(57)【要約】【課題】潅流、培地の交換、薬液の投与、混合と言った作業が細胞へ刺激を極力与えないよう、特に、培養容器への液体の供給と排出を行う給排部の構成形状に工夫を凝らした装置の提供。【解決手段】供給専用端部としての潅流ＩＮパイプ２５と薬液ＩＮパイプ３１は、下端側が半割り状になった舌片状部分２５ｂ、３１ｂが連なっており、供給液、例えば液体培地Ｂや薬液が、それぞれ舌片状部分２５ｂ、３１ｂを伝わって流下し、ディッシュ４１内に入った液体培地Ｂの液面Ｂ１に導かれる。チューブポンプによる吐出により液体培地Ｂ等を供給するが、吐出した際の脈動が消失した状態で供給される。また、チューブ内にエア（空気）が巻き込まれていても、基端２５ｂ、３１ｂと液面Ｂ１との間には十分な距離があるので、ディッシュ４１内の液面Ｂ１に到達する前に上方に逃げる。従って、バブリングの発生が阻止される。【選択図】  図１１
2020031545.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
顕微鏡ステージ上に設置される培養容器と、前記培養容器への液体の供給と排出を行う給排部と、前記給排部をプログラム動作により制御可能なコントローラとを備えた顕微鏡観察用培養装置において、
前記給排部の供給専用端部は、前記培養容器内に垂下され、下端側が半割り状になって舌片状に連なったパイプで構成されており、
液体の供給時に、前記液体が前記舌片状部分を伝わって流下し前記培養容器の液面に導かれることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置。
【請求項２】
請求項１に記載した顕微鏡観察用培養装置において、
給排部の排出専用端部が、培養容器内に垂下され、横孔が形成されたパイプで構成されており、前記横孔は、液面の上限位置に配置されており、
前記給排部の給排兼用端部が、前記培養容器内に垂下され、横孔が形成されたパイプで構成されており、前記横孔は、液面の下限位置に配置されていることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置。
【請求項３】
請求項２に記載した顕微鏡観察用培養装置において、
給排部の排出専用端部と給排兼用端部は近接して垂下されており、互いの横孔が外方を向いて配置されることを特徴とすることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置。
【請求項４】
請求項２または３に記載した顕微鏡観察用培養装置において、
給排兼用端部の横孔は、液体の供給時に培養容器に入れられた液体を囲む側面に沿って渦状の液流が発生する位置に設定可能になっていることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置。
【請求項５】
請求項４に記載した顕微鏡観察用培養装置において、
培養容器は断面円形のディッシュになっていることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置。
【請求項６】
請求項４または５に記載した顕微鏡観察用培養装置において、
培養容器内にインサートが着脱自在になっており、且つ給排兼用端部の横孔の向きが変更可能になっていることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置。
【請求項７】
請求項６に記載した顕微鏡観察用培養装置において、
給排兼用端部の保持部が複数位置に形成されており、給排兼用端部の保持位置を変更することで、インサートを使用した場合と前記インサートを使用しない場合とで横孔の向きが変更可能になっていることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置。
【請求項８】
請求項１から７のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養装置において、
給排部はチューブポンプにより培養容器への液体の供給と排出を行うことを特徴とする顕微鏡観察用培養装置。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、顕微鏡ステージ上に設置される培養容器と、前記培養容器への液体の供給と排出を行う給排部と、前記給排部をプログラム動作により制御可能なコントローラとを備えた顕微鏡観察用培養装置に関するものである。
【背景技術】
【０００２】
特許文献１に開示された顕微鏡観察用培養装置では、培養容器を顕微鏡ステージに設置して使用するようになっている。
このような装置では、温度や湿度と言った培養環境を維持できるよう構成されており、潅流、培地の交換、薬液の投与、混合と言った作業は作業者が完全に手作業で行うか、或いは、ボタンの押下等によるマニュアル操作で行っている。
【０００３】
而して、完全な手作業では、作業者の熟練度に差があることから、標準化が難しい。マニュアル操作では、その欠点は幾分解消されるが、作業のタイミングを計ることも慣れが必要である。
最近では、長時間にわたって細胞等を所定の時間間隔で継続的に顕微鏡観察するようになってきており、途中の作業の失敗でこのような長時間試験が徒労に終わると、手間の損失が大きくなる。
一方、プログラム動作でコントローラから動作指令を発するようにすると、作業者の手から上記した作業が完全に離れることになるが、熟練された作業者は、細胞等へのダメージを極力抑えるよう、繊細且つ慎重な作業を行っており、そのような気配りも失われることになる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２００８−２５９４３０号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００５】
本発明は上記した従来の問題点に鑑みて為されたものであり、プログラム動作による潅流、培地の交換、薬液の投与、混合と言った作業が細胞へ刺激を極力与えることのないよう、特に、培養容器への液体の供給と排出を行う給排部の構成形状に工夫を凝らした、新規且つ有用な顕微鏡観察用培養装置を提供することを、その目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００６】
本発明は上記課題を解決するためになされたものであり、請求項１の発明は、顕微鏡ステージ上に設置される培養容器と、前記培養容器への液体の供給と排出を行う給排部と、前記給排部をプログラム動作により制御可能なコントローラとを備えた顕微鏡観察用培養装置において、前記給排部の供給専用端部は、前記培養容器内に垂下され、下端側が半割り状になって舌片状に連なったパイプで構成されており、液体の供給時に、前記液体が前記舌片状部分を伝わって流下し前記培養容器の液面に導かれることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置である。
【０００７】
請求項２の発明は、請求項１に記載した顕微鏡観察用培養装置において、給排部の排出専用端部が、培養容器内に垂下され、横孔が形成されたパイプで構成されており、前記横孔は、液面の上限位置に配置されており、前記給排部の給排兼用端部が、前記培養容器内に垂下され、横孔が形成されたパイプで構成されており、前記横孔は、液面の下限位置に配置されていることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置である。
【０００８】
請求項３の発明は、請求項２に記載した顕微鏡観察用培養装置において、給排部の排出専用端部と給排兼用端部は近接して垂下されており、互いの横孔が外方を向いて配置されることを特徴とすることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置である。
【０００９】
請求項４の発明は、請求項２または３に記載した顕微鏡観察用培養装置において、給排兼用端部の横孔は、液体の供給時に培養容器に入れられた液体を囲む側面に沿って渦状の液流が発生する位置に設定可能になっていることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置である。
【００１０】
請求項５の発明は、請求項４に記載した顕微鏡観察用培養装置において、培養容器は断面円形のディッシュになっていることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置である。
【００１１】
請求項６の発明は、請求項４または５に記載した顕微鏡観察用培養装置において、培養容器内にインサートが着脱自在になっており、且つ給排兼用端部の横孔の向きが変更可能になっていることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置である。
【００１２】
請求項７の発明は、請求項６に記載した顕微鏡観察用培養装置において、給排兼用端部の保持部が複数位置に形成されており、給排兼用端部の保持位置を変更することで、インサートを使用した場合と前記インサートを使用しない場合とで横孔の向きが変更可能になっていることを特徴とする顕微鏡観察用培養装置である。
【００１３】
請求項８の発明は、請求項１から７のいずれかに記載した顕微鏡観察用培養装置において、給排部はチューブポンプにより培養容器への液体の供給と排出を行うことを特徴とする顕微鏡観察用培養装置である。
【発明の効果】
【００１４】
本発明の顕微鏡観察用培養装置によれば、培養容器への液体の供給と排出を行う給排部の構成形状に特徴があり、熟練作業者の手を介さずに、プログラム動作で作業させた場合でも潅流、培地の交換、薬液の投与、混合と言った作業を信頼性高く行わせることができる。
【図面の簡単な説明】
【００１５】
【図１】本発明の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養装置の全体の斜視図である。
【図２】図１のコントロール側に設けられたピンチバルブの動作説明図である。
【図３】図１の培養容器を含む培養器の分解斜視図である。
【図４】図３の培養容器の斜視図である。
【図５】図４におけるインサート無しの場合のディッシュと各種パイプの概略的な配置関係図である。
【図６】図５の各種パイプの形状説明図である。
【図７】図５のディッシュ内のパイプの配置状態の説明図である。
【図８】図４のインサート有りの場合のディッシュと各種パイプの概略的な配置関係図である。
【図９】図８のディッシュ内のパイプの配置状態の説明図である。
【図１０】図４の培養容器のパイプ保持溝の説明図である。
【図１１】持続潅流のイメージ図である。
【図１２】培地の交換のイメージ図である。
【図１３】薬液の投与のイメージ図である。
【図１４】薬液の混合の（インサート無しの場合の）イメージ図である。
【図１５】薬液の混合の（インサート有りの場合の）イメージ図である。
【発明を実施するための形態】
【００１６】
本発明の実施の形態に係る顕微鏡観察用培養装置１を、図面にしたがって以下で説明する。
なお、培養環境を維持するために、湿度や温度等その他の維持機構も備えているが、本発明の特徴は、給排部にあるので、その他の部分の図示や記載は適宜省略している。
【００１７】
この顕微鏡観察用培養装置１では、図１に示すように、コントローラ３を利用している。このコントローラ３がマイクロコンピュータを備えており、そのプログラム動作によって制御手段が実現されるようになっている。
図１に示すように、コントローラ３のボックス状筐体５の外面にチューブポンプ７、９が取り付けられている。これらのチューブポンプ７、９は、加圧部材と円形状の内周を有する外側部材の間に可撓性チューブを配置し、加圧部材を偏心運動させて当該チューブを順次圧迫してポンプ作用を行うものであり、構造が簡単であり、当該チューブ内を汚染させずに送液できることから、液体培地の供給と排出に利用されている。
【００１８】
これらのチューブポンプ７、９は互いに独立して駆動される。これらの駆動用のモーター（図示省略）は共に筐体５内に設置されている。チューブポンプ７のモーターは正逆回転可能になっている。
チューブポンプ７に配設された可撓性チューブは、流通方向一方側が二つに分岐しており、一方が潅流ＯＵＴ（上限）チューブ１１、他方が潅流ＯＵＴ（下限）チューブ１５になっている。筐体５の同じ面側には、ピンチバルブ１９も取り付けられており、潅流ＯＵＴ（上限）チューブ１１、潅流ＯＵＴ（下限）チューブ１５が、このピンチバルブ１９に取り付けられている。図２に示すように、ピンチバルブ１９のシャフト２１がチューブ１１、１５の間に介装されており、未動作時には潅流ＯＵＴ（上限）チューブ１１を押し潰して不通にする一方で、潅流ＯＵＴ（下限）チューブ１５を開通させ、動作時には潅流ＯＵＴ（上限）チューブ１１を開通させる一方で、潅流ＯＵＴ（下限）チューブ１５を押し潰して不通にするようになっている。
流通方向他方側は廃液系（図示省略）に繋がっている。
【００１９】
チューブポンプ９に配設された可撓性チューブは、潅流ＩＮチューブ２３になっている。この潅流ＩＮチューブ２３の流通方向一方側は液体培地Ｂの供給系（図示省略）に繋がっている。
筐体５の外面には、更に、薬液投与用に、専用のエアポンプ接続部２６が設けられている。筐体５の内部にはエアポンプ（図示省略）が設置されており、このエアポンプ接続部２６を介してポンプ作用が働くようになっている。エアポンプ接続部２６には筒状の薬液セット部２７が着脱自在に接続される。図１には、この薬液セット部２７の内部に薬液をセットした後でエアポンプ接続部２６に一端側を接続した状態が示されている。薬液セット部２７の他端側には可撓性チューブの流通方向一方側が着脱自在に接続されており、これが薬液ＩＮチューブ２９になっている。
【００２０】
コントローラ３のプログラム動作によって実現された制御手段によって、上記したチューブポンプ７、９、ピンチバルブ１９、エアポンプの動作が制御される。
潅流ＯＵＴ（上限）チューブ１１、潅流ＯＵＴ（下限）チューブ１５の流通方向一端側と、潅流ＩＮチューブ２３、薬液ＩＮチューブ２９の流通方向他端側は、それぞれ、剛性のパイプに接続されており、これらは潅流ＯＵＴ（上限）パイプ１３、潅流ＯＵＴ（下限）パイプ１７、潅流ＩＮパイプ２５、薬液ＩＮパイプ３１になっている。
これらのパイプ１３、１７、２５、３１で、給排部が構成されている。
【００２１】
図３に示すように、培養器３３の本体は、収容ユニット３５とその上側開口を閉鎖する蓋体３７とで構成されており、収容ユニット３５の内部縁側には水槽部が設けられ、中心部が液体培地Ｂと共に観察対象となる細胞や組織を入れる培養容器３９の収容空間となっている。
培養容器３９の容器本体は透明なディッシュ４１になっている。このディッシュ４１は底面が円形の浅い有底円筒状になっている。ディッシュ４１には必要に応じてインサート４３を入れて容量を変更可能になっている。このインサート４３の中心には菱形孔が形成されており、インサート４３を使用してもしなくとも、ディッシュ４１の中心に細胞等を入れられるようになっている。ディッシュ４１の開口上面はインサート４３を使用した場合にはインサート抑え４５で抑えた上で、固定蓋４７で閉じられる。インサート４３を使用しなかった場合には、ディッシュ４１の開口上面は直接固定蓋４７で閉じられる。固定蓋４７の中心部は円状に開口して開口部４９になっており、薬液投与蓋５７で開閉可能になっている。この薬液投与蓋５７は顕微鏡観察用の透光部を兼ねている。
【００２２】
図４の拡大図に示すように、固定蓋４７に上記したパイプ１３、１７、２５、３１が位置決めされて固定される。
固定蓋４７は開口部の縁に沿って横長に切り欠かれており、この切欠きの縁と薬液投与蓋５７の縁とで囲まれた部分がパイプ挿通孔５１になっている。このパイプ挿通孔５１から固定蓋４７の外周縁まで直線状にパイプ保持溝５３が連なっている。このパイプ保持溝５３は凹状になって上方に開口している。
パイプ挿通孔５１と２つのパイプ保持溝５３を一組として、合計で二組設けられており、固定蓋４７の一つの直径方向両側にそれぞれ配置されている。同じ側で一組をなす二つのパイプ保持溝５３、５３は互いに平行に延びている。
更に、一方のパイプ挿通孔５１には、パイプ保持溝５３の他に、パイプ保持溝５５が同様の構成で連なっている。このパイプ保持溝５５とパイプ保持溝５３は、ほぼ直交している。
【００２３】
ディッシュ４１はアタッチメント５９に装着するようになっている。このアタッチメント５９には嵌込み穴６１と押え片６３が設けられており、ディッシュ４１の底部を嵌込み穴６１に嵌め込んで、押え片６３で弾性的に抑えることで、ディッシュ４１がアタッチメント５９に固定される。アタッチメント５９は培養器３３の収容ユニット３５の底部開口に装着される。
この顕微鏡観察用培養装置１を使用する際には、図４に示すように固定蓋４７をディッシュ４１に取り付けて培養容器３９とした上で培養器３３に収容し、この培養器３３を顕微鏡ステージに設置する。
【００２４】
図５〜図７で詳細に示すように、パイプ１３、１７、２５、３１は、いずれも、中間で垂直に屈曲されてＬ字状になっており、水平部分がパイプ保持溝５３、５３、……に載せられて保持され、鉛直部分がパイプ挿通孔５１を通ってディッシュ４１内に垂下されており、それぞれ垂下部分１３ａ、１７ａ、２５ａ、３１ａになっている。
パイプ１３、１７の垂下部分１３ａ、１７ａの下端部は共に閉塞されている。
図６に示すように、潅流ＯＵＴ（上限）パイプ１３の垂下部分１３ａには、断面円形の横孔１３ｐが形成されており、潅流ＯＵＴ（下限）パイプ１７の垂下部分１７ａにも、同様な横孔１７ｐが形成されているが、下端閉塞部からの距離が異なった個所に形成されており、横孔１３ｐの高さ位置Ｈ１は、横孔１７ｐの高さ位置Ｈ２よりも高くなっている。
この実施の形態では、ディッシュ４１は市販の３５ｍｍサイズのものになっており、それに対応してＨ１は４ｍｍ、Ｈ２は１．２ｍｍに設定されている。
【００２５】
潅流ＩＮパイプ２５の垂下部分２５ａの下端側は、半割りされて舌片状に連なっている。この舌片状部分２５ｂの基端２５ｃがパイプの開口部となっている。この基端２５ｃは、潅流ＯＵＴ（上限）パイプ１３の横孔１３ｐよりも高さ位置が高くなっている。基端２５ｃは、ディッシュ４１に入れた培地の液面よりも高くなるように設計されている。
薬液ＩＮパイプ３１は、潅流ＩＮパイプ２５と同形状・同寸法で形成されている。
【００２６】
図５〜図７では、インサート無しの場合で、ディッシュ４１にパイプ１３、１７、２５、３１を配置した状態を示す。
一方のパイプ挿通孔５１からは、潅流ＯＵＴ（上限）パイプ１３と潅流ＯＵＴ（下限）パイプ１７が垂下されている。垂下部分１３ａ、１７ａは互いに平行に垂下されており、それぞれの下端部はディッシュ４１の底上面に当接している。横孔１３ｐ、１７ｐは互いに向かい合わないように外方を向いている。なお、図７では、横孔１３ｐ、１７ｐは真逆（すなわち、１８０°）の方向を向いているが、これに限定されず、９０°程度でもよい。
パイプ１３、１７の垂下部分１３ａ、１７ａどうしが近接していると、表面張力の影響を受け易いが、このように、横孔１３ｐ、１７ｐは対向せずに外方、特に、この実施の形態の場合には反対方向を向いているので、液面のレベリングの精度や混合の作業に悪影響は出ない。
【００２７】
他方のパイプ挿通孔５１からは、潅流ＩＮパイプ２５と薬液ＩＮパイプ３１が垂下されている。垂下部分２５ａ、３１ａは互いに平行に垂下されており、それぞれの下端部はディッシュ４１の底上面に当接している。舌片状部分２５ｂ、３１ｂの凹面側は、共に、ディッシュ４１の中心側を向いている。従って、図７の矢印に示すように、流下した液体は潅流ＯＵＴ（上限）パイプ１３、潅流ＯＵＴ（下限）パイプ１７に向かう、穏やかな流れとなる。
【００２８】
図８、図９は、インサート有りの場合で、ディッシュ４１にパイプ１３、１７、２５、３１を配置した状態を示す。
インサート４３をディッシュ４１に入れた場合には、インサート４３の菱形の孔縁のうち２つの鋭角部分４３ａ、４３ａが、ディッシュ４１の内側面に近づいており、そこに、パイプ１３、１７、２５、３１が垂下されるようになっている。このように、インサート４３を使用した場合を考慮して、パイプ１３、１７どうし、パイプ２５、３１どうしは近接した状態で垂下するようになっているが、上記したように、パイプ１３、１７どうしは表面張力の悪影響が出ないように工夫されている。
また、図４、図５に示すように、インサート無しの場合には、全てパイプ保持溝５３に保持させていたが、この場合には、潅流ＯＵＴ（下限）パイプ１７をパイプ保持溝５５に保持させて、横孔１７ｐの向く位置を変更させている。
【００２９】
図１０に示すように、潅流ＯＵＴ（下限）パイプ１７の水平部分を、パイプ保持溝５３、５５のいずれかを選択して保持させることで、上記のように垂下部分１７ａの横孔１７ｐの向きを変更することができる。
【００３０】
給排部は上記のように構成されており、ディッシュ４１内に入れられた細胞等に対して、コントローラ３からの動作指令によって、上記したチューブポンプ７、９、ピンチバルブ１９、エアポンプの動作が制御されて、持続潅流、培地の交換、薬液の投与、薬液の混合の作業が進行する。
【００３１】
（Ａ）持続潅流（図１１）
チューブポンプ９の作動により、潅流ＩＮパイプ２５から、ディッシュ４１内に液体培地Ｂが供給される。
チューブポンプ９はその構造上脈動が発生し、流量を一定にすることが難しいが、潅流ＩＮパイプ２５の舌片状部分２５ｂが液体培地Ｂ内に入り込んでいるので、チューブポンプ９で送られてきた液体培地Ｂが舌片状部分２５ｂを伝わって流下し、ディッシュ４１内の液体培地Ｂの液面Ｂ１に導かれており、吐出した際の脈動が消失した状態で供給される。舌片状部分２５ｂは液面Ｂ１よりも下方に入り込んでいるので、供給する液体培地Ｂがぽたぽたと滴下することもない。
また、潅流ＩＮパイプ２５内にエア（空気）Ａが巻き込まれていても、基端２５ｃと液面Ｂ１との間には十分な距離があるので、ディッシュ４１内の液面Ｂ１に到達する前に矢印に示すように上方に逃げる。従って、バブリングの発生が阻止される。
【００３２】
並行して、チューブポンプ７の作動により、液面Ｂ１を超えようとする液体培地Ｂは、潅流ＯＵＴ（上限）パイプ１３を通して吸引排出される。横孔１３ｐよりも、液体培地Ｂの液面Ｂ１が低い場合には、エア（空気）を吸引し、横孔１３ｐに液体培地Ｂの液面Ｂ１が被ってくると、液体培地Ｂが吸引排出される。
吸引流量が供給流量よりも僅かに大きくなるように設定されるので、横孔１３ｐによるレベリングは精度の高いものとなっている。
また、供給側のパイプ２５と吸引側のパイプ１３とがほぼ対角線上にあり、且つ、低流量で実施されるので、液の流れが液面Ｂ１を乱さない穏やかなものとなっている。
【００３３】
（Ｂ）培地の交換（図１２）
チューブポンプ７の作動により、ディッシュ４１内から、潅流ＯＵＴ（下限）パイプ１７を通して液体培地Ｂの液面Ｂ１が下限位置になるまで吸引排出される。直前まで持続潅流が実施されていた場合には、液体培地Ｂの液面Ｂ１が横孔１３ｐの高さになっているので、液面Ｂ１が横孔１７ｐの高さに下がるまで、排出が続行する。
その後、チューブポンプ９の作動により、潅流ＩＮパイプ２５から、ディッシュ４１内に液体培地Ｂが吐出供給される。供給と並行して、チューブポンプ７の作動により、潅流ＯＵＴ（上限）パイプ１３から排出されるので、液面Ｂ１は上限位置を超えることはない。潅流ＩＮパイプ２５による吐出供給と、潅流ＯＵＴ（上限）パイプ１３による吸引排出の際には、上記「（Ａ）持続潅流」と同様な作用が働く。
【００３４】
（Ｃ）薬液の投与（図１３）
エアポンプの作動により、薬液ＩＮパイプ３１から、ディッシュ４１内に薬液Ｙが吐出供給される。供給と並行して、チューブポンプ７の作動により、潅流ＯＵＴ（上限）パイプ１３から排出されるので、液面Ｂ１は上限位置を超えることはない。
薬液ＩＮパイプ３１は上記「（Ａ）持続潅流」の潅流ＩＮパイプ２５と同様な作用が働く。エアポンプを利用しているので、エア（空気）が巻き込まれ易いが、上記したようにエア（空気）が逃げられるので、バブリングの発生が効果的に阻止される。
【００３５】
（Ｄ）薬液の混合（図１４、１５）
チューブポンプ７の作動方向を吸引用と吐出用とに交互に替える。
チューブポンプ７の吸引作動により、潅流ＯＵＴ（下限）パイプ１７に液体培地Ｂと共に薬液Ｙが吸引排出され、チューブ内に留まった後に、今度は、チューブポンプ７の吐出作動により、潅流ＯＵＴ（下限）パイプ１７から吐出供給されて、液体培地Ｂと共に薬液Ｙがディッシュ４１内に戻される。
この吸引排出と吐出供給が繰り返される。
【００３６】
混合の目的に沿って流量を大きく設定するので、供給・排出のいずれの場合にも液流が発生する。パイプの下端を開口し、ディッシュ４１の底上面から離して下孔として利用されると、特に、供給の際に、近接したディッシュ４１の底上面に、下孔から出てきた液体培地Ｂの液流が衝突して、その勢いが急速に削がれることになるが、この実施の形態では、横孔１７ｐが利用されるので勢いがディッシュ４１の底上面との衝突により削がれることはない。
【００３７】
図１４の左図に示すように、インサート無しの場合には横孔１７ｐからの吐出し方向が矢印に示すようになり、液体培地Ｂの液流がディッシュ４１の対向する内側面４１ａに衝突し、その後は内側面全体に沿って流れる渦流となるので、液流の勢いは削がれずに、混合が促進される。また、ディッシュ４１の中心に置かれた細胞等Ｓに与えるダメージは最小限になっている。
液体培地Ｂが吸引されるときにも、同様に液流が渦流になる。
従って、図１４の右図に示すように、吐出・吸引により、反対方向の渦流が交互に発生することになり、この交互作用からも混合が促進される。
【００３８】
インサート有りの場合に、上記のインサート無しの場合と同様に横孔１７ｐの向きを配置すると、非常に近接したインサート４３の内側面に横孔１７ｐから吐出された液体培地Ｂの液流が衝突するので、液体培地Ｂが噴き上がると共に、勢いが急速に削がれるが、潅流ＯＵＴ（下限）パイプ１７をパイプ保持溝５５に保持させることで、図９に示す位置に横孔１７ｐがくることになり、図１５に示すように、横孔１７ｐからの吐出し方向を矢印のように変更できる。容量の限られたインサート４３内での混合を考慮して流量が下げられるが、インサート４３の容量に対応してそこに供給された液体培地Ｂの混合に十分な勢いの液流は確保される。
このように、インサート４３を使用した場合にも対応できるようになっている。なお、横孔１７ｐは横孔１３ｐの真逆の位置になっていないが、９０°は離れているので、表面張力の影響は抑えられる。
【００３９】
上記したように、作業（Ａ）、（Ｂ）、（Ｃ）、（Ｄ）では、給排部の端部をなすパイプ１３、１７、２５、３１の形状的特徴や配置上の工夫が生かされて、細胞等Ｓへのダメージを最小限としつつ、それぞれの作業が信頼性高く遂行される。
【００４０】
以上、本発明の実施の形態について詳述してきたが、具体的構成は、この実施の形態に限られるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲における設計の変更などがあっても発明に含まれる。
例えば、培養容器はディッシュに限定されず、ウエルプレートなども含まれる。但し、断面円形のディッシュを使用した場合には、その形状的利点を生かして、混合作業の際には、液流が綺麗な渦流を描くように容易に誘導できるので、好ましい培養容器になっている。
【符号の説明】
【００４１】
１…顕微鏡観察用培養装置              ３…コントローラ        ５…筐体
７、９…チューブポンプ              １１…潅流ＯＵＴ（上限）チューブ
１３…潅流ＯＵＴ（上限）パイプ        １３ａ…垂下部分        １３ｐ…横孔
１５…潅流ＯＵＴ（下限）チューブ      １７…潅流ＯＵＴ（下限）パイプ
１７ａ…垂下部分    １７ｐ…横孔      １９…ピンチバルブ      ２１…シャフト
２３…潅流ＩＮチューブ                ２５…潅流ＩＮパイプ    ２５ａ…垂下部分
２５ｂ…舌片状部分  ２５ｃ…基端      ２６…エアポンプ接続部  ２７…薬液セット部
２９…薬液ＩＮチューブ                ３１…薬液ＩＮパルプ    ３１ａ…垂下部分
３１ｂ…舌片状部分  ３１ｃ…基端      ３３…培養器            ３５…収容ユニット
３７…蓋体          ３９…培養容器    ４１…ディッシュ
４１ａ…（ディッシュの）内側面        ４３…インサート
４３ａ…（インサートの）鋭角部分      ４５…インサート抑え    ４７…固定蓋
４９…開口部        ５１…パイプ挿通孔                        ５３…パイプ保持溝
５５…パイプ保持溝  ５７…薬液投与蓋  ５９…アタッチメント    ６１…嵌込み穴
６３…押え片          Ｂ…液体培地      Ｂ１…（液体培地の）液面
Ｙ…薬液            Ｓ…細胞等        Ｈ１、Ｈ２…横孔の高さ
【図１】
2020031545.tif 000003
【図２】
2020031545.tif 000004
【図３】
2020031545.tif 000005
【図４】
2020031545.tif 000006
【図５】
2020031545.tif 000007
【図６】
2020031545.tif 000008
【図７】
2020031545.tif 000009
【図８】
2020031545.tif 000010
【図９】
2020031545.tif 000011
【図１０】
2020031545.tif 000012
【図１１】
2020031545.tif 000013
【図１２】
2020031545.tif 000014
【図１３】
2020031545.tif 000015
【図１４】
2020031545.tif 000016
【図１５】
2020031545.tif 000017