(57)【要約】【課題】運動時の筋損傷を抑制可能な筋損傷抑制剤を提供する。【解決手段】筋損傷抑制剤をイミダゾールジペプチドと分岐鎖アミノ酸とを含んで構成する。筋損傷抑制剤におけるイミダゾールジペプチドに対する分岐鎖アミノ酸の含有比は、例えば、重量基準で０．２以上０．６以下である。【選択図】図４
2020031556.tif 000002
【特許請求の範囲】
【請求項１】
イミダゾールジペプチドと分岐鎖アミノ酸とを含む筋損傷抑制剤。
【請求項２】
イミダゾールジペプチドに対する分岐鎖アミノ酸の含有比が、重量基準で０．２以上０．６以下である請求項１に記載の筋損傷抑制剤。
【請求項３】
アルギニン、クエン酸及びコエンザイムＱ１０を更に含む請求項１又は２に記載の筋損傷抑制剤。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【０００１】
本発明は、筋損傷抑制剤に関する。
【背景技術】
【０００２】
抗疲労成分として、分岐鎖アミノ酸、イミダゾールジペプチド等が知られている。これらによって抗疲労効果を得るためには、分岐鎖アミノ酸の場合で少なくとも２０００ｍｇ、イミダゾールジペプチドの場合には少なくとも４００ｍｇを摂取する必要があるとされている。また、分岐鎖アミノ酸及びイミダゾールジペプチドを含む抗疲労剤組成物が知られている（例えば、特許文献１参照）。
【０００３】
伸張性筋収縮を伴う運動では、運動中に生成する活性酸素によって筋肉に微細な損傷が起こり、その損傷を基に遅発性筋肉痛が発症する。このような筋損傷及び遅発性筋肉痛は、最大発揮筋力及び関節可動域の減少等の原因になり、筋肉疲労、最大下筋収縮、力発揮感覚、運動学習などの多くの運動機能に影響を及ぼすとされている。これに関連して、イミダゾールジペプチドを含む鶏胸肉抽出物が、遅発性筋肉痛を低減することが知られている（例えば、非特許文献１参照）。
【先行技術文献】
【特許文献】
【０００４】
【特許文献１】特開２０１４−１１４２４４号公報
【非特許文献】
【０００５】
【非特許文献１】環太平洋大学研究紀要（１），８３−８７，２００８
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【０００６】
本発明は、運動時の筋損傷を抑制可能な筋損傷抑制剤を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【０００７】
本発明の第１の態様は、イミダゾールジペプチドと分岐鎖アミノ酸とを含む筋損傷抑制剤である。筋損傷抑制剤におけるイミダゾールジペプチドに対する分岐鎖アミノ酸の含有比は、例えば、重量基準で０．２以上０．６以下である。また、筋損傷抑制剤は、アルギニン、クエン酸及びコエンザイムＱ１０を更に含んでいてもよい。第２の態様は、前記筋損傷抑制剤を対象に摂取させることを含む筋損傷の抑制方法である。筋損傷の抑制方法では、筋損傷抑制剤を運動前に摂取させてもよい。
【発明の効果】
【０００８】
本発明によれば、運動時の筋損傷を抑制可能な筋損傷抑制剤を提供することができる。
【図面の簡単な説明】
【０００９】
【図１】運動負荷時の平均パワーを示すグラフである。
【図２】運動負荷後の酸化ストレス度の変化を示すグラフである。
【図３】運動負荷後の抗酸化力の変化を示すグラフである。
【図４】運動負荷後の８−ＯＨｄＧ生成速度を示すグラフである。
【図５】運動負荷後の血中乳酸濃度の変化を示すグラフである。
【図６】運動負荷後３分までの血中乳酸濃度の増加量を示すグラフである。
【図７】運動負荷後の疲労感ＶＡＳの変化を示すグラフである。
【図８】運動負荷後の下肢屈曲時筋痛ＶＡＳの変化を示すグラフである。
【図９】運動負荷後の下肢伸展時筋痛ＶＡＳの変化を示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【００１０】
本明細書において「工程」との語は、独立した工程だけではなく、他の工程と明確に区別できない場合であってもその工程の所期の目的が達成されれば、本用語に含まれる。また組成物中の各成分の含有量は、組成物中に各成分に該当する物質が複数存在する場合、特に断らない限り、組成物中に存在する当該複数の物質の合計量を意味する。以下、本発明の実施形態を詳細に説明する。ただし、以下に示す実施形態は、本発明の技術思想を具体化するための、筋損傷抑制剤を例示するものであって、本発明は、以下に示す筋損傷抑制剤に限定されない。また、筋損傷の抑制とは、伸張性筋収縮を伴う運動によって生成する活性酸素による筋肉に対する酸化的損傷を抑制することを意味する。
【００１１】
筋損傷抑制剤は、第１成分としてイミダゾールジペプチドと、第２成分として分岐鎖アミノ酸とを有効成分として含む。イミダゾールジペプチドに加えて分岐鎖アミノ酸を含むことで、それぞれを単独に摂取する場合に比べて少ない摂取量で、運動時における筋肉の損傷を効果的に抑制することができる。また、運動時における筋損傷が抑制されることで、遅発性筋肉痛が抑制され、翌日以降の運動パフォーマンスを維持、向上させることができる。更に、筋損傷抑制剤は抗疲労作用を有し、運動後の疲労軽減、回復効果に優れた作用を示すことができる。
【００１２】
なお、運動による筋損傷の抑制効果は、例えば、運動後に尿中の８−ヒドロキシデオキシグアノシン（以下、８−ＯＨｄＧと略記することがある）量を測定することで評価することができる。８−ＯＨｄＧは、生体内のＤＮＡ酸化的損傷マーカーとして知られており、激しい運動後には尿中の８−ＯＨｄＧ量が上昇することが知られている。したがって、運動後における尿中８−ＯＨｄＧ量の増加が抑制されていれば、運動時の筋損傷が抑制されていることを示している。
【００１３】
第１成分としてのイミダゾールジペプチドは、Ｌ−ヒスチジンとβ−アラニンから形成されるジペプチド又はその誘導体である。イミダゾールジペプチドとしては、例えば、Ｌ−カルノシン、Ｌ−アンセリン、Ｌ−バレニン、Ｌ−ホモカルノシン、カルシニン、これらのアシル誘導体（例えば、Ｎ−アセチル−Ｌ−カルノシン、Ｎ−アセチル−Ｌ−アンセリン、Ｎ−アセチル−Ｌ−ホモカルノシン等）等が挙げられ、これらからなる群から選択される少なくとも１種が好ましく、Ｌ−カルノシン、Ｌ−アンセリン及びＬ−バレニンからなる群から選択される少なくとも１種がより好ましく、Ｌ−カルノシンが特に好ましい。なお、イミダゾールジペプチドのアシル誘導体は、例えば、公知のアシル化剤を使用してそれ自体公知の方法で製造することができる。
【００１４】
イミダゾールジペプチドは、筋損傷抑制剤に遊離塩基として含まれていても、塩として含まれていてもよい。塩としては、塩酸塩、硫酸塩、燐酸塩、二燐酸塩、臭化水素酸塩、硝酸塩等の無機酸塩；酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、メタンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、サルチル酸塩、シュウ酸塩、ステアリン酸塩、アスコルビン酸塩、リンゴ酸塩、アジピン酸塩、グルコン酸塩等の有機酸塩が挙げられる。
【００１５】
イミダゾールジペプチドは、脊椎動物の筋肉、脳等に多く存在するジペプチド成分である。渡り鳥、回遊魚等の筋肉中にも多く存在し、これらの動物が長時間にわたって活動し続けることが可能なのはイミダゾールジペプチドに起因するとも言われている抗疲労成分である。摂取量は、イミダゾールジペプチド単独で優れた抗疲労効果を得る場合、４００ｍｇ以上摂取する必要があることが一般的に知られている（例えば、「薬理と治療」、ｐｐ１１９−２１２、ｖｏｌ．３６、Ｎｏ．３、２００８及びｐｐ２５５−２６３、ｖｏｌ．３７、Ｎｏ．３、２００９参照）。イミダゾールジペプチドは、魚介類、鶏肉等を含む家畜肉などの動物性材料を熱水抽出、溶剤抽出、超臨界抽出などの方法により得られる抽出物、その精製物等として得ることができる。また、イミダゾールジペプチドは、市販されている純品を使用してもよく、化学合成されたＬ−カルノシンが好ましく用いられる。
【００１６】
筋損傷抑制剤におけるイミダゾールジペプチドの含有量は、例えば、５重量％以上８０重量％以下であり、好ましくは１０重量％以上５０重量％以下、または１０重量％以上４０重量％以下である。また、筋損傷抑制剤におけるイミダゾールジペプチドの含有量は、イミダゾールジペプチドの１日の摂取量として、例えば、５０ｍｇ以上１０００ｍｇ以下となる含有量であり、好ましくは８０ｍｇ以上８００ｍｇ以下、１００ｍｇ以上４００ｍｇ未満、又は１００ｍｇ以上３００ｍｇ以下となる含有量である。
【００１７】
第２成分としての分岐鎖アミノ酸（ＢＣＡＡ）は、バリン、ロイシン及びイソロイシンの総称であり、人体内で合成することができない必須アミノ酸である。また、分岐鎖アミノ酸は筋肉のエネルギー源となる重要な栄養素である。分岐鎖アミノ酸は抗疲労効果を有することが知られているが、抗疲労効果を得るには少なくとも２０００ｍｇの摂取が必要とされている。筋損傷抑制剤は、分岐アミノ酸としてバリン、ロイシン及びイソロイシンからなる群から選択される少なくとも１種を含むことが好ましく、少なくともロイシンを必須成分として含有することがより好ましい。
【００１８】
筋損傷抑制剤におけるイミダゾールジペプチドに対する分岐鎖アミノ酸の含有比は、例えば、重量基準で０．２以上０．６以下であり、好ましくは０．３以上０．５以下である。また、筋損傷抑制剤における分岐鎖アミノ酸の含有量は、例えば、１重量％以上２５重量％以下であり、好ましくは３重量％以上２０重量％以下、または５重量％以上１５重量％以下である。また、筋損傷抑制剤における分岐鎖アミノ酸の含有量は、分岐鎖アミノ酸の１日の摂取量として、例えば、１０ｍｇ以上２００ｍｇ以下となる含有量であり、好ましくは４０ｍｇ以上１５０ｍｇ以下、４０ｍｇ以上１００ｍｇ以下、又は６０ｍｇ以上１００ｍｇ以下となる含有量である。
【００１９】
筋損傷抑制剤が、分岐鎖アミノ酸としてロイシン以外のバリン及びイソロイシンの少なくとも一方を含む場合、イミダゾールジペプチドに対するバリン及びイソロイシンの少なくとも一方の含有比は、例えば、重量基準で０．６以下であり、好ましくは０．４以下、０．２以下又は０．１以下である。また下限は、例えば、０．０１以上である。
【００２０】
筋損傷抑制剤は、アルギニン、シトルリン、カルニチン、葉酸、グリセロホスホコリン、及びヒドロキシメチル酪酸からなる群から選択される少なくとも１種の第３成分を更に含んでいてもよい。筋損傷抑制剤が第３成分を含む場合、イミダゾールジペプチドに対する第３成分の含有比は、例えば、重量基準で０．２以上０．６以下であり、好ましくは０．３以上０．５以下である。また、筋損傷抑制剤における第３成分の含有量は、例えば、１重量％以上２５重量％以下であり、好ましくは３重量％以上２０重量％以下、または５重量％以上１５重量％以下である。
【００２１】
筋損傷抑制剤は、コエンザイムＱ１０（還元型コエンザイムＱ１０であってもよい）、及びピロロキノリンキノンからなる群から選択される少なくとも１種の第４成分を更に含んでいてもよい。筋損傷抑制剤が第４成分を含む場合、イミダゾールジペプチドに対する第４成分の含有比は、例えば、重量基準で０．０５以上０．６以下であり、好ましくは０．１以上０．４以下、又は０．１以上０．２以下である。また、筋損傷抑制剤における第４成分の含有量は、例えば、１重量％以上１５重量％以下であり、好ましくは２重量％以上１０重量％以下、または２重量％以上５重量％以下である。
【００２２】
筋損傷抑制剤は、クエン酸、酒石酸、アスコルビン酸、リンゴ酸、乳酸、及びグルコン酸からなる群から選択される少なくとも１種の第５成分を更に含んでいてもよい。筋損傷抑制剤が第５成分を含む場合、イミダゾールジペプチドに対する第５成分の含有比は、例えば、重量基準で０．２以上０．６以下であり、好ましくは０．３以上０．５以下である。また、筋損傷抑制剤における第５成分の含有量は、例えば、１重量％以上２５重量％以下であり、好ましくは３重量％以上１５重量％以下、または５重量％以上１５重量％以下である。
【００２３】
筋損傷抑制剤は、イミダゾールジペプチド、分岐鎖アミノ酸に加えて、少なくともアルギニン、コエンザイムＱ１０及びクエン酸を含むこともまた好ましい。
【００２４】
筋損傷抑制剤の剤型は使用目的等に応じて適宜選択することができる。剤形としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、トローチ剤、散剤、液剤等の経口投与用製剤；注射剤、点滴剤、坐剤等の非経口投与用製剤等が挙げられる。これらの製剤は、賦形剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤、安定剤、矯味矯臭剤、希釈剤等の添加剤を用いて公知の方法に従って製造することができる。
【００２５】
賦形剤としては、例えば、乳糖、白糖、ブドウ糖、マンニトール、ソルビトール、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、結晶性セルロース、アラビアゴム、デキストラン、プルラン、軽質無水珪酸、合成珪酸アルミニウム、炭酸カルシウム、燐酸水素カルシウム等を挙げることができる。滑沢剤としては、例えば、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、コロイダルシリカ等を挙げることができる。結合剤としては、例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、マクロゴール等を挙げることができる。崩壊剤としては、例えば、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルスターチ、カルボキシメチルスターチナトリウム、架橋ポリビニルピロリドン等を挙げることができる。安定剤としては、例えば、メチルパラベン、プロピルパラベン、ベンジルアルコール等を挙げることができる。矯味矯臭剤は、例えば、通常使用される甘味料、酸味料、香料等から適宜選択される。
【００２６】
筋損傷抑制剤は、健康食品、健康補助食品等の食品組成物、飲料組成物等として構成することもできる。食品組成物、飲料組成物等の形態としては、発酵乳、茶飲料、果汁加工飲料、栄養ドリンク、スポーツドリンク、クッキー、キャンディー、タブレット等を挙げることができる。特に種々の生理効果を有する飲料組成物として、スポーツドリンク、エナジードリンクとすることが好ましい。スポーツドリンク等に構成することで、水分補給と同時に運動時の筋損傷を効果的に抑制することができる。
【００２７】
筋損傷抑制剤を、スポーツドリンク、エナジードリンク等の飲料組成物として構成する場合、イミダゾールジペプチドの１日当たりの摂取量が、例えば、５０ｍｇ以上１０００ｍｇ以下、好ましくは８０ｍｇ以上８００ｍｇ以下、１００ｍｇ以上４００ｍｇ未満、又は１００ｍｇ以上３００ｍｇ以下となるように構成することができる。また、分岐鎖アミノ酸の１日当たりの摂取量は、例えば、１０ｍｇ以上１００ｍｇ以下、好ましくは２０ｍｇ以上８０ｍｇ以下、２０ｍｇ以上６０ｍｇ以下、又は３０ｍｇ以上５０ｍｇ以下となるように構成することができる。このとき、飲料組成物中のイミダゾールジペプチドに対する分岐鎖アミノ酸の含有比は、例えば、重量基準で０．２以上０．６以下であり、好ましくは０．３以上０．５以下である。飲料組成物とする場合は、５００ｍＬもしくは５００ｇ入り容器、３５０ｍＬもしくは３５０ｇ入り容器、２００ｍＬ容器もしくは２００ｇ入り容器、１００ｍＬもしくは１００ｇ入り容器、または５０ｍＬもしくは５０ｇ入り容器に１回当たりの摂取量を添加すると、短時間で効率的な摂取が可能となる。
【００２８】
飲食品組成物の製造に際しては、その他の食品素材、すなわち各種の糖質、乳化剤、増粘剤、甘味料、酸味料、香料、アミノ酸、果汁等を適宜添加することができる。具体的には、蔗糖、異性化糖、グルコース、フラクトース、パラチノース、トレハロース、ラクトース、キシロース等の糖類；ソルビトール、キシリトール、エリスリトール、ラクチ
トール、パラチニット、還元水飴、還元麦芽糖水飴等の糖アルコール類；アスパルテーム、ステビア、アセスルファムカリウム、スクラロース等の高甘味度甘味料；蔗糖脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、レシチン等の乳化剤；カラギーナン、キサンタンガム、グァーガム、ペクチン、ローカストビーンガム等の増粘（安定）剤；クエン酸、乳酸、リンゴ酸等の酸味料；レモン果汁、オレンジ果汁、ベリー系果汁等の果汁類等から選択される少なくとも１種を適宜添加することができる。この他にも、ビタミンＡ、ビタミンＢ類、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ等のビタミン類；カルシウム、鉄、マンガン、亜鉛等のミネラル類等を添加してもよい。
【００２９】
筋肉損傷の抑制方法
筋肉損傷の抑制方法は、前記筋損傷抑制剤を対象に投与することを含む。筋損傷抑制剤は、対象が運動、特に激しい運動する前に対象に投与することが好ましい。投与の対象は、例えば、ヒトを含む哺乳動物である。１日当たりの総投与量は、投与する対象、目的等に応じて適宜選択され、イミダゾールジペプチドとして、例えば、５０ｍｇ以上１０００ｍｇ以下であり、好ましくは１００ｍｇ以上４００ｍｇ以下である。また、分岐鎖アミノ酸として、例えば、１０ｍｇ以上２００ｍｇ以下であり、好ましくは６０ｍｇ以上１００ｍｇ以下である。
【実施例】
【００３０】
以下、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００３１】
（実施例１）
４カプセル中にＬ−カルノシン：２００ｍｇ、ロイシン：８０ｍｇ、アルギニン：８０ｍｇ、クエン酸：８０ｍｇ、コエンザイムＱ１０：３０ｍｇを含むカルノシン主成分サプリメント（以下ＣＡＲと略記することがある；浜理薬品工業株式会社製）と、デンプンをカプセルに入れたプラセボ（以下ＰＬＡと略記することがある）を試験剤として準備した。被験対象者として、健常成人男性９名（２０から２２歳）を選択し、実験の目的、方法について詳細に説明し、文書による参加の同意を得た。
【００３２】
実験手順
実験デザインは、無作為クロスオーバー法による二重盲検法とし、７日間以上のウォッシュアウト期間を設けた。実験当日の朝食は抗酸化作用の強い食品は避け、普段通りの食事とした。また、実験当日の朝から実験終了までの飲料は水のみ可とした。被験者は実験室に到着後に２０分以上の安静状態を保持して安静時の採血を行い、コントロール食を摂取させた。食後すぐにＣＡＲ（４カプセル）あるいはＰＬＡを水と一緒に経口摂取させた。摂取２時間後に運動負荷を開始した。また、運動前の採血及び排尿を運動３０分前に実施した。運動終了の３分後と３０分後に採血、２時間後に採血および採尿を行った。
【００３３】
運動負荷
運動は、ウインゲートテスト（Wingate anaerobic test；無酸素性持久力テスト）の方法に従って３０秒間の全力自転車運動を３本実施した。運動の間の回復時間は４分間とした。自転車運動は、自転車エルゴメータ（Ｐｏｗｅｒｍａｘ−ＶＩＩ、コンビ株式会社製）を用いて、体重１ｋｇ当たり０．０７５ｋｐの負荷で実施した。被験者毎にサドルおよびハンドルの高さを調節し、トゥクリップで両足をペダルに固定した。運動中はサドルから腰を上げないようにさせ、常に最大努力でペダリングするように指示した。運動パフォーマンスは、運動時の平均パワーから評価した。なお、運動前に、下肢を中心としたストレッチングと５秒間の全力自転車漕ぎ運動を含む約１０分間のウォームアップを行った。運動時の平均パワー（Ｗ）、ピークパワー（Ｗ）及び３本の平均パワーの平均値（Ｗ）を表１及び図１に示す。
【００３４】
運動負荷
【表１】
2020031556.tif 000003
【００３５】
表１及び図１に示すように運動パフォーマンスには、カルノシン主成分サプリメントとプラセボとの間に有意差はなかった。
【００３６】
測定項目
以下の測定項目においては、測定された数値の平均値及び標準偏差を示した。血液データの時系列変動の平均値の差の検定は反復のある一元配置分析にて行い、Ｆ値に有意差が認められた場合、多重比較をＤｕｎｎｅｔにて行った。その他の平均値の差の検定は、ｔ検定（ｔ−ｔｅｓｔ）で行った。
【００３７】
１．酸化ストレス度（ｄ−ＲＯＭｓ）と抗酸化力（ＢＡＰ）
血液のＢＡＰとｄ−ＲＯＭｓは，フリーラジカル解析装置（ＦＲＥＥ  Ｃａｒｒｉｏ  Ｄｕｏ、株式会社ウイスマー社製）を用いて測定した。ＢＡＰは血漿中の三価鉄イオンを二価鉄イオンに還元する還元作用から評価した。ｄ−ＲＯＭｓはフリーラジカルによる代謝産物のヒドロペルオキシドの血漿中の濃度を測定することにより評価した。採血方法は、指先自己採血法にてミクロベットを用いて実施した。酸化ストレス度（ｄ−ＲＯＭｓ）の結果を表２及び図２に、抗酸化力（ＢＡＰ）の結果を表３及び図３に示す。
【００３８】
酸化ストレス度（ｄ−ＲＯＭｓ）
【表２】
2020031556.tif 000004
【００３９】
抗酸化力（ＢＡＰ）
【表３】
2020031556.tif 000005
【００４０】
ｄ−ＲＯＭｓはカルノシン主成分サプリメント及びプラセボともに運動後３分で有意な上昇を示したが、両条件間に有意な差は認められなかった。
ＢＡＰは両条件ともに安静時から有意な変動を認められなかった。また、カルノシン主成分サプリメント摂取条件のＢＡＰはプラセボ摂取条件に比べ、運動３分後に有意に（ｐ＜０．０５）低値を示した。
【００４１】
２．尿中８−ＯＨｄＧ
尿中８−ヒドロキシデオキシグアノシン（８−ＯＨｄＧ）は尿中酸化ストレスマーカー測定システム（株式会社セリスタ社製）を用いて運動後２時間の尿中８−ＯＨｄＧ濃度を測定した。得られた尿中８−ＯＨｄＧ濃度は、排尿時からの経過時間と排尿量から単位時間当たりの生成速度（ｎｇ／ｈ／ｋｇ）を算出した。なお、尿中８−ＯＨｄＧの生成速度は体重で補正した。結果を表４及び図４に示す。
【００４２】
尿中８−ＯＨｄＧ
【表４】
2020031556.tif 000006
【００４３】
尿中８−ＯＨｄＧ生成速度は、カルノシン主成分サプリメント摂取条件がプラセボ摂取条件と比較して有意に（ｐ＜０．０５）低値を示した。
【００４４】
３．血中乳酸濃度
血中乳酸濃度（ｍｍｏｌ／Ｌ）はラクテート・プロ２（株式会社アークレイ）を用いて測定した。測定は、安静時、運動終了の３分後、３０分後、２時間後の計４回実施した。血中乳酸濃度（ｍｍｏｌ／Ｌ）の結果を表５及び図５に示す。表５には、安静時から運動後３分までの増加量（ｍｍｏｌ／Ｌ）を併せて示し、そのグラフを図６に示す。
【００４５】
血中乳酸濃度
【表５】
2020031556.tif 000007
【００４６】
運動後の血中乳酸濃度は両条件間に有意な差がなかった。一方、安静時から運動後３分までの血中乳酸濃度増加量の平均値は、カルノシン主成分サプリメント摂取条件がプラセボ摂取条件と比較して、有意ではないものの（ｐ＝０．０６）低値を示した。
【００４７】
４．疲労感ＶＡＳ検査及び下肢筋痛ＶＡＳ検査
疲労感は日本疲労学会により示されている疲労感ＶＡＳ検査用紙を用いて測定した。下肢筋痛のＶＡＳは脚の伸展時と屈曲時の２つの筋痛を評価した。筋痛の評価は１０ｃｍの直線の左側を「立位で右脚を曲げたときに、筋肉痛を全く感じない」または「立位で右脚を伸ばしたときに、筋肉痛を全く感じない」とし、右側を「立位で右脚を曲げたときに、これまで経験したことのないような最大の筋肉痛を感じる」または「立位で右脚を伸ばしたときに、これまで経験したことのないような最大の筋肉痛を感じる」とした。疲労感ＶＡＳ検査及び下肢筋痛ＶＡＳ検査は、安静時、運動終了の３分後、３０分後、２時間後の計４回実施した。疲労感ＶＡＳ検査の結果を表６及び図７に、下肢屈曲時筋痛ＶＡＳ検査の結果を表７及び図８に、下肢伸展時筋痛ＶＡＳ検査の結果を表８及び図９に示す。
【００４８】
疲労感ＶＡＳ検査
【表６】
2020031556.tif 000008
【００４９】
下肢屈曲時筋痛ＶＡＳ検査
【表７】
2020031556.tif 000009
【００５０】
下肢伸展時筋痛ＶＡＳ検査
【表８】
2020031556.tif 000010
【００５１】
運動後２時間の時点の疲労感ＶＡＳはカルノシン主成分サプリメント摂取条件がプラセボ摂取条件と比較して有意に（ｐ＜０．０１）低値を示した。一方、下肢の筋痛のＶＡＳには両条件間に有意な差がなかった。
【００５２】
（実施例２）
試験剤として、Ｌ−カルノシン：２００ｍｇ及びロイシン：８０ｍｇを含むカルノシン主成分サプリメント２（ＣＡＲ２；浜理薬品工業株式会社製）と、デンプンをカプセルに入れたプラセボ（ＰＬＡ）を準備して、実施例１と同様にしてサプリメント２の効果を調べた。
【００５３】
運動負荷
【表９】
2020031556.tif 000011
【００５４】
酸化ストレス度（ｄ−ＲＯＭｓ）
【表１０】
2020031556.tif 000012
【００５５】
抗酸化力（ＢＡＰ）
【表１１】
2020031556.tif 000013
【００５６】
尿中８−ＯＨｄＧ
【表１２】
2020031556.tif 000014
【００５７】
血中乳酸濃度
【表１３】
2020031556.tif 000015
【００５８】
疲労感ＶＡＳ検査
【表１４】
2020031556.tif 000016
【００５９】
下肢屈曲時筋痛ＶＡＳ検査
【表１５】
2020031556.tif 000017
【００６０】
下肢伸展時筋痛ＶＡＳ検査
【表１６】
2020031556.tif 000018
【００６１】
Ｌ−カルノシンとロイシンを含むサプリメントは、実施例１のサプリメントと同様の効果を示した。
【図１】
2020031556.tif 000019
【図２】
2020031556.tif 000020
【図３】
2020031556.tif 000021
【図４】
2020031556.tif 000022
【図５】
2020031556.tif 000023
【図６】
2020031556.tif 000024
【図７】
2020031556.tif 000025
【図８】
2020031556.tif 000026
【図９】
2020031556.tif 000027