(57)【要約】【課題】水酸基を有する親水性高分子を含む被覆層を有する分離材に関して、動的吸着量の更なる向上を図ること。【解決手段】多孔質ポリマー粒子と、前記多孔質ポリマー粒子の表面の少なくとも一部を被覆する被覆層と、を備える分離材が開示される。被覆層が、水酸基を有する親水性高分子と、親水性高分子に結合したグラフト鎖と、を含む。グラフト鎖が、イオン交換基を有するモノマー単位を含む重合体である。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
多孔質ポリマー粒子と、前記多孔質ポリマー粒子の表面の少なくとも一部を被覆する被覆層と、を備え、
前記被覆層が、水酸基を有する親水性高分子と、前記親水性高分子に結合したグラフト鎖と、を含み、前記グラフト鎖が、イオン交換基を有するモノマー単位を含む重合体である、
分離材。
【請求項２】
前記イオン交換基が、スルホ基、カルボキシル基、及びこれらの塩から選ばれる少なくとも１種の陽イオン交換基、又は、ジエチルアミノエチル基、ジメチルアミノエチル基、及びトリメチルアンモニウム基から選ばれる少なくとも１種の陰イオン交換基である、請求項１に記載の分離材。
【請求項３】
前記親水性高分子が、多糖類又はその変性体である、請求項１又は２に記載の分離材。
【請求項４】
前記グラフト鎖における、前記イオン交換基を有するモノマー単位の割合が、前記グラフト鎖中の全モノマー単位の量を基準として５０〜１００ｍｏｌ％である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の分離材。
【請求項５】
当該分離材の窒素雰囲気下での５％重量減少温度が２００℃以上である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の分離材。
【請求項６】
イオン交換用担体である、請求項１〜５のいずれか一項に記載の分離材。
【請求項７】
カラム管と、前記カラム管に充填された請求項１〜６のいずれか一項に記載の分離材と、を備える、充填カラム。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、分離材及び充填カラムに関する。
【背景技術】
【０００２】
タンパク質に代表される生体高分子を分離精製するための分離材として、一般に、合成高分子を含む多孔質ポリマー粒子、又は、親水性天然高分子の架橋ゲルを母体とする粒子が用いられている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００３】
【特許文献１】米国特許第４９６５２８９号明細書
【特許文献２】米国特許第４３３５０１７号明細書
【特許文献３】米国特許第４３３６１６１号明細書
【特許文献４】米国特許第３９６６４８９号明細書
【特許文献５】特開平１−２５４２４７号公報
【特許文献６】米国特許第５１１４５７７号明細書
【特許文献７】特開２００９−２４４０６７号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００４】
水酸基を有する親水性高分子を含む被覆層を有する分離材は、タンパク質の非特異吸着が少ない点で優れている。しかし、この分離材は、動的吸着量の点で改善の余地がある。
【０００５】
本発明の一側面の目的は、水酸基を有する親水性高分子を含む被覆層を有する分離材に関して、動的吸着量の更なる向上を図ることにある。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明の一側面は、多孔質ポリマー粒子と、前記多孔質ポリマー粒子の表面の少なくとも一部を被覆する被覆層と、を備える分離材に関する。前記被覆層が、水酸基を有する親水性高分子と、前記親水性高分子に結合したグラフト鎖と、を含む。前記グラフト鎖が、イオン交換基を有するモノマー単位を含む重合体である。
【０００７】
本発明の別の一側面は、カラム管と、前記カラム管に充填された上記分離材と、を備える、充填カラムに関する。
【発明の効果】
【０００８】
本発明の一側面に係る分離材は、良好な通液性、及び低減された非特異吸着に加えて、十分に高い動的吸着量を示すことができる。本発明の分離材は、例えば、静電的相互作用、又はアフィニティ精製等により生体高分子を分離精製するために用いることができる。
【０００９】
いくつかの形態に係る分離材は、カラム管に充填されたときに、溶出液の性質に依らず、カラム管内での体積変化が殆どないという、操作性における優れた効果を発揮し得る。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
以下、本発明のいくつかの実施形態について詳細に説明する。ただし、本発明は以下の実施形態に限定されるものではない。
【００１１】
一実施形態に係る分離材は、多孔質ポリマー粒子と、多孔質ポリマー粒子の表面の少なくとも一部を被覆する被覆層とを備える粒子である。被覆層が、水酸基を有する親水性高分子と、親水性高分子に結合したグラフト鎖とを含む。グラフト鎖は、イオン交換基を有するモノマー単位を含む重合体である。本明細書において、「多孔質ポリマー粒子の表面」は、多孔質ポリマー粒子内部に形成された細孔の表面も含む。
【００１２】
（多孔質ポリマー粒子）
一実施形態に係る多孔質ポリマー粒子は、架橋ポリマーを含有する粒子であることができる。架橋ポリマーは、例えば、芳香族基と前記芳香族基に結合した２以上のビニル基とを有する架橋性モノマーに由来するモノマー単位を有する。架橋ポリマーによって形成された多孔質ポリマー粒子は、高い弾性率を有することができるため、カラム管に充填されたときに、破壊され難い。
【００１３】
多孔質ポリマー粒子の平均粒径は、５００μｍ以下、３００μｍ以下、又は１００μｍ以下であってもよい。多孔質ポリマ粒子の平均粒径は、１０μｍ以上、３０μｍ以上、又は５０μｍ以上であってもよい。平均粒径が小さくなると、分離材が充填された充填カラムの圧力が増加する可能性がある。
【００１４】
多孔質ポリマー粒子の粒径の変動係数（Ｃ．Ｖ．）は、通液性の観点からは、５〜１５％、又は５〜１０％であってもよい。粒径の変動係数を低減する方法としてマイクロプロセスサーバー（日立製作所製）等の乳化装置によりモノマーを含む液滴を単分散化する方法がある。
【００１５】
多孔質ポリマー粒子の平均粒径及び粒径の変動係数は、以下の測定法により求めることができる。
１）粒子を、水（界面活性剤等の分散剤を含む）に分散させ、１質量％の粒子を含む分散液を調製する。
２）粒度分布計（シスメックスフロー、シスメックス製）を用いて、分散液中の粒子約１万個の画像により平均粒径と粒径の変動係数を測定する。
【００１６】
多孔質ポリマー粒子又は分離材の全体積（細孔容積を含む）に対する細孔容積の割合（空隙率）は、３０％以上７０％以下であってもよい。多孔質ポリマーの細孔の大部分が、直径０．１μｍ以上０．５μｍ以下のマクロポアーであってもよい。言い換えると、多孔質ポリマー粒子の細孔径分布におけるモード径が、０．１〜０．５μｍであってもよい。空隙率が４０％以上７０％以下で、細孔径分布におけるモード径が０．０５μｍ以上０．３μｍ未満であってもよい。細孔径分布におけるモード径が０．１μｍ以上であると、物質が細孔に入りやすい傾向にある。細孔径分布におけるモード径が０．５μｍ以下であると、十分な比表面積が得られる傾向にある。空隙率及びモード径は、後述の多孔化剤により調整可能である。
【００１７】
多孔質ポリマー粒子の比表面積は、３０ｍ２／ｇ以上、３５ｍ２／ｇ以上、又は４０ｍ２／ｇ以上であってもよい。比表面積が小さいと分離される物質の吸着量が相対的に少なくなる傾向がある。
【００１８】
多孔質ポリマー粒子の、細孔径分布におけるモード径（又は平均細孔径）、比表面積、空隙率は水銀圧入測定装置（オートポア：島津製作所製）によって測定した値である。これらは以下のようにして測定できる。約０．０５ｇの試料を、標準５ｃｃ粉体用セル（ステム容積０．４ｃｃ）に採り、初期圧２１ｋＰａ（約３ｐｓｉａ、細孔直径約６０μｍ  相当）の条件で細孔分布を測定する。水銀パラメータは、装置デフォルトの水銀接触角１３０ｄｅｇｒｅｅｓ  、水銀表面張力４８５ｄｙｎｅｓ／ｃｍに設定する。細孔径０．０５〜５μｍの範囲に限定してそれぞれの値を算出する。
【００１９】
架橋ポリマーを含有する多孔質ポリマー粒子は、例えば、架橋性モノマー及び必要によりその他のモノマーを含むモノマー成分と、多孔化剤と、水性媒体とを含む反応液中での懸濁重合により、モノマー成分を重合することを含む方法により合成することができる。
【００２０】
架橋性モノマーは、例えば、ジビニルベンゼン、ジビニルビフェニル、ジビニルナフタレン、及びジビニルフェナントレン等のジビニル化合物であってもよい。これらの架橋性モノマーは、１種単独で使用しても２種類以上を併用してもよい。耐久性、耐酸性、及びアルカリ性の観点から、架橋性モノマーがジビニルベンゼンであってもよい。
【００２１】
単官能性モノマーを架橋性モノマーとともに重合してもよい。単官能性モノマーとしては、例えば、スチレン、ｏ−メチルスチレン、ｍ−メチルスチレン、ｐ−メチルスチレン、α−メチルスチレン、ｏ−エチルスチレン、ｍ−エチルスチレン、ｐ−エチルスチレン、２，４−ジメチルスチレン、ｐ−ｎ−ブチルスチレン、ｐ−ｔ−ブチルスチレン、ｐ−ｎ−ヘキシルスチレン、ｐ−ｎ−オクチルスチレン、ｐ−ｎ−ノニルスチレン、ｐ−ｎ−デシルスチレン、ｐ−ｎ−ドデシルスチレン、ｐ−メトキシスチレン、ｐ−フェニルスチレン、ｐ−クロロスチレン、及び３，４−ジクロロスチレン等のスチレン並びにこれらの誘導体が挙げられる。これらは１種単独で使用しても２種以上を併用してもよい。耐酸性及び耐アルカリ性の観点から、単官能性モノマーがスチレンであってもよい。カルボキシル基、アミノ基、水酸基、アルデヒド基等の官能基を有するスチレン誘導体も使用することができる。
【００２２】
多孔化剤は、重合時に粒子の相分離を促し、それにより多孔質ポリマー粒子を形成させる成分である。多孔化剤の一例は有機溶媒である。多孔化剤として用いられ得る有機溶媒の例としては、脂肪族又は芳香族の炭化水素、エステル、ケトン、エーテル、及びアルコールが挙げられる。多孔化剤は、例えば、トルエン、キシレン、シクロヘキサン、オクタン、酢酸ブチル、フタル酸ジブチル、メチルエチルケトン、ジブチルエーテル、１−ヘキサノール、２−オクタノール、デカノール、ラウリルアルコール、及びシクロヘキサノールからなる群より選ばれる少なくとも１種を含むことができる。
【００２３】
多孔化剤の量は、架橋性モノマー及びその他のモノマーの合計量に対して０〜３００質量％であってもよい。多孔化剤の量によって、多孔質ポリマー粒子の空孔率をコントロールできる。多孔化剤の種類によって、多孔質ポリマー粒子の細孔の大きさ及び形状をコントロールすることができる。
【００２４】
水性媒体が水を含んでいてもよい。この水を多孔化剤として機能させてもよい。例えば、反応液に油溶性界面活性剤を加えると、モノマー及び油溶性界面活性剤を含む粒子が形成され、この粒子が水を吸収することにより粒子内の相分離を促すことが可能である。相分離した粒子から一方の相を除去することにより、粒子が多孔質化される。
【００２５】
油溶性界面活性剤の例としては、分岐Ｃ１６〜Ｃ２４脂肪酸、鎖状不飽和Ｃ１６〜Ｃ２２脂肪酸又は鎖状飽和Ｃ１２〜Ｃ１４脂肪酸とソルビタンとから形成されたソルビタンモノエステル、分岐Ｃ１６〜Ｃ２４脂肪酸、鎖状不飽和Ｃ１６〜Ｃ２２脂肪酸又は鎖状飽和Ｃ１２〜Ｃ１４脂肪酸とジグリセロールとから形成されたジグリセロールモノ脂肪族エーテル、及び、ジグリセロールモノ脂肪族エーテルが挙げられる。ソルビタンモノエステルの例としては、ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノミリステート、及び、ヤシ脂肪酸のソルビタンモノエステルが挙げられる。ジグリセロールモノエステルの例としては、ジグリセロールモノオレエート、ジグリセロールモノミリステート、ジグリセロールモノイソステアレート、及び、ヤシ脂肪酸のジグリセロールモノエステルが挙げられる。ジグリセロールモノ脂肪族エーテルの例としては、分岐Ｃ１６〜Ｃ２４アルコール（例えば、ゲルベアルコール）、鎖状不飽和Ｃ１６〜Ｃ２２アルコール又は鎖状飽和Ｃ１２〜Ｃ１４アルコール（例えば、ヤシ脂肪アルコール）とジグリセロールとから形成されたモノ脂肪族エーテルが挙げられる。これらは１種を単独で又は２種以上を組み合わせて用いることができる。
【００２６】
油溶性界面活性剤の量は、モノマーの合計質量を基準として、５〜８０質量％であってもよい。これにより、モノマー及び油溶性界面活性剤を含む液滴が安定して形成され易い。
【００２７】
水性媒体は、水、又は、水と水溶性溶媒（例えば、低級アルコール）との混合溶媒を含む。水性媒体は、界面活性剤を含んでもよい。界面活性剤は、アニオン系、カチオン系、ノニオン系又は両性イオン系の界面活性剤であってもよい。
【００２８】
アニオン系界面活性剤としては、例えば、オレイン酸ナトリウム、ヒマシ油カリ等の脂肪酸油、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸アンモニウム等のアルキル硫酸エステル塩、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム等のアルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキルナフタレンスルホン酸塩、アルカンスルホン酸塩、ジオクチルスルホコハク酸ナトリウム等のジアルキルスルホコハク酸塩、アルケルニルコハク酸塩（ジカリウム塩）、アルキルリン酸エステル塩、ナフタレンスルホン酸ホルマリン縮合物、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル硫酸エステル塩、ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナトリウム等のポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、及びポリオキシエチレンアルキル硫酸エステル塩が挙げられる。
【００２９】
カチオン系界面活性剤としては、例えば、ラウリルアミンアセテート、ステアリルアミンアセテート等のアルキルアミン塩、及びラウリルトリメチルアンモニウムクロライド等の第四級アンモニウム塩が挙げられる。
【００３０】
ノニオン系界面活性剤としては、例えば、ポリエチレングリコールアルキルエーテル、ポリエチレングリコールアルキルアリールエーテル、ポリエチレングリコールエステル、ポリエチレングリコールソルビタンエステル、ポリアルキレングリコールアルキルアミン又はアミド等の炭化水素系ノニオン界面活性剤、シリコーンのポリエチレンオキサイド付加物又はポリプロピレンオキサイド付加物等のポリエーテル変性シリコーン系ノニオン界面活性剤、並びに、パーフルオロアルキルグリコール類等のフッ素系ノニオン界面活性剤が挙げられる。
【００３１】
両性イオン系界面活性剤としては、例えば、ラウリルジメチルアミンオキサイド等の炭化水素界面活性剤、リン酸エステル系界面活性剤及び亜リン酸エステル系界面活性剤が挙げられる。
【００３２】
界面活性剤は、１種単独で使用しても２種以上を併用してもよい。上記界面活性剤の中でも、モノマーの重合時の分散安定性の観点から、アニオン系界面活性剤が好ましい。
【００３３】
懸濁重合のための反応液は、重合開始剤を含んでもよい。重合開始剤としては、例えば、過酸化ベンゾイル、過酸化ラウロイル、オルソクロロ過酸化ベンゾイル、オルソメトキシ過酸化ベンゾイル、３，５，５−トリメチルヘキサノイルパーオキサイド、ｔｅｒｔ−ブチルパーオキシ−２−エチルヘキサノエート、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルパーオキサイド等の有機過酸化物；２，２’−アゾビスイソブチロニトリル、１，１’−アゾビスシクロヘキサンカルボニトリル、２，２’−アゾビス（２，４−ジメチルバレロニトリル）等のアゾ系化合物が挙げられる。重合開始剤の量は、モノマー１００質量部に対して、０．１〜７．０質量部であってもよい。
【００３４】
モノマーを含む粒子の分散安定性を向上させるために、反応液が分散安定剤を含んでいてもよい。分散安定剤としては、例えば、ポリビニルアルコール、ポリカルボン酸、セルロース類（ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース等）、ポリビニルピロリドンが挙げられる。これらとトリポリリン酸ナトリウム等の無機系水溶性高分子化合物とを併用してもよい。分散安定剤がポリビニルアルコール又はポリビニルピロリドンであってもよい。分散安定剤の量は、モノマー１００質量部に対して１〜１０質量部であってもよい。
【００３５】
懸濁重合のための反応液は、亜硝酸塩類、亜硫酸塩類、ハイドロキノン類、アスコルビン酸類、水溶性ビタミンＢ類、クエン酸、ポリフェノール類等の水溶性の重合禁止剤を含んでもよい。
【００３６】
懸濁重合のための重合温度は、モノマー及び重合開始剤の種類に応じて、適宜選択することができる。重合温度は、２５〜１１０℃、又は５０〜１００℃であってもよい。
【００３７】
（被覆層）
被覆層は、多孔質ポリマー粒子の表面の少なくとも一部を被覆する。被覆層は、水酸基を有する親水性高分子を含有する。多孔質ポリマー粒子の表面を覆う被覆層が設けられることにより、カラム圧の向上を抑制することができる。水酸基を有する親水性高分子を含有する被覆層は、タンパク質の非特異吸着を抑制することができる。親水性高分子が架橋されていてもよい。
【００３８】
親水性高分子及びグラフト鎖を含む被覆層の量が、多孔質ポリマー粒子１ｇに対して３０〜７５０ｍｇであってもよい。
【００３９】
分離材の窒素雰囲気下での５％重量減少温度が、２００℃以上であってもよい。５％重量減少温度が２００℃以上であると、動的吸着量が特に大きくなる傾向がある。５％重量減少温度の上限は、特に制限されないが、通常３００℃程度である。５％重量減少温度は、昇温しながら試料の質量変化を測定する熱重量分析において、試料の質量が初期から５％減少した時点の温度である。
【００４０】
水酸基を有する親水性高分子は、２個以上の水酸基を有していてもよい。水酸基を有する親水性高分子は、例えば、多糖類又はその変性体であってもよい。多糖類としては、アガロース、デキストラン、セルロース、ポリビニルアルコール、及びキトサンが挙げられる。多糖類の変性体は、疎水基が導入された多糖類を指す。疎水基を導入することで、被覆層の界面吸着能を向上させることができる。疎水基としては、例えば、炭素数１〜６のアルキル基、炭素数６〜１０のアリール基等が挙げられる。炭素数１〜６のアルキル基としては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基が挙げられる。炭素数６〜１０のアリール基としては、例えば、フェニル基、ナフチル基が挙げられる。疎水基は、水酸基と反応する官能基（例えば、エポキシ基）及び疎水基を有する化合物（例えば、グリシジルフェニルエーテル）を、水酸基を有する親水性高分子と反応させることにより、導入することができる。水酸基を有する親水性高分子の重量平均分子量は、１万〜２００万程度であってもよい。
【００４１】
水酸基を有する親水性高分子を含有する被覆層は、例えば、水酸基を有する親水性高分子の溶液を多孔質ポリマー粒子の表面に吸着させることと、多孔質ポリマー粒子の表面に吸着した親水性高分子を架橋させることとを含む方法により形成される。親水性高分子の溶液の溶媒としては、特に限定されないが、通常、水が最も一般的である。溶液における親水性高分子の濃度は、５〜５０（ｍｇ／ｍｌ）であってもよい。親水性高分子の溶液に多孔質ポリマー粒子を浸漬し、その状態で一定時間放置するころにより、親水性高分子の溶液を多孔質体の細孔内に含浸させる。含浸のための放置時間は、多孔質ポリマー粒子の表面状態によっても変わるが、通常１日放置すれば、親水性高分子の濃度が、多孔質ポリマー粒子の内部で外部濃度と平衡状態となる。その後、水、アルコール等の溶媒で洗浄し、未吸着分の親水性高分子を除去する。この段階で、通常、親水性高分子の溶液が細孔内に保持される。次いで、架橋剤を加えて親水性高分子を架橋させて、親水性高分子の架橋ゲルを形成させる。架橋反応は、親水性高分子の溶液を細孔内に保持している多孔質ポリマー粒子を媒体中に分散させ、得られた分散液に架橋剤を添加して得られる反応液中で行うことができる。反応液を必要により加熱してもよい。架橋ゲルは、３次元架橋網目構造を有する。
【００４２】
架橋剤としては、例えばジビニルスルホン及びエピクロルヒドリン等のエピハロヒドリン、グルタルアルデヒド等のジアルデヒド化合物、メチレンジイソシアネート、ジイソシアネート化合物、並びに、エチレングリコールジグリシジルエーテル等のグリシジル化合物等のような水酸基に活性な官能基を２個以上有する化合物が挙げられる。親水性高分子がキトサンのようにアミノ基を有する場合、ジクロルオクタンのようなジハライドを架橋剤として使用できる。架橋反応には通常触媒が用いられる。該触媒は架橋剤の種類により異なるが、例えば、架橋剤がエピクロルヒドリン等の場合には水酸化ナトリウム等のアルカリが有効であり、ジアルデヒド化合物の場合には塩酸等の鉱酸が有効である。
【００４３】
架橋剤の量は、親水性高分子が多糖類である場合、単糖類の１単位を１モルとすると、それに対して０．００１〜１００倍の範囲内であってもよい。一般に、架橋剤の量が少ないと、多孔質ポリマー粒子から被覆層が剥離し易くなる傾向がある。架橋剤の量が過剰であると、親水性高分子の特性が損なわれる可能性がある。架橋反応時の触媒の量は、親水性高分子が多糖類である場合、多糖類を形成する単糖類の１単位を１モルとすると、これに対して０．０１〜１０倍、又は０．１〜５倍の割合であってもよい。
【００４４】
架橋反応のための分散液の媒体は、親水性高分子の溶液から親水性高分子及び架橋剤等を抽出し難く、かつ、架橋反応に不活性である必要がある。媒体の具体例として水、アルコールが挙げられる。
【００４５】
架橋反応は、通常、温度５〜９０℃で、１〜１０時間かけて行われる。架橋反応の温度は、３０〜９０℃であってもよい。架橋反応が終了した後、濾過によって取り出した粒子を水、メタノール、エタノール等の親水性溶媒で洗浄し、未反応の親水性高分子及び媒体等を除去すると、多孔質ポリマー粒子及び被覆層を有する被覆粒子が得られる。被覆層は、通常、細孔内にも形成される。被覆層の量は、熱分解の重量減少、アンスロン法等で測定することができる。
【００４６】
被覆層は、親水性高分子に結合したグラフト鎖を更に含む。このグラフト鎖は、イオン交換基を有するモノマー単位を含む重合体である。イオン交換基を有するグラフト鎖を被覆層に導入することにより、タンパク質の動的吸着量を大幅に向上することができる。イオン交換基を有するモノマー単位を誘導するモノマーは、非特異吸着を防止する観点から、グラフト鎖を形成するために用いられる反応溶媒に溶解する化合物であってもよい。
【００４７】
イオン交換基は、陽イオン交換基又は陰イオン交換基であることができる。陽イオン交換基は、スルホ基（−ＳＯ３Ｈ）、カルボキシル基（−ＣＯＯＨ）、及びこれらの塩から選ばれる少なくとも１種であってもよい。陰イオン交換基は、ジエチルアミノエチル基、ジメチルアミノエチル基、及びトリメチルアンモニウム基から選ばれる少なくとも１種であってもよい。
【００４８】
陽イオン交換基を有するモノマー単位を誘導するモノマーの例として、アクリル酸、メタクリル酸、メタクリル酸ナトリウム、メタクリル酸トリメチルシリル、メタクリル酸３−スルホプロピルカリウム、２−アクリルアミド−２−メチルプロパンスルホン酸、ビニルスルホン酸、ビニルスルホン酸ナトリウム、アリルスルホン酸、アリルスルホン酸ナトリウム、２−メチル−２−プロペン−１−スルホン酸ナトリウム、リン酸２−(メタクリロイルオキシ)エチル、２−メタクリロイロキシエチルコハク酸、２−メタクロイロキシエチルアシッドホスフェート、及びオキソエタン酸が挙げられる。
【００４９】
陰イオン交換基を有するモノマー単位を誘導するモノマーの例として、メタクリル酸２−（ジメチルアミノ）エチル、メタクリル酸２−（ジエチルアミノ）エチル、（３−アクリルアミドプロピル）トリメチルアンモニウムクロリド、トリメチル−２−メタクロイルオキシエチルアンモニウムクロリド、リン酸２−（メタクリロイルオキシ）エチル２−（トリメチルアンモニオ）エチル、３−(メタクリルアミド）プロピルトリメチルアンモニウムクロライド、２−（メタクリロイルオキシ）エチルトリメチルアンモニウムメチルスルフェート、及び３−（メタクリルアミド）プロピルトリメチルアンモニウムメチルスルフェートが挙げられる。
【００５０】
グラフト鎖は、イオン交換基を有するモノマー単位の単独重合体であってもよいし、その他のモノマー単位を更に含む共重合体であってもよい。グラフト鎖における、イオン交換基を有するモノマー単位の割合が、グラフト鎖中の全モノマー単位の量を基準として５０〜１００ｍｏｌ％であってもよい。これにより、動的吸着量向上の効果が特に顕著に得られる。
【００５１】
グラフト鎖は、水酸基を有するモノマーに由来するモノマー単位を更に含んでいてもよい。水酸基を有するモノマー単位を誘導するモノマーの例として、（メタ）アクリル酸  ２−ヒドロキシエチル、（メタ）アクリル酸  ３−ヒドロキシブチル、（メタ）アクリル酸  ２−ヒドロキシプロピル、メタクリル酸  ２−（２−ヒドロキシエトキシ）エチル、メタクリル酸  ２，３−ジヒドロキシプロピル、ポリエチレングリコール（メタ）アクリレート、及びＮ−（２−ヒドロキシエチル）アクリルアミドが挙げられる。
【００５２】
イオン交換基を有するグラフト鎖の重量平均分子量は、０．０１万〜５０万であってもよい。本明細書において、重量平均分子量は、ゲル浸透クロマトグラフィーによって求められる、標準ポリスチレン換算の値を意味する。
【００５３】
グラフト鎖は、被覆層を有する被覆粒子の存在下で、イオン交換基を有するモノマーを含むモノマー成分を重合させることにより、形成することができる。例えば、被覆粒子と、モノマー成分と、過酸化物を含むラジカル重合開始剤と、反応溶媒とを含有する反応液中でモノマー成分を重合することで、親水性高分子に結合したグラフト鎖が形成される。イオン交換基を有するグラフト鎖が導入されたことは、例えば反応前後でのＸＰＳ、又は熱重量分析、イオン交換基量の定量等によって確認することができる。親水性高分子が多糖類である場合、通常、糖鎖の１級アルコールのα位の炭素に結合した水素原子が引き抜かれてラジカルが発生し、このラジカルを起点にグラフト鎖が成長する。
【００５４】
グラフト鎖が結合した親水性高分子は、例えば式：Ｒ−ＣＨＸ−ＯＨで表される。式中、Ｘはグラフト鎖を示し、Ｒは親水性高分子を示す。Ｒは、式中のＸ以外のグラフト鎖を含み得る。多糖類にグラフト鎖が導入される場合、この式で表される構造が形成されることが多い。
【００５５】
ラジカル重合開始剤としての過酸化物の例は、過硫酸ナトリウム、過硫酸カリウム、過硫酸アンモニウム、過酸化ベンゾイル、及び過酸化水素を含む。グラフト鎖の密度とグラフト鎖の分子量の観点から、過酸化物の濃度は、反応液の質量を基準として０．０１〜３０重量％であってもよい。
【００５６】
重合を促進するために、反応液が還元剤を含有してもよい。還元剤の例として、炭酸水素ナトリウム、亜硫酸水素ナトリウム、及び亜硫酸ナトリウムが挙げられる。還元剤を加えることで反応液のｐＨを調整することもできる。親水性高分子の加水分解抑制の観点から、反応液のｐＨは４〜９であってもよい。グラフト鎖の密度とグラフト鎖の長さの観点から、還元剤の濃度は、反応液の質量を基準として０．０１〜３０重量％であってもよい。
【００５７】
グラフト鎖を形成するための反応溶媒は、モノマー成分を溶解する溶媒であってもよい。反応溶媒は、例えば、水、アルコール、又は水と有機溶媒との混合溶媒であってもよい。
【００５８】
グラフト鎖を形成する反応は、例えば、温度１０〜９０℃、反応時間０．５〜１２時間の条件で行われる。
【００５９】
被覆層は、グラフト鎖に導入されたイオン交換基の他に、グラフト鎖以外の形態で親水性高分子に結合した追加のイオン交換基を更に有していてもよい。この追加のイオン交換基は、例えば、イオン交換基及びハロゲン化アルキル基を有する化合物と、親水性高分子の水酸基との反応により導入される。イオン交換基及びハロゲン化アルキル基を有する化合物の例としては、モノハロゲノ酢酸、モノハロゲノプロピオン酸等のモノハロゲノカルボン酸及びこれらのナトリウム塩、ジエチルアミノエチルクロライド等のハロゲン化アルキル基を少なくとも１つ有する１級、２級、及び３級アミン、並びにハロゲン化アルキル基を有する４級アンモニウムの塩酸塩が挙げられる。ハロゲン化アルキル基含有化合物は臭化物又は塩化物であってもよい。イオン交換基及びハロゲン化アルキル基を有する化合物の量は、追加のイオン交換基が導入される前の分離材の全質量に対して０．２質量％以上であってもよい。
【００６０】
追加のイオン交換基を導入する反応を促進するために、有機溶媒を用いてもよい。有機溶媒は、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、イソブタノール、１−ペンタノール、及びイソペンタノール等のアルコールであってもよい。例えば、グラフト鎖が導入された分離材を、湿潤状態で濾過等により水切りした後、所定濃度のアルカリ性水溶液に浸漬し、一定時間放置する。そこに、水−有機溶媒の混合溶媒と、イオン交換基及びハロゲン化アルキル基を有する化合物とを含む溶液を添加して、これを反応させる。この反応は、例えば、温度４０〜９０℃、反応時間０．５〜１２時間の条件で行われる。
【００６１】
追加のイオン交換基がアミノ基である場合、例えば、モノ−、ジ−又はトリ−アルキルアミノクロライド、モノ−、ジ−又はトリ−アルカノールアミノクロライド、モノ（又はジ−）アルキル−モノ（又はジ−）アルカノールアミノクロライド（但し、０内が同時に示されることはない。）等の２級又は３級アミノハロゲナイドが用いられる。
【００６２】
追加のイオン交換基が四級アンモニウム基である場合、３級アミノ基を導入し、その後、該３級アミノ基にエピクロルヒドリンのハロゲン化アルキル基含有化合物を反応させて４級アンモニウム基に変換させてもよい。４級アンモニウムクロライド等の４級アミノハロゲナイドを親水性高分子の水酸基と反応させてもよい。４級アンモニウム基を有するハロゲン化アルキル化合物をアルカリ条件下で反応させてもよい。
【００６３】
追加のイオン交換基がカルボキシル基である場合、例えば、モノハロゲノ酢酸、モノハロゲノプロピオン酸等のモノハロゲノカルボン酸又はそのナトリウム塩が用いられる。カルボン酸又はそのナトリウム塩の量は、追加のイオン交換基が導入される前の分離材の質量に対して０．２質量％以上であってもよい。
【００６４】
追加のイオン交換基がスルホ基である場合、分離材に対してエビクロロヒドリン等のグリシジル化合物を反応させてグリシジル基を導入し、その後、亜硫酸ナトリウム又は重亜硫酸ナトリウム等の亜硫酸塩又は重亜硫酸塩の飽和水溶液中でスルホ基を導入することができる。この反応は、例えば、温度３０〜９０℃、反応時間１〜１０時間の条件で行われる。
【００６５】
追加のイオン交換基を導入する他の方法としては、例えば、アルカリ性雰囲気下で、分離材に１，３−プロパンスルトンを反応させる方法も挙げられる。１．３−プロパンスルトンの量は、分離材の全質量に対して０．４質量％以上であってもよい。反応条件は、例えば、０〜９０℃で０．５〜１２時間であってもよい。アルカリ性雰囲気下で、分離材にスルホン酸もしくはスルホン酸塩を有するハロゲン化アルキルを反応させる方法も挙げられる。スルホン酸もしくはスルホン酸塩を有するハロゲン化アルキルの量は、分離材の全質量に対して０．４質量％以上であってもよい。
【００６６】
（分離材）
多孔質ポリマー粒子及び被覆層から構成される分離材の粒径は、例えば、１０〜３００μｍであってもよい。分取用又は工業用のクロマトグラフィーの充填剤として使用される場合、カラム内圧の極端な増加を避けるために、分離材の粒径が５０〜１００μｍであってもよい。
【００６７】
イオン交換基を有するグラフト鎖を有する分離材は、例えば、タンパク質の静電的相互作用による分離、又はアフィニティ精製に用いられる。例えば、タンパク質を含む混合溶液の中に分離材を添加し、静電的相互作用によりタンパク質だけを分離材に吸着させた後、分離材を溶液から濾別し、塩濃度の高い水溶液中に添加すれば、分離材に吸着しているタンパク質を容易に脱離、回収できる。分離材は、カラムクロマトグラフィーにおけるカラム充填剤としても有用である。カラムクロマトグラフィーに用いられる充填カラムは、カラム管と、カラム管に充填された分離材（カラム充填剤）とを備えることができる。陽イオン交換基又は陰イオン交換基が導入された分離材を、イオン交換用担体として用いることもできる。
【００６８】
一実施形態に係る分離材を用いて分離できる生体高分子としては、水溶性の物質が好ましい。生体高分子は、血清アルブミン、免疫グロブリン等の血液タンパク質等のタンパク質、生体中に存在する酵素、バイオテクノロジーにより生産されるタンパク質生理活性物質、又はＤＮＡであってもよい。生体高分子の分子量は２００万以下、又は５０万以下であってもよい。タンパク質の等電点、イオン化状態等によって、イオン交換基の性質及び条件を選ぶことができる。この点に関して、例えば、特開昭６０−１６９４２７号公報を参照することができる。
【００６９】
カラムでタンパク質の分離を行う場合、カラムに通液されるタンパク質溶液等の通液速度は、一般に４００ｃｍ／ｈ以下の範囲である。これに対して、一実施形態に係る分離材は、８００ｃｍ／ｈ以上の通液速度でも高い吸着容量で使用できる。ここでの通液速度とはφ７．８×３００ｍｍのステンレスカラム管に充填剤を充填し、液を流した際の通液速度を意味する。
【００７０】
多孔質ポリマー粒子の表面を、水酸基を有する架橋された水酸基を有する高分子を架橋により被覆し、陽イオン交換基または陰イオン交換基を有するモノマー由来の重合体を有するグラフト鎖の導入によりイオン交換基等を導入することにより、タンパク質等の生体高分子の分離において、イオン交換基を有するモノマー由来の重合体を有するグラフト鎖、水酸基を有する高分子、及び多孔質ポリマー粒子の持つそれぞれの利点をあわせ持った特性が示され得る。上述の実施形態に係る多孔質ポリマー粒子は、耐久性、耐アルカリ性が強い。水酸基を有する高分子の架橋体によって被覆層を形成することにより、非特異吸着も起こりにくい。また、イオン交換基を有するモノマー由来の重合体を有するグラフト鎖を導入することにより、タンパク質の脱吸着がしやすい。イオン交換基を有する分離材は、同一流速下でのタンパク質等の吸着容量（動的吸着容量）が大きい点でも従来のイオン交換樹脂に比べて好ましい性質を有する。
【実施例】
【００７１】
以下、実施例を挙げて本発明についてさらに具体的に説明する。ただし、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
【００７２】
１．多孔質ポリマー粒子
５００ｍＬの三口フラスコに、純度９６％のジビニルベンゼン（新日鉄住金化学株式会社製、商品名：ＤＶＢ９６０）１６ｇ、乳化剤（ソルビタンモノオレエート、商品名：スパン８０）６ｇ、及び過酸化ベンゾイル０．６４ｇを、ポリビニルアルコール水溶液（濃度０．５質量％）に加えた。得られた混合液をマイクロプロセスサーバーを使用して乳化し、連続相としてのポリビニルアルコール水溶液と、連続相中に分散したモノマー相とを含む乳化液を形成させた。モノマー相は、主としてジビニルベンゼン、乳化剤及び過酸化ベンゾイルを含む。得られた乳化液をフラスコに移した。乳化液を８０℃のウォーターバスで加熱しながら攪拌機を用いて約８時間撹拌することにより、ジビニルベンゼンの重合を進行させた。ジビニルベンゼン（ＤＶＢ）の重合体により形成された粒子を、ろ過により取り出し、アセトンで洗浄して、多孔質ポリマー粒子を得た。得られた多孔質ポリマー粒子の粒径をフロー型粒径測定装置で測定した。平均粒径は９９μｍで、粒径の変動係数（Ｃ．Ｖ．値）は８％であった。
【００７３】
２．分離材
実施例１
（水酸基を有するポリマーによる被覆層形成）
アガロース水溶液（濃度２質量％）１００ｍＬに水酸化ナトリウム４ｇ、及びグリシジルフェニルエーテル０．４ｇを加え、これらを７０℃で１２時間反応させて、アガロースにフェニル基を導入した。フェニル基が導入されたアガロース（変性アガロース）を、イソプロピルアルコールで３回再沈殿させることにより、洗浄した。
濃度２０ｍｇ／ｍＬの変性アガロース水溶液７００ｍＬを調製し、そこに多孔質ポリマー粒子１０ｇを分散させた。分散液を５５℃で２４時間攪拌することにより、多孔質ポリマー粒子の細孔内部を含む表面に変性アガロースを吸着させ、それにより変性アガロースを含む被覆層を有する被覆粒子を形成した。被覆粒子をろ過によって取り出し、熱水で洗浄した。多孔質ポリマー粒子への変性アガロースの吸着量を、ろ液中の変性アガロースの濃度から算出した。算出された吸着量は、多孔質ポリマー粒子１ｇ当たり、３００ｍｇであった。
１０ｇの被覆粒子を０．４Ｍ水酸化ナトリウム水溶液３５０ｇに分散させ、得られた分散液にエチレングリコールジグリシジルエーテルを１０ｇ添加した。その後、分散液を１２時間、室温にて攪拌することにより、被覆層中の変性アガロースをエチレングリコールジグリシジルエーテルによって架橋した。ろ過によって取り出した被覆粒子を、純水、加熱した２質量％のドデシル硫酸ナトリウム水溶液、及び水の順で洗浄して、架橋された変性アガロースを含む被覆層を有する被覆粒子を得た。
【００７４】
（タンパク質の非特異吸着能）
架橋された変性アガロースを含む被覆層を有する被覆粒子０．５ｇを、濃度２０ｍｇ／ｍＬのウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含むリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）５０ｍＬに投入した。分散液を２４時間、室温で攪拌した。その後、遠心分離で取得した上澄み液をろ過し、ろ液のＢＳＡ濃度を分光光度計で測定した。得られたＢＳＡ濃度から、被覆粒子に吸着したＢＳＡの量を算出した。ＢＳＡの濃度は分光光度計により２８０ｎｍの吸光度から確認した。吸着量は５ｍｇ以下であり、タンパク質の非特異吸着が十分に抑制されていた。
【００７５】
（グラフト鎖の導入）
５００ｍＬの三口フラスコに、架橋された変性アガロースを含む被覆層を有する被覆粒子１０ｇ、メタクリル酸３−スルホプロピルカリウム（ＳＰＭＡ）水溶液（濃度１０質量％）１００ｍＬ、及び過硫酸カリウム１ｇを投入した。フラスコ内の反応液に窒素ガスを２０分間、２００ｍＬ／ｍｉｎの割合で吹き込んだ。続いて、窒素ガスの吹き込みを維持したまま、７０℃のウォーターバスで加温しながら、反応液を８時間撹拌し、これにより被覆層中の変性アガロースに結合したグラフト鎖を形成した。反応液から取り出した被覆粒子を純水で洗浄して、イオン交換基を有するグラフト鎖が導入された被覆層を有する分離材の粒子を得た。熱重量・示差熱測定により、多孔質ポリマー粒子１ｇに対するグラフト鎖の質量の割合（ｍｇ／粒子ｇ、グラフト量）を求めた。
【００７６】
実施例２
メタクリル酸  ３−スルホプロピルカリウムの濃度を８質量％に変更し、メタクリル酸  ２−ヒドロキシエチル（ＨＥＭＡ）を濃度２質量％で更に反応液に加えたこと以外は実施例１と同様にして、イオン交換基を有するグラフト鎖が導入された被覆層を有する分離材の粒子を得た。得られた分離材のグラフト量を実施例１と同様に測定した。
【００７７】
実施例３
実施例１と同様にして、イオン交換基を有するグラフト鎖が導入された被覆層を有する分離材の粒子を得た。得られた分離材２０ｇを、２−クロロエタンスルホン酸ナトリウム塩２０ｇ及び水酸化ナトリウム２０ｇを含む水溶液１００ｍＬに分散させた。分散液を７０℃に加熱しながら８時間攪拌した。続いて、７０℃に加熱した５ＭのＮａＯＨ水溶液１００ｍＬを添加し、分散液を７０℃に加熱しながら更に１時間攪拌した。反応終了後、分離材をろ過により取り出し、水／エタノール（体積比８／２）の混合液で２回洗浄して、変性アガロースにエチレン基を介して結合した追加のイオン交換基が更に導入された被覆層を有する分離材を得た。得られた分離材のグラフト量を実施例１と同様に測定した。
【００７８】
実施例４
実施例１と同様にして、グラフト鎖が導入される前の被覆粒子を得た。反応液に窒素ガスを吹き込んだ後、反応液に還元剤として炭酸水素ナトリウム１ｇを加えたこと以外は実施例１と同様にして、イオン交換基を有するグラフト鎖が導入された被覆層を有する分離材の粒子を得た。得られた分離材のグラフト量を実施例１と同様に測定した。
【００７９】
実施例５
実施例１と同様にして、グラフト鎖が導入される前の被覆粒子を得た。メタクリル酸３−スルホプロピルカリウム水溶液をメタクリル酸ナトリウム（ＭＡ）水溶液（濃度１０質量％）に変更したこと以外は実施例１と同様にして、イオン交換基を有するグラフト鎖が導入された被覆層を有する分離材の粒子を得た。得られた分離材のグラフト量を実施例１と同様に測定した。
【００８０】
実施例６
実施例１と同様にして、グラフト鎖が導入される前の被覆粒子を得た。メタクリル酸３−スルホプロピルカリウム水溶液をメタクリル酸２―（ジエチルアミノ）エチル（ＤＥＡＥ-ＭＡ）水溶液（１０質量％）に変更したこと以外は実施例１と同様にして、イオン交換基を有するグラフト鎖が導入された被覆層を有する分離材の粒子を得た。得られた分離材のグラフト量を実施例１と同様に測定した。
【００８１】
実施例７
実施例１と同様にして、グラフト鎖が導入される前の被覆粒子を得た。メタクリル酸３−スルホプロピルカリウム水溶液をトリメチル−２−メタクロイルオキシエチルアンモニウムクロリド（Ｑ−ＭＡ）水溶液（１０質量％）に変更したこと以外は実施例１と同様にして、イオン交換基を有するグラフト鎖が導入された被覆層を有する分離材の粒子を得た。得られた分離材のグラフト量を実施例１と同様に測定した。
【００８２】
比較例１
実施例１と同様にして、グラフト鎖が導入される前の被覆粒子を得た。グラフト鎖を導入することなく、実施例３と同様の方法で変性アガロースに結合したイオン交換基を導入して、分離材の粒子を得た。
【００８３】
比較例２
実施例１と同様にして、グラフト鎖が導入される前の被覆粒子を得た。グラフト鎖を導入することなく、２−クロロエタンスルホン酸ナトリウム塩２０ｇをモノクロロ酢酸２０ｇに変更したこと以外は実施例３と同様の方法で変性アガロースに結合したイオン交換基を導入して、分離材の粒子を得た。
【００８４】
参考例
一般的な分離材との比較のため、市販のイオン交換クロマトグラフィー担体（Ｃａｐｔｏ  Ｓ（ＧＥヘルスケア製）を、そのまま参考例の分離材として評価した。このイオン交換クロマトグラフィー担体の粒径をフロー型粒径測定装置で測定したところ、平均粒径は９８μｍで、粒径の変動係数（Ｃ．Ｖ．値）は３８％であった。
【００８５】
３．分離材の評価
細孔径分布におけるモード径、比表面積、空隙率及び粒径の変動係数（Ｃ．Ｖ．）
分離材に関して、細孔径分布におけるモード径、比表面積及び空隙率を、水銀圧入測定によって測定した。分離材の粒径をフロー型粒径測定装置で測定し、測定結果から平均粒径及び粒径の変動係数（Ｃ．Ｖ．）を算出した。結果を表２に示す。
【００８６】
５％重量減少温度
熱重量分析装置を用いて、分離材の５％重量減少温度を測定した。５％重量減少温度が２００℃よりも低い場合、グラフト鎖導入のための反応の過程で加水分解により被覆層が分裂又は脱離した可能性がある。加水分解により被覆層が分裂又は脱離すると、被覆層の膨潤性及びイオン交換基量が低下し、その結果動的吸着量が低下する傾向がある。
【００８７】
４．充填カラム
充填カラムの作製
分離材の粒子をエタノールに分散して、粒子濃度３０質量％のスラリーを調製した。このスラリーをφ７．８×３００ｍｍのステンレスカラム管に１５分かけて充填した。これにより、カラム管に充填された分離材を有する充填カラムを得た。
【００８８】
通液性
充填カラムに流速を変えながら水を通液させ、そのときの線流速とカラム圧との関係を記録した。測定結果から、カラム圧０．３ＭＰａの時点の線流速を求めた。線流速に基づいて、以下の基準で分離材の通液性を評価した。
Ａ：線流速１５００ｃｍ／ｈ以上
Ｂ：線流速１０００ｃｍ／ｈ以上１５００ｃｍ／ｈ以下
Ｃ：線流速１０００ｃｍ／ｈ未満
【００８９】
動的吸着量
充填カラムに１０カラム容量の緩衝液を通液させた。その後、濃度２ｍｇ／ｍＬでタンパク質を含む緩衝液を充填カラムに流しながら、紫外線吸収に基づいてカラム出口でのタンパク質濃度を測定した。カラムの入口と出口でタンパク質濃度が一致するまで、タンパク質を含む緩衝液を充填カラムに通液させた。続いて、緩衝液に１Ｍ  ＮａＣｌを加えた溶液を準備し、これを１０カラム容量分、充填カラムに通液させ、それにより分離材に吸着したタンパク質を回収した。各充填カラムの評価において、以下のタンパク質及び緩衝液を用いた。
実施例１〜５及び比較例１、２
緩衝液：２０ｍｍｏｌ／Ｌの酢酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ５．０）
タンパク質：ＩｇＧ（免疫グロブリンＧ）
実施例６，７及び比較例３、４
緩衝液：２０ｍｍｏｌ／ＬのＴｒｉｓ−塩酸緩衝液（ｐＨ８．０）
タンパク質：ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）
【００９０】
１０％  ｂｒｅａｋｔｈｒｏｕｇｈにおける動的吸着量を、以下の式によって算出した。
ｑ１０＝ｃｆＦ（ｔ１０−ｔ０）／ＶＢ
ｑ１０：１０％  ｂｒｅａｋｔｈｒｏｕｇｈにおける動的吸着量（ｍｇ／ｍＬ  ｗｅｔ  ｒｅｓｉｎ）
ｃｆ：注入しているタンパク質濃度
Ｆ：流速（ｍＬ／ｍｉｎ）
ＶＢ：ベッド体積（ｍＬ）
ｔ１０：１０％ｂｒｅａｋｔｈｒｏｕｇｈにおける時間（ｍｉｎ）
ｔ０：タンパク質注入開始時間（ｍｉｎ）
【００９１】
【表１】
2020044496.tif 000002
【００９２】
【表２】
2020044496.tif 000003
【００９３】
表１は各分離材の構成を示し、表２は評価結果を示す。陽イオン交換基又は陰イオン交換基を有するグラフト鎖が導入された被覆層を有する実施例の分離材は、グラフト鎖が導入されていない比較例の分離材、及び市販の分離材と比較して、大幅に向上した動的吸着量を示した。また、実施例の分離材は、良好な通液性も示した。