(57)【要約】      （修正有）【課題】治療剤の半減期を延ばすための治療剤の提供。【解決手段】治療剤及び１以上の半減期延長部分を含む、修飾された治療剤であって、前記治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い、修飾された治療剤。【選択図】図１
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【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療剤及び１以上の半減期延長部分を含む、修飾された治療剤であって、前記治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い、修飾された治療剤。
【請求項２】
１以上の前記半減期延長部分の各々は、脂質、ポリグリコール領域、又はそれらの組み合わせを含む、ことを特徴とする請求項１に記載の修飾された治療剤。
【請求項３】
１以上の前記半減期延長部分の各々は、脂質を含む、ことを特徴とする請求項２に記載の修飾された治療剤。
【請求項４】
１以上の前記半減期延長部分の各々は、ポリグリコール領域を含む、ことを特徴とする請求項２に記載の修飾された治療剤。
【請求項５】
１以上の前記半減期延長部分の各々は、脂質とポリグリコール領域を含む、ことを特徴とする請求項２に記載の修飾された治療剤。
【請求項６】
前記脂質は、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、及びそれらの誘導体から成る群から選択される、ことを特徴とする請求項２に記載の修飾された治療剤。
【請求項７】
前記ポリグリコール領域は、１以上のポリエチレングリコール・ユニット、ポリプロピレングリコール・ユニット、又はポリブチレングリコール・ユニット、或いはそれらの組み合わせを含む、ことを特徴とする請求項２に記載の修飾された治療剤。
【請求項８】
前記ポリグリコール領域は、１０００以上のポリエチレングリコール・ユニット、ポリプロピレングリコール・ユニット、又はポリブチレングリコール・ユニット、或いはそれらの組み合わせを含む、ことを特徴とする請求項２に記載の修飾された治療剤。
【請求項９】
前記ペプチドは、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含む、ことを特徴とする請求項１に記載の修飾された治療剤。
【請求項１０】
前記ペプチドは、リラキシン、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、ヒトインスリン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、ペプチドベースの毒素、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択され、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである、ことを特徴とする請求項１に記載の修飾された治療剤。
【請求項１１】
前記ペプチドは、リラキシン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、Ｔｏｘｉｎ−５５０、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択され、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである、ことを特徴とする請求項１に記載の修飾された治療剤。
【請求項１２】
前記ペプチドはリラキシン又はその誘導体であり、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである、ことを特徴とする請求項１に記載の修飾された治療剤。
【請求項１３】
１以上の前記半減期延長部分の各々は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み、該拡張組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項１２に記載の修飾された治療剤。
【請求項１４】
前記ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたポリペプチド配列の少なくとも一部を含むアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項１に記載の修飾された治療剤。
【請求項１５】
前記ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたポリペプチド配列に基づくか、又はそれに由来する、１０以上のアミノ酸を含むアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項１に記載の修飾された治療剤。
【請求項１６】
前記ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約５０％相同するアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項１に記載の修飾された治療剤。
【請求項１７】
前記ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも８０％相同するアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項１に記載の修飾された治療剤。
【請求項１８】
前記システイン残基は、前記ペプチドのＮ末端又はＣ末端に位置する、ことを特徴とする請求項１に記載の修飾された治療剤。
【請求項１９】
前記システイン残基は、前記ペプチドの非末端位置に位置する、ことを特徴とする請求項１に記載の修飾された治療剤。
【請求項２０】
前記システイン残基は、前記ペプチド上のアミノ酸付加又は置換である、ことを特徴とする請求項１に記載の修飾された治療剤。
【請求項２１】
請求項１乃至２０の何れか１つの修飾された治療剤を含む、医薬組成物。
【請求項２２】
必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法であって、該方法は、治療上有効な量の請求項１に記載の修飾された治療剤を含む組成物を、被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項２３】
前記修飾された治療剤は、リラキシンペプチド、そのフラグメント、アナログ、複合体、又は凝集体を含む、ことを特徴とする請求項２２に記載の方法。
【請求項２４】
治療剤（ＴＡ）と１以上の半減期延長部分を含む、修飾された治療剤（ｍＴＡ）であって、前記治療剤（ＴＡ）は、１以上の前記半減期延長部分に付けられている、修飾された治療剤（ｍＴＡ）。
【請求項２５】
前記ＴＡはペプチドである、ことを特徴とする請求項２４に記載のｍＴＡ。
【請求項２６】
前記ＴＡは、１以上の前記半減期延長部分に共有結合される、ことを特徴とする請求項２４又は２５に記載のｍＴＡ。
【請求項２７】
前記ＴＡは、前記ＴＡにおいてシステイン残基を介して１以上の前記半減期延長部分に付けられる、ことを特徴とする請求項２４乃至２６の何れか１つに記載のｍＴＡ。
【請求項２８】
前記ｍＴＡの半減期は、前記ＴＡの半減期よりも長い、ことを特徴とする請求項２４乃至２７の何れか１つに記載のｍＴＡ。
【請求項２９】
１以上の前記半減期延長部分は、脂質、ポリグリコール領域、又はそれらの組み合わせを含む、ことを特徴とする請求項２４乃至２８の何れか１つに記載のｍＴＡ。
【請求項３０】
１以上の前記半減期延長部分は、脂質である、ことを特徴とする請求項２４乃至２８の何れか１つに記載のｍＴＡ。
【請求項３１】
１以上の前記半減期延長部分は、ポリグリコール領域を含む、ことを特徴とする請求項２４乃至２８の何れか１つに記載のｍＴＡ。
【請求項３２】
１以上の前記半減期延長部分は、脂質とポリグリコール領域を含む、ことを特徴とする請求項２４乃至２８の何れか１つに記載のｍＴＡ。
【請求項３３】
前記脂質は、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、及びそれらの誘導体から成る群から選択される、ことを特徴とする請求項２９に記載のｍＴＡ。
【請求項３４】
前記ポリグリコール領域は、１以上のポリエチレングリコール・ユニット、ポリプロピレングリコール・ユニット、又はポリブチレングリコール・ユニット、或いはそれらの組み合わせを含む、ことを特徴とする請求項２９に記載のｍＴＡ。
【請求項３５】
前記ポリグリコール領域は、１０００以上のポリエチレングリコール・ユニット、ポリプロピレングリコール・ユニット、又はポリブチレングリコール・ユニット、或いはそれらの組み合わせを含む、ことを特徴とする請求項２９に記載のｍＴＡ。
【請求項３６】
前記ペプチドは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０以上のアミノ酸付加、欠失、置換、又はそれらの組み合わせを含む、ことを特徴とする請求項２５に記載のｍＴＡ。
【請求項３７】
前記ペプチドは、リラキシン、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、ヒトインスリン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、ペプチドベースの毒素、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択され、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである、ことを特徴とする請求項２５に記載のｍＴＡ。
【請求項３８】
前記ペプチドは、リラキシン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、Ｔｏｘｉｎ−５５０、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択され、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである、ことを特徴とする請求項２５に記載のｍＴＡ。
【請求項３９】
前記ペプチドはリラキシン又はその誘導体であり、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである、ことを特徴とする請求項２５に記載のｍＴＡ。
【請求項４０】
１以上の前記半減期延長部分の各々は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み、該拡張組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項３９に記載のｍＴＡ。
【請求項４１】
前記ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７２％、７５％、７７％、８０％、８２％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項４０に記載のｍＴＡ。
【請求項４２】
実質的に非反復的な前記アミノ酸配列は、アミノ酸配列の３０％、２５％、２０％、１７％、１５％、１２％、１０％、８％、５％、３％、又は１％未満が繰り返されるアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項４０に記載のｍＴＡ。
【請求項４３】
前記ＸＴＥＮは、約９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、又は１％未満のアルファ螺旋を有するアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項４０に記載のｍＴＡ。
【請求項４４】
前記ＸＴＥＮは、約９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、又は１％未満のベータシートを有するアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項４０に記載のｍＴＡ。
【請求項４５】
前記治療剤は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列の少なくとも一部を含むアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項２４乃至３９の何れか１つに記載のｍＴＡ。
【請求項４６】
前記治療剤は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたポリペプチド配列に基づくか、又はそれに由来する、１０以上のアミノ酸を含むアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項２４乃至３９の何れか１つに記載のｍＴＡ。
【請求項４７】
前記治療剤は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約５０％相同するアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項２４乃至３９の何れか１つに記載のｍＴＡ。
【請求項４８】
前記治療剤は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも８０％相同するアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項２４乃至３９の何れか１つに記載のｍＴＡ。
【請求項４９】
前記システイン残基は、前記治療剤のＮ末端又はＣ末端に位置する、ことを特徴とする請求項２７に記載のｍＴＡ。
【請求項５０】
前記システイン残基は、前記治療剤の非末端位置に位置する、ことを特徴とする請求項２７に記載のｍＴＡ。
【請求項５１】
前記システイン残基は、前記治療剤上のアミノ酸付加又は置換である、ことを特徴とする請求項２７に記載のｍＴＡ。
【請求項５２】
請求項２４乃至５１の何れか１つに記載のｍＴＡを含む、医薬組成物。
【請求項５３】
必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法であって、該方法は、治療上有効な量の請求項２４乃至５１の何れか１つに記載のｍＴＡを含む組成物を、被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項５４】
前記治療剤は、リラキシンペプチド、そのフラグメント、アナログ、複合体、又は凝集体を含む、ことを特徴とする請求項５３に記載の方法。
【請求項５５】
前記疾患又は疾病は心血管障害である、ことを特徴とする請求項５３に記載の方法。
【請求項５６】
前記疾患又は疾病は、急性心不全である、ことを特徴とする請求項５３に記載の方法。
【請求項５７】
前記疾患又は疾病は線維症である、ことを特徴とする請求項５３に記載の方法。
【請求項５８】
前記疾患又は疾病は疼痛である、ことを特徴とする請求項５３に記載の方法。
【請求項５９】
疼痛は、神経障害性疼痛又は炎症性疼痛である、ことを特徴とする請求項５８に記載の方法。
【請求項６０】
被験体に１以上の追加の治療剤を投与する工程を更に含む、請求項５３に記載の方法。
【請求項６１】
１以上の追加の治療剤は、抗炎症薬、スタチン、利尿薬、ベータ遮断薬、アンギオテンシン転換酵素阻害剤、アンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、又はそれらの任意の組み合わせから成る群から選択される、ことを特徴とする請求項６０に記載の方法。
【請求項６２】
脂質複合体（ＬＣ）であって、ａ．ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から成る群から選択された、１以上の脂質；及びｂ．治療剤（ＴＡ）を含み、該ＴＡはペプチドであり、且つ１以上の前記脂質は、前記ペプチド上でアミノ酸残基を介して前記ＴＡに結合される、脂質複合体（ＬＣ）。
【請求項６３】
前記ＴＡは、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項６４】
１以上のシステイン又はリジンの残基は、１以上の前記アミノ酸の付加又は置換、或いはそれらの組み合わせにより導入される、ことを特徴とする請求項６３に記載のＬＣ。
【請求項６５】
前記ＴＡは、リラキシン、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、ヒトインスリン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、ペプチドベースの毒素、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択されるペプチドを含み、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項６６】
前記ＴＡは、リラキシン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、Ｔｏｘｉｎ−５５０、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択されるペプチドを含み、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項６７】
前記ＴＡはリラキシン又はその誘導体を含む、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項６８】
前記ＴＡはリラキシン誘導体を含む、ことを特徴とする請求項６７に記載のＬＣ。
【請求項６９】
前記リラキシン誘導体は、追加され、欠失され、又は置換され、或いはそれらの組み合わせを行った１以上のアミノ酸を含む、リラキシンの修飾されたＡ鎖を含む、ことを特徴とする請求項６８に記載のＬＣ。
【請求項７０】
前記リラキシン誘導体は、追加され、欠失され、又は置換され、或いはそれらの組み合わせを行った１以上のアミノ酸を含む、リラキシンの修飾されたＢ鎖を含む、ことを特徴とする請求項６８に記載のＬＣ。
【請求項７１】
リラキシン誘導体は、追加され、欠失され、又は置換され、或いはそれらの組み合わせを行った１以上のアミノ酸を含む、リラキシンの修飾されたＡ鎖；及び、追加され、欠失され、又は置換され、或いはそれらの組み合わせを行った１以上のアミノ酸を含む、リラキシンの修飾されたＢ鎖を含む、ことを特徴とする請求項６８に記載のＬＣ。
【請求項７２】
前記リラキシン誘導体は、追加され、欠失され、又は置換され、或いはそれらの組み合わせを行った１以上のアミノ酸を含む、修飾されたプロリラキシンを含む、ことを特徴とする請求項６８に記載のＬＣ。
【請求項７３】
前記ＴＡは、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１ＲとＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１ＲとＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、又はそれらの誘導体を含む、ことを特徴とする請求項６６に記載のＬＣ。
【請求項７４】
前記ＴＡは、ペプチジル毒素又はその誘導体を含み、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項７５】
前記ペプチジル毒素又はその誘導体は、硫酸アンモニウムを含むリフォールディングバッファーを使用してリフォールディングされる、ことを特徴とする請求項７４に記載のＬＣ。
【請求項７６】
前記ＴＡは、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、又はヒトインスリン、或いはそれらの誘導体を含み、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項７７】
前記アミノ酸残基はシステイン又はリジンである、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項７８】
前記アミノ酸残基はシステインである、ことを特徴とする請求項７７に記載のＬＣ。
【請求項７９】
前記アミノ酸残基は、前記ペプチド上のアミノ酸付加又はアミノ酸置換である、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項８０】
前記アミノ酸残基は、前記ペプチドのＮ末端又はＣ末端に位置する、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項８１】
前記アミノ酸残基は、前記ペプチドの非末端位置に位置する、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項８２】
１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを更に含む、請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項８３】
１以上の前記脂質はペグ化される、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項８４】
１以上の前記脂質は、オクタデカン二酸、テトラデシルアミン、ミリスチン酸、ステアリン酸、ドコサヘキサエン酸、リトコール酸エステル、コール酸、及びパルミチン酸から成る群から選択される、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項８５】
前記ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたポリペプチド配列の少なくとも一部を含むアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項８６】
前記ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたポリペプチド配列に基づくか、又はそれに由来する、１０以上のアミノ酸を含むアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項８７】
前記ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約５０％相同するアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項８８】
前記ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも８０％相同するアミノ酸配列を含む、ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項８９】
前記ＬＣは、以下の構造を有し：
【化１】
2020063249.tif 000077
式中：
ＴＡは治療剤であり；
Ａ１は、ＴＡ、及びＰ１、又はＬを連結する化学基であり；
Ｐ１は単結合であるか、又はポリグリコールを含み；及び
Ｌは脂質である
ことを特徴とする請求項６２に記載のＬＣ。
【請求項９０】
Ｐ１は単結合である、ことを特徴とする請求項８９に記載のＬＣ。
【請求項９１】
ＴＡのアミノ酸残基の硫黄原子又は窒素原子は、化学結合を介してＡ１に接続される、ことを特徴とする請求項８９に記載のＬＣ。
【請求項９２】
Ａ１は、
【化２】
2020063249.tif 000078
から選択され；及び
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は各々、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、−ＮＣ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＣ（Ｏ）ＯＲ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロアルキルであり；
ｋは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；
ｐは、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｑは、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０である
ことを特徴とする請求項８９に記載のＬＣ。
【請求項９３】
Ｐ１はポリグリコールを含む、ことを特徴とする請求項８９に記載のＬＣ。
【請求項９４】
Ｐ１は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；及び、Ａ２はＰＥＧ及びＬを連結する化学基である、ことを特徴とする請求項８９に記載のＬＣ
【請求項９５】
ＰＥＧは、
【化３】
2020063249.tif 000079
から選択され；ここで
ｍとｎは独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０である
ことを特徴とする請求項９４に記載のＬＣ。
【請求項９６】
Ａ２は、単結合、
【化４】
2020063249.tif 000080
から選択され；
Ｘは単結合、ＮＲ５、Ｓ、又はＯであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は各々、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアルキルであり；
Ｒ６はＯＨ又は−ＮＲ５Ｒ５であり；
Ｒ７は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、及びヘテロアルキルから独立して選択され；
ｒは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｓは、１、２、３、４、又は５である
ことを特徴とする請求項９４に記載のＬＣ。
【請求項９７】
１以上の前記脂質は、オクタデカン二酸、テトラデシルアミン、ミリスチン酸、ステアリン酸、ドコサヘキサエン酸、リトコール酸エステル、コール酸、及びパルミチン酸から成る群から選択される、ことを特徴とする請求項８９に記載のＬＣ。
【請求項９８】
請求項６２乃至９７の何れか１つに記載のＬＣを含む、医薬組成物。
【請求項９９】
必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法であって、該方法は、治療上有効な量の請求項６２に記載のＬＣを含む組成物を、被験体に投与する工程を含む、方法。
【請求項１００】
前記ＴＡは、リラキシンペプチド、そのフラグメント、アナログ、複合体、又は凝集体を含む、ことを特徴とする請求項９９に記載の方法。
【請求項１０１】
前記疾患又は疾病は心血管障害である、ことを特徴とする請求項９９に記載の方法。
【請求項１０２】
前記疾患又は疾病は、急性心不全である、ことを特徴とする請求項９９に記載の方法。
【請求項１０３】
前記疾患又は疾病は線維症である、ことを特徴とする請求項９９に記載の方法。
【請求項１０４】
前記疾患又は疾病は疼痛である、ことを特徴とする請求項９９に記載の方法。
【請求項１０５】
疼痛は、神経障害性疼痛又は炎症性疼痛である、ことを特徴とする請求項１０４に記載の方法。
【請求項１０６】
前記ＬＣは、１以上の追加の治療剤と共に投与される、ことを特徴とする請求項９９に記載の方法。
【請求項１０７】
１以上の追加の治療剤は、抗炎症薬、スタチン、利尿薬、ベータ遮断薬、アンギオテンシン転換酵素阻害剤、アンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、又はそれらの任意の組み合わせから成る群から選択される、ことを特徴とする請求項１０６に記載の方法。
【請求項１０８】
１以上の追加の治療剤はアスピリンである、ことを特徴とする請求項１０６に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
＜関連出願への相互参照＞
本出願は、２０１３年９月１３日出願の米国仮特許出願第６１／８７７，７９９号、及び２０１３年１２月１８日出願の米国仮特許出願第６１／９１７，８１６号の利益を主張するものであり、その全ては、全体において参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【０００２】
治療剤（例えば生物学的薬物）の開発は、短い半減期により頻繁に妨げられる。物質の生物学的半減期又は排出半減期は、物質（例えば、代謝物質、薬物、シグナル伝達分子、放射性核種、又は他の物質）が、その薬理学的、生理学的、又は放射線学的な活性の半分を失う時間である。短い半減期の結果、患者は大抵、より頻繁により多くの投与量を投与され、それにより、コンプライアンスの減少、高コスト、及びより高い副作用の危険性が引き起こされることもある。
【０００３】
持続放出性の生成物は、半減期が短い薬物の吸収を延ばし、それにより、より長い投与間隔を可能にし、一方で血清中薬物レベルの変動を最小限にするように、設計される。半減期を延ばすために使用される現在の計略は、流体力学的容量（ＰＥＧｙｌａｔｉｏｎ）を増加させるもの、又は、ＦｃＲｎを媒介とした再利用（アルブミン融合）を使用するものである。薬物へのポリペプチド又は親油性構成成分の付着も、生物学的薬剤の半減期を延ばすために使用されてきた（ＵＳ６，２６８，３４３；ＵＳ５，７５０，４９７；ＵＳ８，１２９，３４３）。
【０００４】
本開示は、治療剤の、生物学的、化学的、生理学的、薬理学的、薬物動態学的、及び／又は薬理学的な特性を改善するための、修飾された治療剤（ｍＴＡ）を提供する。
【発明の概要】
【０００５】
修飾された治療剤を形成するための方法と組成物が提供される。修飾された治療剤（ｍＴＡ）は、治療剤、及び１以上の半減期延長部分を含み得、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。ｍＴＡは、２以上の半減期延長部分を含んでもよい。２以上の半減期延長部分は同一でもよい。２以上の半減期延長部分は異なってもよい。１以上の半減期延長部分の、１つの半減期延長部分は、脂質、ポリグリコール領域、又はそれらの組み合わせを含んでもよい。１以上の半減期延長部分の各々は脂質を含んでもよい。１以上の半減期延長部分はポリグリコール領域を含んでもよい。１以上の半減期延長部分は、脂質とポリグリコール領域を含んでもよい。１以上の半減期延長部分の、１つの半減期延長部分は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み得、該拡張組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含む。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得る。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約７０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。脂質は、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸（ｆａｔｔｙ  ｄｉ−ａｃｉｄ）、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコールから成る群、並びにそれらの誘導体から選択されてもよい。ポリグリコール領域は、１以上のポリエチレングリコール・ユニット、ポリプロピレングリコール・ユニット、又はポリブチレングリコール・ユニット、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。ポリグリコール領域は、１０００以上のポリエチレングリコール・ユニット、ポリプロピレングリコール・ユニット、又はポリブチレングリコール・ユニット、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。ペプチドは、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。ペプチドは、リラキシン、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、ヒトインスリン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬ��−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、ペプチドベースの毒素、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれら誘導体から選択されてもよく、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ペプチドは、リラキシン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、Ｔｏｘｉｎ−５５０、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択されてもよく、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ペプチドはリラキシン又はその誘導体であってもよく、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたポリペプチド配列の少なくとも一部を含む、アミノ酸配列によってコード化されてもよい。ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたポリペプチド配列に基づくか、又はそれに由来する、１０以上のアミノ酸を含むアミノ酸配列によってコード化されてもよい。ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約５０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも８０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択された、１以上のアミノ酸配列を含んでもよい。ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択された、２以上のアミノ酸配列を含んでもよい。システイン残基は、ペプチドのＮ末端又はＣ末端に置かれてもよい。システイン残基は、ペプチドの非末端位置に置かれてもよい。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。
【０００６】
脂質複合体（ＬＣ）を形成するための方法と組成物が提供される。脂質複合体（ＬＣ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された、１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはペプチドであり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸残基を介してＴＡに結合される、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。アミノ酸残基はシステイン又はリジンであってもよい。アミノ酸残基はシステインであってもよい。アミノ酸残基は、ペプチド上のアミノ酸付加又はアミノ酸置換であってもよい。アミノ酸残基は、ペプチドのＮ末端又はＣ末端に置かれてもよい。アミノ酸残基はペプチドの非末端位置に置かれてもよい。ＴＡは、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであってもよい。１以上のシステイン又はリジンの残基は、１以上のアミノ酸の付加又は置換、或いはそれらの組み合わせにより導入されてもよい。脂質複合体（ＬＣ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコール、１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上の脂質がシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。
【０００７】
本明細書には更に脂質複合体（ＬＣ）が開示され、該脂質複合体は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された、１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体であり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸残基を介してＴＡに結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。本明細書には更に脂質複合体（ＬＣ）が開示され、該脂質複合体は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコール、１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上のＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体を含み、１以上の脂質がシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【０００８】
本明細書には更に脂質複合体（ＬＣ）が開示され、該脂質複合体は、１以上の治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み、１以上のＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。本明細書には更に脂質複合体（ＬＣ）が開示され、該脂質複合体は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された、１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む、治療剤（ＴＡ）を含む。
【０００９】
本明細書には、ＬＣを含む医薬組成物が開示され、該ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上の脂質がシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。
【００１０】
本明細書には、ＬＣを含む医薬組成物が開示され、該ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはペプチドであり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸残基を介してＴＡに結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【００１１】
本明細書には更に、ＬＣを含む医薬組成物が開示され、該ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上のＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体を含み、１以上の脂質はシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【００１２】
本明細書には更に、ＬＣを含む医薬組成物が開示され、該ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体であり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸残基を介してＴＡに結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【００１３】
本明細書には更に、ＬＣを含む医薬組成物が開示され、該ＬＣは、１以上の治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み、１以上のＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。
【００１４】
本明細書には、ＬＣを含む医薬組成物が開示され、該ＬＣは、治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み、ＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。
【００１５】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、ＬＣを含む組成物を被験体に投与する工程を含み、前記ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはペプチドであり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸残基を介してＴＡに結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【００１６】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、ＬＣを含む組成物を被験体に投与する工程を含み、前記ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上の脂質がシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【００１７】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、ＬＣを含む組成物を被験体に投与する工程を含み、前記ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上のＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体を含み、１以上の脂質はシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【００１８】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、ＬＣを含む組成物を被験体に投与する工程を含み、前記ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体であり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸残基を介してＴＡに結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【００１９】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、ＬＣを含む組成物を被験体に投与する工程を含み、前記ＬＣは、１以上の治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み、１以上のＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。
【００２０】
本明細書には、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、ＬＣを含む組成物を被験体に投与する工程を含み、前記ＬＣは、治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み、ＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。
【００２１】
本明細書には更に、ＬＣを含むキットが開示され、該ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはペプチドであり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸残基を介してＴＡに結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【００２２】
本明細書には更に、ＬＣを含むキットが開示され、該ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上の脂質がシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【００２３】
本明細書には更に、ＬＣを含むキットが開示され、該ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体であり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸残基を介してＴＡに結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【００２４】
本明細書には更に、ＬＣを含むキットが開示され、該ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上のＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体を含み、１以上の脂質はシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【００２５】
本明細書には、ＬＣを含むキットが開示され、該ＬＣは、治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み、ＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。
【００２６】
本明細書には更に、ＬＣを含むキットが開示され、該ＬＣは、１以上の治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み、１以上のＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。
【００２７】
本明細書には、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９のポリヌクレオチド配列を含むベクターが開示される。
【００２８】
本明細書には、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９のポリヌクレオチド配列を含む宿主細胞が開示される。
【００２９】
本明細書には、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６のポリペプチドをコード化するポリヌクレオチド配列を含むベクターが開示される。
【００３０】
本明細書には、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６のポリペプチドをコード化するポリヌクレオチド配列を含む宿主細胞が開示される。
【００３１】
本明細書に開示されるＬＣは更に、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む。
【００３２】
本明細書に開示されるＬＣは、１以上のペグ化された脂質を含んでもよい。
【００３３】
ＬＣは以下の構造を有してもよく：
【００３４】
【化１】
2020063249.tif 000003
式中：ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ、及びＰ１、又はＬを連結する化学基であり；Ｐ１は単結合であるか、又はポリグリコールを含み；及びＬは脂質である。Ｐ１は単結合でもよい。ＴＡのアミノ酸残基の硫黄原子又は窒素原子は、化学結合を介してＡ１に接続されてもよい。Ｐ１はポリグリコールを含んでもよい。Ｐ１は−ＰＥＧ−Ａ２−であってもよく；ここで、ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；及び、Ａ２はＰＥＧ及びＬを連結する化学基である。ＰＥＧは、
【００３５】
【化２】
2020063249.tif 000004
から選択されてもよく；ここで、ｍとｎは独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０である。１以上の脂質は、オクタデカン二酸、テトラデシルアミン、ミリスチン酸、ステアリン酸、ドコサヘキサエン酸、リトコール酸エステル、コール酸、及びパルミチン酸から成る群から選択されてもよい。
【００３６】
式（Ｉ）のＬＣに係る、本明細書に記載される幾つかの実施形態において、Ａ１は
【００３７】
【化３】
2020063249.tif 000005
から選択され；及び
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は各々、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、−ＮＣ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＣ（Ｏ）ＯＲ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロアルキルであり；
ｋは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；
ｐは、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｑは、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０である。
【００３８】
式（Ｉ）のＬＣに係る、本明細書に記載される幾つかの実施形態において、Ａ２は
【００３９】
【化４】
2020063249.tif 000006
から選択され；
Ｘは単結合、ＮＲ５、Ｓ、又はＯであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は各々、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアルキルであり；
Ｒ６はＯＨ又は−ＮＲ５Ｒ５であり；
Ｒ７は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、及びヘテロアルキルから独立して選択され；
ｒは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｓは、１、２、３、４、又は５である。
【００４０】
ＬＣは以下の構造を有してもよく：
【００４１】
【化５】
2020063249.tif 000007
式中：ＴＡはシステイン残基を備えた治療剤であり、ここで、システイン残基はＡ１に接続され；Ａ１は、ＴＡ及びＰ１を連結する化学基であり；Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；Ａ２は、ＰＥＧ及びＬを連結する化学基であり；及び、Ｌは脂質である。
【００４２】
式（Ｉａ）のＴＡのシステイン残基の硫黄原子は、化学結合を介してＡ１に接続されてもよい。
【００４３】
式（Ｉａ）のＬＣのＰＥＧは、
【００４４】
【化６】
2020063249.tif 000008
から選択されてもよく；式中
ｍとｎは独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０であってもよい。
【００４５】
式（Ｉａ）のＬＣに係る、本明細書に記載される幾つかの実施形態において、Ａ１は
【００４６】
【化７】
2020063249.tif 000009
から選択され；及び
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアルキルであり；
ｐは、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｑは、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０である。
【００４７】
式（Ｉａ）のＬＣに係る、本明細書に記載される幾つかの実施形態において、Ａ２は、単結合、
【００４８】
【化８】
2020063249.tif 000010
から選択され；
Ｘは単結合、ＮＲ５、又はＯであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアルキルであり；
Ｒ７は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、及びヘテロアルキルから独立して選択され；
ｒは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｓは、１、２、３、４、又は５である。
【００４９】
Ｐ１は、式（Ｉａ）のＬＣのためのＰＥＧ−Ａ２であってもよい。
【００５０】
式（Ｉ）又は（Ｉａ）のＬＣは、修飾されたリラキシンペプチドを含むＴＡを含んでもよい。式（Ｉ）又は（Ｉａ）のＬＣは、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択される、１以上の脂質を含んでもよい。
【００５１】
治療剤への１以上の脂質の付着は、共有結合を含み得る。修飾されたリラキシンペプチドへの１以上の脂質の付着は、共有結合を含み得る。
【００５２】
１以上の脂質は、システイン残基を介して治療剤に付けられてもよい。１以上の脂質は、システイン残基を介して、修飾されたリラキシンに付けられてもよい。
【００５３】
本明細書には、Ａ３−Ｐ１−Ｌの構造を持つ化合物が開示され、式中：Ａ３はハロアセトアミド、マレイミド、ハロゲン化ベンジル、又はピリジルジスルフィドであり；Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；Ａ２は、ＰＥＧ及びＬを連結する化学基であり；及び、Ｌは、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択される。
【００５４】
本明細書には更に、Ａ３−Ｐ１−Ｌの構造を持つ化合物が開示され、式中：Ａ３はハロアセトアミド、マレイミド、ハロゲン化ベンジル、又はピリジルジスルフィドであり；Ｐ１は単結合であるか、又はポリグリコールを含み；及び、Ｌは、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン及び脂肪族アルコールから選択される。
【００５５】
本明細書には、１以上の脂質を含む方法及び組成物が開示される。１以上の脂質は、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、脂肪二酸、脂肪族アミド、多価不飽和脂肪酸、短鎖脂肪酸、中鎖脂肪酸、長鎖脂肪酸、及び非常に長い鎖の脂肪酸から成る群から選択されてもよい。
【００５６】
脂質は、プロパン酸、ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ウンデカン酸、ドデカン酸、トリデカン酸、テトラデカン酸、ミリスチン酸、ペンタデカン酸、ヘキサデカン酸、ヘプタデカン酸、オクタデカン酸、ノナデカン酸、エイコサン酸、ヘンエイコサン酸（ｈｅｎｅｉｃｏｓａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ）、ドコサン酸、トリコサン酸、テトラコサン酸、ペンタコサン酸、セロチン酸、ヘプタコサン酸、オクタコサン酸、ノナコサン酸、トリアコンタン酸、ヘントリアコンタン酸（ｈｅｎａｔｒｉａｃｏｎｔａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ）、ドトリアコンタン酸、トリトリアコンタン酸、テトラトリアコンタン酸、ペンタトリアコンタン酸、及びヘキサトリアコンタン酸から成る群から選択されてもよい。
【００５７】
１以上の脂質は、ミリストレイン酸、パルミトレイン酸、サピエン酸、オレイン酸、エライジン酸、バクセン酸、リノール酸、リノール酸（ｌｉｎｏｅｌａｉｄｉｃ  ａｃｉｄ）、α−リノレン酸、アラキドン酸、エイコサペンタノン酸、エルカ酸、ドコサヘキサエン酸から成る群から選択されてもよい。
【００５８】
１以上の脂質は、オクタデカン二酸、テトラデシルアミン、ミリスチン酸、ステアリン酸、ドコサヘキサエン酸、リトコール酸エステル、コール酸、及びパルミチン酸から成る群から選択されてもよい。
【００５９】
１以上の脂質はミリスチン酸を含んでもよい。１以上の脂質はドコサヘキサエン酸を含んでもよい。１以上の脂質はリトコール酸エステルを含んでもよい。１以上の脂質はコール酸を含んでもよい。１以上の脂質はパルミチン酸を含んでもよい。１以上の脂質はオクタデカン二酸を含んでもよい。１以上の脂質はテトラデシルアミンを含んでもよい。１以上の脂質はステアリン酸を含んでもよい。
【００６０】
脂肪酸は、少なくとも約６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０以上の炭素原子を含んでもよい。
【００６１】
１以上の脂質は、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸、多価不飽和脂肪酸、短鎖脂肪酸、中鎖脂肪酸、長鎖脂肪酸、及び非常に長い鎖の脂肪酸から成る群から選択された脂肪酸に由来する、脂肪族アルコールを含んでもよい。
【００６２】
１以上の脂質は、コレステロール、７−ＯＨコレステロール、７，２５−ジヒドロキシコレステロール、コール酸、ケノデオキシコール酸、リトコール酸、デオキシコール酸、グリココール酸、グリコデオキシコール酸、グリコリトコール酸、及びグリコケノデオキシコール酸から成る群から選択されてもよい。
【００６３】
１以上の脂質は、コール酸、ケノデオキシコール酸、リトコール酸、デオキシコール酸、グリココール酸、グリコデオキシコール酸、グリコリトコール酸、及びグリコケノデオキシコール酸から成る群から選択されてもよい。
【００６４】
１以上の脂質は、α−トコフェロール、β−トコフェロール、γ−トコフェロール、δ−トコフェロール、α−トコトリエノール、β−トコトリエノール、γ−トコトリエノール、及びδ−トコトリエノールから成る群から選択されてもよい。
【００６５】
本明細書には、１以上の治療剤（ＴＡ）を含む方法及び組成物が開示される。方法と組成物は治療剤（ＴＡ）を含み得る。１以上のＴＡは、タンパク質、生体分子、化学物質、毒素、薬物、又はそれらの任意の組み合わせの少なくとも一部を含んでもよい。
【００６６】
１以上のＴＡは、ホルモン、キナーゼ、受容体、リガンド、増殖因子、調節タンパク質、代謝タンパク質、サイトカイン、抗体、又はそれらの任意の組み合わせの少なくとも一部を含んでもよい。
【００６７】
１以上のＴＡは、リラキシン、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、ヒトインスリン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、ペプチドベースの毒素、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、並びにそれらの誘導体から選択されたペプチドでもよく、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。１以上のＴＡは、リラキシン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、ペプチドベースの毒素、Ｍｏｋａ、又はＶＭ−２４、又はそれらの誘導体を含んでもよく、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。１以上のＴＡは、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、又はＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、又はそれらの誘導体を含んでもよく、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。１以上のＴＡは、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、又はヒトインスリン、又はそれらの誘導体を含んでもよく、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。１以上のＴＡは、ペプチジル毒素（ｐｅｐｔｉｄｙｌ  ｔｏｘｉｎ）又はその誘導体を含んでもよく、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ペプチジル毒素又はその誘導体は、硫酸アンモニウムを含むリフォールディングバッファーを使用して、リフォールディングされてもよい。
【００６８】
１以上のＴＡは、リラキシンペプチド又はその誘導体を含んでもよく、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。リラキシン誘導体は、追加され、欠失され、又は置換され、或いはそれらの組み合わせを行った１以上のアミノ酸を含む、リラキシンの修飾されたＡ鎖を含んでもよい。リラキシン誘導体は、追加され、欠失され、又は置換され、或いはそれらの組み合わせを行った１以上のアミノ酸を含む、リラキシンの修飾されたＢ鎖を含んでもよい。リラキシン誘導体は、追加され、欠失され、又は置換され、或いはそれらの組み合わせを行った１以上のアミノ酸を含む、リラキシンの修飾されたＡ鎖；及び、追加され、欠失され、又は置換され、或いはそれらの組み合わせを行った１以上のアミノ酸を含む、リラキシンの修飾されたＢ鎖を含んででもよい。リラキシン誘導体は、追加され、欠失され、又は置換され、或いはそれらの組み合わせを行った１以上のアミノ酸を含む、の修飾されたプロリラキシンを含んでもよい。
【００６９】
ＴＡは、オキシントモジュリン又はその誘導体であってもよく、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ＴＡはエキセンジン−４又はその誘導体であってもよく、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ＴＡはエクセナチド又はその誘導体であってもよく、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ＴＡはグルカゴン様ペプチド（ＧＬＰ−１）又はその誘導体であってもよく、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ＴＡはグルカゴン又はその誘導体であってもよく、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。
【００７０】
１以上のＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９から成る群から選択されたヌクレオチド配列によってコード化されてもよい。
【００７１】
１以上のＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９から成る群から選択されたヌクレオチド配列に基づくか、或いはそれに由来する、２０以上のヌクレオチドを含むヌクレオチド配列によってコード化されてもよい。
【００７２】
１以上のＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９から成る群から選択されたヌクレオチド配列に、少なくとも５０％相同するヌクレオチド配列によってコード化されてもよい。
【００７３】
１以上のＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９から成る群から選択されたヌクレオチド配列に、少なくとも約５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、９９％相同するヌクレオチド配列によってコード化されてもよい。
【００７４】
１以上のＴＡは、２００以下のヌクレオチドを含むヌクレオチド配列によってコード化されてもよい。
【００７５】
１以上のＴＡは、６０−１５００以下のヌクレオチドを含むヌクレオチド配列によってコード化されてもよい。
【００７６】
１以上のＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたポリペプチド配列の少なくとも一部を含む、アミノ酸配列によってコード化されてもよい。
【００７７】
１以上のＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたポリペプチド配列に基づくか、又はそれに由来する、１０以上のアミノ酸を含み得るアミノ酸配列によってコード化される。
【００７８】
１以上のＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来する、２０−５００以上のアミノ酸を含む、アミノ酸配列を含んでもよい。
【００７９】
１以上のＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約５０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。
【００８０】
１以上のＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。
【００８１】
１以上のＴＡはリラキシンペプチドを含んでもよい。リラキシンペプチドは、修飾されたリラキシンペプチドを含んでもよい。修飾されたラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を含む、野生型リラキシンペプチドの少なくとも一部を含んでもよい。リラキシンペプチドは、リラキシンペプチドのＡ鎖及び／又はＢ鎖の少なくとも一部を含んでもよい。
【００８２】
本明細書に開示されるリラキシンは、１以上のアミノ酸変異を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、欠失、置換、追加、又はそれらの組み合わせを含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンポリペプチドへの、１以上のアミノ酸残基の追加を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンポリペプチドの１以上のアミノ酸残基の置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンポリペプチドの１以上のアミノ酸残基の欠失を含んでもよい。
【００８３】
１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＡ鎖及び／又はＢ鎖において、１以上のアミノ酸残基の１以上のアミノ酸置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＡ鎖において、１以上のアミノ酸残基の１以上のアミノ酸置換を含んでもよい。Ａ鎖における１以上のアミノ酸残基の１以上のアミノ酸置換は、Ｙ３Ｃ、Ａ７Ｃ、Ｔ１６Ｃ、Ｒ１８Ｃ、Ｓ１９Ｃ、又はそれらの組み合わせから成る群から選択されてもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＢ鎖において、１以上のアミノ酸残基の１以上のアミノ酸置換を含んでもよい。Ｂ鎖における１以上のアミノ酸残基の１以上のアミノ酸置換は、Ｓ２Ｃ、Ｍ４Ｃ、Ｓ２６Ｃ、及びＳ２９Ｃ、又はそれらの任意の組み合わせから成る群から選択されてもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＡ鎖においてＹ３Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＡ鎖においてＡ７Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＡ鎖においてＴ１６Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＡ鎖においてＲ１８Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＡ鎖においてＳ１９Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＢ鎖においてＳ２Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＢ鎖においてＭ４Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＢ鎖においてＳ２６Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＢ鎖においてＳ２９Ｃ置換を含んでもよい。
【００８４】
１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドの１以上のアミノ酸残基をシステイン残基に置換することを含んでもよい。野生型リラキシンペプチドの１以上のアミノ酸残基は、アラニン、メチオニン、アルギニン、セリン、トレオニン、及びチロシンから成る群から選択されてもよい。
【００８５】
１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドに１以上のアミノ酸残基を追加することを含んでもよい。
【００８６】
本明細書に開示される方法と組成物に使用するための１以上の脂質は、１以上のＴＡの１以上の薬物速度論的特性を増強し得る。
【００８７】
１以上の脂質は、１以上の脂質に付けられていない１以上のＴＡと比較した場合に薬動力学により測定されるように、少なくとも約２００％、１以上のＴＡの１以上の薬物速度論的特性を増強し得る。１以上の脂質は、１以上の脂質に付けられていないＴＡと比較した場合に薬動力学により測定されるように、少なくとも約２５０％、ＴＡの薬物速度論的特性を増強し得る。
【００８８】
１以上の薬物速度論的特性は半減期を含んでもよい。
【００８９】
本明細書には、Ａ３−Ｐ１−Ｌの構造を持つ化合物が開示され、式中：Ａ３はハロアセトアミド、マレイミド、ハロゲン化ベンジル、又はピリジルジスルフィドであってもよく；Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であってもよく；Ａ２は、ＰＥＧ及びＬを連結する化学基であってもよく；Ｌは、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択される脂質であってもよく；及び、ＰＥＧは
【００９０】
【化９】
2020063249.tif 000011
から選択されてもよく；式中
ｍとｎは独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０であってもよい。
【００９１】
本明細書に記載される幾つかの実施形態において、Ａ２は、単結合、
【００９２】
【化１０】
2020063249.tif 000012
から選択され；
Ｘは単結合、ＮＲ５、又はＯであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアルキルであり；
Ｒ７は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、及びヘテロアルキルから独立して選択され；
ｒは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｓは、１、２、３、４、又は５である。
【００９３】
本明細書には、式（Ｉ）のＬＣを生成する方法が開示され、該方法は、ＴＡのシステイン残基をＡ３−Ｐ１−Ｌと反応させる工程を含み、ここで、Ａ３はＡ１を形成するための反応的な前駆体である。式（Ｉ）のＬＣを生成する方法は、ＴＡのシステイン残基をＡ３−Ｐ１−Ｌと反応させる工程を含み、ここで、Ａ３は、ハロアセトアミド、マレイミド、ハロゲン化ベンジル、又はピリジルジスルフィドである。Ａ３はハロアセトアミドでもよい。Ａ３はブロモアセトアミドでもよい。
【００９４】
本明細書に開示される医薬組成物は更に、１以上の薬学的に許容可能な塩、賦形剤、又はビヒクルを含んでもよい。
【００９５】
本明細書に開示される方法と組成物は、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置するために使用されてもよい。疾患又は疾病は心血管障害であり得る。疾患又は疾病は急性心不全であり得る。疾患又は疾病は繊維症であり得る。疾患又は疾病は疼痛であり得る。疼痛は、神経障害性疼痛又は炎症性疼痛であり得る。
【００９６】
本明細書に開示されるＬＣは、１以上の追加の治療剤と共に投与されてもよい。１以上の追加の治療剤は、抗炎症薬、スタチン、利尿薬、ベータ遮断薬、アンギオテンシン転換酵素阻害剤、アンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、又はそれらの任意の組み合わせから成る群から選択されてもよい。１以上の追加の治療剤はアスピリンでもよい。
【図面の簡単な説明】
【００９７】
本発明の新規な特徴は、特に、添付の特許請求の範囲内に明記される。本発明は、添附図面と合わせて読む場合に、以下の詳細な説明から最良に理解される。一般的慣習に従って、図面の様々な特徴が正確な縮尺でないことを強調する。これに反して、様々な特徴の寸法は、明暸性のために任意に拡張されるか、縮小される。図面は、以下の図を含む。
【図１】Ｌ−システインの修飾されたリラキシンへの、ペグ化された脂質誘導体の化学的結合に関する模式図を示す（箱に含まれる残基は、Ｌ−システインに変異されることもある）。
【図２】脂質結合のためにシステインで修飾されたリラキシンを示す（箱に含まれる残基は、例えばＬ−システイン、リジン、グルタミン、アラニンに変異されることもある）。
【図３】ＬＧＲ７とＣＲＥ−Ｌｕｃ受容体株（ｒｅｐｏｒｔｅｒ  ｌｉｎｅ）を発現するＨＥＫ２９３Ｔ細胞における、リラキシン２受容体を活性化するヒトリラキシン２（ＲＸＦＰ２又はＬＧＲ７）を示す。
【図４】ｐＶＢ００８リラキシン２リンカー・ベクターの概略図と、他のリラキシン発現構成物の追加の概略図を示す。
【図５】リラキシン２  Ｓ２６Ｃとリラキシン２  Ｓ２９Ｃ  ＰＣＲの生成物のアガロースゲルを示す。
【図６】リラキシン２  Ｓ２６Ｃリンカーとリラキシン２  Ｓ２９ＣリンカーＰＣＲの生成物のアガロースゲルを示す。
【図７】制限酵素で消化されたベクター（ｐＶＢ００８とｐＡＣ１４５）と、ＰＣＲ生成物（リラキシン２、リラキシン２  Ｓ２６Ｃリンカー、リラキシン２  Ｓ２９Ｃリンカー、及びエクセナチド）のアガロースゲルを示す。
【図８】リラキシンとリラキシン変異体のＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルを示す。
【図９】Ｎ末端においてＣＢＤタグを備えた野生型リラキシンのＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルを示す。
【図１０】（ａ）Ｔｏｘｉｎ−５５０ペプチド（野生型）のためのジスルフィド結合パターン、及び（ｂ）システインノットＴｏｘｉｎ−５５０ペプチドの典型的なインビトロのフォールディング経路を示し、中央の構造は２つのスルフィド結合中間体を表し、そこでは、ジスルフィド結合は、システインＩとシステインＩＶの間、及びシステインＩＩとシステインＶの間に形成される。
【図１１】脂質複合体に関するマウスの薬物動態学的データを示す。
【図１２】野生型リラキシンに関するマウスの薬物動態学的データを示す。
【図１３】様々な時点における、脂質複合体に関する恥骨靭帯長さのデータを示す。
【図１４】２４時間の時点における、脂質複合体に関する用量応答のデータを示す。
【図１５】ＸＴＥＮで修飾された治療剤の限定されない例（リラキシン−Ｂ−Ｄ１Ａ、Ｓ２９Ｃ−ＸＴＥＮ−２８８）に関する、マウスの薬物動態学的データを示す。
【図１６Ａ】典型的なｍＴＡを示す。エントリー１−１０は、（Ｘにより表わされる）半減期延長部分に付けられたリラキシンのＡ鎖とＢ鎖を含む典型的なｍＴＡを表す。エントリー１１−１３は、（Ｘにより表わされる）半減期延長部分に付けられたＴｏｘｉｎ−５５０を含む典型的なｍＴＡを表す。Ｘは、ＦＡ１、ＦＡ２、ＦＡ３、ＦＡ４、ＦＡ５、ＦＡ６、又はＦＡ７、或いは本明細書に記載される別の脂質であってもよい。ジスルフィド結合は、２つのシステイン残基を繋ぐ括弧、又は２つのシステイン残基を繋ぐ線によって表される。
【図１６Ｂ】典型的なｍＴＡを示す。エントリー１−１０は、（Ｘにより表わされる）半減期延長部分に付けられたリラキシンのＡ鎖とＢ鎖を含む典型的なｍＴＡを表す。エントリー１１−１３は、（Ｘにより表わされる）半減期延長部分に付けられたＴｏｘｉｎ−５５０を含む典型的なｍＴＡを表す。Ｘは、ＦＡ１、ＦＡ２、ＦＡ３、ＦＡ４、ＦＡ５、ＦＡ６、又はＦＡ７、或いは本明細書に記載される別の脂質であってもよい。ジスルフィド結合は、２つのシステイン残基を繋ぐ括弧、又は２つのシステイン残基を繋ぐ線によって表される。
【図１７】典型的なｍＴＡを示す。典型的なｍＴＡは、（Ｘにより表わされる）半減期延長部分に付けられたリラキシンのＡ鎖とＢ鎖を含む。Ｘは、ＸＴＥＮ−２８８又はＸＴＥＮ−８６４であってもよい。ジスルフィド結合は、２つのシステイン残基を繋ぐ括弧、又は２つのシステイン残基を繋ぐ線によって表される。
【発明を実施するための形態】
【００９８】
本明細書には、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示される。通常、ｍＴＡは、治療剤（ＴＡ）と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、ＴＡは、１以上の半減期延長部分に付けられている。治療剤はペプチドであってもよい。ＴＡは、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合により付けられてもよい。ＴＡは、治療剤上でシステイン残基を介して１以上の半減期延長部分に付けられてもよい。修飾された治療剤の半減期は、治療剤だけの半減期よりも長くてもよい。半減期延長部分は、脂質、ポリグリコール領域、又はそれらの組み合わせを含んでもよい。半減期延長部分は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み得、該組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％よりを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含む。半減期延長部分は、治療剤上でシステイン残基の硫黄原子に付けられてもよい。ｍＴＡの限定しない例は、脂質複合体（ＬＣ）と、ＸＴＥＮで修飾された治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）を含む。
【００９９】
本明細書には、脂質複合体（ＬＣ）が開示される。通常、ＬＣは脂質と治療剤を含む。脂質複合体（ＬＣ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された、１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（治療剤）であって、治療剤はペプチドであり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸を介して治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。
【０１００】
脂質複合体（ＬＣ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択される、１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上の脂質がシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。
【０１０１】
本明細書には更に脂質複合体（ＬＣ）が開示され、該脂質複合体は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択される、１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上のＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体を含み、１以上の脂質はシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【０１０２】
本明細書には更に脂質複合体（ＬＣ）が開示され、該脂質複合体は、１以上の治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み、１以上のＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。ＬＣは、治療剤に付けられた１以上の脂質を含み得、該治療剤は修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。
【０１０３】
本明細書には、ＬＣを含む医薬組成物が開示され、該ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（治療剤）であって、治療剤はペプチドであり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸を介して治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【０１０４】
本明細書には更に、ＬＣを含む医薬組成物が開示され、該ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上の脂質がシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【０１０５】
本明細書には更に、ＬＣを含む医薬組成物が開示され、該ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上のＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体を含み、１以上の脂質はシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【０１０６】
本明細書には更に、ＬＣを含む医薬組成物が開示され、該ＬＣは、１以上の治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み、１以上のＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。医薬組成物はＬＣを含み得、該ＬＣは、治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み、ＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。
【０１０７】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、ＬＣを含む組成物を被験体に投与する工程を含み、前記ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（治療剤）であって、治療剤はペプチドであり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸を介して治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【０１０８】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、ＬＣを含む組成物を被験体に投与する工程を含み、前記ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上の脂質がシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【０１０９】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、ＬＣを含む組成物を被験体に投与する工程を含み、前記ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上のＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体を含み、１以上の脂質はシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【０１１０】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、ＬＣを含む組成物を被験体に投与する工程を含み、前記ＬＣは、１以上の治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み、１以上のＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法は、ＬＣを含む組成物を被験体に投与する工程を含み得、前記ＬＣは、治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み、ＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。
【０１１１】
本明細書には更に、ＬＣを含むキットが開示され、該ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（治療剤）であって、治療剤はペプチドであり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸を介して治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【０１１２】
本明細書には更に、ＬＣを含むキットが開示され、該ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上の脂質がシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【０１１３】
本明細書には更に、ＬＣを含むキットが開示され、該ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上のＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体を含み、１以上の脂質はシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【０１１４】
本明細書には更に、ＬＣを含むキットが開示され、該ＬＣは、１以上の治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み、１以上のＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。キットはＬＣを含み得、該ＬＣは、治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み、ＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。
【０１１５】
本明細書には更に、以下の構造を持つＬＣが開示され：
【０１１６】
【化１１】
2020063249.tif 000013
式中：ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ、及びＰ１、又はＬを連結する化学基であり；Ｐ１は単結合であるか、又はポリグリコールを含み；及び、Ｌは脂質である。
【０１１７】
本明細書には更に、以下の構造を持つＬＣが開示され：
【０１１８】
【化１２】
2020063249.tif 000014
式中：ＴＡはシステイン残基を備えた治療剤であり、ここで、システイン残基はＡ１に接続され；Ａ１は、ＴＡ及びＰ１を連結する化学基であり；Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；Ａ２は、ＰＥＧ及びＬを連結する化学基であり；及び、Ｌは脂質である。
【０１１９】
本明細書には、Ａ３−Ｐ１−Ｌの構造を持つ化合物が開示され、式中：Ａ３はハロアセトアミド、マレイミド、ハロゲン化ベンジル、又はピリジルジスルフィドであってもよく；Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であってもよく；Ａ２は、ＰＥＧ及びＬを連結する化学基であってもよく；Ｌは、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択される脂質であってもよく；及び、ＰＥＧは
【０１２０】
【化１３】
2020063249.tif 000015
から選択されてもよく；式中
ｍとｎは独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０であってもよい。
【０１２１】
本明細書には、式（Ｉａ）のＬＣを生成する方法が開示され、該方法は、ＴＡのシステイン残基をＡ３−Ｐ１−Ｌと反応させる工程を含み、ここで、Ａ３はＡ１を形成するための反応的な前駆体である。式（Ｉａ）のＬＣを生成する方法は、ＴＡのシステイン残基をＡ３−Ｐ１−Ｌと反応させる工程を含み、ここで、Ａ３は、ハロアセトアミド、マレイミド、ハロゲン化ベンジル、又はピリジルジスルフィドである。Ａ３はハロアセトアミドでもよい。Ａ３はブロモアセトアミドでもよい。
【０１２２】
本発明の方法、キット、及び組成物についてより詳細に説明する前に、本発明は、記載される特定の方法、キット、又は組成物に限定されず、そのようなものとしてもちろん異なっていてもよいことを、理解されたい。また、本発明の範囲が添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるので、本明細書で使用された技術用語は、特定の実施形態のみを説明するためのものであり、且つ、限定を意図していないことも、理解されたい。実施例は、本発明の作成及び使用の方法の完全な開示と記載を当業者に提供するために掲載されるものであり、発明者が発明と見なすものの範囲を限定するようには意図されておらず、以下の実験の全て又は一部が行われたことを表すことを意図していない。使用される数（例えば、量、温度等）に関する正確さを確認する努力がなされてきたが、幾つかの実験的な誤差及び偏差が、説明されねばならない。他に示されない限り、部分は重量部であり、分子量は重量平均分子量であり、温度は摂氏度であり、圧力は大気圧（ａｔｍｏｓｐｈｅｒｉｃ）であるか又はそれに近いものである。
【０１２３】
値の範囲が提供される場合、その範囲の上限と下限の間に介在する各値は、文脈が明らかに他に指定していない限り、下限の単位の１０分の１まで、具体的に開示されていることが、理解される。任意の述べられた値又は述べられた範囲に介在する値と、任意の他の述べられた値又はその述べられた範囲に介在する値との間にある、より小さな範囲は各々、本発明に包含される。これらのより小さな範囲の上限と下限は、独立して、その範囲に含まれるか又は除外され得、及び、述べられた範囲内の任意の具体的に除外された限定を前提として、何れかの限定がより小さな範囲に含まれているか、どちらも含まれていないか、或いは両方が含まれている場合、各範囲も、本発明内に包含される。述べられた範囲が１つの限定又は両方の限定を含む場合、それら含まれた限定の何れか又は両方を除く範囲も、本発明に含まれる。
【０１２４】
他に定義されない限り、本明細書で用いる全ての技術的及び科学的用語は、本発明の属する技術分野における当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載されるものと同様の、又はそれらに等しい任意の方法及び材料が、本発明の実施又は試験に使用され得るが、幾つかの可能性のあり且つ好ましい方法及び材料が、ここに記載される。本明細書で言及される全ての刊行物は、該刊行物が引用されるものに関連する方法及び／又は材料を開示及び記載するために、参照により本明細書に組み込まれる。本発明の開示は、反対が存在する程度まで、組み込まれた刊行物の任意の開示に取って代わることが、理解される。
【０１２５】
本発明の開示の読み取り後に当業者に明らかとなるように、本明細書に記載及び説明される個々の実施形態の各々は、本発明の範囲又は精神から逸脱することなく他の様々な実施形態の何れかの特徴から容易に分離又はそれと組み合わせられ得る、個別の構成要素及び特徴を有する。任意の列挙された方法は、列挙された事象の順序で、又は理論上可能な任意の他の順序で実行され得る。
【０１２６】
本明細書及び添付の請求項において使用されるように、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈が明確に別段の規定をしていない限り、複数の指示対象を含むことに留意されたい。故に、例えば、「細胞」への言及は、複数のそのような細胞を含み、「ペプチド」への言及は、例えば当業者に既知のポリペプチドなどの、１以上のペプチド又はその同等物への言及を含む。
【０１２７】
本明細書で議論される刊行物は、本出願の出願日前にそれらが開示されたことを示すためのみに提供される。本明細書におけるものは、本発明が、先行発明により、そのような刊行物より先立つ権利が与えられないという承認として、解釈されるものではない。更に、提供される刊行物の日付は、独立して確認される必要があり得る、実際の発行日とは異なる場合もある。
【０１２８】
治療剤の半減期を延ばすｍＴＡを生成するための方法と組成物が提供される。これらの方法と組成物は、多くの疾患における治療用途を見出し、例えば心血管疾患は、リラキシン単独よりも、リラキシンと共役した半減期延長分子により、より有効に処置される場合がある。本発明のこれら及び他の目的、利点、及び特徴は、以下により完全に記載されるような組成物と方法の詳細を読み込んだ後、当業者に明白となる。
【０１２９】
本発明の好ましい実施形態が、本明細書に示され記載されている一方で、このような実施形態が、ほんの一例として提供されることは当業者に明白であろう。多数の変形、変化、及び置換は、本発明から逸脱することなく、当業者によって現在想到される。本明細書に記載される本発明の実施形態の様々な代案が、本発明の実施において利用され得ることを理解されたい。以下の特許請求の範囲が本発明の範囲を定義するものであり、この特許請求の範囲及びそれらの同等物の範囲内の方法及び構成は、それによって包含されることが、意図される。
【０１３０】
＜修飾された治療剤（ｍＴＡ）＞
本明細書には、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤（ＴＡ）と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、ＴＡは、１以上の半減期延長部分に付けられている。治療剤はペプチドであってもよい。ＴＡは、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合により付けられてもよい。ＴＡは、治療剤上でシステイン残基を介して１以上の半減期延長部分に付けられてもよい。修飾された治療剤の半減期は、治療剤だけの半減期よりも長くてもよい。半減期延長部分は、脂質、ポリグリコール領域、又はそれらの組み合わせを含んでもよい。半減期延長部分は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み得、該組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％よりを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含む。半減期延長部分は、治療剤上でシステイン残基の硫黄原子に付けられてもよい。ｍＴＡの限定しない例は、脂質複合体（ＬＣ）と、ＸＴＥＮで修飾された治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）を含む。
【０１３１】
本明細書には、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。ペプチドは、１以上のアミノ酸の付加、欠失、置換、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。
【０１３２】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は脂質を含み；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。ペプチドは、１以上のアミノ酸の付加、欠失、置換、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。ｍＴＡはＬＣでもよい。
【０１３３】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は脂質を含み；ペプチドは、リラキシン、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、ヒトインスリン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、ペプチドベースの毒素、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択されたペプチドであり、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。ｍＴＡはＬＣでもよい。
【０１３４】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は脂質を含み；ペプチドは、リラキシン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、Ｔｏｘｉｎ−５５０、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択され、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。ｍＴＡはＬＣでもよい。
【０１３５】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は脂質を含み；ペプチドはリラキシン又はその誘導体であり、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。ｍＴＡはＬＣでもよい。
【０１３６】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は脂質を含み；治療剤は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたポリペプチド配列の少なくとも一部を含む、アミノ酸配列によってコード化され；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。ペプチドは、１以上のアミノ酸の付加、欠失、置換、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。ｍＴＡはＬＣでもよい。
【０１３７】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された脂質を含み；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。ペプチドは、１以上のアミノ酸の付加、欠失、置換、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。
【０１３８】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された脂質を含み；ペプチドは、リラキシン、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、ヒトインスリン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、ペプチドベースの毒素、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択されたペプチドであり、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。
【０１３９】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された脂質を含み；ペプチドは、リラキシン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、Ｔｏｘｉｎ−５５０、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択され、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。
【０１４０】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された脂質を含み；ペプチドはリラキシン又はその誘導体であり、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。
【０１４１】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々はポリグリコール領域を含み；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。ペプチドは、１以上のアミノ酸の付加、欠失、置換、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。
【０１４２】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々はポリグリコール領域を含み；ペプチドは、リラキシン、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、ヒトインスリン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、ペプチドベースの毒素、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択されたペプチドであり、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。
【０１４３】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々はポリグリコール領域を含み；ペプチドは、リラキシン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、Ｔｏｘｉｎ−５５０、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択され、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。
【０１４４】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々はポリグリコール領域を含み；ペプチドはリラキシン又はその誘導体であり、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。
【０１４５】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々はポリグリコール領域を含み；治療剤は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたポリペプチド配列の少なくとも一部を含む、アミノ酸配列によってコード化され；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。
【０１４６】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は、脂質とポリグリコール領域を含み；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。ペプチドは、１以上のアミノ酸の付加、欠失、置換、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。ｍＴＡはＬＣでもよい。
【０１４７】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は、ポリグリコール領域と脂質を含み、該脂質は、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択され；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。ペプチドは、１以上のアミノ酸の付加、欠失、置換、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。ｍＴＡはＬＣでもよい。
【０１４８】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は、ポリグリコール領域と脂質を含み、該脂質は、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択され；ペプチドは、リラキシン、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、ヒトインスリン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、ペプチドベースの毒素、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択されたペプチドであり、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。ｍＴＡはＬＣでもよい。
【０１４９】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は、ポリグリコール領域と脂質を含み、該脂質は、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択され；ペプチドは、リラキシン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、Ｔｏｘｉｎ−５５０、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択され、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。ｍＴＡはＬＣでもよい。
【０１５０】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は、ポリグリコール領域と脂質を含み、該脂質は、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択され；ペプチドはリラキシン又はその誘導体であり、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。ｍＴＡはＬＣでもよい。
【０１５１】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み、該拡張組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。ペプチドは、１以上のアミノ酸の付加、欠失、置換、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。ｍＴＡは、ＸＴＥＮに修飾される治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）であってもよい。
【０１５２】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み、該拡張組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み；ペプチドは、リラキシン、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、ヒトインスリン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、ペプチドベースの毒素、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択されたペプチドであり、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。ｍＴＡは、ＸＴＥＮに修飾される治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）であってもよい。
【０１５３】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み、該拡張組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み；ペプチドは、リラキシン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、Ｔｏｘｉｎ−５５０、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択され、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。ｍＴＡは、ＸＴＥＮに修飾される治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）であってもよい。
【０１５４】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み、該拡張組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み；ペプチドはリラキシン又はその誘導体であり、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。ｍＴＡは、ＸＴＥＮに修飾される治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）であってもよい。
【０１５５】
本明細書には更に、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；半減期延長部分の各々は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み、該拡張組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み；治療剤は、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたポリペプチド配列の少なくとも一部を含む、アミノ酸配列によってコード化され；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。ｍＴＡは、ＸＴＥＮに修飾される治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）であってもよい。
【０１５６】
ｍＴＡは、以下の構造を有し得：
【０１５７】
【化１４】
2020063249.tif 000016
式中：
ＴＡは治療剤であり；
Ａ１は、ＴＡ、及びＰ１、又はＸを連結する化学基であり；
Ｐ１は単結合であるか、又はポリグリコールを含み；及び
Ｘは半減期延長部分である。
【０１５８】
式（ＩＩ）のＸは脂質を含み得る。
【０１５９】
式（ＩＩ）のＸは、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み得る。
【０１６０】
式（ＩＩ）のｍＴＡのＰ１は単結合であってもよい。
【０１６１】
ＴＡのアミノ酸残基の硫黄原子又は窒素原子は、式（ＩＩ）のｍＴＡにおける化学結合を介してＡ１に接続されてもよい。式（ＩＩ）のｍＴＡのＡ１は、
【０１６２】
【化１５】
2020063249.tif 000017
から選択されてもよく；及び
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は各々、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、−ＮＣ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＣ（Ｏ）ＯＲ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロアルキルであり；
ｋは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；
ｐは、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｑは、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０である。
【０１６３】
式（ＩＩ）のｍＴＡのＰ１はポリグリコールを含み得る。ポリグリコールは、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリブチレングリコール、或いはそれらの組み合わせから選択されてもよい。ポリグリコールはポリエチレングリコールでもよい。ポリグリコールはポリプロピレングリコールでもよい。ポリグリコールはポリブチレングリコールでもよい。
【０１６４】
式（ＩＩ）のｍＴＡのＰ１は、−ＰＥＧ−Ａ２−でもよく；ここで、ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；及び、Ａ２はＰＥＧ及びＸを連結する化学基である。ＰＥＧは、
【０１６５】
【化１６】
2020063249.tif 000018
から選択されてもよく；ここで、ｍとｎは独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０である。Ａ２は、単結合、
【０１６６】
【化１７】
2020063249.tif 000019
から選択されてもよく；
ここで、Ｘは単結合、ＮＲ５、Ｓ、又はＯであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は各々、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアルキルであり；
Ｒ６はＯＨ又は−ＮＲ５Ｒ５であり；
Ｒ７は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、及びヘテロアルキルから独立して選択され；
ｒは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｓは、１、２、３、４、又は５である。
【０１６７】
式（ＩＩ）の半減期延長部分は脂質を含み得る。脂質は、プロパン酸、ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ウンデカン酸、ドデカン酸、トリデカン酸、テトラデカン酸、ミリスチン酸、ペンタデカン酸、ヘキサデカン酸、ヘプタデカン酸、オクタデカン酸、ノナデカン酸、エイコサン酸、ヘンエイコサン酸、ドコサン酸、トリコサン酸、テトラコサン酸、ペンタコサン酸、セロチン酸、ヘプタコサン酸、オクタコサン酸、ノナコサン酸、トリアコンタン酸、ヘントリアコンタン酸（ｈｅｎａｔｒｉａｃｏｎｔａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ）、ドトリアコンタン酸、トリトリアコンタン酸、テトラトリアコンタン酸、ペンタトリアコンタン酸、及びヘキサトリアコンタン酸から成る群から選択されてもよい。脂質は、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、ウンデカン二酸、ドデカン二酸、トリデカン二酸、テトラデカン二酸、ペンタデカン二酸、ヘキサデカン二酸、ヘプタデカン二酸、オクタデカン二酸、及びノナデカン二酸から成る群から選択されてもよい。脂質は、ミリストレイン酸、パルミトレイン酸、サピエン酸、オレイン酸、エライジン酸、バクセン酸、リノール酸、リノール酸（ｌｉｎｏｅｌａｉｄｉｃ  ａｃｉｄ）、α−リノレン酸、アラキドン酸、エイコサペンタノン酸、エルカ酸、ドコサヘキサエン酸から成る群から選択されてもよい。脂質は、コレステロール、７−ＯＨコレステロール、７，２５−ジヒドロキシコレステロール、コール酸、ケノデオキシコール酸、リトコール酸、デオキシコール酸、グリココール酸、グリコデオキシコール酸、グリコリトコール酸、及びグリコケノデオキシコール酸から成る群から選択されてもよい。式（ＩＩ）のｍＴＡの１以上の脂質は、コール酸、ケノデオキシコール酸、リトコール酸、デオキシコール酸、グリココール酸、グリコデオキシコール酸、グリコリトコール酸、及びグリコケノデオキシコール酸から成る群から選択されてもよい。式（ＩＩ）のｍＴＡの１以上の脂質は、α−トコフェロール、β−トコフェロール、γ−トコフェロール、δ−トコフェロール、α−トコトリエノール、β−トコトリエノール、γ−トコトリエノール、及びδ−トコトリエノールから成る群から選択されてもよい。式（ＩＩ）のｍＴＡの１以上の脂質は、オクタデカン二酸、テトラデシルアミン、ミリスチン酸、ドコサヘキサエン酸、リトコール酸エステル、コール酸、及びパルミチン酸から成る群から選択されてもよい。
【０１６８】
本明細書に開示されるｍＴＡは、以下の構造を有し得：
【０１６９】
【化１８】
2020063249.tif 000020
式中：
ＴＡはシステイン残基を備えた治療剤であり、ここで、システイン残基はＡ１に接続され；
Ａ１は、ＴＡ及びＰ１を連結する化学基であり；
Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；
ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；
Ａ２は、ＰＥＧ及びＸを連結する化学基であり；及び
Ｘは半減期延長部分である。
【０１７０】
式（ＩＩａ）のＸは脂質を含み得る。
【０１７１】
式（ＩＩａ）のＸは、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み得る。
【０１７２】
式（ＩＩａ）のｍＴＡのＴＡのシステイン残基の硫黄原子は、化学結合を介してＡ１に接続されてもよい。
【０１７３】
式（ＩＩａ）のｍＴＡのＰＥＧは、
【０１７４】
【化１９】
2020063249.tif 000021
から選択されてもよく；ここで、
ｍとｎは独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０である。
【０１７５】
本明細に開示される式（ＩＩａ）のｍＴＡの幾つかの実施形態において、Ａ１は
【０１７６】
【化２０】
2020063249.tif 000022
から選択され；及び
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアルキルであり；
ｐは、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｑは、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０である。
【０１７７】
本明細書に開示される式（ＩＩａ）のｍＴＡに係る、記載される幾つかの実施形態において、Ａ２は、単結合、
【０１７８】
【化２１】
2020063249.tif 000023
から選択され；
Ｘは単結合、ＮＲ５、又はＯであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアルキルであり；
Ｒ７は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、及びヘテロアルキルから独立して選択され；
ｒは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｓは、１、２、３、４、又は５である。
【０１７９】
本明細に開示される式（ＩＩａ）のｍＴＡの幾つかの実施形態において、Ｐ１は−ＰＥＧ−Ａ２である。
【０１８０】
本明細書には、式（ＩＩ）のｍＴＡを生成する方法が開示され、該方法は、ＴＡのシステイン残基をＡ３−Ｐ１−Ｘと反応させる工程を含み、ここで、Ａ３はＡ１を形成するための反応的な前駆体である。幾つかの実施形態において、Ａ３はハロアセトアミド、マレイミド、ハロゲン化ベンジル、又はピリジルジスルフィドである。更なる実施形態において、Ａ３はハロアセトアミドである。また更なる実施形態において、Ａ３はブロモアセトアミドである。
【０１８１】
修飾された治療剤（ｍＴＡ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択される、１以上の治療剤；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上の脂質がシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。
【０１８２】
修飾された治療剤（ｍＴＡ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された、１以上の治療剤；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはペプチドであり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸残基を介してＴＡに結合される、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。アミノ酸残基はシステイン、リジン、又はセリンであってもよい。アミノ酸残基はシステイン又はリジンから選択されてもよい。アミノ酸残基はシステインであってもよい。アミノ酸残基はリジンでもよい。アミノ酸はアミノ酸変異でもよい。アミノ酸は、アミノ酸付加又はアミノ酸置換であってもよい。
【０１８３】
修飾された治療剤（ｍＴＡ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択される、１以上の治療剤；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上のＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体を含む、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。
【０１８４】
修飾された治療剤（ｍＴＡ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された、１以上の治療剤；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはリラキシンペプチドその誘導体を含む、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。
【０１８５】
修飾された治療剤（ｍＴＡ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択される、１以上の治療剤；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上のＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体を含み、１以上の脂質はシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。
【０１８６】
修飾された治療剤（ｍＴＡ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された、１以上の治療剤；及び（ｂ）治療剤（治療剤）であって、ＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体であり、１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸残基を介して治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含む。アミノ酸残基はシステイン、リジン、又はセリンであってもよい。アミノ酸残基はシステイン又はリジンから選択されてもよい。アミノ酸残基はシステインであってもよい。アミノ酸残基はリジンでもよい。アミノ酸はアミノ酸変異でもよい。アミノ酸は、アミノ酸付加又はアミノ酸置換であってもよい。アミノ酸残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。
【０１８７】
修飾された治療剤（ｍＴＡ）は、１以上の治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み得、１以上のＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。修飾された治療剤（ｍＴＡ）は、治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み得、ＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。
【０１８８】
本明細書に開示されるｍＴＡは、修飾されたリラキシンペプチドを含むＴＡを含んでもよい。本明細書に開示されるｍＴＡは、１以上の脂質を含み得、１以上の脂質は、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪酸、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から成る群から選択されてもよい。修飾されたリラキシンペプチドへの１以上の脂質の付着は、共有結合を含み得る。１以上の脂質は、システイン残基を介して、修飾されたリラキシンペプチドに付けられてもよい。システイン残基はアミノ酸変異でもよい。システイン残基は、アミノ酸付加又はアミノ酸置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。
【０１８９】
＜半減期延長部分＞
本明細書には、修飾された治療剤（ｍＴＡ）が開示され、ｍＴＡは、治療剤と、１以上の半減期延長部分を含み、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。
【０１９０】
１以上の半減期延長部分は、脂質、ポリグリコール領域、又はそれらの組み合わせを含んでもよい。１以上の半減期延長部分は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含んでもよい。
【０１９１】
ポリグリコール領域は、１以上のポリエチレングリコール・ユニット、ポリプロピレングリコール・ユニット、又はポリブチレングリコール・ユニット、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。ポリグリコール領域は、１以上のポリエチレングリコール・ユニットを含んでもよい。ポリグリコール領域は、１以上のポリプロピレングリコール・ユニットを含んでもよい。ポリグリコール領域は、１以上のポリブチレングリコール・ユニットを含んでもよい。
【０１９２】
ポリグリコール領域は、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０の、８０、９０、１００、又はそれより多くのポリエチレングリコール・ユニット、ポリプロピレングリコール・ユニット、又はポリブチレングリコール・ユニット、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。ポリグリコール領域は、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、又はそれより多くのポリエチレングリコール・ユニットを含んでもよい。ポリグリコール領域は、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、又はそれより多くのポリプロピレングリコール・ユニットを含んでもよい。ポリグリコール領域は、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、又はそれより多くのポリブチレングリコール・ユニットを含んでもよい。
【０１９３】
ポリグリコール領域は、１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、又はそれより多くのポリエチレングリコール・ユニット、ポリプロピレングリコール・ユニット、又はポリブチレングリコール・ユニット、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。ポリグリコール領域は、１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、又はそれより多くのポリエチレングリコール・ユニットを含んでもよい。ポリグリコール領域は、１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、又はそれより多くのポリプロピレングリコール・ユニットを含んでもよい。ポリグリコール領域は、１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、又はそれより多くのポリブチレングリコール・ユニットを含んでもよい。
【０１９４】
ポリグリコール領域は、１０００、２０００、３０００、４０００、５０００、６０００、７０００、８０００、９０００、１００００、１１０００、１２０００、１３０００、１４０００、１５０００、１６０００、１７０００、１８０００、１９０００、２００００、２５０００、３００００、３５０００、４００００、４５０００、５００００、又はそれより多くのポリエチレングリコール・ユニット、ポリプロピレングリコール・ユニット、又はポリブチレングリコール・ユニット、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。ポリグリコール領域は、１０００、２０００、３０００、４０００、５０００、６０００、７０００、８０００、９０００、１００００、１１０００、１２０００、１３０００、１４０００、１５０００、１６０００、１７０００、１８０００、１９０００、２００００、２５０００、３００００、３５０００、４００００、４５０００、５００００、又はそれより多くのポリエチレングリコール・ユニットを含んでもよい。ポリグリコール領域は、１０００、２０００、３０００、４０００、５０００、６０００、７０００、８０００、９０００、１００００、１１０００、１２０００、１３０００、１４０００、１５０００、１６０００、１７０００、１８０００、１９０００、２００００、２５０００、３００００、３５０００、４００００、４５０００、５００００、又はそれより多くのポリプロピレングリコール・ユニットを含んでもよい。ポリグリコール領域は、１０００、２０００、３０００、４０００、５０００、６０００、７０００、８０００、９０００、１００００、１１０００、１２０００、１３０００、１４０００、１５０００、１６０００、１７０００、１８０００、１９０００、２００００、２５０００、３００００、３５０００、４００００、４５０００、５００００、又はそれより多くのポリブチレングリコール・ユニットを含んでもよい。
【０１９５】
ポリグリコール領域は、５００−５０，０００ダルトンの分子量を含んでもよい。ポリグリコール領域は、５００−４０，０００ダルトンの分子量を含んでもよい。ポリグリコール領域は、５００−３０，０００ダルトンの分子量を含んでもよい。ポリグリコール領域は、５００−２０，０００ダルトンの分子量を含んでもよい。ポリグリコール領域は、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、２０００、３０００、４０００、５０００、６０００、７０００、８０００、９０００、１００００、１５０００、２００００、２５０００、３００００、３５０００、４００００、又は４５０００ダルトン以上の分子量を含んでもよく、その範囲の中の漸増分を含む。
【０１９６】
半減期延長部分は、ＴＡの上でシステイン残基を介してＴＡに付けられてもよい。付着は、ＴＡの上でシステイン残基の硫黄原子を介する化学的付着を介してもよい。半減期延長部分は、ＴＡの上でシステイン残基の硫黄原子に直接付けられる、リンカーを含んでもよい。半減期延長部分は、ＴＡの上でシステイン残基の硫黄原子に共有結合される、リンカーを含んでもよい。
【０１９７】
＜脂質複合体（ＬＣ）＞
本明細書には、１以上の治療剤（ＴＡ）に付けられる１以上の脂質を含む、脂質複合体（ＬＣ）が開示される。脂質複合体は、１つのＴＡに付けられた１以上の脂質を含んでもよい。脂質複合体は更に、１以上のＴＡと１以上の脂質との間に、親水性コネクタ（ｈｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃ  ｃｏｎｎｅｃｔｏｒ）を含んでもよい。脂質複合体は更に、１以上のポリエチレングリコール・サブユニットを含んでもよい。１以上の脂質はペグ化されてもよい。
【０１９８】
本明細書に開示されるＬＣは、以下の構造を有し得：
【０１９９】
【化２２】
2020063249.tif 000024
式中：
ＴＡは治療剤であり；
Ａ１は、ＴＡ、及びＰ１、又はＬを連結する化学基であり；
Ｐ１は単結合であるか、又はポリグリコールを含み；及び
Ｌは脂質である。
【０２００】
式（Ｉ）のＬＣのＰ１は単結合であってもよい。
【０２０１】
ＴＡのアミノ酸残基の硫黄原子又は窒素原子は、式（Ｉ）のＬＣにおける化学結合を介してＡ１に接続されてもよい。式（Ｉ）のＬＣのＡ１は、
【０２０２】
【化２３】
2020063249.tif 000025
から選択されてもよく；及び
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は各々、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、−ＮＣ（Ｏ）Ｒ５、−ＮＣ（Ｏ）ＯＲ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、（シクロアルキル）アルキル、又はヘテロアルキルであり；
ｋは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；
ｐは、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｑは、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０である。
【０２０３】
式（Ｉ）のＬＣのＰ１はポリグリコールを含み得る。ポリグリコールは、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリブチレングリコール、或いはそれらの組み合わせから選択されてもよい。ポリグリコールはポリエチレングリコールでもよい。ポリグリコールはポリプロピレングリコールでもよい。ポリグリコールはポリブチレングリコールでもよい。
【０２０４】
式（Ｉ）のＬＣのＰ１は、−ＰＥＧ−Ａ２−でもよく；ここで、ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；及び、Ａ２はＰＥＧ及びＬを連結する化学基である。ＰＥＧは、
【０２０５】
【化２４】
2020063249.tif 000026
から選択されてもよく；ここで、ｍとｎは独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０である。Ａ２は、単結合、
【０２０６】
【化２５】
2020063249.tif 000027
から選択されてもよく；
ここで、Ｘは単結合、ＮＲ５、Ｓ、又はＯであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は各々、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアルキルであり；
Ｒ６はＯＨ又は−ＮＲ５Ｒ５であり；
Ｒ７は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、及びヘテロアルキルから独立して選択され；
ｒは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｓは、１、２、３、４、又は５である。
【０２０７】
式（Ｉ）のＬＣの１以上の脂質は、プロパン酸、ブタン酸、ペンタン酸、ヘキサン酸、ヘプタン酸、オクタン酸、ノナン酸、デカン酸、ウンデカン酸、ドデカン酸、トリデカン酸、テトラデカン酸、ミリスチン酸、ペンタデカン酸、ヘキサデカン酸、ヘプタデカン酸、オクタデカン酸、ノナデカン酸、エイコサン酸、ヘンエイコサン酸、ドコサン酸、トリコサン酸、テトラコサン酸、ペンタコサン酸、セロチン酸、ヘプタコサン酸、オクタコサン酸、ノナコサン酸、トリアコンタン酸、ヘントリアコンタン酸（ｈｅｎａｔｒｉａｃｏｎｔａｎｏｉｃ  ａｃｉｄ）、ドトリアコンタン酸、トリトリアコンタン酸、テトラトリアコンタン酸、ペンタトリアコンタン酸、及びヘキサトリアコンタン酸から成る群から選択されてもよい。式（Ｉ）のＬＣの１以上の脂質は、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、ピメリン酸、スベリン酸、アゼライン酸、セバシン酸、ウンデカン二酸、ドデカン二酸、トリデカン二酸、テトラデカン二酸、ペンタデカン二酸、ヘキサデカン二酸、ヘプタデカン二酸、オクタデカン二酸、及びノナデカン二酸から成る群から選択されてもよい。式（Ｉ）のＬＣの１以上の脂質は、ミリストレイン酸、パルミトレイン酸、サピエン酸、オレイン酸、エライジン酸、バクセン酸、リノール酸、リノール酸（ｌｉｎｏｅｌａｉｄｉｃ  ａｃｉｄ）、α−リノレン酸、アラキドン酸、エイコサペンタノン酸、エルカ酸、ドコサヘキサエン酸から成る群から選択されてもよい。式（Ｉ）のＬＣの１以上の脂質は、コレステロール、７−ＯＨコレステロール、７，２５−ジヒドロコレステロール、コール酸、ケノデオキシコール酸、リトコール酸、デオキシコール酸、グリココール酸、グリコデオキシコール酸、グリコリトコール酸、及びグリコケノデオキシコール酸から成る群から選択されてもよい。式（Ｉ）のＬＣの１以上の脂質は、コール酸、ケノデオキシコール酸、リトコール酸、デオキシコール酸、グリココール酸、グリコデオキシコール酸、グリコリトコール酸、及びグリコケノデオキシコール酸から成る群から選択されてもよい。式（Ｉ）のＬＣの１以上の脂質は、α−トコフェロール、β−トコフェロール、γ−トコフェロール、δ−トコフェロール、α−トコトリエノール、β−トコトリエノール、γ−トコトリエノール、及びδ−トコトリエノールから成る群から選択されてもよい。式（Ｉ）のＬＣの１以上の脂質は、オクタデカン二酸、テトラデシルアミン、ミリスチン酸、ドコサヘキサエン酸、リトコール酸エステル、コール酸、及びパルミチン酸から成る群から選択されてもよい。
【０２０８】
本明細書に開示されるＬＣは、以下の構造を有し得：
【０２０９】
【化２６】
2020063249.tif 000028
式中：
ＴＡはシステイン残基を備えた治療剤であり、ここで、システイン残基はＡ１に接続され；
Ａ１は、ＴＡ及びＰ１を連結する化学基であり；
Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；
ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；
Ａ２は、ＰＥＧ及びＬを連結する化学基であり；及び
Ｌは脂質である。
【０２１０】
式（Ｉａ）のＬＣのＴＡのシステイン残基の硫黄原子は、化学結合を介してＡ１に接続されてもよい。
【０２１１】
式（Ｉａ）のＬＣのＰＥＧは、
【０２１２】
【化２７】
2020063249.tif 000029
から選択されてもよく；ここで
ｍとｎは独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０である。
【０２１３】
本明細書に開示される式（Ｉａ）のＬＣの幾つかの実施形態において、Ａ１は
【０２１４】
【化２８】
2020063249.tif 000030
から選択され；及び
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアルキルであり；
ｐは、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｑは、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０である。
【０２１５】
本明細書に開示される式（Ｉａ）のＬＣに係る、記載される幾つかの実施形態において、Ａ２は、単結合、
【０２１６】
【化２９】
2020063249.tif 000031
から選択され；
Ｘは単結合、ＮＲ５、又はＯであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアルキルであり；
Ｒ７は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、及びヘテロアルキルから独立して選択され；
ｒは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｓは、１、２、３、４、又は５である。
【０２１７】
本明細に開示される式（Ｉａ）のＬＣの幾つかの実施形態において、Ｐ１は−ＰＥＧ−Ａ２である。
【０２１８】
本明細書には、式（Ｉ）のＬＣを生成する方法が開示され、該方法は、ＴＡのシステイン残基をＡ３−Ｐ１−Ｌと反応させる工程を含み、ここで、Ａ３はＡ１を形成するための反応的な前駆体である。幾つかの実施形態において、Ａ３はハロアセトアミド、マレイミド、ハロゲン化ベンジル、又はピリジルジスルフィドである。更なる実施形態において、Ａ３はハロアセトアミドである。また更なる実施形態において、Ａ３はブロモアセトアミドである。
【０２１９】
脂質複合体（ＬＣ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択される、１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上の脂質がシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。
【０２２０】
脂質複合体（ＬＣ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された、１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはペプチドであり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸残基を介してＴＡに結合される、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。アミノ酸残基はシステイン、リジン、又はセリンであってもよい。アミノ酸残基はシステイン又はリジンから選択されてもよい。アミノ酸残基はシステインであってもよい。アミノ酸残基はリジンでもよい。アミノ酸はアミノ酸変異でもよい。アミノ酸は、アミノ酸付加又はアミノ酸置換であってもよい。
【０２２１】
脂質複合体（ＬＣ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択される、１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上のＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体を含む、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。脂質複合体（ＬＣ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された、１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはリラキシンペプチドその誘導体を含む、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。
【０２２２】
脂質複合体（ＬＣ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択される、１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上のＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体を含み、１以上の脂質はシステイン残基を介して１以上の治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。脂質複合体（ＬＣ）は、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された、１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（治療剤）であって、ＴＡはリラキシンペプチド又はその誘導体であり、１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸残基を介して治療剤に結合される、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。アミノ酸残基はシステイン、リジン、又はセリンであってもよい。アミノ酸残基はシステイン又はリジンから選択されてもよい。アミノ酸残基はシステインであってもよい。アミノ酸残基はリジンでもよい。アミノ酸はアミノ酸変異でもよい。アミノ酸は、アミノ酸付加又はアミノ酸置換であってもよい。
【０２２３】
脂質複合体（ＬＣ）は、１以上の治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み得、１以上のＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。脂質複合体（ＬＣ）は、治療剤（ＴＡ）に付けられた１以上の脂質を含み得、ＴＡは修飾されたリラキシンペプチドを含み、修飾されたリラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を備えた野生型リラキシンポリペプチドを含む。
【０２２４】
本明細書に開示されるＬＣは、修飾されたリラキシンペプチドを含むＴＡを含んでもよい。本明細書に開示されるＬＣは、１以上の脂質を含み得、１以上の脂質は、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪酸、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から成る群から選択されてもよい。修飾されたリラキシンペプチドへの１以上の脂質の付着は、共有結合を含み得る。１以上の脂質は、システイン残基を介して、修飾されたリラキシンペプチドに付けられてもよい。システイン残基はアミノ酸変異でもよい。システイン残基は、アミノ酸付加又はアミノ酸置換であってもよい。システイン残基は、野生型ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。
【０２２５】
＜リンカー＞
本明細書に開示されるＬＣは更に、１以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＬＣは更に、２以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＬＣは更に、３以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＬＣは更に、４以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＬＣは更に、５以上のリンカーを含んでもよい。
【０２２６】
１以上のリンカーは、治療剤への脂質の付着を可能にし得る。リンカーは、別の脂質への脂質の付着を可能にし得る。リンカーは、１以上のポリエチレングリコール・サブユニットを含む化学基への、脂質の付着を可能にし得る。リンカーは、別のＰＥＧへのＰＥＧの付着を可能にし得る。リンカーは、治療剤へのＰＥＧの付着を可能にし得る。リンカーは、別の治療剤への治療剤の付着を可能にし得る。リンカーはアミノ酸でもよい。リンカーは治療剤のアミノ酸でもよい。リンカーは治療剤のアミノ酸変異でもよい。リンカーは治療剤の置換したアミノ酸でもよい。リンカーは治療剤のアミノ酸追加でもよい。リンカーは、ペプチドのＣ末端に位置するアミノ酸変異でもよい。リンカーは、ペプチドのＮ末端基に位置するアミノ酸変異でもよい。リンカーは、ペプチドの非末端位置に位置するアミノ酸変異でもよい。リンカーはリジンでもよい。リンカーはシステインでもよい。リンカーはＬ−システインでもよい。リンカーはエーテル又はアミドでもよい。リンカーはＰＥＧ分子を脂質に連結し得る。
【０２２７】
＜脂質誘導体＞
本明細書に開示されるＬＣは、１以上の脂質誘導体を含んでもよい。脂質誘導体はＴＡに付けられてもよい。ＴＡへの脂質誘導体の付着は、ＴＡの薬物速度論的特性を増強し得る。脂質誘導体はポリグリコールを含んでもよい。脂質誘導体はペグ化されてもよい。ペグ化された脂質は、少なくとも１つのポリエチレングリコール・サブユニットを含んでもよい。脂質誘導体はペグ化されなくてもよい。脂質は、疎水性又は両親媒性の小分子として広く定義されてもよい。脂質は自然発生のもの、又は合成のものでもよい。脂質は、エイコサノイド、プロスタグランジン、ロイコトリエン、トロンボキサン、ワックスエステル、コエンザイムＡ誘導体、脂肪酸カルニチン、脂肪族アミド、エタノールアミン、胆汁酸、ビタミンＥ、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＫ、脂溶性ビタミン誘導体、モノグリセリド、ジグリセリド、トリグリセリド、リン脂質、ホスファチジルコリン、グリセロ脂質、グリセロール、グリセロリン脂質、スフィンゴリピド、糖脂質（ｓａｃｃｈａｒｏｌｉｐｉｄｓ）、ポリケチド、ステロール、ステロール誘導体、ステロール脂質、ステロイドホルモン、プレノール脂質、カロテノイド、脂肪酸、及び脂肪族アルコールであってもよい。
【０２２８】
１つの態様において、本明細書には、Ａ３−Ｐ１−Ｌの構造を持つ脂質誘導体が開示され、式中：
Ａ３はハロアセトアミド、マレイミド、ハロゲン化ベンジル、又はピリジルジスルフィドであり；
Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；
ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；
Ａ２は、ＰＥＧ及びＬを連結する化学基であり；及び
Ｌは、ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択される脂質である。
【０２２９】
本明細書に記載される幾つかの実施形態において、ＰＥＧは、
【０２３０】
【化３０】
2020063249.tif 000032
から選択され；ここで
ｍとｎは独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０である。
【０２３１】
本明細書に記載される幾つかの実施形態において、Ａ２は、単結合、
【０２３２】
【化３１】
2020063249.tif 000033
から選択され、
Ｘは、単結合、ＮＲ５、Ｓ、又はＯであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は各々、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアルキルであり；
Ｒ６はＯＨ又は−ＮＲ５Ｒ５であり；
Ｒ７は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、及びヘテロアルキルから独立して選択され；
ｒは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｓは、１、２、３、４、又は５である。
【０２３３】
＜脂質＞
本明細書に開示されるＬＣは、１以上の脂質を含んでもよい。１以上の脂質は脂肪酸でもよい。脂肪酸（ＦＡ）は、１以上の治療剤（ＴＡ）に付けられてもよい。ＴＡへの脂肪酸の付着は、ＴＡの薬物速度論的特性を増強し得る。脂肪酸は、脂肪二酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、又は脂肪族アルコールでもよい。脂肪酸は飽和されるか、又は飽和されなくてもよい。飽和脂肪酸は、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキン酸を含むが、これらに限定されない。不飽和脂肪酸は、パルミトレイン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸、エルカ酸、及びアラキドン酸を含むが、これらに限定されない。脂肪酸は、短鎖脂肪酸、中鎖脂肪酸、長鎖脂肪酸、又は非常に長い鎖の脂肪酸でもよい。脂肪酸は、モノ不飽和又はポリ不飽和であってもよい。脂肪酸は、オメガ脂肪酸、必須脂肪酸、部分的に水素化された脂肪酸、シス異性体脂肪酸、又はトランス異性体脂肪酸でもよい。脂肪酸は、オメガ−３脂肪酸、オメガ−６脂肪酸、又はオメガ−９脂肪酸でもよい。脂肪酸はジカルボン酸でもよい。
【０２３４】
脂肪酸は、約６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、又はそれより多くの炭素原子の鎖を含んでもよい。脂肪酸は、１、２、３、４、５、６、又はそれより多くの二重結合を更に含む炭素鎖を含んでもよい。脂肪酸は自然発生のものでもよい。脂肪酸は自然発生でなくてもよい。脂肪酸は合成されてもよい。
【０２３５】
本明細書に開示されるＬＣは更に、１以上の脂肪酸を含んでもよい。本明細書に開示されるＬＣは更に、２以上の脂肪酸を含んでもよい。本明細書に開示されるＬＣは更に、３以上の脂肪酸を含んでもよい。本明細書に開示されるＬＣは更に、４以上の脂肪酸を含んでもよい。本明細書に開示されるＬＣは更に、５以上の脂肪酸を含んでもよい。脂肪酸は異なっていてもよい。脂肪酸は同じものでもよい。
【０２３６】
任意のＬＣの１以上の脂質は、ミリスチン酸、ドコサヘキサエン酸、リトコール酸エステル、コール酸、及びパルミチン酸から成る群から選択されてもよい。任意のＬＣの１以上の脂質はミリスチン酸でもよい。任意のＬＣの１以上の脂質はドコサヘキサエン酸でもよい。任意のＬＣの１以上の脂質はリトコール酸エステルでもよい。任意のＬＣの１以上の脂質はコール酸でもよい。任意のＬＣの１以上の脂質はパルミチン酸でもよい。
【０２３７】
ＬＣは、１以上のステロール又はステロール誘導体を含んでもよい。ステロール又はステロール誘導体は、コレステロール、７−ＯＨコレステロール、７，２５−ジヒドロキシコレステロール、コール酸、ケノデオキシコール酸、リトコール酸、デオキシコール酸、グリココール酸、グリコデオキシコール酸、グリコリトコール酸、及びグリコケノデオキシコール酸から成る群から選択されてもよい。
【０２３８】
ＬＣは１以上の胆汁酸を含んでもよい。胆汁酸は、コール酸、ケノデオキシコール酸、リトコール酸、デオキシコール酸、グリココール酸、グリコデオキシコール酸、グリコリトコール酸、及びグリコケノデオキシコール酸から成る群から選択されてもよい。
【０２３９】
ＬＣは、１以上のビタミンＥ誘導体を含んでもよい。ビタミンＥ誘導体は、α−トコフェロール、β−トコフェロール、γ−トコフェロール、δ−トコフェロール、α−トコトリエノール、β−トコトリエノール、γ−トコトリエノール、及びδ−トコトリエノールから成る群から選択されてもよい。
【０２４０】
＜ペグ化された脂質＞
本明細書に開示されるＬＣは、１以上のペグ化された脂質を含んでもよい。ペグ化された脂質は、少なくとも１つのポリエチレングリコール・サブユニットを含んでもよい。脂質と１以上のポリエチレングリコール・サブユニットとの間の接続は、直接の単結合又はリンカー（Ａ２）であってもよい。脂質と１以上のポリエチレングリコール・サブユニットとの間のリンカーの限定しない例は、単結合、
【０２４１】
【化３２】
2020063249.tif 000034
を含み；ここで、
Ｘは単結合、ＮＲ５、Ｓ、又はＯであり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、及びＲ４は各々、独立して、Ｈ、ハロ、ＣＮ、−ＳＲ５、アルキル、シクロアルキル、ハロアルキル、−ＮＲ５Ｒ５、及び−ＯＲ５から独立して選択され；
Ｒ５は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、又はヘテロアルキルであり；
Ｒ６はＯＨ又は−ＮＲ５Ｒ５であり；
Ｒ７は各々独立して、Ｈ、アルキル、ハロアルキル、アリールアルキル、及びヘテロアルキルから独立して選択され；
ｒは、１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり；及び
ｓは、１、２、３、４、又は５である。
【０２４２】
ペグ化された脂質は構造Ｐ１−Ｌを有し得、ここで、Ｐ１は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；Ａ２は、ＰＥＧ及びＬを連結する化学基であり；及び、Ｌは脂質である。ＰＥＧは
【０２４３】
【化３３】
2020063249.tif 000035
から選択されてもよく；ここで、
ｍとｎは独立して、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０である。
【０２４４】
ペグ化された脂質は、リンカーを介して治療剤に接続されてもよい。リンカーは１以上のアミド部分を含み得る。
【０２４５】
＜ＸＴＥＮで修飾された治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）＞
本明細書には、ＸＴＥＮで修飾された治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）が開示され、該治療剤は、（ａ）拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）；及び（ｂ）リラキシン、線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）、レプチン、Ｔｏｘｉｎ−５５０、及びそれらのアナログから成る群から選択された治療剤（ＴＡ）を含む。
【０２４６】
本明細書には更に、ＸＴＥＮで修飾された治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）が開示され、該治療剤は、（ａ）拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）；及び（ｂ）リラキシン又はそのアナログを含む治療剤（ＴＡ）を含む。
【０２４７】
本明細書には更に、ＸＴＥＮで修飾された治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）が開示され、該治療剤は、（ａ）拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）；及び（ｂ）ＦＧＦ２１又はそのアナログを含む治療剤（ＴＡ）を含む。
【０２４８】
本明細書には更に、ＸＴＥＮで修飾された治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）が開示され、該治療剤は、（ａ）拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）；及び（ｂ）レプチン又はそのアナログを含む治療剤（ＴＡ）を含む。
【０２４９】
本明細書には更に、ＸＴＥＮで修飾された治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）が開示され、該治療剤は、（ａ）拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）；及び（ｂ）Ｔｏｘｉｎ−５５０又はそのアナログを含む治療剤（ＴＡ）を含む。
【０２５０】
本明細書には更に、ＸＴＥＮで修飾された治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）が開示され、該治療剤は、（ａ）リラキシン、線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）、レプチン、Ｔｏｘｉｎ−５５０、及びそれらのアナログから成る群から選択された治療剤（ＴＡ）；及び（ｂ）拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み、該拡張組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み、ここで、ＴＡはＸＴＥＮに付けられる。ＸＴＥＮへのＴＡの付着は、ＴＡの上でシステイン残基を介してもよい。ＸＴＥＮへのＴＡの付着は、ＴＡの上でシステイン残基の硫黄原子を介してもよい。
【０２５１】
本明細書には更に、ＸＴＥＮで修飾された治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）が開示され、該治療剤は、（ａ）リラキシン又はそのアナログを含む治療剤（ＴＡ）；及び拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み、該拡張組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み、ここで、ＴＡはＸＴＥＮに付けられる。ＸＴＥＮへのＴＡの付着は、ＴＡの上でシステイン残基を介してもよい。ＸＴＥＮへのＴＡの付着は、ＴＡの上でシステイン残基の硫黄原子を介してもよい。
【０２５２】
本明細書には更に、ＸＴＥＮで修飾された治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）が開示され、該治療剤は、（ａ）ＦＧＦ２１又はそのアナログを含む治療剤（ＴＡ）；及び拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み、該拡張組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み、ここで、ＴＡはＸＴＥＮに付けられる。ＸＴＥＮへのＴＡの付着は、ＴＡの上でシステイン残基を介してもよい。ＸＴＥＮへのＴＡの付着は、ＴＡの上でシステイン残基の硫黄原子を介してもよい。
【０２５３】
本明細書には更に、ＸＴＥＮで修飾された治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）が開示され、該治療剤は、（ａ）レプチン又はそのアナログを含む治療剤（ＴＡ）；及び拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み、該拡張組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み、ここで、ＴＡはＸＴＥＮに付けられる。ＸＴＥＮへのＴＡの付着は、ＴＡの上でシステイン残基を介してもよい。ＸＴＥＮへのＴＡの付着は、ＴＡの上でシステイン残基の硫黄原子を介してもよい。
【０２５４】
本明細書には更に、ＸＴＥＮで修飾された治療剤（ＸＴＥＮ−ｍＴＡ）が開示され、該治療剤は、（ａ）Ｔｏｘｉｎ−５５０又はそのアナログを含む治療剤（ＴＡ）；及び拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み、該拡張組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み、ここで、ＴＡはＸＴＥＮに付けられる。ＸＴＥＮへのＴＡの付着は、ＴＡの上でシステイン残基を介してもよい。ＸＴＥＮへのＴＡの付着は、ＴＡの上でシステイン残基の硫黄原子を介してもよい。
【０２５５】
ＸＴＥＮ−ｍＴＡは、長さが約２０００、１８００、１６００、１５００、１４００、１３００、１２００、１１００、１０００未満のアミノ酸を含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡは、長さが約９７５、９５０、９２５、８７５、８５０、８２５、８００、７７５、７５０、７２５、７００、６７５、６５０、６２５、又は６００未満のアミノ酸を含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡは、長さが約９００未満のアミノ酸を含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡは、長さが約８９０未満のアミノ酸を含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡは、長さが約８８０未満のアミノ酸を含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡは、長さが約８７０未満のアミノ酸を含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡは、長さが約８６０未満のアミノ酸を含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡは、長さが約８５０未満のアミノ酸を含んでもよい。
【０２５６】
ＸＴＥＮ−ｍＴＡのアミノ配列は、１以上のアスパルテート残基を含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡのアミノ配列は、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０以上のアスパルテート残基を含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡのアミノ配列は、２以上のアスパルテート残基を含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡのアミノ配列は、３以上のアスパルテート残基を含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡのアミノ配列は、４以上のアスパルテート残基を含んでもよい。
【０２５７】
ＸＴＥＮ−ｍＴＡは、１以上のＸＴＥＮを含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０以上のＸＴＥＮを含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡは２以上のＸＴＥＮを含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡは３以上のＸＴＥＮを含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡは４以上のＸＴＥＮを含んでもよい。
【０２５８】
ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来する、１０以上のアミノ酸を含む、アミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来する、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、２００、２５０、３００、３５０、４００、４５０、５００、５５０、６００、６５０、７００、７５０以上のアミノ酸を含む、アミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来する、２０以上のアミノ酸を含む、アミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来する、３０以上のアミノ酸を含む、アミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来する、４０以上のアミノ酸を含む、アミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来する、５０以上のアミノ酸を含む、アミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来する、６０以上のアミノ酸を含む、アミノ酸配列を含んでもよい。
【０２５９】
ＸＴＥＮは、アミノ酸が約４００未満であるアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、アミノ酸が約３９０、３８０、３７５、３７０、３６５、３６０、３５０、３４０、３３０、３２０、３１０、３００、２９０、２８０、２７０、２６０、２５０、２４０、２３０、２２０、２１０、２００、１９０、１８０、１７０、１６０、１５０、１４０、１３０、１２０、１００、９０、８０、７０、６０、５０、４０、３０、２０、又は１０未満であるアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、アミノ酸が約３５０未満であるアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、アミノ酸が約３００未満であるアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、アミノ酸が約２５０未満であるアミノ酸配列を含んでもよい。
【０２６０】
ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から成る群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約５０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。
【０２６１】
ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から成る群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％相同し得るアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から成る群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約６０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から成る群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約７０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から成る群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約８０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。
【０２６２】
ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得る。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約８０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約８５％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約９０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約９５％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含んでもよい。
【０２６３】
ＸＴＥＮは、ＴＡのＮ末端、Ｃ末端、又はＮ末端とＣ末端に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＴＡのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＴＡのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基に化学的に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＴＡのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基の硫黄原子に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＴＡのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基の硫黄原子に化学的に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＴＡの内部残基に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＴＡの内部位置に位置するシステイン残基に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＴＡの内部位置に位置するシステイン残基に化学的に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＴＡの内部位置に位置するシステイン残基の硫黄原子に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＴＡの内部位置に位置するシステイン残基の硫黄原子に化学的に付けられてもよい。
【０２６４】
ＸＴＥＮ−ｍＴＡは、１以上のＴＡを含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０以上のＴＡを含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡは２以上のＴＡを含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡは３以上のＴＡを含んでもよい。ＸＴＥＮ−ｍＴＡは４以上のＴＡを含んでもよい。
【０２６５】
ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１０−５６から成る群から選択されたポリペプチド配列の少なくとも一部を含む、アミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来する、１０以上のアミノ酸を含む、アミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来する、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１０５、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、１７０、１７５、又は１８０以上のアミノ酸を含む、アミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来する、２０以上のアミノ酸を含む、アミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来する、３０以上のアミノ酸を含む、アミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来する、５０以上のアミノ酸を含む、アミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来する、７０以上のアミノ酸を含む、アミノ酸配列を含んでもよい。ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来するアミノ酸は、連続していてもよい。ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列に基づくか、又はそれに由来するアミノ酸は、連続していなくてもよい。
【０２６６】
ＴＡは、アミノ酸が約４００未満であるアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、アミノ酸が約３７５、３５０、３２５、３００、２７５、２５０、２２５、２００、１９０、１８０、１７０、１６０、１５０、１４０、１３０、１２０、１００、９０、８０、７０、６０、５０、４０、３０、２０、又は１０未満であるアミノ酸配列を含んでもよい。
【０２６７】
ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約５０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。
【０２６８】
ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約６０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約７０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約８０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：１０−５６から成る群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約９０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。
【０２６９】
ＴＡはリラキシン又はそのアナログであってもよい。ＸＴＥＮは、リラキシン又はそのアナログのＮ末端、Ｃ末端、又はＮ末端とＣ末端に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、リラキシン又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、リラキシン又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基に化学的に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、リラキシン又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基の硫黄原子に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、リラキシン又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基の硫黄原子に化学的に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、リラキシン又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、リラキシン又はそのアナログの内部位置に位置するシステイン残基に化学的に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、リラキシン又はそのアナログの内部位置に位置するシステイン残基の硫黄原子に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、リラキシン又はそのアナログの内部位置に位置するシステイン残基の硫黄原子に化学的に付けられてもよい。
【０２７０】
ＴＡはＦＧＦ２１又はそのアナログであってもよい。ＸＴＥＮは、ＦＧＦ２１又はそのアナログのＮ末端、Ｃ末端、又はＮ末端とＣ末端に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＦＧＦ２１又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＦＧＦ２１又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基に化学的に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＦＧＦ２１又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基の硫黄原子に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＦＧＦ２１又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基の硫黄原子に化学的に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＦＧＦ１又はそのアナログの内部残基に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＦＧＦ２１又はそのアナログの内部位置に位置するシステイン残基に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＦＧＦ２１又はそのアナログの内部位置に位置するシステイン残基に化学的に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＦＧＦ２１又はそのアナログの内部位置に位置するシステイン残基の硫黄原子に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、ＦＧＦ２１又はそのアナログの内部位置に位置するシステイン残基の硫黄原子に化学的に付けられてもよい。
【０２７１】
ＴＡはレプチン又はそのアナログであってもよい。ＸＴＥＮは、レプチン又はそのアナログのＮ末端、Ｃ末端、又はＮ末端とＣ末端に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、レプチン又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、レプチン又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基に化学的に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、レプチン又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基の硫黄原子に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、レプチン又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基の硫黄原子に化学的に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、レプチン又はそのアナログの内部残基に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、レプチン又はそのアナログの内部位置に位置するシステイン残基に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、レプチン又はそのアナログの内部位置に位置するシステイン残基に化学的に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、レプチン又はそのアナログの内部位置に位置するシステイン残基の硫黄原子に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、レプチン又はそのアナログの内部位置に位置するシステイン残基の硫黄原子に化学的に付けられてもよい。
【０２７２】
ＴＡはＴｏｘｉｎ−５５０又はそのアナログであってもよい。ＸＴＥＮは、Ｔｏｘｉｎ−５５０又はそのアナログのＮ末端、Ｃ末端、又はＮ末端とＣ末端に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、Ｔｏｘｉｎ−５５０又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、Ｔｏｘｉｎ−５５０又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基に化学的に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、Ｔｏｘｉｎ−５５０又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基の硫黄原子に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、Ｔｏｘｉｎ−５５０又はそのアナログのＮ末端又はＣ末端に位置するシステイン残基の硫黄原子に化学的に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、Ｔｏｘｉｎ−５５０又はそのアナログの内部残基に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、Ｔｏｘｉｎ−５５０又はそのアナログの内部位置に位置するシステイン残基に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、Ｔｏｘｉｎ−５５０又はそのアナログの内部位置に位置するシステイン残基に化学的に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、Ｔｏｘｉｎ−５５０又はそのアナログの内部位置に位置するシステイン残基の硫黄原子に付けられてもよい。ＸＴＥＮは、Ｔｏｘｉｎ−５５０又はそのアナログの内部位置に位置するシステイン残基の硫黄原子に化学的に付けられてもよい。
【０２７３】
本明細書に開示されるＸＴＥＮ−ｍＴＡは更に、１以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＸＴＥＮ−ｍＴＡは更に、２以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＸＴＥＮ−ｍＴＡは更に、３以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＸＴＥＮ−ｍＴＡは更に、４以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＸＴＥＮ−ｍＴＡは更に、５以上のリンカーを含んでもよい。
【０２７４】
ＸＴＥＮ−ｍＴＡの上の１以上のリンカーの各々は、ハロゲン原子を含む反応的な前駆体から形成されてもよい。反応的な前駆体は、ＸＴＥＮに付けられたハロアセトアミドでもよい。ハロアセトアミドは、ＸＴＥＮのＮ末端に位置してもよい。ハロアセトアミドはクロロアセトアミド、ブロモアセトアミド、又はヨードアセトアミドでもよい。
【０２７５】
本明細書に開示されるＴＡは更に、１以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＴＡは更に、２以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＴＡは更に、３以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＴＡは更に、４以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＴＡは更に、５以上のリンカーを含んでもよい。
【０２７６】
１以上のリンカーは、治療剤又は別のＸＴＥＮへの、ＸＴＥＮの付着を可能にし得る。
【０２７７】
＜治療剤（ＴＡ）＞
本明細書に開示されるｍＴＡは、１以上の治療剤を含んでもよい。ｍＴＡは２以上の治療剤を含んでもよい。ｍＴＡは、３、４、５、６、又は７以上の治療剤を含んでもよい。治療剤は異なるものであってもよい。治療剤は同じものでもよい。本明細書で使用されるように、用語「治療剤」は、標的タンパク質、標的ペプチド、標的細胞、又は標的組織の活性を変調する、候補タンパク質又はペプチドを指す。活性の変調は、標的タンパク質、ペプチド、細胞、又は組織の活性又は発現の増加、減少、刺激、又は予防を含み得る。標的タンパク質又はペプチドは、発現又は活性により、疾患又は障害の病因に関係するタンパク質を含む。ＴＡは、タンパク質、生体分子、化学物質、毒素、薬物、又はそれらの任意の組み合わせの少なくとも一部を含んでもよい。例示的なＴＡは、ホルモン、キナーゼ、受容体、リガンド、増殖因子、調節タンパク質、代謝タンパク質、サイトカイン、ケモカイン、インターフェロン、ホスファターゼ、抗体、又はそれらの任意の組み合わせの少なくとも一部を含み得るが、これらに限定されない。ＴＡは、１以上のアミノ酸の付加、欠失、置換、或いはそれらの組み合わせを含む、野生型ペプチド又は修飾されたペプチドであってもよい。１以上のアミノ酸付加又は置換は、ペプチドのＣ末端に位置してもよい。１以上のアミノ酸付加又は置換は、ペプチドのＮ末端に位置してもよい。１以上のアミノ酸付加又は置換は、ペプチドのＮ末端又はＣ末端に位置してもよい。１以上のアミノ酸付加又は置換は、ペプチドのＮ末端とＣ末端の両方に位置してもよい。１以上のアミノ酸付加又は置換は、ペプチドの非末端位置に位置してもよい。
【０２７８】
ＴＡはホルモンであり得る。ホルモンの例は、ペプチドホルモン、脂質及びリン脂質由来のホルモン、及びモノアミンを含むが、これらに限定されない。ペプチドホルモンは通常、アミノ酸の鎖から成る。小型のペプチドホルモンの例は、甲状腺刺激ホルモン放出ホルモン（ＴＲＨ）とバソプレシンを含むが、これらに限定されない。多数の又は何百ものアミノ酸からなるペプチドは、タンパク質と称されることもある。タンパク質ホルモンの例は、インスリンと成長ホルモンを含む。より複雑なタンパク質ホルモンは、炭化水素側鎖を有し、及び糖タンパク質ホルモンと称されることがある。黄体形成ホルモン、濾胞刺激ホルモン、及び甲状腺刺激ホルモンは、糖タンパク質ホルモンの例である。脂質及びリン脂質由来のホルモンは通常、リノール酸、アラキドン酸、及びリン脂質などの脂質に由来する。タンパク質ホルモンは、コレステロールとエイコサノイドに由来するステロイドホルモンを含むこともある。ステロイドホルモンの例は、テストステロンとコルチゾールである。エイコサノイドはプロスタグランジンを含むこともある。モノアミンは、芳香族アミノ酸デカルボキシラーゼ酵素の作用により、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファンのような芳香族アミノ酸に由来することもある。ＴＡはオキシントモジュリンでもよい。ＴＡはエキセンジン−４でもよい。ＴＡはエクセナチドでもよい。ＴＡはグルカゴン様ペプチド（ＧＬＰ−１）でもよい。ＴＡはグルカゴンでもよい。ＴＡはレプチンでもよい。ＴＡはベータトロフィンでもよい。
【０２７９】
ＴＡは、リラキシンペプチド又はその誘導体であってもよい。リラキシンペプチドは、修飾されたリラキシンペプチドを含んでもよい。修飾されたラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を含む、野生型リラキシンペプチドの少なくとも一部を含んでもよい。リラキシンペプチドは、リラキシンペプチドのＡ鎖及び／又はＢ鎖の少なくとも一部を含んでもよい。リラキシンペプチドは、１以上のアミノ酸変異を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、欠失、置換、追加、又はそれらの組み合わせを含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンポリペプチドへの、１以上のアミノ酸残基の追加を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンポリペプチドの１以上のアミノ酸残基の置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンポリペプチドの１以上のアミノ酸残基の欠失を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＡ鎖及び／又はＢ鎖において、１以上のアミノ酸残基の１以上のアミノ酸置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＡ鎖において、１以上のアミノ酸残基の１以上のアミノ酸置換を含んでもよい。Ａ鎖における１以上のアミノ酸残基の１以上のアミノ酸置換は、Ｙ３Ｃ、Ａ７Ｃ、Ｔ１６Ｃ、Ｒ１８Ｃ、Ｓ１９Ｃ、又はそれらの組み合わせから成る群から選択されてもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＢ鎖において、１以上のアミノ酸残基の１以上のアミノ酸置換を含んでもよい。Ｂ鎖における１以上のアミノ酸残基の１以上のアミノ酸置換は、Ｄ１Ａ、Ｓ２Ｃ、Ｍ４Ｃ、Ｓ２６Ｃ、及びＳ２９Ｃ、又はそれらの任意の組み合わせから成る群から選択されてもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＡ鎖においてＹ３Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＡ鎖においてＡ７Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＡ鎖においてＴ１６Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＡ鎖においてＲ１８Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＡ鎖においてＳ１９Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＢ鎖においてＳ２Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＢ鎖においてＤ１Ａ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＢ鎖においてＭ４Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＢ鎖においてＳ２６Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドのＢ鎖においてＳ２９Ｃ置換を含んでもよい。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドの１以上のアミノ酸残基をシステイン残基に置換することを含んでもよい。野生型リラキシンペプチドの１以上のアミノ酸残基は、アラニン、メチオニン、アルギニン、セリン、トレオニン、及びチロシンから成る群から選択される。１以上のアミノ酸変異は、野生型リラキシンペプチドに１以上のアミノ酸残基を追加することを含んでもよい。
【０２８０】
ＴＡは増殖因子でもよい。増殖因子は、サイトカインとホルモンを含むが、これらに限定されない。増殖因子の例は、限定されないが、アドレノメデュリン（ＡＭ）、アンジオポエチン（Ａｎｇ）、自己分泌運動性因子、骨形態形成蛋白（ＢＭＰ）、脳由来神経栄養因子（ＢＤＮＦ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、エリスロポイエチン（ＥＰＯ）、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、グリア細胞株由来神経栄養因子（ＧＤＮＦ）、果粒球コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）、増殖分化因子−９（ＧＤＦ９）、肝細胞増殖因子（ＨＧＦ）、肝細胞癌由来の増殖因子（ＨＤＧＦ）、インスリン様増殖因子（ＩＧＦ）、遊歩刺激因子、ミオスタチン（ＧＤＦ−８）、神経増殖因子（ＮＧＦ）及び他のニュートロフィン、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、トロンボポイエチン（ＴＰＯ）、形質転換増殖因子アルファ（ＴＧＦ−α）、形質転換増殖因子ベータ（ＴＧＦ−β）、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ−α）、及び血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）を含む。ＴＡは線維芽細胞増殖因子２１（ＦＧＦ２１）でもよい。
【０２８１】
ＴＡは細胞調節タンパク質でもよい。ＴＡは、形質転換増殖因子ベータのスーパーファミリーの細胞調節タンパク質でもよい。ＴＡは、デカペンタプレジックＶｇ関連（ＤＶＲ）サブファミリーのメンバーでもよい。ＴＡは、アクチビン／インヒビンのサブファミリーのメンバーでもよい。ＴＡは、ＴＧＦ−ベータのサブファミリーのメンバーでもよい。ＴＡは増殖分化因子（ＧＤＦ）でもよい。ＧＤＦは、ＧＤＦ１、ＧＤＦ２、ＧＤＦ３、ＧＤＦ５、ＧＤＦ６、ＧＦＤ８、ＧＤＦ９、ＧＤＦ１０、ＧＤＦ１１、及びＧＤＦ１５でもよい。ＴＡは増殖分化因子１１（ＧＤＦ１１）でもよい。
【０２８２】
ＴＡはタンパク質でもよい。タンパク質は、分泌された因子のアンジオポエチン様ファミリーのメンバーでもよい。タンパク質は、アンジオポエチン様タンパク質（ＡＮＧＰＴＬ）でもよい。ＡＮＧＰＴＬの例は、限定されないが、ＡＮＧＰＴＬ１、ＡＮＧＰＴＬ２、ＡＮＧＰＴＬ３、ＡＮＧＰＴＬ４、ＡＮＧＰＴＬ５、ＡＮＧＰＴＬ６、及びＡＮＧＰＴＬ７含むが、これらに限定されない。ＴＡはＡＮＧＰＴＬ３でもよい。
【０２８３】
ＴＡは、リラキシン、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、ヒトインスリン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、ペプチドベースの毒素、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、並びにそれらの誘導体から選択されたペプチドでもよく、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ＴＡは、リラキシン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、ペプチドベースの毒素、Ｍｏｋａ、又はＶＭ−２４、又はそれらの誘導体を含んでもよく、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ＴＡは、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、又はＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、又はそれらの誘導体を含んでもよく、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ＴＡは、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、又はヒトインスリン、又はそれらの誘導体を含んでもよく、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ＴＡは、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、又はＨ３リラキシン又はその誘導体であってもよく、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ＴＡは、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、又はヒトＩＧＦＩＩ、又はそれらの誘導体を含んでもよく、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ＴＡは、ペプチジル毒素又はその誘導体を含んでもよく、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ＴＡは、Ｔｏｘｉｎ−５５０、Ｍｏｋａ、又はＶＭ−２４、又はそれらの誘導体であってもよく、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ＴＡは、ヒトインスリン又はその誘導体であってもよく、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。
【０２８４】
ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９を含む群から選択されたヌクレオチド配列に基づくか、又はそれに由来するヌクレオチド配列によってコード化されてもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９を含む群から選択されたヌクレオチド配列に、少なくとも５０％相同するヌクレオチド配列によってコード化されてもよい。
【０２８５】
ＴＡは、ＳＥＱ−ＩＤ  ＮＯ：１−９を含む群から選択されたヌクレオチド配列に、少なくとも約５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９９％、又は１００％相同するヌクレオチド配列によってコード化されてもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９を含む群から選択されたヌクレオチド配列に、少なくとも７０％相同するヌクレオチド配列によってコード化されてもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９を含む群から選択されたヌクレオチド配列に、少なくとも７５％相同するヌクレオチド配列によってコード化されてもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９を含む群から選択されたヌクレオチド配列に、少なくとも８０％相同するヌクレオチド配列によってコード化されてもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９を含む群から選択された、１以上のヌクレオチド配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９を含む群から選択された、２以上のヌクレオチド配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９を含む群から選択された、３以上のヌクレオチド配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９を含む群から選択された、４以上のヌクレオチド配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１−９を含む群から選択された、５、６、７、８、又は９のヌクレオチド配列を含んでもよい。
【０２８６】
ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約５０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９９％、又は１００％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約７０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約７５％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約８０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択された、１以上のアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択された、２以上のアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択された、３以上のアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択された、４以上のアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択された、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、又は１５以上のアミノ酸配列を含んでもよい。
【０２８７】
ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列から、２０以上の連続するアミノ酸を含んでもよい。ＴＡは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列から、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０以上の連続するアミノ酸を含んでもよい。
【０２８８】
ＴＡは、哺乳動物又は非哺乳動物由来のものでもよい。ＴＡはヒト由来のものでもよい。代替的に、ＴＡは、ヤギ、ヒツジ、ウシ、ウサギ、サル、イヌ、猫、又はそれらの組み合わせに由来するものでもよい。ＴＡは爬虫類由来のものでもよい。ＴＡはヘビ又はトカゲ由来のものでもよい。ＴＡは両生類由来のものでもよい。ＴＡはカエル又はヒキガエル由来のものでもよい。ＴＡは鳥類由来のものでもよい。ＴＡは組み合わせのものであってもよい。
【０２８９】
本明細書に開示されるＴＡは更に、１以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＴＡは更に、２以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＴＡは更に、３以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＴＡは更に、４以上のリンカーを含んでもよい。本明細書に開示されるＴＡは更に、５以上のリンカーを含んでもよい。
【０２９０】
＜薬物動態＞
修飾された治療剤が薬物動態学的又は薬力学的な行動に対し正に影響を及ぼす機構は、限定されないが、（ｉ）インビボのタンパク質分解、又は治療剤の他の活性を減らす化学的修飾を、予防又は緩和すること；（ｉｉ）腎臓濾過を減らし、受容体媒介性の除去を少なくし、又はバイオアベイラビリティを増加させることにより、半減期又は他の薬物速度論的特性を改善すること；（ｉｖ）毒性を減らすこと；（ｉｖ）可溶性を改善すること；及び／又は（ｖ）治療剤の生物活性及び／又は標的選択性を増加させることを、含む。
【０２９１】
半減期延長部分は、ＴＡに付けられた時、治療剤（ＴＡ）の１以上の薬物速度論的特性を増強し得る。
【０２９２】
本明細書に開示される修飾された治療剤は、ＴＡのみと比較した場合に薬力学によって測定されるように、少なくとも約２００％にＴＡの１以上の薬物速度論的特性を増強し得る。本明細書に開示される修飾された治療剤は、ＴＡのみと比較した場合に薬力学によって測定されるように、少なくとも約３００％、４００％、５００％、６００％、７００％、８００％、９００％、１０００％に、ＴＡの１以上の薬物速度論的特性を増強し得る。本明細書に開示される修飾された治療剤は、ＴＡのみと比較した場合に薬力学によって測定されるように、少なくとも約２５０％にＴＡの１以上の薬物速度論的特性を増強し得る。本明細書に開示される修飾された治療剤は、ＴＡのみと比較した場合に薬力学によって測定されるように、少なくとも約３００％にＴＡの１以上の薬物速度論的特性を増強し得る。本明細書に開示される修飾された治療剤は、ＴＡのみと比較した場合に薬力学によって測定されるように、少なくとも約３５０％にＴＡの１以上の薬物速度論的特性を増強し得る。本明細書に開示される修飾された治療剤は、ＴＡのみと比較した場合に薬力学によって測定されるように、少なくとも約４００％にＴＡの１以上の薬物速度論的特性を増強し得る。本明細書に開示される修飾された治療剤は、ＴＡのみと比較した場合に薬力学によって測定されるように、少なくとも約５００％にＴＡの１以上の薬物速度論的特性を増強し得る。
【０２９３】
薬物速度論的特性は半減期を含み得る。修飾された治療剤の半減期は、ＴＡのみの半減期と比較して、少なくとも約２倍の長さであってもよい。本明細書に開示される修飾された治療剤の半減期は、ＴＡのみの半減期と比較して、少なくとも約３倍、４倍、又は５倍の長さであってもよい。本明細書に開示される修飾された治療剤の半減期は、ＴＡのみの半減期と比較して、少なくとも約６倍、７倍、８倍、９倍、１０倍、１５倍、２０倍、２５倍、３０倍、３５倍、４０倍、４５倍、又は５０倍の長さであってもよい。本明細書に開示される修飾された治療剤の半減期は、ＴＡのみの半減期と比較して、少なくとも約５倍の長さであってもよい。本明細書に開示される修飾された治療剤の半減期は、ＴＡのみの半減期と比較して、少なくとも約１０倍の長さであってもよい。
【０２９４】
加えて、修飾された治療剤は、製作性の向上、及び／又は、治療剤の共役されていない形態と比較して治療剤の免疫原性の減少に対する、正の効果を備えることがある。
【０２９５】
修飾された治療剤は、ＴＡのみのものと比較可能な活性を有していてもよい。修飾された治療剤は、ＴＡのみのものと同様の活性を有していてもよい。修飾された治療剤は、ＴＡのみのものに対して増加した活性を有していてもよい。修飾された治療剤は、ＴＡのみのものに対して減少した活性を有していてもよい。
【０２９６】
ＬＣを形成するための、ＴＡへの１以上の脂質の付着は、ＴＡのみと比べて、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、又は１０倍以下に、ＬＣの活性を減らすこともある。修飾された治療剤を形成するための、ＴＡへのポリグリコール領域の付着は、ＴＡのみと比べて、２倍、３倍、４倍、５倍、６倍、７倍、８倍、９倍、又は１０倍以下に、修飾された治療剤の活性を減らすこともある。
【０２９７】
＜治療用途＞
本明細書には更に、１以上の疾患及び／又は疾病を処置、軽減、阻害、及び／又は予防するためのｍＴＡが開示される。疾患及び／又は疾病は、慢性の疾患又は疾病であり得る。代替的に、疾患及び／又は疾病は、急性の疾患又は疾病であり得る。疾患又は疾病は、再発性であり、難治性であり、促進され、或いは緩和状態にあってもよい。疾患又は疾病は、１以上の細胞型に影響を及ぼし得る。１以上の疾患及び／又は疾病は、自己免疫疾患、炎症性疾患、心血管疾患、及び妊娠であってもよい。本明細書に開示されるｍＴＡは、必要とする被験体に投与されてもよい。
【０２９８】
本明細書には、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、ＬＣを含む組成物を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＬＣは治療剤に付けられた脂質を含み、治療剤はリラキシン又はその誘導体である。疾患又は疾病は心血管疾患であり得る。心血管疾患は急性心不全であり得る。付加的な心血管疾患は、鬱血性心不全、代償性心不全、又は非代償性心不全を含むが、これらに限定されない。疾患又は疾病は自己免疫障害であり得る。自己免疫障害は、強皮症、汎発性強皮症、又は全身性強皮症でもよい。疾患又は疾病は炎症性疾患であり得る。炎症性疾患は結合組織炎あり得る。疾患又は疾病は繊維症であり得る。代替的に、疾患又は疾病は妊娠であり得る。ＬＣは、子癇前症を処置又は陣痛を誘発するために使用されてもよい。
【０２９９】
ＬＣは、１以上の追加の治療剤と共に投与されてもよい。付加的な治療剤は、抗炎症薬、スタチン、利尿薬、ベータ遮断薬、アンギオテンシン転換酵素阻害剤、及びアンギオテンシンＩＩ受容体拮抗薬の１以上を含んでもよい。付加的な治療剤はアスピリンでもよい。
【０３００】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、１以上の脂質複合体（ＬＣ）を被験体に投与する工程を含み、ここで１以上の、ＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上の脂質が１以上の治療剤において少なくとも１つのアミノ酸残基に付けられる、治療剤（ＴＡ）を含む。１以上のＴＡはリラキシンを含んでもよい。疾患又は疾病は心血管疾患であり得る。心血管疾患は急性心不全であり得る。付加的な心血管疾患は、鬱血性心不全、代償性心不全、又は非代償性心不全を含むが、これらに限定されない。疾患又は疾病は自己免疫障害であり得る。自己免疫障害は、強皮症、汎発性強皮症、又は全身性強皮症でもよい。疾患又は疾病は炎症性疾患であり得る。炎症性疾患は結合組織炎あり得る。疾患又は疾病は繊維症であり得る。代替的に、疾患又は疾病は妊娠である。ＬＣは、子癇前症を処置又は陣痛を誘発するために使用されてもよい。ＬＣは、１以上の追加の治療剤と共に投与されてもよい。付加的な治療剤は、抗炎症薬、スタチン、利尿薬、ベータ遮断薬、アンギオテンシン転換酵素阻害剤、及びアンギオテンシンＩＩ受容体拮抗薬の１以上を含んでもよい。付加的な治療剤はアスピリンでもよい。
【０３０１】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、１以上の脂質複合体（ＬＣ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、１以上のＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはペプチドであり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸を介してペプチドに付けられる、治療剤（ＴＡ）を含んでもよい。ＴＡはリラキシンを含んでもよい。疾患又は疾病は心血管疾患であり得る。心血管疾患は急性心不全であり得る。付加的な心血管疾患は、鬱血性心不全、代償性心不全、又は非代償性心不全を含むが、これらに限定されない。疾患又は疾病は自己免疫障害であり得る。自己免疫障害は、強皮症、汎発性強皮症、又は全身性強皮症でもよい。疾患又は疾病は炎症性疾患であり得る。炎症性疾患は結合組織炎あり得る。疾患又は疾病は繊維症であり得る。代替的に、疾患又は疾病は妊娠である。ＬＣは、子癇前症を処置又は陣痛を誘発するために使用されてもよい。ＬＣは、１以上の追加の治療剤と共に投与されてもよい。付加的な治療剤は、抗炎症薬、スタチン、利尿薬、ベータ遮断薬、アンギオテンシン転換酵素阻害剤、及びアンギオテンシンＩＩ受容体拮抗薬の１以上を含んでもよい。付加的な治療剤はアスピリンでもよい。
【０３０２】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法がされ、該方法は、式（Ｉａ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｌの１以上の脂質複合体（ＬＣ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ及びＰ１を連結する化学基であり；Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；Ａ２は、ＰＥＧ及びＬを連結する化学基であり；及び、Ｌは脂質である。ＴＡはリラキシンを含んでもよい。疾患又は疾病は心血管疾患であり得る。心血管疾患は急性心不全であり得る。付加的な心血管疾患は、鬱血性心不全、代償性心不全、又は非代償性心不全を含むが、これらに限定されない。疾患又は疾病は自己免疫障害であり得る。自己免疫障害は、強皮症、汎発性強皮症、又は全身性強皮症であり得る。疾患又は疾病は炎症性疾患であり得る。炎症性疾患は結合組織炎あり得る。疾患又は疾病は繊維症であり得る。代替的に、疾患又は疾病は妊娠である。ＬＣは、子癇前症を処置又は陣痛を誘発するために使用されてもよい。ＬＣは、１以上の追加の治療剤と共に投与されてもよい。付加的な治療剤は、抗炎症薬、スタチン、利尿薬、ベータ遮断薬、アンギオテンシン転換酵素阻害剤、及びアンギオテンシンＩＩ受容体拮抗薬の１以上を含んでもよい。付加的な治療剤はアスピリンでもよい。
【０３０３】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法がされ、該方法は、式（Ｉ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｌの１以上の脂質複合体（ＬＣ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ、及びＰ１、又はＬを連結する化学基であり；Ｐ１は単結合であるか、又はポリグリコールを含み；及び、Ｌは脂質である。ＴＡはリラキシンを含んでもよい。疾患又は疾病は心血管疾患であり得る。心血管疾患は急性心不全であり得る。付加的な心血管疾患は、鬱血性心不全、代償性心不全、又は非代償性心不全を含むが、これらに限定されない。疾患又は疾病は自己免疫障害であり得る。自己免疫障害は、強皮症、汎発性強皮症、又は全身性強皮症であり得る。疾患又は疾病は炎症性疾患であり得る。炎症性疾患は結合組織炎あり得る。疾患又は疾病は繊維症であり得る。代替的に、疾患又は疾病は妊娠である。ＬＣは、子癇前症を処置又は陣痛を誘発するために使用されてもよい。ＬＣは、１以上の追加の治療剤と共に投与されてもよい。付加的な治療剤は、抗炎症薬、スタチン、利尿薬、ベータ遮断薬、アンギオテンシン転換酵素阻害剤、及びアンギオテンシンＩＩ受容体拮抗薬の１以上を含んでもよい。付加的な治療剤はアスピリンでもよい。
【０３０４】
本明細書には、必要とする被験体の代謝性の疾患又は疾病を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、１以上の脂質複合体（ＬＣ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、１以上のＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上の脂質が１以上の治療剤において１以上のシステイン残基に付けられる、治療剤（ＴＡ）を含む。１以上のＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、ＦＧＦ２１、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＦＧＦ２１はヒトＦＧＦ２１でもよい。代謝性の疾患又は疾病は糖尿病であり得る。代謝性の疾患又は疾病は、糖原蓄積病、フェニルケトン尿症、メープルシロップ尿症、１型グルタル酸血症タイプ、カルバモイル燐酸シンテターゼＩ欠失、アルカプトン尿症、中鎖アシルコエンザイムＡ脱水素酵素欠失（ＭＣＡＤＤ）、急性間欠性ポルフィリア、レッシュ−ナイハン症状群、リポイド様の先天性副腎皮質過形成、先天性副腎皮質過形成、カーンズ−セイヤ症候群、ツェルウェガー症候群、ゴーシェ病、又はニーマンピック病であり得る。
【０３０５】
本明細書には、必要とする被験体の代謝性の疾患又は疾病を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、１以上の脂質複合体（ＬＣ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、１以上のＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはペプチドであり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸残基を介してＴＡに付けられる、治療剤（ＴＡ）を含む。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、ＦＧＦ２１、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＦＧＦ２１はヒトＦＧＦ２１でもよい。代謝性の疾患又は疾病は糖尿病であり得る。代謝性の疾患又は疾病は、糖原蓄積病、フェニルケトン尿症、メープルシロップ尿症、１型グルタル酸血症タイプ、カルバモイル燐酸シンテターゼＩ欠失、アルカプトン尿症、中鎖アシルコエンザイムＡ脱水素酵素欠失（ＭＣＡＤＤ）、急性間欠性ポルフィリア、レッシュ−ナイハン症状群、リポイド様の先天性副腎皮質過形成、先天性副腎皮質過形成、カーンズ−セイヤ症候群、ツェルウェガー症候群、ゴーシェ病、又はニーマンピック病であり得る。
【０３０６】
本明細書には、必要とする被験体の代謝性の疾患又は疾病を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、式（Ｉａ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｌの１以上の脂質複合体（ＬＣ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ及びＰ１を連結する化学基であり；Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；Ａ２は、ＰＥＧ及びＬを連結する化学基であり；及び、Ｌは脂質である。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、ＦＧＦ２１、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＦＧＦ２１はヒトＦＧＦ２１でもよい。１以上の脂質は、１以上のステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールを含んでもよい。代謝性の疾患又は疾病は糖尿病であり得る。代謝性の疾患又は疾病は、糖原蓄積病、フェニルケトン尿症、メープルシロップ尿症、１型グルタル酸血症タイプ、カルバモイル燐酸シンテターゼＩ欠失、アルカプトン尿症、中鎖アシルコエンザイムＡ脱水素酵素欠失（ＭＣＡＤＤ）、急性間欠性ポルフィリア、レッシュ−ナイハン症状群、リポイド様の先天性副腎皮質過形成、先天性副腎皮質過形成、カーンズ−セイヤ症候群、ツェルウェガー症候群、ゴーシェ病、又はニーマンピック病であり得る。
【０３０７】
本明細書には、必要とする被験体の代謝性の疾患又は疾病を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、式（Ｉ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｌの１以上の脂質複合体（ＬＣ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ、及びＰ１、又はＬを連結する化学基であり；Ｐ１は単結合であるか、又はポリグリコールを含み；及び、Ｌは脂質である。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、ＦＧＦ２１、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＦＧＦ２１はヒトＦＧＦ２１でもよい。１以上の脂質は、１以上のステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールを含んでもよい。代謝性の疾患又は疾病は糖尿病であり得る。代謝性の疾患又は疾病は、糖原蓄積病、フェニルケトン尿症、メープルシロップ尿症、１型グルタル酸血症タイプ、カルバモイル燐酸シンテターゼＩ欠失、アルカプトン尿症、中鎖アシルコエンザイムＡ脱水素酵素欠失（ＭＣＡＤＤ）、急性間欠性ポルフィリア、レッシュ−ナイハン症状群、リポイド様の先天性副腎皮質過形成、先天性副腎皮質過形成、カーンズ−セイヤ症候群、ツェルウェガー症候群、ゴーシェ病、又はニーマンピック病であり得る。
【０３０８】
本明細書には、必要とする被験体の中枢神経系（ＣＮＳ）障害を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、１以上の脂質複合体（ＬＣ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、１以上のＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上の脂質が１以上の治療剤において少なくとも１つのアミノ酸残基に付けられる、治療剤（ＴＡ）を含む。１以上のＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＣＮＳ障害はアルツハイマー病（ＡＤ）であり得る。更なるＣＮＳ障害は、限定されないが、脳炎、髄膜炎、熱帯性痙性脊髄麻痺、クモ膜嚢胞、ハンチントン病、閉込め症候群、パーキンソン病、トゥーレット症候群（Ｔｏｕｒｅｔｔｅ’ｓ）、及び多発性硬化症を含む。
【０３０９】
本明細書には、必要とする被験体の中枢神経系（ＣＮＳ）障害を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、１以上の脂質複合体（ＬＣ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、１以上のＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはペプチドであり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸残基を介してＴＡに付けられる、治療剤（ＴＡ）を含む。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＣＮＳ障害はアルツハイマー病（ＡＤ）であり得る。更なるＣＮＳ障害は、限定されないが、脳炎、髄膜炎、熱帯性痙性脊髄麻痺、クモ膜嚢胞、ハンチントン病、閉込め症候群、パーキンソン病、トゥーレット症候群、及び多発性硬化症を含む。
【０３１０】
本明細書には、必要とする被験体の中枢神経系（ＣＮＳ）障害を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、式（Ｉａ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｌの１以上の脂質複合体（ＬＣ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ及びＰ１を連結する化学基であり；Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；Ａ２は、ＰＥＧ及びＬを連結する化学基であり；及び、Ｌは脂質である。１以上の脂質は、１以上のステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールを含んでもよい。１以上の脂質は、１以上のステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールを含んでもよい。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＣＮＳ障害はアルツハイマー病（ＡＤ）であり得る。更なるＣＮＳ障害は、限定されないが、脳炎、髄膜炎、熱帯性痙性脊髄麻痺、クモ膜嚢胞、ハンチントン病、閉込め症候群、パーキンソン病、トゥーレット症候群、及び多発性硬化症を含む。
【０３１１】
本明細書には、必要とする被験体の中枢神経系（ＣＮＳ）障害を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、式（Ｉ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｌの１以上の脂質複合体（ＬＣ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ、及びＰ１、又はＬを連結する化学基であり；Ｐ１は単結合であるか、又はポリグリコールを含み；及び、Ｌは脂質である。１以上の脂質は、１以上のステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールを含んでもよい。１以上の脂質は、１以上のステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、又は脂肪族アルコール、或いはそれらの誘導体を含んでもよい。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＣＮＳ障害はアルツハイマー病（ＡＤ）であり得る。更なるＣＮＳ障害は、限定されないが、脳炎、髄膜炎、熱帯性痙性脊髄麻痺、クモ膜嚢胞、ハンチントン病、閉込め症候群、パーキンソン病、トゥーレット症候群、及び多発性硬化症を含む。
【０３１２】
本明細書には、必要とする被験体の、ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）アゴニストから利益を得る疾患又は疾病を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、１以上の脂質複合体を被験体に投与する工程を含み、ここで、１以上のＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールから選択された１以上の脂質；及び（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）であって、１以上の脂質が１以上の治療剤において少なくとも１つのアミノ酸残基に付けられる、治療剤（ＴＡ）を含む。１以上のＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。疾患又は疾病は、代謝性の疾患又は障害であり得る。疾患又は疾病は糖尿病であり得る。疾患又は疾病は肥満症であり得る。ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はＧＣＧＲアゴニストから利益を得る更なる疾患及び／又は疾病は、限定されないが、脂質異常症、心臓血管の疾患、及び脂肪肝疾患を含む。
【０３１３】
本明細書には、必要とする被験体の、ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）アゴニストから利益を得る疾患又は疾病を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、１以上の脂質複合体を被験体に投与する工程を含み、ここで、１以上のＬＣは、（ａ）ステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、脂肪族アミン、及び脂肪族アルコール、並びにそれらの誘導体から選択された１以上の脂質；及び（ｂ）治療剤（ＴＡ）であって、ＴＡはペプチドであり、且つ１以上の脂質がペプチド上でアミノ酸残基を介してＴＡに付けられる、治療剤（ＴＡ）を含む。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。疾患又は疾病は、代謝性の疾患又は障害であり得る。疾患又は疾病は糖尿病であり得る。疾患又は疾病は肥満症であり得る。ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はＧＣＧＲアゴニストから利益を得る更なる疾患及び／又は疾病は、限定されないが、脂質異常症、心臓血管の疾患、及び脂肪肝疾患を含む。
【０３１４】
本明細書には、必要とする被験体の、ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）アゴニストから利益を得る疾患又は疾病を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、式（Ｉａ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｌの１以上の脂質複合体（ＬＣ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ及びＰ１を連結する化学基であり；Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；Ａ２は、ＰＥＧ及びＬを連結する化学基であり；及び、Ｌは脂質である。１以上の脂質は、１以上のステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールを含んでもよい。１以上の脂質は、１以上のステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコールを含んでもよい。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。疾患又は疾病は、代謝性の疾患又は障害であり得る。疾患又は疾病は糖尿病であり得る。疾患又は疾病は肥満症であり得る。ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はＧＣＧＲアゴニストから利益を得る更なる疾患及び／又は疾病は、限定されないが、脂質異常症、心臓血管の疾患、及び脂肪肝疾患を含む。
【０３１５】
本明細書には、必要とする被験体の、ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）アゴニストから利益を得る疾患又は疾病を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、式（Ｉ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｌの１以上の脂質複合体（ＬＣ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ、及びＰ１、又はＬを連結する化学基であり；Ｐ１は単結合であるか、又はポリグリコールを含み；及び、Ｌは脂質である。１以上の脂質は、１以上のステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、及び脂肪族アルコール、或いはそれらの誘導体を含んでもよい。１以上の脂質は、１以上のステロール、ステロール誘導体、胆汁酸、ビタミンＥ誘導体、脂肪二酸、脂肪酸、脂肪族アミド、又は脂肪族アルコール、或いはそれらの誘導体を含んでもよい。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。疾患又は疾病は、代謝性の疾患又は障害であり得る。疾患又は疾病は糖尿病であり得る。疾患又は疾病は肥満症であり得る。ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はＧＣＧＲアゴニストから利益を得る更なる疾患及び／又は疾病は、限定されないが、脂質異常症、心臓血管の疾患、及び脂肪肝疾患を含む。
【０３１６】
本明細書には更に、１以上の疾患及び／又は疾病を処置、軽減、阻害、及び／又は予防に使用するためのｍＴＡが開示される。疾患及び／又は疾病は、慢性の疾患又は疾病であり得る。代替的に、疾患及び／又は疾病は、急性の疾患又は疾病であり得る。疾患又は疾病は、再発性であり、難治性であり、促進され、或いは緩和状態にあってもよい。疾患又は疾病は、１以上の細胞型に影響を及ぼし得る。１以上の疾患及び／又は疾病は、自己免疫疾患、炎症性疾患、心血管疾患、及び妊娠／又はであってもよい。修飾された治療剤（ｍＴＡ）は、治療剤、及び１以上の半減期延長部分を含み得、ここで、治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い。ｍＴＡは、２以上の半減期延長部分を含んでもよい。２以上の半減期延長部分は同一でもよい。２以上の半減期延長部分は異なってもよい。１以上の半減期延長部分の各々は、脂質、ポリグリコール領域、又はそれらの組み合わせを含んでもよい。１以上の半減期延長部分の各々は脂質を含んでもよい。１以上の半減期延長部分の各々はポリグリコール領域を含んでもよい。１以上の半減期延長部分の各々は脂質とポリグリコール領域を含んでもよい。１以上の半減期延長部分の各々は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み得、該拡張組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含む。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含む。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得る。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ペプチドは、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含んでもよい。ペプチドは���リラキシン、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、ヒトインスリン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、ペプチドベースの毒素、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択されてもよく、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ペプチドは、リラキシン、Ｈ１リラキシン、Ｈ２リラキシン、Ｈ３リラキシン、ヒトＩＮＳＬ３、ヒトＩＮＳＬ４、ヒトＩＮＳＬ６、ヒトＩＧＦ１、ヒトＩＧＦＩＩ、ヒトインスリン、オキシントモジュリン、エクセナチド、エキセンジン−４、グルカゴン様タンパク質−１（ＧＬＰ−１）、ＧＬＰ−２、グルカゴン、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＩＰＲのデュアルアゴニスト、ＧＬＰ−１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニスト、レプチン、ベータトロフィン、ＦＧＦ２１、ＧＤＦ１１、ＡＮＧＰＴＬ３、ペプチドベースの毒素、Ｍｏｋａ、及びＶＭ−２４、又はそれらの誘導体から選択されてもよく、前記誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ペプチドはリラキシン又はその誘導体であってもよく、該誘導体は、１以上のアミノ酸の付加、欠失、又は置換、或いはそれらの組み合わせを含むペプチドである。ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたポリペプチド配列の少なくとも一部を含む、アミノ酸配列によってコード化されてもよい。ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６から成る群から選択されたポリペプチド配列に基づくか、又はそれに由来する、１０以上のアミノ酸を含むアミノ酸配列によってコード化されてもよい。ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも約５０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択されたアミノ酸配列に、少なくとも８０％相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択された、１以上のアミノ酸配列を含んでもよい。ペプチドは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：１０−５６を含む群から選択された、２以上のアミノ酸配列を含んでもよい。ペプチドは更にリンカーを含んでもよい。システイン残基は、ペプチドのＮ末端又はＣ末端に置かれてもよい。システイン残基は、ペプチドの非末端位置に置かれてもよい。システイン残基は、ペプチド上のアミノ酸の付加又は置換であってもよい。本明細書に開示されるｍＴＡは、必要とする被験体に投与されてもよい。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。ｍＴＡはＬＣでもよい。
【０３１７】
本明細書には、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、ｍＴＡを含む組成物を被験体に投与する工程を含み、ここで、ｍＴＡは、治療剤に付けられた半減期延長部分を含み、治療剤はリラキシン又はその誘導体である。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得る。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。治療剤は更にリンカーを含んでもよい。疾患又は疾病は心血管疾患であり得る。心血管疾患は急性心不全であり得る。付加的な心血管疾患は、鬱血性心不全、代償性心不全、又は非代償性心不全を含むが、これらに限定されない。疾患又は疾病は自己免疫障害であり得る。自己免疫障害は、強皮症、汎発性強皮症、又は全身性強皮症でもよい。疾患又は疾病は炎症性疾患であり得る。炎症性疾患は結合組織炎あり得る。疾患又は疾病は繊維症であり得る。代替的に、疾患又は疾病は妊娠であり得る。ｍＴＡは、子癇前症を処置又は陣痛を誘発するために使用されてもよい。ｍＴＡは、１以上の追加の治療剤と共に投与されてもよい。付加的な治療剤は、抗炎症薬、スタチン、利尿薬、ベータ遮断薬、アンギオテンシン転換酵素阻害剤、及びアンギオテンシンＩＩ受容体拮抗薬の１以上を含んでもよい。付加的な治療剤はアスピリンでもよい。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３１８】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、１以上のｍＴＡは、（ａ）拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み、該拡張組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み；及び、前記ｍＴＡは、（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）を含み、１以上の半減期延長部分は１以上の治療剤において少なくとも１つのアミノ酸残基に付けられる。ＴＡはリラキシンを含んでもよい。ＴＡはリンカーを含んでもよい。ＴＡは修飾されたポリペプチドを含んでもよい。修飾されたポリペプチドは、１以上の変異を含むポリペプチドを含んでもよい。１以上の変異は、置換、欠失、又は挿入でもよい。修飾されたペプチドは、リンカーに付けられたポリペプチドを含んでもよい。疾患又は疾病は心血管疾患であり得る。心血管疾患は急性心不全であり得る。付加的な心血管疾患は、鬱血性心不全、代償性心不全、又は非代償性心不全を含むが、これらに限定されない。疾患又は疾病は自己免疫障害であり得る。自己免疫障害は、強皮症、汎発性強皮症、又は全身性強皮症でもよい。疾患又は疾病は炎症性疾患であり得る。炎症性疾患は結合組織炎あり得る。疾患又は疾病は繊維症であり得る。代替的に、疾患又は疾病は妊娠である。ｍＴＡは、子癇前症を処置又は陣痛を誘発するために使用されてもよい。ｍＴＡは、１以上の追加の治療剤と共に投与されてもよい。付加的な治療剤は、抗炎症薬、スタチン、利尿薬、ベータ遮断薬、アンギオテンシン転換酵素阻害剤、及びアンギオテンシンＩＩ受容体拮抗薬の１以上を含んでもよい。付加的な治療剤はアスピリンでもよい。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３１９】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、１以上のｍＴＡは、（ａ）１以上の半減期延長部分を含み、１以上の前記半減期延長部分は、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み；及び、１以上の前記ｍＴＡは、（ｂ）治療剤（ＴＡ）を含み、ＴＡはペプチドであり、且つ１以上の半減期延長部分は、ペプチド上でアミノ酸を介してペプチドに付けられる。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得る。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡはリラキシンを含んでもよい。ＴＡは更にリンカーを含んでもよい。疾患又は疾病は心血管疾患であり得る。心血管疾患は急性心不全であり得る。付加的な心血管疾患は、鬱血性心不全、代償性心不全、又は非代償性心不全を含むが、これらに限定されない。疾患又は疾病は自己免疫障害であり得る。自己免疫障害は、強皮症、汎発性強皮症、又は全身性強皮症でもよい。疾患又は疾病は炎症性疾患であり得る。炎症性疾患は結合組織炎あり得る。疾患又は疾病は繊維症であり得る。代替的に、疾患又は疾病は妊娠である。ｍＴＡは、子癇前症を処置又は陣痛を誘発するために使用されてもよい。ｍＴＡは、１以上の追加の治療剤と共に投与されてもよい。付加的な治療剤は、抗炎症薬、スタチン、利尿薬、ベータ遮断薬、アンギオテンシン転換酵素阻害剤、及びアンギオテンシンＩＩ受容体拮抗薬の１以上を含んでもよい。付加的な治療剤はアスピリンでもよい。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３２０】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、式（ＩＩａ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｘの１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ及びＰ１を連結する化学基であり；Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；Ａ２は、ＰＥＧ及びＸを連結する化学基であり；及びＸは半減期延長部分である。半減期延長部分は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み得、該組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含む。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得；及び、Ｐ１は単結合である。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡはリラキシンを含んでもよい。ＴＡは更にリンカーを含んでもよい。疾患又は疾病は心血管疾患であり得る。心血管疾患は急性心不全であり得る。付加的な心血管疾患は、鬱血性心不全、代償性心不全、又は非代償性心不全を含むが、これらに限定されない。疾患又は疾病は自己免疫障害であり得る。自己免疫障害は、強皮症、汎発性強皮症、又は全身性強皮症でもよい。疾患又は疾病は炎症性疾患であり得る。炎症性疾患は結合組織炎あり得る。疾患又は疾病は繊維症であり得る。代替的に、疾患又は疾病は妊娠である。ｍＴＡは、子癇前症を処置又は陣痛を誘発するために使用されてもよい。ｍＴＡは、１以上の追加の治療剤と共に投与されてもよい。付加的な治療剤は、抗炎症薬、スタチン、利尿薬、ベータ遮断薬、アンギオテンシン転換酵素阻害剤、及びアンギオテンシンＩＩ受容体拮抗薬の１以上を含んでもよい。付加的な治療剤はアスピリンでもよい。
【０３２１】
本明細書には更に、必要とする被験体の疾患又は疾病を処置する方法が開示され、該方法は、式（ＩＩ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｘの１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ、及びＰ１、又はＸを連結する化学基であり；Ｐ１は単結合であるか、又はポリグリコールを含み；及びＸは半減期延長部分である。半減期延長部分は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み得、該組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含む。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得；及び、Ｐ１は単結合である。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡはリラキシンを含んでもよい。ＴＡは更にリンカーを含んでもよい。疾患又は疾病は心血管疾患であり得る。心血管疾患は急性心不全であり得る。付加的な心血管疾患は、鬱血性心不全、代償性心不全、又は非代償性心不全を含むが、これらに限定されない。疾患又は疾病は自己免疫障害であり得る。自己免疫障害は、強皮症、汎発性強皮症、又は全身性強皮症でもよい。疾患又は疾病は炎症性疾患であり得る。炎症性疾患は結合組織炎あり得る。疾患又は疾病は繊維症であり得る。代替的に、疾患又は疾病は妊娠である。ｍＴＡは、子癇前症を処置又は陣痛を誘発するために使用されてもよい。ｍＴＡは、１以上の追加の治療剤と共に投与されてもよい。付加的な治療剤は、抗炎症薬、スタチン、利尿薬、ベータ遮断薬、アンギオテンシン転換酵素阻害剤、及びアンギオテンシンＩＩ受容体拮抗薬の１以上を含んでもよい。付加的な治療剤はアスピリンでもよい。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３２２】
本明細書には、必要とする被験体の代謝性の疾患又は疾病を処置する方法が提供され、該方法は、１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、１以上のｍＴＡは、（ａ）１以上の半減期延長部分を含み、１以上の前記半減期延長部分は、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み；及び、１以上の前ｍＴＡは（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）を含み、１以上の半減期延長部分は、１以上の治療剤において１以上のシステイン残基に付けられる。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得る。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。１以上のＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、ＦＧＦ２１、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＦＧＦ２１はヒトＦＧＦ２１でもよい。１以上のＴＡは更にリンカーを含んでもよい。代謝性の疾患又は疾病は糖尿病であり得る。代謝性の疾患又は疾病は、糖原蓄積病、フェニルケトン尿症、メープルシロップ尿症、１型グルタル酸血症タイプ、カルバモイル燐酸シンテターゼＩ欠失、アルカプトン尿症、中鎖アシルコエンザイムＡ脱水素酵素欠失（ＭＣＡＤＤ）、急性間欠性ポルフィリア、レッシュ−ナイハン症状群、リポイド様の先天性副腎皮質過形成、先天性副腎皮質過形成、カーンズ−セイヤ症候群、ツェルウェガー症候群、ゴーシェ病、又はニーマンピック病であり得る。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３２３】
本明細書には、必要とする被験体の代謝性の疾患又は疾病を処置する方法が提供され、該方法は、１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、１以上のｍＴＡは、（ａ）１以上の半減期延長部分を含み、１以上の前記半減期延長部分は、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み；及び、１以上の前記ｍＴＡは、（ｂ）治療剤（ＴＡ）を含み、ＴＡはペプチドであり、且つ１以上の半減期延長部分は、ペプチドの上でアミノ酸残基を介してＴＡに付けられる。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得る。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ペプチドは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、ＦＧＦ２１、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＦＧＦ２１はヒトＦＧＦ２１でもよい。ペプチドは更にリンカーを含んでもよい。代謝性の疾患又は疾病は糖尿病であり得る。代謝性の疾患又は疾病は、糖原蓄積病、フェニルケトン尿症、メープルシロップ尿症、１型グルタル酸血症タイプ、カルバモイル燐酸シンテターゼＩ欠失、アルカプトン尿症、中鎖アシルコエンザイムＡ脱水素酵素欠失（ＭＣＡＤＤ）、急性間欠性ポルフィリア、レッシュ−ナイハン症状群、リポイド様の先天性副腎皮質過形成、先天性副腎皮質過形成、カーンズ−セイヤ症候群、ツェルウェガー症候群、ゴーシェ病、又はニーマンピック病であり得る。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３２４】
本明細書には、必要とする被験体の代謝性の疾患又は疾病を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、式（ＩＩａ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｘの１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ及びＰ１を連結する化学基であり；Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；Ａ２は、ＰＥＧ及びＸを連結する化学基であり；及びＸは半減期延長部分である。半減期延長部分は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み得、該組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み；及び、Ｐ１は単結合である。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、ＦＧＦ２１、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＦＧＦ２１はヒトＦＧＦ２１でもよい。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得る。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。代謝性の疾患又は疾病は糖尿病であり得る。代謝性の疾患又は疾病は、糖原蓄積病、フェニルケトン尿症、メープルシロップ尿症、１型グルタル酸血症タイプ、カルバモイル燐酸シンテターゼＩ欠失、アルカプトン尿症、中鎖アシルコエンザイムＡ脱水素酵素欠失（ＭＣＡＤＤ）、急性間欠性ポルフィリア、レッシュ−ナイハン症状群、リポイド様の先天性副腎皮質過形成、先天性副腎皮質過形成、カーンズ−セイヤ症候群、ツェルウェガー症候群、ゴーシェ病、又はニーマンピック病であり得る。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３２５】
本明細書には、必要とする被験体の代謝性の疾患又は疾病を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、式（Ｉ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｘの１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ、及びＰ１、又はＸを連結する化学基であり；Ｐ１は単結合であるか、又はポリグリコールを含み；及びＸは半減期延長部分である。半減期延長部分は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み、該組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含む。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得る。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、ＦＧＦ２１、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＦＧＦ２１はヒトＦＧＦ２１でもよい。代謝性の疾患又は疾病は糖尿病であり得る。代謝性の疾患又は疾病は、糖原蓄積病、フェニルケトン尿症、メープルシロップ尿症、１型グルタル酸血症タイプ、カルバモイル燐酸シンテターゼＩ欠失、アルカプトン尿症、中鎖アシルコエンザイムＡ脱水素酵素欠失（ＭＣＡＤＤ）、急性間欠性ポルフィリア、レッシュ−ナイハン症状群、リポイド様の先天性副腎皮質過形成、先天性副腎皮質過形成、カーンズ−セイヤ症候群、ツェルウェガー症候群、ゴーシェ病、又はニーマンピック病であり得る。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３２６】
本明細書には、必要とする被験体の中枢神経系（ＣＮＳ）障害を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、１以上のｍＴＡは、（ａ）１以上の半減期延長部分を含み、１以上の前記半減期延長部分は、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み；及び、１以上の前記ｍＴＡは、（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）を含み、１以上の半減期延長部分は、１以上の治療剤において少なくとも１つのアミノ酸残基に付けられる。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得る。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。１以上のＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＣＮＳ障害はアルツハイマー病（ＡＤ）であり得る。更なるＣＮＳ障害は、限定されないが、脳炎、髄膜炎、熱帯性痙性脊髄麻痺、クモ膜嚢胞、ハンチントン病、閉込め症候群、パーキンソン病、トゥーレット症候群、及び多発性硬化症を含む。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３２７】
本明細書には、必要とする被験体の中枢神経系（ＣＮＳ）障害を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、１以上のｍＴＡは、（ａ）１以上の半減期延長部分を含み、１以上の前記半減期延長部分は、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み；及び、１以上の前記ｍＴＡは、（ｂ）治療剤（ＴＡ）を含み、ＴＡはペプチドであり、且つ１以上の半減期延長部分は、ペプチドの上でアミノ酸残基を介してＴＡに付けられる。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得る。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＣＮＳ障害はアルツハイマー病（ＡＤ）であり得る。更なるＣＮＳ障害は、限定されないが、脳炎、髄膜炎、熱帯性痙性脊髄麻痺、クモ膜嚢胞、ハンチントン病、閉込め症候群、パーキンソン病、トゥーレット症候群、及び多発性硬化症を含む。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３２８】
本明細書には、必要とする被験体の中枢神経系（ＣＮＳ）障害を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、式（ＩＩａ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｘの１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ及びＰ１を連結する化学基であり；Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；Ａ２は、ＰＥＧ及びＸを連結する化学基であり；及びＸは半減期延長部分である。半減期延長部分は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み得、該組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含む。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得；及び、Ｐ１は単結合である。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＣＮＳ障害はアルツハイマー病（ＡＤ）であり得る。更なるＣＮＳ障害は、限定されないが、脳炎、髄膜炎、熱帯性痙性脊髄麻痺、クモ膜嚢胞、ハンチントン病、閉込め症候群、パーキンソン病、トゥーレット症候群、及び多発性硬化症を含む。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３２９】
本明細書には、必要とする被験体の中枢神経系（ＣＮＳ）障害を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、式（ＩＩ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｘの１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ、及びＰ１、又はＸを連結する化学基であり；Ｐ１は単結合であるか、又はポリグリコールを含み；及びＸは半減期延長部分である。半減期延長部分は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み得、該組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含む。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得；及び、Ｐ１は単結合である。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。ＣＮＳ障害はアルツハイマー病（ＡＤ）であり得る。更なるＣＮＳ障害は、限定されないが、脳炎、髄膜炎、熱帯性痙性脊髄麻痺、クモ膜嚢胞、ハンチントン病、閉込め症候群、パーキンソン病、トゥーレット症候群、及び多発性硬化症を含む。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３３０】
本明細書には、必要とする被験体の、ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）アゴニストから利益を得る疾患又は疾病を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、１以上のｍＴＡは、（ａ）１以上の半減期延長部分を含み、１以上の前記半減期延長部分は、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み；及び、１以上の前記ｍＴＡは、（ｂ）１以上の治療剤（ＴＡ）を含み、１以上の半減期延長部分は、１以上の治療剤において少なくとも１つのアミノ酸残基に付けられる。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得る。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。１以上のＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。疾患又は疾病は、代謝性の疾患又は障害であり得る。疾患又は疾病は糖尿病であり得る。疾患又は疾病は肥満症であり得る。ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はＧＣＧＲアゴニストから利益を得る更なる疾患及び／又は疾病は、限定されないが、脂質異常症、心臓血管の疾患、及び脂肪肝疾患を含む。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３３１】
本明細書には、必要とする被験体の、ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）アゴニストから利益を得る疾患又は疾病を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、１以上のｍＴＡは、（ａ）１以上の半減期延長部分を含み、１以上の前記半減期延長部分は、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含み；及び、１以上の前記ｍＴＡは、（ｂ）治療剤（ＴＡ）を含み、ＴＡはペプチドであり、且つ１以上の半減期延長部分は、ペプチドの上でアミノ酸残基を介してＴＡに付けられる。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得る。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。疾患又は疾病は、代謝性の疾患又は障害であり得る。疾患又は疾病は糖尿病であり得る。疾患又は疾病は肥満症であり得る。ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はＧＣＧＲアゴニストから利益を得る更なる疾患及び／又は疾病は、限定されないが、脂質異常症、心臓血管の疾患、及び脂肪肝疾患を含む。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３３２】
本明細書には、必要とする被験体の、ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）アゴニストから利益を得る疾患又は疾病を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、式（ＩＩａ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｘの１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ及びＰ１を連結する化学基であり；Ｐ１は単結合又は−ＰＥＧ−Ａ２−であり；ＰＥＧは、１以上のポリエチレングリコールのサブユニットを含む化学基であり；Ａ２は、ＰＥＧ及びＸを連結する化学基であり；及びＸは半減期延長部分である。半減期延長部分は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み得、該組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含む。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得；及び、Ｐ１は単結合である。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。疾患又は疾病は、代謝性の疾患又は障害であり得る。疾患又は疾病は糖尿病であり得る。疾患又は疾病は肥満症であり得る。ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はＧＣＧＲアゴニストから利益を得る更なる疾患及び／又は疾病は、限定されないが、脂質異常症、心臓血管の疾患、及び脂肪肝疾患を含む。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３３３】
本明細書には、必要とする被験体の、ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）アゴニストから利益を得る疾患又は疾病を予防又は処置する方法が提供され、該方法は、式（Ｉ）：ＴＡ−Ａ１−Ｐ１−Ｘの１以上の修飾された治療剤（ｍＴＡ）を被験体に投与する工程を含み、ここで、ＴＡは治療剤であり；Ａ１は、ＴＡ、及びＰ１、又はＸを連結する化学基であり；Ｐ１は単結合であるか、又はポリグリコールを含み；及びＸは半減期延長部分である。半減期延長部分は、拡張組み換え型ポリペプチド（ＸＴＥＮ）を含み得、該組み換え型ポリペプチドは、（ｉ）グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７０％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列；（ｉｉ）実質的に非反復的なアミノ酸配列；（ｉｉｉ）約１０％未満のアルファ螺旋を持つアミノ酸配列；及び／又は（ｉｖ）約１０％未満のベータシートを持つアミノ酸配列を含む。ＸＴＥＮは、グリシン（Ｇ）、アラニン（Ａ）、セリン（Ｓ）、トレオニン（Ｔ）、グルタメート（Ｅ）、アスパルテート（Ｄ）、ロイシン（Ｌ）、及びプロリン（Ｐ）の残基の合計が、合計のアミノ酸配列の約７５％、７７％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９２％、９５％、９７％、又は９９％より多くを構築することを特徴とするアミノ酸配列を含み得る。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７から選択されたアミノ酸配列を含んでもよい。ＸＴＥＮは、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：６６−６７のアミノ酸配列に、少なくとも約５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８３％、８５％、８７％、９０％、９３％、９５％、９７％、又は９９％以上相同するアミノ酸配列を含んでもよい。ＴＡは、ＧＬＰ−１、エキセンジン−４、エクセナチド、オキシントモジュリン、グルカゴン、又はそれらの誘導体を含んでもよい。ＧＬＰ−１はヒトＧＬＰ−１でもよい。疾患又は疾病は、代謝性の疾患又は障害であり得る。疾患又は疾病は糖尿病であり得る。疾患又は疾病は肥満症であり得る。ＧＬＰ−１Ｒ及び／又はＧＣＧＲアゴニストから利益を得る更なる疾患及び／又は疾病は、限定されないが、脂質異常症、心臓血管の疾患、及び脂肪肝疾患を含む。ｍＴＡはＸＴＥＮ−ｍＴＡでもよい。
【０３３４】
本明細書には更に、１以上の疾患及び／又は疾病を処置、軽減、阻害、及び／又は予防するためのＸＴＥＮ−ｍＴＡが開示される。疾患及び／又は疾病は、慢性の疾患又は疾病であり得る。代替的に、疾患及び／又は疾病は、急性の疾患又は疾病であり得る。疾患又は疾病は、再発性であり、難治性であり、促進され、或いは緩和状態にあってもよい。疾患又は疾病は、１以上の細胞型に影響を及ぼし得る。１以上の疾患及び／又は疾病は、自己免疫疾患、炎症性疾患、心血管疾患、及び妊娠であってもよい。本明細書に開示されるＸＴＥＮ−ｍＴＡは、必要とする被験体に投与されてもよい。
【０３３５】
＜組成物＞
本明細書には、本明細書に開示される修飾される治療剤を含む医薬組成物が開示される。組成物は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、又はそれより多くの修飾された治療剤を含んでもよい。修飾された治療剤は異なるものであってもよい。代替的に、修飾された治療剤は同じ又は同様のものでもよい。修飾された治療剤は、異なる治療剤、異なる半減期延長部分、又はそれらの組み合わせを含んでもよい。半減期延長部分は、同じ又は同様のものでもよい。
【０３３６】
本明細書には、本明細書に開示されるＬＣを含む医薬組成物が開示される。組成物は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、又はそれより多くのＬＣを含んでもよい。ＬＣは異なるものであってもよい。代替的に、ＬＣは同じ又は同様のものでもよい。ＬＣは、異なる治療剤、異なる脂質、又はそれらの組み合わせを含んでもよい。脂質は、同じ又は同様のものでもよい。
【０３３７】
本明細書に記載される組成物は更に、１以上の薬学的に許容可能な塩、賦形剤、又はビヒクルを含んでもよい。本医薬組成物に使用される、薬学的に許容可能な塩、賦形剤、又はビヒクルは、担体、賦形剤、希釈剤、抗酸化剤、防腐剤、着色剤、着香料及び希釈化剤、乳化剤、懸濁化剤、溶媒、充填剤、増量剤（ｂｕｌｋｉｎｇ  ａｇｅｎｔｓ）、バッファー、送達ビヒクル、等張化剤、共溶媒、湿潤剤、錯化剤、緩衝剤、抗菌剤、及び界面活性剤を含む。
【０３３８】
中性の緩衝食塩水、又は血清アルブミンと混合された食塩水は、典型的な適切な担体である。医薬組成物は、アスコルビン酸などの抗酸化剤；低分子量ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、又はリジンなどのアミノ酸；単糖類、二糖類、及び、グルコース、マンノース、又はデキストリンを含む他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；マンニトール又はソルビトールなどの糖アルコール；ナトリウムなどの塩を形成するカウンターイオン；及び／又は、Ｔｗｅｅｎ、ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ、又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤を含んでもよい。また、一例として、適切な浸透圧増強剤は、アルカリ金属ハロゲン化物（好ましくは塩化ナトリウム又は塩化カリウム）、マンニトール、ソルビトールなどを含む。適切な防腐剤は、塩化ベンザルコニウム、チメロサール、フェネチルアルコール、メチルパラベン、プロピルパラベン、クロルヘキシジン、ソルビン酸などを含む。過酸化水素も防腐剤として使用してもよい。適切な共溶媒は、グリセリン、プロピレングリコール、及びＰＥＧを含む。適切な錯化剤は、カフェイン、ポリビニルピロリドン、ベータ−シクロデキストリン、又はヒドロキシ−プロピル−ベータ−シクロデキストリンを含む。適切な界面活性剤又は湿潤剤は、ソルビタンエステル、ポリソルベート８０などのポリソルベート、トロメタミン、レシチン、コレステロール、チロキサポールなどを含む。バッファーは、酢酸塩、ホウ酸塩、クエン酸塩、リン酸塩、重炭酸塩、又はトリス−ＨＣｌなどの従来のバッファーでもよい。酢酸塩緩衝液は約ｐＨ４−５．５でもよく、トリスバッファーは約ｐＨ７−８．５でもよい。追加の医薬品は、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，  １８ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  Ａ．  Ｒ．  Ｇｅｎｎａｒｏ，  ｅｄ．，  Ｍａｃｋ  Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ  Ｃｏｍｐａｎｙ，  １９９０」にて説明される。
【０３３９】
組成物は、液体の形態、又は、凍結乾燥或いは冷凍乾燥した形態でもよく、リオプロテクタント、賦形剤、界面活性剤、高分子量の構造的な添加剤、及び／又は増量剤の１以上を含み得る（例えば、米国特許第６，６８５，９４０号、第６，５６６，３２９号、及び第６，３７２，７１６号を参照）。１つの実施形態において、スクロース、ラクトース、又はトレハロースなどの非還元糖であるリオプロテクタントが含まれる。一般的に含まれるリオプロテクタントの量は、再構築後に、結果として生じる製剤が等張になるような量であるが、高張性又はわずかに低張性の製剤も、適切な場合がある。加えて、リオプロテクタントの量は、凍結乾燥後に、許容できない量のタンパク質の崩壊及び／又は凝集を防ぐのに十分でなくてはならない。予め凍結乾燥された製剤における糖（例えば、スクロース、ラクトース、トレハロース）についての典型的なリオプロテクタント濃度は、約１０ｍＭ乃至約４００ｍＭである。別の実施形態において、界面活性剤が含まれ、該界面活性剤は、例えば、非イオン性界面活性剤、及びポリソルベート（例えば、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０）などのイオン性界面活性剤；ポロクサマー（例えば、ポロクサマー１８８）；ポリ（エチレングリコール）フェニルエーテル（例えば、Ｔｒｉｔｏｎ）；硫酸ドデシルナトリウム（ＳＤＳ）；ラウリル硫酸ナトリウム（ｓｏｄｉｕｍ  ｌａｕｒｅｌ  ｓｕｌｆａｔｅ）；ナトリウムオクチル・グリコシド；ラウリル−、ミリスチル−、リノレイル−、又はステアリル−スルホベタイン；ラウリル−、ミリスチル−、リノレイル−、又はステアリル−サルコシン；リノレイル、ミリスチル−、又はセチル−ベタイン；ラウロアミノプロピル−、コカミドプロピル−、リノレアミドプロピル−、ミリストアミドプロピル−、パルミドプロピル−、又はイソステアルアミドプロピル−ベタイン（例えば、ラウロアミドプロピル）；ミリストアミドプロピル−、パルミドプロピル−、又はイソステアルアミドプロピル−ジメチルアミン；ナトリウムメチルココイル−、又はジナトリウムメチルオレイル（ｏｆｅｙｌ）−タウレート；及びＭＯＮＡＱＵＡＴ（商標）シリーズ（Ｍｏｎａ  Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，  Ｉｎｃ．，  Ｐａｔｅｒｓｏｎ，  Ｎ．Ｊ．）、ポリエチルグリコール、ポリプロピルグリコール、及び、エチレンとプロピレングリコールのコポリマー（例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃｓ，ＰＦ６８など）などである。予め凍結乾燥された製剤に存在する典型的な量の界面活性剤は、約０．００１−０．５％である。高分子量の構造的な添加剤（例えば、充填剤、結合剤）は、例えば、アカシア、アルブミン、アルギン酸、リン酸カルシウム（二塩基）、セルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、微結晶性セルロース、デキストラン、デキストリン、デキストラート、スクロース、チロース、α澱粉、硫酸カルシウム、アミロース、グリシン、ベントナイト、マルトース、ソルビトール、エチルセルロース、リン酸水素二ナトリウム、リン酸二ナトリウム、ピロ亜硫酸二ナトリウム、ポリビニルアル���ール、ゼラチン、グルコース、グアーガム、液状グルコース、圧縮可能な糖、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、マルトデキストリン、ポリエチレンオキシド、ポリメタクリレート、ポビドン、アルギン酸ナトリウム、トラガカント微結晶性セルロース、デンプン、及びゼインを含み得る。高分子量の構造的な添加剤の典型的な濃度は、０．１重量％乃至１０重量％である。他の実施形態において、増量剤（例えば、マンニトール、グリシン）が含まれてもよい。
【０３４０】
組成物は、非経口投与に適切でもよい。典型的な組成物は、関節内、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内、大脳内（実質内）、脳室内、筋肉内、眼内、動脈内、又は病巣内の経路など、当業者に利用可能な任意の経路による動物への注入又は点滴に適している。非経口製剤は典型的に、随意に薬学的に許容可能な防腐剤を含む、無菌の、ピロゲンが無い、等張の水溶液であってもよい。
【０３４１】
非水性溶媒の例は、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブ油などの植物油、及びオレイン酸エチルなどの注入可能な有機エステルである。水性担体は、食塩水及び緩衝化した培地を含む、水、アルコール／水溶液、乳剤、又は懸濁液を含む。非経口のビヒクルは、塩化ナトリウム溶液、リンゲルのデキストロース、デキストロース、及び塩化ナトリウム、乳酸化リンゲル（ｌａｃｔａｔｅｄ  Ｒｉｎｇｅｒ’ｓ）、又は固定油を含む。静脈内のビヒクルは、液体及び栄養素の補充液、リンゲルのデキストロースに基づくものなどの電解質補充液を含む。防腐剤及び他の添加剤はまた、例えば、抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤、不活性ガスなどに存在し得る。一般的に、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｓｃｉｅｎｃｅ，  １６ｔｈ  Ｅｄ．，  Ｍａｃｋ  Ｅｄｓ．，  １９８０を参照。
【０３４２】
本明細書に記載される医薬組成物は、生成物の局所濃度を提供する様式で制御又は維持された送達（例えば、ボーラス、デポ効果）のため、及び／又は特定の局所環境における安定性又は半減期を増加させるために、処方され得る。組成物は、ポリ乳酸、ポリグリコール酸などの高分子化合物の微粒子の調製を伴う、本明細書に開示されるＬＣ、ポリペプチド、核酸、又はベクターの製剤、同様に、生物分解性のマトリックス、注入可能な微粒子、マイクロカプセル粒子、マイクロカプセル、生体分解可能な粒子のビーズ、リポソームなどの薬剤、及び、デポ注入として後に送達され得る活性剤の制御又は維持された放出を提供する注入可能な送達デバイスを含むことができる。そのような維持又は制御された送達手段を処方する技術は既知であり、様々なポリマーが開発され、薬物の制御放出及び送達に使用されてきた。そのようなポリマーは典型的に生物分解性且つ生体適合性である。エナンチオマーのポリマー又はポリペプチド・セグメントの錯体生成によって形成されるものを含む高分子ヒドロゲル、及び熱感受性又はｐＨ感受性の特性を持つヒドロゲルが、生物活性のタンパク物質（例えば、超長ＣＤＲ３を含む抗体）の捕捉に関与する穏やか且つ水性の条件のため、薬物デポ効果を提供するのに望ましい場合がある。例えば、ＷＯ９３／１５７２２における、医薬組成物の送達のための多孔性重合体微小粒子の制御放出の記載を参照。
【０３４３】
この目的に適切な材料は、ポリラクチド（例えば、米国特許第３，７７３，９１９号を参照）、ポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸などのポリ−（ａ−ヒドロキシカルボン酸）のポリマー（ＥＰ１３３，９８８Ａ）、Ｌ−グルタミン酸とガンマエチルＬ−グルタミン酸塩のコポリマー（Ｓｉｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ，  ２２：  ５４７−５５６  （１９８３））、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）（Ｌａｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｂｉｏｍｅｄ．  Ｍａｔｅｒ．  Ｒｅｓ．，  １５：  １６７−２７７  （１９８１），  ａｎｄ  Ｌａｎｇｅｒ，  Ｃｈｅｍ．  Ｔｅｃｈ．，  １２：  ９８−１０５  （１９８２））、エチレン酢酸ビニル、又はポリ−Ｄ（−）−３−ヒドロキシ酪酸を含む。他の生分解性ポリマーは、ポリ（ラクトン）、ポリ（アセタール）、ポリ（オルトエステル）、及びポリ（オルトカーボネート）を含む。徐放性の組成物はまた、当該技術分野で既知の様々な方法の何れかによって調製され得るリポソームを含み得る（例えば、Ｅｐｐｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ，  ８２：  ３６８８−９２  （１９８５）を参照）。担体自体、又はその分解生成物は、標的組織において無毒でなくてはならず、疾病を更に悪化させてはならない。これは、標的障害の動物モデルにおける、又は、そのようなモデルが利用不可能な場合には、通常の動物における、慣習的なスクリーニングによって、決定され得る。
【０３４４】
徐放性のための組み換え型タンパク質のマイクロカプセル化は、ヒト成長ホルモン（ｒｈＧＨ）、インターフェロン−（ｒｈＩＦＮ−）、インターロイキン２、及びＭＮ  ｒｇｐ１２０により、上手く実行されてきた。Ｊｏｈｎｓｏｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ．  Ｍｅｄ．，  ２：７９５−７９９  （１９９６）；  Ｙａｓｕｄａ，  Ｂｉｏｍｅｄ．  Ｔｈｅｒ．，  ２７：１２２１−１２２３  （１９９３）；  Ｈｏｒａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．  ８：７５５−７５８  （１９９０）；  Ｃｌｅｌａｎｄ，  ”Ｄｅｓｉｇｎ  ａｎｄ  Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ  ｏｆ  Ｓｉｎｇｌｅ  Ｉｍｍｕｎｉｚａｔｉｏｎ  Ｖａｃｃｉｎｅｓ  Ｕｓｉｎｇ  Ｐｏｌｙｌａｃｔｉｄｅ  Ｐｏｌｙｇｌｙｃｏｌｉｄｅ  Ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅ  Ｓｙｓｔｅｍｓ，”  ｉｎ  Ｖａｃｃｉｎｅ  Ｄｅｓｉｇｎ：  Ｔｈｅ  Ｓｕｂｕｎｉｔ  ａｎｄ  Ａｄｊｕｖａｎｔ  Ａｐｐｒｏａｃｈ，  Ｐｏｗｅｌｌ  ａｎｄ  Ｎｅｗｍａｎ，  ｅｄｓ，  （Ｐｌｅｎｕｍ  Ｐｒｅｓｓ：  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９９５），  ｐｐ．  ４３９−４６２；  ＷＯ  ９７／０３６９２，  ＷＯ  ９６／４００７２，  ＷＯ  ９６／０７３９９；  及び米国特許第５，６５４，０１０号。これらタンパク質の徐放性製剤は、その生体適合性及び広範囲の生物分解性の特性のため、ポリ−乳酸−共グリコール酸（ＰＬＧＡ）ポリマーを使用して開発された。ＰＬＧＡ、乳酸、及びグリコール酸の分解生成物は、人体内で素早く取り除かれ得る。さらに、このポリマーの分解性は、その分子量と組成物に依存し得る。Ｌｅｗｉｓ，  “Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  ｒｅｌｅａｓｅ  ｏｆ  ｂｉｏａｃｔｉｖｅ  ａｇｅｎｔｓ  ｆｒｏｍ  ｌａｃｔｉｄｅ／ｇｌｙｃｏｌｉｄｅ  ｐｏｌｙｍｅｒ，”  ｉｎ：  Ｍ．  Ｃｈａｓｉｎ  ａｎｄ  Ｒ．  Ｌａｎｇｅｒ  （Ｅｄｓ．），  Ｂｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅ  Ｐｏｌｙｍｅｒｓ  ａｓ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖｅｒｙ  Ｓｙｓｔｅｍｓ  （Ｍａｒｃｅｌ  Ｄｅｋｋｅｒ：  Ｎｅｗ  Ｙｏｒｋ，  １９９０），  ｐｐ．  １−４１。徐放性組成物の更なる例は、例えば、ＥＰ５８，４８１Ａ、米国特許第３，８８７，６９９号、ＥＰ１５８，２７７Ａ、カナダ特許第１１７６５６５号、Ｕ．  Ｓｉｄｍａｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ  ２２，  ５４７  ［１９８３］、Ｒ．  Ｌａｎｇｅｒ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｈｅｍ．  Ｔｅｃｈ．  １２，  ９８  ［１９８２］、Ｓｉｎｈａ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃｏｎｔｒｏｌ．  Ｒｅｌｅａｓｅ  ９０，  ２６１  ［２００３］、Ｚｈｕ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｎａｔ．  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．  １８，  ２４  ［２０００］、及びＤａｉ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｃｏｌｌｏｉｄｓ  Ｓｕｒｆ  Ｂ  Ｂｉｏｉｎｔｅｒｆａｃｅｓ  ４１，  １１７  ［２００５］を含む。
【０３４５】
生体接着性ポリマーも、本開示の組成物における使用又は該組成物との使用のために考慮される。生体接着剤は、拡張した期間に生体基質に付着することができる合成且つ自然発生の材料である。例えば、カルボポール及びポリカルボフィルは両方とも、ポリ（アクリル酸）の合成の架橋誘導体である。自然発生物質に基づく生体接着性送達システムは、例えばヒアルロナンとしても知られるヒアルロン酸を含む。ヒアルロン酸は、Ｄ−グルクロン酸及びＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンの残基から成る、自然発生のムコ多糖類である。ヒアルロン酸は、結合組織、同様に関節液、及び目のガラス液及び眼房液を含む、脊椎動物の細胞外組織マトリックスに見出される。ヒアルロン酸のエステル化した誘導体は、生体適合性且つ生物分解性である、送達における使用のための微粒子を生成するために使用されてきた（例えば、Ｃｏｒｔｉｖｏ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ  （１９９１）  １２：７２７−７３０；  ＥＰ  ５１７，５６５；  ＷＯ  ９６／２９９９８；  Ｉｌｌｕｍ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｊ．  Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ  Ｒｅｌ．  （１９９４）  ２９：１３３−１４１を参照）。
【０３４６】
生物分解性及び非生物分解性の両方である重合体のマトリックスは、本開示の組成物を送達するために使用され得、そのような重合体のマトリックスは天然又は合成のポリマーを含み得る。生物分解性のマトリックスが好ましい。放出が生じる期間は、ポリマーの選択に基づく。典型的に、数時間と３乃至１２か月の間に及ぶ期間にわたる放出が、最も望ましい。生物分解性の送達システムを形成するために使用され得る典型的な合成ポリマーは、次のものを含む：乳酸及びグリコール酸のポリマー、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリアルキレン、ポリアルキレングリコール、ポリアルキレンオキシド、ポリアルキルエンテレフタレート、ポリビニルアルコール、ポリビニルエーテル、ポリビニルエステル、ポリビニルハロゲン化物、ポリビニルピロリドン、ポリグリコリド、ポリシロキサン、ポリ無水物、ポリウレタン及びそのコポリマー、ポリ（ブティック酸（ｂｕｔｉｃ  ａｃｉｄ））、ポリ（吉草酸）、アルキルセルロース、ヒドロキシアルキルセルロース、セルロースエーテル、セルロースエステル、ニトロセルロース、アクリル酸エステル及びメタクリル酸エステルのポリマー、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシブチルメチルセルロース、酢酸セルロース、プロピオン酸セルロース、酢酸酪酸セルロース、酢酸フタル酸セルロース、カルボキシルエチルセルロース、三酢酸セルロース、セルロース硫酸ナトリウム塩、ポリ（メタクリル酸メチル）、ポリ（メタクリル酸エチル）、ポリ（メタクリル酸ブチル）、ポリ（メタクリル酸イソブチル）、ポリ（メタクリル酸ヘキシル）、ポリ（メタクリル酸イソデシル）、ポリ（メタクリル酸ラウリル）、ポリ（メタクリル酸フェニル）、ポリ（アクリル酸メチル）、ポリ（アクリル酸イソプロピル）、ポリ（アクリル酸イソブチル）、ポリ（アクリル酸オクタデシル）、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリ（エチレングリコール）、ポリ（エチレンオキシド）、ポリ（エチレンテレフタレート）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリビニルアセテート、ポリ塩化ビニル、ポリスチレン、及びポリビニルピロリドン。典型的な天然ポリマーは、アルギン酸塩、及び、デキストラン及びセルロースを含む他の多糖類、コラーゲン、その化学誘導体（化学基（例えば、アルキル、アルキレン）の置換や追加、ヒドロキシル化、酸化、及び当業者によって慣例的に行われる他の修飾）、アルブミン及び他の親水性タンパク質、ゼイン及び他のプロラミン並びに疎水性タンパク質、コポリマー、及びそれらの混合物を含む。一般に、これら材料は、酵素加水分解又はインビボでの水への暴露によって、表面浸食又はバルク浸食によって、分解される。ポリマーは、水中でその重量の約９０％までを吸収出来るヒドロゲルの形態であり（例えば、ＷＯ  ０４／００９６６４，  ＷＯ  ０５／０８７２０１，  Ｓａｗｈｎｅｙ，  ｅｔ  ａｌ．，  Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，  １９９３，  ２６，  ５８１−５８７を参照）、及び更に、随意に多価イオン又は他のポリマーに架橋される。
【０３４７】
送達システムはまた、コレステロールやコレステロールエステルなどのステロール、及びモノ−、ジ−、及びトリグリセリドなどの脂肪酸又は中性脂肪を含む脂質である非ポリマー系；ヒドロゲル放出系；サイラスティック系；ペプチドベースの系；ワックス被覆；従来の結合剤及び賦形剤を使用する圧縮錠剤；部分的に融合したインプラントなどを含む。具体的な例は、限定されないが、以下のものを含む：（ａ）米国特許第４，４５２，７７５号、第４，６７５，１８９号、及び第５，７３６，１５２号に記載されるものなどのマトリックス内の形態に生成物が含まれている、侵食系、及び、（ｂ）米国特許第３，８５４，４８０号、第５，１３３，９７４号、及び第５，４０７，６８６号に記載されるもの等のポリマーから制御された速度で生成物が浸透する、拡散系。生成物を含むリポソームは、例えば、（ＤＥ  ３，２１８，１２１；  Ｅｐｓｔｅｉｎ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ，  ８２：  ３６８８−３６９２  （１９８５）；  Ｈｗａｎｇ  ｅｔ  ａｌ．，  Ｐｒｏｃ．  Ｎａｔｌ．  Ａｃａｄ．  Ｓｃｉ．  ＵＳＡ，  ７７：  ４０３０−４０３４  （１９８０）；  ＥＰ  ５２，３２２；  ＥＰ  ３６，６７６；  ＥＰ  ８８，０４６；  ＥＰ  １４３，９４９；  ＥＰ  １４２，６４１；  ＪＰ  ８３−１１８００８；  米国特許第４，４８５，０４５号及び第４，５４４，５４５号；並びにＥＰ  １０２，３２４）などの既知の方法によって調製されてもよい。
【０３４８】
代替的に又は付加的に、組成物は、膜、スポンジ、又は、本明細書に開示されるＬＣ、ＬＣの少なくとも一部をコード化する核酸、又はＬＣの少なくとも一部をコード化する核酸を含むベクターが、吸収されるか、又は閉じ込められる、他の適切な材料の、影響を受けた領域への移植を介して局所的に投与されてもよい。移植デバイスが使用される場合、該デバイスは、任意の適切な組織又は臓器に移植され得、本明細書に開示される、ＬＣ、ＬＣの少なくとも一部をコード化する核酸、又はＬＣの少なくとも一部をコード化する核酸を含むベクターの送達は、ボーラスを介して、又は連続投与を介して、或いは持続注入を使用するカテーテルを介して、直接デバイスに通すことができる。
【０３４９】
本明細書に開示される、ＬＣ、ＬＣの少なくとも一部をコード化する核酸、又はＬＣの少なくとも一部をコード化する核酸を含むベクターを含む、医薬組成物が、例えば乾燥粉末として、吸入用に処方されてもよい。吸入溶液はまた、エアロゾル送達のため液化された推進薬において処方され得る。また別の製剤において、溶液は霧状としてもよい。経肺投与のための追加の医薬組成物は、例えば、化学的に修飾したタンパク質の肺送達を開示するＷＯ９４／２００６９に記載されるものを含む。肺送達のために、粒径は、遠位の肺への送達に適していなければならない。例えば、粒径は１μｍ乃至５μｍでもよい；しかし、例えば、各粒子が非常に多孔性である場合、より大きな粒子を使用してもよい。
【０３５０】
本明細書に開示される、ＬＣ、ＬＣの少なくとも一部をコード化する核酸、又はＬＣの少なくとも一部をコード化する核酸を含むベクターを含む、特定の製剤が、経口投与されてもよい。この様式で投与される製剤は、錠剤又はカプセル等の固形剤形の配合に習慣的に使用される担体と共に、又は該担体無しで処方され得る。例えば、カプセルは、バイオアベイラビリティが最大限にされ、且つプレシステミックな崩壊が最小限にされると、胃腸管にある点において、製剤の活性部分を放出するよう設計され得る。追加の薬剤が、選択的結合剤の吸収を促進するために含まれてもよい。希釈剤、香味料、低融点ワックス、植物油、潤滑剤、懸濁化剤、錠剤崩壊剤、及び結合剤も利用され得る。
【０３５１】
別の調製は、錠剤の製造に適切な非毒性の賦形剤を伴う混合物の中に、本明細書に開示される、ＬＣ、ＬＣの少なくとも一部をコード化する核酸、又はＬＣの少なくとも一部をコード化する核酸を含むベクターを含む、有効な量の抗体を含んでもよい。滅菌水、又は別の適切なビヒクル中で錠剤を溶解することによって、溶液は単位用量の形態で調製され得る。適切な賦形剤は、限定されないが、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム又は重炭酸ナトリウム、ラクトース、又はリン酸カルシウムなどの不活性な希釈剤；又は、デンプン、ゼラチン、或いはアカシアなどの結合剤；又は、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、或いはタルクなどの潤滑剤を含む。
【０３５２】
適切な及び／又は好ましい医薬製剤は、意図される投与経路、送達フォーマット、及び所望の投与量に依存して、本開示及び製剤技術の一般知識を考慮して決定されてもよい。投与方法にかかわらず、有効な用量は、患者の体重、体表面積、又は臓器の大きさに従って計算されてもよい。本明細書に記載される製剤の各々に関する処理に適切な投与量を決定するための計算のさらなる改良が、当該技術分野で慣例的に行われ、且つ、当該技術分野で慣例的に行われるタスクの範囲内にある。適切な投与量は、適切な用量反応のデータの使用を通じて確認されてもよい。
【０３５３】
「薬学的に許容可能な」は、連邦政府又は州政府の規制機関によって承認されるもの或いは承認可能なもの、或いは、米国の薬局方、又はヒトを含む動物に使用するための他の一般に認識される薬局方に列挙されるものを指す。
【０３５４】
「薬学的に許容可能な塩」は、薬学的に許容可能であり、且つ親化合物の所望の薬理活性を持つ、化合物の塩を指す。
【０３５５】
「薬学的に許容可能な賦形剤、担体、又はアジュバント」は、本開示の少なくとも１つの抗体と共に、被験体に投与してもよい賦形剤、担体、又はアジュバントを指し、それらは、その薬理活性を破壊せず、且つ、治療用の量の化合物を送達するのに十分な用量で投与された時に無毒である。
【０３５６】
「薬学的に許容可能なビヒクル」は、本開示の少なくとも１つの抗体と共に投与される、希釈剤、アジュバント、賦形剤、又は担体を指す
【０３５７】
＜ベクター、宿主細胞、及び組み換え法＞
ＴＡは、本明細書に開示されるように、組み換え法によって発現されてもよい。通常、ＴＡをコード化する核酸は単離され、更なるクローニング（ＤＮＡの増幅）のため、又は発現のために複製可能なベクターに挿入されてもよい。ＬＣをコード化するＤＮＡは、ＰＣＲ増幅により調製され、及び、従来の手順（例えば、ＬＣをコード化するヌクレオチドへの特異的な結合が可能なオリゴヌクレオチドプローブの使用による）を使用して配列されてもよい。例示的実施形態において、ＬＣをコード化する核酸はＰＣＲ増幅され、制限酵素は消化され、ゲルが精製される。消化されたＬＣは、複製可能なベクターに挿入されてもよい。消化されたＬＣの挿入を含有する、複製可能なベクターは、更なるクローニング（ＤＮＡの増幅）のため、又は発現のために、宿主細胞に形質転換されるか、又は形質導入されてもよい。宿主細胞は原核細胞又は真核細胞でもよい。
【０３５８】
本明細書に開示されるＬＣのポリペプチド成分をコード化する、ポリヌクレオチド配列は、重複するオリゴヌクレオチドプライマーによるＰＣＲ増幅によって得られてもよい。ポリヌクレオチド配列は、ＴＡ生産細胞から単離され、且つ配列されてもよい。代替的に、ポリヌクレオチドは、ヌクレオチドシンセサイザー又はＰＣＲ技術を使用して合成してもよい。一旦得られると、ポリペプチドをコード化する配列は、原核生物及び／又は真核生物の宿主において、異種のポリヌクレオチドを複製及び発現することが可能な、組み換え型ベクターに挿入される。
【０３５９】
加えて、宿主微生物と互換性を持つ、レプリコン及び対照配列を含むファージベクターは、これらの宿主に関連して形質転換ベクターとして使用されてもよい。例えば、λＧＥＭ（商標）−１１などのバクテリオファージは、大腸菌ＬＥ３９２などの感受性宿主細胞を形質転換するために使用され得る組み換え型ベクターを作る際に利用してもよい。
【０３６０】
ＴＡは、細胞内（例えば細胞質）又は細胞外（例えば分泌物）に発現されてもよい。細胞外の発現について、ベクターは、細胞の外側へのＴＡの転位を可能にする分泌シグナルを含んでもよい。
【０３６１】
ＴＡをコード化するベクターのクローン化又は発現に適切な宿主細胞は、本明細書に記載される原核細胞又は真核細胞を含む。宿主細胞は真核生物でもよい。真核細胞の例は、限定されないが、ヒト胚腎臓（ＨＥＫ）細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、菌類、酵母菌、無脊椎の細胞（例えば植物細胞と昆虫細胞）、リンパ系細胞（例えばＹＯ、ＮＳＯ、Ｓｐ２０細胞）を含む。適切な哺乳動物宿主細胞株の他の例は、ＳＶ４０（ＣＯＳ−７）によって形質転換されるサル腎臓ＣＶ１株；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ）；マウスセルトリ細胞；サル腎培養細胞（ＣＶ１）；アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ−７６）；ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ）；イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ）；バッファローラット肝細胞（ＢＲＬ  ３Ａ）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８）；ヒト肝細胞（ＨｅｐＧ２）；マウス乳房腫瘍（ＭＭＴ  ０６０５６２）；ＴＲ１細胞；ＭＲＣ  ５細胞；及びＦＳ４細胞である。宿主細胞は原核細胞（例えば大腸菌）でもよい。
【０３６２】
宿主細胞は、ＴＡをコード化するヌクレオチドを含有するベクターにより形質転換されてもよい。形質転換した宿主細胞は、培地中で培養されてもよい。培地は、プロモーターを誘導するか、形質転換体を選択するか、又は所望の配列をコード化する遺伝子を増幅或いは発現するために、１以上の薬剤で補われてもよい。宿主細胞を形質転換させる方法は当該技術分野で既知であり、電気穿孔、塩化カルシウム、又はポリエチレングリコール／ＤＭＳＯを含んでもよい。
【０３６３】
代替的に、宿主細胞は、ＴＡをコード化するヌクレオチドを含有するベクターによりトランスフェクトされか、又は形質導入されてもよい。トランスフェクトされた宿主細胞又は形質導入された宿主細胞は、培地の中で培養されてもよい培地は、プロモーターを誘導するか、トランスフェクト又は形質導入した細胞を選択するか、又は所望の配列をコード化する遺伝子を発現するために、１以上の薬剤で補われてもよい。
【０３６４】
発現されたＴＡは、宿主細胞のペリプラズムに分泌され、該ペリプラズムから回収され、又は培地に輸送され得る。ペリプラズムからのタンパク質回収は、宿主細胞の破砕を含み得る。宿主細胞の破砕は、浸透圧ショック、超音波処理、又は溶解を含み得る。遠心分離又は濾過が、細胞デブリ又は全細胞を取り除くために使用されてもよい。ＴＡは、例えば親和性レジンクロマトグラフィによって、更に精製されてもよい。
【０３６５】
代替的に、培養培地に分泌されるＴＡは、その中で分離されてもよい。細胞は、培養物、及び、生成されるタンパク質の更なる精製のために濾過及び濃縮される培養物の上清から除去され得る。発現されたポリペプチドは更に、ポリアクリルアミドゲル電気泳動法（ＰＡＧＥ）及びウェスタンブロットアッセイなどの普通に知られている方法を使用して、単離且つ同定することができる。
【０３６６】
ＴＡ生成は、発酵プロセスによって大量に実行されてもよい。様々な大規模な流加回分発酵手順は、組み換え型タンパク質の生産に利用可能である。大規模な発酵は、少なくとも１０００リットルの容量、好ましくは１，０００乃至１００，０００リットルの容量を有する。これらの発酵槽は、酸素と栄養素、特にグルコース（好ましくは炭素／エネルギー源）を分配するためにアジテーターインペラー（ａｇｉｔａｔｏｒ  ｉｍｐｅｌｌｅｒｓ）を使用してもよい。小規模発酵は、容積が約１００リットル以下の発酵槽における発酵を一般的に指すが、約１リットルから約１００リットルまで変動する場合がある。
【０３６７】
発酵プロセスにおいて、タンパク質発現の誘発は典型的に、所望の密度（例えば約１８０−２２０のＯＤ５５０）に適切な条件下で細胞が成長した後（その段階では、細胞は早期の固定相に存在する）に、開始される。様々な誘発因子が、当該技術分野にて既知であり且つ本明細書に記載されるように、利用されるベクターコンストラクトに従って使用されてもよい。細胞は、誘発前のより短い期間で増殖してもよい。より長い又はより短い誘発時間が使用され得るが、細胞は通常約１２−５０時間で誘発される。
【０３６８】
本明細書に開示されるＴＡの生産収量及び品質を改善するために、様々な発酵条件を改変することができる。例えば、適切なアセンブリ、及び分泌されたＴＡポリペプチドのフォールディングを改善するために、Ｄｓｂタンパク質（ＤｓｂＡ、ＤｓｂＢ、ＤｓｂＣ、ＤｓｂＤ、又はＤｓｂＧ）又はＦｋｐＡ（ペプチジルプロリル・シス、シャペロン活性を伴うトランス−イソメラーゼ））などの、シャペロンタンパク質を過剰発現する付加的なベクターは、宿主原核細胞を同時形質転換するために使用され得る。シャペロンタンパク質は、細菌の宿主細胞において生成された異種タンパク質の適切なフォールディング及び可溶性を促進するために実証されてきた。
【０３６９】
発現された異種タンパク質（特に、タンパク分解性に感受性があるもの）のタンパク質分解を最小限にするために、タンパク質分解酵素には不十分な特定の宿主株が、本開示に使用され得る。例えば、宿主細胞株は、プロテアーゼＩＩＩ、ＯｍｐＴ、ＤｅｇＰ、Ｔｓｐ、プロテアーゼＩ、プロテアーゼＭｉ、プロテアーゼＶ、プロテアーゼＶＩ、及びそれらの組み合わせなどの既知の細菌プロテアーゼをコード化する遺伝子における遺伝子変異を達成するために修飾され得る。幾つかの大腸菌のプロテアーゼが不十分な菌株が利用可能である。
【０３７０】
当該技術分野にて既知の標準タンパク質精製法を利用することができる。以下の手順は、適切な精製手順の典型である：免疫親和性又はイオン交換カラム上の分画、エタノール沈澱、逆相ＨＰＬＣ、シリカ又はＤＥＡＥなどの陽イオン交換樹脂上でのクロマトグラフィー、クロマト分画、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ、硫酸アンモニウム沈殿法、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動法、透析、及び親和性クロマトグラフィー、並びに、例えばＳｅｐｈａｄｅｘ  Ｇ−７５を使用するゲル濾過。
【０３７１】
ＴＡは、市販で入手可能なタンパク質濃度フィルタ（例えば、Ａｍｉｃｏｎ又はＭｉｌｌｉｐｏｒｅ  Ｐｅｌｌｉｃｏｎ（登録商標）の限外濾過ユニット）を使用して濃縮されてもよい。
【０３７２】
プロテアーゼ阻害剤又はプロテアーゼ阻害剤カクテルは、ＴＡのタンパク質分解を阻害するために前述の工程の何れかに含まれていてもよい。
【０３７３】
幾つかの場合において、ＴＡ又はそのフラグメントは、単離後に生物学的に活性ではない場合もある。ポリペプチドを「リフォールディングする」又はその三次構造に変換する、及びジスルフィド連結を生成する様々な方法が、生物活性を回復するために使用され得る。そのような方法は、通常７より上のｐＨにまで、及び特定の濃度のカオトロープ存在下で、可溶化したポリペプチドを晒す工程を含む。カオトロープの選択は、封入体の可溶化に使用される選択に非常に類似するが、通常、カオトロープは、より低い濃度で使用され、必ずしも可溶化に使用されるカオトロープと同じではない。リフォールディング溶液／酸化溶液はまた、還元剤、又は、還元剤と、タンパク質のシステインブリッジの形成に生じさせるためにジスルフィドシャフリングを可能にする特定のレドックス電位を生成するための特定の比率にあるその酸化形態とを含む。共通して使用されたレドックス対の幾つかは、システイン／シスタミン、グルタチオン（ＧＳＨ）／ジチオビスＧＳＨ、塩化第二銅、ジチオトレイトール（ＤＴＴ）／ジチアンＤＴＴ、及び２−メルカプトエタノール（ｂＭＥ）／ｄｉ−チオ−ｂ（ＭＥを含む。多くの例において、助溶剤は、リフォールディングの効率を増加させるために使用され得、この目的に使用される一般の試薬は、グリセロール、様々な分子量のポリエチレングリコール、アルギニンなどを含む。バッファーの選択は、リフォールディングされたペプチドの三次元構造を決定し得る。硫酸アンモニウムを含むバッファーの使用は、他のタイプのバッファーよりも優れた収率で、所望のリフォールディングされたペプチドを結果としてもたらし得る。
【０３７４】
＜キット／製造品＞
更なる態様として、本開示は、本開示の方法を実行するための使用を促進する様式で包装された、１以上の化合物又は組成物を含むキットを含む。１つの実施形態において、そのようなキットは、容器に取り付けられるラベル又は前記方法を実行する際の化合物又は組成物の使用を説明する添付文書を伴う容器に包装される、本明細書に記載の化合物又は組成物（例えば、ＴＡのみ、又は第２の薬剤と組み合わせたもの）を含む。適切な容器は、例えば、ボトル、バイアル、シリンジなどを含む。容器は、ガラス又はプラスチックのような様々な材料から形成されてもよい。容器は、無菌のアクセスポートを備えていてもよい（例えば、容器は、皮下注射針によって貫通可能なストッパを有する静脈注射用溶液バッグ又はバイアルでもよい）。製品は、（ａ）本明細書に開示されるようなｍＴＡを含む組成物を中に含んでいる第１の容器；及び（ｂ）追加の治療剤を含む組成物を中に含んでいる第２の容器を含んでもよい。本明細書に開示されるこの実施形態における製造品は更に、第１及び第２の組成物が特定の疾病を処置するために使用され得ることを示す添付文書を含んでもよい。代替的に又は付加的に、製品は更に、制菌性の注射用水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンガー溶液、及びデキストロース溶液などの薬学的に許容可能なバッファーを含む、第２（又は第３）の容器を含んでもよい。製品は更に、他のバッファー、希釈剤、フィルタ、針、及びシリンジを含む、商業上及びユーザの観点から望ましい他の材料を含んでもよい。好ましくは、化合物又は組成物は単位投与形態で包装される。キットは更に、特異的な投与経路に従って組成物を投与するのに、又はスクリーニングアッセイを実行するのに適切なデバイスを含んでもよい。好ましくは、キットは、修飾された治療剤の組成物の使用を説明するラベルを含む。
【０３７５】
特定の実施形態において、修飾された治療剤を含む組成物は、ヒト、ウシ、ネコ、イヌ、及びマウスなど哺乳動物への静脈内投与に適用される医薬組成物として、常法に従って処方される。典型的に、静脈内投与用組成物は、無菌の等張の水性バッファーにある溶液である。必要な場合、組成物はまた、注入の部位にて疼痛を緩和するために、可溶化剤、及びリドカインなどの局所麻酔を含んでもよい。一般的に、成分は、例えば、活性薬剤の量を示すアンプル又はサシェ（ｓａｃｈｅｔｔｅ）などの密封容器において凍結乾燥した粉末又は無水濃縮物として、別々に又は単位投与形態と組み合わせての何れかで供給される。組成物が点滴によって投与される場合、それは、無菌の医薬品等級の水又は塩を含む点滴ボトルにより分配され得る。組成物が注入により投与される場合、滅菌注射用蒸留水又は食塩水のアンプルは、成分が投与前に混合され得るように、提供され得る。
【０３７６】
タンパク質の異常な発現及び／又は活性に関連する疾患又は障害の処置、阻害、及び予防に効果的であり得る、本明細書に記載される組成物の量は、標準の臨床的技術によって決定され得る。加えて、インビトロのアッセイは随意に、最適な投与量の範囲を同定するのを助けるために利用されてもよい。製剤に利用される正確な用量も、投与経路、及び疾患又は障害の重症度に依存してもよく、且つ、医療従事者の判断及び各患者の状況によって決定されなければならない。効果的な用量は、インビトロの又は動物モデルの試験システムに由来する、用量−反応曲線から推定される。
【０３７７】
＜定義＞
下記の用語は、本明細書で使用されるように、他に示されない限り以下の意味を持つ：
【０３７８】
「アミノ」は−ＮＨ２ラジカルを指す。
【０３７９】
「シアノ」又は「ニトリル」は−ＣＮラジカルを指す。
【０３８０】
「ヒドロキシ」又は「ヒドロキシル」は−ＯＨラジカルを指す。
【０３８１】
「ニトロ」は−ＮＯ２ラジカルを指す。
【０３８２】
「オキソ」は＝Ｏ置換基を指す。
【０３８３】
「オキシム」は＝Ｎ−ＯＨ置換基を指す。
【０３８４】
「チオキソ」は＝Ｓ置換基を指す。
【０３８５】
「アルキル」は直鎖又は分枝鎖の炭化水素鎖ラジカルを指し、１乃至３０の炭素原子を有し、単結合により分子の残りに付けられる。１乃至３０の炭素原子の任意の数を含むアルキルが含まれる。３０までの炭素原子を含むアルキルはＣ１−Ｃ３０アルキルと称され、同様に、例えば１２までの炭素原子までの炭素原子を含むアルキルはＣ１−Ｃ１２アルキルである。他の数の炭素原子を含むアルキル（及び、本明細書に定義される他の部分）は、同様に表わされる。アルキル基は、限定されないが、Ｃ１−Ｃ３０アルキル、Ｃ１−Ｃ２０アルキル、Ｃ１−Ｃ１５アルキル、Ｃ１−Ｃ１０アルキル、Ｃ１−Ｃ８アルキル、Ｃ１−Ｃ６アルキル、Ｃ１−Ｃ４アルキル、Ｃ１−Ｃ３アルキル、Ｃ１−Ｃ２アルキル、Ｃ２−Ｃ８アルキル、Ｃ３−Ｃ８アルキル、及びＣ４−Ｃ８アルキルを含む。代表的なアルキル基は、限定されないが、メチル、エチル、ｎ−プロピル、１−メチルエチル（ｉｓｏ−プロピル）、ｎ−ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチル、ｎ−ペンチル、１，１−ジメチルエチル（ｔ−ブチル）、３−メチルヘキシル、２−メチルヘキシル、ビニル、アリル、プロピニルなどを含む。不飽和を含むアルキルはアルケニルとアルキニル基を含む。本明細書に別段の定めが無い限り、アルキル基は、以下に記載されるように随意に置換されてもよい。
【０３８６】
「アルキレン」又は「アルキレン鎖」は、上記のアルキルについて記載されるように、直鎖又は分枝鎖の二価の炭化水素鎖を指す。本明細書に別段の定めが無い限り、アルキレン基は、以下に記載されるように随意に置換されてもよい。
【０３８７】
「アルコキシ」は、Ｒａが定義されるようなアルキルラジカルである式−ＯＲａのラジカルを指す。本明細書に別段の定めが無い限り、アルコキシ基は、以下に記載されるように随意に置換されてもよい。
【０３８８】
「アリール」は、水素、６乃至３０の炭素原子、及び少なくとも１つの芳香環を含む、炭化水素環系に由来するラジカルを指す。アリールラジカルは、縮合した又は架橋した環系を含み得る、単環式、二環式、三環式、又は四環式の環系でもよい。アリール基は、限定されないが、アセアントレリン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、フルオランテン、フルオレン、ａｓ−インダセン、ｓ−インダセン、インダン、インデン、ナフタリン、フェナレン、フェナントレン、プレイアデン、ピレン、及びトリフェニレンの炭化水素環系に由来するアリールラジカルを含む。本明細書に別段の定めがない限り、用語「アリール」又は接頭語「ａｒ」（「アラルキル」などにおける）は、随意に置換したアリールラジカルを含むことを意味する。
【０３８９】
「シクロアルキル」又は「炭素環」は、飽和又は不飽和である、縮合又は架橋した環系を含み得る、安定した、非芳香族の、単環式又は多環式の炭素環を指す。代表的なシクロアルキル又は炭素環は、限定されないが、３乃至１５の炭素原子、３乃至１０の炭素原子、３乃至８の炭素原子、３乃至６の炭素原子、３乃至５の炭素原子、又は３乃至４の炭素原子を持つシクロアルキルを含む。単環式シクロアルキル又は炭素環は、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、及びシクロオクチルを含む。多環式シクロアルキル又は炭素環は、例えば、アダマンチル、ノルボルニル、デカリニル（ｄｅｃａｌｉｎｙｌ）、ビシクロ［３．３．０］オクタン、ビシクロ［４．３．０］ノナン、シス−デカリン、トランス−デカリン、ビシクロ［２．１．１］ヘキサン、ビシクロ［２．２．１］ヘプタン、ビシクロ［２．２．２］オクタン、ビシクロ［３．２．２］ノナン、及びビシクロ［３．３．２］デカン、及び７，７−ジメチル−ビシクロ［２．２．１］へプタニルを含む。本明細書に別段の定めがない限り、シクロアルキル又は炭素環の基は、随意に置換されてもよい。シクロアルキル基の実例は、以下の部分を含むがこれらに限定されない：
【０３９０】
【化３４】
2020063249.tif 000036
【０３９１】
「縮合した」は、既存の環構造に縮合される、本明細書に記載の任意の環構造を指す。縮合環がヘテロシクリル環又はヘテロアリール環である場合、縮合ヘテロシクリル環又は縮合ヘテロアリール環の一部となる既存の環構造上の任意の炭素原子は、窒素原子と置き換えられてもよい。
【０３９２】
「ハロ」又は「ハロゲン」は、ブロモ、クロロ、フルオロ、又はヨードを指す。
【０３９３】
「ハロアルキル」は、上記に定義されるように、１以上のハロラジカルにより置換される、上記に定義されるようなアルキルラジカルを指し、例えば、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、フルオロメチル、トリクロロメチル、２，２，２−トリフルオロエチル、１，２−ジフルオロエチル、３−ブロモ−２−フルオロプロピル、１，２−ジブロモエチルなどである。本明細書に別段の定めが無い限り、ハロアルキルの基は、随意に置換されてもよい。
【０３９４】
「ハロアルコキシ」は同様に、Ｒａが定義されるようなハロアルキルラジカルである、式−ＯＲａのラジカルを指す。本明細書に別段の定めが無い限り、ハロアルコキシの基は、以下に記載されるように随意に置換されてもよい。
【０３９５】
「ヘテロシクロアルキル」又は「ヘテロシクリル」又は「複素環」又は「ヘテロ環」は、２乃至２３の炭素原子と、窒素、酸素、亜リン酸、及び硫黄から成る群から選択される１乃至８のヘテロ原子とを含む、安定した３乃至２４員環の非芳香環ラジカルを指す。本明細書において具体的に別段の定めの無い限り、ヘテロシクリルラジカルは、縮合又は架橋した環系を含み得る、単環式、二環式、三環式、又は四環式の環系でもよく；ヘテロシクリルラジカル中の窒素、炭素、又は硫黄の原子は、随意に酸化されてもよく；窒素原子は随意に四級化されてもよく；及び、ヘテロシクリルラジカルは、部分的又は完全に飽和されてもよい。そのようなヘテロシクリルラジカルの例は、限定されないが、アゼチジニル、ジオキソラニル、チエニル［１，３］ジチアニル、デカヒドロイソキノリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、イソチアゾリジニル、イソキサゾリジニル、モルホリニル、オクタヒドロインドリル、オクタヒドロイソインドリル、２−オキソピペラジニル、２−オキソピペリジニル、２−オキソピロリジニル、オキサゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、４−ピペリジニル（ｐｉｐｅｒｉｄｏｎｙｌ）、ピロリジニル、ピラゾリジニル、キヌクリジニル、チアゾリジニル、テトラヒドロフリル、トリチアニル、テトラヒドロピラニル、チオモルホリニル、チアモルホリニル、１−オキソ−チオモルホリニル、１，１−ジオキソ−チオモルホリニル、１２−クラウン−４、１５−クラウン−５、１８−クラウン−６、２１−クラウン−７、アザ−１８−クラウン−６、ジアザ−１８−クラウン−６、アザ−２１−クラウン−７、及びジアザ−２１−クラウン−７を含む。本明細書に別段の定めが無い限り、ヘテロシクリル基は、随意に置換されてもよい。非芳香族ヘテロ環としても表される、ヘテロシクロアルキル基の説明的な例は、以下のものを含む。
【０３９６】
【化３５】
2020063249.tif 000037
用語「ヘテロシクロアルキル」はまた、限定されないが、単糖類、二糖類、及びオリゴ糖を含む、炭水化物の環状形態を全て含む。他に明記されない限り、ヘテロシクロアルキルは環の中に２乃至１０の炭素を持つ。ヘテロシクロアルキル中の炭素原子の数に言及する場合、ヘテロシクロアルキル中の炭素原子の数は、ヘテロシクロアルキルを構築する、（ヘテロ原子を含む）原子（即ち、ヘテロシクロアルキル環の骨格原子）の総数と同じでないことが理解される。本明細書に別段の定めが無い限り、ヘテロシクロアルキル基は、随意に置換されてもよい。
【０３９７】
本明細書で使用されるような用語「ヘテロアリール」は、単独で又は組み合わせで、約５乃至約２０の骨格環原子を含有する随意に置換した芳香族モノラジカルを指し、ここで、１以上の環原子は、酸素、窒素、硫黄、亜リン酸、シリコン、セレン、及びスズの中から独立して選択されたヘテロ原子であるが、これらの原子には限定されず、前記群の環は２つの隣接したＯ又はＳの原子を包含しないことを前提とする。２以上のヘテロ原子が環の中に存在する実施形態において、２以上のヘテロ原子は互いに同じであり得るか、又は２以上のヘテロ原子の幾つか又は全ては、それぞれ他のものと異なり得る。用語「ヘテロアリール」は、少なくとも１つのヘテロ原子を有する、随意に置換した縮合及び非縮合のヘテロアリールラジカルを含む。用語「ヘテロアリール」はまた、５乃至約２０の骨格環原子を有する縮合及び非縮合のヘテロアリール、同様に、５乃至約１０の骨格環原子を有するものも含む。ヘテロアリール基への結合は、炭素原子又はヘテロ原子を介し得る。故に、制限しない例として、イミダゾール基は、その炭素原子（イミダゾール−２−イル、イミダゾール−４−イル、又はイミダゾール−５−イル）、或いはその窒素原子（イミダゾール−１−イル又はイミダゾール−３−イル）の何れかを介して親分子に付けられてもよい。同様に、ヘテロアリール基は、その炭素原子の何れか又は全て、及び／又はそのヘテロ原子の何れか又は全てを介して、更に置換されてもよい。縮合ヘテロアリールラジカルは２乃至４の縮合環を備え、そこでは、付着する環はヘテロ芳香環であり、他の個々の環は、し環式、芳香族、ヘテロ芳香族、又はそれらの任意の組み合わせであってもよい。単環のヘテロアリール基の制限しない例はピリジルを含み、縮合環のヘテロアリール基はベンズイミダゾリル、キノリニル、アクリジニルを含み、非縮合のビヘテロアリール基はビピリジニルを含む。ヘテロアリールの更なる例は、限定されないが、フラニル、チエニル、オキサゾリル、アクリジニル、アゼピニル、フェナジニル、ベンズイミダゾリル、ベンズインドリル、ベンゾフラニル、ベンゾフラノニル、ベンズオキサゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾチオフェニル、ベンズオキサジアゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキセピニル、１，４−ベンゾジオキサニル、ベンゾナフトフラニル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾジオキソリル、ベンゾジオキシニル、ベンゾピラニル、ベンゾピラノニル、ベンゾチエニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾ［４，６］イミダゾ［１，２−ａ］ピリジニル、カルバゾリル、シンノリニル、ジベンゾフラニル、ジベンゾチオフェニル、フラノニル、イミダゾリル、インドリル、イソキサゾリル、イソキノリニル、インドリジニル、インダゾリル、イソインドリル、インドリニル、イソインドリニル、インドリジニル、イソチアゾリル、イソインドリルオキサジアゾリル、インダゾリル、ナフチリジニル、オキサジアゾリル、２−オキソアゼピニル、オキシラニル、１−オキシドピリジニル、１−オキシドピリミジニル、１−オキシドピラジニル、１−オキシドピリダジニル、１−フェニル−１Ｈ−ピロリル、フェノチアジニル、フェノキサジニル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピロリル、ピラジニル、ピラゾリル、プリニル、フタラジニル、プテリジニル、キノリニル、キナゾリニル、キノキサリニル、キヌクリジニル、トリアゾリル、テトラゾリル、チアゾリル、トリアジニル、チアジアゾリル、テトラヒドロキノリニル、チアゾリル、及びチオフェニルなど、並びに、例えばピリジル−Ｎ−オキシドなどのそれらのオキシドを含む。ヘテロアリール基の実例は、以下の部分を含む：
【０３９８】
【化３６】
2020063249.tif 000038
【０３９９】
上記の基は全て、置換又は非置換であってもよい。本明細書で使用されるように用語「置換した」は、上記の基（例えば、アルキル、アルキレン、アルコキシ、アリール、シクロアルキル、ハロアルキル、ヘテロシクリル、及び／又はヘテロアリール）の何れかが更に官能化され得ることを意味し、少なくとも１つの水素原子は非水素原子置換基への結合により置き換えられる。本明細書に別段の定めがない限り、置換基は、次のものから選択された１以上の置換基を含んでもよい：オキソ、アミノ、−ＣＯ２Ｈ、ニトリル、ニトロ、ヒドロキシル、チオオキシ、アルキル、アルキレン、アルコキシ、アリール、シクロアルキル、ヘテロシクリル、ヘテロアリール、ジアルキルアミン、アリールアミン、アルキルアリールアミン、ジアリールアミン、トリアルキルアンモニウム（−Ｎ＋Ｒ３）、Ｎ−オキシド、イミド、及びエナミン；トリアルキルシリル基、ジアルキルアリールシリル基、アルキルジアリールシリル基、トリアリールシリル基、ペルフルオロアルキル又はペルフルオロアルコキシ、例えば、トリフルオロメチル又はトリフルオロメトキシなどの基におけるシリコン原子。「置換した」はまた、１以上の水素原子が、オキソ、カルボニル、カルボキシル、及びエステルの基における酸素；及び、イミン、オキシム、ヒドラゾン、及びニトリルなどの基における窒素などのヘテロ原子への高位結合（例えば、二重又は三重結合）により置き換えられる、上記の基の何れかを意味する。例えば、「置換した」は、１以上の水素原子が、−ＮＨ２、−ＮＲｇＣ（＝Ｏ）ＮＲｇＲｈ、−ＮＲｇＣ（＝Ｏ）ＯＲｈ、−ＮＲｇＳＯ２Ｒｈ、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲｇＲｈ、−ＯＲｇ、−ＳＲｇ、−ＳＯＲｇ、−ＳＯ２Ｒｇ、−ＯＳＯ２Ｒｇ、−ＳＯ２ＯＲｇ、＝ＮＳＯ２Ｒｇ、及び−ＳＯ２ＮＲｇＲｈで置き換えられる、上記の基の何れかを含む。前述のものにおいて、ＲｇとＲｈは同じ又は異なるものであり、独立して、水素、アルキル、アルコキシ、アルキルアミノ、チオアルキル、アリール、アラルキル、シクロアルキル、シクロアルキルアルキル、ハロアルキル、ヘテロシクリル、Ｎ−ヘテロシクリル、ヘテロシクリルアルキル、ヘテロアリール、Ｎ−ヘテロアリール、及び／又はヘテロアリールアルキルである。加えて、前述の置換基の各々はまた、上記の置換基の１以上で随意に置換されてもよい。更に、上記の基の何れかは、１以上の内部の酸素、硫黄、又は窒素の原子を含むように、置換されてもよい。例えば、アルキル基は、エーテル又はポリエーテルの基を形成するために、１以上の内部酸素原子で置換されてもよい。同様に、アルキル基は、チオエーテル、ジスルフィド等を形成するために、１以上の内部硫黄原子で置換されてもよい。
【０４００】
用語「随意の（ｏｐｔｉｏｎａｌ）」又は「随意に（ｏｐｔｉｏｎａｌｌｙ）」は、後に記載される事象又は状況が生じる又は生じない場合があること、及び、この記載が、前記事象又は状況が生じる場合の例及び生じない場合の例を含むこと、を意図する。例えば、「随意に置換したアルキル」は、上記に定義されるように「アルキル」又は「置換したアルキル」を意味する。更に、随意に置換した基は、未置換（例えば−ＣＨ２ＣＨ３）、完全に置換（例えば−ＣＦ２ＣＦ３）、モノ置換（例えば−ＣＨ２ＣＨ２Ｆ）、又は、完全な置換とモノ置換との間にあるレベルで置換（例えば−ＣＨ２ＣＨＦ２、−ＣＨ２ＣＦ３、−ＣＦ２ＣＨ３、−ＣＦＨＣＨＦ２など）されてもよい。そのような基は、立体的に非実用的及び／又は合成的に利用可能でない、任意の置換又は置換パターン（例えば、置換したアルキルは随意に置換したシクロアルキル基を含み、それは次に随意に置換したアルキル基を潜在的に無制限に含むと定義される）を導入することを意図されないことが、１以上の置換基を含有する任意の基に関して当業者に理解される。故に、記載された任意の置換基は、約１，０００ダルトン、及びより典型的には、約５００ダルトンまでの最大分子量を備えていると、一般的に理解されねばならない。
【０４０１】
「互変異性体」は、分子の１つの原子から同じ分子の別の原子へのプロトン移動を指す。本明細書に提示された化合物は、互変異性体として存在してもよい。互変異性体は、単結合及び隣接した二重結合の切り換え（ｓｗｉｔｃｈ）を伴う水素原子の移動によって相互転換可能な化合物である。互変異性化が可能である配列を結合する際に、互変異性体の化学平衡が存在する。本明細書に開示される化合物の全ての互変異性体が考慮される。互変異性体の正確な比率は、温度、溶媒、及びｐＨを含む様々な因子に依存する。互変体の相互転換の幾つかの例は次のものを含む：
【０４０２】
【化３７】
2020063249.tif 000039
【０４０３】
本明細書に開示される化合物の「代謝物」は、化合物の代謝時に形成される、化合物の誘導体である。用語「活性代謝物」は、化合物の代謝時に形成される、化合物の生物学的に活性な誘導体を指す。本明細書で使用されるように、用語「代謝した」は、有機体によって特定の物質が変化するプロセス（加水分解反応、及び、酸化反応等の酵素によって触媒される反応を含むが、これらに限定されない）の全体を指す。従って、酵素は化合物に対して特異的な構造上の変化を生成し得る。例えば、チトクロームＰ４５０は、様々な酸化反応及び還元反応を触媒する一方で、ウリジン二リン酸グルクロニルトランスフェラーゼは、芳香族アルコール、脂肪族アルコール、カルボン酸、アミン、及び遊離スルフヒドリル基への、活性化グルクロン酸分子の転移を触媒する。代謝についての更に詳しい情報は、「Ｔｈｅ  Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ  Ｂａｓｉｓ  ｏｆ  Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，  ９ｔｈ  Ｅｄｉｔｉｏｎ，  ＭｃＧｒａｗ  Ｈｉｌｌ  （１９９６）」から得てもよい。本明細書に開示される化合物の代謝物は、宿主への化合物の投与及び宿主から採取した組織サンプルの解析により、又は、肝細胞を用いた化合物のインビトロでのインキュベーション及びその結果生じる化合物の解析の何れかによって、同定され得る。両方の方法は、当該技術分野で周知である。幾つ化合物の代謝物は、酸化プロセスによって形成され、対応するヒドロキシ含有化合物に相当してもよい。化合物は、１以上の薬理学的に活性な代謝物に代謝されてもよい。
【０４０４】
本明細書で使用されるように、ペプチドの「誘導体」は、限定されないが、脂質付着（１以上のアミノ酸残基の置換、又はＬ−アミノ酸ｖｓＤ−アミノ酸の置換）を可能にする修飾されたペプチド、そのペプチドのフラグメント、１以上の付加的なアミノ酸を備えたアナログ、複合体、及び／又は凝集体を指す。ペプチドの誘導体は、ペプチドに対して少なくとも５０％の同族性を有する同族体でもよい。ペプチドの誘導体は、ペプチドに対して少なくとも６０％の同族性を有する同族体でもよい。ペプチドの誘導体は、ペプチドに対して少なくとも７０％の同族性を有する同族体でもよい。ペプチドの誘導体は、ペプチドに対して少なくとも８０％の同族性を有する同族体でもよい。ペプチドの誘導体は、ペプチドに対して少なくとも９０％の同族性を有する同族体でもよい。
【０４０５】
「処置すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、「処置（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」、或いは「処置する（ｔｒｅａｔ）」、又は「緩和すること（ａｌｌｅｖｉａｔｉｎｇ）」或いは「緩和する（ａｌｌｅｖｉａｔｅ）」は、次のものを指す場合がある：１）診断された病理学的疾病又は障害の症状を治癒し、遅延し、和らげ、及び／又はその進行を止める、治療手段；及び／又は、２）標的とされた病理学的疾病又は障害の進行を予防する及び／又は遅くする、予防手段（ｐｒｏｐｈｙｌａｃｔｉｃ  ｏｒ  ｐｒｅｖｅｎｔａｔｉｖｅ  ｍｅａｓｕｒｅｓ）。故に、処置を必要とする人は、既に障害を持つ人；障害を持つ傾向のある人；及び、障害が予防されるべき人を含む。
【０４０６】
「アミノ酸」は、自然発生及び合成のアミノ酸を指し、同様に、自然発生のアミノ酸と同じように機能するアミノ酸アナログ及びアミノ酸模倣体も指す。自然発生のアミノ酸は、後に修飾されるアミノ酸、例えば、ヒドロキシプロリン、ガンマ−カルボキシグルタマート、及びＯ−フォスフォセリンと同様に、遺伝コードによってコード化されたものである。アミノ酸アナログは、自然発生のアミノ酸、例えば、水素、カルボキシル基、アミノ基、及びＲ基（例えば、ホモセリン、ノルロイシン、メチオニンスルホキシド、メチオニンメチルスルホニウム）に結合する、アルファ炭素と同じ基礎的な化学構造を有する化合物を指す。前記アナログは、修飾されたＲ基（例えば、ノルロイシン）又は修飾されたペプチドバックボーンを有するが、自然発生のアミノ酸と同じ基礎的な化学構造を保持することができる。アミノ酸模倣体は、アミノ酸の一般的な化学構造とは異なるが、自然発生のアミノ酸と同様に機能する構造を有する、化学化合物を指す。
【０４０７】
本明細書で使用されるように、用語「治療剤」又は「ペプチド治療剤」は、別のタンパク質、ペプチド、細胞、又は組織の活性を調節する、タンパク質又はペプチドを指す。活性の調節は、タンパク質、ペプチド、細胞、又は組織の活性又は発現の増加、減少、刺激、又は予防を含み得る。治療剤は、疾患又は障害の病因に関係するタンパク質又はペプチドの活性を調節し得る。例示的なＴＡは、ホルモン、キナーゼ、受容体、リガンド、増殖因子、調節タンパク質、代謝タンパク質、サイトカイン、ケモカイン、インターフェロン、ホスファターゼ、抗体、又はそれらの任意の組み合わせの少なくとも一部を含み得るが、これらに限定されない。
【０４０８】
「障害」又は「疾患」は、本明細書に開示される物質／分子（例えば、本明細書に開示されるようなｍＴＡ）又は方法による処置から利益を得る、状態を指す。これは、哺乳動物を問題となっている障害にかける病理学的状態を含む、慢性及び急性の障害又は疾患を含む。
【０４０９】
「処置」は、処置されている個体又は細胞の自然経過を変更しようとする試みにおける臨床的介入を指し、予防処置のため又は臨床病理学の間の何れかで実行され得る。望ましい治療効果は、疾患の発生又は再発の予防、症状の緩和、疾患の直接又は間接的な病理学的影響の減少、転移の予防、疾患進行の速度の減少、病状の回復又は軽減、及び緩和又は改善した予後を含む。
【０４１０】
処置の目的のための「哺乳動物」は、ヒト、げっ歯類（例えば、マウス及びラット）、並びにサル；家畜（ｄｏｍｅｓｔｉｃ  ａｎｄ  ｆａｒｍ  ａｎｉｍａｌｓ）；及び、イヌ、ネコ、畜牛、ウマ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ウサギ等の、動物園、スポーツ、研究所、又はペット用の動物を含む、哺乳動物として分類される任意の動物を指す。幾つかの実施形態において、哺乳動物は、ヒト、げっ歯類、又はサルから選択される。
【０４１１】
「薬学的に許容可能な」は、連邦政府又は州政府の規制機関によって承認されるもの或いは承認可能なもの、或いは、米国の薬局方、又はヒトを含む動物に使用するための他の一般に認識される薬局方に列挙されるものを指す。
【０４１２】
「薬学的に許容可能な塩」は、薬学的に許容可能であり、且つ親化合物の所望の薬理活性を持つ、化合物の塩を指す。
【０４１３】
「薬学的に許容可能な賦形剤、担体、又はアジュバント」は、本開示の少なくとも１つの抗体と共に、被験体に投与することが出来る賦形剤、担体、又はアジュバントを指し、それは、その薬理活性を破壊せず、治療用の量の化合物を送達するのに十分な用量で投与された時に無毒である。
【０４１４】
「薬学的に許容可能なビヒクル」は、本開示の少なくとも１つの抗体と共に投与される、希釈剤、アジュバント、賦形剤、又は担体を指す
【０４１５】
用語「修飾された治療剤」、「ｍＴＡ」、「脂質複合体」、及び「ＬＣ」は、互換的に使用してもよい。これらの用語は、半減期延長部分に付けられた治療剤（ＴＡ）を指すこともある。
【実施例】
【０４１６】
実施例１：変異Ｓ２６ＣとＳ２９Ｃを備えたＣＢＤ融合として、鎖Ｂと鎖Ａの間にリンカーを備えた、組み換え型リラキシン２の構築と発現。
【０４１７】
この実験の目的は、鎖Ｂと鎖Ａの間に、ＧＧＧＲＧＧＲリンカー、変異Ｓ２６ＣとＳ２９Ｃを備えた組み換え型リラキシン２を構築及び発現させることであった。
【０４１８】
＜材料＞
この実験に使用される材料は、次のものを含む：
【０４１９】
ｐＶＢ００８リラキシン２  リンカー  直鎖状
【０４２０】
ｐＶＢ００８リラキシン２  リンカー  直鎖状  Ｓ２６Ｃ
【０４２１】
ｐＶＢ００８リラキシン２  リンカー  直鎖状  Ｓ２９Ｃ
【０４２２】
表６に開示されるようなＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯｓ：３８−４６のオリゴ貯蔵溶液１００μＭ。
【０４２３】
図４は、ｐＶＢ００８リラキシン２リンカー・ベクターの概略図を表す。
【０４２４】
＜工程１．  ＰＣＲの構築−リラキシン・フラグメントの増幅＞
ラキシン・フラグメントの野生型を生じさせるためのＰＣＲ反応、又はＳ２６Ｃ又はＳ２９Ｃの変異とのＰＣＲ反応を、以下のように調製した：
【０４２５】
【表１】
2020063249.tif 000040
【０４２６】
＜工程２．  ＰＣＲプログラム＞
リラキシン２フラグメント（野生型、Ｓ２６Ｃ及びＳ２９Ｃ）を、以下のＰＣＲプログラムを行なうことにより増幅した：
【０４２７】
９４℃−２Ｍｉｎ、その後９４℃−１５Ｓｅｃ、４２℃−３０Ｓｅｃ、及び６８℃−１５Ｓｅｃの２０のサイクル。
【０４２８】
リラキシン−２フラグメントのＰＣＲ生成物を、０．８％のアガロースゲルの上で泳動した。図５に示されるように、レーン１、６、及び１１は１００ｂｐのラダーを含有し、レーン２−５はそれぞれ、Ｓ２６Ｃオリゴ混合物を含む工程１の反応１−４反応を含有し、レーン７−１０はそれぞれ、Ｓ２９Ｃオリゴ混合物を含む工程の１反応１−４反応を含有する。
【０４２９】
＜工程３．  リラキシン２リンカーの増幅＞
リラキシン２リンカーを生じさせるＰＣＲ反応を、以下のように調製した：
【０４３０】
【表２】
2020063249.tif 000041
【０４３１】
１０μＭのＰｒｉｍｅｒ  ｍｉｘは、リラキシン２フォワードプライマー（（＃６０）に関するｐＶＢ００８リラキシン２  Ａｍｐ：ＡＡＴＣＴＧＴＡＴＴＴＣＣＡＧＧＧＡＴＣＣＧＧＴＧＧＴＧＡ＝ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６４）、及びリラキシン２リバースプライマー（リラキシン２リンカーＡｍｐ  ｒｅｖ（＃２１１）ＴＧＧＣＴＡＡＧＣＴＴＴＡＧＣＡＧＡＡＡＣＧＡＧＣＣＡＧＡＧＡＡＣＧＴＴＴＧＧＴＧＣＡＡＣＣＡＡＣＧＴＧＧＣ＝ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：６５）を含んでいた。工程２からのＰＣＲ増幅した反応１の混合物を、組み立てた混合物に使用した。
【０４３２】
リラキシン２リンカーを、以下のＰＣＲプログラムを行なうことにより増幅した：９４℃−２Ｍｉｎ、その後９４℃−１５Ｓｅｃ、５２℃−１５Ｓｅｃ、及び６８℃−６０Ｓｅｃの２５のサイクル。
【０４３３】
リラキシン−２リンカー増幅のＰＣＲ生成物を、０．８％のアガロースゲルの上で泳動した。図６に示されるように、レーン１は１００のラダーを含有し、レーン２はＳ２９Ｃを含む工程３の反応１を含有し、レーン３はＳ２９Ｃを含む工程３の反応２を含有し、及びレーン４はＳ２９Ｃを含む工程３の反応３を含有する。
【０４３４】
＜工程４．  ベクターｐＶＢ００８とｐＡＣ１４５の消化（Ｄｉｇｅｓｔｉｏｎ）＞
ベクターｐＶＢ００８とｐＡＣ１４５の制限消化を、リラキシン２リンカーＰＣＲ生成物の挿入のためにベクターを調製するために、実行した。制限消化を以下のように調製した：
２０μｌ  ｐＶＢ００８／ｐＡＣ０４５
１０μｌ  １０×バッファー＃４
２μｌ  ＨｉｎｄＩＩＩ−ＨＦ
２μｌ  ＢａｍＨＩ−ＨＦ
６６μｌ  Ｈ２Ｏ
【０４３５】
制限消化反応を、３７℃で１時間インキュベートした。
【０４３６】
＜工程５．  挿入物の消化＞
リラキシン２リンカーＰＣＲ生成物（野生型、Ｓ２６Ｃ及びＳ２９Ｃ）の制限消化を、ｐＶＢ００８とｐＡＣ１４５のベクターへの挿入のためにＰＣＲ生成物を調製するために、実行した。制限消化を以下のように調製した：
２０μｌ  完全長フラグメント
１０μｌ  １０×バッファー＃４
２μｌ  ＨｉｎｄＩＩＩ−ＨＦ
２μｌ  ＢａｍＨＩ−ＨＦ
６６μｌ  Ｈ２Ｏ
制限消化反応を、３７℃で１時間インキュベートした。
【０４３７】
＜工程６．  ゲル精製＞
ｐＶＢ００８で消化したベクター、ｐＡＣ１４５で消化したベクター、及びリラキシン２リンカー挿入物を、アガロースゲルの上で泳動した。図７に示されるように、レーン１は１ｋｂのラダーを含有し、レーン２は消化されたｐＶＢ００８ベクターを含有し、レーン３は消化されたｐＡＣ１４５ベクターを含有し、レーン４は１００ｂｐのラダーを含有し、レーン５はリラキシン２リンカー挿入物を含有し、レーン６はリラキシン２  Ｓ２６Ｃ−リンカー挿入物を含有し、及びレーン７はリラキシン２  Ｓ２９Ｃリンカー挿入物を含有する。消化されたベクターとリラキシン２ＰＣＲ生成物は、製造業者の指示に基づき精製されたゲルであった（ＮｕｃｌｅｏＳｐｉｎ  Ｇｅｌ及びＰＣＲ  Ｃｌｅａｎｕｐ  Ｍａｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅｌ）。
【０４３８】
＜工程７．  ライゲーション／形質転換＞
ゲル精製され、消化されたベクター（ベクターｄｇ）と消化されたＰＣＲ生成物（リラキシン−２直線ｄｇ（挿入物））を、以下のライゲーション反応によってライゲートした：
５μｌ  ベクター  ｄｇ
１μｌ  リラキシン−２  直鎖状  ｄｇ（挿入物）
２μｌ  １０×バッファー
１μｌ  Ｔ４ＤＮＡリガーゼ
１１μｌ  Ｈ２Ｏ
【０４３９】
ライゲーション反応を室温（ＲＴ）で１時間インキュベートした。
【０４４０】
その後、ライゲートされた生成物を使用してＮＥＢ  ｔｕｒｂｏ  Ｃｏｍｐｅｔｅｎｔ細胞を形質転換させ、２μｌのライゲーション反応をプロトコルに従ってＮＥＢ  ｔｕｒｂｏ  Ｃｏｍｐｅｔｅｎｔ細胞に形質転換した。形質転換細胞をＬＢ／Ｋａｎプレート上に蒔いた。
【０４４１】
５つのコロニーを取り上げ、５ｍｌのＬＢ＋Ｋａｎの中で播種した。細胞を３７℃で６時間増殖させた。
【０４４２】
＜工程８．  配列決定のためのＤＮＡの調製＞
ＤＮＡを、プロトコルに従ってＮｕｃｌｅｏＳｐｉｎ  ＤＮＡ  Ｍｉｎｉ  Ｐｒｅｐ  Ｍａｃｈｅｒｅｙ−Ｎａｇｅｌを使用して、１．５ｍｌの５つの培養物の各々から調製した。ＤＮＡの配列決定を行い、ｐＶＢ００８とｐＡＣ１４５ベクターへのリラキシン２の挿入を確認した。
【０４４３】
＜工程９．  リラキシンペプチドの発現と精製＞
リラキシン又は修飾されたリラキシンペプチドを、そのようなペプチドをコード化するヌクレオチドベクターによる遊離スタイル（ｆｒｅｅ  ｓｔｙｌｅ）のＨＥＫ２９３細胞の一時的な形質移入を介して発現した。発現されたペプチドを培養培地に分泌し、形質移入の４８時間後及び９６時間後に採取した。融合タンパク質を、タンパク質Ａ／Ｇクロマトグラフィー（Ｔｈｅｒｍｏ  Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，  ＩＬ）によって精製し、ＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルにより分析した。図８は、リラキシンとリラキシン変異体のＳＤＳ−ＰＡＧＥゲルを示す。図８に示されるように、レーン１と１７はタンパク質標準を示し；レーン２−６はそれぞれ、ｐＣＡＣ００９５溶解物、Ｗａｓｈ１、Ｗａｓｈ２、Ｗａｓｈ４、及び封入体を示し；レーン７−１１はそれぞれ、ｐＣＡＣ００９６溶解物、Ｗａｓｈ１、Ｗａｓｈ２、Ｗａｓｈ４、及び封入体を示し；及び、レーン１２−１６は、ｐＣＡＣ００９７溶解物、Ｗａｓｈ１、Ｗａｓｈ２、Ｗａｓｈ４、及び封入体を示す。ＰＣＡＣ００９５は、ＧＧＧＲＧＧリンカーとＮ末端８ｘＨｉｓを備えた野生型リラキシンを表わす。ＰＣＡＣ００９６は、ＧＧＧＲＧＧリンカーとＮ末端８ｘＨｉｓを備えたＳ２６Ｃリラキシンを表わす。ＰＣＡＣ００９７は、ＧＧＧＲＧＧリンカーとＮ末端８ｘＨｉｓを備えたＳ２９Ｃリラキシンを表わす。図９に示されるように、レーン１と６はタンパク質標準を示し；レーン２−５はそれぞれ、ｐＣＡＣ００２  Ｌｏａｄ、通過画分、Ｗａｓｈ、及びＢｅａｄｓを示す。ＰＣＡ００２は、Ｎ末端においてＣＢＤタグを備えた野生型リラキシンを表す。
【０４４４】
実施例２：リラキシンペプチドの生物活性の測定
【０４４５】
リラキシン２は、ロイシンリッチ反復を含有するＧＰＣＲ（即ち、ＬＧＲ７（ＲＦＸＲ１））を通って信号を伝達する。野生型リラキシンペプチドの生物活性を、組み換え型ＬＧＲ７を安定して発現するＨＥＫ２９３Ｔ細胞におけるアデニル酸シクラーゼ活性の刺激に基づいて、判定した。細胞を発現する安定したＬＧＲ７を、２００ｎｇ／ｍｌのＺｅｏｃｉｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で補われたダルベッコの修飾されたイーグル培地／Ｆ−１２培地の中に維持した。環式ＡＭＰ反応的要素により駆動されるルシフェラーゼ（ＣＲＥ−Ｌｕｃ）レポーターラインは、ＣＲＥ−Ｌｕｃレンチウイルス（Ｑｉａｇｅｎ）を備えたＨＥＫ２９３Ｔ細胞を発現するこれらＬＧＲ７のレンチウイルス形質導入によって生じさせられ、２週間、ピューロマイシン（２μｇ／ｍＬ）と共に選択された。レポーター遺伝子アッセイを使用して、リラキシンによるｃＡＭＰレベルとＬＧＲ７活性化を検出した。
【０４４６】
アッセイの詳細：ＬＧＲ７とＣＲＥ−Ｌｕｃを発現するＨＥＫ２９３Ｔ細胞を、３８４ウェルの固形底面白色プレート（ｓｏｌｉｄ  ｂｏｔｔｏｍ  ｗｈｉｔｅ  ｐｌａｔｅｓ）の中に１０％のＦＢＳを含有する、５０μＬのダルベッコの修飾されたイーグルの培地／Ｆ−１２培地の中で、１つのウェルにつき５×１０３の密度で蒔く。細胞を３７℃で一晩、予めインキュベートしておく。異なる濃度のリラキシンペプチド（０．０１ｎＭ乃至１０００ｎＭ）を３回加え、１８時間インキュベートして、ルシフェラーゼ活性を１０μＬのＢｒｉｇｈｔ  Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を加えることにより検出した。ルミネセンスをＥｎｖｉｓｉｏｎ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）に記録した。非線形の曲線適合後にＥＣ５０を計算する（リラキシンＨ２の用量応答曲線については図３を参照）。選択したデータを表２と３に示す。
【０４４７】
実施例３：ペグ化された脂質（アミド結合）を接合したリラキシンの合成（模式図Ａ）
【０４４８】
【化３８】
2020063249.tif 000042
【０４４９】
ｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−（２−テトラデカンアミドエトキシ）エトキシ）エチル）カルバメート（Ａ−２−ａ）。
【０４５０】
Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−アミド−ｄＰＥＧ３−アミン（０．５ｇ、２．０ｍｍｏｌ）を、１０ｍｌの乾燥ＤＭＦにおけるミリスチン酸（０．４６ｇ、２．０ｍｍｏｌ）の溶液に加え、そしてＨＡＴＵ（０．８ｇ、２．１ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（０．４５ｍＬ、２．４ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を６時間、ＲＴで撹拌し、溶媒を真空下で除去した。粗製材料をＥｔＯＡｃに溶解し、冷たい１％のＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３、そしてブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗製材料を、ヘキサン中で勾配２５−５０％のＥｔＯＡｃを伴うシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、白色固形物として０．８３ｇの所望の化合物（収率９０％）を得た。ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）４５９．６（Ｍ＋Ｈ）。
【０４５１】
ｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−（２−（（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサエンアミド）エトキシ）エトキシ）エチル）カルバメート（Ａ−２−ｂ）。
【０４５２】
乾燥ＤＭＦ（５ｍＬ）における、Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−アミド−ｄＰＥＧ３−アミン（０．２５ｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ドコサヘキサエン酸（０．３３ｇ、１．０ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（０．４１ｇ、１．１ｍｍｏｌ）、及びＤＩＥＡ（０．２２ｍＬ、１．２ｍｍｏｌ）を使用する、Ａ−２−ａのための手順として同様の条件を使用して、表題化合物を調製した。収率６８％、茶色の油。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：δ０．９７（ｔ、Ｊ＝６．０Ｈｚ、３Ｈ）、１．４４（ｓ、９Ｈ）、２．０７（ｔ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、２Ｈ）、２．２５（Ｊ＝５．０Ｈｚ、２Ｈ）、２．４１（ｄｄ、Ｊ＝５．０、６．５Ｈｚ、２Ｈ）、２．７９−２．８７（ｍ、１０Ｈ）、３．３２（ｔ、Ｊ＝５．５Ｈｚ、２Ｈ）、３．４５（ｄｄ、Ｊ＝５．０、６．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．５５（ｔ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、４Ｈ）、３．５９−３．６２（ｍ、４Ｈ）、４．９７（ｓ、１Ｈ）、５．３０−５．４２（ｍ、１２Ｈ）、６．０３（ｓ、１Ｈ）；ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）４５９．６（Ｍ＋Ｈ）。
【０４５３】
ｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−（２−（（Ｒ）−４−（（３Ｒ，５Ｒ，８Ｒ，９Ｓ，１０Ｓ，１３Ｒ，１４Ｓ，１７Ｒ）−３−ヒドロキシ−１０，１３−ジメチルヘキサデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−イル）ペンタンアミド）エトキシ）エトキシエチル）カルバメート（Ａ−２−ｃ）。
【０４５４】
Ｎ−ｔ−Ｂｏｃ−アミド−ｄＰＥＧ３−アミン（０．１４ｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を、５ｍｌの乾燥ＤＭＦにおけるＮＨＳ−活性化リトコール酸エステル（０．２４ｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液に加え、そして、ＤＩＥＡ（０．１８ｍＬ、１．０ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を１６時間、ＲＴで撹拌し、溶媒を真空下で除去した。粗製材料をＤＣＭに溶解し、冷たい１％のＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３、そしてブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗製材料を、ＤＣＭ中で勾配１−５％のメタノールを伴うシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、白色固形物として０．４８ｇの所望の化合物（収率８０％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：δ０．６２（ｓ、３Ｈ）、０．９０−２．２５（ｍ、３０Ｈ）、３．３１（ｓ、２Ｈ）、３．４３−３．４６（ｓ、２Ｈ）、３．５２−３．５６（ｍ、４Ｈ）、３．５９−３．６０（ｍ、６Ｈ）、４．９４（ｓ、１Ｈ）、６．０５（ｓ、１Ｈ）；ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）６２８．６（Ｍ＋Ｈ）。ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）６０７．５（Ｍ＋Ｈ）。
【０４５５】
Ｎ−（２−（２−（２−（２−ブロモアセトアミド）エトキシ）エトキシ）エチル）テトラデカンアミド（Ａ−３−ａ）
【０４５６】
ＴＦＡ（２ｍｌ、２６ｍｍｏｌ）を、１０ｍｌのＤＣＭにおけるＡ−２−ａ（０．４６ｇ、１ｍｍｏｌ）の溶液に加え、混合物をＲＴで３時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、粗製材料を凍結乾燥して、無色の油を得て、それを１０ｍｌのＤＣＭに溶解した。ブロモ酢酸無水物（０．３１ｇ、１．２ｍｍｏｌ）を加え、そしてＤＩＥＡ（０．５２ｍｌ、２．５ｍｍｏｌ）を加えて、混合物をＲＴで３時間撹拌した。反応混合物をＤＣＭとＥｔＯＡｃで抽出し、１％のＨＣｌ、飽和ＮａＨＣＯ３、そしてブラインで洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。粗製材料を、５％のメタノールを備える石油エーテル中で勾配２０−５０％のＥｔＯＡｃを伴うシリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーによって精製して、白色固形物として０．３７ｇの所望の化合物（２工程にわたる組み合わせた収率、７８％）を得た。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：δ０．８８（ｔ、Ｊ＝６．５Ｈｚ、３Ｈ）、１．２５−１．３２（ｍ、２０Ｈ）、１．６２（ｔ、Ｊ＝７．５Ｈｚ、２Ｈ）、２．１８（ｔ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．４７（ｄｄ、Ｊ＝５．０、１０．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．５０（ｄｄ、Ｊ＝５．０、１０．０Ｈｚ、２Ｈ）、３．５６−３．５８（ｍ、２Ｈ）、３．５９−３．６２（ｍ、２Ｈ）、３．６３（ｄ、Ｊ＝５．５Ｈｚ、５Ｈ）、３．８８（ｓ、２Ｈ）、５．９２−５．９３（ｍ、１Ｈ）、６．９４（ｓ、１Ｈ）；７．０４−７．１７（ｍ、１Ｈ）；１３Ｃ  ＮＭＲ（１００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：δ１４．５５、２３．１２、２６．２０、２９．７６、２９．７９、２９．９５、３０．０６、３０．０８、３０．０９、３０．１１、３２．３５、３７．２３、６９．８４、７０．４６、７０．８３（２）、１６６．０６、１７３．８４；ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）４８０．６（Ｍ＋Ｈ）。
【０４５７】
（４Ｚ，７Ｚ，１０Ｚ，１３Ｚ，１６Ｚ，１９Ｚ）−Ｎ−（２−（２−（２−（２−ブロモアセトアミド）エトキシ）エトキシ）エチル）ドコサ−４，７，１０，１３，１６，１９−ヘキサエンアミド（Ａ−３−ｂ）。
【０４５８】
Ａ−３−ａのための手順として同様の条件を使用して、表題化合物を調製した。収率６７％、茶色の油。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：δ０．９６（ｔ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、３Ｈ）、２．０７（ｑ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．２３（Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、２．４０（ｄｄ、Ｊ＝７．２、１３．８Ｈｚ、２Ｈ）、２．７９−２．８４（ｍ、１０Ｈ）、３．４４−３．５１（ｍ、４Ｈ）、３．５５−３．６２（ｍ、４Ｈ）、３．６３（ｓ、４Ｈ）、３．８８（ｓ、２Ｈ）、５．７８−５．４２（ｍ、１２Ｈ）、５．９４（ｓ、１Ｈ）、６．９２（ｓ、１Ｈ）；ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）５５９．８（Ｍ＋Ｈ）。
【０４５９】
（Ｒ）−Ｎ−（２−（２−（２−（２−ブロモアセトアミド）エトキシ）エトキシ）エチル）−４−（（３Ｒ，５Ｒ，８Ｒ，９Ｓ，１０Ｓ，１３Ｒ，１４Ｓ，１７Ｒ）−３−ヒドロキシ−１０，１３−ジメチルヘキサデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−１７−イル）ペンタンアミド（Ａ−３−ｃ）。
【０４６０】
Ａ−２−ａの代わりにＡ−２−ｃを使用し、Ａ−３−ａのための手順として同様の条件を使用して、表題化合物を調製した。収率８７％。白色固形物。１Ｈ  ＮＭＲ（５００ＭＨｚ；ＣＤＣｌ３）：δ０．８３（ｔ、Ｊ＝４．０Ｈｚ、３Ｈ）、０．８５−０．９４（ｍ、６Ｈ）、１．００−１．９１（ｍ、２８Ｈ）、３．４１−３．６４（ｍ、１２Ｈ）、３．８５−３．８８（ｍ、２Ｈ）、４．８６−４．９４（ｍ、１Ｈ）、６．０５（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、１Ｈ）、７．０４（ｓ、１Ｈ）；ｍ／ｚ（ＥＳＩ＋）６２８．６（Ｍ＋Ｈ）。
【０４６１】
脂肪酸又は胆汁酸で誘導されたペプチドの合成（Ａ−４−ａ、Ａ−４−ｂ、又はＡ−４−ｃ）。
【０４６２】
システインペプチド中間体（１等量）をＤＭＳＯに溶解し、ＴＨＦに溶解したＡ−３−ａ、Ａ−３−ｂ、又はＡ−３−ｃ（２等量）の何れか１つと反応させ、その後、ＤＩＥＡ（３容量％）を加える。反応の完了をＨＰＬＣ−ＭＳによって評価する。ＴＦＡを加えることにより反応物をクエンチして最終ｐＨを４とし、溶出剤（Ａ）水中の０．０５％のＴＦＡ、及び（Ｂ）アセトニトリル中の０．０５％のＴＦＡを使用し、そして溶出剤（Ｂ）の勾配が１０％（１ｍｉｎ）４０−５５％（１０ｍｉｎ）、流速８０ｍｌ／ｍｉｎである、分取逆相ＨＰＬＣにより直接精製した。精製されたペプチドを凍結乾燥し、構造と純度を分析ＨＰＬＣとエレクトロスプレー質量分析法によって確認する。
【０４６３】
実施例４：ペグ化された脂質（エーテル結合）を結合したリラキシンの合成（模式図Ｂ−１とＢ−２）
【０４６４】
【化３９】
2020063249.tif 000043
【０４６５】
４．８ｍＬのアセトニトリル／水（６：１）における２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エタノール（１００ｍｇ、０．６７１ｍｍｏｌ、８９μＬ）の溶液を、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（１５１ｍｇ、０．６９１ｍｍｏｌ）、その後０．５ｍＬの１Ｎ  ＮａＯＨ（ａｑ）で処理した。ＲＴで４５分間撹拌した後、有機溶媒を真空下で取り除き、残留物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（ａｑ）に溶解し、所望のカルバメートをＥｔＯＡｃで抽出した。ＥｔＯＡｃの除去により、無色の油として５７ｍｇ（３４％の収率）のｔｅｒｔ−ブチル２−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ）エチルカルバメートを得た。
【０４６６】
１．４ｍＬのｔ−アミルアルコールにおけるｔｅｒｔ−ブチル２−（２−（２−ヒドロキシエトキシ）エトキシ）エチルカルバメート（６８．５ｍｇ、０．２７５ｍｍｏｌ）とミリスチルトシラート（１０１ｍｇ、０．２７５ｍｍｏｌ）の溶液を、カリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（６１．６ｍｇ、０．５５０ｍｍｏｌ）とヨウ化カリウム（４．６ｍｇ、０．０２８ｍｍｏｌ）で処理した。９０℃で２時間加熱した後、反応物をｒｔに冷却し、飽和ＮＨ４Ｃｌ（ａｑ）でクエンチし、そしてＥｔＯＡｃで抽出して、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥した。濃縮、及び、シリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーを介した後の精製により、無色の油として４４ｍｇ（３６％の収率）のｔｅｒｔ−ブチル２−（２−（２−（テトラデシルオロキシ）エトキシ）エトキシ）エチルカルバメートを得た。
【０４６７】
１．２ｍＬのＤＣＭにおけるｔｅｒｔ−ブチル２−（２−（２−（テトラデシルオキシ）エトキシ）エトキシ）エチルカルバメート（２６ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）の溶液を、０．２９ｍＬのトリフルオロ酢酸で処理した。ｒｔで５０分間撹拌した後、混合物を濃縮し、２ｍＬのＤＣＭに再溶解した。この溶液の１ｍＬのアリコートを別のバイアルに入れ、それを０℃に冷却し、その後、ブロモ酢酸無水物（１０．３ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（１１μＬ、０．０６３ｍｍｏｌ）を充填した（ｃｈａｒｇｅｄ  ｗｉｔｈ）。ｒｔで１２時間撹拌した後、フラッシュカラムクロマトグラフィーを介して反応混合物を精製して、オフホワイト固形物として７．５ｍｇ（２工程にわたり５５％の収率）の２−ブロモ−Ｎ−（２−（２−（２−（テトラデシルオキシ）エトキシ）エトキシ）−エチル）アセトアミドを得た。
【０４６８】
ＤＭＳＯ（４ｍＭ）におけるシステインペプチド中間体（１等量）の溶液を、ＴＨＦ（５．４ｍＭ）とＤＩＥＡ（１１４等量）における２−ブロモ−Ｎ−（２−（２−（２−（テトラデシルオキシ）エトキシ）エトキシ）−エチル）アセトアミド（２．１等量）で処理する。反応の完了後、反応混合物を分取逆相ＨＰＬＣにより精製して、脂質複合体（Ｂ−１−ａ）を得る。
【０４６９】
【化４０】
2020063249.tif 000044
【０４７０】
ｔｅｒｔ−ブチル２−（２−（２−（２−ブロモエトキシ）エトキシ）エトキシ）エチルカルバメート（Ｂ−２−ａ）。
【０４７１】
１５ｍＬのアセトニトリル／水（６：１）における２−（２−（２−（２−アミノエトキシ）エトキシ）エトキシ）エタノール（４００ｍｇ、２．０７ｍｍｏｌ、０．３３ｍＬ）の溶液を、ジ−ｔｅｒｔ−ブチルジカーボネート（６０３ｍｇ、２．７７ｍｍｏｌ）、その後２．８ｍＬの１Ｎ  ＮａＯＨ（ａｑ）で処理した。ＲＴで４５分間撹拌した後、有機溶媒を真空下で取り除き、残留物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（ａｑ）に溶解し、所望のカルバメートをＥｔＯＡｃで抽出した。ＥｔＯＡｃの除去により、無色の油として粗製のカルバメートを得た。
【０４７２】
この油をＤＣＭに溶解し、ｐ−トルエンスルホニル塩化物（１．１８ｇ、６．２１ｍｍｏｌ）とピリジン（０．８４ｍＬ、１０．４ｍｍｏｌ）で処理した。４０℃で１２時間撹拌した後、混合物をＤＣＭで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ（２×１０ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（１０ｍＬ）、及びブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、その後Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濃縮した。シリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製により、無色の油として３３０ｍｇ（２工程にわたり３６％の収率）のトシラートを得た。
【０４７３】
３．１ｍＬの無水アセトンにおけるトシラート（２０３ｍｇ、０．４５３ｍｍｏｌ）の溶液を、ＬｉＢｒ（３８５ｍｇ、４．５３ｍｍｏｌ）で処理した。６０℃で８時間撹拌した後、溶媒を取り除き、結果として生じる残留物をＥｔＯＡｃに溶解した。有機混合物を水で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。シリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製により、無色の油として１２６ｍｇ（７８％の収率）の表題化合物を得た。
【０４７４】
２−（（３Ｓ，８Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｒ，１４Ｓ，１７Ｒ）−１０，１３−ジメチル−１７−（６−メチルヘプタン−２−イル）−２，３，４，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−テトラデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルオキシ）エタノール（Ｂ−２−ｂ）。
【０４７５】
４ｍＬのＤＣＭにおけるコレステロール（１．５０ｇ、３．８９ｍｍｏｌ）の溶液を、ｐ−トルエンスルホニル塩化物（１．４９ｇ、７．７８ｍｍｏｌ）、ピリジン（４ｍＬ）、及びＤＭＡＰ（９４．９ｍｇ、０．７８０ｍｍｏｌ）で処理した。ＲＴで１２時間撹拌した後、混合物をＤＣＭで希釈し、１Ｎ  ＨＣｌ（２×５ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（５ｍＬ）、及びブライン（５ｍＬ）で洗浄し、その後Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、真空下で濃縮した。クロロホルムとメタノールからの再結晶により、白色固形物として１．６６ｇ（７９％の収率）のトシラート中間体を得た。
【０４７６】
７．７ｍＬの１，４−ジオキサンにおけるトシラート中間体（５００ｍｇ、０．９２６ｍｍｏｌ）を充填したマイクロウェーブバイアルを、２．６ｍＬのエチレングリコールで処理した。１０分間のマイクロ波照射により１６０℃に加熱した後、溶媒を取り除き、残留物をクロロホルムに溶解し、飽和ＮａＨＣＯ３（５ｍＬ）、Ｈ２Ｏ（５ｍＬ）、及びブライン（５ｍＬ）で洗浄し、その後、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、真空下で濃縮した。シリカゲルを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーによる粗製材料の精製により、白色固形物として２７０ｍｇ（６８％の収率）の表題化合物を得た。
【０４７７】
２−ブロモ−Ｎ−（１４−（（３Ｓ，８Ｓ，９Ｓ，１０Ｒ，１３Ｒ，１４Ｓ，１７Ｒ）−１０，１３−ジメチル−１７−（６−メチルヘプタン−２−イル）−２，３，４，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４，１５，１６，１７−テトラデカヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ａ］フェナントレン−３−イルオキシ）−３，６，９，１２−テトラオキサテトラデシル）アセトアミド（Ｂ−２−ｃ）。
【０４７８】
２．５ｍＬのＴＨＦにおけるＢ−２−ｂ（２１９ｍｇ、０．５０９ｍｍｏｌ）の溶液を、水素化ナトリウム（鉱油中６０％の分散、２０．４ｍｇ、０．５０９ｍｍｏｌ）で処理し、３０分間撹拌した。混合物を０℃に冷却し、２．５ｍＬのＴＨＦにおけるＢ−２−ａ（１３９ｍｇ、０．３９２ｍｍｏｌ）で処理した。４０℃で６時間加熱した後、反応物を飽和ＮＨ４Ｃｌ（ａｑ）でクエンチし、ＥｔＯＡｃで抽出した。シリカゲルを使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーによる粗製材料の精製により、無色の油として１０１ｍｇ（３６％の収率）のエーテル中間体を得た。
【０４７９】
２．１ｍＬのＤＣＭにおけるエーテル中間体（７４ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ）の溶液を、０．５３ｍＬのＴＦＡで処理した。ｒｔで４０分間撹拌した後、混合物を真空下で濃縮し、１０ｍＬのＤＣＭに溶解した。この溶液の４ｍＬのアリコートを別のバイアルに入れ、１ｍＬの容量に濃縮し、０℃に冷却し、ブロモ酢酸無水物（１３．６ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）とＤＩＥＡ（１５μＬ、０．０８８ｍｍｏｌ）を充填した。ＲＴで１２時間撹拌した後、反応混合物をフラッシュカラムクロマトグラフィーによって直接精製し、無色の油として１２．６ｍｇ（２工程にわたり４１％）の表題化合物を得た。
【０４８０】
脂質複合体Ｂ−２−ｄを、実施例４、模式図Ｂ−１の脂質複合体Ｂ−１−ａとして同様の方法で調製する。
【０４８１】
実施例５：Ｂｒ−ＦＡ１の調製。
【０４８２】
【化４１】
2020063249.tif 000045
【０４８３】
工程Ａ．  ｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−（２−テトラデカンアミドエトキシ）エトキシ）エチル）カルバメート（１−１）。
【０４８４】
ミリスチン酸（０．４６ｇ、２ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＤＭＦに溶解した。ＨＡＴＵ（０．８ｇ、２．１ｍｍｏｌ）とＤＩＰＥＡ（０．４ｍＬ、２．２ｍｍｏｌ）を加え、そしてＢｏｃ−ＮＨ−ＰＥＧ２−ＣＯＯＨ（０．５ｇ、２ｍｍｏｌ）を加えた。その後、反応混合物を６時間撹拌し、溶媒を取り除いた。生成物をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍｌ）で抽出した。有機質層を、飽和ＮａＨＣＯ３、冷却ＨＣｌ（１Ｍ）、そしてブラインで連続して洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。シリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製により、９０％の生成物の収率において白色固形物として０．８１ｇの所望の化合物を得た。ＥＳＩ−ＭＳ：ｃａｌｃｄ  ＭＷ  ４５８．４；ｆｏｕｎｄ  ４５９．６［Ｍ＋１］＋。
【０４８５】
工程Ｂ．  Ｎ−（２−（２−（２−（２−ブロモアセトアミド）エトキシ）エトキシ）エチル）テトラデカンアミド（Ｂｒ−ＦＡ１）
【０４８６】
ＤＣＭ（１０ｍＬ）における１−１（０．２３ｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液を２時間、ＴＦＡ（２ｍＬ）で処理した。混合物を濃縮し、その後、０℃で１０ｍＬのＤＣＭにおいて、ブロモ酢酸無水物（０．１４ｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．１７ｍＬ、１ｍｍｏｌ）を加えた。その後、反応混合物を２時間撹拌し、溶媒を取り除いた。生成物をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍｌ）で抽出した。有機質層を、飽和ＮａＨＣＯ３、冷却ＨＣｌ（１Ｍ）、そしてブラインで連続して洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。シリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製により、８３％の生成物の収率において白色固形物として０．２ｇの表題化合物を得た。ＥＳＩ−ＭＳ：ｃａｌｃｄ  ＭＷ  ４７９．５；ｆｏｕｎｄ  ４８０．４［Ｍ＋１］＋。
【０４８７】
実施例６：Ｂｒ−ＦＡ２の固相合成。
【０４８８】
【化４２】
2020063249.tif 000046
【０４８９】
Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨ（６０ｍｇ、１００μｍｏｌ）を、５ｍＬのＤＭＦにおいてアミノ酸、樹脂、及びＤＩＰＥＡ（７０μＬ、４００μｍｏｌ）を混合することにより、２−クロロトリチル塩化物樹脂（Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍ）（１００ｍｇ、８０μｍｏｌ）に付けて、３０分間撹拌した。その後、樹脂をＤＭＦ（３×）、そしてＤＣＭ（３×）で洗浄し、ＣＨ３ＯＨ／ＤＣＭ／ＤＩＰＥＡ（８：１：１）で１０分間処理して、未反応のトリチルクロライド部位をキャッピングし（ｃａｐ）、真空下で乾燥して、デシケーターに保管した。
【０４９０】
この樹脂（５０ｍｇ、４０μｍｏｌ）に、ＤＭＦ（２０％、５ｍＬ）においてピペリジンを加えた。混合物を１分振り混ぜ、排出した。更に５ｍＬの２０％ピペリジンを加え、この時、混合物を１５分間振り混ぜた。正のニンヒドリン試験を観察した。その後、上述のように樹脂を洗浄した。
【０４９１】
その後、ＤＭＦ（５ｍＬ）において２時間、カップリング試薬ＨＡＴＵ（７６ｍｇ、２００μｍｏｌ）とＤＩＰＥＡ（３５μＬ、２００μｍｏｌ）を使用してオクタデカン酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（ＡｓｔａＴｅｃｈ）（７４ｍｇ、２００μｍｏｌ）で樹脂を処理し、又は、負のニンヒドリン試験を観察するまで繰り返した。ＤＭＦとＤＣＭで洗浄した後、ＤＭＦ（５ｍＬ、２×５ｍｉｎ）において２％のヒドラジンで樹脂を処理した。正のニンヒドリン試験を観察した。その後、上述のように樹脂を洗浄した。
【０４９２】
その後、ＤＭＦ（５ｍＬ）において２時間、ＨＡＴＵ（７６ｍｇ、２００μｍｏｌ）とＤＩＰＥＡ（３５μＬ、２００μｍｏｌ）を使用してＦｍｏｃ−ＰＥＧ２プロピオン酸（Ｑｕａｎｔａ  ＢｉｏＤｅｓｉｇｎ）（８０ｍｇ、２００μｍｏｌ）で樹脂を処理し、又は、負のニンヒドリン試験を観察するまで繰り返した。その後、上述のように樹脂を洗浄した。その後、保護基を取り除き、上記の工程を繰り返す。
【０４９３】
その後、２ｍＬのＤＣＭにおいてブロモ酢酸無水物（５５ｍｇ、２００μｍｏｌ）とＤＩＰＥＡ（３５μＬ、２００μｍｏｌ）で樹脂を処理し、３０分間撹拌した。ＤＣＭ（３×）で洗浄した後、１時間、１０％のＨ２Ｏと１０％のトリイソプロピルシランを含有するＤＣＭにおいて、５ｍＬの１０％ＴＦＡを使用して、樹脂から生成物を開裂した。開裂後、ＴＦＡを減圧下で除去した。結果として生じる黄色の残留物を、冷たいジエチルエーテルで数回洗浄し、最終的に窒素フローの下で、黄色の粉末として粗製生成物へと乾燥した。
【０４９４】
水（０．１％のＴＦＡ）における０．５ｍＬまでの５０％ＣＨ３ＣＮにおいて、５０ｍｇの粗製生成物を溶解する試みは、成功しなかった。それ故、代案として、粗製のペプチド（５０ｍｇ）をＤＭＳＯ（０．１ｍＬ）に溶解し、この溶液を５０％のＣＨ３ＣＮ−水により０．５ｍＬの最終容量に希釈した。溶液を濾過した。濾過した溶液を、水（０．１％のＴＦＡ）の中で１０％のＣＨ３ＣＮ（０．１％のＴＦＡ）と平衡化された分取ＨＰＬＣカラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、Ｐｒｅｐ  Ｃ１８、３００Ａ、５０×２５０ｍｍ）に入れて、水（０．１％のＴＦＡ）において１０％のＣＨ３ＣＮ（０．１％のＴＦＡ）によりカラムを溶出して、カラムからＤＭＳＯを洗浄した。その後、溶出剤の組成物を１分にわたり３５％のＣＨ３ＣＮ−水（０．１％のＴＦＡ）に勾配させ（ｒａｍｐｅｄ  ｔｏ）、直線勾配を水（０．１％のＴＦＡ）へとＣＨ３ＣＮ（０．１％のＴＦＡ）の０．５％／ｍｉｎの速度で開始させ、５０分間行った。溶出された画分を、分析の逆相Ｃ１８カラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、Ｃ１８、１２０Ａ、４．６×５０ｍｍ）上で純度について確認し、＞９５％の純度で生成物を含有する画分を組み合わせ、凍結乾燥して、表題化合物（１５ｍｇ、４１％の収率）を得た。生成物の分子量を、ＥＳＩ−ＭＳにより分析した：ｃａｌｃｄ  ＭＷ  ４７９．５；ｆｏｕｎｄ  ８８１．３［Ｍ＋１］＋、８８２．６［Ｍ＋２］＋。
【０４９５】
実施例７：Ｂｒ−ＦＡ３の固相合成。
【０４９６】
【化４３】
2020063249.tif 000047
【０４９７】
２−クロロトリチル塩化物樹脂の代わりにリンクアミド樹脂を使用することにより、Ｂｒ−ＦＡ２として同様の方法で表題化合物を調製した。分取ＨＰＬＣによる精製と凍結乾燥により、約４５％の生成物の収率で９５％以下の純度を持つ白色粉末として表題化合物を得た。ペプチドの分子量を、ＥＳＩ−ＭＳにより分析した：ｃａｌｃｄ  ＭＷ  ８８１．０；ｆｏｕｎｄ  ８８２．２［Ｍ＋１］＋、８８３．７［Ｍ＋２］＋。
【０４９８】
実施例８：Ｂｒ−ＦＡ４の調製。
【０４９９】
【化４４】
2020063249.tif 000048
【０５００】
ＤＣＭ（１０ｍＬ）におけるテトラデシルアミン（１０７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液を、０℃でブロモ酢酸無水物（０．１４ｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（１００μＬ、０．５５ｍｍｏｌ）で処理した。その後、反応混合物を２時間撹拌し、溶媒を取り除いた。生成物をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍｌ）で抽出した。有機質層を、飽和ＮａＨＣＯ３、冷却ＨＣｌ（１Ｍ）、そしてブラインで連続して洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。シリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製により、８７％の生成物の収率で白色固形物として１４５ｍｇの表題化合物を得た。ＥＳＩ−ＭＳ：ｃａｌｃｄ  ＭＷ  ３３４．３；ｆｏｕｎｄ  ３３５．６［Ｍ＋１］＋。
【０５０１】
実施例９：Ｂｒ−ＦＡ５の調製。
【０５０２】
【化４５】
2020063249.tif 000049
【０５０３】
工程Ａ．  ｔｅｒｔ−ブチル（９，２０−ジオキソ−３，６，１３，１６−テトラオキサ−１０，１９−ジアザトリトリアコンタイル（ｄｉａｚａｔｒｉｔｒｉａｃｏｎｔｙｌ））カルバメート（１−２）。
【０５０４】
ＤＣＭ（１０ｍＬ）における１−１（１１５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）の溶液を２時間、ＴＦＡ（２ｍＬ）で処理した。混合物を濃縮し、５ｍＬのＤＭＦにおいて、Ｂｏｃ−ＮＨ−ＰＥＧ２−酸（７０ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、ＨＡＴＵ（９５ｍｇ、０．２５ｍｍｏｌ）、及びＤＩＰＥＡ（９０μＬ、０．５ｍｍｏｌ）を加えた。その後、反応混合物を２時間撹拌し、溶媒を取り除いた。生成物をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍｌ）で抽出した。有機質層を、飽和ＮａＨＣＯ３、冷却ＨＣｌ（１Ｍ）、そしてブラインで連続して洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。シリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製により、７７％の生成物の収率で白色固形物として１２２ｍｇの所望の化合物を得た。ＥＳＩ−ＭＳ：ｃａｌｃｄ  ＭＷ  ６１７．９；ｆｏｕｎｄ  ６１８．４［Ｍ＋１］＋。
【０５０５】
工程Ｂ．  Ｎ−（１−ブロモ−２，１２−ジオキソ−６，９，１６，１９−テトラオキサ−３，１３−ジアザヘンイコサン−２１−イル）テトラデカンアミド（Ｂｒ−ＦＡ５）。
【０５０６】
ＤＣＭ（１０ｍＬ）における１−２（１２２ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）の溶液を２時間、ＴＦＡ（２ｍＬ）で処理した。混合物を濃縮し、その後、０℃で５ｍＬのＤＣＭにおいて、ブロモ酢酸無水物（５２ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（７０μＬ、０．４ｍｍｏｌ）を加えた。その後、反応混合物を２時間撹拌し、溶媒を取り除いた。生成物をＥｔＯＡｃ（３×１５ｍｌ）で抽出した。有機質層を、飽和ＮａＨＣＯ３、冷却ＨＣｌ（１Ｍ）、そしてブラインで連続して洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。ＨＰＬＣによる精製により、６９％の生成物の収率で白色固形物として８８ｍｇの表題化合物を得た。ＥＳＩ−ＭＳ：ｃａｌｃｄ  ＭＷ  ６３８．７；ｆｏｕｎｄ  ６３９．４［Ｍ＋１］＋。
【０５０７】
実施例１０：Ｂｒ−ＦＡ６の調製。
【０５０８】
【化４６】
2020063249.tif 000050
【０５０９】
工程Ａ．  ｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−（２−テトラデカンアミドエトキシ）エトキシ）エチル）カルバメート（１−３）。
【０５１０】
オクタデカン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステル酸（０．１８ｇ、０．５ｍｍｏｌ）を５ｍＬのＤＭＦに溶解した。ＨＡＴＵ（０．２ｇ、０．５５ｍｍｏｌ）とＤＩＰＥＡ（０．１ｍＬ、０．５５ｍｍｏｌ）を加え、そしてＢｏｃ−ＮＨ−ＰＥＧ３−ＮＨ２（０．１２ｇ、０．５ｍｍｏｌ）を加えた。その後、反応混合物を６時間撹拌し、溶媒を取り除いた。生成物をＥｔＯＡｃ（３×１０ｍｌ）で抽出した。有機質層を、飽和ＮａＨＣＯ３、冷却ＨＣｌ（１Ｍ）、そしてブラインで連続して洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥し、濾過し、濃縮した。シリカゲル上でのフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製により、８７％の生成物の収率で白色固形物として０．２８ｇのｔｅｒｔ−ブチル（２−（２−（２−テトラデカンアミドエトキシ）エトキシ）エチル）カルバメートを得た。ＥＳＩ−ＭＳ：ｃａｌｃｄ  ＭＷ  ６４４．５；ｆｏｕｎｄ  ６４５．５［Ｍ＋１］＋。
【０５１１】
工程Ｂ．  １−ブロモ−２，１６−ジオキソ−６，９，１２−トリオキサ−３，１５−ジアザトリトリアコンタン−３３−ｏｉｃ酸（Ｂｒ−ＦＡ６）。
【０５１２】
ＤＣＭ（２ｍＬ）における１−３（６５ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）の溶液を４時間、ＴＦＡ（４ｍＬ）で処理した。混合物を濃縮し、その後、０℃で５ｍＬのＤＣＭにおいて、ブロモ酢酸無水物（２６ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（３５μＬ、０．２ｍｍｏｌ）を加えた。その後、反応混合物を２時間撹拌し、溶媒を取り除いた。生成物をＨＰＬＣにより精製して、７０％の生成物の収率で白色固形物として３５ｍｇの表題化合物を得た。ＥＳＩ−ＭＳ：ｃａｌｃｄ  ＭＷ  ６０８．３；ｆｏｕｎｄ  ６０９．４［Ｍ＋１］＋。
【０５１３】
実施例１１：Ｂｒ−ＦＡ７の固相合成。
【０５１４】
【化４７】
2020063249.tif 000051
【０５１５】
Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（ｉｖＤｄｅ）−ＯＨとＦｍｏｃ−ＰＥＧ２−プロピオン酸の代わりに、それぞれモノ−Ｆｍｏｃエチレンジアミン塩酸塩と［２−［２−（Ｆｍｏｃ−アミノ）エトキシ］エトキシ］酢酸を使用することにより、Ｂｒ−ＦＡ２と同様の様式で表題化合物を調製した。分取ＨＰＬＣによる精製と凍結乾燥により、約２５％の生成物の収率で９５％以下の純度を持つ白色粉末として表題化合物を得た。ペプチドの分子量を、ＥＳＩ−ＭＳにより分析した：ｃａｌｃｄ  ＭＷ  ８９６．９；ｆｏｕｎｄ  ８９８．１［Ｍ＋１］＋。
【０５１６】
実施例１２：Ｂｒ−ＦＡ８の調製。
【０５１７】
【化４８】
2020063249.tif 000052
【０５１８】
オクタデカン二酸モノ−ｔｅｒｔ−ブチルエステルの代わりにパルミチン酸を使用することにより、Ｂｒ−ＦＡ２と同様の方法で表題化合物を調製した。分取ＨＰＬＣによる精製と凍結乾燥により、約２９％の生成物の収率で９５％以下の純度を持つ白色粉末として表題化合物を得た。ペプチドの分子量を、ＥＳＩ−ＭＳにより分析した：ｃａｌｃｄ  ＭＷ  ８２２．４；ｆｏｕｎｄ  ８２３．６［Ｍ＋１］＋。
【０５１９】
実施例１３：封入体の調製。
【０５２０】
リラキシンアナログを発現する細胞をスピンダウンさせ、細胞ペレットを生成した。細胞ペレットを、溶解バッファー（１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ８、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、１％  Ｔｒｉｒｏｎ−Ｘ１００、２ｍＭ  ＥＤＴＡ）の中で再懸濁し、少なくとも３回、１８，０００ｐｓｉで操作されたＦｒｅｎｃｈ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｃｅｌｌに通すことで溶解し、一方で各通過後に細胞懸濁液を４℃に冷やした。溶解した細胞懸濁液を、１５，０００ｒｐｍ、４℃で、４５分間遠心分離することにより明らかにした。ペレットは、生菌、封入体タンパク質と共に細胞破片を含有している。そのため、ペレットを複数回洗浄することで残りから封入体タンパク質を簡潔に分離して、上清をデカントした後、組織ホモジナイザーを使用してペレットを溶解バッファーの中で再懸濁し、遠心分離にさらして、この手順を少なくとも３回繰り返した。ペレットからＴｒｉｔｏｎ−Ｘ１００を取り除くために、ペレットを、洗浄バッファー（１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ８、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、１％  Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００、２ｍＭ  ＥＤＴＡ）で少なくとも２回洗浄した。ペレットの洗浄を、均質化による再懸濁、その後遠心分離により行った。その後、ペレットを、更に精製することなくリラキシンアナログのインビトロでのリフォールディングに直接使用した。
【０５２１】
実施例１４：リラキシンアナログのリフォールディング。
【０５２２】
実施例１３の細胞ペレットを、リラキシンアナログのインビトロでのリフォールディングに使用した。酸化／還元したグルタチオンを使用してリラキシンアナログのリフォールディングを行った。封入体を８Ｍの塩酸グアニジン（ＧｄｎＨＣｌ）に溶解した。４０ｍＬのＧｄｎＨＣｌを使用して、１ＬのＥ．ｃｏｌｉ培養物から分離した封入体ペレットを溶解した。タンパク質を可溶化した後、不溶性部分を３０分間、１５０００ｒｐｍで遠心分離することによりペレット状にした。その後、３，０００ＭＷのｃｕｔｏｆｆ  Ａｍｉｃｏｎ  Ｕｌｔｒａ（Ｆｉｓｈｅｒ  Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）遠心濾過機ユニットを使用して、可溶化したタンパク質を１０−１５ｍＬに濃縮した。その後、変性タンパク質を、３００ｍＬのリフォールディングバッファー（２ｍＭのＧＳＨを含有する、４４０ｍＭのアルギニン、５５ｍＭのＴｒｉｓ、ｐＨ８．２、１０ｍＭのＧＳＳＧ）の中で希釈した。リフォールディングを１−２時間継続させ、ＴＦＡにｐＨ２を加えることによりクエンチした。その後、沈殿物をペレットへと遠心分離し、上清を遠心分離ユニットに移し、２−３ｍｇ／ｍＬに濃縮した。その後、流速を４．０ｍＬ／ｍｉｎに設定して、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ  Ｊｕｐｉｔｅｒ  Ｃ５カラム（２５０×４．６ｍｍ）を使用して、半分取ＨＰＬＣによって濃縮したタンパク質混合物を精製した。所望のタンパク質についてＬＣ−ＭＳにより画分を分析して、その後プールし、凍結乾燥した。
【０５２３】
実施例１５：リラキシンへの脂質の結合。
【０５２４】
リラキシン中の遊離チオールが、酵素の消化が通常行われる塩基性のｐＨにおいてスクランブル（ｓｃｒａｍｂｌｉｎｇ）を生じさせると観察されたので、システインをキャッピングした後に全ての酵素の処理（トリプシン／Ｃｐ−Ｂ又はＴＥＶプロテアーゼ）を行った。実施例１４の凍結乾燥したタンパク質を、２５％のＴＦＡに溶解した。ペグ化された脂質を、ＡＣＮアセトニトリル／１００ｍＭのＮＨ４ＨＣＯ３バッファー（１：１）、ｐＨ  ８．５に溶解した。その後、リラキシンを混合物に加え、反応を室温で２時間進めた；反応の進行をＬＣ−ＭＳにより確認した。そして、反応の完了後、混合物を凍結乾燥した。
【０５２５】
実施例１６：２重鎖の前駆体へのリラキシン前駆体の酵素変換。
【０５２６】
実施例１５の凍結乾燥した粉末を、１ｍＭのＣａＣｌ２、ｐＨ８を含有する５０ｍＭのＴｒｉｓバッファーの中で再懸濁した。トリプシン（１：１００）をこの混合物に加え、混合物を室温で１時間インキュベートした。１時間後、カルボキシペプチダーゼ−Ｂ（１ｍｇのタンパク質について１０ユニット）を混合物に加え、開裂の進行をＬＣ−ＭＳ分析によりモニタリングした。完全な開裂の後、酢酸を加えることにより混合物のｐＨを４にした。混合物を凍結乾燥し、半分取ＨＰＬＣにより精製した。
【０５２７】
実施例１７：ＴＥＶプロテアーゼを介するＨｉｓ−タグの開裂。
【０５２８】
実施例１６の凍結乾燥したタンパク質を、３ｍＭのＧＳＨ：０．５ｍＭのＧＳＳＧを含有するＰＢＳバッファーの中で再懸濁した。Ｔｅｖプロテアーゼを混合物に加え、室温で一晩インキュベートした。タグの開裂をＬＣ−ＭＳ分析によって確認した。
【０５２９】
実施例１８：Ｔｏｘｉｎ−５５０アナログの遺伝子構築と発現。
【０５３０】
アセンブリを循環させるポリメラーゼを介して挿入物を調製し、そこでは、フォワード及びリバースプライマーがアニールされ、それによりフォワード及びリバースプライマーが更に豊富なＤＮＡフラグメントを生成する。その後、増幅されたフラグメントを、制限消化酵素（Ｂａｍ  Ｉ／Ｈｉｎｄ−ＩＩＩ）で消化した。その後、調製した挿入物を、ＰＥＴバックボーンを備えたベクターにライゲートし、その後、コード化されたＤＮＡフラグメントをＤＮＡ配列決定により確認した。Ｔｏｘｉｎ−５５０構成物（ｐＥＴ／Ｔｘｉｎ−５５０）をＥ．ｃｏｌｉ菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）に形質転換させた。形質転換したＥ．ｃｏｌｉ細胞を、激しく振り混ぜながら（２５０ｒｐｍ）、３７℃でＯＤ６００ｎｍ＝１．０に激しい（ｔｅｒｒｉｆｉｃ）ブロス（５０μｇ／ｍｌのカナマイシンを含む）の中で培養した。タンパク質の発現を誘導するために、ＩＰＴＧ貯蔵溶液（１Ｍ）を０．５ｍＭの最終濃度に加え、細胞を、２６℃で２４時間、２５０ｒｐｍで振り混ぜることで連続的にインキュベートした。翌日、細胞を遠心分離（６０００ｒｐｍ、１５ｍｉｎ）により採取した。
【０５３１】
＜封入体の調製＞
細胞ペレットを、溶解バッファー（１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ８、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、１％  Ｔｒｉｒｏｎ−Ｘ１００、２ｍＭ  ＥＤＴＡ）の中で再懸濁し、少なくとも３回、１８，０００ｐｓｉで操作されたＦｒｅｎｃｈ  ｐｒｅｓｓｕｒｅ  ｃｅｌｌに通すことで溶解し、一方で各通過後に細胞懸濁液を４℃に冷やした。溶解した細胞懸濁液を、１５，０００ｒｐｍ、４℃で、４５分間遠心分離することにより明らかにした。ペレットは、生菌、封入体タンパク質と共に細胞破片を含有していた。ペレットを複数回洗浄して、細胞と他の細胞破片の残りから封入体タンパク質を分離した。簡潔に、上清をデカントした後、組織ホモジナイザーを使用してペレットを溶解バッファーの中で再懸濁し、遠心分離にさらして、この手順を少なくとも３回繰り返した。ペレットからＴｒｉｔｏｎ−Ｘ１００を取り除くために、ペレットを、洗浄バッファー（１００ｍＭ  Ｔｒｉｓ、ｐＨ８、１００ｍＭ  ＮａＣｌ、１％  Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００、２ｍＭ  ＥＤＴＡ）で少なくとも２回洗浄し、ペレットの洗浄を、均質化を介した懸濁、その後に遠心分離により行った。その後、ペレットを、更に精製することなくのインビトロでのリフォールディングに直接使用した。
【０５３２】
実施例１９：Ｔｏｘｉｎ−５５０アナログのリフォールディング。
【０５３３】
酸化／還元したグルタチオンを使用してリフォールディングを行った。（実施例１８のような）封入体を８Ｍの塩酸グアニジン（ＧｄｎＨＣｌ）に溶解した。１０ｍＬのＧｄｎＨＣｌを使用して、１ＬのＥ．ｃｏｌｉ培養物から分離した封入体ペレットを溶解した。タンパク質を可溶化した後、更に１０ｍＬのＴｒｉｓ−ＨＣＬバッファー（５０ｍＭ）を加え、不溶性部分を３０分間、１５０００ｒｐｍで遠心分離することによりペレット状にした。その後、可溶化した上清の変性タンパク質を、２００ｍＬのリフォールディングバッファーの中で希釈した。可溶化した上清の変性タンパク質を希釈するために使用された、様々なリフォールディングバッファーを、下記の表に示す：
【０５３４】
【表３】
2020063249.tif 000053
【０５３５】
図１０は、Ｔｏｘｉｎ−５５０ペプチド（野生型）のためのジスルフィド結合パターン、及びシステインノットＴｏｘｉｎ−５５０ペプチドの典型的なインビトロのフォールディング経路を示し、中央の構造は２つのスルフィド結合中間体を表し、そこでは、ジスルフィド結合は、システインＩとシステインＩＶの間、及びシステインＩＩとシステインＶの間に形成される。
【０５３６】
様々なリフォールディングの試験（ｔｒａｉｌｓ）を行って、リフォールディングバッファー条件の大半は、２Ｍ  （ＮＨ４）２ＳＯ４リフォールディングバッファーを例外として、主要な生成物として２つのスルフィド結合中間体を生じさせ、そこでは、３つのジスルフィド結合生成物が４時間で観察される。３つのジスルフィド結合生成物はＴｏｘｉｎ−５５０ペプチドを含有し、ジスルフィド結合はシステインＩとシステインＩＶの間、システインＩＩとシステインＶの間、及びシステインＩＩＩとシステインＶＩの間に形成される。
【０５３７】
実施例２０：Ｔｏｘｉｎ−５５０への脂質の結合。
【０５３８】
その後、リフォールディングしたＴｏｘｉｎ−５５０を、２％  ＴＦＡを含むＰＢＳと交換し、脂質との結合の前に過剰グルタチオンを取り除いた。ペグ化された脂質を、ＡＣＮアセトニトリル／１００ｍＭのＮＨ４ＨＣＯ３バッファー（１：１）、ｐＨ８．５に溶解した。その後、毒素を混合物に加え、反応を室温で２時間進めた；反応の進行をＬＣ−ＭＳにより確認した。反応の完了後、混合物を後に凍結乾燥して、Ｃ１８−ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘカラムを使用するＲＰ−ＨＰＬＣにより精製した。Ｔｏｘｉｎ−５５０に付けられた脂質を含む脂質複合体を、エントリー１１−１３として図１６Ｂに示す。括弧（ｂｒａｃｋｅｔｓ）は、脂質複合体においてシステイン残基の間に形成されたジスルフィド結合を表す。
【０５３９】
実施例２１：オキシントモジュリンとエクセナチドの誘導体への脂質の結合。
【０５４０】
固相ペプチド合成を使用して、オキシントモジュリンＣｙｓ３８（例えば、Ｏｘｍ−Ｃｙｓ３８、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２４）とエクセナチドＣｙｓ４０（例えば、Ｅｘ４−Ｃｙｓ４０、ＳＥＱ  ＩＤ  ＮＯ：２５）を化学的に合成した。ペグ化された脂質を、ＡＣＮアセトニトリル／１００ｍＭのＮＨ４ＨＣＯ３バッファー（１：１）、ｐＨ８．５に溶解した。システイン変異体をＡＣＮアセトニトリル／１００ｍＭのＮＨ４ＨＣＯ３バッファーに溶解し、そして、ペグ化された脂質混合物に加えて、反応を室温で２時間進行させた。反応の進行をＬＣ−ＭＳにより確認した。反応の完了後、混合物を後に凍結乾燥して、Ｃ１８−ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘカラムを使用するＲＰ−ＨＰＬＣにより精製した。
【０５４１】
実施例２２：リラキシン誘導体へのＸＴＥＮの結合。
【０５４２】
凍結乾燥されたタンパク質、遊離システインを備えるリフォールディングしたリラキシンを、水とアセトニトリルの混合物中の０．２５％のＴＦＡにおいて再懸濁した。ヨードアセチル化されたＸＴＥＮ  ２８８又は８６４（１．２等量；Ｎ末端でヨードアセチル化）を加えて、そして１Ｍの重炭酸アンモニウムを使用してｐＨを８．５に調整した。反応を室温で２時間進行させ；反応の進行をＬＣ−ＭＳにより確認した。反応の完了後、混合物は、陰イオン交換クロマトグラフィー（Ｍｏｎｏ−Ｑ）を介して精製前に交換されたバッファーであった。その後、所望の画分を集め、実施例１６に示されるのと同様の手順に従い、ミニ−Ｃ−鎖の開裂を受けさせた。開裂反応をクエンチし、ＲＰ−ＨＰＬＣにさらして、ＸＴＥＮ−リラキシン接合体を精製した。選択したデータを表３に示す。
【０５４３】
表１における以下の化合物を、同様の手順を使用して調製した、又は調製する。追加の例を図１６Ａ−Ｂと１７に示す。
【０５４４】
【表４−１】
2020063249.tif 000054
【０５４５】
【表４−２】
2020063249.tif 000055
【０５４６】
【表４−３】
2020063249.tif 000056
【０５４７】
【表４−４】
2020063249.tif 000057
【０５４８】
【表４−５】
2020063249.tif 000058
【０５４９】
【表４−６】
2020063249.tif 000059
【０５５０】
【表４−７】
2020063249.tif 000060
【０５５１】
【表４−８】
2020063249.tif 000061
【０５５２】
実施例２３：Ｅｘ４とＯｘｍペプチドの生物活性の測定。
【０５５３】
Ｅｘ４はＧＬＰ１Ｒアゴニストであり、ＯｘｍはＧＬＰ１Ｒ及びＧＣＧＲのデュアルアゴニストである。ＧＬＰ１ＲとＧＣＧＲの受容体を安定して発現するＨｅｋ２９３細胞におけるアデニル酸シクラーゼ活性の刺激に基づいて、インビトロの活性を判定した。細胞を発現する安定したＧＣＧＲ及びＧＬＰ１Ｒの受容体を、２００ｎｇ／ｍｌのＺｅｏｃｉｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で補われたダルベッコの修飾されたイーグル培地／Ｆ−１２培地の中に維持した。環式ＡＭＰ反応的要素により駆動されるルシフェラーゼ（ＣＲＥ−Ｌｕｃ）レポーターラインは、ＣＲＥ−Ｌｕｃレンチウイルス（Ｑｉａｇｅｎ）を備えたＨＥＫ２９３Ｔ細胞を過剰発現するこれら受容体のレンチウイルス形質導入によって生じさせられ、２週間、ピューロマイシン（２μｇ／ｍＬ）と共に選択された。レポーター遺伝子アッセイを使用して、Ｅｘ−４又はＯｘｍによりｃＡＭＰレベルとＧＬＰ１ＲとＧＣＧＲの活性化を検出したＯｘｍ。
【０５５４】
アッセイの詳細：ＧＬＰ１ＲとＣＲＥ−Ｌｕｃを発現するＨＥＫ２９３Ｔ細胞を、３８４ウェルの固形底面白色プレートの中に１０％のＦＢＳを含有する、５０μＬのダルベッコの修飾されたイーグルの培地／Ｆ−１２培地の中で、１つのウェルにつき５×１０３の密度で蒔く。細胞を３７℃で一晩、予めインキュベートした。異なる濃度のペプチド（０．００１ｎＭ乃至１００ｎＭ）を３回加え、１８時間インキュベートして、ルシフェラーゼ活性を１０μＬのＢｒｉｇｈｔ  Ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を加えることにより検出した。ルミネセンスをＥｎｖｉｓｉｏｎ（Ｐｅｒｋｉｎ  Ｅｌｍｅｒ）に記録した。非線形の曲線適合の後にＥＣ５０を計算した。ＧＣＧＲ活性について、ＧＣＧＲとＣＲＥ−Ｌｕｃを備えたレポーター細胞株を利用した。選択したデータを表３に示す。
【０５５５】
実施例２４：毒素ペプチドの生物活性の測定。
【０５５６】
Ｔｏｘｉｎ−５５０ペプチドを、ＮａＶ１．７の電流の測定値のために標準の走行条件（ｒｕｎｎｉｎｇ  ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ）を使用してＩｏｎＦｌｕｘ  ＨＴの上で分析した。簡潔に、ヒトＮａｖ１．７（ＰｒｅｃｉｓＩＯＮ、Ｍｉｌｌｐｏｒｅ）のアルファ及びベータ−１サブユニットを過剰発現するＨＥＫ２９３細胞をトリプシン処理し、無血清培地の中で培養して、室温で３０分間振り混ぜた。化合物を、所望の濃度で、標準の細胞外のリンガー溶液（ＥＣＳ）に希釈した。細胞をＥＣＳで１回洗浄し、そして、４００万の細胞／ｍＬの濃度でＥＣＳの中で培養した。ＩｏｎＦｌｕｘ  ＨＴプレートを、標準プロトコルに従って配置した。
【０５５７】
ＮａＶ１．７電流を、以下の電圧工程プロトコルに従ってＩｏｎＦｌｕｘの上で測定した：
１．  細胞を１０秒間、−９０ｍＶで保持した。
２．  細胞を、１００ｍｓの間、−９０ｍＶ乃至−１２０ｍＶまでステップした（ｓｔｅｐｐｅｄ）。
ａ．  その後、３０ｍｓの間−１０ｍＶまで、及び
ｂ．  その後、３０ｍｓの間−９０ｍＶまで戻す。
【０５５８】
ベースライン電流を５分間安定させ、そして対照ベースライン（ＥＣＳのみ）を確立した。化合物を２０分間適用し、そして正の対照（ペプチドＮａＶ１．７ブロッカー）を適用した。
【０５５９】
その後、リーク減算をデータ上で実行し、結果として生じる電流を以下のように分析する：
１．  カーソル減算（ベースライン−ピーク）を、全ての電流掃引について実行して、電流（Ｉ）の振幅を判定した。
２．  各パッチに関するＥＣＳベースライン電流を最大電流（Ｉｍａｘ）として得た。
３．  与えられた時間の間（例えば、１０分後の化合物の追加）パーセントブロックをＩ／Ｉｍａｘとして計算した。
【０５６０】
選択したデータを表３に示す。
【０５６１】
実施例２５．半減期延長に関するインビボの薬物動態学（ＰＫ）研究。
【０５６２】
ｓｃ、ｐｏ、ｉｖの投薬を使用して、脂質を結合したリラキシン又は他の治療剤をマウスに投薬する。ＴＡの血漿中濃度を、異なる時点（例えば、ｉ．ｖ．ＰＫ  ５分、０．５時間、１時間、２時間、４時間、８時間、２４時間、４８時間、９６時間、及び１４４時間、並びに、ｓ．ｃ．ＰＫ．１５分、０．５時間、１時間、２時間、４時間、８時間、２４時間、４８時間、９６時間、及び１４４時間）において、ｍｓ、ｌｇｒ７、ｇｌｐ１ｒ、及び／又はｇｃｇｒの活性化により判定する。選択したＰＫデータを、図１１、１２、及び１５、並びに表２に示す。
【０５６３】
【表５−１】
2020063249.tif 000062
【０５６４】
【表５−２】
2020063249.tif 000063
【０５６５】
【表６−１】
2020063249.tif 000064
【０５６６】
【表６−２】
2020063249.tif 000065
【０５６７】
実施例２６：急性心不全モデルにおける薬力学（ＰＤ）研究とインビボの効果。
【０５６８】
ＰＫの判定後、適切な投薬レジメンを決定し、ｓｃ、ｐｏ、又はｉｖを使用して脂質を結合したリラキシンを投薬して、血圧、尿流、及び／又は靭帯の伸度について有効性モデルにおける脂質を結合したリラキシンの効果を評価する。また、脂質を結合したリラキシンを、肺及び肝臓におけるブレオマイシンにより誘導された繊維症モデルおいて、及び／又は、高齢の糖尿病のｚｕｃｋｅｒの太ったラットにおける糖尿病の創傷治癒モデルにおいて評価する。
【０５６９】
実施例２７：マウスの恥骨間の靭帯バイオアッセイを使用するＰＤ研究。
【０５７０】
Ｓｔｅｉｎｅｔｚ  ｅｔ  ａｌ．［Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ（１９６０）６７：１０２−１１５］に記載されるような、リラキシンに関する、十分に確立され且つ非常に特異的なマウスの恥骨間の靭帯バイオアッセイを利用することにより、リラキシンアナログの生物活性をＣＤ１マウスにおいて判定した。３−４週齢でメスのＣＤ１バージンマウスを研究から選択した。制御された温度（２５℃）と光周期（１２：１２時間の光−闇のサイクル）の条件下で動物をグループ飼育して、標準の食事と上水（又は指定された飲用溶液）への無制限のアクセスを与えた。処置の１日目に、マウスに、０．１ｍｌのゴマ油の中の１０μｇのエストラジオールピオネートをｓ．ｃ．注入した。８日目に、マウスを異なる群に分けた：ビヒクル対照、ｗｔリラキシン（ＰＢＳバッファーにおいて１％のベンゾプルプリン４Ｂの懸濁液に溶解される）、及びリラキシンアナログ（２０ｍＭのＮＨ４Ａｃバッファー、ｐＨ６．５に溶解される）。Ｗｔリラキシン又はリラキシンアナログを、ｓ．ｃ．注射を介して異なる用量で投与した。リラキシン注射後の異なる時間に、マウスを屠殺し、キャリパー測定を使用して恥骨間の靭帯の長さを判定した。選択したデータを図１３と１４に示す。
【０５７１】
実施例２８：急性心不全の処置のための、脂質を結合したリラキシンの効果と安全性
【０５７２】
目的：異なる用量の脂質を結合したリラキシンを、急性心不全により入院した患者の処置のための効果と安全性を判定するために、プラセボと比較する。
【０５７３】
【表７】
2020063249.tif 000066
【０５７４】
研究タイプ：介入
【０５７５】
研究設計：  割当：無作為化
【０５７６】
エンドポイント分類：安全性／有効性の研究
【０５７７】
介入モデル：並列の割当
【０５７８】
マスキング：二重盲検（被験体、介護者、研究者、結果の評価者（Ｏｕｔｃｏｍｅｓ  Ａｓｓｅｓｓｏｒ））
【０５７９】
第１の目的：処置
【０５８０】
第１評価項目：急性心不全における呼吸困難の軽減［時間枠：５日目まで］［安全性の問題として指定された：無し］
【０５８１】
第２評価項目：生存日数と退院した日（Ｄａｙｓ  ａｌｉｖｅ  ａｎｄ  ｏｕｔ  ｏｆ  ｈｏｓｐｉｔａｌ）［時間枠：６０日目まで］［安全性の問題として指定された：無し］
【０５８２】
急性心不全又は腎不全によるＣＶ死と再入院［時間枠：６０日目まで］［安全性の問題として指定された：無し］
【０５８３】
【表８】
2020063249.tif 000067
【０５８４】
詳述：
【０５８５】
これは、急性非代償性心不全のために入院した患者における兆候と症状の処置のための静脈内組み換え型リラキシンの、国際的な、無作為化した、二重盲検の、プラセボ対照の、第ＩＩ／ＩＩＩ相試験である。第ＩＩ相予備実験を完了した；試験の第ＩＩＩ相の主要部分は進行中である。
【０５８６】
適格性：
【０５８７】
研究の資格を持つ年齢：１８歳以上
【０５８８】
研究の資格を持つ性別：両方
【０５８９】
健康なボランティアの受け入れ：無し
【０５９０】
基準：
【０５９１】
包含基準：
【０５９２】
急性心不全による入院
【０５９３】
休息時、又は最小の運動による呼吸困難
【０５９４】
肺うっ血
【０５９５】
インフォームドコンセントを提供することが可能
【０５９６】
収縮期血圧＞１２５ｍｍＨｇ
【０５９７】
３０−７５ｍＬ／ｍｉｎ／１．７３ｍ２のｅＧＦＲとして定められる腎機能障害
【０５９８】
除外基準：
【０５９９】
急性心不全のための他のＩＶ治療の使用。
【０６００】
発熱又は敗血症
【０６０１】
最近の主要な神経系の事象
【０６０２】
最近の大手術
【０６０３】
最近の急性冠動脈症候群
【０６０４】
他の最近の治験薬使用
【０６０５】
【表９−１】
2020063249.tif 000068
【０６０６】
【表９−２】
2020063249.tif 000069
【０６０７】
【表９−３】
2020063249.tif 000070
【０６０８】
【表９−４】
2020063249.tif 000071
【０６０９】
【表１０−１】
2020063249.tif 000072
【０６１０】
【表１０−２】
2020063249.tif 000073
【０６１１】
【表１０−３】
2020063249.tif 000074
【０６１２】
【表１１】
2020063249.tif 000075
【０６１３】
【表１２】
2020063249.tif 000076
【図１】
2020063249.tif 000081
【図２】
2020063249.tif 000082
【図３】
2020063249.tif 000083
【図４】
2020063249.tif 000084
【図５】
2020063249.tif 000085
【図６】
2020063249.tif 000086
【図７】
2020063249.tif 000087
【図８】
2020063249.tif 000088
【図９】
2020063249.tif 000089
【図１０】
2020063249.tif 000090
【図１１】
2020063249.tif 000091
【図１２】
2020063249.tif 000092
【図１３】
2020063249.tif 000093
【図１４】
2020063249.tif 000094
【図１５】
2020063249.tif 000095
【図１６Ａ】
2020063249.tif 000096
【図１６Ｂ】
2020063249.tif 000097
【図１７】
2020063249.tif 000098
【配列表】
2020063249000001.app
【手続補正書】
【提出日】令和1年11月25日(2019.11.25)
【手続補正１】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項１】
治療剤及び１以上の半減期延長部分を含む、修飾された治療剤であって、前記治療剤は、ペプチド上のシステイン残基を介して、１以上の半減期延長部分の各々に共有結合されるペプチドであり；及び、修飾された治療剤の半減期は、ペプチドだけの半減期よりも長い、修飾された治療剤。
【外国語明細書】
2020063249000001.pdf