プロプ−１−エニル、ブト−１−エニル、ペント−１−エニル、ペンタ−１，４−ジエニル、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニルなどを指す。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、アルキル基は、任意に置換され得る。
【０３８４】
「アルキレン」または「アルキレン鎖」は、飽和もしくは不飽和であり（すなわち、１つ以上の二重結合及び／または三重結合を含有し）、かつ１個〜１２個の炭素原子を有し、炭素及び水素のみから成り、分子の残部をラジカル基に結合する、直鎖または分岐鎖の二価炭化水素鎖、例えば、メチレン、エチレン、プロピレン、ｎ−ブチレン、エテニレン、プロペニレン、ｎ−ブテニレン、プロピニレン、ｎ−ブチニレンなどを指す。アルキレン鎖は、単結合または二重結合によって分子の残部に、そして単結合または二重結合によってラジカル基に結合する。アルキレン鎖が分子の残部及びラジカル基に結合する点は、鎖内の１個の炭素または任意の２個の炭素を通じたものであり得る。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、アルキレン鎖は、任意に置換され得る。
【０３８５】
「アルコキシ」は、式−ＯＲａのラジカルを指し、式中、Ｒａは、上に定義された１個〜１２個の炭素原子を含有するアルキルラジカルである。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、アルコキシ基は、任意に置換され得る。
【０３８６】
「アルキルアミノ」は、式−ＮＨＲａまたは−ＮＲａＲａのラジカルを指し、式中、各Ｒａは、独立して、上に定義された１個〜１２個の炭素原子を含有するアルキルラジカルである。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、アルキルアミノ基は、任意に置換され得る。
【０３８７】
「チオアルキル」は、式−ＳＲａのラジカルを指し、式中、Ｒａは、上に定義された１個〜１２個の炭素原子を含有するアルキルラジカルである。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、チオアルキル基は、任意に置換され得る。
【０３８８】
「アリール」は、水素、６個〜１８個の炭素原子、及び少なくとも１つの芳香族環を含む、炭化水素環系ラジカルを指す。本発明の目的のため、アリールラジカルは、単環式、二環式、三環式、または四環式の環系であり得、これは縮合もしくは架橋環系を含み得る。アリールラジカルとしては、アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、フルオランテン、フルオレン、ａｓ−インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、フェナレン、フェナントレン、プレイアデン、ピレン、及びトリフェニレンから誘導されるアリールラジカルが挙げられるが、これらに限定されない。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、「アリール」という用語または「ａｒ−」という接頭辞（「アラルキル」の場合のように）、任意に置換されるアリールラジカルを含むよう意図される。
【０３８９】
「アラルキル」は、式−Ｒｂ−Ｒｃのラジカルを指し、式中、Ｒｂは、上に定義されたアルキレン鎖であり、Ｒｃは、１つ以上の上に定義されたアリールラジカル、例えば、ベンジル、ジフェニルメチルなどである。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、アラルキル基は、任意に置換され得る。
【０３９０】
「シクロアルキル」または「炭素環式環」は、３個〜１５個の炭素原子を有し、好ましくは３個〜１０個の炭素原子を有し、飽和もしくは不飽和であり、かつ単結合によって分子の残部に結合する、炭素及び水素原子のみから成る安定した非芳香族単環式または多環式炭化水素ラジカルを指し、これは縮合もしくは架橋環系を含み得る。単環式ラジカルとしては、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、及びシクロオクチルが挙げられる。多環式ラジカルとしては、例えば、アダマンチル、ノルボルニル、デカリニル（ｄｅｃａｌｉｎｙｌ）、７，７−ジメチル−ビシクロ［２．２．１］ヘプタニルなどが挙げられる。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、シクロアルキル基は、任意に置換され得る。
【０３９１】
「シクロアルキルアルキル」は、式−ＲｂＲｄのラジカルを指し、式中、Ｒｄは、上に定義されたアルキレン鎖であり、Ｒｇは、上に定義されたシクロアルキルラジカルである。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、シクロアルキルアルキル基は、任意に置換され得る。
【０３９２】
「縮合」は、本発明の化合物中の既存の環構造に縮合される、本明細書に記載される任意の環構造を指す。縮合環がヘテロシクリル環またはヘテロアリール環である場合、縮合ヘテロシクリル環または縮合ヘテロアリール環の一部となる既存の環構造上の任意の炭素原子が、窒素原子で置換され得る。
【０３９３】
「ハロ」または「ハロゲン」は、ブロモ、クロロ、フルオロ、またはヨードを指す。
【０３９４】
「ハロアルキル」は、上に定義された１つ以上のハロラジカルで置換される、上に定義されたアルキルラジカル、例えば、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、トリクロロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、１，２−ジフルオロエチル、３−ブロモ−２−フルオロプロピル、１，２−ジブロモエチルなどを指す。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、ハロアルキル基は、任意に置換され得る。
【０３９５】
「ヘテロシクリル」または「複素環式環」は、２個〜１２個の炭素原子、ならびに窒素、酸素、及び硫黄から成る群から選択される１個〜６個のヘテロ原子から成る、安定した３〜１８員の非芳香族環ラジカルを指す。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、ヘテロシクリルラジカルは、単環式、二環式、三環式、または四環式の環系であり得、これは縮合もしくは架橋環系を含み得、ヘテロシクリルラジカル内の窒素、炭素、または硫黄原子は、任意に酸化され得、窒素原子は、任意に四級化され得、ヘテロシクリルラジカルは、部分的または完全に飽和され得る。そのようなヘテロシクリルラジカルの例としては、ジオキソラニル、チエニル［１，３］ジチアニル、デカヒドロイソキノリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、イソチアゾリジニル、イソキサゾリジニル、モルフォリニル、オクタヒドロインドリル、オクタヒドロイソインドリル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、オキサゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、４−ピペリドニル、ピロリジニル、ピラゾリジニル、キヌクリジニル、チアゾリジニル、テトラヒドロフリル、トリチアニル、テトラヒドロピラニル、チオモルフォリニル、チアモルフォリニル、１−オキソ−チオモルフォリニル、及び１，１−ジオキソ−チオモルフォリニルが挙げられるが、これらに限定されない。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、本明細書において具体的に別段の記載がない限り、ヘテロシクリル基は、任意に置換され得る。
【０３９６】
「Ｎ−ヘテロシクリル」は、少なくとも１個の窒素を含有する、上に定義されたヘテロシクリルラジカルを指し、ヘテロシクリルラジカルが分子の残部に結合する点は、ヘテロシクリルラジカル内の窒素原子を通じたものである。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、Ｎ−ヘテロシクリル基は、任意に置換され得る。
【０３９７】
「ヘテロシクリルアルキル」は、式−ＲｂＲｅのラジカルを指し、式中、Ｒｂは、上に定義されたアルキレン鎖であり、Ｒｅは、上に定義されたヘテロシクリルラジカルであり、ヘテロシクリルが窒素含有ヘテロシクリルである場合、ヘテロシクリルは、窒素原子においてアルキルラジカルに結合し得る。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、ヘテロシクリルアルキル基は、任意に置換され得る。
【０３９８】
「ヘテロアリール」は、水素原子と、１個〜１３個の炭素原子と、窒素、酸素、及び硫黄から成る群から選択される１個〜６個のヘテロ原子と、少なくとも１つの芳香族環と、を含む、５〜１４員環系ラジカルを指す。本発明の目的のため、ヘテロアリールラジカルは、単環式、二環式、三環式、または四環式の環系であり得、これは縮合もしくは架橋環系を含み得、ヘテロアリールラジカル内の窒素、炭素、または硫黄原子は、任意に酸化され得、窒素原子は、任意に四級化され得る。例としては、アゼピニル、アクリジニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンズインドリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾフラニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキセピニル、１，４−ベンゾジオキサニル、ベンゾナフトフラニル、ベンゾキサゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾジオキシニル、ベンゾピラニル、ベンゾピラノニル、ベンゾフラニル、ベンゾフラノニル、ベンゾチエニル（ベンゾチオフェニル）、ベンゾトリアゾリル、ベンゾ［４，６］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジニル、カルバゾリル、シノリニル（ｃｉｎｎｏｌｉｎｙｌ）、ジベンゾフラニル、ジベンゾチオフェニル、フラニル、フラノニル、イソチアゾリル、イミダゾリル、インダゾリル、インドリル、インダゾリル、イソインドリル、インドリニル、イソインドリニル、イソキノリル、インドリジニル、イソキサゾリル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、２−オキソアゼピニル、オキサゾリル、オキシラニル、１−オキシドピリジニル、１−オキシドピリミジニル、１−オキシドピラジニル、１−オキシドピリダジニル、１−フェニル−１Ｈ−ピロリル、フェナジニル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、フタラジニル、プテリジニル、プリニル、ピロリル、ピラゾリル、ピリジニル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、キノリニル、キヌクリジニル、イソキノリニル、テトラヒドロキノリニル、チアゾリル、チアジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、トリアジニル、及びチオフェニル（すなわち、チエニル）が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、ヘテロアリール基は、任意に置換され得る。
【０３９９】
「Ｎ−ヘテロアリール」は、少なくとも１個の窒素を含有する、上に定義されたヘテロアリールラジカルを指し、ヘテロアリールラジカルが分子の残部に結合する点は、ヘテロアリールラジカル内の窒素原子を通じたものである。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、Ｎ−ヘテロアリール基は、任意に置換され得る。
【０４００】
「ヘテロアリールアルキル」は、式−ＲｂＲｆのラジカルを指し、式中、Ｒｂは、上に定義されたアルキレン鎖であり、Ｒｆは、上に定義されたヘテロアリールラジカルである。本明細書において具体的に別段の記載がない限り、ヘテロアリールアルキル基は、任意に置換され得る。
【０４０１】
本明細書で使用される「置換される」という用語は、少なくとも１個の水素原子が、例えば、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、及びＩなどのハロゲン原子；ヒドロキシル基、カルボキシル基、リン酸基、硫酸基、アルコキシ基、及びエステル基などの基における酸素原子；チオール基、チオアルキル基、スルフィン酸基、スルホン基、スルホニル基、及びスルホキシド基などの基における硫黄原子；ホスフィン酸基及びホスホン酸基などの基におけるリン原子；グアニジン基、アミン、アミド、アルキルアミン、ジアルキルアミン、アリールアミン、アルキルアリールアミン、ジアリールアミン、Ｎ−オキシド、イミド、及びエナミンなどの基における窒素原子；トリアルキルシリル基、ジアルキルアリールシリル基、アルキルジアリールシリル基、及びトリアリールシリル基などの基におけるケイ素原子；ならびに種々の他の基における他のヘテロ原子などであるがこれらに限定されない、非水素原子への結合で置換される、上記の基（すなわち、アルキル、アルキレン、アルコキシ、アルキルアミノ、チオアルキル、アリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ハロアルキル、ヘテロシクリル、Ｎ−ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロアリール、Ｎ−ヘテロアリール、及び／またはヘテロアリールアルキル）のうちのいずれかを意味する。「置換される」は、１個以上の水素原子が、オキソ、カルボニル、カルボキシル、及びエステル基における酸素、ならびにイミン、オキシミン、ヒドラゾン、及びニトリルなどの基における窒素などの、ヘテロ原子への高次結合（例えば、二重結合または三重結合）で置換される、上記の基のうちのいずれかも意味する。例えば、「置換される」は、１個以上の水素原子が、−ＮＲｇＲｈ、−ＮＲｇＣ（＝Ｏ）Ｒｈ、−ＮＲｇＣ（＝Ｏ）ＮＲｇＲｈ、−ＮＲｇＣ（＝Ｏ）ＯＲｈ、−ＮＲｇＳＯ２Ｒｈ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲｇＲｈ、−ＯＲｇ、−ＳＲｇ、−ＳＯＲｇ、−ＳＯ２Ｒｇ、−ＯＳＯ２Ｒｇ、−ＳＯ２ＯＲｇ、＝ＮＳＯ２Ｒｇ、及び−ＳＯ２ＮＲｇＲｈで置換される、上記の基のうちのいずれかを含む。「置換される」は、１個以上の水素原子が、−Ｃ（＝Ｏ）Ｒｇ、−Ｃ（＝Ｏ）ＯＲｇ、−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲｇＲｈ、−ＣＨ２ＳＯ２Ｒｇ、−ＣＨ２ＳＯ２ＮＲｇＲｈ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）１−１０Ｒｇ、−（ＣＨ２ＣＨ２Ｏ）２−１０Ｒｇ、−（ＯＣＨ２ＣＨ２）１−１０Ｒｇ、及び−（ＯＣＨ２ＣＨ２）２−１０Ｒｇで置換される、上記の基のうちのいずれかも意味する。前述のもののうち、Ｒｇ及びＲｈは、同じであるか、または異なり、かつ独立して、水素、アルキル、アルコキシ、アルキルアミノ、チオアルキル、アリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ハロアルキル、ヘテロシクリル、Ｎ−ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロアリール、Ｎ−ヘテロアリール、及び／またはヘテロアリールアルキルである。「置換される」は、１個以上の水素原子が、アミノ、シアノ、ヒドロキシル、イミノ、ニトロ、オキソ、チオキソ、ハロ、アルキル、アルコキシ、アルキルアミノ、チオアルキル、アリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ハロアルキル、ヘテロシクリル、Ｎ−ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロアリール、Ｎ−ヘテロアリール、及び／またはヘテロアリールアルキル基への結合で置換される、上記の基のうちのいずれかをさらに意味する。上記の非水素基は、概して、本明細書において「置換基」または「非水素置換基」と称される。さらに、前述の置換基のそれぞれは、任意に、上記の置換基のうちの１個以上で置換されてもよい。
【０４０２】
「ａ」及び「ａｎ」という冠詞は、本明細書において、その冠詞の文法上の目的語の１つまたは２つ以上（すなわち、少なくとも１つ）を指すように使用される。例として、「１つの要素（ａｎ  ｅｌｅｍｅｎｔ）」は、１つの要素または２つ以上の要素を意味する。
【０４０３】
「約」は、本明細書に記載される基準の分量、レベル、値、数、頻度、百分率、寸法、大きさ、量、重量、長さ、または他の単位に対して３０、２５、２０、１５、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、もしくは１％と同じ程度変動する、分量、レベル、値、数、頻度、百分率、寸法、大きさ、量、重量、または長さを意味する。
【０４０４】
「活性化する」という用語は、イオン、分子、または他の物質の通過を可能にする、受容体（例えば、細孔受容体）がある方法で構造的に変化する、物理的、化学的、もしくは生化学的な条件、物質、または過程の適用を指す。
【０４０５】
「活性状態」という用語は、非静止状況における受容体の状態または状況を指す。
【０４０６】
「外向き電流」は、細胞内空間から細胞外空間への、イオン、分子、または他の物質の流束の運動を指す。
【０４０７】
「経腸」または「腸内」投与は、経口、舌下、唇下、頬側、及び直腸内投与を含む、胃腸管を介する投与を指し、胃または十二指腸の栄養管を介する投与を含む。
【０４０８】
「不活性状態」という用語は、原初の内因性状態、つまり静止状態における、受容体の状態を指す。
【０４０９】
「調節すること」という用語は、典型的に、対照と比較して統計的に有意または生理的に有意な量で、「増加させること」または「向上させること」、ならびに「減少させること」または「低減させること」を含む。「増加した」または「向上した」量は、典型的には「統計的有意」量であり、対照（例えば、化合物の非存在、またはより少ない量の化合物、異なる化合物または治療法）によって生成される量、あるいはより前の時間点（例えば、化合物を用いる治療の前）の量の、約１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、２．５、２．６、２．７、２．８、２．９、３．０、３．２、３．４、３．６、３．８、４．０、４．２、４．３、４．４、４．６、４．８、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、３０、４０、５０倍以上（例えば、１００、２００、５００、１０００倍）である（すべての整数ならびにその間の１超の小数点及び範囲、例えば、５．５、５．６、５．７、５．８などを含む）増加を含み得る。「減少した」または「低減した」量は、典型的には「統計的有意」量であり、対照（例えば、化合物の非存在、またはより少ない量の化合物、異なる化合物または治療法）によって生成される量もしくは活性、あるいはより前の時間点（例えば、化合物を用いる治療の前）の量の、１％、２％、３％、４％、５％、６％、７％、８％、９％、１０％、１１％、１２％、１３％、１４％、１５％、１６％、１７％、１８％、１９％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、もしくは１００％（すべての整数ならびにその間の小数点及び範囲を含む）の減少を含み得る。
【０４１０】
「プロドラッグ」は、生理条件下で、または加溶媒分解によって本発明の生物活性化合物に転換され得る化合物を示すよう意図される。したがって、「プロドラッグ」という用語は、薬学的に許容される本発明の化合物の代謝前駆体を指す。プロドラッグは、それを必要とする対象に投与されるときに不活性であり得るが、インビボで本発明の活性化合物に転換される。プロドラッグは、典型的に、例えば血液中の加水分解によって、インビボで急速に変換されて本発明の親化合物をもたらす。プロドラッグ化合物は、多くの場合、哺乳類生物における溶解度、組織適合性、または遅延放出の利点を提示する（Ｂｕｎｄｇａｒｄ，Ｈ．，Ｄｅｓｉｇｎ  ｏｆ  Ｐｒｏｄｒｕｇｓ（１９８５），ｐｐ．７−９，２１−２４（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ）を参照されたい）。プロドラッグの詳論は、Ｈｉｇｕｃｈｉ，Ｔ．，ｅｔ  ａｌ．，Ａ．Ｃ．Ｓ．Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ  Ｓｅｒｉｅｓ，Ｖｏｌ．１４、及びＢｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ  Ｃａｒｒｉｅｒｓ  ｉｎ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｓｉｇｎ，Ｅｄ．Ｅｄｗａｒｄ  Ｂ．Ｒｏｃｈｅ，Ａｍｅｒｉｃａｎ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｅｒｇａｍｏｎ  Ｐｒｅｓｓ，１９８７に提供されている。
【０４１１】
「プロドラッグ」という用語はまた、哺乳類の対象にそのようなプロドラッグが投与されると本発明の活性化合物をインビボで放出する、あらゆる共有結合担体を含むよう意図される。本発明の化合物のプロドラッグは、本発明の化合物中に存在する官能基を、本発明の親化合物に対して、日常的操作またはインビボのいずれかで修飾が切断されるような方法で修飾することによって調製され得る。プロドラッグは、ヒドロキシ、アミノ、またはメルカプト基が、哺乳類の対象に本発明の化合物のプロドラッグが投与されると切断されてそれぞれ遊離ヒドロキシ基、遊離アミノ基、または遊離メルカプト基を形成する、任意の基に結合している、本発明の化合物を含む。プロドラッグの例としては、アルコールの酢酸塩、ギ酸塩、及び安息香酸塩誘導体、または本発明の化合物中のアミン官能基のアミド誘導体などが挙げられるが、これらに限定されない。
【０４１２】
本明細書に開示される発明は、開示される化合物のインビボの代謝産物も包含するよう意図される。そのような産物は、例えば、主に酵素過程に起因する、投与される化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、エステル化などから生じ得る。したがって、本発明は、本発明の化合物を、その代謝産物をもたらすのに十分な期間にわたって哺乳動物に投与することを含む過程によって生成される、化合物を含む。そのような産物は、典型的に、ラット、マウス、モルモット、サル、またはヒトなどの動物に、放射標識化された本発明の化合物を検出可能な用量で投与し、代謝が起こるのに十分な時間を与え、その転換産物を尿、血液、または他の生物学的試料から単離することによって、特定される。
【０４１３】
「哺乳動物」は、ヒト、ならびに、実験動物及び家庭用ペット（例えば、ネコ、イヌ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、ウサギ）などの飼育動物ならびに野生動物などの非飼育動物の両方を含む。
【０４１４】
「任意の」または「任意に」は、後に記載される事象または状況が発生する場合もしない場合もあること、ならびに、その記載が、該事象または状況が発生する事例と、それが発生しない事例とを含むことを意味する。例えば、「任意に置換されるアリール」は、アリールラジカルが置換される場合もされない場合もあること、ならびに、その記載が、置換アリールラジカルと、置換を有しないアリールラジカルと含むことを意味する。
【０４１５】
「薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤」としては、ヒトまたは飼育動物での使用に許容されるものとしてＵｎｉｔｅｄ  Ｓｔａｔｅｓ  Ｆｏｏｄ  ａｎｄ  Ｄｒｕｇ  Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎによって認可されている、任意のアジュバント、担体、賦形剤、滑剤、甘味剤、希釈剤、防腐剤、染料／着色料、風味向上剤、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、安定剤、等張剤、溶媒、または乳化剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０４１６】
「薬学的に許容される塩」は、酸付加塩と塩基付加塩との両方を含む。
【０４１７】
「薬学的に許容される酸付加塩」は、生物学的または別様に望ましくないものではなく、かつ、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などを含むがこれらに限定されない無機酸、ならびに、酢酸、２，２−ジクロロ酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、４−アセトアミド安息香酸、ショウノウ酸、ショウノウ−１０−スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、炭酸、桂皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデシル硫酸、エタン−１，２−ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２−ヒドロキシエタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、２−オキソ−グルタル酸、グリセロリン酸、グリコール酸、馬尿酸、イソ酪酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、ナフタレン−１，５−ジスルホン酸、ナフタレン−２−スルホン酸、１−ヒドロキシ−２−ナフトエ酸、ニコチン酸、オレイン酸、オロト酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモン酸、プロピオン酸、ピログルタミン酸、ピルビン酸、サリチル酸、４−アミノサリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、酒石酸、チオシアン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、ウンデシレン酸などを含むがこれらに限定されない有機酸を用いて形成される、生物学的有効性及び遊離塩基の特性を保持する塩を指す。
【０４１８】
「薬学的に許容される塩基付加塩」は、生物学的または別様に望ましくないものではない、生物学的有効性及び遊離酸の特性を保持する塩を指す。これらの塩は、遊離酸への無機塩基または有機塩基の付加から調製される。無機塩基から誘導される塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩、アンモニウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、鉄塩、亜鉛塩、銅塩、マンガン塩、アルミニウム塩などが挙げられるが、これらに限定されない。好ましい無機塩は、アンモニウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、及びマグネシウム塩である。有機塩基から誘導される塩としては、一級、二級、及び三級アミン、自然発生置換アミンを含む置換アミン、環状アミン、ならびに塩基性イオン交換樹脂、例えば、アンモニア、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、ジエタノールアミン、エタノールアミン、デアノール、２−ジメチルアミノエタノール、２−ジエチルアミノエタノール、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、カフェイン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、ベネタミン、ベンザチン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ−エチルピペリジン、ポリアミン樹脂などの塩、が挙げられるが、これらに限定されない。特に好ましい有機塩基は、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、コリン、及びカフェインである。
【０４１９】
多くの場合、結晶化は、本発明の化合物の溶媒和化合物を生成する。本明細書において使用される場合、「溶媒和化合物」という用語は、溶媒の１個以上の分子とともに本発明の化合物の１個以上の分子を含む凝集物を指す。溶媒は水であり得、この場合、溶媒化合物は水和物であり得る。代替的に、溶媒は有機溶媒であり得る。したがって、本発明の化合物は、一水和物、二水和物、半水和物、セスキ水和物、三水和物、四水和物など、ならびに対応する溶媒和形態を含む、水和物として存在し得る。本発明の化合物は真の溶媒和化合物であり得るが、他の事例では、本発明の化合物は、単に外来性の水を保持するか、または水と何らかの外来性の溶媒との混合物であってもよい。
【０４２０】
「薬学的組成物」は、本発明の化合物と、哺乳動物、例えばヒトへの生物活性化合物の送達に当該技術分野において一般的に許容される媒体との製剤を指す。そのような媒体は、そのための薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤すべてを含む。
【０４２１】
本発明の化合物またはそれらの薬学的に許容される塩は、１つ以上の不斉中心を含有し得、したがって、鏡像異性体、ジアステレオマー、及び、絶対立体化学の観点から（Ｒ）もしくは（Ｓ）として、またはアミノ酸の場合は（Ｄ）もしくは（Ｌ）として定義され得る、他の立体異性体型を生じさせ得る。本発明は、そのような可能性のある異性体すべて、ならびにそれらのラセミ形態及び光学的に純粋な形態を含むよう意図される。光学的に活性な（＋）及び（−）、（Ｒ）及び（Ｓ）、または（Ｄ）及び（Ｌ）の異性体は、キラルシントンもしくはキラル試薬を使用して調製されるか、または従来の技術、例えばクロマトグラフィ及び分別結晶化を使用して分離され得る。個別の鏡像異性体の調製／単離のための従来の技術は、好適な光学的に純粋な前駆体からのキラル合成、または、例えばキラル高圧液体クロマトグラフィ（ＨＰＬＣ）を使用する、ラセミ体（または塩もしくは誘導体のラセミ体）の分割を含む。本明細書に記載される化合物がオレフィン二重結合または他の幾何学的不斉中心を含有する場合、別段の記載がない限り、その化合物は、Ｅ及びＺ両方の幾何異性体を含むことが意図される。同様に、すべての互変異性型も含まれるよう意図される。
【０４２２】
「安定した化合物」及び「安定した構造」は、反応混合物から有用な純度になるまでの単離、及び効力のある治療薬への製剤化に耐えるように、十分に強固である化合物を示すよう意図される。
【０４２３】
「統計的に有意」とは、結果が偶然生じた可能性が低いことを意味する。統計的有意性は、当該技術分野で既知の方法によって決定され得る。一般的に使用される有意性の尺度としては、帰無仮説が真であった場合に観察される事象が起こるであろう頻度または確率である、ｐ値が挙げられる。得られるｐ値が有意レベルより小さい場合、帰無仮説は棄却される。単純な事例では、有意レベルは、０．０５以下のｐ値で定義される。
【０４２４】
「実質的に」または「本質的に」は、「ほぼ全く」または「完全に」、例えば、何らかの所定の分量の８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％以上を含む。
【０４２５】
「続発性」という用語は、別の病態、状況、もしくは治療とともに起こり得るか、別の病態、状況、もしくは治療から続き得るか、または別の病態、状況、もしくは治療から生じ得る、状況もしくは状態を指す。この用語は、病態、状況、もしくは治療が、患者の最終的な病的状態、症状、もしくは状況における症状または応答を発生させるにあたり、小さな役割しか果たさない状況も指す。
【０４２６】
本開示の化合物を用いた治療を必要とする「対象」または「患者」（これらの用語は本明細書において互換的に使用される）としては、例えば、「リン酸塩低下」を必要とする対象が挙げられ、これは、「リン酸塩管理」、例えば、リン酸塩またはリンレベルの予防的管理を必要とする対象を含み得る。本明細書に記載される疾患及び／もしくは状態、特に、有益な治療的かつ／もしくは予防的な結果を達成するように、他の活性剤の有無にかかわらず本発明の化合物で治療され得る疾患及び／もしくは状態を有するか、または有する危険性がある、哺乳動物が含まれる。有益な成果としては、症状の重症度の減少、症状の発生の遅延、正リン血の維持、高リン血症を発症する危険性の低減、本明細書に記載される１つ以上の徴候の調節（例えば、高リン血症を有するかまたはその危険性がある患者の血清もしくは血液中のリンレベルの低減、高リン血症を有するかまたはその危険性がある患者のリン酸イオンの糞便中排泄の増加）、寿命の延長、及び／または、疾患もしくは状態の急速あるいはより完全な回復が挙げられる。
【０４２７】
「立体異性体」は、同じ結合によって結合される同じ原子から成るが、互換的でない異なる三次元構造を有する、化合物を指す。本発明は、種々の立体異性体及びそれらの混合物を企図し、分子が重ねることができない互いの鏡像である２つの立体異性体を指す「鏡像異性体」を含む。
【０４２８】
「互変異性体」は、ある分子の１個の原子から同じ分子の別の原子へのプロトン移動を指す。本発明は、いかなる該化合物の互変異性体をも含む。
【０４２９】
「治療有効量」または「有効量」は、哺乳動物、好ましくはヒトに投与されると、胃腸内腔からのリン酸イオンの輸送を阻害ないしは低減させ、リン酸イオンの糞便中排泄を増加させ、リン酸イオンの血清レベルを低減させ、哺乳動物、好ましくはヒトの高リン血症を処置し、かつ／または本明細書に記載される任意の１つ以上の状態を処置するのに十分である、ある量の本発明の化合物を含む。「治療有効量」を構成する本発明の化合物の量は、化合物、状態及びその重症度、投与の様式、ならびに治療される哺乳動物の年齢に応じて変動するが、自身の知識及び本開示を考慮する当業者によって日常的に決定され得る。
【０４３０】
本明細書において使用される場合、「治療すること」または「治療」は、目的の疾患または状態を有する哺乳動物、好ましくはヒトの、目的の疾患または状態の治療を包含し、  （ｉ）特に哺乳動物が疾患または状態にかかりやすい状態だがそれを有すると未だ診断されていないとき、そのような哺乳動物におけるその状態の発症を防止すること、
（ｉｉ）疾患または状態を阻害すること、すなわち、その発達を停止させること、
（ｉｉｉ）疾患または状態を緩和すること、すなわち、疾患または状態の退行を引き起こすこと、あるいは
（ｉｖ）疾患または状態に起因する症状を緩和すること、すなわち、根底にある疾患または状態に対処せずに疼痛を緩和すること、を含む。本明細書において使用される場合、「疾患」及び「状態」という用語は、互換的に使用され得るか、あるいは、特定の病弊または状態が既知の原因物質を有しない（そのため病因が未だ究明されていない）場合があり、したがって疾患としてではなく、多かれ少なかれ一式の特定の症状が臨床医によって特定されている望ましくない状態または症候群としてしか認識されていないという点で、異なっていてもよい。
実施例
【０４３１】
実施例１
細胞内ｐＨの増加は、細胞内のリン酸塩取り込みの減少をもたらす
実験を行って、ヒト胎児由来腎臓細胞（ＨＥＫ−２９３細胞）内の細胞内ｐＨの変化とリン酸イオン（Ｐｉ）の取り込みの変化との間の関係を試験した。
【０４３２】
ＨＥＫ−２９３細胞を、２５，０００細胞／ウェルで９６ウェルプレートに播種し、一晩培養した。次に細胞にラットまたはヒトのいずれかのＮａＰ２ｂ  ｃＤＮＡをトランスフェクトするか、あるいはＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ  ２０００（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用して偽トランスフェクト（ＤＮＡなし）した。第２の一晩のインキュベーションの間、細胞をコンフルエンスに近づけた。
【０４３３】
アンモニウムパルス手技を使用して、細胞内ｐＨを約７．４から約６．８に低減させた。培地をウェルから吸引し、ＮａＣｌ−ＨＥＰＥＳ緩衝液（１００ｍＭのＮａＣｌ、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１０ｍＭのグルコース、５ｍＭのＫＣｌ、２ｍＭのＣａＣｌ２、１ｍＭのＭｇＣｌ２、ｐＨ７．４）で細胞を２回洗浄し、次に、５μＭのＢＣＥＣＦ−ＡＭを含有するＮＨ４Ｃｌ−ＨＥＰＥＳ緩衝液（２０ｍＭのＮＨ４Ｃｌ、８０ｍＭのＮａＣｌ、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、５ｍＭのＫＣｌ、２ｍＭのＣａＣｌ２、１ｍＭのＭｇＣｌ２、ｐＨ７．４）とともに３０分間室温でインキュベートした。アンモニウムを含まず、Ｎａ＋を含まないＨＥＰＥＳ（１００ｍＭのコリン、５０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１０ｍＭのグルコース、５ｍＭのＫＣｌ、２ｍＭのＣａＣｌ２、１ｍＭのＭｇＣｌ２、ｐＨ７．４）で細胞を２回洗浄し、同じ緩衝液中で、１０分間室温でインキュベートして細胞内ｐＨを低下させた。ｐＨ非感応性ＢＣＥＣＦ蛍光（λｅｘ  ４３９ｎｍ、λｅｍ  ５３８ｎｍ）に正規化されたＢＣＥＣＦ蛍光（λｅｘ  ５０５ｎｍ、λｅｍ  ５３８ｎｍ）のｐＨ感応性変化を監視することによって、約ｐＨ６．８への細胞内ｐＨの低減を確認した。アンモニウムパルス手技を省略した対照が含まれ、７．４の正常な細胞内ｐＨを示すようにＢＣＥＣＦが使用された。
【０４３４】
次に、ナトリウムを含まない取り込み用緩衝液（１４ｍＭのトリス、１３７ｍＭの塩化コリン、５．４ｍＭのＫＣｌ、２．８ｍＭのＣａＣｌ２、１．２ｍＭのＭｇＳＯ４、１００μＭのＫＨ２ＰＯ４、１ｍｇ／ｍＬのウシ血清アルブミン、ｐＨ７．４）で細胞を洗浄し、ナトリウムを含有する取り込み用緩衝液（１４ｍＭのトリス、１３７ｍＭの塩化ナトリウム、５．４ｍＭのＫＣｌ、２．８ｍＭのＣａＣｌ２、１．２ｍＭのＭｇＳＯ４、１００μＭのＫＨ２ＰＯ４、１ｍｇ／ｍＬのウシ血清アルブミン、ｐＨ７．４）で細胞を覆うことによって、３３Ｐ取り込みを開始した。ラットまたはヒトのＮａＰ２ｂをトランスフェクトした細胞株では、ナトリウム依存性３３Ｐ取り込みのみがＮａＰ２ｂに起因するように、ＰｉＴ発現抑制剤で内因性ＰｉＴ活性を抑制した。偽トランスフェクト細胞にはＰｉＴ発現抑制剤を使用しなかったため、ナトリウム依存性３３ＰはＰｉＴにのみ起因する。
【０４３５】
ＮＨＥ１の特異的阻害薬である５μＭのＥＩＰＡの存在及び非存在下で、３３Ｐの取り込みを測定した。室温で２３分後、アッセイ混合物を除去し、氷冷のナトリウムを含まない取り込み用緩衝液で細胞を２回洗浄した。２０μＬの０．１％のＴｗｅｅｎ  ８０、続いて１００μＬのシンチレーション液の添加によって細胞を溶解させ、ＴｏｐＣｏｕｎｔ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）を使用して計数した。
【０４３６】
図２２Ａ〜２２Ｃに示されるように、細胞内酸性化は、ＰｉＴ介在性（２２Ａ）またはＮａＰｉ２ｂ介在性（２２Ｂ〜２２Ｃ）のいずれかの３３Ｐ取り込みで７５％超の減少を引き起こした。細胞質からのＮＨＥ１介在性プロトン排出を遮断するＥＩＰＡは、細胞内ｐＨを低下させるために前処理されなかった細胞内で、Ｐｉ取り込みの小さいが有意な減少も引き起こした。
【０４３７】
実施例２
グアニル酸シクラーゼＣ（ＧＣ−Ｃ）受容体作動薬は、リン酸塩吸収を減少させる
実験を行って、グアニル酸シクラーゼＣ（ＧＣ−Ｃ）受容体作動薬が、３３Ｐ取り込みによって測定されたときの小腸内のリン酸塩吸収／取り込みを減少させ得るかを判定した。以下に示されるように、３３Ｐ及びリナクロチドをラットに同時に投与した。
１．ビヒクル（Ｎ＝５／群）
２．０．１ｍｇ／ｋｇのリナクロチド（Ｎ＝６／群）
３．０．３ｍｇ／ｋｇのリナクロチド（Ｎ＝４／群）
【０４３８】
３３Ｐ投与後５分、１５分、３０分、４５分、及び６０分時点で血液を採取し、血漿シンチレーション計数を行った。結果を図１Ａ〜１Ｂに示す。図１Ａは、反復測定を用いた二元配置分散分析、続いてＤｕｎｎｅｔｔの多重比較検定の結果を示し、図１Ｂは、一元配置分散分析、続いてＤｕｎｎｅｔｔの多重比較検定の結果を示す。これらの結果は、リナクロチドの両方の用量が、胃腸管内のリン酸塩の吸収を減少させたことを示す。
【０４３９】
実施例３
Ｉ１受容体作動薬及びアデニル酸シクラーゼ作動薬は、リン酸塩吸収を減少させる
実験を行って、他の種類の薬物が、３３Ｐ取り込みによって測定されたときの小腸内のリン酸塩吸収／取り込みを減少させ得るかを判定した。以下に示されるように、３３Ｐ及びイミダゾリンサブタイプ１（Ｉ１）受容体作動薬（モクソニジン）またはアデニル酸シクラーゼ作動薬（水溶性フォルスコリン類似体であるＮＫＨ４７７）のいずれかをラットに同時に投与した。
１．ビヒクル
２．２ｍｇ／ｋｇのモクソニジン
３．６ｍｇ／ｋｇのモクソニジン
４．１ｍｇ／ｋｇのＮＫＨ４７７
５．３ｍｇ／ｋｇのＮＫＨ４７７
【０４４０】
３３Ｐ投与後５分、１５分、３０分、４５分、及び６０分時点で血液を採取し、血漿シンチレーション計数を行った。結果を図２Ａ〜２Ｂに示す。図２Ａは、反復測定を用いた二元配置分散分析、続いてＤｕｎｎｅｔｔの多重比較検定の結果を示し、図２Ｂは、一元配置分散分析、続いてＤｕｎｎｅｔｔの多重比較検定の結果を示す。これらの結果は、すべての試験化合物が、１５分時点での３３Ｐ取り込み／吸収を著しく減少させたことを示す。
【０４４１】
実施例４
Ａ２Ｂ作動薬及びＰ２Ｙ２作動薬は、リン酸塩吸収を減少させる
実験を行って、異なる機構による細胞内カルシウム（Ｃａ＋＋）の増加が、３３Ｐ取り込みによって測定されたときの小腸内のリン酸塩吸収も減少させ得るかを判定した。以下に示されるように、３３Ｐ及び試験化合物をラットに同時に投与した。
１．ビヒクル、ｎ＝６
２．１０ｍｇ／ｋｇのＢＡＹ  ６０−６５８３（アデノシンＡ２Ｂ作動薬）
３．１５ｍｇ／ｋｇのＵｐ４Ｕ（Ｐ２Ｙ２受容体作動薬）
【０４４２】
３３Ｐ投与後５分、１５分、３０分、４５分、及び６０分時点で血液を採取し、血漿シンチレーション計数を行った。図３は、Ｐ２Ｙ２受容体作動薬であるＵｐ４Ｕ（１５ｍｇ／ｋｇ）が、３３Ｐ取り込み／吸収を著しく減少させたことを示す。
【０４４３】
実施例５
ラットの急性リン酸塩取り込みに対する薬力学的作用
化合物を、ラットの消化管への投与の後に、循環している放射標識化されたリン酸塩の出現を低減させる能力について試験した。ラットの血液中の放射標識化されたリン酸塩のトレーサーの蓄積の速度を、胃腸管からのリン酸塩食の腸管内吸収速度の代理として計った。この目的のために、実施例の化合物と合わせたリン酸塩トレーサー食のラットへの胃内共投与の後に、循環している放射標識化されたリン酸塩を監視した。しかしながら、試験した化合物のうちのいくつかは、推定上の胃腸運動性作用を有する（例えば、胃内容排出を遅延させる）、または意図的に胃腸管内で化学的に不安定であるなど、このアッセイを妨げ得る特性を潜在的に有したため、リン酸塩トレーサーのボーラスの直接的な十二指腸内投与も折々行った。
【０４４４】
８週齢であった雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｈｏｌｌｉｓｔｅｒ，ＣＡ）から購入した。血液採取を可能にするため、販売業者によって頸静脈内にカテーテルが外科的に植え込まれたラットを購入した。十二指腸内投与を必要とする研究のために、十二指腸の内腔への直接注入を可能にするように、追加のカテーテルが販売業者によって外科的に植え込まれた。研究に至るまで、０．６５％のＰ、１％のＣａ、及び１．５ｉｕ／ｇのビタミンＤ３を含有する通常の穀物系固形飼料（Ｈａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄ、Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ、２０１８  Ｔｅｋｌａｄ  Ｇｌｏｂａｌ  １８％  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｏｄｅｎｔ  Ｄｉｅｔ）をラットに給餌し、水を適宜与えた。
【０４４５】
一晩の絶食後、指示された薬用量で溶液中に分散した試験物品を含むかまたは含まずに、トレーサーとして［３３Ｐ］オルトリン酸塩（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を含有するリン酸塩溶液を、ラットに投与した。この投薬溶液は、典型的に、８ｍＭの一塩基性リン酸ナトリウム（１．２５μＣｉの［３３Ｐ］オルトリン酸塩／μモル）、４ｍＭの塩化カルシウム、０．４％のヒドロキシプロピルメトセルロース（ｗ／ｖ）、及び２％のジメチルスルホキシド（ｗ／ｖ）を含有した。投薬溶液は、１０ｍｌ／ｋｇの胃内経管栄養のための水中で、そして以前に植え込まれたカテーテルを使用して５ｍｌ／ｋｇでボーラスとして十二指腸内投与された場合は食塩水中で調製した。
【０４４６】
投薬後の意識のあるラットから植え込まれたカテーテルを介して頸静脈から血液を採取し、得られた血漿に関連する放射性同位体をシンチレーション計数によって判定した。全循環血漿の体重推定法を使用して、投与された用量からの血漿へのリン酸塩取り込みの相対量を評価した。Ｂｉｊｓｔｅｒｂｏｓｃｈ  ｅｔ  ａｌ．，Ｅｘｐｅｒｉｅｎｔｉａ．３７：３８１−３８２，１９８１（Ｔｈｅ  ｐｌａｓｍａ  ｖｏｌｕｍｅ  ｏｆ  ｔｈｅ  Ｗｉｓｔａｒ  ｒａｔ  ｉｎ  ｒｅｌａｔｉｏｎ  ｔｏ  ｔｈｅ  ｂｏｄｙ  ｗｅｉｇｈｔ）を参照されたい。各群（ｎ＝６）について、投薬後１５分時点でのリン酸塩取り込みの比較量を、研究用ビヒクル群（ｎ＝６）に対する百分率として平均±ＳＥＭとして表した。各試験群の平均をビヒクル群の平均と比較した統計的比較を、一元配置分散分析、続いてＤｕｎｎｅｔｔの事後検定によって決定し、Ｐ＜０．０５を統計的に有意として許容した（ｎｓは「有意差なし」であり、＊はＰ＜０．０５であり、＊＊はＰ＜０．０１であり、＊＊＊はＰ＜０．００１である）。
【０４４７】
胃内投薬により実施例の化合物を試験する研究の結果を、以下の表Ｅ１に要約する。
【表９】
2020063273.tif 000026
2020063273.tif 000027
【０４４８】
以下の表Ｅ２における十二指腸内投薬により実施例の化合物を試験する研究の結果。
【表１０】
2020063273.tif 000028
【０４４９】
Ａ２Ｂ受容体作動薬、炭酸脱水酵素阻害薬、ドパミンＤ１受容体作動薬、イミダゾリンＩ１受容体作動薬、グアニル酸シクラーゼ２Ｃ作動薬、ＭＴ２メラトニン受容体作動薬、ＮＯ放出剤、可溶性グアニリルシクラーゼ活性化因子、及びフォルスコリンの可溶性類似体の実施例であった試験化合物は、すべて個別に、胃に送達された食事からのリン酸塩の急性取り込みを著しく低減させた。さらに、小腸の十二指腸に直接投薬されたフォルスコリンの可溶性類似体は、共投与された試験ボーラスからのリン酸塩取り込みを阻害したと決定された。
【０４５０】
実施例６
Ｕｓｓｉｎｇチャンバ
麻酔された動物から十二指腸及び空腸の断片をただちに除去し、腸間膜線に沿って開き、粘膜表面最上部とともにＰｙｒｅｘプレート上に固定する。上皮組織を筋層からストリッピングし、コンピュータ制御されたＵｓｓｉｎｇチャンバ（Ｎａｔｉｏｎａｌ  Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ  Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）上に１００ｍｍ２の露出面積で設置する。この組織の両面を、（ミリモル／Ｌで）ＮａＣｌ（１２５．４）、ＫＣｌ（５．４）、ＣａＣ１２（１．２）、ＮａＨＣＯ３（２１）、ＮａＨＰＯ（０．３）、ＮａＨ２ＰＯ４（１．２）を含有する１３ｍＬの等張緩衝溶液（ｐＨ６．０またはｐＨ７．４）とともにインキュベートする。流束測定の開始及び終了時の組織の機能的生存能及び整合性は、テオフィリン（１０ｍＭ漿膜）またはグルコース（１０ｍＭ粘膜）またはＬ−アラニン（５ｍＭ粘膜）のいずれかに応答する短絡電流（Ｉｓｃ）の測定で確かになるであろう。
【０４５１】
一方向性のＰｉ流動速度（Ｊｍｓ：粘膜側から漿膜側への流動、Ｊｓｍ：反対方向の流動）の計算のため、１８５ＫＢｑの［３３Ｐ］−オルトリン酸塩（３７０ＭＢｑ／ｍＬ、Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ）及び試験化合物を組織の一方の側面に添加する。２０分後、試料を、Ｕｓｓｉｎｇチャンバの標識化された側面から（０．１ｍｌ）、そしてその後少なくとも３回の１０分間隔で非標識の側面から（０．５ｍＬ）採取する。非標識側面から採取したすべての試料を等体積の等張浴液と交換する。正味の流束（Ｊｎｅｔ）を、コンダクタンスが２５％を超えて異ならない、対になった組織のＪｍｓとＪｓｍとの間の差として計算する。別の一連の実験では、流束測定は、浴溶液へのヒ酸塩（粘膜）またはウアバイン（漿膜）の添加の前及び後に行われる。放射能測定値は、ＴｏｐＣｏｕｎｔ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）液体シンチレーションカウンターで計測される。
【０４５２】
実施例７
インビトロ−エクスビボアッセイ
ペントバルビタールナトリウムで麻酔された動物から十二指腸及び空腸の断片（５ｃｍ）を除去し、氷冷の０．９％の食塩水で洗い流し、ガラス棒上で裏返す。試料を棒上にしっかりと設置し、次に、ｍＭ単位でヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ’−２−エタンスルホン酸（１６）、グルコース（１０）、ＫＣｌ（３．５）、ＭｇＳＯ４（１０）、ＣａＣｌ２（１）、ＮａＣｌ（１２５）を含有する、ｐＨ７．４もしくは６．０の酸素化緩衝液中で、５分間３７℃でプレインキュベートし、続いて１００ｍＭの３３Ｐｉ（３３Ｐｉ特異的活性、１．８５ＭＢｑ／ｍＬ）及び試験化合物を含有する同じ緩衝液中で２分間インキュベートする。粘膜表面における静水層の作用を最小限に抑えるために磁気撹拌子（ｍａｇｎｅｔｉｃ  ｆｌｅａ）を使用して、緩衝液を急速に撹拌する。
【０４５３】
１０倍過剰量の非放射性リン酸塩を含有するリン酸緩衝食塩水に１０分間室温で組織を曝露することによって、取り込みを終了する。この手順の後に、室温のリン酸緩衝食塩水中でさらに１０分間の洗浄を行い、次に試料をブロット乾燥し、重量を記録する。試料をＰｒｏｔｏｓｏｌ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ）中で一晩消化する。消化された試料及び初期取り込み溶液のシンチレーション計数は、組織のリン酸塩滞留の計算を可能にする（ｎモル／ｇ単位）。
【０４５４】
実施例８
標的ベースのスクリーニングアッセイ
腸受容体の活性化は、（例えば、腸の管腔膜の局在性ｐＨを変更することによって）リン酸塩吸収の直接的阻害または間接的阻害のいずれかを引き起こすシグナル伝達をもたらし得る。これらの標的と相互作用する化合物の能力の測定は、目的の標的を異種性に発現する市販の細胞株を使用して達成され得る。これらの細胞株は、Ｐｅｒｋｉｎ  ＥｌｍｅｒまたはＭｕｌｔｉｓｐａｎなどの会社から一般的に入手可能である。代替的に、目的の標的を発現する初代細胞も一般的に使用される。
【０４５５】
推定上のリガンドの相互作用の測定は、２つの手法：（１）そのような細胞から調製されたインタクトな細胞もしくは膜のいずれかからの放射性同位体標識化標準リガンドの置換、または（２）試験化合物を用いた治療に際する二次メッセンジャー産生の測定、のうちのいずれかによって達成され得る（以下の表Ｅ３を参照されたい）。二次メッセンジャーの測定については、多くの市販のキットが、細胞内ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ（例えばＣｉｓ  Ｂｉｏ製）、及びカルシウム（例えばＭｏｌｅｃｕｌａｒ  Ｄｅｖｉｃｅｓ製のカルシウム６染料）を測定するために利用可能である。
【表１１】
2020063273.tif 000029
【０４５６】
可溶性酵素の活性が直接影響される場合、精製された酵素調製物が使用され、酵素反応の産物が監視される、酵素アッセイが用いられ得る（以下の表Ｅ４を参照されたい）。
【表１２】
2020063273.tif 000030
【０４５７】
実施例９
腸管内のナトリウム及びリン酸塩吸収の阻害
腸管内腔からのリン酸塩の吸収を阻害する、選択された実施例の化合物の能力を評価するために、ラットにおいてリン酸塩の摂取及び排泄の均衡を測定する。８週齢のＳｐｒａｇｕｅ  ＤａｗｌｅｙラットをＣｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｈｏｌｌｉｓｔｅｒ，ＣＡ）から購入し、食物及び水を自由に与えて、少なくとも６日間順化させる。この時間の間、及び研究全体にわたって、標準的飼料（Ｈａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄ、Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ、２０１８  Ｔｅｋｌａｄ  Ｇｌｏｂａｌ  １８％  Ｐｒｏｔｅｉｎ  Ｒｏｄｅｎｔ  Ｄｉｅｔ）、または０．６％のＣａ及び０．３５もしくは０．６％のリンから成る精製卵白合成飼料（Ｈａｒｌａｎ  Ｔｅｋｌａｄ、それぞれＴＤ．８４１２２及びＴＤ．１３０３１８）をラットに給餌してよい。
【０４５８】
研究の開始の１日前、ラットを、水及び上記の飼料の粉末版を自由に与えて、個別の代謝ケージに順化させる。暗期の開始の約１時間前に、ラットが消費すると決定された固形飼料の１日の質量に基づいて、１０ｍｌ／ｋｇの有効用量の試験物品を経口（ＰＯ）で、または薬物混和食物を介してのいずれかで、動物に投薬する。両方の投薬パラダイムで、各ラットに、それらが代謝ケージ内に収容される各日につき、同じ種類のラットに関してその種類の固形飼料の適宜消費量の１日の平均である、水及び一定分量の粉末状固形飼料を自由に与える（すなわち、８週齢の雄ラットは、平均１８ｇ／日の上記の精製飼料を消費する）。これは、可変性を低減させ、その後の２４時間の消費及び排泄の測定値を合理化するために行われる。１日の水及び固形飼料の消費量測定、ならびに１日の尿及び糞便採取が、連続１〜４日間続く。
【０４５９】
尿試料のリン酸塩、ナトリウム、及びカリウム含量を、イオンクロマトグラフィによって決定する。尿試料を、重量法の体積判定、続いて６ＮのＨＣｌを用いる酸性化によって処理する。酸性化された試料を手短に遠心分離し（３，６００×ｇ）、次に上清を１０ｍＭのＨＣｌで希釈する。希釈試料、校正標準物質（Ｓｉｇｍａ／Ｆｌｕｋａ  Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ）、及びＱＣ試料（研究所内で調製された標準物質）を、イオン交換クロマトグラフィシステム（Ｄｉｏｎｅｘ  ＩＣＳ−３０００）での注入の前に濾過する。２５ｍＭのメタンスルホン酸移動相及びＤｉｏｎｅｘ  ＣＳ１２Ａカチオン交換分析カラムから成る均一濃度法を使用して、ナトリウム及びカリウムを分離させる。３５ｍＭの水酸化カリウム移動相及びＤｉｏｎｅｘ  ＡＳ１８アニオン交換分析カラムから成る均一濃度法を使用して、リン酸塩を分離させる。Ｄｉｏｎｅｘ  Ｃｈｒｏｍｅｌｅｏｎソフトウェアを使用して、定量分析を行う。全試料の濃度を、クロマトグラフ的ピーク領域に基づいて校正曲線から内挿する。
【０４６０】
各２４時間の糞便試料のリン酸塩、ナトリウム、及びカリウム含量を、原子発光分光法によって決定する。乾燥させた糞便ペレットまたは乾燥させた均質化糞便の代表的な試料を、６５〜９５℃で２〜３時間にわたって、濃縮した硝酸及び過酸化水素の反復添加で消化する。次に、以下の元素発光波長：カルシウム（４２２．６７３ｎｍ）、ナトリウム（５８８．９９５ｎｍ）、カリウム（７６６．４９１ｎｍ）、及びリン（２１４．９１５または２１３．６１８ｎｍ）で原子発光分光器（Ａｇｉｌｅｎｔ  ４１００  ＭＰ−ＡＥＳ）を用いる分析の前に、試料溶液を１％の硝酸で希釈する。イオン化緩衝液及び内部標準物質の両方として、セシウム溶液を使用する。Ａｇｉｌｅｎｔ  ＭＰ  Ｅｘｐｅｒｔソフトウェアを使用して、データ分析を行う。
【０４６１】
測定される各日につき各動物の飼料中で消費されるＰに対して、１日の尿中及び糞便中リン酸塩排泄量を計算する。リン吸収の阻害百分率は、これらの比の低減を対照群（固形飼料中に薬物が含まれない動物）と比較して決定することによって表される。これは、他の目的のイオンを用いて行ってもよい。試験される日が複数ある場合、これらは、各ラットのリン酸塩の均衡の定常状態における測定値の複製となり得、この場合、動物の通常の１日の消費量が必要条件である。ラットにおける中立的均衡を維持するためのおよそ同時の尿中Ｐの減少を伴う糞便中リン酸塩の増加は、実施例の化合物で処置されたラットのリン酸塩吸収の全体的減少の指標である。
【０４６２】
実施例１０
ラット慢性腎疾患（ＣＫＤ）モデルにおける作用。
多くの場合後期のＣＫＤに関連する軟組織石灰化に影響する、選択された実施例の化合物の能力を評価するために、５／６腎摘除（５／６Ｎｘ）ラットモデルを用いて、病的状態におけるミネラルの恒常性を検査する。ＣＫＤの種々の態様を研究するために一般的に使用されるモデルである５／６Ｎｘラットは、食事性リン酸塩の負荷を受けない限り、通常は高リン血症ではない（Ｓｈｏｂｅｉｒｉ  ｅｔ．ａｌ．，Ａｍ  Ｊ  Ｎｅｐｈｒｏｌ．３１：４７１−４８１，２０１０，Ｖａｓｃｕｌａｒ  Ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｉｎ  Ａｎｉｍａｌ  Ｍｏｄｅｌｓ  ｏｆ  ＣＫＤ：Ａ  Ｒｅｖｉｅｗを参照されたい）。したがって、これらの動物において効率的かつ定常なリン血性の血管石灰化の進行を確かにするために、Ｌｏｐｅｚのグループによって開発されたプロトコルから適合された、飼料中の向上した生体利用能のリン酸塩とビタミンＤ３処置の組み合わせを実施する（Ｌｏｐｅｚ  ｅｔ  ａｌ．，Ｊ  Ａｍ  Ｓｏｃ  Ｎｅｐｈｒｏｌ．１７：７９５−８０４，２００６．Ｃａｌｃｉｍｉｍｅｔｉｃ  Ｒ−５６８  Ｄｅｃｒｅａｓｅｓ  Ｅｘｔｒａｏｓｓｅｏｕｓ  Ｃａｌｃｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ  ｉｎ  Ｕｒｅｍｉｃ  Ｒａｔｓ  Ｔｒｅａｔｅｄ  ｗｉｔｈ  Ｃａｌｃｉｔｒｉｏｌを参照されたい）。
【０４６３】
販売業者によって外科手技が行われた、５／６腎摘出された雄のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットを、Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｈｏｌｌｉｓｔｅｒ，ＣＡ）から購入する。機能的な腎臓の質量の低減は、２つの手術：左腎の腎亜全摘、続いて１週間の回復の後の右腎の一側性腎摘除によって達成される。第２の手術からの３日間の回復期間後、９週齢のラットを試験施設に輸送する。
【０４６４】
到着から研究の全体にわたって、０．９％の無機Ｐ（リン）及び０．６％のＣａから成る精製された粉末状飼料（ＴＤ．１０８０９、Ｈａｒｌａｎ−Ｔｅｋｌａｄ、Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）をラットに給餌する。後眼窩または尾静脈の出血によって母体血清を得、０．９〜１．２ｍｇ／ｄｌの血清クレアチニンレベルを有する動物のみを、血清クレアチニン及び体重に基づいて階級化された群（ｎ＝１２）を用いる研究に登録する。処置群に登録されたラットに、上記のビヒクル群と同じ飼料を使用して固形飼料中薬物を投薬する。さらに、１週間当たり３回のカルシトリオール（活性型ビタミンＤ３、８０ｎｇ／ｋｇの腹腔内投与（ｉ．ｐ．））投与のレジメンを開始する。
【０４６５】
標準的な臨床化学またはＥＬＩＳＡ分析により、適切な血清マーカー測定を用いて、腎機能、リン血状態、ならびに他のパラメータを毎週監視する。２ｍｇ／ｄＬ超の血清クレアチニンまたは平均コホート体重の８０％以下の体重を有するラットは、進行した病的状態のため研究から除く。ラットを代謝ケージに入れて排泄物を採取することによって、腎機能の尿マーカーも測定され得る。
【０４６６】
４週間後、ラットを安楽死させ、器官を採取及び秤量する。大動脈弓、心臓、胃、及び腎臓の残遺物のミネラル化を判定する。全組織試料を、６５〜９５℃で２〜３時間にわたって、濃縮した硝酸及び過酸化水素の反復添加で消化する。次に、以下の元素発光波長：カルシウム（４２２．６７３ｎｍ）、ナトリウム（５８８．９９５ｎｍ）、カリウム（７６６．４９１ｎｍ）、及びリン（２１４．９１５または２１３．６１８ｎｍ）で原子発光分光器（Ａｇｉｌｅｎｔ  ４１００  ＭＰ−ＡＥＳ）を用いる分析の前に、試料溶液を１％の硝酸で希釈する。イオン化緩衝液及び内部標準物質として、セシウム溶液を使用する。Ａｇｉｌｅｎｔ  ＭＰ  Ｅｘｐｅｒｔソフトウェアを使用して、データ分析を行う。
【０４６７】
無処置の対応物と比較して、試験物品で処置された動物における血管石灰化の低減は、このＣＫＤラットモデルにおける病態を悪化させるのに必要とされる食事性リン酸塩吸収の報告される阻害と一致する。
【図１】
2020063273.tif 000031
【図２】
2020063273.tif 000032
【図３】
2020063273.tif 000033
【図４−１】
2020063273.tif 000034
【図４−２】
2020063273.tif 000035
【図５Ａ】
2020063273.tif 000036
【図５Ｂ】
2020063273.tif 000037
【図５Ｃ】
2020063273.tif 000038
【図６Ａ−１】
2020063273.tif 000039
【図６Ａ−２】
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【図６Ｂ】
2020063273.tif 000041
【図６Ｃ】
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【図７】
2020063273.tif 000043
【図８Ａ】
2020063273.tif 000044
【図８Ｂ】
2020063273.tif 000045
【図９−１】
2020063273.tif 000046
【図９−２】
2020063273.tif 000047
【図９−３】
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【図９−４】
2020063273.tif 000049
【図９−５】
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【図９−６】
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【図９−７】
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【図９−８】
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【図９−９】
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【図９−１０】
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【図９−１１】
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【図９−１２】
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【図９−１３】
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【図９−１４】
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【図９−１５】
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【図９−１６】
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【図９−１７】
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【図９−１８】
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【図９−１９】
2020063273.tif 000064
【図９−２０】
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【図９−２１】
2020063273.tif 000066
【図９−２２】
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【図１０−１】
2020063273.tif 000068
【図１０−２】
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【図１１】
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【図１２−１】
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【図１２−２】
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【図１３−１】
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【図１３−２】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７−１】
2020063273.tif 000078
【図１７−２】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１−１】
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【図２１−２】
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【図２２】
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【配列表】
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【手続補正書】
【提出日】令和1年12月24日(2019.12.24)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
高リン血症の治療を必要とする患者における高リン血症を治療するための組成物であって、胃腸管内でその中のリン酸イオン（Ｐｉ）の輸送を阻害するように実質的に活性でありかつグアニル酸シクラーゼＣ受容体（ＧＣ−Ｃ）作動薬である化合物を含む、前記組成物。
【請求項２】
前記化合物がＮＨＥ３に結合しない、請求項１に記載の組成物。
【請求項３】
高リン血症が腎疾患と関連している、請求項１又は２に記載の組成物。
【請求項４】
前記ＧＣ−Ｃ作動薬が、ペプチド、任意に細菌性熱安定性エンテロトキシン、グアニリン、プログアニリン、ウログアニリン、プロウログアニリン、リンホグアニリン、または前述のもののうちのいずれかの変異体もしくは類似体である、請求項１〜３のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項５】
前記ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドが、アミノ酸配列（Ｉ）：Ｘａａ1  Ｘａａ2  Ｘａａ3  Ｘａａ4  Ｘａａ5  Ｃｙｓ6  Ｃｙｓ7  Ｘａａ8  Ｘａａ9  Ｃｙｓ10  Ｃｙｓ11  Ｘａａ12  Ｘａａ13  Ｘａａ14  Ｃｙｓ15  Ｘａａ16  Ｘａａ17  Ｃｙｓ18  Ｘａａ19  Ｘａａ20  Ｘａａ21（配列番号１）を含み、Ｘａａ1  Ｘａａ2  Ｘａａ3  Ｘａａ4  Ｘａａ5が、Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ（配列番号２）であるか、または欠損しているか、あるいはＸａａ1  Ｘａａ2  Ｘａａ3  Ｘａａ4が欠損している、或いは
アミノ酸配列（ＩＩＩ）：Ｘａａ1  Ｘａａ2  Ｘａａ3  Ｃｙｓ4  Ｘａａ5  Ｘａａ6  Ｘａａ7  Ｘａａ8  Ｘａａ9  Ｘａａ10  Ｘａａ11  Ｃｙｓ12  Ｘａａ13  Ｘａａ14  Ｘａａ15  Ｘａａ16（配列番号５）を含み、Ｘａａ1が、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｇｌｎ、Ｐｒｏ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、もしくはＴｈｒであるか、または欠損しており、Ｘａａ2が、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｙであるか、または欠損しており、Ｘａａ3が、Ｔｈｒ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｇｌｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、またはＬｅｕであり、Ｘａａ5が、Ａｓｐ、Ｉｌｅ、またはＧｌｕであり、Ｘａａ6が、Ｉｌｅ、Ｔｒｐ、またはＬｅｕであり、Ｘａａ7が、Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、またはＴｙｒであり、Ｘａａ8が、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔであるか、または欠損しており、Ｘａａ9が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ10が、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ｔｈｒ、またはＩｌｅであり、Ｘａａ11が、ＡｌａまたはＶａｌであり、Ｘａａ13が、ＴｈｒまたはＡｌａであり、Ｘａａ14が、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＳｅｒであり、Ｘａａ15が、Ｃｙｓ、Ｔｙｒであるか、または欠損しており、Ｘａａ16が、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、またはＳｅｒである、請求項４に記載の組成物。
【請求項６】
Ｘａａ5が、Ａｓｎ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ及びＩｌｅからなる群より選択される、
Ｘａａ8が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、及びＰｒｏからなる群より選択される、
Ｘａａ9が、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、及びＰｈｅからなる群より選択される、
Ｘａａ12が、Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、及びＡｌａからなる群より選択される、
Ｘａａ13が、Ａｌａ、Ｐｒｏ、及びＧｌｙからなる群より選択される、
Ｘａａ14が、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、及びＡｓｐからなる群より選択される、
Ｘａａ16が、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、及びＴｒｐからなる群より選択される、
Ｘａａ17が、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、及びＡｌａからなる群より選択される、
Ｘａａ19が、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ａｓｎ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ及びＡｒｇからなる群より選択される、
Ｘａａ20  Ｘａａ21がＡｓｐＰｈｅであるか、あるいはＸａａ20がＡｓｎまたはＧｌｕであり、Ｘａａ21が欠損している、或いは
Ｘａａ19  Ｘａａ20  Ｘａａ21が欠損している、
請求項５に記載の組成物。
【請求項７】
前記ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドが、
アミノ酸配列Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ（配列番号３）、または１個、２個、３個、４個、もしくは５個の欠失、挿入、及び／若しくは置換を有するその変異体である、
アミノ酸配列Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ（配列番号４）、又は１個、２個、３個、４個、もしくは５個の欠失、挿入、及び／若しくは置換を有するその変異体である、或いは
アミノ酸配列Ａｓｎ  Ａｓｐ  Ｇｌｕ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｖａｌ  Ａｓｎ  Ｖａｌ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｌｅｕ（配列番号６）、又は１個、２個、３個、４個、もしくは５個の欠失、挿入、及び／若しくは置換を有するその変異体である、
請求項５に記載の前記組成物。
【請求項８】
前記化合物がプレカナチドである、請求項１に記載の組成物。
【請求項９】
１つ以上の追加の生物活性剤と併用される、請求項１〜８のいずれか１項に記載の組成物。
【請求項１０】
前記化合物及び前記１つ以上の追加の生物活性剤が、単一の薬学的組成物の一部として投与される、個別の薬学的組成物として投与される、又は順次に投与される、若しくは同時に投与される、請求項９に記載の組成物。
【請求項１１】
前記追加の生物活性剤が、ビタミンＤ2（エルゴカルシフェロール）、ビタミンＤ3（コレカルシフェロール）、活性型ビタミンＤ（カルシトリオール）、活性型ビタミンＤ類似体（例えばドキセルカルシフェロール、パリカルシトール）、リン酸塩結合剤、ＮａＰｉ２ｂ阻害薬、ナイアシン、ニコチンアミド、ＡＣＥ阻害薬、アンチオゲンシンＩＩ受容体遮断薬、β遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、直接的レニン阻害薬、利尿薬、血管拡張薬、エリスロポエチン療法、鉄補充療法、終末糖化産物の阻害薬、ビタミンＤ、及びスタチンのうちの１つ以上である、請求項９又は１０に記載の組成物。
【手続補正２】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】０４６７
【補正方法】変更
【補正の内容】
【０４６７】
無処置の対応物と比較して、試験物品で処置された動物における血管石灰化の低減は、このＣＫＤラットモデルにおける病態を悪化させるのに必要とされる食事性リン酸塩吸収の報告される阻害と一致する。
本発明は以下の実施形態を包含する。
[１]  リン酸塩低下を必要とする患者の胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害するための方法であって、グアニル酸シクラーゼＣ受容体（ＧＣ−Ｃ）作動薬化合物を前記患者に投与することを含み、前記ＧＣ−Ｃ作動薬化合物が、それを必要とする前記患者に投与されると、胃腸管内でその中のリン酸イオン（Ｐｉ）の輸送を阻害するように実質的に活性である、前記方法。
[２]  リン酸塩低下を必要とする患者の胃腸管内のリン酸塩取り込みを阻害するための方法であって、ＮＨＥ３に結合しない化合物を前記患者に投与することを含み、前記化合物が、それを必要とする前記患者に投与されると、胃腸管内でその中のリン酸イオン（Ｐｉ）の輸送を阻害するように実質的に活性である、前記方法。
[３]  前記化合物が、小腸内の上皮横断ｐＨ勾配（ｃｒｏｓｓ−ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ  ｐＨ  ｇｒａｄｉｅｎｔ）（ＣＥＰＧ）を減少させ、前記ＣＥＰＧが、（ｉ）小腸の表面の上皮細胞の、任意に上皮細胞の亜頂端表面における細胞質と、（ｉｉ）小腸の頂端表面における不撹拌層との間のｐＨの差として定義され、前記化合物が、それを必要とする前記患者に投与されると、胃腸管内でその中のリン酸イオン（Ｐｉ）の輸送を阻害するように実質的に活性である、実施形態２に記載の前記方法。
[４]  前記化合物が、小腸、任意に空腸内の水吸収を減少させ、前記化合物が、それを必要とする患者に投与されると、胃腸管内でその中のリン酸イオン（Ｐｉ）の輸送を阻害するように実質的に活性である、実施形態２に記載の前記方法。    
[５]  前記化合物が、小腸内のＣＥＰＧを減少させ、水吸収を減少させる、実施形態２〜４のいずれかに記載の前記方法。
[６]  前記化合物が、小腸内の水吸収を著しく減少させることなく小腸内のＣＥＰＧを減少させる、実施形態２または３に記載の前記方法。
[７]  前記化合物が、小腸内のＣＥＰＧを著しく減少させることなく、任意に、小腸内の重炭酸塩分泌を著しく刺激することなく、かつ／または酸分泌を阻害することなく小腸内の水吸収を減少させる、実施形態２または４に記載の前記方法。
[８]  前記方法が、
（ａ）高リン血症、任意に食後高リン血症を治療するための方法、
（ｂ）腎疾患、任意に慢性腎疾患（ＣＫＤ）または末期腎疾患（ＥＳＲＤ）を治療するための方法、
（ｃ）血清クレアチニンレベルを低減させるための方法、
（ｄ）タンパク尿を治療するための方法、
（ｅ）腎代替療法（ＲＲＴ）、任意に透析までの時間を遅らせるための方法、
（ｆ）ＦＧＦ２３レベルを低減させるための方法、
（ｇ）活性型ビタミンＤの高リン血症作用を低減させるための方法、
（ｈ）副甲状腺機能亢進症、任意に続発性副甲状腺機能亢進症を軽減させるための方法、
（ｉ）血清副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）を低減させるための方法、
（ｊ）任意に食後血清リンによって誘導される、内皮障害を改善するための方法、
（ｋ）血管石灰化、任意に内膜局在性血管石灰化を低減させるための方法、
（ｌ）尿中亜リン酸を低減させるための方法、
（ｍ）血清リンレベルを正常化するための方法、
（ｎ）高齢患者のリン負荷を低減させるための方法、
（ｏ）食事性リン酸塩取り込みを減少させるための方法、
（ｐ）腎肥大を低減させるための方法、及び
（ｑ）心肥大を低減させるための方法、のうちの１つ以上から選択される方法をもたらす、実施形態１〜７のいずれかに記載の前記方法。
[９]  前記化合物が、小腸の表面の上皮細胞の、任意に上皮細胞の亜頂端表面における細胞内ｐＨを減少させる、実施形態２〜６または８のいずれかに記載の前記方法。
[１０]  前記化合物が、小腸の頂端表面における不撹拌層のｐＨを増加させる、実施形態２〜６または８のいずれかに記載の前記方法。
[１１]  前記化合物が、（ａ）小腸内の重炭酸塩分泌を刺激するか、または（ｂ）小腸内の酸分泌を阻害するか、または（ｃ）小腸内の重炭酸塩分泌を刺激し、かつ酸分泌を阻害する、実施形態２〜６または８のいずれかに記載の前記方法。
[１２]  前記化合物が、小腸の表面の上皮細胞の１つ以上の細胞内二次メッセンジャーを増加させる、実施形態２〜６または８のいずれかに記載の前記方法。
[１３]  前記１つ以上の細胞内二次メッセンジャーが、Ｃａ＋＋、環状アデノシン一リン酸塩（ｃＡＭＰ）、及び環状グアノシン一リン酸塩（ｃＧＭＰ）から選択される、実施形態１２に記載の前記方法。
[１４]  前記化合物が、前記患者に経腸投与されると実質的に全身で生体利用不可能である、実施形態１〜１３のいずれかに記載の前記方法。
[１５]  前記化合物が、胃腸管の上皮に対して実質的に不透過性である、実施形態１４に記載の前記方法。
[１６]  前記化合物が、胃腸管の上皮に対して実質的に透過性である、実施形態１４に記載の前記方法。
[１７]  それを必要とする前記患者への投与が、（ａ）血清リン濃度もしくはレベルを正常な血清リンレベルの約１５０％以下に低減させ、かつ／または（ｂ）食事性亜リン酸の取り込みを無処置状態と比べて少なくとも約１０％低減させる、実施形態１〜１６のいずれかに記載の前記方法。
[１８]  それを必要とする前記患者への投与が、糞便中排泄におけるリン酸塩レベルを無処置状態と比べて少なくとも約１０％上昇させる、実施形態１〜１７のいずれかに記載の前記方法。
[１９]  それを必要とする前記患者への投与が、尿中リン酸塩濃度またはレベルを無処置状態と比べて少なくとも約１０％低減させる、実施形態１〜１８のいずれかに記載の前記方法。
[２０]  それを必要とする前記患者が、ＥＳＲＤを有し、前記患者への投与が、血清リン濃度またはレベルを無処置状態と比べて少なくとも約１０％低減させる、実施形態１〜１９のいずれかに記載の前記方法。
[２１]  それを必要とする前記患者が、ＣＫＤを有し、前記患者への投与が、ＦＧＦ２３レベル及び血清インタクト副甲状腺ホルモン（ｉＰＴＨ）レベルを無処置状態と比べて少なくとも約１０％低減させる、実施形態１〜２０のいずれかに記載の前記方法。
[２２]  前記化合物が、グアニル酸シクラーゼＣ受容体（ＧＣ−Ｃ）作動薬、Ｐ２Ｙ作動薬、アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬、可溶性グアニル酸シクラーゼ作動薬、アデニル酸シクラーゼ受容体作動薬、イミダゾリン−１受容体作動薬、コリン作動薬、プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬、ドパミンＤ１作動薬、メラトニン受容体作動薬、５ＨＴ４作動薬、心房性ナトリウム利尿ペプチド受容体作動薬、炭酸脱水酵素阻害薬、ホスホジエステラーゼ阻害薬、及び腺腫において下方制御される交換輸送体（Ｄｏｗｎ−Ｒｅｇｕｌａｔｅｄ  ｉｎ  Ａｄｅｎｏｍａ）（ＤＲＡまたはＳＬＣ２６Ａ３）作動薬のうちの１つ以上から選択される、実施形態２〜２１のいずれかに記載の前記方法。
[２３]  前記ＧＣ−Ｃ作動薬が、ペプチド、任意に細菌性熱安定性エンテロトキシン、グアニリン、プログアニリン、ウログアニリン、プロウログアニリン、リンホグアニリン、または前述のもののうちのいずれかの変異体もしくは類似体である、実施形態１または２２に記載の前記方法。
[２４]  前記ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドが、アミノ酸配列（Ｉ）：Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５  Ｃｙｓ６  Ｃｙｓ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｃｙｓ１０  Ｃｙｓ１１  Ｘａａ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｃｙｓ１５  Ｘａａ１６  Ｘａａ１７  Ｃｙｓ１８  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１（配列番号１）を含み、Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４  Ｘａａ５が、Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ（配列番号２）であるか、または欠損しているか、あるいはＸａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｘａａ４が欠損している、実施形態２３に記載の前記方法。
[２５]  Ｘａａ５が、Ａｓｎ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、またはＰｈｅである、実施形態２４に記載の前記方法。
[２６]  Ｘａａ５が、ＴｈｒまたはＩｌｅである、実施形態２４に記載の前記方法。    [２７]  Ｘａａ５が、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、またはＴｒｐである、実施形態２４に記載の前記方法。
[２８]  Ｘａａ８が、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ、Ｇｌｙ、またはＰｒｏである、実施形態２４に記載の前記方法。
[２９]  Ｘａａ９が、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ａｌａ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅである、実施形態２４に記載の前記方法。
[３０]  Ｘａａ９が、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、またはＰｈｅである、実施形態２４に記載の前記方法。
[３１]  Ｘａａ１２が、Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、またはＡｌａである、実施形態２４に記載の前記方法。
[３２]  Ｘａａ１３が、Ａｌａ、Ｐｒｏ、またはＧｌｙである、実施形態２４に記載の前記方法。
[３３]  Ｘａａ１４が、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ｓｅｒ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｇｌｕ、Ｇｌｎ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＡｓｐである、実施形態２４に記載の前記方法。
[３４]  Ｘａａ１６が、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、またはＴｒｐである、実施形態２４に記載の前記方法。
[３５]  Ｘａａ１７が、Ｇｌｙ、Ｐｒｏ、またはＡｌａである、実施形態２４に記載の前記方法。
[３６]  Ｘａａ１９が、Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ａｓｎ、またはＬｅｕである、実施形態２４に記載の前記方法。
[３７]  Ｘａａ１９が、ＬｙｓまたはＡｒｇである、実施形態２４に記載の前記方法。
[３８]  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１がＡｓｐＰｈｅであるか、あるいはＸａａ２０がＡｓｎまたはＧｌｕであり、Ｘａａ２１が欠損している、実施形態２４に記載の前記方法。    [３９]  Ｘａａ１９  Ｘａａ２０  Ｘａａ２１が欠損している、実施形態２４に記載の前記方法。
[４０]  前記ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドが、アミノ酸配列Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ａｓｎ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ（配列番号３）、あるいは１個、２個、３個、４個、もしくは５個の欠失、挿入、及び／または置換を有するその変異体を含む、実施形態２４に記載の前記方法。
[４１]  前記ペプチドが、アミノ酸配列Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｔｙｒ  Ｃｙｓ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｐｒｏ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｔｙｒ（配列番号４）、あるいは１個、２個、３個、４個、もしくは５個の欠失、挿入、及び／または置換を有するその変異体を含む、実施形態２４に記載の前記方法。
[４２]  前記ＧＣ−Ｃ作動薬ペプチドが、アミノ酸配列（ＩＩＩ）：Ｘａａ１  Ｘａａ２  Ｘａａ３  Ｃｙｓ４  Ｘａａ５  Ｘａａ６  Ｘａａ７  Ｘａａ８  Ｘａａ９  Ｘａａ１０  Ｘａａ１１  Ｃｙｓ１２  Ｘａａ１３  Ｘａａ１４  Ｘａａ１５  Ｘａａ１６（配列番号５）を含み、Ｘａａ１が、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｇｌｎ、Ｐｒｏ、Ｌｙｓ、Ｇｌｙ、もしくはＴｈｒであるか、または欠損しており、Ｘａａ２が、Ｈｉｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｙであるか、または欠損しており、Ｘａａ３が、Ｔｈｒ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｇｌｕ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、またはＬｅｕであり、Ｘａａ５が、Ａｓｐ、Ｉｌｅ、またはＧｌｕであり、Ｘａａ６が、Ｉｌｅ、Ｔｒｐ、またはＬｅｕであり、Ｘａａ７が、Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、またはＴｙｒであり、Ｘａａ８が、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔであるか、または欠損しており、Ｘａａ９が、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、またはＴｒｐであり、Ｘａａ１０が、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、Ｔｈｒ、またはＩｌｅであり、Ｘａａ１１が、ＡｌａまたはＶａｌであり、Ｘａａ１３が、ＴｈｒまたはＡｌａであり、Ｘａａ１４が、Ｇｌｙ、Ａｌａ、またはＳｅｒであり、Ｘａａ１５が、Ｃｙｓ、Ｔｙｒであるか、または欠損しており、Ｘａａ１６が、Ｈｉｓ、Ｌｅｕ、またはＳｅｒである、実施形態２３に記載の前記方法。
[４３]  前記ペプチドが、アミノ酸配列Ａｓｎ  Ａｓｐ  Ｇｌｕ  Ｃｙｓ  Ｇｌｕ  Ｌｅｕ  Ｃｙｓ  Ｖａｌ  Ａｓｎ  Ｖａｌ  Ａｌａ  Ｃｙｓ  Ｔｈｒ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ｌｅｕ（配列番号６）、あるいは１個、２個、３個、４個、もしくは５個の欠失、挿入、及び／または置換を有するその変異体を含む、実施形態４２に記載の前記方法。
[４４]  前記Ｐ２Ｙ作動薬が、図４または図５Ａ〜５Ｃ中の化合物から選択される、実施形態２２に記載の前記方法。
[４５]  前記アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬が、図６Ａ〜６Ｃ中の化合物から選択される、実施形態２２に記載の前記方法。
[４６]  前記可溶性グアニル酸シクラーゼ作動薬が、図９Ａ〜９Ｌ中の化合物から選択される、実施形態２２に記載の前記方法。
[４７]  前記アデニル酸シクラーゼ受容体作動薬が、図１０中の化合物から選択される、実施形態２２に記載の前記方法。
[４８]  前記イミダゾリン−１受容体作動薬が、モクソニジン及び図１１中の化合物から選択される、実施形態２２に記載の前記方法。
[４９]  前記コリン作動薬が、図１２中の化合物から選択される、実施形態２２に記載の前記方法。
[５０]  前記プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬が、ＰＧＥ２またはその類似体／誘導体、及び図７または図１３中の化合物から選択される、実施形態２２に記載の前記方法。
[５１]  前記ドパミンＤ１作動薬が、図１４中の化合物から選択される、実施形態２２に記載の前記方法。
[５２]  前記メラトニン受容体作動薬が、メラトニン及び図１５中の化合物から選択される、実施形態２２に記載の前記方法。
[５３]  前記５ＨＴ４作動薬が、セロトニン及びその類似体、プルカロプリド、メトクロプラミド、クレオボプリド、モサプリド、プルカロプリド、レンザプリド、テガセロッド、ザコプリド、ノルシサプリド、ナロノプリド、ならびにベルセトラグから選択される、実施形態２２に記載の前記方法。
[５４]  前記心房性ナトリウム利尿ペプチド受容体作動薬が、Ｓｅｒ  Ｌｅｕ  Ａｒｇ  Ａｒｇ  Ｓｅｒ  Ｓｅｒ  Ｃｙｓ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ａｓｐ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｐｈｅ  Ａｒｇ  Ｔｙｒ（配列番号７）、Ｃｙｓ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ａｓｐ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ（配列番号８）、及びＳｅｒ  Ｓｅｒ  Ｃｙｓ  Ｐｈｅ  Ｇｌｙ  Ｇｌｙ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ａｓｐ  Ａｒｇ  Ｉｌｅ  Ｇｌｙ  Ａｌａ  Ｇｌｎ  Ｓｅｒ  Ｇｌｙ  Ｌｅｕ  Ｇｌｙ  Ｃｙｓ  Ａｓｎ  Ｓｅｒ  Ｐｈｅ  Ａｒｇ（配列番号９）から選択されるアミノ酸配列（１個、２個、３個、４個、もしくは５個の欠失、挿入、及び／または置換を有するそれらの変異体を含む）を含むか、またはそれから成る、実施形態２２に記載の前記方法。
[５５]  前記炭酸脱水酵素阻害薬が、図１７中の化合物から選択される、実施形態２２に記載の前記方法。
[５６]  前記ホスホジエステラーゼ阻害薬が、図１８中の化合物から選択される、実施形態２２に記載の前記方法。
[５７]  前記ＤＲＡ作動薬が、図２１Ａ〜Ｂから選択される、実施形態２２に記載の前記方法。
[５８]  前記化合物が、前記患者に経腸投与されると実質的に全身で生体利用不可能であり、（ｉ）少なくとも約２００Å２のｔＰＳＡを有する、実施形態１〜５７のいずれかに記載の前記方法。
[５９]  前記化合物が、少なくとも約２５０Å２のｔＰＳＡを有する、実施形態５８に記載の前記方法。
[６０]  前記化合物が、少なくとも約２７０Å２のｔＰＳＡを有する、実施形態５８に記載の前記方法。
[６１]  前記化合物が、少なくとも約３００Å２のｔＰＳＡを有する、実施形態５８に記載の前記方法。
[６２]  前記化合物が、少なくとも約３５０Å２のｔＰＳＡを有する、実施形態５８に記載の前記方法。
[６３]  前記化合物が、少なくとも約４００Å２のｔＰＳＡを有する、実施形態５８に記載の前記方法。
[６４]  前記化合物が、少なくとも約５００Å２のｔＰＳＡを有する、実施形態５８に記載の前記方法。
[６５]  前記化合物が、少なくとも約５００Ｄａの分子量を有する、実施形態５８に記載の前記方法。
[６６]  前記化合物が、少なくとも約１０００Ｄａの分子量を有する、実施形態５８に記載の前記方法。
[６７]  前記化合物が、少なくとも約２５００Ｄａの分子量を有する、実施形態５８に記載の前記方法。
[６８]  前記化合物が、少なくとも約５０００Ｄａの分子量を有する、実施形態５８に記載の前記方法。
[６９]  前記化合物が、（ｉ）ＮＨ及び／もしくはＯＨ及び／もしくは他の可能性のある水素結合供与体部分の約５超の総数、（ｉｉ）Ｏ原子及び／もしくはＮ原子及び／もしくは他の可能性のある水素結合受容体の約１０超の総数、ならびに／または（ｉｉｉ）約１０５超もしくは約１０未満のＭｏｒｉｇｕｃｈｉ分配係数を有する、実施形態５８に記載の前記方法。
[７０]  前記化合物が、約１００×１０−６ｃｍ／ｓ未満、または約１０×１０−６ｃｍ／ｓ未満、または約１×１０−６ｃｍ／ｓ未満、または約０．１×１０−６ｃｍ／ｓ未満の透過係数Ｐａｐｐを有する、実施形態５８に記載の前記方法。
[７１]  １つ以上の追加の生物活性剤を投与することをさらに含む、実施形態１〜７０のいずれかに記載の前記方法。
[７２]  前記化合物及び前記１つ以上の追加の生物活性剤が、単一の薬学的組成物の一部として投与される、実施形態７１に記載の前記方法。
[７３]  前記化合物及び前記１つ以上の追加の生物活性剤が、個別の薬学的組成物として投与される、実施形態７１に記載の前記方法。
[７４]  前記個別の薬学的組成物が、順次に投与される、実施形態７３に記載の前記方法。
[７５]  前記個別の薬学的組成物が、同時に投与される、実施形態７３に記載の前記方法。
[７６]  前記追加の生物活性剤が、ビタミンＤ２（エルゴカルシフェロール）、ビタミンＤ３（コレカルシフェロール）、活性型ビタミンＤ（カルシトリオール）、及び活性型ビタミンＤ類似体（例えばドキセルカルシフェロール、パリカルシトール）から選択される、実施形態７１〜７５のいずれかに記載の前記方法。
[７７]  前記追加の生物活性剤が、リン酸塩結合剤である、実施形態７１〜７５のいずれかに記載の前記方法。
[７８]  前記リン酸塩結合剤が、セベラマー（例えば、Ｒｅｎｖｅｌａ（登録商標）（炭酸セベラマー）、Ｒｅｎａｇｅｌ（登録商標）（塩酸セベラマー））、炭酸ランタン（例えば、Ｆｏｓｒｅｎｏｌ（登録商標））、炭酸カルシウム（例えば、Ｃａｌｃｉｃｈｅｗ（登録商標）、Ｔｉｔｒａｌａｃ（登録商標））、酢酸カルシウム（例えばＰｈｏｓＬｏ（登録商標）、Ｐｈｏｓｅｘ（登録商標））、酢酸カルシウム／炭酸マグネシウム（例えば、Ｒｅｎｅｐｈｏ（登録商標）、ＯｓｖａＲｅｎ（登録商標））、ＭＣＩ−１９６、クエン酸第二鉄（例えば、Ｚｅｒｅｎｅｘ（商標））、水酸化炭酸鉄マグネシウム（例えば、Ｆｅｒｍａｇａｔｅ（商標））、水酸化アルミニウム（例えば、Ａｌｕｃａｐｓ（登録商標）、Ｂａｓａｌｊｅｌ（登録商標））、ＡＰＳ１５８５、ＳＢＲ−７５９、及びＰＡ−２１から成る群から選択される、実施形態７７に記載の前記方法。
[７９]  前記追加の生物活性剤が、ＮａＰｉ２ｂ阻害薬である、実施形態７１〜７５のいずれかに記載の前記方法。
[８０]  前記追加の生物活性剤が、ナイアシンまたはニコチンアミドである、実施形態７１〜７５のいずれかに記載の前記方法。
[８１]  前記対象がＣＫＤを有し、前記さらに活性な生物剤が、ＡＣＥ阻害薬、アンチオゲンシンＩＩ受容体遮断薬、β遮断薬、カルシウムチャネル遮断薬、直接的レニン阻害薬、利尿薬、血管拡張薬、エリスロポエチン療法、鉄補充療法、終末糖化産物の阻害薬、ビタミンＤ、及びスタチンのうちの１つ以上から選択される、実施形態７１〜７５のいずれかに記載の前記方法。
[８２]  前記化合物または組成物が、経口投与される、実施形態１〜８１のいずれかに記載の前記方法。
[８３]  前記化合物または組成物が、１日１回経口投与される、実施形態８２に記載の前記方法。
[８４]  リン酸塩取り込みの阻害薬のスクリーニングの方法であって、（ａ）腸細胞を培養することと、（ｂ）前記培養された腸細胞を試験化合物と接触させることと、（ｃ）（ｉ）前記腸細胞の頂端表面におけるｐＨ、（ｉｉ）前記腸細胞の細胞内ｐＨ、及び／または（ｉｉｉ）前記腸細胞によるリン酸塩取り込みを測定することと、（ｄ）（ｃ）（ｉ）の前記ｐＨが対照と比べて増加し、（ｃ）（ｉｉ）の前記細胞内ｐＨが対照と比べて減少し、かつ／または（ｃ）（ｉｉｉ）のリン酸塩取り込みが対照と比べて減少する場合、前記試験化合物をリン酸塩取り込みの阻害薬として特定することと、を含む、前記方法。
[８５]  ステップ（ａ）が、腸細胞を単層培養することを含む、実施形態８４に記載の前記方法。
[８６]  ステップ（ａ）が、腸陰窩から前記細胞を単離し、エンテロイド（ｅｎｔｅｒｏｉｄ）を形成するのに十分な条件下で培養することを含む、実施形態８４に記載の前記方法。
[８７]  ステップ（ａ）が、単離した胚性幹細胞、内胚葉細胞、または多能性幹細胞を、オルガノイドを形成するのに十分な条件下で培養することを含む、実施形態８４に記載の前記方法。
[８８]  ステップ（ａ）が、腸切片（複数可）をＵｓｓｉｎｇチャンバ内で培養することを含む、実施形態８４に記載の前記方法。
[８９]  ステップ（ｃ）（ｉ）が、前記細胞をｐＨ感応性蛍光染料と接触させることと、前記染料の蛍光を測定することと、を含む、実施形態８４に記載の前記方法。
[９０]  ステップ（ｃ）（ｉｉ）が、前記細胞を３３Ｐ標識化リン酸イオンと接触させることと、前記標識化リン酸イオンの取り込みを測定することと、を含む、実施形態８４に記載の前記方法。
[９１]  （ｄ）の前記増加及び／または減少が、統計的に有意である、実施形態８４に記載の前記方法。
[９２]  前記試験化合物が、小腸内の重炭酸塩分泌を刺激し、かつ／または酸分泌を阻害することで知られるか、あるいはその疑いがある小分子またはペプチドである、実施形態８４に記載の前記方法。
[９３]  前記試験化合物が、Ｐ２Ｙ作動薬、アデノシンＡ２ｂ受容体作動薬、グアニル酸シクラーゼＣ受容体作動薬、可溶性グアニル酸シクラーゼ作動薬、アデニル酸シクラーゼ受容体作動薬、イミダゾリン−１受容体作動薬、コリン作動薬、プロスタグランジンＥＰ４受容体作動薬、ドパミンＤ１作動薬、メラトニン受容体作動薬、５ＨＴ４作動薬、心房性ナトリウム利尿ペプチド受容体作動薬、炭酸脱水酵素阻害薬、ホスホジエステラーゼ阻害薬、及び腺腫において下方制御される交換輸送体（ＤＲＡまたはＳＬＣ２６Ａ３）作動薬のうちの１つ以上から選択される、実施形態９２に記載の前記方法。
【外国語明細書】
2020063273000001.pdf