(57)【要約】【課題】がん幹細胞を標的とするための新規の化合物および組成物の提供。【解決手段】本発明は、ナフトフラン化合物、ナフトフラン化合物の多形、粒子の形態のナフトフラン化合物、１種以上のナフトフラン化合物を含有する精製された組成物、１種以上の粒子の形態のナフトフラン化合物を含有する精製された組成物、これらのナフトフラン化合物、多形、精製された組成物および／または粒子の形態を生成する方法、ならびにそれを必要としている被験体を処置するためのこれらのナフトフラン化合物、多形、精製された組成物および／または粒子の形態を使用する方法を提供する。【選択図】なし【特許請求の範囲】
【請求項１】
本願明細書に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
関連出願
本出願は、２０１０年３月１９日に出願された米国仮特許出願第６１／３１５，８８６号、２０１０年３月１９日に出願された米国仮特許出願第６１／３１５，８９０号、および２０１０年４月１９日に出願された米国仮特許出願第６１／３２５，８１４号の利益を主張する。これらの出願の各内容は本明細書においてその全体が参照として援用される。
【０００２】
発明の分野
本発明は、ナフトフラン化合物、ナフトフラン化合物の多形、粒子の形態のナフトフラン化合物、１種以上のナフトフラン化合物を含有する精製された組成物、１種以上の粒子の形態のナフトフラン化合物を含有する精製された組成物、これらのナフトフラン化合物、多形、精製された組成物および／または粒子の形態を生成する方法、ならびにそれを必要としている被験体を処置するためにこれらのナフトフラン化合物、多形、精製された組成物および／または粒子の形態を使用する方法を提供する。
【背景技術】
【０００３】
発明の背景
米国単独でのがんによる死亡者数は毎年数十万に達する。手術、放射線療法、および化学療法による特定の形態のがんの処置における進展に関わらず、多くのタイプのがんは本質的に治療不能である。有効な処置が特定のがんに利用可能であるときでさえ、このような処置の副作用は重篤であり、生活の質の重大な低下をもたらし得る。
【０００４】
大部分の従来の化学療法薬剤は、特に進行した固形腫瘍を有する患者について、毒性および限定された効力を有する。化学療法剤は、非がん細胞およびがん細胞に損傷をもたらす。このような化合物の治療係数（がん細胞と正常細胞とを区別する治療の能力の尺度）は非常に低いことがあり得る。しばしば、がん細胞を死滅させるのに有効な化学療法薬剤の用量は、正常細胞、特に頻繁な細胞分裂を起こすこれらの正常細胞（上皮細胞など）をまた死滅させる。正常細胞が治療によって影響されるとき、脱毛、造血の抑制、および悪心などの副作用が起こり得る。患者の身体全体の健康次第でこのような副作用は化学療法の投与を妨げることがあり、または少なくとも患者にとって極度に不快であり、苦痛を感じさせ、がん患者の残りの生活の質を大幅に低下させ得る。腫瘍退縮によって化学療法に反応するがん患者においてでさえも、このような腫瘍反応は、無増悪生存期間（ＰＦＳ）の延長または全生存期間（ＯＳ）の延長が伴わないことが多い。実際のところ、化学療法への最初の反応の後に、がんは急速に進行し、より転移を形成することが多い。このような再発性がんは、化学療法剤に対して高度に抵抗性または難治性となる。化学療法後のこのような急速な再発性および難治性は、がん幹細胞によってもたらされると考えられる。
【０００５】
最近の研究は、自己複製能力を有し、悪性増殖、再燃および転移に基本的に関与していると考えられているがん幹細胞（ＣＳＣ、腫瘍開始細胞またはがん幹様細胞ともまた称される）の存在を明らかにしてきた。重要なことに、ＣＳＣは、従来の治療に対して固有に抵抗性である。したがって、がん幹細胞に対して活性を有する標的化薬剤は、がん患者にとって大いに期待できる（非特許文献１）。したがって、従来の化学療法は、大量のがん細胞を死滅させることができるが、がん幹細胞は残る。がん幹細胞は、化学療法によって通常の非幹がん細胞が減少した後により急速に増殖することができ、これは化学療法後の急速な再燃についての機序であると考えられている。
【０００６】
ＳＴＡＴ３は、サイトカインおよび／または増殖因子に反応して活性化し、増殖、生存、および他の生物学的プロセスを促進する癌遺伝子である。ＳＴＡＴ３は、増殖因子受容体チロシンキナーゼ、ヤヌスキナーゼ、またはＳｒｃファミリーキナーゼによって媒介される重要なチロシン残基のリン酸化によって活性化される。チロシンリン酸化によって、ＳＴＡＴ３はホモ二量体を形成し、核に移動し、標的遺伝子プロモーターにおける特定のＤＮＡ応答エレメントに結合し、遺伝子発現を誘導する。ＳＴＡＴ３は、腫瘍化、浸潤、および転移に関与する遺伝子（Ｂｃｌ−ｘｌ、Ａｋｔ、ｃ−Ｍｙｃ、サイクリンＤ１、ＶＥＧＦ、およびサバイビンを含めた）を活性化する。ＳＴＡＴ３は、全ての主要な癌腫およびいくつかの血液腫瘍を含めた多種多様のヒトがんにおいて異常に活性である。持続的に活性なＳＴＡＴ３は、乳がんおよび肺がん、結腸直腸がん、卵巣がん、肝細胞癌腫、および多発性骨髄腫などの過半数；ならびに頭部／頸部がんの９５％超において発生する。ＳＴＡＴ３は、がん細胞の薬剤抵抗性についての主要な機序の１つであると考えられる。しかし、ＳＴＡＴ３は、薬学的阻害剤を発見するのが困難な標的であることが判明してきた。これまでのところ、当業界で数十年に及ぶ努力の後でも臨床的に関連する効力を有するＳＴＡＴ３の直接的阻害剤は同定されてこなかった。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【０００７】
【非特許文献１】Ｊ  Ｃｌｉｎ  Ｏｎｃｏｌ．、２００８年、６月１０日；２６巻（１７号）
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００８】
したがって、がん細胞を選択的に標的とし、がん幹細胞を標的とし、ＳＴＡＴ３を阻害するための化合物および薬学的組成物、ならびに臨床適用のためのこれらの化合物および薬学的組成物を調製する方法を発見することが求められている。
【０００９】
本明細書において引用した参照文献は、特許請求された本発明に対する先行技術であると認められない。
【課題を解決するための手段】
【００１０】
要旨
本発明は、ナフトフラン化合物、ナフトフラン化合物の多形、１種以上のナフトフラン化合物を含有する精製された組成物、および粒子の形態のナフトフラン化合物を提供する。これらのナフトフラン化合物（粒子の形態のものを含めた）、多形、および精製された組成物は、がん幹細胞およびＳＴＡＴ３の選択的阻害剤である。ＷＯ２００９／０３６０９９およびＷＯ２００９／０３６１０１は、ナフトフラン化合物ががん幹細胞を標的とすることを開示している。ナフトフラン化合物はまた、ＳＴＡＴ３を阻害することによって非幹がん細胞を阻害する。これらの化合物は、特定の曝露条件下で正常細胞への損傷をもたらすことなく多くの異なるタイプのがん細胞を死滅させることができる。したがって、これらの化合物は、がん処置、特に、難治性、再発性、転移性がん、またはＳＴＡＴ３を発現しているがんの処置および予防のために使用することができる。これらの刊行物はまた、ナフトフラン化合物、その誘導体、および中間体、ならびに関連する化合物の薬学的組成物を調製するためのプロセスを記載する。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
図２に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形。
（項目２）
少なくとも約１０．２°の２θ、約１１．９°の２θ、約１４．１°の２θ、約１４．５°の２θ、約１７．３°の２θ、約２２．２°の２θ、および約２８．１°の２θにおけるピークからなる群からの１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形。
（項目３）
図３に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形。
（項目４）
少なくとも約７．５°の２θ、約９．９°の２θ、約１２．３°の２θ、約１５°の２θ、約２３°の２θ、約２３．３°の２θ、約２４．６°の２θ、および約２８．４°の２θにおけるピークからなる群から選択される１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形。
（項目５）
少なくとも約１０．２°の２θにおけるピーク、少なくとも約１１．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．１°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１７．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２２．２°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．１°の２θにおけるピーク、ならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である、項目２に記載の多形。
（項目６）
少なくとも約７．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約９．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１２．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約１５°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２４．６°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．４°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である、項目４に記載の多形。
（項目７）
粒子の形態であり、該粒子が、約０．０２〜約２０マイクロメートルの範囲の直径を有する、項目１から６のいずれか一項に記載の２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形。
（項目８）
多形の粒子の集団を含む薬学的組成物中に存在し、該粒子の累計の一部が、０．２μｍ〜２０μｍの範囲の直径を有する、項目１から６のいずれか一項に記載の２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形。
（項目９）
前記一部が、前記粒子の累計の少なくとも約１％、約５％、約１０％、約２０％、約５０％、または約９０％である、項目８に記載の薬学的組成物。
（項目１０）
前記多形の粒子の集団を含む薬学的組成物中に存在し、該粒子の累計の５０％（Ｄ５０）が、約２μｍの直径を有する、項目１から６のいずれか一項に記載の２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形。
（項目１１）
項目１から９のいずれか一項に記載の２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形の精製した形態を含み、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、核磁気共鳴（ＮＭＲ）、またはＨＰＬＣおよびＮＭＲの両方によって決定すると９５．０％以上の純度を有し、かつ５％以下の不純物を含む、組成物。
（項目１２）
ＨＰＬＣ、ＮＭＲ、またはＨＰＬＣおよびＮＭＲの両方によって決定すると、９９％以上の純度を有する、項目１１に記載の組成物。
（項目１３）
各々０．２％以下の単一の不純物を含む、項目１１に記載の組成物。
（項目１４）
前記不純物が、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）、トルエン、エタノール、メタノール、クロロホルム、およびＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサンからなる群から選択される残留溶媒を含む、項目１１に記載の組成物。
（項目１５）
化合物１
【化１４】
2020063308.tif 000002
の精製した形態、その塩、溶媒和物、水和物、またはプロドラッグを含む組成物であって、
高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、核磁気共鳴（ＮＭＲ）、またはＨＰＬＣおよびＮＭＲの両方によって決定すると９５．０％以上の純度を有し、かつ５％以下の不純物を含む、組成物。
（項目１６）
ＨＰＬＣ、ＮＭＲ、またはＨＰＬＣおよびＮＭＲの両方によって決定すると、９９％以上の純度を有する、項目１５に記載の組成物。
（項目１７）
各々０．２％以下の単一の不純物を含む、項目１５に記載の組成物。
（項目１８）
前記不純物が、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）、トルエン、エタノール、メタノール、クロロホルム、およびＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサンからなる群から選択される残留溶媒を含む、項目１５に記載の組成物。
（項目１９）
粒子が、結晶状態の前記化合物を含む、項目１５に記載の組成物。
（項目２０）
薬学的組成物が、少なくとも２つの異なる多形状態の前記化合物を含む、項目１５に記載の組成物。
（項目２１）
アモルファス状態の前記化合物を含む、項目１５に記載の薬学的組成物。
（項目２２）
結晶状態の前記化合物およびアモルファス状態の該化合物を含む、項目１５に記載の薬学的組成物。
（項目２３）
化合物が、粒子の形態であり、該粒子が、約２０マイクロメートル以下の直径を有する、下記に示す構造を有する化合物、その塩、溶媒和物、水和物、またはプロドラッグ。
【化１５】
2020063308.tif 000003
（項目２４）
前記粒子の累計の一部が、０．２μｍ〜２０μｍの範囲の直径を有する、項目２３に記載の化合物の粒子の集団を含む薬学的組成物。
（項目２５）
前記粒子の累計の５０％（Ｄ５０）が、約２μｍの直径を有する、項目２３に記載の化合物の粒子の集団を含む薬学的組成物。
（項目２６）
前記粒子が、結晶状態、アモルファス状態または少なくとも２つの異なる多形状態の前記化合物を含む、項目２４または項目２５に記載の薬学的組成物。
（項目２７）
前記粒子が、結晶状態の前記化合物およびアモルファス状態の該化合物を含む、項目２４または項目２５に記載の薬学的組成物。
（項目２８）
薬学的に許容される添加剤をさらに含む、項目２４または項目２５２３に記載の薬学的組成物。
（項目２９）
（ａ）３−ブテン−２−オンとＢｒ２とを反応させ、３，４−ジブロモブテン−２−オンを形成させる工程と、
（ｂ）３，４−ジブロモブテン−２−オンを脱臭素化し、３−ブロモブテン−２−オンを形成させる工程と、
（ｃ）３−ブロモブテン−２−オンと２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノンとを反応させ、２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形を形成させる工程と、
（ｄ）該多形を結晶化させ、図２に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形を生じさせる工程と
を含む、図２に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形を調製するプロセス。
（項目３０）
（ａ）３−ブテン−２−オンとＢｒ２とを反応させ、３，４−ジブロモブテン−２−オンを形成させる工程と、
（ｂ）３，４−ジブロモブテン−２−オンを脱臭素化し、３−ブロモ−３−ブテン−２−オンを形成させる工程と、
（ｃ）３−ブロモ−３−ブテン−２−オンと２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノンとを反応させ、２−アセチル−２，３−ジヒドロプナフト［２，３−ｎ］フラン−４，９−ジオンを形成させる工程と、
（ｄ）２−アセチル−２，３−ジヒドロプナフト［２，３−ｎ］フラン−４，９−ジオンとＭｎＯ２およびトルエンとを反応させ、２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンを形成させる工程と、
（ｅ）該２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンを結晶化させる工程と、
（ｆ）２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンを酢酸エチルにスラリー化し、２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形を形成させる工程と
を含む、図３に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形を調製するプロセス。
（項目３１）
ヒト被験体においてがんを処置する方法であって、それを必要とするヒト被験体に、治療有効量の項目１から６、１５または２３のいずれか一項に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩を投与する工程を含む、方法。
（項目３２）
前記がんが、結腸直腸腺癌、乳がん、卵巣がん、頭頸部がん、黒色腫、血管肉腫、胃腺癌、およびアドレノコルチコイドからなる群から選択される、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
前記がんが、結腸直腸腺癌である、項目３１に記載の方法。
（項目３４）
前記がんが、卵巣がんである、項目３１に記載の方法。
（項目３５）
前記がんが、乳がんである、項目３１に記載の方法。
（項目３６）
前記がんが、肺がんである、項目３１に記載の方法。
（項目３７）
前記がんが、難治性がんである、項目３１に記載の方法。
（項目３８）
前記がんが、再発性がんである、項目３１に記載の方法。
（項目３９）
前記がんが、転移性がんである、項目３１に記載の方法。
（項目４０）
前記がんが、ＳＴＡＴ３の過剰発現と関連する、項目３１に記載の方法。
（項目４１）
がん患者において無増悪生存期間（ＰＦＳ）を延長させる方法であって、それを必要とするヒト被験体に、治療有効量の項目１から６、１５または２３のいずれか一項に記載の化合物、または薬学的に許容されるその塩を投与する工程を含む、方法。
（項目４２）
前記がんが、結腸直腸腺癌、乳がん、卵巣がん、頭頸部がん、黒色腫、血管肉腫、胃腺癌、およびアドレノコルチコイドからなる群から選択される、項目４１に記載の方法。
（項目４３）
前記がんが、結腸直腸腺癌である、項目４１に記載の方法。
（項目４４）
前記がんが、卵巣がんである、項目４１に記載の方法。
（項目４５）
前記がんが、乳がんである、項目４１に記載の方法。
（項目４６）
前記がんが、肺がんである、項目４１に記載の方法。
（項目４７）
前記がんが、難治性がんである、項目４１に記載の方法。
（項目４８）
前記がんが、再発性がんである、項目４１に記載の方法。
（項目４９）
前記がんが、転移性がんである、項目４１に記載の方法。
（項目５０）
前記がんが、ＳＴＡＴ３の過剰発現と関連する、項目４１に記載の方法。
【００１１】
本明細書に記載されているこれらのナフトフラン化合物（粒子の形態のものを含めた）、多形、および精製された組成物は、例えば、細胞増殖障害の症状を処置し、進行を遅延させ、再燃を予防し、または軽減することを含めて、種々の適応症において有用である。例えば、ナフトフラン化合物（粒子の形態のものを含めた）、多形、および精製された組成物は、がんを処置し、進行を遅延させ、再燃を予防し、症状を軽減し、または別の方法で改善するのに有用である。
【００１２】
いくつかの実施形態において、ナフトフラン化合物は、本明細書において「化合物１」と称される下記に示す化合物の多形である。
【００１３】
【化１】
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例えば、いくつかの実施形態において、多形は、図１に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。図１に示すＸ線粉末回折分析を、０．０３°のステップサイズおよび３時間の計数時間で５°〜７０°の範囲に亘って４０ＫＶ／３０ｍＡでのＣｕ照射を使用したＰｈｉｌｉｐｓ  ＰＷ１８００回折計を使用して行った。分析は、下記の条件を使用して２〜４５°２θで行った：発散スリット：０．６ｍｍ、散乱線除去スリット：０．６ｍｍ、受光スリット：０．１ｍｍ、検出器スリット：０．６ｍｍ、ステップサイズ：０．０２°、ステップ時間：５秒。いくつかの実施形態において、多形は、図２に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、図３に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。図２および３に示したＸ線粉末回折分析は、Ｂｒｕｋｅｒ  Ｄ８  Ａｄｖａｎｃｅ回折計を使用して行った。分析は、下記の条件を使用して２〜４５°２θで行った：発散スリット：０．６ｍｍ、散乱線除去スリット：０．６ｍｍ、受光スリット：０．１ｍｍ、検出器スリット：０．６ｍｍ、ステップサイズ：０．０２°、ステップ時間：５秒。
【００１４】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．４、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２１．０、２２．２、２４．０、２６．０、および２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２２．２、および／または２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１１．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１７．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２２．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおけるピーク、少なくとも約１１．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．１°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１７．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２２．２°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．１°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００１５】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１１．４、１２．３、１５．０、２３．０、２３．３、２４．１、２４．６、２５．０、２６．１、２７．０、および２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１２．３、１５、２３．０、２３．３、２４．６、および／または２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約９．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１２．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２４．６°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．４°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約９．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１２．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．０°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２４．６°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．４°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００１６】
本発明はまた、粒子の形態のナフトフラン化合物を提供する。例えば、粒子の形態のナフトフラン化合物は、活性であり、すなわち、効力および／または抗腫瘍活性をインビボで有する下記に示す式Ｉの化合物の粒子である。効果的な１つの粒子または複数の粒子は、粒径に関する定められた必要条件を有し、例えば、約２００μｍ以下、約１５０μｍ以下、約１００μｍ以下、約４０μｍ以下、または約２０μｍ以下、約１０μｍ以下、約５μｍ以下、約４μｍ以下、約３μｍ以下、約２μｍ以下、約１μｍ以下、約０．５μｍ以下、または約０．２μｍ以下の直径を有する。定められた粒径より大きな１つの粒子または複数の粒子は、不活性であるか、またはより活性が低い。
【００１７】
いくつかの実施形態において、粒子の形態のナフトフラン化合物は、式Ｉによる化合物、またはその塩もしくは溶媒和物の粒子であり、
【００１８】
【化２】
2020063308.tif 000005
式中、粒子は、約２００μｍ以下の直径を有し、各（Ｒ１）は、水素、ハロゲン、フッ素、シアノ、ニトロ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、アルキル、メチル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ＯＲａ、ＳＲａ、およびＮＨ２からなる群から独立に選択され、ｎは、４であり、Ｒ３は、水素、ハロゲン、フッ素、シアノ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、アルキル、メチル、置換アルキル、ハロゲン置換アルキル、ヒドロキシル置換アルキル、アミン置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ＯＲａ、ＳＲａ、およびＮＲｂＲｃからなる群から選択され、Ｒａは、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、複素環、置換複素環、アリール、および置換アリールからなる群から独立に選択され、ＲｂおよびＲｃは、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、および置換アリールからなる群から独立に選択され、あるいはＲｂおよびＲｃは、それらが結合しているＮと一緒になって、複素環または置換複素環を形成する。
【００１９】
いくつかの実施形態において、各（Ｒ１）は、水素、メチル、Ｆ（フッ素）、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、およびＮＨ２からなる群から独立に選択され、Ｒ３は、メチルおよびＣ（Ｒ８）３からなる群から選択され、各（Ｒ８）は、水素、メチル、Ｆ（フッ素）、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、およびＮＨ２からなる群から独立に選択される。いくつかの実施形態において、（Ｒ１）および（Ｒ８）の最大で２つは、Ｆ（フッ素）であり、残りは、水素である。いくつかの実施形態において、Ｒ３は、メチルである。さらなる実施形態において、化合物は、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、およびその塩または溶媒和物からなる群から選択される。
【００２０】
いくつかの実施形態において、粒子の形態のナフトフラン化合物は、化合物１の粒子である。
【００２１】
いくつかの実施形態において、粒子の形態のナフトフラン化合物は、化合物１の多形の粒子である。例えば、いくつかの実施形態において、多形は、図１に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、図２に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、図３に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００２２】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．４、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２１．０、２２．２、２４．０、２６．０、および２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２２．２、および／または２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１１．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１７．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２２．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおけるピーク、少なくとも約１１．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．１°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１７．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２２．２°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．１°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００２３】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１１．４、１２．３、１５．０、２３．０、２３．３、２４．１、２４．６、２５．０、２６．１、２７．０、および２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１２．３、１５、２３．０、２３．３、２４．６、および／または２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約９．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１２．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２４．６°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．４°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約９．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１２．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．０°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２４．６°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．４°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００２４】
いくつかの実施形態において、粒子は、約１６０μｍ以下、約１５０μｍ以下、約１２０μｍ以下、約１００μｍ以下、約５０μｍ以下、約４０μｍ以下、または約２０μｍ以下の直径を有する。さらなる実施形態において、粒子は、約１０μｍ以下、約５μｍ以下、約４μｍ以下、約３μｍ以下、約２μｍ以下、約１μｍ以下、約０．５μｍ以下、約０．２μｍ以下、または約０．１μｍ以下の直径を有する。
【００２５】
本発明は、活性な、すなわち、効力および／または抗腫瘍活性を有する、ナフトフラン化合物、例えば、式Ｉの化合物の１つの粒子または複数の粒子を提供する。活性のある１つの粒子または複数の粒子は特定の粒径を有し、例えば、約２００μｍ以下、約１５０μｍ以下、約１００μｍ以下、約４０μｍ以下、または約２０μｍ以下、約１０μｍ以下、約５μｍ以下、約４μｍ以下、約３μｍ以下、約２μｍ以下、約１μｍ以下、約０．５μｍ以下、約０．２μｍ以下、または約０．１μｍ以下の直径を有する。特定の粒径より大きい１つの粒子または複数の粒子は、不活性であるか、または本明細書に記載されている粒子より活性が低い。
【００２６】
本発明によるいくつかの実施形態において、薬学的組成物は、式Ｉによる化合物、例えば、ナフトフラン、またはその塩もしくは溶媒和物の粒子を含む。例えば、いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、化合物１の粒子を含む。例えば、いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、化合物１の多形の粒子を含む。例えば、いくつかの実施形態において、多形は、図１に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、図２に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、図３に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００２７】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．４、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２１．０、２２．２、２４．０、２６．０、および２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２２．２、および／または２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１１．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１７．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２２．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおけるピーク、少なくとも約１１．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．１°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１７．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２２．２°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．１°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００２８】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１１．４、１２．３、１５．０、２３．０、２３．３、２４．１、２４．６、２５．０、２６．１、２７．０、および２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１２．３、１５、２３．０、２３．３、２４．６、および／または２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約９．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１２．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２４．６°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．４°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約９．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１２．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．０°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２４．６°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．４°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００２９】
粒子の累計（ｃｕｍｕｌａｔｉｖｅ  ｔｏｔａｌ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｐａｒｔｉｃｌｅｓ）の一部は、約２００μｍ以下の直径を有することができる。いくつかの実施形態において、１セットの粒子の一部は、セット中の粒子の総数の少なくとも約１％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％でよい。いくつかの実施形態において、上記一部は、実質的な一部である。例えば、１セットの粒子の「実質的な一部」は、セット中の粒子の総数の少なくとも約９９％、少なくとも約９５％、少なくとも約９０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８０％、少なくとも約７５％、少なくとも約７０％、少なくとも約６０％、または少なくとも約５０％でよい。各（Ｒ１）は、水素、ハロゲン、フッ素、シアノ、ニトロ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、アルキル、メチル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ＯＲａ、ＳＲａ、およびＮＨ２からなる群から独立に選択することができる。ｎは、正の整数でよく、例えば、ｎは、４でよい。Ｒ３は、水素、ハロゲン、フッ素、シアノ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、アルキル、メチル、置換アルキル、ハロゲン置換アルキル、ヒドロキシル置換アルキル、アミン置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ＯＲａ、ＳＲａ、およびＮＲｂＲｃからなる群から選択することができる。Ｒａは、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、複素環、置換複素環、アリール、および置換アリールからなる群から独立に選択することができる。ＲｂおよびＲｃは、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、および置換アリールからなる群から独立に選択することができ、あるいはＲｂおよびＲｃは、それらが結合しているＮと一緒になって、複素環または置換複素環を形成する。
【００３０】
本発明によるいくつかの実施形態において、各（Ｒ１）は、水素、メチル、Ｆ（フッ素）、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、およびＮＨ２からなる群から独立に選択することができる。Ｒ３は、メチルおよびＣ（Ｒ８）３からなる群から選択することができる。各（Ｒ８）は、水素、メチル、Ｆ（フッ素）、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、およびＮＨ２からなる群から独立に選択することができる。いくつかの実施形態において、（Ｒ１）およびＲ８の最大で２つはＦ（フッ素）であり、残りは水素でよい。
【００３１】
【化３】
2020063308.tif 000006
本発明によるいくつかの実施形態において、式Ｉによる化合物は、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、および２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、式Ｉによる化合物は、化合物１である。いくつかの実施形態において、式Ｉによる化合物は、化合物１の多形である。例えば、いくつかの実施形態において、多形は、図１に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、図２に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、図３に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００３２】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．４、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２１．０、２２．２、２４．０、２６．０、および２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２２．２、および／または２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１１．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１７．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２２．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおけるピーク、少なくとも約１１．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．１°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１７．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２２．２°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．１°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００３３】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１１．４、１２．３、１５．０、２３．０、２３．３、２４．１、２４．６、２５．０、２６．１、２７．０、および２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１２．３、１５、２３．０、２３．３、２４．６、および／または２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約９．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１２．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２４．６°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．４°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約９．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１２．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．０°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２４．６°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．４°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００３４】
例えば、薬学的組成物は、約１６０μｍ以下、約１００μｍ以下、約４０μｍ以下、約２０μｍ以下、約１０μｍ以下、約５μｍ以下、約３μｍ以下、または約２μｍ以下の粒径を有する粒子の累計の少なくとも約９０％を有することができる。例えば、薬学的組成物は、約１６０μｍ以下、約１００μｍ以下、約４０μｍ以下、約２０μｍ以下、約１０μｍ以下、約５μｍ以下、約３μｍ以下、約２μｍ以下、約１μｍ以下、または約０．５μｍ以下の粒径を有する粒子の累計の少なくとも約５０％を有することができる。例えば、薬学的組成物は、約１６０μｍ以下、約１００μｍ以下、約４０μｍ以下、約２０μｍ以下、約５μｍ以下、約２μｍ以下、約１μｍ以下、約０．５μｍ以下、または約０．１μｍ以下の粒径を有する粒子の累計の少なくとも約１０％を有することができる。薬学的組成物において、粒子は、例えば、約１６０μｍ以下、約４０μｍ以下、約２０μｍ以下、約１０μｍ以下、約５μｍ以下、約４μｍ以下、約３μｍ以下、約２μｍ以下、約１μｍ以下、約０．５μｍ以下、約０．３μｍ以下、または約０．２μｍ以下のメジアン直径を有することができる。例えば、粒子は、約０．２μｍ〜約５０μｍのメジアン直径、または約０．５μｍ〜約３０μｍのメジアン直径を有することができる。例えば、薬学的組成物は、最大で約２μｍの、メジアン直径を超える平均直径の比を有する粒子の累計を有することができる。本薬学的発明は、結晶状態の、少なくとも２つの異なる多形状態の化合物を含む粒子を有することができる。
【００３５】
いくつかの実施形態において、薬学的組成物は、粒子の形態の式Ｉの化合物またはその多形を含み、１つの粒子または複数の粒子は、２０ミクロン未満、１０ミクロン未満、５ミクロン未満、２ミクロン未満、１ミクロン未満または０．５ミクロン未満である。
【００３６】
本発明は、式ＩＩの実質的に純粋な化合物を提供し、
【００３７】
【化４】
2020063308.tif 000007
式中、各Ｒ１は、独立に、Ｈ、Ｃｌ、またはＦであり、ｎは、０、１、２、３、または４である。いくつかの実施形態において、式ＩＩの化合物は、粒子の形態である。
【００３８】
いくつかの実施形態において、実質的に純粋な化合物は、化合物１である。いくつかの実施形態において、化合物１は、粒子の形態である。
【００３９】
いくつかの実施形態において、実質的に純粋な化合物は、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、リン酸モノ−［１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニル］エステル、リン酸１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニルエステルジメチルエステル、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、およびその塩または溶媒和物からなる群から選択される。
【００４０】
いくつかの実施形態において、実質的に純粋な化合物は、化合物１の多形である。例えば、いくつかの実施形態において、多形は、図１に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、図２に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、図３に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００４１】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．４、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２１．０、２２．２、２４．０、２６．０、および２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２２．２、および／または２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１１．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１７．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２２．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおけるピーク、少なくとも約１１．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．１°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１７．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２２．２°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．１°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００４２】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１１．４、１２．３、１５．０、２３．０、２３．３、２４．１、２４．６、２５．０、２６．１、２７．０、および２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１２．３、１５、２３．０、２３．３、２４．６、および／または２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約９．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１２．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２４．６°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．４°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約９．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１２．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．０°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２４．６°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．４°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００４３】
いくつかの実施形態において、化合物１の多形は、粒子の形態である。
【００４４】
いくつかの実施形態において、化合物、生成物およびまたは薬学的組成物は、少なくとも約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、または約９９％の純度を有する。いくつかの実施形態において、化合物、生成物およびまたは薬学的組成物は、少なくとも約９５．５％、約９６％、約９６．５％、約９７％、約９７．５％、約９８％、約９８．５％、約９９％、または約９９．５％の純度を有する。いくつかの実施形態において、化合物、生成物およびまたは薬学的組成物は、少なくとも約９９．１％、約９９．２％、約９９．３％、約９９．４％、約９９．５％、約９９．６％、約９９．７％、約９９．８％、または約９９．９％の純度を有する。
【００４５】
いくつかの実施形態において、化合物、生成物およびまたは薬学的組成物は、最大で約１０％、約５％、約１％、約０．１５％、または約０．５％の不純物を有する。いくつかの実施形態において、化合物、生成物およびまたは薬学的組成物は、各々の単一の不純物について、最大で約０．５％、約０．２％、約０．１５％、または約０．１％を含有する。さらなる実施形態において、不純物は、２−アセチル−２，３−ジヒドロナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２，６−ジアセチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２，７−ジアセチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、３−アセチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオール、および１−（４，９−ジヒドロキシ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−エタノンからなる群からの１つ以上である。
【００４６】
いくつかの実施形態において、不純物は、残留溶媒を含む。いくつかの実施形態において、溶媒は、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）、トルエン、エタノール、メタノール、クロロホルム、およびＣＨ２Ｃｌ２／ヘキサンからなる群から選択される。
【００４７】
いくつかの実施形態において、純度は、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）で決定する。いくつかの実施形態において、純度は、ＮＭＲ（核磁気共鳴）で決定する。さらなる実施形態において、純度は、ＨＰＬＣおよびＮＭＲの両方で決定する。
【００４８】
本発明はまた、粒子の形態の化合物１の多形（化合物は高度に精製した形態にある）、生成物および／または薬学的組成物を提供する。例えば、いくつかの実施形態において、多形は、図１に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、図２に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、図３に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００４９】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．４、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２１．０、２２．２、２４．０、２６．０、および２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２２．２、および／または２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１１．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１７．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２２．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおけるピーク、少なくとも約１１．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．１°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１７．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２２．２°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．１°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００５０】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１１．４、１２．３、１５．０、２３．０、２３．３、２４．１、２４．６、２５．０、２６．１、２７．０、および２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１２．３、１５、２３．０、２３．３、２４．６、および／または２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約９．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１２．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２４．６°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．４°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約９．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１２．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．０°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２４．６°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．４°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００５１】
化合物１の多形は、粒子の形態である。いくつかの実施形態において、化合物１の多形は、粒子の形態であり、粒子は、約１６０μｍ以下、約１５０μｍ以下、約１２０μｍ以下、約１００μｍ以下、約５０μｍ以下、約４０μｍ以下、または約２０μｍ以下の直径を有する。いくつかの実施形態において、粒子の形態の化合物１の多形は、粒子の集団中に存在し、粒子の集団は、約１６０μｍ以下、約１５０μｍ以下、約１２０μｍ以下、約１００μｍ以下、約５０μｍ以下、約４０μｍ以下、または約２０μｍ以下のＤ５０（すなわち、分布を２つの等しい部分に分ける粒径分布のメジアンポイント）を有する。いくつかの実施形態において、化合物１の多形は、粒子の形態であり、粒子は、約１０μｍ以下、約５μｍ以下、約４μｍ以下、約３μｍ以下、約２μｍ以下、約１μｍ以下、約０．５μｍ以下、約０．２μｍ以下、または約０．１μｍ以下の直径を有する。いくつかの実施形態において、粒子の形態の化合物１の多形は、粒子の集団中に存在し、粒子の集団は、約１０μｍ以下、約５μｍ以下、約４μｍ以下、約３μｍ以下、約２μｍ以下、約１μｍ以下、約０．５μｍ以下、または約０．２μｍ以下のＤ５０を有する。
【００５２】
本発明は、活性であり、すなわち、効力および／または抗腫瘍活性を有する、化合物１の多形の粒子または粒子の集団を提供する。活性のある１つの粒子または複数の粒子は特定の粒径を有し、例えば、約２００μｍ以下、約１５０μｍ以下、約１００μｍ以下、約４０μｍ以下、または約２０μｍ以下、約１０μｍ以下、約５μｍ以下、約４μｍ以下、約３μｍ以下、約２μｍ以下、約１μｍ以下、約０．５μｍ以下、または約０．２μｍ以下の直径またはＤ５０を有する。特定の粒径より大きな１つの粒子または複数の粒子は、不活性であるか、または本明細書に記載されている粒子より活性が低い。
【００５３】
化合物１の多形の粒子の累計の一部は、約２００μｍ以下の直径またはＤ５０を有することができる。いくつかの実施形態において、１セットの粒子の一部は、セット中の粒子の総数の少なくとも約１％、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、または少なくとも約３０％でよい。いくつかの実施形態において、上記一部は、実質的な一部である。例えば、１セットの粒子の「実質的な一部」は、セット中の粒子の総数の少なくとも約９９％、少なくとも約９５％、少なくとも約９０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８０％、少なくとも約７５％、少なくとも約７０％、少なくとも約６０％、または少なくとも約５０％でよい。
【００５４】
いくつかの実施形態において、化合物１の多形の粒子の集団は、約１６０μｍ以下、約１００μｍ以下、約４０μｍ以下、約２０μｍ以下、約１０μｍ以下、約５μｍ以下、約３μｍ以下、または約２μｍ以下、約１μｍ以下または約０．５μｍ以下の粒径を有する粒子の累計の少なくとも約９０％を有することができる。例えば、化合物１の多形の粒子の集団は、約１６０μｍ以下、約１００μｍ以下、約４０μｍ以下、約２０μｍ以下、約１０μｍ以下、約５μｍ以下、約３μｍ以下、約２μｍ以下、約１μｍ以下、または約０．５μｍ以下の粒径を有する粒子の累計の少なくとも約５０％を有することができる。例えば、化合物１の多形の粒子の集団は、約１６０μｍ以下、約１００μｍ以下、約４０μｍ以下、約２０μｍ以下、約５μｍ以下、約２μｍ以下、約１μｍ以下、約０．５μｍ以下、または約０．１μｍ以下の粒径を有する粒子の累計の少なくとも約１０％を有することができる。化合物１の多形の粒子の集団において、粒子は、例えば、約１６０μｍ以下、約４０μｍ以下、約２０μｍ以下、約１０μｍ以下、約５μｍ以下、約４μｍ以下、約３μｍ以下、約２μｍ以下、約１μｍ以下、約０．５μｍ以下または約０．２μｍ以下のメジアン直径を有することができる。例えば、粒子は、約０．００２μｍ〜約５０μｍのメジアン直径、または約０．２μｍ〜約３０μｍのメジアン直径を有することができる。例えば、化合物１の多形の粒子の集団は、最大で約２の、メジアン直径を超える平均直径の比を有する粒子の累計を有することができる。化合物１の多形の粒子の集団は、結晶状態の、少なくとも２つの異なる多形状態の化合物を含む粒子を有することができる。
【００５５】
いくつかの実施形態において、化合物１の多形は、粒子の形態であり、粒子は、約２０ミクロン以下、約１０ミクロン以下、約５ミクロン以下、または約２３ミクロン以下、約２ミクロン以下、約１ミクロン以下、約０．５ミクロン以下、約０．２ミクロン以下、または約０．１ミクロン以下の直径を有する。いくつかの実施形態において、粒子の形態の化合物１の多形は、粒子の集団中に存在し、粒子の集団は、約２０ミクロン以下、約１０ミクロン以下、約５ミクロン以下、約４ミクロン以下、約５ミクロン以下、約３ミクロン以下、約２ミクロン以下、約１ミクロン以下、約０．５ミクロン以下または約０．２ミクロン以下のＤ５０を有する。
【００５６】
本発明はまた、治療有効量の実質的に純粋なナフトフラン化合物および薬学的に許容されるキャリア、添加剤（ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ）、または賦形剤（ｄｉｌｕｅｎｔ）を含む薬学的組成物を提供する。添加剤には、例えば、脂肪酸のグリセロールエステル、飽和脂肪酸のグリセロールエステル、８〜１８個の炭素を有する飽和脂肪酸のグリセロールエステル、ラウリン酸グリセリル、ポリエチレングリコール、セルロース、微晶性セルロース、カルボキシメチルセルロース、ホスファチジルコリン、脂質、ステロール、コレステロール、界面活性剤、ポリソルベート、および／またはポリオキシエチレンソルビタンアルキレートを含むことができる。
【００５７】
本発明によるいくつかの実施形態において、製造のアイテムは、治療有効量の薬学的組成物および薬学的に許容される添加剤を含有する容器を含むことができる。
【００５８】
本発明のいくつかの実施形態による化合物、生成物および／または薬学的組成物を生成するための方法は、化合物を粉砕し、粒子を形成させることを含めてもよい。例えば、化合物は、ボールミル粉砕し、ロールミル粉砕し、ジェットミル粉砕し、湿式ミル粉砕し、超音波粉砕し、磨砕し、またはこれらおよび／もしくは他の粉砕手順の組合せで処理することができる。化合物の温度を低下させ、例えば、極低温に低下させ、粉砕することができる。このような温度の低下は、化合物をより脆性とし、粉砕による粒径の減少に対してより影響を受けやすくさせることができる。
【００５９】
本発明のいくつかの実施形態による化合物、生成物および／または薬学的組成物を生成するための方法は、結晶化を含むことができる。結晶化の間に得られる粒径分布（ＰＳＤ）は、核生成、成長、凝集、摩擦、破損などの結晶化の間に起こる様々な機序の組合せによって影響される。粒径が結晶化の間に一貫して制御されず、所望の規格に合致することができないとき、乾式粉砕などの追加の処理工程を含めることができる。
【００６０】
新生物に苦しめられているヒト、哺乳動物、または動物被験体を処置し、進行を遅延させ、再燃を予防し、症状を軽減し、または別の方法で改善する本発明による方法は、抗新生物作用が起こるように、治療有効量の化合物、生成物および／または薬学的組成物を投与する工程を含むことができる。例えば、抗新生物作用は、抗がん活性でよい。例えば、抗新生物作用は、新生物の容積増加を遅延させること、新生物の容積増加を停止させること、または新生物の容積を減少させることを含むことができる。新生物には、固形腫瘍、悪性腫瘍、転移細胞、がん幹細胞を含むことができる。新生物には、癌腫、肉腫、腺癌、リンパ腫、または血液系悪性腫瘍を含むことができる。新生物は、化学療法、放射線療法、および／またはホルモン療法による処置に対して難治性であり得る。化合物、生成物および／または薬学的組成物を投与して、新生物の再燃を予防することができる。化合物、生成物および／または薬学的組成物は、外科的切除に対するアジュバント療法として投与することができる。化合物、生成物および／または薬学的組成物は、例えば、経口および／または静脈内に投与することができる。
【００６１】
本発明による方法はまた、疾患または障害に苦しめられているヒト、哺乳動物、または動物被験体においてその疾患または障害を処置し、進行を遅延させ、再燃を予防し、症状を軽減し、または別の方法で改善する工程を含む。いくつかの実施形態において、疾患または障害は、自己免疫疾患、炎症性疾患、炎症性腸疾患、関節炎、自己免疫性脱髄障害、アルツハイマー病、発作、虚血再灌流傷害および多発性硬化症からなる群から選択される。
【００６２】
種々の検査結果または臨床結果のいずれかが達成された場合、疾患または障害を患っている患者への化合物、生成物および／または薬学的組成物の投与は成功したと考えられる。例えば、疾患または障害と関連する症状の１つ以上が軽減され、減少し、阻害され、またはさらなる状態、すなわちさらに悪い状態に進行しない場合、投与は成功したと考えられる。障害、例えば、自己免疫障害が、寛解に入り、またはさらなる状態、すなわちさらに悪い状態に進行しない場合、投与は成功したと考えられる。
【００６３】
いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている化合物、生成物および／または薬学的組成物は、例えば、化学療法剤および他の抗新生物剤、抗炎症化合物および／または免疫抑制化合物を含めた種々の公知の治療剤のいずれかと組み合わせて投与する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載されている化合物、生成物および／または薬学的組成物は、種々の公知の処置（非限定的例によると、外科的処置および外科的方法、放射線療法、化学療法および／またはホルモンもしくは他の内分泌関連の処置を含めた）のいずれかと併せて有用である。
【００６４】
これらの「併用療法（ｃｏ−ｔｈｅｒａｐｙ）」は、逐次的または同時に投与することができる。本明細書に記載されている化合物、生成物および／または薬学的組成物、ならびに第２の治療は、被験体、好ましくはヒト被験体に同じ薬学的組成物で投与することができる。代わりに、本明細書に記載されている化合物、生成物および／または薬学的組成物、ならびに第２の治療は、別々の薬学的組成物において、被験体に同時、別々または逐次的に投与することができる。本明細書に記載されている化合物、生成物および／または薬学的組成物、ならびに第２の治療は、同じまたは異なる投与経路によって被験体に投与し得る。いくつかの実施形態において、本発明の併用療法は、本明細書に記載されている有効量の化合物、生成物および／または薬学的組成物、ならびに本明細書に記載されている化合物、生成物および／または薬学的組成物と異なる作用機序を有する、有効量の少なくとも１種の他の治療（例えば、予防剤または治療剤）を含む。いくつかの実施形態において、本発明の併用療法は、一緒に機能して、相加効果または相乗効果を有することによって、本明細書に記載されている化合物、生成物および／または薬学的組成物の、ならびに第２の治療の、予防効果または治療効果を改善させる。特定の実施形態において、本発明の併用療法は、第２の治療（例えば、予防剤または治療剤）と関連する副作用を減少させる。
【００６５】
いくつかの実施形態において、疾患または障害は、以下のような化合物、生成物および／または薬学的組成物を投与することによって処置することができる。化合物の血液モル濃度は、少なくとも有効な期間と同じだけ長くおよび有害な期間より短い第１の連続した期間の間、少なくとも有効濃度でかつ有害な濃度未満でよい。血液モル濃度は、第１の連続した期間の後で、有効濃度未満でよい。例えば、有効濃度は、約０．１μＭ、約０．２μＭ、約０．５μＭ、約１μＭ、約２μＭ、約３μＭ、約４μＭ、約５μＭ、約６μＭ、約１０μＭ、または当業者によって有効であると決定された別の濃度でよい。例えば、有害な濃度は、約１μＭ、約３μＭ、約１０μＭ、約１５μＭ、約３０μＭ、約１００μＭ、または当業者によって有害であると決定された別の濃度でよい。例えば、有効な期間は、約１時間、２時間、約４時間、約６時間、約８時間、約１０時間、約１２時間、約２４時間、または当業者によって有効であると決定された別の期間でよい。例えば、有害な期間は、約１２時間、約２４時間、約４８時間、約７２時間、約１４４時間、または当業者によって有害であると決定された別の期間でよい。
【００６６】
いくつかの実施形態において、化合物、生成物および／または薬学的組成物の治療有効量は、腫瘍の細胞のＩＣ５０超および正常細胞のＩＣ５０未満の血中濃度を生じさせるように選ばれる。いくつかの実施形態において、治療有効量は、腫瘍の細胞を死滅させるのに十分に高く、および正常細胞のＩＣ５０未満の血中濃度を生じさせるように選ばれる。
【００６７】
いくつかの実施形態において、化合物、生成物および／または薬学的組成物を、剤形、例えば、錠剤、丸剤、カプセル剤（硬質もしくは軟質）、カプレット、散剤、顆粒剤、懸濁剤、液剤、ゲル剤、カシェ剤、トローチ剤、ロゼンジ剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤、水中油型乳剤、油中水型乳剤、および／または飲料で経口により投与する。
【００６８】
本発明によるいくつかの実施形態において、新生物性細胞の複製または拡散を減少または阻害するための組成物は、下記の方法によって選択された１セットの粒子を含む。式Ｉによる化合物、またはその塩もしくは溶媒和物を、提供することができる。
【００６９】
【化５】
2020063308.tif 000008
いくつかの実施形態において、化合物１、またはその塩もしくは溶媒和物を提供することができる。いくつかの実施形態において、化合物１の多形を提供することができる。例えば、いくつかの実施形態において、多形は、図１に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、図２に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、図３に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００７０】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．４、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２１．０、２２．２、２４．０、２６．０、および２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２２．２、および／または２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１１．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１７．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２２．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおけるピーク、少なくとも約１１．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．１°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１７．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２２．２°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．１°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００７１】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１１．４、１２．３、１５．０、２３．０、２３．３、２４．１、２４．６、２５．０、２６．１、２７．０、および２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１２．３、１５、２３．０、２３．３、２４．６、および／または２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約９．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１２．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２４．６°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．４°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約９．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１２．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．０°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２４．６°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．４°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【００７２】
化合物を含む少なくとも１つのセットの粒子を調製することができる。各々の少なくとも１つのセットの粒子の粒径分布を決定することができる。少なくとも１つのセットの粒子を、新生物性細胞に、および正常細胞に、所定の濃度で所定の期間投与することができる。新生物性細胞および正常細胞の代謝および／または分裂に対する粒子の効果を観察することができる。有効性レーティングを、新生物性細胞に対する粒子の効果に基づいて、各セットの粒子に割り当てることができる。毒性レーティングを、正常細胞に対する粒子の効果に基づいて、各セットの粒子に割り当てることができる。第１の粒径分布を有する少なくとも１つのセットの粒子の有効性レーティングおよび／または毒性レーティングを、第１の粒径分布と異なる粒径分布を有する少なくとも１つの他のセットの粒子の有効性レーティングおよび／または毒性レーティングと比較することができる。少なくとも１つの他のセットの粒子より大きな有効性レーティング、より小さな毒性レーティング、ならびに／またはより大きな重み付けした有効性レーティング（ｗｅｉｇｈｔｅｄ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｉｔｙ  ｒａｔｉｎｇ）および毒性レーティングの合計を有する１セットの粒子は、最適なセットとして選択することができる。例えば、最適なセットの粒子の粒径分布は、最適な粒径分布として同定することができる。例えば、最適なセットの粒子を、組成物中に含むことができる。例えば、有効性レーティングは、抗腫瘍活性に比例的でよい。例えば、有効性レーティングは、新生物性細胞の代謝および／または分裂の阻害に基づくことができる。例えば、毒性レーティングは、忍容性（ｔｏｌｅｒａｂｉｌｉｔｙ）に対して反比例でもよい。例えば、毒性レーティングは、正常細胞の代謝および／または分裂の阻害の基づくことができる。例えば、少なくとも１つのセットの粒子は、新生物性細胞および正常細胞にインビトロで投与することができる。例えば、有効性レーティングは、新生物性細胞のＩＣ５０でよい。例えば、毒性レーティングは、正常細胞のＩＣ５０でよい。例えば、少なくとも１つのセットの粒子は、試験動物の新生物性細胞および正常細胞にインビボで投与することができる。試験動物は、例えば、哺乳動物、霊長類、マウス、ラット、モルモット、ウサギ、またはイヌでよい。有効性レーティングは、新生物性細胞の容積の減少でよく、毒性レーティングは、試験動物の総量（ｍａｓｓ）の減少でよい。
【００７３】
いくつかの実施形態において、化合物を含む１つのセットの粒子を調製する工程は、化合物を溶解および分散させ、化合物をマイクロ流体技術によって溶解および分散させ、化合物を空洞形成または噴霧によって溶解および分散させ、化合物を粉砕し、化合物をボールミル粉砕し、化合物をロールミル粉砕し、化合物をジェットミル粉砕し、化合物を湿式粉砕し、化合物を超音波粉砕し、化合物を磨砕し、そして／あるいは化合物をふるい分けることによって、所定の粒径分布の粒子を単離する工程を含むことができる。粒子は、薬学的に許容される添加剤に懸濁させることができる。粒径分布の決定には、ふるい分析、光学顕微鏡計数法、電子顕微鏡計数法、電気抵抗計数法、沈降時間、レーザー回折、音響分光法、および組合せからなる群から選択される技術の使用を含むことができる。
【００７４】
新生物または他の細胞増殖障害を処置する方法は、新生物に苦しめられているヒト、哺乳動物、または動物に、最適な粒径および分布を有する組成物の最適なセットの粒子を含む治療有効量の上記組成物を投与する工程を含むことができる。
【００７５】
本発明はまた、式ＩＩの化合物を調製する方法を提供し
【００７６】
【化６】
2020063308.tif 000009
（式中、Ｒ１は、Ｈ、Ｃｌ、またはＦである）、このプロセスは、塩基の存在下の間に式ＩＩＩの化合物と、
【００７７】
【化７】
2020063308.tif 000010
第１の溶媒中のケトンとを反応させ、熟成した反応混合物から粗生成物を結晶化させ、粗生成物と第２の溶媒中の酸化剤とを反応させるプロセスを含む。
【００７８】
いくつかの実施形態において、反応を開放空気容器中で行う。
【００７９】
いくつかの実施形態において、ケトンは、式ＩＶの化合物である。
【００８０】
【化８】
2020063308.tif 000011
いくつかの実施形態において、第１の溶媒は、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、ジオキサン、およびトルエンからなる群から選択され、塩基は、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）、トリエチルアミン、およびジイソプロピルエチルアミンからなる群から選択される。いくつかの実施形態において、酸化剤は、二酸化マンガンである。いくつかの実施形態において、第２の溶媒は、トルエンである。いくつかの実施形態において、このプロセスは、酸化生成物をチャコールで処理するプロセスをさらに含む。
【００８１】
本発明は、式ＩＩの化合物を調製するプロセスを提供し
【００８２】
【化９】
2020063308.tif 000012
（式中、Ｒ１は、Ｈ、Ｃｌ、またはＦである）、このプロセスは、塩基の存在下の間に式ＩＩＩの化合物と、
【００８３】
【化１０】
2020063308.tif 000013
第１の溶媒中のケトンとを反応させ、熟成した反応混合物から粗生成物を結晶化させ、第２の溶媒中の粗生成物を溶解し、粗生成物をチャコールで処理するプロセスを含む。
【００８４】
本発明は、ナフトフラン化合物を調製するプロセスを提供する。このプロセスは、ナフトジヒドロフラン化合物またはナフトジヒドロフラン化合物を含む混合物を、第１の溶媒中の酸化剤と反応させる工程をさらに含む。いくつかの実施形態において、混合物は、ナフトフラン化合物をさらに含む。いくつかの実施形態において、ナフトフラン化合物は、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、リン酸モノ−［１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニル］エステル、リン酸１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニルエステルジメチルエステル、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、およびその塩または溶媒和物からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、酸化剤は、二酸化マンガンである。いくつかの実施形態において、第１の溶媒は、トルエンである。いくつかの実施形態において、このプロセスは、酸化生成物を活性炭のパッドを通して濾過する工程をさらに含む。いくつかの実施形態において、このプロセスは、第１の溶媒を蒸発させることによってナフトフラン化合物を結晶化させる工程をさらに含む。いくつかの実施形態において、このプロセスは、第２の溶媒によってナフトフラン化合物を再結晶する工程をさらに含む。いくつかの実施形態において、第２の溶媒は、酢酸エチルである。いくつかの実施形態において、このプロセスは、ナフトフラン化合物を第２の溶媒と共にスラリー化し、スラリーを加熱し、スラリーを冷却する工程をさらに含む。
【００８５】
本発明は、実質的に純粋なナフトフラン化合物を調製するプロセスを提供する。このプロセスは、第１の溶媒によってナフトフラン化合物を結晶化させ、第２の溶媒によってナフトフラン化合物を再結晶させる工程を含む。本発明は、実質的に純粋なナフトフラン化合物を調製する別のプロセスを提供する。このプロセスは、第１の溶媒によってナフトフラン化合物を結晶化させ、第２の溶媒によって結晶性ナフトフラン化合物をスラリー化し、スラリーを加熱し、スラリーを冷却する工程を含む。いくつかの実施形態において、ナフトフラン化合物は、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、リン酸モノ−［１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニル］エステル、リン酸１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニルエステルジメチルエステル、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、およびその塩または溶媒和物からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、第１の溶媒は、トルエンである。いくつかの実施形態において、第２の溶媒は、酢酸エチルである。
【００８６】
本発明は、上記のプロセスのいずれか１つによって調製したナフトフラン化合物を提供する。いくつかの実施形態において、ナフトフラン化合物は、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、リン酸モノ−［１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニル］エステル、リン酸１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニルエステルジメチルエステル、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、およびその塩または溶媒和物からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、ナフトフラン化合物は、少なくとも約８０％、約８５％または約９０％、約９５％、または約９９％の純度を有する。いくつかの実施形態において、ナフトフラン化合物は、最大で約１０％、約５％、約２％、または約１％、約０．５％、約０．２％、約０．１５％、または約０．１％の不純物を有する。
【００８７】
本発明は、化合物１の粒子（化合物１の多形の粒子、化合物１の純度が高い形態の粒子、および化合物１の多形の純度が高い形態の粒子を含めた）を調製するためのプロセスを提供する。いくつかの実施形態において、所望のメジアン粒径、例えば、約２０ミクロンを有する粒子は、化合物１の結晶（化合物１の精製した形態の結晶、化合物１の多形の結晶および／または化合物１の多形の精製した形態の結晶を含めた）を粉砕することによって生成する。例えば、結晶は、ジェットミル粉砕法を使用して粉砕し、ベンチュリ圧力は、約４０であり、粉砕圧力は、約１００であり、送り速度は、概ね１３０４ｇ／時間である。
【図面の簡単な説明】
【００８８】
【図１】図１は、結晶形１のＸＲＰＤデータを示す説明図である。
【図２】図２は、結晶形２のＸＲＰＤデータを示す説明図である。
【図３】図３は、結晶形３のＸＲＰＤデータを示す説明図である。
【図４】図４は、結晶形１および結晶形３のＸＲＰＤデータの比較を示す説明図である。
【図５Ａ】図５Ａおよび５Ｂは、結晶形２についての合成プロセスを示す一連の説明図である。
【図５Ｂ】図５Ａおよび５Ｂは、結晶形２についての合成プロセスを示す一連の説明図である。
【図６Ａ】図６Ａ〜６Ｄは、結晶形３についての合成プロセスを示す一連の説明図である。
【図６Ｂ】図６Ａ〜６Ｄは、結晶形３についての合成プロセスを示す一連の説明図である。
【図６Ｃ】図６Ａ〜６Ｄは、結晶形３についての合成プロセスを示す一連の説明図である。
【図６Ｄ】図６Ａ〜６Ｄは、結晶形３についての合成プロセスを示す一連の説明図である。
【図７】図７Ａおよび７Ｂは、結晶形１および３の形態を示す写真である。
【図８】図８は、結晶形１の限定された抗腫瘍活性を示すグラフである。
【図９】図９は、結晶形２の抗腫瘍活性を示すグラフである。
【図１０】図１０は、結晶形１および結晶形３の抗腫瘍活性の比較を示すグラフである。
【図１１】図１１は、結晶形２についてのがん患者における臨床薬物動態学的（ＰＫ）データを示すグラフである。
【図１２】図１２は、がん患者における結晶形３の臨床ＰＫデータを示すグラフである。
【図１３−１】図１３は、図５Ａ〜５Ｂに例示する合成プロセスを使用して生成した約９０％純粋な結晶形２について観察された毒性を示すグラフである。
【図１３−２】図１３は、図５Ａ〜５Ｂに例示する合成プロセスを使用して生成した約９０％純粋な結晶形２について観察された毒性を示すグラフである。
【図１４】図１４は、図５Ａ〜５Ｂに例示する合成プロセスを使用して生成した約９５％純粋な結晶形２の安全性を示すグラフである。
【図１５】図１５は、異なる粒径範囲を有する化合物１の抗腫瘍活性を示すグラフである。
【図１６】図１６は、異なる粒径範囲を有する化合物１のインビボでのＰＫデータを示すグラフである。
【図１７】図１７は、化合物１の溶解と粒径との間の関係を示すグラフである。
【図１８】図１８は、がん幹細胞特異的がん療法と従来のがん療法との間の差異を示す説明図である。
【図１９】図１９は、腎臓への結腸がん転移病変の完全な退縮を示す説明図である。
【図２０】図２０は、患者における１日２回（ＢＩＤ）投与の薬物動態を例示するグラフであり、患者は１日２回５００ｍｇを投与された（１０００ｍｇの総１日用量）。
【図２１】図２１は、患者における毎日１回投与の薬物動態を例示するグラフであり、患者は毎日１回２０ｍｇを投与された。
【図２２】図２２は、化合物１で処置した結腸直腸がん患者の無増悪生存期間の比較を例示するグラフである。化合物１で処置した結腸直腸がんを有する評価可能な患者の無増悪生存期間（ＰＦＳ）を、結腸直腸がんを有する患者における最良支持療法についての根拠のあるＰＦＳデータと比較した。
【図２３】図２３は、薬物動態学的曝露に対する無増悪生存期間（ＰＦＳ）の比較を例示するグラフである。化合物１を投与されている評価可能な患者のＰＦＳを、少なくとも４時間の１．６ｕＭ超または１．６ｕＭ未満での化合物１への曝露に対して比較した。
【図２４】図２４は、改善された安全性および効力についての望ましいＰＫパターンを例示するグラフである。
【図２５】図２５は、ＢＢＩ６０８処置の間に延長された安定疾患（＞１６週間）を達成した患者が、処置の前に患者の腫瘍組織中に高レベルのｐ−ＳＴＡＴ３を有することを例示する写真である。
【発明を実施するための形態】
【００８９】
発明の詳細な説明
本発明の実施形態を、下記で詳細に考察する。実施形態の記載において、明確とするために特定の用語法を用いる。しかし、本発明は、このように選択された特定の用語法に限定されることを意図しない。他の同等の構成成分を用いることができ、本発明の精神および範囲から逸脱することなく他の方法を開発できることを当業者であれば認識する。本明細書において引用した全ての参照は、各々が個々に組み込まれているように参照により組み込まれている。
【００９０】
この明細書において、１セットの粒子の「実質的な一部」は、セット中の粒子の総数の少なくとも約９９％、少なくとも約９５％、少なくとも約９０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８０％、少なくとも約７５％、少なくとも約７０％、少なくとも約６０％、または少なくとも約５０％でよい。
【００９１】
組成物の抗がん幹細胞活性は、インビトロまたはインビボで決定することができる。例えば、組成物の抗腫瘍活性は、化合物を投与し、がん幹細胞の自己複製および生存を測定することによって、インビトロで決定することができる。例えば、化合物の抗腫瘍活性は、化合物が投与された腫瘍細胞の挙動を、化合物が投与されていない腫瘍細胞の挙動（対照）と比較することによってインビトロで評価することができる。例えば、組成物の抗腫瘍活性は、化合物が投与された動物において、腫瘍の容積の変化を測定することによって、転移性モデルを適用することによって、および／または同所性モデルを適用することによってインビボで決定することができる。例えば、化合物の抗腫瘍活性は、化合物が投与された動物を、化合物が投与されていない動物（対照）と比較することによってインビボで評価することができる。
【００９２】
組成物の忍容性は、インビトロまたはインビボで決定することができる。例えば、組成物の忍容性は、化合物を投与し、正常細胞の分裂速度を測定することによって、正常細胞の栄養素取込みを測定することによって、栄養素取込み以外の正常細胞の代謝率の指標を測定することによって、正常細胞の増殖を測定することによって、および／または正常細胞の活力の別の指標を測定することによってインビトロで決定することができる。例えば、化合物の忍容性は、化合物が投与された正常細胞の挙動を、化合物が投与されていない正常細胞の挙動（対照）と比較することによってインビトロで評価することができる。例えば、組成物の忍容性は、化合物が投与された動物において、体重または食物摂取量を測定し、あるいは臨床観察（毛髪の保持もしくは脱毛、活動性、および／もしくは刺激に対する反応性など）を行なうことによってインビボで決定することができる。例えば、化合物の忍容性は、化合物が投与された動物を、化合物が投与されていない動物（対照）と比較することによってインビボで評価することができる。
【００９３】
化合物、生成物および／または薬学的組成物は、有効性レーティングおよび／または毒性レーティングを割り当てることができる。例えば、有効性レーティングは、抗腫瘍活性に比例的であり得、または抗腫瘍活性に関して単調増加関数であり得る。例えば、毒性レーティングは、忍容性に対して反比例であり得、または忍容性に関して単調減少関数であり得る。ナフトフラン化合物は、インビボで抗腫瘍活性を欠いていると報告されてきた。Ｍ．Ｍ．  ＲａｏおよびＤ．Ｇ．Ｉ．  Ｋｉｎｇｓｔｏｎ、Ｊ．  Ｎａｔｕｒａｌ  Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、４５巻（５号）（１９８２年）６００〜６０４頁を参照されたい。さらに、この化合物は、がん細胞および正常細胞に対して等しく毒性であることが報告されてきた。すなわち、この化合物は、がん細胞および正常細胞を等しく死滅させることが報告され、この化合物はがん処置のための潜在力を有さないと結論付けられた。Ｋ．  Ｈｉｒａｉ  Ｋ．ら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ、２３巻（６号）（１９９９年）５３９〜５５０頁；Ｔａｋａｎｏ  Ａ．ら、Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２９巻：４５５〜４６４頁、２００９年を参照されたい。
【００９４】
しかし、本明細書において報告する実験的研究は、この刊行物に記載されているように特定の薬物動態学的曝露を達成する適当な粒径分布を有する粒子として化合物を投与するとき、化合物は選択的抗腫瘍活性を有することを示す。  
【００９５】
本発明の目的のために、薬物の「バイオアベイラビリティー」は、投与した剤形から体循環に入る薬物の相対量、および薬物が血流中に出現する速度と定義される。バイオアベイラビリティーは、少なくとも３つの要因によって支配される：（ｉ）バイオアベイラビリティーを制御する吸収、続いて（ｉｉ）その組織再分布および（ｉｉｉ）排除（代謝分解ならびに腎臓および他の機序）。
【００９６】
「絶対的バイオアベイラビリティー」は、薬物の静脈内投与によって次には推定することができる組織再分布および生体内変化（すなわち、排泄）を考慮に入れることによって推定される。他に示さない限り、「ＨＰＬＣ」とは、高速液体クロマトグラフィーを指し、「薬学的に許容される」とは、哺乳動物に投与されたときにアレルギー反応または他の有害反応（ｕｎｔｏｗａｒｄ  ｒｅａｃｔｉｏｎ）（胃の不調、めまい感など）を典型的には生じさせない生理学的に許容できる材料を指し、「哺乳動物」とは、乳腺によって分泌された乳で子を養い、通常多かれ少なかれ毛で覆われた皮膚を有する、ヒトおよび全ての他の動物を含めた高等脊椎動物のクラスを指し、「処置する」とは、哺乳動物における疾患（複数可）の少なくとも１つの症状を緩和し、軽減し、または排除することを包含することを意図する。
【００９７】
「処置」という用語は、本明細書において使用する場合、望ましくない状態を予防的に防止または抑制し、状態の程度または症状を治療的に排除または減少させるための、本発明による化合物の投与を包含することを意図する。処置はまた、望ましくない状態の再燃を予防し、望ましくない状態の進行を遅延させ、望ましくない状態の発症を予防または遅延させることを含む。本発明による処置は、このような処置の必要性を生じさせる疾患または状態を有するヒトまたは他の哺乳動物に投与される。処置はまた、細胞または器官へのインビトロでの化合物の適用を含む。処置は、全身性または局所投与によってでよい。
【００９８】
有効量は、所望の薬理効果を達成するのに必要な、単回用量または複数回用量で投与される活性成分の量である。技術を有する医師は、技術を有する臨床医には周知の通例の実験法および用量設定によって、個々の患者のための、または個々の状態を処置するための有効用量を決定および最適化することができる。実際の用量およびスケジュールは、組成物が他の薬物と組み合わせて投与されるかどうかによって、または薬物動態、薬物体内動態（ｄｒｕｇ  ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ）、および代謝における個体間の差異によって変化し得る。同様に、量は、インビトロの適用によって変化し得る。過度の実験なしに、特定の状況の必要性によって用量を調節することは当技術分野の範囲内である。本明細書において開示する場合、用量範囲は、特定の適用において正当化し得るより高いまたは低い用量の構成成分の使用を妨げない。
【００９９】
本明細書において提供した薬学的組成物についての記載は、ヒトへの投与に適した薬学的組成物を含む。この開示に基づいて、このような組成物が任意の哺乳動物または他の動物への投与に一般に適していることを当業者であれば理解する。様々な動物への投与に適した組成物の調製はよく理解されており、通常の技術を有する獣医学の薬理学者は、ヒトへの投与のための薬学的組成物に基づいた通例の実験法によって、このような修正を設計および行うことができる。
【０１００】
化合物の構造および特性
式Ｉのナフトフラン化合物（２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンなど）は、水および試験した広範なパネルの溶媒（ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシド）、Ｎ−メチルピロリジン、ＤＭＡ（ジメチルアセトアミド）、エタノール、ＰＥＧ４００（ポリエチレングリコール４００）、プロピレングリコール、クレモフォールＥＬ（ポリエトキシ化ヒマシ油）、Ｌａｂｒａｓｏｌ（カプリロカプロイルマクロゴールグリセリド（ポリオキシルグリセリド））、Ｌａｂｒａｆｉｌ  Ｍ（植物油ＰＥＧ−６（ポリエチレングリコール）エステル）、およびＣａｐｒｙｏｌ（プロピレングリコールカプリレート）を含めた）中で実際に不溶性であった。ナフトフラン化合物は、一連の極性有機溶媒、例えば、特定のハロカーボン、例えば、クロロカーボン（塩化メチレンなど）、エステル、酢酸エチル、カルボン酸（酢酸など）、ケトン（アセトンなど）、およびアルコール（メタノールなど）中で可溶性であり得る。ナフトフラン化合物は、塩化メチレンおよび酢酸エチル中で可溶性であることが見出された。
【０１０１】
本明細書に記載されている実験的研究は、選択的抗がん活性のための特定の薬物動態学的曝露を達成するための小さな粒子の形態の薬学的組成物の活性化合物を投与することによって、選択的抗腫瘍活性が達成されたことを見出したが、それは、ナフトフラン化合物に焦点を置いた。化合物で行なった現在論じている観察を考慮すると、他のナフトフラン、例えば、ナフトフランは、小さな直径の粒子の形態で投与したときに、選択的抗がん活性を達成するための特定の薬物動態学的曝露を達成するように、それらの薬物動態プロファイルの有利な修正を同様に示し得る。１つ以上の異なる粒径分布として投与される他のナフトフランの薬物動態プロファイルを、実験的に決定することができる。
【０１０２】
実施例において試験した化合物について観察されたように、動物、哺乳動物、またはヒトに投与される形態の粒径の減少によってそれらの薬物動態プロファイルおよび効力の改善を示し得るいくつかの他の化合物は、式Ｉ、ならびにその塩および溶媒和物として示されるものを含む。
【０１０３】
【化１１】
2020063308.tif 000014
式Ｉにおいて、記号（Ｒ１）ｎは、（Ｒ１）置換基が、ベンゼン環に沿った各々の利用可能な位置において独立に置換されていることを示す。例えば、ｎが４と等しい場合、４個のＲ１置換基は全て同じでもよく、またはこれらは各々互いに異なり得る。例えば、各（Ｒ１）は、水素、ハロゲン、フッ素、シアノ、ニトロ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、アルキル、メチル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ＯＲａ、ＳＲａ、およびＮＨ２からなる群から独立に選択することができる。アルキルは、例えば、単結合によって連結している１〜８個の炭素原子を有する部分を含むことができ、アルケニルは、例えば、１つ以上の二重結合によって連結している２〜８個の炭素原子を有する部分を含むことができ、アルキニルは、例えば、１つ以上の三重結合によって連結している２〜８個の炭素原子を有する部分を含むことができる。置換基は、水素、ハロゲン、シアノ、ニトロ、アリール、ＯＲａ、ＳＲａ、およびＮＨ２などの部分を含むことができる。例えば、各（Ｒ１）は、水素、メチル、Ｆ（フッ素）、Ｃｌ（塩素）、Ｂｒ（臭素）、Ｉ（ヨウ素）、ＯＨ（ヒドロキシル）、およびＮＨ２（アミン）からなる群から独立に選択することができる。例えば、Ｒ３は、水素、ハロゲン、フッ素、シアノ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、アルキル、メチル、置換アルキル、ハロゲン置換アルキル、ヒドロキシル置換アルキル、アミン置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、複素環、置換複素環、アリール、置換アリール、ＯＲａ、ＳＲａ、およびＮＲｂＲｃからなる群から選択することができる。例えば、Ｒ３は、メチルおよびＣ（Ｒ８）３からなる群から選択することができる。各（Ｒ８）は、水素、メチル、Ｆ（フッ素）、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＯＨ、およびＮＨ２からなる群から独立に選択することができる。例えば、独立に選択される（Ｒ１）置換基および（Ｒ８）置換基の最大で２つは、Ｆ（フッ素）であるように選択することができ、残りは水素であるように選択される。
【０１０４】
いくつかの実施形態において、式Ｉの化合物は、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、およびその塩または溶媒和物からなる群から選択される。例えば、式Ｉの化合物は、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンであるように、各（Ｒ１）は、水素であるように選択することができ、そしてＲ３は、メチルであるように選択することができる。例えば、各Ｒａは、水素、アルキル、置換アルキル、アルケニル、置換アルケニル、アルキニル、置換アルキニル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、シクロアルケニル、置換シクロアルケニル、複素環、置換複素環、アリール、および置換アリールからなる群から独立に選択することができる。例えば、各ＲｂおよびＲｃは、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、複素環、置換複素環、アリール、および置換アリールからなる群から独立に選択することができる。代わりに、ＲｂおよびＲｃは、それらが結合しているＮと一緒になって、複素環または置換複素環を形成することができる。
【０１０５】
多形
本発明のナフトフラン化合物には、多形が含まれる。いくつかの実施形態において、多形は、式Ｉによる化合物の多形である。いくつかの実施形態において、多形は、化合物１の多形である。例えば、いくつかの実施形態において、多形は、図１に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。この多形は、本明細書において「結晶形１」、「晶形１（Ｆｏｒｍ  １）」または「ＸＲＰＤ１」と称され、これらの用語は互換的に使用される。いくつかの実施形態において、多形は、図２に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。この多形は、本明細書において「結晶形２」、「晶形２」または「ＸＲＰＤ２」と称され、これらの用語は互換的に使用される。いくつかの実施形態において、多形は、図３に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。この多形は、本明細書において「結晶形３」、「晶形３」または「ＸＲＰＤ３」と称され、これらの用語は互換的に使用される。
【０１０６】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．４、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２１．０、２２．２、２４．０、２６．０、および２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２、１１．９、１４．１、１４．５、１７．３、２２．２、および／または２８．１°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１１．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１４．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１７．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２２．２°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．１°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１０．２°の２θにおけるピーク、少なくとも約１１．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．１°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１７．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２２．２°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．１°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【０１０７】
例えば、いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１１．４、１２．３、１５．０、２３．０、２３．３、２４．１、２４．６、２５．０、２６．１、２７．０、および２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５、９．９、１２．３、１５、２３．０、２３．３、２４．６、および／または２８．４°の２θにおける１つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約９．９°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１２．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約１５°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２３．３°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２４．６°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約２８．４°の２θにおける１つのピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。いくつかの実施形態において、多形は、少なくとも約７．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約９．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１２．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．０°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２４．６°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．４°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形である。
【０１０８】
結晶形１は種々の溶媒および条件において検出されてきたが、それは低い抗腫瘍活性を有することが示されてきた（図８）。図８に示す研究において、確立された皮下ＦａＤｕヒト頭頸部がんを有する免疫抑制マウスは、示された量の結晶形１を有する手動で磨砕した化合物１、またはビヒクル対照を経口で（ｐｏ）投与された。化合物１は、ＧＥＬＵＣＩＲＥ（商標）中で処方された。全ての投与計画は毎日施行された（１日１回（ｑｄ））。処置の間に腫瘍のサイズを定期的に評価した。
【０１０９】
結晶形２は驚いたことに不純物の存在下で得られたが、この多形は強力な抗腫瘍活性を示すことが示されている（図９）。図９に示す研究において、確立された皮下ＦａＤｕヒト頭頸部がんを有する免疫抑制マウスは、図５Ａおよび５Ｂに記載した合成プロセスによって生成された１００ｍｇ／ｋｇの微粒子化した化合物１（第１の収穫物）、またはビヒクル対照を経口（ｐｏ）投与された。化合物１は、ＧＥＬＵＣＩＲＥ（商標）中で処方された。全ての投与計画は毎日施行された（ｑｄ）。処置の間に腫瘍のサイズを定期的に評価した。晶形２は、現在の医薬品の製造管理および品質管理の基準（ｃｕｒｒｅｎｔ  ｇｏｏｄ  ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ  ｐｒａｃｔｉｃｅ）（ｃＧＭＰ）のプロセスによって首尾よく製造され、ＦＤＡおよびカナダ保健省から臨床試験において使用することの承認を受けた。晶形２は、がん患者において望ましい薬物動態（図１１）、安全性、および抗腫瘍活性の強い徴候を示した。
【０１１０】
結晶形３は、晶形１と同様な、しかし異なるＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンを共有することを示し、それは晶形１とは非常に異なる結晶晶癖を呈した（図７ＡおよびＢ）。晶形３は、本明細書に記載されている特に設計されたスラリープロセスを使用して、晶形１からのみ生じさせることができる。晶形３は、強力な抗腫瘍活性を示すことが示されている（図１０）。図１０に示す研究において、確立された皮下ＦａＤｕヒト頭頸部がんを有する免疫抑制マウスは、手動で磨砕した結晶形１もしくは晶形３を有する２００ｍｇ／ｋｇの化合物１、またはビヒクル対照を経口で（ｐｏ）投与された。化合物１は、ｇｅｌｕｃｉｒｅにおいて処方された。全ての投与計画は毎日施行された（ｑｄ）。処置の間に腫瘍のサイズを定期的に評価した。この多形は、ｃＧＭＰプロセスによって首尾よく製造され、ＦＤＡおよびカナダ保健省から臨床試験において使用することの承認を得た。晶形３はまた、がん患者において望ましい薬物動態（図１２）、安全性、および抗腫瘍活性の強い徴候を示した。
【０１１１】
結晶形２を調製するための合成プロセスを図５Ａ〜５Ｂに示す。手短に言えば、導入した３−ブテン−２−オン（４５１．２グラム）を、機械式撹拌機、温度計、および添加漏斗を備えた２リットルの三つ口丸底フラスコに滴下する。添加漏斗に、臭素（９３６．０グラム）を加える。フラスコ中の内容物を−５℃に冷却した後、激しく撹拌し、３０分間に亘り温度を−５℃に維持しながら、臭素をフラスコ中に滴下する。混合物を−５℃にてさらに１５分間撹拌し、次いで４つの等しい部分に分割する。混合物の各々の部分をテトラヒドロフラン（２１３３．６グラム）と共に、機械式撹拌機、温度計、および添加漏斗を備えた２２リットルの四つ口丸底フラスコに加える。導入したＤＢＵ（１，３−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン、２２２．９グラム）を、添加漏斗に加える。激しく撹拌し、３０分間に亘り温度を０℃〜５℃に維持しながら、ＤＢＵをフラスコ中に滴下する。混合物を０℃〜５℃でさらに１５分間撹拌する。次いで、２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン（２３１グラム）を、フラスコに加える。さらなるＤＢＵ（２４６．０グラム）を添加漏斗中に導入し、次いで反応混合物の温度が４０℃を超えないような速度でフラスコ中の混合物に滴下する。ＤＢＵの添加が完了した後、このように得られた混合物を室温で一晩撹拌し、反応混合物の試料を、ＨＰＬＣ分析のために採取する。反応混合物に、水（１０．８リットル）を導入し、このように得られた混合物を０℃〜３℃に少なくとも３０分間冷却し、次いで真空濾過機（ｖａｃｕｕｍ  ｆｉｌｔｅｒ）によって濾過する。濾過した固体を、５％水性重炭酸ナトリウム（３リットル）、水（３リットル）、１％水性酢酸（３リットル）およびエタノール（２回）（２×１リットル）で連続的にすすぐ。すすいだ固体を保存し、他のバッチからのものと一緒にプールする。合わせた粗生成物（２８．７３ｋｇ）を、酢酸エチル（８１１．７ｋｇ）と共に、機械式撹拌機、温度計、およびコンデンサーを備えた５００ガロンの槽（ｖｅｓｓｅｌ）に加える。窒素雰囲気下にて、混合物を２時間加熱還流させ（７２℃）、次いで活性炭層を含有する１０ミクロンのカートリッジフィルターで濾過し、不溶物を除去する。新鮮な熱い酢酸エチル（１０ｋｇ）を使用して、槽、トランスファーラインおよびフィルターをすすぐ。合わせた濾液を０〜５℃に冷却し、この温度で２時間保持し、次いで２０インチのブフナーフィルターで濾過する。濾過した固体生成物を０〜５℃の酢酸エチル（５．７ｋｇ）ですすぎ、４０℃にて真空下で一定の重量になるまで乾燥させる。残留する濾液を蒸発によって容積で６３％減少させ、結晶化プロセスを再び繰り返し、生成物の第２の収穫物を生じさせ、これをまた生成物の第１の収穫物の場合と同じ条件下で乾燥させた。得られた両方の収穫物は、結晶形２である。生成された第１の収穫物（０．５ｋｇ）は、ＨＰＬＣによって９９．５％純度を有した（ＮＭＲによって約９５％）。生成された第２の収穫物（１．０９ｋｇ）は、ＨＰＬＣによって９８．９％純度を有した（ＮＭＲによって約９０％）。
【０１１２】
結晶形３を調製するための合成プロセスを、図６Ａ〜６Ｄに示す。その工程を本明細書において手短に概説する。工程１：３−ブテン−２−オン（メチルビニルケトン、ＭＶＫ）を、臭素を使用して臭素化する。さらなる溶媒は使用しない。中間体３，４−ジブロモブタン−２−オンをテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）に溶解し、１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン（ＤＢＵ）と反応させ、第２の中間体である３−ブロモ−３−ブテン−２−オンを形成させる。この反応が完了すると、２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン（ＨＮＱ）を加える。第２の部分のＤＢＵを加え、混合物を空気に曝露させる。反応物を水によってクエンチし、固体を濾過によって集める。これらの固体を、水性重炭酸ナトリウム、水性酢酸、水、およびエタノールで洗浄する。生成物をエタノールにスラリー化し、固体を集めることによって単離する。工程２：所望の２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン（化合物１）を伴う残留量の２−アセチル−２，３−ジヒドロナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンを、トルエン中の活性化二酸化マンガンで酸化して化合物１にする。混合物を、チャコールおよびセライトのケークを通して濾過する。濾液を濃縮し、生成物を沈殿させ、これを濾過し、乾燥させる。工程３：固体を酢酸エチル中で７５℃〜８０℃にて約５時間スラリー化させ（２５ｍＬ／ｇの精製した化合物１）、濾過によって集め、乾燥させる。この方法によって生成した化合物１は、結晶形３である。スラリープロセスを伴わずにこの方法によって生成した化合物１は、結晶形１を生じた。
【０１１３】
薬物血漿濃度および選択的抗腫瘍活性に及ぼす化合物の粒径分布の効果
本発明の前に、化合物１の微粒子は、作出および／または評価もされてこなかった。従前の研究は、化合物１が正常細胞およびがん細胞に対して等しく毒性であることを示し、抗腫瘍活性は動物モデルにおいて観察されなかった。本明細書において示した研究は、化合物１の粒径の減少がバイオアベイラビリティーを改善しただけでなく、毒性の徴候なしに選択的抗腫瘍活性の増加をもたらしたことを実証する。バイオアベイラビリティーに対する改善は、同等に化合物１へのがん細胞および正常細胞の曝露を増加させるため、これは予想外である。正常細胞への毒性の増強を伴わない抗がん活性の選択的増強についての機序は公知でなかった。これらの研究において、化合物１のバイオアベイラビリティーの改善は、Ｄ５０（すなわち、粒径分布を２つの等しい部分に分ける粒径分布のメジアンポイント）が約２０μｍであるとき、最大化したようであった。しかし、Ｄ５０値が約２μｍであるさらなる研究を行なった。２ミクロンのＤ５０を有する化合物１の微粒子は、２０ミクロンのＤ５０を有する粒子と比較して薬物動態学的曝露において改善はないにも関わらず、驚いたことに増強された抗腫瘍活性を有した。さらなる研究において、約１００ナノメートルのＤ５０（Ｄ５０＝１１０．４ナノメートル）を有する化合物１のナノ粒子を生み出したが、驚いたことに、化合物１のこの粒径で抗腫瘍活性の低下が観察された。したがって、好ましい実施形態において、化合物１の粒子、例えば、微粒子を含有する組成物は、２０ミクロン以下および０．２ミクロン以上のＤ５０を有し、驚いたことに正常細胞への細胞毒性の増加を伴わずに強力な抗腫瘍活性を有する。
【０１１４】
異なる粒径範囲を有する化合物１の粒子の抗腫瘍活性を図１５において例示し、異なる粒径範囲を有する化合物１の粒子の薬物動態学的データを図１６〜１８に例示する。図１５に示す研究において、確立された皮下ＦａＤｕヒト頭頸部がんを有する免疫抑制マウスは、示された粒径を有する示された量の化合物１、またはビヒクル対照を経口で（ｐｏ）与えられた。全ての投与計画は、毎日（ｑｄ）施行された。腫瘍のサイズを定期的に評価した。
【０１１５】
定められた粒径、例えば、縮小された粒径を有する粒子の形態のナフトフラン化合物の投与は、薬物血漿濃度をインビボで増強することが見出された。本明細書において、特に断りのない限り、「径」および「直径」という用語は、粒子を記載するのに互換的に使用される。「直径」という用語の使用は、粒子が完全または概ね球形を有することを必ずしも意味しないことを理解すべきである。例えば、「直径」、例えば、非球状粒子と同等の容積の球の直径は、粒径の近似として使用することができる。
【０１１６】
驚くべき結果において、定められた粒径分布のナフトフラン化合物の粒子の投与（例えば、薬学的組成物中の小さな粒子として）は、選択的抗腫瘍活性をもたらすことが見出された。例えば、２０μｍ（すなわち、ミクロン、これらの用語は本明細書において互換的に使用される）のメジアン粒径を有する粒子として投与される化合物は、マウス異種移植モデルにおいて、相対的に弱いが効力（選択的抗腫瘍活性）を示した。比較して、１５０μｍ（ミクロン）の粒子は、効力を示さなかった。より小さな粒子の形態のナフトフラン化合物の投与が選択的抗腫瘍活性をもたらし得るという発見は驚くべきものであり、溶解性またはバイオアベイラビリティー単独における改善に基づいて説明することができない。すなわち、一般に、改善された溶解性は、薬物経口バイオアベイラビリティーの増加と関連し、これは正常細胞に対する毒性ならびに抗腫瘍活性を増強し得る。上記で論じるように、ナフトフラン化合物は、ＷＯ２００９／０３６０９９およびＷＯ２００９／０３６１０１に記載されているように曝露が定められた条件下で行なわれない場合、腫瘍細胞および正常細胞に対して等しく毒性であり得る。
【０１１７】
さらなる驚くべき結果において、薬学的組成物中のさらに縮小された径のナフトフラン化合物の粒子の投与は、有意に改善された抗腫瘍活性（しかし、殆ど変化しない薬物動態プロファイル、すなわち、変化しないバイオアベイラビリティー）をもたらすことが見出された。例えば、２μｍ（ミクロン）のメジアン粒径を有する粒子として投与した化合物は、マウス異種移植モデルにおいて劇的に増強された効力を示した。２０μｍの粒子と比較して、２μｍの粒子は、有意に改善された効力（しかし、非常に類似の薬物動態プロファイル）を示した。すなわち、このような改善された効力は、薬物動態プロファイル、すなわち、バイオアベイラビリティーと無関係である。乏しい溶解性を有するこのような化合物について、改善された効力は通常、薬物の経口バイオアベイラビリティーの増加と関連するため、結果は非常に驚くべきことである。
【０１１８】
したがって、観察された選択的抗腫瘍活性の改善は驚くべきことであり、予想外である。本発明は、ナフトフラン化合物、例えば、活性であり、すなわち、効力または選択的抗腫瘍活性を有する式Ｉの化合物の粒子（単数または複数）を提供する。活性のある粒子（単数または複数）は定められた粒径を有し、例えば、約２００μｍ以下、約１５０μｍ以下、約１００μｍ以下、約４０μｍ以下、または約２０μｍ以下、約１０μｍ以下、約５μｍ以下、約４μｍ以下、約３μｍ以下、約２μｍ以下、約１μｍ以下、約０．５μｍ以下、約０．２μｍ以下、または約０．１μｍ以下の直径を有する。定められた粒径より大きい粒子（単数または複数）は、不活性であるか、または本明細書に記載されている粒子より活性が低い。
【０１１９】
したがって、より小さな粒子の形態の式Ｉによるナフトフラン化合物または別の化合物の投与は、その選択的抗腫瘍活性の改善をもたらすことができる。定められた粒径分布を有する式Ｉによる化合物の粒子の投与中の使用は、所望の選択的抗腫瘍活性の確立を可能とすることができる。例えば、定められた粒径分布を有する、例えば、より小さな粒子であるナフトフラン化合物の粒子の使用は、より短い期間でより高い血中濃度、および相対的に弱いが選択的抗腫瘍活性をもたらすことができる。さらに縮小された粒径の化合物は、化合物の血漿濃度が変化することなく、有意に改善された効力をもたらすことができる。
【０１２０】
本明細書において、他に示さない限り、「血漿濃度」、「血液モル濃度」、および「血中濃度」という用語は、互換的に使用される。「新生物」という用語は、増殖の異常なパターンを示す細胞を記載するために使用することができる。このような新生物は、腫瘍（良性および悪性の両方）、例えば、固形腫瘍、ならびに定まった形状を有さず、ヒトまたは動物の体の特定の領域に限定されない他の細胞増殖障害（白血病など）を含むことができる。したがって、「新生物」は、がんおよびがんではない両方の新生物性細胞および組織を含む。本明細書において、特に明記し、明らかにし、または特定の研究もしくは実験に言及しない限り、「腫瘍」および「がん」という用語は、ヒトまたは動物の体の特定の領域に限定されないものを含めたより広範なクラスの全ての新生物を意味すると理解される。しかし、より限定された用語である「固形腫瘍」は、定まった形状を有さず、ヒトまたは動物の体の特定の領域に限定されない細胞増殖障害（白血病など）を含めないと理解される。
【０１２１】
新生物は、下記の特徴のどれも示さなくてもよく、下記の特徴の１つ、以上を示すこともできる：固体形態（固形腫瘍）、悪性腫瘍、転移、またはＳｔａｔ３経路活性。新生物には、例えば、がん幹細胞が含まれてもよい。新生物は、例えば、癌腫、肉腫、腺癌、リンパ腫、または血液系悪性腫瘍であってよい。
【０１２２】
吸収は、薬物が投与の部位から体内の測定の部位に運ばれるプロセスとして定義されてきた。Ｍ．  Ｒｏｗｌａｎｄ、Ｔ．Ｎ．  Ｔｏｚｅｒ（１９９５年）Ｃｌｉｎｉｃａｌ  ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ：Ｃｏｎｃｅｐｔｓ  ａｎｄ  ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．、Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ  Ｗｉｌｌｉａｍｓ  ＆  Ｗｉｌｋｉｎｓを参照されたい。経口薬物吸収は、腸細胞の頂端膜が膜の透過についての律速段階であると考えられるため、腸細胞の頂端膜を通る薬物移動と称されることが多い。Ｕ．  ＦａｇｅｒｈｏｌｍおよびＨ．  Ｌｅｎｎｅｒｎａｅｓ（１９９５年）Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ｅｓｔｉｍａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｈｅ  ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ  ｕｎｓｔｉｒｒｅｄ  ｗａｔｅｒ  ｌａｙｅｒ  ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  ｈｕｍａｎ  ｊｅｊｕｎｕｍ，  ａｎｄ
ｉｔｓ  ｉｍｐｏｒｔａｎｃｅ  ｉｎ  ｏｒａｌ  ｄｒｕｇ  ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ、Ｅｕｒ  Ｊ  Ｐｈａｒｍ  Ｓｃｉ、３巻：２４７〜２５３頁；Ｍ．Ｂ．  Ｌａｎｄｅ、Ｊ．Ｍ．  ＤｏｎｏｖａｎおよびＭ．Ｌ．  Ｚｅｉｄｅｌ（１９９５年）Ｔｈｅ  ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ  ｂｅｔｗｅｅｎ  ｍｅｍｂｒａｎｅ  ｆｌｕｉｄｉｔｙ  ａｎｄ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｉｅｓ  ｔｏ  ｗａｔｅｒ，  ｓｏｌｕｔｅｓ，  ａｍｍｏｎｉａ，  ａｎｄ  ｐｒｏｔｏｎｓ、Ｊ  Ｇｅｎ  Ｐｈｙｓｉｏｌ、１０６巻：６７〜８４頁を参照されたい。透過性は、いかに容易に薬物が膜を通して移動するかを記載する一般用語である。薬物の特定の透過性特性は、親油性、電荷、径、および極性表面積を含めたその物理化学的性質に依存する。ＲｏｗｌａｎｄおよびＴｏｚｅｒ、１９９５年；Ｃ．Ａ．  Ｌｉｐｉｎｓｋｉ、Ｆ．  Ｌｏｍｂａｒｄｏ、Ｂ．Ｗ．  ＤｏｍｉｎｙおよびＰ．Ｊ．  Ｆｅｅｎｅｙ（２００１年）Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ  ａｎｄ  ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ  ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ  ｔｏ  ｅｓｔｉｍａｔｅ  ｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙ  ａｎｄ  ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ  ｉｎ  ｄｒｕｇ  ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ  ａｎｄ  ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ  ｓｅｔｔｉｎｇｓ、Ａｄｖ  Ｄｒｕｇ  Ｄｅｌｉｖ  Ｒｅｖ、４６巻：３〜２６頁を参照されたい。吸収速度は、薬物の透過性、膜の表面積、および膜を越えた濃度勾配に依存する。濃度勾配は、薬物の膜輸送についての最も一般の機序である受動拡散のための推進力である。経口投与について、薬物は、腸によって主に吸収される。ヒトの腸は、長さが約５〜８メートルであり、殆ど２００平方メートルの総表面積を有し、一方マウスの腸は、僅か約１０〜２０ｃｍの長さである。したがって、より大きな粒径を有する薬物の透過性がより小さな粒径を有する薬物の透過性より低いにも関わらず、より大きな粒径を有する薬物は、より小さな粒径を有する薬物がマウスにおいてそうであるように、ヒトにおいてより大きなまたは同じ吸収速度を有し得ることを予測することができる。
【０１２３】
例えば、約２００μｍ、１５０μｍ、１００μｍ、８０μｍ、６０μｍ、４０μｍ、２０μｍ、１０μｍ、５μｍ、４μｍ、３μｍ、２μｍ、１μｍ、０．５μｍまたは０．２μｍ以下のメジアン直径を有する式Ｉによる化合物の粒径分布は、例えば、がんまたは腫瘍の処置のために薬学的処方物中で投与されたときに、選択的抗腫瘍活性をもたらすことを予測することができる。例えば、粒径分布は、粒子が、約０．０２μｍ〜約５μｍ、または約０．２μｍ〜約４μｍのメジアン直径を有するようなものでよい。例えば、粒径分布は、粒子が、約５μｍ以下のメジアン直径、最大で約２の平均直径とメジアン直径の比、および少なくとも約０．２５のモード直径とメジアン直径の比を有するようなものでよい。
【０１２４】
「粒子」という用語は、式Ｉの化合物の凝集物を意味することができる。「平均」という用語は、全ての粒子の径の合計を粒子の総数で割ったものを意味することができる。「メジアン」という用語は、例えば、粒子の２分の１がより大きな直径を有し、粒子の２分の１がより小さな直径を有する直径を意味することができる。「モード」という用語は、最も頻繁にあらわれる粒径値を示すことができる。「累計」という用語は、全ての粒子を意味することができる。
【０１２５】
ナフトフラン化合物の粒子の投与によって達成される選択的抗腫瘍活性は、粒径分布、例えば、粒子の容積、またはこれらの容積を代表する直径だけでなく、粒子の形状および粒子の形状の分布に依存し得る。例えば、針様の形状を有する１セットの粒子は、球状の形状を有する１セットの粒子とは異なる薬物動態プロファイルをもたらし得る。したがって、投与する粒子の形状および粒子の形状分布を測定し、かつ／または所定の形状および形状分布、例えば、ほぼ均一な形状を有する粒子（例えば、粒子は、球に近似している）を生成するプロセスを使用することが望ましい場合がある。例えば、粒子の球形度Ψは、
【０１２６】
【数１】
2020063308.tif 000015
として定義することができ、式中、Ｖｐは、粒子の容積であり、Ａｐは、粒子の表面積である。球はΨ＝１の球形度を有し、粒子の球形度が単一性に近いほど、粒子の形状は球により密接に近似する。比較として、四面体は、約０．６７１の球形度を有し、立方体は、約０．８０６の球形度を有し、八面体は、約０．８４６の球形度を有し、十二面体は、約０．９１０の球形度を有し、二十面体は、約０．９３９の球形度を有する。球の形態は所与の容積についての表面積を最小化するため、ほぼ球状である粒子は、よりほぼ球状でない同じ容積の粒子より遅く溶解することが予想し得る。１セットの球の平均球形度は、
【０１２７】
【数２】
2020063308.tif 000016
と定義することができ、式中、ΣＶｐは、全ての粒子の総容積であり、ΣＡｐは、全ての粒子の総表面積である。例えば、投与される式Ｉによる化合物の粒子は、少なくとも約０．８の平均球形度、または少なくとも約０．９の平均球形度を有し得る。
【０１２８】
粒径、粒径分布、形状、形状分布、および要因（粒子の表面粗さまたは不規則性など）は、薬学的処方物で投与される１セットの化合物１の粒子の平均比表面積に影響することができる。平均比表面積は、ΣＡｐ／Σｍｐ（式中、ΣＡｐは、粒子の総表面積であり、Σｍｐは、粒子の総質量である）として定義することができる。粒子の平均比表面積が大きくなるほど、予想される粒子の溶解が速くなる。
【０１２９】
薬学的処方物中の式Ｉによる化合物の粒子は、異なる粒子に亘ってまたは同じ粒子内で、結晶状態のナフトフラン化合物を含むことができる。結晶状態は、異なる粒子に亘ってまたは同じ粒子内で、１種以上の多形を含み得る。当業者が認識するように、粒子の溶解速度は、第１の多形、または第２の多形の化合物の粒子中の物質の状態、例えば、結晶性であるかによって影響を受け得ると予想される。
【０１３０】
一連の技術の１つ以上を適用して、薬学的処方物中の式Ｉによる化合物の粒径および／または粒径分布を決定することができる。例えば、ふるい分析、光学顕微鏡計数法、電子顕微鏡計数法、電気抵抗計数法、沈降時間、レーザー回折、および／または音響分光法を、適用することができる。これらの技術またはそのバリエーションのいくつかまたは全てを適用して、薬学的処方物中のナフトフラン化合物の粒子の形状、形状分布、および／または比表面積を決定することができる。ＢＥＴ等温線および／または通気性比表面積技術を適用して、薬学的処方物中の式Ｉによる化合物の粒子の比表面積を決定することができる。
【０１３１】
ナフトフラン化合物を生成するためのプロセス
ＷＯ２００９／０３６０９９およびＷＯ２００９／０３６１０１は、以下のような式ＩＩのナフトフラン化合物の調製のためのプロセスを開示している。  
【０１３２】
【化１２】
2020063308.tif 000017
ＤＢＵ：１，８−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＲＴ：室温
このプロセスにおいて、開放空気容器中で３−ブロモ−３−ブテン−２−オン（４−３）を、２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン（４−４）と反応させ、２，３−ジヒドロナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン（４−５）が得られる。２，３−ジヒドロナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン（４−５）を、開放空気からの酸素で酸化させ、ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン（４−６）とする。このプロセスによって生成されたナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンに関して。しかし、上記化合物のさらなる開発の間に、このプロセスはまだ、これらの化合物の潜在的な臨床適用を妨げるかなりの様々な不純物を生じさせたことが決定された。いくつかの実施形態において、不純物の１つは、２，３−ジヒドロナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン（４−５）である。
【０１３３】
一態様において、本発明は、ナフトフランの調製のための改善されたプロセスを提供する。改善されたプロセスは、不純物を最小化し、それによって実質的に純粋なナフトフランを生成する。本明細書において使用する場合、「実質的に純粋な」という用語は、ＨＰＬＣによる面積％として測定して、少なくとも約８０％以上の本発明の化合物を含む調製物を意味する。いくつかの実施形態において、ナフトフランは、ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンおよびその関連する化合物（４−６）である。
【０１３４】
いくつかの実施形態において、本発明のプロセスは、３−ブロモ−３−ブテン−２−オン（４−３）および２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン（４−４）のカップリングの粗生成物を第１の溶媒中の酸化剤で酸化する工程を含む。さらなる実施形態において、酸化剤は、二酸化マンガン（ＭｎＯ２）である。またさらなる実施形態において、粗生成物を、それが酸化する前に単離する。いくつかの実施形態において、第１の溶媒は、トルエンまたはクロロホルムである。
【０１３５】
いくつかの実施形態において、本発明のプロセスは、熟成した（ａｇｅｄ）酸化混合物をチャコールで処理し、特定の不純物を除くプロセスをさらに含む。さらなる実施形態において、熟成した酸化混合物を、活性炭のパッドで濾過する。またさらなる実施形態において、混合物を概ね１００℃で濾過する。
【０１３６】
いくつかの実施形態において、本発明のプロセスは、濾液から生成物を結晶化する工程をさらに含む。さらなる実施形態において、生成物を、濾液を蒸発させることによって濃縮し、冷却することによって結晶化させる。
【０１３７】
いくつかの実施形態において、本発明のプロセスは、第２の溶媒で生成物を再結晶化する工程をさらに含む。さらなる実施形態において、第２の溶媒は、酢酸エチルである。
【０１３８】
代替の実施形態において、本発明のプロセスは、第１の溶媒から結晶化した生成物を第２の溶媒でスラリー化し、スラリーを加熱し、スラリーを冷却する工程をさらに含む。さらなる実施形態において、第２の溶媒は、酢酸エチルである。いくつかの実施形態において、生成物をスラリー化し、加熱することのみで、部分的に溶解させる。さらなる実施形態において、生成物をスラリー化するのに使用する第２の溶媒の容積は、加熱した条件における生成物の完全な溶解のための容積の約１／１０、１／５、１／４、１／３、１／２、または２／３である。
【０１３９】
本発明はまた、本発明のプロセスによって調製したナフトフラン化合物を提供する。いくつかの実施形態において、ナフトフラン化合物は、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、リン酸モノ−［１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニル］エステル、リン酸１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニルエステルジメチルエステル、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、およびその塩または溶媒和物からなる群から選択される。さらなる実施形態において、ナフトフラン化合物は、トルエンの存在下で２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン（４−４）および３−ブロモ−３−ブテン−２−オン（４−３）のカップリングの単離した粗生成物を、二酸化マンガンと反応させる工程を含むプロセスによって調製される。またさらなる実施形態において、このプロセスは、熟成した反応混合物を活性炭のパッドで濾過する工程をさらに含む。
【０１４０】
別の態様において、本発明は、実質的に純粋なナフトフラン化合物を提供する。
【０１４１】
いくつかの実施形態において、本発明は、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、リン酸モノ−［１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニル］エステル、リン酸１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニルエステルジメチルエステル、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、およびその塩または溶媒和物からなる群から選択される実質的に純粋な化合物を提供する。
【０１４２】
いくつかの実施形態において、本発明は、実質的に純粋な式ＩＩの化合物を提供し、
【０１４３】
【化１３】
2020063308.tif 000018
式中、各Ｒ１は、独立に、Ｈ、Ｃｌ、またはＦであり、ｎは、０、１、２、３、または４である。
【０１４４】
本明細書において使用する場合、「実質的に純粋な」とは、少なくとも約８０％の純度を意味する。いくつかの実施形態において、本発明の化合物の純度は、少なくとも約８５％、約９０％、約９５％、または約９９％の純度を有する。さらなる実施形態において、本発明の化合物の純度は、少なくとも約９９．５％、または約９９．８％の純度を有する。またさらなる実施形態において、本発明の化合物の純度は、少なくとも約９９．８５％、約９９．９０％、約９９．９４％、約９９．９５％、または約９９．９９％の純度を有する。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、リン酸モノ−［１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニル］エステル、リン酸１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニルエステルジメチルエステル、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、およびその塩または溶媒和物からなる群から選択される。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、多形である。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、式Ｉによる化合物の多形である。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、化合物１の多形である。
【０１４５】
本発明の化合物中存在し得る典型的な不純物は、副生成物、異性体、中間体、および溶媒からなる群から選択される１つ以上を含む。いくつかの実施形態において、本発明の化合物に存在し得る不純物は、式ＩＩの化合物に対して最大で約１０％、約８％、約５％、約２％、または約１％である。さらなる実施形態において、本発明の化合物に存在し得る不純物は、式ＩＩの化合物に対して最大で約０．５％、約０．２％、約０．１５％、または約０．１％である。またさらなる実施形態において、本発明の化合物に存在し得る不純物は、式ＩＩの化合物に対して最大で約０．０５％、約０．０２％、または約０．０１％である。いくつかの実施形態において、式ＩＩの実質的に純粋な化合物は、式ＩＩの化合物に対して最大で約５００、２００、１００、５０、２０、１０、５、２、１、０．５、０．２、０．１５、０．１、または０百万分率（ｐ．ｐ．ｍ．）の残留副生成物（単数または複数）を有する。
【０１４６】
いくつかの実施形態において、不純物は、２−アセチル−２，３−ジヒドロナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２，６−ジアセチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２，７−ジアセチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、３−アセチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオール、および１−（４，９−ジヒドロキシ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−エタノンからなる群から選択される１種以上の副生成物を含む。
【０１４７】
いくつかの実施形態において、不純物は、マンガン（Ｍｎ）を含む。
【０１４８】
本発明の化合物の純度は、様々なデバイスで決定し得る。いくつかの実施形態において、純度は、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）で決定する。いくつかの実施形態において、純度は、ＮＭＲ（核磁気共鳴）で決定する。さらなる実施形態において、純度は、ＨＰＬＣおよびＮＭＲで決定する。
【０１４９】
化合物１を含有するこれらの純度が高い組成物は、動物実験において、化合物１を含有するより純度が低い組成物と比較して有意に改善された安全性プロファイルを示す。純度が高い化合物１の任意の有害作用の徴候は、マウスにおいて観察されてこなかった。さらに、化合物１を含有するこれらの純度が高い組成物を患者において試験し、非常に安全であることが実証されてきた。例えば、図１３は、化合物１について約９０％純度を有する組成物で観察された毒性を例示し、一方、図１４は、化合物１について約９５％以上の純度を有する純度が高い組成物が安全で有効であることを例示する。図１３に示す研究において、確立された皮下ＦａＤｕヒト頭頸部がん（上のパネル）またはＭＤＡ−２３１ヒト乳がん（下のパネル）を有する免疫抑制マウスは、示された量の化合物１、またはビヒクル対照を経口で（ｐｏ）投与された。化合物１は、ＧＥＬＵＣＩＲＥ（商標）で処方された。全ての投与計画は毎日施行された（ｑｄ）。処置の間に体重を定期的に評価した。各ポイントは、８つの腫瘍の平均±ＳＥＭを表す。約９０％純粋な化合物１で有意な毒性が観察された。第１の実験において全部で４匹のマウスが処置の間に死亡し（上のパネル）（１匹が１６日目、２匹が１９日目、および１匹が２３日目）、したがってこれらの体重は、死亡後にプロットに含めなかった。第２の実験において全部で３匹のマウスが処置の間に死亡し（下のパネル）（１匹が１４日目および２匹が２１日目）、したがってこれらの体重は、死亡後にプロットに含めなかった。図１４に示す研究において、確立された皮下ＦａＤｕヒト頭頸部がん（上のパネル）またはＭＤＡ−２３１ヒト乳がん（下のパネル）を有する免疫抑制マウスは示された量の化合物１、またはビヒクル対照を経口で（ｐｏ）投与された。化合物１は、ＧＥＬＵＣＩＲＥ（商標）で処方された。全ての投与計画は毎日施行された（ｑｄ）。処置の間に体重を定期的に評価した。各ポイントは、８つの腫瘍の平均±ＳＥＭを表す。より高い純度を有する化合物１は忍容性良好であり、毒性の徴候を示さなかった。両方の実験における処置の全体を通して、全てのマウスは健康を維持した。第１相研究において、化合物１の用量を２０ｍｇ／日から２０００ｍｇ／日に増やしても、最大耐量（ＭＴＤ）には達しなかった。用量制限毒性（ｄｏｓｅ−ｌｉｍｉｔｉｎｇ  ｔｏｘｉｃｉｔｙ）は観察されなかった。患者は、薬物が誘発する有害作用を伴わずに化合物１に非常に良好に忍容性を示したが、これはがん化学療法剤と著しく対照的である。化合物１の実質的に純粋な組成物の臨床安全性プロファイルは、過去における腫瘍学の薬物の中でも一番良い。
【０１５０】
薬学的処方物
特定の添加剤または促進剤は、薬学的処方物中の所与の粒径分布の式Ｉによる化合物の粒子の経口バイオアベイラビリティーを増強することが見出された。例えば、薬学的に適合性の添加剤であるＧＥＬＵＣＩＲＥ（商標）４４／１４（Ｇａｔｔｅｆｏｓｓｅによって生成されるポリエチレングリコールグリセリルラウレート）の添加は、約２０ミクロン以下のメジアン粒径を有する化合物１のバイオアベイラビリティーを増加させることができる。経口バイオアベイラビリティーを増強または制御するために使用することができる他の添加剤の例には、界面活性剤（ＴＷＥＥＮ８０（商標）もしくはＴＷＥＥＮ２０（商標）（ポリソルベート、すなわち、モノラウリン酸ポリオキシエチレンソルビタン）など）または特定の脂質（ホスファチジルコリン、例えば、ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）など）が含まれる。界面活性剤は、両親媒性であり、疎水性基および親水性基の両方を含有する化合物を含む。他の添加剤には、例えば、脂肪酸のグリセロールエステル、飽和脂肪酸のグリセロールエステル、８〜１８個の炭素を有する飽和脂肪酸のグリセロールエステル、ラウリン酸グリセリル、ポリエチレングリコール、ポリオキシエチレンソルビタンアルキレート、セルロースまたはセルロース誘導体（微晶性セルロースおよびカルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）など）、ならびに脂質（ステロール、例えば、コレステロールなど）を含むことができる。他の添加剤には、抗酸化剤（ビタミンＥなど）を含めることができる。他の添加剤およびさらなる構成成分は、当業者が認識するように、本発明による薬学的処方物中に含まれていてもよい。例えば、他の活性剤、標準的ビヒクル、キャリア、液体キャリア、食塩水、水溶液、賦形剤、表面活性剤、分散化剤、不活性な賦形剤、造粒剤および崩壊剤、結合剤、滑沢剤、流動促進剤、抜染剤、甘味剤、香味剤、着色剤、保存剤、生理学的に分解可能な組成物（ゼラチンなど）、水性ビヒクルおよび溶剤、油性ビヒクルおよび溶剤、懸濁化剤、分散剤または湿潤剤、懸濁化剤、乳化剤、粘滑剤、バッファー、塩、増粘剤、ゼラチン、充填剤、乳化剤、抗酸化剤、抗生物質、抗真菌剤、安定化剤、水、グリコール、油、アルコール、結晶化遅延剤（例えば、糖の結晶化を遅延させる）、デンプン、糖、スクロース、表面活性剤、任意の他の成分の溶解性を増加させる薬剤（ポリヒドロキシアルコール、例えば、グリセロールまたはソルビトールなど）、薬学的に許容されるポリマー材料または疎水性材料、ならびに他の構成成分が含まれてもよい。加える適当なさらなる剤（単数または複数）は、当業者が認識するように、剤形（例えば、注射可能な液剤、カプセル剤、または丸剤）に依存する。
【０１５１】
本発明の式Ｉによる化合物は、「薬学的組成物」に処方し得る。本発明による実施形態は、例えば、患者の処置に有用であり得る化合物を含めた様々な剤形を含む。例えば、経口剤形には、錠剤、丸剤、カプセル剤（硬質もしくは軟質）、カプレット、散剤、顆粒剤、懸濁剤（例えば、水性もしくは油性ビヒクル中）、液剤（例えば、水性もしくは油性ビヒクル中）、ゲル剤、カシェ剤、トローチ剤、ロゼンジ剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤、飲料、水中油型乳剤、または油中水型乳剤が含まれてもよい。投与におけるこれらの容易さのために、錠剤およびカプセル剤は、好ましい経口投与を代表し得る。固体経口剤形は、標準的な技術によって糖コーティングまたは腸溶コーティングしてもよい。例えば、鼻腔用および他の粘膜用スプレー処方物（例えば、吸入可能な形態）は、保存剤および等張剤と共に、精製した活性化合物の水溶液を含むことができる。このような処方物は好ましくは、鼻粘膜または他の粘膜と適合性のｐＨおよび等張状態に調節される。代わりに、処方物は、ガスキャリアに懸濁した微粉化した固体粉末、吸入剤、またはエアゾールの形態でよい。このような処方物は、任意の適切な手段または方法によって、例えば、ネブライザー、アトマイザー、定量吸入器などによって送達し得る。例えば、本発明による薬学的組成物は、局所的に、例えば、軟膏剤、クリーム剤、または坐剤の形態で投与し得る。例えば、本発明による薬学的組成物は、注射物を注射することによって投与し得る。したがって、本発明による剤形は、例えば、固体、半固体、液体、または気体の形態を有することができる。適切な剤形には、これらに限定されないが、経口、直腸、舌下、粘膜、鼻、眼、皮下、筋肉内、静脈内、非経口、経皮、脊髄（ｓｐｉｎａｌ）、髄腔内（ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌ）、関節内、動脈内、くも膜下、気管支、リンパ、および子宮内投与、ならびに活性成分の全身的送達のための他の剤形が含まれる。活性成分、例えば、式Ｉによる化合物は、被験体（患者）への投与後に、急速放出、持続放出、遅延放出、または当業者に公知の任意の他の放出プロファイルを実現する処方物中に含有されてもよい。所与の処置のために選択される投与様式および剤形は、所与の処置適用、ならびに被験体（患者）の精神状態および健康状態などの要因のために望ましく効果的な化合物または組成物の治療量に密接に関連する。
【０１５２】
本発明の薬学的組成物は、単回単位用量として、複数の単回単位用量として、もしくは複数回用量形態で、調製し、包装し、またはまとめて販売し得る。本明細書において使用する場合、「単位用量」は、所定の量の活性成分を含めた薬学的組成物の別々の量である。各単位用量中の活性成分の量は一般に、投与される活性成分の総量、または総投与量の便利な一部（例えば、このような投与量の２分の１もしくは３分の１など）と等しい。経口投与に適した本発明の薬学的組成物の処方物は、別々の固体投与単位の形態でよい。各固体投与単位は、所定の量の活性成分、例えば、単位用量またはその一部を含有する。本明細書において使用する場合、「油性」液体は、水より極性が低い炭素またはケイ素をベースとする液体を含むものである。このような薬学的剤形において、活性剤は好ましくは、それゆえ１種以上の薬学的に許容されるキャリア（複数可）および必要に応じて任意の他の治療成分と一緒に利用される。キャリア（複数可）は、処方物の他の成分と適合性であり、そのレシピエントに対して過度に有害でないという意味で薬学的に許容されなくてはならない。本発明の組成物は、単位剤形で提供することができ、各投与単位、例えば、茶匙、錠剤、カプセル剤、液剤、または坐剤は、単独でまたは他の薬学的活性剤との適当な組合せで、所定の量の活性薬物またはプロドラッグを含有する。「単位剤形」という用語は、ヒトおよび動物被験体のための単位投与量として適した物理的に個別の単位を意味し、各単位は、単独で、または他の活性剤との組合せで、所望の効果を生じさせるのに十分な量で計算した所定の量の本発明の組成物を含有する。
【０１５３】
本薬学的組成物の剤形は、当技術分野で公知の技術によって調製され、治療有効量の活性化合物または成分を含有することができる。公知または今後開発される任意の技術を、本発明による薬学的組成物または処方物の調製のために使用し得る。一般に、調製は、活性成分をキャリアまたは１種以上の他のさらなる構成成分と合わせ、次いで、必要に応じてまたは望ましい場合、生成物を所望の単回用量または複数回用量単位に形状化（ｓｈａｐｉｎｇ）または包装することを含む。本発明による粉末状および顆粒状処方物は、公知の方法または今後開発される方法を使用して調製し得る。このような処方物は、被験体に直接投与してもよく、あるいはこのような処方物を使用して、例えば、錠剤、充填カプセル剤を形成させ、またはそこに水性もしくは油性ビヒクルを加えることによって水性もしくは油性懸濁剤もしくは液剤を調製してもよい。錠剤は、必要に応じて１種以上の補助成分と共に、圧縮もしくは成形によって、または湿式造粒によって作製し得る。圧縮錠剤は、適切なデバイス中で、易流動性形態（粉末状調製物または顆粒状調製物など）の活性成分を圧縮することによって調製し得る。成形錠剤は、適切なデバイス中で、活性成分、薬学的に許容されるキャリア、および混合物を湿らせるための少なくとも十分な液体の混合物を成形することによって作製し得る。錠剤はコーティングしなくてもよく、または当技術分野において公知の方法もしくは今後開発される方法を使用してコーティングしてもよい。コーティングされた錠剤は、例えば、腸溶性コーティングを使用することによって、被験体の消化管における遅延性崩壊のために処方され、それによって活性成分の持続放出および吸収を提供し得る。錠剤は、薬学的に洗練されて口当たりの良い調製物を提供するための成分をさらに含んでもよい。活性成分を含めた硬質カプセル剤を、生理学的に分解可能な組成物（ゼラチンなど）を使用して作製し得る。このような硬質カプセル剤は、活性成分を含む。活性成分を含んだ軟質ゼラチンカプセル剤は、生理学的に分解可能な組成物（ゼラチンなど）を使用して作製し得る。このような軟質カプセル剤は、水または油媒体と混合してもよい活性成分を含む。投与に適した本発明の薬学的組成物の液体処方物は、液体形態で、または使用前に水または別の適切なビヒクルと再構成することを意図した乾燥生成物の形態で、調製し、包装し、販売し得る。活性成分が水性もしくは油性ビヒクルに分散している液体懸濁剤、および活性成分が水性もしくは油性ビヒクルに溶解している液剤は、従来の方法または今後開発される方法を使用して調製し得る。活性成分の液体懸濁剤は、水性もしくは油性ビヒクル中にあってもよい。活性成分の液剤は、水性もしくは油性ビヒクル中にあってもよい。このような薬学的剤形を調製するために、活性成分、例えば、ナフトフランを、従来の薬学的配合技術によって薬学的キャリアと密接に混合することができる。キャリアは、投与のために望ましい調製の形態によって多種多様の形態を取り得る。経口剤形の組成物の調製において、通常の薬学的媒体のいずれかを用いてもよい。
【０１５４】
本発明によるいくつかの実施形態において、製造のアイテムは、式Ｉによる化合物を含む治療有効量の薬学的組成物を含有する容器を含む。容器は、薬学的に許容される添加剤を含んでもよい。容器は、印刷されたラベルの説明書を含んでもよい。例えば、印刷されたラベルは、薬学的組成物が投与されるべき投与量および頻度、ならびに組成物を食物と共に投与すべきか、または食物摂取の前もしくは後の定められた期間内で投与すべきかについて示すことができる。組成物は、組成物と著しく相互作用しない、剤形を保持および分配することができる任意の適切な容器中に含有することができる。ラベルの説明書は、本明細書に記載されている処置方法と一致することができる。ラベル（ｌａｂｅｌｉｎｇ）は、容器と、その２つの物理的近接を維持する手段によって、関連し得る。非限定的例として、容器およびラベルは両方とも、包装材料（ボックスもしくはプラスチックの収縮包装など）中に含有されていてもよく、あるいはラベルの説明書をおおい隠さない（ｄｏｅｓ  ｎｏｔ  ｏｂｓｃｕｒｅ）接着剤または他の結合手段もしくは保持手段などにより容器に結合している説明書と関連してもよい。
【０１５５】
選択された粒径分布を有する薬学的処方物を作製し、最適な粒径分布を同定するためのプロセス
粉砕プロセス
本発明による方法において、粉砕プロセスまたは磨砕プロセスを使用して、式Ｉによる活性成分または化合物の粒径を縮小させることができる。例えば、粉砕プロセスまたは磨砕プロセスは、２００μｍ以上、１５０μｍ以上、１００μｍ以上、４０μｍ以上、２０μｍ以上、５μｍ以上、２μｍ以上または２００μｍ以下、１５０μｍ以下、１００μｍ以下、４０μｍ以下、２０μｍ以下、５μｍ以下、２μｍ以下の径のメジアン径を有する粒子を生成するのに適していてもよい。このような粉砕プロセスまたは磨砕プロセスには、例えば、ボールミル粉砕、ロールミル粉砕、ジェットミル粉砕、湿式粉砕、超音波粉砕、磨砕、および組合せを含むことができる。例えば、このプロセスは、粒子を硬い表面と強く接触させる（ｉｍｐａｃｔｉｎｇ）ことによって、または粒子を高圧に供する、例えば、粒子を２つの表面の間に圧搾することによって、粒径を縮小させることができる。例えば、ジェットミル粉砕において、ガス流は粒子を運び出して、高速に加速する。次いで、粒子は他の粒子および壁に強く接触し、より小さな粒子に破砕する。例えば、湿式粉砕において、粒子は液体と混合され、結果として生じたスラリーは高剪断ミキサーを通過し、粒子を破砕する。例えば、超音波粉砕において、例えば、スラリー中の粒子は、超音波放射に曝露される。超音波によって誘発された空洞形成によって、粒子をより小さな径の粒子に破砕することができる。
【０１５６】
粒子を粉砕または磨砕操作に供する前に、粒子の温度を下げることは有利であり得る。例えば、温度は、例えば、粒子を液体窒素などの低温流体に曝露させ、または浸漬するによって極低温に低下させることができる。このように温度を低下させることによって、粒子を、より脆性、および粉砕または磨砕操作において減少した粒径を有するようにより感受性にすることができる。粉砕プロセスまたは磨砕プロセスに続いて、ふるい分けなどの選択プロセスを使用して、粒径の範囲を狭めることができる。
【０１５７】
結晶化プロセス
結晶化は、薬物物質を製造するための主要な分離および精製工程である。結晶化をまた利用して、粒径を制御することができる。結晶化の間に得た粒径分布（ＰＳＤ）は、結晶化の間に起こる様々な機序の組合せ（核生成、成長、凝集、摩擦、破損など）によって影響を受ける。結晶化の間のＰＳＤの制御は、所望の生成物特性を達成するのに極めて重要である。粒径が結晶化の間に一貫して制御されず、所望の規格に合致することができないとき、乾式粉砕などの追加の処理工程を含めることができる。（Ｂｒａａｔら、Ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｔｉｏｎ：Ｐａｒｔｉｃｌｅ  Ｓｉｚｅ  Ｃｏｎｔｒｏｌ、Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ  ｏｆ  Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ  Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：第３版、２００６年１０月２日に出版）。
【０１５８】
がんを処置するための方法
新生物に苦しめられているヒト、哺乳動物、または動物被験体を処置し、進行を遅延させ、再燃を予防し、症状を軽減し、または別の方法で改善するための本発明による方法は、新生物の容積増加が遅延し、新生物の容積増加が停止し、新生物の容積が減少し、かつ／またはがん性新生物が死滅するように、所定の粒径分布の粒子、例えば、式Ｉによる化合物（化合物１、純粋な化合物、純粋な生成物および／または純粋な薬学的組成物など）を含む治療有効量の薬学的組成物を投与する工程を含む。この方法による処置の影響を受けやすい可能性があるタイプの新生物の数例には、固形腫瘍、悪性腫瘍、がん、転移性腫瘍、がん幹細胞含めた新生物、ＳＴＡＴ３経路が関連付けられる新生物、癌腫、および肉腫が含まれる。式Ｉによる化合物の粒子の投与による処置の影響を受けやすい可能性があるがんの包括的でない一覧には、下記が含まれる：乳がん、頭頸部がん、肺がん、卵巣がん、膵臓がん、結腸直腸癌、前立腺がん、黒色腫、肉腫、肝臓がん、脳腫瘍、白血病、多発性骨髄腫、胃がん、およびリンパ腫。ＳＴＡＴ３経路を、これらのがんにおいて関連付けてもよい。例えば、式Ｉによる化合物の粒子の投与による処置の影響を受けやすい可能性があるがんの包括的でない一覧には、下記が含まれる：結腸直腸がん、乳がん、卵巣がん、肺がん、黒色腫および髄芽腫。ＣＳＣ経路を、これらのがんにおいて関連付けてもよい。例えば、式Ｉによる化合物の粒子の投与による処置の影響を受けやすい可能性がある他のがんの包括的でない一覧には、下記が含まれる：肺がん、子宮頸がん、腎細胞癌、肝細胞癌、食道がん（ｅｓｏｐｈａｇａｅｌ  ｃａｎｃｅｒ）、神経膠腫、膀胱がん、結腸直腸がん、乳がん、前立腺がん、膵臓がん、子宮内膜がん、甲状腺がん、胆管がん、骨がん、眼がん（網膜芽細胞腫）、胆嚢がん、下垂体がん、直腸がん、唾液腺がん、および鼻咽頭がん（ｎａｓａｌ  ｐｈａｒｙｎｇｅａｌ  ｃａｎｃｅｒ）。
【０１５９】
がん幹細胞
近年に至って、腫瘍化の新規なモデルは、広範な許容性を獲得してきたが、ここでは全腫瘤の小さな画分のみが腫瘍内の腫瘍原性活性に関与していることを仮定しており、一方、古いまたはクローンの遺伝子モデルは、全ての変異した腫瘍細胞が等しくこのような腫瘍原性活性の一因となることを推測する。新規なモデルによる腫瘍原性細胞のこの小さな画分は、幹細胞様の質を有する形質転換細胞であり、「がん幹細胞」（ＣＳＣ）と称される。ＢｏｎｎｅｔおよびＤｉｃｋは、１９９０年代に、インビボで、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）におけるＣＳＣの存在を最初に示した。彼らのデータは、ヒトＡＭＬ細胞の小さな亜集団のみが、免疫不全マウス中に移植されたときに、ＡＭＬを伝達する能力を有し、一方、他のＡＭＬ細胞は白血病を誘発することができなかったことを示した。その後、これらのＣＳＣは、原始造血幹細胞として同じ細胞マーカーであるＣＤ３４＋／ＣＤ３８−を有することを示した。（Ｂｏｎｎｅｔ，  Ｄ．、Ｎｏｒｍａｌ  ａｎｄ  ｌｅｕｋａｅｍｉｃ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ．、Ｂｒ  Ｊ  Ｈａｅｍａｔｏｌ、２００５年、１３０巻（４号）：４６９〜７９頁）。それ以来、研究者らは、脳がん、乳房がん、皮膚がん、前立腺がん、結腸直腸がんなどの腫瘍を含めて腫瘍の様々なタイプにおいて確証的にＣＳＣを見出した。
【０１６０】
腫瘍化のＣＳＣモデルは、腫瘍移植を確立するために、なぜ数万または数十万の腫瘍細胞を実験動物に注入する必要があるかを説明する。ヒトＡＭＬにおいて、これらの細胞の発生頻度は、１０，０００個中で１個未満である。（Ｂｏｎｎｅｔ，  Ｄ．およびＪ．Ｅ．  Ｄｉｃｋ、Ｈｕｍａｎ  ａｃｕｔｅ  ｍｙｅｌｏｉｄ  ｌｅｕｋｅｍｉａ  ｉｓ  ｏｒｇａｎｉｚｅｄ  ａｓ  ａ  ｈｉｅｒａｒｃｈｙ  ｔｈａｔ  ｏｒｉｇｉｎａｔｅｓ  ｆｒｏｍ  ａ  ｐｒｉｍｉｔｉｖｅ  ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ  ｃｅｌｌ．、Ｎａｔ
Ｍｅｄ、１９９７年、３巻（７号）：７３０〜７頁）。所与の腫瘍細胞集団において、まれではあるがこのような細胞は、殆ど全ての腫瘍タイプにおいて存在するという増えつつある証拠が存在する。しかし、がん細胞系は、組織培養において増殖するように特に適応されたがん細胞の亜集団から選択されるため、がん細胞系の生物学的および機能特性は、劇的な変化を起こすことができる。したがって、全てのがん細胞系がＣＳＣを含有するとは限らない。
【０１６１】
がん幹細胞は、正常な幹細胞と多くの同様の形質を共有する。例えば、ＣＳＣは、限定された数の分裂とは対照的に、自己複製能力、すなわち典型的には他の分裂腫瘍細胞より遅い速度でさらなる腫瘍原性がん幹細胞を生じさせる能力を有する。ＣＳＣはまた、複数の細胞型に分化する能力を有し、これは、多くの腫瘍が宿主の器官に由来する複数の細胞型を含有するだけでなく、腫瘍転移において異種性（ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ）が一般に保持されているという組織学的証拠を説明する。ＣＳＣは、腫瘍化、がんの転移、およびがんの再発に基本的に関与していることが示されてきた。ＣＳＣはまた、腫瘍開始細胞、がん幹様細胞、幹様がん細胞、高度に腫瘍原性の細胞、腫瘍幹細胞、固形腫瘍幹細胞、または超悪性細胞と称される。
【０１６２】
がん幹細胞の存在は、将来のがん処置および療法に対して基礎的関連を有する。これらの関連は、疾患同定、選択的薬物ターゲティング、がん転移および再発の予防、ならびにがんとの戦いにおける新規な戦略の開発において顕在化する。
【０１６３】
現在のがん処置の効力は、試験の初期段階において、腫瘍縮小のサイズ、すなわち、死滅した腫瘤の量によって評価されることが多い。ＣＳＣは腫瘍の非常に小さな割合を形成し、ＣＳＣのより分化した後代より著しく異なる生物学的特徴を有するため、腫瘤の測定は、幹細胞に特異的に作用する薬物を必ずしも選択し得ない。実際は、がん幹細胞は放射線療法（ＸＲＴ）に対して抵抗性であるようであり、また化学療法剤および標的化薬物に対して難治性である。（Ｈａｍｂａｒｄｚｕｍｙａｎ，  Ｄ．、Ｍ．  Ｓｑｕａｔｒｉｔｏ、およびＥ．Ｃ．  Ｈｏｌｌａｎｄ、Ｒａｄｉａｔｉｏｎ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ａｎｄ  ｓｔｅｍ−ｌｉｋｅ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｂｒａｉｎ  ｔｕｍｏｒｓ．、Ｃａｎｃｅｒ  Ｃｅｌｌ、２００６年、１０巻（６号）：４５４〜６頁；Ｂａｕｍａｎｎ，  Ｍ．、Ｍ．  Ｋｒａｕｓｅ、およびＲ．  Ｈｉｌｌ、Ｅｘｐｌｏｒｉｎｇ  ｔｈｅ  ｒｏｌｅ
ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｒａｄｉｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ．、Ｎａｔ  Ｒｅｖ  Ｃａｎｃｅｒ、２００８年、８巻（７号）：５４５〜５４頁；Ａｉｌｌｅｓ，  Ｌ．Ｅ．およびＩ．Ｌ．  Ｗｅｉｓｓｍａｎ、Ｃａｎｃｅｒ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｓｏｌｉｄ  ｔｕｍｏｒｓ．、Ｃｕｒｒ  Ｏｐｉｎ  Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ、２００７年、１８巻（５号）：４６０〜６頁）。正常な体性幹細胞は、化学療法剤に天然で抵抗性である。正常な体性幹細胞は、薬物、およびＤＮＡ修復タンパク質を排除する様々なポンプ（ＭＤＲなど）を有する。さらに、化学療法剤は急速に複製する細胞を標的とする一方、正常な体性幹細胞はまた、低速の細胞の代謝回転を有する。正常な幹細胞の変異したカウンターパートであるがん幹細胞はまた、薬物療法および放射線処置を生き残ることを可能とする同様の機序を有し得る。すなわち、従来の化学療法および放射線療法は、新たな高度に腫瘍原性のがん幹細胞を生じさせることができない大量の腫瘍を形成する分化した細胞または分化している細胞を死滅させる。他方、分化した細胞および分化している細胞を生じさせるがん幹細胞の集団は、放置され、疾患の再燃をもたらすことができた。従来の抗がん療法についてのさらなる危険は、化学療法処置が化学療法抵抗性のがん幹細胞のみを残し、続いて起こる再発性腫瘍はまた化学療法に対して抵抗性である可能性があるということである。
【０１６４】
生存しているがん幹細胞は腫瘍を再生息させ、再燃をもたらし得るため、抗がん療法はＣＳＣに対する戦略を含むということは避けられない（図１８を参照されたい）。これはタンポポが再成長するのを防止するために、たとえ雑草の地表面の塊が切断されていても根を除去することと類似している。（Ｊｏｎｅｓ，  Ｒ．Ｊ．、Ｗ．Ｈ．  Ｍａｔｓｕｉ、およびＢ．Ｄ．  Ｓｍｉｔｈ、Ｃａｎｃｅｒ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ：ａｒｅ  ｗｅ  ｍｉｓｓｉｎｇ  ｔｈｅ  ｔａｒｇｅｔ？、Ｊ  Ｎａｔｌ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｉｎｓｔ、２００４年、９６巻（８号）：５８３〜５頁）。がん幹細胞を選択的に標的にすることによって、攻撃的な切除可能でない腫瘍および難治性または再発性がんを有する患者を処置し、ならびに腫瘍転移および再発を予防することが可能となる。がん幹細胞を標的とする特異的療法の開発は、特に転移性がんに苦しんでいる人のために、がん患者の生存および生活の質を改善し得る。この未開発の潜在性を解き明かす手掛かりは、がん幹細胞の自己複製および生存のために選択的に重要である経路の同定および検証である。残念ながら、がんにおける腫瘍化、または胚性幹細胞および成体幹細胞における自己複製の根底にある複数の経路は過去に解明されてきたが、がん幹細胞の自己複製および生存について、同定および検証されてきた経路は殆どなかった。
【０１６５】
がん幹細胞の同定および単離についてのたくさんの研究がまた存在している。使用される方法は、ＣＳＣが薬物を流出させる能力を主に活用し、またはがん幹細胞と関連する表面マーカーの発現に基づいている。
【０１６６】
例えば、ＣＳＣは多くの化学療法剤に抵抗性なため、ＣＳＣがＡＢＣＧ２（ＢＣＲＰ−１）などの薬物流出ポンプを殆ど遍在的に過剰発現することは驚くにはあたらない（Ｈｏ，  Ｍ．Ｍ．ら、Ｓｉｄｅ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｌｕｎｇ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅｓ  ａｎｄ  ｔｕｍｏｒｓ  ｉｓ  ｅｎｒｉｃｈｅｄ  ｗｉｔｈ  ｓｔｅｍ−ｌｉｋｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ．、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、２００７年、６７巻（１０号）：４８２７〜３３頁；Ｗａｎｇ，  Ｊ．ら、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌ−ｌｉｋｅ  ｓｉｄｅ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅａｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ．、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、２００７年、６７巻（８号）：３７１６〜２４頁；Ｈａｒａｇｕｃｈｉ，  Ｎ．ら、Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｓｉｄｅ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ  ｃｅｌｌｓ  ｆｒｏｍ  ｈｕｍａｎ  ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ  ｓｙｓｔｅｍ．、Ｓｔｅｍ  Ｃｅｌｌｓ、２００６年、２４巻（３号）：５０６〜１３頁；Ｄｏｙｌｅ，  Ｌ．Ａ．およびＤ．Ｄ．  Ｒｏｓｓ、Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ＢＣＲＰ（ＡＢＣＧ２）．、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、２００３年、２２巻（４７号）：７３４０〜５８頁；Ａｌｖｉ，  Ａ．Ｊ．ら、Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ａｎｄ  ｍｏｌｅｃｕｌａｒ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｍａｍｍａｒｙ  ｓｉｄｅ  ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｃｅｌｌｓ．、Ｂｒｅａｓｔ  Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、２００３年、５巻（１）：Ｒ１〜８頁）、および他のＡＴＰ結合カセット（ＡＢＣ）スーパーファミリーメンバー（Ｆｒａｎｋ，  Ｎ．Ｙ．ら、ＡＢＣＢ５−ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ  ｔｒａｎｓｐｏｒｔ  ａｎｄ  ｃｈｅｍｏｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ
ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｍａｌｉｇｎａｎｔ  ｍｅｌａｎｏｍａ．、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、２００５年、６５巻（１０号）：４３２０〜３３頁；Ｓｃｈａｔｔｏｎ，  Ｔ．ら、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎｉｔｉａｔｉｎｇ  ｈｕｍａｎ  ｍｅｌａｎｏｍａｓ．、Ｎａｔｕｒｅ、２００８年、４５１巻（７１７６号）：３４５〜９頁）。したがって、造血幹細胞および白血病性幹細胞を富化するために当初使用されたサイドポピュレーション（ＳＰ）技術をまた用いて、ＣＳＣを同定および単離した。（Ｋｏｎｄｏ，  Ｔ．、Ｔ．  Ｓｅｔｏｇｕｃｈｉ、およびＴ．  Ｔａｇａ、Ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ  ｏｆ  ａ  ｓｍａｌｌ  ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃａｎｃｅｒ  ｓｔｅｍ−ｌｉｋｅ  ｃｅｌｌｓ  ｉｎ  ｔｈｅ  Ｃ６  ｇｌｉｏｍａ  ｃｅｌｌ  ｌｉｎｅ．、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ、２００４年、１０１巻（３号）：７８１〜６頁）。Ｇｏｏｄｅｌｌらによって最初に記載されたこの技術は、Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２などの蛍光色素の識別的ＡＢＣ輸送体依存性流出を利用して、ＣＳＣ中に富化された細胞集団を明らかにし（ｄｅｆｉｎｅ）そして単離する（Ｄｏｙｌｅ，
Ｌ．Ａ．およびＤ．Ｄ．  Ｒｏｓｓ、Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｍｅｄｉａｔｅｄ  ｂｙ  ｔｈｅ  ｂｒｅａｓｔ  ｃａｎｃｅｒ  ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ  ｐｒｏｔｅｉｎ  ＢＣＲＰ（ＡＢＣＧ２）．、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ、２００３年、２２巻（４７号）：７３４０〜５８頁；Ｇｏｏｄｅｌｌ，  Ｍ．Ａ．ら、Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｏｆ  ｍｕｒｉｎｅ  ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ  ｔｈａｔ  ａｒｅ  ｒｅｐｌｉｃａｔｉｎｇ
ｉｎ  ｖｉｖｏ．、Ｊ  Ｅｘｐ  Ｍｅｄ、１９９６年、１８３巻（４号）：１７９７〜８０６頁）。具体的には、ＳＰは薬物流出をベラパミルで遮断することによって明らかとなり、この時点で、色素をＳＰからもはや排除することができない。
【０１６７】
研究者らはまた、がん幹細胞を大量の腫瘍から区別する特異的マーカーを見出すことに焦点を当ててきた。がん幹細胞によって最も一般に発現されている表面マーカーには、ＣＤ４４、ＣＤ１３３、およびＣＤ１６６が含まれる。（Ｃｏｌｌｉｎｓ，  Ａ．Ｔ．ら、Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ  ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｉｃ  ｐｒｏｓｔａｔｅ  ｃａｎｃｅｒ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ．、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、２００５年、６５巻（２３号）：１０９４６〜５１頁；Ｌｉ，  Ｃ．ら、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｃａｎｃｅｒ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ．、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、２００７年、６７巻（３号）：１０３０〜７頁；Ｍａ，  Ｓ．ら、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｔｕｍｏｒｉｇｅｎｉｃ  ｌｉｖｅｒ  ｃａｎｃｅｒ  ｓｔｅｍ／ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ  ｃｅｌｌｓ．、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ、２００７年、１３２巻（７号）：２５４２〜５６頁；Ｐｒｉｎｃｅ，  Ｍ．Ｅ．ら、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｓｕｂｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｃｅｌｌｓ  ｗｉｔｈ  ｃａｎｃｅｒ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌ  ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ  ｉｎ  ｈｅａｄ  ａｎｄ  ｎｅｃｋ  ｓｑｕａｍｏｕｓ  ｃｅｌｌ  ｃａｒｃｉｎｏｍａ．、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ、２００７年、１０４巻（３号）：９７３〜８頁；Ｒｉｃｃｉ−Ｖｉｔｉａｎｉ，  Ｌ．ら、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ａｎｄ  ｅｘｐａｎｓｉｏｎ  ｏｆ
ｈｕｍａｎ  ｃｏｌｏｎ−ｃａｎｃｅｒ−ｉｎｉｔｉａｔｉｎｇ  ｃｅｌｌｓ．、Ｎａｔｕｒｅ、２００７年、４４５巻（７１２３号）：１１１〜５頁；Ｓｉｎｇｈ，  Ｓ．Ｋ．ら、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ  ｏｆ  ａ  ｃａｎｃｅｒ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌ  ｉｎ  ｈｕｍａｎ  ｂｒａｉｎ  ｔｕｍｏｒｓ．、Ｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓ、２００３年、６３巻（１８号）：５８２１〜８頁；Ｄａｌｅｒｂａ，  Ｐ．ら、Ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ
ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ  ｏｆ  ｈｕｍａｎ  ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ  ｃａｎｃｅｒ  ｓｔｅｍ  ｃｅｌｌｓ．、Ｐｒｏｃ  Ｎａｔｌ  Ａｃａｄ  Ｓｃｉ  Ｕ  Ｓ  Ａ、２００７年、１０４巻（２４号）：１０１５８〜６３頁）。これらの表面マーカー（複数可）の発現差異に主に基づいて腫瘍細胞を選別することによって、現在まで記載された高度に腫瘍原性のＣＳＣの大部分について明らかにされてきた。したがって、これらの表面マーカーは、がん細胞系からおよび大量の腫瘍組織からのがん幹細胞の同定および単離についてよく検証されている。
【０１６８】
最近の研究は、腫瘍を再び生じさせる独占的能力を有するがん幹細胞（ＣＳＣ）の存在を明らかにしてきた。これらのＣＳＣは、殆ど全ての腫瘍タイプに存在し、継続した悪性増殖、がん転移、再発、および制がん剤（ｃａｎｃｅｒ  ｄｒｕｇ）抵抗性と機能的にリンクしている。ＣＳＣおよびＣＳＣのより分化した後代は、著しく異なる生物学的特徴を有するようである。従来の制がん剤スクリーニングは、腫瘤の量の測定に依存し、したがって、ＣＳＣに特異的に作用する薬物を必ずしも選択し得ない。実際は、ＣＳＣは、標準的化学療法および放射線療法に対して抵抗性であり、標準的抗がん処置の後で富化されることが示されてきたが、これはがんの難治性および再発をもたらす。これらの細胞を単離する方法には、これらだけに限定されないが、Ｈｏｅｃｈｓｔ３３３４２を流出させるこれらの細胞の能力による同定、これらの細胞が発現している表面マーカー（ＣＤ１３３、ＣＤ４４、ＣＤ１６６、および他など）による同定、ならびにこれらの細胞の腫瘍原性特性による富化が含まれる。がん幹細胞を腫瘍化と結びつける増えつつある証拠は、がん幹細胞を標的とするおびただしい治療の機会を解明する。
【０１６９】
ＣＳＣ研究における最近のブレークスルーと合わせた本明細書において提供するデータによって、本発明が、ＣＳＣの阻害を対象とした数々の方法、ＣＳＣおよび異種がん細胞の両方を阻害することを対象とした方法、ならびに特にＣＳＣを有するがん、または一般にがんを処置する方法を提供することを可能とする。本発明はまた、関連する方法（例えば、製造および薬物候補のスクリーニング）、材料、組成物ならびにキットを提供する。上記方法は、腫瘍原性ＣＳＣ細胞に分裂することによってその数を補充することがもはやできないように、ＣＳＣが自己複製することを防止することができる。または、上記方法は、ＣＳＣにおいて、またはＣＳＣおよび異種がん細胞の両方において細胞死を誘発することができる。
【０１７０】
この方法は、被験体のがんを処置するために使用することができる。このような処置のための良好な候補であるがんには、これらに限定されないが、乳がん、頭頸部がん、肺がん、卵巣がん、膵臓がん、結腸直腸癌、前立腺がん、腎細胞癌、黒色腫、肝細胞癌、子宮頸がん、肉腫、脳腫瘍、胃がん、多発性骨髄腫、白血病、およびリンパ腫が含まれる。いくつかの実施形態において、上記方法は、肝臓がん、頭頸部がん、膵臓がん、および／または胃がんを処置するために使用される。いくつかの実施形態において、上記方法は、多発性骨髄腫、脳腫瘍、および肉腫を処置するために使用される。
【０１７１】
さらに、ＣＳＣは腫瘍化、がんの転移およびがんの再発に基本的に関与していることが示されてきたため、ＣＳＣ、またはＣＳＣおよび異種がん細胞の両方を阻害することを対象とする本発明の任意の方法を実施して、転移性であり、化学療法もしくは放射線療法に対して難治性であり、または最初の処置の後に被験体において再燃したがんを処置することができる。
【０１７２】
いくつかの実施形態において、本発明によるがん幹細胞阻害剤は、式１の化合物、化合物１、化合物１の多形、図１に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形、図２に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形、少なくとも約１０．２°の２θにおけるピーク、少なくとも約１１．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．１°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１７．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２２．２°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．１°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形、図３に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形、少なくとも約７．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約９．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１２．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約１５°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２４．６°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．４°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、リン酸モノ−［１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニル］エステル、リン酸１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニルエステルジメチルエステル、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、およびその塩または溶媒和物；式１の化合物、化合物１、化合物１の多形、図１に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形、図２に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形、少なくとも約１０．２°の２θにおけるピーク、少なくとも約１１．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．１°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１７．３°の２θにおける���ーク、少なくとも約２２．２°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．１°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形、図３に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形、少なくとも約７．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約９．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１２．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約１５°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２４．６°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．４°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、リン酸モノ−［１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニル］エステル、リン酸１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニルエステルジメチルエステル、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、およびその塩または溶媒和物の多形；または式１の化合物、化合物１、化合物１の多形、図１に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形、図２に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形、少なくとも約１０．２°の２θにおけるピーク、少なくとも約１１．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．１°の２θにおけるピーク、少なくとも約１４．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約１７．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２２．２°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．１°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形、図３に示されるものと実質的に同様のＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形、少なくとも約７．５°の２θにおけるピーク、少なくとも約９．９°の２θにおけるピーク、少なくとも約１２．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約１５°の２θにおけるピーク、少なくとも約���３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２３．３°の２θにおけるピーク、少なくとも約２４．６°の２θにおけるピーク、および少なくとも約２８．４°の２θにおけるピークならびに任意のこれらの組合せからの２つ以上のピークを含むＸ線回折パターンによって特徴付けられる２−アセチル−４Ｈ，９Ｈ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの多形、２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、リン酸モノ−［１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニル］エステル、リン酸１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニルエステルジメチルエステル、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、およびその塩または溶媒和物の実質的に純粋な形態；２−（１−ヒドロキシエチル）−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−クロロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチル−７−フルオロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、２−エチル−ナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン、リン酸モノ−［１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニル］エステル、リン酸１−（４，９−ジオキソ−３ａ，４，９，９ａ−テトラヒドロ−ナフト［２，３−ｂ］フラン−２−イル）−ビニルエステルジメチルエステル、エナンチオマー、ジアステレオマー、互変異性体、およびその塩または溶媒和物の粒子の形態である（本明細書において「本発明の化合物」ともまた称される）。
【０１７３】
本発明は、がん幹細胞を阻害することができる薬物候補を同定する方法を提供する。いくつかの実施形態において、薬物候補は、ＣＳＣの細胞死を誘発し、またはＣＳＣの自己複製を少なくとも阻害することができる。さらなる実施形態において、薬物候補は、ＣＳＣの細胞死を誘発し、またはＣＳＣの自己複製を少なくとも阻害し、および異種がん細胞の細胞死を誘発することができる。その経路における様々な相を、薬物候補をスクリーニングするための標的とすることができる。
【０１７４】
したがって、別の態様において、本発明の化合物を使用して、障害または状態を処置または予防するための薬学的組成物を処方することができる。障害のいくつかには、これらに限定されないが、自己免疫疾患、炎症性疾患、炎症性腸疾患、関節炎、自己免疫性脱髄障害、アルツハイマー病、発作、虚血再灌流傷害および多発性硬化症が含まれる。障害のいくつかはがんであり、これらに限定されないが、様々なタイプの乳がん、頭頸部がん、肺がん、卵巣がん、膵臓がん、結腸直腸癌、前立腺がん、腎細胞癌、黒色腫、肝細胞癌、子宮頸がん、肉腫、脳腫瘍、胃がん、多発性骨髄腫、白血病、およびリンパ腫が含まれる。
【０１７５】
したがって、一態様では、本発明は、有効量の本発明の化合物をがん幹細胞に投与する、がん幹細胞を阻害する方法を提供する。ＣＳＣを有することが公知のがんは、このような処置のための良好な候補であり、これらに限定されないが、様々なタイプの乳がん、頭頸部がん、肺がん、卵巣がん、膵臓がん、結腸直腸腺癌、前立腺がん、肝臓がん、黒色腫、多発性骨髄腫、脳腫瘍、肉腫、髄芽腫、および白血病が含まれる。
【０１７６】
さらに、ＣＳＣは、腫瘍化、がんの転移およびがんの再発に基本的に関与していることが示されてきたため、ＣＳＣを阻害することを対象とした本発明の任意の方法を行って、転移性であり、化学療法もしくは放射線療法に対して難治性であり、または最初の処置の後に被験体において再燃したがんを処置することができる。
【０１７７】
上記方法のいくつかの実施形態において、処置を受けるがんは、下記の群から選択される：肝臓がん、結腸がん、頭頸部がん、膵臓がん、胃がん、腎臓がん、肉腫、多発性骨髄腫、転移性乳がん、転移性前立腺がん、白血病、リンパ腫、膵臓がん、食道がん（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ  ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ  ｃａｎｃｅｒ）、脳腫瘍、神経膠腫、膀胱がん、子宮内膜がん、甲状腺がん、胆管がん、骨がん、眼がん（網膜芽細胞腫）、胆嚢がん、下垂体がん、直腸がん、唾液腺がん、および鼻咽頭がん。
【０１７８】
一態様では、本発明は、本発明の化合物を含む治療有効量の薬学的組成物を、被験体に投与する、被験体においてがんを処置する方法を提供する。がんは、転移性であり得る。被験体は、哺乳動物、例えば、ヒトでよい。
【０１７９】
新生物を患っている被験体（患者）に、例えば、式Ｉによる化合物の粒子の投与による処置を、下記の状態について示し得る。新生物は、化学療法、放射線療法、またはホルモン療法による治療に対して難治性であり得る。新生物は、外科的切除の影響を受けにくい場合がある。新生物は、被験体（患者）において再燃し得る。がん幹細胞は、新生物の再燃において関連付けられてきた。本発明による方法によりがん幹細胞を死滅させるかまたはこれらの自己複製を阻害することにより、新生物がそれ自体再び生じることを予防し得る。ナフトフランの粒子の投与による処置は、例えば、新生物性細胞の死滅を誘発し、その増殖および／もしくは分裂を阻害し、ならびに／または選択的に死滅させることによって、新生物の容積増加を遅延もしくは停止させ、または新生物の容積を減少させ得る。例えば、本発明による治療は、新生物の細胞の細胞死を誘発し得る。例えば、処置は、新生物性細胞のＳＴＡＴ３経路を阻害するように作用し得る。
【０１８０】
新生物を患っている被験体（患者）への、例えば、本発明の化合物の粒子の投与による処置は、新生物の再燃を予防するために、および／または外科的切除に対するアジュバント療法として使用し得る。
【０１８１】
例えば、本発明の化合物の粒子を含めた薬学的組成物は、これは便利な形態の処置であるため、経口で投与し得る。例えば、薬学的組成物は、１日４回以下経口で投与し得る。代わりに、薬学的組成物は、静脈内または腹腔内に投与することができる。
【０１８２】
本発明による方法において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた薬学的組成物の治療有効量は、約２０ｍｇ〜約２０００ｍｇ、約１００ｍｇ〜約１５００ｍｇ、約１６０ｍｇ〜約１４００ｍｇ、または約１８０ｍｇ〜１２００ｍｇの範囲の総１日用量でよい。いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた薬学的組成物の治療有効量は、約２００ｍｇ〜約１５００ｍｇ、または約３６０ｍｇ〜１２００ｍｇの範囲の総１日用量である。いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた薬学的組成物の治療有効量は、約４００ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲の総１日用量である。いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた薬学的組成物の治療有効量は、約１０００ｍｇの総１日用量である。
【０１８３】
いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、１日用量が単回で投与される。例えば、いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、約２０ｍｇの１日１回〜約２０００ｍｇの１日１回の範囲の１日用量が単回で投与される。いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、約２０ｍｇの１日１回〜約１０００ｍｇの１日１回の範囲の１日用量が単回で投与される。
【０１８４】
いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、１日用量が複数回に分けて投与される（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ  ｉｎ  ｍｏｒｅ  ｔｈａｎ  ｏｎｅ  ｄａｉｌｙ  ｄｏｓｅ）。例えば、いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、１日用量が２回に分けて投与され、総１日用量は、約１６０ｍｇ〜１４００ｍｇの範囲にある。いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、１日用量が２回に分けて投与され、総１日用量は、約３２０ｍｇ〜１２００ｍｇの範囲にある。いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、１日用量が２回に分けて投与され、総１日用量は、約４００ｍｇ〜１０００ｍｇの範囲にある。いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、１日用量が２回に分けて投与され、総１日用量は、約１０００ｍｇである。
【０１８５】
いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、１日用量が２回に分けて投与され、各用量は、約８０ｍｇ〜１０００ｍｇの範囲にある。いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、１日用量が２回に分けて投与され、各用量は、約１６０ｍｇ〜６００ｍｇの範囲にある。いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、１日用量が２回に分けて投与され、各用量は、約２００ｍｇ〜約５００ｍｇの範囲にある。いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、１日用量が２回に分けて投与され、各用量は、約５００ｍｇである。
【０１８６】
いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、１日用量が３回に分けて投与され、総１日用量は、約２４０ｍｇ〜約１５００ｍｇの範囲にある。いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、１日用量が３回に分けて投与され、総１日用量は、約４８０ｍｇ〜約１５００ｍｇの範囲にある。
【０１８７】
いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、１日用量が３回に分けて投与され、各用量は、約８０ｍｇ〜５００ｍｇの範囲にある。いくつかの実施形態において、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた治療有効量の薬学的組成物は、１日用量が３回に分けて投与され、各用量は、１６０ｍｇ〜５００ｍｇの範囲にある。
【０１８８】
本発明の化合物またはその薬学的組成物は、経路、例えば、経口、静脈内、もしくは腹腔内経路のいずれかの１つによって、またはそれらの経路の組合せによって投与することができる。例えば、いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、経口で投与することができる。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、ＧｅｌｕｃｉｒｅおよびＴｗｅｅｎ８０を含む処方物で経口で投与することができる。
【０１８９】
本発明の化合物は、被験体、例えば、患者において、少なくとも２時間から２４時間以下の時間にわたり、少なくとも約０．００２μＭ〜約３０μＭの範囲の化合物の血中濃度を達成する用量で投与することができる。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、被験体において、少なくとも２時間から２４時間以下の時間にわたり、少なくとも約０．２μＭ〜約１μＭの範囲の、少なくとも２時間および２４時間未満にわたり、約０．２μＭ以上、約０．５μＭ以上、約１．０μＭ以上、約１．５μＭ以上、約２．０μＭ以上、約２．５μＭ以上、約３．０μＭ以上、約４．０μＭ以上、約５．０μＭ以上、約６．０μＭ以上、約７．０μＭ以上、約８．０μＭ以上、約９．０μＭ以上、約１０．０μＭ以上、約１５．０μＭ以上の、化合物の血中濃度を達成する用量で投与することができる。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、被験体において、少なくとも２時間および２４時間未満にわたり、約１．０μＭ以上、約１．５μＭ以上、約２．０μＭ以上、約３．０μＭ以上、約５．０μＭ以上、約１０．０μＭ以上、約１５．０μＭ以上の、化合物の血中濃度を達成する用量で投与することができる。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、被験体において、少なくとも２時間および２４時間未満にわたり、約２．０μＭ以上、約３．０μＭ以上、約５．０μＭ以上、約１０．０μＭ以上の、化合物の血中濃度を達成する用量で投与することができる。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、被験体において、少なくとも２時間および２４時間未満にわたり、約３．０μＭ以上、または約５．０μＭ以上の、化合物の血中濃度を達成する用量で投与することができる。
【０１９０】
本発明の化合物は、被験体、例えば、患者において、２４時間で少なくとも約０．００２μＭ．ｈ〜約３００μＭ．ｈの範囲の化合物の血中濃度を達成する用量で投与することができる。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、被験体において、少なくとも２時間および２４時間未満にわたり、約０．２μＭ以上、約０．５μＭ以上、約１．０μＭ以上、約１．５μＭ以上、約２．０μＭ以上、約２．５μＭ以上、約３．０μＭ以上、約４．０μＭ以上、約５．０μＭ以上、約６．０μＭ以上、約７．０μＭ以上、約８．０μＭ以上、約９．０μＭ以上、約１０．０μＭ以上、約１５．０μＭ以上の、２４時間の曲線下面積（ＡＵＣ２４）を達成する用量で投与することができる。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、被験体において、少なくとも２時間および２４時間未満にわたり、約１．０μＭ以上、約１．５μＭ以上、約２．０μＭ以上、約３．０μＭ以上、約５．０μＭ以上、約１０．０μＭ以上、約１５．０μＭ以上の、化合物の血中濃度を達成する用量で投与することができる。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、被験体において、少なくとも２時間および２４時間未満にわたり、約２．０μＭ以上、約３．０μＭ以上、約５．０μＭ以上、約１０．０μＭ以上の、化合物の血中濃度を達成する用量で投与することができる。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、被験体において、少なくとも２時間および２４時間未満にわたり、約３．０μＭ以上、または約５．０μＭ以上の、化合物の血中濃度を達成する用量で投与することができる。いくつかの実施形態において、本発明の化合物は、被験体において、約２μＭ＊時間以上、約１０μＭ＊時間以上、約２０μＭ＊時間以上、約３０μＭ＊時間以上、約４０μＭ＊時間以上、約５０μＭ＊時間以上、約６０μＭ＊時間以上、約７０μＭ＊時間以上、約８０μＭ＊時間以上、約９０μＭ＊時間以上、約１００μＭ＊時間以上、約１２５μＭ＊時間以上、約１５０μＭ＊時間以上、約２００μＭ＊時間以上、約２５０μＭ＊時間以上、約３００μＭ＊時間以上、約４００μＭ＊時間以上、および約５００μＭ＊時間以上の２４時間の曲線下面積（ＡＵＣ０〜２４時間）を達成する用量で投与することができる。
【０１９１】
被験体（患者）の状態がそれを必要とする場合、薬学的組成物の用量は、連続またはパルス状注入として投与し得る。処置の期間は、利益が持続する限り数十年、数年、数カ月、数週間、または数日間でよい。上記の範囲はガイドラインとしてのみ提供し、それは、最適化に供せられる。
【０１９２】
本発明による方法において、化合物の血液モル濃度が、有効な期間と少なくとも同じ長さであって有害な期間より短い第１の連続した期間にわたり、少なくとも有効濃度であって有害な濃度未満である場合、新生物の細胞は、薬学的組成物を投与することによって選択的に死滅する。血液モル濃度は、第１の連続した期間の後は有効濃度未満でよい。有効濃度は、新生物性細胞、例えば、がん細胞が死滅するように、十分に高い濃度でよい。有効な期間は、新生物性細胞、例えば、がん細胞が死滅するように、十分に長くてよい。有害な濃度は、正常細胞が損傷または死滅する濃度でよい。有害な期間は、正常細胞が損傷または死滅するのに十分に長い期間でよい。例えば、有効濃度は、約０．０２μＭ以上、約０．０５μＭ以上、約０．１μＭ以上、約０．２μＭ以上、約０．５μＭ以上、約１μＭ以上、約３μＭ以上、約１０μＭ以上または約２０μＭ以上でよい。例えば、有害でない濃度は、約３μＭ以下、約１０μＭ以下、約１４μＭ以下、約３０μＭ以下、または約１００μＭ以下でよい。例えば、有効な期間は、約２時間、約４時間、約６時間、約１２時間、約２４時間、または約４８時間以上でよい。例えば、正常細胞のための有害でない曝露を達成するために、化合物１の薬物濃度は、約１２時間以内、約２４時間内に血液から実質的に取り除かれなければならない。「血液からの実質的な除去」とは、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％までの薬物血中濃度の減少を意味する。例えば、有効濃度は、化合物をある期間投与するときに、がん細胞のＩＣ５０を超える濃度でよい。例えば、有効な期間は、化合物を少なくとも有効濃度で投与するときにがん細胞が選択的に阻害または死滅する期間でよい。例えば、有害な濃度は、化合物を任意の期間投与するときに、正常細胞のＩＣ５０を超える濃度でよい。例えば、有害な期間は、化合物を有効濃度で投与するときに正常細胞およびがん細胞が阻害または死滅する期間でよい。
【０１９３】
新生物性細胞（がん細胞など）の選択的死滅、および正常細胞の温存に必要であるとみなされる、本明細書において記載される「選択的薬物動態プロファイル」（ＳＰＰ）を達成するために、当業者は投与量および頻度を選択することによって薬学的組成物を投与することができる。ＳＰＰのこのような考察によってまた、薬学的組成物の設計、例えば、粒子の粒径分布および形状分布を導くことができる。
【０１９４】
本発明による方法において、薬学的組成物を、錠剤、丸剤、カプセル剤（硬質もしくは軟質）、カプレット、散剤、顆粒剤、懸濁剤、液剤、ゲル剤、カシェ剤、トローチ剤、ロゼンジ剤、シロップ剤、エリキシル剤、乳剤、水中油型乳剤、油中水型乳剤、または飲料などの剤形で経口で投与する。
【０１９５】
最適な粒径分布の同定
本発明による方法において、新生物に苦しめられているヒト、哺乳動物、または動物を処置するための式Ｉによる化合物、化合物１、化合物１の多形、および／または化合物１の実質的に純粋な形態の最適な粒径分布は、下記のように決定することができる。化合物を含む少なくとも１セットの粒子を、調製することができる。１セットの粒子の調製において、例えば、固体化合物の試料の粒径は、例えば、化合物を溶解して溶液を噴霧し、化合物を溶解して溶液を超音波処理し、固体化合物をボールミル粉砕し、固体化合物をロールミル粉砕し、固体化合物を磨砕し、かつ／または固体化合物をふるい分けることによって縮小させることができる。少なくとも１セットの粒子の粒径分布は、当業者に公知の方法または方法の組合せによって決定することができる。例えば、粒径分布は、ふるい分析、光学顕微鏡計数法、電子顕微鏡計数法、電気抵抗計数法、沈降時間、レーザー回折、音響分光法、別の技術、または技術の組合せなどの技術を使用して決定することができる。少なくとも１セットの粒子は、所定の濃度で所定の期間、新生物性細胞および正常細胞に投与することができる。新生物性細胞および正常細胞の代謝、分裂、および／または活力の他の指標に対する粒子の効果を観察することができる。新生物性細胞に対する粒子の観察される効果を使用して、各セットの粒子に有効性レーティングを割り当てることができる。例えば、新生物性細胞の代謝および／もしくは分裂を阻害し、新生物性細胞を損傷もしくは死滅させ、または別の方法で高い抗腫瘍活性を示す１セットの粒子は、高い有効性レーティングを割り当てることができる。正常細胞に対する粒子の観察された効果を使用して、毒性レーティングを各セットの粒子に割り当てることができる。例えば、正常細胞の代謝および／もしくは分裂を阻害し、または正常細胞を損傷もしくは死滅させ、または正常細胞がこのセットの粒子に対して低い忍容性を別の方法で示す１セットの粒子は、高い毒性レーティングを割り当てることができる。
【０１９６】
例えば、１セットの粒子を、新生物性細胞および正常細胞にインビトロで投与することができる。例えば、有効性レーティングは、新生物性細胞のＩＣ５０と等しく、比例し、またはその単調増加関数でよい。例えば、毒性レーティングは、正常細胞のＩＣ５０と等しく、比例し、またはその単調増加関数でよい。
【０１９７】
例えば、１セットの粒子を、試験動物の新生物性細胞および正常細胞にインビボで投与することができる。例えば、試験動物は、哺乳動物、霊長類、マウス、ラット、モルモット、ウサギ、またはイヌでよい。例えば、有効性レーティングは、１セットの粒子を投与した後の、新生物性細胞の容積の減少と等しく、比例し、またはその単調増加関数でよい。例えば、毒性レーティングは、１セットの粒子を投与した後の、試験動物の塊の減少と等しく、比例し、またはその単調増加関数でよい。例えば、１セットの粒子は、臨床試験においてヒトに投与することができる。新生物を処置する方法は、治療有効量の式Ｉによる化合物、化合物１、化合物１の多形、および／または化合物１の実質的に純粋な形態の１セットの粒子を、新生物に苦しめられているヒト、哺乳動物、または動物に投与する工程を含めてもよい。化合物、式Ｉによる化合物、化合物１、化合物１の多形、および／または化合物１の実質的に純粋な形態の粒子を、動物もしくはヒトに、または細胞にインビトロで投与する前に、粒子は、薬学的に許容される添加剤に懸濁させることができる。
【０１９８】
第１の粒径分布を有する各セットの粒子の有効性レーティングおよび／または毒性レーティングは、第１の粒径分布と異なる粒径分布を有する別のセット（単数または複数）の粒子の有効性レーティングおよび／または毒性レーティングと比較することができる。高い有効性レーティングおよび低い毒性レーティングを有する化合物の１セットの粒子は、新生物性細胞、例えば、がん細胞を阻害することまたは死滅させることにおいて有効であり得るが、正常細胞を温存することができる。当業者は、最適なセットとして、少なくとも１つの他のセットの粒子を超える有効性レーティング、少なくとも１つの他のセットの粒子より低い毒性レーティング、ならびに／または少なくとも１つの他のセットの粒子を超える重み付けした有効性レーティングおよび毒性レーティングの合計を有する１セットの粒子を選択することができる（例えば、有効性レーティングは、正の係数で重み付けすることができ、毒性レーティングは、負の係数で重み付けすることができる）。当業者はまた別の基準を使用して、最適なセットの粒子、例えば、重み付けした有効性レーティングおよび有効性レーティングと毒性レーティングの重み付け比（ｗｅｉｇｈｔｅｄ  ｒａｔｅ）の合計を有する粒子を選択することができる。最適なセットの粒子の粒径分布は、試験した化合物についての最適な粒径分布と考えることができる。最適な粒径分布は、１つの化合物、例えば、化合物１について、別の化合物、例えば、化合物１ではない式Ｉによる化合物についての分布とは異なり得る。所与の化合物についての最適な粒径分布は、インビトロでの細胞への、小さな試験動物への、および大きな試験動物への投与によって決定されるとき、異なり得る。しかし、インビトロまたはインビボでの生物への所与の化合物の投与によって決定された最適な粒径分布は、別の化合物についての粒径分布を最適化するため、または別の生物への投与のための合理的な出発点を表し得る。
【０１９９】
式Ｉによる化合物、化合物１、化合物１の多形、および／または化合物１の実質的に純粋な形態の最適なセットの粒子は、新生物性細胞の複製または拡散を減少させるかまたは阻害するための組成物中に含むことができる。
【実施例】
【０２００】
本発明の異なる特徴をさらに例示するために、下記に実施例を提供する。実施例はまた、本発明を実施するための有用な方法論を例示する。これらの実施例は、特許請求された本発明を制限しない。
【０２０１】
（実施例１）
ナフトフラン化合物の調製
ナフトフラン化合物（２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン）の調製のための手順を、以下のように要約する。
【０２０２】
工程１：臭素化
機械式撹拌機、温度計、および添加漏斗を備えた２リットルの三つ口丸底フラスコに、３−ブテン−２−オン（４５１．２グラム）を導入する。添加漏斗に、臭素（９３６．０グラム）を加える。フラスコ中の内容物を−５℃に冷却した後、激しく撹拌し、３０分間に亘り温度を−５℃に維持しながら、臭素をフラスコ中に滴下する。混合物を−５℃にてさらに１５分間撹拌し、次いで４つの等しい部分に分割する。
【０２０３】
工程２  脱臭素化
混合物の各々の部分をテトラヒドロフラン（２１３３．６グラム）と共に、機械式撹拌機、温度計、および添加漏斗を備えた２２リットルの四つ口丸底フラスコに加える。添加漏斗に、ＤＢＵ（１，３−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン、２２２．９グラム）を導入する。激しく撹拌し、３０分間に亘り温度を０℃〜５℃に維持しながら、ＤＢＵをフラスコ中に滴下する。混合物を０℃〜５℃でさらに１５分間撹拌する。
【０２０４】
工程３：カップリング反応
次いで、２−ヒドロキシ−１，４−ナフトフラン（２３１グラム）を、フラスコに加える。さらなるＤＢＵ（２４６．０グラム）を添加漏斗中に導入し、次いで反応混合物の温度が４０℃を超えないような速度でフラスコ中の混合物に滴下する。ＤＢＵの添加が完了した後、このように得られた混合物を室温で一晩撹拌し、反応混合物の試料をＨＰＬＣ分析のために採取する。
【０２０５】
工程４：結晶化
反応混合物に、水（１０．８リットル）を導入し、このように得られた混合物を０℃〜３℃に少なくとも３０分間冷却し、次いで真空濾過機によって濾過する。濾過した固体を、５％水性重炭酸ナトリウム（３リットル）、水（３リットル）、１％水性酢酸（３リットル）およびエタノール（２回）（２×１リットル）で連続的にすすぐ。
【０２０６】
すすいだ固体を保存し、他のバッチからのものと一緒にプールする。合わせた粗生成物（２８．７３ｋｇ）を、酢酸エチル（８１１．７ｋｇ）と共に、機械式撹拌機、温度計、およびコンデンサーを備えた５００ガロンの槽に加える。窒素雰囲気下にて、混合物を２時間加熱還流させ（７２℃）、次いで活性炭層を含有する１０ミクロンのカートリッジフィルターで濾過し、不溶物を除去する。
【０２０７】
新鮮な熱い酢酸エチル（１０ｋｇ）を使用して、槽、トランスファーラインおよびフィルターをすすぐ。合わせた濾液を０〜５℃に冷却し、この温度で２時間保持し、次いで２０インチのブフナーフィルターで濾過する。濾過した固体生成物を０〜５℃の酢酸エチル（５．７ｋｇ）ですすぎ、４０℃にて真空下で一定の重量になるまで乾燥させる。残留する濾液を蒸発によって容積で６３％減少させ、結晶化プロセスを再び繰り返し、生成物の第２の収穫物を生じさせ、これをまた生成物の第１の収穫物の場合と同じ条件下で乾燥させた。
【０２０８】
１ロットのナフトフラン化合物を、この手順に従って得た。このロットの化合物についての純度は、９５．４４面積％である（ＨＰＬＣ）。
【０２０９】
（実施例２）
ナフトフラン化合物の調製
ナフトフラン化合物（２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン）を調製するための別の手順を、以下のように要約する。
【０２１０】
工程１：臭素化
１２ＬのＲＢＦ（丸底フラスコ）（ＵＶフィルターによって光から保護）にＭＶＫ（２，１６０ｍｌ、２６．４ｍｏｌ）を導入し、ドライアイス／アセトン浴中で−９．６℃に冷却した。臭素（１，３００ｍｌ、２５．３ｍｏｌ）を、Ｔ＝＜−２．６℃（Ｔｍａｘ）に維持しながら２時間２０分に亘りゆっくりと加えた。このように得られた黄色の混合物を、さらに２８分間撹拌した。
【０２１１】
工程２：脱臭化水素化
事前冷却したＴＨＦ（テトラヒドロフラン）（２０Ｌ、５ｍｌ／ｇのＨＮＱ（２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン））を有する７２ＬのＲＢＦに上記からの臭素化生成物を導入し、このように得られた溶液を−４．８℃に冷却した。ＴＨＦ（４，２００ｍｌ）に溶解したＤＢＵ（４，２００ｍｌ、２８．１ｍｏｌ）を、Ｔ＜０．３℃（Ｔｍａｘ）に維持しながら２時間２０分に亘りゆっくりと加えた。このように得られた縣濁物を、４２分間撹拌した。
【０２１２】
工程３：カップリング
２−ヒドロキシ−１，４−ナフトフラン（４，００３ｇ、２３．０ｍｏｌ）を、−１．８℃で１度に上記からの反応混合物に導入した。第２の部分のＤＢＵ（３，７８０ｍｌ、２５．３ｍｏｌ）を４８分間に亘り加えている間、冷却浴を施して、反応温度を４０℃とした。冷却浴を取り除き、反応混合物を空気に曝しながら週末に亘り撹拌した。
【０２１３】
工程４：粗材料の単離
事前冷却した水（１００Ｌ、２５ｍｌ／ｇのＨＮＱ）を有する２００Ｌの反応器に、上記からの反応混合物を導入した。このように得られた縣濁物を６．０℃に冷却し、次いでＴ＝３±３℃で約１時間撹拌した。次いで、このように得られた縣濁物を濾過し、集めた固体を２００Ｌの反応器に戻した。
【０２１４】
５％ＮａＨＣＯ３水溶液（２６Ｌ、６．５ｍｌ／ｇのＨＮＱ）中で１時間撹拌した後、縣濁物を濾過した。集めた固体を２００Ｌの反応器に戻し、水（２６Ｌ）中で１時間撹拌し、次いで濾過した。
【０２１５】
湿った固体を２００Ｌの反応器に戻し、１％水性酢酸（２６Ｌ）中で約１時間撹拌し、濾過し、次いで濾過用漏斗上で水（１０Ｌ）にて洗浄した。集めた固体を２００Ｌの反応器に戻し、エタノール（１７．５Ｌ；４．３ｍｌ／ｇのＨＮＱ）中で穏やかに加熱還流した（７７．４℃）。このように得られた縣濁物を４．２℃に冷却し、濾過した。
【０２１６】
湿った固体を１００Ｌの反応器に移し、エタノール（１７．５Ｌ；４．３ｍｌ／ｇのＨＮＱ）中で加熱還流した（７７．６℃）。このように得られた縣濁物を４．５℃に冷却し、濾過した。湿ったケークを一晩液体除去した。１Ｈ  ＮＭＲ試料およびＨＰＬＣ試料を採取した。１Ｈ  ＮＭＲ：化合物１／ＮＤＨＦ（２−アセチル−２，３−ジヒドロナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン）４２：５８％；ＨＰＬＣ：化合物１／ＮＤＨＦ７４：１１面積％。
【０２１７】
その固体を真空オーブン中で５０℃にて４日間に亘り乾燥させ、２，２６８ｇの粗化合物１を得た。１Ｈ  ＮＭＲ：化合物１／ＮＤＨＦ４１：５９％；ＨＰＬＣ：化合物１／ＮＤＨＦ６７：１１面積％。
【０２１８】
工程５：ナフトジヒドロフランの酸化
粗化合物１（２．２６８ｋｇ）を、トルエン（７７Ｌ）中でスラリー化した。ＭｎＯ２（９５３６ｇ）を加え、混合物を穏やかに加熱還流した。ＴＬＣ（１：１ＥＡ：ヘキサン）から、１時間後に反応の完了が示された。
【０２１９】
次いで、反応混合物を、事前加熱したセライト（１５３０ｇ、底層）、活性炭（２２３０ｇ、中層）、およびセライト（９３２ｇ、最上層）のパッドを通して熱いまま濾過した。黄色〜オレンジ色の濾液を集めた。
【０２２０】
濾液をロータリーエバポレーター（ｒｏｔｏｖａｐ）で概ね１／１０容積まで濃縮した。スラリーを濾過し、トルエンで洗浄した。次いで、結晶を５０℃で乾燥させ、９５２ｇ（４２％）の暗い黄色の固体を得た。ＨＰＬＣ：９９．９４％。１Ｈ  ＮＭＲは、ナフトジヒドロフランを示さなかった。
【０２２１】
結晶を５０℃にて真空下でさらに４６〜６５時間乾燥させ、材料中の残留トルエンの量を減少させた。
【０２２２】
工程６：酢酸エチルによる処理
化合物１（５８１６ｇ）を、２００Ｌの反応槽に導入した。酢酸エチル（１４５Ｌ、２５ｍＬ／ｇ）を加え、溶液を２時間２６分に亘り加熱還流させた。還流を５時間３０分間維持し、次いで混合物を冷却し、１７℃に一晩維持した。
【０２２３】
スラリーを、ポリエチレンフリット上で濾過した。黄色の結晶を空気乾燥させ、次いで真空オーブン中のトレイに７５時間置き、５５３２ｇ（９５．１％収率）の黄色の固体を得た。ＨＰＬＣ：９９．８６％。１Ｈ  ＮＭＲは、化合物１の構造と一致する。
【０２２４】
工程７：酢酸エチルによる再結晶化
２ＬのＲＢＦに、粗材料（１０ｇ）および酢酸エチル（９００ｍｌ）を導入した。混合物を約７７℃で還流し、次いでさらなる酢酸エチル（１００ｍｌ）を加え、完全な溶解を達成した。このように得られた透明な黄色がかった溶液を約３０分間還流させながら撹拌し、次いで加熱器（ｈｅａｔｉｎｇ）を取り去った。混合物を室温で一晩撹拌した。
【０２２５】
このように得られた縣濁物を濾過し、集めた黄色の固体を漏斗上にて酢酸エチル（３０ｍｌ）ですすいだ。湿った固体を真空オーブン中で４０〜５０℃にて４時間に亘り乾燥させ、８．５３ｇの黄色の結晶性生成物を得た（総収率約１７％）。
【０２２６】
１Ｈ  ＮＭＲ：構造と一致；ＨＰＬＣ：９９．９４面積％；ＤＳＣ：２２８．６８℃、１５１Ｊ／ｇ。
【０２２７】
特に他に明示しない限り、下記の実施例において使用する化合物１は、実施例１におけるように調製した。
【０２２８】
（実施例３）
ナフトフラン化合物の微粒子化
例えば、化合物１の結晶を粉砕し、１６０ミクロン（μｍ）のふるい（ふるい＃１００、１５０μｍの開口）を通過させ、概ね１６０ミクロン以下の結晶を生じさせた。
【０２２９】
例えば、化合物１の結晶を、約２０ミクロンのメジアン粒径に粉砕した（Ｔｈｅ  Ｒｅｔｓｃｈ超遠心ミルＺＭ２００；単一の通過、１８，０００ｒｐｍ、０．２５ｍｍのスクリーンを使用）。表３は、結果として生じた粒径分布を表す（Ｈｙｄｒｏ２０００Ｓ  ｗｅｔアクセサリーを有するＭａｌｖｅｒｎ２０００）。欄（ｃｏｌｕｍｎ）は、欄の見出しにおける添字に示された総累積パーセントにおける最大の粒径を示す。例えば、欄Ｄ９０は、粒子の９０％がそれ以下の粒径を有する粒径を示す。欄Ｄ５０は、メジアン径（粒子の半分がそれを超える粒径を有し、粒子の半分がそれ以下の粒径を有する）を表す。
【０２３０】
【表３】
2020063308.tif 000019
例えば、表４に示すように、化合物１の結晶を、ジェットミル粉砕法（４’’ジェットミル、ベンチュリ圧力＝４０、粉砕圧力＝１００、送り速度＝１３０４ｇ／時間）を使用して約２ミクロンのメジアン粒径に微粒子化した。粒径分析を、乾燥粒子法（Ｓｙｍｐａｔｅｃ  Ｈｅｌｏｓ／ＫＦ粒径分析器）を使用して行った。
【０２３１】
【表４】
2020063308.tif 000020
粒径分布の対数正規モデルに由来する累積分布関数は、表４において示したデータに良好にフィットした。累積分布関数は、以下によって表され、
【０２３２】
【数３】
2020063308.tif 000021
式中、ｅｒｆは、誤差関数であり、ｄは、粒子直径の変数であり、ｄメジアンは、メジアン粒径であり、σは、累積分布関数の幅に関連するパラメーターである。ＣＤＦ（ｄ）は、ｄ以下の粒径を有する粒子の一部を表す。２．０７ミクロンの観察されたメジアンにｄメジアンを設定し、モデルをフィットさせて、σ＝１．０６の値を得た。このモデルは、３．６ミクロンの平均直径および０．６７ミクロンのモード直径を示した。このモデルはまた２２００ｍ２／ｋｇの粒子の比表面積を示唆するが、表面粗さなどの因子を考慮していない。
【０２３３】
（実施例４）
２ミクロン、２０ミクロン、１５０ミクロンのメジアン粒径の処方物の、マウスにおける薬物動態
実験において、２ミクロン、２０ミクロン、１５０ミクロンの平均粒径を有する実施例２の工程６において調製された微粒子化した化合物１は、２０％Ｇｅｌｕｃｉｒｅ４４／１４および１％Ｔｗｅｅｎ８０中の縣濁物として処方され、経口によりマウスに１００ｍｇ／ｋｇで投与された。各時点は、３匹のマウスの平均を表す（図１６）。
【０２３４】
図１６に示すように、全てが１００ｍｇ／ｋｇで投与されたとき、１２５〜１５０ミクロンの間の粒径を有する化合物１は、２ミクロンおよび２０ミクロン粒子と比較してより低いレベルの曝露を示す一方で、それは同じパターンを示す。２０ミクロン（ｄ５０）の粒径の化合物１は、マウスにおいて、２ミクロン（ｄ５０）の粒径を有する化合物１の用量の場合と同様の血漿曝露を示す。さらに、１２５〜１５０ミクロンの化合物１の曝露を倍にした場合、それは２ミクロンおよび２０ミクロンのＰＫグラフと非常に類似したものとなる。
【０２３５】
（実施例５）
縮小された粒径を有する処方物は腫瘍増殖のより大きな阻害を示す
本研究において、化合物１は、２０ミクロン超の粒径を有する組成物でマウスに投与された場合、効力を示さないか、または弱い効力を示す。しかし、化合物１は、それが５ミクロン未満の粒径の組成物で投与される場合、観察される毒性を伴わずに強力な抗腫瘍活性を有することが見出された。
【０２３６】
実験において、１６０ミクロンまでふるい分けした化合物１の粒子の処方物を、確立された皮下異種移植ＦａＤｕヒト頭頸部がんを有する免疫抑制マウスのモデルにおいて試験した。薬学的組成物を、９％Ｇｅｌｕｃｉｒｅ、２０％ビタミンＥ  ＴＰＧＳ中の８０ｍｇ／ｍｌとして処方した（表３）。図１５に示すように、４００ｍｇ／ｋｇという毎日の経口投与の用量で効力は観察されなかった（ビヒクル対照もまた投与した）。この用量レベルは、図１６に示すＰＫ実験において使用したものよりも４倍高い。したがって、これらのマウスは、良好な効力を示す１００ｍｇ／ｋｇの２ミクロンの化合物１を投与することによって認めるものよりも４倍高い曝露を受ける。全ての投与計画は毎日施行された（ｑｄ）。
【０２３７】
実験において、化合物１の結晶を、約２０ミクロンのメジアン粒径に粉砕した。約２０ミクロンのメジアン粒径に粉砕された化合物１が、異種移植したＦａＤｕヒト頭頸部腫瘍を有するマウスにおいて経口により毎日２００ｍｇ／ｋｇで投与されたときに、弱いまたは中程度の効力のみが観察された（図１５）（ビヒクル対照もまた投与した）。全ての投与計画は毎日施行された（ｑｄ）。
【０２３８】
実施例１において調製した化合物１の結晶をまた試験した。表４に示すように、化合物１の結晶を、ジェットミル粉砕法（４’’ジェットミル、ベンチュリ圧力＝４０、粉砕圧力＝１００、送り速度＝１３０４ｇ／時間）を使用して約２ミクロンのメジアン粒径に微粒子化した。
【０２３９】
ＦａＤｕヒト頭頸部がん細胞を雌性胸腺欠損ヌードマウスの皮下に接種し（６×１０６個の細胞／マウス）、触知できる腫瘍を形成させた。腫瘍が概ね１００ｍｍ３に達したとき、動物を経口（ｐｏ）により１００ｍｇ／ｋｇの化合物１またはビヒクル対照で毎日処置した。化合物１を、２０％ｇｅｌｕｃｉｒｅにおいて１０ｍｇ／ｍｌで処方した。処置を通して腫瘍および体重を測定した（図１５）。
【０２４０】
表５に示すように、化合物１をまた、ジェットミル粉砕法（８’’Ｐａｎｃａｋｅミル、ベンチュリ圧力＝４０、粉砕圧力＝４０、送り速度＝１９２０ｇ／時間）を使用して約２ミクロンのメジアン粒径に微粒子化した。粒径分析を、乾燥粒子法（Ｓｙｍｐａｔｅｃ
Ｈｅｌｏｓ／ＫＦ粒径分析器）を使用して行った。表４において２ミクロンの材料の場合と同様の抗腫瘍活性が観察された。
【０２４１】
【表５】
2020063308.tif 000022
したがって、１５０ミクロンまたは２０ミクロンの化合物１は、２ミクロンの化合物１の場合と同様の血漿曝露パターンを示す（図１６）。これらは、異なる効力を示す：１５０ミクロンの化合物１は、効力を示さず（図１５）、２０ミクロンの化合物１は、弱いまたは中程度の効力を示し、２ミクロンの化合物１は、強い効力を示す。
【０２４２】
図１６に示すように、２０ミクロン（ｄ５０）の粒径の化合物１は、マウスにおいて２ミクロンの粒径（ｄ５０）を有する化合物１の用量の場合と同様の血漿曝露を示す。しかし、驚いたことに、２０ミクロンの粒径を有する化合物１は、マウス異種移植モデルにおいて弱いまたは中程度の効力のみを示す一方、２ミクロンの粒径を有する化合物１は、強力な効力を示す。薬物の効力がその薬物動態をベースとすることは共通の理解であるため、これは予想外の結果である。したがって、両方の粒径が同じ薬物動態を示すため、それらは両方とも等しく効果的であるはずである。
【０２４３】
さらに、１２５〜１５０ミクロンの化合物１の曝露を倍増させた場合、それは２ミクロンおよび２０ミクロンのＰＫグラフと非常に類似したものとなる。興味深いことに、１５０ミクロンの化合物１が４００ｍｇ／ｋｇもの高さのレベルでマウスに投与されるとき、それはまた異種移植モデルにおいて効力を示さない（図１５）。
【０２４４】
これらの結果は、粒径の減少が血漿曝露の増加、したがってより良好な効力をもたらすという従来の見解と反する。
【０２４５】
（実施例６）
ＨＰＬＣアッセイ
このＨＰＬＣ法は、ナフトフラン、例えば、２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン（化合物１）の、ＨＰＬＣによる純度、およびこの反応の完了を評価するためのものである。全ての構成成分は、クロマトグラムにおける総ピークの面積パーセントで表す。
【０２４６】
【表６Ａ】
2020063308.tif 000023
２、溶液の調製
１０ｍＭのリン酸バッファー
１．７４ｇのリン酸水素二カリウムを秤量し、１Ｌの精製水で希釈する（必要とされる量のために重量および容積を調節する）。ｐＨをリン酸でｐＨ６．８に調節する。
【０２４７】
移動相Ａ
８０：２０の比のバッファー：アセトニトリルに１０ｍＭのリン酸バッファーおよびアセトニトリルを混合することによって、移動相Ａを調製する。脱気する。
【０２４８】
移動相Ｂ
２０：８０の比のバッファー：アセトニトリルに１０ｍＭのリン酸バッファーおよびアセトニトリルを混合することによって、移動相Ｂを調製する。脱気する。
【０２４９】
賦形剤
移動相Ａは、全ての試料調製物および標準的調製物のための賦形剤として使用する。
【０２５０】
３、標準の調製
化合物１のストック標準（濃度、約１．０ｍｇ／ｍＬ）
１０ｍｇの化合物１の参照材料を２０ｍＬのシンチレーションバイアル中に秤量して調製する。重量±０．０１ｍｇを記録する。１０ｍＬのＤＭＳＯを加え、固体が溶解するまで超音波処理する。
【０２５１】
【数４】
2020063308.tif 000024
ストック試験試料（濃度、約１．０ｍｇ／ｍＬ）
試験溶液は、２０ｍＬのシンチレーションバイアル中に１０ｍｇの試料を秤量し、１０ｍＬのＤＭＳＯで希釈することによって調製する。
【０２５２】
【数５】
2020063308.tif 000025
処理用試験試料（濃度、約０．０１ｍｇ／ｍＬ）
この溶液は、１ｍＬを１００ｍＬのメスフラスコに移し、賦形剤溶液で希釈することによって調製する。
【０２５３】
【数６】
2020063308.tif 000026
【０２５４】
【表６Ｂ】
2020063308.tif 000027
５、操作手順
下記のシーケンスで溶液を注入する。
１．賦形剤ブランク（１×）
２．化合物１の作業用標準（５×）
３．試験溶液（各々２×）
４．作業用標準（各々１×）
６、システムの適合性
下記の基準に合致した場合、システムは使用に適している。
１．上記シーケンスの始めの賦形剤ブランクの注入には、任意の同定された不純物による干渉ピークが含まれない。
２．化合物１の作業用標準の最初の５回の反復した注入は、（１）％ＲＳＤピーク面積＜３．０％；（２）％ＲＳＤ保持時間＜３．０％；および（３）平均テーリング係数＜２．０を有する。
３．その間に挟んだ標準（ｂｒａｃｋｅｔｅｄ  ｓｔａｎｄａｒｄ）についてのクロマトグラムにおいて、（１）保持時間は、最初の適合性のある注入からの平均保持時間の９７．０〜１０３．０％であり、（２）その面積％は、初期値の９７．０〜１０３．０％である。
【０２５５】
７、計算
全てのピークは、クロマトグラムにおける総ピークの面積％として報告し、これを下記の式を介して統合ソフトウェアによって計算する。
【０２５６】
【数７】
2020063308.tif 000028
ＮＭＲおよびＴＬＣ
【０２５７】
【表６Ｃ】
2020063308.tif 000029
【０２５８】
【表６Ｄ】
2020063308.tif 000030
（実施例７）
２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの調製
化合物１の調製のための手順を下記に提供する。
【０２５９】
工程１：臭素化
機械式撹拌機、温度計、および添加漏斗を備えた２リットルの三つ口丸底フラスコに、３−ブテン−２−オン（４５１．２グラム）を導入する。添加漏斗に、臭素（９３６．０グラム）を加える。フラスコ中の内容物を−５℃に冷却した後、激しく撹拌し、３０分間に亘り温度を−５℃に維持しながら、臭素をフラスコ中に滴下する。混合物を−５℃にてさらに１５分間撹拌し、次いで４つの等しい部分に分割する。
【０２６０】
工程２：脱臭素化
混合物の各々の部分をテトラヒドロフラン（２１３３．６グラム）と共に、機械式撹拌機、温度計、および添加漏斗を備えた２２リットルの四つ口丸底フラスコに加える。添加漏斗に、ＤＢＵ（１，３−ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ−７−エン、２２２．９グラム）を導入する。激しく撹拌し、３０分間に亘り温度を０℃〜５℃に維持しながら、ＤＢＵをフラスコ中に滴下する。混合物を、０℃〜５℃でさらに１５分間撹拌する。
【０２６１】
工程３：カップリング反応
次いで、２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン（２３１グラム）を、フラスコに加える。さらなるＤＢＵ（２４６．０グラム）を添加漏斗中に導入し、次いで反応混合物の温度が４０℃を超えないような速度でフラスコ中の混合物に滴下する。ＤＢＵの添加が完了した後、このように得られた混合物を室温で一晩撹拌し、反応混合物の試料をＨＰＬＣ分析のために採取する。
【０２６２】
反応混合物に、水（１０．８リットル）を導入し、このように得られた混合物を０℃〜３℃に少なくとも３０分間冷却し、次いで真空濾過機によって濾過する。濾過した固体を、５％水性重炭酸ナトリウム（３リットル）、水（３リットル）、１％水性酢酸（３リットル）およびエタノール（２回）（２×１リットル）で連続的にすすぐ。
【０２６３】
工程４：結晶化
すすいだ固体を保存し、他のバッチからのものと一緒にプールする。合わせた粗生成物（２８．７３ｋｇ）を、酢酸エチル（８１１．７ｋｇ）と共に、機械式撹拌機、温度計、およびコンデンサーを備えた５００ガロンの槽に加える。窒素雰囲気下にて、混合物を２時間加熱還流させ（７２℃）、次いで活性炭層を含有する１０ミクロンのカートリッジフィルターで濾過し、不溶物を除去する。
【０２６４】
新鮮な熱い酢酸エチル（１０ｋｇ）を使用して、槽、トランスファーラインおよびフィルターをすすぐ。合わせた濾液を０〜５℃に冷却し、この温度で２時間保持し、次いで２０インチのブフナーフィルターで濾過する。濾過した固体生成物を０〜５℃の酢酸エチル（５．７ｋｇ）ですすぎ、４０℃にて真空下で一定の重量になるまで乾燥させる。
【０２６５】
残留する濾液を蒸発によって容積で６３％減少させ、結晶化プロセスを再び繰り返し、生成物の第２の収穫物を生じさせ、これをまた生成物の第１の収穫物の場合と同じ条件下で乾燥させた。
【０２６６】
上記手順に従って２ロットの化合物１を得た。ＨＰＬＣによって測定して、１ロットは９１．６４面積％の純度を有し、他のロットは９５．４４面積％の純度を有する。
【０２６７】
（実施例８）
粗２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンの調製
化合物１の調製のための別の手順を、以下のように要約する。
【０２６８】
工程１：臭素化
１２ＬのＲＢＦ（丸底フラスコ）（ＵＶフィルターによって光から保護）にＭＶＫ（２，１６０ｍｌ、２６．４ｍｏｌ）を導入し、ドライアイス／アセトン浴中で−９．６℃に冷却した。臭素（１，３００ｍｌ、２５．３ｍｏｌ）を、Ｔ＝＜−２．６℃（Ｔｍａｘ）に維持しながら２時間２０分に亘りゆっくりと加えた。このように得られた黄色の混合物を、さらに２８分間撹拌した。
【０２６９】
工程２：脱臭化水素化
事前冷却したＴＨＦ（テトラヒドロフラン）（２０Ｌ、５ｍｌ／ｇのＨＮＱ（２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン））を有する７２ＬのＲＢＦに上記からの臭素化生成物を導入し、このように得られた溶液を−４．８℃に冷却した。ＴＨＦ（４，２００ｍｌ）に溶解したＤＢＵ（４，２００ｍｌ、２８．１ｍｏｌ）を、Ｔ＜０．３℃（Ｔｍａｘ）に維持しながら２時間２０分に亘りゆっくりと加えた。このように得られた縣濁物を４２分間撹拌した。
【０２７０】
工程３：カップリング
２−ヒドロキシ−１，４−ナフトキノン（４，００３ｇ、２３．０ｍｏｌ）を、−１．８℃で１度に上記からの反応混合物に導入した。第２の部分のＤＢＵ（３，７８０ｍｌ、２５．３ｍｏｌ）を４８分間に亘り加えている間、冷却浴を施して、反応温度を４０℃とした。冷却浴を取り除き、反応混合物を空気に曝しながら週末に亘り撹拌した。
【０２７１】
工程４：粗材料の単離
事前冷却した水（１００Ｌ、２５ｍｌ／ｇのＨＮＱ）を有する２００Ｌの反応器に、上記からの反応混合物を導入した。このように得られた縣濁物を６．０℃に冷却し、次いでＴ＝３±３℃で約１時間撹拌した。次いで、このように得られた縣濁物を濾過し、集めた固体を２００Ｌの反応器に戻した。
【０２７２】
５％ＮａＨＣＯ３水溶液（２６Ｌ、６．５ｍｌ／ｇのＨＮＱ）中で１時間撹拌した後、縣濁物を濾過した。集めた固体を２００Ｌの反応器に戻し、水（２６Ｌ）中で１時間撹拌し、次いで濾過した。
【０２７３】
湿った固体を２００Ｌの反応器に戻し、１％水性酢酸（２６Ｌ）中で約１時間撹拌し、濾過し、次いで濾過用漏斗上で水（１０Ｌ）にて洗浄した。集めた固体を２００Ｌの反応器に戻し、エタノール（１７．５Ｌ；４．３ｍｌ／ｇのＨＮＱ）中で穏やかに加熱還流した（７７．４℃）。このように得られた縣濁物を４．２℃に冷却し、濾過した。
【０２７４】
湿った固体を１００Ｌの反応器に移し、エタノール（１７．５Ｌ；４．３ｍｌ／ｇのＨＮＱ）中で加熱還流した（７７．６℃）。このように得られた縣濁物を４．５℃に冷却し、濾過した。湿ったケークを一晩液体除去した。１Ｈ  ＮＭＲ試料およびＨＰＬＣ試料を採取した。１Ｈ  ＮＭＲ：化合物１／ＮＤＨＦ（２−アセチル−２，３−ジヒドロナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオン）４２：５８％；ＨＰＬＣ：化合物１／ＮＤＨＦ７４：１１面積％。
【０２７５】
固体を真空オーブン中で５０℃にて４日間に亘り乾燥させ、２，２６８ｇの粗化合物１を得た。１Ｈ  ＮＭＲ：化合物１／ＮＤＨＦ４１：５９％；ＨＰＬＣ：化合物１／ＮＤＨＦ６７：１１面積％。
【０２７６】
（実施例９）
ナフトジヒドロフランの酸化
粗化合物１（２．２６８ｋｇ）をトルエン（７７Ｌ）中でスラリー化した。ＭｎＯ２（９５３６ｇ）を加え、混合物を穏やかに加熱還流した。ＴＬＣ（１：１ＥＡ：ヘキサン）から、１時間後に反応の完了が示された。
【０２７７】
次いで、反応混合物を、事前加熱したセライト（１５３０ｇ、底層）、活性炭（２２３０ｇ、中層）、およびセライト（９３２ｇ、最上層）のパッドを通して熱いまま濾過した。黄色〜オレンジ色の濾液を集めた。
【０２７８】
濾液をロータリーエバポレーターで概ね１／１０容積まで濃縮した。スラリーを濾過し、トルエンで洗浄した。次いで、結晶を５０℃で乾燥させ、９５２ｇ（４２％）の暗い黄色の固体を得た。ＨＰＬＣ：９９．９４％。１Ｈ  ＮＭＲは、ナフトジヒドロフランを示さなかった。
【０２７９】
結晶を５０℃にて真空下でさらに４６〜６５時間乾燥させ、材料中の残留トルエンの量を減少させた。
【０２８０】
（実施例１０）
酢酸エチルによる処理
化合物１（５８１６ｇ）を、２００Ｌの反応槽に導入した。酢酸エチル（１４５Ｌ、２５ｍＬ／ｇ）を加え、溶液を２時間２６分に亘り加熱還流させた。還流を５時間３０分間維持し、次いで混合物を冷却し、１７℃に一晩維持した。
【０２８１】
スラリーを、ポリエチレンフリット上で濾過した。黄色の結晶を空気乾燥させ、次いで真空オーブン中のトレイに７５時間置き、５５３２ｇ（９５．１％収率）の黄色の固体を得た。ＨＰＬＣ：９９．８６％。１Ｈ  ＮＭＲは、化合物１の構造と一致する。
【０２８２】
（実施例１１）
酢酸エチルによる再結晶化
２ＬのＲＢＦに、粗材料（１０ｇ）および酢酸エチル（９００ｍｌ）を導入した。混合物を約７７℃で還流し、次いでさらなる酢酸エチル（１００ｍｌ）を加え、完全な溶解を達成した。このように得られた透明な黄色がかった溶液を約３０分間還流させながら撹拌し、次いで加熱器を取り去った。混合物を室温で一晩撹拌した。
【０２８３】
このように得られた縣濁物を濾過し、集めた黄色の固体を漏斗上にて酢酸エチル（３０ｍｌ）ですすいだ。湿った固体を真空オーブン中で４０〜５０℃にて４時間に亘り乾燥させ、８．５３ｇの黄色の結晶性生成物を得た（総収率約１７％）。
【０２８４】
１Ｈ  ＮＭＲ：構造と一致；ＨＰＬＣ：９９．９４面積％；ＤＳＣ：２２８．６８℃、１５１Ｊ／ｇ。
【０２８５】
（実施例１２）
がんおよびがん幹細胞を標的とするナフトフラン化合物の同定
方法
生存中評価：各動物の健康状態に対する毎日の検査をまた行なった。体重を３日毎にチェックした。施設の動物飼育手順によって、食物および水を毎日供給した。＞２０％の死亡率およびまたは＞２０％の正味の体重減少を生じさせる処置を、毒性とみなした。結果は平均腫瘍容積（ｍｍ３）±ＳＥとして表す。Ｐ値＜０．０５は、統計的に関連するとみなす。
【０２８６】
動物飼育：雄性または雌性の胸腺欠損ヌードマウス（４〜５週齢）（Ｃｈａｒｌｅｓ  Ｒｉｖｅｒ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＭＡ．）を、研究の開始の前に少なくとも１週間、動物収容施設に順応させた。利用した実験手順の全ては、アメリカ生理学会によって概説されたガイドラインおよびＧｕｉｄｅ  ｆｏｒ  ｔｈｅ  Ｃａｒｅ  ａｎｄ  Ｕｓｅ  ｏｆ  Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ  Ａｎｉｍａｌｓと一致し、またＢｏｓｔｏｎ  Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ  Ｉｎｃの施設動物管理および使用に関する委員会（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ  Ａｎｉｍａｌ  Ｃａｒｅ  ｚｎｄ  Ｕｓｅ  Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）の承認を受けた。動物を、４匹の群で、制御した温度（６８°Ｆ〜７２°Ｆ）、光（１２時間の明暗サイクル）、および湿度（４５〜５５％）を伴う室内で、木材チップを敷き詰めたケージに収容した。実験の間、動物に水および食物に自由にアクセスさせた。
【０２８７】
（実施例１３）
臨床試験：安全性および効力
２−アセチルナフト［２，３−ｂ］フラン−４，９−ジオンを選択し、米国ＦＤＡおよびカナダ保健省からのＩＮＤ承認を受けた後、第１相臨床試験に入ったが、これは標準的治療に失敗した進行がんを有する成人患者における用量漸増試験（ｄｏｓｅ  ｅｓｃａｌａｔｉｏｎ  ｓｔｕｄｙ）であった。１サイクルは、化合物の１日２回の経口投与（４週間）からなる。疾患の進行、許容されない毒性、または別の中断の基準が経験されるまで、サイクルを４週間（２８日間）毎に繰り返した。非盲検多施設試験として用量漸増試験を行った。修正したサイモンの加速用量設定スキームを、用量漸増のために使用した。
【０２８８】
試験の主目的は、安全性、忍容性、および推奨される第ＩＩ相の用量（ＲＰ２Ｄ）を決定することであった。試験の第２の目的は、化合物の薬物動態プロファイル、化合物の薬力学、および化合物の予備的抗腫瘍活性を決定することであった。
【０２８９】
組み入れ基準は、転移性、切除不能、または再発性である組織学的または細胞学的に確認された固形腫瘍；≧１８歳；ＲＥＣＩＳＴによる測定可能な疾患；およびカルノフスキー≧７０％を含めた。除外基準は、最初の用量の４週間以内の化学療法、放射線療法、免疫療法または研究薬剤（ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌ  ａｇｅｎｔ）；最初の用量の４週間以内の手術；および公知の脳転移を含めた。
【０２９０】
２０１１年２月７日時点で、化学療法に失敗した様々な進行固形腫瘍を有する４２人のがん患者を研究に登録した。上記の基準によって選択された患者の人口統計学的特性およびベースライン疾患特性を、表７に要約した。
【０２９１】
【表７】
2020063308.tif 000031
これらの４２人の患者のうち、１０コホートを、２０ｍｇ／日〜２０００ｍｇ／日の範囲の用量で評価した。用量漸増は忍容性良好であり、用量制限毒性は観察されなかった。有害事象は全体的に軽度であり、最も共通したのは、下痢、悪心、および疲労であった。グレード３以上の事象には、疲労および下痢が含まれる。これらの有害事象は、これらの末期がん患者が臨床試験の間、経験するものについての記録である（これは、化合物１と関連し得る、または関連し得ない）。有害事象を表８に要約した。
【０２９２】
【表８】
2020063308.tif 000032
現在まで、ＭＴＤにもＲＰ２Ｄにも達しなかった。約１０００ｍｇ／日までの用量の化合物は、明らかな直線的な薬物動態を伴う、有望な薬物動態を示し、２８日間毎の繰り返される毎日の投与による薬物蓄積の証拠はなかった。３２０ｍｇ／日の用量レベルで、化合物の血漿濃度は、少なくとも１．５μＭの濃度で（インビトロでの化合物のＩＣ５０：３０〜５００ｎＭ）８時間に亘り持続した。異なる用量群の平均血漿濃度を、図１２に示した。
【０２９３】
投与された４２人の患者の内２４人は、２０１１年２月７日時点の腫瘍反応について評価可能であった。１６人（１６人／２４人の評価可能な患者）は、安定疾患を達成した（８〜７５＋週間）。現在まで登録した患者を、表９に要約した。
【０２９４】
【表９−１】
2020063308.tif 000033
【０２９５】
【表９−２】
2020063308.tif 000034
ＲＥＣＩＳＴ１．１によって、１６人／２４人の評価可能な患者はＳＤ／ＭＲを示し、１２人は延長されたＳＤ（＞１２週間）を示す。新たな転移病変は、投与された患者の８３％において予防された。
【０２９６】
患者０００１における腎臓への結腸がん転移病変の完全な退縮を図１９に示す。２０ｍｇの毎日の投与で、患者の尿中の高濃度の化合物が観察された。尿中の化合物の富化（表１０）は、相対的低投与量で観察された完全な退縮を説明する。
【０２９７】
患者０００１における腎臓への結腸がん転移病変の完全な退縮を図１９に示す。２０ｍｇの毎日の投与で、患者の尿中の高濃度の化合物が観察された。尿中の化合物の富化は、相対的低投与量で観察された完全な退縮を説明する助けとなり得る。
【０２９８】
【表１０】
2020063308.tif 000035
したがって、化合物は、優れた安全性プロファイルを示した。用量制限毒性は現在まで観察されなかった。
【０２９９】
１日２回の経口投与による有望なＰＫプロファイルがまた観察された。血漿濃度は効果的な濃度（インビトロＩＣ５０）の数倍に達した。ＡＵＣデータを、表１１に示す。
【０３００】
【表１１】
2020063308.tif 000036
さらに、抗腫瘍活性の徴候が観察された。２４人の患者のうち１６人は、結腸直腸腺癌、頭頸部がん、肺がん、乳がん、胃がん、および卵巣がん、黒色腫を含めた一連の化学療法に対して難治性である腫瘍においてＲＥＣＩＳＴによってＳＤ／ＭＲを示した。腎臓への結腸がん転移病変の完全な退縮が一例あった（図１９）。化合物１で処置された患者は新たな転移性腫瘍病変の劇的な欠如を示した。進行難治性がんを有する２４人の評価可能な患者の内、８０％超が転移性腫瘍を示さなかった。
【０３０１】
ＢＢＩ６０８処置の間に延長された安定疾患（＞１６週間）を達成した患者は、抗−ｐ−ＳＴＡＴ３抗体を使用した免疫組織化学による処置の前に、患者の腫瘍組織において高レベルのｐ−ＳＴＡＴ３を有することが見出された（図２５）。
【０３０２】
（実施例１４）
投与計画
本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態を含めた薬学的組成物の治療有効量は、約２０ｍｇ〜約２０００ｍｇ、約２４０ｍｇ〜約１５００ｍｇ、または約４００ｍｇ〜約１０００ｍｇの範囲の総１日用量でよい。
【０３０３】
適切な投与計画は、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態の１日用量を単回で投与することを含む。例えば、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態は、約２０ｍｇの１日１回〜約１０００ｍｇの１日１回の範囲の１日用量が単回で投与される。
【０３０４】
適切な投与計画は、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態の１日用量を複数回に分けて投与することを含む。例えば、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態は、１日用量を２回に分けて投与され、総１日用量は、約４０ｍｇ〜約２０００ｍｇの範囲にある。例えば、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態は、１日用量を２回に分けて投与され、各用量は、約２０ｍｇ〜１０００ｍｇの範囲にある。例えば、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態は、１日用量を２回に分けて投与され、各用量は、約１６０ｍｇ〜６００ｍｇの範囲にある。例えば、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態は、１日用量を２回に分けて投与され、各用量は、約２００ｍｇ〜５００ｍｇの範囲にある。例えば、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態は、１日用量を２回に分けて投与され、各用量は、約５００ｍｇである。
【０３０５】
適切な投与計画は、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態の１日用量を３回に分けて投与することを含み、総１日用量は、約６０ｍｇ〜約１５００ｍｇの範囲にある。例えば、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態は、１日用量を３回に分けて投与され、各用量は、約２０ｍｇ〜５００ｍｇの範囲にある。例えば、本発明の化合物の粒子、多形および／または精製した形態は、１日用量を３回に分けて投与され、各用量は、１６０ｍｇ〜５００ｍｇの範囲にある。
【０３０６】
ヒト被験体が約５００ｍｇの化合物１を１日２回投与される投与計画（すなわち、１０００ｍｇの総１日用量）は、処置療を受けた殆ど全ての患者において最良な選択的薬物動態の達成を示してきた。本明細書において５００ｍｇの１日２回と称されるこの投与計画は、ヒトにおいて化合物１の所望の薬物動態特性を実証した（図２０）。
【０３０７】
別の適切な投与計画において、５００ｍｇの化合物１を、ヒト被験体に１日３回（ＴＩＤ）投与する。化合物１の曝露のレベルは、１日２回投与と比較して１日３回投与によって有意に改善されない一方、１日３回の投与用量は、ヒトにおける薬物の曝露時間を増加させる。本明細書において５００ｍｇの１日３回と称されるこの用量計画は、薬物が関連する顕著な有害事象が観察されずにヒトにおいて良好な忍容性を示してきた。
【０３０８】
また別の適切な投与計画において、約２０ｍｇ以上の化合物１を、ヒト被験体に毎日１回投与する。本明細書において２０ｍｇの１日１回と称されるこの投与計画は、患者において治療的活性レベルを示してきたが、ヒトにおいて血液から急速に取り除かれる（図２１）。この用量計画は、ヒトにおいて良好な忍容性、および尿中の非常に高濃度の薬物によって腎臓における結腸がん病変に強力な抗腫瘍活性の徴候を示してきた。
【０３０９】
また別の適切な投与計画において、化合物１を、空の胃に乳と共に投与するが、これは望ましい薬物動態を与える（表１２）。
【０３１０】
【表１２】
2020063308.tif 000037
また別の適切な投与計画において、化合物１を食物と共に投与し、これはＴｍａｘを遅延させる（表１３）。
【０３１１】
【表１３】
2020063308.tif 000038
（実施例１５）
ナフトフラン化合物は、無増悪生存期間を延長する
無増悪生存期間（ＰＦＳ）の延長は、化学療法に対して難治性である進行結腸直腸がんを有する患者において示されてきた（図２２）。無増悪生存期間の延長はまた、頭頸部がん、胃がん、卵巣がん、３重陰性（ｔｒｉｐｌｅ  ｎｅｇａｔｉｖｅ）乳がん、黒色腫、アドレノコルチコイドがん（ａｄｒｅｎｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ  ｃａｎｃｅｒ）、および肺がんを有する患者において認められてきた。
【０３１２】
１ｕＭ超の化合物１の薬物血中濃度は、結腸直腸がん、胃がん、頭頸部がん、黒色腫、軟骨肉腫、肺がん、前立腺がん、卵巣がん、アドレノコルチコイドがんおよび血管肉腫を含めた多様ながんを有する患者における無増悪生存期間の増加と相関した（図２３）。
【０３１３】
（実施例１６）
化合物１の薬物動態プロファイル
化合物１はがん細胞および正常細胞に対して等しく毒性であることが見出され、がんを処置するために潜在力のあるものではないことが結論付けられた（Ｋ．  Ｈｉｒａｉ  Ｋ．ら、Ｃａｎｃｅｒ  Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ  ａｎｄ  Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ、２３巻（６号）（１９９９年）５３９〜５５０頁；Ｔａｋａｎｏ  Ａ．ら、Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ  Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２９巻：４５５〜４６４頁、２００９年）。本明細書に記載されている研究は、がん細胞およびがん幹細胞が、化合物１によって死滅するのに正常細胞よりはるかに短い曝露を必要とすることを反直感的に発見した。正常細胞は、化合物１への２４時間までの曝露に忍容性を示すことができる。さらに、本研究は、正常細胞は、短期間の薬物への非曝露後に回復することができ、一方がん細胞は、特定の濃度の化合物１に少なくとも２時間一度曝露すると回復することができないことを発見した。これらの研究に基づいて、特別の薬物動態学的曝露［選択的薬物動態プロファイル（ＳＰＰ）、または好ましい薬物動態プロファイル（ＰＰＰ）と称し、この刊行物において互換的に使用する］を、患者において選択的抗腫瘍活性を達成するために、表１４において下記で示したデータを使用して化合物１について設計した（図２４）。
【０３１４】
【表１４】
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本発明の化合物（化合物１、粒子、多形および／またはその精製した形態など）への適切なＳＰＰまたはＰＰＰ曝露は、少なくとも２時間、少なくとも１．０μＭ以上であり、薬物血中濃度は、２４時間内に実質的に取り除かれなくてはならない。
【０３１５】
例えば、患者は、少なくとも１．５μＭの濃度の本発明の化合物（化合物１、粒子、多形および／またはその精製した形態など）への曝露を定められた期間、好ましくは少なくとも２時間維持し、薬物は、２４時間内に実質的に取り除かれなくてはならない。上記化合物へのより長い曝露は、毒性および／または選択性の喪失をもたらし得る。
【０３１６】
この所望のＳＰＰまたはＰＰＰを達成するために、本発明の化合物は、被験体、例えば、患者において、少なくとも約０．０２μＭ〜約３０μＭの範囲の化合物の血中濃度を達成するための用量で投与することができる。例えば、本発明の化合物は、被験体において、少なくとも２時間ではあるが２４時間未満の時間、少なくとも約０．５μＭ超の化合物の血中濃度を達成するための用量で投与することができる。例えば、本発明の化合物は、被験体において、少なくとも２時間ではあるが２４時間未満の時間、少なくとも約２μＭの化合物の血中濃度を達成するための用量で投与することができる。
【０３１７】
好ましくは、がん細胞の死滅を誘発するために、がん細胞を本発明の化合物（化合物１、粒子、多形および／またはその精製した形態など）に０．２μＭ超の濃度で４時間曝露させなければならない。しかし、延長された曝露は、がん細胞を死滅させることにおける本発明の化合物（化合物１、粒子、多形および／またはその精製した形態など）の効力に有意に寄与しない。化合物１の濃度が約０．５超〜約３μＭ超に２４時間未満維持されたときに、化合物１は、がん細胞を死滅させ、正常細胞を温存することにおいて選択的活性を示した。化合物１の縮小された粒径は、この好ましい薬物動態学的パターンおよび選択的活性を達成した。
【０３１８】
がん細胞を死滅させ、正常細胞を温存することにおける化合物１の選択的活性は、表１４におけるデータによって表され、図２４において例示される。約０．２μＭ以上および約３０μＭ以上の濃度での化合物１への約４時間から約２４時間までのがん細胞の曝露は、がん細胞の選択的死滅および正常細胞の温存を示した。２４時間を超える期間のこれらの濃度での連続的曝露は、正常細胞もまた損傷したという点で選択性の喪失をもたらした。０．５μＭ未満の血中濃度での化合物１への曝露は、曝露時間の量に関わらず、がん細胞の死滅をもたらさなかった。
【０３１９】
本明細書に記載されている投与計画は、この好ましいＰＫパターンを示す。例えば、５００ｍｇの１日２回が投与されている患者において示されるＰＫは、患者において、この好ましいＰＫ曝露パターンであり（図２０）、これは、２４時間までに薬物の実質的な除去を伴う、治療レベルを超える化合物１の持続した曝露を示す。８０ｍｇの１日２回から２００ｍｇの１日２回により、用量依存的な薬物血漿濃度の増加を伴ってＳＰＰまたはＰＰＰが患者において達成された。３００ｍｇの１日２回および４００ｍｇの１日２回により、薬物血漿濃度は、２００ｍｇの１日２回超のさらなる増加が制限されるようであった。しかし、５００ｍｇの１日２回は、驚いたことに患者間の差異を減少させる助けをすることができ、すなわち、全ての処置を受けた患者は、十分に高い薬物血漿濃度でＳＰＰを達成することができることが見出された（図１２）。最後に、１．６ｕＭ超の化合物１に少なくとも４時間曝露された患者は、無増悪生存期間の改善を示し、このことは、この曝露パターンがヒトにおいて改善された効力をもたらすことを示す。１ｕＭ超の化合物１のＰＫ曝露は、結腸直腸がん、胃がん、頭頸部がん、黒色腫、軟骨肉腫、肺がん、前立腺がん、卵巣がん、アドレノコルチコイドがんおよび血管肉腫を含めた多様ながんを有する患者における無増悪生存期間（図２３）の増加と相関する。これらのデータは、前臨床実験から予想されるものと非常に異なる。前臨床試験において、化合物は、約１００〜２００ｎＭのＩＣ５０でがん細胞またはがん幹細胞を死滅させることを示した。しかし、これらの濃度が臨床活性と関連しないことが患者において臨床で観察された。対照的に、血漿濃度は、活性の徴候を有するのに１ｕＭ超に達しなくてはならない。約２ｕＭ以上または約３ｕＭ以上への薬物血漿濃度のさらなる増加は、抗腫瘍活性の改善された徴候と関連する。
【０３２０】
本明細書において例示および考察された実施形態は、本発明を作製および使用するために本発明者らに公知の最良の方法を当業者に教示することのみを意図する。本明細書において何物も本発明の範囲を限定するものとして考えるべきではない。示された全ての実施例は、代表であり、制限するものではない。上記の本発明の実施形態は、上記の教示に照らして当業者が認識するように、本発明から逸脱することなく修正または変更し得る。したがって、特許請求の範囲およびこれらの同等物内で、本発明は特に記載したものとは別の方法で実施し得ることが理解される。
【図１】
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【図２】
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【図３】
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【図４】
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【図５Ａ】
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【図５Ｂ】
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【図６Ａ】
2020063308.tif 000046
【図６Ｂ】
2020063308.tif 000047
【図６Ｃ】
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【図６Ｄ】
2020063308.tif 000049
【図７】
2020063308.tif 000050
【図８】
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【図９】
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【図１０】
2020063308.tif 000053
【図１１】
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【図１２】
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【図１３−１】
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【図１３−２】
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【図１４】
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【図１５】
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【図１６】
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【図１７】
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【図１８】
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【図１９】
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【図２０】
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【図２１】
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【図２２】
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【図２３】
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【図２４】
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【図２５】
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【外国語明細書】
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